【事件の表示】
　特許第２９４７６６８号「固体脂質粒子の懸濁液を含有する局所製剤」の請求項１ないし２１に係る特許に対する特許異議の申立てについて、次のとおり決定する。
【結　論】
　訂正を認める。
　特許第２９４７６６８号の請求項に係る特許を維持する。
【理　由】
　
(1)手続の経緯
　
　特許第2947668号の請求項1〜21に係る発明は、平成4年3月25日(優先権主張、1991年3月25日、オランダ)に特許出願され、平成11年7月2日にその特許権の設定の登録がなされ、その後、荒井純子より特許異議の申立てがなされ、平成12年6月22日付けで取消理由通知がなされ、期間延長請求がなされ、その延長された指定期間内である平成13年1月25日に訂正請求がなされたものである。
　
(2)訂正の適否についての判断
　
(2-1)訂正の内容
　
　特許権者の求める訂正は、特許第2947668号の明細書中、
　
(2-1-1)特許請求の範囲の請求項1、3〜6において、
　
「【請求項1】少なくとも1種の脂質を含有し、50及び1000nmの間の平均粒径を有する、身体への局所適用のための、非小胞固体類脂質ナノ粒子の水性懸濁液であって、該固体類脂質ナノ粒子が薬物を含有しないことを特徴とする懸濁液。」、
「【請求項3】固体類脂質ナノ粒子の濃度が懸濁液重量を基準にして0．01〜60重量％である請求項1又は2に記載の懸濁液。
【請求項4】固体類脂質ナノ粒子の濃度が懸濁液重量を基準にして5〜45重量％である請求項1〜3のいずれか1項記載の懸濁液。
【請求項5】脂質が硬質パラフィンである請求項1〜4のいずれか1項記載の懸濁液。
【請求項6】硬質パラフィンが54〜57℃の溶融温度域を有する、請求項1〜5のいずれか1項記載の懸濁液。」
とあるのを、
「【請求項1】1種の脂質を含有し、50及び1000nmの間の平均粒径を有する、身体への局所適用のための、非小胞固体類脂質ナノ粒子の水性懸濁液であって、該固体類脂質ナノ粒子が薬物を含有せず、かつ、前記脂質が、炭化水素からなる群から選択される固体脂質であり、前記ナノ粒子が、炭化水素以外の他の脂質を含有しないことを特徴とする懸濁液。」、
「【請求項3】前記脂質が硬質パラフィンである請求項1又は2に記載の懸濁液。
【請求項4】前記脂質が54〜57℃の溶融温度域を有する硬質パラフィンである、請求項1又は2に記載の懸濁液。
【請求項5】固体類脂質ナノ粒子の濃度が懸濁液重量を基準にして0.01〜60重量%である請求項1又は2に記載の懸濁液。
【請求項6】固体類脂質ナノ粒子の濃度が懸濁液重量を基準にして5〜45重量%である請求項1〜3のいずれか1項記載の懸濁液。」
と訂正し、
　
(2-1-2)特許請求の範囲の請求項16において、
　
「【請求項16】少なくとも1種の脂質を含有し、50〜1000nmの平均粒径を有する、身体への局所適用のための、非小胞固体類脂質ナノ粒子の懸濁液を生産する方法であって、
a．加熱した水性液体中で適当量の固体脂質または固体脂質の混合物を溶融し、
b．水性液体中で溶融脂質を、50〜1000nmの溶融類脂質液滴を形成させる様に激しく分散させ、
c．分散した脂質液滴が固化し、固体類脂質ナノ粒子の懸濁液が形成されるまで分散液を冷却する工程を含むことを特徴とする方法。」
とあるのを、
「【請求項16】請求項1〜9のいずれかに記載の非小胞固体類脂質ナノ粒子の懸濁液を生産する方法であって、
a．加熱した水性液体中で適当量の前記固体脂質を溶融し、
b．水性液体中で溶融脂質を、50〜1000nmの溶融類脂質液滴を形成させる様に激しく分散させ、
c．分散した脂質液滴が固化し、固体類脂質ナノ粒子の懸濁液が形成されるまで分散液を冷却する工程を含むことを特徴とする方法。」
と訂正し、
　
(2-1-3)発明の詳細な説明において、以下の訂正をするものである。
　
(a)【0006】欄中「少なくとも1種の脂質」とあるのを「1種の炭化水素からなる脂質」とする(2箇所)。
(b)【0010】欄中「少なくとも1種の脂質」とあるのを「1種の炭化水素からなる脂質」とする。
(c)【0007】欄中「または(固体)脂質混合物」とあるのを削除する。
(d)【0011】欄中「脂質の混合物を用いる場合、完全混合物……含有していてもよい。」とあるのを削除する。
(e)【0012】欄中「本発明の類脂質ナノ粒子……水素化ひまし油。」とあるのを「本発明の類脂質ナノ粒子を構成する脂質は、炭化水素(例えば固体パラフィン(硬質パラフィン))からなる群から選択される固体脂質であり、ナノ粒子は、炭化水素以外の他の脂質を含有しない。」とする。
(f)【0017】欄中「少なくとも1種の固体脂質」とあるのを「1種の炭化水素から成る固体脂質」とする。
(g)【0029】欄〜【0030】欄中「1.3　別の……懸濁液を得た。」とあるのを削除する。
(h)【0032】欄中「1.5」とあるのを「1.3」とする。
(i)【0033】欄中「1.6」とあるのを「1.4」とする。
(j)【0034】欄中「1.7」とあるのを「1.5」とする。
(k)【0038】欄〜【0039】欄中「3.2　1.3の懸濁液……性質を有していた。」とあるのを削除する。
　
(2-2)訂正の目的の適否、新規事項の有無及び拡張・変更の存否
　
　訂正(2-1-1)は、請求項1において、固体類脂質が炭化水素からなる群から選択されるもので、かつ、非小胞固体類脂質ナノ粒子が炭化水素以外の他の脂質を含有しないものに限定するものであり、固体類脂質については出願当初明細書の段落【0012】に適当なものとして「炭化水素、例えば固体パラフィン(硬質パラフィン)」が挙げられており、実施例においてもその具体例が示されているから、特許請求の範囲の減縮に該当し、それは当初明細書に記載した事項の範囲内のものである。また、訂正(2-1-1)の請求項3〜6に係る訂正は、減縮した請求項1及びその請求項1を引用した請求項2を引用した請求項3〜6を削除して、代わりにそれらに対応する請求項3〜6を追加するものであるから、特許請求の範囲の減縮に該当し、当初明細書に記載した事項の範囲内のものである。
　訂正(2-1-2)は、請求項16において、生産する方法に係る発明の処理手段に変更はなく、目的物を請求項1〜9を引用する形式に改めるものであり、その目的物は請求項1の訂正によって減縮されたものであるから特許請求の範囲の減縮に該当し、当初明細書に記載した事項の範囲内のものである。
　訂正(2-1-3)は、訂正1に伴って、対応する発明の詳細な説明の記載を訂正するものであり、いずれも明りようでない記載の釈明に該当する。そして、当初明細書に記載した事項の範囲内のものである。
　そして、いずれの訂正も実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものでもない。
　
(2-3)むすび
　
　以上のとおりであるから、上記訂正は、特許法第120条の4第2項及び同条第3項で準用する同法第126条第2項及び第3項の規定に適合するので、当該訂正を認める。
　
(3)特許異議の申立てについての判断
　
(3-1)本件特許の訂正後の請求項1〜21に係る発明は、訂正明細書の特許請求の範囲の請求項1〜21に記載した下記の通りのものである。
　
【請求項1】1種の脂質を含有し、50及び1000nmの間の平均粒径を有する、身体への局所適用のための、非小胞固体類脂質ナノ粒子の水性懸濁液であって、該固体類脂質ナノ粒子が薬物を含有せず、かつ、前記脂質が、炭化水素からなる群から選択される固体脂質であり、前記ナノ粒子が、炭化水素以外の他の脂質を含有しないことを特徴とする懸濁液。
【請求項2】少なくとも一種の乳化剤を更に含有する、請求項1に記載の懸濁液。
【請求項3】前記脂質が硬質パラフィンである請求項1又は2に記載の懸濁液。
【請求項4】前記脂質が54〜57℃の溶融温度域を有する硬質パラフィンである、請求項1又は2に記載の懸濁液。
【請求項5】固体類脂質ナノ粒子の濃度が懸濁液重量を基準にして0.01〜60重量%である請求項1又は2に記載の懸濁液。
【請求項6】固体類脂質ナノ粒子の濃度が懸濁液重量を基準にして5〜45重量%である請求項1〜3のいずれか1項記載の懸濁液。
【請求項7】固体類脂質ナノ粒子の平均粒径が100〜400nmである請求項1〜6のいずれか1項記載の懸濁液。
【請求項8】固体類脂質ナノ粒子の外部に局所有効量の薬物を更に含有する請求項1〜7のいずれか1項記載の懸濁液。
【請求項9】薬物がステロイド抗炎症化合物、抗真菌薬、介癬治療薬、抗湿疹剤、抗増殖剤及びジスラノールよりなる群から選ばれる請求項8に記載の懸濁液。
【請求項10】請求項1〜9のいずれか1項に記載の非小胞固体類脂質ナノ粒子懸濁液を含有する身体局所適用用製剤。
