(57)【要約】  本発明は、式Ｉ、ここで、Ｒは、Ｈ、ＣＦ3を表し；Ｒ１は、Ｈ、ＣＦ3、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキル、フェニル、フェノキシを表し；Ｒ２は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ４）−アルキル、Ｏ−（Ｃ１−Ｃ４）−アルキル、ＣＦ3を表し；又は、Ｒ１及びＲ２は、フェニル環と一緒になって、縮合したナフチルを表し；Ｒ３は、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキルを表し；Ｒ４は、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキル、ベンジルを表し；Ｒ５は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキルを表す、の化合物に関する。本発明は、また、生理学的に適合性のあるそれらの塩、溶媒和物、及び生理学的機能性誘導体に関する。本発明の化合物は、脂肪酸代謝の障害及びグルコース利用障害に加えて、インスリン抵抗性が一部関与する障害を治療及び／又は予防するために好適である。    【化１】2008509894.tif 000049
2008509894.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2008509894.tif 000048
［ここで、
Ｒは、Ｈ、ＣＦ3であり；
Ｒ１は、Ｈ、ＣＦ3、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキル、フェニル、フェノキシであり；
Ｒ２は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ４）−アルキル、Ｏ−（Ｃ１−Ｃ４）−アルキル、ＣＦ3であり；又は
Ｒ１及びＲ２は、フェニル環と一緒になって、縮合したナフチルであり；
Ｒ３は、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキルであり；
Ｒ４は、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキル、ベンジルであり；
Ｒ５は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキルである］
の化合物、並びに生理学的に許容されるその塩、溶媒和物及び生理学的機能性誘導体。
【請求項２】
Ｒは、Ｈであり；
Ｒ１は、Ｈ、メチル、ブチル、フェニル、フェノキシ又はＣＦ3であり；
Ｒ２は、Ｈ、メチル、メトキシ又はＣＦ3であり；
Ｒ１及びＲ２は、フェニル環と一緒になって、縮合したナフチルであり；
Ｒ３は、エチル又はプロピルであり；
Ｒ４は、メチルであり；そして、
Ｒ５は、Ｈである；
請求項１に記載の式Ｉの化合物。
【請求項３】
請求項１または２に記載の１つ又はそれ以上の式Ｉの化合物を含む薬剤。
【請求項４】
請求項１または２に記載の１つ又はそれ以上の式Ｉの化合物、及び代謝障害又はそれに伴う障害に対し有利な効果を有する１つ又はそれ以上の有効成分を含む医薬。
【請求項５】
請求項１または２に記載の１つ又はそれ以上の式Ｉの化合物、及び１つ又はそれ以上の抗糖尿病薬を含む医薬。
【請求項６】
請求項１または２に記載の１つ又はそれ以上の式Ｉの化合物、及び１つ又はそれ以上の脂質調節剤を含む医薬。
【請求項７】
脂肪酸代謝の障害及びグルコース利用障害の治療及び／又は予防のための、請求項１または２に記載の式Ｉの化合物の使用。
【請求項８】
インスリン抵抗性が関与する障害の治療及び／又は予防のための、請求項１または２に記載の式Ｉの化合物の使用。
【請求項９】
糖尿病及びそれに関連する続発症の治療及び／又は予防のための、請求項１または２に記載の式Ｉの化合物の使用。
【請求項１０】
異常脂質血症及びそれらの続発症の治療及び／又は予防のための、請求項１または２に記載の式Ｉの化合物の使用。
【請求項１１】
代謝症候群に関連する状態の治療及び／又は予防のための、請求項１または２に記載の式Ｉの化合物の使用。
【請求項１２】
脂肪酸代謝の障害及びグルコース利用障害の治療及び／又は予防のための、少なくとも更に１つの有効成分と組み合わせた、請求項１または２に記載の化合物の使用。
【請求項１３】
インスリン抵抗性が関与する障害の治療及び／又は予防のための、少なくとも更に１つの有効成分と組み合わせた、請求項１または２に記載の化合物の使用。
【請求項１４】
有効成分を医薬として好適な担体と混合すること、及びこの混合物を投与に好適な形態に変換することを含む、請求項１または２に記載の１つ又はそれ以上の化合物を含む医薬を製造する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、シクロヘキシルメトキシ置換基を有する酢酸誘導体、それらの製造方法、及び医薬としてのそれらの使用、並びにそれらの生理的に許容される塩及び生理学的機能性誘導体に関する。
【背景技術】
【０００２】
類似の構造の化合物が、高脂血症及び糖尿病の治療用の技術において記載されている（ＷＯ第２００４／０７６４２７号）。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明は、治療のために利用可能な脂質及び／又は糖質代謝の調節を可能とし、それ故２型糖尿病及び粥状動脈硬化症のような疾患、並びにそれらのさまざまな続発症の予防及び／又は治療に好適な、特に効果的な化合物を見出す目的に基づく。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
これは、驚くべきことに、特に良好なＰＰＡＲα効果に加えて、相当する良好なＰＰＡＲγ効果をも示す、以下に記載する化合物を選択することによって達成された。
【０００５】
本発明は、それ故、式Ｉ：
【化１】
2008509894.tif 000003
［ここで、
Ｒは、Ｈ、ＣＦ3であり；
Ｒ１は、Ｈ、ＣＦ3、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキル、フェニル、フェノキシであり；
Ｒ２は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ４）−アルキル、Ｏ−（Ｃ１−Ｃ４）−アルキル、ＣＦ3であり；又は
Ｒ１及びＲ２は、フェニル環と一緒になって、縮合したナフチルであり；
Ｒ３は、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキルであり；
Ｒ４は、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキル、ベンジルであり；
Ｒ５は、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキルである］
の化合物、並びにそれらの生理学的に許容される塩、溶媒和物及び生理学的機能性誘導体に関する。
【０００６】
式Ｉの好ましい化合物は、
Ｒが、Ｈであり；
Ｒ１が、Ｈ、メチル、ブチル、フェニル、フェノキシ又はＣＦ3であり；
Ｒ２が、Ｈ、メチル、メトキシ又はＣＦ3であり；
Ｒ１及びＲ２が、フェニル環と一緒になって、縮合したナフチルであり；
Ｒ３が、エチル又はプロピルであり；
Ｒ４が、メチルであり；そして
Ｒ５が、Ｈである；
化合物である。
【０００７】
置換基、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５におけるアルキル基は、直鎖状又は分枝鎖状であっても良い。
【０００８】
式Ｉの化合物は、少なくとも２つの不斉中心を有し、そして更に多くの不斉中心を含んでも良い。式Ｉの化合物は、それ故、ラセミ体、ラセミ混合物、純粋エナンチオマー、ジアステレオマー及びジアステレオマー混合物の形態であっても良い。本発明は、式Ｉの化合物のこれら全ての異性体を包含する。これらの異性体は、ある場合は明確に記載されていなくても、公知の方法で得ることができる。
【０００９】
薬学的に許容される塩は、その水に対する溶解性が初めの又は基本化合物のそれより大きい故に、医学的応用に対して特に好適である。これらの塩は、薬学的に許容されるアニオン又はカチオンを有していなければならない。本発明化合物の好適な薬学的に許容される酸付加塩は、塩酸、臭化水素酸、リン酸、メタリン酸、硝酸及び硫酸などの無機酸の塩、例えば、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グリコール酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、コハク酸、ｐ−トルエンエスルホン酸及び酒石酸などの有機酸の塩である。好適な薬学的に許容される塩基の塩としては、アンモニウム塩、アルカリ金属塩（ナトリウム及びカリウム塩など）、アルカリ土類金属塩（マグネシウム及びカルシウム塩など）、トロメタモール（２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−１，３−プロパンジオール）、ジエタノールアミン、リシン又はエチレンジアミンがある。
【００１０】
例えば、トリフルオロアセテート等の薬学的に非許容なアニオンとの塩は、また、薬学的に許容される塩の製造又は精製のための有用な中間体として、及び／又は非治療的用途、例えば、インビトロ用途での使用のため、本発明の構成の中に属している。
【００１１】
本明細書で使用される用語「生理学的機能性誘導体」は、本発明の式Ｉの化合物のあらゆる生理学的に許容される誘導体、例えばエステルを意味し、これは、例えば、ヒトのような哺乳類に投与した場合、式Ｉの化合物又はその活性代謝物を（直接的に又は間接的に）形成することができる。
【００１２】
生理学的機能性誘導体は、また、例えば、H. Okada et al., Chem. Pharm. Bull. 1994, 42, 57-61に記載されているような、本発明化合物のプロドラッグをも包含する。そのようなプロドラッグは、インビボで代謝されて本発明の化合物になることができる。これらのプロドラッグは、それら自体、活性であってもなくてもよい。
【００１３】
本発明の化合物は、また、種々の多形、例えばアモルファス及び結晶多形として存在し得る。本発明の化合物の全ての多形は、本発明の構成内に属し、本発明の更なる態様である。
【００１４】
以下に記載される「式Ｉの化合物」の全ての言及は、上述した式Ｉの化合物、及びそれらの塩、溶媒和物、並びに本明細書に記載されたような生理学的機能性誘導体を表す。
【００１５】
使用
本発明は、更に、ＰＰＡＲ受容体リガンドとしての、式Ｉの化合物及びそれらの医薬組成物の使用に関する。本発明のＰＰＡＲ受容体リガンドは、ＰＰＡＲ受容体活性の調節剤として好適である。
【００１６】
ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体（ＰＰＡＲ）は、リガンドによって活性化され得る転写因子であり、核ホルモン受容体のクラスに属する。三つのＰＰＡＲアイソフォーム、ＰＰＡＲα、ＰＰＡＲγ及びＰＰＡＲδがあり、異なった遺伝子によってコード化される（Peroxisome proliferators-activated receptor (PPAR): structure, mechanisms of activation and diverse functions: Motojima, K. Cell Struc. Funct., 1993 Oct. 18(5), 267-77）。
【００１７】
ＰＰＡＲγの２つの変異体、即ちＰＰＡＲγ1及びγ2、があり、それらはプロモーターの選択的使用及び差次的ｍＲＮＡスプライシングの結果である（Vidal-Puig et al. J. Clin. Invest., 97:2553-2561, 1996）。異なったＰＰＡＲ受容体は、異なった組織分布を有しており、異なった生理的機能を調節している。ＰＰＡＲ受容体は、多くの遺伝子の制御の種々の態様に主要な役割を演じており、これらの遺伝子の産物は、脂質及び糖質の代謝に直接的又は間接的に、決定的に関わっている。それ故、例えば、ＰＰＡＲα受容体は、肝臓における脂肪酸異化又はリポタンパク質代謝の制御に重要な部分の役割を演じているが、一方ＰＰＡＥγは、例えば、脂肪細胞分化の制御に決定的に関わっている。
【００１８】
しかし、更に、ＰＰＡＲ受容体は、糖質又は脂質の代謝に直接的には関連していないものを含めて多くのその他の生理的プロセスの制御にも関与している。異なったＰＰＡＲ受容体の活性は、種々の脂肪酸、脂肪酸誘導体及び合成化合物によって、いろいろな程度に調節することができる。機能、生理的効果及び病理生理学について関連のある総説は、Joel Berger et al., Annu. Rev. Med., 2002, 53, 409-435; Timothy Wilson et al., J. Med. Chem., 2000, Vol. 43, No. 4, 527-550; Steven Kliewer et al., Recent. Prog. Horm. Res., 2001, 56, 239-63を参照のこと。
【００１９】
本発明は、ＰＰＡＲ受容体の活性、特にＰＰＡＲα及びＰＰＡＲγの活性を調節するのに好適な式Ｉの化合物に関する。調節プロフィルに応じて、式Ｉの化合物は、以下に記載する適応症の治療、制御及び予防に、そしてそれらに関連する多数のその他の薬学的な適用に好適である（例えば、Joel Berger et al., Annu. Rev. Med., 2002, 53, 409-435; Timothy Wilson et al. J. Med. Chem., 2000, Vol. 43, No. 4, 527-550; Steven Kliewer et al., Recent Prog Horm Res. 2001; 56: 239-63; Jean-Charles Fruchart, Bart Staels and Patrick Duriez: PPARS, Metabolic Disease and Arteriosclerosis, Pharmacological Research, Vol. 44, No. 5, 2001; Sander Kersten, Beatrice Desvergne & Walter Wahli: Roles of PPARs in health and disease, NATURE, VOL 405, 25 MAY 2000; Ines Pineda Torra, Giulia Chinetti, Caroline Duval, Jean-Charles Fruchart and Bart Staels: Peroxisome proliferator-activated receptors: from transcriptional control to clinical practice, Curr Opin Lipidol 12: 2001, 245-254を参照）。
