(57)【要約】ヒアルロン酸およびヒアルロン酸の分解を阻害する化合物を含む組成物およびデバイス、ならびに、それらを製造および使用する方法。１つの好ましい実施形態では、ヒアルロン酸、金化合物および重合体を含む組成物であって、ここで該金化合物がヒアルロン酸の分解を阻害する、組成物が提供される。別の実施形態では、ヒアルロン酸、スルフェート含有多糖類および重合体を含む組成物であって、ここで該スルフェート含有多糖類がヒアルロン酸の分解を阻害する、組成物が提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒアルロン酸、金化合物および重合体を含む組成物であって、ここで該金化合物がヒアルロン酸の分解を阻害する、組成物。
【請求項２】
前記化合物がヒアルロン酸の酵素誘導性分解を阻害する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記酵素がヒアルロニダーゼである、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記金化合物が有機金化合物である、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記金化合物が金チオマレートまたはその類似体もしくは誘導体である、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
ヒアルロン酸、スルフェート含有多糖類および重合体を含む組成物であって、ここで該スルフェート含有多糖類がヒアルロン酸の分解を阻害する、組成物。
【請求項７】
前記スルフェート含有多糖類がヒアルロン酸の酵素誘導性分解を阻害する、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
前記酵素がヒアルロニダーゼである、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
前記スルフェート含有多糖類がフカンである、請求項６に記載の組成物。
【請求項１０】
前記フカンがフコイダンまたはその類似体もしくは誘導体である、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記スルフェート含有多糖類がデキストラン硫酸またはその類似体もしくは誘導体である、請求項６に記載の組成物。
【請求項１２】
前記スルフェート含有多糖類がヘパリンまたはその類似体もしくは誘導体である、請求項６に記載の組成物。
【請求項１３】
ヒアルロン酸、および、インドメタシンまたはその類似体もしくは誘導体を含む組成物であって、ここで該インドメタシンがヒアルロン酸の分解を阻害する、組成物。
【請求項１４】
前記インドメタシンがヒアルロン酸の酵素誘導性分解を阻害する、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
前記酵素がヒアルロニダーゼである、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
ヒアルロン酸および重合体を含む組成物であって、ここで該重合体がヒアルロン酸の分解を阻害する、組成物。
【請求項１７】
前記重合体がヒアルロン酸の酵素誘導性分解を阻害する、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
前記酵素がヒアルロニダーゼである、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
前記重合体が構造（−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＯ−）を有する乳酸残基を含む、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２０】
前記重合体が構造（−ＯＣＨ２ＣＨ２−）を有するエチレンオキシド残基を含む、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２１】
前記重合体がポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ）を含む、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２２】
前記重合体がポリ（Ｌ−乳酸）−ｃｏ−メトキシポリ（エチレングリコール）（ＭｅＰＥＧ−ＰＬＬＡ）（６０：４０）を含む、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２３】
前記重合体がポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＧＡ−ＰＥＧ）を含む、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２４】
前記重合体がポリ（カプロラクトン）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＣＬ−ＰＥＧ）を含む、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２５】
前記重合体が重合体のブレンド物である、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２６】
前記重合体がポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ）とポリ（Ｌ−乳酸）−ｃｏ−メトキシポリ（エチレングリコール）（ＭｅＰＥＧ−ＰＬＬＡ）のブレンド物である、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２７】
さらに金化合物を含む、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２８】
ヒアルロン酸、ならびにソルビタンエステルおよびエチレンオキシド重合体とプロピレンオキシド重合体との共重合体よりなる群から選択される化合物を含む組成物であって、ここで該化合物がヒアルロン酸の分解を阻害する、組成物。
【請求項２９】
前記化合物がヒアルロン酸の酵素誘導性分解を阻害する、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３０】
前記酵素がヒアルロニダーゼである、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３１】
ヒアルロン酸、ならびにポリエチレングリコール、プロピレングリコール、オクチルフェノールエトキシレートおよびカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）よりなる群から選択される化合物を含む組成物であり、ここで該化合物がヒアルロン酸の分解を阻害する、組成物。
【請求項３２】
前記化合物がヒアルロン酸の酵素誘導性分解を阻害する、請求項３１に記載の組成物。
【請求項３３】
前記酵素がヒアルロニダーゼである、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３４】
ヒアルロン酸、ならびにケンフェロール、硫酸化β−（１，４）−テトラガラクトシド、硫酸化ネオマイシン、ミリセチン、フロレチン、ケルセチン、シリビン、リキリチゲニン、トラニラスト、バイカレイン、トラキサノックス、イソリキリチゲニン、クロモグリク酸２ナトリウム、フラボノン−７−硫酸ナトリウムおよび５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウムよりなる群から選択される化合物を含む組成物であって、ここで該化合物がヒアルロン酸の分解を阻害する、組成物。
【請求項３５】
前記化合物がヒアルロン酸の酵素誘導性分解を阻害する、請求項３４に記載の組成物。
【請求項３６】
前記酵素がヒアルロニダーゼである、請求項３５に記載の組成物。
【請求項３７】
ヒアルロン酸、ならびにビタミンＣ、エスキン、トラニラスト、トラキサノックス、ヘデラゲニン、塩酸グアニジン、Ｌ−アルギニン、ノルリグナン、ウロリシンＢ、リキリチゲニン、バイカレイン、イソリキリチゲニン、クロモグリク酸２ナトリウム（ＤＳＣＧ）、クリシン−７−スルフェート、フラボノン−７−硫酸ナトリウム、５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウム、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−メトキシフェニル）プロペノン、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−クロロフェニル）プロペノン、７−フルオロ−４’−ヒドロキシフラボン−４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、モリン、ミリセチン、フェノプロフェン、ミオクリシン、リン酸化ヘスペリジン、エキナセア、ロスマリン酸およびスルホン化度０．２〜１のスルホン化β−（１，４）−ガラクトオリゴ糖（ｎ＝２〜６）よりなる群から選択される化合物を含む組成物であり、ここで該化合物がヒアルロン酸の分解を阻害する、組成物。
【請求項３８】
前記化合物がヒアルロン酸の酵素誘導性分解を阻害する、請求項３７に記載の組成物。
【請求項３９】
前記酵素がヒアルロニダーゼである、請求項３８に記載の組成物。
【請求項４０】
ヒアルロン酸および縮合タンニン、タンニン酸、ケンフェロールおよびケルセチンよりなる群から選択される化合物を含む組成物であり、ここで該化合物がヒアルロン酸の分解を阻害する、組成物。
【請求項４１】
前記化合物がヒアルロン酸の酵素誘導性分解を阻害する、請求項４０に記載の組成物。
【請求項４２】
前記酵素がヒアルロニダーゼである、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４３】
ヒアルロン酸、ならびにスルホン化ネオマイシン、スルホン化プラネトース、硫酸化ヒドロキノンジグラルクトシドおよび硫酸化２−ヒドロキシフェニルモノラクトビオシドよりなる群から選択される化合物を含む組成物であり、ここで該化合物がヒアルロン酸の分解を阻害する、組成物。
【請求項４４】
前記化合物がヒアルロン酸の酵素誘導性分解を阻害する、請求項４３に記載の組成物。
【請求項４５】
前記酵素がヒアルロニダーゼである、請求項４４に記載の組成物。
【請求項４６】
ヒアルロン酸、ならびにシリビン、フロレチン、タキシフォリン、ジアドゼイン（４’，７−ジヒドロキシイソフラボン）、テクトリゲニン（４’，７−ジヒドロキシ−６−メトキシイソフラボン）、クリシン−７−スルフェート、４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、ジフェニルアクリル酸、ジフェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸およびインドール−２−カルボン酸よりなる群から選択される化合物を含む組成物であり、ここで該化合物がヒアルロン酸の分解を阻害する、組成物。
【請求項４７】
前記化合物がヒアルロン酸の酵素誘導性分解を阻害する、請求項４６に記載の組成物。
【請求項４８】
前記酵素がヒアルロニダーゼである、請求項４７に記載の組成物。
【請求項４９】
さらに担体を含む、請求項１〜４８の何れか１項に記載の組成物。
【請求項５０】
前記担体が重合体である、請求項４９に記載の組成物。
【請求項５１】
前記重合体が生分解性である、請求項５０に記載の組成物。
【請求項５２】
前記重合体が非生分解性である、請求項５０に記載の組成物。
【請求項５３】
前記重合体が澱粉、セルロースおよびデキストランよりなる群から選択される炭水化物を含む、請求項５０に記載の組成物。
【請求項５４】
前記重合体がコラーゲン、ゼラチン、フィブリノーゲンおよびアルブミンよりなる群から選択されるタンパク質を含む、請求項５０に記載の組成物。
【請求項５５】
前記重合体がポリエステルを含む、請求項５０に記載の組成物。
【請求項５６】
前記ポリエステルがポリ（Ｄ，Ｌラクチド）、（Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）またはポリ（グリコリド）である、請求項５５に記載の組成物。
【請求項５７】
前記重合体がポリ（ε−カプロラクトン）、ポリ（ヒドロキシブチレート）、ポリ（アルキルカーボネート）、ポリ（無水物）およびポリ（オルトエステル）よりなる群から選択されるメンバーを含む、請求項５０に記載の組成物。
【請求項５８】
前記重合体がエチレン酢酸ビニル共重合体（ＥＶＡ）、シリコーンゴム、ポリウレタンおよびアクリル系重合体または共重合体よりなる群から選択されるメンバーを含む、請求項５０に記載の組成物。
【請求項５９】
前記重合体がポリ（エチレングリコール）を含む、請求項５０に記載の組成物。
【請求項６０】
前記重合体が４アームチオールＰＥＧおよび４アームＮＨＳ  ＰＥＧを含む、請求項５０に記載の組成物。
【請求項６１】
前記重合体がさらにコラーゲンまたはコラーゲン誘導体を含む、請求項６０に記載の組成物。
【請求項６２】
前記コラーゲン誘導体がメチル化コラーゲンである、請求項６１に記載の組成物。
【請求項６３】
さらに麻酔剤を含む、請求項１〜４８の何れか１項に記載の組成物。
【請求項６４】
前記麻酔剤がプリロカイン、リドカインまたはベンゾカインである、請求項６３に記載の組成物。
【請求項６５】
前記組成物が無菌である、請求項１〜４８の何れか１項に記載の組成物。
【請求項６６】
さらにβ−リン酸３カルシウム、ヒドロキシアパタイト、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム、リン酸カルシウム、骨および脱鉱物質骨よりなる群から選択されるセラミックを含む、請求項１〜４８の何れか１項に記載の組成物。
【請求項６７】
さらに骨形成タンパク質または増殖因子を含む、請求項１〜４８の何れか１項に記載の組成物。
【請求項６８】
前記骨形成タンパク質がＢＭＰ−２、ＢＭＰ−３、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６またはＢＭＰ−７である、請求項６７に記載の組成物。
【請求項６９】
前記増殖因子が線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、トランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）または血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）である、請求項６７に記載の組成物。
【請求項７０】
請求項６７に記載の組成物を所望の位置において骨の増強または損失骨の置換を必要とする患者に送達することを含む、骨の増強または損失骨の置換のための方法。
【請求項７１】
請求項１〜４８の何れか１項に記載の組成物を手術手順中に神経を包囲する領域に浸潤させることを含む、手術後の瘢痕形成に関わる疼痛を低減するための方法。
【請求項７２】
請求項１〜４８の何れか１項に記載の組成物を所望の位置において手術癒着を防止することを必要とする患者に送達することを含む、手術癒着を防止するための方法。
【請求項７３】
請求項１〜４８の何れか１項に記載の組成物を、皮膚または組織の修復または増強を必要とする患者の皮膚または組織内に注射することを含む、皮膚または組織の修復または増強のための方法。
【請求項７４】
前記注射を口唇内に行う、請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
前記注射を皮膚または顔面の内に行う、請求項７３に記載の方法。
【請求項７６】
請求項１〜４８の何れか１項に記載の組成物を眼の手術中に眼の内部に送達することを含む、眼の手術中の眼の液体容量を維持する方法。
【請求項７７】
前記眼の手術が白内障摘出手術、眼内レンズ移植、網膜再付着、水晶体超音波吸引術、角膜移植または緑内障濾過手術である、請求項７６に記載の方法。
【請求項７８】
請求項１〜４８の何れか１項に記載の組成物を、変形性関節症に伴う疼痛の低減を必要とする患者の関節内に注射することを含む、変形性関節症に伴う疼痛を低減する方法。
【請求項７９】
患者の下部食道括約筋の近接部内に請求項１〜４８の何れか１項に記載の組成物を注射することを含む、胃食道逆流性疾患を治療する方法。
【請求項８０】
尿失禁が治療または防止されるように請求項１〜４８の何れか１項に記載の組成物を、尿失禁の治療または防止を必要とする患者に投与することを含む、尿失禁を治療または防止するための方法。
【請求項８１】
前記組成物を尿道周囲に投与する、請求項８０に記載の方法。
【請求項８２】
前記組成物を経尿道で投与する、請求項８０に記載の方法。
【請求項８３】
便失禁が治療または防止されるように患者の肛門括約筋の近接部内に請求項１〜４８の何れか１項に記載の組成物を注射することを含む、便失禁を治療または予防する方法。
【請求項８４】
増量剤を含む医療用インプラントであって、該増量剤がヒアルロン酸および該ヒアルロン酸の分解を阻害する化合物を含む、医療用インプラント。
【請求項８５】
ＧＥＲＤの管理のために処方される、請求項８４に記載の医療用インプラント。
【請求項８６】
便失禁の管理のために処方される、請求項８４に記載のインプラント。
【請求項８７】
尿失禁の管理のために処方される、請求項８４に記載のインプラント。
【請求項８８】
前記化合物が金チオマレート、インドメタシン、プロピレングリコール、ヘパリン、デキストラン硫酸、フコイダンおよびカルボキシメチルセルロースよりなる群から選択される、請求項８４に記載のインプラント。
【請求項８９】
前記化合物がケンフェロール、硫酸化β−（１，４）−テトラガラクトシド、硫酸化ネオマイシン、ルテオリン、ミリセチン、フロレチン、ケルセチン、シリビン、リキリチゲニン、トラニラスト、バイカレイン、トラキサノックス、イソリキリチゲニン、クロモグリク酸２ナトリウム、フラボノン−７−硫酸ナトリウムおよび５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウムよりなる群から選択される、請求項８４に記載のインプラント。
【請求項９０】
医療用インプラントを含む医療用デバイスであって、ここでインプラントがヒアルロン酸および金化合物を含む組成物でコーティングされ、そしてここで該金化合物がヒアルロン酸の分解を阻害する、医療用デバイス。
【請求項９１】
前記金化合物が有機金化合物である、請求項９０に記載の医療用デバイス。
【請求項９２】
前記金化合物が金チオマレートまたはその類似体もしくは誘導体である、請求項９０に記載の医療用デバイス。
【請求項９３】
医療用インプラントを含む医療用デバイスであって、ここで該インプラントがヒアルロン酸およびインドメタシンまたはその類似体もしくは誘導体を含む組成物でコーティングされ、そしてここで該インドメタシンがヒアルロン酸の分解を阻害する、医療用デバイス。
【請求項９４】
医療用インプラントを含む医療用デバイスであって、ここでインプラントがヒアルロン酸およびスルフェート含有多糖類を含む組成物でコーティングされ、そしてここでスルフェート含有多糖類がヒアルロン酸の分解を阻害する、医療用デバイス。
【請求項９５】
前記スルフェート含有多糖類がフカンである、請求項９４に記載の医療用デバイス。
【請求項９６】
前記フカンがフコイダンまたはその類似体もしくは誘導体である、請求項９４に記載の医療用デバイス。
【請求項９７】
前記スルフェート含有多糖類がデキストラン硫酸またはその類似体もしくは誘導体である、請求項９４に記載の医療用デバイス。
【請求項９８】
前記スルフェート含有多糖類がヘパリンまたはその類似体もしくは誘導体である、請求項９４に記載の医療用デバイス。
【請求項９９】
医療用インプラントを含む医療用デバイスであって、ここで該インプラントがヒアルロン酸および重合体を含む組成物でコーティングされ、そしてここで該重合体がヒアルロン酸の分解を阻害する、医療用デバイス。
【請求項１００】
前記重合体が構造（−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＯ−）を有する乳酸残基を含む、請求項９９に記載の医療用デバイス。
【請求項１０１】
前記重合体が構造（−ＯＣＨ２ＣＨ２−）を有するエチレンオキシド残基を含む、請求項９９に記載の医療用デバイス。
【請求項１０２】
前記重合体がポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ）を含む、請求項９９に記載の医療用デバイス。
【請求項１０３】
前記重合体がポリ（Ｌ−乳酸）−ｃｏ−メトキシポリ（エチレングリコール）（ＭｅＰＥＧ−ＰＬＬＡ）（６０：４０）を含む、請求項９９に記載の医療用デバイス。
【請求項１０４】
前記重合体がポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＧＡ−ＰＥＧ）を含む、請求項９９に記載の医療用デバイス。
【請求項１０５】
前記重合体がポリ（カプロラクトン）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＣＬ−ＰＥＧ）を含む、請求項９９に記載の医療用デバイス。
【請求項１０６】
前記重合体がソルビタンエステルおよびエチレンオキシド重合体とプロピレンオキシド重合体との共重合体よりなる群から選択される、請求項９９に記載の医療用デバイス。
【請求項１０７】
前記重合体が重合体のブレンド物である、請求項９９に記載の医療用デバイス。
【請求項１０８】
前記重合体がポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ）とポリ（Ｌ−乳酸）−ｃｏ−メトキシポリ（エチレングリコール）（ＭｅＰＥＧ−ＰＬＬＡ）とのブレンド物である、請求項９９に記載の医療用デバイス。
【請求項１０９】
医療用インプラントを含む医療用デバイスであって、ここで該インプラントがヒアルロン酸、ならびにポリエチレングリコール、オクチルフェノールエトキシレート、プロピレングリコールおよびカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）よりなる群から選択されるメンバーを含む組成物でコーティングされ、そしてここで該メンバーがヒアルロン酸の分解を阻害する、上記医療用デバイス。
【請求項１１０】
医療用インプラントを含む医療用デバイスであって、ここで該インプラントがヒアルロン酸、ならびにケンフェロール、硫酸化β−（１，４）−テトラガラクトシド、硫酸化ネオマイシン、ルテオリン、ミリセチン、フロレチン、ケルセチン、シリビン、リキリチゲニン、トラニラスト、バイカレイン、トラキサノックス、イソリキリチゲニン、クロモグリク酸２ナトリウム、フラボノン−７−硫酸ナトリウムおよび５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウムよりなる群から選択される化合物を含む組成物でコーティングされ、そしてここで化合物がヒアルロン酸の分解を阻害する、医療用デバイス。
【請求項１１１】
医療用インプラントを含む医療用デバイスであって、ここで該インプラントがヒアルロン酸、ならびにビタミンＣ、エスキン、トラニラスト、トラキサノックス、ヘデラゲニン、塩酸グアニジン、Ｌ−アルギニン、ノルリグナン、ウロリシンＢ、リキリチゲニン、バイカレイン、イソリキリチゲニン、クロモグリク酸２ナトリウム（ＤＳＣＧ）、クリシン−７−スルフェート、フラボノン−７−硫酸ナトリウム、５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウム、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−メトキシフェニル）プロペノン、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−クロロフェニル）プロペノン、７−フルオロ−４’−ヒドロキシフラボン−４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、ルテオリン、モリン、ミリセチン、フェニルブタゾン、オキシプネブタノン、フェノプロフェン、ミオクリシン、リン酸化ヘスペリジン、エキナセア、ロスマリン酸およびスルホン化度０．２〜１のスルホン化β−（１，４）−ガラクトオリゴ糖（ｎ＝２〜６）よりなる群から選択される化合物を含む組成物でコーティングされ、そしてここで該化合物がヒアルロン酸の分解を阻害する、医療用デバイス。
【請求項１１２】
医療用インプラントを含む医療用デバイスであって、ここで該インプラントがヒアルロン酸、ならびに縮合タンニン、タンニン酸、ケンフェロール、ケルセチンおよびアペギニンよりなる群から選択される化合物を含む組成物でコーティングされ、そしてここで該化合物がヒアルロン酸の分解を阻害する、医療用デバイス。
【請求項１１３】
医療用インプラントを含む医療用デバイスであって、ここで該インプラントがヒアルロン酸、ならびにスルホン化ネオマイシン、スルホン化プラネトース、硫酸化ヒドロキノンジグラルクトシドおよび硫酸化２−ヒドロキシフェニルモノラクトビオシドよりなる群から選択される化合物を含む組成物でコーティングされ、そしてここで該化合物がヒアルロン酸の分解を阻害する、医療用デバイス。
【請求項１１４】
医療用インプラントを含む医療用デバイスであって、ここで該インプラントがヒアルロン酸、ならびにシリビン、フロレチン、タキシフォリン、ジアドゼイン（４’，７−ジヒドロキシイソフラボン）、テクトリゲニン（４’，７−ジヒドロキシ−６−メトキシイソフラボン）、クリシン−７−スルフェート、４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、ジフェニルアクリル酸、ジフェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸およびインドール−２−カルボン酸よりなる群から選択される化合物を含む組成物でコーティングされ、そしてここで該化合物がヒアルロン酸の分解を阻害する、医療用デバイス。
【請求項１１５】
前記組成物がさらに金化合物を含み、該金化合物がヒアルロン酸の分解を阻害する、請求項９３〜１１４の何れか１項に記載の医療用デバイス。
【請求項１１６】
ヒアルロン酸、ならびに金チオマレート、インドメタシン、フコイダン、デキストラン硫酸、ヘパリン、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）およびこれ等の類似体または誘導体よりなる群から選択される化合物を含む組成物であって、ここで該組成物の粘度がヒアルロン酸対照の粘度の５０％以上であり、ここで該粘度はヒアルロン酸ビスコメトリーアッセイを用いて測定される、組成物。
【請求項１１７】
ヒアルロン酸、ならびにオクチルフェノールエトキシレート、ソルビタンエステルおよびエチレンオキシド重合体とプロピレンオキシド重合体との共重合体よりなる群から選択される化合物を含む組成物であって、ここで該組成物の粘度がヒアルロン酸対照の粘度の５０％以上であり、ここで該粘度はヒアルロン酸ビスコメトリーアッセイを用いて測定される、組成物。
【請求項１１８】
ヒアルロン酸、ならびに構造（−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＯ−）を有する乳酸残基を含む重合体、構造（−ＯＣＨ２ＣＨ２−）を有するエチレンオキシド残基を含む重合体、ポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ）、ポリ（Ｌ−乳酸）−ｃｏ−メトキシポリ（エチレングリコール）（ＭｅＰＥＧ−ＰＬＬＡ）（６０：４０）、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＧＡ−ＰＥＧ）、ポリ（カプロラクトン）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＣＬ−ＰＥＧ）およびこれ等のブレンド物よりなる群から選択される重合体を含む組成物であって、ここで該組成物の粘度がヒアルロン酸対照の粘度の５０％以上であり、ここで該粘度はヒアルロン酸ビスコメトリーアッセイを用いて測定される、組成物。
【請求項１１９】
ヒアルロン酸、ならびにケンフェロール、硫酸化β−（１，４）−テトラガラクトシド、硫酸化ネオマイシン、ルテオリン、ミリセチン、フロレチン、ケルセチン、シリビン、リキリチゲニン、トラニラスト、バイカレイン、トラキサノックス、イソリキリチゲニン、クロモグリク酸２ナトリウム、フラボノン−７−硫酸ナトリウムおよび５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウムよりなる群から選択される化合物を含む組成物であって、ここで該組成物の粘度がヒアルロン酸対照の粘度の５０％以上であり、ここで該粘度はヒアルロン酸ビスコメトリーアッセイを用いて測定される、組成物。
【請求項１２０】
ヒアルロン酸および化合物を含む組成物であって、ここで該組成物の粘度がヒアルロン酸対照の粘度の５０％以上であり、ここで該粘度はヒアルロン酸ビスコメトリーアッセイを用いて測定され、そしてここで該化合物は、ビタミンＣ、エスキン、トラニラスト、トラキサノックス、ヘデラゲニン、塩酸グアニジン、Ｌ−アルギニン、ノルリグナン、ウロリシンＢ、リキリチゲニン、バイカレイン、イソリキリチゲニン、クロモグリク酸２ナトリウム（ＤＳＣＧ）、クリシン−７−スルフェート、フラボノン−７−硫酸ナトリウム、５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウム、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−メトキシフェニル）プロペノン、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−クロロフェニル）プロペノン、７−フルオロ−４’−ヒドロキシフラボン−４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、ルテオリン、モリン、ミリセチン、フェニルブタゾン、オキシプネブタノン、フェノプロフェン、ミオクリシン、リン酸化ヘスペリジン、エキナセア、ロスマリン酸およびスルホン化度０．２〜１のスルホン化β−（１，４）−ガラクトオリゴ糖（ｎ＝２〜６）よりなる群から選択される、組成物。
【請求項１２１】
ヒアルロン酸および縮合タンニン、タンニン酸、ケンフェロール、ケルセチンおよびアペギニンよりなる群から選択される化合物を含む組成物であって、ここで組成物の粘度がヒアルロン酸対照の粘度の５０％以上であり、ここで粘度はヒアルロン酸ビスコメトリーアッセイを用いて測定される、組成物。
【請求項１２２】
ヒアルロン酸、ならびにスルホン化ネオマイシン、スルホン化プラネトース、硫酸化ヒドロキノンジグラルクトシドおよび硫酸化２−ヒドロキシフェニルモノラクトビオシドよりなる群から選択される化合物を含む組成物であって、ここで組成物の粘度がヒアルロン酸対照の粘度の５０％以上であり、ここで該粘度はヒアルロン酸ビスコメトリーアッセイを用いて測定される、組成物。
【請求項１２３】
ヒアルロン酸およびシリビン、フロレチン、タキシフォリン、ジアドゼイン（４’，７−ジヒドロキシイソフラボン）、テクトリゲニン（４’，７−ジヒドロキシ−６−メトキシイソフラボン）、クリシン−７−スルフェート、４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、ジフェニルアクリル酸、ジフェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸およびインドール−２−カルボン酸よりなる群から選択される化合物を含む組成物であって、ここで該組成物の粘度がヒアルロン酸対照の粘度の５０％以上であり、ここで該粘度はヒアルロン酸ビスコメトリーアッセイを用いて測定される、組成物。
【請求項１２４】
ヒアルロン酸、ならびにヘパリン（ナトリウム塩）、金チオリンゴ酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、デキストラン硫酸、フコイダンおよびこれ等の類似体および誘導体よりなる群から選択される化合物を含む組成物であって、ここで該ヒアルロン酸の分子量がヒアルロン酸対照の分子量の約１０％超であり、ここで該分子量はＧＰＣ分子量アッセイを用いて測定される、組成物。
【請求項１２５】
前記ヒアルロン酸の分子量が前記ヒアルロン酸対照の分子量の約２５％超である、請求項１２４に記載の組成物。
【請求項１２６】
前記ヒアルロン酸の分子量が前記ヒアルロン酸対照の分子量の約５０％超である、請求項１２５に記載の組成物。
【請求項１２７】
前記ヒアルロン酸の分子量が前記ヒアルロン酸対照の分子量の約７５％超である、請求項１２５に記載の組成物。
【請求項１２８】
前記ヒアルロン酸の分子量が前記ヒアルロン酸対照の分子量の約９０％超である、請求項１２５に記載の組成物。
【請求項１２９】
ヒアルロン酸、ならびにヘパリン（ナトリウム塩）、金チオリンゴナトリウム、カルボキシメチルセルロース、デキストラン硫酸、フコイダンおよびこれ等の類似体および誘導体よりなる群から選択される化合物を含む組成物であって、ここで該化合物が微粒子内に含有されている、組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の引用）
本出願はその仮出願が参照により全体が本明細書に援用される２００４年８月１３日に共に出願された米国仮特許出願６０／６０１，２１４および６０／６０１，２１８の利益を主張する。
【０００２】
（背景）
（技術分野）
本発明は医薬組成物、デバイスおよび方法、および、より特定すればインプラント処置されたヒアルロン酸材料の持続性および活性を増大させることに関する組成物、デバイスおよび方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
（関連技術の説明）
ヒアルロン酸（ＨＡ）は関節滑液、眼の硝子体液、軟骨、血管、細胞外マトリックス、皮膚および臍帯を包含する多くの身体組織中に天然に存在する遍在的な物質である。水の保持がヒアルロン酸の最も重要な生物学的機能の１つであり、これは軟骨細胞のように直接の血液補給を有さない細胞への栄養提供と老廃物除去に二次的であるのみである。水に結合するＨＡの能力は組織に構造を与え、関節（例えば膝）および筋肉のような身体の可動部分を潤滑化して衝撃を吸収し、そして皮膚の容量に寄与している。
【０００４】
潤滑剤として機能し、そして構造的支持を与えるヒアルロン酸の能力は、例えば眼科、軟組織補強（例えば形成および再生外科における使用のためのＨＡインプラント）、創傷治療、関節の粘度補充（例えば間接内注射）、骨再生、癒着防止、薬剤送達、細胞温存、表面コーティングおよび保湿剤を包含する多種多様な医療用途においてその使用を惹起してきた。他の型のバイオ材料（例えばコラーゲン）と比較してＨＡが特に有利な点は、ＨＡが天然の細胞外マトリックスの一部であるため、身体がＨＡ系インプラントに対して免疫原性（アレルギー性）の応答を生じない点である。
【０００５】
しかしながらヒアルロン酸は身体内にインプラント処置された場合には比較的限定された寿命を有する。インビボのインプラントの持続性はヒアルロニダーゼのような種々の分解性酵素の活性により相殺される場合がある。ヒアルロニダーゼは一般的には加水分解酵素、例えばヒアルロネートのリアーゼおよびヒアルロノグルクロニダーゼを指し、これ等は動物の結合組織中に存在する特定の酸ムコ多糖類（例えばナトリウムヒアルロン酸および硫酸コンドロイチンナトリウムＡおよびＣ）の内部グリコシド性結合の切断を触媒することができる。例えば、ヒアルロノグルコサミニダーゼはヒアルロン酸内のＮ−アセチルグルコサミンおよびＤ−グルクロン酸残基の間のランダムβ−１，４結合の加水分解を触媒する。これはまたコンドロイチン、コンドロイチン４−および６−スルフェードおよびデルマタンスルフェートも加水分解する。ヒアルロノグルクロニダーゼはＨＡ内のグルクロン酸およびＮ−アセチルグルコサミン残基の間のβ−１，３結合の加水分解を触媒する。ヒアルロネートのリアーゼはグルクロネートへのＮ−アセチルフルコサミンからの結合が破壊され、そして二重結合が導入される排除反応を介したＨＡのフラグメント化を触媒する。インプラント処置後の身体内の酵素的分解の結果として、投与後の身体内のＨＡの機能的活性が限定される。このため、インプラント（特に例えば美容促進剤または組織増量剤）としてＨＡを利用する医療処置は定期的な反復投与を必要とする場合が多い。例えば、ＨＡ系皮膚インプラントおよび粘度補給治療は６〜９ヶ月おきに反復しなければならない。
【０００６】
本発明はヒアルロン酸に伴う難点および医療用途におけるその使用に着目しており、そして他の関連する利点も提供する。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
（簡単な要旨）
慨すれば本発明はヒアルロン酸系インプラントの活性を延長するための組成物、デバイスおよび方法を提供する。ヒアルロン酸系インプラントは例えば美容目的の皮膚注射（皺、瘢痕、輪郭欠損を減少するため）、関節の疼痛を緩解するための関節内注射、血管穿刺処置後の止血のための血管「プラグ」、および、尿失禁、便失禁および胃食道逆流を治療するための「増量剤」を包含する種々の医療処置において、構造、支持および潤滑性を与えるために使用される。
【０００８】
１つの態様において、本発明はヒアルロン酸および阻害化合物（即ち阻害剤）を組み合わせた組成物を提供し、ここで阻害化合物はヒアルロニダーゼの活性を阻害することができる。このような化合物を含有するＨＡ組成物は身体により急速に分解されず、そしてインビボにおける増強された持続性および継続性を有するヒアルロン酸系インプラントを製造するために使用できる。
【０００９】
