(57)【要約】  本発明はカメリア・シネンシスの抽出物とラプサナ・コムニスの抽出物を含有する組成物に関する。また、本発明は汚染が皮膚に及ぼす影響を排除し、防止するために本発明による組成物を美容で使用することに関する。さらに、本発明は汚染が皮膚に及ぼす影響を排除し、防止するために化粧組成物を調製するためにカメリア・シネンシスとラプサナ・コムニスの抽出物を使用することに関する。最後に、本発明は汚染が皮膚に及ぼす影響を排除し、防止するための美容ケア方法であって、本発明による組成物の適正量が皮膚に塗布されることを特徴とする美容ケア方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
カメリア・シネンシス(Camellia sinensis)の抽出物とラプサナ・コムニス(Lapsana communis)の抽出物を含有することを特徴とする化粧組成物。
【請求項２】
請求項１に記載の化粧組成物において、カメリア・シネンシス抽出物はこの植物の葉のハイドログリコール抽出物であることを特徴とする化粧組成物。
【請求項３】
請求項１または２に記載の化粧組成物において、ラプサナ・コムニス抽出物はこの植物の気中部分のハイドログリコール抽出物であることを特徴とする化粧組成物。
【請求項４】
請求項１乃至３のいずれか１つに記載の化粧組成物において、
重量比で約０．０１−５％、好ましくは重量比で０．０１−０．５％、最も好ましくは重量比で０．０１−０．０５％のカメリア・シネンシス抽出物および
重量比で約０．０１−５％、好ましくは重量比で０．０１−０．５％、最も好ましくは０．０１−０．０５％のラプサナ・コムニス抽出物を含有することを特徴とする化粧組成物。
【請求項５】
請求項１乃至４のいずれか１つに記載の化粧組成物において、刺激緩和剤、着色剤、薄膜形成剤、表面活性剤、香料、防腐剤、乳剤、オイル、グリコール、ビタミンおよびＵＶフィルタなどの１または２以上の調剤または添加剤も含むことを特徴とする化粧組成物。
【請求項６】
汚染が皮膚に及ぼす影響を排除し、防止するために請求項１乃至５に記載の組成物の美容使用。
【請求項７】
汚染が皮膚に及ぼす影響を排除し、防止するための化粧組成物を調製するために請求項１乃至４に記載のカメリア・シネンシスとラプサナ・コムニスの抽出物の使用。
【請求項８】
汚染が皮膚に及ぼす影響を排除し、防止するための美容ケア方法であって、請求項１乃至５のいずれか１つに記載の組成物の適正量が皮膚に塗布されることを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、大気汚染が皮膚に及ぼす影響を排除し、防止できる新規の化粧組成物であって、２つの植物抽出物、すなわち、カメリア・シネンシス(Camellia sinensis)とラプサナ・コムニス(Lapsana communis)の抽出物を含有する化粧組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
表面積が約２ｍ２である皮膚は人体の最大の器官である。皮膚は生命にとって重要であり、人体とその周辺の間の真の境界として、相互作用の防壁となっている。皮膚は、侵入に対して適応性と反作用に対する大きな能力を有している。また、皮膚は、環境からの汚染を吸収し、皮膚に直接的有毒性の影響を及ぼす物質を通過させる主要な場所でもある。
【０００３】
ピュアな（汚染されていない）空気は、窒素７８％、酸素２１％、アルゴン０．０９％、水蒸気０．１％、および二酸化炭素、水素およびオゾンを含む、他の多少の希ガスの混合物である。大気汚染は、その成分の変質により、または有毒物質の添加によりピュアな空気が変質したものと定義されている。もっと簡単に言うと、現在確認されている汚染物質は、基本的に工業、加熱および自動車の走行によって発生していると言うことができる。これらは、通常、次のように７つの化学物質族に分類されている。
【０００４】
−  オゾンや窒素酸化物などの酸化剤は刺激物質であり、遊離基(free radical)の生成源になっている。
【０００５】
−  ダストは、時には多環式炭化水素(polycyclic hydrocarbons)と結合している浮遊粒子からなっている。これらの有害な役割は空気の温度と相対湿度によって変化している。酸性粒子は刺激性があり、組織の加湿と酸素添加の減少が観察されている。
【０００６】
−  有機化学生成物は発がん性物質(carcinogens)であり、これらは産業廃棄物と自動車の燃焼過程に起因している。
【０００７】
−  一酸化炭素は組織の低酸素症(hypoxia)を発生しており、その８０％は自動車に起因している。
【０００８】
−  炭化水素と溶剤は自動車からの汚染の５０%を占めている。これらは毒性、刺激性、発がん性(carcinogenic)および突然変異誘発性(mutagenic)である。光下に置かれると、これらは窒素酸化物と反応してオゾンを発生している。
【０００９】
