(57)【要約】  本発明は、オオバナサルスベリ植物の葉に由来する医薬組成物、治療組成物、及び食品組成物、並びにコロソリン酸、ガロタンニン類、エラジタンニン類、及びヴァロン酸ジラクトンに関して組成を変化させ制御組成物の製造に使用する新規抽出プロセスに関するものである。本発明の実施態様は、健康上の利益をもたらす医薬組成物、治療組成物、及び／又は食品組成物用の新規組み合わせ用のタンニン酸リッチな基材中に約15.5％から約98.5％のコロソリン酸リッチなバナバ葉抽出混合物を含む。本発明の幾つかの実施態様は、他の化合物の濃度を特別に上昇させた組み合わせにおいて、コロソリン酸を含まない、或いは、コロソリン酸を低濃度で含む。かかるコロソリン酸を含まない抽出組成物は、ガロタンニン類、エラジタンニン類、及びヴァロン酸ジラクトンの比を上昇させるようにコントロールできる抽出プロセスの産物である。かかる組成物、即ち、コロソリン酸を含むもの及びコロソリン酸を含まないものの両方は、血糖値のコントロールを行うのに有効であり、製造及び製剤後に、腸溶性被覆物及び特別な微小カプセル化によって標的に運ぶナノテクノロジー的なアプローチを利用する戦略により、その有効性を更に高めることができる。これら抽出組成物の個々の化合物に関して、かかる化合物は、グルコースの細胞摂取の改善、血糖の低減、インスリンの効率の良さ、砂糖及びデンプン吸収の同時低減、体重減に関して、付加的及び相乗的な組み合わせ効果を示す。更に、付加的及び相乗的な効果は、これらの組成物を他の第２治療剤と組み合わせる場合、潜在的な利点となる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
コロソリン酸と、
ガロタンニン類、エラジタンニン類及びヴァロン酸ジラクトンからなる群から選択される一種以上の化合物とを含む、
オオバナサルスベリ由来の組成物。
【請求項２】
コロソリン酸の濃度が約15.5％から約98.5％であることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
コロソリン酸の濃度が約20％から約80％であることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
ガロタンニン類及びエラジタンニン類の総濃度が約2.5％から約98％であることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
ガロタンニン類及びエラジタンニン類の総濃度が約5％から約90％であることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
ヴァロン酸ジラクトンの濃度が約0.1％から約20％であることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
ヴァロン酸ジラクトンの濃度が約1％から約10％であることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
ガロタンニン類、エラジタンニン類及びヴァロン酸ジラクトンからなる群から選択される一種以上の化合物を含む、
オオバナサルスベリ由来の組成物。
【請求項９】
ガロタンニン類及びエラジタンニン類の総濃度が約2.5％から約98％であることを特徴とする請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
ガロタンニン類及びエラジタンニン類の総濃度が約5％から約90％であることを特徴とする請求項８に記載の組成物。
【請求項１１】
ガロタンニン類及びエラジタンニン類の総濃度が約10％から約60％であることを特徴とする請求項８に記載の組成物。
【請求項１２】
ガロタンニン類及びエラジタンニン類の総濃度が約35％から約45％であることを特徴とする請求項８に記載の組成物。
【請求項１３】
本質的に、ガロタンニン類、エラジタンニン類及びヴァロン酸ジラクトンからなる群から選択される一種以上の化合物からなり、
本質的に、コロソリン酸を含まない、
オオバナサルスベリ由来の組成物。
【請求項１４】
前記組成物が99％水溶性であるであることを特徴とする請求項１又は８に記載の組成物。
【請求項１５】
前記組成物がグルコース代謝障害の治療に十分な治療剤であることを特徴とする請求項１又は８に記載の組成物。
【請求項１６】
前記組成物が高尿酸血症の治療に十分な治療剤であることを特徴とする請求項１又は８に記載の組成物。
【請求項１７】
前記組成物が、グルコース代謝障害の治療に十分な第二の治療剤と組み合わされていることを特徴とする請求項１又は８に記載の組成物。
【請求項１８】
前記組成物が高尿酸血症の治療に十分な治療剤であることを特徴とする請求項１又は８に記載の組成物。
【請求項１９】
高血糖症患者にオオバナサルスベリ由来の組成物を有効量投与することを含む高血糖症の治療方法であって、
前記組成物が、コロソリン酸と、ガロタンニン類、エラジタンニン類及びヴァロン酸ジラクトンからなる群から選択される一種以上の化合物とを含む、
高血糖症の治療方法。
【請求項２０】
高血糖症患者にオオバナサルスベリ由来の組成物を有効量投与することを含む高血糖症の治療方法であって、
前記組成物が、ガロタンニン類、エラジタンニン類及びヴァロン酸ジラクトンからなる群から選択される一種以上の化合物を含む、
高血糖症の治療方法。
【請求項２１】
オオバナサルスベリ由来の組成物の抽出方法であって、
前記組成物が、コロソリン酸と、ガロタンニン類、エラジタンニン類及びヴァロン酸ジラクトンからなる群から選択される一種以上の化合物とを含み、
前記方法が、各化合物の最終濃度を他の化合物と独立にコントロールすることを含み、
かかるコントロールが、様々な極性の溶剤を適用して個々のフラクションを作製し、個々に抽出されたフラクションを混合することによってもたらされる、
オオバナサルスベリ由来の組成物の抽出方法。
【請求項２２】
オオバナサルスベリ由来の組成物の抽出方法であって、
前記組成物が、ガロタンニン類、エラジタンニン類及びヴァロン酸ジラクトンからなる群から選択される一種以上の化合物を含み、
前記方法が、各化合物の最終濃度を他の化合物と独立にコントロールすることを含み、
かかるコントロールが、様々な極性の溶剤を適用して個々のフラクションを作製し、個々に抽出されたフラクションを混合することによってもたらされる、
オオバナサルスベリ由来の組成物の抽出方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この特許出願は、２００４年１２月２２日に出願された、モフェット及びシャーの米国仮特許出願第６０／６３８,８７３の優先権を主張するものである。
【０００２】
本発明は、オオバナサルスベリ（Lagerstroemia speciosa L.）植物の葉に由来する医薬組成物、治療組成物、及び食品組成物、並びにそれら組成物の製造に使用する新規抽出プロセスに関するものである。
【背景技術】
【０００３】
バナバは、薬草オオバナサルスベリの一般名であり、オオバナサルスベリは、フトモモ目ミソハギ科に属する。オオバナサルスベリ、即ち、"バナバ木"は、インド、フィリピン、オーストラリア、中国、及び東南アジアを原産とする、熱帯の花の咲くサルスベリ属の木である。その大きく装飾的な葉は、楕円形で、端部がとがっており、成熟すると赤色に変化する。花は、無臭で、明るいピンク色から紫色であり、雄蘂は、皺が寄っているように見える。バナバの果実は、木のようであり、多くの翼を有する種を含んでいる。
【０００４】
バナバ葉は、伝統的に、血糖値の上昇に関係する兆候の治療薬として用いられている。伝統的には、オオバナサルスベリ植物の葉及び花から、簡単な水煎じ薬又は茶を入れ、得られたジュースを消費する。血糖値のバランスをとるため、並びに、糖尿病及び高血糖症用の治療として、かかる煎じ薬又は茶を投与する。
【０００５】
バナバの葉及び花の抽出物は、血液から体細胞中へのグルコースの輸送を誘起するものと考えられている。複数の研究は、オオバナサルスベリからの抽出物がエールリッチ腹水腫瘍細胞中でグルコースの輸送活性を刺激することを示している（ムラカミ Cら, "Screening of plant constituents for effect on glucose transport activity in Ehrlich ascites tumor cells", Chem. Pharm. Bull. (Tokyo) 1993 Dec; 41 (12): 2129-31）。一般には、コロソリン酸がオオバナサルスベリ抽出物中の活性成分であると考えられている。最近、コロソリン酸濃度を1％に規格化したバナバ抽出物が、２型糖尿病を患った被験者の血糖値を低下させることが示された（Judy, William V.ら: "Antidiabetic activity of a standardized extract (GlucosolTM) from Lagerstroemia speciosa Leaves in Type II diabetics - A dose-dependence study", Journal of Ethnopharmacology 87 (2003) 115-117）。そのため、コロソリン酸を含むバナバ葉抽出物は、血糖及び血中インスリンのレベルを調整する効果を有するものと考えられており、従って、糖尿病、高血糖症、及び肥満の予防及び／又は治療に有用である可能性がある。（カクダ Tら, "Hypoglycemic effect of extracts from Lagerstroemia speciosa L. leaves in genetically diabetic KK-AY mice", Biosci Biotechnol Biochem. 1996 Feb; 60 (2): 204-8及びスズキ Yら, "Antiobesity activity of extracts from Lagerstroemia speciosa L. leaves on female KK-Ay mice", J Nutr Sci Vitaminol (Tokyo). 1999 Dec; 45 (6): 791-5参照。）
【０００６】
米国では1500万人以上が糖尿病（ＤＭ)を患っているものと見積もられており、糖尿病は、米国では第７番目の主要な死因である。糖尿病は、膵臓のベータ細胞によるインスリン分泌の部分的又は完全な欠如、及び細胞中のインスリン受容体の欠陥の何れかを主としてもたらす、炭水化物、脂質、及びタンパク質の複雑な慢性代謝障害である。従って、この障害は、血糖値をコントロールできないことを中心に展開して、グルコースレベルの上昇をもたらし、また、高血糖症、動脈硬化、糖尿病性網膜症（失明に至る可能性がある）、白内障、腎症、感染リスクの上昇、高血圧症、神経疾患、切断のリスク、インポテンス、糖尿病性ケトアシドーシス、及び認知症等の第２の健康問題をもたらす可能性がある。
【０００７】
糖尿病には、膵臓のベータ細胞によるインスリンの生産レベルを基準として２つの主要な型があり：１型糖尿病は、糖尿病総人口の5から10％で、一般に小児期に発症し、小児糖尿病（ＪＤ）又はインスリン依存性糖尿病（ＩＤＤＭ）として知られている。ＩＤＤＭでは、人生の初期に体自体の免疫システムによって膵臓のベータ細胞が損傷し、それによって、インスリンが殆ど又は全く生産されなくなるということが、医学的なコンセンサスである。従って、ＩＤＤＭを患っている個人は、インスリン注射に日々依存している。２型糖尿病は、糖尿病総人口の90から95％で、非インスリン依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）としても知られている。ＮＩＤＤＭでは、膵臓のベータ細胞はインスリンを生産するものの、健康な血糖値を維持するのに十分な量のインスリンを生産しないということが、医学的なコンセンサスである。インスリンが不十分であることに付随して、問題が悪化し、インスリン耐性、即ち、細胞でのインスリンの作用の有効性をとりなす分子機構が劣化する。
【０００８】
糖尿病の厄介な問題は、基本的に高血糖症、即ち、血中のグルコース濃度が高くなり過ぎた状態と関連がある。高血糖症は、インスリンが不十分であること、単糖を含む食品を過剰に消費すること、運動不足、種々の病気、及び過剰のストレスで引き起こされ得る。高血糖症は、アルドース還元酵素活性を増加させることが可能で、アルドース還元酵素活性は、ソルビトールの蓄積、神経ミオイノシトールの消耗に影響を及ぼし、Ｎａ−Ｋ ＡＴＰ合成酵素活性を変化させる。また、高血糖症は、ジアシルグリセロール及びタンパク質キナーゼＣ活性を増加させ、血管平滑筋の収縮性及びホルモン応答を変化させ、また、内皮細胞透過性を変化させる。更に、高血糖症は、内皮及びマクロファージ受容体を活性化して糖化最終産物（ＡＧＥ）を増加させる非酵素的な糖鎖付加プロセスと関係しており、リポタンパクプロファイル並びにマトリクス及び基底膜タンパク質を変化させる。やがて、高血糖症及びその厄介な問題は、最終的には、昏睡状態や死をもたらす。
【０００９】
