(57)【要約】  本発明は、ジヒドロベンゾジアゼピン誘導体、これを含有する組成物および医薬、ならびにこのような化合物、組成物および医薬の製造方法および使用に関する。このようなジヒドロベンゾジアゼピン誘導体は、不適切なROCKキナーゼに関連する疾患の治療に有用である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)：
【化１】
2008516975.tif 000076
（式中、
点線は、結合または結合の不存在を表し；
R1は、ピラゾリル、ピリジニル、場合によりNH2で置換されていてもよいピリミジニル、またはインダゾリルを表し；
R2は、場合によりC1-6アルキル、CN、C1-6アルコキシ、C1-6ハロアルキル、C1-6ハロアルコキシ、NO2、ハロゲンから選択される1個以上の置換基で置換されていてもよいフェニル、または場合により5員のヘテロアリール基で置換されていてもよいO、NもしくはSから選択される1個以上のヘテロ原子を含んでいる5員のヘテロアリール基を表し；
R3とR4は、独立してHまたはC1-6アルキルを表す）
で表される化合物、またはその塩、溶媒和物、もしくは生理学的機能性誘導体。
【請求項２】
以下の群：
【化２】
2008516975.tif 000077
2008516975.tif 000078
2008516975.tif 000079
から選択される請求項１に記載の化合物またはその塩、溶媒和物、もしくは生理学的機能性誘導体。
【請求項３】
治療上有効な量の請求項１〜２のいずれか1項に記載の化合物、またはその塩、溶媒和物、もしくは生理学的機能性誘導体ならびに1つ以上の製薬上許容される担体、希釈剤および賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項４】
不適切 なROCK活性により媒介される、哺乳動物の障害の治療方法であって、治療上有効な量の請求項１〜２のいずれか1項に記載の化合物、その塩、溶媒和物、または生理学的機能性誘導体を該哺乳動物に投与することを含んでなる、上記治療方法。
【請求項５】
治療において使用するための、請求項１〜２のいずれか1項に記載の化合物、その塩、溶媒和物、または生理学的機能性誘導体。
【請求項６】
不適切なROCK活性により媒介される障害の治療において使用するための医薬の製造における、請求項１〜２のいずれか1項に記載の化合物、その塩、溶媒和物、または生理学的機能性誘導体の使用。
【請求項７】
不適切なROCK活性により媒介される障害の治療において使用するための、請求項１〜２のいずれか1項に記載の化合物、その塩、溶媒和物、または生理学的機能性誘導体。
【請求項８】
式(I)：
【化３】
2008516975.tif 000080
（式中、
点線は、結合または結合の不存在を表し；
R1は、ピラゾリル、場合によりハロゲンで置換されていてもよいピリジニル、場合によりNH2で置換されていてもよいピリミジニル、またはインダゾリルを表し；
R2は、場合によりC1-6アルキル、CN、C1-6アルコキシ、C1-6ハロアルキル、C1-6ハロアルコキシ、NO2、ハロゲンから選択される1個以上の置換基で置換されていてもよいフェニル、または場合により5員のヘテロアリール基で置換されていてもよいO、NもしくはSから選択される1個以上のヘテロ原子を含む5員のヘテロアリール基を表し；
R3とR4は、独立してHまたはC1-6アルキルを表す）
で表される化合物またはその塩、溶媒和物、もしくは生理学的機能性誘導体。
【請求項９】
前記化合物が：
7-(3-フルオロピリジン-4-イル)-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化４】
2008516975.tif 000081
である、請求項１に記載の化合物またはその塩、溶媒和物、もしくは生理学的機能性誘導体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、ジヒドロベンゾジアゼピン誘導体ならびにこれを含有する組成物および医薬、ならびにこのような化合物、組成物および医薬の製造方法および使用に関する。このようなジヒドロベンゾジアゼピン誘導体は、不適切なチロシンおよび/またはセリン/トレオニンキナーゼ活性、特にROCKキナーゼ活性に関連する疾患の治療において治療効果を有する可能性がある。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
酵素の重要な大ファミリーは、プロテインキナーゼ酵素ファミリーである。現在、約500の様々な公知のプロテインキナーゼが存在している。プロテインキナーゼは、ATP-Mg2+複合体のγ-リン酸塩をアミノ酸側鎖に転移させることによって、様々なタンパク質のアミノ酸側鎖のリン酸化を触媒する役割を果たす。これらの酵素は、細胞内のシグナル伝達プロセスの大部分を制御し、タンパク質中のセリン、トレオニンおよびチロシン残基の水酸基の可逆的リン酸化を通じて細胞機能、細胞増殖、細胞分化および細胞破壊（アポトーシス）を支配する。研究により、プロテインキナーゼは、多くの細胞機能、例えばシグナル伝達、転写調節、細胞運動および細胞分裂の主要調節因子であることが示されている。プロテインキナーゼをコードする幾つかの癌遺伝子も示されており、キナーゼが腫瘍形成に関与することを示唆している。これらのプロセスは高度に調節されており、時には複雑なかみ合った経路により調節され、この場合各キナーゼはそれ自体が1つ以上のキナーゼによって調節される。結果として、異常なまたは不適切なプロテインキナーゼ活性は、このような異常なキナーゼ活性に関連する病状の発生の一因となり得る。これらの生理的関連性、多様性および遍在性により、生化学研究および医学研究において、プロテインキナーゼは最も重要かつ広範に研究された酵素ファミリーの1つとなっている。
【０００３】
酵素のプロテインキナーゼファミリーは、それがリン酸化するアミノ酸残基に基づき、典型的にはプロテインチロシンキナーゼおよびプロテインセリン/トレオニンキナーゼの2つの主要なサブファミリーに分類される。セリン/トレオニンキナーゼ(PSTK)としては、例えば、サイクリックAMPおよびサイクリックGMP依存性プロテインキナーゼ、カルシウムおよびリン脂質依存性プロテインキナーゼ、カルシウムおよびカルモジュリン依存性プロテインキナーゼ、カゼインキナーゼ、細胞分裂周期プロテインキナーゼなどが挙げられる。これらのキナーゼは通常、細胞質性であるか、あるいは恐らくアンカータンパク質により特定の細胞画分に関連している。異常なプロテインセリン/トレオニンキナーゼの活性は、多くの病態、例えば関節リウマチ、乾癬、敗血症性ショック、骨粗鬆、多くの癌および他の増殖性疾患に関与しており、あるいは関与が疑われている。従って、セリン/トレオニンキナーゼおよびこれらが一部を構成するシグナル伝達経路は、ドラッグデザインの重要なターゲットである。チロシンキナーゼはチロシン残基をリン酸化する。チロシンキナーゼは、細胞調節において同程度に重要な役割を果たす。これらのキナーゼは増殖因子やホルモンなどの幾つかの分子受容体を含み、例えば、上皮細胞増殖因子受容体、インスリン受容体、血小板由来増殖因子受容体などが挙げられる。研究から、多くのチロシンキナーゼは、受容体ドメインが細胞の外側に位置し、キナーゼドメインが細胞の内側に位置している膜貫通タンパク質であることが示唆されている。チロシンキナーゼの調節因子を同定する多くの研究も進行中である。
【０００４】
細胞が利用する主要なシグナル伝達系は、RhoAシグナル経路である。RhoAは小型のGTP結合タンパク質であり、増殖因子、ホルモン、機械的ストレス、浸透圧変化ならびに高濃度のグルコースなどの代謝産物のような幾つかの細胞外刺激により活性化され得る。RhoA活性化は、GTP結合、コンホメーション変化、翻訳後修飾(ゲラニルゲラニル化およびファルネシル化)ならびにその内因性GTPアーゼ活性の活性化を伴う。活性RhoAは、ROCKを含む幾つかのエフェクタータンパク質と相互作用することが可能であり、細胞質および細胞核へとシグナルを伝達する。
【０００５】
ROCK1とROCK2は、物理的結合を介してRhoA-GTP複合体により活性化され得るキナーゼファミリーを構成する。活性ROCKは多くの基質をリン酸化し、中心的細胞機能において重要な役割を果たす。ROCKの基質としては、例えば、ミオシン軽鎖ホスファターゼのミオシン結合サブユニット(MBS、MYPT1とも呼ばれる)、アデュシン、モエシン、ミオシン軽鎖(MLC)、LIMキナーゼならびに転写因子FHLが挙げられる。これらの基質のリン酸化は、タンパク質の生物学的活性を調節し、このように外部刺激に対する細胞応答を変化させる手段を提供する。十分に立証された例の1つとして、平滑筋収縮におけるROCKの関与がある。フェニレフリンによって刺激されると、血管平滑筋が収縮する。研究により、フェニレフリンがbアドレナリン受容体を刺激してRhoAの活性化をもたらすことが示されている。活性RhoAが順にROCK1のキナーゼ活性を刺激し、次にROCK1のキナーゼ活性がMBSをリン酸化する。このようなリン酸化は、ミオシン軽鎖ホスファターゼの酵素活性を阻害し、カルシウム依存性ミオシン軽鎖キナーゼ(MLCK)によりミオシン軽鎖自体のリン酸化を増大させ、結果的にミオシン-アクチン束の収縮性を増大させて平滑筋収縮を生じる。この現象は、カルシウム感作と呼ばれる場合もある。平滑筋収縮に加えて、ROCKが細胞機能、例えばアポトーシス、細胞移動、転写活性、線維症、細胞質分裂、炎症および細胞増殖に関与することも示されている。さらに、神経細胞中で、ROCKはミエリン関連糖タンパク質(MAG)などのミエリン関連阻止因子による軸索成長の阻害で重要な役割を果たす。ROCK活性は、発生中の神経細胞における成長円錐の崩壊も媒介する。上記プロセスは両方ともLIMキナーゼおよびミオシン軽鎖ホスファターゼなどの基質のROCK誘導性リン酸化により媒介され、神経細胞のアクチン-ミオシン系の収縮性の増大をもたらすと考えられている。
【０００６】
ROCKの阻害剤について、様々な疾患の治療における使用が提案されている。疾患としては、循環器疾患（例えば、高血圧症、慢性うっ血性心不全、心臓肥大、再狭窄、慢性腎不全およびアテローム性動脈硬化）が挙げられる。さらに、その筋弛緩特性により、ぜんそく、男性の勃起不全、女性の性機能不全および過活動膀胱症候群にも適している。ROCK阻害剤は、抗炎症特性を有することが示されている。従って、神経炎症性疾患（例えば、脳梗塞、多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症および炎症性痛覚）ならびに他の炎症性疾患（例えば、関節リウマチ、過敏性腸症候群、炎症性腸症候群）の治療として用いることができる。さらに神経突起伸長誘導効果によって、ROCK阻害剤は、CNS（中枢神経系）内の病変の全域で新たな軸索成長と軸索の再配線を誘導する、神経細胞再生のための有用な薬となり得る。従ってROCK阻害剤は、CNS疾患、例えば脊髄損傷、急性神経損傷(脳梗塞、外傷性脳損傷)、パーキンソン病、アルツハイマー病、および他の神経変性疾患の再生（回復）治療に役立つ可能性がある。ROCK阻害剤は細胞増殖および細胞移動を減少させるため、癌および腫瘍転移の治療に役立ち得る。さらに、ROCK阻害剤がウイルス侵入の際に細胞骨格再構成を抑制することを示唆する証拠があり、このため該阻害剤は、抗ウイルス用途および抗菌用途において薬効を有する可能性もある。ROCK阻害剤は、インスリン抵抗性および糖尿病の治療にも役立つ。
【０００７】
本発明は、ROCK活性の阻害剤である新規なジヒドロベンゾジアゼピン化合物を見出したものである。従ってこのような誘導体は、不適切なROCK活性に関連する疾患の治療において治療効果を有する可能性がある。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
発明の概要
本発明の1つの態様において、
式(I)：
【化１】
2008516975.tif 000002
【０００９】
（式中、
点線は、結合または結合の不存在を表し；
R1は、ピラゾリル、ピリジニル、場合によりNH2で置換されていてもよいピリミジニル、またはインダゾリルを表し；
R2は、場合によりC1-6アルキル、CN、C1-6アルコキシ、C1-6ハロアルキル、C1-6ハロアルコキシ、NO2、ハロゲンから選択される1個以上の置換基により置換されていてもよいフェニル、または場合により5員のヘテロアリール基で置換されていてもよいO、NまたはSから選択される1個以上のヘテロ原子を含んでいる5員のヘテロアリール基を表し；
R3とR4は、独立してHまたはC1-6アルキルを表す）
で表される化合物、またはその塩、溶媒和物、もしくは生理学的機能性誘導体を提供する。
【００１０】
本発明の第2の態様において、治療において使用するための、式(I)の化合物、またはその塩、溶媒和物、もしくは生理学的機能性誘導体を提供する。
【００１１】
本発明の第3の態様において、不適切なROCK活性により媒介される、哺乳動物の障害の治療において使用するための、式(I)の化合物、またはその塩、溶媒和物、もしくは生理学的機能性誘導体を提供する。
【００１２】
本発明の第4の態様において、式(I)の化合物、またはその塩、溶媒和物、もしくは生理学的機能性誘導体および1つ以上の製薬上許容される担体、希釈剤および賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
【００１３】
本発明の第5の態様において、哺乳動物に式(I)の化合物、またはその塩、溶媒和物もしくは生理学的機能性誘導体を投与することを含んでなる、哺乳動物における不適切なROCK活性に媒介される障害の治療方法を提供する。
【００１４】
本発明の第6の態様において、不適切なROCK活性により媒介される障害の治療において使用するための医薬の製造における、式(I)の化合物、またはその塩、溶媒和物、もしくは生理学的機能性誘導体の使用を提供する。
【００１５】
本発明の第7の態様において、式(I)：
【化２】
2008516975.tif 000003
【００１６】
（式中、
点線は、結合または結合の不存在を表し；
R1は、ピラゾリル、場合によりハロゲンで置換されていてもよいピリジニル、場合によりNH2で置換されていてもよいピリミジニル、またはインダゾリルを表し；
R2は、場合によりC1-6アルキル、CN、C1-6アルコキシ、C1-6ハロアルキル、C1-6ハロアルコキシ、NO2、ハロゲンから選択される1個以上の置換基により置換されていてもよいフェニル、または場合により5員のヘテロアリール基で置換されていてもよいO、NまたはSから選択される1個以上のヘテロ原子を含んでいる5員のヘテロアリール基を表し；
R3とR4は、独立してHまたはC1-6アルキルを表す）
で表される化合物またはその塩、溶媒和物、もしくは生理学的機能性誘導体を提供する。
【００１７】
発明の詳細な説明
本明細書において用いる「有効量」という用語は、例えば研究者または臨床医が模索している、動物またはヒトの組織、系の生物学的応答または医学的応答を誘発する薬または医薬品の量を意味する。さらに、「治療上有効な量」という用語は、そのような量を投与されていない対応する被験体と比較して、疾患、障害もしくは副作用の、改善された治療、治癒、予防、もしくは回復、あるいは疾患もしくは障害の進行速度の低下をもたらす任意の量を意味する。この用語の範囲には、正常な生理的機能の増強に有効な量も含まれる。
