(57)【要約】式（Ｉ）の構造2008536939.tif 000044を有する化合物であって、ここでＺ、ｘ、ｙおよびＲ１〜Ｒ１１が本明細書に規定されるような化合物を用いて、血管形成またはＨＩＦ−１過剰発現に関与する医学的状態を有する患者を処置するための方法が提供される。このような状態としては、例えば、肺癌、脳の癌および前立腺癌（特に非アンドロゲン依存性前立腺癌を含むガン）、有害な新血管形成に関連する状態（例えば、血管新生緑内障、角膜移植片新血管形成、水晶体後線維増殖症および糖尿病性網膜症）、および慢性炎症性状態（例えば、乾癬および慢性関節リウマチ）が挙げられる。
2008536939.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
血管形成またはＨＩＦ−１過剰発現に関与する医学的状態を有する患者を処置するための方法であって、式（Ｉ）の化合物
【化１】
2008536939.tif 000023
あるいはその薬学的に受容可能な塩の治療上有効な量を該患者に投与する工程を包含し、
ここで、
Ｚが−Ｏ−（Ｌ）ｑ−、−Ｓ−（Ｌ）ｑ−、または−ＮＲ１２−（Ｌ）ｑ−であり、ｑがゼロまたは１であり、Ｌが単環式アリールであり、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ハロ、アミノ、およびＣ１−Ｃ６アルキル置換アミノから独立して選択される最大４個の置換基で必要に応じて置換され、Ｌ上の任意の２つの隣接する置換基は、一緒になって、必要に応じて置換される環状構造を形成し得、かつＲ１２は水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
ｘが包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
ｑがゼロである場合、ｙは包括的に２〜約６の範囲の整数であり、そしてｑが１である場合、ｙは包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
Ｒ１およびＲ２が独立して、水素およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択されるか、または一緒になって０〜２個のさらなるヘテロ原子を含む必要に応じて置換された窒素複素環を形成し得；
Ｒ３が、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ２−Ｃ３アルケニル、単環式アリール、および単環式アリール置換Ｃ１−Ｃ３アルキルから選択され；
Ｒ４が、水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５が、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびＣ２−Ｃ６アルケニルから選択され；
Ｒ６が水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ１２アシル、および−ＳＯ２ＮＨ２から選択され；
Ｒ７が、水素、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、−ＯＲ１３および−ＳＲ１３から選択され、Ｒ１３はＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アシル、またはアリールであり；
Ｒ８が水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、またはヒドロキシルであり；
Ｒ９が水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、アリール、およびアルカリルから選択され；そして
Ｒ１０およびＲ１１が独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択される、方法。
【請求項２】
前記化合物の分子量が多くとも約７５０であるようにｘ、ｙ、Ｚ、Ｌ、ｑ、およびＲ１〜Ｒ１３が選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ｘが１または２であり、かつｙが１または２である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
ＺがＯである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
Ｒ１が水素、メチルもしくはエチルであり、かつＲ２がメチルもしくはエチルであるか、またはＲ１およびＲ２が一緒になって、単環式窒素複素環を形成する、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
Ｒ３が水素またはメチルである、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記化合物が、式（ＩＩ）
【化２】
2008536939.tif 000024
の構造を有するように、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１が水素である、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
Ｚが−Ｏ−、−Ｓ−、または−ＮＲ１２−であるように、ｑがゼロである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記化合物の分子量が多くとも約７５０であるように、ｘ、ｙ、Ｚ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ１２が選択される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ｘが１または２であり、かつｙが２である、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
ＺがＯである、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
Ｒ１が水素、メチルもしくはエチルであり、かつＲ２がメチルもしくはエチルであるか、またはＲ１およびＲ２が一緒になって単環式窒素複素環を形成する、請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
Ｒ３が水素またはメチルである、請求項８に記載の方法。
【請求項１４】
前記化合物が式（２）
【化３】
2008536939.tif 000025
の構造を有するように、ｘが１であり、ｙが２であり、Ｒ１およびＲ２がメチルであり、Ｒ３がメチルであり、かつＺが−Ｏ−である、請求項８に記載の方法。
【請求項１５】
血管形成またはＨＩＦ−１過剰発現に関与する医学的状態を有する患者を処置するための方法であって、式（ＩＩＩ）の化合物
【化４】
2008536939.tif 000026
あるいはその薬学的に受容可能な塩の治療上有効な量を該患者に投与する工程を包含し、
ここで、
Ｚが−Ｏ−（Ｌ）ｑ−、−Ｓ−（Ｌ）ｑ−、または−ＮＲ１２−（Ｌ）ｑ−であり、ｑがゼロまたは１であり、Ｌが単環式アリールであり、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ハロ、アミノ、およびＣ１−Ｃ６アルキル置換アミノから独立して選択される最大４個の置換基で必要に応じて置換され、Ｌ上の任意の２つの隣接する置換基は、一緒になって、必要に応じて置換される環状構造を形成し得、かつＲ１２は水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
ｘが包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
ｑがゼロである場合、ｙは包括的に２〜約６の範囲の整数であり、そしてｑが１である場合、ｙは包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
Ｒ１およびＲ２が独立して、水素およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択されるか、または一緒になって０〜２個のさらなるヘテロ原子を含む必要に応じて置換された窒素複素環を形成し得；
Ｒ３が、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ２−Ｃ３アルケニル、単環式アリール、および単環式アリール置換Ｃ１−Ｃ３アルキルから選択され；
Ｒ４が、水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５が、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびＣ２−Ｃ６アルケニルから選択され；
Ｒ６が水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ１２アシル、および−ＳＯ２ＮＨ２から選択され；
Ｒ７が、水素、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、−ＯＲ１３および−ＳＲ１３から選択され、Ｒ１３はＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アシル、またはアリールから選択され；
Ｒ８が水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、またはヒドロキシルであり；
Ｒ９が水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、アリール、およびアルカリルから選択され；そして
Ｒ１０およびＲ１１が独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択される、方法。
【請求項１６】
前記化合物の分子量が多くとも約７５０であるようにｘ、ｙ、Ｚ、Ｌ、ｑ、およびＲ１〜Ｒ１３が選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
ｘが１または２であり、かつｙが１または２である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
ＺがＯである、請求項１５に記載の方法。
【請求項１９】
Ｒ１が水素、メチルもしくはエチルであり、かつＲ２がメチルもしくはエチルであるか、またはＲ１およびＲ２が一緒になって、単環式窒素複素環を形成する、請求項１５に記載の方法。
【請求項２０】
Ｒ３が水素またはメチルである、請求項１５に記載の方法。
【請求項２１】
前記化合物が式（ＩＶ）
【化５】
2008536939.tif 000027
の構造を有するように、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１が水素である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２２】
ｑが１であり、かつＬがフェニルまたはＣ１−Ｃ６アルコキシ置換フェニルである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
ｘが１または２であり、かつｙが２である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
ＺがＯである、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
Ｒ１が水素、メチル、またはエチルであり、かつＲ２がメチルまたはエチルであるか、あるいはＲ１およびＲ２が一緒になって、単環式窒素複素環を形成する、請求項２１に記載の方法。
【請求項２６】
Ｒ３が水素またはメチルである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２７】
前記化合物が式（Ｖ）
【化６】
2008536939.tif 000028
の構造を有するように、ｘが１であり、ｙが１であり、ｑが１であり、Ｌが２−メトキシフェニルであり、Ｒ１およびＲ２がエチルであり、Ｒ３がメチルであり、かつＺが−Ｏ−である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２８】
前記医学的状態がホルモン非依存性のガンである、請求項１、７、１４、１５、２１、および２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
前記医学的状態が肺癌である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記医学的状態が脳の癌である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記医学的状態が慢性炎症性の疾患である、請求項１、７、１４、１５、２１、および２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
前記医学的状態が慢性関節リウマチである、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記医学的状態が乾癬である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
前記医学的状態が有害な血管新生に関連する、請求項１、７、１４、１５、２１、および２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５】
前記化合物が、薬学的に受容可能なキャリアをさらに含む薬学的組成物中で投与される、請求項１、７、１４、１５、２１、および２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
前記薬学的組成物が単位剤形である、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記化合物が経口的に、非経口的にまたは経皮的に投与される、請求項１、７、１４、１５、２１、および２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
前記薬学的組成物が経口的に投与される、請求項２または請求項１４に記載の方法。
【請求項３９】
前記患者に対して第二の活性な因子を同時投与する工程をさらに包含する、請求項１、７、１４、１５、２１、および２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４０】
前記第二の活性因子が抗癌剤であり、かつ前記医学的状態がガンである、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
哺乳動物の組織において血管形成活性またはＨＩＦ−１過剰発現を阻害するための方法であって、該組織と、式（Ｉ）
【化７】
2008536939.tif 000029
の構造を有する化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩とを接触させる工程を包含し、
ここで、
Ｚが−Ｏ−（Ｌ）ｑ−、−Ｓ−（Ｌ）ｑ−、または−ＮＲ１２−（Ｌ）ｑ−であり、ｑがゼロまたは１であり、Ｌが単環式アリールであり、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ハロ、アミノ、およびＣ１−Ｃ６アルキル置換アミノから独立して選択される最大４個の置換基で必要に応じて置換され、Ｌ上の任意の２つの隣接する置換基は、一緒になって、必要に応じて置換される環状構造を形成し得、かつＲ１２は水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
ｘが包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
ｑがゼロである場合、ｙは包括的に２〜約６の範囲の整数であり、そしてｑが１である場合、ｙは包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
Ｒ１およびＲ２が独立して、水素およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択されるか、または一緒になって０〜２個のさらなるヘテロ原子を含む必要に応じて置換された窒素複素環を形成し得；
Ｒ３が、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ２−Ｃ３アルケニル、単環式アリール、および単環式アリール置換Ｃ１−Ｃ３アルキルから選択され；
Ｒ４が、水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５が、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびＣ２−Ｃ６アルケニルから選択され；
Ｒ６が水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ１２アシル、および−ＳＯ２ＮＨ２から選択され；
Ｒ７が、水素、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、−ＯＲ１３および−ＳＲ１３から選択され、Ｒ１３はＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アシル、またはアリールであり；
Ｒ８が水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、またはヒドロキシルであり；
Ｒ９が水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、アリール、およびアルカリルから選択され；そして
Ｒ１０およびＲ１１が独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択される、方法。
【請求項４２】
前記化合物の分子量が多くとも約７５０であるようにｘ、ｙ、Ｚ、Ｌ、ｑ、およびＲ１〜Ｒ１３が選択される、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
ｘが１または２であり、かつｙが１または２である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４４】
ＺがＯである、請求項４１に記載の方法。
【請求項４５】
Ｒ１が水素、メチルもしくはエチルであり、かつＲ２がメチルもしくはエチルであるか、またはＲ１およびＲ２が一緒になって、単環式窒素複素環を形成する、請求項４１に記載の方法。
【請求項４６】
Ｒ３が水素またはメチルである、請求項４１に記載の方法。
【請求項４７】
前記化合物が式（ＩＩ）
【化８】
2008536939.tif 000030
の構造を有するように、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１が水素である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４８】
哺乳動物の内皮細胞の増殖を阻害するための方法であって、このような細胞と、式（Ｉ）の構造：
【化９】
2008536939.tif 000031
を有する化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩とを接触させる工程を包含し、
