【事件の表示】
　特許第２９００２３８号「天然メナキノン−７高含量脂質」の請求項１ないし１３に係る特許に対する特許異議の申立てについて、次のとおり決定する。
【結　論】
　訂正を認める。
　特許第２９００２３８号の請求項１に係る特許を維持する。
【理　由】
I　手続の経緯
　本件特許第２９００２３８号発明は、平成７年７月７日（優先権主張、平成６年７月７日、日本国）に特許出願され、平成１１年３月１９日に特許権の設定の登録がなされ、その後、日清製油株式会社により特許異議の申立てがあり、取消理由の通知がなされ、その指定期間内である平成１２年９月１２日に訂正請求（後日取下げ）がなされ、再度の取消理由の通知がなされ、その指定期間内である平成１３年２月１９日に訂正請求がなされたものである。
II　訂正の適否についての判断
１　訂正の内容
ア　訂正事項ａ
　訂正前の請求項１ないし１３を、「【［請求項１】枯草菌で発酵した食品素材より抽出した天然メナキノン−７を２００ｐｐｍ以上含有してなる脂質を主成分とする、骨粗鬆症の予防および／または治療用組成物。」と訂正する。
イ　訂正事項ｂ
　上記特許請求の範囲の訂正に伴い、該訂正との整合を図るために、発明の詳細な説明の欄の該当箇所を訂正する。
ウ　訂正事項ｃ
　明細書の段落番号【００２２】の実施例３を削除するとともに、以下の実施例の番号を繰り上げるものである。
２　訂正の目的の適否、新規事項の有無及び拡張・変更の存否
　訂正事項ａは、特許請求の範囲の減縮を目的とする明細書の訂正に該当し、訂正事項ｂ、ｃは、特許請求の範囲の訂正に伴い、該訂正との整合を図るものであるから、明りょうでない記載の釈明を目的とする明細書の訂正に該当するものであり、いずれも、新規事項の追加には該当せず、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものではない。
３　独立特許要件の判断
（１）本件発明
　訂正後の請求項１に係る発明（以下「本件発明」という。）は、訂正明細書の特許請求の範囲の請求項１に記載された事項により特定される次のとおりのものである。
「【［請求項１】枯草菌で発酵した食品素材より抽出した天然メナキノン−７を２００ｐｐｍ以上含有してなる脂質を主成分とする、骨粗鬆症の予防および／または治療用組成物。」
（２）引用刊行物に記載された事項
　刊行物１（ビタミン６２巻８号（８月）１９８８、３９３〜３９８頁、甲第１号証）には、糸引き納豆からビタミンＫ類のメナキノン−７（ＭＫ−７）を抽出するして８，６３６ｎｇ／ｇの高濃度で得られることが記載されている（３９６〜３９８頁参照。）。
  刊行物２(科学技術庁資料調査会編・三訂日本食品標準成分表、昭和３８年、甲第２号証）には、１００ｇの納豆中に１０ｇの脂質が含まれていることが記載されている。
　刊行物３（特開平５−１５５８０３号公報、甲第３号証）には「植物油脂の精製工程で副生するビタミンＫを含んだ脱臭留出物をアルコールにて抽出し、得られた抽出液を活性炭で処理することを特徴とする天然ビタミン濃縮物の製造方法。」（特許請求の範囲請求項１）、「天然ビタミンＫの濃縮法としては、従来、蒸留法、溶剤分別法、カラムクロマトグラフィー法等が知られている。」（２頁１欄５０行〜２欄２行）と記載され、具体的に、その実施例１には、濃度２１０５ｍｇ／ｋｇの天然ビタミンＫ濃縮物が得られている。
　刊行物４（麦島与外１名著「油脂・蝋」昭和４５年４月３０日、日刊工業新聞社、１４０〜１４５頁、甲第４号証）には、圧搾により大豆などから油脂を得ることが記載されている（１４１頁末行〜１４２頁３行参照。）。
