(57)【要約】  本発明はホスホン酸処理フルオロキノロン、その抗菌類似体および当該化合物の使用方法に関する。当該化合物は、骨および関節の感染の予防および／または治療、特に骨髄炎の予防および／または治療に抗生物質として有効である。  【選択図】図６
2008536911.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物であって、
【化１】
2008536911.tif 000124
式中、ｆは０または１であり；
ｍは０または１であり；
Aはフルオロキノロン分子、またはその抗菌類似体であり；
Bはホスホン酸処理された基であり；
LａおよびLｂはＢをＡと結合させるための切断可能なリンカーである；
化合物、またはその医薬品として許容できるそれらの塩、代謝産物、溶媒和物またはプロドラッグ。
【請求項２】
フルオロキノン分子または類似体Aが式A1aおよびA1bで表される請求項１記載の化合物であって、
【化２】
2008536911.tif 000125
式中、前記リンカーLａはｆが１のときA２に付加しており、Lｂはｍが１のときA１に付加しており；
A２はｆが１のときアミノの基であり、A２はｆが０のとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基であり；
A１はｍが１のときOまたはSであり、A１はｍが０のときOHであり；
Z１はアルキル、アリールまたは−O−アルキルであり；
Z２は水素、ハロゲンまたはアミノ基であり；
X１はＮまたは−CY１−であり、
Y１は水素、ハロゲン、アルキル、−O−アルキルまたは−S−アルキルであり、
またはX１はZ１と架橋を形成しており；
X２はＮまたは−CY２−であり、
Y２は水素、ハロゲン、アルキル、−O−アルキルまたは−S−アルキルであり、
またはX２はA２と架橋を形成しており；
X３はNまたはCHであり；
X４はNまたはCHである、化合物。
【請求項３】
Z１はシクロプロピルであり、X２は−CY２−であり、Y２はフッ素である請求項２記載の化合物。
【請求項４】
フルオロキノロン分子または類似体Aが式A2で表される化合物であって、
【化３】
2008536911.tif 000126
式中、前記リンカーLaはｆが１のときA２に付加しており、Lｂはｍが１のときA１に付加しており；
A２はｆが１のときアミノの基であり、A２はｆが０のとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基であり；
A１はｍが１のときOまたはSであり、A１はｍが０のときOHであり；
Z１はアルキル、アリールまたは−O−アルキルであり；
Z２は水素、ハロゲンまたはアミノ基であり；
Z３は水素またはハロゲンであり；
Z４は水素、ハロゲン、アルキル、−O−アルキルまたは−S−アルキル、
またはZ１と架橋を形成する、請求項１記載の化合物。
【請求項５】
Z１はシクロプロピルであり、Z３はフッ素である請求項４記載の化合物。
【請求項６】
フルオロキノロン分子または類似体Aが式A3で表される化合物であって、
【化４】
2008536911.tif 000127
式中、前記リンカーLaはｆが１のときA２に付加しており、Lｂはｍが１のときA１に付加しており；
A２はｆが１のときアミノの基であり、A２はｆが０のとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基であり；
A１はｍが１のときOまたはSであり、A１はｍが０のときOHであり；
Z５は水素、ハロゲン、アルキルまたは−O−アルキルである、請求項１記載の化合物。
【請求項７】
アミノ基はN結合置換窒素ヘテロ環基である請求項２、４または６記載の化合物。
【請求項８】
N結合置換ヘテロ環基は、ピロール、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、１，４−ジアゼパン、ジヒドロピロリジン、ジヒドロピリジンおよびテトラヒドロピリジンからなる群から選択される基である請求項７記載の化合物。
【請求項９】
Bはビスホスホン酸塩である請求項１記載の化合物。
【請求項１０】
各ビスホスホン酸塩は独立して以下の化合物であって、
【化５】
2008536911.tif 000128
式中、各R２は、少なくとも２つのR２がHであることを条件として、独立してH、下級アルキル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり；
各X５は独立してH、OH、NH２またはハロ基である、請求項９記載の化合物。
【請求項１１】
Lｂは以下からなる群から選択される切断可能なリンカーである化合物であって、
【化６】
2008536911.tif 000129
Laは以下からなる群から選択される切断可能なリンカーである化合物であって、
【化７】
2008536911.tif 000130
式中、ｎは１０以下の整数であり；
各ｐは独立して０または１０以下の整数であり；
RLはH、エチルまたはメチルであり；
RXはS、NRLまたはOであり；
各Zは水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、アシル、アシルオキシ、カルボキシ、カルバモイル、スルフリル、スルフィニル、スルフェニル、スルホニル、メルカプト、アミノ、ヒドロキシル、シアノおよびニトロからなる群から独立して選択され、
ｓは１、２、３または４であり；
ｑは２または３であり；
各RWは独立してHまたはメチルであり；
RｙはCaHｂで、aは０から２０までの整数、ｂは１と２a＋１の間の整数であり；
XはCH２、−CONRL−、−CO−O−CH２−または−CO−O−であり；
YはO、S、S(O)、SO２、C(O)、CO２、CH２または不在である、請求項１記載の化合物。
【請求項１２】
各ｎは独立して１または２、各ｐは独立して０または１、RLはH、RXはNHである請求項１１記載の化合物。
【請求項１３】
フルオロキノロン分子または類似体Aはシプロフロキサシンまたはその抗菌性類似体である請求項１記載の化合物。
【請求項１４】
フルオロキノロン分子または類似体Aはガチフロキサシンまたはその抗菌性類似体である請求項１記載の化合物。
【請求項１５】
フルオロキノロン分子または類似体Aはモキシフロキサシンまたはその抗菌性類似体である請求項１記載の化合物。
【請求項１６】
式（II）の化合物であって、
【化８】
2008536911.tif 000131
式中、破線は任意の基B−L３およびL２−Bを表しており、B−L３およびL２−Bのうち少なくとも１つは存在しており；
Z５は水素、ハロゲン、アルキルまたは−O−アルキルであり；
A１はL２−BがA１に付加しているときOまたはSであり、A１はL２−BがA１に付加していないときOHであり；
A２はB−L３がA２は付加しているときアミノ基であり、A２はB−L３がA２は付加していないとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基であり；
各Bは独立してホスホン酸処理された以下の式の基であり、
【化９】
2008536911.tif 000132
式中、各R２は、少なくとも２つのR２がHであることを条件として、H、下級アルキル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり；
各X５は独立してH、OH、NH２またはハロ基であり；
L２は以下の式のリンカーであり、
【化１０】
2008536911.tif 000133
式中、ｎは１０以下の整数であり；
ｐは０または１０以下の整数であり；
RLはH、エチルまたはメチルであり；
RXはS、NRLまたはOであり；
各Zは水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、アシル、アシルオキシ、カルボキシ、カルバモイル、スルフリル、スルフィニル、スルフェニル、スルホニル、メルカプト、アミノ、ヒドロキシル、シアノおよびニトロからなる群から独立して選択され、
ｓは１、２、３または４であり；
L３は以下の式のリンカーであり、
【化１１】
2008536911.tif 000134
式中、ｎは１０以下の整数であり；
各ｐは独立して０または１０以下の整数であり；
ｑは２または３であり；
RLはH、エチルまたはメチルであり；
各RWは独立してHまたはメチルであり；
RｙはCaHｂで、aは０から２０までの整数、ｂは１と２a＋１の間の整数であり；
XはCH２、−CONRL−、−CO−O−CH２−または−CO−O−であり；
YはO、S、S(O)、SO２、C(O)、CO２、CH２または不在である；
化合物、または医薬品として許容できるそれらの塩、代謝産物、溶媒和物またはプロドラッグ。
【請求項１７】
各リンカーｎは独立して１または２、各ｐは独立して０または１、RLはH、RXはNHである請求項１６記載の化合物。
【請求項１８】
アミノ基はN結合置換窒素ヘテロ環基である請求項１６記載の化合物。
【請求項１９】
N結合置換窒素ヘテロ環基は、ピロール、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、１，４−ジアゼパン、ジヒドロピロリジン、ジヒドロピリジンおよびテトラヒドロピリジンからなる群から選択される基である請求項１８記載の化合物。
【請求項２０】
以下の群から選択される式により表される化合物、
【化１２】
2008536911.tif 000135
および
【化１３】
2008536911.tif 000136
または医薬品として許容できるそれらの塩、代謝産物、溶媒和物またはプロドラッグ。
【請求項２１】
請求項１、１６および２０から選択される化合物を含む医薬組成物、および医薬品として許容できる担体または賦形剤。
【請求項２２】
被験体の細菌感染を治療するための方法であって、請求項１、１６および２０から選択される製薬学的に有効量の第１抗生物質を含む医薬組成物をそういう治療を必要としている被験体に投与する方法。
【請求項２３】
前述の医薬組成物に第２抗生物質が含まれている請求項２２記載の方法。
【請求項２４】
前述の第２抗生物質がリファマイシン類似体である請求項２３記載の方法。
【請求項２５】
前述の第２抗生物質がテトラサイクリン、チゲサイクリンまたはテトラサイクリン、グリシサイクリンもしくはミノサイクリン類似体である請求項２３記載の方法。
【請求項２６】
前述の被験体がヒトである請求項２２記載の方法。
【請求項２７】
被験体の細菌感染を予防するための方法であって、請求項１、１６および２０から選択される製薬学的に有効量の抗生物質を含む医薬組成物をそういう予防を必要としている被験体に投与する方法。
【請求項２８】
前述の医薬組成物は侵襲的治療の前、期間中または後に前述の被験体に投与する請求項２７記載の方法。
【請求項２９】
被験体の骨にフルオロキノロン分子またはその類似体を蓄積させる方法であって、請求項１、１６および２０のいずれかに記載の化合物を被験体に投与する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は２００５年４月２１日に出願されそのすべてが本願に組み込まれている米国仮出願番号６０／６７３，３３６の優先権を主張する。
【０００２】
本発明はホスホン酸処理フルオロキノロン、その抗菌類似体および当該化合物の使用方法に関する。当該化合物は、骨および関節の感染の予防および／または治療、特に骨髄炎の予防および／または治療に抗生物質として有効である。
【背景技術】
【０００３】
骨髄炎は種々の微生物、主に黄色ブドウ球菌（非特許文献１）が引き起こす骨の炎症である。この疼痛を伴う消耗性疾患は主に子供に発生する。成人の場合は、糖尿病患者や腎透析患者が罹りやすい。急性の場合は抗生物質で治療可能であるが、毎日の療法を長期間継続しなければならない。再発したり慢性になったりして、繰り返し入院し治療を受けなければならなくなる場合もある。
【０００４】
フルオロキノロンは経済性と臨床性が証明済みの完全合成の殺菌性抗生物質である。細菌のトポイソメラーゼII（DNAジャイラーゼ）およびトポイソメラーゼIV酵素を標的とし、薬物、DNAおよび酵素の三重複合体を形成し、DNAの転写、複製および修復を阻害し分裂を促進することにより、細菌細胞の急速な死を引き起こす（非特許文献２）。新旧含めて人気の高いフルオロキノロンには、ノルフロキサシン（Ｎｏｒｏｘｉｎ（登録商標）（特許文献１））、シプロフロキサシン（Ｃｉｐｒｏ (登録商標)（特許文献３））、ガチフロキサシン（Ｔｅｑｕｉｎ（登録商標）（特許文献３））およびモキシフロキサシン（Ａｖｅｌｏｘ（登録商標）（特許文献４））が含まれる。ほとんどのフルオロキノロンは、広範な抗微生物性、傑出した生物利用能、優れた薬物動態、ほとんど皆無の副作用などの優れた特長を提供する。フルオロキノロンは骨髄炎の経口治療の面でも優れた効能を示している（非特許文献３）。
【０００５】
ビスホスホン酸塩は明確な特徴を持つ骨親和性治療薬である。当該化合物は、骨組織を形成するヒドロキシアパタイトミネラルの中のCa2＋に結合する能力のゆえに、骨への高い親和性を有することが知られている（非特許文献４）。従って、骨を選択的に標的とする数多くのビスホスホン酸塩結合化合物が作られており、その中には、タンパク質（非特許文献５）、ビタミン（特許文献５，６，７）チロシンキナーゼ阻害剤（特許文献８，９）、ホルモン（特許文献１０，１１）および骨スキャン剤（特許文献１２）などが含まれる。他のビスホスホン酸塩誘導体も同様に、関節炎（特許文献１３）、骨粗鬆症（特許文献１４，１５）、高カルシウム血症（特許文献１６）および骨癌（特許文献１７）の治療薬として使用されている。
【０００６】
抗生物質の標的送達に関していくつかの戦略が調査されている（特許文献１８、１９、２０、２１）。抗生物質の骨標的送達に関しては、ビスホスホン酸処理抗生物質の使用を提案する人もいる。しかしテトラサイクリン、ベータラクタムおよびフルオロキノロンも含め、実際に合成されたそういう化合物は極めてまれである（特許文献２２、２３；非特許文献６、７、８）。さらに、そういう化合物はin vivoで投与されたことはないし、骨標的活性が証明されたこともない。
【特許文献１】米国特許第４１４６７１９号
【特許文献２】米国特許第４６７０４４４号
【特許文献３】米国特許第４９８０４７０号
【特許文献４】米国特許第４９９０５１７号
【特許文献５】米国特許第６２１４８１２号
【特許文献６】米国特許第２００３／０１２９１９４号
【特許文献７】国際公開第０２／０８３１５０号パンフレット
【特許文献８】国際公開第０１／４４２５８号パンフレット
【特許文献９】国際公開第０１／４４２５９号パンフレット
【特許文献１０】米国特許第５１８３８１５号
【特許文献１１】米国特許第２００４／０１１６６７３号
【特許文献１２】米国特許第４８１０４８６号
【特許文献１３】米国特許第４７４６６５４号
【特許文献１４】米国特許第５４２８１８１号
【特許文献１５】米国特許第６４２０３８４号
【特許文献１６】米国特許第４９７３５７６号
【特許文献１７】米国特許第６５４８０４２号
【特許文献１８】米国特許第５９００４１０号
【特許文献１９】米国特許第２００２／０１４２９９４号
【特許文献２０】米国特許第２００４／００３３９６９号
【特許文献２１】米国特許第２００５／０２６８６４号
【特許文献２２】米国特許第５８５４２２７号
【特許文献２３】米国特許第５８８０１１１号
【特許文献２４】国際公開第０４／０２６３１５号パンフレット（Ｉｌｅｘ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）
【特許文献２５】米国特許第６２１４８１２号（ＭＢＣ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）
【特許文献２６】米国特許第５３５９０６０号（Ｐｆｉｚｅｒ）
【特許文献２７】米国特許第５８５４２２７号（Ｅｌｉｚａｎｏｒ Ｐｈａｒｍ.）
【特許文献２８】米国特許第６３３３４２４号（ＥｌｉｚａｎｏｒＰｈａｍ.）
【特許文献２９】米国特許第６５４８０４２号（Ａｒｓｔａｄａｎｄ Ｓｋａｔｔｅｌｂｏｌ）
【特許文献３０】国際公開第２００４／０８９９２５号パンフレット（ＳｅｍａｐｈｏｒｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）
【特許文献３１】米国特許第４６７０４４４号
【特許文献３２】米国特許第４９８０４７０号
【特許文献３３】米国特許第４９９０５１７号
【特許文献３４】国際公開第０４／０２６３１５号パンフレット
【特許文献３５】米国特許第３３４２８１０号
【特許文献３６】米国特許第４００２７５２号
【特許文献３７】米国特許第４２１９４７８号
【特許文献３８】米国特許第４９８３６０２号
【特許文献３９】米国特許第４３５３８２６号
【特許文献４０】米国特許第４３４１７８５号
【特許文献４１】米国特許第３３４２８１０号
【非特許文献１】Ｃａｒｅｋ等、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｆａｍｉｌｙ  Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ（２００１），Ｖｏｌ１２，１２：２４１３−２４２０
【非特許文献２】Ｍｉｔｓｃｈｅｒ Ｌ.Ａ.Ｃｈｅｍ Ｒｅｖ.（２００５），１０５：５５９−５９２
【非特許文献３】Ｌａｚｚａｒｉｎｉ等，Jｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｏｎｅａｎｄ ＪｏｉｎｔＳｕｒｇｅｒｙ (２００４)，８６A（１０）：２３０５−１８
【非特許文献４】Ｈｉｒａｂａｙａｓｈｉ ａｎｄ Ｆｕｊｉｓａｋｉ, Ｃｌｉｎ. Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ. （２００３）４２（１５）：１３１９−１３３０
【非特許文献５】Ｕｌｕｄａｇ等，ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌＰｒｏｇ.（２０００）１６：１１１５−１１１８
【非特許文献６】ＤＥ １９５  ３２  ２３５
【非特許文献７】Ｐｉｅｐｅｒａｎｄ Ｋｅｐｐｌｅｒ, Ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ, Ｓｕｌｆｕｒ ａｎｄ Ｓｉｌｉｃｏｎｅ（２００１）１７０：５−１４
【非特許文献８】Ｈｅｒｃｚｅｇｈ等，Ｊ. Ｍｅｄ. Ｃｈｅｍ（２００２）４５：２３３８−４１
【非特許文献９】Ｈｉｒａｂａｙａｓｈｉａｎｄ Ｆｕｊｉｓａｋｉ, Ｃｌｉｎ. Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ. （２００３）４２（１５）：１３１９−１３３０
【非特許文献１０】Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ, ４ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ  Ｊ．Ｍａｒｃｈ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ,Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ, １９９２
【非特許文献１１】ＶｅｐｓａｌａｉｎｅｎＪ., Ｃｕｒｒｅｎｔ ＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ, ９, １２０１-１２０８, ２００２)
【非特許文献１２】Ｍｉｔｓｈｅｒ Ｌ.Ａ.Ｃｈｅｍ Ｒｅｖ.（２００５）、１０５：５５９−５９２
【非特許文献１３】Ｇｏｒｄｅｅｖ等, Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ．（２００３），１３：４２１３−１６
【非特許文献１４】Ｈｕｂｓｃｈｅｗｅｒｌｅｎ等，Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ．（２００３），１３：４２２９−３３
【非特許文献１５】Ｇｏｄｉｎｇ等，Ｂｉｏｃｈｉｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ（２００３），１６３８（１）：１−１９
【非特許文献１６】Ｋａｗａｂｅ等，Ｃｌｉｎ  Ｏｒｔｈｏｐ．（１９８６）２１１：２４４−５１；Ｔｕｃｋｅｒｍａｎｎ等，Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ（２００１），６９（１）：４９−５７；Ｓｅｌｌｅｒｓ等，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ．（１９７８）１７１（２）：４９３−６）
【非特許文献１７】Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ等，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ（１９９２），３６（１２）：２６９３−９７
【非特許文献１８】Ｗｏｏｄｃｏｃｋ，  Ｊ．Ｍ．等，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ（１９９７），４１：１０１−１０６；Ｄｏｎｓｋｅｙ等，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ（２００４），４８：３２６−３２８
【非特許文献１９】Ｍｉｔｓｈｅｒ  Ｌ．Ａ．，  Ｃｈｅｍ  Ｒｅｖ．（２００５），１０５：５５９−５９２
【非特許文献２０】Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．（１９８６），２９：３９４−４０４
【非特許文献２１】Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．（１９８４），２５８：９１９９−９２０１
【非特許文献２２】Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  （１９９７），４１：２３６２−２３６６
【非特許文献２３】Ｙｏｓｈｉｎａｒｉ等，  Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ（２００１），２２（７）：７０９−７１５）
【非特許文献２４】Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｏｎｅ  ＆  Ｊｏｉｎｔ  Ｓｕｒｅｒｙ（２００４）８６Ａ：２５２６−４０）
【非特許文献２５】Ｊ．  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ（１９９７），５：１２９−１３８
【非特許文献２６】Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．２００２；４５，２３３８−２３４１
【非特許文献２７】Ａｎｔｉｍｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｏｔｈｅｒａｐｙ（１９９２），３６（１２）：２６９３−９７
【非特許文献２８】Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．（２０００），４２：１７５−１９５
【非特許文献２９】Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．（１９９２），３６：２６９３−７；Ｊ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．（２００４），５３：９２８−９３５
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
過去何年かの間に進歩が見られたにも拘らず、骨のユニークな解剖学的特徴のゆえに、骨特異的な送達にはまだ限界がある。ビスホスホン酸塩修飾は将来性のある方法ではあるが、過去数十年の進歩が証明しているように、治療学的に最適化されたビスホスホン酸塩誘導体は合成物ごとにデザインし最適化する必要があるので、成功する確実な保証はない（非特許文献９）。
【０００８】
従って、骨および関節の感染を予防および治療するのにより適した投与薬が必要である。特に、時間的にコントロールされ（または持続性の）、空間的にコントロールされた（または標的化された）医薬品を骨へ送達できる高活性のホスホン酸処理フルオロキノロンが必要である。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
以下の明細書を一読すれば当業者には明白なように、本発明はこういうニーズも含め他のニーズも満足させるものである。
【００１０】
本発明は骨結合親和性の高い抗微生物化合物に関する。特に、本発明はホスホン酸処理フルオロキノロン、その抗菌類似体およびそれらの化合物の使用方法に関する。こういう化合物は、骨および関節の感染を予防または治療するための抗生物質として、特に骨髄炎の予防および治療の抗生物質として有効である。
【００１１】
１つの実施態様において、本発明の化合物は式（Ｉ）で表される化合物、および医薬品として許容できるそれらの塩、代謝産物、溶媒和物およびプロドラッグである。
【化１４】
2008536911.tif 000003
【００１２】
式中、ｆは０または１であり、
ｍは０または１であり、
Aはフルオロキノロン分子、またはその抗菌類似体であり、
Bはホスホン酸処理された基であり、
LaおよびLｂはBをAと結合させるための切断可能なリンカーである。
【００１３】
リンカーはBとAを共有結合させるのが好ましい。ホスホン酸処理された基Bは骨組織に高い親和性を有するのが好ましい。
【００１４】
式（Ｉ）の化合物の好ましい実施態様では、フルオロキノロン分子またはその類似体Aは式A1aおよびA1bで表される。
【化１５】
2008536911.tif 000004
【００１５】
式中、リンカーLaはｆが１のときA２に付加しており、Lｂはｍが１のときA１に付加しており；
A２はｆが１のときアミノの基であり、A２はｆが０のとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基であり；
A１はｍが１のときOまたはSであり、A１はｍが０のときOHであり；
Z１はアルキル、アリールまたは−O−アルキルであり；
Z２は水素、ハロゲンまたはアミノ基であり；
X１はNまたは−CY１−であり、
Y１は水素、ハロゲン、アルキル、−O−アルキルまたは−S−アルキルであり、
またはX１はZ１と架橋を形成しており；
X２はNまたは−CY２−であり、
Y２は水素、ハロゲン、アルキル、−O−アルキルまたは−S−アルキルであり、
またはX２はA２と架橋を形成しており；
X３はNまたはCHであり；
X４はNまたはCHである。
【００１６】
式A1aおよびA1bにおいて、Z１はシクロプロピル、X２は−CY２−、Y２はフッ素であるのが好ましい。
【００１７】
式（Ｉ）の化合物のさらに好ましい実施態様では、フルオロキノロン分子またはその類似体Aは式A2で表される。
【化１６】
2008536911.tif 000005
【００１８】
式中、前記リンカーLaはｆが１のときA２に付加しており、Lｂはｍが１のときA１に付加しており；
A２はｆが１のときアミノの基であり、A２はｆが０のとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基であり；
A１はｍが１のときOまたはSであり、A１はｍが０のときOHであり；
Z１はアルキル、アリールまたは−O−アルキルであり；
Z２は水素、ハロゲンまたはアミノ基であり；
Z３は水素またはハロゲンであり；
Z４は水素、ハロゲン、アルキル、−O−アルキルまたは−S−アルキル、
またはZ１と架橋を形成する。式A2の化合物のZ１はシクロプロピル、Z３はフッ素であるのが好ましい。
【００１９】
式（Ｉ）の化合物の別の好ましい実施態様では、フルオロキノロン分子またはその類似体Aは式A3で表される。
【化１７】
2008536911.tif 000006
【００２０】
式中、リンカーLaはｆが１のときA２に付加しており、Lｂはｍが１のときA１に付加しており；
A２はｆが１のときアミノの基であり、A２はｆが０のとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基であり；
A１はｍが１のときOまたはSであり、A１はｍが０のときOHであり；
Z５は水素、ハロゲン、アルキルまたは−O−アルキルである。
【００２１】
式A1a、A1b、A2およびA3の化合物の好ましい実施態様では、アミノ基はN結合置換窒素ヘテロ環基であり、さらに好ましい実施態様では、アミノ基はピロール、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、１，４−ジアゼパン、ジヒドロピロリジン、ジヒドロピリジンおよびテトラヒドロピリジンからなる群から選択される基である。
【００２２】
式（Ｉ）の化合物の好ましい実施態様では、各Bはビスホスホン酸塩であり、さらに好ましい実施態様では、各Bは独立して以下から選択される。
【化１８】
2008536911.tif 000007
【００２３】
式中、各R２は、少なくとも２つのR２がHであることを条件として、独立してH、下級アルキル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり；
各X５は独立してH、OH、NH２またはハロ基である。
【００２４】
式（Ｉ）の化合物の好ましい実施態様では、Lbは以下からなる群から選択される切断可能なリンカーである。
【化１９】
2008536911.tif 000008
【００２５】
Laは以下からなる群から選択される切断可能なリンカーである。
【化２０】
2008536911.tif 000009
【００２６】
式中、ｎは１０以下の整数であり；
各ｐは独立して０または１０以下の整数であり；
RLはH、エチルまたはメチルであり；
RXはS、NRLまたはOであり；
各RWは独立してHまたはメチルであり；
RｙはCaHｂで、aは０から２０までの整数、ｂは１と２a＋１の間の整数であり；
各Zは水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、アシル、アシルオキシ、カルボキシ、カルバモイル、スルフリル、スルフィニル、スルフェニル、スルホニル、メルカプト、アミノ、ヒドロキシル、シアノおよびニトロからなる群から独立して選択され、
ｓは１、２、３または４であり；
ｑは２または３であり；
XはCH２、−CONRL−、−CO−O−CH２−または−CO−O−であり；
YはO、S、S(O)、SO２、C(O)、CO２、CH２または不在である。
【００２７】
各リンカーLaおよびLｂにおいて、ｎが１、２、３または４であるのが好ましい。より好ましいのは、ｎが１または２であり、ｐが独立して０、１、２、３または４で、より好ましいのは０または１であり、RLはHであり、RXはNRLで、より好ましいのはHである。
【００２８】
式（Ｉ）の化合物の好ましい実施態様では、フルオロキノロン分子または類似体Aはシプロフロキサシンまたはその抗菌性類似体である。
【００２９】
式（Ｉ）の化合物の別の好ましい実施態様では、フルオロキノロン分子または類似体Aはガチフロキサシンまたはその抗菌性類似体である。
【００３０】
式（Ｉ）の化合物のさらに好ましい実施態様では、フルオロキノロン分子または類似体Aはモキシフロキサシンまたはその抗菌性類似体である。
【００３１】
本発明の別の実施態様では、本発明の化合物は式（II）で表される。または医薬品として許容できるそれらの塩、代謝産物、溶媒和物またはプロドラッグである。
【化２１】
2008536911.tif 000010
【００３２】
式中、破線は任意の基B−L３およびL２−Bを表しており、B−L３およびL２−Bのうち少なくとも１つは存在しており；
Z５は水素、ハロゲン、アルキルまたは−O−アルキルであり；
A１はL２−BがA１に付加しているときOまたはSであり、A１はL２−BがA１に付加していないときOHであり；
A２はB−L３がA２は付加しているときアミノ基であり、A２はB−L３がA２は付加していないとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基であり；
各Bは独立してホスホン酸処理された以下の式の基である。
【化２２】
2008536911.tif 000011
【００３３】
式中、各R２は、少なくとも２つのR２がHであることを条件として、H、下級アルキル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールである。
【００３４】
各X５は独立してH、OH、NH２またはハロ基であり；
L２は以下の式のリンカーである。
【化２３】
2008536911.tif 000012
【００３５】
式中、ｎは１０以下の整数であり；
ｐは０または１０以下の整数であり；
RLはH、エチルまたはメチルであり；
RXはS、NRLまたはOであり；
各Zは水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、アシル、アシルオキシ、カルボキシ、カルバモイル、スルフリル、スルフィニル、スルフェニル、スルホニル、メルカプト、アミノ、ヒドロキシル、シアノおよびニトロからなる群から独立して選択され、
ｓは１、２、３または４であり；
L３は以下の式のリンカーである。
【化２４】
2008536911.tif 000013
【００３６】
式中、ｎは１０以下の整数であり；
各ｐは独立して０または１０以下の整数であり；
ｑは２または３であり；
RLはH、エチルまたはメチルであり；
各RWは独立してHまたはメチルであり；
RｙはCaHｂで、aは０から２０までの整数、ｂは１と２a＋１の間の整数であり；
XはCH２、−CONRL−、−CO−O−CH２−または−CO−O−であり；
YはO、S、S(O)、SO２、C(O)、CO２、CH２または不在である。
【００３７】
各リンカーL２およびL３において、ｎが１、２、３または４であるのが好ましい。より好ましいのは、ｎが１または２であり、各ｐが独立して０、１、２、３または４で、より好ましいのは０または１であり、RLはHであり、RXはNRLで、より好ましいのはNHであり、各Zは水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシおよびニトロからなる群から独立して選択される。
【００３８】
式（II）の化合物において、アミノ基はN結合置換窒素ヘテロ環基であるのが好ましい。さらに好ましいアミノ基は、ピロール、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、１，４−ジアゼパン、ジヒドロピロリジン、ジヒドロピリジンおよびテトラヒドロピリジンからなる群から選択される。
【００３９】
本発明は、別の実施態様では以下の化合物、または医薬品として許容できるそれらの塩、代謝産物、溶媒和物またはプロドラッグを含む。
【化２５】
2008536911.tif 000014
および
【化２６】
2008536911.tif 000015
【００４０】
本発明の別の面は、医薬品として許容できる担体または賦形剤と組み合わせた本発明の化合物を含有する医薬組成物も開示している。医薬組成物は治療学的有効量の本発明の化合物を含んでいるのが好ましい。
【００４１】
本発明は被験体の細菌感染を治療する方法にも関係しており、本願で定義される第１抗菌化合物の製薬学的有効量を含有する医薬組成物を被験体に投与する方法もそれに含まれる。被験体は好ましくは哺乳動物であり、より好ましくはヒトである。
【００４２】
被験体の細菌感染を治療する本発明の方法は、本願で定義される第１抗菌化合物および第２抗菌化合物の製薬学的有効量を含有する医薬組成物を被験体に投与する方法にも関係している。第２抗菌化合物はリファマイシン類似体、テトラサイクリン、チゲサイクリンまたはテトラサイクリン、グリシサイクリンもしくはミノサイクリンの類似体であるのが好ましい。
【００４３】
本発明は被験者の細菌感染を予防する方法にも関係しており、本願で定義される抗菌化合物の製薬学的有効量を含有する医薬組成物を被験体に投与することもそれに含まれている。被験体は好ましくは哺乳動物であり、より好ましくはヒトである。
【００４４】
本発明は本発明の化合物を被験体に蓄積する方法も提供する。被験体は好ましくは哺乳動物であり、より好ましくはヒトである。本発明の化合物は被験体の骨に蓄積するのが好ましい。
【００４５】
さらに本発明は、本発明の式（Ｉ）および／または式（II）のような本発明の化合物の調製方法も提供する。
【００４６】
本発明の特長の一つは、骨との結合親和力を増大させる抗微生物化合物を提供することである。未対処の医学的ニーズである骨および関節の感染を予防および治療する方法も本発明は提供する。
【００４７】
非制限的な好ましい実施態様について添付の図面を参照しながら以下に説明するが、本発明の他の目的、長所および特徴はそれを一読されればより明らかとなる。実施態様は代表的な例であり、本発明の範囲を制限するように解釈されるべきものではない。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４８】
A）発明の一般的な説明
本発明は、本願で定義され本願の特定の実施態様で示されているように、式（Ｉ）および式（II）で表されるホスホン酸処理フルオロキノロンおよびその抗菌類似体を開示する。こういう化合物は多くのヒトおよび獣病源体に対して有効な抗微生物治療薬である。
【００４９】
本発明は切断可能なリンカーによりフルオロキノロン抗生物質に結合されたホスホン酸処理された基に中心を置く。ホスホン酸誘導体は、骨組織を形成するヒドロキシアパタイトミネラル中のCa２＋に結合する能力のゆえに、骨への高い親和性を有することが知られているのであるから、本願の出願者たちは、そういう抗生物質にホスホン酸処理された基を結合させることにより、フルオロキノロン抗生物質の骨結合親和性、吸着性および保持力が増強されるのではないかと仮定し、それを追認した。骨のフルオロキノロン濃度を（ホスホン酸処理されていない抗生物質の投与により達成される濃度と比較して）高め、切断可能なリンカーの切断により抗微生物治療薬を徐放することにより、あるいは化合物を骨から放出することにより、隣接の脈管遮断骨（腐骨）の抗生物質濃度をその場所に存在する微生物を除去するのに十分なレベルにまで高められることを証明した。さらに本願の出願者たちは、in vivoで抗微生物活性を得るには、抗微生物治療薬をホスホン酸処理分子から切断して放出する必要があると仮定した。
【００５０】
本願の発明者たちはそういうホスホン酸処理フルオロキノロンおよびその抗菌類似体を合成し、そういう誘導体が骨材質との親和性を高めることを証明した。さらに本願の発明者たちは、そういうホスホン酸処理化合物（プロドラッグ）が、本発明の化合物を製剤するのに使用されるホスホン酸処理されていない親薬物の量よりも多くの量をin vivoで骨中に蓄積すること、および本発明に従ってホスホン酸処理フルオロキノロンおよびその抗菌類似体を投与することにより、フルオロキノロン抗微生物治療薬の骨中の存在時間を長期化できることも証明した。さらに本願の発明者たちは、本発明に従ってホスホン酸処理された化合物を注射された動物において、感染の２０日前まで骨感染を予防できたことも証明した。従って、骨および関節関連の感染や骨髄炎など骨関連の病気の予防および／または治療に本発明の化合物は特に有効である。
【００５１】
B）定義
本明細書において用いられる用語の意味の範囲を含め、明細書および特許請求の範囲をより明確に一貫性を持って理解していただくため、以下に一般定義を記載する。
【００５２】
用語アルキルは、指定された炭素数、あるいは指定されていない場合は１から１２（好ましくは１から６）の炭素数を持つ直鎖基、側鎖基、環状基およびそれらの組み合わせを含む飽和脂肪族基を意味する。アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、sec−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロへキシル、シクロブチルメチル、シクロブチルエチル、シクロペンチルメチル、シクロペンチルエチル、アダマンチルなどが含まれるが、これだけに限定されるものではない。環状アルキル基（例えばシクロアルキルやヘテロシクロアルキル）はシクロヘプチル基（これだけに限定されるものではないが）のように単環で構成されていてもよいが、アダマンチルやノルボミル基（これだけに限定されるものではないが）のように複数の縮合環で構成されていてもよい。
【００５３】
用語アルキルアリールは、１、２または３個のアリール基に付加した指定された炭素数を有するアルキル基を意味する。
【００５４】
用語N−アルキルアミノカルボニルは、Rをアルキル基とする−C(O)NHR基を意味する。
【００５５】
用語N,N−ジアルキルアミノカルボニルは−C(O)NRaRｂ基を意味するが、ここにRaおよびRｂはそれぞれ独立してアルキル基である。
【００５６】
用語アルキルチオはRをアルキル基とする−SR基を意味する。
【００５７】
用語アルコキシは、本明細書で使用する場合、指定される炭素数を有し、あるいは指定されていない場合は１から１２（好ましくは１から６）までの炭素数を有し、酸素原子と結合しているアルキル、アルケニルまたはアルキニルを意味する。アルコキシ基の例としては、メトキシ、エトキシ、tert−ブトキシ、アリルオキシなどを含むが、これだけに限定されるものではない。用語アルコキシカルボニルは、Rをアルキル基とする−C(O)OR基を意味する。用語アルキルスルホニルは、Rをアルキル基とする−SO２R基を意味する。
【００５８】
用語アルキレンは、指定された炭素数、あるいは指定されていない場合は１から１２（好ましくは１から６）の炭素数を持つ直鎖基、側鎖基、環状基およびそれらの組み合わせを含む二価の飽和脂肪族基を意味し、例えばメチレン、エチレン、２，２−ジメチルエチレン、プロピレン、２−メチル−プロピレン、ブチレン、ペンチレン、シクロペンチルメチレンなどがある。
【００５９】
置換アルキルと言う用語は、ハロゲン、アルキル、アリール、アルコキシ、アシルオキシ、アミノ、モノまたはジアルキルアミノ、ヒドロキシル、メルカプト、カルボキシ、ベンジルオキシ、フェニル、ベンジル、シアノ、ニトロ、チオアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボアルコキシおよびカルボキシアミドからなる群から選択される１またはそれ以上の置換体、好ましくは１から３までの置換体、もしくは本発明の目的上必要ならば保護基で適切にブロック可能な官能基で置換された上記定義のアルキル基を意味する。フェニル基は、ハロゲン、アルキル、アリール、アルコキシ、アシルオキシ、アミノ、モノまたはジアルキルアミノ、ヒドロキシル、メルカプト、カルボキシ、ベンジルオキシ、ベンジル、シアノ、ニトロ、チオアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボアルコキシおよびカルボキシアミドからなる群から選択される１から３までの置換体で適宜置換してもよい。置換アルキル基の例としては、−CF３、−CF２−CF３、ヒドロキシメチル、１または２−ヒドロキシエチル、メトキシメチル、１または２−エトキシエチル、カルボキシメチル、１または２−カルボキシエチル、メトキシカルボニルエチル、１または２−メトキシカルボニルエチル、ベンジル、ピルジニルメチル、チオフェニルメチル、イミダゾリニルメチル、ジメチルアミノエチルなどを含むが、これに限定されるものではない。
【００６０】
置換アルキレンという用語は、ハロゲン、アルキル、アリール、アルコキシ、アシルオキシ、アミノ、モノまたはジアルキルアミノ、ヒドロキシル、メルカプト、カルボキシ、ベンジルオキシ、フェニル、ベンジル、シアノ、ニトロ、チオアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボアルコキシおよびカルボキシアミドからなる群から選択される１またはそれ以上の置換体、好ましくは１から３までの置換体、もしくは本発明の目的上必要ならば保護基で適切にブロック可能な官能基で置換された上記定義のアルキレン基を意味する。フェニル基は、ハロゲン、アルキル、アリール、アルコキシ、アシルオキシ、アミノ、モノまたはジアルキルアミノ、ヒドロキシル、メルカプト、カルボキシ、ベンジルオキシ、ベンジル、シアノ、ニトロ、チオアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボアルコキシおよびカルボキシアミドからなる群から選択される１から３までの置換体で適宜置換してもよい。置換アルキル基の例としては、−CF２、−CF２−CF２−、ヒドロキシメチレン、１または２−ヒドロキシエチレン、メトキシメチレン、１または２−エトキシエチレン、カルボキシメチレン、１または２−ヒドロキシエチレン、メトキシメチレン、１または２−エトキシエチレン、カルボキシメチレン、１または２−カルボキシエチレンなどを含むが、これに限定されるものではない。
【００６１】
用語アルケニルは、指定された炭素数、あるいは指定されていない場合は１から１２（好ましくは１から６）の炭素数を持つ直鎖基、側鎖基、環状基およびそれらの組み合わせを含み、少なくとも一つの二重結合（−C＝C−）を有する不飽和脂肪族基を意味する。アルケニル基の例としては、アリルビニル、−CH２−CH=CH−CH３、−CH２−CH２−シクロペンテニル、−CH２−CH２−シクロへキセニルなどを含むが、これに限定されるものではなく、エチル基は空いている炭素価のシクロペンテニルまたはシクロヘキセニル部分に付加していてもよい。
【００６２】
用語アルケニレンは、指定された炭素数、あるいは指定されていない場合は１から１２（好ましくは１から６）の炭素数を持つ直鎖基、側鎖基、環状基およびそれらの組み合わせを含み、少なくとも一つの二重結合（−C＝C−）を有する二価の不飽和脂肪族基を意味する。アルケニレン基の例は、−CH＝CH−、−CH２−CH=CH−CH２−、−CH２−CH（シクロペンテニル）−などを含むが、これに限定されるものではない。
【００６３】
用語アルキニルは、指定された炭素数、あるいは指定されていない場合は１から１２（好ましくは１から６）の炭素数を持つ直鎖基、側鎖基、環状基およびそれらの組み合わせを含み、少なくとも一つの三重結合（−C≡C−）を有する不飽和脂肪族基を意味する。アルキニル基の例は、アセチレン、２−ブチニルなどを含むが、これだけに限定されるものではない。
【００６４】
用語アルキニレンは、指定された炭素数、あるいは指定されていない場合は１から１２（好ましくは１から６）の炭素数を持つ直鎖基、側鎖基、環状基およびそれらの組み合わせを含み、少なくとも一つの三重結合（−C≡C−）を有する二価の飽和脂肪族基を意味する。アルキニレン基の例は、−C≡C−、−C≡C−CH２−などを含むが、これだけに限定されるものではない。
【００６５】
置換アルケニルまたは置換アルキニルと言う用語は、ハロゲン、アルキル、アリール、アルコキシ、アシルオキシ、アミノ、ヒドロキシル、メルカプト、カルボキシ、ベンジルオキシ、フェニル、ベンジル、シアノ、ニトロ、チオアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボアルコキシおよびカルボキシアミドからなる群から選択される１またはそれ以上の置換体、もしくは本発明の目的上必要ならば保護基で適切にブロック可能な官能基で置換された上記定義のアルケニルおよびアルキニル基を意味する。置換アルケニルおよびアルキニル基の例は、−C＝CF２、メトキシエテニル、メトキシプロペニル、ブロモプロピニルなどを含むが、これだけに限定されるものではない。
【００６６】
置換アルケニレンまたは置換アルキニレンと言う用語は、ハロゲン、アルキル、アリール、アルコキシ、アシルオキシ、アミノ、ヒドロキシル、メルカプト、カルボキシ、ベンジルオキシ、フェニル、ベンジル、シアノ、ニトロ、チオアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボアルコキシおよびカルボキシアミドからなる群から選択される１またはそれ以上の置換体、もしくは本発明の目的上必要ならば保護基で適切にブロック可能な官能基で置換された上記定義のアルケニレンおよびアルキニレン基を意味する。
【００６７】
用語アリールまたはArは、単環（フェニルなどの基を含むが、これに限定されるものではない）または複数の縮合環（ナフチルやアンスリルなどの基を含むが、これに限定されるものではない）を有する６から１４までの炭素原子からなる芳香族炭素環式基を意味し、非置換および置換アリール基の両方が含まれる。置換アリールは、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、アルコキシ、アシルオキシ、アミノ、モノまたはジアルキルアミノ、ヒドロキシル、メルカプト、カルボキシ、ベンジルオキシ、フェニル、アリールオキシ、ベンジル、シアノ、ニトロ、チオアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボアルコキシおよびカルボキシアミドからなる群から選択される１またはそれ以上の置換体、好ましくは１から３までの置換体、もしくは本発明の目的上必要ならば保護基で適切にブロック可能な官能基で置換されたアリール基を意味する。代表的な例として、ナフチル、フェニル、クロロフェニル、ヨードフェニル、メトキシフェニル、カルボキシフェニルなどが含まれるが、これに限定されるものではない。用語アリールオキシは、環炭素の一つの酸素原子に結合したアリール基を意味する。アルコキシ基の例として、フェノキシ、２−、３−または４−メチルフェノキシなどの基が含まれるが、これに限定されるものではない。用語アリールチオ基は、Rｃがアリール基として−SRｃ基を意味する。用語ヘテロアリールチオ基は、Rｄがヘテロアリールとして−SRｄ基を意味する。
【００６８】
用語アリーレンは上記定義のアリール（置換アリールを含む）から誘導されるジラジカルを意味し、１，２−フェニレン、１，３−フェニレン、１，４−フェニレン、１，２−ナフチレンなどで代表される。
【００６９】
用語アミノは−NH２基を意味する。
【００７０】
用語N−アルキルアミノまたはN,N−ジアルキルアミノは、RおよびR'が独立して上記定義のアルキル基を表すものとして、それぞれ−NHRおよび−NRR'を意味する。代表的な例として、N,N−ジメチルアミノ、N−エチル−N−メチルアミノ、N,N−ジ（１−メチルエチル）アミノ、N−シクロヘキシル−N−メチルアミノ、N−シクロヘキシル−N−エチルアミノ、N−シクロへキシル−N−プロピルアミノ、N−シクロへキシルメチル−N−メチルアミノ、N−シクロへキシルメチル−N−エチルアミノなどが含まれるが、これだけに限定されるものではない。
【００７１】
用語チオアルコキシは、Rが上記定義のアルキルとして−SR基を意味し、例えばメチルチオ、エチルチオ、プロピルチオなどがこれに含まれる。
【００７２】
用語アシル基は、Rが水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、アリールオキシ、N−アルキルアミノ、N,N−ジアルキルアミノ、N−アリールアミノ、チオアルコキシ、チオアリールオキシまたは置換アルキルの場合、−C(O)R基を意味し、ここにアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび置換アルキルは上記定義の通りである。
【００７３】
用語チオアシル基は、Rが水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、アリールオキシ、N−アルキルアミノ、N,N−ジアルキルアミノ、N−アリールアミノ、チオアルコキシ、チオアリールオキシまたは置換アルキルの場合、−C(S)R基を意味し、ここにアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび置換アルキルは上記定義の通りである。
【００７４】
用語スルホニル基は、Rが水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、アリールオキシ、N−アルキルアミノ、N,N−ジアルキルアミノ、N−アリールアミノ、チオアルコキシ、チオアリールオキシまたは置換アルキルの場合、−SO２R基を意味し、ここにアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび置換アルキルは上記定義の通りである。
【００７５】
用語アシルオキシは、Rが水素、アルキル、アリール、ヘテロアリールまたは置換アルキルの場合−OC（＝O）Rを意味し、ここにアルキル、アリール、ヘテロアリールまたは置換アルキルは上記定義の通りである。代表的な例として、ホルミルオキシ、アセチルオキシ、シクロヘキシルカルボニルオキシ、シクロへキシルメチルカルボニルオキシ、ベンゾイルオキシ、ベンジルカルボニルオキシなどが含まれるが、これだけに限定されるものではない。
【００７６】
