【事件の表示】
　特許第２６４７５５６号「改良された生物学的活性を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体類」の請求項１ないし１８に係る特許に対する特許異議の申立てについて、次のとおり決定する。
【結論】
　訂正を認める。
　特許第２６４７５５６号の請求項１、７ないし１８に係る特許を維持する。
【理由】
Ｉ．経緯
　本件特許第２６４７５５６号は、平成４年３月１８日の国際出願（優先権主張、１９９１年３月１９日、１９９２年３月１３日、米国）に係り、平成９年５月９日に設定登録されたものである。その後、日本油脂株式会社及び旭硝子株式会社からの異議申立てがあり、取消理由通知に対して、平成１１年３月１日に訂正請求がなされたものである。
ＩＩ．訂正請求の適否
　本件訂正請求に係る訂正事項は、以下のとおりである。
１．特許明細書の請求項１における、
「下記の一般式：
　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、共重合体のポリオキシプロピレン部分により表されている分子量は９００〜１５０００ダルトンの間にありそして共重合体のポリオキシエチレン部分により表されている分子量は共重合体の５％−９０％の間を構成しておりそして多分散値は１．０７より小さい］
を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体。」なる記載を、
「下記の一般式：
　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、共重合体のポリオキシプロピレン部分により表されている分子量は９００〜１５０００ダルトンの間にありそして共重合体のポリオキシエチレン部分により表されている分子量は共重合体の５％−９０％の間を構成しておりそして多分散値は１．０７より小さくそして共重合体は核磁気共鳴により測定された場合に実質的に不飽和を含まない］
を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体。」に訂正する。
２．特許明細書の請求項２〜６を削除するとともに、請求項７〜２８の項番を２〜２３に順次繰り上げる。
　そこで、検討するに、１の訂正は、請求項１のポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体において、その構造中の不飽和結合についての限定を加えるものであるから、特許請求の範囲の減縮を目的とするものであるするものである。また、２の訂正も、請求項の削除とこれに伴う請求項の項番を整理するものであるから、特許請求の範囲の減縮を目的とするものである。
　しかも、これら訂正は、いずれも特許明細書に記載された事項の範囲内の訂正であって、特許請求の範囲を実質的に拡張、変更するものでもない。
　さらに、後記することから明らかなように、訂正後の特許請求の範囲に記載された事項により特定される各発明は、特許出願の際独立して特許を受けられない発明とすることもできないものである。
　したがって、本件訂正請求は特許法第１２０条の４第２項及び同条第３項で準用する同法第１２６条第２〜４項の規定に適合するから、当該訂正を認める。
ＩＩＩ．特許異議申立について、
　本件異議申立人の主張の概要は以下のとおりである。
（１）日本油脂株式会社の主張
ｉ）本件請求項１，２，５および６の各発明は、甲第２、３号証の記載を勘案すれば、甲第１号証の発明と同一であるから、これら各請求項に係る特許は、特許法第２９条第１項第３号の規定に違反してなされたものである。
ｉｉ）本件請求項１〜１８項の各発明は、甲第１〜３号証の記載から当業者が容易に想到できたものであるから、これら請求項に係る特許は、特許法第２９条第２項の規定に違反してなされたものである。
ｉｉｉ）本件請求項１〜１８の記載には不備があり、本件特許は、特許法第３６条の要件を満たしていない出願に対しなされたものである。
　証拠方法
甲第１号証；特開昭６３−２０６７６３号公報（以下、引用例１という。）
甲第２号証；日本油脂カタログ「ニッサンプロノン」（以下、引用例２という。）
甲第３号証；日本油脂株式会社　主任研究員丸山常勝作成の実験報告書（以下、実験報告書１という。）
（２）旭硝子株式会社の主張
ｉ）本件請求項１〜６の各発明は、甲第３、４号証を勘案すれば、甲第１号証または甲第２号証に記載された発明であるから、これら請求項に係る特許は特許法第２９条第１項第３号の規定に違反してなされたものである。
ｉｉ）本件請求項１５，１６及び１８の各発明は、甲第１号証及び２号証に記載された発明から当業者が容易に発明できたものであるから、これら請求項に係る特許は、特許法第２９条第２項の規定に違反してなされたものである。なお、この主張に関してはさらに甲第５号証を提示している。
　証拠方法
甲第１号証；特公昭４５−３３１９４号公報（以下、引用例３という。）
甲第２号証；特公昭５９−１５３３６号公報（以下、引用例４という。）
甲第３号証；旭硝子株式会社、高橋佳世子作成の実験成績書Ｉ（以下、実験報告書２という。）
甲第４号証；旭硝子株式会社、高橋佳世子作成の実験成績書ＩＩ（以下、実験報告書３という。）
甲第５号証；「プラスチック材料講座１８　ポリエーテル」日刊工業新聞社、昭和３６年９月１５日発行、第１〜３頁
　一方、本件訂正後の発明は、訂正明細書及び図面の記載からみて、特許請求の範囲の請求項１〜２３に記載された事項により特定されるものであって、、同請求項１〜１３の記載は以下のとおりである。なお、訂正前の２〜６は削除されており、訂正前の請求項７〜１８は、訂正明細書の請求項２〜１３にそれぞれ対応する。
「１．下記の一般式：
　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、共重合体のポリオキシプロピレン部分により表されている分子量は９００〜１５０００ダルトンの間にありそして共重合体のポリオキシエチレン部分により表されている分子量は共重合体の５％−９０％の間を構成しておりそして多分散値は１．０７より小さくそして共重合体は核磁気共鳴により測定された場合に実質的に不飽和を含まない］
を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体。」
２．下記の一般式：
　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、疎水基（Ｃ３Ｈ６Ｏ）の分子量は１７５０ダルトンでありそして該化合物の平均合計分子量が８４００ダルトンでありそして多分散値は１．０７より小さい］
を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体を含んでなる、表面活性共重合体。
３．多分散値が１．０５より小さい、請求の範囲第２項記載の表面活性共重合体。
４．多分散値が１．０３より小さい、請求の範囲第２項記載の表面活性共重合体。
５．共重合体が実質的に不飽和を含まない、請求の範囲第２項記載の表面活性共重合体。
６．下記の一般式：
　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、疎水基（Ｃ３Ｈ６Ｏ）の分子量は９，７００ダルトンでありそして該化合物の平均合計分子量が１０，０００ダルトンでありそして多分散値は１．０７より小さい］
を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体を含んでなる、表面活性共重合体。
７．　多分散値が１．０５より小さい、請求の範囲第６項記載の表面活性共重合体。
８．多分散値が１．０３より小さい、請求の範囲第６項記載の表面活性共重合体。
９．共重合体が実質的に不飽和を含まない、請求の範囲第６項記載の表面活性共重合体。
１０．下記の一般式：
　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、疎水基（Ｃ３Ｈ６Ｏ）の分子量は３４００ダルトンでありそして該化合物の平均合計分子量が４０００ダルトンでありそして多分散値は１．０７より小さい］
を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体を含んでなる、表面活性共重合体。
１１．　多分散値が１．０５より小さい、請求の範囲第１０項記載の表面活性共重合体。
１２．多分散値が１．０３より小さい、請求の範囲第１０項記載の表面活性共重合体。
１３．共重合体が実質的に不飽和を含まない、請求の範囲第１０項記載の表面活性共重合体。
　そこで、本件訂正後の発明について、本件異議申立人の主張が採用できるか否かを以下検討する。
（１）異議申立人、日本油脂株式会社の主張ｉ）について、
　引用例１においては、ポリオキシエチレン基とポリオキシプロピレン基とを有し、分子末端が水酸基であるブロック共重合体を含有する電子写真用感光体について記載され、このブロック共重合体として、プロノン１０２、１０４および２０８が例示されている。また引用例２においては、これら各プロノンが、本件訂正後の請求項１の発明における共重合体と同様のポリオキシプロピレン部分の分子量、およびポリオキシエチレン部分の構成割合を有するものであることを示す記載があり、さらに実験報告書１においては、上記各プロノンの多分散値が１．０７より小さいことを示す実験結果が記載されている。しかし、引用例１及び２においては上記各プロノンが核磁気共鳴により測定された場合に実質的に不飽和を含まないことを示す記載はなく、また、実験報告書１においても、上記各プロノンに含まれる不飽和結合の有無についての試験結果は示されていない。さらに、平成１１年３月１日付意見書及びこれに添付された参考資料１の上記各プロノンについての試験結果によれば、これらプロノンは、核各磁気共鳴による測定において明らかにその分子中に不飽和結合を含むものと解されるから、本件訂正後の請求項１の発明の共重合体と引用例１、２に記載された上記各プロノンとが、同一物質ということはできず、本件訂正後の請求項１の発明はこれら引用例に記載された発明とはいえない。
　さらに、異議申立人が指摘する本件特許明細書の請求項２、５および６は上記訂正により削除されており、これら請求項に係る特許については、もはや取消すべき対象がない。
　したがって、異議申立人の主張ｉ）は採用できない。
（２）同異議申立人の主張ｉｉ）について、
　前記したことから明らかなように、本件訂正後の請求項１の発明におけるブロック共重合体は、引用例１及び２に記載された共重合体と同一物質とはいえない。また、本件訂正後の請求項２〜１３（特許明細書の請求項７〜１８に対応）の発明における表面活性共重合体に含まれるブロック共重合体は、特定の疎水基（Ｃ３Ｈ６Ｏ）部分の分子量、共重合体の平均合計分子量及び多分散値を有するものであり、これら分子量及び多分散値を有する共重合体は、引用例１，２に記載されてはおらず、実験報告書１の試験結果も本件訂正後の請求項２〜１３の発明のブロック共重合体と引用例１，２も共重合体とが同一物質であることを示してはいない。
　したがって、本件訂正後の請求項１〜１３の発明と甲第１，２号証に記載された発明とは構成上異なるとせざるを得ない。そして、本件訂正後の請求項１〜１３の発明の共重合体あるいは表面活性共重合体は、血液および他の生理学的流体中での病理学的疎水性相互作用に起因する例えば血流障害等の治療に有効であるとともに、毒性も少ないとの効果を有するものであり、このような生物学的効果は引用例１、２に全く示唆されていないものである。
　してみれば、本件訂正後の請求項１〜１３の発明は、実験報告書１の結果を勘案しても甲第１、２号証に記載された発明から当業者が容易に発明できたとすることはできない。
（３）同異議申立人の主張ｉｉｉ）について、
　本件訂正明細書の発明の詳細な説明においては、本件訂正後の請求項１〜１３のブロック共重合体あるいはこれを含む表面活性共重合体の用途として、生物学的な用途のみが記載されてはいるが、特許法第３６条第５項の規定（平成２年法）は、発明の詳細な説明中に多面的に記載された発明のうち、どの発明について特許を受けようとするのかあるいはどのように表現するかは、出願人自らが判断し、これに基づき特許請求の範囲に記載できることを規定しているものと解され、その要件を満たしていないとできる場合は、発明の詳細な説明中に特許を受けようとする発明が記載されていないとか、あるいは特許請求の範囲の記載が明確でなく、また一つのまとまりのある技術思想として把握できない場合であって、単に、特許請求の範囲の記載が、発明の詳細な説明中の記載との対比により広すぎるとの理由だけで、特許法第３６条第５項の要件を満たしていないとすることはできない。　したがって、本件訂正明細書の発明の詳細な説明において、上記ブロック共重合体およびこれを含む表面活性共重合体の用途として、生物学的な用途のみが記載されていたとしても、これにより、本件上記各請求項に記載されたブロック共重合体あるいはこれを含む表面活性共重合体について、さらに用途限定しなくてはならないことはない。
　よって、この点の主張も採用できない。