【請求項11】極性液体、ゲル、液体もしくは半固体脂質、またはo／w乳濁液を含有する請求項10に記載の製剤。
【請求項12】固体類脂質ナノ粒子の外部に薬物を含有する請求項10または11に記載の製剤。
【請求項13】薬物がステロイド抗炎症化合物、抗真菌薬、介癬治療薬、抗湿疹剤、抗増殖剤及びジスラノールよりなる群から選ばれる請求項12に記載の製剤。
【請求項14】身体の化粧的または医療的治療に使用するための請求項1に記載の懸濁液。
【請求項15】身体の化粧的または医療的治療に使用するための請求項10に記載の製剤。
【請求項16】請求項1〜9のいずれかに記載の非小胞固体類脂質ナノ粒子の懸濁液を生産する方法であって、
a．加熱した水性液体中で適当量の前記固体脂質を溶融し、
b．水性液体中で溶融脂質を、50〜1000nmの溶融類脂質液滴を形成させる様に激しく分散させ、
c．分散した脂質液滴が固化し、固体類脂質ナノ粒子の懸濁液が形成されるまで分散液を冷却する工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項17】工程a．が、少なくとも一種の乳化剤の存在下に行われる、請求項16に記載の方法。
【請求項18】請求項16又は17に記載の非小胞固体類脂質ナノ粒子懸濁液を含有する製剤を生産する方法であって、固体類脂質ナノ粒子懸濁液に、極性液体、かかる液体に基づくゲル、液体もしくは半固体脂質、o／w乳濁液または上記物のいずれかの混合物を添加して、固体類脂質ナノ粒子が懸濁した溶液、ゲル、w／o乳濁液またはo／w乳濁液を作成する更なる工程を包含する方法。
【請求項19】前記極性液体が水性である、請求項18に記載の方法。
【請求項20】請求項16又は17に記載の非小胞固体類脂質ナノ粒子懸濁液及びこれらのナノ粒子の外部に薬物を含有する製剤を生産する方法であって、固体類脂質ナノ粒子の懸濁液の連続相に、または固体類脂質ナノ粒子が懸濁した溶液、ゲル、w／o乳濁液またはo／w乳濁液に、局所有効量の薬物を添加する更なる工程を包含する方法。
【請求項21】医薬上許容される賦形剤を更に添加する、請求項20に記載の方法。
　
(3-2)特許異議申立ての理由の概要
　
　特許異議申立人は、甲第1号証〜甲第3号証を提出し、(ア)本件特許の請求項1〜7、10、11、14〜19に係る発明は、特開平3-2112号公報(甲第1号証)に記載された発明であるから、特許法第29条第1項第3号に該当するので特許を受けることができないものであり、(イ)本件特許の請求項6、8、9、12、13、16〜21に係る発明は、特開平3-2112号公報(甲第1号証)に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第29条第2項の規定により特許を受けることができないものであり、(ハ)本件特許の請求項1〜7、10、11、14〜19に係る発明は、特願平3-53370号(特開平5-220383号(甲第2号証))の願書に最初に添付した明細書に記載された発明と同一であるから、特許法第29条の2の規定により特許を受けることができないものであると主張している。
　
(3-3)当審の判断
　
(3-3-1)証拠方法に記載された発明
　
(a)特開平3-2112号公報(甲第1号証)には、「1.液体担体中にワックス分散物を含んでいる非発泡性で流動性の組成物であって、その分散相は粒度500nm未満の粒子の安定な微小分散物であり該粒子は本質的には1種のワックス又はワックス混合物からなり、該ワックス又は該混合物は終末の融点が60℃より高く100℃より低く、前述の微小分散物を形成し得るものであり、該組成物はワックス0.1乃至40重量%、非イオン系又はアニオン系乳化剤の少なくとも1種0.01乃至25重量%及び水の少なくとも35重量%を含んでおり、ワックス／乳化剤の重量比は1乃至30の範囲であり、該組成物はカチオン系界面活性剤を含んでいないことを特徴とする毛髪用化粧料組成物又は化粧料組成物担体。」(特許請求の範囲第1項)、「2.ワックスはカルナウバワックス又はカンデリラワックス又はそれらの混合物のほかに別のワックス又は別のワックスの混合物を含んでいる請求項1記載の化粧品組成物又は担体。」(特許請求の範囲第2項)、「4.別のワックスはパラフィンワックス、オゾケライト、水素添加したジョジョバワックス、稲ワックス、場合によってはエステル化した蜜蝋、又はセラミドである請求項3記載の化粧品組成物又は担体。」(特許請求の範囲第4項)、「9.液体担体は水からなる請求項1乃至8の何れかに記載の化粧料組成物又は担体。」(特許請求の範囲第9項)、「10.ワックス／乳化剤の重量比率は1乃至20の範囲にある請求項1乃至9の何れかに記載の化粧料組成物又は担体。」(特許請求の範囲第10項)の発明が記載されており、そして、「本発明はワックスの微小分散物を含有する毛髪用の化粧料組成物又は化粧料組成物担体ならびにこれらの組成物による毛髪のための美容処理法に関する。」(公報2頁右上欄から左下欄)、「今回この種のワックス微小分散物が調髪に量感をもたらしまた毛髪とくに繊細なかつしなやかな毛髪に厚さを与える調髪用ローションとしてとくに使用できることが見出された：これらのローションによって毛髪の先端まで毛髪を抑えぴったり覆うようにして毛髪を滑らかに且つ艶出しすることができる。これらはまた主要活性成分としてワックスすなわち脂肪物質として分類される物質を含んでいるのに拘わらず髪に脂ぎった外観をもたらさず逆にその出現を遅くする意外な特性も呈する。」(3頁左上欄〜右上欄)、「本発明による組成物は微小乳濁物の熱間生成により作られる。より詳しくは、これらの組成物は主に、ワックス及び乳化剤をワックス融点より高く100℃を超えない温度に場合によっては一部分の水の存在下にワックスの完全溶融まで加熱し、該温度以上の温度とした水又は残部の水を徐々に添加し連続水相中のワックスの微小乳濁物の生成まで攪拌し、これを室温まで冷却させるとワックスの微小分散物となるようにすることを特徴とする方法によって作られる。場合によっては生物中に存在している二次的成分は情況に応じて原料に又は製品の組成物中に添加する。揮発性ではない水溶性の成分は場合によっては微小分散物を作るために用いられる水に添加できる。」(公報6頁左上欄〜右上欄)という記載もある。
　
(b)特願平3-53370号(特開平5-220383号(甲第2号証))の願書に最初に添付した明細書(以下、先願明細書という。)には、「単一相で構成される液体ビヒクル中のロウの分散物の形で存在している流体組成物であって、分散相は0.5μm末満の大きさの粒子を含有している安定な微小分散物であり、該粒子は少なくとも1種のロウと少なくとも1種のカチオン系乳化剤と場合によっては少なくとも1種の油及び／又は少なくとも1種の油溶性活性成分との混合物から本質的になり、該混合物は50℃より高く100℃より低い最終融点を有し、該組成物は0.1〜40重量%のロウと0.01〜25重量%の乳化剤とを含有し、油が存在する場合にはその濃度はロウ又はロウの混合物の重量につき30重量%以下である、流体混合物。」(請求項1)、「乳化剤は11〜16のHLB値を有する請求項1記載の組成物。」(請求項6)、「前記のロウはカルナウバロウ、カンデリラロウ又はこれの混合物以外に別のロウ又は該別のロウの混合物を含有する請求項10記載の組成物。」(請求項11)、「別のロウはパラフィンロウ、オゾケライト、水添ジョジョバロウ、米ロウ又は場合によってはエステル化した蜜ロウである請求項11に記載の組成物。」(請求項12)、「液体ビヒクルは液相の重量につき70〜100重量%の水を含有する請求項1記載の組成物。」(請求項15)、「毛髪用ローションの形で構成される請求項1記載の組成物。」(請求項23)、「場合によっては油及び／又は油溶性物質を添加したロウと乳化剤との混合物を、該混合物の溶融温度よりも高いが100℃を越えない温度で、場合によっては一部分の水の存在下に溶融が完了するまで、加熱し、次いで水性連続相中にロウの微小エマルジョンが形成されるまで前記の温度に少なくとも等しい温度に加熱した水又は残りの水を攪拌により徐々に添加し、次いでロウの微小エマルジョンを室温にまで冷却させこれによってロウの微小分散物を生成することからなる、請求項1記載の流体組成物の製造方法。」(請求項24)が記載されており、また、実施例には粒子の平均直径が15〜350nmのものが示されている。
　請求項1の「0.5μm末満の大きさの粒子」は「0.5μm未満の大きさの粒子」の誤記と認められる。
　
