(57)【要約】  治療的用途のための懸濁調製物は、粘性の流体の特徴を示す非水性の疎水性ビヒクル、ビヒクル中に分散された生体分子を含んでなる乾燥粒子調製物並びにビヒクル及び乾燥粒子調製物の少なくとも一方中に取り込まれた界面活性剤を包含する。乾燥粒子調製物はインターフェロン、バッファー、界面活性剤並びに炭水化物、抗酸化剤及びアミノ酸からなる群から選択される１種又は複数の安定剤を包含する。
2008500345.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
粘性流体の特徴を示す非水性の疎水性ビヒクル、
該ビヒクル中に分散された生体分子を含んでなる乾燥粒子調製物、並びに
該ビヒクル及び乾燥粒子調製物の少なくとも一方中に取り込まれた界面活性剤、
を含んでなる、治療的用途のための懸濁調製物。
【請求項２】
疎水性ビヒクルが非ポリマーである、請求項１の懸濁調製物。
【請求項３】
疎水性ビヒクルが実質的に酢酸イソ酪酸スクロースを含んでなる、請求項２の懸濁調製物。
【請求項４】
生体分子がインターフェロンである、請求項１の懸濁調製物。
【請求項５】
埋め込み可能な薬剤送達装置から少なくとも１カ月間にわたり１ｎｇ／日〜６００μｇ／日のインターフェロンを送達する、請求項４の懸濁調製物。
【請求項６】
生体分子がインターフェロンオメガである、請求項１の懸濁調製物。
【請求項７】
生体分子が界面活性剤とともに吹き付け乾燥される、請求項１の懸濁調製物。
【請求項８】
乾燥粒子調製物が更に１種又は複数の安定剤及びバッファーを含んでなる、請求項１の懸濁調製物。
【請求項９】
安定剤が炭水化物、抗酸化剤及びアミノ酸からなる群から選択される、請求項８の懸濁調製物。
【請求項１０】
疎水性ビヒクルが６０重量％を超える量で存在する、請求項１の懸濁調製物。
【請求項１１】
乾燥粒子調製物が０．０１〜４０重量％の範囲内で存在する、請求項１の懸濁調製物。
【請求項１２】
乾燥粒子調製物中の界面活性剤添加量が０〜１０重量％の範囲内にある、請求項１の懸濁調製物。
【請求項１３】
ビヒクル中の界面活性剤添加量が０〜２０重量％の範囲内にある、請求項１の懸濁調製物。
【請求項１４】
インターフェロン、バッファー、界面活性剤並びに炭水化物、抗酸化剤及びアミノ酸からなる群から選択される１種又は複数の安定剤、
を含んでなる乾燥粒子調製物。
【請求項１５】
吹き付け乾燥される、請求項１４の乾燥粒子調製物。
【請求項１６】
インターフェロンがインターフェロンオメガである、請求項１４の乾燥粒子調製物。
【請求項１７】
インターフェロンが０．１〜９９．９重量％の範囲内の量で存在する、請求項１４の乾燥粒子調製物。
【請求項１８】
インターフェロンに対する各安定剤の重量比が０．１〜９９．９の範囲内にある、請求項１７の乾燥粒子調製物。
【請求項１９】
インターフェロンに対する各安定剤の重量比が０．５を超える、請求項１８の乾燥粒子調製物。
【請求項２０】
インターフェロンに対する炭水化物の重量比が１．０を超える、請求項１９の乾燥粒子調製物。
【請求項２１】
バッファーの濃度が５ｍＭ〜５０ｍＭの範囲内にある、請求項１４の乾燥粒子調製物。
【請求項２２】
バッファーのｐＨが５．０〜８．０の範囲内にある、請求項１４の乾燥粒子調製物。
【請求項２３】
インターフェロン、炭水化物、抗酸化剤及び／又はアミノ酸、バッファー及び界面活性剤が１：２：１：１．５〜２．５：０．０６の比率で存在する、請求項１４の乾燥粒子調製物。
【請求項２４】
インターフェロンがインターフェロンオメガであり、炭水化物がスクロースであり、抗酸化剤及び／又はアミノ酸がメチオニンであり、そしてバッファーがクエン酸塩である、請求項１４の乾燥粒子調製物。
【請求項２５】
界面活性剤が０．０１〜１０重量％の範囲内に存在する、請求項１４の乾燥粒子調製物。
【請求項２６】
界面活性剤が０．０１〜５重量％の範囲内で存在する、請求項１４の乾燥粒子調製物。
【請求項２７】
粘性の流体の特徴を示す非水性の疎水性ビヒクル、該ビヒクル中に分散されたインターフェロンを含んでなる乾燥粒子調製物並びに該ビヒクル及び乾燥粒子調製物の少なくとも一方中に取り込まれた界面活性剤を含んでなる懸濁調製物、並びに
少なくとも１カ月間にわたり使用環境中に治療的有効量のインターフェロンの連続的送達を提供するのに十分な量の懸濁調製物を含有するレザボア、
を含んでなる埋め込み可能な送達装置。
【請求項２８】
非ポリマーの疎水性ビヒクル中にインターフェロンオメガの乾燥粒子調製物を懸濁させ、そして
乾燥粒子調製物及び疎水性ビヒクルの少なくとも一方中に界面活性剤を取り込む工程、を含んでなる、
親水性放出速度媒質中へのインターフェロンオメガの放出を促進する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は概括的に、埋め込み可能な薬剤送達装置及びデポー注射剤のような持続放出系により送達可能な調製物に関する。
【背景技術】
【０００２】