ここで、
Ｚが−Ｏ−（Ｌ）ｑ−、−Ｓ−（Ｌ）ｑ−、または−ＮＲ１２−（Ｌ）ｑ−であり、ｑがゼロまたは１であり、Ｌが単環式アリールであり、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ハロ、アミノ、およびＣ１−Ｃ６アルキル置換アミノから独立して選択される最大４個の置換基で必要に応じて置換され、Ｌ上の任意の２つの隣接する置換基は、一緒になって、必要に応じて置換される環状構造を形成し得、かつＲ１２は水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
ｘが包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
ｑがゼロである場合、ｙは包括的に２〜約６の範囲の整数であり、そしてｑが１である場合、ｙは包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
Ｒ１およびＲ２が独立して、水素およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択されるか、または一緒になって０〜２個のさらなるヘテロ原子を含む必要に応じて置換された窒素複素環を形成し得；
Ｒ３が、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ２−Ｃ３アルケニル、単環式アリール、および単環式アリール置換Ｃ１−Ｃ３アルキルから選択され；
Ｒ４が、水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５が、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびＣ２−Ｃ６アルケニルから選択され；
Ｒ６が水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ１２アシル、および−ＳＯ２ＮＨ２から選択され；
Ｒ７が、水素、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、−ＯＲ１３および−ＳＲ１３から選択され、Ｒ１３はＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アシル、またはアリールであり；
Ｒ８が水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、またはヒドロキシルであり；
Ｒ９が水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、アリール、およびアルカリルから選択され；そして
Ｒ１０およびＲ１１が独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択される、方法。
【請求項４９】
前記化合物の分子量が多くとも約７５０であるようにｘ、ｙ、Ｚ、Ｌ、ｑ、およびＲ１〜Ｒ１３が選択される、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
ｘが１または２であり、かつｙが１または２である、請求項４８に記載の方法。
【請求項５１】
ＺがＯである、請求項４８に記載の方法。
【請求項５２】
Ｒ１が水素、メチルもしくはエチルであり、かつＲ２がメチルもしくはエチルであるか、またはＲ１およびＲ２が一緒になって、単環式窒素複素環を形成する、請求項４８に記載の方法。
【請求項５３】
Ｒ３が水素またはメチルである、請求項４８に記載の方法。
【請求項５４】
前記化合物が式（ＩＩ）
【化１０】
2008536939.tif 000032
の構造を有するように、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１が水素である、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
単独療法レジメンにおいて最小有効用量未満に抗癌剤の有効量を低下させるための方法であって、式（Ｉ）
【化１１】
2008536939.tif 000033
の構造を有する抗血管形成または抗ＨＩＦ−１化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩と該抗癌剤とを投与する工程を包含し、ここで
Ｚが−Ｏ−（Ｌ）ｑ−、−Ｓ−（Ｌ）ｑ−、または−ＮＲ１２−（Ｌ）ｑ−であり、ｑがゼロまたは１であり、Ｌが単環式アリールであり、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ハロ、アミノ、およびＣ１−Ｃ６アルキル置換アミノから独立して選択される最大４個の置換基で必要に応じて置換され、Ｌ上の任意の２つの隣接する置換基は、一緒になって、必要に応じて置換される環状構造を形成し得、かつＲ１２は水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
ｘが包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
ｑがゼロである場合、ｙは包括的に２〜約６の範囲の整数であり、そしてｑが１である場合、ｙは包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
Ｒ１およびＲ２が独立して、水素およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択されるか、または一緒になって０〜２個のさらなるヘテロ原子を含む必要に応じて置換された窒素複素環を形成し得；
Ｒ３が、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ２−Ｃ３アルケニル、単環式アリール、および単環式アリール置換Ｃ１−Ｃ３アルキルから選択され；
Ｒ４が、水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５が、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびＣ２−Ｃ６アルケニルから選択され；
Ｒ６が水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ１２アシル、および−ＳＯ２ＮＨ２から選択され；
Ｒ７が、水素、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、−ＯＲ１３および−ＳＲ１３から選択され、Ｒ１３はＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アシル、またはアリールであり；
Ｒ８が水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、またはヒドロキシルであり；
Ｒ９が水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、アリール、およびアルカリルから選択され；そして
Ｒ１０およびＲ１１が独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択される、方法。
【請求項５６】
前記化合物の分子量が多くとも約７５０であるようにｘ、ｙ、Ｚ、Ｌ、ｑ、およびＲ１〜Ｒ１３が選択される、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記化合物が経口的に投与される、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記抗癌剤がタキサンである、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記タキサンがパクリタキセルである、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前立腺癌を有する患者を処置するための方法であって、式（Ｉ）
【化１２】
2008536939.tif 000034
の構造を有する化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩の治療上有効な量を該患者に投与する工程を包含し、ここで
Ｚが−Ｏ−（Ｌ）ｑ−、−Ｓ−（Ｌ）ｑ−、または−ＮＲ１２−（Ｌ）ｑ−であり、ｑがゼロまたは１であり、Ｌが単環式アリールであり、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ハロ、アミノ、およびＣ１−Ｃ６アルキル置換アミノから独立して選択される最大４個の置換基で必要に応じて置換され、Ｌ上の任意の２つの隣接する置換基は、一緒になって、必要に応じて置換される環状構造を形成し得、かつＲ１２は水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
ｘが包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
ｑがゼロである場合、ｙは包括的に２〜約６の範囲の整数であり、そしてｑが１である場合、ｙは包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
Ｒ１およびＲ２が独立して、水素およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択されるか、または一緒になって０〜２個のさらなるヘテロ原子を含む必要に応じて置換された窒素複素環を形成し得；
Ｒ３が、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ２−Ｃ３アルケニル、単環式アリール、および単環式アリール置換Ｃ１−Ｃ３アルキルから選択され；
Ｒ４が、水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５が、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびＣ２−Ｃ６アルケニルから選択され；
Ｒ６が水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ１２アシル、および−ＳＯ２ＮＨ２から選択され；
Ｒ７が、水素、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、−ＯＲ１３および−ＳＲ１３から選択され、Ｒ１３はＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アシル、またはアリールであり；
Ｒ８が水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、またはヒドロキシルであり；
Ｒ９が水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、アリール、およびアルカリルから選択され；そして
Ｒ１０およびＲ１１が独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択される、方法。
【請求項６１】
前記化合物の分子量が多くとも約７５０であるようにｘ、ｙ、Ｚ、Ｌ、ｑ、およびＲ１〜Ｒ１３が選択される、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
ｘが１または２であり、かつｙが１または２である、請求項６０に記載の方法。
【請求項６３】
ＺがＯである、請求項６０に記載の方法。
【請求項６４】
Ｒ１が水素、メチルもしくはエチルであり、かつＲ２がメチルもしくはエチルであるか、またはＲ１およびＲ２が一緒になって、単環式窒素複素環を形成する、請求項６０に記載の方法。
【請求項６５】
Ｒ３が水素またはメチルである、請求項６０に記載の方法。
【請求項６６】
前記化合物が式（ＩＩ）
【化１３】
2008536939.tif 000035
の構造を有するように、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１が水素である、請求項６０に記載の方法。
【請求項６７】
Ｚが−Ｏ−、−Ｓ−、または−ＮＲ１２であるように、ｑがゼロである、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
前記化合物の分子量が多くとも約７５０であるようにｘ、ｙ、Ｚ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ１２が選択される、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
ｘが１または２であり、かつｙが２である、請求項６７に記載の方法。
【請求項７０】
ＺがＯである、請求項６７に記載の方法。
【請求項７１】
Ｒ１が水素、メチルもしくはエチルであり、かつＲ２がメチルもしくはエチルであるか、またはＲ１およびＲ２が一緒になって、単環式窒素複素環を形成する、請求項６７に記載の方法。
【請求項７２】
Ｒ３が水素またはメチルである、請求項６７に記載の方法。
【請求項７３】
前記化合物が式（２）
【化１４】
2008536939.tif 000036
の構造を有するように、ｘが１であり、ｙが２であり、Ｒ１およびＲ２がメチルであり、Ｒ３がメチルであり、かつＺが−Ｏ−である、請求項６７に記載の方法。
【請求項７４】
前記前立腺癌が非アンドロゲン依存性である、請求項６０に記載の方法。
【請求項７５】
Ｇ１期においてガン細胞の細胞周期停止を達成するための方法であって、このような細胞と、式（Ｉ）
【化１５】
2008536939.tif 000037
の構造を有する化合物、またはその薬学的に受容可能な塩とを接触させる工程を包含し、
ここで：
Ｚが−Ｏ−（Ｌ）ｑ−、−Ｓ−（Ｌ）ｑ−、または−ＮＲ１２−（Ｌ）ｑ−であり、ｑがゼロまたは１であり、Ｌが単環式アリールであり、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ハロ、アミノ、およびＣ１−Ｃ６アルキル置換アミノから独立して選択される最大４個の置換基で必要に応じて置換され、Ｌ上の任意の２つの隣接する置換基は、一緒になって、必要に応じて置換される環状構造を形成し得、かつＲ１２は水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
ｘが包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
ｑがゼロである場合、ｙは包括的に２〜約６の範囲の整数であり、そしてｑが１である場合、ｙは包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
Ｒ１およびＲ２が独立して、水素およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択されるか、または一緒になって０〜２個のさらなるヘテロ原子を含む必要に応じて置換された窒素複素環を形成し得；
Ｒ３が、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ２−Ｃ３アルケニル、単環式アリール、および単環式アリール置換Ｃ１−Ｃ３アルキルから選択され；
Ｒ４が、水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５が、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびＣ２−Ｃ６アルケニルから選択され；
Ｒ６が水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ１２アシル、および−ＳＯ２ＮＨ２から選択され；
Ｒ７が、水素、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、−ＯＲ１３および−ＳＲ１３から選択され、Ｒ１３はＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アシル、またはアリールであり；
Ｒ８が水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、またはヒドロキシルであり；
Ｒ９が水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、アリール、およびアルカリルから選択され；そして
Ｒ１０およびＲ１１が独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択される、方法。
【請求項７６】
前記化合物が式（ＩＩ）
【化１６】
2008536939.tif 000038
の構造を有するように、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１が水素である、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
前記化合物が式（ＩＩ）
【化１７】
2008536939.tif 000039
の構造を有するように、ｘが１であり、ｙが２であり、Ｒ１およびＲ２がメチルであり、Ｒ３がメチルであり、かつＺが−Ｏ−である、請求項７６に記載の方法。
【請求項７８】
非アンドロゲン依存性ガン細胞においてアポトーシスを誘導するための方法であって、このような細胞と、式（Ｉ）
【化１８】
2008536939.tif 000040
の構造を有する化合物、またはその薬学的に受容可能な塩とを接触させる工程を包含し、
ここで：
Ｚが−Ｏ−（Ｌ）ｑ−、−Ｓ−（Ｌ）ｑ−、または−ＮＲ１２−（Ｌ）ｑ−であり、ｑがゼロまたは１であり、Ｌが単環式アリールであり、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ハロ、アミノ、およびＣ１−Ｃ６アルキル置換アミノから独立して選択される最大４個の置換基で必要に応じて置換され、Ｌ上の任意の２つの隣接する置換基は、一緒になって、必要に応じて置換される環状構造を形成し得、かつＲ１２は水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
ｘが包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
ｑがゼロである場合、ｙは包括的に２〜約６の範囲の整数であり、そしてｑが１である場合、ｙは包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
Ｒ１およびＲ２が独立して、水素およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択されるか、または一緒になって０〜２個のさらなるヘテロ原子を含む必要に応じて置換された窒素複素環を形成し得；
Ｒ３が、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ２−Ｃ３アルケニル、単環式アリール、および単環式アリール置換Ｃ１−Ｃ３アルキルから選択され；
Ｒ４が、水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５が、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびＣ２−Ｃ６アルケニルから選択され；
Ｒ６が水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ１２アシル、および−ＳＯ２ＮＨ２から選択され；