用語ヘテロアルキル、ヘテロアルケニルおよびヘテロアルキニルは、主鎖、側鎖または環状鎖の一部に１つまたはそれ以上のヘテロ原子、好ましくは１から３までのヘテロ原子を含む指定された数の炭素原子（または炭素数が指定されていない場合は１から１２まで、好ましくは１から６までの炭素原子）を含有するそれぞれ上記定義のアルキル、アルケニルおよびアルキニル基を意味する。ヘテロ原子は−NR−、−NRR、−S−、−S(O)−、−S(O)２−、−O−、−SR、−S(O)R、−S(O)２R、−OR、−PR−、−PRR、−P(O)R−および−P(O)RRからなる群から独立して選択される（ここに各Rは水素、アルキルまたはアリールである）。好ましくは、Rが水素またはアルキルおよび／またはOの場合、−NRである。ヘテロアルキル、ヘテロアルケニルおよびヘテロアルキニルは、分子の残余部分のヘテロ原子（原子価が空いている場合）または炭素原子と結合していてもよい。ヘテロアルケニル基の例としては、−O−CH３、−CH２−O−CH３、−CH２−CH２−O−CH３、−S−CH２−CH２−CH３、−CH２−CH（CH３）−S−CH３、−CH２−CH２−NH−CH２−CH３、１−エチル−６−プロピルピペリジノ、２−エチルチオフェニル、ピペラジノ、ピロリジノ、ピペリジノ、モルホリノなどが含まれるが、これだけに限定されるものではない。ヘテロアルケニル基の例としては、−CH＝CH−、CH２−N（CH３）２などが含まれるが、これだけに限定されるものではない。
【００７７】
用語ヘテロアリールまたはHetArは、環内にN、O、PまたはSなどを含むがこれだけに限定されるものではないヘテロ原子を１、２、３、４または５個、好ましくは１から３までのヘテロ原子を含んでいる４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７または１８員環原子を含有する一価の芳香族単環、二環または三環基を意味する。代表的な例としては、イミダゾリル、ピラゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピロリル、ピリジル、チオフェンなどの単環、あるいはインドリル、キノリン、キナゾリン、インドリジニル、ベンゾチエニルなどの複数の縮合環が含まれるが、これだけに限定されるものではない。
【００７８】
ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニルおよびヘテロアリール基は、アルキル、アルケニル、アルキニル、ベンジル、ハロゲン、アルコキシ、アシロキシ、アミノ、モノまたはジアルキルアミノ、ヒドロキシル、メルカプト、カルボキシ、ベンジルオキシ、フェニル、アリールオキシ、シアノ、ニトロ、チオアルコキシ、カルボキシアルデヒド、カルボアルコキシおよびカルボキシアミドからなる群から選択される１またはそれ以上の置換体、好ましくは１から３までの置換体、もしくは本発明の目的上必要ならば保護基で適切にブロック可能な官能基で、置換されていても置換されていなくてもよい。こういう置換へテロアルキル基には、フェニルまたはベンジル基が窒素または炭素を置換し、炭素または窒素、−NH−S（＝O）２−フェニル、−NH−（C=O）O−アルキル、−NH−（C=O）O−アルキルアリールなどの空いた原子価が分子の残余部分と結合したピペラジン、ピロリジン、モルホリンまたはピペリジンが含まれるが、これだけに限定されるものではない。そういう基のヘテロ原子および炭素原子は置換されていてもよい。またヘテロ原子は酸化型であってもよい。
【００７９】
用語ヘテロアリーレンは、上記定義のヘテロアリール（置換へテロアリールを含む）から誘導されるジラジカル基を意味し、２，６−ピリジニレン、２，４−ピリジニレン、１，２−キノリニレン、１，８−キノリニレン、１，４−ベンゾフラニリレン、２，５−ピリジニレン、２，５−インドールニレンなどの基によって代表される。
【００８０】
用語ヘテロアルキレン、ヘテロアルケニレンおよびヘテロアルキニレンは、上記定義のヘテロアルキル、ヘテロアルケニルおよびヘテロアルキニル（置換ヘテロアルキル、ヘテロアルケニルおよびヘテロアルキニルを含む）から誘導されるジラジカル基を意味する。
【００８１】
用語カルボキシアルデヒドは−CHOを意味する。
【００８２】
用語カルボアルコキシは、Rが上記定義のアルキルの場合−C(=O)ORを意味し、メトキシカルボニル、エトキシカルボニルなどの基を含む。
【００８３】
用語カルボキシアミドは、RおよびR'が独立して上記定義の水素、アリールまたはアルキルの場合−C（＝O）NHRまたは−C（＝O）NRR'を意味する。代表的な例として、アミノカルボニル、N−メチルアミノカルボニル、N,N−ジメチルアミノカルボニルなどの基が含まれる。
【００８４】
用語カルボキシは−C（O）OH基を意味する。
【００８５】
用語カルバモイルは−C(O)NH２基を意味する。
【００８６】
用語ハロゲンまたはハロは、本明細書で使用する場合、Cl、Br、FまたはI置換体、好ましくはフッ素または塩素を意味する。
【００８７】
用語ヒドロキシは−OH基を意味する。
【００８８】
異性体：分子式（または元素組成）は同じであるが、原子結合の性質または順序もしくは原子の空間配置が異なる化合物を異性体と呼ぶ。原子間の結合性は同じであるが、原子の空間配置が異なる異性体は立体異性体と呼ばれる。互いに鏡像関係にない立体異性体はジアステレオマーと呼び、互いに重ね合わせることのできない鏡像関係にある立体異性体は鏡像異性体と呼ばれる。化合物に非対称な中心がある場合、例えば４つの異なる基と結合している場合は、一対の鏡像異性体が可能である。鏡像異性体は非対称中心の絶対配置により特徴づけられ、Ｃａｈｎ、ＩｎｇｏｌｄおよびＰｒｅｌｏｇのRおよびS順位規則または分子が偏光面を回転する仕方により記述され、右旋性または左旋性（それぞれ（＋）または（−）異性体）と呼ばれる。キラル化合物は各鏡像異性体としてまたはその混合物として存在可能である。等しい割合の鏡像異性体を含有する混合物はラセミ混合物と呼ばれる。
【００８９】
本発明の化合物には１つまたはそれ以上の非対称中心が存在する場合がある。従って、そういう化合物は各（R）または（S）立体異性体として、もしくはその混合物として存在可能である。例えば、実施例セクションに記述されている化合物１５、１８、２８および４９のピペラジン官能基には、水素原子、メチル基、メチレン基およびアミノ基が付加した炭素があるが、この炭素は非対称中心である。化合物１５、１８、２８および４９は（R）または（S）立体異性体として存在する可能性がある。他に記載がなければ、明細書および特許請求の範囲に記載されている特定の化合物の記述または名称には各鏡像異性体および混合物、そしてそのラセミ体が含まれる。例えば、化合物３６、３９および４４の記述には、あらゆる可能性のあるジアステレオマーおよびその混合物が含まれる。立体化学の決定方法および立体異性体の分離方法は当業者には周知である（非特許文献１０の第４章の考察を参照）。
【００９０】
光学的に純粋：一般的に当業者によって理解されているように、光学的に純粋な化合物とは鏡像異性体的に純粋な化合物のことである。光学的に純粋と言う用語は、本明細書で使用する場合、目的の薬理学的活性を有する化合物を生じるのに少なくとも充分量の単一の鏡像異性体を含んでいる化合物を意味する。好ましくは、光学的に純粋というのは単一の異性体を少なくとも９０％（鏡像異性体過剰率８０％）含む化合物を意味する。より好ましくは少なくとも９５％（鏡像異性体過剰率９０％）、さらに好ましくは少なくとも９７．５％（鏡像異性体過剰率９５％）、そして最も好ましいのは少なくとも９９％（鏡像異性体過剰率９８％）である。本発明の化合物は光学的に純粋であるのが好ましい。
【００９１】
保護基は以下のような特徴を示す化学基を意味する。１）目的の官能基と高収率で選択的に反応し、目的の反応にとって安定した保護基質を提供する。２）保護基質から選択的に除去され、目的の官能基を提供する。３）既存の他の官能基または目的の反応で与えられる他の官能基と適合性のある試薬によって高収率で除去可能である。適切な保護基は、Ｇｒｅｅｎ等（１９９１）  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ,  ２ｎｄ  Ｅｄ．(Ｊｏｈｎ  Ｅｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ  Ｉｎｃ．,  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ)に例示されている。好ましいアミノ保護基としては、ベンジルオキシカルボニル（CBｚ）、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Boc）、ｔ−ブチルジメチルシリル（TBDMS）、９−フルオレニルメチル−オキシカルボニル（Fmoc）、または６−ニトロベラトリロキシカルボニル（Nvoc）、ニトロピペロニル、ピレニルメトキシカルボニル、ニトロベンジル、ジメチルジメトキシベンジル、５−ブロモ−７−ニトロインドリニルなどの適切な感光性保護基が含まれるが、これだけに限定されるものではない。好ましいヒドロキシ保護基には、アセチル（Ac）、ベンゾイル（Bz）、ベンジル（Bn）、テトラヒドロピラニル（THP）、TBDMS、感光性保護基（ニトロベラトリルオキシメチルエーテル（Nvom）等）、Mom（メトキシメチルエーテル）およびMem（メトキシエトキシメチルエーテル）が含まれる。特に好ましい保護基には、NPEOC（４−ニトロフェネチルオキシカルボニル）およびNPEOM（４−ニトロフェネチルオキシ−メチルオキシカルボニル）が含まれる。
【００９２】
プロドラッグ：活性な医薬分子の放出過程を経ることのできる医薬組成物を意味する。本発明の式（Ｉ）および式（II）の化合物は、リンカーL（La、Lｂ、L２およびL３のいずれか）が切断されてフルオロキノロン分子を放出できるのでプロドラッグである。特に本発明のプロドラッグには、哺乳動物の被験体に投与されたとき活性な親薬物（すなわち本願の式A1a、A1b、式A2および式A3の化合物）をin vivoで放出する化合物も含まれる。本発明のホスホン酸処理フルオロキノロンプロドラッグは、選択されたフルオロキノロンに含まれる官能基を、in vivoで切断されてフルオロキノロン親分子を放出できる方法で修飾することにより調製される。プロドラッグには、式（Ｉ）、式（II）および本明細書が示すそれらの具体的な実施態様が含まれるが、ここに式A1a、A1b、式A2および式A3のフルオロキノロン中のカルボキシまたはアミノ基はin vivoで切断可能な基と結合し、おのおの遊離のカルボキシまたはアミノ基を再生する。プロドラッグの例としては、選択されたフルオロキノロン分子のヒドロキシ官能基のエステル（例えば酢酸、ギ酸、安息香酸誘導体）およびカルバミン酸塩（例えばN,N−ジメチルアミノカルボニル）が含まれるが、これだけに限定されるものではない。
【００９３】
プロドラッグには、処理過程で２つまたはそれ以上の事象を経る医薬組成物も含まれる。そういう実施態様では、より複雑なプロドラッグが式（Ｉ）または式（II）のプロドラッグを放出し、それがさらに切断されて目的のフルロキノロン分子を放出する。
【００９４】
医薬品として許容できるプロドラッグとは、生理学的条件の下に、または溶媒和分解によって、本明細書で定義される生物活性な化合物に変換される式（Ｉ）または式（II）の化合物を意味する。そういう医薬品として許容できるプロドラッグには、より複雑な型の式（Ｉ）および式（II）の化合物が含まれ、それが最初の処理過程を経て式（Ｉ）または式（II）の化合物を生じ、それがさらに切断され、目的のフルオロキノロン親分子を放出する。
【００９５】
医薬品として許容できる活性代謝産物とは、本明細書で定義される式（Ｉ）または式（II）の化合物が体内で新陳代謝されて生じる医薬品として活性な生成物を意味する。
【００９６】
医薬品として許容できる溶媒和物とは、式（Ｉ）または式（II）の化合物の活性成分の特性および生物学的有効性を保持する溶媒和物を意味する。医薬品として許容できる溶媒和物の例としては、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、DMSO、酢酸エチル、酢酸、エタノールアミンなどが含まれるが、それだけに限定されるものではない。
【００９７】
医薬品として許容できる担体または賦形剤とは、一般的に安全で、無毒で、生物学的またはその他の面で有害ではない医薬組成物を調製するのに役立ち、薬理学的に好ましいプロフィールを提供できる担体または賦形剤を意味し、ヒトの医薬品だけでなく獣医学的にも使用可能な担体または賦形剤もその中に含まれる。本明細書および特許請求の範囲で使用する医薬品として許容できる担体または賦形剤には、そういう担体および／または賦形剤が１種類またはそれ以上含まれる。そういう担体には、緩衝生理食塩水、デキストロース、水、グリセロール、エタノールおよびそれらの組み合わせが含まれるが、これだけに限定されるものではない。
【００９８】
医薬品として許容できる化合物の塩とは、本明細書で定義される親化合物の遊離酸および塩基の特性および生物学的有効性を保持または改善する塩、または内因的に荷電された分子の官能基を利用できる塩で、生物学的またはその他の面で有害ではない塩を意味する。そういう塩には以下のものが含まれる。
【００９９】
（１）塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸との間で形成される酸付加塩、または酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、琥珀酸、リンゴ酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、３−（４−ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１，２−エタン−ジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−クロロベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、４−トルエンスルホン酸、ショウノウスルホン酸、３−フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、第三ブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、ムコン酸などの有機酸との間で形成される酸付加塩。
【０１００】
（２）親化合物の中にある酸性プロトンがアルカリ金属イオン、アルカリ土類元素イオンまたはアルミニウムイオンなどの金属イオンによって置換されるか、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、N−メチルグルカミンなどの有機塩基と配位結合することにより形成される塩。または、
【０１０１】
（３）分子に荷電した官能基が存在し、しかもテトラアルキル（アリール）アンモニウム官能基とアルカリ金属イオン、テトラアルキル（アリール）ホスホニウム官能基とアルカリ金属イオン、イミダゾリウム官能基とアルカリ金属イオンなどの適切な対イオンが存在するときに形成される塩。
【０１０２】
骨または骨組織と言う用語は、本願で使用する場合、ほとんどの脊椎動物の骨格の主要部分を形成する高密度、半硬質、多孔性および石灰化された結合組織を意味する、歯、骨関節組織および動脈硬化の血管壁によく見られる石灰化もこの中に含まれる。
【０１０３】
フルオロキノロン抗微生物分子、フルオロキノロン分子、フルオロキノロンおよびその関連用語は、本明細書でより詳細に記述される既知のフルオロキノロンの一部である広範な抗微生物治療薬を意味している。フルオロキノロン誘導体およびフルオロキノロン分子の抗菌類似体は、抗微生物（例えば抗菌）活性を有するフルオロキノロンの化学類似体を意味する。誘導体および類似体には、フルオロキノロンに構造が似ているがフルオロキノロンとして従来は定義されていない化合物も含まれることは、当業者にとって公知である。フルオロキノロン誘導体およびフルオロキノロンの抗菌類似体と言う用語は、本願で使用する場合、同一の意味を持つ。本願で使用されるフルオロキノロンおよびフルオロキノロン分子に関する言及はすべて、フルオロキノロン誘導体およびフルオロキノロンの抗菌類似体も含んでいる。
【０１０４】
抗菌と言う用語には、細菌の生長を阻害、停止または後退させる化合物、細菌の酵素または生化学経路を阻害、停止または後退させる化合物、細菌を殺傷または損傷させる化合物および細菌感染を阻止または遅らせる化合物が含まれる。
【０１０５】
ホスホン酸処理された基と言う用語は、少なくとも１つの燐原子が少なくとも３つの酸素原子と結合し、本明細書で後述する骨組織に測定可能な高い親和性を有するヒトに無毒な化合物を意味する。
【０１０６】
治療するまたは治療と言う用語は、ヒトなどの哺乳動物の細菌感染に関連する病状を軽減させることを少なくとも意味し、それはグラム陽性菌などの細菌の生長、複製および／または繁殖の減少による軽減であり、病状を部分的または全体的に治療、治癒、阻止、緩和、改善および／または軽減することがそれに含まれる。
【０１０７】
予防法と言う用語は、細菌感染に関連する病状が哺乳動物，好ましくはヒトで生じる可能性を少なくとも減少させることを意味する。予防するおよび予防と言う用語は、細菌感染に関連する病状が哺乳動物、好ましくはヒトで生じるのを阻止するまたは停止させることを意味する。特に、これらの用語は、骨の修復または補充の手術中または手術後に生じやすい細菌感染を予防する、またはその可能性を減らすための哺乳動物の治療に関する。これらの用語には、病気に罹りやすいことが分かっているがまだ診断を受けていない哺乳動物の細菌感染を予防する、またはその病気に罹る可能性を減らす場合も含まれる。例えば、そういう感染が生じる前に、式（Ｉ）および／または式（II）の化合物、もしくは医薬品として許容できるそのプロドラッグ、塩、活性代謝産物または溶媒和物を投与することにより、哺乳動物の細菌感染を予防する、またはその病気に罹る可能性を減らすことが可能である。
【０１０８】
C）本発明の化合物
本明細書の実施例セクションで後述するように、本願の発明者達は、骨組織に高い親和性を有するフルオロキノロンのホスホン酸処理誘導体を調製した。
【０１０９】
一つの実施例では、本発明の化合物は以下の式（Ｉ）、医薬品として許容できるその塩、代謝産物、溶媒和物およびプロドラッグで表される。
【化２７】
2008536911.tif 000016
【０１１０】
式中、ｆは０または１であり；
ｍは０または１であり；
Aはフルオロキノロン分子、またはその抗菌類似体であり；
Bはホスホン酸処理された基、好ましくは骨組織に高い親和性を有するホスホン酸処理された基であり；
LａおよびLｂはＢをＡと結合させる、好ましくは共有結合させるための切断可能なリンカーである。
【０１１１】
前述したように、本発明は切断可能なリンカーによりフルオロキノロン抗生物質に結合されたホスホン酸処理された基に中心を置いており、骨との関係で、または骨内で、フルオロキノロン抗生物質の親和性、結合、蓄積および／または持続時間を増大させること、および切断可能なリンカーを切断することによる徐放、あるいは化合物の骨からの放出を可能とすることがその目的である。
【０１１２】
ホスホン酸塩
本発明では、骨組織を形成するヒドロキシアパタイトミネラル中のCa２＋に結合する能力のゆえに骨への高い親和性を有するホスホン酸処理された非毒性の基は、すべて適切である。ホスホン酸処理された基の適切な例は以下の特許文献に記載されている（特許文献２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０）。本発明に適したビスホスホン酸塩およびトリホスホン酸塩基の具体的な例は以下の式を有しているが、これだけに限定されるものではない。
【化２８】
2008536911.tif 000017
【０１１３】
式中、各R２は、少なくとも２つのR２、好ましくは少なくとも３つのR２がHであることを条件として、独立してH、下級アルキル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり、
R４はCH２、O、SまたはNHであり、
各R５は、R６がH、下級アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールまたはNH２である場合に、独立してH、R６、OR６、NR６またはSR６であり、
各X５は独立してH、OH、NH２またはハロ基である。
【０１１４】
モノホスホン酸塩、ビスホスホン酸塩およびトリスホスホン酸塩またはテトラホスホン酸塩を使用する可能性があるが、ビスホスホン酸塩が好ましい。より好ましいビスホスホン酸塩基は、ビスホスホン酸塩−CH（P（O）（OH）２）２である。実施例４で後述するように、そういうビスホスホン酸塩基を有しているフルオロキノロン誘導体はヒドロキシアパタイト骨粉に高い結合親和性を持っている。勿論、ホスホン酸処理した他のタイプの基は当業者により選択および合成可能である。例えば、ホスホン酸処理した基はエステラーゼ活性化したホスホン酸塩基であってもよいし（非特許文献１１）、適切なそのプロドラッグであってもよい。これらの基および他の適切なホスホン酸処理した基は本発明に含まれる。
【０１１５】
フルオロキノロン
フルオロキノロンは良く知られた広範囲な（グラム陽性およびグラム陰性）合成抗微生物治療薬である。シプロフロキサシン（Ｃｉｐｒｏ（登録商標）（特許文献３１））、ガチフロキサシン（Ｔｅｑｕｉｎ（登録商標）（特許文献３２））およびモキシフロキサシン（Ａｖｅｌｏｘ（登録商標）（特許文献３３））は、この種類の中でも最も良く知られた化合物である。上述の３つの治療薬は、経済的にも臨床的にも大成功を収めている。本発明は特定のフルオロキノロンに限定されるものではなく、適切な抗微生物活性を有する他のフルオロキノロン分子もこの中に含まれる。例えば、バロフロキサシン、ベノフロキサシン、クリナフロキサシン、ダノフロキサシン、ジフロキサシン、エノキサシン、エンロフロキサシン、フレロフロキサシン、フルメキン、ガレノキサシン、ジェミフロキサシン、グレパフロキサシン、イルロキサシン、レボフロキサシン、ロメフロキサシン、ロメフロキサシン、ナジフロキサシン、ノルフロキサシン、オフロキサシン、オラムフロキサシン、パズフロキサシン、ペフロキサシン、プレマフロキサシン、プルリフロキサシン、ルフロキサシン、サラフロキサシン、シタフロキサシン、スパルフロキサシン、テマフロキサシン、トスフロキサシン、トロバフロキサシン（非特許文献１２）、他のフルオロキノロン誘導体およびＶｉｃｕｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉａｌｓ（非特許文献１３）またはＭｏｒｐｈｏｃｈｅｍ  Ｉｎｃ．（非特許文献１４）が開示したオキサゾリジノン−フルオロキノロンハイブリッドのようなハイブリッドなども含まれるが、これだけに限定されるものではない。フルオロキノロンの抗菌類似体も本発明には含まれる。本発明に従ってフルオロキノロン抗微生物分子およびその抗菌類似体を調製するのは、当業者にとっては容易である。当業界で入手可能な様々な文献、例えば本明細書で後述し参考のために本明細書に組み入れられている米国特許、PCT特許出願、科学関連の出版物などを必要に応じて参照することも可能である。
【０１１６】
一つの実施例によれば、本発明に使用されるフルオロキノロン抗微生物分子Aは、式A1aおよびA1bによって代表される化合物から選択される。
【化２９】
2008536911.tif 000018
【０１１７】
式中、リンカーLａはｆが１のときA２に付加しており、Lｂはｍが１のときA１に付加しており；
A２はｆが１のときアミノの基であり、A２はｆが０のとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基であり、アミノ基としては、N結合置換窒素ヘテロ環基、特にピロール、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、１，４−ジアゼパン、ジヒドロピロリジン、ジヒドロピリジンおよびテトラヒドロピリジンが含まれるが、これだけに限定されるものではなく；
A１はｍが１のときOまたはSであり、A１はｍが０のときOHであり；
Z１はアルキル、アリールまたは−O−アルキルであり、好ましくはシクロプロピルであり；
Z２は水素、ハロゲンまたはアミノ基であり；
X１はＮまたは−CY１−であり、
Y１は水素、ハロゲン、アルキル、−O−アルキルまたは−S−アルキルであり、
またはX１はZ１と架橋を形成しており；
X２はＮまたは−CY２−であり、
Y２は水素、ハロゲン（好ましくはフッ素）、アルキル、−O−アルキルまたは−S−アルキルであり、
またはX２はA２と架橋を形成しており；
X３はNまたはCHであり；
X４はNまたはCHである。
【０１１８】
より具体的な実施例では、本発明のフルオロキノロン抗微生物分子は式A2の化合物である。
【化３０】
2008536911.tif 000019
【０１１９】
式中、リンカーLaはｆが１のときA２に付加しており、Lｂはｍが１のときA１に付加しており；
A２はｆが１のときアミノの基であり、A２はｆが０のとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基であり、アミノ基としては、N結合置換窒素ヘテロ環基、特にピロール、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、１，４−ジアゼパン、ジヒドロピロリジン、ジヒドロピリジンおよびテトラヒドロピリジンが含まれるが、これだけに限定されるものではなく；
Z１はアルキル、アリールまたは−O−アルキル、好ましくはシクロプロピルであり；
Z２は水素、ハロゲンまたはアミノ基であり；
Z３は水素またはハロゲン、好ましくはフッ素であり；
Z４は水素、ハロゲン、アルキル、−O−アルキルまたは−S−アルキル、
またはZ１と架橋を形成する。
【０１２０】
さらにより具体的な実施例では、本発明のフルオロキノロン抗微生物分子は式A3の化合物である。
【化３１】
2008536911.tif 000020
【０１２１】
式中、リンカーLaはｆが１のときA２に付加しており、Lｂはｍが１のときA１に付加しており；
A２はｆが１のときアミノの基であり、A２はｆが０のとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基であり、アミノ基としては、N結合置換窒素ヘテロ環基、特にピロール、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、１，４−ジアゼパン、ジヒドロピロリジン、ジヒドロピリジンおよびテトラヒドロピリジンが含まれるが、これだけに限定されるものではなく；
Z５は水素、ハロゲン、アルキルまたは−O−アルキルである。
【０１２２】
一つの実施例によれば、フルオロキノロン抗微生物分子はモキシフロキサシンである。別の実施例によれば、フルオロキノロン抗微生物分子はガチシフロキサシンである。第三の実施例によれば、フルオロキノロン抗微生物分子はシプロフロキサシンである。これら三分子の化学構造式は以下に記述される。矢印は、本明細書記載のリンカーでホスホン酸処理した基を付加する好ましい部位を示している。
【化３２】
2008536911.tif 000021
【０１２３】
本発明によるガチフロキサシン、モキシフロキサシンおよびシプロフロキサシンのホスホン酸処理誘導体の具体例は、実施例セクションに示してある。ホスホン酸処理した基を一つだけでなくそれ以上有している（例えばモキシフロキサシン分子の各末端に一つずつ）ホスホン酸処理フルオロキノロンおよびその抗菌類似体も本発明に含まれる。前述の通り、前述の付加部位はホスホン酸処理した基を結合する好ましい部位に過ぎない。他の可能部位（例えばベンゼン基、すなわち式A1aおよびA1bのZ２の位置、オラムフロキサシンのA2、式A2のZ１の位置または式A3のZ５の位置）も本発明に含まれる。
【０１２４】
リンカー
切断可能なリンカーL（La、Lｂ、L２およびL３のいずれか）はホスホン酸処理した基Bをフルオロキノロン抗生物質Aに共有結合的に結合する。切断可能と言う用語は、本明細書で使用する場合、生理学的条件下で化学的または生化学的に不安定な基を意味する。化学的不安定性は、分子間の化学反応に依存する場合は分子間化学反応または加水分解（すなわち１つまたはそれ以上の水分子の挿入によって分子または基が２つまたはそれ以上の分子または基へ分割）による自発的分解に起因するのが好ましい。本発明は、化学的または生化学的に安定したリンカーおよび活性な（またはin vivoで活性化する）フルオロキノロン抗微生物分子がホスホン酸処理した基からin vivoで放出されるのを妨害するリンカーを明示的に除外している。
【０１２５】
リンカーの切断は、急速なものから緩慢なものまで様々である。例えば、切断可能なリンカーの半減期は約１分、約１５分、約３０分、約１時間、約５時間、約１０時間、約１５時間、約１日、約４８時間またはそれ以上であってもよい。切断可能なリンカーは、特別に選択された酵素（例えばアミダーゼ、エステラーゼ、メタロプロテイナーゼなど）だけで切断可能な酵素感受性のリンカーであってもよいし、酸触媒や自己開裂などを含むがこれだけに限定されない他の化学的手段によって切断されやすいリンカーであってもよい。例えば、骨特異的なエステラーゼ（非特許文献１５）または骨特異的なメタロプロテイナーゼ（MMP）（非特許文献１６）によってのみ切断可能なエステラーゼ感受性のリンカーを使用し、フルオロキノロン抗生物質を望ましい活性部位で放出することも本発明では可能である。血漿中で切断されにくい切断可能なリンカーを使い、それが切断されてフルオロキノロン抗生物質を放出する前に、ホスホン酸処理したフルオロキノロン化合物の充分量を骨組織に送達し蓄積させる方法も可能である。例えば、骨に結合したフルオロキノロン抗生物質の１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、５０％、６０％または７０％だけが、本発明の化合物を投与したのち１分、１５分、３０分、１時間、５時間、１０時間、１５時間、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、１週間、２週間、３週間またはそれ以上の期間にわたって放出されるように選択してもよい。骨に結合したフルオロキノロン抗生物質の約１％から約２５％だけが一日に放出されるようにリンカーを選択するのが好ましい。リンカーの選択は、（i）ホスホン酸処理した基がフルオロキノロン分子に付加する部位、（ii）使用するホスホン酸処理した基の種類、（iii）使用するフルオロキノロンの種類、（iv）リンカーの切断およびそれに伴うフルオロキノロン抗生物質の放出の容易さなどの要因により様々であってよい。
【０１２６】
ホスホン酸処理した基がフルオロキノロン分子のカルボキシル基部分と結合する場合、有効な切断可能リンカーには、これだけに限定されるものではないが、以下の構造が含まれる。
【化３３】
2008536911.tif 000022
【０１２７】
式中、ｎは１０以下の整数で、好ましいのは１，２，３または４で、さらに好ましいのは１または２であり；
ｐは０または１０以下の整数で、好ましいのは０、１、２、３または４で、さらに好ましいのは０または１であり；
RLはH、エチルまたはメチルで、好ましいのはHであり；
RXはS、NRLまたはOで、好ましいのはNRL、さらに好ましいのはNHであり；
各Zは水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、アシル、アシルオキシ、カルボキシ、カルバモイル、スルフリル、スルフィニル、スルフェニル、スルホニル、メルカプト、アミノ、ヒドロキシル、シアノおよびニトロからなる群から独立して選択され、
ｓは１、２、３または４であり；
Bは本明細書記載のホスホン酸処理された基であり；
Aは本明細書記載のフルオロキノロン抗微生物分子またはその抗菌類似体である。
【０１２８】
ホスホン酸処理した基がフルオロキノロン分子のアミノ基と結合する場合、有効な切断可能リンカーには、これだけに限定されるものではないが、以下の構造が含まれる。
【化３４】
2008536911.tif 000023
【０１２９】
式中、ｎは１０以下の整数で、好ましいのは１，２，３または４で、さらに好ましいのは１または２であり；
各ｐは独立して０または１０以下の整数で、好ましいのは０、１、２、３または４で、さらに好ましいのは０または１であり；
ｑは２または３であり；
RLはH、エチルまたはメチルであり；
各RWは独立してHまたはメチルであり；
RｙはCaHｂで、aは０から２０までの整数、ｂは１と２a＋１の間の整数であり；
XはCH２、−CONRL−、−CO−O−CH２−または−CO−O−であり；
YはO、S、S(O)、SO２、C(O)、CO２、CH２または不在である。
【０１３０】
別の実施例によれば、本発明の化合物は式（II）および医薬品として許容できるその塩、代謝産物、溶媒和物およびプロドラッグである。
【化３５】
2008536911.tif 000024
【０１３１】
式中、破線は任意の基B−L３およびL２−Bを表しており、B−L３およびL２−Bのうち少なくとも１つは存在しており；
Z５は水素、ハロゲン、アルキルまたは−O−アルキルであり；
A１はL２−BがA１に付加しているときOまたはSであり、A１はL２−BがA１に付加していないときOHであり；
A２はB−L３がA２は付加しているときアミノ基であり、A２はB−L３がA２は付加していないとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基で、アミノ基としては、N結合置換窒素ヘテロ環基、特にピロール、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、１，４−ジアゼパン、ジヒドロピロリジン、ジヒドロピリジンおよびテトラヒドロピリジンが含まれるが、これだけに限定されるものではなく；
各Bは独立してホスホン酸処理された以下の式の基である。
【化３６】
2008536911.tif 000025
【０１３２】
式中、各R２は、少なくとも２つのR２がHであることを条件として、H、下級アルキル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり；
各X５は独立してH、OH、NH２またはハロ基であり；
L２は以下の式のリンカーである。
【化３７】
2008536911.tif 000026
【０１３３】
式中、ｎは１０以下の整数で、好ましいのは１、２、３または４、さらに好ましいのは１または２であり；
ｐは０または１０以下の整数で、好ましいのは１，２、３または４で、さらに好ましいのは０または１であり；
RLはH、エチルまたはメチルで、好ましいのはHであり；
RXはS、NRLまたはOで、好ましいのはNRLで、さらに好ましいのはNHであり；
各Zは水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、アシル、アシルオキシ、カルボキシ、カルバモイル、スルフリル、スルフィニル、スルフェニル、スルホニル、メルカプト、アミノ、ヒドロキシル、シアノおよびニトロからなる群から独立して選択され、ｓは１、２、３または４であり；
L３は以下の式のリンカーである。
【化３８】
2008536911.tif 000027
【０１３４】
式中、ｎは１０以下の整数で、好ましいのは１、２、３または４、さらに好ましいのは１または２であり；
各ｐは独立して０または１０以下の整数で、好ましいのは１、２、３または４、さらに好ましいのは０または１であり；
ｑは２または３であり；
RLはH、エチルまたはメチルで、好ましいのはHであり；
各RWは独立してHまたはメチルであり；
RｙはCaHｂで、aは０から２０までの整数、ｂは１と２a＋１の間の整数であり；
XはCH２、−CONRL−、−CO−O−CH２−または−CO−O−であり；
YはO、S、S(O)、SO２、C(O)、CO２、CH２または不在である。
【０１３５】
本発明には、単一のホスホン酸処理した基が２つまたはそれ以上のフルオロキノロン分子に結合している化合物も含まれる。その場合、フルオロキノロン分子は同じ（例えば２つのシプロフロキサシン分子）であってもよいし、異なって（例えば１つのシプロフロキサシン分子と１つのガチフロキサシン分子）いてもよい。ホスホン酸処理した基は、類似の基（例えばカルボキシ基）と結合していてもよいし、異なる基（例えば１つのフルオロキノロン分子のカルボキシ基と他のフルオロキノロン分子のアミノ基）と結合していてもよい。本発明の切断可能なマルチフルオロキノロンリンカーとして可能性のある化合物の例には、これだけに限定されるものではないが、以下の構造が含まれる。
【化３９】
2008536911.tif 000028
【０１３６】
式中、各Rｄは独立してアルキルまたはアリール基であり；
RLはH、エチルまたはメチルで、好ましいのはHであり；
ｐは０または１０以下の整数で、好ましいのは０、１、２、３または４、さらに好ましいのは０または１であり；
A１およびA２は本明細書記載のフルオロキノロン分子に付加する部位であり、Bは本明細書で定義されるビスホスホン酸塩に付加する部位である。
【０１３７】
ホスホン酸処理した基Bは骨組織への親和性が高いので、長期間（最高数年間）骨に結合している可能性が高い。従って、ホスホン酸処理した基は毒性が低い、好ましくは測定可能な毒性のないことが重要である。別の実施例では、リンカーがin vivoで加水分解または切断され（ほとんどが骨組織で行なわれるのが好ましい）、（i）フルオロキノロン抗微生物分子および（ii）骨治療効果が証明されているホスホン酸処理された非毒性の分子を放出するようなホスホン酸処理した基Bおよびリンカーが選択される。従って、そういう化合物は１）骨の細菌感染を予防および／または治療するのに有効な抗生物質を長期間および／または高濃度で局所的に骨に供給し、２）骨の再生の刺激または骨の再吸収の阻害を行なう医薬品を骨に供給することにより、感染または他の傷害により生じた損傷から骨の回復を促進するという二重の効果を有している。本発明で有効な骨の治療効果が証明されているホスホン酸処理された分子には、リセドロネートおよびオルパドロネートがあり、さらにパミドロネート、アレンドロネート、インカドロネート、エチドロネート、イバンドロネート、ゾレンドロネートまたはネリドロネートなどがこの中に含まれるが、決してこれだけに限定されるものではない。こういう分子は骨粗鬆症の治療に一般的に使用されるよく知られたビスホスホン酸塩骨再吸収阻害薬である。
【０１３８】
以下のスキームは、ビスホスホン酸塩部分に遊離のヒドロキシ基が含まれている場合の実施例の原理を示したものである。
【化４０】
2008536911.tif 000029
【０１３９】
リセンドロネートおよびオルパドロネートから誘導される本発明のビスホスホン酸塩誘導体を以下に示す。
【化４１】
2008536911.tif 000030
【０１４０】
ビスホスホン酸塩部分に第一級または第二級アミノ基が含まれる場合の同実施例の類似例を以下に示す。
【化４２】
2008536911.tif 000031
【０１４１】
インカドロネートおよびパミドロネートから誘導される本発明のビスホスホン酸塩誘導体の別の例を以下に示す。
【化４３】
2008536911.tif 000032
【０１４２】
本発明には、予め決められた範囲のpHだけで切断されるpH感受性リンカーの使用も含まれる。一つの実施例では、pH感受性リンカーは塩基感受性リンカーであり、塩基のpHが約７から約９の範囲で切断される。別の実施例では、リンカーは酸感受性リンカーであり、酸性のpHが約７．５から約４まで、好ましくは約６．５以下で切断される。感染中にはふつう組織が酸性化されることが知られている（非特許文献１７）ので、こういう酸感受性リンカーのほとんどが、細菌感染部位で、フルオロキノロン抗生物質の特異的放出を可能にすると仮定したものである。
【０１４３】
勿論、当業者は他の種類のリンカーを選択および合成できる。例えば、特許文献３４のｌｌｅｘ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈが開示しているように、骨に親和性を有しin vivoで加水分解されるホスホン酸処理された基がリンカーに含まれていてもよい。リンカーは活性基（例えば骨形成の刺激または骨再吸収の減少を促進する放出可能な基）を含んでいてもよい。本発明には、こういうリンカーを初めその他適切なリンカーが含まれる。
【０１４４】
さらに別の実施例では、本発明は以下の化合物を含む。
【化４４】
2008536911.tif 000033
【化４５】
2008536911.tif 000034
【化４６】
2008536911.tif 000035
【化４７】
2008536911.tif 000036
【化４８】
2008536911.tif 000037
【化４９】
2008536911.tif 000038
【化５０】
2008536911.tif 000039
【０１４５】
式中
【化５１】
2008536911.tif 000040
は、式CｎHｍCOの単純なアルカノイルで、ここにｎは０と２０の間の整数、ｍは１と２ｎ＋１の間の整数、またはアルファアミノアシルまたはベータアミノアシルである。
【０１４６】
さらに本発明は、式Ｉおよび式IIの化合物および医薬品として許容できるそれらの塩、代謝産物、溶媒和物およびプロドラッグも含む。医薬品として許容できる塩には、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、リン酸塩、リン酸一水素、リン酸二水素、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、蟻酸塩、イソ酪酸塩、カプロン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオール酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、琥珀酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ブチン−１，４−二酸塩、ヘキシン−１，６−二酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、スルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩，ガンマヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩およびマンデル酸塩が含まれるが、これだけに限定されるものではない。
【０１４７】
本発明の化合物が塩基の場合、目的の塩を当業界で周知の適切な方法によって調製しても良く、その中には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸、あるいは酢酸、リンゴ酸、琥珀酸、マンデル酸、フマル酸、マロン酸、ピルビン酸、シュウ酸、グリコール酸、サリチル酸、グルクロン酸やガラクツロン酸などのピラノシジル酸、クエン酸や酒石酸などのアルファヒドロキシ酸、アスパラギン酸やグルタミン酸などのアミノ酸、安息香酸や桂皮酸などの芳香族の酸、ｐ−トルエンスルホン酸やエタノールスルホン酸などのスルホン酸などの有機酸で遊離の塩基を処理する方法も含まれる。
【０１４８】
本発明の化合物が酸の場合、目的の塩を当業界で周知の適切な方法によって調製しても良く、その中には、アミン（第一級、第二級または第三級）、アルカリ金属、アルカリ土類金属水酸化物などの無機または有機の塩基で遊離の酸を処理する方法も含まれる。適切な塩の例としては、グリシンやアルギニンなどのアミノ酸、アンモニア、第一級、第二級および第三級アミン、ピペリジンやモルホリンやピペラジンなどの環状アミンから誘導される有機塩、あるいはナトリウム、カルシウム、カリウム、マグネシウム、マンガン、鉄、銅、亜鉛、アルミニウムおよびリチウムから誘導される無機塩などが含まれる。
【０１４９】
化合物、塩、プロドラッグまたは溶媒和物が固体の場合、本発明の化合物、塩および溶媒和物は異なる結晶形で存在しても良く、それらすべてが本発明の範囲に含まれていることは、当業者には周知のことである。
【０１５０】
本発明の化合物は単一の立体異性体、ラセミ体および／または鏡像異性体および／またはジアステレオマーの混合物として存在しても良い。そういう単一の立体異性体、ラセミ体および／またはその混合物はすべて本発明の範囲に含まれる。本発明の化合物は光学的に純粋な形で使用されるのが好ましい。
【０１５１】
式Ｉおよび／または式IIの化合物は、ヒトまたは動物の体内で分解され式Ｉまたは式IIの化合物を提供するプロドラッグの形で投与しても良い。プロドラッグの例には、in vivoで加水分解可能な式Ｉおよび／または式IIの化合物エステルも含まれる。
【０１５２】
カルボキシまたはヒドロキシ基を含みin vivoで加水分解可能な式Ｉおよび／または式IIの化合物のエステルは、例えば、ヒトまたは動物の体内で加水分解され親酸またはアルコールを提供する医薬品として許容可能なエステルである。医薬品として許容できるカルボキシの適切なエステルには、（１−６C）アルコキシメチルエステル、例えばメトキシメチル、（１−６C）アルカノイルオキシメチルエステル、例えばピバロイルオキシメチル、フタリジルエステル、（３−８C）シクロアルコキシカルボニルオキシ（１−６C）アルキルエステル、例えば１−シクロへキシルカルボニルオキシエチル、１，３−ジオキソレン−２−オニルメチルエステル、例えば５−メチル１，３−ジオキソレン−２−オニルメチル、（１−６C）アルコキシカルボニルオキシエチルエステル、例えば１−メトキシカルボニルオキシエチルなどが含まれ、本発明の化合物のどのカルボキシ基ともエステルを形成できる。
【０１５３】
ヒドロキシ基を含みin vivoで加水分解可能な式Ｉおよび／または式IIの化合物のエステルには、リン酸エステルおよびアルファアシルオキシアルキルエステルなどの無機エステル、およびin vivoで加水分解によってエステルが分解され親ヒドロキシ基を提供する関連化合物が含まれる。アルファアシルオキシアルキルエステルにはアセトキシメトキシおよび２，２−ジメチルプロピオニルオキシメトキシが含まれる。in vivoで加水分解可能なヒドロキシのためのエステル形成基には、アルカノイル、ベンゾイル、フェニルアセチル、置換ベンゾイルおよびフェニルアセチル、アルコキシカルボニル（アルキル炭酸エステルを提供）、ジアルキルカルバモイルおよびN−（ジアルキルアミノエチル）−N−アルキルカルバモイル（カルバミン酸を提供）、ジアルキルアミノアセチルおよびカルボキシアセチルがある。
【０１５４】
D）抗菌組成物および治療方法
本発明の関連分野として、本発明の化合物を治療または抗菌組成物の活性成分として治療または予防目的で使用することが考慮されている。
【０１５５】
医薬組成物
本発明の化合物は医薬品として許容できる組成物として製剤しても良い。
【０１５６】
本発明は、本明細書記載の発明化合物を治療学的に有効量含有する医薬組成物を医薬品として許容できる担体または賦形剤と組み合わせて提供する。そういう担体には、生理食塩水、緩衝生理食塩水、デキストロース、水、グリセロール、エタノールおよびそれらの組み合わせが含まれるが、これだけに限定されるものではない。
【０１５７】
本発明の適切な形態の医薬組成物を調製する方法は当業者には周知である。例えば、医薬製剤は、薬剤師の通常の技術を使い、混合、顆粒化、錠剤にするための加圧、成分の混合、添加および溶解などの工程を経て調製可能であり、種々の投与方法に応じた製品が提供できる。
【０１５８】
本発明の化合物および組成物は細菌に対して広範な活性を有すると考えられており、メチシリン、リファンピシン、イソニアジッド、ストレプトマイシン、バンコマイシンなどの抗生物質に耐性の菌株に対する活性（非特許文献１８およびその引用参考文献）、ならびにグラム陽性菌（例えば、黄色ブドウ球菌、表皮ブドウ球菌、化膿連鎖球菌、大腸連鎖球菌）に対する活性およびグラム陰性菌（例えば、大腸菌、クラミジア肺炎病源体、腸内細菌、ヒトインフルエンザ菌、肺炎桿菌、レジオネラ肺炎病源体、緑膿菌）に対する活性もその中に含まれる（非特許文献１９を参照）。
【０１５９】
追加の抗生物質を含む医薬組成物
本発明のフルオロキノロン化合物、組成物および方法と組み合わせて、様々な第二抗生物質が使用可能である。そういう第二抗生物質は、細胞壁合成、原形質膜の構築、核酸合成、リボソーム機能、葉酸合成などを阻害することにより活性を示す。化合物および組成物と組み合わせることの可能な第二抗生物質には、スルホンアミド、ベータラクタム、テトラサイクリン、クロラムフェニコール、アミノグリコシド、マクロライド、グリコペプチド、ストレプトグラミン、キノロン、フルオロキノロン、オキサゾリジノンおよびリポペプチドが含まれるが、これだけに限定されるものではない。
【０１６０】
第二抗生物質は、リファンピシン（特許文献３５）、リファペンチン（特許文献３６）、リファブチン（特許文献３７）、リファラジル（特許文献３８）、リファノイン（特許文献３９）、リファキシミン（特許文献４０）のようなリファマイシン類似体、あるいは米国特許第２００５／００４３２９８号に記載されているような他のリファマイシン誘導体およびハイブリッドであるのが好ましい。あるいは、第二抗生物質はテトラサイクリン、チゲサイクリンまたは他のテトラサイクリン、グリシサイクリンおよびミノサイクリン誘導体であるのが好ましい。
【０１６１】
細菌の生長を阻害する方法
関連分野として、本発明は細菌その中でも特にグラム陽性菌の生長を阻害する方法にも関する。本発明のホスホン酸処理したフルオロキノロン化合物またはその抗菌類似体（または医薬品として許容できるそのプロドラッグ、塩、活性代謝産物または溶媒和物）の有効量を生長阻害目的で細菌に接触させる方法もその中に含まれる。例えば、本発明の化合物を細菌に接触させることで、細菌のトポイソメラーゼII（DNAジャイラーゼ）および／またはトポイソメラーゼIV酵素依存のDNA転写、複製および／または修復を阻害できる。
【０１６２】
DNA転写、複製および／または修復阻害薬としての発明化合物の活性は、in vivoおよびin vitroアッセイを含め当業者に入手可能などの方法でも測定可能である。細菌のトポイソメラーゼII（DNAジャイラーゼ）および／またはトポイソメラーゼIV酵素の高次コイルアッセイまたはデカテネーションアッセイの例は、Ｄｏｍａｇａｌａおよび共同研究者（非特許文献２０）、Ｍｉｚｕｕｃｈｉおよび共同研究者（非特許文献２１）、田中および共同研究者（非特許文献２２）により記載されている。
【０１６３】
細菌との接触はin vitro（生化学および／または細胞アッセイ）、ヒト以外の動物のin vivo、哺乳動物のin vivoで行なうことができ、その中にはヒトおよび／またはex vivo（例えば滅菌目的）も含まれる。
【０１６４】
医薬組成物は有効で便利な方法であればどの方法で投与しても良い。例えば、局所、非経口、経口、膣内、静脈内、腹腔内、筋肉内、眼球内、皮下、鼻腔内、気管支内、皮内投与などがその中に含まれる。
【０１６５】
治療または予防において、本発明の化合物および／または医薬品として許容できるそのプロドラッグ、塩、活性代謝産物および溶媒和物は、注射可能組成物、例えば無菌の水溶性分散剤、好ましくは等張剤として投与できる。あるいは組成物は、軟膏、クリーム、ローション、眼軟膏、目薬、点耳液、うがい薬、含浸包帯剤、縫合糸、エアロゾルなどの形態で局所使用目的として製剤してもよいし、適切な通常の添加物、例えば保存剤、薬剤浸透を助けるための溶媒、軟膏およびクリーム用の皮膚軟化薬などを含んでいてもよい。そういう局所製剤には、従来の適合性担体、例えばクリームまたは軟膏基剤やローション用のエタノールまたはオレイルアルコールなどを含めてもよい。そういう担体は、製剤の約１重量％から約９８重量％、通常は製剤の８０重量％まで含めてもよい。
【０１６６】
全身投与の代替方法には、胆汁塩やフシジン酸や他のデタージェントなどの浸透液を使用した経粘膜および経皮投与も含まれる。本発明の化合物が腸溶性製剤またはカプセル製剤として調剤できる場合は、経口投与も可能である。こういう化合物は、軟膏剤、ペースト、ジェリーなどの形で局所的および／または限局的に投与してもよい。
【０１６７】
治療薬は上記記載の方法を使って全身的に投与してもよいが、限局的に投与することも可能である。例えば、注射などの方法で骨に直接投与してもよい。あるいは局所組成物を使った創傷への塗布や皮下または他の形の創傷に直接塗布する方法など、他の限局的な方法で投与することも可能である。
【０１６８】
活性成分および医薬品として許容できるそのプロドラッグ、塩、活性代謝産物および溶媒和物は、骨セメントまたはフィラー（例えばＳｋｅｌｉｔｅ(登録商標)，Ｍｉｌｌｅｎｉｕｍ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ，  Ｋｉｎｇｓｔｏｎ，  ＯＮ，  Ｃａｎａｄａ）およびカルシウムまたはヒドロキシアパタイトビーズなどの代用骨または骨修復化合物の一部として投与してもよい。
【０１６９】
医薬組成物の調剤には、少なくとも医薬品としてまたは治療学的に有効な量の活性成分（すなわち式Ｉまたは式IIの化合物および／または医薬品として許容できるそのプロドラッグ、塩、活性代謝産物および溶媒和物）が含まれ、１またはそれ以上の医薬品用量単位で構成されているのが好ましい。選択された調剤は、治療を必要としている哺乳動物、例えばヒトの患者に投与できる。治療学的に有効な量という用語は、式Ｉおよび／または式IIの化合物（および／または医薬品として許容できるそのプロドラッグ、塩、活性代謝産物および溶媒和物）のうち、治療される被験体に治療効果を与える量を意味する。治療効果は客観的（あるテストまたはマーカーで測定可能）または主観的（被験体により提供される効果の表示または感覚）である。
【０１７０】