(c)甲第3号証(「化学大辞典7」(共立出版社昭和51年9月10日発行)p.177)には、パラフィンろうは、石油から分離され、精製された結晶性パラフィンの製品をいい、融点はおよそ37.8〜64.5℃に変化することが記載されている。
　
(3-3-2)申立理由(ア)(イ)について
　
　訂正後の本件請求項1に係る発明(以下、本件発明1という。)と甲第1号証に記載された発明(以下、引用発明ということがある。)を比較する。引用発明のワックスは本件発明1の固体類脂質に該当し、その粒径は引用発明では500nm未満、本件発明1では50及び1000nmの間の平均粒径であるから、両者は重複した範囲のものを含んでおり、引用発明の粒子は本質的には1種のワックス又はワックス混合物からなるものであるから、非小胞であり、かつその粒子は薬物を含有しないものである。また、引用発明の組成物は毛髪用化粧料組成物であるから、身体の局所適用のためのものであり、引用発明の液体担体は水からなるものであるから、水性のものである。さらに、本件発明1の組成物は懸濁液とされているが、「大抵の場合には乳化剤が必要とされ」(本件特許公報【0013】欄)、その場合は乳濁液となっていると考えられるから、引用発明の水、ワックス、乳化剤等からなる組成物と相違はない。
　よって、本件発明1の脂質が炭化水素からなる群から選択される固体脂質であって、かつ、固体類脂質ナノ粒子が、炭化水素以外の他の脂質を含有しないのに対し、引用発明では脂質の種類についてそのような特定をしていない点でのみ相違し、他の点では一致している。
　引用発明には、その発明の態様として、ワックス(固体脂質)がカルナウバワックス又はカンデリラワックス又はそれらの混合物のほかに別のワックス又は別のワックスの混合物を含んでいるものも含まれており、その別のワックスとしてパラフィンワックス(炭化水素からなる脂質)が挙げられているが、カルナウバワックス等の非炭化水素質のワックスとの併用であり、ナノ粒子として炭化水素からなる脂質を単独で使用することについて記載、示唆はされておらず、具体的な実施態様も示されていない。
　よって、本件発明は甲第1号証に記載された発明であるとすることはできない。
　
　また、本件発明1は、皮膚の閉塞(occlusion)によって表皮を通しての水の損失の減少を引き起こす「障壁」(barrier)を形成し、皮膚の軟化、薬物のより良い浸透を起こし、また、製剤中の刺激性薬物による刺激を抑えるという格別の効果を奏するものであり、その効果について甲第1号証には何等の記載あるいは示唆はないし、一方、甲第3号証はパラフィンロウの由来、融点等を示すのみで、本件発明1の効果と脂質の関係について教唆するような記載はなく、炭化水素からなる脂質のナノ粒子についての記載もないから、本件発明1が甲第1号証及び甲第3号証に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものとすることはできない。
　
　また、本件請求項2〜9、14に係る発明は、本件発明1をさらに特定した懸濁液に係る発明、請求項10〜13に係る発明は請求項1〜9に係る発明の懸濁液を含有する製剤に係る発明、請求項15に係る発明は請求項10に係る発明の製剤をさらに特定した製剤に係る発明であり、本件発明1が前記のとおり甲第1号証に記載された発明ではなく、甲第1号証及び甲第3号証に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものでもないから、本件請求項2〜15に係る発明は、同様の理由により、甲第1号証に記載された発明ではなく、甲第1号証及び甲第3号証に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものでもない。
　
　本件請求項16〜21に係る発明は、請求項1〜9に係る発明の懸濁液の製造方法に係る発明であり、製造する懸濁液が前記のとおり甲第1号証に記載された発明のものと異なるものであり、甲第1号証に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものでもないから、その製造方法に係る発明も甲第1号証に記載された発明とすることはできないし、甲第1号証に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものとすることもできない。甲第3号証にはそのような懸濁液又はその製造について記載はないから、甲第1号証及び甲第3号証に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものとすることもできない。
　
(3-3-3)申立理由(ウ)について
　
　本件発明1と先願明細書に記載された発明(先願発明という。)を比較する。先願発明の流体組成物は液体ビヒクル中にロウが分散物の形で存在しているものであり、ロウは本件発明の脂質に該当し、その粒子のサイズは0.5μm未満であり、実施例には粒子の平均直径が15〜350nmのものが示されているから、本件発明1の50及び1000nmの間の平均粒径のものと重複した範囲をもち、ロウはカルナウバロウ等の室温で固体のもので、それが水を含有する液体中に微粒子の固体物質として存在しているのであるから、流体組成物が本件発明の非小胞固体脂質ナノ粒子の水性懸濁液である点で一致しており、その用途は、化粧料組成物又はその担体であるから、身体の局所適用のためのものである点でも一致している。
　ただ、本件発明1の脂質が炭化水素からなる群から選択される固体脂質であって、かつ、固体類脂質ナノ粒子が、炭化水素以外の他の脂質を含有しないものであるに対し、先願発明では脂質の種類についてそのような特定をしていない点でのみ相違している。
　先願発明では、その発明の態様として、ロウ(固体脂質)がカルナウバロウ又はカンデリラロウ又はそれらの混合物のほかに別のロウ又は別のロウの混合物を含んでいるものも含まれており、その別のロウとしてパラフィンロウ(炭化水素からなる脂質)が挙げられているが、カルナウバロウ等の非炭化水素質のロウとの併用であり、ナノ粒子として炭化水素からなる脂質を単独で使用することについて記載、示唆はされておらず、具体的な実施態様も示されていない。
　よって、本件発明は先願発明と同一であるとすることはできない。
　
　また、本件請求項2〜7、14に係る発明は、本件発明1をさらに特定した懸濁液に係る発明、請求項10〜11に係る発明は請求項1〜9に係る発明の懸濁液を含有する製剤に係る発明、請求項15に係る発明は請求項10に係る発明の製剤をさらに特定した製剤に係る発明であり、本件発明1が前記のとおり先願発明と同一ではないから、本件請求項2〜7、10、11、14に係る発明も、同様の理由により、先願発明と同一ではない。
　本件請求項16〜19に係る発明は、請求項1〜9に係る発明の懸濁液の製造方法に係る発明であり、製造する懸濁液が前記のとおり先願発明のものと同一ではないから、その製造方法に係る発明も先願発明と同一であるとすることはできない。
　
(3-4)むすび
　
　以上のとおりであるから、特許異議申立の理由および証拠方法によっては、本件請求項1〜請求項21に係る発明の特許を取り消すことはできない。
　また、他に本件請求項1〜請求項21に係る発明の特許を取り消すべき理由を発見しない。
　よって、結論のとおり決定する。
【異議決定日】
平成１３年３月２９日（２００１．３．２９）
【訂正の要旨】
訂正の要旨
　特許第２９４７６６８号の明細書中、
（１）特許請求の範囲の請求項１、３〜６において、
「【請求項１】少なくとも１種の脂質を含有し、５０及び１０００ｎｍの間の平均粒径を有する、身体への局所適用のための、非小胞固体類脂質ナノ粒子の水性懸濁液であって、該固体類脂質ナノ粒子が薬物を含有しないことを特徴とする懸濁液。」、
「【請求項３】固体類脂質ナノ粒子の濃度が懸濁液重量を基準にして０．０ｌ〜６０重量％である請求項１又は２に記載の懸濁液。
　【請求項４】固体類脂質ナノ粒子の濃度が懸濁液重量を基準にして５〜４５重量％である請求項１〜３のいずれか１項記載の懸濁液。
　【請求項５】脂質が硬質パラフィンである請求項１〜４のいずれか１項記載の懸濁液。
　【請求項６】硬質パラフィンが５４〜５７℃の溶融温度域を有する、請求項１〜５のいずれか１項記載の懸濁液。」
とあるのを、特許請求の範囲の減縮を目的として、
「【請求項１】１種の脂質を含有し、５０及び１０００ｎｍの間の平均粒径を有する、身体への局所適用のための、非小胞固体類脂質ナノ粒子の水性懸濁液であって、該固体類脂質ナノ粒子が薬物を含有せず、かつ、前記脂質が、炭化水素からなる群から選択される固体脂質であり、前記ナノ粒子が、炭化水素以外の他の脂質を含有しないことを特徴とする懸濁液。」、