インターフェロンはウイルス、バクテリア、寄生虫又は他の抗原に対する露出のような種々の刺激に対して応答する細胞により生成される糖蛋白のサイトカインの１群である。インターフェロンは抗ウイルス、免疫調節及び抗増殖活性を有する。インターフェロンはＩ型又はＩＩ型として分類される。Ｉ型として分類されるインターフェロンはＩ型インターフェロン受容体又はα−β受容体と呼ばれる一般的（ｃｏｍｍｏｎ）受容体に結合し、ウイルス又はインターフェロン誘導物質に応答して白血球、繊維芽細胞又はリンパ芽球により生成される。Ｉ型インターフェロンはインターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）、インターフェロンベータ（ＩＦＮ−β）及びインターフェロンオメガ（ＩＦＮ−ω）を包含するが、ＩＦＮ−ωはヒトＩＦＮ−α（約６０％）及びヒトＩＦＮ−β（約２９％）に対して限定された相同性を有する。ＩＩ型として分類されるインターフェロンはＴ−リンパ球により生成される。ＩＩ型インターフェロンはインターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）を包含する。インターフェロンはウイルス性肝炎、多発性硬化症及び特定の癌の処置に使用される。とりわけＩＦＮ−ωは、Ｂ＆Ｃ型肝炎個体群の処置に適用されてきた。ＩＦＮ−ωの注射可能な形態は近年、第ＩＩ相臨床試験中である。この注射可能な形態は溶液を基剤にしており、持続送達用に調製されていない。
【０００３】
介入を伴わず長期間にわたり制御された方法で患者にインターフェロン送達する方法に興味がもたれている。例えば、ＩＦＮ−ωの持続送達は複数のボーラス注射のピーク血漿レベルに関連する効果を減少又は回避し、それにより疲労及びインフルエンザ様症状のような全身的副作用を最少にする可能性があることによりＩＦＮ−ωの治療的効果を改善することができる。介入を伴わない有益な薬剤の持続送達は、埋め込み可能な薬剤送達装置、例えば、浸透圧、機械的又は電気機械的ポンプのインプラント及びデポー注射により提供することができる。埋め込み可能な薬剤送達装置は多数の理由で魅力的である。例えば、埋め込み可能な薬剤送達装置は、数週間、数カ月又は１年までもの間、治療的用量の薬剤を提供するようにさせることができる。デポー注射は典型的には数週間にわたり治療的用量を提供する。埋め込み可能な送達装置は一旦挿入されると、数週間にわたり治療的用量を提供する。埋め込み可能な薬剤送達装置は患者に一旦挿入されると、患者により容易にはいたずらされない。従って一般に患者のコンプライアンスが確保される。
【０００４】
インターフェロンの持続送達は埋め込み可能な送達薬剤装置の操作寿命期間中、インターフェロンが高温、例えば、３７℃以上で実質的に安定な調製物中に含有されることを要する。インターフェロンは生体分子、具体的にタンパク質である。一般的に言うと、長期間、例えば、数週間、数カ月又は１年間、高温で安定なタンパク質の調製物は計画が困難である。タンパク質は水性環境内で必然的に活性である。従って、タンパク質を水溶液として調製することが好都合であると考えられる。不幸なことには、タンパク質は典型的には、長期間には、水性調製物中にごく僅かに安定である。この１つの理由はタンパク質が脱アミノ化（通常加水分解により）、酸化、ジスルフィド交換及びラセミ化のような多数の機序により分解することができ、そして水がこれらの多数の分解経路における反応物質であることである。水はまた、可塑化剤としてはたらき、タンパク質分子の変性及び／又は凝集を容易にする。
【０００５】
水性タンパク質調製物は凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｙｉｎｇ）（又はｌｙｏｐｈｉ
ｌｉｚａｔｉｏｎ）、吹き付け乾燥及びデシケート乾燥のような乾燥法を使用して乾燥粒子タンパク質調製物に縮小させる（ｒｅｄｕｃｅ）ことができる。このような乾燥粒子タンパク質調製物は外気温及び更に高温において長期間著しく増加した安定度を示すことができる。しかし、所望の流速で埋め込み可能な薬剤送達装置から乾燥粒子調製物を制御可能に送達することは困難である。乾燥粒子タンパク質調製物を非水性の流動性ビヒクル中に懸濁することが示唆されてきた。好ましくは、懸濁ビヒクルは、粒子が所望の期間中懸濁物中に実質的に均一に分散されるように、高い粘度、例えば、１ｋＰ以上を有する。更に、懸濁調製物は所望の期間中貯蔵及び送達条件で安定であり、そして埋め込み可能な薬剤送達装置の操作寿命の間その流動性を維持しなければならない。
【０００６】
埋め込み可能な薬剤送達装置により有益な薬剤を送達するための非水性懸濁ビヒクルは文献に記載されている。例えば、特許文献１は、体温以下の軟化温度を有するワックス、水素化植物油、シリコン油、中間の鎖長の脂肪酸モノグリセリド及びポリオールを包含する非水性懸濁ビヒクルを教示している（特許文献１参照）。これらの懸濁ビヒクルの粘度はセルロースエーテル、例えば、ヒドロキシプロピルセルロース及びポビドンのようなヒドロゲルのような増粘剤を使用して所望レベルまで増加させることができる。特許文献２は低反応性をもつ非水性の、無水の、非プロトン性の、疎水性の、非極性の懸濁ビヒクルを開示している（特許文献２参照）。このようなビヒクルの例はペルフルオロデカリン、メトキシフルラン及びペルフルオロトリブチルアミンを包含する。ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）のようなポリマー物質もまた懸濁ビヒクルとして使用することができる。