治療学的に有効な量に相当する量は、特定の化合物、投与経路、賦形剤の使用、病状およびその重症度、治療を必要としている哺乳動物の種類、他の医薬品との併用などの要素により様々であるが、治療学的に有効な量は当業者が容易に決定できることである。哺乳動物、その中でも特にヒトに投与する場合、活性成分の一日の投与量は０．１mg／kgから２００mg／kg、通常は約１−５mg／kgが予想される。いずれにせよ医師は、最適な投与量を決定できるし、それが個体の年齢、体重および反応によって異なることも承知している。上述の投与量は平均的な場合の例にすぎない。勿論、固体によってはそれよりも多い場合もあれば少ない場合もあるし、それも本発明の範囲に含まれる。
【０１７１】
本発明は治療を必要としている被験体に治療方法を提供する。本発明では、骨組織に高い親和性を有するホスホン酸処理されたフルオロキノロン分子が被験体に投与される。ホスホン酸処理された基は切断可能なリンカーを通してフルオロキノロン分子に結合しているのが好ましい。被験体は好ましくはヒトなどの哺乳動物である。当該治療方法は、獣医学の分野で、馬、牛、羊、山羊などの家畜や犬、猫、鳥などのペットにも適用できる。
【０１７２】
本発明は骨関連の感染の予防および／または治療に使用されるのが好ましいが、細菌感染によるまたはそれに関連して生じる他の疾病の治療および予防方法も本発明には含まれており、その中には中耳炎、結膜炎、肺炎、菌血症、副鼻腔炎、胸腔内の気腫および心内膜炎、アテローム硬化性血管の石灰化近辺の低度感染、髄膜炎などが含まれるが、これだけに限定されるものではない。そういう方法では、前記定義された抗菌化合物および／または組成物の治療または予防的有効量、すなわち治療効果を提供し哺乳動物の感染を予防または治療するのに充分な量が哺乳動物（好ましくはヒト）に投与される。正確な量は当業者が通常の方法で決定でき、関係する菌株や使用される特定の抗菌化合物などいくつかの要素により異なる。
【０１７３】
予防法
本発明の化合物に特に期待されている別の目的は予防である。人工関節を付ける人は、菌血症を起こす可能性のある治療を受ける前に、抗生物質による予防法を考慮すべきであると多くの整形外科医が考えている。深部感染は、人工関節を失い重病および死を伴う原因となる重大な合併症である。従って、本発明の化合物および組成物は、そういう場合の予防用抗生物質の代替医薬品として使用できる。例えば、本発明の化合物および／または組成物は、内在装置（例えば股関節、膝、肩などの関節置換）の挿入または手術、骨移植、骨折の修復、歯科手術またはインプラントなどの侵襲的治療の直前に、関連細菌に対して全身的および／または局所的効果を達成するため、注入投与することも可能である。侵襲的治療後も、術後治療または装置が体内に存在する期間の治療などを継続できる。
【０１７４】
さらに、化合物および／または組成物は、侵襲的治療を行なう前に骨組織に投与し、そこに蓄積させてもよい。
【０１７５】
本発明の化合物は、全身的または局所的に存在させるため、および／または骨に蓄積させるため、好ましくは手術中に細菌に感染する可能性のある部位に蓄積させるため、手術前１、２、３、４、５、６または７日前またはそれ以上前から１０、９、８、７、６、５、４、３、２、１時間前またはそれ以前までに１回、２回、３回またはそれ以上投与することができる。さらに好ましくは、修飾していない、すなわちホスホン酸処理していない親フルオロキノロンの濃度の約５、１０、２０、３０、４０、５０、７５、１００、５００倍、あるいは１０００倍の濃度を達成できるように、ホスホン酸処理した誘導体を局所的に投与してもよい。化合物は、侵襲的治療後１、２、３、４、５または６日、もしくは１，２，３週間またはそれ以上、もしくは装置が体内に存在している全期間を通して投与してもよい。
【０１７６】
従って、本発明は、骨組織に高い親和性を有するホスホン酸処理したフルオロキノロン分子を投与する哺乳動物の骨に、フルオロキノロン分子を蓄積させる方法を提供する。ホスホン酸処理したフルオロキノロンは哺乳動物の骨組織に結合し、その結果、ホスホン酸処理していないフルオロキノロンよりも多い量が骨に蓄積される。ホスホン酸処理した基は、切断可能なリンカーを通してフルオロキノロン分子に結合されているのが好ましい。
【０１７７】
本発明は、骨組織に高い親和性を有するホスホン酸処理したフルオロキノロン分子を投与される哺乳動物の骨にフルオロキノロン抗微生物分子を長期間蓄積させる方法も提供する。ホスホン酸処理した基は、切断可能なリンカーを通してフルオロキノロン分子に結合している。ホスホン酸処理したフルオロキノロンは哺乳動物の骨組織に結合し、そこに蓄積され、リンカーは骨内で徐々に切断されてフルオロキノロンを放出するので、骨内のフルオロキノロン分子の存在期間が長期化される。
【０１７８】
E）内在装置および本発明のホスホン酸処理フルオロキノロン誘導体でコーティングした生成物
本発明の化合物でコーティングした内在装置も本発明には含まれている。内在装置と言う用語は、本明細書で使用する場合、外科用インプラント、整形外科装置、補綴装置、カテーテルなど、体内に導入され、長期間その位置に存在する装置を意味する。そう言う装置には、人工関節およびインプラント、心臓弁、ペースメーカー、血管移植片、血管カテーテル、脳脊髄液シャント、尿カテーテル、連続携帯式腹膜透析（CAPD）などが含まれるが、これだけに限定されるものではない。
【０１７９】
一つの実施例では、内在装置は、体内に挿入される前に、約１mg／mlから約１０mg／mlの濃度の本発明化合物および／または組成物に浸す、またはそれを噴霧する。
【０１８０】
別の実施例によれば、内在装置は骨様の物質(例えばリン酸カルシウム、カルシウムイオン、ヒドロキシアパタイト（非特許文献２３）)で作製、またはそれで予めコーティングする。そういう物質は、本発明の化合物で内在装置をコーティングする間に、および／または局所的または全身的投与のあとで、本発明の化合物の内在装置への結合を改善する傾向にある。内在装置は、本発明の骨標的化合物で予めコーティングした、あるいはそれを含有する骨材料でコーティングしてもよい。上述の実施例では、ヒドロキシアパタイトが骨材料として好ましい。ヒドロキシアパタイトでコーティングした人工器官のコーティング方法、使用方法および特長に関しては、ＤｕｍｂｌｅｔｏｎおよびＭａｎｌｙが記載し参考のために本明細書に組み入れられている記事（非特許文献２４）に見出される。
【０１８１】
F）調製方法
本発明の化合物およびその塩、溶媒和物、結晶形、活性代謝産物およびプロドラッグは、容易に入手可能な出発材料と当業界で周知の技術を使って調製できる。いくつかの新規で例示的な発明化合物の調製方法を以下の実施例セクションに記載する。そういう方法は本発明の範囲に含まれる。
（実施例）
【０１８２】
本明細書記載の実施例は、本発明の代表的化合物の例示的な合成方法を提供する。骨結合活性、微生物に対する本発明化合物の最低阻害濃度（MIC）の判定方法、in vivo活性および細胞毒性の試験方法など、本発明化合物の例示的なアッセイ方法も提供する。
【実施例１】
【０１８３】
モキシフロキサシン、ガチフロキサシンおよびシプロフロキサシンのビスホスホン酸塩結合体の合成
A）一般実験手法
キノロン抗生物質製剤の合成方法は、Ｃｈｅｍ．
Ｒｅｖ．（２００５），１０５：５５９‐５９２に記載してある。モキシフロキサシン、ガチフロキサシンおよびシプロフロキサシンの合成は、それぞれ米国特許第４９９０５１７号、米国特許第４９８０４７０号および米国特許第４６７０４４４号に記載してある。
【０１８４】
A１）ビスホスホン酸塩構成単位の調製
【化５２】
2008536911.tif 000041
【０１８５】
Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．（１９９９），７：９０１−９１９に記載されている手順に従い、一般構造式IIIおよびＶのベンジル置換ビスホスホン酸塩構成単位は、Ｉの陰イオンを４置換ベンジルブロマイドまたはブロモアセレートIVでアルキル化することにより得られる。ニトロ化合物IIIaは、アニリンIIIｂを水素添加条件下でPtO２などの触媒を使って還元することにより変換できる。IIIｃおよびVaなどのエステルは、エステル開裂によって対応する酸IIIｄまたはVbに変換できる。例えば、エステルIIIｃ（ここにR'=ｔ−Bu）は、TFAで処理することにより対応する酸IIIｄが得られる。同じような条件下で、エステルＶa（ここにX=Ot-Bu）は酸Vbに変換される。
【化５３】
2008536911.tif 000042
【０１８６】
一般式IXのアリール置換メチレンビスホスホン酸塩は、ベンジルハロゲン化によって分けられた２つのアルブゾブ反応により親ベンジルハライドから得られる。ヒドロキシ置換親分子IXaは、Ｏｒｇ．  Ｂｉｏｍｏｌ．  Ｃｈｅｍ．（２００４），２１：３１６２−３１６６に記載されているように、亜リン酸ジアルキルのアルカリ金属塩を４−ヒドロキシベンズアルデヒドへ求核添加することにより得られる。
【化５４】
2008536911.tif 000043
【０１８７】
ジエチル(エトキシホスフィニル)メチルホスホナートＸは、Ｓｙｎｔｈ．  Ｃｏｍｍ．（２００２），３２：２９５１−２９５７および米国特許第５９５２４７８（１９９９）に記載されている手法を使って調製できる。これは４置換ブロモベンゼン（XI）と結合し、エステル中間体XIIaの開裂を経て、酸XIIｂを提供する。
【化５５】
2008536911.tif 000044
【０１８８】
一般式XIIIのアミンは、Ｓｙｎｔｈ．  Ｃｏｍｍ．（１９９６），２６：２０３７−２０４３に記載の手順に従って、ジベンジルアミン、ジアリルアミンまたは他のN−ベンジルおよびN−アリル第二級アミン、亜リン酸ジエチルおよびオルトギ酸トリエチルから得られる。XIIIを無水琥珀酸ＸＩＶａまたは無水グルタル酸XIVｂでアシル化すると、それぞれ酸XVaおよびXVｂが得られる（非特許文献２５）。上記したIIIｂまたはIXをXIV（a−ｂ）で同様にして処理すれば、サクシナミン酸およびグルタラミン酸XVI（a−ｄ）が得られる。
【化５６】
2008536911.tif 000045
【０１８９】
オレフィンXVIIは、Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．  （１９８６），５１：３４８８−３４９０に記載の手順に従ってＩから調製できる。
【化５７】
2008536911.tif 000046
【０１９０】
Ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ，  Ｓｕｌｆｕｒ，  ａｎｄ  Ｓｉｌｉｃｏｎ（１９９８），１３２：２１９−２２９に記載されているように、一般構造式XIX(ｃ−ｄ)のアルコールおよび一般構造式XXIのヨウ化物は、Ｉの陰イオンを色々な長さの鎖を持つ保護されたオメガヒドロキシブロマイドXVIIIでアルキル化することにより調製される。脱保護後、in situで生成されるトリフェニルホスフィン／ヨウ素錯塩で処理することにより、アルコールは対応するヨウ化物に変換できる。さらにこれらのアルコールXIX(ｃ−ｄ)は、二クロム酸ピリジニウムなどを使った通常の酸化方法により、一般構造式ＸＸの酸に変換してもよい。
【化５８】
2008536911.tif 000047
【０１９１】
親アミンIIIｂおよびXIIIから得られるブロモアセトアミドXXIIおよびXXIIIは、Ｊ．  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ（１９９５），３：２７３−２８２に記載される手順の改良方法を使うことにより調製できる。
【化５９】
2008536911.tif 000048
【０１９２】
チオールXXIV（a−ｂ）は、Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．（１９９９），７：９０１−９１９に記載される手順に従って、Ｉの陰イオンを保護された３−ヨードプロパン−１−チオールでアルキル化することにより調製できる。あるいは、ヨウ化物XXI（a−ｂ）およびスルヒドリル基を提供可能な適切に選択された試薬からも調製できる。その中には、チオウレアなどの試薬を使いその後加水分解する方法や、チオ酢酸を使いその後加水分解または還元する方法が含まれる。
【化６０】
2008536911.tif 000049
【０１９３】
チオグリコールアミドXXVおよびXXVIは、他のアミンに関してＪ．  Ｉｎｄ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．（１９９７），７４：６７９−６８２に記載されているように、IIIｂおよびXIIIなどのアミン官能基化ビスホスホン酸塩をチオグリコール酸の活性型またはチオグリコール酸それ自身と縮合することにより得られる。
【化６１】
2008536911.tif 000050
【０１９４】
XXVIII（a−ｂ）などのビニルケトンは、適切に選択された塩基の存在下で、親（ヒドロキシフェニル）ビニルケトンXXVIIをヨウ化物XXI（a−ｂ）と縮合することにより調製できる。
【化６２】
2008536911.tif 000051
【０１９５】
ジエチル（エトキシホスフィニル）メチルホスホネートXXIVは、Ｓｙｎｔｈ．  Ｃｏｍｍ．（２００２），３２：２９５１−２９５７および米国特許第５９５２４７８号（１９９９）に記載されている手順を使って調製できる。ハロゲン化１，３−ジオキソロンXXXと結合させれば、ビスホスホン酸塩XXXIが得られる。その後ラジカルハロゲン置換反応を行なえば、ビスホスホン酸塩XXXIIが得られる。
【０１９６】
本セクションに記載されているビスホスホン酸塩構成単位はホスホン酸エステルの形態であり、RはMe、Et、i-Pr、アリルまたはBn、あるいは遊離のビスホスホン酸および／または遊離のビスホスホン酸塩である。
【０１９７】
A２）フルオロキノロン−ビスホスホン酸塩結合体の合成
【化６３】
2008536911.tif 000052
【０１９８】
C−７置換体に第一級または第二級アミン官能基を有するフルオロキノロンを求核触媒の条件下でビニリデンビスホスホン酸塩XVIIで処理すれば、Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．（２００２），４５：２３３８−２３４１に記載されているように、ビスホスホン酸塩付加物が得られる。従って、モキシフロキサシンXXXIII、ガチフロキサシンXXXIVおよびしプロフロキサシンXXXVは、アミノメシル化メチレンビスホスホン酸塩XXXVI-XXXVIIIに変換できる。
【化６４】
2008536911.tif 000053
【０１９９】
XXXIII−XXXVの第二級アミノ基を保護し、オメガヨードアルキルビスホスホン酸塩XXI（a−ｂ）で処理すれば、フルオロキノロンビスホスホン酸塩付加物ＸＬ（a−ｆ）が得られる。
【化６５】
2008536911.tif 000054
【０２００】
保護されたフルオロキノロンとXXIIおよびXXIIIなどのビスホスホン酸処理したアルキルハライドとの同じような反応は、Ｊ．  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ（１９９５），３：２７３−２８２に記載されているのと類似の方法で、親ビスホスホン酸処理グリコアミドプロドラッグXLI（a−ｃ）およびXLII（a−ｃ）を提供する。
【化６６】
2008536911.tif 000055
【０２０１】
フルオロキノロンのカルボキシ基の保護は化合物XLIII−XLVを与える。これらの化合物は、Ｓｙｎｌｅｔｔ（１９９４）：８９４に記載されているように、塩基の存在下でブロモアセトアミドXXXIIIおよび二酸化炭素と反応すると、ビスホスホン酸処理したカルバミン酸塩XLVI−XLVIIIが得られる。類似の処理でXXIIIの代わりにXXIIを使用すれば、類似の化合物IL−LIが得られる。
【化６７】
2008536911.tif 000056
【０２０２】
他の化合物に関してＪ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．（１９９１），３４：７８−８１に記載されているのと同じ方法で、モキシフロキサシンXXIIIをクロロギ酸１−クロロアルキルで処理すると、親カルバミン酸１−クロロアルキルが生成し、それがXV（a−ｂ）、XVI（a−ｄ）またはXX（a−ｂ）の塩と反応すると、それぞれビスホスホン酸塩付加物LII（ａ−ｂ）、LIII（a−ｄ）またはLIV（a−ｂ）が得られる。同様に、同じ反応順序で、ガチフロキサシンはそれぞれLV（a−ｆ）およびLV（a−ｂ）に、シプロフロキサシンはそれぞれLVII（a−ｆ）およびLVIII（a−ｂ）に変換される。
【化６８】
2008536911.tif 000057
【０２０３】
ビスホスホン酸フェニルエステルは、標準結合試薬の存在下、保護されたフルオロキノロンXXXIX（a−ｃ）をビスホスホン酸処理したフェノールIXaと縮合させることにより調製できる。
【化６９】
2008536911.tif 000058
【０２０４】
同様に、XXXIX（a−ｃ）は、適切に選択された標準結合試薬の存在下、チオールXXXIV（a−ｂ）、XXVまたはXXVIと反応すると、一般構造式LX（a−ｃ）、LXI（a−ｃ）、LXII（a−ｃ）およびLXIII（a−ｃ）のビスホスホン酸処理したチオエステルを生成する。
【化７０】
2008536911.tif 000059
【０２０５】
XXXIII、XXXIVおよびXXXVなどのフルオロキノロンをXXVII（a−ｂ）などのビスホスホン酸処理したビニルケトンと縮合すると、ビスホスホン処理したフルオロキノロンLXIV（a−ｂ）、LXV（a−ｂ）およびLXVI（a−ｂ）が得られる。
【化７１】
2008536911.tif 000060
【０２０６】
非求核塩基の存在下、フルオロキノロンXXXIII−XXXVをビスホスホン酸処理したハロメチルジオキソロンXXXIIで処理すると、ビスホスホン酸処理したジオキソロニルメチルフルオロキノロンLXVII、LXVIIIおよびLXIXが得られる。
【化７２】
2008536911.tif 000061
【０２０７】
ビスホスホン酸処理したアミドLXX−LXXIIは、結合試薬の存在下でカルボン酸Vbと処理するか、塩基の存在下で酸塩化物Vcで処理することにより、保護された親フルオロキノロンXLIII−XLVから調製できる。
【化７３】
2008536911.tif 000062
【０２０８】
ビスホスホン酸処理したアミドLXXIV-LXXVIは、標準の脱水結合条件下でビスホスホン酸処理した３−（２−アシルオキシフェニル）−３−メチルブタン酸（LXXIII X=OH）で処理することにより、あるいは適切な塩基の存在下で親アシルハライド（LLXIII X=ハロゲン）と処理することにより、保護された親フルオロキノロンXLIII-XLVから調製できる。
【０２０９】
類似化合物LXXVIII-LXXXは、適切に保護したビスホスホン酸処理３−（２−ホスホリルオキシフェニル）−３−メチルブタン酸（LLXVII X=OH）または親アシルハライド（LXXVII X=ハロゲン）を使って、同じような方法で調製できる。
【化７４】
2008536911.tif 000063
【０２１０】
本セクションに記載されているビスホスホン酸塩構成単位はホスホン酸エステルの形態であり、RはMe、Et、i-Pr、アリルまたはBn、あるいは遊離のビスホスホン酸および／または遊離のビスホスホン酸塩である。ビスホスホン酸エステルは、塩基の存在下または不在下で臭化またはヨウ化トリメチルシリルで処理する方法、ビスホスホン酸エステルがビスホスホン酸ベンジルの場合はハロゲン化する方法、ビスホスホン酸エステルがビスホスホン酸アリルの場合はパラジウム触媒および求核分子で処理する方法など、従来の方法によって遊離酸および酸性塩に変換できる。
【０２１１】
他に使用されている保護基は、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｇｒｅｅｎｅ，  Ｔ．Ｗ．  ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，  Ｐ．Ｍ．Ｇ．，  Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９９９で検討されている文献に記載されているような従来の方法を使って付加および除去できる。
【０２１２】
B）詳細な実験手法
スキーム１
テトラメチルエテニリデンビスホスホン酸塩（２）の合成
【化７５】
2008536911.tif 000064
【０２１３】
テトラメチルエテニリデンビスホスホン酸塩（２）：化合物２は、Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．  １９８６，  ５１，  ３４８８−３４９０に記載されている方法で調製した。２は透明な液体として得られた。全収率７４％。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ３．７８−３．８１（ｍ，１２Ｈ），６．９４−７．１２（ｍ，２Ｈ）
【０２１４】
スキーム２
モキシフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体５の調製
【化７６】
2008536911.tif 000065
【０２１５】
７−（（４aS,７aS）−１−（２，２−ビス（ジメチルホスホノ）エチル）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン―３−カルボン酸（４）：モキシフロキサシン３（０．８００ｇ，１．９９mmol）を乾燥CHCｌ３（３０ml）に溶解した。この溶液にテトラメチルエテニリデンビスホスホン酸塩２（０．５１５ｇ，２．１１mmol）および触媒量のDMAPを添加した。反応混合物を室温で３．５時間攪拌してから、摂氏４０度で蒸発させた。粗生成物のうち１．０２２ｇを以下の手順で精製した。少量の酢酸エチルで処理し、不溶性の物質を濾過し、生成物をヘキサンで沈殿させ、ヘキサンで洗浄し、乾燥させると、精製した４（０．４４８ｇ，４５％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．８６−０．８７（ｍ，１Ｈ），０．９４−１．０５（ｍ，２Ｈ），１．１０−１．３５（ｍ，４Ｈ），１．５５−１．８５（ｍ，５Ｈ），２．２５−２．４０（ｍ，２Ｈ），２．６４（ｔｔ，Ｊ＝２３．９，６．０，１Ｈ），２．７５−２．９５（ｍ，２Ｈ），３．０５−３．２５（ｍ，２Ｈ），３．５４（ｓ，３Ｈ），３．５６−３．７２（ｍ，６Ｈ），３．７４−４．０１（ｍ，８Ｈ），７．７７（ｄ，Ｊ＝１４．１，１Ｈ），８．７６（ｓ，１Ｈ）
【０２１６】
７−（（４aS,７aS）−１−（２，２−ビスホスホノエチル）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン―３−カルボン酸（５）：TMSBｒ（０．７６ml，５．７６mmol）を４（３７１mg，０．５７５mmol）のCH２Cl２（１０ml）溶液に攪拌しながら一度に添加し、その結果得られた混合物を室温で２４時間攪拌した。溶媒は減圧下で除き、固形物は高真空下で１時間乾燥した。それから固形物をH２O（１５ml）に懸濁し、１MのNaOHを加えてｐHを直ちに７に調整し、生成物の溶液を得た。蒸発させることにより本質的に純粋な生成物が得られた（定量的）。１１２mgをC18
Sep-Pak（登録商標）（H２O）上で精製し、純粋な５を得た（６６mg，回収率５９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．７８−１．３６（ｍ，４Ｈ），１．５６−２．１５（ｍ，４Ｈ），２．３６−２．５３（ｍ，１Ｈ），２．６０−２．８５（ｍ，１Ｈ），３．３２−３．８５（ｍ，７Ｈ），３．６２（ｓ，３Ｈ），４．０５−４．３８（ｍ，４Ｈ），７．５９（ｄ，Ｊ＝１３．７，１Ｈ），８．５９（ｓ，１Ｈ）
【０２１７】
スキーム３
シプロフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体８の調製
【化７７】
2008536911.tif 000066
【０２１８】
７−（４−（２，２−ビス（ジメチルホスホノ）エチル）ピペラジン−１−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（７）：シプロフロキサシン６（０．４０ｇ，１．２１mmol）を乾燥CHCｌ３（５０ml）に懸濁した。この溶液にテトラメチルエテニリデンビスホスホン酸塩２（０．３０１ｇ，１．２３mmol）および触媒量のDMAPを添加した。反応混合物を室温で２時間攪拌してから、摂氏４０度で蒸発させた。粗生成物は煮沸トルエン（５０ml）で加熱した。不溶性の生成物８が白い粉末として得られた（０．３０９ｇ，４４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．１７−１．２１（ｍ，２Ｈ），１．３６−１．４３（ｍ，２Ｈ），１．６３（ｂｓ，１Ｈ），２．６７−２．８４（ｍ，５Ｈ），２．９５−３．０７（ｍ，２Ｈ），３．３５（ｂｓ，４Ｈ），３．４８−３．５６（ｍ，１Ｈ），３．８０−３．８８（ｍ，１２Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝７．０，１Ｈ），８．０２（ｄ，Ｊ＝１２．９，１Ｈ），８．７７（ｓ，１Ｈ）
【０２１９】
７−（４−（２，２−ビスホスホノエチル）ピペラジン−１−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（８）：TMSBｒ（０．５８ml，４．３９mmol）を７（２５２mg，０．４３８mmol）のCH２Cl２（１０ml）溶液に攪拌しながら一度に添加し、その結果得られた混合物を室温で１６時間攪拌した。溶媒は減圧下で除き、固形物は高真空下で１時間乾燥した。固形物をH２O（３０ml）に懸濁し、１MのNaOHを加えてｐHを直ちに７．６に調整し、生成物の溶液を得た。生成物の溶液をCHCｌ３（２ｘ２５ml）で洗浄し、濾過し、蒸発させると、定量的収率の８を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ１．１４（ｂｓ，２Ｈ），１．３２−１．３８（ｍ，２Ｈ），２．３５−２．５０（ｍ，１Ｈ），３．３６−３．９０（ｍ，１１Ｈ），７．６６（ｄ，Ｊ＝７．０，１Ｈ），７．９３（ｄ，Ｊ＝１３．１，１Ｈ），８．５１（ｓ，１Ｈ）
【０２２０】
スキーム４
テトラエチル−１−（３−イオドプロピル）−メチレンビスホスホン酸塩（１１）
【化７８】
2008536911.tif 000067
【０２２１】
テトラエチル−４−（２−テトラヒドロ−２H−ピラニルオキシ）ブチレン−１，１−ビスホスホン酸塩（９）：乾燥THF（２０ml）中のNaH（鉱物油中６０％懸濁液、９００mg、２２．０mmol）懸濁液に、テトラエチルメチレンビスホスホン酸塩（６．４６ｇ、２２．４mmol）を滴加した。その結果得られた透明の溶液を室温で１５分間攪拌し、その後２−（３−ブロモプロポキシ）テトラヒドロ−２H-ピラン（５．５０ｇ、２２．６mmol）を滴加した。反応混合物は６時間加熱還流し、CH２Cl２（７５ml）で希釈し、塩水（２ｘ５０ml）で洗浄し、乾燥し（MGSO４）、蒸発させ、そのまま次の工程で使用した。
【０２２２】
テトラエチル−４−ヒドロキシブチレン−１，１−ビスホスホン酸塩（１０）：粗生成物９（最高２２．４mmol）のMeOH（４０ml）溶液を攪拌しながら、アンバーライトIR-120（０．６ｇ）を添加した。反応混合物を摂氏５０度で４時間加熱し、濾過し、蒸発させた。粗生成物は、シリカゲルを使い、５−１０％メタノール／酢酸エチルの傾斜溶離で、フラッシュクロマトグラフィにて精製し、純粋な１０（２．６７ｇ，テトラエチルビスホスホン酸塩から３４％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３４（ｔ，Ｊ＝７．１Hz，１２Ｈ），１．８１（クイント、Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），１．９９−２．１３（ｍ，２Ｈ），２．３７（ｔｔ，Ｊ＝２４．４，５．６Ｈｚ，１Ｈ），２．５１（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），３．６６（ｑ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），４．１３−４．２２（ｍ，８Ｈ）
【０２２３】
テトラエチル−４−ヨードブチレン−１，１−ビスホスホン酸塩（１１）：１０（１．５２ｇ，４．３９mmol）のCH２Cl２（５０ml）溶液に、トリフェニルホスフィン（１．３２ｇ，５．０３３mmol）およびイミダゾール（０．４５ｇ，６．６１mmol）を添加した。反応混合物は、ヨード（１．２２ｇ，４．８１mmol）を加える前に、摂氏０度に冷却した。次に混合物を冷却槽から除き、２時間攪拌し、ヘキサン（１００ml）で希釈し、さらにヘキサン（２ｘ３０ml）で沈殿物を洗浄しながら濾過した。濾液は蒸発させ、シリカゲルを使い、０−１０％メタノール／酢酸エチルの傾斜溶離で、フラッシュクロマトグラフィにて精製し、純粋な１１（１．６ｇ，８０％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３２−１．３８（ｍ，１２Ｈ），１．９５−２．１５（ｍ，４Ｈ），２．２８（ｔｔ，Ｊ＝２４．１，６．１，１Ｈ），３．１８（ｔ，Ｊ＝６．６，２Ｈ），４．１２−４．２４（ｍ，８Ｈ）
【０２２４】
スキーム５
モキシフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体１４の調製
【化７９】
2008536911.tif 000068
【０２２５】
７−（（４aS,７aS）−１−（tert−ブトキシカルボニル）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン―３−カルボン酸（１２）：２０mlのTHFに入ったモキシフロキサシン（３．８３４mg，２．０７８mmol）、Boc２O（４５９．１mg，２．０８２mmol）および４．２mlの１M NaOH水溶液の混合物を室温で一晩攪拌した。有機溶媒を除去した後、残渣を飽和塩化アンモニウム水溶液で中和した。混合物を酢酸エチル（３ｘ）で抽出し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。溶媒を除去すると、黄色の泡状物（９４７mg，９１％）が得られた。この泡状物には１Ｈ  ＮＭＲによると微量の不純物が含まれていたが、精製せずに、次の工程で直接使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．７９−０．８６（ｍ，１Ｈ），１．０３−１．１８（ｍ，２Ｈ），１．２３−１．３４（ｍ，２Ｈ），１．４４−１．５４（ｍ，１Ｈ），１．４９（ｓ，９Ｈ），１．７６−１．８４（ｍ，２Ｈ），２．２５−２．２９（ｍ，１Ｈ），２．８９（ｔ，Ｊ＝１１．８，１Ｈ），３．２２−３．３０（ｍ，１Ｈ），３．３８（ｂｓ，１Ｈ），３．５７（ｓ，３Ｈ），３．８８（ｄｔ，Ｊ＝２．７，１０．０，１Ｈ），３．９６−４．０１（ｍ，１Ｈ），４．０７−４．１２（ｍ，２Ｈ），４．７９（ｂｓ，１Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝１３．７，１Ｈ），８．７９（ｓ，１Ｈ）ppm
【０２２６】
４，４−ビス（ジエチルホスホノ）ブチル−７−（（４aS,７aS）−１−（tert−ブトキシカルボニル）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン―３−カルボン酸塩（１３）：１０mlの無水DMFに入った１２（５７６mg，１．１５mmol）、ヨードビスホスホン酸塩１１（４９７mg，１．０９mmol）および炭酸カリウム（１５１mg，１．０９mmol）の混合物を室温で２１時間攪拌した。酢酸エチル（１００ml）を加え、有機化合物を水（３ｘ２０ml）および塩水（２０ml）で抽出し、MgSO４上で乾燥した。シリカゲルを使い、５−１０％メタノール／酢酸エチルの傾斜溶離で、フラッシュクロマトグラフィにて精製し、純粋な生成物（５１８mg，５７％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．７２−０．８０（ｍ，１Ｈ），０９２−１．１０（ｍ，１Ｈ），１．１６−１．３０（ｍ，２Ｈ），１．３３（ｔ，Ｊ＝７．０，１２Ｈ），１．４７（ｓ，９Ｈ），１．７１−１．８３（ｍ，４Ｈ），２．０５−２．１６（ｍ，４Ｈ），２．１８−２．２８（ｍ，１Ｈ），２．３２−２．５０（ｍ，１Ｈ），２．８１−２．９４（ｍ，１Ｈ），３．１３−３．２６（ｍ，１Ｈ），３．２８−３．４２（ｍ，１Ｈ），３．５５（ｓ，３Ｈ），３．７８−３．９０（ｍ，２Ｈ），３．９８−４．０８（ｍ，２Ｈ），４．１２−４．２３（ｍ，８Ｈ），４．２５−４．３６（ｍ，２Ｈ），４．７６（ｂｓ，１Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝４．３，１Ｈ），８．５１（ｓ，１Ｈ）
【０２２７】
４，４−ビスホスホノブチル−７−（（４aS,７aS）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン―３−カルボン酸塩（１４）：１３（５１８mg，０．６２４mmol）のCH２Cｌ２（５０ml）溶液を攪拌しながら、TMSBｒ（０．８２ml，６．２１mmol）を一度に添加し、その結果得られた混合物を室温で２３時間攪拌した。減圧下で溶媒を除去し、固形物を高真空下で１時間乾燥した。固形物を再びH２O（２００ml）に懸濁し、１M NaOHを加えてｐHを直ちに７に調整すると、生成物の溶液が得られた。生成物の溶液をCHCl３（２ｘ５０ml）で洗浄し、濾過し、蒸発させると、定量収率の生成物が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．８３（ｂｓ，１Ｈ），０．９８（ｂｓ，１Ｈ），１．０８（ｂｓ，１Ｈ），１．２１（ｂｓ，１Ｈ），１．６５−２．１５（ｍ，９Ｈ），２．６１（ｂｓ，１Ｈ），２．９３（ｂｓ，１Ｈ），３．２０−３．３５（ｍ，１Ｈ），３．４３−３．６４（ｍ，２Ｈ），３．５２（ｓ，３Ｈ），３．７５（ｂｓ，２Ｈ），３．８４−４．１７（ｍ，２Ｈ），４．３１（ｂｓ，２Ｈ），７．４１（ｄ，Ｊ＝１２．１，１Ｈ），８．８０（ｓ，１Ｈ）
【０２２８】
スキーム６
ガチフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体１８の調製
【化８０】
2008536911.tif 000069
【０２２９】
７−（４−（tert−ブトキシカルボニル）−３−メチルピペラジン−１−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（１６）：１０mlのTHFに入ったガチフロキサシン（１５，３３５．１mg，０．８９２７mmol）、Boc２O（２０２mg，０．９１６３mmol）および１．９mlの１M NaOH水溶液の混合物を室温で一晩攪拌した。有機溶媒を除去した後、残渣を飽和塩化アンモニウム水溶液で中和した。混合物を酢酸エチル（３ｘ）で抽出し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。溶媒を除去すると、白色の固形物１６（４０３mg，９５％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．９４−１．０４（ｍ，２Ｈ），１．１９−１．２６（ｍ，２Ｈ），１．３３（ｄ，Ｊ＝６．９，３Ｈ），１．５０（ｓ，９Ｈ），３．２３−３．３７（ｍ，３Ｈ），３．４４−３．５１（ｍ，２Ｈ），３．７３（ｓ，３Ｈ），３．９５−４．０３（ｍ，２Ｈ），４．３６（ｂｓ，１Ｈ），７．８９（ｄ，Ｊ＝１１．４，１Ｈ），８．８３（ｓ，１Ｈ）ppm
【０２３０】
４，４−ビス（ジエチルホスホノ）ブチル−７−（４−（tert−ブトキシカルボニル）−３−メチルピペラジン−１−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（１７）：１０mlの無水DMFに入った１６（４７６mg，１．００mmol）、ヨードビスホスホン酸塩１１（４６５mg，１．０２mmol）および炭酸カリウム（１８０mg，１．３０mmol）の混合物を室温で２２時間攪拌した。溶媒を摂氏７０度で蒸発させ、シリカゲル上で、５％メタノール／CH２Cl２のフラッシュクロマトグラフィ（２ｘ）にて精製し、純粋な１７（４６０mg，５７％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．８６−０．９６（ｍ，２Ｈ），１．０８−１．１８（ｍ，２Ｈ），１．２８−１．４０（ｍ，１５Ｈ），１．５０（ｓ，９Ｈ），２．００−２．１６（ｍ，４Ｈ），２．３２−２．４９（ｍ，１Ｈ），３．１７−３．５０（ｍ，５Ｈ），３．７１（ｓ，３Ｈ），３．８４−３．９８（ｍ，２Ｈ），４．１２−４．２４（ｍ，８Ｈ），４．２８−４．３８（ｍ，３Ｈ），７．８６（ｄ，Ｊ＝１２．３，１Ｈ），８．５４（ｓ，１Ｈ）
【０２３１】
４，４−ビスホスホノブチル−７−（３−メチルピペリジン−１−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（１８）：１７（４６０mg，０．５７３mmol）のCH２Cｌ２（５０ml）溶液を攪拌しながら、TMSBｒ（０．７６ml，５．７６mmol）を一度に添加し、その結果得られた混合物を室温で１５時間攪拌した。減圧下で溶媒を除去し、固形物を高真空下で１時間乾燥した。固形物を再びH２O（２００ml）に懸濁し、１M NaOHを加えてｐHを直ちに７．３５に調整すると、生成物の溶液が得られた。生成物の溶液をCHCl３（２ｘ１００ml）で洗浄し、濾過し、蒸発させると、粗生成物（３００mg，生成物の四ナトリウム塩に基いて回収率７７％）が得られた。粗物質をC18 Sep-Pak（登録商標）（H２O）上で精製し、純粋な１８を得た（８９mg，２３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．８８−１．０３（ｍ，２Ｈ），１．１０−１．２４（ｍ，２Ｈ），１．３６（ｄ，Ｊ＝６．３，３Ｈ），１．８０−２．１２（ｍ，５Ｈ），３．１８−３．６１（ｍ，７Ｈ），３．７２（ｓ，３Ｈ），４．０２−４．１５（ｍ，１Ｈ），４．３４（ｔ，Ｊ＝６．６，２Ｈ），７．４８（ｄ，Ｊ＝１２．３，１Ｈ），８．８３（ｓ，１Ｈ）
【０２３２】
テトラエチル−１−（４−ヨードブチル）メチレンビスホスホン酸塩（２３）の調製
【化８１】
2008536911.tif 000070
【０２３３】
４−ブロモ−１−ブタノール（１９）：還流しているテトラヒドロフラン６７．５ml（８３２．２mmol）に３１ml（２７４mmol）の４８％臭化水素酸を滴加し、黄色の溶液をさらに２時間還流させた。室温まで冷却後、反応物は飽和重炭酸ナトリウム水溶液で慎重に中和した。その結果生じた混合物はジエチルエーテル（３ｘ）で抽出し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。溶媒を除去すると、黄色い油性の生成物１９（１０．７ｇ，２６％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．６９−１．７６（ｍ，２Ｈ），２．０１−１．９４（ｍ，２Ｈ），３．４６（ｔ，Ｊ＝６．６，２Ｈ），３．７０（ｔ，Ｊ＝６．４，２Ｈ）
【０２３４】
２−（４−ブロモブトキシ）−テトラヒドロ−２H−ピラン（２０）：１９（１０．７ｇ，６９．９３mmol）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（２６．５mg，０．１３７２mmol）のジクロロメタン（２０ml）溶液に、３．４−ジヒオロ−２H-ピラン（８．５ml，９０．９６mmol）を滴加した。混合物を室温で一晩攪拌した。溶媒を除去した後、溶離剤として５：１へキサン／酢酸エチルを用い、シリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィにて残渣を精製すると、無色の油性生成物２０（１５．３ｇ，９２％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．４８−１．６２（ｍ，４H），１．６８−１．８５（ｍ，４Ｈ），１．９４−２．０２（ｍ，２H），３．４０−３．５３（ｍ，４H），３．７４−３．８８（ｍ，２H），４．５７−４．５９（ｍ，１H）
【０２３５】
テトラエチル−５−（２−テトラヒドロ−２H-ピラニルオキシ）ペンチレン−１，１−ビスホスホン酸塩（２１）：THF４０ml中の水素化ナトリウム懸濁液にテトラエチルメチレンビスホスホン酸塩（６．１６ｇ，２０．９５mmol）を慎重に添加し、その結果得られた淡黄色の透明な溶液を室温で４５分攪拌した。次に臭化物２０（４．９７ｇ，２０．９６mmol）を加え、５mlのTHFで洗浄した。反応物は一晩還流し、飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチする前に、室温まで冷却した。固形物を溶解するには、さらに少量の水が必要であった。混合物は酢酸エチル（３ｘ）で抽出し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空で濃縮した。溶離剤として２０：１（ｖ／ｖ）ジクロロメタン／メタノールを用い、シリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィにて精製すると、７．３ｇの不純物を含む生成物２１が淡黄色の油として得られた。その物質はそれ以上精製せずに直接次の工程で使用した。１Ｈ  ＮＭＲ選択シグナル（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ２．２８（ｔｔ，Ｊ＝６．１，２４．３，１Ｈ），３．３７−３．５１（ｍ，２Ｈ），３．７１−３．８９（ｍ，２H），４．５６−４．５８（ｍ，１H）
【０２３６】
テトラエチル−５−ヒドロキシペンチレン−１，１−ビスホスホン酸塩（２２）：粗化合物２１を２０mlのメタノールに溶解し、７４．６mg（０．３８６３mmol）のｐ−トルエンスルホン酸一水和物を添加した。室温で一晩攪拌した後、混合物を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィを用いて１５：１、８：１、それから６：１の酢酸エチル／メタノールで傾斜溶離を行なうと、無色の油（３．１ｇ，２工程で４１％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．２４−１．３６（ｍ，１２Ｈ），１．５５−１．７２（ｍ，４H），１．８９−２．０３（ｍ，２H），２．１６（ｂｓ，１Ｈ），２．２９（ｔｔ，Ｊ＝６．１，２４．３，１Ｈ），３．６６（ｂｓ，２Ｈ），４．１１−４．２２（ｍ，８Ｈ）
【０２３７】
テトラエチル−５−ヨードペンチレン−１，１−ビスホスホン酸塩（２３）：アルコール２２（１．４１９ｇ，３．９３８mmol）、トリフェニルホスフィン（１．２５ｇ，４．７１８mmol）およびイミダゾール（３２５．６mg，４．７３５mmol）を１５mlの乾燥アセトトリルに溶解し、１．１９６ｇ（４．７０３mmol）のI２を数度に分けて添加した。室温で一晩攪拌した後、溶媒を真空除去し、残渣を酢酸エチルおよび飽和Na２S２O３水溶液に加えた。有機層が淡黄色になり二相が分離するまで、混合物を攪拌した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。溶離剤として１５：１酢酸エチル／メタノールを用い、シリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィにて精製すると、生成物２３が黄色い油として得られた（１．２６ｇ，６８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３６（ｔ，Ｊ＝７．０，１２Ｈ），１．６６−１．７２（ｍ，２Ｈ），１．８１−１．９９（ｍ，４H），２．３５（ｔｔ，Ｊ＝５．９，２４．１，１Ｈ），３．２０（ｔ，Ｊ＝６．９，２Ｈ），４．１７−４．２３（ｍ，８Ｈ）
【０２３８】
スキーム８
モキシフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体２５
【化８２】
2008536911.tif 000071
【０２３９】
５，５−ビス（ジエチルホスホノ）フェニル−７−（（４aS,７aS）−１−（tert−ブトキシカルボニル）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン―３−カルボン酸塩（２４）：１５mlの無水DMF中に化合物１２（４６４．７mg，０．９２６５mmol）、ヨードビスホスホン酸塩２３（４３５．５mg，０．９２６２mmol）および炭酸カリウム（１２９．３mg，０．９３５５mmol）を含む混合物を摂氏６５度で２日間加熱した。室温に冷却後、反応物を水で希釈し、酢酸エチル（３ｘ）で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。シリカゲルを使い、１５：１、８：１、それから５：１の酢酸エチル／メタノールの傾斜溶離で、フラッシュクロマトグラフィにて精製すると、４２５．６mg（５４％）の生成物２４が黄色の泡状物として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．７２−０．８０（ｍ，１Ｈ），１．００−１．０８（ｍ，２H），１．２４−１．３６（ｍ，１３Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ），１．６３−１．８１（ｍ，８Ｈ），１．９２−２．０４（ｍ，２Ｈ），２．２０−２．２８（ｍ，１Ｈ），２．３６（ｔｔ，Ｊ＝５．８，２４．１，１Ｈ），２．８２−２．９２（ｍ，１Ｈ），３．１６−３．２４（ｍ，１Ｈ），３．３０−３．３８（ｍ，１Ｈ），３．５６（ｓ，３Ｈ），３．８０−３．８５（ｍ，１Ｈ），３．８９−３．９４（ｍ，１Ｈ），４．０１−４．０８（ｍ，２Ｈ），４．１２−４．２１（ｍ，８Ｈ），４．２９−４．３６（ｍ，２Ｈ），４．７７（ｂｓ，１Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝１４．４，１Ｈ），８．５５（ｓ，１Ｈ）
【０２４０】
５，５−ビスホスホノペンチル−７−（（４aS,７aS）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン―３−カルボン酸塩（２５）：化合物２４のCH２Cｌ２（１５ml）溶液に０．６１ml（４．５２９mmol）のブロモトリメチルシランを添加した。混合物を室温で一晩攪拌してから濃縮した。残渣を少なくとも３０分間高真空下に置き、それから水に溶解した。その結果得られた溶液を１N水酸化ナトリウム水溶液でｐH７．４にし、溶媒を除去した。固形物を二度水に溶解し、溶媒を除いた。このようにして得られた固形物はWaters（登録商標）C18 Sep-Pak（登録商標）カートリッジ（２０cc）に移し、水、１０：１それから５：１の水／メタノールで傾斜溶離すると、生成物２５がオフホワイトの固体として得られた（２１１mg，７０％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．７８−０．８４（ｍ，１Ｈ），０．９７−１．１０（ｍ，２H），１．１７−１．２４（ｍ，１Ｈ），１．６２−２．００（ｍ，１１Ｈ），２．８１（ｂｓ，１Ｈ），３．０４−３．１０（ｍ，１Ｈ），３．３９−３．４３（ｍ，１Ｈ），３．５４（ｓ，３Ｈ），３．６３−３．６８（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｄｔ，Ｊ＝３．３，９．６，１Ｈ），３．９２−３．９４（ｍ，１Ｈ），４．０５−４．０８（ｍ，２Ｈ），４．２５−４．２８（ｍ，２Ｈ），７．４７（ｄ，Ｊ＝１４．１，１Ｈ），８．７６（ｓ，１Ｈ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ２１．４５；１９F  ＮＭＲ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ１２１．６４（ｄ，Ｊ＝１３．８）；ＭＳ（ｍ／ｅ）：６３０（Ｍ−Ｈ）
【０２４１】
５，５−ビス（ジエチルホスホノ）フェニル−７−（（４aS,７aS）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン―３−カルボン酸塩、トリフルオロ酢酸塩（２６）：化合物２３（９０．７mg，０．１０７５mmol）のCH２Cｌ２（３ml）溶液に、トリフルオロ酢酸（０．５ml）を添加した。反応混合物は室温で１時間攪拌し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液でクエンチし、水の層をCH２Cｌ２（２ｘ）で抽出した。有機相は一緒にして、１Nの水酸化ナトリウム溶液（１ｘ）および水（２ｘ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。半分取HPLCにより、純粋な生成物２６が粘着性のある油として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．７９−０．８３（ｍ，１Ｈ），１．００−１．０７（ｍ，２H），１．１６−１．２０（ｍ，１Ｈ），１．３３（ｔ，Ｊ＝７．２，１２Ｈ），１．７１−１．８４（ｍ，８Ｈ），１．９３−２．０１（ｍ，２Ｈ），２．２２−２．３６（ｍ，２Ｈ），２．６９−２．７４（ｍ，１Ｈ），３．０５−３．０８（ｍ，１Ｈ），３．３１−３．３４（ｍ，１Ｈ），３．３８−３．４４（ｍ，２Ｈ），３．５５（ｓ，３Ｈ），３．８６−３．９７（ｍ，３Ｈ），４．１３−４．２２（ｍ，８Ｈ），４．３０（ｄｔ，Ｊ＝２．７，６．９，２Ｈ），７．７７（ｄ，Ｊ＝１４．３，１Ｈ），８．５０（ｓ，１Ｈ）；１９F  ＮＭＲ（３７６ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ−１２３．６１，−７５．８０
【０２４２】
スキーム９
ガチフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体２８
【化８３】
2008536911.tif 000072
【０２４３】
５，５−ビス（ジエチルホスホノ）ペンチル−７−（４−（tert−ブトキシカルボニル）−３−メチルピペラジン−１−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（２７）：１５mlの無水DMFに入った１６（４８６mg，１．０２２mmol）、ヨードビスホスホン酸塩２３（４８１．４mg，１．０２４mmol）および炭酸カリウム（１４４．３mg，１．０４４mmol）の混合物を摂氏６５度で２日間攪拌した。室温に冷却した後、反応物を水で希釈し、酢酸エチル（３ｘ）で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。シリカゲルを使い、１２：１、１０：１、８：１それから６：１の酢酸エチル／メタノールの傾斜溶離で、フラッシュクロマトグラフィにて精製すると、４５５．３mg（５４％）の生成物２７が茶色の油として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．８８−０．９６（ｍ，２Ｈ），１．１０−１．１７（ｍ，２H），１．３２−１．４０（ｍ，１５Ｈ），１．５０（ｓ，９Ｈ），１．６７−１．８２（ｍ，４Ｈ），１．９３−２．０５（ｍ，２Ｈ），２．３０（ｔｔ，Ｊ＝６．１，２４．１，１Ｈ），３．１８−３．４５（ｍ，５Ｈ），３．７２（ｓ，３Ｈ），３．８６−３．９６（ｍ，２Ｈ），４．１４−４．２２（ｍ，８Ｈ），４．２９−４．３８（ｍ，３Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝１２．３，１Ｈ），８．５６（ｓ，１Ｈ）
【０２４４】
５，５−ビスホスホノペンチル−７−（３−メチルピペリジン−１−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（２８）：化合物２７（４７９．４mg，０．５８６２mmol）のCH２Cｌ２（５ml）溶液に、０．７９ml（５．８６６mmol）のブロモトリメチルシランを添加した。混合物を室温で一晩攪拌してから濃縮した。残渣は少なくとも３０分高真空下に保ち、それから水に溶解した。その結果得られた溶液は１Nの水酸化ナトリウム水溶液でｐH７．１とし、溶媒は除去した。固形物は水に二度溶解し、溶媒は真空下で除去した。このようにして得られた固形物は、Waters（登録商標）C18 Sep-Pak（登録商標）カートリッジ（２０cc）に移し、水、２：１それから１：２の水／メタノール、次にメタノールで傾斜溶離すると、生成物２８がオフホワイトの固体として得られた（２０３mg，５０％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．９６−１．０２（ｍ，２Ｈ），１．１４−１．２０（ｍ，２H），１．３５（ｄ，Ｊ＝６．５，３Ｈ），１．６４−１．７１（ｍ，２Ｈ），１．７７−１．９２（ｍ，５Ｈ），３．２６−３．３８（ｍ，２Ｈ），３．４３−３．６６（ｍ，５Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），４．０９−４．１５（ｍ，１Ｈ），４．３１（ｔ，Ｊ＝６．９，２Ｈ），７．６６（ｄ，Ｊ＝１２．３，１Ｈ），８．８３（ｓ，１Ｈ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ２１．２４；１９F  ＮＭＲ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ１２１．８６（ｄ，Ｊ＝１２．６）；ＭＳ（ｍ／ｅ）：６０４（Ｍ−Ｈ）
