(57)【要約】  本発明は、アンドロゲン受容体として作用することのできる化合物、アンタゴニスト、それを含有する医薬製剤、およびその使用方法に関する。このような使用としては、限定されるものではないが、特に、結腸癌、皮膚癌および前立腺癌などの癌の治療のための抗腫瘍剤としての使用、ならびにアンドロゲンに関連する病気に罹患している被検体においてアンドロゲン受容体アンタゴニスト活性を誘導することが挙げられる。アンドロゲンに関連する病気の例としては、限定されるものではないが、脱毛症、多毛症、行動障害、座瘡、および精子形成の抑制が望まれる場合の抑制されない精子形成が挙げられる。
2008516954.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式ＩまたはＩａ：
【化１】
2008516954.tif 000041
（式中、
Ｒ’およびＲ”は、各々独立に、Ｈ、アルコキシ、およびハロからなる群から選択され；
ＲaおよびＲbは、各々独立に、Ｈ、アルキルおよびハロからなる群から選択され；
Ｒ1およびＲ2は、各々独立に、Ｈ、ヒドロキシ、アルコキシ、ニトロ、アミノおよびジアルキルアミノからなる群から選択され；
Ｒ3およびＲ4は、各々独立に、Ｈ、ヒドロキシ、ハロ、アルコキシ、および−ＯＲ7Ｃ（Ｏ）Ｒ8（式中、Ｒ7が低級アルキレンであり、Ｒ8がアルコキシである）からなる群から選択され；
あるいは、Ｒ1およびＲ3は、ともにアルキレンジオキシであり；
あるいは、Ｒ2およびＲ4は、ともにアルキレンジオキシであり；
Ｒ5およびＲ6は、各々独立に、Ｈ、ハロゲン、ニトロおよびアルコキシからなる群から選択され；
Ｘ1はＮであるか、またはＸ1は、Ｈ、アルコキシもしくはニトロと結合しているＣであり；かつ
Ｘ2はＮであるか、またはＸ2は、Ｈ、アルコキシもしくはニトロと結合しているＣである；
但し、クルクミンはそれから除外される）の化合物；
またはその製薬上許容される塩。
【請求項２】
Ｒ1およびＲ2が、各々独立に、アルコキシ、ニトロ、アミノ、およびジメチルアミノからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ1およびＲ3が、ともにメチレンジオキシまたはエチレンジオキシである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ2およびＲ4が、ともにメチレンジオキシまたはエチレンジオキシである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ5およびＲ6が、各々独立に、Ｈ、Ｆ、およびニトロからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
式ＩＩ：
【化２】
2008516954.tif 000042
（式中、
Ｒ11およびＲ12は、各々独立に、アルコキシ、ニトロ、アミノ、およびジアルキルアミノからなる群から選択され；
Ｒ13およびＲ14は、各々独立に、ヒドロキシ、アルコキシ、−ＯＲ18Ｃ（Ｏ）Ｒ19（式中、Ｒ18は低級アルキレンもしくはアルケニレンであり、Ｒ19はアルコキシである）、およびテトラヒドロピラニルからなる群から選択され；
あるいは、Ｒ11およびＲ13は、ともにアルキレンジオキシであり；
あるいは、Ｒ12およびＲ14は、ともにアルキレンジオキシであり；
Ｒ15およびＲ16は、各々独立に、Ｈ、ハロゲン、およびニトロからなる群から選択され；
Ｒ17は、−Ｒ20Ｃ（Ｏ）ＯＲ21（式中、Ｒ20がアルキレンもしくはアルケニレンであり、Ｒ21がＨもしくはアルキルである）であり、；
Ｘ3はＮであるか、またはＸ3は、Ｈ、アルコキシもしくはニトロと結合しているＣであり；かつ
Ｘ4はＮであるか、またはＸ4は、Ｈ、アルコキシもしくはニトロと結合しているＣである）の化合物；
またはその製薬上許容される塩。
【請求項７】
Ｒ11およびＲ12が、各々独立に、アルコキシ、ニトロ、アミノ、およびジメチルアミノからなる群から選択される、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ11およびＲ13が、ともにメチレンジオキシまたはエチレンジオキシである、請求項６に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ12およびＲ14が、ともにメチレンジオキシまたはエチレンジオキシである、請求項６に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ15およびＲ16が、各々独立に、Ｈ、Ｆ、およびニトロからなる群から選択される、請求項６に記載の化合物。
【請求項１１】
式ＩＶ：
【化３】
2008516954.tif 000043
（式中、
Ｒ41およびＲ42は、各々独立に、ヒドロキシまたはアルコキシであり；かつ
Ｒ43およびＲ44は、各々独立に、ヒドロキシまたはアルコキシである）の化合物；
あるいはその製薬上許容される塩。
【請求項１２】
式：
【化４】
2008516954.tif 000044
の化合物またはその製薬上許容される塩。
【請求項１３】
請求項１、６、１１または１２に記載の化合物を製薬上許容される担体中に含む医薬製剤。
【請求項１４】
前記担体が水性担体である、請求項１３に記載の医薬製剤。
【請求項１５】
治療を必要とする被検体に、治療有効量の請求項１、６、１１、１２に記載の化合物もしくはクルクミン、またはその製薬上許容される塩を投与するステップを含む、癌を治療する方法。
【請求項１６】
前記癌が、皮膚癌、小細胞肺癌、精巣癌、リンパ腫、白血病、食道癌、胃癌、結腸癌、乳癌、子宮内膜癌、卵巣癌、中枢神経系癌、肝臓癌および前立腺癌からなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記癌が前立腺癌である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記癌が、結腸癌である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記被験体が抗アンドロゲン除去症候群に罹患している、請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
細胞と、請求項１、６、１１、１２に記載の化合物もしくはクルクミン、またはその製薬上許容される塩の有効量のアンドロゲン受容体アンタゴニストとを接触させるステップを含む、アンドロゲン受容体アンタゴニスト活性を誘導する方法。
【請求項２１】
前記細胞が癌細胞である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記接触させるステップがインビボで行われる、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記接触させるステップがインビトロで行われる、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
アンドロゲン受容体アンタゴニスト有効量の、請求項１、６、１１、１２に記載の化合物もしくはクルクミン、またはその製薬上許容される塩を投与するステップを含む、アンドロゲンに関連する病気に罹患している被験体においてアンドロゲン受容体アンタゴニスト活性を誘導する方法。
【請求項２５】
前記被験体が脱毛症に罹患している、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記被験体が多毛症に罹患している、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
前記被験体が行動障害に罹患している、請求項２４に記載の方法。
【請求項２８】
前記被験体が座瘡に罹患している、請求項２４に記載の方法。
【請求項２９】
前記被験体が男性被験体であり、前記有効量の前記アンドロゲン受容体アンタゴニストが精子形成を阻害する、請求項２４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、２００３年３月２７日出願、２００３年１０月３０日に英語で公開されたＰＣＴ国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２００３／００９３５０、表題Ｎｏｖｅｌ  Ｃｕｒｃｕｍｉｎ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆの一部継続出願であり、現在米国特許第６，７９０，９７９号として公開されている２００２年４月１７日出願の米国特許出願第１０／１２４，６４２号、表題Ｎｏｖｅｌ  Ｃｕｒｃｕｍｉｎ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆからの優先権を主張する。それらの開示は、引用することにより本明細書の一部をなすものとする。
【０００２】
連邦支援の記載
本発明は、助成金番号ＣＡ−１７６２５および助成金番号ＣＡ−５５６３９の下での政府支援をもってなされた。政府は本発明に一定の権利を有する。
【０００３】
発明の分野
本発明は、アンドロゲン受容体アンタゴニストとして作用することの可能な化合物、それを含有する医薬製剤、およびその使用方法に関する。
【背景技術】
【０００４】
発明の背景
アンドロゲン受容体（ＡＲ）は、ステロイド受容体スーパーファミリーとして知られるリガンド依存性転写因子の大きなファミリーのメンバーである。Ｃｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８５，７２１１−７２１５（１９８８）。Ｂｅａｔｏ，Ｍ．，Ｃｅｌｌ，５６，３３５−３４４（１９８９）。アンドロゲンおよびＡＲは、正常な前立腺の発達および前立腺癌の増殖に重要な役割を果たす。前立腺癌は、米国で最も一般的な男性悪性腫瘍である。Ｌａｎｄｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｊ．Ｃｌｉｎ．，４８，６−２９（１９９８）。近年、ヒドロキシフルタミド（ＨＦ）などの抗アンドロゲンが外科もしくは内科的去勢との併用で前立腺癌の治療に広く用いられている。Ｃｒａｗｆｏｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３２１，４１９−４２４（１９８９）。シプロステロン（ｃｙｐｒｏｓｔｅｒｏｎｅ）、ＨＦ、およびビカルタミド（下記参照）を含む数種類の化合物が、臨床的に前立腺癌の治療に用いられている。
【化１】
2008516954.tif 000003
【０００５】
合成ステロイド性抗アンドロゲンシプロステロンは、ヨーロッパで最初に臨床に用いられた抗アンドロゲンの１種（ＭｃＬｅｏｄ，Ｄ．，Ｇ．，Ｃａｎｃｅｒ，７１，１０４６−１０４９（１９９３））であるが、多くの副作用がある。Ｎｅｕｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ，１，４１−６５（１９８２）。ＨＦおよびビカルタミドは両方とも非ステロイド性抗アンドロゲンである。ビカルタミドは、当初アゴニスト活性のない純粋な抗アンドロゲン活性を有すると考えられていた新しい非ステロイド性抗アンドロゲンである。その半減期は長く（６日）、ＡＲに対してＨＦよりも高い結合親和性を有する。Ｖｅｒｈｅｌｓｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．，４１，５２５−５３０（１９９４）。（ａ）  Ｋｅｌｌｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｕｒｏｌ．（１９９３），１４９，６０７−６０９；（ｂ）  Ｓｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｃａｎｃｅｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ，１１，１５６６−１５７２（１９９３）。
【０００６】
抗アンドロゲンホルモン療法は前立腺癌の治療に広く用いられているが、いくつかの抗アンドロゲンはＡＲアゴニストとして作用し、その結果「抗アンドロゲン除去症候群」をもたらす可能性がある。Ｍｉｙａｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９５，７３７９−７３８４（１９９８）。現在受け入れられている仮説は、アンドロゲン受容体における突然変異が、フルタミドの活性代謝物であるＨＦがなぜアンドロゲン受容体標的遺伝子を活性化させ、前立腺癌の増殖を促進できるのかの説明となり得るということを前提にしている。Ｍｉｙａｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９５，７３７９−７３８４（１９９８）。同じ機構を用いて、フルタミドを服用している間、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）の増加している患者のＰＳＡが治療中止後に減少する、「フルタミド除去症候群」が説明される。実際、ＨＦは、最初に同定されたアンドロゲン受容体共役因子であるＡＲＡ７０の存在下で、ＰＳＡおよびＭＭＴＶ−ＬＴＲ（アンドロゲン応答配列を発現するリポーター遺伝子）などのアンドロゲン受容体標的遺伝子を活性化することができる。Ｙｅｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｅ  Ｌａｎｃｅｔ，３４９，８５２−８５３（１９９７）。この症候群がアンドロゲン除去療法の失敗につながることが多いので、アゴニスト活性のない、より優れた抗アンドロゲンを開発することが望ましい。
【０００７】