血糖及び血中インスリンの変動は、食欲、空腹感、及び体重増加と関係することが多い。グルコースは、体の細胞への主たるエネルギー供給栄養素であり、そのため、血液から細胞中へのグルコースの輸送が細胞機能にとって根本的に重要である。全体的に見ると、グルコースの摂取及び貯蔵対グルコースの代謝とエネルギーとしての消費と間のバランスが、体重の安定における決定的な因子である。長期の正の貯蔵バランスが体重の増加をもたらす一方、負の貯蔵バランスは、体重の減少をもたらす。逆に、食物摂取の量及び質が、体内のインスリン生産及び血糖値に影響し得る。カロリーが高く炭水化物及び単糖が豊富な食物を食べることで、脂肪細胞（脂質貯蔵細胞）の数及びサイズの両方の増加に至る可能性がある。かかる増加は、インスリン耐性、糖尿病、高血糖症、高コレステロール、高血圧及び他の健康リスクと関係がある。
【００１０】
一般に、インスリンを含む複雑な恒常性維持機構が、脂肪細胞及び筋肉細胞中へのグルコースの摂取及び貯蔵をコントロールし、それによって血糖値を一定に維持することで、血糖値を調節する。しかしながら、これらの機構は、内部及び／又は外部の環境刺激によって過剰にストレスを受けると正常に機能しなくなり、チェックしないままの場合、肥満、高血糖症、及び／又は上述の糖尿病の状態に至る可能性がある。糖尿病に加えて、"Ｘ症候群"又は"メタボリックシンドローム"と名付けられた疾病も、グルコース代謝の欠陥（インスリン耐性）、血圧の上昇（高血圧症）、及び血中脂質のバランスの悪さ（異常脂質血症）を伴う。（Reaven, 1993, Annu. Rev. Med. 44: 121-131参照。）
【００１１】
血糖値の異常を患っている人のインスリンの分泌及びグルコースの摂取をより効率的に調節することを目的とした多様で様々な治療が存在し、該治療としては、食事制限、経口高血糖症薬、及び／又は注射によるインスリン代償療法が挙げられる。しかしながら、これら現在の治療は、副作用をもたらす可能性があり；例えば、食事制限は、維持が難しくて、過食症に至る可能性があり；経口高血糖症薬は、頭痛、急激な気分変動、及び体重増加をもたらす可能性あり；インスリンの投与は、しばしば、脂肪細胞等の多くの細胞によって非選択的にグルコースの摂取が促進されることにより、血糖を低下させ、望ましくない体重増加の原因となる。従って、種々の異なる治療手段の正と負の効果のバランスを取るためには、継続的な治療の変更及び監視が、必要なことが多い。
【００１２】
しかしながら、最も功を奏する治療は、食事制限、治療薬の投与、及び食品補足を含む多角的な方法で、この問題にアプローチするものである。従って、バナバの葉及び花由来の抽出物は、グルコース摂取のコントロールを助ける点において、大いにインスリンのように機能するため、バナバは、血糖値の調節、食欲の抑制、及び／又は他の種々の高血糖症及び糖尿病に対する治療体制の促進のための組み合わせ治療における効果的なサプリメントとしての潜在能力を有するものと思われる。
【００１３】
バナバ葉抽出物は、トリテルペノイド化合物、即ち、コロソリン酸（２-ヒドロキシウルソル酸）を含み、該コロソリン酸が抽出物の活性成分であると考える人もいる。出願人は、現在受け入れられている見解として、このことを理解するが、医薬としての活性を有するものとして、変性することが可能な他のサルスベリ属起源の化合物が関係していると見なせる情報を掴んだものと考えている。フトシ・マツヤマの米国特許第６,４８５,７６０号及び第６,７１６,４６９号は、オオバナサルスベリ抽出物を含み、濃縮物100 mg当りコロソリン酸含量が0.01から15 mg（0.01％から15％）の組成物を投与することにより、患者の血糖値の増加を阻害し、或いは低減する方法及び組成物を開示している。ウデル（Udell）らの米国特許第６,７８４,２０６号は、コロソリン酸を1％の含量で含むソフトゲルカプセルの製造方法を開示している。これらの特許に開示されているように、コロソリン酸を含む種々のバナバ抽出組成物が、インスリンの模倣体として提案されているが、これらの組成物は、医薬としての期待を完全には満たしておらず、伝統的なバナバ葉の茶及び煎じ薬の効果をもたらすに留まっている。更に、コロソリン酸を1％含むように標準化された抽出物を用いた幾つかの研究は、血糖低下作用を明らかにできておらず、例えば、Hong H及びMaeng WJ, "Effects of malted barley extract and banaba extract on blood glucose levels in genetically diabetic mice", J Med Food. 2004; 7 (4): 487-490; Edens N及びSkelding MB, "Oral administration of Lagerstroemia speciosa extract may delay starch digestion, but does not improve oral glucose tolerance in Zucker diabetic fatty rats", Diabetes. 2003; 52 (suppl. 1): A385-A386を参照されたく、また、該葉の単なる温水抽出物を使用した他の研究（スズキ Yら, "Antiobesity activity of extracts from Lagerstroemia speciosa L. leaves on female KK-Ay mice", J Nutr Sci Vitaminol. 1999; 45 (6): 791-795）を同様に参照されたい。これらバナバ葉の抽出物が実現できていない期待及び矛盾した結果の理由は、明らかではない。一つの可能な説明としては、抽出の状態及び工業的に利用可能な処理方法が完全でないことに加えて、バナバ葉内の活性剤の理解が完全ではなく、一般に、単一の活性成分としてコロソリン酸に焦点を当て、バナバ葉抽出物内の他の化合物を事実上排除していることが挙げられる。
【発明の開示】
【００１４】
本発明は、オオバナサルスベリ（バナバ）植物の葉に由来する医薬組成物、治療組成物、及び栄養補助食品組成物に関するものである。本発明の第１の目的は、コロソリン酸、ガロタンニン類、エラジタンニン類、及びヴァロン酸ジラクトンに関する様々な組成物の制御された混合物を含む医薬組成物、治療組成物、及び食品組成物を提供することにある。ガロタンニンは、公式化学名：ペンタ-Ｏ-ガロイル-Ｄ-グルコピラノース（ＰＧＧ）としても知られており、アルファ形態及びベータ形態の両方で存在している。幾つかの組成物は、より高い濃度でコロソリン酸を含み、ガロタンニン類、エラジタンニン類、及びヴァロン酸ジラクトンの濃度に関してバランスされており、また、他の実施態様は、コロソリン酸濃度が低い又はコロソリン酸が存在しない、或いは、コロソリン酸を実質的に含まないものの、前述の植物化学物質が濃縮されている。この意味での”実質的に含まない”とは、従来の分析方法ではコロソリン酸が存在しないこと、或いは、他の植物化学物質の総濃度に比べて非常に低い濃度、例えば、総濃度の約2％以下の濃度であることをさす。
【００１５】
従って、本発明の実施態様は、バナバ葉の新規抽出プロセスから得られるコロソリン酸が約15.5％から約98.5％の混合物を含む新規組成物、即ち、インスリンの分泌及びグルコースの摂取を効率的に制御することに関して驚くべき健康上の利益をもたらす組成物を含む。幾つかの実施態様では、本発明の新規組成物は、コロソリン酸、ガロタンニン類、エラジタンニン類、及び／又はヴァロン酸ジラクトンの混合物の様々な組み合わせを含み；ここで、コロソリン酸の濃度は、混合物の約15.5％から約80％であり、ガロタンニン及びエラジタンニンの合計濃度は、混合物の約20％から約85％であり、及び／又はヴァロン酸ジラクトンの濃度は、混合物の約0.01％から約20％である。更に他の実施態様は、コロソリン酸が存在しない、或いは非常に低濃度で存在し、その代わり、存在する活性化合物はタンニンが豊富で、ガロタンニン類及びエラジタンニン類の組み合わせ化学種を含み、ガロタンニン類及びエラジタンニン類が組成物の約10％から約98％を構成している組成物を含む。かかる実施態様は、更に、ヴァロン酸ジラクトンを含んでもよい。
【００１６】
治療組成物及び食品組成物を提供する第１の目的には、組成物の活性剤の最適且つ適切な輸送を支える賦形剤及び被覆物を含む適切な処方設計を提供することが含まれる。例えば、タンニン類は、消化管内で出くわすタンパク質との反応性が高いことが知られている。従って、例えば、幾つかの実施態様においては、粒径を例えば20ミクロンの範囲に制御したり、粒子の表面特性を制御するナノテクノロジーによるアプローチに加えて、腸溶性被覆物が提供される。更に他の実施態様においては、効率的且つ適切な輸送のために小腸領域に輸送することを目的とする微小カプセル化被覆物が提供される。
【００１７】
本発明の第２の目的は、オオバナサルスベリ植物の葉に由来する医薬組成物、治療組成物、及び食品組成物の調製方法乃至プロセスを提供することにあり、これら組成物は、天然のコロソリン酸、並びにガロタンニン類、エラジタンニン類、及び両方の主タンニン類の加水分解性形態が豊富であり、該両方の主タンニン類は、ヴァロン酸を生成し、それにより、単独で又は他の補足的な促進成分と共に、バナバ葉抽出物の全体的な利益を生み出す。本発明の第３の目的は、コロソリン酸を含まない、或いは実質的に含まない抽出物の調製プロセスを提供することにある。従って、これらの実施態様によれば、エラジタンニン類及びガロタンニン類の様々な化学種を含むバナバ由来タンニン類に由来する治療上の利益の発現に焦点を当てることが可能になる。
【００１８】
従って、本発明の１つの視点では、オオバナサルスベリ植物の葉に由来する医薬組成物、治療組成物、及び／又は食品組成物の経済的な製造方法が提供される。一実施態様では、コロソリン酸が約15.5％から約98.5％、特には約20％から約80％であるコロソリン酸リッチな抽出産物を生成する経済的なプロセスが提供される。他の実施態様では、ガロタンニン類及びエラジタンニン類が約2.5％から約85％、好ましくは約20％から約60％、最も好ましくは約40％の、タンニン酸濃度が高くガロタンニン類及びエラジタンニン類の両方が豊富な抽出産物を生成する経済的なプロセスが提供される。更に他の実施態様においては、高濃度のコロソリン酸を抽出する経済的なプロセスを、高濃度のガロタンニン類及びエラジタンニン類を抽出する経済的なプロセスと組み合わせて、コロソリン酸と高度に濃縮されたタンニン酸濃縮物との両方を含み、天然に生じるエラジタンニン類に対してカスタマイズ可能な比でガロタンニン類が存在している組み合わせ製品を製造する。更にその他の実施態様では、コロソリン酸を含まない、或いは、コロソリン酸の濃度が非常に低い組成物を生成する方法が提供される。これらのプロセスは、特には、抽出物におけるガロタンニン類及びエラジタンニン類化学種の濃度を向上させる。更には、上記プロセスの何れも、コロソリン酸、ガロタンニン類及びエラジタンニン類の混合物を含み、ヴァロン酸ジラクトンの栄養的な輸送を向上させるために特別に抽出されたタンニン類の加水分解性形態を含む組み合わせ製品を製造するために、ヴァロン酸ジラクトンの抽出プロセスと組み合わせることができる。更に他の実施態様は、コロソリン酸が存在しない、或いは非常に低濃度で存在し、その代わり、存在する活性化合物はタンニンが豊富で、ガロタンニン類及びエラジタンニン類の組み合わせ化学種を含み、ガロタンニン類及びエラジタンニン類が組成物の約10％から約98％を構成している組成物を含む。かかる実施態様は、更に、ヴァロン酸ジラクトン及び尿酸を含んでもよい。
【００１９】
本発明の第４の目的は、疾病、特には、グルコースの代謝障害が現れるようなものの治療方法又は予防対策を提供する方法、或いは、グルコースの代謝効率が良いこと、インスリンの分泌及び血中インスリンのレベルが適度な範囲内に維持されていること、砂糖及びアミノ酸の適切な代謝、及び適正体重が維持されていることに起因して、明白な疾病が存在しなくても、広く健康に良い効果、及び健康生活感を増強する方法を提供することにある。尿酸の代謝障害は、糖尿病と関係が有る、或いは、糖尿病の一因である可能性もあるので；本発明のバナバ由来組成物は、例えば、血中の尿酸値が高くなることによって現れる該障害の治療にも好適であるかもしれない。例えば、固形及び液状製剤による経口ルート、並びに皮内、筋肉内、腹腔内、皮下、硬膜外、舌下、大脳内、膣内、経皮投与等の他のルート等の総ての標準的なルートの投与用の製剤が提供される。更に、経口投与に関しては、消化管環境がタンニン類及び他の化合物の生体利用効率に決定的に重要な意味を持つ可能性があるので、治療の実施態様は、製剤の投与スケジュールを含む。従って、例えば、患者、被験者、又は直接消費者は、食間、即ち、胃中のタンパク質含量が低い時に、経口製剤を自己投与する治療方法をアドバイスされる。
【００２０】
