(57)【要約】【課題】カルボン酸−酸化セルロースが、トロンビンおよびフィブリノーゲンと組み合わされて利用される場合、該セルロース中に存在することのある酸部分は、トロンビンおよびフィブリノーゲンの活性度を変性する。したがって、トロンビンおよびフィブリノーゲンをそのような酸部分から遮蔽して、それらトロンビンおよびフィブリノーゲンの止血活性度を維持する吸収性止血材を提供する。【解決手段】本発明は、吸収性フォームと、吸収性織布またはメリヤス生地と、トロンビンと、フィブリノーゲンとを含む止血材に向けられている。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
止血材において、
吸収性フォームと、
吸収性織布またはメリヤス生地と、
トロンビンと、
フィブリノーゲンと、
を含む、止血材。
【請求項２】
請求項１に記載の止血材において、
前記フォームは、多糖類、アルブミン、キチン、カルボキシメチルキチン、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の塩、アルギン酸塩、アルギン酸、アルギン酸プロピレングリコール、グリコーゲン、デキストラン、硫酸デキストラン、カードラン(curdlan)、ペクチン(pectin)、プルラン(pullulan)、キサン(xanthan)、コンドロイチン(chondroitin)、コンドロイチン硫酸(chondroitin sulfates)、カルボキシメチルデキストラン(carboxymethyl dextran)、カルボキシメチルキトサン(carboxymethyl chitosan)、キトサン、ヘパリン、ヘパリン硫酸、ヘパラン、ヘパラン硫酸、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、カラゲナン(carrageenans)、キトサン、デンプン、アミロース(amylose)、アミロペクチン(amylopectin)、ポリ−Ｎ−グルコサミン、ポリマンヌロン酸、ポリグルクロン酸、ポリグルロン酸(polygluronic acid)、および、上記の物質のいずれかの誘導体、から成る群から選ばれた１種以上のポリマーを含有している、止血材。
【請求項３】
請求項２に記載の止血材において、
前記フォームは、メチルセルロース、アルキルヒドロキシアルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、硫酸セルロース、カルボキシメチルセルロースの塩、カルボキシメチルセルロース、カルボキシエチルセルロース、から成る群から選ばれた多糖類を含有している、止血材。
【請求項４】
請求項３に記載の止血材において、
前記吸収性織布またはメリヤス生地は、酸化多糖類を含有している、止血材。
【請求項５】
請求項４に記載の止血材において、
前記吸収性織布またはメリヤス生地は、酸化セルロースを含有している、止血材。
【請求項６】
請求項５に記載の止血材において、
前記吸収性織布またはメリヤス生地は、酸化された再生セルロースを含有している、止血材。
【請求項７】
請求項５に記載の止血材において、
前記吸収性織布またはメリヤス生地は、酸化された再生セルロースを含有する吸収性メリヤス生地である、止血材。
【請求項８】
請求項１に記載の止血材において、
前記フォームは、カルボキシメチルセルロースおよびアルブミンを含有しており、
前記吸収性織布またはメリヤス生地は、酸化された再生セルロースを含有しており、
前記トロンビンおよび前記フィブリノーゲンは、前記フォームの中に組み込まれているか、または前記フォーム上に吹き付けられている、止血材。
【請求項９】
請求項８に記載の止血材において、
［カルボキシメチルセルロース］対［前記アルブミン］の重量比は、重量で約１：８〜８：１の範囲である、止血材。
【請求項１０】
請求項８に記載の止血材において、
前記止血材おけるトロンビン活性度は、約２０〜５００ＩＵ／ｃｍ2の範囲であり、かつ、フィブリノーゲン活性度は、約２〜１５ｍｇ／ｃｍ2の範囲である、止血材。
【発明の詳細な説明】
【開示の内容】
【０００１】
本出願は、出願日２００４年１０月２０日の米国仮出願番号第60/620539号、および出願日２００５年７月１日の米国仮出願番号第60/696258号に基づく優先権を主張する。
【０００２】
〔発明の分野〕