フェノール性のジアリールヘプタノイドのクルクミン（１）は、ターメリックの主な色素である。クルクミンおよびその類似体は有力な抗酸化作用、抗炎症作用、Ｎｕｒｆｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，３２，３２１−３２８（１９９７）、腫瘍細胞に対する細胞毒性、Ｓｙｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ，６１，１５３１−１５３４（１９９８）、抗腫瘍増強作用、Ｓｕｇｉｙａｍａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，５２，５１９−５２５（１９９６）．Ｒｕｂｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔ，９４，７９−８３（１９９５）ならびに抗血管新生作用（Ｊ．Ｌ．Ａｒｂｉｓｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．４：  ３７６（１９９８））を示す。
【０００８】
ＤＭＢＡに惹起され、ＴＰＡに誘導されるマウス皮膚の発癌に有力な抗腫瘍増強効果を示す、２種類の環状ジアリールヘプタノイド、１３−オキソミリカノール（ｏｘｏｍｙｒｉｃａｎｏｌ）およびミリカノン（ｍｙｒｉｃａｎｏｎｅ）が報告されている。Ｉｓｈｉｄａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔ，１５９．１３５−１４０（２０００）。本研究では、多数の新規なクルクミン類似体を調製し、２種類のヒト前立腺癌細胞系統、ＰＣ−３およびＤＵ−１４５を用いて、アンドロゲン受容体共役因子、ＡＲＡ７０の存在下、ＡＲに対するアンタゴニスト活性について評価した。ＰＣ−３細胞は、機能的ＡＲを発現しないアンドロゲン非依存性腫瘍細胞である。ＤＵ−１４５細胞も、機能的ＡＲを発現しないアンドロゲン非依存性腫瘍細胞である。
【発明の開示】
【０００９】
本発明の実施形態によれば、本発明は、式Ｉの化合物に関する。
【００１０】
本発明の第１の態様は、式ＩまたはＩａ：
【化２】
2008516954.tif 000004
（式中、
Ｒ’およびＲ”は、各々独立に、Ｈ、アルコキシ、およびハロからなる群から選択され；
ＲaおよびＲbは、各々独立に、Ｈ、アルキルおよびハロからなる群から選択され；
Ｒ1およびＲ2は、各々独立に、Ｈ、ヒドロキシ、アルコキシ、ニトロ、アミノおよびジアルキルアミノからなる群から選択され；
Ｒ3およびＲ4は、各々独立に、Ｈ、ヒドロキシ、ハロ、アルコキシ、および−ＯＲ7Ｃ（Ｏ）Ｒ8（式中、Ｒ7は低級アルキレンであり、Ｒ8はアルコキシである）からなる群から選択され；
あるいは、Ｒ1およびＲ3は、ともにアルキレンジオキシであり；
あるいは、Ｒ2およびＲ4は、ともにアルキレンジオキシであり；
Ｒ5およびＲ6は、各々独立に、Ｈ、ハロゲン、ニトロおよびアルコキシからなる群から選択され；
Ｘ1はＮであるか、またはＸ1は、Ｈ、アルコキシもしくはニトロと結合しているＣであり；かつ
Ｘ2はＮであるか、またはＸ2は、Ｈ、アルコキシもしくはニトロと結合しているＣである；
但し、クルクミンはそれから除外される）の化合物；あるいはその製薬上許容される塩である。
【００１１】
本発明のさらなる態様は、式ＩＩ：
【化３】
2008516954.tif 000005
（式中、
Ｒ11およびＲ12は、各々独立に、アルコキシ、ニトロ、アミノ、およびジアルキルアミノからなる群から選択され；
Ｒ13およびＲ14は、各々独立に、ヒドロキシ、アルコキシ、−ＯＲ18Ｃ（Ｏ）Ｒ19（式中、Ｒ18は低級アルキレンもしくはアルケニレンであり、Ｒ19はアルコキシである）、およびテトラヒドロピラニルからなる群から選択され；
あるいは、Ｒ11およびＲ13は、ともにアルキレンジオキシであり；
あるいは、Ｒ12およびＲ14は、ともにアルキレンジオキシであり；
Ｒ15およびＲ16は、各々独立に、Ｈ、ハロゲン、およびニトロからなる群から選択され；
Ｒ17は、−Ｒ20Ｃ（Ｏ）ＯＲ21（式中、Ｒ20はアルキレンまたはアルケニレンであり、Ｒ21はＨまたはアルキルである）であり；
Ｘ3はＮであるか、またはＸ3は、Ｈ、アルコキシもしくはニトロと結合しているＣであり；かつ
Ｘ4はＮであるか、またはＸ4は、Ｈ、アルコキシもしくはニトロと結合しているＣである）の化合物；
あるいはその製薬上許容される塩である。
【００１２】
さらに他の本発明の実施形態によれば、本発明は、式ＩＩＩ：
【化４】
2008516954.tif 000006
（式中、
Ｒ25およびＲ26は、各々独立に、Ｈまたは低級アルキルであり；
Ｒ27、Ｒ28、Ｒ29およびＲ30は、各々アルコキシであり；
Ｒ31は、Ｈまたは低級アルキルである）の化合物；
あるいはその製薬上許容される塩に関する。
【００１３】
本発明のさらなる態様は、式ＩＶ：
【化５】
2008516954.tif 000007
（式中、
Ｒ41およびＲ42は、各々独立に、ヒドロキシまたはアルコキシであり；かつ
Ｒ43およびＲ44は、各々独立に、ヒドロキシまたはアルコキシである）の化合物；
あるいはその製薬上許容される塩である。
【００１４】
本発明のさらなる態様は、式：
【化６】
2008516954.tif 000008
の化合物あるいはその製薬上許容される塩である。
【００１５】
さらに他の本発明の実施形態によれば、本発明は、治療を必要とする被検体に、治療有効量の上記式の化合物またはクルクミンを投与することを含む、癌を治療する方法に関する。治療され得る癌の例としては、限定されるものではないが、皮膚癌、小細胞肺癌、精巣癌、リンパ腫、白血病、食道癌、胃癌、結腸癌、乳癌、子宮内膜癌、卵巣癌、中枢神経系癌、肝臓癌および前立腺癌が挙げられる。
【００１６】
さらに他の本発明の実施形態によれば、本発明は、癌細胞と、上記式の化合物またはクルクミンのアンドロゲン受容体アンタゴニスト有効量とを接触させることを含む、アンドロゲン受容体アンタゴニスト活性を誘導する方法に関する。
【００１７】
他の本発明の実施形態によれば、本発明は、上記式の化合物またはクルクミンを投与することにより、アンドロゲンに関連する病気に罹患している被験体においてアンドロゲン受容体アンタゴニスト活性を誘導する方法に関する。アンドロゲンに関連する病気の例としては、限定されるものではないが、脱毛症、多毛症、行動障害、座瘡、および、精子形成の抑制が望ましい場合の無抑制の精子形成が挙げられる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
本明細書に記載の本発明をさらに説明する添付の図面を参照して、本発明を以下により十分に説明する。しかし、本発明は異なる形態で具体化されてもよく、本明細書に示す実施形態に限定されるものと解釈されるべきではない。むしろ、これらの実施形態は、本開示が徹底的かつ完全であり、当業者に本発明の範囲を十分に伝えるように提供される。
【００１９】
本明細書において本発明の説明に用いられる用語は、特定の実施形態を説明する目的のためだけのものであり、本発明を限定することを目的としているのではない。本発明および添付の請求項の説明に用いられる単数形の「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文中に別に明示されている場合を除いて、同様に複数形態も含むことを意図する。
【００２０】
別に定義されていなければ、本明細書において用いられる全ての技術用語および科学用語は、本発明の属する当業者に一般に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書において言及される全ての刊行物、特許出願、特許および他の参照文献は、引用することにより本明細書の一部をなすものとする。
【００２１】
本明細書において用いられる用語「アルキル」または「低級アルキル」とは、直鎖または分枝鎖であってよく、飽和または不飽和であってよい、Ｃ１〜Ｃ４、Ｃ６またはＣ８アルキルをさす。
【００２２】
本明細書において用いられる「クルクミン」とは、式：
【化７】
2008516954.tif 000009
の化合物をさす。クルクミン、あるいはその製薬上許容される塩を用いて、本明細書に記載される方法を実施することができる。
【００２３】
「シクロアルキル」はそれ自体明確に特定されており、典型的にはＣ３、Ｃ４またはＣ５〜Ｃ６またはＣ８シクロアルキルである。
【００２４】
本明細書において用いられる「アルケニル」または「低級アルケニル」は、同様にＣ１〜Ｃ４アルケニルをさし、本明細書において用いられるアルコキシまたは低級アルコキシは、同様にＣ１〜Ｃ４アルコキシをさす。
【００２５】
本明細書において用いられる「アルコキシ」とは、直鎖または分枝鎖の、飽和または不飽和のオキソ−炭化水素鎖をさし、例えばメトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、およびｔ−ブトキシが挙げられる。
【００２６】
本明細書において用いられる用語「アリール」とは、Ｃ３〜Ｃ１０の環状芳香族基、例えばフェニル、ナフチルなどをさし、トリルなどの置換アリール基を含む。
【００２７】
本明細書において用いられる「ハロ」とは、任意のハロゲン基、例えばクロロ、フルオロ、ブロモ、またはヨードをさす。いくつかの実施形態では、ハロは好ましくは、フルオロである。
【００２８】
本明細書において用いられる用語「ヒドロキシアルキル」とは、Ｃ１〜Ｃ４の直鎖または分枝鎖のヒドロキシ置換アルキル、すなわち−ＣＨ2ＯＨ、−（ＣＨ2）2ＯＨなどをさす。
【００２９】
本明細書において用いられる用語「アミノアルキル」とは、Ｃ１〜Ｃ４の直鎖または分枝鎖のアミノ置換アルキルをさす（この際の用語「アミノ」とは基ＮＲ’Ｒ”をさし、この際のＲ’およびＲ”は、独立にＨまたは上記に定義される低級アルキル、すなわち−ＮＨ2、−ＮＨＣＨ3、−Ｎ（ＣＨ3）2等から選択される）。
【００３０】
用語「テトラヒドロピラニル」とは、式：
【化８】
2008516954.tif 000010
の基をさす。
【００３１】
本明細書において用いられる用語「オキシアルキル」とは、Ｃ１〜Ｃ４の酸素置換アルキル、すなわち−ＯＣＨ3をさし、本明細書において用いられる用語「オキシアリール」とは、Ｃ３〜Ｃ１０の酸素置換環状芳香族基をさす。
【００３２】
用語「アルキレンジオキシ」とは、各ＲＮが独立にアルキルである、一般式、−ＯＲＮＯ−、−ＯＲＮＯＲＮ−、または−ＲＮＯＲＮＯＲＮ−の基をさす。
【００３３】
本明細書において用いられる「治療」または「治療すること」とは、疾患に罹患している患者へ利益を付与する、任意の種類の治療をさし、患者の状態の（例えば、１以上の症状の）改善、疾患の進行の遅延、疾患の発病の予防または遅延等が含まれる。
【００３４】
本明細書において用いられる「製薬上許容される」とは、本明細書に記載される治療を達成するために、疾患の重篤度および治療の必要性に鑑みて過度に有害な副作用なく、化合物または組成物が被験体への投与に適していることを意味する。
【００３５】
本明細書において用いられる「阻害する」とは、起こり得る効果が部分的にまたは完全に排除されることを意味する。
【００３６】
本明細書において用いられる「アンドロゲン」とは、当業者に一般に既知の性ホルモンをさし、限定されるものではないが、テストステロン、ジヒドロテストステロン、およびアンドロステンジオン、ならびにアンドロゲン受容体アゴニストなどのアンドロゲンに似た機構で作用することが知られている化合物が挙げられる。「アンドロゲン」は、ホルモンまたは化合物、あるいはそれらの組合せに関する。
【００３７】
本明細書において用いられる「抗アンドロゲン除去症候群」とは、抗アンドロゲン療法の投与において血清前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）濃度に変化も減少もないこと、および抗アンドロゲン療法の中止後に観察されるＰＳＡ濃度がその後に低下することを特徴とする事象をさす。
【００３８】
本明細書において用いられる「アンドロゲン受容体アンタゴニスト」とは、アンドロゲン受容体アゴニストの活性を部分的にまたは完全に阻害する化合物をさす。
【００３９】
本明細書において用いられる「アンドロゲンに関連する病気」とは、アンドロゲンまたは複数のアンドロゲンの組合せが、観察される状態に影響を与える状態をさす。
【００４０】
本発明は、主としてヒト被検体の治療に関するが、獣医学目的の他の動物被験体（すなわち哺乳類、鳥類）の治療に用いてもよい。哺乳類が好ましく、ヒトが特に好ましい。
【００４１】
上に述べたとおり、本発明の第１の態様は、式ＩまたはＩａ：
【化９】
2008516954.tif 000011
（式中、
Ｒ’およびＲ”は、各々独立に、Ｈ、アルコキシ、およびハロからなる群から選択され；
ＲaおよびＲbは、各々独立に、Ｈ、アルキルおよびハロからなる群から選択され；
Ｒ1およびＲ2は、各々独立に、Ｈ、ヒドロキシ、アルコキシ、ニトロ、アミノおよびジアルキルアミノからなる群から選択され；
Ｒ3およびＲ4は、各々独立に、Ｈ、ヒドロキシ、ハロ、アルコキシ、および−ＯＲ7Ｃ（Ｏ）Ｒ8（式中、Ｒ7が低級アルキレンであり、Ｒ8がアルコキシである）からなる群から選択され；
あるいは、Ｒ1およびＲ3は、ともにアルキレンジオキシであり；
あるいは、Ｒ2およびＲ4は、ともにアルキレンジオキシであり；
Ｒ5およびＲ6は、各々独立に、Ｈ、ハロゲン、ニトロおよびアルコキシからなる群から選択され；
Ｘ1はＮであるか、またはＸ1は、Ｈ、アルコキシもしくはニトロと結合しているＣであり；かつ
Ｘ2はＮであるか、またはＸ2は、Ｈ、アルコキシもしくはニトロと結合しているＣである；
但し、クルクミンはそれから除外される）の化合物；あるいはその製薬上許容される塩である。
