【事件の表示】
　特許第２８７３９２１号「水溶性抗酸化性組成物」の請求項１ないし２に係る特許に対する特許異議の申立てについて、次のとおり決定する。
【結　論】
　訂正を認める。
　特許第２８７３９２１号の請求項１ないし２に係る特許を維持する。
【理　由】
I　手続の経緯
　本件特許第２８７３９２１号発明は、平成７年３月２４日に出願され、平成１１年１月１４日にその特許の設定登録がなされ、その後、日本香料工業会による特許異議の申立てがあり、取消理由の通知がなされ、その指定期間内である平成１２年５月１５日に訂正請求がなされたものである。
II　訂正の適否についての判断
１　訂正の内容
　本件訂正は、特許請求の範囲の請求項１ないし２における「抗酸化性組成物」を「油脂類用抗酸化性組成物」に訂正するものである。
２　訂正の目的の適否、新規事項の有無及び拡張・変更の存否
　上記訂正は、抗酸化性組成物の用途を油脂類用に限定するものであるから、特許請求の範囲の減縮を目的とするものである。そして、この訂正は、特許明細書の「本発明の抗酸化性組成物は、被酸化性物質例えば油脂類、・・・などへ直接添加する」（本件特許公報２頁４欄３８、３９行）との記載に基づくものである。
　したがって、本件訂正は、願書に添付した明細書に記載した事項の範囲内のものであり、かつ、実質上特許請求の範囲を拡張し、又は変更するものではない。
３　独立特許要件の判断
（１）本件発明
　訂正後の特許請求の範囲の請求項１ないし２に係る発明（以下「本件第１ないし２発明」という。）は、特許請求の範囲の請求項１ないし２に記載された事項により特定される次のとおりのものである。
  請求項１に係る発明は、下記のとおりである。
「【請求項１】ミカン科植物果皮の水又は含水アルコール抽出物を有効成分として含有することを特徴とする油脂類用抗酸化性組成物。
【請求項２】ミカン科植物が、シイクワシャー、ソウキツ、チチュカイマンダリン、オオタポンカン、タチバナ、サンキツ、ヤツシロ、スイートライム、コベニ、オウトウ、ムカクキシュウ、クネンボ、ハッサク、バレンシアオレンジ、又はシュウトウであることを特徴とする請求項１記載の油脂類用抗酸化性組成物。」
（２）引用刊行物等に記載された事項
（ア）当審において引用された刊行物の記載
　刊行物１（特開昭５９−８５２７２号公報、甲第２号証）には「かんきつ類の果皮または全果からエタノール、水、メタノール、酢酸エチル、その他の単独あるいは併用の溶剤を用いて抽出した成分を主剤とするカロチノイド色素の退変色防止剤。」（特許請求の範囲第１項）、「この発明は、カロチノイド色素の経時的退変色を工業的に有利に防止することを目的とする。」（１頁右下欄８、９行）、「この発明の要部をなす退変色防止剤は、かんきつ類の果実の果皮または全果の溶剤抽出物である。」（２頁左上欄２、３行）と記載され、具体的には、夏みかん果皮又は温州みかん果皮を含水アルコールで抽出したカロチノイド色素の退変色防止剤が記載されている（実施例１、２参照。）。
（イ）異議証拠刊行物の記載
　甲第１号証（特開平５−９８２５５号公報）には「柑橘類の果皮にエタノール及び／又はメタノールを加え、抽出し、該抽出液から固形物を除去した後、該抽出液を乾固し、その後加水し、水溶性の成分を抽出し、更にクロロホルム及び／又はｎ−ヘキサンにて脂溶性の抗酸化能成分を除去することを特徴とする柑橘類果皮の非アスコルビン酸・水溶性抗酸化能成分を含有する抗酸化剤の製造方法。」（特許請求の範囲請求項１）が記載されている。　　甲第３号証（「食品と開発」Vol．２５、No.６、１９９０年６月１日発行、株式会社健康産業新聞社、P１４〜１８）には、カロチノイド系色素の退色、変色の原因として、酸化による変化と非酸化的変化によるものがあることが記載されている（１７頁）。