【００２０】
この型の化合物は、以下の治療及び／又は予防に、特に好適である。
１．・脂肪酸代謝の障害及びグルコース利用障害
・インスリン抵抗性が関与する障害
２．糖尿病、特に２型糖尿病、それに伴う続発症の予防を含む。
この関連における特定の態様は以下のものである：
・高血糖
・インスリン抵抗性の改善
・耐糖能の改善
・膵臓β細胞の保護
・大血管及び微小血管障害の予防
３．異常脂質血症及びそれらの続発症、例えば粥状動脈硬化、冠動脈性心疾患、脳血管障害等、特に（限定はされないが）１つ又はそれ以上の以下の因子によって特徴づけられるもの：
・高血漿トリグリセリド濃度、食後の高血漿トリグリセリド濃度、
・低ＨＤＬコレステロール濃度
・低ＡｐｏＡリポタンパク質濃度
・高ＬＤＬコレステロール濃度
・小粒子で、比重の重いＬＤＬコレステロール粒子（small dense LDL cholesterol particles）
・高ＡｐｏＢリポタンパク質濃度
４．代謝症候群に関連し得る種々のその他の状態、例えば：
・中心性肥満を包含する肥満（過剰体重）
・血栓症、凝固能亢進状態及び前血栓症状態（動脈及び静脈）
・高血圧
・心不全、例えば、心筋梗塞、高血圧性心疾患又は心筋症後のもの（しかしこれらには限定されない）
５．例えば、炎症反応又は細胞分化が関与する更なる障害又は状態：
・粥状動脈硬化症、例えば、（これらには限定はされないが）狭心症又は心筋梗塞を含む冠状動脈硬化症、発作等
・血管再狭窄又は再閉塞
・慢性炎症性腸疾患、例えば、クローン病及び潰瘍性大腸炎等
・膵炎
・他の炎症状態
・網膜症
・脂肪細胞腫瘍
・脂肪腫性癌腫、例えば、脂肪肉腫等
・固形腫瘍及び新生物、例えば、（限定はされないが）消化管の癌、肝臓の癌、胆管の癌及び膵臓の癌、内分泌腫瘍、肺の癌、腎臓及び尿路の癌、生殖管の癌、前立腺癌等
・急性及び慢性骨髄増殖症候群並びにリンパ腫
・血管形成
・神経変性障害
・アルツハイマー病
・多発性硬化症
・パーキンソン病
・例えば、乾癬のような紅斑落屑性皮膚病
・尋常性座瘡
・ＰＰＡＲによって調節されるその他の皮膚障害及び皮膚科疾患
・湿疹及び神経皮膚炎
・皮膚炎、例えば、脂漏性皮膚炎又は光線皮膚炎
・角膜炎及び角化症、例えば、脂漏性角化症、老人性角化症、光線角化症、光線誘発角化症又は毛包性角化症
・ケロイド及びケロイド予防
・疣贅（コンジローム又は尖圭コンジロームを包含する）
・ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）感染症、例えば、性病性乳頭腫等、ウイルス性疣贅、例えば伝染性軟属腫等、白板症
・丘疹性皮膚炎、例えば、扁平苔癬等
・皮膚癌、例えば、基底細胞癌、黒色腫又は皮膚Ｔ細胞性リンパ腫等
・限局性良性表皮腫瘍、例えば、角皮症、表皮母斑等
・凍瘡
・高血圧
・Ｘ症候群
・多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）
・喘息
・変形性関節症
・紅斑性狼瘡（ＬＥ）、又は炎症性リウマチ障害例えば、関節リウマチ等
・血管炎
・消耗（悪液質）
・痛風
・虚血・再灌流症候群
・急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）
【００２１】
薬剤
所望の生物学的効果を達成するのに必要な式Ｉの化合物の量は、多くの因子、例えば選択された特定化合物、使用目的、投与様式及び患者の臨床状態に依存する。１日量は、一般的に、体重キログラム当たり１日につき０.００１ｍｇから１００ｍｇ（典型的には０.０１ｍｇから５０ｍｇ）、例えば０.１〜１０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲内である。静脈内投与量は、例えば、０.００１ｍｇから１.０ｍｇ／ｋｇの範囲でよく、それは、キログラム当たり及び１分間当たり１０ｎｇから１００ｎｇの注入として好適に投与することができる。これらの目的のための好適な注入液剤は、例えば、１ミリリットル当たり、０.１ｎｇから１０ｍｇ、典型的には１ｎｇから１０ｍｇ、を含有することができる。単回投与は、例えば、１ｍｇから１０ｇの有効成分を含有することができる。それ故、注射用アンプルは、例えば、１ｍｇから１００ｍｇを含有することができ、そして、例えばカプセル又は錠剤のような経口投与することができる単回投与剤形は、例えば、０.０５から１０００ｍｇ、典型的には０.５から６００ｍｇを含有することができる。上に挙げた状態の治療用には、式Ｉの化合物は、化合物それ自体として使用できるが、しかし、それらは、好ましくは、許容される担体との医薬組成物の形態において使用される。勿論、担体は、組成物の他の成分と適合性があり、患者の健康に有害でないという意味で許容されるものでなければならない。担体は、固体若しくは液体、又は両者であってもよく、好ましくは、例えば、０.０５質量％から９５質量％までの有効成分を含有してもよい錠剤のような単回投与として、化合物と共に処方される。他の式Ｉの化合物を包含する、その他の医薬として活性な物質も存在してよい。本発明の医薬組成物は、本質的に、成分と医薬として許容される担体及び／又は賦形剤を混合することから成る、公知の製薬方法によって製造することができる。
【００２２】
本発明の医薬組成物は、その最も好適な投与様式が、各個々の場合において、治療しようとする疾患の性質及び重症度、並びに使用される式Ｉの化合物の性質によって決まるのであるが、経口、直腸、局所、口腔（例えば舌下）及び非経口（例えば、皮下、筋肉内、皮内又は静脈内）投与用に好適なものである。被覆された製剤及び被覆された徐放性製剤も、また、本発明の構成内に属する。酸及び胃液耐性製剤が好ましい。胃液に耐性な好適なコーティング剤は、セルロースアセテートフタレート、ポリビニルアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、並びにメタクリル酸及びメタクリル酸メチルのアニオン性ポリマーを含む。
【００２３】
経口投与用に好適な医薬製剤は、例えば、カプセル剤、カシェ剤、しゃぶり錠剤（suckable tablets）又は錠剤のような分離した単位の形態でもよく、それらの各々は、粉末若しくは顆粒として、水性若しくは非水性液体中の溶液若しくは懸濁液として、又は水中油若しくは油中水エマルジョンとして、一定量の式Ｉの化合物を含有する。これら組成物は、既に述べたように、有効成分と担体（１つ又はそれ以上の付加的な成分から成るものでもよい）を触させる工程を包含する任意の好適な製薬方法によって製造することができる。組成物は、一般的に、有効成分を液体及び／又は微粉化した固体担体とを一様かつ均一に混合することによって製造され、その後その製造物は必要に応じて成形される。それ故、例えば、錠剤は、場合によっては１つ又はそれ以上のその他の成分と共に、本化合物の粉末又は顆粒を圧縮又は成形することによって製造することができる。圧縮錠剤は、場合によって結合剤、流動促進剤、不活性希釈剤及び／又は１つ（又はそれ以上）の界面活性／分散剤と適切に混合し、本化合物を、例えば、粉末又は顆粒のような自由流動形で、好適な機械で打錠することによって製造することができる。湿製錠剤は、粉末形態にあり、且つ、不活性液体希釈剤で湿潤化した化合物を、好適な機械で成形することによって製造することができる。
【００２４】
口腔（舌下）投与に好適な医薬組成物は、式Ｉの化合物と着香料、通常はショ糖及びアラビアゴム又はトラガントゴムを含有するしゃぶり錠剤、及びゼラチン及びグリセリン又はショ糖及びアラビアゴムのような不活性な基剤中に本化合物を含むパステル剤（pastilles）を含む。
【００２５】
非経口投与に好適な医薬組成物は、好ましくは式Ｉの化合物の無菌の水性製剤を含み、これは好ましくは対象のレシピエントの血液と等張である。これらの製剤は、好ましくは静脈内に投与されるが、投与を、皮下、筋肉内又は皮内注射によって行ってもよい。これらの製剤は、好ましくは、本化合物を水と混合し、得られた溶液を滅菌し、血液と等張にすることによって製造することができる。本発明の注射できる組成物は、一般的に０.１から５質量％の活性化合物を含有する。
【００２６】
直腸投与に好適な医薬組成物は、好ましくは、単回投与坐薬の形態である。これらは、式Ｉの化合物を１つ又はそれ以上の通常の固体担体、例えば、カカオ脂と混合し、得られた混合物を成形することによって製造することができる。
【００２７】
皮膚に対する局所使用に好適な医薬組成物は、好ましくは、軟膏、クリーム、ローション、ペースト、スプレー、エアゾール又はオイルの形態である。使用することができる担体は、ワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール類、アルコール類及びこれらの物質の２つ又はそれ以上の組合せである。有効成分は、一般的に、組成物の０.１から１５質量％、例えば０.５から２質量％の濃度で存在する。
【００２８】
経皮投与もまた可能である。経皮使用に好適な医薬組成物は、患者の表皮と長期間密接に接触するのに好適な単一の貼付剤の形態であってもよい。そのような貼付剤は、適切な場合には緩衝化され、接着剤に溶解及び／又は分散された、又はポリマーに分散された、水性溶液中に有効成分を好適に含有する。好適な有効成分濃度は、約１％から３５％、好ましくは約３％から１５％である。特別な可能性は、例えば、Pharmaceutical Research,
2(6): 318 (1986)に記載されているようなエレクトロトランスポート又はイオントフォレシスによって放出される有効成分である。
【００２９】
式Ｉの化合物は、代謝障害に対する好ましい効果によって特徴づけられる。それらは脂質及び糖代謝に有益に影響し、特にそれらはトリグリセリドレベルを低下させ、そしてＩＩ型糖尿病及び動脈硬化症及びそれらの多様な続発症の予防及び治療に好適である。
【００３０】
他の薬物との併用
本発明の化合物は、単独で、又は、例えば、代謝障害又はしばしばそれに関連する障害に対して有利な効果を有する１つ又はそれ以上の更なる医薬活性物質との組合せで投与することができる。そのような薬物の例としては以下のものがある。
１．血糖を低下させる薬物、抗糖尿病薬
２．異常脂質血症の治療用の有効成分
３．抗粥状動脈硬化症薬
４．抗肥満薬
５．抗炎症有効成分
６．悪性腫瘍の治療用有効成分
７．抗血栓症有効成分
８．高血圧治療用有効成分
９．心不全の治療用有効成分
１０．糖尿病に起因する又は糖尿病に伴う合併症の治療及び／又は予防用有効成分
【００３１】
それらは、特に効果における相乗的な改善のために、式Ｉの本発明の化合物と組み合わせることができる。有効成分の組合せ投与は、患者に対して有効成分を別々に投与するか、それとも複数の有効成分が１つの医薬製剤に存在する合剤の形態かのいずれかで行うことができる。
【００３２】
例として、以下が挙げられる。
抗糖尿病薬
好適な高糖尿病薬は、例えば、Rote Liste 2001, Chapter 12、又はUSP Dictionary of
USAN and International Drug Names, US Pharmacopeia, Rockville 2003に開示されている。抗糖尿病薬は、全てのインスリン類及びインスリン誘導体、例えばLantus(R) (www.lantus.comを参照) 又は Apidra(R)、及びその他の即効性インスリン (米国特許第６,２２１,６３３号参照)、ＷＯ第０１／０４１４６号、その他、例えば、ＷＯ第９８／０８８７１号（Novo Nordisk A/S）に記載されたＧＬＰ−１受容体調節剤を包含する。
経口で効果のある血糖低下有効成分は、好ましくは、スルホニル尿素、ビグアニジン、メグリチニド、オキサジアゾリジンジオン、チアゾリジンジオン、グルコシダーゼ阻害剤、グルカゴン拮抗薬、経口ＧＬＰ−作動薬、ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤、例えば、ＷＯ第９７／２６２６５号及びＷＯ第９９／０３８６１号に開示されたようなカリウムチャンネル開口薬、インスリン抵抗性改善剤、糖新生及び／又はグリコーゲン分解の促進に関与する肝臓酵素の阻害剤、グルコース取り込みの調節剤、脂質代謝を変え血中脂質組成を変える化合物、食物摂取量又は食物吸収を減少させる化合物、ＰＰＡＲ及びＰＸＲ調節剤、及びβ細胞のＡＴＰ依存性カリウムチャンネルに作用する有効成分を包含する。
【００３３】
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、インスリンと併用して投与される。
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、例えば、グリコーゲン・ホスホリラーゼ阻害剤（ＷＯ第０１／９４３００号、ＷＯ第０２／０９６８６４号、ＷＯ第０３／０８４９２３号、ＷＯ第０３／０８４９２２号、ＷＯ第０３／１０４１８８号を参照）のような、肝臓のグルコース産生に影響する物質と併用される。
１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、例えば、トルブタミド、グリベンクラミド、グリピジド又はグリメピリドのようなスルホニル尿素と併用して投与される。
１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、例えば、トルブタミド、グリベンクラミド、グリピジド、グリメピリド又はレパグリニドのような、β細胞のＡＴＰ依存性カリウムチャンネルに作用する有効成分と併用して投与される。
１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、例えば、メトホルミンのようなビグアニドと併用して投与される。
【００３４】
更なる実施態様において、式Ｉの化合物は、例えば、レパグリニドのようなメグリチニドと併用して投与される。