本発明は、止血材(hemostat)に関する。
【０００３】
〔発明の背景〕
外科的処置において、出血の制御の他に、空気および様々な体液を密封することは、失血を最小限に抑え、組織および器官構造体を密封し、手術後の合併症を減少させ、かつ、手術室における手術時間を短縮するために、極めて重要であり、不可欠である。
【０００４】
止血特性、組織密封特性および組織癒着特性が改善された手当て用品を提供する努力において、治療薬であって、トロンビン、フィブリンおよびフィブリノーゲンを包含するが、それらに限定されない治療薬は、ゼラチンベースのキャリヤ、多糖類ベースのキャリヤ、グリコール酸ベースまたは乳酸ベースのキャリヤ、および、コラーゲンマトリックスを包含する、手当て用品のキャリヤまたは基体と組み合わされてきた。そのような手当て用品の例は、米国特許第6,762,336号、米国特許第6,733,774号、および特許協力条約刊行物の国際公開番号ＷＯ2004/064878A1号明細書に開示されている。
【０００５】
カルボン酸部分を含有するように酸化されたセルロース（以下、カルボン酸−酸化セルロースという）は、生分解性(biodegradability)と、殺菌特性、組織密封特性、組織修復特性、薬物放出特性および止血特性を有するため、該セルロースは、神経手術、腹部手術、心臓血管手術、胸部手術、頭頸部手術、骨盤手術、ならびに、皮膚および皮下組識の処置を包含する様々な外科的処置における局所的手当て用品(topical dressing)として利用することが望ましい。
【０００６】
しかし、カルボン酸−酸化セルロースが、トロンビンおよびフィブリノーゲンと組み合わされて利用される場合、該セルロース中に存在することのある酸部分は、トロンビンおよびフィブリノーゲンの活性度を変性する。したがって、トロンビンおよびフィブリノーゲンをそのような酸部分から遮蔽して、それらトロンビンおよびフィブリノーゲンの止血活性度(hemostatic activities)を維持することが望ましい。
【０００７】
〔発明の概要〕
本発明は、吸収性フォーム(absorbable foam)と、吸収性織布またはメリヤス生地(absorbable woven or knitted fabric)と、トロンビンと、フィブリノーゲンとを含む止血材に向けられている。
【０００８】
〔発明の詳細な記述〕
本明細書に記述される止血材は、該止血材が止血を必要とする創傷に使用されたとき、効果的な止血を提供し維持する。本明細書で用いられる「効果的な止血(effective hemostasis)」は、止血の当業者によって認識される有効時間以内で、毛細血管出血、静脈出血もしくは小動脈出血を制御し、および／または軽減する能力である。「効果的な止血」が更に示すものは、政府の規制基準、等によって与えられている場合がある。
【０００９】
幾つかの具体例において、本発明の止血材は、激しい出血または活発な出血の場合、止血を提供し維持するのに有効である。本明細書で用いられる「激しい出血(severe bleeding)」は、比較的多量の血液が比較的速い速度で失われる場合の出血を包含することを意味する。「激しい出血」の例は、動脈穿刺、肝臓切除、鈍的肝外傷、鈍的脾損傷もしくは大動脈瘤に起因する出血、過剰な抗凝固薬療法(over-anticoagulation)を受けている患者からの出血、または、凝固障害（例えば、血友病）を有する患者からの出血を包含するが、それらに限定されない。
【００１０】
止血材は一般に、吸収性フォームと強化布とを含む。強化布は、吸収性フォームが裏地(backing)に直接的または間接的に取り付けられることが可能である該裏地であって、トロンビンおよびフィブリノーゲンが該フォームの全体にわたって実質的に均一に分散されている該裏地、および／または、トロンビンおよびフィブリノーゲンが該フォームの表面に配置されている該裏地を提供する。使用者が、該止血材を、創傷の上に、もしくは、創傷の内部に配置して巧みに扱うこと、または、止血、もしくは、組織の密封および癒着を必要とする患者の組織の上に直接配置して巧みに扱うこと、ができるために十分な強度を、強化布は該止血材に提供する。
【００１１】
止血材は、トロンビンおよびフィブリノーゲンのための担体(carrier)としての機能を果たすことに加えて、例えば、カルボン酸−酸化セルロースが強化布として使用されている場合、強化布の中に存在する場合のある酸部分からトロンビンおよびフィブリノーゲンを保護する役目をも果たす。