　甲第４号証（「化学大辞典」１９８９年１０月２０日発行、株式会社東京化学同人、１３３０頁）には、「退色」の意味が記載されている。
　甲第５号証（「広辞苑」１９９１年１１月１５日発行、株式会社岩波書店、１５４６頁）には、「退色、褪色」の意味が記載されている。
（３）対比・判断
（ａ）特許法第２９条第１項第３号違反について
　本件第１発明と刊行物１に記載された発明を対比する。
　刊行物１には、かんきつ類の果皮を水又は含水アルコールで抽出した成分を主剤とするカロチノイド色素の退変色防止剤が記載されており、該かんきつ類はミカン科植物に包含されるものであるから、両者は、「かんきつ類の果皮の水又は含水アルコール抽出物を有効成分として含有する組成物」である点で一致し、本件第１発明が該組成物の用途が油脂類用抗酸化性組成物であるのに対し、刊行物１記載の発明はその用途がカロチノイド色素の退変色防止剤である点で相違している。
　そこで、上記相違点について検討する。
　本件明細書には「油脂類などを含有する飲食品、・・・などは、空気中の酸素により酸化を受け徐々に劣化して、不快臭を生ずるなどの品質の低下（酸敗）をまねき」（１頁２欄２〜５行）、「本発明の目的は、安全性が高く、既存の抗酸化性組成物より効果の高い水溶性の天然抗酸化性組成物を提供する」（２頁３欄２３〜２５行）、「以下に述べる抗酸化活性試験に供した。・・・上記で得られた水溶性抗酸化性組成物を加え攪拌し、遮光下５０℃の恒温槽（「層」は誤記。）に置き酸化させた。酸化度の測定はチオシアネート法によった。」（３頁５欄４行〜６欄１行）と記載されている。一方、刊行物１には「この発明は、カロチノイド色素の経時的退変色を工業的に有利に防止することを目的とする。」（１頁右下欄８、９行）、「食用油・・・にキャロットより抽出した色素（カロチノイド色素の１種β−カロチンが主体）・・・、前記取得物・・・を加え黄色に着色した。このものと、無添加で他の条件を同一にしたものを比較したところ、無添加のものは日光下４日間で完全に退変色したが、添加したものは１０％だけ退変色していた。」（２頁右下欄９〜１５行）と記載され、また、紫外線カーボンアーク耐光試験機を使用して退変色率の算出がなされている（実施例２、３参照。）。
　以上の記載によれば、本件第１発明の組成物が、空気中の酸素による酸化を防止するための油脂類用抗酸化性組成物として使用されているのに対し、刊行物１記載の発明の組成物は、光の作用によるカロチノイド色素の退変色を防止するためのカロチノイド色素の退変色防止剤として使用されているものであると認められる。
　そうすると、本件第１発明と刊行物１記載の発明とは、該組成物の適用範囲が明確に相違するものであり、また、該組成物の作用機序も相違するものであることは技術常識であるから、両者の用途は実質的に同一のものであるとすることはできない。
　したがって、本件第１発明は、刊行物１に記載された発明とはいえない。
　また、本件第２発明は、本件第１発明を更に技術的に限定したものであるから、上記と同様な理由により、刊行物１に記載された発明であるとはいえない。
（ｂ）特許法第２９条第２項違反について
　本件第１発明と甲号各証に記載された発明を対比する。
  甲第１号証には、柑橘類の果皮にエタノール及び／又はメタノールを加えて抽出した水溶性抗酸化剤が記載されているが、抽出溶媒として、水又は含水アルコールを使用することについて記載も示唆もされていない。
