(57)【要約】  本発明はベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体、その製造方法およびその誘導体を含む薬学的組成物に関する。前記誘導体はナトリウム／水素交換チャンネルであるＮＨＥ−１に対して強力な抑制作用を示し、摘出された虚血心モデルにおいて虚血／再かん流による心臓損傷の機能回復を改善させ、ｉｎ ｖｉｖｏ虚血動物モデルにおいて、心筋梗塞のサイズを有意に減少させ、優れた心臓保護効果を示す。更に、神経細胞の壊死および死滅に対する保護効果を有し、ｉｎ ｖｉｖｏ脳虚血モデルにおいて、脳梗塞のサイズが有意に減少することで神経細胞および虚血脳に対する保護効果を示す。 また、前記誘導体は心筋梗塞、不整脈、狭心症などの虚血性心疾患、脳卒中などの脳血管疾患の予防および治療に有用に使用することができ、冠動脈バイパス術、経皮経管冠動脈形勢術などの施術時または血栓溶解剤などの再かん流療法に対する心臓保護剤などとして使用することができる。【代表図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化学式１に表されるベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体または薬学的に許容可能なその塩。
化学式１
【化１】
2008525523.tif 000018
前記式において、
Ｒ1は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ2、アミノ、または分岐鎖または直鎖のＣ1〜Ｃ5アルキル、Ｃ1〜Ｃ5アルケニル、Ｃ1〜Ｃ5アルキニル、Ｃ1〜Ｃ5アルコキシ、Ｃ1〜Ｃ5ハロアルキル、またはＣ6〜Ｃ14アリールであり、ここで、前記Ｃ6〜Ｃ14アリールは非置換、またはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ2、アミノ、および分岐鎖または直鎖であるＣ1〜Ｃ5アルキル、Ｃ1〜Ｃ5アルケニル、Ｃ1〜Ｃ5アルキニル、Ｃ1〜Ｃ5アルコキシ、およびＣ1〜Ｃ5ハロアルキルの中から選択された１種の置換基に置換され、
Ｒ2は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ2、アミノ、または側鎖または直鎖のＣ1〜Ｃ5アルキル、Ｃ1〜Ｃ5アルケニル、Ｃ1〜Ｃ5アルキニル、Ｃ1〜Ｃ5アルコキシ、またはＣ1〜Ｃ5ハロアルキルである。
【請求項２】
前記化学式１のＲ1は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ2、ＮＨ2、ＣＦ3、ＯＣＨ3、分岐鎖または直鎖のＣ1〜Ｃ3アルキル、Ｃ1〜Ｃ3アルケニル、またはＣ6〜Ｃ10アリールであり、ここで、前記Ｃ6〜Ｃ10アリールは、非置換、またはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ2、ＮＨ2、ＣＦ3、ＯＣＨ3、分岐鎖または直鎖のＣ1〜Ｃ3アルキル、およびＣ1〜Ｃ3アルケニルからなる群から選択された１種の置換基で置換され、および
Ｒ2は、Ｈ、またはＣ1〜Ｃ3アルキルであることを特徴とする、請求項１記載のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体または薬学的塩。
【請求項３】
前記薬学的に許容可能な塩が、塩酸、臭化水素酸、硫酸、およびリン酸の中から選択される無機酸、またはクエン酸、酢酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、グルコン酸、メタンスルホン酸、グリコン酸、コハク酸、酒石酸、４−トルエンスルホン酸、ガラクツロン酸、エンボン酸、グルタミン酸およびアスパラギン酸の中から選択される有機酸であることを特徴とする、請求項１記載のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項４】
薬学的に許容可能な塩は塩酸またはメタンスルホン酸の塩であることを特徴とする、請求項１記載のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項５】
前記ベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体または薬学的に許容可能なその塩が、
１）（４−ブロモベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
２）［４−（２−クロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
３）［４−（３−クロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
４）［４−（４−クロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
５）［４−（２−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
６）［４−（３−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
７）［４−（４−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
８）［４−（２−メチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
９）［４−（３−メチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
１０）［４−（４−メチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
１１）［４−（２−メトキシフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
１２）［４−（３−メトキシフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
１３）［４−（４−メトキシフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
１４）［４−（２−トリフルオロメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
１５）［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
１６）［４−（４−トリフルオロメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
１７）（４−フェニルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
１８）［４−（１−ナフタレニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩
１９）［４−（３，５−ジクロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩
２０）［４−（２，５−ジクロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジン、
２１）［４−（２，３−ジクロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
２２）［４−（２−メトキシ−５−クロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
２３）［４−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
２４）［４−（３，５−ジフルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
２５）［４−（２，５−ジフルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
２６）［４−（２，３−ジフルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
２７）［４−（３，４−ジフルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
２８）［４−（２−メチル−５−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
２９）［４−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
３０）［４−（３，５−ジメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
３１）［４−（２，５−ジメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
３２）（４−クロロベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
３３）（４−フルオロベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
３４）（４−ヨードベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
３５）（４−メチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
３６）（４−ビニルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
３７）（４−エチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
３８）（４−イソプロピルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
３９）（４−ニトロベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
４０）（４−アミノベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
４１）（４−メトキシベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
４２）（４−シアノベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
４３）（４−トリフルオロメチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
４４）（ベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
４５）（４−ブロモ−５−メチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
４６）（４−クロロ−５−メチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
４７）（４，５−ジメチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
４８）（４−シアノ−５−メチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸、
４９）（４−ブロモ−６−メチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
５０）（４，６−ジメチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、および
５１）（４−シアノ−６−メチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
からなる群から選択されることを特徴とする、請求項１記載のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体または薬学的に許容可能なその塩。
【請求項６】
下記反応式１のように、カルボン酸誘導体（II）と過量のグアニジンと反応させるか、または塩基存在下でグアニジンと反応させて化合物（I）を得ることを特徴とするベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体および薬学的に許容可能なその塩の製造方法。
反応式１
【化２】
2008525523.tif 000019
前記反応式１において、
Ｒ1およびＲ2は、各々請求項１の化学式１で定義した通りであり、Ｌは、グアニジンに容易に置換される離脱基である。
【請求項７】
前記Ｌは、ハロゲン、水酸基、アルコキシ基、メシレートおよびトシレートの中から選択されることを特徴とする、請求項６記載の製造方法。
【請求項８】
請求項１〜５のうちいずれか一項に記載のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体または薬学的に許容可能なその塩を有効成分として含有するＮＨＥ（ナトリウム／水素交換輸送体−１）抑制剤。
【請求項９】
請求項１〜５のうちいずれか一項に記載のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体または薬学的に許容可能なその塩を有効成分として含有する神経細胞保護剤。
【請求項１０】
請求項１〜５のうちいずれか一項に記載のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体または薬学的に許容可能なその塩を有効成分として含有する虚血性心疾患の予防および治療用薬学的組成物。
【請求項１１】
前記虚血性心疾患が、心筋梗塞、不整脈および狭心症を含むことを特徴とする、請求項１０記載の薬学的組成物。
【請求項１２】
請求項１〜５のうちいずれか一項に記載のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体または薬学的に許容可能なその塩を有効成分として含有する再かん流療法時の虚血／再かん流損傷に対する心臓保護剤。
【請求項１３】
前記再かん流療法が、冠動脈バイパス術、経皮経管冠動脈形成術のような心臓施術およびその組合せ、または血栓溶解剤を含む薬物療法であることを特徴とする、請求項１２記載の心臓保護剤。
【請求項１４】
請求項１〜５のうちいずれか一項に記載のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体または薬学的に許容可能なその塩を有効成分として含有する虚血性脳疾患の予防および治療用薬学的組成物。
【請求項１５】
前記虚血性脳疾患が、脳卒中および脳外傷を含むことを特徴とする、請求項１４記載の薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体、その製造方法およびその誘導体を含む薬学的組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
急性心筋梗塞、不整脈、心不全などの虚血性心疾患が発生した後、冠動脈バイパス術、経皮経管冠動脈形成術などの外科施術または血栓溶解剤などの薬物療法による迅速な冠動脈の再かん流療法によりこれらの疾患を患う患者の生存率が増加する。しかし、再かん流療法後にも心筋梗塞または不整脈の再発率が高く、または心機能異常または神経認知機能の障害などを含む後遺症が残るという問題がある［Robert, M. (2003) Ann.Thorac. Surg.75: S700-708］。従って、心筋細胞の虚血性障害の進行を遅らせ、再かん流により誘発される損傷から保護することのできる心臓保護剤の開発が要求される［Kloner, R.A.; Rezkalla, S.H. (2004) J. Am. Coll. Cardiol. 44: 276-286］。
【０００３】
ＮＨＥ（ｓｏｄｉｕｍ−ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｅｘｃｈａｎｇｅｒ）は多様な細胞種から発現されるイオンチャンネルであり、細胞内のｐＨ調節において重要な役割を行い、現在まで７個の亜型が確認され、心筋細胞の主亜型であるＮＨＥ−１は心筋虚血−再かん流の損傷において主要な役割を行う［Avkiran, M. et al., (2002) J. Am. Coll. Cardiol. 39: 747-753］。ＮＨＥ−１は正常な生理的ｐＨ（＝７．２）では作用を働かず、虚血を随伴した深刻な細胞内のアシドーシス（ｐＨ＝６．４）により活性化する。活性ＮＨＥ−１を通して水素イオンを排出し、細胞内のナトリウムイオンを増加させ、ＮＣＸ（Ｎａ+／Ｃａ2+ ｅｘｃｈａｎｇｅｒ）が逆方向に作動し、結果的に細胞内のカルシウムイオンの濃度が高くなる。細胞内のカルシウムイオンの増加はプロテアーゼ、ホスホリパーゼ、エンドヌクレアーゼなどの酵素を活性化させ、タンパク質の分解、迅速な新陳代謝の妨害による活性酸素種（ＲＯＳ）の増加、ＤＮＡの変形などを引き起こし、最終的に細胞損傷を引き起こす。結果的に、ＮＨＥ−１の抑制により細胞内のナトリウムイオンの過負荷を減少させることで、細胞内のカルシウムイオンの過負荷を抑制し、虚血／再かん流による細胞損傷を保護することができる。しかし、増加した細胞内の水素イオン濃度は別のイオンチャンネルで調節することでＮＨＥ−１の抑制による細胞内アシドーシスを発生させない。
【０００４】
ＮＨＥ阻害剤として最初に知られた薬物は、利尿薬として使用されるパラジン誘導体アミロリドである［Benos, DJ. (1982) A. J. Physiol. 242: C131］。アミロリドはＮＨＥ−１に対する抑制作用があり、ラットの虚血心モデルにおいて、虚血／再かん流後に心機能の回復を増進させることが観察されたが、ＮＨＥ−１以外にもＮＨＥ−２およびナトリウムチャンネルを抑制するなどの選択性が不足しているため心臓保護剤としては問題があった。
【０００５】
従って、ＮＨＥ−１に対して特効性を有する薬物を開発するための研究が行われ、Hoechst Marion Roussel（現在Aventis）によりＮＨＥ−１に対して高い特効性を有するベンゾイルグアニジン誘導体であるカリポリド（ＨＯＥ−６９４）が開発された［Schloz, W. et. al., (1993) Br. J. Pharmacol. 109: 562］。現在まで知られた大部分のＮＨＥ−１抑制剤はアシルグアニジンであり、ゾニポリド（ｚｏｎｉｐｏｒｉｄｅ）、サビポリド（ｓａｂｉｐｏｒｉｄｅ）、ＳＭ−２０２２０、ＢＭＳ−２８４６４０などの薬物が選択的ＮＨＥ−１抑制剤として例示されている。
【０００６】
ＮＨＥ−１抑制剤は、細胞内のナトリウムとカルシウムイオンの過負荷を減少させることで、細胞死滅または懐死の減少、損傷された心筋機能の回復、不整脈の減少、代謝状態の改善などの虚血再かん流心臓に対して保護効果を有することが確認された［Karmazyn, M. (2002) Science & Medicine: 18-26］。従って、虚血／再かん流損傷に対する心臓保護剤として選択的なＮＨＥ−１抑制剤は、冠動脈バイパス術、経皮経管冠動脈形成術および／または急性心筋梗塞のための血栓溶解剤療法などに適用することができ、心不全、不整脈などの広範囲な虚血性心疾患の治療および予防効果が期待される。
【０００７】
そこで、本発明の発明者はＮＨＥ−１に対して選択性がある薬物の研究を行い、選択的なＮＨＥ−１抑制剤としてベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体を発見し、これらが虚血／再かん流により誘発される心筋障害機能の回復に効果的であり、神経細胞の死滅に対する保護効果だけでなく、脳虚血および心虚血モデルにおいて、梗塞症のサイズを有意に減少させ、従って、優れた虚血性心臓疾患および脳疾患の治療および予防において非常に有用であることを確認し、本発明を完成するに至った。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、ベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体および薬学的に許容可能なその塩を提供することに目的がある。
また、本発明はベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体の製造方法を提供することに別の目的がある。
【０００９】
また、本発明はベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジンまたは薬学的に許容可能なその塩を有効成分とする、虚血性心臓疾患および虚血性脳疾患の予防および治療用、および再かん流療法に対する心臓保護用薬学的組成物を提供することにまた別の目的がある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明の一特徴によると、ベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体および薬学的許容可能なその塩を提供する。
本発明の別の特徴によると、ベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体の製造方法を提供する。
本発明のまた別の特徴によると、ベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体または薬学的に許容可能なその塩を有効成分とする、虚血性心臓疾患および虚血性脳疾患の予防および治療用、および再かん流療法に対する心臓保護用薬学的組成物を提供する。
【発明の効果】
【００１１】
本発明のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体は、ナトリウム／水素交換輸送体であるＮＨＥ−１に対して強力な抑制作用を有し、摘出された虚血心モデルにおいて虚血／再かん流による心臓機能の損傷回復を促進させ、ｉｎ ｖｉｖｏ虚血動物モデルにおいて、心筋梗塞のサイズを有意に減少させ、優れた心臓保護効果を示す。更に、神経細胞の壊死およびアポトーシスに対して保護効果を有し、ｉｎ ｖｉｖｏ脳虚血モデルにおいて、梗塞サイズを有意に減少させる。
【００１２】
従って、本発明の薬学的組成物は、心筋梗塞、不整脈、狭心症などの虚血性心臓疾患、および脳卒中などの脳血管疾患の予防および治療に有用に使用することができ、冠動脈バイパス術および経皮経管冠動脈形成術などの心臓施術、または血栓溶解剤などの薬物を使用する再かん流療法に対する心臓保護剤として使用することが可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明は下記化学式１に表されるベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体および薬学的に許容可能なその塩を提供する。
化学式１
【００１４】
【化１】
2008525523.tif 000002
【００１５】
前記式において、
Ｒ1は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ2、アミノ、または分岐鎖または直鎖であるＣ1〜Ｃ5アルキル、Ｃ1〜Ｃ5アルケニル、Ｃ1〜Ｃ5アルキニル、Ｃ1〜Ｃ5アルコキシ、Ｃ1〜Ｃ5ハロアルキル、またはＣ6〜Ｃ14アリールであり、ここで、前記Ｃ6〜Ｃ14アリールは非置換、またはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ2、アミノ、および分岐鎖または直鎖であるＣ1〜Ｃ5アルキル、Ｃ1〜Ｃ5アルケニル、Ｃ1〜Ｃ5アルキニル、Ｃ1〜Ｃ5アルコキシ、およびＣ1〜Ｃ5ハロアルキルの中から選択された１種に置換され、
Ｒ2はＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ2、アミノ、または側鎖または直鎖であるＣ1〜Ｃ5アルキル、Ｃ1〜Ｃ5アルケニル、Ｃ1〜Ｃ5アルキニル、Ｃ1〜Ｃ5アルコキシ、またはＣ1〜Ｃ5ハロアルキルである。
【００１６】
更に好ましくは、
Ｒ1は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ2、ＮＨ2、ＣＦ3、ＯＣＨ3、分岐鎖または直鎖であるＣ1〜Ｃ3アルキル、Ｃ1〜Ｃ3アルケニル、またはＣ6〜Ｃ10アリールであり、ここで、前記Ｃ6〜Ｃ10アリールは非置換、またはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ2、ＮＨ2、ＣＦ3、ＯＣＨ3、分岐鎖または直鎖であるＣ1〜Ｃ3アルキル、およびＣ1〜Ｃ3アルケニルの中から選択された１種に置換され、および
Ｒ2はＨ、またはＣ1〜Ｃ3アルキルである。
【００１７】
ここで、“アルコキシ”は側鎖または直鎖であるアルキル、アルケニル、またはアルキニルに置換された酸素ラジカルを意味する。
“ハロアルキル”はフッ素、塩素、臭素、およびヨウ素原子のうち少なくとも１種に置換されたアルキルを意味する。
“アミノ”は−ＮＨ2、−ＮＨＲ3または−ＮＨ3Ｒ4を含み、ここで、Ｒ3およびＲ4は各々独立的に直鎖または分岐鎖のＣ1〜Ｃ5アルキルである。
【００１８】
前記化学式１に表される本発明のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体は、薬学的に許容可能な遊離酸により形成された薬学的に許容可能な塩の形態で使用され得る。遊離酸としては無機酸または有機酸を使用することができ、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、およびリン酸を含む無機酸が有用であり、好ましくは臭化水素酸を使用する。有機酸としては、クエン酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、グルコン酸、メタンスルホン酸、酢酸、グリコン酸、コハク酸、酒石酸、４−トルエンスルホン酸、ガラクツロン酸、エンボン酸、グルタミン酸、またはアスパラギン酸を使用することができ、好ましくは、メタンスルホン酸を使用することができる。
【００１９】