【００１８】
本明細書において用いる「アルキル」という用語は、特定の数の炭素原子を有する直鎖または分岐鎖の炭化水素基を指す。従って、本明細書において用いる「C1-C3アルキル」および「C1-C6アルキル」という用語は、それぞれ少なくとも1個、また多くとも3個または6個の炭素原子を含んでいる上記のアルキル基を指す。このような、本発明において有用な分岐鎖または直鎖のアルキル基の例としては、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、イソブチル、n-ブチル、t-ブチル、n-ペンチル、イソペンチル、およびn-ヘキシルが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００１９】
本明細書において用いる「ハロゲン」という用語は、フッ素(F)、塩素(Cl)、臭素(Br)、またはヨウ素(I)を指し、「ハロ」という用語は、ハロゲン基：フルオロ(-F)、クロロ(-Cl)、ブロモ(-Br)、およびヨード(-I)を指す。
【００２０】
本明細書において用いる「C1-C6ハロアルキル」という用語は、それぞれ本明細書において定義されるハロゲン基の少なくとも1個で置換されている、少なくとも1個、かつ多くとも6個の炭素原子を含んでいる上記のアルキル基を指す。このように本発明において有用な分岐鎖または直鎖のハロアルキル基の例としては、1個以上のハロゲン原子、例えば、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードにより独立して置換されているメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、イソブチルおよびn-ブチルが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００２１】
本明細書において用いる「ヘテロアリール」という用語は、特定の数の環原子を有し、いずれもO、NもしくはSから特定されまたは選択される1個以上のヘテロ原子を含んでいる、芳香族の単環を指す。本明細書において用いる「ヘテロアリール」基の例としては、フラニル、チオフェニル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリルが挙げられる。
【００２２】
本明細書において用いる「アルコキシ」という用語は、Raが上記のアルキルである基RaO-を指し、「C1-C3アルコキシ」および「C1-C6アルコキシ」という用語は、アルキル部分が少なくとも1個、かつ多くとも3個または6個の炭素原子を含む、本明細書において定義されるアルコキシ基を指す。本発明において有用な「C1-C3アルコキシ」基および「C1-C6アルコキシ」基の例としては、メトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、イソプロポキシ、n-ブトキシ、およびt-ブトキシが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００２３】
本明細書において用いる「ハロアルコキシ」という用語は、Raが上記のハロアルキルである基RaO-を指し、「C1-C6ハロアルコキシ」という用語は、ハロアルキル部分が少なくとも1個、かつ多くとも6個の炭素原子を含む、本明細書で定義されるハロアルコキシ基を指す。本発明において有用なC1-C6ハロアルコキシ基の例としてはトリフルオロメトキシが挙げられるが、これに限定されるものではない。
【００２４】
1つの実施形態において、R3とR4はいずれもHを表す。
【００２５】
1つの実施形態において、R1はピリジニルである。別の実施形態において、R1はハロゲンで置換されているピリジニルである。1つの実施形態において、R1はフルオロで置換されているピリジニルである。
【００２６】
1つの実施形態において、R2は、場合によりハロゲン、CN、CF3、OCH3、NO2で置換されていてもよいフェニル、または場合によりチオフェンで置換されていてもよいチオフェニルである。
【００２７】
本発明は、上記の実施形態の全ての組み合わせを含むことが理解されるべきである。
【００２８】
本発明の化合物の具体例として、下記の化合物またはその塩、溶媒和物、もしくは生理学的機能性誘導体が挙げられる。
【表１】
2008516975.tif 000004
2008516975.tif 000005
2008516975.tif 000006
【００２９】
本明細書において用いる「本発明の化合物」とは、式(I)の化合物またはその塩、溶媒和物、もしくは生理学的機能性誘導体を意味する。
【００３０】
本明細書において用いる「場合により」という用語は、その後に続いて記載される事象が生じても生じなくてもよいこと、ならびに生じる事象および生じない事象の両方を意味する。
【００３１】
本明細書において用いる「生理学的機能性誘導体」という用語は、本発明の化合物の任意の製薬上許容される誘導体、例えば哺乳動物に投与する際に本発明の化合物またはその活性代謝産物を（直接的または間接的に）供与することができるエステルまたはアミドを指す。このような誘導体は、過度の実験を要することなく、また生理学的機能性誘導体の教示の範囲で参照により本明細書に組み込まれるBurger’s Medicinal Chemistry And Drug Discovery, 5th Edition, Vol 1: Principles and Practiceの教示を参考にして、当業者に明らかである。
【００３２】
本発明の化合物の溶媒和物は、本発明の範囲に包含される。本明細書において用いる「溶媒和物」という用語は、1つの溶質(本発明においては、式(I)の化合物またはその塩もしくは生理学的機能性誘導体)と1つの溶媒により形成される、可変性化学量論の複合体を指す。本発明の目的のため、このような溶媒は、溶質の生物学的活性を妨げてはならない。好適な溶媒の例として、水、メタノール、エタノールおよび酢酸が挙げられるが、これらに限定されるものではない。好ましくは、使用する溶媒は製薬上許容される溶媒である。製薬上許容される好適な溶媒の例としては、限定するものではないが、水、エタノールおよび酢酸が挙げられる。使用する溶媒で最も好ましいのは水である。
【００３３】
本明細書において用いる「置換されている」という用語は、指定した置換基（1つまたは複数）による置換を指し、他に記載がない限り、多様な程度の置換が許容される。
【００３４】
本発明の化合物の塩もまた、本発明の範囲に包含される。典型的には、本発明の塩は、製薬上許容される塩である。「製薬上許容される塩」という用語に包含される塩は、本発明の化合物の無毒の塩を指す。本発明の化合物の塩は、式(I)の化合物中の置換基上の窒素から誘導された酸付加塩を含んでもよい。代表的な塩としては、以下の塩：酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、酸性酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物、エデト酸カルシウム、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシラート、エストラート、エシラート、フマル酸塩、グルセプテート、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニレート、ヘキシルレゾルシネート、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトアート、ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、臭化メチル、硝酸メチル、硫酸メチル、一カリウムマレイン酸塩、ムケート(mucate)、ナプシラート、硝酸塩、N-メチルグルカミン、シュウ酸塩、パモ酸塩(エンボナート)、パルミテート、パントテン酸塩、リン酸塩/二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、カリウム、サリチル酸塩、ナトリウム、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクラート、トシラート、トリエチオダイド、トリメチルアンモニウムおよび吉草酸塩、が挙げられる。製薬上許容されない他の塩は、本発明の化合物の製造に役立てることが可能であり、これらは本発明の他の態様を形成する。
【００３５】
式(I)の化合物がキナーゼ活性を阻害する能力は、例えば、以下のアッセイにおいてROCK1キナーゼを阻害する活性により示すことができる。従って、式(I)の化合物は、不適切なチロシンおよび/またはセリン/トレオニンキナーゼ活性、特にROCKキナーゼ（好適にはROCK1キナーゼ）に関連する病気の治療において治療効果を有する可能性がある。本発明の化合物が有益な治療効果を有する可能性がある病状の例としては、循環器疾患（例えば、高血圧症、慢性うっ血性心不全、心臓肥大、再狭窄、慢性腎不全およびアテローム性動脈硬化）が挙げられる。さらに、その筋弛緩特性により、ぜんそく、男性の勃起不全、女性の性機能不全および過活動膀胱症候群にも好適である。ROCK阻害剤は、抗炎症特性を有することが示されている。従って、神経炎症性疾患（例えば、脳梗塞、多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症および炎症性痛覚）ならびに他の炎症性疾患（例えば、関節リウマチ、過敏性腸症候群、炎症性腸症候群）の治療として用いることができる。さらに、ROCK阻害剤の神経突起伸長誘導効果により、該阻害剤は、CNS(中枢神経系)内の病変の全域で新たな軸索成長と軸索の再配線を誘導する、神経細胞再生のための有用な薬となり得る。従ってROCK阻害剤は、CNS疾患、例えば脊髄損傷、急性神経細胞損傷(脳梗塞、外傷性脳損傷)、パーキンソン病、アルツハイマー病、および他の神経変性疾患の再生（回復）治療に役立つ可能性がある。ROCK阻害剤は細胞増殖と細胞移動を減少させるため、癌および腫瘍転移の治療に役立ち得る。さらに、ROCK阻害剤がウイルス侵入の際の細胞骨格再構成を抑制することを示唆する証拠があり、このため該阻害剤は、抗ウイルス用途および抗菌用途において薬効を有する可能性がある。ROCK阻害剤は、インスリン抵抗性および糖尿病の治療にも役立つ。
【００３６】
本明細書において治療とは、規定の症状の予防ならびに治療に及ぶことを当業者は理解するだろう。
【００３７】
上記のとおり、式(I)の化合物は、医学または獣医学において有用であり、特に、不適切なチロシンおよび/またはセリン/トレオニンキナーゼ活性、とりわけROCK活性に関連する疾患の治療において有用である。
【００３８】
従って、本発明の他の態様として、医学または獣医学において、特に不適切なチロシンおよび/またはセリン/トレオニンキナーゼ活性、とりわけROCK活性を伴う患者の治療において用いるための、式(I)の化合物またはその製薬上許容される塩もしくは溶媒和物を提供する。
【００３９】
本発明の別の態様により、不適切なチロシンおよび/またはセリン/トレオニンキナーゼ活性、とりわけROCK活性を伴う患者の治療用医薬の製造のための、式(I)の化合物またはその製薬上許容される塩もしくは溶媒和物の使用を提供する。
【００４０】
他のまたは別の態様において、不適切なチロシンおよび/またはセリン/トレオニンキナーゼ活性、とりわけROCK活性を伴うヒト被験体または動物被験体の治療方法を提供し、この方法は、該ヒトまたは動物被験体に、式(I)の化合物またはその製薬上許容される塩もしくは溶媒和物を投与することを含んでなる。
【００４１】
治療において使用するため、治療上有効な量の式(I)の化合物、ならびにその塩、溶媒和物および生理学的機能性誘導体は、未加工化学薬品として投与してもよいが、その一方、この活性成分を医薬組成物として提供することができる。従って本発明は、治療上有効な量の式(I)の化合物およびその塩、溶媒和物および生理学的機能性誘導体、ならびに1つ以上の製薬上許容される担体、希釈剤、または賦形剤を含む医薬組成物をさらに提供する。式(I)の化合物ならびにその塩、溶媒和物および生理学的機能性誘導体は上記のとおりである。担体、希釈剤または賦形剤は、製剤の他の成分と適合し、そのレシピエントに対して有害ではないという意味において許容できるものでなければならない。本発明の別の態様により、式(I)の化合物、またはその塩、溶媒和物および生理学的機能性誘導体を1つ以上の製薬上許容される担体、希釈剤、または賦形剤と混合することを含んでなる、医薬組成物の製造方法も提供する。この医薬組成物は、本明細書に記載されるあらゆる症状の治療および/または予防において使用することができる。
【００４２】
医薬組成物は、1単位用量につき所定量の活性成分を含有する単位用量形態で提供することができる。このような単位には、治療状態、投与経路ならびに患者の年齢、体重および症状に応じて、例えば、0.5mg〜1g、好ましくは1mg〜700mg、さらに好ましくは5mg〜100mgの式(I)の化合物が含まれ得る。あるいは、医薬組成物は、1単位用量につき所定量の活性成分を含有する単位用量形態で提供することができる。好ましい単位用量の組成物は、上記のとおり、活性成分の1日用量(daily dose)または分割用量(sub-dose)、またはその適当な分割量を含有する組成物であり、さらに、このような医薬組成物は、製薬業界において周知な方法のいずれかにより製造することができる。
【００４３】
医薬組成物は、任意の適当な経路、例えば経口(口腔もしくは舌下を含む)、直腸、鼻腔、局所(口腔、舌下もしくは経皮を含む)、膣内または非経口(皮下、筋肉内、静脈内もしくは皮内を含む)の経路による投与に適合させることができる。このような組成物は、製薬業界において公知の任意の方法により、例えば上記活性成分を担体または賦形剤と結合させることによって製造することができる。
【００４４】
経口投与に適した医薬組成物は、個別の単位として、例えば、カプセル剤または錠剤；粉剤または顆粒剤；水性もしくは非水性の液体の液剤または懸濁剤；可食のフォーム剤またはホイップ剤；あるいは水中油型乳濁剤または油中水型乳濁剤として提供することができる。
【００４５】
例えば、経口投与のための錠剤またはカプセル剤の形態において、活性薬物成分は、経口用、無毒の製薬上許容される不活性担体、例えばエタノール、グリセロール、水等と組み合わせることができる。粉剤は、化合物を好適な粒径まで粉砕し、同様に粉砕した医薬担体、例えばデンプンまたはマンニトールのような食用炭水化物と混合することによって製造される。香料、保存料、分散剤および着色剤を含めることもできる。
【００４６】
カプセル剤は、上記のとおり粉剤の混合物を調製し、これをゼラチン被包成形物に充填することにより作成する。充填操作の前に、流動促進剤および滑沢剤、例えばコロイド状シリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたは固形ポリエチレングリコールを、上記の粉剤混合物に加えることができる。該カプセル剤が服用される際の医薬の有効性を高めるために、崩壊剤または可溶化剤、例えばアガー-アガー、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウムを加えることもできる。
