(57)【要約】  Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、Ｈｅｔ1、ＸおよびＸ’が請求項１で示した意味を有する式（Ｉ）の化合物は、チロシンキナーゼ、特にＴＩＥ−２、およびＲａｆキナーゼの阻害剤であり、とりわけ、腫瘍を治療するために使用することができる。2008519780.tif 000014
2008519780.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物であって、
【化１】
2008519780.tif 000012
式中、
Ｒ6、Ｒ7は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、Ａ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＯＡまたはＣＮを示し、
Ｒ8、Ｒ9は、それぞれ互いに独立して、ＨまたはＡを示し、
Ｈｅｔ1は、１から４個のＮ、Ｏ、および／またはＳ原子を有する単環式または二環式の飽和、不飽和、または芳香族複素環を示し、これは非置換であるか、あるいはＨａｌ、Ａ、ＯＡ、ＯＨ、２から６個のＣ原子を有するアルケニル、２から６個のＣ原子を有するアルキニル、ＮＯ2、ＮＨ2、ＮＨＡ、ＮＡ2、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＡ、ＣＮ、−Ｏ−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8Ｒ9、−ＮＲ8−アルキレン−ＮＲ8Ｒ9、ＣＯＮＲ8Ｒ9、−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8−アルキレン−ＯＲ8および／またはカルボニル酸素（＝Ｏ）で一、二、または三置換されていることができ、
Ｈｅｔは、１から４個のＮ、Ｏ、および／またはＳ原子を有する単環式または二環式の飽和、不飽和、または芳香族複素環を示し、これは非置換であるか、あるいはＨａｌ、Ａ、ＯＡ、ＣＯＯＡ、ＣＮおよび／またはカルボニル酸素（＝Ｏ）で一、二、または三置換されていることができ、
Ａは、１から１０個のＣ原子を有するアルキルを示し、これはさらに１〜７個のＨ原子がＦおよび／または塩素で置換されていてもよく、
Ｘ、Ｘ’は、それぞれ互いに独立して、ＮＨを示すか不在であり、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを示す化合物であり、
ならびにあらゆる比率のそれらの混合物を含む、医薬品として使用できるそれらの誘導体、溶媒和物、塩、互変異性体および立体異性体。
【請求項２】
Ｘが、ＮＨを示し、
Ｘ’がＮＨを示す
請求項１に記載の化合物、ならびにあらゆる比率のそれらの混合物を含む、医薬品として使用できるそれらの誘導体、溶媒和物、塩、互変異性体および立体異性体。
【請求項３】
Ｈｅｔ1が、１から４個のＮ、Ｏ、および／またはＳ原子を有する単環式または二環式の不飽和または芳香族複素環を示し、これは非置換であるか、あるいはＨａｌ、Ａ、ＯＡ、ＯＨ、−Ｏ−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8Ｒ9および／または−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8−アルキレン−ＯＲ8で一、二、または三置換されていることができる
請求項１または２に記載の化合物、ならびにあらゆる比率のそれらの混合物を含む、医薬品として使用できるそれらの誘導体、溶媒和物、塩、互変異性体および立体異性体。
【請求項４】
Ｈｅｔ1が、ピリジル、イソオキサゾリル、キノリル、イソキノリル、チアゾリル、１,３,４−チアジアゾリル、１,２,４−チアジアゾリル、フリル、チエニル、ピロリル、ピリミジニル、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソチアゾリル、ベンゾ−１,３−ジオキソリルまたはピラジニルを示し、そのそれぞれが非置換であるか、あるいはＨａｌ、Ａ、ＯＡ、ＯＨ、−Ｏ−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8Ｒ9および／または−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8−アルキレン−ＯＲ8で一、二、または三置換されている
請求項１から３の一項または複数項に記載の化合物、ならびにあらゆる比率のそれらの混合物を含む、医薬品として使用できるそれらの誘導体、溶媒和物、塩、互変異性体および立体異性体。
【請求項５】
Ｈｅｔが、１から３個のＮ、Ｏおよび／またはＳ原子を有する単環式飽和複素環を示し、これは非置換であるかまたはＡで一置換されていることができる
請求項１から４の一項または複数項に記載の化合物、ならびにあらゆる比率のそれらの混合物を含む、医薬品として使用できるそれらの誘導体、溶媒和物、塩、互変異性体および立体異性体。
【請求項６】
Ｈｅｔが、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニルまたはピペラジニルを示し、そのそれぞれが非置換であるかＡで一置換されている
請求項１から５の一項または複数項に記載の化合物、ならびにあらゆる比率のそれらの混合物を含む、医薬品として使用できるそれらの誘導体、溶媒和物、塩、互変異性体および立体異性体。
【請求項７】
Ｒ6、Ｒ7が、Ｈを示す
請求項１から６の一項または複数項に記載の化合物、ならびにあらゆる比率のそれらの混合物を含む、医薬品として使用できるそれらの誘導体、溶媒和物、塩、互変異性体および立体異性体。
【請求項８】
Ｘが、ＮＨを示し、
Ｘ’が、ＮＨを示し、
Ｒ6、Ｒ7が、Ｈを示し、
Ｒ8、Ｒ9が、それぞれ互いに独立して、ＨまたはＡを示し、
Ｈｅｔ1が、１から４個のＮ、Ｏ、および／またはＳ原子を有する単環式または二環式の不飽和または芳香族複素環を示し、これは非置換であるか、あるいはＨａｌ、Ａ、ＯＡ、ＯＨ、−Ｏ−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8Ｒ9および／または−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8−アルキレン−ＯＲ8で一、二、または三置換されていることができ、
Ｈｅｔが、１から３個のＮ、Ｏおよび／またはＳ原子を有する単環式飽和複素環を示し、これは非置換であるかまたはＡで一置換されていることができ、
Ａが、１から１０個のＣ原子を有するアルキルを示し、これはさらに１〜７個のＨ原子がＦおよび／または塩素で置換されていてもよく、
Ｈａｌが、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを示す、
請求項１から７の一項または複数項に記載の化合物、ならびにあらゆる比率のそれらの混合物を含む、医薬品として使用できるそれらの誘導体、溶媒和物、塩、互変異性体および立体異性体。
【請求項９】
Ｘが、ＮＨを示し、
Ｘ’が、ＮＨを示し、
Ｒ6、Ｒ7が、Ｈを示し、
Ｒ8、Ｒ9が、それぞれ互いに独立して、ＨまたはＡを示し、
Ｈｅｔ1が、ピリジル、イソオキサゾリル、キノリル、イソキノリル、チアゾリル、１,３,４−チアジアゾリル、１,２,４−チアジアゾリル、フリル、チエニル、ピロリル、ピリミジニル、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソチアゾリル、ベンゾ−１,３−ジオキソリルまたはピラジニルを示し、そのそれぞれが非置換であるか、あるいはＨａｌ、Ａ、ＯＡ、ＯＨ、−Ｏ−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8Ｒ9および／または−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8−アルキレン−ＯＲ8で一、二、または三置換されており、
Ｈｅｔが、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニルまたはピペラジニルを示し、そのそれぞれが非置換であるかＡで一置換されており、
Ａが、１から１０個のＣ原子を有するアルキルを示し、これはさらに１〜７個のＨ原子がＦおよび／または塩素で置換されていてもよく、
Ｈａｌが、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを示す
請求項１から８の一項または複数項に記載の化合物、ならびにあらゆる比率のそれらの混合物を含む、医薬品として使用できるそれらの誘導体、溶媒和物、塩、互変異性体および立体異性体。
【請求項１０】
群
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−（５−ｔｅｒｔ−ブチルイソオキサゾール−３−イル）尿素、
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−（２，６−ジクロロピリジン−４−イル）尿素、
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−イソキノリン−３−イル尿素、
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−キノリン−３−イル尿素、
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−（４−トリフルオロメチルピリジン−２−イル）尿素、
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−（４−ｔｅｒｔ−ブチルチアゾール−２−イル）尿素、
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−（５−トリフルオロメチル−１，３，４−チアジアゾール−２−イル）尿素、
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−（６−トリフルオロメチルピリジン−３−イル）尿素、
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−（２−クロロ−６−トリフルオロメチルピリジン−３−イル）尿素、
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−（６−ヒドロキシ−５−トリフルオロメチルピリジン−３−イル）尿素、
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−［６−（３−モルホリン−４−イルプロポキシ）−５−トリフルオロメチルピリジン−３−イル）尿素、
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−［６−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）−５−トリフルオロメチルピリジン−３−イル）尿素、
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−（２−ヒドロキシ−５−トリフルオロメチルピリジン−３−イル）尿素、
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−［２−（３−モルホリン−４−イルプロポキシ）−５−トリフルオロメチルピリジン−３−イル）尿素、
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−［２−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）−５−トリフルオロメチルピリジン−３−イル）尿素、
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−（２−｛２−［（２−メトキシエチル）メチルアミノ］エトキシ｝−５−トリフルオロメチルピリジン−３−イル）尿素、
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−（６−｛２−［（２−メトキシエチル）メチルアミノ］エトキシ｝−５−トリフルオロメチルピリジン−３−イル）尿素、
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−ベンゾ−１，３−ジオキソール−５−イル尿素、
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−（２，２−ジメチルベンゾ−１，３−ジオキソール−５−イル）尿素、
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−（２，２−ジフルオロベンゾ−１，３−ジオキソール−５−イル）尿素
から選択される請求項１に記載の化合物、ならびにあらゆる比率のそれらの混合物を含む、医薬品として使用できるそれらの誘導体、溶媒和物、塩、互変異性体および立体異性体。
【請求項１１】
請求項１から１０に記載の式Ｉの化合物、ならびに医薬品として使用できるそれらの誘導体、塩、溶媒和物、互変異性体および立体異性体の調製方法であって、
ａ）Ｘ、Ｘ’がＮＨを示す式Ｉの化合物を調製するために、
式ＩＩ
【化２】
2008519780.tif 000013
（式中、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8およびＲ9は、請求項１で示した意味を有する）の化合物を、式ＩＩＩ
Ｈｅｔ1−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ        ＩＩＩ
（式中、Ｈｅｔ1は、請求項１で示した意味を有する）の化合物と反応させるか、
または
ｂ）Ｘ、Ｘ’がＮＨを示す式Ｉの化合物を調製するために、
式ＩＩの化合物を、式ＩＶ
Ｈｅｔ1−ＮＨ2        ＩＶ
（式中、Ｈｅｔ1は、請求項１で示した意味を有する）の化合物、
およびクロロ炭酸エステルと反応させ、
かつ／または
式Ｉの塩基または酸をその塩の１つに変換することを特徴とする方法。
【請求項１２】
請求項１に記載の少なくとも１つの式Ｉの化合物、および／またはあらゆる比率のそれらの混合物を含む、医薬品として使用できるそれらの誘導体、塩、溶媒和物、互変異性体および立体異性体、ならびに場合によっては賦形剤および／または補助剤を含む薬物。
【請求項１３】
請求項１に記載の化合物、ならびにあらゆる比率のそれらの混合物を含む、医薬品として使用できるそれらの誘導体、塩、溶媒和物、互変異性体および立体異性体の使用であって、
キナーゼシグナル伝達の阻害、制御および／または調節が役割を果たす疾患の治療のための薬物を調製するための使用。
【請求項１４】
キナーゼが、チロシンキナーゼおよびＲａｆキナーゼの群から選択される請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
チロシンキナーゼが、ＴＩＥ−２、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＦＧＦＲおよび／またはＦＬＴ／ＫＤＲである請求項１４に記載の使用。
【請求項１６】
請求項１に記載の化合物、ならびにあらゆる比率のそれらの混合物を含む、医薬品として使用できるそれらの誘導体、溶媒和物および立体異性体の請求項１４に記載の使用であって、請求項１に記載の化合物によるチロシンキナーゼの阻害により影響される疾患の治療のための薬物を調製するための使用。
【請求項１７】
請求項１に記載の化合物によるＴＩＥ−２、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＦＧＦＲおよび／またはＦＬＴ／ＫＤＲの阻害により影響される疾患の治療のための薬物を調製するための請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
治療される疾患が、固形腫瘍である請求項１６または１７に記載の使用。
【請求項１９】
固形腫瘍が、扁平上皮、膀胱、胃、腎臓、頭および首、食道、子宮頸部、甲状腺、腸、肝臓、脳、前立腺、尿生殖路、リンパ系、胃、喉頭および／または肺の腫瘍の群に由来する請求項１８に記載の使用。
【請求項２０】
固形腫瘍が、単球性白血病、肺腺癌、小細胞肺癌、膵臓癌、神経膠芽腫および乳癌の群に由来する請求項１８に記載の使用。
【請求項２１】
固形腫瘍が、肺腺癌、小細胞肺癌、膵臓癌、神経膠芽腫、結腸癌および乳癌の群に由来する請求項１８に記載の使用。
【請求項２２】
治療される疾患が、血液および免疫系の腫瘍である請求項１６または１７に記載の使用。
【請求項２３】
腫瘍が、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病および／または慢性リンパ性白血病の群に由来する請求項２２に記載の使用。
【請求項２４】
血管新生が関与する疾患を治療するための請求項１６または１７に記載の使用。
【請求項２５】
疾患が、眼疾患である請求項２４に記載の使用。
【請求項２６】
網膜血管新生、糖尿病性網膜症、加齢黄斑変性症および／または炎症性疾患を治療するための請求項１６または１７に記載の使用。
【請求項２７】
炎症性疾患が、関節リューマチ、乾癬、接触性皮膚炎および遅延型過敏反応の群に由来する請求項２６に記載の使用。
【請求項２８】
骨の病態を治療するためであって、該骨の病態が、骨肉腫、骨関節炎およびくる病の群に由来する請求項１６または１７に記載の使用。
【請求項２９】
固形腫瘍を治療する薬剤を調製するための、請求項１に記載の式Ｉの化合物、ならびに／または生理的に許容されるそれらの塩および溶媒和物の使用であって、治療上有効量の式Ｉの化合物が、１）エストロゲン受容体調整剤、２）アンドロゲン受容体調整剤、３）レチノイド受容体調整剤、４）細胞毒性剤、５）抗増殖剤、６）プレニルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤、７）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、８）ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、９）逆転写酵素阻害剤、および１０）さらなる血管新生阻害剤の群の化合物と組み合わせて投与される使用。
【請求項３０】
固形腫瘍を治療する薬剤を調製するための、請求項１に記載の式Ｉの化合物、ならびに／または生理的に許容されるそれらの塩および溶媒和物の使用であって、治療上有効量の式Ｉの化合物が、放射線療法、ならびに１）エストロゲン受容体調整剤、２）アンドロゲン受容体調整剤、３）レチノイド受容体調整剤、４）細胞毒性剤、５）抗増殖剤、６）プレニルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤、７）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、８）ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、９）逆転写酵素阻害剤、および１０）さらなる血管新生阻害剤の群の化合物と組み合わせて投与される使用。
【請求項３１】