（４）異議申立人、旭硝子株式会社の主張ｉ）について、
　引用例３においては、アルキレンオキサイド重合体の製造方法について記載され、例３においては、例１の製法により得られたポリマー（その製法からみて、ポリオキシプロピレングリコール（分子量２０２５）と解される。）に対し、エチレンオキサイドが１５重量％となるようにエチレンオキサイドを吹き込み、不飽和度０．０３（ミリ当量／ｇ）のポリマー（このポリマーは、異議申立人が指摘するようにポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック重合体と解される。）を得ている。
　また、実験報告書２によれば、実験１の結果として、引用例３の例３を追試して得たポリマーの多分散値が１．０２８であることが示されている。
　なお、同報告書の実験２は、引用例３の例３を忠実に追試したものではないからこの結果は採用しない。
　したがって、以上の点からみると、引用例３においては、本件訂正後の請求項１の発明におけるのと同様なポリオキシプロピレン部分の分子量、ポリオキシエチレン部分の構成割合および多分散値を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック重合体が記載されているとすることができるものの、引用例３においては、得られたポリマーが核磁気共鳴により測定された場合に実質的に不飽和を含まないことを示す記載はなく、また実験報告書２の結果中にもこのことは示されてはいない。もっとも、引用例３の例３においては得られたポリマーの不飽和度（ミリ当量／ｇ）が０．０３であることが示されてはいるが、上記意見書及びこれに添付された参考資料１の実験結果からいえば、不飽和度（ミリ当量／ｇ）が０．０１であっても、各磁気共鳴による測定によって、不飽和結合が検出されており、これからみれば、引用例の例３のポリマーも、核磁気共鳴により測定すれば、不飽和結合が検出されるとするのが普通であるから、この点でこの引用例３のポリマーは本件訂正後の請求項１のブロック共重合体と同一物質とはいえない。
　また、引用例４においては、ポリプロピレンエーテルポリオール等の処理法について記載され、実施例７においては、実施例６で得たポリプロピレンエーテルジオールとエチレンオキサイドを反応させ、エチレンオキシド含有量９．５重量％と同含有量１３．０重量％の各ポリマーを得ており、また比較例の記載には、これらポリマーの分子量がそれぞれ４０４８、７４３０であることが示されている。
　しかし、この記載からでは、これらポリマーの多分散値は不明である。この点について、同異議申立人は実験報告書３の実験結果から、これらポリマーも多分散値は１．０７より小さい旨主張している。この実験においては、引用例４の実施例６におけるポリプロピレンエーテルジオールを得るために分子量１０００のポリオキシプロピレングリコールを使用しているが、実施例６においては、このような分子量のものを使用することは記載されてはいないのであるから、この実験は引用例４の手段を忠実に追試したものとはいえない。したがって、本件訂正後の請求項１のブロック共重合体は、引用例４に記載されたポリマーとは同一物質とはいえず、同請求項１の発明は引用例４に記載された発明ではない。なお、特許明細書の請求項２〜６は上記訂正により削除され、これら請求項に係る特許はもはや取り消すべき対象がない。
（５）同異議申立人の主張ｉｉ）について、
引用例４の記載は上記したとおりであり、実験報告書３の結果をみても、引用例４に記載されたポリマーは、多分散値が１．７より小さいものとはいえない。そして、本件訂正後の請求項１０、１１および１３（特許明細書の請求項１５、１６および１８に対応）の各発明における表面活性剤は、いずれも多分散値が１．０７より小さいブロック共重合体を含むのであるから、これら請求項２〜１３の発明と引用例４の発明とはそれぞれ構成上同一とはい４えない。
　さらに、引用例５は単に米国Ｗｙａｎｄｏｔｔｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏｒｐ．のプルロニックが、エチレンオキサイドとプロピレンオキサイドのブロック共重合体であり、非イオン界面活性剤に用いられるれ旨記載されているだけであり、引用例５の記載は、本件訂正後の請求項１０，１１および１３の表面活性共重合体に含まれる上記ブロック共重合体と引用例４の上記ポリマーとの同一性の判断に何等影響を与えないものである。
　しかも、本件訂正後の請求項１０、１１および１３の各発明は上記したことから明らかなように、血液および他の生理学的流体中での病理学的疎水性相互作用に起因する例えば血流障害等の治療に有効であるとともに、毒性も少ないとの効果を有するものであり、このような生物学的効果は引用例４には全く示唆されていないのである。してみれば、本件訂正後の請求項１０、１１および１３の各発明は、実験報告書３および引用例５を参酌しても、引用例４に記載された発明であるとも、また、当業者が容易に発明できたものともすることはできない。
　したがって、同異議申立人の主張はいずれも採用できない。
ＩＶ．結び
　以上のとおりであるから、本件訂正請求は認めることができ、また、本件異議申立人の主張する理由および提示証拠によっては、本件訂正後の請求項１〜１３（本件特許明細書の請求項１および７〜１８に対応）に係る特許は取り消すことはできない。さらに、他にこれら請求項に係る特許を取り消すべき理由を発見しない。
　よって、結論のとおり決定する。
【異議決定日】
平成１１年６月２日（１９９９．６．２）
【訂正の要旨】
１．特許明細書の請求項１における、
「下記の一般式：
　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、共重合体のポリオキシプロピレン部分により表されている分子量は９００〜１５０００ダルトンの間にありそして共重合体のポリオキシエチレン部分により表されている分子量は共重合体の５％−９０％の間を構成しておりそして多分散値は１．０７より小さい］
を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体。」なる記載を、
「下記の一般式：
　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、共重合体のポリオキシプロピレン部分により表されている分子量は９００〜１５０００ダルトンの間にありそして共重合体のポリオキシエチレン部分により表されている分子量は共重合体の５％−９０％の間を構成しておりそして多分散値は１．０７より小さくそして共重合体は核磁気共鳴により測定された場合に実質的に不飽和を含まない］
を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体。」に訂正する。
２．特許明細書の請求項２〜６を削除するとともに、請求項７〜２８の項番を２〜２３に順次繰り上げる。
（５４）【発明の名称】
改良された生物学的活性を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体類
（５７）【特許請求の範囲】
１．下記の一般式：
　　　　　　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、共重合体のポリオキシプロピレン部分により表されている分子量は９００−１５０００ダルトンの間でありそして共重合体のポリオキシエチレン部分により表されている分子量は共重合体の５％−９０％の間を構成しておりそして多分散値は１．０７より小さ
くそして共重合体は核磁気共鳴により測定された場合に実質的に不飽和を含まない
を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体。
２
　　　　　　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、疎水基（Ｃ３Ｈ６Ｏ）の分子量は１７５０ダルトンでありそして該化合物の平均合計分子量が８４００ダルトンでありそして多分散値は１．０７より小さい］
を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体を含んでなる、表面活性共重合体。
３
２
４
２
５
２
６
　　　　　　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、疎水基（Ｃ３Ｈ６Ｏ）の分子量は９，７００ダルトンでありそして該化合物の平均合計分子量は１０，０００ダルトンでありそして多分散値は１．０７より小さい］
を有するポリ．オキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体を含んでなる、表面活性共重合体。
７
６
８
６
９
６
１０
　　　　　　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、疎水基（Ｃ３Ｈ６Ｏ）の分子量は３４００ダルトンでありそして該化合物の平均合計分子量は４０００ダルトンでありそして多分散値は１．０７より小さい］
を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体を含んでなる、表面活性共重合体。
１１
１０
１２
１０
１３
１０
１４
　　　　　　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体を製造することを含んでなる非一毒性の表面活性共重合体を製造する方法において、改良が酸化エチレンとポリオキシプロピレン重合体との縮合段階の前のポリオキシプロピレン重合体の精製であり、それによりポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体の多分散値を１．０７より小さくするような方法。
１５
１４
１６
１４
１７
１４
１８
１４
１９
　　　　　　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、疎水基（Ｃ３Ｈ６Ｏ）の分子量は１７５０ダルトンでありそして該化合物の平均合計分子量は８４００ダルトンである］
を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体を製造することを含んでなる非一毒性の表面活性共重合体を製造する方法において、改良が酸化エチレンとポリオキシプロピレン重合体との縮合段階の前のポリオキシプロピレン重合体の精製であり、それにより１．０７より小さい多分散値を有するポリオキジプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体を製造するような方法。
２０
１９
２１
が１
１９
２２
１９
２３
１９
【発明の詳細な説明】
関連出願の相互参照
　本出願は、１９９１年３月１９日に出願された米国特許出願第０７／６７３，２８９号の係属中の一部継続出願である。
技術分野
　本発明は、改良された毒性および効能特性を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体の製造に関するものである。本発明は、約１．０５より小さい多分散値を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体も包含している。
発明の背景
　ある種のポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体が人間または動物に投与された時に有利な生物学的影響を有することは見いだされている。これらの有利な生物学的影響は以下にまとめられている。
　レオロジー剤としてのポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体類
　共重合体類を、単独でまたは限定されるものでないが他の化合物、フィブリン溶解酵素、抗凝固剤、フリーラジカル捕捉剤、抗炎症剤、抗生物質、膜安定剤および／または潅流媒体と組み合わせて、循環系疾病の処置に使用することができる。これらの活性は米国特許第４，８０１，４５２号、４，８７３，０８３号、４，８７９，１０９号、４，８３７，０１４号、４，８９７，２６３号、５，０６４，６４３号、５，０２８，５９９号、５，０４７，２３６号、５，０８９，２６０号、５，０１７，３７０号、５，０７８，９９５号、５，０３２，３９４号、５，０４１，２８８号、５，０７１，６４９号、５，０３９，５２０号、５，０３０，４４８号、４，９９７，６４４号、４，９３７，０７０号、５，０８０，８９４号、および４，９３７，０７０号明細書中に記されており、それらの全ては引用することにより本明細書の内容となる。
　ポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体類は全く異例の治療活性を有していることが示されている。表面活性共重合体類は人間および動物の血液および他の生理学的流体中での病理学的疎水性相互作用の処置用に有用である。これには、接着性の疎水性蛋白質または損傷膜の存在による傷により血液流に対する抵抗が病理学的に増大されているような疾病および状態の処置用の表面活性共重合体の使用が包含される。この接着性は病理学的疎水性相互作用により生じ、そして特異的なリガンドとそれらの受容体との相互作用は必要としない。摩擦を増加させそして血管の有効半径を減少させることにより、そのような蛋白質および／または損傷膜が毛細血管中の抵抗を増加させる。これらの蛋白質の最も重要なものは可溶性フィブリンであると信じられている。
　病理学的疎水性相互作用により引き起こされる状態に罹っている動物または人間に有効量の表面活性共重合体を投与することにより、病理学的疎水性相互作用を処置することができる。表面活性共重合体は溶液状でそのまま投与することもできまたはフィブリン溶解酵素、抗凝固剤、または酸素ラジカル捕捉剤を包含しているがそれらに限定されるものではない他の試薬と共に投与することもできる。
　前記の特許明細書中に記されている方法は、動物または人間に有効量の下記の一般式：
　　　　　　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、ａは（Ｃ３Ｈ６Ｏ）により表されている疎水基が約９５０−４０００ダルトン、好適には約１２００−３５００ダルトン、の間の分子量を有するような整数であり、そしてｂは（Ｃ２Ｈ４０）により表されている親水基が化合物の約５０％−９５％を構成するような整数である］
を有する表面活性共重合体を投与することを含んでいる。
　好適な表面活性共重合体は、下記の一般式：
　　　　　　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、疎水基（Ｃ３Ｈ６Ｏ）の分子量は約１７５０ダルトンであり、そして化合物の合計分子量が約８４００ダルトンである］
を有する共重合体である。
　表面活性共重合体は、細胞および／または分子の間で病理学的疎水性相互作用があるような状態において有効である。これらの相互作用は、１）正常値より高いフィブリノーゲンの濃度、２）血管内または局所的な可溶性フィブリン、特に高分子量フィブリン、の発生、３）毛細血管内での摩擦増加、または４）血液成分類に対する機械的もしくは化学的外傷により引き起こされると信じられている。これらの状態の全てが例えば細胞および分子の如き血液成分類の病理学的疎水性相互作用の増加をもたらす。
　フィブリン、特に可溶性フィブリン、が細胞同士の接着を増加させ、小血管中の摩擦を増加させ、そして特に低い剪断速度における血液の粘度を増加させるということが信じられている。表面活性共重合体の作用は本質的には潤滑作用であると信じられており、その理由はそれらが接着により引き起こされる摩擦を減少させるからである。
　下記の仮説に拘束されることは望まないが、表面活性共重合体が下記の機構に従い作用すると信じられている：疎水性相互作用が生物学的構造の重大な決定因子である。それらが燐脂質類を膜および蛋白質分子中にそれらの元来の構造で一緒に保持している。該化合物の生物学的活性を認識するためには表面活性共重合体の生物学の理解が必要である。水は強い水素結合性液体であり、それはそれの流体状態で全方向で周辺分子との結合を生じる。水との不充分な結合を生じる表面であると定義されている疎水性表面は表面張力または水分子の水素結合における均衡の欠如を生じる。、この力は非常に強力である。純水の表面張力は約８２ダイン／ｃｍである。これは、表面分子上での１平方インチ当たり数十万ポンドの力に相当する。
　疎水性表面を有する２個の分子または粒子が接近すると、それらは即座に接着する。この接着は、水分子が応力を受けた非一水素結合性疎水性表面から応力を受けていない塊液相へ移る時に生じる自由エネルギーの減少により引き起こされる。そのような表面を一緒に保持するエネルギー、すなわち接着の仕事量、は粒子の表面張力の直接的関数である１：
　　　　　　　　　ＷＡＢ＝γＡ＋γＢ−γＡＢ
［式中、ＷＡＢ＝接着の仕事量すなわち粒子表面ＡＢの１平方センチメートルを２個の分離粒子に分離するのに必要なエネルギーであり、γＡおよびγＢは粒子Ａおよび粒子Ｂの表面張力であり、γＡＢはそれらの間の界面張力である］。
　従って、相当な表面張力を出現させる循環中の粒子または分子は瞬間的に互いに接着するであろう。膜および高分子内のそのような接着はそれらの一体性を保つために必要である。我々はそのような力を記載するために「正常な疎水性相互作用」という語を使用する。正常な環境下では、循環中の全ての細胞および分子は親水性の非一接着性表面を有している。細胞および分子の相互作用を調整する受容体およびリガンドは一般的には細胞および分子のほとんど親水性である露呈表面上に置かれており、そこではそれらは水性媒体中で自由に運動しそして互いに相互作用している。脂質類および他の疎水性物質を循環中に移送するためには特定担体分子が必要である。例えば血液の如き体液中では、可動性要素間の非特異的接着力は非常に望ましくない。これらの力は「病理学的疎水性相互作用」と定義されており、その理由はそれらは正常な可動性要素の運動を制限しそして細胞および分子の不適切な接着を促進させるからである。
　損傷組織中では、正常には細胞および分子の内部上に置かれている疎水性領域が露呈され始めそしてそれの相互作用が損傷と組み合われるような病理学的接着表面を生成する。血管壁に沿って沈着したフィブリンも接着表面を供している。そのような接着表面は損傷組織の特性であるようである。表面活性共重合体が接着性の疎水性表面と結合しそしてそれらを正常組織のものと非常に似ている非−接着性の水和された表面に転換させる能力が種々の疾病状態におけるそれの可能な治療活性の基礎であると信じられている。
　上記の表面張力による接着は生物学で一般的に研究されている接着とは異なっている。一般的に研究されている接着は特異的な受容体リガンドの相互作用によるものである。特に、それはフィブリノーゲンの受容体−介在性接着とは異なっている−フォン・ウィリブランズ（ｖｏｎ　Ｗｉｌｌｉｂｒａｎｄｓ）因子族の蛋白質類２。
　表面活性共重合体の親水性および疎水性鎖の両者は生物学的活性に寄与する独特な性質を有している。ポリオキシエチレン（ＰＯＥ）の親水性鎖は多くの表面活性剤のものより長くそしてそれらは柔軟性である。
それらは水を、エーテル−結合された酸素との水素結合受容体相互作用により、即座に結合させる。これらの長く強く水和された柔軟性鎖は相対的に圧縮不能でありそして互いに接近してくる疎水性表面との障壁を形成する。分子の端部におけるヒドロキシル部分は水素結合供与体として作用することができる唯一の基である。電荷を有する基はない。
　結合能力のこの非常に限定された応用範囲により、分子が宿主メディエイタおよび炎症機構を活性化できないことが説明される。しかしながら、ＰＯＥ鎖は必ずしも不活性ではない。ポリオキシエチレンは酸素基とのイオン−双極相互作用によりカチオンを結合させることができる。クラウンポリエーテル類および逆オクタブロック共重合体イオノホア類がそのようなカチオン結合の例である３。柔軟性ＰＯＥ鎖が損傷膜または他の疎水性構造近くのカルシウムおよび他のカチオン運動を結合および調節する構造を形成している。
　表面活性共重合体の疎水性成分は大きく、弱くそして柔軟性である。それにより膜または蛋白質分子と結合されるエネルギーは、膜燐脂質類を一緒に保持するかまたは蛋白質の三次元構造を維持するエネルギーより小さい。従って、膜脂質類および蛋白質類を溶解させる一般的洗剤とは異なり、表面活性共重合体は膜上の損傷点に接着しそして傷の拡大を予防する。
　表面活性共重合体が疎水性表面に対するフィブリノーゲンの接着並びにその後の血小板および赤血球の接着を遮断するための表面活性共重合体の能力は試験管内で容易に示される。多くの表面活性剤は疎水性粒子の相互接着を妨害するが、表面活性共重合体は毒性を最少にしながら非−接着活性を最適にする独特な性質の均衡を有している。従って、細胞を溶解させるかまたは膜蛋白質を溶解させるために非イオン性表面活性剤を使用しているような生化学者は表面活性共重合体を日常的には使用していない。表面活性共重合体は細胞を溶解から保護している。疎水基は損傷細胞および分子と効果的に競合して病理学的な疎水性相互作用を妨害するが、構造的一体性を維持するはるかに強い正常な疎水性相互作用を破壊することはできない。
　血液の粘度は一般的には一定圧力および幾何学的形状を有する管を介する流れの主要な決定因子であるとみなされている。例えば損傷組織の如き最少管の中では、他の要素が意味のあるものになる。管の直径が細胞のものより小さい時には、管に入るためには血液細胞は変形されるはずでありそして次に管壁に沿って滑動して摩擦を生じるはずである。小さい管に入る血液細胞の変形は広範囲に研究されているが４、接着または摩擦成分は研究されていない。管壁に対する細胞の接着は一般的にはフォン・ウィリブランズ因子および他の特異的接着性分子との特異的な相互作用によるものである５。我々のデータは、病理学的状態では細胞および管壁の間の非特異的な物理化学的接着から生じる摩擦が流の主要決定因子になることを示唆している。
　数学的には、２個の粒子間の接着強度および他方に沿う滑動に抵抗する摩擦力の両者がそれらの表面張力の直接的関数であり、それらはそれらの疎水性相互作用によりほとんど決定される。小管を通って滑動する細胞の摩擦は接着成分および変形成分６からなっており、それらは実際には分離することが困難である：
　　　　　　　　　　　　Ｆ＝Ｆａ＋Ｆｄ
［式中、Ｆは細胞の摩擦であり、Ｆａは接着成分であり、そしてＦｄは変形成分である］。
　管内の変形成分は管中ヘの加入に必要なものとは異なっている。それは高い剪断速度で流れている血液を有する比較的大きい管の中で生じるものと同様であるかもしれない７。血管内の摩擦はほとんど研究されていないが、摩擦力が接着の仕事量に直接的に相互関連しているような重合体系に適用されるのと同じ原則を含んでいるかは疑問である８：
　　　　　　　　　　　　Ｆａ＝ｋＷＡ＋ｃ
［式中、Ｆａは摩擦力の接着成分であり、ＷＡは接着の仕事量であり、そしてｋおよびｃは研究された特定系に関与する定数である］。多くの潤滑剤は薄膜状で作用し、それは２個の表面を分離しそして接着を減少させる９。
　毛細血管血液流上の表面活性共重合体の影響は、臨界的変数をしっかり調節できる人工的試験管内系から人間疾病を模している生体内系までの範囲にわたる数種のモデル中で評価された。第一に、表面活性共重合体は小さい管を通る大細胞の運動を模するように設計されているモデル中で治療濃度で使用される時には有効な潤滑剤であり得る。それは摩擦の接着成分を顕著に減少させるが、摩擦の変形成分に対する検出可能な影響は有していなかった。第二に、表面活性共重合体はガラスおよび空気のトロンボゲン表面により形成される狭い溝の中の流動を非常に促進させる。１滴の血液をカバースリップ上に置きそして運動顕微鏡の付いた顕微鏡下で血液が静かな圧力に応じてカバースリップの端部に流れるのに要した時間にわたり観察した。表面活性共重合体はガラスに対する血小板の接着を抑制しそして赤血球が顕微鏡溝を通って流れることができるような赤血球の柔軟性を維持していた。表面活性共重合体は赤血球による渦の生成を抑制しないが、それは渦を比較的柔軟性にしそして比較的容易に破壊した。第三に、表面活性共重合体は曲がりくねった毛管寸法のフィブリンで張られた溝の中の血液流を２０倍以上増加させる。それは血液の粘度をはるかに少ない量（１０％）だけ減少させて増加させた流の責任をとっている。
　比較的大きい生理学的モデルでは、表面活性共重合体は人間赤血球が潅流されている単離されたネズミの心臓中で虚血性損傷後の３０％へマトクリットにおいて冠状血液流を同様な量だけ増加させた。
　兎の中央脳動脈の結紮により生じる発作の生体内モデルでは、表面活性共重合体が虚血脳組織への血液流を増加させる。水素洗浄技術により２倍程度多い増加が測定された。これらのモデルのそれぞれにおいて、血液希釈に関する調節がありそして測定された剪断速度における粘度に対する測定可能な影響はなかった。
　入手可能なデータは表面活性共重合体が潤滑剤として作用して損傷組織中の血液流を増加させることを示唆していると信じられている。それは疎水性表面の相互同士の接着を遮蔽し、そしてそれにより摩擦を減少させそして流動を増加させる。この仮説は、表面活性共重合体が該摩擦力が小さい正常組織中では血液流に対する影響をほとんど有していないという観察により強化されている。
　表面活性共重合体は身体により代謝されず、そして血液から急速に排除される。血液中の共重合体の半減期は約２時間であると信じられている。改良されたフィブリン溶解性組成物中の表面活性共重合体は組成物中のいずれの他の成分とも共有結合されておらずまたはいずれの蛋白質とも共有結合されていないということは理解されよう。