種々の阻害化合物を本発明の範囲内において記載する。別個の実施形態においては本明細書に記載した阻害化合物の各々がヒアルロン酸の分解を阻害することができる。特定の実施形態においては、阻害化合物はヒアルロニダーゼによるヒアルロン酸の酵素誘導性分解を阻害する。１つの態様において、本発明はヒアルロン酸および金化合物及を含む組成物を提供し、ここで金化合物（例えば有機金化合物）がヒアルロン酸の分解を阻害する。組成物はさらに重合体を含んでよい。１つの態様において、金化合物は金チオマレートまたは金チオリンゴ酸ナトリウムである。別の態様において、金化合物はオーラノフィンである。別の態様において、金化合物は金ナトリウムチオスルフェートである。別の態様において、本発明はヒアルロン酸およびインドメタシンまたはその類似体もしくは誘導体を含む組成物を提供し、ここでインドメタシンがヒアルロン酸の分解を阻害する。別の態様において、本発明はヒアルロン酸およびスルフェート含有多糖類及を含む組成物を提供し、ここでスルフェート含有多糖類がヒアルロン酸の分解を阻害する。組成物はさらに重合体を含んでよい。スルフェート含有多糖類は例えばフカン、例えばフコイダンまたはその類似体もしくは誘導体；デキストラン硫酸またはその類似体もしくは誘導体；またはヘパリンまたはその類似体もしくは誘導体であってよい。別の態様において、本発明はヒアルロン酸および重合体を含む組成物を提供し、ここで重合体がヒアルロン酸の分解を阻害する。１つの態様において、重合体はジブロック共重合体である。１つの態様において、重合体は構造（−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＯ−）を有する乳酸残基を含む。別の態様において重合体は構造（−ＯＣＨ２ＣＨ２−）を有するエチレンオキシド残基を含む。別の態様において重合体はポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ）を含む。別の態様において重合体はポリ（Ｌ−乳酸）−ｃｏ−メトキシポリ（エチレングリコール）（ＭｅＰＥＧ−ＰＬＬＡ）（６０：４０）を含む。別の態様において重合体はポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＧＡ−ＰＥＧ）を含む。別の態様において重合体はポリ（カプロラクトン）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＣＬ−ＰＥＧ）を含む。別の態様において重合体はソルビタンエステルまたはエチレンオキシドとプロピレンオキシド重合体の共重合体である。重合体は重合体のブレンド物であってよい。１つの態様において、重合体はポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ）とポリ（Ｌ−乳酸）−ｃｏ−メトキシポリ（エチレングリコール）（ＭｅＰＥＧ−ＰＬＬＡ）のブレンド物である。別の態様においてｈＨＩはオクチルフェノールエトキシレートである。さらに別の態様において、本発明はヒアルロン酸と共溶媒型の分子を組み合わせた組成物を提供し、ここでこれ等の薬剤はヒアルロニダーゼおよびインビボのＨＡ分解を阻害する。１つの態様において、本発明はヒアルロン酸、および、ポリエチレングリコール、プロピレングリコールおよびカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）よりなる群から選択されるメンバーを含む組成物を提供し、ここでメンバーはヒアルロン酸の分解を阻害する。さらに別の態様において、ヒアルロン酸およびＨＩを含む組成物が提供され、ここでＨＩはビタミンＣ、エスキン、トラニラスト、トラキサノックス、ヘデラゲニン、塩酸グアニジン、Ｌ−アルギニン、ノルリグナン、ウロリシンＢ、リキリチゲニン、バイカレイン、イソリキリチゲニン、クロモグリク酸２ナトリウム（ＤＳＣＧ）、クリシン−７−スルフェート、フラボノン−７−硫酸ナトリウム、５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウム、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−メトキシフェニル）プロペノン、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−クロロフェニル）プロペノン、７−フルオロ−４’−ヒドロキシフラボン−４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、ルテオリン、モリン、ミリセチン、フェニルブタゾン、オキシプネブタノン、フェノプロフェン、ミオクリシン、リン酸化ヘスペリジン、エキナセア、ロスマリン酸、スルホン化度０．２〜１のスルホン化β−（１，４）−ガラクトオリゴ糖（ｎ＝２〜６）；フラボノイド、例えば縮合タンニン、タンニン酸、ケンフェロール、ケルセチン、アペギニン；およびスルホン化化合物、例えばスルホン化ネオマイシン、スルホン化プラネトース（ｓｕｌｆｏｎａｔｅｄ  ｐｌａｎｅｔｏｓｅ）、硫酸化ヒドロキノンジグラルクトシド（ｓｕｌｐｈａｔｅｄ  ｈｙｄｒｏｃｈｉｎｏｎｅ  ｄｉｇｌａｌｃｔｏｓｉｄｅ）または硫酸化２−ヒドロキシフェニルモノラクトビオシド；およびシリビン、フロレチン、タキシフォリン、ジアドゼイン（４’，７−ジヒドロキシイソフラボン）、テクトリゲニン（４’，７−ジヒドロキシ−６−メトキシイソフラボン）、クリシン−７−スルフェート、４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、ジフェニルアクリル酸、ジフェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸またはインドール−２−カルボン酸であり；ここで組成物は場合により重合体を含む。記載した組成物の何れもさらに金化合物を含んでよく、ここで金化合物（例えば有機金化合物、例えば金チオマレートまたはその類似体もしくは誘導体）はヒアルロン酸の分解を阻害する。ヒアルロニダーゼによるヒアルロン酸の分解を阻害する化合物は、実施例１において示すヒアルロン酸ビスコメトリーアッセイまたは実施例２２において示すＧＰＣ分子量アッセイを用いながら発見してよい。１つの態様において、ヒアルロン酸および金チオマレート、インドメタシン、フコイダン、デキストラン硫酸、ヘパリン、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）またはその類似体もしくは誘導体を含む組成物が提供され、ここで組成物の粘度はヒアルロン酸対照の粘度の５０％以上であって、ここで粘度はヒアルロン酸ビスコメトリーアッセイを用いて測定される。別の態様において、ヒアルロン酸およびオクチルフェノールエトキシレート、ソルビタンエステルまたはエチレンオキシドとプロピレンオキシド重合体の共重合体よりなる群から選択される化合物を含む組成物が提供され、���こで組成物の粘度はヒアルロン酸対照の粘度の５０％以上であって、ここで粘度はヒアルロン酸ビスコメトリーアッセイを用いて測定される。別の態様において、ヒアルロン酸および構造（−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＯ−）を有する乳酸残基を含む重合体、構造（−ＯＣＨ２ＣＨ２−）を有するエチレンオキシド残基を含む重合体、ポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ）、ポリ（Ｌ−乳酸）−ｃｏ−メトキシポリ（エチレングリコール）（ＭｅＰＥＧ−ＰＬＬＡ）（６０：４０）、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＧＡ−ＰＥＧ）、ポリ（カプロラクトン）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＣＬ−ＰＥＧ）またはそのブレンド物よりなる群から選択される重合体を含む組成物が提供され、ここで組成物の粘度はヒアルロン酸対照の粘度の５０％以上であって、ここで粘度はヒアルロン酸ビスコメトリーアッセイを用いて測定される。さらに別の態様において、ヒアルロン酸およびビタミンＣ、エスキン、トラニラスト、トラキサノックス、ヘデラゲニン、塩酸グアニジン、Ｌ−アルギニン、ノルリグナン、ウロリシンＢ、リキリチゲニン、バイカレイン、イソリキリチゲニン、クロモグリク酸２ナトリウム（ＤＳＣＧ）、クリシン−７−スルフェート、フラボノン−７−硫酸ナトリウム、５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウム、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−メトキシフェニル）プロペノン、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−クロロフェニル）プロペノン、７−フルオロ−４’−ヒドロキシフラボン−４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、ルテオリン、モリン、ミリセチン、フェニルブタゾン、オキシプネブタノン、フェノプロフェン、ミオクリシン、リン酸化ヘスペリジン、エキナセア、ロスマリン酸、スルホン化度０．２〜１のスルホン化β−（１，４）−ガラクトオリゴ糖（ｎ＝２〜６）；フラボノイド、例えば縮合タンニン、タンニン酸、ケンフェロール、ケルセチン、アペギニン；およびスルホン化化合物、例えばスルホン化ネオマイシン、スルホン化プラネトース、硫酸化ヒドロキノンジグラルクトシドまたは硫酸化２−ヒドロキシフェニルモノラクトビオシド；およびシリビン、フロレチン、タキシフォリン、ジアドゼイン（４’，７−ジヒドロキシイソフラボン）、テクトリゲニン（４’，７−ジヒドロキシ−６−メトキシイソフラボン）、クリシン−７−スルフェート、４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、ジフェニルアクリル酸、ジフェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸またはインドール−２−カルボン酸よりなる群から選択されるＨＩを含む組成物が提供され、ここで組成物の粘度はヒアルロン酸対照の粘度の５０％以上であって、ここで粘度はヒアルロン酸ビスコメトリーアッセイを用いて測定される。さらに別の態様において、ヒアルロン酸およびヘパリン（ナトリウム塩）、ナトリウム金チオマレート、カルボキシメチルセルロース、デキストラン硫酸、フコイダンおよびこれ��の類似体および誘導体よりなる群から選択される化合物を含む組成物が提供され、ここでヒアルロン酸の分子量はヒアルロン酸対照の分子量の約１０％以上、または約２５％以上、または約５０％以上、または約７５％以上、または約９０％以上であって、ここで分子量はＧＰＣ分子量アッセイを用いて測定される。
【００１０】
特定の態様においては、組成物は２種以上のＨＩを含んでよい。さらに別の態様においては、組成物は１種以上のＨＩを含んでよく、ここでＨＩの一種以上は別の治療効果を有する。例えばＨＩはまた治療部位において組織の炎症を低減してよく（例えば金療法用化合物）、抗凝固作用を有してよく、または、抗増殖作用を有してよい。
【００１１】
さらに別の態様において、本発明はＨＡインプラント処置の部位において薬剤を持続放出するための薬物送達ベヒクル（担体）と組み合わせたヒアルロニダーゼ阻害剤を含む組成物を提供する。１つの態様において、担体は重合体である。重合体は生分解性または非生分解性であってよい。１つの態様において、重合体は炭水化物、例えば澱粉、セルロースおよびデキストランを含む。別の態様において、重合体はタンパク質、例えばコラーゲン、ゼラチン、フィブリノーゲンおよびアルブミンを含む。別の態様において、重合体はポリエステル（例えばポリ（Ｄ，Ｌラクチド）、（Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）またはポリ（グリコリド））を含む。別の態様において、重合体はポリ（ε−カプロラクトン）、ポリ（ヒドロキシブチレート）、ポリ（アルキルカーボネート）、ポリ（無水物）またはポリ（オルトエステル）を含む。別の態様において、重合体はエチレン酢酸ビニル共重合体（ＥＶＡ）、シリコーンゴム、ポリウレタンまたはアクリル系重合体または共重合体を含む。１つの態様において、重合体担体はポリエチレングリコールを含む。別の態様において、重合体担体は４アームチオールＰＥＧおよび４アームＮＨＳ  ＰＥＧを含み、そして場合によりさらにコラーゲンまたはコラーゲン誘導体、例えばメチル化コラーゲンを含んでよい。
【００１２】
別の態様において、ヒアルロン酸およびＨＩ（例えばヘパリン（ナトリウム塩）、金チオリンゴ酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、デキストラン硫酸、フコイダンおよびこれ等の類似体および誘導体）を含む組成物が提供され、ここでＨＩは微粒子内に含有されている。微粒子は液体、半固体または固体のＨＡインプラント内に分散または含有されることにより組成物からのＨＩの持続放出を促進してよい。特定の実施形態においては、ＨＩ負荷微粒子はＨＡフィルムまたはメッシュ内に含有される。別の実施形態においては、ＨＩ負荷微粒子はＨＡの液体または半固体の形態内に分散される。特定の実施形態においては、ＨＩ負荷微粒子はＨＡインプラント内に均質に分散または配合される。
【００１３】
さらに別の態様においては、組成物はさらにβ−リン酸３カルシウム、ヒドロキシアパタイト、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム、リン酸カルシウム、骨および脱鉱物質骨のようなセラミックを含んでよい。１つの態様において、組成物はさらに骨形成タンパク質（例えばＢＭＰ−２、ＢＭＰ−３、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６またはＢＭＰ−７）、増殖因子（例えば線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、トランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）または血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ））を含んでよい。
【００１４】
本明細書に記載する組成物の何れも、さらに麻酔薬（例えばプリロカイン、リドカインまたはベンゾカイン）を含んでよく、そして／または滅菌形態において提供してもよい。
【００１５】
１つの態様において、本発明は本明細書に記載したＨＡ−ヒアルロニダーゼ阻害剤組成物が種々の臨床適応症、例えば美容目的の皮膚インプラント用；関節の粘度補充物として；骨生育を増強するための医療用デバイスとして；脊髄融合手術におけるインプラントとして；手術用のスリング、メッシュまたはパッチとして；歯周病治療用のインプラントとして（例えば歯科用インプラントとして）；皮膚移植片として（例えば人工皮膚の開発用）；角膜遮蔽物として；尿失禁、便失禁および胃食道逆流を治療するための組織増量剤として；手術癒着障壁として；または緑内障ドレナージデバイスとして利用してよい。１つの態様において、本発明は本明細書に記載した組成物を所望の位置においてそれを必要とする患者に送達することを含む骨の増強または損失骨の置換のための方法を提供する。別の態様において、本発明は本明細書に記載した組成物を手術手順中に神経を包囲する領域に浸潤させることを含む、手術後の瘢痕形成に関わる疼痛を低減するための方法を提供する。別の態様において本発明は、本明細書に記載した組成物を所望の位置においてそれを必要とする患者に送達することを含む、手術癒着を防止するための方法を提供する。別の態様において本発明は、本明細書に記載した組成物を、それを必要とする患者の皮膚または組織内に注射することを含む、皮膚または組織の修復または増強のための方法を提供する。注射は例えば口唇内、または顔面皮膚内に行ってよい。別の態様において、本発明は本明細書に記載した組成物を眼の手術中に眼の内部に送達することを含む、眼の手術中の眼の液体容量を維持する方法を提供する。眼の手術は例えば白内障摘出手術、眼内レンズ移植、網膜再付着、水晶体超音波吸引術、角膜移植または緑内障濾過手術であってよい。別の態様において、本発明は本明細書に記載した組成物を、それを必要とする患者の関節内に注射することを含む、変形性関節症に伴う疼痛を低減する方法を提供する。別の態様において、本発明は、患者の下部食道括約筋の近接部内に本明細書に記載した組成物を注射することを含む、胃食道逆流性疾患を治療する方法を提供する。別の態様において、本発明は尿失禁が治療または防止されるように本明細書に記載した組成物を、それを必要とする患者に投与することを含む、尿失禁を治療または防止するための方法を提供する。組成物は例えば尿道周囲または経尿道で投与してよい。別の態様において、本発明は便失禁が治療または防止されるように患者の肛門括約筋の近接部内に本明細書に記載した組成物を注射することを含む、便失禁を治療または防止する方法を提供する。
【００１６】
本発明は増量剤を含む医療用インプラントを提供する。増量剤はヒアルロン酸およびヒアルロン酸の分解を阻害する化合物（例えば金チオマレート、インドメタシン、プロピレングリコール、ヘパリン、デキストラン硫酸、フコイダンおよびカルボキシメチルセルロース）を含む。これらの医療用インプラントは例えばＧＥＲＤの管理、便失禁および尿失禁の管理のために処方してよい。
【００１７】
別の態様において、医療用インプラントおよびヒアルロン酸の分解を阻害する阻害化合物を含む医療用デバイスが提供される。特定の実施形態においては、ヒアルロン酸および阻害化合物を含む組成物でコーティングされたインプラントを含む医療用デバイスが提供される。１つの態様において、インプラントがヒアルロン酸および金化合物を含む組成物でコーティングされた医療用インプラントを含む医療用デバイスが提供され、そしてここで金化合物はヒアルロン酸の分解を阻害する。別の態様において、本発明は、医療用インプラントがヒアルロン酸およびインドメタシンまたはその類似体もしくは誘導体を含む組成物でコーティングされたインプラントを含む医療用デバイスを提供し、そしてここでインドメタシンはヒアルロン酸の分解を阻害する。別の態様において、本発明は、医療用インプラントがヒアルロン酸およびスルフェート含有多糖類を含む組成物でコーティングされたインプラントを含む医療用デバイスを提供し、そしてここでスルフェート含有多糖類はヒアルロン酸の分解を阻害する。スルフェート含有多糖類は例えばフカン、例えばフコイダンまたはその類似体もしくは誘導体、デキストラン硫酸またはその類似体もしくは誘導体、またはヘパリンまたはその類似体もしくは誘導体であってよい。別の態様において、本発明はヒアルロン酸および重合体を含む組成物でコーティングされた医療用インプラントを含む医療用デバイスが提供され、ここで重合体がヒアルロン酸の分解を阻害する。１つの態様において、重合体は構造（−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＯ−）を有する乳酸残基を含む。別の態様において重合体は構造（−ＯＣＨ２ＣＨ２−）を有するエチレンオキシド残基を含む。別の態様において重合体はポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ）を含む。別の態様において重合体はポリ（Ｌ−乳酸）−ｃｏ−メトキシポリ（エチレングリコール）（ＭｅＰＥＧ−ＰＬＬＡ）（６０：４０）を含む。別の態様において重合体はポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＧＡ−ＰＥＧ）を含む。別の態様において重合体はポリ（カプロラクトン）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＣＬ−ＰＥＧ）を含む。別の態様において、重合体はソルビタンエステルおよびエチレンオキシドとプロピレンオキシド重合体の共重合体よりなる群から選択される。別の態様において、重合体はポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ）とポリ（Ｌ−乳酸）−ｃｏ−メトキシポリ（エチレングリコール）（ＭｅＰＥＧ−ＰＬＬＡ）のブレンド物である。別の態様において、本発明は、医療用インプラントがヒアルロン酸およびポリエチレングリコール、プロピレングリコール、オクチルフェノールエトキシレートまたはカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）のような化合物を含む組成物でコーティングされたインプラントを含む医療用デバイスを提供し、そしてここで化合物はヒアルロン酸の分解を阻害する。別の態様において、本明細書に記載した阻害化合物（即ちヒアルロニダーゼ阻害剤）を含む組成物はさらに金化合物（例えば金チオマレート）を含んでよく、ここで金化合物はヒアルロン酸の分解を阻害する。
【００１８】
これ等および他の本発明の態様は以下の詳細な説明および図面を参照することにより明確化される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１９】
（詳細な説明）
本発明を説明する前に、これを理解するためには以後使用する特定の用語の定義を説明することが有効であると考える。
【００２０】
「ヒアルロン酸」または「ＨＡ」とは、本明細書においては、本明細書に記載または参照するヒアルロン酸の全形態、例えばプロセシングされるか化学的または物理的に修飾されているもの、並びに交差結合（例えば共有結合的、イオン結合的、熱的または物理的に）しているヒアルロン酸を指す。ＨＡは約２５００反復２糖類単位の直鎖よりなるグリコサミノグリカンである。各２糖類単位はグルクロン酸に連結したＮ−アセチルグルコサミン残基よりなる。分子は種々の長さ（即ち種々の数の反復２糖類単位および種々の分枝様式）のものであることができ、そして、本発明の開示の範囲から逸脱することなく数部位において（種々の官能Ｇｌｕの追加または除去を介して）修飾することができる。
【００２１】
「ヒアルロニダーゼ阻害剤」または「ＨＩ」とは、本明細書においては、ヒアルロン酸を加水分解するヒアルロニダーゼまたは他の加水分解酵素の能力を直接または間接的に改変または阻害する化合物を指す。「ＨＩ」はまた、ＨＡのインビボの分解を防止、低減またはそのために必要な時間を延長する何れかの分子を、その活性の特定の機序に関わらず指すものとする。ＨＩの例はケンフェロール、硫酸化β−（１，４）−テトラガラクトシド、硫酸化ネオマイシン、ルテオリン、ミリセチン、フロレチン、ケルセチン、シリビン、リキリチゲニン、トラニラスト、バイカレイン、トラキサノックス、イソリキリチゲニン、クロモグリク酸２ナトリウム、フラボノン−７−硫酸ナトリウムおよび５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウム、金含有化合物、インドメタシン、硫酸化多糖類、医薬品用共溶媒、ノニオン系界面活性剤、ジブロック共重合体およびカルボキシメチルセルロースを包含する。ＨＩとしての使用に適する種々の化合物および共重合体を本明細書において詳述する。
【００２２】
「類似体」とは本明細書においては、親化合物と構造的には同様であるが組成において僅かに異なる（例えば１原子または官能基が異なるか、付加または除去されている）化学物質を指す。類似体は元の化合物とは異なる化学的または物理的な特性を有していてもいなくてもよく、そして向上した生物学的および／または化学的活性を有していてもいなくてもよい。例えば類似体は親化合物と比較して、より親水性であってよく、または、改変された反応性を有していてよい。類似体は親化合物の化学的および／または物理的活性を模倣していてよく（即ち同様または同一の活性を有していてよく）、或いは、場合によっては、増強または低減された活性を有していてよい。類似体は元の化合物の天然に存在するまたは天然に存在しない（例えば組み換え体）の変異体であってよい。類似体の例はムテインである（即ち少なくとも１つのアミノ酸が欠失、付加または別のアミノ酸で置換されているタンパク質）。類似体の他の型は化合物の異性体（エナンチオマー、ジアステレオマー等）および他の型のキラル変異体並びに構造異性体を包含する。類似体は直鎖化合物の分枝鎖または環状の変異体であってよい。例えば直鎖化合物は特定の所望の特性を付与するため（例えば親水性または生物利用性を向上させるため）に分枝鎖化されるか、他の態様で置換された類似体を有してよい。
【００２３】
「誘導体」とは本明細書においては、親化合物と構造的に同様であり、そして、親化合物から（事実上または理論的に）誘導可能な化学物質の化学的または生物学的に修飾された別形を指す。一般的に、「誘導体」は「類似体」とは、親化合物が「誘導体」を生成するための原料であってよいのに対し、親化合物は必ずしも「類似体」を生成するための原料として使用されないという点において、異なっている。類似体は親化合物の種々の化学的または物理的特性を有していてよい。例えば誘導体は親化合物と比較してより親水性であってよく、または、改変された反応性を有していてよい。
【００２４】
誘導体化（即ち修飾）は分子内の部分１つ以上の置換（例えば官能基の変化）を包含してよい。例えば水素はフッ素または塩素のようなハロゲンで置換されてよく、或いは、ヒドロキシル基（−ＯＨ）はカルボン酸部分（−ＣＯＯＨ）で置き換えられていてよい。
【００２５】
「誘導体」という用語はまた全ての溶媒和物、例えば水和物または付加物（例えばアルコール付加物）、活性代謝産物および親化合物の塩の全てを指すものとする。調製してよい塩の形は化合物内の部分の性質により変動する。例えばカルボン酸基のような酸性の基はアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩（例えばナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩およびカルシウム塩、および生理学的に耐容性のある第４アンモニウムイオンとの塩、および、アンモニアおよび例えばトリエチルアミン、エタノールアミンまたはトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミンのような生理学的に耐容性のある有機アミンの酸付加塩）を形成することができる。塩基性の基は例えば塩酸、硫酸またはリン酸のような無機酸と、または、酢酸、クエン酸、乳酸、安息香酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、メタンスルホン酸またはｐ−トルエンスルホン酸のような有機のカルボン酸およびスルホン酸との酸付加塩を形成することができる。塩基性の基および酸性の基、例えば塩基性窒素原子に加えてカルボキシル基を同時に含有している化合物は両性イオンとして存在できる。塩は例えば化合物を溶媒または希釈剤中の無機または有機の酸または塩基の化合物と組み合わせることにより、または、カチオン交換またはアニオン交換により他の塩から、当該分野でよく知られている慣用的な方法により得ることができる。
【００２６】
他の型の誘導体は親化合物のコンジュゲートおよびプロドラッグ（即ち生理学的条件下で元の化合物に変換されることができる化学修飾された誘導体）を包含する。例えばプロドラッグは活性剤の不活性型であってよい。生理学的条件下において、プロドラッグは化合物の活性型に変換される。プロドラッグは例えば窒素原子上の水素原子１つまたは２つをアシル基（アシルプロドラッグ）またはカーバメート基（カーバメートプロドラッグ）により置き換えることにより形成してよい。プロドラッグに関するより詳細な情報は例えばＦｌｅｉｓｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  １９（１９９６）１１５；Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ（ｅｄ．），Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８５；またはＨ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，  Ｄｒｕｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｆｕｔｕｒｅ，１６（１９９１）４４３に記載されている。
【００２７】
「阻害する」とは本明細書においては、統計学的、生物学的または臨床的に有意である対照と相対比較した場合の酵素（例えばヒアルロニダーゼ）の活性にける直接または間接的な改変、低下または消失を指す。
【００２８】
本明細書において示す何れかの濃度範囲は特段の記載が無い限り、何れかの整数の、その範囲、および、整数の１０分の一および１００分の一のようなその分数の濃度を包含するものと理解される。さらに又、重合体のサブユニット、大きさまたは厚みのような何れかの物理的態様に関して本明細書に示した何れかの数の範囲は、特段の記載が無い限り、示した範囲内の何れの整数も包含するものと理解される。本明細書において使用する列挙される要素については単数と複数を区別しない。本明細書においては、「約」という用語は特定の数値、範囲または構造の±１５％を意味する。本明細書においては、「包含する」および「含む」という用語は同義語として使用する。
【００２９】
本明細書においては、「平均」という用語は算術平均、並びに、例えば重合体の分子量または粒径分布の場合に用いられるような何れかの適切に加重された平均を包含する。
【００３０】
例えば特定の操作法または組成物（例えば化合物、タンパク質等）をより詳細に説明する種々の参考文献を本明細書内に記載する。これ等の参考文献は、特許および学術文献を含めて、参照により全体が本明細書に組み込まれる。ＰＣＴ出願に言及する場合は、根拠となる、または引用された米国特許出願もまた参照により全体が本明細書に組み込まれるものとする。
【００３１】
（Ｉ．ヒアルロン酸）
ヒアルロン酸は関節滑液、眼の硝子体液、軟骨、血管、皮膚および臍帯を包含する多くの組織の細胞外マトリックス中に存在する天然物である。分子量約１．２〜１．５百万ダルトン（Ｄａ）を有するヒアルロン酸の市販品形態は雄鳥の鶏冠および他の動物原料から抽出される。他のＨＡ原料は細胞培養物／醗酵工程から単離されるＨＡを包含する。より小さい分子量のＨＡ製剤もまた種々の市販元から入手できる。
【００３２】
一般的に本発明における使用に適するＨＡ製品の多くの市販元があり、即ち、ＨＩは本発明に従って添加してよい多くのＨＡ市販品が存在する。例としては、変形性関節症の治療のため、粘度補充のため、眼科用粘弾性製品として、顔面美容（皮膚）のため、および、膀胱尿管逆流インプラント（増量剤）としての市販の組成物が包含される。これ等および他の製品に関する詳細な説明は以下に示す通りである。
【００３３】
変形性関節症の疼痛および他の症状の関節内治療のためのＨＡ含有物質は以下の物質を包含する。Ｇｅｎｚｙｍｅ  Ｂｉｏｓｕｒｇｅｒｙ（Ｒｉｄｇｅｆｉｅｌｄ，ＮＪ）より入手できるＳＹＮＶＩＳＣは雄鳥鶏冠から誘導されたヒラン［ヒアルロン酸ナトリウム（ヒアルロナン）の誘導体］重合体を含有する粘弾性流体である。Ａｎｉｋａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（Ｗｏｂｕｒｎ，ＭＡ）より入手できるＯＲＴＨＯＶＩＳＣは膝の変形性関節症（ＯＡ）に罹患した患者における疼痛の緩解および関節の運動性および運動範囲の改善を意図した高度に精製された高分子量の高粘度の注射可能な形態のＨＡである。ＯＲＴＨＯＶＩＳＣは滑液の弾性および粘度を温存するために膝内に注射される。ＨＹＶＩＳＣは競走馬の変形性関節症および凝りを治療するために現在使用されているＡｎｉｋａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓにより開発された高分子量の注射可能なＨＡ製品である。本発明のＨＩと組み合わせてよい変形性関節症の治療のための他のＨＡ系の粘度補充用製品はＭｅｄｅｘｕｓ，Ｉｎｃ．（Ｃａｎａｄａ）のＨＹＡＬＧＡＮ、Ｓｅｉｋａｇａｋｕ  Ｃｏｒｐ．（Ｊａｐａｎ）のＳＵＰＡＲＴＺ、Ｂｉｏｎｉｃｈｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．（Ｃａｎａｄａ）のＳＵＰＬＡＳＹＮ、ＤｅＰｕｙ  Ｏｒｔｈｏｐａｅｄｉｃｓ，Ｉｎｃ．（Ｗａｒｓａｗ，ＩＮ）のＡＲＴＨＲＥＡＳＥおよびＱ−Ｍｅｄ  ＡＢ（Ｓｗｅｄｅｎ）のＤＵＲＯＬＡＮＥを包含する。
【００３４】
ＨＡの粘弾性溶液は目の状態を治療するため、例えば白内障摘出手術、眼内レンズ移植、網膜再付着、水晶体超音波吸引術、角膜移植および緑内障濾過手術中のガラス体代替物として使用されている。ＡＭＶＩＳＣおよびＡＭＶＩＳＣ  ＰＬＵＳ（共にＡｎｉｋａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ．より入手）およびＯＣＵＣＯＡＴ（Ｂａｕｓｃｈ＆Ｌｏｍｂ）は眼の形状を維持し、そして、白内障摘出、角膜移植および緑内障手術の間の壊れ易い組織を保護するために使用されている高分子量の粘弾性で注射可能なＨＡ溶液である。ＨＡ系の眼科用粘弾性製品にはＡｌｃｏｎ  ＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓのＰＲＯＶＩＳ、ＶＩＳＣＯＡＴ、ＤＵＯＶＩＳＣおよびＣＥＬＬＵＧＥＬ；Ｐｈａｒｍａｃｉａ＆ＵｐｊｏｈｎのＨＥＡＬＯＮ、ＨＥＡＬＯＮ  ＧおよびＨＥＡＬＯＮ５、ＡｌｌｅｒｇａｎのＶＩＴＲＡＸ；Ｂｉｏ−Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ＧｅｎｅｒａｌのＢＩＯＬＯＮ；Ａｎｉｋａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ／Ｓｔａａｒ  ＳｕｒｇｉｃａｌのＳＴＡＡＲＶＩＳＣ；Ａｎｉｋａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ／Ｃｙｔｏｓｏｌ  ＯｐｈｔｈａｌｍｉｃｓのＳＨＥＬＬＧＥＬ；およびＮｏｖａｒｔｉｓのＵＮＩＶＩＳＣが包含される。
【００３５】
ＨＡ系製品はまた増量剤として使用できる。ここでは、典型的には阻害不能な括約筋を包囲する組織を「増量」するために、材料を組織に注入することにより容量を温存し、支持を確保し、そして機能を温存する。ＨＡ系増量剤は尿失禁、便失禁および胃食道逆流の治療において使用され；全て括約筋の不全または損傷の結果として漏出が起こる状態である。本発明において使用するためのＨＡ系の膀胱尿管逆流（尿失禁）製品の代表例はＱ−Ｍｅｄ／Ｐｒｉｏｒｉｔｙ  ＨｅａｌｔｈｃａｒｅのＤＥＦＬＵＸである。
【００３６】
ヒアルロン酸製品はまた種々の外科的処置の後に癒着防止のために使用される。癒着は手術中に損傷を受けた隣接組織間に起こる瘢痕組織の結合または架橋である。癒着瘢痕組織は正常な解剖学的機能を損ない、そして、疼痛、腸閉塞、不妊および神経根捕獲を包含する多くの臨床的問題点をもたらす場合がある。生体吸収性交差結合ヒアルロン酸（ＨＡ）製品のＩＮＣＥＲＴファミリーは瘢痕組織の形成を阻害するための障壁として機能するように手術中の隣接組織間に入れられるように設計されている。他のＨＡ系手術癒着用製品にはＧｅｎｚｙｍｅ  Ｂｉｏｓｕｒｇｅｒｙ，Ｉｎｃ．（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）のＧＹＮＥＣＡＲＥ  ＩＮＴＥＲＧＥＬ（ＬｉｆｅＣｏｒｅ）およびＳＥＰＲＡＦＩＬＭ付着障壁が包含される。
【００３７】
他のＨＡ製品には欠損部分の充填、瘢痕形成防止、組織支持および治癒加速を目的とした整形外科手術中の使用のために作成されたインプラントが包含される。例えばＯＳＳＩＧＥＬは骨折治癒を加速するために設計されたヒアルロン酸（ＨＡ）および塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）の粘性製剤である（Ｏｒｑｕｅｓｔ，Ｉｎｃ．）。
【００３８】
医療におけるＨＡ製品の使用の最も急速に成長している分野は恐らくは身体増強（例えば顔面）、皺治療および他の美顔美容用途である。美顔処置においては、ＨＡは典型的には線または他の望ましくない斑点の露出を減少させる目的のために皮膚の陥没または欠損部に充填するために皮下組織内に注入される。この目的のために入手可能である製造されている合成ヒアルロンゲルはＨＹＬＡＦＯＲＭ（別名ＨＹＬＡＮ  Ｂ、Ｇｅｎｚｙｍｅ  Ｂｉｏｓｕｒｇｅｒｙ）；ＲＥＳＴＹＬＡＮＥおよびＰＥＲＬＡＮＥ（Ｑ−Ｍｅｄ  ＡＢ，Ｓｗｅｄｅｎ）を包含する。ＭＡＣＲＯＬＡＮＥ（Ｑ−Ｍｅｄ）は豊胸のために開発された製品である。
【００３９】
ＨＡ含有物質を利用する他の用途は薬物送達、癌治療および間質性膀胱炎の治療を包含する。薬物送達において使用するため、そして、ＨＩと組み合わせてよいＨＡ含有物質の例は、ヒアルロン誘導ターゲティング（ＨＩＴ）（ＳｋｙｅＰｈａｒｍａ（ＵＫ））およびＮＡＳＨＡゲル（Ｑ−Ｍｅｄ）を包含する。局所用製剤、例えばＭｅｄｉｔｅｃｈ（Ａｕｓｔｒａｌｉａ）のＳＯＬＡＲＥＳＥおよびＳＯＬＡＲＡＳＥは皮膚がんの治療に使用される局所用ゲルである。間質性膀胱炎の治療に使用される市販のＨＡ系物質は膀胱の上皮上のグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）層の一次的交換のための滅菌ヒアルロン酸ナトリウム溶液であるＣＹＳＴＩＳＴＡＴ（Ｂｉｏｎｉｃｈｅ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．）を包含する。
【００４０】
従って、精製されたＨＡおよびＨＡを含有する組成物は共に、種々の臨床適応症のために市場において容易に入手可能である。これ等のＨＡ含有物質はＨＡ原料として本発明において使用してよいＨＡ含有物質の例である。
【００４１】
（ＩＩ．ヒアルロニダーゼ阻害剤）
種々の化合物がインビボのＨＡの酵素的分解を阻害または低減するために使用でき、そして本発明の実施における使用のために適している。例えば化合物をＨＡと組み合わせることにより、種々の臨床適応症において分解に抵抗し、延長された活性を有するＨＡインプラントを製造することができる。
【００４２】
ヒアルロニダーゼ阻害剤（ＨＩ）はマイクロモル〜ミリモルの範囲の濃度においてインビボでヒアルロン酸の分解を阻害するために使用してよい。これ等の化合物はヒアルロン酸と同時に、または逐次的に送達してよい。例えばＨＩは投与用製剤にヒアルロン酸を配合することによりヒアルロン酸と同時に患者に送達してよい。或いは、またはさらに加えて、これ等のＨＩ化合物はヒアルロン酸投与の後に投与してよい。特定の態様において、これ等の化合物の重合体剤型からの制御された放出を介したこれ等の化合物への標的組織の連続曝露が好ましい場合がある。これ等の組成物および他の組み合わせを本明細書においてさらに詳述する。
【００４３】
（１．金化合物）
種々の金化合物がインビボのＨＡ分解の阻害剤として機能することができ、そして本発明の実施における使用のために適している。金化合物は本明細書においては、金がリガンド１つ以上とキレート形成または結合している複合体、有機金化合物、無機金化合物およびその塩および単体（例えば金属）の金を包含する。化合物は親水性、疎水性、両親媒性であってよく、そして溶液中に溶解するか、または粒子懸濁物の形態（例えばコロイド金）であってよい。しばしば有機金属化合物は毒性である場合があるが、このような化合物が治療を受ける対象に対して毒性とならないように使用すべき量を決定する方法は当業者の知るとおりである。種々の臨床適応症において分解に抵抗し、延長された生物学的活性を有するＨＡ金インプラントを製造するためにＨＡと組み合わせることができる金化合物の例を以下に記載する。
【００４４】
（ａ．金（Ｉ）複合体）
１つの態様において、金化合物は金（Ｉ）複合体である。金複合体は金（Ｉ）がリガンド１つ以上とキレート形成、結合、複合体系性または他の態様で連結している化合物を包含する（例えば配位複合体）。このような金（Ｉ）複合体の代表例は金（Ｉ）ホスフィン化合物、金（Ｉ）ホスフィンまたはホスフェートチオレート、ビス配位金（Ｉ）塩および金（Ｉ）キレートを包含する（米国特許５，５２７，７７９参照）。
【００４５】
金（Ｉ）ホスフィンおよび関連化合物は一般式Ｒ３ＰＡｕＸを有し、ここでＲはアルキル（例えばメチル、エチル、イソプロピルまたはｎ−ブチル）、アリールまたは複素環またはこれ等の置換された誘導体であり、そしてＸはハロゲンである。金（Ｉ）ホスフィン化合物の代表例は例えばトリフェニルホスフィン複合体（Ｐｈ３ＰＡｕＣｌ）およびＥｔ３ＰＡｕＣｌを包含する。
【００４６】
別の例は一般式Ｒ３ＰＡｕＸを有し、ここでＸはイミダゾールであるか、または、Ｘは２−チアゾリニル、チオ−２−ベンズイミダゾリルまたは２−ベンゾキサゾリルチオ−部分である。
【００４７】
金（Ｉ）ホスフィン化合物の別の例はＮＳＣ６５２５３７、ＮＳＣ６５２５３９、ＡｕＳＰおよびＡｕＮＰコア部を有する２−配位トリフェニルホスフィン金（Ｉ）複合体（例えばＮｏｍｉｙａ，  Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｎｏｒｇ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２００３：９５（２−３：２０８−２０参照）、モノおよびジホスフィン誘導体を含有する複合体、例えばクロロトリフェニルホスフィン−１，３−ビス（ジフェニルホスフィン）プロパン金（Ｉ）（例えばＣａｒｕｓｏ，Ｆ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００３；４６（９）：１７３７−４２参照）、ピラゾールおよびイミダゾールのような窒素含有複素環を有するトリフェニルホスフィン複合体（例えばＮｏｍｉｙａ，  Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｎｏｒｇ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２０００  Ｍａｒ；７８（４）：３６３−７０参照）、クロロ（トリフェニルホスフィン）金（Ｉ）（ＴＥＰＡｕ）（Ｅｔ３ＰＡｕＣｌ）およびホスホネート複合体（およびホスフィン反応産物）およびテトラキス（（トリヒドロキシメチル）ホスフィン）金（Ｉ）塩化物（例えばＰｉｌｌａｒｓｅｔｔｙ，  Ｎ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００３；４６（７）：１１３０−１１３２参照）を包含する。
【００４８】
関連化合物の例は一般式（ＲＯ）３ＰＡｕＸを有するトリアルキルホスファイト金化合物および式Ｒ３ＰＡｕＳＣＮおよび（ＲＯ）３ＰＡｕＳＣＮを有するチオシアネート金複合体を包含し、指揮中Ｒはアルキル（例えばメチル、エチル）、アリール（例えばフェニル）または複素環であり、そして置換または未置換であってよく、そしてＸはハロゲンである。金（Ｉ）ホスフィン（またはホスファイト）チオレートは一般式Ｒ３ＰＡｕＳＲ’を有するこれ等の化合物を包含し、式中、Ｒはアルキル（例えばエチル）、アルコキシまたはフェニルであり、そしてＲ’はＨ、アルキル、アリールまたは複素環であり、そして置換または未置換であってよい。例えばＲ’は置換された炭水化物部分であってよく、その結果、下記一般式：
【００４９】
【化１】
2008509935.tif 000002
［式中、ＸはＨ、アセチルまたはホルミルであり；ＹはＯまたはＳであり；そしてｎは１〜１２である］を有する化合物が生じる。
【００５０】
金ホスフィン化合物の例はオーラノフィン（１−チオ−β−Ｄ−グルコピラノース−２，３，４，６−テトラアセト−Ｓ）（トリエチルホスフィン）金）であり、これは抗炎症および抗リウマチ特性を有することが解っている。
【００５１】
ホスフィンまたはホスファイトＡｕ（Ｉ）チオレートの他の例は下記：
【００５２】
【化２】
2008509935.tif 000003
およびホスフィンまたはホスフェートＡｕ（Ｉ）複合体、例えばチオアルコール、チオ酸およびチオフェノールの誘導体、およびＸが２−チアゾリニル、チオ−２−ベンズイミダゾリルおよび２−ベンゾキサゾリルチオである一般式Ｒ３ＰＡｕＸを有するもの、一般式（Ｒ３ＰＡｕ）２Ｓを有するものを包含し、そしてより大きい環のキレート化合物、例えば下記：
【００５３】
【化３】
2008509935.tif 000004
［式中、ＲはＨ、アルキル、アリールまたは複素環であり、そして置換または未置換であってよい］も使用してよい。
【００５４】
他の金キレートの例はＷｅｉｎｓｔｏｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１７（１）：１３９−１４０，１９７４に記載の大きい環のキレートを包含する。
【００５５】
ビス配位金（Ｉ）塩の例は、以下の一般式：［Ｒ３ＰＡｕＰＲ３］＋Ｘ；［Ｒ２ＳＡｕＳＲ２］＋Ｘ；［ＲＣ５Ｈ４ＮＡｕＮＣ５Ｈ４Ｒ］＋Ｘ；および［Ｒ３ＰＡｕＮＣ５Ｈ４Ｒ］＋Ｘを有するものを包含し、ここで式中、Ｒはアルキル、アリールまたは複素環であり、置換または未置換であることができ；そしてＸはハライド、ＣｌＯ４、ＢＦ４または当該分野で知られた何れかの１価または２価のアニオンである。
【００５６】
金（Ｉ）キレートの代表例は以下の一般式：
【００５７】
【化４】
2008509935.tif 000005
［式中、Ｒは何れかの適切な架橋部分であり、そして置換または未置換のアルキル、アリールまたは複素環であってよく；ＸはＯ、ＮまたはＳＯ２ＮＲ２であり、そしてＲ１はＨ、アルキル、アリールまたは複素環であり、置換または未置換であることができる］を有する。例えばＲはＣ６Ｈ４であってよく、ＸはＯであり、そしてＲ１はＣ２Ｈ５である。
【００５８】
（ｂ．有機金化合物）
別の態様において、金化合物は有機金化合物である。本明細書に記載したものを含む種々の有機金化合物を本発明の組成物中で使用してよい。
【００５９】
１つの態様において、有機金化合物は抗炎症および抗リューマチ特性を有していてよい（例えば金療法化合物とも称する）。金療法の金化合物の代表例はオーラノフィン（上記）、金チオポリペプチドおよび金チオマレートおよび金チオリンゴ酸ナトリウム（ＭＹＯＣＲＩＳＩＮ；ブタンジオン酸、メルカプト−、モノ金（１＋）ナトリウム塩（９ＣＩ））（Ｊ．Ｒｅｐｒｏｄ．Ｆｅｒｔｉｌ．１９８０；６０（２）：４６１−７参照）を包含し、これは以下の一般構造：
【００６０】
【化５】
2008509935.tif 000006
を有している。
【００６１】
有機金化合物の他の例は金チオグルコース（１−チオ−Ｄ−グルコピラノセート−Ｏ２，Ｓ１）金およびその誘導体、例えばビス（チオグルコース）金（Ｉ）、ビス（チオマレート）金（Ｉ）、およびオーレート（１−）｛［３−［［２−プロペニルアミノ）チオキソメチル］イミノ］ベンゾエート（２−）］−，ナトリウム｝］（ＮＳＣ６１７７４６ナトリウム塩）および金（Ｉ）複合体、例えばピリジン誘導体、例えばＮＳＣ６８９４１８およびＮＳＣ６８９４１９、イミダゾール誘導体、例えばクロトリマゾールおよびケトコナゾール（例えばＮａｖａｒｒｏ，Ｎ．，ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００１；４０（２７）：６８７９−８４参照）、ＮＳＣ６５２５３８および２核の金（Ｉ）ジチオホスホネート複合体（例えばＭａｓｐｅｒｏ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００３；４１（１７）：５３１１−９参照）を包含する。
【００６２】
（ｃ．金（ＩＩＩ）複合体）