Ｒ７が、水素、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、−ＯＲ１３および−ＳＲ１３から選択され、Ｒ１３はＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アシル、またはアリールであり；
Ｒ８が水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、またはヒドロキシルであり；
Ｒ９が水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、アリール、およびアルカリルから選択され；そして
Ｒ１０およびＲ１１が独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択される、方法。
【請求項７９】
前記化合物が式（ＩＩ）
【化１９】
2008536939.tif 000041
の構造を有するように、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１が水素である、請求項７８に記載の方法。
【請求項８０】
前記化合物が式（２）
【化２０】
2008536939.tif 000042
の構造を有するように、ｘが１であり、ｙが２であり、Ｒ１およびＲ２がメチルであり、Ｒ３がメチルであり、かつＺが−Ｏ−である、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
経口的に投与可能な薬学的組成物であって、経口の剤形に適切なキャリアと、式（Ｉ）
【化２１】
2008536939.tif 000043
の構造を有する化合物、あるいはその薬学的に受容可能な塩の治療上有効な抗血管形成または抗ＨＩＦ−１量とを含み、
ここで：
Ｚが−Ｏ−（Ｌ）ｑ−、−Ｓ−（Ｌ）ｑ−、または−ＮＲ１２−（Ｌ）ｑ−であり、ｑがゼロまたは１であり、Ｌが単環式アリールであり、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ハロ、アミノ、およびＣ１−Ｃ６アルキル置換アミノから独立して選択される最大４個の置換基で必要に応じて置換され、Ｌ上の任意の２つの隣接する置換基は、一緒になって、必要に応じて置換される環状構造を形成し得、かつＲ１２は水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
ｘが包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
ｑがゼロである場合、ｙは包括的に２〜約６の範囲の整数であり、そしてｑが１である場合、ｙは包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
Ｒ１およびＲ２が独立して、水素およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択されるか、または一緒になって０〜２個のさらなるヘテロ原子を含む必要に応じて置換された窒素複素環を形成し得；
Ｒ３が、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ２−Ｃ３アルケニル、単環式アリール、および単環式アリール置換Ｃ１−Ｃ３アルキルから選択され；
Ｒ４が、水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５が、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびＣ２−Ｃ６アルケニルから選択され；
Ｒ６が水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ１２アシル、および−ＳＯ２ＮＨ２から選択され；
Ｒ７が、水素、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、−ＯＲ１３および−ＳＲ１３から選択され、Ｒ１３はＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アシル、またはアリールであり；
Ｒ８が水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、またはヒドロキシルであり；
Ｒ９が水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、アリール、およびアルカリルから選択され；そして
Ｒ１０およびＲ１１が独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択される、組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願への相互参照）
本出願は、２００６年４月１７日に出願された米国特許出願第１１／４０６，４６７号への優先権を主張する。本出願はまた、米国特許法§１１９（ｅ）の下、以下の米国仮特許出願への優先権を主張する：２００５年４月１８日に出願された連続番号６０／６７２，６８９、２００６年１月５日に出願された連続番号６０／７５６，３９１、および２００６年１月３１日に出願された連続番号６０／７６４，０３９。上記の出願の開示は、その全体が参考として援用される。
【０００２】
（技術分野）
本発明は概して、ＨＩＦ−１および血管形成の阻害に関しており、そしてさらに詳細には、ＨＩＦ−１および血管形成のインヒビターとしての特定の置換された１，３，５（１０）−エストラトリエンの使用に関する。本発明はまた、ＨＩＦ−１または血管形成インヒビターの投与に応答する状態、疾患および障害を処置するための方法および薬学的組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
血管形成は、それによって新規な血管が形成される基本的なプロセスである。このプロセスは、組織への血管内皮細胞の遊走、その後のこの細胞の血管への凝縮に関与する。血管形成は、天然の状態の結果として生じてもよいし、または血管形成因子によって誘導されてもよい。この血管形成プロセスは、種々の正常な生理学的機能、例えば、組織および器官の子宮内形成、胎児の発達ならびに創傷治癒に必須である。このプロセスは完全には理解されていないが、毛細血管の一次細胞である内皮細胞の増殖および遊走を刺激する化合物および阻害する化合物の複雑な相互作用に関与する。正常な条件下では、血管形成プロセスは、数年またはそれ以上に及び得る長期間にわたって静穏状態で（すなわち、毛細管の増殖なしに）微小血管を維持する。
【０００４】
血管形成は正常な条件下で高度に調節されたプロセスであるが、多くの障害および疾患が、持続的な未調節の血管形成によって駆動される。未制御の血管形成は、特定の障害もしくは疾患を直接的に生じ得るか、または既存の病理学的な状態を増悪し得、その結果新血管新生が有害になり、創傷治癒における状態のように、所望されない。例えば、眼の新血管新生は、失明の最も一般的な原因とみなされており、眼の多くの有害条件の病態の基礎にある。いくつかの以前に存在する状態、例えば、関節炎を考慮すれば、新規に形成された毛細血管は関節に浸潤して、軟骨を破壊する。糖尿病では、網膜で形成された新規な毛細管が硝子体液に浸潤して、出血および失明を生じる。
【０００５】
固形腫瘍の増殖および転移の両方とも血管形成依存性である。例えば、直径２ｍｍより大きく拡大する腫瘍は、それら自体の血液供給を得なければならず、そして新規な毛細管の成長を誘導することによって血液供給を得るということが示されている。これらの新しい血管が、腫瘍に包埋した後、それらは、腫瘍増殖に必須の栄養素および増殖因子、ならびに腫瘍細胞が循環に入りそして遠位、例えば、肝臓、肺または骨に転移する手段を提供する（非特許文献１）。そのため、明らかに、血管形成の防止または減少が、ガンならびに他の血管形成関連の障害および疾患を処置するために所望される。
【０００６】
腫瘍血管形成の阻害が決定的に重要な目標である１つの特定の領域は、前立腺癌（ＰＣ）の処置である。ＰＣは米国では最も一般的に診断される非皮膚の悪性腫瘍であり、局在するＰＣを有する男性では局所処置様式を用いて治癒は可能であるが、より進行した疾患については治療的な処置は存在しない。後期段階のＰＣについて有効な処置は、アンドロゲン依存性の疾患において働くと考えられる抗アポトーシス性薬物耐性機構を克服しなければならない。ＰＣの原発部位での腫瘍増殖は、通常は致死ではないが、遠位への転移および転移性病巣の増殖における予防は、生存に重要である。進行したＰＣについての一次治療は、長期間にわたって、処置された男性の７５％を超えて転移性のＰＣを制御するストラテジーであるアンドロゲンアブレーション（ａｂｌａｔｉｏｎ）からなる。しかし、不幸にも、転移性ＰＣを有する全ての男性が、アンドロゲン独立性（ＡＩ）疾患を最終的に発症する。ホルモン不応性ＰＣ（ＨＲＰＣ）は、転移性ＰＣ細胞のサブセットから発達し、これは、生存経路を活性化して、アンドロゲンによる刺激なしにアンドロゲンレセプター（ＡＲ）媒介性シグナル伝達経路によって増殖する能力を獲得する。男性が一旦ＨＰＲＣを発症すれば、処置は症状の緩和を指向し、そして中央生存値は、６〜１２ヶ月の範囲である。ＨＲＰＣについて現在承認されている併用療法（ドセタキセル＋プレドニゾン）は生存を延長したが、それはわずか２〜４ヶ月の延長であった。
【０００７】
低酸素誘導性因子１（ＨＩＦ−１）は２つのタンパク質：ＨＩＦ−１αおよびＨＩＦ−１βから作成される異種二量体のタンパク質である。ＨＩＦ−１は、生理学的状況および病態生理学的な状況の両方において低酸素に曝された細胞で遺伝子発現を調節する。
【０００８】
ＨＩＦ−１は、血管形成、グルコース代謝、細胞増殖／生存および浸潤／転移に関与するタンパク質をコードする多くの遺伝子の転写を活性化する。ＨＩＦ−１はまた、創傷治癒、骨発達、脂肪生成、乳腺発達および炎症を含む、驚くほど多様な正常な組織プロセスにおいて必須の役割を果たす（非特許文献２；非特許文献３；非特許文献４；非特許文献５；非特許文献６）。
【０００９】
ＨＩＦ−１αタンパク質合成は、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）およびＥＲＫ分裂促進因子活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）経路の活性化によって調節される。これらの経路は、レセプターチロシンキナーゼ、非レセプターチロシンキナーゼまたはＧタンパク質カップリングレセプターを介するシグナル伝達によって活性化され得る。
【００１０】
ＨＩＦ−１αタンパク質分解は、Ｅ３ユビキチン−タンパク質リガーゼによる遍在化のためにタンパク質を標的する、酸素依存性プロリルヒドロキシル化によって調節される。これらのリガーゼは、ヒドロキシル化ＨＩＦ−１αに特異的に結合するＶｏｎ  Ｈｉｐｐｅｌリンダウ腫瘍抑制タンパク質（ｌｉｎｄａｕ  ｔｕｍｏｒ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒタンパク質）（ＶＨＬ）を含む。遍在化したＨＩＦ−１αはプロテアソームによって急速に分解される。
【００１１】
ＨＩＦ−１αは、腫瘍内の低酸素、ならびに遺伝子変化、例えば、ガン遺伝子（例えば、ＥＲＢＢ２）における機能獲得変異および腫瘍抑制遺伝子（例えばＶＨＬおよびＰＴＥＮ）における機能変異の損失の結果として、ヒトのガンで過剰発現される。ＨＩＦ１α過剰発現は、処置の不全および死亡率の増大に関連する（非特許文献７）。
【００１２】
今日までに開発されている血管形成インヒビターは、有意な不利点をともなっている。例えば、スラミンは強力な血管形成インヒビターであるが、抗腫瘍活性に達するのに必要な用量では、ヒトにおいて重篤な全身性の毒性が生じる。他の化合物、例えば、レチノイドおよびインターフェロンは、ヒトでの使用に安全と思われるが、弱い抗血管形成効果しか有さない。さらに他の化合物は、作成が困難であるかもしれないし、または作成に費用が嵩むかもしれない。これらの問題を考慮して、血管形成を阻害するためにさらに有効な方法および組成物が継続して必要である。理想的な血管形成インヒビターは以下である。
【００１３】
有意な全身毒性を生じない用量で血管形成が阻害されないように十分に強力である。
【００１４】
実質的なアポトーシス促進活性を示す。
【００１５】
経口活性であり、すなわち、非経口投与が不必要である十分な経口バイオアベイラビリティーを示す。
【００１６】
別の血管形成または抗増殖性因子と組み合わせて使用し得、そしておそらく第二の因子とともに用いられる場合相乗的（すなわち相加的よりも優れた）効果さえ示し、そして、
合成が単純であって、合成するのに費用効果が高い。
【００１７】
本発明は、前述の特徴のいくつかまたは全てを示す化合物を用いて、増殖および血管形成を阻害するための方法を提供する。Ｔａｎａｂｅらの特許文献１、特許文献２、特許文献３、特許文献４、特許文献５、および特許文献６（共通してＳＲＩ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｍｅｎｌｏ  Ｐａｒｋ，ＣＡに譲渡された）は、新規なステロイド化合物のファミリーを、抗エストロゲン剤として、そして乳房、卵巣および子宮のガンを含むエストロゲン依存性障害（すなわち、エストロゲン誘導性またはエストロゲン刺激性である状態または疾患）を処置するために有用であるとして記載している。
【特許文献１】米国特許第６，０５４，４４６号明細書
【特許文献２】米国特許第６，２８１，２０５号明細書
【特許文献３】米国特許第６，４５５，５１７号明細書
【特許文献４】米国特許第６，５０３，８９６号明細書
【特許文献５】米国特許第６，５４８，４９１号明細書
【特許文献６】米国特許第６，７４７，０１８号明細書
【非特許文献１】Ｆｏｌｋｍａｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．（１９８６）４６（２）：４６７〜４７３
【非特許文献２】Ｅｌｓｏｎ  ＤＡら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ（２０００）６０：６１８９〜６１９５
【非特許文献３】Ｓｃｈｉｐａｎｉ  Ｅ．ら、Ｇｅｎｅｓ  Ｄｅｖ（２００１）１５：２８６５〜２８７６
【非特許文献４】Ｙｕｎ  Ｚら、，Ｄｅｖ  Ｃｅｌｌ（２００２）２：３３１〜３４１
【非特許文献５】Ｃｒａｍｅｒ  Ｔら、Ｃｅｌｌ（２００３）１１２：６４５〜６５７
【非特許文献６】Ｓｅａｇｒｏｖｅｓ  ＴＮら、Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ（２００３）１３０：１７１３〜１７２４
【非特許文献７】Ｓｅｍｅｎｚａ  ＧＬ  Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ（２００３）３：７２１〜３２
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１８】
抗エストロゲン剤として前述の特許に記載された特定の化合物は、全く予期されぬことに、ＨＩＦ−１および血管形成の強力なインヒビターでもあり、そして進行性の前立腺癌のようなホルモン依存性でないガンの処置において特に有用であるということが現在発見されている。
【００１９】
従って、１実施形態では、血管形成に関与する医学的状態を伴う患者を処置するための方法が提供され、この方法は、治療上有効な量のステロイド性抗血管形成化合物をこの患者に投与する工程を包含する。この医学的状態とは、血管形成の少なくとも部分的な阻害によって処置可能であり得る状態である。一般には、この状態とは、未制御の血管形成を伴うかまたはそれに由来する疾患または障害である。このような状態としては、限定はしないが以下が挙げられる：肺癌、脳の癌および前立腺癌、特に非アンドロゲン依存性前立腺癌を含むガン；有害な新血管形成に関連する状態、例えば、眼の新血管形成を伴う眼の障害で、これには、血管新生緑内障、角膜移植片新血管形成、水晶体後線維増殖症および糖尿病性網膜症を含む；および慢性炎症性状態、例えば、乾癬および慢性関節リウマチ。
【００２０】
別の実施形態では、ＨＩＦ−１過剰発現に関与する医学的状態、例えば、とりわけ、血管形成状態、グルコース代謝異常および細胞増殖／生存および浸潤／代謝状態を有する患者を処置するための方法が提供される。
【００２１】
前述の方法で投与されるステロイド化合物は、式（Ｉ）
【００２２】
【化２２】
2008536939.tif 000003
の構造を有し、ここで、
Ｚは−Ｏ−（Ｌ）ｑ−、−Ｓ−（Ｌ）ｑ−、または−ＮＲ１２−（Ｌ）ｑ−であり、ｑがゼロまたは１であり、Ｌが単環式アリールであり、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ハロ、アミノ、およびＣ１−Ｃ６アルキル置換アミノから独立して選択される最大４個の置換基で必要に応じて置換され、Ｌ上の任意の２つの隣接する置換基は、一緒になって、必要に応じて置換される環状構造を形成し得、かつＲ１２は水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
ｘは包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
ｑがゼロである場合、ｙは包括的に２〜約６の範囲の整数であり、そしてｑが１である場合、ｙは包括的に１〜約６までの範囲の整数であり；
Ｒ１およびＲ２は独立して、水素およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択されるか、または一緒になって０〜２個のさらなるヘテロ原子を含む必要に応じて置換された窒素複素環を形成し得；
Ｒ３は、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ２−Ｃ３アルケニル、単環式アリール、および単環式アリール置換Ｃ１−Ｃ３アルキルから選択され；
Ｒ４は、水素またはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５は、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびＣ２−Ｃ６アルケニルから選択され；
Ｒ６は水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ１２アシル、および−ＳＯ２ＮＨ２から選択され；
Ｒ７は、水素、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、−ＯＲ１３および−ＳＲ１３から選択され、Ｒ１３はＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アシル、またはアリールであり；
Ｒ８は水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、またはヒドロキシルであり；
Ｒ９は水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、アリール、およびアルカリル（ａｌｋａｒｙｌ）から選択され；そして
Ｒ１０およびＲ１１は独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択される化合物であるか。
【００２３】
あるいは、その薬学的に受容可能な塩であってもよい。