「【請求項３】前記脂質が硬質パラフィンである請求項１又は２に記載の懸濁液。
　【請求項４】前記脂質が５４〜５７℃の溶融温度域を有する硬質パラフィンである、請求項１又は２に記載の懸濁液。
　【請求項５】固体類脂質ナノ粒子の濃度が懸濁液重量を基準にして０ｍ〜６０重量％である請求項１又は２に記載の懸濁液。
　【請求項６】固体類脂質ナノ粒子の濃度が懸濁液重量を基準にして５〜４５重量％である請求項１〜３のいずれか１項記載の懸濁液。」
と訂正する。
（２）特許請求の範囲の請求項１６において、
「【請求項１６】少なくとも１種の脂質を含有し、５０〜１０００ｎｍの平均粒径を有する、身体への局所適用のための、非小胞固体類脂質ナノ粒子の懸濁液を生産する方法であって、
ａ．加熱した水性液体中で適当量の固体脂質または固体脂質の混合物を溶融し、
ｂ．水性液体中で溶融脂質を、５０〜１０００ｎｍの溶融類脂質液滴を形成させる様に激しく分散させ、
ｃ．分散した脂質液滴が固化し、固体類脂質ナノ粒子の懸濁液が形成されるまで分散液を冷却する工程を含むことを特徴とする方法。」
とあるのを、特許請求の範囲の減縮を目的として、
「【請求項１６】請求項１〜９のいずれかに記載の非小胞固体類脂質ナノ粒子の懸濁液を生産する方法であって、
ａ．加熱した水性液体中で適当量の前記固体脂質を溶融し、
ｂ．水性液体中で溶融脂質を、５０〜１０００ｎｍの溶融類脂質液滴を形成させる様に激しく分散させ、
ｃ．分散した脂質液滴が固化し、固体類脂質ナノ粒子の懸濁液が形成されるまで分散液を冷却する工程を含むことを特徴とする方法。」
と訂正する。
（３）発明の詳細な説明において、明りようでない記載の釈明を目的として、以下の訂正をする。
（３−１）【０００６】欄中「少なくとも１種の脂質」とあるのを「１種の炭化水素からなる脂質」とする（２箇所）。
（３−２）【００１０】欄中「少なくとも１種の脂質」とあるのを「１種の炭化水素からなる脂質」とする。
（３−３）【０００７】欄中「または（固体）脂質混合物」とあるのを削除する。
（３−４）【００１１】欄中「脂質の混合物を用いる場合、完全混合物……含有していてもよい。」とあるのを削除する。
（３−５）【００１２】欄中「本発明の類脂質ナノ粒子……水素化ひまし油。」とあるのを「本発明の類脂質ナノ粒子を構成する脂質は、炭化水素（例えば固体パラフィン（硬質パラフィン））からなる群から選択される固体脂質であり、ナノ粒子は、炭化水素以外の他の脂質を含有しない。」とする。
（３−６）【００１７】欄中「少なくとも１種の固体脂質」とあるのを「１種の炭化水素から成る固体脂質」とする。
（３−７）【００２９】欄〜【００３０】欄中「１．３　別の……懸濁液を得た。」とあるのを削除する。
（３−８）【００３２】欄中「１．５」とあるのを「１．３」とする。
（３−９）【００３３】欄中「１．６」とあるのを「１．４」とする。
（３−１０）【００３４】欄中「１．７」とあるのを「１．５」とする。
（３−１１）【００３８】欄〜【００３９】欄中「３．２　１．３の懸濁液……性質を有していた。」とあるのを削除する。
（５４）【発明の名称】
固体脂質粒子の懸濁液を含有する局所製剤
（５７）【特許請求の範囲】
　【請求項１】　
１種の
ず、かつ、前記脂質が、炭化水素からなる群がら選択される固体脂質であり、前記ナノ粒子が、炭化水素以外の他の脂質を含有しない
　【請求項２】　少なくとも一種の乳化剤を更に含有する、請求項１に記載の懸濁液。
　
【請求項３】
前記固体脂質が、硬質パラフィンである、請求項１又は２に記載の懸濁液。
　
【請求項４】
前記脂質が、５４〜５７℃の溶融温度域を有する硬質パラフィンである、請求項３のいずれかに記載の懸濁液。
　
【請求項５】
固体類脂質ナノ粒子の濃度が懸濁液重量を基準にして０．０１〜６０重量％である請求項１又は２に記載の懸濁液。
　
【請求項６】
固体類脂質ナノ粒子の濃度が懸濁液重量を基準にして５〜４５重量％である請求項１〜３のいずれか１項記載の懸濁液。
　【請求項７】　固体類脂質ナノ粒子の平均粒径が１００〜４００ｎｍである請求項１〜６のいずれか１項記載の懸濁液。
　【請求項８】　固体類脂質ナノ粒子の外部に局所有効量の薬物を更に含有する請求項１〜７のいずれか１項記載の懸濁液。
　【請求項９】　薬物がステロイド抗炎症化合物、抗真菌薬、介癬治療薬、抗湿疹剤、抗増殖剤及びジスラノールよりなる群から選ばれる請求項８に記載の懸濁液。
　【請求項１０】　請求項１〜９のいずれか１項に記載の非小胞固体類脂質ナノ粒子懸濁液を含有する身体局所適用用製剤。
　【請求項１１】　極性液体、ゲル、液体もしくは半固体脂質、またはｏ／ｗ乳濁液を含有する請求項１０に記載の製剤。
　【請求項１２】　固体類脂質ナノ粒子の外部に薬物を含有する請求項１０または１１に記載の製剤。
　【請求項１３】　薬物がステロイド抗炎症化合物、抗真菌薬、介癬治療薬、抗湿疹剤、抗増殖剤及びジスラノールよりなる群から選ばれる請求項１２に記載の製剤。
　【請求項１４】　身体の化粧的または医療的治療に使用するための請求項１に記載の懸濁液。
　【請求項１５】　身体の化粧的または医療的治療に使用するための請求項１０に記載の製剤。
　【請求項１６】　
請求項１〜９のいずれかに記載の
ａ．加熱した水性液体中で適当量の
前記固体脂質
ｂ．水性液体中で溶融脂質を、５０〜１０００ｎｍの溶融類脂質液滴を形成させる様に激しく分散させ、
ｃ．分散した脂質液滴が固化し、固体類脂質ナノ粒子の懸濁液が形成されるまで分散液を冷却する工程を含むことを特徴とする方法。
　【請求項１７】　工程ａ．が、少なくとも一種の乳化剤の存在下に行われる、請求項１６に記載の方法。
　【請求項１８】　請求項１６又は１７に記載の非小胞固体類脂質ナノ粒子懸濁液を含有する製剤を生産する方法であって、固体類脂質ナノ粒子懸濁液に、極性液体、かかる液体に基づくゲル、液体もしくは半固体脂質、ｏ／ｗ乳濁液または上記物のいずれかの混合物を添加して、固体類脂質ナノ粒子が懸濁した溶液、ゲル、ｗ／ｏ乳濁液またはｏ／ｗ乳濁液を作成する更なる工程を包含する方法。
　【請求項１９】　前記極性液体が水性である、請求項１８に記載の方法。
　【請求項２０】　請求項１６又は１７に記載の非小胞固体類脂質ナノ粒子懸濁液及びこれらのナノ粒子の外部に薬物を含有する製剤を生産する方法であって、固体類脂質ナノ粒子の懸濁液の連続相に、または固体類脂質ナノ粒子が懸濁した溶液、ゲル、ｗ／ｏ乳濁液またはｏ／ｗ乳濁液に、局所有効量の薬物を添加する更なる工程を包含する方法。
　【請求項２１】　医薬上許容される賦形剤を更に添加する、請求項２０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
　【０００１】
　【産業上の利用分野】
　本発明は固体脂質粒子懸濁液、該懸濁液を含有する、身体に局所適用するための、液体または半固体製剤、及びそれらの製造に関する。
　【０００２】
　【発明の背景】
　身体に局所適用する液体または半固体製剤は非常に多く知られており、それらは一般に水性または他の極性液体、液体または半固体、またはそれらの混合物をベースにしている。製剤が水性液体と脂質物質の混合物をベースにしている場合、該製剤は脂質物質が連続相である油中水（ｗ／ｏ）乳濁液であるか、水性液体が連続相である水中油（ｏ／ｗ）乳濁液である。これらのタイプの乳濁液はそれ自身のタイプの乳化剤を用いて製造する。ヨーロッパ特許公告ＥＰ−Ｂ−６９４２３は乳濁液のタイプは存在する水性または脂質成分の相対濃度によってよりも用いた乳化剤のタイプによって決定されることを示している。ｗ／ｏタイプの既知乳濁液の例は軟膏であり、このものは一般に半固体である。既知のｏ／ｗ乳濁液の例として液体であるローション、半固体であるクリーム及びゲルが挙げられる。
　【０００３】
　上記液体または半固体ｗ／ｏまたはｏ／ｗ乳濁液に含有される液体または半固体脂質は化粧上または医療上重要な作用、すなわち閉塞（ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ）の原因である。閉塞とはかかる脂質含有乳濁液での治療後に、表皮を通しての水の損失の減少を引き起こす「障壁」（ｂａｒｒｉｅｒ）が形成されることを意味する。閉塞作用は乳濁液の脂質含量に正に相関する。結果として生ずる閉塞の望ましい化粧上の効果は皮膚の軟化である。閉塞の結果として起こる望ましい医療上の効果は閉塞性乳濁液の局所適用後の、その中に加えられた多くの薬物の皮膚中へのより良い浸透とより良い有効性である。他方、かかる脂質含有乳濁液はべとべとよごれていて、処置領域にぎらぎら光る外観を与え、また衣服を汚ごす欠点を有しており、これらの望ましくない性質もまた乳濁液の脂質含量に正に相関している。