別の態様において、金化合物は金（ＩＩＩ）複合体である。金（ＩＩＩ）複合体の代表例は、コリルグリシナト複合体、例えばクロロビスコリルグリシナト金（ＩＩＩ）（例えばＣａｒｒａｓｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｎｏｒｇ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．８４（３−４）；２８７−９２，２００１）、３および４座のホスフィノチオレート複合体（例えばＯｒｔｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．３９（１３）：２８０１−６，２０００参照）およびエチレンジアミン、ジエチレントリアミン、テトラアザシクロテトラデカン、２，２−ビピリジン、６−（１，１−ジメチルベンジル）−２，２’−ビピリジン）、サイクラム、フェナントロリン、ターピリジンリガンドとの複合体（例えばＭｅｓｓｏｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４３（１９）：３５４１−８，２０００およびＭａｒｃｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２７０（２３）：４６５５−６１，２００３参照）を包含する。
【００６３】
（ｄ．無機金化合物）
別の態様において、金化合物は無機金化合物である。無機金化合物の代表例は金ＩＩＩおよびＩＶの塩化物（それぞれＡｕＣｌ３およびＡｕＣｌ４）および金塩、例えば金（ＩＩ）塩化物、塩酸塩、ナトリウム金（ＩＩＩ）塩化物およびチオ硫酸金ナトリウムを包含する。
【００６４】
（ｅ．金粒子）
別の態様において、金は粒子の形態である。平均粒径約５０ｎｍ未満の金属金粒子は「コロイド状金」と称する場合がある。コロイド状金の調製品は通常は液体懸濁物の形態であり、約０．５ｎｍ〜約４０ｎｍまたは約１０ｎｍ未満、または約１ｎｍ〜約３ｎｍの範囲の金粒子を包含する。コロイド状金粒子は当該分野で知られた方法を用いて調製してよく、そして市販品を入手可能である。
【００６５】
金粒子は官能基付与されていてもいなくてもよい。官能基付与された金粒子は例えばオリゴヌクレオチド、脂質、ペプチド、タンパク質、酵素阻害剤、抗体または適切な反応性部分を有する他の化合物のような化合物にコンジュゲートしてよい。
【００６６】
種々の官能基付与および非官能基付与の金粒子がＮａｎｏｐｒｏｂｅｓ．Ｉｎｃ．（Ｙａｐｈａｎｋ，ＮＹ）より入手可能である。正荷電および負荷電のＮＡＮＯＧＯＬＣ粒子（１．４ｎｍ）を本発明の組成物中に使用してよい。正荷電ＮＡＮＯＧＯＬＤはその表面に多重アミンを有し、負荷電ＮＡＮＯＧＯＬＤは多重カルボキシル基を有する。官能基付与されたＮＡＮＯＧＯＬＤ粒子は種々の生物学的化合物にコンジュゲートしてよい。例えば、モノマレイミドＮＡＮＯＧＯＬＤはスルヒドリルでシステインおよび他の分子を含有するＦａｂ’、ＩｇＧ、タンパク質またはペプチドを共有結合的に標識するために使用してよい。同様の製品であるモノマレイミドウンデカ金（同様にＮａｎｏｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．より入手）はチオール（−ＳＨ）を選択的に標識するための単一のマレイミド基を有する直径僅か０．８ｎｍの１１金原子のコアを有する。モノスルホＮＨＳ−ＮＡＮＯＧＯＬＤはタンパク質、脂質、ペプチド、修飾オリゴヌクレオチドまたは他のアミン含有分子への共有結合のための第１アミンと反応するスルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（スルホ−ＮＨＳ）を含んでいる。ウンデカ金化合物系の同様の製品もまた入手可能である（モノスルホＮＨＳ−ウンデカ金）。他の交差結合反応（例えば糖タンパク質の炭水化物部分への共有結合）のために結合した第１アミンを有するＮＡＮＯＧＯＬＤ粒子も又入手可能である。ポリ−Ｌ−リジンとのコロイド状金粒子のコンジュゲート形成により生じるカチオン形金粒子は商品名ＢＩＯＳＩＴＥの下にＥｎｅｒｇｙ  Ｂｅａｍ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ（Ａｇａｗａｍ，ＭＡ）から入手できる。
【００６７】
例えば金チオマレートのような金化合物はヒアルロン酸の分解を阻害するために使用してよい。これ等の化合物はヒアルロン酸と同時または逐次的に送達してよい。例えば金化合物は投与される製剤に金化合物を配合することによりヒアルロン酸と同時に患者に送達してよい。或いは、またはさらに加えて、これ等の化合物はヒアルロン酸投与後に投与してよい。特定の態様において、これ等の化合物の重合体剤型からの制御放出を介して金化合物に標的組織を連続的に曝露することが好ましい場合がある。
【００６８】
（２．多糖類）
１つの態様において、ヒアルロニダーゼ阻害剤は多糖類または硫酸化（即ちスルフェート含有）多糖類または硫酸化多糖類の類似体または誘導体であってよい。多糖類の代表例はアルギン酸、ペクチンおよびグリコサミノグリカンを包含する（例えばＢｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９９７；６１（６）：１０３０−２，Ｊ．Ｅｎｚｙｍｅ  Ｉｎｈｉｂ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００２；１７（３）：１８３−６参照）。スルホン化化合物の代表例はスルホン化度０．２〜１のスルホン化β−（１，４）−ガラクトオリゴ糖（ｎ＝２〜６）、スルホン化ネオマイシン、Ｏ−スルホン化ＨＡ（例えばＡｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．１９９９；３７０（２）：１７６−８２参照）、スルホン化プラネトース、硫酸化ヒドロキノンジグラルクトシド及、硫酸化２−ヒドロキシフェニルモノラクトビオシドを包含する。硫酸化多糖類の代表例はヘパリン／ヘパリンスルフェート（例えばＡｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．１９９９；３７０（２）：１７６−８２；Ｍａｔｒｉｘ  Ｂｉｏｌ．２００２；２１（１）：３１−７）、デキストラン硫酸およびフカン（例えばフコイダン）を包含する。
【００６９】
デキストラン硫酸はカチオンおよびポリカチオンと相互作用することができる水溶性の高いポリアニオンである。従ってデキストラン硫酸は種々の膜、特に正電荷を有するものに結合することができる。デキストラン硫酸は種々の臨床用途を有することが報告されている。デキストラン硫酸および誘導体は癌細胞の成育を阻害し（Ｂｉｔｔｏｕｎ，Ｐ．，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １９９９（３−４）ｐ２４７−２５５）；抗凝固作用を有し（Ｍａｕｒａｙ  Ｓ．，１９９８  Ｊ  Ｂｉｏｍａｔ．Ｓｃｉ．Ｐｏｌｙ  ｅｄ．１９９８  ９  ４  ｐ３７３−８７）；シンシチウム形成またはＡＩＤＳ患者において生じる白血球凝集を防止し；そして感受性の天然成分のための安定化剤（医薬品賦形剤）として機能できることがわかっている。
【００７０】
ヘパリンは抗凝固特性を有するグリコサミノグリカンと称される直鎖のアニオン性のムコ多糖類の異質物群である。その主要な活性成分は製造方法および原料に応じて約６０００〜２０，０００の分子量を有する１，４−α−結合におけるＤ−グルクロン酸およびＤ−グリコサミン（共に硫酸化）を有するグリコサミノグリカンである。異なるヘパリン試料は多様な程度のＮ−およびＯ−硫酸化をヘキソースアミンおよびヘキスロン酸残基内に有する場合がある。ヘパリン（その誘導体を包含する）は血液凝固が問題となる多くの血管の状況（例えば開心術および透析）において抗凝固剤として広範に使用されている。
【００７１】
フカン（フコイダンを包含する）は褐藻類から抽出される高分子量の硫酸化多糖類である。これ等の化合物は抗血栓、抗増殖、抗補体、抗癌および抗好中球遊走作用を包含するインビボおよびインビトロの多重阻害作用を有している（Ｒｉｏｕ  Ｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１６（３Ａ）：１２１３−１２１８，１９９６；Ｉｔｏｈ，Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １３（６Ａ）：２０４５−２０５２、１９９３；Ｎｉｓｈｉｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｒｏｍｂ．Ｒｅｓ．６２：７６５−７７３，１９９１；Ｂｌｏｎｄｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３１：２４７−２５３，１９９４；Ｐａｔａｎｋａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６８：２１７７０−２１７７６，１９９３）。フコイダンも又、健康食品として販売されており、そして美顔品または皮膚薬として提案されている（例えばＪＰ０１０３１７０７およびＪＰ０１０８５９０５参照）。
【００７２】
ヘパリン、ヘパランスルフェート、デキストラン硫酸およびフコイダンのような  硫酸化多糖類はヒアルロン酸の分解を阻害するために使用してよい。これ等の化合物はヒアルロン酸と同時または逐次的に送達してよい。例えば硫酸化多糖類は投与用製剤に硫酸化多糖類を配合することによりヒアルロン酸と同時に患者に送達してよい。或いは、またはさらに加えて、これ等の化合物はヒアルロン酸投与の後に投与してよい。特定の態様において、これ等の化合物の重合体剤型からの制御された放出を介した硫酸化多糖類への標的組織の連続曝露が好ましい場合がある。
【００７３】
（３．ＰＬＡ、ＰＬＧＡおよび他の物質の共重合体）
別の態様において、ヒアルロニダーゼ阻害剤（ＨＩ）は重合体物質であってよい。重合体は単独重合体または共重合体（例えばジブロックまたはトリブロック共重合体）であってよい。１つの態様において、単独重合体はポリ（乳酸）（ＰＬＡ）である。１つの態様において、重合体はジブロック共重合体である。種々のジブロック共重合体がインビボのＨＡ分解の阻害剤として機能し、そして、本発明の実施における使用に適している。
【００７４】
種々の臨床適応症において分解に抵抗し延長された生物学的活性を有するＨＡジブロック共重合体インプラントを製造するためにＨＡと組み合わせることができるジブロック共重合体の例は、乳酸および／またはグリコール酸およびポリ（エチレングリコール）のジブロック共重合体を包含する。１つの態様において、共重合体は構造（−Ｏ−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＯ−）を有する乳酸残基、構造（−ＯＣＨ２ＣＨ２−）を有するエチレンオキシド残基、グリコール酸残基（−Ｏ−ＣＨ２−ＣＯ−）またはカプロラクトン残基（−Ｏ−（ＣＨ２）５−ＣＯ−）を包含してよい。例えばジブロック共重合体はポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＰＥＧ）；ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＬＧＡ−ＰＥＧ）；およびポリ（カプロラクトン）−ｃｏ−ポリ（エチレングリコール）（ＰＣＬ−ＰＥＧ）であってよい。１つの態様においては、重合体はメトキシポリ（エチレングリコール）およびポリ（Ｌ−乳酸）の６０：４０比を有する共重合体（ＭｅＰＥＧ−ＰＬＬＡ）であってよい。これ等の共重合体の全てにおいて、メトキシポリ（エチレングリコール）（ＭｅＰＥＧ）はＰＥＧと置換されていてよい。１つの態様においては、共重合体はポリ（Ｌ−乳酸）−ｃｏ−メトキシポリ（エチレングリコール）（ＰＬＡ−ＭｅＰＥＧ）である。
【００７５】
ジブロック共重合体内の単量体は鎖内に無作為に配置されてよく、または、相互に連結した個々の重合体の鎖であってよい。このような連結共重合体は多くの場合、疎水性の重合体および親水性の重合体の組み合わせを用いて製造される。例えば本来疎水性であるＰＬＡは本来親水性であるポリ（エチレングリコール）と組み合わせて使用してよい。得られる両親媒性の共重合体は親水性と疎水性の領域の両方を含有することになる。このような分子は、それらが何れかの領域を介して薬剤分子と会合することによりその挙動を修飾する場合があることから、医薬品産業において頻繁に利用されている。両親媒性共重合体は又主要な重合体の全体的挙動を修飾するための他の重合体とのブレンド剤として使用してもよい。このような特性はミセルを形成して非水溶性薬剤を可溶化するか、または、ＰＬＧＡのような剛性の重合体を可塑化してそれらがより生体適合性となりカプセル化された薬剤をより急速に放出されるようにするというジブロック共重合体の能力を変動させる場合がある（例えばＬｉｇｇｉｎｓ，Ｒ．Ｔ．，ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ（２００２）５４，ｐ１９１−２０２；Ｋｗｏｎ  Ｇ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９５）１６，ｐ２９５−３０９；およびＪａｃｋｓｏｎ、Ｊ．Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．（２００４），Ｉｎｔ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ（ｉｎ  Ｐｒｅｓｓ）参照）。
【００７６】
１つの態様において、ＨＩはポリ（エチレンオキシド）またはポリ（エチレングリコール）の共重合体である。ＰＥＧおよびＰＥＯの構造は同様であり、ＰＥＧは通常は分子量２０，０００未満の重合体を指し、ＰＥＯはより大きい分子量の重合体を指す。ＰＥＧの親水性および生体適合性の本質とＰＬＧＡの分解特性を包含する共重合体を製造するためにＰＬＡまたはＰＬＧＡにポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）またはポリ（エチレンオキシド）（ＰＥＯ）を組み合わせることに、多大な研究努力が集中されてきた。共重合体の組成に応じて、得られる重合体の特性は親水性から疎水性に、そして、非分解性から分解性に変動することができる。
【００７７】
ＰＬＡ１００およびポリ（エチレンオキシド）のブロック共重合体を開発する最も初期の研究の一部では、重合体マトリックスの平衡水分含有量が６０％超に達するように共重合体中に種々の量のＰＥＯを使用していた（Ｃｏｈｎ  ａｎｄ  Ｙｏｕｎｅｓ，１９８８）。これ等の特定の共重合体については、乳酸部分は２０〜８４モル％の範囲であり、ＰＥＯ鎖は約６００〜６０００の範囲のＭＷを有していた。ＰＬＡおよびＰＥＧのランダムブロック共重合体を用いた他の研究ではこれ等の物質の分解挙動および薬剤送達用の微粒子としてのその用途が評価されている。分解速度はＰＥＧ含有量に強力に依存していると考えられ、部分的に分解されたＰＬＡセグメントは場合によりそれらが他の態様で重合体塊から放出されるよりも前に結合ＰＥＧにより可溶化される。
【００７８】
１つの態様において、共重合体はＰＥＧまたはＰＥＯの中心的ブロックおよびＰＬＡ鎖を何れかの末端に含む。これらの重合体は、所定の長さのＰＥＧセグメントを原料とし、そして重合反応の開始剤としてＰＥＧを使用しながらＰＬＡを重合することにより製造してよい。ＰＥＧブロックの長さ並びにＰＬＡ１００ブロックの長さはこれ等の共重合体の水吸収性および分解に対して影響を有する。Ｋｉｓｓｅｌによる一連の報告ではこれ等のトリブロック物質の合成、インビトロ分解、薬物送達、インビトロ生体適合性、インビボ生体適合性、並びに、分解中のＰＬＡ−ＰＥＯ−ＰＬＡ微粒子の微小環境が研究されている。生体適合性の研究はＰＬＡ−ＰＥＯ−ＰＬＡ重合体が極めて同様で最小限の有害組織反応を示すことを明らかにしている。ＰＬＡ１００−ＰＥＯ−ＰＬＡ１００およびＰＬＡ５０−ＧＡ５０−ＰＥＯ−ＰＬＡ５０−ＧＡ５０重合体から製造した微粒子からのＢＳＡのインビトロ送達を比較した薬物送達試験は、ＰＬＡＧＡ含有重合体がかなり高度な連続放出を示したのに対し、ＰＬＡ含有重合体はＰＬＡＧＡ微粒子により典型的な２相的放出を有していたことを示している。ＰＬＡ５０−ＧＡ５０−ＰＥＯ−ＰＬＡ５０−ＧＡ５０微粒子からのチトクロームＣおよびＦＩＴＣデキストランの放出試験もまたインビトロの連続放出を示していた。
【００７９】
別の態様において、ＨＩはε−カプロラクトンから誘導した単量体単位を含む。例えばＨＩはＰＬＡまたはＰＧＡのε−カプロラクトンの共重合体であってよい。多くの研究グループがε−カプロラクトンとのＰＬＡまたはＰＧＡの共重合体を研究している。１つの研究においては、ＤＬ−ラクチド、グリコリドおよびε−カプロラクトンの６６種の３元重合体のシリーズが成型フィルムの分解速度および他の特性について調べられている（Ｓａｗｈｎｅｙ  ａｎｄ  Ｈｕｂｂｅｌｌ）。これ等によれば、最長の分解時間はグリコリドラクチドε−カプロラクトンの２：１：７比を有する重合体で、そして、最速の分解は６：３：１比の重合体で観察されている。ラクチドとε−カプロラクトンの共重合体の物理的特性はε−カプロラクトン含有量が５から２０％に上昇するに従い、硬質からゴム質に変化することがわかっている。５０％ε−カプロラクトン含有量を有する多孔性の共重合体は膝関節における半月板組織再生のためのインプラントとして評価されている。重合体は塊状崩壊挙動を示し、そして、分解中は主にＬ−ラクチドを含有する結晶性の相と主にε−カプロラクトンよりなる不定形の相に分離する。
【００８０】
さらに別の態様において、共重合体はグリシン、ｐ−ヒドロキシ安息香酸およびｐ−ヒドロキシケイヒ酸またはアスパラギン酸から誘導された単量体単位を含む。例えば共重合体はグリシン、ｐ−ヒドロキシ安息香酸およびｐ−ヒドロキシケイヒ酸またはアスパラギン酸およびＰＬＡまたはＰＧＡから誘導された単量体単位を含む共重合体であってよい。これ等の物質は、ＰＬＡまたはＰＧＡ単独とは異なる分解および放出の特性を有する生分解性の物質である。
【００８１】
これ等のジブロック共重合体（例えばカプロラクトンＰＥＧまたはＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体）は投与されるヒアルロン酸製剤にこれ等の物質を単にブレンドするか、溶解することによりヒアルロン酸の分解を阻害するために使用してよい。或いは、それらはヒアルロン酸を投与した後に投与してよい。
【００８２】
上記した重合体および共重合体（例えばジブロック共重合体）はヒアルロン酸の分解を阻害するために使用してよい。これ等の化合物はヒアルロン酸と同時または逐次的に送達してよい。例えば重合体は投与される製剤にヒアルロン酸を配合することによりヒアルロン酸と同時に患者に送達してよい。或いは、またはさらに加えて、これ等の化合物はヒアルロン酸投与後に投与してよい。特定の態様において、これ等の化合物の重合体剤型からの制御放出を介してこれ等の化合物に標的組織を連続的に曝露することが好ましい場合がある。
【００８３】
（４．医薬品用賦形剤）
別の態様において、ＨＩは医薬品用賦形剤であってよい。本明細書においては、医薬品用賦形剤とは患者への投与に適する剤型に薬理学的活性化合物を変換するために使用される添加剤を指す。
【００８４】
賦形剤は医薬品の生体利用性および生体同等性を向上させるために使用してよい。剤型の製剤において使用される賦形剤は充填剤、結合剤、錠剤崩壊剤、潤滑剤、コーティング、溶媒、懸濁剤および染料を包含するがこれ等に限定されない。これ等の賦形剤は高い水準の生体適合性を有するため、患者において如何なる望ましくない毒性も誘導することなく薬剤の製剤特性の向上においてその役割を果たすという点において有用である。
【００８５】
ＨＩとしての使用に適する賦形剤の例はカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）ナトリウム、プロピレンオキシドとエチレンオキシドの一部のトリブロック重合体（一連のこれ等の化合物は、ＢＡＳＦ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｍｏｕｎｔ  Ｏｌｉｖｅ，ＮＪから商品名ＰＬＵＲＯＮＩＣおよびＰＬＵＲＯＮＩＣ  Ｒの下に市販されている）およびポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を包含する。
【００８６】
ポリエチレングリコールは用途および所望の送達形態に応じて種々の物理的形態で使用されている。固体のＰＥＧは水溶性軟膏基剤として有用である。水性のベヒクル中においては、ＰＥＧは粘度およびコンシステンシーの調節のために使用できる。他の乳化剤と共に使用される場合は、ＰＥＧは乳化安定剤として機能することができる。液体のＰＥＧはソフトゼラチンカプセルの内容物のための水混和性ベヒクルとして使用される。低溶解性化合物の水溶性または溶解特性は適切なＰＥＧを用いて固体分散体を作成することにより増大させることができる。より高分子のＰＥＧは錠剤結合剤の有効性を増大させ、顆粒に可塑性を付与することができる。熱可塑性顆粒について使用される場合、１０〜１５％ＰＥＧ６０００の粉末化成分の混合物を７０〜７５℃に加熱する。塊はペースト様となり、冷却しながら攪拌すれば顆粒を形成する。その手法は延長された崩壊が必要である場合にはロゼンジのような剤型に対して有用である。ＰＥＧはフィルムコーティング中の可塑剤として使用されている。固体の等級はフィルムコーティング錠剤のために単独で使用することができ、そして親水性の光沢付与物質として有用である。それらはフィルム形成重合体と組み合わせて可塑剤として広範に使用されている。フィルム中の特に液体等級のＰＥＧの存在はその水浸透性を増大させる傾向を有し、そして腸溶性コーティングフィルムにおける低ｐＨに対抗した保護性を低減する場合がある。ＰＥＧはマイクロカプセルが圧縮されて錠剤とされる場合にコーティングフィルムの破断を回避するためのマイクロカプセル化製品中の可塑剤として有用である。ＰＥＧ６０００以上の等級は特に溶解性錠剤中の潤滑剤として使用できる。潤滑剤の作用はステアリン酸マグネシウムほど良好ではなく、圧縮中に材料の加温が過剰になれば付着性が発生する場合がある。抗付着作用もまた発揮され、ここでも過剰加熱の回避の対象となる。
【００８７】
別の態様において、医薬品用賦形剤はソルビタンエステル（ＳＰＡＮ）、例えばＳＰＡＮ２０、ＳＰＡＮ４０およびＳＰＡＮ８５（Ａｄｏｌｏｒ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｅｘｔｏｎ，ＰＡ）である。
【００８８】
さらに別の態様において、医薬品用賦形剤はポリソルベート化合物、例えばＴＷＥＥＮ（ＩＣＩ  Ａｍｅｒｉｃａｓ  Ｉｎｃ．，Ｂｒｉｄｇｅｗａｔｅｒ，ＮＪ）であり、これは典型的には水中油乳化剤として、そして乳液、クリーム、軟膏および座薬基剤中で使用される。ＴＷＥＥＮはソルビタンエステルのポリオキシエチレン誘導体である。ポリオキシエチレン鎖の存在がこれ等の誘導体を親水性とする。ポリソルベートは経口摂取された場合に良好な耐容性を示し、毒性はきわめて低く、実質上は局所的には無刺激性である。
【００８９】
さらに別の態様において、医薬品用賦形剤はプロピレングリコールであり、これは溶媒、抽出剤および保存料として広範に使用されている。
【００９０】
医薬品用賦形剤、例えばプロピレングリコール、カルボキシメチルセルロース、ＰＬＵＲＯＮＩＣおよびＳＰＡＮはヒアルロン酸の分解を阻害するために使用してよい。これ等の化合物はヒアルロン酸と同時または逐次的に送達してよい。例えば重合体は投与される製剤にヒアルロン酸を配合することによりヒアルロン酸と同時に患者に送達してよい。或いは、またはさらに加えて、これ等の化合物はヒアルロン酸投与後に投与してよい。特定の態様において、これ等の化合物の重合体剤型からの制御放出を介してこれらの化合物に標的組織を連続的に曝露することが好ましい場合がある。
【００９１】
（５．他のヒアルロニダーゼ阻害剤）
種々の臨床適応症において分解に抵抗し延長された活性を有するＨＡインプラントを製造するためにＨＡと組み合わせることができる他の例示される化合物はフラボノイド、抗炎症剤および界面活性剤またはこれらの何れかの組み合わせである。列挙された化合物の分類は相互に排他的ではなく、当業者の知る通り化合物は１つより多い分類に属する場合がある（例えばグリチルリチンはフラボノイドおよび抗炎症剤の両方である）。
【００９２】
１つの態様において、ＨＩはフラボノイドである。フラボノイドは天然界に遍在するポリフェノール化合物であり、そして化学構造に従って、フラボノール、フラボン、フラバノン、イソフラボン、カテキン、アントシアニジン、カルコンおよびネオフラボノイドに分類される。フラボノイドは高次の植物、例えば果実および野菜中、および飲料（例えば紅茶、コーヒー、ビール、ワイン、果汁飲料）に存在することが知られている。本明細書に記載したＨＩとして有用な例示されるフラボノイドは縮合タンニン、タンニン酸、ケンフェロール、ケルセチン、アペギニン、アジサイ由来のヒドランゲノール、クミンスパイス由来のクルクミン、グリチルリチン、イソリキリチン、グラブリジン、リキリチゲニン、ラムノリキルチン、ネオリキルチン、リコフラボノール、リコイソフラボンＡおよびＢ、リコイソフラボン、ホルモノネチングラブロール、グラブロン、グラブレン、ヒスプグラブリジンＡ、ヒスプグラブリジンＢ、バイカレイン、トラニラスト、シリビン、フロレチン、タキシフォリン、ジアドゼイン（４’，７−ジヒドロキシイソフラボン）、テクトリゲニン（４’，７−ジヒドロキシ−６−メトキシイソフラボン）、ルテオリン、キサントフモール、イソキサントフモール、ゲニステイン、ナリンゲニン、カルコナリンゲニン、ミリセチン、リン酸化ヘスペリジン、ビオカニンＡ、モリン、フロレチン、シリマリン、４−フェニル−クマリン、７−フルオロ−４’−ヒドロキシフラボン−４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、フラボノン−７−硫酸ナトリウム、５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウム、４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン等を包含する。例えばＭａｔｒｉｘ  Ｂｉｏｌ．２００２；２１（１）：３１−７；Ｂｉｏｌ  Ｒｅｐｒｏｄ．１９９７，５６（６）：１３８３−９；Ｅｘｐｅｒｉｅｎｔｉａ  １９９１，４７（１１−１２）：１１９６−２００；Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９０；４０（２）：３９７−４９１を参照できる。
【００９３】
別の態様において、ＨＩはフェノール系化合物であってよい。代表的なフェノール系化合物はジフェニルアクリル酸、ジフェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−メトキシフェニル）プロペノン、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−クロロフェニル）プロペノン、インドール−２−カルボン酸、ノルリグナン、エラジタンニンおよびウロリシンＢを包含する。
【００９４】
別の１つの態様において、ＨＩは抗炎症剤であってよく、これはステロイドまたは非ステロイドであってよい。代表的な抗炎症剤はインドメタシン（例えばＭａｔｒｉｘ  Ｂｉｏｌ．２００２；２１（１）：３１−７参照）、エスキン、トラキサノックス、サリシレート（例えばＭａｔｒｉｘ  Ｂｉｏｌ．２００２；２１（１）：３１−７参照）、エイコサトリエン酸（例えばＪ．Ｅｎｚｙｍｅ  Ｉｎｈｉｂ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００２；１７（３）：１８３−６参照）、グリチルリチン（例えばＢｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１９９７；２０（９）：９７３−７参照）；アレルギー性反応をモジュレートする薬剤、例えばクロモグリク酸２ナトリウム（ＤＳＣＧ）、トラニラスト、リキリチゲニン、イソリキリチゲニン、バイカレイン（例えばＣｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１９９２；４０（６）：１４３９−４２；Ｔｏｘｉｃｏｎ．２００３；４２：６３５−６４６参照）；ナトリウムポリスチレンスルホネート（Ｎ−ＰＳＳ）（例えばＪ．Ａｎｄｒｏｌ．２０００；２１（６）：８６２−７５参照）；サッカリン酸）（例えばＪ．Ｅｎｚｙｍｅ  Ｉｎｈｉｂ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００３；１８（４）：３７７−３８１参照）；硫酸コンドロイチンＡ誘導オリゴ糖（ＣｈＳＡＯ）（例えばＢｉｏｌ  Ｒｅｐｒｏｄ．２００５；７２（４）：１０６１）、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、γ−リノレン酸、フェノプロフェン等を包含する。
【００９５】
１つの態様において、ＨＩはインドメタシンであってよい。インドメタシンは慢性関節リューマチ、変形性関節症および痛風の管理に使用されている非ステロイド抗炎症、鎮痛および抗発熱剤である。さらに別の態様において、ＨＩは界面活性剤、例えばテトラデシルナトリウムスルフェート（Ｊ．Ｒｅｐｒｏｄ．Ｆｅｒｔｉｌ．１９８３；６８（２）：２５７−６３参照）またはＴＲＩＴＯＮＸ−１００（Ｄｏｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｍｉｄｌａｎｄ  ＭＩ）の商品名下に販売されているノニオン系界面活性剤であるオクチルフェノールエトキシレートであってよい。インドメタシンおよびＴＲＩＴＯＮ−Ｘ１００はインビボのヒアルロン酸の分解を阻害するために使用してよい。これ等の化合物はヒアルロン酸と同時または逐次的に送達してよい。例えば重合体は投与される製剤にヒアルロン酸を配合することによりヒアルロン酸と同時に患者に送達してよい。或いは、またはさらに加えて、これ等の化合物はヒアルロン酸投与後に投与してよい。特定の態様において、これ等の化合物の重合体剤型からの制御放出を介してこれらの化合物に標的組織を連続的に曝露することが好ましい場合がある。
【００９６】
種々の臨床適応症において分解に抵抗し延長された活性を有するＨＡインプラントを製造するためにＨＡと組み合わせることができる他の例示される化合物はアスコルビン酸、例えばビタミンＣまたはＬ−アスコルビン酸６−ヘキサデカノエート（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００４，２７９（４４）：４５９９０−９７）；サポニン（例えばＪ．Ｅｎｚｙｍｅ  Ｉｎｈｉｂ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００２；１７（３）：１８３−６参照）、例えばヘデラゲニン；システアミン；エキナセア；ロスマリン酸；塩酸グアニジン；Ｌ−アルギニンを包含する。
【００９７】
（ＩＩＩ．製剤）
本発明の組成物は種々の方法で製造できる。例えば金チオマレートまたはフコイダンのようなＨＩはＨＡ溶液中に直接溶解または懸濁することができる。化合物がＨＡ溶液中で安定であれば、ＨＡおよび化合物を含有する組成物は単回適用器具内に製造できる。化合物がある程度の時間ＨＡ溶液中で安定であることができない場合は、組成物は成分が使用直前に混合される２成分系として製造することができる。
【００９８】
硫酸化多糖類（例えば硫酸デキストラン、ヘパリンおよびフコイダンおよびこれ等の類似体または誘導体）は一般的に水溶性であり、そして、ヒアルロン酸と共に溶液として同時投与してよい。一部の場合においては、これ等の物質はヒアルロン酸適用時に固体として投与してよい。固体形態の送達は曝露された手術部位の存在下に送達を行う場合に実用的である。或いは、これ等の化合物は非水性の注射ベヒクル（担体）中の懸濁液として注射または適用してよい。注射はヒアルロン酸投与の前、同時または後に行ってよい。
【００９９】
医薬品用賦形剤、例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコール、ＳＰＡＮおよびＰＬＵＲＯＮＩＣ並びにジブロック共重合体およびＴＲＩＴＯＮＸ−１００は一般的に水溶性であり、そして、ヒアルロン酸と共に溶液として同時投与してよい。一部の場合においては、これ等の物質は、例えば曝露された手術部位の場合に、ヒアルロン酸適用時に固体として投与してよい。或いは、これ等の化合物は非水性の注射ベヒクル中の懸濁液として注射または適用してよい。注射はヒアルロン酸投与の前、同時または後に行ってよい。医薬品用賦形剤並びにジブロック共重合体およびＴＲＩＴＯＮＸ−１００の１つの特定の利点はそれら自体がヒアルロン酸のための優れた注射ベヒクルを与えるためヒアルロン酸をこれ等の薬剤中に溶解または懸濁して適切な部位に注射適用することができる点である。例えばＰＣＬ−ＰＥＧ系のジブロック共重合体は室温でワックス状の物質であるが穏やかに加温すると身体内に容易に注射される粘稠な液体となる。
【０１００】
１つの態様において、ヒアルロニダーゼ阻害剤は担体中に含有させてよい。担体は所望の位置へのＨＩ組成物の送達のためのベヒクルとして作用してよく、そして、組成物に他の望ましい特性を付与する場合がある（例えば親水性、生体利用性、粘度等）。
【０１０１】
担体の代表例は重合体および非重合体の担体の両方を包含し（例えばリポソームまたはビタミン系の担体）、これ等は生分解性または非生分解性の何れかであってよい。生分解性の重合体の代表例はアルブミン、ゼラチン、澱粉、セルロース、デキストラン、多糖類、フィブリノーゲン、ポリ（エステル）（例えばポリ（Ｄ，Ｌラクチド）、（Ｄ，Ｌラクチド−グリコリド）共重合体、ポリ（グリコリド）、ポリ（ε−カプロラクトン）、それらの共重合体およびブレンド物）、ポリ（ヒドロキシブチレート）、ポリ（アルキルカーボネート）、ポリ（無水物）およびポリ（オルトエステル）を包含する（一般的にＩｌｌｕｍ．Ｌ．，Ｄａｖｉｓ，Ｓ．Ｓ．（ｅｄｓ．）”Ｐｏｌｙｍｅｒｓ  ｉｎ  ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ”Ｗｒｉｇｈｔ，Ｂｒｉｓｔｏｌ，１９８７；Ａｒｓｈａｄｙ，Ｊ．，Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １７：１−２２（１９９１）；Ｐｉｔｔ，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ  ５８：１７３−１９６（１９９０）；Ｈｏｌｌａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ４：１１５−０１８０（１０９６）を参照できる）。非生分解性の重合体の代表例はエチレンオキシドとプロピレンオキシド系のブロック共重合体（即ちエチレンオキシドとプロピレンオキシド重合体の共重合体）、例えばＢＡＳＦ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｍｏｕｎｔ  Ｏｌｉｖｅ，ＮＪ）から入手可能なＰＬＵＲＯＮＩＣ重合体ファミリー、ＥＶＡ共重合体、シリコーンゴム、ポリ（メタクリレート）系およびポリ（アクリレート）系の重合体を包含する。特定の実施形態においては、重合体はポリ（Ｄ，Ｌ−乳酸）オリゴマーおよび重合体、ポリ（Ｌ−乳酸）オリゴマーおよび重合体、ポリ（グリコール酸）、乳酸とグリコール酸の共重合体、ポリ（カプロラクトン）、ポリ（バレロラクトン）、ポリ無水物、カプロラクトンおよび／または乳酸および／またはグリコール酸とポリエチレングリコールまたはメトキシポリエチレングリコールの共重合体またはこれ等のブレンド物であってよい。
【０１０２】
重合体担体（重合体）は例えば棒状のデバイス、ペレット、スラブまたはカプセルを包含する種々の形態に形状化してよい（例えばＧｏｏｄｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｈｏｓｐ．Ｐｈａｒｍ．４３：１４５４−１４６１（１９８６）；Ｌａｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，”Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ｏｆ  ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ｆｒｏｍ  ｐｏｌｙｍｅｒｓ”；Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  ｐｏｌｙｍｅｒｓ，  Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  ｍａｔｅｒｉａｌｓ  ａｎｄ  ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  ｆｏｒ  ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  ｕｓｅ，  Ｇｏｌｄｂｅｒｇ，  Ｅ．Ｐ．，Ｎａｋａｇｉｍ，Ａ．（ｅｄｓ．）Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，ｐｐ．１１３−１３７．１９８０；Ｒｈｉｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．６９：２６５−２７０（１９８０）；Ｂｒｏｗｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．７２：１１８１−１１８５（１９８３）；およびＢａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １：２５９−２６７（１９８５）参照）。これ等のヒアルロニダーゼ阻害剤は重合体のマトリックス内に閉塞されることにより連結されるか、共有結合により結合されるか、またはマイクロカプセル中に封入されてよい。本発明の特定の実施形態内においては、ヒアルロニダーゼ阻害剤含有組成物は非カプセル状の製剤、例えば微小球（ナノメートル〜マイクロメートルの大きさの範囲）、ペースト、ゲル、種々の大きさの糸、フィルム、メッシュおよびスプレーとして提供される。特定の実施形態においては、組成物は患者の所望の位置への注射に適する形態である。
【０１０３】
特定の実施形態においては、本発明のヒアルロニダーゼ阻害剤含有組成物（特定の実施形態においてはヒアルロニダーゼ阻害剤化合物１つ以上および重合体担体を含む）は意図する使用に適する態様で形状化される。本発明の特定の態様においては、組成物は生体適合性であり、ヒアルロニダーゼ阻害剤化合物１つ以上を数日間〜数ヶ月の期間に渡り放出しなければならない。例えば、本発明の１つの態様においては、７〜１０日間の期間に渡りヒアルロニダーゼ阻害剤化合物の１０％、２０％または２５％超を放出する「迅速放出」または「バースト」ヒアルロニダーゼ阻害剤含有組成物が提供される。このような「迅速放出」組成物は特定の実施形態においては所望のヒアルロニダーゼ阻害剤化合物のヒアルロニダーゼ阻害剤水準を放出することができるものでなければならない。他の実施形態内においては、７〜１０日間の期間に渡りヒアルロニダーゼ阻害剤化合物の５％（ｗ／ｖ）未満を放出する「低放出」ヒアルロニダーゼ阻害剤含有組成物が提供される。さらに又、本発明のヒアルロニダーゼ阻害剤含有組成物は好ましくは数ヶ月安定であり、そして、滅菌条件下に製造され維持されることが可能でなければならない。
【０１０４】
本開示の特定の態様内において、ヒアルロニダーゼ阻害剤含有組成物は特定の用途に応じて約０．０５０ｎｍ〜約５００μｍの範囲の何れかの大きさに形状化してよい。例えば美顔用途の皮膚増強剤（後述）の目的のために使用される場合、ヒアルロニダーゼ阻害剤含有組成物は、約０．１〜約１００μｍ、好ましくは約０．５〜約５０μｍ、最も好ましくは約１〜約２５μｍの平均直径を有する微小球または微粒子に形状化することが一般的には好ましい。或いは、このような組成物はヒアルロニダーゼ阻害剤化合物がミセルとして可溶化される溶液として適用してもよい。ミセルの組成物は本来は重合体であってよい。例えば重合体ミセルはＭｅＰＥＧおよびポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド）の共重合体を含んでいてよい。或いは、このような組成物はまたリポソーム（上記）内にＨＩがカプセル化されている溶液として適用してもよい。特定の他の態様において、ＨＩはリポソーム内にカプセル化（例えば含有）されない。或いは、このような組成物はヒアルロニダーゼ阻害剤化合物がエマルジョンまたはミクロエマルジョンの油相中にカプセル化（例えば含有）されている溶液として適用してよい。
【０１０５】
１つの態様において、ＨＡはＨＩ１つ以上を含む重合体または非重合体であってよい二次担体と組み合わせてよい。二次担体は種々の形態を取ってよく、そして、組成物からのＨＩの持続および制御された放出をもたらしてよい。
【０１０６】
１つの態様において、二次担体は微粒子の形態である。「微粒子」とは本明細書においては、規則的または不規則の形状を有する個別の固体粒子の１つまたは複数を指す。微粒子は一般的に約５００μｍ以下の直径（即ち微粒子の最も幅広の距離）を有する。ナノ粒子は典型的には約５００ｎｍ未満の直径を有する。
【０１０７】
微粒子は生体再吸収性または非生体再吸収性の種々の重合体から製造してよい。「生体再吸収性」とは本明細書においては、ヒトまたは動物への投与の後に身体から消失することができる組成物または物質の特性を指す。生体再吸収は種々の手段の１つ以上、例えば溶解、酸化的分解、加水分解、酵素的分解、代謝、例えば腎臓、腸管、肺または皮膚のような経路を介した成分、その分解産物またはその代謝差物のクリアランスにより起こりえる。生体再吸収に関わる分解の機序は総称して「生体分解」とする。
【０１０８】
別の態様において、微粒子は微小球の形態である。「微小球」とは本明細書においては、形状が本質的に球状である微粒子を指す。微小球は球、楕円であってよく、或いはこのような球、楕円に近似した形状を有してよく、そして平滑であるか、亀裂や凹部のような断裂部を有していてよい。微小球は典型的には約５００ｎｍ〜約５００μｍの平均直径を有する。特定の実施形態においては、微粒子は少なくとも約２００ｎｍまたは５００ｎｍ、１μｍ、５μｍ、１０μｍ、２０μｍ、５０μｍまたは１００μｍ、１５０μｍ、２５０μｍ、５００μｍ、１０００μｍ、２５００μｍまたは５０００μｍの好ましい平均直径を有しており、旨適な大きさは所望の薬剤放出特性および用途により決定される。特定の実施形態においては、微粒子は約２００ｎｍまたは５００ｎｍ、１μｍ、５μｍ、１０μｍ、２０μｍ、５０μｍまたは１００μｍ、１５０μｍ、２５０μｍ、５００μｍ、１０００μｍ、２５００μｍまたは５０００μｍ以下の好ましい平均直径を有しており、旨適な大きさは所望の薬剤放出特性および用途により決定される。
【０１０９】