【００４７】
さらに、望ましい場合または必要な場合、好適な結合剤、滑沢剤、崩壊剤および着色剤を混合物に組み込むこともできる。好適な結合剤としては、デンプン、ゼラチン、天然糖（例えばグルコースまたはβ-ラクトース、コーンシロップ）、天然ガムおよび合成ガム（例えばアカシア、トラガカントまたはアルギン酸ナトリウム）、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックス等が挙げられる。これらの剤形で用いられる滑沢剤としては、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム等が挙げられる。崩壊剤としては、限定するものではないが、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガム等が挙げられる。錠剤は、例えば、粉剤混合物を調製し、顆粒化またはスラッグ化し、滑沢剤と崩壊剤を添加し、圧縮錠剤化することによって製剤化する。粉剤混合物は、好適には粉砕した化合物を希釈剤または上記の基剤と混合し、場合により、結合剤（カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、またはポリビニルピロリドン）、遅延剤溶液（例えばパラフィン）、再吸収促進剤(例えば第4級塩）および/または吸収剤（例えばベントナイト、カオリンまたはリン酸二カルシウムと混合することにより調製する。粉剤混合物は、結合剤（例えば、シロップ、デンプン糊、アラビアゴム粘液、またはセルロース系またはポリマー系物質料の溶液）で湿らせて篩にかけることにより顆粒化することができる。顆粒化する代わりに粉剤混合物を錠剤機にかけることが可能であり、砕かれて顆粒化した、形成不完全なスラグが得られる。この顆粒は、錠剤成形用ダイスへの粘着を防ぐため、ステアリン酸、ステアリン酸塩の塩、タルクまたは鉱物油の添加によって潤滑化することができる。その後、潤滑化した混合物を圧縮錠剤化する。本発明の混合物は、フリーフローの不活性担体と組み合わせて、顆粒化またはスラグ化の段階を経ずに直接圧縮錠剤化することもできる。セラックのシーリングコート、糖またはポリマー系物質のコーティングおよびワックスのポリッシュコーティングからなる透明または不透明の保護コーティングを施すことができる。異なる単位用量を識別するため、これらのコーティングに染料を加えることができる。
【００４８】
液剤、シロップ剤およびエリキシル剤などの経口液体は、所定の量に一定量の上記化合物が含有されるように単位用量形態で調製することができる。シロップ剤は、適当に味付けした水溶液に上記化合物を溶解させることにより調製することが可能であり、一方エリキシル剤は無毒のアルコール溶媒の使用によって調製する。懸濁剤は、無毒の溶媒に上記化合物を分散させることにより製剤化することができる。可溶化剤および乳化剤（例えばエトキシル化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテル）、保存料、香味用添加物（例えばペパーミント油もしくは天然甘味料またはサッカリンもしくは他の人工甘味料）等も加えることができる。
【００４９】
必要に応じて、単位用量の経口投与用組成物はマイクロカプセル化することができる。この製剤は、放出を長引かせまたは持続させるため、例えば粒子状物質をポリマー、ワックス等でコーティングし、あるいはポリマー、ワックス等に組み込むことによって調製することもできる。
【００５０】
式(I)の化合物、ならびにその塩、溶媒和物および生理学的機能性誘導体は、小型単層ベシクル、大型単層ベシクルおよび多層ベシクルなどのリポソーム送達系の形態で投与することもできる。リポソームは、コレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリンなどの多様なリン脂質から形成することができる。
【００５１】
式(I)の化合物ならびにその塩、溶媒和物および生理学的機能性誘導体は、モノクローナル抗体を、化合物分子を結合させた個別の担体として利用することにより送達してもよい。化合物は、標的化可能な薬物担体としての可溶性ポリマーと結合させてもよい。このようなポリマーは、ポリビニルピロリドン、ピラン共重合体、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミド-フェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノール、またはパルミトイル残基で置換されているポリエチレンオキシドポリリジンを含み得る。さらにこの化合物は、薬の制御放出の達成に有用なある種の生分解性ポリマー（例えば、ポリ乳酸、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレートおよび架橋ヒドロゲルまたはヒドロゲルの両親媒性ブロック共重合体）に結合させてもよい。
【００５２】
経皮投与に適した医薬組成物は、レシピエントの表皮に長期間密着させたままにすることを意図した個別のパッチとして提供することができる。例えば、活性成分は、Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986)に一般的に記載されているとおり、このパッチからイオントフォレシスにより送達することができる。
【００５３】
局所投与に適した医薬組成物は、軟膏、クリーム剤、懸濁剤、ローション剤、粉剤、液剤、ペースト剤、ゲル剤、スプレー剤、エアロゾル剤またはオイル剤として製剤化することができる。
【００５４】
目または他の外部組織、例えば口および皮膚の治療のため、この組成物は、好ましくは局所用軟膏または局所用クリーム剤として適用される。軟膏として製剤化する場合、その活性成分をパラフィン軟膏基剤または水混和性軟膏基剤のいずれかと共に用いてよい。あるいは、この活性成分は、水中油型クリーム剤基剤または油中水型クリーム剤基剤を用いてクリーム剤として製剤化することができる。
【００５５】
目への局所投与に適した医薬組成物には点眼薬があり、ここで活性成分は好適な担体、特に水性溶媒に溶解または懸濁される。
【００５６】
口への局所投与に適した医薬組成物には、ロゼンジ、トローチ、およびうがい薬がある。
【００５７】
直腸投与に適した医薬組成物は、坐薬または浣腸剤として提供することができる。
【００５８】
経鼻投与に適した固形担体の医薬組成物としては、例えば20〜500ミクロンの範囲の粒径を有する粗粉剤があり、これらは嗅ぎ薬を吸う方法で、すなわち鼻に近づけた粉剤の容器からの鼻腔を通じた急速な吸入で投与される。鼻腔用スプレーまたは点鼻薬としての投与用の、液体担体の好適な組成物としては、活性成分の水溶液または油剤が挙げられる。
【００５９】
吸入投与に適した医薬組成物としては、多様な種類の定量、加圧型のエアロゾル、噴霧器または吸入器によって生成される微粒子の粉末またはミストが挙げられる。
【００６０】
膣内投与に適した医薬組成物は、ペッサリー、タンポン、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、フォーム剤またはスプレー剤として提供することができる。
【００６１】
非経口投与に適した医薬組成物としては、酸化防止剤、緩衝剤、静菌薬および該製剤を目的のレシピエントの血液と等浸透圧とする溶質を含有し得る水性および非水系の滅菌注射液と、懸濁化剤と増粘剤を含有し得る水性および非水系の滅菌懸濁剤とが挙げられる。この組成物は、1回投与用または多回投与用容器、例えばシールしたアンプルおよびバイアルに入れてよく、使用直前に滅菌液体担体の添加のみを必要とする凍結乾燥状態として保存してもよい。滅菌粉剤、顆粒剤および錠剤から、即席の注射液および懸濁剤を調製してもよい。
【００６２】
上記の特に挙げた成分に加えて、組成物は、当該組成物の種類に関する、当技術分野の他の従来の剤を含んでよく、例えば経口投与に好適な組成物は香料を含んでよいことが理解されるべきである。
【００６３】
本発明の化合物の治療上有効な量は、多くの要因によって決まるが、これらの要因としては、例えば、ヒトまたは他の動物の年齢および体重、治療を必要とする厳密な症状およびその重篤性、製剤の性質および投与経路が挙げられ、最終的には担当の医師または獣医師の判断によるだろう。しかしながら、腫瘍性増殖、例えば結腸癌または乳癌の治療用の、式(I)の化合物の有効量は、一般的には1日当たり、レシピエント（哺乳動物）の体重1kgにつき0.1〜100 mgの範囲であり、さらに通常は1日当たり、レシピエント（哺乳動物）の体重1kgにつき1〜10 mgの範囲である。従って、体重70kgの成体の哺乳動物に対する、1日当たりの実際の有効量は通常70〜700 mgと考えられ、この量を1日1回投与してよく、あるいは、さらに通常は、1日当たりの総量が同じになるように1日当たり多数（例えば2回、3回、4回、5回または6回）の分割投与(sub-doses)をすることができる。上記化合物の塩もしくは溶媒和物、または生理学的機能性誘導体の有効量は、式(I)の化合物自体の有効量の一定割合として決定することができる。上記の他の症状の治療には、同様の投与量が適当であると考えられる。
【００６４】
本発明において用いるための式(I)の化合物は、1つ以上の他の治療薬と組み合わせて使用してよい。従って、本発明は他の態様において、式(I)の化合物と他の治療薬とを含む組合せを提供する。このような組み合わせは、治療、特に不適切なチロシンおよび/またはセリン/トレオニンキナーゼ活性、とりわけROCKキナーゼ活性に関連する疾患の治療に用いることができる。
【００６５】
上記の組み合わせは、医薬組成物の形態での使用のため便利に提供することが可能であり、このように上記の組み合わせを、好ましくは製薬上許容される担体または賦形剤と共に含む該医薬組成物は、本発明の他の態様を構成する。このような組み合わせの個々の成分は、別個のまたは併用医薬製剤として連続的にあるいは同時に投与してよい。
【００６６】
同一の組成物中に配合した場合、2つの化合物は安定し、相互にまた製剤の他の成分と適合しなければならいこと、投与用に製剤化し得ることが理解されるだろう。別個に製剤化する場合、任意の便利な剤形で、当技術分野においてこのような化合物について公知の方法で便利に提供することができる。
【００６７】
式(I)の化合物を、同じ疾患に対して活性な第2の治療薬と併用する場合、各化合物の用量は、化合物を単独で用いる場合の用量とは異なる。当業者は適切な用量を容易に理解するだろう。
【００６８】
本発明の化合物は、標準的な化学反応を含む様々な方法で作成することができる。前に定義した変数はいずれも、他に示さない限り、引き続き前に定義された意味を有する。実例として一般的合成法を以下に示し、その後本発明の具体的な化合物を実施例において調製する。
【００６９】
一般式(I)の化合物は、下記の合成スキームで一部説明するとおり、有機合成の技術分野において公知の方法によって調製することができる。以下のスキームの全てにおいて、必要な場合には、化学の一般原理に従って感受性または反応性の基に対する保護基が用いられるということが十分に理解される。保護基は、有機合成の標準的な方法によって取り扱う(T. W. Green and P. G. M. Wuts (1991) Protecting Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons)。これらの基は、化合物合成の都合のよい段階で、当業者に容易に理解できる方法で除去される。方法ならびに反応条件および実行順序の選択は、式(I)の化合物の調製と整合するべきである。
【００７０】
一般式(I)の化合物は、下記のスキームに示され、下記の実施例の欄でさらに詳述する合成順序に従って調製することができる。
【００７１】
一般式(I)の化合物は、スキーム1に示すとおり、4-ブロモ-1-アミノ-2-ケトアリール誘導体から調製することができる。アミノ基のアシル化は、Fmoc保護したアミノ酸塩化物誘導体の存在下で加熱することにより達成し得る。得られる生成物は、適当な溶媒中でピペリジンを用いて脱保護することができる。アルコール溶媒中でベンゾジアゼピン環へと環化した後、水素化アルミニウムリチウムを用いてアミドカルボニルを還元する。この中間体は、パラジウム媒介カップリングにおいてジヒドロベンゾジアゼピン生成物を供与するために使用することが可能であり、あるいはイミン基を除去するために水素化ホウ素ナトリウムを用いてさらに還元することもできる。水素化ホウ素ナトリウム生成物のパラジウム媒介カップリングは、テトラヒドロベンゾジアゼピン生成物を生じさせる。
【００７２】
スキーム1
【化３】
2008516975.tif 000007
【００７３】
カルボニル基を還元的に除去する必要性をなくす合成スキームも開発されている。これらの経路は、共通の2-フルオロ-3-ケトアリール中間体を経る。1つのアプローチは、スキーム2に示される直接メタル化から成る。このようにして、リチウムジイソプロピルアミドを用いて4-フルオロヨードベンゼンを脱プロトン化し、その後、アルデヒドを加えてアルコールを得る。Dess-Martinペルヨージナンを用いる酸化によりベンゾフェノン誘導体が得られ、この誘導体はエチレンジアミンを用いて環化し、ジヒドロベンゾジアゼピンを得る。パラジウム媒介カップリングを利用してR2置換基を導入し、この生成物は、イミン基を除去するために水素化ホウ素ナトリウムを用いてさらに還元することができる。
【００７４】
スキーム2
【化４】
2008516975.tif 000008
【００７５】
補足的な合成順序をスキーム3に示す。この経路は、アリールアニオン等価物を市販の2-フルオロ-5-ブロモベンズアルデヒドに付加することを含む。得られるアルコールはDess-Martinペルヨージナンを用いて酸化し、対応するケトンとする。スキーム2と同様に、エチレンジアミンを用いて環化した後パラジウム媒介カップリングでジヒドロベンゾジアゼピン生成物を供与し、この生成物は水素化ホウ素ナトリウムを用いてさらに還元し、テトラヒドロベンゾジアゼピン誘導体を生成することができる。
【００７６】
スキーム3
【化５】
2008516975.tif 000009
【００７７】
2-アミノ-4-ピリミジニル置換基をジヒドロベンゾジアゼピン環系の7位に導入することを目的として、スキーム4に示す合成順序を用いることができる。アルコールをStille条件下で1-エトキシビニル-トリ-n-ブチルスタンナンと結合させる。得られるメチルケトンはN,N-ジメチルホルムアミドジメチルアセタール中で加熱還流させ、エナミンを得る。グアニジンを用いて環化し、所望の2-アミノ-4-ピリミジル置換基を得る。Dess-Martinペルヨージナンでアルコールを酸化した後、エチレンジアミンを用いて環化し、最終生成物を得る。
【００７８】
スキーム4
【化６】
2008516975.tif 000010
【００７９】