−  二酸化硫黄はオイルと石炭の燃焼生成物の１つである。これはハイドロ脂質膜(hydrolipidic film)の変質と刺激性の原因となっている。
【００１０】
−  鉛、亜鉛、アルミニウム、水銀などの金属は、酵素反応を冒すことによって細胞代謝に干渉する可能性がある。これらはＤＮＡと細胞脂質の病変と共に酸化損傷の原因になっている。
【００１１】
これらの汚染物質のいずれの場合も、リスクはその濃度、露出持続時間、相互の関連性、特に、主体の病変素質(predisposition)に応じて変化している。これらは相互間の作用が相乗効果になっている。
【００１２】
汚染が皮膚に及ぼす影響は変化している。皮膚ｐＨの酸性化、水分の横断表皮損失(transepidermal loss)増加に伴う加湿減少、表皮落屑(desquamation)の増加、薄層角質(stratum corneum)の柔軟性の減少、遊離基の作用に起因する表面脂質の変質、細胞エネルギ代謝の減少が観察されている。
【００１３】
これらの侵入の繰り返しは炎症過程を開始し、我慢できない反応の基因になっている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
従って、大気汚染が皮膚に及ぼす影響を排除し、防止する能力を持つ化粧組成物はこれらの種々の現象を排除できることが要求されている。
【００１５】
本件出願人が行なった研究で明らかになったことは、カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニスの２植物抽出物を結合すると、汚染が皮膚に及ぼす影響から保護する効果が得られることである。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
従って、本発明は、特に、カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニスの抽出物を含有する組成物を提供することである。
【００１７】
カメリア・シネンシスはホワイトティー(white tea)とも呼ばれ、南東アジアの固有種であり、本発明による組成物に使用されている種類のものはPai Mu Tanである。これはツバキ(Theaceae)科に属し、これもグリーンティーとブラックティーを含んでいる。これらは調製の仕方が他の種類と異なっており、ポリフェノールの含有量を高く保つ操作は最小限に制限されている。
【００１８】
本発明による組成物で使用されているラプサナ・コムニスの抽出物は、ホワイトティーの葉のハイドログリコール抽出によって得られている。これにより、香りの特性を持つ半透明で、ダークオレンジの溶液が得られる。この溶液は総ポリフェノール中とＰＣＯ（プロアントシアニディン・オリゴマー(proanthocyanidin oligomers)中で滴定される。これは、
−  乾燥物質：２−４％
−  ｐＨ：５．３−７．３
−  総ポリフェノールの割合：＞５ｇ／１没食子酸(gallic acid)等価物
−  ＰＣＯの割合：２．５ｇ／カテキン等価物
というような分析特性を有している。
【００１９】
キク(Asteraceae)科に属するラプサナ・コムニスは、非常に普通の１年生直物であり、大気汚染を受けやすい道路脇や他のロケーションで成長している。これは需要の少ない植物であり、非常に丈夫である。
【００２０】
本発明による組成物で使用されているラプサナ・コムニスの抽出物は、この植物の気中部分のハイドログリコール抽出によって得られている。このようにすると、匂い特性を持つクリアで、褐色の液体が得られ、これは、
−  水分含有量：１８−２６％
−  ｐＨ：６−８
−  濃度：１．０５５−１．０７５
−  屈折率：１．４２０−１．４４０
というような分析特性を有している。
【００２１】
本発明による組成物は、
−  重量比で約０．０１−５％、好ましくは重量比で０．０１−０．５％、最も好ましくは重量比で０．０１−０．０５％のカメリア・シネンシス抽出物および
−  重量比で約０．０１−５％、好ましくは重量比で０．０１−０．５％、最も好ましくは０．０１−０．０５％のラプサナ・コムニス抽出物
を含有している。
【００２２】
本発明による組成物は、これらに限定されないが、例を挙げると、刺激緩和剤(demulcent)、着色剤、薄膜形成剤、表面活性剤、香料、保存剤、乳化剤、オイル、グリコール、ビタミンＥなどのビタミン、ＵＶフィルタなどのように、化粧や皮膚科(dermatological)の組成物で普通に、従来から使用されている１または２以上の調剤または添加剤を含めることもできる。化粧品分野の知識があれば、この分野の精通者は、望みの特性に応じてどの調剤を、どの量だけ本発明の組成物に添加すべきかが分かるはずである。
【発明の効果】
【００２３】
本発明による組成物は、美容術や皮膚科分野の取引の精通者に公知の形体にすることができ、この生薬(galenic)の唯一の制約は顔面またはボディの皮膚に適用することだけである。
【００２４】