特定の実施形態においては、微粒子は合成重合体の１種以上から形成される。合成重合体はポリエステルであってよく、これはラクチド、乳酸、グリコリド、グリコール酸、ε−カプロラクトン、γ−カプロラクトン、ヒドロキシ吉草酸、ヒドロキシ酪酸、β−ブチロラクトン、γ−ブチロラクトン、ガンマ−バレロラクトン、γ−デカノラクトン、δ−デカノラクトン、トリメチレンカーボネート、１，４−ジオキサン−２−オンおよび１，５−ジオキセパン−２−オンから選択される単量体１つ以上の残基を包含する。ポリエステルは又さらに化学式［−ＯＣ６Ｈ４ＣＯＯＨ］を有する残基を含んでよい。ポリエステルはポリ（ラクチド）（ＰＬＬＡ）またはポリ（ＤＬ−ラクチド）（ＰＤＬＬＡ）またはポリ（グリコリド）または（ＤＬ−ラクチド−グリコリド）共重合体（ＰＬＧＡ）、ポリ（ε−カプロラクトン）、ポリ（δ−デカノラクトン）、ポリ（δ−バレロラクトン）またはポリ（乳酸）（ＰＬＡ）を含んでよい。別の態様においては、重合体はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）またはその共重合体の残基を包含するポリエステルのようなポリエステルを含んでよい（例えばＰＬＡ−ブロック−ＰＥＧ、またはＰＬＧＡ−ブロック−ＰＥＧ、またはポリプロピレンオキシド−ブロック−ＰＥＧ）。他の態様においては、重合体は生物学的に誘導された重合体、例えば多糖類を含んでよい（例えばキトサン、セルロース、アルギネートまたはその誘導体）。
【０１１０】
微粒子は分解性の合成重合体から製造してよい。分解性の重合体は、ポリエステルがラクチド、乳酸、グリコリド、グリコール酸、ε−カプロラクトン、ガンマ−カプロラクトン、ヒドロキシ吉草酸、ヒドロキシ酪酸、β−ブチロラクトン、γ−ブチロラクトン、γ−バレロラクトン、γ−デカノラクトン、δ−デカノラクトン、トリメチレンカーボネート、１，４−ジオキサン−２−オンまたは１，５−ジオキセパン−２−オンから選択される単量体１つ以上の残基を含んでよいポリエステル、および、式Ｘ−Ｙ、Ｙ−Ｘ−Ｙ、Ｒ（Ｙ−Ｘ）ｎ、Ｒ−（Ｘ−Ｙ）ｎおよびＸ−Ｙ−Ｘ（式中、Ｘはポリアルキレンオキシド（例えばポリ（エチレングリコール、ポリ（プロピレングリコール）およびポリ（エチレングリコール）とポリ（エチレンオキシド）のブロック共重合体）（例えば重合体のＰＬＵＲＯＮＩＣおよびＰＬＵＲＯＮＩＣＲシリーズ）であり、そしてＹは生分解性のポリエステルであり、ここでポリエステルはラクチド、乳酸、グリコリド、グリコール酸、ε−カプロラクトン、ガンマ−カプロラクトン、ヒドロキシ吉草酸、ヒドロキシ酪酸、β−ブチロラクトン、γ−ブチロラクトン、γ−バレロラクトン、γ−デカノラクトン、δ−デカノラクトン、トリメチレンカーボネート、１，４−ジオキサン−２−オンまたは１，５−ジオキセパン−２−オンから選択される単量体１つ以上（例えばＰＬＧ−ＰＥＧ−ＰＬＧ）の残基を含んでよく、そしてＲは多官能性の重合開始剤である）のブロック共重合体を包含してよい。
【０１１１】
別の態様において、微粒子を製造するために使用される重合体は非生分解性、例えばポリ（メチルメタクリレート）、ポリ（スチレン）またはポリ（ジビニルベンゼン）であってよい。
【０１１２】
ＨＩは微粒子を製造するために使用するＨＩの種類および重合体の種類に応じて約０．０００１％〜９０％（薬剤重量／微粒子重量）超の範囲の濃度で微粒子中に存在してよい。別の態様においては、ＨＩは０．０００１％〜０．００１％、０．００１％〜０．０１％または０．０１％〜０．１％、または０．１％〜１％、または１％〜１０％、または１０％〜２５％、または２５％〜５０％、または５０％〜７５％、または７５％〜８５％または９０％（薬剤重量／微粒子重量）超の濃度で微粒子中に存在してよい。
【０１１３】
本発明の範囲内の微粒子は組成および特定の用途に応じて広範な放出特性を有してよい。微粒子は数時間（例えば１時間、２時間、４時間、８時間、１２時間または２４時間）〜数日（例えば１日、２日、３日、７日または１４日）〜数ヶ月（例えば１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、６ヶ月または１２ヶ月）〜数年（例えば〜１年、２年、３年）の期間に渡るＨＩの持続放出を与えるように製造してよい。放出プロファイルは初期の速度、５０％、９０％または１００％薬剤放出までの時間の項目において、または、０次、１次のような適切な速度論的モデル、拡散制御（例えば時間の平方根、Ｈｉｇｕｃｈｉモデル）の速度論により、または、放出速度の異なる相の数（例えば１相、２相または３相）により、特徴付けてよい。放出プロファイルはそのバースト（初期）相の範囲により特徴付けてよい。バースト相は少量または多量の薬剤放出をもたらし、その結果、微粒子は「低」または「高」バースト系として定義してよい。例えば低バースト系は放出の初期相において負荷された総量の約３０、２０、１０またはさらには５または１％もの少量を放出してよい。高バースト系はバースト相において薬剤の総量の少なくとも約５０、６０、７０またはさらには１００％を放出してよい。バースト相の持続時間は放出プロファイルの全体的な意図される持続時間により変動する。数時間に負荷された薬剤の全てを放出することを意図する微粒子については、バースト相は数分に渡って起こってよい（例えば１〜３０分）。数日間に渡って放出することを意図する微粒子については、バースト相は数時間のオーダーとなる（例えば１〜２４時間）。数週間に渡って放出することを意図する微粒子については、バースト相は数時間〜数日であってよい（例えば１２時間〜７日間）。微粒子の放出特性を説明する例示的放出プロファイルは低バースト微小球であってよく、最初の２４時間には１０％未満を放出し、その後概ね０次放出の相が続き、そして５日後から薬剤枯渇に至るまで速度が漸減する。
【０１１４】
微粒子の製造のためには種々の方法が当該分野で知られている。微粒子にＨＩを配合するために適合してよい一般的に使用されている方法は、（ａ）相分離の後ｏ／ｏ、ｗ／ｏ、ｏ／ｗまたはｗ／ｏ／ｗ（ｏ＝油、ｗ＝水）のような分散液中で溶媒蒸発、（ｂ）超臨界流体の使用、（ｃ）コアセルベーション、（ｄ）溶融分散、（ｅ）噴霧乾燥、（ｆ）噴霧凝結、または（ｇ）懸濁コーティングを包含する。微粒子を製造するための方法の代表例は、例えば米国特許４，６５２，４４１；５，１００，６６９；４，４３８，２５３および５，６６５，４２８に開示されている。
【０１１５】
特定の実施形態においては、微粒子は、凍結乾燥粉末を生成する液体の微粒子含有組成物の凍結乾燥を含む、凍結乾燥の工程に付してよい。粉末はヒアルロン酸と直接組み合わせてよい。或いは、凍結乾燥した粉末を水または他の水性媒体で希釈再調製した後にヒアルロン酸と組み合わせてよい。
【０１１６】
本発明のヒアルロニダーゼ阻害剤含有組成物はまた種々の「ペースト」またはゲルの形態に製造してよい。例えば本発明の１つの実施形態内においては、１つの温度（例えば３７℃より高温、例えば４０℃、４５℃、５０℃、５５℃または６０℃）では液体であり、そして別の温度（例えば周囲体温または３７℃未満の何れかの温度）においては固体または半固体であるＨＩ組成物が提供される。
【０１１７】
重合体担体にヒアルロニダーゼ阻害剤化合物を配合するための方法は実施例において後に詳述するとおりである。
【０１１８】
本発明の組成物はヒアルロン酸およびヒアルロニダーゼ阻害剤化合物を含有するほかに、生物活性疎水性化合物を含有してよい。１つの態様において、組成物はヒアルロン酸、ヒアルロニダーゼ阻害剤化合物、担体（重合体または非重合体）および生物活性疎水性化合物を含有する。本発明の別の態様内において、疎水性化合物を含有して放出するために適合された担体が提供される。特定の実施形態においては、担体は重合体である。疎水性化合物を含有する担体は場合により炭水化物、タンパク質またはポリペプチドと組み合わせてよい。特定の実施形態内において、担体は疎水性化合物１つ以上を含有する領域、ポケットまたは顆粒を含有するかを含む。例えば、本発明の１つの実施形態内において、疎水性化合物を含有するマトリックス内に疎水性化合物を配合した後に、重合体担体内にマトリックスを配合してよい。この点において種々のマトリックス、例えば炭水化物および多糖類、例えば澱粉、セルロース、デキストラン、メチルセルロースおよびヒアルロン酸、タンパク質またはポリペプチド、例えばアルブミン、ヒアルロン酸およびゼラチンを利用できる。別の実施形態内においては、疎水性化合物を疎水性コア内に含有してよく、このコアを親水性シェル内に含有させてよい。例えば実施例において後述するとおり、インドメタシンを親水性シェルを有する疎水性コア（例えばポリＤ，Ｌ乳酸−ＰＥＧまたはＭｅＰＥＧ凝集物）内に配合してよい。
【０１１９】
本発明の特定の態様内において、ヒアルロニダーゼ阻害剤含有組成物はヒアルロニダーゼ阻害剤化合物が特定の用途において使用されるヒアルロン酸に共有結合するような態様において形状化してよい。ヒアルロニダーゼ阻害剤化合物は直接ヒアルロン酸に結合するかリンカー分子（例えばポリ（エチレングリコール））を介することができる。コンジュゲートを所望の部位に導入または適用した後、ヒアルロニダーゼ阻害剤化合物はヒアルロン酸になお結合した状態でヒアルロニダーゼを阻害してよい。
【０１２０】
ヒアルロニダーゼ阻害剤はヒアルロニダーゼによるヒアルロン酸の分解を阻害するのに効果的な量で組成物中に存在してよい。組成物中のＨＩの量はＨＩの種類および力価およびＨＡインプラントの種類および位置、所望の用量並びに種々の他の要因に応じて変動する。例えばＨＩは約０．１ｍｇ／ｍｌ以下、または約０．１ｍｇ／ｍｌ〜０．２５ｍｇ／ｍｌ、または約０．２５ｍｇ／ｍｌ〜０．５ｍｇ／ｍｌ、または約０．５ｍｇ／ｍｌ〜１ｍｇ／ｍｌ、または約１ｍｇ／ｍｌ〜５ｍｇ／ｍｌ、または約５ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌ、または約１０ｍｇ／ｍｌ〜２５ｍｇ／ｍｌ、または約２５ｍｇ／ｍｌ〜１００ｍｇ／ｍｌ、または約１００ｍｇ／ｍｌ〜２５０ｍｇ／ｍｌ、または約２５０ｍｇ／ｍｌ〜３５０ｍｇ／ｍｌ、または約３５０ｍｇ／ｍｌ〜５００ｍｇ／ｍｌの濃度で個々の実施形態において組成物（例えば流体または半固体形態の組成物）中に存在してよい。
【０１２１】
特定のＨＩ（例えば所定のＭＷを有する化合物）に関しては、組成物中に存在するＨＩの量はモル濃度の単位で表示してよい。例えばＨＩは約１ｍＭ未満（例えば約１μｍ〜１０μｍ、または約１０μｍ〜１００μｍ、または約１００μｍ〜１ｍＭ）、または約１ｍＭ〜２．５ｍＭ、または約２．５ｍＭ〜５ｍＭ、または約５ｍＭ〜１０ｍＭ、または約１０ｍＭ〜２５ｍＭ、または約２５ｍＭ〜５０ｍＭ、または約５０ｍＭ〜１００ｍＭ、または約１００ｍＭ〜２５０ｍＭ、または約２５０ｍＭ〜３５０ｍＭの濃度で個々の実施形態において組成物中に存在してよい。別の実施形態においてはＨＩは約５０％（重量による）未満、または約２５％未満、または約１０％未満、または約５％未満、または約２％未満、または約１％未満、または約０．５％未満、または約０．２５％未満、または約０．１％未満、または約０．０１％未満、または約０．００１％未満、または約０．０００１％未満の濃度で組成物中に存在してよい。
【０１２２】
ＨＡ組成物の特定の種類（例えばフィルムまたはメッシュの形態の材料）に関しては、ＨＩの濃度は面積の単位で表示してよい。例えば別の実施形態において、組成物は材料の平方インチ当たり約０．０００１ｍｇ〜約０．００１ｍｇ、または材料の平方インチ当たり約０．００１ｍｇ〜約０．０１ｍｇ、または材料の平方インチ当たり約０．０１ｍｇ〜約０．１ｍｇ、または材料の平方インチ当たり約０．１ｍｇ〜約１ｍｇ、または材料の平方インチ当たり約１ｍｇ〜約５ｍｇ、または材料の平方インチ当たり約５ｍｇ〜約１０ｍｇ、または材料の平方インチ当たり約１０ｍｇ〜約２０ｍｇ、または材料の平方インチ当たり約２０ｍｇ〜約５０ｍｇ、または材料の平方インチ当たり約５０ｍｇ〜約１００ｍｇ、または材料の平方インチ当たり約１００ｍｇ〜約２５０ｍｇを含んでよい。
【０１２３】
ＨＡインプラントから送達されるＨＩの総用量は、別の実施形態において、約０．１ｍｇ未満、または約０．１ｍｇ〜０．５ｍｇ、または約０．５ｍｇ〜１ｍｇ、または約１ｍｇ〜５ｍｇ、または約５ｍｇ〜１０ｍｇ、または約１０ｍｇ〜２０ｍｇ、または約２０ｍｇ〜１００ｍｇ、または約１００ｍｇ〜２００ｍｇ、または約２００ｍｇ〜３５０ｍｇ、または約３５０ｍｇ〜５００ｍｇであってよい。総用量は水性の体液の容量当たりに送達されるＨＩの量の単位で表示してよい。例えば、別の実施形態においては、ＨＡインプラントから送達されるＨＩの総用量は約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜０．１ｍｇ／ｍｌ、または約０．１ｍｇ／ｍｌ〜１ｍｇ／ｍｌ、または約１ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌ、または約１０ｍｇ／ｍｌ〜２５ｍｇ／ｍｌ、または約２５ｍｇ／ｍｌ〜１００ｍｇ／ｍｌ体液の範囲であってよい。
【０１２４】
本発明の特定の実施形態内において、本明細書において提供される組成物はその利用性を増強するためにさらに修飾してよい。例えば１つの実施形態内において、本明細書に記載した組成物に血塊形成に寄与する化合物または因子（例えばトロンビン）を添加してよい。ＨＡ−ＨＩ組成物はさらに神経毒、例えばＡｌｌｅｒｇａｎ，Ｉｎｃ．（Ｉｒｖｉｎｅ，ＣＡ）より商品名ＢＯＴＯＸの下に販売されているボツリヌス毒素および／またはリドカイン、ベンゾカインまたはプリロカインのような麻酔薬を含んでよい。麻酔薬はさらにＨＡ−ＨＩ組成物への麻酔薬の製剤化を支援および／またはＨＡ−ＨＩ組成物からの麻酔薬の放出を調節するために使用できる上記した重合体担体を含むことができる。治療薬、例えば抗生物質、抗感染剤（例えば５−フルオロウラシル）、抗炎症剤（例えばステロイド系または非ステロイド系）、疼痛緩解剤、抗瘢痕形成（抗腺維化）剤、瘢痕形成（腺維化）剤を本発明の組成物に添加することにより追加的な治療利益を得てよい。
【０１２５】
さらに又、組成物はさらに添加剤を含有してよい。添加剤の代表例は溶媒、抗酸化剤（例えば亜硫酸塩およびアスコルビン酸）、結合剤、細孔形成剤、保存料（例えばパラオキシ安息香酸エステル、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸等）、制菌剤（例えばビスマストリブロモフェネート、メチルヒドロキシベンゾエート、バシトラシン、エチルヒドロキシベンゾエート、プロピルヒドロキシベンゾエート、エリスロマイシン、クロロクレゾール、塩化ベンザルコニウム等）および（殺菌剤として知られている）殺菌剤を包含する。染料または他の着色料は組成物の視覚性を増強するために添加してよい。染料または着色料は永久的または一時的（メチレンブルー）なものであってよい。染料の代表例はＦＤ＆Ｃ染料として知られている食品用に適するもの、および天然の着色剤、例えばブドウ果皮エキス、ビートレッド粉末、ベータカロテン、アナトー、カルミン、ターメリック、パプリカ等を包含する。臨床状況における本発明の組成物の視覚性を向上させるための物質の他の例は放射線不透明またはＸ線不透明の物質、例えばタンタルおよびＭＲＩ造影剤を包含する。
【０１２６】
本明細書に記載した組成物の何れも、滅菌形態で提供してよい。本実施形態における滅菌はオートクレーブ、乾熱器使用、ガス滅菌および濾過を包含するがこれ等に限定されない業界で許容されＵＳＰＸＸＩＩ＜１２１１＞に列挙されている多くの手段により達成してよい。好ましくは滅菌はＨＡまたはＨＩを分解しない方法により達成しなければならない。ＨＡはガンマ線照射への曝露により分解するため、滅菌は典型的には、放射線照射以外の方法により行う。滅菌はＵＳＰＸＸＩＩ＜１２１１＞に定義された無菌的処理と称されるものにより維持されてよい。ガス滅菌のために使用される許容できるガスはエチレンオキシドを包含する。濾過は０．２２μｍのような適切な孔径およびＴＥＦＬＯＮのような適切な材料のフィルターを用いて行ってよい。さらに、滅菌組成物はこれ等の滅菌方法と任意の無菌的手法を組み合わせて使用することにより達成してよい。直径２００ｎｍ超の微粒子を含む本発明の特定の態様においては、粒子が０．２２μｍのフィルターを容易に通過できないため、濾過以外の滅菌方法を使用しなければならない。本発明の特定の実施形態の成分全てが単一の方法で好都合に滅菌されるわけではないため、滅菌は個別の工程において実施発明の成分を滅菌し、そして滅菌された成分を組み合わせて実施組成物とすることにより達成してよい。
【０１２７】
（ＩＶ．臨床適用）
（１．ＨＩ負荷ヒアルロン酸整形外科用インプラント）
組織充填剤として、そして治癒および修復のためのスカホールドとして機能するために、整形外科手術における使用のために種々のヒアルロン酸インプラントが開発されている。結合組織および軟骨の重要な有機性化合物であるヒアルロン酸は組織代替物または骨格修復用製品として使用するために無機質製剤、自家骨髄、骨グラフとおよび／または増殖因子（例えば線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）または骨形成性タンパク質（ＢＭＰ））と組み合わせることができる。典型的な用途は、例えば、全関節交換手術（例えば人工腰部、膝等）、脊髄融合手術、長骨骨折、外傷性の骨の欠損、空洞または空隙の修復、皮膚輪郭の増強、および骨グラフト採取部位における骨充填物としての使用である。例えば、ＯＳＳＩＧＥＬは骨折の治癒を加速するために設計されたヒアルロン酸（ＨＡ）と塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）の粘稠な製剤である（Ｏｒｑｕｅｓｔ，Ｉｎｃ．）。
【０１２８】
整形外科処置において使用されるヒアルロン酸組成物の代表例は米国特許６，７６４，５１７；６，５１４，５１４；６，７３０，１２９；および６，６５１，８８７に記載されている。
【０１２９】
本発明においては、ヒアルロニダーゼの阻害剤をヒアルロン酸含有インプラントまたは組成物に単独または持続放出形態で添加することにより、ＨＡの分解速度を低減し、そして組成物／インプラントのインビボ活性をＨＡ単独使用時を越えて延長する（例えば患者の７５％超において一貫して２週間より長く、患者の２５％超で２ヶ月より長い）。１つの態様において、組成物は骨折部位または骨内の空洞のような所望の位置に送達することにより骨を増強、または消失骨に置き換えてよい。送達されるＨＩの総用量、用量放出速度およびＨＡからの薬剤放出の持続時間は所望に応じてヒアルロン酸インプラントの活性を有意に延長するために専用に調節できる。上記した通り、一部の実施形態においては、ＨＩ−ＨＡ組成物はさらに、組織代替物または骨格修復用製品として使用するために無機質製剤、自家骨髄、骨グラフト材料および／または増殖因子（例えば線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、トランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）または骨形成性タンパク質（ＢＭＰ））と組み合わせることができる。以下の組成物はこの適応症における使用に理想的に適している。
【０１３０】
ＨＩを重合体系と組み合わせることにより薬剤の持続放出がもたらされる。整形外科用途におけるＨＡと組み合わせたＨＩ剤の送達に適する物質は非分解性または分解性の物質よりなることができる。適切な分解性の物質の非限定的な例は、β−トリカルシウムホスフェートよりなる再吸収可能なセラミック（例えばＯｒｔｈｏｖｉｔａ，Ｉｎｃ．製のＶＩＴＯＳＳ、Ｅ−Ｉｎｔｅｒｐｏｒｅ−Ｃｒｏｓｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ製のＰＲＯＯＳＴＥＯＮ５００Ｒ）、ヒドロキシアパタイト即ちＣａ１０（ＰＯ４）６ＯＨ（例えばＧｅｉｓｔｌｉｃｈ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｉｎｃ．製のＢＩＯＯＳＳ、Ｃｅｒｅｍｅｄ  Ｄｅｎｔａ  Ｉｎｃ．製のＯＳＴＥＯＧＲＡＦ）、炭酸カルシウム即ちＣａＣＯ３、硫酸カルシウム（例えばＷｒｉｇｈｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ製のＯＳＴＥＯＳＥＴおよびＡＬＬＯＭＡＴＲＩＸ）、リン酸カルシウム（例えばＭｅｒｃｋ，ＮＯＲＩＡＮＳＲＳ製のＣＡＬＣＩＢＯＮ）、ＰＥＧの交差結合物質、ゼラチン、コラーゲン、ＧＥＬＦＯＡＭ、脱鉱物質骨マトリックス、骨自家移植片（例えばＡＬＬＯＧＲＯ、ＯＲＴＨＯＢＬＡＳＴ、ＯＰＴＥＦＯＲＭ、ＧＲＡＦＴＯＮ）、多糖類、炭水化物、タンパク質（例えばアルブミン、カゼイン、乳清タンパク質、植物タンパク質、魚タンパク質等）、自系の骨、脱鉱物質骨マトリックス、アルギネート、澱粉、セルロース誘導体（ＨＰＣ等）、セルロース、セルロースエステル、そのブレンド物および共重合体、キトサン、キトサン誘導体、ポリエステル−ポリアルキレンオキシドブロック共重合体（例えばＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡ、ＭｅＰＥＧ−ＰＬＧＡ等）、分解性ポリエステル、ポリ無水物、ポリオルトエステル、ポリホスホエステル、ポリホスファジンおよびシアノアクリレート重合体を包含する。本発明の実施における使用において特に有用な分解性重合体は注射可能なＰＥＧ含有製剤、例えばＣＯＳＥＡＬ（Ａｎｇｉｏｔｅｃｈ  Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  Ｃｏｒｐ．，Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡ）、ＦＯＣＡＬＳＥＡＬ、ＳＰＲＡＹＧＥＬ、ＤＵＲＡＳＥＡＬ、または、米国特許５，８７４，５００；６，０５１，６４８；６，１６６，１３０および６，３１２，７２５に記載のもののような４アームチオールＰＥＧ（１０Ｋ）、４アームＮＨＳ  ＰＥＧ（１０Ｋ）およびメチル化コラーゲンを含む組成物、フィブリノーゲン含有製剤、例えばＦＬＯＳＥＡＬまたはＴＩＳＳＥＡＬ、ＲＥＰＥＬまたはＦＬＯＷＧＥＬ；および排出され得る他の低分子量重合体を包含する。
【０１３１】
整形外科用のＨＡと組み合わせたＨＩの送達のための適切な非分解性物質は混合するとポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）を形成するＰＶＡ、ＰＶＰ、ポリアクリルアミド、メチルメタクリレート（ＭＭＡ）およびメチルメタクリレートスチレン（ＭＭＡ−スチレン）を含む交差結合組成物または骨セメント（例えばＳｔｒｙｋｅｒ  Ｈｏｗｍｅｄｉｃａ製のＳＩＭＰＬＥＸＰ、Ｚｉｍｍｅｒ製のＺＩＭＭＥＲ  ＲＥＧＵＬＡＲおよびＺＩＭＭＥＲ  ＬＯＷ  ＶＩＳＣＯＳＩＴＹ  ＣＥＭＥＮＴ、Ｓｍｉｔｈ  ａｎｄ  Ｎｅｐｈｅｗ製のＰＡＬＡＣＯＳ、Ｗｒｉｇｈｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ製のＣＭＷ−１およびＣＭＷ−２、ＤｅＰｕｙ製のＤＥＰＵＹ  ＥＮＤＵＲＡＮＣＥ）、合成癌性骨空洞充填物（例えばＣＯＲＴＯＳＳ，Ｏｒｔｈｏｖｉｔａ）、ｐＨＥＭＡ、ポリ（ビニルＰＥＧ）、ポリ（スチレンスルホネート）、ポリ（アクリル酸）、ポリ（メタアクリル酸）並びにヒドロゲルを形成することが文献既知の他の重合体を包含する。別の組成物は上記列挙した物質のブレンド物および共重合体を包含する。塩基性リン酸カルシウムおよびヒドロキシアパタイトのようなリン酸カルシウムはヒアルロニダーゼ阻害剤と組み合わせて使用してよい。
【０１３２】
当業者に明らかなように、潜在的に何れのヒアルロニダーゼ阻害剤も単独または組み合わせにおいて上記本実施形態の実施において利用してよい。ＨＡ整形外科処置と組み合わせて使用するための例示されるＨＩ剤は、硫酸化多糖類；医薬品用賦形剤；ジブロック共重合体およびインドメタシンまたは金化合物；フラボノイド、例えば縮合タンニン、タンニン酸、ケンフェロール、ケルセチン、アペギニン、アジサイ由来のヒドランゲノール、クミンスパイス由来のクルクミン、グリチルリチン、イソリキリチン、グラブリジン、リキリチゲニン、ラムノリキルチン、ネオリキルチン、リコフラボノール、リコイソフラボンＡおよびＢ、リコイソフラボン、ホルモノネチングラブロール、グラブロン、グラブレン、ヒスプグラブリジンＡ、ヒスプグラブリジンＢ、バイカレイン、トラニラスト、シリビン、フロレチン、タキシフォリン、ジアドゼイン（４’，７−ジヒドロキシイソフラボン）、テクトリゲニン（４’，７−ジヒドロキシ−６−メトキシイソフラボン）、ルテオリン、キサントフモール、イソキサントフモール、ゲニステイン、ナリンゲニン、カルコナリンゲニン、ミリセチン、リン酸化ヘスペリジン、ビオカニンＡ、モリン、フロレチン、シリマリン、４−フェニル−クマリン、７−フルオロ−４’−ヒドロキシフラボン−４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、フラボノン−７−硫酸ナトリウム、５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウム、４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン；抗炎症剤、例えばインドメタシン、エスキン、トラキサノックス、サリシレート、エイコサトリエン酸、グリチルリチン；アレルギー性反応をモジュレートする薬剤、例えばクロモグリク酸２ナトリウム（ＤＳＣＧ）、トラニラスト、リキリチゲニン、イソリキリチゲニン、バイカレイン、ナトリウムポリスチレンスルホネート（Ｎ−ＰＳＳ）、サッカリン酸、硫酸コンドロイチンＡ誘導オリゴ糖（ＣｈＳＡＯ）、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、γ−リノレン酸、フェノプロフェン；フェノール系化合物、例えばジフェニルアクリル酸、ジフェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−メトキシフェニル）プロペノン、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−クロロフェニル）プロペノン、インドール−２−カルボン酸、ノルリグナン、エラジタンニンおよびウロリシンＢ；ビタミンＣ、Ｌ−アスコルビン酸６−ヘキサデカノエート；サポニン、例えばヘデラゲニン；システアミン；エキナセア；ロスマリン酸；塩酸グアニジン；Ｌ−アルギニン；界面活性剤、例えばテトラデシルナトリウムスルフェートまたはオクチルフェノールエトキシレートを包含する。例えば、整形外科用のインプラントの効果的なインプラント処置に関わる多くの問題点には望ましくない炎症反応が関与している。従って、インドメタシンおよび金化合物の両方とも抗炎症特性を有していることから、これ等の化合物はこれ等の用途において二重の目的を果たすと考えられる。
【０１３３】
これ等の化合物は全て単独またはさらに骨形成タンパク質および／または骨原性の増殖因子（例えばトランスフォーミング増殖因子、血小板由来増殖因子、線維芽細胞増殖因子）並びに上記のものの類似体および誘導体と組み合わせて使用してよい。骨形成タンパク質の例は例えばＢＭＰ−２、ＢＭＰ−３、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６（Ｖｇｒ−１）、ＢＭＰ−７（ＯＰ−１）、ＢＭＰ−８、ＢＭＰ−９、ＢＭＰ−１０、ＢＭＰ−１１、ＢＭＰ−１２、ＢＭＰ−１３、ＢＭＰ−１４、ＢＭＰ−１５およびＢＭＰ−１６を包含する。これ等のうちＢＭＰ−２、ＢＭＰ−３、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６およびＢＭＰ−７が特に利用性が高い。骨形成性タンパク質は例えば米国特許４，８７７，８６４；５，０１３，６４９；５，６６１，００７；５，６８８，６７８；６，１７７，４０６；６，４３２，９１９；および６，５３４，２６８およびＷｏｚｎｅｙ，Ｊ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ：２４２（４８８５）；１５２８−１５３４に記載されている。
【０１３４】
これ等の化合物の適切な用量はヒアルロニダーゼに対して延長された阻害作用を示すための各薬剤の安定した濃度を与えるようなものとする。これ等の濃度は概略値であり、化合物の力価および必要な作用の持続時間に応じて調節してよく：金チオマレート１０ｍｍＭおよび他の金化合物、インドメタシン１ｍｇ／ｍｌ、ヘパリン１ｍｇ／ｍｌ、硫酸化多糖類２ｍｇ／ｍｌおよびプロピレングリコール、ＴＲＩＴＯＮＸ−１００、ＰＥＧ、ＳＰＡＮ、ＰＬＵＲＯＮＩＣＬ１０１およびカルボキシメチルセルロースは全て１０ｍｇ／ｍｌとしてよい。この濃度を達成するためには、水性の体液の数ｍｌに曝露されると考えられる容量においてｍｌ当たり必要な用量の約１０倍の用量が必要となる場合がある（例えば１０ｍｇのインドメタシン、２０ｍｇの硫酸化多糖類、１００ｍｇのプロピレングリコール、ＴＲＩＴＯＮＸ−１００、ＰＥＧ、ＳＰＡＮ、ＰＬＵＲＯＮＩＣまたはカルボキシメチルセルロース）。従って例えば、領域を通過して拡散する間質性流体の恐らくは２ｍｌに注射液が曝露される場所においてＨＡ溶液１ｍｌを注射する場合は、後の時点までｍｌ当たり１０ｍｇの用量を確保するためには、これ等の阻害剤各々の１００ｍｇが推奨される。用量の必要性は注射容量および適用部位並びに所望の作用持続時間に大きく依存している。流体の交換が高度である部位においては、より多くのヒアルロニダーゼ阻害剤を投与してよい。さらに又阻害剤が重合体剤型から制御された態様で放出されれば、適用される総用量は阻害剤の放出プロファイル、適用部位、その領域の体液の交換および他のパラメーター、例えば年齢および全身状態に基づいて当業者が計算してよい。
【０１３５】
（２．ＨＩ負荷ヒアルロン酸脊髄手術用インプラント）
背部痛は合衆国における健康管理費用の第１位の要因であり、そして、年間費用において５００億ドル超に相当している（全世界では１０００億ドル）。合衆国において１２百万人超が何らかの形態の変形性円板疾患（ＤＤＤ）を有しており、その１０％（１．２百万人）はその問題部分を補正するために手術を必要とする。
【０１３６】
健常者においては、脊柱は強力な関節を形成し、運動中の脊髄の圧縮を吸収する椎間円板により分離される脊椎の骨板よりなる。椎間円板は線維輪と称される堅固な線維軟骨性の被膜により包囲された髄核と称される内部のゲル様の物質よりなる。髄核はグリコサミノグリカンおよび水のゼラチン状のマトリックス内に包埋されたコラーゲンフィブリルおよび結合組織細胞（線維芽細胞および軟骨細胞に類似している）の弛緩したフレームワークよりなる。線維輪は脊椎体内に係留されている線維軟骨の多数の同心円の環よりなる。ＤＤＤの最も一般的な原因は、線維輪内に破断により腫脹、ヘルニア形成または髄核および線維輪の脊柱管および／または脊髄孔内への隔離をもたらす局在化した脆弱化の領域が形成される場合に生じる。腫脹またはヘルニア化した円板はしばしば脊髄線維または脊髄神経根線維のような神経組織を圧迫する。損傷した椎間円板からの脊髄または神経根への圧力は神経機能不全（麻痺、脆弱化、刺痛）、肢体不自由性の疼痛、腸または膀胱の撹乱をもたらし、長期の障害を頻繁に誘発する。ＤＤＤの多くの症例は自発的に緩解するが、多数の患者は最小限侵襲性の処置、顕微解剖、円板の大部分の外科的切除、脊髄融合（種々の手法およびデバイスを用いた隣接する椎骨板の融合）および／または人工円板のインプラント処置の形態の外科的介入を必要とする。
【０１３７】
脊髄神経への圧迫を軽減するための切開手術では典型的には破壊された腰椎板（および脊髄神経根を包囲する骨の部分−椎弓切除として知られている）の切除を行う。患者は全身麻酔下に修正された跪姿勢を取る。後正中切開を行い組織を切除して適切な介在空間を曝露し；黄色靱帯を切開し、場合によっては骨性の板を摘出して十分な可視化を確保する。神経根を慎重に除去してヘルニア化したフラグメントおよび輪内の欠陥部を曝露する。典型的には輪の破断部から円板の空洞部に入り、髄核の弛緩したフラグメントを下垂体摂子を用いて除去する。椎間腔の内部または外部に隔離されている円板の別のフラグメントも慎重に除去し、椎間腔を強制的に灌流して残余フラグメントを全て除去する。破断部が硬膜内に存在する場合は、フィブリングルーで補強されることが多い縫合糸により硬膜を閉鎖する。次に組織を吸収性の縫合糸で閉鎖する。
【０１３８】
ミクロ腰椎板切除（ミクロ椎間板切除）は外来処置として実施され、ヘルニア化した円板用に最もよく選択される介入方法として椎弓切除の大部分の代替となっている。罹患した円板の上方の棘突起から下部の棘突起まで１インチの切開を行う。手術用顕微鏡を用いながら、組織を黄色靱帯まで切開し、神経根がはっきりと確認できるまで板から骨を除去する。神経根を慎重に引出し、輪内の破断部を拡大下に可視化する。ミクロ円板摂子を使用しながら輪の破断部を介して円板フラグメントを除去し、隔離された円板フラグメントが有れば全て除去する。椎弓切除術の場合と同様、椎間腔を灌流して円板フラグメントを全て除去し、硬膜の破断部があれば全て修復し、組織を吸収性の縫合糸で閉鎖する。前部（腹部）からの処置もまた切開および内視鏡的な腰椎円板切除術の両方のために使用できる。頚椎および胸椎の円板切除は腰椎の処置と同様であり、後部からの処置（椎弓切除を伴う）または融合を伴う前部からの椎間板切除術として実施することができる。
【０１３９】
残念ながら、かなりの数の患者において、神経根周囲の組織の術後の瘢痕形成が神経を圧迫し、刺激を誘発し疼痛および他の神経学的な症状の再発をもたらしている。このような合併症の発生率を低下させるために多くの外科医がヒアルロン酸よりなるインプラントを神経周囲の領域に浸潤させている。ＨＡは隣接組織が神経と接触したり、脊髄神経上に瘢痕組織が形成して最終的にはこれを拘束するのを防止する。しかしながらＨＡの急速な吸収が数日間の期間に渡り、多くは完治前に起こり、神経周囲の瘢痕組織の形成を可能にしてしまう。
【０１４０】
本発明においては、ヒアルロニダーゼの阻害剤をヒアルロン酸含有インプラントまたは組成物に単独または持続放出形態で添加することにより、ＨＡの分解速度を低減し、そして組成物／インプラントのインビボ活性をＨＡ単独使用時を越えて延長する（例えば患者の７５％超において一貫して２週間より長く、患者の２５％超で２ヶ月より長い）。送達されるＨＩの総用量、用量放出速度およびＨＡからの薬剤放出の持続時間は所望に応じてヒアルロン酸インプラントの活性を有意に延長するために専用に調節できる。これにより障壁がインビボでより長期に機能し、神経根周囲に瘢痕組織が形成される可能性を低減する。ＨＩ−ＨＡインプラントは脊髄手術の失敗の発生率を低減し、疼痛および神経学的症状の再発を防止し、瘢痕組織の除去のため外科的介入を反復する必要性を低減する。
【０１４１】
脊髄手術において使用するためのＨＩと組み合わせてよい適切なＨＡ市販品の例はＲＥＳＴＹＬＡＮＥ、ＨＹＬＡＦＯＲＭ、ＰＥＲＬＡＮＥ、ＳＹＮＶＩＳＣ、ＳＥＰＲＡＦＩＬＭ、ＳＥＰＬＡＣＯＡＴ、ＩＮＴＥＲＧＥＬおよびＬＵＢＲＩＣＯＡＴを包含する。
【０１４２】
脊髄手術処置において使用されるヒアルロン酸組成物の代表例は米国特許６，７１９，７９７；５，２５８，０４３；および４，９０４，２６０に記載されている。
【０１４３】
ＨＩはまた重合体系と組み合わせることにより薬剤の持続放出がもたらされる。本発明の目的のためのＨＩ剤の送達に適する物質は非分解性または分解性の物質よりなることができるが；分解性の物質が好ましい。適切な分解性の物質の非限定的な例は、ＰＥＧの交差結合物質、ゼラチン、コラーゲン、ＧＥＬＦＯＡＭ、骨自家移植片（例えばＡＬＬＯＧＲＯ、ＯＲＴＨＯＢＬＡＳＴ、ＯＰＴＥＦＯＲＭ、ＧＲＡＦＴＯＮ）、多糖類、炭水化物、タンパク質（例えばアルブミン、カゼイン、乳清タンパク質、植物タンパク質、魚タンパク質等）、自系の骨、脱鉱物質骨マトリックス、アルギネート、澱粉、セルロース誘導体（ＨＰＣ等）、セルロース、セルロースエステル、そのブレンド物および共重合体、キトサン、キトサン誘導体、ポリエステル−ポリアルキレンオキシドブロック共重合体（例えばＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡ、ＭｅＰＥＧ−ＰＬＧＡ等）、分解性ポリエステル、ポリ無水物、ポリオルトエステル、ポリホスホエステル、ポリホスファジンおよびシアノアクリレート重合体、注射可能なＰＥＧ含有製剤、例えばＣＯＳＥＡＬ、ＦＯＣＡＬＳＥＡＬ、ＳＰＲＡＹＧＥＬ、ＤＵＲＡＳＥＡＬ、または、米国特許５，８７４，５００；６，０５１，６４８；６，１６６，１３０および６，３１２，７２５に記載のもののような４アームチオールＰＥＧ（１０Ｋ）、４アームＮＨＳ  ＰＥＧ（１０Ｋ）およびメチル化コラーゲンを含む組成物、フィブリノーゲン含有製剤、例えばＦＬＯＳＥＡＬまたはＴＩＳＳＥＡＬ、ＲＥＰＥＬまたはＦＬＯＷＧＥＬ；および排出され得る他の低分子量重合体を包含する。
【０１４４】
当業者に明らかなように、潜在的に何れのヒアルロニダーゼ阻害剤も単独または組み合わせにおいて上記本実施形態の実施において利用してよい。脊髄手術処置においてＨＡと組み合わせて使用するための例示されるＨＩ剤は、ヘパリン、金チオマレート、デキストラン硫酸、フコイダン、プロピレングリコール；フラボノイド、例えば縮合タンニン、タンニン酸、ケンフェロール、ケルセチン、アペギニン、アジサイ由来のヒドランゲノール、クミンスパイス由来のクルクミン、グリチルリチン、イソリキリチン、グラブリジン、リキリチゲニン、ラムノリキルチン、ネオリキルチン、リコフラボノール、リコイソフラボンＡおよびＢ、リコイソフラボン、ホルモノネチングラブロール、グラブロン、グラブレン、ヒスプグラブリジンＡ、ヒスプグラブリジンＢ、バイカレイン、トラニラスト、シリビン、フロレチン、タキシフォリン、ジアドゼイン（４’，７−ジヒドロキシイソフラボン）、テクトリゲニン（４’，７−ジヒドロキシ−６−メトキシイソフラボン）、ルテオリン、キサントフモール、イソキサントフモール、ゲニステイン、ナリンゲニン、カルコナリンゲニン、ミリセチン、リン酸化ヘスペリジン、ビオカニンＡ、モリン、フロレチン、シリマリン、４−フェニル−クマリン、７−フルオロ−４’−ヒドロキシフラボン−４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、フラボノン−７−硫酸ナトリウム、５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウム、４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン；抗炎症剤、例えばインドメタシン、エスキン、トラキサノックス、サリシレート、エイコサトリエン酸、グリチルリチン；アレルギー性反応をモジュレートする薬剤、例えばクロモグリク酸２ナトリウム（ＤＳＣＧ）、トラニラスト、リキリチゲニン、イソリキリチゲニン、バイカレイン、ナトリウムポリスチレンスルホネート（Ｎ−ＰＳＳ）、サッカリン酸、硫酸コンドロイチンＡ誘導オリゴ糖（ＣｈＳＡＯ）、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、γ−リノレン酸、フェノプロフェン；フェノール系化合物、例えばジフェニルアクリル酸、ジフェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−メトキシフェニル）プロペノン、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−クロロフェニル）プロペノン、インドール−２−カルボン酸、ノルリグナン、エラジタンニンおよびウロリシンＢ；ビタミンＣ、Ｌ−アスコルビン酸６−ヘキサデカノエート；サポニン、例えばヘデラゲニン；システアミン；エキナセア；ロスマリン酸；塩酸グアニジン；Ｌ−アルギニン；界面活性剤、例えばテトラデシルナトリウムスルフェートまたはオクチルフェノールエトキシレート；並びに上記したものの類似体および誘導体を包含する。
【０１４５】
これ等の化合物の適切な用量はヒアルロニダーゼに対して延長された阻害作用を示すための各薬剤の安定した濃度を与えるようなものとする。これ等の濃度は概略値であり、化合物の力価および作用の持続時間および解剖学的位置に応じたヒアルロン酸の分解の予測される速度に応じて調節してよく：金チオマレート１０ｍｍＭ、インドメタシン１ｍｇ／ｍｌ、ヘパリン１ｍｇ／ｍｌ、硫酸化多糖類２ｍｇ／ｍｌおよびプロピレングリコール、ＴＲＩＴＯＮＸ−１００、ＰＥＧ、ＳＰＡＮ、ＰＬＵＲＯＮＩＣＬ１０１およびカルボキシメチルセルロースは全て１０ｍｇ／ｍｌとしてよい。この濃度を達成するためには、水性の体液の数ｍｌに曝露されると考えられる容量においてｍｌ当たり必要な用量の約１０倍の用量が必要となる場合がある（例えば総重量で１０ｍｇのインドメタシン、２０ｍｇの硫酸化多糖類、１００ｍｇのプロピレングリコール、ＴＲＩＴＯＮ、ＰＥＧ、ＳＰＡＮ、ＰＬＵＲＯＮＩＣまたはカルボキシメチルセルロース）。従って例えば、領域を通過して拡散する間質性流体の恐らくは２ｍｌに注射液が曝露される場所においてＨＡ溶液１ｍｌを注射する場合は、後の時点までｍｌ当たり１０ｍｇの用量を確保するためには、これ等の阻害剤各々の１００ｍｇが推奨される。用量の必要性は注射容量および適用部位に大きく依存している。流体の交換が高度である部位においては、より多くのヒアルロニダーゼ阻害剤を投与してよい。さらに又阻害剤が重合体剤型から制御された態様で放出されれば、適用される総用量は阻害剤の放出プロファイル、適用部位、その領域の体液の交換および他のパラメーター、例えば年齢および全身状態に基づいて当業者が計算してよい。
【０１４６】
（３．ＨＩ負荷ヒアルロン酸手術癒着障壁）
手術癒着形成は通常は分離されている身体組織が共に生育または瘢痕形成する複雑な過程である。癒着は手術中に損傷を受けた隣接組織間に生じる瘢痕組織の連結部または架橋部である。組織の乾燥、虚血、熱傷害、感染または外来物体の存在の結果としての手術外傷は組織癒着形成の刺激物質として長年に渡り認識されている。機械的傷害には腸の破裂（Ｃｈｏａｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｓｕｒｇ．８８：２４９−２５４，１９６４）および腸壁の外層の剥離または磨耗（Ｇｕｓｔａｖｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｃｔａ  Ｃｈｉｒ．Ｓｃａｎｄ．１０９：３２７−３３３，１９５５）を包含する。大型管を腸のループに分割することは虚血を誘導（Ｊａｍｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐａｔｈ．Ｂａｃｔ．９０：２７９−２８７，１９６５）し、これが癒着をもたらす場合がある。領域に導入され癒着を誘発する外来物はタルク（Ｇｒｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．１３３：５４４−５５０，１９７０）、ガーゼスポンジ（Ｌｅｈｍａｎ  ａｎｄ  Ｂｏｙｓ，Ａｎｎ，Ｓｕｒｇ．１１１：４２７−４３５，１９４０）、毒性化学物質（Ｃｈａｎｃｙ，Ａｒｃｈ．Ｓｕｒｇ．６０：１１５１−１１５３，１９５０）、細菌（Ｍｏｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｓｃｉ．２５０：６７５−６７９，１９６５）および糞便（Ｊａｃｋｓｏｎ，Ｓｕｒｇｅｒｙ  ４４：５０７−５１８，１９５８）を包含する。結果として、手術癒着は失敗した手術治療の主因であり、そして腸閉塞および不妊の最上位の原因となる。他の癒着関連の合併症は慢性の骨盤痛、尿道閉塞および排尿機能不全を包含する。術後癒着は主要な泌尿器または腹部の手術を受けた患者の６０％〜９０％において生じると推定されており、腹部癒着の治療の推定年間費用は２０億ドル超と考えられている。
