【事件の表示】
　特許第３０２８８５６号「紅藻類アマノリ属海藻オリゴ糖の製造法」の請求項１ないし５に係る特許に対する特許異議の申立てについて、次のとおり決定する。
【結　論】
　訂正を認める。
　特許第３０２８８５６号の請求項１ないし２に係る特許を維持する。
【理　由】
１．手続の経緯
  特許第３０２８８５６号に係る発明についての出願は、平成　３年　２月２６日に特許出願され、平成１２年　２月　４日にその特許の設定登録がなされ、その後、小野節子より請求項１ないし５の特許について特許異議の申立てがなされ、取消理由通知がなされ、訂正請求がなされたものである。
　
２．訂正の適否の判断
２−１　訂正の内容
（ａ）特許請求の範囲の請求項１の「紅藻類の多糖類分解能を有するビプリオ．エスビー（Ｖｉｂｒｉｏｓｐ．）ＮＯ．６３８０」を「海水由来であって、炭素源として寒天を用いた場合スサビノリの８割以上の多糖類分解酵素を生産することを特徴とする紅藻類の多糖類分解能を有するビブリオ・エスビー（Ｖｉｂｒｉｏ ｓｐ．）ＮＯ．６３８０」に訂正する。
（ｂ）特許請求の範囲の請求項２の「・・・ビブリオ属に属する微生物の産生する多糖類分解酵素を作用させて・・・」を「・・・ビブリオ・エスビー（Ｖｉｂｒｉｏ ｓｐ．）ＮＯ．６３８０の産生する粗酵素状態の多糖類分解酵素を直接作用させて・・・」と訂正する。
（ｃ）特許請求の範囲の請求項３〜５を削除する。
　
２−２訂正の目的の適否、新規事項の有無及び特許請求の範囲の拡張・変更の存否
　上記訂正事項（ａ）に関連する記載として、願書に最初に添附した明細書（以下、「特許明細書」という。）の発明の詳細な説明には、「・・そのような目的に合致する酵素を効率的に産生する微生物を海水より新たにスクリーニングし、その微生物を用いて・・製造する方法を完成した。」（段落【０００４】）と、また「図４に示すように炭素源に寒天を用いた場合も、スサビノリを用いた場合の８割以上の多糖類分解酵素を生産することができた。」（段落【００１６】）と記載され、さらに、図４には、炭素源としてスサビノリおよび寒天を用いた場合の多糖類分解酵素の相対活性量が示されていることから、「海水由来であって、炭素源として寒天を用いた場合スサビノリの８割以上の多糖類分解酵素を生産する」ことは、特許明細書に記載されているといえる。
　そうすると、上記訂正事項（ａ）は、特許明細書に記載された範囲内において、請求項１を「海水由来であって、炭素源として寒天を用いた場合スサビノリの８割以上の多糖類分解酵素を生産する」ものに限定したものといえるから、特許請求の範囲の減縮に該当するものであって、新規事項の追加に該当せず、また、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものではない。
　上記訂正事項（ｂ）に関連する記載として、「このようにして得られる粗酵素状態の多糖類分解酵素は、上記の培養法等により培養して得られるもので、」（段落【０００９】）と記載され、また、「本発明者らは紅藻類アマノリ属に属する海藻を直接酵素的に分解し、紅藻類アマノリ属海藻オリゴ糖を製造すべく鋭意研究し、・・製造する方法を完成した。」（段落【０００４】）と記載されていることから、「ビブリオ・エスビー（Ｖｉｂｒｉｏ ｓｐ．）ＮＯ．６３８０の産生する粗酵素状態の多糖類分解酵素を直接作用させ」ることは、特許明細書に記載されているといえる。
　そうすると、上記訂正事項（ｂ）は、特許明細書に記載された範囲内において、請求項２を「ビブリオ・エスビー（Ｖｉｂｒｉｏ ｓｐ．）ＮＯ．６３８０の産生する粗酵素状態の多糖類分解酵素を直接作用させ」るものに限定したものといえるから、特許請求の範囲の減縮に該当するものであって、新規事項の追加に該当せず、また、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものではない。
