【事件の表示】
　特許第２８３５９２３号「炎症性疾患の処置方法及び装置」の請求項１ないし請求項４に係る特許に対する特許異議の申立てについて、次のとおり決定する。
【結　論】
　訂正を認める。
　特許第２８３５９２３号の請求項１ないし２に係る特許を維持する。
【理　由】
〔1〕手続きの経緯
　本件特許第2835923号（以下「本件特許」という。）は、平成6年6月28日の出願であって、平成10年10月9日に特許権の設定登録がされ、その後、東レ株式会社により特許異議の申立てがされた。そして、当審において取消理由が通知され、その指定期間内である平成12年4月4日に訂正請求がされた。
〔2〕訂正の適否についての判断
１．本件訂正請求による訂正の内容は以下のとおりである。
a）特許請求の範囲の請求項１の「リンパ球に比し炎症性細胞への親和性が高い担体」を「酢酸セルロースからなる担体」と訂正する。
b）特許請求の範囲の請求項１の「血液流出部を備えている」を「血液流出部を備え、末梢血から炎症性細胞を吸着除去処理された処理血液を当該炎症性疾患患者に戻す体外循環式とした」と訂正する。
c）特許請求の範囲の請求項３および請求項４を削除する。
d）発明の詳細な説明の段落【0008】の「すなわち、本発明は炎症性疾患患者の末梢血を、リンパ球に比し炎症性細胞への親和性が高い担体と接触させ、かくして得られる炎症性細胞が吸着除去された処理血液を当該患者に戻すことを特徴とする炎症性疾患の処置方法を提供するものである。」を「すなわち、本発明は、酢酸セルロースからなる担体を収容した炎症性細胞吸着部と、血液を該吸着部に流入させるための血液流入部と、該吸着部内に流入された血液を該吸着部外に流出させるための血液流出部を備え、末梢血から炎症性細胞を吸着除去処理された処理血液を当該炎症性疾患患者に戻す体外循環式としたことを特徴とする末梢血から炎症性細胞を吸着除去処理することにより炎症性疾患を処置するための装置を提供するものである。」と訂正する。
e）発明の詳細な説明の段落【0009】を削除する。
f）発明の詳細な説明の段落【0010】、【0011】をそれぞれ段落【0009】、【0010】とする。
g）発明の詳細な説明の段落【0012】の「本発明において用いられるリンパ球に比し炎症性細胞への親和性が高い担体（以下、単に「担体」と略す）としては、かかる特性を有し、接触する血液に有害なものでなければその材質を問わずに利用することができる。もちろんＣＤ１１ｂ陽性細胞を選択的に吸着し得る担体は最も好ましいものである。このような担体としては水に対する接触角が５５°〜９５°の間にある材質、具体的には特にポリスチレン、酢酸セルロース、６?ナイロン、１１?ナイロン、ポリエチレンテレフタレート等からなる担体が好適な担体として例示される。
　ここで接触角とは、静止液体の自由表面が固体壁に接する場所で液面となす角（液の内部にある角を取る）をいう。
　該担体の形状及び大きさなどもまた任意であり、特に限定はしないが、一般には血液細胞と区別し得るだけの大きさを有し、接触する血液との接触面が大きい形状、すなわち効率的な接触を可能とする形状である。例えば、φ０．１〜１０mm程度のビーズ状担体などとすることができる。」を「本発明において用いられる酢酸セルロースからなる担体はリンパ球に比し炎症性細胞への親和性が高いものである。
　該担体の形状及び大きさなどもまた任意であり、特に限定はしないが、一般には血液細胞と区別し得るだけの大きさを有し、接触する血液との接触面が大きい形状、すなわち効率的な接触を可能とする形状である。例えば、φ０．１〜１０mm程度のビーズ状担体などとすることができる。」と訂正し、段落【0011】とする。
h）発明の詳細な説明の段落【0013】ないし【0034】をそれぞれ段落【0012】ないし【0033】と訂正する。
２．訂正事項について検討すると、訂正事項a）は、「リンパ球に比し炎症性細胞への親和性が高い担体」を「酢酸セルロースからなる担体」と具体的に限定するものであるから、特許請求の範囲を減縮するものであると認める。
　訂正事項b）は、吸着除去処理が体外循環式であることを限定するものであるから、特許請求の範囲を減縮するものであると認める。