【０００７】
特許文献３は実質的に疎水性の非ポリマー物質で形成される単一相の粘性の流動性組成物でできた懸濁ビヒクルを開示している（特許文献３参照）。これらの懸濁ビヒクル形成時に使用される非ポリマー物質はそれらに限定はされないが、疎水性糖類物質、オルガノゲル又は、単一相ビヒクルとして行動する脂質物質を包含する。開示物に従うと、懸濁ビヒクル調製時に使用することができる代表的な糖類物質はそれらに限定はされないが、酢酸イソ酪酸スクロース（ＳＡＩＢ）のような外界又は生理学的温度において流体として存在する置換スクロースエステルを包含する。これらの非ポリマー物質は外界及び生理学的温度で安定であるのみならずまた、タンパク質粒子の実質的に均一な分散を維持することができるタンパク質懸濁物の調製を許す。
【０００８】
ＳＡＩＢのような疎水性ビヒクルは特に賦形剤を添加されずに使用される時に、親水性媒質の存在下でデポーのように行動することができる。これは、ビヒクル中に懸濁されたタンパク質が親水性媒質の存在下ではビヒクルから瞬時には放出されないであろうということを意味する。デポー注射の適用のためには、懸濁ビヒクルのデポー効果は典型的に望ましい。埋め込まれた送達装置に対して、懸濁ビヒクルが放出媒質中でデポーのように行動する時は、懸濁ビヒクルによる放出の制御が送達装置による放出の制御に対して累積的である。懸濁ビヒクルによる放出のこの更なる制御は適用に応じて望ましいかも知れず又は望ましくないかも知れない。とにかく、タンパク質が放出媒質の存在下で、そして懸濁ビヒクルから放出媒質中への移行期間中にビヒクル中で安定であれば、懸濁ビヒクルからのタンパク質の非瞬時の放出は許容できるのみであると考えられる。
【０００９】
以上から、埋め込み可能な薬剤送達装置又はデポー注射のような持続性送達系を介して送達可能な生体分子、特にタンパク質、より特にはインターフェロンの改善された安定な調製物の要望が存在し続ける。
【特許文献１】Ｅｃｋｅｎｈｏｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，米国特許第５，９０４，９３５号明細書
【特許文献２】Ｋｎｅｐｐ  ｅｔ  ａｌ．，米国特許第６，２６４，９９０号明細書
【特許文献３】米国特許開示第ＵＳ−２００４−０２２４９０３−Ａ１明細書
【発明の開示】
【００１０】
１つの態様において、本発明は、粘性の流体の特徴を示す非水性の疎水性のビヒクル、該ビヒクル中に分散された生体分子を含んでなる乾燥流体調製物並びに該疎水性ビヒクル及び乾燥粒子調製物の少なくとも一方中に取り込まれた界面活性剤を含んでなる、治療的用途のための懸濁調製物に関する。
【００１１】
もう１つのアスペクトにおいて、本発明はインターフェロン、バッファー、界面活性剤並びに炭水化物、抗酸化剤及びアミノ酸からなる群から選択される１種又は複数の安定剤を含んでなる乾燥粒子調製物に関する。
【００１２】
更にもう１つの態様において、本発明は粘性の流体の特徴を示す非水性の疎水性ビヒクル、該ビヒクル中に分散されたインターフェロンを含んでなる乾燥粒子調製物並びに該ビヒクル及び乾燥粒子調製物の少なくとも一方中に取り込まれた界面活性剤を含んでなる懸濁調製物を含んでなる埋め込み可能な送達装置に関する。埋め込み可能な送達装置は更に、少なくとも１カ月間にわたり使用環境中に治療的有効量のインターフェロンの連続的送達を提供するのに十分な量の懸濁調製物を含有するレザボアを包含する。
【００１３】
もう１つの態様において、本発明は非ポリマーの疎水性ビヒクル中にインターフェロンオメガの乾燥粒子調製物を懸濁させ、そして乾燥粒子調製物及び疎水性ビヒクルの少なくとも一方中に界面活性剤を取り込む工程を含んでなる、親水性放出速度媒質中へのインターフェロンオメガの放出を促進する方法に関する。
【００１４】
本発明の他の特徴物及び利点は以下の説明から明白になるであろう。
【００１５】
発明の詳細な説明
次に本発明を付記の図面に示される幾つかの好ましい態様につき詳細に説明される。以下の説明において、本発明の完全な理解を提供するために多数の特定の詳細を示す。しかし、本発明は幾つかの又はすべてのこれらの特定の詳細を伴わずに実施することができることは当業者に明白であろう。他の場合には、本発明を不必要に分かりにくくしないように、周知の特徴物及び／又は工程段階は詳細に説明しなかった。本発明の特徴物及び利点は以下の図面及び考察に関してより良く理解することができる。
【００１６】