【０２４５】
スキーム１０
４−［（テトラエチルビスホスホノメチル）カルバモイル］ブタン酸（３１）および３−［テトラエチル−ビスホスホノメチル］カルバモイル］プロパン酸（３２）の合成
【化８４】
2008536911.tif 000073
【０２４６】
テトラエチル−N,N−ジベンジル−１−アミノメチレンビスホスホン酸塩（２９）：化合物２９は、Ｓｙｎｔｈ．  Ｃｏｍｍ．  １９９６，２６，２０３７−２０４３に記載の手順の変形方法に従って調製した。オルトギ酸トリエチル（８．８９ｇ，６０mmol）、亜リン酸ジエチル（１６．５７ｇ，１２０mmol）およびジベンジルアミン（１１．８０ｇ，６０mmol）を蒸留ヘッド付き１００ml丸底フラスコに入れ、アルゴン下、摂氏１８０−１９５度で１時間加熱した。エタノールの放出が完了したら、反応混合物を室温まで冷却し、CHCl３（３００ml）で希釈し、水性NaOH（２M，３ｘ６０ml）および塩水（２ｘ７５ml）で洗浄し、MgSO４で乾燥した。蒸発後、２５．２ｇ（８７％）の粗油が得られた。粗油をクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン：メタノール＝１４：４：１）で精製すると、純粋な２９（２．３６g，４１％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３２（ｄｔ，Ｊ＝２．０，７．０，１２Ｈ），３．５５（ｔ，Ｊ＝２５．０，１Ｈ），３．９５−４．２５（ｍ，１２Ｈ），７．２０−７．４５（ｍ，１０Ｈ）
【０２４７】
テトラエチル−１−アミノメチレンビスホスホン酸塩（３０）：化合物２９（２．００ｇ，４．１４mmol）をエタノール（４０ml）に溶解した。この溶液にパラジウム担持炭素（１０％，１．５ｇ）およびシクロヘキサン（２．５ml，２４．７mmol）を添加した。反応混合物をアルゴン下で１５時間還流し、セライトで濾過し、蒸発すると、不純物をわずかに含む淡黄色の油である３０が得られた（１．５０ｇ，１１９％）。この油はこれ以上精製せず、直接次の工程で使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３５（ｔ，Ｊ＝７．０，１２Ｈ），３．５８（ｔ，Ｊ＝２０．３，１Ｈ），３．６５−３．９０（ｂｒｓ，２Ｈ），４．２０−４．２８（ｍ，８Ｈ）
【０２４８】
４−［（テトラエチルビスホスホノメチル）カルバモイル］ブタン酸（３１）：化合物３１は、Ｊ．  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ，１９９７，５，１２９−１３８に記載の方法で調製した。３０から粗収率８５％でオレンジ色の油として得られた。粗生成物をクロマトグラフィ（１０％AcOH／EtOAc）で精製すると、白色の固体が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３０（ｔ，Ｊ＝７．０，６Ｈ），１．３４（ｔ，Ｊ＝７．０，６Ｈ），１．９２−２．２０（ｍ，２Ｈ），２．３８−２．４４（ｍ，２Ｈ），２．５４（ｔ，Ｊ＝７．３，１Ｈ），４．０４−４．２８（ｍ，８Ｈ），５．１６（ｔｄ，Ｊ＝２２．１，Ｊ＝１０．０，１Ｈ），８．４５（ｄ，Ｊ＝１０．２，１Ｈ）
【０２４９】
４−［（テトラエチルビスホスホノメチル）カルバモイル］プロパン酸（３２）：化合物３２は、Ｊ．  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ，１９９７，５，１２９−１３８に記載の方法で調製した。油として得られ、徐々に固体化し、３０からの粗収率は５７％であった。粗生成物をクロマトグラフィ（１０％AcOH／EtOAc）で精製すると、白色の固体が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３１（ｔ，Ｊ＝７．０，６Ｈ），１．３３（ｔ，Ｊ＝７．１，６Ｈ），２．６１−２．７３（ｍ，４Ｈ），４．０５−４．２８（ｍ，８Ｈ），５．０７（ｔｄ，Ｊ＝２１．６，Ｊ＝９．８，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝９．４，１Ｈ）
【０２５０】
スキーム１１
モキシフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体３６の調製
【化８５】
2008536911.tif 000074
【０２５１】
４−［（テトラエチルビスホスホノメチル）カルバモイル］ブタン酸のナトリウム塩（３３）：カルボン酸３１（３００．２mg，０．７１９３mmol）を２mlのTHFに溶解し、１Nの水酸化ナトリウム水溶液０．７２ml（０．７２mmol）を添加した。混合物は室温で４時間攪拌し、有機溶媒を除去した。残留水は一晩高真空下に置くことにより、あるいは凍結乾燥により除去した。その結果得られた固形物は、直接次の工程で使用した。
【０２５２】
７−（（４aS,７aS）−１−（（１−クロロエトキシ）カルボニル）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（３４）：モキシフロキサシン３（９９４．５mg，２．４７７mmol）の溶液およびクロロホルム２５ml中の５４７．９mg（２．５５７mmol）のプロトンスポンジに、クロロギ酸１−クロロエチル（０．２７ml，２．４７８mmol）を添加した。透明な黄色の溶液を室温で５時間攪拌し、水（３ｘ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を除去すると、黄色い泡状の生成物３４が得られた（１．２２８ｇ，９８％）。水で洗浄後もプロトンスポンジが残っている場合は、粗生成物は溶離剤ジクロロメタン／メタノール（１９：１）を用いて短いシリカゲルカラムを通過させた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．７８−０．８６（ｍ，１Ｈ），１．０３−１．１７（ｍ，２Ｈ），１．２５−１．３５（ｍ，１Ｈ），１．４７−１．６４（ｍ，１Ｈ），１．７８−１．９０（ｍ，５Ｈ），２．３２（ｂｓ，１Ｈ），２．９５−３．０５（ｍ，１Ｈ），３．２４−３．６４（ｍ，２Ｈ），３．５８（ｓ，３Ｈ），３．８６−４．０３（ｍ，２Ｈ），４．０４−４．２２（ｍ，２Ｈ），４．７０−４．９８（ｍ，１Ｈ），６．６３（ｑ，Ｊ＝５．９，１Ｈ），７．８２（ｄｄ，Ｊ＝１．６，１３．７，１Ｈ），８．７９（ｓ，１Ｈ）
【０２５３】
混合アセタール３５：無水アセトニトリル７ml中の３４（７４１．４mg，１．４６０mmol）および３３（１．４５４mmol）の混合物を摂氏６０度の油浴で二日間加熱した。室温まで冷却した後、反応混合物をセライトのパッドで濾過した。濾液を濃縮し、Waters（登録商標）C18 Sep-Pak（登録商標）カートリッジ（３５cc）に移し、水、２：１それから１：２の水／メタノール、次にメタノールで傾斜溶離を行なった。純粋な生成物が茶色いガラス状の固体として得られた（５５６．３mg，４３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．７８−０．８６（ｍ，１Ｈ），１．０４−１．２０（ｍ，２Ｈ），１．２８−１．３６（ｍ，１２Ｈ），１．４６−１．６４（ｍ，４Ｈ），１．７４−２．０３（ｍ，５Ｈ），２．２６−２．４４（ｍ，４Ｈ），２．９０−３．０２（ｍ，１Ｈ），３．２２−３．５０（ｍ，３Ｈ），３．５８（ｓ，３Ｈ），３．８４−４．０３（ｍ，３Ｈ），４．０３−４．２８（ｍ，８Ｈ），４．６４−４．９４（ｂｓ，１Ｈ），５．０２（ｄｔ，Ｊ＝１０．０，２１．９，１Ｈ），６．１５（ｄ，Ｊ＝１０．２，１Ｈ），６．８４（ｑ，Ｊ＝４．７，１Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝１３．９，１Ｈ），８．７９（ｓ，１Ｈ）
【０２５４】
混合アセタール３６：テトラエステル３５（５５６mg，０．６２５６mmol）のCH２Cｌ２（５ml）溶液に、０．８３ml（６．２８９mmol）のブロモトリメチルシランを添加した。室温で６時間攪拌した後、混合物を濃縮し、残渣を少なくとも３０分間高真空下に保った。その結果得られた物質は、希釈した水酸化ナトリウム溶液に溶解し（NaOH２当量以下；これはかなり時間がかかる工程で、溶液を維持するには時々超音波処理が必要であった）、それから１Nの水酸化ナトリウム溶液でｐH７．２０に慎重に調整した。このようにして得た水溶液はWaters（登録商標）C18 Sep-Pak（登録商標）カートリッジ（２０cc）に移し、水それから１０：１の水／メタノールで傾斜溶離を行なった。目的の生成物を含む画分は直ちに一つにし、アセトン／ドライアイス冷浴で凍結させた。溶媒は凍結乾燥で除去し、得られた物質をCH２Cｌ２で洗浄すると、９０mg（１８％）の生成物３６がオフホワイトの粉末として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．７５−０．８３（ｍ，１Ｈ），０．９６−１．０４（ｍ，１Ｈ），１．０４−１．１３（ｍ，１Ｈ），１．１８−１．２７（ｍ，１Ｈ），１．４６−１．６０（ｍ，２Ｈ），１．５２（ｄ，Ｊ＝５．５，３Ｈ），１．７３−１．８６（ｍ，２Ｈ），１．９３（クイント，Ｊ＝７．６，２Ｈ），２．２８−２．４０（ｍ，１Ｈ），２．３８（ｔ，Ｊ＝７．１，２Ｈ），２．４９（ｔ，Ｊ＝７．２，２Ｈ），２．９８−３．１２（ｍ，１Ｈ），３．３０（ｄ，Ｊ＝９．４，１Ｈ），３．４３−３．５３（ｍ，１Ｈ），３．５９（ｓ，３Ｈ），３．９０−４．１０（ｍ，４Ｈ），４．２４（ｔ，Ｊ＝１９．４，１Ｈ），６．７７（ｑ，Ｊ＝５．５，１Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝１４．５，１Ｈ），８．４６（ｓ，１Ｈ）ppm；３１Ｐ  ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ１４．２３ppm；１９Ｆ  ＮＭＲ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ−１２３．５２（ｂｓ）ppm；ＭＳ（ｍ／ｅ）：７７７（Ｍ＋Ｈ）
【０２５５】
スキーム１２
ガチフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体３９の調製
【化８６】
2008536911.tif 000075
【０２５６】
７−（４−（（１−クロロエトキシ）カルボニル）−３メチルピペラジン−１−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（３７）：ガチフロキサシン１５（２８２．８mg，０．７５３３mmol）の溶液およびクロロホルム１０ml中のプロトンスポンジ（１６６．６mg，０．７７３mmol）に、クロロギ酸１−クロロエチル（８２マイクロリットル，０．７５２５mmol）を添加した。白色の懸濁液が急速に透明になった後、さらに２時間室温で攪拌した。混合物を水（３ｘ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を除去すると、黄色い固体の生成物３７が得られた（３５６．５mg，９８％）。水で洗浄後もプロトンスポンジが残っている場合は、粗生成物は溶離剤ジクロロメタン／メタノール（１９：１）を用いて短いシリカゲルカラムを通過させた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．９４−１．０４（ｍ，２Ｈ），１．２１−１．２６（ｍ，２Ｈ），１．４０（ｄ，Ｊ＝７．１，３Ｈ），１．８５（ｄ，Ｊ＝５．９，３Ｈ），３．３１−３．３４（ｍ，２Ｈ），３．４１−３．５３（ｍ，４Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ）、３．９８−４．０７（ｍ，２Ｈ），４．４５（ｂｓ，１Ｈ），６．６５（ｄｑ，Ｊ＝１．８，５．７，１Ｈ），７．９２（ｄ，Ｊ＝１２．０，１Ｈ），８．８４（ｓ，１Ｈ）
【０２５７】
混合アセタール３８：無水アセトニトリル５ml中の３７（３２４．１mg，０．６７２５mmol）およびカルボン酸ナトリウム３３（０．７１９３mmol）の混合物を摂氏６０度の油浴で二日間加熱した。室温まで冷却した後、反応混合物をセライトのパッドで濾過した。濾液を濃縮し、Waters（登録商標）C18 Sep-Pak（登録商標）カートリッジ（２０cc）に移し、水、２：１それから１：２の水／メタノール、次にメタノールで傾斜溶離を行なった。純粋な生成物が茶色い粘着性の油として得られた（２４７．６mg，４３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．９６−１．０４（ｍ，２Ｈ），１．１６−１．２９（ｍ，２Ｈ），１．３４（ｔ，Ｊ＝７．１，１２Ｈ），１．５２（ｄ，Ｊ＝５．５，３Ｈ），１．６９（ｂｓ，３Ｈ），１．９９（クイント，Ｊ＝７．０，２Ｈ），２．３５（ｔ，Ｊ＝７．２，２Ｈ），２．４２（ｔ，Ｊ＝７．２，２Ｈ），３．２２−３．５３（ｍ，５Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ），３．９８−４．０４（ｍ，２Ｈ），４．１４−４．２４（ｍ，８Ｈ），４．３６−４．４４（ｍ，１Ｈ），５．０３（ｄｔ．Ｊ＝１０．２，２１．７，１Ｈ），６．１８−６．２１（ｍ，１Ｈ），６．８６（ｑ，Ｊ＝５．５，１Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝１２．１，１Ｈ），８．８３（ｓ，１Ｈ）
【０２５８】
混合アセタール３９：テトラエステル３８（２４７．１mg，０．２８６４mmol）のCH２Cｌ２（６ml）溶液に、０．４０ml（３．０３１mmol）のブロモトリメチルシランを添加した。室温で一晩攪拌した後、溶媒を除去し、残渣を少なくとも３０分間高真空下に保った。その結果得られた物質は、希釈した水酸化ナトリウム溶液に溶解し（NaOH２当量以下；これはかなり時間がかかる工程で、溶液を維持するには時々超音波処理が必要であった）、それから１Nの水酸化ナトリウム溶液でｐH７．２５に慎重に調整した。このようにして得た水溶液はWaters（登録商標）C18 Sep-Pak（登録商標）カートリッジ（２０cc）に移し、水それから１０：１の水／メタノールで傾斜溶離を行なった。目的の生成物を含む画分は直ちに一つにし、アセトン／ドライアイス冷浴で凍結させた。溶媒は凍結乾燥で除去し、得られた物質をジクロロメタンで洗浄すると、６５mg（３０％）の生成物３９がオフホワイトの粉末として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．８９−１．００（ｍ，２Ｈ），１．０８−１．１７（ｍ，２Ｈ），１．３７（ｔ，Ｊ＝７．２，３Ｈ），１．５３（ｄ，Ｊ＝５．５，３Ｈ），１．９３（クイント，Ｊ＝７．２，２Ｈ），２．３８（ｔ，Ｊ＝７．６，２Ｈ），２．５０（ｔ，Ｊ＝７．０，２Ｈ），３．２４−３．３４（ｍ，２Ｈ），３．４２−３．５０（ｍ，３Ｈ），３．７５（ｓ，３Ｈ）３．９３（ｂｓ，１Ｈ），４．０６−４．１２（ｍ，１Ｈ），４．２２（ｔ，Ｊ＝１９．０，１Ｈ），４．３４（ｂｓ，１Ｈ），６．７９（ｑ，Ｊ＝５．５，１Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝１２．７，１Ｈ），８．５１（ｓ，１Ｈ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ１４．２７；１９Ｆ  ＮＭＲ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ−１２２．３２（ｂｓ）；ＭＳ（ｍ／ｅ）：７５１（Ｍ＋Ｈ）
【０２５９】
スキーム１３
ガチフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体４４の調製
【化８７】
2008536911.tif 000076
【０２６０】
テトライソプロピル‐５‐（２‐テトラヒドロ‐２H‐ピラニルオキシ）‐ペンチレン‐１，１‐ビスホスホン酸塩（４０）：水素化ナトリウム（６０％，３４２．５mg，８．５６３mmol）のTHF（１５ml）懸濁液にテトライソプロピルメチレンビスホスホン酸塩（２．８０ml，８．６１mmol）を添加し、その結果得られた淡黄色の透明な液体を室温で３０分攪拌した。次に純粋な化合物２０（２．０１９４ｇ，８．５１６mmol）をピペットを用いて添加し、５mlのTHFで洗浄した。反応物は８時間還流し、室温まで冷却してから飽和NH４Clでクエンチした。混合物は酢酸エチル（３ｘ）で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥し、真空下で濃縮した。溶離剤として１０：１のEtOAc:MeOHを用いてフラッシュクロマトグラフィを行なうと、７６０mgの未反応出発物質２０が回収された。目的の生成物４０はもう一つ未反応出発物質であるテトライソプロピルメチレンビスホスホン酸塩から分離不可能であった。混合物は直接次の工程で使用した。選択１Ｈ  ＮＭＲシグナル（４００ＭＨｚ，ＣＤＣＬ３）：デルタ１．４８−２．０２（ｍ，１２Ｈ），２．１４（ｔｔ，Ｊ＝２４．２，５．９，１Ｈ），３．３６−３．４２（ｍ，１Ｈ），３．４６−３．５２（ｍ，１Ｈ），３．７１−３．７７（ｍ，１Ｈ），３．８３−３．８９（ｍ，１Ｈ），４．５７−４．５８（ｍ，１Ｈ）
【０２６１】
テトライソプロピル‐５‐ヒドロキシペンチレン‐１，１‐ビスホスホン酸塩（４１）：前工程のフラッシュクロマトグラフィで得た混合物を４mlのMeOHに溶解し、２４．５mg（０．１２７mmol）のｐ‐トルエンスルホン酸一水和物を添加した。室温で一晩攪拌後、混合物を濃縮し、溶離剤として１２：１のEtOAc／MeOHを用いてフラッシュクロマトグラフィで精製すると、４１が無色の油として得られた（１２．５ｇ，２工程で５０%）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３３−１．３６（ｍ，２４Ｈ），１．５４−１．６１（ｍ，２Ｈ），１．６５−１．７２（ｍ，２Ｈ），１．８４−１．９８（ｍ，２Ｈ），２．１５（ｔｔ，Ｊ＝２４．１，６．１，１Ｈ），２．２８（ｔ，Ｊ＝５．７，１Ｈ），３．６６（ｑ，Ｊ＝６．１，２Ｈ），４．７２−４．８２（ｍ，４Ｈ）
【０２６２】
テトライソプロピル‐５‐カルボキシペンチレン‐１，１‐ビスホスホン酸塩（４２）：化合物４１（３６５．５mg、０．９０８３mmol）および二クロム酸ピリジニウム（１．２２ｇ，３．１８mmol）を３mlのN.N-ジメチルホルムアミドに溶解し、室温で一晩攪拌した。反応が完了したことをTLCで確認した後、混合物を水で希釈し、EtOAc（３ｘ）で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥し、真空下で濃縮した。１９：１のEtOAc／酢酸を用い、シリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィを行なうと、４２が無色の油として得られた（２４６．８mg，６５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．２９−１．３５（ｍ，２４Ｈ），１．９０−１．９９（ｍ，４Ｈ），２．１８（ｔｔ，Ｊ＝２４．４，５．５，１Ｈ），２．３４（ｔ，Ｊ＝６．８，２Ｈ），４．７３−４．８２（ｍ，４Ｈ）
【０２６３】
混合アセタール４３：テトライソプロピルビスホスホネートカルボン酸４２（２７７．４mg，０．６４４５mmol）のTHF溶液（２ml）に１Nの水酸化ナトリウム水溶液を０．６５ml（０．６５mmol）添加した。室温で４時間攪拌した後、溶媒を除去した。その結果得られた固形物の２４４mg（０．５３９４mmol）およびガチフロキサシン誘導体３７（２３９．６mg，０．４９７２mmol）の混合物を４mlの無水アセトニトリルに入れ、摂氏６０度の油浴で一晩加熱した。室温まで冷却した後、混合物をセライトのパッドで濾過した。濾液は濃縮し、Waters（登録商標）C18 Sep-Pak（登録商標）カートリッジ（２０cc）に移し、水、２：１それから１：２の水／メタノール、次にメタノールで傾斜溶離した。溶媒を除去すると、生成物４３が粘着性の黄色い油として得られた（３２２mg，７４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．８８−１．０４（ｍ，２Ｈ），１．１４−１．２５（ｍ，２Ｈ），１．２８−１．４２（ｍ，２４Ｈ），１．５１（ｄ，Ｊ＝５．５．３Ｈ），１．６１（ｂｓ，３Ｈ），１．８６−２．００（ｍ，４Ｈ），２．１３（ｔｔ，Ｊ＝４．７，２４．３，１Ｈ），２．３５（ｔ，Ｊ＝６．０，２Ｈ），３．２２−３．５３（ｍ，５Ｈ），３．７３（ｓ，３Ｈ），３．９６−４．０４（ｍ，２Ｈ），４．３４−４．４４（ｍ，１Ｈ），４．７８（セプテット，Ｊ＝６．１，１Ｈ），６．８６（ｑ，Ｊ＝５．３，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝１２．２，１Ｈ），８．８３（ｓ，１Ｈ）
【０２６４】
混合アセタール４４：CH２Cｌ２６ml中のテトライソプロピルエステル４３（３１９．７mg，０．３６５０mmol）の溶液に、２．４０ml（１８．１８mmol）のブロモトリメチルシランを添加した。室温で一晩攪拌した後、溶媒を除去し、残渣を少なくとも３０分間高真空下に保持した。その結果得られた物質を水酸化ナトリウムの希釈溶液に溶解し（NaOH２当量以下；これはかなり時間がかかる工程で、溶液を維持するには時々超音波処理が必要であった）、それから１Nの水酸化ナトリウム溶液でｐH７．４７に慎重に調整した。このようにして得た水溶液はWaters（登録商標）C18 Sep-Pak（登録商標）カートリッジ（２０cc）に移し、水それから１０：１の水／メタノールで傾斜溶離を行なった。目的の生成物を含む画分は直ちに一つにし、アセトン／ドライアイス冷浴で凍結させた。溶媒は凍結乾燥で除去し、得られた物質をジクロロメタンで洗浄すると、９３mg（３０％）の生成物４４がオフホワイトの粉末として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．８８−１．０２（ｍ，２Ｈ），１．０７−１．２０（ｍ，２Ｈ），１．３７（ｔ，Ｊ＝７．３，３Ｈ），１．５５（ｄ，Ｊ＝５．５，３Ｈ），１．７２−１．８５（ｍ，５Ｈ），２．４８（ｔ，Ｊ＝６．４，２Ｈ），３．２５−３．３４（ｍ，２Ｈ），３．４３−３．５２（ｍ，４Ｈ），３．７５（ｓ，３Ｈ），３．９３（ｂｓ，１Ｈ），４．１０（セプテット，Ｊ＝３．５，１Ｈ），４．３６（ｂｓ，１Ｈ），６．８０（ｄｑ，Ｊ＝０．８，５．５，１Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝１２．７，１Ｈ），８．５２（ｓ，１Ｈ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ２０．８７；１９Ｆ  ＮＭＲ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ−１２２．３２（ｂｓ）；ＭＳ（ｍ／ｅ）：７０８（Ｍ＋Ｈ）
【０２６５】
スキーム１４
ガチフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体４９の調製
【化８８】
2008536911.tif 000077
【０２６６】
テトラエチル‐３‐（ｔ‐ブトキシカルボニル）プロピレン‐１，１‐ビスホスホン酸塩（４５）：テトラメチレンビスホスホン酸塩（１０．０ｇ，３４．７mmol）のベンゼン（５６ml）溶液にアクリル酸ｔ−ブチル（５．５４ml，３８．２mmol）、K２CO３（４．７９ｇ，３４．７mmol）およびベンジルトリエチルアンモニウムクロライド（０．７９ｇ，３．５mmol）を添加した。混合物を攪拌しながら１８時間還流した。その後濾過し、濾液を濃縮した。０−１０％のMeOH／EtOAc傾斜溶離を用い、フラッシュクロマトグラフィにてシリカゲル上で精製すると、化合物４５が無色の油として得られた（３．８ｇ，２６％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３４（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１２Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ），２．１１−２．２５（ｍ，２Ｈ），２．４８（ｔ，Ｊ＝２３．９，６．５Ｈｚ，１Ｈ），２，５６（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ），４．１３−４．２２（ｍ，８Ｈ）
【０２６７】
テトラエチル‐３‐カルボキシプロピレン‐１，１‐ビスホスホン酸塩（４６）：ｔ−ブチルエステル４５（４．３ｇ，１０．３mmol）をTFA（８．６ml）中で攪拌し、乾燥するまで濃縮した。１０−６０％MeOH／H２Oの傾斜溶離を用い、逆相Biotage 40M C18カラムで精製すると、化合物４６（３．７ｇ，９９％）が無色の油として得られ。それは時間の経過とともに固形化した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３４（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１２Ｈ），２．１８−２．２８（ｍ，２Ｈ），２．６０（ｔｔ，Ｊ＝２３．９，６．５Ｈｚ，１Ｈ），２，６９（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），４．１４−４．２３（ｍ，８Ｈ）
【０２６８】
代替手法
アルコール１０（１２．７ｇ，３６．７mmol）のMeCN（２００ml）溶液およびリン酸緩衝液（２００ml；等量の０．６７M Na２HPO４溶液および０．６７M NaH２PO４溶液を混合して調製）に、摂氏３５度で、触媒量のTEMPO（４３０mg，２．７５mmol）を添加した。摂氏３５度に保持した反応フラスコには二つの添加漏斗を装着した。一つの漏斗にはNaClO２(８．３ｇ，９１．７mmol)のH２O（７５ml）溶液を満たした。もう一方の漏斗には家庭用漂白剤のH２O（７５ml）溶液を満たした。NaClO２溶液の約５分の１を添加し、それから家庭用漂白剤の約５分の１を添加することにより反応を開始させた。残りの溶液は同時に滴加し、滴加が同時に終了するように速度を調節した。反応混合物は摂氏３５度で４時間攪拌し、それから室温で１８時間攪拌した。反応混合物は３００mlのH２Oで希釈し、溶液のｐHを１MのNaOHを加えて８．０に調整した。その結果得られた溶液は摂氏０度に冷却し、それに冷却したNa２SO３（６．１重量％，１８５ml）溶液を徐々に添加した。混合物は摂氏０度で３０分間攪拌し、その後少量のEt２Oを添加した。激しく攪拌した後、混合物を抽出漏斗へ注ぎ、Et２O層を分離・廃棄した。水層は濃塩酸でｐH３．４まで酸性化し、CHCｌ３／i−PrOH混合液（４：１）で三度抽出した。一緒にした有機層をMgSO４で乾燥し、濾過し、乾燥するまで濃縮すると、４６が淡黄色の油として得られた（１２．９ｇ，９８％）。この油はそれ以上精製せずに使用した。この化合物の１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、エステル４５の加水分解で得られた生成物と一致していた。
【０２６９】
７‐（４‐（クロロメトキシカルボニル）‐３‐メチルピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸（４７）：１５（８．６５ｇ，２２．９mmol）およびプロトンスポンジ（４．９０ｇ，２２．９mmol）の無水CH２Cｌ２（１００ml）懸濁液を氷浴で冷却し、クロロホルム酸クロロメチルエステル（２．０３ml，２２．９mmol）を滴加した。その結果得られた混合物を同じ温度で４時間攪拌した。反応混合物をCH２Cｌ２（３００ml）を添加して希釈し、冷却した水性HCｌ（５％）および飽和NaClで洗浄し、それから無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤を濾過した後、有機物を減圧下で除去すると、４７が黄色の固形物として得られた（１０．２ｇ，９５％）。この固形物は精製せずに使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．９４−１．０４（ｍ，２Ｈ），１．１７−１．２７（ｍ，２Ｈ），１．４０（ｄ，Ｊ＝６．７，３Ｈ），３．２８−３．５３（ｍ，５Ｈ），３．７３（ｓ，３Ｈ），３．９８−４．１０（ｍ，２Ｈ），４．４５（ｂｓ，１Ｈ），５．８５（ｍ，２Ｈ），７．９２（ｄ，Ｊ＝１２．３，１Ｈ），８．８３（ｓ，１Ｈ）
【０２７０】
混合アセタール４８：化合物４６（３．７０ｇ，１０．３mmol）をCH３CN（２０ml）に溶解し、KOH水溶液（０．６３４ｇ，１１．３mmol）を添加した。その結果得られた溶液を５分間攪拌し、減圧下で濃縮した。４６のナトリウム塩をDMF（２５ml）に溶解し、４７（２．０９ｇ，４．４７mmol）を添加した。その結果得られた溶液を室温で３時間攪拌し、氷冷したH２O（１５０ml）を加えてクエンチした。生成物をEtOAc（３ｘ１００ml）で抽出し、一つにした有機物を水および塩水で洗浄し、Na２SO４で乾燥した。乾燥剤を濾過した後、有機物を減圧下で除去すると、４８が黄色い固形物として得られた（３．３ｇ，９３％）。この固形物は精製せずに使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．９２−１．０４（ｍ，２Ｈ），１．１７−１．２７（ｍ，２Ｈ），１．３４（ｔ，Ｊ＝６．９，１２Ｈ），１．３９（ｄ，Ｊ＝１０．５，３Ｈ），１．９５（ｂｓ，２Ｈ），２．１９−２．３３（ｍ，２Ｈ），２．４７（ｔｔ，Ｊ＝７．５，３１．１，１Ｈ），２．７７（ｔ，Ｊ＝７．６，２Ｈ），３．２８−３．５２（ｍ，５Ｈ），３．７３（ｓ，３Ｈ），３．９８−４．２３（ｍ，８Ｈ），４．４２（ｂｓ，１Ｈ），５．８７（ｍ，２Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝１１．９，１Ｈ），８．８３（ｓ，１Ｈ）
【０２７１】
混合アセタール４９：粗生成物４８（３．２５ｇ，４．１１mmol）および２，６−ルチジン（９．５３ml，８２．１mmol）のCH２Cｌ２（３０ml）溶液を氷浴で冷却し、TMSBｒ（８．１３ml，６１．６mmol）を滴加した。その結果得られた黄色の溶液を室温まで温めながら２４時間攪拌した。次に溶媒および過剰のルチジンを減圧下で除去した。残渣を再びH２Oに懸濁し、Biotage〔登録商標〕フラッシュクロマトグラフィシステムを用いて、逆相クロマトグラフィ（０％から６０％のCH３CN水溶液）で精製した。CH３CNは減圧下で除去し、水を凍結乾燥で除くと、淡黄色をした４９のモノ‐２，６‐ルチジン塩が得られた（１．５８ｇ，４９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．８８−１．１１（ｍ，２Ｈ），１．２０−１．３１（ｍ，２Ｈ），１．３６（ｄ，Ｊ＝６．９，３Ｈ），２．０４−２．２２（ｍ、３H）,１．７９（ｔ，Ｊ＝７．７，２Ｈ），２．７１（ｓ，６Ｈ），３．２８−３．５５（ｍ，５Ｈ），３．７５（ｓ，３Ｈ），３．９７（ｂｄ，Ｊ＝１２．０，１Ｈ），４．２０−４．２６（ｍ，１Ｈ），４．３８（ｂｓ，１Ｈ），５．８２（ｓ，２Ｈ），７．４１（ｄ，Ｊ＝１２．８，１Ｈ），７．６２（ｄ，Ｊ＝８．２，１Ｈ），８．２６（ｔ，Ｊ＝７．７，２Ｈ），８．８４（ｓ，１Ｈ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ２０．９４（ｓ，１Ｐ）；１９Ｆ  ＮＭＲ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ−１１９．０５（ｄ，Ｊ＝１０．５，１Ｆ）；ＬＣＭＳ−９８．８％（２５４ｎｍ），９８．８％（２２０ｎｍ），９８．９％（３２０ｎｍ）：ＭＳ（ＭＨ＋）６８０．２
【０２７２】
スキーム１５
モキシフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体５２の調製
【化８９】
2008536911.tif 000078
【０２７３】
テトラエチル‐１‐（N‐２‐ブロモアセチルアミノ）メチレンビスホスホン酸塩（５０）：ブロモアセチルブロマイド（０．３５ml，４．０mmol）のCH２Cｌ２（１ml）溶液を、氷浴を用いて冷却攪拌している３０（１．１ｇ，３．６mmol）の溶液およびピリジン（０．５９ml，７．３mmol）のCH２Cｌ２（１０ml）溶液に滴加した。同じ温度で４時間攪拌した後、水を加えて反応物をクエンチした。生成物はCH２Cｌ２で抽出し、一つにした有機物は１０％の水性HCｌおよび塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮した。黄色の粗油をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（CH２Cｌ２中０％から３％のMeOH）で精製すると、５０が無色の固体として得られた（０．５８ｇ，３７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３５（ｔ，Ｊ＝７．２，１２Ｈ），３．９２（ｓ，２Ｈ），４．１２−４．２８（ｍ，８Ｈ），４．９２（ｄｔ，Ｊ＝１０．２，２１．７，１Ｈ），６．９１（ｂｄ，Ｊ＝１０．０，１Ｈ）
【０２７４】
（１，１‐ビス（ジエチルホスホノ）メチルカルバモイル）メチル‐７‐（（４aS,７aS）‐１‐（tert‐ブトキシカルボニル）‐オクタヒドロピロロ［３，４‐ｂ］ピリジン‐６‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸塩（５１）：１２（１．１ｇ，２．１mmol）、５０（０．９０ｇ，２．１mmol）およびCs２CO３（０．７６ｇ，２．３mmol）の溶液を室温で１２時間攪拌した。混合物をH２Oで希釈し、CH２Cｌ２で抽出した。有機物を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮すると、茶色の固形物が得られた。この固形物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（CH２Cｌ２中０％から８％のMeOH）で精製すると、５１がベージュ色の固体として得られた（１．２９ｇ，７２％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．７５−０．８０（ｍ，１Ｈ），０．９９−１．０９（ｍ，２Ｈ），１．２２−１．２９（ｍ，１Ｈ），１．３１−１．３７（ｍ，１２Ｈ），１．４６−１．５１（ｍ，１Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ），１．７５−１．８３（ｍ，３Ｈ），２．２２−２．２７（ｍ，１Ｈ），２．８６−２．９１（ｍ，１Ｈ），３．１９−３，２３（ｍ，１Ｈ），３．３４−３．３８（ｍ、１H）,３．５６（ｓ，３Ｈ），３．８３（ｄｔ，Ｊ＝１．９，１０．０，１Ｈ），３．８７−３．９２（ｍ，１Ｈ），４．０２−４．０９（ｍ，２Ｈ），４．２０−４．３８（ｍ，８Ｈ），４．７３−４．８２（ｂｓ，１Ｈ），４．８３（ｄ，Ｊ＝１５．８，１Ｈ），４．９１（ｄ，Ｊ＝１５．８，１Ｈ），５．２２（ｄｔ，Ｊ＝１０．０，２３．０，１Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝１４．１，１Ｈ），８．４９（ｓ，１Ｈ），９．２４（ｄ，Ｊ＝９．２，１Ｈ）
【０２７５】
（１，１‐ビスホスホノメチルカルバモイル）メチル‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐７‐（（４aS,７aS）‐オクタヒドロピロロ［３，４‐ｂ］ピリジン‐６‐イル）‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸塩（５２）：攪拌している５１（１．２７ｇ，１．５０mmol）のCH２Cｌ２溶液に、TMSBｒ（３．０ml，２３mmol）を添加した。１８時間後、溶媒を減圧下で除去し、黄色の固体を再びH２Oに懸濁し、NaOHを加えてｐHを７．４に調整した。その結果得られた溶液をWaters  C18 Sep-Pak（登録商標）に移し、生成物をH２O（１５０ml）、次に５％MeOH／H２O（５０ml）で溶離すると、５２が黄色い固体として得られた（７４４mg，６９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．７０−０．７８（ｍ，１Ｈ），０．８６−１．００（ｍ，２Ｈ），１．０３−１．１０（ｍ，１Ｈ），１．６７−１．７８（ｍ，４Ｈ），２．６１（ｂｓ，１Ｈ），２．９０−２．９５（ｍ，１H）,３．２３−３．２６（ｍ，１H）,３．４０（ｓ，３Ｈ），３．５１−３．６５（ｍ，３Ｈ），３．７５（ｂｓ，１Ｈ），３．８３−３．８７（ｍ，１Ｈ），３．９２−３．９７（ｍ，１Ｈ），４．１９（ｔ，Ｊ＝１８．０，１Ｈ），４．７４（ｓ，２Ｈ），７．２４（ｄ，Ｊ＝１４．５，１Ｈ），８．７７（ｓ，１Ｈ）；１９Ｆ  ＮＭＲ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ−１２１．７６（ｄ，Ｊ＝１５．４，１Ｆ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ１３．９０（ｓ，２Ｐ）；ＬＣＭＳ：９４．８％（２５４ｎｍ），９５．６％（２２０ｎｍ），９７．０％（３２０ｎｍ）；ＭＳ：（ＭＨ＋）６３３．１
【０２７６】
スキーム１６
ガチフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体５４の調製
【化９０】
2008536911.tif 000079
【０２７７】
（１，１−ビス（ジエチルホスホノ）メチルカルバモイル）メチル‐７‐（４‐（tert‐ブトキシカルボニル）‐３‐メチルピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸塩（５３）：５０と１６の間の結合反応は、５１の合成に関して記載した方法によって、１．３mmolの規模で行なった。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（CH２Cｌ２中０％から５％のMeOH）で精製すると、５３が淡黄色の固体として得られた（０．６７２ｇ，６２％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．９０−０．９５（ｍ，２Ｈ），１．１３−１．１９（ｍ，２Ｈ），１．３２−１．３６（ｍ，１５Ｈ），１．５０（ｓ，９Ｈ），３．１９−３．４６（ｍ，５Ｈ），３．７２（ｓ，３Ｈ），３．８９−３．９７（ｍ，２Ｈ），４．２１−４．３７（ｍ，９Ｈ），４．８７（ｓ，２Ｈ），５．２１（ｄｔ，Ｊ＝９．９，２２．９，１Ｈ），７．８１（ｄ，Ｊ＝１２．４，１Ｈ），８．５３（ｓ，１Ｈ），９．１０（ｄ，Ｊ＝９．９，１Ｈ）；ＬＣＭＳ：９７．８％（２５４ｎｍ），９６．１％（２２０ｎｍ），９８．０％（３２０ｎｍ）；ＭＳ：（ＭＨ＋）８１９．３
【０２７８】
（１，１‐ビスホスホノメチルカルバモイル）メチル‐７‐（３‐メチルピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸塩（５４）：５３の脱保護は、５１に関して記載した方法によって、０．４５mmolの規模で行なった。粗生成物をWaters C18 Sep-Pak（登録商標）カラム（１５０mlのH２O、次に５０mlの５％MeOH／H２O）で精製すると、５４が淡黄色の固体として得られた（２３５mg，７５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ１．０２−１．０６（ｍ，２Ｈ），１．１８−１．２３（ｍ，２Ｈ），１．３８（ｄ，Ｊ＝６．７，３Ｈ），３．３２−３．４３（ｍ，２Ｈ），３．４９−３．６９（ｍ，５Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ）４．１４−４．２０（ｍ，１Ｈ），４．４９（ｔ，Ｊ＝２０．１，１Ｈ），４．９４（ｓ，２Ｈ），７．６８（ｄ，Ｊ＝１２．３，１Ｈ），９．００（ｓ，１Ｈ）；１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ−１１９．２０（ｄ，Ｊ＝１２．０，１Ｆ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ１６．４１（ｓ，２Ｐ）；ＬＣＭＳ：９７．５％（２５４ｎｍ），９７．４％（２２０ｎｍ），９８．４％（３２０ｎｍ）；ＭＳ：（ＭＨ＋）６０７．０
【０２７９】
スキーム１７
シプロフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体５７の調製
【化９１】
2008536911.tif 000080
【０２８０】
７‐（４‐（tert‐ブトキシカルボニル）ピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸（５５）：シプロフロキサシン塩酸塩６（３．９５ｇ．１０．７mmol）、ｄｌ−tert−ブチルジカーボネート（２．４６ｇ，１１．３mmol）およびNaOH（１．２９ｇ，３２．２mmol）のTHF／H２O懸濁液を室温で６時間攪拌した。生成物を濾過して回収すると、無色の固体５５が得られた（３．９３ｇ，７８％）。この固体は精製せずに使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．８９−１．２３（ｍ，２Ｈ），１．３７−１．４３（ｍ，２Ｈ），１．５０（ｓ，９Ｈ），３．２８（ｂｄ，Ｊ＝５．０，４Ｈ），３．５１−３．５６（ｍ，１Ｈ），３．６７（ｂｔ，Ｊ＝５．０，４Ｈ），７．３７（ｄ，Ｊ＝７．３，１Ｈ），８．０５（ｄ，Ｊ＝１３．０，１Ｈ），８．７８（ｓ，１Ｈ）
【０２８１】
（１，１‐ビス（ジエチルホスホノ）メチルカルバモイル）メチル‐７‐（４‐（tert‐ブトキシカルボニル）ピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸塩（５６）：５５（０．４７２ｇ，１．０１mmol）、５０（０．４０８ｇ，０．９６２mmol）およびCs２CO３（０．３４５ｇ，１．０６mmol）の溶液を室温で３時間攪拌した。次に混合物をH２Oで希釈し、EtOAcで抽出した。有機物を塩水で洗浄し、Na２SO４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮すると、茶色の油が得られた。それをシリカゲルクロマトグラフィ（（CH２Cｌ２中０％から７％のMeOH）で精製すると、５６が淡黄色の固形物として得られた（０．７３７ｇ，９０％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．１２−１．１７（ｍ，２Ｈ），１．３１−１．３６（ｍ，１４Ｈ），１．５０（ｓ，９Ｈ），３．２６（ｂｔ，Ｊ＝４．９，４Ｈ），３．４１−３．４７（ｍ，１Ｈ），３．６６（ｂｔ，Ｊ＝４．９，４Ｈ），４．２０−４．３８（ｍ，８Ｈ），４．８８（ｓ，２Ｈ），５．２２（ｄｔ，Ｊ＝１０．３，２２．６，１Ｈ），７．３１（ｄ，Ｊ＝６．９，１Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝１３．３，１Ｈ），８．４９（ｓ，１Ｈ），９．２１（ｄ，Ｊ＝９．８，１Ｈ）；１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）デルタ−１２３．５７（ｄｄ，Ｊ＝７．５，１３．２，１Ｆ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）デルタ１７．３５（ｓ，２Ｐ）
【０２８２】
（１，１‐ビスホスホノメチルカルバモイル）メチル‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐４‐オキソ‐７‐（ピペラジン‐１‐イル）キノリン‐３‐カルボン酸（５７）：５６の脱保護は、５１に関して記載した方法によって、０．９３８mmolの規模で行なった。粗生成物をｐＨを８に調整した後Waters C18 Sep-Pak（登録商標）カラムで精製（１５０mlのH２O、次に５０mlの５％MeOH／H２O）すると、５７が無色の固体として得られた（３５０mg，６６％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ１．１８−１．２２（ｍ，２Ｈ），１．３６−１．４１（ｍ，２Ｈ），３．１５（ｍ，４Ｈ），３．２５（ｍ，４Ｈ），３．５２（ｂｓ，１Ｈ），４．２２（ｔ，Ｊ＝１８．７，１Ｈ），４．７９（ｓ，２Ｈ），７．３６（ｄ，Ｊ＝７．２，１Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝１２．５，１Ｈ），８．８０（ｓ，１Ｈ）；１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ−１２３．７２（ｄｄ，Ｊ＝６．９，１２．０，１Ｆ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ１３．９１（ｓ，２Ｐ）；ＬＣＭＳ：９７．９％（２５４ｎｍ），９７．４％（２２０ｎｍ），９８．２％（２９０ｎｍ）；ＭＳ：（ＭＨ＋）５６３．１
【０２８３】
スキーム１８
ジメチル−２−｛４−［（ブロモアセチル）アミノ］フェニル｝−１−（ジメトキシホスホリル）エチルホスホン酸塩の調製
【化９２】
2008536911.tif 000081
【０２８４】
ジメチル‐１‐（ジメトキシホスホリル）‐２‐（４‐ニトロフェニル）エチルホスホン酸塩（５８a）：攪拌しているテトラメチルメチレンジホスホン酸塩のDMF（４０ml）溶液に水素化ナトリウム（１．０２ｇ，２５．４mmol）を数度に分けて添加した。３０分後、４‐ニトロベンジルブロマイド（５．００ｇ，２３．１mmol）のTHF（５ml）溶液を添加し、その結果生じた混合物を室温で４．５時間攪拌した。反応は飽和NH４CL（２０ml）水溶液を添加してクエンチした。水（１００ml）を加えた後、生成物をEtOAcで抽出し、一緒にした有機物を塩水で洗浄し、MgSO４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィ（EtOAc中０％から１０％のMeOH）で精製すると。５８aが無色の固体として得られた（２．５５ｇ，３０％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ２．６５（ｔｔ，Ｊ＝６．５，２３．８，１Ｈ），３．３１（ｄｔ，Ｊ＝６．５，１６．５，２Ｈ），３．７３（ｄ，Ｊ＝７．０，６Ｈ），３．７５（ｄ，Ｊ＝７．０，６Ｈ），７．４２（ｄ，Ｊ＝８．９，２Ｈ），８．１５（ｄ，Ｊ＝８．９，２Ｈ）
【０２８５】
ジエチル‐１‐（ジエトキシホスホリル）‐２‐（４‐ニトロフェニル）エチルホスホン酸塩（５８ｂ）：テトラメチルメチレンジホスホン酸塩の代わりにテトラメチルエステルを用いて５８aの場合と同様にして調製すると、５８ｂが黄色の油として得られた（収率３４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．２７（ｔ，Ｊ＝５．３，１２Ｈ），２．６２（ｔｔ，Ｊ＝６．５，２３．６，１Ｈ），３．３３（ｄｔ，Ｊ＝６．２，１６．４、２Ｈ），４．１１（ｍ，８Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝８．９，２Ｈ），８．１４（ｄ，Ｊ＝８．９，２Ｈ）：３１Ｐ  ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）デルタ２３．２５６（ｓ，２Ｐ）
【０２８６】
ジメチル‐２‐（４‐アミノフェニル）‐１‐（ジメトキシホスホリル）‐エチルホスホン酸塩（５９a）：５９a（１．０１ｇ，２．７５mmol）およびPtO２（０．０３５ｇ，０．１５mmol）の混合物のEtOH（４０ml，９５％）溶液をPARR装置に入れ、５５p.s.iのH２下で１４時間振盪した。触媒をグラスファイバーの濾紙を用いて濾過し、溶媒を減圧下で除去すると、５９aが淡黄色の固体として得られた（０．９５９ｇ，１０３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ２．６２（ｔｔ，Ｊ＝６．３，２３．９，１Ｈ），３．１２（ｄｔ，Ｊ＝６．３，１６．２，２Ｈ），３．７０（ｄ，Ｊ＝１．９，６Ｈ），３．７３（ｄ，Ｊ＝１．９，６Ｈ），６．６１（ｄ，Ｊ＝８．５，２Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝８．５，２Ｈ）
【０２８７】
ジエチル‐２‐（４‐アミノフェニル）‐１‐（ジエトキシホスホリル）エチルホスホン酸塩（５９ｂ）：５３ｂを出発物質とし、５９aと同様の方法で調製すると、５９ｂが赤色の油として得られた（９６％）。これを精製せずに使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．２７（ｔ，Ｊ＝５．３，１２Ｈ），２．５６（ｔｔ，Ｊ＝６．５，２３．６，１Ｈ），３．１４（ｄｔ，Ｊ＝６．２，１６．４，２Ｈ），３．６３（ｓ，２Ｈ），４．０８（ｍ，８Ｈ），６．５９（ｄ，Ｊ＝８．９，２Ｈ），７．０３（ｄ，Ｊ＝８．９，２Ｈ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）デルタ２４．３５６（ｓ，２Ｐ）
【０２８８】
ジメチル‐２‐｛４‐［（ブロモアセチル）アミノ］フェニル｝‐１‐（ジメトキシホスホリル）エチルホスホン酸塩（６０a）：５９a（０．９５９ｇ，２．８７mmol）およびピリジン（３４９マイクロリットル，４．３１mmol）のCH２Cｌ２溶液を攪拌しながら氷浴で冷却した。ブロモアセチルブロマイド（２５０マイクロリットル，２．８７mmol）のCH２Cｌ２（５ml）溶液を滴加し、その結果得られる混合物をその温度で４時間攪拌した。反応は水を加えてクエンチし、生成物はCH２Cｌ２で抽出した。一緒にした有機層は塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。黄色の粗固形物をシリカゲルクロマトグラフィで精製すると、６０aが無色の固体として得られた（０．８９７ｇ，６７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ２．６５（ｔｔ，Ｊ＝６．２，２４．４，１Ｈ），３．２２（ｄｔ，Ｊ＝６．２，１７．４，２Ｈ），３．７２（ｄ，Ｊ＝３．７，６Ｈ），３．７５（ｄ，Ｊ＝３．７，６Ｈ），４．０１（ｓ，２Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝８．６，２Ｈ），７．４７（ｄ，Ｊ＝８．６，２Ｈ），８．１５（ｂｓ，１Ｈ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）デルタ２６．３３（ｓ，２Ｐ）
【０２８９】
ジエチル‐２‐｛４‐［（ブロモアセチル）アミノ］フェニル｝‐１‐（ジエトキシホスホリル）エチルホスホン酸塩（６０ｂ）：５９ｂを出発物質とし、６０aと同様の方法で調製すると、６０ｂが赤色の油として得られた（８２％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．２７（ｔ，Ｊ＝５．３，１２Ｈ），２．６３（ｔｔ，Ｊ＝６．５，２３．６，１Ｈ），３．２６（ｄｔ，Ｊ＝６．２，２Ｈ），４．１４（ｍ，１０Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝８．９，２Ｈ），７．４９（ｄ，Ｊ＝８．９，２Ｈ），８．２８（ｓ，１Ｈ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）デルタ２３．９６４（ｓ，２Ｐ）
【０２９０】
スキーム１９
モキシフロキサシンビスホスホン酸塩結合体６２の調製
【化９３】
2008536911.tif 000082
【０２９１】
（４‐（２，２‐ビス（ジメチルホスホノ）エチル）フェニルカルバモイル）メチル‐７‐（（４aS,７aS）‐１‐（tert‐ブトキシカルボニル）‐オクタヒドロピロロ［３，４‐ｂ］ピリジン‐６‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸塩（６１）：６０aと１２の間の結合反応は、５１の合成に関して記載した方法によって、０．９７mmolの規模で行なった。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（CH２Cｌ２中０％から８％のMeOH）で精製すると、６１が淡黄色の固体として得られた（０．５６２ｇ，６５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．７３−０．８４（ｍ，１Ｈ），０．９７−１．１１（ｍ，２Ｈ），１．２０−１．２８（ｍ，２Ｈ），１．４１−１．５２（ｍ，１Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），１．７０−１．８５（ｍ，２Ｈ），２．１９−２．２９（ｍ，１Ｈ），２．６７（ｔｔ，Ｊ＝６．３，２３．７，１Ｈ），２．８２−２．９３（ｍ，１Ｈ），３．２０（ｄｔ，Ｊ＝６．２，１６．０，３Ｈ），３．３６（ｂｓ，１Ｈ），３．５５（ｓ，３Ｈ），３．６９（ｄ，Ｊ＝３．１，６Ｈ），３．７２（ｄ，Ｊ＝３．１，６Ｈ），３，７４−３．９５（ｍ，２Ｈ），４．１−４．１３（ｍ，２Ｈ），４．７７（ｂｓ，１Ｈ），４．８９（ＡＢｑ，Ｊ＝１４．９，２Ｈ），７．２４（ｄ，Ｊ＝８．４，２Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝８．４，２Ｈ），７．８９（ｄ，Ｊ＝１４．１，１Ｈ），８．４９（ｓ，１Ｈ），１１．０（ｓ，１Ｈ）