R2が非置換のフェニル環である一般式(I)の化合物は、スキーム5に示すように調製することができる。2-アミノベンゾフェノンから出発し、エチレンジアミンを含むエタノール中で加熱して、ジヒドロベンゾジアゼピンを作成することができる。この化合物を臭素化し、主要生成物として7-ブロモジヒドロベンゾジアゼピンを得る。その後、金属媒介カップリングを行って最終化合物を得る。
【００８０】
スキーム5
【化７】
2008516975.tif 000011
【００８１】
例示のためにのみ、本発明の特定の実施形態をここに説明する。例示する化合物について与えられた物理的データは、これらの化合物の規定の構造と一致する。
【実施例】
【００８２】
本明細書において用いられる場合、これらの方法、スキームおよび実施例において用いられる記号および表記法は、現代の科学文献、例えば、Journal of the American Chemical SocietyまたはJournal of Biological Chemistryにおいて用いられているものと一致する。標準的な1文字または3文字の略語は通常、アミノ酸残基を指定するために用いられ、他に示さない限りL体であると考えられる。他に示さない限り、出発物質は全て民間の供給業者から入手し、さらなる精製を行うことなく用いた。具体的には、実施例および明細書を通して下記の略語を用いることができる：
g (グラム)；                           mg (ミリグラム)；
L (リットル)；                         mL (ミリリットル)；
μL (マイクロリットル)；               psi (ポンド/平方インチ)；
M (モル)；                             mM (ミリモル)；
i. v. (静脈)；                         Hz (ヘルツ)；
MHz (メガヘルツ)；                     mol (モル)；
mmol (ミリモル)；                      rt (室温)；
min (分)；                             h (時間)；
mp (融点)；                            TLC (薄層クロマトグラフィー)；
Tr (保持時間)；                        RP (逆相)；
MeOH (メタノール)；                    i-PrOH (イソプロパノール)；
TEA (トリエチルアミン)；               TFA (トリフルオロ酢酸)；
TFAA (トリフルオロ無水酢酸)；          THF (テトラヒドロフラン)；
DMSO (ジメチルスルホキシド)；          AcOEt (酢酸エチル)；
DME (1,2-ジメトキシエタン)；           DCM (ジクロロメタン)；
DCE (ジクロロエタン)；
DMF (N,N-ジメチルホルムアミド)；
DMPU (N,N'-ジメチルプロピレンウレア)；
CDI (1,1'-カルボニルジイミダゾール)；
IBCF (クロロギ酸イソブチル)；
HOAc (酢酸)；
HOSu (N-ヒドロキシスクシンイミド)；
HOBT (1-ヒドロキシベンゾトリアゾール)；
mCPBA (メタ-クロロ過安息香酸)；
EDC (1-[(3-ジメチルアミノ) プロピル]-3-エチルカルボジイミドヒドロクロライド)；
BOC (tert-ブチルオキシカルボニル)；
FMOC (9-フルオレニルメトキシカルボニル)；
DCC (ジシクロヘキシルカルボジイミド)；
CBZ (ベンジルオキシカルボニル)；
Ac (アセチル)；
atm (気圧)；
TMSE (2-(トリメチルシリル)エチル)；
TMS (トリメチルシリル)；
TIPS (トリイソプロピルシリル)；
TBS (t-ブチルジメチルシリル)；
DMAP (4-ジメチルアミノピリジン)；
BSA (ウシ血清アルブミン)
ATP (アデノシン三リン酸)；
HRP (ホースラディッシュペルオキシダーゼ)；
DMEM (ダルベッコ改変イーグル培地)；
HPLC (高圧液体クロマトグラフィー)；
BOP (ビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル)ホスフィン酸クロリド)；
TBAF (テトラ-n-ブチルアンモニウムフルオライド)； 
HBTU(O-ベンゾトリアゾール-1-イル-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート)；
HEPES (4-(2-ヒドロキシエチル)-1-ピペラジンエタンスルホン酸)；
DPPA  (ジフェニルホスホリルアジド)；
fHNO3 (発煙硝酸)；および
EDTA (エチレンジアミンテトラ酢酸)。
【００８３】
エーテルは全てジエチルエーテルを指し、塩水は全て飽和NaCl水溶液を指す。他に示さない限り、温度は全て℃(摂氏)で表す。反応は全て、他に示さない限り、室温、不活性雰囲気下で行う。
【００８４】
1H NMRスペクトルは、Varian VXR-300、Varian Unity-300、Varian Unity-400 instrument、Brucker AVANCE-400、またはGeneral Electric QE-300上に記録した。化学シフトは、100万分の1(ppm、δ単位)で表す。結合定数は、ヘルツ(Hz)単位で表す。分裂パターンは見かけ上の多重度を表し、s(一重項)、d(二重項)、t(三重項)、q(四重項)、quint(五重項)、m(多重項)、br(広域)と表される。
【００８５】
HPLCは、下記の条件に従ってGilson HPLCまたはShimadzu HPLCシステム上に記録した。カラム：5μm Phenomenex Luna C-18を充填した50 X 4.6mm (内径)のステンレス製カラム；流速：2.0 mL/分；移動相：A相 = 50mM 酢酸アンモニウム(pH 7.4)、B相 = アセトニトリル、0〜0.5分 (A: 100％、B: 0％)、0.5〜3.0分(A:100〜0％、B:0〜100％)、3.0〜3.5分(A: 0％、B: 100％)、3.5〜3.7分(A: 0〜100％、B: 100〜0％)、3.7〜4.5分(A: 100％、B: 0％)；検出: UV 254nm；注入量: 3μL。
【００８６】
低分解能質量スペクトル(MS)は、JOEL JMS-AX505HA、JOEL SX-102、またはSCIEX-APIiii spectrometer上に記録し、LC-MSは、micromass 2MDとWaters 2690上に記録し、高分解能MSは、JOEL SX-102A spectrometerを使用して得た。質量スペクトルは全て、エレクトロスプレーイオン化(ESI)、化学イオン化(CI)、電子衝撃(EI)下でとり、または高速原子衝撃(FAB)法によりとった。赤外線(IR)スペクトルは、1mm NaClセルを用いてNicolet 510 FT-IR spectrometer上で得た。反応の大部分は、薄層クロマトグラフィーにより0.25 mmのE. Merck シリカゲルプレート(60F-254)上でモニターし、UV光、5％エタノール性のリンモリブデン酸またはp-アニスアルデヒド溶液を用いて可視化した。シリカゲル(230-400 mesh, Merck)上でフラッシュカラムクロマトグラフィーを行った。
【００８７】
実施例1：
5-(2-フルオロフェニル)-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化８】
2008516975.tif 000012
【００８８】
実施例1、ステップ1：
9H-フルオレン-9-イルメチル[2-({4-ブロモ-2-[(2-フルオロフェニル)カルボニル]フェニル}アミノ)-2-オキソエチル]カルバメート
【化９】
2008516975.tif 000013
【００８９】
丸底フラスコに、(2-アミノ-5-ブロモフェニル)(2-フルオロフェニル)メタノン(1.45g)、9H-フルオレン-9-イルメチル(2-クロロ-2-オキソエチル)カルバメート(1.6g)とクロロホルム(150mL)を入れた。混合物は、2時間加熱還流した後濃縮乾燥させた。飽和重炭酸ナトリウム溶液と酢酸エチルとの混合物中に残渣をとった。得られた固体をフィルター上で回収し、最初は水で、その後ジエチルエーテルで洗浄した。完全に空気乾燥させ、9H-フルオレン-9-イルメチル[2-({4-ブロモ-2-[(2-フルオロフェニル)カルボニル]フェニル}アミノ)-2-オキソエチル]カルバメート(2g)を淡黄色の粉末として得た。H1 NMR (d6-dmso)：10.8 (br s, 1H)、7.95 (d, 1H)、7.75-7.90 (m, 4H)、7.45-7.70 (m, 5H)、7.20-7.42 (m, 6H)、4.30 (d, 2H)、4.20 (t, 1H)、3.65 (d, 2H)。
【００９０】
実施例1、ステップ2：
N1-{4-ブロモ-2-[(2-フルオロフェニル)カルボニル]フェニル}グリシンアミド
【化１０】
2008516975.tif 000014
【００９１】
丸底フラスコに、9H-フルオレン-9-イルメチル[2-({4-ブロモ-2-[(2-フルオロフェニル)カルボニル]フェニル}アミノ)-2-オキソエチル]カルバメート(580mg)とテトラヒドロフラン(15mL)を入れた。混合物をピペリジン(1.5mL)で処理した後室温で1.5時間攪拌した。濃縮して油状物とした後、残渣をジクロロメタン中にとり、シリカゲルクロマトグラフィーで精製してN1-{4-ブロモ-2-[(2-フルオロフェニル)カルボニル]フェニル}グリシンアミド(135mg)を白色の粉末として得た。H1 NMR(d6-dmso)：8.42 (d, 1H)、7.82 (dd, 1H)、7.65-7.72 (m, 1H)、7.6 (dt, 1H)、7.52 (m, 1H)、7.33-7.40 (m, 2H)、4.0-6.4 (br s, 2H)、3.20 (s, 2H)。
【００９２】
実施例1、ステップ3：
7-ブロモ-5-(2-フルオロフェニル)-1,3-ジヒドロ-2H-1,4-ベンゾジアゼピン-2-オン
【化１１】
2008516975.tif 000015
【００９３】
丸底フラスコに、N1-{4-ブロモ-2-[(2-フルオロフェニル)カルボニル]-フェニル}グリシンアミド(135mg)、エタノール(3mL)と酢酸(0.5mL)を入れた。混合物は、15分間加熱還流した後で冷却して濃縮乾燥させた。残渣は飽和重炭酸ナトリウム溶液で処理し、10分間攪拌した後酢酸エチルで抽出した。混合した有機物は、硫酸マグネシウムで乾燥させた後濾過し、濃縮乾燥させた。残渣をジエチルエーテルから再濃縮し、7-ブロモ-5-(2-フルオロフェニル)-1,3-ジヒドロ-2H-1,4-ベンゾジアゼピン-2-オン(100mg)を淡黄色の泡状物として得た。H1 NMR (d6-dmso)：10.74 (br s, 1H)、7.71 (dd, 1H)、7.52-7.59 (m, 2H)、7.15-7.34 (m, 4H)、4.20 (s, 2H)。
【００９４】
実施例1、ステップ4:
7-ブロモ-5-(2-フルオロフェニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化１２】
2008516975.tif 000016
【００９５】
丸底フラスコに、7-ブロモ-5-(2-フルオロフェニル)-1,3-ジヒドロ-2H-1,4-ベンゾジアゼピン-2-オン(500mg)とテトラヒドロフラン(20 mL)を入れた。この混合物に、水素化アルミニウムリチウム(テトラヒドロフラン中の1.8mLの1M溶液)を加えた。反応物は、室温で一晩攪拌した後、水と10％水酸化ナトリウムでクエンチした。クエンチされた混合物はセライト（Celite）を通して濾過し、このフィルターは酢酸エチルで洗浄した。濾液は硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して油状物とした。シリカゲル精製により、7-ブロモ-5-(2-フルオロフェニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン(250mg)を黄色の粉末として得た。H1 NMR (d6-dmso)：7.43-7.50 (m, 1H)、7.40 (dt, 1H)、7.18-7.28 (m, 3H)、6.75-6.81 (m, 2H)、6.71 (d, 1H)、3.95 (m, 2H)、3.49 (m, 2H)。Mass (ES+) =  319.1 (100％)。
【００９６】
実施例1、ステップ5：
5-(2-フルオロフェニル)-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化１３】
2008516975.tif 000017
【００９７】
5mLマイクロ波管に、7-ブロモ-5-(2-フルオロフェニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン(85mg)、4-ピリジルボロン酸(100mg)、ジクロロビス(トリフェニル-ホスフィン)パラジウム(II)(20mg)、ジメチルホルムアミド(3.5mL)と飽和炭酸ナトリウム溶液(0.5mL)を入れた。反応物は、マイクロ波照射を使用し、360秒間かけて150℃まで加熱した。反応物を濃縮乾燥させ、残渣を水にとり、酢酸エチルで抽出した。有機抽出物は混合して硫酸マグネシウムで乾燥させた。乾燥剤は濾過し、濾液を濃縮して油状物とした。シリカゲル精製により、表題の化合物(5-(2-フルオロフェニル)-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン、35mg)をオフホワイトの結晶性固体として得た。H1 NMR (d6-dmso)：8.40 (d, 2H)、7.57 (dd, 1H)、7.44 (t, 2H)、7.25 (m, 3H)、7.18 (m, 1H)、7.12 (m, 1H)、6.99 (br t, 1H)、6.85 (d, 1H)、3.98 (m, 2H)、3.54 (m, 2H)。Mass (ES+) =  318.2 (100％)。
【００９８】
実施例2：
5-(2-フルオロフェニル)-7-(4-ピリジニル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化１４】
2008516975.tif 000018
【００９９】
実施例2、ステップ1：
7-ブロモ-5-(2-フルオロフェニル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化１５】
2008516975.tif 000019
【０１００】