【００２４】
式（Ｉ）の化合物は、本発明の他の方法において同様に有用である。例えば、本発明はさらに、哺乳動物の組織においてＨＩＦ−１過剰発現または血管形成活性を阻害するための方法を提供し、この方法は、この組織と式（Ｉ）の化合物とを接触させる工程を包含する。別の実施形態では、哺乳動物の内皮細胞の増殖を阻害するための方法が提供され、この方法は、このような細胞と式（Ｉ）の化合物とを接触させる工程を包含する。さらなる別の実施形態では、ＨＩＦ−１を過剰発現する哺乳動物細胞の増殖を阻害するための方法が提供され、この方法は、このような細胞と式（Ｉ）の化合物とを接触させる工程を包含する。
【００２５】
さらなる実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、非アンドロゲン依存性の前立腺癌を含む前立腺癌の処置において用いられる。関連の実施形態では、ガン細胞におけるアポトーシスを誘導するための方法が提供され、この方法は、このような細胞と式（Ｉ）の構造を有する化合物とを接触させる工程を包含する。
【００２６】
さらなる実施形態では、式（Ｉ）の化合物を、Ｇ１期において、すなわち、ＤＮＡ合成が生じるＳ期の前に、ガン細胞の細胞周期停止を達成するための方法において用いる。
【００２７】
抗ガン剤の有効用量を低下させるため、すなわち、その薬剤を単独療法レジメンで用いる場合に必要な最小有効用量未満に有効用量を低下させるための方法も提供され、ここでこの方法は式（Ｉ）の化合物とともに抗癌剤を投与する工程を包含する。
【００２８】
別の実施形態では、任意の前述の方法、例えば、ＨＩＦ−１過剰発現または血管形成に関与する医学的状態を有する患者を処置するための方法は、式（ＩＩＩ）
【００２９】
【化２３】
2008536939.tif 000004
の化合物であって、このｘ、ｙ、Ｚ、Ｌ、ｑ、およびＲ１〜Ｒ１３が式（Ｉ）の変数および置換基について規定されるとおりである化合物の治療上有効な量を患者に投与することによって行われてもよい。式（ＩＶ）の化合物は、式（Ｉ）の化合物と類似であるが、Ｃ１７およびＣ２０の炭素原子を結合する単結合を有し、一方、式（ＩＩ）の化合物は、Ｃ１７およびＣ２０を結合する二重結合を有することが理解される。
【００３０】
本発明はさらに組成物を、経口投与可能な薬学的組成物の形態で提供し、この組成物は、経口剤形への組み込みのために適切なキャリアおよび式（Ｉ）の構造を有する化合物の治療上有効な量を含み、ここで、ｘ、ｙ、Ｚ、Ｌ、ｑ、およびＲ１〜Ｒ１３は、この化合物の分子量が多くとも約７５０であるように選択される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３１】
（定義および命名法）
他に示さない限り、本発明は、特定の化合物、置換基、薬学的組成物、投与形態などに限定されず、変化してもよい。本明細書において用いられる用語法は、特定の実施形態のみを記載する目的であり、かつ限定を意図するものではないことも理解されるべきである。
【００３２】
本明細書においておよび添付の特許請求の範囲において用いられる場合、単数形「１つ、１つの（ａ）、（ａｎ）」、および「この、その、該、前記（ｔｈｅ）」は、文脈が明確に他を示すのでない限り、複数の言及を包含する。従って、例えば、「置換基（ｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔ）」という言及は、単独置換、および同じであっても異なってもよい２つ以上の置換基を包含し、「化合物（ｃｏｍｐｏｕｎｄ）」という言及は、異なる化合物の組み合わせまたは混合物、および単独の化合物を包含し、「薬学的に受容可能なキャリア（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ  ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ  ｃａｒｒｉｅｒ）」という言及は、このようなキャリアの２つ以上、および単独のキャリアなどを包含する。
【００３３】
本明細書において、および添付の特許請求の範囲において、多数の用語に言及がなされ、これは以下の意味を有すると規定されるものとする。
【００３４】
本明細書において用いる場合、「式〜を有する（ｈａｖｉｎｇ  ｔｈｅ  ｆｏｒｍｕｌａ）」または「構造〜を有する（ｈａｖｉｎｇ  ｔｈｅ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ）」という句は、限定されるものではなく、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語が一般に用いられるのと同じように用いられる。
【００３５】
本明細書において用いる場合、「アルキル（ａｌｋｙｌ）」という用語は、分枝または未分枝の飽和炭化水素基であって、ただし代表的には１〜約２４炭素原子を含む必要はない炭化水素基、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、オクチル、デシルなど、ならびにシクロアルキル基、例えば、シクロペンチル、シクロヘキシルなどをいう。一般には、やはり必須ではないが、本明細書におけるアルキル基は、１〜約１８個の炭素原子、好ましくは１〜約１２個の炭素原子を含む。「低級アルキル（ｌｏｗｅｒ  ａｌｋｙｌ）」という用語は、１〜６炭素原子のアルキル基を意図する。好ましい低級アルキル置換基は、１〜３個の炭素原子を含み、そして特に好ましくは、このような置換基は、１または２個の炭素原子（すなわち、メチルおよびエチル）を含む。「置換されたアルキル（ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ａｌｋｙｌ）」とは、１つ以上の置換基で置換されたアルキルをいい、そして「ヘテロ原子含有アルキル（ｈｅｔｅｒｏａｔｏｍ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ａｌｋｙｌ）」および「ヘテロアルキル（ｈｅｔｅｒｏａｌｋｙｌ）」という用語は、アルキル基をいい、下にさらに詳細に記載されるように、少なくとも１つの炭素原子がヘテロ原子で置換される。他に示さない限り、「アルキル（ａｌｋｙｌ）」および「低級アルキル（ｌｏｗｅｒ  ａｌｋｙｌ）」という用語は、それぞれ直線、分枝した、環状、非置換、置換および／またはヘテロ原子含有のアルキルまたは低級アルキルを包含する。
【００３６】
「アルケニル（ａｌｋｅｎｙｌ）」という用語は、本明細書において用いる場合、少なくとも１つの二重結合を含む２〜２４個の炭素原子の直鎖、分枝または環状の炭化水素基、例えば、エテニル、ｎ−プロペニル、イソプロペニル、ｎ−ブテニル、イソブテニル、オクテニル、デセニル、テトラデセニル、ヘキサデセニル、エイコセニル、テトラコセニルなどをいう。一般には、ここでも必須ではないが、本明細書のアルケニル基は、２〜約１８個の炭素原子、好ましくは２〜１２個の炭素原子を含む。「低級アルケニル（ｌｏｗｅｒ  ａｌｋｅｎｙｌ）」という用語は、２〜６個の炭素原子のアルケニル基を意図し、そして「シクロアルケニル（ｃｙｃｌｏａｌｋｅｎｙｌ）」という特定の用語は、環状アルケニル基を意図し、好ましくは５〜８個の炭素原子を有する。「置換されたアルケニル（ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ａｌｋｅｎｙｌ）」という用語は、１つ以上の置換基で置換されたアルケニルをいい、そして「ヘテロ原子含有アルケニル（ｈｅｔｅｒｏａｔｏｍ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ａｌｋｅｎｙｌ）」および「ヘテロアルケニル（ｈｅｔｅｒｏａｌｋｅｎｙｌ）」という用語は、アルケニルであって、少なくとも１つの炭素原子がヘテロ原子で置換されるアルケニルをいう。他に示さない場合、「アルケニル（ａｌｋｅｎｙｌ）」および「低級アルケニル（ｌｏｗｅｒ  ａｌｋｅｎｙｌ）」という用語は、それぞれ、直鎖、分枝、環状、未置換、置換および／またはヘテロ原子含有のアルケニルおよび低級アルケニルを包含する。
【００３７】
本明細書において用いる場合、「アルコキシ（ａｌｋｏｘｙ）」という用語は、単独の末端エーテル結合を通じたアルキル基結合を意図する；すなわち、「アルコキシ（ａｌｋｏｘｙ）」基は、アルキルが上記で規定されるＯ−アルキルとして提示され得る。「低級アルコキシ（ｌｏｗｅｒ  ａｌｋｏｘｙ）」基は、１〜６個の炭素原子を含むアルコキシ基を意図し、そして例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｔ−ブチルオキシなどを包含する。好ましい低級アルコキシ置換基は、１〜３個の炭素原子を含み、そして特に好ましくはこのような置換基は、１または２個の炭素原子（すなわち、メトキシおよびエトキシ）を含む。アルコキシ置換基は、環状構造上で第二の置換基、例えば隣接する置換基と一緒になって、環状エーテル、例えば［１，４］ジオキサン、［１，３］ジオキソラン、またはテトラヒドロピラニル環を形成し得る。「アルケニルオキシ（ａｌｋｅｎｙｌｏｘｙ）」および「アルキニルオキシ（ａｌｋｙｎｙｌｏｘｙ）」という用語は、類似の方式で規定される。
【００３８】
「アリール（ａｒｙｌ）」という用語は、本明細書において用いる場合、そして他に特定しない限り、単一の芳香族環、あるいは一緒に融合される、直接結合される、または間接的に結合される（その結果、種々の芳香族環がメチレンまたはエチレン部分のような共通の基に結合される）、複数の芳香族環を含む芳香族置換基をいう。好ましいアリール基は、５〜２４個の炭素原子を含み、そして詳細には好ましいアリール基は、５〜１４個の炭素原子を含む。例示的なアリール基は、１つの芳香族環または２つの融合されるかもしくは結合された芳香族環、例えば、フェニル、ナフチル、ビフェニル、ジフェニルエーテル、ジフェニルアミン、ベンゾフェノンなどを含む。「置換された  アリール（ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ａｒｙｌ）」とは、１つ以上の置換基で置換されたアリール部分をいい、そして「ヘテロ原子含有アリール（ｈｅｔｅｒｏａｔｏｍ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ａｒｙｌ）」および「ヘテロアリール（ｈｅｔｅｒｏａｒｙｌ）」という用語は、アリール置換基をいい、ここでは少なくとも１つの炭素原子が、下に詳細に記載されるようにヘテロ原子で置換される。他に示さない場合、「アリール（ａｒｙｌ）」という用語は、未置換、置換および／またはヘテロ原子含有芳香族置換基を包含する。
【００３９】
「アルカリル（ａｌｋａｒｙｌ）」という用語は、アルキル置換基を有するアリール基をいい、この「アラルキル（ａｒａｌｋｙｌ）」という用語は、アリール置換基を有するアルキル基をいい、ここで「アリール（ａｒｙｌ）」および「アルキル（ａｌｋｙｌ）」は上記のとおりである。好ましいアラルキル基は、６〜２４個の炭素原子を含み、そして特に好ましいアラルキル基は６〜１６個の炭素原子を含む。アラルキル基の例としては、限定はしないが、ベンジル、２−フェニル−エチル、３−フェニル−プロピル、４−フェニル−ブチル、５−フェニル−ペンチル、４−フェニルシクロヘキシル、４−ベンジルシクロヘキシル、４−フェニルシクロヘキシルメチル、４−ベンジルシクロヘキシルメチル、などが挙げられる。アラルキル基としては、例えば、ｐ−メチルフェニル、２，４−ジメチルフェニル、ｐ−シクロヘキシルフェニル、２，７−ジメチルナフチル、７−シクロオクチルナフチル、３−エチル−シクロペンタ−１，４−ジエンなどが挙げられる。「アルカリルオキシ（ａｌｋａｒｙｌｏｘｙ）」および「アラルキルオキシ（ａｒａｌｋｙｌｏｘｙ）」という用語は、式−ＯＲの置換基であって、ここでＲは、規定されたとおりアルカリルまたはアラルキルである。
【００４０】
「アシル（ａｃｙｌ）」という用語は、式−（ＣＯ）−アルキル、−（ＣＯ）−アリール、または−（ＣＯ）−アラルキルを有する置換基をいい、そして「アシルオキシ（ａｃｙｌｏｘｙ）」という用語は、式−Ｏ（ＣＯ）−アルキル、−Ｏ（ＣＯ）−アリール、または−Ｏ（ＣＯ）−アラルキルを有する置換基であって、ここで「アルキル」、「アリール」、および「アラルキル」は上記で規定されたとおりである置換基をいう。
【００４１】
「環状の（ｃｙｃｌｉｃ）」という用語は、脂環式または芳香族の置換基をいい、これは置換されてもされなくても、そして／またはヘテロ原子含有であってもよく、そして単環式でも、二環式でも、または多環式であってもよい。
【００４２】
「脂環式（ａｌｉｃｙｃｌｉｃ）」という用語は、従来の意味で用いて、芳香族環状部分とは反対に、脂肪族の環状部分を指し、そして単環式でも、二環式でも、または多環式でもよい。
【００４３】
「ハロ（ｈａｌｏ）」および「ハロゲン（ｈａｌｏｇｅｎ）」という用語は、従来の意味で用いて、クロロ、ブロモ、フルオロまたはヨード置換基をいう。
【００４４】
「ヘテロ原子含有（ｈｅｔｅｒｏａｔｏｍ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」という用語は、「ヘテロ原子含有アルキル基（ｈｅｔｅｒｏａｔｏｍ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ａｌｋｙｌ  ｇｒｏｕｐ）」（「ヘテロアルキル（ｈｅｔｅｒｏａｌｋｙｌ）」基とも呼ばれる）または「ヘテロ原子含有アリール基（ｈｅｔｅｒｏａｔｏｍ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ａｒｙｌ  ｇｒｏｕｐ）」（「ヘテロアリール（ｈｅｔｅｒｏａｒｙｌ）」基とも呼ばれる）においてと同様、分子、結合または置換基であって、１つ以上の炭素原子が炭素以外の原子、例えば窒素、酸素、イオウ、リンまたはケイ素で、代表的には窒素、酸素またはイオウ、好ましくは窒素または酸素で置換される分子、結合または置換基をいう。同様に、「ヘテロアルキル（ｈｅｔｅｒｏａｌｋｙｌ）」という用語は、ヘテロ原子含有であるアルキル基換基をいい、「複素環式（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ）」という用語は、ヘテロ原子含有である環状置換基をいい、「ヘテロアリール（ｈｅｔｅｒｏａｒｙｌ）」および「複素環式芳香族化合物（ｈｅｔｅｒｏａｒｏｍａｔｉｃ）」という用語はそれぞれ、ヘテロ原子含有である「アリール（ａｒｙｌ）」および「芳香族（ａｒｏｍａｔｉｃ）」置換基をいう、など。ヘテロアルキル基の例としては、アルコキシアリール、アルキルスルファニル置換アルキル、Ｎ−アルキル化アミノアルキルなどが挙げられる。ヘテロアリール置換基の例としては、ピロリル、ピロリジニル、ピリジニル、キノリニル、インドリル、ピリミジニル、イミダゾリル、１，２，４−トリアゾリル、テトラゾリルなどが挙げられ、そしてヘテロ原子含有脂環式基の例は、ピロリジノ、モルホリノ、ピペラジノ、ピペリジノなどである。
【００４５】
「ヒドロカルビル（ｈｙｄｒｏｃａｒｂｙｌ）」とは、１〜約３０個の炭素原子、好ましくは１〜約２４個の炭素原子、より好ましくは１〜約１８個の炭素原子、最も好ましくは約１〜１２個の炭素原子を含む単価のヒドロカルビルラジカルをいい、これには、直鎖、分枝、環状、飽和および不飽和種、例えば、アルキル基、アルケニル基、アリール基などを含む。「置換ヒドロカルビル（ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ｈｙｄｒｏｃａｒｂｙｌ）」とは、１つ以上の置換基で置換されるヒドロカルビルをいい、そして「ヘテロ原子含有ヒドロカルビル（ｈｅｔｅｒｏａｔｏｍ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ｈｙｄｒｏｃａｒｂｙｌ）」という用語は、ヒドロカルビルであって、少なくとも１つの炭素原子がヘテロ原子で置換されるヒドロカルビルをいう。他に示さない限り、「ヒドロカルビル（ｈｙｄｒｏｃａｒｂｙｌ）」とは、置換および／またはヘテロ原子含有ヒドロカルビル部分を含むものと解釈されるべきである。
【００４６】
官能基が「保護される（ｐｒｏｔｅｃｔｅｄ）」と称される場合、これは、この基が改変型であって保護された部位で所望されない副反応を妨げるということを意味する。本発明の化合物の適切な保護基は、当業者のレベルを考慮し、そして標準的な教科書、例えば、Ｇｒｅｅｎｅら、，  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｗｉｌｅｙ，１９９１）を参照して、本出願から認識される。
【００４７】
「置換される（ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ）」とは、「置換アルキル（ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ａｌｋｙｌ）」、「置換アリール（ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ａｒｙｌ）」などにおいてのように、前述の定義のいくつかにおいて暗示されるとおり、アルキル、アリール、または他の部分において、炭素（または他の）原子に結合した少なくとも１つの水素原子が、１つ以上の非水素置換基で置き換えられることを意味する。このような置換基の例としては、限定はしないが、以下が挙げられる：官能基、例えば、ハロ、ヒドロキシル、スルフヒドリル、Ｃ１−Ｃ２４アルコキシ、Ｃ２−Ｃ２４アルケニルオキシ、Ｃ５−Ｃ２４アリールオキシ、アシル（これには以下を含むＣ２−Ｃ２４アルキルカルボニル（−ＣＯ−アルキル）およびＣ６−Ｃ２４アリールカルボニル（−ＣＯ−アリール））、アシルオキシ（−Ｏ−アシル）、Ｃ２−Ｃ２４アルコキシカルボニル（−（ＣＯ）−Ｏ−アルキル）、Ｃ６−Ｃ２４アリールオキシカルボニル（−（ＣＯ）−Ｏ−アリール）、ハロカルボニル（−ＣＯ）−Ｘで、ここでＸはハロである）、Ｃ２−Ｃ２４アルキルカルボナート（−Ｏ−（ＣＯ）−Ｏ−アルキル）、Ｃ６−Ｃ２４アリールカルボナート（−Ｏ−（ＣＯ）−Ｏ−アリール）、カルボキシ（−ＣＯＯＨ）、カルボキシラト（−ＣＯＯ−）、カルバモイル（−（ＣＯ）−ＮＨ２）、モノ−（Ｃ１−Ｃ２４アルキル）置換カルバモイル（−（ＣＯ）−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ２４アルキル））、ジ−（Ｃ１−Ｃ２４アルキル）置換カルバモイル（−（ＣＯ）−Ｎ（Ｃ１−Ｃ２４アルキル）２）、モノ−（Ｃ６−Ｃ２４アリール）置換カルバモイル（−（ＣＯ）−ＮＨ−アリール）、ジ−（Ｃ６−Ｃ２４アリール）置換カルバモイル（−（ＣＯ）−Ｎ（アリール）２）、ジ−Ｎ−（Ｃ１−Ｃ２４アルキル）、Ｎ−（Ｃ６−Ｃ２４アリール）置換カルバモイル、チオカルバモイル（−（ＣＳ）−ＮＨ２）、カルバミド（−ＮＨ−（ＣＯ）−ＮＨ２）、シアノ（−Ｃ≡Ｎ）、イソシアノ（−Ｎ＋≡Ｃ−）、シアナト（−Ｏ−Ｃ≡Ｎ）、イソシアナト（−Ｏ−Ｎ＋≡Ｃ−）、イソチオシアナト（−Ｓ−Ｃ≡Ｎ）、アジド（−Ｎ＝Ｎ＋＝Ｎ−）、ホルミル（−（ＣＯ）−Ｈ）、チオホルミル（−（ＣＳ）−Ｈ）、アミノ（−ＮＨ２）、モノ−（Ｃ１−Ｃ２４アルキル）置換アミノ、ジ−（Ｃ１−Ｃ２４アルキル）置換アミノ、モノ−（Ｃ５−Ｃ２４アリール）置換アミノ、ジ−（Ｃ５−Ｃ２４アリール）置換アミノ、Ｃ２−Ｃ２４アルキルアミド（−ＮＨ−（ＣＯ）−アルキル）、Ｃ６−Ｃ２４アリールアミド（−ＮＨ−（ＣＯ）−アリール）、イミノ（−ＣＲ＝ＮＨ、ここでＲ＝水素、Ｃ１−Ｃ２４アルキル、Ｃ５−Ｃ２４アリール、Ｃ６−Ｃ２４アルカリル、Ｃ６−Ｃ２４アラルキルなどである）、アルキルイミノ（−ＣＲ＝Ｎ（アルキル）、ここでＲ＝水素、Ｃ１−Ｃ２４アルキル、Ｃ５−Ｃ２４アリール、Ｃ６−Ｃ２４アルカリル、Ｃ６−Ｃ２４アラルキルなどである）、アリールイミノ（−ＣＲ＝Ｎ（アリール）、ここでＲ＝水素、Ｃ１−Ｃ２４アルキル、Ｃ５−Ｃ２４アリール、Ｃ６−Ｃ２４アルカリル、Ｃ６−Ｃ２４アラルキル、などである）、ニトロ（−ＮＯ２）、ニトロソ（−ＮＯ）、スルホ（−ＳＯ２−ＯＨ）、スルホナト（−ＳＯ２��Ｏ−）、Ｃ１−Ｃ２４アルキルスルファニル（−Ｓ−アルキル；「アルキルチオ（ａｌｋｙｌｔｈｉｏ）」とも呼ばれる）、アリールスルファニル（−Ｓ−アリール；「アリールチオ（ａｒｙｌｔｈｉｏ）」とも呼ばれる）、Ｃ１−Ｃ２４アルキルスルフィニル（−（ＳＯ）−アルキル）、Ｃ５−Ｃ２４アリールスルフィニル（−（ＳＯ）−アリール）、Ｃ１−Ｃ２４アルキルスルホニル（−ＳＯ２−アルキル）、Ｃ５−Ｃ２４アリールスルホニル（−ＳＯ２−アリール）、ホスホノ（−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２）、ホスホナト（−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）２）、ホスフィナト（−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−））、ホスホ（−ＰＯ２）、およびホスフィノ（−ＰＨ２）；およびヒドロカルビル部分Ｃ１−Ｃ２４アルキル（好ましくはＣ１−Ｃ１８アルキル、より好ましくはＣ１−Ｃ１２アルキル、最も好ましくはＣ１−Ｃ６アルキル）、Ｃ２−Ｃ２４アルケニル（好ましくはＣ２−Ｃ１８アルケニル、より好ましくはＣ２−Ｃ１２アルケニル、最も好ましくはＣ２−Ｃ６アルケニル）、Ｃ５−Ｃ２４アリール（好ましくはＣ５−Ｃ１４アリール）、Ｃ６−Ｃ２４アルカリル（好ましくはＣ６−Ｃ１８アルカリル）、およびＣ６−Ｃ２４アラルキル（好ましくはＣ６−Ｃ１８アラルキル）。