１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、例えば、シグリタゾン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン又はDr. Reddy's Research FoundationのＷＯ第９７／４１０９７号に開示された化合物、特に５−［［４−［（３，４−ジヒドロ−３−メチル−４−オキソ−２−キナゾリニル）メトキシ］フェニル］メチル］−２，４−チアゾリジンジオンのようなチアゾリジンジオンと併用して投与される。
【００３５】
１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、例えば、ＷＯ第９８／１９９９８号、  ＷＯ第９９／６１４３１号、ＷＯ第９９／６７２７８号、ＷＯ第９９／６７２７９号、ＷＯ第０１／７２２９０号、ＷＯ第０２／３８５４１号、ＷＯ第０３／０４０１７４号に記載されたＤＰＰIV阻害剤、特にＰ９３／０１（１−シクロペンチル−３−メチル−１−オキソ−２−ペンタンアンモニウムクロリド）、Ｐ−３１／９８、ＬＡＦ２３７（１−［２−（３−ヒドロキシ−アダマンタ−１−イルアミノ）アセチル］ピロリジン−２−（Ｓ）−カルボニトリル）、ＴＳ０２１（（２Ｓ，４Ｓ）−４−フルオロ−１−［［（２−ヒドロキシ−１，１−ジメチルエチル）アミノ］アセチル］ピロリジン−２−カルボニトリル・モノベンゼンスルホネート）と併用される。
【００３６】
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、例えば、ロシグリタゾン、ピオグリタゾンのようなＰＰＡＲγ作動薬と併用して投与される。
【００３７】
１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、例えば、ＷＯ第２００４／００７５１７号、ＷＯ第２００４／０５２９０２号及びＷＯ第２００４／０５２９０３号に直接的又は間接的に開示された、ＳＧＬＴ−１及び／又は２に対する阻害効果を有する化合物と併用して投与される。
【００３８】
１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、例えば、ミグリトール又はアカルボースのようなα−グリコシダーゼ阻害剤と併用して投与される。
１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、上に挙げた化合物の２つ以上の組合せと、例えば、スルホニル尿素とメトホルミン、スルホニル尿素とアカルボース、レパグリニドとメトホルミン、インスリンとスルホニル尿素、インスリンとメトホルミン、インスリンとトログリタゾン、インスリンとロバスタチン、等と併用して投与される。
【００３９】
脂質調節剤
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、ロバスタチン、フルバスタチン、プラバスタチン、シンバスタチン、イバスタチン、イタバスタチン、アトルバスタチン、ロスバスタチンのようなＨＭＧＣｏＡ還元酵素阻害剤と併用して投与される。
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、胆汁酸吸収阻害剤（例えば、米国特許第６,２４５,７４４号、米国特許第６,２２１,８９７号、米国特許第６,２７７,８３１号、欧州特許第０６８３７７３号、欧州特許０６８３７７４号を参
照）と併用して投与される。
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、例えば、コレスチラミン、コレセベラムのような高分子胆汁酸吸着剤と併用して投与される。
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、コレステロール吸収阻害剤例えば、ＷＯ第０２５００２７号に記載されたもの、又はエゼチミブ、チクエシド、パマクエシドと併用して投与される。
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、ＬＤＬ受容体誘導剤（例えば、米国特許第６,３４２,５１２号を参照）と併用して投与される。
【００４０】
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、膨張性薬剤、好ましくは不溶性膨張性薬剤（例えば、イナゴマメ／Caromax(R）(Zunft H J; et al., Carob pulp preparation for treatment of hypercholesterolemia, ADVANCES IN THERAPY (2001 SepOct), 18(5), 230-6)と併用して投与される。Caromaxは、Nutrinova, Nutrition Specialties & Food Ingredients GmbH, Industriepark Hochst, 65926 Frankfurt/Mainのイナゴマメ含有製品である）と併用して投与される。Caromax(R）との併用は、１つの製剤でも又は式Ｉの化合物とCaromax(R）の別々の投与によっても可能である。これに関して、Caromax(R）は、例えば、ベーカリー製品又はミューズリ・バー（ｍｕｅｓｌｉ  ｂａｒｓ）のような食物製品の形で投与することもできる。
【００４１】
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、ＰＰＡＲα作動薬と併用し
て投与される。
【００４２】
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、例えば、ＡＺ２４２（テサグリタザール（Tesaglitazar）（Ｓ）−３−（４−［２−（４−メタンスルホニルオキシフェニル）エトキシ］フェニル）−２−エトキシプロピオン酸）、ＢＭＳ２９８５８５（Ｎ−［（４−メトキシフェノキシ）カルボニル］−Ｎ−［［４−［２−（５−メチル−２−フェニル−４−オキサゾリル）エトキシ］フェニル］メチル］グリシン）又は、ＷＯ第９９／６２８７２号、ＷＯ第９９／６２８７１号、ＷＯ第０１／４０１７１号、ＷＯ第０１／４０１６９号、ＷＯ第９６／３８４２８号、ＷＯ第０１／８１３２７号、ＷＯ第０１／２１６０２号、ＷＯ第０３／０２０２６９号、ＷＯ第００／６４８８８号又はＷＯ第００／６４８７６号に記載されたような混合型ＰＰＡＲα／γ作動薬と併用して投与される。
【００４３】
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、例えば、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル、クロフィブラート、ベザフィブラートのようなフィブラートと併用して投与される。
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、ニコチン酸又はナイアシンと併用して投与される。
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、ＣＥＴＰ阻害剤、例えば、ＣＰ−５２９、４１４（トルセトラピブ（torcetrapib））と併用して投与される。
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、ＡＣＡＴ阻害剤と併用して投与される。
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、ＭＴＰ阻害剤、例えば、インプリタピド（implitapide）と併用して投与される。
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、抗酸化剤と併用して投与される。
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、リポタンパク質リパーゼ阻害剤と併用して投与される。
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、ＡＴＰクエン酸リアーゼ阻害剤と併用して投与される。
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、スクアレンシンテターゼ阻害剤と併用して投与される。
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、リポタンパク質（ａ）拮抗薬と併用して投与される。
【００４４】
抗肥満剤
本発明の１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、例えば、オルリスタットのようなリパーゼ阻害剤と併用して投与される。
【００４５】
１つの実施態様において、更なる有効成分は、フェンフルラミン又はデクスフェンフルラミンである。別の実施態様において、更なる有効成分は、シブトラミンである。
【００４６】
更なる実施態様において、式Ｉの化合物は、ＣＡＲＴ調節剤（“Cocaine -amphetamine-regulated transcript influences energy metabolism, anxiety and gastric emptying in mice” Asakawa, A, et al., M.: Hormone and Metabolic Research (2001), 33(9), 554-558を参照）、ＮＰＹ拮抗薬（例えば、ナフタレン−１−スルホン酸｛４−［（４−アミノキナゾリン−２−イルアミノ）メチル］−シクロヘキシルメチル｝アミド塩酸塩（ＣＧＰ  ７１６８３Ａ））、ＭＣ４作動薬（例えば、１−アミノ−１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン−２−カルボン酸［２−（３ａ−ベンジル−２−メチル−３−オキソ− ２，３，３ａ，４，６，７−ヘキサヒドロピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５−イル）−１−（４−クロロフェニル）−２−オキソエチル］アミド：（ＷＯ第０１／９１７５２号））、オレキシン拮抗薬（例えば、１−（２−メチル−ベンゾオキサゾール−６−イル）−３−［１，５］ナフチリジン−４−イル尿素塩酸塩（ＳＢ−３３４８６７−Ａ））、Ｈ３作動薬（３−シクロヘキシル−１−（４，４−ジメチル−１，４，６，７−テトラヒドロイミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−５−イル）プロパン−１−オン・シュウ酸塩（ＷＯ第００／６３２０８号））、ＴＮＦ作動薬、ＣＲＦ拮抗薬（例えば、［２−メチル−９−（２，４，６−トリメチルフェニル）−９Ｈ−１，３，９−トリアザフルオレン−４−イル］ジプロピルアミン（ＷＯ第００／６６５８５号））、ＣＲＦ  ＢＰ拮抗薬（例えば、ウロコルチン）、ウロコルチン作動薬、β３作動薬（例えば、１−（４−クロロ−３−メタンスルホニルメチル−フェニル）−２−［２−（２，３−ジメチル−１Ｈ−インドール−６−イルオキシ）エチルアミノ］−エタノール塩酸塩（ＷＯ第０１／８３４５１号））、ＭＳＨ（メラニン細胞刺激ホルモン）作動薬、ＣＣＫ−Ａ作動薬（例えば、｛２−［４−（４−クロロ−２，５−ジメトキシフェニル）−５−（２−シクロヘキシル−エチル）チアゾール−２−イルカルバモイル］−５，７−ジメチルインドール−１−イル｝酢酸・トリフルオロ酢酸塩（ＷＯ第９９／１５５２５号））、セロトニン再取り込み阻害剤（例えば、デクスフェンフルラミン）、混合型セロトニン作動性及びノルアドレナリン作動性化合物（例えば、ＷＯ第００／７１５４９号）、５ＨＴ作動薬、例えば１−（３−エチルベンゾフラン−７−イル）ピペラジン・シュウ酸塩（ＷＯ第０１／０９１１１号）、ボンベシン作動薬、ガラニン拮抗薬、成長ホルモン（例えば、ヒト成長ホルモン）、成長ホルモン放出化合物（６−ベンジルオキシ−１−（２−ジイソプロピルアミノエチルカルバモイル）−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−カルボン酸ｔ−ブチルエステル（ＷＯ第０１／８５６９５号））、ＴＲＨ作動薬（例えば、欧州特許第０ ４６２ ８８４号を参照）、脱共役タンパク質２又は３調節剤、レプチン作動薬（例えば、Lee, DanielW.; Leinung, Matthew C.; Rozhavskaya-Arena, Marina; Grasso, Patricia, Leptin agonists as a potential approach to the treatment of obesity, Drugs of the Future (2001), 26(9), 873-881を参照）、ＤＡ作動薬（ブロモクリプチン、ドプレキシン）、リパーゼ／アミラーゼ阻害剤（例えば、ＷＯ第００／４０５６９号）、ＰＰＡＲ調節剤（例えば、ＷＯ第００／７８３１２号）、ＲＸＲ調節剤又はＴＲ−β作���薬と併用して投与される。
【００４７】
本発明の１つの実施態様において、更なる有効成分はレプチンである。
１つの実施態様において、更なる有効成分は、デクスアンフェタミン、アンフェタミン、マジンドール又はフェンテルミンである。
１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、冠循環及び血管系に対して効果を有する薬物、例えば、ＡＣＥ阻害剤（例えば、ラミプリル）、アンジオテンシン−レニン系に作用する薬物、カルシウム拮抗薬、β遮断薬等と併用して投与される。
１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、抗炎症効果を有する薬物と併用して投与される。
１つの実施態様において、式Ｉの化合物は、癌治療及び癌予防のために採用される薬物と併用して投与される。
【００４８】
本発明の化合物と、１つ又はそれ以上の前述の化合物及び場合により１つ又はそれ以上の別の薬理学的に活性な物質との全ての好適な組合せは、本発明によって与えられた保護の範囲内にあるとされることは、理解されるであろう。
化合物の活性は以下のようにして試験した。
【００４９】
細胞性ＰＰＡＲαアッセイにおけるＰＰＡＲ作動薬のＥＣ５０値の測定
原理
