(57)【要約】  本発明は式（Ｉ）で示される化合物、並びにその医薬的に許容される塩及び水和物を包含し、これらは異常脂肪血症の治療に有用である。医薬組成物及び使用方法も包含される。【化１】2008536846.tif 000085
2008536846.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2008536846.tif 000077
［式中、
ｎは１又は２を表し；
Ｒ１は、シクロヘキシル、フェニル及び５〜６個の原子を含むヘテロアリールからなる群より選択され、当該へテロアリール５員環は１〜４個のヘテロ原子を含むものであり、そのヘテロ原子の０〜１個がＯ又はＳであり、その０〜４個がＮであり、また当該へテロアリール６員環は１〜３個のＮ原子を含むものであり；
当該シクロヘキシル、フェニル及びヘテロアリールは、ハロゲン、ＯＨ、ＳＨ、ＣＮ、ニトロ、Ｃ１−４ハロアルキル、アミノ、Ｃ１−４アルキルアミノ、Ｃ２−８ジアルキルアミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４ハロアルコキシ、Ｃ１−４アルキルチオ、Ｃ１−４アルキルスルフィニル及びＣ１−４アルキルスルホニルからなる群より選択される１〜４個により置換されていてもよく；そして、
Ｒ２は、
【化２】
2008536846.tif 000078
又は、ＣＯ２Ｒａ（式中、ＲａはＨ又はＣ１−４アルキルである）である］
で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物。
【請求項２】
ｎが１である請求項１記載の化合物。
【請求項３】
ｎが２である請求項１記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１がフェニル又はヘテロアリールを表し、当該基は１〜４個の基により置換されていてもよく、その基の１〜４個がハロ基であり、またその１〜２個がＯＨ、ＳＨ、ＣＮ、ニトロ、Ｃ１−４ハロアルキル、アミノ、Ｃ１−４アルキルアミノ、Ｃ２−８ジアルキルアミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４ハロアルコキシ、Ｃ１−４アルキルチオ、Ｃ１−４アルキルスルフィニル及びＣ１−４アルキルスルホニルからなる群より選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１が１〜４個の基により置換されていてもよいフェニルを表し、その基の１〜４個がハロ基であり、またその１〜２個がＯＨ、ＳＨ、ＣＮ、ニトロ、Ｃ１−４ハロアルキル、アミノ、Ｃ１−４アルキルアミノ、Ｃ２−８ジアルキルアミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４ハロアルコキシ、Ｃ１−４アルキルチオ、Ｃ１−４アルキルスルフィニル及びＣ１−４アルキルスルホニルからなる群より選択される、請求項４記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１が１〜４個の基により置換されていてもよいヘテロアリールを表し、その基の１〜４個がハロ基であり、またその１〜２個がＯＨ、ＳＨ、ＣＮ、ニトロ、Ｃ１−４ハロアルキル、アミノ、Ｃ１−４アルキルアミノ、Ｃ２−８ジアルキルアミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４ハロアルコキシ、Ｃ１−４アルキルチオ、Ｃ１−４アルキルスルフィニル及びＣ１−４アルキルスルホニルからなる群より選択される、請求項４記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１が１〜４個の基により置換されていてもよいヘテロアリールを表し、その基の１〜４個がハロ基であり、またその１〜２個がＣ１−４ハロアルキル又はＣ１−４アルキルである請求項６記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ１が１〜４個のハロ基により置換されていてもよいフェニルを表す請求項５記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ２がＣＯ２Ｒａを表し、ＲａがＨを表す請求項１記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ２がテトラゾリルを表す請求項１記載の化合物。
【請求項１１】
以下の表の化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物のいずれかから選択される請求項１記載の化合物。
【表１】
2008536846.tif 000079
【表２】
2008536846.tif 000080
【表３】
2008536846.tif 000081
【表４】
2008536846.tif 000082
【請求項１２】
請求項１記載の化合物を、医薬的に許容される担体と組合わせて含有してなる医薬組成物。
【請求項１３】
ヒト患者におけるアテローム性動脈硬化症の治療方法であって、治療を必要とする患者に、アテローム性動脈硬化症の治療に有効な量の請求項１の化合物を投与することを含む方法。
【請求項１４】
ヒト患者における異常脂肪血症の治療方法であって、治療を必要とする患者に、異常脂肪血症の治療に有効な量の請求項１の化合物を投与することを含む方法。
【請求項１５】
ヒト患者における糖尿病の治療方法であって、治療を必要とする患者に、糖尿病の治療に有効な量の請求項１の化合物を投与することを含む方法。
【請求項１６】
ヒト患者における代謝症候群の治療方法であって、治療を必要とする患者に、代謝症候群の治療に有効な量の請求項１の化合物を投与することを含む方法。
【請求項１７】
ヒト患者におけるアテローム性動脈硬化症、異常脂肪血症、糖尿病、代謝症候群又は関連する症状の治療方法であって、治療を必要とする患者に、請求項１の化合物とＤＰ受容体アンタゴニストとを投与することを含み、これらの化合物を、実質的に紅潮を伴わずに、アテローム性動脈硬化症、異常脂肪血症、糖尿病、代謝症候群又は関連する症状の治療に有効な量投与することを含む方法。
【請求項１８】
ヒト患者におけるアテローム性動脈硬化症、異常脂肪血症、糖尿病又は関連する症状の治療方法であって、治療を必要とする患者に、請求項１の化合物と化合物ＡないしＡＪからなる群より選択されるＤＰ受容体アンタゴニスト又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物を投与することを含む方法。
【表５】
2008536846.tif 000083
【表６】
2008536846.tif 000084
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は異常脂肪血症に関わる化合物、組成物及び哺乳動物における治療又は予防の方法に関する。異常脂肪血症は血清脂肪が異常な症状である。上昇したコレステロールと低レベル高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）が、アテローム性動脈硬化症及び心臓血管系疾患の正常を上回る危険度と関連している。血清コレステロールに影響を与える、知られている因子としては、遺伝的素質、食事、体重、身体的活性度、年齢及び性別などである。正常量のコレステロールは、ステロイド、細胞膜及び胆汁酸などの必須の有機分子のための生体ビルディングブロックであるが、コレステロールが過剰になると心臓血管系疾患の一因となることが知られている。例えば、コレステロールは冠状動脈に集まるプラークの主成分であり、アテローム性動脈硬化症と呼ばれる心臓血管疾患に至らしめるものである。
【背景技術】
【０００２】
コレステロールを低下させる伝統的な治療法は、スタチン類（身体におけるコレステロールの生産を低下させる）などの投薬である。ごく最近、血中コレステロールを低下させる際の栄養と栄養サプリメントの価値が著しく注目を集めている。例えば、可溶性線維、ビタミンＥ、大豆、にんにく、オメガ−３脂肪酸およびナイアシンなどの食餌化合物がいずれも著しく注目を集め、研究資金の調達を受けている。
【０００３】
ナイアシン又はニコチン酸（ピリジン−３−カルボン酸）は、臨床治験で冠状動脈事象を低下させる薬物である。高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）が血清レベルを上昇させるその作用については、一般に知られている。重要なことは、ナイアシンが他の脂質のプロフィルに有益な作用も有することである。具体的には、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）、超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）及びトリグリセリド（ＴＧ）を低下させる。しかし、ニコチン酸の臨床使用は、多くの有害な副作用、例えば時に紅潮と呼ばれる皮膚血管拡張などにより制限されている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
血清コレステロール、血清トリグリセリドなどを制御する伝統的かつ代替の制御手段に対しては注目が集まっているにもかかわらず、人口の相当な部分が、その総コレステロールレベル約２００ｍｇ／ｄＬを超えており、その結果、異常脂肪血症治療の候補となっている。従って、総コレステロール、血清トリグリセリドなどを低下させ、ＨＤＬを上昇させる化合物、組成物及び代替方法が、当該技術分野において必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は血清脂質レベルを改変する際に作用を有することが判明した化合物に関する。
従って、本発明は、記載された方法に従い、総コレステロールとトリグリセリド濃度の低下に作用し、ＨＤＬを上昇させる組成物を提供する。その結果として、本発明の一つの目的は、ナイアシン治療と関連する副作用を最小としながら、異常脂肪血症、アテローム性動脈硬化症、糖尿病、代謝症候群及び関連する症状を治療するために使用することのできるニコチン酸受容体アゴニストを提供することにある。
【０００６】
さらに別の目的は、経口用の医薬組成物を提供することである。
その他諸々の目的は、本明細書に提示した記載から明らかとなろう。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本発明は式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物に関する。
【０００８】
【化１】
2008536846.tif 000003
【０００９】
［式中、
ｎは１又は２を表し；
Ｒ１は、シクロヘキシル、フェニル及び５〜６個の原子を含むヘテロアリールからなる群より選択され、当該へテロアリール５員環は１〜４個のヘテロ原子を含むものであり、そのヘテロ原子の０〜１個がＯ又はＳであり、その０〜４個がＮであり、また当該へテロアリール６員環は１〜３個のＮ原子を含むものであり；
当該シクロヘキシル、フェニル及びヘテロアリールは、ハロゲン、ＯＨ、ＳＨ、ＣＮ、ニトロ、Ｃ１−４ハロアルキル、アミノ、Ｃ１−４アルキルアミノ、Ｃ２−８ジアルキルアミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４ハロアルコキシ、Ｃ１−４アルキルチオ、Ｃ１−４アルキルスルフィニル及びＣ１−４アルキルスルホニルからなる群より選択される１〜４個により置換されていてもよく；そして、
Ｒ２は、
【００１０】
【化２】
2008536846.tif 000004
【００１１】
又はＣＯ２Ｒａ（式中、ＲａはＨ又はＣ１−４アルキルである）である］。
【００１２】
本明細書で特に断りのない限り、以下に定義の用語を用いて本発明を詳細に説明する。
【００１３】
「アルキル」とは、アルコキシ、アルカノイルなど、接頭語「アルク」（ａｌｋ）を有する他の基と同様、指定された炭素原子数を含む炭素鎖を意味し、直鎖、分枝若しくは環状、又はその組合わせであり得る。数が特定されていない場合、直鎖については１〜６個の炭素原子を、分枝のアルキル基については３〜７個の炭素原子を意図する。アルキル基の例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−及びｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニルなどである。シクロアルキルはアルキルのサブセットであり、原子数が特定されていない場合、３〜７個の炭素原子を意図し、１〜３個の縮環する炭素環状環を形成する。「シクロアルキル」はまたアリール基に縮環した単環式環を含み、その接合点は非芳香性部分上にある。シクロアルキルの例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、テトラヒドロナフチル、デカヒドロナフチル、インダニルなどである。
【００１４】
「アルケニル」とは、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含む炭素鎖を意味し、直鎖若しくは分枝又はその組合わせであり得る。アルケニルの例は、ビニル、アリル、イソプロペニル、ペンテニル、ヘキセニル、ヘプテニル、１−プロペニル、２−ブテニル、２−メチル−２−ブテニルなどである。
【００１５】
「アルキニル」とは、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含む炭素鎖を意味し、直鎖若しくは分枝又はその組合わせであり得る。アルキニルの例は、エチニル、プロパルギル、３−メチル−１−ペンチニル、２−ヘプチニルなどを含む。
【００１６】
「ヘテロアリール」（ＨＡＲ）とは、特に断りのない限り、Ｏ、Ｓ及びＮから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含み、５〜６個の原子を有するモノ芳香環又は環系を意味する。その例としては、ピロリル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、ピラゾリル、ピリジル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、フラニル、トリアジニル、チエニル、ピリミジル、ピリダジニル、ピラジニルなどであるが、それに限定されるものではない。ヘテロアリールはまた、荷電形状、例えばピリジニウムなどの基をも包含する。
【００１７】
「ハロゲン」（ハロ）は、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素である。
【００１８】
「実質的に紅潮を伴わずに」という文言は、測定可能な皮膚紅潮、例えば、治療量のニコチン酸を投与するときにしばしば見られる副作用を除去することをいう。ニコチン酸の紅潮作用は、通常、患者が治療用量での薬物に寛容になるにつれて低頻度となり、重篤度も低くなるが、紅潮作用はある程度まで生じ、一過性となり得る。従って、「実質的に紅潮を伴わずに」とは、紅潮が生じるとしてもその重篤度が低減しているか、又は生じたであろうよりも紅潮の発生が少ないことをいう。好ましくは、紅潮の発生率が（ナイアシンに比べて）少なくとも３分の１低下し、より好ましくは発生率が半分まで低下し、最も好ましくは、紅潮発生率が約３分の２以上低下する。同様に、紅潮の重篤度は（ナイアシンに比べて）好ましくは少なくとも約３分の１低下し、より好ましくは少なくとも半分まで低下し、最も好ましくは少なくとも約３分の２低下する。明らかに、紅潮の発生率と重篤度が１００パーセント低下することが最も好ましいが、要求されるものではない。
【００１９】
本発明の一態様は、式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物に関する：
【００２０】
【化３】
2008536846.tif 000005
【００２１】
［式中、
ｎは１又は２を表し；
Ｒ１は、シクロヘキシル、フェニル及び５〜６個の原子を含むヘテロアリールからなる群より選択され、当該へテロアリール５員環は１〜４個のヘテロ原子を含むものであり、そのヘテロ原子の０〜１個がＯ又はＳであり、その０〜４個がＮであり、また当該へテロアリール６員環は１〜３個のＮ原子を含むものであり；
当該シクロヘキシル、フェニル及びヘテロアリールは、ハロゲン、ＯＨ、ＳＨ、ＣＮ、ニトロ、Ｃ１−４ハロアルキル、アミノ、Ｃ１−４アルキルアミノ、Ｃ２−８ジアルキルアミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４ハロアルコキシ、Ｃ１−４アルキルチオ、Ｃ１−４アルキルスルフィニル及びＣ１−４アルキルスルホニルからなる群より選択される１〜４個により置換されていてもよく；そして、
Ｒ２は、
【００２２】
【化４】
2008536846.tif 000006
又はＣＯ２Ｒａ（式中、ＲａはＨ又はＣ１−４アルキルである）である］。
【００２３】
興味深い化合物の一サブセットは、ｎが１である、式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物に関係する。このサブセット内では、すべての他の変数は当初に定義したとおりである。
【００２４】
興味深い化合物のもう一つのサブセットは、ｎが２である、式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物に関係する。このサブセット内では、すべての他の変数は当初に定義したとおりである。
【００２５】
興味深い化合物の別のサブセットは、Ｒ１がフェニル又はヘテロアリールを表し、当該基が１〜４個の基により置換されていてもよく、その基の１〜４個がハロ基であり、またその１〜２個がＯＨ、ＳＨ、ＣＮ、ニトロ、Ｃ１−４ハロアルキル、アミノ、Ｃ１−４アルキルアミノ、Ｃ２−８ジアルキルアミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４ハロアルコキシ、Ｃ１−４アルキルチオ、Ｃ１−４アルキルスルフィニル及びＣ１−４アルキルスルホニルからなる群より選択される、式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物に関係する。このサブセット内では、すべての他の変数は当初に定義したとおりである。
【００２６】
特に興味深い化合物の別のサブセットは、Ｒ１が１〜４個の基により置換されていてもよいフェニルを表し、その基の１〜４個がハロ基であり、またその１〜２個がＯＨ、ＳＨ、ＣＮ、ニトロ、Ｃ１−４ハロアルキル、アミノ、Ｃ１−４アルキルアミノ、Ｃ２−８ジアルキルアミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４ハロアルコキシ、Ｃ１−４アルキルチオ、Ｃ１−４アルキルスルフィニル及びＣ１−４アルキルスルホニルからなる群より選択される、式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物に関係する。このサブセット内では、すべての他の変数は当初に定義したとおりである。
【００２７】
特に興味深い化合物の別のサブセットは、Ｒ１が１〜４個の基により置換されていてもよいヘテロアリールを表し、その基の１〜４個がハロ基であり、またその１〜２個がＯＨ、ＳＨ、ＣＮ、ニトロ、Ｃ１−４ハロアルキル、アミノ、Ｃ１−４アルキルアミノ、Ｃ２−８ジアルキルアミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ１−４ハロアルコキシ、Ｃ１−４アルキルチオ、Ｃ１−４アルキルスルフィニル及びＣ１−４アルキルスルホニルからなる群より選択される、式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物に関係する。このサブセット内では、すべての他の変数は当初に定義したとおりである。
【００２８】
特に興味深い化合物の別のサブセットは、Ｒ１が１〜４個の基により置換されていてもよいヘテロアリールを表し、その基の１〜４個がハロ基であり、またその１〜２個がＣ１−４ハロアルキル又はＣ１−４アルキルである、式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物に関係する。このサブセット内では、すべての他の変数は当初に定義したとおりである。
【００２９】
特に興味深い化合物の別のサブセットは、Ｒ１が１〜４個のハロ基により置換されていてもよいフェニルを表す、式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物に関係する。このサブセット内では、すべての他の変数は当初に定義したとおりである。
【００３０】
興味深い化合物の別のサブセットは、Ｒ２がＣＯ２Ｒａを表し、ＲａがＨを表す、式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物に関係する。このサブセット内では、すべての他の変数は当初に定義したとおりである。
【００３１】
興味深い化合物の別のサブセットは、Ｒ２がテトラゾリルを表す、式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物に関係する。このサブセット内では、すべての他の変数は当初に定義したとおりである。
【００３２】
特に興味深い化合物の例は、以下の表に示す化合物である。
【００３３】
【表１】
2008536846.tif 000007
並びにその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物。
【００３４】
【表２】
2008536846.tif 000008
並びにその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物。
【００３５】
【表３】
2008536846.tif 000009
並びにその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物。
【００３６】
【表４】
2008536846.tif 000010
並びにその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物。
【００３７】
投与量情報
式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物の投与量は、幅広い限度内で変わる。それぞれの特定患者に対する具体的な投与計画とレベルは、様々なファクター、例えば、年齢、体重、全身の健康、性別、食事、投与期間、投与経路、排泄速度、薬物組合わせ及び患者症状の重篤度などに依存する。症状の進行を防止し、対抗し又は阻止するために必要な治療的有効量又は予防的有効量を決定するために、これらのファクターを考慮することは、通常の知識を有する医師の範囲内のことである。一般に、該化合物の用量は、低用量で約０．０１ｍｇ／日ないし高用量で約２０００ｍｇ／日の範囲であり、これを単回又は分割して投与する。代表的な投与量は、約０．１ｍｇ／日ないし約１ｇ／日である。当初は低用量で用い、用量を上げて、さらに不都合な作用を最小とする。本明細書に記載の化合物は、患者に関わる医療症状を治療又は予防するために適切な期間、毎日投与を基本として投与することが期待され、その期間は、月、年又は患者の生涯に及ぶ治療過程である。
【００３８】
併用療法
別の１種以上の活性薬剤を本明細書に記載の化合物とともに投与してもよい。別の活性薬剤は、脂質改変化合物又は他の医薬活性を有する薬剤、又は脂質改変作用と他の医薬活性の両方をもつ薬剤であり得る。採用し得るさらなる別の薬剤は、限定されるものではないが、以下のものである：ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、例えばラクトン化又はジヒドロキシ開環酸型のスタチン類及びその医薬的に許容される塩ならびにエステル、例えばロバスタチン（参照：ＵＳＰ４，３４２，７６７）、シンバスタチン（参照：ＵＳＰ４，４４４，７８４）、ジヒドロキシ開環酸シンバスタチン、とりわけそのアンモニウム塩又はカルシウム塩、プラバスタチン、とりわけそのナトリウム塩（参照：ＵＳＰ４，３４６，２２７）、フルバスタチン、とりわけそのナトリウム塩（参照：ＵＳＰ５，３５４，７７２）、アトルバスタチン、とりわけそのカルシウム塩（参照：ＵＳＰ５，２７３，９９５）、ピタバスタチン（ＮＫ−１０４ともいう）（参照：ＰＣＴ国際公開ＷＯ９７／２３２００）、及びロスバスタチン（クレストール（登録商標）としても知られる）（参照：ＵＳＰ５，２６０，４４０）を含むが、これに限定されるものではない；ＨＭＧ−ＣｏＡ合成阻害剤；スクアレンエポキシダーゼ阻害剤；スクアレンシンセターゼ阻害剤（スクアレン合成阻害剤としても知られる）、アシル−補酵素Ａ：コレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＡＣＡＴ）阻害剤、例えばＡＣＡＴ−１又はＡＣＡＴ−２の選択的阻害剤並びにＡＣＴＡ−１及び−２の二重阻害剤；ミクロゾマールトリグリセリド移転タンパク質（ＭＴＰ）阻害剤；内皮リパーゼ阻害剤；胆汁酸金属イオン封鎖剤；ＬＤＬ受容体インデューサー；例えば糖タンパク質ＩＩｂ／ＩＩＩａフィブリノーゲン受容体アンタゴニスト及びアスピリンのような血小板凝集阻害剤；ヒトペルオキシソーム増殖因子活性化受容体ガンマ（ＰＰＡＲ−ガンマ）アゴニスト、例えばピオグリタゾン及びロシグリタゾンのような一般にグリタゾンとして参照される化合物、及び例えばチアゾリジンジオンとして知られる構造分類内に含まれる化合物、並びにチアゾリジンジオン構造分類以外のＰＰＡＲ−ガンマアゴニスト；ＰＰＡＲ−アルファアゴニスト、例えばクロフィブレート、例えば微小化フェノフィブレート及びゲムフィブロジルを含むフェノフィブレート；ＰＰＡＲ二重アルファ／ガンマアゴニスト；ビタミンＢ６（ピリドキシンとしても知られる）及び、例えばそのＨＣｌ塩のような医薬的に許容されるその塩；ビタミンＢ１２（シアノコバラミンとしても知られる）；葉酸、又は例えばナトリウム塩及びメチルグルカミン塩のような医薬的に許容されるその塩若しくはエステル；ビタミンＣとＥ及びベータカロテンなどの抗酸化性ビタミン；ベータ−ブロッカー；ロサルタンなどのアンギオテンシンＩＩアンタゴニスト；例えばエナラプリル及びカプトプリルなどのアンギオテンシン変換酵素阻害剤；レニン阻害剤、例えばニフェジピン及びジルチアゼムなどのカルシウムチャンネルブロッカー；エンドセリンアンタゴニスト；ＡＢＣＡ１遺伝子発現を上昇させる薬剤；コレステリルエステル転移タンパク質（ＣＥＴＰ）阻害化合物、５−リポキシゲナーゼ活性化タンパク質（ＦＬＡＰ）阻害化合物、５−リポキシゲナーゼ（５−ＬＯ）阻害化合物、アンタゴニスト及びアゴニストの両方を包含するファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）リガンド；肝臓Ｘ受容体（ＬＸＲ）−アルファリガンド、ＬＸＲ−ベータリガンド、アレンドロン酸ナトリウムなどのビスホスフォネート化合物；例えばロフェコキシブ及びセレコキシブなどのシクロオキシゲナーゼ−２阻害剤；及び血管の炎症を減弱させる化合物。
【００３９】