　血液成分類の病理学的疎水性相互作用により引き起こされるかまたはそれを引き起こすようなある種の循環状態の処置のために、表面活性共重合体をフリーラジカル捕捉剤であるフィブリン溶解性酵素と共に投与することができ、またはそれを単独で投与することもできる。これらの状態には下記のものが包含されるが、それらに限定されるものではない：心筋梗塞、発作、腸または他の組織梗塞、悪性種、成人呼吸困難症候群（ＡＲＤＳ）、散在性管内凝固（ＤＩＣ）、糖尿病、不安定性狭心症、溶血性尿毒症症候群、赤血球断片化症候群、熱発作、維持されている胎児、子癇、悪性高血圧、火傷、挫傷、骨折、外傷性ショック、主要手術、敗血症、凝固系、中枢神経系外傷の活性化を促進させるバクテリア性、寄生体性、ウイルス性およびリケッチア性感染症、並びに主要手術中および直後。これらの状態で起きる血液中の病理学的疎水性相互作用の処置は微細管および一般的に観察される他の合併症を相当減少させるということが信じられている。
　表面活性共重合体は、傷つけられた血液供給のある非損傷組織に対する側副循環における増加においても有効である。そのような組織はしばしば管閉塞領域と隣接している。この機構が小血管中の病理学的疎水性相互作用を減少させるようである。表面活性共重合体が有効である循環状態には下記のものが包含されるが、それらに限定されるものではない：脳血栓症、脳塞栓症、心筋梗塞、不安定性狭心症、一時的脳虚血発作、足の間欠的跛行、プラスチックおよび再構成手術、バルーン血管形成術、末梢血管手術、および整形手術、特に止血器を使用するもの。
　表面活性共重合体は２．３秒−１（低い）から９０秒−１（高い）の範囲にわたる剪断速度における正常血液の粘度にはほとんど影響を与えない。しかしながら、それは手術後患者におけるまたはある種の病理学的状態の患者で見られる異常な高粘度を顕著に減少させる。この観察は２つの疑問を呈する：１）これらの患者における上昇された全血粘度を引き起こすもの、および２）健康人間の血液粘度に対して少量の影響を有している表面活性共重合体が行ういずれの機構により粘度における病理学上昇が正常化されているのか？
　ヘマトクリットおよび血漿フィブリノーゲン水準が全血粘度の主要な決定因子であることは一般的に認められている。これは正常人間においておよび炎症状態の多くの患者において確認されている。しかしながら、これらの因子は観察された変化を説明できなかった。冠状動脈心臓バイパス手術を受けている患者では、ヘマトクリットは平均して２３±４％ほど低下しそしてフィブリノーゲンは手術後６時間内に４８±９％ほど低下することが見いだされた。粘度は予期したほど減少しないが、２３±２から３８±４センチポイズの中間値に増加した（２．３秒−１の剪断速度）。ある患者では１００を越える粘度が見られた。異常に高い血液粘度は可溶性フィブリンの循環している高分子量重合体に関連していた１１。可溶性フィブリン水準は手術中に１９±５μｇ／ｍｌから４３±６μｇ／ｍｌに上昇した。これらの研究は可溶性フィブリンに関する熱量計酵素評価１２および大きい蛋白質重合体の分子量を測定するためのＳＤＳアガロースゲルを用いるウエスターン凝固工程１３を利用していた。
　特異的受容体の不存在下では、循環中の細胞および分子は接着性がそれらの間の自由エネルギーまたは表面張力を減少しない限り互いに接着するであろう。血液の種々の成分類の表面張力の評価は接触角度を測定することにより行うことができる。
　赤血球、リンパ球、血小板、好中球は全て１４−１７度の範囲の接触角度を有している。例えばアルブミン、α２マクログロブリンおよびハーゲマン因子の如き周囲血液蛋白質類は１２−１５のわずかに低い範囲の接触角度を有している。これは、これらの蛋白質類が細胞に対する接着エネルギーを有していないことを意味している。対照的に、フィブリノーゲンは２４４度の接触角度を有しておりそして可溶性フイブリンは３１である。従って、フィブリノーゲンは循環促進渦形成において赤血球および他の細胞に弱く接着する。フイブリンはフイブリノーゲンよりはるかに非常に強力な接着を促進させ、その理由はそれの増大した接触角度およびそれがフィブリノーゲンとの重合体を形成する傾向のためである。循環中の可溶性フィブリンが接着性増加をもたらし、それが低い剪断速度における非常に顕著に増加された粘度を生じる。この接着には血管の内皮壁も含まれる。接着力が細胞運動を遅くさせるの不充分であるなら、それらは摩擦増加をもたらす。これはそれの直径が循環細胞のもの以下であるような非常に小さい血管および毛管中で特に重要である。これらの小管中を滑動する細胞の摩擦は意義がある。表面活性共重合体は細胞および内皮細胞の疎水性表面に対するフイブリノーゲンおよびフィブリンの接着を遮断する。これはそれらの接着を妨害しそしてそれらを潤滑化させて流動に対する非常に減じられた抵抗性をもたらす。これは粘度の測定により部分的にのみ測定することができる。
　ある種のフィブリノーゲン水準が循環における問題を生じるのに充分かどうかは個々の患者の数種の要素に依存している。高いヘマクリットおよび高水準のフィブリノーゲンは粘度増加に対する主要原因であると広くみなされている。しかしながら、増加されたフィブリノーゲン水準は循環中の増加した可溶性フィブリンとしばしば関連している。注意深い研究は、フィブリンがほとんどの重要な変化にしばしば起因していることを示している。フィブリノーゲンの正常水準は２００−４００μｇ／ｍｌである。ほとんどの患者で約８００μｇ／ｍｌより大きいフィブリノーゲン水準が上記の低い剪断速度において高い血液粘度を引き起こすということが測定されている。可溶性フイブリンの正常水準は約９．２±１．９であると報告されている１４。ウイマン（Ｗｉｍａｎ）およびランビー
（Ｒａｎｂｙ）評価を使用すると、低い剪断速度における粘度は約１５μｇ／ｍｌ以上という許容できないほどの高さであった。可溶性フイブリンは約６００，０００−数百万の分子量を有する分子種であることを理解すべきである。
　可溶性フィブリンを示すためには多くの方法が使用されている。これらには寒冷沈澱反応、特にクリオフィブリノーゲン、が包される。沈澱生成を増加させるためにヘパリンが使用されてきている。エタノールおよびプロタミンも血漿からフィブリンを沈澱させる。近代的技術は、循環中の可溶性フィブリンは一般的に溶解剤と錯体生成することを示している。これらはしばしばフィブリノーゲンまたはフィブリン減成生成物である。ペプチドＡ部分のフィブリンだけが分裂されているデスＡＡフィブリンは、１個のフィブリン分子と２個のフィブリノーゲンからなる相対的に小さい塊を形成する傾向がある。ＡおよびＢペプチド類の両者が分裂してデスＡＡＢＢフィブリンを製造するなら、はるかに大きい塊が循環中で製造される。フィブリン減成生成物はフィブリンと重合して含まれている特定生成物により変動する寸法の塊を生成することができる。
　循環中の可溶性フィブリンは、特に低い剪断速度における、血液粘度を顕著に増加させることができる。しかしながら、臨床的状態に関するこれの関連性は明白でないままである。粘度は、生体内循環を測定する多くの要素の中の１つである赤血球の塊を主として評価するものである。可溶性フィブリンにより影響を受ける他の因子は内皮細胞、白血球および血小板である。可溶性フィブリンは内皮細胞に関して化学走性であり、それらに即座に接着しそしてそれらの非有機化を引き起こす。それはまた白血球、特に食細胞、に関しても刺激効果を有している。可溶性フィブリンの効果の一部は種々の型の細胞上の特異的受容体により介在されているかもしれない。しかしながら、可溶性フィブリンの接触角度により測定される自由エネルギーが他の血漿蛋白質のものより小さいため、それは血液中の事実上全ての製造された因子との非特異的な疎水性相互作用により即座に接着する。
　循環している可溶性フィブリンは正常では損傷を生じることなく大食細胞およびフィブリン溶解機構により清浄化されている。しかしながら、可溶性フィブリンの製造が多すぎる場合、または清浄機構が傷つけられている場合、または合併症因子が存在している場合には、可溶性フィブリンが悪い反応を誘発することもあり得る。
　可溶性フィブリンは損傷または炎症組織中で製造される。従って、それの影響はこれらの組織中で最も顕著であり、そこではそれが内皮細胞および循環している血液細胞を灌流を顕著に減少させるような方法でコーティングしている。最大影響は小血管の中であり、そこでは内皮細胞および白血球をコーティングしている可溶性フィブリンが摩擦を非常に増加させて白血球細胞を小管中に動かす。摩擦は白血球および赤血球に伴うさらにはるかに重大な問題であるようであり、その理由はそれらが比較的大きく且つはるかに比較的に堅いからである。
　可溶性フィブリンの製造が充分である場合には、影響は他の領域中では見られない。研究されている最良のものは成人呼吸困難症候群であり、そこでは損傷組織の領域中で製造される可溶性フィブリンが微小血栓および肺不全を引き起こす可能性がある肺の中での他の工程を生じる。しかしながら、比較的少ない管傷度が他の多くの器官中で示されることがあり得る。
　単独でまたはフィブリノーゲンおよび他の物質との複合体中での可溶性フィブリンは、冠状血栓症から外傷、火傷、移植後の再潅流傷または凝固の活性化が局部化されているかもしくは全身化されているような他の状態までの範囲にわたる種々の管疾病範囲の病因論に対する主要原因剤であると現在では認識されている。最近の研究は、急性心筋梗塞形成または不安定性狭心症のある事実上全ての患者はそれらの循環中に顕著に高められた水準の可溶性フィブリンを有することを示していた。
　可溶性フィブリンの影響の一例は犬を使用する研究で示された。正常な犬を子宮摘出する。次に動物を麻酔したままで、外頚静脈を注意深く切除する。一方、７分間にわたる指を用いる静かな圧力により静脈を閉塞することもできる。それを走査電子顕微鏡によりフィブリン、赤血球および他の製造された要素の接着に関して試験する。
　７分間にわたる閉塞により生じる状態があってもまたはそうでなくても、非常にわずかな細胞が子宮摘出を受けなかった犬からの静脈の内皮に接着していることが見いだされている。同様に、子宮摘出を受けなかった動物中では頚静脈の内皮に対する赤血球の接着には小さい増加だけがあった。しかしながら、動物が静脈の穏やかな７分間にわたる閉塞の他に子宮摘出を受けている場合には、明白な壁血栓を製造するようなある場合には内皮表面に対する血液の製造された要素の接着における激しい増加があった。赤血球およびフィブリンの両者は内皮表面に可視的に接着性であった。さらに、正常な内皮構築の破壊もあった。動物の全てが手術後に高められた水準の可溶性フィブリンを有していた。このモデルは、遠隔部位における深い静脈血栓症の非常に増加された危険性を生じる相対的に局部化された手術により製造される可溶性フィブリンの影響を示している。
　表面活性共重合体は、フィブリン、フィブリノーゲン、血小板、赤血球および血液流の他の検出可能要素の接着を抑制することにより血液中にフィブリンおよびフィブリノーゲンの問題を処理する。それは表面上の血栓の生成を遮断する。表面活性共重合体は水または血漿の粘度に影響を有していない。しかしながら、それは管中で小区分中の水および血漿の流速を顕著に増加させる。カラムの端部における空気界面またはかなりの表面張力を与える空気泡の存在が管壁に沿って摩擦を生じさせる。表面活性共重合体はこの表面張力および摩擦を減少させ、そして流動を改良する。これは一例であり、それにより表面活性共重合体は一般的に測定された時の流体の粘度に影響を有していないにもかかわらず組織を通り管を通る流体の流動を改良する。
　表面活性共重合体は正常人間からの全血粘度には小さい影響だけを有している。それは高いヘマトクリットで起きる増加ににはほとんど影響を有していなかった。しかしながら、それは可溶性フィブリンおよびフィブリノーゲン重合体により引き起こされると考えられる低い剪断速度における粘度の非常に大きい増加に対しては影響を有している。
　最近の研究は、表面活性共重合体は心筋および種々の有害傷害から他の細胞を保護する能力も有していることを示している。長期にわたる虚血中に、心筋細胞は「非可逆的損傷」を受ける。非可逆的損傷を維持する細胞は形態学的に無傷であるが、正常環境に戻った時に生存することができない。酸素化された血液の再潅流の数分以内に、そのような潜伏出血病変を含有している細胞が膨潤および収縮帯を出現させそして壊死する。
　非可逆的に損傷された心筋細胞は機械的および浸透性の脆さ並びにリパーゼ類、プロテアーゼ類および他の酵素類の潜伏性活性化を有している。再灌流はカルシウム充填、細胞膨潤、機械的な膜破壊および細胞を急速に破壊させる酸素フリーラジカルの生成を含む一連の事象を刺激する。単離された灌流されたネズミの心臓モデルにおいては、表面活性共重合体はそのような損傷を遅延させる。この機構は多分赤血球に関して知られているのと同様な方式で浸透性安定化および増加された機械的抵抗を含んでいるのであろう。
　心筋に対する表面活性共重合体の保護影響は心筋細胞に限定されるものではない。それは形態学的に評価されると微細管の内皮細胞も保護する。そのような細胞の一体性を維持しそして非一接着性表面を保有および維持するのを助けることにより、表面活性共重合体は微細管中での高分子および細胞の接着を減少させて冠状管抵抗を減少させそして非再流動現象の出現を遅延させる。
　表面活性共重合体を使用できる状態の例は、鎌状細胞疾病の処置および移植用の器官の保存におけるものである。これらの両者の態様では、血液流は病理学的疎水性相互作用のために減じられている。