【００１２】
吸収性フォームは、生体適合性、水溶性または水膨潤性のポリマー、および、発泡剤／界面活性度剤である場合がある。該フォームを作り上げるのに使用される生体適合性、水溶性または水膨潤性のポリマーは、多糖類を含有することが好ましい。そのような多糖類は、セルロース、アルキルセルロース（例えば、メチルセルロース）、アルキルヒドロキシアルキルセルロース(alkylhydroxyalkyl cellulose)、ヒドロキシアルキルセルロース(hydroxyalkyl cellulose)、硫酸セルロース、カルボキシメチルセルロースの塩、カルボキシメチルセルロース(carboxymethyl cellulose)、および、カルボキシエチルセルロース(carboxyethyl cellulose)を包含するが、それらに限定されない。加えて、アルブミン、キチン、カルボキシメチルキチン、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の塩、アルギン酸塩、アルギン酸、アルギン酸プロピレングリコール、グリコーゲン、デキストラン、硫酸デキストラン、カードラン(curdlan)、ペクチン(pectin)、プルラン(pullulan)、キサン(xanthan)、コンドロイチン(chondroitin)、コンドロイチン硫酸(chondroitin sulfates)、カルボキシメチルデキストラン(carboxymethyl dextran)、カルボキシメチルキトサン(carboxymethyl chitosan)、キトサン、ヘパリン、ヘパリン硫酸、ヘパラン、ヘパラン硫酸、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、カラゲナン(carrageenans)、キトサン、デンプン、アミロース(amylose)、アミロペクチン(amylopectin)、ポリ−Ｎ−グルコサミン(poly-N-glucosamine)、ポリマンヌロン酸(polymannuronic acid)、ポリグルクロン酸、ポリグルロン酸(polygluronic acid)、および、上記の物質のいずれかの誘導体を利用することができる。生体適合性、水溶性または水膨潤性のポリマーは、カルボキシメチルセルロースのアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩であることがなおいっそう好ましく、カルボキシルメチルセルロースナトリウム(sodium carboxylmethyl cellulose)（ＣＭＣ−Ｎａ）であることが最も好ましい。
【００１３】
発泡剤／界面活性度剤は、カチオン界面活性度剤、アニオン界面活性度剤、両性界面活性度剤、両性イオン界面活性度剤もしくは非イオン界面活性度剤、または、天然タンパク質もしくは修飾タンパク質である場合がある。それらは、アルブミン、ラウリル硫酸ナトリウム (sodium lauryl sulfate)、ラウレス硫酸ナトリウム(sodium laureth sulfate)またはラウリル硫酸アンモニアを包含するが、それらに限定されない。好ましい発泡剤／界面活性度剤はアルブミンであり、更に好ましくは、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）である。
【００１４】
強化布は、吸収性織布またはメリヤス生地であり、酸化された多糖類、特に、酸化セルロース、および酸化セルロースの中和された誘導体を含有する。例えば、該セルロースは、カルボン酸−酸化セルロースまたはアルデヒド−酸化セルロースである場合がある。更に好ましくは、酸化された再生多糖類(oxidized regenerated polysaccharides)は、限定はされないが酸化された再生セルロースを含み、当該酸化された再生セルロースを使用して、第２の吸収性織布またはメリヤス生地を作ることができる。再生セルロースは、再生されなかったセルロースと比べてより高い均一度を有するため、再生セルロースは好ましい。再生セルロースと、酸化された再生セルロースの製法に関する詳細な記述は、米国特許第3,364,200号、米国特許第5,180,398号、および米国特許第4,626,253号明細書に開示されている。それら米国特許明細書の各々の内容は、参照されることによって、そっくりそのまま開示されるかのように、本明細書に組み入れられる。