　訂正事項c）は、訂正前の請求項３及び請求項４をそれぞれ削除するものであるから、特許請求の範囲を減縮するものであると認める。
　訂正事項d）ないしh）は、上記特許請求の範囲の訂正に伴って、発明の詳細な説明の記載をそれと整合させるものであると認める。
　また、上記訂正事項a）ないしh）は、特許明細書に記載した事項の範囲内のものであって、実質上特許請求の範囲を拡張し、または変更するものでもない。
　さらに、後述するように、本件訂正後の請求項１、請求項２に係る発明（以下、「請求項１、請求項２に係る発明」という。）は、特許異議申立の理由によっては、特許出願の際独立して特許を受けることができないとすることはできない。
　その他、請求項１、請求項２に係る発明が、特許出願の際独立して特許を受けることができないとする理由を発見しない。
３．以上のとおりであるから、本件訂正請求は、特許法第１２０条の４第２項の規定、及び同条第３項で準用する同法第１２６条第２ないし第４項の規定に適合するものと認められるので、当該訂正を認める。
〔3〕特許異議申立てについての判断
１．本件発明は、平成12年4月4 日付けで提出された訂正明細書の請求項１および請求項２に係る発明は、その特許請求の範囲の請求項１および請求項２に記載された次の事項により特定されるとおりのものである。
「請求項１
　酢酸セルロースからなる担体を収容した炎症性細胞吸着部と、血液を該吸着部に流入させるための血液流入部と、該吸着部内に流入された血液を該吸着部外に流出させるための血液流出部を備え、末梢血から炎症性細胞を吸着除去処理された処理血液を当該炎症性疾患患者に戻す体外循環式としたことを特徴とする末梢血から炎症性細胞を吸着除去処理することにより炎症性疾患を処置するための装置。
　請求項２
　炎症性疾患が、慢性関節リウマチである請求項１記載の装置。」
２．これに対して、特許異議申立人は、「本件特許発明は、特許法第２９条第１項第３号または同条第２項の規定により特許を受けることができないものであり、特許法第１１３条第２号の規定により取り消すべきものである。」と主張し、以下の証拠方法を提出している。
　甲第１号証：特開平2-193069号公報
　甲第２号証：OLA　ROKKE　et　al．、Scand　J　Infect　Dis　22、1990、ｐ79−86
　甲第３号証：今掘和友監、「生化学辞典」、第２版、株式会社東京化学同人、1990年11月22日発行、ｐ288、1004
３．そこで、異議申立人が提出した甲号各証についてみると、甲第１号証には、血液中の顆粒球除去方法及びこれに用いる顆粒球除去装置に関し、第１図とともに、以下の事項が記載されている。
a)「リンパ球に比し顆粒球への親和性が高い担体を収容した顆粒球吸着部と、血液を該吸着部に流入させるための血液流入部と、該吸着部内に流入された血液を該吸着部外に流出させるための血液流出部を備えていることを特徴とする顆粒球除去装置。」（請求項３）　
b)「第１図中、1は顆粒球吸着部であり、この中に水に対する接触角が55°〜95°である担体4が充填されている。
　かかる担体を収容する吸着部1の一端部には、被処理血液（Ｇ／Ｌ比の高い患者血液）を該吸着部内に流入させるための血液流入部2が備えられ、他端部には、該吸着部内に流入され、上記担体との接触により顆粒球を吸着除去された血液を該吸着部外に流出させるための血液流出部3が備えられている。」（第3頁左下欄第14行〜同右下欄第3行）
　同じく甲第２号証には、敗血症において顆粒球が有害な働きをするので、これを除去することにより敗血症の治療を行うことができないかということを考え、敗血症のブタから血液を取り出して白血球除去フィルターにより白血球を除去した後、血液をブタに戻すという処置を行うことにより、循環エンドトキシンの濃度の低下、顆粒球活性化の程度の低下、心拍出量の増大という、敗血症の治療効果が得られたことが明記されている。
　同じく甲第３号証には、白血球には、顆粒球、単球が含まれ、両者で白血球の大部分を占めていることが示すされている。