また、本発明の前記化学式１に表されるベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体は薬学的に許容される塩だけでなく、通常の方法により製造される塩、水和物および溶媒和物の形態で使用され得る。
本発明による付加塩は通常の方法で製造することができ、例えば、化学式１の化合物を水混和性有機溶媒、例えば、アセトン、メタノール、エタノール、またはアセトニトリルなどに溶解し、過量の有機酸、または無機酸の酸水溶液を加えた後、沈殿させたり結晶化させて製造する。これらの付加塩は、溶液から溶媒や過量の酸を蒸発させたり、または沈殿物を吸引および濾過させることで得られる。
【００２０】
更に好ましくは、ベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体またはその塩は下記化合物を含む。
１）（４−ブロモベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
２）［４−（２−クロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
３）［４−（３−クロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
４）［４−（４−クロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
５）［４−（２−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
６）［４−（３−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
【００２１】
７）［４−（４−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
８）［４−（２−メチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
９）［４−（３−メチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
１０）［４−（４−メチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
１１）［４−（２−メトキシフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
１２）［４−（３−メトキシフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
【００２２】
１３）［４−（４−メトキシフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
１４）［４−（２−トリフルオロメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
１５）［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
１６）［４−（４−トリフルオロメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
１７）（４−フェニルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
【００２３】
１８）［４−（１−ナフタレニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩
１９）［４−（３，５−ジクロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩
２０）［４−（２，５−ジクロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジン、
２１）［４−（２，３−ジクロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
２２）［４−（２−メトキシ−５−クロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
２３）［４−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
【００２４】
２４）［４−（３，５−ジフルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
２５）［４−（２，５−ジフルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
２６）［４−（２，３−ジフルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
２７）［４−（３，４−ジフルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
２８）［４−（２−メチル−５−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
２９）［４−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
３０）［４−（３，５−ジメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
３１）［４−（２，５−ジメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩、
【００２５】
３２）（４−クロロベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
３３）（４−フルオロベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
３４）（４−ヨードベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
３５）（４−メチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
３６）（４−ビニルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
３７）（４−エチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
３８）（４−イソプロピルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
３９）（４−ニトロベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
【００２６】
４０）（４−アミノベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
４１）（４−メトキシベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
４２）（４−シアノベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
４３）（４−トリフルオロメチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
４４）（ベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
４５）（４−ブロモ−５−メチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
４６）（４−クロロ−５−メチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
【００２７】
４７）（４，５−ジメチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
４８）（４−シアノ−５−メチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸、
４９）（４−ブロモ−６−メチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
５０）（４，６−ジメチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、および
５１）（４−シアノ−６−メチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩、
【００２８】
また、本発明は、ベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体および薬学的に許容可能なその塩の製造方法を提供する。
本発明は下記反応式１に表される化学式１のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体の製造方法を提供する。
下記反応式１
【００２９】
【化２】
2008525523.tif 000003
【００３０】
前記式において、
Ｒ1およびＲ2は化学式１で定義した通りであり、
Ｌは、グアニジンにより容易に置換される離脱基であり、ハロゲン、アルコキシ、アリルオキシ、スルホニルオキシ、およびカルボニルオキシから選ばれ、好ましくはハロゲン、アルコキシ、トシレート（−ＯＳＯ2ＰｈＣＨ3）、またはメシレート（−ＯＳＯ2ＣＨ3）である。
【００３１】
前記反応式１において、カルボン酸誘導体（II）は離脱基Ｌに応じてエステル、ハロゲン化アシル、カルボン酸無水物誘導体であり得る。前記エステル誘導体は一般的なアルキルエステル（例、メチルエステル、エチルエステル）以外にも、活性エステル誘導体（例、ｐ−ニトロフェニルエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、ペンタフルオロフェニルエステル）、またはスルホン酸エステル（トシレートエステル、メシレートエステル）を含む。このようなカルボン酸誘導体は通常的な公知方法にてカルボン酸から容易に製造することができる。
【００３２】
前記反応式１において、
１）前記カルボン酸誘導体（II）がアルキルエステルや活性エステルの場合、
適切な溶媒を使用して定量または過量のグアニジンと反応させて化合物（Ｉ）を得る。
【００３３】
この反応溶媒はメタノール、エタノール、またはイソプロパノールのようなアルコール類、テトラヒドロフラン、ジオキサン、１，２−ジメトキシエタンのようなエーテル類、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、およびこれらの混合溶媒の中から選択して使用することができる。反応は常温から溶媒の沸点までの範囲で行う。
２）前記カルボン酸誘導体（II）がハロゲン化アシルまたは酸無水物である場合、
適切な溶媒と過量のグアニジンを反応させたり、または塩基存在下でグアニジンと反応させて化合物（Ｉ）を得る。この反応で使用される塩基としては水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウムなどの無機塩基、またはトリエチルアミン、ピリジンなどの有機塩基である。
【００３４】
反応溶媒としてはベンゼン、トルエンなどの芳香族炭化水素溶媒、テトラヒドロフランなどのエーテル溶媒、ジクロロメタン、クロロホルムなどのハロゲン化炭化水素溶媒、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、またはこれらの混合溶媒を使用することができる。
前記反応式１において、出発物質として使用されるカルボン酸誘導体（II）は下記のような方法にて製造する。
１）前記反応式１において、カルボン酸誘導体（II）がメチルまたはエチルエステル（Ｌ＝ＯＭｅまたはＯＥｔ）のような一般的なアルキルエステルであるメチルまたはエチルエステルであり、Ｒ1がＨ、ハロゲン（Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ、Ｉ）、ＣＮ、ＮＯ2、ＮＨ2、アミノ、ハロアルキル、またはアルコキシである場合、
前記反応式１で使用したカルボン酸誘導体（II）のＲ1が水素、ハロゲン（Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ、Ｉ）、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロアルキル、またはアルコキシである場合、下記反応式２のように、化合物（IV）のホルミル化反応後、アルデヒド化合物（V）とメチルチオグリコレートの求核置換反応および分子環化反応を通して化合物（II−１）を製造する。
反応式２
【００３５】
【化３】
2008525523.tif 000004
【００３６】
前記式において、
Ｒ1は、Ｈ、ハロゲン（Ｂｒ、Ｃｌ、Ｆ、Ｉ）、ＣＮ、ＮＯ2、アミノ、Ｃ1〜Ｃ5ハロアルキル、またはＣ1〜Ｃ5アルコキシであり、
Ｒ2は、前記化学式１で定義した通りであり、
Ｌは、前記反応式１で定義した通りであり、そして
Ｘは、Ｆ、ＮＯ2、Ｃｌ、またはＢｒである。
【００３７】
前記反応式２で使用されるアルデヒド化合物（V）は市販されている化合物を使用したり、塩基を使用してＲ1、Ｒ2およびＸが適当に置換された化合物（IV）から製造する。ここで、前記塩基としてはリチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）またはｎ−ブチルリチウムを使用して、Ｒ1およびＸ置換炭素原子の間に位置する炭素原子から水素を離脱させて形成された陰電荷がジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）またはギ酸メチルを攻撃してアルデヒド基を導入する公知の方法にて製造した。
【００３８】
化合物（Ｖ）は、塩基の存在下において、求核置換反応を生じ、この反応では、メチルチオグリコレートのチオール基の、Ｘで置換された炭素原子への求核性攻撃により（ここで、Ｘは、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ）またはニトロ基である）が生じ、メチルチオグリコレートが付加し、一方、Ｘ基は除去される。次いで、分子間環化反応が起こり、ここでは、エステルのアルファ水素イオンが離脱して、生じた陰電荷がアルデヒドを攻撃し、そして、脱水反応が生じる。すなわち、ベンゾチオフェン環化合物（II−１）が、一連の求核置換反応、分子間環化反応及び脱水反応を介して、化合物（Ｖ）から製造される。これらの反応に適する塩基として、炭酸カリウム、ｔ−ブトキシドカリウムまたは水素化ナトリウムが好適である。一連の反応は、ＤＭＦ、またはテトラヒドロフランまたはジオキサンのようなエーテル溶媒において、を使用することが好ましく、室温から溶媒の沸点までの範囲で行うことが好ましい。
【００３９】
前記反応式２において、Ｒ1がアミノ基である化合物は、Ｒ1がニトロ基である化合物（II−１）から通常の還元反応にて製造される。
前記反応式２において、Ｒ1がＣＮである化合物（II−５）は下記反応式３の通り、Ｒ1がＢｒまたはIである化合物（II−４）から製造され得る。
反応式３
【００４０】
【化４】
2008525523.tif 000005
【００４１】
前記式において、
Ｒ2は、前記化学式１で定義した通りであり、
Ｌは、前記反応式１で定義した通りであり、
Ｘ1は、ＢｒまたはＩである。
前記反応式３において、ＣＮ-の供給源としてＣｕＣＮ、ＫＣＮ、またはＮａＣＮが使用され、特にＣｕＣＮが好ましい。
前記反応は触媒なしに、ＤＭＦまたは１−メチル−２−ピロリジノンのように沸点が高い溶媒、またはマイクロ波反応器で加熱して反応させることができる。反応温度は１００〜２２０℃の範囲である。
【００４２】
触媒を使用する場合はパラジウム触媒が好ましく、Ｐｄ2（ｄｂａ）3またはＰｄ（ＰＰｈ3）4が更に好ましい。この時、反応を促進する付加物として、ｄｐｐｆ（１，１'−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン）、Ｅｔ4ＮＣＮ、またはＢｕ3ＳｎＣｌなどを使用することができる。パラジウム触媒を使用する場合、溶媒はジオキサンまたはテトラヒドロフランのようなエーテル、ベンゼンまたはトルエンのような芳香族炭化水素、ＣＨ3ＣＮ、またはＤＭＦを単独に使用したり、混合して使用することができる。反応温度は常温から溶媒の沸点までの範囲である。
【００４３】
２）前記反応式１において、カルボン酸誘導体（II）がメチルまたはエチルエステル（Ｌ＝ＯＭｅまたはＯＥｔ）のような一般的なアルキルエステルであり、Ｒ1がアルキル、アルケニル、アルキニル、またはアリールである場合、下記反応式４のように、前記反応式２で製造した４−ハロベンゾチオフェン化合物（II−６）と、アリールおよびアルキルボロン酸、またはスタニルアリール（Ｓｔａｎｙｌａｒｙｌ）およびアルキル誘導体化合物（VI）を、金属触媒、特にパラジウム触媒の存在下でシュティレ型（Ｓｔｉｌｌｅ−ｔｙｐｅ）結合またはスズキ型結合で反応させ、化合物（II−７）および（II−８）を製造する。
反応式４
【００４４】
【化５】
2008525523.tif 000006
【００４５】
前記式において、
Ｌは、前記反応式１で定義した通りであり、
Ｘ1は、Ｂｒ、ＩまたはＣｌであり、
ＹおよびＺは、各々Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＮＯ2、アミノ、分岐鎖または直鎖であるＣ1〜Ｃ5アルキル、Ｃ1〜Ｃ5アルケニル、Ｃ1〜Ｃ5アルキニル、Ｃ1〜Ｃ5アルコキシ、またはＣ1〜Ｃ5ハロアルキルであり、
Ｒ1は、分岐鎖または直鎖であるＣ1〜Ｃ5アルキル、Ｃ1〜Ｃ5アルケニル、Ｃ1〜Ｃ5アルキニルまたはＣ6〜Ｃ14アリールであり、ここで、前記Ｃ6〜Ｃ14アリールは非置換、またはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ2、アミノ、分岐鎖または直鎖であるＣ1〜Ｃ5アルキル、Ｃ1〜Ｃ5アルケニル、Ｃ1〜Ｃ5アルキニル、Ｃ1〜Ｃ5アルコキシ、およびＣ1〜Ｃ5ハロアルキルからなる群から選択された１種の置換基で置換され、
Ｒ2は、化学式１で定義した通りであり、
ＱはＢ（ＯＨ）2、ＢＣｌ2、ＢＢｒ、
【００４６】
【化６】
2008525523.tif 000007
2008525523.tif 000008
【００４７】
ＳｎＢｕ3、ＳｎＭｅ3、またはＺｎＣｌである。
前記反応式４において、一般式（VI）のボロン酸またはスタニル化合物は市販されている化合物を使用するか、水酸化化合物から公知の方法にて製造される。
前記反応式４において、金属触媒としてはパラジウム、ニッケル、および白金着体を使用することができるが、パラジウム触媒を使用することが好ましい。パラジウム触媒としてはＰｄ（ＰＰｈ3）4、Ｐｄ−Ｃ、ＰｄＣｌ2（ＰＰｈ3）2、Ｐｄ2（ｄｂａ）3、ＰｄＣｌ2（ｄｐｐｆ）、［ＰｄＣｌ（アリル）］2、Ｐｄ（ＯＡｃ）2またはＰｄＣｌ2を使用することができる。
【００４８】
前記反応式４において、反応を促進して収率を高めるために、ＰＰｈ3、Ｐ−（０−トリル）3、またはＰＢｕ3などのホスフィン、塩化リチウム、臭化リチウムまたはヨード化リチウムなどの塩を付加物として使用することができる。
前記反応式４において、スズキ型反応を行う場合は塩基を１〜３当量使用する。使用することのできる塩基としてはトリエチルアミンおよびイソプロピルエチルアミンのような第３級アミン有機塩基、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、炭酸セシウム、水酸化バリウムなどのような無機塩基がある。無機塩基が有機溶媒に溶解される場合、０．５〜４Ｍの水溶液を加える。
【００４９】
前記反応式４の反応で、溶媒としてはテトラヒドロフラン、ジオキサン、１，２−ジメトキシエタンのようなエーテル溶媒、ベンゼン、トルエン、キシレンのような芳香族溶媒、メタノール、エタノールのようなアルコール溶媒、ＤＭＦ、アセトニトリル、または酢酸エチルを単独で使用したり、混合して使用することができる。反応は常温から溶媒の沸点までの範囲で行う。
前記反応式４において、Ｒ1がエチルを有する化合物である場合は、Ｒ1がビニルである化合物から通常の還元方法により製造することができる。
また、本発明は下記反応式５に表される化学式１のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体のまた別の製造方法を提供する。
反応式５
【００５０】
【化７】
2008525523.tif 000009
【００５１】
前記式において、Ｒ1、Ｒ2は化１で定義した通りである。
前記反応式５において、カルボン酸化合物（III）は縮合剤の存在下でグアニジンと反応してベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン化合物（I）を製造する。
前記反応式５において、前記カルボン酸化合物（III）が適切な反応溶媒で縮合剤の存在下で当量または過量のグアニジンと反応して化合物（I）を製造する。反応温度は常温から溶媒の沸点までである。
【００５２】
この時、使用される縮合剤としては、Ｎ，Ｎ−カルボニルジイミダゾール、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＰＣ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＷＳＣ）、またはジフェニルホスホニルアジド（ＤＰＰＡ）である。
前記反応において、溶媒として、テトラヒドロフランまたは１，４−ジオキサンなどのエーテル溶媒、ベンゼンまたはトルエンなどの芳香族炭化水素溶媒、ジクロロメタンまたはクロロホルムなどのハロゲン化炭化水素溶媒、またはＤＭＦが単独で使用されたり、または混合して使用することができる。
前記反応式５の出発物質であるカルボン酸化合物（III）は塩基存在下で、前記反応式２〜４で製造したエステルを通常の方法により加水分解して製造することができる。
前記反応式１の出発物質であるカルボン酸誘導体（II）のうち、メチルまたはエチルエステル化合物以外の化合物は反応式５のカルボン酸化合物（III）から通常の方法により製造することができる。
【００５３】
また、本発明は前記ベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体または薬学的に許容可能なその塩を有効成分として含有する虚血性心疾患および虚血性脳疾患の予防および治療、および再かん流療法に対する心臓保護に有用な薬学的組成物を提供する。
本発明の化合物は臨床投与時に経口または非経口の剤形にて投与することができ、通常、充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、界面活性剤などの希釈剤または賦形剤を混ぜて剤形化される。本発明の化合物を経口投与するための固形製剤は錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、トローチなどが含まれ、このような固形製剤は少なくとも一つの賦形剤、例えば、澱粉、炭酸カルシウム、スクロース、ラクトースまたはゼラチンを混ぜて調剤される。一方、賦形剤以外にステアリン酸マグネシウム、タルクのような潤滑剤も加えられる。経口投与のための液状製剤としては懸濁剤、内用液、乳剤、シロップ剤などが含まれるが、単純希釈剤である水、流動パラフィン以外に、様々な賦形剤、例えば、湿潤剤、甘味剤、芳香剤、保存剤などが本発明の経口投与用の液状製剤に含まれる。また、非経口投与用の製剤には滅菌された水溶液、非水性溶剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤、坐剤などが使用される。非水性溶剤および懸濁剤としては注入可能なプリピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブオイルのような植物性油、オレイン酸エチルのようなエステルを使用することができる。坐剤の基剤としてはウイテプゾール、マクロゴール、ツイーン６１、カカオ脂、ラウリン脂、グリセロール、ゼラチンが含まれる。
【００５４】
また、ヒトに対する本発明の化合物の投与量は患者の年齢、体重、性別、投与形態、健康状態および疾患程度により異なり得、体重が７０ｋｇである成人患者を基準にする時、一般的に０．１〜１，０００ｍｇ／日の量を投与し、好ましくは１〜５００ｍｇ／日の量を投与し、更に、医師または薬剤師の判断に応じて１日１回〜数回にわたり分割投与することもできる。
本発明のベンゾチオフェン−２‐カルボニルグアニジン誘導体および薬学的に許容可能なその塩は、ヒトＮＨＥ−１を発現させた細胞において、ＮＨＥ−１に対して強力な抑制効果を示し、ランゲンドルフの摘出したラットの虚血心モデルでも、心臓機能（左心室拡張期血圧、ＬＶＤＰ）の回復を増進させ、虚血／再かん流に対して優れた心臓保護作用を示し、麻酔したラットを利用した虚血心筋梗塞モデルにおいて心筋梗塞のサイズを有意に減少させ、優れた抗虚血作用を示す。
【００５５】
更に、本発明のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体および薬学的に許容可能なその塩は、グルタミン酸によって誘発されたラット胎仔の脳から摘出した大脳皮質神経細胞の損傷および壊死に対して保護作用を示し、虚血脳モデルにおいて、脳梗塞のサイズを減少させ、優れた抗虚血効果を示す。
従って、本発明の化合物はＮＨＥ−１に対する強力な抑制効果、および神経細胞損傷に対する保護作用、およびｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏモデルにおいて虚血／再かん流に対して優れた心臓保護作用および脳保護作用を示すため、心筋梗塞、不整脈、狭心症のような虚血性心疾患、脳卒中のような虚血性脳疾患の予防および治療に有用に使用され、冠動脈バイパス術、経皮経管冠動脈形成術のような冠動脈の再かん流療法に対する心臓保護剤、および／または心筋梗塞用の血栓溶解剤として使用することができる。
【実施例】
【００５６】
以下、本発明の理解を深めるために好ましい実施例および実験例を提示するが、下記実施例および実験例は本発明をより容易に理解するために提供するのみであり、実施例により本発明の内容が限定されるわけではない。