　【０００４】
　Ｈ．ツツミら、Ｊ．Ｓｏｃ．Ｃｏｓｍｅｔ．Ｃｈｅｍ．，３０，１９７９，３４５−３５６は水、固体パラフィン（融点４８℃）、及びポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート及びソルビタンモノオレエートの混合物から製造した異なる粒径分布をの水中油乳濁液を記述した。得られた乳濁液の固体粒子は約３−６５μｍの平均直径を有していた。乳濁液の閉塞性は粒径に反比例することが見い出された。しかしながら、本発明者らの経験ではμｍ寸法の固体パラフィン粒子（マイクロ粒子）を含有するこれらのタイプの乳濁液は固有的に不安定であることが見い出された。また、これらのタイプの乳濁液は通常の乳濁液に比べより低い閉塞性しか示さないことが見い出された。
　【０００５】
　ヨーロッパ特許公告ＥＰ−Ｂ−１６７８２５は５０−１０００ｎｍの粒径の固体類脂質ナノペレット（類脂質粒子は５−７０重量％の脂質を含有する）の水性懸濁液１−２０重量％、乳化剤０．０１−７０重量％及び薬物０．０５−２５重量％よりなる経口用の薬物含有担体系を開示している。それらの小さなサイズにより、類脂質粒子は全体として胃腸管から容易に吸収される。このタイプの経口投与用薬物含有担体系の利点の中で、溶解しにくい、消化管から吸収されにくい、消化管中で化学的または酵素的に不活性化される、またはいわゆる一回通過効果（ｆｉｒｓｔ−ｐａｓｓ　ｅｆｆｅｃｔ）をこうむりやすい薬物の生物学的利用能が改善されることが特に挙げられる。
　【０００６】
　【発明の概要】
　本発明は
１種の炭化水素からなる
　
１種の炭化水素からなる
　【０００７】
　本発明はさらに該懸濁液及び製剤の製造方法であって、
ａ．加熱した水性液体中で好ましくは有効量の乳化剤の存在下に適当量の
固体脂質
ｂ．水性液体中で溶融脂質を、５０−１０００ｎｍの溶融類脂質液滴を形成させる方法で、激しく分散させ、
ｃ．分散した類脂質液滴が固化し、固体類脂質ナノ粒子の懸濁液が形成されるまで分散液を冷却し、
ｄ．工程ｃで得られる懸濁液に医薬上許容される賦形剤（ｖｅｈｉｃｌｅ）を任意的に添加し、ついで
ｅ．懸濁液の連続相または医薬上許容される賦形剤に局所有効量の１以上の薬物を任意的に添加する
工程よりなる方法を提供する。
　【０００８】
　【発明の詳しい開示】
　当分野で一般に用いられる液体または半固体脂質含有乳濁液を５０−１０００ｎｍの間の平均粒径を有する固体類脂質粒子（ナノ粒子）の懸濁液によって部分的にまたは完全に代替することによって、脂質含有乳濁液に固有であることが一般に知られている閉塞効果が維持され、他方、本発明の製剤の化粧上の性質に関する評価が当分野で既知の脂質含有乳濁液の評価に比べて大巾に改善された非常に安定な製剤が製造されることが今や見い出された。新規製剤は皮膚の軟化を与え、皮膚に柔軟性を与えるために有利に用いることができる。
　【０００９】
　新規固体類脂質ナノ粒子懸濁液の連続相に局所的に有効な薬物を有利に入れることができることがさらに見い出された。薬物含有閉塞性製剤に固有の既知の利点（そこに入れた薬物の皮膚及び爪中へのより良い浸透及び該薬物のより良い有効性が挙げられる）に加え、該新規製剤は下記の他の驚くべき効果も示す：より良い調節された薬物供給、特に持続的な放出、及びそこに入れられた本質的に刺激性の薬物の低減された刺激性。
　【００１０】
　本発明は従って
１種の炭化水素からなる
　本発明はまた該固体類脂質ナノ粒子水性懸濁液を含有する、身体への局所適用のための、製剤を提供する。
　身体への局所適用は皮膚、髪及び爪への適用を包含することが理解されよう。
　本発明の固体類脂質ナノ粒子は５０−１０００ｎｍの間の平均粒径を有する。好ましくは、粒径は１００−４００ｎｍの間であり、さらに好ましくは１５０−３００ｎｍの間である。
　【００１１】
　本発明の固体類脂質ナノ粒子の濃度は懸濁液の重量を基準にして重量で０．０１−６０％、好ましくは５−４５％、より好ましくは１０−３０％の間である。
　本発明の類脂質粒子は室温で固体である。かくして、本発明のナノ粒子の固体脂質は３０−１００℃、好ましくは４０−９５℃の間の溶融温度範囲を有する脂質
である。
　【００１２】
　本発明の類脂質ナノ粒子
を構成する脂質は、炭化水素（例えば固体パラフィン（硬質パラフィン））からなる群がら選択される固体脂質であり、ナノ粒子は、炭化水素以外の他の脂質を含有しない。
　【００１３】
　本発明の好ましい固体脂質は５４−５７℃の溶融温度範囲を有する固体パラフィンである。
　本発明の製剤を乳化剤を添加することなく製造することができる固体脂質は存在する（これらの例はスフィンゴリピドである）が、大抵の場合には乳化剤が必要とされる。
　脂質と乳化剤の混合物から形成されたナノ粒子はさらに室温で固体でなければならないことが理解されよう。
　乳化剤の濃度は用いられた脂質及び乳化剤のタイプによって変化するが、懸濁液の重量に基いて重量で０．０１−２０％、好ましくは０．１−１０％、より好ましくは１−５％であることができる。
　【００１４】
　ｗ／ｏ及びｏ／ｗ乳化剤のグループに属し、約２一約８０のＨＬＢ（親水性−親油性バランス）数を有する種々の乳化剤が加熱した水性液体中に溶融固体脂質を分散するのに有効であることが見い出された。乳化剤は好ましくは約８−４０のＨＬＢ数を有する。乳化剤の選択は使用する特定の固体脂質による。
　【００１５】
　適当な乳化剤の例は以下の通りである：
−カチオン系乳化剤、例えばセチルトリエチルアンモニウムブロミド
−アニオン系乳化剤、例えばラウリル硫酸ナトリウム
−両性乳化剤、例えばヒドロキシエチルイミダゾリン（ＶＡＲＩＮＥＴＭ）
−ブロック共重合体、例えばポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル（例えばＰＬＵＲＯＮＩＣ　Ｆ６８ＴＭ）
−非イオン系乳化剤、例えばポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（例えばＴＷＥＥＮ　２０ＴＭ）、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（例えば　ＢＲＩＪ　９７ＴＭ）及び（ＥＴＯＭＡＣＲＯＧＯＬ　１０００ＴＭ）、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル（例えばＭＹＲＪ　５２ＴＭ）、ソルビタンエステル（例えばＳＰＡＮ　８０ＴＭ）、スクロースエステル（例えばＷＡＳＡＧＥＳ　ＴＥＲ　７ＴＭ）
−及びさらなる適当な乳化剤、例えばレシチン、シリコーン系界面活性剤、ベタイン及びポリグリセロール脂肪酸エステル
　【００１６】
　好ましくは非イオン系乳化剤を用いる。さらに好ましくは乳化剤はポリオキシエチレンアルキルエーテル及びソルビタンエステルの群がら選ばれる。
　異なる乳化剤の混合物も有利に用いることができる。本発明の固体類脂質ナノ粒子の懸濁液の連続相は好ましくは水よりなるが、水と非水極性液体、例えばエチルアルコール、グリセロール、プロピレングリコール等のアルコール及びＮ−メチルピロリドン、２−ピロリドン等のピロリドンの混合物よりなっていてもよい。
　【００１７】
　本発明はさらに身体に局所適用するための固体類脂質ナノ粒子水性懸濁液を生産する方法であって、
ａ．加熱した水性液体、好ましくは水中で適切な量の
１種の炭化水素からなる
ｂ．水性液体中で溶融脂質を、５０及び１０００ｎｍの間の粒径を有する溶融類脂質液滴を形成させる方法で、激しく分散させ、
ｃ．分散した類脂質液滴が固化し、固体類脂質ナノ粒子の懸濁液が形成されるまで分散液を冷却する工程よりなる方法を提供する。
　【００１８】
　水性液体中での溶融脂質の激しい分散は溶融脂質の微小液滴の形成に必須である。これは当分野で既知の種々の方法のいずれか、例えばヨーロッパ特許公告ＥＰ−Ｂ−１６７８２５に記載された方法であって、超音波処理によって任意的に伴われた、高速混合機による機械的混合よりなる方法によって行うことができる。高剪断力ホモジナイザーバルブ機、例えばマントン−ガウリンホモジナイザーの使用よりなる方法も用いることができる。好ましい方法はマイクロ流動化（ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚａｔｉｏｎ）である。マイクロフルーイディクス社（Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ニュートン，ＭＡ，ＵＳＡによって製造されたミクロフルーイダイザー（ＭＩＣＲＯＦＬＵＩＤＩＺＥＲＴＭ）装置を５０−１０００ｎｍの範囲内の目的とするいずれかの液滴への微小化を達成させるため有利に用いることができる。液滴のサイズは用いた類脂質物質、乳化剤、処理中の温度及び圧力及び処理の持続時間等の種々の因子によってさらに影響される。