　刊行物５（臨床評価２０巻１号１９９２、４５〜１００頁、甲第５号証）には「ビタミンＫ２（メナテトレノン）はFig.１の化学構造をもち血液凝固障害治療薬としてすでに広く用いられている。ビタミンＫあるいはＫ２の骨代謝疾患治療薬としての可能性を示唆する内外の報告があったが、骨粗鬆症に対する検討を実際に臨床レベルで行ったのは富田らおよびわれわれであった。すなわちわれわれは１９８３年から１９８５年にかけて・・・骨粗鬆症に対する治療効果を検討した。・・・
　
　　　　　　　　　　　　　　Ｃ３１Ｈ４０Ｏ２：分子量４４４．６６
　　Fig.1　Chemical  structure  of  menatetrenone         」（４７頁左欄１５行〜右欄下から３４行）、「以上の結果、１日用量４５mgのEa −0167は・・・明らかに高い骨量改善効果があった。すなわちEa−0167は閉経後および老人性骨粗鬆症に対し、安全で有効な治療薬であることが示唆された。」（１００頁左欄９〜１３行）と記載されている。
　刊行物６（中野政弘編「発酵食品」昭和６１年３月１０日、株式会社光琳、１１６〜１２１頁、甲第６号証）には、納豆の製造方法が記載されている。
　刊行物７（J.Ferment.Technol.,Vol.62,NO.4,p.321-327,1984、甲第７号証）には、メナキノンを膜処理して精製することが記載されている。
（３）対比・判断
　本件発明と刊行物５に記載の発明を対比すると、刊行物５には、ビタミンＫ２（メナテトレノン）が骨粗鬆症に対する治療薬であることが示唆されており、該メナテトレノンはビタミンＫ２類のメナキノン−４に相当するから、両者は、ビタミンＫ２類の化合物を主成分とする骨粗鬆症の予防および／または治療用組成物である点で一致し、ただ、本件発明が枯草菌で発酵した食品素材より抽出した天然メナキノン−７を２００ｐｐｍ以上含有してなる脂質を使用するものであるのに対し、刊行物５記載の発明はビタミンＫ２類のメナキノン−４を使用している点で相違している。
　そこで、上記相違点について検討する。
　刊行物１ないし４、６、７には、メナキノン−７を骨粗鬆症の治療薬として使用することについて示唆されていないのみならず、枯草菌で発酵した食品素材より抽出した天然メナキノン−７を骨粗鬆症の治療薬として使用することについて何らの示唆もされていないから、本件発明は、刊行物１ないし７に記載された発明を併せ考えても、当業者が容易に想到し得たものであるとはいえない。
（４）むすび
　以上のとおりであるから、本件訂正は、特許法第１２０条の４第２項及び同条第３項で準用する第１２６条第２項から４項の規定に適合するので、当該訂正を認める。
III　異議申立てについての判断
１　異議申立ての理由の概要
　異議申立人は、甲第１ないし７号証を提示し、訂正前の請求項１ないし４、６、８ないし１２に係る発明は、甲第１ないし３、４、７号証に記載された発明である、また、訂正前の請求項１ないし１３に係る発明は、甲第１ないし７号証に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものであるから、訂正前の請求項１ないし１３に係る発明についての特許は、特許法第２９条第１項、第２項の規定に違反してされたものであり、取り消されるべきである旨主張している。
２　判断