コレステロール吸収阻害剤も本発明では使用し得る。かかる化合物は、腸の内腔から小腸壁の腸細胞へのコレステロールの動きを遮断し、結果として血清コレステロールレベルを低下させる。コレステロール吸収阻害剤の例は、米国特許ＵＳＰ５，８４６，９６６；５，６３１，３６５；５，７６７，１１５；６，１３３，００１；５，８８６，１７１；５，８５６，４７３；５，７５６，４７０；５，７３９，３２１；５，９１９，６７２；及びＰＣＴ出願ＷＯ００／６３７０３；ＷＯ００／６０１０７；ＷＯ００／３８７２５；ＷＯ００／３４２４０；ＷＯ００／２０６２３；ＷＯ９７／４５４０６；ＷＯ９７／１６４２４；ＷＯ９７／１６４５５；及びＷＯ９５／０８５３２に記載されている。最も注目すべきコレステロール吸収阻害剤は、エゼチミベであり、１−（４−フルオロフェニル）−３（Ｒ）−［３（Ｓ）−（４−フルオロフェニル）−３−ヒドロキシプロピル］−４（Ｓ）−（４−ヒドロキシフェニル）−２−アゼチジノンとしても知られ、ＵＳＰ５，７６７，１１５及び５，８４６，９６６に記載されている。
【００４０】
コレステロール吸収阻害剤の治療有効量は、１日体重あたり約０．０１ｍｇ／ｋｇないし約３０ｍｇ／ｋｇの投与量であり、好ましくは約０．１ｍｇ／ｋｇないし約１５ｍｇ／ｋｇである。
【００４１】
糖尿病患者にとって、本発明で使用される化合物は、従来の糖尿病投薬法に従って投与し得る。例えば、本明細書に記載の治療を受ける糖尿病患者は、インスリン投薬又は経口抗糖尿病剤投薬をも受け得る。ここで有用な経口抗糖尿病剤投薬の一例は、メトフォルミンである。
【００４２】
これらナイアシン受容体アゴニストが、ある程度の血管拡張を誘発するという事象において理解すべきは、式（Ｉ）で示される化合物が血管拡張抑制剤と同時に投与し得るということである。従って、本明細書に記載した方法の一側面は、式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物を、紅潮を低減する化合物と組合わせて使用することに関する。この観点で、従来の用量でのアスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、インドメタシンその他のＮＳＡＩＤ、ＣＯＸ−２選択的阻害剤などの従来の化合物が有用である。あるいは、ＤＰアンタゴニストが同様に有用である。
【００４３】
異なるサブタイプの受容体は、プロスタグランジンＤ２と相互作用する。一つのプロスタグランジンＤ２受容体は「ＤＰ」と言われ、もう一つのプロスタグランジンＤ２受容体は「ＣＲＴＨ２」として知られる。本発明では他の方法では起こる可能性のある紅潮を予防し、最小化し又は低減するために、ＤＰ受容体の拮抗作用を利用する。
【００４４】
ＤＰ受容体アンタゴニストの用量と選択性は、ＤＰアンタゴニストの選択性がＣＲＴＨ２受容体を実質的に変調することなく、ＤＰ受容体を変調するようなものとなる。とりわけ、ＤＰ受容体アンタゴニストは、理想的にはＤＰ受容体での親和性（すなわち、Ｋｉ）が、ＣＲＴＨ２受容体での親和性よりも少なくとも約１０倍高い（数値的には、より低いＫｉ値）親和性を有している。これらの指標に従ってＤＰと選択的に相互作用する化合物は、「ＤＰ選択的」と見なされる。
【００４５】
本明細書に記載したＤＰアンタゴニストの投与量は、哺乳動物患者、特にヒトでの紅潮作用を低減又は予防するために有用なものとして、低値として約０．０１ｍｇ／日ないし高値として約１００ｍｇ／日の範囲の用量であり、これを一日１回又は分割して投与する。好ましくは、投与量は低値として約０．１ｍｇ／日から高値として約１．０ｇ／日の範囲であり、これを一日１回又は分割して投与する。
【００４６】
ＤＰ受容体に選択的に拮抗し、紅潮作用を抑制するために特に有用な化合物の例は以下のとおりである：
【００４７】
【表５】
2008536846.tif 000011
【００４８】
【表６】
2008536846.tif 000012
並びにその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物。
【００４９】
式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物及びＤＰアンタゴニストは、同時に又は連続して、単回又は複数回の日用量で、例えば、１日２回、１日３回又は１日４回、本発明から外れることなく投与し得る。もし２４時間を超える範囲での放出プロフィルを示す持続放出製品などの持続放出が望ましいならば、投薬を隔日に行ってもよい。しかし、１日１回の投与が好ましい。同様に、朝又は夕方の投与が利用できる。
【００５０】
塩及び溶媒和物
式（Ｉ）で示される化合物の塩及び溶媒和物もまた本発明に含まれ、この点で多数の医薬的に許容されるニコチン酸の塩若しくは溶媒和物が有用である。アルカリ金属塩、とりわけナトリウム及びカリウムは、本明細書に記載したように有用な塩を形成する。同様に、アルカリ土類金属、とりわけカルシウム及びマグネシウムは、本明細書に記載したように有用な塩を形成する。様々なアミンの塩、例えばアンモニウム及び置換アンモニウム化合物もまた本明細書に記載したように有用な塩を形成する。同様に、式（Ｉ）で示される化合物の溶媒和のタイプとしては、半水和物、モノ−、ジ−、トリ−及びセスキ−水和物などの水和物を含み、特に興味のある型である。
【００５１】
本発明に使用する化合物は、従来の投与ルートを経て投与し得る。好適な投与ルートは経口である。
【００５２】
医薬組成物
本明細書に記載の医薬組成物は、一般に医薬的に許容される担体を組合わせた式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物を含む。
【００５３】
適切な経口組成物の例は、錠剤、カプセル、トローチ、ロゼンジ、懸濁液、分散性粉末又は顆粒、エマルジョン、シロップ及びエリキシルである。担体成分の例は、希釈剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、甘味剤、着香剤、着色剤、保存剤などである。希釈剤の例は、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム及びリン酸ナトリウムである。顆粒化剤及び崩壊剤の例は、コーンスターチ及びアルギン酸である。結合剤の例は、デンプン、ゼラチン及びアラビアゴムである。滑沢剤の例は、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸及びタルクである。錠剤は裸錠でもよく、又は既知技法で被覆してもよい。かかるコーティングは崩壊を遅延する可能性があり、従って、胃腸管での吸収を遅延させ、それによって長時間の持続作用を提供し得る。
【００５４】
本発明の一態様において、式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物は、別の治療剤及び担体と組合わせて、固定の組合わせ製品を形成する。この固定の組合わせ製品は、経口用の錠剤又はカプセルでもよい。
【００５５】
さらに詳しくは、本発明の別の態様においては、式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物（約１ないし約１０００ｍｇ）及び第二の治療剤（約１ないし約５００ｍｇ）を医薬的に許容される担体と組合わせて、経口用の錠剤又はカプセルを提供する。
【００５６】
長時間にわたる持続性放出は、製剤において特に重要であり得る。時間遅延物質、例えば、モノステアリン酸グリセリル又はジステアリン酸グリセリルなどが採用し得る。投与形態はＵＳＰ４，２５６，１０８；４，１６６，４５２及び４，２６５，８７４に記載されている技法により、被覆して制御放出用浸透圧治療錠剤を形成してもよい。
【００５７】
他の制御放出技法も利用可能であり、本発明に含まれる。持続性放出錠剤においてニコチン酸の放出を減速するために有用な代表的成分には、種々のセルロース化合物、例えば、メチルセルロース、エチルセルロース、プロピルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、微結晶セルロース、デンプンなどが含まれる。種々の天然及び合成物質も持続放出製剤に使用し得る。その例は、アルギン酸及び種々のアルギン酸エステル、ポリビニルピロリドン、トラガカント、イナゴマメガム、グアガム、ゼラチン、例えばセチルアルコールなどの種々の長鎖アルコール、及びミツロウなどである。
【００５８】
選択肢として、またさらにより興味のあるものとして、上記の錠剤があり、この錠剤は式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物及びシンバスタチン又はアトルバスタチンなどのＨＭＧＣｏ−Ａ還元酵素阻害剤を含んでなる。この特定の態様では、選択肢としてＤＰアンタゴニストを同様に含む。
【００５９】
本発明による持続放出錠剤の代表的な放出時間枠は、約１時間から約４８時間の長さであり、好ましくは約４時間ないし約２４時間、より好ましくは約８時間ないし約１６時間である。
【００６０】
ハードゼラチンカプセルは経口用のもう一つの投与形態を構成する。かかるカプセルは上に記載した担体物質と混合した有効成分を同様に含む。ソフトゼラチンカプセルは、プロピレングリコール、ＰＥＧ及びエタノールなどの水混和性溶媒、又はラッカセイ油、流動パラフィン若しくはオリーブ油などの油と、混合した有効成分を含む。
【００６１】
水性懸濁液も水性懸濁液の製造に適した賦形剤と混合した活性物質を含むものとして意図される。かかる賦形剤は、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカント及びアラビアゴムなどの懸濁化剤；例えばレシチンなどの分散剤又は湿潤剤；例えばパラ−ヒドロキシ安息香酸エチル若しくはｎ−プロピルなどの保存剤、着色剤、着香剤、甘味剤などを含む。
【００６２】
水の添加による水性懸濁液の調製に適した分散性粉末及び顆粒は、分散剤若しくは湿潤剤、懸濁化剤及び１種以上の保存剤と混合した有効成分を提供する。適切な分散剤又は湿潤剤及び懸濁化剤は、すでに上記のもので例示したとおりである。シロップ及びエリキシルも製剤化し得る。
【００６３】
さらに詳しくは、興味深い医薬組成物は、持続性放出錠剤であって、式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物、及び化合物ＡないしＡＪからなる群より選択されるＤＰ受容体アンタゴニストと、医薬的に許容される担体との組合わせを含んでなる錠剤である。
【００６４】
なおさらに興味深い別の医薬組成物は、式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物、及び化合物Ａ、Ｂ、Ｄ、Ｅ、Ｘ、ＡＡ、ＡＦ、ＡＧ、ＡＨ、ＡＩ及びＡＪからなる群より選択されるＤＰアンタゴニストと、医薬的に許容される担体との組合わせを含んでなる錠剤である。
【００６５】
なおさらに興味深い別の医薬組成物は、式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物、化合物Ａ、Ｂ、Ｄ、Ｅ、Ｘ、ＡＡ、ＡＦ、ＡＧ、ＡＨ、ＡＩ及びＡＪからなる群より選択されるＤＰアンタゴニスト、及びシンバスタチン又はアトルバスタチンと、医薬的に許容される担体との組合わせから構成される持続性放出錠剤である。
【００６６】
用語「組成物」とは、上記の医薬組成物を包含することに加えて、活性又は賦形剤である２種類以上の成分の組合わせ、錯体又は凝集、又は１種類以上の成分の解離、又は１種類以上の成分の他のタイプの反応若しくは相互作用により、直接又は間接に生じる生成物をも包含する。従って、本発明の医薬組成物は、当該化合物、さらに追加の有効成分及び医薬的に許容される賦形剤を混和又は他の方法で組合わせて調製した組成物を包含する。
【００６７】
本発明のもう一つの側面は、医薬の製造における式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物及びＤＰアンタゴニストの使用に関する。この医薬は本明細書に記載した用途を有する。
【００６８】
さらに詳しくは、本発明のもう一つの側面は、医薬の製造における式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物、ＤＰアンタゴニスト及びＨＭＧＣｏＡ還元酵素阻害剤（例えば、シンバスタチン）の使用に関する。この医薬は本明細書に記載した用途を有する。
【００６９】
本発明化合物は、抗高脂肪血症活性を示し、ＬＤＬ−Ｃ、トリグリセリド、アポリポタンパク質ａ及び総コレステロールを低下させ、ＨＤＬ−Ｃを上昇させる用途を示している。従って、本発明化合物は異常脂肪血症の治療に有用である。従って、本発明は、アテローム性動脈硬化症及びその他の本明細書に記載した疾患及び症状の治療、予防又は逆転に関し、式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物を、当該症状の治療、予防又は逆転に有効な量、投与することに関する。これは当該症状の治療又は予防に有効な量の式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物を投与することによりヒトにおいて達成されるが、一方、紅潮の頻度及び／又は重篤度の点では、その作用が予防、低減又は最少化される。
【００７０】
興味深い本発明の一側面は、ヒト患者におけるアテローム性動脈硬化症の治療方法であって、治療を必要とする患者に、実質的に紅潮を伴わずに、アテローム性動脈硬化症の治療に有効な量の式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物を投与することを含む方法である。
【００７１】
興味深い本発明のもう一つの側面は、ヒト患者における血清ＨＤＬレベルの上昇方法であって、治療を必要とする患者に、血清ＨＤＬレベルの上昇に有効な量の式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物を投与することを含む方法に関する。
【００７２】
興味深い本発明のもう一つの側面は、ヒト患者における異常脂肪血症の治療方法であって、治療を必要とする患者に、異常脂肪血症の治療に有効な量の式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物を投与することを含む方法に関する。
【００７３】
興味深い本発明のもう一つの側面は、ヒト患者における血清ＶＬＤＬ又はＨＤＬレベルの低下方法であって、治療を必要とする患者に、実質的に紅潮を伴わずに、血清ＶＬＤＬ又はＬＤＬレベルの低下に有効な量の式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物を投与することを含む方法に関する。
【００７４】
興味深い本発明のもう一つの側面は、ヒト患者における血清トリグリセリドレベルの低下方法であって、治療を必要とする患者に、血清トリグリセリドレベルの低下に有効な量の式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物を投与することを含む方法に関する。
【００７５】
興味深い本発明のもう一つの側面は、ヒト患者における血清Ｌｐ（ａ）レベルの低下方法であって、治療を必要とする患者に、血清Ｌｐ（ａ）レベルの低下に有効な量の式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物を投与することを含む方法に関する。本明細書にて使用する場合、Ｌｐ（ａ）とはリポタンパク質（ａ）をいう。
【００７６】
興味深い本発明のもう一つの側面は、ヒト患者における糖尿病、とりわけ２型糖尿病の治療方法であって、治療を必要とする患者に、糖尿病の治療に有効な量の式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物を投与することを含む方法に関する。
【００７７】
興味深い本発明のもう一つの側面は、ヒト患者における代謝症候群の治療方法であって、治療を必要とする患者に、代謝症候群の治療に有効な量の式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物を投与することを含む方法に関する。
【００７８】
興味深い本発明のもう一つの側面は、ヒト患者におけるアテローム性動脈硬化症、異常脂肪血症、糖尿病、代謝症候群又はその関連症状の治療方法であって、治療を必要とする患者に、式（Ｉ）で示される化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物及びＤＰ受容体アンタゴニストを投与することを含み、当該組合わせが、実質的に紅潮を伴わずに、アテローム性動脈硬化症、異常脂肪血症、糖尿病又はその関連症状の治療に有効な量投与することを含む方法に関する。
【００７９】
興味深い本発明のもう一つの側面は、上記の方法であって、その場合のＤＰ受容体アンタゴニストが化合物ＡないしＡＪ及びその医薬的に許容される塩及び溶媒和物からなる群より選択される方法に関する。
【００８０】
さらに、ニコチン酸受容体については、ＷＯ０２／０８４２９８Ａ２（２００２年１０月２４日発行）及び文献（Ｓｏｇａ，Ｔ．ｅｔ  ａｌ．，Ｔｕｎａｒｕ，Ｓ．ｅｔ  ａｌ．ａｎｄ  Ｗｉｓｅ，Ａ．ｅｔ  ａｌ；上記引用）に同定及び特性化されている。
【００８１】
多数のＤＰ受容体アンタゴニスト化合物が公開されており、有用であって、それらは本発明方法に含まれる。例えば、ＤＰ受容体アンタゴニストは、ＷＯ０１／７９１６９（２００１年１０月２５日公開）、ＥＰ１３０５２８６（２００３年５月２日公開）、ＷＯ０２／０９４８３０（２００２年１１月２８日公開）、及びＷＯ０３／０６２２００（２００３年７月３１日公開）に従って入手することができる。
【００８２】
化合物ＡＢは、ＷＯ０１／６６５２０Ａ１（２００１年９月１３日公開）に公開された記載に従って合成し得る；化合物ＡＣは、ＷＯ０３／０２２８１４Ａ１（２００３年３月２０日公開）に公開された記載に従って合成し得る；また、化合物ＡＤ及びＡＥは、ＷＯ０３／０７８４０９（２００３年９月２５日公開）に公開された記載に従って合成し得る。本発明にて使用されるその他の代表的なＤＰアンタゴニスト化合物は、下記実施例に従って合成することができる。
【００８３】
式（Ｉ）で示される化合物の合成法
式（Ｉ）で示される化合物は、以下の代表的な反応工程図に従って調製した。同様の試薬、条件又はこれらの構造部類に対するその他の合成方法が、有機合成の専門家に着想し得るということが理解される。従って、これらの反応工程図は本発明の範囲を限定するものと解釈すべきではない。置換基はすべて、特に断りのない限り、上に定義したとおりである。
【００８４】
【化５】
2008536846.tif 000013
【００８５】
式（Ｉ）で示される化合物（式中、ｎ＝１）は、反応工程図１に示すように、共通の中間体２及び４を利用することにより調製し得る。すなわち、３−エトキシ−シクロペンテノンをシュウ酸ジアルキルでアシル化し、ベータ−ジケトンをベンジルヒドラジン−ＨＣｌで環化すると、同時にエノールエーテルの加水分解を伴い、エステルを開裂してケト酸１を提供し得る。この酸を第一級カルボキサミドに変換し、脱水してそのニトリルとし、次いでケトンを当業者既知の方法によりそのエノールトリフラートに変換して、共通の中間体２を提供することができる。別法として、ベンジルヒドラジンＨＣｌの代わりにヒドラジンを用いることが可能であり、生成したピラゾールはそのＮ−トルエンスルホンアミド３として保護することができる。エチルエノールエーテルは、酸性条件下で選択的に加水分解することが可能であり、次いで得られるケトンを当業者既知の方法によりそのエノールトリフラートに変換して、共通の中間体４を提供することができる。
【００８６】
【化６】
2008536846.tif 000014
【００８７】
式（Ｉ）で示される化合物（式中、ｎ＝２）は、反応工程図２に示すように、共通の中間体６及び８を利用することにより調製し得る。従って、シクロヘキサン−１，４−ジオンモノ−ケタールをシュウ酸ジアルキルでアシル化し、ベータ−ジケトンをベンジルヒドラジン−ＨＣｌで環化し、次いでケタールを加水分解してケトエステル５とすることができる。次いでこのケトンを当業者既知の方法によりそのエノールトリフラートに変換して、共通の中間体６を提供することができる。別法として、ベンジルヒドラジンＨＣｌの代わりにヒドラジンを用いることが可能であり、ケタールを加水分解してケトエステル７とすることができる。得られたピラゾール７はそのＮ−トルエンスルホンアミドとして保護することができ、そのケトンは当業者既知の方法によりそのエノールトリフラートに変換して、共通の中間体８を提供することができる。
【００８８】
【化７】
2008536846.tif 000015
【００８９】
共通の中間体２はスズキカップリング反応により９のような化合物に変換することができ、該カップリング反応はＣ５部分を組み込み、続いてテトラゾール環を合成し、水素化条件下で脱ベンジル化すると同時にオレフィンを還元する（反応工程図３）。
【００９０】
【化８】
2008536846.tif 000016
【００９１】
共通の中間体４もまたスズキカップリング反応により１０のような化合物に変換することができ、該カップリング反応によりＣ５部分を組み込み、続いて連続的にトシル及びエステル開裂し、さらに水素化条件下でオレフィンを還元する（反応工程図４）。
【００９２】
【化９】
2008536846.tif 000017
【００９３】
共通の中間体２及び４を用いる代わりに、１１のような化合物は、反応工程図５に示すように、シクロペンテノンから直接調製することもできる。修飾したスズキカップリング反応は、ホウ酸の１，４−付加、引き続く典型的なピラゾール環形成、転移水素化及び鹸化により、酸１１を得る。酸１１への鹸化に先立って、該エチルエステルは、１２の調製に示すように、第一級のカルボキサミドに変換し、脱水してそのニトリルとし、次いでテトラゾール環の合成に付すことができる。
【００９４】
【化１０】
2008536846.tif 000018
【００９５】
共通の中間体６はスズキカップリング反応を介して１３のような化合物に変換することができ、該カップリング反応によりＣ５部分を組み込み、続いて同時的オレフィンの還元とベンジルの開裂を行い、及びエチルエステルの鹸化を行う（反応工程図６）。別法として、この反応の手順では、共通の中間体８を用いて、１４のような化合物を生成させることができる。
【００９６】
【化１１】
2008536846.tif 000019
【００９７】
反応工程図７には、式（Ｉ）のＣ５位置でのヘテロ環を取り入れるための種々の戦略が示される。例えば、チアゾールのような所定のヘテロ環を脱プロトン化すると、３−エトキシ−シクロペンテノンへ１，２−付加するためのアニオンを生成し、続いて、ベータ−置換エノンへ転移する。引き続き、上記反応工程図に類似の転換反応を用いて、チアゾール誘導体１５を生成させることができる。シクロペンテノンは窒素求核試薬とも反応して、ピラゾールのようなヘテロ環との１，４−付加体を形成することもできる。引き続き、上記反応工程図に類似の転換反応を用いて、ピラゾール誘導体１６を生成させることもできる。また、３−ヨード−シクロペンテノンは、反応工程図７に示されたＮ−メチルピラゾールホウ酸エステルのようなヘテロ環状ホウ酸エステルとのスズキカップリング反応に参画し得る。再度、引き続く上記反応工程図に類似の転換反応を用いて、Ｎ−メチルピラゾール誘導体１７を生成させることができる。
【００９８】
【化１２】
2008536846.tif 000020
【００９９】
反応工程図８はオキサゾール誘導体１８へのルートを示す。３−カルボキシ−シクロペンテノンから生成するプロパルギルアミドは、水銀塩で環化してシクロペンタノンオキサゾール（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９０，３３，１１２８）とし、引き続く上記反応工程図に記載の転換反応により、オキサゾール誘導体１８とすることができる。
【０１００】
【化１３】
2008536846.tif 000021
【０１０１】
反応工程図９はチアゾール位置異性体２１へのルートを示す。３−エトキシ−シクロペンテノンをスタンニル化して、中間体１９を生成させることができ、また２，４−ジブロモ−チアゾールから２０への変換は、次工程のスチルカップリングにおける位置制御を可能にする。従って、１９と２０のカップリングは、ベータ−置換シクロペンテノン中間体を生じ、このものは上記反応工程図に記載した次工程の転換反応に従い、チアゾール誘導体２１を生じ得る。
【０１０２】
ここで利用する様々な有機基の転換反応及び保護基は、上記以外の多くの方法により実施し得る。本明細書に開示した中間体又は化合物の調製のために利用し得る他の合成手法についての文献は、例えば、Ｍ．Ｂ．Ｓｍｉｔｈ，Ｊ．Ｍａｒｃｈ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，５ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ（２００１）；Ｒ．Ｃ．Ｌａｒｏｃｋ  Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，Ａ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｇｒｏｕｐ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ，２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｉｎｃ．（１９９９）；Ｔ．Ｌ．Ｇｉｌｃｈｒｉｓｔ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａｄｄｉｓｏｎ  Ｗｅｓｌｅｙ  Ｌｏｎｇｍａｎ  Ｌｔｄ．（１９９７）；Ｊ．Ａ．Ｊｏｕｌｅ，Ｋ．  Ｍｉｌｌｓ，Ｇ．Ｆ．Ｓｍｉｔｈ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｓｔａｎｌｅｙ  Ｔｈｏｒｎｅｓ  Ｌｔｄ．（１９９８）；Ｇ．Ｒ．Ｎｅｗｋｏｍｅ，Ｗ．Ｗ．Ｐａｕｄｌｅｒ  Ｃｏｎｔｅｍｐｏｒｙ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ（１９８２）；ｏｒ  Ｗｕｔｓ，Ｐ．Ｇ．Ｍ．；Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．；Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，（１９９９）などに見出され、これら６つの文献の全文を参照することにより本明細書の一部とする。
【０１０３】
式（Ｉ）で示される化合物の例は、下記表１に示す。表１に示す例は代表的なものであって、如何なる方法でも制限されるものではないことを理解すべきである。
【０１０４】
【表７】
2008536846.tif 000022
【０１０５】
【表８】
2008536846.tif 000023
【０１０６】
【表９】
2008536846.tif 000024
【０１０７】
医薬的に許容されるその塩又は溶媒和物も同様に包含される。
式（Ｉ）で示される化合物は、１つ以上のキラル中心をもち、従って、エナンチオマー又はジアステレオマーとして存在する。式（Ｉ）及び本発明全般で記載した式は、特に断りのない限り又は示さない限り、ラセミ体を含め、すべてのかかるエナンチオマー、ジアステレオマー及びその混合物を表すものとする。かかる異性体形状のすべてが包含される。