　【００１９】
　上述のようにして微小液滴を形成させた後、該類脂質液滴が固化するまで分散液を冷却して本発明の固体類脂質ナノ粒子を形成させる。冷却は当分野で既知の方法に従って積極的に行うことができる。
　【００２０】
　かくして生産された水性液体中固体類脂質ナノ粒子の懸濁液はそのまま皮膚上に用いることができ、上述の魅力的な化粧上の性質を有している。該懸濁液はまた局所的に有効な薬物を収容することができ、その結果上述の医療的に魅力的な性質を享受し得る。別法として、この懸濁液を、局所的に有効な薬物の存在と共にまたは存在なしに、適切な、好ましくは水性の、極性液体と、液体または半固体脂質と、または軟膏等のｗ／ｏ乳濁液となるかまたはローション、クリーム、ゲル等のｏ／ｗ乳濁液となることができるそれらの混合物とさらに混合することができる。身体に適用する完成製剤はさらに医薬賦形剤も含有し得る。
　【００２１】
　本発明の固体類脂質ナノ粒子の懸濁液においてまたはとともに用いることができる局所的に有効な薬物は、例えば、抗生物質、化学療法剤、抗ウイルス剤、インドメタシン等の非ステロイド性抗炎症化合物、サリチル酸及びその誘導体、止痒剤、タール製品、ニコチン酸及びその誘導体、樹脂類似物（ｒｅｔｉｎｏｉｄｓ）、ＥＰ−Ｂ−１２４１８６のイミダゾールー工タノールエステル等の皮脂合成阻害剤、創傷治癒剤、成長因子、またはヘキサクロロフエン等の消毒薬であるが、好ましくは硝酸オキシコナゾール（ｏｘｉｃｏｎａｚｏｌｅ　ｎｉｔｒａｔｅ）等の抗真菌薬、ヒドロコルチゾン、ヒドロコルチゾン−１７α−ブチレート、ブデソニド（ｂｕｄｅｓｏｎｉｄｅ）もしくはトリアムシノロンァセトニド等のステロイド系抗炎症化合物、抗増殖剤、介癬治療薬、抗湿疹剤及びジスラノールを本発明の製剤に加える。局所的に有効な薬物を２以上組み合わせて用いることも可能である。
　【００２２】
　本発明の固体類脂質ナノ粒子懸濁液と混合することができる非水性極性液体は、例えば、エチルアルコール、グリセロール、プロピレングリコール等のアルコール及びＮ−メチルピロリドン、２−ピロリドン等のピロリドン類である。
　本発明の固体類脂質ナノ粒子懸濁液と、そのままでまたはｗ／ｏもしくはｏ／ｗ乳濁液として、混合することができる液体または半固体脂質の例は以下の如くである：
−ロウ、例えばハホウバ油（ｊｏｊｏｂａ　ｏｉ１）
−鉱油、例えば液体または軟質パラフィン−脂肪アルコール、例えばオレイルアルコール
−エステル、例えばミリスチン酸イソプロピル
−植物油、例えばヤシ油
−脂肪酸、例えばリノレン酸、及び
−シリコーン油。
　【００２３】
　本発明の固体類脂質ナノ粒子懸濁液と混合するべく、ｗ／ｏまたはｏ／ｗ乳濁液を用いる場合には、該乳濁液はまたかかるｗ／ｏまたはｏ／ｗ乳濁液を製造する分野で既知の適当なｗ／ｏまたはｏ／ｗ乳化剤を含有する。
　通常用いられる医薬賦形剤は緩衝剤、保存剤、抗酸化剤、加湿剤（ｍｏｉｓｔｕｒｉｚｅｒｓ）、浸透促進剤、ＵＶ吸収剤、染料及び芳香剤である。
　【００２４】
　本発明は身体に局所適用するための、固体類脂質ナノ粒子の水性懸濁液を含有する製剤を生産する方法であって、固体類脂質ナノ粒子懸濁液に適当な、好ましくは水性の、極性液体、かかる液体に基づくゲル、液体もしくは半固体脂質、ｏ／ｗ乳濁液、または上記物のいずれかの混合物を添加して固体類脂質ナノ粒子が懸濁した溶液、ゲル、ｗ／ｏ乳濁液またはｏ／ｗ乳濁液を形成させるさらなる工程よりなる方法をもさらに提供する。
　【００２５】
　本発明は固体類脂質ナノ粒子の水性懸濁液及び該ナノ粒子の外部に１以上の薬物を含有する製剤を生産する方法であって、固体類脂質ナノ粒子の懸濁液の連続相に、または固体類脂質ナノ粒子が懸濁した溶液、Ｗ／０乳濁液または０／Ｗ乳濁液に局所的に有効な量の薬物及び任意的に医薬上許容される賦形剤を添加するさらなる工程よりなる方法をもさらにまた提供する。
　【００２６】
　本明細書に引用されたすべての刊行物及び特許出願は各刊行物または特許出願が具体的及び個々的に示され、参考に加入されていかの如く参考にここに加入される。
　明確化及び理解の目的のために例示及び実施例によってある程度詳細に上記本発明を説明したが、特許請求の範囲の精神及び範囲を逸脱することなくそれにある種の変化及び修飾を加えることができることは本発明の教示に照らし当業者に容易に理解させるところであろう。
　以下の実施例は本発明を例証するものである。そこに記載した組成物について引用したすべてのパーセンテージは重量基準である。
　【００２７】
　【実施例】
実施例１
　
固体類脂質粒子懸濁液の生産
　１．１．固体類脂質マイクロ粒子懸濁液を以下のようにして生産した：
　融点が５４−５７℃に亘る固体パラフィン３００ｇを８０℃に加熱した。セトマクロゴール１０００（ＣＥＴＯＭＡＣＲＯＧＯＬ　１０００ＴＭ）（ＨＬＢ＝１６．１）５０ｇを水６５０ｍ１に８０℃で溶解した。脂質相を水相に加え、分散液を５分間夕ーラックス（ＴＵＲＲＡＸＴＭ）ホモジナイザーを２０００ｒｐｍで用いて均質化し、周囲温度に冷却した。得られた固体類脂質マイクロ粒子懸濁液は２μｍより大きな粒径を有していた（光顕微鏡検査（ｌｉｇｈｔ　ｍｉｃｒｏ　ｓｃｏｐｙ）で測定）。このものは安定でなく、２０時間の静置内に分離が起こった。
　【００２８】
　１．２．固体類脂質ナノ粒子懸濁液を以下のようにして生産した。
　融点が５４−５７℃に亘る固体パラフィン３００℃を８０℃に加熱した。５０ｇのセトマクロゴール１０００を水６５０ｍｌに８０℃で溶解した。脂質相を水相に加え、分散液を５分間ターラックスホモジナイザーを２０００ｒｐｍで用いて均質化した。この分散液をマイクロフルーイダイザー（ＭＩＣＲＯＦＬＵＩＤＺＥＲＴＭ）装置（相互作用小室Ｆ２０Ｙ及び背圧小室Ｈ３０Ｚを装備したタイプＭ−１１０Ｔ）に供給し、水浴中７０℃で加熱し、１０，０００ｐｓｉ（約６８０気圧）で操作した。
　マイクロフルーイダイザー装置に１回通した後、出てきた分散液を周囲温度に冷却した。得られた固体類脂質ナノ粒子懸濁液は１３２ｎｍの平均粒径を有しており（動的光散乱法によって測定）、非常に安定であった。３０ケ月の貯蔵後でも粒子の分離及び凝集は生じなかった。
　【００２９】
　１．３．
　スパン８５（ＳＰＡＮ　８５ＴＭ）（ＨＬＢ＝１．８）（溶融パラフィンに溶解）１０ｇと共の該固体パラフィン５０ｇ、及び８０℃の水９４０ｍｌ。
　水浴中で７０℃に加熱したマイクロフルーイダイザー装置を３回通した後、出てきた分散液を周囲温度に冷却して、１１８ｎｍの平均粒径を有する固体類脂質ナノ粒子の安定な懸濁液を得た。
　【００３０】
　
１．４．
　ホスホリポン９０（ＰＨＯＳＰＨＯＬＩＰＯＮ　９０ＴＭ）（最低９０％の水素化大豆ホスファチジルコリンと最大６％のリゾホスファチジルコリンとのレシチン混合物、ＨＬＢ±８０、Ｎａｔｔｅｒｍａｎｎ　Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ有限責任会社）（溶融パラフィンに溶解）５ｇと共の融点範囲５４−５７℃の該固体パラフィン５０ｇ、及び８０℃の水９４５ｇ。
　水浴中７０℃で加熱したマイクロフルーイダイザー装置を２回通した後、出てきた分散液を周囲温度で冷却して４２８ｎｍの平均粒径を有する固体類脂質ナノ粒子の安定な懸濁液を得た。
　【００３１】
　
１．５．
　水６００ｇに溶解した融点範囲５４−５７℃の固体パラフィン２００ｇ及びタガット０２（ＴＡＧＡＴ　０２ＴＭ）（ポリオキシエチレン−グリセリル−モノオレエート）２００ｇ。
　水浴中で８０℃に加熱したマイクロフルーイダイザー装置を１回通し、出てきた分散液を周囲温度に冷却して１４０ｎｍの平均粒径を有するナノ粒子の非常に安定な懸濁液を得た。
　【００３２】
実施例２
　
通常のクリーム、及び固体類脂質マイクロ粒子懸濁液または固体類脂質ナノ粒子を含有するクリームの生産
　２．１．通常のクリームを以下のようにして生産した。
　ペトロラタム５２ｇ、セトステアリルアルコール７２ｇ、プロピレングリコール８８．８ｇ及びｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル〔ニパジンＭ（ＮＬＰＡＧＩＮＭＴＭ）〕を一緒に７０℃で加熱した。１６ｇのセトマクロゴール１０００を水１７６ｇに７０℃で溶解した。攪拌機を２００ｒｐｍで及びターラックスホモジナイザーを２０００ｒｐｍで同時に用いて両相を混合した。分散液を減圧下周囲温度まで冷却した。