本発明は持続性送達系、とりわけ埋め込み可能な薬剤送達装置及び恐らくはデポー注射により送達可能な生体分子を包含する調製物を提供する。本明細書で考慮される生体分子は動物又はヒトの被験体に治療的利益を提供し、非水性懸濁物中に調製される時に増加された安定度を示すことができるものである。本明細書で考慮される生体分子は概括的に水中で分解性であるが、外界及び生理学的温度で乾燥粒子として概括的に安定である。生体分子の例はそれらに限定はされないが、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、アミノ酸、ヌクレオチド、アミノ酸残基又はヌクレオチド残基のポリマー、ホルモン、ウイルス、天然に誘導される抗体、リポタンパク質及び翻訳修飾後の形態のような合成により生成された又は組み換えにより生成された複合タンパク質、例えば、グリコシル化タンパク質並びにＤ−アミノ酸、Ｄ−配置又はＬ−配置中に、修飾された、誘導された又は天然に存在しないアミノ酸を有するタンパク質並びに／又はそれらの構造の一部としてのペプト模倣単位（ｐｅｐｔｏｍｉｍｅｔｉｃ  ｕｎｉｔ）を包含する。
【００１７】
治療的効果を与えることができる生体分子の特定の例はそれらに限定はされないが、バクロフェン、ＧＤＮＦ、神経向性因子、コナトンキンＧ、ジコノチド、クロニジン、アキソカイン、アンチセンス・オリゴヌクレオチド、副腎皮質刺激ホルモン、アンギオテンシンＩ及びＩＩ、心房性ナトリウム利尿ペプチド、ボンベシン、ブラジキニン、カルシトニン、セレベリン、ジノルフィンＮ、アルファ及びベータエンドルフィン、エンドセリン、
エンケファリン、表皮成長因子、フェルチレリン、卵胞ゴナドトロピン放出ペプチド、ガラニン、グルカゴン、ゴナドレリン、ゴナドトロピン、ゴセレリン、成長ホルモン放出ペプチド、ヒストレリン、インスリン、インターフェロン、ロイプロリド、ＬＨＲＨ、モチリン、ナファレルリン、ニューロテンシン、オキシトシン、レラキシン、ソマトスタチン、サブスタンスＰ、腫瘍壊死因子、トリプトレリン、バソプッシン、成長ホルモン、神経成長因子、血液凝固因子、リボザイム及びアンチセンス・オリゴヌクレオチドを包含する。前記の各物質の類似体、誘導体、アンタゴニスト、アゴニスト及び製薬学的に許容できる塩もまた、本発明の調製物中に使用することができる。
【００１８】
本発明で特に興味深いものはインターフェロンである。インターフェロンはＩ型インターフェロン受容体（α−β受容体）又はＩＩ型インターフェロン受容体を活性化することができる組み換え分子であることができる。これらの組み換え分子は天然のヒトのＩ型又はＩＩ型インターフェロンに対する配列相同性を含有するかも知れないし、含有しないかも知れない。本発明の態様に従うインターフェロンは組み換えヒトインターフェロンの生物学的活性を有するタンパク質、インターフェロン類似体、インターフェロン異性体（ｉｓｏｆｏｒｍ）、インターフェロン疑似体、インターフェロンフラグメント、混成インターフェロンタンパク質、融合タンパク質オリゴマー及び前記の複合体、前記の相同体、前記のグリコシル化パターンの変化物、前記の突然変異タンパク質及び前記に挙げた僅かな修飾体を含有するインターフェロン分子からなる群から選択することができる。本発明に従うインターフェロンは合成又は製造法により限定してはならず、組み換え法（ｃＤＮＡから生成されようと又は遺伝子ＤＮＡから生成されようと）、合成法、トランスジェニック法及び遺伝子活性化法により合成又は製造されたものを包含することとする。インターフェロンの特定の例はそれらに限定はされないが、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−ω及びＩＦＮ−γを包含する。
【００１９】
本発明の態様は生体分子を包含する乾燥粒子調製物を提供する。本発明の乾燥粒子調製物は低い湿度含量、典型的には５重量％未満を有する。本発明の１つの態様に従うと、乾燥粒子調製物は前記のようなインターフェロンを包含する。乾燥粒子調製物はまた安定剤を包含する。１つの態様において、安定剤は炭水化物、抗酸化剤及び／又はアミノ酸を包含する。乾燥粒子インターフェロン調製物はまたバッファーを包含する。乾燥粒子調製物中の安定剤及びバッファーの量は安定剤及びバッファーの活性及び調製物の所望の特徴に実験的基づいて決定することができる。１つの態様において、調製物中の炭水化物の量は凝集の問題により決定される。概括的に、炭水化物のレベルはインターフェロンに未結合の過剰炭水化物のために水の存在下で結晶成長の促進を回避するために、あまり高くするべきでない。１つの態様において、調製物中の抗酸化剤の量は酸化の問題により決定される。１つの態様において、調製物中のアミノ酸の量は酸化の問題及び／又は吹き付け乾燥中の粒子の成形性により決定される。１つの態様において、調製物中のバッファーの量は前処理の問題、凝集の問題及び／又は吹き付け乾燥中の粒子の成形性により決定される。バッファーは、すべての賦形剤が可溶化される時に、処理、例えば、吹き付け乾燥中にインターフェロンを安定化することができる。概括的に多量すぎるバッファーはその後結晶化をもたらすことができる、水の存在下でバッファー系を生成する可能性がある。
【００２０】