【００１５】
強化布として利用することのできる布の例は、インターシード(Interceed)（登録商標）吸収性癒着障壁、サージセル(Surgicel)（登録商標）吸収性止血材、サージセル・ヌ−ニット(Surgicel Nu-Knit)（登録商標）吸収性止血材、および、サージセル(Surgicel)（登録商標）細繊維吸収性止血材(Fibrillar absorbable hemostat)を包含するが、それらに限定されない。それらは、それぞれ、ジョンソン・アンド・ジョンソン・ウーンド・マネージメント・ワールドワイド社(Johnson & Johnson Wound Management Worldwide)、または、ガイケア・ワールドワイド社(Gynecare Worldwide)から入手できる。それらの会社は、いずれも、ニュージャージー州サマービル、エチコン社(Ethicon, Inc.)の一部門である。
【００１６】
本発明において利用される強化布が、意図された用途で使用されるのに必要な物理特性を有するという条件で、該強化布は、織られている(woven)か、または編まれている(knitted)場合がある。そのような布は、例えば、米国特許第4,626,253号、米国特許第5,002,551号、および米国特許第5,007,916号明細書に記述されている。それらの米国特許明細書の内容は、参照されることによって、そっくりそのまま開示されるかのように、本明細書に組み入れられる。好ましい具体例において、強化布は、ブライトレーヨン(bright rayon)のヤーンを材料として作られたたて編トリコット生地(warp knitted tricot fabric)であって、その後、カルボキシル部分またはアルデヒド部分を、強化布に生分解性を提供するのに有効な量で含有するように酸化される該たて編トリコット生地である。
【００１７】
代わりの具体例において、強化布は、脂肪族のポリエステルのポリマー、共重合体、または、それらの混合物で構成された繊維と組み合わされた酸化多糖類繊維を含有する。
【００１８】
強化布は、酸化された再生セルロースを含有することが好ましく、約０．０００１５ｇ／平方センチメートル〜０．０３０ｇ／平方センチメートル（約０．００１〜０．２ｇ／平方インチ）の範囲、好ましくは約０．００１５ｇ／平方センチメートル〜０．０１５ｇ／平方センチメートル（約０．０１〜０．１ｇ／平方インチ）の範囲、最も好ましくは約０．００６ｇ／平方センチメートル〜０．０１０ｇ／平方センチメートル（約０．０４〜０．０７ｇ／平方インチ）の範囲の坪量を有することができる。
【００１９】
止血材を製造する場合、発泡スラリー(foam slurry)を、例えば、カルボキシルメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ−Ｎａ）およびヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）から製造し、次いで、このスラリーを、例えば、酸化された再生セルロース布の表面に広げることができる。［水溶性または水膨潤性のポリマー］対［発泡剤］の比は、重量で約１：８〜８：１、好ましくは重量で約２：１〜１：２の範囲である場合がある。次いで、発泡スラリーを、凍結乾燥、または、高温のオーブンによって乾燥させて、固体フォーム基体(solid foam substrate)を形成する。該フォーム基体は、強度を増大させるための化学架橋剤（例えば、グルタールアルデヒド(glutaraldehyde)）で処理するか、または、加熱によって部分的に架橋することができる。該止血材の密度は、約５〜２０ｍｇ／ｃｍ3である場合がある。
【００２０】
トロンビンおよびフィブリノーゲンは、動物由来、好ましくはヒト由来であってもよく、または、組換え体(recombinant)であってもよい。止血材におけるトロンビン活性度は、約２０〜５００ＩＵ／ｃｍ2、好ましくは約２０〜２００ＩＵ／ｃｍ2、最も好ましくは約５０〜２００ＩＵ／ｃｍ2の範囲である場合がある。止血材におけるフィブリノーゲン活性度は、約２〜１５ｍｇ／ｃｍ2、好ましくは約３〜１０ｍｇ／ｃｍ2、最も好ましくは約４〜７ｍｇ／ｃｍ2の範囲である場合がある。
【００２１】