本発明の第５の目的は、オオバナサルスベリの抽出物と血糖のコントロールに関して治療上又は健康上の利益を有する他の第２剤とを組み合わせ、それによって、各剤が単独でもたらす能力及び利益を向上させる治療組成物を提供することにある。一時的又は慢性的な高い血糖値は、糖尿病及びメタボリックシンドロームと関係が有る。更に、糖尿病は、高尿酸血症と関係があり、そのため、高尿酸血症の治療のために、本発明のバナバ系抽出物を第２剤と組み合わせてもよい。この用法での第２剤は、”第１剤”が本発明の実施態様に従うバナバ植物由来の組成物であり、”第２剤”はバナバ由来のもの以外の化合物又は化合物群であり、かかる第２剤は他の天然資源由来であったり、合成経由であったり或いは従来の医薬又は他の健康関連の製造プロセス経由であることを暗に示している。一例は、加水分解性タンニン類を高濃度で含む組成物の使用である。他のものは、ハイビスカス、緑茶、又はマンゴスチン等の種々の天然資源に由来する、＋／−ヒドロキシクエン酸（ＨＣＡ）に規格を定めたハイビスカス抽出物である。更には、ここに記載した本発明の組成物を、インスリン自体又は他の経口抗糖尿病薬等の血糖値をコントロールするのに使用される標準的な薬剤の何れかと組み合わせて、使用することができる。
【００２１】
本発明の実施態様は、バナバ葉等の単一天然資源内に存在し、異なる極性を有する植物化学物質の特定のグループ及びサブグループを標的とした抽出技術を使用するコンセプトを基本としている。かかる標的戦略は、前駆抽出物又は別々の抽出画分を生成させるものであり、該前駆抽出物又は別々の抽出画分は、（１）抽出プロセスを分けること及びその後（２）得られた抽出物を最終抽出組成物に再混合することを経てのみ製造できる新規抽出組成物完成品の組み立てにおける構成成分となる。かかるモジュール化されたサブプロセス及び混合は、従来の単一経路の抽出コンセプト乃至技術によっては産出することのできない製品をもたらす。単一天然資源内の極性若しくは非極性の成分を目的として抽出媒体をカスタマイズすることによって、或いは、他の組み合わせ比の溶媒極性の抽出媒体でもよいが、更に他の”目的構成抽出物”と混合することを予定された植物化学物質混合物、即ち、薬剤として新規で且つ有効であることが明らかとなった、植物化学物質の濃度を化合物ごとにコントロールした最終抽出組成物を獲得する。
【００２２】
前述及び他の目的、利点、並びに特性が、以下の本発明の特定の説明用実施態様の記載から明らかとなるであろう。本発明の製剤は、医薬組成物、治療組成物、及び食品組成物の領域で特に有効であることが明らかとなっているが、当業者であれば、他の製剤及び混合物を、種々の異なる用途に用い、並びに種々の異なる領域の製造に用いて、非常に広範囲の医薬及び医療ニーズを満足させられることが分かるであろう。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２３】
（医薬組成物、治療組成物、及び／又は食品組成物）
１．活性成分
本発明は、オオバナサルスベリ植物（バナバ植物）由来の医薬組成物、治療組成物、及び／又は食品組成物に関するものである。その伝統的な固有の用途から、バナバ葉は、血糖値のコントロールに有効であり、そのため、抗糖尿病薬として作用する。背景に記載したように、コロソリン酸は、葉及び葉の伝導的な抽出物の抗糖尿病作用の活性剤又は原因活性剤の候補として注目を集めてきた。これに関するコロソリン酸の該効能を支持するデータにも関わらず、データは、バナバ葉の医学特性の中心にコロソリン酸を据えるこの理論と完全には一致していない。本発明者らは、コロソリン酸は有意の薬剤であり得ると思うものの、バナバ葉中に存在する他の植物化学的な化合物がバナバ葉によってもたらされる潜在能力の全体への重要な寄与物である可能性を考慮した。種々の成長段階、異なる場所、種々の季節における収穫でのバナバ葉の植物化学物質プロファイルに関する現場作業、並びに種々の抽出方法、ＨＰＬＣによる抽出物の定性及び定量分析、並びに動物調査を含めた本発明者らの検討は、ヴァロン酸ジラクトンと同様に、バナバ葉中に存在する多数のタンニン類に本発明者らの注目を向けさせた。タンニン類は、傑出してエラジタンニン類及びガロタンニン類を含み、それらを抽出し、同定し、定量した（以下の"例"の記載並びに図８〜１７参照）。
【００２４】
文献に記載の個々の検討の閲覧並びに本発明者らの独自の作業から、本発明者らは、タンニン類と同様に、特には、ヴァロン酸ジラクトンのグルコース調節効果が、酵素の活性が血中において高レベルの尿酸の原因となり得るキサンチン酸化酵素の阻害を経て、少なくとも一部介在するとの理論を立てた。医学文献における種々の検討は、インスリン耐性の２型糖尿病を伴う高尿酸血症とメタボリックシンドロームとの間の関連性を注記している。本発明者らは、ヴァロン酸ジラクトンによってキサンチン酸化酵素活性が阻害されることに気付き、また、エラゴタンニン類によってキサンチン酸化酵素活性がより軽度で阻害されることに気付いた。塩酸に曝したバナバ葉抽出物は、ヴァロン酸のレベル上昇を示したため、バナバ抽出物は、消化管の酸リッチ環境では、利用可能なヴァロン酸量が上昇することが分かる。そのため、本発明者らは、タンニン化学種及びヴァロン酸ジラクトンの利益のみの利用、並びに該利益とコロソリン酸の効果とを組み合わせた利益の利用の両方を可能とするために、コロソリン酸を含むものとコロソリン酸を除いたものとの両方の製剤を開発した。
【００２５】
より詳しくは、ここに記載した本発明の組成物は、バナバ植物の葉に由来する抽出物を含む天然配合物を、独自に提供する。本発明においては、バナバ葉から抽出した約15.5％から約98.5％のコロソリン酸濃縮物が、約2.5％から約85％のエラジタンニンリッチ抽出産物と組み合わされ、医薬組成物、治療組成物、及び／又は食品組成物に調合された場合、組み合わせ混合物が、血糖値のコントロールに関して顕著な健康上の利益を与える、驚くべき相乗効果を生み出すことを発見した。これらの利点は、ヴァロン酸ジラクトンを生成する加水分解性タンニン類の形成を経て、或いは加水分解工程がより高濃度のヴァロン酸ジラクトンを保有する抽出物をもたらすバナバ起源タンニン酸類に対する予備処理工程を経て、バナバ植物の葉から抽出できるヴァロン酸ジラクトン産物を混合物中に含ませることで、向上させることができる。
【００２６】
従って、一実施態様において、本発明は、約15.5％から約98.5％のコロソリン酸を含む組成物を対象とする。他の実施態様において、本発明は、約2.5％から約85％のエラジタンニン類を含む組成物を対象とする。更なる実施態様において、本発明の新規組成物は、コロソリン酸、ガロタンニン類、エラジタンニン類、及び／又はヴァロン酸ジラクトンの混合物の種々の組み合わせを包含し；ここで、コロソリン酸の濃度は、混合物の約15.5％から約80％であり、ガロタンニン／エラジタンニンの濃度は、混合物の約2.5％から約85％であり、並びに／或いは、該組成物は、ヴァロン酸ジラクトン成分を混合物の約0.01％から約20％の濃度で含んでもよい。
【００２７】
２．製剤及び投与ルート
本発明の組成物は、所望の治療効果を達成するのに必要な投与ルート（例えば、経口ルート、舌下、注射）で通常利用される総ての医薬として許容される形態を包含することができる。従って、本発明の組成物を、単位用量形態（例えば、硬い又は柔らかいゼラチンでカプセル化された又はタブレットの形態）で、経口投与のために、上皮又は皮膚粘膜ライニングを通した吸収による投与のために、舌下投与のために、或いは、注入又はボーラス注入法を経た投与のために、調合及び用いることができる。また、例えば、病巣内又は硬膜外注射のために、溶液及び微小エマルジョン等の容易流動性を有する形態も採用できる。また、本発明の組成物を、他の如何なる便利なルートによる投与、例えば、経鼻投与又は吸入投与用に製剤化してもよく、それ自体で又は他の生物活性物質と共に投与してもよい。しかしながら、本発明の組成物は、典型的には経口又は舌下投与用を目的としている。
【００２８】
経口及び／又は舌下投与のために、主題の組成物を、かかる用途のために通常採用される医薬として許容可能な総ての形態に製剤化してもよい。より詳しくは、経口投与用には、主題の組成物を、タブレット、ウエハーカプセル、ゼラチンカプセル、薬用キャンディー、水性若しくは油性懸濁液、顆粒、粉末、エマルジョン、他のカプセルの形態に製剤化することができ、或いは、それらを、飲用に適する液体として、例えば、シロップ、懸濁液、又はエリキシル剤として製剤化することもできる。これらの組成物を、当該技術分野で周知の一般的な方法で製剤化することができる。
【００２９】
任意に、本発明の医薬組成物、治療組成物、及び／又は食品組成物は、医薬として味の良い製剤をもたらすために、フルクトース、アスパルテーム又はサッカリン等の甘味剤；ペパーミント、ウィンターグリーン油、又はチェリー等のフラボノイド香料添加剤；着色剤；保存剤等のかかる分野で一般的な一種以上の精製又は非精製添加剤及び助剤を含んでもよい。従って、該組成物は、酸化防止剤、溶剤、充填剤、染料、及び顔料、並びに、親水性若しくは親油性ゲル化剤又は活性剤を含んでもよい。
【００３０】
これらの種々の添加剤及び助剤の量は、考慮する分野においてそれらが通常用いられる量であり、例えば、組成物の全重量の約0.01％から約90％の範囲である。好適な例となる親水性ゲル化剤としては、カルボキシビニルポリマー（カルボマー）、アクリレート／アルキルアクリレートコポリマー等のアクリルコポリマー、ポリアクリルアミド、ヒドロキシプロピルセルロース等の多糖類、天然ガム、クレーが挙げられ、親油性ゲル化剤としての代表例としては、ベントン等の変性クレー、ステアリン酸アルミニウム等の脂肪酸金属塩、及び疎水性シリカ、又はエチルセルロース及びポリエチレンが挙げられる。例となる組み入れ可能な親水性活性剤としては、タンパク質若しくはタンパク質加水分解物、アミノ酸、ポリオール、尿素、アラントイン、砂糖及び砂糖誘導体、水溶性ビタミン、及びスターチ、並びに他の植物抽出物が挙げられる。また、例となる親油性活性剤としては、ビタミン、必須脂肪酸、セラミド及び精油が挙げられる。
【００３１】
更に、タブレット又は錠剤形態の場合は、前記組成物は、胃腸管内での崩壊及び吸収を遅らせ、それによって長期間に渡って持続した作用をもたらすために、被覆されていてもよい。グリセロールモノエステルやグリセロールステアレート等の時間遅延物質を使用することができる。従って、本発明の組成物を、制御された放出システムで供給することができる。例えば、治療上受け入れ可能な溶剤、増粘剤（持続した放出を付加するために）、又はタンパク質の反応を低減するための特注コーティング、或いはそれらの組み合わせが含まれていてもよい。例となる本発明に従う溶剤としては、低級アルコール、特には、メタノール、エタノール、及びイソプロパノール、並びに、ブチルアルコール及びプロピレングリコール等の他の大部分のアルキルアルコール等が挙げられる。ポリマー材料等の例となる増粘剤を使用してもよい。（Medical Applications of Controlled Release, Langer及びWise (eds.), CRC Pres., Boca Raton, Fla. (1974); Controlled Drug Bioavailability, Drug Product Design and Performance, Smolen and Ball (eds.). Wiley, New York (1984); Ranger及びPeppas, 1983, J. Macromol. Sci. Rev. Macromol. Chem. 23:61参照；また、Levyら, 1985, Science 228:190; During et al., 1989, Ann. Neurol. 25:351; Howardら, 1989, J. Neurosurg. 71:105も参照）。本発明に従って使用可能な他の制御放出システムが、Langerによる概説, 1990, Science 249:1527-1533に記載されている。更に、種々の他の成分をバナバ抽出成分に添加して、最終正味重量の組成物を作り上げてもよい。
【００３２】
本発明の経口組成物は、更に、マンニトール、ラクトース、スターチ、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウム等の賦形剤を含んでもよい。更に、本発明の組成物は、賦形剤を含んでもよいし、該賦形剤中に含まれてもよく、該賦形剤は、水及び油等の液体であってもよく、また、該賦形剤としては、ピーナッツオイル、大豆油、鉱油、糠油、ゴマ油等の石油、動物、植物若しくは合成起源のものが挙げられる。本発明の配合物を静脈内投与する場合、水が典型的な賦形剤である。また、液体賦形剤、特には注射液として、食塩水及びデキストロース水溶液を使用してもよい。
【００３３】
また、本発明の組成物は、アカシア由来ガム、ゼラチン、スターチペースト、タルク、ケラチン、コロイダルシリカ、蜜蝋、尿素等の賦形剤中に含まれていてもよい。また、好適な賦形剤としては、スターチ、グルコース、ラクトース、スクロース、麦芽、米、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、グリセロールモノステアレート、塩化ナトリウム、乾燥スキムミルク、グリセロール、プロピレン、グリコール、メタノール、エタノール、プロパノール等の賦形剤が挙げられる。更には、助剤、安定化剤、増粘剤、潤滑剤、及び着色剤を使用してもよい。また、本発明の組成物は、所望により、少量の湿潤剤又は乳化剤、或いはｐＨ緩衝剤を含むことができる。
【００３４】