ＴＩＥ−２活性障害に基づく疾患を治療するための薬物を調製するためであって、請求項１に記載の化合物の治療上有効量が、増殖因子受容体阻害剤と組み合わせて投与される請求項１６または１７に記載の使用。
【請求項３２】
Ｒａｆキナーゼにより引き起こされ、媒介されかつ／または伝播される疾患を治療するための薬物を調製するための式Ｉの化合物の請求項１３または１４に記載の使用。
【請求項３３】
Ｒａｆキナーゼが、Ａ−Ｒａｆ、Ｂ−ＲａｆおよびＲａｆ−１からなる群から選択される請求項３２に記載の使用。
【請求項３４】
疾患が、高増殖性および非高増殖性疾患の群から選択される請求項３２に記載の使用。
【請求項３５】
疾患が、癌である請求項３２または３４に記載の使用。
【請求項３６】
疾患が、非癌性である請求項３２または３４に記載の使用。
【請求項３７】
非癌性疾患が、乾癬、関節炎、炎症、子宮内膜症、瘢痕、良性前立腺過形成、免疫疾患、自己免疫疾患および免疫不全症からなる群から選択される請求項３２、３４または３６に記載の使用。
【請求項３８】
疾患が、脳腫瘍、肺癌、扁平上皮癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、肝癌、腎臓癌、結腸直腸癌、乳癌、頭部癌、頸部癌、食道癌、婦人科癌、甲状腺癌、リンパ腫、慢性白血病および急性白血病からなる群から選択される請求項３２、３４または３５の一項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の背景）
本発明には、価値ある特性、特に薬剤の調製に使用することができる特性を有する新規な化合物を見出す目的があった。
【０００２】
本発明は、キナーゼシグナル伝達、特にチロシンキナーゼおよび／またはセリン／トレオニンキナーゼシグナル伝達の阻害、制御および／または調節に役割を果たす化合物および化合物の使用、さらにこれらの化合物を含む薬剤組成物、ならびにキナーゼに誘発される疾患の治療のための該化合物の使用に関する。
【０００３】
具体的には、本発明は、チロシンキナーゼシグナル伝達を、阻害、制御および／または調節する式Ｉの化合物、これらの化合物を含む組成物、および哺乳動物における血管新生、癌、腫瘍の形成、増殖および伝播、動脈硬化、加齢黄斑変性、脈絡膜血管新生および糖尿病性網膜症などの眼疾患、炎症性疾患、関節炎、血栓症、線維症、糸球体腎炎、神経変性、乾癬、再狭窄、創傷治癒、移植片拒絶、代謝、および免疫系の疾患、同じく自己免疫疾患、肝硬変、糖尿病、ならびに不安定性および浸透性を含む血管の疾患などのチロシンキナーゼに誘発される疾患および状態を治療するためのそれらの使用方法に関する。
【０００４】
チロシンキナーゼは、タンパク質基質においてチロシン残基へのアデノシン三リン酸（γリン酸）の末端リン酸の転移を触媒する、少なくとも４００種のメンバーを有する酵素の一種である。チロシンキナーゼは、基質リン酸化を介して、種々の細胞機能のシグナル伝達において重要な役割を果たすと考えられている。シグナル伝達の正確な機序は依然として不明であるが、チロシンキナーゼは、細胞増殖、発癌、および細胞分化の重要な要因であることが示されている。
【０００５】
チロシンキナーゼは、受容体型チロシンキナーゼ、および非受容体型チロシンキナーゼに分類することができる。受容体型チロシンキナーゼは、細胞外部分、膜貫通部分、および細胞内部分を有し、非受容体型チロシンキナーゼは、細胞内のみである（ＳｃｈｌｅｓｓｉｎｇｅｒおよびＵｌｌｒｉｃｈ、Ｎｅｕｒｏｎ ９、３８３〜３９１（１９９２）および１〜２０（１９９２）の概説を参照されたい）。
【０００６】
受容体型チロシンキナーゼは、異なる生物活性を有する多数の膜貫通受容体からなる。たとえば、受容体型チロシンキナーゼの約２０種の異なるサブファミリーが同定されている。ＨＥＲサブファミリーと称される、１つのチロシンキナーゼサブファミリーは、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、およびＨＥＲ４からなる。この受容体サブファミリーのリガンドには、上皮増殖因子、ＴＧＦ−α、アンフィレグリン、ＨＢ−ＥＧＦ、ベータセルリン、およびヘレグリンが含まれる。これらの受容体型チロシンキナーゼの別のサブファミリーは、インスリンサブファミリーであり、ＩＮＳ−Ｒ、ＩＧＦ−ＩＲ、およびＩＲ−Ｒが含まれる。ＰＤＧＦサブファミリーには、ＰＤＧＦ−αおよび−β受容体、ＣＳＦＩＲ、ｃ−ｋｉｔ、ならびにＦＬＫ−ＩＩが含まれる。さらに、キナーゼ挿入ドメイン受容体(ＫＤＲ)、胎児肝臓キナーゼ−１(ＦＬＫ−１)、胎児肝臓キナーゼ−４(ＦＬＫ−４)、およびｆｍｓチロシンキナーゼ−１(ｆｌｔ−１)からなるＦＬＫファミリーがある。ＰＤＧＦおよびＦＬＫファミリーは、これら２つの群が類似しているため、通常、一緒に議論される。受容体型チロシンキナーゼに関する詳細な議論は、参照により本明細書の一部とする、Ｐｌｏｗｍａｎ等による論文、ＤＮ＆Ｐ７（６）：３３４〜３３９、１９９４を参照されたい。
【０００７】
ＲＴＫ(受容体型チロシンキナーゼ)は、また、ＴＩＥ２ならびにそのリガンドのアンギオポイエチン１および２を含む。これらリガンドの相同体が次々見出されており、その作用は詳細には未だ示されてはいない。ＴＩＥ１は、ＴＩＥ２の相同体として知られている。ＴＩＥのＲＴＫは、内皮細胞に選択的に発現し、血管新生および血管成熟の過程に関与する。それらは、したがって、とりわけ血管系の疾患および血管が利用され、または再編成さえもされる病変における有用な標的である。血管新生および成熟の防止に加えて、血管新生の刺激もまた活性成分にとっての有用な標的であり得る。血管新生、腫瘍の発生およびキナーゼシグナル伝達についての論文を再検討するため以下の文献を引用する。
【０００８】
Ｇ.Ｂｒｅｉｅｒ  Ｐｌａｃｅｎｔａ（２０００）２１、Ｓｕｐｐｌ  Ａ、Ｔｒｏｐｈｏｂｌａｓｒ  Ｒｅｓ  １４、Ｓ１１〜Ｓ１５
Ｆ.Ｂｕｓｓｏｌｉｎｏ等、ＴＩＢＳ  ２２、２５１〜２５６（１９９７）
Ｇ.Ｂｅｒｇｅｒｓ  ＆  Ｌ.Ｅ.Ｂｅｎｊａｍｉｎ、Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ  ３、４０１〜４１０（２００３）
Ｐ.Ｂｌｕｍｅ−Ｊｅｎｓｅｎ  ＆  ．Ｈｕｎｔｅｒ  Ｎａｔｕｒｅ  ４１１、３５５〜３６５（２００１）
Ｍ．Ｒａｍｓａｕｅｒ  ＆  Ｐ.Ｄ'Ａｍｏｒｅ  Ｊ.Ｃｌｉｎ.ＩＮｖｅｓｔ.１１０、１６１５〜１６１７（２００２）
Ｓ.Ｔｓｉｇｋｏｓ等、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ.Ｉｎｖｅｓｔｉｇ.Ｄｒｕｇｓ  １２、９３３〜９４１（２００３）。
【０００９】
癌治療で既に試験されているキナーゼ阻害剤の例は、Ｌ.Ｋ.Ｓｈａｗｙｅｒ等、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ  １、１１７〜１２３（２００２）およびＤ.Ｆａｂｂｒｏ ＆ Ｃ.Ｇａｒｃｉａ−Ｅｃｈｅｖｅｒｒｉａ Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎ.Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ＆ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ５、７０１〜７１２（２００２）に示されている。
【００１０】
非受容体型チロシンキナーゼも同様に、多数のサブファミリーからなり、Ｓｒｃ、Ｆｒｋ、Ｂｔｋ、Ｃｓｋ、Ａｂｌ、Ｚａｐ７０、Ｆｅｓ／Ｆｐｓ、Ｆａｋ、Ｊａｋ、Ａｃｋ、およびＬＩＭＫが含まれる。これらのサブファミリーはそれぞれ、種々の受容体にさらに下位分類される。たとえば、Ｓｒｃサブファミリーは、もっとも大きなサブファミリーの１つである。これには、Ｓｒｃ、Ｙｅｓ、Ｆｙｎ、Ｌｙｎ、Ｌｃｋ、Ｂｌｋ、Ｈｃｋ、Ｆｇｒ、およびＹｒｋが含まれる。酵素のＳｒｃサブファミリーは、腫瘍形成と関連づけられている。非受容体型チロシンキナーゼのより詳細な議論は、参照により本明細書の一部とする、Ｂｏｌｅｎによる論文、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、８：２０２５〜２０３１(１９９３)を参照されたい。
【００１１】
受容体型チロシンキナーゼおよび非受容体型チロシンキナーゼは両方共、癌、乾癬および過免疫応答を含む様々な発病状態に導く細胞シグナル伝達経路に関与する。
【００１２】
様々な受容体型チロシンキナーゼおよびそれらに結合する増殖因子が、あるものは血管新生を促進するのが間接的かもしれないが、血管新生における役割を果たすことが提唱されている(Ｍｕｓｔｏｎｅｎ ａｎｄ Ａｌｉｔａｌｏ、Ｊ.Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ.１２９：８９５〜８９８、１９９５）。これらの受容体型チロシンキナーゼの１つは、ＦＬＫ−１とも称される、胎児肝臓キナーゼ１である。ＦＬＫ−１のヒト類似体は、キナーゼ挿入ドメイン含有受容体ＫＤＲであり、これは高親和力でＶＥＧＦに結合することから、血管内皮細胞増殖因子受容体２、すなわちＶＥＧＦＲ−２としても知られている。最後に、マウス型のこの受容体もＮＹＫと称されている（Ｏｅｌｒｉｃｈｓ等、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ８（１）：１１〜１５、１９９３）。ＶＥＧＦおよびＫＤＲは、血管内皮細胞の増殖、ならびにそれぞれ血管形成および血管新生と称される、血管の形成および発芽において重要な役割を果たすリガンド−受容体対である。
【００１３】
血管新生は、血管内皮増殖因子(ＶＥＧＦ)の過剰な活性を特徴とする。ＶＥＧＦは、実際は、リガンドのファミリーからなる(ＫｌａｇｓｂｕｒｎおよびＤ'Ａｍｏｒｅ、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ＆Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｖｉｅｗｓ  ７：２５９〜２７０、１９９６）。ＶＥＧＦは、高親和性膜貫通チロシンキナーゼ受容体ＫＤＲ、およびＦｌｔ−１、または血管内皮細胞増殖因子受容体１(ＶＥＧＦＲ−１)とも称される関連ｆｍｓチロシンキナーゼ−１に結合する。細胞培養、および遺伝子ノックアウト実験は、それぞれの受容体が血管新生の種々の局面に寄与することを示唆している。ＫＤＲは、ＶＥＧＦのマイトジェン機能を媒介し、Ｆｌｔ−１は、細胞接着に関連する機能など、非マイトジェン機能を調整すると考えられる。したがって、ＫＤＲを阻害することによって、マイトジェンＶＥＧＦ活性レベルが調整される。実際、腫瘍増殖は、ＶＥＧＦ受容体アンタゴニストの抗血管新生作用に感受性であることが示されている(Ｋｉｍ等、Ｎａｔｕｒｅ  ３６２、８４１〜８４４頁、１９９３）。
【００１４】
ＶＥＧＦＲに対する３つのＰＴＫ(タンパク質チロシンキナーゼ)受容体：ＶＥＧＦＲ−１(Ｆｌｔ−１)；ＶＥＧＲＦ−２(Ｆｌｋ−１またはＫＤＲ)およびＶＥＧＦＲ−３(Ｆｌｔ−４)が確認されており、ＶＥＧＦＲ−２が特に重要である。
【００１５】
したがって、固形腫瘍は、それらの増殖を助けるために必要とされる血管の形成に関して血管新生に依存しているため、チロシンキナーゼ阻害剤で治療することができる。これらの固形腫瘍には、単球性白血病、脳、尿生殖路、リンパ系、胃、喉頭、ならびに肺腺癌および小細胞肺癌を含む肺の癌が含まれる。さらなる例には、Ｒａｆ活性化癌遺伝子（たとえば、Ｋ−ｒａｓ、ｅｒｂ−Ｂ）の過剰発現または活性化が観察される癌腫が含まれる。そのような癌には、膵臓癌および乳癌が含まれる。したがって、これらのチロシンキナーゼの阻害剤は、これらの酵素に起因する増殖性疾患の予防および治療に適している。
【００１６】
ＶＥＧＦの血管新生活性は、腫瘍に限定されない。ＶＥＧＦは、糖尿病性網膜症において網膜または網膜近傍に生じる血管新生活性の原因となる。この網膜での血管増殖は、視力低下をもたらし、最後には失明に至る。眼ＶＥＧＦｍＲＮＡおよびタンパク質レベルは、霊長類での網膜静脈閉塞、およびマウスでのｐＯ2レベルの低下などの状態によって上昇し、新生血管形成に至る。抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体、またはＶＥＧＦ受容体免疫融合体(immunofusion)の眼内注射は、霊長類モデルおよび齧歯類モデルの両方で、眼の新生血管形成を阻害する。ヒト糖尿病性網膜症におけるＶＥＧＦの誘発の原因にかかわらず、眼ＶＥＧＦの阻害はこの疾患の治療に適している。
【００１７】
ＶＥＧＦの発現は、また、壊死の部位と隣接する動物およびヒトの腫瘍の低酸素領域において著しく増加する。加えて、ＶＥＧＦは、ｒａｓ、ｒａｆ、ｓｒｃおよびｐ５３変異体腫瘍遺伝子（それらはすべて癌との闘いにおいて重要である）の発現により上方制御される。抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体は、ヌードマウスにおけるヒト腫瘍の増殖を阻害する。同じ腫瘍細胞が培養液中でＶＥＧＦを発現し続けるものの、その抗体はそれらの分裂速度を低下しない。したがって、腫瘍から誘導されたＶＥＧＦは、自己分泌分裂促進因子としては機能しない。ＶＥＧＦは、それゆえそのパラ分泌血管内皮細胞の走化活動および分裂促進活動を通して血管新生を促進することによりｉｎ  ｖｉｖｏでの腫瘍の増殖に寄与する。これらのモノクローナル抗体は、また、一般的にはよく血管新生されていない胸腺欠損マウスのヒト結腸癌の増殖を阻害し、接種した細胞から生じる腫瘍の数を減少させる。
【００１８】
細胞質チロシンキナーゼドメインを除去するが、膜アンカーを保持するように切断されたマウスＫＤＲ受容体相同体、Ｆｌｔ−１、Ｆｌｋ−１のＶＥＧＦ結合構築体のウイルスでの発現は、おそらくは膜貫通内皮細胞ＶＥＧＦ受容体とのヘテロダイマー形成の優性阻害機序によって、マウスにおいて移植性膠芽細胞腫の増殖を実質的に停止する。ヌードマウスにおいて通常は固形腫瘍として増殖する胚幹細胞は、両方のＶＥＧＦ対立遺伝子がノックアウトされている場合、検出可能な腫瘍を形成しない。総合すると、これらのデータは、固形腫瘍の増殖におけるＶＥＧＦの役割を示している。ＫＤＲまたはＦｌｔ−１の阻害は、病的血管新生に関与し、腫瘍増殖は血管新生に依存することが知られているため、これらの受容体は、血管新生が病理全体の一部である疾患、たとえば炎症、糖尿病性網膜血管形成、ならびに種々の形態の癌の治療に適している(Ｗｅｉｄｎｅｒ等、Ｎ.Ｅｎｇｌ.Ｊ.Ｍｅｄ.３２４、１〜８頁、１９９１）。
【００１９】
内皮特異的受容体型チロシンキナーゼＴＩＥ−２のリガンドであるアンギオポイエチン１(Ａｎｇ−１)は、新規な血管新生因子である(Ｄａｖｉｓ等、Ｃｅｌｌ、１９９６、８７：１１６１〜１１６９；Ｐａｒｔａｎｅｎ等、Ｍｏｌ.Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ.１２：１６９８〜１７０７(１９９２)；米国特許第５,５２１,０７３号；第５,８７９,６７２号；第５,８７７,０２０号；および第６,０３０,８３１号）。頭字語ＴＩＥは、「ＩｇおよびＥＧＦ相同ドメインを有するチロシンキナーゼ」の略語である。ＴＩＥは、血管内皮細胞および初期造血細胞においてのみ発現する受容体型チロシンキナーゼの一種を識別するために用いられる。ＴＩＥ受容体キナーゼは典型的に、ＥＧＦ様ドメイン、および鎖間のジスルフィド橋結合によって安定化した細胞外フォールドユニットからなる免疫グロブリン(ＩＧ)様ドメインの存在を特徴とする(Ｐａｒｔａｎｅｎ等、Ｃｕｒｒ.Ｔｏｐｉｃｓ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ.Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１９９９、２３７：１５９〜１７２）。血管発生の初期段階にその機能を発揮するＶＥＧＦとは対照的に、Ａｎｇ１およびその受容体ＴＩＥ−２は、血管発生の後期段階、すなわち血管転換(血管内腔の形成に関連する転換)および成熟中に作用する(Ｙａｎｃｏｐｏｕｌｏｓ等、Ｃｅｌｌ、１９９８、９３：６６１〜６６４；Ｐｅｔｅｒｓ Ｋ.Ｇ.、Ｃｉｒｃ.Ｒｅｓ.、１９９８、８３(３):３４２~３;Ｓｕｒｉ等、Ｃｅｌｌ ８７、１１７１〜１１８０(１９９６))。
【００２０】
したがって、ＴＩＥ−２の阻害は、血管新生によって開始される新しい血管系の転換および成熟を中断するはずであり、それにより血管新生のプロセスを中断するはずであることが予期される。さらに、ＶＥＧＦＲ−２のキナーゼドメイン結合部位における阻害は、チロシン残基のリン酸化を遮断し、血管新生の開始を阻止する働きをするであろう。したがって、ＴＩＥ−２および／またはＶＥＧＦＲ−２の阻害は腫瘍血管新生を妨げ、腫瘍増殖を遅延する、または完全に排除する働きをするはずであると仮定されなければならない。したがって不適切な血管新生に関連する癌および他の疾患の治療を提供することができる。
【００２１】
本発明は、不規則なまたは乱されたＴＩＥ−２活性に関連する疾患の予防および／または治療のためにＴＩＥ−２を制御、調節または阻害する方法を対象とする。特に式Ｉの化合物は、また、いくつかの形態の癌の治療において使用することもできる。式Ｉの化合物は、さらに、いくつかの既存の癌化学療法における相加作用または相乗効果を提供することができかつ／またはいくつかの既存の癌化学療法および放射線治療の有効性を修復するために使用することができる。
【００２２】
式Ｉの化合物は、さらに、ＴＩＥ−２の単離および活性または発現の調査のために使用することができる。加えて、それらは、不規則なまたは乱されたＴＩＥ−２活性に関連する疾患の診断法において使用するのに特に適している。
【００２３】
本発明は、さらに、不規則なまたは乱されたＶＥＧＦＲ−２活性に関連する疾患を予防および／または治療するためにＶＥＧＦＲ−２を制御、調節または阻害する方法を対象とする。
【００２４】
本発明はさらに、Ｒａｆキナーゼの阻害剤としての式Ｉの化合物に関する。
【００２５】
タンパク質リン酸化は、細胞機能を調節するための基礎的なプロセスである。タンパク質キナーゼおよびホスファターゼの協調作用は、リン酸化の程度を制御し、それゆえ特定の標的タンパク質の活性を制御する。タンパク質リン酸化の主たる役割の１つはシグナル伝達にあり、ここで細胞外シグナルは、たとえばｐ２１ras／ｒａｆ経路において、タンパク質リン酸化および脱リン酸化事象のカスケードによって増幅および伝播される。
【００２６】
ｐ２１ras遺伝子は、ハーベイ(Harvey)(Ｈ−Ｒａｓ)およびカーステン(Kirsten)(Ｋ−Ｒａｓ)ラット肉腫ウイルスの癌遺伝子として発見された。ヒトでは、細胞Ｒａｓ遺伝子(ｃ−Ｒａｓ)の特徴的な突然変異は、多くの異なる型の癌と関連づけられている。Ｒａｓを構成的に活性化するこれらの突然変異対立遺伝子は、培養において、たとえばマウス細胞系ＮＩＨ３Ｔ３などの細胞を形質転換することが示されている。
【００２７】
ｐ２１ras癌遺伝子は、ヒト固形癌腫の発生および進行の重要な要因であり、すべてのヒト癌腫の３０％で突然変異している(Ｂｏｌｔｏｎ等(１９９４)Ａｎｎ.Ｒｅｐ.Ｍｅｄ.Ｃｈｅｍ.２９、１６５〜７４；Ｂｏｓ.(１９８９)Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ.４９、４６８２〜９）。その正常な非変異型では、Ｒａｓタンパク質は、ほぼすべての組織において、増殖因子受容体に導かれるシグナル伝達カスケードの主要な要素である(Ａｖｒｕｃｈ等(１９９４)Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ.Ｓｃｉ.１９、２７９〜８３）。