【０１０８】
さらに、１つの立体中心をもつ一般式（Ｉ）のキラル化合物は、当業者周知の方法を用いて、キラル環境の存在下に、それらのエナンチオマーに分割してもよい。１を超える立体中心をもつキラル化合物は、当業者周知の方法を用いて、それらの物理的性質に基づいて、アキラル環境にてそれらのジアステレオマーに分離し得る。ラセミの形状で得られる単一のジアステレオマーは、上記のように、それらのエナンチオマーに分割し得る。
【０１０９】
要すれば、化合物のラセミ混合物は、個々のエナンチオマーが単離されるように分離するとよい。この分離は当業者周知の方法により実施し得、例えば、式（Ｉ）で示される化合物のラセミ混合物を、エナンチオマー的に純粋な化合物とカップリングさせてジアステレオマー混合物を形成し、次いでこれを分別結晶又はクロマトグラフィーなどの標準的方法により、個々のジアステレオマーに分離する。該カップリング反応は、エナンチオマーとして純粋な酸又は塩基を用い塩を形成することであるが、これに限定されるものではない。次いで、ジアステレオマー誘導体は、付加したキラル残基をジアステレオマー化合物から開裂することにより、実質的に純粋なエナンチオマーに変換してもよい。式（Ｉ）で示される化合物のラセミ混合物は、キラル固定相を利用するクロマトグラフ法により直接分離することもでき、この方法は当該技術分野で周知である。光学異性体のさらなる分割法を用いることも可能であり、それは平均的当業者にとっては明らかである。かかる方法は、文献（Ｊａｑｕｅｓ，Ａ．Ｃｏｌｌｅｔ，ａｎｄ  Ｓ．Ｗｉｌｅｎ  ｉｎ”Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍａｔｅｓ，ａｎｄ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ”（エナンチオマー、ラセミ体、及び分割），Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８１））で検討されている方法であるが、これに限定されるものではない。別法として、一般式（Ｉ）で示される化合物のエナンチオマーは、キラルプールから、又は合成起源から得られる光学的に純粋な出発原料又は試薬を用いて、不斉立体選択的合成により入手してもよい。かかる不斉合成法には、文献（Ｊ．Ｄ．Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｅｄ．Ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（不斉合成）；Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ：Ｏｒｌａｎｄｏ，Ｖｏｌｕｍｅ  ５，（１９８５））で検討されている方法を含むが、これに限定されるものではない。
【０１１０】
本明細書に記載の化合物は、互変異性体としても存在し、それは１つ以上の二重結合のシフトに伴って、水素の結合点が異なる。例えば、ケトンとそのエノール型は、ケト−エノール互変異性体である。又は、例えばピラゾールのプロトンはヘテロ環状環内の２個の窒素のいずれにも存在し得る。式（Ｉ）及び本明細書に記載の式は、特に断りのない限り、個々の互変異性体及びその混合物すべてを表すものとする。
【実施例】
【０１１１】
代表的実施例
以下の実施例は、本発明をより完全に説明するために提供するものであり、特に断りのない限りいかなる方法でもその範囲を限定すると解釈すべきではない。
（ｉ）操作はすべて室温又は外気温、すなわち１８〜２５℃の範囲の温度で実施した；
（ｉｉ）溶媒の蒸発は、ロータリーエバポレーターを用いて、減圧下（４．５〜３０ｍｍＨｇ）、５０℃までの浴温で実施した；
【０１１２】
（ｉｉｉ）反応のコースは、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）及び／又は直列高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により追跡し、次いで質量分析（ＭＳ）に付し、本明細書ではＬＣＭＳとした；反応時間はいずれも説明のためのみに示した。
（ｉｖ）収率は、示すとすれば、説明のためのみである。
（ｖ）すべての最終化合物の構造は、少なくとも以下の技法の一つで確認した：
ＭＳ又はプロトン核磁気共鳴（１Ｈ−ＮＭＲ）スペクトル法；
また、純度は少なくとも以下の技法の一つで確認した：
ＴＬＣ又はＨＰＬＣ；
【０１１３】
（ｖｉ）１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、バリアンユニティ又はバリアンイノバ装置により、指定の溶媒を用い、５００又は６００ＭＨｚで記録した；
行リストとして記載したＮＭＲデータは、主要な診断プロトンについてデルタ値の形とし、残存する溶媒ピークに比例して１００万分の１（ｐｐｍ）で示した（多重度及び水素数）；
シグナルの形状について使用した簡便な略号は：ｓ．シングレット；ｄ．ダブレット（外見上）；ｔ．トリプレット（外見上）；ｍ．マルチプレット；ｂｒ．ブロード；などである；
【０１１４】
（ｖｉｉ）ＭＳデータは、ヒューレット−パッカード（エイジレント１１００）ＨＰＬＣ装置と接続したウォーターズマイクロマスユニット上で記録し、マスリンクス／オープンリンクスソフトウエアで操作した；エレクトロスプレー−イオン法は、正（ＥＳ＋）又は負（ＥＳ−）イオン検出により使用した；ＬＣＭＳ  ＥＳ＋の方法は、１〜２ｍＬ／分、１０〜９５％Ｂ直線勾配５．５分（Ｂ＝０．０５％ＴＦＡ−アセトニトリル、Ａ＝０．０５％ＴＦＡ−水）とした；
及びＬＣＭＳ  ＥＳ−の方法は、１〜２ｍＬ／分、１０〜９５％Ｂ直線勾配５．５分（Ｂ＝０．１％ギ酸−アセトニトリル、Ａ＝０．１％ギ酸−水）、ウォーターズＸテラＣ１８−３．５μｍ−５０×３．０ｍｍＩＤ及びダイオードアレイ検出とした；
【０１１５】
（ｖｉｉｉ）分取用逆相ＨＰＬＣ（ＲＰＨＰＬＣ）による化合物の精製は、ウォーターズシンメトリープレップＣ１８−５μｍ−３０×１００ｍｍＩＤ、又はウォーターズアトランティスプレップｄＣ１８−５μｍ−２０×１００ｍｍＩＤ；２０ｍＬ／分、１０−１００％Ｂ直線勾配１５分（Ｂ＝０．０５％ＴＦＡ−アセトニトリル、Ａ＝０．０５％ＴＦＡ−水）；及びダイオードアレイ又は２５４波長検出とした；
【０１１６】
（ｉｘ）分取用逆相ＨＰＬＣによる化合物の自動精製は、ＹＭＣ−パックプロＣ１８カラム（１５０×２０ｍｍｉ．ｄ．）を用いるギルソンシステム上、０〜５０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）により２０ｍＬ／分で溶出して実施した。
（ｘ）分取用薄層クロマトグラフィー（ＰＴＬＣ）による化合物の精製は、シリカゲルを塗布した２０×２０ｃｍのガラスプレップ板上で、又はシリカゲルを塗布したガラスローターを用いるクロマトトロン上の遠心分離クロマトグラフィーにより実施した；両方ともアナルテックから商品として入手し得る；
【０１１７】
（ｘｉ）カラムクロマトグラフィーは、キーゼルゲル６０、０．０６３−０．２００ｍｍを用いるガラスシリカゲルカラム（メルク）上で、又はバイオテージカートリッジシステム上で実施した；
（ｘｉｉ）マイクロ波照射はスミスシンセサイザー（パースナルケミストリー）を用いて実施した；
【０１１８】
（ｘｉｉｉ）化学記号はそれらの通常の意味を有し、以下の略号を使用した：ｖ（容量）、ｗ（重量）、ｂ．ｐ．（沸点）、ｍ．ｐ．（融点）、Ｌ（リットル）、ｍＬ（ミリリットル）、ｇ（グラム）、ｍｇ（ミリグラム）、ｍｏｌ（モル）、ｍｍｏｌ（ミリモル）、ｅｑ又はｅｑｕｉｖ（当量）、ＩＣ５０（５０％の最大可能阻害モル濃度）、ＥＣ５０（５０％の最大可能有効モル濃度）、μＭ（マイクロモル）、ｎＭ（ナノモル）；
【０１１９】
（ｘｉｖ）頭文字の定義は以下のとおりである；
ＴＨＦはテトラヒドロフランである；
ＤＭＥは１，２−ジメトキシエタンである；
ＤＭＦはジメチルホルムアミドである；
ＤＣＭはジクロロメタン（塩化メチレン）である；
ＴＦＡはトリフルオロ酢酸である；
ＴＢＡＦはフッ化テトラブチルアンモニウムである；
ＴＦＡＡはトリフルオロ酢酸無水物である；
ＬＤＡはリチウムジイソプロピルアミドである；
ＥＤＣ（Ｉ）は１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩である；
ＮＨＳはＮ−ヒドロキシコハク酸イミドである；
ＴｓＣｌは塩化トルエンスルホニル（トシル）である；
ｄｐｐｆは１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンである；
ＵＶは紫外線である；
（ｅｅ）はエナンチオマー過剰率である。
【０１２０】
中間体Ａ
【０１２１】
【化１４】
2008536846.tif 000025
【０１２２】
−７８℃に冷却した３−エトキシシクロペンテノン（２．１２ｇ、１６．８２ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液に、窒素気流下、リチウムジイソプロピルアミド（１２ｍＬ、２４ｍｍｏｌ、２．０Ｍ／ＴＨＦ）を加えた。１５分後、二シュウ酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（３．７３ｇ、１８．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を加えた。反応混合物を−７８℃で１５分間攪拌し、次いで、−２０℃まで昇温し、さらに１５分間攪拌した。１Ｎ−ＨＣｌ（４０ｍＬ）で反応を停止させ、酢酸エチルで（３回）抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過、減圧濃縮した。残渣を３５％酢酸エチル−ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）により精製して、所望の生成物を灰白色固体として得た。
【０１２３】
このジケトン（２．１５ｇ、８．４５ｍｍｏｌ）のエタノール（１００ｍＬ）溶液に、ベンジルヒドラジン塩酸塩（１．８ｇ、９．２２ｍｍｏｌ）及びＨＯＡｃ（１０ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で１６時間攪拌し、次いで、７０℃で３０分間還流した。反応液を室温に冷却し、減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶かし、水、飽和ＮａＨＣＯ３、及び食塩水で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過、減圧濃縮した。残渣を３０％酢酸エチル−ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）により精製して、所望の生成物を褐色油として得た。このｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．６４ｇ、５．２５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（２０ｍＬ）を加え、得られた溶液を室温で４時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮し、トルエンと（３回）共沸蒸留した。この物質はさらに精製することなく次工程で使用した。
【０１２４】
この酸（１．３４ｇ、５．２５ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）溶液に、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド（１．２１ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）を加え、次いで、ＥＤＣ（２．０１ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１８時間攪拌した後、反応混合物を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液及び食塩水で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過、減圧濃縮した。黄色固体が得られた。この活性化エステル（２．０ｇ、５．２５ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（５０ｍＬ）溶液に、ＮＨ４ＯＨ（１４．８Ｎ、１０．０ｅｑ．、３．５３ｍＬ）を加えた。直ちに沈殿が形成された。室温で１５分間攪拌後に、反応混合物をガラス漏斗で濾過し、沈殿を１，４−ジオキサンで洗浄した。濾液を減圧濃縮して固体を得た。このカルボキサミド（５．２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（６０ｍＬ）溶液に、塩化シアヌル（３．１２ｇ、１７ｍｍｏｌ）を３回に分けて加えた。室温３０分後に、反応を水で停止させ、酢酸エチルで（２回）抽出した。有機層を水、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過、減圧濃縮した。残渣を３０％酢酸エチル−ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）により精製して、所望の生成物を黄色固体として得た。
【０１２５】
このシアノケトン（４４７ｍｇ、１．８７ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１４ｍＬ）溶液に、−７８℃で新たに調製したリチウムジイソプロピルアミド（１．８９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６ｍＬ）溶液を加えた。反応液を−７８℃で３０分間攪拌した後、２−［Ｎ，Ｎ−ビス（トリフルオロメチルスルホニル）アミン］−５−クロロピリジン（コミンズ試薬、１．４ｇ、３．６ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を−２０℃まで昇温させ、３時間攪拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液で反応を停止させ、得られた混合物を酢酸エチルで抽出し、１Ｎ−ＨＣｌ溶液、飽和ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。溶液を濾過し、減圧濃縮した。残渣を２０００−ミクロンローター（ＳｉＯ２）及び５％酢酸エチル−ヘキサンを溶出液として用いるクロマトトロン上で精製して、二重結合位置異性体の２：１混合物として所望の生成物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：（主たる異性体）δ７．４５−７．３（ｍ，５Ｈ），６．０６（ｂｔ，１Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），３．５６（ｂｄ，２Ｈ）；（マイナー異性体）δ７．４５−７．３（ｍ，５Ｈ），６．６３（ｂｔ，１Ｈ），５．３９（ｓ，２Ｈ），３．１８（ｂｄ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ３７０（Ｍ＋Ｈ）。
【０１２６】
中間体Ｂ
【０１２７】
【化１５】
2008536846.tif 000026
【０１２８】
（４−エトキシ−２−オキソシクロペンタ−３−エン−１−イル）（オキソ）酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（４．０ｇ、１５．７ｍｍｏｌ）（中間体Ａ、工程１）のエタノール（９０ｍＬ）溶液に、ヒドラジン（０．５４ｍＬ、１７．３ｍｍｏｌ）を加えた。５分後に、氷酢酸（１０ｍＬ）を加えた。得られた溶液を７０℃で１時間加熱した。反応液を室温まで冷却し、減圧濃縮した。得られた油を、酢酸エチル−ヘキサン（１：１）を溶出液とするバイオテージフラッシュ６０Ｍカートリッジを用いるフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、所望の化合物を白色固体として得た。この遊離ピラゾール（２．７８、１１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１００ｍＬ）溶液に、ピリジン（２．６９ｍＬ、３３．３ｍｍｏｌ）を加え、次いで、塩化トシル（３．１７ｇ、１６．５１ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で４時間攪拌し、１Ｎ−ＨＣｌで反応停止した。得られた混合物をＤＣＭで抽出した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３溶液、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。これを濾過し、減圧濃縮した。粗製の物質を２５％酢酸エチル−ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）により精製して、所望の生成物を白色固体として得た。
【０１２９】
このエノールエーテル（１．１５ｇ、２．８４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１９ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（１ｍＬ）および水（０．２ｍＬ）を加えた。室温で２０分間攪拌した後、飽和ＮａＨＣＯ３溶液を加えて反応を停止した。得られた混合物をＤＣＭで（３回）抽出した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。溶液を濾過し、減圧濃縮した。粗製の物質を３０％酢酸エチル−ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、所望の化合物を白色固体として得た。このケトン（５９５ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液に、−７８℃、窒素気流下でリチウムジイソプロピルアミド（０．７９ｍＬ、１．５８ｍｍｏｌ、２．０Ｍ／ＴＨＦ溶液）を加えた。溶液を−７８℃で５分間攪拌した後、２−［Ｎ，Ｎ−ビス（トリフルオロメチルスルホニル）アミン］−５−クロロピリジン（コミンズ試薬、０．７４５ｇ、１．８９ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温まで昇温し、飽和１Ｎ−ＨＣｌ溶液で反応停止した。得られた混合物を酢酸エチルで抽出し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。溶液を濾過し、減圧濃縮した。残渣を１５％酢酸エチル−ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）により精製して、所望の生成物を得た。ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ５０９（Ｍ＋Ｈ）。
【０１３０】
中間体Ｃ
【０１３１】
【化１６】
2008536846.tif 000027
【０１３２】
シクロヘキサン−１，４−ジオン  モノ−エチレンケタール（５ｇ、３２ｍｍｏｌ）及びシュウ酸ジエチル（５．６ｇ、３８．４ｍｍｏｌ）のエタノール（１００ｍＬ）溶液に、カリウム−ｔ−ブトキシド（３８ｍＬ、１．０Ｍ／ＴＨＦ）を加えた。１時間後に、ベンジルヒドラジン塩酸塩（６．９ｇ、３５．２ｍｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物を室温で１６時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮し、酢酸エチルで希釈した。有機層を水、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。反応混合物を濾過し、減圧濃縮し、フラッシュクロマトグラフィーにより精製して、所望の化合物を得た。このケタール（３．０ｇ、８．７６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液に、エタノール（５０ｍＬ）を加え、次いで、３Ｎ−ＨＣｌ（２０ｍＬ）を加えた。５０℃で一夜攪拌した後、反応液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄した。有機層を減圧濃縮し、０〜６０％酢酸エチル−ヘキサンの勾配を用いるフラッシュクロマトグラフィー（ホリゾン）により精製した。このケトンは中間体Ａ及びＢについて記載した手法と同様の手法に従って、そのエノールトリフラートに変換した。ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ２３１（Ｍ＋Ｈ）。
【０１３３】
中間体Ｄ
【０１３４】
【化１７】
2008536846.tif 000028
【０１３５】
−７８℃に冷却したシクロヘキサン−１，４−ジオンモノ−エチレンケタール（１０．７５ｇ、６８．８３ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ溶液に窒素気流下、ＬＤＡ（３７ｍＬ、２．０Ｍ溶液）を加えた。１５分間攪拌した後に、シュウ酸ジエチル（１０．３ｍＬ、７４ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温に昇温し、１６時間攪拌した。反応混合物に１Ｎ−ＨＣｌを加えて反応停止し、得られた混合物を酢酸エチルで抽出し、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。この溶液を濾過し、減圧濃縮した。残渣を０〜１００％酢酸エチル−ヘキサンの勾配を用いるフラッシュクロマトグラフィー（バイオテージ−ホリゾン）により精製した。このジケトン（１０．５ｇ、４０．９８ｍｍｏｌ）のエタノール（３００ｍＬ）溶液に、ヒドラジン水和物（１．４ｍＬ、４５．０７ｍｍｏｌ）および氷酢酸（３０ｍＬ）を加えた。得られた反応混合物を６５℃で１．５時間加熱した。反応混合物を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶かし、飽和ＮａＨＣＯ３、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。この溶液を濾過し、減圧濃縮した。残渣を６０％酢酸エチル−ヘキサンを溶媒として用いるフラッシュクロマトグラフィー（バイオテージ４０Ｍ）により精製して、所望の化合物を黄色泡状物として得た。このケタール（６．７６ｇ、２６．８ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ／ＴＨＦ（２：１）溶液に、３Ｎ−ＨＣｌ（５０ｍＬ）を加えた。得られた反応混合物を６０℃で４８時間加熱した。飽和ＮａＨＣＯ３溶液を加えて反応を停止させた。有機溶媒を減圧除去した。残渣を酢酸エチルで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過、減圧濃縮してオレンジ色の油を得た。これを５％酢酸エチル−ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィー（バイオテージフラッシュ４０Ｍ）により精製して、所望の生成物を白色固体として得た。
【０１３６】
０℃に冷却したこの遊離ピラゾール（０．４７ｇ、２．２６ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ溶液に、水素化ナトリウム（０．１０８ｇ、２．７ｍｍｏｌ）を加えた。３０分後、塩化トシル（０．４５２ｇ、２．３７ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で１時間攪拌し、次いで１Ｎ−ＨＣｌを加えて反応を停止した。得られた混合物を水で希釈し、酢酸エチルで（２回）抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過、減圧濃縮した。残渣を５０％酢酸エチル−ヘキサンによる分取ＴＬＣにより精製して、所望の化合物を白色固体として得た。−７０℃に冷却したこのケトン（０．９４１ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液に、Ｎ２気流下、ＬＤＡ（１．３ｍＬ、２．０Ｍ溶液）を加えた。−７８℃で３０分間攪拌後、２−［Ｎ，Ｎ−ビス（トリフルオロメチルスルホニル）アミン］−５−クロロピリジン（コミンズ試薬、１．５５ｇ、３．９ｍｍｏｌ）を加えた。反応液をゆっくりと室温まで昇温させ、４時間攪拌した。１Ｎ−ＨＣｌを加えて反応を停止させた。得られた混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過、減圧濃縮した。残渣を１５％酢酸エチル−ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィー（バイオテージ４０Ｍ）により精製して、所望の化合物を白色固体として得た。ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ４９４．９（Ｍ＋Ｈ）。
【０１３７】
（実施例１）
【０１３８】
【化１８】
2008536846.tif 000029
【０１３９】
中間体Ａ（５０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）をジオキサン（１ｍＬ）中で１．１当量の４−フルオロフェニルホウ酸、トリエチルアミン（２８ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）及びＰｄ（Ｐｈ３Ｐ）４（１５ｍｇ、１０％触媒）と混合した。反応混合物をマイクロ波反応器中で１００℃（１００ワット）で１０分間加熱し、１Ｍ−ＮａＯＨ、食塩水に分配し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。粗生成物を分取用遠心分離クロマトグラフィー（ＳｉＯ２，ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）により精製し、シアノベンジルオレフィン中間体を得た。この物質（２５ｍｇ、０．０７９ｍｍｏｌ）を水（１ｍＬ）及びイソプロパノール（２ｍＬ）に希釈し、濁りのある混合物をアジ化ナトリウム（１０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）とＺｎＢｒ２（２６ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）で処理した。不均一な反応混合物を１６時間還流し、室温まで冷却し、濃ＨＣｌでｐＨ２の酸性とし、ＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。次いでベンジル保護オレフィン中間体（１７ｍｇ、０．０４７ｍｍｏｌ）をメタノール（２ｍＬ）中に希釈し、濁りのある混合物に濃ＨＣｌを滴下して均一とした。触媒Ｐｄ−Ｃ（１０重量％）を加え、反応混合物を１気圧の水素ガス（風船）下で４８時間、激しく攪拌した。反応混合物を濾過し、減圧濃縮して、所望の生成物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，５００ＭＨｚ）δ７．３７（ｍ，２Ｈ），７．０５（ｍ，２Ｈ），４．２８（ｍ，１Ｈ），３．３３（ｍ，２Ｈ），２．９４（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ２７１（Ｍ＋Ｈ）。