ヒトＰＰＡＲαに結合して、それを作動薬の様式で活性化する物質の効力を、安定的にトランスフェクトされるＨＥＫ細胞株（ＨＥＫ＝ヒト胎児腎臓）（本明細書では、ＰＰＡＲαレポーター細胞株という）を使用して分析した。それは２つの遺伝要素、即ち、ルシフェラーゼレポーター要素（ｐｄｅｌｔａＭ−ＧＡＬ４Ｌｕｃ−Ｚｅｏ）及びＰＰＡＲα融合タンパク質（ＧＲ−ＧＡＬ４ヒトＰＰＡＲα−ＬＢＤ）、を含有しており、後者はＰＰＡＲαリガンドに依存してルシフェラーゼレポーター要素の発現を媒介する。安定的に、構成的に発現する融合タンパク質ＧＲ−ＧＡＬ４ヒトＰＰＡＲα−ＬＢＤは、ＰＰＡＲαレポーター細胞株の細胞核において、ＧＡＬ４タンパク質部分を介して、その細胞株のゲノムに安定的に組み込まれているルシフェラーゼレポーター要素の５’−上流のＧＡＬ４ＤＮＡ結合モチーフに結合する。脂肪酸が枯渇したウシ胎仔血清（ｃｓ−ＦＣＳ）をアッセイに使うと、ＰＰＡＲαリガンドを添加しない場合ルシフェラーゼレポーター遺伝子の発現は殆どない。ＰＰＡＲαリガンドは、ＰＰＡＲα融合タンパク質に結合し、活性化して、それによってルシフェラーゼレポーター遺伝子の発現を引き起こす。形成したルシフェラーゼは、適切な基質を介して化学発光により検出することができる。
【００５０】
細胞株の構築
ＰＰＡＲαレポーター細胞株は、２つのステップで調製された。先ず、ルシフェラーゼレポーター要素を構築し、ＨＥＫ細胞に安定的にトランスフェクトした。この目的のために、酵母転写因子ＧＡＬ４の５つの結合部位（各々の場合において、５’−ＣＧＧＡＧＴＡＣＴＧＴＣＣＴＣＣＧＡＧ−３’）を、６８ｂｐ長の最小ＭＭＴＶプロモーター（ジーンバンク・アクセッション番号Ｖ０１１７５）の５’−上流にクローン化した。最小ＭＭＴＶプロモーター部分は、ＲＮＡポリメラーゼＩＩによる充分な転写を可能にするためにＣＣＡＡＴボックスとＴＡＴＡ要素を含有している。ＧＡＬ４−ＭＭＴＶ構築物のクローニングと配列決定は、Sambrook J.ら(Molecular cloning, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989)の記載と同様にして行った。次いで、完全なホタルPhotinus pyralisのルシフェラーゼ遺伝子（ジーンバンク・アクセッション番号Ｍ１５０７７）を、ＧＡＬ４−ＭＭＴＶ要素の３’−下流にクローン化した。配列決定後、５つのＧＡＬ４結合部位、ＭＭＴＶプロモーター及びルシフェラーゼ遺伝子からなるルシフェラーゼレポーター要素を、プラスミドｐｄｅｌｔａＭ−ＧＡＬ４−Ｌｕｃ−Ｚｅｏを得るために、ゼオジン（zeozin）耐性を付与したプラスミドにサブクローン化した。このベクターを、Ausubel, F.M.ら (Current protocols in molecular biology, Vol. 1-3, John Wiley & Sons, Inc., 1995) の記載に従ってＨＥＫ細胞にトランスフェクトした。次いで、ゼオジン含有培地（０.５ｍｇ／ｍｌ）を、ルシフェラーゼ遺伝子の非常に低い基底発現（basal expression）を示す、好適な安定細胞を選択するのに使用した。
【００５１】
第２のステップでは、ＰＰＡＲα融合タンパク質（ＧＲ−ＧＡＬ４−ヒトＰＰＡＲα−ＬＢＤ）を、記載した安定細胞に導入した。この目的のために、最初に、グルココルチコイド受容体（ジーンバンク・アクセッション番号Ｐ０４１５０）のＮ末端７６アミノ酸をコードするｃＤＮＡを酵母転写因子ＧＡＬ４（ジーンバンク・アクセッション番号Ｐ０４３８６）のアミノ酸１−１４７をコード化するｃＤＮＡ部分に連結した。ヒトＰＰＡＲα受容体（アミノ酸Ｓ１６７−Ｙ４６８：ジーンバンク・アクセッション番号Ｓ７４３４９）のリガンド結合ドメインのｃＤＮＡをこのＧＲ−ＧＡＬ４構築物の３’末端にクローン化した。このようにして調製した融合構築物（ＧＲ−ＧＡＬ４−ヒトＰＰＡＲα−ＬＢＤ）を、サイトメガロウイルスプロモーターによって、その中に構成的発現が可能なようにプラスミドｐｃＤＮＡ３（Invitrogen製）にサブクローン化した。このプラスミドを制限酵素エンドヌクレアーゼで線状化し、ルシフェラーゼレポーター要素を含有する前に記載した細胞クローンに安定的にトランスフェクトした。ルシフェラーゼレポーター要素を含有し、ＰＰＡＲα融合タンパク質（ＧＲ−ＧＡＬ４−ヒトＰＰＡＲα−ＬＢＤ）を構成的に発現する、完成したＰＰＡＲα−レポーター細胞株を、ゼオジン（０.５ｍｇ／ｍｌ）及びＧ４１８（０.５ｍｇ／ｍｌ）で選択することにより単離した。
【００５２】
アッセイ手順
ＰＰＡＲα−作動薬の活性は、以下に記載する３日間アッセイで測定される。
１日目
ＰＰＡＲα−レポーター細胞株を、以下の添加物が混合されているＤＭＥＭ培地（＃４１９６５−０３９、Invitrogen製）で、８０％密集まで培養する：１０％ｃｓ−ＦＣＳ（ウシ胎仔血清、＃ＳＨ−３００６８．０３、Hyclone製）、０.５ｍｇ／ｍｌゼオジン（＃Ｒ２５０−０１、Invitrogen製）、０.５ｍｇ／ｍｌＧ４１８（＃１０１３１−０２７、Invitrogen製）、１％ペニシリン−ストレプトマイシン溶液（＃１５１４０−１２２、Invitrogen製）及び２ｍＭ・Ｌ−グルタミン（＃２５０３０−０２４、Invitrogen製）。培養は、５％ＣＯ2存在下、細胞培養インキュベーター内で標準細胞培養瓶（＃３５３１１２、Becton Dickinson製）中３７℃で行った。８０％密集細胞を、ＰＢＳ（＃１４１９０―０９４、Invitrogen製）１５ｍｌで１度洗滌し、トリプシン溶液（＃２５３００−０５４、Invitrogen製）３ｍｌで、３７℃、２分間処理し、既述のＤＭＥＭ培地５ｍｌに取り上げ、細胞計数器で計数する。５００,０００個の細胞／ｍｌに希釈した後、３５,０００個の細胞を透明なプラスチック底の９５ウエル・マイクロタイタープレート（＃３６１０、Corning Costar製）の各ウエルに播種する。プレートを細胞培養インキュベーター内で、３７℃、５％ＣＯ2で２４時間培養する。
【００５３】
２日目
試験するＰＰＡＲα−作動薬をＤＭＳＯに溶解し、１０ｍＭの濃度にする。この原液を、５％ｃｓ−ＦＣＳ（＃ＳＨ−３００６８．０３、Hyclone製）、２ｍＭ・Ｌ−グルタミン（＃２５０３０−０２４、Invitrogen製）及び前記の抗生物質（ゼオジン、Ｇ４１８、ペニシリン及びストレプトマイシン）と混合したＤＭＥＭ培地（＃４１９６５−０３９、Invitrogen製）で希釈する。
被検物質を１０μＭから１００ｐＭの範囲の１１の異なった濃度で試験する。より強力な化合物は、１μＭから１０ｐＭの濃度範囲又は１００ｎＭと１ｐＭの間の濃度範囲で試験する。
１日目に播種したＰＰＡＲα−レポーター細胞株の培地を、吸引により完全に除き、そして培地で希釈した被検物質を直ちに細胞に添加する。物質の希釈及び添加は、ロボット（BeckmanFX）で行った。培地に希釈した被検物質の最終体積は、９６ウエル・マイクロタイタープレートの１ウエル当たり１００μｌである。アッセイのＤＭＳＯ濃度は、溶媒の細胞障害性の作用を避けるために０.１％ｖ／ｖ以下である。
個々のプレートにおいてアッセイが機能していることを実証するために、１１の異なった濃度に同様に希釈された、標準ＰＰＡＲα−作動薬を、各プレートに装填した。アッセイプレートを、インキュベーター内で、３７℃、５％ＣＯ2存在下に２４時間インキュベートする。
【００５４】
３日目
被検物質で処理したＰＰＡＲα−レポーター細胞をインキュベーターから取り出し、培地を吸引して除く。９６ウエル・マイクロタイタープレートの各ウエルにBright Glo試薬（Promega製）５０μｌをピペット操作で加えることにより、細胞を溶解する。暗所室温で１０分間インキュベーション後、マイクロタイタープレートをルミノメーター（Trilux、Wallac製）で測定する。マイクロタイタープレートの各ウエルについての測定時間は１秒である。
【００５５】
評価
ルミノメーターからの生データを、マイクロソフト・エクセルのファイルに移す。ＰＰＡＲ作動薬の用量−効果プロット及びＥＣ５０値を、製造者（ＩＤＢＳ）によって規定されたようにＸＬ．Ｆｉｔプログラムを用いて計算する。
【００５６】
細胞性ＰＰＡＲγアッセイにおけるＰＰＡＲ作動薬のＥＣ５０値の測定
原理
一過性トランスフェクション系を、ＰＰＡＲ作動薬の細胞性ＰＰＡＲγ活性を測定するのに採用する。それは、ルシフェラーゼレポータープラスミド（ｐＧＬ３ｂａｓｉｃ−５ｘＧＡＬ４−ＴＫ）を使用すること、及びＰＰＡＲγ発現プラスミド（ｐｃＤＮＡ３−ＧＡＬ４−ヒトＰＰＡＲγＬＢＤ）を使用することに基づいている。両プラスミドは、ヒト胎児由来腎臓細胞（ＨＥＫ細胞）に一過性にトランスフェクトされる。次いで、レポータープラスミドのＧＡＬ４結合部位に結合する融合タンパク質ＧＡＬ４−ヒトＰＰＡＲγＬＢＤの、これらの細胞中で発現される。ＰＰＡＲγ活性リガンドの存在下で、活性化された融合タンパク質ＧＡＬ４−ヒトＰＰＡＲγＬＢＤは、ルシフェラーゼの基質を添加後化学発光シグナルの形態で検出することができる、ルシフェラーゼレポーター遺伝子の発現を誘発する。安定的にトランスフェクトされたＰＰＡＲα−レポーター細胞株との違いとして、細胞性ＰＰＡＲγアッセイにおいて、２つの成分（ルシフェラーゼレポータープラスミド及びＰＰＡＲγ発現プラスミド）は、ＨＥＫ細胞に一時的にトランスフェクトされる。これは、ＰＰＡＲα融合タンパク質の安定で永久的な発現が細胞傷害性であるためである。
【００５７】
プラスミドの構築
ルシフェラーゼレポータープラスミドｐＧＬ３ｂａｓｉｃ−５ｘＧＡＬ４−ＴＫは、Promega社のベクターｐＧＬ３ｂａｓｉｃに基づいている。レポータープラスミドは、酵母転写因子ＧＡＬ４の５つの結合部位（各結合部位は、配列５’−ＣＴＣＧＧＡＧＧＡＣＡＧＴＡＣＴＣＣＧ−３’を有する）を、１６０ｂｐ長のチミジンキナーゼプロモーター部位（ジーンバンク・アクセッション番号ＡＦ０２７１２８）の５’上流と共に、ｐＧＬ３ｂａｓｉｃにクローン化することによって調製される。チミジンキナーゼプロモーターの３’−下流は、既に使用されているプラスミドｐＧＬ３ｂａｓｉｃの構築物である、Photinus pyralis由来の完全なルシフェラーゼ遺伝子（ジーンバンク・アクセッション番号Ｍ１５０７７）である。レポータープラスミドｐＧＬ３ｂａｓｉｃ−５ｘＧＡＬ４−ＴＫのクローン化及び配列決定は、Sambrook J. ら (Molecular cloning, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989)の記載に準じて行った。
ＰＰＡＲγ発現プラスミドｐｃＤＮＡ３−ＧＡＬ４−ヒトＰＰＡＲγＬＢＤは、酵母転写因子ＧＡＬ４（ジーンバンク・アクセッション番号Ｐ０４３８６）のアミノ酸１−１４７をコードするｃＤＮＡを、サイトメガロウイルスプロモーターの３’−下流のプラスミドｐｃＤＮＡ３（Invitrogen製）に、第一にクローン化することによって調製された。引き続いて、ＧＡＬ４ＤＮＡ結合ドメインの３’−下流のヒトＰＰＡＲγ受容体（アミノ酸Ｉ１５２−Ｙ４７５；アクセッション番号ｇ１４８００９９）のリガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）のｃＤＮＡをクローン化した。ＰＰＡＲγ発現プラスミドｐｃＤＮＡ３−ＧＡＬ４−ヒトＰＰＡＲγＬＢＤのクローン化及び配列決定を、Sambrook J.ら (Molecular cloning, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989)の記載に準じて再び行った。ルシフェラーゼレポータープラスミドｐＧＬ３ｂａｓｉｃ−５ｘＧＡＬ４−ＴＫ及びＰＰＡＲγ発現プラスミドｐｃＤＮＡ３−ＧＡＬ４−ヒトＰＰＡＲγＬＢＤの他に、同様に細胞性ＰＰＡＲγアッセイに使用されるものは、リファレンスプラスミドｐＲＬ−ＣＭＶ（Promeg製）及びプラスミドｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ（＋）（Stratagene製）である。これら４つのプラスミドの全ては、最小のエンドトキシン含量でプラスミドの品質を保証する、Qiagen社のプラスミド調製キットを用いて、ＨＥＫ細胞へのトランスフェクション前に調製された。
【００５８】
アッセイの手順
ＰＰＡＲγ作動薬の活性は、以下に記載する４日間アッセイで測定される。トランスフェクション前に、ＨＥＫ細胞を、以下の添加物と混合したＤＭＥＭ培地（＃４１９６５−０３９、Invitrogen製）で培養される：１０％ＦＣＳ（＃１６０００−０４４、Invitrogen製）、１％ペニシリン−ストレプトマイシン溶液（＃１５１４０−１２２、Invitrogen製）及び２ｍＭ・Ｌ−グルタミン（＃２５０３０−０２４、Invitrogen製）。
【００５９】
１日目
はじめに、ＤＭＥＭ培地に加えて前記の４つのプラスミド全てを含有するトランスフェクション培地である、溶液Ａを調製する。アッセイ用に各９６ウエル・マイクロタイタープレート当り溶液Ａ３ｍｌを作り上げるのに、以下の量が使用される：抗生物質及び無血清ＤＭＥＭ培地（＃４１９６５−０３９、Invitrogen製）２６２２μｌ、リファレンスプラスミドｐＲＬ−ＣＭＶ（１ｎｇ／μｌ）１００μｌ、ルシフェラーゼレポータープラスミドｐＧＬ３ｂａｓｉｃ−５ｘＧＡＬ４−ＴＫ（１０ｎｇ／μｌ）１００μｌ、ＰＰＡＲγ発現プラスミドｐｃＤＮＡ３−ＧＡＬ４−ヒトＰＰＡＲγＬＢＤ（１００ｎｇ／μｌ）１００μｌ及びプラスミドｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ（＋）（５００ｎｇ／μｌ）７８μｌ。次いで、各９６ウエル・マイクロタイタープレート当り、ＤＭＥＭ培地（＃４１９６５−０３９、Invitrogen製）１.９ｍｌをPolyFectトランスフェクション試薬（Qiagen製）１００μｌと混合することによって、溶液Ｂ２ｍｌを調製する。引き続いて、溶液Ａ３ｍｌを溶液Ｂ２ｍｌと混合して溶液Ｃ５ｍｌを作り、これは多数回ピペット操作することによって完全に混合し、室温で１０分間インキュベートする。
容量１７５ｃｍ2の細胞培養瓶からの８０％密集ＨＥＫ細胞を、ＰＢＳ（＃１４１９０−０９４、Invitrogen製）１５ｍｌで１回洗滌し、トリプシン溶液（＃２５３００−０５４、Invitrogen製）３ｍｌで３７℃、２分間処理する。次いで、細胞を、１０％ＦＣＳ（＃１６０００−０４４、Invitrogen製）、１％ペニシリン−ストレプトマイシン溶液（＃１５１４０−１２２、Invitrogen製）及び２ｍＭ・Ｌ−グルタミン（＃２５０３０−０２４、Invitrogen製）と混合したＤＭＥＭ培地（＃４１９６５−０３９、Invitrogen製）１５ｍｌ中に取りあげる。細胞懸濁液を細胞計数器で計数した後に、懸濁液を２５０,０００細胞／ｍｌに希釈する。この細胞懸濁液１５ｍｌを、１つのマイクロタイタープレート当り、溶液Ｃ５ｍｌと混合する。懸濁液２００μｌを、透明なプラスチックの底を有する９６ウエル・マイクロタイタープレート（＃３６１０，Corning Costar製）の各ウエルに播種する。プレートを細胞培養インキュベーター中で、３７℃にて、５％ＣＯ2存在下２４時間インキュベートする。