本発明による組成物の利点は、ゲル、ローション、クリーム、乳液、ミルク、スプレーなどの形体になっていることである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２５】
本発明は、汚染が皮膚に及ぼす影響を排除し、防止するために本発明による組成物を美容で使用することに関する。
【００２６】
また、本発明は、汚染が皮膚に及ぼす影響を排除し、防止するための化粧組成物を調製するためにカメリア・シネンシスとラプサナ・コムニスの抽出物を使用することに関する。
【００２７】
最後に、本発明は、汚染が皮膚に及ぼす影響を排除し、防止するための美容ケア方法であって、本発明による組成物の適正量が皮膚に塗布されることを特徴とする方法に関する。
【００２８】
以下の例は単なる例示であり、本発明の範囲を限定するものではない。これらの例は、一方では、カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物が培養中の人体ケラチン生成細胞に及ぼすアンチラジカル効果(antiradical effect)の評価とこの同じ複合物がエネルギ代謝に及ぼす効果の評価に関し、他方では、本発明に含まれる組成物の例に関する。
【００２９】
これらの例は添付図面に示されている。
【実施例】
【００３０】
Ｉ．カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物が培養中の人体ケラチン生成細胞に及ぼす効果
Ａ．材料と方法
材料
ケラチン生成細胞培養は、環状切除期間に収集され、インシュリン、ＥＧＦおよび下垂体抽出物(pituitary extract)で補充されたＫＧＭ２媒質(Clonetics)中で倍増された人体包皮細胞(human foreskin cells)から得られている。分析試験は種々の実験の再現性を保証するために２回目と４回目の培養(passage)の間にケラチン生成細胞に対して実施された。
【００３１】
排気ガスはモータによって発生させた。これらのガスは培養中の人体ケラチン生成細胞に２時間接触させた。これらの細胞は研究対象の生成物と共に、あるいは生成物なしでさらに２２時間培養された。
【００３２】
細胞毒性の研究
このステップは、Formazanブルー分析試験（ＭＴＴ）を使用して実施された。研究対象の生成物の存在下または不存在下で、異なる濃度で２４時間細胞培養したあと、細胞を収めているくぼみ (well)をゆっくりひっくり返して空にしたあと、細胞層は培養媒質でリンスされた。２００μlの希釈ＭＴＴ溶液はすべてのくぼみに分散された。次に、培養皿(plate)は２−４時間３７℃で培養された。Formazanブルー結晶の形成は、得られたデセドロゲナーゼ(succinate dehydrogenases)に逆比例する量で観察された。そのあと、くぼみはゆっくりひっくり返すことによって再び空にされた。そのあと、細胞は分離され(lyse)、Formazanブルー結晶は、２００μlのジメチルスルホキシド（ＤＳＭＯ）の添加によって分解された。撹拌によってカラーを均質化したあと、培養皿は分光光度計を使用して５７０ｎｍで観察された。
【００３３】
分析試験は、カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物と細胞とを２４時間接触させたあと実施された。
【００３４】
バッチ１：どの生成物も受け入れない負のコントロール
バッチ２：排気ガスに露出された細胞
バッチ３：排気ガスに露出されたあと、複合物（０．０１％）で処理された細胞
バッチ４：排気ガスに露出されたあと、複合物（０．０２５％）で処理された細胞
バッチ５：排気ガスに露出されたあと、複合物（０．０５％）で処理された細胞。
【００３５】
３．アンチラジカル活動の研究
分析試験はカメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物と細胞とを２４時間接触させたあと３通りに実施された。
【００３６】
バッチの説明
バッチ１：どの生成物も受け入れない負のコントロール
バッチ２：排気ガスに露出された細胞
バッチ３：排気ガスに露出されたあと、複合物（０．０１％）で処理された細胞
バッチ４：排気ガスに露出されたあと、複合物（０．０２５％）で処理された細胞
バッチ５：排気ガスに露出されたあと、複合物（０．０５％）で処理された細胞。
【００３７】
ａ）マロンジアルデヒド（ＭＤＡ）の抽出
生成物と細胞間を２４時間接触させたあと、細胞は、
−  ＮａＣｌ０．１Ｍ、ＥＤＴＡ２０ｍＭを含有する２５０μlのＴｒｉｓ緩衝剤５０ｍＭ、ｐＨ８
−  ７％のＳＤＳ  ２５μl
−  ＨＣ１  ３００μl（０．１Ｎ）
−  水中１％のホスホタングステン酸(phosphotangusten acid) ３８μl
−  水中０．６７％のチオバルビゾール酸(thiobarbituric acid)  ３００μl
の中で懸濁に戻された。
【００３８】
５０℃の暗室で１時間培養し、アイス冷却水で冷却したあと、ｎ−ブタノール３００ｍlは各チューブに添加された。これらは１０，０００ｇと０℃で１０分間遠心分離された。上位相(top phase)はＭＤＡを滴定するために回復された。