トロンビン粉末は、トロンビン溶液を凍結乾燥することによって製造することができる。フィブリノーゲンは、フィブリノーゲンを含有する溶液、例えば、米国特許第6,121,232号明細書、および特許協力条約出願公開番号ＷＯ02/095019号明細書に記述されるような溶液、を凍結乾燥することによって製造することができる。次いで、有機溶媒（例えば、ＰＦ５０６０またはＨＦＥ７０００〜７３００シリーズ）に懸濁した、フィブリノーゲンおよびトロンビンの乾燥粉末を、フォームの表面に吹き付ける。代替的に、トロンビンおよびフィブリノーゲンは、フォームを生成する間に、該フォームの中に組み入れることができる。
【００２２】
代わりの具体例において、止血材は、第１のフォームであって、第１のフォームの上にまたはその中に第１の治療薬（例えば、フィブリノーゲン）が組み入れられている第１のフォームと、第１のフォームから離れた（結合していない）第２のフォームであって、第２のフォームの上に第２の治療薬（例えば、トロンビン）の粉末を有する場合があるか、または第２のフォームの中に第２の治療薬が組み入れられる場合がある第２のフォームとを有することができる。代替的に、止血材は、強化布であって、当該強化布に隣接する第１のフォームと、第１のフォームの反対側にある第２のフォームとを有する強化布を有することができる。トロンビンまたはフィブリノーゲンのいずれかを第１のフォームに組み入れることができるが、フィブリノーゲンが好ましい。トロンビンまたはフィブリノーゲンのいずれかを第２のフォームに組み入れることができるが、トロンビンが好ましい。そのような具体例において、第２のフォームが第１のフォームよりも密度が小さく、その結果、第２のフォームが、創傷部位における血液と接触して凝固過程(clotting process)を引き起こした後、迅速に液化するかまたは溶けるような具合に、第１および第２のフォームを製造するために使用する発泡スラリーを選定する。先ず、第２のフォームが出血部位と接触し、次いで、組み合わされた強化層および第１のフォームは、血餅が血流によって洗い流されないようにする。
【００２３】
止血材は、凝血促進酵素(procoagulant enzymes)、タンパク質およびペプチドであって、天然に存在するか、組換え体であるか、または合成物質である場合があり、しかも、プロトロンビン、フィブリン、フィブロネクチン、ヘパリナーゼ、ファクターＸ／Ｘａ、ファクターVII／VIIａ、ファクターIX／IXａ、ファクターXI／XIａ、ファクターXII／XIIａ、組織因子、バトロキソビン(batroxobin)、アンクロド(ancrod)、エカリン(ecarin)、フォン・ウィルブランド因子(von Willebrand Factor)、コラーゲン、エラスチン(elastin)、アルブミン、ゼラチン、血小板表面糖タンパク質(platelet surface glycoproteins)、バソプレシン(vasopressin)およびバソプレシン類似体、エピネフリン(epinephrine)、セレクチン(selectin)、凝血促進性毒(procoagulant venom)、プラスミノゲンアクチベータインヒビター(plasminogen activator inhibitor)、血小板活性度化剤、止血活性度を有する合成ペプチド、上記のものの誘導体、ならびに、それらのいずれかの組合せ、から成る群から選定することができる、凝血促進酵素、タンパク質およびペプチドを任意的に含有することができるが、それらに限定されない。
【００２４】
本明細書に記述される止血材は、主要な創傷閉鎖デバイス(wound closure devices)（例えば、動脈閉鎖デバイス(arterial closure devices)、ステープルおよび縫合糸）の付属物として使用して、気体、液体または固体の潜在的漏洩を密封するだけでなく、止血をもたらすことができる。例えば、該止血材を利用して、組織からの空気、または、器官および組織からの諸流体を密封することができる。それらの流体は、胆汁、リンパ液、髄液、胃腸液、間質液および尿を包含するが、それらに限定されない。
【００２５】