【００４２】
式ＩおよびＩａの化合物のいくつかの特定の実施形態では、少なくとも１つのＲ’およびＲ”は、アルコキシまたはハロである。
【００４３】
式ＩおよびＩａの化合物のいくつかの特定の実施形態では、Ｒaはハロであり、ＲbはＨ、アルキルまたはハロ、好ましくは、アルキルである。
【００４４】
式ＩおよびＩａの化合物のいくつかの特定の実施形態では、Ｒ1およびＲ2は、各々独立に、アルコキシ、ニトロ、アミノ、およびジメチルアミノからなる群から選択される。
【００４５】
式ＩおよびＩａの化合物のいくつかの特定の実施形態では、Ｒ1およびＲ3は、ともにメチレンジオキシまたはエチレンジオキシである。
【００４６】
式ＩおよびＩａの化合物のいくつかの特定の実施形態では、Ｒ2およびＲ4は、ともにメチレンジオキシまたはエチレンジオキシである。
【００４７】
式ＩおよびＩａの化合物のいくつかの特定の実施形態では、Ｒ5およびＲ6は、各々独立に、Ｈ、Ｆ、およびニトロからなる群から選択される。
【００４８】
本発明のさらなる態様は、式ＩＩ：
【化１０】
2008516954.tif 000012
（式中、
Ｒ11およびＲ12は、各々独立に、アルコキシ、ニトロ、アミノ、およびジアルキルアミノからなる群から選択され；
Ｒ13およびＲ14は、各々独立に、ヒドロキシ、アルコキシ、−ＯＲ18Ｃ（Ｏ）Ｒ19（式中、Ｒ18は低級アルキレンもしくはアルケニレンであり、Ｒ19はアルコキシである）、およびテトラヒドロピラニルからなる群から選択され；
あるいは、Ｒ11およびＲ13は、ともにアルキレンジオキシであり；
あるいは、Ｒ12およびＲ14は、ともにアルキレンジオキシであり；
Ｒ15およびＲ16は、各々独立に、Ｈ、ハロゲン、およびニトロからなる群から選択され；
Ｒ17は、−Ｒ20Ｃ（Ｏ）ＯＲ21（式中、Ｒ20はアルキレンまたはアルケニレンであり、Ｒ21はＨまたはアルキルである）であり；
Ｘ3はＮであるか、またはＸ3は、Ｈ、アルコキシもしくはニトロと結合しているＣであり；かつ
Ｘ4はＮであるか、またはＸ4は、Ｈ、アルコキシもしくはニトロと結合しているＣである）の化合物；
あるいはその製薬上許容される塩である。
【００４９】
式ＩＩの化合物のいくつかの特定の実施形態では、Ｒ20はアルケニレンである。
【００５０】
式ＩＩの化合物のいくつかの特定の実施形態では、Ｒ13およびＲ14は、テトラヒドロピラニルである。
【００５１】
式ＩＩの化合物のいくつかの特定の実施形態では、Ｒ11およびＲ12は、各々独立に、アルコキシ、ニトロ、アミノ、およびジメチルアミノからなる群から選択される。
【００５２】
式ＩＩの化合物のいくつかの特定の実施形態では、Ｒ11およびＲ13は、ともにメチレンジオキシまたはエチレンジオキシである。
【００５３】
式ＩＩの化合物のいくつかの特定の実施形態では、Ｒ12およびＲ14は、ともにメチレンジオキシまたはエチレンジオキシである。
【００５４】
式ＩＩの化合物のいくつかの特定の実施形態では、Ｒ15およびＲ16は、各々独立に、Ｈ、Ｆ、およびニトロからなる群から選択される。
【００５５】
本発明のさらに他の実施形態によれば、本発明は、式ＩＩＩ：
【化１１】
2008516954.tif 000013
（式中、
Ｒ25およびＲ26は、各々独立に、Ｈまたは低級アルキルであり；
Ｒ27、Ｒ28、Ｒ29およびＲ30は、各々アルコキシであり；
Ｒ31は、Ｈまたは低級アルキルである）の化合物；
あるいはその製薬上許容される塩に関する。
【００５６】
本発明のさらなる態様は、式ＩＶ：
【化１２】
2008516954.tif 000014
（式中、
Ｒ41およびＲ42は、各々独立に、ヒドロキシまたはアルコキシであり；かつ
Ｒ43およびＲ44は、各々独立に、ヒドロキシまたはアルコキシである）の化合物；
あるいはその製薬上許容される塩である。
【００５７】
本発明のさらなる態様は、式：
【化１３】
2008516954.tif 000015
の化合物またはその製薬上許容される塩である。
【００５８】
Ａ．具体的な化合物
本発明の範囲内の具体的な化合物としては、
【化１４】
2008516954.tif 000016
【化１５】
2008516954.tif 000017
【化１６】
2008516954.tif 000018
【化１７】
2008516954.tif 000019
【化１８】
2008516954.tif 000020
が挙げられるが、これらには限定されない。本発明の化合物のさらなる例を下に説明する。
【００５９】
Ｂ．化合物の合成
以下の一般的な合成方法の変形方法は、当業者に容易に明らかであり、それらも本発明の範囲内にあると見なされる。
【００６０】
図１および２は、クルクミン類似体の構造および１，３−ジアリール−１，３−ジケトプロパン誘導体を示す。クルクミン（１）、デメトキシクルクミン（２）およびビスデメトキシクルクミン（３）は、２および３を微量成分として含有する市販のクルクミン（Ａｌｄｒｉｃｈ）のカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＣＨＣｌ3−ＭｅＯＨ）により得た。１のジアゾメタンでの処理により、ジメチル化されたクルクミン（４）およびモノメチル化されたクルクミン（９）を得た。ヨウ化メチルおよびＫ2ＣＯ3での１のメチル化により、メチル基もＣ−４位に導入されている、トリメチル化された誘導体１０を得た。化合物５〜８は、１−４をヒスチジンヒドラジド、ＡｃＯＨおよびｐ−ＴｓＯＨとともに一晩加熱することにより合成した。１の１０％Ｐｄ−Ｃでの水素化により、１１〜１３の混合物を得た。同様に、化合物１４〜１６および１７〜１８を、それぞれ４、および１０の水素化によって得た。１をアセトン中のクロロ酢酸メチル、ＮａＩおよびＫ2ＣＯ3とともに加熱することにより、モノメトキシカルボニルメチルエーテル１８およびビス−メトキシカルボニルメチルエーテル１９の混合物がもたらされ、それを分取ＴＬＣ（ＰＬＣ）により分離した。化合物２１〜２３を、ベンゼンまたはバニリンおよび４−アセチル−５−オキソヘキサン酸エチルから当分野で公知の方法により調製した。Ｐｅｄｅｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｌｉｅｂｉｇｓ  Ａｎｎ．Ｃｈｅｍ．，１５５７−１５６９（１９８５）。化合物２１〜２３は、ケト−エノール互変異性体の分離不可能な混合物を構成する。２４〜３８の合成は、本発明者らの過去の論文に記載されている。Ｉｓｈｉｄａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔ，１５９．１３５−１４０（２０００）。  Ｉｓｈｉｄａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｕｒｃｕｍｉｎ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ａｓ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  Ａｇｅｎｔｓ。非公開データ。化合物３９〜４４はＡｌｄｒｉｃｈ，Ｉｎｃ（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩ）から購入した。
【００６１】
Ｃ．製薬上許容される塩
本明細書において用いられる用語「活性物質」には、化合物の製薬上許容される塩が含まれる。製薬上許容される塩とは、親化合物の所望の生物活性を保持し、かつ望ましくない毒物学的効果は付与しない塩である。このような塩の例は、（ａ）無機酸の形態の酸付加塩、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸など；ならびに有機酸の形態の塩、例えば、酢酸、シュウ酸、酒石酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、グルコン酸、クエン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、安息香酸、タンニン酸、パルミチン酸、アルギン酸、ポリグルタミン酸、ナフタレンスルホン酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、ポリガラクツロン酸など；ならびに（ｂ）元素の陰イオンから形成された塩、例えば、塩素、臭素、およびヨウ素である。
【００６２】
本発明の組成物を調製するために用いられる活性物質は、あるいは、製薬上許容される活性物質の遊離塩基の形態であってもよい。化合物の遊離塩基は塩よりも可溶性が低いため、遊離塩基組成物は、活性物質の標的領域へのより持続的な放出をもたらすために用いられる。標的領域に存在するまだ溶液となっていない活性物質は、生理反応を誘導するために利用できないが、徐々に溶液となる、生物学的に利用可能な薬剤の貯蔵物として役立つ。
【００６３】
Ｄ．医薬製剤
本発明のクルクミンおよびクルクミン類似体は薬理活性物質として有用であり、塊状で利用してもよい。しかし、これらの化合物は投与用の医薬製剤に処方されることがより好ましい。多数の適した医薬製剤のいずれかを、本発明の化合物の投与のための媒体として利用してもよい。
【００６４】
本発明の化合物は、種々の状態の治療のための投与用に処方することができる。本発明の医薬製剤の製造において、本発明の化合物およびその生理学的に許容される塩、またはいずれかの酸誘導体（以降、「活性化合物」と呼ぶ）は、一般に、とりわけ許容される担体と混合される。当然、担体は製剤中の任意の他の成分と適合するという意味において許容されるものでなくてはならず、患者に対して有害であってはならない。担体は、固体もしくは液体、あるいは両方であってよく、単位用量製剤、例えば０．５重量％〜９５重量％の活性化合物を含有し得る錠剤として化合物とともに処方されるのが好ましい。各々の活性化合物のうちの１種類以上を本発明の製剤中に組み込んでよく、その製剤は、基本的に成分を混合することからなる、周知の製薬技法により調製することができ、所望により１種類以上の副成分を含有する。
【００６５】
本発明の製剤としては、経口、直腸、局所、口内（例えば、舌下）、非経口（例えば、皮下、筋肉内、皮内、または静脈内）および経皮投与に適したものが挙げられるが、いずれの所与の場合においても最も適した経路は、治療される症状の性質および重篤度、ならびに用いる特定の活性化合物の性質に依存する。
【００６６】
経口投与に適した製剤は、別個の単位で、例えば各々が所定の量の活性化合物を含有するカプセル剤、サシェ剤、トローチ剤、または錠剤で；粉剤または顆粒剤として；水性または非水性の溶液または懸濁液として；あるいは水中油型または油中水型エマルジョンとして提示され得る。このような製剤は、活性化合物と適した担体（上記のように１種類以上の副成分を含有し得る）を結合させるステップを含有する、任意の適した製薬法により調製してよい。
【００６７】
一般に、本発明の製剤は、活性化合物と液体担体または細かく分割された固体担体、または両方を、均一に、かつ密に混合することにより調製され、その後、必要に応じて、得られる混合物を成形する。例えば、錠剤は、活性化合物を所望により１種類以上の副成分とともに含有する粉末または顆粒を圧縮または型に入れて成形することにより調製され得る。圧縮錠は、適した機械で、所望により結合剤、滑沢剤、不活性希釈液、および／または表面活性／分散剤と混合した、粉末または顆粒などの流動性のある形態の化合物を圧縮することにより調製され得る。型成形された錠剤は、適した機械で、不活性液体結合剤で湿らせた粉末の化合物を型成形することにより製造され得る。
【００６８】
口内（舌下）投与に適した製剤としては、風味のある塩基、通常スクロースおよびアラビアガムまたはトラガカントガムに活性化合物を含むトローチ剤；ならびに不活性塩基、例えばゼラチンおよびグリセリンまたはスクロースおよびアラビアガムに化合物を含む香錠が挙げられる。
【００６９】
非経口投与に適した本発明の製剤は、活性化合物の滅菌水性調製物を便宜に含み、その調製物は対象とするレシピエントの血液と等張であることが好ましい。これらの調製物は、皮下、静脈内、筋肉内、または皮内注射によって投与してよい。このような調製物は、化合物と水またはグリシンバッファーを混合し、得られる溶液を滅菌し、血液と等張にすることにより、便宜に調製することができる。
【００７０】
直腸投与に適した製剤は、単位用量の坐剤として提示されることが好ましい。これらは活性化合物を１種類以上の従来型の固体担体、例えばカカオバターと混合し、その後得られる混合物を成形することにより調製され得る。
【００７１】
皮膚への局所適用に適した製剤は、軟膏、クリーム、ローション、ペースト、ゲル、スプレー、エアロゾル、または油の形態をとることが好ましい。使用され得る担体としては、ワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール、アルコール、経皮促進剤、およびそれらの２以上の組合せが挙げられる。
【００７２】
経皮投与に適した製剤は、長期間レシピエントの表皮と緊密な接触を続けるために適した個別のパッチとして提示され得る。また、経皮投与に適した製剤は、イオン泳動（例えば、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ３（６）：３１８（１９８６）参照）により送達することができ、一般に、活性化合物の所望により緩衝された溶液の形態をとる。適した製剤はクエン酸塩またはビス／トリスバッファー（ｐＨ６）またはエタノール／水であり、０．０１〜０．２Ｍの有効成分を含有する。
【００７３】
Ｅ．使用方法