本発明では赤外線分光法、核磁気共鳴分光法、質量分析、液体クロマトグラフィ法、Ｘ線結晶学、旋光度分光法、および典型元素の分析計算値と実測値の比較による元素分析を使用して分子構造を確認した。
反応式１〜５の化合物（II）は下記製造例を通して製造した。
【００５７】
製造例１
４−ブロモベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００５８】
（段階１）２，６−ジブロモベンゾアルデヒドの製造
窒素雰囲気下で、無水ＴＨＦ（７０ｍｌ）にジイソプロピルアミン（８．３ｍｌ、５９．３４ｍｍｏｌ）を加えた後、０℃でｎ−ＢｕＬｉ（１．６Ｍ、５９．３４ｍｍｏｌ）を注射器で一滴ずつゆっくりと加えた。反応混合液を０℃で３０分間攪拌した後、−７８℃まで冷却し、滴下漏斗を使用してＴＨＦ（３５ｍｌ）に１，３−ジブロモベンゼン（７ｇ、２９．６７ｍｍｏｌ）を徐々に滴下した。−７８℃で３０分間攪拌した後、ＤＭＦ（４．６ｍｌ、５９．３４ｍｍｏｌ）を徐々に加え、継続的に１時間攪拌させた。反応終了後、希薄Ｈ2ＳＯ4水溶液を加え、酢酸エチルで２度抽出した後、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、無水ＭｇＳＯ4で乾燥させた後、濾過した。濾液を減圧下で濃縮させ、残留物をシリカゲルコラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝４０：１）で精製し、白色固体の標記化合物（６．６４ｇ、２５．１６ｍｍｏｌ、８５％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ １０．２６（ｓ、１Ｈ）、７．６３（ｄ、２Ｈ）、７．２２（ｔ、１Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２６３（Ｍ+）
【００５９】
（段階２）４−ブロモベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
前記段階１で得られた化合物（６．６４ｇ、２５．１６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（９０ｍｌ）に溶かした後、炭化カリウム（７．６５ｇ、５５．３５ｍｍｏｌ）およびメチルチオグリコレート（２．７ｍｌ、３０．１９ｍｍｏｌ）を逐次加えた後、６時間攪拌しながら加熱、還流させた。反応終了後、室温まで冷却し、酢酸エチルで抽出した後、水と塩水で洗浄した。反応溶液をＭｇＳＯ4で乾燥させた後、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルコラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝４０：１）で精製し、白色固体の標記化合物（５．７２ｇ、２１．０９ｍｍｏｌ、８４％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．１９（ｓ、１Ｈ）、７．７９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．２Ｈｚ）、７．５８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．３０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６，８．２Ｈｚ）、３．９６（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２７２（Ｍ+）
【００６０】
製造例２
４−（２−クロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
前記製造例１で得られた４−ブロモベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（１５０ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ3）4（１０２ｍｇ、８ｍｍｏｌ％）および２−クロロフェニルボロン酸（１３０ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）をトルエン（３ｍｌ）に溶解した後、２Ｍ Ｋ2ＣＯ3（０．５５ｍｌ、１．１ｍｍｏｌ）を加え、１６時間攪拌しながら加熱、還流させた。反応終了後、酢酸エチルで２度抽出し、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させた後、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルコラムクロマトグラフィ（ヘキサン→ヘキサン：酢酸エチル＝６０：１）で精製し、白色固体の標記化合物（１４４ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ、８６％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ７．８７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．２Ｈｚ）、７．７６（ｓ、１Ｈ）、７．５７〜７．３２（ｍ、６Ｈ）、３．９０（ｓ、３Ｈ）
【００６１】
製造例３
４−（３−クロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００６２】
３−クロロフェニルボロン酸（１７３ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を使用して製造例２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１６２ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ、７３％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．０９（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．５５〜７．３５（ｍ、６Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３０２（Ｍ+）
【００６３】
製造例４
４−（４−クロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００６４】
４−クロロフェニルボロン酸（２６０ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１７８ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ、８４％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．０９（ｓ、１Ｈ）、７．８６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．２Ｈｚ）、７．５６〜７．３４（ｍ、６Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３０２（Ｍ+）
【００６５】
製造例５
４−（２−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００６６】
２−フルオロフェニルボロン酸（２３２ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（２３３ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ、７４％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ７．９３（ｍ、２Ｈ）、７．８８〜７．１９（ｍ、６Ｈ）、３．９１（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２８６（Ｍ+）
【００６７】
製造例６
４−（３−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００６８】
３−フルオロフェニルボロン酸（１９１ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）を使用して製造例２と同様の方法で反応させ、黄白色固体の標記化合物（１３５ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ、７０％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．１２（ｓ、１Ｈ）、７．８５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．５６〜７．０８（ｍ、６Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２８６（Ｍ+）
【００６９】
製造例７
４−（４−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００７０】
４−フルオロフェニルボロン酸（１５５ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を使用して製造例２と同様の方法で反応させ、黄白色固体の標記化合物（１７８ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ、８４％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．０９（ｓ、１Ｈ）、７．８３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．５５〜７．１５（ｍ、６Ｈ）、３．９２（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２８６（Ｍ+）
【００７１】
製造例８
４−（２−メチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００７２】
２−メチルフェニルボロン酸（２２６ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（２８０ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ、９０％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ７．８７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．７０（ｓ、１Ｈ）、７．５１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２，８．２Ｈｚ）、７．３６〜７．２１（ｍ、５Ｈ）、３．８９（ｓ、３Ｈ）、２．１０（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２８２（Ｍ+）
【００７３】
製造例９
４−（３−メチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００７４】
３−メチルフェニルボロン酸（２２６ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（２９０ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ、９３％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．１５（ｓ、１Ｈ）、７．８３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．５１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５，８．１Ｈｚ）、７．３９〜７．２５（ｍ、５Ｈ）、３．９２（ｓ、３Ｈ）、２．４５（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２８２（Ｍ+）
【００７５】
製造例１０
４−（４−メチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００７６】
４−メチルフェニルボロン酸（１５０ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を使用して製造例２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（２０５ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ、９８％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．１６（ｓ、１Ｈ）、７．８３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．５４〜７．２５（ｍ、６Ｈ）、３．９２（ｓ、３Ｈ）、２．４５（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２８２（Ｍ+）
【００７７】
製造例１１
４−（２−メトキシフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００７８】
２−メトキシフェニルボロン酸（２５２ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（２９９ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ、９１％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ７．８６〜７．８２（ｍ、２Ｈ）、７．５４〜７．０３（ｍ、６Ｈ）、３．９０（ｓ、３Ｈ）、３．７５（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２９８（Ｍ+）
【００７９】
製造例１２
４−（３−メトキシフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００８０】
３−メトキシフェニルボロン酸（１３５ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を使用して製造例２と同様の方法で反応させ、黄白色固体の標記化合物（１３０ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、５９％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．１６（ｓ、１Ｈ）、７．８７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．５５〜７．３７（ｍ、３Ｈ）、７．１５〜６．９６（ｍ、３Ｈ）、３．９２（ｓ、３Ｈ）、３．８７（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２９８（Ｍ+）
【００８１】
製造例１３
４−（４−メトキシフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００８２】
４−メトキシフェニルボロン酸（２５２ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（３２０ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ、９７％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．１５（ｓ、１Ｈ）、７．７９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．５３〜７．４４（ｍ、３Ｈ）、７．３５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、７．０７〜７．００（ｍ、２Ｈ）、３．９２（ｓ、３Ｈ）、３．８９（ｓ、３Ｈ）
【００８３】
製造例１４
４−（２−トリフルオロメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００８４】
２−トリフルオロメチルフェニルボロン酸（３１５ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１７０ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ、４６％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ７．９１〜７．８０（ｍ、２Ｈ）、７．６３〜７．４５（ｍ、４Ｈ）、７．３８〜７．２８（ｍ、２Ｈ）、３．８９（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３３６（Ｍ+）
【００８５】
製造例１５
４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００８６】
３−トリフルオロメチルフェニルボロン酸（３１５ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（３６０ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ、９７％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．０５（ｓ、１Ｈ）、７．９１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．７９〜７．５０（ｍ、５Ｈ）、７．３８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３３６（Ｍ+）
【００８７】
製造例１６
４−（４−トリフルオロメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００８８】
４−トリフルオロメチルフェニルボロン酸（２１０ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を使用して製造例２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（２３７ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ、９５％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．０８（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．８０〜７．６５（ｍ、４Ｈ）、７．５５（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．４，８．２Ｈｚ）、７．３８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３３６（Ｍ+）
【００８９】
製造例１７
４−フェニルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００９０】
フェニルボロン酸（１３５ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を使用して製造例２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１９５ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ、９８％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．１５（ｓ、１Ｈ）、７．８５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．５６〜７．３７（ｍ、７Ｈ）、３．９２（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２６８（Ｍ+）
【００９１】
製造例１８
４−（１−ナフタレニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００９２】
１−ナフタレンボロン酸（１９０ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を使用して製造例２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１７２ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ、７３％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ７．９７〜７．９２（ｍ、３Ｈ）、７．６２〜７．２６（ｍ、８Ｈ）、３．８４（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３１８（Ｍ+）
【００９３】
製造例１９
４−（３，５−ジクロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００９４】
前記製造例1で得られた４−ブロモベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２００ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ3）4（６８ｍｇ、８ｍｍｏｌ％）および３，５−ジクロロフェニルボロン酸（２１２ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を１，２−ジメトキシエタン（４．２ｍｌ）に溶解した後、２Ｍ Ｂａ（ＯＨ）2・Ｈ2Ｏ（２１０ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を加え、１６時間攪拌しながら加熱、還流させた。反応終了後、酢酸エチルで２度抽出し、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させた後、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルコラムクロマトグラフィ（ヘキサン→ヘキサン：酢酸エチル＝６０：１）で精製し、白色固体の標記化合物（１３７ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ、５５％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．０５（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．５６〜７．３２（ｍ、５Ｈ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３３６（Ｍ+）
【００９５】
製造例２０
４−（２，５−ジクロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００９６】
２，５−ジクロロフェニルボロン酸（３１７ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例１９と同様の方法で反応させ、黄白色固体の標記化合物（３３８ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ、９１％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ７．９２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．２Ｈｚ）、７．７４（ｓ、１Ｈ）、７．５７〜７．２６（ｍ、５Ｈ）、３．９２（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３３６（Ｍ+）
【００９７】
製造例２１
４−（２，３−ジクロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【００９８】
２，３−ジクロロフェニルボロン酸（３１７ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例１９と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（２８３ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ、７６％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ７．９２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．２Ｈｚ）、７．７４（ｓ、１Ｈ）、７．５７〜７．２６（ｍ、５Ｈ）、３．９２（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３３６（Ｍ+）
【００９９】
製造例２２
４−（２−メトキシ−５−クロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１００】
２−メトキシ−５−クロロフェニルボロン酸（３０９ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例１９と同様の方法で反応させ、黄白色固体の標記化合物（３２０ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ、８７％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ７．８９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．８２（ｓ、１Ｈ）、７．５４（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．７，８．１Ｈｚ）、７．３６〜７．３０（ｍ、３Ｈ）、６．９９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．７Ｈｚ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、３．７８（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３３２（Ｍ+）