【００２８】
生化学的には、Ｒａｓは、グアニンヌクレオチド結合タンパク質であり、ＧＴＰ結合活性化型とＧＤＰ結合静止型とのサイクリングは、Ｒａｓ内因性ＧＴＰアーゼ活性および他の調節タンパク質によって厳密に制御される。Ｒａｓ遺伝子産物は、グアニン三リン酸(ＧＴＰ)およびグアニン二リン酸(ＧＤＰ)に結合し、ＧＴＰをＧＤＰに加水分解する。Ｒａｓは、ＧＴＰ結合状態で活性である。癌細胞のＲａｓ突然変異体において、内因性ＧＴＰアーゼ活性は低下し、その結果として、タンパク質は、たとえば酵素Ｒａｆキナーゼなどの下流エフェクターに構成的増殖シグナルを伝達する。これがそれらの突然変異体を有する細胞の癌増殖をもたらす(Ｍａｇｎｕｓｏｎ等(１９９４）Ｓｅｍｉｎ.Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｌ.５、２４７〜５３）。Ｒａｓ癌原遺伝子は、高等真核生物において、受容体型および非受容体型チロシンキナーゼによって開始された増殖および分化シグナルを伝達するために、機能的に無傷のＣ−Ｒａｆ−１癌原遺伝子を必要とする。
【００２９】
活性化Ｒａｓは、Ｃ−Ｒａｆ−１癌原遺伝子の活性化に必要であるが、それによりＲａｓがＲａｆ−１タンパク質(Ｓｅｒ／Ｔｈｒ)キナーゼを活性化する生化学的段階は充分に特徴が明らかにされている。Ｒａｆキナーゼに対する非活性化抗体を投与してＲａｆキナーゼシグナル伝達経路を阻害することによって、あるいは優性阻害Ｒａｆキナーゼ、またはＲａｆキナーゼの基質である優性阻害ＭＥＫ(ＭＡＰＫＫ)の共発現によって活性Ｒａｓの作用を阻害することにより、形質転換細胞の正常な増殖表現型への転換がもたらされることが示されている、Ｄａｕｍ等(１９９４)Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ.Ｓｃｉ.１９、４７４〜８０；Ｆｒｉｄｍａｎ等(１９９４)Ｊ Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅｍ.２６９、３０１０５〜８；Ｋｏｌｃｈ等(１９９１)Ｎａｔｕｒｅ ３４９、４２６〜２８、および概説としてＷｅｉｎｓｔｅｉｎ−Ｏｐｐｅｎｈｅｉｍｅｒ等、Ｐｈａｒｍ.＆Ｔｈｅｒａｐ.(２０００)８８、２２９〜２７９を参照されたい。
【００３０】
同様に、Ｒａｆキナーゼの阻害（アンチセンスオリゴデオキシヌクレオチドによる）は、ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏで様々なヒト腫瘍型の増殖の阻害と関連している(Ｍｏｎｉａ等、Ｎａｔ.Ｍｅｄ.１９９６、２、６６８〜７５）。
【００３１】
Ｒａｆ−セリンおよびトレオニン特異的タンパク質キナーゼは、種々の細胞系において細胞増殖を刺激する細胞質ゾル酵素である(Ｒａｐｐ Ｕ.Ｒ.等(１９８８）Ｔｈｅ Ｏｎｃｏｇｅｎｅ Ｈａｎｄｂｏｏｋ；Ｔ.Ｃｕｒｒａｎ、Ｅ.Ｐ.Ｒｅｄｄｙ、およびＡ.Ｓｋａｌｋａ(編)、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ；Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ、２１３〜２５３頁；Ｒａｐｐ Ｕ.Ｒ.等(１９８８)Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｓｙｍ.Ｑｕａｎｔ.Ｂｉｏｌ.５３：１７３〜１８４；Ｒａｐｐ Ｕ.Ｒ.等(１９９０)Ｉｎｖ Ｃｕｒｒ.Ｔｏｐ.Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ.Ｉｍｍｕｎｏｌ.ＰｏｔｔｅｒおよびＭｅｌｃｈｅｒｓ(編)、Ｂｅｒｌｉｎ、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ １６６：１２９〜１３９）。
【００３２】
３種のアイソザイムの特徴が明らかにされている。
【００３３】
Ｃ−Ｒａｆ（Ｒａｆ−１）（Ｂｏｎｎｅｒ Ｔ.Ｉ.等(１９８６)Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ.１４：１００９〜１０１５）。Ａ−Ｒａｆ（Ｂｅｃｋ Ｔ.Ｗ.等(１９８７)Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ.１５：５９５〜６０９）、およびＢ−Ｒａｆ(Ｑｋａｗａ Ｓ.等(１９９８)Ｍｏｌ.Ｃｅｌｌ.Ｂｉｏｌ.８：２６５１〜２６５４；Ｓｉｔｈａｎａｎｄａｍ Ｇ.等(１９９０)Ｏｎｃｏｇｅｎｅ：１７７５）。３種の酵素は、様々な組織での発現に差がある。Ｒａｆ−１は、研究されたすべての器官およびすべての細胞系で発現し、Ａ−ＲａｆおよびＢ−Ｒａｆは、それぞれ尿生殖組織および脳組織で発現する(Ｓｔｏｒｍ Ｓ.Ｍ.(１９９０)Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ５：３４５〜３５１）。
【００３４】
Ｒａｆ遺伝子は、癌原遺伝子である。これらの遺伝子は、特に改変形態で発現されたとき、細胞の悪性形質転換を開始し得る。発癌活性化に至る遺伝子変化は、タンパク質のＮ末端阻害調節ドメインを除去または妨げることによって、構成的活性タンパク質キナーゼを生じる(Ｈｅｉｄｅｃｋｅｒ Ｇ.等(１９９０)Ｍｏｌ.Ｃｅｌｌ.Ｂｉｏｌ.１０：２５０３〜２５１２；Ｒａｐｐ Ｕ.Ｒ.等(１９８７)、Ｏｎｃｏｇｅｎｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ；Ｓ.Ａ.Ａａｒｏｎｓｏｎ、Ｊ.Ｂｉｓｈｏｐ、Ｔ.Ｓｕｇｉｍｕｒａ、Ｍ.Ｔｅｒａｄａ、Ｋ.Ｔｏｙｏｓｈｉｍａ、およびＰ.Ｋ.Ｖｏｇｔ(編)、Ｊａｐａｎ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｋｙｏ)。発癌的に活性化されているが、野生型ではない、大腸菌発現ベクターを用いて調製されたＲａｆタンパク質型のＮＩＨ３Ｔ３細胞へのマイクロインジェクションは、形態変換をもたらし、ＤＮＡ合成を促進する(Ｒａｐｐ Ｕ.Ｒ.等(１９８７)、Ｏｎｃｏｇｅｎｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ；Ｓ.Ａ.Ａａｒｏｎｓｏｎ、Ｊ.Ｂｉｓｈｏｐ、Ｔ.Ｓｕｇｉｍｕｒａ、Ｍ.Ｔｅｒａｄａ、Ｋ.Ｔｏｙｏｓｈｉｍａ、およびＰ.Ｋ.Ｖｏｇｔ(編)、Ｊａｐａｎ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｋｙｏ；Ｓｍｉｔｈ Ｍ.Ｒ.等、(１９９０)Ｍｏｌ.Ｃｅｌｌ.Ｂｉｏｌ.１０：３８２８〜３８３３）。
【００３５】
したがって、活性化Ｒａｆ−１は、細胞増殖の細胞内活性化因子である。Ｒａｆ癌遺伝子は、細胞突然変異(Ｒａｓ復帰突然変異細胞)または抗Ｒａｓ抗体のマイクロインジェクションによる細胞Ｒａｓ活性の遮断に起因する増殖停止に打ち勝つので、Ｒａｆ−１タンパク質セリンキナーゼは、マイトジェンシグナル伝達の下流エフェクターの候補である(Ｒａｐｐ Ｕ.Ｒ.等(１９８８)Ｔｈｅ Ｏｎｃｏｇｅｎｅ Ｈａｎｄｂｏｏｋ；Ｔ.Ｃｕｒｒａｎ、Ｅ.Ｐ.Ｒｅｄｄｙ、およびＡ.Ｓｋａｌｋａ(編)、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ；Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ、２１３〜２５３頁；Ｓｍｉｔｈ Ｍ.Ｒ.等(１９８６)Ｎａｔｕｒｅ(Ｌｏｎｄｏｎ)３２０：５４０〜５４３)。
【００３６】
Ｃ−Ｒａｆ機能は、種々の膜結合型癌遺伝子による形質転換、および血清に含まれるマイトジェンによる増殖刺激に必要とされる(Ｓｍｉｔｈ Ｍ.Ｒ.等(１９８６）Ｎａｔｕｒｅ(Ｌｏｎｄｏｎ)３２０：５４０〜５４３）。Ｒａｆ−１タンパク質セリンキナーゼ活性は、リン酸化を介してマイトジェンによって調節され(Ｍｏｒｒｉｓｏｎ Ｄ.Ｋ.等(１９８９)Ｃｅｌｌ ５８：６４８〜６５７)、これはさらに細胞内分布をもたらす(Ｏｌａｈ Ｚ.等(１９９１)Ｅｘｐ.Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ.８４：４０３；Ｒａｐｐ Ｕ.Ｒ.等(１９８８)Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｓｙｍ.Ｑｕａｎｔ.Ｂｉｏｌ.５３：１７３〜１８４)。Ｒａｆ−１活性化増殖因子には、血小板由来増殖因子(ＰＤＧＦ)(Ｍｏｒｒｉｓｏｎ Ｄ.Ｋ.等(１９８８)Ｐｒｏｃ.Ｎａｔｌ.Ａｃａｄ.Ｓｃｉ.ＵＳＡ ８５：８８５５〜８８５９)、コロニー刺激因子(Ｂａｃｃａｒｉｎｉ Ｍ.等(１９９０)ＥＭＢＯ Ｊ.９：３６４９〜３６５７）、インスリン(Ｂｌａｃｋｓｈｅａｒ Ｐ.Ｊ.等、(１９９０)Ｊ.Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅｍ.２６５：１２１１５〜１２１１８）、上皮増殖因子(ＥＧＦ)(Ｍｏｒｒｉｓｏｎ Ｒ.Ｋ.等、(１９８８)Ｐｒｏｃ.Ｎａｔｌ.Ａｃａｄ.Ｓｃｉ.ＵＳＡ ８５：８８５５〜８８５９）、インターロイキン−２(Ｔｕｒｎｅｒ Ｂ.Ｃ.等(１９９１)Ｐｒｏｃ.Ｎａｔｌ.Ａｃａｄ.Ｓｃｉ.ＵＳＡ ８８：１２２７)およびインターロイキン−３、ならびに顆粒球マクロファージコロニー刺激因子(Ｃａｒｒｏｌｌ Ｍ.Ｐ.等、(１９９０)Ｊ.Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅｍ.２６５：１９８１２〜１９８１７)が含まれる。
【００３７】
細胞のマイトジェン処理後、一過性に活性化されたＲａｆ−１タンパク質セリンキナーゼは、核周囲領域および核に転移する(Ｏｌａｈ Ｚ.等(１９９１)Ｅｘｐ.Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ．８４：４０３；Ｒａｐｐ Ｕ.Ｒ.等(１９８８)Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｂｏｒ Ｓｙｍ.Ｑｕａｎｔ.Ｂｉｏｌ.５３：１７３〜１８４）。活性化Ｒａｆを含有する細胞は、遺伝子発現パターンが変わり(Ｈｅｉｄｅｃｋｅｒ Ｇ.等(１９８９)Ｇｅｎｅｓ ａｎｄ ｓｉｇｎａｌ ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ ｍｕｌｔｉｓｔａｇｅ ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ、Ｎ.Ｃｏｌｂｕｒｎ(編)、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ.Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、３３９〜３７４頁)、Ｒａｆ癌遺伝子は、一過性トランスフェクションアッセイにおいて、Ａｐ−１／ＰＥＡ３依存性プロモーターからの転写を活性化する(Ｊａｍａｌ Ｓ.等(１９９０)Ｓｃｉｅｎｃｅ ３４４：４６３〜４６６；Ｋａｉｂｕｃｈｉ Ｋ.等(１９８９)Ｊ.Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅｍ.２６４：２０８５５〜２０８５８；Ｗａｓｙｌｙｋ Ｃ.等(１９８９)Ｍｏｌ.Ｃｅｌｌ.Ｂｉｏｌ.９：２２４７〜２２５０)。
【００３８】
細胞外マイトジェンによるＲａｆ−１活性化には少なくとも２つの独立した経路がある。１つは、タンパク質キナーゼＣ(ＫＣ)を伴い、もう１つは、タンパク質チロシンキナーゼによって開始される(Ｂｌａｃｋｓｈｅａｒ Ｐ.Ｊ.等、(１９９０)Ｊ.Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅｍ.２６５：１２１３１〜１２１３４；Ｋｏｖａｃｉｎａ Ｋ.Ｓ.等(１９９０)Ｊ.Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅｍ.２６５：１２１１５〜１２１１８；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ Ｄ.Ｋ.等(１９８８)Ｐｒｏｃ.Ｎａｔｌ.Ａｃａｄ.Ｓｃｉ.ＵＳＡ ８５：８８５５〜８８５９；Ｓｉｅｇｅｌ Ｊ.Ｎ.等(１９９０)Ｊ.Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅｍ.２６５：１８４７２〜１８４８０；Ｔｕｒｎｅｒ Ｂ.Ｃ.等(１９９１)Ｐｒｏｃ.Ｎａｔｌ.Ａｃａｄ.Ｓｃｉ.ＵＳＡ ８８：１２２７)。いずれの場合にも、活性化はＲａｆ−１タンパク質リン酸化を伴う。Ｒａｆ−１リン酸化は、自己リン酸化によって増幅されたキナーゼカスケードの結果であるか、またはジアシルグリセロールによるＰＫＣ活性化に類似した、潜在的活性化リガンドとＲａｆ−１調節ドメインとの結合によって開始された自己リン酸化がもっぱらの原因である可能性がある(Ｎｉｓｈｉｚｕｋａ Ｙ.(１９８６)Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３３：３０５〜３１２）。
【００３９】
細胞調節が達成される主要な機序の１つは、膜を通過する細胞外シグナルの伝達、それに続く細胞内の生化学的経路の調整によるものである。タンパク質リン酸化は、細胞内シグナルが分子から分子に伝播され、最終的に細胞応答を引き起こす一過程である。これらのシグナル伝達カスケードは、高度に調節されており、多くのタンパク質キナーゼおよびタンパク質ホスファターゼの存在からわかるように、しばしば重複している。タンパク質のリン酸化は、主としてセリン、トレオニン、またはチロシン残基で起こり、したがって、タンパク質キナーゼは、それらのリン酸化部位の特異性によって、すなわちセリン／トレオニンキナーゼ、およびチロシンキナーゼに分類されている。リン酸化は細胞内の非常に偏在的なプロセスであり、細胞表現型はこれらの経路の活性に大いに影響を受けるため、いくつかの疾病状態および／または疾患は、キナーゼカスケードの分子成分における異常活性化または機能的突然変異に起因すると現在考えられている。したがって、これらのタンパク質、およびそれらの活性を調整することのできる化合物の特徴を明らかにすることに、かなりの注目が向けられている(概説としてＷｅｉｎｓｔｅｉｎ−Ｏｐｐｅｎｈｅｉｍｅｒ等、Ｐｈａｒｍａ.＆Ｔｈｅｒａｐ.２０００、８８、２２９〜２７９を参照されたい)。
【００４０】
したがって、チロシンキナーゼおよび／またはＲａｆキナーゼのシグナル伝達を特異的に阻害、調節、および／または調整する小化合物の合成が望ましく、本発明の目的である。
【００４１】
本発明による化合物およびそれらの塩は、充分に耐性でありながら、非常に有用な薬理学的特性を有することが見出された。
【００４２】
特に、それらはチロシンキナーゼ阻害特性を示す。
【００４３】
さらに、本発明による化合物は、酵素Ｒａｆキナーゼの阻害剤であることが見出された。この酵素は、ｐ２１rasの下流エフェクターであるため、この阻害剤は、たとえばＲａｆキナーゼに媒介される腫瘍および／または癌細胞増殖の治療において、Ｒａｆキナーゼ経路の阻害が指示されているヒトまたは動物薬で用いるための薬剤組成物に適していることがわかる。特に、ヒトおよび動物固形癌、たとえばマウス癌の進行は、Ｒａｓタンパク質シグナル伝達カスケードに依存しており、したがってカスケードの中断、すなわちＲａｆキナーゼの阻害による治療に感受性であるため、これらの化合物は、それらの癌の治療に適している。したがって、本発明による化合物、または医薬品として許容されるその塩は、Ｒａｆキナーゼ経路に媒介される疾患、特に、固形癌を含む癌、たとえば癌腫(たとえば、肺、膵臓、甲状腺、膀胱、または結腸)、骨髄疾患(たとえば、骨髄性白血病)、または腺腫(たとえば、絨毛状結腸腺腫)、病的血管新生、および転移性細胞遊走を治療するために投与される。これらの化合物はさらに、補体活性化依存性慢性炎症(Ｎｉｃｕｌｅｓｃｕ等、(２００２)Ｉｍｍｕｎｏｌ.Ｒｅｓ．、２４：１９１〜１９９)、およびＨＩＶ−１(ヒト免疫不全ウイルス１型)誘発性免疫不全(Ｐｏｐｉｋ等、(１９９８)Ｊ Ｖｉｒｏｌ、７２：６４０６〜６４１３)の治療に適している。
【００４４】
驚いたことに、本発明による化合物は、シグナル経路、特に本明細書に記載したシグナル経路、好ましくはＲａｆキナーゼシグナル経路と相互に作用することができることが見出されている。本発明による化合物は、酵素に基づくアッセイ、たとえば本明細書に記載されているアッセイにおいて、容易に証明される有利な生物活性を好ましくは示す。上記の酵素に基づくアッセイにおいて、本発明による化合物は、適当な範囲、好ましくはミクロモル範囲、より好ましくはナノモル範囲のＩＣ50値によって通常は記録される阻害効果を好ましくは発揮し、引き起こす。
【００４５】
本明細書で論じたように、これらのシグナル経路は、様々な疾患と関係している。したがって、本発明による化合物は、１つまたは複数の前記シグナル経路と相互に関係することによって前記シグナル経路に左右される疾患の予防および／または治療に適する。
【００４６】
本発明は、それゆえ、本明細書に記載のシグナル経路のプロモーターまたは阻害剤としての、好ましくは阻害剤としての本発明による化合物に関する。本発明は、それゆえ、好ましくは、Ｒａｆキナーゼ経路のプロモーターまたは阻害剤としての、好ましくは阻害剤としての本発明による化合物に関する。本発明は、それゆえ、好ましくは、Ｒａｆキナーゼのプロモーターまたは阻害剤としての、好ましくは阻害剤としての本発明による化合物に関する。本発明は、さらにより好ましくは、Ａ−Ｒａｆ、Ｂ−ＲａｆおよびＣ−Ｒａｆ−１からなる群から選択される１つまたは複数のＲａｆキナーゼのプロモーターまたは阻害剤としての、好ましくは阻害剤としての本発明による化合物に関する。本発明は、特に好ましくは、Ｃ−Ｒａｆ−１のプロモーターまたは阻害剤としての、好ましくは阻害剤としての本発明による化合物に関する。
【００４７】
本発明は、さらに、疾患、好ましくは、Ｒａｆキナーゼによって引き起こされ、媒介されかつ／または伝播される本発明に記載されている疾患、特にＡ−Ｒａｆ、Ｂ−ＲａｆおよびＣ−Ｒａｆ−１からなる群から選択されるＲａｆキナーゼによって引き起こされ、媒介されかつ／または伝播される本明細書に記載されている疾患の治療および／または予防における１つまたは複数の本発明による化合物の使用に関する。本明細書で論じた疾患は、通常２つの群、過剰増殖性疾患および非過剰増殖性疾患に分類される。これに関して、乾癬、関節炎、炎症、子宮内膜症、瘢痕、良性前立腺肥大、免疫疾患、自己免疫疾患、および免疫不全疾患は、非癌性疾患とみなされ、その中で関節炎、炎症、免疫疾患、自己免疫疾患、および免疫不全疾患は、通常、非過剰増殖性疾患とみなされる。これに関して、脳腫瘍、肺癌、扁平上皮癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、肝臓癌、腎臓癌、結腸直腸癌、乳癌、頭部癌、頸部癌、食道癌、婦人科癌、甲状腺癌、リンパ腫、慢性白血病、および急性白血病は、癌性疾患とみなされ、そのすべてが、通常、過剰増殖性疾患の群であるとみなされる。特に癌細胞増殖、特にＲａｆキナーゼに媒介される癌細胞増殖は、本発明の標的となる疾患である。したがって本発明は、前記疾患の治療および／または予防における薬物および／または薬物活性成分としての本発明による化合物、および前記疾患を治療および／または予防する薬剤を調製するための本発明による化合物の使用、ならびにそのような投与を必要としている患者に本発明による１種または複数の化合物を投与することを含む前記疾患を治療するための方法に関する。