　上記訂正事項（ｃ）は、特許請求の範囲の請求項３ないし５を削除するものであるから、特許請求の範囲の減縮に該当するものであり、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものではない。
　
２−３　むすび
　以上のとおりであるから、上記訂正請求は、特許法第１２０条の４第２項および第３項で準用する第１２６条第２項及び第３項の規定に適合するので、当該訂正を認める。
　
３．特許異議申立てについての判断
３−１　訂正明細書の請求項に係る発明
　訂正明細書の請求項１および２に係る発明は、その特許請求の範囲の請求項１及び２に記載された次の事項により特定されるとおりのものである。
「【請求項１】　海水由来であって、炭素源として寒天を用いた場合スサビノリの８割以上の多糖類分解酵素を生産することを特徴とする紅藻類の多糖類分解能を有するビブリオ・エスピー（Ｖｉｂｒｉｏ ｓｐ．）ＮＯ．６３８０。
【請求項２】　紅藻類アマノリ属に属する海藻にビブリオ・エスピー（Ｖｉｂｒｉｏ　ｓｐ．）ＮＯ．６３８０の産生する粗酵素状態の多糖類分解酵素を直接作用させて紅藻類アマノリ属海藻オリゴ糖を製造することを特徴とする紅藻類アマノリ属海藻オリゴ糖の製造方法。」
（以下、本件発明１及び２という。）
　
３−２　異議申立の理由の概要
　異議申立人　小野節子は、下記に示す甲第１号証〜甲第４号証を提出して、訂正前の本件請求項４は甲第１号証に記載された発明と同一であるから、特許法第２９条第１項第３号の規定により、及び請求項１ないし３及び５に係る発明は、甲第１号証〜甲第４号証に記載された発明に基づいて、当業者が容易に発明をすることができたものであるから、特許法第２９条第２項の規定により、特許を受けることができないものである旨、主張している。
　　　　　　　　　　　　　　　　記
（１）甲第１号証：日本水産学会誌、Ｖｏｌ．５６（５）、ｐ．８１９−８２３、１９９０ 
（２）甲第２号証：日本水産学会誌、Ｖｏｌ．５４（２）、ｐ．２７７−２８１、１９８８
（３）甲第３号証：日本水産学会誌、Ｖｏｌ．４７（６）、ｐ．７５３−７６０、１９８１
（４）甲第４号証：日本水産学会誌、Ｖｏｌ．５２（３）、ｐ．５４５−５４８、１９８６
　
３−３　各甲号証記載の発明
　上記甲第１号証には「ポルフィランは福岡県の有明湾で採取された紅藻類アマノリ属海藻スサビノリからハッシドおよびスーらの方法により調製された。」（第８１９頁左欄第２５〜２７行）との記載、「ＡＰ−２株はインデューサーなしでは酵素を産生することはできない。アマノリ属海藻スサビノリからの抽出物はポルフィランと同様に非常によいインデューサーであり、寒天や力ラギーナンよりも優れている。」（第８２１頁左欄第１８行〜右側第２行）との記載、「ポルフィランは分解され、様々なネオアガロオリゴ糖や他のオリゴ糖を形成した。」（第８２２頁左欄第９〜１１行）との記載、及び「分類細菌学のベルギーの判定方法によるとビブリオ属に該当する。」（第８２２頁左欄第２５行〜第８２３頁左欄第１行）との記載がある。
　甲第２号証には「β−１，３−キシラン、β−１，４−マンナンおよびポルフィランは緑藻類イワヅタ、緑藻類ミルおよび紅藻類アマノリ属スサビノリからそれぞれ調製された。」（第２７７頁左欄第２８行〜右欄第３行）との記載、「β−１，３−キシラナーゼによるβ−１，３−キシランの加水分解の時間経過が研究された。酵素はβ−１，３−キシランを分解して、キシロース、キシロビオース、キシロトリオースおよびより大きいオリゴ糖を形成した。」（第２８０頁右欄第２〜６行）との記載、及び「それらの結果はビブリオ・エスピ−ＡＸ−４から得られる酵素がエンド型−β−１，３−キシラナーゼであることを示した。」（第２８０頁右欄第１４〜１５行）との記載がある。
　甲第３号証には、ビブリオ属細菌のＭ−８７、Ｍ−７、Ｍ−８６、Ｍ−８２、Ｍ−８３が、マンナンを分解するβ−マンナーゼ活性を保持することが記載されている。
　甲第４号証には、「アマノリ属海藻はわが国において広く養殖されているが、病原微生物や異常天候による被害もひん繁に報告され、細胞工学的手法による品種改良が期待されている。本属海藻の細胞壁構成多糖はβ−１，４−マンナン、β−１、３−キシラン及びポルフィランである。」（第５４５頁右欄第３〜７行）との記載がある。