本明細書に記載される式の化合物に加えて、本発明は有用な治療方法も提供する。例えば、本発明は、腫瘍細胞に対する細胞毒性、抗腫瘍増強作用、抗炎症活性を誘導する方法を提供する。より具体的には、本発明は、アンドロゲン受容体アンタゴニスト活性を誘導する方法を提供する。アンドロゲン受容体アンタゴニスト活性は、アンドロゲン関連腫瘍または癌細胞増殖を阻害する有用な手段である。
【００７４】
阻害され得る癌細胞としては、皮膚癌、小細胞肺癌、精巣癌、リンパ腫、白血病、食道癌、胃癌、結腸癌、乳癌、子宮内膜癌、卵巣癌、中枢神経系癌、肝臓癌および前立腺癌由来の細胞が挙げられる。
【００７５】
本発明はまた、癌に罹患している被験体において癌を治療する方法を提供する。これらの被験体も抗アンドロゲン除去症候群に罹患している被験体に含まれる。本方法には、被験体へ癌治療有効量の本発明の式の化合物を投与することが含まれる。本方法は、種々の癌細胞の治療に有用であり、その癌には、限定されるものではないが、皮膚癌、小細胞肺癌、精巣癌、リンパ腫、白血病、食道癌、胃癌、結腸癌、乳癌、卵巣癌、中枢神経系癌、肝臓癌および前立腺癌が挙げられる。
【００７６】
抗アンドロゲン活性をもつ化合物も、アンドロゲンにより増強される脱毛症および多毛症などの毛髪障害の治療に有用である可能性がある。抗アンドロゲン性化合物は、また、当業者には、アンドロゲンが精子形成を持続するために必要とされることが一般に知られ、理解されるように、男性避妊の一形態として治療上有用であり得る。さらに、抗アンドロゲン性活性をもつ化合物は、行動障害の治療に有用である可能性があり、その行動障害としては、限定されるものではないが、攻撃性、暴力行為および性的攻撃性が挙げられる。また、抗アンドロゲン性化合物は、座瘡障害に関連するアンドロゲンを含むホルモンのレベルを変更することにより、座瘡の治療に治療上有用であり得る。
【００７７】
本発明の方法を用いて治療され得る被験体は、一般にヒト被験体であるが、本発明の方法は、獣医学目的のため、その他の被験体、特に、限定されるものではないが、ウマ、ウシ、イヌ、ウサギ、ニワトリ、ヒツジなどを含む哺乳類被験体に有用であり得る。上記のように、本発明は、本明細書に記載される式の化合物またはその製薬上許容される塩を、限定されるものではないが、経口、直腸、局所、口内、非経口、筋肉内、皮内、静脈内、および経皮投与を含む、任意の適した投与経路用の製薬上許容される担体中に含む医薬製剤を提供する。
【００７８】
任意の特定の化合物の治療有効量は、化合物、患者によって多少変動し、患者の状態および送達経路によって決まる。一般的な提案としては、約０．１〜約５０ｍｇ／ｋｇの用量が治療効力を有し、さらに高い用量が経口および／またはエアゾール投与に用いられる可能性もある。高いレベルで毒性が懸念されるため、静脈内投薬量は約１０ｍｇ／ｋｇ以下などのより低いレベルに制限され、全ての重量は、塩が用いられる場合を含め、活性塩基の重量に基づいて計算されている。一般に、静脈内または筋肉内投与には０．５ｍｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇの投薬量が用いられる。経口投与には約１０ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇの投薬量が用いられ得る。
【００７９】
本発明を、以下の限定されない実施例においてより詳細に説明する。
【実施例１】
【００８０】
Ａ．材料および方法
化合物１〜３を、２および３を微量成分として含有する市販のクルクミン（Ａｌｄｒｉｃｈ）のカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＣＨＣｌ3−ＭｅＯＨ）によって得た。化合物３９〜４４はＡｌｄｒｉｃｈ，Ｉｎｃ（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩ）から購入した。
【００８１】
ジメチルクルクミン（４）。Ｅｔ2ＯおよびＭｅＯＨ中のクルクミン（１）をエーテル中の過剰なジアゾメタンで２４時間処理した。溶媒を真空除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーおよびＰＬＣにより精製して４の黄色の針状晶を得た（収率１９．８％）；融点１２９〜１３０℃（ＭｅＯＨ）（Ｒｏｕｇｈｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ  Ｉ，２３７９−２３８８（１９７３））（１２８〜１３０℃）；1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  ３．９３（１２Ｈ，ｓ，ＯＣＨ3×４）、５．８２（１Ｈ，ｓ，１−Ｈ）、６．４８（２Ｈ，ｄ，１６Ｈｚ）、６．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ）、７．０８（２Ｈ，ｂｓ）、７．１５（２Ｈ，ｂｄ）、７．６１（２Ｈ，Ｊ＝１６Ｈｚ）；13Ｃ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ５５．９、５６．０、１０１．３、１０９．８、１１１．１、１２２．０、１２２．６、１２８．１、１４０．４、１４９．２、１５１．０、１８３．２。
【００８２】
ピラゾール誘導体（８）の調製。ブタノールおよびエタノール中の１〜４の溶液に、ヒスチジンヒドラジド（１当量）、酢酸およびｐ−ＴｓＯＨを添加した。溶液を２４時間還流した後、溶媒を真空除去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーおよびＰＬＣにより精製した。
【００８３】
化合物８。黄色の粉末（収率１７．５％）、融点１６６〜１６８℃（ＭｅＯＨ）；1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  ３．９２（６Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３×２）、３．９４（６Ｈ，ｓ，ＯＣＨ３×２）、６．６２（１Ｈ，ｓ，１−Ｈ）、６．８６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ）、６．９３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ）、７．０４（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）、７．０６（２Ｈ，ｂｓ）、７．０５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ）；13Ｃ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  ５５．８、５５．９、９９．６、１０８．６、１１１．２、１１５．８、１２０．１、１２９．７、１３０．６、１４９．１、１４９．３；Ｃ23Ｈ24Ｎ2Ｏ4・１・１／４Ｈ2Ｏの分析計算値：理論値：Ｃ，６６．５７；Ｈ，６．４４；Ｎ，６．７５。分析値Ｃ，６６．４４；Ｈ，６．１９；Ｎ，６．２７。
【００８４】
モノメチルクルクミン（９）。ＭｅＯＨ中のクルクミン（１）を、Ｅｔ2Ｏ中の過剰なジアゾメタンで２４時間処理した。溶媒の除去後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーおよびＰＬＣにより精製して黄色の非晶質固体を得た（収率２０％）；融点８９〜９１℃、［α］D−３．６（ｃ＝１．１４，ＣＨＣｌ3）；1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  ３．９３（９Ｈ，ｓ，ＯＣＨ3×３）、５．８１（１Ｈ，ｓ，１−Ｈ）、５．９４（１Ｈ，ｂｓ，ＯＨ）、６．４９（２Ｈ，ｂｄ，Ｊ＝１５Ｈｚ）、６．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ）、６．９７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ）、７．１０（４Ｈ，ｍ）、７．６０（２Ｈ，ｂｄ，Ｊ＝１５Ｈｚ）；ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  ３８２（Ｍ*）、ＨＲＦＡＢＭＳ  ３８２．１３９６（Ｍ＋Ｈ+）（Ｃ22Ｈ22Ｏ6の計算値：３８２．１４１６）。
【００８５】
１、４および１０の水素化（１１〜１８）。出発物質のＥｔＯＡｃ溶液を、Ｐａｒｒ’ｓ装置を用いて１０％のＰｄ−ＣとともにＨ2（４５ｐｓｉ）下で一晩振とうした。溶液を濾過し、真空濃縮して残渣を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーおよびＰＬＣにより精製した。
【００８６】
テトラヒドロクルクミン（１１）。白色粉末、融点９２〜９３℃（Ｒｏｕｇｈｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ  Ｉ，２３７９−２３８８（１９７３）、９５〜９６℃）、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  ２．５３〜２．５８（３Ｈ，ｍ）、２．７８〜２．８８（５Ｈ，ｍ）、３．８７（６Ｈ，ｓ，ＯＣＨ3×２）、５．４３（１Ｈ，ｓ，１−Ｈ）、５．５０（２Ｈ，ｓ，ＡｒＯＨ）、６．６５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ）、６．６９（２Ｈ，ｓ）、６．８３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ）；13Ｃ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  ３１．３、４０．４、５５．８、９９．８、１１１．０、１１４．３、１２０．８、１３２．６、１４４．０、１４６．４および１９３．２。
【００８７】
ヘキサヒドロクルクミン（１２）。白色粉末、融点８７〜８８℃（Ｒｏｕｇｈｌｅｙ，ＰＪ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ  Ｉ，２３７９−２３８８（１９７３）、７８〜８０℃）、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  １．６０〜１．８１（２Ｈ，ｍ）、２．５３〜２．９７（８Ｈ，ｍ）、３．８５（６Ｈ，ｓ，ＯＣＨ3×２）、４．０６（１Ｈ，ｍ，２−Ｈ）、６．７０（４Ｈ，ｍ）、６．８０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ）；13Ｃ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  ２９．７、３１．７、３８．８、４５．８、４９．８、５６．３、６７．４、１１１．５、１１１．６、１１４．８、１１４．９、１２１．２、１２１．４、１３３．０、１３４．２、１４４．２、１４４．５、１４６．９、１４７．９および２１１．９。
【００８８】
オクタヒドロクルクミン（１３）。無色油状物質。1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  １．６１（２Ｈ，ｍ）、１．７５（４Ｈ，ｍ）、２．５３−２．７０（４Ｈ，ｍ）、３．８０（６Ｈ，ｓ，ＯＣＨ3×２）、３．９１（２Ｈ，ｂｒｓ）、６．１３（２Ｈ，ｓ，ＡｒＯＨ）、６．６５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ）、６．６９（２Ｈ，ｂｓ）６．８２（２Ｈ，ｂｄ，Ｊ＝８Ｈｚ）、13Ｃ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，アセトン−ｄ6）：δ  ３１．１、３９．８、４２．６、３５．６、７２．０、１１１．０、１１４．３、１２０．６、１３３．６、１４３．６および１４６．４。
【００８９】
化合物１４。白色粉末（収率２６．０％）、融点６０〜６１℃、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  ２．５６（３Ｈ，ｍ）、２．８６（５Ｈ，ｍ）、３．８５（１２Ｈ，ｓ，ＯＣＨ3×４）、５．４４（１Ｈ，ｓ，１−Ｈ）、６．７１（４Ｈ，ｍ）、６．７８（２Ｈ，ｂｄ）；Ｃ23Ｈ28Ｏ6・１／４Ｈ2Ｏの分析計算値：理論値：Ｃ，６８．２１；Ｈ，７．０９。分析値  Ｃ，６８．２５；Ｈ，７．０６。
【００９０】
化合物１５。白色粉末（収率２０．０％）、融点９４〜９５℃、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  １．６５−１．８０（２Ｈ，ｍ）、２．５３−２．８４（８Ｈ，ｍ）、３．８５（１２Ｈ，ｓ，ＯＣＨ3×４）、４．０５（１Ｈ，ｂｓ，２’−Ｈ）、６．６８−７．２３（４Ｈ，ｍ）、６．７９（２Ｈ，ｂｄ），Ｃ23Ｈ30Ｏ6・１／４Ｈ2Ｏの分析計算値：理論値：Ｃ，６７．８８；Ｈ，７．５５。分析値  Ｃ，６７．７３；Ｈ，７．４９。
【００９１】
化合物１６。無色油状物質（収率４．２％）、融点６０〜６１℃、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  １．５５−１．６５（４Ｈ，ｍ）、１．７３−１．８２（３Ｈ，ｍ）、２．６０−２．７２（３Ｈ，ｍ）、３．８６（６Ｈ，ｓ，ＯＣＨ3×２）、３．８７（８Ｈ，ｂｓ，ＯＣＨ3×２，２，２’−Ｈ）、６．７２−６．７８（４Ｈ，ｍ）、６．７９（２Ｈ，ｂｄ）、７．２７（２Ｈ，ｓ，ＯＨ×２）、ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ：４０４（Ｍ+）、ＨＲＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４０４．２１９０７０（Ｍ＋Ｈ）+（Ｃ23Ｈ32Ｏ6の計算値：４０４．２１９８８９１）。
【００９２】