４．そこで、まず、請求項１に係る発明と甲第１号証記載の発明とを対比すると、両者は、患者の血液を体外循環させることにより、血液中の顆粒球を酢酸セルロースからなる顆粒球吸着部で吸着する装置である点で一致するが、請求項１に係る発明が癌患者における顆粒球を除去するものであるのに対して、甲第１号証記載のものは炎症性疾患の患者における炎症性細胞を吸着するものである点、で相違するものであると認める。
　甲第２号証には、炎症性疾患の一つである敗血症において、顆粒球を除去するために、フィルタで白血球そのものを除去する発明が記載されているが、甲第１号証に記載された発明は、癌患者に対する顆粒球を除去するものであって、両者はその対象および除去物が異なるものであるから、甲第１号証に記載された発明を甲第２号証に記載された発明に適用することが容易であるとすることはできない。
　また、上記相違点は甲第３号証にも示されていない。
　したがって、請求項１に係る発明が、甲第１号証に記載された発明であるとすることはできず、また、甲第１号証ないし甲第３号証に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものであるとすることもできない。
　次に、請求項２に係る発明は、請求項１に係る発明をさらに限定したものであるから、その余について検討するまでもなく、甲第１号証に記載された発明であるとすることはできず、また、甲第１号証ないし甲第３号証に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものであるとすることもできない。
〔4〕むすび
　以上のとおりであるから、請求項１および請求項２に係る発明の特許は、申立ての理由によっては取り消すことはできない。
　また、他に請求項１および請求項２に係る発明についての特許を取り消すべき理由を発見しない。
　よって、結論のとおり決定する。
【異議決定日】
平成１２年８月９日（２０００．８．９）
【訂正の要旨】
訂正の要旨
ａ）特許請求の範囲の請求項１の「リンパ球に比し炎症性細胞への親和性が高い担体」を「酢酸セルロースからなる担体」と訂正する。
ｂ）特許請求の範囲の請求項１の「血液流出部を備えている」を「血液流出部を備え、末梢血から炎症性細胞を吸着除去処理された処理血液を当該炎症性疾患患者に戻す体外循環式とした」と訂正する。
ｃ）特許請求の範囲の請求項３および請求項４を削除する。
ｄ）発明の詳細な説明の段落【０００８】の「すなわち、本発明は炎症性疾患患者の末梢血を、リンパ球に比し炎症性細胞への親和性が高い担体と接触させ、かくして得られる炎症性細胞が吸着除去された処理血液を当該患者に戻すことを特徴とする炎症性疾患の処置方法を提供するものである。」を「すなわち、本発明は、酢酸セルロースからなる担体を収容した炎症性細胞吸着部と、血液を該吸着部に流入させるための血液流入部と、該吸着部内に流入された血液を該吸着部外に流出させるための血液流出部を備え、末梢血から炎症性細胞を吸着除去処理された処理血液を当該炎症性疾患患者に戻す体外循環式としたことを特徴とする末梢血から炎症性細胞を吸着除去処理することにより炎症性疾患を処置するための装置を提供するものである。」と訂正する。
ｅ）発明の詳細な説明の段落【０００９】を削除する。
ｆ）発明の詳細な説明の段落【００１０】、【００１１】をそれぞれ段落【０００９】、【００１０】とする。
ｇ）発明の詳細な説明の段落【００１２】の「本発明において用いられるリンパ球に比し炎症性細胞への親和性が高い担体（以下、単に「担体」と略す）としては、かかる特性を有し、接触する血液に有害なものでなければその材質を問わずに利用することができる。もちろんＣＤ１１ｂ陽性細胞を選択的に吸着し得る担体は最も好ましいものである。このような担体としては水に対する接触角が５５°〜９５°の間にある材質、具体的には特にポリスチレン、酢酸セルロース、６−ナイロン、１１−ナイロン、ポリエチレンテレフタレート等からなる担体が好適な担体として例示される。
　ここで接触角とは、静止液体の自由表面が固体壁に接する場所で液面となす角（液の内部にある角を取る）をいう。