乾燥粒子調製物中に包含することができる炭水化物の例はそれらに限定はされないが、単糖類（例えば、果糖、麦芽糖、ガラクトース、ブドウ糖、Ｄ−マンノース及びソルボース）、二等類（例えば、乳糖、蔗糖、トレハロース、セロビオース）、多糖類（例えば、ラフィノース、メレジトース、マルトデキストリン、デキストラン及びデンプン）並びにアルジトール（アクリルポリオール）（例えば、マンニトール、キシトール、マルチトール、ラクチトール、キシリトール、ソルビトール、ピラノシルソルビトール及びミオインシトール）を包含する。好ましい炭水化物は非還元糖、例えば、スクロース、トレハロース、マンニトール及びデキストランを包含する。
【００２１】
乾燥粒子調製物中に包含することができる抗酸化剤の例はそれらに限定はされないが、メチオニン、アスコルビン酸、チオ硫酸ナトリウム、カタラーゼ、白金、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、クエン酸、システイン、チオグリセロール、チオグリコール酸、チオソルビトール、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、プロピルガレートを包含する。
【００２２】
乾燥粒子調製物中に包含することができるアミノ酸の例はそれらに限定はされないが、アルギニン、メチオニン、グリシン、ヒスチジン、アラニン、Ｌ−ロイシン、グルタミン酸、イソロイシン、Ｌ−スレオニン、２−フェニルアミン、ヴァリン、ノルヴァリン、プラリン、フェニルアラニン、トリプトファン、セリン、アスパラギン、システイン、チロシン、リシン及びノルロイシンを包含する。好ましいアミノ酸は容易に酸化するもの、例えば、システイン、メチオニン及びトリプトファンを包含する。
【００２３】
乾燥粒子調製物中に包含することができるバッファーの例はそれらに限定はされないが、クエン酸塩、ヒスチジン、コハク酸塩、リン酸塩、マレイン酸塩、トリス、酢酸塩、炭水化物及びグリグリ（ｇｌｙ−ｇｌｙ）を包含する。好ましいバッファーはクエン酸塩、ヒスチジン、コハク酸塩及びトリスを包含する。
【００２４】
乾燥粒子調製物は例えば、界面活性剤、充填剤及び塩から選択される他の賦形剤を包含することができる。界面活性剤の例はそれらに限定はされないが、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ  ２０、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ  ８０、Ｔｗｅｅｎ  ２０、Ｔｗｅｅｎ  ８０、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ６８及び硫酸ドデシルナトリウム（ＳＤＳ）を包含する。充填剤の例はそれらに限定はされないが、マンニトール及びグリシンを包含する。塩の例はそれらに限定はされないが、塩化ナトリウム、塩化カルシウム及び塩化マグネシウムを包含する。乾燥粒子調製物中に界面活性剤を取り入れる可能な利点は本明細書中で更に考察されるであろう。
【００２５】
以下の表１は本発明の幾つかの態様に従うタンパク質粒子調製物の組成の範囲を示す。１つの態様において、乾燥粒子インターフェロン調製物は１：２：１：１．５〜２．５のインターフェロン：炭水化物：抗酸化剤及び／又はアミノ酸：バッファーを包含する。乾燥インターフェロン調製物の１例は１：２：１：１．５〜２．５のＩＦＮ−ω：スクロース：メチオニン：クエン酸塩である。もう１つの特定の例において、乾燥粒子インターフェロン調製物は１：２：１：１．５〜２．５：０．０６のインターフェロン：炭水化物：抗酸化剤及び／又はアミノ酸：バッファー：界面活性剤を包含する。
【００２６】
【表１】
2008500345.tif 000003
【００２７】
本発明の態様に従う乾燥粒子調製物は吹き付け乾燥、凍結乾燥又は成分の混合物から粒子を形成するための当該技術分野で利用可能な他の方法により調製することができる。典型的な吹き付け乾燥法は、冷凍温度から室温に維持することができる試料室中に、タンパク質及び安定化賦形剤を含有する噴霧溶液を充填する工程を包含することができる。凍結温度は一般的にタンパク質の安定度を促進する。次に供給ポンプが噴霧溶液をノズル噴霧器中に噴霧する。同時に、噴霧されるガス（典型的には空気、チッソ又は不活性ガス）がノズル噴霧器の出口に向けられて、噴霧溶液からの液滴の霧を形成する。液滴の霧は即座に乾燥室内の乾燥ガスと接触される。乾燥ガスは液滴から溶媒を除去し、乾燥粒子を回収室内に運搬する。
【００２８】
本発明の態様に従う懸濁調製物は本発明の態様に従う乾燥粒子調製物を非水性の疎水性ビヒクル中に取り入れることにより調製される。非水性の疎水性ビヒクルは溶媒、液体又は非液体ポリマー、液体又は非液体の非ポリマー及び界面活性剤の任意の組み合わせであることができる。
【００２９】
１つの態様において、本発明の懸濁調製物中に使用される非水性の疎水性ビヒクルは生物分解性である、すなわちそれは生物学的環境に反応して長期間の間に崩壊又は分解する。この分解は、酵素の作用、酸化、還元、加水分解（例えば、タンパク質分解）、置換、あるいは可溶化、エマルション又はミセルの形成による分解、によるような１種又は複数の物理的又は化学的工程により起ることができる。１つの態様において、ビヒクルの成分はビヒクルが１ｋＰ〜１，０００ｋＰ、好ましくは５ｋＰ〜２５０ｋＰ、より好ましくは５ｋＰ〜３０ｋＰの範囲内の粘度を有するように選択される。１つの態様において、長期間にわたり、高温、例えば、３７℃以上で生体分子の安定度を維持するためには、ビヒクルの成分はビヒクルが生体分子と反応しないように選択される。ビヒクルの成分はビヒクルが選択される生体分子及び粒子賦形剤に対してほとんど又は全く溶解性をもたず、それにより選択される生体分子及び賦形剤を乾燥粒子として維持し、それにより選択される生体分子の安定度を維持するように選択することができる。