【０１４０】
（実施例２〜１９）
以下の化合物は、実施例１に記載し、反応工程図３で説明した条件と同様の条件下で調製した。実施例２を除きこれらの例ではすべてパラジウムカップリング反応を容易にするために、マイクロ波反応器を利用した。実施例２では、塩基としてリン酸カリウムを使用し、加熱条件（８５℃、２時間）で実施した。
【０１４１】
【表１０】
2008536846.tif 000030
【０１４２】
【表１１】
2008536846.tif 000031
【０１４３】
【表１２】
2008536846.tif 000032
【０１４４】
選択した実施例の１Ｈ−ＮＭＲ：
実施例２
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ２．９５（ｍ，２Ｈ），３．４０（ｍ，２Ｈ），４．２７（ｍ，１Ｈ），７．２０−７．４０（ｍ，５Ｈ）。
実施例３
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ２．９５（ｍ，２Ｈ），３．４０（ｍ，２Ｈ），４．４５（ｂｄ，１Ｈ），７．０５−７．４０（ｍ，４Ｈ）。
実施例４
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ２．２９（ｓ，３Ｈ），２．９５（ｍ，２Ｈ），３．３０（ｍ，２Ｈ），４．２５（ｍ，１Ｈ），７．０５（ｍ，１Ｈ），７．２０（ｍ，３Ｈ）。
実施例５
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ２．９９（ｍ，２Ｈ），３．３６（ｍ，２Ｈ），４．３５（ｍ，１Ｈ），７．５５（ｄ，２Ｈ），７．６５（ｄ，２Ｈ）。
実施例６
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ３．００（ｍ，２Ｈ），３．４０（ｍ，２Ｈ），４．７０（ｂｍ，１Ｈ），７．２０−７．６０（ｍ，４Ｈ）。
実施例７
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ２．９０（ｂｍ，２Ｈ），３．４０（ｍ，２Ｈ），４．３０（ｍ，１Ｈ），７．４０（ｍ，３Ｈ）。
実施例８
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ２．９０（ｂｍ，２Ｈ），３．４０（ｂｍ，２Ｈ），４．３０（ｂｓ，１Ｈ），６．８１（ｂｔ，１Ｈ），６．９６（ｂｄ，２Ｈ）。
実施例９
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ２．９５（ｍ，２Ｈ），３．４０（ｍ，２Ｈ），４．４０（ｍ，１Ｈ），７．００（ｍ，１Ｈ），７．１０（ｍ，２Ｈ）。
実施例１０
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ３．０５（ｍ，２Ｈ），３．２０（ｍ，２Ｈ），４．６４（ｍ，１Ｈ），６．９９（ｔ，２Ｈ），７．３１（ｍ，１Ｈ）。
実施例１１
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ３．０５（ｍ，２Ｈ），３．２１（ｍ，２Ｈ），４．６４（ｍ，１Ｈ），６．９９（ｂｔ，２Ｈ），７．３１（ｍ，１Ｈ）。
実施例１２
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ３．００（ｍ，２Ｈ），３．１５（ｓ，３Ｈ），３．４０（ｍ，２Ｈ），４．４３（ｂｍ，１Ｈ），７．６５（ｔ，１Ｈ），７．７６（ｄ，１Ｈ），７．８７（ｄ，１Ｈ），７．９６（ｓ，１Ｈ）。
実施例１３
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ３．００（ｍ，２Ｈ），３．４０（ｍ，２Ｈ），４．７０（ｂｍ，１Ｈ），７．４０（ｍ，１Ｈ），７．６０−７．７０（ｍ，３Ｈ）。
実施例１５
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）２種類の明瞭な回転異性体δ２．９５（ｍ，２Ｈ），３．４０（ｍ，２Ｈ），４．４２（ｍ，１Ｈ），６．９０−７．７７（ｍ，３Ｈ）。
実施例１６
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ１．２５（ｄ，６Ｈ），２．９５（ｍ，３Ｈ），３．４０（ｍ，２Ｈ），４．２０（ｍ，１Ｈ），７．１８（ｄ，２Ｈ），７．２６（ｄ，２Ｈ）。
実施例１７
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ２．９０（ｍ，２Ｈ），３．４０（ｍ，２Ｈ），４．２５（ｍ，１Ｈ），７．４０（ｂｑ，４Ｈ）。
実施例１８
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ２．４０（ｓ，３Ｈ）２．９０（ｍ，２Ｈ），３．３０（ｍ，２Ｈ），４．５１（ｍ，１Ｈ），７．２０（ｍ，３Ｈ），７．３０（ｄ，１Ｈ）。
実施例１９
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ２．９５（ｍ，２Ｈ），３．４０（ｍ，２Ｈ），４．３０（ｂｍ，１Ｈ），７．４０（ｍ，４Ｈ）。
【０１４５】
（実施例２０）
【０１４６】
【化１９】
2008536846.tif 000033
【０１４７】
中間体Ｂ（０．０５ｇ、０．１ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（１．５ｍＬ）溶液に、３−フリルホウ酸（１３．４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４２μＬ、０．２ｍｍｏｌ）及びテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（０）（０．０１ｍｍｏｌ、１１ｍｇ）を加えた。得られた混合物は、マイクロ波により１００℃で１０分間、加熱した。反応混合物をそのままバイオテージクァッド３  １２Ｍカラムに付し、１５％酢酸エチル／ヘキサンで溶出して、所望の化合物（３６ｍｇ）を得た。このトルエンスルホンアミド（３６ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）溶液に、ＴＢＡＦ（１００μＬ、１．０Ｍ溶液）を加え、得られた混合物を封管中、８０℃で１時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、そのままバイオテージクァッド３  １２Ｍカラムに付し、３０％酢酸エチル／ヘキサンで溶出して、所望の化合物を得た。このｔｅｒｔ−ブチルエステルのＤＣＭ（３ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（３ｍＬ）を加え、得られた反応液を室温で３時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮し、バイオテージクァッド３上、５０％酢酸エチル／ヘキサン及び１５％ＭｅＯＨ／酢酸エチル／０．２％ＨＯＡｃを用いて精製し、所望の化合物を得た。このオレフィン混合物（１２ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５ｍＬ）溶液に、濃ＨＣｌ（２滴）を加え、次いでＰｄ／Ｃを加えた。得られた混合物をＨ２風船下に１６時間攪拌した。反応混合物をセライトで濾過し、濾液を減圧濃縮し、逆相ＨＰＬＣ（ギルソン）により精製して、所望の化合物を得た。ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ２１９（Ｍ＋Ｈ）。
【０１４８】
（実施例２１〜３１）
以下の化合物は、上記実施例２０に記載し、反応工程図４にて説明した条件と同様の条件下で調製した。反応工程の順序は、オレフィンの還元とｔ−ブチル開裂に関して、逆順であってもよい。Ｎ−トルエンスルホンアミド保護基のＴＢＡＦ脱保護は、水性ＬｉＯＨでも実施可能であり、また水素化の工程は、Ｐｄ−Ｃ又は水酸化パラジウム（パールマンの触媒）のいずれも触媒される。実施例２８のピリミジンは、Ｎ−トルエンスルホンアミド保護基なしで合成した。
【０１４９】
【表１３】
2008536846.tif 000034
【０１５０】
【表１４】
2008536846.tif 000035
【０１５１】
選択した実施例の１Ｈ−ＮＭＲ：
実施例２１
（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．９０（ｍ，２Ｈ），３．１０（ｍ，２Ｈ），４．１０（ｍ，１Ｈ），７．２０−７．３０（ｍ，５Ｈ）。
実施例２５
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ２．２０（ｓ，３Ｈ），２．９０（ｍ，２Ｈ），３．２０（ｍ，２Ｈ），４．１５（ｍ，１Ｈ），６．９５（ｓ，１Ｈ），７．１５（ｓ，１Ｈ）。
実施例２６
（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．１５（ｓ，３Ｈ），２．８５（ｍ，２Ｈ），３．２０（ｍ，２Ｈ），４．２０（ｍ，１Ｈ），６．８０（ｓ，１Ｈ），６．９５（ｓ，１Ｈ）。
実施例２７
（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．４０（ｓ，３Ｈ），２．７０（ｍ，２Ｈ），３．２０（ｍ，２Ｈ），４．１０（ｍ，１Ｈ），６．６０（ｓ，１Ｈ），６．７０（ｓ，１Ｈ）。
実施例２８
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ２．９０（ｍ，２Ｈ），３．４０（ｍ，２Ｈ），４．１０（ｍ，１Ｈ），８．８０（ｓ，２Ｈ），９．０５（ｓ，１Ｈ）。
実施例２９
（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．８０（ｍ，２Ｈ），３．２０（ｍ，２Ｈ），４．２０（ｍ，１Ｈ），７．３０（ｔ，１Ｈ），７．９５（ｔ，１Ｈ），８．１０（ｄ，１Ｈ）。
実施例３０
（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．８０（ｍ，２Ｈ），３．２０（ｍ，２Ｈ），４．１０（ｍ，１Ｈ），７．１０（ｄｄ，１Ｈ），７．９８（ｔ，１Ｈ），８．２０（ｓ，１Ｈ）。
実施例３１
（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．７５（ｍ，２Ｈ），３．０５（ｍ，２Ｈ），３．９１（ｓ，３Ｈ），４．１０（ｍ，１Ｈ），６．９０（ｄｄ，１Ｈ），７．６０（ｄ，１Ｈ），８．０５（ｄ，１Ｈ）。
【０１５２】
（実施例３２）
【０１５３】
【化２０】
2008536846.tif 000036
【０１５４】
市販品として入手し得るシクロペンテノン（１ｍＬ、１２．３ｍｍｏｌ）をＨＯＡｃ（１２３ｍＬ）中で、２，３，５−トリフルオロフェニルホウ酸（２．６ｇ、１４．８ｍｍｏｌ）、酢酸ナトリウム（２ｇ、２４．６ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（２７６ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）、及びＳｂＣｌ２（２８０ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）と混合した。反応混合物を１８時間攪拌し、減圧濃縮し、塩化メチレン中に希釈し、セライトで濾過し、減圧濃縮した。粗生成物を分取用遠心分離クロマトグラフィー（ＳｉＯ２、２０％ＥｔＯＡｃ−ヘキサン）により精製して、ベータ−置換エノン中間体を得た。この物質（１．５ｇ、４．８ｍｍｏｌ）をエタノール（１００ｍＬ）中に希釈し、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１Ｍ−ｔ−ＢｕＯＨ、５．３ｍＬ、５．３ｍｍｏｌ）及びシュウ酸ジエチル（７７８ｍｇ、５．３ｍｍｏｌ）で処理し、その後、無色の反応混合物が赤に変色した。反応混合物を１時間放置し、ＬＣＭＳでモニターし、次いで、ヒドラジン−塩酸塩（３６１ｍｇ、５．３ｍｍｏｌ）で処理した。反応混合物を１５時間放置し、減圧下に濃縮し、ＥｔＯＡｃ−水（１：１）で希釈し、有機層を分離し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧濃縮した。残渣を分取用遠心分離クロマトグラフィー（ＳｉＯ２、５０％ＥｔＯＡｃ−ヘキサン）により精製して、オレフィン性ピラゾールエチルエステルを得た。
【０１５５】
オレフィン中間体をエタノール−水（７：１、０．１Ｍ）中、ギ酸アンモニウム（５当量）、ギ酸（４当量）、及びＰｄ−Ｃ（１当量）で処理して還元した。反応混合物を再封管可能な加圧チューブ中、８５℃で１２時間加熱し、次いで、冷却、濾過、減圧濃縮し、水及びＥｔＯＡｃに分配し、有機層を分離し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧濃縮した。粗エステル（６３ｍｇ、０．２０３ｍｍｏｌ）を水−ＴＨＦ（１：１、２ｍＬ）に希釈し、ＬｉＯＨ（１４．５ｍｇ、０．６０９ｍｍｏｌ）で処理した。反応混合物を１８時間放置し、少量の水に減圧濃縮し、ｐＨ２に酸性化し、ＥｔＯＡｃで抽出して、その有機画分を無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧濃縮した。残渣をギルソンシステム上の分取逆相ＨＰＬＣにより精製し、所望の生成物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，５００ＭＨｚ）２種の明瞭な回転異性体（メジャー）δ７．０３（ｍ，１Ｈ），６．９７（ｍ，１Ｈ），４．３７（ｍ，１Ｈ），３．２５（ｍ，２Ｈ），２．８９（ｍ，２Ｈ）及び（マイナー）δ６．９７（ｍ，１Ｈ），６．５２（ｍ，１Ｈ），４．６９（ｄｄ，１Ｈ），３．２５（ｍ，２Ｈ），２．８９（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ２６５（Ｍ＋Ｈ）。
【０１５６】
（実施例３３）
【０１５７】
【化２１】
2008536846.tif 000037
【０１５８】
上記実施例３２からのエチルエステル中間体（１．５ｇ、４．８７ｍｍｏｌ）を水酸化アンモニウム（０．０５Ｍ）及びジオキサン（０．３０Ｍ）に希釈し、反応混合物を再封管可能な加圧チューブ中で１２時間攪拌した。混合物を減圧濃縮し、澄明な粗カルボキサミド中間体を得た。このカルボキサミド（４００ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に希釈し、トリエチルアミン（０．５ｍＬ、３．５ｍｍｏｌ）と混合し、混合物を−５℃に冷却し、次いで、トリフルオロ酢酸無水物（０．５ｍＬ、３．５ｍｍｏｌ）で処理した。反応混合物を２時間室温に維持し、飽和重炭酸ナトリウム水で反応停止し、濃縮して、水および塩化メチレンに分配し、その有機画分を無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧濃縮した。このニトリル中間体（６７ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）をアジ化ナトリウム（３３ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）及びＺｎＢｒ２（５７ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）と混合し、イソプロパノール−水（１０：１）（１．１ｍＬ）で希釈した。反応混合物を再封管可能な加圧チューブ中で８５℃で２４時間加熱し、冷却し、濃縮、濾過し、ギルソンシステム上の分取逆相ＨＰＬＣにより精製し、所望の生成物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，５００ＭＨｚ）２種の明瞭な回転異性体（主部）δ７．０４（ｍ，１Ｈ），６．９６（ｍ，１Ｈ），４．５３（ｍ，１Ｈ），３．３７（ｍ，２Ｈ），２．９９（ｍ，２Ｈ）及び（マイナー）δ６．９６（ｍ，１Ｈ），６．４５（ｍ，１Ｈ），４．８３（ｍ，１Ｈ），３．２７（ｍ，２Ｈ），２．９２（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ３０７（Ｍ＋Ｈ）。
【０１５９】
（実施例３４）
【０１６０】
【化２２】
2008536846.tif 000038
【０１６１】
中間体Ｃ（１００ｍｇ、０．２３２ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（１．５ｍＬ）溶液に、フェニルホウ酸（３４ｍｇ、０．２７９ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（９７μＬ、０．７０ｍｍｏｌ）及びテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（０）（１３ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物をマイクロ波で、１００℃で１０分間加熱した。反応混合物を減圧濃縮し、溶出液として４０％酢酸エチル−ヘキサンを用いる分取用ＴＬＣプレートにより精製して、所望の化合物を黄色油として得た。このエチルエステル（６２ｍｇ、０．１７２ｍｍｏｌ）のジオキサン（３ｍＬ）溶液に、１Ｎ−ＮａＯＨ（１．７４ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で一夜攪拌した後、減圧濃縮してジオキサンを除去した。残渣を１Ｎ−ＨＣｌで酸性とした。得られた混合物を酢酸エチルで抽出し、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。この溶液を濾過し、減圧濃縮して固体を得た。このオレフィン（３４ｍｇ、０．１０２ｍｍｏｌ）のメタノール（１．５ｍＬ）溶液に、濃ＨＣｌ（３００μＬ）およびＰｄ／Ｃを加えた。得られた混合物を水素風船下で４時間攪拌した。触媒をセライトで濾過した。濾液を減圧濃縮し、逆相ＨＰＬＣ（ギルソン）により精製して、所望の化合物を黄色固体として得た。ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ３４３（Ｍ＋Ｈ）。
【０１６２】
（実施例３５）
【０１６３】
【化２３】
2008536846.tif 000039
【０１６４】
中間体Ｄ（７５ｍｇ、０．１５２ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（１．５ｍＬ）溶液に、３，５−ジフルオロ−フェニルホウ酸（２９ｍｇ、０．１８２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（６４μＬ、０．４６ｍｍｏｌ）及びテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（０）（９ｍｇ、０．００８ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物をマイクロ波で１００℃で１０分間加熱した。反応混合物を減圧濃縮し、溶出液として２０％酢酸エチル−ヘキサンを用いる分取用ＴＬＣプレートにより精製して、所望の生成物を得た。このオレフィンのＴＨＦ／ＭｅＯＨ（２：１、３ｍＬ）溶液（５５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）に、ギ酸アンモニウム（８７ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、ギ酸（３００μＬ）及びＰｄ／Ｃを加え、反応液を加圧管中、８０℃で４８時間加熱した。反応混合物をセライトで濾過した。濾液を減圧濃縮し、酢酸エチルに再溶解した。有機層を水、飽和ＮａＨＣＯ３溶液及び食塩水で洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過、減圧濃縮した。この物質をさらに精製することなく、次工程で使用した。このエチルエステルのＴＨＦ／ＭｅＯＨ（１：１、２ｍＬ）溶液に、１Ｎ−ＬｉＯＨ（２ｍＬ）を加えた。得られた溶液を室温で１８時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮し、有機溶媒を除去した。残渣を１Ｎ−ＨＣｌで酸性化し、酢酸エチルで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過、減圧濃縮した。残渣を逆相ＨＰＬＣ（ギルソン）により精製して、所望の化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ１．９５（ｍ，１Ｈ），２．１（ｂｄ，１Ｈ），２．６７（ｄｄ，１Ｈ），２．９０（ｍ，２Ｈ），３．１０（ｍ，１Ｈ），３．３０（ｄｄ，１Ｈ），６．７８（ｔ，１Ｈ），６．９３（ｄ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ  ２７９（Ｍ＋Ｈ）。
【０１６５】
（実施例３６〜４４）
以下の化合物は、上記実施例３４及び３５に記載し、反応工程図６にて説明した条件と同様の条件下で調製した。
【０１６６】
【表１５】
2008536846.tif 000040
【０１６７】
【表１６】
2008536846.tif 000041
【０１６８】
選択した実施例の１Ｈ−ＮＭＲ：
実施例３６
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ２．１０（ｍ，２Ｈ），２．８０（ｍ，３Ｈ），３．１６（ｄｄ，１Ｈ），３．２０（ｍ，１Ｈ），７．１０（ｍ，３Ｈ）。
実施例３７
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ２．０５（ｍ，２Ｈ），２．６０（ｄ，１Ｈ）２．９０（ｍ，２Ｈ），３．２０（ｄｄ，１Ｈ），３．４６（ｂｍ，１Ｈ），７．１９（ｔ，１Ｈ），７．２８（ｔ，１Ｈ），７．４０（ｔ，２Ｈ）。
実施例３９
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ２．０７（ｍ，２Ｈ），２．７８（ｍ，３Ｈ），３．１０（ｄｄ，１Ｈ），３．２５（ｍ，１Ｈ），７．０４（ｔ，１Ｈ），７．１４（ｔ，１Ｈ），７．２３（ｑ，１Ｈ），７．３２（ｔ，１Ｈ）。
実施例４０
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ２．０５（ｍ，２Ｈ），２．９０（ｍ，３Ｈ），３．２０（ｄ，２Ｈ），７．００（ｄｄ，２Ｈ）。
実施例４１
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ８．０６（ｄ，１Ｈ），７．８９（ｔ，１Ｈ），７．２８（ｔ，１Ｈ），３．１９（ｍ，２Ｈ），２．７８（ｍ，３Ｈ），２．０９（ｍ，２Ｈ）。
実施例４２
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ７．２０（ｄ，１Ｈ），６．９２（ｍ，２Ｈ），３．２５（ｍ，１Ｈ），２．８０（ｍ，４Ｈ），２．２８（ｍ，１Ｈ），１．９６（ｍ，１Ｈ）。
実施例４３
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ２．００（ｍ，２Ｈ），２．６８（ｄｄ，１Ｈ），２．８０（ｍ，２Ｈ），３．１０（ｄｄ，１Ｈ），３．２０（ｍ，１Ｈ），６．９５（ｍ，１Ｈ），７．１０（ｍ，２Ｈ）。
実施例４４
（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．０７（ｍ，２Ｈ），２．７２−２．８４（ｍ，３Ｈ），３．１２（ｍ，１Ｈ），３．２７（ｍ，１Ｈ），７．００（ｔ，１Ｈ），７．１６（ｄ，２Ｈ），７．３５（ｑ，１Ｈ）。
【０１６９】
（実施例４５）
【０１７０】
【化２４】
2008536846.tif 000042
【０１７１】
ｎ−ＢｕＬｉ（３．４４ｍＬ、１．６Ｍ、５．５ｍｍｏｌ）の無水Ｅｔ２Ｏ（２０ｍＬ）攪拌溶液に、−７８℃で、チアゾール（４２５ｍｇ、５ｍｍｏｌ）のＥｔ２Ｏ（１２．５ｍＬ）溶液を５分間かけて滴下した。反応混合物を−７８℃で１時間攪拌した後、３−エトキシシクロペンテノン（６３０ｍｇ、５ｍｍｏｌ）のＥｔ２Ｏ溶液を１５分間で滴下した。反応液を室温までゆっくり昇温し、ＭｅＯＨ／２Ｎ−ＨＣｌ（１：１）で反応停止した。得られた混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過、減圧濃縮した。残渣を４０％酢酸エチル−ヘキサンを溶出液とするフラッシュクロマトグラフィー（バイオテージフラッシュ４０Ｍ）により精製して、所望の化合物（４００ｍｇ）を白色固体として得た。このシクロペンテノン（４００ｍｇ、２．４２ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を、Ｎ２気流下、−７８℃に冷却し、ＬＤＡ（１．２７ｍＬ、２．０Ｍ）を加えた。１５分後、二シュウ酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（０．５３８ｇ、２．６６ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温までゆっくり昇温し、１時間攪拌し、１Ｎ−ＨＣｌで反応停止した。得られた混合物を酢酸エチルで抽出し、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過、減圧濃縮した。残渣を３０％酢酸エチル−ヘキサンを溶出液とするフラッシュクロマトグラフィー（バイオテージ４０Ｍ）により精製して、所望の化合物を得た。このジケトン（２５０ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）のエタノール（１０ｍＬ）溶液に、ヒドラジン（２９μＬ）及び氷酢酸（１ｍＬ）を加えた。室温で一夜攪拌後、反応混合物を減圧濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（バイオテージ４０Ｍ）により精製して所望の化合物を得た。このオレフィン（５５ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（９ｍＬ）溶液に、ＥｔＯＨ（５ｍＬ）を加え、次いで、触媒量のＰｔ２Ｏを加えた。反応液を水素風船下で４８時間攪拌した。反応液をセライトで濾過し、４０％酢酸エチル−ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィー（バイオテージフラッシュ２０Ｍ）により精製した。次いで、この物質を５０％ＴＦＡ／ＤＣＭ（２ｍＬ）で２時間処理した。反応混合物を減圧下に濃縮して、所望の化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ３．０５（ｍ，２Ｈ），３．４０（ｍ，２Ｈ），４．５０（ｍ，１Ｈ），７．５０（ｓ，１Ｈ），７．８０（ｓ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ２３６（Ｍ＋Ｈ）。