丸底フラスコに、7-ブロモ-5-(2-フルオロフェニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン(47mg)、メタノール(5mL)と酢酸(1mL)を入れた。得られた混合物は、室温で攪拌しながらほんの一部を水素化ホウ素ナトリウムで処理した。水素化ホウ素ナトリウムの添加は、出発物質が消費されるまで継続した。その後反応物を濃縮乾燥させ、飽和重炭酸ナトリウム溶液中にとった。水性混合物を10分間攪拌した後酢酸エチルで抽出した。混合有機抽出物は、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して油状物とした。シリカゲル精製により、7-ブロモ-5-(2-フルオロフェニル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン(30mg)を無色の油状物として得た。H1 NMR(d6-dmso)：7.47 (t, 1H)、7.34 (q, 1H)、7.10-7.25 (m, 3H)、6.88 (d, 1H)、6.40 (s, 1H)、5.66 (d, 1H)、5.04 (br s, 1H)、3.20 (m, 1H)、2.95 (m, 1H)、2.76 (m, 2H)、2.60 (br s, 1H)。
【０１０１】
実施例2、ステップ2：
5-(2-フルオロフェニル)-7-(4-ピリジニル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化１６】
2008516975.tif 000020
【０１０２】
5mLマイクロ波管に、得られた7-ブロモ-5-(2-フルオロフェニル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン(25mg)、4-ピリジルボロン酸(50mg)、ジクロロビス(トリフェニル-ホスフィン)パラジウム(II)(10mg)、炭酸カリウム(50mg)、ジメチルホルムアミド(3.5mL)と水(0.5mL)を入れた。反応物は、マイクロ波照射を使用し、360秒間かけて160℃まで加熱した。反応物は濃縮乾燥させ、残渣を水にとり、酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を混合し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。乾燥剤は濾過し、濾液を濃縮して油状物とした。シリカゲル精製により、表題の化合物5-(2-フルオロフェニル)-7-(4-ピリジニル)-2,3,4,5-テトラヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン(10mg)を白色の粉末として得た。H1 NMR (d6-dmso)：8.42 (d, 2H)、7.46 (m, 2H)、7.30 (m, 3H)、7.18 (m, 2H)、7.02 (d, 1H)、6.83 (s, 1H)、5.85 (br s, 1H)、5.22 (br s, 1H)、3.18-3.3 (m, 1H)、2.78-2.96 (m, 3H)、2.64 (br s, 1H)。Mass (ES+) = 320.2 (100％)。
【０１０３】
実施例3：
5-(3-ニトロフェニル)-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化１７】
2008516975.tif 000021
【０１０４】
実施例3、ステップ1：
(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)(3-ニトロフェニル)メタノン
【化１８】
2008516975.tif 000022
【０１０５】
丸底フラスコにテトラヒドロフラン(THF)を入れ、窒素雰囲気下で-78℃まで冷却した。THF/ヘプタン中の、12.5mLの2M LDA溶液をこれに加えた。得られた溶液を4-フルオロヨードベンゼン(5.55g)で処理し、1.5時間攪拌した。得られたアニオンは、3-ニトロベンズアルデヒド(3.47g)でクエンチングすると黒色の混合物を生じ、これを-78℃で15分間攪拌した後で0℃まで温めた。反応物を水でクエンチし、ジエチルエーテルで希釈した。有機層を回収し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。乾燥塩は濾過により除去し、濾液を濃縮して油状物とした。残渣はジクロロメタン中で溶解させ、Dess-Martinペルヨージナン(10.6g)を用いて室温で処理した。反応混合物は、30分間攪拌した後で直接シリカゲルパッド上に供した。このパッドをジクロロメタンで溶出し、所望の画分を混合して濃縮乾燥させた。残渣はジエチルエーテルを用いて粉末化し、固体をフィルター上で回収して(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)(3-ニトロフェニル)メタノンを黄褐色の粉末(6.3g)として得た。H1 NMR(d6-dmso)：8.51 (dd, 1H)、8.43 (s, 1H)、8.15 (d, 1H)、8.03 (m, 1H)、7.94 (dd, 1H)、7.83 (dd, 1H)、7.25 (dd, 1H)。
【０１０６】
実施例3、ステップ2：
[2-フルオロ-5-(4-ピリジニル)フェニル](3-ニトロフェニル)メタノン
【化１９】
2008516975.tif 000023
【０１０７】
20mLマイクロ波管に、(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)(3-ニトロフェニル)メタノン(1.1g)、4-ピリジルボロン酸(730mg)、ジクロロビス(トリフェニル-ホスフィン)パラジウム(II)(420mg)、ジメトキシエタン(8mL)、エタノール(4mL)と飽和炭酸ナトリウム溶液(2mL)を入れ、マイクロ波照射を使用し、360秒間かけて110℃まで加熱した。反応物は濃縮乾燥させ、残渣を水にとり、その後酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を混合し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。乾燥塩は濾過により除去して濾液を濃縮した。残渣はシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、[2-フルオロ-5-(4-ピリジニル)フェニル](3-ニトロフェニル)メタノン(540mg)を固体として得た。H1 NMR (d6-dmso)：8.63 (d, 2H)、8.52 (dd, 1H)、8.48 (s, 1H)、8.21 (d, 1H)、8.15 (m, 1H)、8.06 (dd, 1H)、7.85 (dd, 1H)、7.74 (d, 2H)、7.58 (dd, 1H)。
【０１０８】
実施例3、ステップ3：
5-(3-ニトロフェニル)-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化２０】
2008516975.tif 000024
【０１０９】
5mLマイクロ波管に、[2-フルオロ-5-(4-ピリジニル)フェニル](3-ニトロフェニル)メタノン(100mg)、エタノールとエチレンジアミン(100mg)を入れ、マイクロ波照射を使用し、600秒間かけて180℃まで加熱した。反応物は濃縮乾燥させ、残渣を水にとり、その後ジクロロメタンで抽出した。抽出物は硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して油状物とした。シリカゲル精製の後エーテルを用いて粉末化し、5-(3-ニトロフェニル)-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン(60mg)を黄色の粉末として得た。H1 NMR (d6-dmso)：8.42 (d, 2H)、8.28 (s, 1H)、8.27 (d, 1H)、7.84 (d, 1H)、7.66 (m, 2H)、7.38 (d, 2H)、7.26 (s, 1H)、6.92 (d, 1H)、6.79 (br s, 1H)、4.00 (m, 2H)、3.60 (m, 2H)。Mass (ES+) = 345.3 (100％)。
【０１１０】
実施例4：
5-(2,2'-ビチエン-5-イル)-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化２１】
2008516975.tif 000025
【０１１１】
実施例4、ステップ1：
2,2'-ビチエン-5-イル(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)メタノン
【化２２】
2008516975.tif 000026
【０１１２】
3-ニトロベンズアルデヒドの代わりに2,2'-ビチオフェン-5-カルボアルデヒドを使用する点を除いて、実施例3、ステップ1と同じ手順を用いた。これにより2,2'-ビチエン-5-イル(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)メタノンを黄緑色の粉末として得た。H1 NMR (d6-dmso)：7.90-7.98 (m, 2H)、7.70 (d, 1H)、7.60 (d, 1H)、7.53 (d, 1H)、7.43 (d, 1H)、7.23 (dd, 1H)、7.16 (dd, 1H)。
【０１１３】
実施例4、ステップ2：
5-(2,2'-ビチエン-5-イル)-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化２３】
2008516975.tif 000027
【０１１４】
5mLマイクロ波管に、2,2'-ビチエン-5-イル(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)メタノン(230mg)、4-ピリジルボロン酸(2当量)、ジクロロビス(トリフェニル-ホスフィン)パラジウム(II)(10mol％)、DME(3mL)、エタノール(1.5mL)と飽和炭酸ナトリウム溶液(0.8mL)を入れた。混合物は、マイクロ波照射を使用し、360秒間かけて110℃まで加熱した。反応物は濃縮乾燥させ、残渣を水にとり、酢酸エチルで抽出した。有機抽出物は硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過して濃縮乾燥させた。残渣はエタノール(4mL)中に溶解させ、5mLマイクロ波管に移した。この溶液をエチレンジアミン(3mmol)で処理し、マイクロ波照射を使用して600秒間かけて180℃まで加熱した。反応物は濃縮乾燥させ、残渣をジクロロメタンにとった。シリカゲルクロマトグラフィーを用いた精製により、5-(2,2'-ビチエン-5-イル)-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン(100mg)をオレンジ色の粉末として得た。H1 NMR (d6-dmso)：8.48 (d, 2H)、7.75 (d, 1H)、7.68 (dd, 1H)、7.55 (m, 3H)、7.36 (d, 1H)、7.20 (d, 1H)、7.09 (dd, 1H)、6.98 (d, 1H)、6.89 (d, 1H)、6.44 (br t, 1H)、3.87 (m, 2H)、3.62 (m, 2H)。Mass (ES+) =  388.2 (100％)。
【０１１５】
実施例5：
7-(4-ピリジニル)-5-(3-チエニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化２４】
2008516975.tif 000028
【０１１６】
実施例5、ステップ1：
(5-ヨード-2-フルオロフェニル)(3-チエニル)メタノン
【化２５】
2008516975.tif 000029
【０１１７】
3-ニトロベンズアルデヒドの代わりに3-チオフェンカルボキシアルデヒドを使用する点を除いて、実施例3、ステップ1と同じ手順を用い、(5-ヨード-2-フルオロフェニル)(3-チエニル)メタノンを白色の結晶として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm  8.2 (m, 1H) 7.9 (ddd, J=8.7, 5.0, 2.3Hz, 1H) 7.8 (dd, J=6.5, 2.3Hz, 1H) 7.7 (dd, J=5.1, 2.7 Hz, 1H) 7.5 (dd, J=5.0, 1.2Hz, 1H) 7.2 (dd, J=9.9, 8.8 Hz, 1H)。
【０１１８】
実施例5、ステップ2：
7-(4-ピリジニル)-5-(3-チエニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化２６】
2008516975.tif 000030
【０１１９】
(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)(3-ニトロフェニル)メタノンの代わりに(5-ヨード-2-フルオロフェニル)(3-チエニル)メタノンを使用する点を除いて、実施例4、ステップ2と同じ手順を用い、7-(4-ピリジニル)-5-(3-チエニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピンを、オフホワイトの粉末として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.5 (m, 2H) 7.6 (dd, J=8.6, 2.4 Hz, 1H) 7.5 (m, 3H) 7.4 (m, 2H) 7.3 (dd, J=4.8, 1.6 Hz, 1H) 6.9 (d, J=8.6 Hz, 1H) 6.5 (s, 1H) 3.9 (d, J=4.0 Hz, 2H)  3.6 (d, J=4.0 Hz, 2H)。
【０１２０】
実施例6：
5-[3-(メチルオキシ)フェニル]-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化２７】
2008516975.tif 000031
【０１２１】
実施例6、ステップ1：
(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)[3-(メチルオキシ)フェニル]メタノン
【化２８】
2008516975.tif 000032
【０１２２】
3-ニトロベンズアルデヒドの代わりに3-メトキシベンズアルデヒドを使用する点を除いて、実施例3、ステップ1と同じ手順を用い、(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)[3-(メチルオキシ)フェニル]メタノンを得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.0 (ddd, J=8.7, 4.9, 2.4 Hz, 1H) 7.9 (dd, J=6.5, 2.2Hz, 1H) 7.5 (dd, J=9.0, 7.4 Hz, 1H) 7.3 (m, 4H) 3.9 (s, 3H)。
【０１２３】
実施例6、ステップ2：
5-[3-(メチルオキシ)フェニル]-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化２９】
2008516975.tif 000033
【０１２４】