　該担体の形状及び大きさなどもまた任意であり、特に限定はしないが、一般には血液細胞と区別し得るだけの大きさを有し、接触する血液との接触面が大きい形状、すなわち効率的な接触を可能とする形状である。例えば、φ０．１〜１０ｍｍ程度のビーズ状担体などとすることができる。」を「本発明において用いられる酢酸セルロースからなる担体はリンパ球に比し炎症性細胞への親和性が高いものである。
　該担体の形状及び大きさなどもまた任意であり、特に限定はしないが、一般には血液細胞と区別し得るだけの大きさを有し、接触する血液との接触面が大きい形状、すなわち効率的な接触を可能とする形状である。例えば、φ０．１〜１０ｍｍ程度のビーズ状担体などとすることができる。」と訂正し、段落【００１１】とする。
ｈ）発明の詳細な説明の段落【００１３】ないし【００３４】をそれぞれ段落【００１２】ないし【００３３】と訂正する。
（５４）【発明の名称】
炎症性疾患の処置方法及び装置
（５７）【特許請求の範囲】
　【請求項１】酢酸セルロースからなる担体を収容した炎症性細胞吸着部と、血液を該吸着部に流入させるための血液流入部と、該吸着部内に流入された血液を該吸着部外に流出させるための血液流出部を備え、末梢血から炎症性細胞を吸着除去処理された処理血液を当該炎症性疾患患者に戻す体外循環式としたことを特徴とする末梢血から炎症性細胞を吸着除去処理することにより炎症性疾患を処置するための装置。
　【請求項２】炎症性疾患が、慢性関節リウマチである請求項１記載の装置。
【発明の詳細な説明】
　　　【０００１】
　　【産業上の利用分野】
　本発明は炎症性疾患の処置方法及び装置に関し、更に詳細には炎症性疾患患者の末梢血より顆粒球を吸着除去した処理血液を当該患者に戻すことによって各種炎症性疾患の症状の改善及び治療をするための処置方法及び装置に関する。
　　　【０００２】
　　【従来の技術】
　炎症組織に集積してくる好中球等の食細胞は貪食、活性酸素産生、顆粒内酵素の放出及び組織への遊走、接着と多彩な機能を有する細胞集団であり、これらは進入微生物に対する生体防御に不可欠である。
　　　【０００３】
　一方、これらの細胞群が過剰に、もしくは慢性的に局所に浸潤した場合、著しい組織障害を引き起こすことが知られている。即ち、心筋梗塞等での虚血後の再灌流障害（Ｊ．Ｌ．，Ｒｏｍｓｏｎ，ｅｔ　ａ１．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，
６７
１０
２１６
３４
１１７
２０
　　　【０００４】
　また、肺の組織障害の結果として起こる肺水腫の臨床症候群であるＡＲＤＳには呼吸器感染症、物理化学的な肺の損傷や敗血症、薬物中毒、重症外傷等々と様々な原因があるにもかかわらず、その組織学的所見は一定しており、広汎におよぶ肺胞の障害、血管拡張、上皮細胞の障害、その結果としての浮腫の形成に加えて好中球の集積が観察され、ＡＲＤＳの炎症反応に好中球が深く関与しているとされている（Ａ．Ａ．Ｆｏｗｌｅｒ，ｅｔ　ａｌ．，Ａｍ．Ｒｅｖ．Ｒｅｓｐｉｒ．，
１３６
１２３
１４４
６０
１４４
１４０
　　　【０００５】
　従って、これらの疾患に対して好中球の作用又は機能を制御すべく、その活性酸素に対するＳＯＤ、Ｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）（Ｇ．Ｒ．Ｂｅｒｎａｒｄ，ｅｔ　ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，
７３
５５
１４２
８１
　　　【０００６】
　　【発明が解決しようとする課題】
　しかしながら、これらのいずれの炎症性疾患の治療法も患者にとって異物である薬物を投与するものであり、何らかの副作用を生ずることは避け難いものであった。
　従って、本発明の目的は薬物を投与せずに炎症性疾患に関与する生体成分の含量を調節することにより、炎症性疾患を治療する方法及び装置を提供することにある。
　　　【０００７】
　　【課題を解決するための手段】
　そこで本発明者らは炎症性疾患と末梢血中の顆粒球、単球等の炎症性細胞の量との関係、炎症性疾患におけるこれらの炎症性細胞の血中濃度と炎症組織濃度との関係等について鋭意検討した結果、炎症性疾患患者の末梢血より炎症性細胞を選択的に除去処理し、その処理血液を患者に戻してやれば、炎症性疾患の症状が改善し、治癒が促進されることを見出し、本発明を完成するに至った。