【０１７２】
（実施例４６〜５０）
以下の化合物は、上記実施例４５に記載し、反応工程図７にて説明した条件と同様の条件下で調製した。実施例４６のシクロヘキシルは、３−エトキシ−シクロペンテノンへの塩化シクロヘキシルマグネシウムのグリニヤールによる付加を経て調製した。この３−（シクロヘキシル）−シクロペンテノンは、シュウ酸ジエチルアシル化、ピラゾール形成、エチルエステルのＬｉＯＨ鹸化及び最後にオレフィンの水素化などを含む、反応工程図７に示すのと同様の転換反応を経て実施した。実施例４７及び４９は、それぞれ２−ブロモピリジンとｎ−ブチルリチウムとのリチウム−ハロゲン化物交換、及び２−クロロピラジンとリチウムテトラメチルピペリジニルアミドとの交換を介して合成した。実施例４９の３−（ピラジニル）−シクロペンテノン中間体は、シュウ酸ジエチルアシル化、ピラゾール形成、水素化及び最後にエチルエステルのＬｉＯＨ鹸化を含む、反応工程図７に示すのと同様の転換反応を経て実施した。実施例４８を生成するＮ−メチルピラゾールのアルファ−リチウム化については、テトラヘドロン、１９８３，３９（１２），２０２３を参照されたい。実施例５０は、３−ピリジルグリニヤール試薬を生成させるために、塩化イソプロピルマグネシウムとのメタ−ブロモピリジン交換を介して合成した。
【０１７３】
【表１７】
2008536846.tif 000043
【０１７４】
選択した実施例の１Ｈ−ＮＭＲ：
実施例４７
（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．９０（ｍ，２Ｈ），３．００（ｍ，２Ｈ），４．１０（ｍ，１Ｈ），７．２０（ｄｄ，１Ｈ），７．３５（ｄ，１Ｈ），７．７０（ｔ，１Ｈ），８．５０（ｄ，１Ｈ）。
実施例４８
（５００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）主回転異性体、δ７．９４（ｓ，１Ｈ），６．５５（ｓ，１Ｈ），４．３９（ｍ，１Ｈ），４．０５（ｓ，３Ｈ），３．３７（ｍ，２Ｈ），２．９４（ｍ，２Ｈ）。
実施例４９
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ３．０５（ｍ，２Ｈ），３．２０（ｍ，１Ｈ），３．４０（ｍ，１Ｈ），４．３５（ｍ，１Ｈ），８．４５（ｄ，１Ｈ），８．５７（ｔ，１Ｈ），８．６１（ｄ，１Ｈ）。
実施例５０
（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ８．５５（ｓ，１Ｈ），８．４０（ｄ，１Ｈ），７．８１（ｄ，１Ｈ），７．４０（ｍ，１Ｈ），４．１０（ｍ，１Ｈ），３．３５（ｄｄ，１Ｈ），３．２０（ｄｄ，１Ｈ），２．９０（ｄｄ，１Ｈ），２．８０（ｄｄ，１Ｈ）。
【０１７５】
（実施例５１）
【０１７６】
【化２５】
2008536846.tif 000044
【０１７７】
市販品として入手し得るシクロペンテノン（２ｍＬ、２４．７ｍｍｏｌ）をクロロホルム（１０ｍＬ）中でピラゾール（３．３ｇ、４９．４ｍｍｏｌ）と混合し、再封管可能な加圧チューブに入れた。反応混合物を５０℃で２４時間加温し、冷却、濃縮し、分取遠心分離クロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ−ヘキサン）により精製して、ベータ−置換シクロペンタノン中間体を得た。反応工程図５に示すように、実施例３２と同様の方法で、この物質をエタノール中、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド及びシュウ酸ジエチルで処理し、次いでヒドラジン塩酸塩で処理した。同様の方法でエチルエステル中間体を鹸化し（ただし、ＬｉＯＨの代わりにＮａＯＨを使用した）、残渣をギルソンシステム上の分取逆相ＨＰＬＣにより精製して、所望の生成物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，５００ＭＨｚ）δ８．１４（ｍ，１Ｈ），８．０２（ｍ，１Ｈ），６．６１（ｍ，１Ｈ），５．８５（ｍ，１Ｈ），３．５９（ｍ，２Ｈ），３．２８（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ２１９（Ｍ＋Ｈ）。
【０１７８】
（実施例５２）
【０１７９】
【化２６】
2008536846.tif 000045
【０１８０】
実施例５２は、上記実施例５１に記載し、反応工程図７にて説明した条件と同様の条件下で、１，２，３−トリアゾールから調製した。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ３．２０（ｍ，２Ｈ），３．５０（ｍ，２Ｈ），５．９０（ｍ，１Ｈ），７．７２（ｄ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ２２０（Ｍ＋Ｈ）。
【０１８１】
（実施例５３）
【０１８２】
【化２７】
2008536846.tif 000046
【０１８３】
文献（Ｃａｎ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．１９８２，６０，２１０）に記載されている３−ヨード−シクロペンテノン（５０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を、反応工程図７に示す市販入手可能なホウ酸エステル（６５ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）及びリン酸カリウム（１６６ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）と、ＤＭＥ（１０ｍＬ）中で混合した。反応混合物をＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（０．０３１ｍｍｏｌ）で処理し、１００℃で１４時間加熱した。次いで、反応混合物を冷却し、濃縮し、分取用遠心分離クロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ−ヘキサン）により精製して、ベータ−置換シクロペンテノン中間体を得た。反応工程図５に示すように、実施例３２と同様の方法で、この物質をエタノール中、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド及びシュウ酸ジエチルで処理し、次いでヒドラジン塩酸塩で処理してオレフィン性ピラゾールエチルエステルを得た。このオレフィンエステル中間体をギ酸アンモニウム、ギ酸、Ｐｄ−Ｃで処理して還元し、同様の条件で水性ＮａＯＨにより鹸化した。残渣をギルソンシステム上、分取逆相ＨＰＬＣにより精製して、所望の生成物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，５００ＭＨｚ）δ７．５９（ｓ，１Ｈ），７．５１（ｓ，１Ｈ），４．０３（ｍ，１Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ），３．２５（ｄｄ，１Ｈ），３．１７（ｄｄ，１Ｈ），２．７７（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ２３３（Ｍ＋Ｈ）。
【０１８４】
（実施例５４）
【０１８５】
【化２８】
2008536846.tif 000047
【０１８６】
市販入手可能な３−カルボキシ−シクロペンタノン（１００ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）をベンゼン（２０ｍＬ）中に希釈し、塩化チオニル（０．０９３ｍＬ、０．７８ｍｍｏｌ）で処理し、その反応混合物を２時間加熱還流した。次いで、混合物を濃縮し、塩化メチレン（２０ｍＬ）で希釈し、０℃に冷却し、プロパルギルアミン（７８ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）、次いでトリエチルアミン（０．３３ｍＬ、２．３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１２時間熟成し、次いで飽和重炭酸ナトリウム水で分配し、有機画分を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。残渣を分取用遠心分離クロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ−ヘキサン）により精製して、ベータ−アミド中間体を得た。このプロパルギルアミド（５９４ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）をＨＯＡｃ（１０ｍＬ）中に希釈し、Ｈｇ（ＯＡｃ）２（３７ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）で処理し、２時間加熱還流した。次いで、反応混合物を冷却し、濾過、濃縮し、飽和重炭酸水及び塩化メチレンに分配した。有機画分を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮し、残渣を分取用遠心分離クロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ−ヘキサン）により精製して、ベータ−オキサゾール中間体（９０ｍｇ）を得た。反応工程図５に示すように、実施例３２と同様の方法で、この物質をエタノール中、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド及びシュウ酸ジエチルで処理し、次いで、ヒドラジン塩酸塩で処理してピラゾールエチルエステルを得た。このエステル中間体を同様に水性ＮａＯＨで鹸化した。残渣を、ギルソンシステム上、分取逆相ＨＰＬＣにより精製して、所望の生成物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，５００ＭＨｚ）δ６．７１（ｓ，１Ｈ），４．２６（ｍ，１Ｈ），３．２５（ｍ，２Ｈ），３．１０（ｄｄ，２Ｈ），２．３２（ｓ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ２３４（Ｍ＋Ｈ）。
【０１８７】
（実施例５５）
【０１８８】
【化２９】
2008536846.tif 000048
【０１８９】
−７８℃に冷却したヘキサブチル−ジスタンナン（５．８ｇ、１０ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ溶液に、窒素気流下、ｎＢｕＬｉ（６．２５ｍＬ、１．６Ｍ、１０ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、３−エトキシ−シクロペンテノン（１．２６ｇ、１０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液を滴下した。反応液を−７８℃で１時間攪拌し、次いで飽和塩化アンモニウム溶液に注いで反応停止した。得られた混合物を酢酸エチルで抽出し、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。有機層を濾過し、減圧濃縮して黄色油を得た。この物質を１０％酢酸エチル−ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）により精製して、所望のスタンナンを無色の油として得た。
【０１９０】
−７８℃に冷却した２，４−ジブロモチアゾール（１．０ｇ、４．１１ｍｍｏｌ）の無水エーテル（５０ｍＬ）溶液に、窒素気流下、ｎＢｕＬｉ（３．０８ｍＬ、４．９４ｍｍｏｌ、１．６Ｍ溶液）を加えた。−７８℃で１時間攪拌した後、クロロトリメチルシラン（０．５７ｍＬ、４．５２ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を−７８℃でさらに１時間攪拌し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液を加えて反応停止した。得られた混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過、減圧濃縮した。残渣を１０％酢酸エチル−ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）により精製して、所望のＴＭＳ−ブロモチアゾールを無色油として得た。
【０１９１】
スタンナン中間体と臭化物中間体の２つの結合は、反応工程図９に示すように、以下のとおり行った。シクロペンテノンスタンナン（３９０ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）とＴＭＳ−ブロモチアゾール（２０６ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ）のトルエン（５ｍＬ）溶液に、ジクロロパラジウム（ビストリフェニルホスフィン）を加えた。得られた混合物を１８時間加熱還流した。反応液を室温に冷却した。ＫＦ飽和溶液（５ｍＬ）を加え、得られた混合物を１時間激しく攪拌した。反応混合物をセライトで濾過した。濾液を、水、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過、減圧濃縮した。残渣を４０％酢酸エチル−ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）により精製して、所望の生成物を得た。このベータ−置換シクロペンテノン（６７ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）の無水エタノール（５ｍＬ）溶液に、シュウ酸ジエチル（３８μＬ、０．２８ｍｍｏｌ）及びカリウム−ｔ−ブトキシド（２８２μＬ、０．２８ｍｍｏｌ、１．０Ｍ／ＴＨＦ）を加えた。室温で２時間攪拌した後、ヒドラジン塩酸塩（２３ｍｇ、０．３３８ｍｍｏｌ）の水（０．５ｍＬ）溶液を加えた。反応液を室温で１６時間攪拌し、次いで１５分間加熱還流した。反応混合物を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルで希釈し、水、飽和ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄し、濾過、減圧濃縮して、所望の生成物を単一の二重結合異性体として得た。このオレフィン（１２ｍｇ、０．０４５ｍｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ／ＥｔＯＨ（２．８：１，２ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２（５ｍｇ）を加え、反応液を水素風船下に４時間攪拌した。反応混合物をセライトで濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、６０％酢酸エチル−ヘキサンを用いるフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２）により精製して、所望の生成物を得た。このエチルエステルのＴＨＦ／ＭｅＯＨ（１：１）（２ｍＬ）溶液に、１Ｎ−ＮａＯＨ（０．５ｍＬ）を加えた。反応液を室温で１６時間攪拌後、１Ｎ−ＨＣｌ（０．５ｍＬ）を加えて酸性化した。得られた混合物を逆相ＨＰＬＣにより精製して所望の生成物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ３．００（ｍ，２Ｈ），３．３０（ｍ，２Ｈ），４．４０（ｍ，１Ｈ），７．４０（ｓ，１Ｈ），９．１０（ｓ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ２３６（Ｍ＋Ｈ）。
【０１９２】
ＤＰ実施例１
［５−［（４−クロロフェニル）チオ］−４−（メチルスルホニル）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸（化合物Ｇ）
【０１９３】
【化３０】
2008536846.tif 000049
【０１９４】
工程１：４−クロロニコチンアルデヒド
標題化合物を文献（Ｆ．Ｍａｒｓａｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍ．，２５，８１（１９８８））記載どおりに調製した。
工程２：４−（メチルチオ）ニコチンアルデヒド
ＮａＳＭｅ（９．５ｇ、１３５ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２５０ｍＬ）溶液に、工程１の４−クロロニコチンアルデヒド（１３．５ｇ、９４．４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２５０ｍＬ）溶液を加えた。反応混合物を６０℃で１５分間維持した。反応混合物をＮＨ４ＣｌおよびＥｔＯＡｃに注いだ。有機層を分離し、Ｈ２Ｏで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。次いで化合物をシリカゲル上、５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンにより精製し、標題化合物を得た。
【０１９５】
工程３：（２Ｚ）−２−アジド−３−［４−（メチルチオ）ピリジン−３−イル］プロパン−２−エン酸メチル
４−（メチルチオ）ニコチンアルデヒド（４．８ｇ、３１ｍｍｏｌ）及びアジド酢酸メチル（９．０ｇ、７８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５０ｍＬ）溶液を、２５％ＮａＯＭｅ／ＭｅＯＨ溶液（１６．９ｍＬ、７８ｍｍｏｌ）中に−１２℃で加えた。３０分間の添加の間、内部温度をモニターし、−１０℃〜−１２℃に維持した。次いで、得られた混合物を氷浴中で数時間攪拌し、次いで低温室中、氷浴中で一夜攪拌した。次いで、懸濁液を氷及びＮＨ４Ｃｌの混合物に注ぎ、１０分間攪拌後、スラリーを濾過した。生成物を冷Ｈ２Ｏで洗浄し、次いで真空乾燥し、標題化合物を一部塩を含むベージュ色固体として得た。次いでこの化合物を、シリカゲル上、ＥｔＯＡｃで精製した。
【０１９６】
工程４：４−（メチルチオ）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸メチル
工程３の化合物（０．４０ｇ、１．６ｍｍｏｌ）のキシレン（１６ｍＬ）懸濁液を１４０℃までゆっくり加熱した。１４０℃で１５分間経過後、黄色の溶液を室温に冷却した。窒素形成による発熱の可能性があるので注意しなければならない。次いで、懸濁液を０℃に冷却し、濾過し、キシレンで洗浄して標題化合物を得た。
【０１９７】
工程５：４−（メチルチオ）−６−オキソ−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−７−カルボン酸エチル
工程４の化合物（０．３５ｇ、１．６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液に、０℃でＮａＨ（１．２当量）を加えた。５分経過後、ｎＢｕ４ＮＩ（０．１０ｇ）及び４−ブロモ酪酸エチル（０．４０ｍＬ）を加えた。室温で１時間経過後、反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ及びＥｔＯＡｃ上に注いだ。有機層を分離し、Ｈ２Ｏで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。蒸発後、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。次いで、このビスエステルをＴＨＦ（７．０ｍＬ）に溶かし、１．０６Ｍのカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド／ＴＨＦ溶液（２．２ｍＬ）を０℃で加えた。室温で１時間経過後、反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ及びＥｔＯＡｃ上に注いだ。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で蒸発させて、標題化合物をエチルエステルとメチルエステルの混合物として得た。
【０１９８】
工程６：４−（メチルチオ）−８，９−ジヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６（７Ｈ）−オン
工程５の化合物（０．３２ｇ）にＥｔＯＨ（８．０ｍＬ）及び濃ＨＣｌ（２．０ｍＬ）を加えた。得られた懸濁液を５時間還流した。反応混合物をＥｔＯＡｃとＮａ２ＣＯ３に分配した。有機層を分離し、蒸発させて標題化合物を得た。
【０１９９】
工程７：（２Ｅ，２Ｚ）−［４−（メチルチオ）−８，９−ジヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６（７Ｈ）−イリデン］エタン酸エチル
ホスホノ酢酸トリエチル（０．４５ｇ、２．１７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１２ｍＬ）に、８０％ＮａＨ（０．０６ｇ、２．００ｍｍｏｌ）及び工程６の化合物（０．２２ｇ、１．００ｍｍｏｌ）を加えた。５５℃で４時間経過後、反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ及びＥｔＯＡｃに注いだ。有機層を分離し、減圧下で蒸発させた。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
【０２００】
工程８：［４−（メチルチオ）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸エチル
工程７の化合物を溶解のために加熱しながら、ＭｅＯＨ−ＴＨＦに溶かした。あらかじめ冷却した溶液に室温でＰｔＯ２を加え、得られた混合物を大気圧の水素下に１８時間保持した。反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２によりセライトで注意深く濾過した。濾液を減圧下で蒸発させて標題化合物を得た。別法として、工程７の化合物は、ＥｔＯＡｃ中、Ｐｄ（ＯＨ）２により４０ＰＳＩのＨ２圧下、１８時間水素化することができる。
【０２０１】
工程９：［４−（メチルスルホニル）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸エチル
工程８の化合物（０．０８ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３．０ｍＬ）溶液に、Ｎａ２ＷＯ４（０．１０ｇ）及び３０％Ｈ２Ｏ２（６００μＬ）を加えた。１時間経過後、反応混合物をＨ２ＯおよびＥｔＯＡｃに分配した。有機層をＨ２Ｏで洗浄し、分離し、蒸発させた。標題化合物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。
【０２０２】
工程１０：［５−［（４−クロロフェニル）チオ］−４−（メチルスルホニル）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸エチル
４，４’−ジクロロジフェニルジスルフィド（０．２４ｇ）の１，２−ジクロロエタン溶液（２．０ｍＬ）に、ＳＯ２Ｃｌ２（５０μＬ）を加えた。ＤＭＦ（２．０ｍＬ）中、工程９の化合物（０．０５ｇ）に先の混合物（〜１８０μＬ）を加えた。反応は１Ｈ−ＮＭＲで追跡し、出発原料が残らなくなるまで室温で保持した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３とＥｔＯＡｃに注いだ。有機層を分離し、蒸発させ、標題化合物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。
【０２０３】
工程１１：５−［（４−クロロフェニル）チオ］−４−（メチルスルホニル）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸
ＴＨＦ−ＭｅＯＨ（１：１）混合物に溶かした工程１０の化合物に、１Ｎ−ＮａＯＨを加えた。室温で１８時間経過後、反応混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ及びＥｔＯＡｃに分配した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させて標題化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ１１．００（ｂｓ，１Ｈ），８．６０（ｄ，１Ｈ），７．８０（ｄ，１Ｈ），７．２０（ｄ，２Ｈ），７．００（ｄ，２Ｈ），４．６５（ｍ，１Ｈ），４．２０（ｍ，１Ｈ），３．７５（ｍ，１Ｈ），３．３５（ｓ，３Ｈ），２．８０ないし２．１０（ｍ，６Ｈ）。
【０２０４】
ＤＰ実施例２
５−［（４−クロロフェニル）チオ］−４−（メチルチオ）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸（化合物Ｈ）
【０２０５】
【化３１】
2008536846.tif 000050
【０２０６】
標題化合物は、実施例１の工程１０及び１１に記載の方法と同様の方法で、実施例１、工程８の化合物から調製し得る。ｍ／ｚ４１８。
【０２０７】
ＤＰ実施例３
５−［（３，４−ジクロロフェニル）チオ］−４−（メチルスルホニル）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸（化合物Ｉ）
【０２０８】
【化３２】
2008536846.tif 000051
【０２０９】
標題化合物は、実施例１に記載したように、工程１０のビス（３，４−ジクロロフェニル）ジスルフィドを用いて調製した。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ８．５５（ｄ，１Ｈ），７．８５（ｄ，１Ｈ），７．３５（ｄ，１Ｈ），７．１５（ｓ，１Ｈ），６．９５（ｄ，１Ｈ），４．６０（ｍ，１Ｈ），４．１５（ｍ，１Ｈ），３．８０（ｍ，１Ｈ），３．４０（ｓ，３Ｈ），２．８０ないし２．１０（ｍ，６Ｈ）。ｍ／ｚ４８４。
【０２１０】
エナンチオマーはキラルセルＯＤカラム（２５ｃｍ×２０ｍｍ）上、３０％イソプロパノール、１７％エタノール、０．２％酢酸／ヘキサンを用いて、流速８ｍｌ／分で分離した。それらの純度はキラルセルＯＤカラム（２５ｃｍ×４．６ｍｍ）上、３５％イソプロパノール、０．２％酢酸／ヘキサンを用いて、流速１．０ｍｌ／分で検証した。移動度の大きいエナンチオマーＴｒ＝９．７分、移動度の小さいエナンチオマーＴｒ１１．１分。
【０２１１】
ＤＰ実施例４
［５−（４−クロロベンゾイル）−４−（メチルスルホニル）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸（化合物Ｊ）
【０２１２】
【化３３】
2008536846.tif 000052
【０２１３】