【００４８】
本発明による化合物は、異種移植腫瘍モデルにおいて、ｉｎ  ｖｉｖｏで抗増殖作用を有することを示すことができる。本発明による化合物は、たとえば腫瘍増殖を阻害する、リンパ増殖性疾患に伴う炎症を緩和する、移植拒絶または組織修復による神経障害を阻害するなどのために、過剰増殖性疾患を有する患者に投与される。本発明の化合物は、予防または治療目的に適している。本明細書では、「治療」という用語は、疾患の予防および既存状態の治療の両方を指すために用いられる。増殖の予防は、たとえば腫瘍の増殖を防ぐ、転移増殖を防ぐ、心臓血管手術に伴う再狭窄を減じるなどのために、顕性疾患の発症に先立って本発明による化合物を投与することによって達成される。あるいは、化合物は、患者の臨床症状を安定または改善することによって、進行中の疾患を治療するために用いられる。
【００４９】
宿主および患者は、任意の哺乳動物種、たとえば霊長類種、特にヒト、ならびにマウス、ラット、およびハムスターを含む齧歯動物、ウサギ、ウマ、ウシ、イヌ、ネコなどに属することができる。動物モデルは、実験的研究に重要であり、ヒトの疾患治療のモデルを提供する。
【００５０】
本発明の化合物による治療に対する特定の細胞の感受性は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験によって判定することができる。一般的には、細胞の培養液を、活性剤が細胞死を誘発する、または遊走を阻害するのに充分な期間、通常は約１時間から１週間、様々な濃度の本発明による化合物と組み合わせる。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験は、生検試料由来の培養細胞を用いて行うことができる。その後、処置後に残存する生存細胞をカウントする。
【００５１】
用量は、用いられる特定の化合物、特定の疾患、患者の状態などに応じて異なる。治療用量は、一般的には、患者の生存性を維持しながら、標的組織において望ましくない細胞集団を大幅に減少するのに充分な量である。治療は、一般に、大幅な低減が生じるまで、たとえば細胞荷重が少なくとも約５０％低減するまで継続され、望ましくない細胞が体内で本質的に検出されなくなるまで継続することができる。
【００５２】
シグナル伝達経路を確認するためおよび様々なシグナル伝達経路間の相互作用を検出するために、様々な科学者が適当なモデルまたはモデルシステム、たとえば細胞培養モデル(たとえばＫｈｗａｊａ等、ＥＭＢＯ、１９９７、１６、２７８３〜９３)および遺伝子導入動物のモデル(たとえばＷｈｉｔｅ等、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、２００１、２０、７０６４〜７０７２)を開発している。シグナル伝達カスケードのいくつかの段階を判定するためには、相互に作用し合う化合物を、シグナルを調節するために利用することができる(たとえばＳｔｅｐｈｅｎｓ等、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｊ．、２０００、３５１、９５〜１０５)。本発明による化合物もまた、動物および／または細胞培養モデルあるいは本明細書で述べた臨床疾患におけるキナーゼ依存性のシグナル伝達経路を試験するための試薬として使用することができる。
【００５３】
キナーゼ活性の測定は、当業者には周知の技術である。基質、たとえばヒストン(例えばＡｌｅｓｓｉ等、ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ.１９９６、３９９、３、ｐａｇｅｓ ３３３〜３３８)または塩基性ミエリンタンパクを使用するキナーゼ活性を測定するための一般的な試験システムが、文献(例えばＣａｍｐｏｓ−Ｇｏｎｚａｌｅｚ,Ｒ.ａｎｄ Ｇｌｅｎｎｅｙ,Ｊｒ.,Ｊ.Ｒ.１９９２、Ｊ.Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅｍ.２６７、１４５３５)に記載されている。
【００５４】
キナーゼ阻害剤を同定するために、種々のアッセイ系が利用可能である。シンチレーション近接アッセイ(Ｓｏｒｇ等、Ｊ.ｏｆ.Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ、２００２、７、１１〜１９)、およびフラッシュプレートアッセイでは、γＡＴＰを用いて基質としてのタンパク質またはペプチドの放射性リン酸化を測定する。阻害化合物の存在下では、検出される放射性シグナルが低減するか、まったく検出されない。さらに、ホモジニアス時間分解蛍光共鳴エネルギー転移(ＨＴＲ−ＦＲＥＴ)、および蛍光偏光(ＦＰ)技法は、アッセイ法として適している(Ｓｉｌｌｓ等、Ｊ.ｏｆ Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ、２００２、１９１〜２１４）。
【００５５】
他の非放射性ＥＬＩＳＡアッセイ法は、特定のホスホ−抗体(ホスホ−ＡＢ)を用いる。このホスホ−ＡＢは、リン酸化基質にのみ結合する。この結合は、二次ペルオキシダーゼ複合抗ヒツジ抗体を用いて、化学発光によって検出することができる(Ｒｏｓｓ等、２００２、Ｂｉｏｃｈｅｍ.Ｊ．、まもなく発行、原稿ＢＪ２００２０７８６)。
【００５６】
細胞増殖の脱制御および細胞死(アポトーシス)に関連する多くの疾患がある。重要な状態としては、これらに限定されるものではないが、以下のものが挙げられる。本発明による化合物は、平滑筋細胞および／または炎症細胞の脈管の内膜層への増殖および／または遊走があり、たとえば新生内膜閉塞病変の場合など、脈管の血流が制限される様々な状態の治療に適している。対象となる閉塞性移植血管疾患には、アテローム性動脈硬化症、移植後の冠血管疾患、静脈移植血管狭窄、吻合周囲プロテーゼ再狭窄、血管形成またはステント留置術後の再狭窄などが含まれる。
【００５７】
本発明による化合物は、また、ｐ３８キナーゼ阻害剤としても適している。
【００５８】
ｐ３８キナーゼを阻害するヘテロアリール尿素が、ＷＯ０２／８５８５９、ＷＯ０２／８５８５７、ＷＯ９９／３２１１１に記載されている。
【００５９】
（従来技術）
ピリドピリミジンは、ＷＯ９８／０８８４６に記載されている。
【００６０】
（発明の概要）
本発明は、式Ｉの化合物であって、
【００６１】
【化１】
2008519780.tif 000003
【００６２】
式中、
Ｒ6、Ｒ7は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、Ａ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＯＡまたはＣＮを示し、
Ｒ8、Ｒ9は、それぞれ互いに独立して、ＨまたはＡを示し、
Ｈｅｔ1は、１から４個のＮ、Ｏおよび／またはＳ原子を有する単環式または二環式の飽和、不飽和、または芳香族複素環を示し、これは非置換であるか、あるいはＨａｌ、Ａ、ＯＡ、ＯＨ、２から６個のＣ原子を有するアルケニル、２から６個のＣ原子を有するアルキニル、ＮＯ2、ＮＨ2、ＮＨＡ、ＮＡ2、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＡ、ＣＮ、−Ｏ−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8Ｒ9、−ＮＲ8−アルキレン−ＮＲ8Ｒ9、ＣＯＮＲ8Ｒ9、−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8−アルキレン−ＯＲ8および／またはカルボニル酸素(＝Ｏ)で一、二、または三置換されていることができ、
Ｈｅｔは、１から４個のＮ、Ｏおよび／またはＳ原子を有する単環式または二環式の飽和、不飽和、または芳香族複素環を示し、これは非置換であるか、あるいはＨａｌ、Ａ、ＯＡ、ＣＯＯＡ、ＣＮおよび／またはカルボニル酸素(＝Ｏ)で一、二、または三置換されていることができ、
Ａは、１から１０個のＣ原子を有するアルキルを示し、これはさらに１〜７個のＨ原子がＦおよび／または塩素で置換されていてもよく、
Ｘ、Ｘ’は、それぞれ互いに独立して、ＮＨを示すか不在であり、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを示す化合物、
ならびにあらゆる比率のそれらの混合物を含む、医薬品として使用できるそれらの誘導体、溶媒和物、塩、互変異性体および立体異性体に関する。
【００６３】
本発明は、また、これらの化合物の光学活性形態(立体異性体)、光学異性体、ラセミ化合物、ジアステレオマーおよび水和物、溶媒和物にも関する。化合物の溶媒和物という語は、不活性溶媒分子のその化合物へのそれらの相互の引力によって形づくる付加を意味するものと理解される。溶媒和物は、たとえば、一水和物、二水和物またはアルコキシドである。
【００６４】
式Ｉは、また、式ＩａおよびＩｂの互変異性化合物も包含する。
【００６５】
【化２】
2008519780.tif 000004
【００６６】
医薬品として使用できる誘導体という語は、たとえば、本発明による化合物の塩およびまたいわゆるプロドラッグ化合物を意味するものと理解される。
【００６７】
プロドラッグ誘導体という用語は、たとえばアルキル基またはアシル基、糖またはオリゴペプチドで修飾されており、有機体において迅速に開裂されて、本発明による有効な化合物を形成する式Ｉの化合物を意味する。
【００６８】
これらには、たとえばＩｎｔ.Ｊ.Ｐｈａｒｍ.１１５、６１〜６７(１９９５)に記載されているように、本発明による化合物の生分解性ポリマー誘導体も含まれる。
【００６９】
「有効量」という表現は、組織、系、動物、またはヒトにおいて、たとえば研究者または医師から求められるまたは望まれる生物学的または医学的応答を引き起こす薬剤または薬剤活性成分の量を意味する。
【００７０】
さらに、「治療上有効量」という表現は、この量を与えられていない相当する対象と比較して、以下の結果を有する量を意味する。疾患、症候群、状態、愁訴、障害、または副作用の治療、治癒、予防または除去の改善、あるいは疾患、愁訴または障害の進行の低減である。
【００７１】
「治療上有効量」という表現はまた、正常な生理機能を増大するのに有効な量も包含する。
【００７２】
本発明はまた、式Ｉの化合物の混合物の使用、たとえば１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：１０、１：１００、または１：１０００の比率である、たとえば２種のジアステレオマーの混合物に関する。
【００７３】
これらは、特に好ましくは、立体異性化合物の混合物である。
【００７４】
本発明は、式Ｉの化合物およびそれらの塩、ならびに請求項１から１０に記載の式Ｉの化合物と医薬品として使用できるそれらの誘導体、塩、溶媒和物および立体異性体との調製方法であって、
ａ）Ｘ、Ｘ'がＮＨを示す式Ｉの化合物を調製するために、
式ＩＩ
【００７５】
【化３】
2008519780.tif 000005
【００７６】
（式中、Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8およびＲ9は、請求項１で示した意味を有する）の化合物を、式ＩＩＩ
Ｈｅｔ1−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ        ＩＩＩ
（式中、Ｈｅｔ1は、請求項１で示した意味を有する）の化合物と反応させるか、
または
ｂ）Ｘ、Ｘ’がＮＨを示す式Ｉの化合物を調製するために、
式ＩＩの化合物を、式ＩＶ
Ｈｅｔ1−ＮＨ2        ＩＶ
（式中、Ｈｅｔ1は、請求項１で示した意味を有する）の化合物、
およびクロロ炭酸エステルと反応させ、
かつ／または
式Ｉの塩基または酸をその塩の１つに変換することを特徴とする方法に関する。
【００７７】
上文および下文で、基Ｒ6、Ｒ7、Ｒ8、Ｒ9、ＸおよびＸ'は、特に他に記述がない限り式Ｉに対して示した意味を有する。
【００７８】
Ａは、アルキルを示し、非枝分かれ（線状）または枝分かれしており、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個のＣ原子を有する。Ａは、好ましくはメチルを、さらに、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓ−ブチルまたはｔ−ブチル、さらにまたペンチル、１−、２−または３−メチルブチル、１,１−、１,２−または２,２−ジメチルプロピル、１−エチルプロピル、ヘキシル、１−、２−、３−または４−メチルペンチル、１,１−、１,２−、１,３−、２,２−、２,３−または３,３−ジメチルブチル、１−または２−エチルブチル、１−エチル−１−メチルプロピル、１−エチル−２−メチルプロピル、１,１,２−または１,２,２−トリメチルプロピル、さらに好ましくは、たとえばトリフルオロメチルを示す。
【００７９】
Ａは、非常に詳しくは、１、２、３、４、５または６個のＣ原子を有するアルキルを示し、好ましくは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルまたは１,１,１−トリフルオロエチルを示す。Ａはまた、シクロアルキルも示す。
【００８０】
シクロアルキルは、好ましくは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルまたはシクロヘプチルを示す。
【００８１】
アルキレンは、好ましくは枝分かれしておらず、好ましくは、メチレン、エチレン、プロピレン、ブチレンまたはペンチレンを示す。
【００８２】
Ｒ6およびＲ7は、好ましくはＨを示す。
【００８３】
ＸおよびＸ’は、好ましくはＮＨを示す。
【００８４】
さらなる置換とは関係なく、Ｈｅｔ1は、たとえば、２−または３−フリル、２−または３−チエニル、１−、２−または３−ピロリル、１−、２、４−または５−イミダゾリル、１−、３−、４−または５−ピラゾリル、２−、４−または５−オキサゾリル、３−、４−または５−イソオキサゾリル、２−、４−または５−チアゾリル、３−、４−または５−イソチアゾリル、２−、３−または４−ピリジル、２−、４−、５−または６−ピリミジニル、さらに好ましくは、１,２,３−トリアゾール−１−、−４−または−５−イル、１,２,４−トリアゾール−ｌ−、−３−または５−イル、１−または５−テトラゾリル、１,２,３−オキサジアゾール−４−または−５−イル、１,２,４−オキサジアゾール−３−または−５−イル、１,３,４−チアジアゾール−２−または−５−イル、１,２,４−チアジアゾール−３−または−５−イル、１,２,３−チアジアゾール−４−または−５−イル、３−または４−ピリダジニル、ピラジニル、１−、２−、３−、４−、５−、６−または７−インドリル、４−または５−イソインドリル、１−、２−、４−または５−ベンズイミダゾリル、１−、３−、４−、５−、６−または７−ベンゾピラゾリル、２−、４−、５−、６−または７−ベンズオキサゾリル、３−、４−、５−、６−または７−ベンズイソオキサゾリル、２−、４−、５−、６−または７−ベンゾチアゾリル、２−、４−、５−、６−または７−ベンズイソチアゾリル、４−、５−、６−または７−ベンズ−２,１,３−オキサジアゾリル、２−、３−、４−、５−、６−、７−または８−キノリル、１−、３−、４−、５−、６−、７−または８−イソキノリル、３−、４−、５−、６−、７−または８−シンノリニル、２−、４−、５−、６−、７−または８−キナゾリニル、５−または６−キノキサリニル、２−、３−、５−、６−、７−または８−２Ｈ−ベンゾ−１,４−オキサジニル、さらに好ましくは、１，３−ベンゾジオキソール−５−イル、１,４−ベンゾジオキサン−６−イル、２,１,３−ベンゾチアジアゾール−４−または−５−イルまたは２,１,３−ベンズオキサジアゾール−５−イルを示す。
【００８５】
複素環基は、また、部分的または完全に水素化されていてもよい。
【００８６】
Ｈｅｔ１は、したがってまた、たとえば、２,３−ジヒドロ−２−、−３−、−４−または−５−フリル、２,５−ジヒドロ−２−、−３−、−４−または５−フリル、テトラヒドロ−２−または−３−フリル、１,３−ジオキソラン−４−イル、テトラヒドロ−２−または−３−チエニル、２,３−ジヒドロ−ｌ−、−２−、−３−、−４−または−５−ピロリル、２,５−ジヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−または−５−ピロリル、１−、２−または３−ピロリジニル、テトラヒドロ−ｌ−、−２−または−４−イミダゾリル、２,３−ジヒドロ−ｌ−、−２−、−３−、−４−または−５−ピラゾリル、テトラヒドロ−ｌ−、−３−または−４−ピラゾリル、１,４−ジヒドロ−１−、−２−、−３−または−４−ピリジル、１,２,３,４−テトラヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−、−５−または−６−ピリジル、１−、２−、３−または４−ピペリジニル、２−、３−または４−モルホリニル、テトラヒドロ−２−、−３−または−４−ピラニル、１,４−ジオキサニル、１,３−ジオキサン−２−、−４−または−５−イル、ヘキサヒドロ−１−、−３−または−４−ピリダジニル、ヘキサヒドロ−ｌ−、−２−、−４−または−５−ピリミジニル、１−、２−または３−ピペラジニル、１,２,３,４−テトラヒドロ−ｌ−、−２−、−３−、−４−、−５−、−６−、−７−または−８−キノリル、１,２,３,４−テトラヒドロ−ｌ−、−２−、−３−、−４−、−５−、−６−、−７−または−８−イソキノリル、２−、３−、５−、６−、７−または８−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ−１,４−オキサジニル、さらに好ましくは、２,３−メチレンジオキシフェニル、３,４−メチレンジオキシフェニル、２,３−エチレンジオキシフェニル、３,４−エチレンジオキシフェニル、３,４−(ジフルオロメチレンジオキシ)フェニル、２,３−ジヒドロベンゾフラン−５−または６−イル、２,３−(２−オキソメチレンジオキシ)フェニルあるいはまた３,４−ジヒドロ−２Ｈ−１,５−ベンゾジオキセピン−６−または−７−イル、さらに好ましくは２，３−ジヒドロベンゾフラニルまたは２,３−ジヒドロ−２−オキソフラニルを示すことができる。
【００８７】
非置換のＨｅｔ1は、特に好ましくは、ピリジル、イソオキサゾリル、キノリル、イソキノリル、チアゾリル、１,３,４−チアジアゾリル、１,２,４−チアジアゾリル、フリル、チエニル、ピロリル、ピリミジニル、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソチアゾリル、ベンゾ−１,３−ジオキソリルまたはピラジニルを；まさに特に好ましくは、ピリジル、イソオキサゾリル、キノリル、イソキノリル、チアゾリル、１,３,４−チアジアゾリルまたは１,２,４−チアジアゾリルを示す。