　訂正明細書により訂正前の請求項１ないし１２が削除され、また、訂正後の請求項１については、上記II3に述べたとおりであるから、異議申立人の主張はいずれも採用できない。
３　むすび
　以上のとおり、特許異議の申立ての理由及び証拠によっては、本件発明に係る特許を取り消すことはできない。
　また、他に本件発明に係る特許を取り消すべき理由を発見しない。
　よって、結論のとおり決定する。
【異議決定日】
平成１３年８月１日（２００１．８．１）
【訂正の要旨】
　訂正の要旨
１　訂正事項ａ
　特許請求の範囲の減縮を目的として、特許請求の範囲の請求項１ないし１３を、「【［請求項１】枯草菌で発酵した食品素材より抽出した天然メナキノン−７を２００ｐｐｍ以上含有してなる脂質を主成分とする、骨粗鬆症の予防および／または治療用組成物。」と訂正する。
２　訂正事項ｂ
　明りょうでない記載の釈明を目的として、特許請求の範囲の訂正に伴い、該訂正との整合を図るために、発明の詳細な説明の欄の該当箇所を訂正する。
３　訂正事項ｃ
　明りょうでない記載の釈明を目的として、明細書の段落番号【００２２】の実施例３を削除するとともに、以下の実施例の番号を繰り上げるものである。
（５４）【発明の名称】
天然メナキノン−７高含量脂質
（５７）【特許請求の範囲】
　【請求項１】　枯草菌で発酵した食品素材より
抽出した
を２００ｐｐｍ以上含有してなる脂質を主成分とする、骨粗鬆症の予防および／または治療用組成物
【発明の詳細な説明】
　【０００１】
　【発明の属する技術分野】
　本発明は納豆菌に代表される枯草菌で発酵せしめた食品素材を原料として得られる
天然メナキノン−７を２００ｐｐｍ以上含有してなる
質を
　【０００２】
　【従来の技術】
　ビタミンＫは古くから血液凝固に関与するビタミンとして知られ、ビタミンＫ欠乏性出血症の治療に医薬品として合成ビタミンＫ１およびＫ２が用いられ、予防に食品として天然ビタミンＫ１濃縮物が利用されている。
　骨粗鬆症は、老化、疾病などの原因によって起こる、骨がもろくなる病態で、骨折したり、激しい痛みなどを伴い、老人医療の面から大きな社会問題となりつつある。骨粗鬆症の治療、予防には、主にカルシウム、ビタミンＤ類が医薬品あるいは食品として利用されているが、最近になって骨粗鬆症の治療、予防にビタミンＫが単独、あるいは既知の有効物質との併用で有効であることが見いだされた。出血症の治療、予防に必要なビタミンＫは極めて微量（一日当たりμｇオーダー）であるが、骨粗鬆症の治療、予防には一日当たり数〜数十ｍｇのビタミンＫを必要とする。
　【０００３】
　ビタミンＫ類の中で、自然界に存在するのはビタミンＫ１およびＫ２群のみである。Ｋ１は主に植物によって合成される。Ｋ２群の中には側鎖長の違いによりメナキノン（ＭＫ）−１〜１４までが知られており、ＭＫ−４は主に動物体内の腸内細菌によって合成され、ＭＫ−７は主に納豆菌によって合成される。食品中では、Ｋ１は特に緑色野菜、植物油、海藻等に多く含まれており、Ｋ２の代表的な物質であるＭＫ−７は納豆に多く含まれている。主な食品あるいは食品素材中のビタミンＫ含量は、海藻・海苔・茶葉などにビタミンＫ１が数十ｐｐｍ、大豆油・ほうれん草・ブロッコリなどにビタミンＫ１が数ｐｐｍ、納豆中にＭＫ−７が数〜十数ｐｐｍである。大豆油や納豆の原料である大豆中には１ｐｐｍ以下のビタミンＫ１しか含有されていない。
　【０００４】
　【発明が解決しようとする課題】