　【００３３】
　２．２．別の通常のクリームを７０℃に加熱したセトステアリルアルコール２６ｇ及び水５０ｇに７０℃で溶解した４ｇのセトマクロゴール１０００から２．１．と同様にして生産した。攪拌機を２００ｒｐｍで及びターラックスホモジナイザーを２０００ｒｐｍで同時に用いて両相を混合した。分散液を減圧下で周囲
温度に冷却した。
　２．３．固体類脂質マイクロ粒子懸濁液を含有するクリームを以下のようにして生産した：
　１．１．の懸濁液２００ｇを２．２．のクリーム８０ｇと、引き続いて混合機を２００ｒｐｍで及びターラックスホモジナイザーを２０００ｒｐｍで用いて、３０℃で混合した。得られたクリームはざらざらした外観を有していた。
　【００３４】
　２．４．２．３．と同様な方法で、１．２．の懸濁液２００ｇと２．２．のクリーム８０ｇとを混合して固体類脂質ナノ粒子懸濁液を含有するクリームを生産した。
　２．５．２．３．ど同様な方法で、ニパジンＭ２ｇを加えた１．２．の懸濁液２００ｇと２．１．のクリーム２００ｇとを混合して固体類脂質ナノ粒子懸濁液を含有する別のクリームを生産した。
　２．６．ニパジンＭ２ｇを加えた１．２．の懸濁液１３４ｇとブリジ９９（ＢＲＩＪ　９９ＴＭ）、セチルアルコール２２ｇ及びプロピレングリコール２２ｇとを攪拌機を２００ｒｐｍで用いて混合することによって固体類脂質ナノ粒子を含有するさらに別のクリームを生産した。
　【００３５】
実施例３
　
通常のゲル、及び固体類脂質ナノ粒子懸濁液を含有するゲルの生産
　３．１．トリス（トロメタミン）〔ＴＲＩＳ（ｔｒｏｍｅｔｈａｍｉｎｅ）〕でｐＨ＝５．０に調整した水９８０ｇにカーボポル９４０（ＣＡＲＢＯＰＯＬ９．４０ＴＭ）２０ｇを懸濁して通常のゲルを
生産した。
　【００３６】
実施例４
　
固体類脂質ナノ粒子を含有するローション、及び固体類脂質ナノ粒子及び薬物を含有するローションの生産
　４．１．固体類脂質ナノ粒子懸濁液を含有するローションを以下のようにして生産した。
　水１１９ｇ、ポリオキシエチレン（２０）オレイルエーテル３ｇ及びプロピレングリコール５０ｇを含有する澄明な溶液に７５℃でステアリン酸イソプロピル１５ｇ及びオクタメチルシクロテトラシロキサン１５ｇを含有する澄明な液体混合物を加えた。
　この温度で混合物を２００ｒｐｍで攪拌し、また同時にターラックスホモジナイザーを２０００ｒｐｍで用いて均質化した。得られた液体乳濁液を１００ｒｐｍで攪拌しながら３０℃に冷却した。
　この液体乳濁液に３０℃で１．２．の懸濁液１００ｇを加え、攪拌機を用いて１００ｒｐｍで混合した。
　液体乳濁液液滴及び固体類脂質ナノ粒子を含有する希薄液体ローションを得た。このローションは良好な化粧上の性質を有していた。
　【００３７】
　４．２．固体類脂質ナノ粒子及び薬物を含有するローションを以下のようにして生産した：
　１．２．の分散液にニパジンＢ５ｇ及びニパジンＡ１０ｇを加えた。この保存された分散液３３．３ｇとヒドロキシプロピルセルロースの澄明な２．１ｗｔ／ｖｏｌ％水分散液４８．３５ｇとを攪拌機を２００ｒｐｍで用いて混合した。混合物にベンジルアルコール２ｇ、ライム香気０．２ｇ、Ｎ−アセチル−システイン１５ｇ及び硝酸オキシコナゾール１．１５ｇを加え、周囲温度で１５０ｒｐｍで混合した。
　【００３８】
実施例５
　
固体類脂質ナノ粒子懸濁液を含有する軟膏の生産
　５．１．固体類脂質ナノ粒子懸濁液を含有する軟膏を以下のようにして生産した。
　３００ｒｐｍで攪拌機を用いて３０℃でステアリン酸イソプロピル２５ｇ、オクタメチルシクロテトラシロキサン５４ｇ及びセチルジメチコン（ｄｉｍｅｔｈｉｃｏｎｅ）共重合体６ｇを混合した。澄明な液体油状混合物が得られた。
　１．２．の懸濁液１００ｇを（１ｗｔ％）塩化ナトリウム水溶液２１５ｇで希釈した。
　固体類脂質ナノ粒子の水性懸濁液を油状混合物に３０℃で加え、同時に攪拌機を用いて２００ｒｐｍで攪拌した。
　得られた混合物をターラックスホモジナイザーを用いて２０００ｒｐｍで均質化し、同時に１００ｒｐｍで攪拌した。このようにして固体類脂質ナノ粒子を含有し、非常に良好な化粧上の性質を有する軟膏を得た。
　【００３９】
実施例６
　
固体類脂質ナノ粒子懸濁液及び薬物を含有するクリーム及び軟膏の生産
　６．１．乳鉢中でジスラノール５ｍｇと２．５．のクリーム５ｇとを手で混合した。
　６．２．（参考例）乳鉢中でトレチノイン１０ｍｇと２．５．のクリーム１０ｇとを手で混合した。
　６．３．乳鉢中でジスラノール１０ｍｇと２．６．のクリーム１０ｇとを手で混合した。
　【００４０】
　６．４．固体類脂質ナノ粒子及び薬物を含有するクリームを以下のようにして生産した。
　セトステアリルアルコール４１．２ｇ、ミリスチン酸イソプロピル１８．５ｇ及びオクタメチルシクロテトラシロキサン１９．６ｇを５５℃で一緒に加熱した。水１６５．６ｇに５５℃でセトマクロゴール１０００の１０．３ｇ、クエン酸（１水和物）２．４ｇ及びクエン酸三ナトリウム２．３ｇを溶解した。
　両相を攪拌機を２００ｒｐｍで用いて混合した。分散液を減圧下で３０℃の温度に冷却した。１．２．の分散液にニパジンＢ５ｇ及びニパジンＰ１０ｇを加えた。
　１．２．の保存した分散液１４６．３ｇ及びその中にヒドロコルチゾン−１７α−ブチレート０．４５ｇを溶解したプロピレングリコール４４．２ｇと上記冷却分散液とを攪拌機を２２０ｒｐｍで用いて混合した。得られたクリームを減圧下で周囲温度まで冷却した。
　【００４１】
　６．５．固体類脂質ナノ粒子及び薬物を含有する軟膏を以下のようにして生産した。
　セチルジメチコンコポリオール（ｃｏｐｏｌｙｏｌ）６ｇ、ミリスチン酸イソプロピル３０ｇ及びオクタメチルシクロテトラシロキサン５０ｇを一緒に３０℃で加熱した。１．２．の分散液にニパジンＢ５ｇ及びニパジンＰ１０ｇを加えた。１．２．の保存した分散液１００ｇ、塩化ナトリウム１ｇ、クエン酸（１水和物）２．５ｇ及びクエン酸三ナトリウム２．４ｇ、ヒドロコルチゾン−１７α−ブチレート０．３ｇ及び水１０８．１ｇを磁気攪拌機を５００ｒｐｍで用いて３０℃で混合した。
　混合後、水相を音波処理（ｓｏｎｉｆｉｃａｔｉｏｎ）によって均質化した。上述の油相に、攪拌機を用いて１７５ｒｐｍで混合しながら、均質化した水相を加えた。分散液を２００ｒｐｍで１時間及び引き続き３００ｒｐｍで１１／２時間混合した。得られたクリームを減圧下で周囲温度に冷却した。
　【００４２】
実施例７
　
固体類脂質ナノ粒子懸濁液及び薬物を含有するゲルの生産
　７．１．ジスラノール５ｍｇと３．３．のゲル５ｇとを乳鉢中で手で混合した。
　７．２．固体類脂質ナノ粒子及び薬物を含有するゲルを以下のようにして生産した。
　１．２．の分散液にニパジンＢ５ｇ及びニパジンＰ１０ｇを加えた。１．２．の保存分散液１００ｇ、ミリスチン酸イソプロピル６ｇ、クエン酸（１水和物）１．８ｇ、１０ｗｔ％水酸化ナトリウム溶液８．２ｇ、及びプロピレングリコール６０ｇ中ヒドロコルチゾン−１７α−ブチレート０．３０５ｇの溶液を攪拌機を１５０ｒｐｍでターラックスホモジナイザーを２０００ｒｐｍで用いて一緒に混合した。減圧下で１５０ｒｐｍで攪拌しながらカーボポル９８ｌの５ｗｔ％水性分散液１２８．１ｇを加えた。
　【００４３】
実施例８
　
インビトロ閉塞性試験
　以下のインビトロ閉塞性試験によって１．１．及び１．２．の懸濁液及び２．２．、２．３．及び２．４．のクリームを比較した。
　ビーカーの形態の容器を用いた。この容器は直径５．５ｃｍで高さは７ｃｍであり、その頂部に密閉させるための標準実験室濾紙（ＴＶＮ、Ｓｃｈｕｔより販売、オランダ）（表面積２３．８ｃｍ２）を受けるよう設計されていた。試験は容器に蒸留水５０ｇを入れ、上表面に試験する製剤２００ｍｇを均等に分配した該濾紙で容器を密閉し、密閉容器を３３℃及びＲＨ５８％のストーブに７２時間入れることにより行った。他の条件はすべて等しくしたので、７２時間後の容器からの水の重量損失（水流束）はもっぱら試験した製剤の閉塞性によっていた。
　試験した製剤の閉塞因子Ｆは次式によって計算した。
　Ｆ＝１００（（Ａ−Ｂ）／Ａ）
式中、Ａは非被覆濾紙を通しての水流束であり、Ｂは試験した製剤によって被覆された濾紙を通しての水流束である。
　すべての製剤を３回試験したが、１つの製剤についての結果の間のふれは最大で１０％であった。以下の表１は閉塞因子Ｆの平均値を示す。
　【００４４】
　これらの結果から、固体類脂質マイクロ粒子は固体類脂質ナノ粒子に閉塞性効果において大巾に劣ること、及びクリームヘの固体類脂質マイクロ粒子の添加はクリームの閉塞性を低下させるが、クリームヘの固体類脂質ナノ粒子の添加はクリームの閉塞性を高めることが明らかである。