(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)(3-ニトロフェニル)メタノンの代わりに(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)[3-(メチルオキシ)フェニル]を使用する点を除いて、実施例4、ステップ2と同じ手順を用い、5-[3-(メチルオキシ)フェニル]-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピンを得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm 8.4 (s, 2H) 7.6 (s, 1H) 7.4 (s, 2H) 7.2 (s, 2H) 7.1 (s, 1H) 7.0 (s, 1H) 6.9 (d, J=15.9 Hz, 2H) 6.6 (s, 1H) 3.9 (s, 2H) 3.7 (s, 3H) 3.6 (s, 2H)。
【０１２５】
実施例7：
7-(4-ピリジニル)-5-[2-(トリフルオロメチル)フェニル]-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化３０】
2008516975.tif 000034
【０１２６】
実施例7、ステップ1：
(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)[2-(トリフルオロメチル)フェニル]メタノン
【化３１】
2008516975.tif 000035
【０１２７】
3-ニトロベンズアルデヒドの代わりに2-トリフルオロメチルベンズアルデヒドを使用する点を除いて、実施例3、ステップ1と同じ手順を用い、(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)[2-(トリフルオロメチル)-フェニル]-メタノンを得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm  8.1 (m, 1H) 8.0 (m, 1H) 7.9 (m, 2H) 7.8 (m, 2H) 7.1 (m, 1H)。
【０１２８】
実施例7、ステップ2：
7-(4-ピリジニル)-5-[2-(トリフルオロメチル)フェニル]-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化３２】
2008516975.tif 000036
【０１２９】
(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)(3-ニトロフェニル)メタノンの代わりに(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)[2-(トリフルオロメチル)フェニル]-メタノンを使用する点を除いて、実施例4、ステップ2と同じ手順を用い、7-(4-ピリジニル)-5-[2-(トリフルオロメチル)フェニル]-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピンを得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-D) δ ppm  8.5 (m, 2H) 7.7 (d, J=8.1Hz, 1H) 7.6 (d, J=7.5 Hz, 1H) 7.5 (d, J=7.7 Hz, 1H) 7.4 (m, 2H) 7.1 (m, 2H) 7.0 (d, J=2.2Hz, 1H) 6.7 (d, J=8.6 Hz, 1H) 4.2 (m, 2H) 3.8 (s, 2H)。
【０１３０】
実施例8：
5-(2-ニトロフェニル)-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化３３】
2008516975.tif 000037
【０１３１】
実施例8、ステップ1：
(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)(2-ニトロフェニル)メタノン
【化３４】
2008516975.tif 000038
【０１３２】
3-ニトロベンズアルデヒドの代わりに2-ニトロベンズアルデヒドを使用する点を除いて、実施例3、ステップ1と同じ手順を用い、(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)[2-ニトロフェニル]メタノンを得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm  8.3 (dd, J=8.1, 1.2Hz, 1H) 8.1 (m, 1H) 7.9 (m, 2H) 7.8 (m, 1H) 7.7 (dd, J=7.7, 1.5 Hz, 1H)  7.2 (dd, J=11.1, 9.2Hz, 1H)。
【０１３３】
実施例8、ステップ2：
5-(2-ニトロフェニル)-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化３５】
2008516975.tif 000039
【０１３４】
(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)(3-ニトロフェニル)メタノンの代わりに(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)[2-ニトロフェニル]-メタノンを使用する点を除いて、実施例4、ステップ2と同じ手順を用い、5-(2-ニトロフェニル)-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピンを得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm 9.2 (s, 1H) 8.6 (s, 2H) 8.4 (s, 1H) 8.0 (s, 3H) 7.9 (s, 1H) 7.7 (s, 2H) 7.2 (s, 2H) 4.0 (s, 2H) 3.8 (s, 2H)。
【０１３５】
実施例9：
5-フェニル-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化３６】
2008516975.tif 000040
【０１３６】
実施例9、ステップ1：
(5-ブロモ-2-フルオロフェニル)(フェニル)メタノン
【化３７】
2008516975.tif 000041
【０１３７】
丸底フラスコに、2-フルオロ-5-ブロモベンズアルデヒド(1.01g)とテトラヒドロフラン(50mL)を入れ、窒素雰囲気下に置いた後-78℃まで冷却した。この溶液に臭化フェニルマグネシウムの1M溶液(5mL)を加えた。反応物は、15分間攪拌した後で冷却槽から取り出して0℃まで温めた。クエンチングは、水とジエチルエーテルの添加によって達成した。有機層を回収し、硫酸マグネシウムで乾燥させた後、濃縮して油状物とした。残渣はジクロロメタン(100mL)中に溶解させ、Dess-Martinペルヨージナン(2.12g)を用いて室温で処理した。反応混合物は、30分間攪拌した後で直接シリカゲルパッド上に供した。このパッドはジクロロメタンで溶出し、所望の画分を混合して濃縮乾燥させ、(5-ブロモ-2-フルオロフェニル)(フェニル)メタノンを黄色の油状物(0.80g)として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm  7.8 (m, 1H) 7.7 (m, 3H) 7.6 (m, 1H) 7.5 (m, 2H) 7.3 (m, 1H)。
【０１３８】
実施例9、ステップ2：
[2-フルオロ-5-(4-ピリジニル)フェニル](フェニル)メタノン
【化３８】
2008516975.tif 000042
【０１３９】
(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)(3-ニトロフェニル)メタノンの代わりに(5-ブロモ-2-フルオロフェニル)(フェニル)メタノンを使用する点を除いて、実施例3、ステップ2と同じ手順を用いた。これにより[2-フルオロ-5-(4-ピリジニル)フェニル](フェニル)メタノンを得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm  8.6 (m, 2H) 8.1 (m, 1H) 8.0 (dd, J=6.5, 2.5 Hz, 1H) 7.8 (d, J=7.9 Hz, 2H) 7.7 (m, 3H)  7.5 (m, 3H)。
【０１４０】
実施例9、ステップ3：
5-フェニル-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化３９】
2008516975.tif 000043
【０１４１】
[2-フルオロ-5-(4-ピリジニル)フェニル](3-ニトロフェニル)メタノンの代わりに[2-フルオロ-5-(4-ピリジニル)フェニル](フェニル)メタノンを使用する点を除いて、実施例3、ステップ3と同じ手順を用いた。これにより5-フェニル-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピンを得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm  8.4 (td, J=5.0, 1.6 Hz, 2H) 7.6 (dd, J=8.7, 2.3Hz, 1H) 7.4 (m, 7 H) 7.2 (m, 1H) 6.9 (d, J=8.8 Hz, 1H) 6.6 (s, 1H) 3.9 (m, 2H) 3.6 (m, 2H)。
【０１４２】
実施例10：
4-(5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-7-イル)-2-ピリミジンアミン
【化４０】
2008516975.tif 000044
【０１４３】
実施例10、ステップ1：
(5-ブロモ-2-フルオロフェニル)(フェニル)メタノール
【化４１】
2008516975.tif 000045
【０１４４】
丸底フラスコに、2-フルオロ-5-ブロモベンズアルデヒド(1.01g)とテトラヒドロフラン(50mL)を入れ、窒素雰囲気下に置いた後-78℃まで冷却した。この溶液に臭化フェニルマグネシウム(5mL)の1M溶液を加えた。反応物を15分間攪拌した後、冷却槽から取り出して0℃まで温めた。クエンチングは、水とジエチルエーテルの添加によって達成した。有機層を回収し、硫酸マグネシウムで乾燥させた後濃縮して油状物とした。シリカゲルクロマトグラフィーで精製し、(5-ブロモ-2-フルオロフェニル)(フェニル)メタノールを無色の油状物として得た。H1 NMR (d6-dmso)：7.68 (dd, 1H)、7.46 (m, 1H)、7.32 (m, 4H)、7.23 (m, 1H)、7.12 (dd, 1H)、6.16 (d, 1H)、5.89 (d, 1H)。
【０１４５】
実施例10、ステップ2：
1-{4-フルオロ-3-[ヒドロキシ(フェニル)メチル]フェニル}エタノン
【化４２】
2008516975.tif 000046
【０１４６】
5mLマイクロ波管に、(5-ブロモ-2-フルオロフェニル)-(フェニル)メタノール(1当量)、トリブチル-(1-エトキシビニル)スズ(1当量)、テトラエチルアンモニウムクロリド(3当量)、ビス（トリフェニル-ホスフィン)パラジウム(II)クロリド(10 mol％)とアセトニトリル(3.5mL)を入れた。反応物は、マイクロ波照射を使用し、1時間かけて150℃まで加熱した。反応物は濃縮乾燥させ、残渣を水にとり、酢酸エチルで抽出した。この有機物は硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過した後で濃縮し油状物とした。シリカゲルクロマトグラフィーで精製し、1-{4-フルオロ-3-[ヒドロキシ(フェニル)メチル]フェニル}エタノンを油状物として得た。H1 NMR (d6-dmso)：8.16 (dd, 1H)、7.89 (m, 1H)、7.18-7.34 (m, 6H)、6.14 (d, 1H)、5.93 (d, 1H)、2.53 (s, 3H)。
【０１４７】
実施例10、ステップ3：
(2E)-3-(ジメチルアミノ)-1-{4-フルオロ-3-[ヒドロキシ(フェニル)-メチル]フェニル}-2-プロペン-1-オン
【化４３】
2008516975.tif 000047
【０１４８】
丸底フラスコに、1-{4-フルオロ-3-[ヒドロキシ(フェニル)-メチル]フェニル}エタノン(140mg)とジメチルホルムアミドジメチルアセタール(4mL)を入れた。混合物は、18時間かけて加熱還流させた後で濃縮乾燥させた。残渣は最小量のジクロロメタンにとった後、急速に攪拌されているジエチルエーテルに加え、固体を生じさせた。固体はフィルター上に回収してジエチルエーテルで洗浄し、(2E)-3-(ジメチルアミノ)-1-{4-フルオロ-3-[ヒドロキシ(フェニル)メチル]フェニル}-2-プロペン-1-オンを白色の粉末(60mg)として得た。8.09 (dd, 1H)、7.82 (m, 1H)、7.69 (d, 1H)、7.31 (m, 4H)、7.21 (m, 1H)、7.14 (dd, 1H)、6.06 (d, 1H)、5.94 (d, 1H)、5.75 (d, 1H)、3.14 (s, 3H)、2.88 (s, 3H)。
【０１４９】
実施例10、ステップ4：
[5-(2-アミノ-4-ピリミジニル)-2-フルオロフェニル](フェニル)メタノール
【化４４】
2008516975.tif 000048
【０１５０】
5mLマイクロ波管に、(2E)-3-(ジメチルアミノ)-1-{4-フルオロ-3-[ヒドロキシ(フェニル)メチル]フェニル}-2-プロペン-1-オン(0.2mmol)、グアニジンハイドロクロライド(0.4mmol)、炭酸カリウム(0.6mmol)とエタノール(3.5mL)を入れた。反応物は、マイクロ波照射を使用し、600秒間かけて150℃まで加熱した。反応物は濃縮乾燥させ、残渣を水にとり、酢酸エチルで抽出した。有機物は硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮乾燥させた。ジエチルエーテルから再濃縮し、[5-(2-アミノ-4-ピリミジニル)-2-フルオロフェニル]-(フェニル)メタノールを白色の泡状物として得た。H1 NMR (d6-dmso)：8.34 (dd, 1H)、8.26 (d, 1H)、7.93 (m, 1H)、7.31 (m, 4H)、7.21 (m, 2H)、7.05 (d, 1H)、6.67 (br s, 2H)、6.10 (d, 1H)、5.94 (d, 1H)。Mass (ES+) = 296.1 (100％)。
【０１５１】
実施例10、ステップ5：
[5-(2-アミノ-4-ピリミジニル)-2-フルオロフェニル](フェニル)メタノン
【化４５】
2008516975.tif 000049
【０１５２】