従って、本発明の組成物は、溶液、懸濁液、エマルジョン、タブレット、錠剤、ペレット、カプセル、ゼラチンカプセル、カプセル含有液、粉体、持続する放出剤形、坐薬、エマルジョン、エアロゾル、スプレー、懸濁液の形態をとることができ、或いは使用に好適な他のあらゆる形態をとることもできる。一実施態様において、医薬として許容される賦形剤は、カプセルである（例えば、米国特許第５,６９８,１５５参照）。好適な医薬用賦形剤の他の例が、E. W. Martinによって"Remington's Pharmaceutical Sciences"に記載されている。バナバ葉抽出混合物がジュース濃縮物で補完されている場合、液体飲料が便利な供給形態である。被験者に投与する際に、本発明の組成物及び治療上受け入れ可能な賦形剤は、一般的には、殺菌されている。本発明の組成物の種々の構成成分の量は、考慮している分野で通常使用される量であり、当該技術分野で周知の手段及び組み合わせで、目的に応じて種々の組成物に製剤することができる。
【００３５】
投与の適切なモードは、開業医に裁量の余地を残し、もちろん、患者の詳細及び医療状況に依存する。大部分の例で、投与は、本発明の組成物の血流への放出をもたらす。典型的には、投与は、経口ルートを経るが、但し、組織的であっても局所的であってもよい。このことは、例えば、限定を目的とするものではないが、局所注入、注射によって、又は吸入器若しくは噴霧器とエアロゾル化剤を含む製剤の使用による肺投与によって、或いはフルオロカーボン又は合成界面活性剤中でのかん流を経て、達成してもよい。
【００３６】
本発明のある実施態様では、本発明の組成物を、少なくとも一種の他の治療薬を含む併用療法に用いることができる。本発明の配合物及び治療薬は、付加的に作用することができ、或いは、相乗的に作用する場合もある。特定の実施態様では、本発明の組成物を、他の治療薬の投与と同時に投与し、該他の治療薬は、本発明の配合物と同じ組成の一部であってもよいし、異なる組成であってもよい。他の実施態様では、本発明の組成物を、他の治療薬の投与の前又は後に投与する。かかる第２剤の例としては、ギムネマ酸、フェヌグリークの抽出物及びそれから単離された特定の植物化学物質、苦瓜、ハートウッド抽出物、サラシア抽出物、及び他の植物化学物質、特には、グルコース調節の利益となるもの、並びに、複合アミノ酸補助物が挙げられ、それらの何れも、本発明の全体での利益の向上に、付加的に又は相乗的に作用する可能性がある。
【００３７】
治療において、本発明の配合物が有効な疾患の多くは、慢性疾患であり、一実施態様では、併用療法は、例えば、特定の薬に付随する毒性を最小化するために、本発明の配合物を含む組成物及び他の治療剤を含む組成物の投与を交互に行うことを含む。各薬若しくは治療剤の投与の継続期間は、例えば、一ヶ月、三ヶ月、六ヶ月、又は一年とすることができる。ある実施態様では、本発明の組成物を、特に限定されるものではないが、毒性等の逆の副作用を潜在的にもたらす他の治療剤と同時に投与することができ、該治療剤を、不利な面が顕在化する閾値以下の用量で、有益に投与することができる。
【００３８】
本発明の組成物は、治療に有効な量、典型的には精製された形態で、投与されるべきであり、被験者への適切な投与形態をもたらすために、適当な量の治療上許容される賦形剤と共に、供給されるべきである。ここに記載された特定の疾患又は状態の治療に有効な本発明の配合物の量は、疾患又は状態の性質に依存し、標準的な医療技術によって決定することができる。更に、最適な用量の範囲の確定を助けるために、任意選択的にインビトロ又はインビボ検査を採用してもよい。また、前記組成物において用いられる正確な用量は、投与ルート及び疾病又は疾患の深刻さにも左右され、医師の判断及び各患者の状況に従って決定されるべきである。しかしながら、経口投与用の好適な用量の範囲は、通常、体重1キログラム（kg）当り、本発明の配合物約0.001ミリグラム（mg）から約200 mgである。
【００３９】
コロソリン酸を含む本発明の特定の実施態様では、経口量は、約0.01から約70 mg/Kg-体重、好ましくは約0.1から約50 mg/Kg-体重、より好ましくは約0.5から約25 mg/Kg-体重、より一層好ましくは約1から約10 mg/Kg-体重の範囲である。最も特定された実施態様では、経口量は、体重1キログラム当り、本発明の配合物5 mgである。コロソリン酸が存在せず、タンニン酸類が主として存在する活性剤である本発明の実施態様では、経口量は、約10から約250 mg/Kg-体重、好ましくは約20から約225 mg/Kg-体重、より好ましくは約40から約200 mg/Kg-体重の範囲である。ここに記載した用量は、投与された全量に対するものであり；即ち、本発明の配合物を二種以上投与した場合、好適用量は、投与された本発明の配合物の合計量に対応する。経口組成物は、好ましくは、約10重量％から約95重量％の活性成分を含む。タンニン類（エラジタンニン類及びガロタンニン類の組み合わせ）又はヴァロン酸ジラクトンのレベルに用量を標準化した場合（本発明の組成物がコロソリン酸を含まず、又はコロソリン酸を低濃度含むものである場合に適当なように）、用量は、コロソリン酸用に上記したものよりも、数倍ほど、例えば、3倍、10倍、100倍、或いはそれ以上高い。
【００４０】
皮内投与、筋肉内投与、腹腔内投与、皮下投与、硬膜外投与、舌下投与、大脳内投与、膣内投与、経皮投与、或いは、吸入投与用のコロソリン酸含有態様の推奨用量は、0.001から200 mg/Kg-体重の範囲である。静脈（i.v.）投与用の好適用量範囲は、0.01から100 mg/Kg-体重、好ましくは0.1から35 mg/Kg-体重、より好ましくは1から10 mg/Kg-体重である。鼻腔内投与用の好適用量範囲は、通常、約0.01 mg/kg-体重から1 mg/kg-体重である。直腸内投与用の坐薬は、通常、体重1キログラム当り、本発明の配合物を0.01 mgから50 mg含み、活性成分を0.5重量％から10重量％の範囲で含む。局所投与用の本発明の配合物の好適用量は、0.01 mgから1 mgの範囲であり、配合物が投与される面積に左右される。有効用量は、当該技術分野で周知のように、インビトロ又は動物モデル試験システムから導かれる用量−応答カーブから外挿してもよい。経口量の関連で上記したように、コロソリン酸を含まないものの、主活性成分としてタンニン類を含む、本発明のバナバ由来抽出物の実施態様の用量は、用量範囲が10から100倍ほど高い。
【００４１】
従って、本発明の組成物は、所望の治療又は予防活性のために、ヒトに使用する前に、典型的には、インビトロ及びインビボで検査される。例えば、インビトロ検査を用いて、本発明の特定の配合物又は本発明の配合物の組み合わせの投与が、脂肪酸合成の低減に好適であるか否かを判断することができる。また、本発明の配合物が、実験室内動物モデルシステムを用いたインビボ研究において、有効且つ安全であることを実証してもよい。
【００４２】
更なる視点において、本発明は、被験者又は患者に、本発明の組成物を治療に有効な量投与することによって、予防及び治療する方法を提供するものである。被験者は、ヒトであっても、非ヒトであってもよく、通常、哺乳類であり、非ヒトの単なる例としては、牝牛若しくは去勢牛、馬、羊、豚等の鶏、七面鳥、鶉、猫、犬、マウス、ラット、兎、モルモット等が挙げられる。
【００４３】
３．概観
本発明の一実施態様は、高濃度のコロソリン酸（ＣＲＡ）を抽出するためのプロセスであり；これを抽出プロセス"Ａ"と称することができる。次に記載することは、ＣＲＡ含有量を全く有さない全タンニン類のための、基本的に水のみの抽出プロセス、即ち、抽出プロセス"Ｂ"である。次に記載することは、具体的に目的のガロタンニン類の製造方法、即ち、抽出プロセス"Ｃ"である。その後に記載することは、エラジタンニン類の回収及び分離のための異なる方法、即ち、抽出プロセス"Ｄ"である。一実施態様は、高ＣＲＡ含量と、最終抽出物＃１と称する混合バナバ葉タンニン錯体とを組み合わせるためのものである。
【００４４】
あるタンニン類は、消化管内で加水分解性であり、ヴァロン酸ジラクトン：□-アミラーゼ及びグルコダーゼ阻害基礎構造のタンニン類を有する。この生化学的に変性したタンニングループは、食用砂糖及びスターチの吸収を低減することによって、体重を管理するための補完としての作用メカニズムを有する。
【００４５】
本発明の実施態様は、ガロタンニン及びエラジタンニン組成物の改良された試験方法を提供する。ここに記載されたことは、各タンニングループの各形態及び数パーセントが加水分解性である場合に限る。本発明者らは、バナバの伝統的な用途が水抽出に由来し、ガロタンニン類及びエラジタンニン類に対する作用機構の最近の発見が、この伝統を立証し、また、特定の生理作用を有する少数の植物化学物質を解明したことに気付いた。本発明者らは、タンニン類の両クラスによって、及び加水分解後のヴァロン酸ジラクトンの放出によってもたらされる付加的及び相乗的利点を開示する。
【００４６】
本発明の実施方法の幾つかは、この落葉樹の葉の成熟サイクルの間の二度の機会に、選択的にバナバ葉を収集することに焦点を当てる。一つのピークは、エラジタンニン含量のピークに起こり、第二のピークは、ガロタンニン含量のピークに起こる。次に、２つの異なる抽出を、二種の目的形態のタンニン類のために利用する。最後に、処理方法は、エラジタンニン類に対するガロタンニン類の天然の比率に比べて、ガロタンニン類のパーセントを著しく向上させるような比率で、２つの抽出物をブレンドする。
【００４７】
タンニン類は、タンパク質に対して非常に反応性に富んでおり、投与後のタンパク質とバナバタンニン類との間の消化管内でのかかる反応は、タンニン含有抽出物又は該抽出物で作製された製品の生体利用効率、及び投与に続いて生じる利益を減少させる可能性がある。そのため、開示した治療方法は、日々の食品摂取及び日々の活動の全体に関連する製品の投与スケジュールを含む。治療方法を含む実施態様は、かかるタンパク質の反応が起こり難い食事間に製品（タブレット、飲料、飲料予備混合物、食品、又は食品サプリメント）を摂取するように、消費者を導く。他の実施態様は、タンニン類とタンパク質との反応を避け、或いは著しく限定するために被覆物を使用し、該被覆物を放出用の小腸に運ぶために、本発明のバナバ抽出物を腸溶性カプセル又は微小カプセル化された被覆物中で運ぶことを含む。これらのアプローチは、理論的にタンニン類の加水分解を低減し、タンニン酸類の幾つかのグルコース輸送刺激（インビトロ）；前脂肪細胞識別（インビトロ）；ＰＰＡＲ（ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体-ガンマ）発現調節に対する抽出物の活性をより高くすることを目的とするものである。被覆された抽出物及び被覆されていない抽出物、並びに、特には、ガロタンニン類をより高い比率で含む被覆された抽出物を組み合わせて、両作用機構用の単一製品の形態で、抽出物の両形態を使用することも可能である。
【００４８】
本発明の一実施態様は、加水分解性で、アルファ-アミラーゼ及びグルコシダーゼ阻害効果のためのヴァロン酸ジラクトンに、より高いパーセンテージで転換するタンニン類を含有する組成物を含む。タンニン類の分子量が生体利用効率に影響するので、バナバタンニン抽出物にナノテクノロジー方法を施して内容物のサイズを20ミクロンよりも小さくし、タンニン酸系の配合の全体での効能を向上させる抽出後製造工程が含まれる。追加の腸溶性又は微小カプセル化コーティングは、反応性を低減することで全体での生体利用効率を更に向上させる。また、最後に、投与スケジュールの調節によって、両技術を更に改良することができる。
【００４９】
（本発明の医薬組成物、治療組成物、及び／又は食品組成物の使用方法）
本発明によれば、本発明の組成物は、治療上受容可能な賦形剤を含んでもよく、必要とする被験者、典型的にはヒトに投与され；該必要とする被験者としては、グルコース代謝障害、糖尿病、高血糖症、肥満、膵炎、高血圧症、Ｘ症候群、又は炎症を患った被験者が挙げられる。"治療"又は"処理"は、疾病又は疾患の改善、或いはその少なくとも１つの兆候を意味し、これらは、被験者が認識できるものでも、認識できないものでもよい。また、"治療"又は"処理"は、疾病又は疾患の発現の遅延又は進行の阻害、即ち、例えば、認識できる兆候の肉体的安定化、又は、例えば、物理パレメーターの生理学的安定化のいずれか或いは両方を意味してもよい。
【００５０】
ある実施態様では、本発明の組成物は、かかる疾病に対する予防策として、被験者、典型的にはヒトに投与される。ここで使用する"予防"又は"防止"とは、所定の疾病又は疾患を発症するリスクの低減を意味する。種々の実施態様では、本発明の組成物は、被験者、典型的には、糖尿病等のグルコース代謝障害、高血糖症、肥満、膵炎、高血圧症、Ｘ症候群、又は炎症に対して遺伝的若しくは非遺伝的素因を有するヒトに、予防策として投与される。
【００５１】