  甲第３号証には、カロチノイド色素の退変色の原因として、酸化による変化と非酸化的変化によるものがあることが、また、甲第４、５号証には、退色及び褪色の一般的な意味が、それぞれ、記載されているのみで、本件第１発明の構成について触れるものではない。
　次に、本件第１発明の効果について検討する。
　本件明細書の実施例２では、エタノール、５０％エタノール、２０％エタノール、水を、それぞれ、溶媒とした際のシイクワシャー果皮の抽出液の抗酸化性について測定されている。この記載によれば、５０％エタノール、２０％エタノール、水の各溶媒による抽出物については、２００時間を超えた時点でも吸光度の上昇は見られないのに対し、エタノールによる抽出物については、１００時間を超えた時点で吸光度の上昇が見られ、酸化反応が起こっていることから、抽出溶媒として、エタノールを使用するより、水又は含水エタノールを使用した方が優れた抗酸化性を有する抽出物が得られていることが認められる。
　そうすると、甲第１号証には、柑橘類の果皮から抽出した水溶性抗酸化剤が記載されているが、抽出溶媒として、水又は含水アルコールを使用することについて示唆されていないこと、刊行物１（甲第２号証）には、上記したように、溶媒抽出物を油脂類用抗酸化性組成物の用途に使用することについて何らの示唆もないこと、甲第３ないし５号証は本件第１発明の構成について特に触れるものではないこと、さらに、本件第１発明は、水又は含水エタノールを抽出溶媒として使用することにより、優れた油脂類用抗酸化性組成物が得られるという顕著な効果を奏するものであることに照らせば、甲第１号証記載の発明に、刊行物１及び甲第３ないし５号証記載の発明を併せ考えても、本件第１発明の構成を採用することは、当業者が容易に想到し得たものとはいえない。
　したがって、本件第１発明は、甲第１号証、刊行物１及び甲第３ないし５号証に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。
　また、本件第２発明は、本件第１発明を更に技術的に限定したものであるから、上記と同様な理由により、上記証拠に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものとはいえない。
　よって、本件第１ないし２発明は、特許出願の際独立して特許を受けることができるものである。
（４）むすび
　以上のとおりであるから、本件訂正は、特許法第１２０条の４第２項及び同条第３項で準用する第１２６条第２項から４項の規定に適合するので、当該訂正を認める。
III　異議申立てについての判断
１  異議申立ての理由の概要
　異議申立人は、訂正前の請求項１ないし２に係る発明は、甲第２号証に記載された発明であるか、あるいは甲第１ないし２号証に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものであるから、本件特許は特許法第２９条第１項第３号、又は同条第２項の規定に違反してなされたものであって、取り消されるべきものである旨主張している。　
２　判断
　異議申立人の主張がいずれも採用できないことは、上記II３から明らかである。
３　むすび
　以上のとおりであるから、特許異議申立の理由及び証拠によっては、本件第１ないし２発明の特許を取り消すことはできない。
　また、他に本件第１ないし２発明の特許を取り消すべき理由を発見しない。
  よって、結論のとおり決定する。
【異議決定日】
平成１２年９月２６日（２０００．９．２６）
【訂正の要旨】