【０２９２】
（４‐（２，２‐ビスホスホノエチル）フェニルカルバモイル）メチル‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐７‐（（４aS,７aS）‐オクタヒドロピロロ［３，４‐ｂ］ピリジン‐６‐イル）‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸塩（６２）：６１の脱保護は、５２に関して記載した方法によって、０．６３mmolの規模で行なった。粗生成物をWaters C18 Sep-Pak（登録商標）カラム（H２O中０から１０％のMeOH）で精製すると、６２が淡黄色の固体として得られた（４０mg，９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．６０−０．６９（ｍ，１Ｈ），０．９３−１．０７（ｍ，２Ｈ），１．１２−１．２１（ｍ，１Ｈ），１．７２−１．９６（ｍ，４Ｈ），２．１６（ｔｔ，Ｊ＝６．９，２０．６，１Ｈ），２．６２−２．７２（ｍ，１Ｈ），２．９０−３．１７（ｍ，３Ｈ），３．３１−３．４０（ｍ，１Ｈ），３．４４−３．６３（ｍ，５Ｈ），３．６５−３．７２（ｍ，１Ｈ），３．７５−３．９９（ｍ，３Ｈ），４．８０（ｓ，２Ｈ），７．２５−７．３９（ｍ，５Ｈ），８．５７（ｓ，１Ｈ）；１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ−１２１．４２（ｄ，Ｊ＝１４．０，１Ｆ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ２０．２５（ｄ，Ｊ＝２２．４，２Ｐ）；ＬＣＭＳ：９５．７％（２５４ｎｍ），９５．４％（２２０ｎｍ），９６．０％（２９０ｎｍ）；ＭＳ：（ＭＨ＋）６３３．１
【０２９３】
スキーム２０
ガチフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体６４の調製
【化９４】
2008536911.tif 000083
【０２９４】
（４‐（２，２‐ビス（ジメチルホスホノ）エチル）フェニルカルバモイル）メチル‐７‐（４‐（tert‐ブトキシカルボニル）‐３‐メチルピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸塩（６３）：６０aと１６の間の結合反応は、５１の合成に関して記載した方法によって、１．８４mmolの規模で行なった。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（CH２Cｌ２中０％から８％のMeOH）で精製すると、６３が淡黄色の固体として得られた（１．１０ｇ，７０％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．９２−１．００（ｍ，２Ｈ），１．１６−１．２５（ｍ，２Ｈ），１．３５（ｄ，Ｊ＝６．８，３Ｈ），１．５０（ｓ，９Ｈ），２．６９（ｔｔ，Ｊ＝６．４，２４．３，１Ｈ），３．１７−３．５０（ｍ，７Ｈ），３．７１（ｄ，Ｊ＝２．５，６Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ），３．７５（ｄ，Ｊ＝２．５，６Ｈ），３，９３−３．９９（ｍ，２Ｈ），４．３６（ｂｓ，１Ｈ），４．９２（ｓ，２Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ），７．８９（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ），７．９８（ｄ，Ｊ＝１２．６，１Ｈ），８．５７（ｓ，１Ｈ），１０．９０（ｓ，１Ｈ）：１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）デルタ−１２０．６５（ｄ，Ｊ＝１１．５，１Ｆ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）デルタ２６．５（ｓ，２Ｐ）
【０２９５】
（４‐（２，２‐ビスホスホノエチル）フェニルカルバモイル）メチル‐７‐（３‐メチルピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸塩（６４）：６３の脱保護は、５２に関して記載した方法によって、０．４１３mmolの規模で行なった。粗生成物をWaters C18 Sep-Pak（登録商標）カラム（H２O中０から１０％のMeOH）で精製すると、６４が淡黄色の固体として得られた（１４１mg，４３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．９８−１．０１（ｍ，２Ｈ），１．１５−１．１８（ｍ，２Ｈ），１．２２（ｄ，Ｊ＝６．３，３Ｈ），２．２０（ｔｔ，Ｊ＝６．７，２１．０，１Ｈ），３．０７−３．４９（ｍ，９Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），４．０５−４．１１（ｍ，１Ｈ），４．９２（ｓ，２Ｈ），７．４６（ＡＢｑ，Ｊ＝８．４，４Ｈ），７．５５（ｄ，Ｊ＝１１．９，１Ｈ），８．８０（ｓ，１Ｈ）；１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ−１２１．１６（ｄ，Ｊ＝１２．６，１Ｆ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ２０．２３（ｓ，２Ｐ）；ＬＣＭＳ：８９．３％（２５４ｎｍ），９１．４％（２２０ｎｍ），９４．０％（２９０ｎｍ）；ＭＳ：（ＭＨ＋）６９７．２
【０２９６】
スキーム２１
テトラエチル（４−ブロモアセトアミドフェニル）メチレン−ビスホスホン酸塩（７１）の合成
【化９５】
2008536911.tif 000084
【０２９７】
ジエチル（４‐ニトロフェニル）メチルホスホン酸塩（６５）：ニトロベンジルブロマイド（８．４ｇ，３９mmol）およびトリエチルホスファイト（７．５ml，４３mmol）を封管に入れ、摂氏１２０度に加熱しながら攪拌した。混合物を冷却し、高真空下で除去した。粗生成物は精製せずに使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．２６（ｔ，Ｊ＝７．１，６Ｈ），３．２４（ｄ，Ｊ＝２３．１，２Ｈ），４．０１−４．１０（ｍ，４Ｈ），７．４７（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．４，２Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ＝８．３，２Ｈ）
【０２９８】
ジエチル（４‐（２，２，２‐トリフルオロアセトアミド）フェニル）メチルホスホン酸塩（６７）：粗生成物６５を無水EtOHに溶解し、H２（６０psi）下PtO２（２００mg）を用いて４時間水素添加した。触媒を濾過して除き、溶媒を除去すると、淡褐色の固体６６が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．２２（ｔ，Ｊ＝７．２，６Ｈ），３．０３（ｄ，Ｊ＝２３．１，２Ｈ），３．７０（ｂｓ，２Ｈ），３．９５−４．０３（ｍ，４Ｈ），６．６１（ｄ，Ｊ＝８．４，２Ｈ），７．１５（ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．４，２Ｈ）
【０２９９】
粗アニリン６６およびピリジン（４．７ml，５９mmol）をCH２Cl２に溶解し、その結果得られた溶液を氷浴で約摂氏４度に冷却した。攪拌しながら、無水トリフルオロ酢酸（５．４２ml，３９mmol）を滴加し、その結果得られた溶液を室温まで徐々に温めながらさらに２０時間攪拌した。反応は水（１００ml）を加えてクエンチし、生成物はCH２Cl２で抽出した。有機抽出物を一緒にし、１０％のHCｌおよび塩水で洗浄し、Na２SO４で乾燥した。濾過・濃縮した後、粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（ヘキサン中９０−１００％のEtOAcによる傾斜溶離）で精製すると、無色の固体６７が得られた（９．４１ｇ，４‐ニトロベンジルブロマイドからの収率７１％）１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．２３（ｔ，Ｊ＝７．２，６Ｈ），３．１５（ｄ，Ｊ＝２３．１，２Ｈ），３．９８−４．０７（ｍ，４Ｈ），７．１８（ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．４，２Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝８．４，２Ｈ），９．９８（ｓ，１Ｈ）
【０３００】
ジエチル（４‐（２，２，２‐トリフルオロアセトアミド）フェニル）ブロモメチルホスホン酸塩（６８）：６７（９．４１ｇ，２７．７mmol）、NBS（７．５ｇ，４１．６mmol）およびアゾビス（シクロヘキサンカーボニトリル）（７０mg，０．２９mmol）のベンゼン溶液を強い可視光下で５時間加熱・還流した。水を加えた後、生成物をEtOAcで抽出した。有機物は飽和NaClで洗浄し、Na２SO４で乾燥した。粗固形物をシリカゲルクロマトグラフィ（１：１のEtOAc／ヘキサン）で精製すると、６８が淡黄色の固体として得られた（４．０ｇ，収率３４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：デルタ１．３７（ｔ，Ｊ＝８．３，６Ｈ），４．２２−４．３０（ｍ，４Ｈ），４．８５（ｄ，Ｊ＝１３．６，１Ｈ），７．５４（ｄｄ，Ｊ＝８．７，１．７，２Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝８．６，２Ｈ），８．８５（ｓ，１Ｈ）
【０３０１】
テトラエチル（４‐（２，２，２‐トリフルオロアセトアミド）フェニル）メチレンホスホン酸塩（６９）：６８（４．０ｇ，９．６mmol）およびトリエチルホスフィン（１．６ml，９．６mmol）のTHF溶液を２０時間加熱還流した。溶液を室温まで冷却し、約５mlまで濃縮し、ジエチルエーテルを添加した。生成物６９を回収すると、無色の沈殿物が得られた（０．６ｇ，収率１４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：デルタ１．１５（ｔ，Ｊ＝７．５，６Ｈ），１．３２（ｔ，Ｊ＝７．５，６Ｈ），３．７（ｔ，Ｊ＝２４．８，１Ｈ），３．８２−３．９２（ｍ，２Ｈ），３．９６−４．０６（ｍ，２Ｈ），４．１３−４．２０（ｍ，４Ｈ），７．４０（ｍ，２Ｈ），７．５９（ｄ，Ｊ＝８．９，２Ｈ），９．９２（ｓ，１Ｈ）
【０３０２】
テトラエチル（４‐アミノフェニル）メチレンホスホン酸塩（７０）：６９（０．４５ｇ，０．９５mmol）およびKOH（６４mg，１．０５mmol）の水懸濁液を摂氏５０度に温めながら５時間攪拌した。溶液をH２Oで希釈し、２０mlの飽和NH４Cｌで中和した。水相をCH２Cl２で抽出し、一緒にした有機抽出物をNa２SO４で乾燥し、濾過・濃縮すると、淡黄色の固体７０が得られた（３３０mg，粗収率９２％）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ３，４００ＭＨｚ）：デルタ１．１３（ｔ，Ｊ＝７．２，６Ｈ），１．２５（ｔ，Ｊ＝７．２，６Ｈ），３．５９（ｔ，Ｊ＝２５．０，１Ｈ），３．７０（ｓ，２Ｈ），３．８４−３．９４（ｍ，４Ｈ），３．９７−４．１３（ｍ，４Ｈ），６．６１（ｄ，Ｊ＝８．５，２Ｈ），７．２０−７．２３（ｍ，２Ｈ）
【０３０３】
テトラエチル（４‐ブロモアセトアミドフェニル）メチレンビスホスホン酸塩（７１）：氷浴で冷却し攪拌している７０（１．０５ｇ，２．７７mmol）およびピリジン（０．３４ml，４．２mmol）のCH２Cｌ２（１４ml）溶液に、ブロモアセチルブロマイド（０．３６ml，４．２mmol）のCH２Cｌ２（１ml）溶液を滴加した。同じ温度で４時間攪拌した後、水を加えて反応をクエンチした。生成物はCH２Cｌ２で抽出し、一緒にした有機物は１０％の水性HClおよび塩水で洗浄し、MｇSO４で乾燥した。乾燥剤を濾過した後、有機物を減圧下で濃縮し、褐色の粗固形物はシリカゲルフラッシュクロマトグラフィ（CH２Cｌ２中０％から６％のMeOH）で精製すると、７１が淡黄色の固体として得られた（１．１６ｇ，７７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．１５（ｔ，Ｊ＝６．８，６Ｈ），１．２８（ｔ，Ｊ＝６．８，６Ｈ），３．７０（ｔ，Ｊ＝２５．３，１Ｈ），３．９９−４．１７（ｍ，６Ｈ），７．４２（ｄｔ，Ｊ＝１．６，８．８，２Ｈ），７．５０（ｂｄ，Ｊ＝８．２，２Ｈ），８．５４（ｂｓ，１Ｈ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ１９．４２（ｓ，２Ｐ）
【０３０４】
スキーム２２
モキシフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体７３の調製
【化９６】
2008536911.tif 000085
【０３０５】
（４−ビス（ジエチルホスホノ）メチルフェニルカルバモイル）メチル−７−（（４aS,７aS）−１−（tert−ブトキシカルボニル）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（７２）：７０と１２の間の結合反応は、５１の合成に関して記載した方法によって、１．３４mmolの規模で行なった。粗生成物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィ（CH２Cｌ２中０％から１０％のMeOH）で精製すると、７２が淡黄色の固体として得られた（０．５３９ｇ，４５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．７５−０．８３（ｍ，１Ｈ），０．９８−１．１１（ｍ，２Ｈ），１．１５（ｔ，Ｊ＝７．２，６Ｈ），１．２６（ｔ，Ｊ＝７．２，６Ｈ），１．２４−１．２８（ｍ，１Ｈ），１．４４−１．６０（ｍ，１１Ｈ），１．７２−１．８５（ｍ，２Ｈ），２．２０−２．２９（ｍ，１Ｈ），２．８２−２．９４（ｍ，１Ｈ），３．１７−３．２９（ｍ，１Ｈ），３．３２−３．４３（ｍ，１Ｈ），３．５６（ｓ，３Ｈ），３．７１（ｔ，Ｊ＝２５．８，１Ｈ），３．８１−３．９８（ｍ，４Ｈ），３．９９−４．１６（ｍ，８Ｈ），４．７７（ｂｓ，１Ｈ），４．９１（ＡＢｑ，Ｊ＝１６．０，２Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝８．６，２Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝１４．１，２Ｈ），７．９７（ｄ，Ｊ＝８．６，２Ｈ），８．４９（ｓ，１Ｈ），１１．１０（ｓ，１Ｈ）：３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ１９．６５（ｓ，２Ｐ）
【０３０６】
（４‐ビスホスホノメチルフェニルカルバモイル）メチル‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐７‐（（４aS,７aS）‐オクタヒドロピロロ［３，４‐ｂ］ピリジン‐６‐イル）‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸塩（７３）：７２の脱保護は、５１に関して記載した方法によって、０．５９mmolの規模で行なった。粗生成物をWaters C18 Sep-Pak（登録商標）カラム（H２O中０から２０％のMeOH）で精製すると、７３が淡黄色の固体として得られた（１１０mg，２７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．８３−０．９３（ｍ，１Ｈ），０．９９−１．１４（ｍ，２Ｈ），１．１７−１．２７（ｍ，１Ｈ），１．７４−１．９３（ｍ，４Ｈ），２．６１−２．７０（ｍ，１Ｈ），２．９６−３．０５（ｍ，１Ｈ），３．２９−３．３６（ｍ，１Ｈ），３．４８（ｔ，Ｊ＝２３．２，１Ｈ），３．６２（ｓ，３Ｈ），３．５６−３．６５（ｍ，３Ｈ），３．６９−３．７７（ｍ，１Ｈ），３．８７−３．９５（ｍ，１Ｈ），３．９９−４．０６（ｍ，１Ｈ），４．９０（ＡＢｑ，Ｊ＝１５．４，２Ｈ），７．３７−７．５６（ｍ，５Ｈ），８．７８（ｓ，１Ｈ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ１６．６８（ｓ，２Ｐ）；ＬＣＭＳ：１００％（２５４ｎｍ），１００％（２２０ｎｍ），１００％（２９０ｎｍ）；ＭＳ：（ＭＨ＋）６３３．１
【０３０７】
スキーム２３
シプロフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体７５の調製
【化９７】
2008536911.tif 000086
【０３０８】
（４−ビス（ジエチルホスホノ）メチルフェニルカルバモイル）メチル−７−（４−（tert−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（７４）：５５と７１の間の結合反応は、５１の合成に関して記載した方法によって、１．０mmolの規模で行なった。粗生成物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィ（EtOAc中０％から６％のMeOH）で精製すると、７４が淡黄色の固体として得られた（０．５３ｇ，６２％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．１５（ｔ，Ｊ＝７．０，６Ｈ），１．２１−１．３０（ｍ，８Ｈ），１．３２−１．３９（ｍ，２Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ），３．２１−３．２８（ｍ，４Ｈ），３．４２−３．４９（ｍ，１Ｈ），３．６２−３．６９（ｍ，４Ｈ），３．７２（ｔ，Ｊ＝２５．１，１Ｈ），３．８７−４．１６（ｍ，８Ｈ），４．９１（ｓ，２Ｈ），７．３１（ｄ，Ｊ＝８．１，１Ｈ），７．５５（ｍ，２Ｈ），７．９８（ｄ，Ｊ＝９．３，２Ｈ），８．１５（ｄ，Ｊ＝１２．８．１Ｈ），８．４９（ｓ，１Ｈ），１１．０７（ｓ，１Ｈ）：１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ−１２２．８４（ｄｄ，Ｊ＝７．３，１２．９，１Ｆ）
【０３０９】
（４‐ビスホスホノメチルフェニルカルバモイル）メチル‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐４‐オキソ‐７‐（ピペラジン‐１‐イル）キノリン‐３‐カルボン酸（７５）：７４の脱保護は、５１に関して記載した方法によって、０．６２mmolの規模で行なった。粗生成物をWaters C18 Sep-Pak（登録商標）カラム（H２O中０から８％のMeOH）で精製すると、７５が淡黄色の固体として得られた（２３０mg，５８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ１．１４−１．２０（ｍ，２Ｈ），１．４５−１．３８（ｍ，２Ｈ），３．０９−３．１９（ｍ，４Ｈ），３．２２−３．２９（ｍ，４Ｈ），３．３６（ｔ，Ｊ＝２２．７，１Ｈ），３．７０−３．７８（ｍ，１Ｈ），４．７２（ｓ，２Ｈ）、７．４２（ｄ，Ｊ＝８．５，２Ｈ），７．４９（ｄ，Ｊ＝７．０，１Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝８．５，１Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝１４．０，１Ｈ），８．６２（ｂｓ，１Ｈ）；１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ−１２３．２５（ｄｄ，Ｊ＝７．１，１３．３，１Ｆ；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ１６．７４（ｓ，２Ｐ）；ＬＣＭＳ：１００％（２５４ｎｍ），１００％（２２０ｎｍ），１００％（２９０ｎｍ）；ＭＳ：（ＭＨ＋）６３９．１
【０３１０】
スキーム２４
テトラエチル−N−（ブロモアセチル）−N−メチル−１−アミノメチレンビスホスホン酸塩（７８）の調製
【化９８】
2008536911.tif 000087
【０３１１】
テトラエチルN‐ベンジル‐N‐メチル‐１‐アミノメチレンビスホスホン酸塩（７６）：化合物７６は、Ｓｙｎｔｈ．  Ｃｏｍｍ．  １９９６，２６，２０３７−２０４３に記載の手順の変形方法を用いて調製した。蒸留装置を付けた１００mlの丸底フラスコに、オルトギ酸トリエチル（１３．８ｇ，９３．３mmol）、ジエチルホスファイト（３２．２ｇ，２３３mmol）およびN−ベンジルメチルアミン（９．４２ｇ，７７．７mmol）を入れ、加熱した。反応物をAr下、摂氏１８０−１９０度で３時間加熱すると、EtOHの放出が完了した。反応混合物を室温まで冷却し、CHCｌ３（４００ml）で希釈し、水性NaOH（１M）および塩水で洗浄し、Na２SO４で乾燥した。溶媒を吸引除去すると、無色の油７６（３１．７ｇ，１００％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３４（ｄｔ，Ｊ＝１．６，７．１，１２Ｈ），２．６６（ｓ，３Ｈ），３．４８（ｔ，Ｊ＝２４．９，１Ｈ），３．９９（ｓ，２Ｈ），４．０７−４．２４（ｍ，８Ｈ），７．２４−７．３９（ｍ，５Ｈ）
【０３１２】
テトラエチル‐N‐メチル‐１‐アミノメチレンビスホスホン酸塩（７７）：化合物７６（１２．４ｇ，３０．４mmol）をEtOH（１５０ml）に溶解し、パラジウム担持炭素（１０％，５ｇ）およびシクロヘキセン（９．０ml，８８．７mmol）を添加した。その結果得られた混合物をアルゴン下で１６時間加熱・還流した。冷却したその溶液をグラスファイバー濾紙で濾過し、減圧下で濃縮すると、７７が淡黄色の油として得られた（８．７ｇ，９０％）。その油は精製せずに直接次の工程で使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３６（ｔ，Ｊ＝７．４，１２Ｈ），２．６９（ｓ，３Ｈ），４．２０−４．３１（ｍ，８Ｈ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）デルタ１９．４４（ｓ，２Ｐ）
【０３１３】
テトラエチル‐N‐（ブロモアセチル）‐N‐メチル‐１‐アミノメチレンビスホスホン酸塩（７８）：氷浴で冷却し攪拌している７７（４．５ｇ，１４mmol）およびピリジン（１．７８ml，２１．３mmol）のCH２Cｌ２（２５ml）溶液に、ブロモアセチルブロマイド（１．４８ml，１７．０mmol）のCH２Cｌ２（１ml）溶液を滴加した。反応物は室温まで徐々に温めながら、１８時間攪拌した。水を加えて反応物をクエンチした後、生成物はCH２Cｌ２で抽出し、一緒にした有機物は１０％の水性HClおよび塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮した。黄色の粗油はシリカゲルHPFC（EtOAc中０％から１０％のMeOH）で精製すると、７８が淡黄色の液体として得られた（２．９３ｇ，４７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３２（ｔ，Ｊ＝７．１，１２Ｈ），３．３８（ｓ，３Ｈ），３．９２（ｓ，２Ｈ），４．１５−４．２５（ｍ，８Ｈ），５．６９（ｔ，Ｊ＝２４．５，１Ｈ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１６．９３（ｓ，２Ｐ）
【０３１４】
スキーム２５
モキシフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体８０の調製
【化９９】
2008536911.tif 000088
【０３１５】
（N−メチル−１，１−ビス（ジエチルホスホノ）メチルカルバモイル）メチル−７−（（４aS,７aS）−１−（tert−ブトキシカルボニル）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（７９）：１２と７８の間の結合反応は、５１の合成に関して記載した方法によって、３．２７mmolの規模で行なった。粗生成物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィ（CH２Cｌ２中０％から１０％のMeOH）で精製すると、７９が黄色の固体として得られた（０．７１０ｇ，２５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．７４−０．８３（ｍ，１Ｈ），０．９６−１．１５（ｍ，２Ｈ），１．１８−１．２５（ｍ，１Ｈ），１．３１−１．３９（ｍ，１４Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ），１．７５−１．８１（ｍ，２Ｈ），２．２０−２．２７（ｍ，１Ｈ），２．８８（ｂｔ，Ｊ＝８．７，１Ｈ），３．２１（ｂｓ，１Ｈ），３．３１（ｓ，３Ｈ），３．３６（ｂｓ，１Ｈ），３．５４（ｓ，３Ｈ），３．８０−３．９１（ｍ，２Ｈ），４．０１−４．０８（ｍ，２Ｈ），４．１３−４．２６（ｍ，８Ｈ），４．７７（ｂｓ，１Ｈ），４．９９（ＡＢｑ，Ｊ＝１５．８，２Ｈ），５．７０（ｔ，Ｊ＝２４．８，１Ｈ），７．８１（ｄ，Ｊ＝７．８，１Ｈ），８．６１（ｓ，１Ｈ）：３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）デルタ１７．１０（ｓ，２Ｐ）
【０３１６】
（N‐メチル‐１，１‐ビスホスホノメチルカルバモイル）メチル‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐７‐（（４aS,７aS）‐オクタヒドロピロロ［３，４‐ｂ］ピリジン‐６‐イル）‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸塩（８０）：７９の脱保護は、５１に関して記載した方法によって、０．８１５mmolの規模で行なった。粗生成物をWaters C18 Sep-Pak（登録商標）カラム（H２O中０から１０％のMeOH）で精製すると、８０が淡黄色の固体として得られた（１１０mg，２７％）。それはシス／トランス回転異性体の混合物であった。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．８９−０．９６（ｍ，１Ｈ），１．０６−１．１７（ｍ，２Ｈ），１．２０−１．２６（ｍ，１Ｈ），１．８３−１．９３（ｍ，４Ｈ），２．７８（ｂｓ，１Ｈ），３．１０（ｂｓ，１Ｈ），３．１６（ｓ，１／３−３Ｈ），３．２７（ｓ，２／３−３Ｈ），３．３９（ｂｓ，１Ｈ），３．５５（ｓ，１／３−３Ｈ），３．５７（ｓ，２／３−３Ｈ），３．６７−３．８３（ｍ，３Ｈ），３．８８−４．１４（ｍ，３Ｈ），４．９２（ｔ，Ｊ＝２１．９，１Ｈ），５．１２（ＡＢｑ，Ｊ＝１５．７，２／３−２Ｈ），５．１６（ＡＢｑ，Ｊ＝１５．７，１／３−２Ｈ），７．３７（ｄ，Ｊ＝１４．０，２／３−１Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝１４．０，１／３−１Ｈ），８．９６（ｓ，１Ｈ）；１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ−１２１．９２（ｄ，Ｊ＝１４．０，２／３−１Ｆ）．−１２１．８４（ｄ，Ｊ＝１４．０，１／３−１Ｆ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ１２．３１（ｓ，１／３−２Ｐ），１３．０８（ｓ，２／３−２Ｐ）；ＬＣＭＳ：９８．４％（２５４ｎｍ），９９．２％（２２０ｎｍ），９８．９％（３２０ｎｍ）；ＭＳ：（ＭＨ＋）６４７．１
【０３１７】
スキーム２６
ガチフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体８２の調製
【化１００】
2008536911.tif 000089
【０３１８】
（N‐メチル‐１，１‐ビス（ジエチルホスホノ）メチルカルバモイル）メチル‐７‐（４‐（tert‐ブトキシカルボニル）‐３‐メチルピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸塩（８１）：７８と１６の間の結合反応は、５１の合成に関して記載した方法によって、１．９２mmolの規模で行なった。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィ（CH２Cｌ２中０％から１０％のMeOH）で精製すると、８１が淡黄色の固体として得られた（０．４１５ｇ，３０％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．８７（ｂｔ，Ｊ＝３．８，２Ｈ），１．１３（ｄ，Ｊ＝７．５，２Ｈ），１．３０−１．３９（ｍ，１５Ｈ），１．５０（ｓ，９Ｈ），３．１９−３．２７（ｍ，３Ｈ），３．３１（ｓ，３Ｈ），３．４２（ｂｔ，Ｊ＝１３．４，２Ｈ），３．７０（ｓ，３Ｈ），３，８４−３．９０（ｍ，１Ｈ），３．９４（ｄ，Ｊ＝１２．２，１Ｈ），４．１１−４．２６（ｍ，８Ｈ），４．３３（ｂｓ，１Ｈ），４．９７−５．０１（ｍ，２Ｈ），５．７０（ｔ，Ｊ＝２４．８，１Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝１２．６，１Ｈ），８．６３（ｓ，１Ｈ）：１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）デルタ−１２１．６１（ｄ，Ｊ＝１３．０，１Ｆ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）デルタ１７．１１（ｓ，２Ｐ）
【０３１９】
（N‐メチル‐１，１‐ビスホスホノメチルカルバモイル）メチル‐７‐（３‐メチルピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸塩（８２）：８１の脱保護は、５１に関して記載した方法によって、０．３５４mmolの規模で行なった。粗生成物をWaters C18 Sep-Pak（登録商標）カラム（H２O中０から５％のMeOH）で精製すると、８２が淡黄色の固体として得られた（１３５mg，５４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ１．０６−１．１１（ｍ，２Ｈ），１．１９−１．２３（ｍ，２Ｈ），１．３３−１．３６（ｍ，３Ｈ），３．１６（ｓ，１／３−３Ｈ），３．２７（ｓ，２／３−３Ｈ），３．２１−３．３０（ｍ，１Ｈ），３．３２−３．３６（ｍ，１Ｈ），３．４０−３．４８（ｍ，１Ｈ），３．５３−３．６４（ｍ，３Ｈ），３．７４（ｓ，２／３−３Ｈ），３．７９（ｓ，１／３−３Ｈ），３．８９（ｔ，Ｊ＝２１．０，１／３−１Ｈ），４．１３−４．１７（ｍ，１Ｈ），４．９２（ｔ，Ｊ＝２１．０，２／３−１Ｈ），５．１３（ｓ，２／３−２Ｈ），５．１９（ｓ，１／３−２Ｈ），７．４５（ｂｄ，Ｊ＝１２．０，２／３−１Ｈ），７．５９（ｂｄ，Ｊ＝１２．０，１／３−１Ｈ），９．０２（ｓ，２／３−１Ｈ），９．０３（ｓ，１／３−１Ｈ）；１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ−１２１．８３（ｄ，Ｊ＝１２．０，１／３−１Ｆ），−１２２．０２（ｄ，Ｊ＝１２．０，２／３−１Ｆ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ１２．３２（ｓ，１／３−２Ｐ），１３．１１（ｓ，２／３−２Ｐ）；ＬＣＭＳ：９８．０％（２５４ｎｍ），９７．３％（２２０ｎｍ），９７．４％（２９０ｎｍ）；ＭＳ：（ＭＨ＋）６２１．１
【０３２０】
スキーム２７
モキシフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体（８５）の調製
【化１０１】
2008536911.tif 000090
【０３２１】
テトラエチル（４‐ヒドロキシフェニル）メチレンビスホスホン酸塩（８３）：Ｏｒｇ．  Ｂｉｏｍｏｌ．  Ｃｈｅｍ，（２００４），２１：３１６２−３１６６に記載の方法で調製した。反応混合物が絶対に摂氏５０度を超えないように注意しながら、ナトリウム金属（０．５５ｇ，２３．９mmol）を室温で少量ずつジエチルホスファイト（２０ml，１５５mmol）に添加した。その結果得られた溶液に、４−ヒドロキシベンズアルデヒド（１．０ｇ，８．２mmol）を添加した。反応混合物は室温で４８時間攪拌し、水（１００ml）でクエンチし、クロロホルム（３ｘ１００ml）で抽出した。クロロホルム層を塩水で洗浄し、Na２SO４で乾燥し、真空下で濃縮した。過剰のジエチルホスファイトはバルブ‐バルブ蒸留で除いた。その結果得られた固体の残渣をエチルエーテルで洗浄し、濾過すると、８３（２．４２ｇ，７８％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．１２（ｔ，Ｊ＝７．０，６Ｈ），１．３０（ｔ，Ｊ＝７．０，６Ｈ），３．６３（ｔ，Ｊ＝２５．４，１Ｈ），３．８４−３．９５（ｍ，２Ｈ），３．９８−４．２２（ｍ，６Ｈ），６．５４（ｄ，Ｊ＝８．２，２Ｈ），７．２１（ｂｄ，Ｊ＝８．２，２Ｈ），８．４２（ｓ，１Ｈ）：３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）デルタ２０．１１（ｓ，２Ｐ）
【０３２２】
４−（ビス（ジエチルホスホノ）メチル）フェニル−７−（（４aS,７aS）−１−（tert−ブトキシカルボニル）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（８４）：氷浴で冷却し攪拌している１２（０．５０２ｇ，１．００mmol）のCH２Cｌ２溶液に、トシル酸２‐フルオロ‐１‐メチルピリジニウム（０．３４０ｇ，１．２０mmol）を添加した。次にトリエチルアミン（０．５５８ｇ，４．００mmol）を滴加し、その結果得られた混合物をその温度で７０分間攪拌した。次に８３（０．３８０ｇ，１．００mmol）のCH２Cｌ２（１ml）溶液を添加し、その結果得られた溶液を室温まで温めながら１８時間攪拌した。EtOAcで希釈した後、有機層を１０％水性HCｌ、塩水、５％の重炭酸水溶液、塩水で洗浄し、Na２SO４で乾燥した。粗生成物をシリカゲルHPFC（EtOAｃ中０％−２５％のMeOH）で精製すると、８４が淡黄色の固体として得られた（０．５０８ｇ，５９％）。
【０３２３】
４−（ビスホスホノメチル）フェニル−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ‐７−（（４aS,７aS）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（８５）：８４の脱保護は、５１に関して記載した方法によって、０．２８９mmolの規模で行なった。粗生成物をWaters C18 Sep-Pak（登録商標）カラム（４０mlのH２O、次に４０mlのMeOH／H２O）で精製すると、８５が淡黄色の固体として得られた（２１４mg，５４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ１．０５−１．２９（ｍ，４Ｈ），１．７７−１．８７（ｍ，４Ｈ），２．７１（ｂｓ，１Ｈ），２．９６（ｂｔ，Ｊ＝１０．７，１Ｈ），３．２６−３．３０（ｍ，１Ｈ），３．４０（ｔ，Ｊ＝２１．９，１Ｈ），３．５６−３．６９（ｍ，６Ｈ），３．８２−３．８６（ｍ，１Ｈ），４．０５−４．０９（ｍ，１Ｈ），４．１５−４．２０（ｍ，１Ｈ），７．１０（ｄ，Ｊ＝７．６，２Ｈ），７．５９−７．６４（ｍ，３Ｈ），８．９０（ｄ，Ｊ＝２．３，１Ｈ）；１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ−１２０．９８（ｄ，Ｊ＝１０．５，１Ｆ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ１６．７９（ｓ，２Ｐ）；ＬＣＭＳ：１００％（２５４ｎｍ），１００％（２２０ｎｍ），１００％（３２０ｎｍ）；ＭＳ：（ＭＨ＋）６５２．１
【０３２４】
スキーム２８
ガチフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体８７の調製
【化１０２】
2008536911.tif 000091
【０３２５】
４‐（ビス（ジエチルホスホノ）メチル）フェニル‐７‐（４‐（tert‐ブトキシカルボニル）‐３‐メチルピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン−３‐カルボン酸塩（８６）：１６と８３の間の結合反応は、８４の合成に関して記載した方法によって、１．０５mmolの規模で行なった。粗生成物をシリカゲルHPFC（EtOAc中０％から３０％のMeOH）で精製すると、８６が無色の固体として得られた（０．３１８ｇ，３６％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．９６（ｔ，Ｊ＝３．９，２Ｈ），１．１４−１．２０（ｍ，２Ｈ），１．１７（ｔ，Ｊ＝６．８，６Ｈ），１．２９（ｔ，Ｊ＝６．８，６Ｈ），１．３４（ｄ，Ｊ＝６．７，３Ｈ），１．５０（ｓ，９Ｈ），３．２０−３．２５（ｍ，３Ｈ），３．４０−３．４７（ｍ，２Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ），３．９１−４．００（ｍ，３Ｈ），４．０２−４．１６（ｍ，８Ｈ），４．３５（ｂｓ，１Ｈ），７．２０（ｄ，Ｊ＝８．５，２Ｈ），７．４０（ｄ，Ｊ＝８．５，２Ｈ），７．９３（ｄ，Ｊ＝１２．３，１Ｈ），８．７１（ｓ，１Ｈ）：１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ−１２１．１６（ｄ，Ｊ＝１２．５，１Ｆ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）デルタ１９．３５（ｓ，２Ｐ）
【０３２６】
４‐（ビスホスホノメチル）フェニル‐７‐（３‐メチルピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸塩（８７）：８６の脱保護は、５１に関して記載した方法によって、０．１８５mmolの規模で行なった。粗生成物をWaters C18 Sep-Pak（登録商標）カラム（４０mlのH２O）で精製すると、８７が無色の固体として得られた（８０mg，６１％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ１．２４（ｄ，Ｊ＝６．２，３Ｈ），１．２１−１．３０（ｍ，２Ｈ），１．３６−１．４５（ｍ，２Ｈ），２．５１−２．５９（ｍ，１Ｈ），２．８６（ｂｓ，１Ｈ），３．０４−３．１４（ｍ，２Ｈ），３．２０−３．２６（ｍ，１Ｈ），３．４２（ｔ，Ｊ＝２３．２，１Ｈ），３．４６−３．５６（ｍ，２Ｈ），３．６５（ｓ，３Ｈ），４．０２（ｂｓ，１Ｈ），７．２７（ｄ，Ｊ＝７．７，２Ｈ），７．３７（ｄ，Ｊ＝１２．０，１Ｈ），７．６７（ｄ，Ｊ＝７．０，２Ｈ），８．９６（ｓ，１Ｈ）；１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ−１２１．７６（ｄ，Ｊ＝１２．２，１Ｆ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ１６．７４（ｓ，１Ｐ）：ＬＣＭＳ：１００％（２５４ｎｍ），１００％（２２０ｎｍ），１００％（２９０ｎｍ）；ＭＳ（ＭＨ＋）６２６．１
【０３２７】
スキーム２９
テトライソプロピル−５−チアペンチレン−１，１−ビスホスホン酸塩（９２）の調製
【化１０３】
2008536911.tif 000092
【０３２８】
テトライソプロピル‐４‐（２‐テトラヒドロ‐２H‐ピラニルオキシ）ブチレン‐１，１‐ビスホスホン酸塩（８８）：NaH（鉱物油に６０％懸濁、１．４３ｇ，３５．８mmol）の乾燥THF（３５ml）懸濁液に、テトライソプロピルメチレンビスホスホン酸塩（１２．３５ｇ，３５．９mmol）を滴加した。その結果得られた透明な溶液を室温で１５分間攪拌した後、２‐（３‐ブロモプロポキシ）テトラヒドロ‐２H‐ピラン（８．０ｇ，３６mmol）を滴加し、フラスコを２ｘ５mlのTHFで洗浄した。反応混合物を６時間加熱・還流した。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルに移し、半分飽和の塩水で洗浄した。水層は酢酸エチルで抽出し、一緒にした有機物は塩水で洗浄し、乾燥（MgSO４）・蒸発させ、そのまま次の工程で使用した。
【０３２９】
テトライソプロピル‐４‐ヒドロキシブチレン‐１，１‐ビスホスホン酸塩（８９）：粗生成物８８（最高３６mmol）のMeOH（７０ml）溶液に、攪拌しながらアンバーリスト１５（１．０５ｇ）を添加した。反応混合物は４０分間還流し、濾過し、蒸発させた。シリカゲルを用い、０−１０％メタノール／酢酸エチルの傾斜溶離で、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィにて精製したら、純粋な８９が得られた（７．０ｇ，テトライソプロピルメチレンビスホスホン酸塩から４８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３３−１．３６（ｍ，２４Ｈ），１．７７−１．８３（ｍ，１Ｈ），１．９６−２．１０（ｍ，２Ｈ），２．２１（ｔｔ，Ｊ＝２４．８，５．４，１Ｈ），２．３１−２．４２（ｍ，２Ｈ），３．６６（ｔ，Ｊ＝５．９，２Ｈ），４．７０−４．８３（ｍ，４Ｈ）
【０３３０】
テトライソプロピル‐４‐ヨードブチレン‐１，１‐ビスホスホン酸塩（９０）：８９（７．０ｇ，１７mmol）のCH２Cｌ２（１５０ml）溶液に、トリフェニルホスフィン（５．２５ｇ，２０．０mmol）およびイミダゾール（１．７８ｇ，２６．１mmol）を添加した。反応混合物は、ヨード（４．８６ｇ，１９．１mmol）を添加する前に、摂氏０度に冷却した。次に混合物を氷浴から除き、２時間攪拌し、ヘキサン（３００ml）へ移し、沈殿物をさらにヘキサン（２ｘ５０ml）で洗浄しながら濾過した。濾液を蒸発させ、溶離剤として酢酸エチルを用い、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィで精製したら、純粋な９０（７．６ｇ，８５％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３３−１．３７（ｍ，２４Ｈ），１．９２−２．２３（ｍ，５Ｈ），３．１８（ｔ，Ｊ＝６．７，２Ｈ），４．７４−４．８３（ｍ，４Ｈ）
【０３３１】
テトライソプロピル‐４‐アミノイソチオウレヨードブチレン‐１，１‐ビスホスホン酸塩酸塩（９１）：９０（３．８ｇ，７．４mmol）のエタノール（２０ml）溶液に、チオウレア（０．５９ｇ，７．７５mmol）を添加した。反応混合物は１８時間還流し、蒸発させ、そのまま次の工程に用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ１．３５−１．３８（ｍ，２４Ｈ），１．９４−２．０９（ｍ，４Ｈ），２．５０−２．６７（ｍ，１Ｈ），３．１７（ｔ，Ｊ＝６．１，２Ｈ），４．７０−４．８５（ｍ，４Ｈ）
【０３３２】
テトライソプロピル‐５‐チアペンチレン‐１，１‐ビスホスホン酸塩（９２）：粗生成物９１（７．４mmol）の水（３０ml）溶液に水酸化ナトリウム（０．３９６ｇ，９．９０mmol）を添加した。反応混合物を１．５時間還流し、摂氏０度に冷やし、１MのHCｌ（１０ml）で酸性化した。生成物をCHCl３（３ｘ５０ml）で抽出し、有機物を塩水（７０ml）で洗浄し、乾燥（MgSO４）・蒸発させたら、定量収率の粗生成物９２が得られた。これはそのまま次の工程で使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３３−１．３６（ｍ，２４Ｈ），１．８８−２．１９（ｍ，５Ｈ），２．５０−２．５６（ｍ，２Ｈ），４．７４−４．８３（ｍ，４Ｈ）
【０３３３】
スキーム３０
モキシフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体９４の調製
【化１０４】
2008536911.tif 000093
【０３３４】
S−４，４−ビス（ジイソプロピルホスホノ）ブチル−７−（（４aS,７aS）−１−（tert−ブトキシカルボニル）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（９３）：１２（２００mg，０．４００mmol）のCH２Cｌ２（３ml）溶液に、トシル酸２‐フルオロ‐１‐メチルピリジニウム（０．１３６ｇ，０．４８０mmol）を添加した。反応混合物は摂氏０度に冷却し、シリンジを使ってトリエチルアミン（０．２０ml，１．４３mmol）を添加した。摂氏０度で１時間攪拌した後、チオール９２（０．２０８ｇ，０．４９７mmol）のCH２Cｌ２（３ml）溶液を加えた。さらに１時間摂氏０度に保った後、室温まで温めながら一晩放置した。反応混合物は酢酸エチルで希釈し、氷冷した飽和NH４Cｌ溶液、５％NaHCO３および水で洗浄した。乾燥（MgSO４）・蒸発後、２．５−５％メタノール／CH２Cｌ２の傾斜溶離で残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィにて精製すると、純粋な９３（０．２４１０ｇ，６７．０％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．７３−０．８２（ｍ，１Ｈ），０．９７−１．１１（ｍ，２Ｈ），１．２４−１．２７（ｍ，１Ｈ），１．３２−１．３６（ｍ，２４Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ），１．５９−２．２８（ｍ，１０Ｈ），２．８２−２．９３（ｍ，１Ｈ），２．９７（ｔ，Ｊ＝７．２，２Ｈ），３．１７−３．２６（ｍ，１Ｈ），３．３０−３．４３（ｍ，１Ｈ），３．５５（ｓ，３Ｈ），３．７８−３．９５（ｍ，２Ｈ），４．０５−４．１２（ｍ，２Ｈ），４．７２−４．８５（ｍ，５Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝１３．９，１Ｈ），８．５４（ｓ，１Ｈ）
【０３３５】
S−４，４−ビスホスホノブチル−７−（（４aS,７aS）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（９４）：９３（６３３mg，０．７０２mmol）のCH２Cｌ２（５０ml）溶液に、TMSBｒ（０．９３ml，７．０５mmol）を添加した。反応混合物を６５時間攪拌し、溶媒を減圧下で除去し、固形物を高真空下で１時間乾燥した。その固形物をH２O（２００ml）に懸濁し、直ちに１MのNaOHを加えてｐHを８に調整し、生成物の溶液を得た。不溶性物質を水およびCHCｌ３で洗浄しながら、生成物の溶液を濾過した。水の層を蒸発させ、逆相クロマトグラフィ（傾斜溶離剤：１００％の水‐３３％のメタノール／水）で精製した。純粋な生成物９４が黄白色の固体として得られた（２３６mg，生成物の四ナトリウム塩に基づいて回収率４７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ１．０２−１．１１（ｍ，１Ｈ），１．１３−１．２２（ｍ，２Ｈ），１．２７−１．３６（ｍ，１Ｈ），１．６４−１．９８（ｍ，９Ｈ），２．４２−２．５２（ｍ，１Ｈ），２．５９−２．６９（ｍ，１Ｈ），２．７４−２．８４（ｍ，１Ｈ），２．９５−３．２５（ｍ，１Ｈ），３．３４−３．４４（ｍ，１Ｈ），３．５６−３．７０（ｍ，２Ｈ），３．６１（ｓ，３Ｈ），３．８３−３．９６（ｍ，２Ｈ），４．０８−４．１８（ｍ，２Ｈ），７．５３（ｄ，Ｊ＝１４．１，１Ｈ），８．５９（ｓ，１Ｈ）；１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ−１２１．３８（ｄ，Ｊ＝１３．２，１Ｆ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ２０．７４（ｓ，２Ｐ）；ＭＳ：（ＭＨ＋）６３４．０
【０３３６】
スキーム３１
ガチフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体９６の調製
【化１０５】
2008536911.tif 000094
【０３３７】
S‐４，４‐ビス（ジイソプロピルホスホノ）ブチル‐７‐（４‐（tert‐ブトキシカルボニル）‐３‐メチルピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸塩（９５）：１６（６０１mg，１．２６mmol）のCH２Cｌ２（５ml）溶液に、トシル酸２‐フルオロ‐１‐メチルピリジニウム（０．３７１ｇ，１．３１mmol）を添加した。反応混合物は摂氏０度に冷却し、シリンジを使ってトリエチルアミン（０．６３ml，４．５２mmol）を添加した。摂氏０度で８０分間攪拌した後、チオール９２（０．５７５ｇ，１．３７mmol）のCH２Cｌ２（５ml）溶液を加えた。さらに１０分間摂氏０度に保った後、室温まで温めながら一晩放置した。反応混合物は酢酸エチル（５０ml）で希釈し、氷冷した飽和NH４Cｌ溶液（２ｘ２５ml）、氷冷した５％NaHCO３（２ｘ２５ml）、水（２５ml）および塩水（２５ml）で洗浄した。乾燥（MgSO４）・蒸発後、２．５−５％メタノール／CH２Cｌ２の傾斜溶離で残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィにて精製すると、少量の１６が不純物として混じった９５（０．６６３ｇ，６０．０％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．８８−１．０１（ｍ，２Ｈ），１．１０−１．２７（ｍ，２Ｈ），１．３１−１．３９（ｍ，２７Ｈ），１．４９（ｓ，９Ｈ），１．８５−２．２８（ｍ，５Ｈ），２．９７（ｔ，Ｊ＝７．４，２Ｈ），３．１８−３．５２（ｍ，５Ｈ），３．７１（ｓ，３Ｈ），３．８０−４．０５（ｍ，２Ｈ），４．３４（ｂｓ，１Ｈ），４．７２−４．８７（ｍ，４Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝１２．５，１Ｈ），８．５７（ｓ，１Ｈ）
【０３３８】
S‐４，４‐ビスホスホノブチル‐７‐（３‐メチルピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸塩（９６）：９５（６６３mg，０．７５７mmol）のCH２Cｌ２（５０ml）溶液に、TMSBｒ（１．０ml，７．６mmol）を添加した。反応混合物を９２時間攪拌し、溶媒を減圧下で除去し、固形物を高真空下で１時間乾燥した。その固形物をH２O（２００ml）に懸濁し、直ちに１MのNaOHを加えてｐHを７．５に調整し、生成物の溶液を得た。生成物の溶液をCHCｌ３（２ｘ５０ml）で洗浄し、蒸発させ、逆相クロマトグラフィ（傾斜溶離剤：１００％の水‐３０％のメタノール／水）で精製した。純粋な生成物９６が白色の固体として得られた（１０３mg，生成物の四ナトリウム塩に基づいて回収率２０％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．９６−１．０４（ｍ，２Ｈ），１．１６−１．２５（ｍ，２Ｈ），１．３３（ｄ，Ｊ＝６．３，３Ｈ），１．７６−２．０２（ｍ，５Ｈ），２．９９−３．０８（ｍ，２Ｈ），３．１６−３．５９（ｍ，７Ｈ），３．７６（ｓ，３Ｈ），４．０６−４．１４（ｍ，１Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝１２．１，１Ｈ），８．６６（ｓ，１Ｈ）；１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ−１２１．２６（ｄ，Ｊ＝１２．０，１Ｆ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ２０．８０（ｓ，２Ｐ）；ＭＳ：（ＭＨ＋）６０８．１
【０３３９】
スキーム３２
モキシフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体９９の調製
【化１０６】
2008536911.tif 000095
【０３４０】
テトラエチル‐１‐（N‐３‐チアプロピオニルアミノ）メチレンビスホスホン酸塩（９７）：Arで蒸気を継続してパージしながら、アミン３０（６９１mg，２．２８mmol）およびメルカプト酢酸（２００マイクロリットル，２．８９mmol）の混合物を摂氏１４０−１５０度に加熱した。蒸気の除去が終了したと思えるころ、溶離剤として５％メタノール／CH２Cｌ２を用い、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィにて残渣を精製すると、９７が得られた（０．３２１ｇ，３７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３３９（ｔ，Ｊ＝７．０，６Ｈ），１．３４４（ｔ，Ｊ＝７．０，６Ｈ），１．９９（ｔ，Ｊ＝８．８，１Ｈ），３．２５−３．３５（ｍ，２Ｈ），４．１１−４．３０（ｍ，８Ｈ），４．９７（ｔｄ，Ｊ＝２１．４，Ｊ＝１０．１，１Ｈ）
【０３４１】