【０１０１】
製造例２３
３−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１０２】
３−クロロ−４−フルオロフェニルボロン酸（２８９ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例１９と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（３３０ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ、９３％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．０５（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．５９〜７．２６（ｍ、５Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３２０（Ｍ+）
【０１０３】
製造例２４
４−（３，５−ジフルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１０４】
３，５−ジフルオロフェニルボロン酸（２６２ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例１９と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（２６２ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ、８３％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．１０（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．５３（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．４，８．０Ｈｚ）、７．３５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）７．０９〜７．０４（ｍ、３Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３０４（Ｍ+）
【０１０５】
製造例２５
４−（２，５−ジフルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１０６】
２，５−ジフルオロフェニルボロン酸（２６２ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例１９と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（２６３ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ、７８％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ７．９３〜７．８９（ｍ、２Ｈ）、７．５４（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６，８．０Ｈｚ）、７．３８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、７．２５〜７．１０（ｍ、３Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３０４（Ｍ+）
【０１０７】
製造例２６
４−（２，３−ジフルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１０８】
２，３−ジフルオロフェニルボロン酸（２６２ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例１９と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（２５３ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ、７５％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ７．９４〜７．９０（ｍ、２Ｈ）、７．５４（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．４，８．０Ｈｚ）、７．３９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、７．３０〜７．１８（ｍ、３Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３０４（Ｍ+）
【０１０９】
製造例２７
４−（３，４−ジフルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１１０】
３，４−ジフルオロフェニルボロン酸（２６２ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例１９と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（３２５ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ、９７％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．０８（ｓ、１Ｈ）、７．８６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．５６〜７．２３（ｍ、５Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３０４（Ｍ+）
【０１１１】
製造例２８
４−（２−メチル−５−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１１２】
２−メチル−５−フルオロフェニルボロン酸（２５６ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例１９と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（３１０ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ、９３％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ７．８７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．６８（ｓ、１Ｈ）、７．５１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２，８．２Ｈｚ）、７．３１〜７．０４（ｍ、４Ｈ）、３．９０（ｓ、３Ｈ）、２．０４（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３００（Ｍ+）
【０１１３】
製造例２９
４−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１１４】
５−フルオロ−２−メチルフェニルボロン酸（２５６ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例１９と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（３２１ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ、９７％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ７．９３〜７．８５（ｍ、２Ｈ）、７．５２（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．４，７．４Ｈｚ）、７．３９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、７．２６〜７．０５（ｍ、３Ｈ）、３．９２（ｓ、３Ｈ）、２．３９（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３００（Ｍ+）
【０１１５】
製造例３０
４−（３，５−ジメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１１６】
３，５−ジメチルフェニルボロン酸（２４９ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例１９と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（２８０ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ、８５％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．１９（ｓ、１Ｈ）、７．８６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．５３（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６，８．０Ｈｚ）、７．３９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、７．２６〜７．０５（ｍ、３Ｈ）、３．９２（ｓ、３Ｈ）、２．３９（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３００（Ｍ+）
【０１１７】
製造例３１
４−（２，５−ジメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１１８】
２，５−ジメチルフェニルボロン酸（２４９ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を使用して製造例１９と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（３１６ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ、９６％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ７．８４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．７１（ｓ、１Ｈ）、７．５０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．４，８．０Ｈｚ）、７．２６〜７．０５（ｍ、４Ｈ）、３．８９（ｓ、３Ｈ）、２．３６（ｓ、３Ｈ）、２．０４（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２９６（Ｍ+）
【０１１９】
製造例３２
４−クロロベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１２０】
２−クロロ−６−ニトロベンズアルデヒド（９６０ｍｇ、５．１７ｍｍｏｌ）を使用して製造例１の段階２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１．０ｇ、４．３９ｍｍｏｌ、８５％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．７８〜７．７３（ｍ、１Ｈ）、７．４３〜７．３３（ｍ、２Ｈ）、３．９６（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２２６（Ｍ+）
【０１２１】
製造例３３
４−フルオロベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１２２】
２，６−ジフルオロベンズアルデヒド（５７０ｍｇ、４．０１ｍｍｏｌ）を使用して製造例１の段階２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（５５３ｍｇ、２．６３ｍｍｏｌ、６６％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．２６（ｓ、１Ｈ）、７．７３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．６Ｈｚ）、７．５７〜７．４６（ｍ、１Ｈ）、７．２０〜７．１１（ｍ、１Ｈ）、４．０６（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２１０（Ｍ+）
【０１２３】
製造例３４
４−ヨードベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１２４】
（段階１）２−フルオロ−６−ヨードベンズアルデヒドの製造
３−ヨードフルオロベンゼン（２．０ｇ、９．０１ｍｍｏｌ）を使用して製造例１の段階１と同様の方法で反応させ、黄色液体の標記化合物（２．０ｇ、７．９９ｍｍｏｌ、８９％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ １０．１５（ｓ、１Ｈ）、７．８３〜７．７９（ｍ、１Ｈ）、７．２８〜７．１２（ｍ、２Ｈ）
【０１２５】
（段階２）４−ヨードベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステル
前記段階１で製造した２−フルオロ−６−ヨードベンズアルデヒド（１．０ｇ、３．９９ｍｍｏｌ）を使用して製造例１の段階２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１．１５ｇ、３．６１ｍｍｏｌ、９０％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．１１（ｓ、１Ｈ）、７．８４〜７．８０（ｍ、２Ｈ）、７．１４（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．４，７．４Ｈｚ）、３．９６（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３１８（Ｍ+）
【０１２６】
製造例３５
４−メチルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１２７】
前記製造例1で得られた４−ブロモベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２００ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ3）4（８５ｍｇ、１０ｍｍｏｌ％）および炭酸カリウム（３０６ｍｇ、２．２１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３ｍｌ）に溶解した後、トリメチルボロキシン（０．１２ｍｌ、０．８９ｍｍｏｌ）を加え、１６時間攪拌しながら加熱、還流させ、酢酸エチルで２度抽出し、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させた後、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルコラムクロマトグラフィ（ヘキサン→ヘキサン：酢酸エチル＝６０：１）で精製し、黄白色固体の標記化合物（１４０ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ、９２％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．１５（ｓ、１Ｈ）、７．６９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．２Ｈｚ）、７．３５（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２，８．２Ｈｚ）、７．１７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、２．６３（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２０６（Ｍ+）
【０１２８】
製造例３６
４−ビニルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１２９】
前記製造例1で得られた４−ブロモベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（５００ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＰＰｈ3）4（１７０ｍｇ、８ｍｍｏｌ％）をトルエン（８ｍｌ）に溶解した後、トリブチル（ビニル）スズ（０．８１ｍｌ、２．７６ｍｍｏｌ）を加え、１６時間攪拌しながら加熱、還流させ、酢酸エチルで２度抽出し、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させた後、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルコラムクロマトグラフィ（ヘキサン→ヘキサン：酢酸エチル＝６０：１）で精製し、黄白色固体の標記化合物（２４７ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ、６１％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．２９（ｓ、１Ｈ）、７．７７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．５７〜７．４０（ｍ、２Ｈ）、７．２９〜７．１４（ｍ、１Ｈ）、５．８４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１７．６Ｈｚ）、５．４６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１１．０Ｈｚ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２１８（Ｍ+）
【０１３０】
製造例３７
４−エチルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１３１】
前記製造例３６で得られた４−ビニルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（１５０ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）をメタノール（７ｍｌ）に溶解した後、トリブチル（ビニル）スズ（０．８１ｍｌ、２．７６ｍｍｏｌ）を加え、0.26ＭＰａ（４０ｐｓｉ）の水素ガス存在下の室温で１６時間５０％Ｒａｎｅｙ Ｎｉ（７５ｍｇ）で水酸化させた。反応終了後、濾過してＮｉ成分を除去し、濾液を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルコラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝２０：１）で精製し、黄白色オイルの標記化合物（１１０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ、７２％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．１９（ｓ、１Ｈ）、７．６９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．３９（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．０，８．２Ｈｚ）、７．２１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．８Ｈｚ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、２．９９（ｑ、２Ｈ）、１．３５（ｔ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２２０（Ｍ+）
【０１３２】
製造例３８
４−イソプロピルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１３３】
高温、真空下で乾燥されたＺｎＣｌ2（４２８ｍｇ、３．１４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍｌ）に溶かした後、２Ｍ塩化イソプロピルマグネシウム溶液（１．６ｍｌ、３．２ｍｍｏｌ）ＴＨＦ溶液を一滴ずつ徐々に加え、５０℃で３時間攪拌させて亜鉛スラリーを製造する。
【０１３４】
前記製造例３４で得られた４−ヨードベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（５００ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（３６ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）、およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ2・ＣＨ2Ｃｌ2（１２８ｍｇ、１０ｍｍｏｌ%）をＴＨＦ（５ｍｌ）に溶かした後、亜鉛スラリーをゆっくり加え、常温で１６時間攪拌した。酢酸エチルで２度抽出し、１Ｍ塩酸水溶液、重炭酸ナトリウム飽和水溶液および食塩で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させた後、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルコラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝６０：１）で精製し、白黄色オイルの標記化合物（２５４ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ、６９％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．２４（ｓ、１Ｈ）、７．７１〜７．２６（ｍ、３Ｈ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、３．５０（ｍ、１Ｈ）、１．３８（ｄ、６Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２３４（Ｍ+）
【０１３５】
製造例３９
４−ニトロベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１３６】
２，６−ジニトロベンズアルデヒド（５００ｍｇ、２．５５ｍｍｏｌ）を使用して製造例１の段階２と同様の方法で反応させ、黄色固体の標記化合物（３２３ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ、５３％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．８８（ｓ、１Ｈ）、８．３９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、８．１８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．２Ｈｚ）、７．６１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０，８．０Ｈｚ）、４．００（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２３７（Ｍ+）
【０１３７】
製造例４０
４−アミノベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１３８】
前記製造例３９で得られた４−ニトロベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（１８５ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）を使用して製造例３７と同様の方法で反応させ、黄色固体の標記化合物（１５９ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ、９８％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．４４（ｓ、１Ｈ）、７．２２〜７．０６（ｍ、２Ｈ）、６．５３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、６．０２（ｓ、２Ｈ）、３．８５（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２０７（Ｍ+）
【０１３９】
製造例４１
４−メトキシベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１４０】
（段階１）２−フルオロ−６−メトキシベンズアルデヒドの製造