　市販の食品から骨粗鬆症に有効な量のビタミンＫを摂取する場合、仮にビタミンＫを１ｐｐｍ含有する食品あるいは食品素材より一日１０ｍｇのビタミンＫを摂取しようとすると、一日に１０ｋｇもの量を食する必要があり不可能である。十数ｐｐｍ含有する納豆でも一日数百ｇを食さなくてはならず、嗜好上、これだけの量を毎日食することは困難である。
　市販の、出血症予防のために調製粉乳に添加している天然ビタミンＫ１濃縮物は高価であるため、大量のビタミンＫ１を摂取するには価格面で困難である。
　一方、医薬品の合成ビタミンＫは食品に使用することはできない。
　【０００５】
　
このように、天然メナキノン−７（ＭＫ−７）
天然メナキノン−７を２００ｐｐｍ以上含有してなる
　【０００６】
　【課題を解決するための手段】
　本発明の目的は、通常の食品からは充分な量の摂取ができない、または摂取困難な天然ビタミンＫ、特に納豆菌に代表される可食の枯草菌によって作り出された天然ＭＫ−７を、食品あるいは補助食品として簡単に日常的摂取ができるようにした天然ＭＫ−７高含量の濃縮脂質、およびそれを主成分とする食品あるいは補助食品を提供することにある。
　【０００７】
　本発明者らは、上記の目的を達成すべく鋭意研究を重ねた結果、枯草菌で発酵した食品素材よ
り抽
を２００ｐｐｍ以上含有してなる
　本発明において、脂質の原料となるものは、納豆菌に代表される枯草菌を繁殖させ発酵させることができるものであれば使用できるが、発酵物より取り出した脂質を食用に供することから食品素材が好ましい。食品素材は、一般食品の材料となるものの他に、それらの加工過程で発生する粕や煮汁などの副産物を用いてもよい。一般食品としては、特に大豆などの穀類が好ましい。上記の他にも、食することが可能で枯草菌が繁殖できるものであれば特に限定するものでない。
　【０００８】
　接種する枯草菌としては、上記素材と同様な理由から可食の枯草菌が好ましい。可食の枯草菌としては、納豆菌が最も一般的である。市販の納豆菌が使用できるが、その中でも天然ＭＫ−７産生能力の高いものが望ましい。また、人為的に天然ＭＫ−７産生能力を高めたものも使用できる。
　発酵方法は、一般的に知られている納豆の発酵方法の他に液体培養などの公知の発酵方法を用いてもよい。通常、納豆の発酵は３６〜３９℃で１５〜２０時間かけて行われるが、さらに４２℃以上の温度で、４８時間以上の長時間発酵させることによって、脂質中の天然、ＭＫ−７含量を高めることができる。
　【０００９】
　取り出す方法は抽出、圧搾、遠心分離など物性の相違を利用して分ける方法を選択できるが、特に抽出法が効果的である。抽出方法は、発酵物に対して最も効果的な方法を選択すればよく、特に限定されるものではないが、発酵物の固形分量が多ければ固−液抽出法が、少なければ液−液抽出法が効果的である。固−液抽出法を選択する場合、発酵物は固体でも多量の水分を含有しているので、あらかじめ水分含量を測定して、その水分含量に対して等倍〜１０倍量の親水性有機溶媒を混合するか、減圧下で１００℃以下の温度で加熱するかして水を除去してから、親油性有機溶媒を等倍〜１０倍量添加して、粉砕・抽出すると抽出効率が向上する。
　【００１０】
　親水性有機溶媒と混合して脱水を行う場合は、親水性溶媒−水混液を分離・除去してから脂質を抽出してもまた除去せずに抽出してもよい。親水性溶媒−水混液を除去してから抽出する場合は、分離した親水性溶媒−水混液を、親油性有機溶媒を用いて更に脂質分を抽出するとよい。脱水後の発酵物を粉砕し、抽出した後、ろ過してろ液の親油性有機溶媒層を分取後、減圧下で溶媒を留去すると抽出脂質が得られる。