【００３０】
もう１つの態様において、懸濁調製物は非ポリマーを包含する非水性の単一相の疎水性のビヒクル中に本発明の１つの態様に従う乾燥粒子調製物を懸濁することにより調製される。使用に適する非ポリマー物質の例はそれらに限定はされないが、疎水性糖類物質、オルガノゲル又は単一相ビヒクルとして行動する脂質物質、例えば、脂質ゲル（例えば、ジ
オレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ））を包含する。代表的な糖類物質はそれらに限定はされないが、外界又は生理学的温度で流体として存在するスクロースエステル、例えば、スクロースアセテートイソブチレート（ＳＡＩＢ）を包含する。ビヒクルは１種又は複数の溶媒を包含しても、又は包含しなくてもよい。例えば、液体の非ポリマーであるＳＡＩＢは「生のまま」、すなわち他の補助剤の添加なしに使用することができる。脂質ゲルのビヒクルを形成する（ＤＯＰＣとともに）ための溶媒の例は、それらに限定はされないが、ｎ−メチルプロパノール、綿実油、ゴマ油、大豆油、ビタミンＥ、ヒマシ油、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ  ８０及びＮ−ジメチルアセトアミドを包含する。
【００３１】
前記の非水性の単一相の疎水性ビヒクルはまた、界面活性剤、保存剤及び安定剤のような賦形剤を包含することができる。界面活性剤は、一旦調製物が使用環境に送達された後にビヒクルからの生体分子の放出を容易にするか又は生体分子がビヒクル中に懸濁される時に、生体分子の安定度を維持する補助をするためにビヒクルに包含することができる。界面活性剤が包含される時は、それは典型的には，ビヒクルの２０重量％未満、好ましくは１０重量％未満、より好ましくは５重量％未満を占めるであろう。保存剤は概括的に所望の保存効果を達成するのに十分な量のみをビヒクル中に包含される。ビヒクル中に使用することができる界面活性剤の例はそれらに限定はされないが、Ｔｗｅｅｎ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ、Ｓｐａｎ  ２０、Ｓｐａｎ  ４０、Ｓｐａｎ  ６０、Ｓｐａｎ  ８０、グリセリルカプリレート、グリセリルラウレート、ＰＥＧ−８カプリル酸カプリン酸グリセリド、ポリグリセリル−６オレエート、ジオクチルナトリウム、スルホコハク酸塩及びビタミンＥ  ＴＰＧＳを包含する。ビヒクル中に使用することができる保存剤は例えば、抗酸化剤及び抗微生物剤を包含する。有用である可能性がある抗酸化剤の例はそれらに限定はされないが、トコフェノール（ビタミンＥ）、アスコルビン酸、アスコルビルパルミテート、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン及びプロピルガレートを包含する。
【００３２】
１つの態様において、本発明の１つの態様に従う懸濁調製物は非水性の疎水性ビヒクル中に懸濁された前記のような乾燥粒子インターフェロン調製物を包含する。選択された期間にわたり所望の速度でインターフェロンの投与を許す調製物を提供するためには、種々の量の乾燥粒子インターフェロン調製物をビヒクル中に充填することができる。懸濁調製物は０．１〜４０重量％、好ましくは、０．１〜２０重量％のインターフェロンを包含することができる。懸濁調製物は６０重量％を超える、好ましくは、８０重量％を超える懸濁ビヒクルを包含することができる。
【００３３】
本発明の態様に従う懸濁調製物は埋め込み可能な薬剤送達装置からの送達のために又はデポー注射としての使用のために調製することができる。埋め込み可能な薬剤送達装置は被験体内に埋め込み後に持続的期間にわたり制御された速度で流動性調製物を送達することができるような任意の装置により具体化することができる。適した埋め込み可能な薬剤送達装置の１例は商品名ＤＵＲＯＳ（Ｒ）インプラントとして入手できるような浸透圧ポンプのインプラントである。非浸透圧ポンプのインプラントも使用することができる。懸濁調製物は送達される生体分子及び懸濁調製物を送達するために使用される埋め込み可能な薬剤送達装置に応じて、５ｍｌ／日までの流速での送達のために調製することができる。生体分子が低い流速を提供するようになっている浸透圧ポンプのインプラントから送達される場合は、調製物は好ましくは、０．５〜５μＬ／日の間の送達用に調製され、約１．５μＬ／日〜１．０μＬ／日の流速が特に好ましい。１つの態様において、本発明の１つの態様に従う懸濁調製物は埋め込み装置から１カ月、好ましくは、３カ月、より好ましくは、１年にわたり１ｎｇ／日〜６００μｇ／日の範囲内でインターフェロンを送達するように調製される。