窒素雰囲気下で３−フルオロアニソール溶液（２．２ｇ、１７．４４ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（４０ｍｌ）に溶かし、−７８℃まで冷却した後、ｎ−ＢｕＬｉ（１．６Ｍ、１９．１８ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。反応混合液を−７８℃で１時間攪拌し、ＤＭＦ（１．６ｍｌ、２０．９３ｍｍｏｌ）を徐々に加えた後、１時間攪拌した。反応終了後、希釈Ｈ2ＳＯ4を加え、酢酸エチルで２度抽出した後、食塩で洗浄した。ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルコラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝６：１）で精製し、白色固体の標記化合物（１．４８ｇ、９．６ｍｍｏｌ、５５％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ １０．４３（ｓ、１Ｈ）、７．５４〜７．４３（ｍ、１Ｈ）、６．７９〜６．６８（ｍ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）
【０１４１】
（段階２）４−メトキシベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
前記段階１で製造した２−フルオロ−６−メトキシベンズアルデヒド（５００ｍｇ、３．２４ｍｍｏｌ）を使用して製造例１の段階２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（３４５ｍｇ、１．５５ｍｍｏｌ、４８％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．２３（ｓ、１Ｈ）、７．４４〜７．３４（ｍ、２Ｈ）、６．７７〜６．７３（ｍ、１Ｈ）、３．９６（ｓ、３Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２２２（Ｍ+）
【０１４２】
製造例４２
４−シアノベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１４３】
前記製造例１で得られた４−ブロモベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２．０ｇ、７．３８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（８ｍｌ）に溶かした後、マイクロ波合成器を使用して２００℃で２０分間ＣｕＣＮと反応させた。反応終了後、８Ｎ塩酸を利用して反応液を酸性にした後、酢酸エチルで３度抽出し、塩水で洗浄した。無水ＭｇＳＯ4で乾燥し、濾過した後、濾液を減圧下で濃縮させ、シリカゲルコラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝２０：１）で精製し、白色固体の標記化合物（１．２８ｇ、５．８９ｍｍｏｌ、８０％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．２７（ｓ、１Ｈ）、８．１０（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．０Ｈｚ）、７．７８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．５６（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６，８．０Ｈｚ）、３．９８（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２１７（Ｍ+）
【０１４４】
製造例４３
ベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１４５】
２−フルオロ−ベンズアルデヒド（５００ｍｇ、４．０３ｍｍｏｌ）を使用して製造例１の段階２と同様の方法で反応させ、黄色固体の標記化合物（５６７ｍｇ、２．９５ｍｍｏｌ、７３％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．０６（ｓ、１Ｈ）、７．９０〜７．８４（ｍ、２Ｈ）、７．５０〜７．３６（ｍ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝１９２（Ｍ+）
【０１４６】
製造例４４
４−ブロモ−５−メチルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１４７】
（段階１）２−ブロモ−３−メチル−６−フルオロベンズアルデヒドの製造
【０１４８】
２−ブロモ−４−フルオロトルエン（１．０ｇ、５．２９ｍｍｏｌ）を使用して製造例１の段階１と同様の方法で反応させ、黄白色固体の標記化合物（１．１ｇ、５．０７ｍｍｏｌ、９６％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ １０．３９（ｓ、１Ｈ）、７．４５〜７．３８（ｍ、１Ｈ）、７．０９〜６．９９（ｍ、１Ｈ）、２．４３（ｓ、３Ｈ）
【０１４９】
（段階２）４−ブロモ−５−メチルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１５０】
前記段階１で製造した２−ブロモ−３−メチル−６−フルオロベンズアルデヒド（１．１ｇ、５．０７ｍｍｏｌ）を使用して製造例１の段階２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１．０ｇ、３．５１ｍｍｏｌ、６９％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．１９（ｓ、１Ｈ）、７．６７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．３２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．２Ｈｚ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、２．５３（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２８４（Ｍ+）
【０１５１】
製造例４５
４−クロロ−５−メチルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１５２】
（段階１）２−クロロ−３−メチル−６−フルオロベンズアルデヒドの製造
２−クロロ−４−フルオロトルエン（１．０ｇ、６．９２ｍｍｏｌ）を使用して製造例１の段階２と同様の方法で反応させ、黄白色固体の標記化合物（１．１３ｇ、６．５５ｍｍｏｌ、９５％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ １０．４９（ｓ、１Ｈ）、７．４６〜７．３９（ｍ、１Ｈ）、７．０５〜６．９６（ｍ、１Ｈ）、２．３９（ｓ、３Ｈ）
【０１５３】
（段階２）４−クロロ−５−メチルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
前記段階１で製造した２−クロロ−３−メチル−６−フルオロベンズアルデヒド（１．１２ｇ、６．４９ｍｍｏｌ）を使用して製造例１の段階２と同様の方法で反応させ、黄白色固体の標記化合物（１．０３ｇ、４．２８ｍｍｏｌ、６６％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．２０（ｓ、１Ｈ）、７．６４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．２Ｈｚ）、７．３２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、２．５０（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２４０（Ｍ+）
【０１５４】
製造例４６
４，５−ジメチルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１５５】
前記製造例４４で得られた４−ブロモ−５−メチルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（３００ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ3）4（４９ｍｇ、４ｍｍｏｌ％）、およびメチルボロン酸（９４ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ）をトルエン（５ｍｌ）に溶かした後、２Ｍ炭酸カリウム（１ｍｌ、２．１ｍｍｏｌ）を加え、１６時間攪拌しながら加熱、還流させ、酢酸エチルで２度抽出し、塩水で洗浄した。ＭｇＳＯ4で乾燥させた後、濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、シリカゲルコラムクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル＝４０：１）で精製し、白色固体の標記化合物（１９５ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ、８４％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．１５（ｓ、１Ｈ）、７．５８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．２Ｈｚ）、７．２５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．２Ｈｚ）、３．９４（ｓ、３Ｈ）、２．５２（ｓ、３Ｈ）、２．３８（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２２０（Ｍ+）
【０１５６】
製造例４７
４−シアノ−５−メチルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１５７】
前記製造例４４で製造した２−ブロモ−５−メチルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２５５ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）を使用して製造例４２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１０７ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ、５２％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．２３（ｓ、１Ｈ）、７．９５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．３９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、３．９８（ｓ、３Ｈ）、２．６９（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２３１（Ｍ+）
【０１５８】
製造例４８
４−ブロモ−６−メチルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１５９】
（段階１）２，６−ジブロモ−４−メチルベンズアルデヒドの製造
３，５−ジブロモトルエン（１．０ｇ、４．０ｍｍｏｌ）を使用して製造例１の段階１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（６６２ｍｇ、２．３８ｍｍｏｌ、６０％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ １０．２４（ｓ、１Ｈ）、７．４７（ｓ、２Ｈ）、２．３７（ｓ、３Ｈ）
【０１６０】
（段階２）４−ブロモ−６−メチルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
前記段階１で製造した２，６−ジブロモ−４−メチルベンズアルデヒド（６６０ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ）を使用して製造例１の段階２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（５５７ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ、８２％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．１２（ｓ、１Ｈ）、７．５７（ｓ、１Ｈ）、７．４２（ｓ、１Ｈ）、３．９５（ｓ、３Ｈ）、２．４６（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２８４（Ｍ+）
【０１６１】
製造例４９
４，６−ジメチルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１６２】
前記製造例４８で製造した４−ブロモ−６−メチルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２２０ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）を使用して製造例４６と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１５８ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ、９３％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．１２（ｓ、１Ｈ）、７．５０（ｓ、１Ｈ）、７．０４（ｓ、１Ｈ）、３．９６（ｓ、３Ｈ）、２．６１（ｓ、３Ｈ）、２．４６（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２２０（Ｍ+）
【０１６３】
製造例５０
４−シアノ−６−メチルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの製造
【０１６４】
前記製造例４８で製造した４−ブロモ−６−メチルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２６０ｍｇ、０．９１ｍｍｏｌ）を使用して製造例４２と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１３５ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ、６４％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ ８．２２（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．５９（ｓ、１Ｈ）、３．９７（ｓ、３Ｈ）、２．５３（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２３１（Ｍ+）
【０１６５】
〔実施例１〕
（４−ブロモベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩
【０１６６】
前記製造例１で製造した化合物（８８ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３ｍｌ）に溶かした後、２Ｍグアニジンメタノール溶液（１ｍｌ、２．０ｍｍｏｌ）を加え、常温で３時間反応させた。水を加えて反応を終了させた後、酢酸エチルで２度抽出し、塩水で洗浄した。ＭｇＳＯ4で乾燥させ、濾過した後、濾液を減圧下で濃縮し、残留物をアセトンに溶かした。メタンスルホン酸を２〜３滴加え、固体の標記化合物を析出した。生成された固体を濾過した後、エーテルで洗浄し、黄色固体の標記化合物（７３ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ、５７％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ １１．７０（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．４０（ｓ、１Ｈ）、８．３１（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．１６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．７８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．５１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８，７．８Ｈｚ）、２．３７（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２９９（Ｍ+）
【０１６７】
〔実施例２〕
［４−（２−クロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０１６８】
前記製造例２で製造した化合物（２００ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１２５ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ、４５％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ3ＯＤ）δ ７．８６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．６９（ｓ、１Ｈ）、７．４８〜７．１９（ｍ、６Ｈ）、２．４９（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３２９（Ｍ+）
〔実施例３〕
【０１６９】
［４−（３−クロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０１７０】
前記製造例３で製造した化合物（９５ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（８５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、６４％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ3ＯＤ）δ ８．３７（ｓ、１Ｈ）、８．１９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．８３〜７．６２（ｍ、６Ｈ）、２．８４（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３２９（Ｍ+）
〔実施例４〕
【０１７１】
［４−（４−クロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０１７２】
前記製造例４で製造した化合物（２００ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１１０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ、３９％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ １１．６１（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．３１（ｓ、１Ｈ）、８．２５（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．１６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．６９〜７．４６（ｍ、６Ｈ）、２．３３（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３２９（Ｍ+）
〔実施例５〕
【０１７３】
［４−（２−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０１７４】
前記製造例５で製造した化合物（１８５ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１４４ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ、５４％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ １１．５１（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．２５（ｂｒ、４Ｈ）、８．１９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、８．０９（ｓ、１Ｈ）、７．７１〜７．３９（ｍ、６Ｈ）、２．３１（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３１３（Ｍ+）
【０１７５】
〔実施例６〕
［４−（３−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０１７６】
前記製造例６で製造した化合物（７６ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（６３ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、５８％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ3ＯＤ）δ８．２８（ｓ、１Ｈ）、８．０５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．６９〜７．２６（ｍ、６Ｈ）、２．７１（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３１３（Ｍ+）
【０１７７】
〔実施例７〕
［４−（４−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０１７８】
前記製造例７で製造した化合物（１１８ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１１５ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ、６８％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．５６（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．３５（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．３４（ｓ、１Ｈ）、８．１５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．７０〜７．４０（ｍ、６Ｈ）、２．３５（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３１３（Ｍ+）
【０１７９】
〔実施例８〕
［４−（２−メチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０１８０】
前記製造例８で製造した化合物（１７８ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１７０ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ、６７％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．４２（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．２０（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．１４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．６５（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８，７．８Ｈｚ）、７．４３〜７．２７（ｍ、５Ｈ）、２．３０（ｓ、３Ｈ）、２．０８（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３０９（Ｍ+）
【０１８１】
〔実施例９〕
［４−（３−メチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０１８２】
前記製造例９で製造した化合物（１２７ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（９３ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、５１％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．４９（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．３３（ｓ、１Ｈ）、８．２３（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．１２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．６５（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２，７．８Ｈｚ）、７．４８〜７．３２（ｍ、５Ｈ）、２．４３（ｓ、３Ｈ）、２．２９（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３０９（Ｍ+）
【０１８３】
〔実施例１０〕
［４−（４−メチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０１８４】
前記製造例１０で製造した化合物（１５５ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１１０ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ、４９％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．４７（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．３２〜８．０９（ｍ、６Ｈ）、７．６４〜７．２０（ｍ、６Ｈ）、２．４２（ｓ、３Ｈ）、２．３１（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３０９（Ｍ+）