丸底フラスコに、[5-(2-アミノ-4-ピリミジニル)-2-フルオロフェニル](フェニル)メタノールを入れ、ジクロロメタン(10mL)中に溶解させた。得られた溶液は、Dess-Martinペルヨージナンで処理し、室温で30分間攪拌した。反応物は、飽和重炭酸ナトリウム溶液でクエンチした後有機層を除去し、硫酸マグネシウムで乾燥させて濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、[5-(2-アミノ-4-ピリミジニル)-2-フルオロフェニル](フェニル)メタノン(30mg)を白色の粉末として得た。H1 NMR (d6-dmso)：8.28-8.36 (m, 2H)、8.27 (dd, 1H)、7.79 (d, 2H)、7.70 (t, 1H)、7.56 (t, 2H)、7.50 (dd, 1H)、7.17 (d, 1H)、6.71 (br s, 2H)。Mass (ES+) = 294.1 (100％)。
【０１５３】
実施例10、ステップ6：
4-(5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-7-イル)-2-ピリミジンアミン
【化４６】
2008516975.tif 000050
【０１５４】
5mLマイクロ波管に、[5-(2-アミノ-4-ピリミジニル)-2-フルオロフェニル](フェニル)メタノン(21mg)、エチレンジアミン(60mg)とエタノール(3mL)を入れた。混合物は、マイクロ波照射を使用し、900秒間かけて180℃まで加熱した。残渣を濃縮乾燥させ、水で処理して酢酸エチルで抽出した。有機物は硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過して濃縮乾燥させた。ジエチルエーテルから再濃縮し、4-(5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-7-イル)-2-ピリミジンアミンを黄色の粉末として得た。H1 NMR (d6-dmso)：8.07 (d, 1H)、7.81 (dd, 1H)、7.59 (d, 1H)、7.32-7.46 (m, 5H)、6.82 (d, 1H)、6.72 (d, 1H)、6.65 (br t, 1H)、6.35 (br s, 2H)、3.92 (m, 2H)、3.59 (m, 2H)。Mass (ES+) = 316.1 (100％)。
【０１５５】
実施例11：
7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化４７】
2008516975.tif 000051
【０１５６】
実施例11、ステップ1：
7-ブロモ-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化４８】
2008516975.tif 000052
【０１５７】
5mLマイクロ波管に、2-フルオロ-5-ブロモベンズアルデヒド(1g)とエチレンジアミン(3mL)を入れた。混合物は、マイクロ波照射を使用し、300秒間かけて140℃まで加熱した。反応物は水で希釈し、ジエチルエーテルで抽出した。有機物は1N HClで抽出し、水相のpHが8になるまで2.5M NaOHで調整した。塩基性水相は、ジエチルエーテルでさらに抽出した。有機物は硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮乾燥させた。ジエチルエーテルから再濃縮し、7-ブロモ-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピンを黄色の結晶性固体として得た。H1 NMR (d6-dmso)：8.04 (s, 1H)、7.46 (d, 1H)、7.19 (dd, 1H)、7.07 (br t, 1H)、6.64 (d, 1H)、3.82 (m, 2H)、3.17 (m, 2H)。Mass (ES+) = 225.0 (100％)。
【０１５８】
実施例11、ステップ2：
7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化４９】
2008516975.tif 000053
【０１５９】
20mLマイクロ波管に、7-ブロモ-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン(115mg)、4-ピリジルボロン酸(2当量)、炭酸カリウム(2当量)、ジクロロビス(トリフェニル-ホスフィン)パラジウム(II)(10mol％)、DMF(3.5mL)と水(0.7mL)を入れ、マイクロ波照射を使用し、360秒間かけて160℃まで加熱した。反応物は濃縮乾燥させ、残渣を水にとり、その後酢酸エチル/テトラヒドロフラン(3:1)で抽出した。有機抽出物を混合し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥塩は濾過により除去して濾液を濃縮した。残渣はジエチルエーテルで粉末化し、得られた固体はフィルター上で回収した。熱テトラヒドロフランから再結晶化させ、7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピンを黄褐色の粉末(9mg)として得た。H1 NMR (d6-dmso)：8.49 (d, 2H)、8.23 (s, 1H)、7.85 (d, 1H)、7.62 (m, 3H)、7.29 (br t, 1H)、6.80 (d, 1H)、3.85 (m, 2H)、3.25 (m, 2H)。Mass (ES+) = 224.2 (100％)。
【０１６０】
実施例12：
5-フェニル-7-(1H-ピラゾール-4-イル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化５０】
2008516975.tif 000054
【０１６１】
実施例12、ステップ1：
[2-フルオロ-5-(1H-ピラゾール-4-イル)フェニル](フェニル)メタノン
【化５１】
2008516975.tif 000055
【０１６２】
下記の試薬を任意の順序で混合し、マイクロ波で1000秒間かけて150℃まで加熱した：(5-ブロモ-2-フルオロフェニル)(フェニル)メタノン(実施例9、ステップ1で得られた化合物)(253mg、0.91mmol)、1,1-ジメチルエチル 4-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-ピラゾール-1-カルボキシレート(533mg、1.9mmol)、ジクロロビス(トリフェニル-ホスフィン)パラジウム(II)(64mg、0.09mmol)、ジメトキシエタン(2mL)、エタノール(1mL)と炭酸ナトリウムの2M 水溶液(0.9mL, 1.9mmol)。その後、セライト製のプラグを通して反応混合物を濾過し、メタノールですすいで濃縮乾燥させた。50％酢酸エチル溶液とヘキサンで溶出しながら、シリカゲルから精製し、2-フルオロ-5-(1H-ピラゾール-4-イル)フェニル](フェニル)メタノン(95mg,、0.35mmol)を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm 13.0 (s, 1H) 8.2 (s, 1H) 7.9 (s, 1H) 7.9 (m, 1H) 7.8 (m, 3H) 7.7 (m, 1H) 7.5 (m, 2H)  7.3 (dd, J=8, 8 Hz, 1H)。
【０１６３】
実施例12、ステップ2：
5-フェニル-7-(1H-ピラゾール-4-イル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化５２】
2008516975.tif 000056
【０１６４】
5mLマイクロ波管に、2-フルオロ-5-(1H-ピラゾール-4-イル)フェニル](フェニル)メタノン(36mg、0.13mmol)、エタノール(4ml)とエチレンジアミン(0.7 mL)を入れ、マイクロ波照射を使用し、900秒間かけて190℃まで加熱した。反応物を濃縮乾燥させ、15％メタノール/クロロホルムで溶出しながらprep-TLC上で精製し、5-フェニル-7-(1H-ピラゾール-4-イル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン(3mg、0.01mmol)を得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.6 (m, 4H) 7.4 (m, 4H) 7.1 (d, J=1.8 Hz, 1H) 6.7 (d, J=8.4 Hz, 1H) 4.0 (m, 2H) 3.9 (m, 2H)。
【０１６５】
実施例13：
[2-フルオロ-5-(1H-インダゾール-5-イル)フェニル](フェニル)メタノン
【化５３】
2008516975.tif 000057
【０１６６】
実施例13、ステップ1：
[2-フルオロ-5-(1H-インダゾール-5-イル)フェニル](フェニル)メタノン
【化５４】
2008516975.tif 000058
【０１６７】
下記の試薬を任意の順序で混合し、マイクロ波で1000秒間かけて150℃まで加熱した：(5-ブロモ-2-フルオロフェニル)(フェニル)メタノン(実施例9、ステップ1で得られた化合物)(278mg、1.0mmol)、5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-インダゾール(486mg、2.0mmol)、ジクロロビス(トリフェニル-ホスフィン)パラジウム(II)(70 mg、0.10mmol)、ジメトキシエタン(2mL)、エタノール(1mL)と炭酸ナトリウムの2M水溶液(1mL、2.0mmol)。その後、セライト製のプラグを通して反応混合物を濾過し、メタノールですすいで濃縮乾燥させた。50％酢酸エチル溶液とヘキサンで溶出しながら、シリカゲルから精製し、[2-フルオロ-5-(1H-インダゾール-5-イル)フェニル](フェニル)メタノン(187mg, 0.6mmol)を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm 13.1 (s, 1H) 8.1 (s, 1H) 8.1 (s, 1H) 8.0 (m, J=5.9 Hz, 1H) 7.8 (m, J=7.5 Hz, 3H) 7.7 (m, 2H) 7.6 (m, 3H) 7.5 (dd, J=9.1, 9.1Hz, 1H)。
【０１６８】
実施例13、ステップ2：
[2-フルオロ-5-(1H-インダゾール-5-イル)フェニル](フェニル)メタノン
【化５５】
2008516975.tif 000059
【０１６９】
5mLマイクロ波管に、[2-フルオロ-5-(1H-インダゾール-5-イル)フェニル](フェニル)メタノン(122mg、0.38mmol)、エタノール(4ml)とエチレンジアミン(0.9mL)を入れ、マイクロ波照射を使用し、600秒間かけて180℃まで加熱した。反応物を濃縮乾燥させ、20％メタノール/クロロホルムで溶出しながらprep-TLC上で精製し、[2-フルオロ-5-(1H-インダゾール-5-イル)フェニル](フェニル)メタノン(3mg, xmmol)を得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-D6) δ ppm 13.0 (s, 1H) 8.0 (d, J=1.0 Hz, 1H) 7.7 (m, J=0.8 Hz, 1H) 7.6 (m, 4H) 7.4 (m, 4H) 7.1 (d, J=2.1Hz, 1H) 6.9 (d, J=8.7 Hz, 1H) 6.3 (t, J=4.21Hz,1H) 4.0 (m, 2H) 3.7 (m, 2H)。
【０１７０】
実施例14：
(3S)-5-(2-フルオロフェニル)-3-メチル-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化５６】
2008516975.tif 000060
【０１７１】
実施例14、ステップ1：
9H-フルオレン-9-イルメチル[(1S)-2-({4-ブロモ-2-[(2-フルオロフェニル)カルボニル]フェニル}アミノ)-1-メチル-2-オキソエチル]カルバメート
【化５７】
2008516975.tif 000061
【０１７２】
丸底フラスコに、(2-アミノ-5-ブロモフェニル)(2-フルオロフェニル)メタノン(3.5g、11.9mmol)、9H-フルオレン-9-イルメチル[(1S)-2-クロロ-1-メチル-2-オキソエチル]カルバメート(4.7g、14.2mmol)とクロロホルム(300mL)を入れた。混合物は、3時間かけて加熱還流させた後濃縮乾燥させた。残渣を水で処理し、固体を沈殿させた。これを回収してジエチルエーテルで粉末化した後空気乾燥させ、9H-フルオレン-9-イルメチル [(1S)-2-({4-ブロモ-2-[(2-フルオロフェニル)カルボニル]フェニル}アミノ)-1-メチル-2-オキソエチル]カルバメート(5.75g、9.8mmol)を淡黄色の粉末として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm  7.8 (m, 11H) 7.3 (m, 7 H) 4.2 (m, 2H) 1.1 (d, J=7.1, 3H)。
【０１７３】
実施例14、ステップ2：
N1-{4-ブロモ-2-[(2-フルオロフェニル)カルボニル]フェニル}-L-アラニンアミド
【化５８】
2008516975.tif 000062
【０１７４】
9H-フルオレン-9-イルメチル[2-({4-ブロモ-2-[(2-フルオロフェニル)カルボニル]フェニル}アミノ)-2-オキソエチル]カルバメートの代わりに9H-フルオレン-9-イルメチル[(1S)-2-({4-ブロモ-2-[(2-フルオロフェニル)カルボニル]フェニル}アミノ)-1-メチル-2-オキソエチル]カルバメート(3g、5.10mmol)を使用する点を除いて、実施例1、ステップ2と同じ手順を用いた。これによりN1-{4-ブロモ-2-[(2-フルオロフェニル)カルボニル]フェニル}-L-アラニンアミドを黄色の粉末(1.3g、3.7 mmol)として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ 8.4 (d, 1H) 7.8 (m, 1H) 7.7 (m, 1H) 7.6 (m, 1H) 7.5 (m, 1H) 7.4 (m, 2H) 4.2 (m, 1H)  1.1 (d, J=7.1, 3H)。
【０１７５】
実施例14、ステップ3：
(3S)-7-ブロモ-5-(2-フルオロフェニル)-3-メチル-1,3-ジヒドロ-2H-1,4-ベンゾジアゼピン-2-オン
【化５９】
2008516975.tif 000063
【０１７６】
N1-{4-ブロモ-2-[(2-フルオロフェニル)カルボニル]-フェニル}グリシンアミドの代わりにN1-{4-ブロモ-2-[(2-フルオロフェニル)カルボニル]フェニル}-L-アラニンアミド(0.43g、1.2mmol)を使用する点を除いて、実施例1、ステップ3と同じ手順を用いた。これにより(3S)-7-ブロモ-5-(2-フルオロフェニル)-3-メチル-1,3-ジヒドロ-2H-1,4-ベンゾジアゼピン-2-オンを黄色の泡状物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) δ ppm 10.7 (s, 1H) 7.7 (dd, J=8.8, 2.4 Hz, 1H) 7.5 (m, 2H) 7.3 (t, J=7.5 Hz, 1H) 7.2 (m, 2H) 7.2 (d, J=8.6 Hz, 1H) 3.7 (q, J=6.5 Hz, 1H) 1.5 (m, 3H)。