【００３４】
前記に考察されたように、非水性の疎水性のビヒクルは親水性媒質中に放出されるとデ
ポーのように行動することができる。このデポー効果は適用に応じて望ましいかも知れないし又は望ましくないかも知れない。しかし、デポー効果が望ましいか又は許容できる場合は、疎水性ビヒクル中に懸濁される生体分子は親水性媒質の存在下でそして疎水性ビヒクルから親水性媒質中への放出期間中に疎水性ビヒクル中で安定に留まることが重要である。
【００３５】
本発明者は、乾燥粒子調製物が疎水性ビヒクルから親水性媒質中に放出される時に、本発明の乾燥粒子調製物中そして／又は本発明の乾燥粒子調製物を取り込んでいる疎水性ビヒクル中への直接の少量の界面活性剤の添加が乾燥粒子調製物中の生体分子の安定度を促進することができることを見いだした。その説に限定されることを望まないが、本発明者は、本発明の乾燥粒子調製物又は懸濁ビヒクル中への直接の少量の界面活性剤の添加が乾燥粒子調製物中の生体分子の界面動態を修飾し、それが、生体分子が疎水性ビヒクルから親水性媒質へ移動する時の生体分子の変性及び凝集の減少をもたらした可能性があると考える。とりわけ、界面活性剤は外側上に、より疎水性の賦形剤をそして内部に、より親水性の賦形剤を有する粒子を形成する補助をした可能性がある。この生体分子の分布が疎水性ビヒクルから親水性媒質への放出期間中の生体分子の安定度に重要な役割を果たした可能性がある。
【００３６】
本発明の態様に従う乾燥粒子調製物及び／又は懸濁ビヒクル中に取り込まれることができる界面活性剤はイオン性でも非イオン性でもよい。界面活性剤の幾つかの例はそれらに限定はされないが、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ  ２０、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ  ８０、Ｔｗｅｅｎｓ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ６８、硫酸ドデシルナトリウム（ＳＤＳ）、Ｓｐａｎ
２０、Ｓｐａｎ  ４０、Ｓｐａｎ  ６０、Ｓｐａｎ  ８０、ビタミンＥ  ＴＰＧＳ、カプリル酸グリセリル、ラウリン酸グリセリル、ＰＥＧ−８カプリル酸カプリン酸グリセリド、ポリグリセリル−６オレエート、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ及びジオクチルナトリウムスルホコハク酸塩を包含する。以下の表２は本発明の幾つかの態様に従う乾燥粒子調製物及び懸濁ビヒクルの界面活性剤充填量を示す。
【００３７】
【表２】
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【００３８】
疎水性ビヒクルから親水性放出速度媒質中への本発明の態様に従う乾燥粒子インターフェロン調製物の放出に対する界面活性剤の効果を算定するための研究を実施した。研究において、疎水性ビヒクルはＳＡＩＢであり、親水性放出速度媒質はリン酸バッファー溶液である。ＳＡＩＢは限定された水溶性をもつ、高粘度の疎水性液体である。それは３７℃で約３．２ｋＰの粘度を有する。ＳＡＩＢは酢酸及びイソ酪酸無水物を含む天然の糖（スクロース）の制御されたエステル化により生成される。研究に使用される材料は以下の表３に示される。
【００３９】
【表３】
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【実施例１】
【００４０】
オメガ−インターフェロンの固形粒子を、それぞれ３．３、６．６、３．３及び７．１ｍｇ／ｍＬのＩＦＮ−ω、スクロース、メチオニン及びクエン酸塩を含有する溶液濃度を有する２５ｍＭのクエン酸溶液からスクロース及びメチオニンを含むＩＦＮ−ωを吹き付け乾燥して、１：２：１：２．１５（ＩＦＮ−ω：スクロース：メチオニン：クエン酸塩）の最終組成を与えることにより得た。粒子のＳＥＭ画像は図１に示す。平均粒度は６．５１μｍである。
【実施例２】
【００４１】
１％Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ６８界面活性剤を含むＩＦＮ−ωの固形粒子を、それぞれ３．３、６．６、３．３、７．１及び０．２ｍｇ／ｍＬのＩＦＮ−ω、スクロース、メチオニン、クエン酸塩及びＰｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ６８を含有する溶液濃度を有する２５ｍＭのクエン酸溶液からスクロース及びメチオニン及びＰｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ６８（ポリエチレンオキシド−ポリプロピレンオキシド・コポリマー）を含むＩＦＮ−ωを吹き付け乾燥して、１：２：１：２．１５：０．０６（ＩＦＮ−ω：スクロース：メチオニン：クエン酸塩：Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ６８）の最終組成を与えることにより得た。ＩＦＮ−ω／賦形剤溶液に対する１％のＰｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ６８の添加は５５ｍＬのバッチサイズ（１．１ｇ固形物）において約４９％の収率を伴って有効に吹き付け乾燥した。粒子のＳＥＭ画像は図２に示す。粒子は滑らかな球形を有する。平均粒度は４．０３μｍである。