　　　【０００８】
　すなわち、本発明は、酢酸セルロースからなる担体を収容した炎症性細胞吸着部と、血液を該吸着部に流入させるための血液流入部と、該吸着部内に流入された血液を該吸着部外に流出させるための血液流出部を備え、末梢血から炎症性細胞を吸着除去処理された処理血液を当該炎症性疾患患者に戻す体外循環式としたことを特徴とする末梢血から炎症性細胞を吸着除去処理することにより炎症性疾患を処置するための装置を提供するものである。
　　　【０００９】
　本発明方法の対象となる炎症性疾患患者としては、ＡＲＤＳ、多臓器不全（ＭＯＦ）、アレルギー性疾患、慢性関節リウマチ、その他自己免疫疾患、心筋梗塞等での虚血後の再灌流障害など顆粒球の産生する因子が原因となる疾患等が挙げられる。このうち、特に治療が困難とされている疾患、すなわち、致命率が高いＡＲＤＳ、非ステロイド抗炎症薬やＤＭＡＲＤＳ等の薬剤治療の行き詰まりや患者のコントロールが難しい慢性関節リウマチ等が特に好ましい対象である。
　　　【００１０】
　本発明における炎症性細胞とは、血液中に存在する細胞のうちで炎症の発生及び悪化に影響する細胞をいい、具体例としてはＣＤ１１ｂ陽性細胞、すなわち顆粒球（ＣＤ１５陽性細胞）及び単球（ＣＤ１４陽性細胞）が挙げられる。
　　　【００１１】
　本発明において用いられる酢酸セルロースからなる担体はリンパ球に比し炎症性細胞への親和性が高いものである。
　該担体の形状及び大きさなどもまた任意であり、特に限定はしないが、一般には血液細胞と区別し得るだけの大きさを有し、接触する血液との接触面が大きい形状、すなわち効率的な接触を可能とする形状である。例えば、φ０．１〜１０ｍｍ程度のビーズ状担体などとすることができる。
　　　【００１２】
　本発明においては、炎症性疾患患者の末梢血はかかる担体との接触処理に付され、炎症性細胞が吸着除去された処理血液が当該患者に戻される。処理血液は、血液細胞成分として患者に戻すことができ、これによって所望の効果を奏するが、殊に血漿成分を分離除去する必要はない。また、処理血液には必要に応じて血液成分を任意に補給することもできる。
　　　【００１３】
　かかる接触処理の手段としては、担体への炎症性細胞の吸着が有効に行われ、処理血液が患者に戻され得るように回収できる限りにおいて特に限定されず、また該処理血液を患者に戻す手段としても何等限定はない。例えば、体外循環により連続的に或いはバッチ式にて接触処理した処理血液を常法に従い静脈内投与する手段が適宜採用できる。
　　　【００１４】
　体外循環によれば、担体を収容した炎症性細胞吸着部と、血液を該吸着部に流入させるための血液流入部と、該吸着部内に流入された血液を該吸着部外に流入させるための血液流出部を備えている炎症性細胞除去装置を介して、連続的に本発明の処置が可能である。かかる装置の具体例としてはＥＰ０３１９９６１−Ａ２に記載の顆粒球除去装置を好適に例示できる。
　　　【００１５】
　次に本発明に用いる炎症性細胞除去装置を図面とともに説明する。
　図１中、１は炎症性細胞吸着部であり、この中に酢酸セルロースからなる担体４が充填されている。
　　　【００１６】
　かかる担体を収容する吸着部１の一端部には、被処理血液（炎症性疾患患者血液）を該吸着部内に流入させるための血液流入部２が備えられ、他端部には、該吸着部内に流入され、上記担体との接触により炎症性細胞を吸着除去された血液を該吸着部外に流出させるための血液流出部３が備えられている。
　　　【００１７】
　この装置は、通常の血漿交換療法に準じて、体外循環により連続的に炎症性細胞を除去することができ、輸送材料としての、例えばシリコーンゴムチューブ、ポリ塩化ビニル等の無害な素材からなる配管１１及び血液ポンプ５を備えることができる。
　　　【００１８】