　【００１１】
　液−液抽出法では、水を除去せずに抽出を行うことができるが、水に対して親和性の低い溶媒か混合溶媒を選択して、抽出時に二層に分離させる必要がある。発酵液に対して１／１０〜１０倍量の水との親和性の低い溶媒か混合溶媒を発酵液と混合後、静置、または加速度を与え強制的に二層を分離して親油性有機溶媒層を分取後、減圧下で溶媒を留去すると抽出脂質が得られる。残った水層に同様の操作を繰り返すと一層効果的である。
　【００１２】
　有機溶媒としては、炭素数１〜１０の炭化水素あるいはアルコール、エーテル、エステル、ケトンの群から選ばれる単独あるいは２種以上の混合物が使用できる。抽出法は、固−液、液−液共にバッチ式でも連続式でもよい。抽出温度は、溶媒の沸点以下であれば使用できるが、天然、ＭＫ−７の化学的分解を抑えるためには室温〜１００℃程度の温度が望ましい。
　【００１３】
　以上の抽出操作のみによっても、得られた抽出脂質中の天然ＭＫ−７含有量は２００ｐｐｍ〜１％程度にまで高まる。このとき、脂質中に含有されるＭＫ−７以外の物質は、油脂、ステロールおよびその誘導体、トコフェロール、リン脂質、炭化水素等である。
　【００１４】
　より高含有量の脂質を得るためには、さらに精製処理を施す必要がある。精製方法としては、溶媒分別、吸着分別、蒸留、クロマトグラフィー、膜分離の操作を単独もしくはそれらを２種以上複合した方法が効果的であるが、油脂中の脂質精製法として一般的なアルカリ精製法は、使用する強アルカリによってＭＫ−７が分解してしまうため好ましくない。
　溶媒分別法には、次の二種の方法がある。上記の抽出溶媒の範囲の溶媒もしくはその混合物で互いに混ざり合わない二種の溶媒を選択し、そのいずれか一方あるいは両方に抽出脂質を溶解し、二液相間でバッチまたは連続で混合−分離を繰り返し行うことによって、天然ＭＫ−７の分配率の高い溶媒層に天然ＭＫ−７を濃縮する。それを分取して減圧下で溶媒を留去して天然ＭＫ−７高含量脂質を得る。溶媒の混合比率は、一方の溶媒１倍量に対して、他方の溶媒を１／５〜５倍量とすることが望ましい。別法として、抽出脂質１倍量に対して１／２〜１０倍量の、上記の抽出溶媒の範囲の溶媒もしくはその混合物に抽出脂質を加熱溶解した後に、冷却して生成したステロール類を主成分とする不溶物を、ろ過、遠心分離等の方法により除去することによって、天然ＭＫ−７高含量の脂質を得る。
　【００１５】
　吸着分別法は、ＭＫ−７が炭素系吸着剤に選択的に吸着される性質を利用して、吸着・溶離を行う方法である。抽出脂質の有機溶媒溶液に活性炭を添加・混合するか、活性炭を詰めたカラムに抽出脂質の有機溶媒溶液を通液するかして、活性炭にＭＫ−７を吸着せしめた後、有機溶媒で活性炭を洗浄して不純物を洗い流し、有機溶媒でＭＫ−７を溶離して、天然ＭＫ−７高含量の脂質を得る。ここで使用する有機溶媒は、上記の抽出溶媒の範囲の溶媒もしくはその混合物であるが、吸着・洗浄には溶離作用の弱い溶媒、主にアルコール類を、溶離には溶離作用の強い溶媒、主に炭化水素類を使用することによって、より効率的に濃縮を行うことができる。
　【００１６】
　蒸留法は、天然ＭＫ−７が高沸点かつ高温で分解する物質であることから、高真空蒸留である分子蒸留法または水蒸気蒸留法が効果的である。両方法とも、蒸発対象物の蒸気圧を小さくして、高沸点の物質でも低い温度で蒸発させることができる。これらの蒸留法は、バッチ式でも連続式でもよい。この方法を適用することによって得られた天然ＭＫ−７高含量の脂質は、溶媒の残留もなく、無臭であるためそのまま食用に供することができる。