　鎌状細胞発症中に、鎌状赤血球は細胞の異常形のために凝集する。多くの場合、散在性管内凝固による可溶性フィブリンの高濃度が存在している。これは血液細胞、血管を内張りしている細胞並びに可溶性フィブリンおよびフィブリノーゲンの間の病理学的疎水性相互作用をもたらす。患者に表面活性共重合体を投与することにより、血液流は増大されそして組織損傷はそれにより減じられる。表面活性共重合体を鎌状細胞発症の前に与えて発症の開始を予防することができる。さらに、有効量の表面活性共重合体を有する溶液が有効量の抗凝固剤を含有することもできる。
　移植用に供与者から除去された器官の中では、組織は虚血および血液の欠如により損傷されている。好適には、表面活性共重合体を灌流媒体と混合する。表面活性共重合体と共に使用できる灌流媒体は当技術の専門家には既知である。灌流媒体は全血または血漿であることもできる。溶液は器官中に灌流させることができ、それにより組織に対する損傷を減少させる。器官に表面活性共重合体溶液を灌流させることにより組織損傷が減じられるため、器官が成育可能な時間、従って器官を移植できる時間が増大する。
　表面活性共重合体は正常組織中の血液流に対する最少の影響を有していながら疾病または損傷組織を通る血液流を改良するため、動物または人間に有効量の薬品および有効量の表面活性共重合体を含有している溶液を投与する段階を含んでいる表面活性共重合体が薬品を損傷組織に分配させる方法を包括していることも意図されている。
　疾病または損傷組織中での活性を有する薬品は表面活性共重合体と共に使用するために適している。これらの薬品には、
１．抗微生物性薬品類
　　抗生物質類
　　抗菌・カビ性薬品類
　　抗ウイルス性薬品類
　　抗寄生体性薬品類
２．抗菌・カビ性薬品類
３．癌およびある種の感染症を処置するための化学療法薬品類
４．フリーラジカルの生成を防止する薬品を含むフリーラジカル捕捉剤薬品類
５．フィブリン溶解性薬品類
６．灌流媒体
７．ステロイドおよび非ステロイド系の抗炎症性薬品類の両者を含むがそれらに限定されるものではない抗−炎症剤
８．膜安定剤、例えばジランチン
９．抗凝固剤
１０．イオノトロピー薬品類、例えばカルシウムチャンネル遮蔽剤
１１．自律神経系調節剤
が包含される。
佐薬としてのポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体類
　他のポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体類は佐薬並びに抗原および改良された佐薬からなるワクチンとしても有用である。
一態様では、抗原が有効量の下記の一般式：
　　　　　　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、疎水基（Ｃ３Ｈ６Ｏ）の分子量は約４５００−５５００ダルトンの間でありそして親水基（Ｃ２Ｈ４Ｏ）の百分率は約５％−１５重量％の間である］
を有する表面活性共重合体と混合されている。
　改良されたワクチンは抗原および佐薬を含んでおり、そこでは佐薬は水の油中乳化液状に調合されている下記の一般式：
　　　　　　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、疎水基（Ｃ３Ｈ６Ｏ）の分子量は約３０００−５５００ダルトンの間でありそして親水基（Ｃ２Ｈ４０）の百分率は約５％−１５重量％の間である］
を有する表面活性共重合体を含んでいる。共重合体は一般的に使用されている水の油中ワクチン乳化液を不安定化させるが、一般的乳化剤が省かれているならそれらの効率を驚異的に増加させそして安定性を増加させる。
　改良されたワクチンは抗原および佐薬を含んでおり、そこでは佐薬は下記の一般式：
　　　　　　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、疎水基（Ｃ３Ｈ６Ｏ）の分子量は約３０００−５５００ダルトンの間でありそして親水基（Ｃ２Ｈ４Ｏ）の百分率は約５％−１５重量％の間である］
を有する表面活性共重合体およびリポ多糖類（ＬＰＳ）誘導体を含んでいる。ＬＰＳおよび表面活性共重合体の組み合わせを含んでいる佐薬はピーク滴定量、ピーク滴定量に達する時間および応答時間の長さに関する相乗効果を生じる。さらに、該組み合わせは保護ＩｇＧ２同形像を増加させる傾向がある。
　佐薬は下記の一般式：
［式中、
（Ｃ３Ｈ６Ｏ）からなるオクタブロック共重合体の疎水性部分の分子量は約５０００−７０００ダルトンの間であり、
ａは（Ｃ２Ｈ４Ｏ）により表されている親水性部分が化合物の合計分子量の約１０％−４０％の間を構成するような数であり、
ｂは（Ｃ３Ｈ６Ｏ）により表されている親水性部分が化合物の合計分子量の約６０％−９０％の間を構成するような数である］
を有するオクタブロック共重合体（ポロキサミン）も含んでいる。
　共重合体の（Ｃ３Ｈ６Ｏ）部分は化合物の９５％までを構成することができる。共重合体の（Ｃ２Ｈ４Ｏ）部分は化合物の５％程度の低さを構成することができる。
　脂質がコンジュゲートした多糖類と共重合体および例えばモノホスホリル脂質の如き免疫調節剤との組み合わせは、ＩｇＧの副群の全てが存在しているような強力なＩｇＧ応答の製造を含んでいる。特に、肺炎球菌感染症に対して保護性であるＩｇＧ２およびＩｇＧ３副群が優れている。これは予期せぬ発見であり、その理由はイムノゲン調合物中には蛋白質またはペプチドがないからである。ペプチド分子はこれらの同形像の製造用に必要なＴ細胞を刺激するために必須であると信じられている。他の者は多糖類がＴ細胞を刺激できないことを報告している。それにもかかわらず、共重合体、脂質共役多糖類および免疫調節剤の組み合わせはそのような応答を生じることができる。ポロキサマー類およびポロキサミン類の佐薬活性は現在出願係属中の米国特許出願第０７／５４４，８３１号明細書中に詳細に記されており、それは引用することにより本明細書の内容となる。
抗感染症剤としてのポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体類
　他の群のポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体はバクテリアおよびウイルスの成長を抑制する。例えば、これらの表面活性共重合体はＨＩＶウイルスであるミコバクテリア種およびトキソプラズマ・ゴンディイを抑制することが知られている。
　表面活性共重合体はＨＩＶウイルスまたは関連菌株により引き起こされる感染症を含む人間または動物におけるウイルス感染症の処置において有効である。本発明は、ＨＩＶウイルスまたは同様なウイルスが感染している患者に投与できる組成物を提供するものである。表面活性共重合体は細胞中のＨＩＶウイルスおよび関連ウイルス菌株の複製を抑制または阻止する際に有効である。
　表面活性共重合体は、単独でまたは一般的な抗生物質と共に使用された時に、微生物により引き起こされる感染症の処置用に有用である。表面活性共重合体と共に使用することができる数種の一般的な抗生物質には下記のものが包含されるがそれらに限定されるものではない：リファンピン、イソニアジド、エタンブトール、ゲンタマイシン、テトラサイクリン、およびエリスロマイシン。
　表面活性共重合体は下記の一般式：
　　　　　　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、ａは（Ｃ３Ｈ６０）により表されている疎水基が約１２００−５３００ダルトンの、好適には約１７５０−４５００ダルトンの、分子量を有するような整数であり、そしてｂは（Ｃ２Ｈ４Ｏ）により表されている親水性部分が化合物の約１０％−５０％の間を構成するような整数である］
を有している。
　ポロキサマー類の抗感染症活性は現在出願係属中の米国特許出願第０７／７６０，８０８号明細書中に詳細に記されており、それはここでは参考として記しておく。
成長刺激剤および免疫刺激剤としてのポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体類
　ある種のポリオキシプロピレン／ポリエチレン共重合体類は数種の異なる方法で生物学的系に影響を与えることができる。生物学的に活性な共重合体類は有機体の成長を刺激し、有機体の運動活性を刺激し、動物の胸腺、周囲リンパ組織および骨髄細胞中のＴ−細胞の産生を刺激し、そして肺の免疫応答性を刺激することができる。
　生物学的に活性な共重合体類は個別細胞に対する広範囲の影響も有している。これらの化合物類はイオン泳動活性を有しており、すなわちそれらはある種のイオンを細胞膜を越えて移動させる。該化合物類はその後のヒスタミン放出を伴いながら非一細胞溶解性乳房細胞の非粒状化をもたらすことができる。さらに、この種の生物学的に活性な共重合体類の一部はある種の癌細胞系を特異的に死滅させることができる。
　ある種の生物学的に活性な共重合体を経口的に動物に投与して例えば鶏および白鳥の如き食用動物の成長を刺激することができる。これらのおよび他の生物学的活性は現在出願係属中の米国特許出願第０７／１０７，３５８号および同０７／６１０，４１７号明細書中に詳細に記されており、それは引用することにより本明細書の内容となる。
ポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体構造
　表面活性共重合体ブロックは、高温および高圧における塩基性触媒の存在下での酸化エチレンおよび酸化プロピレンの縮合により、製造される。しかしながら、重合体鎖を各共重合体中で形成するために組み合わされる単量体の数において統計学的変動がある。示されている分子量は各調合物中の共重合体分子の平均重量の概略値である。これらの化合物類の製造のさらに詳細な議論は米国特許第２，６７４，６１９号明細書中に見られ、それは引用することにより本明細書の内容となる。ポロキサマー類およびポロキサミンブロック共重合体類の構造のさらに一般的な論議はシュモルカ（Ｓｃｈｍｏｌｋａ），Ｉ．Ｒ．、「ブロック重合体表面活性剤の評論（Ａ　Ｒｅｖｉｅｗ　ｏｆ　Ｂｌｏｃｋ　Ｐｏｌｙｍｅｒ　Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ）」、Ｊ．ＡＭ．ＯＩＬ　ＣＨＥＭＩＳＴＳ’ＳＯＣ．、５４：１１０−１１６（１９７７）中に見られ、それは引用することにより本明細書の内容となる。
　ポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体類の商業的に入手可能な調合物は成分分子の寸法および構造に関しては広く変動することが測定されている。例えば、ＢＡＳＦ（パルシッパニー、ニュージャージー州）から購買されるポロキサマー１８８の調合物は約１７５０ダルトンの疎水基（Ｃ３Ｈ６Ｏ）の分子量および約８４００ダルトンの化合物の合計分子量の公表されている構造を有している。実際には、該化合物は３，０００ダルトン以下から２０，０００ダルトン以上までの範囲にわたる分子からなっている。商業的ポロキサマー１８８の分子多様性および分子分布はゲル透過クロマトグラフィーを用いて検出される広い主および副ピークにより説明されている。
　最近入手可能なポロキサマー調合物中の重合体寸法の広い変動の他に、さらにこれらの画分が相当量の不飽和を含有していることも測定されている。重合体分子中のこの不飽和が少なくとも部分的には入手可能なポロキサマー調合物の毒性および可変性の生物学的活性の原因となっている。
　従って、商業的に入手可能なポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体類中に存在している広範囲の分子が生物学的活性の予測を困難にしている。さらに、ポロキサマー１８８調合物中で示されている如く、調合物中の他の分子の存在が望ましくない生物学的活性をもたらすことがある。
　表面活性共重合体ポロキサマー１８８はペルフルオロカーボン類を含有している人工血液調合物用の乳化剤として使用されている。人工血液調合物を受容している患者は毒性反応を示すことが報告されている。毒性反応は、補体１５の活性化、食細胞泳動の麻痺１６、並びに組織培養中の人間および動物細胞に対する細胞毒性１７の活性化を含んでいる。共重合体類の毒性を減少させるための超臨界的流体分別を使用する研究は部分的にだけの成功が証されている１８。さらに、ビーグル犬中での毒性学的研究では、ポロキサマー１８８の潅流が高められた肝臓酵素（ＳＧＯＴ）および器官重量の増加（腎臓）をもたらすことが示された。腎臓の病歴評価は、基部管状内皮細胞の投与量関連性細胞質空胞形成を示していた。