　　　　　　　　訂正の要旨
　本件訂正は、特許請求の範囲の減縮を目的として、特許請求の範囲の請求項１及び２における「抗酸化性組成物」を「油脂類用抗酸化性組成物」に訂正するものである。
（５４）【発明の名称】
水溶性抗酸化性組成物
（５７）【特許請求の範囲】
　　【請求項１】　ミカン科植物果皮の水又は含水アルコール抽出物を有効成分として含有することを特徴とする油脂類用抗酸化性組成物。
　　【請求項２】　ミカン科植物が、シイクワシャー、ソウキツ、チチュウカイマンダリン、オオタポンカン、タチバナ、サンキツ、ヤツシロ、スイートライム、コベニ、オウトウ、ムカクキシュウ、クネンボ、ハッサク、バレンシアオレンジ、又はシュウトウであることを特徴とする請求項１記載の油脂類用抗酸化性組成物。
【発明の詳細な説明】
　【０００１】
　　【産業上の利用分野】
　本発明は、ミカン科植物果皮の水又は含水アルコール抽出物を有効成分として含有する水溶性抗酸化性組成物に関する。
　【０００２】
　　【従来の技術】
　油脂類などを含有する飲食品、医薬品、医薬部外品、香粧品、飼料などは、空気中の酸素により酸化を受け徐々に劣化して、不快臭を生ずるなどの品質の低下（酸敗）をまねき、またこの時生ずる酸化物などは有毒であることが知られている。このような酸化を防ぐために抗酸化剤が用いられ、たとえば、ジブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）やブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）などの合成抗酸化剤が多用されてきた。しかし、近年これらの合成抗酸化剤の毒性についての報告がなされ、使用に抵抗感が持たれている。このような事情から天然由来の抗酸化成分であるトコフェロール類の需要が増加してきている。
　【０００３】
　このように天然由来の抗酸化剤の開発に期待が持たれており、ローズマリー抽出物、ヒマワリ種子抽出物、茶の葉抽出物が開発され商品化されている。実用化はされていないが、食用とされる植物から抗酸化成分が見いだされた例として、ローズマリーと同じ香辛料であるセージ、野菜類、大豆、オレンジ果皮、オリーブ、イナゴマメの莢、胡麻、ブドウ種子、などが報告されている。これらから得られた抗酸化成分は没食子酸、タンニン類、カフェー酸などのフェノール性化合物類、フラボノイド類、カテキン類、アントシアニン類、アスコルビン酸であり水溶性のものが多く、トコフェロールが脂溶性であるのとは対照的である。
　【０００４】
　ところでミカン科植物の持つ抗酸化作用が調べられた例として、先にあげたオレンジの果皮の他に、オオタポンカンの果皮の例がある。この中に含まれる抗酸化成分はクロロゲン酸とその誘導体であるとされているが、詳細は明らかでない。なお、ヒマワリ種子の抗酸化成分についてもクロロゲン酸とその誘導体であることが示されている。
　【０００５】
　　【発明が解決しようとする課題】
　現在、天然の抗酸化剤として、トコフェロールなどの油溶性のものが主として用いられている。しかしながら、加工品の種類（例えば水産加工品など）によっては油溶性の抗酸化剤では適用しにくい。本発明の目的は、安全性が高く、既存の抗酸化性組成物より効果の高い水溶性の天然抗酸化性組成物を提供することである。
　【０００６】