本明細書に記述される止血材は、更なる医療用途を有し、様々な臨床機能として使用することができる。それらの臨床機能は、組織の補強および支持(buttressing)（即ち、胃腸または血管を吻合するための補強および支持）と、近似化(approximation)［即ち、（張力下で）実行するのが困難である吻合(anastomoses)を連結するための近似化］と、張力の解放とを包含するが、それらに限定されない。該止血材は、上記の事象の全てにおいて、生来の組織回復の過程を更に促進し、かつ、潜在的に改善することができる。この止血材は、多くのタイプの手術において、体内で使用することができる。それらの手術は、心臓血管手術、末梢血管手術、心肺手術、婦人科手術、神経手術および一般手術を包含するが、それらに限定されない。該止血材は更に、医療用具（例えば、メッシュ、クリップおよび膜）を組織に、組織を組織に、または、医療用具を医療用具に取り付けるために使用することができる。
【００２６】
実施例１
酸化された再生セルロース（ＯＲＣ）布を有する、カルボキシルメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ−Ｎａ）／ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）の凍結乾燥フォーム
ミキシングボウル(mixing bowl)の中に、カルボキシルメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ−Ｎａ）［アクアロン(Aqualon)、カタログ番号７Ｍ８ＳＦＰＨ］の２％溶液１９０ｍＬと、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）［ALBUTEIN（商標），アルファ・セラピューティック社(Alpha Therapeutic Corporation)］の２０％溶液１０ｍＬとを添加した。その混合物を、機械的にかき回して泡を立て、発泡スラリー(foamed slurry)を生じさせた。該発泡スラリーを、矩形のフレーム(frame)であって、その底部に、インターシード(Interceed)（登録商標）の商品名でエチコン社(Ethicon, Inc.)から入手できる、カルボン酸−酸化された再生セルロースのメリヤス生地の一片が配置されている該フレームに移した。次いで、該発泡スラリーを、該フレームの全体にわたって端から端まで均一に広げて、約３ｍｍの厚さにした。次いで、該発泡スラリーを、凍結乾燥させて、溶媒を除去し、このようにして、酸化された再生セルロース布に隣接し、それに取り付けられた、カルボキシルメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ−Ｎａ）／ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）の固体フォームを生じさせた。
【００２７】
実施例２
酸化された再生セルロース（ＯＲＣ）布を有する、カルボキシルメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ−Ｎａ）／ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）の加熱処理フォーム
ミキシングボウルの中に、カルボキシルメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ−Ｎａ）［アクアロン、カタログ番号７Ｍ８ＳＦＰＨ］の２％溶液１９０ｍＬと、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）［ALBUTEIN（商標），アルファ・セラピューティック社］の２０％溶液１０ｍＬとを添加した。その混合物を、機械的にかき回して泡を立て、発泡スラリー(foamed slurry)を生じさせた。該発泡スラリーを、矩形フレームであって、その底部に、インターシード(Interceed)（登録商標）の商品名でエチコン社から入手できる、カルボン酸−酸化された再生セルロースのメリヤス生地の一片が配置されている該フレームに移した。次いで、該発泡スラリーを、該フレームの全体にわたって端から端まで均一に広げて、約３ｍｍの厚さにした。次いで、該発泡スラリーは、６５℃のオーブンで１時間の間加熱して溶媒を除去し、このようにして、酸化された再生セルロース布に隣接し、それに取り付けられた、カルボキシルメチルセルロースナトリウム／ヒト血清アルブミンの固体フォームを生じさせた。
【００２８】
実施例３
活性度凝固因子(active clotting factors)を含有する強化フォーム(Reinforced Foams)