工程１：［５−（４−クロロベンゾイル）−４−（メチルチオ）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸エチル
塩化４−クロロベンゾイル（０．３０ｇ、１．７ｍｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン（６．０ｍＬ）溶液に、ＡｌＣｌ３（０．２４ｇ、１．８ｍｍｏｌ）を加えた。５分経過後、実施例１工程８からの［４−（メチルチオ）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸エチル（０．１５ｇ、０．４７ｍｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン（６．０ｍＬ）溶液を先の混合物に加えた。８０℃で４時間経過後、反応混合物をＥｔＯＡｃ及びＮａＨＣＯ３に分配した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し蒸発させた。標題化合物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。
【０２１４】
工程２：［５−（４−クロロベンゾイル）−４−（メチルスルホニル）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸エチル
［５−（４−クロロベンゾイル）−４−（メチルチオ）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸エチル（０．１２ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５．０ｍＬ）溶液に、Ｎａ２ＷＯ４（０．１ｇ）及び３０％Ｈ２Ｏ２（３００μＬ）を加えた。反応混合物を５５℃で１時間攪拌した。次いで、反応混合物をＨ２ＯとＥｔＯＡｃに分配した。有機層をＨ２Ｏで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発した。標題化合物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。
【０２１５】
工程３：［５−（４−クロロベンゾイル）−４−（メチルスルホニル）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸
［５−（４−クロロベンゾイル）−４−（メチルスルホニル）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸エチルを、実施例１工程１１に記載のように処理し、標題化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ８．５５（ｄ，１Ｈ），７．９０（ｄ，２Ｈ），７．６５（ｄ，１Ｈ），７．４５（ｄ，２Ｈ），４．５５（ｍ，１Ｈ），４．２５（ｍ，１Ｈ），３．４５（ｍ，１Ｈ），３．２０（ｓ，３Ｈ），２．０５ないし３．００（ｍ，６Ｈ）。ｍ／ｚ４４６。
【０２１６】
ＤＰ実施例５
［５−（４−ブロモフェニル）チオ］−４−（メチルスルホニル）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸（化合物Ｋ）
【０２１７】
【化３４】
2008536846.tif 000053
【０２１８】
標題化合物を、実施例１に記載したように４，４’−ジブロモジフェニルジスルフィドを用いて調製した。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ８．６０（ｄ，１Ｈ），７．８０（ｄ，１Ｈ），７．３５（ｄ，２Ｈ），７．００（ｄ，２Ｈ），４．６５（ｍ，１Ｈ），４．２０（ｍ，１Ｈ），３．８０（ｍ，１Ｈ），３．３５（ｓ，３Ｈ），２．８０ないし２．１０（ｍ，６Ｈ）。
【０２１９】
ＤＰ実施例６方法−１
［９−（３，４−ジクロロフェニル）チオ］−１−（メチルスルホニル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル］酢酸（化合物Ｌ）
【０２２０】
【化３５】
2008536846.tif 000054
【０２２１】
工程１：２−（メチルチオ）ニコチンアルデヒド
標題化合物を、実施例１工程２に記載したように２−ブロモニコチンアルデヒド（Ａ．Ｎｕｍａｔａ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  １９９９  ｐ．３０６）から調製した。ただし、溶液は５５℃に２時間加熱した。
【０２２２】
工程２：（２Ｚ）−２−アジド−３−［２−（メチルチオ）ピリジン−３−イル］プロパン−２−エン酸メチル
標題化合物を、実施例１工程３に記載のように調製した。
【０２２３】
工程３：４−（メチルチオ）−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸メチル
（２Ｚ）−２−アジド−３−［２−（メチルチオ）ピリジン−３−イル］プロパン−２−エン酸メチル（１．００ｇ、４．００ｍｍｏｌ）のメシチレン（５０ｍＬ）溶液を、１６０℃で１時間加熱した。反応混合物を室温に、次いで０℃に冷却し、沈殿を濾取し、冷メシチレンで洗浄し標題化合物を得た。
【０２２４】
工程４：１−（メチルチオ）−８−オキソ−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−７−カルボン酸メチル
４−（メチルチオ）−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸メチル（０．３０ｇ、１．３５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）−トルエン（１２．０ｍＬ）懸濁液に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシドの１．０６Ｍ−ＴＨＦ溶液（１．４２ｍＬ／１．４１ｍｍｏｌ）及びアクリル酸メチル（３００μＬ）を加えた。得られた混合物を８０℃で１８時間加熱した。混合物をＥｔＯＡｃ及びＮＨ４Ｃｌに分配し、セライトで濾過した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過して標題化合物とした。
【０２２５】
工程５：１−（メチルチオ）−６，７−ジヒドロ−８Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−オン
１−（メチルチオ）−８−オキソ−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−７−カルボン酸メチルを、実施例１工程６に記載したように、標題化合物に変換した。
【０２２６】
工程６：［８−ヒドロキシ−１−（メチルチオ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル］酢酸メチル
１−（メチルチオ）−６，７−ジヒドロ−８Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−オン（０．１５ｇ、０．６８ｍｍｏｌ）、ブロモ酢酸メチル（０．３４ｍＬ）、Ｚｎ−Ｃｕ（０．２２６ｇ）のＴＨＦ（３．０ｍＬ）混合物を２時間超音波処理した。次いで、この混合物を、反応が完結するまで６０℃で５分間加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃおよびＮＨ４Ｃｌに分配した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で蒸発させて標題化合物を得た。この化合物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。
【０２２７】
工程７：［１−（メチルチオ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル］酢酸メチル
ＣＨ３ＣＮ（３．２ｍＬ）中、ＮａＩ（０．３００ｇ）にＴＭＳＣｌ（０．２６６ｍＬ）を加えた。この混合物を、水浴中、［８−ヒドロキシ−１−（メチルチオ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル］酢酸メチル（０．１５ｇ、０．５１５ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（１．５ｍＬ）懸濁液に加えた。０．５時間経過後、反応混合物をＥｔＯＡｃ及びＮａＨＣＯ３に分配した。有機層を分離し、チオ硫酸ナトリウムで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、蒸発した。標題化合物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。
【０２２８】
工程８：［１−（メチルスルホニル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル］酢酸メチル
［１−（メチルチオ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル］酢酸メチルを、実施例１工程９に記載のように標題化合物に変換した。
【０２２９】
工程９：［９−（３，４−ジクロロフェニル）チオ］−１−（メチルスルホニル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル］酢酸
［１−（メチルスルホニル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル］酢酸メチルを、実施例１工程１０及び１１に記載のように、工程１０のビス（３，４−ジクロロフェニル）ジスルフィドを用いて標題化合物に変換した。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ８．３５（ｄ，１Ｈ）７．８０（ｄ，１Ｈ），７．３５（ｄ，１Ｈ），７．１５（ｓ，１Ｈ），６．９５（ｄ，１Ｈ），４．５５（ｍ，１Ｈ），４．３５（ｍ，１Ｈ），３．９０（ｍ，１Ｈ），３．３０（ｓ，３Ｈ），３．１５（ｍ，１Ｈ），３．０５（ｍ，１Ｈ），２．８０（ｍ，１Ｈ），２．５０（ｍ，１Ｈ）。
【０２３０】
ＤＰ実施例６方法−２
［９−（３，４−ジクロロフェニル）チオ］−１−（メチルスルホニル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル］酢酸
工程１：１−（メチルチオ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−オール
実施例６方法−１工程５からの１−（メチルチオ）−６，７−ジヒドロ−８Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−オン（０．５５ｇ、２．２ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１０ｍＬ）−ＴＨＦ（１ｍＬ）懸濁液に、０℃でＮａＢＨ４（０．１０ｇ、２．６ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３０分経過後、アセトンを加えて反応を停止した。減圧下で溶媒を蒸発させ、残渣にＥｔＯＡｃ及びＨ２Ｏを加えた。有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、蒸発した。標題化合物をＥｔＯＡｃ／ヘキサンで洗浄し、濾取した。
【０２３１】
工程２：２−［１−（メチルチオ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル］マロン酸ジメチル
１−（メチルチオ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−オール（０．５４ｇ、２．１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）懸濁液に、−７８℃で、１Ｍ−ＮａＨＭＤＳ／ＴＨＦ（２．３５ｍＬ、２．４ｍｍｏｌ）及びクロロリン酸ジフェニル（０．５３ｍＬ，２．６ｍｍｏｌ）を加えた。３０分経過後、マロン酸ジメチル（０．７３ｍＬ、６．４ｍｍｏｌ）及び１Ｍ−ＮａＨＭＤＳ／ＴＨＦ（６．８ｍＬ、６．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃とし、次いで室温とした。次いで、混合物をＥｔＯＡｃとＮＨ４Ｃｌに分配した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過、蒸発した。標題化合物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。
【０２３２】
工程３：［１−（メチルチオ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル］酢酸メチル
２−［１−（メチルチオ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル］マロン酸ジメチル（０．５９ｇ、２．１７ｍｍｏｌ）及びＤＭＳＯ（４ｍＬ）の混合物に、ＮａＣｌ（０．４５ｇ）のＨ２Ｏ（０．４５ｍＬ）溶液を加えた。１５０℃で１８時間経過後、反応混合物をＥｔＯＡｃ及びＨ２Ｏに分配した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発した。次いで、標題化合物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。
【０２３３】
工程４：［９−（３，４−ジクロロフェニル）チオ］−１−（メチルスルホニル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル］酢酸
標題化合物を、実施例６方法−１、工程８〜９に記載したように、［１−（メチルチオ）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル］酢酸メチルから得た。
【０２３４】
ＤＰ実施例７
［１０−［（３，４−ジクロロフェニル）スルファニル］−１−（メチルスルホニル）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，４−ｂ］インドリジン−９−イル］酢酸（化合物Ｍ）
【０２３５】
【化３６】
2008536846.tif 000055
【０２３６】
工程１：［１−（メチルスルホニル）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，４−ｂ］インドリジン−９−イル］酢酸エチル
標題化合物を、実施例１工程５〜９に記載した方法と同じ方法で、実施例６工程３の生成物から調製した。
工程２：［１０−［（３，４−ジクロロフェニル）スルファニル］−１−（メチルスルホニル）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，４−ｂ］インドリジン−９−イル］酢酸
工程１の生成物を、実施例１、工程１０〜１１と同じ方法で、工程１０のビス（３，４−ジクロロフェニル）ジスルフィドを用い、標題化合物に変換した。ＭＳ  Ｍ＋１＝４８５。
【０２３７】
ＤＰ実施例８
｛４−（メチルスルホニル）−５−｛［４−（トリフルオロメチル）フェニル］チオ｝−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸（化合物Ｎ）
【０２３８】
【化３７】
2008536846.tif 000056
【０２３９】
標題化合物を、実施例１に記載したようにビス［４−（トリフルオロメチル）フェニル］ジスルフィドを用いて調製した。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ８．５５（ｄ，１Ｈ），７．７５（ｄ，１Ｈ），７．４５（ｄ，２Ｈ），７．１５（ｄ，２Ｈ），４．５５（ｍ，１Ｈ），４．１５（ｍ，１Ｈ），３．８０（ｍ，１Ｈ），３．３０（ｓ，３Ｈ），２．８０ないし２．１０（ｍ，６Ｈ）。ｍ／ｚ５１３（Ｍ＋１）。
【０２４０】
ＤＰ実施例９
［５−［（２−クロロ−４−フルオロフェニル）チオ］−４−（メチルスルホニル）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸（化合物Ｏ）
【０２４１】
【化３８】
2008536846.tif 000057
【０２４２】
標題化合物を、実施例１に記載したようにビス（２−クロロ−４−フルオロフェニル）ジスルフィドを用いて調製した。ｍ／ｚ４６９（Ｍ＋１）。
【０２４３】
ＤＰ実施例１０
［４−（メチルスルホニル）−５−（２−ナフチルチオ）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸（化合物Ｐ）
【０２４４】
【化３９】
2008536846.tif 000058
【０２４５】
標題化合物を、実施例１に記載したようにジ（２−ナフチル）ジスルフィドを用いて調製した。ｍ／ｚ４６７（Ｍ＋１）。
【０２４６】
ＤＰ実施例１１
［５−［（２，３−ジクロロフェニル）チオ］−４−（メチルスルホニル）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸（化合物Ｑ）
【０２４７】
【化４０】
2008536846.tif 000059
【０２４８】
標題化合物を、実施例１に記載したようにビス（２，３−ジクロロフェニル）ジスルフィドを用いて調製した。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ８．８５（ｄ，１Ｈ），７．８０（ｄ，１Ｈ），７．３０（ｄ，１Ｈ），７．００（ｔ，１Ｈ），６．６０（ｄ，１Ｈ），４．６０（ｍ，１Ｈ），４．２０（ｍ，１Ｈ），３．８０（ｍ，１Ｈ），３．４０（ｓ，３Ｈ），２．８０ないし２．１０（ｍ，６Ｈ）。
【０２４９】
ＤＰ実施例１２
［５−［（４−メチルフェニル）チオ］−４−（メチルスルホニル）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸（化合物Ｒ）
【０２５０】
【化４１】
2008536846.tif 000060
【０２５１】
標題化合物を、実施例１に記載したようにｐ−トリルジスルフィドを用いて調製した。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ８．５５（ｄ，１Ｈ），７．８０（ｄ，１Ｈ），６．９５（ｍ，４Ｈ），４．６０（ｍ，１Ｈ），４．１５（ｍ，１Ｈ），３．８０（ｍ，１Ｈ），３．３５（ｓ，３Ｈ），２．８０ないし２．１０（ｍ，６Ｈ）。
【０２５２】
ＤＰ実施例１３
［４−（メチルスルホニル）−５−（フェニルチオ）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸（化合物Ｓ）
【０２５３】
【化４２】
2008536846.tif 000061
【０２５４】
標題化合物を、実施例１に記載したようにジフェニルジスルフィドを用いて調製した。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ８．５５（ｄ，１Ｈ），７．８０（ｄ，１Ｈ），７．１５ないし６．９０（ｍ，５Ｈ），４．６０（ｍ，１Ｈ），４．１５（ｍ，１Ｈ），３．７５（ｍ，１Ｈ），３．３０（ｓ，３Ｈ），２．８０ないし２．１０（ｍ，６Ｈ）。
【０２５５】
ＤＰ実施例１４
［５−［（２，４−ジクロロフェニル）チオ］−４−（メチルスルホニル）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［３，２−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸（化合物Ｔ）
【０２５６】
【化４３】
2008536846.tif 000062
【０２５７】
標題化合物を、実施例１に記載したようにビス（２，４−ジクロロフェニル）ジスルフィドを用いて調製した。該ジスルフィドは、エーテル中、Ｂｒ２を用いて２，４−ジクロロチオフェニルから調製した。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ８．５５（ｄ，１Ｈ），７．８５（ｄ，１Ｈ），７．３５（ｓ，１Ｈ），７．００（ｄ，１Ｈ），６．６５（ｄ，１Ｈ），４．５５（ｍ，１Ｈ），４．１５（ｍ，１Ｈ），３．８０（ｍ，１Ｈ），３．３５（ｓ，３Ｈ），２．８０ないし２．１０（ｍ，６Ｈ）。
【０２５８】
ＤＰ実施例１５
［５−［（４−クロロフェニル）チオ］−４−（メチルスルホニル）−６，７，８，９−テトラヒドロピリド［４，３−ｂ］インドリジン−６−イル］酢酸（化合物Ｕ）
【０２５９】
【化４４】
2008536846.tif 000063
【０２６０】
標題化合物を、実施例１に記載したように３−クロロニコチンアルデヒド（Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ  ｐ．１５１，１９９３）から調製した。ただし、末端環状化反応は、還流下、デカリンにアジドを付加することにより実施した。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ９．２０（ｓ，１Ｈ），８．８５（ｓ，１Ｈ），７．２０（ｄ，２Ｈ），７．００（ｄ，２Ｈ），４．７０（ｍ，１Ｈ），４．３０（ｍ，１Ｈ），３．７５（ｍ，１Ｈ），３．３５（ｓ，３Ｈ），２．８０ないし２．１０（ｍ，６Ｈ）。
【０２６１】
ＤＰ実施例１６
［９−［（４−クロロフェニル）チオ］−１−（メチルスルホニル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル］酢酸（化合物Ｖ）
【０２６２】
【化４５】
2008536846.tif 000064
【０２６３】
標題化合物を、実施例６方法１工程８の生成物から、実施例１工程１０及び１１に概説した手法に記載したように、工程１０のビス（４−クロロフェニル）ジスルフィドを用いて調製した。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ８．２５−８．３（ｍ，１Ｈ），７．７１−７．７５（ｍ，１Ｈ），７．１２−７．１７（ｍ，２Ｈ），６．９７−７．０４（ｍ，２Ｈ），４．４５−４．５１（ｍ，１Ｈ），４．３２−４．３９（ｍ，１Ｈ），３．７３−３．８０（ｍ，１Ｈ），３．２９（ｓ，３Ｈ），３．１５−３．２１（ｍ，１Ｈ），２．９９−３．０８（ｍ，１Ｈ），２．６６−２．７３（ｍ，１Ｈ），２．４６−２．５４（ｍ，１Ｈ）。
【０２６４】
ＤＰ実施例１７
（−）−［（４−クロロベンジル）−７−フルオロ−５−メタンスルホニル］−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−３−イル］酢酸（化合物Ｅ）
【０２６５】
【化４６】
2008536846.tif 000065
【０２６６】
工程１：（±）−（７−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−３−イル）酢酸エチルエステル
【０２６７】
【化４７】
2008536846.tif 000066
【０２６８】
４−フルオロ−２−ヨードアニリン（１０．００ｇ）、２−（２−オキソシクロペンチル）酢酸エチル（６．５７ｇ）及びｐ−トルエンスルホン酸（１２１ｍｇ）のベンゼン（１００ｍＬ）溶液を、Ｎ２気流下、ディーン−スタークトラップを用いて２４時間還流した。この時間の後、ベンゼンを蒸留により除去した。次いで、ＤＭＦ６０ｍＬを加え、その溶液を脱気し、ヒューニッヒ塩基（Ｈｕｎｉｇ’ｓ  ｂａｓｅ）（１９ｍＬ）、次いでＰｄ（ＯＡｃ）２（４０５ｍｇ）を連続して添加した。この溶液を１１５℃で３時間加熱し、次いで室温まで冷却した。反応を停止するために、１Ｎ−ＨＣｌ（３００ｍＬ）及び酢酸エチル（２００ｍＬ）を加え、混合物をセライトで濾過した。層を分離し、酸性相を酢酸エチル２００ｍＬで２回抽出した。有機層を併合し、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、セライトで濾過し、濃縮した。粗製物質を１００％トルエンで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）δ９．７６（ｂｒｓ，１Ｈ），７．３４（ｄｄ，１Ｈ），７．０３（ｄ，１Ｈ），６．７８（ｔｄ，１Ｈ），４．１４（ｑ，２Ｈ），３．５７（ｍ，１Ｈ），２．８５−２．５５（ｍ，５Ｈ），２．１５（ｍ，１Ｈ），１．２２（ｔ，３Ｈ）。
【０２６９】
工程２：（±）−（７−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−３−イル）酢酸
【０２７０】
【化４８】
2008536846.tif 000067
【０２７１】
工程１からのエステル（１．２４ｇ）の１４ｍＬのテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）溶液に、室温で、ＭｅＯＨ（７ｍＬ）、次いで２Ｎ−ＮａＯＨ（７ｍＬ）を加えた。２．５時間後、酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）／１Ｎ−ＨＣｌを入れた分液漏斗に反応混合物を注入した。層分離し、酸性層をＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機層を併合し、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発乾固して粗製の油を得て、これをそのまま（＞９０％純度）次工程で使用した。
１Ｈ−ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）δ１０．９０（ｂｒｓ，１Ｈ），９．７７（ｂｒｓ，１Ｈ），７．３４（ｄｄ，１Ｈ），７．０４（ｄｄ，１Ｈ），６．７９（ｔｄ，１Ｈ），３．５６（ｍ，１Ｈ），２．９０−２．５０（ｍ，５Ｈ），２．１６（ｍ，１Ｈ）。ＭＳ（−ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ２３２．２（Ｍ−Ｈ）−。
【０２７２】
工程３：（±）−（５−ブロモ−７−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−３−イル）酢酸
【０２７３】
【化４９】
2008536846.tif 000068
【０２７４】
工程２の酸（＞９０％純度）（２．２０ｇ）のピリジン（３０ｍＬ）溶液に、６．８５ｇの三臭化ピリジニウム（純度９０％）を−４０℃で加えた。この懸濁液を０℃で１０分間攪拌し、室温で３０分間加温した。次いで、高真空下、加熱せずに溶媒を除去した。粗製物質を４０ｍＬのＡｃＯＨに溶かし、０℃に冷却した溶液に、Ｚｎ粉末２．８８ｇを分割して加えた。懸濁液を１５℃で１５分間攪拌し、さらに１５分間かけて室温に昇温した。この時点で１Ｎ−ＨＣｌを添加して反応停止し、この混合物を食塩水／ＥｔＯＡｃを入れた分液漏斗に注入した。層分離し、有機層を水、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。この物質はさらに精製することなく次工程で使用した。
１Ｈ−ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）δ１０．７７（ｂｒｓ，１Ｈ），９．８４（ｂｒｓ，１Ｈ），７．０９（ｍ，２Ｈ），３．６０（ｍ，１Ｈ），２．９５−２．６５（ｍ，４Ｈ），２．５６（ｄｄ，１Ｈ），２．１９（ｍ，１Ｈ）。