【００６０】
２日目
試験されるＰＰＡＲ作動薬をＤＭＳＯに溶解し、１０ｍＭの濃度にする。この原液を、２％ Ultroser（＃１２０３９−０１２、Biosepra製）、１％ペニシリン−ストレプトマイシン溶液（＃１５１４０−１２２、Invitrogen）及び２ｍＭ・Ｌ−グルタミン（＃２５０３０−０２４、Invitrogen製）と混合したＤＭＥＭ培地（＃４１９６５−０３９、Invitrogen製）に希釈する。被検物質を１０μＭから１００ｐＭの範囲の１１の異なった濃度で試験する。より強力な化合物は、１μＭから１０ｐＭの濃度範囲で試験する。
１日目にトランスフェクトし、播種したＨＥＫ細胞の培地を、吸引により完全に除き、そして培地で希釈した被検物質を直ちに細胞に添加する。物質の希釈及び添加は、ロボット（Beckman FX）で行った。培地に希釈した被検物質の最終体積は、９６ウエル・マイクロタイタープレートの１ウエル当たり１００μｌである。個々のプレートにおいてアッセイが機能していることを実証するために、１１の異なった濃度に同様に希釈された標準ＰＰＡＲγ−作動薬を、各プレートに装填した。アッセイプレートを、インキュベーター内で、３７℃、５％ＣＯ2存在下に４８時間インキュベートする。
【００６１】
４日目
吸引によって培地を除いた後、Dual-GloTM 試薬（Dual-GloTM ルシフェラーゼ・アッセイシステム、Promega製）５０μｌを、細胞を溶解し、細胞中に形成されたホタル・ルシフェラーゼ (Photinus pyralis) の基質を与えるために、製造者の使用説明書に従って各ウエルに加えた。暗所室温にて１０分間インキュベーションの後、ホタル・ルシフェラーゼ媒介化学発光を、測定器で測定する（測定時間／ウエル：１秒、Trilux、Wallac製）。次いで、Dual-GloTM Stop & Glo試薬（Dual-GloTM ルシフェラーゼ・アッセイシステム、Promega製）５０μｌを、ホタル・ルシフェラーゼの活性を停止させ、リファレンスプラスミドｐＲＬ−ＣＭＶによって発現するレニラ（Renilla、ウミシイタケ）ルシフェラーゼの基質を与えるために、各ウエルに加える。暗所室温で更に１０分間インキュベーションの後に、レニラ・ルシフェラーゼによって媒介される化学発光を、測定器で１秒／ウエルで再び測定する。
【００６２】
評価
ルミノメーターからの生データを、マイクロソフト・エクセルのファイルに移す。ホタル／レニラルシフェラーゼ活性比を、マイクロタイタープレートの１ウエルから導かれる各測定について、決定する。ＰＰＡＲ作動薬の用量−効果プロット及びＥＣ５０値を、製造者（ＩＤＢＳ）によって規定されたようにＸＬ．Ｆｉｔプログラムによる比から計算する。
【００６３】
いくつかの本発明の式Ｉの化合物の活性についての結果を、以下の表Ｉに示す。
【表１】
2008509894.tif 000004
【００６４】
【表２】
2008509894.tif 000005
【００６５】
式Ｉの本発明の化合物は、ＰＰＡＲα受容体及びＰＰＡＲγ受容体を活性化し、それ故に、例えば、臨床に使用されているフィブラート（例えば、J.-Ch. Fruchard et al.,: PPARS, Metabolic Disease and Atherosclerosis, Pharmacological Research, Vol. 44, No. 5, 2001; S. Kersten et al.: Roles of PPARs in health and disease, NATURE, VOL 405, 25 MAY 2000; I. Pineda et al.: Peroxisome proliferator-activated receptors: from transcriptional control to clinical practice, Curr Opin Lipidol 12: 2001, 245-254を参照）と同様に、身体のトリグリセリドの低下をもたらすことが表Ｉから明らかである。
【００６６】
〔実施例〕
以下に詳細に示す実施例は、限定することなく、本発明を例示に資するものである。
【表３】
2008509894.tif 000006
【００６７】
【表４】
2008509894.tif 000007
【００６８】
方法
式Ｉの本発明の化合物は、以下の反応スキームに従って得ることができる。
方法Ａ：
【化２】
2008509894.tif 000008
【００６９】
化合物Ａ−１（N.W.Boaz, Tetraheron: Asymmetry, (1999) 10, 813-816に記載の通りに製造された）をアルコールＡ−２に（例えば、ＴＨＦ中での、クロロギ酸エチル、トリエチルアミン及びナトリウムボロヒドリド、又はＴＨＦ中のクロロギ酸イソブチル及びＮ−メチルモルホリン及びナトリウムボロヒドリドにより）還元し、引き続いて、第一級ヒドロキシル基を保護基ＰＧ（例えば、ＰＧ＝ＴＨＰでは；ジクロロメタン中のジヒドロピラン及びトルエンスルホン酸一水和物と室温で撹拌することにより）で保護し、化合物Ａ−３を得る。 Ａ−３をエーテル性溶媒中リチウムアルミニウムヒドリドで還元し、化合物Ａ−４を得る。化合物Ａ−４の第一級ヒドロキシル基を、ＰＧと直交する保護基ＰＧ’で保護し（例えば、ＰＧ＝ＴＢＤＰＳでは；ＴＢＤＰＳＣｌ及びイミダゾールと一緒にＤＭＦ中、室温で撹拌し）、化合物Ａ−５を得る。化合物Ａ−５の一方の保護基を脱離させ（例えば、ＤＧ＝ＴＨＰでは；メタノール又はイソプロパノール中、トルエンスルホン酸一水和物又はピリジニウム・ｐ−トルエンスルホナートと一緒に室温で撹拌し）、化合物Ａ−６を得る。化合物Ａ−６を化合物Ｃ（ここで、化合物Ｃは、２―ハロ酢酸（ハロゲンは、臭素又は塩素であって良い）とＲ６−ＯＨとのエステルであって、Ｒ６は上記の意味を有する）と反応させ、化合物Ａ−７を得る。エーテル性溶媒中、化合物Ａ−７を、エーテル性溶媒中、リチウムアミド塩基（例えば、リチウムジイソプロピルアミド又はリチウム−２，２，５，５−テトラメチルピロリジド）及び一般式Ｒ４Ｘのアルキルハライド（ここで、Ｒ４は上記の意味を有する）と低温で反応させる。この様にして得られた化合物を、次いでエーテル性溶媒中リチウムアミド塩基（例えば、リチウムジイソプロピルアミド又はリチウム−２，２，５，５−テトラメチルピロリジド）及び一般式Ｒ５Ｘのアルキルハライド（ここで、Ｒ５は上記の意味を有する）と低温で反応させ、化合物Ａ−８を得る。保護基ＳＧ’をＡ−８から脱離させ（ＰＧ＝ＴＢＤＰＳの場合、ＴＨＦ中でのテトラブチルアンモニウムフルオリドにより）、一般式Ａ−９の化合物を得る。化合物Ａ−９は、エーテル性溶媒中で塩基（例えば、水素化ナトリウム又はカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド）及び化合物Ｄ（ここで、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は上記の意味を有する）と反応させ、化合物Ａ−１０を得る。化合物Ａ−１０は、Ｒ６が第一級又は第二級アルキル基の場合、メタノール中塩基により、又はＲ６が第三級アルキル基の場合、不活性溶媒中の無水の酸（例えば、ジオキサン中の塩化水素又はジクロロメタン中のトリフルオロ酢酸）により、酸Ａ−１１に加水分解される。
【００７０】
実施例１〜１１は、この方法により合成することができる：
方法Ｂ：
【化３】
2008509894.tif 000009
【００７１】
化合物Ａ−４（方法Ａ参照）を、化合物Ｃ（ここで、化合物Ｃは、２−ハロ酢酸（ハロゲンは、臭素又は塩素であっても良い）とアルコールＲ６−ＯＨとのエステルであり、Ｒ６は、上記の意味を有する）と反応させ、化合物Ｂ−１を得る。化合物Ｂ−１を、エーテル性溶媒中リチウムアミド塩基（例えば、リチウムジイソプロピルアミド）及び一般式Ｒ４Ｘのアルキルハライド（ここで、Ｒ４は上記の意味を有する）と低温で反応させる。この様にして得られた化合物を、次いでエーテル溶媒中リチウムアミド塩基（例えば、リチウムジイソプロピルアミド）及び一般式Ｒ５Ｘのアルキルハライド（ここで、Ｒ５は上記の意味を有する）と低温反応させ、化合物Ｂ−３を得る。保護基ＰＧをＢ−２から脱離させ、一般式Ｂ−３の化合物を得る。化合物Ｂ−３を、エーテル溶媒中塩基（例えば、水素化ナトリウム又はカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド）及び化合物Ｄ（ここで、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は上記で説明した意味を有する）と反応させ、化合物Ｂ−４を得る。化合物Ｂ−４は、Ｒ６が第一級又は第二級アルキル基の場合、メタノール中塩基により、又はＲ６が第三級アルキル基の場合、不活性溶媒中の無水の酸（例えば、ジオキサン中の塩化水素又はジクロロメタン中のトリフルオロ酢酸）により、酸Ｂ−５に加水分解される。
【００７２】
実施例１２〜２１のエナンチオマー生成物は、この方法により合成することができる。
【００７３】
ここで使われている略号は、以下を意味する。
Ａｃ：アセチル；
Ｂｎ：ベンジル；
Ｂｕ：ブチル；
ｉＢｕ：イソブチル；
ｔＢｕ：ｔｅｒｔ−ブチル；
ＢｕＬｉ：ｎ−ブチルリチウム；
Ｂｚ：ベンゾイル；
Ｃｙ：シクロヘキシル；
ＤＣＩ：直接化学イオン化（質量スペクトルにおいて）；
ＤＣＭ：ジクロロメタン；
ＤＨＰ：２，３−ジヒドロピラン；
ＤＭＡＰ：４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン；
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド；
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド；
ＥＡ：酢酸エチル；
ＥＤＣ：Ｎ’−(３−ジメチルアミノプロピル)−Ｎ−エチルカルボジイミド×ＨＣｌ；
ＥＩ：電子衝撃イオン化（質量スペクトルにおいて）
ｅｑｕｉｖ．：当量；
ＥＳＩ：電子スプレーイオン化（質量スペクトルにおいて）；
Ｅｔ：エチル；
ｈ：時間；
ＨＡＴＵ：Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム・ヘキサフルオロホスフェート；
ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール×Ｈ2Ｏ；
ＨＰＬＣ：高圧、高速液体クロマトグラフィー；
ＬＣ−ＭＳ：液体クロマトグラフィー−質量分析；
Ｍｅ：メチル；
ＭＳ：質量分析；
ＭｓＣｌ：メタンスルホニルクロリド；
ＭＴＢＥ：ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル；
ＮＭＲ：核磁気共鳴スペクトル；
Ｐｄ／Ｃ：炭素上パラジウム；
Ｐｈ：フェニル；
ｉＰｒ：イソプロピル；
ｎＰｒ：ｎ−プロピル；
Ｒｆ：保持率（薄層クロマトグラフィーにおいて）；
ＲＴ：室温；
ｓａｔ．：飽和；
ＴＢＡＦ：テトラブチルアンモニウムフルオリド；
ＴＢＡＩ：テトラブチルアンモニウムヨージド
ＴＢＤＰＳＣｌ：ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルクロリド；
ＴＢＤＭＳＣｌ：ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド；
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸；
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン；
ＴＨＰ：テトラヒドロピラニル；
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー；
Ｔｒ：トリチル；
ＴｓＯＨ：トルエンスルホン酸；
その他の化合物は、上記の方法に従って製造することができる。
【００７４】
一般式Ａ−８の化合物のビルディングブロック合成：
【化４】
2008509894.tif 000010
ジエチルケトンを亜硝酸イソアミル及びＨＣｌとジエチルエーテル中で反応させ、ペンタン−２，３−ジオン２−オキシム（G. Buechi, J. Galindo, J.Org.Chem. (1991) 56(8), 2605-2606）を得る。後者を酢酸中で、ｐ−メチルベンズアルデヒド及びＨＣｌと反応させ、５−エチル−４−メチル−２−ｐ−トリルオキサゾール３−オキシド（P. M. Weintraub, J. Med. Chem. (1972) 15(4), 419-420）を得る。この化合物をホスホリルクロリドと一緒にクロロホルム中で沸騰させ、４−クロロメチル−５−エチル−２−ｐ−トリルオキサゾール（M. S. Malamas, R. P. Carlson, D. Grimes, R. Howell, K. Glaser, I. Gunawan, J. A. Nelson, M. Kanzelberger, U. Shah, D. A. Hartman, J. Med. Chem. (1996) 39(1), 237-245）を得る。この化合物をアセトン中、ヨウ化ナトリウムと還流下で加熱し、５−エチル−４−ヨードメチル−２−ｐ−トリルオキサゾール（A., Zlatkov,
P., Peikov, J., Rodriguez-Alvarez, N., Danchev, I., Nikolova, J., Mitkov, Eur. J. Med. Chem. Chim. Ther. (2000) 35(10), 941-948）を得る。
【００７５】
以下のビルディングブロックは、表ＩＩＩで図示した前駆体から、この合成と同様にして得られる。
【表５】
2008509894.tif 000011
【００７６】
【表６】
2008509894.tif 000012
【００７７】
【表７】
2008509894.tif 000013
【００７８】
〔実施例１〕