【００８８】
さらなる置換とは関係なく、Ｈｅｔは、たとえば、２−または３−フリル、２−または３−チエニル、１−、２−または３−ピロリル、１−、２、４−または５−イミダゾリル、１−、３−、４−または５−ピラゾリル、２−、４−または５−オキサゾリル、３−、４−または５−イソオキサゾリル、２−、４−または５−チアゾリル、３−、４−または５−イソチアゾリル、２−、３−または４−ピリジル、２−、４−、５−または６−ピリミジニル、さらに好ましくは、１,２,３−トリアゾール−１−、−４−または−５−イル、１,２,４−トリアゾール−１−、−３−または５−イル、１−または５−テトラゾリル、１,２,３−オキサジアゾール−４−または−５−イル、１,２,４−オキサジアゾール−３−または−５−イル、１,３,４−チアジアゾール−２−または−５−イル、１,２,４−チアジアゾール−３−または−５−イル、１,２,３−チアジアゾール−４−または−５−イル、３−または４−ピリダジニル、ピラジニル、１−、２−、３−、４−、５−、６−または７−インドリル、４−または５−イソインドリル、１−、２−、４−または５−ベンズイミダゾリル、１−、３−、４−、５−、６−または７−ベンゾピラゾリル、２−、４−、５−、６−または７−ベンズオキサゾリル、３−、４−、５−、６−または７−ベンズイソオキサゾリル、２−、４−、５−、６−または７−ベンゾチアゾリル、２−、４−、５−、６−または７−ベンズイソチアゾリル、４−、５−、６−または７−ベンズ−２,１,３−オキサジアゾリル、２−、３−、４−、５−、６−、７−または８−キノリル、１−、３−、４−、５−、６−、７−または８−イソキノリル、３−、４−、５−、６−、７−または８−シンノリニル、２−、４−、５−、６−、７−または８−キナゾリニル、５−または６−キノキサリニル、２−、３−、５−、６−、７−または８−２Ｈ−ベンゾ−１,４−オキサジニル、さらに好ましくは、１,３−ベンゾジオキソール−５−イル、１,４−ベンゾジオキサン−６−イル、２,１,３−ベンゾチアジアゾール−４−または−５−イルまたは２,１,３−ベンズオキサジアゾール−５−イルを示す。
【００８９】
複素環基は、また、部分的または完全に水素化されていてもよい。
【００９０】
Ｈｅｔは、したがってまた、たとえば、２,３−ジヒドロ−２−、−３−、−４−または−５−フリル、２,５−ジヒドロ−２−、−３−、−４−または５−フリル、テトラヒドロ−２−または−３−フリル、１,３−ジオキソラン−４−イル、テトラヒドロ−２−または−３−チエニル、２,３−ジヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−または−５−ピロリル、２,５−ジヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−または−５−ピロリル、１−、２−または３−ピロリジニル、テトラヒドロ−１−、−２−または−４−イミダゾリル、２,３−ジヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−または−５−ピラゾリル、テトラヒドロ−１−、−３−または−４−ピラゾリル、１,４−ジヒドロ−１−、−２−、−３−または−４−ピリジル、１,２,３,４−テトラヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−、−５−または−６−ピリジル、１−、２−、３−または４−ピペリジニル、２−、３−または４−モルホリニル、テトラヒドロ−２−、−３−または−４−ピラニル、１,４−ジオキサニル、１,３−ジオキサン−２−、−４−または−５−イル、ヘキサヒドロ−１−、−３−または−４−ピリダジニル、ヘキサヒドロ−１−、−２−、−４−または−５−ピリミジニル、１−、２−または３−ピペラジニル、１,２,３,４−テトラヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−、−５−、−６−、−７−または−８−キノリル、１,２,３,４−テトラヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−、−５−、−６−、−７−または−８−イソキノリル、２−、３−、５−、６−、７−または８−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ−１,４−オキサジニル、さらに好ましくは、２,３−メチレンジオキシフェニル、３,４−メチレンジオキシフェニル、２,３−エチレンジオキシフェニル、３,４−エチレンジオキシフェニル、３,４−(ジフルオロメチレンジオキシ)フェニル、２,３−ジヒドロベンゾフラン−５−または６−イル、２,３−(２−オキソメチレンジオキシ)フェニルあるいはまた３,４−ジヒドロ−２Ｈ−１,５−ベンゾジオキセピン−６−または−７−イル、さらに好ましくは２,３−ジヒドロベンゾフラニルまたは２,３−ジヒドロ−２−オキソフラニルを示してもよい。
【００９１】
さらに好ましい実施形態において、Ｈｅｔは、非置換であるかＡにより一置換されていてもよい１から３個のＮ、Ｏおよび／またはＳ原子を有する単環式飽和複素環を示す。本明細書のこの単環式飽和複素環は、特に好ましくは、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニルまたはピペラジニルを示す。
【００９２】
Ｈａｌは、Ｆ、ＣｌまたはＢｒを示し、他にＩも示すが、特に好ましくはＦまたはＣｌである。
【００９３】
アルケニルは、２、３、４、５または６個のＣ原子を有しており、好ましくは、ビニル、１−または２−プロペニル、１−ブテニル、イソブテニル、ｓ−ブテニルを意味し、さらに１−ペンテニル、イソペンテニルまたは１−ヘキセニルが好ましい。
【００９４】
アルキニルは、２、３、４、５または６個のＣ原子を有しており、好ましくは、エチニル、プロピン−１−イルを意味し、さらにブチン−１−、ブチン−２−イル、ペンチン−１−、ペンチン−２−またはペンチン−３−イルを意味する。
【００９５】
−Ｏ−Ｈｅｔは、たとえばピペリジン−４−イルオキシを好ましくは示す。
【００９６】
−Ｏ−アルキレン−Ｈｅｔは、たとえば、モルホリン−４−イルエトキシ、モルホリン−４−イルプロポキシ、１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ、ピペラジン−４−イルエトキシ、ピロリジン−２−イルメトキシまたはピロリジン−１−イルエトキシを好ましくは示す。
【００９７】
−Ｏ−アルキレンＮＲ8Ｒ9は、たとえば、ＣＨ3−ＮＨ−ＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−、ＮＨ2−ＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−または(Ｃ2Ｈ5)2Ｎ−ＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−を好ましくは示す。
【００９８】
−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8−アルキレン−ＯＲ8は、たとえば、−Ｏ−ＣＨ2ＣＨ2−Ｎ(ＣＨ3)−ＣＨ2ＣＨ2−ＯＣＨ3を好ましくは示す。
【００９９】
本発明を通じて、１回を超えて生じるすべての基は、同一であっても異なっていてもよく、すなわち互いに独立している。
【０１００】
式Ｉの化合物は、１つまたは複数のキラル中心を有することができ、したがって、様々な立体異性体の形態で現れることができる。式Ｉは、すべてのこれらの形態を包含する。
【０１０１】
したがって、本発明は、特に、前記基の少なくとも１つが上で示した好ましい意味の１つを有する式Ｉの化合物に関する。化合物の好ましいいくつかの群は、以下の下位式ＩａからＩｈで表すことができ、これらは式Ｉに従い、式中、詳細に指定されない基は、式Ｉに関して示した意味を有するが、
Ｉａにおいて、Ｘは、ＮＨを示し、
Ｘ’は、ＮＨを示し；
Ｉｂにおいて、Ｈｅｔ1は、１から４個のＮ、Ｏ、および／またはＳ原子を有する単環式または二環式の不飽和または芳香族複素環を示し、これは非置換であるか、あるいはＨａｌ、Ａ、ＯＡ、ＯＨ、−Ｏ−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8Ｒ9および／または−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8−アルキレン−ＯＲ8で一、二、または三置換されていることができ；
Ｉｃにおいて、Ｈｅｔ1は、ピリジル、イソオキサゾリル、キノリル、イソキノリル、チアゾリル、１,３,４−チアジアゾリル、１,２,４−チアジアゾリル、フリル、チエニル、ピロリル、ピリミジニル、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソチアゾリル、ベンゾ−１,３−ジオキソリルまたはピラジニルを示し、そのそれぞれが非置換であるか、あるいはＨａｌ、Ａ、ＯＡ、ＯＨ、−Ｏ−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8Ｒ9および／または−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8−アルキレン−ＯＲ8で一、二、または三置換されており；
Ｉｄにおいて、Ｈｅｔは、１から３個のＮ、Ｏおよび／またはＳ原子を有する単環式飽和複素環を示し、これは非置換であるかまたはＡで一置換されていることができ；
Ｉｅにおいて、Ｈｅｔは、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニルまたはピペラジニルを示し、そのそれぞれが非置換であるかＡで一置換されており；
Ｉｆにおいて、Ｒ6、Ｒ7は、Ｈを示し；
Ｉｇにおいて、Ｘは、ＮＨを示し、
Ｘ'は、ＮＨを示し、
Ｒ6、Ｒ7は、Ｈを示し、
Ｒ8、Ｒ9は、それぞれ互いに独立して、ＨまたはＡを示し、
Ｈｅｔ1は、１から４個のＮ、Ｏ、および／またはＳ原子を有する単環式または二環式の不飽和または芳香族複素環を示し、これは非置換であるか、あるいはＨａｌ、Ａ、ＯＡ、ＯＨ、−Ｏ−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8Ｒ9および／または−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8−アルキレン−ＯＲ8で一、二、または三置換されていることができ、
Ｈｅｔは、１から３個のＮ、Ｏおよび／またはＳ原子を有する単環式飽和複素環を示し、これは非置換であるかまたはＡで一置換されていることができ、
Ａは、１から１０個のＣ原子を有するアルキルを示し、これはさらに１〜７個のＨ原子がＦおよび／または塩素で置換されていてもよく、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを示し；
Ｉｈにおいて、Ｘは、ＮＨを示し、
Ｘ'は、ＮＨを示し、
Ｒ6、Ｒ7は、Ｈを示し、
Ｒ8、Ｒ9は、それぞれ互いに独立して、ＨまたはＡを示し、
Ｈｅｔ1は、ピリジル、イソオキサゾリル、キノリル、イソキノリル、チアゾリル、１,３,４−チアジアゾリル、１,２,４−チアジアゾリル、フリル、チエニル、ピロリル、ピリミジニル、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソチアゾリル、ベンゾ−１,３−ジオキソリルまたはピラジニルを示し、そのそれぞれが非置換であるか、あるいはＨａｌ、Ａ、ＯＡ、ＯＨ、−Ｏ−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−Ｈｅｔ、−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8Ｒ9および／または−Ｏ−アルキレン−ＮＲ8−アルキレン−ＯＲ8で一、二、または三置換されており、
Ｈｅｔは、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニルまたはピペラジニルを示し、そのそれぞれが非置換であるかＡで一置換されており、
Ａは、１から１０個のＣ原子を有するアルキルを示し、これはさらに１〜７個のＨ原子がＦおよび／または塩素で置換されていてもよく、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを示すものであり、
ならびにあらゆる比率のそれらの混合物を含む、医薬品として使用できるそれらの誘導体、塩、溶媒和物、互変異性体および立体異性体である。
【０１０２】
式Ｉの化合物、およびそれらを調製するための出発原料は、さらに、正確には前記反応に適している既知の条件下で、文献(たとえば、Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ、Ｍｅｔｈｏｄｅｎ ｄｅｒ ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ Ｃｈｅｍｉｅ(有機化学の方法)、Ｇｅｒｏｇ−Ｔｈｉｅｍｅ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｓｔｕｔｔｇａｒｔなどの標準的な著作物)に記載されているような、それ自体知られている方法で調製される。それ自体知られているが、本明細書にはより詳細に挙げられていない変法も用いることができる。
【０１０３】
必要に応じて、出発材料は、ｉｎ  ｓｉｔｕで形成されて、それらが反応混合物から分離されずに、むしろ直ちに式Ｉの化合物へとさらに変換されるようにすることもできる。
【０１０４】
式Ｉの化合物は、好ましくは、式ＩＩの化合物を式ＩＩＩの化合物と反応させることにより得ることができる。
【０１０５】
式ＩＩの化合物は新規であり、式ＩＩＩの化合物は一般に知られている。
【０１０６】
この反応は、一般に、不活性溶媒中で、トリエチルアミン、ジメチルアニリン、ピリジンまたはキノリンなどの有機塩基の存在下で行われる。使用される条件により、反応時間は、数分と１４日の間であり、反応温度は、約０℃と１５０℃の間、通常は１５℃と９０℃の間、特に好ましくは１５℃と３０℃の間である。
【０１０７】
適切な不活性溶媒は、たとえばヘキサン、石油エーテル、ベンゼン、トルエンまたはキシレンなどの炭化水素類；たとえばトリクロロエチレン、１,２−ジクロロエタン、四塩化炭素、クロロホルムまたはジクロロメタンなどの塩素化炭化水素類；たとえばメタノール、エタノール、イソプロパノール、ｎ−プロパノール、ｎ−ブタノールまたはｔ−ブタノールなどのアルコール類；たとえばジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン(ＴＨＦ)またはジオキサンなどのエーテル類；たとえばエチレングリコールモノメチルまたはモノエチルエーテル、エチレングリコールジメチルエーテル(ジグライム)などのグリコールエーテル類；たとえばアセトンまたはブタノンなどのケトン類；たとえばアセトアミド、ジメチルアセトアミドまたはジメチルホルムアミド(ＤＭＦ)などのアミド類；たとえばアセトニトリルなどのニトリル類；たとえばジメチルスルホキシド(ＤＭＳＯ)などのスルホキシド類；二硫化炭素；たとえばギ酸または酢酸などのカルボン酸類；たとえばニトロメタンまたはニトロベンゼンなどのニトロ化合物類；たとえば酢酸エチルなどのエステル類、あるいは前記溶媒の混合物である。
【０１０８】
式Ｉの化合物は、さらに好ましくは、式ＩＩの化合物を式ＩＶの化合物およびクロロ炭酸エステルたとえば４−ニトロフェニルエステルなどと反応させることによって得ることができる。式ＩＶの化合物は一般に知られている。
【０１０９】
この反応は、不活性溶媒中で、酸結合剤、好ましくは有機塩基、たとえばＤＩＰＥＡ、トリエチルアミン、ジメチルアニリン、ピリジンまたはキノリンなどの存在下、あるいは式Ｖのカルボキシル成分の過剰下で一般に行われる。
【０１１０】
好ましくはカリウム、ナトリウム、カルシウムまたはセシウムの、アルカリまたはアルカリ土類金属の水酸化物、炭酸塩もしくは重炭酸塩、あるいはアルカリまたはアルカリ土類金属の弱酸の別の塩の添加もまた有利であり得る。
【０１１１】
使用される条件により、反応時間は、数分と１４日の間であり、反応温度は、約−３０℃と１４０℃の間、通常は−１０℃と９０℃の間、特に約０℃と約７０℃の間である。
【０１１２】
適当な不活性溶媒は上記のものである。
【０１１３】
（薬剤の塩およびその他の形態）
本発明による前記化合物は、それらの最終的な塩ではない形態で使用することができる。他方、本発明はまた、技術的に知られている方法によりさまざまな有機および無機の酸および塩基から誘導することができる医薬品として許容されるこれら化合物の塩の形態でのそれらの使用に関する。式Ｉの化合物の医薬品として許容される塩の形態は、大部分を従来の方法により調製する。式Ｉの化合物が、カルボキシル基を含有する場合、その適当な塩の１つは、その化合物を適当な塩基と反応させて対応する塩基付加塩を生じさせることにより形成することができる。上記塩基としては、例えば、水酸化カリウム、水酸化ナトリウムおよび水酸化リチウムを含むアルカリ金属水酸化物；水酸化バリウムおよび水酸化カルシウム等のアルカリ土類金属水酸化物；アルカリ金属アルコキシド、例えば、カリウムエトキシドおよびナトリウムプロポキシド；およびさまざまな有機塩基、例えばピペリジン、ジエタノールアミン、Ｎ−メチルグルタミンなどがある。式Ｉの化合物のアルミニウム塩も同様に含まれる。式Ｉのいくつかの化合物の場合、酸付加塩は、これらの化合物を、医薬品として許容される有機酸および無機酸、例えば、塩化水素、臭化水素またはヨウ化水素等のハロゲン化水素、その他の無機酸および硫酸塩、硝酸塩またはリン酸塩および同種のものなど対応するそれらの塩、およびエタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸等のアルキルおよびモノアリールスルホン酸、ならびにその他の有機酸、および、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、アスコルビン酸塩、および同種のもの等対応するそれらの塩で処理することにより形成することができる。したがって、医薬品として許容される式Ｉの化合物の酸付加塩としては、以下のもの：酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アルギニン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩（ベシル酸塩）、重硫酸塩、重亜硫酸塩、臭化物、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、カプリル酸塩、塩化物、クロロ安息香酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、二水素リン酸塩、ジニトロ安息香酸塩、硫酸ドデシル、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、ガラクタル酸塩(粘液酸から）、ガラクツロン酸塩、グルコヘプタン酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミコハク酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、馬尿酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ヨウ化物、イセチオン酸塩、イソ酪酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メタリン酸塩、メタンスルホン酸塩、メチル安息香酸塩、一水素リン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、オレイン酸塩、パルモエ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、フェニル酢酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ホスホン酸塩、フタル酸塩が挙げられるが、これは、限定を意味しない。