【０１８５】
〔実施例１１〕
［４−（２−メトキシフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０１８６】
前記製造例１１で製造した化合物（１７２ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１１０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ、４５％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．４７（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．２２（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．０９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．９９（ｓ、１Ｈ）、７．６２（ｍ、１Ｈ）、７．５０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８，８．４Ｈｚ）、７．３９〜７．３２（ｍ、２Ｈ）、７．２５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８Ｈｚ）、７．１３（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２，７．２Ｈｚ）、３．７３（ｓ、３Ｈ）、２．３０（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３２５（Ｍ+）
【０１８７】
〔実施例１２〕
［４−（３−メトキシフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０１８８】
前記製造例１２で製造した化合物（９５ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、黄白色固体の標記化合物（６５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、４９％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．３９（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．２４（ｓ、１Ｈ）、８．１２（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、７．９９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．５２（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５，８．１Ｈｚ）、７．３９〜７．３５（ｍ、２Ｈ）、７．０５〜６．９４（ｍ、３Ｈ）、３．７１（ｓ、３Ｈ）、２．１８（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３２５（Ｍ+）
【０１８９】
〔実施例１３〕
［４−（４−メトキシフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０１９０】
前記製造例１３で製造した化合物（１２０ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１３１ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ、７７％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．４８（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．３５（ｓ、１Ｈ）、８．２７（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．０９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．６４（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８，８．１Ｈｚ）、７．５６（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．４５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．１５（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、３．８６（ｓ、３Ｈ）、２．３１（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３２５（Ｍ+）
【０１９１】
〔実施例１４〕
［４−（２−トリフルオロメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０１９２】
前記製造例１４で製造した化合物（１２０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（７７ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ、４７％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．３４（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．２２（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．１９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、７．９７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８Ｈｚ）、７．８７〜７．６４（ｍ、４Ｈ）、７．５３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８Ｈｚ）、７．３６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．３Ｈｚ）、２．３０（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３６３（Ｍ+）
【０１９３】
〔実施例１５〕
［４−（３−トリフルオロメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０１９４】
前記製造例１５で製造した化合物（２００ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（２２８ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ、５６％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ3ＯＤ）δ８．２０（ｓ、１Ｈ）、８．０８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．９１〜７．８０（ｍ、４Ｈ）、７．６９（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５，７．５Ｈｚ）、７．５３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、２．６８（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３６３（Ｍ+）
【０１９５】
〔実施例１６〕
［４−（４−トリフルオロメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０１９６】
前記製造例１６で製造した化合物（１５０ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１３０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ、６３％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．５１（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．３２（ｓ、１Ｈ）、８．２８（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．２１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．９７〜７．８５（ｍ、４Ｈ）、７．７１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５，８．１Ｈｚ）、７．５７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、２．３１（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３６３（Ｍ+）
【０１９７】
〔実施例１７〕
（４−フェニルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０１９８】
前記製造例１７で製造した化合物（１５０ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１０５ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ、４８％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ3ＯＤ）δ８．２８（ｓ、１Ｈ）、７．９９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．６７〜７．４７（ｍ、７Ｈ）、２．６８（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２９６（Ｍ+）
【０１９９】
〔実施例１８〕
［４−（１−ナフタレニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２００】
前記製造例１８で製造した化合物（１２０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１００ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、６０％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．２８（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．５７（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．２５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、８．０９（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１，８．１Ｈｚ）、７．７９〜７．６７（ｍ、４Ｈ）、７．５８〜７．４３（ｍ、５Ｈ）、２．２９（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３４５（Ｍ+）
【０２０１】
〔実施例１９〕
［４−（３，５−ジクロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２０２】
前記製造例１９で製造した化合物（９４ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（８０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ、６２％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．５２（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．２４（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．２５（ｓ、１Ｈ）、８．２１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．７９〜７．５０（ｍ、５Ｈ）、２．３２（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３６３（Ｍ+）
【０２０３】
〔実施例２０〕
［４−（２，５−ジクロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンの製造
【０２０４】
前記製造例２０で製造した化合物（１６４ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させるが、メタンスルホン酸塩を作らず、残留物をシリカゲルクロマトグラフィ（ＭｅＯＨ：ＣＨ2Ｃｌ2＝１：１０）により生成し、白色固体の標記化合物（１３０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ、７３％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ８．０２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．９Ｈｚ）、７．６９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．３Ｈｚ）、７．６２〜７．５７（ｍ、２Ｈ）、７．５１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５，７．９Ｈｚ）、７．３７（ｓ、１Ｈ）、７．３２（ｄ、１Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３６３（Ｍ+）
【０２０５】
〔実施例２１〕
［４−（２，３−ジクロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２０６】
前記製造例２１で製造した化合物（２００ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１３０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ、４８％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．４２（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．３２（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．２２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８Ｈｚ）、７．８９（ｓ、１Ｈ）、７．８２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８Ｈｚ）、７．６６（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８，７．８Ｈｚ）、７．５９〜７．４３（ｍ、３Ｈ）、２．３１（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３６３（Ｍ+）
【０２０７】
〔実施例２２〕
［４−（２−メトキシ−５−クロロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２０８】
前記製造例２２で製造した化合物（２００ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１２５ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ、４６％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ3ＯＤ）δ７．９２（ｄ、１Ｈ）、７．８１（ｓ、１Ｈ）、７．５４（ｄｄ、１Ｈ）、７．４１〜７．２３（ｍ、３Ｈ）、７．１２（ｄ、１Ｈ）、３．６７（ｓ、３Ｈ）、２．６０（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３６０（Ｍ+）
【０２０９】
〔実施例２３〕
［４−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２１０】
前記製造例２３で製造した化合物（１６０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１１０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ、５０％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．５３（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．３０（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．２９（ｓ、１Ｈ）、８．１８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．８５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．７０〜７．５３（ｍ、３Ｈ）、７．５２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、２．３２（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３４７（Ｍ+）
【０２１１】
〔実施例２４〕
［４−（３，５−ジフルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２１２】
前記製造例２４で製造した化合物（１６０ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１６０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ、７１％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．５２（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．３４（ｓ、１Ｈ）、８．３２（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．２１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．６８（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５，８．１Ｈｚ）、７．５６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、７．４５〜７．３８（ｍ、３Ｈ）、２．３２（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３３１（Ｍ+）
【０２１３】
〔実施例２５〕
［４−（２，５−ジフルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２１４】
前記製造例２５で製造した化合物（１３２ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（５３ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ、２９％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．４７（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．２３〜８．０９（ｍ、６Ｈ）、７．６９〜７．６６（ｍ、１Ｈ）、７．５２〜７．４３（ｍ、４Ｈ）、２．３０（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３３１（Ｍ+）
【０２１５】
〔実施例２６〕
［４−（２，３−ジフルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２１６】
前記製造例２６で製造した化合物（１５０ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１４８ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ、７０％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．４８（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．３５（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．２４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、８．１１（ｓ、１Ｈ）、７．７１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５，７．８Ｈｚ）、７．６４〜７．５８（ｍ、１Ｈ）、７．５４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、７．４５〜７．３７（ｍ、２Ｈ）、２．３１（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３３１（Ｍ+）
【０２１７】
〔実施例２７〕
［４−（３，４−ジフルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２１８】
前記製造例２７で製造した化合物（１３４ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１４７ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ、７８％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ3ＯＤ）δ８．２４（ｓ、１Ｈ）、８．０５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．２Ｈｚ）、７．６７〜７．４２（ｍ、５Ｈ）、２．６９（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３３１（Ｍ+）
【０２１９】
〔実施例２８〕
［４−（２−メチル−５−フルオロフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２２０】
前記製造例２８で製造した化合物（１４０ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（７５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ、３８％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．４１（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．３５（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．１６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．６５（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２，８．４Ｈｚ）、７．４８〜７．１５（ｍ、４Ｈ）、２．３１（ｓ、３Ｈ）、２．０８（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３２７（Ｍ+）
【０２２１】
〔実施例２９〕
［４−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２２２】
前記製造例２９で製造した化合物（１６０ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１４２ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ、６３％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．５１（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．３１（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．１８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、８．０９（ｓ、１Ｈ）、７．６７（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８，７．８Ｈｚ）、７．４８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、７．３５〜７．２９（ｍ、３Ｈ）、２．３９（ｓ、３Ｈ）、２．３１（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３２７（Ｍ+）
【０２２３】
〔実施例３０〕