　また、上記血液流出部より送出された血液の循環回路には、血液循環が正常に行われていることを確認するための動脈圧計８及び静脈圧計９、血液の凝固を防ぐための薬物、例えばヘパリンを投与するための薬物投与口６及び血液凝固剤の作用を防止する薬物、例えばプロタミンを注入するための薬物投与口１０並びに体外循環中に低下する血液の温度を上昇させるための加温器７等を設置してもよい。更に、循環血液の血液像を検出するための通常の検出器及び本発明に起因する炎症性細胞以外の血液成分の不足を補うための血液成分補給器を設置することもできる。
　　　【００１９】
　かかる補給のための血液成分は、例えば、成分輸血が利用し得る。
　　　【００２０】
　かかる炎症性細胞除去装置を用いて炎症性疾患患者の末梢血を１時間循環させれば、約３０％程度の顆粒球を主体とする白血球がこの装置内に吸着回収される。このとき、末梢血中の顆粒球、特に好中球濃度は急激には低下しない。その理由は、次のように考えられる。すなわち、顆粒球、特に好中球は炎症組織に集積、接着、浸潤することによりその炎症組織局所において各種起炎物質の産生、活性酸素の生成等を経て組織障害を生起させ、炎症を増悪させていると考えられている。そこで、循環血中より顆粒球を本法により除去すると生体のホメオスタシス機構により、血液中の顆粒球数を一定に保つべく、マージナル　プール（ｍａｒｇｉｎａｌ　ｐｏｏｌ）より顆粒球が循環血中に再び動員されることが考えられる。その結果、炎症局所への顆粒球浸潤数が減少して炎症の治癒は促進するが、末梢血中の顆粒球数は急激には低下しないものと考えられる。
　　　【００２１】
　上記体外循環による本発明の処置は、炎症疾患患者の症状等によっても異なるが、一般に１回当たり流速３０ｍｌ／分の条件で３０分〜９０時間血液循環することにより行い得る。もちろん、これは本発明の開示に従い、例えば採用する担体の量や吸着特性等をふまえて適宜に設定することができる。例えば、後記する臨床例においては、流速３０ｍｌ／分、１回当たり１時間の血液循環にて、１〜３回／週を１クールとして、１〜８週間の処置により慢性関節リウマチの良好な処置結果が得られている。
　また、バッチ式にて接触処理した処理血液を静脈内投与する場合も、実質的に上記体外循環による処置の場合に準じて行うことができる。尚、採血量及び処理された血液の投与量は、一般に、１日当たり１５０〜４５０ｍｌ程度である。
　　　【００２２】
　本発明方法によれば炎症性疾患の症状を改善し、治癒を促進させることができるが、炎症性疾患の治療をより早期に達成するため本発明方法と抗炎症剤投与、抗菌剤投与、抗ウィルス剤投与等の薬物療法を併用してもよい。なお、この薬物療法との併用時には、薬物の投与量は薬物療法単独の場合の投与量よりも少なくて充分に効果が奏される。従って、当該併用療法によれば、薬物療法単独の場合よりも副作用が軽減される。
　　　【００２３】
　　【発明の効果】
　本発明方法によれば患者に何ら副作用を生じることなく、速やかに炎症性疾患の症状改善及び治療をすることができる。
　　　【００２４】
　　【実施例】
　次に実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明は何らこれに限定されるものではない。
　以下の実施例において、顆粒球数、単球数等の白血球数は、特記しない限り、自動分析装置（ＴＨＭＳ　Ｈ１，Ｔｅｃｈｎｉｃｏｎ）により測定した。
　　　【００２５】
実施例１
　酢酸セルロースビーズ１１ｇを内径１．５ｃｍ、長さ５ｃｍのカラム（Ｂｉｏ−Ｒａｄ，Ｒｉｃｈｍｏｎｄ，ＣＡ）に充填し、高圧蒸気滅菌したものを炎症性細胞除去カラム〔図１中の炎症性細胞吸着部，以下「Ｇ−１カラム」という〕とした。
　家兎の耳静脈を用い、図１に示す回路を設け、２ｍｌ／分の流速で１時間血液体外循環を行い、ＣＤ１１ｂ陽性細胞除去能を検討した。
　　　【００２６】
　４羽の家兎について流速２ｍｌ／分の条件で１時間循環を行い、その後Ｇ−１カラムからビーズを取り出し、ビーズに粘着した白血球をＥＤＴＡを含むリン酸緩衝液（ＰＢＳ）により回収し解析した。なお、Ｇ−１カラム処置前の末梢血白血球数及び、その血液像はテクニコン社製のＴＨＭＳ　Ｈ１により計測した。家兎の総血液量を体重の５％として求めた血中の総顆粒球数は（３．０２±１．６０）×１０８個であり、一方ＥＤＴＡ−ＰＢＳによりビーズから回収された白血球数は（５．２±１．３）×１０７個であった。この溶出液をフローサイトメトリーにより解析したところ、顆粒球、単球マーカーのＣＤ１１ｂ陽性細胞が７６．２±６．０％含まれ、その絶対数は（４．２±１．４）×１０７個であり、これを回収顆粒球として血中の総顆粒球数により除し、Ｇ−１カラムヘの回収率を求めたところ１３．７士１．９％であった。