【０１１４】
さらに、本発明による化合物の塩基塩としては、アルミニウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、銅塩、鉄(III）塩、鉄(II）塩、リチウム塩、マグネシウム塩、マンガン(III)塩、マンガン(II)塩、カリウム塩、ナトリウム塩および亜鉛塩が挙げられるが、これは限定を意味するように意図されていない。上記の塩のうち、優先されるのは、アンモニウム塩、アルカリ金属塩のナトリウム塩およびカリウム塩、ならびにアルカリ土類金属塩のカルシウム塩およびマグネシウム塩である。医薬品として許容される毒性のない有機塩基から誘導される式Ｉの化合物の塩としては、第一級、第二級および第三級アミン、天然の置換アミンも含む置換アミン、環状アミン、および塩基性イオン交換樹脂も含む、例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、クロロプロカイン、コリン、Ｎ,Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミン(ベンザチン)、ジクロロヘキシルアミン、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リドカイン、リシン、メグルミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエタノールアミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、およびトリス(ヒドロキシメチル)メチルアミン(トロメタミン)の塩が挙げられるが、これは限定を意味するように意図されていない。
【０１１５】
塩基性窒素含有基を含有する本発明の化合物は、(Ｃ1〜Ｃ4)アルキルハロゲン化物、例えば、メチル、エチル、イソプロピルおよびｔ−ブチルの塩化物、臭化物およびヨウ化物；ジ(Ｃ1〜Ｃ4)アルキル硫酸、例えば、ジメチル、ジエチルおよびジアミル硫酸；(Ｃ10〜Ｃ18)アルキルハロゲン化物、例えば、デシル、ドデシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリルの塩化物、臭化物およびヨウ化物；ならびにアリール(Ｃ1〜Ｃ4)アルキルハロゲン化物、例えば、塩化ベンジルおよび臭化フェネチル等の作用物質を用いて第四級化することができる。水溶性および油溶性の両方の本発明による化合物を上記の塩を用いて調製することができる。
【０１１６】
上記のうちの好ましい薬剤の塩としては、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、ベシル酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、ヘミコハク酸塩、馬尿酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、イセチオン酸塩、マンデル酸塩、メグルミン、硝酸塩、オレイン酸塩、ホスホン酸塩、ピバリン酸塩、リン酸ナトリウム、ステアリン酸塩、硫酸塩、スルホサリチル酸塩、酒石酸塩、チオリンゴ酸塩、トシル酸塩およびトロメタミンが挙げられるが、これは限定を意味するように意図されていない。
【０１１７】
式Ｉの塩基性化合物の酸付加塩は、その遊離の塩基の形態を十分な量の所望の酸と接触させて、従来どおりに塩を形成させることにより調製する。遊離の塩基は、その塩の形態を塩基と接触させて従来どおりに遊離の塩基を単離することにより再生させることができる。その遊離の塩基の形態は、極性溶媒中の溶解性等の本発明のためのある一定の物理的性質に関して、対応するその塩の形態とは異なるが、一方で、その塩は、その他の点において、そのそれぞれの遊離の塩基の形態に対応する。
【０１１８】
言及したように、医薬品として許容される式Ｉの化合物の塩基付加塩は、アルカリ金属およびアルカリ土類金属または有機アミン等の金属類またはアミン類により形成される。好ましい金属は、ナトリウム、カリウム、マグネシウムおよびカルシウムである。好ましい有機アミンは、Ｎ,Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンおよびプロカインである。
【０１１９】
本発明による酸性化合物の塩基付加塩は、その遊離の酸の形態を十分な量の所望の塩基と接触させて、従来どおりに塩を形成させることにより調製する。その遊離の酸は、その塩の形態を酸と接触させて従来どおりに遊離の酸を単離することにより再生させることができる。その遊離の酸の形態は、極性溶媒中の溶解性等の本発明のためのある一定の物理的性質に関して、対応するその塩の形態とは異なるが、一方で、その塩は、その他の点において、そのそれぞれの遊離の酸の形態に対応する。
【０１２０】
本発明による化合物が、このタイプの医薬品として許容される塩を形成することができる複数の基を含有する場合、本発明はまた、多塩も包含する。典型的な多塩の形態としては、例えば、酸性酒石酸塩、二酢酸塩、二フマル酸塩、ジメグルミン、二リン酸塩、二ナトリウムおよび三塩酸塩が挙げられるが、これは限定を意味するように意図されていない。
【０１２１】
上で述べたことに関しては、現在の関連における「医薬品として許容される塩」という表現は、特にこの塩の形態が、活性成分の遊離の形態または以前に使用された活性成分のいずれか別の塩の形態と比較してその活性成分に改良された薬物動態学的特性を与える場合に、式Ｉの化合物をその塩の１つの形態で含む活性成分を意味すると捉えるものと理解することができる。活性成分の医薬品として許容される塩の形態はまた、この活性成分にそれが以前は有していなかった望ましい薬物動態学的特性を初めて提供し、体内におけるその治療効果に対するこの活性成分の薬力学についての好ましい影響を有することさえできる。
【０１２２】
本発明は、さらに、少なくとも１つの式Ｉの化合物および／またはすべての比率のそれらの混合物を含めた医薬品として使用可能なそれらの誘導体、溶媒和物および立体異性体、ならびに場合により賦形剤および／または補助剤を含む薬剤に関する。
【０１２３】
医薬品製剤は、予め定められた１投薬単位当たりの有効成分の量を含む投薬単位の形で投与することができる。上記単位は、処置する状態、投与の方法ならびに患者の年齢、体重および状態により、例えば、本発明による化合物の０．５ｍｇから１ｇ、好ましくは１ｍｇから７００ｍｇ、特に好ましくは５ｍｇから１００ｍｇを含むことができ、または医薬品製剤は、予め定められた１投薬単位当たりの有効成分の量を含む投薬単位の形で投与することができる。好ましい投薬単位の製剤は、有効成分の上で示した１日量または分割投与量、あるいは対応するそれらの画分を含むものである。さらに、この型の医薬品製剤は、医薬品技術において一般に知られている方法を使用して調製することができる。
【０１２４】
医薬品製剤は、任意の望ましい適切な方法、例えば、経口(頬側または舌下を含む）、直腸、経鼻、局所(頬側、舌下または経皮を含む）、膣または非経口(皮下、筋肉内、静脈内または皮内を含む)の方法による投与に適合させることができる。上記製剤は、例えば、有効成分を賦形剤(１つまたは複数)または補助剤(１つまたは複数)と組み合わせることにより、医薬品技術において知られているすべての方法を使用して調製することができる。
【０１２５】
経口投与に適合する医薬品製剤は、例えばカプセルまたは錠剤；粉末または顆粒；水性もしくは非水性液体中の溶液または懸濁液；食用気泡または気泡食品；あるいは水中油滴型乳濁液または油中水滴型乳濁液等の独立単位として投与することができる。
【０１２６】
したがって、例えば、錠剤またはカプセルの形の経口投与の場合、有効成分要素は、例えばエタノール、グリセロール、水および同種のものなど、経口で、毒性がなく、医薬品に許容される不活性の賦形剤と組み合わせることができる。粉末は、化合物を適当な細かい粒度に粉砕し、それを同じように粉砕した医薬品用賦形剤、例えば食用になる炭水化物等、例えばデンプンまたはマンニトール等と混合することにより調製する。香料、防腐剤、分散剤および染料をさらに存在させることができる。
【０１２７】
カプセルは、粉末混合物を上記のように調製し、成型したゼラチンの殻にそれを充填することにより製造する。例えば、高分散ケイ酸、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたは固形のポリエチレングリコール等の流動促進剤および滑剤を充填作業の前に粉末混合物に添加することができる。例えば寒天、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウム等の錠剤分解物質または可溶化剤を、カプセルが摂取された後の薬剤の有効性を改良するためにさらに加えることができる。
【０１２８】
さらに、所望によりまたは必要に応じて、適当な結合剤、滑剤および錠剤分解物質ならびに染料をその混合物中にさらに組み込むことができる。適当な結合剤としては、デンプン、ゼラチン、天然糖例えばグルコースまたはβ−ラクトース等、トウモロコシからつくった甘味料、天然および合成ゴム例えばアラビアゴム、トラガカントまたはアルギン酸ナトリウム等、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックス類などが挙げられる。これらの剤形に使用される滑剤としては、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。錠剤分解物質としては、それらに限定されないが、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどが挙げられる。錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、その混合物を粒状にするか乾式プレスにかけ、滑剤および錠剤分解物質を加え、全体の混合物を加圧成型して錠剤を生じさせることにより製剤化する。粉末混合物は、適当な方法で粉砕した化合物を、上記のような希釈剤または基材および場合により結合剤例えばカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチンまたはポリビニルピロリドン等、溶解遅延剤例えばパラフィン等、吸収促進剤例えば第四級塩等、および／または吸収剤例えばベントナイト、カオリンまたは第二リン酸カルシウム等と混合することにより調製する。粉末混合物は、それを結合剤例えばシロップ、デンプン糊、アカディア(acadia)粘液またはセルロースまたはポリマー材料の溶液等、で湿潤させ、それを加圧して篩を通すことにより顆粒状にすることができる。顆粒化の別法として、粉末混合物を打錠器に通し、不均一の形状の塊を生じさせてそれを破砕して顆粒を形成させることもできる。その顆粒は、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルクまたは鉱物油を添加して錠剤の鋳型へのくっつきを防止するように滑らかにすることができる。その滑らかにした混合物を、次に加圧して錠剤を生じさせる。本発明による化合物はまた、自由に流れる不活性賦形剤と混合し、次いで、顆粒化または乾式プレスのステップを行わずに直接加圧して錠剤を生じさせることもできる。セラックシール層、糖またはポリマー材料の層からなる透明または不透明な保護層およびワックスの光沢層が存在してもよい。異なる用量単位の間を区別することができるように、染料をこれらのコーティングに添加することができる。
【０１２９】
経口液例えば溶液、シロップおよびエリキシル剤等は、所定量が化合物の事前に特定した量を含むように用量単位の形で調製することができる。シロップは適当な香料の水溶液中に化合物を溶解することによって調製することができ、一方、エリキシル剤は毒性のないアルコール媒体を使用して調製する。懸濁剤は毒性のない媒体中に化合物を分散させることによって製剤化することができる。可溶化剤および乳化剤例えばエトキシレート化イソステアリルアルコール類およびポリオキシエチレンソルビトールエーテル類等、防腐剤、香料添加剤例えばペパーミント油等、あるいは天然甘味料もしくはサッカリン、またはその他の人工甘味料などをさらに添加することができる。
【０１３０】
経口投与のための用量単位の製剤は、所望に応じて、マイクロカプセルに封入することができる。その製剤はまた、例えば、ポリマー、ワックスおよび同種のもの中の粒子材料のコーティングまたは埋め込みによって、放出が延長または遅延するように調製することができる。
【０１３１】
式Ｉの化合物ならびにその塩、溶媒和物および生理的に機能する誘導体はまた、例えば小さい単層小胞、大きい単層小胞および多層小胞等のリポソーム送達系の形で投与することができる。リポソームは、例えばコレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリン等さまざまなリン脂質から形成することができる。
【０１３２】
式Ｉの化合物ならびにその塩、溶媒和物および生理的に機能する誘導体はまた、化合物分子が結合する個々の担体としてモノクローナル抗体を使用して送達することもできる。該化合物はまた、目標の薬剤の担体としての可溶性ポリマーに結合させることもできる。上記ポリマーは、パルミトイル基により置換されている、ポリビニルピロリドン、ピラン共重合体、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノールまたはポリエチレンオキシドポリリシンを包含し得る。該化合物は、さらに、薬剤の制御放出を達成するのに適する生分解性ポリマーの類、例えば、ポリ乳酸、ポリε−カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロキシピラン、ポリシアノアクリラート、およびヒドロゲルの橋かけまたは両親媒性ブロック共重合体に結合させることができる。
【０１３３】
経皮的投与に適合する医薬品製剤は、レシピエントの表皮に伸ばして密接に接触させる独立した硬膏剤として投与することができる。かくして、例えば、有効成分は、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，３(６)，３１８(１９８６)中、一般用語で記載されているイオン泳動により硬膏剤から送達することができる。
【０１３４】
局所投与に適合する医薬品化合物は、軟膏剤、クリーム剤、懸濁剤、ローション剤、散剤、液剤、ペースト剤、ゲル剤、スプレー剤、エアロゾル剤または油剤として製剤化することができる。
【０１３５】
眼またはその他の外部組織、例えば口および皮膚の治療のためには、製剤は、好ましくは局所の軟膏またはクリームとして適用する。軟膏を与える製剤の場合、有効成分はパラフィンまたは水混和性のクリーム基剤のいずれかと共に使用することができる。別法では、有効成分は水中油滴型クリーム基剤または油中水滴型基剤により製剤化して、クリーム剤を生じさせることができる。
【０１３６】
眼の局所適用に対応する医薬品製剤としては点眼液が挙げられ、その有効成分は適当な担体、特に水性溶媒中に溶解または懸濁させる。
【０１３７】
口中の局所適用に対応する医薬品製剤としては、トローチ剤、パステル剤およびうがい薬が含まれる。
【０１３８】
直腸投与に適合する医薬品製剤は、座剤または浣腸剤の形で投与することができる。
【０１３９】
担体物質が固体である経鼻投与に適合する医薬品製剤は、例えば２０〜５００ミクロンの範囲の粒径を有する粗い粉末を含み、それは、鼻呼吸をするやり方で、すなわち、鼻の近くに保持した粉末を含有する容器から鼻腔を通して急速に吸入することにより投与される。担体物質が液体の鼻腔用スプレーまたは鼻点滴剤としての投与に適した製剤は、水または油中の有効成分の溶液を含む。
【０１４０】
吸入による投与に適合する医薬品製剤は、微細な粒子状粉末または霧を含み、それはさまざまな型のエアロゾルの加圧容器、噴霧器または吸入器により発生させることができる。
【０１４１】
膣投与に適合する医薬品製剤は、膣坐薬、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、泡沫またはスプレー製剤として投与することができる。
【０１４２】
非経口的投与に適合する医薬品製剤としては、酸化防止剤、緩衝液、静菌剤および溶質を含んでおり、それを用いて製剤を治療されるレシピエントの血液と等張にする水性および非水性の無菌の注射液、ならびに懸濁媒体および増粘剤を含むことができる水性および非水性の無菌の懸濁剤が挙げられる。その製剤は、単回投与または複数回投与の容器、例えば密閉したアンプルおよびガラス瓶で投与することができ、使用直前に無菌の担体液(例えば注射のための水)の添加のみが必要であるように凍結乾燥した状態で保存することができる。処方せんにしたがって調製される注射液または懸濁剤は、無菌の粉末、顆粒および錠剤から調製することができる。
【０１４３】
上で特に言及した構成要素に加えて、該製剤が、独特のタイプの製剤に対して技術的に通常のその他の作用物質も含むことができることは言うまでも無く、したがって、例えば、経口投与に適する製剤は香料を含むことができる。
【０１４４】
式Ｉの化合物の治療有効量は、例えば、その動物の年齢と体重、治療を必要とする正確な状態、およびその重傷度、製剤の性質および投与の方法を含む多数の要因に依存し、最終的には治療をする医師または獣医により決定される。しかしながら、腫瘍性増殖、例えば結腸癌または乳癌の治療のための本発明による化合物の有効量は、一般に、１日にレシピエント(哺乳類)の体重１ｋｇ当たりの０．１から１００ｍｇの範囲、特に、典型的には、１日に体重１ｋｇ当たりの１から１０ｍｇの範囲である。したがって、体重７０ｋｇの成熟した哺乳類に対する１日当たりの実際量は、通常、７０と７００ｍｇの間であり、この量は、１日当たりの単回投与量として、または通常は、全体の１日の投与量が同じになるように１日当たりの連続した分割投与量(例えば、２回、３回、４回、５回または６回等)として投与することができる。塩または溶媒和物あるいはそれらの生理的に機能する誘導体の有効量は、本発明による化合物それ自体の有効量の一部分として決定することができる。同様の投与量が上記のその他の状態の治療に対して適しているものと見なすことができる。
【０１４５】
本発明は、その上、少なくとも１つの式Ｉの化合物および／またはすべての比率のそれらの混合物を含めた医薬品として使用可能なそれらの誘導体、溶媒和物および立体異性体と、少なくとも１つのさらなる薬剤有効成分を含む薬剤に関する。