S−（１，１−ビス（ジエチルホスホノ）メチルカルバモイル）メチル−７−（（４aS,７aS）−１−（tert−ブトキシカルボニル）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（９８）：１２（４２７mg，０．８５１mmol）のCH２Cｌ２（６．５ml）溶液に、トシル酸２‐フルオロ‐１‐メチルピリジニウム（０．２９２ｇ，１．０３mmol）を添加した。反応混合物は摂氏０度に冷却し、シリンジを使ってトリエチルアミン（０．４３ml，３．０９mmol）を添加した。摂氏０度で１時間攪拌した後、チオール９７（０．３２ｇ，０．８５mmol）のCH２Cｌ２（１０ml）溶液を加えた。さらに１０分間摂氏０度に保った後、室温まで温めながら一晩放置した。反応混合物はCH２Cｌ２で希釈し、氷冷した飽和NH４Cｌ溶液、氷冷した５％NaHCO３、水および塩水で洗浄した。乾燥（MgSO４）・蒸発後、溶離剤として４％メタノール／CH２Cｌ２を用い、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィにて精製すると、わずかに不純物を含有した９８（０．４１８ｇ，５７．０％）が黄色の泡状物として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．７５−０．８５（ｍ，１Ｈ），０．９９−１．１７（ｍ，２Ｈ），１．２１−１．３９（ｍ，１３Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ），１．６１（ｓ，２Ｈ），１．７５−１．８３（ｍ，２Ｈ），２．２１−２．３０（ｍ，１Ｈ），２．８２−２．９４（ｍ，１Ｈ），３．１７−３．２８（ｍ，１Ｈ），３．３０−３．４４（ｍ，１Ｈ），３．５７（ｓ，３Ｈ），３．７２（ｓ，２Ｈ），３．８１−３．８８（ｍ，１Ｈ），３．９１−３．９８（ｍ，１Ｈ），４．０１−４．２８（ｍ，１０Ｈ），４．７０−４．８６（ｂｓ，１Ｈ），４．９８（ｔｄ，Ｊ＝２１．６，９．９，１Ｈ），７．１０（ｄ，Ｊ＝１０．３，１Ｈ），８．５９（ｓ，１Ｈ）
【０３４２】
S−（１，１−ビスホスホノメチルカルバモイル）メチル−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−７−（（４aS,７aS）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（９９）：９８（４１８mg，０．４８６mmol）のCH２Cｌ２（３０ml）溶液に、TMSBｒ（０．６４ml，４．８mmol）を添加した。反応混合物を４１時間攪拌し、溶媒を減圧下で除去し、固形物を高真空下で１時間乾燥した。その固形物をH２O（１００ml）に懸濁し、直ちに１MのNaOHを加えてｐHを７に調整し、生成物の溶液を得た。生成物の溶液はCHCｌ３（２ｘ５０ml）で洗浄し、濾過し、蒸発させ、逆相クロマトグラフィ（傾斜溶離剤：１００％の水‐１５％のメタノール／水）で精製した。純粋な生成物９９が黄白色の固体として得られた（９０mg，生成物の四ナトリウム塩に基づいて回収率２５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．９３−１．０３（ｍ，１Ｈ），１．０３−１．１９（ｍ，２Ｈ），１．１９−１．２９（ｍ，１Ｈ），１．７８−２．０１（ｍ，４Ｈ），２．７９（ｂｓ，１Ｈ），３．０２−３．１２（ｍ，１Ｈ），３．３６−３．４４（ｍ，１Ｈ），３．６１（ｓ，３Ｈ），３．５７−３．８５（ｍ，３Ｈ），３．７８（ｂｓ，２Ｈ），３．８９−３．９５（ｍ，１Ｈ），４．０２−４．１６（ｍ，２Ｈ），４．２７（ｔ，Ｊ＝１８．７，１Ｈ），７．４０（ｄ，Ｊ＝１３．９，１Ｈ），８．５９（ｓ，１Ｈ）；１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ−９４．６７（ｄ，Ｊ＝１３．４，１Ｆ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ１４．０８（ｄ，Ｊ＝２２．０，１Ｐ），１３．９５（ｄ，Ｊ＝２２．０，１Ｐ）；ＭＳ：（ＭＨ＋）６４９．０
【０３４３】
スキーム３３
テトラエチル−２−クロロカルボニルエチレン−１，１−ビスホスホン酸塩１０２の調製
【化１０７】
2008536911.tif 000096
【０３４４】
上記の化合物は、Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．（１９９９），７：９０１−１９に記載の化合物と類似の方法で合成した。
【０３４５】
テトラエチル２‐ｔ‐ブトキシカルボニルエチレン‐１，１‐ビスホスホン酸塩（１００）：テトラエチルメチレンビスホスホン酸塩（３．００ｇ，１０．４mmol）の乾燥DMF（９ml）溶液に、NaH（鉱物油に６０％懸濁，０．４６ｇ，１１．５mmol）を少量ずつ加えた。その結果得られたスラリーを室温で３０分間攪拌した後、ブロモ酢酸ｔ−ブチル（１．７ml，１１．５mmol）をニートで急いで加えた。反応混合物を蒸発させ、溶離剤として５％メタノール／酢酸エチルを用い、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィにて精製すると、１００（２．１ｇ，５０％）が透明な無色の油として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３３（ｂｔ，Ｊ＝７．０，１２Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），２Ｈ），２．７６（ｔｄ，Ｊ＝１６．０，６．１，２Ｈ），３．０７（ｔｔ，Ｊ＝２４．０，６．１，１Ｈ），４．１０−４．２５（ｍ，８Ｈ）
【０３４６】
テトラエチル２‐カルボキシエチレン‐１，１‐ビスホスホン酸塩（１０１）：エステル１００（２．１ｇ，５．２mmol）をTFA（１２ml）中で２．５分間攪拌し、減圧濃縮した。粗酸１０１をフラッシュクロマトグラフィ（１００酢酸エチル‐１０％メタノール／酢酸エチルの傾斜溶離）で精製すると、酸１０１が白色の固体として得られた（１．３５ｇ，７５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．２８−１．３９（ｍ，１２Ｈ），２．８６（ｔｄ，Ｊ＝１６．１，６．３，２Ｈ），３．１２（ｔｔ，Ｊ＝２４．０，６．３，１Ｈ），４．１３−４．２６（ｍ，８Ｈ）
【０３４７】
テトラエチル２‐クロロカルボニルエチレン‐１，１‐ビスホスホン酸塩（１０２）：粗酸１０１（１．０２ｇ，２．９５mmol）のCH２Cｌ２（１５ml）溶液に、蒸留したばかりのSOCｌ２（０．８４ml，１１．６mmol）を加えた。混合物を攪拌しながら３時間還流し、濃縮乾燥すると、粗生成物１０２が無色の油（定量的）として得られた。この油はそれ以上精製せずに、すぐ次の工程で使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３０−１．４０（ｍ，１２Ｈ），３．０５（ｔｔ，Ｊ＝２３．５，６．２，１Ｈ），３．４０（ｔｄ，Ｊ＝１４．８，６．２，２Ｈ），３．１２（ｔｔ，Ｊ＝２４．０，６．３，１Ｈ），４．１３−４．２７（ｍ，８Ｈ）
【０３４８】
スキーム３４
モキシフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体１０７の調製
【化１０８】
2008536911.tif 000097
【０３４９】
アリルメチル−７−（（４aS,７aS）−１−（tert−ブトキシカルボニル）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（１０３）：酸１２（１．００ｇ，２．０mmol）の乾燥DMF（２０ml）溶液に、K２CO３（３３２mg，２．４mmol）およびアリルブロマイド（２１０マイクロリットル，２．４mmol）を添加した。反応混合物を摂氏７５−８０度で２４時間加熱し、蒸発させ、残渣を水および酢酸エチルへ移した。水の層を酢酸エチルで抽出し、一緒にした有機物を塩水で洗浄し、乾燥（MgSO４）・蒸発させた。粗生成物１０３（０．８０ｇ，７４％）は次の工程で使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．７３−０．８３（ｍ，１Ｈ），０．８８−１．１２（ｍ，２Ｈ），１．１８−１．２９（ｍ，１H），１．４８（ｓ，９Ｈ），１．５８−１．８５（ｍ，４Ｈ），２．１９−２．２８（ｍ，１Ｈ），２．８２−２．９３（ｍ，１Ｈ），３．１５−３．２６（ｍ，１Ｈ），３．３０−３．４０（ｍ，１Ｈ），３．５６（ｓ，３Ｈ），３．７８−３．９２（ｍ，２Ｈ），３．９９−４．１１（ｍ，２Ｈ），４．７０−４．９０（ｍ，３Ｈ），５．２７（ｄｄ，Ｊ＝１０．４，１．３，１Ｈ），５．４８（ｄｄ，Ｊ＝１７．２，１．５，１Ｈ），６．００−６．１１（ｍ，１Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝１４．３，１Ｈ），８．５６（ｍ，１Ｈ）
【０３５０】
アリル−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−７−（（４aS,７aS）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（１０４）：摂氏０度に冷却した乾燥メタノール（２５ml）中の保護アミン１０３（０．８０ｇ，１．５mmol）溶液に、アセチルクロライド（５．３３ml，７４．６mmol）を添加した。その結果得られた溶液を１．５時間かけて室温まで温め、濃縮し、残渣を氷冷した飽和NaHCO３およびCH２Cl２へ移した。乾燥・濃縮後、粗生成物１０４が得られた（０．６２ｇ，９５％）。次の工程で直接使用できるほど純粋であった。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．７５−０．８５（ｍ，１Ｈ），０．９５−１．１０（ｍ，２Ｈ），１．１４−１．２４（ｍ，１Ｈ），１．５３−１．６８（ｍ，１Ｈ），１．７２−１．９０（ｍ，３Ｈ），２．３８（ｂｓ，１Ｈ），２．７３−２．８７（ｍ，１Ｈ），３．１２−３．２４（ｍ，１Ｈ），３．３５−３．６４（ｍ，３Ｈ），３．５５（ｓ，３Ｈ），３．８２−４．０２（ｍ，３Ｈ），４．７４−４．８８（ｍ，２Ｈ），５．２６（ｄｄ，Ｊ＝１０．６，１．１，１Ｈ），５．４６（ｄｄ，Ｊ＝１７．２，１．５，１Ｈ），５．９８−６．１１（ｍ，１Ｈ），７．６１（ｄ，Ｊ＝１３．９，１Ｈ），８．５３（ｓ，１Ｈ）
【０３５１】
アリル−７−（（４aS,７aS）−１−（３，３−ビス（ジエチルホスホノ）プロピオニル）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（１０５）：摂氏０度に冷却したCH２Cl２（２０ml）中の粗アミン１０４（０．６２４ｇ，１．４１mmol）、トリエチルアミン（０．２４ml，１．６９mmol）およびDMAP（１７mg，０．１４mmol）に、粗アシルクロライド１０２（１２．５ml中１．７６mmol）のCH２Cl２溶液を滴加した。その結果得られた混合物を室温まで温めて一晩放置し、CH２Cl２で希釈し、飽和NaHCO３で洗浄し、CH２Cl２で逆抽出した。一緒にした有機物を塩水で洗浄し、乾燥（MgSO４）・濃縮した。フラッシュクロマトグラフィ（５％メタノール／CH２Cl２）にて純粋のアミド１０５（０．８０ｇ，７４％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，回転異性体の混合物）：デルタ０．７２−０．８１（ｍ，１Ｈ），０．９３−１．１０（ｍ，２Ｈ），１．１５−１．２６（ｍ，１Ｈ），１．２８−１．３８（ｍ，１２Ｈ），１．４３−１．６４（ｍ，２Ｈ），１．７８−１．９０（ｍ，２Ｈ），２．１８−２．３６（ｍ，１Ｈ），２．７５−３．１０（ｍ，３Ｈ），３．１３−３．２９（ｍ，２Ｈ），３．３４−３．６６（ｍ，２Ｈ），３．５５（ｓ，３Ｈ，主回転異性体），３．５９（ｓ，３Ｈ，副回転異性体），３．７４−４．２６（ｍ，１２Ｈ），４．５３−４．６６（ｍ，１Ｈ），４．７６−４．８８（ｍ２Ｈ），５．１７−５．３５（重なり合った二重の二重線，１Ｈ），５．４２−５．５４（重なり合った二重の二重線，１Ｈ），５．９８−６．１０（ｍ，１Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝１３．９，１Ｈ，主回転異性体），７．８４（ｄ，Ｊ＝１４．３，１Ｈ，副回転異性体），８．５４（ｓ，１Ｈ，主回転異性体），８．５５（ｓ，１Ｈ，副回転異性体）
【０３５２】
７−（（４aS,７aS）−１−（３，３−ビス（ジエチルホスホノ）プロピオニル）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（１０６）：アリルエステル１０５（０．８０ｇ，１．０４mmol）のTHF（２０ml）溶液に、Pd(PPh３)４(２４mg，０．０２mmol)およびトルエンスルフィン酸ナトリウム（２０４mg，１．１４mmol）の水（２ml）溶液を加えた。混合物を室温で１．２５時間攪拌し、蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィ（傾斜溶離剤：５％メタノール／CH２Cl２‐１０％メタノール／CH２Cl２）で精製すると、１０６（０．６０ｇ，７９％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，回転異性体の混合物）：デルタ０．７６−０．８５（ｍ，１Ｈ），１．０２−１．１９（ｍ，２Ｈ），１．２５−１．４０（ｍ，１３Ｈ），１．４６−１．６７（ｍ，２Ｈ），１．８０−１．９３（ｍ，２Ｈ），２．３３−２．４０（ｍ，１Ｈ），２．７２−３．１０（ｍ，３Ｈ），３．１２−３．３６（ｍ，２Ｈ），３．４０−３．６５（ｍ，１Ｈ），３．５６（ｓ，３Ｈ，主回転異性体），３．６０（ｓ，３Ｈ，副回転異性体），３．７８−４．２８（ｍ，１１Ｈ），４．５７−４．７０（ｍ，１Ｈ），５．２０−５．３０（ｍ，１Ｈ），７．８１（ｄ，Ｊ＝１３．９，１Ｈ，主回転異性体），７．８４（ｄ，Ｊ＝１３．６，１Ｈ，副回転異性体），８．７８（ｓ，１Ｈ，主回転異性体），８．７９（ｓ，１Ｈ，副回転異性体）
【０３５３】
７−（（４aS,７aS）−１−（３，３−ビスホスホノプロピオニル）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（１０７）：１０７（０．６０ｇ，０．８２mmol）のCH２Cl２（４０ml）溶液に、TMSBｒ（１．１ml，８．２mmol）を添加した。反応混合物を３８時間攪拌し、溶媒を減圧下で除去し、固形物を高真空下で１時間乾燥した。その固形物をH２O（８０ml）に懸濁し、直ちに１MのNaOHを加えてｐHを７に調整し、生成物の溶液を得た。生成物の溶液は濃縮し、逆相クロマトグラフィ（傾斜溶離剤：１００％の水‐２５％のメタノール／水）で精製した。純粋な生成物１０７が黄色の固体として得られた（１８９mg，生成物の四ナトリウム塩に基づいて回収率３２％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ，回転異性体の混合物）：デルタ０．７３−０．８３（ｍ，１Ｈ），０．９５−１．１６（ｍ，２Ｈ），１．１７−１．２８（ｍ，１Ｈ），１．４６−１．７３（ｍ，２Ｈ），１．７６−１．８９（ｍ，２Ｈ），２．３０−２．６２（ｍ，２Ｈ），２．６７−４．４８（ｍ，８Ｈ），３．６０（ｓ，３Ｈ），４．８７−４．９８（ｍ，０４３Ｈ），５．０８−５．１８（ｍ，０．５７Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝１４．３，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ）；１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ−９６．８８−９６．７３（ｍ，１Ｆ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ１９．９４−２０．２６（ｍ，２Ｐ）；ＭＳ：（ＭＨ＋）６１８．１
【０３５４】
スキーム３５
ガチフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体１１２の調製
【化１０９】
2008536911.tif 000098
【０３５５】
アリル−７−（４−（tert−ブトキシカルボニル）−３−メチルピペラジン−１−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（１０８）：酸１６（０．６０ｇ，１．３mmol）の乾燥DMF（１４ml）溶液に、K２CO３（２２１mg，１．６mmol）およびアリルブロマイド（１４０マイクロリットル，１．６mmol）を添加した。反応混合物を摂氏７５−８０度で２４時間加熱し、蒸発させ、残渣を水および酢酸エチルへ移した。水の層を酢酸エチルで抽出し、一緒にした有機物を塩水で洗浄し、乾燥（MgSO４）・蒸発させた。粗生成物１０８（０．５１ｇ，７８％）は次の工程で使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．８３−０．９８（ｍ，２Ｈ），１．０７−１．２０（ｍ，２Ｈ），１．３３（ｄ，Ｊ＝６．６，１Ｈ），１．４９（ｓ，９Ｈ），３．１５−３．４９（ｍ，５Ｈ），３．７２（ｓ，３Ｈ），３．８４−３．９９（ｍ，２Ｈ），４．３４（ｂｓ，１Ｈ），４．８３（ｄ，Ｊ＝５．９，１．３，１Ｈ），５．４８（ｄｄ，Ｊ＝１７．２，１．５，１Ｈ），６．００−６．１１（ｍ，２Ｈ），５．２８（ｄｄ，Ｊ＝１０．４，１．３，１Ｈ），５．４８（ｄｄ，Ｊ＝１７．２１．５，１Ｈ），６００−６．１１（ｍ，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝１２．５，１Ｈ），８．５９（ｓ，１Ｈ）
【０３５６】
アリル−７−（３-（メチルピペラジン−１−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（１０９）：摂氏０度に冷却した乾燥メタノール（２０ml）中の保護アミン１０８（０．５１ｇ，０．９９mmol）溶液に、アセチルクロライド（４．３ml，６０．５mmol）を添加した。その結果得られた溶液を４０分間かけて室温まで温め、蒸発させ、残渣を氷冷した飽和NaHCO３およびCH２Cl２へ移した。乾燥・蒸発後、粗生成物１０９が得られた（０．３８ｇ，９２％）。次の工程で直接使用できるほど純粋であった。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．８６−１．００（ｍ，２Ｈ），１．０８−１．１８（ｍ，５Ｈ），２．８７−２．９７（ｍ，１Ｈ），３．００−３．１４（ｍ，３Ｈ），３．２１−３．３９（ｍ，３Ｈ），３．７７（ｓ，３Ｈ），３．８６−３．９５（ｍ，１Ｈ），４．８０−４．８６（ｍ，２Ｈ），５．２５−５．３０（ｍ，１Ｈ），５．４５−５．５１（ｍ，１Ｈ），６．００−６．１０（ｍ，１Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝１２．５，１Ｈ），８．５８（ｓ，１Ｈ）
【０３５７】
アリル−７−（４−（３，−（ジエチルホスホノ）プロピオニル）−３−メチルピペラジン−１−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（１１０）：摂氏０度に冷却したCH２Cl２（１５ml）中の粗アミン１０９（０．３７８ｇ，０．９１０mmol）、トリエチルアミン（０．１５ml，１．０９mmol）およびDMAP（１１mg，０．０９mmol）に、粗アシルクロライド１０２（８．５ml中１．１３mmol）のCH２Cl２溶液を滴加した。その結果得られた混合物を室温まで温めて一晩放置し、CH２Cl２で希釈し、飽和NaHCO３で洗浄し、CH２Cl２で逆抽出した。一緒にした有機物を塩水で洗浄し、乾燥（MgSO４）・蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィ（５％メタノール／CH２Cl２）にて純粋のアミド１１０（０．５５ｇ，８１％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，回転異性体の混合物）：デルタ０．８７−０．９９（ｍ，１Ｈ），１．１０−１．２１（ｍ，２Ｈ），１．２９−１．４３（ｍ，１５Ｈ），２．７８−３．０５（ｍ，２Ｈ），３．１６−３．８２（ｍ，６Ｈ），３．７２（ｓ，３Ｈ），３．８５−３．９５（ｍ，１Ｈ），４．１２−４．３０（ｍ，９Ｈ），４．４７−４．５９（ｍ，０．５Ｈ），４．８０−４．９２（ｍ，２．５Ｈ），５．２８（ｄｄ，Ｊ＝１０．４，１．３，１Ｈ），５．４５−５．５５（ｍ，１Ｈ），６．００−６．１２（ｍ，１Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝１２．５，１Ｈ），８．５９（ｓ，１Ｈ）
【０３５８】
７−（４−（３，３−ビス（ジエチルホスホノ）プロピオニル）−３−メチルピペラジン−１−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（１１１）：アリルエステル１１０（０．５５ｇ，０．７４mmol）のTHF（２０ml）溶液に、Pd(PPh３)４(２０mg，０．０２mmol)およびトルエンスルフィン酸ナトリウム（１５８mg，０．８９mmol）の水（１．６ml）溶液を加えた。混合物を室温で４５分間攪拌し、１MのHCｌ（０．９５ml，０．９５mmol）を加えてわずかに酸性とし、蒸発させた。残渣を再びCHCｌ３に溶解し、乾燥（MgSO４）・蒸発させた。その後、フラッシュクロマトグラフィ（５％メタノール／CHCl３）で精製すると、１１１（０．３５ｇ，６７％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，回転異性体の混合物）：デルタ０．９３−１．０６（ｍ，２Ｈ），１．１６−１．２８（ｍ，２Ｈ），１．３０−１．４０（ｍ，１５Ｈ），２．８１−３．０５（ｍ，２Ｈ），３．１８−３．８４（ｍ，６Ｈ），３．７３（ｓ，３Ｈ），３．９７−４．０５（ｍ，１Ｈ），４．１２−４２８（ｍ，９Ｈ），４．４９−４．６１（ｍ，０．５Ｈ），４．８４−４．９４（ｍ，０．５Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝２．５，１Ｈ），８．８３（ｓ，１Ｈ）
【０３５９】
７−（４−（３，３−ビスホスホノプロピオニル）−３−メチルピペラジン−１−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（１１２）：１１１（０．３５ｇ，０．５０mmol）のCH２Cl２（３０ml）溶液に、TMSBｒ（０．６６ml，５．０mmol）を添加した。反応混合物を２２時間攪拌し、溶媒を減圧下で除去し、固形物を高真空下で１時間乾燥した。その固形物をH２O（１２０ml）に懸濁し、直ちに１MのNaOHを加えてｐHを７．５に調整し、生成物の溶液を得た。生成物の溶液は蒸発させ、溶離剤として水を用い、連続逆相クロマトグラフィで精製した。純粋な生成物１１２が淡黄色の固体として得られた（１０８mg，生成物の四ナトリウム塩に基づいて回収率３４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ，回転異性体の混合物）：デルタ０．８８−１．０４（ｍ，２Ｈ），１．０６−１．２２（ｍ，２Ｈ），１．３８（ｄ，Ｊ＝７．０，１．７Ｈ），１．５１（ｄ，Ｊ＝６．６，１．３Ｈ），２．３９−２．６２（ｍ，１Ｈ），２．７８−３．０８（ｍ，２Ｈ），３．２７−３．４８（ｍ，４Ｈ），３．７７（ｓ，３Ｈ），３．９８−４．７８（ｍ，３Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝１２．８，１Ｈ），８．５３（ｓ，１Ｈ）；１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ−９５．７７−９５．６３（ｍ，１Ｆ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ１９．７６−２０．１６（ｍ，２Ｐ）；ＭＳ：（ＭＨ＋）５９０．０
【０３６０】
スキーム３６
モキシフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体１１７の調製
【化１１０】
2008536911.tif 000099
【０３６１】
ベンジル−７−（（４aS,７aS）−１−（tert−ブトキシカルボニル）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（１１３）：攪拌している１２（２．２６７ｇ，４．５２mmol）のDMF（４０ml）溶液に、炭酸カリウム（７４９mg，５．４２mmol）を添加した。１０分後ベンジルブロマイド（４．３２ｇ，２０．０mmol）を加え、その結果得られた混合物を室温で２０時間攪拌した。混合物を減圧下で濃縮し、それからEtOAc（４ｘ１５０ml）および塩水（２００ml）で抽出した。一緒にした有機層をMgSO４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮すると、１１３が白色の固体として得られた（２．３６６ｇ，８９％）。その固体は精製せずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．７４（ｍ，１Ｈ），１．０２（ｍ，２Ｈ），１．２３（ｍ，１Ｈ），１．４８（ｓ，１１Ｈ），１．７７（ｍ，２H），２．２２（ｍ，１Ｈ），２．８８（ｓ，１Ｈ），３．２１（ｍ，１Ｈ），３．３５（ｍ，１Ｈ），３．５４（ｓ，３Ｈ），３．８６（ｍ，２Ｈ），４．０３（ｍ，２Ｈ），４．７６（ｓ，１Ｈ），５．３９（ｄｄ，Ｊ＝１２．６，２０．６，２Ｈ），７．３３（ｍ，３Ｈ），７．５１（ｄ，Ｊ＝８．４，２Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝１４．１，１Ｈ），８．５４（ｓ，１Ｈ）
【０３６２】
ベンジル−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ‐７−（（４aS,７aS）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（１１４）：氷浴中の乾燥メタノール２５mlに、アセチルクロライド（５．３３ml，７４．９５mmol）を滴加した。１５分後、その３M HCｌメタノール溶液に１１３（２．６６８ｇ，４．５２mmol）を加えると、混合物は黄色に変わった。３０分後反応は終了した。混合物は減圧下で濃縮し、EtOAc（４ｘ１５０ml）および重炭酸ナトリウムの飽和溶液（２００ml）で抽出した。一緒にした有機物をMgSO４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮すると、１１４が白色の固体として得られた（１．７９１ｇ，８０％）。その固体は精製せずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．７７（ｍ，１Ｈ），１．０１（ｍ，２Ｈ），１．１４（ｍ，１Ｈ），１．５２（ｍ，１Ｈ），１．７７（ｍ，３Ｈ），２．２９（ｍ，１Ｈ），２．６８（ｔ，Ｊ＝１０．３，１Ｈ），３．０５（ｄ，Ｊ＝１２．１，１Ｈ），３．３５（ｍ，３Ｈ），３．５４（ｓ，３Ｈ），３．８６（ｍ，３Ｈ），５．３６（ｄｄ，Ｊ＝１２．６，２０．６，２Ｈ），７．３６（ｍ，３Ｈ），７．５１（ｄ，Ｊ＝８．４，２Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝１４．１，１Ｈ），８．５２（ｓ，１Ｈ）
【０３６３】
ベンジル−７−（（４aS,７aS）−１−（（（４−（２，２−ビス（ジエチルホスホノ）エチル）フェニルカルバモイル）メトキシ）カルボニル）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（１１５）：乾燥DMF２５ml中の１１４（１００mg，０．２０３mmol）および炭酸セシウム（２００mg，０．６１０mmol）の溶液から室温で二酸化炭素を泡立たせた。次に６０ｂ（１０４mg，０．２０３mmol）をその溶液に加え、二酸化炭素の泡立ちをさらに３０分間継続させた。２０時間後、反応は終了した。次に、混合物を減圧下で濃縮し、CH２Cl２（３ｘ１００ml）および塩水（１００ml）で抽出した。一緒にした有機層をMgSO４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。粗油をシリカゲルクロマトグラフィ（CH２Cl２中５％のメタノール）で精製すると、１１５が淡黄色の油として得られた（１０１mg，５１％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．７４（ｍ，１Ｈ），０．９９（ｍ，２Ｈ），１．２３（ｍ，１３Ｈ），１．５２（ｍ，２Ｈ），１．７８（ｍ，２Ｈ），２．２８（ｍ，１Ｈ），２．５７（ｔｔ，Ｊ＝６．３，２３．８，１Ｈ），３．１９（ｍ，４Ｈ），３．４２（ｔ，Ｊ＝９．２，１Ｈ），３．５４（ｓ，３Ｈ），３．８４（ｍ，２Ｈ），４．１２（ｍ，９Ｈ），４．７１（ｍ，２Ｈ），４．８４（ｑ，Ｊ＝８．８，１Ｈ），５．３４（ｄｄ，Ｊ＝１２．６，２０．６，２Ｈ），７．３０（ｍ，５Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝７．３，４Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝１４．１，１Ｈ），８．５２（ｓ，２Ｈ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）デルタ２３．９６４（ｓ，２Ｐ）
【０３６４】
７−（（４aS,７aS）−１−（（（４−（２，２−ビス（ジエチルホスホノ）エチル）フェニルカルバモイル）メトキシ）カルボニル）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（１１６）：EtOH（１０ml）中の１１５（１０１mg，０．１０４mmol）およびPd／C１０％（５０mg）混合物に、シクロへキセン（２ml，２０mmol）を添加し、その混合物を２０時間還流した。次に、グラスファイバー濾紙を用いて触媒を濾過し、溶媒を減圧下で除去すると、１１６が無色の油として得られた（８８mg，９６％）。その油は精製せずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．８１（ｍ，１Ｈ），１．１１（ｍ，２Ｈ），１．２５（ｍ，１５Ｈ），１．５３（ｍ，２Ｈ），１．８３（ｍ，２Ｈ），２．３３（ｍ，１Ｈ），２．５９（ｔｔ，Ｊ＝２３．８、６．３，１Ｈ），３．２２（ｍ，４Ｈ），３．４８（ｔ，Ｊ＝９．２，１Ｈ），３．５７（ｓ，３Ｈ），３．９５（ｍ，２Ｈ），４．０９（ｍ，８Ｈ），４．７４（ｓ，２Ｈ），４．８８（ｑ，Ｊ＝８．８，１Ｈ），７．２５（ｍ，３Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝７．３，１Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝１４．１，１Ｈ），８．１０（ｓ，１Ｈ），８．７６（ｓ，２Ｈ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）デルタ２３．９４９（ｓ，２Ｐ）
【０３６５】
７−（（４aS,７aS）−１−（（（４−（２，２−ビスホスホノエチル）フェニルカルバモイル）メトキシ）カルボニル）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（１１７）：化合物１１６（２００mg，０．２２７mmol）のCH２Cl２（２５ml）溶液に、０．３５ml（２．７２４mmol）のブロモトリメチルシランを添加した。混合物を室温で一晩攪拌してから濃縮した。残渣は少なくとも３０分間高真空下に保ち、それから水に溶解した。その結果得られた溶液のｐHを１N水酸化ナトリウム水溶液で７．１にし、溶媒を減圧下で除去した。そのようにして得た固形物をWaters C18 Sep-Pak（登録商標）カラム（２０cc）に移し、水および２：１の水／メタノールで傾斜溶離すると、生成物１１７（７５mg，４３％）が、凍結乾燥後オフホワイトの固体として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．６１（ｍ，１Ｈ），０．８４（ｍ，１Ｈ），０．９５（ｍ，１Ｈ），１．０３（ｍ，１Ｈ），１．４３（ｍ，２Ｈ），１．７０（ｍ，２Ｈ），２．０３（ｔｔ，Ｊ＝２３．８、６．３，１Ｈ），２．２１（ｍ，１Ｈ），２．９５（ｔ，Ｊ＝１５．３，３Ｈ），３．１７（ｄ，Ｊ＝９．８，１Ｈ），３．３８（ｓ，１Ｈ），３．４５（ｓ，３Ｈ），３．８５（ｔ，Ｊ＝９．４，１Ｈ），３．９３（ｍ，３Ｈ），４．６５（ｑ，Ｊ＝１０．３，２Ｈ），４．７７（ｓ，１Ｈ），７．１８（ｄ，Ｊ＝８．６，２Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝８．６，２Ｈ），７．４９（ｄ，Ｊ＝１４．５，１Ｈ），８．３１（ｓ，１Ｈ）；３１Ｐ  ＮＭＲ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）デルタ２０．２７９（ｓ，２Ｐ）
【０３６６】
スキーム３７
ガチフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体１２１の調製
【化１１１】
2008536911.tif 000100
【０３６７】
１‐（４‐ヒドロキシフェニル）プロプ‐２‐エン‐１‐オン（１１８）：THF（２０ml）中の４’‐ヒドロキシアセトフェノン（２．７０ｇ，１９．９mmol）、パラホルムアルデヒド（２．６８ｇ，８９．３mmol）およびトリフルオロ酢酸N‐メチルアニリニウム（６．５１ｇ，２９．４mmol）の混合物を３時間還流した。混合物を冷却し、ジエチルエーテル（２００ml）に加え、フラスコをさらにジエチルエーテル（１００ml）で洗浄した。生成物の溶液を赤色ゴムからデカントし、濾過した。それを蒸発させると粗生成物１１８（２．０ｇ，６８％）が得られた。それを直接次の工程で用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ５．６９（ｂｓ，１Ｈ），５．９２（ｄｄ，Ｊ＝１０．４，１．７，１Ｈ），６．４４（ｄｄ，Ｊ＝１７．０，１．７，１Ｈ），６．９３（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ），７．１８（ｄｄ，Ｊ＝１７．２，１０．６，１Ｈ），７．９３（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ）
【０３６８】
１‐（４‐（４，４‐ビス（ジエチルホスホノ）ブトキシ）フェニル）プロプ‐２‐エン‐１‐オン（１１９）：アセトン（７５ml）中のヨウ化物１１（３．１ｇ，６．８mmol）、フェノール１１８（１．２１ｇ，８．１７mmol）およびK２CO３（１．０３３ｇ，７．４７mmol）の混合物を6.5時間還流した。混合物を冷却し、濾過し、蒸発させた。残渣をCH２Cｌ２（１７０ml）に再溶解し、セライトを用いて濾過し、蒸発させると、粗生成物１１９が得られた（３．２ｇ，９９％）。これを次の工程で直接用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．２８−１．３９（ｍ，１２Ｈ），１．８９−２．２５（ｍ，４Ｈ），２．２６−２．４８（ｍ，１Ｈ），４．０５（ｔ，Ｊ＝５．７．２Ｈ），４．１２−４．２６（ｍ，８Ｈ），５．８７（ｄｄ，Ｊ＝１０．６，１．８，１Ｈ），６．４２（ｄｄ，Ｊ＝１６．９，１．８，１Ｈ），６．９３（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ），７．１７（ｄｄ，Ｊ＝１７．０，１０．４，１Ｈ），７．９５（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ）
【０３６９】
１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４‐ジヒドロ−７−（４−（３−（４−（４，４−ビス（ジエチルホスホノ）ブトキシ）フェニル）−３−オキソプロピル）−３−メチルピペラジン−１−イル）−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（１２０）：CH２Cｌ２（２００ml）中の粗エノン１１９（３．２ｇ，６．７mmol）、ガチフロキサシン１５（３．０７ｇ，８．１８mmol）、DMAP（２００mg，１．６４mmol）およびトリエチルアミン（１．４ml，１０．０mmol）の混合物を室温で２０時間攪拌した。混合物を蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィ（傾斜溶離：５％メタノール／CH２Cｌ２‐１０％メタノール／CH２Cｌ２）で精製すると、１２０が得られた（３．６ｇ，６３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．９４−１．０４（ｍ，２Ｈ），１．１２−１．２８（ｍ，５Ｈ），１．３０−１．３７（ｍ，１２Ｈ），２．０６−２．２４（ｍ，４Ｈ），２．２７−２．４５（ｍ，１Ｈ），２．５５−３．５０（ｍ，１０Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ），３．９７−４．０８（ｍ，３Ｈ），４．１３−４．２４（ｍ，８Ｈ），６．９２（ｄ，Ｊ＝８．８．２Ｈ），７．８６（ｄ，Ｊ＝１２．１，１Ｈ），７．９４（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ），８．８０（ｓ，１Ｈ）
【０３７０】
１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−７−（４−（３−（４−（４，４−ビスホスホノブトキシ）フェニル）−３−オキソプロピル）−３−メチルピペラジン−１−イル）−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸（１２１）：１２０（３．６ｇ，４．３mmol）のCH２Cｌ２（１５０ml）溶液に、TMSBｒ（５．６ml，４２mmol）を添加した。反応混合物を２６．５時間攪拌し、溶媒を減圧下で除去し、固形物を高真空下で１時間乾燥した。その固形物をH２O（８００ml）に懸濁し、直ちに１MのKOHを加えてｐHを８に調整し、溶解速度の遅い生成物の溶液を得た。生成物の溶液は摂氏３０度で蒸発させ、逆相クロマトグラフィ（傾斜溶離剤：１００％の水‐３０％のメタノール／水）で精製した。純粋な生成物１２１が白色の綿毛状固体として得られた（１．２６g，生成物の四ナトリウム塩に基づいて回収率３３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．８８−１．０２（ｍ，２Ｈ），１．０８−１．２２（ｍ，２Ｈ），１．１７（ｄ，Ｊ＝６．２，３Ｈ），１．７７−２．１４（ｍ，５Ｈ），２．７２−３．３０（ｍ，１０Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），４．０６−４．１４（ｍ，１Ｈ），４．２１（ｔ，Ｊ＝６．４，２Ｈ），７．１４（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝１２．８，１Ｈ），８．０５（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ），８．５２（ｓ，１Ｈ）；１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ−１２２．４４（ｄ，Ｊ＝１２．０，１Ｆ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ２０．８８（ｓ，２Ｐ）；ＭＳ：（ＭＨ＋）７４０．２
【０３７１】
スキーム３８
ガチフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体１２９の調製
【化１１２】
2008536911.tif 000101
【０３７２】
１‐（４‐ブロモフェニル）‐１‐オキソプロパン‐２‐イルギ酸塩（１２３）：ギ酸（１．６ml，４３mmol）のアセトニトリル（２０ml）溶液を氷浴で冷却し、TEA（６．０ml，４３mmol）、次に１０mlTHF／アセトニトリル（１：１）中の２．４’‐ジブロモプロピオフェノン（１０．０ｇ，３４．２mmol）をそれに順次滴加した。その結果得られた溶液を室温まで温めながら１８時間攪拌した。その結果得られた無色の沈殿物を濾過し、有機物を減圧除去した。残渣を再びEtOAcに溶解し、もう一度濾過し、濃縮すると、１２３が黄色の油として得られた。それを精製せずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．５６（ｄ，Ｊ＝７．０．３Ｈ），６．０２（ｑ，Ｊ＝７．０，１Ｈ），７．６３（ｄ，Ｊ＝８．７，２Ｈ），7．８０（ｄ，Ｊ＝８．７，２Ｈ），８．１１（ｓ，１Ｈ）
【０３７３】
１‐（４‐ブロモフェニル）‐２‐ヒドロキシプロパン‐１‐オン（１２４）：粗生成物１２３をMeOH（１００ml）に溶解し、次に１MのNaOH（１．５ml）を加え、その結果得られた溶液を１８時間攪拌した。約半分のメタノールを減圧除去し、飽和NH４Cl水溶液を加えて反応をクエンチした。反応物はEtOAcで抽出し、有機層を塩水で洗浄し、Na２SO４で乾燥し濃縮すると、黄色の残渣が得られた。それをシリカゲルフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン中１０％から５０％のEtOAc）で精製すると、１２４が黄色の油として得られた（５．２７ｇ，２工程で６８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．４４（ｄ，Ｊ＝７．０．３Ｈ），３．７（ｂｓ，１Ｈ），５．１１（ｂｑ，Ｊ＝６．９，１Ｈ），７．６５（ｄ，Ｊ＝８．５，２Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝８．５，２Ｈ）
【０３７４】
４‐（４‐ブロモフェニル）‐５‐メチル‐１，３‐ジオキソール‐２‐オン（１２５）：１２４の１，２ジクロロエタン（DCE，６０ml）溶液を氷浴で冷却し、２０％ホスゲン（２３．５ml，４０．１mmol）のトルエン溶液を加えた。１５分間攪拌後、N,N‐ジメチルアニリン（４．０ml，７９mmol）のDCE（１０ml）溶液を同じ温度で１時間かけて滴加した。氷浴を除き、反応物を摂氏７０度で２０時間加熱した。溶液をCH２Cl２で希釈し、水、１０％の水性HCｌ、水、塩水で洗浄し、Na２SO４で乾燥し、濾過した。溶媒を除去した後、生成物をEtOAc／ヘキサンで再結晶すると、１２５が淡緑色の固体として得られた（６．０７ｇ，６３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ２．３６（ｓ，３Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝８．７．２Ｈ），７．５８（ｄ，Ｊ＝８．７，２Ｈ）
【０３７５】
エチル（ジエチルホスホノメチル）‐（４‐（５‐メチル‐２‐オキソ‐１，３‐ジオキソール‐４‐イル）フェニル）ホスフィン酸塩（１２６）：アセトニトリル（３ml）中の１２５（０．３２３ｇ，１．２７mmol）、ジエチル（エトキシホスフィニル）メチルホスホン酸塩（０．３２５ｇ、１．３３mmol）、TEA（０．５３０ml，３．８０mmol）およびPd(PPh３)４(０．１４６ｇ，０．１２７mmol)の混合物を摂氏９０度で３時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、生成物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィ（CH２Cｌ２中０％から６％のMeOH）で精製すると、１２６が黄色の固体として得られた（０．３６８ｇ，７０％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．１５−１．２３（ｍ，３Ｈ），１．２７−１．３６（ｍ，６Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．５４−２．７２（ｍ，２Ｈ），３．９３−４．２１（ｍ，６Ｈ），７．５８（ｄｄ，Ｊ＝２．８，８．５，２Ｈ），７．９４（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１２．２，２Ｈ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）デルタ１７．４１−１７．５４（ｍ，１Ｐ），３０．８６−３１．０８（ｍ，１Ｐ）
【０３７６】
エチル（ジエチルホスホノメチル）‐（４‐（５‐（ブロモメチル‐２‐オキソ‐１，３‐ジオキソール‐４‐イル）フェニル）ホスフィン酸塩（１２７）：CCｌ４中の１２６（１．７９ｇ，４．２８mmol）、NBS（０．７６１ｇ，４．２８mmol）および１，１’‐アゾビス（シクロヘキサンカルボニトリル）（０．１１ｇ，０．４３mmol）の混合物を強い可視光下で４時間加熱還流した。１Ｈ‐ＮＭＲによれば、その時点ですべての１２６が反応していた。溶媒は吸引装置を使って除去し、粗生成物をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィ（CH２Cｌ２中０％から５％のMeOH）で精製すると、１２７が黄色の油として得られた（１．２６ｇ，６０％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．２２（ｔ，Ｊ＝７．１，３Ｈ），１．３１（ｔ，Ｊ＝７．１，３Ｈ），１．３５（ｔ，Ｊ＝７．１，３Ｈ），２．６４（ｄｄｄ，Ｊ＝２．８，１８．０，２０．４，２Ｈ），３．９５−４．２３（ｍ，６Ｈ），４．４４（ｓ，２Ｈ），７．６６（ｄｄ，Ｊ＝２９，８．４，２Ｈ），８．０２（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１２．２，２Ｈ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）デルタ１９．６３（ｄ，Ｊ＝５．６，１Ｐ），３２．９３（ｄ，Ｊ＝５．６，１Ｐ）
【０３７７】
１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐７‐（３‐メチル‐４‐（（２‐オキソ‐５‐（４‐（O‐エチル（ジエチルホスホノメチル）ホスホノイル）フェニル‐１，３‐ジオキソール‐４‐イル）メチル）ピペラジン‐１‐イル）‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸（１２８）：１５および１２７のDMF溶液を室温で１６時間攪拌した。反応は飽和NH４Cｌ水溶液を加えてクエンチし、生成物は酢酸エチルで抽出した。有機層は塩水で洗浄し、NaSO４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルHPFC（EtOAc中１０％のMeOH、次にCH２Cl２中５％のMeOH）で精製すると、１２８が淡黄色の固体として得られた（４４mｇ，２８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．９７−１．０３（ｍ，２Ｈ），１．１７−１．３８（ｍ，１４Ｈ），２．６１−２．７０（ｍ，３Ｈ），２．７９（ｂｓ，１Ｈ），２．９７（ｂｄ，Ｊ＝３．０，１Ｈ），３．１６（ｂｔ，Ｊ＝９．２，１Ｈ），３．３９−３．４７（ｍ，３Ｈ），３．５８（ｄ，Ｊ＝１４．７，１Ｈ），３．７７（ｓ，３Ｈ），３．９９−４．２３（ｍ，８Ｈ），７．７９（ｄｄ，Ｊ＝２．１，８．３，２Ｈ）７．８９（ｄ，Ｊ＝７．９，１Ｈ），８．００（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１１．４，２Ｈ），８．８２（ｓ，１Ｈ）
【０３７８】
１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐７‐（３‐メチル‐４‐（（２‐オキソ‐５‐（４‐（ホスホノメチルホスフィノイル）フェニル‐１，３‐ジオキソール‐４‐イル）メチル）ピペラジン‐１‐イル）‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸（１２９）：攪拌している１２８（７０mg，０．０８８mmol）のCH２Cl２（４ml）溶液にTMSBｒ（０．１７５ml，１．３３mmol）を添加した。その結果得られた溶液を室温で１５時間攪拌し、溶媒は減圧下で除去した。固形物を３０mMのトリエチルアンモニウム重炭酸塩緩衝液（２ml）に懸濁し、トリエチルアミンを加えてｐHを約６に調整した。次にその溶液をC18 HPFC（３０mMのトリエチルアンモニウム重炭酸塩中の５％から５０％のCH３CN）で精製した。単離された生成物をさらにC18 HPFC（水中の５％から５０％のCH３CN）で精製すると、１２９がモノトリエチルアンモニウム塩として得られた（２０mg，３２％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ１．０３−１．０８（ｍ，２Ｈ），１．２３（ｄ，Ｊ＝７．６，２Ｈ），１．３６（ｄ，Ｊ＝５．８，２Ｈ），２．３３（ｄ，Ｊ＝１８．２，２Ｈ），３．０５−３．２５（ｍ，２Ｈ），３．３２−３．４４（ｍ，２Ｈ），３．５５−３．７０（ｍ，３Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），４．２３−４．３３（ｍ，２Ｈ），４．５８（ｄ，Ｊ＝１４．８，１Ｈ），７．７４−７．７７（ｍ，３Ｈ），７．９３（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１１．１，２Ｈ），８．９２（ｓ，１Ｈ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）デルタ１２．８２（ｓ，１Ｐ），２９．３７（ｓ，１Ｐ）；ＬＣＭＳ：８７．４％（２５４ｎｍ），８７．１％（２２０ｎｍ），８８．５％（２９０ｎｍ）；ＭＳ：（ＭＨ＋）７０８．２
【０３７９】
スキーム３９
ガチフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体１３４の調製
【化１１３】
2008536911.tif 000102
【０３８０】
テトラエチル‐１‐（N‐（N‐アルファ、イプシロン‐ジ‐（ｔ‐ブトキシカルボニル）リシノイル）アミノ）メチレンビスホスホン酸塩（１３０）：Boc−Lys（Boc）−OHジシクロヘキサミン塩（１．５７ｇ，２．９７mmol）のCH２Cｌ２（１２ml）溶液に、アミン３０（９００mg，２．９７mmol）、EDCI（６２６mg，３．２６mmol）およびDMAP（３６mg，０．３０mmol）を添加した。混合物を１８時間攪拌した後、沈殿物を濾過して除き、少量のCH２Cｌ２で洗浄した。一つにした濾液を１MのHCｌ、飽和NaHCO３溶液および塩水で洗浄した。有機層をNa２SO４で乾燥し、濾過し、乾燥するまで濃縮した。０−１５％MeOH／EtOAcを傾斜溶離剤として用い、残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィで精製したら、アミン１３０が白色の泡状物として得られた（１．３５ｇ，７２％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３０−１．３４（ｍ，１２Ｈ），１．４３（ｓ，１８Ｈ），１．３８−１．５３（ｍ，４Ｈ），１．５９−１．６９（ｍ，１Ｈ），１．７９−１．８７（ｍ，１Ｈ），３．０７−３．１２（ｍ，２Ｈ），４．１１−４．２４（ｍ，８Ｈ），４．７１（ｂｓ，１Ｈ），４．９７（ｄｔ，Ｊ＝２１．４，１０．１Ｈｚ，１Ｈ），５．１１（ｂｓ，１Ｈ），６．７６（ｄ，Ｊ＝１０．０，１Ｈ）
【０３８１】
テトラエチル‐１‐（N‐リシノイルアミノ）メチレンビスホスホン酸塩（１３１）：カルバミン酸塩１３０（１．３５ｇ，２．１４mmol）に、TFA／CH２Cｌ２（１１ml，４０％ｖ／ｖ）溶液を加えた。１８時間攪拌した後、反応混合物を濃縮乾燥し、Et２Oを加えて数度蒸発させた。その結果得られた脱保護物質である黄色の油（２．１ｇ，＞定量）はそれ以上精製せずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：デルタ１．２２−１．２８（ｍ，１２Ｈ），１．３４−１．４０（ｍ，２Ｈ），１．４８−１．５４（ｍ，２Ｈ），１．６８−１．７４（ｍ，２Ｈ），２．７１−２．７６（ｍ，２Ｈ），３．９３−３．９７（ｍ，１Ｈ），４．０３−４．１５（ｍ，８Ｈ），４．８２（ｄｔ，Ｊ＝２２．４，９．８Ｈｚ，１Ｈ），７．７７（ｂｓ，３Ｈ），８．２５（ｂｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，３Ｈ），９．２７（ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ）
【０３８２】