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［５−エチル−２−（４−トリフルオロメチルフェニル）−オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化５】
2008509894.tif 000014
【００７９】
（１Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキサンカルボン酸イソプロピル
【化６】
2008509894.tif 000015
（１Ｓ，３Ｒ）−３−イソプロポキシカルボニルシクロヘキサンカルボン酸（１４０ｇ）をＴＨＦに溶解し、トリエチルアミン（１００ｍｌ）を加えた。−１０℃で、クロロギ酸エチル（６８.４ｍｌ）を滴下しながら加え、そして懸濁液を終夜撹拌した。celiteを通して濾過した後、ナトリウムボロヒドリド（５５ｇ）を０℃で加え、懸濁液を室温で更に６時間撹拌した。更に、ナトリウムボロヒドリド（２５ｇ）を加え、そして、懸濁液を終夜撹拌した。水を加え、溶液を２時間撹拌した。二相を分離し、水相をＭＴＢＥで抽出し、そして、集めた有機相をＮａＣｌ飽和溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮した。（１Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキサンカルボン酸イソプロピル（１０５ｇ）を無色の油状物質として得た。
Ｃ１１Ｈ２０Ｏ３（２００.２８）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：２０１.２［ＭＨ+］。
【００８０】
（１Ｒ，３Ｓ）−３−（テトラヒドロピラン−２−イルオキシメチル）シクロヘキサンカルボン酸イソプロピル
【化７】
2008509894.tif 000016
（１Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキサンカルボン酸イソプロピル（１００ｇ）及びジヒドロピラン（４６.２ｇ）をジクロロメタン（５００ｍｌ）に溶解し、そして、０℃で、トルエンスルホン酸一水和物（４.７５ｇ）を加えた。溶液を終夜撹拌し、次いで重炭酸ナトリウム飽和溶液を加えた。有機相を分離し、ＭＴＢＥで希釈し、塩化ナトリウム飽和溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そして濃縮して、（１Ｒ，３Ｓ）−３−（テトラヒドロピラン−２−イルオキシメチル）シクロヘキサンカルボン酸イソプロピル（１４０ｇ）を褐色の油状物質として得た。
Ｃ１６Ｈ２８Ｏ４（２８４.４）；ＭＳ（ＣＩ＋）：２８５（５）［ＭＨ+］，  ２０１（１００）［ＭＨ+−Ｃ５Ｈ８Ｏ］，８５（７７）。
【００８１】
（１Ｒ，３Ｓ）−３−（テトラヒドロピラン−２−イルオキシメチル）シクロヘキシルメタノール
【化８】
2008509894.tif 000017
（１Ｒ，３Ｓ）−３−（テトラヒドロピラン−２−イルオキシメチル）シクロヘキサンカルボン酸イソプロピル（６０.６ｇ）をＴＨＦ（１００ｍｌ）に溶解し、そして０℃で、ＴＨＦ（３００ｍｌ）中リチウムアルミニウムヒドリド（１６.２ｇ）の懸濁液に滴下しながら加えた。混合物を前駆体がＴＬＣで最早検出できなくなるまで室温で撹拌した。１０ＮのＫＯＨ（５０ｍｌ）を、０℃で混合物に加えた。灰色の沈殿物上の溶液をデカントし、残留物を酢酸エチルで溶解し、濾過した。集めた濾液を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで抽出し、有機相をＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮した。残留物をシリカゲル（ヘプタン／酢酸エチル勾配）上でのクロマトグラフィーで精製し、（１Ｒ，３Ｓ）−３−（テトラヒドロピラン−２−イルオキシメチル）シクロヘキシルメタノール（３０.７ｇ）を黄色の油状物質として得た。
Ｃ１３Ｈ２４Ｏ３（２２８.１７）；ＭＳ（ＣＩ＋）：２２９.４（２４）  ［ＭＨ+］，１４５.４（９）［ＭＨ+  −Ｃ５Ｈ８Ｏ］，８５.２（１００）。
【００８２】
（１Ｓ，３Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシラニルオキシメチル）−シクロヘキシルメタノール
【化９】
2008509894.tif 000018
（１Ｒ，３Ｓ）−３−（テトラヒドロピラン−２−イルオキシメチル）シクロヘキシルメタノール（３６.２ｇ）をＤＭＦ（１９０ｍｌ）及びトルエン（１３０ｍｌ）に溶解し、イミダゾール（２７.０ｇ）を加えた。０℃で、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルクロロシラン（４７.９ｇ）を滴下しながら加え、溶液を室温で終夜撹拌した。溶液を濃縮し、残留物をＭＴＢＥ及び水に取り込み、水相をＭＴＢＥでもう１回抽出し、集めた有機相を水で２回、そして、塩化ナトリウム飽和溶液で１回洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮した。これにより、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニル−［（１Ｒ，３Ｓ）−３−（テトラヒドロピラン−２−イルオキシメチル）シクロヘキシルメトキシ］シランを黄色の油状物質として、定量的収率で得た。
後者をイソプロパノール（４００ｍｌ）に溶解し、ｐ−トルエンスルホン酸（１.５２ｇ）を加えた後、室温で４８時間撹拌した。次いでＮａＨＣＯ３、飽和溶液を、ｐＨ試験紙で反応液が中性になるまで加えた。溶媒を実質的に留去した。水性残留物を水及びＭＴＢＥに取り込んだ。水相を分離し、ＭＴＢＥで３回抽出した。集めた有機相を水とＮａＣｌ飽和溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮し、（１Ｓ，３Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシラニルオキシメチル）シクロヘキシルメタノール（６７ｇ）を黄色の油状物質として得た。
Ｃ２４Ｈ３４Ｏ２Ｓｉ（３８２.６２）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：３８３.５  ［ＭＨ+］。
【００８３】
２−［（１Ｓ，３Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシラニルオキシメチル）シクロヘキシルメトキシ］−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化１０】
2008509894.tif 000019
（１Ｓ，３Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシラニルオキシメチル）シクロヘキシルメタノール（６７ｇ）、ブロモ酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（８６.３ｇ）、テトラブチルアンモニウム・硫酸水素塩（１９.８ｇ）をトルエン（３００ｍｌ）に溶解し、そして１０℃（氷−水浴）で、水（７３ｍｌ）中の水酸化ナトリウム（７０.８ｇ）溶液を加え、混合物を、１０℃で１８時間激しく撹拌（ＫＰＧパドル撹拌機）した。次いで、ＭＴＢＥ及び水を加え、そして、相を分離した。水相を２回ＭＴＢＥで抽出し、集めた有機相を塩化ナトリウム飽和溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残留物をシリカゲル（ヘプタン／酢酸エチル勾配）上のクロマトグラフィーで精製した。これにより、２−［（１Ｓ，３Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシラニルオキシメチル）シクロヘキシルメトキシ］−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６０.７ｇ）を淡黄色の油状物質として得た。
Ｃ３０Ｈ４４Ｏ４Ｓｉ（４９６.３０）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：５１４.４９  ［Ｍ+＋ＮＨ４］。
【００８４】
２−［（１Ｓ，３Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシラニルオキシメチル）シクロヘキシルメトキシ］−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化１１】
2008509894.tif 000020
２ＭのリチウムジイソプロピルアミドのＴＨＦ溶液（１５５ｍｌ）を、ＴＨＦ（１８０ｍｌ）中の２−［（１Ｓ，３Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシラニルオキシメチル）シクロヘキシルメトキシ］−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６０.７ｇ）の溶液に−７８℃で加え、その間温度を−５５℃以上には上げなかった。溶液をこの温度で１０分間撹拌し、次いで０℃に温め、そしてこの温度で更に１５分間撹拌し、その後溶液を再度−７８℃に冷却し、ヨウ化メチル（３８ｍｌ）を滴下しながら加えた。溶液を０℃まで温め、次いでＮＨ４Ｃｌ飽和溶液及び酢酸エチルを加えた。相を分離し、有機相をＮＨ４Ｃｌ飽和溶液で洗浄し、集めた水相を酢酸エチルで、もう１回抽出し、集めた有機相を塩化ナトリウム飽和溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。
２ＭのリチウムジイソプロピルアミドのＴＨＦ溶液（１５０ｍｌ）を、ＴＨＦ（１８０ｍｌ）中のこの様にして得られた残留物の溶液に、−７８℃で加えた。その間温度を−５５℃以上には上げなかった。溶液をこの温度で１０分間撹拌し、次いで、−１０℃に温め、そしてこの温度で更に１５分間撹拌し、その後溶液を再度−７８℃まで冷却し、ヨウ化メチル（３８ｍｌ）を滴下しながら加えた。溶液を−１０℃に温め、次いでＮＨ４Ｃｌ飽和溶液及び酢酸エチルを加えた。相を分離し、有機相をＮＨ４Ｃｌ飽和溶液で洗浄し、集めた水相を酢酸エチルでもう１回抽出し、その後集めた有機相を塩化ナトリウム飽和溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残留物をシリカゲル（ヘプタン／酢酸エチル勾配）上のクロマトグラフィーで精製し、２−［（１Ｓ，３Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシラニルオキシメチル）シクロヘキシルメトキシ］−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル（５１.２ｇ）を褐色の油状物質として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ＝７.５７−７.６３（ｍ，４Ｈ）；７.４０−７.５０（ｍ，６Ｈ）；３.４３−３.４９（ｍ，２Ｈ）；３.１１−３.１６（ｍ，１Ｈ）；３.０４−３.０９（ｍ，１Ｈ）；１.８０−１.８６（ｍ，１Ｈ）；１.６５−１.７８（ｍ，２Ｈ）；１.４６−１.６２（ｍ，２Ｈ）；１.４０（ｓ，９Ｈ）；１.２６（ｓ，６Ｈ）；０.７４−１.６０（ｍ，４Ｈ）；１.００（ｓ，９Ｈ）；０.５８−０.６７（ｍ，１Ｈ）。
【００８５】
２−（（１Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化１２】
2008509894.tif 000021
２−［（１Ｓ，３Ｒ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシラニルオキシメチル）シクロヘキシルメトキシ］−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル（５１.２ｇ）をＴＨＦ（３５０ｍｌ）に溶解した。テトラブチルアンモニウムフルオリド・水和物（５４.
５ｇ）を添加した後、室温で終夜撹拌した。大半のＴＨＦを蒸発させ、残留物をＭＴＢＥ／水に取り込んだ。有機相を分離し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮した。残留物をシリカゲ
ル（ヘプタン／酢酸エチル勾配）上のクロマトグラフィーで精製し、２−（（１Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１４.４ｇ）を黄色の油状物質として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ＝４.３０−４.３６（ｍ，１Ｈ）；３.２３−３.２９（ｍ，１Ｈ）；３.１５−３.２１（ｍ，２Ｈ）；３.０５−３.１３（ｍ，１Ｈ）；１.５３−１.８１（ｍ，４Ｈ）；１.１５−１.５２（ｍ，３Ｈ）；１.４１（ｓ，９Ｈ）；１.２７（ｓ，６Ｈ）；０.７０−０.８６（ｍ，２Ｈ）；０.４９−０.５８（ｍ，１Ｈ）。
【００８６】
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［５−エチル−２−（４−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化１３】
2008509894.tif 000022
２−（（１Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３００ｍｇ）をＭＴＢＥ（１０ｍｌ）に溶解し、そして水素化ナトリウム（６０％／鉱油）（５０ｍｇ）を加えた。ガスの発生が止んだ後、５−エチル−４−ヨードメチル−２−（４−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾール（６００ｍｇ）を加え、そして懸濁液を還流下で終夜加熱した。水及びＭＴＢＥを添加した後、相を分離し、有機相を塩化ナトリウム飽和溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮した。残留物を分取型ＨＰＬＣで精製し、２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［５−エチル−２−（４−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１９０ｍｇ）を黄色の油状物質として得た。