化合物１７。無色油状物質（収率５．９％）、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  １．１０（３Ｈ，ｄ）、１．８０（１Ｈ，ｍ）、２．４３−２．８２（８Ｈ，ｍ）、３．８６（６Ｈ，ｓ，ＯＣＨ3×２）、３．８７（６Ｈ，ｓ，ＯＣＨ3×２）、３．９４（１Ｈ，ｂｓ，２’−Ｈ）*．７０−６．７８（６Ｈ，ｍ）、ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ  ４１６（Ｍ+）。
【００９３】
化合物１８。無色油状物質（収率６．９５％）、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  ０．９５（３Ｈ，ｄ，１−ＣＨ3）、１．５２（１Ｈ，ｍ）、１．８４（２Ｈ，ｍ）、２．６７（６Ｈ，ｍ）、３．８３（１４Ｈ，ｂｓ，ＯＣＨ3×４，２，２’−Ｈ）、６．７８（６Ｈ，ｍ）；ＥＩＭＳ  ｍ／ｚ：４１８（Ｍ+）、ＨＲＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４１８．２３６６１８（Ｍ＋Ｈ）+（Ｃ24Ｈ34Ｏ6の計算値：４１８．２３５５３９２）。
【００９４】
１９および２０の調製。アセトン（２０ｍＬ）中のクルクミン（１，１００ｍｇ，０．８１ｍｍｏｌ）とクロロ酢酸メチル（２ｍＬ）およびＮａＩ（２０ｍｇ）の混合物を、無水炭酸カリウム（１７６ｍｇ）で攪拌しながら２４時間還流した。ろ過および溶媒の除去後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して対応する酢酸エチル１９および２０を得た。
【００９５】
化合物１９：黄色の粉末（収率２０．０％）、融点６０〜６１℃、融点６６〜６７℃、［α］D−２．４（ｃ＝２．０８，ＣＨＣｌ3）；1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，アセトン−ｄ6）：δ  ３．７３（３Ｈ，Ｓ，−ＣＯＯＣＨ3）、３．８６（６Ｈ，ｓ，ＯＣＨ3×２）、４．７９（２Ｈ，ｓ，Ｏ−ＣＨ2−ＣＯＯ），５．９９（１Ｈ，ｓ，１−Ｈ）、６．７０および６．７３（両方とも１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ）、６．８８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ）、６．９４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ）、７．１７（２Ｈ，ｍ）、７．３３（２Ｈ，ｍ）、７．５９および７．６１（両方とも１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ）、13Ｃ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：ｄ  ５１．８、５５．９、５５．９、６５．９、１０１．４、１１１．２、１１１．６、１１４．３、１１５．９、１２１．８、１２２．６、１２３．０、１２３．５、１２７．６、１２８．７、１２９．８、１４０．３、１４１．３、１４８．４、１４９．８、１５０．０、１５０．４、１６９．４、１８３．４、１８４．６；Ｃ24Ｈ24Ｏ8・３／４Ｈ2Ｏの分析計算値：理論値：Ｃ，６３．５０；Ｈ，５．６６。分析値  Ｃ，６３．５３；Ｈ，５．６５。
【００９６】
化合物２０：黄色の粉末（収率２０．０％）、融点１４１〜１４２℃（ＭｅＯＨ）、［α］D−０．２９（ｃ＝５．８６，ＣＨＣｌ3）；1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  ３．８０（６Ｈ，ｓ）、３．９３（６Ｈ，ｓ）、４．７３（４Ｈ，ｓ，Ｏ−ＣＨ2−ＣＯＯ×２）、５．８２（１Ｈ，ｓ，１−Ｈ）、６．５０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ）、６．７９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ）、７．０９（４Ｈ，ｂｓ）、７．５８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ）、13Ｃ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：ｄ  ５２．３、５６．０、６６．０、１０１．４、１１０．７、１１３．６、１２２．０、１２２．７、１２９．５、１４０．１、１４９．０、１４９．７、１６９．０、１８３．１；Ｃ27Ｈ28Ｏ10・１／２Ｈ2Ｏの分析計算値：理論値：Ｃ，６２．１８；Ｈ，５．６０。分析値  Ｃ，６２．３１；Ｈ，５．５７。
【００９７】
化合物２１：黄色の非晶質固体（収率３．０％）、1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  ２．５８（２Ｈ，ｍ）、２．９５（２Ｈ，ｍ）、７．１２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５Ｈｚ）、７．４０（６Ｈ，ｍ）、７．６０（４Ｈ，ｍ）、７．８１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５Ｈｚ）、１２．６５（１Ｈ，ｂｓ）；Ｃ22Ｈ20Ｏ4の分析計算値：理論値：Ｃ，７５．８４、Ｈ，５．７９。分析値  Ｃ，７５．５６，Ｈ，５．７４。
【００９８】
化合物２２：黄色の非晶質固体（収率２５．０％）、Ｃ26Ｈ28Ｏ8の分析計算値：理論値：Ｃ，６６．６６、Ｈ，６．０２。分析値  Ｃ，６６．３８、Ｈ，６．１６。
【００９９】
化合物２３：黄色の粉末（収率４５．０％）、融点１４４〜１４６℃（ＭｅＯＨ）（Ｐｅｄｅｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｌｉｅｂｉｇｓ  Ａｎｎ．Ｃｈｅｍ．１５５７−１５６９（１９８５）、７１〜７３℃（ＣＨ2Ｃｌ2））Ｃ24Ｈ26Ｏ8・２・１／２Ｈ2Ｏの分析計算値：理論値：Ｃ，５９．８７；Ｈ，５．２３。分析値  Ｃ，５９．９４；Ｈ，５．１１。
【０１００】
１〜４、１０〜１３、２２、および２３の構造を、それらの物理的なスペクトルデータと、文献に報告されているデータとの比較により確認した。Ｐｅｄｅｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｌｉｅｂｉｇｓ  Ａｎｎ．Ｃｈｅｍ．１５５７−１５６９（１９８５），Ｒｏｕｇｈｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ  Ｉ，２３７９−２３８８（１９７３）。
【０１０１】
Ｂ．ＤＨＴに媒介される転写活性の抑制。
細胞培養およびトランスフェクション。ヒト前立腺癌ＤＵ１４５およびＰＣ−３細胞を、ペニシリン（２５単位／ｍＬ）、ストレプトマイシン（２５μｇ／ｍＬ）、および１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）を含有するダルベッコ最小必須培地（ＤＭＥＭ）中で維持した。ＡＲトランス活性化アッセイのため、ＰＣ−３細胞にＡＲ発現プラスミドおよびリポーター遺伝子をトランスフェクトした。内因性ＡＲ共役因子の量が少ないため、ＤＵ−１４５細胞にＡＲおよびＡＲＡ７０の発現プラスミド、ならびにリポーター遺伝子をトランスフェクトした。Ｍｉｙａｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９５，７３７９−７３８４（１９９８）に既に記載されている状態が僅かに変更されて起こった。
【０１０２】
ＳｕｐｅｒＦｅｃｔキットを製造業者の手順書（Ｑｉａｇｅｎ，Ｃｈａｔｓｗｏｒｔｈ，ＣＡ）に従って用いてトランスフェクションを行った。手短に言えば、１×１０5細胞をトランスフェクションの２４時間前に３５ｍｍ皿に蒔き、その後、ＭＭＴＶ−ＬＴＲプロモーターおよびＡＲ−結合因子を含有するリポータープラスミドであるＭＭＴＶ−ルシフェラーゼをＡＲ発現プラスミド（野生型または変異型）、またはｐＳＧ５ＡＲＡ７０と同時トランスフェクトした。ＰＲＬ−ＴＫをトランスフェクション効率の内部対照として用いた。全ての転写活性化アッセイにおいてＤＮＡの合計量をｐＳＧ５で３．０ｇに調整した。トランスフェクションの２時間後、ＤＭＥＭ−１０％活性炭処理（ｃｈａｒｃｏａｌ  ｓｔｒｉｐｐｅｄ）血清培地を交換し、１４〜１６時間後、細胞をＤＨＴ、抗アンドロゲン、または試験化合物で処理した。さらに１４〜１６時間後、細胞を回収し、ルシフェラーゼアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｄｕａｌ  Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ  Ａｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）においてルシフェラーゼ活性を試験した。データを、内部ルシフェラーゼ陽性対照と比較した相対ルシフェラーゼ活性で表した。
【０１０３】
Ｃ．結果および考察
本研究の目的は、抗アンドロゲン受容体アンタゴニスト活性のための新規なクルクミン類似体を詳しく調べることであった。新規なクルクミン類似体の合成ならびに抗アンドロゲン受容体アンタゴニストおよび抗腫瘍剤としての評価を本明細書に報告する。
【０１０４】
４７種類のクルクミン  誘導体（１−４７）を、２種類の異なるヒト前立腺癌細胞、ＰＣ−３およびＤＵ−１４５を用いてＡＲに対するアンタゴニスト活性について試験した（図３Ａ〜Ｃ）。親化合物であるクルクミン（１）は、いずれの場合も不活性であった。しかし、ジメチル化クルクミン（４）は、野生型ＡＲをトランスフェクトしたＰＣ−３細胞においてアッセイした場合、有意なアンタゴニスト活性を示し（ＤＨＴに誘導されたＡＲ活性が７０％低下）、ＨＦよりも有力であった（ＨＦはＤＨＴに誘導されたＡＲ活性が１６％低下、図３Ａ）。また、化合物４は、変異ＬＮＣａＰ  ＡＲおよびＡＲＡ７０をトランスフェクトしたＤＵ−１４５細胞においてアッセイした場合、高いアンタゴニスト活性も示し（ＤＨＴに誘導されたＡＲ活性の４５％の低下を示す、図３Ｂ）、化合物４が正常および変異ＡＲの両方に効果的なアンタゴニストであることを示す。
【０１０５】
この一連の化合物においてＡＲアンタゴニスト活性の構造的な要件を決定するため、ＰＣ−３細胞アッセイ系で構造−活性相関（ＳＡＲ）研究を行った。４と比較して、モノメチル化クルクミン（９）は１個のベンゼン環のｐ−位でＯ−メチル基を１個欠き、４よりも有意に活性が低かった（図３Ｂ）。従って、４のビス（３，４−ジメトキシフェニル）基は活性に重要である。４のＣ−４にメチル基を導入した結果（１０）、活性の低下がもたらされた（図３Ｂ）。４の水素化によって得られた化合物１４および１５は、ＤＨＴに誘導されたＡＲ活性が１８％低下し、ＨＦと同程度に有力であったが、４と比較して活性が相当に低かった（図３Ａ）。４のβ−ジケトン部分を対応するピラゾール誘導体８に変換すると活性が大きく低下した。さらに、４中に見出されたビス−アリール基を含むが共役二重結合をもたない１，３−ビス（３，４−ジメトキシフェニル）−１，３−プロパンジオン（３９）は４よりも活性が低く（図３Ａおよび３Ｂ）、共役二重結合も４の活性に寄与していることを示す。これらの知見から、ビス（３，４−ジメトキシフェニル）基および共役したβ−ジケトン部分が活性にとって重大であることが示唆される。
【０１０６】
図３Ｃのデータは、野生型ＡＲおよびＡＲＡ７０をトランスフェクトしたＤＵ−１４５細胞において抗アンドロゲン活性がアッセイされた、若干異なる細胞アッセイ系を示す。化合物４、２０、２２、２３、および３９は、このアッセイ系においてＨＦに匹敵するかまたはＨＦよりも有力な抗アンドロゲン活性を示した。化合物２０および２２はほぼ等しい効力であり（それぞれ５４％および５３．８％の低下）、４よりも僅かに活性が高かった（４９．９％）。クルクミン（１）自体は活性でないので、フェノール性のヒドロキシル基でメトキシカルボニルメチル基を導入する（２０）か、またはＣ−４でエトキシカルボニルエチル基を導入する（２２）かのいずれかが、野生型ＡＲおよびＡＲＡ７０の存在下でＤＵ−１４５細胞における抗ＡＲ活性に大いに寄与する。
【０１０７】
この研究で、本発明者らはフルオロジアリールヘプタノイド２４〜２９および環状ジアリールヘプタノイド３０〜３８の抗アンドロゲン活性も調査した。化合物２４〜２９は両方のベンゼン環にフッ素またはトリフルオロメチル置換基を有するが、弱い活性を示すかまたは不活性であった。環状ジアリールヘプタノイド３０〜３８の中で、化合物３０が最も活性が高く、ＨＦと同程度に活性があった（図３Ａおよび３Ｃ）。残りの環状ジアリールヘプタノイドは弱いアンタゴニスト活性を示した。
【０１０８】
結論として、本発明者らは多数のクルクミン類似体を調製し、ヒト前立腺癌細胞系統を用いて３種類の異なるアッセイ条件で見込まれるそれらの抗アンドロゲン活性を評価した。化合物４は全てのアッセイにおいて有望な抗アンドロゲン活性を示した。化合物４、２０、２２、２３および３９は、新規なクラスの抗アンドロゲン剤として同定された。ＳＡＲ研究により、ビス（３，４−ジメトキシフェニル）部分である、共役したβ−ジケトン、およびＣ−４位のエトキシカルボニルエチル基がアンタゴニスト活性に重要な役割を果たすことが明らかとなった。
【実施例２】
【０１０９】
さらなるクルクミン類似体の合成および特徴付け
さらなるクルクミン類似体を下の表１に示す。
【表１Ａ】
2008516954.tif 000021
【表１Ｂ】
2008516954.tif 000022
【表１Ｃ】
2008516954.tif 000023
【表１Ｄ】