［４−（３，５−ジメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２２４】
前記製造例３０で製造した化合物（１５５ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（９５ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、４３％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．４７（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．３３（ｓ、１Ｈ）、８．２０（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．１２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．６４（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．９，８．１Ｈｚ）、７．４５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．１９〜７．１５（ｍ、３Ｈ）、２．３９（ｓ、６Ｈ）、２．３０（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３２３（Ｍ+）
【０２２５】
〔実施例３１〕
［４−（２，５−ジメチルフェニル）ベンゾチオフェン−２−カルボニル］グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２２６】
前記製造例３１で製造した化合物（２３０ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１３６ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ、４２％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．４３（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．１９（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．１３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．８９（ｓ、１Ｈ）、７．６４（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８，７．８Ｈｚ）、７．３３〜７．２９（ｍ、２Ｈ）、７．２２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．０９（ｓ、１Ｈ）、２．３３（ｓ、３Ｈ）、２．３１（ｓ、３Ｈ）、２．０１（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３２３（Ｍ+）
【０２２７】
〔実施例３２〕
（４−クロロベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２２８】
前記製造例３２で製造した化合物（２００ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１１０ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ、３６％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．６６（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．４５（ｓ、１Ｈ）、８．４０（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．１３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８Ｈｚ）、７．６５〜７．５６（ｍ、２Ｈ）、２．３４（ｓ、３Ｈ）
【０２２９】
〔実施例３３〕
（４−フルオロベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２３０】
前記製造例３３で製造した化合物（１２７ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１５８ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ、７７％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．６０（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．４１（ｓ、１Ｈ）、８．２６（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、７．９９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．６６〜７．５９（ｍ、１Ｈ）、７．３５（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８，８．１Ｈｚ）、２．３６（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２３７（Ｍ+）
【０２３１】
〔実施例３４〕
（４−ヨードベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２３２】
前記製造例３４で製造した化合物（２００ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１０７ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ、３９％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．７０（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．３２（ｓ、１Ｈ）、８．２９（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．１５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．９６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、７．３１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８，８．１Ｈｚ）、２．３５（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３４５（Ｍ+）
【０２３３】
〔実施例３５〕
（４−メチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２３４】
前記製造例３５で製造した化合物（９５ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（４３ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ、２８％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．５７（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．４２（ｓ、１Ｈ）、８．２９（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、７．９３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．４７（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５，７．８Ｈｚ）、７．３２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、２．６６（ｓ、３Ｈ）、２．３５（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２３３（Ｍ+）
【０２３５】
〔実施例３６〕
（４−ビニルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２３６】
前記製造例３６で製造した化合物（７８ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、黄白色固体の標記化合物（５４ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ、４４％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．６９（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．７２（ｓ、１Ｈ）、８．５８（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．１９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８Ｈｚ）、７．８６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、７．７２（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５，７．５Ｈｚ）、７．４４（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝１０．８，１１．１Ｈｚ）、６．１８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１７．１Ｈｚ）、５．７２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１１．１Ｈｚ）、２．４８（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２４５（Ｍ+）
【０２３７】
〔実施例３７〕
（４−エチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２３８】
前記製造例３７で製造した化合物（１１０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１０８ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ、６３％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．５４（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．４８（ｓ、１Ｈ）、８．３３（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、７．９３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．５０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．５，７．８Ｈｚ）、７．３３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、２．９９（ｑ、２Ｈ）、２．３６（ｓ、３Ｈ）、１．３１（ｔ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２４７（Ｍ+）
【０２３９】
〔実施例３８〕
（４−イソプロピルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２４０】
前記製造例３８で製造した化合物（２４０ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１６８ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ、４６％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ3ＯＤ）δ８．４９（ｓ、１Ｈ）、７．８２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．５３（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６，７．９Ｈｚ）、７．４１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、３．５８（ｍ、１Ｈ）、２．７３（ｓ、３Ｈ）、１．４３（ｄ、６Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２６１（Ｍ+）
【０２４１】
〔実施例３９〕
（４−ニトロベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２４２】
前記製造例３９で製造した化合物（１００ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、黄色固体の標記化合物（８１ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、５４％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．５９（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．９５（ｓ、１Ｈ）、８．６４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、８．４７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８Ｈｚ）、８．２７（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、７．８２（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８，８．１Ｈｚ）、２．３４（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２６４（Ｍ+）
【０２４３】
〔実施例４０〕
（４−アミノベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２４４】
前記製造例４０で製造した化合物（１１５ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、黄色固体の標記化合物（７０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ、３８％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．４１（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．４８（ｓ、１Ｈ）、８．２４（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、７．２７〜７．１４（ｍ、２Ｈ）、６．５９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８Ｈｚ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２３４（Ｍ+）
【０２４５】
〔実施例４１〕
（４−メトキシベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製
造
【０２４６】
前記製造例４１で製造した化合物（１８８ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１４５ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ、５０％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．４４（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．４２（ｓ、１Ｈ）、８．２０（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、７．６５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．５５（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１，８．１Ｈｚ）、７．０３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．８Ｈｚ）、３．９９（ｓ、３Ｈ）、２．３４（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２４９（Ｍ+）
【０２４７】
〔実施例４２〕
（４−シアノベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２４８】
前記製造例４２で製造した化合物（１．７６ｇ、８．１ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（２．４ｇ、７．１２ｍｍｏｌ、８８％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）δ８．３８（ｓ、１Ｈ）、８．３１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．３Ｈｚ）、７．８９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、７．６４（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．４，８．２Ｈｚ）、２．６６（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２４４（Ｍ+）
【０２４９】
〔実施例４３〕
（４−トリフルオロメチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２５０】
トリフルオロメチルベンゾチオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（１３８ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１７０ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ、７７％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．６８（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．５１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、８．４７（ｓ、１Ｈ）、８．３４（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、７．９４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、７．７５（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２，８．４Ｈｚ）、２．３５（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２８７（Ｍ+）
【０２５１】
〔実施例４４〕
（ベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２５２】
前記製造例４３で製造した化合物（２００ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１１３ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ、３５％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．５８（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．３７（ｓ、１Ｈ）、８．２８（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．１４〜８．０９（ｍ、２Ｈ）、７．６１〜７．５０（ｍ、２Ｈ）、２．３９（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２１８（Ｍ+）
【０２５３】
〔実施例４５〕
（４−ブロモ−５−メチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２５４】
前記製造例４４で製造した化合物（２００ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１９５ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ、６８％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．６５（ｂｒ ｓ、１Ｈ）、８．３９（ｓ、１Ｈ）、８．２７（ｂｒ ｓ、４Ｈ）、８．０５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．５６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、２．５０（ｓ、３Ｈ）、２．３６（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３１３（Ｍ+）
【０２５５】
〔実施例４６〕
（４−クロロ−５−メチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２５６】
前記製造例４５で製造した化合物（２００ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（２６０ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ、８６％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ3ＯＤ）δ８．４０（ｓ、１Ｈ）、７．８５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．３Ｈｚ）、７．５１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．３Ｈｚ）、２．７３（ｓ、３Ｈ）、２．５４（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２６７（Ｍ+）
【０２５７】
〔実施例４７〕
（４，５−ジメチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２５８】
前記製造例４６で製造した化合物（９０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（９８ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ、７０％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ3ＯＤ）δ８．６２（ｓ、１Ｈ）、７．９２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．２Ｈｚ）、７．５９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．３Ｈｚ）、２．９４（ｓ、３Ｈ）、２．８４（ｓ、３Ｈ）、２．６５（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３１３（Ｍ+）
【０２５９】
〔実施例４８〕
（４−シアノ−５−メチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２６０】
前記製造例４７で製造した化合物（８０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（７８ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ、６４％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ3ＯＤ）δ８．３６（ｓ、１Ｈ）、８．２１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．６１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．４Ｈｚ）、２．７２（ｓ、３Ｈ）、２．７１（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３１３（Ｍ+）
【０２６１】
〔実施例４９〕
（４−シアノ−５−メチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２６２】
前記製造例４８で製造した化合物（１００ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１０８ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ、７５％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ3ＯＤ）δ８．４８（ｓ、１Ｈ）、７．９７（ｓ、１Ｈ）、７．７５（ｓ、１Ｈ）、２．８９（ｓ、３Ｈ）、２．６７（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝３１３（Ｍ+）