下記のように、実施例１および実施例２で作った構成体に止血剤を施した。該構成体は、７．６２ｃｍ×１０．１６ｃｍ（３インチ×４インチ）の片に切断した。凍結乾燥トロンビンと、フィブリノーゲンを含有する生物活性度成分２(Biological Active Components 2)（ＢＡＣ−２）とを、別々にすり潰して粉末にした。そのトロンビン粉末およびＢＡＣ−２粉末は、４５μｍ篩を通過させた。それら２種類の粉末は、秤量して、６ｍｇ／ｃｍ2、７ｍｇ／ｃｍ2、または、８ｍｇ／ｃｍ2、の最終フィブリノーゲン濃度と、５０ＩＵ／ｃｍ2のトロンビン活性度とを与えた。次いで、それらの粉末は、混合して、フラスコに入れた過フッ素化溶媒(per-fluorinated solvent)ＨＦＥ７０００に懸濁させた。次いで、その懸濁液は、様々な構成体の上に吹き付け、次いで、窒素の下、室温で１時間の間乾燥させた。
【００２９】
実施例４
ブタ脾臓の直線状切開モデルによる止血試験
ブタ脾臓に複数箇所の直線状切開（長さ１．５ｃｍおよび深さ０．３ｃｍ）を行った。該創傷に０．９％生理食塩水溶液を吹き付けた後、実施例３からの様々な試験材料を、それらの創傷に当てた。タンポン挿入を３０秒間適用し、次いで、３０秒間観察した。止血が達成されなかった時、追加のタンポン挿入を適用して、出血を止めた。対照として一片の外科用ガーゼと、［ニコムド・ファルマ有限責任会社(Nycomed Pharma GmbH)から市販されている］市販製品のタココンブ(Tachocomb)（登録商標）外科用パッチとを使用した。表１に実験結果を記載する。
【００３０】
【表１】
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【００３１】
実施例５
トロンビンを含有するカルボキシルメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ−Ｎａ）／ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）のフォーム
ミキシングボウルの中に、カルボキシルメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ−Ｎａ）［アクアロン、カタログ番号７Ｍ８ＳＦＰＨ］の２％溶液１９０ｍＬと、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）［ALBUTEIN（商標），アルファ・セラピューティック社］の２０％溶液１０ｍＬとを添加した。その混合物を、機械的にかき回して泡を立て、発泡スラリーを生じさせた。該発泡スラリーの一部分をガラスビーカーに移した。該発泡スラリーの中にトロンビン粉末を包み込んで、１,０００ＩＵ／ｃｍ3の推定活性度を生じさせた。最終の混合物は、高さ０．５ｃｍのアルミニウム秤量皿の中で凍結乾燥させて、固体フォームの全体にトロンビンが分散している該固体フォームを形成した。
【００３２】
実施例６
フィブリノーゲンを含有するカルボキシルメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ−Ｎａ）／ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）のフォーム
ミキシングボウルの中に、カルボキシルメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ−Ｎａ）［アクアロン、カタログ番号７Ｍ８ＳＦＰＨ］の２％溶液１９０ｍＬと、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）［ALBUTEIN（商標），アルファ・セラピューティック社］の２０％溶液１０ｍＬとを添加した。その混合物を、機械的にかき回して泡を立て、発泡スラリーを生じさせた。該発泡スラリーの一部分をガラスビーカーに移した。該発泡スラリーの中にフィブリノーゲン粉末５ｇを包み込んだ。最終の混合物は、高さ０．５ｃｍのアルミニウム秤量皿であって、その底部に酸化された再生セルロース（ＯＲＣ）布を有する該秤量皿の中に置いた。次いで、該発泡スラリーを凍結乾燥させて、固体フォームの全体にフィブリノーゲンが分散している該固体フォームを形成した。
【００３３】
実施例７