【０１４６】
本発明はまた、
（ａ）式Ｉの化合物および／またはすべての比率のそれらの混合物を含めた医薬品として使用可能なそれらの誘導体、溶媒和物および立体異性体の有効量、と
（ｂ）さらなる薬剤有効成分の有効量
の別々のパックからなるセット(キット)に関する。
【０１４７】
該セットは、箱、個々の瓶、袋またはアンプル等の適当な容器よりなる。そのセットは、例えば、それぞれが有効量の式Ｉの化合物ならびに／またはすべての比率のそれらの混合物を含めた医薬品として使用可能なそれらの誘導体、溶媒和物および立体異性体と、有効量のさらなる薬剤有効成分を、溶解された形または凍結乾燥された形で含む。
【０１４８】
(使用)
本化合物は、チロシンキナーゼにより誘発される疾患の治療における、哺乳類特に人に対する医薬品有効成分として適している。これらの疾患としては、腫瘍細胞の増殖、固形腫瘍の増殖を促進するする病的な新血管形成(または血管新生)、眼の新血管形成(糖尿病性網膜症、加齢黄斑変性症など)および炎症(乾癬、関節リウマチなど)が挙げられる。
【０１４９】
本発明は、式Ｉの化合物および／またはそれらの生理的に許容される塩および溶媒和物の、癌の治療および予防のための薬剤を調製するための使用を含む。治療のため選択される癌腫は、脳癌、尿生殖路癌、リンパ系の癌、胃癌、喉頭癌および肺癌の群から始まる。選択される癌の形態のさらなる群は、単球性白血病、肺腺癌、小細胞肺癌、膵臓癌、神経膠芽腫および乳癌である。
【０１５０】
同様に含まれるのは、本発明の請求項１の化合物および／またはそれらの生理的に許容される塩および溶媒和物の、血管新生が関与する疾患の治療または予防のための薬剤を調製するための使用である。
【０１５１】
血管新生が関与する上記疾患は、網膜血管新生、糖尿病性網膜症、加齢黄斑変性症および同種のもの等の眼疾患である。
【０１５２】
式Ｉの化合物ならびに／またはそれらの生理的に許容される塩および溶媒和物の、炎症性疾患の治療または予防のための薬剤を調製するための使用も、また、本発明の範囲に含まれる。上記炎症性疾患の例としては、関節リウマチ、乾癬、接触性皮膚炎、遅延型過敏反応などが挙げられる。
【０１５３】
同様に含まれるのは、本発明による化合物ならびに／またはそれらの生理的に許容される塩および溶媒和物の、哺乳類におけるチロシンキナーゼ誘発性疾患もしくはチロシンキナーゼ誘発性状態の治療または予防のための薬剤を調製するための使用であって、この方法は、本発明による化合物の治療有効量を、上記治療を必要としている病気の哺乳動物に投与する。その治療量は、その特定の疾患によって変化し、必要以上の努力無しで当該技術に熟達した者によって決定され得る。
【０１５４】
本発明はまた、式Ｉの化合物ならびに／またはそれらの生理的に許容される塩および溶媒和物の、網膜血管新生の治療または予防のための薬剤を調製するための使用を含む。
【０１５５】
糖尿病性網膜症および加齢黄斑変性症等の眼疾患の治療または予防のための方法は、同じく本発明の一部である。関節リウマチ、乾癬、接触性皮膚炎および遅延型過敏反応等の炎症性疾患の治療または予防、ならびに骨肉腫、骨関節炎およびクル病の群に由来する骨の病態の治療または予防のための使用は、同じく本発明の範囲に含まれる。
【０１５６】
「チロシンキナーゼ誘発性疾患または状態」という表現は、１つまたは複数のキナーゼの活動によって決まる病的状態を指す。チロシンキナーゼは、増殖、接着ならびに遊走および分化を含むさまざまな細胞活動のシグナル伝達経路に直接または間接的に参加する。チロシンキナーゼ活性と関連する疾患としては、腫瘍細胞の増殖、固形腫瘍の増殖を促進する病的な新血管形成、眼の新血管形成(糖尿病性網膜症、加齢黄斑変性症など)および炎症(乾癬、関節リウマチなど)が挙げられる。
【０１５７】
本発明による化合物は、癌の治療のために患者に投与することができる。本化合物は、腫瘍の血管新生を阻害し、それにより腫瘍の増殖に影響を及ぼす(Ｊ.Ｒａｋら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ,５５：４５７５〜４５８０,１９９５)。本発明による化合物の血管新生阻害特性はまた、網膜新生血管と関係するある一定の形の失明の治療にも適している。
【０１５８】
本発明による化合物はまた、癌化骨軟化症としても知られる、骨肉腫、骨関節炎およびクル病(Ｈａｓｅｇａｗａら，Ｓｋｅｌｅｔａｌ Ｒａｄｉｏｌ.２８，ｐｐ.４１〜４５,１９９９；Ｇｅｒｂｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｖｏｌ.５，Ｎｏ.６，ｐｐ．６２３〜６２８，Ｊｕｎｅ １９９９)等のある骨の病態の治療にも適している。ＶＥＧＦは、成熟した破骨細胞中に発現するＫＤＲ／Ｆｌｋ−１を介して破骨細胞の骨吸収を直接促進するため(ＦＥＢＳ Ｌｅｔ．４７３：１６１〜１６４(２０００)；Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，１４１：１６６７(２０００））、本化合物はまた、骨粗鬆症およびパジェット病等の骨吸収と関係する状態の治療および予防にも適する。
【０１５９】
該化合物はまた、脳卒中等の脳の虚血の発症の後に起こる組織障害を、虚血に続く脳水腫、組織障害および再灌流傷害を減少することによって(Ｄｒｕｇ Ｎｅｗｓ Ｐｅｒｓｐｅｃｔ １１：２６５〜２７０(１９９８)；Ｊ.Ｃｌｉｎ.Ｉｎｖｅｓｔ．１０４：１６１３〜１６２０(１９９９)）、減少または予防するために使用することができる。
【０１６０】
本発明は、したがって、式Ｉの化合物、ならびにすべての比率のそれらの混合物を含めた医薬品として使用可能なそれらの誘導体、溶媒和物および立体異性体の、キナーゼシグナル伝達の、阻害、制御および／または調節が役割を果たす疾患の治療用の薬剤を調製するための使用に関する。
【０１６１】
選択は、ここで、チロシンキナーゼおよびＲａｆキナーゼの群から選ばれるキナーゼに与えられる。
【０１６２】
そのチロシンキナーゼは好ましくはＴＩＥ−２、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＦＧＦＲおよび／またはＦＬＴ／ＫＤＲである。
【０１６３】
請求項１による化合物によるチロシンキナーゼの阻害により影響される疾患を治療する薬剤を調製するための、式Ｉの化合物、ならびにすべての比率のそれらの混合物を含めた医薬品として使用可能なそれらの誘導体、溶媒和物および立体異性体の使用が選択される。
【０１６４】
請求項１による化合物によるＴＩＥ−２、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＦＧＦＲおよび／またはＦＬＴ／ＫＤＲの阻害により影響される疾患を治療する薬剤を調製するための使用が特に選択される。
【０１６５】
特別な選択は、疾患が固形腫瘍である疾患の治療のための使用に与えられる。
【０１６６】
前記固形腫瘍は、好ましくは、扁平上皮、膀胱、胃、腎臓、頭部および頸部、食堂、頸部、甲状腺、腸、肝臓、脳、前立腺、尿生殖路、リンパ系、胃、喉頭および／または肺の腫瘍の群から選択される。
【０１６７】
前記固形腫瘍は、さらに好ましくは、肺腺腫癌、小細胞癌、膵臓癌、膠芽細胞腫、結腸癌および乳癌の群から選択される。
【０１６８】
優先的には、血液および免疫系の腫瘍の処置のための使用であり、好ましくは急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病および／または慢性リンパ性白血病の群から選択される腫瘍の処置のための使用である。
【０１６９】
本発明は、さらに式Ｉの化合物の、血管新生が関与する疾患の治療のための使用に関する。
該疾患は好ましくは眼疾患である。
本発明は、さらに、網膜血管新生、糖尿病性網膜症、加齢黄斑変性症および／または炎症性疾患の治療のための使用に関する。
【０１７０】
該炎症性疾患は、好ましくは、関節リウマチ、乾癬、接触性皮膚炎および遅延型過敏反応からなる群から選択される。
【０１７１】
本発明は、さらに、式Ｉの化合物の、骨の病態の治療のためであって、該骨の病態が、骨肉腫、骨関節炎およびクル病の群を起源とするものである使用に関する。
【０１７２】
式Ｉの化合物は、Ｒａｆキナーゼ(該Ｒａｆキナーゼは、Ａ−Ｒａｆ、Ｂ−ＲａｆおよびＲａｆ−１からなる群から選択される)により引き起こされ、媒介されかつ／または伝播する疾患を治療する薬剤を調製するために適している。
【０１７３】
過剰増殖性疾患および非過剰増殖性疾患の群からの疾患を治療するための使用が好ましい。
【０１７４】
これらは癌性疾患または非癌性疾患である。
その非癌性疾患は、乾癬、関節炎、炎症、子宮内膜症、瘢痕、良性前立腺過形成、免疫疾患、自己免疫疾患および免疫不全疾患からなる群から選択される。
その癌性疾患は、脳腫瘍、肺癌、扁平上皮癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、肝癌、腎臓癌、結腸直腸癌、乳癌、頭部癌、頚部癌、食道癌、婦人科癌、甲状腺癌、リンパ腫、慢性白血病および急性白血病からなる群から選択される。
【０１７５】
式Ｉの化合物はまた、治療中の状態に対してそれらが特に有用であるために選択される他のよく知られた治療薬と同時に投与することもできる。例えば、骨の状態の場合、有利である組み合わせとしては、アレンドロネートおよびリセドロネート等の再吸収抑制性ビスフォスフォネート、αｖβ３拮抗薬等のインテグリン遮断薬(以下でさらに明らかにする）、プレムプロ(Prempro)(登録商標）、プレマリン(Premarin)(登録商標）およびＥｎｄｏｍｅｔｒｉｏｎ(登録商標)等のホルモン補充療法で使用される共役エストロゲン；ラロキシフェン、ドロロキシフェン、ＣＰ−３３６，１５６(Pfizer)およびラソフォキシフェン(lasofoxifene)等の選択的エストロゲン受容体調節物質(ＳＥＲＭ）、カテプシンＫ阻害薬、およびＡＴＰプロトンポンプ阻害薬とのものが挙げられる。
【０１７６】
本化合物はまた、既知の抗癌剤との組み合わせにも適している。これらの既知の抗癌剤としては、以下の：エストロゲン受容体調節物質、アンドロゲン受容体調節物質、レチノイド受容体調節物質、細胞傷害性作用物質、抗増殖性作用物質、プレニル化タンパク質トランスフェラーゼ阻害薬、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害薬、ＨＩＶプロテアーゼ阻害薬、逆転写酵素阻害薬およびその他の血管新生阻害薬が挙げられる。本化合物は、放射線治療と同時に投与するのに特に適している。放射線治療との組み合わせにおけるＶＥＧＦ阻害の相乗効果が技術的に記載されている(ＷＯ００／６１１８６参照）。
【０１７７】
「エストロゲン受容体調節物質」とは、その機構は無視して、エストロゲンの受容体への結合を干渉するかまたは阻害する化合物を指す。エストロゲン受容体調節物質の例としては、非限定で、タモキシフェン、ラロキシフェン、イドキシフェン、ＬＹ３５３３８１、ＬＹ１１７０８１、トレミフェン、フルベストラント、４−[７−(２,２−ジメチル−ｌ−オキソプロポキシ−４−メチル−２−[４−[２−(１−ピペリジニル)エトキシ]フェニル]−２Ｈ−１−ベンゾピラン−３−イル)フェニル２,２−ジメチルプロパノアート、４,４’−ジヒドロキシベンゾフェノン−２,４−ジニトロフェニルヒドラゾンおよびＳＨ６４６が挙げられる。
【０１７８】
「アンドロゲン受容体調節物質」とは、機構は無視して、アンドロゲンの受容体への結合を干渉するかまたは阻害する化合物を指す。アンドロゲン受容体調節物質の例としては、フィナステリドおよび他の５α−レダクターゼ阻害薬、ニルタミド、フルタミド、ビカルタミド、リアロゾールおよび酢酸アビラテロンが挙げられる。
【０１７９】
「レチノイド受容体調節物質」とは、機構は無視して、レチノイドの受容体への結合を干渉するかまたは阻害する化合物を指す。上記レチノイド受容体調節物質の例としては、ベキサロテン、トレチノイン、１３−シス−レチノイン酸、９−シス−レチノイン酸、α−ジフルオロメチルオルニチン、ＩＬＸ２３−７５５３、トランス−Ｎ−(４'−ヒドロキシフェニル)レチナミドおよびＮ−４−カルボキシフェニルレチナミドが挙げられる。
【０１８０】
「細胞傷害性作用物質」とは、主として細胞機能に対する直接作用によるかまたは細胞減数分裂を伴う阻害もしくは干渉により細胞死をもたらす化合物を指し、アルキル化剤、腫瘍壊死因子、インターカレーター、マイクロチューブリン阻害薬およびトポイソメラーゼ阻害薬が含まれる。
【０１８１】
細胞傷害性作用物質の例としては、非限定で、チラパザミン、セルテネフ、カケクチン、イフォスアミド、タソネルミン、ロニダミン、カルボプラチン、アルトレタミン、プレドニムスチン、ジブロモズルシトール、ラニムスチン、フォテムスチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、テモロゾマイド、ヘプタプラチン(heptaplatin）、エストラムスチン、トシル酸インプロスルファン、トロフォスファミド、ニムスチン、塩化ジブロスピジウム(dibrospidium chloride）、プミテパ、ロバプラチン、サトラプラチン、プロフィロマイシン、シスプラチン、イロフルベン、デキシフォスファミド、シス−アミンジクロロ(２−メチルピリジン)白金、ベンジルグアニン、グルフォスファミド、ＧＰＸ１００、(トランス,トランス,トランス)ビス−μ−(ヘキサン−１,６−ジアミン)μ−[ジアミン白金(II)]ビス[ジアミン(クロロ)白金(II)]テトラクロリド、ジアリジジニルスペルミン(diarizidinylspermine）、三酸化ヒ素、１−(11−ドデシルアミノ−l0−ヒドロキシウンデシル)−３,７−ジメチルキサンチン、ゾルビシン、イダルビシン、ダウノルビシン、ビサントレン、ミトザントロン、ピラルビシン、ピナフィド(pinafide）、バイルビシン(valrubicin）、アムルビシン、アンチネオプラストン、３'−デアミノ−３'−モルホリノ−13−デオキソ−10−ヒドロキシカルミノマイシン、アナマイシン、ガラルビシン(galarubicin)、エリナフィド、ＭＥＮ１０７５５および４−デメトキシ−３−デアミノ−３−アジリジニル−４−メチルスルホニルダウノルビシンが挙げられる(ＷＯ００／５００３２参照）。
【０１８２】
マイクロチューブリン阻害薬の例としては、パクリタキセル、硫酸ビンデシン、３',４'−ジデヒドロ−４'−デオキシ−８'−ノルビンカロイコブラスチン、ドセタキソール、リゾキシン、ドラスタチン、イセチオン酸ミボブリン、オウリスターチン(auristatin）、セマドチン、ＲＰＲ１０９８８１、ＢＭＳ１８４４７６、ビンフルニン、クリプトフィシン、２,３,４,５,６−ペンタフルオロ−Ｎ−(３−フルオロ−４−メトキシフェニル)ベンゼンスルホンアミド、無水ビンブラスチン、Ｎ,Ｎ−ジメチル−Ｌ−バリル−Ｌ−バリル−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｌ−プロリル−Ｌ−プロリン−ｔ−ブチルアミド、ＴＤＸ２５８およびＢＭＳ１８８７９７が挙げられる。
【０１８３】
トポイソメラーゼ阻害薬のいくつかの例は、トポテカン、ヒカプタミン(hycaptamine)、イリノテカン、ルビテカン、６−エトキシプロピオニル−３',４'−Ｏ−エキソベンジリデンシャルトルーシン(chartreusin)、９−メトキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−５−ニトロピラゾロ[３,４,５−ｋｌ]アクリジン−２−(６Ｈ)プロパンアミン、１−アミノ−９−エチル−５−フルオロ−２,３−ジヒドロ−９−ヒドロキシ−４−メチル−１Ｈ,12Ｈ−ベンゾ[デ]ピラノ[３',４'：ｂ,７]インドリジノ[１,２ｂ]キノリン−10,13(９Ｈ,15Ｈ)ジオン、ルルトテカン(lurtotecan)、７−[２−(Ｎ−イソプロピルアミノ)エチル](20Ｓ)−カンプトテシン、ＢＮＰ１３５０、ＢＮＰＩ１１００、ＢＮ８０９１５、ＢＮ８０９４２、リン酸エトポシド、テニポシド、ソブゾキサン、２'−ジメチルアミノ−２'−デオキシエトポシド、ＧＬ３３１、Ｎ−[２−(ジメチルアミノ)エチル]−９−ヒドロキシ−５,６−ジメチル−６Ｈ−ピリド[４,３−ｂ]カルバゾール−ｌ−カルボキシアミド、アスラクライン(asulacrine）、(５ａ,５aB,８aa,９ｂ)−９−[２−[Ｎ−[２−(ジメチルアミノ)エチル]−Ｎ−メチルアミノ]エチル]−５−[４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル]−５,５ａ,６,８,８ａ,９−ヘキソヒドロフロ(３',４'：６,７)ナフト(２,３−ｄ)−１,３−ジオキソール−６−オン、２,３−(メチレンジオキシ)−５−メチル−７−ヒドロキシ−８−メトキシベンゾ[ｃ]フェナントリジニウム、６,９−ビス[(２−アミノエチル)アミノ]ベンゾ[ｇ]イソキノリン−５,10−ジオン、５−(３−アミノプロピルアミノ)−７,10−ジヒドロキシ−２−(２−ヒドロキシエチルアミノメチル）−６Ｈ−ピラゾロ[４,５,１−デ]アクリジン−６−オン、Ｎ−[１−[２(ジエチルアミノ)エチルアミノ]−７−メトキシ−９−オキソ−９Ｈ−チオキサンテン−４−イルメチル］フォルムアミド、Ｎ−(２−(ジメチルアミノ)エチル)アクリジン−４−カルボキシアミド、６−[[２−(ジメチルアミノ)エチル]アミノ]−３−ヒドロキシ−７Ｈ−インデノ[２,１−ｃ]キノリン−７−オンおよびジメスナである。
【０１８４】
「抗増殖性作用物質」としては、アンチセンスＲＮＡおよびアンチセンスＤＮＡのオリゴヌクレオチド、例えば、Ｇ３１３９、ＯＤＮ６９８、ＲＶＡＳＫＲＡＳ、ＧＥＭ２３１、ＩＮＸ３００１など、および、代謝拮抗物質、例えば、エノシタビン、カルモフール、テガフル、ペントスタチン、ドキシフルリジン、トリメトレキサート、フルダラビン、カペシタビン、ガロシタビン、シタラビンオクフォスファート、フォステアビン水酸化ナトリウム(fosteabine sodium hydrate)、ラルチトレキセド、パルチトレキシド(paltitrexid）、エミテフール、チアゾフリン、デシタビン、ノラトレキセド、ペメトレキセド、ネルザラビン、２'−デオキシ−２'−メチリデンシチジン、２'−フルオロメチレン−２'−デオキシシチジン、Ｎ−[５−(２,３−ジヒドロベンゾルリル)スルホニル]−Ｎ’−(３,４−ジクロロフェニル)尿素、Ｎ６−[４−デオキシ−４−[Ｎ２−[２(Ｅ),４(Ｅ)−テトラデカジエノイル]グリシルアミノ]−Ｌ−グリセロ−Ｂ−Ｌ−マンノヘプトピラノシル］アデニン、アピリジン、エクチナサイジン、トロキサシタビン(troxacitabine）、４−[２−アミノ−４−オキソ−４,６,７,８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピリミジノ[５,４−ｂ]−１,４−チアジン−６−イル−(Ｓ)−エチル]−２,５−チエノイル−Ｌ−グルタミン酸、アミノプテリン、５−フルオロウラシル、アラノシン、11−アセチル−８−(カルバモイルオキシメチル)−４−フォルミル−６−メトキシ−14−オキサ−１,11−ジアザテトラシクロ(７.４.１.０.０)テトラデカ−２,４,６−トリエン−９−イル酢酸エステル、スワンソニン、ロメトレキソール、デクスラゾキサン、メチオニナーゼ、２'−シアノ−２'−デオキシ−Ｎ４−パルミトイル−１−Ｂ−Ｄ−アラビノフラノシルシトシン、３−アミノピリジン−２−カルボキシアルデヒドチオセミカルバゾンなどが挙げられる。「抗増殖性作用物質」としてはまた、「血管新生阻害薬」のもとで掲げたもの以外のトラスツズマブ等の増殖因子に対するモノクローナル抗体、および組換えウイルスが介在する遺伝子により送達することができるｐ５３等の腫瘍抑制遺伝子導入も含まれる(例えば、米国特許第６０６９１３４号参照）。