より詳しくは、本発明は、糖尿病等のグルコース代謝障害、高血糖症、肥満、膵炎、高血圧症、Ｘ症候群、又は炎症の治療又は防止方法を提供し、該方法は、被験者に、治療上受容可能な賦形剤を含み得る本発明の組成物を、治療上有効量投与することを含む。ここで使用するように"グルコース代謝障害"との語句は、異常グルコース貯蔵及び／又は利用をもたらす、あるいは異常グルコース貯蔵及び／又は利用の兆候が表われる疾患を意味する。グルコース代謝の兆候（即ち、血中インスリン、血糖）が高すぎる限りにおいては、本発明の組成物は、正常なレベルを回復するために患者に投与される。反対に、グルコース代謝の兆候が低すぎる限りにおいても、本発明の組成物は、正常なレベルを回復するために患者に投与される。グルコース代謝の正常な兆候は、当業者に良く知られている。これら特定の疾病又は状態の一つを抱えると医学的に診断された被験者に対しては、治療を制限する必要はない。多くの人は、ボーダーラインの状態を有し、独自の判断で、グルコースレベル、アミノ酸レベル、代謝ホルモンレベルを、ピークと谷の変化を最少にしつつ中程度に維持することに関して健康上の利点が実証されている剤を利用してもよい。
【００５２】
本発明の組成物が予防又は治療に有用なグルコース代謝障害としては、耐糖能異常；インスリン耐性；インスリン耐性関与胸部、結腸又は前立腺癌；非インスリン依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）、インスリン依存性糖尿病（ＩＤＤＭ）、妊娠性糖尿病（ＧＤＭ）、及び若年発症成人型糖尿病（ＭＯＤＹ）等の糖尿病；Ｘ症候群；高血糖症；低血糖症；膵炎；高血圧症；多嚢胞卵巣；及び高レベル血中インスリン及び／又は血糖が挙げられる。本発明は、更に、例えば、被験者のインスリン感応性及び／又は酸素消費を向上させるために、被験者中でのグルコース代謝を変化させる方法を提供するものである。ここで用いるように"Ｘ症候群又はメタボリックシンドロームの治療又は予防"とは、特に限定されるものではないが、グルコース耐性、高血圧症、異常脂質血症／異常リポタンパク血症等の兆候の治療又は予防を包含し、"グルコース代謝の変化"とは、特に限定されるものではないが、総血中グルコース含量、血中インスリン、血中インスリン／血中グルコース比、インスリン感応性、及び酸素消費量等のグルコース代謝又は関連因子の少なくとも１つの状況の観測可能な（測定可能な）変化をさす。肥満の治療又は予防に加えて、本発明の組成物を個人に投与して、個人の体重減少を促進することができる。
【００５３】
本発明の組成に関する実施態様は、ここに記載した疾病又は疾患を治療又は防止するための動物への使用を目的として、非ヒト動物に投与される。かかる動物としては、家畜及び非家畜が挙げられ、それらは、家の中で生活していても、人のコントロールの下で生活していても、或いは野生の状態で生息していてもよい。家畜の例としては、ペット、実験動物、畜産動物が挙げられる。無脊椎動物も同様に含まれるが、かかる動物は、典型的には、脊椎動物である。一般に、該脊椎動物は、哺乳動物であるが、爬虫類、両生類、魚類、鳥類等の他の部類の脊椎動物も同様に含まれる。動物用途に加えて、本発明の配合物を、家畜類の脂肪分を低減して低脂肪肉を生産するために使用することもできる。非ヒト動物用途のために、本発明の配合物を、動物の飼料経由で、或いは、水浸組成物として経口的に投与することができる。
【００５４】
（バナバ葉抽出物からの医薬組成物、治療組成物、及び／又は食品組成物を製造するためのプロセス）
本発明の目的は、天然コロソリン酸、エラジタンニン類、及び／又はヴァロン酸が豊富なオオバナサルスベリ植物（バナバ植物）由来の医薬組成物、治療組成物、及び／又は食品組成物を、これら組成物が単独又は他の補完及び増強成分と組み合わさってバナバ葉の総体的な利点をもたらすように調製するプロセスを提供することにある。従って、本発明の一視点においては、オオバナサルスベリ植物（バナバ植物）の葉の抽出物由来の医薬組成物、治療組成物、及び／又は食品組成物を製造するための経済的なプロセスが提供される。上記のような製剤の抽出の基礎を成すプロセスの全体の種々の部分又はサブプロセス、並びに、下記のような分析及び試験を図１から８に描写し、各図は詳細なフローチャートであり、アルコール抽出を図１に示し、製品＃１用の抽出プロセスを図２に示し、製品＃２用の抽出プロセスを図３に示し、製品＃２Ａ用の抽出プロセスを図４に示し、製品＃２Ｂ用の抽出プロセスを図５に示し、製品＃３用の抽出プロセスを図６に示し、タンニンの量を増やすプロセス用の抽出プロセスを図７に示し、ヴァロン酸抽出プロセス用の抽出プロセスを図８に示す。
【００５５】
ここに記載した本発明の新規組成物の調製プロセスは、バナバ植物の葉由来の抽出物を含み、異なる成熟レベルの葉を用いた、新規の天然の最終製品を提供する。ある意味では、バナバ抽出プロセスは、原料中の組成、特にはタンニン類の組成を最適化するため、葉の収集と共に現場で始まる。成熟した緑葉は、エラジタンニン含量が高い。本発明者らは、ラジェストロエミン等の特別且つ有意のエラジタンニン類が成熟した赤色バナバ葉中で排他的に或いは主に生じることに気付いた。葉の成熟度、土壌条件、雨季、並びに葉を木から直接収集するか、地面に落ちた後に回収するか等のバナバタンニン類の生成及び比に影響を及ぼす多くの因子が存在する。
【００５６】
本発明では、赤、緑、茶色の葉を特定の比で使用して、有益で治癒力のあるバナバ葉抽出産物の収率の向上をもたらす新規抽出方法を開発した。一実施態様では、ここに記載した方法は、バナバ葉から抽出したコロソリン酸濃縮物を約15.5％から約98.5％産出する。他の実施態様では、ここに記載した方法は、エラジタンニン類が製品中に存在する全タンニン類の約88〜90％で、ガロタンニン類が製品中に存在する全タンニン類の約10〜12％で、総タンニン含量が2.5％から約85％のガロタンニン−エラジタンニンリッチな抽出産物を産出する。更に、ここに記載した新規加工方法を用いて、コロソリン酸及び／又はガロタンニン／エラジタンニン抽出最終産物を、血糖値のコントロール、グルコースの細胞摂取の向上、食用砂糖又はスターチの吸収の低減に関して、予期不能且つ有意の健康上の利益を付与する付加的又は相乗的な効果をもたらす医薬混合物、治療混合物、及び／又は食品組み合わせ混合物に処方することができる。エラジタンニン類の加水分解の後にバナバ植物の葉から抽出すことも可能なヴァロン酸ジラクトン産物を混合物中に含ませることで、これらの利点を更に向上させることができる。最後に、上記のように、天然起源でも合成プロセス経由のいずれでもよい他の所謂第２剤と共に、共製剤化、又は治療管理の組み合わせにより、かかる本発明のバナバ起源の組成物の総ての効能及び健康上の利点を増強することもできる。
【００５７】
650から1850ダルトンの分子量を有するエラジタンニン類が多数存在する。それらは、それらに付加したエラグ酸（ＥＡ）を１から４分子有する。エラジタンニン化学種の近似平均分子量は、約1200ダルトンであり、各化合物は、付加したエラグ酸を平均２分子含む。従って、加水分解したタンニン中の1％のエラグ酸は、2％のエラジタンニンに相当する。エラジタンニン類の分子構造には、分子量が関係する。エラジタンニン類の大部分は、分子の一部として、ヴァロン酸を有する。ガロタンニン類に関しては、ガロタンニンの分子量は、940（ＰＧＧ）と考えられている。それには、５分子の没食子酸（ＧＡ）が付加している。従って、加水分解したタンニン中の1％の没食子酸は、1.1％のガロタンニンに相当する。
【００５８】
葉の多様性におけるバラツキを伴う組成物中のバラツキを理解することは、最終抽出産物の組成における最適な品質及び正確さをもたらすように、抽出プロセスをコントロールする上で重要である。異なるグレードの葉に対する典型的な試験データを以下の表に示す。これらのデータは、異なる葉のブレンドを選択するための重要な基準を表わしている。
2008525497.tif 000002
【００５９】
本発明の一実施態様は、特には、最終医薬組成物、治療組成物、及び／又は食品組成物の約15.5％から約98.5％の成分を構成するコロソリン酸リッチな抽出産物を、バナバ植物の葉から抽出するための新規加工方法に関する。ここに記載した抽出方法は、葉抽出物の最終産物中からコロソリン酸を分離したり、より高比率のコロソリン酸を葉抽出物の最終産物中に含有させる。本発明の特定の実施態様では、抽出プロセスは、単一の医薬組成物、化粧品組成物、治療組成物又は皮膚用組成物の組成混合物の全重量の約20％から約80％の範囲の濃度量の、より詳しくは約40％の濃縮物のコロソリン酸抽出産物をもたらす。
【００６０】
従って、本発明の実施態様に従う抽出プロセスは、異なる成熟レベルの葉の選択を、赤葉を約10〜15％の範囲：緑葉を約50〜60％の範囲：茶色葉を約25〜35％の範囲の比で、より具体的には、赤葉を約10％：緑葉を約60％：茶色葉を約30％の比で行うことを含む。種々の葉の没食子酸含量は、成熟と共に変化し、赤葉は、緑葉よりも最高で20％高く、茶色葉よりも最高で40％高い。赤葉は、エラジタンニン含量が最も低く、水溶性エラジタンニン含量が非常に低い。様々な実験作業から、本発明者らは、上記の利率の葉の使用が、３つの工程プロセスを経て、所望の範囲の総タンニン類、並びにエラジタンニン類及びガラタンニン類の比率を有する最適品質の抽出物をもたらすとの結論に至った。第１工程は、エラジタンニン類を総タンニン含量の約50％及びガロタンニン類を総タンニン含量の約50％含む抽出物を生成するように、選択したバナバ葉の混合物を冷却した脱塩水で徹底的に抽出して、タンニン類を抽出することを含む。第２工程は、エラジタンニン類を総タンニン含量の約95％及びガロタンニン類を総タンニン含量の約5％含む抽出物を生成するように、これらの使用済みの葉を還流条件の水で抽出して、タンニン類を抽出することを含む。他のことを言及しない限り、水を含む総ての加工工程では、脱塩水を利用する。水抽出の後の第３工程は、アルコール溶媒の使用により、第２工程後の使用済みの葉から、コロソリン酸を抽出することを含む。最終成果は、コロソリン酸をより高い濃度で含むバナバ葉抽出物である。本発明に従う水及びメタノールの両方の抽出工程は、幾つかのサブステップを含んでもよい。ここでは様々な量及び容積の境界を定めたが、本発明の精神から逸脱することなく、種々の他の量、及び類似の成分を代用し、並びに／或いは、添加又は削除できることを理解されたい。
【００６１】
典型的には、異なる成熟レベルの葉の選択を、赤葉を10〜15％の範囲：緑葉を50〜60％の範囲：茶色葉を25〜35％の範囲の比で、より具体的には、赤葉を10％：緑葉を60％：茶色葉を30％の比で行うことで、水性抽出物を調製する。次に、選択した葉組成物を挽き、バナバ葉を混合し、次に、約25〜30℃の水で２回抽出する。水抽出用のプロセスは、適切な抽出機中に、既知量（例えば、約750 kgの量）のバナバ葉及び８倍の容積（例えば、6000 L）の水を投入することを含む。水を1時間循環させ、綺麗なタンクに水溶性抽出物（ＷＳＥ＃１）として排出する。次に、更に６倍の容積の水（例えば、4500 L）を、元の抽出機に加える。水を1時間循環させ、綺麗なタンクに水溶性抽出物（ＷＳＥ＃２）として排出する。次に、更に６倍の容積の水（例えば、4500 L）を、元の抽出機に加える。次に、抽出機の外部ジャケットに水蒸気を供給し、水を連続的に循環させながら、約95〜98℃の還流温度で約1時間還流して、混合物を加熱する。加熱後、還流を止め、混合物を排出し、水溶性抽出物（ＷＳＥ＃３）を綺麗なタンク中に収納する。次に、更に６倍の容積の水（例えば、4500 L）を、元の抽出機に加え、次に、得られた混合物を還流条件下で再度95〜98℃まで加熱し、連続的に循環させながら、更に1時間そのままにする。次に、約1時間後、抽出機を排出させ、抽出物（ＷＳＥ＃４）を回収する。次に、この工程を少なくとももう１度繰り返して、抽出物（ＷＳＥ＃５）を生成させる。次に、抽出物ＷＳＥ＃１と抽出物ＷＳＥ＃２を組み合わせて、"バナバ葉の水溶性抽出物"ＷＳＥＢＬ−Ａとラベルされた綺麗な容器中で保管する。次に、同様に、抽出物ＷＳＥ＃３、抽出物ＷＳＥ＃４及び抽出物ＷＳＥ＃５を組み合わせて、"バナバ葉の水溶性抽出物"ＷＳＥＢＬ−Ｂとラベルされた別の綺麗な容器中で保管し、それらを用いて、ガロタンニン抽出物及びエラジタンニン抽出物を個々に作製する。ＷＳＥＢＬ−Ａ及びＷＳＥＢＬ−Ｂを濃縮し、それぞれスプレー乾燥した後、特定の比で混合して、製品＃１を生成させる。
【００６２】
典型的には、水抽出プロセスでは、以下のように操作を行う：
１．異なる成熟レベルを有するバナバ葉の選択物を特定範囲の比で既知量、適当な抽出機に投入し、
２．約８倍の容積の水を抽出機に投入し、
３．水を1時間循環させる。
４．水溶性抽出物（ＷＳＥ＃１）として、抽出物を綺麗なタンクに排出及び濾過する。
５．更に６倍の容積の水（例えば、4500 L）を、元の抽出機に加え、
６．水を1時間循環させ、水溶性抽出物（ＷＳＥ＃２）として、抽出物を綺麗なタンクに排出及び濾過し、
７．更に６倍の容積の水（例えば、4500 L）を、元の抽出機に加え、
８．外部ジャケットに水蒸気を供給して抽出機を加熱し、水を連続的に循環させながら、（95〜98℃）の温度で1時間還流し、
９．抽出物（水溶性抽出物＃３）を濾過し、適切且つ綺麗な容器中に保管し、
１０．工程＃７から９を更に２回繰り返し（水溶性抽出物＃４及び５）、
１１．ＷＳＥ＃１とＷＳＥ＃２を組み合わせて水溶性抽出物（ここでは、ＷＳＥＢＬ−Ａと称する）とし、綺麗な容器中に保管し、
１２．水溶性抽出物ＷＳＥ＃３、ＷＳＥ＃４及びＷＳＥ＃５を組み合わせて（ここでは、ＷＳＥＢＬ−Ｂと称する）、綺麗な容器中に保管し、