【０２６３】
〔実施例５０〕
（４，６−ジメチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２６４】
前記製造例４９で製造した化合物（１２５ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（７５ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ、３９％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ3ＯＤ）δ８．３１（ｓ、１Ｈ）、７．６１（ｓ、１Ｈ）、７．１５（ｓ、１Ｈ）、２．７２（ｓ、３Ｈ）、２．６６（ｓ、３Ｈ）、２．４７（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２４７（Ｍ+）
【０２６５】
〔実施例５１〕
（４−シアノ−６−メチルベンゾチオフェン−２−カルボニル）グアニジンメタンスルホン酸塩の製造
【０２６６】
前記製造例５０で製造した化合物（１１０ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を使用して実施例１と同様の方法で反応させ、白色固体の標記化合物（１３５ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ、８０％）を得た。
1Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ3ＯＤ）δ８．３８（ｓ、１Ｈ）、８．１６（ｓ、１Ｈ）、７．８３（ｓ、１Ｈ）、２．７３（ｓ、３Ｈ）、２．５７（ｓ、３Ｈ）
ＭＳ（ｍ／ｚ）Ｍ+＝２５８（Ｍ+）
【０２６７】
実施例により製造された本発明の化合物を下記表１に表した。
【０２６８】
【表１】
2008525523.tif 000010
【０２６９】
2008525523.tif 000011
【０２７０】
2008525523.tif 000012
【０２７１】
本発明による化学式１に表される化合物について下記のような実験を通して様々な生化学的および薬理活性を調査した。
【０２７２】
実験例１
ＮＨＥ−１抑制効果
【０２７３】
本発明のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体の細胞内でのＮＨＥ−１抑制効果を測定するために、下記のような実験を実施した。
【０２７４】
ＣＣＬ３９から由来されたＰＳ１２０細胞にヒトＮＨＥ−１を発現させ、１０％ウシ胎仔血清、１％ペニシリン／ストレプトマイシン（１００×溶液）、１％Ｌ−グルタミン（２００ｍＭ水溶液）が補足されたＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ‘ｓ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ’ｓ ｍｅｄｉｕｍ）で前記ヒトＮＨＥ‐１が発現された細胞を培養した。１００ｍｍディッシュで育てたＰＳ１２０／ＮＨＥ−１細胞を約８０〜９０％の密集度でトリプシンにて処置した後、ＰＢＳで１回、ナトリウムのない緩衝液（１３８．２ｍＭ Ｃｈｏｌｉｎｅ Ｃｈｌｏｒｉｄｅ、４．９ｍＭ ＫＣｌ、１．５ｍＭ ＣａＣｌ2・２Ｈ2Ｏ、１．２ｍＭ ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ、１．２ｍＭ ＫＨ2ＰＯ4、１５ｍＭ Ｄ−グルコース、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４）で１回洗浄した。これを遠心分離し、沈殿物を２０ｍＭ ＮＨ4Ｃｌおよび１０μＭ ＢＣＥＣＦ−ＡＭ［２'，７'−ビス（２−カルボキシエチル）−５，６−カルボキシ−フルオロセインアセトキシメチルエステル］を含有するナトリウムのない緩衝液に浮遊させた後、３７℃、ＣＯ2培養器で３０分間培養させた。遠心分離をして得た後、ＮＨ4Ｃｌおよび細胞外に残っているＢＣＥＣＦ−ＡＭを除去するためにＰＳ１２０／ＮＨＥ−１細胞をナトリウムのない緩衝液で１回洗浄し、２．５×１０4細胞／１０μｌの密度で懸濁し、再生するまで４℃の暗室に保管した。９６ウェルマイクロプレートに１８０μｌ ＨＢＳ緩衝液（１３７ｍＭ ＮａＣｌ、４．９ｍＭ ＫＣｌ、１．５ｍＭ ＣａＣｌ2・２Ｈ2Ｏ、１．２ｍＭ ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ、１．２ｍＭ ＫＨ2ＰＯ4、１５ｍＭ Ｄ−グルコース、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４）と１０μｌ ＤＭＳＯまたは１０μｌ ＤＭＳＯまたは本発明の化合物溶液（０．０３〜１０μＭ）１０μｌをＤＭＳＯに溶解し、分注してよく混合した後、細胞内アシドーシスが誘発されたＰＳ１２０／ＮＨＥ−１細胞を１０μｌずつ添加して攪拌させた。細胞を添加して４分後、蛍光分光光度計（ＧＥＭＩＮＩ−ＸＳ；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅ）を使用して蛍光（励起：４８５／４４４ｎｍ、放出：５３５ｎｍ）を測定した。測定された蛍光値は、高−Ｋ+／ニゲリシン技術を利用してｐＨ値に換算した。ＮＨ4Ｃｌ予備パルスで細胞内アシドーシスを誘発させた細胞はＮＨＥ−１の作動により正常のｐＨ値に回復されるが、この時、細胞内アシドーシスの回復を５０％抑制させる化合物の濃度を求め（ＩＣ50値）、ＮＨＥ−１に対する化合物の抑制効果を測定した。対照物質としてカリポリド(cariporide)を使用した。
【０２７５】
結果は表２(本発明の化合物のＮＨＥ−１抑制効果)に表した。
【０２７６】
【表２】
2008525523.tif 000013
【０２７７】
表２に表された通り、対照物質であるカリポリドは０．６８μＭのＩＣ50を示し、ＮＨＥ−１に対する優れた抑制効果を表した。本発明の化合物のうち実施例１、３、１９、２３、３２〜３９、４１〜４３および４５〜４７の化合物は３．０μＭ以下のＩＣ50のＮＨＥ−１の抑制を表し、特に、実施例１、３２、３４、３６、３７、４３および４５の化合物は０．５μＭ以下のＩＣ50を表し、カリポリドより強力なＮＨＥ−１抑制効果を表した。
従って、本発明の化合物はＮＨＥ−１に対して強力な抑制効果を有するため、虚血／再かん流による損傷に対する心臓保護剤として有用に使用することができる。
【０２７８】
実験例２
摘出されたラットの虚血心モデルに対する心臓保護効果
【０２７９】
本発明のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体が心臓保護作用を示すかを調べるために、ランゲンドルフのラットから摘出した心臓標本に対して下記のような実験を実施した。
オスのラット（３００〜４５０ｇ、韓国化学研究院実験動物室）にペントバルビタール・ナトリウム１００ｍｇ／ｋｇを腹腔内に注射して麻酔を行った後、ヘパリン１０００Ｕ／ｋｇを静脈投与し、心臓を摘出した。具体的に、気管切開を行い、気管カニューレ（ＰＥ２４０）を気管に挿入し、げっ歯類の人工呼吸器（ｒｏｄｅｎｔ ｖｅｎｔｉｌａｔｏｒ）を利用して人工呼吸させ、その状態で開胸術を行い、心臓を素早く摘出した後、ランゲンドルフ装置に吊るし、一定のかん流圧（８５ｍｍＨｇ）下で９５％Ｏ2／５％ＣＯ2で飽和された３７℃の生理液（ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｋｒｅｂｓ−Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ ｂｉｃａｒｂｏｎａｔｅ ｂｕｆｆｅｒ；組成＜ｍＭ／Ｌ＞：１１６ＮａＣｌ、４．７ＫＣｌ、１．１ＭｇＣＯ4、１．１７ＫＨ2ＰＯ4、２４．９ＮａＨＣＯ3、２．５２ＣａＣｌ2、８．３２グルコース、２．０ピルビン酸塩）を使用して大動脈カニューレを逆行させてかん流させた。
【０２８０】
エタノールと蒸留水の混合液（１：１ｖｏｌ／ｖｏｌ）で充填されたラテックス風船と連結されたカテーテル先端マノメーターを、左心房を切開して左心室に挿入し、風船に伝達される脳室内圧を変換器にて等積に測定し、増幅器（Ｐｌｕｇｓｙｓ ｂｒｉｄｇｅ ａｍｐｌｉｆｉｅｒ）で処理し、記録計（Ｌｉｎｅａｒｃｏｒｄｅｒ ｍａｒｋ ８ ＷＲ３５００）に記録した。心臓を１５分間安定化させた後、左心室拡張末期圧（ＬＶＥＤＰ）を５ｍｍＨｇで与え、その風船の容積を初期基準期間適応させ、実験期間維持させた。
【０２８１】
基準心臓収縮機能、心拍数（ＨＲ）および冠血流（ＣＦ）を左心室収縮間隔により定めた。摘出された心臓の収縮機能を評価する指標である左心室発生圧（ＬＶＤＰ）は左心室収縮期圧（ＬＶＳＰ）と左心室拡張末期圧（ＬＶＥＤＰ）の差異から算出した。生体内の心臓と異なり、ランゲンドルフ心臓は心拍出量を測定することのできないため、間接的に心仕事量を調べる重要な指標であるＲＰＰ（ｒａｔｅ−ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｐｒｏｄｕｃｔ）は心拍数にＬＶＤＰをかけて計算した。心臓の温度は実験期間にかけて、９５％Ｏ2／５％ＣＯ2が持続的に供給される３７℃の生理液に心臓を漬けることで一定に維持させた。安定化させた後、心臓は本発明の化合物または対照薬物をＨＢＳ緩衝液で希釈したＤＭＳＯ溶液（ＤＭＳＯの最終濃度０．０４％）に溶かした溶液、または溶媒（陰性対照群；０．０４％ＤＭＳＯ）のみで１０分間かん流させた後、心臓収縮機能と心拍数および冠血流を再度測定した。かん流液の供給を３０分間完全に遮断し、心臓に対する広範囲の虚血（ｇｌｏｂａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ）を誘発させ、３０分間再かん流させた後、指標（ＬＶＤＰ、ＨＲ、ＬＶＥＤＰおよびＣＦ）を再測定した。再かん流後、再かん流液中の乳酸塩脱水素酵素（ＬＤＨ）の総濃度をキットを利用して測定し、虚血心筋損傷の指標とした。陰性対照群を溶媒のみで処理し、陽性対照物質としてカリポリドを使用した。
【０２８２】
結果は表３(本発明の化合物の心臓保護効果)に表した。
【０２８３】
【表３】
2008525523.tif 000014
【０２８４】
表３に表した通り、ラットの摘出心臓を利用した虚血／再かん流心臓実験において、陰性対照群では心臓の収縮機能の指標であるＲＰＰ（ＬＶＤＰ×ＨＲ）が虚血誘発前の１５．５％と著しく低下し、虚血／再かん流による心筋の収縮を表し、心臓保護作用の指標である再かん流左心室拡張末期圧も陰性対照群において、５ｍｍＨｇから５５．３ｍｍＨｇと有意に増加された。細胞損傷の指標となる乳酸塩脱水素酵素（ＬＨＤ）の再かん流時の遊離量は３３．６μ／ｇであった。
カリポリド１０μＭ処置群は再かん流後の心筋収縮機能（ＬＶＤＰ×ＨＲ）が虚血誘発前の６９．８％で、陰性対照群に比べて著しく改善された。カリポリド処理群の左心室拡張末期圧は２２．４ｍｍＨｇと陰性対照群より有意に低く、虚血心の保護効果を有することが分かり、再かん流時のＬＤＨ遊離量も対照群と比べて１９．３μ／ｇと有意に低下した。
【０２８５】
実施例１、３２〜３９、４２、４３、４５および４７の細胞実験で、ＮＨＥ−１に対する抑制効果が優れていた化合物を各々１０μＭ処置することにより、虚血／再かん流による心臓損傷に対する保護効果が有意に改善された。実施例３２、３４、３９、４２および４３の化合物は心臓収縮力、左心室拡張末期圧、乳酸塩脱水素酵素の遊離などの全ての指標においてカリポリドと類似または優れた改善効果を表した。特に、実施例３９、４２、４３の化合物は心臓収縮力が虚血誘発前に比べて各々７３．３、８２．３、８０．６％、左心室拡張末期圧が１１．３、６．０、５．８ｍｍＨｇ、乳酸塩脱水素酵素の遊離量が１０．８、１４．７、５．２μ／ｇと、すべての指標においてカリポリドに比べて虚血／再かん流心臓に対する保護効果が優れていた。
【０２８６】
従って、本発明の化合物は虚血／再かん流損傷による心臓機能の回復を効果的に増進させることで虚血心に対する保護効果が優れているため、虚血性心疾患に係る疾患の予防および治療に有用に使用されることができる。
【０２８７】
実験例３
ラットのｉｎ ｖｉｖｏ虚血心モデルに対する心臓保護作用
【０２８８】
本発明のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体がｉｎ ｖｉｖｏ虚血心において心臓を保護する効果を有するかを調べるために、ラットに対する抗虚血効果（心筋梗塞減少）を下記のような実験を通して調査を行った。
【０２８９】
各オスのラット（３５０〜４５０ｇ、韓国化学研究院実験動物室）にペントバルビタール・ナトリウム７５ｍｇ／ｋｇを腹腔注射をして麻酔をかけた。気管切開術を実施した後、チューブを期間に挿入し、１０ｍｌ／ｋｇの一回心拍出量、１分当り６０心拍数で人工呼吸を行った。大腿静脈および大腿動脈にカニューレを挿入し、各々化合物の投与および血圧測定に利用した。一方、虚血性心筋損傷モデルにおいて、ラットの体温は結果に重要な影響を及ぼし、直腸に挿入した体温測定用探針と抗温被覆調節ユニット（Ｈｏｍｅｏｔｈｅｒｉｍｉｃ ｂｌａｎｋｅｔ ｃｏｎｔｒｏｌ ｕｎｉｔ）を使用してラットの体温を３７℃に一定に維持させた。その後、実験期間を通して、ラットの平均動脈圧と心拍数を測定し続けた。この時、血圧測定にはステーサムＰ２３ＸＬ圧力変換器（Ｇｒａｓｓ Ｉｎｓ．，ＭＡ，米国）を使用し、心拍数測定には心電図／心拍数カプラー（Ｈｕｇｏ Ｓａｃｈｓ Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ，独）を使用した。また、グラフテックリニアコーダーＷＲ３３１０（Ｈｕｇｏ Ｓａｃｈｓ Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ，独）を使用して全変化を連続的に記録した。
【０２９０】
左冠状動脈はＳｅｌｙｅ Ｈ．の方法により塞いだ。具体的に、左開胸術により各ラットの胸を一部開いた後、左手の中指でラットの右側胸部を圧迫して心臓を外部に押し出し、左手の親指と人差し指で心臓を軽く固定した。その後、５−０絹糸結紮で左前下降枝動脈（ＬＡＤ）を縫合した後、心臓を胸腔に再位置させて縫合糸の両端を外部に位置させた。縫合糸の両端はＰＥチューブ（ＰＥ１００，２．５ｃｍ）に通過させた後、２０分間放置して安定化させた。大腿静脈に挿入されたカニューレを通して賦形剤または本発明の化合物を投与し、薬物の効果が充分に表れるように３０分間放置した。この時、対照群としてカリポリドを使用した。その後、ＰＥチューブに通しておいた縫合糸の両端を止血鉗糸で強く引っ張り、ＰＥチューブを冠状動脈に対して垂直に圧力を加えた後、４５分間放置し、冠状動脈を閉塞させた後、止血鉗子を除去して９０分間再かん流させた。
【０２９１】
前記方法により冠状動脈を再閉塞し、１％エバンスブルー溶液２ｍｌを静脈注射をした。その後、過量のペントバルビタールを静脈注射してラットを屠殺させて心臓を取り出し、左心室を摘出した心臓から除去し、心尖部から５〜６個の切片に切断し、各切片の質量を測定した。各心臓切片の表面はコンパクト微細映像測定装置（ｃｏｍｐａｃｔ ｍｉｃｒｏ ｖｉｓｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ）であるハイスコープ（Ｈｉ−ｓｃｏｐｅ）を利用してキャプチャーし、画像分析用プログラムを利用して青色に着色された正常面積と着色されなかった領域の面積を分析した。各切片の総面積に対して着色されなかった領域の面積比を求め、これに各切片の質量をかけて各切片の危険領域であるＡＡＲ（ａｒｅａ ａｔ ｒｉｓｋ）を計算した。各切片に対するＡＡＲの和を総左心室の質量で割り、下記数学式１によりＡＡＲ（％）を求めた。
【０２９２】
数学式１
（数１）
ＡＡＲ（％）＝［（各切片に対するＡＡＲの和）／（総左心室質量）］×１００
【０２９３】
また、心臓切片を１％２，３，５−トリフェニルテトラゾリウム塩（ＴＴＣ）リン酸緩衝溶液（ｐＨ７．４）の中で３７℃で１５分間培養させ、１０％ホルマリン溶液で２０〜２４時間固定させた。２，３，５−トリフェニルテトラゾリウム塩は補因子であるＮＡＤＨの存在下で心筋の脱水素酵素により還元され、ホルマザン染料を形成し、結局、組織の正常部位が赤レンガ色を帯びるようになる。反面、組織の梗塞部位は脱水素酵素と補助因子が不足するため、２，３，５−トリフェニルテトラゾリウム塩が還元されず、従って赤色を帯びない。
【０２９４】
前記のように、２，３，５−トリフェニルテトラゾリウム塩の利点により、各切片の正常領域および梗塞サイズ（ＩＳ）を前記ＡＡＲと同様の方法で求めて分析した。このように求めた各切片に対する梗塞サイズの和を総ＡＡＲ質量または総左心室質量で割り、下記数学式２によりＩＳ（％）を求めた。この実験モデルにおいては、ＩＳ（％）が低いほど梗塞サイズが小さいため化合物の抗虚血効果が更に強いと判定された。
【０２９５】
数学式２
（数２）
ＩＳ（％）＝
［（各切片に対する梗塞サイズの和）／（全体左心室または総ＡＡＲの質量）］×１００
【０２９６】
結果を表４(本発明の化合物の心臓保護効果（ｉｎ ｖｉｖｏ）)に表した。
【０２９７】
【表４】
2008525523.tif 000015
【０２９８】
表４に表される通り、ｉｎ ｖｉｖｏ虚血心筋損傷モデルにおいても、本発明の化合物は危険領域に対する心筋梗塞率が有意に減少されることを確認することができた。
具体的に、賦形剤投与群は危険領域（ＡＡＲ）に対する心筋梗塞率（ＩＳ／ＡＡＲ、％）が５８．６％であり、心筋損傷が非常に深刻であることが確認された。陽性対照物質であるカリポリドを投与した場合、心筋梗塞率は０．１および０．３ｍｇ／Ｋｇの投与により各々４０．５、３７．９％と、有意のある抗虚血作用を示した。
【０２９９】
実施例１、３２、３３、３４、３５、４７および４８の化合物は各々０．１ｍｇ／Ｋｇの投与で５０％以下の心筋梗塞率を示し、陰性対照群より有意に減少した。特に、ＮＨＥ−１に対する抑制効果が優れ、摘出されたラットの虚血／再かん流心臓モデルにおいて非常に高い機能回復を見せた実施例４２の化合物は、０．１および０．３ｍｇ／Ｋｇの投与により各々３６．９および３４．４％の心筋梗塞率を示し、カリポリドと比較して優れた虚血心臓保護効果を表した。
【０３００】
従って、本発明の化合物はｉｎ ｖｉｖｏ虚血心モデルにおいて、心筋梗塞率を減少させることが確認され、虚血心に対する保護作用が優れているため、心筋梗塞、不整脈、狭心症などの虚血性心疾患の予防および治療に有用に使用することができ、冠動脈バイパス術、経皮経管冠動脈形成術などの心臓施術時の心臓保護剤として効果的に使用することができる。
【０３０１】
実験例４
神経細胞の保護作用
本発明のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体がグルタミン酸により誘発された神経細胞の損傷および壊死を抑制する作用を調べるために、下記のような実験を行った。
【０３０２】
生後１４日のラット胎仔の脳から大脳皮質神経細胞を摘出し、３７℃、５％ＣＯ2の雰囲気下でＥａｇｌｅｓ‘ｓ ＭＥＭで培養した。培養３〜４日にグリア細胞（ｇｌｉａｌ ｃｅｌｌ）の過度成長を防ぐために１０μＭサイトシン−β−アラビノフラノシド（ＡｒａＣ）を培地に加えた。ＮｅｕＮ（ｎｅｕｒｏｎａｌ ｎｕｃｌｅｉ、ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｎｅｕｒｏｎａｌ ｍａｒｋｅｒｓ）およびＧＦＡＰ（ｇｌｉａｌ ｆｉｂｒｉｌｌａｒｙ ａｃｉｄｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ、ｇｌｉａｌ ｃｅｌｌ ｍａｒｋｅｒｓ）で染色を行うことで８０％以上の細胞が神経細胞であることを確認した。培養７〜９日に１００μＭグルタミン酸で処理を行い細胞毒性を誘導し、この時、化合物を同時に添加して陰性対照群は賦形剤のみを使用した。細胞壊死はグルタミン酸の処理２０時間後に、乳素脱水素酵素（ＬＤＨ）の遊離量により決定され、細胞死滅においてはグルタミン酸の処理１２時間後のＴＵＮＥＬ（Ｔｅｒｍｉｎａｌ  ｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｙｌ ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ ＵＴＰ ｎｉｃｋ ｅｎｄ ｌａｂｅｌｉｎｇ）陽性細胞を測定した。
結果は表５(本発明の化合物のグルタミン酸による神経毒性に対する神経細胞の保護効果)に表した。
【０３０３】
【表５】
2008525523.tif 000016
【０３０４】
表５に表される通り、実施例４２の化合物は神経細胞壊死および細胞死滅を用量依存的に抑制することで、グルタミン酸により誘発された神経毒性に対する神経細胞保護作用を示した。
従って、本発明の化合物は優れた神経細胞保護作用を有するため、神経細胞の損傷または壊死により誘発された脳卒中または脳外傷のような脳虚血疾患の神経保護剤として効果的に使用することができる。
【０３０５】
実験例５
ラットのｉｎ ｖｉｖｏ脳虚血モデルに対する脳保護効果
本発明のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体が虚血−再かん流による脳損傷から脳を保護する効果を調べるために下記のような実験を行った。
オスのＳＤラット（３５０±５０ｇ、三育実験動物室）に麻酔をかけた後、ヘパリンを腹腔内に注射した。右側の頚動脈を６０分間閉鎖して虚血を引き起こした後、２４時間再かん流を行った。化合物および賦形剤を閉鎖２０分前に静脈注射した。
【０３０６】
２４時間再かん流を行った後、致死量のペントバルビタール・ナトリウムで麻酔させ、気をつけて脳を摘出し、２ｍｍ間隔で切った。得られた冠状切片は２％２，３，５−トリフェニルテトラゾリウム塩溶液を使用して３７℃で２０分間染色した。染色された切片は映像分析器（ＢＡＳ ｉｍａｇｅ １５００）を使用して全体の脳面積に対する壊死面積を％で表した。更に、脳浮腫に対する化合物の心臓保護効果は虚血を引き起こした右脳半球の容積と比較して左脳半球の容積を％で表した。
結果は表６(虚血／再かん流による脳損傷に対する脳保護効果)に表した。
【０３０７】
【表６】
2008525523.tif 000017
【０３０８】
表６に表される通り、実施例４２の化合物は虚血／再かん流により誘発された脳梗塞だけでなく脳浮腫も各々０．１ｍｇ／ｋｇおよび０．３ｍｇ／ｋｇの注射にて有意に減少させた。
従って、本発明の化合物は虚血／再かん流による脳損傷を保護する作用が優れているため、脳卒中などの虚血脳損傷により誘発される様々な疾患の治療に有用に使用されることができる。
【０３０９】
実験例６
ラットに対する急性経口毒性実験
本発明のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体の急性経口毒性を調べるために、下記のような実験を行った。
生後６週の特定病原体未感染の（ＳＰＦ）ＳＤ系ラットを使用して実験を実施した。群当り２匹ずつの動物に実施例１〜５１から得られた化合物を各々０．５％メチルセルロース溶液に懸濁して１０ｍｇ／ｋｇ・ｍｌの容量で経口投与した。
経口投与後、動物の斃死可否、臨床症状、体重変化などを観察して血液学的検査と血液生化学的検査を実施し、剖検して肉眼で腹腔臓器と胸腔臓器の異常可否を観察した。
【０３１０】
特記な臨床症状も斃死した動物も観察されず、更に、体重変化、血液検査、血液性化学検査、剖検所見でも急性毒性は観察されなかった。以上の結果、実験された化合物は全てのラットで１０ｍｇ／ｋｇまで毒性を示さず、経口投与最小致死量（ＬＤ50）は１００ｍｇ／ｋｇ以上である安全な物質と判断された。
一方、本発明による化合物は目的に従って様々な形態に製剤化が可能である。下記は本発明による化合物を活性成分として含有させた製剤化方法を例示したものであるが、本発明がこれに限定されるわけではない。
【０３１１】
製剤例１
錠剤（直接加圧）
活性成分５．０ｍｇを篩にかけた後、ラクトース１４．１ｍｇ、クロスポピドンＵＳＮＦ０．８ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム０．１ｍｇを混合して加圧して錠剤を製造した。
【０３１２】
製剤例２
錠剤（湿式組立）
活性成分５．０ｍｇを篩にかけた後、ラクトース１６．０ｍｇ、澱粉４．０ｍｇを混合した。ポリソルベート８０溶液０．３ｍｇを純粋な水に溶解させた後、前記混合物を添加した。微粒化して乾燥させ、微粒を篩にかけた後、コロイド状二酸化ケイ素２．７ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム２．０ｍｇと混ぜた。微粒を加圧して錠剤を製造した。
【０３１３】
製剤例３
粉末とカプセル剤
本発明の化合物５．０ｍｇを篩にかけた後、ラクトース１４．８ｍｇ、ポリビニルピロリドン１０．０ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム０．２ｍｇを混合した。前記混合物を適当な装置を使用して硬質なＮｏ．５ゼラチンカプセルに充填させてカプセル剤を製造した。
【０３１４】
製剤例４
注射剤
本発明の化合物１００ｍｇ、マンニトール１８０ｍｇ、Ｎａ2ＨＰＯ4・１２Ｈ2Ｏ ２６ｍｇおよび蒸留水２９７４ｍｇを含有させ、注射剤を製造した。
【産業上の利用可能性】
【０３１５】
本発明のベンゾチオフェン−２−カルボニルグアニジン誘導体はナトリウム／水素交換チャンネルであるＮＨＥ−１に対して強力な抑制作用を示し、摘出された虚血心モデルにおいて虚血／再かん流による心臓損傷の機能回復を改善させ、ｉｎ ｖｉｖｏ虚血動物モデルにおいて、心筋梗塞のサイズを有意に減少させ、優れた心臓保護効果を示す。更に、神経細胞の壊死および死滅に対する保護効果を有し、ｉｎ ｖｉｖｏ脳虚血モデルにおいて、脳梗塞のサイズが有意に減少することで神経細胞および虚血脳に対する保護効果を示す。
【０３１６】
従って、本発明の薬学的組成物は心筋梗塞、不整脈、狭心症などの虚血性心疾患、脳卒中などの脳血管疾患の予防および治療に有用に使用することができ、冠動脈バイパス術、経皮経管冠動脈形勢術などの施術時または血栓溶解剤などの再かん流療法に対する心臓保護剤などとして使用することができる。
【国際調査報告】
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