【０２７５】
工程４：（±）−［５−ブロモ−４−（４−クロロベンジル）−７−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−３−イル］酢酸
【０２７６】
【化５０】
2008536846.tif 000069
【０２７７】
工程３の酸（２．１３ｇ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、酸の消費が完全となるまでＴＬＣでモニターしながら、ジアゾメタン／エーテル溶液を過剰に加えた。次いで、真空下に溶媒を除去した。このように形成された粗メチルエステルのＤＭＦ２０ｍＬ溶液に、５３９ｍｇのＮａＨ懸濁液（６０％油）を−７８℃で加えた。この懸濁液を０℃で１０分間攪拌し、再び−７８℃に冷却し、臭化４−クロロベンジル１．７０ｇで処理した。５分後、温度を０℃に戻し、混合物を２０分間攪拌した。この時点でＡｃＯＨ２ｍＬを加えて反応を停止し、この混合物を１Ｎ−ＨＣｌ／ＥｔＯＡｃを入れた分液漏斗に注ぎ込んだ。層分離し、有機層を食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。アルキル化された物質は、工程２に記載した手法で加水分解した。粗製物質をさらにＥｔＯＡｃ／ヘキサン中で破砕精製し、標題化合物を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）δ１０．７０（ｂｒｓ，１Ｈ），７．３１（ｄ，２Ｈ），７．１８（ｄ，１Ｈ），７．０６（ｄ，１Ｈ），６．９２（ｄ，２Ｈ），５．９０（ｄ，１Ｈ），５．７４（ｄ，１Ｈ），３．６１（ｍ，１Ｈ），３．００−２．７０（ｍ，３Ｈ），２．６５（ｄｄ，１Ｈ），２．３９（ｄｄ，１Ｈ），２．２６（ｍ，１Ｈ）。ＭＳ（−ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ４３６．３，４３４．５（Ｍ−Ｈ）−。
【０２７８】
工程５：（＋）−［５−ブロモ−４−（４−クロロベンジル）−７−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−３−イル］酢酸
【０２７９】
【化５１】
2008536846.tif 000070
【０２８０】
工程４の酸２．３５ｇのＥｔＯＨ（１３０ｍＬ）溶液に、８０℃で、７８０μＬの（Ｓ）−（−）−１−（１−ナフチル）エチルアミンを加えた。この溶液を室温に冷却し、一夜攪拌した。回収した塩（１．７ｇ）を再びＥｔＯＨ２００ｍＬで再結晶した。濾過後、得られた白色固体塩を１Ｎ−ＨＣｌで中性とし、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。この物質をＳｉＯ２のパッドで濾過し、ＥｔＯＡｃで溶出して標題のエナンチオマーを得た。２つのエナンチオマーの保持時間は、それぞれ、７．５分及び９．４分であった［キラルパックＡＤカラム、ヘキサン／２−プロパノール／酢酸（９５：５：０．１）］。高極性のエナンチオマーは９８％ｅｅであった。
ｅｅ＝９８％；保持時間＝９．４分［キラルパックＡＤカラム：２５０×４．６ｍｍ、ヘキサン／２−プロパノール／酢酸（７５：２５：０．１）］；［α］Ｄ２１＝＋３９．２ｏ（ｃ１．０、ＭｅＯＨ）。
【０２８１】
工程６：（−）−［４−（４−クロロベンジル）−７−フルオロ−５−（メタンスルホニル）−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−３−イル］酢酸及びナトリウム塩
工程５からの酸（１５．４ｇ）を先ずジアゾメタンでエステル化した。スルホニル化は、このように形成したエステルをＮ−メチルピロリジノン中、１６．３ｇのメタンスルホン酸ナトリウム塩と３０．２ｇのＣｕＩ（Ｉ）とを混合することにより実施した。懸濁液をＮ２の流入により脱気し、１５０℃に加熱して３時間攪拌し、次いで室温まで冷却した。反応を停止するために、５００ｍＬの酢酸エチルと５００ｍＬのヘキサンを加え、混合物をＳｉＯ２のパッドで濾過し、ＥｔＯＡｃで溶出した。有機層を濃縮した。粗製油をＥｔＯＡｃに溶かし、水で３回、食塩水で１回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過、濃縮した。粗製物質をさらに１００％トルエン〜５０％トルエン／ＥｔＯＡｃの勾配によるフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、スルホン化エステルを得て、これを工程２に記載した手法により加水分解した。標題化合物を、酢酸イソプロピル／ヘプタン、次いでＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサンによる２回の連続的再結晶により入手した。
【０２８２】
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚアセトン−ｄ６）δ１０．７３（ｂｒｓ，１Ｈ），７．５７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．３１（ｍ，１Ｈ），７．２９（ｍ，１Ｈ），６．８４（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），６．２９（ｄ，１Ｈ，ＪＡＢ＝１７．８Ｈｚ），５．７９（ｄ，１Ｈ，ＪＡＢ＝１７．８Ｈｚ），３．４３（ｍ，１Ｈ），２．９８（ｓ，３Ｈ），２．９４（ｍ，１Ｈ），２．８５−２．６５（ｍ，３Ｈ），２．４２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝１６．１Ｈｚ，Ｊ２＝１０．３Ｈｚ），２．２７（ｍ，１Ｈ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚアセトン−ｄ６）δ１７３．０，１５６．５（ｄ，ＪＣＦ＝２３７Ｈｚ），１５３．９，１３９．２，１３３．７，１３３．３，１３０．０（ｄ，ＪＣＦ＝８．９Ｈｚ），１２９．６，１２８．２，１２７．５（ｄ，ＪＣＦ＝７．６Ｈｚ），１２２．２（ｄ，ＪＣＦ＝４．２Ｈｚ），１１２．３（ｄ，ＪＣＦ＝２９．４Ｈｚ），１１１．０（ｄ，ＪＣＦ＝２２．６Ｈｚ），５０．８，４４．７，３８．６，３６．６，３６．５，２３．３。ＭＳ（−ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ４３６．１，４３４．１（Ｍ−Ｈ）−。
ｅｅ＝９７％；保持時間＝１５．３分［キラルセルＯＤカラム：２５０×４．６ｍｍ、ヘキサン／２−プロパノール／エタノール／酢酸（９０：５：５：０．２）］；［α］Ｄ２１＝−２９．３°（ｃ１．０、ＭｅＯＨ）。Ｍｐ１７５．０℃。
【０２８３】
ナトリウム塩は、上記の酸化合物（６．４５ｇ、１４．８０ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ（１００ｍＬ）中、１４．８０ｍＬの１Ｎ−ＮａＯＨ水溶液にて処理することにより調製した。有機溶媒を真空下で除去し、粗製固体をイソプロピルアルコール（１．２Ｌ）に還流下溶解した。最終容量を溶媒の蒸留により５００ｍＬまで縮小した。ナトリウム塩を室温まで冷却して結晶化した。結晶のナトリウム塩をＨ２Ｏに懸濁し、ドライアイス浴で凍結し、高真空下に凍結乾燥して標題化合物をナトリウム塩として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ  ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．６３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝８．５Ｈｚ，Ｊ２＝２．６Ｈｚ），７．４７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝９．７Ｈｚ，Ｊ２＝２．６Ｈｚ），７．３３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），６．７０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），６．０６（ｄ，１Ｈ，ＪＡＢ＝１７．９Ｈｚ），５．７６（ｄ，１Ｈ，ＪＡＢ＝１７．９Ｈｚ），３．２９（ｍ，１Ｈ），３．０８（ｓ，３Ｈ），２．８０（ｍ，１Ｈ），２．６９（ｍ，１Ｈ），２．５５（ｍ，１Ｈ），２．１８（ｍ，２Ｈ），１．９３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝１４．４Ｈｚ，Ｊ２＝９．７Ｈｚ）。
【０２８４】
ＤＰ実施例１７Ａ
（±）−［５−ブロモ−４−（４−クロロベンジル）−７−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−３−イル）酢酸（実施例１７、工程４）についての別途方法
工程１：（±）−（７−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−３−イル）酢酸ジシクロヘキシルアミン（ＤＣＨＡ）塩
２−ブロモ−４−フルオロアニリンの０．５２６Ｍキシレン溶液を（２−オキソシクロペンチル）酢酸エチル（１．５当量）及び硫酸（０．０２当量）とともに、２０時間加熱還流した。水分をディーン−スターク装置により共沸混合物として除去した。反応をＮＭＲで追跡し、２０時間後、概して８０〜８５％の所望イミン中間体への変換が観察された。反応混合物を１Ｍ−重炭酸ナトリウム（０．２容量）で１５分間洗浄し、有機画分を蒸発させた。残渣のシロップを真空蒸留（０．５ｍｍＨｇ）した。残留するキシレンは３０℃で蒸留し、次いで過剰のケトンと未反応のアニリンを５０〜１１０℃の範囲で回収した。該イミンは１１０〜１８０℃の画分に淡褐色澄明な液体として回収し、その純度は８３％であった。
【０２８５】
次いで、イミン中間体を、酢酸カリウム（３当量）、塩化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム一水和物（１当量）、酢酸パラジウム（０．０３当量）及びＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドの脱気混合物に加えた（イミンの最終濃度＝０．３６５Ｍ）。反応混合物を１１５℃で５時間加熱し、室温まで放冷した。次いで、３Ｎ−ＫＯＨ（３当量）を加え、混合物を室温で１時間攪拌した。反応混合物を水（１．０容量）で希釈し、トルエン（３×０．７５容量）で洗浄した。水相を３Ｎ−ＨＣｌでｐＨ１の酸性とし、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（２×０．７５容量）で抽出した。併合した有機画分を水（０．７５容量）で洗浄した。澄明な淡褐色溶液に、ジシクロヘキシルアミン（１当量）を加え、その溶液を室温で１６時間攪拌した。塩を濾取し、酢酸エチル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで洗浄し、乾燥して標題化合物を得た。アッセイ：９４Ａ％。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ｍＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ９．２４（ｓ，１Ｈ），７．１６−７．０８（ｍ，２Ｈ），６．８２（ｔ，１Ｈ），６．２（ｂｒ，２Ｈ），３．６−３．５（ｍ，１Ｈ），３．０４−２．９７（ｍ，２Ｈ），２．８８−２．７０（ｍ，３Ｈ），２．６６（ｄｄ，１Ｈ），２．４５−２．３７（ｍ，１Ｈ），２．１３−２．０５（ｍ，２．０５），１．８３（ｄ，４Ｈ），１．６７（ｄ，２Ｈ），１．５５−１．４３（ｍ，４Ｈ），１．３３−１．１１（ｍ，６Ｈ）。
【０２８６】
工程２：（±）−（５−ブロモ−７−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−３−イル）酢酸
上記工程１のＤＣＨＡ塩のジクロロメタンスラリー（０．２４１Ｍ溶液）を−２０ないし−１５℃に冷却した。ピリジン（２当量）を一度に加え、そのスラリーに臭素（２．５当量）を、３０〜４５分かけて温度を−２０ないし−１５℃に維持しながら滴下した。（臭素の約１／３を添加したところで、反応混合物が濃厚となり、効率的な攪拌が必要となった。最終的に臭素の約１／２を添加したところで、混合物は再び「ゆるやか」になった）。添加終了後、反応混合物を−１５℃でさらに１時間熟成した。酢酸（３．０４当量）を５分間かけて加え、亜鉛末（３．０４当量）を分割して加えた。（亜鉛の一部は−１５℃で加え、混合物を約５分間熟成して、発熱が終了するのを確認した（約−１５℃ないし−１０℃））。この操作を約３０分にわたり繰り返した。もはや発熱の観察されなくなったところで、残りの亜鉛を素早く加えた。全部の操作には３０分ないし４５分を要した。
【０２８７】
添加終了後、バッチを室温まで昇温し、１時間熟成して濃縮した。反応混合物をメチルｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ、０．８容量）に置換し、１０％酢酸水溶液（０．８容量）を加えた。混合物（塩の結晶化、例えばピリジウム）を室温で１時間熟成し、ソルカ−フロックで濾過した。ソルカ−フロックのパッドをＭＴＢＥ（約０．２容量）ですすぎ、濾液（二相、ＭＴＢＥ／水相）を抽出器に移した。有機層を水洗した（０．８容量）。ＭＴＢＥ抽出液を濃縮し、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ、０．２５容量）に置換し、化合物を結晶化した。水（０．２５容量）を加え、バッチを１時間熟成した。追加の水（０．３３容量）を１時間かけて加えた。水の添加終了後、バッチをさらに１時間熟成し、濾過し、３０／７０のＩＰＡ／水（０．１５容量）ですすいだ。結晶化したブロモ酸をオーブン中、＋４５℃で乾燥した。
【０２８８】
工程３：（±）−［５−ブロモ−４−（４−クロロベンジル）−７−フルオロ−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−３−イル］酢酸
工程２のブロモ酸をジメチルアセトアミドに溶かし（０．４１６Ｍ溶液）、炭酸セシウム（２．５当量）を一度に加えた。このスラリーに塩化４−クロロベンジル（２．５当量）を一度に加え、バッチを５０℃で２０時間加熱した。バッチを室温に冷却し、５Ｎ水酸化ナトリウム（４．００当量）を５分間かけて加えた（温度が＋４０℃に上昇した）。反応液を５０℃で約３時間熟成させ、室温まで冷却し、Ｌ抽出器に移した。反応液を酢酸イソプロピル（ＩＰＡｃ、２容量）で希釈し、＋１５℃まで冷却した。この溶液を５Ｎ−ＨＣｌでｐＨ〜２の酸性とした。層分離し、有機層を水洗した（２×２容量）。ＩＰＡｃ溶液を濃縮し、ＩＰＡ（０．８容量）に置換し、生成物を結晶化した。水（８Ｌ）を２時間かけて加え、バッチを濾過して、標題化合物を得た。バッチは＋４０℃のオーブンで２４時間乾燥した。
【０２８９】
ＤＰ実施例１８
（±）−｛４−［１−（４−クロロフェニル）エチル］−７−フルオロ−５−メタンスルホニル−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−３−イル｝酢酸（化合物Ｘ）
【０２９０】
【化５２】
2008536846.tif 000071
【０２９１】
標題化合物を、２００３年７月３０日に公開されたＰＣＴ出願ＷＯ０３／０６２２００に提供された記載に従って合成した。
【０２９２】
ＤＰ実施例１９
（±）−［９−（４−クロロベンジル）−６−フルオロ−メタンスルホニル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸（化合物Ｙ）
【０２９３】
【化５３】
2008536846.tif 000072
【０２９４】
標題化合物を、２００３年７月３０日に公開されたＰＣＴ出願ＷＯ０３／０６２２００に提供された記載に従って合成した。
【０２９５】
ＤＰ実施例２０
［４−（４−クロロベンジル）−７−フルオロ−５−メタンスルホニル−１−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−３−イル）酢酸（化合物Ｚ）
【０２９６】
【化５４】
2008536846.tif 000073
【０２９７】
標題化合物を、２００３年７月３０日に公開されたＰＣＴ出願ＷＯ０３／０６２２００に提供された記載に従って合成した。
【０２９８】
ＤＰ実施例２１
｛９−［（３，４−ジクロロフェニル）チオ］−１−イソプロピル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル｝酢酸（エナンチオマーＡ及びエナンチオマーＢ）（化合物ＡＡ）
【０２９９】
【化５５】
2008536846.tif 000074
【０３００】
工程１：２−クロロニコチンアルデヒド
ジイソプロピルアミン（１１０ｍＬ、７８０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５００ｍＬ）溶液に、２．５Ｍ／ｎ−ＢｕＬｉ／ヘキサン溶液（３００ｍＬ、７５０ｍｍｏｌ）を−４０℃で加えた。５分後、反応混合物を−９５℃に冷却し、次いで、ＤＭＰＵ（１５ｍＬ）と２−クロロピリジン（５０ｍＬ、５３２ｍｍｏｌ）を連続して加えた。次いで、得られた混合物を昇温し、−７８℃で４時間攪拌した。この時点で、黄色の懸濁液を再び−９５℃に冷却し、ＤＭＦ（７０ｍＬ）を加えた。最終反応混合物を−７８℃に昇温し、その温度で１．５時間攪拌した。反応混合物を冷ＨＣｌ水（３Ｎ、８００ｍＬ）に注ぎ、５分間攪拌した。濃ＮＨ４ＯＨ水を加えて、ｐＨ７．５に調整した。水層をＥｔＯＡｃで３回抽出した。併合した有機層をＮＨ４ＯＨ水及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過、濃縮した。粗製物質を、シリカゲルパッドにより１００％ヘキサン乃至１００％ＥｔＯＡｃの勾配で溶出して精製し、生成物を冷ヘキサンで結晶化して、標題化合物を淡黄色固体として得た。
【０３０１】
工程２：（２Ｚ）−２−アジド−３−（２−クロロピリジン−３−イル）プロパン−２−エン酸メチル
２−クロロニコチンアルデヒド（２０．０ｇ、１３９．９ｍｍｏｌ）及びアジド酢酸メチル（３２．２ｍＬ、３４９．７ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１６８ｍＬ）溶液を、２５％ＮａＯＭｅ／ＭｅＯＨ溶液（８０ｍＬ、３４９ｍｍｏｌ）の溶液に、−２０℃で加えた。内部温度をモニターし、３０分の添加の間、−２０℃に維持した。次いで、得られた混合物を氷浴中で数時間攪拌し、低温室中での氷浴中で一夜攪拌した。次いで、この懸濁液を氷およびＮＨ４Ｃｌの混合物中に注ぎ込み、１０分間攪拌後にスラリーを濾過した。生成物を冷Ｈ２Ｏで洗浄し、次いで真空乾燥した。粗製の物質をＣＨ２Ｃｌ２に溶かし、ＭｇＳＯ４を加えた。この懸濁液をシリカゲルパッドで濾過し、ＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した。濾液を減圧濃縮し、標題化合物のベージュ色の沈殿（２０ｇ）を得た。
【０３０２】
工程３：４−クロロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸メチル
（２Ｚ）−２−アジド−３−［２−クロロピリジン−３−イル］プロパン−２−エン酸メチル（２１ｇ、８８ｍｍｏｌ）のメシチレン（８８０ｍＬ）溶液を１時間加熱還流した。反応混合物を室温に、次いで０℃に冷却し、沈殿を濾取し、冷ヘキサンで洗浄した。この物質をＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：２０）中で一夜攪拌し、濾過後、標題生成物を淡黄色固体として得た。
【０３０３】
工程４：１−クロロ−８−オキソ−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−７−カルボン酸メチル
４−クロロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸メチル（１２．５ｇ、５９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１１６ｍＬ）−トルエン（４６０ｍＬ）懸濁液に、１．０Ｍ−カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（６４ｍＬ、６４ｍｍｏｌ）／ＴＨＦ溶液（６４ｍＬ、６４ｍｍｏｌ）及びアクリル酸メチル（５５ｍＬ、６１１ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を１００℃で１８時間加熱した。この時点後に懸濁液を室温まで冷却し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水（４００ｍＬ）及びヘキサン（４００ｍＬ）の混合物中に注ぎ込んだ。固体をデカントし、濾過し、Ｈ２Ｏ及びヘキサンで洗浄して標題化合物を得た。
【０３０４】
工程５：１−クロロ−６，７−ジヒドロ−８Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−オン
前工程の化合物にイソプロパノール（８．０ｍＬ）及び濃ＨＣｌ（２．０ｍＬ）を加え、１００℃で１時間加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃとＮａ２ＣＯ３に分配した。有機層を分離し、蒸発して標題化合物を得た。
【０３０５】
工程６：１−イソプロペニル−６，７−ジヒドロ−８Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−オン
１−クロロ−６，７−ジヒドロ−８Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−オン（５．０ｇ、２４．３ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（１．０ｇ、１．０９ｍｍｏｌ）及びトリフェニルアルシン（２．７０ｇ、８．８２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１００ｍＬ）混合物に、トリブチルイソプロペニルスタンナン（９．６０ｇ、２９．００ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を脱気し、７８℃で１８時間加熱した。減圧下、溶媒を蒸発させた。得られた混合物にＣＨ２Ｃｌ２及びセライトを加え、次いでセライトで濾過した。標題化合物をフラッシュクロマトグラフィー（５０％〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製した。
【０３０６】
工程７：（２Ｅ）−（１−イソプロペニル−６，７−ジヒドロ−８Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イリデン）エタン酸エチル
１−イソプロペニル−６，７−ジヒドロ−８Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−オン（０．６０ｇ、２．８ｍｍｏｌ）及びホスフォノ酢酸トリエチル（１．００ｇ、４．４６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２４ｍＬ）溶液に、−７８℃で、８０％ＮａＨ（０．１２ｇ、４．００ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を０℃に、次いで室温に昇温した。反応混合物を飽和ＮＨ４ＣｌとＥｔＯＡｃに注いだ。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。標題化合物をフラッシュクロマトグラフィー（４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製した。
【０３０７】
工程８：（１−イソプロペニル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル）酢酸エチル
（２Ｅ）−（１−イソプロペニル−６，７−ジヒドロ−８Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イリデン）エタン酸エチル（０．４０ｇ、１．４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２（０．２０ｇ）を加えた。この混合物を１気圧のＨ２のもとで３時間攪拌した。混合物をセライトで濾過し、蒸発させて標題化合物を得た。
【０３０８】
工程９：｛９−［（３，４−ジクロロフェニル）チオ］−１−イソプロピル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル｝酢酸エチル
ビス（３，４−ジクロロフェニル）ジスルフィド（０．２４ｇ、０．６７ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５．６ｍＬ）溶液に、ＳＯ２Ｃｌ２（０．０３６ｍＬ）を加えた。得られた黄色混合物を室温で１時間攪拌した。この溶液を、（１−イソプロペニル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル）酢酸エチル（０．１５ｇ、０．５２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．６ｍＬ）溶液に０℃で加えた。０℃で１．５時間後、反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３とＥｔＯＡｃ上に注いだ。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過、蒸発させた。標題化合物をフラッシュクロマトグラフィー（３０％〜４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製した。
【０３０９】
工程１０：｛９−［（３，４−ジクロロフェニル）チオ］−１−イソプロピル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル｝酢酸
｛９−［（３，４−ジクロロフェニル）チオ］−１−イソプロピル−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピリド［３，４−ｂ］ピロリジン−８−イル｝酢酸エチル（０．２３ｇ、０．５０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）及びＭｅＯＨ（２．５ｍＬ）溶液に、１．０Ｍ−ＮａＯＨ（１．５ｍＬ、１．５ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１８時間攪拌後、ＨＯＡｃ（０．２５ｍＬ）を加え、溶媒を蒸発させた。残渣をＥｔＯＡｃ／Ｈ２Ｏに取り込み、有機層をＨ２Ｏ及び食塩水で洗浄した。乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）後、溶液を濾過し、蒸発させた。残渣をＥｔＯＡｃ：ヘキサン（１：１）とともに攪拌し、濾過後、標題化合物を白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＭｅＯＨ−ｄ４）δ１．１４１．２６（ｍ，６Ｈ），２．４７−２．５６（ｍ，１Ｈ），２．５６−２．６４（ｍ，１Ｈ），２．９４−３．０５（ｍ，２Ｈ），３．８１−３．８９（ｍ，１Ｈ），４．２２−４．３０（ｍ，１Ｈ），４．３３−４．４４（ｍ，２Ｈ），６．９３−６．９９（ｍ，１Ｈ），７．１４−７．１９（ｍ，１Ｈ），７．３３−７．３９（ｍ，１Ｈ），７．５４−７．５９（ｍ，１Ｈ），８．１６−８．２１（ｍ，１Ｈ）。