【実施例３】
【００４２】
乾燥箱中に４種の懸濁物（Ａ、Ｂ、Ｃ及びＤ）を調製し、表４に示す。適量のＳＡＩＢを秤量し、シンチレーション用ガラスバイアル中に添加した。特定の場合は同バイアルに適量の界面活性剤を添加した。バイアルを５０℃に加熱し、スパチュラで手動混合した。適量のＩＦＮ−ω粒子（実施例１又は２で調製されたような）を秤量し、バイアルに添加した。バイアルを４０℃以下の温度に加熱した。懸濁物をスパチュラを使用して混合した。
【００４３】
【表４】
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【００４４】
ＰＢＳ中のＩＦＮ−ω／ＳＡＩＢ懸濁物の安定度試料は５ｍＬのＶａｃｕｔａｉｎｅｒ（Ｒ）ガラス管中に約８ｍｇのＩＦＮ−ω／ＳＡＩＢ懸濁物を秤量し、管に２ｍＬのＰＢＳを添加することにより得た。試料を安定度試験のために３７℃で保存した。各安定度試験の時点で、試料を安定度室から取り出した。液体をＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラム）バイアル中にデカントし、急速ＲＰ−ＨＰＬＣ（逆走高速液体クロマトグラフィー）法により直接分析した。ＳＡＩＢゲルに対しては、０．１％ＳＤＳを含む５０％ＡＣＮの０．５ｍＬを管に添加し、そしてゲルを６０分間溶解し、次に２ｍＬのＰＢＳを管に添加した。曇った溶液を遠心分離し、液体層を急速ＲＰ−ＨＰＬＣ分析のためのＨＰＬＣバイアルに移した。液相及び固相からのタンパク質回収率及び総回収率を計算した。
【００４５】
ＰＢＳ中の埋め込み可能装置のレザボア中のＩＦＮ−ω／ＳＡＩＢ懸濁物の安定度試料を表５におけるように調製した。試料を初回、３日及び７日に分析した。
【００４６】
【表５】
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【００４７】
懸濁物からのタンパク質の放出期間中、ＳＡＩＢが水溶性でないのですべてのタンパク質が放出速度媒質中に瞬時には放出されなかった。３７℃における選択安定度時間中の水相からのタンパク質の回収は図３に示す。調製物Ａ（ＩＦＮ−ω／ＳＡＩＢ）に対しては
、７日後に回収されたタンパク質の割合は約５３％である。調製物Ｂ（ＩＦＮ−ω／ＳＡＩＢ＋Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ６８）に対しては、７日後に回収されたタンパク質の割合は約７３％である。調製物Ｃ（ＩＦＮ−ω／ＳＡＩＢ＋Ｓｐａｎ−４０）に対しては、７日後に回収されたタンパク質の割合は約８０％である。調製物Ｄ（ＩＦＮ−ω／Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ６８／ＳＡＩＢ）に対しては、７日後に回収されたタンパク質の割合は約６９％である。結果はＳＡＩＢビヒクル又は乾燥粒子ＩＦＮ−ω調製物中への界面活性剤の添加が７日後の水相中へのＩＦＮ−ωの放出を高めたことを示す。
【００４８】
水相及びＳＡＩＢ固相（ゲル）双方から回収された総ＩＦＮ−ωは図４に示す。調製物Ａ（界面活性剤を含まない）に対しては総回収量は経時的に減少した、例えば、３７℃において３日後に約１０％そして７日後に２５％のＰＢＳの平均低下を認めた。懸濁ビヒクル又は乾燥粒子調製物（調製物Ｂ〜Ｄ）中への界面活性剤の添加は約７日後に約９０〜１００％の総回収率をもたらした。研究により、界面活性剤は懸濁ビヒクルから放出速度媒質中へのＩＦＮ−ωの放出を高めるために、乾燥粒子ＩＦＮ−ω調製物又は懸濁ビヒクル中に界面活性剤を添加することができることが示される。
【００４９】
本発明は限定された数の態様に関して説明されてきたが、この開示の利益を有する当業者は、本明細書に開示された本発明の範囲から逸脱しない他の態様を考案することができることを認めるであろう。従って、本発明の範囲は付記の請求の範囲によってのみ限定されなければならない。
【図面の簡単な説明】
【００５０】
【図１】本発明の１つの態様に従う吹き付け乾燥ＩＦＮ−ω粒子の走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）の画像を示す。
【図２】Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ６８とともに吹き付け乾燥されたＩＦＮ−ωのＳＥＭ画像を示す。
【図３】３７℃で長期間にわたり水相から回収されたＩＦＮ−ωの部分を示す。
【図４】３７℃で長期間にわたり水相及び固相から回収された総ＩＦＮ−ωを示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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