　分子蒸留法では、５Ｐａ以下の圧力で２００℃〜３００℃の温度範囲で、抽出脂質を分子蒸留装置に付し、段階的温度にて蒸発留分を分取することによって天然ＭＫ−７高含量の脂質を得る。
　水蒸気蒸留法では、１ｋＰａ以下の圧力で２００〜３５０℃の温度範囲で、水または水蒸気を導入しながら蒸留を行い、段階的温度にて蒸発留分を分取することによって天然ＭＫ−７高含量の脂質を得る。
　【００１７】
　クロマトグラフィー法は、カラムクロマトグラフィー法が効果的である。カラムに充填する固定相は、市販のクロマトグラフィー用充填剤でよい。実用上、シリカゲルベースの吸着剤もしくは有機ポリマーを骨格に持った合成吸着剤が望ましい。移動相は、上記の抽出溶媒の範囲の溶媒もしくはその混合物から選択する。
　以上の精製方法を、単独もしくはそれらを複合して行うことによって、天然ＭＫ−７高含量脂質を得ることができる。このときのＭＫ−７含有量は１％以上である。精製を重ねることによってほぼ１００％のものも調製できる。
　蒸留して得られた天然、ＭＫ−７高含量脂質には脂質以外のものとして、若干量の溶媒が残留していると共に、発酵物由来の臭気も残留している場合がある。これらの両方を完全に除去するためには、最後に１００〜２５０℃にて水蒸気蒸留を行うとよい。水蒸気蒸留は、流動性がないと適用が困難であるため、溶媒留去時にペースト状あるいは固体になる場合は、１／２〜５倍量の植物油に溶解してから水蒸気蒸留処理を行う。
　【００１８】
　【発明の効果】
　本発明により得られた天然ＭＫ−７高含量脂質は、原料が天然物であり、かつ食することのできるものであることから、出血症はもちろん骨粗鬆症の予防のために、食品あるいは補助食品として安全性が高く簡易に日常的摂取ができる。
　また、この脂質は無味・無臭であることから、嗜好上の問題もなく、様々な形態の食品に応用することが可能である。
　【００１９】
　【発明の実施の形態】
　次に実施例によって本発明を詳しく説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。なお、以下の実施例においてＭＫ−７含量は（財）日本食品分析センターの高速液体クロマトグラフ法に準じて測定した値を、その他の分析値は公定法に準じて測定した値を示す。
　【００２０】
実施例１
　室温下、市販の挽き割り納豆（ＭＫ−７含量１７．２ｐｐｍ；水分５７．７％）３ｋｇにイソプロピルアルコール２．３Ｌを加えて粉砕後、ｎ−ヘキサン４．６Ｌを加えて再度粉砕した。全量をろ過した後に、ろ液を静置して分離したｎ−ヘキサン層（上層）を分取した。上層は５．２Ｌであった。上層の溶媒を２ｋＰａ，６０℃で留去し、１５３ｇの残渣を得た。この残渣を３ｈＰａ，１７０℃，１．５ｇ水蒸気／時間で６０分間脱臭を行って、黄色、無味、無臭、油状の脂質（▲１▼）１４４ｇを得た。
　この脂質には、ＭＫ−７　３５１ｐｐｍ，トコフェロール　１３５ｐｐｍが含有されており、ＴＬＣ（薄層クロマトグラフィー）で観察したところ大部分はトリグリセライドで微量のステロールおよびその誘導体、リン脂質、炭化水素類がみられた。この脂質の酸価は１．２、過酸化物価は０．６であった。ＭＫ−７を高回収率で得た。
　【００２１】
実施例２