【００３９】
ａ）マロンジアルデヒド(malondialdehyde)（ＭＤＡ）の滴定
ＭＤＡは、ＨＰＬＣによってＭＤＡ−ＴＢＡを分離したあと蛍光を測定することによって滴定された
−  Ｂｉｓｃｈｏｆｆポンプ型式２．２００
−  自動アルコールインジェクタ型式：７８８オートサンプラ
−  ＵｌｔｒａｓｅｐＣ１８（３０ｃｍ  ｘ  ０．１８ｃｍ）カラム、多孔性６ｍｍ
−  蛍光検出器、Ｊａｓｃｏ  ８２１−ＦＩ
蛍光検出は、５１５ｎｍで励起し、５５３ｎｍで放出することによって実施された。使用された溶離剤(eluent)はメタノール：水、４０：６０（ｖ／ｖ）でなり、ｐＨはＫＯＨ  １Ｍを使用して調整された。
【００４０】
定量化は、ＩＣＳソフトウェアアプリケーション（Ｐｉｃ３）（Instrumentation, Consommable Service）を使用して、サンプル（０．１２５、０．２５および１ｎＭ）として扱われた標準を用いて行なわれた。
【００４１】
Ｂ．結果
１．細胞毒性の研究
このステップの目的は、カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物で処理したあとの排気ガスが培養中の人体ケラチン生成細胞に及ぼす細胞毒性効果の可逆性を見つけることであった。この研究は、ＭＴＴ分析試験を使用して細胞生存能力を判断することによって行なわれた。それぞれ０．０２５％と０．０５%の濃度でケラチン生成細胞と共に培養されたカメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物は、排気ガスによって誘起された細胞有毒性の可逆性に顕著な効果があった。このように細胞有毒性を抑止すると、細胞生存能力はそれぞれ１６％および２７％増加した（図１）。
【００４２】
２．アンチラジカル活動の研究
得られた結果は、カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物（それぞれ０．０１、０．０２５および０．０５%の濃度でテストされた）は、排気ガスが原因のリポ過酸化(lipoperoxidation)に対して相当の保護を行なうことを示している。ＭＤＡ発生の減少率はそれぞれー１７、−２７およびー２７%である（図２）。
【００４３】
３．結論
選択した実験条件では、カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物は、排気ガスによって誘起される細胞有毒性とプロラジカル活動(pro-radical activity)を可逆にすることが、２４時間の接触後培養中のケラチン生成細胞に効果があるようである。
【００４４】
確かに、ＭＤＡ滴定は、０．０１、０．０２５および０．０５％の濃度で研究されたカメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物が排気ガスを原因とするリポ過酸化に対して人体ケラチン生成細胞のために相当の保護を行なうことを示している。ＭＤＡ発生の減少率は−１７、−２７および−３４％である。
【００４５】
結論として、カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物は、排気ガスによって誘起された遊離基に対して相当のアンチラジカル効果がある。
【００４６】
ＩＩ．カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物がエネルギ代謝に及ぼす効果の評価
Ａ．材料と方法
１．材料
ケラチン生成細胞培養は、環状切除期間に収集され、インシュリン、ＥＧＦおよび下垂体抽出物で補充されたＫＧＭ２媒質(Clonetics)中で倍増された人体包皮細胞から得られた。分析試験は種々の実験の再現性を保証するために２回目と４回目の培養(passage)の間にケラチン生成細胞に対して実施された。
【００４７】
排気ガスはモータによって発生させた。細胞は２時間排気ガスに接触させた。これらの細胞は研究対象の生成物と共に、あるいは生成物なしでさらに２２時間培養された。
【００４８】
２．カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物が呼吸レート（１００万細胞当たりおよび１分当たりのピコアトム数の酸素の消費）に及ぼす効果の研究
この分析試験は、
−  グルコース存在下の非浸透細胞における基底細胞呼吸レートに及ぼす効果
−  ピルピン酸塩−リンゴ酸塩呼吸培養基(substrate)の存在下の浸透細胞のミトコンドリア呼吸レートに及ぼす効果
という２つの異なる条件下で実施された。
【００４９】