【０１７７】
実施例14、ステップ4：
(3S)-5-(2-フルオロフェニル)-3-メチル-7-(4-ピリジニル)-1,3-ジヒドロ-2H-1,4-ベンゾジアゼピン-2-オン
【化６０】
2008516975.tif 000064
【０１７８】
7-ブロモ-5-(2-フルオロフェニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピンの代わりに(3S)-7-ブロモ-5-(2-フルオロフェニル)-3-メチル-1,3-ジヒドロ-2H-1,4-ベンゾジアゼピン-2-オン(0.062g、0.18mmol)を使用する点を除いて、実施例1、ステップ5と同じ手順を用い、(3S)-5-(2-フルオロフェニル)-3-メチル-7-(4-ピリジニル)-1,3-ジヒドロ-2H-1,4-ベンゾジアゼピン-2-オンを白色の固体(14mg、0.04mmol)として得た。1H NMR (400 MHz、アセトン) δ ppm  9.8 (s, 1H) 8.6 (m, 2H) 8.0 (dd, J=8.6, 2.2Hz, 1H) 7.7 (m, 1H) 7.6 (dd, J=5.7, 1.5 Hz, 1H) 7.5 (m, 4H) 7.3 (td, J=7.5, 1.1Hz, 1H) 7.1 (ddd, J=10.1, 8.9, 1.1Hz, 1H) 3.9 (q, J=6.4 Hz, 1H) 1.7 (d, J=6.4 Hz, 3H)。
【０１７９】
実施例14、ステップ5：
(3S)-5-(2-フルオロフェニル)-3-メチル-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピントリフルオロアセテート
【化６１】
2008516975.tif 000065
【０１８０】
7-ブロモ-5-(2-フルオロフェニル)-1,3-ジヒドロ-2H-1,4-ベンゾジアゼピン-2-オンの代わりに(3S)-5-(2-フルオロフェニル)-3-メチル-7-(4-ピリジニル)-1,3-ジヒドロ-2H-1,4-ベンゾジアゼピン-2-オンを使用する点を除いて、実施例1、ステップ4と同じ手順を用い、(3S)-5-(2-フルオロフェニル)-3-メチル-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピントリフルオロアセテートを白色の固体(0.009g、0.02mmol)として得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-D6) d ppm 1.4 (d, J=6.9 Hz, 3H) 3.7 (s, 2H) 4.3 (m, 1H) 7.3 (d, J=9.3Hz, 2H) 7.3 (s, 2H) 7.6 (m, 2H) 7.8 (m, 2H) 8.0 (dd, J=9.1, 2.2Hz, 1H) 8.6 (d, J=6.0 Hz, 1H) 9.2 (s, 1H)。
【０１８１】
実施例15：
4-[7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-5-イル]ベンゾニトリル
【化６２】
2008516975.tif 000066
【０１８２】
実施例15、ステップ1：
4-[(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)カルボニル]ベンゾニトリル
【化６３】
2008516975.tif 000067
【０１８３】
3-ニトロベンズアルデヒドの代わりに4-ホルミルベンゾニトリルを使用する点を除いて、実施例3、ステップ1と同じ手順を用い、4-[(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)カルボニル]ベンゾニトリルをオフホワイトの粉末として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-D) δ ppm 6.9 (m, 1H) 7.8 (d, J=8.6 Hz, 2H) 7.90-7.82 (m, 4H)。
【０１８４】
実施例15、ステップ2：
4-[7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-5-イル]ベンゾニトリル
【化６４】
2008516975.tif 000068
【０１８５】
(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)(3-ニトロ-フェニル)メタノンの代わりに4-[(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)カルボニル]ベンゾニトリルを使用する点を除いて、実施例4、ステップ2と同じ手順を用い、4-[7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン-5-イル]ベンゾニトリルをオフホワイトの粉末として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) d ppm 8.4 (d, J=6.2Hz, 2H) 7.6 (dd, J=8.6, 2.4 Hz, 1H) 7.4 (q, J=8.7 Hz, 3H) 7.4 (m, 2H) 7.2 (d, J=2.2Hz, 1H) 6.9 (d, J=8.8 Hz, 1H) 6.7 (t, J=3.8 Hz, 1H) 3.9 (dd, J=4.3, 3.6 Hz, 2H) 3.6 (m, 2H)。
【０１８６】
実施例16：
5-(4-クロロフェニル)-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化６５】
2008516975.tif 000069
【０１８７】
実施例16、ステップ1：
(4-クロロフェニル)(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)メタノン
【化６６】
2008516975.tif 000070
【０１８８】
3-ニトロベンズアルデヒドの代わりに4-クロロベンズアルデヒドを使用する点を除いて、実施例3、ステップ1と同じ手順を用い、(4-クロロフェニル)(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)メタノンを白色の粉末として得た。1H NMR (300 MHz, クロロホルム-D) d ppm 7.9 (m, 1H) 7.8 (d, J=8.7 Hz, 2H) 7.7 (dd, J=9.0, 5.2Hz, 1H) 7.7 (dd, J=9.0, 5.2Hz, 1H) 7.5 (d, J=8.8 Hz, 2H) 7.0 (t, J=9.2Hz, 1H)。
【０１８９】
実施例16、ステップ2：
5-(4-クロロフェニル)-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化６７】
2008516975.tif 000071
【０１９０】
(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)(3-ニトロ-フェニル)メタノンの代わりに(4-クロロフェニル)(2-フルオロ-5-ヨードフェニル)メタノンを使用する点を除いて、実施例4、ステップ2と同じ手順を用い、5-(4-クロロフェニル)-7-(4-ピリジニル)-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピンをオフホワイトの粉末として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-D6) d ppm 8.4 (d, J=6.0 Hz, 2H) 7.8 (d, J=8.1Hz, 2H) 7.6 (td, J=8.7, 1.9 Hz, 3H) 7.2 (d, J=2.4 Hz, 1H) 7.4 (m, 2H) 6.9 (d, J=8.8 Hz, 1H) 6.8 (s, 1H) 4.0 (d, J=4.2Hz, 2H) 3.6 (s, 2H)。
【０１９１】
実施例17：
7-(3-フルオロピリジン-4-イル)-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化６８】
2008516975.tif 000072
【０１９２】
実施例17、ステップ1：
5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化６９】
2008516975.tif 000073
【０１９３】
5mLマイクロ波管に、2-フルオロベンゾフェノン(0.40g)、エチレンジアミン(0.40g)とエタノール(4 mL)を入れた。混合物は、マイクロ波中で、180℃で10分間加熱した。内容物を濃縮して油状物とし、ジクロロメタン中に溶解させた。得られた溶液は、シリカゲルクロマトグラフィーで精製した。未反応のベンゾフェノンはいずれもジクロロメタンで溶出し、その後所望の生成物をヘキサン中の70％酢酸エチルで溶出した。所望の画分を濃縮し、5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピンを黄色の結晶性固体として得た。H1 NMR (d6-dmso)：7.30-7.42 (m, 5H), 7.12 (dd, 1H), 6.78 (d, 1H), 6.75 (d, 1H), 6.49 (dd, 1H), 6.05 (br t, 1H), 3.84 (m, 2H), 3.56 (m, 2H)。
【０１９４】
実施例17、ステップ2：
7-ブロモ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化７０】
2008516975.tif 000074
【０１９５】
丸底フラスコに、5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン(1.0 g)とテトラヒドロフランを入れた。混合物は、N-ブロモスクシンイミド(1.1当量)で処理した後室温で15分間攪拌した。その後、反応物を過剰の亜硫酸ナトリウムで処理し、混合物は濃縮乾燥させた。残渣を水に溶解させた後酢酸エチルで抽出した。有機抽出物は、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して油状物とした。ジクロロメタン/ジエチルエーテル混合物から固体を生じさせ、フィルター上で回収した。固体はジエチルエーテルで洗浄した後空気乾燥させ、7-ブロモ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン (0.60g)を得た。H1 NMR (d6-dmso)：7.38-7.44 (m, 5H), 7.26 (dd, 1H), 6.86 (d, 1H), 6.75 (d, 1H), 6.41 (br t, 1H), 3.89 (m, 2H), 3.55 (m, 2H)。
【０１９６】
実施例17、ステップ3：
7-(3-フルオロピリジン-4-イル)-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン
【化７１】
2008516975.tif 000075
【０１９７】
5mLマイクロ波管に、7-ブロモ-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピン(50mg)、ジメチルホルムアミド(3.5mL)、3-フルオロ-4-ピリジルボロン酸(2当量)、炭酸カリウム(2当量)、ビス（トリフェニル-ホスフィン)-パラジウムジクロライド(10 mol ％)と水(0.7mL)を入れた。混合物は、マイクロ波中で、150℃で5分間加熱し、その後冷却して濃縮乾燥させた。残渣は酢酸エチルにとり、セライトパッドを通して濾過した。濾液は濃縮乾燥させ、残渣をジエチルエーテル中で粉末化させた。得られた固体は、フィルター上で回収した後、予備薄層クロマトグラフィーで精製した。プレートはクロロホルム中の12.5％メタノールで溶出し、所望のバンドを回収して、7-(3-フルオロピリジン-4-イル)-5-フェニル-2,3-ジヒドロ-1H-1,4-ベンゾジアゼピンを黄色の粉末として得た。H1 NMR (d6-dmso)：8.45 (d, 1H)、8.32 (d, 1H)、7.52 (d, 1H)、7.46 (m, 2H)、7.36-7.42 (m, 4H)、7.21 (s, 1H)、6.91 (d, 1H)、6.78 (br t, 1H)、3.96 (m, 2H)、3.60 (m, 2H)。
【０１９８】
生物学的データ
ROCKキナーゼアッセイ：
ROCK阻害剤活性は、Sf9細胞中で発現させたヒト組換えROCK1キナーゼドメイン(アミノ酸2-543)を利用して測定した(WO9967283参照)。この酵素は、His-tag NTAカラムとSource15 HPLCクロマトグラフィーを用いて精製した。Rock-1活性のアッセイは、ペプチド基質とATP33とを用いたインキュベーションを含み、その結果生じた上記ペプチドへのP33の取り込みは、シンチレーション近接アッセイ(SPA-Amersham Pharmacia)により定量化した。
【０１９９】
IC50測定のため、試験化合物は、典型的には100％DMSO中に10mM濃度で溶解させ、その後100％DMSOで段階希釈した。化合物は、典型的には50μM〜0.8nMのアッセイ濃度、3倍希釈で、希釈範囲の11点にわたってアッセイした。IC50値は、ビスポーク(bespoke)曲線適合ソフトで算出した後pIC50に変換した。
【０２００】
アッセイは、不透明な白壁の384穴プレート中で、総アッセイボリューム20μlで行った。アッセイには以下の材料が含まれていた：1nM hROCK1；1μMビオチン化ペプチド(ビオチン-Ahx-AKRRRLSSLRA-CONH2)；1μM ATP；1ウェルにつき1.85kBqのATP(γ-33P)；25mM Hepes pH 7.4；15mM MgCl2；0.015％ BSA。反応液は、22℃で120分間インキュベートし、その後、60mM EDTAとストレプトアビジンPVT SPAビーズとを含有する50μl溶液を添加することによって反応を停止させた。SPAビーズは、1ウェルにつき0.14mgの濃度まで加えた。プレートは、22℃で10分間インキュベートした後1500 rpmで1分間遠心分離した。P33の取り込みは、Packard TopCountのシンチレーション計数により定量化した。
【０２０１】
実施例1〜17は全て、上記のアッセイを用いて行い、Rock-1に対してpIC50が5.0以上の阻害活性を示した。
【０２０２】
この明細書および特許請求の範囲を含む本願は、任意の後願の優先権主張の基礎として用いることができる。このような後願の特許請求の範囲は、本願明細書に記載されている任意の新規な特徴または特徴の組み合わせに向けることができる。このような特許請求の範囲は、物、組成物、方法または使用の特許請求の範囲の形としてよく、例として、限定するものではないが、本願の特許請求の範囲を1つ以上含んでよい。
【国際調査報告】
2008516975.tif 000082