１３．ＷＳＥＢＬ−Ａ及びＷＳＥＢＬ−Ｂを、それぞれ濃縮及びスプレー乾燥し、
１４．ＷＳＥＢＬ−Ａ及びＷＳＥＢＬ−Ｂを試験して、エラジタンニン類及びガロタンニン類の比をチェックし、
１５．特定の比で抽出物を混合して、以下の性質を有する製品＃１を生成させる。
2008525497.tif 000003
【００６３】
典型的には、使用済みのバナバ葉の水抽出の後、適当な濃度の適切なアルコール溶媒、例えば、100％のメタノール、約90％のエタノール、又は約90％のイソプロパノール等でアルコール抽出を行う。典型的には、アルコール抽出プロセスは、水抽出済みのバナバ葉と共に、４倍の容積のアルコール溶媒を、原料の浸漬レベルの上方約1 cm〜3 cmの容積で、抽出機に投入することを含む。還流を始め、抽出機の外部ジャケットに水蒸気を供給して、加熱を開始し、約3時間連続的に循環させながら、約70〜75℃とする。約3時間後、加熱及び循環を止め、抽出機からアルコール抽出物を濾過し、アルコール溶性抽出物＃１を生成させる。これらの工程を少なくとも更に２回繰り返し（ＡＳＥ＃２及びＡＳＥ＃３を生成させ）、次に、３つ（又はそれ以上）の全アルコール溶性抽出物を組み合わせ、綺麗な容器に保管する。
【００６４】
典型的には、アルコール抽出プロセスでは、以下のように操作を行う：
１．約４倍の容積のアルコール溶媒を、原料の浸漬レベルの上方少なくとも約2 cmの容積で、抽出機に投入し、
２．抽出機の外部ジャケットに水蒸気を供給して、連続的に循環させながら、還流温度で約3時間還流し、
３．抽出機からアルコール抽出物（アルコール溶性抽出物＃１）を濾過し、
４．工程＃１から３を更に２回繰り返し（アルコール溶性抽出物＃２及び３を得）、
５．３つの全アルコール溶性抽出物を組み合わせる。
【００６５】
次に、２つの付加的な方法の少なくとも一方で、得られたＡＳＥ産物（上記工程＃５から）の質を高める。第１の方法は、異なる極性を有する異種の溶媒を用いた溶媒−溶媒抽出を含み、並びに／或いは、その後にイオン交換樹脂カラムを用いたクロマトグラフィーを施される。これらの方法によれば、抽出物からコロソリン酸を除去することなく、不純物を除去することができ、従って、より硬度に濃縮されたコロソリン酸最終産物が得られる。
【００６６】
前記溶媒−溶媒抽出プロセスは、上記したアルコール抽出プロセスのアルコール溶性抽出物（ＡＳＥ）最終産物を更に処理する工程を含む。まず、混合ＡＳＥ（上記工程５からの）を20ミクロンのフィルターで濾過する。次に、ＡＳＥを適当な反応器に投入し、水蒸気を用いて、蒸留温度（95〜98℃）まで加熱する。アルコールが蒸留されつくすまで、蒸留を継続し、生成物として、溶解固形物（ＴＤＳ）30〜40％の濃厚なペーストを得る。次に、このペーストを、15倍の容積の70％イソプロパノール又はその相当物と共に、適当な反応器に投入する。次に、反応器を還流温度（95〜98℃）まで加熱し、一定の撹拌の下、約1時間還流する。約1時間後、抽出物を室温に冷却し、スパークラーフィルターで濾過する。次に、得られたイソプロパノール溶液を沈降タンクに投入し、該沈降タンクに同容積の石油エーテルを加え、混合物を30分間撹拌し、約1時間沈殿させる。沈殿後、下部のアルコール層を回収し、適当な容器に入れ、沈降タンクから石油エーテル層を除去する。沈降タンクに再度イソプロパノール層を投入し、該沈降タンクに同容積の別の石油エーテルを加え、混合、沈殿、及び回収工程を少なくとも更に２回繰り返し、その後、沈降タンクに３つの全石油エーテル層を回収した後の容積を測定する。次に、0.3％の水酸化カリウムを含む35％イソプロパノールを半分の容積で沈降タンクに投入し、アルカリ性イソプロパノール−石油エーテル混合物を約1時間撹拌し、次に、更に約1時間沈殿させ、層分離させる。次に、下部のアルカリ性イソプロパノール層を回収し、適当なガラスライニング反応器に投入する。一定の撹拌の下、ｐＨが約3.0になるまで、該反応器に塩酸をゆっくり加える。反応器中に生成した沈殿をチェックした後、ナッチフィルターで濾過し、ｐＨが約5.0から約6.0になるまで、水で洗浄する。50％アルコール（例えば、メタノール、エタノール）中で沈殿物を再度懸濁させてスラリーとし、ナッチフィルターで濾過する。生成した湿潤ケークを真空乾燥し、製粉し、篩にかけて所望の粒径にする。こうして得られた製品（製品２Ａ）は、コロソリン酸を約15.5％から約95.5％含有するオフホワイトのバナバ抽出物である。
【００６７】
典型的には、溶媒−溶媒抽出プロセスでは、以下のように操作を行う：
１．混合アルコール抽出物を20ミクロンのフィルターで濾過し、
２．アルコール溶性抽出物を反応器に投入し、
３．水蒸気を用いて、反応器を蒸留温度まで加熱し、
４．アルコールが蒸留されつくすまで蒸留を継続し、生成物として、30〜40％ＴＤＳの濃厚なペーストを得、
５．該濃厚なペーストを適当な反応器に投入し、
６．該反応器に15倍の容積の70％イソプロパノールを投入し、
７．反応器を還流温度まで加熱し、撹拌下で、1時間還流し、
８．反応器を室温に冷却し、抽出物をスパークラーフィルターで濾過し、
９．イソプロパノール溶液を沈降タンクに投入し、
１０．該沈降タンクに同容積の石油エーテルを加え、
１１．イソプロパノール−石油エーテル混合物を30分間撹拌し、
１２．混合物を1時間沈殿させ、
１３．下部のアルコール層を適当な容器中に回収し、
１４．沈降タンクから石油エーテル層を除去し、
１５．沈降タンクに再度イソプロパノール層を投入し、
１６．工程＃１０から１３を更に２回繰り返し、
１７．３つの全石油エーテル層を沈降タンク中に組み合わせ、その容積を測定し、
１８．0.3％の水酸化カリウムを含む35％のイソプロパノールを沈降タンクに半分の容積で投入し、
１９．アルカリ性イソプロパノール−石油エーテル混合物を1時間撹拌し、
２０．混合物を1時間沈殿させ、層分離させ、
２１．下部のアルカリ性イソプロパノール層を回収し、
２２．アルカリ性イソプロパノール層を適当なガラスライニング反応器に投入し、
２３．ｐＨを約3.0にするために、一定の撹拌の下、反応器に塩酸をゆっくり加え、
２４．反応器中に生成した沈殿をチェックし、ナッチフィルターで濾過し、
２５．ｐＨが約5.0から約6.0になるまで、水で沈殿物を洗浄し、
２６．50％のアルコール（メタノール及びエタノールのいずれか）中で沈殿物を再度懸濁させて、スラリーとし、
２７．該スラリーをナッチフィルターで濾過し、
２８．生成した湿潤ケークを真空乾燥し；製粉し、篩にかけて所望の粒径とし、コロソリン酸が約15.5％から約95.5％でオフホワイトのバナバ抽出物である製品（製品２Ａ）を作製する。
【００６８】
典型的には、イオン交換抽出プロセスでは、以下のように操作を行う：
１．水酸化ナトリウム溶液を用いて弱アニオン樹脂を再生させ（例えば、8 Kgの水酸化ナトリウムで、100リットルの適当な樹脂（例えば、インディオン（Indion）８５０、エクスチェンジ・インディア社（Exchange India Ltd.））を）、
２．洗浄液のｐＨが中性になるまで水で上記樹脂を洗浄し、
３．水を排出し、75％の水性メタノールで樹脂を濯ぎ、
４．バナバ葉の３つの全メタノール抽出物を組み合わせ、400 gのコロソリン酸に相当する容積を樹脂に充填し、
５．無色になるまで（典型的には、約10容積の）水で樹脂を洗浄し、
６．無色になるまで（典型的には、約30容積の）2％水酸化ナトリウム溶液で樹脂を洗浄し、
７．1％の水酸化ナトリウムを含む25％の水性メタノール5容積で樹脂を洗浄し、
８．溶離液中のコロソリン酸含量が乾燥ベースで約0.5％未満になるまで、0.5％の水酸化ナトリウムを含む80％の水性メタノールで樹脂を溶離し、
９．総ての溶離液を回収し、塩酸でｐＨ約4.5に酸性化し、
１０．メタノールを完全に蒸発させ、
１１．得られたスラリーを10ミクロンのフィルタークロスで濾過し、
１２．洗浄液中から塩化物が無くなるまで、水で残渣を洗浄し、
１３．50％のメタノールで残渣を（再度）洗浄し、
１４．真空下で残渣を乾燥し；こうして得られた製品（製品２Ｂ）は、コロソリン酸を約15.5％から約95.5％含有する色がオフホワイトのバナバ抽出物である。
１５．製品＃２Ａ及び／又は製品＃２Ｂと製品＃１を特定の比率で混合して、以下の仕様の製品＃２を得る。
2008525497.tif 000004
【００６９】
本発明の他の実施態様は、特には、製品中に存在する総タンニン類の約88〜90％がエラジタンニン類で10〜12％がガロタンニン類であり、より水溶性の形態で、特には飲料用であり、最終医薬組成物、治療組成物、及び／又は食品組成物の約2.5％から約85％の成分を構成するガロタンニン-エラジタンニンリッチな抽出産物を、バナバ植物の葉から抽出するための新規処理方法に関する。典型的には、ここに記載した抽出方法は、葉の抽出物の最終産物中で、特定の比率のガロタンニン類及びエラジタンニン類の分離及び含有をもたらす。本発明の特定の実施態様では、抽出プロセスは、単一の医薬組成物、化粧品組成物、治療組成物又は皮膚用組成物の組成混合物の全重量の約10％から約80％の範囲の濃度量の、最も好ましくは約20％の濃縮物のガロタンニン-エラジタンニン抽出産物をもたらす。このことの重要な第２の様相は、バナバ葉中の植物化学物質の各グループの用量及び機能を向上させる独自の抽出組成設計の創出において、個々の相異なる抽出技術及び混合戦略を利用できない場合に、ガロタンニンの通常組成比と考えられる含量を超えて、ガロタンニン類の含量を向上させる特定の抽出技術である。
【００７０】
従って、本発明に従うガロタンニン-エラジタンニンの濃度を上げた抽出物の抽出プロセスは、上述した水抽出プロセスに続く２段プロセスを更に含む。第１工程は、上記水抽出プロセスの工程１１及び１２の水抽出プロセスに由来するＷＳＥＢＬ−Ａ及びＷＳＥＢＬ−Ｂを初期再処理することを含む。ＷＳＥＢＬ−Ａ及びＷＳＥＢＬ−Ｂのガロタンニン及びエラジタンニン含量を試験し、乾燥基準で製品＃１として試験するための製品となるような比で抽出物溶液を混合し、"ＷＳＥＢＬ"とラベルする。初期再処理は、幾つかのサブステップを含んでもよい。最初に、ＷＳＥＢＬ最終産物をハイフロースーパーセル粉末が詰まったスパークラーフィルターで濾過し、次に、20ミクロンのフィルターで濾過して抽出物から不所望物質を除去する。次に、ＷＳＥＢＬを反応器に投入し、反応器の外部ジャケットに水蒸気を通して、ＷＳＥＢＬを80℃まで加熱する。次に、活性炭 15 kgと水100 Lを混合して、15％のチャーコールスラリーを調製する。該チャーコールスラリーを反応器に加え、温度を約80℃に1時間維持する。1時間後、反応器を室温に冷却し、フィルタープレスでＷＳＥＢＬを濾過し、更に連続的に5ミクロン及び0.5ミクロンの両方のフィルターで濾過し、該工程でＷＳＥＢＬの透明度を向上させる。次に、濾液を綺麗な貯蔵タンク中に回収し、流下膜式蒸留器でＷＳＥＢＬから水を総て蒸留し、20から22％ＴＤＳに濃縮する。もう１度、但し今回はＷＳＥＢＬをハイフロースーパーセル床で濾過し、該工程で最終製品の溶解度を向上させる。次に、抽出溶液をスプレー乾燥する。得られたＷＳＥＢＬ抽出物、即ち、製品＃３は、タンニン類を合計で約10から約40％含んでいる。
【００７１】
典型的には、追加のＷＳＢＥＬ抽出最終産物の初期再処理プロセスでは、以下のように操作を行う：
１．ＷＳＥＢＬをハイフロースーパーセル粉末充填スパークラーフィルターで濾過し、次に、20ミクロンのフィルターで濾過して、抽出物から不所望物質を除去し、
２．適当な反応器にＷＳＥＢＬを投入し、
３．該反応器の外部ジャケットに水蒸気を通して、約80℃に加熱し、
４．活性炭 15 kgと水100 Lを混合して、15％のチャーコールスラリーを調製し、
５．該チャーコールスラリーを反応器に加え、温度を約80℃に1時間維持し、
６．反応器を室温に冷却し、
７．フィルタープレスでＷＳＥＢＬを濾過し、次に、5ミクロンのフィルター及び引き続き0.5ミクロンのフィルターで濾過し、それによってＷＳＥＢＬを透明にし、
８．濾液を綺麗な貯蔵タンク中に回収し、
９．流下膜式蒸留器でＷＳＥＢＬから水を蒸留しつくし、20から22％のＴＤＳに濃縮し、
１０．ＷＳＥＢＬをハイフロースーパーセル床でもう１度濾過する。この濾過工程で、最終製品の溶解度が向上する。抽出溶液をスプレー乾燥する。得られたＷＳＥＢＬ抽出物は、タンニン類を合計で約10から約40％含んでいる。これが、以下の仕様の製品＃３である。
2008525497.tif 000005
【００７２】
非イオン性樹脂カラムクロマトグラフィー技術により、ＷＳＥＢＬ−Ａ及びＷＳＥＢＬ−Ｂ中の総タンニン類含量を10％〜40％から約85％に向上させる。極性、細孔径、及び親水性を基準に、使用する樹脂を選択する。本発明における使用に好適な非イオン性ポリマーの架橋吸着樹脂としては、現在利用可能な例として、インディオンＮＰＡ １；ＮＰＡ ２；ＮＰＡ ３（イオン・エクスチェンジ・インディア社、ムンバイ、インド）や、Ｈｐ ２０／２１樹脂（三菱化学社、日本）や、アンバーライト（Amberlite）ＸＡＤ-４、ＸＡＤ-１６、ＸＡＤ １１８０、ＸＡＤ ７ＨＰ、ＸＡＤ ７６１（ローム・アンド・ハース、米国）が挙げられる。使用する樹脂の主要な望ましい特性としては：水分保持容量が50〜55％であること、表面積が約300から750 m2/gであること、空隙率が約0.8 ml/gであること、並びに、有効細孔径が80から600Åであることが挙げられる。ＷＳＥＢＬ−Ａは、ＷＳＥＢＬ−Ｂに比べて、ガロタンニン類を高レベルで含み、ガロタンニン類は分子量がより低いので、ＸＡＤ ４、ＸＡＤ １６、ＨＰ２０又はＨＰ２１等のより小さな細孔径の樹脂を用いて処理される。一方、エラジタンニン類は分子量がより高いので、ＷＳＥＢＬ−Ｂは、より大きな細孔径の樹脂（例えば、ＸＡＤ １１８０、ＸＡＤ ＨＰ７、ＸＡＤ ７６１）を用いて処理される。