Ｃ２９Ｈ４０Ｆ３ＮＯ５（５３９.６４）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：５４０.７［ＭＨ+］。
【００８７】
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［５−エチル−２−（４−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化１４】
2008509894.tif 000023
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［５−エチル−２−（４−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２７０ｍｇ）をジクロロメタン（５ｍｌ）及びトリフルオロ酢酸（２.５ｍｌ）に溶解し、終夜撹拌した。次いで、溶液を完全に蒸発させ、残留物を分取型ＨＰＬＣで精製し、２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［５−エチル−２−（４−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸（１２７ｍｇ）を黄色の油状物質として得た。
Ｃ２５Ｈ３２Ｆ３ＮＯ５（４８３.２２）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：４８４.４１  ［ＭＨ+］。
【００８８】
〔実施例２〕
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［５−エチル−２−（３−トリフルオロメチルフェニル）−オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化１５】
2008509894.tif 000024
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［５−エチル−２−（３−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸を、２−（（１Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル及び５−エチル−４−ヨードメチル−２−（３−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾールから実施例１と類似の方法で得た。
Ｃ２５Ｈ３２Ｆ３ＮＯ５（４８３.２２）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：４８４.４２［ＭＨ+］。
【００８９】
〔実施例３〕
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［５−エチル−２−（２−トリフルオロメチルフェニル）−オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化１６】
2008509894.tif 000025
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［５−エチル−２−（２−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸を、２−（（１Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル及び５−エチル−４−ヨードメチル−２−（２−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾールから実施例１と類似の方法で得た。
Ｃ２５Ｈ３２Ｆ３ＮＯ５（４８３.２２）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：４８４.３６［ＭＨ+］。
【００９０】
〔実施例４〕
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［２−（３，４−ジメチルフェニル）−５−エチルオキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化１７】
2008509894.tif 000026
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［２−（３，４−ジメチルフェニル）−５−エチルオキサゾール−４−イメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸を、２−（（１Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル及び２−（３，４−ジメチルフェニル）−５−エチル−４−ヨードメチルオキサゾールから実施例１と類似の方法で得た。
Ｃ２６Ｈ３７ＮＯ５（４４３.２７）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：４４４.４２［ＭＨ+］。
【００９１】
〔実施例５〕
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［２−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５−エチルオキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化１８】
2008509894.tif 000027
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［２−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５−エチルオキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸を、２−（（１Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル及び２−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５−エチル−４−ヨードメチルオキサゾールから実施例１と類似の方法で得た。
Ｃ２８Ｈ４１ＮＯ５（４７１.３０）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：４７２.４６［ＭＨ+］。
【００９２】
〔実施例６〕
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［５−イソプロピル−２−（４−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化１９】
2008509894.tif 000028
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［５−イソプロピル−２−（４−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸を、２−（（１Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル及び４−ヨードメチル−５−イソプロピル−２−（４−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾールから実施例１と類似の方法で得た。
Ｃ２６Ｈ３４Ｆ３ＮＯ５（４９７.２４）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：４９８.４１［ＭＨ+］。
【００９３】
〔実施例７〕
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［５−イソプロピル−２−（３−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化２０】
2008509894.tif 000029
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［５−イソプロピル−２−（３−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸を、２−（（１Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル及び４−ヨードメチル−５−イソプロピル−２−（３−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾールから実施例１と類似の方法で得た。
Ｃ２６Ｈ３４Ｆ３ＮＯ５（４９７.２４）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：４９８.３５［ＭＨ+］。
【００９４】
〔実施例８〕
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［２−（３，４−ジメチルフェニル）−５−イソプロピルオキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化２１】
2008509894.tif 000030
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［２−（３，４−ジメチルフェニル）−５−イソプロピルオキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸を、２−（（１Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル及び２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−ヨードメチル−５−イソプロピルオキサゾールから実施例１と類似の方法で得た。
Ｃ２７Ｈ３９ＮＯ５（４５７.２８）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：４５８.４４［ＭＨ+］。
【００９５】
〔実施例９〕
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［２−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５−イソプロピルオキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化２２】
2008509894.tif 000031
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［２−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５−イソプロピルオキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸を、２−（（１Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル及び２−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−４−ヨードメチル−５−イソプロピルオキサゾールから、実施例１と類似の方法で得た。
Ｃ２９Ｈ４３ＮＯ５（４８５.３１）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：４８６.２３［ＭＨ+］。
【００９６】
〔実施例１０〕
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［５−イソプロピル−２−（３−メトキシフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化２３】
2008509894.tif 000032
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［５−イソプロピル−２−（３−メトキシフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸を、２−（（１Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル及び４−ヨードメチル−５−イソプロピル−２−（３−メトキシフェニル）オキサゾールから実施例１と類似の方法で得た。
Ｃ２６Ｈ３７ＮＯ６（４５９.２６）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：４６０.４２［ＭＨ+］。
【００９７】
〔実施例１１〕
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［５−イソプロピル−２−（ナフタ−２−イル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化２４】
2008509894.tif 000033
２−｛（１Ｓ，３Ｒ）−３−［５−イソプロピル−２−（ナフタ−２−イル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸を、２−（（１Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル及び４−ヨードメチル−５−イソプロピル−２−（ナフタ−２−イル）オキサゾールから実施例１と類似の方法で得た。
Ｃ２９Ｈ３７ＮＯ５（４７９.２７）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：４８０.４４［ＭＨ+］。
【００９８】
〔実施例１２〕
２−｛（１Ｒ，３Ｓ）−３−［２−（３，４−ジメチルフェニル）−５−イソプロピルオキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化２５】
2008509894.tif 000034
【００９９】
［（１Ｒ，３Ｓ）−３−（テトラヒドロピラン−２−イルオキシメチル）シクロヘキシルメトキシ］酢酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化２６】
2008509894.tif 000035