【０３１０】
工程１０の生成物をＣＨ２Ｎ２によりそのメチルエステルに変換し、該エステルをキラル固定相（キラルセルＯＤカラム、２×２５ｃｍ）上のＨＰＬＣ分離に付し、１２％  ２−プロパノール／ヘキサンにより６ｍＬ／分の流速で溶出した。エナンチオマーＡ（低極性）は３１．９分の保持時間を示し、エナンチオマーＢ（高極性）は３５．５分の保持時間を示した。Ａ及びＢともに、実施例１７工程１０と同様に加水分解し、標題化合物のエナンチオマーＡ及びＢを得た。
【０３１１】
ＤＰ実施例２２
（（１Ｒ）−６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−９−｛（１Ｓ）−１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］エチル｝−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル）酢酸（化合物ＡＪ）
【０３１２】
【化５６】
2008536846.tif 000075
【０３１３】
工程１：塩化２−（２−ブロモ−４−フルオロフェニル）ヒドラジニウム
２−ブロモ−４−フルオロアニリンの濃ＨＣｌ（１．５Ｍ）懸濁液に、−１０℃で、１０．０Ｍ−ＮａＮＯ２水溶液（１．１当量）をゆっくりと加えた。この混合物を０℃で２．５時間攪拌した。ＳｎＣｌ２（３．８Ｍ）の冷却（−３０℃）濃ＨＣｌ溶液をゆっくり加え、その間、内部温度を１０℃以下に維持した。得られた混合物を１０℃で２０分間、次いで室温で１時間、機械的に攪拌した。濃厚なスラリーを濾過し、固体を一夜風乾した。固体を冷ＨＣｌに再懸濁し、再度濾過した。乾燥した物質をＥｔ２Ｏに懸濁し、１０分間攪拌後、濾過し、一夜風乾して標題化合物をベージュ色の固体として得た。
【０３１４】
工程２：（±）−（８−ブロモ−６−フルオロ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル）酢酸エチル
工程１の化合物（１当量）のＡｃＯＨ（０．５Ｍ）懸濁液に、（２−オキソシクロヘキシル）酢酸エチル（１当量）を加えた。混合物を還流下で１６時間攪拌し、冷却して、減圧下、ＡｃＯＨを蒸発させ除去した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、水及び飽和ＮａＨＣＯ３水で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。次いで、残渣をシリカゲルパッド上、トルエンで溶出して精製した。濾液を濃縮し、ヘキサン中で攪拌し、濾過後に標題化合物を白色固体として得た。ＭＳ（＋ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ３５４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３１５】
工程３：（±）−［６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸エチル
工程２の化合物（１当量）の無水ＤＭＳＯ（０．２８Ｍ）溶液に、メタンスルフィン酸ナトリウム（３当量）及びヨウ化銅（３当量）を加えた。この混合物にＮ２を５分間吹き込み、次いで、反応液をＮ２気流下に１００℃で攪拌した。１２時間後、さらにメタンスルフィン酸ナトリウム（２当量）及びヨウ化銅（２当量）を加えた。混合物をさらに１００℃で１２時間攪拌し、冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ−ＨＣｌを加えて混合物を酸性とした。懸濁液を３０分間攪拌し、セライトで濾過した。濾液を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。残渣をシリカゲルパッドで濾過し、先ずトルエンで溶出して非極性不純物を除き、次いで、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（２：１）混合物により所望の生成物を溶出した。ヘキサン／ＥｔＯＡｃ混合物で溶出した濾液を濃縮し、標題化合物を淡黄色固体として得た。ＭＳ（−ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ３５２．１（Ｍ−Ｈ）。
【０３１６】
工程４：［（１Ｒ）−６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸エチル
工程３からのラセミ混合物を、キラルパックＡＤ分取用カラム上、分取ＨＰＬＣにより１５％ｉＰｒＯＨ／ヘキサン混合物で溶出して分割した。高極性エナンチオマー（より長い保持時間）を、最終生成物の活性に基づき、標題化合物と同定した。
【０３１７】
工程５：［（１Ｒ）−９−［（１Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）エチル］−６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸エチル
工程４の化合物（１当量）、トリフェニルホスフィン（１．５当量）及び（１Ｒ）−１−（４−クロロフェニル）エタノール（１．５当量；参考例１に記載した一般手法に従い調製）のＴＨＦ（０．１７５Ｍ）溶液に、アゾジカルボン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル溶液（２．１Ｍ／ＴＨＦ、１．５当量）を１０分かけて加えた。混合物を室温で２時間攪拌し、濃縮した。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーに付し、７％ＥｔＯＡｃ／トルエンで溶出精製し、標題化合物を得て（〜９０％純度）、これをそのまま次工程にて使用した。
【０３１８】
工程６：［（１Ｒ）−９−［（１Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）エチル］−６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸及び［（１Ｓ）−９−［（１Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）エチル］−６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸
工程５の化合物のＴＨＦとメタノール（２：１）の混合溶液（０．１Ｍ）に、１Ｎ−ＬｉＯＨ（３当量）を加えた。混合物を室温で２時間攪拌し、ＡｃＯＨを加え、溶媒を蒸発により除去した。残渣をＥｔＯＡｃ／Ｈ２Ｏに取り込み、有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過、濃縮した。残渣を３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンに移し、生成物をジエチルエーテルに懸濁し、４５分間超音波処理し、濾過し、高真空下、５０℃で２４時間乾燥し、標題化合物を白色固体として得た。ＭＳ（−ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ４６２．１（Ｍ−Ｈ）。
【０３１９】
別法として、（±）−［６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸エチルを工程５のアルキル化反応に用い、２つのジアステレオマー：［（１Ｒ）−９−［（１Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）エチル］−６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸エチル及び［（１Ｓ）−９−［（１Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）エチル］−６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸エチルの混合物を得た。ジアステレオマー混合物は、以下の手法を用いる選択的加水分解により分割して、所望の［（１Ｒ）−９−［（１Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）エチル］−６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸を得た。
【０３２０】
分割
［（１Ｒ）−９−［（１Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）エチル］−６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸エチル及び［（１Ｓ）−９−［（１Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）エチル］−６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸エチルのジアステレオマー混合物（１当量）をＴＨＦ／ＭｅＯＨ（３．５／１）混合物に溶かし（０．２５Ｍ）、０℃に冷却した。１Ｎ−ＬｉＯＨ水（１当量）をゆっくり加え、混合物を０℃で１２時間、又は［（１Ｒ）−９−［（１Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）エチル］−６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸エチルが完全に加水分解されるまで攪拌した。他方のジアステレオマーはこれらの条件下でほんの僅かに水解されるのみであった。ＡｃＯＨを加え、溶媒を蒸発により除去した。残渣をＥｔＯＡｃ／Ｈ２Ｏに取り込み、有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過、濃縮した。［（１Ｓ）−９−［（１Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）エチル］−６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸エチル及び［（１Ｒ）−９−［（１Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）エチル］−６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸は、フラッシュクロマトグラフィーにより１％ＡｃＯＨ含有の４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出して分離し、所望の［（１Ｒ）−９−［（１Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）エチル］−６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸（ｄｅ＞９０％）を得て、これを３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンに移し、所望の化合物（ｄｅ＞９５％）を白色固体として得た。
【０３２１】
工程７：［（１Ｒ）−６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸メチル
［（１Ｒ）−９−［（１Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）エチル］−６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸（［α］Ｄ＝−２２６°；ＭｅＯＨ中）のＭｅＯＨ（０．１Ｍ）溶液に、１０％パラジウム−炭素（１０％ｗｔ／ｗｔ）を加えた。Ｎ２気流をこの混合物に５分間吹き込んだ。反応液をＨ２気流下（風船）に室温で２４時間攪拌し、セライトパッドで濾過し、ＣＨ２Ｃｌ２で溶出した。減圧下で溶媒を蒸発除去し、残渣をＭｅＯＨ中に移し、化合物［（１Ｒ）−６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸メチルを得た。
【０３２２】
【化５７】
2008536846.tif 000076
【０３２３】
工程８：（（１Ｒ）−６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−９−｛（１Ｓ）−１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］エチル｝−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸（化合物ＡＪ）
工程７の化合物（１当量）、トリフェニルホスフィン（１．５当量）及び（１Ｒ）−１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］エタノール（１．５当量）のＴＨＦ（０．２Ｍ）溶液に、アゾジカルボン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル溶液（１Ｍ／ＴＨＦ、１．５当量）を２０分かけて加えた。混合物を室温で２時間攪拌し、濃縮した。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーに付し、１０％ＥｔＯＡｃ／トルエンで溶出精製して、（（１Ｒ）−６−フルオロ−８−（メチルスルホニル）−９−｛（１Ｓ）−１−［４−（トリフルオロメチル）フェニル］エチル｝−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−イル］酢酸メチル（純度〜９０％）を得て、これをそのまま次工程で使用した。
【０３２４】
０℃で上記エステル（１当量）のＴＨＦ／ＭｅＯＨ（３．５：１）混合物（０．２５Ｍ）溶液に、１Ｎ−ＬｉＯＨ水（１当量）をゆっくり加え、その混合物を０℃で１６時間、又は該エステルがほとんど完全に加水分解されるまで攪拌した。これらの条件では、一方のマイナーなジアステレオマーは非常にゆっくりした速度で加水分解される。ＡｃＯＨを加え、溶媒を減圧除去した。残渣をＥｔＯＡｃ／Ｈ２Ｏに取り込み、有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過、濃縮した。未反応のメチルエステルを除去するために、残渣をシリカゲルパッドで濾過し、先ず１０％ＥｔＯＡｃ／トルエンで溶出し、次いで、１％ＡｃＯＨ含有６０％ＥｔＯＡｃ／トルエンで溶出した。残渣を３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンに移し、高真空下、５０℃で１６時間乾燥し、標題化合物を白色固体として得た（ｄｅ及びｅｅ＞９５％；キラルＨＰＬＣによりチェック）。ＭＳ（−ＡＰＣＩ）ｍ／ｚ４９６．０（Ｍ−Ｈ）−。［α］Ｄ＝−１８１ｏ（ＭｅＯＨ中）。
【０３２５】
生物活性のアッセイ
式（Ｉ）で示される化合物の活性は、以下のアッセイにより証明し得る：
３Ｈ−ニコチン酸競合結合アッセイ
ナイアシン受容体を安定的に発現するＣＨＯ−ＫＩ細胞を用いて、結合分析用の膜を作製した。増殖用培地（Ｆ−１２ケーイン（Ｋａｉｇｈｎ‘ｓ）修飾培地（ＡＴＣＣ＃３０−２００４）：１０％ＦＢＳ（ギブコ＃１０４３８−０２６）、１ｍｇ／ｍｌのＧ４１８（ギブコ＃１０１３１−０２７）及び１Ｘペン−ストレップ（シグマＰ−０８７１）を含有）中で、細胞を〜８０％集密度まで増殖させ、掻き取りによって採集し、１２０００Ｘｇ、摂氏４℃で１０分間遠心分離した。細胞ペレットを採集用バッファー（２０ｍＭ−ＨＥＰＥＳ、１０ｍＭ−ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４）中に再懸濁し、５にセットした１２ｍｍポリトロンホモジェナイザーで１０秒（４回）バーストにより均一化した。細胞溶解液を２０００Ｘｇ、４°で１０分間遠心分離して未溶解細胞と核を除去し、得られた上清を３９０００Ｘｇ、４°で４５分間遠心分離して膜をペレット化した。得られたペレットを洗浄バッファー（２０ｍＭ−ＨＥＰＥＳ、０．１ｍＭ−ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４）に再懸濁し、４にセットした１２ｍｍポリトロンホモジェナイザーで１０秒（３回）バーストにより均一化し、再度、３９０００Ｘｇ、４°で４５分間遠心分離した。得られたペレットを洗浄バッファーに再懸濁し、使用時まで液体窒素中で保存した。本調製品の膜タンパク質濃度は、ＢＳＡを標準として、ピアースＢＣＡタンパク質アッセイにより決定した。
【０３２６】
３Ｈ−ニコチン酸の平衡結合は、９６穴ポリプロピレンプレートにて実施した。反応液は、アッセイバッファー（２０ｍＭ−ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４、１ｍＭ−ＭｇＣｌ２、及び０．０１％ＣＨＡＰＳ；１５−３０μｇ膜タンパク質／アッセイ）に希釈した膜１４０μｌ、アッセイバッファーに希釈した２０μｌの試験化合物（化合物ストックは１００％ＤＭＳＯ中とした；アッセイにおける最終ＤＭＳＯ濃度は０．２５％であった）、及び４０μｌの２５０ｎＭトリチウム化ナイアシン（［５，６−３Ｈ］−ニコチン酸；アメリカンラジオラベルドケミカルズインク、２０μＭ／エタノール；各アッセイにおける最終エタノール濃度は１．５％であった）を含有していた。非特異結合は２５０μＭの非標識ニコチン酸の存在下に決定した。室温で３〜４時間混合した後、パッカードハーベスターを用い、パッカードユニフィルターＧＦ／Ｃプレートで反応液を濾過し、氷冷結合バッファー（８×２００μｌ）で洗浄した。プレートを一夜乾燥し、その背面をＧＦ／Ｃプレート用に設計されたパーキンエルマーテープによりシールした。パーキンエルマーマイクロシント−２０シンチレーション液４０μｌを各ウエルに加え、上部をシールし、パッカードトップカウントシンチレーションカウンターにてプレートを分析した。
【０３２７】
計算：試験化合物は、最初に１μＭ及び０．１μＭでアッセイし、次いで、中間用量が放射線リガンド結合の約５０％を阻害する（すなわち、ＩＣ５０）ように選択した濃度範囲でアッセイする。試験化合物が存在しないときの特異結合（Ｂ０）は、総結合（ＢＴ）から非特異結合（ＮＳＢ）を引いた差であり、同様に（試験化合物の存在するときの）特異結合（Ｂ）は、置換結合（ＢＤ）から非特異結合（ＮＳＢ）を引いた差である。ＩＣ５０は、阻害応答曲線、試験化合物の濃度に対する％Ｂ／Ｂ０のロジット−ログプロットから決定する。
【０３２８】
Ｋｉはチェン及びプルストッフの変換：Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋［Ｌ］／ＫＤ）から計算する（式中、［Ｌ］はアッセイで使用する放射リガンドの濃度であり、ＫＤは同じ結合条件下で独立して決定される放射−リガンドの解離定数である）。
式（Ｉ）で示される特定化合物は、このナイアシン結合アッセイにおいて、約０．０１０〜５０μＭの範囲内にＩＣ５０を有する。本発明のさらに有利な化合物は、このアッセイにおいて、約０．０１〜１０μＭの範囲内にＩＣ５０値を有する。なおさらに有利な化合物は、このアッセイにおいて、約０．０１０〜１．０μＭの範囲内にＩＣ５０値を有する。
【０３２９】
３５Ｓ−ＧＴＰγＳ結合アッセイ
ナイアシン受容体又はベクター対照（７μｇ／アッセイ）を安定的に発現するチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）−Ｋ１細胞から調製した膜を、ワラックシンチストリッププレート中、アッセイバッファー（１００ｍＭ−ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ−ＮａＣｌ及び１０ｍＭ−ＭｇＣｌ２、ｐＨ７．４）に希釈し、４０μＭのＧＤＰを含有するアッセイバッファー（最終［ＧＤＰ］は１０μＭとした）に希釈した試験化合物と〜１０分間プレインキュベートし、次いで３５Ｓ−ＧＴＰγＳを０．３ｎＭまで加えた。潜在的な化合物の沈殿を避けるために、化合物はすべて先ず１００％ＤＭＳＯ中で調製し、次いでアッセイバッファーで希釈して、アッセイ中のＤＭＳＯの最終濃度を３％とした。結合は１時間進行させ、次いでプレートを４０００ｒｐｍ、室温で１５分間遠心分離し、次いでトップカウントシンチレーションカウンターにて計測した。結合曲線の非直線回帰分析は、グラフパッドプリズムにて実施した。
【０３３０】
膜の調製：
材料：
ＣＨＯ−Ｋ１細胞培地：Ｆ−１２ケーイン修飾細胞培地；１０％ＦＢＳ、２ｍＭ−Ｌ−グルタミン、１ｍＭピルビン酸ナトリウム及び４００μｇ／ｍｌ  Ｇ４１８
膜掻き取りバッファー：２０ｍＭ−ＨＥＰＥＳ；１０ｍＭ−ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４
膜洗浄バッファー：２０ｍＭ−ＨＥＰＥＳ；０．１ｍＭ−ＥＤＴＡ、ｐＨ７．４
プロテアーゼ阻害剤カクテル：Ｐ−８３４０（シグマ、セントルイス、ミズーリ州）
【０３３１】
操作手順：
○  １５ｃｍ２プレートから細胞培地を吸引し、５ｍＬ冷ＰＢＳですすぎ、吸引する。
○  ５ｍＬの膜掻き取りバッファーを加え、細胞を掻き取る。掻き取ったものを５０ｍＬ遠心管に移す。５０μＬのプロテアーゼ阻害剤カクテルを加える。
○  ４℃で２０，０００ｒｐｍ、１７分間回転する。
○  上清を吸引し、ペレットを３０ｍＬの膜洗浄バッファーに再懸濁する。５０μＬのプロテアーゼ阻害剤カクテルを加える。
○  ４℃で２０，０００ｒｐｍ、１７分間回転する。
○  膜ペレットから上清を吸引する。ペレットは後の使用のために、又は直ちに使用し得るように、−８０℃に凍結してもよい。
【０３３２】
アッセイ：
材料：
グアノシン５’−二リン酸ナトリウム塩（ＧＤＰ、シグマ−アルドリッチカタログ＃８７１２７）
グアノシン５’−［γ３５Ｓ］チオ三リン酸、トリエチルアンモニウム塩（［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ、アマシャムバイオサイエンスカタログ＃ＳＪ１３２０，〜１０００Ｃｉ／ｍｍｏｌ）
９６穴シンチプレート（パーキン−エルマー＃１４５０−５０１）
結合バッファー：２０ｍＭ−ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４；１００ｍＭ−ＮａＣｌ；１００ｍＭ−ＭｇＣｌ２
ＧＤＰバッファー：結合バッファープラスＧＤＰ、０．４〜４０μＭの範囲、アッセイ前に新たに作製
【０３３３】
操作手順：
（総アッセイ容量＝１００μ／ウエル）
化合物含有又は不含のＧＤＰバッファー２５μＬ（最終ＧＤＰ１０μＭ−そのため４０μＭストック液使用）
結合バッファー中の膜５０μＬ（０．４ｍｇタンパク質／ｍＬ）
結合バッファー中の［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ２５μＬ。これは５μｌの［３５Ｓ］ＧＴＰγＳストック液を１０ｍＬの結合バッファー（このバッファーはＧＤＰ不含）に加えることにより実施する。
【０３３４】
○  選抜のための化合物プレートを解凍（１００％ＤＭＳＯ中、２ｍＭの化合物５μＬを入れた娘プレート）する。
○  ２ｍＭの化合物を２４５μＬのＧＤＰバッファーで１：５０に希釈して、２％ＤＭＳＯ中４０μＭとする。凍結膜ペレットを氷上で解凍する。
○  ポリトロンＰＴ３１００（７０００ｒｐｍ設定のプローブＰＴ−ＤＡ３００７／２）を用いて懸濁液となるまで、膜を簡単に均一化する。ブラッドフォードアッセイにより膜タンパク質濃度を決定する。膜を結合バッファー中に０．４０ｍｇ／ｍｌのタンパク質濃度に希釈する。（注：最終アッセイ濃度は２０μｇ／ウエルである）。
○  １ウエルあたりＧＤＰバッファー２５μＬの中の化合物を、シンチプレートに加える。
○  １ウエルあたり５０μＬの膜をシンチプレートに加える。
○  室温で５〜１０分間、プレインキュベートする。
○  ２５μＬの希釈した［３５Ｓ］ＧＴＰγＳを加える。室温で６０分間、シェーカー（ラブ−ラインモデル＃１３１４、設定４で振盪）上でインキュベートする。
○  プレートカバーでシールしたプレートを２２℃、２５００ｒｐｍで２０分間回転することにより、アッセイを停止する。
○  トップカウントＮＸＴシンチレーションカウンター−３５Ｓプロトコールで読み取る。
【０３３５】
式（Ｉ）で示される特定の化合物は、この機能的ＧＴＰγＳ結合アッセイにおいて、約０．０１０〜１００μＭの範囲内にＥＣ５０を有する。本発明のさらに有利な化合物は、このアッセイにおいて、約０．０１０〜１０μＭの範囲内にＥＣ５０値を有する。なおさらに有利な化合物は、このアッセイにおいて、約１μＭ未満、約０．０１〜１μＭの範囲内にＥＣ５０値を有する。
【０３３６】
レーザードップラーによる紅潮
操作手順−オスＣ５７Ｂ１６マウス（〜２５ｇ）を１０ｍｇ／ｍｌ／ｋｇのネンブタールナトリウムにより麻酔する。アンタゴニストを投与すべき場合には、アンタゴニストをネンブタール麻酔と同時に注射する。１０分後、動物をレーザーの下に置き、耳たぶを裏返して下方を露出する。レーザーを耳の中心部に位置させ、８．４〜９．０Ｖの強度に絞る（一般的には耳の上〜４．５ｃｍ）。データの取得は１５×１５の画像フォーマット、自動間隔、６０画像、及び中間分解能で２０秒の時間の遅れで開始する。試験化合物は１０番目の画像に続いて、腹腔空隙への注射を介して投与する。画像１〜１０は動物のベースラインと考えられ、データはベースライン中間強度の平均に正規化する。
材料と方法−レーザードップラー感作ピム（Ｐｉｍ）ＩＩ；ナイアシン（シグマ）；ネンブタール（アボットラボ）
【０３３７】
オスのスプラーグ−ドウリーラットにおけるインビボでの遊離脂肪酸の阻害
非エステル化遊離脂肪酸（ＮＥＦＡ）アッセイは、自由活発に動き回るラット由来の血清で実施する。カテーテルを外科的に大腿部血管に埋め込み、動物は到着の１週間以内に使用する。アッセイ前の約１６時間、動物から食物を絶つ。〜２００μｌの血液をカテーテルから引き抜き、ベースラインＮＥＦＡ血清サンプルとする。薬物は個々のラットに腹腔内（ＩＰ）又は経口（ｐｏ）にて種々濃度で投与し、次いで、さらなるＮＥＦＡ分析のために、指定された時点で、カテーテルから〜２００μｌの血液を引き抜く。ＮＥＦＡアッセイは製造業者の説明書（和光純薬、ＵＳＡ；ＮＥＦＡ  Ｃ）に従って実施し、遊離の脂肪酸濃度は、既知の標準曲線（既知遊離脂肪酸の範囲）の回帰分析を介して決定する。データはエクセルとプリズムグラフを用いて解析する。
【０３３８】
本明細書に引用されるすべての特許、特許出願及び出願公開は、その全文を参照することにより本明細書の一部とする。ある特定の好適な態様が本明細書に詳細に記載されているが、多くの別の実施態様が本発明の範囲内に包含されるものと理解される。
【国際調査報告】
2008536846.tif 000086