【００７３】
クロマトグラフ処理方法は、上記方法でＷＳＥＢＬ−Ａ及びＷＳＥＢＬ−Ｂを調製することを含む。1〜5％ＴＤＳを含む抽出物の溶液は、カラムに充填するのに好適である（樹脂／抽出物の比は、約10：1 v/w）。樹脂を水中で懸濁させ、カラムに充填する。次に、カラムを水で、その次に、メタノールやエタノール等の適切なアルコール溶媒で完全に洗浄する。もう一度、水でカラムを洗浄し、樹脂の表面から残留溶媒を除去する。カラム中の残留水を、重力排出及び／又は真空吸引で除去する。ＷＳＥＢＬ−Ａ又はＷＳＥＢＬ−Ｂ溶液を、ゆっくりとカラムに投入し、樹脂表面における所望のタンニン類の吸着を最大化させる。過剰の溶液をカラムから排出させ、別々に回収する。洗浄水が無色になるまで過剰量の水で表面を洗浄して、樹脂表面から不要の物質を洗い落とす。樹脂表面を効率的に浄化するために、所望により、水性緩衝溶液を使用してもよい。選択溶離液を用いて、樹脂表面から所望のタンニン類を除去する。この目的のためには、メタノール、エタノールのような溶媒、及び／又は他の類似のアルコール溶媒を使用することができる。次に、溶離液が無色になるまで、溶媒で樹脂を溶離する。溶離液溶媒を真空下で蒸留して、溶離液からタンニン類を総て除去する。溶離液の除去後に得られた固体を、所望の粒径の粉末にする。得られた最終製品は、タンニン類を合計で40％超含み、特定のプロセスでは、タンニン類を合計で80％超含み、更に特定のプロセスでは、タンニン類を合計で約85％含む。
【００７４】
典型的には、クロマトグラフプロセスでは、以下のように操作を行う：
１．タンニン類を合計で約10％から約40％含む体積のＷＳＥＢＬ−Ａ及びＷＳＥＢＬ−Ｂを準備する。1〜5％のＴＤＳを含む抽出物の溶液は、カラムに充填するに好適である。（樹脂／抽出物の比は、約10：1 v/wである）
２．選択した樹脂を水中で懸濁させ、カラムに詰め、
３．カラムを水で、その次に、メタノールやエタノール等のアルコール溶媒で完全に洗浄する。もう一度、水でカラムを洗浄し、樹脂の表面から残留溶媒を除去し、
４．重力排出及び／又は真空吸引で、カラム中の残留水を除去し、
５．ＷＳＥＢＬ−Ａ又はＷＳＥＢＬ−Ｂを、ゆっくりとカラムに投入し、こうして、樹脂表面における所望のタンニン類の吸着を最大化させ、過剰の溶液をカラムから別々に排出及び回収し、
６．洗浄水が無色になるまで、大量の水で表面を洗浄して、樹脂表面から無用の物質を洗い落とす。樹脂表面を効率的に浄化するために、所望により、水性緩衝溶液を使用してもよく、
７．選択溶離液を用いて、樹脂表面から所望のタンニン類を除去し（この目的のためには、メタノール、エタノールのような溶媒、及び／又は他の類似のアルコール溶媒を使用する。溶離液が無色になるまで、溶媒で樹脂を溶離する）、
８．溶離液溶媒を真空下で蒸留して、溶離液からタンニン類を総て除去し、
９．溶離液の除去後に得られた固体を、所望の粒径の粉末にしたところ；本発明で得られた最終製品は、合計40％超のタンニン類から構成されていた。
【００７５】
（ヴァロン酸プロセス）
段落［００６２］（これに固定）の工程１３の水抽出プロセス由来のスプレー乾燥した水抽出ＷＳＥＢＬ−Ｂを、ガラスライニング反応器中で10倍容積の10％塩酸と混合する。反応器の外部ジャケットに水蒸気を供給して、混合物を10時間95〜100℃に加熱する。加水分解後、混合物を室温に冷却する。同容積の酢酸エチルを反応器中に運び、30分間混合する。1時間沈殿させ、酢酸エチル層を分離させる。再度、同容積の酢酸エチルを水性層中に運ぶ。上記プロセスを繰り返し、沈降タンク中で両酢酸エチル層を組み合わせる。洗浄液のｐＨが中性になるまで、水で繰り返し酢酸エチル層を洗浄する。酢酸エチル層を30〜40ＴＤＳに濃縮し真空乾燥する。
【００７６】
典型的には、加水分解プロセスでは、以下のように操作を行う：
１．ガラスライニング反応器中に、既知量のＷＳＥＢＬ−Ｂ粉末を投入する。
２．該反応器中に、約10倍容積の10％塩酸を投入し、
３．外部ジャケットに水蒸気を供給して抽出機を加熱し、連続的に循環させながら、ある温度（95〜100℃）で10時間還流し、
４．外部ジャケットに冷却水を供給して、室温に冷却し、
５．同容積の酢酸エチルを反応器中に運ぶ。
６．30分間混合し、
７．酢酸エチル層を分離させ、
８．工程５〜７を繰り返し、全酢酸エチル層組み合わせ、
９．酢酸エチル層を30〜40ＴＤＳに濃縮し、真空乾燥する。
【００７７】
これらのプロセスを組み合わせて、コロソリン酸、ガロタンニン類及びエラジタンニン類を含む混合最終産物を製造することができる。更に、コロソリン酸、ガロタンニン類、及び、プロセス前よりも増加した量の加水分解ヴァロン酸ジラクトンを更に含むガロタンニン類又はエラジタンニン類の混合物を含む組み合わせ製品を製造するために、上記プロセスのいずれかをヴァロン酸ジラクトンを抽出するプロセスと組み合わせてもよい。
【実施例】
【００７８】
（分析方法及び実施例）
ここに記載したバナバ組成物の一般的な健康及び健康であることの改善に対する有効性を以下の実施例により詳しく説明するが、該実施例は、単に説明目的に掲載するものであって、予防又は治療用途の限定的な例として意図するものではない。バナバ葉混合物の治療用組成物を、ここに記載した実施態様に従って調製することができる。従って、本発明及び本発明の利点を更に詳しく説明するために、以下の具体例を開示するが、該具体例は、単に説明用として意図するものであり、限定を意図するものでは全くない。
【００７９】
（１．バナバ抽出化合物の分析方法、同定及び定量）
Lih-Jeng Juang及びShuenn-Jyi Sheuによる”Chemical Identication of the Sources of Commercial Fructus Chebulae”, Phytochem. Anal. 16, 246-251 (2005)に詳述されている公になっている試験方法で、エラジタンニン類及びガロタンニン類を試験した。抽出化合物の同定を、ＨＰＬＣで行った。
【００８０】
コロソリン酸の分析を、以下の手順に従って、ＨＰＬＣで行った。
ＨＰＬＣ条件、試薬、基準、計算：
カラム：ルナ（Luna） Ｃ１８（２）, 5ミクロン（4.6×250 mm）
波長：210 nm
流速：1 ml/分
注入容積：20μl
温度：250℃±20℃
システム：アイソクラティック
実行時間：15分
0.1％v/vリン酸：二度蒸留した水1000 mlで1 mlのオルトリン酸を薄めた。
移動相：0.1％v/vオルトリン酸：：アセトニトリル（15：85v/v）
溶剤：メタノールＡＲグレード
基準：クロマデックス（Chromadex）
保持時間：〜7.5分
標準調製：100 mlの容量フラスコ中で、約25 gの社内の参照サンプルを正確に秤量し、50 mlの溶剤を加え、15分間超音波をかけて溶解させ、冷却、溶剤で所定の容積に作り上げた。サンプル溶液中の活性成分の濃度の確認は、標準溶液の濃度の確認とほぼ同様である。
0.45μのメンブレンフィルターを通して標準溶液及びサンプル溶液の両方を濾過し、注入した。
標準及びサンプルの両方のグラフからコロソリン酸の面積を書き留めた。
以下：
コロソリン酸（％）＝（サンプルのピーク面積×標準の濃度×標準の純度）／（標準のピーク面積×サンプルの濃度）
のようにして計算した。
原料サンプルの分析
250 mlの丸底フラスコ中に粉化した原料5 gを量り取った。
イソプロピルアルコール100 mlを移し、ウォーターバス上で1時間還流した。
ワットマン濾紙を通して250 mlの標準フラスコ中に抽出物を濾過した。
同様の方法で濾過及び抽出を更に２回繰り返し、抽出物の容積を250 mlに作り上げた。必要に応じて溶液を希釈し、サンプル溶液として使用した。上記のようにしてコロソリン酸を計算した。
【００８１】
（２．バナバ抽出物から単離した化合物）
上記の手順により、タンニン酸類の種々の化学種を含む多種の化合物をバナバ抽出物から同定し、それらの化合物は、活性剤として、特には高血糖治療薬としての潜在能力を有している可能性がある。これらは、ラジェスタンニン（図９）、ラジェスタンニンＢ（図１０）、ラジェスタンニンＣ（図１１）、ラジェストロエミン（図１２）、フロシンＡ（図１３）、フロシンＢ（図１４）、レジニンＡ（図１５）、レジニンＢ（図１６）、レジニンＣ（図１７）、及びレジニンＤ（図１８）を含んでいた。
【００８２】
（３．バナバ抽出物のインビトロ調査）
ムラカミ C, ミョウガ K, カサイ R, オウタニ K, クロカワ T, イシバシ S, Dayrit F, Padolina WG, ヤマサキ K. "Screening of plant constituents for effect on glucose transport activity in Ehrlich ascites tumor cells", Chem Pharm Bull (Tokyo). 1993 Dec; 41 (12): 2129-31に記載のＤ-グルコース摂取法を用いて、本発明のバナバ植物抽出物の効果を調査した。他のアプローチは、ラベルされたＤ-グルコースの細胞への輸送を測定することであり、ヤマサキ, K.らの植物療法研究, 7, 2000, 1993に記載の急速濾過技術で測定できる。
【００８３】
（４．血糖降下の利点を示すインビトロ調査）
バナバ抽出物製剤の血糖降下能力の動物調査
血糖降下調査の概要
本発明者らは、独立した試験施設に、理解不能なコード化された製剤形態の６種の製剤を供給した：以下の概要表に、試験した製剤、投薬量を特定し、結果について簡単なメモを付与する。表１の次に、詳細な手順及びデータを示す。
【００８４】
【表１】
2008525497.tif 000006
【００８５】
２つのパートで調査を実施した。パートIでは、スクロースを過剰に与えたラットにおける血糖降下効果について、試験薬の選別を行った。この調査におけるラットには、ラット１匹当り15 gのペレットを与えることによる制御された供給スケジュールを維持した。この供給スケジュールは、コントロールのラットに軽度から中程度の体重減少をもたらした。この調査のパートIIでは、良好に供与された条件における体重及び空腹時血糖値の効果について、試験薬の選別を行った。
【００８６】
この調査のパート１を、各性別のウィスターアルビノラットで実施した。各グループは、８匹のラット（メス４匹及びオス４匹）からなる。インドのワドダラのサラバイリサーチセンターから該動物を入手し、それらを実験に供する前に、15日間実験室の条件に慣れさせた。それらには、アムルト（Amrut）ブランド（インドのプネのプラナヴ（Pranav）・アグロ（Agro）工業）のラット用ペレット飼料（コントロールの供給条件）及び水道水を無制限に付与し続けた。該動物を冷暖房の下22〜24℃の均一温度に維持した。それらを、12時間の光と12時間の闇のサイクルにさらした。標準手順のとおり、施設内動物倫理委員会からの許可を得た後、前記調査を実施した。
【００８７】
試験薬を15日間投与し、夜間絶食の後、血糖降下調査を行った。初期血糖値を記録した後16日目に、試験薬を各グループに投与した。薬の投与から1時間後、前記ラットに40 g/kgの用量でスクロース溶液を投与した。この後、グルコースストリップ及びグルコメーター（ジョンソン・エンド・ジョンソン）を用いて様々な時間間隔で：スクロース充填から2、4、8、12及び24時間後に、血糖値を記録し；これらの時間的パラメーターを、スクロース充填から4時間後に血糖が上がり始め、8時間後にピークに達し、その後24時間ほどゆっくりと低下することを見出した予備的研究を基に規格化した。これらの結果を、図１９に経時的解析で示すと共に、下記表２に表形式で示す。
【００８８】
【表２】
2008525497.tif 000007
【００８９】
コントロールグループのラットでは、スクロース充填から2時間後において42.89％ほど血糖値が上昇し、4時間の時点で25.95％に一時的に下がり、8時間ほどで64.78％に再度上昇し、24時間ほどで約29％に再度低下した。L-2504021では、血糖上昇及び低下のパターンは、血糖上昇の度合いが種々の時間間隔において大幅に低いことを除いて、コントロールグループで見られたのと類似していた。更に、ピーク糖値の最大拮抗作用が、このグループで観測された（42.44％の拮抗作用；表２ａ参照）。
【００９０】
【表２ａ】
2008525497.tif 000008
【００９１】