テトラエチル‐１‐（N‐（N‐アルファ、イプシロン‐ジ‐（ブロモアセチル）リシノイル）アミノ）メチレンビスホスホン酸塩（１３２）：摂氏０度のCH２Cｌ２（２７ml）中のTFA塩１３１（最高２．１４mmol）に、ピリジン（１．７３ml，２１．４mmol）およびブロモアセチルブロマイド（３９０マイクロリットル，４．４９mmol）を添加した。混合物を摂氏０度で１．５時間攪拌した後、CH２Cｌ２で希釈し、５％のHCｌ、飽和NaHCO３溶液および塩水で洗浄した。有機層をMgSO４で乾燥し、濾過し、濃縮乾燥した。傾斜溶離剤として０−２０％MeOH／EtOAcを用い、シリカゲルクロマトグラフィで精製すると、１３２が白色の泡状物として得られた（５７４mg，４０％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．３０−１．３７（ｍ，１２Ｈ），１．３８−１．４６（ｍ，２Ｈ），１．５３−１．６１（ｍ，２Ｈ），１．７２−１．８１（ｍ，１Ｈ），１．８６−１．９３（ｍ，１Ｈ），３．２５−３．３４（ｍ，２Ｈ），３．８７（ｓ，２Ｈ），３．８８（ｓ，２Ｈ），４．１３−４．２５（ｍ，８Ｈ），４．５３（ｑ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ），４．９７（ｄｔ，Ｊ＝２１．７，９．９Ｈｚ，１Ｈ），６．９６（ｂｓ，１Ｈ），７．０１（ｂｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１７（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）
【０３８３】
ビス（ガチフロキサシンエステル）結合体１３３：ジブロマイド（３１１mg，０．４６mmol）のDMF（５ml）溶液に、炭酸セシウム（１８７mg，０．９７mmol）およびBocガチフロキサシン１６（４３９mg，０．９２mmol）を添加した。混合物を室温で１８時間攪拌した。次にそれをH２Oに注ぎ、３ｘEtOAcで抽出した。一緒にした有機層を飽和NaHCO３溶液および塩水で洗浄し、MgSO４で乾燥し、濾過し、濃縮乾燥した。傾斜溶離液として２０−１００％MeCN／H２Oを用い、C18カラムの逆相フラッシュクロマトグラフィで粗生成物を精製し、さらに０−１０％MeOH／CH２Cｌ２を用い、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィで精製すると、結合体１３３が淡い桃色の固体として得られた（３１６mg，４７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．９３−０．９９（ｍ，４Ｈ），１．１４−１．１９（ｍ，４Ｈ），１．２５−１．３４（ｍ，１８Ｈ），１．４９（ｓ，９Ｈ），１．５０（ｓ，９Ｈ），１．５５−１．６１（ｍ，１Ｈ），１．６５−１．７７（ｍ，３Ｈ），１．９９−２．０６（ｍ，２Ｈ），３．２０−３．３５（ｍ，９Ｈ），３．３９−３．４７（ｍ，４Ｈ），３．７４（ｓ，６Ｈ），３．９１−３．９８（ｍ，４Ｈ），４．１１−４．１８（ｍ，８Ｈ），４．３４（ｂｓ，２Ｈ），４．４９−４．６８（ｍ，５Ｈ），５．０３（ｄｔ，Ｊ＝２１．９，１０．２Ｈｚ，１Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ，１Ｈ），７．８６（ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，２Ｈ），８．４７−８．５０（ｍ，２Ｈ），８．７２（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），９．５１（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ：９２．６％（２５４ｎｍ），９５．２％（２２０ｎｍ），９６．７％（３２０ｎｍ），Ｃ８７Ｈ９５Ｆ２Ｎ９Ｏ２１Ｐ２の質量（ＥＳ−）計算値１４６１、観察値１４６０（Ｍ−Ｈ）−
【０３８４】
ビス（ガチフロキサシンエステル）結合体１３４：保護結合体１３３（３９１mg，０．２７mmol）のCH２Cｌ２（５ml）溶液に、２．６‐ルチジン（１．５５ml，１３．４mmol）を添加した。混合物を摂氏マイナス７８度に冷却し、トリメチルシリルブロマイド（８８２マイクロリットル、６．６８mmol）を徐々に添加した。混合物の温度を室温まで上げ、１８時間攪拌した後、濃縮乾燥した。粗生成物を２回の連続逆相フラッシュフクロマトグラフィで精製した。一回目のカラムはｐH７で傾斜溶離液として５−６０％MeCN／５０mMのEt３NH２CO３緩衝液を用い、二回目のカラムはｐH７で傾斜溶離液として５−５０％MeCN／５０mMのEt３NH２CO３緩衝液を用いて行なった。一緒にした純粋な分画を凍結乾燥すると、結合体１３４が白色の固体として得られた（１６mg，５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６＋ＴＦＡ）：デルタ０．９７（ｂｓ，４Ｈ），１．０７−１．１０（ｍ，４Ｈ），１．１７（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，９Ｈ），１．２６（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，６Ｈ），１．３４−１．４９（ｍ，４Ｈ），１．６１−１．６４（ｍ，１Ｈ），１．７２−１．７６（ｍ，１Ｈ），３．１０（ｑ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，６Ｈ），３．１７−３．２６（ｍ，４Ｈ），３．３８−３．５２（ｍ，１０Ｈ），３．８１（ｓ，６Ｈ），４．０１，４．０６（ｍ，２Ｈ），４．４５−４．６４（ｍ，５Ｈ），７．６７（ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．６８（ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，１Ｈ）８．５２（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｓ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ：９８．１％（２５４ｎｍ），９７．６％（２２０ｎｍ），９９．１％（３２０ｎｍ），Ｃ４９Ｈ６３Ｆ２Ｎ９Ｏ１７Ｐ２の質量（ＥＳ−）計算値１１４９、観察値１１４８．２（Ｍ−Ｈ）−
【０３８５】
スキーム４０
ガチフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体１４１の調製
【化１１４】
2008536911.tif 000103
【０３８６】
６‐（エトキシ（ジエチルホスホノメチル）ホスフィノイル）‐３，４‐ジヒドロ‐４，４‐ジメチルクロメン‐２‐オン（１３５）：アセトニトリル（２０ml）中の６‐ブロモ‐４，４‐ジメチルクロマン‐２‐オン（３．５ｇ，９．７mmol）、ジエチル（エトキシホスフィニル）メチルホスホン酸塩（１．７ｇ，９．７mmol）、トリエチルアミン（４．１ml，２９mmol）およびPd（PPｈ３）４（０．５６ｇ，０．４８mmol）の混合物を１８時間摂氏１００度で加熱した。反応混合物は冷却し、アセトニトリル（５０ml）で希釈し、水性HCｌ（１０％）、水および飽和水性NaClで洗浄した。有機相をNaSO４で乾燥し、濾過し、濃縮した。Biotage（登録商標）フラッシュクロマトグラフィシステムを用い、シリカゲルクロマトグラフィ（CH２Cｌ２中０−１０％MeOH）で粗生成物を精製すると、１３５が淡黄色の油として得られた（３．０ｇ，７３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．２１（ｔ，Ｊ＝７．２，３Ｈ），１．３０−１．３７（ｍ，６Ｈ），１．４０（ｓ，６Ｈ），２．６１（ｄｄ，Ｊ＝１．７，１７．２，２０．７，２Ｈ），２．６６（ｓ，２Ｈ），３．９５−４．０８（ｍ，２Ｈ），４．１１−４．２１（ｍ，４Ｈ），７．１６（ｄｄ，Ｊ＝３．１，８．３，２Ｈ），７．７３（ｄｄ，Ｊ＝３．１，８．３，２Ｈ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ２０．０７（ｄ，Ｊ＝７．７，１Ｐ），３３．７４（ｄ，Ｊ＝７．７，１Ｐ）
【０３８７】
３‐（２‐ヒドロキシ‐５‐（エトキシ（ジエチルホスホノメチル）ホスフィノイル）フェニル）‐３‐メチルブタン酸（１３６）：１３５（０．９９ｇ，２．４mmol）およびKOH（０．０９５ｇ，２．４mmol）のMeOH溶液を室温で２時間攪拌した。溶媒を減圧下で除去し、生成物を水に再懸濁し、HCｌを加えてｐHを４に調整し、生成物をCH２Cｌ２で抽出した。有機物をNaSO４で乾燥し、濾過し、濃縮すると、１３６が淡黄色の油として得られた（１．１ｇ，１０５％）。それを精製せずに使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．２６（ｔ，Ｊ＝７．２，３Ｈ），１．２９−１．３７（ｍ，６Ｈ），１．４５（ｓ，３Ｈ），２．６３（ｄｄ，Ｊ＝１７．７，２０．９，２Ｈ），２．９３（ＡＢｑ，Ｊ＝１４．２，２Ｈ），４．００−４．２０（ｍ，６Ｈ），６．７４（ｂｓ，１Ｈ），７．５６（ｄｄｄ，Ｊ＝１．６，８．５，１２．２，２Ｈ），７．６３（ｄ，Ｊ＝１３．３，１Ｈ）
【０３８８】
ベンジル‐３‐（２‐ヒドロキシ‐５‐（エトキシ（ジエチルホスホノメチル）ホスフィノイル）フェニル）‐３‐メチルブタン酸塩（１３７）：攪拌している１３６（１．１ｇ，２．５mmol）のアセトニトリル（５ml）溶液に、KOH水溶液（０．１４ｇ、２．５mmol）を加えた。１０分後溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣は真空下で１時間乾燥した。淡黄色の固体をもう一度DMF（１０ml）に懸濁し、ベンジルブロマイド（３３０マイクロリットル、２．８当量）を加えた。その結果得られた溶液を室温で２時間攪拌した。混合物をEtOAc（８０ml）で希釈し、H２Oおよび飽和NaCl水溶液で洗浄し、Na２SO４で乾燥した。Biotage（登録商標）フラッシュクロマトグラフィシステムを用い、シリカゲルクロマトグラフィ（CH２Cｌ２中０−１０％MeOH）で粗生成物を精製すると、１３７が淡黄色の油として得られた（０．６４ｇ，４８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．２３（ｔ，Ｊ＝７．１，３Ｈ），１．２６（ｔ，Ｊ＝７．１，３Ｈ），１．３０（ｔ，Ｊ＝７．１，３Ｈ），１．４５（ｓ，３Ｈ），１．４９（ｓ，３Ｈ），２．６０（ｄｄ，Ｊ＝１７．４，２０．９，２Ｈ），３．００（ＡＢｑ，Ｊ＝１４．０，２Ｈ），３．７８−３．８８（ｍ，２Ｈ），３．９９−４．１５（ｍ，４Ｈ），４．９３（ｓ，２Ｈ），６．７５−６．７８（ｍ，１Ｈ），７．１４（ｄｄ，Ｊ＝２．０，７．５，２Ｈ），７．２５−７．３１（ｍ，３Ｈ），７．５８（ｄｄｄ，Ｊ＝１．４，８．０，１１．９，１Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝１３．４，１Ｈ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ２１．０４（ｄ，Ｊ＝４．６，１Ｐ），３６．００（ｄ，Ｊ＝４．６，１Ｐ）
【０３８９】
ベンジル‐３‐（２‐アセトキシ‐５‐（エトキシ（ジエチルホスホノメチル）ホスフィノイル）フェニル）‐３‐メチルブタン酸塩（１３８）：１３７（０．６４ｇ，１．２mmol）およびDMAP（触媒）のピリジン（１０ml）溶液を氷浴で冷却し、アセチルクロライド（９４マイクロリットル，１．３mmol）を滴加した。その結果得られた溶液をその温度で２時間攪拌し、その後EtOAc（８０ml）で希釈した。有機物を水性HCｌ（１０％）、水および飽和水性NaClで洗浄し、NaSO４で乾燥した。Biotage（登録商標）フラッシュクロマトグラフィシステムを用い、シリカゲルクロマトグラフィ（CH２Cｌ２中０−１０％MeOH）で粗生成物を精製すると、１３８が淡黄色の液体として得られた（０．５２ｇ，７５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．２０（ｔ，Ｊ＝７．１，３Ｈ），１．３０（ｔ，Ｊ＝７．１，６Ｈ），１．４９（ｓ，３Ｈ），２．３３（ｓ，３Ｈ），２．５６（ｄｄｄ，Ｊ＝６．８，１７．３，２３．４，２Ｈ），２．８４（ＡＢｑ，Ｊ＝１４．４，２Ｈ），３．９５−４．０４（ｍ，２Ｈ），４．０６−４．１８（ｍ，４Ｈ），４．９５（ｓ，２Ｈ），７．１４−７．２０（ｍ，３Ｈ），７．２８−７．３４（ｍ，３Ｈ），７．７３（ｄｄｄ，Ｊ＝１．９，８．２，１１．８，１Ｈ），７．８９（ｄｄ，Ｊ＝１．９，１３．３，１Ｈ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ２０．２０（ｄ，Ｊ＝９．９，１Ｐ），３３．８８（ｄ，Ｊ＝９．９，１Ｐ）
【０３９０】
３‐（２‐アセトキシ‐５‐（エトキシ（ジエチルホスホノメチル）ホスフィノイル）フェニル）‐３‐メチルブタン酸（１３９）：化合物１３８（０．５０ｇ，０．８７mmol）をMeOHに溶解し、H２（１気圧）下、Pd／Cで２時間水素添加した。触媒を濾過し、溶媒を除去すると、淡黄色の固体１３９（０．４１ｇ，９８％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．２１（ｄｔ，Ｊ＝０．４，７．１，３Ｈ），１．２８（ｄｔ，Ｊ＝０．４，７．１，３Ｈ），１．３１（ｔ，Ｊ＝７．１，３Ｈ），１．５０（ｓ，３Ｈ），１．５３（ｓ，３Ｈ），２．３７（ｓ，３Ｈ），２．６２（ｄｄｄ，Ｊ＝５．４，１８．４，２２．４，２Ｈ），２．７４（ＡＢｑ，Ｊ＝１３．９，２Ｈ），３．８９−４．１６（ｍ，６Ｈ），７．１７（ｄｄ，Ｊ＝３．６，８．２，１Ｈ），７．６９（ｄｄｄ，Ｊ＝１．９，８．２，１１．９，１Ｈ），７．８６（ｄｄ，Ｊ＝１．９，１３．７，１Ｈ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ２０．１７（ｄ，Ｊ＝５．０，１Ｐ），３４．５１（ｄ，Ｊ＝５．０，１Ｐ）
【０３９１】
７‐（４‐（３‐（２‐アセトキシ‐５‐（エトキシ（ジエチルホスホノメチル）ホスフィノイル）フェニル）‐３‐メチルブタノイル）‐３‐メチルピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸（１４０）：１３９（４００mg，０．８３６mmol）、１５（３１０mg，０．８４mmol）およびジイソプロピルエチルアミン（２９１マイクロリットル，１．６７mmol）のDMF（５ml）溶液を氷浴で冷却し、HBTU（３１７mg，０．８３６mmol）を一度に添加した。その結果得られた混合物を室温まで徐々に温めながら、一晩攪拌した。反応混合物をEtOAc（１００ml）で希釈し、水性HCｌ（１０％）、水および飽和水性NaClで洗浄し、NaSO４で乾燥した。Biotage（登録商標）フラッシュクロマトグラフィシステムを用い、シリカゲルクロマトグラフィ（CH２Cｌ２中０−１０％MeOH）でベイジュ色の粗生成物を精製すると、１４０が淡黄色の固体として得られた（２６０mg，３４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．９２−０．９４（ｍ，２Ｈ），１．１２−１．２７（ｍ，１４Ｈ），１．４３（ｓ，３Ｈ），１．４６（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），２．５３−５．６３（ｍ，１Ｈ），２．７４−２．８５（ｍ，３Ｈ），３．００−３．４０（ｍ，５Ｈ），３．６５（ｓ，３Ｈ），３．８８−４．０８（ｍ，６Ｈ），４．２７（ｂｓ，１Ｈ），４．６６（ｂｓ，１Ｈ），７．０７（ｄｄ，Ｊ＝３．２，８．１，１Ｈ），７．６０−７．６５（ｍ，１Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝１２．０，１Ｈ），７．８２（ｄｄ，Ｊ＝５．２，８．１，１Ｈ），８．７２（ｓ，１Ｈ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ２０．０７（ｄ，Ｊ＝８．７，１Ｐ），３３．９０（ｄ，Ｊ＝８．７，１Ｐ）
【０３９２】
７‐（４‐（３‐（２‐アセトキシ‐５‐（（ホスホノメチル）ホスホノイル）フェニル）‐３‐メチルブタノイル）‐３‐メチルピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸（１４１）：攪拌している１４０（１５０mg，０．１７９mmol）および２，６‐ルチジン（４１６マイクロリットル，３．５９mmol）のCH２Cｌ２（５ml）溶液に、TMSBｒ（３５５マイクロリットル，２．６９mmol）を添加した。その結果得られた黄色の溶液を室温で２３時間攪拌し、それから溶媒を減圧下で除去した。黄色の固体を水に再懸濁し、１MのNaOHを加えてその溶液のｐHを約６．５に調整した。次に、Biotage（登録商標）フラッシュクロマトグラフィシステムを用い、逆相クロマトグラフィ（水中０−６０％のCH３CN）でその溶液を精製すると、１４１がモノ２，６‐ルチジン塩として得られた（８０mg，６０％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．９９−１．０９（ｍ，２Ｈ），１．１６−１．２９（ｍ，５Ｈ），１．５１（ｓ，６Ｈ），２．４６（ｓ，３Ｈ），２．７０（ｓ，６Ｈ），２．９８−３．１０（ｍ，２Ｈ），３．１６−３．５４（ｍ，４Ｈ），３．７１（Ｓ，３Ｈ），３．８３（ｄ，Ｊ＝１２．７，１Ｈ），４．１７（ｄ，＝１２．９，１Ｈ），４．２１−４．２７（ｍ，１Ｈ），４．５６（ｂｓ，１Ｈ），７．２０（ｄｄ，Ｊ＝２．９，８．０，１Ｈ），７．５６（ｄｄ，Ｊ＝３．７，１２．２，１Ｈ），７．６２（ｄ，Ｊ＝８．０，２Ｈ），７．７１（ｂｄ，Ｊ＝９．２，１Ｈ），７．９３（ｄｄ，Ｊ＝３．８，１２．２，１Ｈ），８．２６（ｔ，Ｊ＝８．０，１Ｈ），８．８９（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＭＨ−）７５０．１
【０３９３】
スキーム４１
ガチフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体１４５の調製
【化１１５】
2008536911.tif 000104
【０３９４】
ベンジル‐３‐（２‐（２，２‐ジメチルアセトキシ）‐５‐（エトキシ（ジエチルホスホノメチル）ホスフィノイル）フェニル）‐３‐メチルブタン酸塩（１４２）：攪拌している１３７（８２５mg，１．５６mmol）およびDMAP（触媒）のピリジン（１０ml）溶液に、イソブチリルクロライド（１６５マイクロリットル，１．５６mmol）を室温で滴加した。その結果得られた溶液を２時間攪拌し、EtOAc（８０ml）で希釈した。有機物を水性HCｌ（５％）、水および飽和水性NaClで洗浄し、NaSO４で乾燥した。Biotage（登録商標）フラッシュクロマトグラフィシステムを用い、シリカゲルクロマトグラフィ（CH２Cｌ２中０−１０％MeOH）で粗生成物を精製すると、１４２が淡黄色の液体として得られた（７２８mg，７８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．１８−１．２２（ｍ，６Ｈ），１．２９−１．３３（ｍ，９Ｈ），１．４６（ｓ，３Ｈ），１．４９（ｓ，３Ｈ），２．５８（ｄｄｄ，Ｊ＝６．９，１７．５，２３．５，２Ｈ），２．７９−２．９０（ｍ，３Ｈ），３．９６−４．１９（ｍ，６Ｈ），４．９６（ｓ，２Ｈ），７．０９（ｄｄ，Ｊ＝３．４，８．３，１Ｈ），７．１８−７．２１（ｍ，２Ｈ），７．２８−７．３２（ｍ，３Ｈ），７．７２（ｄｄｄ，Ｊ＝１．９，８．３，１１．８，１Ｈ），７．８８（ｄｄ，Ｊ＝１．９，１３．３，１Ｈ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ２０．２８（ｄ，Ｊ＝９．８，１Ｐ），３４．０４（ｄ，Ｊ＝９．８，１Ｐ）
【０３９５】
３‐（２‐（２，２‐ジメチルアセトキシ）‐５‐（エトキシ（ジエチルホスホノメチル）ホスフィノイル）フェニル）‐３‐メチルブタン酸（１４３）：化合物１４２（７２５mg，１．２１mmol）をMeOH（２０ml）に溶解し、H２（１気圧）下、Pd／C（１００％、５００mg）で５時間水素添加した。触媒を濾過し、溶媒を除去すると、淡黄色の固体１４３（５４３mg，８８％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．２１（ｔ，Ｊ＝７．１，３Ｈ），１．２９（ｔ，Ｊ＝７．３，３Ｈ），１．３１（ｔ，Ｊ＝７．０，３Ｈ），１．３６（ｄ、J=７．０，６Ｈ），１．５０（ｓ，３Ｈ），１．５２（ｓ，３Ｈ），２．６３（ｄｄｄ，Ｊ＝３．９，１７．２，２２．２，２Ｈ），２．７６（ＡＢｑ，Ｊ＝１４．０，２Ｈ），２．８６（セプテット，Ｊ＝７．１，１Ｈ），３．９１−４．１６（ｍ，６Ｈ），７．１０（ｄｄ，Ｊ＝３．４，８．２，１Ｈ），７．６９（ｄｄｄ，Ｊ＝１．８，８．２，１１．７，１Ｈ），７．８６（ｄｄ，Ｊ＝１．８，１３．６，１Ｈ）
【０３９６】
７‐（４‐３‐（２‐（２，２‐ジメチルアセトキシ）‐５‐（エトキシ（ジエチルホスホノメチル）ホスフィノイル）フェニル）‐３‐メチルブタノイル）‐３‐メチルピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸（１４４）：１４３（３９８mg，０．７９０mmol）、１５（２９６mg，０．７９０mmol）およびジイソプロピルエチルアミン（２７５マイクロリットル，１．５８mmol）を含むDMF（５ml）溶液を氷浴で冷却し、HBTU（３００mg，０．７９０mmol）を一度に添加した。その結果得られた混合物を室温まで温めながら、一晩攪拌した。反応混合物をEtOAc（１００ml）で希釈し、水性HCｌ（１０％）、水および飽和水性NaClで洗浄し、NaSO４で乾燥した。Biotage（登録商標）フラッシュクロマトグラフィシステムを用い、シリカゲルクロマトグラフィ（EtOAc中０−５％MeOH）で粗物質を精製すると、１４４が淡黄色の液体として得られた（２２９ｇ，３４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．９７−１．００（ｍ，２Ｈ），１．１８−１．３６（ｍ，１４Ｈ），１．３８（ｄ，Ｊ＝７．１，６Ｈ），１．５４（ｓ，３Ｈ），１．５６（ｓ，３Ｈ），２．６３（ｄｄｄ，Ｊ＝５．６，１７．２，２２．０，２Ｈ），２．８５−２．９２（ｍ，３Ｈ），３．１３（ｂｓ，１Ｈ），３．２７−３．５１（ｍ，５Ｈ），３．７１（ｓ，３Ｈ），３．９８−４．１９（ｍ，６Ｈ），４．４３（ｂｓ，１Ｈ），４．８３（ｂｓ，１Ｈ），７．０８（ｄｄ，Ｊ＝３．５，８．１，１Ｈ），７．６７−７．７４（ｍ，１Ｈ），７．８９（ｄ，Ｊ＝１２．１，１Ｈ），７．９５（ｄｄ，Ｊ＝１．７，１３．７，１Ｈ），８．８３（ｓ，１Ｈ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ２０．１（ｄ，Ｊ＝９．０，１Ｐ），３４．３２（ｄ，Ｊ＝９．０，１Ｐ）
【０３９７】
７‐（４‐３‐（２‐（２，２‐ジメチルアセトキシ）‐５‐（（ホスホノメチル）ホスホノイル）フェニル）‐３‐メチルブタノイル）‐３‐メチルピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸（１４５）：攪拌している１４４（５６５mg，０．６５４mmol）および２，６‐ルチジン（１．５２ml，１３．１mmol）のCH２Cｌ２（１５ml）溶液に、TMSBｒ（１．２９ml，９．８９mmol）を添加した。その結果得られた淡緑色の溶液を室温で１８時間攪拌し、それから溶媒を減圧下で除去した。赤色の固体を水（５ml）に再懸濁し、１MのNaOHを加えてその溶液のｐHを約７に調整した。次に、Biotage（登録商標）フラッシュクロマトグラフィシステムを用い、逆相クロマトグラフィ（水中０−６０％のCH３CN）で２度その溶液を精製すると、１４５が二ナトリウム塩として得られた（１３０mg，１６％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．９９−１．０９（ｍ，２Ｈ），１．２１（ｄ，Ｊ＝７．３，３Ｈ），１．３３−１．４４（ｍ，２Ｈ），１．３８（ｄ，Ｊ＝７．０，６Ｈ），１．５１（ｓ，６Ｈ），２．２９（ＡＢｑ，Ｊ＝１６．４，２Ｈ），２．９３−３．１０（ｍ，３Ｈ），３．１４−３．４１（ｍ，２Ｈ），３．４８−３．５６（ｍ，２Ｈ），３．７１（Ｓ，３Ｈ），３．８５（ｄ，Ｊ＝１３．１，１Ｈ），４．１８（ｄ，＝１３．１，１Ｈ），４．２５（セプテット，Ｊ＝３．６，１Ｈ），４．５８（ｂｓ，１Ｈ），７．１０−７．１５（ｍ，１Ｈ），７．６５（ｄ，Ｊ＝１２．１，１Ｈ），７．７０（ｔ，Ｊ＝９．４，１Ｈ），７．９３（ｂｄ，Ｊ＝１２．５，１Ｈ），８．８９（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＭＨ−）７７８．１
【０３９８】
スキーム４２
ガチフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体１４９の調製
【化１１６】
2008536911.tif 000105
【０３９９】
ベンジル‐（３‐（２‐ブチロキシ‐５‐（エトキシ（ジエチルホスホノメチル）ホスフィノイル）フェニル）‐３‐メチルブタン酸塩（１４６）：攪拌した１３７（６４０mg，１．２１mmol）およびDMAP（触媒）のピリジン（５ml）溶液に、ブチリルクロライド（１２７マイクロリットル，１．２１mmol）を室温で滴加した。その結果得られた溶液を２時間攪拌し、EtOAc（８０ml）で希釈した。有機物は水性HCｌ（５％）、水および飽和水性NaClで洗浄し、NaSO４で乾燥した。Biotage（登録商標）フラッシュクロマトグラフィシステムを用い、シリカゲルクロマトグラフィ（EtOAc中０−２０％MeOH）で粗生成物を精製すると、１４６が無色の液体として得られた（３６０mg，４９％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．０２（ｔ，Ｊ＝７．５，３Ｈ），１．２０（ｔ，Ｊ＝７．１，３Ｈ），１．３０（ｔ，Ｊ＝７．１，Ｈ），１．３１（ｔ，Ｊ＝７．１，３Ｈ），１．４６（ｓ，３Ｈ），１．４９（ｓ，３Ｈ），１．７８（セクステット，Ｊ＝７．３，２Ｈ），２．５７−２．６８（ｍ，４Ｈ），２．７３（ＡＢｑ，Ｊ＝１３．８，２Ｈ），３．９０−４．１７（ｍ，６Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝３．６，１Ｈ），７．６９（ｄｄｄ，Ｊ＝１．６，８．４，１１．７，１Ｈ），７．８６（ｄｄ，Ｊ＝１．６，１３．６，１Ｈ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ２０．０５（ｄ，Ｊ＝９．８，１Ｐ），３３．９０（ｄ，Ｊ＝９．８，１Ｐ）
【０４００】
（３‐（２‐ブチロキシ‐５‐（エトキシ（ジエチルホスホノメチル）ホスフィノイル）フェニル）‐３‐メチルブタン酸（１４７）：化合物１４６（２００mg，０．３３５mmol）をMeOH（２０ml）に溶解し、H２（１気圧）下、Pd／C（１０％、７５mg）で３時間水素添加した。触媒を濾過し、溶媒を除去すると、淡黄色の固体１４３（１６５mg，９８％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．０６（ｔ，Ｊ＝７．３，３Ｈ），１．２３（ｔ，Ｊ＝７．２，３Ｈ），１．２９（ｔ，Ｊ＝７．０，３Ｈ），１．３２（ｔ、J=７．０，３Ｈ），１．５１（ｓ，３Ｈ），１．５４（ｓ，３Ｈ），１．８２（セクステット，Ｊ＝７．３，２Ｈ），２．５７−２．６８（ｍ，４Ｈ），２．７３（ＡＢｑ，Ｊ＝１３．８，２Ｈ），３．９０−４．１７（ｍ，６Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝３．６，１Ｈ），７．６９（ｄｄｄ，Ｊ＝１．６，８．４，１１．７，１Ｈ），７．８６（ｄｄ，Ｊ＝１．６，１３．６，１Ｈ）；３１Ｐ（１６２ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ２０．０５（ｄ，Ｊ＝３．７，１Ｐ），３４．３５（ｄ，Ｊ＝３．７，１Ｐ）
【０４０１】
７‐（４‐（３‐（２‐ブチロキシ‐５‐（エトキシ（ジエチルホスホノメチル）ホスフィノイル）フェニル）‐３‐メチルブタノイル）‐３‐メチルピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸（１４８）：１４７（１６３mg，０．３２２mmol）、１５（１２１mg，０．３２２mmol）およびジイソプロピルエチルアミン（１１２マイクロリットル，０．６４４mmol）を含むDMF（４ml）溶液を氷浴で冷却し、HBTU（１２２mg，０．３２２mmol）を添加した。その結果得られた混合物を室温まで温めながら、一晩攪拌した。反応混合物をEtOAc（１００ml）で希釈し、水性HCｌ（１０％）、水および飽和水性NaClで洗浄し、NaSO４で乾燥した。淡褐色の液体１４８（１９４mg，７０％）を精製せずに用いた。
【０４０２】
７‐（４‐（３‐（２‐ブチロキシ‐５‐（（ホスホノメチル）ホスホノイル）フェニル）‐３‐メチルブタノイル）‐３‐メチルピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸（１４９）：攪拌している粗生成物１４８（１９４mg，０．２２５mmol）および２，６‐ルチジン（５２１マイクロリットル，４．４９mmol）のCH２Cｌ２（２ml）溶液に、TMSBｒ（１．２９ml，９．８９mmol）を添加した。その結果得られた淡黄色の溶液を室温で２４時間攪拌し、それから溶媒を減圧下で除去した。赤味がかった固体を水（２ml）に再ｓ懸濁し、１MのNaOHを加えてその溶液のｐHを約７に調整した。次に、Biotage（登録商標）フラッシュクロマトグラフィシステムを用い、逆相クロマトグラフィ（水中０−６０％のCH３CN）でその溶液を精製すると、１４９がモノ‐２，６‐ルチジン塩として得られた。（６０mg，３０％）：ＭＳ（ＭＨ＋）７８０．２
【０４０３】
スキーム４３
ガチフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体１５３の調製
【化１１７】
2008536911.tif 000106
【０４０４】
ベンジル‐（３‐（２‐（ジエチルホスホリルオキシ）‐５‐（エトキシ（ジエチルホスホノメチル）ホスフィノイル）フェニル）‐３‐メチルブタン酸塩（１５０）：攪拌した１３７（６９５mg，１．３２mmol）およびトリエチルアミン（３６８マイクロリットル，２．６４mmol）のTHF溶液に、ジエチルクロロホスホン酸塩（２８３マイクロリットル，１．９８mmol）を滴加した。その結果得られた混合物を２４時間室温で攪拌し、EtOAc（８０ml）で希釈した。有機物は水性HCｌ（５％）、水および飽和水性NaClで洗浄し、NaSO４で乾燥した。Biotage（登録商標）フラッシュクロマトグラフィシステムを用い、シリカゲルクロマトグラフィ（EtOAc中０−２０％MeOH）で粗生成物を精製すると、１５０が淡黄色の液体として得られた（３９０mg，４５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．２１（ｔ，Ｊ＝７．０，３Ｈ），１．２４−１．３６（ｍ，１２Ｈ），１．５１（ｓ，３Ｈ），１．５３（ｓ，３Ｈ），２．５０−２．６１（ｍ，２Ｈ），２．９４（ＡＢｑ，Ｊ＝１４．１，２Ｈ），３．８６−４．２４（ｍ，１０Ｈ），４．９３（ｓ，２Ｈ），７．１３−７．１７（ｍ，２Ｈ），７．２６−７．２９（ｍ，３Ｈ），７．５９（ｄｄ，Ｊ＝２．９，８．３，１Ｈ），７．７１（ｔ，Ｊ＝９．８，１Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝１３．１，１Ｈ）
【０４０５】
（３‐（２‐（ジエチルホスホリルオキシ）‐５‐（エトキシ（ジエチルホスホノメチル）ホスフィノイル）フェニル）‐３‐メチルブタン酸（１５１）：化合物１５０（４３０mg，０．３３５mmol）をMeOH（２０ml）に溶解し、H２（１気圧）下、Pd／C（１０％、２００mg）で２時間水素添加した。触媒を濾過し、溶媒を除去すると、無色の油１５１（１６５mg，９８％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ１．１９−１．３９（ｍ，１５Ｈ），１．５７（ｓ，３Ｈ），１．５９（ｓ，３Ｈ），２．６２（ｂｔ，Ｊ＝１９．４，２Ｈ），２．８０（ＡＢｑ，Ｊ＝１３．９，２Ｈ），３．９０−４．１７（ｍ，６Ｈ），４．２２−４．３２（ｍ，４Ｈ），７．５７（ｄｄ，Ｊ＝３．４，８．４，１Ｈ），７．６９（ｄｄｄ，Ｊ＝１．７，８．４，１１．８，１Ｈ），７．８１（ｂｄ，Ｊ＝１３．５，１Ｈ）
【０４０６】
７‐（４‐（３‐（２‐（ジエチルホスホリルオキシ）‐５‐（エトキシ（ジエチルホスホノメチル）ホスフィノイル）フェニル）‐３‐メチルブタノイル）‐３‐メチルピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸（１５２）：１５１（３４５mg，０．６０３mmol）、１５（２２６mg，０．６０３mmol）およびジイソプロピルエチルアミン（２１０マイクロリットル，１．２１mmol）を含むDMF（５ml）溶液を氷浴で冷却し、HBTU（２２９mg，０．６０３mmol）を添加した。その結果得られた混合物を室温まで温めながら、一晩攪拌した。反応混合物をEtOAc（１００ml）で希釈し、水性HCｌ（１０％）、水および飽和水性NaClで洗浄し、NaSO４で乾燥した。淡褐色の液体１５２（３２６mg，５８％）を精製せずに用いた。
【０４０７】
７‐（４‐（３‐（２‐ホスホリルオキシ‐５‐（（ホスホノメチル）ホスホノイル）フェニル）‐３‐メチルブタノイル）‐３‐メチルピペラジン‐１‐イル）‐１‐シクロプロピル‐６‐フルオロ‐１，４‐ジヒドロ‐８‐メトキシ‐４‐オキソキノリン‐３‐カルボン酸（１５３）：攪拌している粗生成物１５２（３２６mg，０．３５１mmol）および２，６‐ルチジン（８４１マイクロリットル，７．０１mmol）のCH２Cｌ２（３ml）溶液に、TMSBｒ（１．２９ml，９．８９mmol）を滴加した。その結果得られた淡緑色の溶液を室温で２４時間攪拌し、それから溶媒を減圧下で除去した。褐色がかった固体をトリエチルアミン／炭酸塩緩衝液（３０mM，２ml）に再懸濁し、１MのNaOHを加えてその溶液のｐHを約６．５に調整した。次に、Biotage（登録商標）フラッシュクロマトグラフィシステムを用い、逆相クロマトグラフィ（水中０−６０％のCH３CN）でその溶液を精製すると、１５２がジ‐２，６‐ルチジン塩として得られた（１１０mg，３１％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ０．９７−１．０９（ｍ，２Ｈ），１．２６−１．３６（ｍ，５Ｈ），１．５６（ｓ，６Ｈ），２．３４（ｔ，Ｊ＝１６．７，２Ｈ），２．６９（ｓ，１２Ｈ），２．９１−３．１０（ｍ，２Ｈ），３．１６−３．５５（ｍ，３Ｈ），３．６８（ｓ，３Ｈ），３．９０（ｄ，Ｊ＝１３．５，１Ｈ），４．１４（ｄ，Ｊ＝１３．５，１Ｈ），４．２２−４．２７（ｍ，１Ｈ），４．３２（ｂｓ，１Ｈ），４．５７（ｂｓ，１Ｈ），７．４９（ｂｄ，Ｊ＝８．５，１Ｈ），７．６１（ｄ，Ｊ＝８．１，４Ｈ），７．６４−７．６６（ｍ，１Ｈ），７．７３−７．８１（ｍ，２Ｈ），８．２５（ｔ，Ｊ＝８．１，２Ｈ），８．９４（ｓ，１Ｈ）；１９Ｆ（３７６ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：デルタ１１９．１５（ｄ，Ｊ＝１２．８）；ＭＳ（ＭＨ＋）７９０．２
【０４０８】
スキーム４３
モキシフロキサシンメチルエステル１５４の調製
【化１１８】
2008536911.tif 000107
【０４０９】
メチル−１−シクロプロピル−６−フルオロ−１，４−ジヒドロ−７−（（４aS,７aS）−オクタヒドロピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６−イル）−８−メトキシ−４−オキソキノリン−３−カルボン酸塩（１５４）：濃硫酸２滴の存在下、メタノール３ml中のモキシフロキサシン（３．１１３mg，０．２８１５mmol）を５時間還流した。濃縮後、残渣を重炭酸ナトリウム飽和水溶液に移し、酢酸エチル（３ｘ）で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を除去し、その結果得られた混合物をWaters（登録商標）C18 Sep-Pak（登録商標）カラム（６cc）に移し、水および２：１および１：２の水／メタノール、次にメタノールで傾斜溶離すると、１２mgのエステル１５４（収率１０％）がオフホワイトの粉末として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：デルタ０．７９−０．８４（ｍ，１Ｈ），０．９９−１．０５（ｍ，２Ｈ），１．１６−１．２０（ｍ，１Ｈ），１．６９−１．８１（ｍ，３Ｈ），２．２６−２．３２（ｍ，１Ｈ），２．６７−２．７２（ｍ，１Ｈ），３．０４（ｄｔ，Ｊ＝４．１，１２．７，１Ｈ），３．２９−３．３２（ｍ，１Ｈ），３．３６−３．４２（ｍ，２Ｈ），３．５６（ｓ，３Ｈ），３．８６−３．９８（ｍ，３Ｈ），３．９１（ｓ，３Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝１４．３，１Ｈ），８．５５（ｓ，１Ｈ）
【実施例２】
【０４１０】
In  vitro抗菌活性および細胞毒性の判定
In  vitro抗菌活性
黄色ブドウ球菌の菌株ＡＴＣＣ１３７０９およびＲＮ４２２０による市販抗生物質および合成化合物への感受性は、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（前Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ）（Ｍ２６−Ａ）によって設定されたガイドラインに従って判定した。化合物は順次DMSOで２倍に希釈し、陽イオン調整したミューラー・ヒントンブロス（ＣＡＭＨＢ；Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）に移した。９６ウェルのマイクロタイタープレートを用い、CAMHBで希釈した５０マイクロリットルの化合物をCAMHBで希釈した１００マイクロリットルの細菌と混合した。アッセイの最終微生物数は１ml当たり５ｘ１０５c.f.u.で、アッセイに用いたDMSOの最終濃度は１．２５％であった。アッセイは２度ずつ行い、摂氏３７度で１８時間培養した。視認可能な成長を阻害した化合物濃度は、最少阻害濃度（MIC）として報告した。
【０４１１】
感受性試験の実験も血清の存在下で行なった。実験は感受性試験を以下のように修正して行なった。CAMHBで希釈した７５マイクロリットルの化合物を、所定の資源（市販のマウス血清（MS）およびヒト血清（HS）、Ｅｑｕｉｔｅｃｈ−Ｂｉｏ  Ｉｎｃ．）の１００％血清で希釈、または８％精製ヒト血清アルブミン（HSA）（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ）で希釈した７５マイクロリットルの細菌と混合した。アッセイに使用した動物血清およびヒト血清アルブミンの最終濃度はそれぞれ５０％および４％であった。他の成分の濃度はすべて、感受性試験に記載されているのと同一であった。
【０４１２】
データは省略しているが、化合物は２つの群に分類できることを結果が示している。モキシフロキサシン３、ガチフロキサン１５およびシプロフロキサシン６に示されるように、遊離のフルオロキノロンは高い抗菌活性を示し、MICは一般的に０．５−１マイクログラム／ml未満であった。ホスホン処理したフルオロキノロンを含有するプロドラッグは、化合物４４（１−８マイクログラム／ml）、４９（０．５−１マイクログラム／ml）、５４（４−１６マイクログラム／ml）および１４１（４マイクログラム／ml）に示されるように活性がはるかに弱く、MICは一般的に１０−１００倍高い８ないし＞１２８マイクログラム／mlの範囲であった。
【０４１３】
ビスホスホン酸塩結合の薬物が非保護で骨の鉱物が不在の状態では、血清の存在はその薬物と関連するMIC値にほとんど影響を及ぼさなかった。抗菌活性がアッセイ中に放出されるフルオロキノロン部分に起因している場合、血清の加水分解酵素の介入は少なくとも切断には必要ないことをこれは示唆している。薬物が血清中よりも水性緩衝液中のほうでもっと多く放出されると言うようなことは、本質的にないようである。これに対し、保護されているビスホスホン酸塩２６（培地に５０％マウス血清が存在する場合、MICは３２マイクログラム／mlから０．５マイクログラム／mlへ変化）では活性が大きく増大した。事実、２６とその脱保護親化合物２５（MIC３２マイクログラム／ml、血清中不変）との比較によっても、抗菌活性がアッセイ中に放出されるフルオロキノロン部分に起因している場合、溶液中の遊離ビスホスホン酸塩は血清の加水分解酵素の基質ではない、と言うことが明確に示唆されている。
【０４１４】
細胞毒性のアッセイ
哺乳動物に対する毒性レベルを調べるため、（３‐（４，５‐ジメチルチアゾール‐２
‐イル）‐５‐（３‐カルボキシメトキシフェニル）‐２‐（４‐スルホフェニル）‐２H‐テトラゾリウム）の分子内塩（MTS試薬）の生物学的還元を測定するアッセイに基づき、哺乳動物細胞の成長阻害能力をいくつかの化合物について試験した。アッセイは９６ウェルのマイクロタイタープレートを用いて行なった。簡略すれば、１％のウシ成長血清（ＨｙＣｌｏｎｅ）を含むダルベッコ変法イーグル培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を用いて、５％CO２下、摂氏３７度で１８時間、１００、５０、２５および１２．５マイクロモルの化合物をウェル当たり２ｘ１０４のヘラ細胞と一緒に培養した。還元量は、４９０nmの吸収に基づいて、MTS試薬である（３‐（４，５‐ジメチルチアゾール‐２‐イル）‐５‐（３‐カルボキシメトキシフェニル）‐２‐（４‐スルホフェニル）‐２H‐テトラゾリウム）の分子内塩が親フォルマザン生成物（（４，５‐ジメチルチアゾール‐２‐イル）‐３‐（３‐カルボキシメトキシフェニル）‐５‐（４‐スルホフェニル）‐フォルマザン）に還元される量を培養の終わりに測定することによって決定した。
【０４１５】
化合物４，５，７，８，１４，１８、２６，２８，３９，５３，５４，６４および１５４について上述の条件下でアッセイを行なったが、濃度１００マイクロモル（データ省略）まで毒性はまったく生じなかった。
【実施例３】
【０４１６】
フルオロキノロン−ビスホスホン酸塩結合体の安定性
LC／MS（液体クロマトグラフィと質量分析の組み合わせ）または生物学的アッセイに基づく検出方法を用いて、選択したフルオロキノロン‐ビスホスホン酸塩結合体の溶液および様々な培地中の安定性を評価した。LC／MS検出では、化合物の２００マイクロモル溶液のうち５マイクロリットル部分を９５マイクロリットルの培地（１００mM PBS（ｐH７．５）、１００ｍMトリス（ｐH７．５）またはラットの血漿および血清）に加えた。混合物を様々な時間培養し、それから５００マイクロリットルのメタノールで希釈した。混合物を１５分間渦動させ、１０，０００ｇで１５分間遠心分離した。上澄み液をアルゴン気流中蒸発させ、その結果得られた残渣を再び１００マイクロリットルの水に戻した。その結果得られた混合物を１５分間渦動させ、１０，０００ｇで１０分間遠心分離した。次に２０マイクロリットル部分を用いて、LC／MS標準との比較により、親薬物の濃度を決定した。LC／MS分析は、移動相として０．１％ギ酸水溶液：０．１％ギ酸アセトニトリル溶液（８５：１５）を用い、Ｚｏｒｂａｘ（登録商標）ＳＢ−Ａｑカラム（２ｘ３０ｍｍ、３．５ミクロン）を使用した流速０．３ml／分のアジレント１１００（登録商標）シリーズLC／MSDトラップに基づいて行なった。バイオアッセイ検出は、１mg／mlの各化合物のPBS溶液を等量の培地で希釈し、外気温度で培養した。指定された時間に、２０mg／mlの骨灰粉末（Ｎｏｗ  Ｆｏｏｄｓ，  Ｂｌｏｏｍｉｎｇｄａｌｅ，  Ｉｌｌｉｎｏｉｓ，  ＵＳＡ）のPBSスラリー１００マイクロリットルに、溶液の１００マイクロリットル部分を加えた。骨灰粉末中の薬物／プロドラッグの懸濁物を結合させるため、１０分間外気温度で培養し、１６，０００ｇで２分間遠心分離した。上澄み液中のフルオロキノロンは、次のような微生物学的アッセイで評価した。指定された菌株（大腸菌LBB925 tolC）の単離コロニーを０．８５％生理食塩水に再懸濁し（OD６００＝０．２）、陽イオン調整したミューラー・ヒントンアガー（CAMHA）プレートに塗布した。既知量の上澄み液をディスクに載せ、乾燥した。次に播種したCAMHAプレートにディスクを置いた。プレートを摂氏３７度で１８時間培養し、その後ディスクによって生じた阻止帯の直径を測定した。プロドラッグの量は、参考として各実験に使用した遊離ガチフロキサシン１５の既知量の検量線から導いた。表１にその結果を示す。
【０４１７】
【表１】
2008536911.tif 000108
【０４１８】
表１に示したデータは２つの傾向を支持している。第一に、溶液中では親薬物がプロドラッグから再生しており、活性化および不活性化ラット血清（化合物４９、５４および１２１）を比較した場合、この再生は血清の加水分解酵素とは多少独立的に生じているようである。第二に、ガチフロキサシン１５のプロドラッグ１８、２８および５４で観察された速度は、同じビスホスホン酸処理リンカーを用いたモキシフロキサシン３の親プロドラッグである各１４，２５および５２よりも予想を超えて顕著に速かった。
【実施例４】
【０４１９】
In  vitroでの化合物の骨粉末結合およびその後の親薬物の再生
骨粉末結合
実施例の分子が骨粉に結合する能力は、２つの方法、つまりLC／MSまたは蛍光測定による検出で判定した。LC／MS検出では、試験化合物の原液（５ml）を０．１Mのトリス‐HCｌ緩衝液ｐH7、０．１５MのNaclへ加え、最終濃度を１００マイクロモルとした。化合物のサンプル溶液（１ml）３組を新鮮なラット脛骨２５mgまたは真空乾燥で粉末にしたラット脛骨２０mgと一緒に、またはそれなしで、１０分間激しく攪拌した。次にサンプルを１０，０００ｇで１５分間遠心分離した。未結合化合物の存在は、アジレント１１００（登録商標）LC／UVシステムに３０マイクロリットルの各上澄み液を注入することにより測定した。蛍光測定による検出では、各化合物をPBSまたは水（化合物５２）に溶解し、骨灰粉末（Ｎｏｗ  Ｆｏｏｄｓ，  Ｂｌｏｏｍｉｎｇｄａｌｅ，  Ｉｌｌｉｎｏｉｓ，  ＵＳＡ）のPBSスラリー１０mg／mlに、１mg／mlの濃度で再懸濁した。骨灰粉末の薬物／プロドラッグの懸濁液は結合のため摂氏３７度で１時間培養し、３，０００rpmで２分間遠心分離してから、その上澄み液を回収した。骨灰粉末のペレットは、１mlのPBSで３度洗浄した。上澄み液はすべて保存し、励起／発光波長２８０／４６５nmの蛍光測定でフルオロキノロンを評価した。フルオロキノロンの量は各実験で得られた検量線に基づいて決定した。骨粉に結合した薬物／プロドラッグの量は、インプット量（通常１mg）と結合後上澄み液から回収された量の差から導いた。すべての結合実験で、インプット薬物の＞９９％が親薬物として上澄み液から回収された。表２にその結果を示す。
【０４２０】
【表２−１】
2008536911.tif 000109
【表２−２】
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【表２−３】
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【表２−４】
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【表２−５】
2008536911.tif 000113
【表２−６】
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【０４２１】
表２が示す結果は、ビスホスホン酸処理したプロドラッグが骨物資によって溶液から非常に有効に除去されることを確証した。この結果は、プロドラッグ（一般的に＞８５％結合）と親薬物（各＜２％結合）との比較により、骨送達の仲介物質としてビスホスホン酸塩の使用が優れていることも示している。合理的な推測では、蛍光で検出された未結合物質の一部はビスホスホン酸処理したプロドラッグではなく、汚染または再生親薬物である。いずれにせよ、骨物質への結合レベルは、骨吸収／吸着の動態動力学を反映しているようだ。明らかな傾向としては、３つのヒドロキシ基を有するビスホスホン酸塩（化合物１２９，１４１、１４５，１４９および１５３）の結合能力は低い。事実、化合物１５３は全然結合しなかった。これは全く予想外のことである。
【０４２２】
骨粉末結合プロドラッグからの薬物の再生
プロドラッグが感染部位で活性物質を放出する能力は、in vivoで使用する場合に非常に重要である。これは薬物が骨物質に結合したプロドラッグから放出されるのをin vitroで測定することにより、部分的に予め判定可能である。
【０４２３】
ホスホン酸処理した親プロドラッグから再生される薬物の量は、次の方法で測定した。上のセクションで述べた洗浄骨粉結合プロドラッグを４００マイクロリットルのPBSまたは４００マイクロリットルの５０％（PBS中ｖ／ｖ）ヒトまたはラットの血清に再懸濁した。懸濁液を一晩または３日または６日摂氏３７度で培養し、１３，０００rpmで２分間遠心分離し、上澄み液を回収した。各上澄み液にメタノール（上澄み液に対し５ｘ容量）を加え、混合物を生産モデル・ボルテックスで１５分間渦動させ、遊離したフルオロキノロンを抽出した。次に混合物を１０，０００rpmで１５分間遠心分離し、不溶性の物質をペレット成形した。抽出したフルオロキノロンを含有する上澄み液を回収し、高速真空で濃縮乾燥した。乾燥ペレットはPBSに再懸濁し、フルオロキノロンの量は上述の蛍光測定法で決定した。再生薬物の割合は結合薬物量と再生薬物量の差から導いた。再生薬物はMIC測定に基づいて同定した。再生物質のMICは親薬物のMICと一致していたが、プロドラッグのそれとは一致していなかった。
【０４２４】
In  vitroで骨結合プロドラッグから親薬物の再生
【表３−１】
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【表３−２】
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【表３−３】
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【表３−４】
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【表３−５】
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【表３−６】
2008536911.tif 000120
【０４２５】
表３が示すデータは、親活性成分を放出するプロドラッグの能力に関して、適切なビスホスホン酸処理リンカーを選択することが重要であるという証拠を提供している。このデータはいくつかの傾向を示している。第一に、以前に報告したリンカー（非特許文献２６）を含有する化合物５および８では、２４時間後骨物質から放出された測定可能な量の薬物は存在しない。５に関しては、７日間の培養の後わずかな量が観察されたにすぎない。第二に、加水分解速度が骨物質への固定後かなり減少したことをデータは示している。化合物１４および２５は一旦固定されると測定可能な量のモキシフロキサシン３を放出することはなかったが、溶液中ではそれが生じ（表１）、薬物放出の兆候は培養７日後になって初めて現れた。同様に、骨粉に固定された化合物５２はモキシフロキサシン３を１．２％再生したが（表１）、溶液中では同じ化合物の１８％が再生された（表１）。化合物５４は２．７％のガチフロキサシン１５を提供したが（表３）、溶液中の同化合物は３１．７％の親薬物を提供した（表１）。第三に、ビスホスホン酸処理したリンカーだけでは、プロドラッグから親薬物を放出する速度を予測できない。化合物５２および５４に関して溶液相の再生データと骨粉結合の再生データの両方を考察した場合これは明らかである。これら２つの化合物は同じビスホスホン酸処理リンカーを有し、親フルオロキノロンの同じ部位（カルボキシル）に付加している。しかし、ガチフロキサシン１５は、溶液中（表１）であっても骨粉末結合（表３）であっても、プロドラッグ５２からモキシフロキサシン３が放出される速度の２倍の速度でプロドラッグ５４から放出される。従って、プロドラッグをin vivoでの活性に適した速度で放出するには、選択した親薬物に関して、適切なビスホスホン酸処理したリンカーを経験的に調整しなければならない。最後に、培地の効果は無視できるほどである。血清の存在とは無関係に同程度の速度で進行する。化合物３６，３９，４４，５２、６４，７３，８２，８５，８７および１４１がこれに相当する。だからと言って、骨結合プロドラッグから活性成分を放出する際に血清の加水分解酵素は何の役割も果たしていないと言うわけではないが、少なくともその触媒作用に依存する必要がないことをこれは示している。一方、４９，５７，６２，８０，９９，１２１，１２９、１３４，１４５，１４９および１５３のような化合物では、血清の存在下、顕著な速度の増大が見られた。２４時間後２−４倍のフルオロキノロンが再生された。しかし５４では速度は低下した。この影響は、生体分子触媒作用が関係していると結論するには不十分な証拠である。実際、イオン強度の影響またはキレート化によって切断を助けるある種の金属イオンの役割など、何らかの培地の影響を除外することはできない。事実、５４の行動は生化学的よりもむしろ化学的に誘発された切断の可能性が高いことを示している。さらに、グリコールアミド・リンカーに関係するプロドラッグは、かなり異様な行動を示しており、リンカーの置換体および特定のフルオロキノロンにかなり依存している。従って、この化合物群の中では、５２，６４，７３および８２は培地の変更の影響を受けない。化合物５７��６２、８０および９９は、血清の存在下高い率の再生を示し、化合物５４は低い率の再生を示した。リンカーの置換体パターンはこの行動の予測には役立たない。実験的に決定できるにすぎない。