【０１４７】
一般的に癒着形成とは、因子が放出されて血管の浸透性が増大し、フィブリノーゲンの流入とフィブリン付着が生じるという炎症反応である。フィブリン付着は、手術または疾患（例えば炎症性腸疾患、クローン病）により損傷を受けた隣接する組織または臓器を架橋するマトリックスを形成する。正常な状況下においては、臓器間の大部分のフィブリンマトリックスは治癒の過程において分解する。しかしながらフィブリンマトリックスが分解不可能となると、線維芽細胞が蓄積し、マトリックスに結合し、コラーゲンを付着させ、そして血管形成を誘導する。その結果は、通常では分離した状態で存続するはずの臓器または組織を共に連結する線維性の瘢痕組織の恒久的な帯の形成である。この事象カスケードを手術後４〜５日間以内に防止できれば、癒着形成は低減できる。
【０１４８】
種々の手術処置後の癒着を防止または低減するためにヒアルロン酸系製品が開発されている。ヒアルロン酸（典型的にはヒアルロン酸ナトリウム）フィルム、ゲルまたはスプレーは隣接組織を分離する一次的な生体再吸収性の障壁を形成する働きを有する（即ち２組織間の障壁の物理的存在はそれらが相互に直接接触して治癒過程において共に瘢痕形成することを防止する）。残念なことに、設置後約２４〜４８時間には膜は水和し、再吸収が開始される。これは一部の手術処置のためには適しているが、他の処置において（または治癒がより緩徐である糖尿病のような弱体化された患者において）は、この活性持続時間は不十分であり、障壁は治癒が完了する前に再吸収され、癒着形成の高い危険性に患者をおくことになる。
【０１４９】
本発明においては、ヒアルロニダーゼの阻害剤をヒアルロン酸含有手術癒着用フィルム、ゲルまたはスプレーに単独または持続放出形態で添加することにより、ＨＡの分解速度を低減し、そして組成物／インプラントのインビボ活性をＨＡ単独使用時を越えて延長する（例えば患者の９０％超において一貫して２日より長く、患者の５０％超で７日より長い）。１つの態様においては、ＨＩ含有製剤は、癒着の形成を防止するために手術処置中、標的の組織または臓器の表面のような所望の位置に送達される。所望の位置を示すこのような表面の例としては、ファロピアン管、卵巣および子宮のような生殖管の内表面、腱を包囲する指の内部、脊髄、腹腔の内部筋肉表面、および、例えば小腸および大腸、胃を含む消化管の外表面、および、腎臓、脾臓および肝臓のような副臓器の表面を包含するがこれ等に限定されない。
【０１５０】
送達されるＨＩの総用量、用量放出速度およびＨＡからの薬剤放出の持続時間は所望に応じてヒアルロン酸インプラントの活性を有意に延長するために専用に調節できる。これにより障壁がインビボでより長期に機能し、隣接する臓器または組織の間に瘢痕組織が形成される可能性を低減する。ＨＩ−ＨＡインプラントは腹部および婦人科の手術の後に形成する場合がある癒着の発生率および／または重症度を低減する。癒着の低減は疼痛、腸閉塞および不妊の発生を防止し、瘢痕組織の除去のため外科的介入を反復する必要性を低減する。
【０１５１】
本明細書に記載した薬剤、組成物および方法を利用しながら、広範な手術癒着および手術の合併症を治療または防止することができる。癒着の形成または望ましくない瘢痕組織の蓄積／封入は種々の手術処置の合併症である。上記した通り手術癒着は、腹腔または骨盤腔においては、実質的には如何なる切開または内視鏡的な手術処置の潜在的合併症である。手術インプラントの封入もまた胸部再構築手術、関節交換手術、ヘルニア修復手術、人工血管グラフト手術および神経手術の合併症でもある。各々の場合において、インプラントは手術インプラント（例えば乳房インプラント、人工関節、手術メッシュ、血管グラフト、硬膜パッチ、心嚢）の機能を弱体化または損傷する線維性の結合組織被膜により封入される。慢性の炎症および瘢痕形成はまた、慢性の静脈洞炎の治療または慢性炎症（例えば外来性物体、感染（カビ、マイコバクテリウム））の他の領域の除去のための手術中にも起こる。ＨＩ−ＨＡインプラントはこれ等の手術条件の維持においても使用してよい。
【０１５２】
腹部、胃腸、冠動脈、末梢神経および腱、整形外科、婦人科および他の手術において使用するためのＨＩと組み合わせてよい適切なＨＡ市販品の例はＬｉｆｅｃｏｒｅ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ製のＲＥＳＴＹＬＡＮＥ、ＨＹＬＡＦＯＲＭ、ＰＥＲＬＡＮＥ、ＳＹＮＶＩＳＣおよびＬＵＢＲＩＣＯＡＴ、ＩＮＴＥＲＧＥＬおよびＧｅｎｚｙｍｅ  Ｂｉｏｓｕｒｇｅｒｙ，Ｉｎｃ．製のＳＥＰＲＡＦＩＬＭ、ＳＥＰＲＡＧＥＬおよびＳＥＰＲＡＣＯＡＴ癒着障壁を包含する。他のＨＡ製品は、Ａｎｉｋａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ製のＯＳＳＩＧＥＬ交差結合ＨＡ製品、ＡＴＲＩＳＯＬ（生体吸収性交差結合ヒアルロン酸（ＨＡ）製品のＩＮＣＥＲＴファミリー）のようなインプラントおよびＧｅｎｚｙｍｅ  Ｂｉｏｓｕｒｇｅｒｙ製のＨＹＡＬＧＥＬ−ＲのようなＨＡ誘導体が包含される。
【０１５３】
手術癒着を防止するために使用されるヒアルロン酸組成物の代表例は米国特許６，７２３，７０９；６，５３１，１４７；および６，４６４，９７０に記載されている。
【０１５４】
ＨＩは重合体系と組み合わせることにより薬剤の持続放出がもたらされる。本発明の目的のためのＨＩ剤の送達に適する物質は非分解性または分解性の物質よりなることができるが；分解性の物質が好ましい。適切な分解性の物質の非限定的な例は、ＰＥＧの交差結合物質、ゼラチン、コラーゲン、ＧＥＬＦＯＡＭ、骨自家移植片（例えばＡＬＬＯＧＲＯ、ＯＲＴＨＯＢＬＡＳＴ、ＯＰＴＥＦＯＲＭ、ＧＲＡＦＴＯＮ）、多糖類、炭水化物、タンパク質（例えばアルブミン、カゼイン、乳清タンパク質、植物タンパク質、魚タンパク質等）、自系の骨、脱鉱物質骨マトリックス、アルギネート、澱粉、セルロース誘導体（ＨＰＣ等）、セルロース、セルロースエステル、そのブレンド物および共重合体、キトサン、キトサン誘導体、ポリエステル−ポリアルキレンオキシドブロック共重合体（例えばＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡ、ＭｅＰＥＧ−ＰＬＧＡ等）、分解性ポリエステル、ポリ無水物、ポリオルトエステル、ポリホスホエステル、ポリホスファジン、シアノアクリレート重合体、注射可能なＰＥＧ含有製剤、例えばＣＯＳＥＡＬ、ＦＯＣＡＬＳＥＡＬ、ＳＰＲＡＹＧＥＬ、ＤＵＲＡＳＥＡＬ、または、米国特許５，８７４，５００；６，０５１，６４８；６，１６６，１３０および６，３１２，７２５に記載のもののような４アームチオールＰＥＧ（１０Ｋ）、４アームＮＨＳ  ＰＥＧ（１０Ｋ）およびメチル化コラーゲンを含む組成物、フィブリノーゲン含有製剤、例えばＦＬＯＳＥＡＬまたはＴＩＳＳＥＡＬ、ＲＥＰＥＬまたはＦＬＯＷＧＥＬ；および排出され得る他の低分子量重合体を包含する。
【０１５５】
ＨＩ−ＨＡ含有手術癒着用障壁は種々の手術処置、例えば腹部手術、泌尿器および骨盤の手術、脊髄の手術、心臓手術、腱の手術および抹消神経の手術、静脈洞の手術において使用してよい。ＨＩ−ＨＡ組成物を投与する好ましい方法は、手術中、または、内視鏡、超音波、ＣＴ、ＭＲＩまたは蛍光検視ガイダンスと共に「ゲル」、「懸濁液」、「溶液」、「ペースト」、「フィルム」または「ラップ」（例えば身体の通路、臓器または組織の表面の全体または部分にまきつけることができるフィルム、メッシュまたは膜）として；ＨＩ組成物でＨＡ手術用インプラントを「コーティングすること」；および手術部位におけるＨＩ溶出重合体インプラントの設置を包含する。内視鏡処置中、ＨＩ−ＨＡ製剤は「スプレー」として内視鏡の送達ポートを介して、処置中に操作される腹部および骨盤の臓器の膜に対して適用してよい。
【０１５６】
当業者に明らかなように、潜在的に何れのヒアルロニダーゼ阻害剤も単独または組み合わせにおいて上記本実施形態の実施において利用してよい。手術癒着の防止においてＨＡと組み合わせて使用するための例示されるＨＩ剤は、金チオマレート；デキストラン硫酸；フコイダン；プロピレングリコール；フラボノイド、例えば縮合タンニン、タンニン酸、ケンフェロール、ケルセチン、アペギニン、アジサイ由来のヒドランゲノール、クミンスパイス由来のクルクミン、グリチルリチン、イソリキリチン、グラブリジン、リキリチゲニン、ラムノリキルチン、ネオリキルチン、リコフラボノール、リコイソフラボンＡおよびＢ、リコイソフラボン、ホルモノネチングラブロール、グラブロン、グラブレン、ヒスプグラブリジンＡ、ヒスプグラブリジンＢ、バイカレイン、トラニラスト、シリビン、フロレチン、タキシフォリン、ジアドゼイン（４’，７−ジヒドロキシイソフラボン）、テクトリゲニン（４’，７−ジヒドロキシ−６−メトキシイソフラボン）、ルテオリン、キサントフモール、イソキサントフモール、ゲニステイン、ナリンゲニン、カルコナリンゲニン、ミリセチン、リン酸化ヘスペリジン、ビオカニンＡ、モリン、フロレチン、シリマリン、４−フェニル−クマリン、７−フルオロ−４’−ヒドロキシフラボン−４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、フラボノン−７−硫酸ナトリウム、５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウム、４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン；抗炎症剤、例えばインドメタシン、エスキン、トラキサノックス、サリシレート、エイコサトリエン酸、グリチルリチン；アレルギー性反応をモジュレートする薬剤、例えばクロモグリク酸２ナトリウム（ＤＳＣＧ）、トラニラスト、リキリチゲニン、イソリキリチゲニン、バイカレイン、ナトリウムポリスチレンスルホネート（Ｎ−ＰＳＳ）、サッカリン酸、硫酸コンドロイチンＡ誘導オリゴ糖（ＣｈＳＡＯ）、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、γ−リノレン酸、フェノプロフェン；フェノール系化合物、例えばジフェニルアクリル酸、ジフェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−メトキシフェニル）プロペノン、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−クロロフェニル）プロペノン、インドール−２−カルボン酸、ノルリグナン、エラジタンニンおよびウロリシンＢ；ビタミンＣ、Ｌ−アスコルビン酸６−ヘキサデカノエート；サポニン、例えばヘデラゲニン；システアミン；エキナセア；ロスマリン酸；塩酸グアニジン；Ｌ−アルギニン；界面活性剤、例えばテトラデシルナトリウムスルフェートまたはオクチルフェノールエトキシレート；並びに上記したものの類似体および誘導体を包含する。
【０１５７】
これ等の化合物の適切な用量はヒアルロニダーゼに対して延長された阻害作用を示すための各薬剤の安定した濃度を与えるようなものとする。これ等の濃度は概略値であり、化合物の力価および必要な作用の持続時間に応じて調節してよく：金チオマレート１０ｍｍＭ、インドメタシン１ｍｇ／ｍｌ、ヘパリン１ｍｇ／ｍｌ、デキストラン硫酸２ｍｇ／ｍｌおよびプロピレングリコール、ＴＲＩＴＯＮＸ−１００、ＰＥＧ、ＳＰＡＮ、ＰＬＵＲＯＮＩＣＬ１０１およびカルボキシメチルセルロースは全て１０ｍｇ／ｍｌとしてよい。この濃度を達成するためには、水性の体液の数ｍｌに曝露されると考えられる面積または容量においてｍｌ当たり必要な用量の約１０倍の用量が必要となる場合がある（例えば総重量で１０ｍｇのインドメタシン、２０ｍｇの硫酸化多糖類、１００ｍｇのプロピレングリコール、ＴＲＩＴＯＮ、ＰＥＧ、ＳＰＡＮ、ＰＬＵＲＯＮＩＣまたはカルボキシメチルセルロース）。従って例えば、領域を通過して拡散する間質性流体の恐らくは２ｍｌに注射液が曝露される場所においてＨＡ溶液１ｍｌを注射する場合は、後の時点までｍｌ当たり１０ｍｇの用量を確保するためには、これ等の阻害剤各々の１００ｍｇが推奨される。用量の必要性は注射容量および適用部位に大きく依存している。流体の交換が高度である部位においては、より多くのヒアルロニダーゼ阻害剤を投与してよい。さらに又阻害剤が重合体剤型から制御された態様で放出されれば、適用される総用量は阻害剤の放出プロファイル、適用部位、その領域の体液の交換および他のパラメーター、例えば年齢および全身状態に基づいて当業者が計算してよい。
【０１５８】
（４．ＨＩ負荷ヒアルロン酸美顔品用インプラント）
顔面の瘢痕を補正し、顔面の線を低減し、そして口唇を増強するための軟組織の増強用の種々の注射可能なヒアルロン酸製品が開発されている。特に、このようなインプラントは、ざ瘡瘢痕、疾患または外傷に起因する萎縮、眉間皺、鼻唇襞、または、鼻整形、皮膚グラフト処置または他の軟組織の二次的な欠陥の補正を包含する（がこれ等に限定されない）種々の輪郭の不全の治療を適応症としている。この目的のために市販されている合成生産ヒアルロンゲルはＲＥＳＴＹＬＡＮＥおよびＰＥＲＬＡＮＥおよびＧｅｎｚｙｍｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎより入手されるＨＹＬＡＦＯＲＭ（別名ＨＹＬＡＮ  Ｂ）を包含する。美顔品注射において使用するためのＨＩと組み合わせてよいＨＡ市販品の他の例はＭｅｉｊｉ  Ｓｅｉｋａ  Ｋａｉｓｈａ，Ｌｔｄ．（Ｊａｐａｎ）より入手されるＡＣＨＹＡＬ、Ｌ．Ｅ．Ａ．Ｄｅｒｍ（Ｆｒａｎｃｅ）より入手されるＪＵＶＥＤＥＲＭ、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｏ．Ｒ．ＧＥＶ．ＭａｃＤｅｒｍｏｌ（Ｆｒａｎｃｅ）より入手されるＭＡＣＤＥＲＭＯＬ、および、Ｒｏｆｉｌ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（Ｈｏｌｌａｎｄ）より入手されるＲＯＦＩＬＡＮ  Ｈｙｌａｎ  Ｇｅｌを包含する。
【０１５９】
残念なことに、ヒアルロニダーゼおよび経時的にＨＡインプラントを分解することができる他の酵素を生産する宿主の結合組織細胞および炎症細胞がインプラントに生息するに従って、反復する「修正（タッチアップ）」処置が必要となる場合が多い。ヒアルロニダーゼ阻害剤（ＨＩ）を単独または持続放出製剤中に含有する注射可能なヒアルロン酸はインプラントの増強された持続性をもたらし、その後の反復注射の回数を低減する。以前に報告されているヒアルロニダーゼ阻害剤の何れも皮膚用ＨＡ注射に配合するために適しているが、以下のもの、即ち、金チオマレート、インドメタシン、プロピレングリコール、デキストラン硫酸、フコイダン、ヘデラゲニン、フラボノイド、アレルギー反応をモジュレートする薬剤、フェノール系化合物およびカルボキシメチルセルロースが特に好ましい。
【０１６０】
使用する製剤に関わらずＨＩ負荷ＨＡ注射の投与は以下の態様において進行してよい。ＨＩ−ＨＡインプラント物質を含有する小ゲージ針（３０または３２ゲージ）を有する予め負荷したシリンジを使用する。背もたれを僅かに傾けて患者を着座位とする。局所用リドカインおよび／またはプリロカインを麻酔のために使用する。針を皮膚と角度をつけながら挿入し、表面の皮膚組織に進行する。十分な量のインプラント物質を押し出して軟組織の輪郭欠陥を修復する。ＨＩ負荷ＲＥＳＴＹＬＡＮＥの場合は、注射後数時間内に注射された物質の一部が消散するため、過剰補正（究極的に必要な量より多い物質の注射）が必要となる。ＨＩ負荷ＰＥＲＬＡＮＥは典型的にはより深い線を補正するために使用されており、そして皮膚内のより深部に注射される。
【０１６１】
美顔手術注射において使用されるヒアルロン酸組成物の代表例は米国特許５，６３３，００１；５，２５６，１４０；および６，７０３，０４１に記載されている。
【０１６２】
ＨＩは重合体系と組み合わせることによりＨＡ皮膚注射の部分としての薬剤の持続放出がもたらされる。本発明の目的のためのＨＩ剤の送達に適する物質は非分解性または分解性の物質よりなることができるが；分解性の物質が好ましい。適切な分解性の物質の非限定的な例は、ＰＥＧの交差結合物質、ゼラチン、コラーゲン、ＧＥＬＦＯＡＭ、多糖類、炭水化物、タンパク質（例えばアルブミン、カゼイン、乳清タンパク質、植物タンパク質、魚タンパク質等）、アルギネート、澱粉、セルロース誘導体（ＨＰＣ等）、セルロース、セルロースエステル、そのブレンド物および共重合体、キトサン、キトサン誘導体、ポリエステル−ポリアルキレンオキシドブロック共重合体（例えばＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡ、ＭｅＰＥＧ−ＰＬＧＡ等）、分解性ポリエステル、ポリ無水物、ポリオルトエステル、ポリホスホエステル、ポリホスファジンおよびシアノアクリレート重合体、注射可能なＰＥＧ含有製剤、例えばＣＯＳＥＡＬ、ＦＯＣＡＬＳＥＡＬ、ＳＰＲＡＹＧＥＬ、ＤＵＲＡＳＥＡＬ、または、米国特許５，８７４，５００；６，０５１，６４８；６，１６６，１３０および６，３１２，７２５に記載のもののようなペンタエリスリトールポリ（エチレングリコール）エーテルテトラスルヒドリル（４アームチオールＰＥＧ）、ペンタエリスリトールポリ（エチレングリコール）エーテルテトラスクシンイミジルグルタレート（４アームＮＨＳ  ＰＥＧ）およびメチル化コラーゲンを含む組成物、フィブリノーゲン含有製剤、例えばＦＬＯＳＥＡＬまたはＴＩＳＳＥＡＬ、ＲＥＰＥＬまたはＦＬＯＷＧＥＬ；および排出され得る他の低分子量重合体を包含する。
【０１６３】
ＨＡ−ＨＩ組成物はさらにリドカイン、ベンゾカインまたはプリロカインのような麻酔薬および／またはボツリヌス毒素のような神経毒を含んでよい。
【０１６４】
当業者に明らかなように、潜在的に何れのヒアルロニダーゼ阻害剤も単独または組み合わせにおいて上記本実施形態の実施において利用してよい。美顔注射処置においてＨＡと組み合わせて使用するための例示されるＨＩ剤は、金チオマレート、インドメタシン、プロピレングリコール、カルボキシメチルセルロース、デキストラン硫酸、フコイダンおよびヘパリン、並びにこれ等の類似体および誘導体を包含する。
【０１６５】
これ等の化合物の適切な用量はヒアルロニダーゼに対して延長された阻害作用を示すための各薬剤の安定した濃度を与えるようなものとする。これ等の濃度は概略値であり、化合物の力価および必要な作用の持続時間に応じて調節してよく：金チオマレート１０ｍｍＭ、インドメタシン１ｍｇ／ｍｌ、ヘパリン１ｍｇ／ｍｌ、硫酸化多糖類２ｍｇ／ｍｌおよびプロピレングリコール、ＴＲＩＴＯＮＸ−１００、ＰＥＧ、ＳＰＡＮ、ＰＬＵＲＯＮＩＣＬ１０１およびカルボキシメチルセルロースは全て１０ｍｇ／ｍｌとしてよい。この濃度を達成するためには、水性の体液の数ｍｌに曝露されると考えられる容量においてｍｌ当たり必要な用量の約１０倍の用量が必要となる場合がある（例えば総重量で１０ｍｇのインドメタシン、２０ｍｇの硫酸化多糖類、１００ｍｇのプロピレングリコール、ＴＲＩＴＯＮ、ＰＥＧ、ＳＰＡＮ、ＰＬＵＲＯＮＩＣまたはカルボキシメチルセルロース）。従って例えば、領域を通過して拡散する間質性流体の恐らくは２ｍｌに注射液が曝露される場所においてＨＡ溶液１ｍｌを注射する場合は、後の時点までｍｌ当たり１０ｍｇの用量を確保するためには、これ等の阻害剤各々の１００ｍｇが推奨される。用量の必要性は注射容量および適用部位に大きく依存している。流体の交換が高度である部位においては、より多くのヒアルロニダーゼ阻害剤を投与してよい。さらに又阻害剤が重合体剤型から制御された態様で放出されれば、適用される総用量は阻害剤の放出プロファイル、適用部位、その領域の体液の交換および他のパラメーター、例えば年齢および全身状態に基づいて当業者が計算してよい。
【０１６６】
（５．ＨＩ負荷ヒアルロン酸眼科用インプラント）
ＨＡの粘弾性溶液は組織潤滑剤として機能するため、および、眼の内部に対する手術中に眼内液体の容量を維持するために使用されている（例えば白内障摘出手術、眼内レンズ移植、網膜再付着、水晶体超音波吸引術、角膜移植および緑内障濾過手術）。ＡＭＶＩＳＣ、ＡＭＶＩＳＣ  ＰＬＵＳおよびＯＣＵＣＯＡＴ（Ｂａｕｓｃｈ＆Ｌｏｍｂ）は眼の形状を維持し、そして、白内障摘出、角膜移植および緑内障手術の間の壊れ易い組織を保護するために使用されている高分子量の粘弾性で注射可能なＨＡ溶液である。ＨＡ系の眼科用粘弾性製品にはＡｌｃｏｎ  ＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓのＰＲＯＶＩＳ、ＶＩＳＣＯＡＴ、ＤＵＯＶＩＳＣおよびＣＥＬＬＵＧＥＬ；Ｐｈａｒｍａｃｉａ＆ＵｐｊｏｈｎのＨＥＡＬＯＮ、ＨＥＡＬＯＮ  ＧおよびＨＥＡＬＯＮ５、ＡｌｌｅｒｇａｎのＶＩＴＲＡＸ；Ｂｉｏ−Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ＧｅｎｅｒａｌのＢＩＯＬＯＮ；Ａｎｉｋａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ／Ｓｔａａｒ  ＳｕｒｇｉｃａｌのＳＴＡＡＲＶＩＳＣ；Ａｎｉｋａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ／Ｃｙｔｏｓｏｌ  ＯｐｈｔｈａｌｍｉｃｓのＳＨＥＬＬＧＥＬ；およびＮｏｖａｒｔｉｓのＵＮＩＶＩＳＣが包含される。
【０１６７】
眼手術において使用されるヒアルロン酸組成物の代表例は米国特許５，７２８，４０５；６，６３５，２６７；６，４６５，５８８；および６，２４２，４８０；６，６２０，９２７；５，７２８，４０５；６，６３５，２６７；６，４６５，５８８；および６，２４２，４８０に記載されている。
【０１６８】
本発明によればＨＡ眼科用インプラント内へのＨＩの示差的負荷を用いることにより眼科用インプラントの溶解速度を正確に制御してよい。本発明においては、ＨＩはＨＡ含有インプラントまたは組成物に持続放出形態で添加することにより、ヒアルロン酸の分解速度を低減し、そして組成物／インプラントのインビボ活性をＨＡ単独使用時を越えて延長する（例えば患者の７５％超において一貫して１ヶ月より長い）。送達されるＨＩの総用量、用量放出速度およびマトリックスからの薬剤放出の持続時間は所望に応じてコラーゲンインプラントの活性を有意に延長するために専用に調節できる。
【０１６９】
ＨＩは重合体系と組み合わせることによりＨＡ皮膚注射の一部としての薬剤の持続放出がもたらされる。本発明の目的のためのＨＩ剤の送達に適する物質は非分解性または分解性の物質よりなることができるが；分解性の物質が好ましい。適切な分解性の物質の非限定的な例は、ＰＥＧの交差結合物質、ゼラチン、コラーゲン、ＧＥＬＦＯＡＭ、多糖類、炭水化物、タンパク質（例えばアルブミン、カゼイン、乳清タンパク質、植物タンパク質、魚タンパク質等）、アルギネート、澱粉、セルロース誘導体（ＨＰＣ等）、セルロース、セルロースエステル、そのブレンド物および共重合体、キトサン、キトサン誘導体、ポリエステル−ポリアルキレンオキシドブロック共重合体（例えばＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡ、ＭｅＰＥＧ−ＰＬＧＡ等）、分解性ポリエステル、ポリ無水物、ポリオルトエステル、ポリホスホエステル、ポリホスファジンおよびシアノアクリレート重合体、注射可能なＰＥＧ含有製剤、例えばＣＯＳＥＡＬ、ＦＯＣＡＬＳＥＡＬ、ＳＰＲＡＹＧＥＬ、ＤＵＲＡＳＥＡＬ、または、米国特許５，８７４，５００；６，０５１，６４８；６，１６６，１３０および６，３１２，７２５に記載のもののような４アームチオールＰＥＧ（１０Ｋ）、４アームＮＨＳ  ＰＥＧ（１０Ｋ）およびメチル化コラーゲンを含む組成物、フィブリノーゲン含有製剤、例えばＦＬＯＳＥＡＬまたはＴＩＳＳＥＡＬ、ＲＥＰＥＬまたはＦＬＯＷＧＥＬ；および排出され得る他の低分子量重合体を包含する。
【０１７０】
当業者に明らかなように、潜在的に何れのヒアルロニダーゼ阻害剤も単独または組み合わせにおいて上記本実施形態の実施において利用してよい。眼の処置においてＨＡと組み合わせて使用するための例示されるＨＩ剤は、金チオマレート、プロピレングリコール、デキストラン硫酸、フコイダン、ヘパリン；フラボノイド、例えば縮合タンニン、タンニン酸、ケンフェロール、ケルセチン、アペギニン、アジサイ由来のヒドランゲノール、クミンスパイス由来のクルクミン、グリチルリチン、イソリキリチン、グラブリジン、リキリチゲニン、ラムノリキルチン、ネオリキルチン、リコフラボノール、リコイソフラボンＡおよびＢ、リコイソフラボン、ホルモノネチングラブロール、グラブロン、グラブレン、ヒスプグラブリジンＡ、ヒスプグラブリジンＢ、バイカレイン、トラニラスト、シリビン、フロレチン、タキシフォリン、ジアドゼイン（４’，７−ジヒドロキシイソフラボン）、テクトリゲニン（４’，７−ジヒドロキシ−６−メトキシイソフラボン）、ルテオリン、キサントフモール、イソキサントフモール、ゲニステイン、ナリンゲニン、カルコナリンゲニン、ミリセチン、リン酸化ヘスペリジン、ビオカニンＡ、モリン、フロレチン、シリマリン、４−フェニル−クマリン、７−フルオロ−４’−ヒドロキシフラボン−４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、フラボノン−７−硫酸ナトリウム、５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウム、４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン；抗炎症剤、例えばインドメタシン、エスキン、トラキサノックス、サリシレート、エイコサトリエン酸、グリチルリチン；アレルギー性反応をモジュレートする薬剤、例えばクロモグリク酸２ナトリウム（ＤＳＣＧ）、トラニラスト、リキリチゲニン、イソリキリチゲニン、バイカレイン、ナトリウムポリスチレンスルホネート（Ｎ−ＰＳＳ）、サッカリン酸、硫酸コンドロイチンＡ誘導オリゴ糖（ＣｈＳＡＯ）、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、γ−リノレン酸、フェノプロフェン；フェノール系化合物、例えばジフェニルアクリル酸、ジフェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−メトキシフェニル）プロペノン、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−クロロフェニル）プロペノン、インドール−２−カルボン酸、ノルリグナン、エラジタンニンおよびウロリシンＢ；ビタミンＣ、Ｌ−アスコルビン酸６−ヘキサデカノエート；サポニン、例えばヘデラゲニン；システアミン；エキナセア；ロスマリン酸；塩酸グアニジン；Ｌ−アルギニン；界面活性剤、例えばテトラデシルナトリウムスルフェートまたはオクチルフェノールエトキシレート；並びに上記したものの類似体および誘導体を包含する。
【０１７１】
これ等の化合物の適切な用量はヒアルロニダーゼに対して延長された阻害作用を示すための各薬剤の安定した濃度を与えるようなものとする。これ等の濃度は概略値であり、化合物の力価および必要な作用の持続時間に応じて調節してよく：金チオマレート１０ｍｍＭ、インドメタシン１ｍｇ／ｍｌ、ヘパリン１ｍｇ／ｍｌ、硫酸化多糖類２ｍｇ／ｍｌおよびプロピレングリコール、ＴＲＩＴＯＮＸ−１００、ＰＥＧ、ＳＰＡＮ、ＰＬＵＲＯＮＩＣＬ１０１およびカルボキシメチルセルロースは全て１０ｍｇ／ｍｌとしてよい。この濃度を達成するためには、水性の体液の数ｍｌに曝露されると考えられる面積においてｍｌ当たり必要な用量の約１０倍の用量が必要となる場合がある（例えば総重量で１０ｍｇのインドメタシン、２０ｍｇの硫酸化多糖類、１００ｍｇのプロピレングリコール、ＴＲＩＴＯＮ、ＰＥＧ、ＳＰＡＮ、ＰＬＵＲＯＮＩＣまたはカルボキシメチルセルロース）。従って例えば、領域を通過して拡散する間質性流体の恐らくは２ｍｌに注射液が曝露される場所においてＨＡ溶液１ｍｌを注射する場合は、後の時点までｍｌ当たり１０ｍｇの用量を確保するためには、これ等の阻害剤各々の１００ｍｇが推奨される。用量の必要性は注射容量および適用部位に大きく依存している。流体の交換が高度である部位においては、より多くのヒアルロニダーゼ阻害剤を投与してよい。さらに又阻害剤が重合体剤型から制御された態様で放出されれば、適用される総用量は阻害剤の放出プロファイル、適用部位、その領域の体液の交換および他のパラメーター、例えば年齢および全身状態に基づいて当業者が計算してよい。
【０１７２】
（６．関節内注射用の高負荷ヒアルロン酸）
変形性関節症（ＯＡ）はアメリカ人の多数が罹患している疼痛性の変性関節状態である。ＯＡの厳密な原因は不明であるが可能性のある原因としては傷害、加齢、遺伝的素因および肥満が包含される。関節滑液の通常の要素であるヒアルロン酸は通常の活動（休息、歩行）中の関節表面を潤滑化し、機械的損傷の防止を支援し、高衝撃の活動（例えば走行、跳躍）における関節へのショックを低減する。ＯＡ患者においては、滑液の弾性および粘性および滑液中のヒアルロン酸濃度が低下する。これが関節内の関節軟骨の分解に寄与すると考えられている。関節内投与されたＨＡ（典型的にはヒアルロン酸ナトリウム）は注射後のある期間中は関節軟骨表面、滑膜組織および関節の被膜を貫通する。関節内にヒアルロン酸を注射（粘度補給として知られる）することにより、部分的には滑液の正常な環境を回復し、疼痛を低減し、そして潜在的にはその後の損傷および障害を防止することが可能である。
【０１７３】
ＨＡ含有物質は典型的には保存的な治療からは不十分な疼痛緩解しか得られない患者において膝の疼痛性の変形性関節症の治療のために関節内注射（単回投与または反復投与サイクルの過程の何れか）として投与される。場合により、他の関節、例えば腰部（蛍光検視下に注射）、踵部、肩部および肘部の関節にもＨＡを注射することによりこれ等の特定の関節における疾患の症状を緩解する。特定の市販品に応じて、ＨＡ物質は連続５〜６週間週一回関節内に注射される。効果的な場合は、患者は６ヶ月以上の期間兆候的緩解を経験したことを自身で報告し、その時点で治療の効果を延長するためにサイクルを反復してよい。一部の患者においては持続的な利点にも関わらず、数日間の期間に渡り注射されたＨＡが身体により関節から急速に浄化（除去）される。ＨＡの関節内の滞留時間をその分解を阻害することにより延長することは、その薬効を増強し、そして兆候的緩解の持続時間を増大させることが期待される。
【０１７４】
１つの態様において、本発明の組成物は動物（例えばウマ）における変形性関節症の管理のために使用してよい。
【０１７５】
本発明においては、ＨＩを関節内ＨＡ含有インプラントまたは組成物に添加することによりＨＡの分解速度を低減し、そして組成物／インプラントのインビボ活性をＨＡ単独使用時を越えて延長する（例えば多くの患者において一貫して６ヶ月より長期、そして一部の患者においては１年より長期）。送達される総用量、用量放出速度およびマトリックスからの薬剤放出の持続時間は所望に応じてＨＡインプラントの活性を有意に延長するために専用に調節できる。
【０１７６】
多くの市販のＨＡ含有物質をＨＩと組み合わせてよく、例えば、ＳＹＮＶＩＳＣは雄鳥鶏冠から誘導されたヒラン（ヒアルロン酸ナトリウムの誘導体）を含有する粘弾性流体であり；ＯＲＴＨＯＶＩＳＣは高度に精製された高分子量の高粘度の注射可能な形態のＨＡであるＨＹＡＬＧＡＮ（Ｆｉｄｉａ／Ｓａｎｏｆｉ−Ｓｙｎｔｈｅｌａｂｏより入手）であり；そしてＨＰＳおよびＳＵＰＡＲＴＺ（Ｓｅｉｋａｇａｋｕ／Ｓｍｉｔｈ＆Ｎｅｐｈｅｗ）等が挙げられる。一部のＨＡ製品（特にＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ  Ｖｅｔｍｅｄｉｃａ，Ｓｔ．Ｊｏｓｅｐｈ，ＭＯ製のＨＹＶＩＳＣ）は獣医科用途に使用されている（典型的にはウマの変形性関節症および凝りを治療するため）。
【０１７７】
粘度補給治療において使用されるヒアルロン酸組成物の代表例は米国特許６，６５４，１２０、６，６４５，９４５および６，６３５，２８７に記載されている。
【０１７８】
ＨＩは重合体系と組み合わせることにより薬剤の持続放出がもたらされる。ＯＡの管理におけるＨＡと組み合わせたＨＩ剤の送達に適する物質は非分解性または分解性の物質よりなることができるが；分解性の物質が好ましい。適切な分解性の物質の非限定的な例は、ＰＥＧの交差結合物質、ゼラチン、コラーゲン、ＧＥＬＦＯＡＭ、多糖類、炭水化物、タンパク質（例えばアルブミン、カゼイン、乳清タンパク質、植物タンパク質、魚タンパク質等）、アルギネート、澱粉、セルロース誘導体（ＨＰＣ等）、セルロース、セルロースエステル、そのブレンド物および共重合体、キトサン、キトサン誘導体、ポリエステル−ポリアルキレンオキシドブロック共重合体（例えばＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡ、ＭｅＰＥＧ−ＰＬＧＡ等）、分解性ポリエステル、ポリ無水物、ポリオルトエステル、ポリホスホエステル、ポリホスファジンおよびシアノアクリレート重合体を包含する。本発明の実施における使用のために特に有用な分解性重合体は、注射可能なＰＥＧ含有製剤、例えばＣＯＳＥＡＬ、ＦＯＣＡＬＳＥＡＬ、ＳＰＲＡＹＧＥＬ、ＤＵＲＡＳＥＡＬ、または、米国特許５，８７４，５００；６，０５１，６４８；６，１６６，１３０および６，３１２，７２５に記載のもののような４アームチオールＰＥＧ（１０Ｋ）、４アームＮＨＳ  ＰＥＧ（１０Ｋ）およびメチル化コラーゲンを含む組成物、フィブリノーゲン含有製剤、例えばＦＬＯＳＥＡＬまたはＴＩＳＳＥＡＬ、ＲＥＰＥＬまたはＦＬＯＷＧＥＬ；および排出され得る他の低分子量重合体を包含する。別の組成物は上記列挙した物質のブレンド物および共重合体を包含する。
【０１７９】
当業者に明らかなように、潜在的に何れのヒアルロニダーゼ阻害剤も単独または組み合わせにおいて上記本実施形態の実施において利用してよい。変形性関節症の管理においてＨＡと組み合わせて使用するための例示されるＨＩ剤は、金チオマレート、プロピレングリコール、デキストラン硫酸、フコイダン、ヘパリン；フラボノイド、例えば縮合タンニン、タンニン酸、ケンフェロール、ケルセチン、アペギニン、アジサイ由来のヒドランゲノール、クミンスパイス由来のクルクミン、グリチルリチン、イソリキリチン、グラブリジン、リキリチゲニン、ラムノリキルチン、ネオリキルチン、リコフラボノール、リコイソフラボンＡおよびＢ、リコイソフラボン、ホルモノネチングラブロール、グラブロン、グラブレン、ヒスプグラブリジンＡ、ヒスプグラブリジンＢ、バイカレイン、トラニラスト、シリビン、フロレチン、タキシフォリン、ジアドゼイン（４’，７−ジヒドロキシイソフラボン）、テクトリゲニン（４’，７−ジヒドロキシ−６−メトキシイソフラボン）、ルテオリン、キサントフモール、イソキサントフモール、ゲニステイン、ナリンゲニン、カルコナリンゲニン、ミリセチン、リン酸化ヘスペリジン、ビオカニンＡ、モリン、フロレチン、シリマリン、４−フェニル−クマリン、７−フルオロ−４’−ヒドロキシフラボン−４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、フラボノン−７−硫酸ナトリウム、５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウム、４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン；抗炎症剤、例えばインドメタシン、エスキン、トラキサノックス、サリシレート、エイコサトリエン酸、グリチルリチン；アレルギー性反応をモジュレートする薬剤、例えばクロモグリク酸２ナトリウム（ＤＳＣＧ）、トラニラスト、リキリチゲニン、イソリキリチゲニン、バイカレイン、ナトリウムポリスチレンスルホネート（Ｎ−ＰＳＳ）、サッカリン酸、硫酸コンドロイチンＡ誘導オリゴ糖（ＣｈＳＡＯ）、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、γ−リノレン酸、フェノプロフェン；フェノール系化合物、例えばジフェニルアクリル酸、ジフェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−メトキシフェニル）プロペノン、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−クロロフェニル）プロペノン、インドール−２−カルボン酸、ノルリグナン、エラジタンニンおよびウロリシンＢ；ビタミンＣ、Ｌ−アスコルビン酸６−ヘキサデカノエート；サポニン、例えばヘデラゲニン；システアミン；エキナセア；ロスマリン酸；塩酸グアニジン；Ｌ−アルギニン；界面活性剤、例えばテトラデシルナトリウムスルフェートまたはオクチルフェノールエトキシレート；並びに上記したものの類似体および誘導体を包含する。以下の組成物はこの適応症における使用のため理想的に適している。
【０１８０】
これ等の化合物の適切な用量はヒアルロニダーゼに対して延長された阻害作用を示すための各薬剤の安定した濃度を与えるようなものとする。これ等の濃度は概略値であり、化合物の力価および必要な作用の持続時間に応じて調節してよく：金チオマレート１０ｍｍＭ、インドメタシン１ｍｇ／ｍｌ、ヘパリン１ｍｇ／ｍｌ、硫酸化多糖類２ｍｇ／ｍｌおよびプロピレングリコール、ＴＲＩＴＯＮＸ−１００、ＰＥＧ、ＳＰＡＮ、ＰＬＵＲＯＮＩＣＬ１０１およびカルボキシメチルセルロースは全て１０ｍｇ／ｍｌとしてよい。この濃度を達成するためには、水性の体液の数ｍｌに曝露されると考えられる面積においてｍｌ当たり必要な用量の約１０倍の用量が必要となる場合がある（例えば総重量で１０ｍｇのインドメタシン、２０ｍｇの硫酸化多糖類、１００ｍｇのプロピレングリコール、ＴＲＩＴＯＮ、ＰＥＧ、ＳＰＡＮ、ＰＬＵＲＯＮＩＣまたはカルボキシメチルセルロース）。従って例えば、領域を通過して拡散する間質性流体の恐らくは２ｍｌに注射液が曝露される場所においてＨＡ溶液１ｍｌを注射する場合は、後の時点までｍｌ当たり１０ｍｇの用量を確保するためには、これ等の阻害剤各々の１００ｍｇが推奨される。用量の必要性は注射容量および適用部位に大きく依存している。流体の交換が高度である部位においては、より多くのヒアルロニダーゼ阻害剤を投与してよい。さらに又阻害剤が重合体剤型から制御された態様で放出されれば、適用される総用量は阻害剤の放出プロファイル、適用部位、その領域の体液の交換および他のパラメーター、例えば年齢および全身状態に基づいて当業者が計算してよい。
【０１８１】
（７．ＧＥＲＤ用のＨＬ負荷ヒアルロン酸増量剤）
ＨＡ系の注射剤は胃食道逆流性疾患（ＧＥＲＤ）の管理のために使用されている。ＧＥＲＤは下部食道括約筋（胃と食道の間の筋肉）が胃の内容物が食道に逆流することを防止できない場合に生じる。胃酸および酵素は食道の上皮層に対して極めて腐食性であり、そして食道の糜爛、潰瘍、瘢痕形成および狭窄を誘発する場合がある。食道内への反復する逆流は非可逆的な傷害をもたらす場合があり、患者は食道癌の特定の形態を発症する危険性を高める。ＨＡ増量剤を下部食道括約筋（ＬＥＳ）の近傍に注射することで組織の構造を回復させ、食道内への逆流を低減することができる。ＨＡ増量剤は典型的には内視鏡視野下に直接注射を解して投与される。本質的に全てのＨＡ系処置で生じるとおり、基本的な問題はインプラントの分解であり、これが治療の持続性を限定する。ヒアルロン酸がその構造的一体性を消失し、もはやＬＥＳを管理できなくなった時点で、ＨＡ（または他の生体物質、例えばコラーゲン）の再注射または括約筋の切開手術による強化をともなう反復介入が必要となる。ＧＥＲＤの治療のためのＨＡ系増量剤の代表例はＱ−Ｍｅｄ／Ｐｒｉｏｒｉｔｙ  ＨｅａｌｔｈｃａｒｅのＤＥＦＬＵＸである。ＧＥＲＤ手術において用いられるヒアルロン酸組成物の代表例は米国特許６，７３６，８２３、６，７３６，８５４、６，３１６，０１１に記載されている。
【０１８２】
本発明においては、ＨＩはＨＡ含有インプラントまたは組成物に単独で、または持続放出形態で添加することにより、ヒアルロン酸の分解速度を低減し、そして組成物／インプラントのインビボ活性をＨＡ単独使用時を越えて延長する（例えば患者の７５％超において一貫して６ヶ月より長く、患者の３５％超で１年より長い）。送達される総用量、用量放出速度およびマトリックスからのＨＩ放出の持続時間は所望に応じてＨＡインプラントの活性を有意に延長するために専用に調節できる。
【０１８３】
ＨＩは重合体系と組み合わせることにより薬剤の持続放出がもたらされる。ＧＥＲＤの管理におけるＨＡと組み合わせたＨＩ剤の送達に適する物質は非分解性または分解性の物質よりなることができる。適切な分解性の物質の非限定的な例は、ＰＥＧの交差結合物質、ゼラチン、コラーゲン、ＧＥＬＦＯＡＭ、多糖類、炭水化物、タンパク質（例えばアルブミン、カゼイン、乳清タンパク質、植物タンパク質、魚タンパク質等）、アルギネート、澱粉、セルロース誘導体（ＨＰＣ等）、セルロース、セルロースエステル、そのブレンド物および共重合体、キトサン、キトサン誘導体、ポリエステル−ポリアルキレンオキシドブロック共重合体（例えばＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡ、ＭｅＰＥＧ−ＰＬＧＡ等）、分解性ポリエステル、ポリ無水物、ポリオルトエステル、ポリホスホエステル、ポリホスファジンおよびシアノアクリレート重合体を包含する。本発明の実施における使用のために特に有用な分解性重合体は、注射可能なＰＥＧ含有製剤、例えばＣＯＳＥＡＬ、ＦＯＣＡＬＳＥＡＬ、ＳＰＲＡＹＧＥＬ、ＤＵＲＡＳＥＡＬ、または、米国特許５，８７４，５００；６，０５１，６４８；６，１６６，１３０および６，３１２，７２５に記載のもののような４アームチオールＰＥＧ（１０Ｋ）、４アームＮＨＳ  ＰＥＧ（１０Ｋ）およびメチル化コラーゲンを含む組成物、フィブリノーゲン含有製剤、例えばＦＬＯＳＥＡＬまたはＴＩＳＳＥＡＬ、ＲＥＰＥＬまたはＦＬＯＷＧＥＬ；および排出され得る他の低分子量重合体を包含する。
【０１８４】
ＧＥＲＤの管理のためにＨＡと組み合わせたＨＩ剤の送達に適する非分解性の物質は混合するとポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）を形成するＰＶＡ、ＰＶＰ、ポリアクリルアミド、メチルメタクリレート（ＭＭＡ）およびメチルメタクリレートスチレン（ＭＭＡ−スチレン）を含む交差結合組成物または骨セメント（例えばＳｔｒｙｋｅｒ  Ｈｏｗｍｅｄｉｃａ製のＳＩＭＰＬＥＸＰ、Ｚｉｍｍｅｒ製のＺＩＭＭＥＲ  ＲＥＧＵＬＡＲおよびＺＩＭＭＥＲ  ＬＯＷ  ＶＩＳＣＯＳＩＴＹ  ＣＥＭＥＮＴ、Ｓｍｉｔｈ  ａｎｄ  Ｎｅｐｈｅｗ製のＰＡＬＡＣＯＳ、Ｗｒｉｇｈｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ製のＣＭＷ−１およびＣＭＷ−２、ＤｅＰｕｙ製のＤＥＰＵＹ  ＥＮＤＵＲＡＮＣＥ）、合成癌性骨空洞充填物（例えばＣＯＲＴＯＳＳ，Ｏｒｔｈｏｖｉｔａ，Ｉｎｃ）、ｐＨＥＭＡ、ポリ（ビニルＰＥＧ）、ポリ（スチレンスルホネート）、ポリ（アクリル酸）、ポリ（メタアクリル酸）並びにヒドロゲルを形成することが文献既知の他の重合体を包含する。別の組成物は上記列挙した物質のブレンド物および共重合体を包含する。