【００４８】
さらに、前述の官能基は、特定の基が可能である場合、１つ以上のさらなる置換基でさらに置換されてもよいし、または１つ以上のヒドロカルビル部分、例えば、上記で特に列挙されたもので置換されてもよい。同様に、上述のヒドロカルビル部分はさらに、１つ以上の官能基で、またはさらなるヒドロカルビル部分、例えば、特に列挙されたもので置換されてもよい。
【００４９】
「置換された（ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ）」という用語が可能な置換基の列挙の前にある場合、この用語はその基のあらゆるメンバーにあてはまるとものとする。例えば、「置換アルキル、アルケニル、およびアリール（ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ａｌｋｙｌ、ａｌｋｅｎｙｌ、ａｎｄ  ａｒｙｌ）」という句は、「置換アルキル、置換アルケニル、および置換アリール（ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ａｌｋｙｌ、ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ａｌｋｅｎｙｌ、ａｎｄ  ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ａｒｙｌ）」と解釈されるべきである。同じように、「ヘテロ原子含有（ｈｅｔｅｒｏａｔｏｍ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」という用語が、可能なヘテロ原子含有基の列挙の前にある場合、この用語はその基のあらゆるメンバーにあてはまるものとする。例えば、「ヘテロ原子含有アルキル、アルケニル、およびアリール（ｈｅｔｅｒｏａｔｏｍ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ａｌｋｙｌ，ａｌｋｅｎｙｌ、ａｎｄ  ａｒｙｌ）」という句は、「ヘテロ原子含有のアルキル、置換アルケニル、および置換アリール（ｈｅｔｅｒｏａｔｏｍ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ａｌｋｙｌ，ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ａｌｋｅｎｙｌ，ａｎｄ  ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ａｒｙｌ）」と解釈されるべきである。
【００５０】
「任意の（ｏｐｔｉｏｎａｌ）」または「必要に応じて（ｏｐｔｉｏｎａｌｌｙ）」とは、この実質的に記載された状況が、存在しても存在しなくてもよいことを意味し、その結果この説明はこの状況が生じる場合および生じない場合を包含する。例えば、「必要に応じて置換される（ｏｐｔｉｏｎａｌｌｙ  ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ）」という句は、水素以外の置換基が所定の原子上に存在してもしなくてもよいことを意味し、従って、この説明は、水素以外の置換基が存在する構造および水素以外の置換基が存在しない構造を包含する。
【００５１】
【化２４】
2008536939.tif 000005
基および置換基の位置を記載するのにおいて、上述の番号付けシステムを使用して、ＩＵＰＡＣまたは化学情報検索サービス機関（Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｂｓｔｒａｃｔｓ  Ｓｅｒｖｉｃｅ）によって用いられる協定に対してシクロペンタノフェナントレン核の番号付けを確認する。本明細書において用いる場合、「ステロイド（ｓｔｅｒｏｉｄ）」という用語は、前述のシクロペンタノフェナントレン核を有する化合物を意味するものとする。本発明のステロイドは、コア構造
【００５２】
【化２５】
2008536939.tif 000006
を有する置換、１，３，５（１０）エストラトリエンである。
【００５３】
本明細書の分子構造では、基の特定の高次構造を示すための太字および破線の使用はＩＵＰＡＣの協定に従う。破線によって示される結合は、該当の基が描画された分子の基本面の下であることを示し（「α」立体配置）、そして太線で示される結合は、該当の位置の基が描画された分子の基準面の上であることを示した（「β」立体配置）。
【００５４】
本明細書における特定の化合物または分子セグメントは、１つ以上の不斉中心を含んでもよく、従って異性体のラセミ混合物（５０〜５０）であっても、１方の異性体が過剰に存在する異性体の混合物であっても、または実質的に純粋な異性体であってもよいことも強調されるべきであり、「実質的に純粋（ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｌｌｙ  ｐｕｒｅ）とは、異性体の一方が、異性体の混合物のうち９０％より多く、好ましくは９５％より多く、より好ましくは９９％より多くに相当することを意味する。このようなキラル分子については、本明細書における開示は、異性体の混合物および実質的に純粋な異性体を包含するものとする。
【００５５】
オレフィン化合物または分子セグメントが「Ｅ」または「Ｚ」立体配置で描写される場合、この分子構造は、両方の代替物を包含するものであること、従って、「Ｅ」立体配置で置換されたと描写されたオレフィン部分もまた、「Ｚ」立体配置を包含すると解釈されるべきであることも理解されるべきである。例えば、化合物（Ｉ）におけるＣ１７−Ｃ２０二重結合は、「Ｅ」立体配置で置換されると本明細書において示される。描写された構造はまた、「Ｚ」立体配置を包含するものとされるが、描写される化合物では、「Ｅ」立体配置が、一般に好ましい。
【００５６】
本発明の化合物に対して活性因子として言及する場合、出願人らは、「化合物（ｃｏｍｐｏｕｎｄ）」または「活性因子（ａｃｔｉｖｅ  ａｇｅｎｔ）」という用語は、特定された分子部分を包含するだけでなく、その薬学的に受容可能な、薬学的に活性なアナログであって、限定はしないが、塩、エステル、アミド、プロドラッグ、結合体、活性代謝物および他のこのような誘導体、アナログおよび関連化合物を含むアナログも包含するものとする。
【００５７】
本明細書において用いる場合、「処置する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」および「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」という用語は、症状の重篤度および／または頻度の軽減、症状および／または背景の原因の排除、症状および／またはそれらの背景にある原因の出現の予防、ならびに障害の改善または治療を指す。従って、本発明の化合物を用いる患者の「処置」とは、感受性の個体における特定の障害および有害な生理学的事象の予防、ならびに障害または疾患を阻害するかまたはその退行を生じることによる、臨床的に症候性の個体の処置を包含する。
【００５８】
本発明の化合物の「有効量（ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ａｍｏｕｎｔ）」および「治療上有効な量（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｌｌｙ  ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ａｍｏｕｎｔ）」という用語は、所望の効果を提供するために十分な薬物または因子の量を意味する。
【００５９】
「剤形（ｄｏｓａｇｅ  ｆｏｒｍ）」という用語は、単回投与で治療効果を達成するために十分な量の活性因子を含む薬学的組成物の任意の形態を意味する。処方物が錠剤またはカプセルである場合、この剤形は一般に、このような錠剤またはカプセルである。過剰投与になることなく有効な方式で最も有効な結果を与える投与頻度は、その薬理学的特徴およびその物理学的特徴（例えば、親水性）の両方を含む、特定の活性因子の特徴で変化する。
【００６０】
「薬学的に受容可能な（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ  ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ）」とは、生物学的ではないか、そうでなければ所望されない物質を意味し、すなわちこの物質は、いかなる所望されない生物学的影響を生じることも、それが含まれる組成物の他の成分のいずれとも有害な様式で相互作用することもなく患者に投与される、薬学的組成物生物に組み込まれ得る。「薬学的に受容可能な（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ  ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ）」という用語を用いて薬学的なキャリアまたは賦形剤を指す場合、このキャリアまたは賦形剤は、必要な標準の毒性学的および製造的な試験を満たしていること、または米国の食品医薬品局（Ｕ．Ｓ．Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）によって調製された不活性成分ガイド（Ｉｎａｃｔｉｖｅ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ  Ｇｕｉｄｅ）に含まれることが暗示される。「薬理学的に活性な（ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ  ａｃｔｉｖｅ）」（または単に「活性な（ａｃｔｉｖｅ）」）とは、「薬理学的に活性な（ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ  ａｃｔｉｖｅ）」誘導体またはアナログにおいてと同様、親化合物と同じタイプおよびほぼ等価な程度の薬理学的な活性を有する誘導体またはアナログをいう。
【００６１】
（抗血管形成および抗ＨＩＦ−１化合物：）
１実施形態では、本発明の方法において用いられるステロイド抗血管形成および抗ＨＩＦ−１化合物は式（Ｉ）
【００６２】
【化２６】
2008536939.tif 000007
の構造を有し、この変数および置換基は以下のとおりである：
Ｚは、−Ｏ−（Ｌ）ｑ−、−Ｓ−（Ｌ）ｑ−、または−ＮＲ１２−（Ｌ）ｑ−であって、このｑはゼロまたは１であり、Ｌは単環式アリールであって、水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（例えば、メトキシ、エトキシなど）、Ｃ１−Ｃ６アルキル（例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｔ−ブチル、ｎ−ヘキシルなど）、ハロ、アミノ、およびＣ１−Ｃ６アルキル置換アミノ（例えば、メチルアミノ、エチルアミノ、イソプロピルアミノ、シクロヘキシルアミノなど）から独立して選択される最大４個の置換基で必要に応じて置換され、Ｌ上の任意の２つの隣接する置換基は、一緒になって、必要に応じて置換される環状構造を形成し得、かつＲ１２は水素またはＣ１−Ｃ６アルキルである。Ｌ上の隣接する置換基が結合される場合に形成された環状構造は、例えば、環状エーテル、例えば、［１，４］ジオキサン、［１、３］ジオキソラン、またはテトラヒドロピラニル環であってもよい。ｑが１であり、その結果Ｌが存在する場合、好ましい化合物は、Ｌ上の任意の置換基がＣ１−Ｃ６アルコキシ、例えば、メトキシ、エトキシなどである化合物である。特に好ましい実施形態では、Ｌはフェニル、２−メトキシフェニル、３−メトキシフェニル、２，５−ジメトキシフェニル、または２，６−ジメトキシフェニルである。ｑがゼロであるか１であるかにかかわらず、Ｚは好ましくはＯである。
【００６３】
下付き文字ｘおよびｙは、同じであっても異なってもよく、そして包括的に１〜約６までの範囲の整数である；しかし、ｑがゼロである場合、ｙは包括的に２〜約６の範囲の整数であり、そしてｑが１である場合、ｙは包括的に１〜約６の範囲の整数であってもよい。好ましい実施形態では、ｘは１または２であって、ｙは２である。ｑが１であり、その結果Ｌが存在する式（Ｉ）の化合物については、ｘおよびｙは好ましくは１である。ｑがゼロであり、その結果Ｌが存在しない式（ＩＩ）の化合物については、ｘは好ましくは１であってｙは２である。
【００６４】
Ｒ１およびＲ２は独立して、水素およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択されるか、または一緒になって０〜２個のさらなるヘテロ原子を含む必要に応じて置換された窒素複素環を形成し得る。例えば、Ｒ１は、水素、メチルもしくはエチルであり、そしてＲ２がメチルもしくはエチルであるか、またはＲ１およびＲ２は一緒になって、必要に応じて１つ以上の置換基で置換される窒素複素環、例えば、ピロリジノ、モルホリノ、ピペラジノ、またはピペリジノ環を形成してもよい。
【００６５】
Ｒ３は、水素、ヒドロキシル、ハロ、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ２−Ｃ３アルケニル、単環式アリール、および単環式アリール置換Ｃ１−Ｃ３アルキルから選択され、そして好ましくは、水素またはＣ１−Ｃ３アルキル、最も好ましくは水素またはメチルである。
【００６６】
Ｒ４は、水素またはＣ１−Ｃ６アルキル、好ましくは水素である。
【００６７】
Ｒ５は、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロ、シアノ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびＣ２−Ｃ６アルケニルから選択される。好ましくはＲ５は、水素、またはＣ１−Ｃ６アルコキシ、必要に応じて水素またはメトキシである。
【００６８】
Ｒ６は、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ１２アシル、および−ＳＯ２ＮＨ２から選択される。後者の２つの置換基は、この化合物を「プロドラッグ（ｐｒｏｄｒｕｇ）」に変換する。式（Ｉ）の化合物の他のプロドラッグも可能であって、そして本発明の方法および組成物によって包含される。
【００６９】
Ｒ７は、水素、ハロ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、−ＯＲ１３および−ＳＲ１３から選択され、Ｒ１３はＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アシル、Ｃ２−Ｃ６アシルオキシ、またはアリールである。代表的にはＲ７は、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、またはＣ２−Ｃ６アシルオキシである。
【００７０】
Ｒ８は水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、またはヒドロキシル、好ましくは水素である。
【００７１】
Ｒ９は水素、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、アリール、およびアルカリルから選択され；そして好ましくは水素である。
【００７２】
Ｒ１０およびＲ１１は独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、およびＣ１−Ｃ６アルキルから選択され、そして好ましくは水素である。
【００７３】
本発明の１つの重要な実施形態では、十分に経口的に生体利用可能であって、経口的に投与可能である式（Ｉ）の化合物が提供される；このような化合物では、この化合物の分子量が多くとも約７５０であるようにｘ、ｙ、Ｚ、Ｌ、ｑ、およびＲ１〜Ｒ１３が選択される。
【００７４】
式（Ｉ）の化合物の１つの好ましいサブセットでは、この化合物が式（ＩＩ）
【００７５】
【化２７】
2008536939.tif 000008
の構造を有するように、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１は水素である。
【００７６】
好ましいこのような化合物の１つの群では、ｑがゼロであって、その結果Ｚは−Ｏ−、−Ｓ−、または−ＮＲ１２−であって、ｘは１または２であり、そしてｙは２である。好ましくはＺはＯである。Ｒ１およびＲ２は上記のとおりであるが、好ましくはＲ１およびＲ２のうちの１つは水素、メチル、またはエチルであり、もう１つはメチルもしくはエチルであるか、またはＲ１およびＲ２は一緒になって、窒素複素環、例えば、ピロリジノ、モルホリノ、ピペラジノまたはピペリジノ環を形成し、１つ以上の置換基で必要に応じて置換される。これらの好ましい化合物では、Ｒ３は水素またはメチルである。
【００７７】
式（ＩＩ）では、ｘが１であり、ｙが２であり、Ｒ１およびＲ２がメチルであり、Ｒ３がメチルであり、ｑがゼロであり、かつＺが−Ｏ−である場合、式（２）
【００７８】
【化２８】
2008536939.tif 000009
の構造を有する本発明の１つの例示的な化合物が提供される。
【００７９】
ｘが１であり、ｙが１であり、Ｒ１およびＲ２がエチルであり、Ｒ３がメチルであり、ｑが１であり、Ｚが−Ｏ−Ｌ−であり、かつＬが２−メトキシフェニルまたはフェニルである場合、以下の２つの例示的な化合物が提供される：