　【００４５】
　実施例９ラビット皮膚に対するインビボジスラノール刺激性試験６．１．及び６．３．のジスラノール含有クリーム及び７．１．のジスラノール含有ゲルの刺激性をＥｓｓｅｘ研究所の市販クリームであり、ジスラノール０．１％を含有するプソリクレム（ＰＳＯＲＩＣＲＥＭＥＴＭ）製品と比較して試験した。
　４匹のラビット（ニュージーランドホワイト種の白子雌）の背中を剃った。次の日に試験する製剤を、ａ−ｓｅｌｅｃｔ方式で（ｉｎ　ａｎ　ａ−ｓｅｌｅｃｔ　ｍａｎｎｅｒ）無作為化して、背中あたり８つの製剤で、１回適用した。各適用においては皮膚面積２×２ｃｍに製剤０．０５ｍｌを適用した。製剤適用２０及び１４０時間後に、皮膚刺激を０−４の任意的な尺度（０は紅班なしを４は重度の紅班を示す）に従って２人の別個の評点者によって評価した。表２に平均刺激評点を示す。
　【００４６】
　これらの結果から、本発明の製剤が同量の刺激性薬物を含有する通常の製剤に比べ皮膚に対する刺激がはるかに小さいことが明白である。
　【００４７】
実施例１０
　
マウス皮膚に対するインビボジスラノール抗増殖活性試験
　６．１．及び６．３．のジスラノール含有クリーム及び７．１．のジスラノール含有ゲルの活性をＥｓｓｅｘ研究所の市販クリームであってジスラノール０．１％を含有するプソリクレム製品と比較して試験した。
　表皮のＤＮＡへのチミジンの取込みの減少をジスラノールの抗増殖活性の尺度として用いた。
　１群１０匹の無毛マウス（Ｈｒ／ｈｒ，Ｂｏｍｍｉｃｅ，雌性）の群を用いた。試験する製剤をマウスの皮膚の２×２ｃｍの領域に２５μｌの量ほど適用し、非処置皮膚（対照）の２×２ｃｍと比較した。適用１時間後に２５μＣｉ３Ｈ−チミジン（Ａｍｅｒｓｈａｍ）を含有する２５μｌの皮下注射をマウスに施した。適用３時間後にマウスを殺し、それらの処置及び非処置の２×２ｃｍ皮膚領域を調製し、それらの表皮を２Ｍ臭化カリウム中でのインキュベーションによって分離した。ついで、２時間で表皮のＤＮＡに取り込まれた放射性チミジンの量をシンチレーションカウンター（ＴＲＩ−ＣＡＲＢＴＭ，Ｐａｃｋａｒｄ）を用いて測定した。
　処置領域におけるチミジン取込み（未処置対照領域のパーセンテージとして表示）の平均値及び標準偏差を表３に示す。
　【００４８】
　これらの結果から、試験した４種のジスラノール製剤の抗増殖活性は同程度であることがわかる。
　【００４９】
実施例１１
　
ヒトについてのインビボでの組み合わせた白化（ｂｌａｎｃｈｉｎ）及び化粧品試験
　非揮発性閉塞性脂質をそれぞれ２３，２０，１２及び２８．１ｗｔ％含有する製剤６．４．，６．５．，７．２．及びロコイド（ＬＯＣＯＩＤＴＭ）クリーム（０．１ｗｔ％ヒドロコルチゾン−１７α−ブチレート，Ｂｒｏｃａｄｅｓ　Ｐｈａｒｍａ　Ｂ．Ｖ．，オランダ）をＭｃｋｅｎｚｉｅ−Ｓｔｏｕｇｈｔｏｎ血管収縮試験及び化粧品試験によって試験した。
　１１．１．Ｍｃｋｅｎｚｉｅ−Ｓｔｏｕｇｈｔｏｎ血管収縮試験
　６．４．，６．５．及び７．２．の製剤及びロコイドクリームのインビボ皮膚白化効果をＭｃｋｅｎｚｉｅ−Ｓｔｏｕｇｈｔｏｎ血管収縮試験によって比較した。
　【００５０】
　試験は非患者の志願者（女性１名、男性７名）の一団について行った。両前腕の屈筋部上の部位に、直径１５ｍｍの円形ポンチ（ｐｕｎｃｈ）を用いて軽く圧痕を付した。それらの部位は手首及びひじから少なくとも４ｃｍ離れていた。予め符号を付した（ｒｒｅｃｏｄｅｄ）製剤をこれらの部位にラテン方陣実験法（ａ　Ｌａｔｉｎ　ｓｑｕａｒｅ　ｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｄｅｓｉｇｎ）に従って適用した。製剤は標準寸法１８の短い太針を備えたＨａｍｉｌｔｏｎ注射器（Ｇａｓｔｉｇｈｔ　１７１０）を用いて専門家によって各部位あたり１０μｌ量適用した。適用部位は防護物（ａ　ｇｕａｒｄ）で、閉塞することなく、被覆し、他方、防護物はその場所に外科用テープの輪（直径：外側５０／６０ｍｍ、内側２５ｍｍ）で保持した。製剤の適用１７時間後に手当て用品（ｄｒｅｓｓｉｎｇｓ）を除去し、腕を石けん及びなまぬるい水で洗浄した。ついで、処置皮膚の発光パラメーター（ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ　ｐａｒａｍｅｔｅｒ）Ｌ＊の非処置皮膚（Ｌ＊０）に比較しての変化をＭＩＮＯＬＴＡ　ＣＨＲＯＭＡＭＥＴＥＲ　Ｃ３００ＴＭを用いて測定することにより、種々の部位での白化を評価した。この測定は製剤の除去１，３及び６時間後に行った。本実験は二重盲検方法で行った。
　この研究の結果（図１参照）は試験した４つの製剤間に統計上有意な差異がなかったことを示している。
　【００５１】
　１１．２．化粧品受容性試験
　化粧品受容性試験を行うため、６．４．，６．５．及び７．２．に従って、しかしヒドロコルチゾン−１７α−ブチレートを加えることなく製剤を調製した。参考として、ロコイドクリーム基剤（ヒドロコルチゾン−１７α−ブチレートを含有しない）及び高く評価されている化粧用非イオン性リポソームクリームであるキャンデルミル（ＣＡＮＤＥＲＭＹＬＴＭ）（ＡＬＣＯＮ，Ｇａｌｄｅｒｍａ，フランス）を用いた。すべての製剤は少量の黄色着色剤Ｅ１０２で着色し、また少量のラベンダー香気で香気づけした。
　【００５２】
　一連の（ｌｅｆｔ−ｒｉｇｈｔ）化粧品受容性研究において２０人の非患者志願者を用いて製剤を比較した。各志願者は二重盲検法で３回参加した。両前腕の屈筋部に、専門家によって、予め符号を付した製剤を適用した。志願者は製剤の外観、展伸性（Ｓｐｒｅａｄｉｎｇ　ｐｒｏｐｏｒｔｉｅｓ）、粘着性及び皮膚感触について答える必要があり、最後に彼／彼女の好みで製剤をランク付けすることを求められた。合計で６０の選択がなされた。結果を表４に示す。
　【００５３】
　【００５４】
　表４に示した結果から、３種の固体類脂質ナノ粒子含有製剤が２つの参考製剤に化粧品として優ることが明示された。
　Ｍｃｋｅｎｚｉｅ−Ｓｔｏｕｇｈｔｏｎ血管収縮試験及び化粧品受容性試験の両者の結果を考慮すると、局所製剤中の非揮発性閉塞性脂質を本発明の固体類脂質ナノ粒子懸濁液によって代替する場合には薬物の有効性が同程度に維持され、化粧品的性質の評価が増加することがわかる。
　【００５５】
実施例１２
　
固体類脂質ナノ粒子及び硝酸オキシコナゾールを含有するローション、及びＮ−アセチルシステイン及びオキシコナゾールを含有するローションを用いるインビトロ爪浸透性
　４．２．のローション、及び参考としての澄明溶液であってベンジンアルコール０．２ｇ、水０．３３ｇ及びエタノール６．５２ｇよりなるビヒクル中にＮ−アセチルシステイン１．５ｇ、硝酸オキシコナゾール０．１１５ｇ、ライム芳香０．０２ｇ及びヒドロキシプロピルセルロース０．０３７５ｇを含有する澄明溶液をオキシコナゾールのブタの爪に浸透する能力について試験した。両製剤に製剤３０μｌあたり１μＣｉの１４Ｃ−オキシコナゾールを加えた。
　ブタの爪から８ｍｍの円板を打ち抜いた。１日に２回（７日間）、適用領域を脱イオン水１５μｌ及び脱水アルコール１５μｌで２回洗浄した後、製剤２μｌを適用した。適用７日後に適用領域から３ｍｍの円板を打ち抜き、この円板をスライスして５０μｍのスライスを得た。
　【００５６】
　スライス中の標識オキシコナゾールの量をシンチレーションカウンターを用いて測定した。測定された標識オキシコナゾールの量を用いてスライス内のオキシコナゾールの全量を計算した。
　スライスあたりのオキシコナゾール量及び浸透したオキシコナゾールの全量をそれぞれ図２及び３に図示した。
　図２及び３から、固体類脂質ナノ粒子含有製剤は、Ｎ−アセチルシステイン及び硝酸オキシコナゾールを含有する製剤との比較において、爪スライスあたり及び爪全体あたりのオキシコナゾール濃度を増加させていることが明らかである。
　【００５７】
　【発明の効果】
　本発明の固体類脂質ナノ粒子懸濁液またはそれを含有する製剤は通常の乳濁液等や製剤に比し、皮膚等の閉塞効果が向上する、皮膚刺激性が低減される、化粧品としての評価が向上する、薬物の浸透性が向上する等の利点を有する。
【図面の簡単な説明】
　【図１】
　４種のヒドロコルチゾン−１７α−ブチレート含有製剤の局所適用後の、時間の関数としての皮膚の白化の図による表示である。
　【図２】
　２種の硝酸オキシコナゾール含有製剤の局所適用後の、ブタの爪中への浸透の深さの関数としての平均オキシコナゾール濃度の図による表示である。
　【図３】
　２種の硝酸オキシコナゾール含有製剤の局所適用後の、ブタの爪中に浸透したオキシコナゾールの総量の図による表示である。