この分析試験はトリプシンで解離された培養中のケラチン生成細胞について実施された。培養中の５００万−１千万のケラチン生成細胞は、グルコース（基底呼吸）またはピルピン酸塩−リンゴ酸塩（ミトコンドリア呼吸）を含有する３０℃の１ｍl媒質の中で懸濁状態に置かれた。呼吸はリアルタイムでモニタされ、１分当たりと１０６細胞当たり消費された酸素のピコアトム数で示されている。異なる量の生成物をオキシグラフのタンクに添加すると、呼吸の刺激または抑止の可能性があることが分かった。
【００５０】
培養媒質の中で解離された酸素の量はＣｌａｒｋ電極を使用して求められた。テフロン（登録商標）薄膜に分散された酸素は−０．８ボルトの分極プラチナカソードで減少している。これらの条件下で、このカソードとシルバアノード間を通る電流は溶液中の酸素濃度に比例している。
【００５１】
イオンブリッジはＫＣ１の半飽和溶液によって得られた。測定はマイクロコンピュータで行なわれ、処理された。
【００５２】
バッチの説明：
バッチ１：どの生成物も受け入れない負のコントロール
バッチ２：排気ガスに露出された細胞
バッチ３：排気ガスに露出されたあと、複合物（０．０１％）で処理された細胞
バッチ４：排気ガスに露出されたあと、複合物（０．０２５％）で処理された細胞
バッチ５：排気ガスに露出されたあと、複合物（０．０５％）で処理された細胞。
【００５３】
分析試験は、生成物−カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物−と細胞を２０分間接触させたあと実施された。
【００５４】
３．生成物が培養中のケラチン生成細胞の基底およびミトコンドリアＡＴＰ合成に及ぼす効果の研究
この分析試験の目的は、カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物が培養中のケラチン生成細胞の基底およびミトコンドリアＡＴＰ合成レートに及ぼす効果を評価することである。これは、ルシフェリン(luciferin)／ルシフェラーゼ(luciferase)キットを使用して生物発光(bioluminescence)によって測定された。
【００５５】
種々の部分標本の中の新たに合成された基底ＡＴＰの量は、次に示すＡＴＰ消費反応期間に放出された光によって測定された
ルシフェラーゼ
ＡＴＰ＋ルシフェリン−−−−−−−＞オキシルシフェリン+AMP+PPI+CO2+hv
Ｍｇ２＋
この反応期間に放出された光の強度は、Boehringer Mannheim提供のＡＴＰモニタリング試薬（ＡＴＰ生物発光分析試験キットＨＳ  ＩＩ）でルミノメータを使用して測定された。このデバイスは反応期間に放出された光をＲＬＵ（相対輝度単位）に変換された。測定されたＲＬＵは標準ＡＴＰスケールに従ってＡＴＰのモル数に変換された。
【００５６】
ＡＴＰ合成レートはモル数／分／１０６細胞で示されている。
【００５７】
培養中のケラチン生成細胞はＡＤＭ培養媒質(Clonetics)の中で１回のラン当たり１０６のレートでＣＯ２培養器において培養された。
【００５８】
処理は、所望の濃度のカメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物をオキシグラフのタンク内の懸濁細胞に直接に塗布することによって行なわれた。１０６細胞／ｍlの濃度の細胞は、サーモスタットを３０℃にセットし、撹拌されたオキシグラフのタンクにおいて「呼吸緩衝剤(respiration buffer)」（Hanks-Hepesグルコース２０ｍＭ）の中で懸濁状態に置かれた。細胞はディジトニン(digitonin)を使用して浸透された。呼吸培養基（ピルピン酸塩１０ｎＭおよびリンゴ酸塩１０ｎＭ）を添加して、酸素消費レートが観察された（Chanceによるステート２）。異なる量の生成物（最終濃度：０．０１、０．０２５および０．０５％）を一定間隔でオキシグラフのタンクに添加しあと、１つの部分標本がオキシグラフのタンクから採集され、そのＡＴＰを上述した方法に従って滴定した。従って、異なる量の生成物をオキシグラフのタンクに添加すると、ＡＴＰ合成の活性化または抑止の可能性を知ることができる。
【００５９】
バッチの説明
バッチ１：どの生成物も受け入れない負のコントロール
バッチ２：排気ガスに露出された細胞
バッチ３：排気ガスに露出されたあと、複合物（０．０１％）で処理された細胞
バッチ４：排気ガスに露出されたあと、複合物（０．０２５％）で処理された細胞
バッチ５：排気ガスに露出されたあと、複合物（０．０５％）で処理された細胞。
【００６０】
Ｂ．結果
異なる投与量の複合物が培養中のケラチン生成細胞の呼吸レート（酸素消費量）に及ぼす効果の研究
この分析試験は２つの異なる実験条件下で実施された。その結果は１００万細胞当たりと１分当たりの酸素のピコアトム数で示されている。
【００６１】
以前に排気ガスに露出されたケラチン生成細胞と共にそれぞれ０．０１、０．０２５および０．０５%の濃度で培養されたカメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物は、研究対象の濃度で排気ガスに相当の効果をもたらしている。基底呼吸をこのように刺激すると、それぞれ１４、２４および３４％のように酸素消費量の大幅な増加が得られた（図３）。