【００８０】
【化２９】
2008536939.tif 000010
【００８１】
【化３０】
2008536939.tif 000011
本発明の方法において有用な他のステロイドの抗血管形成および抗ＨＩＦ−１の化合物は式（ＩＩＩ）
【００８２】
【化３１】
2008536939.tif 000012
の構造を有し、ここでｘ、ｙ、Ｚ、Ｌ、ｑ、およびＲ１〜Ｒ１３は、式（Ｉ）の変数および置換基について上記されるとおりである。式（ＩＩＩ）の化合物は、式（Ｉ）の化合物と類似であるが、Ｃ１７およびＣ２０炭素原子を連結する単結合を有し、一方式（ＩＩ）の化合物はＣ１７およびＣ２０を連結する二重結合を有することが理解される。
【００８３】
式（ＩＩＩ）の化合物の１つの好ましいサブセットでは、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１１は水素であって、その結果この化合物は式（ＩＶ）
【００８４】
【化３２】
2008536939.tif 000013
の構造を有する。
【００８５】
特に好ましいこのような化合物では、ｑは１であり、Ｚは−Ｏ−Ｌ−であり、Ｌは２−メトキシフェニルであり、ｘは１であり、かつｙは１である。Ｒ１およびＲ２は上記のとおりであるが、好ましくはメチルまたはエチルであるか、または一緒になって、窒素複素環、例えば、ピロリジノ、モルホリノ、ピペラジノまたはピペリジノ環を形成し、必要に応じて１つ以上の置換基で置換される。Ｒ３は水素またはメチルである。１つの代表的なこのような化合物は式（Ｖ）：
【００８６】
【化３３】
2008536939.tif 000014
の構造を有し、ここでＲ１およびＲ２はエチルであり、そしてＲ３はメチルである。
【００８７】
これらの化合物は、比較的単純な直接的な方法を用いて高収率で合成され得る。構造式（Ｉ）によって包含される１つの代表的な化合物の合成は、実施例１に詳細に記載され、そしてこの化合物のクエン酸塩の調製は実施例２に記載される。多くの他の式（Ｉ）の化合物の合成は、Ｔａｎａｂｅらの米国特許第６，２８１，２０５号（ＳＲＩ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｍｅｎｌｏ  Ｐａｒｋ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａに対してともに共同譲渡）に示され、これは、この化合物の使用を抗エストロゲン剤として開示しており、参照によって本明細書に援用される。前述の特許はまた、構造式（ＩＩＩ）によって包含される多数の化合物の合成を提供する。当業者は、当該分野で公知であるかまたは関連のテキストおよび文献に記載される方法に従って、本明細書において実施例１に説明される合成またはＴａｎａｂｅらの米国特許第６，２８１，２０５号に説明される合成を改変することによって式（Ｉ）および（ＩＩＩ）の他の化合物を合成し得る。３位で、すなわちＲ６でスルファミン酸基を有する化合物の合成に関与するさらなる情報については、参照によって本明細書に援用される、「Ｅｓｔｒｏｎｅ  Ｓｕｌｆａｍａｔｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｅｓｔｒｏｎｅ  Ｓｕｌｆａｔａｓｅ，ａｎｄ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｕｓｅ」と題されたＴａｎａｂｅらの米国特許第６，０４６，１８６号（これもともに共通譲渡）を参照しなければならないかもしれない。  
【００８８】
ちょうど記載された任意の化合物は、本発明の文脈において塩、エステル、アミド、プロドラッグ、活性代謝物、またはアナログが薬学的に受容可能であってかつ薬理学的に活性であるという条件ならば、塩、エステル、アミド、プロドラッグ、活性代謝物、アナログなどの形態であってもよい。塩、エステル、アミド、プロドラッグ、活性代謝物、アナログ、および活性因子の他の誘導体は、合成の有機化学の分野の当業者に公知の標準的な手順を用いて調製されてもよく、そして例えば、Ｊ．Ｍａｒｃｈ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，第４版（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，  １９９２）に記載されている。
【００８９】
例えば、酸付加塩は、遊離の塩基と酸との反応に関与する従来の方法論を用いて遊離の塩基（本発明の化合物ではＣ１７置換基上の末端アミノ基）から調製されてもよい。酸付加塩を調製するための適切な酸としては、有機酸、例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸など、ならびに無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの両方が挙げられる。酸付加塩は、適切な塩基での処理によって遊離の塩基に再変換され得る。逆に、存在し得る任意の酸性部分の塩基性塩の調製は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カルシウム、トリメチルアミンなどのような薬学的に受容可能な塩基を用いて類似の方式で行われてもよい。エステルの調製は、ヒドロキシル基と酸塩化物のようなエステル化試薬との反応を包含する。アミドは、適切なアミン反応物を用いてエステルから調製されてもよいし、またはそれらは、アンモニアもしくは低級アルキルアミンとの反応によって無水物もしくは酸塩化物から調製されてもよい。プロドラッグ、結合体および活性代謝物はまた、当業者に公知の技術を用いて調製されてもよく、または適切な文献に記載され得る。プロドラッグおよび結合体は代表的には、個々の代謝系によって改変されるまで治療的に不活性である化合物を生じる部分の共有結合によって調製される。
【００９０】
本明細書において好ましいアナログは、三級アミノ基−ＮＲ１Ｒ２および上記で説明されるような酸の会合によって形成される酸付加塩である。
【００９１】
（使用および投与：）
本明細書において記載される化合物は、血管形成およびＨＩＦ−１の阻害、特に多くの有害な生理学的状態に関連するような持続性かつ非制御のＨＩＦ−１過剰発現および血管形成の阻害において有用である。第一の実施形態では、血管形成またはＨＩＦ−１過剰発現に関連する医学的状態に罹患している患者を処置するための方法が提供される。処置は、式（Ｉ）の化合物（好ましい実施形態では）または式（ＩＩＩ）の化合物（別の実施形態では）の治療上有効な量を患者に投与する工程を包含する。「患者（ｐａｔｉｅｎｔ）」とは、哺乳動物の個体、一般にはヒトを意味する。
【００９２】
この化合物は、患者に対してそれ自体で、または適切なキャリアもしくは賦形剤と混合された薬学的組成物として投与され得る。本発明の化合物はまた、組み合わせて投与されてもよく、この場合それらは、別々に、異なる剤形で、または同時に、１剤形でまたは２つの異なる剤形で投与され得る。化合物はまた、他の抗血管形成因子、抗増殖因子、または処方医師によって特定の目的に適切であるとみなされ得るような他のタイプの因子と組み合わせて投与されてもよい。特定の目的の併用療法は、従来の化学療法と組み合わせてすなわち、タキサン、例えば、パクリタキセル、ドセタキセル、そのアナログなどのような抗ガン剤の投与を含む投薬レジメンにおいて、本発明の化合物を投与する工程を包含する。本明細書に記載される化合物を別の抗癌剤とともに投与することにより、この薬剤の必要な投与量を軽減し得、従って、このような薬物の多くの副作用を軽減し得ることが見出されている。
【００９３】
本発明と組み合わせた使用のために適切な薬学的処方物としては、「治療上有効な（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｌｌｙ  ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ）」量で、すなわち、その意図される目的、例えば、抗血管形成および抗ＨＩＦ−１を達成するために有効な量で活性因子が含まれる組成物が挙げられる。本発明の任意の特定の抗血管形成または抗ＨＩＦ−１因子の治療上有効な量の決定は、当業者の能力の十分に範囲内である。すなわち、任意の本発明の化合物について、治療上有効な用量は、細胞培養アッセイから最初に評価され得る。例えば、細胞培養物で決定され得るＩＣ５０値を含む循環濃度の範囲を得るための用量が処方され得る。このような情報は、ヒトで有用な用量をより正確に決定するために用いられ得る。
【００９４】
本明細書に記載される化合物の毒性および治療効率は、細胞培養物または実験動物における標準的な薬学的な手順によって、例えば、最大耐量（ＭＴＤ）、最大応答の５０％を達成するための有効用量であるＥＤ５０、およびＥＤ５０に対するＭＴＤの比である治療係数（ＴＩ）を決定するために用いられる手順によって決定され得る。明らかに、高いＴＩを有する化合物は本明細書において最も好ましい化合物であって、好ましい投薬レジメンとは、活性因子の血漿レベルを、所望の治療効果を維持するための最小濃度でまたはそれより上回って維持するレジメンである。当然ながら、投薬量はまた、多数の要因に依存し、この要因としては、特定の化合物、意図する送達部位、投与経路、および処方医に公知である他の関連の要因が挙げられる。しかし、一般には、投薬量は、約約０．１μｇ／ｋｇ／日〜１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲で、より代表的には約１．０ｍｇ／ｋｇ／日〜１０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。
【００９５】
本発明の化合物は抗血管形成因子および抗ＨＩＦ−１因子として有用であり、そして、例えば、本発明の化合物の哺乳動物組織（皮膚組織、眼組織、腫瘍など）への、そこでのＨＩＦ−１、血管形成または増殖を阻害するための導入によって、およびこの細胞と本発明の化合物とを接触させることにより目的の組織（これは目的の組織を含む細胞、組織へ導入される外因性細胞、または組織内ではない近接する細胞であってもよい）と関連する内皮細胞の増殖を阻害することによって、血管形成および増殖を阻害すること自体に有用性を見出す。さらに、本明細書の抗血管形成因子および抗ＨＩＦ−１因子はＧ１期において、すなわちＤＮＡ合成が生じるＳ期の前に細胞周期停止を達成することが実証されているので、本発明はまた、Ｇ１期におけるガン細胞の細胞周期停止を果たすために本発明の開示された化合物を用いるための方法を提供する。本明細書に記載される因子はまた、アポトーシスを誘導するのに有用であり、従って、アポトーシスの誘導に応答性である障害、特にガンを処置するのに有用である。他のこのような障害は周知であって、当業者によって、および／または該当の文献を参照することで容易に確認され得る。
【００９６】
血管形成および過剰発現されたＨＩＦ−１を阻害するための方法におけるそれらの有用性自体に加えて、本発明の因子は、ＨＩＦ−１、増殖および血管形成が上記で示されたような役割を有することが見出されている状態、疾患および障害を処置するための方法において有用である。これらの状態、疾患および障害としては、限定はしないが以下が挙げられる：肺癌、脳の癌および前立腺癌、特に非アンドロゲン依存性前立腺癌を含むガン；有害な新血管新生に関連する状態、例えば、眼の新血管新生に関連する眼の障害であって、血管新生緑内障、角膜移植片新血管新生、水晶体後線維増殖症および糖尿病性網膜症を含む障害；ならびに慢性炎症性常態、例えば乾癬および慢性関節リウマチ。
【００９７】
この化合物は一般には、下に記載されるような薬学的に受容可能な処方物として投与される。
【００９８】
本発明のＨＩＦ−１および血管形成インヒビターの投与は、投与の任意の適切な方式を用いて行われ得る。従って、投与は例えば、経口であっても、非経口であっても、経皮であっても、経粘膜（直腸および膣を含む）、舌下であっても、吸入によっても、またはある剤形の移植リザーバを介してもよい。本明細書において用いる場合、「非経口的（ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ）」という用語は、例えば、皮下、静脈内および筋肉内の注射を含むものとする。
【００９９】
意図される投与方式に依存して、薬学的処方物は、固体であっても、半固体であってもまたは液体であっても、例えば、錠剤、カプセル、カプレット、液体、懸濁物、エマルジョン、坐剤、顆粒、ペレット、ビーズ、粉末などで、好ましくは正確な用量の単回投与のために適切な単位剤形であってもよい。適切な薬学的組成物および剤形は、薬学的処方物の分野の当業者に公知の従来の方法を用いて調製され得、そして該当のテキストおよび文献に、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ｅａｓｔｏｎ，  ＰＡ：Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，  １９９５）に記載される。経口的に活性である、すなわち安全だが治療上有効な用量であるような十分な経口のバイオアベイラビリティーを示すこれらの化合物については、経口的に投与されてもよく、経口薬物投与が好ましい。一般には、本明細書に記載される血管形成および増殖のインヒビターのうち、多くとも約７５０の分子量を有する化合物が経口的に活性であり、従って経口投与可能である。これらの化合物の投与のための経口剤形としては、錠剤、カプセル、カプレット、溶液、懸濁液およびシロップが挙げられ、そしてまた、複数の顆粒、ビーズ、粉末またはペレットを含んでもよく、これはカプセル化されてもされなくてもよい。好ましい経口剤形は錠剤およびカプセルである。
【０１００】
錠剤は、標準的な錠剤処理手順および装置を用いて製造されてもよい。活性因子に加えて、錠剤は一般には、不活性な、薬学的に受容可能なキャリア物質、例えば、結合剤、潤滑剤、崩壊剤、充填剤、安定化剤、サーファクタント、着色剤などを含む。結合剤は、錠剤に対して結合性を付与するために用いられ、これによって錠剤がインタクトなままであることを確実にする。適切な結合物質としては、限定はしないが、デンプン（コーンスターチおよび予めゼラチン化されたデンプン）、ゼラチン、糖（スクロース、グルコース、デキストロースおよびラクトースを含む）、ポリエチレングリコール、ワックス、ならびに天然および合成のガム、例えば、アカシアアルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、セルロースポリマー（ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、微結晶性セルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロースなどを含む）およびビーガム（Ｖｅｅｇｕｍ）が挙げられる。潤滑剤を用いて、錠剤製造を容易にし、圧力が開放されるとき、粉末流動を促進し、そして粒子キャッピング（すなわち、粒子破壊）を防止する。崩壊剤は錠剤の崩壊を促進するために用いられ、そして一般にはデンプン、クレー（ｃｌａｙ）、セルロース、アルギン、ガムまたは架橋されたポリマーである。充填剤としては、例えば、二酸化ケイ素、二酸化チタン、アルミナ、滑石、カオリン、粉末セルロースおよび微結晶性セルロースのような物質、ならびにマンニトール、尿素、スクロース、ラクトース、デキストロース、塩化ナトリウムおよびソルビトールのような可溶性物質が挙げられる。当該分野で衆知の安定化剤を用いて、例えば、酸化反応を含む薬物分解反応を阻害または遅延させる。
【０１０１】
カプセルはまた、経口的に活性であるこれらの血管形成およびＨＩＦ−１インヒビターのための好ましい経口剤形であり、この場合この活性剤含有組成物は、液体または固体（顆粒、ビーズ、粉末またはペレットのような粒子を含む）の形態でカプセル化されてもよい。適切なカプセルは、硬性であっても軟性であってもよく、そして一般には、ゼラチン、デンプンまたはセルロース物質から作成され、ここでゼラチンカプセルが好ましい。２ピースのハードゼラチンカプセルは好ましくは、例えば、ゼラチンバンドなどでシールされる。例えば、カプセル化された薬剤を調製するための物質および方法を記載する、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（上記で引用）を参照のこと。
【０１０２】
経口の剤形は、錠剤であっても、カプセルであっても、カプレットであっても、または粒子であっても、所望の場合、長期間にわたって活性因子の漸進的な徐放性を提供するように処方され得る。一般には、当業者によって理解されるように、徐放性の剤形は、親水性ポリマーのような漸進的に加水分解可能な物質のマトリックス内で活性因子を分散させることによって、またはこのような物質を用いて固体の薬物含有剤形をコーティングすることによって処方される。徐放性コーティングまたはマトリックスを提供するために有用な親水性ポリマーとしては、例えば以下が挙げられる：セルロースポリマー、例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、酢酸セルロースおよびカルボキシメチルセルロースナトリウム；アクリル酸ポリマーおよびコポリマーであって、好ましくはアクリル酸、メタクリル酸、アクリル酸アルキルエステル、メタクリル酸アルキルエステルなどから形成されたポリマーおよびコポリマー、例えば、アクリル酸、メタクリル酸、アクリル酸メチル、アクリル酸エチル、メタクリル酸メチルおよび／またはメタクリル酸エチルのコポリマー；ならびにビニルポリマーおよびコポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン、ポリ酢酸ビニルおよびエチレン酢酸ビニルコポリマー。
【０１０３】
非経口投与のための本発明による調製物としては、滅菌の水溶液および非水溶液、懸濁液およびエマルジョンが挙げられる。注射用水溶液は、活性因子を水溶性型で含む。非水性の溶媒またはビヒクルの例としては、脂肪酸、例えば、オリーブオイルおよびコーン油、合成脂肪酸エステル、例えば、オレイン酸エチルまたはトリグリセリド、低分子量アルコール、例えば、プロピレングリコール、合成親水性ポリマー、例えば、ポリエチレングリコール、リポソームなどが挙げられる。非経口処方物はまた、アジュバント、例えば、安定化剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤および安定化剤を含んでもよく、そして水性懸濁液は、懸濁液の粘度を増大する物質、例えば、カルボキシルメチル・セルロース・ナトリウム、ソルビトールおよびデキストランを含んでもよい。注射用処方物は、滅菌剤の組み込み、細菌保持フィルターを通じた濾過、照射または熱によって滅菌される。それらはまた、滅菌の注射用培地を用いて製造されてもよい。活性因子はまた、注射を介する投与の直前に適切なビヒクルで再水和され得る、乾燥型、例えば、凍結乾燥型であってもよい。
【０１０４】