　ポロキサマー共重合体中の鎖長さにおいて小変化だけが行われる時に生物学的活性を生じることができる非常に大きな変化はハンター（Ｈｕｎｔｅｒ）他の中に示されている１９。著者は、ポロキサマー重合体のポリオキシエチレン部分の鎖長さにおける１０％の差が優秀な佐薬と佐薬活性が全くないものとの間の差を意味することができると示している。ポロキサマー１２１は約４４００ダルトンの分子量を有しておりそして約１０重量％のポリオキシエチレンを含有している。ポロキサマー１２２は約５５００ダルトンの分子量を有しておりそして約２０重量％のポリオキシエチレンを含有している。各分子中のポリオキシプロピレンの量は大体同じである。ハンター他の中に示されている如く、ポロキサマー１２１を佐薬として牛血清アルブミンと共に使用した時には抗体滴定量は６７．８１４±５９１６であった。ポロキサマー１２２を同一条件下で佐薬として牛血清アルブミンと共に使用した時にはＢＳＡに対する抗体滴定量は１８４±４５であった。佐薬なしの対照滴定量は＜１００であった。従って、ポロキサマーの鎖長さにおける相対的に小さい変化が生物学的活性における非常に大きい変化をもたらすことができる。
　ポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体類の商業的に入手可能な源が毒性並びに生物学的活性における変化を示すことが報告されているため、必要とされることは商業的調合物の治療活性を保有しているが例えば毒性の如き他の生物学的活性を含んでいないようなポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体類の調合物である。さらに、必要とされることは分子量における比較的小さい多分散性でありそして比較的少ない不飽和を含有しており従って比較的有効性が大きいポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体類の調合物である。
発明の概要
　本発明は、商業的調合物の治療活性を保有しているが先行技術調合物に固有である望ましくない影響を有していないポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体類の新規な調合物を含んでいる。本発明を構成しているポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体類は先行技術のポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体類より少ない分子の多分散集団であるため、共重合体類の生物学的活性はさらに良好に規定されそしてさらに予期可能である。さらに、本発明を構成しているポリオキシプロピレシ／ポリオキシエチレン共重合体類は実質的に不飽和を含んでいない。
　本発明は、一般式：
　　　　　　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、疎水基（Ｃ３Ｈ６Ｏ）の分子量は約１７５０ダルトンでありそして化合物の合計分子量は約８４００ダルトンである］
を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体も含んでいる。
　商業的に入手可能な表面活性共重合体ポロキサマー１８８により示される毒性が主として製造方法の結果として存在している少量の高および低分子量分子によるものであることが測定されている。高分子量分子（１５，０００ダルトンより大きい）は多分補体系の活性化の原因であろう。低分子量分子（５，０００ダルトンより小さい）は培養中で細胞に対して毒性であり得る洗剤様の物理的性質を有している。さらに、低分子量分子は集団中に存在している不飽和重合体を有している。
　ポロキサマー１８８の最適なレオロジー分子は約８，４００−９４００ダルトンである。１５，０００以上であり且つ５，０００以下であるポロキサマー１８８分子はそれより有効性が小さいレオロジー剤でありそして望ましくない副作用を示す。５，０００−１５，０００ダルトンの間の分子を含有している調合物はさらに有効なレオロジー剤である。
　本発明はまた、１．０５より小さい多分散値を有するポリオ　キシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体類を製造する方法も含んでいる。非−毒性の表面活性共重合体の製造方法は、最初に酸化プロピレンを複数の反応性水素原子を含有している塩基化合物と縮合させてポリオキシプロピレン重合体を製造し、そして次に酸化エチレンをポリオキシプロピレン重合体と縮合させて下記の一般式：
　　　　　　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体を製造することを含んでおり、改良は酸化エチレンとポリオキシプロピレン重合体との縮合段階の前のポリオキシプロピレン重合体の精製である。ポリオキシプロピレン重合体の精製はゲル透過クロマトグラフィーにより行うことができる。
　従って、本発明の一目的は毒性影響に寄与する分子を排除しながら比較的高い割合の治療的に活性な分子を有している表面活性共重合体を提供することである。
　本発明の別の目的は分子重量範囲に関して比較的均質なポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体を提供することである。
　本発明の別の目的は約１．０５より小さい多分散値を有するポリオキシエチレン／ポリオキシプロピレンブロック共重合体の製造を提供することである。
　本発明の別の目的は実質的に不飽和を有していないポリオキシエチレン／ポリオキシプロピレンブロック共重合体を提供することである。
　本発明の別の目的は補体を活性化させないであろうポロキサマー１８８の治療活性を有する表面活性共重合体を提供することである。
　本発明のさらに別の目的は虚血により損傷されている組織の処置において人間および動物の両者で安全に使用することができる精製されたポロキサマー１８８を提供することである。
　本発明のさらに別の目的は再灌流傷により損傷されている組織の処置において人間および動物の両者で安全に使用することができる表面活性共重合体を提供することである。
　本発明のさらに別の目的はワクチン佐薬として人間および動物の両者で安全に使用することができる表面活性共重合体を提供することである。
　本発明の別の目的は細胞毒性でないポロキサマー１８８の治療活性を有する表面活性共重合体を提供することである。
　本発明のさらに別の目的は発作の処置において人間および動物の両者で安全に使用することができる表面活性共重合体を提供することである。
　本発明のさらに別の目的は比較的小さい腎臓毒性および比較的小さい洗剤様の活性を有する表面活性共重合体を提供することである。
　本発明のさらに別の目的は抗微生物剤として人間および動物の両者で安全に使用することができる表面活性共重合体を提供することである。
　本発明のさらに別の目的は抗バクテリア剤、抗ウイルス剤、抗菌・殺カビ剤、および抗原生動物剤として人間および動物の両者で安全に使用することができる表面活性共重合体を提供することである。
　本発明のさらに別の目的は心筋損傷の処置において人間および動物の両者で安全に使用することができる表面活性共重合体を提供することである。
　本発明のさらに別の目的は成人呼吸困難症候群の処置において人間および動物の両者で安全に使用することができる表面活性共重合体を提供することである。
　本発明のこれらのおよび他の目的、特徴および利点は開示されている態様および添付されている請求の範囲の下記の詳細な記載を検討した後に明白になるであろう。
【図面の簡単な説明】
　図１はポロキサマー化合物類を命名するためのポロキサマーグリッドである。
　図２はゲル透過クロマトグラフィーにかけられた商業的に入手可能なポロキサマー１８８のクロマトグラムである。
　図３は実施例Ｉに記されているクロマトグラフィー実施から集められたポロキサマー１８８の画分１のクロマトグラムである。
　図４は実施例Ｉに記されているクロマトグラフィー実施から集められたポロキサマー１８８の画分２のクロマトグラムである。
　図５は実施例１に記されているクロマトグラフィー実施から集められたポロキサマー１８８の画分３のクロマトグラムである。
　図６は実施例１に記されているクロマトグラフィー実施から集められたポロキサマー１８８の画分４のクロマトグラムである。
　図７は実施例１に記されているクロマトグラフィー実施から集められたポロキサマー１８８の画分５のクロマトグラムである。
　図８は実施例１に記されているクロマトグラフィー実施から集められたポロキサマー１８８の画分６のクロマトグラムである。
　図９Ａ−９Ｃは分別されていないおよび分別されているポロキサマー７６０．５のゲル透過クロマトグラムである。
　図１０Ａ−１０Ｃは図９Ａ−９Ｃ中に表示されている画分類の核磁気スペクトルである。
　図１１Ａ−１１Ｃはポロキサマー１８８の３種の画分類のゲル透過クロマトグラムである。
　図１２Ａ−１２Ｃは分別されていないおよび分別されているポロキサマー３３１のゲル透過クロマトグラムである。
詳細な記述
　ポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体類の先行技術調合物は工業的用途に適しているが、治療剤としての共重合体類に関する新たに発見された用途は調合物中の分子の比較的小さい多分散集団を必要としている。
　本発明は、１．０５より小さい多分散値を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体類を含んでいる。新規な共重合体類は、先行技術調合物から不同分子を除去することによりまたは本発明の一部と考えられる方法に従い共重合体を製造することにより、製造できる。本発明の共重合体類の製造方法は、ポリオキシエチレンブロックを分子に加える前のポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体のポリプロピレンブロックの精製である。この方法で、ポリオキシエチレン重合体の分子への添加前に部分的に重合されたポリオキシプロピレン重合体が除去される。これが、本発明として考えられる物理的パラメータ内に入るブロック共重合体をもたらす。
　本発明はまた、下記の一般式：
　　　　　　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、共重合体のポリオキシプロピレン部分により表されている分子量は約９００−１５０００ダルトンの間、より好適には１，２００−６５００ダルトンの間、でありそして共重合体のポリオキシエチレン部分により表されている分子量は共重合体の約５％−９０％の間、より好適な範囲は共重合体の約１０％−９０％、を構成しておりそして多分散値は約１．０７より小さい］
を有するポリオキジプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体も含んでいる。
　本発明はまた、下記の一般式：
　　　　　　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、疎水基（Ｃ３Ｈ６Ｏ）の分子量は約１７５０ダルトンでありそして該化合物の平均合計分子量は約８３００−９４００ダルトンである］
を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体も含んでいる３０該化合物は約５，０００−１５，０００の範囲の分子量分布を有しており、好適な分子量範囲は約７，０００−１２，０００ダルトンの間である。さらに、共重合体は核磁気共鳴により測定された不飽和を実質的に有していない。
　ポロキサマー化合物類の命名法はポロキサマーグリッド（図１）を基礎にしている。ポロキサマーグリッドは種々の重合体員の命名法および組成の間の関係である。疎水性（ポリオキシプロピレン）分子量は範囲の大体中間点として示されている。グリッド上のポロキサマー数の最初の２個の数字に１００を掛算すると疎水基の大体の分子量を与える。最後の数字に１０を掛算すると表面活性剤の親水性（ポリオキシエチレン）含有量の概略重量％を与える２０。例えば、グリッド（図１）の右上四半分に示されているポロキサマー４０７は４０００分子量疎水基から誘導されており、親水基が共重合体の合計分子量の７０％を構成している。他の例は、７６００ダルトンの分子量を有する疎水基を有しておりそして共重合体の合計分子量の５％を構成している親水基を有するポロキサマー７６０．５１である。
　本出願に記されている代表的なポロキサマー類をそれらのプルロニック（商標）数と共に表Ｉに示す。
　一般的に重合体類を特徴づける時には分子量平均は重要でありそして有用であるが、重合体の分子量分布を知ることも重要である。ある種の加工および最終用途特性（融解流動性、曲げ寿命、引っ張り強度など）は個々の分子量平均における値および／または変化を観察することによりしばしば予測されるかまたは理解されている。これらの値はポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体類の生物学的性質に指定されることもできる。加工特性のリストを以下に記す。
　例えば、分布の幅は多分散性（Ｄ）として知られておりそして一般的にはＭｗ／Ｍｎとして定義されている。単分散性試料は全ての分子が同一であるものと定義されている。そのような場合には、多分散性（Ｍｗ／Ｍｎ）は１．０である。狭い分子量標準は１近くのＤの値を有しており、そして典型的な重合体は２−５の範囲を有している。ある種の重合体類は２０より大きい多分散性を有している。