【００６２】
２．複合物がミトコンドリア呼吸レートに及ぼす効果
この分析試験は、ピルピン酸塩・リンゴ酸塩の培養基の存在下で浸透細胞について実施された。
【００６３】
以前に排気ガスに露出されたケラチン生成細胞と共に種々の濃度で培養されたカメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物は、０．０２５と０．０５％の濃度で酸素消費レートに相当の効果をもたらしている。ミトコンドリア呼吸をこのように刺激すると、それぞれ１９および２４％のように酸素消費量の大幅な増加が得られた（図４）。
【００６４】
３．異なる投与量の複合物が培養中のケラチン生成細胞の基底およびミトコンドリアＡＴＰ合成に及ぼす効果
この分析試験は、２つの異なる実験条件下で実施された。その結果は１分当たりと１００万細胞当たりのモル数で示されている。
【００６５】
ａ）細胞基底ＡＴＰ合成に及ぼす効果
この分析試験はグルコース存在下で非浸透全細胞について実施された。
【００６６】
以前に排気ガスに露出されたケラチン生成細胞と共に種々の濃度で培養されたカメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物は、０．０２５％と０．０５％の濃度で基底ＡＴＰ合成レートに相当の効果をもたらしている。基底ＡＴＰ合成レートはそれぞれ２３％および２９%だけ増加した（図５）。
【００６７】
ｂ）細胞ミトコンドリアＡＴＰ合成のレートに及ぼす効果
この分析試験はピルピン酸塩・リンゴ酸塩の存在下で浸透全細胞について実施された。
【００６８】
以前に排気ガスに露出されたケラチン生成細胞と共に種々の濃度で培養されたカメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物は、０．０２５％と０．０５％の濃度でミトコンドリアＡＴＰ合成レートに相当の効果をもたらしている。
【００６９】
ミトコンドリアＡＴＰ合成レートはそれぞれ１９％と２９％だけ増加した（図６）。
【００７０】
ＩＩＩ．得られた結果に関する結論
実験条件の下で、得られた結果に鑑みて、カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物は次のような効果をもたらしている。
【００７１】
−  排気ガスによって誘起された細胞有毒性の可逆性に及ぼす相当の効果。これはカメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物の濃度が０．０２５％と０．０５％であるときそれぞれ１６％と２７%である（図１）。
【００７２】
−  基底呼吸レートに対する相当の効果。これは基底呼吸レートに及ぼす相当の効果。これはカメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物の濃度が０．０２５％と０．０５％であるときそれぞれ２４％と３４%である（図３）。
【００７３】
−  ミトコンドリア呼吸レートに及ぼす相当の効果。これはカメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物の濃度が０．０２５％と０．０５％であるときそれぞれ１９％と２４%である（図４）。
【００７４】
−  基底ＡＴＰ合成レートに及ぼす相当の効果。これはカメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物の濃度が０．０２５％と０．０５％であるときそれぞれ２３％と２９%である（図５）。
【００７５】
−  ミトコンドリアＡＴＰ合成レートに対する相当の効果。これはカメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物の濃度が０．０２５％と０．０５％であるときそれぞれ１９％と２９%である（図６）。
【００７６】
以上から注目されるように、驚くべきことは、カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物が非常に低濃度で活性化され、このことは２抽出物間の相乗効果を示していることである。
【００７７】
ＩＶ．本発明による組成物の例
Ａ．  汚染防止ゲルクリーム
脱塩水                                          ｑｓ  １００
PEMULEN TR1                                           ０．５
グリセリン                                            ５．０
SEPIGEL 305                                           １．０
カメリア・シネンシス抽出物                            ０．０５
ラプサナ・コムニス抽出物                              ０．０５