2008516954.tif 000024
【０１１０】
前記の化合物は次のように合成される：
【化１９】
2008516954.tif 000025
ＬＬ−７：合成方法は、Ｐｅｄｅｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．により開発された戦略から修正した。アセチルアセトン（０．２ｍｌ、２ｍｍｏｌ）および無水ホウ酸（１００ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）を１５ｍｌの酢酸エチルに溶かした。溶液を７０℃にて０．５時間攪拌した。５−ヒドロキシメチルフラン（５０６ｍｇ、４ｍｍｏｌ）およびホウ酸トリブチル（１．０８ｍｌ、４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を３０分間攪拌した。次に、４ｍｌのＥｔＯＡｃに溶かしたブチルアミン（０．３ｍｌ、３ｍｍｏｌ）を１５分間滴下した。攪拌を８５℃にて５時間継続した。次に、混合物を８ｍｌの１ＮのＨＣｌを添加すること、および６０℃にて０．５時間攪拌することにより加水分解した。有機層を分離した。水層を酢酸エチルで抽出した。混合した有機層を中性になるまで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を真空除去した。粗生成物を、ヘキサン−ＥｔＯＡｃで溶出するＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（登録商標）カラムクロマトグラフィーにより精製した。６８ｍｇの赤色の粉末が１２％の収率で得られた。1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  ４．６７（４Ｈ，ｓ）、５．７４（Ｈ，ｓ）、６．４０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ）、６．５３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ）、６．５８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ）、７．４３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）。
【０１１１】
【化２０】
2008516954.tif 000026
ＬＬ−１０：バニリン（１．５２ｇ、１０ｍｍｏｌ）およびホウ酸トリブチル（２．７ｍｌ、１０ｍｍｏｌ）を８ｍｌ酢酸エチルに溶かした。この攪拌溶液に、アセトン（０．３７ｍｌ、５ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を１０分間攪拌した。５ｍｌＥＡ中のブチルアミン（１ｍｌ、１０ｍｍｏｌ）を滴下した。溶液を５０℃にて数時間攪拌した。７ｍｌの１Ｎ  ＨＣｌを添加した。混合物を５０℃にて０．５時間攪拌した。1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  ３．９４（６Ｈ，ｓ）、６．９０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、６．９５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）、７．１１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）、７．２０（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．６８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）。
【０１１２】
【化２１】
2008516954.tif 000027
ＬＬ−１：アセチルアセトン（３．１ｍｌ、３０ｍｍｏｌ）および無水ホウ酸（１．５ｇ、２１ｍｍｏｌ）を２０ｍｌの酢酸エチルに溶かした。溶液を７０℃にて１時間攪拌した。この溶液にバニリン（１．５２ｇ、１０ｍｍｏｌ）およびホウ酸トリブチル（２．７ｍｌ、１０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を３０分間攪拌した。８５℃にて、７ｍｌのＥｔＯＡｃに溶かしたブチルアミン（１ｍｌ、１０ｍｍｏｌ）を１５分間滴下した。攪拌を１００℃にて１時間継続した。次に、２０ｍｌの１Ｎ  ＨＣｌを５０℃にて添加し、５０℃にて０．５時間攪拌することにより、混合物を加水分解した。有機層を分離した。水層を酢酸エチルで抽出した。混合した有機層を中性になるまで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を真空除去した。粗生成物を、ヘキサン−ＥｔＯＡｃで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。黄色の粉末が収率４９％で得られた。1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  ２．１６（３Ｈ，ｓ）、３．９４（３Ｈ，ｓ）、５．６３（Ｈ，ｓ）、６．３３（Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ）、６．９２（Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．０１（Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）、７．１０（Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）、７．５３（Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ）。
【０１１３】
ＬＬ−１７：８０℃にて、ＬＬ−１（４６８．２ｍｍｏｌ）および無水ホウ酸（１００ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）を１０ｍｌのＥｔＯＡｃに溶かした。溶液を１時間攪拌した。この混合物に、３，４−ジメトキシベンズアルデヒド（３６５ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）およびホウ酸トリブチル（０．５４ｍｌ、２ｍｍｏｌ）を含む１０ｍｌのＥｔＯＡｃ溶液を添加した。０．５時間攪拌した後、ピペリジン（０．０８ｍｌ）を混合物に添加した。２時間攪拌した後、４ｍｌの０．４Ｎ  ＨＣｌを５０℃にて添加した。混合物を５０℃にて０．５時間激しく攪拌した。混合した有機層を中性になるまで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を真空除去した。粗生成物を精製して６７．２ｍｇのＬＬ−１７を収率８．８％で得られた。ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３８１．１（Ｍ−１）+ 1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  ３．９４（９Ｈ，ｓ）、５．８１（Ｈ，ｓ）、６．４８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．６Ｈｚ）、６．８７−７．１４（６Ｈ，ｍ）、７．６０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．６Ｈｚ）。
【０１１４】
【化２２】
2008516954.tif 000028
ＬＬ−１８：ＬＬ−１７の調製と同一手順。収率５０％（ＬＬ−１および４−ヒドロキシベンズアルデヒドから出発）。橙色の粉末。ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３３７．１（Ｍ−１）+；1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ3ＣＯＣＤ3）：δ  ３．９３（３Ｈ，ｓ）、５．９８（Ｈ，ｓ）、６．７０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ）、６．８７−６．９２（３Ｈ，ｍ）、７．１９（Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）、７．３５（Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）、７．５６−７．６４（４Ｈ，ｍ）。
【０１１５】
【化２３】
2008516954.tif 000029
ＬＬ−２７−Ｂ：アセチルアセトン（３．１ｍｌ、３０ｍｍｏｌ）および無水ホウ酸（１．５ｇ、２１ｍｍｏｌ）を２０ｍｌの酢酸エチルに溶かした。溶液を７０℃にて０．５時間攪拌した。３−ヒドロキシ−４−メトキシベンズアルデヒド（１．５２ｇ、１０ｍｍｏｌ）およびホウ酸トリブチル（２．７ｍｌ、１０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃にて３０分間攪拌した。次に、７ｍｌのＥｔＯＡｃに溶かしたブチルアミン（１ｍｌ、１０ｍｍｏｌ）を８５℃にて１５分間滴下した。攪拌を１００℃にて１時間継続した。次に、２０ｍｌの１Ｎ  ＨＣｌを添加し、５０℃にて０．５時間攪拌することにより、混合物を加水分解した。有機層を分離した。水層を酢酸エチルで抽出した。混合した有機層を中性になるまで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を真空除去した。粗生成物を精製した。１．０４ｇのＬＬ−２７−Ａおよび２４８ｍｇのＬＬ−２７−Ｂが得られた。ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３６７．１（Ｍ−１）+；1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ3ＣＯＣＤ3）：δ  ４．０１（６Ｈ，ｓ）、６．０１（Ｈ，ｓ）、６．６６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）、７．０３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．２０（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．２６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ）、７．６５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ）。
【０１１６】
【化２４】
2008516954.tif 000030
ＬＬ−３２−Ｂ：アセチルアセトン（３．１ｍｌ、３０ｍｍｏｌ）および無水ホウ酸（１．５ｇ、２１ｍｍｏｌ）を２０ｍｌの酢酸エチルに溶かした。溶液を７０℃にて０．５時間攪拌した。２，３，４−トリメトキシベンズアルデヒド（１．９６ｇ、１０ｍｍｏｌ）およびホウ酸トリブチル（２．７ｍｌ、１０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃にて３０分間攪拌した。次に、７ｍｌのＥｔＯＡｃに溶かしたブチルアミン（１ｍｌ、１０ｍｍｏｌ）を８５℃にて１５分間滴下した。攪拌を１００℃にて１時間継続した。次に、２０ｍｌの１Ｎ  ＨＣｌを添加し、５０℃にて０．５時間攪拌することにより、混合物を加水分解した。有機層を分離した。水層を酢酸エチルで抽出した。混合した有機層を中性になるまで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を真空除去した。粗生成物を精製した。１．２５ｇのＬＬ−３２−Ａおよび１５０ｍｇのＬＬ−３２−Ｂが得られた。1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  ３．８９（６Ｈ，ｓ）、３．９０（６Ｈ，ｓ）、３．９４（６Ｈ，ｓ）、５．８３（Ｈ，ｓ）、６．６４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ）、６．７１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ）、７．３１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ）、７．８５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．２Ｈｚ）。
【０１１７】
【化２５】
2008516954.tif 000031
ＬＬ−３５：ＬＬ−１７の調製と同一手順。収率５５％（ＬＬ−３２−Ａおよび３，４−ジメトキシベンズアルデヒドから出発）。ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４２７．２（Ｍ＋１）+、４４９．３（Ｍ＋Ｎａ）+；1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  ３．８９（３Ｈ，ｓ）、３．９１（３Ｈ，ｓ）、３．９３（３Ｈ，ｓ）、３．９４（６Ｈ，ｓ）、５．８３（Ｈ，ｓ）、６．５１（Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ）、６．６３（Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ）、６．７１（Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ）、６．８９（Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．０９（Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ）、７．１５（Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，Ｊ＝８．７Ｈｚ）、７．３１（Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ）、７．６１（Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ）、７．８５（Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．２Ｈｚ）。