　納豆製造時に副生成する大豆煮汁に納豆菌を接種し、納豆の製造と同じ条件で培養したもの（ＭＫ−７含量１０．８ｐｐｍ）１０ｋｇにジエチルエーテル１０Ｌを加えて震とう後、静置して分離したジエチルエーテル層（上層）を分取した。上層の溶媒を２ｋＰａ，６０℃で留去し、７．９ｇの残渣を得た。この残渣を５ｈＰａ，１８０℃，０．０８ｇ水蒸気／時間で６０分間脱臭を行って、黄色、無味、無臭、油状の脂質（▲２▼）７．２ｇを得た。
　この脂質には、ＭＫ−７　１．４％，トコフェロール　８５ｐｐｍが含有されており、ＴＬＣで観察したところ上記の他にトリグリセライド、ステロールおよびその誘導体、リン脂質、炭化水素類がみられた。この脂質の酸価は０．８、過酸化物価は０．２であった。ＭＫ−７の回収率は９３％であった。
　【００２２】
実施例３
　上記実施例１で得られた脂質（▲１▼）５０ｇを流下膜式分子蒸留装置に付した。３Ｐａの圧力で２００℃から２８０℃まで１０℃刻みで昇温した。２３０℃〜２８０℃までに留出した蒸発物を分取して、黄褐色、無味、無臭、ペースト状の脂質１０．３ｇを得た。
　この脂質には、ＭＫ−７　１５６０ｐｐｍ、トコフェロール　１６３ｐｐｍが含有されており、ＴＬＣで観察したところ上記の他にトリグリセライド、ステロールおよびその誘導体、炭化水素類がみられた。この脂質の酸価は０、過酸化物価は０．１であった。ＭＫ−７の回収率は９２％であった。
　【００２３】
実施例４
　市販の顆粒状活性炭５０ｇをイソプロピルアルコールで充填したカラムに、上記実施例１で得られた脂質（▲１▼）５０ｇをイソプロピルアルコール１５０ｍｌに溶解した溶液を、４０℃、空間速度（ＳＶ）１．０で通液してＭＫ−７を吸着せしめた。同様の温度および流速でイソプロピルアルコール１Ｌを通液してカラムを洗浄した後に、トルエン５００ｍｌを通液してカラムから流出した液の５０〜５００ｍｌの画分を分取した。この画分を２ｋＰａ，６０℃で溶媒留去し、４．５ｇの残渣を得た。この残渣に９ｍｌのアセトンを加えて５０℃で溶解後、−２０℃で１時間冷却して、生成した沈殿物をろ別した。ろ液を２ｋＰａ，６０℃で溶媒留去し、３．９ｇの残渣を得た。この残渣に大豆油３ｇを加えて、３ｈＰａ，１８０℃，０．０７ｇ水蒸気／時間で６０分間脱臭を行って、黄色、無味、無臭、油状の脂質６．８ｇを得た。
　この脂質には、ＭＫ−７　２２００ｐｐｍ，トコフェロール　１２ｐｐｍが含有されており、ＴＬＣで観察したところ大部分はトリグリセライドで微量のステロールおよびその誘導体、炭化水素類がみられた。この脂質の酸価は１．５、過酸化物価は１．８であった。ＭＫ−７の回収率は８５％であった。
　【００２４】
実施例５
　上記実施例２で得られた脂質（▲２▼）５ｇを２０ｍｌのｎ−ヘキサンに溶解して、２０ｍｌの５％含水エタノールを加えて震とう後、ヘキサン層（上層）と含水エタノール層（下層）をそれぞれ分け取り、上層には２０ｍｌの５％含水エタノールを、下層には２０ｍｌのｎ−ヘキサンを加えて再度震とうした。それぞれの上層を分け取り、２ｋＰａ，６０℃で溶媒留去し、４．５ｇの残渣を得た。１００ｇのシリカゲルをｎ−ヘキサンで充填したカラムに、前記残渣を５ｍｌのｎ−ヘキサンで溶解した溶液をＳＶ１．０で通液した後に、ｎ−ヘキサン：ジエチルエーテル（２０：１）５００ｍｌを通液してカラムから流出した液の３２０〜４８０ｍｌの画分を分取した。この画分を２ｋＰａ，６０℃で溶媒留去し、０．３１ｇの脂質を得た。この脂質には、ＭＫ−７　１５．４％が含有されており、ＴＬＣで観察したところ上記の他にトリグリセライド、ステロールおよびその誘導体、炭化水素類がみられた。ＭＫ−７の回収率は６８％であった。