　また、ミカン科植物資源の有効利用や需要開拓のために、その新たな利用法の開発が求められている。たとえば、これまで廃棄されてきた自然落下果実や摘果、市場に出すことのできない等級の果実や、一般に生食としないミカン科植物果実の利用法の開発などである。また、ミカン科植物の果汁や果肉などの缶詰加工時にでる果皮などの残渣は、一部飼料などに用いられる他は、そのほとんどが廃棄されており、処理方法や費用などの点で問題が発生していることから、加工残渣の有効利用を図ることが求められている。本発明は、このようなミカン科植物資源の有効利用法を提供することも目的とする。
　【０００７】
　　【課題を解決するための手段】
　本発明者は、このような事情に基づき、安全性の高い抗酸化性組成物の探索を行った結果、ミカン科植物果皮の水又は含水アルコール抽出物が、抗酸化活性を示すことを見出し、本発明を完成した。
　即ち、本発明は、ミカン科植物果皮の水又は含水アルコール抽出物を有効成分として含有することを特徴とする抗酸化性組成物である。
　【０００８】
　また、本発明はミカン科植物が、シイクワシャー、ソウキツ、チチュウカイマンダリン、オオタポンカン、タチバナ、サンキツ、ヤツシロ、スイートライム、コベニ、オウトウ、ムカクキシュウ、クネンボ、ハッサク、バレンシアオレンジ、又はシュウトウであることを特徴とする上記記載の抗酸化性組成物である。
　以下、本発明を詳細に説明する。
　【０００９】
　本発明で用いるミカン科植物としては、ミカン属やキンカン属に属する植物を挙げることができる。より具体的には、マルキンカン、ニンポウキンカン、ナガミキンカン、フクシュウキンカン、カボス、イヨカン、シュンコウカン、オオベニミカン、カワバタ、シキキツ、ヒュウガナツ、ユコウ、キヌカワ、ユズ、シャデンユ、グラントレモン、ナツダイダイ、ジミカン、マーシュグレープフルーツ、クレメンチン、ヒラドブンタン、ピロロ、ミヤガワワセウンシュウ、エトログシトロン、モリタネーブル、スダチ、サンポウカン、ウジュキツ、ギリミカン、ラグファライム、ダンシータンジェリン、コウジ、カブチ、オウカン、テング、ユーレカレモン、シイクワシャー、ソウキツ、チチュウカイマンダリン、オオタポンカン、タチバナ、サンキツ、ヤツシロ、スイートライム、コベニ、オウトウ、ムカクキシュウ、クネンボ、ハッサク、バレンシアオレンジ、シュウトウ等を例示することができる。これらの中でも、シイクワシャー、ソウキツ、チチュウカイマンダリン、オオタポンカン、タチバナ、サンキツ、ヤツシロ、スイートライム、コベニ、オウトウ、ムカクキシュウ、クネンボ、ハッサク、バレンシアオレンジ、シュウトウを好ましい植物として挙げることができる。
　【００１０】
　本発明の抗酸化性組成物は、以下のようにして製造することができる。まず、ミカン科植物の果皮を生のまま、あるいは乾燥させ、必要に応じて適当な大きさに粉砕した後、これに約５倍〜２０倍量の水または含水アルコールを加えて抽出する。含水アルコールの場合アルコール濃度は５０％以下が好ましい。抽出は室温でもよいし加温してもよい。また、抽出時間は１週間程度必要である。この抽出液をグラスフィルター等で濾過し、濾液を減圧濃縮して、濃縮エキスを得る。ここで、抗酸化活性を高めるため、さらに簡単な分画操作を行うことも可能である。上記で得られた濃縮エキスを乾燥し粉末とするか、ペースト状あるいは含水エタノール溶液とすることにより本発明の抗酸化性組成物を得ることができる。
　本発明の抗酸化性組成物は、被酸化性物質例えば油脂類、天然色素、ビタミン類などへ直接添加するか、または被酸化性物質を含む組成物例えば飲食品、医薬品、医薬部外品、香粧品、飼料などに添加して使用する。
　【００１１】
　　【実施例】
　以下、実施例により、本発明を更に詳細に説明するが、本発明の技術的範囲はこれらの実施例に限定されるものではない。