【実施例５】
【０４２６】
ラット脛骨におけるモキシフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体52およびガチフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体４９および５４のIn vivoレベルの判定
ビスホスホン酸処理したフルオロキノロンプロドラッグのin vivoにおける骨結合および分解速度を調べるため、ビスホスホン酸処理モキシフロキサシンプロドラッグ５２またはビスホスホン酸処理ガチフロキサシンプロドラッグ４９または５４でラットを処置し、脛骨の薬物量を注射後様々な時間に分析した。雌のCDラット（加齢５７−７０日、ｎ＝５／群、ＣＨａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ，  Ｓｔ−Ｃｏｎｓｔａｎｔ，  Ｃａｎａｄａ）に化合物４９，５２または５４（０．８５％NaClに溶解）の単一ボーラスを静脈（尾の静脈）注射で投与した。用量はそれぞれ１８．８mg／kg（体重）（１５の９mg／kgと等価）、１５．８mg／kg（体重）（３の１０mg／kgと等価）および１７．４mg／kg（体重）（１５の１０mg／kgと等価）であった。４９、５２または５４の骨中レベルを評価するため、動物は静脈注射後特定の時間に人道的に屠殺した。脛骨は切開して回収し、柔組織を除き、金属ボールミル（Ｒｅｔｓｃｈ  ＭＭ３０１（登録商標））を用いて粉砕し、骨の薬物濃度を判定する前に摂氏マイナス８０度に保った。
【０４２７】
ビスホスホン酸塩化合物４９，５２および５４の脛骨濃度の判定
実験的に得た粉砕した骨粉をメタノール中の５％ギ酸に懸濁した（５００mg／１．６ml）。混合物を１０分間渦動し、１０，０００ｇで１０分間遠心分離した。その結果得たペレットを乾燥し、重さを測定し、ビスホスホン酸処理したプロドラッグの量の判定に用いた。
【０４２８】
脛骨のプロドラッグ量に関しては、以下の方法で標準、OC（品質管理）およびブランクを調整した（２組ずつ）。乾燥したブランクの脛骨粉２０mgにプロドラッグのスパイク液（１０マイクロリットル）および９９０マイクロリットルの緩衝液（０．１Ｍのトリス‐HCｌ、ｐH７、０．１５MのNaCl）を加えた。混合物を１０分間渦動し（RT）、１０，０００ｇで１５分間遠心分離し、上澄み液を廃棄し、ペレットを切断手順用に保存した。標準（６レベル）の範囲は０．０５から１０マイクロモルであり、QCレベルは０．０７５、０．７５および７．５マイクロモルであった。
【０４２９】
プロドラッグを薬物（モキシフロキサシン３またはガチフロキサシン１５）に切断するため、各標準、QC、ブランクおよび実験用サンプルの脛骨ペレット（乾燥重量２０mg）に、６Nの
NaOHを５００マイクロリットル加えた。摂氏５０度で１時間（４９）または２時間（５２および５４）培養した後、混合物を６NのHCｌ（５００マイクロリットル）で酸性化し、内部標準（５２に関してガチフロキサシン１５、４９および５４に関してモキシフロキサシン３）を加えた。１０，０００ｇで１５分間遠心分離した後（RT）、溶離液として１００％メタノールを用い、Ｓｔｒａｔａ（登録商標）カートリッジ（３０mg／１ml）で上澄み液を抽出した。溶離液はアルゴン気流下で蒸発乾燥し、乾燥した残渣は１５分間渦動し、LC／MS分析に使用する２００マイクロリットルの移動相へ再び移した。１０，０００ｇで１５分間遠心分離した後、２０マイクロリットルの上澄み液をLC／MS分析装置に注入した。
【０４３０】
プロドラッグの切断で得られる薬物量は、アジレント１１００（登録商標）シリーズLC／MSトラップで分析した。上澄み液はＺｏｒｂａｘ（登録商標）SB−Aqカラム（２ｘ３０mm、３．５ミクロン）に注入し、移動相として０．１％ギ酸の水溶液：０．１％ギ酸のアセトニトリル溶液（８５：１５）を用い、流速は０．３ml／分であった。MSは次のように設定した：ESIプローブ、正極性、ネブライザ４５psi、乾性ガス温度摂氏３５０度、乾性ガス流速１０L／分、毛管式イグジット１４０Vおよびスキマー３７V。化合物５２および５４に関しては、実行時間８分、最初の１．２分間分岐弁を排気に設定を選択した。化合物４９に関しては、実行時間１４分、最初の２分間分岐弁を排気に設定を選択した。検出イオンはシングル反応モード（SRM）で決定した。
【０４３１】
５２の決定に関しては、モキシフロキサシン３をm／z４０２．２、内部標準（ガチフロキサシン１５）をm／z３７６．１→３３２．１で分析した。
【０４３２】
４９および５４の決定に関しては、ガチフロキサシン１５をm／z３７６．１→３３２．１、内部標準（モキシフロキサシン３）をm／z４０２．２で分析した。
【０４３３】
注射後７−２８日目における脛骨内のビスホスホン酸処理化合物５２および５４の濃度
ラット脛骨内の５２および５４の決定結果は、それぞれ図１および２に示してある。
【０４３４】
プロドラッグ４９、５２および５４の高濃度が骨内に存在することをデータが示しており、骨組織にフルオロキノロン抗菌剤を送達するのにビスホスホン酸処理部分の使用が有効であることをこれは示唆している。化合物５２および５４の半減期はそれぞれ２０日および２１日である。この結果は、骨内のプロドラッグ量が指数関数的に減少する結果（データ省略）と一致している。
【０４３５】
注射後５分から２４時間までのビスホスホン酸塩化合物５２の脛骨濃度
短期間にラット脛骨内に存在する５２の決定結果は図３に示してある。
【０４３６】
ビスホスホン酸処理したプロドラッグが非常に急速に骨に蓄積することをこのデータは示しており、蓄積プロセスの半減期は１時間未満であった。
【０４３７】
注射後０から２４時間までの脛骨におけるビスホスホン酸塩化合物４９の濃度
ラット脛骨内の４９の決定結果は図４に示してある。
【０４３８】
骨で急速に切断されるプロドラッグ４９の濃度は、それでも確かに高いけれども、より緩慢に切断される５２および５４よりは低いことをこのデータは示している。しかし、骨組織にフルオロキノロン抗菌剤を送達するのにビスホスホン酸処理部分の使用が有効であるという結果をこのデータは支持している。in vitroではるかに高い再生率を示す化合物４９は、予想通り寿命ははるかに短い。脛骨からの消失は、最初の急速な段階（半減期１１時間）と第二の緩慢な段階（半減期２日間）の二段階で行なわれる。
【実施例６】
【０４３９】
ラット血漿中のモキシフロキサシン−ビスホスホン酸塩結合体５２のin vivoレベルの判定
フルオロキノロンのビスホスホン酸処理プロドラッグが血液循環から消失する際の動態力学を評価するため、注射後短い間隔（５分から２４時間）で、ビスホスホン酸処理したモキシフロキサシンプロドラッグの血漿内レベルを決定した。雌のCDラット（加齢５７−７０日、ｎ＝３／群、ＣＨａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ，  Ｓｔ−Ｃｏｎｓｔａｎｔ，  Ｃａｎａｄａ）に化合物５２（０．８５％NaClに溶解）の単一ボーラスを静脈（尾の静脈）注射で投与した。用量は１０mg／kgのモキシフロキサシン３に相当する１５．８mg／kg（体重）であった。血漿中の５２レベルを評価するため、動物は静脈注射後特定の時間にCO２吸引により屠殺した。血液サンプルは心穿刺で集め、血漿単離のためBD真空チューブ（緑のキャップ）に移した。血漿成分はサンプルを遠心分離することにより得た。分析のときまで、摂氏マイナス８０度で保存した。
【０４４０】
血漿中のビスホスホン酸塩化合物５２濃度のLC/MSによる判定
血漿中のプロドラッグ量に関し、次の方法で標準およびQCを調製した（２組ずつ）。１００マイクロリットルのブランク血漿に、プロドラッグ（５２、水溶液）のスパイク溶液（５マイクロリットル）を加えた。標準（８レベル）の範囲は０．０６から２５マイクロモル、QCレベルは０．１８、１．８７および１．７５マイクロモルであった。プロドラッグを含まないブランク血漿のサンプルも４つ調整した。
【０４４１】
プロドラッグの結合のため、各標準、QC、ブランクおよび実験用血漿（１００マイクロリットル）に１０マイクロリットルのヒドロキシアパタイト懸濁液（シグマ＃０２５２０）を加えた。渦動（１０分間）および遠心分離（１０分間、１０，０００ｇ、RT）後、上澄み液を廃棄し、ペレットを水（HPLC等級）で２度洗浄し、それから遠心分離を行なった。プロドラッグの切断による薬物（モキシフロキサシン３）の放出を調べるため、洗浄したペレットに６Nの水酸化ナトリウム（５００マイクロリットル）を加え、混合物を渦動し、水浴を用い摂氏３７度で１時間培養した。培養期間終了後、混合物を６Nの塩酸（５００マイクロリットル）で酸性化し、内部標準（シプロフロキサシン６、原液６．５マイクロリットル、５０マイクロモル水溶液）を加えた。内部標準はブランク血漿サンプルには加えたが、ダブルブランク血漿サンプルには加えなかった。サンプルは１０分間渦動し、溶離液としてギ酸：メタノール（１：９９）を用い、ストラタ・カートリッジ（３０mg／ml）で抽出した。溶離液は蒸発乾燥し、乾燥した残渣を２００マイクロリットルの移動相（初期条件）へ再び移し、２０マイクロリットルをLC／MSに注入した。
【０４４２】
プロドラッグの切断により得られるモキシフロキサシン３は、アジレント１１００（登録商標）LC／MSDトラップを用いて、同じ方法で分析した。抽出したサンプルはＺｏｒｂａｘ（登録商標）SB−Aqカラム（２ｘ３０mm、３．５ミクロン）に注入し、移動相として０．１％ギ酸の水溶液（水）および０．１％ギ酸のアセトニトリル溶液（有機）を用い、流速は０．３ml／分であった。使用したプログラムは次の通りである。最初の２分間は１２％有機、次に０．０１分で２０％有機へ切り換え、その状態を５分間維持し、それから０．０１分で５０％有機へ切り換え、その状態を１分間維持してから初期条件へ戻り平衡化した。MSは次のように設定した：ESIプローブ、正極性、ネブライザ４５psi、乾性ガス温度摂氏３５０度、乾性ガス流速１０L／分、毛管式イグジット１２５V（１．８から４分間）または１４０V（４から１３分間）およびスキマー３７V。実行時間は１３分で、最初の１．８分間分岐弁を排気に設定した。モキシフロキサシン３はm／z４０２．２→３５８．１を７．１分目に、内部標準（シプロフロキサシン６）はm／z３３２．１→２８８．０を２．９分目に、シングル反応モード（SRM）を用いて分析した。
【０４４３】
５２の血漿中濃度の決定結果は図５に示してある。プロドラッグ５２は血液循環から急速に消失し半減期は１時間未満であり、図３に示した骨中の補足蓄積速度と完全に一致した。
【実施例７】
【０４４４】
プロドラッグ化合物３９、４４、４９、５２、５４、１０７、１２１、１２９、１４１、１４５、１４９および１５３のラットでの予防的使用
ビスホスホン酸処理したフルオロキノロンプロドラッグの活性をin vivoで判定するため、親化合物モキシフロキサシン３（５２に関し）の誘導体である化合物５２および１０７、および親化合物ガチフロキサシン１５の誘導体である化合物３９，４４、４９、５４、１２１、１２９、１４１、１４５、１４９を感染予防モデルに使用した。具体的には、黄色ブドウ球菌ATCC１３７０９細胞を脳心臓滲出培地（BHIB）中、摂氏３７度で一晩繁殖させた。細胞は新鮮なBHIBに継体培養し、摂氏３７度で４，５時間培養した。細胞はリン酸緩衝生理食塩水（PBS）で２度洗浄し、１０％（ｖ／ｖ）ウシ胎児血清を補充したBHIBに、約１０１０コロニー形成ユニット（CFU）／ml（濁度測定に基づいて）密度で再懸濁した。懸濁液は等分し、CFU数を調べるためその一部を使用した。培養物は冷凍（摂氏マイナス８０度）保存し、継体培養なしに使用した。接種物として使用するにあたり、培養物は解凍し、PBSで希釈し、使用するまで氷浴に保った。
【０４４５】
動物はＯ’Ｒｅｉｌｌｙ等により記載されている方法（非特許文献２７）で骨感染させた。雌のCDラット（加齢５７−７０日、ｎ＝５／群、ＣＨａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ，  Ｓｔ−Ｃｏｎｓｔａｎｔ，  Ｃａｎａｄａ）に手術前および手術中にイソフルオランで麻酔をかけた。麻酔薬の投与終了後ラットを仰向けにし、手術部位の毛を剃った。脚の皮膚を洗浄し、消毒した（プロビオジン‐エタノール７０％）。膝関節の下の縦方向切開は矢状面で行なった。膝関節（脛骨先端または顆）の下の骨を切開したが、足関節には届いていなかった。２mmのバルブビットを装着した高速ドリルを用いて、脛骨の骨髄腔に穴をあけた。ラットの脛骨には、０．０５mlの５％モルイン酸ナトリウム（硬化薬）、それから０．０５mlの黄色ぶどう球菌懸濁液（約５ｘ１０５CFU／ラット）を注射した。穴の密閉には、液体を即座に吸収し部位に固着する医科用のドライセメントを少量使用した。切口は皮膚用金属製クリップを３つ用いて閉じた。生理食塩水中の１０mg／kgのモキシフロキサシン３（正の対照として）を感染一時間後に一度だけ静脈注射した。フルオロキノロンプロドラッグ（０．９％の生理食塩水で調整）は静脈内単一ボーラスとして、感染前の種々の時間に注射した。比較のため、感染前の同じ時点で、等モル量の親薬物（モキシフロキサシン３またはガチフロキサシン１５）を一度だけ静脈注射した。
【０４４６】
細菌CFU数を調べるため、感染させたラットは術後２４時間目にCO２で窒息死させた。感染した脛骨を取り出し、柔組織を除き、重さを量った。骨を金属製のボールミルを用いて粉砕し、５mlの０．９％NaClに再懸濁し、定量培養のため連続的に希釈処理した。化合物３９，４４，４９，５４，１４１、１４５、１４９に関しては、連続希釈前に、０．９％のNaCl溶液１mlを５０mgのチャーコールに加えた。治療効果はLog生菌（骨１グラム当たりのLog CFU）として測定した。各ラット群について得られた結果は、平均Log CFUおよび標準偏差を計算することにより評価した。検出限界は骨の２Log CFU／ｇである。種々の未処理および処理群に関する生菌数の統計学的比較は、Ｄｕｎｎｅｔｔの多重比較検定を用いて行なった。処理感染群と未処理感染群を比較してP値が＜０．０５の場合に、差は有意であると考えた。
【０４４７】
実験では、感染前の様々な時点で（３０日まで）、化合物５２（ビスホスホン酸処理したモキシフロキサシンプロドラッグ）を１５．８mg／kg（１０mg／kgのモキシフロキサシン３に相当）静脈注射した。未処理群および術後１時間目にモキシフロキサシン３で処理された群についても実験を行なった（データは両方とも示してある）。第二の未処理群との比較により、感染５、１０、１５および２０日前にプロドラッグ５２で処理した群および術後１時間目にモキシフロキサシン３で処理した群において、細菌力価が有意に（P＜０．０５）低下した。結果は図６に示してある。モキシフロキサシン２０mg／kgに相当する３２mg／kgの５２を用いて平行実験も行なった。この場合、未処理群との比較（P値）に基づいて、感染前７、１４、２１日目、さらには２８日目に投与した場合も、５２で処理された動物の細菌力価が有意に低下した。感染後１時間目に１０mg／kgの３で処理した群でも細菌力価は有意に低下したが、手術７日前に２０mg／kgの３で処理した群では細菌力価の低下は生じなかった。結果は図７に示してある。
【０４４８】
感染４８時間前に様々な用量の化合物５４（ビスホスホン酸処理したガチフロキサシンプロドラッグ）を静脈注射する実験も行なった。比較のため、ガチフロキサシン１５も１０mg／kg（５４の１７．３mg／kgに相当）を感染４８時間前に投与した。未処理群との比較により、感染４８時間前に１７．３mg／kgのプロドラッグ５４で処理された群および術後１時間目にモキシフロキサシン３で処理された群（正の対照）において、細菌力価が有意に低下していることが示された。結果は図８に示してある。
【０４４９】
ビスホスホン酸処理したモキシフロキサシンおよびガチフロキサシン１５の他のプロドラッグを用いてラットを予防的に治療した場合も表４に示してある。
【０４５０】
【表４】
2008536911.tif 000121
【０４５１】
この結果は、ビスホスホン酸処理したフルオロキノロンプロドラッグ４９、５２、５４、１２１および１４１が予防効果の面で優れていることを明確に示している。図６および７のデータは、モキシフロキサシンプロドラッグ５２を手術の数週間前に投与した場合、感染の細菌力価が低下することを示している。これはこのプロドラッグに関して前に測定した半減期２０日と良く符合している（図１）。モキシフロキサシン３を感染の５日前、あるいは２日前に使用してもそういう予防効果が生じない点は注目に値する。これらの結果および骨結合データは、in vivoで骨物質を標的にする能力がビスホスホン酸処理したプロドラッグには備わっており、抗菌活性に必要な濃度以上の濃度で活性部分を放出できることを明確に示している。この放出は単回の注射後、数週間持続可能である。
【０４５２】
用量と抗菌活性の間の関係は、ガチフロキサシンプロドラッグ５４により明確に示されている。この化合物は感染の４８時間前に１７．３mg／kgを使用した場合、ほとんど無菌状態の骨を提供できる。一方、ガチフロアキサシン１５には同じ用量でもそういう効果はない（図８）。同様に、図６および７の比較によって示されるように、化合物５２を３２mg／kg使用すると、予防効果は長期化する。用量と予防活性の間の関係は、用量を変えることにより、本発明のホスホン酸処理化合物の効果をin vivoで調整可能であることを示している。さらに、治療薬として使用される本発明のホスホン酸処理した化合物とin vivoモデルにおける治療結果との間には明確な相関関係があることもこれは証明している。
【０４５３】
プロドラッグ１２１には予防効果があり、同じモル用量でも結合体１０７にはそういう効果はないという事実は、切断されて親化合物である抗菌剤を放出する能力がビスホスホン酸処理した化合物には備わっていることを示している。単に骨に送達するだけでは不十分である。ビスホスホン酸処理した化合物で骨の表面を覆う工程それ自体は、予防効果を提供するには不適切であることもこれは示している。
【０４５４】
もっと予測外だったのは、プロドラッグ３９，４４、１２９、１４５、１４９および１５３の結果である。これらの化合物はin vitroでは良く再生した（表３）が、in vivoでは良い結果を示さなかった。再生プロセスには生体触媒作用が必要であり、骨組織には適切な酵素が存在しないと論じることもある場合には可能である。しかし、５４と同じ速度で再生し、しかも血清が存在してもしなくても同様に再生する化合物３９および４４（表３）に関しては、そういう議論は成り立たない。一方、活性の欠如は骨に達する前に血漿で再生しているからであると論じることも可能である。しかし、血漿中、溶液状態で非常に急速に再生する化合物４９（表１）は良好な結果を示している。
【０４５５】
in  vitroとin  vivoの結果の矛盾は、特定のプロドラッグの適切性は実験的に決定する必要があることを強調している。
【０４５６】
有効な治療には、骨への送達（ビスホスホン酸塩官能基は非常に効果的であることは以前に証明されている）およびその後ビスホスホン酸処理化合物が分解し、抗微生物性の親フルオロキノロンに変わるプロセスの両方が必要であることもこれらの実験は証明している。
【実施例８】
【０４５７】
感染骨および未感染骨でビスホスホン酸塩モキシフロキサシンから再生されたモキシフロキサシン３の量の判定
特に炎症および外科治療部位の血液循環の低下を考慮し、感染がビスホスホン酸処理プロドラッグに及ぼす影響を測定するため、感染ラットの感染および未感染後肢の脛骨における再生モキシフロキサシンのレベルを決定した。
【０４５８】
ラットは実施例７の方法で感染させ、術後１日目に１５．８または３１．６mg／kg（体重）のプロドラッグ５２で治療（IV）した。治療後１日目および６日目に、上述の方法で脛骨を回収した。再生モキシフロキサシン３のレベルは以下のようにして決定した。
【０４５９】
脛骨の再生モキシフロキサシンのLC/MSによる判定
実験的に得た脛骨全体を粉砕して粉にし、５％ギ酸のメタノール溶液に懸濁（５００mg／１．６ml）し、放出されたモキシフロキサシン３を抽出した。混合物を１０分間渦動し、１２５０ｇで２０分間遠心分離した。上澄み液（１６０マイクロリットル）を回収し、内部標準（シプロフロキサシン６）を加え、渦動し、窒素気流下で蒸発乾燥した。
【０４６０】
標準（５から１，０００ng）、QC（２５および２５０ng）およびブランクを次の方法で調整した（２組）。ブランクの脛骨粉（５０mg、未乾燥）に５％ギ酸のメタノール溶液およびモキシフロキサシン３のスパイク水溶液（１０マイクロリットル）を加えた。混合物を１０分間渦動し、２，５００ｇで１０分間遠心分離した。上澄み液を別のバイアルに移し、内部標準を加え、渦動し、蒸発乾燥した。その結果得られた各乾燥残渣（サンプル、標準、ＱＣおよびブランク）は２００マイクロリットルの水に移し、１５分間渦動し、１０，０００ｇで１５分間遠心分離した。溶液（２０マイクロリットル）をLC／MSに注入した。LC／MSの方法は実施例６に記載した通りである。その結果は図９に示してある。
【０４６１】
治療用化学物質のアクセス可能性に関しては、感染した骨と未感染の骨との間の違いは無視できるほどであることをこの実験は示している。モキシフロキサシン３の再生レベルは、ビスホスホン酸処理プロドラッグの用量とは無関係に、または投与と脛骨の回収の時間差とは無関係に、未感染脛骨と感染脛骨の間で有意な違いはないのであるから、感染脚における血液循環の減退および炎症の増大はプロドラッグ５２の分配には有意には干渉しない。治療活性を必要としている部位に抗菌剤フルオロキノロンを送達する効果の点でビスホスホン酸塩が優れていることをこれは示している。
【実施例９】
【０４６２】
ビスホスホン酸処理モキシフロキサシンプロドラッグ５２およびガチフロキサシンプロドラッグ５４から再生された親薬物の組織内分配
組織内分配に及ぼすビスホスホン酸塩官能基の影響を評価するため、ビスホスホン酸処理プロドラッグ５２から再生されたモキシフロキサシン３およびビスホスホン酸処理プロドラッグ５４から再生されたガチフロキサシン１５のレベルを種々の器官および骨で決定した。これらの実験は、実施例６に記載の方法で感染させ、調査対象プロドラッグを用いて種々の用量レジメンで治療したラットを使って行なった。
【０４６３】
微生物学的アッセイによるモキシフロキサシン３およびガチフロキサシン１５の判定
粉砕した骨のサンプルおよび組織のホモジネートをPBSに懸濁し、渦動し、１３，０００rpmで２分間遠心分離した。上澄み液を回収し、再生薬物３または１５の量を決定するため、以下に記載のアッセイを行なった。
【０４６４】
骨のサンプルおよび組織のホモジネートから得られた上澄み液を用いて、以下の微生物学的アッセイ測定により、プロドラッグの量を評価した。指定された菌株（大腸菌LBB925 tolC）の単離コロニーを０．８５％生理食塩水に再懸濁し（OD６００＝０．１）、陽イオン調整したミューラー・ヒントンアガー（CAMHA）プレートに塗布した。既知量の上澄み液をディスクに載せ、乾燥した。次に播種したCAMHAプレートにディスクを置いた。プレートを摂氏３７度で１８時間培養し、その後ディスクによって生じた阻止帯の直径を測定した。プロドラッグの量は、参考として各実験に使用した遊離モキシフロキサシン３または遊離ガチフロキサシン１５の既知量の検量線から導いた。
【０４６５】
感染誘発の手術後１４、１５、１６および１７日目に３２mg／kg（体重）のビスホスホン酸処理モキシフロキサシンプロドラッグ５２で治療したラットにも、この実験を行なった。ラットは手術後４３日目に屠殺し、目的の組織を回収し、モキシフロキサシン３のレベルを決定した。その結果を表５に示す。
【０４６６】
【表５】
2008536911.tif 000122
【０４６７】
２つの異なる用量レジメンを用いて、３４mg／kg（体重）のビスホスホン酸処理ガチフロキサシンプロドラッグ５４で治療したラットにも、この実験を行なった。用量レジメンAでは、感染誘発の手術後１４、２１、２８および３５日目に治療を行なった。用量レジメンBでは、感染誘発の手術後１４、１５、１６および１７日目に治療を行なった。いずれの場合もラットは手術後４３日目に屠殺し、目的の組織を回収し、ガチフロキサシン１５のレベルを決定した。その結果を表６に示す。
【０４６８】
表６：選択された骨および器官でのガチフロキサシン１５の濃度（マイクログラム／グラム（組織））
【表６】
2008536911.tif 000123
【０４６９】
再生プロドラッグ５２および５４に関して、いくつかの傾向が観察された。第一に、治療後数週間経った後でも、再生薬物は選択された骨のすべてに検出された。第二に、骨への分配は均一ではなく、脛骨が最も多く、次が下顎骨および大腿骨であった。この傾向は両方のプロドラッグで観察された。骨の解剖学的構造および生理学的性質がプロドラッグの分配に影響を及ぼす重要な要因であることをこれは示している。第三に、比較的少ない量の親薬物が肝臓、脾臓および腎臓に検出されたが、骨の周囲の組織には検出されなかった。これは再生物質が骨からこれらの器官へ拡散した結果生じた現象というよりはむしろ、注射した時点で生じている現象に一致している。注射の時点で不溶性の粒子が形成され、循環している金属イオン（特にカルシウム）によりビスホスホン酸塩の錯体が形成され、それが他のビスホスホン酸塩に関して記載されているように（非特許文献２８）、腎臓、肝臓および脾臓に到達したのであると、この現象は説明できる。
【０４７０】
このin vivo実験で観察された重要な点は、プロドラッグ５２および５４が同じリンカーを有しているにも拘らず、５４から生じたガチフロキサシン１５の組織および骨中の濃度が５２から生じたモキシフロキサシン３の濃度よりも絶えず高いということである。これは薬物が骨から排斥される速度の違いが原因であると説明することも可能であるが、上述したin vitroでの再生速度（表３）ともこれは一致しているのである。
【実施例１０】
【０４７１】
リファンピシンおよびビスホスホン酸塩ガチフロキサシンプロドラッグ５４の併用による、ラットで誘発した骨髄炎の治療
ガチフロキサシン１５はビスホスホン酸処理プロドラッグ５４から比較的緩慢に放出されるので、１５は骨に大量に濃縮されることはない。この緩慢な放出メカニズムの特長は、実施例５および７に具体的に示されているように、細菌が治療薬に長期間さらされることである。この点に関して、抗微生物薬と抗微生物薬をビスホスホン酸処理したプロドラッグを併用するならば、最初に高用量の治療薬を供給し、次に長期間有効な薬を供給できるので有利であろう。この併用方法は、患者の治療回数を減少させ、骨に標的を絞ることができるので、全身的な抗生物質の投与の場合と比べて副作用が少なく、患者にとっては特に魅力的であろう。
【０４７２】
この点に関し、同時投与抗生物質としてリファンピシン（特許文献４１）を選択した。この薬は骨髄炎の治療に有効であることが証明されているが、耐性細菌の発生率が高いという欠点があるからである（非特許文献２９）。
【０４７３】
この実験では、実施例７に記載の方法でラットを感染させ、感染誘発の手術後１４，１５，１６および１７日目に２０mg／kg（体重）のリファンピシンを皮下注射するか、３４mg／kgのプロドラッグ５４（２０mg／kgのガチフロキサシン１５に相当）を静脈注射し、２０mg／kgのリファンピシンを皮下注射するという併用方法を用いることによって治療を行なった。治療を行なわない標準対照および２０mg／kgのリファンピシンで毎日治療する方法もこれに含めた。ラットは術後４３日目に人道的に屠殺し、感染脛骨の細菌力価を決定した。結果は図１０に示してある。
【０４７４】
リファンピシンとプロドラッグ５４の併用は、同じ用量レジメンのリファンピシンだけの場合とは異なり、細菌力価を統計学的に有意に低下させた（ｐ＝０．００７）。ビスホスホン酸処理したフルオロキノロンプロドラッグには、他の抗菌薬物と併用することにより、その薬物の治療効果を長期化できる可能性があることをこれは示している。従って、骨髄炎の治療においては医学界に価値ある手段を提供することになろう。
【０４７５】
本明細書記載の実施例は例示目的だけであり、種々の変更および修正は当業者には明らかで、それも本出願の趣旨および範囲、および本出願の特許請求の範囲に含まれる。
【０４７６】
本明細書で言及される文書は、特許、特許出願、刊行物、書籍、書籍の章、雑誌の記事、手引書、ガイドおよび製品文献も含め、すべて参考のため本明細書に明示的に組み込まれている。
【図面の簡単な説明】
【０４７７】
【図１】図１は１５．８mg／kgのIVボラスをラットの脛骨に注射して７−２８日後の化合物５２の濃度を示す折れ線グラフである。
【０４７８】
【図２】図２は１７．４mg／kgのIVボラスをラットの脛骨に注射して７−２８日後の化合物５４の濃度を示す折れ線グラフである。
【０４７９】
【図３】図３は１５．８mg／kgのIVボラスをラットの脛骨に注射して５分から２４時間後の化合物５２の濃度を示す折れ線グラフである。
【０４８０】
【図４】図４は１８．８mg／kgのIVボラスをラットの脛骨に注射して０−１２０時間後の化合物４９の濃度を示す折れ線グラフである。
【０４８１】
【図５】図５はラットの血液循環からビスホスホン酸処理モキシフロキサシンプロドラッグ５２が急速に消失するのを示す折れ線グラフである。
【０４８２】
【図６】図６は感染前の種々の時点で骨感染の細菌価に及ぼす１５．８mg／kgのビスホスホン酸処理モキシフロキサシンプロドラッグ５２の予防効果を示す棒グラフである。
【０４８３】
【図７】図７は感染前の種々の時点で骨感染の細菌価に及ぼす３２mg／kgのビスホスホン酸処理モキシフロキサシンプロドラッグ５２の予防効果を示す棒グラフである
【０４８４】
【図８】図８は感染48時間前に静脈注射された種々の投与量のビスホスホン酸処理ガチフロキサシンプロドラッグ５４が骨感染の細菌価に及ぼす予防効果を示す棒グラフである。
【０４８５】
【図９】図９は、１５．８または３１．６mg／kgのプロドラッグ５２を感染動物に静脈注射後１日および６日目に、感染したラット脛骨と未感染のラット脛骨の間で再生モキシフロキサシン３の量を比較した棒グラフである。
【０４８６】
【図１０】図１０は、２０mg／kgのリファンピシンと３４mg／kgのビスホスホン酸処理プロドラッグ４９の併用が感染後４３日目に骨感染の細菌価に及ぼす予防効果を、２０mg／kgのリファンピシンだけの場合と比較した棒グラフである。
【図１】
2008536911.tif 000137
【図２】
2008536911.tif 000138
【図３】
2008536911.tif 000139
【図４】
2008536911.tif 000140
【図５】
2008536911.tif 000141
【図６】
2008536911.tif 000142
【図７】
2008536911.tif 000143
【図８】
2008536911.tif 000144
【図９】
2008536911.tif 000145
【図１０】
2008536911.tif 000146
【手続補正書】
【提出日】平成20年1月10日(2008.1.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物であって、
【化１】
2008536911.tif 000147
式中、ｆは０または１であり；
ｍは０または１であり；
Bは少なくとも２つの遊離のヒドロキシル基を有するホスホン酸処理された基であり；
Lｂは以下からなる群から選択される切断可能なリンカーであり、
【化２】
2008536911.tif 000148
式中ｎは１−１０の整数であり；
各ｐは独立して０または１−１０の整数であり；
RLはH、エチルまたはメチルであり；
RXはS、NRLまたはOであり；
各Zは水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、アシル、アシルオキシ、カルボキシ、カルバモイル、スルフリル、スルフィニル、スルフェニル、スルホニル、メルカプト、アミノ、ヒドロキシル、シアノおよびニトロからなる群から独立して選択され、
ｓは１、２、３または４であり；
ｑは２または３であり；
Laは以下からなる群から選択される切断可能なリンカーであり、
【化３】
2008536911.tif 000149
式中ｎは１−１０の整数であり；
各ｐは独立して０または１０以下の整数であり；
RLはH、エチルまたはメチルであり；
RXはS、NRLまたはOであり；
各Zは水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、アシル、アシルオキシ、カルボキシ、カルバモイル、スルフリル、スルフィニル、スルフェニル、スルホニル、メルカプト、アミノ、ヒドロキシル、シアノおよびニトロからなる群から独立して選択され、
ｓは１、２、３または４であり；
ｑは２または３であり；
各RWは独立してHまたはメチルであり；
RｙはCaHｂで、aは０から２０までの整数、ｂは１と２a＋１の間の整数であり；
XはCH２、−CONRL−、−CO−O−CH２−または−CO−O−であり；
YはO、S、S(O)、SO２、C(O)、CO２、CH２または不在であり；
Aは式A1aまたはA1bで表されるフルオロキノロン分子またはその抗菌類似体であり、
【化４】
2008536911.tif 000150
式中、前記リンカーLaはｆが１のときA２に付加しており、Lｂはｍが１のときA１に付加しており；
A２はｆが１のときアミノの基であり、A２はｆが０のとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基であり；
A１はｍが１のときOまたはSであり、A１はｍが０のときOHであり；
Z１はアルキル、シクロプロピル、アリールまたは−O−アルキルであり；
Z２は水素、ハロゲンまたはアミノ基であり；
X１はNまたは−CY１−であり、
Y１は水素、ハロゲン、アルキル、−O−アルキルまたは−S−アルキルであり、
またはX１はZ１と架橋を形成しており；
X２はNまたは−CY２−であり、
Y２は水素、ハロゲン、アルキル、−O−アルキルまたは−S−アルキルであり、
またはX２はA２と架橋を形成しており；
X３はNまたはCHであり；
X４はNまたはCHである；
化合物、またはその医薬品として許容できるそれらの塩、代謝産物、溶媒和物またはプロドラッグ。
【請求項２】
Z１はシクロプロピルであり、X２は−CY２であり、Y２はフッ素である請求項１記載の化合物。
【請求項３】
フルオロキノロン分子または類似体Aが式A2で表される化合物であって、
【化５】
2008536911.tif 000151
式中、前記リンカーLaはｆが１のときA２に付加しており、Lｂはｍが１のときA１に付加しており；
A２はｆが１のときアミノの基であり、A２はｆが０のとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基であり；
A１はｍが１のときOまたはSであり、A１はｍが０のときOHであり；
Z１はアルキル、シクロプロピル、アリールまたは−O−アルキルであり；
Z２は水素、ハロゲンまたはアミノ基であり；
Z３は水素またはハロゲンであり；
Z４は水素、ハロゲン、アルキル、−O−アルキルまたは−S−アルキル、
またはZ１と架橋を形成する、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
Z１はシクロプロピルであり、Z３はフッ素である請求項３記載の化合物。
【請求項５】
フルオロキノロン分子または類似体Aが式A3で表される化合物であって、
【化６】
2008536911.tif 000152
式中、前記リンカーLaはｆが１のときA２に付加しており、Lｂはｍが１のときA１に付加しており；
A２はｆが１のときアミノの基であり、A２はｆが０のとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基であり；
A１はｍが１のときOまたはSであり、A１はｍが０のときOHであり；
Z５は水素、ハロゲン、アルキルまたは−O−アルキルである、請求項１記載の化合物。
【請求項６】
アミノ基はN結合置換窒素ヘテロ環基である請求項１、３または５記載の化合物。
【請求項７】
N結合置換ヘテロ環基は、置換または非置換のピロール、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、１，４−ジアゼパン、ジヒドロピロリジン、ジヒドロピリジンおよびテトラヒドロピリジンからなる群から選択される基である請求項６記載の化合物。
【請求項８】
Bはビスホスホン酸塩である請求項１記載の化合物。
【請求項９】
各ビスホスホン酸塩は独立して以下の化合物であって、
【化７】
2008536911.tif 000153
式中各R２は、少なくとも２つのR２がHであることを条件として、独立してH、下級アルキル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり；
各X５は独立してH、OH、NH２またはハロ基である、請求項８記載の化合物。
【請求項１０】
各ｎは独立して１または２、各ｐは独立して０または１、RLはH、RXはNHである請求項１記載の化合物。
【請求項１１】
フルオロキノロン分子または類似体Aはシプロフロキサシンまたはその抗菌性類似体である請求項１記載の化合物。
【請求項１２】
フルオロキノロン分子または類似体Aはガチフロキサシンまたはその抗菌性類似体である請求項１記載の化合物。
【請求項１３】
フルオロキノロン分子または類似体Aはモキシフロキサシンまたはその抗菌性類似体である請求項１記載の化合物。
【請求項１４】
式（II）の化合物であって、
【化８】
2008536911.tif 000154
式中、破線は任意の基B−L３およびL２−Bを表しており、B−L３およびL２−Bのうち少なくとも１つは存在しており；
Z５は水素、ハロゲン、アルキルまたは−O−アルキルであり；
A１はL２−BがA１に付加しているときOまたはSであり、A１はL２−BがA１に付加していないときOHであり；
A２はB−L３がA２に付加しているときアミノ基であり、A２はB−L３がA２に付加していないとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基であり；
各Bは独立してホスホン酸処理された以下の式の基であり、
【化９】
2008536911.tif 000155
式中、各R２は、少なくとも２つのR２がHであることを条件として、H、下級アルキル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり；
各X５は独立してH、OH、NH２またはハロ基であり；
L２は以下の式のリンカーであり、
【化１０】
2008536911.tif 000156
式中、ｎは１−１０の整数であり；
ｐは０または１−１０の整数であり；
RLはH、エチルまたはメチルであり；
RXはS、NRLまたはOであり；
各Zは水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、アシル、アシルオキシ、カルボキシ、カルバモイル、スルフリル、スルフィニル、スルフェニル、スルホニル、メルカプト、アミノ、ヒドロキシル、シアノおよびニトロからなる群から独立して選択され、
ｓは１、２、３または４であり；
L３は以下の式のリンカーであり、
【化１１】
2008536911.tif 000157
式中、ｎは１−１０の整数であり；
各ｐは独立して０または１−１０の整数であり；
ｑは２または３であり；
RLはH、エチルまたはメチルであり；
各RWは独立してHまたはメチルであり；
RｙはCaHｂで、aは０から２０までの整数、ｂは１と２a＋１の間の整数であり；
XはCH２、−CONRL−、−CO−O−CH２−または−CO−O−であり；
YはO、S、S(O)、SO２、C(O)、CO２、CH２または不在である；
化合物、または医薬品として許容できるそれらの塩、代謝産物、溶媒和物またはプロドラッグ。
【請求項１５】
各リンカーｎは独立して１または２、各ｐは独立して０または１、RLはH、RXはNHである請求項１４記載の化合物。
【請求項１６】
アミノ基はN結合置換窒素ヘテロ環基である請求項１４記載の化合物。
【請求項１７】
N結合置換窒素ヘテロ環基は、置換または非置換のピロール、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、１，４−ジアゼパン、ジヒドロピロリジン、ジヒドロピリジンおよびテトラヒドロピリジンからなる群から選択される基である請求項１６記載の化合物。
【請求項１８】
以下の群から選択される式により表される化合物、
【化１２】
2008536911.tif 000158
および
【化１３】
2008536911.tif 000159
または医薬品として許容できるそれらの塩、代謝産物、溶媒和物またはプロドラッグ。
【請求項１９】
請求項１、１４および１８から選択される化合物を含む医薬組成物、および医薬品として許容できる担体または賦形剤。
【請求項２０】
被験体の細菌感染を治療するための方法であって、製薬学的に有効量の請求項１、１４および１８の化合物を含む医薬組成物をそういう治療を必要としている被験体に投与する方法。
【請求項２１】
前述の医薬組成物に追加抗生物質が含まれている請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
前述の追加抗生物質がリファマイシン類似体である請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
前述の追加抗生物質がテトラサイクリン、チゲサイクリンまたはテトラサイクリン、グリシサイクリンもしくはミノサイクリン類似体である請求項２１記載の方法。
【請求項２４】
前述の被験体がヒトである請求項２０記載の方法。
【請求項２５】
被験体の細菌感染を予防するための方法であって、請求項１、１４および１８のいずれかの化合物を含む製薬学的に有効量の医薬組成物をそういう予防を必要としている被験体に投与する方法。
【請求項２６】
前述の医薬組成物は侵襲的治療の前、期間中または後に前述の被験体に投与する請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
被験体の骨にフルオロキノロン分子またはその類似体を蓄積させる方法であって、請求項１、１４および１８のいずれかに記載の化合物を被験体に投与する方法。
【手続補正書】
【提出日】平成20年5月13日(2008.5.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物であって、
【化１】
2008536911.tif 000160
式中、ｆは０または１であり；
ｍは０または１であって、ここでｆおよびｍの少なくとも一方が１であり；
Bは少なくとも２つの遊離のヒドロキシル基を有するホスホン酸処理された基であり；
Lｂは以下からなる群から選択される切断可能なリンカーであり、
【化２】
2008536911.tif 000161
式中ｎは１−１０の整数であり；
各ｐは独立して０または１−１０の整数であり；
RLはH、エチルまたはメチルであり；
RXはS、NRLまたはOであり；
各Zは水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、アシル、アシルオキシ、カルボキシ、カルバモイル、スルフリル、スルフィニル、スルフェニル、スルホニル、メルカプト、アミノ、ヒドロキシル、シアノおよびニトロからなる群から独立して選択され、
ｓは１、２、３または４であり；
Laは以下からなる群から選択される切断可能なリンカーであり、
【化３】
2008536911.tif 000162
式中ｎは１−１０の整数であり；
各ｐは独立して０または１０以下の整数であり；
RLはH、エチルまたはメチルであり；
ｑは２または３であり；
各RWは独立してHまたはメチルであり；
RｙはCaHｂで、aは０から２０までの整数、ｂは１と２a＋１の間の整数であり；
XはCH２、−CONRL−、−CO−O−CH２−または−CO−O−であり；
YはO、S、S(O)、SO２、C(O)、CO２、CH２または不在であり；
Aは式A1aまたはA1bで表されるフルオロキノロン分子またはその抗菌類似体であり、
【化４】
2008536911.tif 000163
式中、前記リンカーLaはｆが１のときA２に付加しており、Lｂはｍが１のときA１に付加しており；
A２はｆが１のときアミノの基であり、A２はｆが０のとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基であり；
A１はｍが１のときOまたはSであり、A１はｍが０のときOHであり；
Z１はアルキル、シクロプロピル、アリールまたは−O−アルキルであり；
Z２は水素、ハロゲンまたはアミノ基であり；
X１はNまたは−CY１−であり、
Y１は水素、ハロゲン、アルキル、−O−アルキルまたは−S−アルキルであり、
またはX１はZ１と架橋を形成しており；
X２はNまたは−CY２−であり、
Y２は水素、ハロゲン、アルキル、−O−アルキルまたは−S−アルキルであり、
またはX２はA２と架橋を形成しており；
X３はNまたはCHであり；
X４はNまたはCHである；
化合物、またはその医薬品として許容できるそれらの塩、代謝産物、溶媒和物またはプロドラッグ。
【請求項２】
Z１はシクロプロピルであり、X２は−CY２であり、Y２はフッ素である請求項１記載の化合物。
【請求項３】
フルオロキノロン分子または類似体Aが式A2で表される化合物であって、
【化５】
2008536911.tif 000164
式中、前記リンカーLaはｆが１のときA２に付加しており、Lｂはｍが１のときA１に付加しており；
A２はｆが１のときアミノの基であり、A２はｆが０のとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基であり；
A１はｍが１のときOまたはSであり、A１はｍが０のときOHであり；
Z１はアルキル、シクロプロピル、アリールまたは−O−アルキルであり；
Z２は水素、ハロゲンまたはアミノ基であり；
Z３は水素またはハロゲンであり；
Z４は水素、ハロゲン、アルキル、−O−アルキルまたは−S−アルキル、
またはZ１と架橋を形成する、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
Z１はシクロプロピルであり、Z３はフッ素である請求項３記載の化合物。
【請求項５】
フルオロキノロン分子または類似体Aが式A3で表される化合物であって、
【化６】
2008536911.tif 000165
式中、前記リンカーLaはｆが１のときA２に付加しており、Lｂはｍが１のときA１に付加しており；
A２はｆが１のときアミノの基であり、A２はｆが０のとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基であり；
A１はｍが１のときOまたはSであり、A１はｍが０のときOHであり；
Z５は水素、ハロゲン、アルキルまたは−O−アルキルである、請求項１記載の化合物。
【請求項６】
アミノ基はN結合置換窒素ヘテロ環基である請求項１、３または５記載の化合物。
【請求項７】
N結合置換ヘテロ環基は、置換または非置換のピロール、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、１，４−ジアゼパン、ジヒドロピロリジン、ジヒドロピリジンおよびテトラヒドロピリジンからなる群から選択される基である請求項６記載の化合物。
【請求項８】
Bはビスホスホン酸塩である請求項１記載の化合物。
【請求項９】
各ビスホスホン酸塩は独立して以下の化合物であって、
【化７】
2008536911.tif 000166
式中各R２は、少なくとも２つのR２がHであることを条件として、独立してH、下級アルキル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり；
各X５は独立してH、OH、NH２またはハロ基である、請求項８記載の化合物。
【請求項１０】
各ｎは独立して１または２、各ｐは独立して０または１、RLはH、RXはNHである請求項１記載の化合物。
【請求項１１】
フルオロキノロン分子または類似体Aはシプロフロキサシンまたはその抗菌性類似体である請求項１記載の化合物。
【請求項１２】
フルオロキノロン分子または類似体Aはガチフロキサシンまたはその抗菌性類似体である請求項１記載の化合物。
【請求項１３】
フルオロキノロン分子または類似体Aはモキシフロキサシンまたはその抗菌性類似体である請求項１記載の化合物。
【請求項１４】
式（II）の化合物であって、
【化８】
2008536911.tif 000167
式中、破線は任意の基B−L３およびL２−Bを表しており、B−L３およびL２−Bのうち少なくとも１つは存在しており；
Z５は水素、ハロゲン、アルキルまたは−O−アルキルであり；
A１はL２−BがA１に付加しているときOまたはSであり、A１はL２−BがA１に付加していないときOHであり；
A２はB−L３がA２に付加しているときアミノ基であり、A２はB−L３がA２に付加していないとき水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ピリジニル、−O−アルキルまたはアミノ基であり；
各Bは独立してホスホン酸処理された以下の式の基であり、
【化９】
2008536911.tif 000168
式中、各R２は、少なくとも２つのR２がHであることを条件として、H、下級アルキル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり；
各X５は独立してH、OH、NH２またはハロ基であり；
L２は以下の式のリンカーであり、
【化１０】
2008536911.tif 000169
式中、ｎは１−１０の整数であり；
ｐは０または１−１０の整数であり；
RLはH、エチルまたはメチルであり；
RXはS、NRLまたはOであり；
各Zは水素、ハロゲン、アルキル、アルコキシ、アシル、アシルオキシ、カルボキシ、カルバモイル、スルフリル、スルフィニル、スルフェニル、スルホニル、メルカプト、アミノ、ヒドロキシル、シアノおよびニトロからなる群から独立して選択され、
ｓは１、２、３または４であり；
L３は以下の式のリンカーであり、
【化１１】
2008536911.tif 000170
式中、ｎは１−１０の整数であり；
各ｐは独立して０または１−１０の整数であり；
ｑは２または３であり；
RLはH、エチルまたはメチルであり；
各RWは独立してHまたはメチルであり；
RｙはCaHｂで、aは０から２０までの整数、ｂは１と２a＋１の間の整数であり；
XはCH２、−CONRL−、−CO−O−CH２−または−CO−O−であり；
YはO、S、S(O)、SO２、C(O)、CO２、CH２または不在である；
化合物、または医薬品として許容できるそれらの塩、代謝産物、溶媒和物またはプロドラッグ。
【請求項１５】
各リンカーｎは独立して１または２、各ｐは独立して０または１、RLはH、RXはNHである請求項１４記載の化合物。
【請求項１６】
アミノ基はN結合置換窒素ヘテロ環基である請求項１４記載の化合物。
【請求項１７】
N結合置換窒素ヘテロ環基は、置換または非置換のピロール、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、１，４−ジアゼパン、ジヒドロピロリジン、ジヒドロピリジンおよびテトラヒドロピリジンからなる群から選択される基である請求項１６記載の化合物。
【請求項１８】
以下の群から選択される式により表される化合物、
【化１２】
2008536911.tif 000171
および
【化１３】
2008536911.tif 000172
または医薬品として許容できるそれらの塩、代謝産物、溶媒和物またはプロドラッグ。
【請求項１９】
請求項１、１４および１８から選択される化合物を含む医薬組成物、および医薬品として許容できる担体または賦形剤。
【請求項２０】
被験体の細菌感染を治療するための方法であって、製薬学的に有効量の請求項１、１４および１８の化合物を含む医薬組成物をそういう治療を必要としている被験体に投与する方法。
【請求項２１】
前述の医薬組成物がさらに抗生物質を含む請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
追加抗生物質がリファマイシン類似体である請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
追加抗生物質がテトラサイクリン、チゲサイクリンまたはテトラサイクリン、グリシサイクリンもしくはミノサイクリン類似体である請求項２１記載の方法。
【請求項２４】
前述の被験体がヒトである請求項２０記載の方法。
【請求項２５】
被験体の細菌感染を予防するための方法であって、請求項１、１４および１８のいずれかの化合物を含む製薬学的に有効量の医薬組成物をそういう予防を必要としている被験体に投与する方法。
【請求項２６】
前述の医薬組成物は侵襲的治療の前、期間中または後に前述の被験体に投与する請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
被験体の骨にフルオロキノロン分子またはその類似体を蓄積させる方法であって、請求項１、１４および１８のいずれかに記載の化合物を被験体に投与する方法。
【国際調査報告】
2008536911.tif 000173
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