本発明の化合物はまた、従来の経皮薬物送達系を用いて皮膚を通じて投与されてもよく、ここでは活性因子は、皮膚に固定される薬物送達デバイスとして機能する積層構造内に含まれる。このような構造では、この薬物組成物は、上部の裏打ち層の背後にある層、または「リザーバ（ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ）」に含まれる。この積層構造は、単独のリザーバを含んでもよく、または複数のリザーバを含んでもよい。１実施形態では、このリザーバは、薬物送達の間に皮膚に系を固定するように機能する、薬学的に受容可能な接触接着物質のポリマーマトリックスを含む。あるいは、この薬物含有リザーバおよび皮膚接触接着剤は、このリザーバを裏打ちする接着剤とともに、別のおよび別個の層として存在してもよく、この場合、これは、上記のようなポリマーマトリックスであってもよいし、または液体もしくはヒドロゲルリザーバであってもよく、またはいくつかの他の形態をとってもよい。経皮薬物送達システムは、さらに、皮膚浸透増強剤を含んでもよい。
【０１０５】
前に記載された処方物に加えて、この化合物はまた、活性因子の制御放出、好ましくは長期間にわたる持続放出（徐放性）のためのデポ調製物として処方されてもよい。これらの徐放性剤形は一般には、移植によって（例えば、皮下もしくは筋肉内、または筋肉内注射によって）投与される。
【０１０６】
本発明の組成物は一般に、経口的に、非経口的に、経皮的にまたは移植デポを介して投与されるが、他の投与方式も適切である。例えば、投与は、好ましくは活性因子に加えて、賦形剤、例えば坐剤ワックスを含む坐剤を用いて、直腸を介して、または膣を介してなされてもよい。経鼻または舌下投与のための処方物はまた、当該分野で周知の標準的な賦形剤で調製される。本発明の薬学的組成物はまた、吸入のために、例えば、生理食塩水の溶液として、乾燥粉末として、またはエアロゾルとして処方されてもよい。
【０１０７】
本発明は、その好ましい特異的な実施形態と組み合わせて記載されているが、上記の説明および以下の実施例は、例示することを意図しており、本発明の範囲を限定するものではないことが理解されるべきである。本発明の範囲内の他の局面、利点および改変は、本発明が関連する当業者に明らかである。
【０１０８】
実験：
本発明の実施は、他に示さない限り、当該分野の技術の範囲内である、合成の有機化学の従来の技術、生物学的試験などを使用する。このような技術は、文献中で詳細に説明される。ステロイド関連の合成手順に関する詳細な情報については、例えば、Ｆｉｅｓｅｒら、Ｓｔｅｒｏｉｄｓ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｒｅｉｎｈｏｌｄ，１９５９）、Ｄｊｅｒａｓｓｉ，Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ：Ａｎ  Ｏｕｔｌｉｎｅ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｓ（Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ：Ｈｏｌｄｅｎ−Ｄａｙ，１９６３）、およびＦｒｉｅｄら、Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，第１巻および２巻（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｒｅｉｎｈｏｌｄ，１９７２）を参照のこと。引用文献は、本明細書に記載されかつ特許請求されるような化合物を評価するために有用な生物学的な試験手順の説明については、Ｌｉｔｔｌｅｆｉｅｌｄら、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  １２７：２７５７〜２７６２（１９９０）およびＷａｋｅｌｉｎｇら、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ９９：４４７〜４５３（１９８３）を参照すべきかもしれない。
【０１０９】
以下の実施例では、用いられる数値（例えば、量、温度など）に関して正確性を確実にするための労力が払われているが、ある程度の実験誤差および偏差は見込まれるべきである。他に示さない限り、温度は、摂氏温度であって、圧力は大気圧またはその付近である。全ての試薬は、他に示されない限り市販されている。１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、Ｖａｒｉａｎ  Ｇｅｍｉｎｉ  ３００ＭＨｚ分光計または類似の装置で記録して、内部参照する。１Ｈ  ＮＭＲのデータは以下のように報告される：化学シフト（δ  ｐｐｍ）、多重度（ｓ＝一重項，ｄ＝二重項，ｔ＝三重項，ｑ＝四重項，ｍ＝多重項）、カップリング定数（Ｈｚ）、インテグレーションおよびアサインメント。
【実施例】
【０１１０】
（実施例１）
（Ｅ）−３−ヒドロキシ−７α−メチル−２１−［（２−ジメチルアミノ）エトキシ］−１９−ノルプレグナ−１，３，５（１０），１７（２０）−テトラエン（化合物２）の調製：
【０１１１】
【化３４】
2008536939.tif 000015
無水ＤＭＦ（１０ｍＬ）に含まれる鉱油（２．５ｇ，６２．５ｍｍｏｌ）中のヘキサン洗浄６０％ＮａＨの懸濁物に０℃でアルゴン下で、２−クロロエチルジメチルアミン塩酸塩（１．３０ｇ，９ｍｍｏｌ）を含有するアリコートを２０分を超えて添加して、さらなる水素が発生しなくなるまで撹拌した。（Ｅ）−３−テトラヒドロピラニルオキシ−７α−メチル−２１−ヒドロキシ−１９−ノルプレグナ−１，３，５（１０），１７（２０）−テトラン（１）
【０１１２】
【化３５】
2008536939.tif 000016
（Ｔａｎａｂｅらの米国特許第６，２８１，２０５号に記載されるように合成した）（１．２ｇ、３．０ｍｍｏｌ）を含有する５ｍＬのＤＭＦの溶液を添加して、その混合物を室温で１０分間撹拌した。ｎ−Ｂｕ４ＮＩ（０．１１ｇ，０．３ｍｍｏｌ）を添加して、反応物は７０℃に２．５時間加熱し、次いで冷却した。この懸濁液を氷／水に注意深く注ぎ、酢酸エチルで抽出した。この合わせた抽出物をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮して（２）のテトラヒドロピラニル（ＴＨＰ）エーテルの１．４１ｇ（１００％）をガム（ｇｕｍ）として得た。
【０１１３】
２０ｍＬのＭｅＯＨに含まれる粗ＴＨＰエーテル（１．４ｇ）に、室温でｐ−ＴｓＯＨ（０．６ｇ，３．５ｍｍｏｌ）を加え、そしてその混合物を室温で３時間撹拌した。この溶液を飽和した水性のＮａＨＣＯ３に注ぎ、そしてＥｔＯＡｃを用いて３回抽出した。この合わせた抽出物をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、そして濃縮して粗固体生成物（２）を得た。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（溶出１％、次いで１０％  ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）によって、アミン（２）を白色個体として生成した（０．５８６ｇ，５１％）。
【０１１４】
【数１】
2008536939.tif 000017
（実施例２）
（Ｅ）−ヒドロキシ−７α−メチル−２１−［（２−ジメチルアミノ）エトキシ］−１９−ノルプレグナ−１，３，５（１０），１７（２０）−テトランのクエン酸塩の調整：
【０１１５】
【化３６】
2008536939.tif 000018
アミン（２）（０．３８３ｇ，１．０ｍｍｏｌ；実施例１に記載のように合成された）を含有する３０ｍＬのＭｅＯＨの溶液に、室温で、クエン酸（０．１９２ｇ，１．０ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を１５分間撹拌し、次いで減圧下で濃縮して、真空中で乾燥した。クエン酸塩（３）（０．５８ｇ，１００％）を、白色固体として得た。
【０１１６】
【数２】
2008536939.tif 000019
（実施例３）
（ヒト皮膚毛細血管内皮細胞（ＨＤＭＶＥＣ）の増殖に対する（２）の影響）
ＨＤＭＶＥＣ細胞（Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）の増殖に対する（２）の阻害活性を測定するために、２，０００個の細胞を、９６ウェルプレートの各々のウェル中で、５％ウシ胎仔血清（Ｓｉｇｍａ）を補充した２００μｌのＥＧＭ培地（Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ）中に播種した。このプレートを３７℃で組織培養インキュベーター中で２４時間インキュベートし、次いでＥＧＭに溶解した種々の濃度の（２）を各々のウェルに５〜１０μｌのアリコートで添加した。４つのウェルを各々の濃度に用いた。各々のウェルにおける培地を、１日おきに添加した新鮮な試験溶液で更新した。培養の７日後、ＭＴＴキット（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，  Ｍａｄｉｓｏｎ，  ＷＩ）の試薬を用い、その供給業者によって提供される指示を用いて、生きている細胞を測定した。コントロールウェル中の生存細胞数に対する処置されたウェルにおける生存細胞の数で阻害のパーセンテージを得た。
【０１１７】
結果は、（２）の用量の増大につれて細胞の数の急激な減少を示した。ＩＣ５０値は約８０ｎＭであった。この結果によって、（２）が用量応答性の方式でＨＤＭＶＥＣ細胞の増殖を阻害したことが示される。
【０１１８】
（実施例４）
（ニワトリ絨毛尿膜（ＣＡＭ）アッセイにおける抗血管形成活性に対する（２）の影響）
ＣＡＭアッセイは、以前に記載のとおり行なった（Ｋ．Ａｍｉｎ，Ｊ．Ｌｉ、およびＷ−Ｒ．Ｃｈａｏ、Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．２：１７３〜１７８，（２００３））。要するに、新鮮な受精卵を、標準的な孵卵器において３７℃で３日間インキュベートした。３日目に、卵を無菌条件下で割って、胚を２０×１００ｍｍの滅菌プラスチックペトリ皿に入れて、底の棚の上に貯水槽を備える胚インキュベーターで３７℃で培養した。小型のポンプを用いて貯水槽中に空気を継続的にバブリングし、それによってこのインキュベーター中の湿度を一定に保った。６日目、無菌のシリコン「ｏ（オー）」リングを各々のＣＡＭに置いて、０．５％のメチルセルロースに溶解した試験化合物（２）を、滅菌条件下で各々の「ｏ」リングに送達した。胚をこのインキュベーターに戻した。コントロールの胚には、１０μＬのビヒクルのみを与えたが、試験胚には１２．５μｇの（２）を送達した。８日目に、胚をインキュベーターから取り出して、室温で保持し、一方で血管密度は１６０×の倍率で画像キャプチャリングシステムを用いて各々の「ｏ」リングの下で測定した。その結果、（２）は、ビヒクルコントロールと比較した場合処置の７日後に血管密度を急激に減少させたことが実証された。
【０１１９】
（実施例５）
（創傷治癒および微小血管密度に対する（２）の影響）
インビボのフィブリン−Ｚチャンバアッセイ（Ｋ．Ａｍｉｎら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．２：１７３〜１７８，（２００３））を行って、創傷治癒および微小血管密度を分析した。プラスミノーゲンフリーのフィブリノーゲンおよびトロンビンを、ポートから滅菌二重多孔性チャンバに添加した。このチャンバをラットに移植するために、動物を３５ｍｇ／ｋｇのペントバルビタールナトリウムで麻酔した。各々約２ｃｍ長の２つの切開を背側に行い、一方は脊椎中央の上であって、もう一方は脊椎下部領域の上であった。端部の丸いハサミを用いて切開側方の皮下筋膜にポケットを作成し、そしてチャンバをそのポケットに深く入れた。この切開創を、オートクリップ・ステープリングデバイスで閉じた。感染を防ぐために切開領域に三種の抗生物質の軟膏を塗布した。移植の２４時間後、ラットに（２）の毎日の単回経口用量を０、３、または３０ｍｇ／ｋｇで１２日間与え始めた。１２日目の終わりに、動物を屠殺した。このチャンバを回収し、１０％のホルマリンで一晩固定し、そして組織学的分析のためにパラフィン中に包埋した。
【０１２０】
創傷治癒の応答に対する（２）の効果を決定するために、肉芽組織（ＧＴ）の厚みを、デジタルカメラ（Ａｘｉｏｃａｍ）およびデジタル画像化ソフトウェアＫＳ３００を装備したＺｅｉｓｓ  ＡｘｉｏｓｋｏｐＩＩを用いてフィブリンＺチャンバのＨ＆Ｅ染色した断面積においてミクロンで測定した。微小血管密度に対する（２）の効果を測定するために、４μｍ厚のパラフィン包埋切片で免疫組織化学を行った。この切片をＨｅｍｏ−Ｄで脱パラフィン処理して、等級化されたアルコールで再水和して、３％Ｈ２Ｏ２に含まれる内因性ペルオキシダーゼブロックに供して、抗原回復のために１０％クエン酸中で煮沸して、５％のロバ血清でブロックして、一次ＧＴモノクローナル抗体を１：２０で用いて４℃で一晩置いた。この後に洗浄およびビオチン化ロバ抗マウス二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｓ  １：１０００）を用いるインキュベーションを３７℃で２０分間行い、続いて、アビジン−ビオチンペルオキシダーゼ複合体（ＡＢＣ  Ｋｉｔ，Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｓ）を用いて２５分間インキュベーションした。最終的に、この切片をジアミノベンジジンテトラヒドロクロライド（ＤＡＢ）色素原で発色し、そしてヘマトキシリンを用いて対比染色した。その群についての平均に最も近いＧＴ厚みを有する５つのフィブリンＺチャンバをＭＶＤ評価のために選択した。３つのホットスポットの画像（×２００倍の視野で最大血管密度を示す）を各々の切片から捉えて、Ｚｅｉｓｓ相互作用デジタル画像化ソフトウェアＫＳ３００を用いて血管をカウントした。全部で１５の高倍率の視野（ＨＰＦ、４０×）を、各々の群について血管密度についてカウントした。
【０１２１】
結果は、（２）を３０ｍｇ／ｋｇで用いる処置の後、かなり低レベルの肉芽が形成された、およびかなり薄い組織を示した。コントロールの組織は、処置された組織よりも有意に厚かった。３ｍｇ／ｋｇの（２）の用量によって、約２０％の厚みの減少が生じたが、組織の厚みの３５％より大きい減少が３０ｍｇ／ｋｇの薬物での処置から生じた。化合物（２）は、肉芽組織の形成を劇的に阻害した。さらに、コントロールに比較した場合、微小血管形成において３０％の減少があった。
【０１２２】
（実施例６）
（種々のタイプのガン細胞株における細胞増殖に対する（２）の影響）
化合物（２）を、いくつかの種々のヒトガン細胞株において、細胞増殖に対するその影響について評価した。用いたヒトガン細胞株（ＡＴＣＣ）は、Ａ５４９肺癌細胞、Ｕ−８７脳の癌細胞、ＳＫＯＶ−３卵巣癌細胞、ＰＣ−３非アンドロゲン依存性前立腺癌細胞、およびＭＤＡ  ＭＢ−２３１エストロゲン非依存性乳癌細胞であった。ヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）およびマウス形質転換線維芽細胞株（Ｌ９２９）も、比較のためのアッセイに含んだ。アッセイは、ヒト皮膚微小血管内皮細胞について実施例３に記載されたのと同じ手順を用いて行った。細胞株（Ｓｉｇｍａ）を培養するために用いた培地は、Ａ５４９およびＰＣ−３細胞、Ｕ−８７およびＭＤＡ  ＭＢ−２３１細胞、ＳＫＯＶ−３細胞およびＬ９２９細胞について、それぞれＲＰＭＩ−１６４０、Ｅａｇｌｅの最小基本培地、ＭｃＣｏｙの５Ａ培地、およびＭＥＭ培地であった。ＨＵＶＥＣ細胞に用いた培地は、５％ウシ胎仔血清を補充したＥＧＭ（Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ）であった。全ての他の培地には、１０％のウシ胎仔血清を補充した。
【０１２３】
その結果によって、細胞数は、マウス形質転換線維芽細胞株であるＬ９２９以外は全ての細胞培養物において０．１〜１μＭに急速に減少したことが示された。従って（２）は、試験されたヒトガン細胞株の全てで細胞増殖に阻害性の効果を有したが、Ｌ９２９マウス線維芽細胞の増殖に対する影響は、かなり低く、増殖阻害を誘導するためにより高濃度の（２）を要する。
【０１２４】
（実施例７）
（ＤＵ−１４５ヒトアンドロゲン非依存性前立腺癌細胞におけるアポトーシスに対する（２）の影響）
ＤＵ−１４５細胞（ＡＴＣＣ）を１０μＭの（２）を用いて２４時間処置した。アポトーシスを、末端デオキシヌクレオチジルトランスフェラーゼ媒介性ｄＵＴＰニック末端標識（ＴＵＮＥＬ）アッセイによって測定した。このアッセイは、Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を用いて、製造業者によって提供される指示に従って行った。要するに、ＤＵ−１４５細胞は、（２）とともに２４時間、４８時間または７２時間インキュベートした。インキュベーションの終わりに、細胞を、新鮮に調製した４％のメタノールフリーのパラホルムアルデヒド含有ＰＢＳで固定し、洗浄し、次いで０．２％のＴｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００含有ＰＢＳ中を透過させた。次いで、スライド上の細胞を、Ｔｄｔ酵素とともに１時間３７℃でインキュベートし、ヨウ化プロピジウムで染色し、そして蛍光顕微鏡下で検査した。断片化したＤＮＡを、アポトーシス細胞内の緑色蛍光染色で可視化した。
【０１２５】
未処置の細胞は、ＤＮＡのフラグメントがもしあっても極めて少なかった。他方では、アポトーシスの結果として、断片化ＤＮＡのかなり多数の小片が処置細胞にはっきり現れていた。
【０１２６】
（実施例８）
（細胞周期に対する（２）の影響）
ＤＵ−１４５細胞を、（２）の１０μＭを用いて、６時間、２４時間、４８時間、７２時間または９６時間処置した。各々の期間の終わりに、細胞をＤＮＡ染色溶液（０．５ｍｇ／ｍｌのヨウ化プロピジウム、０．１％クエン酸ナトリウムおよび０．０５％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００）中で低浸透圧性に溶解した。染色された細胞は、Ｐｈｏｅｎｉｘ  Ｆｌｏｗ  Ｓｙｓｔｅｍによって提供されるソフトウェアを用いてフローサイトメトリー（ＦＡＣＳ）によって分析した。
【０１２７】
結果によって、（２）で処置した場合、未処置のコントロールサンプルの場合より約３０％多い細胞をＧ１期で停止して、Ｓ期からＧ２期に進行可能なのは有意に少数の細胞であることが示された。
【０１２８】
（実施例９）
（異種移植片ヌードマウスモデルにおけるインビボ腫瘍増殖に対する（２）の影響）  
異種移植片ヌードＢａｌｂ−Ｃ無胸腺マウスモデルを用いて、ＰＣ−３ヒト前立腺腫瘍に対するそのインビボ抗腫瘍活性について、化合物（２）を評価した。マウスは、Ｔａｃｏｎｉｃ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから入手した。実験は、ＢＡＬＢ−Ｃ無胸腺ヌードマウス（Ｔａｃｏｎｉｃ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）の右脇腹にＰＣ−３細胞を皮下移植すること、続いて腫瘍増殖を毎日観察することによって行った。コントロールおよび各々の処置群に８匹のマウスがあった。腫瘍容積が７０〜１００ｍｍ３に達する場合、薬物送達は、（２）の３用量レベルで示した。この化合物は、以下のとおり経口的に送達された：コントロール群に対して０ｍｇ／ｋｇ、１処置群に対して１０ｍｇ／ｋｇ、そして第二の処置群に対して３０ｍｇ／ｋｇで２８日間各々毎日１回；そして３番目の処置群に対して１００ｍｇ／ｋｇを毎週１回。腫瘍容積は、毎週２回、そして体重を毎週１回測定した。
【０１２９】