　〔実施例１〕　高抗酸化能をもつミカン科植物果皮の種あるいは品種の選択
　高抗酸化能をもつミカン科植物果皮の種あるいは品種の選択をするために、ミカン科植物を代表する５０種（あるいは品種）について、リノール酸に対する抗酸化活性を測定した。各々の成熟果皮あるいは青果皮１００ｇを凍結乾燥後、７５％エタノールで抽出し、エバポレーターで濃縮乾固した。このものを、１．０ｍｇ／ｍｌ水溶液に調製し、その０．１ｍｌを以下に述べる抗酸化活性試験に供した。
　【００１２】
　リノール酸を同量のＴｗｅｅｎ８０と混和し、０．２Ｎ　ＮａＯＨ水溶液でｐＨ９とした後、Ｍ／３０リン酸バッファー（ｐＨ７）にて定容とした０．０１Ｍリノール酸溶液の５．０ｍｌを５０ｍｌのネジブタ付きガラスサンプル瓶にいれ、上記で得られた水溶性抗酸化性組成物を加え攪拌し、遮光下５０℃の恒温層に置き酸化させた。酸化度の測定はチオシアネート法によった。１０ｍｌの試験管に７５％エタノール溶液９．７ｍｌと３０％アンモニウムチオシアネート溶液０．１ｍｌを加え、ここに１日ごとにサンプリングした液０．１ｍｌを加え攪拌した後、２０ｍＭ塩化鉄（ＩＩ）の３．５％塩酸溶液を０．１ｍｌ加え攪拌した。これより正確に３分後に波長５００ｎｍでの吸光度を測定し酸化度とした。
抗酸化能は酸化度の経時的変化を指標にした。この結果を相対的な抗酸化活性としてまとめたものが表１である。
　【００１３】
　【表１】
　【００１４】
　〔実施例２〕　シイクワシャー果皮の水溶性抗酸化性組成物
　シイクワシャー果皮（７０ｇ、生重量）を、アセトン、５０％アセトン、エタノール、５０％エタノール、２０％エタノール、水の各溶媒（３００ｍｌ）を用いた室温で３日間抽出したものを、濾過後抽出し、各々の溶媒で５００ｍｌとした。この抽出液０．１ｍｌを実施例１と同様の抗酸化活性試験に供した。なお、比較としてｄｌ−α−トコフェロールを同様に処理し試験に供した。結果を図１に示す。この結果は、シイクワシャー果皮からの抗酸化性組成物の抽出には、１００％のエタノールあるいはアセトンを用いるより、含水エタノール、含水アセトンあるいは水を用いる方が効率的であることを示している。
　【００１５】
　〔実施例３〕シイクワシャー果皮の水溶性抗酸化成分の分画
　シイクワシャー果皮（８．０ｋｇ、生重量）を、５０％エタノール（５０Ｌ）を用い室温で７日間抽出したものを濾過し、エバポレーターで濃縮後、水（１．５Ｌ）に懸濁させ同量の酢酸エチルで分配後、さらに水層を同量のブタノールで分配した。ブタノール抽出後の水層をダイヤイオンＨＰ−２０（２Ｌ）処理し、水溶出（４Ｌ）、５０％メタノール溶出（４Ｌ）、１００％メタノール溶出（４Ｌ）の３分画に分けた。１００％メタノール溶出部は濃縮後ＯＤＳ（フジシリシア、ＤＭ１０２０Ｔ、１００ｇ）に付し、水溶出部（２５ｇ）、１０％メタノール溶出部（３．２ｇ）、１００％メタノール溶出部（６．８ｇ）に分けた。以上得られた分画を濃縮した後、各々１．０ｍｇ／ｍｌの濃度に調製したもの０．１ｍｌを実施例１と同様の抗酸化活性試験に供した。なお、比較としてｄｌ−α−トコフェロールを同様に処理し試験に供した。結果を図２に示す。
　【００１６】
　〔実施例４〕タチバナ果皮の水溶性抗酸化性組成物の分画