【０１８５】
当業者に明らかなように、潜在的に何れのヒアルロニダーゼ阻害剤も単独または組み合わせにおいて上記本実施形態の実施において利用してよい。ＧＥＲＤの管理においてＨＡと組み合わせて使用するための例示されるＨＩ剤は、金チオマレート、プロピレングリコール、ヘパリン；デキストラン硫酸、フコイダン、カルボキシメチルセルロース、フラボノイド、例えば縮合タンニン、タンニン酸、ケンフェロール、ケルセチン、アペギニン、アジサイ由来のヒドランゲノール、クミンスパイス由来のクルクミン、グリチルリチン、イソリキリチン、グラブリジン、リキリチゲニン、ラムノリキルチン、ネオリキルチン、リコフラボノール、リコイソフラボンＡおよびＢ、リコイソフラボン、ホルモノネチングラブロール、グラブロン、グラブレン、ヒスプグラブリジンＡ、ヒスプグラブリジンＢ、バイカレイン、トラニラスト、シリビン、フロレチン、タキシフォリン、ジアドゼイン（４’，７−ジヒドロキシイソフラボン）、テクトリゲニン（４’，７−ジヒドロキシ−６−メトキシイソフラボン）、ルテオリン、キサントフモール、イソキサントフモール、ゲニステイン、ナリンゲニン、カルコナリンゲニン、ミリセチン、リン酸化ヘスペリジン、ビオカニンＡ、モリン、フロレチン、シリマリン、４−フェニル−クマリン、７−フルオロ−４’−ヒドロキシフラボン−４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、フラボノン−７−硫酸ナトリウム、５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウム、４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン；抗炎症剤、例えばインドメタシン、エスキン、トラキサノックス、サリシレート、エイコサトリエン酸、グリチルリチン；アレルギー性反応をモジュレートする薬剤、例えばクロモグリク酸２ナトリウム（ＤＳＣＧ）、トラニラスト、リキリチゲニン、イソリキリチゲニン、バイカレイン、ナトリウムポリスチレンスルホネート（Ｎ−ＰＳＳ）、サッカリン酸、硫酸コンドロイチンＡ誘導オリゴ糖（ＣｈＳＡＯ）、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、γ−リノレン酸、フェノプロフェン；フェノール系化合物、例えばジフェニルアクリル酸、ジフェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−メトキシフェニル）プロペノン、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−クロロフェニル）プロペノン、インドール−２−カルボン酸、ノルリグナン、エラジタンニンおよびウロリシンＢ；ビタミンＣ、Ｌ−アスコルビン酸６−ヘキサデカノエート；サポニン、例えばヘデラゲニン；システアミン；エキナセア；ロスマリン酸；塩酸グアニジン；Ｌ−アルギニン；界面活性剤、例えばテトラデシルナトリウムスルフェートまたはオクチルフェノールエトキシレート；並びに上記したものの類似体および誘導体を包含する。以下の組成物はこの適応症における使用のため理想的に適している。
【０１８６】
これ等の化合物の適切な用量はヒアルロニダーゼに対して延長された阻害作用を示すための各薬剤の安定した濃度を与えるようなものとする。これ等の濃度は概略値であり、化合物の力価および必要な作用の持続時間に応じて調節してよく：金チオマレート１０ｍｍＭ、インドメタシン１ｍｇ／ｍｌ、ヘパリン１ｍｇ／ｍｌ、硫酸化多糖類２ｍｇ／ｍｌおよびプロピレングリコール、ＴＲＩＴＯＮＸ−１００、ＰＥＧ、ＳＰＡＮ、ＰＬＵＲＯＮＩＣＬ１０１およびカルボキシメチルセルロースは全て１０ｍｇ／ｍｌとしてよい。この濃度を達成するためには、水性の体液の数ｍｌに曝露されると考えられる面積においてｍｌ当たり必要な用量の約１０倍の用量が必要となる場合がある（例えば総重量で１０ｍｇのインドメタシン、２０ｍｇの硫酸化多糖類、１００ｍｇのプロピレングリコール、ＴＲＩＴＯＮ、ＰＥＧ、ＳＰＡＮ、ＰＬＵＲＯＮＩＣまたはカルボキシメチルセルロース）。従って例えば、領域を通過して拡散する間質性流体の恐らくは２ｍｌに注射液が曝露される場所においてＨＡ溶液１ｍｌを注射する場合は、後の時点までｍｌ当たり１０ｍｇの用量を確保するためには、これ等の阻害剤各々の１００ｍｇが推奨される。用量の必要性は注射容量および適用部位に大きく依存している。流体の交換が高度である部位においては、より多くのヒアルロニダーゼ阻害剤を投与してよい。さらに又阻害剤が重合体剤型から制御された態様で放出されれば、適用される総用量は阻害剤の放出プロファイル、適用部位、その領域の体液の交換および他のパラメーター、例えば年齢および全身状態に基づいて当業者が計算してよい。
【０１８７】
（８．尿失禁用のＨＬ負荷ヒアルロン酸増量剤）
注射用ヒアルロン酸は尿失禁の治療においてもしばしば使用されている。以下に記載する実施形態はヒアルロニダーゼ阻害剤負荷ＨＡ製品の組成およびこの一般的な医学的状態の治療におけるその使用のための方法を詳述するものである。
【０１８８】
慨すれば、失禁、即ち尿の不随意の溢出は寿命内のある時点において女性の２０％および男性の１〜２％に生じる一般的な医学的状態である。失禁の最も一般的な形態は腹圧性失禁、即ち腹部の内圧の増大を誘発する活動（例えばくしゃみ、咳または緊張）に応答した尿の不注意による漏出である。これは膀胱内圧（膀胱の内部の圧力）が尿道内の圧力を超えた場合に生じるものであり、排尿筋（膀胱筋）の収縮の非存在下において膀胱から尿道内に尿を押出す。腹圧性失禁をもたらすと考えられる幾つかの状況は以下を包含する。
（１）膀胱頚部および内部尿道括約筋の腹部外への下行。
（２）外傷、手術、出産または悪性疾患による内因性の尿道括約筋の障害。
【０１８９】
是正手段は主に、手術または非手術の手段による近位尿道および膀胱頚部の腹腔内への支持に着目している。第２の方法では尿道圧力を増大し腹圧性失禁を低下するように設計された尿道増量剤（ＨＡを含む）の使用を行う。
【０１９０】
尿道周囲および経尿道のＨＡ注射は腹圧性失禁の管理において良好に使用されてきたが、多くの症例は、ＨＡインプラントの持続性が限定されているために１回より多い治療を必要としている。ＨＩ負荷ＨＡ注射を用いることにより、インプラントの活性を持続させることができ、そして、後の尿道周囲および経尿道の注射の必要性および頻度を低減することができる。
【０１９１】
数種の市販のＨＡ系製品が腹圧性失禁の管理のために使用できる。ＨＡ系膀胱尿管逆流（尿失禁）用製品の代表例はＱ−Ｍｅｄ／Ｐｒｉｏｒｉｔｙ  ＨｅａｌｔｈｃａｒｅのＤＥＦＬＵＸである。残念なことに、ＨＡは数週間以内に分解を開始し、数ヶ月以内に完全に分解する。治療後に自身の失禁の改善を示す患者のパーセントは初期は５８〜１００％の範囲であるが、ＨＡ再吸収により患者の大多数においては上記した時間間隔内に処置を反復する必要が生じる。本発明においては、ＨＩはＨＡ系注射剤に単独で、または持続放出形態で添加することにより、インプラントの分解速度を低減し、そしてそのインビボ活性をＨＡ単独使用時を越えて延長する（例えば患者の大多数において一貫して１年より長期）。
【０１９２】
尿失禁において用いられるヒアルロン酸組成物の代表例は米国特許６，６０５，２９４、６，６９９，４７１および６，４２３，３３２に記載されている。
【０１９３】
本発明においては、ＨＩはＨＡ含有インプラントまたは組成物に単独で、または持続放出形態で添加することにより、ヒアルロン酸の分解速度を低減し、そして組成物／インプラントのインビボ活性をＨＡ単独使用時を越えて延長する（例えば患者の７５％超において一貫して６ヶ月より長く、患者の３５％超で１年より長い）。送達される総用量、用量放出速度およびマトリックスからのＨＩ放出の持続時間は所望に応じてＨＡインプラントの活性を有意に延長するために専用に調節できる。
【０１９４】
ＨＩは重合体系と組み合わせることにより薬剤の持続放出がもたらされる。尿失禁の管理におけるＨＡと組み合わせたＨＩ剤の送達に適する物質は非分解性または分解性の物質よりなることができる。適切な分解性の物質の非限定的な例は、ＰＥＧの交差結合物質、ゼラチン、コラーゲン、ＧＥＬＦＯＡＭ、多糖類、炭水化物、タンパク質（例えばアルブミン、カゼイン、乳清タンパク質、植物タンパク質、魚タンパク質等）、アルギネート、澱粉、セルロース誘導体（ＨＰＣ等）、セルロース、セルロースエステル、そのブレンド物および共重合体、キトサン、キトサン誘導体、ポリエステル−ポリアルキレンオキシドブロック共重合体（例えばＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡ、ＭｅＰＥＧ−ＰＬＧＡ等）、分解性ポリエステル、ポリ無水物、ポリオルトエステル、ポリホスホエステル、ポリホスファジンおよびシアノアクリレート重合体を包含する。本発明の実施における使用のために特に有用な分解性重合体は、注射可能なＰＥＧ含有製剤、例えばＣＯＳＥＡＬ、ＦＯＣＡＬＳＥＡＬ、ＳＰＲＡＹＧＥＬ、ＤＵＲＡＳＥＡＬ、または、米国特許５，８７４，５００；６，０５１，６４８；６，１６６，１３０および６，３１２，７２５に記載のもののような４アームチオールＰＥＧ（１０Ｋ）、４アームＮＨＳ  ＰＥＧ（１０Ｋ）およびメチル化コラーゲンを含む組成物、フィブリノーゲン含有製剤、例えばＦＬＯＳＥＡＬまたはＴＩＳＳＥＡＬ、ＲＥＰＥＬまたはＦＬＯＷＧＥＬ；および排出され得る他の低分子量重合体を包含する。
【０１９５】
尿失禁の管理のためにＨＡと組み合わせたＨＩ剤の送達に適する非分解性の物質は混合するとポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）を形成するＰＶＡ、ＰＶＰ、ポリアクリルアミド、メチルメタクリレート（ＭＭＡ）およびメチルメタクリレートスチレン（ＭＭＡ−スチレン）を含む交差結合組成物または骨セメント（例えばＳｔｒｙｋｅｒ  Ｈｏｗｍｅｄｉｃａ製のＳＩＭＰＬＥＸＰ、Ｚｉｍｍｅｒ製のＺＩＭＭＥＲ  ＲＥＧＵＬＡＲおよびＺＩＭＭＥＲ  ＬＯＷ  ＶＩＳＣＯＳＩＴＹ  ＣＥＭＥＮＴ、Ｓｍｉｔｈ  ａｎｄ  Ｎｅｐｈｅｗ製のＰＡＬＡＣＯＳ（登録商標）、Ｗｒｉｇｈｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ製のＣＭＷ−１およびＣＭＷ−２、ＤｅＰｕｙ製のＤＥＰＵＹ  ＥＮＤＵＲＡＮＣＥ）、合成癌性骨空洞充填物（例えばＣＯＲＴＯＳＳＴＭ，Ｏｒｔｈｏｖｉｔａ）、ｐＨＥＭＡ、ポリ（ビニルＰＥＧ）、ポリ（スチレンスルホネート）、ポリ（アクリル酸）、ポリ（メタアクリル酸）並びにヒドロゲルを形成することが文献既知の他の重合体を包含する。別の組成物は上記列挙した物質のブレンド物および共重合体を包含する。
【０１９６】
（ａ．経尿道の手法：）
利用する製剤に関わらず、ＨＩ負荷ＨＡ経尿道注射剤の投与は以下の態様において進行してよい。数ｍｌのインプラント物質を含有する小ゲージ針（安定化カニューレを有する２３ゲージの経尿道注射針）を有する予め負荷した単回用シリンジを使用する。患者を切石位とし２％リドカイン１０ｍｌを麻酔のために尿道に導入する。女性の場合は、膀胱頚部を膀胱鏡尿路造影により可視化する。膀胱鏡の注入口を介して、膀胱粘膜の真下の面内に膀胱頚部より１〜１．５ｃｍ遠位に鋭角で針を４時の位置に挿入する。次に針を膀胱鏡を用いながらそれが膀胱頚部の粘膜の真下に位置するまで尿管の長軸に平行に進行させる。ＨＩ負荷ＨＡをゆっくりこの部位に注射する。次に８時の位置において操作を反復する。メチレンブルーおよび他の非毒性の着色剤を注射の可視化を容易にするためにインプラントに添加することができる。
【０１９７】
（ｂ．尿道周囲注射）
ＨＩ負荷ＨＡ注射剤の尿道周囲注射もまた失禁の治療のために使用できる。数ｍｌのインプラント物質を含有する小ゲージ針（尿道周囲注射針）を有する予め負荷した単回用シリンジを使用する。患者を切石位とし２％リドカイン１０ｍｌを麻酔のために尿道に導入し、膀胱頚部を膀胱鏡尿路造影により可視化する（男性の場合は尿道は恥骨上膀胱鏡法を介して可視化することもできる）。針は尿道の直ぐ横に隣接する領域内に経膣的または恥骨上に挿入する。膀胱頚部近傍の適切な位置に到達（膀胱鏡的および上記の通り観察される）した時点で、ＨＩ負荷ＨＡをこの部位にゆっくり注射する。メチレンブルーおよび他の非毒性の着色剤を注射の可視化を容易にするためにインプラントに添加することができる。
【０１９８】
当業者に明らかなように、潜在的に何れのヒアルロニダーゼ阻害剤も単独または組み合わせにおいて上記本実施形態の実施において利用してよい。尿失禁の管理においてＨＡと組み合わせて使用するための例示されるＨＩ剤は、金チオマレート、プロピレングリコール；デキストラン硫酸、フコイダン、カルボキシメチルセルロース、フラボノイド、例えば縮合タンニン、タンニン酸、ケンフェロール、ケルセチン、アペギニン、アジサイ由来のヒドランゲノール、クミンスパイス由来のクルクミン、グリチルリチン、イソリキリチン、グラブリジン、リキリチゲニン、ラムノリキルチン、ネオリキルチン、リコフラボノール、リコイソフラボンＡおよびＢ、リコイソフラボン、ホルモノネチングラブロール、グラブロン、グラブレン、ヒスプグラブリジンＡ、ヒスプグラブリジンＢ、バイカレイン、トラニラスト、シリビン、フロレチン、タキシフォリン、ジアドゼイン（４’，７−ジヒドロキシイソフラボン）、テクトリゲニン（４’，７−ジヒドロキシ−６−メトキシイソフラボン）、ルテオリン、キサントフモール、イソキサントフモール、ゲニステイン、ナリンゲニン、カルコナリンゲニン、ミリセチン、リン酸化ヘスペリジン、ビオカニンＡ、モリン、フロレチン、シリマリン、４−フェニル−クマリン、７−フルオロ−４’−ヒドロキシフラボン−４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、フラボノン−７−硫酸ナトリウム、５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウム、４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン；抗炎症剤、例えばインドメタシン、エスキン、トラキサノックス、サリシレート、エイコサトリエン酸、グリチルリチン；アレルギー性反応をモジュレートする薬剤、例えばクロモグリク酸２ナトリウム（ＤＳＣＧ）、トラニラスト、リキリチゲニン、イソリキリチゲニン、バイカレイン、ナトリウムポリスチレンスルホネート（Ｎ−ＰＳＳ）、サッカリン酸、硫酸コンドロイチンＡ誘導オリゴ糖（ＣｈＳＡＯ）、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、γ−リノレン酸、フェノプロフェン；フェノール系化合物、例えばジフェニルアクリル酸、ジフェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−メトキシフェニル）プロペノン、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−クロロフェニル）プロペノン、インドール−２−カルボン酸、ノルリグナン、エラジタンニンおよびウロリシンＢ；ビタミンＣ、Ｌ−アスコルビン酸６−ヘキサデカノエート；サポニン、例えばヘデラゲニン；システアミン；エキナセア；ロスマリン酸；塩酸グアニジン；Ｌ−アルギニン；界面活性剤、例えばテトラデシルナトリウムスルフェートまたはオクチルフェノールエトキシレート；並びに上記したものの類似体および誘導体を包含する。以下の組成物はこの適応症における使用のため理想的に適している。
【０１９９】
これ等の化合物の適切な用量はヒアルロニダーゼに対して延長された阻害作用を示すための各薬剤の安定した濃度を与えるようなものとする。これ等の濃度は概略値であり、化合物の力価および必要な作用の持続時間に応じて調節してよく：金チオマレート１０ｍｍＭ、インドメタシン１ｍｇ／ｍｌ、ヘパリン１ｍｇ／ｍｌ、硫酸化多糖類２ｍｇ／ｍｌおよびプロピレングリコール、ＴＲＩＴＯＮＸ−１００、ＰＥＧ、ＳＰＡＮ、ＰＬＵＲＯＮＩＣＬ１０１およびカルボキシメチルセルロースは全て１０ｍｇ／ｍｌとしてよい。この濃度を達成するためには、水性の体液の数ｍｌに曝露されると考えられる面積においてｍｌ当たり必要な用量の約１０倍の用量が必要となる場合がある（例えば総重量で１０ｍｇのインドメタシン、２０ｍｇの硫酸化多糖類、１００ｍｇのプロピレングリコール、ＴＲＩＴＯＮ、ＰＥＧ、ＳＰＡＮ、ＰＬＵＲＯＮＩＣまたはカルボキシメチルセルロース）。従って例えば、領域を通過して拡散する間質性流体の恐らくは２ｍｌに注射液が曝露される場所においてＨＡ溶液１ｍｌを注射する場合は、後の時点までｍｌ当たり１０ｍｇの用量を確保するためには、これ等の阻害剤各々の１００ｍｇが推奨される。用量の必要性は注射容量および適用部位に大きく依存している。流体の交換が高度である部位においては、より多くのヒアルロニダーゼ阻害剤を投与してよい。さらに又阻害剤が重合体剤型から制御された態様で放出されれば、適用される総用量は阻害剤の放出プロファイル、適用部位、その領域の体液の交換および他のパラメーター、例えば年齢および全身状態に基づいて当業者が計算してよい。
【０２００】
（９．便失禁用のＨＡ負荷ヒアルロン酸増量剤）
ＨＡ系の注射剤はまた便失禁の管理のために使用されている。便失禁は北米成人の１１％程度に生じている一般的で社会的障害となる状態である。放屁または便の失禁は種々の要因により生じるが、出産時に肛門括約筋が損傷を受ける可能性がある女性においてより一般的である（特に３度の膣裂傷に罹患、鉗子分娩を必要、大型の出生児および／または経膣分娩の一部として長時間分娩の経験を有する女性）。便失禁の病因は多要因の場合が多いが、原因には括約筋の傷害（出産、手術、事故）、肛門直腸疾患（痔、脱肛、炎症性腸疾患、フィステル、腫瘍、結腸切除、宿便、下痢）、遺伝（二分脊椎、髄膜瘤、Ｈｉｒｓｈｓｐｒｕｎｇ病）、特発性または挙動性（排便抵抗、痴呆、精神遅滞）が包含される。受動的便失禁（即ち患者の認知を伴わず生じる）は主に内部肛門括約筋の機能不全によるものであり、切迫便失禁（排便を随意的に阻害することが不可能）は通常は外部肛門括約筋の機能不全による。
【０２０１】
是正手段は初期は保存的であり、伏在する要因（容易に顕在化できる場合）を排除することを目的とする。多数の患者において、明確な原因は発見できず、内部または外部肛門括約筋の手術による修復が試みられる場合が多い。残念なことに、これ等の患者の５０％超が長期の良好な結果を達成できず、そして別の形態の治療を要することになる。手術が不成功であったもの、手術を希望しない患者、および医学的理由から手術ができない患者は全て、注射括約筋増強の候補である。本操作においては、ＨＡのような増量剤を内部または外部括約筋の周囲の領域に注射することにより括約筋の圧力を増大させ、そして便失禁を低減する。
【０２０２】
肛門周囲括約筋ＨＡ注射は便失禁の管理において良好に使用されてきたが、多くの症例は、ＨＡインプラントの持続性が限定されているために１回より多い治療を必要としている。ＨＩ負荷ＨＡ注射を用いることにより、インプラントの活性を持続させることができ、そして肛門周囲注射の必要性および頻度を低減することができる。数種の市販のＨＡ系製品が便失禁の管理のために使用できる。種々のＨＡ系増量剤を便失禁の治療において使用してよく、注射用増量剤も包含される。便失禁においても使用できるＨＡ系膀胱尿管逆流用製品の代表例はＱ−Ｍｅｄ／Ｐｒｉｏｒｉｔｙ  ＨｅａｌｔｈｃａｒｅのＤＥＦＬＵＸであり、これはヒアルロン酸の溶液中の交差結合デキストランの粒子よりなる。
【０２０３】
便失禁において使用されるヒアルロン酸組成物の代表例は米国特許６，１２９，７６１および５，４９０，９８４に記載されている。  
【０２０４】
残念なことに、ＨＡは数週間以内に分解を開始し、数ヶ月以内に完全に分解する。治療後に自身の失禁の改善を示す患者のパーセントは高値であるが、ＨＡ再吸収により患者の大多数において処置を反復する必要が生じる。本発明においては、ＨＩはＨＡ系注射剤に単独で、または持続放出形態で添加することにより、インプラントの分解速度を低減し、そしてそのインビボ活性をＨＡ単独使用時を越えて延長する（例えば患者の大多数において一貫して１年より長期）。送達される総用量、用量放出速度およびマトリックスからのＨＩ放出の持続時間は所望に応じてＨＡインプラントの活性を有意に延長するために専用に調節できる。
【０２０５】
ＨＩは重合体系と組み合わせることにより薬剤の持続放出がもたらされる。便失禁の管理におけるＨＡと組み合わせたＨＩ剤の送達に適する物質は非分解性または分解性の物質よりなることができる。適切な分解性の物質の非限定的な例は、ＰＥＧの交差結合物質、ゼラチン、コラーゲン、ＧＥＬＦＯＡＭ、多糖類、炭水化物、タンパク質（例えばアルブミン、カゼイン、乳清タンパク質、植物タンパク質、魚タンパク質等）、アルギネート、澱粉、セルロース誘導体（ＨＰＣ等）、セルロース、セルロースエステル、そのブレンド物および共重合体、キトサン、キトサン誘導体、ポリエステル−ポリアルキレンオキシドブロック共重合体（例えばＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡ、ＭｅＰＥＧ−ＰＬＧＡ等）、分解性ポリエステル、ポリ無水物、ポリオルトエステル、ポリホスホエステル、ポリホスファジンおよびシアノアクリレート重合体を包含する。本発明の実施における使用のために特に有用な分解性重合体は、注射可能なＰＥＧ含有製剤、例えばＣＯＳＥＡＬ、ＦＯＣＡＬＳＥＡＬ、ＳＰＲＡＹＧＥＬ、ＤＵＲＡＳＥＡＬ、または、米国特許５，８７４，５００；６，０５１，６４８；６，１６６，１３０および６，３１２，７２５に記載のもののような４アームチオールＰＥＧ（１０Ｋ）、４アームＮＨＳ  ＰＥＧ（１０Ｋ）およびメチル化コラーゲンを含む組成物、フィブリノーゲン含有製剤、例えばＦＬＯＳＥＡＬまたはＴＩＳＳＥＡＬ、ＲＥＰＥＬまたはＦＬＯＷＧＥＬ；および排出され得る他の低分子量重合体を包含する。
【０２０６】
便失禁の管理のためにＨＡと組み合わせたＨＩ剤の送達に適する非分解性の物質は混合するとポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）を形成するＰＶＡ、ＰＶＰ、ポリアクリルアミド、メチルメタクリレート（ＭＭＡ）およびメチルメタクリレートスチレン（ＭＭＡ−スチレン）を含む交差結合組成物または骨セメント（例えばＳｔｒｙｋｅｒ  Ｈｏｗｍｅｄｉｃａ製のＳＩＭＰＬＥＸＰ、Ｚｉｍｍｅｒ製のＺＩＭＭＥＲ  ＲＥＧＵＬＡＲおよびＺＩＭＭＥＲ  ＬＯＷ  ＶＩＳＣＯＳＩＴＹ  ＣＥＭＥＮＴ、Ｓｍｉｔｈ  ａｎｄ  Ｎｅｐｈｅｗ製のＰＡＬＡＣＯＳ、Ｗｒｉｇｈｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ製のＣＭＷ−１およびＣＭＷ−２、ＤｅＰｕｙ製のＤＥＰＵＹ  ＥＮＤＵＲＡＮＣＥ）、合成癌性骨空洞充填物（例えばＣＯＲＴＯＳＳ，Ｏｒｔｈｏｖｉｔａ）、ｐＨＥＭＡ、ポリ（ビニルＰＥＧ）、ポリ（スチレンスルホネート）、ポリ（アクリル酸）、ポリ（メタアクリル酸）並びにヒドロゲルを形成することが文献既知の他の重合体を包含する。別の組成物は上記列挙した物質のブレンド物および共重合体を包含する。
【０２０７】
ＨＩ負荷ＨＡの肛門周囲注射は以下の態様で実施する。数ｍｌのインプラント物質を含有する小ゲージ針を有する単回用の予め負荷したシリンジを使用する。２％リドカイン約１０ｍｌを選択された注射領域に応じて会陰皮膚または直腸粘膜内に導入する。針は肛門括約筋を包囲する粘膜下の平面内に皮膚または肛門粘膜を経由して挿入する。針が適切な位置に到達した時点で、この部位に、肛門管の周囲で対称となるまで、ＨＩ負荷ＨＡをゆっくり注射する（典型的には円周状に経括約筋的に行う３回注射において、肛門端縁から離れるように進入し、歯状線において、またはその直ぐ上において注射する）。メチレンブルーおよび他の非毒性の着色剤を注射の可視化を容易にするためにインプラントに添加することができる。
【０２０８】
当業者に明らかなように、潜在的に何れのヒアルロニダーゼ阻害剤も単独または組み合わせにおいて上記本実施形態の実施において利用してよい。便失禁の管理においてＨＡと組み合わせて使用するための例示されるＨＩ剤は、金チオマレート、カルボキシメチルセルロース、デキストラン硫酸、フコイダン、プロピレングリコール；フラボノイド、例えば縮合タンニン、タンニン酸、ケンフェロール、ケルセチン、アペギニン、アジサイ由来のヒドランゲノール、クミンスパイス由来のクルクミン、グリチルリチン、イソリキリチン、グラブリジン、リキリチゲニン、ラムノリキルチン、ネオリキルチン、リコフラボノール、リコイソフラボンＡおよびＢ、リコイソフラボン、ホルモノネチングラブロール、グラブロン、グラブレン、ヒスプグラブリジンＡ、ヒスプグラブリジンＢ、バイカレイン、トラニラスト、シリビン、フロレチン、タキシフォリン、ジアドゼイン（４’，７−ジヒドロキシイソフラボン）、テクトリゲニン（４’，７−ジヒドロキシ−６−メトキシイソフラボン）、ルテオリン、キサントフモール、イソキサントフモール、ゲニステイン、ナリンゲニン、カルコナリンゲニン、ミリセチン、リン酸化ヘスペリジン、ビオカニンＡ、モリン、フロレチン、シリマリン、４−フェニル−クマリン、７−フルオロ−４’−ヒドロキシフラボン−４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、フラボノン−７−硫酸ナトリウム、５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウム、４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン；抗炎症剤、例えばインドメタシン、エスキン、トラキサノックス、サリシレート、エイコサトリエン酸、グリチルリチン；アレルギー性反応をモジュレートする薬剤、例えばクロモグリク酸２ナトリウム（ＤＳＣＧ）、トラニラスト、リキリチゲニン、イソリキリチゲニン、バイカレイン、ナトリウムポリスチレンスルホネート（Ｎ−ＰＳＳ）、サッカリン酸、硫酸コンドロイチンＡ誘導オリゴ糖（ＣｈＳＡＯ）、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、γ−リノレン酸、フェノプロフェン；フェノール系化合物、例えばジフェニルアクリル酸、ジフェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−メトキシフェニル）プロペノン、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−クロロフェニル）プロペノン、インドール−２−カルボン酸、ノルリグナン、エラジタンニンおよびウロリシンＢ；ビタミンＣ、Ｌ−アスコルビン酸６−ヘキサデカノエート；サポニン、例えばヘデラゲニン；システアミン；エキナセア；ロスマリン酸；塩酸グアニジン；Ｌ−アルギニン；界面活性剤、例えばテトラデシルナトリウムスルフェートまたはオクチルフェノールエトキシレート；並びに上記したものの類似体および誘導体を包含する。以下の組成物はこの適応症における使用のため理想的に適している。
【０２０９】
これ等の化合物の適切な用量はヒアルロニダーゼに対して延長された阻害作用を示すための各薬剤の安定した濃度を与えるようなものとする。これ等の濃度は概略値であり、化合物の力価および必要な作用の持続時間に応じて調節してよく：インドメタシン１ｍｇ／ｍｌ、ヘパリン１ｍｇ／ｍｌ、硫酸化多糖類２ｍｇ／ｍｌおよびプロピレングリコール、ＴＲＩＴＯＮＸ−１００、ＰＥＧ、ＳＰＡＮ、ＰＬＵＲＯＮＩＣＬ１０１およびカルボキシメチルセルロースは全て１０ｍｇ／ｍｌとしてよい。この濃度を達成するためには、水性の体液の数ｍｌに曝露されると考えられる面積においてｍｌ当たり必要な用量の約１０倍の用量が必要となる場合がある（例えば総重量で１０ｍｇのインドメタシン、２０ｍｇの硫酸化多糖類、１００ｍｇのプロピレングリコール、ＴＲＩＴＯＮ、ＰＥＧ、ＳＰＡＮ、ＰＬＵＲＯＮＩＣまたはカルボキシメチルセルロース）。従って例えば、領域を通過して拡散する間質性流体の恐らくは２ｍｌに注射液が曝露される場所においてＨＡ溶液１ｍｌを注射する場合は、後の時点までｍｌ当たり１０ｍｇの用量を確保するためには、これ等の阻害剤各々の１００ｍｇが推奨される。用量の必要性は注射容量および適用部位に大きく依存している。流体の交換が高度である部位においては、より多くのヒアルロニダーゼ阻害剤を投与してよい。さらに又阻害剤が重合体剤型から制御された態様で放出されれば、適用される総用量は阻害剤の放出プロファイル、適用部位、その領域の体液の交換および他のパラメーター、例えば年齢および全身状態に基づいて当業者が計算してよい。
【０２１０】
１つの態様において、ＨＩは金化合物、例えばオーラノフィンである、金チオマレートおよび金チオリンゴ酸ナトリウム、または金ナトリウムチオスルフェートである。これ等の化合物の用量はヒアルロニダーゼに対して延長された阻害作用を示すための各薬剤の安定した濃度を与えるようなものとする。これ等の薬剤の濃度は実施例において示すものと同等かそれより高値であってよく、約１０ｍＭである。この濃度を達成するためには、ｍｌ当たり必要な用量の約１０倍の用量が必要となる場合がある（例えば水性の体液の数ｍｌに曝露されると考えられる面積において１０ｍＭ金チオマレートの総濃度）。従って例えば、領域を通過して拡散する間質性流体の恐らくは２ｍｌに注射液が曝露される場所においてＨＡ溶液１ｍｌを注射する場合は、後の時点までｍｌ当たり１０ｍｇの用量を確保するためには、これ等の阻害剤各々の１００ｍｇが推奨される。用量の必要性は注射容量および適用部位に大きく依存している。流体の交換が高度である部位においては、より多くのヒアルロニダーゼ阻害剤を投与してよい。さらに又阻害剤が重合体剤型から制御された態様で放出されれば、適用される総用量は阻害剤の放出プロファイル、適用部位、その領域の体液の交換および他のパラメーター、例えば年齢および全身状態に基づいて当業者が計算してよい。
【０２１１】
（１０．医療用デバイスのためのＨＩ負荷ＨＡコーティング）
ＨＡは医療用デバイスのためのコーティングとして、デバイス表面の生体適合性および／または潤滑性を増強するために使用できる。ＨＡは医療用デバイスの表面上に直接コーティングするか、または、デバイスはデバイス表面にコーティングを施した後にさらに修飾してデバイス表面上のＨＡの接着および／または保持を増強させることができる。ＨＡに対する修飾は交差結合を包含することができる。交差結合は化学交差結合、イオン交差結合、物理的交差結合または放射線誘導交差結合のための方法を用いることにより達成できる。ＨＡコーティングはさらにＨＡコーティングのヒアルロニダーゼ誘導分解を低減するようにヒアルロニダーゼ阻害剤を含んでよい。これらのＨＡ−ＨＩ組成物はステント、カテーテル、電気リード線、例えばペースメーカーのリード線、眼科用インプラント、眼内レンズ、コンタクトレンズ、シャント、バイパスグラフト、ステントグラフト、縫合糸および骨固定デバイスを包含する如何なる型の医療用デバイスをコーティングするためにも使用できる。
【０２１２】
ＨＩは重合体系と組み合わせることにより薬剤の持続放出がもたらされる。ＨＡと組み合わせたＨＩ剤の送達に適する物質は非分解性または分解性の物質よりなることができる。適切な分解性の物質の非限定的な例は、ＰＥＧの交差結合物質、ゼラチン、コラーゲン、ＧＥＬＦＯＡＭ、多糖類、炭水化物、タンパク質（例えばアルブミン、カゼイン、乳清タンパク質、植物タンパク質、魚タンパク質等）、アルギネート、澱粉、セルロース誘導体（ＨＰＣ等）、セルロース、セルロースエステル、そのブレンド物および共重合体、キトサン、キトサン誘導体、ポリエステル−ポリアルキレンオキシドブロック共重合体（例えばＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡ、ＭｅＰＥＧ−ＰＬＧＡ等）、分解性ポリエステル、ポリ無水物、ポリオルトエステル、ポリホスホエステル、ポリホスファジンおよびシアノアクリレート重合体を包含する。本発明の実施における使用のために特に有用な分解性重合体は、注射可能なＰＥＧ含有製剤、例えばＣＯＳＥＡＬ、ＦＯＣＡＬＳＥＡＬ、ＳＰＲＡＹＧＥＬ、ＤＵＲＡＳＥＡＬ、または、米国特許５，８７４，５００；６，０５１，６４８；６，１６６，１３０および６，３１２，７２５に記載のもののような４アームチオールＰＥＧ（１０Ｋ）、４アームＮＨＳ  ＰＥＧ（１０Ｋ）およびメチル化コラーゲンを含む組成物、フィブリノーゲン含有製剤、例えばＦＬＯＳＥＡＬまたはＴＩＳＳＥＡＬ、ＲＥＰＥＬまたはＦＬＯＷＧＥＬ；および排出され得る他の低分子量重合体を包含する。ＨＡと組み合わせたＨＩ剤の送達のための適切な非分解性の物質は混合するとポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）を形成するＰＶＡ、ＰＶＰ、ポリアクリルアミド、メチルメタクリレート（ＭＭＡ）およびメチルメタクリレートスチレン（ＭＭＡ−スチレン）を含む交差結合組成物または骨セメント（例えばＳｔｒｙｋｅｒ  Ｈｏｗｍｅｄｉｃａ製のＳＩＭＰＬＥＸＰ、Ｚｉｍｍｅｒ製のＺＩＭＭＥＲ  ＲＥＧＵＬＡＲおよびＺＩＭＭＥＲ  ＬＯＷ  ＶＩＳＣＯＳＩＴＹ  ＣＥＭＥＮＴ、Ｓｍｉｔｈ  ａｎｄ  Ｎｅｐｈｅｗ製のＰＡＬＡＣＯＳ、Ｗｒｉｇｈｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ製のＣＭＷ−１およびＣＭＷ−２、ＤｅＰｕｙ製のＤＥＰＵＹ  ＥＮＤＵＲＡＮＣＥ）、合成癌性骨空洞充填物（例えばＣＯＲＴＯＳＳ，Ｏｒｔｈｏｖｉｔａ）、ｐＨＥＭＡ、ポリ（ビニルＰＥＧ）、ポリ（スチレンスルホネート）、ポリ（アクリル酸）、ポリ（メタアクリル酸）並びにヒドロゲルを形成することが文献既知の他の重合体を包含する。別の組成物は上記列挙した物質のブレンド物および共重合体を包含する。
【０２１３】
当業者に明らかなように、潜在的に何れのヒアルロニダーゼ阻害剤も単独または組み合わせにおいて上記本実施形態の実施において利用してよい。医療用デバイスの管理においてＨＡと組み合わせて使用するための例示されるＨＩ剤は、金チオマレート、ヘパリン、フコイダン、デキストラン硫酸、プロピレングリコール、カルボキシメチルセルロース；フラボノイド、例えば縮合タンニン、タンニン酸、ケンフェロール、ケルセチン、アペギニン、アジサイ由来のヒドランゲノール、クミンスパイス由来のクルクミン、グリチルリチン、イソリキリチン、グラブリジン、リキリチゲニン、ラムノリキルチン、ネオリキルチン、リコフラボノール、リコイソフラボンＡおよびＢ、リコイソフラボン、ホルモノネチングラブロール、グラブロン、グラブレン、ヒスプグラブリジンＡ、ヒスプグラブリジンＢ、バイカレイン、トラニラスト、シリビン、フロレチン、タキシフォリン、ジアドゼイン（４’，７−ジヒドロキシイソフラボン）、テクトリゲニン（４’，７−ジヒドロキシ−６−メトキシイソフラボン）、ルテオリン、キサントフモール、イソキサントフモール、ゲニステイン、ナリンゲニン、カルコナリンゲニン、ミリセチン、リン酸化ヘスペリジン、ビオカニンＡ、モリン、フロレチン、シリマリン、４−フェニル−クマリン、７−フルオロ−４’−ヒドロキシフラボン−４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン、フラボノン−７−硫酸ナトリウム、５−ヒドロキシフラボン−７−硫酸ナトリウム、４’−クロロ−４，６−ジメトキシカルコン；抗炎症剤、例えばインドメタシン、エスキン、トラキサノックス、サリシレート、エイコサトリエン酸、グリチルリチン；アレルギー性反応をモジュレートする薬剤、例えばクロモグリク酸２ナトリウム（ＤＳＣＧ）、トラニラスト、リキリチゲニン、イソリキリチゲニン、バイカレイン、ナトリウムポリスチレンスルホネート（Ｎ−ＰＳＳ）、サッカリン酸、硫酸コンドロイチンＡ誘導オリゴ糖（ＣｈＳＡＯ）、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、γ−リノレン酸、フェノプロフェン；フェノール系化合物、例えばジフェニルアクリル酸、ジフェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、３−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−フェニルプロピオン酸、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−メトキシフェニル）プロペノン、１−（２−ヒドロキシ−４，６−ジメトキシフェニル）−３−（４−クロロフェニル）プロペノン、インドール−２−カルボン酸、ノルリグナン、エラジタンニンおよびウロリシンＢ；ビタミンＣ、Ｌ−アスコルビン酸６−ヘキサデカノエート；サポニン、例えばヘデラゲニン；システアミン；エキナセア；ロスマリン酸；塩酸グアニジン；Ｌ−アルギニン；界面活性剤、例えばテトラデシルナトリウムスルフェートまたはオクチルフェノールエトキシレート；並びに上記したものの類似体および誘導体を包含する。
【０２１４】
これ等の化合物の適切な用量はヒアルロニダーゼに対して延長された阻害作用を示すための各薬剤の安定した濃度を与えるようなものとする。これ等の薬剤の濃度はマイクロ〜ミリモルの範囲であってよく、そして化合物の力価および所望の作用持続時間に応じて調節してよい。
【０２１５】
当業者の知る通り、上記したＨＩ剤またはその誘導体および類似体の何れも、本発明の精神および範囲から外れることなく上記した組成物の変形例を作成するために利用できる。ＨＩは重合体担体を用いるか用いることなくヒアルロン酸インプラントにおいて利用でき、そして担体を改変することは本発明の範囲から外れることではないことは明らかである。ＨＩ剤の組み合わせを用いて本発明の精神および範囲を外れることなくより長時間持続するＨＡインプラントを作成できることも明らかである。
【実施例】
【０２１６】
（実施例１：ヒアルロン酸粘度測定試験を用いたヒアルロン酸分解の阻害）
粘度測定試験（ヒアルロン酸ビスコメトリーアッセイ）を用いてヒアルロニダーゼによるヒアルロン酸（ＨＡ）の分解に対する種々の化合物の作用を測定した（例えば”Ｒｈｅｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｎ  Ｍｉｘｔｕｒｅｓ  ｏｆ  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｗｅｉｇｈｔ  Ｈｙａｌｕｒｏｎａｔｅｓ”，  Ｂｅｒｒｉａｕｕｄ，  Ｎ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．（１９９４）；１６（３）：ｐ．１３７−１４２および”Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃａｌｓ  ｕｓｉｎｇ  Ｖｉｓｃｏｓｉｔｙ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｙａｌｕｒｏｎａｎ”，  Ｄｅｇｕｉｎｅ  Ｖ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎｉｃａ  Ｃｈｉｍｉｃａ  Ａｃｔａ  （１９９７）；２６２（１−２）：ｐ．１４７−５２）。粘度測定器を通過するための試料に対する時間は試料中のＨＡの粘度に比例し、これがさらにＨＡの分子量に比例していた。酵素（ヒアルロニダーゼ）がＨＡを分解するに従い、重合体の分子量が低下し、溶液の粘度が低下し、そして溶液はより急速に粘度測定器を通過するようになる。従って、より短い通過時間はより低いＨＡ分子量（即ちヒアルロニダーゼによるＨＡの分解が高値であること）を示すのに対し、より長い時間はＨＡのより高値の分子量（即ちヒアルロニダーゼによるＨＡの分解が低値であること）を示すものであった。
【０２１７】
０．０７％ＨＡ溶液は以下の通り作成、即ち、１５ｍｌのＨＡおよび２０μｌのｐＨ５．５緩衝液（１Ｍ）をシンチレーションバイアル中で混合した。酵素阻害剤（ＭｅＰＥＧ２０００−ＰＬＬＡ（６０：４０）ジブロック共重合体、ヘパリン、金チオマレートおよびインドメタシン）を各バイアルに計量投入し、表１に示す終濃度とした。溶液を３７℃で一夜溶解させた。ｐＨを確認して６．０に調節した。溶液の粘度はウベローデＰＣ１粘度計の通過時間を測定することにより分析した。ヒアルロニダーゼ５０μｌ（水６２０μｌ中４．２ｍｇ）をバイアル当たり添加し（終濃度約６単位／ｍｌ）、そして振とうしながら一夜インキュベートした。一夜インキュベーションの後、粘度計の読み取り値を各溶液について記録した。結果を表１および図１に示す（注記：ＨＡ対照を除く全試料はヒアルロニダーゼ添加である）。データによれば、ヒアルロン酸溶液の粘度が酵素対照より高値のままであったことから、ヘパリン、金チオマレート、インドメタシンおよびジブロック共重合体はヒアルロニダーゼの活性を阻害していた。
【０２１８】
【表１】
2008509935.tif 000007
（実施例２：ヒアルロン酸分解の阻害）
粘度計を用いて、実施例１に記載した方法により、ヒアルロニダーゼによるＨＡの分解に対する硫酸化多糖類（デキストラン硫酸、フコイダンおよびヘパリン）、プロピレングリコールおよびインドメタシンの作用を測定した。結果は表２および図２に示す。データによれば、ヒアルロン酸溶液の粘度が酵素対照より高値のままであったことから、ヘパリン、インドメタシン、プロピレングリコール、デキストラン硫酸およびフコイダンはヒアルロニダーゼの活性を阻害していた。
【０２１９】
【表２】
2008509935.tif 000008
（実施例３：ＴＲＩＴＯＮＸ−１００によるヒアルロン酸分解の阻害）
実施例１に記載した方法を用いてヒアルロニダーゼによるＨＡ分解の阻害に対するＴＲＩＴＯＮＸ−１００の作用を分析した。試料が粘度計を通過する時間として表示した結果を表３および図３に示す。データによれば、ヒアルロン酸溶液の粘度が酵素対照より高値のままであったことから、ＴＲＩＴＯＮＸ−１００はヒアルロニダーゼの作用を阻害している。
【０２２０】
【表３】
2008509935.tif 000009
（実施例４：ヒアルロニダーゼによるＨＡ分解に対する種々の化合物の作用）