　この実験に供した家兎のうちの１羽の末梢血及びＧ−１ビーズ溶出液のフローサイトメトリーのヒストグラムにより、ＣＤ１１ｂ陽性細胞の分布を検討した。末梢血中の汎Ｔ細胞マーカーのＣＤ５及びＣＤ１１ｂ陽性細胞は両者とも３０％前後の存在比率を示すのに対し、Ｇ−１ビーズ溶出液に於いてはＣＤ５陽性細胞が７．１％、ＣＤ１１ｂ陽性細胞が７６．Ｏ％であり、ＣＤ１１ｂ陽性細胞の回収率がＣＤ５陽性細胞の約１０倍であることがわかった。ＣＤ１１ｂ陽性細胞は食細胞であり、ＣＤ５陽性細胞はＴ細胞であるから、Ｇ−１カラムにはＴ細胞よりも炎症増悪因子として重要な食細胞を選択的に吸着することが判明した。
　　　【００２７】
実施例２
　エンドトキシン（ＬＰＳ）を２ｍｇ／ｋｇの用量で家兎の耳静脈より投与し実験的肺水腫モデルを作製した。
　１５〜１６週齢の日本白色種の雌を用い対照群８羽はＬＰＳ投与のみとし、実施例１と同様の体外血液循環（以下、Ｇ−１療法という）群の８羽はＬＰＳ投与直後にＧ−１療法を１時間施行し、更に１日及び２日後も同じ条件で体外血液循環し合計３回Ｇ−１療法を行った。
　その結果、対照群では８羽中５羽が４８時間以内に死亡したが、Ｇ−１療法群では１羽の死亡のみであり、Ｇ−１療法が肺水腫に有効であることが判明した。
　なお、このときＬＰＳ投与１時間後、対照群、Ｇ−１療法群ともに好中球は減少した。しかし、好中球の減少率（％）は対照群では９１．９士１．７であったのに対し、Ｇ−１療法群では７４．０±７．２であり、末梢血中からの好中球の減少率が少なかった。なお、同時にβ−グルクロニダーゼ活性の変化も比較したが、対照群とＧ−１療法群間に差がなかった。
　　　【００２８】
実施例３
　卵白アルブミン（ＯＶＡ）４ｍｇを１ｍｌの完全フロイントアジュバントと混和しエマルジョンとしたものを家兎の皮内に感作し、２週間後に再び同様のＯＶＡ感作を行った。その５日後にヒザ関節に５ｍｇのＯＶＡを含む生理食塩水１ｍｌを注入し、関節炎を惹起させた。
　最後の感作１０分後、１日後、２日後及び４日後に、家兎の耳静脈を用い、図１に示す回路を設け、２ｍｌ／分の流速でそれぞれ１時間Ｇ−１療法を行った。その結果、Ｇ−１療法により、有意な関節腫脹の抑制を認めた（図２）。
　羅患部関節液中には、ＣＤ１１ｂ陽性細胞が約９０％存在したが、Ｇ−１療法後炎症性細胞吸着部のカラムより回収した白血球のうち、約９０％がＣＤ１１ｂ陽性細胞であり、Ｇ−１療法によりＣＤ１１ｂ陽性細胞が効率良く血液から除去されていた。
　ＯＶＡを関節に投与し、関節炎惹起１日後の羅患部関節液中の細胞数について対照群とＧ−１療法群とを比較した。その結果、表１に示すようにＣＤ１１ｂ陽性細胞数は対照群に比べて低下しており、特に単球は危険率０．１％以下の有意な低下を示した。
　　　【００２９】
　【表１】
　　　【００３０】
実施例４
　家兎からヘパリン採血した血液１０ｍｌを、２０ｍｌ容シリンジ（テルモ社）中で１１ｇのオートクレーブ処理した酢酸セルロースビーズとインキュベート（３７℃、１ｒｐｍ、１時間）した。この処理血液を、実施例３に従い関節炎を誘発した同一固体の家兎に静注し、経日的に関節腫脹を計測することによりその効果（Ｇ−２療法）を試験した。
　　　【００３１】
　試験は１群５羽の家兎を用い、以下の群により行った。
　Ｃｏｎｔｒｏｌ：関節炎を誘発するだけの非処置群。
　Ｇ−１　　　　：関節炎の誘発１０分後に実施例３のＧ−１療法１時間を行った群。
　Ｗｈｏｌｅ　Ｂｌｏｏｄ／Ｇ−２：関節炎の誘発１０分後に上記処理血液を静注した群。
　Ｐｌａｓｍａ／Ｇ−２：上記処理血液より分離（２５００ｒｐｍ、１０分室温）回収した血漿を０．２μｍのミリポアフィルターで濾過後、関節炎の誘発１０分後に静注した群。