　タチバナ果皮（４．３ｋｇ、生重量）を、エタノール（１８Ｌ）を用い室温で７日間抽出したものを、濾過後濃縮した。この濃縮液を等量（１．５Ｌ）のブタノールと水で分配し、各層を濃縮後さらに、ブタノール可溶部を等量（１．５Ｌ）のヘキサンとメタノールで分配しヘキサン可溶部とメタノール可溶部を得て、これらを濃縮した。水可溶部は、ダイヤイオンＨＰ−２０処理を行い、水溶出部とエタノール溶出部とに分け、これらを濃縮した。さらに、先のエタノール抽出済みの果皮を水（１８Ｌ）で再抽出し濃縮後、ダイヤイオンＨＰ−２０処理を行い、水溶出部とエタノール溶出部とに分け、それぞれ濃縮した、各濃縮物を、１０ｍｇ／ｍｌの濃度に調製したもの０．１ｍｌを実施例１と同様の抗酸化活性試験に供した。なお、比較としてｄｌ−α−トコフェロールを同様に処理し試験に供した。結果を図３に示す。この結果は、エタノール抽出物中の活性成分はブタノール、エタノールの双方に可溶であることを示しており、また、タチバナ果皮には、エタノールでは抽出されにくい水溶性の抗酸化成分が含まれることを示している。
　【００１７】
　〔実施例５〕イヨ果皮の水溶性抗酸化性組成物
　イヨ果皮（７０ｇ、生重量）を、エタノール、５０％エタノール、水の各溶媒（３００ｍｌ）を用い室温で３日間抽出したものを、濾過後、抽出した各々の溶媒で５００ｍｌとした。この抽出液０．１ｍｌを実施例１と同様の抗酸化活性試験に供した。なお、比較としてｄｌ−α−トコフェロールを同様に処理し試験に供した。結果を図４に示す。この結果は、イヨ果皮の水溶性抗酸化性組成物の抽出には含水エタノールあるいは水を用いる方が効率的であることを示している。
　【００１８】
　〔実施例６〕シイクワシャー果皮の水溶性抗酸化組成物のβ−カロチン褪色防止作用
　シイクワシャー果皮のエタノール抽出物、５０％エタノール抽出物、水抽出物、およびタチバナ果皮のエタノール抽出物、エタノール抽出済み果皮の水抽出物を各１０ｍｇ／ｍｌに調製し、以下に述べる方法でカロチン褪色防止作用を調べた。
　【００１９】
　β−カロチン（５．０ｍｇ）にＴｗｅｅｎ８０（０．５ｍｌ）とエタノール（０．５ｍｌ）を加えて溶かし、ここに蒸留水を加えて５０ｍｌとしたβ−カロチン溶液を調製した。このβ−カロチン溶液９．０ｍｌに上記で調製された抽出液１．０ｍｌを加えた。抽出液の替わりに抽出物を調製する時に用いた溶媒１．０ｍｌを加えたものをコントロールとし、アスコルビン酸溶液１．０ｍｌ（最終濃度が０．１％となるように調製）を加えたものを対照として用いた。ブランクとして、Ｔｗｅｅｎ８０（０．５ｍｌ）とエタノール（０．５ｍｌ）を加えて溶かし、ここに蒸留水を加えて５０ｍｌとした溶液９．０ｍｌに各々１．０ｍｌを溶かしたものを用いた。これらの溶液を、９６ウェルプレートに０．３ｍｌずつ分注し蓋をした後、約５０００Ｌｘの蛍光灯照明下、室温に置いた。照明開始から経時的に４５０ｎｍでの吸光度の減少を測定し、β−カロチンの褪色度を測定した。結果を図５に示す。いずれの抽出物もβ−カロチンの褪色を抑えるが、とくにシイクワシャー果皮水抽出物およびタチバナエタノール抽出済み果皮の水抽出物は、アスコルビン酸とほぼ同程度の効果を示している。
　【００２０】
　　【発明の効果】
　本発明の抗酸化剤は、天然物であるミカン科植物果皮より得られるものであり、これら果皮は可食であるから原料としての安全性が高く、水溶性で高い抗酸化能を示すので、水系あるいはエマルジョン系の抗酸化添加剤としての使用できる。
【図面の簡単な説明】
　　【図１】
　シイクワシャー果皮抽出液の抗酸化活性を示す図である。
　　【図２】
　シイクワシャー果皮抽出液分画の抗酸化活性を示す図である。
　　【図３】
　タチバナ果皮抽出液および分画の抗酸化活性を示す図である。
　　【図４】
　イヨ果皮抽出物の抗酸化活性を示す図である。
　　【図５】
　シイクワシャー果皮およびタチバナ果皮のβ−カロチン褪色防止作用を示す図である。