実施例１に記載した方法を用いてＨＡの酵素誘導性分解に対するデキストラン硫酸、ＴＷＥＥＮ４０、ＳＰＡＮ８０、ＰＥＧ３３５０、プロピレングリコール、ＰＬＵＲＯＮＩＣＦ１２７、ＰＬＵＲＯＮＩＣＬ１０１およびカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）の作用を分析した。結果を表４および図４に示す。データによれば、ヒアルロン酸溶液の粘度が酵素対照より高値のままであったことから、物質デキストラン硫酸、ＳＰＡＮ８０、ＰＥＧ、プロピレングリコール、ＰＬＵＲＯＮＩＣＬ１０１およびカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）はヒアルロニダーゼの作用を阻害している。意外にも、２つの他の界面活性剤であるＴＷＥＥＮ４０およびＰＬＵＲＯＮＩＣＦ１２７は同じ程度まで酵素を阻害しなかった。
【０２２１】
【表４】
2008509935.tif 000010
（実施例５：ヒアルロニダーゼ阻害剤の用量応答作用）
種々のヒアルロン酸阻害剤の存在下および非存在下のヒアルロン酸の製剤を製造する。阻害剤の用量応答作用を試験するために、例えば０．１ｍｇ／ｍｌ〜２０ｍｇ／ｍｌの濃度範囲の阻害剤の種々の濃度を用いてヒアルロン酸製剤を製造する。阻害剤の濃度は阻害剤の力価に応じて調製できる。試験してよい阻害剤の例はデキストラン硫酸、ＰＬＵＲＯＮＩＣＦ１２７、ＣＭＣ、ＴＷＥＥＮ４０、プロピレングリコール、フコイダン、インドメタシン、ヘパリンおよび金チオリンゴ酸ナトリウムである。製剤は標準的手法に従って滅菌する。無胸腺マウスを入手し、対照ヒアルロン酸製剤または阻害剤負荷製剤の何れかの皮下注射用に準備する。注射すべき製剤の量は０．１ｍｌ〜０．５ｍｌである。製剤の重量を記録し、所定量を瞬時皮下注射して典型的には背骨の片側の動物背部上にゲルのパウチを形成する。注射の位置は各注射動物につき同一にしなければならない。１週間〜数ヶ月の種々の時点において、動物を屠殺し、注射部位の皮膚を切開し、残存する製剤を摘出して計量する。ヒアルロン酸製剤の分解に対する阻害剤の作用を調べられるように、製剤の重量は阻害剤の用量および動物中での持続時間と相関している。対照と比較した場合にヒアルロン酸製剤が未損傷で存続する時間を延長する阻害剤の種類および用量範囲はヒアルロン酸分解の低減における向上を表すものである。ヒアルロン酸の分解の速度をより良好に制御するために動物への注射の前に製剤にヒアルロニダーゼを添加することにより実験を変更することができる。
【０２２２】
（実施例６：噴霧乾燥によるインドメタシン負荷微小球の製造）
ＤＬラクチドグリコリド共重合体［ＰＬＧＡ］（８５：１５、Ａｂｓｏｒｂａｂｌｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）３．６ｇを塩化メチレン２００ｍｌに溶解する。インドメタシン４００ｍｇを重合体溶液に添加し、得られた溶液をＢｕｃｈｉベンチトップ噴霧乾燥機を用いて噴霧乾燥する。使用した噴霧乾燥機のパラメーターは以下の通り、即ち、導入口温度５０℃、吐出口温度＜３９℃、アスピレーター１００％、流量７００ｌ／ｈｒとする。収集した微小球を室温真空下に一夜乾燥し、粒径範囲が約１０ミクロン未満（典型的には約０．５〜約２ミクロン）の均一で球状の粒子が製造される。
【０２２３】
（実施例７：水中油法によるインドメタシン負荷微小球（＜１０ミクロン）の製造）
ＰＬＧ（８５：１５、Ａｂｓｏｒｂａｂｌｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）８００ｍｇをジクロロメタン２０ｍｌに溶解する。インドメタシン１６０ｍｇを溶解重合体溶液に添加する。新しく調製した１０％ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）溶液１００ｍｌを６００ｍｌ容のビーカーに添加する。ＰＶＡ溶液を３０分間２０００ｒｐｍで攪拌する。重合体／ジクロロメタン溶液をＰＶＡ溶液に滴下し、その間Ｆｉｓｈｅｒ  ＤＹＮＡ−ＭＩＸ攪拌器で２０００ｒｐｍで攪拌する。添加終了後、溶液をさらに３時間攪拌する。微小球溶液を数個の使い捨て５００ｍｌ目盛り付ポリプロピレンコニカル遠沈管に移し、１０分間２６００ｒｐｍで遠心分離する。水相を傾瀉し、微小球を脱イオン水に再懸濁する。遠心分離、傾瀉および再懸濁の工程を３回反復する。合わせて洗浄した微小球を単一の遠沈管に移し、アセトン／ドライアイスバス中で凍結し、次に凍結乾燥する。凍結乾燥過程の後、微小球をさらに約２４時間真空下に乾燥する。
【０２２４】
（実施例８：水中油のエマルジョン法によるインドメタシン含有微小球（５０〜１００ミクロン））
約５０〜１００ミクロンの平均粒径を有する微小球を実施例７に記載の操作法と同様にして、１％ＰＶＡ溶液および５００ｒｐｍ攪拌速度を用いながら製造する。
【０２２５】
（実施例９：水中油中水法により製造されたヘパリン負荷微小球）
ヘパリン（２０〜４０ｍｇ）を脱イオン水７５０μＬに添加し、２分間回転混合する。ＰＬＧＡ（８５：１５、Ａｂｓｏｒｂａｂｌｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）２００ｍｇを塩化メチレン７ｍｌに溶解する。水性の薬剤溶液を塩化メチレン溶液に添加し、混合物をＰＯＬＹＴＲＯＮホモゲナイザー（速度設定４）を用いて２０秒間乳化する。溶液を５％ＰＶＡ溶液５０ｍｌに添加し、ＰＯＬＹＴＲＯＮホモゲナイザー（速度設定２）を用いて１０秒間ホモゲナイズする。得られた二重エマルジョンを次に１％ＰＶＡ溶液１００ｍｌ中に希釈し、系を３時間磁気攪拌することにより塩化メチレンを蒸発させる。微小球溶液を数個の使い捨て５０ｍｌ目盛り付ポリプロピレンコニカル遠沈管に移し、１０分間２６００ｒｐｍで遠心分離する。水相を傾瀉し、微小球を脱イオン水に再懸濁する。遠心分離、傾瀉および再懸濁の工程を３回反復する。合わせて洗浄した微小球を単一の遠沈管に移し、アセトン／ドライアイスバス中で凍結し、次に凍結乾燥する。凍結乾燥過程の後、微小球をさらに約２４時間真空下に乾燥する。
【０２２６】
（実施例１０：水中油中水法により製造されたデキストラン硫酸負荷微小球）
デキストラン硫酸（２０）を脱イオン水７５０μＬに添加し、２分間回転混合する。ＰＤＬＬＡ（Ａｂｓｏｒｂａｂｌｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）２００ｍｇを塩化メチレン７ｍｌに溶解する。水性のＨＩ溶液を塩化メチレン溶液に添加し、混合物をＰＯＬＹＴＲＯＮホモゲナイザー（速度設定４）を用いて２０秒間乳化する。溶液を５％ＰＶＡ溶液５０ｍｌに添加し、ＰＯＬＹＴＲＯＮホモゲナイザー（速度設定２）を用いて１０秒間ホモゲナイズする。得られた二重エマルジョンを次に１％ＰＶＡ溶液１００ｍｌ中に希釈し、系を３時間磁気攪拌することにより塩化メチレンを蒸発させる。微小球溶液を数個の使い捨て５０ｍｌ目盛り付ポリプロピレンコニカル遠沈管に移し、１０分間２６００ｒｐｍで遠心分離する。水相を傾瀉し、微小球を脱イオン水に再懸濁する。遠心分離、傾瀉および再懸濁の工程を３回反復する。合わせて洗浄した微小球を単一の遠沈管に移し、アセトン／ドライアイスバス中で凍結し、次に凍結乾燥する。凍結乾燥過程の後、微小球をさらに約２４時間真空下に乾燥する。
【０２２７】
（実施例１１：フコイダン負荷微小球）
ＰＬＧＡ（８５：１５、Ａｂｓｏｒｂａｂｌｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）２００ｍｇを塩化メチレン７ｍｌに溶解する。フコイダン２ｇをフリーザーミル試験管にいれ、６８５０Ｆｒｅｅｚｅｒ／Ｍｉｌｌ（ＡＳＴ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて低温ミリングする。ミリングされたフコイダン４０ｍｇを重合体溶液に添加する。溶液をＰＯＬＹＴＲＯＮホモゲナイザー（ＰＴ６１００型）でホモゲナイズする。新しく調製した５％ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）溶液１００ｍｌを６００ｍｌ容のビーカーに添加する。ＰＶＡ溶液を３０分間２０００ｒｐｍで攪拌する。重合体／ジクロロメタン溶液をＰＶＡ溶液に滴下し、その間Ｆｉｓｈｅｒ  ＤＹＮＡ−ＭＩＸ攪拌器で２０００ｒｐｍで攪拌する。添加終了後、溶液をさらに３時間攪拌する。微小球溶液を数個の使い捨て５０ｍｌ目盛り付ポリプロピレンコニカル遠沈管に移し、１０分間２６００ｒｐｍで遠心分離する。水相を傾瀉し、微小球を脱イオン水に再懸濁する。遠心分離、傾瀉および再懸濁の工程を３回反復する。合わせて洗浄した微小球を単一の遠沈管に移し、アセトン／ドライアイスバス中で凍結し、次に凍結乾燥する。凍結乾燥過程の後、微小球をさらに約２４時間真空下に乾燥する。
【０２２８】
（実施例１２：水中油中水法により製造された金チオマレート負荷微小球）
金チオリンゴ酸ナトリウム水和物［Ａｌｄｒｉｃｈ，ｃａｔ：１５７２０１］（２０〜４０ｍｇ）を脱イオン水７５０μＬに添加し、２分間回転混合する。ＰＬＧＡ（８５：１５、Ａｂｓｏｒｂａｂｌｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）２００ｍｇを塩化メチレン７ｍｌに溶解する。水性の薬剤溶液を塩化メチレン溶液に添加し、混合物をＰＯＬＹＴＲＯＮホモゲナイザー（速度設定４）を用いて２０秒間乳化する。溶液を５％ＰＶＡ溶液５０ｍｌに添加し、ＰＯＬＹＴＲＯＮホモゲナイザー（速度設定２）を用いて１０秒間ホモゲナイズする。得られた二重エマルジョンを次に１％ＰＶＡ溶液１００ｍｌ中に希釈し、系を３時間磁気攪拌することにより塩化メチレンを蒸発させる。微小球溶液を数個の使い捨て５０ｍｌ目盛り付ポリプロピレンコニカル遠沈管に移し、１０分間２６００ｒｐｍで遠心分離する。水相を傾瀉し、微小球を脱イオン水に再懸濁する。遠心分離、傾瀉および再懸濁の工程を３回反復する。合わせて洗浄した微小球を単一の遠沈管に移し、アセトン／ドライアイスバス中で凍結し、次に凍結乾燥する。凍結乾燥過程の後、微小球をさらに約２４時間真空下に乾燥する。
【０２２９】
（実施例１３：噴霧乾燥によるフコイダン負荷微小球の製造）
ＤＬラクチドグリコリド共重合体［ＰＬＧＡ］（８５：１５、Ａｂｓｏｒｂａｂｌｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）３．６ｇを塩化メチレン２００ｍｌに溶解する。フコイダン２ｇをフリーザーミル試験管にいれ、６８５０Ｆｒｅｅｚｅｒ／Ｍｉｌｌ（ＡＳＴ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて低温ミリングする。ミリングされたフコイダン４００ｍｇを重合体溶液に添加する。溶液をＰＯＬＹＴＲＯＮホモゲナイザー（ＰＴ６１００型）でホモゲナイズする。得られた溶液は、フコイダンが沈殿しないように重合体溶液を攪拌しながらＢｕｃｈｉベンチトップ噴霧乾燥機を用いて噴霧乾燥する。使用した噴霧乾燥機のパラメーターは以下の通り、即ち、導入口温度５０℃、吐出口温度＜３９℃、アスピレーター１００％、流量７００ｌ／ｈｒとする。収集した微小球を室温真空下に一夜乾燥し、粒径範囲が約１０ミクロン未満（典型的には約０．５〜約２ミクロン）の均一で球状の粒子が製造される。
【０２３０】
（実施例１４：ＨＩ負荷ＳＹＮＶＩＳＣ）
実施例６〜１３において製造したＨＩ負荷微小球２０ｍｇを個別の末端キャップ付の３ｍＬ容のシリンジに計量投入する。プランジャーをシリンジに設置し、シリンジを反転させる。末端キャップを取り外し、プランジャーを０．１ｍｌのマークまで押込む。末端キャップを取り付ける。ＳＹＮＶＩＳＣの入った２ｍＬ容量のシリンジを二重シリンジ連結器を用いて微小球を含有するシリンジと連結する。次にＳＹＮＶＩＳＣを一方のシリンジから次のシリンジに移してから戻す作業を少なくとも２０回行う。ＳＩＮＶＩＳＣ／微小球混合物が元のシリンジ内に入った後、シリンジを二重シリンジ連結器から切り離せば製剤は使用可能である。
【０２３１】
（実施例１５：ＨＩ負荷ヒアルロン酸整形外科用インプラントを用いた椎間円板手術または椎弓切除の後の瘢痕形成を防止するための方法）
脊髄神経根の周囲の瘢痕形成およびその圧縮を防止するためにヒアルロニダーゼ阻害剤を含有するヒアルロン酸インプラントを円板または椎弓切除の手術において使用することにより手術後の疼痛および他の神経学的症状を低減する。この適応症においては、ヒアルロニダーゼ阻害剤を含有するヒアルロン酸含有組成物を、捕獲された脊髄神経を脱圧迫するために設計された手術処置の部分として神経根周囲の組織内に注射する。
【０２３２】
ヒアルロン酸−ヒアルロニダーゼ阻害剤物質は以下の当該分野で知られ製造する：
１．ヒアルロン酸（例えばＳＹＮＶＩＳＣ；ＨＹＬＡＮＧ−Ｆ２０（Ｇｅｎｚｙｍｅ  Ｂｉｏｓｕｒｇｅｒｙ，Ｒｉｄｇｅｆｉｅｌｄ，ＮＪ）−他のＨＡ原料、例えばＲＥＳＴＹＬＡＮＥ、ＨＹＬＡＦＯＲＭ、ＰＥＲＬＡＮＥ、ＳＥＰＬＡＦＩＬＭ、ＳＥＰＬＡＣＯＡＴ、ＩＮＴＥＲＧＥＬおよびＬＵＢＲＩＣＯＡＴも同様に利用できる）２ｍｌを含有する２．２５ｍｌ容のガラスシリンジを以下の通りヒアルロニダーゼ阻害剤を含有するように製造する。
【０２３３】
ａ．ヒアルロニダーゼ阻害剤として金チオマレートを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例７に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中の金チオマレートの５ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有される金チオマレート１０ｍｇの総量がＳＹＮＶＩＳＣ２ｍｌに配合される）。金チオマレート約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１０ｍｇが好ましい用量である。
【０２３４】
ｂ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてインドメタシンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例５、６および７に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のインドメタシンの１ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるインドメタシン２ｍｇの総量がＳＹＮＶＩＳＣ２ｍｌに配合される）。インドメタシン約０．２ｍｇ〜約２０ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約２ｍｇが好ましい用量である。
【０２３５】
ｃ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてプロピレングリコールを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例６〜１３に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のプロピレングリコールの１０ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるプロピレングリコール２０ｍｇの総量がＳＹＮＶＩＳＣ２ｍｌに配合される）。プロピレングリコール約０．５ｍｇ〜約２００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約２０ｍｇが好ましい用量である。
【０２３６】
ｄ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてデキストラン硫酸を利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１０に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のデキストラン硫酸の１０ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるデキストラン硫酸２０ｍｇの総量がＳＹＮＶＩＳＣ２ｍｌに配合される）。デキストラン硫酸約０．５ｍｇ〜約２００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約２０ｍｇが好ましい用量である。
【０２３７】
ｅ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてフコイダンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１１および１３に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のフコイダンの５ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるフコイダン１０ｍｇの総量がＳＹＮＶＩＳＣ２ｍｌに配合される）。フコイダン約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１０ｍｇが好ましい用量である。
【０２３８】
ｆ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてヘパリンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例９に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のヘパリンの１ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるヘパリン２ｍｇの総量がＳＹＮＶＩＳＣ２ｍｌに配合される）。ヘパリン約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約２ｍｇが好ましい用量である。
【０２３９】
２．ＳＹＮＶＩＳＣ／微小球ヒアルロニダーゼ阻害剤物質を滅菌し、そして以下に記載する態様において患者に投与する。全ての外科的処置の間、厳密に無菌的な投与手法に従わなければならない。
【０２４０】
脊髄神経への圧迫を軽減するための切開手術では典型的には破壊された腰椎板（および脊髄神経根を包囲する骨の部分−椎弓切除として知られている）の切除を行う。患者は全身麻酔下に修正された跪姿勢を取る。後正中切開を行い組織を切除して適切な介在空間を曝露し；黄色靱帯を切開し、場合によっては骨性の板を摘出して十分な可視化を確保する。神経根を慎重に除去してヘルニア化したフラグメントおよび輪内の欠陥部を曝露する。典型的には輪の破断部から円板の空洞部に入り、髄核の弛緩したフラグメントを下垂体摂子を用いて除去する。椎間腔の内部または外部に隔離されている円板の別のフラグメントも慎重に除去し、椎間腔を強制的に灌流して残余フラグメントを全て除去する。破断部が硬膜内に存在する場合は、フィブリングルーで補強されることが多い縫合糸により硬膜を閉鎖する。次に組織を吸収性の縫合糸で閉鎖する。
【０２４１】
切開手術の代替として、ミクロ腰椎板切除（ミクロ椎間板切除）は外来処置として実施され、ヘルニア化した円板用に最もよく選択される介入方法として椎弓切除の大部分の代替となっている。罹患した円板の上方の棘突起から下部の棘突まで１インチの切開を行う。手術用顕微鏡を用いながら、組織を黄色靱帯まで切開し、神経根がはっきりと確認できるまで板から骨を除去する。神経根を慎重に引出し、輪内の破断部を拡大下に可視化する。ミクロ円板摂子を使用しながら輪の破断部を介して円板フラグメントを除去し、隔離された円板フラグメントが有れば全て除去する。椎弓切除術の場合と同様、椎間腔を灌流して円板フラグメントを全て除去し、硬膜の破断部があれば全て修復し、組織を吸収性の縫合糸で閉鎖する。前部（腹部）からの処置もまた切開および内視鏡的な腰椎円板切除術の両方のために使用できる。頚椎および胸椎の円板切除は腰椎の処置と同様であり、後部からの処置（椎弓切除を伴う）または融合を伴う前部からの椎間板切除術として実施することができる。
【０２４２】
残念ながら、実施した外科的処置にも関わらず、かなりの数の患者において、神経根周囲の組織の術後の瘢痕形成が神経を圧迫し、刺激を誘発し疼痛および他の神経学的な症状の再発をもたらしている。このような合併症の発生率を低下させるために、切開またはミクロ椎間板切除の際に神経周囲の領域にＨＡ／微小球ヒアルロニダーゼ阻害剤インプラント（上記）を浸潤させる。ＨＡ−ヒアルロニダーゼ阻害剤（ＨＩ）インプラントは隣接組織が神経と接触したり、脊髄神経上に瘢痕組織が形成して最終的にはこれを拘束するのを防止する。ＨＡ−ＨＩインプラントは脊髄手術の不成功の発生率を低減し、疼痛および神経学的症状の再発を防止し、そして、瘢痕組織を除去するための手術介入を反復して実施する必要性を低下する。
【０２４３】
（実施例１６：ＨＩ負荷ヒアルロン酸手術用癒着障壁を用いた手術癒着を防止するための方法）
ＨＩ含有ヒアルロン酸製剤は標的組織または臓器の表面に送達され；典型的には腹部または婦人科の手術処置中に癒着の形成を防止するために行われる。ＨＩを持続放出形態のヒアルロン酸含有手術癒着障壁（例えばフィルム、ゲルまたはスプレー）に添加することによりＨＡの分解速度を低減し、そして組成物／インプラントのインビボ活性をＨＡ単独使用時を越えて延長する。
【０２４４】
癒着は如何なる手術処置の部分としても生じえるものであるが、腹部手術後の腸閉塞の主要原因であり、そして、婦人科手術後の疼痛および不妊の主要原因であると認識されている。実質的には臓器が癒着の部位となるが、女性の生殖管（特にファロピアン管）および腸（小腸および大腸）が特に癒着形成を起こし易い。
【０２４５】
内視鏡的および切開手術処置における癒着防止のためには、ヒアルロン酸−ヒアルロニダーゼ阻害剤癒着障壁を以下の通り製造する：
１．内視鏡的処置のためには、液体のヒアルロン酸（ＳＥＰＲＡＧＥＬ；Ｇｅｎｚｙｍｅ  Ｂｉｏｓｕｒｇｅｒｙ（Ｒｉｄｇｅｆｉｅｌｄ，ＮＪ）より入手できる化学修飾されたヒアルロン酸ナトリウム／カルボキシメチルセルロース吸収性癒着障壁−他のＨＡ原料、例えばＲＥＳＴＹＬＡＮＥ、ＨＹＬＡＦＯＲＭ、ＰＥＲＬＡＮＥ、ＳＥＰＬＡＣＯＡＴ、ＩＮＴＥＲＧＥＬおよびＬＵＢＲＩＣＯＡＴも同様に利用できる）２ｍｌを以下の通りヒアルロニダーゼ阻害剤を含有するように製造する。
【０２４６】
ａ．ヒアルロニダーゼ阻害剤として金チオマレートを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１２に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中の金チオマレートの５ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有される金チオマレート１０ｍｇの総量がＳＥＰＲＡＧＥＬ２ｍｌに配合される）。金チオマレート約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１０ｍｇが好ましい用量である。
【０２４７】
ｂ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてインドメタシンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例６、７および８に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のインドメタシンの１ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるインドメタシン２ｍｇの総量がＳＥＰＲＡＧＥＬ２ｍｌに配合される）。インドメタシン約０．２ｍｇ〜約２０ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約２ｍｇが好ましい用量である。
【０２４８】
ｃ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてプロピレングリコールを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例６〜１３に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のプロピレングリコールの１０ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるプロピレングリコール２０ｍｇの総量がＳＥＰＲＡＧＥＬ２ｍｌに配合される）。プロピレングリコール約０．５ｍｇ〜約２００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約２０ｍｇが好ましい用量である。
【０２４９】
ｄ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてデキストラン硫酸を利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例５に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のデキストラン硫酸の約１０ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるデキストラン硫酸２０ｍｇの総量がＳＥＰＲＡＧＥＬ２ｍｌに配合される）。デキストラン硫酸約０．５ｍｇ〜約２００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約２０ｍｇが好ましい用量である。
【０２５０】
ｅ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてフコイダンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例６および８に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のフコイダンの５ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるフコイダン１０ｍｇの総量がＳＥＰＲＡＧＥＬ２ｍｌに配合される）。フコイダン約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１０ｍｇが好ましい用量である。
【０２５１】
ｆ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてヘパリンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例４に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のヘパリンの１ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるヘパリン約２ｍｇの総量がＳＥＰＲＡＧＥＬ２ｍｌに配合される）。ヘパリン約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約２ｍｇが好ましい用量である。
【０２５２】
２．切開手術処置のためには、ヒアルロニダーゼを含有するＨＡフィルムを使用し、そして製造は以下の通り、即ち、３”ｘ５”または５”ｘ６”のヒアルロン酸フィルム（ＳＥＰＲＡＦＩＬＭ；Ｇｅｎｚｙｍｅ  Ｂｉｏｓｕｒｇｅｒｙ，Ｒｉｄｇｅｆｉｅｌｄ，ＮＪより入手できる化学修飾されたヒアルロン酸ナトリウム／カルボキシメチルセルロース吸収性癒着障壁−他のＨＡフィルム原料、例えばＩＮＴＥＲＣＥＥＤも同様に利用できる）を以下の通りヒアルロニダーゼ阻害剤を含有するように製造する。
【０２５３】
ａ．ヒアルロニダーゼ阻害剤として金チオマレートを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１２に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸フィルム平方インチ当り金チオマレートの０．５ｍｇの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有される金チオマレート７．５ｍｇの総量がＳＥＰＲＡＦＩＬＭの３”ｘ５”のシートに配合されるか、または、微小球中に含有される金チオマレート約１５ｍｇの総量がＳＥＰＲＡＦＩＬＭの５”ｘ６”のシートに配合される）。ヒアルロン酸フィルム平方インチ当たり金チオマレート約０．０１ｍｇ〜約５ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約０．５ｍｇ／ｓｑが好ましい用量である。
【０２５４】
ｂ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてインドメタシンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例５、６および７に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸フィルム平方インチ当りインドメタシンの１ｍｇの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるインドメタシン１５ｍｇの総量がＳＥＰＲＡＦＩＬＭの３”ｘ５”のシートに配合されるか、または、微小球中に含有されるインドメタシン約３０ｍｇの総量がＳＥＰＲＡＦＩＬＭの５”ｘ６”のシートに配合される）。ヒアルロン酸フィルム平方インチ当たりインドメタシン約０．０１ｍｇ〜約５ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１ｍｇ／ｓｑが好ましい用量である。
【０２５５】
ｃ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてプロピレングリコールを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例６〜１３に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸フィルム平方インチ当りプロピレングリコールの１ｍｇの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるプロピレングリコール１５ｍｇの総量がＳＥＰＲＡＦＩＬＭの３”ｘ５”のシートに配合されるか、または、微小球中に含有されるプロピレングリコール約３０ｍｇの総量がＳＥＰＲＡＦＩＬＭの５”ｘ６”のシートに配合される）。ヒアルロン酸フィルム平方インチ当たりプロピレングリコール約０．０１ｍｇ〜約２０ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１ｍｇ／ｓｑが好ましい用量である。
【０２５６】
ｄ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてデキストラン硫酸を利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１０に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸フィルム平方インチ当りデキストラン硫酸の１ｍｇの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるデキストラン硫酸１５ｍｇの総量がＳＥＰＲＡＦＩＬＭの３”ｘ５”のシートに配合されるか、または、微小球中に含有されるデキストラン硫酸３０ｍｇの総量がＳＥＰＲＡＦＩＬＭの５”ｘ６”のシートに配合される）。ヒアルロン酸フィルム平方インチ当たりデキストラン硫酸約０．０１ｍｇ〜約２０ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１ｍｇ／ｓｑが好ましい用量である。
【０２５７】
ｅ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてフコイダンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１１および１３に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸フィルム平方インチ当りフコイダンの０．５ｍｇの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるフコイダン７．５ｍｇの総量がＳＥＰＲＡＦＩＬＭの３”ｘ５”のシートに配合されるか、または、微小球中に含有されるフコイダン約１５ｍｇの総量がＳＥＰＲＡＦＩＬＭの５”ｘ６”のシートに配合される）。ヒアルロン酸フィルム平方インチ当たりフコイダン約０．００５ｍｇ〜約１０ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約０．５ｍｇ／ｓｑが好ましい用量である。
【０２５８】
ｆ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてヘパリンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例９に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸フィルム平方インチ当りヘパリンの０．１ｍｇの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるヘパリン１．５ｍｇの総量がＳＥＰＲＡＦＩＬＭの３”ｘ５”のシートに配合されるか、または、微小球中に含有されるヘパリン約３．０ｍｇの総量がＳＥＰＲＡＦＩＬＭの５”ｘ６”のシートに配合される）。ヒアルロン酸フィルム平方インチ当たりヘパリン約０．００１ｍｇ〜約５ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約０．１ｍｇ／ｓｑが好ましい用量である。
【０２５９】
３．ＨＡ／微小球ヒアルロニダーゼ阻害剤物質を滅菌し、そして以下に記載する態様において患者に投与する。全ての外科的処置の間、厳密に無菌的な投与手法に従わなければならない。
【０２６０】
潜在的に適用可能な適切な外科的処置の数は多数であるため、包括的な腹腔鏡検査および開腹手術を説明する。ＨＩ負荷癒着障壁（上記したゲルまたはフィルム）を、手術中に切開、剥離または操作された腹部および骨盤の臓器の腸間膜に適用する。内視鏡的処置のためには、内視鏡のサイドポートを介して送達される噴霧可能な製剤（例えば液体またはゲル）が好ましい。開腹手術処置のためにはＨＩ−ＨＡシートを破壊された腹腔内組織上に適用する。いずれの場合も、処置部分は可能な限り乾燥させ、過剰な液体は完全に吸引することが必要である。
【０２６１】
ＨＩ−ＨＡフィルムについては、乾燥した器具および／または手袋を用いて穏やかに取り扱いながら、膜を所望の大きさおよび形状に切断する。製品に含まれるホルダーの一方の末端を介して膜を１〜２ｃｍ露出させる。必要に応じて、膜／ホルダーを僅かに屈曲または湾曲させることにより腹骨盤腔内への進入を容易にする。適用に際しては、適用部位に直接接触するまでは組織表面とは接触しないようにする。接触した場合は、標準的な灌流溶液をゆっくり適用して意図しない組織表面から膜を穏やかにはがす。曝露した障壁はまず、乾燥した手袋または器具を用いて膜を穏やかに押し下げることにより組織または臓器上の所望の位置に接着させ、次にホルダーを引き戻す。障壁を切開端部および関連する手術創を十分超えるまで伸展させ、十分な被覆を確保する。必要に応じて、標準的な灌流溶液で障壁を僅かに湿潤させることにより組織または臓器の輪郭を包囲するその被覆を容易にする。個々の障壁を十分重複させることにより、外傷組織表面に完全で連続した被覆を確保する。腹骨盤腔は外科医の標準的手法に従って閉鎖する。
【０２６２】
ヒアルロン酸癒着障壁へのヒアルロニダーゼ阻害剤の添加により、障壁がインビボでより長期間機能できるようになり、そして、隣接する臓器または組織の間に瘢痕組織が形成される可能性が低下する。ＨＩ−ＨＡインプラントは腹部および婦人科の手術の後に形成する可能性がある癒着の発生率および／または重症度を低減する。癒着の低減により疼痛、腸閉塞および不妊の発生が防止され、そして瘢痕組織を除去するための外科的介入を反復する必要が低減される。ＨＩ−ＨＡ含有手術癒着障壁は種々の手術処置、例えば腹部の手術、婦人科および骨盤の手術、脊髄の手術、心臓手術、腱および末梢神経の手術および副鼻腔の手術において使用してよい。
【０２６３】
（実施例１７：ＨＩ負荷ヒアルロン酸インプラントを用いた軟組織欠陥の増強のための方法）
中等度〜重度の顔面の皺および襞の補正のための中程度〜深部の皮膚インプラント処置のためにＨＡ−ＨＩインプラントを使用する。ヒアルロニダーゼ阻害剤（ＨＩ）を含有する注射可能なヒアルロン酸組成物は増大した持続性をもたらし（即ちＨＡの分解速度を低減する）そして組成物のインビボ活性をＨＡ単独使用時を越えて延長し、後の反復注射の回数を低減する。
【０２６４】
皮膚注入用のヒアルロン酸−ヒアルロニダーゼ阻害剤物質は以下の通り製造する：
１．インプラント材料（Ｑ−Ｍｅｄ  ＡＢ，Ｓｗｅｄｅｎより入手したｐＨ７および２０ｍｇ／ｍｌの濃度で生理学的緩衝液中に安定化および懸濁されたＲＥＳＴＹＬＡＮＥヒアルロン酸ゲル材）０．５ｍｌまたは１．０ｍｌの入った予め充填された使い捨てガラスシリンジをヒアルロニダーゼ阻害剤を含有するように製造し、滅菌された小ゲージ針（３０Ｇｘ１／２”）を取り付ける。他のＨＡ原料、例えばＨＹＬＡＦＯＲＭ（Ｇｅｎｚｙｍｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ＰＥＲＬＡＮＥ、ＳＥＰＲＡＧＥＬおよびＩＮＴＥＲＧＥＬも使用できる。ヒアルロニダーゼは以下の通りＨＡ注射剤に配合する。
【０２６５】
ａ．ヒアルロニダーゼ阻害剤として金チオマレートを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１２に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中の金チオマレートの５ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有される金チオマレート５ｍｇの総量がＲＥＳＴＹＬＡＮＥ１ｍｌに配合される）。金チオマレート約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約５ｍｇが好ましい用量である。
【０２６６】
ｂ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてインドメタシンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例６、７および８に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のインドメタシンの１ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるインドメタシン１ｍｇの総量がＲＥＳＴＹＬＡＮＥ１ｍｌに配合される）。インドメタシン約０．２ｍｇ〜約２０ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１ｍｇが好ましい用量である。
【０２６７】
ｃ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてプロピレングリコールを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例６〜１３に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のプロピレングリコールの１０ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるプロピレングリコール１０ｍｇの総量がＲＥＳＴＹＬＡＮＥ１ｍｌに配合される）。プロピレングリコール約０．５ｍｇ〜約２００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１０ｍｇが好ましい用量である。
【０２６８】
ｄ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてデキストラン硫酸を利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１０に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のデキストラン硫酸の１０ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるデキストラン硫酸１０ｍｇの総量がＲＥＳＴＹＬＡＮＥ１ｍｌに配合される）。デキストラン硫酸約０．５ｍｇ〜約２００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１０ｍｇが好ましい用量である。
【０２６９】
ｅ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてフコイダンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１１および１３に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のフコイダンの５ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるフコイダン５ｍｇの総量がＲＥＳＴＹＬＡＮＥ１ｍｌに配合される）。フコイダン約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、５ｍｇが好ましい用量である。
【０２７０】
ｆ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてヘパリンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例９に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のヘパリンの１ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるヘパリン１ｍｇの総量がＲＥＳＴＹＬＡＮＥ１ｍｌに配合される）。ヘパリン約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１ｍｇが好ましい用量である。
【０２７１】
２．ＲＥＳＴＹＬＡＮＥ／微小球ヒアルロニダーゼ阻害剤物質を滅菌し、そして以下に記載する態様において患者に投与する。全ての外科的処置の間、厳密に無菌的な投与手法に従わなければならない。
【０２７２】
背もたれを僅かに傾けて患者を着座位とする。疼痛への対処を患者が必要とするか調べる。必要であれば、局所用リドカインおよび／またはプリロカインを麻酔のために使用する。処置域はアルコールまたは別の適切な無菌溶液で清浄化する。
【０２７３】