　多分散性を表示するための式を以下に記す：
［式中、面積ｉ＝ｉｔｈ片の面積であり、
　　　　Ｍｉ＝ｉｔｈ片の分子量である］
　このようにして、上記で挙げられている要素を計算することにより、薬学的調合物用に許容可能なある種の多分散性を特定することができる。高い多分散値は一定の調合物中の分子集団に関する広い変動を示しているが、低い多分散値はそれより小さい変動を示している。分子寸法は生物学的活性の重要な決定因子であるため、さらに均質な生物学的効果を得るためには調合物中の分子の分散性を制限することが重要である。従って、多分散性測定を使用して調合物中の分子の分散性を測定しそして生物学的活性における変動に関する化合物の予測を補正することができる。
　ここで記されている多分散値はカラム加熱器モジュール、モデル４１０屈折率検出器、マキシマ８２０ソフトウエアパッケージ（全てウォーターズ、ミリポルの部門、ミルフォード、マサチュセツツ州製）、２個の一連のリクロゲルＰＳ−４０カラムおよびリクロゲルＰＳ−２０カラム（ＥＭサイエンス、ギップスタウン、ニュージャージー州）が備えられているモデル６００Ｅパワーラインクロマトグラフィーシステム並びにポリエチレングリコール分子量標準（ポリマー・ラボラトリーズ・インコーポレーテッド、アンヘルスト、マサチュセツツ州）を用いて得られたクロマトグラムから測定されたと理解すべきである。このシステムを用いて得られる多分散値はクロマトグラフィー条件、分子量標準およびゲル透過力ラムの寸法排除特性に関連している。異なる分離原則を用いる多分散性測定がここに記されているものとは異なる絶対的多分散値を与えるかもしれない。しかしながら、当技術分野の専門家は単に単独試料を両方のシステムに走行させそして次に各クロマトグラムからの多分散値を比較することにより異なる分離方法を用いて得られた多分散値をここに記されている値に容易に転換させることができる。
　本発明に従うと、１．０７より小さい多分散値を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体である組成物が提供される。好適には、多分散値は約１．０５より小さく、最も好適な多分散値は１．０３である。本発明はポロキサマー化合物類およびポロキサミン化合物類を包含しているがそれらに限定されるものではないことを理解すべきである。
　本発明に従うと、下記の一般式：
　　　　　　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、共重合体の合計分子量は約５，０００−１５，０００ダルトンの間、好適には７，０００−１２，０００ダルトンの間、でありそして共重合体のポリオキシエチレン部分により表されている分子量は共重合体の約８０％を構成している］
を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体を含んでいる表面活性共重合体である組成物が提供される。
　本発明の一態様は、下記の一般式：
　　　　　　ＨＯ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂ（Ｃ３Ｈ６Ｏ）ａ（Ｃ２Ｈ４Ｏ）ｂＨ
［式中、疎水基（Ｃ３Ｈ６Ｏ）の分子量は約１７５０ダルトンでありそして化合物の平均分子量は約８３００−９４００ダルトンである］
を有するポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレン共重合体を含んでいる。多分散値は約１．０５より小さい。少なくともこれらの物理的要素に対応するブロック共重合体は先行技術ポロキサマー１８８の有利な生物学的効果を有しているが、先行技術化合物に関して報告されている望ましくない副作用は示さない。表面活性共重合体の多分散値を減少させることにより、先行技術ポロキサマー１８８に伴う毒性が相当減じられるということが見いだされた。しかしながら、改質されたポロキサマー１８８の有利な治療活性は保有されている。
　本発明の表面活性共重合体類は多くの方法で製造することができる。先行技術化合物類をゲル透過クロマトグラフィーにかけることにより、多分散値を減少させることができる。さらに、該化合物類を当技術の専門家に既知である分子ふるい技術にかけることもできる。
　本発明の表面活性共重合体は数種の方法で製造することができる。第一の方法では、商業的に入手可能なポロキサマー１８８をゲル透過クロマトグラフィーにかける。この工程から得られるクロマトグラムは図２に示されている。
　図２に示されている如く、商業的ポロキサマー１８８は約７９００−９５００ダルトンのピーク分子量を有する広い分布の分子からなっている。これは一般的には８４００ダルトンのポロキサマー１８８に関する表示されている分子量に相当している。ポロキサマー１８８に関して表示されている分子量はヒドロキシル方法により測定されている。ポリエーテル鎖の末端基はヒドロキシル基である。ｍｇのＫＯＨ／ｇの試料で表示されている分析的に測定された「ＯＨ数」から、数平均分子量を計算することができる。多分散性化合物の分子量は分子量を測定するために使用される形態学により異なることがあると理解すべきである。
　図２は主ピークの左および右に置かれている小さい副ピークまたは肩部も示している。ポロキサマー１８８クロマトグラムのこれらの面積はそれぞれ高および低分子量を表示している。高分子量種は約２４，０００−１５，０００ダルトンの寸法範囲である。これらの比較的大きい分子量は比較的低い分子量種と比べて補充剤を活性化する大きい能力を有していると信じられている。右にある肩部すなわちクロマトグラムの比較的低分子量側は約２，３００ダルトン−５，０００ダルトンの間の分子からなっている。この種はさらに大きい洗剤様の性質を有する化合物でありそして細胞に対して細胞毒性である。
　ゲル透過クロマトグラフィー工程を使用すると、約５，０００ダルトン−１５，０００ダルトンの範囲の、好適には約６，０００ダルトン−１３，０００ダルトンの間の、分子を有しており、約８，７００ダルトンにピークを有するポロキサマー１８８の画分が商業的に入手可能なポロキサマー１８８の有利な治療活性を依然として保有しながら毒性活性が本質的にない表面活性共重合体類の集団を代表している。この新規な組成物は最近入手可能なものよりはるかに均質な調合物であり、そして予期せぬことに先行技術調合物より少ない副作用を有している。
　共重合体に関する最適範囲として記載されている分子量範囲が外側範囲であると考えられていること並びにその範囲に入る分子の集団が本発明の態様であると考えられていることを理解すべきである。
　本発明は、ここに記されている仕様を有する表面活性共重合体の新規な製造方法も含んでいる。新規方法は均一な疎水性ポリオキシプロピレン重合体の製造を方法を含んでおり、そして次に一般的に行われている如く親水性ポリオキシエチレンの添加で進行する。ポロキサマー１８８の標準的な商業的方法の結果である毒性共重合体類は頭が切られた重合体鎖および重合体中の不飽和によるものであると信じられている。
　本発明の実施においては、疎水性ポリオキシプロピレン重合体が精製されて実質的に均一なポリオキシプロピレン重合体の集団を得る。精製はゲル透過クロマトグラフィーを用いて実施することができる。しかしながら、希望する範囲のポリオキシプロピレン重合体を与えるような当技術の専門家に既知であるいずれの方法でも使用することができる。
　改良されたレオロジー試薬の製造においては、ポリオキシプロピレン重合体は約１７５０ダルトンの平均分子量を有していなければならず、１，０００−２，６００ダルトンの間の概略分子量範囲を有している。好適な分子量範囲は１，２００−２，４００ダルトンの間である。
　希望するポリオキシプロピレン共重合体が得られた後に、共重合体のエチレン部分を当技術分野の専門家に既知である標準的方法により分子の両端に加える。最終的な重合体集団は分子の合計分子量の約２０％のポリオキシエチレン組成を有していなければならない。
　本発明はさらに下記の実施例により説明されており、それらは本発明の範囲を何ら限定しようとするものではない。対照的に、本発明の範囲および／または添付されている請求の範囲から逸脱しない限り、ここの記載を読んだ後に当技術分野の専門家に示唆されるであろうそれらの種々の他の態様、改変、および同等物を再分類できることは明白に理解されるであろう。
　　　　　　　　　　　　　　実施例Ｉ
　ポロキサマー１８８（ＢＡＳＦコーポレーション、パルシッパニー、ニュージャージー州）をテトラヒドロフラン中に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解させた。カラム加熱器モジュール、モデル４１０屈折率検出器およびマキシマ８２０ソフトウェアパッケージ（全てウォーターズ、ミリポア部門、ミルフォード、マサチュセッツ州製）が備えられているモデル６００Ｅパワーラインクロマトグラフィーシステムを使用して商業的に製造されたポロキサマー１８８共重合体を分別した。クロマトグラフィーシステムには２個のリクロゲルＰＳ−４０カラムおよびリクロゲルＰＳ−２０カラムが順番に備えられていた（ＥＭサイエンス、ギブスタウン、ニュージャージー州）。リクロゲルＰＳ−４０カラムは１０μｍ粒子寸法でありそしてリクロゲルＰＳ−２０カラムは５μｍ粒子寸法であった。全てのカラムの寸法は７ｍｍ×２５ｃｍであった。
　テトラヒドロフラン中の２００μＬ（４ｍｇ）のポロキサマー１８８をカラムに加え、そして試料をカラムおよび検出器を用いて４０℃において走行させた。生じたクロマトグラムは図２に示されている。
　　　　　　　　　　　　　　実施例ＩＩ
　実施例Ｉで集められた試料を５種の画分に分別し、そして各画分を実施例Ｉ中に示されている如くしてカラム上に流した。種々のクロマトグラフィー走行からのクロマトグラムは図３−８に示されている。ポロキサマー１８８の治療活性を保有しながら最少の毒性を示す画分は図５に示されている。明白にわかるように、図５にはピークのいずれの側にも肩部は存在していない。
　各画分に関する平均分子量は表ＩＩに示されている。各画分に関するクロマトグラムは図３−８に示されている。
　分別されていないポロキサマー１８８の多分散値は１．０８９６であった。ほとんどポロキサマー１８８に相当している画分は、約１．０２８０の多分散値を有する画分３である。
　　　　　　　　　　　　　　実施例ＩＩＩ
　機械的スタラー、還流コンデンサー、温度計および酸化プロピレン供給入り口が備えられている１リットル３首丸底フラスコ中に、５７グラム（０．７５モル）のプロピレングリコールおよび７．５グラムの無水水酸化ナトリウムを入れた。フラスコに窒素を流して空気を除去しそして水酸化ナトリウムが溶解するまで撹拌しながら１２０℃に加熱した。生成物が約１７５０ダルトンの計算分子量を有するまで、充分な酸化プロピレンを混合物中にそれが反応するのと同じ速さで加えた。生成物を窒素下で冷却しそしてＮａＯＨ触媒を硫酸を用いて中和しそして次に生成物を濾過した。最終的生成物は水−不溶性のポリオキシプロピレングリコールであった。
　　　　　　　　　　　　　　実施例ＩＶ
　実施例ＩＩＩからのポリオキシプロピレングリコールをテトラヒドロフラン中に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解させた。カラム加熱器モジュール、モデル４１０屈折率検出器およびマキシマ８２０ソフトウェアパッケージ（全てウォーターズ、ミリポア部門、ミルフォード、マサチュセッツ州製）が備えられているモデル６００Ｅパワーラインクロマトグラフィーシステムを使用して商業的に製造されたポロキサマー１８８共重合体を分別した。クロマトグラフィーシステムには２個のリクロゲルＰＳ−４０カラムおよびリクロゲルＰＳ−２０カラムが順番に備えられていた（ＥＭサイエンス、ギブスタウン、ニュージャージー州）。リクロゲルＰＳ−４０カラムは１０μｍ粒子寸法でありそしてリクロゲルＰＳ−２０カラムは５μｍ粒子寸法であった。全てのカラムの寸法は７ｍｍ×２５ｃｍであった。
　テトラヒドロフラン中の２００μＬ（４ｍｇ）のポリオキシプロピレングリコールをカラムに加え、そして試料をカラムおよび検出器を用いて４０℃において走行させた。１，０００−２，６００ダルトンの間の分子量分布を有する１７５０ダルトンの平均分子量に相当する画分を集めた。他の画分は廃棄された。
　　　　　　　　　　　　　　実施例Ｖ
　実施例ＩＶからの精製されたポリオキシプロピレングリコールを適当量の無水水酸化ナトリウムと共に実施例ＩＩＩ中に記されているのと同じ装置の中に入れた。適当量の酸化エチレンを１２０℃の平均温度において実施例ＩＩＩ中に記されているのと同じ技術を用いて加えた。加えられた酸化エチレンの量はポリオキシプロピレングリコール基質および加えられた酸化エチレンの重量の合計重量の２０％に相当していた。
　この工程は、商業的調合物に比較して分子寸法および構造に関してはるかに均質である分子からなるポリオキシプロピレン／ポリオキシエチレンブロック共重合体を生じた。