　
３−４　判断
（特許法第２９条第１項第３号について）
　訂正前の請求項４に係る発明は削除されたので、同発明に係る異議申立人の主張は採用できない。
（特許法第２９条第２項について）
（本件発明１について）
　本件発明１のビブリオ・エスピーＮｏ．６３８０は、請求項１に記載されているとおり、「炭素源として寒天を用いた場合スサビノリの８割以上の多糖類分解酵素を生産すること」を特徴とするものである。
　これに対して、甲第１号証に記載されているＡＰ−２株は、第８２１頁のＦｉｇ．１［異なる炭化水素でのＡＰ−２株のポルフィラン分解酵素の産生能］によれば、寒天を用いた場合の酵素活性で比較した酵素産生能は、スサビノリの抽出物（The  extract  of  P. yezoensis ）を用いた場合の３割程度にすぎないものである。また、甲第１号証には、上記で摘記したとおり、「ＡＰ−２株はインデューサーなしでは酵素を産生することはできない。アマノリ属海藻スサビノリからの抽出物はポルフィランと同様に非常によいインデューサーであり、寒天や力ラギーナンよりも優れている。」と記載されていることから、甲第１号証が刊行された当時は、寒天を炭素源として用いてビブリオ属細菌を培養しても十分な酵素産生を望めず、むしろ、炭素源として海苔抽出物を用いることが必要であると当業者は認識していたことがわかる。
　このため、炭素源を寒天として用いた場合良好に多糖類分解酵素を生産する本件発明の株の発明が、甲第１号証に記載の発明に基づいて当業者が容易になし得たということはできない。
　さらに、甲第２号証ないし甲第４号証には、いずれも「炭素源として寒天を用いた場合スサビノリの８割以上の多糖類分解酵素を生産すること」について開示するところはなく、また、甲第１号証ないし甲第４号証に記載の事項を組み合わせても、本件発明１に係る特定の菌株を得ることはできない。
　そして、本件発明１は、炭素源として寒天を使用することにより、ジャーファメンターや連続遠心機の管に詰まることなく、酵素の製造を容易にかつ良好に行うことができるという顕著な効果を奏するものである。
　してみれば、本件発明１は、甲第１号証ないし甲第４号証に記載された発明に基づき当業者が容易に発明をすることができたとはいえない。
（本件発明２について）
　上記発明１について述べたとおり、ビブリオ・エスピーＮｏ．６３８０菌株は、甲第１号証ないし甲第４号証には開示されておらず、また甲第１号証ないし甲第４号証に記載の事項を組み合わせても、容易に発明することができないものである。
　しかも、本件発明は、この菌株の産生する粗酵素状態の多糖類分解酵素を直接作用させて、目的とする紅藻類アマノリ属海藻オリゴ糖を製造しているところ、甲第１号証ないし甲第４号証には、たった１つの株から得られた粗酵素状態の多糖類分解酵素でアマノリ属海藻の前処理なしに直接作用させて、多糖を分解し十分なオリゴ糖を得られることについては、開示するところがない。
　したがって、本件発明２が甲第１号証ないし甲第４号証に記載の発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたとはいえない。
　
４．むすび
　以上のとおりであるから、異議申立人の主張する理由及び提出した証拠方法によっては、本件発明１及び２の特許を取り消すことはできない。
　また、他に本件発明１及び２の特許を取り消すべき理由を発見しない。
　よって、結論のとおり決定する。
【異議決定日】
平成１３年６月２５日（２００１．６．２５）
【訂正の要旨】
　訂正の要旨
（１）特許請求の範囲の減縮を目的として、特許請求の範囲に
「【請求項１】　紅藻類の多糖類分解能を有するビブリオ・エスピー（Ｖｉｂｒｉｏ　ｓｐ．）ＮＯ．６３８０。
　【請求項２】　紅藻類アマノリ属に属する海藻にビブリオ属に属する微生物の産生する多糖類分解酵素を作用させて紅藻類アマノリ属海藻オリゴ糖を製造することを特徴とする紅藻類アマノリ属海藻オリゴ糖の製造方法。