ＣＭＣ−Ｎａ／ＨＳＡ／トロンビンのフォームとＣＭＣ−Ｎａ／ＨＳＡ／フィブリノーゲンのフォームとを用いた止血試験
ブタ肝臓に、激しく出血する創傷を作った。その創傷は、外科用メスを用いて三角形の切り傷を作ることによって作り出した。各々の辺は約２．５４ｃｍ（約１インチ）であり、深さは５ｍｍであった。その三角形の肝臓組織を取り除いた後、該創傷に、カルボキシルメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ−Ｎａ）／ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）／トロンビンのフォーム（２．５４ｃｍ×２．５４ｃｍ（１インチ×１インチ））を迅速に当てた。次いで、該トロンビン・フォームの頂部に、一片のＣＭＣ−Ｎａ／ＨＳＡ／フィブリノーゲンのフォームを当て、次いで、手動で圧縮した。止血は、２分間で達成された。
【００３４】
〔実施の態様〕
（１）止血材において、
吸収性フォームと、
吸収性織布またはメリヤス生地と、
トロンビンと、
フィブリノーゲンと、
を含む、止血材。
（２）実施態様１に記載の止血材において、
前記フォームは、多糖類、アルブミン、キチン、カルボキシメチルキチン、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の塩、アルギン酸塩、アルギン酸、アルギン酸プロピレングリコール、グリコーゲン、デキストラン、硫酸デキストラン、カードラン(curdlan)、ペクチン(pectin)、プルラン(pullulan)、キサン(xanthan)、コンドロイチン(chondroitin)、コンドロイチン硫酸(chondroitin sulfates)、カルボキシメチルデキストラン(carboxymethyl dextran)、カルボキシメチルキトサン(carboxymethyl chitosan)、キトサン、ヘパリン、ヘパリン硫酸、ヘパラン、ヘパラン硫酸、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、カラゲナン(carrageenans)、キトサン、デンプン、アミロース(amylose)、アミロペクチン(amylopectin)、ポリ−Ｎ−グルコサミン、ポリマンヌロン酸、ポリグルクロン酸、ポリグルロン酸(polygluronic acid)、および、上記の物質のいずれかの誘導体、から成る群から選ばれた１種以上のポリマーを含有している、止血材。
（３）実施態様２に記載の止血材において、
前記フォームは、メチルセルロース、アルキルヒドロキシアルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、硫酸セルロース、カルボキシメチルセルロースの塩、カルボキシメチルセルロース、カルボキシエチルセルロース、から成る群から選ばれた多糖類を含有している、止血材。
（４）実施態様３に記載の止血材において、
前記吸収性織布またはメリヤス生地は、酸化多糖類を含有している、止血材。
（５）実施態様４に記載の止血材において、
前記吸収性織布またはメリヤス生地は、酸化セルロースを含有している、止血材。
【００３５】
（６）実施態様５に記載の止血材において、
前記吸収性織布またはメリヤス生地は、酸化された再生セルロースを含有している、止血材。
（７）実施態様５に記載の止血材において、
前記吸収性織布またはメリヤス生地は、酸化された再生セルロースを含有する吸収性メリヤス生地である、止血材。
（８）実施態様１に記載の止血材において、
前記フォームは、カルボキシメチルセルロースおよびアルブミンを含有しており、
前記吸収性織布またはメリヤス生地は、酸化された再生セルロースを含有しており、
前記トロンビンおよび前記フィブリノーゲンは、前記フォームの中に組み込まれているか、または前記フォーム上に吹き付けられている、止血材。
（９）実施態様８に記載の止血材において、
［カルボキシメチルセルロース］対［前記アルブミン］の重量比は、重量で約１：８〜８：１の範囲である、止血材。
（１０）実施態様８に記載の止血材において、
前記止血材にけるトロンビン活性度は、約２０〜５００ＩＵ／ｃｍ2の範囲であり、かつ、フィブリノーゲン活性度は、約２〜１５ｍｇ／ｃｍ2の範囲である、止血材。
【国際調査報告】
2008516735.tif 000003
2008516735.tif 000004