コントロール群の腫瘍は一定速度で増殖したが、１０ｍｇ／ｋｇの群、３０ｍｇ／ｋｇの群および１００ｍｇ／ｋｇの群の腫瘍は、増殖速度が顕著に減少した。これによって、（２）は腫瘍増殖速度を強力に阻害したことが実証される。
【０１３０】
コントロール群では高密度な微小血管形成があったが、３０ｍｇ／ｋｇを投与されている群では最小限の微小血管形成があった。微小血管形成は、コントロール群に比較して処置群では約５０％減少した。
【０１３１】
（実施例１０）
（異種移植片ヌードマウスモデルにおける腫瘍増殖に対するパクリタキセルと組み合わせた（２）の影響）
マウスを実施例７のとおりに処置し、ただし、１群では、腫瘍が７０〜１００ｍｍ３に達した場合経口の（２）ではなく７．５ｍｇ／ｋｇのパクリタキセル（Ｓｉｇｍａ）を腹腔内投与にて与え、別の群では（２）を経口的に１０ｍｇ／ｋｇでそしてパクリタキセルをｉ．ｐ．で７．５ｍｇ／ｋｇの両方を与えた。
【０１３２】
結果によって、（２）の１０ｍｇ／ｋｇまたはパクリタキセルの７．５ｍｇ／ｋｇで、コントロールに比較してマウスでは同様のプロフィールの増殖阻害が生じたことが示された。他方では、２つの薬物の組み合わせを投与されるマウスは、経時的に増殖のかなり大きい阻害を有した。
【０１３３】
（実施例１１）
（イシカワ細胞ベースアッセイにおける（２）のエストロゲン活性）
ガン処置薬物によって生じるエストロゲン性活性の非存在は有益である。なぜならエストロゲンは、特定の腫瘍の開始および／または進行に関与しているからである。従って、化合物（２）のエストロゲン効果を、以下のように検討した。
【０１３４】
イシカワ細胞ベースアッセイ（Ｉｓｈｉｋａｗａ  ｃｅｌｌ  ｂａｓｅｄ  ａｓｓａｙｓ）を、化合物（２）を用いて、または２−メトキシエストラジオールを用いて処置したヒト内皮イシカワ細胞で並行して行った。２−メトキシエストラジオールは、抗血管形成因子として文献中に報告された化合物である。デキストランコーティングチャコール（Ｓｉｇｍａ）で内因性エストラゲンを取り除いた、５％ウシ胎仔血清を含有する、エストロゲンおよびフェノールレッドを含まない培地（ＤＭＥＭ／ＨａｍｍのＦ１２培地）中で４８時間、９６ウェルプレート中で細胞を培養した。次いで、化合物（２）または他の試験化合物をこの細胞に添加して、培養をさらに７２時間継続した。コントロール細胞（（２）なし）に、１０−９Ｍの２−メトキシエストラジオールを添加した。７２時間の終わりに、アルカリホスファターゼ活性を、５ｍＭのｐ−ニトロフェニルホスフェート、０．２４ｍＭのＭｇＣｌ２、および１Ｍのジエタノールアミン（ｐＨ９．８）をこの細胞に添加することによって測定し、一方この９６ウェルプレートは氷上に保持した。次いで、このプレートを室温に温めて、ｐ−ニトロフェノールの生成による黄色を、４０５ｎｍの波長でＥＬＩＳＡプレートリーダーを用いて２〜３時間後に測定した。エストロゲン活性は、１０−９Ｍでエストラジオールによって刺激されるアルカリホスファターゼ活性の割合として、試験化合物単独によって刺激されたアルカリホスファターゼ活性として規定された。１０−９Ｍのエストラジオールによる刺激を１００％とした。
【０１３５】
結果によって、２−メトキシエストラジオールで処置した細胞は大量のエストラゲン活性を生じたが、（２）で処置した細胞はこのような活性を本質的に生じなかったことが示された。従って（２）は、これらの細胞におけるエストラゲン活性の生成を刺激しない。
【０１３６】
（実施例１２）
（ＤＵ−１４５前立腺ガン細胞における転写−３のシグナルトランスデューサーおよびアクチベーター（ＳＴＡＴ−３）のリン酸化に対する（２）の影響）
Ｓｔａｔ−３のリン酸化をブロックすることにより腫瘍細胞のアポトーシスを誘導して、ＶＥＧＦ誘導性ＨＭＶＥＣ細胞遊走および管形成を軽減することが実証されている（Ｒ．Ｄｈｉｒら，Ｐｒｏｓｔａｔｅ，５１：２４１〜２４６，（２００２）；およびＬ．Ｂ．Ｍｏｒａら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，６２：６６５９〜６６６６，（２００２））。従って、Ｓｔａｔ−３は、抗癌剤を開発するための重要な分子標的である。ＤＵ−１４５細胞を、０（コントロール）、１００、または５００ｎＭの（２）を用いて４８時間処置した。ウエスタンブロット分析は、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．の総抗体およびｐｈｏｓｐｈｏ−Ｓｔａｔ−３（ｐＳｔａｔ−３，Ｔｙｒ７０５）抗体を用いて行った。
【０１３７】
ウエスタンブロット分析によって、０．５μＭの化合物（２）を用いる４８時間のＤＵ−１４５細胞の処置は、Ｓｔａｔ−３のチロシンリン酸化を５２％まで減少させたことが示され、これによって（２）は、ＤＵ−１４５前立腺癌細胞でＳｔａｔ−３のリン酸化を阻害したことが示された。
【０１３８】
（実施例１３）
（ヒト皮膚微小血管内皮細胞（ＨＤＭＶＥＣ）の増殖に対する本発明の種々の化合物の影響）
実施例３の手順を行って、ＨＤＭＶＥＣ細胞（Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）の増殖に対する本発明の種々の化合物の阻害性効果を評価した。結果は以下の表に示す：
【０１３９】
【化３７−１】
2008536939.tif 000020
【０１４０】
【化３７−２】
2008536939.tif 000021
【０１４１】
【化３７−３】
2008536939.tif 000022
（実施例１４）
（低酸素（低酸素状態）の実験）
低酸素実験は、２つの方法のいずれかで行った。極めて低雰囲気の酸素濃度（効率的に無酸素）を生じるように、本発明者らは、５％ＣＯ２含有空気雰囲気で３７℃で一晩細胞をインキュベートし、次いで３７℃に維持されたアルミニウムガス交換チャンバに入れるプロトコールを用いた（Ｌａｄｅｒｏｕｔｅ  ＫＲら、Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  ２２：２５１５〜２５２３，（２００２）；Ｌａｄｅｒｏｕｔｅ  ＫＲら、Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  ２４：４１２８〜４１３７，（２００４））。次いで、細胞を含むチャンバを３７℃の循環水槽に入れて、もとの大気を、真空ポンプおよびガスシリンダーを装備したマニフォールドを用いて５％ＣＯ２−９５％Ｎ２で繰り返し交換した。０．０１％未満の大気の酸素分圧（ｐＯ２）値（空気に対して、約２１％のｐＯ２で）を、このシステムを用いてチャンバの内側で達成し得る。種々の低酸素曝露後に、このチャンバは嫌気性のグローブ・ボックス（Ｂａｃｔｒｏｎ  Ｘ，Ｓｈｅｌｄｏｎ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ  Ｉｎｃ．，Ｃｏｒｎｅｌｉｕｓ，ＯＲ；５％のＣＯ２−９５％のＮ２を含有するシリンダーに結合）を開けて、有意な再酸素化なしに細胞溶解物を調製した。低酸素細胞の全ての操作は嫌気性のグローブ・ボックス内で行った。このチャンバおよびグローブ・ボックスの両方における大気酸素レベルは、ポーラログラフの酸素電極（Ｏｘｙｇｅｎ  Ｓｅｎｓｏｒｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｏｒｒｉｓｔｏｗｎ，ＰＡ）を用いて測定および較正している。１％のｐＯ２に関与する低酸素実験は、対流ファンを用いて３７℃に保持する１％Ｏ２５％ＣＯ２９５％Ｎ２の雰囲気でグローブ・ボックスを平衡化することによって行った。細胞は、このグローブ・ボックス中の湿気のある空間内でインキュベートして、細胞上の培地は、ロータリー・シェーカーを用いることによって、穏やかにかつ連続して撹拌した。これらの実験については、本発明者らは、全てＡＴＣＣから入手可能である、ＲＡＷ２６４．７不死化マウスマクロファージを正常なコントロールの細胞として、ＰＣ−３前立腺癌細胞、そしてＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌細胞を用いた。
【０１４２】
本発明者らは、免疫ブロット法を用いてこの実験を評価した。核溶解物を用いて、免疫ブロット法によってＨＩＦ−１αタンパク質を検出した（Ｍｕｒｐｈｙ  ＢＪら、Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ（Ｉｎ  Ｐｒｅｓｓ）：２００５）。要するに、細胞を空気中で氷上に、または嫌気的グローブ・ボックス中のＳｕｐｅｒ  Ｉｃｅ（登録商標）コールドパックの上に置いて、培地を除去した。細胞を脱酸素した氷冷ＰＢＳで２回洗浄し、次いで約８００μｌの脱気して氷冷した溶解緩衝液１（ＬＢ１；１０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ８．０，０．５％  ＮＰ−４０，１５０ｍＭのＮａＣｌ，１ｍＭのＥＤＴＡ，１×Ｐｒｏｔｅａｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  Ｃｏｃｋｔａｉｌ  ＩＩＩ，ＰＩＣ  ＩＩＩ、Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ）を添加することによって溶解した。この溶解物を５００×ｇで５分間４℃でスピンした後、その上清を破棄して、ペレットを５００μｌの氷冷ＬＢ２（２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．９，４００ｍＭ  ＮａＣｌ，１ｍＭ  ＥＤＴＡ，１ｍＭ  ＤＴＴ，１×ＰＩＣ  ＩＩＩ）に再懸濁した。９，０００×ｇで５分間４℃でのスピンの後、上清のタンパク質濃度を、ビシン−コニン酸アッセイ（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を用いることによって決定した。等しいタンパク質サンプル（代表的には５〜１０μｇ）を４〜１２％のＮｕＰａｇｅ  ＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に溶解して、Ｉｍｍｏｂｉｌｏｎ  Ｐメンブレン（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）上に電気ブロットした。０．１％Ｔｗｅｅｎ２０を含有するＰＢＳ中に含まれる５％脱脂粉乳中でブロットを４℃で一晩ブロックした。タンパク質検出のために、ブロットを、５％脱脂粉乳を含有するＰＢＳ−０．１％Ｔｗｅｅｎ２０中に希釈した一次抗体および西洋ワサビペルオキシダーゼと結合体化された二次抗マウスＩｇＧまたは抗ヤギＩｇＧ抗体（１：５，０００希釈）とともに室温で１時間インキュベートした。一次抗体結合は、供給業者の指示に従って、ＥＣＬ  Ｐｌｕｓ  Ｗｅｓｔｅｒｎ  Ｂｌｏｔｔｉｎｇ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ）を用いることによって検出および可視化した。ＨＩＦ−１αタンパク質は、抗−ＨＩＦ−１αモノクローナル抗体（Ｎｏｖｕｓ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ、Ｃａｔ．Ｎｏ．ＮＢ１００−１２３；１：５００希釈）および西洋ワサビペルオキシダーゼ結合体化抗マウスＩｇＧ二次抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｃａｔ．Ｎｏ．ｓｃ−２０６２；１：２０，０００希釈）を用いることによって検出した。ＥＲＫ１／２タンパク質の検出は、構成的な核タンパク質発現のためのローディングコントロールおよび内部標準の両方として用いた。ＥＲＫ１／２タンパク質は、抗マウスＥＲＫ１／２抗体（Ｓｔｒｅｓｓｇｅｎ、Ｃａｔ．Ｎｏ．ＫＡＰ−ＭＡ００１）および西洋ワサビペルオキシダーゼ結合体化ヤギ抗ウサギＩｇＧ二次抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｃａｔ．Ｎｏ．ｓｃ−２０３０）を用いることによって検出された。
【０１４３】
明白な細胞傷害性なしに（すなわちこの阻害についてのＩＣ５０がＰＣ−３細胞に対する細胞傷害性についてのＩＣ５０よりも低い）、無酸素、低酸素そして正常酸素（５％ＣＯ２−空気；５μＭ以下、６時間）条件下でさえ、ＰＣ−３細胞におけるＨＩＦ−１αタンパク質発現に対して（２）が強力な阻害性効果を有したことを本発明者らは見出した。
【０１４４】
本発明者らは、正常な酸素および無酸素のＭＤＡ−ＭＢ−２３１ヒト乳癌細胞に関与する同様の研究を行い、（２）がまた、これらの細胞におけるＨＩＦ−１αタンパク質発現の強力なインヒビターであることを見出した。
【０１４５】
その結果、ＨＩＦ−１αサブユニットの発現が調節解除される（そして発癌に寄与する）特定のヒトガン細胞株において、（２）はＨＩＦ−１活性の新規なインヒビターであることが示された。これに関して、（２）がＲＡＷ２６４．７マクロファージ（「正常な（ｎｏｒｍａｌ）」細胞株）におけるＨＩＦ−１αタンパク質発現に影響しなかったということは治療的に重要である。ＨＩＦ−１活性は、先天性免疫反応の炎症性の応答に重要である。本発明者らの（２）の研究に用いたのと同じ低酸素／無酸素条件下で、これらのガン細胞株のいずれにおいてもＨＩＦ−１αタンパク質発現に対して２−メトキシエストラジオール（２−ＭＥ２；標準的なＨＩＦ−１インヒビターとみなされる）のいずれの影響も本発明者らは見出さなかった。さらに、本発明者らは、別の標準的なＨＩＦ−１インヒビターであるＹＣ−１が、これらの条件下でＨＩＦ−１αタンパク質発現を再現性に阻害することは見出さなかった。
【０１４６】
（実施例１５）
（肺癌の治療のためのＳＲ１６３８８の生物学的プロフィール）  
化合物（２）は、エストロゲンレセプターβに対して高い親和性で選択的に結合する。ヒト組み換えエストロゲンレセプターα（ＥＲ−α）およびエストロゲンレセプターβ（ＥＲ−β）をＰａｎ  Ｖｅｒａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）から入手して、結合アッセイを行った。（２）の結合親和性を測定するために、種々の濃度の（２）または１７β−エストラジオールを、固定量の３Ｈ−１７β−エストラジオールの存在下でＥＲ−αまたはＥＲ−βレセプターのいずれかとともに４℃で一晩インキュベートした。インキュベーションの終わりに、遊離および結合した３Ｈ−エストラジオールを、ヒドロキシルアパタイトを用いて製造業者によって与えられる指示に従って分離した。（２）のＥＲ−βに対する結合は、ＥＲ−αに対してよりもかなり高く、それぞれＥＲ−βおよびＥＲ−αに対して６４および３の結合親和性であった（この結合親和性は、３Ｈエストラジオールの５０％を置き換える非放射性標識エストラジオールの量に対する、３Ｈエストラジオールの５０％を置き換える化合物の量として規定される）ことがこの結果から示された。
【０１４７】
化合物（２）は、Ａ５４９ヒト非小細胞肺癌細胞（ＮＳＣＬＣ）の細胞増殖を強力に阻害する。ＮＳＣＬＣ細胞の増殖に対する試験物質の阻害活性を測定するために、２，０００個の細胞を９６ウェルプレートの各々のウェルにおいて、２ｍＭグルタミンおよび１０％ウシ胎仔血清（増殖培地）を補充した２００μｌのＲＰＭＩ−１６４０培地中に播種した。このプレートを３７℃で組織培養インキュベーター中で２４時間インキュベートし、次いで増殖培地に溶解した種々の濃度の試験物質を、各々のウェルに５〜１０μｌのアリコートで添加した。各々の濃度に４つのウェルを用いた。各々のウェルの培地は、１日おきに添加する新鮮な試験溶液で更新した。培養の７日後、ＭＴＴキット（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）の試薬を用い、この供給業者によって与えられる指示を用いて、生きている細胞を測定した。コントロールウェル中の生きている細胞に対する処置したウェル中の生きている細胞の数で阻害のパーセンテージを得た。化合物（２）およびシスプラチンをこのアッセイで並行して試験した。この結果、（２）がＮＳＣＬＣ細胞の増殖を用量応答性の様式で阻害し、そしてこの阻害活性はシスプラチンよりも強力であったことが示された。
【０１４８】
化合物（２）は単独で、またはシスプラチン（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、タルセバ（Ｔａｒｃｅｖａ）（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）、もしくはパクリタキセル（Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）と組み合わせて、ヌードマウス異種移植片モデルにおいてＮＳＣＬＣ腫瘍の増殖を強力に阻害した。この異種移植片モデルは、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓによって供給される８週齢の雌性無胸腺ヌードマウスを用いて行った。検疫の４日後、Ａ５４９ヒト非小細胞肺癌（（３×１０６個の細胞／マウス）を含む、１００μｌのＭａｔｒｉｇｅｌ／リン酸緩衝化生理食塩水混合物（１：１）をマウスの右脇腹に皮下移植した。動物を腫瘍増殖について毎日観察した。腫瘍が触診可能になったとき、本発明者らは、式Ｖ＝Ｗ×Ｌ×Ｈ×π／６を用いてこの腫瘍の測定を開始するが、ここでＷおよびＬは、この腫瘍の短径および長径に、Ｈはこの腫瘍の高さに相当する。腫瘍の容積が約５０ｍｍ３に達したとき、動物を腫瘍の容積に基づいて、各々１０マウスのコントロール群および処置群に無作為に分ける。平均値に最も近い腫瘍容積を有するマウスのみを用いた。無作為化の日に、動物に薬物処置の投与を開始した。化合物（２）およびタルセバ（Ｔａｒｃｅｖａ）（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）は１日１回胃管を通して経口投与した。シスプラチンおよびパクリタキセルは、毎週１回腹腔内注射によって投与した。
【０１４９】
薬物処置の開始後、腫瘍容積は、毎週２回、体重は毎週１回測定した。この研究は３０日間行ない、そして腫瘍容積が１５００ｍｍ３より大きくなるかまたは腫瘍が潰瘍形成もしくはもとの体重の２０％の減少を生じた動物に、不定期の屠殺を行った。受けた処置に関する有害な臨床徴候について動物を毎日検査した。３０日の終わりに、全てのマウスを屠殺した。研究全体を通じて、処置群で毒性の影響は観察されなかった。１０および２０ｍｇ／ｋｇの用量では、（２）はＡ５４９腫瘍の増殖速度を劇的に減少した。化合物（２）は、１０ｍｇ／ｋｇでシスプラチン３ｍｇ／ｋｇと組み合わせて、いずれかの薬物単独の同じ用量と比較した場合、腫瘍増殖を統計的に有意に（Ｐ＜０．０２）阻害した。最も印象的な結果は、マウスを（２）とタルセバ（Ｔａｒｃｅｖａ）またはパクリタキセル（Ｐａｌｉｔａｘｅｌ）とを組み合わせて処置した際に得られた。化合物（２）の２０ｍｇ／ｋｇをタルセバ（Ｔａｒｃｅｖａ）２０ｍｇ／ｋｇと、またはパクリタキセル（Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）８ｍｇ／ｋｇと組み合わせて、腫瘍増殖を完全にブロックした（（２）単独、タルセバ（Ｔａｒｃｅｖａ）単独、または（２）＋タルセバ（Ｔａｒｃｅｖａ）について、それぞれ、Ｐ＜０．０２、０．０１、および０．０１；ＳＲ１６３８８および（２）＋パクリタキセルについて、それぞれ、Ｐ＜０．０２および０．０１）。
【国際調査報告】
2008536939.tif 000045