ISONONYL ISONONANOATE                                 ７．０
C12 C15アルキルベンゾエート(ALKYL BENZOATE)          ３．０
シリコーンオイル                                      ２．０
水酸化ナトリウム                                      ０．２
香料                                                  ０．３
着色剤（１％）                                        ０．１２
保存剤                                                １．０
Ｂ．汚染防止クリーム
脱塩水                                        ｑｓ    １００
CATEARYL GLUCOSIDE                                    ５．０
トリグリセリド  ＣＢ−Ｃ１０                          １０
シリコーンオイル                                      ２．０
揮発性シリコーン                                      ５．０
CARBOMER                                              ０．２
グリセリン                                            ５．０
カメリア・シネンシス抽出物                            ０．０５
ラプサナ・コムニス抽出物                              ０．０５
香料                                                  ０．３
保存剤                                                １．０
【図面の簡単な説明】
【００７８】
【図１】排気ガスが培養中のケラチン生成細胞に及ぼす細菌毒性影響の可逆性にカメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物（ＣＬＡＬＡＭＰ複合物）が及ぼす効果を示す図であり、カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物は０．０１％、０．０２５％および０．０５％でテストされている。
【図２】以前に排気ガスに露出された培養中のケラチン生成細胞におけるリポ過酸化マーカであるマロンジアルデヒド(malondialdehyde − MDA)の測定によって、カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物（０．０１％、０．０２５％および０．０５％でテストされたＣＬＡＬＡＭＰ複合物）のアンチラジカル効果を示す図である。
【図３】カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物（０．０１％、０．０２５％および０．０５％でテストされたＣＬＡＬＡＭＰ複合物）が以前に排気ガスに露出された培養中のケラチン生成細胞の呼吸レートに及ぼす効果を示す図であり、その結果は１００万細胞当たりと１分当たりの酸素のピコアトム数(picoatoms)で示されている。
【図４】カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物（０．０１％、０．０２５％および０．０５％でテストされたＣＬＡＬＡＭＰ複合物）が以前に排気ガスに露出された培養中のケラチン生成細胞のピルピン酸塩・リンゴ酸塩の存在下のミトコンドリア呼吸レートに及ぼす効果を示す図であり、その結果は１００万細胞当たりと１分当たりの酸素のピコアトム数(picoatoms)で示されている。
【図５】カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物（０．０１％、０．０２５％および０．０５％でテストされたＣＬＡＬＡＭＰ複合物）が以前に排気ガスに露出された培養中のケラチン生成細胞の細胞基底ＡＴＰ合成に及ぼす効果を示す図であり、その結果は１００万細胞当たりと１分当たりのモル数で示されている。
【図６】カメリア・シネンシスとラプサナ・コムニス複合物（０．０１％、０．０２５％および０．０５％でテストされたＣＬＡＬＡＭＰ複合物）が以前に排気ガスに露出された培養中のケラチン生成細胞の細胞基底ミトコンドリアＡＴＰ合成レートに及ぼす効果を示す図であり、その結果は１００万細胞当たりと１分当たりのモル数で示されている。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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