　Ｂｌｏｏｄ　Ｃｅｌｌ／Ｇ−２：上記処理血液より分離（２５００ｒｐｍ、１０分、室温）した血液細胞を生食に浮遊させ、遠心（２５００ｒｐｍ、１０分、室温）後、上清を除き、生食に再浮遊させ、これを関節炎の誘発１０分後に静注した群。
　　　【００３２】
　結果を図３及び図４に示す。
　Ｇ−１群は、コントロール群に比し全観察期間において有意な関節腫脹の軽減を認め、４日後ではコントロール群に比べて４５．４％（コントロール群：３．００ｍｍ、Ｇ−１群：１．６４ｍｍ）の抑制を示した（図３）。
　一方、Ｇ−２療法において、Ｐｌａｓｍａ／Ｇ−２群は、コントロール群に比し有意な関節腫脹の軽減を認めず、Ｗｈｏｌｅ　Ｂｌｏｏｄ／Ｇ−２群及びＢｌｏｏｄ　Ｃｅｌｌ／Ｇ−２群は、上記Ｇ−１群とほぼ同等の効果を示した（図４）。
　これらの結果より、処理血液中の血液細胞成分が抗炎症効果を示すことが明らかとなった。
　　　【００３３】
実施例５（臨床試験）
　アメリカリウマチ協会（ＡＲＡ　１９８７年）の診断基準により慢性関節リウマチ（ＲＡ）と診断され、発症後６ケ月以上経過している患者６３例に対し、図１記載の装置（以下、Ｇ−１という）を用いて、静脈血を体外循環した。流速３０ｍｌ／分、１回当たり１時間の血液循環にて、１〜３回／週を１クールとして、１〜８週間体外循環した。
　その結果を次に示す。
（１）Ｇ−１の吸着特性
　顆粒球体外吸着療法を行った患者の中で、Ｇ−１治療中にＧ−１通過前及び通過後より採血できた６症例の白血球及び血清蛋白を通過前後で比較することにより、Ｇ−１に吸着される白血球及び血清蛋白の種類を検討した。その結果、Ｇ−１に吸着される血液成分は顆粒球と単球のみであり、赤血球、リンパ球、血小板、総蛋白、アルブミン、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ及びＲＦはＧ−１通過前後で有意の差を認めなかった。
　そこで、顆粒球体外吸着療法を行った７症例の患者より治療直後にＧ−１より白血球を回収し、Ｇ−１に吸着する白血球中の顆粒球の割合を検討した。その結果、Ｇ−１に吸着した白血球の９５％が単球を含む顆粒球（ＣＤ１５陽性細胞）であり、Ｇ−１は顆粒球吸着の特異性が高いものであることが示された。
（２）顆粒球吸着効率
　Ｇ−１の顆粒球及びリンパ球に対する吸着能を調べるために、全症例６３例についてＧ−１の出入口で末梢血の顆粒球とリンパ球の数を調べた。顆粒球については末梢血の顆粒球数が多くなるほどＧ−１への吸着数も多くなり、末梢血の顆粒球数とＧ−１へ吸着した顆粒球数との間に正の相関が認められた（ｐ＝０．０００１）。一方、リンパ球はほとんど吸着されず、末梢血リンパ球数と吸着したリンパ球との間には相関は認められなかった。また、Ｇ−１に吸着された細胞数は顆粒球が４．９１±０．２６×１０９個、リンパ球が０．１２±０．０３×１０９個であり、吸着効率は顆粒球が４８．３±１．２１（％）、リンパ球が５．４±１．０４（％）であった。
（３）有効性の評価
　慢性関節リウマチの有効性評価項目として知られているＬａｎｓｂｕｒｙ指数［Ｔｈｅ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｖｏｌ．８１，Ｎｏ．４，ｐ５６５−５７８（１９８６）］はＧ−１治療終了後では前値と比し２１．１％（６０．２％→４７．５％）改善した（Ｐ＜０．００１）。
　また、Ｌａｎｓｂｕｒｙ指数の各因子について検討したところ、赤沈を除くＬａｎｓｂｕｒｙ指数の各因子は全例において有意な改善効果を示した。特に疼痛関節点数、腫脹関節点数、活動性関節点数はＧ−１後有意に低下した。疼痛関節点数については有効例の１００％に減少効果が認められ、全症例５９例中１６例に疼痛関節点数の消失が認められた。また、赤沈は有意な改善は得られなかったが、低下傾向を示した。
【図面の簡単な説明】
　　【図１】
　本発明方法に用いる炎症性細胞除去装置の概略を示す図である。
　　【図２】
　家兎関節炎に対するＧ−１療法の効果を示す図である。
　　【図３】
　家兎関節炎に対するＧ−１療法の効果を示す図である。
　　【図４】
　家兎関節炎に対するＧ−２療法の効果を示す図である。