　　　　　　　　　　　　　　実施例ＶＩ
　ポロキサマー７６０．５の画分をゲル透過クロマトグラフィーにより製造しそしてオキシエチレンの重量％に関しておよびＮＭＲ分析による不飽和に関して下記の如く分析した。ポロキサマー７６０．５（ＢＡＳＦコーポレーション、パルシッパニー、ニュージャージー州）をテトラヒドロフラン中に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解させた。カラム加熱器モジュール、モデル４１０屈折率検出器およびマキシマ８２０ソフトウェアパッケージ（全てウォーターズ、ミリポア部門、ミルフォード、マサチュセッツ州製）が備えられているモデル６００Ｅパワーラインクロマトグラフィーシステムを使用して商業的に製造されたポロキサマー７６０．５共重合体を分別した。クロマトグラフィーシステムにはウルトラスチラゲル１０３および５００Ａが順番に備えられていた（ウォーターズ、ミリポア部門、ミルフォード、マサチュセッツ州）。カラムの寸法は７．７ｍｍ内径×３０ｃｍであった。除去可能な２μｍ適合部が付いているプレカラムフィルター＃Ａ−３１５をカラムの保護用に使用した。テトラヒドロフラン中の２００μＬ（４ｍｇ）のポロキサマ−７６０．５をカラムに加え、そして試料をカラムと共に４０℃においてそして検出器と共に４５℃において走行させた。
　試料１はＢＡＳＦコーポレーション（パルシッパニー、ニュージャージー州）から得られたポロキサマー７６０．５の分別されていない試料でありそして図９Ａに示されている。画分１はクロマトグラフィーシステムからの初期画分でありそして図９Ｂに示されている。画分２は後期画分でありオキシ図９Ｃに示されている。全てのプロトンＮＭＲ分析はＮＦ工程「重量％オキシエチレン」に従いブルーカー３００ＭＨｚ装置上で行われた。
　図９Ｂおよび９Ｃからのプロトン核磁気共鳴スペクトルは分別されていない試料と比べてスペクトル中に広がっているわずかなバン（ｂａｎ）を示した。後期溶離画分（画分２）は、約４．０ｐｐｍにおける二重線記号により示されているような最大量の不飽和を含有していた。早期溶離ピーク（画分１）に関するプロトンスペクトルは水以外の不純物を示さなかった。
　重量％オキシエチレンを試料に関して計算した。表ＩＩＩからわかる如く、最も純粋な画分である早期溶離画分は最低％のオキシエチレンを有していた。この画分も核磁気共鳴により測定された不飽和を示さなかった。上記のポロキサマー命名システムを使用すると、種々の画分は下記の特徴およびポロキサマー数を有していた。
ａ．ＮＭＲにより測定された
ｂ．ゲル透過クロマトグラフィーにより測定されたポリオキシプロピレン
ｃ．ＮＭＲにより測定された
　　　　　　　　　　　　　　実施例ＶＩＩ
　ポロキサマー１８８（プルロニックＲＦ６８）を実施例１に従うゲル透過クロマトグラフィーシステム上で分別した。３種の画分を集めた。
図１１Ａは画分１である早期高分子量画分を示している。図１１Ｂは主ピークである画分ＩＩを示している。図１１Ｃは分子の後期溶離性の比較的低い分子量数を示している。各画分の％オキシエチレンをプロトンＮＭＲにより２００ＭＨｚＮＭＲ分光計を用いて測定した。約１０ｍｇの各試料を試験した。各瓶に約０．７ｍＬのＣＤＣｌ３を加えることにより試料を製造した。溶液を濾過しそして５ｍｍＮＭＲ管に移した。１滴のＤ２Ｏを加え、そして管を測定の前に振った。
ａ．ＮＭＲにより測定された
ｂ．ゲル透過クロマトグラフィーにより測定された
　表ＩＶに示されている如く、早期溶離性の大分子量画分は高い％のオキシエチレンを有しており、そしてポロキサマー２５８に相当していた。中期画分は最少％のオキシエチレンを有しているが、後期溶離性の小分子量画分は最高％のオキシエチレンを有していた。中期画分は１８８の希望値と非常に対応している１７８の計算されたポロキサマー数を有していた。後期画分は０３９の計算されたポロキサマー数を有していた。従って、商業的に入手可能なポロキサマー調合物は生物学的システム中で有害となるかもしれない重合体の相当な数を有していた。
　　　　　　　　　　　　　実施例ＶＩＩＩ
　ポロキサマー３３１（プルロニック（商標）Ｌ１０１）を実施例ＶＩ中の処方に従い分別した。分別されていないポロキサマー３３１、早期溶離性画分および後期溶離性画分に関するクロマトグラムはそれぞれ図１２Ａ−１２Ｃに示されている。各試料に関するＮＭＲスペクトルを次に実施例ＶＩ中の如くして測定した。これらのスペクトルの結果およびクロマトグラムは表Ｖにまとめられている。
ａ．ＮＭＲにより測定された
ｂ．ゲル透過クロマトグラフィーにより測定されたポリオキシプロピレン
ｃ．ＮＭＲにより測定された
　各画分に関するポロキサマー数を集められた数値データを基にして計算する時には、後期画分重合体は分別されていない調合物とは非常に異なっているポロキサマーである。さらに、重合体の不飽和集団は分別工程により除去されていた。
　以上は本発明の好適態様にのみ関連しているということ並びに添付されている請求の範囲に示されているような本発明の精神および範囲から逸脱しない限り多数の改変または変更をそこで行えるということは理解すべきである。
　　　　　　　　　　　　　　
１　　アダムソン（Ａｄａｍｕｓｏｎ），ＡＷ、フィジカル・ケミストリー・オブ・サーフェセズ（ＰＨＹＳＩＣＡＬ　ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ　ＯＦ　ＳＵＲＦＡＣＥＳ）、４版、ジョーン・ウィリー・アンド・サンズ、ニューヨーク（１９８２）。
２　　一般的には、血流遮断および血栓症、基本的原則および臨床的実施（ＨＥＭＯＳＴＡＳＩＳ　ＡＮＤ　ＴＨＲＯＭＢＯＳＩＳ，ＢＡＳＩＣＰＲＩＮＣＩＰＬＥＳ　ＡＮＤ　ＣＬＩＮＩＣＡＬ　ＰＲＡＣＴＩＣＥ）、コルマン（Ｃｏｌｍａｎ）他編集、Ｊ．Ｂ．リッピンコット・カンパニー（１９８７）を参照のこと。
３　　アトキンソン（Ａｔｋｉｎｓｏｎ），ＴＰ他、““、ＡＭ．Ｊ．ＰＨＹＳＩＯＬ．、２５４：Ｃ２０（１９８８）。
４　　ブルックス（Ｂｒｏｏｋｓ），ＤＥ，およびエヴァアンス（Ｅｖａｎｓ），ＥＡ、臨床的血液レオロジーにおける血球のレオロジー、心血管および血液学的疾病、糖尿病、外科および婦人科（Ｒｈｅｏ１０ｇｙ　ｏｆ　ｂｌｏｏｄ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎ　ＣＬＩＮＩＣＡＬ　ＨＥＭＯＲＨＥＯＬＯＧＹ，Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ　ａｎｄ　Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｄｉｓｅａｓｅ，Ｄｉａｂｅｔｅｓ，Ｓｕｒｇｅｒｙ　ａｎｄ　Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｙ）。Ｓ．チエン（Ｃｈｉｅｎ）、Ｊ．ドルマンディ（Ｄｏｒｍａｎｄｙ），Ｅ．エルンスト（Ｅｒｎｓｔ）およびＡ．マトライ（Ｍａｔｒａｉ），編集、マルチヌス・ニイホッフ・パブリッシャーズ、ドルドレヒト（１９８７）。
５　　トンプソン（Ｔｈｏｍｐｓｏｎ），ＡＲ，およびハーカー（Ｈａｒｋｅｒ），ＬＡ，血流遮断および血栓症の手引（ＭＡＮＵＡＬ　ＯＦ　ＨＥＭＯＳＴＡＳＩＳ　ＡＮＤ　ＴＩＩＲＯＭＢＯＳＩＳ）、３版、Ｆ．Ａ．デヴィス・カンパニー、フィラデルフィア（１９８３）。
６　　リー（Ｌｅｅ），ＬＨ、「重合体摩擦および摩耗に対する表面エネルギーの影響（Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｓｕｒｆａｃｅ　ｅｎｅｒｇｅｔｉｃｓ　ｏｎ　ｐｏｌｙｍｅｒ　ｆｒｉｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｗｅａｒ）」、重合体摩擦および摩耗における進歩（ＡＤＶＡＮＣＥＳ　ＩＮ　ＰＯＬＹＭＥＲ　ＦＲＩＣＴＩＯＮ　ＡＮＤ　ＷＥＡＲ，Ｐｏｌｙｍｅｒ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ中、ポリマー・サイエンス・アンド・テクノロジー（Ｐｏｌｙｍｅｒ　ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、５Ａ巻、Ｌ．Ｈリー（Ｌｅｅ）編集者、プレヌム・プレス、ニューヨーク（１９７４）。
７　　ルックス（Ｂｒｏｏｋｓ）および工ヴァアンス（Ｅｖａｎｓ）（１９８７）、上記
８　　リー（Ｌｅｅ）、（１９７４）、上記
９　　アダムソン（Ａｄａｍｕｓｏｎ）、（１９８２）、上記
１０　グローヴァー（Ｇｒｏｖｅｒ），Ｆ．Ｌ．，他、「非イオン系表面活性剤および血液粘度（Ａ　ｎｏｎ１０ｎｉｃ　ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ　ａｎｄ　ｂ１ｏｏｄ　ｖｉｓｃｏｓｉｔｙ）」、ＡＲＣＨ　ＳＵＲＧ）、１０６：３０７（１９７３）。
１１　パパデア（Ｐａｐａｄｅａ），Ｃ．およびハンター（Ｈｕｎｔｅｒ），アルキル．、「フイブリン（フィブリノーゲン）濃度に関連する血液粘度に対するレオスＲｘＲの影響（Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ＲｈｅｏｔｈＲｘＲ　ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ　ｏｎ　ｂｌｏｏｄ　ｖｉｓｃｏｓｉｔｙ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｔｏ　ｆｉｂｒｉｎ（ｏｇｅｎ）　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ」、ＦＡＳＥＢ　Ｊ２：Ａ３８４（１９８８）。
１２　ウィマン（Ｗｉｍａｎ），Ｂ．およびランビー（Ｒａｎｂｙ），Ｍ．、「急速および定量的分光写真計評価による血漿中の可溶性フィブリンの測定（Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ｆｉｂｒｉｎ　ｉｎ　ｐｌａｓｍａ　ｂｙ　ａ　ｒａｐｉｄ　ａｎｄ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ　ａｓｓａｙ）」、ＴＨＲＯＭＢ．ＨＡＥＭＯＳＴ５５：１８９（１９８６）。
１３　コナガーン（Ｃｏｎｎａｇｈａｎ），ＤＧ、フランシス（Ｆｒａｎｃｉｓ），ＣＷ、レーン（Ｌａｎｅ），ＤＡ、およびマーダー（Ｍａｒｄｅｒ），ＶＪ、「新しい高感度技術を用いてのフィブリン重合体、フィブリノーゲン減成生成物、および架橋結合されたフィブリン減成生成物の特異的同定（Ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆｉｂｒｉｎ　ｐｏｌｙｍｅｒｓ，ｆｉｂｒｉｎｏｇｅｎ　ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ，ａｎｄ　ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｅｄ　ｆｉｂｒｉｎ　ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ｉｎ　ｐｌａｓｍａ　ａｎｄ　ｓｅｒｕｍ　ｗｉｔｈ　ａ　ｎｅｗ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ）、ＢＬＯＯＤ、６５：５８９（１９８５）。
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１９　ハンター（Ｈｕｎｔｅｒ）、［非イオン性ブロック重合体表面活性財の佐薬活性、ＩＩＩ、選択された生物学的活性表面の特徴（Ｔｈｅ　Ａｄｕｖａｎｔ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　Ｎｏｎｉｏｎｉｃ　Ｂｌｏｏｋ　Ｐｏｌｙｍｅｒ　Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ，ＩＩＩ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓｅｌｅｃｔｅｄ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ　Ａｃｔｉｖｅ　Ｓｕｒｆａｃｅｓ）」、ＳＣＡＮＤ．Ｊ．ＩＭＭＵＮＯＬ．。２３巻、２８−３００頁（１９８６）。
２０　ヘンリー（Ｈｅｎｒｙ），Ｒ．Ｌ．、他、「火傷被覆およびポロキサマー調合物の使用（Ｂｕｒｎ　Ｗｏｕｎｄ　Ｃｏｖｅｒｉｎｇｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　Ｕｓｅ　ｏｆ　Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ　Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ）」、ＣＲＨＩＣＡＬ　ＲＥＶＩＥＷＳ　ＩＮ　ＢＩＯＣＯＭＰＡＴＩＢＩＬＩＴＹ、５巻、Ｎｏ．３、２０７−２２０頁（１９８９）。
【図面】