ＲＥＳＴＹＬＡＮＥ−ＨＩインプラントを小ゲージ針（３０または３２ゲージ）から投与する。各投与セッションの典型的な使用量は投与部位につき２ｍｌ未満である。注入前に針の先端に小型の液滴が目視できるようになるまでシリンジのプランジャーロッドを慎重に押込む。針を皺または襞の長さに平行に約３０度の角度で挿入する。針の斜面は上向きとし、物質は真皮の中央に向けて注入しなければならない。中央部真皮投入のためには、針の輪郭が目視できるが色は目視できない状態で無ければならない。ＲＥＳＴＹＬＡＮＥ−ＨＩを過度に深部に、または筋肉内に注入すれば、作用持続時間はより短期化する。ＲＥＳＴＹＬＡＮＥ−ＨＩを過度に表在部に注入すれば、目視可能な塊および／または灰色味をおびた変色部が生じる。
【０２７４】
ＲＥＳＴＹＬＡＮＥ−ＨＩインプラントは針を緩徐に引き戻しながらプランジャーロッド上に均一な圧力をかけて適用する。皺は持ち上げられ、注入終了により消失しなければならない。皮膚の過度に表在部において材料が漏出しないように、皮膚から針を引き抜く直前に注入を停止することが重要である。
【０２７５】
所望の容量作用の１００％を補正するのみとし、過度に補正しないことが重要である。皮膚輪郭変形の場合は、欠陥部をそれが排除される場所まで手操作により伸展させると最もよい結果が得られる。補正の程度および持続時間は処置対象の欠陥の特性、インプラント部位の組織の応力、組織内のインプラントの深度および注入手法により変動する。顕著に硬結した欠陥は補正が困難である場合がある。
【０２７６】
注入の深度および投与量に関する注入手法は変動する。直線描画性、連続穿刺注入または両方の組み合わせが良好に使用されている。
【０２７７】
注入が終了した後、投与部位を穏やかにマッサージすることにより、それが周囲組織の輪郭と整合するようにする。過剰補正が生じた場合は、その領域を指と伏在表面骨との間をしっかりマッサージして最良の結果が得られるようにする。
【０２７８】
いわゆる「白色化」が観察された場合、すなわち被覆皮膚が白色味を帯びた色に変化した場合は、注入を即時停止し、その領域を正常な色に戻るまでマッサージする。
【０２７９】
皺がさらに投与を要する場合は、満足できる結果が得られるまで数回皮膚穿刺視ながら同じ処置を反復する。所望の補正を達成するためにはさらにＲＥＳＴＹＬＡＮＥ−ＨＩインプラントを用いた治療を要する場合がある。局所的浮腫を有する患者の場合は治療時に補正の程度を判断することが困難な場合がある。このような場合は、１〜２週間後に修正セッションに患者を来院させる。
【０２８０】
治療領域が注射直後に浮腫化している場合は、短時間氷パックを部位に適用することができる。患者は軽度〜中等度の注射部位反応を有する場合があり、それは典型的には数日以内に解消する。
【０２８１】
美顔品注射において使用するためのＨＩと組み合わせてよい他の適切なＨＡ市販品の例はＭｅｉｊｉ  Ｓｅｉｋａ  Ｋａｉｓｈａ，Ｌｔｄ．（Ｊａｐａｎ）より入手されるＡＣＨＹＡＬ、Ｌ．Ｅ．Ａ．Ｄｅｒｍ（Ｆｒａｎｃｅ）より入手されるＪＵＶＥＤＥＲＭ、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｏ．Ｒ．ＧＥＶ．ＭａｃＤｅｒｍｏｌ（Ｆｒａｎｃｅ）より入手されるＭＡＣＤＥＲＭＯＬ、および、Ｒｏｆｉｌ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（Ｈｏｌｌａｎｄ）より入手されるＲＯＦＩＬＡＮ  Ｈｙｌａｎ  Ｇｅｌを包含する。ＨＡ−ＨＩ組成物はさらにリドカイン、ベンゾカインまたはプリロカインのような麻酔剤および／またはボツリヌス毒素のような神経毒を含んでよい。
【０２８２】
（実施例１８：眼の手術用にＨＩ負荷ヒアルロン酸を使用するための方法）
ヒアルロニダーゼ阻害剤を含有するヒアルロン酸溶液を眼の手術における眼内レンズの挿入と組み合わせて使用する。
【０２８３】
ＨＩ負荷粘弾性物質はヒアルロン酸にヒアルロニダーゼ阻害剤を組み合わせることにより製造される。種々のＨＡ眼科用製品がヒアルロニダーゼ阻害剤と組み合わせられている。例えばＡＭＶＩＳＣ、ＡＭＶＩＳＣ  ＰＬＵＳおよびＯＣＵＣＯＡＴ（Ｂａｕｓｃｈ＆Ｌｏｍｂ）は眼の形状を維持し、そして、白内障摘出、角膜移植および緑内障手術の間の壊れ易い組織を保護するために使用されている高分子量の粘弾性で注射可能なＨＡ溶液である。他のＨＡ系の眼科用粘弾性製品にはＡｌｃｏｎ  ＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓのＰＲＯＶＩＳ、ＶＩＳＣＯＡＴ、ＤＵＯＶＩＳＣおよびＣＥＬＬＵＧＥＬ；Ｐｈａｒｍａｃｉａ＆ＵｐｊｏｈｎのＨＥＡＬＯＮ、ＨＥＡＬＯＮ  ＧおよびＨＥＡＬＯＮ５、ＡｌｌｅｒｇａｎのＶＩＴＲＡＸ；Ｂｉｏ−Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ＧｅｎｅｒａｌのＢＩＯＬＯＮ；Ａｎｉｋａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ／Ｓｔａａｒ  ＳｕｒｇｉｃａｌのＳＴＡＡＲＶＩＳＣ；Ａｎｉｋａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ／Ｃｙｔｏｓｏｌ  ＯｐｈｔｈａｌｍｉｃｓのＳＨＥＬＬＧＥＬ；およびＮｏｖａｒｔｉｓのＵＮＩＶＩＳＣが包含される。
【０２８４】
上記ＨＡ製品の何れも潜在的に使用することができるが、以下の実施例においてはＨＥＡＬＯＮ  ＧＶ（Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｏｐｔｉｃｓ）を以下の態様においてヒアルロニダーゼ阻害剤と組み合わせる。
【０２８５】
１．ＨＥＡＬＯＮ  ＧＶ（Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｏｐｔｉｃｓより入手；ＨＥＡＬＯＮ  ＧＶ各ｍｌは１４ｍｇのヒアルロン酸ナトリウム７０００を含有）の使い捨て０．８５ｍｌまたは０．５５ｍｌガラスシリンジを以下の通りヒアルロニダーゼ阻害剤を含有するように製造する。
【０２８６】
ａ．ヒアルロニダーゼ阻害剤として金チオマレートを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１２に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中の金チオマレートの５ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有される金チオマレート４．２５ｍｇの総量がＨＥＡＬＯＮ  ＧＶ０．８５ｍｌに配合される）。金チオマレート約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約４．２５ｍｇが好ましい用量である。
【０２８７】
ｂ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてインドメタシンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例６、７および８に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のインドメタシンの１ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるインドメタシン０．８５ｍｇの総量がＨＥＡＬＯＮ  ＧＶ０．８５ｍｌに配合される）。インドメタシン約０．０５ｍｇ〜約２０ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約０．８５ｍｇが好ましい用量である。
【０２８８】
ｃ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてプロピレングリコールを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例６〜１３に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のプロピレングリコールの１０ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるプロピレングリコール８．５ｍｇの総量がＨＥＡＬＯＮ  ＧＶ０．８５ｍｌに配合される）。プロピレングリコール約０．５ｍｇ〜約２００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約８．５ｍｇが好ましい用量である。
【０２８９】
ｄ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてデキストラン硫酸を利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１０に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のデキストラン硫酸の１０ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるデキストラン硫酸８．５ｍｇの総量がＨＥＡＬＯＮ  ＧＶ０．８５ｍｌに配合される）。デキストラン硫酸約０．５ｍｇ〜約２００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約８．５ｍｇが好ましい用量である。
【０２９０】
ｅ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてフコイダンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１１および１３に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のフコイダンの５ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるフコイダン４．２５ｍｇの総量がＨＥＡＬＯＮ  ＧＶ０．８５ｍｌに配合される）。フコイダン約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、４．２５ｍｇが好ましい用量である。
【０２９１】
ｆ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてヘパリンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例９に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のヘパリンの１ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるヘパリン０．８５ｍｇの総量がＨＥＡＬＯＮ  ＧＶ０．８５ｍｌに配合される）。ヘパリン約０．０５ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約０．８５ｍｇが好ましい用量である。
【０２９２】
２．ＨＥＡＬＯＮ  ＧＶ／微小球ヒアルロニダーゼ阻害剤物質を滅菌し、そして以下に記載する態様において患者に投与する。全ての外科的処置の間、厳密に無菌的な投与手法に従わなければならない。
【０２９３】
ＨＡの粘弾性溶液は組織潤滑剤として機能するため、および、眼の内部に対する手術中に眼内液体の容量を維持するために使用されている（例えば白内障摘出手術、眼内レンズ移植、網膜再付着、水晶体超音波吸引術、角膜移植および緑内障濾過手術中におけるガラス体代替物として）。典型的には十分な量のＨＩ−ＨＥＡＬＯＮを２７ゲージのカニューレを有するシリンジを介してガラス体腔内にゆっくり導入する。注射を指向させることにより、ＨＩ−ＨＥＡＬＯＮは安全な切開と牽引の開放のために網膜から膜（例えば網膜上膜）を分離するために使用できる。ＨＥＡＬＯＮは又例えば脱着した網膜を穏やかに押し戻したり、網膜フラップを展開するために所望の位置内に組織を移動させる役割を果たし、そして再結合のために強膜に網膜を押し付けて保持することを支援する。
【０２９４】
（実施例１９：ＨＩ負荷ヒアルロン酸インプラントを用いた変形性関節症の管理のための方法）
ヒアルロニダーゼ阻害剤を含有するヒアルロン酸含有組成物は変形性関節症の症候的管理（疼痛、強直、浮腫の低減）のために関節内に送達される。ＨＩの存在がヒアルロン酸の分解速度を制御し、ＨＡ単独使用時を超えて組成物のインビボ活性を延長する（例えば多くの患者において一貫して６ヶ月より長期、そして一部の患者においては１年より長期）。
【０２９５】
ＨＩ負荷関節内ヒアルロン酸はヒアルロン酸とヒアルロニダーゼ阻害剤を組み合わせることにより製造される。種々の市販のＨＡの関節内用の製品をヒアルロニダーゼ阻害剤と組み合わせることができる。多くの市販のＨＡ含有物質がＨＩと組み合わせるために適しており、例えば、ＳＹＮＶＩＳＣ；ＯＲＴＨＯＶＩＳＣ；ＤＵＲＯＬＡＮＥ；ＨＹＡＬＧＡＮ（Ｆｉｄｉａ／Ｓａｎｏｆｉ−Ｓｙｎｔｈｅｌａｂｏより入手）；およびＨＰＳおよびＳＵＰＡＲＴＺが挙げられる。一部のＨＡ製品（特にＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ  Ｖｅｔｍｅｄｉｃａ，Ｓｔ．Ｊｏｓｅｐｈ，ＭＯ製のＨＹＶＩＳＣ）は獣医科用途に使用されている（典型的にはウマの変形性関節症および凝りを治療するため）。
【０２９６】
上記したＨＡ製品の何れも潜在的に使用できるが、以下の実施例においてはＳＹＮＶＩＳＣを以下の態様においてヒアルロニダーゼ阻害剤と組み合わせる。
【０２９７】
１．ヒアルロン酸（ＳＹＮＶＩＳＣ；Ｇｅｎｚｙｍｅ  Ｂｉｏｓｕｒｇｅｒｙより入手されるＨｙｌａｎＧ−Ｆ２０、または他のＨＡ原料、例えばＤＵＲＯＬＡＮＥ）２ｍｌを含有する２．２５ｍｌ用のガラスシリンジを以下の通りヒアルロニダーゼ阻害剤を含有するように製造する。
【０２９８】
ａ．ヒアルロニダーゼ阻害剤として金チオマレートを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１２に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中の金チオマレートの５ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有される金チオマレート１０ｍｇの総量がＳＹＮＶＩＳＣ２ｍｌに配合される）。金チオマレート約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１０ｍｇが好ましい用量である。
【０２９９】
ｂ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてインドメタシンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例６、７および８に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のインドメタシンの１ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるインドメタシン２ｍｇの総量がＳＹＮＶＩＳＣ２ｍｌに配合される）。インドメタシン約０．２ｍｇ〜約２０ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約２ｍｇが好ましい用量である。
【０３００】
ｃ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてプロピレングリコールを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例６〜１３に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のプロピレングリコールの１０ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるプロピレングリコール２０ｍｇの総量がＳＹＮＶＩＳＣ２ｍｌに配合される）。プロピレングリコール約０．５ｍｇ〜約２００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約２０ｍｇが好ましい用量である。
【０３０１】
ｄ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてデキストラン硫酸を利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１０に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のデキストラン硫酸の１０ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるデキストラン硫酸２０ｍｇの総量がＳＹＮＶＩＳＣ２ｍｌに配合される）。デキストラン硫酸約０．５ｍｇ〜約２００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約２０ｍｇが好ましい用量である。
【０３０２】
ｅ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてフコイダンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１１および１３に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のフコイダンの５ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるフコイダン１０ｍｇの総量がＳＹＮＶＩＳＣ２ｍｌに配合される）。フコイダン約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１０ｍｇが好ましい用量である。
【０３０３】
ｆ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてヘパリンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例９に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のヘパリンの１ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるヘパリン２ｍｇの総量がＳＹＮＶＩＳＣ２ｍｌに配合される）。ヘパリン約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約２ｍｇが好ましい用量である。
【０３０４】
２．ＳＹＮＶＩＳＣ／微小球ヒアルロニダーゼ阻害剤物質を滅菌し、そして以下に記載する態様において患者に投与する。全ての外科的処置の間、厳密に無菌的な投与手法に従わなければならない。
【０３０５】
ヒアルロニダーゼ阻害剤を含有するヒアルロン酸含有組成物は膝関節における変形性関節症の管理のために関節腔内に注入される。注射の前に注射部位をアルコールまたは他の滅菌溶液で拭く。滑液または滲出液をＨＡ−ＨＩインプラント注射前に除去する。滑液を除去するため、および、ＨＩ負荷ＳＩＮＶＩＳＣの注射のためには同じシリンジを使用してはならないが；同じ針を使用しなければならない。ＨＡ−ＨＩインプラントは１８〜２２ゲージの針を介して膝関節内に厳密に無菌的な手法を用いて注入する。投与中の密封性を確保し漏出を防止するために、ルアーハブをしっかり保持しながら針を確実に固定する。針を取り付ける場合、または針ガードを除去する場合には、シリンジの先端が破損する場合があるので、過剰に締め付けたり過剰な梃子作用力を与えないようにする。ＳＹＮＶＩＳＣ−ＨＩ薬を投与中は膝には麻酔薬や他の如何なる薬品も関節内に注射してはならない。これはインプラント材を希釈し、安全性と有効性に影響する場合がある。
【０３０６】
ＨＩ−ＳＹＮＶＩＳＣを含有するシリンジは単回使用を意図している。シリンジをそのパッケージから取り外した後はシリンジの内容物を即座に使用しなければならない。全２ｍｌを１膝のみに注入する。両側治療の場合は各膝に対して別々のシリンジを使用しなければならない。未使用の材料は廃棄する。ＨＡ−ＨＩインプラントは膝の疼痛性の変形性関節症の治療のために合計３回の注入を週一回（一週間間隔）で関節内注射により投与する。
【０３０７】
当業者に明らかなように、他の関節（例えば肩、腰、踵、腕等）および他の動物種（ウマ、イヌ、ネコ等）に同様の態様において投与することができる。
【０３０８】
（実施例２０：ＨＩ負荷ヒアルロン酸増量剤を用いた尿失禁の管理のための方法）
ＨＩ負荷ＨＡ増量剤を用いた尿道周囲および経尿道の注射は尿失禁の治療に用いることができる。ＨＩ負荷ＨＡ注射はインプラントの分解速度を低減し、そしてそのインビボ活性をＨＡ単独使用時を越えて延長（例えば患者の大多数において一貫して１年より長期）、例えばインプラントの活性を持続させることができ、そして、後の尿道周囲および経尿道の注射の必要性および頻度を低減することができる。
【０３０９】
ＤＥＦＬＵＸは生体適合性および生分解性のインプラントを構成する非動物性の安定化ヒアルロン酸（ＮＡＳＨＡ、１７ｍｇ／ｍｌ）の担体ゲル中のデキストラノマー微小球（５０ｍｇ／ｍｌ）の滅菌された高粘度のゲルである。デキストラノマー微小球は粒径が８０〜２５０ミクロンの範囲であり、平均粒径は約１３０ミクロンである。ＮＡＳＨＡは主に担体として働き、インプラント部位にデキストラノマー微小球を残存させる。ＤＥＦＬＵＸ（Ｑ−Ｍｅｄ／Ｐｒｉｏｒｉｔｙ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）は１ｍｌを含有する単回使用の使い捨て滅菌シリンジにおいて供給され、そして以下の態様においてヒアルロニダーゼ阻害剤と組み合わせるために適している。
【０３１０】
１．ＤＥＦＬＵＸの１ｍｌシリンジを以下の通りヒアルロニダーゼ阻害剤を含有するように製造する：
ａ．ヒアルロニダーゼ阻害剤として金チオマレートを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１２に記載した重合体微小球、またはデキストラノマー微小球に配合する）内に配合することにより、ヒアルロン酸中の金チオマレートの５ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有される金チオマレート５ｍｇの総量がＤＥＦＬＵＸ１ｍｌに配合される）。金チオマレート約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約５ｍｇが好ましい用量である。
【０３１１】
ｂ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてインドメタシンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例６、７および８に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のインドメタシンの１ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるインドメタシン１ｍｇの総量がＤＥＦＬＵＸ１ｍｌに配合される）。インドメタシン約０．２ｍｇ〜約２０ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１ｍｇが好ましい用量である。
【０３１２】
ｃ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてプロピレングリコールを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例６〜１３に記載した重合体微小球、またはデキストラノマー微小球に配合する）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のプロピレングリコールの１０ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるプロピレングリコール１０ｍｇの総量がＤＥＦＬＵＸ１ｍｌに配合される）。プロピレングリコール約０．５ｍｇ〜約２００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１０ｍｇが好ましい用量である。
【０３１３】
ｄ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてデキストラン硫酸を利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１０に記載した重合体微小球、またはデキストラノマー微小球に配合する）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のデキストラン硫酸の１０ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるデキストラン硫酸１０ｍｇの総量がＤＥＦＬＵＸ１ｍｌに配合される）。デキストラン硫酸約０．５ｍｇ〜約２００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１０ｍｇが好ましい用量である。
【０３１４】
ｅ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてフコイダンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１１および１３に記載した重合体微小球、またはデキストラノマー微小球に配合する）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のフコイダンの５ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるフコイダン５ｍｇの総量がＤＥＦＬＵＸ１ｍｌに配合される）。フコイダン約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、５ｍｇが好ましい用量である。
【０３１５】
ｆ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてヘパリンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例９に記載した重合体微小球、またはデキストラノマー微小球に配合する）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のヘパリンの１ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるヘパリン１ｍｇの総量がＤＥＦＬＵＸ１ｍｌに配合される）。ヘパリン約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１ｍｇが好ましい用量である。
【０３１６】
２．ＤＥＦＬＵＸ／微小球ヒアルロニダーゼ阻害剤物質を滅菌し、そして以下に記載する態様において患者に投与する。
【０３１７】
ＨＩ負荷ＤＥＦＬＵＸ組成物の経尿道注入は以下の態様において進行させてよい。１ｍｌのインプラント物質を含有する小ゲージ針（安定化カニューレを有する２３ゲージの経尿道注射針）を有する予め負荷した単回用シリンジを使用する。患者を切石位とし２％リドカイン１０ｍｌを麻酔のために尿道に導入する。女性の場合は、膀胱頚部を膀胱鏡尿路造影により可視化する。膀胱鏡の注入口を介して、膀胱粘膜の真下の面内に膀胱頚部より１〜１．５ｃｍ遠位に鋭角で針を４時の位置に挿入する。次に針を膀胱鏡を用いながらそれが膀胱頚部の粘膜の真下に位置するまで尿管の長軸に平行に進行させる。ＨＩ負荷ＨＡをゆっくりこの部位に注射する。次に８時の位置において操作を反復する。メチレンブルーおよび他の非毒性の着色剤を注射の可視化を容易にするためにインプラントに添加することができる。
【０３１８】
ＨＩ負荷ＤＥＦＬＵＸ組成物の尿道周囲注射は以下の態様において進行させてよい。１ｍｌのインプラント物質を含有する小ゲージ針（尿道周囲注射針）を有する予め負荷した単回用シリンジを使用する。患者を切石位とし２％リドカイン１０ｍｌを麻酔のために尿道に導入し、膀胱頚部を膀胱鏡尿路造影により可視化する（男性の場合は尿道は恥骨上膀胱鏡法を介して可視化することもできる）。針は尿道の直ぐ横に隣接する領域内に経膣的または恥骨上に挿入する。膀胱頚部近傍の適切な位置に到達（膀胱鏡的および上記の通り観察される）した時点で、ＨＩ負荷ＨＡをこの部位にゆっくり注射する。メチレンブルーおよび他の非毒性の着色剤を注射の可視化を容易にするためにインプラントに添加することができる。
【０３１９】
（実施例２１：ＨＩ負荷ヒアルロン酸増量剤を用いた便失禁の管理のための方法）
便失禁は北米成人の１１％程度に生じている一般的で社会的障害となる状態である。放屁または便の失禁は種々の要因により生じるが、出産時に肛門括約筋が損傷を受ける可能性がある女性においてより一般的である（特に３度の膣裂傷に罹患、鉗子分娩を必要、大型の出生児および／または経膣分娩の一部として長時間分娩の経験を有する女性）。便失禁の病因は多要因の場合が多いが、原因には括約筋の傷害（出産、手術、事故）、肛門直腸疾患（痔、脱肛、炎症性腸疾患、フィステル、腫瘍、結腸切除、宿便、下痢）、遺伝（二分脊椎、髄膜瘤、Ｈｉｒｓｈｓｐｒｕｎｇ病）、特発性または挙動性（排便抵抗、痴呆、精神遅滞）が包含される。受動的便失禁（即ち患者の認知を伴わず生じる）は主に内部肛門括約筋の機能不全によるものであり、切迫便失禁（排便を随意的に阻害することが不可能）は通常は外部肛門括約筋の機能不全による。ＨＩ負荷ＨＡ組成物を内部または外部の括約筋の周囲の領域に注射することにより、括約筋の圧力を増大させ、そして便失禁を低減することができる。ＨＩ負荷ＨＡ注射を用いることにより、インプラントの活性を持続させることができ、そして肛門周囲注射の必要性および頻度を低減することができる。
【０３２０】
ＤＥＦＬＵＸは生体適合性および生分解性のインプラントを構成する非動物性の安定化ヒアルロン酸（ＮＡＳＨＡ、１７ｍｇ／ｍｌ）の担体ゲル中のデキストラノマー微小球（５０ｍｇ／ｍｌ）の滅菌された高粘度のゲルである。デキストラノマー微小球は粒径が８０〜２５０ミクロンの範囲であり、平均粒径は約１３０ミクロンである。ＮＡＳＨＡは主に担体として働き、インプラント部位にデキストラノマー微小球を残存させる。ＤＥＦＬＵＸは１ｍｌを含有する単回使用の使い捨て滅菌シリンジにおいて供給され、そして以下の態様においてヒアルロニダーゼ阻害剤と組み合わせるために適している。
【０３２１】
１．ＤＥＦＬＵＸの１ｍｌシリンジを以下の通りヒアルロニダーゼ阻害剤を含有するように製造する。
【０３２２】
ａ．ヒアルロニダーゼ阻害剤として金チオマレートを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１２に記載した重合体微小球、またはデキストラノマー微小球に配合する）内に配合することにより、ヒアルロン酸中の金チオマレートの５ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有される金チオマレート５ｍｇの総量がＤＥＦＬＵＸ１ｍｌに配合される）。金チオマレート約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約５ｍｇが好ましい用量である。
【０３２３】
ｂ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてインドメタシンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例６、７および８に記載した重合体微小球）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のインドメタシンの１ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるインドメタシン１ｍｇの総量がＤＥＦＬＵＸ１ｍｌに配合される）。インドメタシン約０．２ｍｇ〜約２０ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１ｍｇが好ましい用量である。
【０３２４】
ｃ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてプロピレングリコールを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例６〜１３に記載した重合体微小球、またはデキストラノマー微小球に配合する）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のプロピレングリコールの１０ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるプロピレングリコール１０ｍｇの総量がＤＥＦＬＵＸ１ｍｌに配合される）。プロピレングリコール約０．５ｍｇ〜約２００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１０ｍｇが好ましい用量である。
【０３２５】
ｄ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてデキストラン硫酸を利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１０に記載した重合体微小球、またはデキストラノマー微小球に配合する）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のデキストラン硫酸の１０ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるデキストラン硫酸１０ｍｇの総量がＤＥＦＬＵＸ１ｍｌに配合される）。デキストラン硫酸約０．５ｍｇ〜約２００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１０ｍｇが好ましい用量である。
【０３２６】
ｅ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてフコイダンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例１１および１３に記載した重合体微小球、またはデキストラノマー微小球に配合する）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のフコイダンの５ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるフコイダン５ｍｇの総量がＤＥＦＬＵＸ１ｍｌに配合される）。フコイダン約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、５ｍｇが好ましい用量である。
【０３２７】
ｆ．ヒアルロニダーゼ阻害剤としてヘパリンを利用しながら薬剤を持続放出送達系（例えば実施例９に記載した重合体微小球、またはデキストラノマー微小球に配合する）内に配合することにより、ヒアルロン酸中のヘパリンの１ｍｇ／ｍｌの濃度を達成するようにする（即ち、微小球中に含有されるヘパリン１ｍｇの総量がＤＥＦＬＵＸ１ｍｌに配合される）。ヘパリン約０．２ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲が臨床上有益であるが、約１ｍｇが好ましい用量である。
【０３２８】
２．ＤＥＦＬＵＸ／微小球ヒアルロニダーゼ阻害剤物質を滅菌し、そして以下に記載する態様において患者に投与する。
【０３２９】
ＨＩ−ＤＥＦＬＵＸインプラントを以下の態様において内視鏡視野下の直接注入により投与する。インプラント材１ｍｌを含有する小ゲージ針を有する予め負荷された単回使用シリンジを使用する。２％リドカイン約１０ｍｌを選択された注射領域に応じて会陰皮膚または直腸粘膜内に導入する。針は肛門括約筋を包囲する粘膜下の平面内に皮膚または肛門粘膜を経由して挿入する。針が適切な位置に到達した時点で、この部位に、肛門管の周囲で対称となるまで、ＨＩ負荷ＨＡをゆっくり注射する（典型的には円周状に経括約筋的に行う３回注射において、肛門端縁から離れるように進入し、歯状線において、またはその直ぐ上において注射する）。メチレンブルーおよび他の非毒性の着色剤を注射の可視化を容易にするためにインプラントに添加することができる。
【０３３０】
（実施例２２：ヒアルロン酸分解：ＧＰＣ分子量アッセイ）
ゲル透過クロマトグラフィー（ＧＰＣ）試験（ＧＰＣ分子量アッセイ）を用いて経時的なヒアルロン酸の分解に対する種々の化合物の作用を測定した（ヒアルロニダーゼによる分解によるヒアルロン酸の分子量の低下により測定）。
【０３３１】
（方法：）
分析に使用したＧＰＣ系は屈折率検出器および直列のＵＬＴＲＡＨＹＤＲＯＧＥＬ１００およびＵＬＴＲＡＨＹＤＲＯＧＥＬ２０００（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）カラムを装着したＢＲＥＥＺＥコンピューター化ＧＰＣ器とした。水を分当たり１ｍｌの流量で移動層として使用した。注入量は５０μｌとし、泳動時間は２５分とした。
【０３３２】
１１，０００〜２百万ダルトンの範囲の多糖類の標準物質（Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ；Ｃｈｕｒｃｈ  Ｓｔｒｅｔｔｏｎ，ＵＫ）を用いながら、対数の分子量の関数としての保持時間の直線の検量線を作成した。
【０３３３】
２百万〜３．５百万ダルトンの範囲の分子量のヒアルロン酸（ヒアルロン酸ナトリウム、Ｌｉｆｅｃｏｒｅ，Ｃｈａｓｋａ  ＭＮ）を水中０．５％ｗ／ｖの濃度まで希釈した。ヒアルロニダーゼ（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｓｔ  Ｌｏｕｉｗ，ＭＯ）をｍｌ当たり１０００単位の濃度で水中希釈し、適切な容量で添加することにより所望の終濃度を達成した。ヒアルロニダーゼは全実験において１５時間のインキュベーション時間に渡りｍｌ当たり１００単位で使用した。ｍｌ当たり１００単位の濃度において、酵素は５時間以内に２．５百万から１００，０００ダルトン未満まで分子量を低下させた。水中０．１％ｗ／ｖの濃度のＨＡ（１００単位／ｍｌ酵素の存在下または非存在下）を各実験における対照として使用した。
【０３３４】
（結果：）
以下の化合物、即ちヘパリン（ナトリウム塩）、金チオマレート、カルボキシメチルセルロース、デキストラン硫酸、フコイダンを試験することによりヒアルロニダーゼによるヒアルロン酸の分解に対するその作用を測定した。阻害剤は試料溶液に直接、または、濃縮された溶液の小容量として添加した。試験した５化合物の各々はヒアルロニダーゼによるヒアルロン酸の分解を阻害した。
【０３３５】
ヘパリン（ナトリウム塩、Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．）を１ｍｇ／ｍｌ、０．５ｍｇ／ｍｌ、０．２５ｍｇ／ｍｌおよび０．１ｍｇ／ｍｌの濃度で試験した。ヘパリンは試験した濃度の各々においてヒアルロン酸分解を阻害した。０．１ｍｇ／ｍｌもの低濃度であっても、ＨＡの分子量は約３．４百万から約２．４百万に低下（表５、図５）し、分解は約７０％阻害されたことを示していた。
【０３３６】
【表５】
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金チオマレート（ナトリウム塩、Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．）は１０ｍＭ、５ｍＭ、２．５ｍＭおよび１ｍＭの濃度において、５０％を超えてＨＡの分解を阻害した（表６、図６）。
【０３３７】
【表６】
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カルボキシメチルセルロース（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）は０．０５〜１ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度においてヒアルロニダーゼによる分解を阻害した。インキュベーション後のヒアルロン酸の分子量は２．２５百万の元の値に近似したままであった（表７、図７）。
【０３３８】
【表７】
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デキストラン硫酸（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．）は０．０５〜１ｍｇ／ｍｌの濃度範囲に渡ってヒアルロン酸の分解を阻害した（表８、図８）。
【０３３９】
【表８】
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フコイダン（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．）は０．５〜５ｍｇ／ｍｌの濃度範囲に渡ってヒアルロン酸の分解を阻害した（表９、図９）。
【０３４０】
【表９】
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本発明の特定の実施形態を説明のために本明細書に記載したが種々の変更が本発明の精神および範囲を外れることなく行えることは上記より当業者の知る通りである。従って本発明は添付する特許請求の範囲以外によって限定されるものではない。
【図面の簡単な説明】
【０３４１】
【図１】図１はヒアルロン酸の酵素誘導性分解に対するヘパリン、金チオマレートおよびインドメタシンの作用を示す棒グラフである（ＨＡ対照に相対比較した場合の溶液の％粘度）。
【図２】図２はヒアルロン酸の酵素分解に対するデキストラン硫酸、フコイダン、ヘパリン、プロピレングリコールおよびインドメタシンの作用を示す棒グラフである（ＨＡ対照に相対比較した場合の溶液の％粘度）。
【図３】図３は一夜インキュベートした後のヒアルロニダーゼによるＨＡ分解に対するＴＲＩＴＯＮＸ−１００の作用を示す棒グラフである。
【図４】図４はヒアルロニダーゼによるＨＡ分解に対する種々の化合物の作用を示す棒グラフである。
【図５】図５はヘパリンナトリウム塩およびヒアルロニダーゼの存在下のＨＡ分解を示す棒グラフである（１５時間インキュベートした後の１００単位／ｍｌ）。
【図６】図６は金チオリンゴ酸ナトリウムおよびヒアルロニダーゼの存在下のＨＡ分解を示す棒グラフである（１５時間インキュベートした後の１００単位／ｍｌ）。
【図７】図７はＣＭＣおよびヒアルロニダーゼの存在下のＨＡ分解を示す棒グラフである（１５時間インキュベートした後の１００単位／ｍｌ）。
【図８】図８はデキストラン硫酸およびヒアルロニダーゼの存在下のＨＡ分解を示す棒グラフである（１５時間インキュベートした後の１００単位／ｍｌ）。
【図９】図９はフコイダンおよびヒアルロニダーゼの存在下のＨＡ分解を示す棒グラフである（１５時間インキュベートした後の１００単位／ｍｌ）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【国際調査報告】
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