　【請求項３】　ビブリオ属に属する微生物が、ビブリオ・エスピー（Ｖｉｂｒｉｏ　ｓｐ．）ＮＯ．６３８０である請求項２記載の紅藻類アマノリ属海藻オリゴ糖の製造方法。
　【請求項４】　ビブリオ属に属し多糖類分解酵素生産能を有する微生物を炭素源として寒天を含有する培地に培養し、培養物から多糖類分解酵素を採取することを特徴とする多糖類分解酵素の製造方法。
　【請求項５】　ビブリオ属に属する微生物が、ビブリオ・エスピー（Ｖｉｂｒｉｏ　ｓｐ．）ＮＯ．６３８０である請求項４記載の紅藻類アマノリ属海藻オリゴ糖の製造方法。」
とあるを、
「【請求項１】　海水由来であって、炭素源として寒天を用いた場合スサビノリの８割以上の多糖類分解酵素を生産することを特徴とする紅藻類の多糖類分解能を有するビブリオ・エスピー（Ｖｉｂｒｉｏ　ｓｐ．）ＮＯ．６３８０。
　【請求項２】　紅藻類アマノリ属に属する海藻にビブリオ・エスピー（Ｖｉｂｒｉｏ　ｓｐ．）ＮＯ．６３８０の産生する粗酵素状態の多糖類分解酵素を直接作用させて紅藻類アマノリ属海藻オリゴ糖を製造することを特徴とする紅藻類アマノリ属海藻オリゴ糖の製造方法。」と訂正する。
（５４）【発明の名称】
紅藻類アマノリ属海藻オリゴ糖の製造法
（５７）【特許請求の範囲】
　【請求項１】　海水由来であって、炭素源として寒天を用いた場合スサビノリの８割以上の多糖類分解酵素を生産することを特徴とする紅藻類の多糖類分解能を有するビブリオ・エスピー（Ｖｉｂｒｉｏ　ｓｐ．）Ｎｏ．６３８０。
　【請求項２】　紅藻類アマノリ属に属する海藻にビブリオ・エスピー（Ｖｉｂｒｉｏ　ｓｐ．）Ｎｏ．６３８０の産生する粗酵素状態の多糖類分解酵素を直接作用させて紅藻類アマノリ属海藻オリゴ糖を製造することを特徴とする紅藻類アマノリ属海藻オリゴ糖の製造方法。
【発明の詳細な説明】
　【０００１】
　【産業上の利用分野】
　本発明は、紅藻類アマノリ属海藻オリゴ糖（以下、海苔オリゴ糖と言う）の製造方法に関し、詳しくは微生物の生産する多糖類分解酵素を用いて紅藻類アマノフ属海藻（以下、単に海苔と言う）由来の多糖類を分解し海苔オリゴ糖を製造する方法に関するものである。さらに、本発明は上記多糖類分解酵素の製造方法に関するものである。
　【０００２】
　【従来の技術】
　近年、健康食品に対する志向が高くなってきたことに伴い、ミネラルやビタミン類を豊富に含んでいる海藻類由来のオリゴ糖、例えば海苔オリゴ糖などを健康食品として利用することが注目され始めている。しかし、海苔オリゴ糖の製造法については特に確立された方法はなく、従来の海苔オリゴ糖の生産は、海苔を熱水およびエタノールで処理することにより、炭水化物の主要成分であるポルフィランなどの硫酸多糖を抽出し、これを酸加水分解してオリゴ糖としていた。しかしながら、海苔からの多糖抽出は時間がかかる割には収量が少なく、海苔オリゴ糖を生産するうえで、かならずしも経済的な方法とは言えないものである。
　【０００３】
　また、海苔から分離した菌の培養においては、一般に炭素源に海苔もしくは海苔から抽出した多糖類を用いている。しかし、この場合海苔は乾燥および粉末化に煩雑な処理が必要であり、しかもジャーファメンターや連続遠心機等の管に海苔粉末が詰まり、大量培養を行うためには非常に困難をきたしている。また、海苔多糖類においても抽出に多大な時間を要し、収量も少ないことなどから、目的の菌株を大量培養することは困難であった。
　【０００４】
　【発明が解決しようとする課題】
　本発明者らは紅藻類アマノリ属に属する海藻を直接酵素的に分解し、紅藻類アマノリ属海藻オリゴ糖を製造すべく鋭意研究し、そのような目的に合致する酵素を効率的に産生する微生物を海水より新たにスクリーニングし、その微生物を用いて紅藻類アマノリ属海藻オリゴ糖を容易に且つ経済的に製造する方法を完成した。
　【０００５】