【０１８５】
本発明は、さらに、疾患を治療する薬剤を調製するための式Ｉの化合物の使用に関するものであり、その疾患は血管新生障害を特徴とする。その疾患は好ましくは癌性の疾患である。
血管新生障害は、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＲＦ−２および／またはＶＥＧＦＲ−３活性が阻害されることにより好ましくはもたらされる。
したがって、ＶＥＧＲＦ−２活性を阻害する薬剤を調製するための本発明による化合物の使用もまた特に優先される。
【０１８６】
（アッセイ）
実施例に記載した式Ｉの化合物は、下記のアッセイ法により試験され、キナーゼ阻害活性を有することが見出された。他のアッセイ法は、文献から知られており当業者により容易に実施することができる(例えば、Ｄｈａｎａｂａｌら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ.５９：１８９〜１９７；Ｘｉｎら、Ｊ.Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅｍ.２７４：９１１６〜９１２１；Ｓｈｅｕら、Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ.１８：４４３５〜４４４１；Ａｕｓｐｒｕｎｋら、Ｄｅｖ.Ｂｉｏｌ.３８：２３７〜２４８；Ｇｉｍｂｒｏｎｅら、Ｊ.Ｎａｔｌ.Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ.５２：４１３〜４２７；Ｎｉｃｏｓｉａら、Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ １８：５３８〜５４９を参照）。
【０１８７】
ＶＥＧＦ受容体キナーゼアッセイ
ＶＥＧＦ受容体活性は、放射標識されたリン酸塩を４：１のポリグルタミン酸／チロシン基質(ｐＥＹ)に組み込むことによって測定する。リン酸化したｐＥＹ生成物は、フィルター膜に捕捉され、放射標識されたリン酸塩の組み込みが、シンチレーション計数により数量化される。
【０１８８】
材料
ＶＥＧＦ受容体キナーゼ
ヒトＫＤＲの細胞間チロシンキナーゼドメイン(Ｔｅｒｍａｎ，Ｂ.Ｉ.ら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ(１９９１)Ｖｏｌ.６，ｐｐ.１６７７〜１６８３.)およびＦｌｔ−１(Ｓｈｉｂｕｙａ,Ｍ.ら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ(１９９０)Ｖｏｌ.５，ｐｐ.５１９〜５２４)は、グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ(ＧＳＴ）遺伝子融合タンパク質としてクローン化した。これは、ＧＳＴ遺伝子のカルボキシル末端におけるインフレーム融合物としてのＫＤＲキナーゼの細胞質ドメインをクローン化することによって達成された。可溶性組換え型ＧＳＴキナーゼドメイン融合タンパク質を、バキュロウイルス発現ベクター(ｐＡｃＧ２Ｔ、Pharmingen社)を使用してヨトウガ(Spodoptera frugiperda(Ｓｆ２１))由来昆虫細胞(Invitrogen社)中に発現させた。
【０１８９】
溶解緩衝液
５０ｍＭのトリス(ｐＨ７.４）、０.５ＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＤＴＴ、１ｍＭのＥＤＴＡ、０.５％のトリトンＸ−１００、１０％のグリセロール、ロイペプチン、ペプスタチン、アプロチニンの各１０ｍｇ／ｍｌ、および１ｍＭのフェニルメチルスルホニルフッ化物(すべてSigma社）。
【０１９０】
洗浄緩衝液
５０ｍＭのトリス(ｐＨ７.４）、０.５ＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＤＴＴ、１ｍＭのＥＤＴＡ、０.０５％のトリトンＸ−１００、１０％のグリセロール、ロイペプチン、ペプスタチン、アプロチニンの各１０ｍｇ／ｍｌ、および１ｍＭのフェニルメチルスルホニルフッ化物
透析用緩衝液
５０ｍＭのトリス(ｐＨ７.４）、０.５ＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＤＴＴ、１ｍＭのＥＤＴＡ、０.０５％のトリトンＸ−１００、５０％のグリセロール、ロイペプチン、ペプスタチン、アプロチニンの各１０ｍｇ／ｍｌ、および１ｍＭのフェニルメチルスルホニルフッ化物。
【０１９１】
１０×反応緩衝液
２００ｍＭのトリス(ｐＨ７.４）、１.０ＭのＮａＣｌ、５０ｍＭのＭｎＣｌ2、１０ｍＭのＤＴＴおよび５ｍｇ／ｍｌのウシ血清アルブミン[ＢＳＡ](Sigma社)
酵素希釈緩衝液
５０ｍＭのトリス（ｐＨ７.４）、０.１ＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＤＴＴ、１０％のグリセロール、１００ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ。
【０１９２】
１０×基質
７５０μｇ／ｍｌのポリ(グルタミン酸／チロシン；４：１)（Sigma社）
停止溶液
３０％トリクロロ酢酸、０.２Ｍのピロリン酸ナトリウム（いずれもFisher社）
洗浄溶液
１５％トリクロロ酢酸、０.２Ｍのピロリン酸ナトリウム
フィルタープレート
ミリポア＃ＭＡＦＣ  ＮＯＢ、ＧＦ／Ｃグラスファイバー  ９６−ウェルプレート。
【０１９３】
方法Ａ−タンパク質精製
１．Ｓｆ２１細胞に、５ウイルス粒子／細胞の感染多重度の組換えウイルスにより感染させ、２７℃で４８時間培養した。
【０１９４】
２．すべてのステップを４℃で実施した。感染した細胞は、1000×ｇで遠心分離することにより収集し、１/１０容の溶解緩衝液により４℃で３０分間溶解させ、続いて100.000×ｇで１時間の遠心分離をした。その上清を次に溶解緩衝液で平衡化させたグルタチオンセファローズ酸(Pharmacia社)に通し、５容の同じ緩衝液、続いて５容の洗浄緩衝液で洗浄した。組換え型ＧＳＴ−ＫＤＲタンパク質を洗浄緩衝液／１０ｍＭの還元グルタチオン(Sigma社)により溶出し、透析用緩衝液に向かって透析させた。
【０１９５】
方法Ｂ−ＶＥＧＦ受容体キナーゼアッセイ
１．５０％ＤＭＳＯ中のアッセイに５μｌの阻害薬または対照を加える
２．５μｌの１０×反応緩衝液、５μｌの２５ｍＭ  ＡＴＰ／１０μＣｉ[33Ｐ]ＡＴＰ（Amersham社）および５μｌの１０×基質を含有する３５μｌの反応混合物を加える
３．酵素希釈緩衝液中の１０μｌのＫＤＲ(２５ｎＭ)を添加することにより反応を開始させる
４．混合し、室温で１５分間培養する
５．５０μｌの停止溶液を加えて反応を停止させる
６．４℃で１５分間培養する
７．９０μｌのアリコートをフィルタープレートに移す
８．吸引し、洗浄溶液により３回洗浄する
９．３０μｌのシンチレーションカクテルを加え、プレートをシールし、Ｗａｌｌａｃｅ Ｍｉｃｒｏｂｅｔａシンチレーションカウンターで数える。
【０１９６】
ヒト臍静脈内皮細胞有糸分裂誘発アッセイ
増殖因子に対して細胞分裂応答を仲介するＶＥＧＦ受容体の発現は、血管内皮細胞に大部分は限定される。培養液中のヒト臍静脈内皮細胞(ＨＵＶＥＣ)は、ＶＥＧＦの処置により増殖し、ＶＥＧＦ刺激に対するＫＤＲキナーゼ阻害薬の影響を数量化するアッセイ系として使用することができる。記載されているアッセイにおいて、静止状態のＨＵＶＥＣの単層は、ＶＥＧＦまたは塩基性線維芽細胞増殖因子(ｂＦＧＦ)の添加２時間前に、媒体または試験化合物で処理する。ＶＥＧＦまたはｂＦＧＦに対する細胞分裂の応答は、[3Ｈ]チミジンの細胞ＤＮＡへの取り込みを計量することによって測定する。
【０１９７】
材料
ＨＵＶＥＣ
初代培養単離品としての凍結ＨＵＶＥＣを、クロネティクス社(Clonetics Corp.)から購入する。その細胞は、内皮増殖培地(ＥＧＭ；クロネティクス社)で得られ、継代３〜７における分裂促進アッセイに使用する。
【０１９８】
培養皿
ＮＵＮＣＬＯＮ  ９６ウェルポリスチレン組織培養皿(ＮＵＮＣ ＃１６７００８）
アッセイ培地
１ｇ／ｍｌのグルコース(低グルコースＤＭＥＭ；Mediatech社)と１０％(Ｖ/Ｖ)のウシ胎仔血清(Clonetics社)を含有するダルベッコ変法イーグル培地
試験化合物
試験化合物の作業原液は、１００％ジメチルスルホキシド(ＤＭＳＯ)中に、それらの望ましい最終濃度の４００倍の大きさに希釈する。１倍濃度への最終の希釈は、細胞に加える直前にアッセイ培地中で行った。
【０１９９】
１０×増殖因子
ヒトＶＥＧＦ１６５(５００ｎｇ／ｍｌ；Ｒ＆Ｄ  Systems社)およびｂＦＧＦ(１０ｎｇ／ｍｌ；Ｒ＆Ｄ Systems社)の溶液をアッセイ培地中で調製する。
【０２００】
１０×［3Ｈ］チミジン
［メチル−3Ｈ］チミジン(２０Ｃｉ／ｍｍｏｌ；Dupont-NEN社)を低グルコースＤＭＥＭ培地中８０μＣｉ／ｍｌに希釈する。
【０２０１】
細胞洗浄培地
１ｍｇ／ｍｌのウシ血清アルブミン(Boehringer-Mannheim社)を含有するハンクの平衡塩類溶液(Hank's balanced salt solution）
細胞溶解液
１Ｎ  ＮａＯＨ、２％(ｗ/ｖ）のＮａ2ＣＯ3。
【０２０２】
方法１
ＥＧＭ中に保存したＨＵＶＥＣ単層を、トリプシン化によって収集し、９６ウェルプレートに１ウェル当たり１００μｌのアッセイ培地につき４０００個の細胞密度で蒔く。５％のＣＯ2を含有する湿った雰囲気中、３７℃で２４時間にわたり細胞増殖を阻止する。
【０２０３】
方法２
増殖阻止培地を、媒体(０.２５％[ｖ/ｖ]のＤＭＳＯ)または望ましい最終濃度の試験化合物のいずれかを含有する１００μｌのアッセイ培地により置換する。測定はすべて３回繰り返して行う。細胞を次に、試験化合物が細胞に入るようにするため、３７℃／５％ＣＯ2で２時間培養する。
【０２０４】
方法３
２時間にわたる前処理の後、細胞を、アッセイ培地、１０×ＶＥＧＨ溶液または１０×ｂＦＧＦ溶液のいずれかの１０μｌ／ウェルを添加して刺激する。細胞を次に３７℃／５％ＣＯ2で培養する。
【０２０５】
方法４
２４時間後、増殖因子の存在下、１０×[3Ｈ]チミジン(１０μｌ／ウェル)を加える。
【０２０６】
方法５
［3Ｈ］チミジンの添加３日後、培地を吸引により除去し、細胞を細胞洗浄培地で２度洗浄する(４００μｌ/ウェルに続いて２００μｌ/ウェル）。洗浄した接着細胞を、次に、細胞溶解液(１００μｌ/ウェル)を加え、３７℃に３０分加温して可溶化する。細胞溶解物を、１５０μｌの水を含有する７ｍｌのシンチレーションガラス瓶に移す。シンチレーションカクテル(５ｍｌ/ガラス瓶)を加え、細胞関連放射能を液体シンチレーション分光法により測定する。
【０２０７】
これらのアッセイによれば、式Ｉの化合物はＶＥＧＦの阻害薬であり、したがって、眼疾患、例えば糖尿病性網膜症の治療、および癌腫、例えば固形腫瘍の治療等における血管新生の阻害に適している。本化合物は、培養液中のヒト血管内皮細胞のＶＥＧＦ刺激の有糸分裂誘発を０.０１〜５.０μＭのＩＣ５０値で阻害する。これらの化合物はまた、関係するチロシンキナーゼについての選択性を示す(例えば、ＦＧＦＲ１およびＳｒｃファミリー；ＳｒｃキナーゼとＶＥＧＦＲキナーゼの間の関係、Ｅｌｉｃｅｉｒｉら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｅｌｌ, Ｖｏｌ.４, ｐｐ.９１５〜９２４, Ｄｅｃｅｍｂｅｒ １９９９参照）。
【０２０８】
ＴＩＥ−２試験は、例えば、ＷＯ０２／４４１５６に示されている方法と同様に行うことができる。
該アッセイ法は、放射性33Ｐ−ＡＴＰの存在下のＴｉｅ−２キナーゼによる基質ポリ(Ｇｌｕ、Ｔｙｒ)のリン酸化反応において試験される物質の阻害活性を測定する。そのリン酸化された基質は、培養時間中に「フラッシュプレート」マイクロタイタープレートの表面に結合する。反応混合物を除去した後、マイクロタイタープレートを何回も洗浄し、その表面の放射能をその後測定する。測定される物質の阻害効果により、影響を受けていない酵素反応と比較して低い放射能の結果となる。
【０２０９】
上文および下文において、温度はすべて℃で示している。以下の実施例において、「従来のワークアップ」とは、必要ならば水を加え、必要ならｐＨを、最終生成物の構成により２と１０の間の値に調整し、混合物を酢酸エチルまたはジクロロメタンで抽出し、相分離し、有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、蒸発させ、生成物をシリカゲルに基づくクロマトグラフィーにより、かつ／または結晶化により精製することを意味する。シリカゲルに基づくＲｆ値；溶離剤：酢酸エチル／メタノール９：１
質量分析法(ＭＳ)：ＥＩ(電子衝撃イオン化)Ｍ+
ＦＡＢ（高速原子衝撃）（Ｍ＋Ｈ）+
ＥＳＩ（電気スプレーイオン化）（Ｍ＋Ｈ）+
ＡＰＣＩ−ＭＳ（大気圧化学イオン化−質量分析）（Ｍ＋Ｈ）+。
【０２１０】
実施例１
１−［４−（４−アミノ−５−オキソ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８−イル）フェニル］−３−（５−ｔ−ブチルイソオキサゾール−３−イル）尿素（「１」）の調製を次のスキームに準じて行う。
【０２１１】
【化４】
2008519780.tif 000006
【０２１２】
１．１  ４−アミノ−８Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−５−オンの調製を、文献の手順で行う：Ｊｅａｎ−Ｌｕｃ  Ｇｉｒａｒｄｅｔ等、Ｊ.Ｍｅｄ.Ｃｈｅｍ.２０００、４３、３７０４〜３７１３。
【０２１３】
１．２  ４−アミノ−８−（４−ニトロフェニル）−８Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−５−オン（「Ａ２」）の調製：
５．９６ｇの４−アミノ−８Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−５−オンを、１２０ｍｌのＤＭＦに溶解し、４ｍｌのフルオロ−４−ニトロベンゼンと１２ｇの炭酸セシウムを連続して加える。この混合物を８５℃で一晩撹拌する。反応後溶媒をロータリーエバポレーターで蒸発させ、残留物に水を加える。不溶性生成物を吸引して濾別し、水でよく洗浄して９．５ｇの黄土色の固体物質を生成させる
Ｒｆ（ジクロロメタン／メタノール９：１）０．４
ＥＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+２８４。
【０２１４】
１．３  ４−アミノ−８−（４−アミノフェニル）−８Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］−ピリミジン−５−オン（「Ａ３」）の調製：
７ｇの「Ａ２」を、ラネーニッケルを用いてＤＭＦ中で還元し、褐色固体物質の５．４ｇの所望の生成物を生成する
Ｒｆ（ジクロロメタン／メタノール９：１）０．３
ＥＩ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+２５３。
【０２１５】
１．４  ４０ｍｇの３−アミノ−５−ｔ−ブチルイソオキサゾールと６３ｍｇの４−ニトロフェニルクロロホルメートとを５ｍｌのジクロロメタンに溶解する。０．０３ｍｌのピリジンを加え、この混合物を室温で２時間撹拌する。５ｍｌのジクロロメタン中の懸濁液としての１００ｍｇの４−アミノ−８−（４−アミノフェニル）−８Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］−ピリミジン−５−オンを次に加える。最後に、０．１ｍｌのＮ−エチルジイソプロピルアミンを加える
混合物全体を室温で１６時間撹拌する
通常の後処理により、１００ｍｇの黄色の粗生成物を生じさせる。
【０２１６】
「１」を生じさせる調製用ＨＰＬＣのＡＰＣＩ−ＭＳ４２０により精製を行う
調製用ＨＰＬＣの条件は以下のとおりである：
カラム：ＲＰ１８（７μｍ）Ｌｉｃｈｒｏｓｏｒｂ２５０×２５
溶離液：Ａ：９８Ｈ２Ｏ、２ＣＨ３ＣＮ、０．１％のＴＨＡ
Ｂ：１０Ｈ２Ｏ、９０ＣＨ３ＣＮ、０．１％のＴＨＡ
ＵＶ：２２５ＮＭ
流速：１０ｍｌ／分。
【０２１７】
実施例２
以下の化合物を実施例１と同様に得る。
【０２１８】
【表１−１】
2008519780.tif 000007
【０２１９】
【表１−２】
2008519780.tif 000008
【０２２０】
【表１−３】
2008519780.tif 000009
【０２２１】
【表１−４】
2008519780.tif 000010
【０２２２】
【表１−５】
2008519780.tif 000011
【０２２３】
以下の実施例は薬剤に関する：
実施例Ａ：注射バイアル
１００ｇの式Ｉの有効成分および５ｇのリン酸一水素二ナトリウムの３ｌの２回蒸留水の溶液を、２Ｎの塩酸、を用いてｐＨ６．５に調整し、無菌ろ過し、注射バイアルに移し、無菌状態で凍結乾燥し、無菌条件下で密封する。各注射バイアルは５ｍｇの有効成分を含有する。
【０２２４】
実施例Ｂ：坐薬
２０ｇの式Ｉの有効成分と、１００ｇのダイズレシチンおよび１４００ｇのカカオバターとの混合物を溶融し、型に注ぎ冷却させる。各坐薬は２０ｍｇの有効成分を含有する。
【０２２５】
実施例Ｃ：溶液
９４０ｍｌの２回蒸留水中の、１ｇの式Ｉの有効成分、９．３８ｇのＮａＨ2ＰＯ4・２Ｈ2Ｏ、２８．４８ｇのＮａ2ＨＰＯ4・１２Ｈ2Ｏおよび０．１ｇの塩化ベンザルコニウムから、溶液を調製する。そのｐＨを６．８に調整し、その溶液を１ｌとし、放射殺菌により無菌化する。この溶液は点眼液の形で使用することができる。
【０２２６】
実施例Ｄ：軟膏
５００ｍｇの式Ｉの有効成分を、９９．５ｇのワセリンと無菌状態のもとで混合する。
【０２２７】
実施例Ｅ：錠剤
１ｋｇの式Ｉの有効成分、４ｋｇのラクトース、１．２ｋｇのジャガイモデンプン、０．２ｋｇのタルクおよび０．１ｋｇのステアリン酸マグネシウムを、圧縮成型して、各錠剤が１０ｍｇの有効成分を含有するように従来どおりに錠剤を生じさせる。
【０２２８】
実施例Ｆ：コーティング錠
錠剤を実施例Ｅと同様に圧縮成型し、その後、スクロース、ジャガイモデンプン、タルク、トラガカントおよび染料のコーティングで従来どおり被覆する。
【０２２９】
実施例Ｇ：カプセル
２ｋｇの式Ｉの活性成分を、各カプセルが２０ｍｇの活性成分を含有するように、従来どおり硬質のゼラチンカプセルに導入する。
【０２３０】
実施例Ｈ：アンプル
６０ｌの２回蒸留水中の１ｋｇの式Ｉの有効成分の溶液を、無菌ろ過し、アンプル中に移し、無菌条件下で凍結乾燥させ、無菌条件下で密封する。各アンプルは１０ｍｇの活性成分を含有する。
【国際調査報告】
2008519780.tif 000015
2008519780.tif 000016
2008519780.tif 000017
2008519780.tif 000018