【０１１８】
【化２６】
2008516954.tif 000032
ＬＬ−３６：ＬＬ−１７の調製と同一手順。収率４８％（ＬＬ−３３−Ａおよび３，４−ジメトキシベンズアルデヒドから出発）。ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４２７．２（Ｍ＋１）+、４４９．３（Ｍ＋Ｎａ）+；1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  ３．８９（３Ｈ，ｓ）、３．９０（３Ｈ，ｓ）、３．９３（３Ｈ，ｓ）、３．９４（３Ｈ，ｓ）３．９５（３Ｈ，ｓ）、５．８４（Ｈ，ｓ）、６．５０（Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）、６．５１（Ｈ，ｓ）、６．５７（Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．２Ｈｚ）、６．８８（Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．０６（Ｈ，ｓ）、７．０８（Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ）、７．１４（Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．６０（Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ）、７．９６（Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ）。
【０１１９】
【化２７】
2008516954.tif 000033
ＬＬ−４１：アセトン（０．３６ｍｌ、５ｍｍｏｌ）および３，４−ジメトキシベンズアルデヒド（１．６６ｇ、１０ｍｌ）の０．２５Ｍ  ＮａＯＨ水溶液５０ｍｌ溶液に、１．５ｍｌの臭化セチルトリメチルアンモニウム２５％  ｗ／ｗ水溶液を添加した。混合物を室温にて２０時間激しく攪拌させておき、ブラインで希釈し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル溶液を濃縮した後、カラムクロマトグラフィーに付した。１．３４ｇの鮮黄色の粉末が得られた。収率７５％。ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３５５．２（Ｍ＋１）+；1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ3ＣＯＣＤ3）：δ  ３．９４（６Ｈ，ｓ）、３．９６（６Ｈ，ｓ）、６．９０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、６．９５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ）、７．１５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）、７．２０（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．６９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ）。
【０１２０】
【化２８】
2008516954.tif 000034
ＬＬ−４６：ＬＬ−１７の調製と同一手順。収率３８％（ＬＬ−４０および３，４−ジメトキシベンズアルデヒドから出発）。ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ４８３．４（Ｍ＋１）+；1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  １．２５（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）、２．３２−２．３７（２Ｈ，ｍ）、２．５５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）、２．９５（０．５Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）、３．９１−３．９７（９Ｈ，ｍ）、４．１４（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）、６．７０（Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）、６．８４−７．１９（７Ｈ，ｍ）、７．６２−７．７６（２Ｈ，ｍ）；
【化２９】
2008516954.tif 000035
ＬＬ−５５：３ｍｌのＴＨＦ中のＬＤＡ（０．２９ｍｌ、２Ｍ  ｈｅｘ／ＴＨＦ、０．５８ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、−７８℃にて３，４−ジメトキシシンナモン（ｄｉｍｅｔｈｙｏｘｙｃｉｎｎａｍｏｎｅ）（１００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍｌ）溶液に添加した。１５分後、３，４−ジメトキシシンナムアルデヒド（８５ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）ＴＨＦ（３ｍｌ）を添加した。混合物を−７８℃にて２０分間攪拌した。さらに次に、混合物を飽和ＮＨ4Ｃｌでクエンチした。溶液を周囲温度となるまで置き、酢酸エチルで抽出した。２２ｍｇのＬＬ−５５がカラムクロマトグラフィーによって得られた。収率１３％。1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ3ＣＯＣＤ3）：δ  ２．９３（２Ｈ，ｄ）、３．８０（６Ｈ，ｓ）、３．８５（６Ｈ，ｓ）、４．１３（Ｈ，ｄ）、６．２５（Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６Ｈｚ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ）、６．５８（Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ）、６．８０（Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．２Ｈｚ）、６．８８（Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ）、６．９０（Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝０．９Ｈｚ，Ｊ＝８．７Ｈｚ）、７．００（Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．０４（Ｈ，ｄ，Ｊ＝０．９Ｈｚ）、７．２５（Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝０．９Ｈｚ，Ｊ＝８．７Ｈｚ）、７．３４（Ｈ，ｄ，Ｊ＝０．９Ｈｚ）、７．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．２Ｈｚ）。
【０１２１】
【化３０】
2008516954.tif 000036
ＬＬ−６１：４−トキシカルボニルエチルクルクミン（１５３．１ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）およびジヒドロピラン（０．７３ｍＬ、７．３２ｍｍｏｌ）を、ＰＰＴＳ（８．３ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）を含有する無水ジクロロメタン３ｍＬに溶かした。溶液を室温にて４８時間攪拌した。次に、溶液を水で洗浄した。溶媒を真空除去した。粗生成物を、ヘキサン−ＥｔＯＡｃで溶出するＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（登録商標）クロマトグラフィーにより精製してＬＬ−６１（１３４ｍｇ）、収率５９％、黄色の粉末、融点６０〜６１℃を得た；ＥＳＩ  ＭＳ  ｍ／ｚ  ６３５．２（Ｍ−１）+；1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  １．２５（３Ｈ，ｔ）、１．５７−２．１７（１２Ｈ，ｍ）、２．９６（０．５７Ｈ，ｔ）、３．６２（４Ｈ，ｔ）、３．９１（６Ｈ，ｓ）、４．１３（２Ｈ，ｑ）、５．４７（２Ｈ，ｔ）、６．７２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝Ｉ５．６Ｈｚ）、６．９０−７．１８（６Ｈ，ｍ）、７．４４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）；
【化３１】
2008516954.tif 000037
ＬＬ−６２：１，７−ビス−（３，４−ジメトキシフェニル）−４−メチル−１，６−ヘプタジエン−３，５−ジオン（５０．３ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（２ｍＬ）を、ＤＭＦ（２ｍＬ）中のＮａＨ（１０ｍｇの６０％、６ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）の油を含まない懸濁液に窒素下０℃にて添加した。溶液を０℃にて３０分間攪拌した後、室温にて２時間攪拌した。ナトリウム塩溶液に、ＤＭＦ（２ｍＬ）中のＳｅｌｅｃｔｆｌｕｏｒｏ（商標）（８６．７ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を添加した。２時間攪拌した後、溶液をＥｔＯＡｃで抽出し、５％  Ｈ2ＳＯ4（１０ｍＬ）、その後飽和ＮａＨＣＯ3溶液（１０ｍＬ）で洗浄した。次に、溶媒を真空蒸発した。粗生成物を、ヘキサン−ＥｔＯＡｃで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製してＬＬ−６２（２５ｍｇ）を収率４９％の黄色の粉末で得た。1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  １．９７（３Ｈ，ｓ）、３．９０（６Ｈ，ｓ）、３．９５（６Ｈ，ｓ）、６．８３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）、６．８７（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３Ｈｚ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）、６．９０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）、６．９５（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）、７．７５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）；
【化３２】
2008516954.tif 000038
クルクミン
ＬＬ−６４Ｂ：再結晶化したクルクミン（１．０８ｇ、２．９４ｍｍｏｌ）およびジヒドロピラン（２ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を、ＰＰＴＳ（７４ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を含む３０ｍＬの無水ジクロロメタンに溶かした。溶液を室温にて２４時間攪拌した。次に、溶液を水で洗浄した。溶媒を真空除去した。粗生成物を、ヘキサン−ＥｔＯＡｃで溶出するＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（登録商標）クロマトグラフィーにより精製してＬＬ−６４Ｂ（１．１２ｇ）、収率６６．８％、黄色の粉末を得た；ＥＳＩ  ＭＳ  ｍ／ｚ  ５３５．０（Ｍ−１）+；1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  １．５７−２．１７（１２Ｈ，ｍ）、３．６２（４Ｈ，ｔ）、３．９１（６Ｈ，ｓ）、５．４７（２Ｈ，ｔ）、５．８３（１Ｈ，ｓ）、６．５０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝Ｉ５．９Ｈｚ）、７．０９−７．１６（６Ｈ，ｍ）、７．６０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝Ｉ５．９Ｈｚ）；Ｃ31Ｈ36Ｏ8・１／４Ｈ2Ｏの分析計算値（理論上）：Ｃ，６８．８１；Ｈ，６．８０。分析値：Ｃ，６８．８６；Ｈ，６．８３。
【０１２２】