　また、海苔から分離した微生物の培養においては、一般に炭素源として海苔またはそれから抽出した多糖類を使用しているが、これらの炭素源は前述の通り種々の欠点を有しているので本発明者らは、上記新たにスクリーニングした微生物を培養して多糖類分解酵素を製造するに当たって上記欠点を有しない培養方法を開発し、本発明を完成した。
　【０００６】
　【課題を解決するための手段】
　本発明は、紅藻類アマノリ属に属する海藻にビブリオ属に属する微生物の産生する多糖類分解酵素を作用させて紅藻類アマノリ属海藻オリゴ糖を製造することを特徴とする紅藻類アマノリ属海藻オリゴ糖の製造方法である。さらに、本発明は、ビブリオ属に属し多糖類分解酵素生産能を有する微生物を炭素源として寒天を含有する培地に培養し、培養物から多糖類分解酵素を採取することを特徴とする多糖類分解酵素の製造方法である。
　【０００７】
　以下に、本発明を詳細に説明する。先ず、本発明の海苔オリゴ糖の製造方法で用いる微生物について説明すると、その形態学的性質及び生理学的性質は下記に示す通りである。
菌株の菌学的性質
形態学的性質
生理学的性質
上記表１に示す菌株の性質に基づいて清水らの方法［海洋微生物研究法、学会出版センター、２２８〜２３９（１９８５）］に従って同定を行った結果、上記微生物は発酵型、好塩型、非発光性のグラム陰性菌であるなどの理由によりビブリオ属に属るものであることが判明し、そして、この微生物をビブリオ・エスピー（Ｖｉｂｒｉｏｓｐ．）Ｎｏ．６３８０と命名した。この菌株は工業技術院生命工学工業技術研究所に、ＦＥＲＭ　Ｐ−１１９４８として寄託している。
　【０００８】
　次に、このようにして分離した微生物を培地中で培養し、培地中に多糖類分解酵素を蓄積させこれを培養物から回収すことにより多糖類分解酵素を製造する。この微生物の培養に用いられる培地は炭素源、窒素源及び無機塩類を含有する培地であるが、炭素源としては、従来この分野の微生物に使用している海苔又は海苔由来の多糖類に代えて、海苔の構成多糖であるポルフィラと似た構造（ガラクトースとアンヒドロガラクトースの繰り返し構造）を有している寒天を使用する。これによりジャーファメンターや連続遠心機の管に詰まることもなく、酵素の製造が容易に且つ良好に行うことができる。窒素源としては、クエン酸鉄アンモニウム、塩化アンモニウム等が使用される。無機塩類としては、ＮａＣｌ，ＫＣｌ，ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ，ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ，Ｋ２ＨＰＯ４，等が使用され、緩衝液としてはトリス‐塩酸緩衝液（ｐＨ７．８）等が使用される。また、微生物の培養条件は、温度１９〜２０℃、ｐＨ７．５〜８．０である。
　【０００９】
　このようにして得られる粗酵素状態の多糖類分解酵素は、上記の培養法等により培養して得られるもので、その最適酵素反応条件は次の通りである。
　（１）至適ｐＨ：図１に本酵素の各ｐＨにおける相対活性量を示す。この図から明らかなように、ｐＨ６．０〜７．５の範囲で相対活性量が高く相対活性量が最大になるｐＨは７．０である。従って、至適ｐＨは７．０である。
　【００１０】
　（２）至適温度：図２に本酵素の各温度における相対活性量を示す。この図から明らかなように、温度３５℃相対活性量が最大となる。従って、至適温度は３５℃である。次に、多糖類分解酵素を紅藻類アマノリ属に属する海藻に作用させて海藻オリゴ糖を製造する。
　【００１１】
　上記酵素反応は、０．０５Ｍリン酸ナトリウム緩衝液中で行われ、ｐＨ６．０〜７．５、温度３０℃〜４０℃の範囲で行われる。上記紅藻類アマノリ属に属する海藻としては、スサビノリ、コスジノリ、オニマノリ、クロノリ、ウップルイノリ、マルバアサクサノリ、アサクサノリ、チシマクロノリ等が用いられ、その使用量は反応液に対し１０ｇ／Ｌである。そして、上記酵素の使用量は反応液に対し２００ｕｎｉｔ／Ｌである。
　【００１２】
　酵素処理液からの海苔オリゴ糖の分離、回収は遠心分離法及び限外濾過法により行った。以下、本発明を実施例により具体的に説明する。但し、これら実施例により本発明の技術的範囲が限定されるものではない。