L-2505022を投与されたグループでは、ピーク時に15.95％の拮抗作用が観測されたことを除いて、スクロース供給後の血糖上昇の中程度の相乗作用が観測された。L-2505024を投与されたグループでは、スクロース供給で誘起された血糖上昇の拮抗作用が、血糖値を測定した時間間隔の総てで観測された。該拮抗作用は、後期に比べて初期の段階においてより高かった。L-2504020を投与されたグループでは、初期において良好な拮抗作用が観測され、ピーク時において軽度から中程度の拮抗作用が観測され、また、後期において良好な拮抗作用が再度観測された。L-2506043を投与されたグループでは、初期段階において良好な拮抗作用が、ピーク時において弱い拮抗作用が、また、後期において中程度の拮抗作用が観測された。L-2504019を投与されたグループでは、初期パートで中程度の相乗作用が、また、ピーク時及び後期において弱い拮抗作用が観測された。
【００９２】
この調査のパート２を、各性別のウィスターアルビノラットで実施した。各グループは、６匹のラット、即ち、メス３匹及びオス３匹からなる。ワドダラのサラバイリサーチセンターから該動物を入手し、それらを実験に供する前に、15日間実験室の条件に慣れさせた。それらには、アムルト・ブランド（プラナヴ・アグロ工業, プネ, インド）のラット用ペレット飼料及び水道水を無制限に付与し続けた。該動物をコントロールした温度条件下22〜24℃の均一温度に維持した。それらを、12時間の光と12時間の闇のサイクルにさらした。標準手順のとおり、施設内動物倫理委員会からの許可を得た後、前記調査を実施した。
【００９３】
最初に、夜間絶食の後、総てのグループの各ラット中の血糖値を記録した。試験薬を15日間投与し、夜間絶食の後、上述のようにグルコメーターを用いたグルコースストリップ法で評価した。体重における試験薬の効果を5日の間隔をあけて記録した。得られたデータを表３及び表４にまとめる。
【００９４】
【表３】
2008525497.tif 000009
【００９５】
コントロールグループでは、初期の値に比べて8.70％の血糖値の減少が観測された。L-2504021では、コントロールグループに比べて統計的に有意な29.87％の減少が観測された。同様の効果がL-2504022及びL-2506043で観測されたが、減少幅が幾分少なかった（それぞれ24.11％及び22.03％）。L-2505024、L-2504020及びL-2504019で観測された軽度から中程度の減少は、コントロールグループに比べて統計的に有意ではないことが分かった。
【００９６】
【表４】
2008525497.tif 000010
【００９７】
コントロールグループのラットでは、15日間の観測期間に渡って、一貫した緩やかな体重増加が観測された。薬剤投与グループの総てで、初期の値に比べて体重増加が観測された。L-2504021及びL-2504022製剤を投与されたグループでは、観測された体重増加の度合いが、コントロールのグループに比べて少なく、体重増加の妨害を示唆していた。体重増加は、L-2504021の場合は10日目に記録したデータに関して、L-2504022の場合は10日目及び15日目の両方で記録したデータに関して著しく少なかった。残ったグループでは、体重変化は、コントロールのグループに比べて如何なる有意な違いをも示さなかった。
【００９８】
（動物調査のデータに対するコメント：）
肥満性糖尿病の人の治療に効能を有するであろう試験製剤を得るとの考えで、製剤を調製した。薬は、理想的にグルコース又はスクロース充填に対して非常に良好な血糖降下活性を有し、正常な動物中において極微又は弱い血糖降下活性を有し、また、良好な体重減少活性を有していた。現在、ＮＩＤＤ糖尿病の治療に対する主な焦点は、食後血糖値の突然の上昇を防止する薬を有することにあり、かかる薬は、正常血糖値に最少の影響を及ぼし、過剰投与が薬誘起低血糖症をもたらさないことを暗示する場合、殊更に良好である。かかる薬が体重減少効果を有する場合、肥満性糖尿病患者の治療において更なる利点となる。
【００９９】
この背景に対し、血糖降下効果、体重増加の減少効果又は遅延効果に関して、６種の試験製剤を選別した。糖尿病の治療のために、最も好適な薬は、良好で長続きする血糖降下効果を有するものである。それが体重減少効果を有する場合、更なる利点を有する。上記の効果に加えて低血糖作用を有さない場合、それは最も理想的なものとなる。従って、理想製剤の如何なる選択も、血糖降下活性の存在からスタートせざるを得ず、これが第一の判断基準となる。この活性においては、血糖値の上昇を妨害し、より長い期間それを維持する薬が、通常好まれる。
【０１００】
この判断基準を基に、６種の製剤から（観測された多くの効果は、ほぼ有意であり、血糖降下効果の度合いに重要性があるので、統計的な有意性を無視した；表１ａ）、L-2504021及びL-2505024が最良の血糖降下剤として浮上してきた。L-2504020は、ピークのレベルで中程度の血糖降下効果を有するものの、後期において良好な拮抗作用を有するので、順位がその次である。弱から中程度の活性を有するL-2506043は、順位がその次である。主な欠点は、ピーク時に弱い拮抗作用を有することである。L-2504022は、スクロース付与後に正常なコントロールラットに比べてより高い血糖値をもたらし、調査した投与量レベルにおいて高血糖促進活性を示唆したので、抗糖尿病製剤に入る余地が無かった。また、L-2504019は、初期部分において血糖促進効果を、その後に非常に弱い拮抗作用もたらす傾向があったので、糖尿病患者への投与用の如何なる製剤としても適切ではなかった。
【０１０１】
第２の判断基準は、体重減少の存在である。初期の体重をベース点として採用した場合、試験製剤のいずれも、体重減少をもたらさなかった（良好に供与された条件下）。体重増加のパターンを考慮した場合、得られた結果は、L-2504022が良好な体重増加遅延活性を有することを示唆しており；従って、それは、体重減少のための候補となるものの、肥満性糖尿病患者においては候補とならない。中程度の体重増加遅延効果を有する他の製剤は、L-2504021である。非常に良好な血糖降下活性も有するという事実から、肥満性糖尿病患者の治療用に試験した製剤の中でL-2504021が最良である。
【０１０２】
第３の判断基準は、上記の特性（血糖降下効果及び体重増加遅延効果）を有する薬が正常血糖のラットに強い血糖低下作用を及ぼさないということである。L-2504021は、中程度の［強い］血糖低下作用を［正常血糖のラットにおいて］もたらしたので、この判断基準を完全には満たしていない。驚くべきことに、L-2504022は、スクロース付与ラットにおいて血糖促進効果をもたらし、正常血糖のラットにおいて中程度の血糖降下活性をもたらした。また、L-2506043は、中程度の血糖低下作用をもたらした。それは体重増加遅延効果を有さず、中程度の血糖降下効果を有するだけであるので、更なる開発の応急手当の正当な理由とはならなかった。L-2505024及びL-2504020は、有意の血糖降下活性をもたらさなかった。それらは、中程度の血糖降下活性を有するので、非肥満性糖尿病の治療剤としての開発の候補となるかもしれないが、体重減少を目的ともする治療には適切ではないかもしれない。
【０１０３】
総てのファクターを考慮したところ、L-2504021が更なる調査及び製品最適化用の最良の候補製剤と見なすことができる。また、L-2505024は、更なる調査のためのもう一つの検討材料に値する。
【０１０４】
（一般的な試験手順及び被験者のタイプ）
本発明の標準化された抽出物の抗糖尿病活性を、Judy, William V.らによって説明された手順（"Antidiabetic activity of a standardized extract (GlucosolTM) from Lagestroemia speciosa leaf in Type II diabetics -- A dose-dependence study. Journal of Ethnopharmacology" 87 (2003) 115-117）に従って測定することができる。基本的には、バナバ植物の葉を収穫して、抽出し、グループにすることができる。しかしながら、アルコールに溶解させる代わりに、活性炭での処理による不純物（クロロフィル等）の除去、濾過、及び減圧下での濃縮による乾燥固形物の生成等の当該技術分野で周知の他の方法で最終抽出産物を精製することができる。活性剤（コロソリン酸、ガロタンニン類、又はエラジタンニン類）の濃度を、上記の手順でＨＰＬＣにより決定することができる。次に、各サンプル及び各グループからの抽出物を、所望の仕様に標準化することができる。次に、標準化された最終産物を、タブレット、即ち、柔らかい若しくは硬いゲル状タブレットに、又は上記明細書に記載した他の適切なキャリアに製剤することができる。
【０１０５】
次に、標準化及び製剤化された本発明の組成物を、糖尿病、高血糖症、Ｘ症候群、肥満等のグルコース代謝障害を患っているボランティアに、本発明に従って決定された投薬量で投与することができる。ボランティアを同数の２つのグループからなる６つの組（各組における一方のグループには、グループ１，２，４，８，９及び１０からの活性剤を付与し、他のグループにはプラシーボを付与した）に分けた。製剤又はプラシーボを投与する前に、基礎血糖値を決定する。各グループは、投薬間に適度な洗浄期間をもうけつつ、15日間、経口投薬を受ける。血液サンプルを、最初の投与の前に7日間定期的に採取し、投与を開始した後15日間に渡って定期的に採取した。臨床グルコースモニターの使用によるような当該技術分野で周知に手段で、血糖値を決定し、投与開始前の7日間において決定された血糖値に対して、グラフ化した。次に、統計的分析で、投薬量範囲での血糖値における、グループ１，２，４，８，９及び１０の各成分のプラシーボに対する効果を決定した。
【０１０６】
（本発明の均等）
本発明の多くの特定実施態様及びその変形を詳細に記載したが、開示した治療の組み合わせを用いた他の変形及び方法が、当業者には明らかあろう。従って、種々の応用、変形及び置換が本発明の精神又は請求項の範囲から逸脱することのない均等から作成できるかもしれない。本発明の理解を伝えるために、記載において種々の語句及び慣習を用いた。これら種々の語句の対応する記載をこれら種々の語句の一般的な言語上又は文法上の変形又は形態に適用できることが理解される。また、いくつかの製品を商品名で特定したが、これの商品名は、現在の例としてもたらされるもので、本発明は、特には、かかる製品又は化合物を化学的な語句で記載する場合、かかる文字通りの範囲で限定されないことが理解される。記載は、本発明を説明する利用可能なデータの生化学の理論及び解釈をもたらすものではあるが、かかる理論及び解釈が請求項を拘束又は限定するものでないことを理解された。更に、本発明は、ここに説明した例示目的の実施態様に限定されず、それらの各要素が権利を与えられる均等の総ての範囲を含むことを理解されたい。
【図面の簡単な説明】
【０１０７】
【図１】バナバ葉のアルコール抽出のフローチャートである。
【図２】バナバ抽出プロセスにおける製品＃１のフローチャートである。
【図３】バナバ抽出プロセスにおける製品＃２のフローチャートである。
【図４】バナバ抽出プロセスにおける製品＃２Ａのフローチャートである。
【図５】バナバ抽出プロセスにおける製品＃２Ｂのフローチャートである。
【図６】バナバ抽出プロセスにおける製品＃３のフローチャートである。
【図７】タンニンの濃度を上げるプロセスのフローチャートである。
【図８】ヴァロン酸抽出プロセスのフローチャートである。
【図９】バナバ抽出産物ラジェスタンニンの式を示す。
【図１０】バナバ抽出産物ラジェスタンニンＢの式を示す。
【図１１】バナバ抽出産物ラジェスタンニンＣの式を示す。
【図１２】バナバ抽出産物ラジェストロエミンの式を示す。
【図１３】バナバ抽出産物フロシンＡの式を示す。
【図１４】バナバ抽出産物フロシンＢの式を示す。
【図１５】バナバ抽出産物レジニンＡの式を示す。
【図１６】バナバ抽出産物レジニンＢの式を示す。
【図１７】バナバ抽出産物レジニンＣの式を示す。
【図１８】バナバ抽出産物レジニンＤの式を示す。
【図１９】種々のバナバ抽出物製剤で治療されたラット群の、スクロース供与後の血糖の経時変化を示す。
【図１】
2008525497.tif 000011
【図２】
2008525497.tif 000012
【図３】
2008525497.tif 000013
【図４】
2008525497.tif 000014
【図５】
2008525497.tif 000015
【図６】
2008525497.tif 000016
【図７】
2008525497.tif 000017
【図８】
2008525497.tif 000018
【図９】
2008525497.tif 000019
【図１０】
2008525497.tif 000020
【図１１】
2008525497.tif 000021
【図１２】
2008525497.tif 000022
【図１３】
2008525497.tif 000023
【図１４】
2008525497.tif 000024
【図１５】
2008525497.tif 000025
【図１６】
2008525497.tif 000026
【図１７】
2008525497.tif 000027
【図１８】
2008525497.tif 000028
【図１９】
2008525497.tif 000029
【国際調査報告】
2008525497.tif 000030