ＬＬ−６５：ＬＬ−６４Ｂ（５５ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（３ｍＬ）を、ＴＨＦ（２ｍＬ）中のＮａＨ（７ｍｇの６０％、４．２ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の油を含まない懸濁液に窒素下０℃にて添加した。溶液を０℃にて３０分間攪拌した後、室温にて２時間攪拌した。ナトリウム塩溶液に、プロピオル酸エチル（０．０２ｍＬ、ｍｍｏｌ）を添加した。２時間攪拌した後、溶液をＥｔＯＡｃで抽出し、５％  Ｈ2ＳＯ4（１０ｍＬ）、その後飽和ＮａＨＣＯ3溶液（１０ｍＬ）で洗浄した。次に、溶媒を真空蒸発した。粗生成物を、ヘキサン−ＥｔＯＡｃで溶出するＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（登録商標）クロマトグラフィーにより精製してＬＬ−６５（３９．４ｍｇ）収率６２％、橙色粉末を得た；融点７２〜７３℃；ＥＳＩ  ＭＳ  ｍ／ｚ  ６３４．７Ｍ+；1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  １．３４（３Ｈ，ｔ）、１．５−２．２（１２Ｈ，ｍ）、３．６２（４Ｈ，ｔ）、３．９２（６Ｈ，ｓ）、４．２８（２Ｈ，ｑ）、５．４９（２Ｈ，ｔ）５．９６（Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）、７．００（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）、７．０８−７．１６（６Ｈ，ｍ）、７．７６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ）、７．８３（Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ）；Ｃ36Ｈ42Ｏ10の分析計算値（理論上）：Ｃ，６８．１２；Ｈ，６．６７。分析値：Ｃ，６７．８２；Ｈ，６．７３。
【０１２３】
ＬＬ−６６：ＬＬ−６５（１４．８ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）およびＰＰＴＳ（５ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（２．５ｍＬ）溶液を室温にて３時間攪拌した。溶液を真空蒸発させた。ヘキサン−ＥｔＯＡｃで溶出するＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（登録商標）クロマトグラフィーによりＬＬ−６６（１０ｍｇ）が得られた。収率９３％、橙色粉末、融点１０６〜１０６．５℃；ＥＳＩ  ＭＳ  ｍ／ｚ  ４６５．２（Ｍ−１）+；1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  １．３４（３Ｈ，ｔ）、３．９５（６Ｈ，ｓ）、４．２９（２Ｈ，ｑｕａｒｔ）、５．９６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）、６．９５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）、６．９６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）、７．０５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ）、７．１７（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，Ｊ＝２．１Ｈｚ）、７．７５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ）、７．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ）。
【０１２４】
【化３３】
2008516954.tif 000039
ＬＬ−８０：ＬＬ−６６の調製と同一手順。収率６２％（１，７−ビス（３，４−ジメトキシフェニル）−１，６−ペンタジエン−３，６−ジオンから出発）。赤色粉末。1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  １．３４（３Ｈ，ｔ）、３．９５（１２Ｈ，ｓ）、４．２９（２Ｈ，ｑｕａｒｔ）、５．９８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）、６．９５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）、７．０８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）、７．２２（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）、７．７７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．３Ｈｚ）、７．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ）。
【０１２５】
ＨＯＪ−７：収率３％（５ｍｍｏｌの２，４−ジフルオロベンズアルデヒドから出発）、黄色の粉末、融点１５５．５〜１５６℃（ｎ−ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ５．８６（１Ｈ，ｓ）、６．６８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．０Ｈｚ）、６．８４−６．９６（４Ｈ，ｍ）、７．５６（２Ｈ，ｍ）、７．７１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．０Ｈｚ）。ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３４７［Ｍ−１］+。Ｃ19Ｈ12Ｆ4Ｏ2の分析計算値：Ｃ，６５．５２；Ｈ，３．４７。分析値：Ｃ，６５．６６；Ｈ，３．５７。
【０１２６】
ＨＯＪ−９：収率１０％（５ｍｍｏｌの２−フルオロ−４−メトキシベンズアルデヒドから出発）、黄色の粉末、融点１６３〜１６５℃（ｎ−ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ３．８４（６Ｈ，ｓ）、５．８２（１Ｈ，ｓ）、６．６２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．０Ｈｚ）、６．７０（４Ｈ，ｍ）、７．４８（２Ｈ，１，Ｊ＝８．７Ｈｚ）、７．７１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．０Ｈｚ）。ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３７１［Ｍ−１］+。Ｃ21Ｈ18Ｆ2Ｏ4の分析計算値：Ｃ，６７．７４；Ｈ，４．８７。分析値：Ｃ，６７．５８；Ｈ，４．９２。
【０１２７】
ＨＯＪ−１０：収率９％（５ｍｍｏｌの２−フルオロ−６−メトキシベンズアルデヒドから出発）、黄色の針状晶、融点１４４〜１４５℃（ｎ−ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ３．８２（６Ｈ，ｓ）、５．９０（１Ｈ，ｓ）、６．７２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．０Ｈｚ）、６．８８（２Ｈ，ｍ）、７．５６（２Ｈ，ｍ）、７．００−７．０７（４Ｈ，ｍ）、７．７４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．０Ｈｚ）。ＥＳＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ３７１［Ｍ−１］+。Ｃ21Ｈ18Ｆ2Ｏ4の分析計算値：Ｃ，６７．７４；Ｈ，４．８７。分析値：Ｃ，６７．６０；Ｈ，４．９５。
【０１２８】
生物活性。上に示した化合物は以下のようにスクリーニングされ、下の表２に示されるように、抗癌活性および抗アンドロゲン受容体活性を有することが見出された。
【０１２９】
細胞培養およびトランスフェクション―ヒト前立腺癌ＬＮＣａＰおよびＰＣ−３細胞を、それぞれＲＰＭＩ培地およびダルベッコ最小必須培地（ＤＭＥＭ）中で維持した。両方の培地は、ペニシリン（２５単位／ｍＬ）、ストレプトマイシン（２５μｇ／ｍＬ）、および１０％ウシ胎児血清で増強した。可能性のある抗アンドロゲンの同定のため、アンドロゲン受容体トランス活性化アッセイ、アンドロゲン依存性リポーター遺伝子転写試験を一次スクリーニングとして用いた。このアッセイは、最初に、臨床的に関連する変異ＡＲを発現するＬＮＣａＰ細胞で行った。ＬＮＣａＰ  ＡＲトランス活性化アッセイにより可能性のある化合物が示されると、野生型ＡＲに対して可能性のある活性についてそれらを再試験した。野生型ＡＲトランス活性化アッセイは、内因性の機能的ＡＲを欠くＰＣ−３宿主細胞で行った。
【０１３０】
本発明者らが既に記載した細胞トランスフェクションの条件に従った（Ｏｈｔｓｕ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍ  ４５：  ５０３７−５０４２（２００２）；Ｏｈｔｓｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １１：５０８３−５０９０（２００３））。手短に言えば、細胞を２４ウェルまたは４８ウェルの組織培養皿に、トランスフェクションの２４時間前（ＰＣ−３細胞）または４８時間前に（ＬＮＣａＰ細胞）蒔いた。その後、ＬＮＣａＰ細胞にＭＭＴＶ−ＬＴＲプロモーターおよびアンドロゲン受容体結合因子を含むリポーター遺伝子であるＭＭＴＶ−ルシフェラーゼ、ならびにトランスフェクション効率の内部対照として働くＰＲＬ−ＳＶ４０をトランスフェクトした。ＰＣ−３細胞に野生型ＡＲ発現プラスミドであるｐＳＧ５ＡＲ、を上述のＭＭＴＶ−ルシフェラーゼリポーター遺伝子およびＰＲＬ−ＳＶ４０内部対照に加えてトランスフェクトした。ＳｕｐｅｒＦｅｃｔ（Ｑｉａｇｅｎ，Ｃｈａｔｓｗｏｒｔｈ，ＣＡ）を、製造業者の推奨に従ってトランスフェクション試薬として用いた。５時間のトランスフェクションの終わりに、培地を１０％活性炭−デキストラン処理した（ｃｈａｒｃｏａｌ  ｄｅｘｔｒａｎ−ｓｔｒｉｐｐｅｄ）アンドロゲン除去血清を補給したＤＭＥＭまたはＲＰＭＩに交換した。２４時間後、細胞を１ｎＭのＤＨＴおよび／または指定された濃度の試験化合物でさらに２４時間処理した。デュアルルシフェラーゼアッセイシステム（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を用いるルシフェラーゼ活性測定のために細胞を回収した。生成されたデータを、内部ルシフェラーゼ対照に標準化した相対ルシフェラーゼ活性として表した。ＤＨＴインキュベーションは、リポーター遺伝子の顕著な発現を誘導した。このアンドロゲン誘導性リポーター遺伝子発現を有意に抑制することのできる試験化合物を可能性のある抗アンドロゲン物質として同定した。
【０１３１】
ＬＮＣａＰ細胞増殖アッセイ：上に述べたように、ＬＮＣａＰ細胞は相当量の変異ＡＲを含み、従ってこれらの細胞の増殖は、アンドロゲンインキュベーションにより有意に活性化され得る。従ってＬＮＣａＰ細胞増殖アッセイを上述のＡＲトランス活性化アッセイにより同定された可能性のある抗アンドロゲンを確認するための代替法として用いた。ミトコンドリア脱水素酵素による無色の基質から還元したテトラゾリウムへの変換を基にする、ＭＴＴ分析を用いた。実験条件は他の場所に詳述されている（Ｏｈｔｓｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １１  ：５０８３−５０９０（２００３））。手短に言えば、細胞を９６ウェル組織培養プレートに蒔いた後、１ｎＭのＤＨＴおよび／または１０％活性炭−デキストラン処理血清含有ＲＰＭＩ中の試験化合物の存在下で５日間連続してインキュベートする。インキュベーションの終わりに、細胞にＭＴＴ（ＰＢＳ中５ｍｇ／ｍｌ）を３７℃にて３時間与えた。生じる沈殿を溶解バッファーに溶かした後、マイクロプレートリーダーを用いて波長５９５ｎｍにて定量した。ＭＴＴ分析から生成されたデータの精度を確認するため、２通りの試料を用いて細胞計数を行った。アンドロゲン誘導性前立腺腫瘍細胞増殖に有害作用を示した試験化合物を可能性のある抗アンドロゲン物質として同定した。
【０１３２】
【表２】
2008516954.tif 000040
【０１３３】
前記は本発明の一例となるものであり、それを限定するものと見なされるものではない。本発明を請求の範囲により定義し、請求の範囲と均等のものもその中に含まれる。
【図面の簡単な説明】
【０１３４】
【図１】クルクミン類似体の構造を示す図である（１〜２０）。
【図２】クルクミン類似体の構造を示す図である（２１〜４４）。
【図３】図３Ａは、ヒドロキシフルタミド（ＨＦ）および選択された化合物による、ＤＨＴに媒介されるＭＭＴＶ転写ＡＲ活性の抑制を示す。図３Ｂは、ヒドロキシフルタミド（ＨＦ）および選択された化合物による、ＤＨＴに媒介されるＭＭＴＶ転写ＡＲ活性の抑制を示す。図３Ｃは、ヒドロキシフルタアミド（ＨＦ）および選択された化合物による、ＤＨＴに媒介されるＭＭＴＶ転写ＡＲ活性の抑制を示す。
【図１】
2008516954.tif 000045
【図２】
2008516954.tif 000046
【図３Ａ】
2008516954.tif 000047
【図３Ｂ】
2008516954.tif 000048
【図３Ｃ−１】
2008516954.tif 000049
【図３Ｃ−２】
2008516954.tif 000050
【国際調査報告】
2008516954.tif 000051