　【００１３】
　【実施例１】
　この実施例ではビブリオ・エスピー（Ｖｉｂｒｉｏ　ｓｐ．）Ｎｏ．６３８０を培養して多糖類分解酵素を製造する方法について説明する。
〔微生物の培養〕
（注）
１）人工海水：塩化ナトリウム　３００ｍＭ
　　　　　　　塩化カリウム　１０ｍＭ
　　　　　　　硫酸マグネシウム（７水和物）
　　　　　　　５０ｍＭ塩化カルシウム（２水塩）１０ｍＭ
２）Ｆｅ　ｓｔｏｃｋ：クエン酸鉄アンモニウム１０ｇ／１００ｍｌ　脱塩水
３）Ｐｉ　ｓｔｏｃｋ：リン酸水素二カリウム（３水和物）７．５ｇ／１００ｍｌ　脱塩水
４）ＮＨ４　ｓｔｏｃｋ：塩化アンモニウム　２０ｇ／１００ｍｌ　脱塩水
　上記組成の培地２００ｍｌに、凍結乾燥保存菌体ビブリオ・エスピーＮｏ．６３８０株（ＦＥＲＭ　Ｐ−１１９４８）を接種し、ｐＨ７．８、温度２０℃で２日間振とう培養した。
〔酵素液の調整〕
　上述の培養液２００ｍｌを４℃の温度で１０，０００ｒｐｍにて１０分間遠心分離して、上澄液１９０ｍｌを得た。この上澄液を多糖類分解酵素とした。
〔多糖類分解酵素の活性〕
　上記酵素液１００μｌと基質であるスサビノリ５ｍｇおよび０．０５Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．０）５００μｌをエッペンドルフチュウブに入れ、３０℃で３０分間反応させた後、沸騰水浴中で１０分間加熱して酵素反応を停止させ、ついで急冷後反応物を遠心分離し、その上澄液中の遊離全糖量をフェノール硫酸法で比色定量し、ガラクトース量として酵素活性を示した。その結果、培養液１ｍｌあたり１．０単位の多糖類分解酵素が生産されていることがわかった。なお、酵素活性は３０℃、１分間に１００μｇの糖をスサビノリから溶出する酵素量を１単位と定義している。
　【００１４】
　【００１５】
　【実施例２】スサビノリ粉末１０ｇを１，０００ｍｌの０．０５Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．０）に溶解後、これに実施例１で得られた多糖類分解酵素２００ｍｌ（２００単位）を加え、３５℃で２時間攪拌しながら反応させた。反応液を４℃の温度で１０，０００ｒｐｍにて１０分間遠心分離して、その上澄液を担体としてＢｉｏ−ｇｅｌ　Ｐ−２（日本バイオラット　ラボラトリーズ（株）の商品名）〔オリゴ糖分画（分画範囲１００〜１８００ダルトン）ゲル濾過担体〕を充填したカラムに加えた。このカラムを０．１Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ４．０）で溶出し、オリゴ糖の溶出パターンを得た。この結果、図３に示すように４種類の大きさの異なる海苔オリゴ糖混合物（全糖量の５５〜６５％）を得た。
　【００１６】
　【実施例３】
　実施例１の培地組成の炭素源をスサビノリの代わりに寒天６ｇ／Ｌを用いる以外は、実施例１の記載と同様の手順で培養を行い、得られた培養液から酵素液１９０ｍｌを調製した。この酵素液について実施例１と同様に酵素活性試験を行った結果、図４に示すように炭素源に寒天を用いた場合も、スサビノリを用いた場合の８割以上の多糖類分解酵素を生産することができた。
　【００１７】
　【発明の効果】
　本発明によれば、海苔から多糖（ポルフィラン）を抽出することなく、海苔に直接微生物の産生する多糖類分解酵素を作用させてオリゴ糖を直接得ることができる。また、前記多糖類分解酵素を市販の寒天を炭素源として用いて容易に生産することができる。
【図面の簡単な説明】
　【図１】
　多糖類分解酵素の各ｐＨにおける相対活性量及び至適ｐＨを示す図である。
　【図２】
　多糖類分解酵素の各温度における相対活性量及び至適温度を示す図である。
　【図３】
　海苔オリゴ糖のカラムクロマトにおける溶出パターンを示す図である。
　【図４】
　炭素源としてスサビノリおよび寒天を用いた場合の多糖類分解酵素の相対活性量を示す図である。