［（１Ｒ，３Ｓ）−３−（テトラヒドロピラン−２−イルオキシメチル）シクロヘキシル］メタノール（５１ｇ）、ブロモ酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（１５１.５ｇ）、テトラブチルアンモニウム・硫酸水素塩（２３.２２ｇ）をトルエン（３８０ｍｌ）中に溶解し、そして１０℃（氷−水浴）で、水（１４３ｍｌ）中水酸化ナトリウム（８９.３６ｇ）の溶液を加え、混合物を激しく（ＫＰＧパドル撹拌機）、１０℃、次いで室温で１８時間撹拌した。次いで、ＭＴＢＥ及び水を加え、相を分離した。水相をＭＴＢＥで２回抽出し、集めた有機相を塩化ナトリウム飽和溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残留物をシリカゲル（ヘプタン／酢酸エチル勾配）上でのクロマトグラフィーで精製した。これにより、［（１Ｒ，３Ｓ）−３−（テトラヒドロピラン−２−イルオキシメチル）シクロヘキシルメトキシ］酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（５６.１ｇ）を淡黄色の油状物質として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ＝４.４９−４.５３（ｍ，１Ｈ）；３.９１（ｓ，２Ｈ）；３.６７−３.７４（ｍ，１Ｈ）；３.３７−３.４６（ｍ，２Ｈ）；３.２０−３.２７（ｍ，２Ｈ）；３.０９−３.１７（ｍ，１Ｈ）；１.６５−１.８８（ｍ，５Ｈ）；１.３５−１.６２（ｍ，７Ｈ）；１.１５−１.３０（ｍ，１Ｈ）；１.４１（ｓ，９Ｈ）；０.７８−０.９１（ｍ，２Ｈ）；０.５６−０.６８（ｍ，１Ｈ）。
【０１００】
２−メチル−２−［（１Ｒ，３Ｓ）−３−（テトラヒドロピラン−２−イルオキシメチル）シクロヘキシルメトキシ］プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化２７】
2008509894.tif 000036
２ＭのリチウムジイソプロピルアミドのＴＨＦ溶液（１４７ｍｌ）を、ＴＨＦ（４５０ｍｌ）中［（１Ｒ，３Ｓ）−３−（テトラヒドロピラン−２−イルオキシメチル）シクロヘキシルメトキシ］酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（５０.４ｇ）の溶液に−７８℃で加え、その間、温度を−５５℃以上に上げない様にした。溶液をこの温度で１０分間撹拌し、次いで０℃に温め、そして更に１５分間この温度で撹拌した。その後、溶液を再び−７８℃に冷却し、ヨウ化メチルを滴下しながら加えた。溶液を０℃に温め、次いで、ＮＨ４Ｃｌ飽和溶液、酢酸エチルを加えた。相を分離し、有機相をＮＨ４Ｃｌ飽和溶液で洗浄し、集めた水相をもう１回酢酸エチルで抽出し、次いで集めた有機相を塩化ナトリウム飽和溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。
２ＭのリチウムジイソプロピルアミドのＴＨＦ溶液を、この様にして得られた残留物のＴＨＦ（５５０ｍｌ）溶液に、−７８℃で加え、その間、温度は−５５℃以上には上げなかった。溶液をこの温度で１０分間撹拌し、次いで−１０℃に温め、この温度で更に１５分間撹拌し、その後溶液を再び−７８℃に冷却し、ヨウ化メチル（３４.３ｍｌ）を滴下
しながら加えた。溶液を−１０℃に温め、ＮＨ４Ｃｌ飽和溶液及び酢酸エチルを加えた。相を分離し、有機相をＮＨ４Ｃｌ飽和溶液で洗浄し、集めた水相を、酢酸エチルでもう１回抽出し、集めた有機相を塩化ナトリウム飽和溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。残留物をシリカゲル（ヘプタン／酢酸エチル勾配）上でのクロマトグラフィーで精製し、［（１Ｒ，３Ｓ）−３−（テトラヒドロピラン−２−イルオキシメチル）シクロヘキシルメトキシ］プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３１.４ｇ）を褐色の油状物質として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ＝４.４９−４.５３（ｍ，１Ｈ）；３.６７−３.７４（ｍ，１Ｈ）；３.３９−３.４６（ｍ，２Ｈ）；３.０５−３.１７（ｍ，３Ｈ）；１.６５−１.８６（ｍ，６Ｈ）；１.３５−１.６２（ｍ，６Ｈ）；１.４１（ｓ，９Ｈ）；１.１５−１.３０（ｍ，１Ｈ）；１.２６（ｓ，６Ｈ）；０.７７−０.９１（ｍ，２Ｈ）；０.５５−０.６７（ｍ，１Ｈ）。
【０１０１】
２−（（１Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化２８】
2008509894.tif 000037
２−メチル−２−［（１Ｒ，３Ｓ）−３−（テトラヒドロピラン−２−イルオキシメチル）シクロヘキシルメトキシ］プロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３１.４ｇ）をイソプロパノール（１１５ｍｌ）に溶解し、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１.６１ｇ）を加えた後、室温で７８の間撹拌した。引き続いて、ＮａＨＣＯ３飽和溶液を、ｐＨ試験紙で反応液が中性になるまで加えた。大部分の溶媒を留去した。水性の残留物を水及びＭＴＢＥに取り込んだ。水相を分離し、ＭＴＢＥで３回抽出した。集めた有機相を水、ＮａＣｌ飽和溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮し、残留物をシリカゲル（ヘプタン／酢酸エチル＝１０／１）上でのクロマトグラフィーで精製し、２−（（１Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１４.９ｇ）を黄色の油状物質として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ＝４.３２（ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，１Ｈ）；３.６７−３.７４（ｍ，２Ｈ）；３.０５−３.１２（ｍ，２Ｈ）；１.７６−１.８３（ｍ，１Ｈ）；１.６６−１.７５（ｍ，２Ｈ）；１.１５−１.５０（ｍ，４Ｈ）；１.４１（ｓ，９Ｈ）；１.２７（ｓ，６Ｈ）；０.７１−０.８８（ｍ，２Ｈ）；０.４８−０.５７（ｍ，１Ｈ）。
【０１０２】
２−｛（１Ｒ，３Ｓ）−３−［５−イソプロピル−２−（３−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化２９】
2008509894.tif 000038
２−（（１Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１００ｍｇ）をＭＴＢＥ（２ｍｌ）に溶解し、水素化ナトリウム（鉱物油中６０％）（２１ｍｇ）を加えた。ガス放出が止まった後、２−（３，４−ジメチルフェニル）−４−ヨードメチル−５−イソプロピルオキサゾール（２４８ｍｇ）を加え、溶液を還流下で終夜加熱した。水を加えた後、相を分離し、有機相を珪藻土カートリッジ (Separtis)で乾燥し、濾液を濃縮した。残留物をＣＨ２Ｃｌ２／ＴＦＡ＝３／１に取り込み、終夜放置した。溶液を完全に濃縮し、残留物を分取型ＨＰＬＣで精製し、２−｛（１Ｒ，３Ｓ）−３−［５−イソプロピル−２−（３−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸（３１ｍｇ）を得た。
Ｃ２７Ｈ３９ＮＯ５（４５７.６２）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：４５８.３２［ＭＨ+］。
【０１０３】
〔実施例１３〕
２−［（１Ｒ，３Ｓ）−３−（２−ビフェニル−４−イル−５−メチルオキサゾール−４−イルメトキシメチル）シクロヘキシルメトキシ］−２−メチルプロピオン酸
【化３０】
2008509894.tif 000039
２−［（１Ｒ，３Ｓ）−３−（２−ビフェニル−４−イル−５−メチルオキサゾール−４−イルメトキシメチル）シクロヘキシルメトキシ］−２−メチルプロピオン酸を、２−（（１Ｓ，３Ｒ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル及び２−ビフェニル−４−イル−４−ヨードメチル−５−メチルオキサゾールから実施例１２と類似の方法で得た。
Ｃ２９Ｈ３５ＮＯ５（４７７.２５）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：４７８.３０［ＭＨ+］。
【０１０４】
〔実施例１４〕
２−｛（１Ｒ，３Ｓ）−３−［５−イソプロピル−２−（ナフタ‐２−イル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化３１】
2008509894.tif 000040
２−｛（１Ｒ，３Ｓ）−３−［５−イソプロピル−２−（ナフタ−２−イル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸を、２−（（１Ｓ，３Ｒ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル及び４−ヨードメチル−５−イソプロピル−２−（ナフタ−２−イル）オキサゾールから実施例１２と類似の方法で得た。
Ｃ２９Ｈ３７ＮＯ５（４７９.２７）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：４８０.３０［ＭＨ+］。
【０１０５】
〔実施例１５〕
２−｛（１Ｒ，３Ｓ）−３−［５−イソプロピル−２−（３−メトキシフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化３２】
2008509894.tif 000041
２−｛（１Ｒ，３Ｓ）−３−［５−イソプロピル−２−（３−メトキシフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸を、２−（（１Ｓ，３Ｒ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル及び４−ヨードメチル−５−イソプロピル−２−（３−メトキシフェニル）オキサゾールから実施例１２と類似の方法で得た。
Ｃ２５Ｈ３５ＮＯ６（４４５.５６）：ＬＣＭＳ（ＥＳ−）：４４４.１４［Ｍ−Ｈ+］。
【０１０６】
〔実施例１６〕
２−｛（１Ｒ，３Ｓ）−３−［５−イソプロピル−２−（３−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化３３】
2008509894.tif 000042
２−｛（１Ｒ，３Ｓ）−３−［５−イソプロピル−２−（３−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸を、２−（（１Ｓ，３Ｒ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル及び４−ヨードメチル−５−イソプロピル−２−（３−トリフルオロメチルフェニル）オキサゾールから、実施例１２と類似の方法で得た。
Ｃ２６Ｈ３４Ｆ３ＮＯ５（４９７.２４）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：４９８.４２［ＭＨ+］。
【０１０７】
〔実施例１７〕
２−｛（１Ｒ，３Ｓ）−３−［２−（４−イソブチルフェニル）−５−イソプロピルオキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化３４】
2008509894.tif 000043
２−｛（１Ｒ，３Ｓ）−３−［２−（４−イソブチルフェニル）−５−イソプロピルオキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸を、２−（（１Ｓ，３Ｒ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル及び４−ヨードメチル−２−（４−イソブチルフェニル）−５−イソプロピルオキサゾールから、実施例１２と類似の方法で得た。
Ｃ２９Ｈ４３ＮＯ５（４８５.６７）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：４８６.４２［ＭＨ+］。
【０１０８】
〔実施例１８〕
２−｛（１Ｒ，３Ｓ）−３−［２−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５−イソプロピルオキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化３５】
2008509894.tif 000044
２−｛（１Ｒ，３Ｓ）−３−［２−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５−イソプロピルオキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸を、２−（（１Ｓ，３Ｒ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル及び４−ヨードメチル−２−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５−イソプロピルオキサゾールから実施例１２と類似の方法で得た。
Ｃ２９Ｈ４３ＮＯ５（４８５.６７）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：４８６.３４［ＭＨ+］。
【０１０９】
〔実施例１９〕
２−［（１Ｒ，３Ｓ）−３−（５−エチル−２−ナフタレン−２−イル−オキサゾール−４−イルメトキシメチル）シクロヘキシルメトキシ］−２−メチルプロピオン酸
【化３６】
2008509894.tif 000045
２−［（１Ｒ，３Ｓ）−３−（５−エチル−２−ナフタレン−２−イルオキサゾール−４−イルメトキシメチル）シクロヘキシルメトキシ］−２−メチルプロピオン酸を、２−（（１Ｓ，３Ｒ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル及び５−エチル−４−ヨードメチル−２−ナフタレン−２−イル−オキサゾールから実施例１２と類似の方法で得た。
Ｃ２８Ｈ３５ＮＯ５（４６５.５９）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：４６６.３１［ＭＨ+］。
【０１１０】
〔実施例２０〕
２−メチル−２−｛（１Ｒ，３Ｓ）−３−［５−メチル−２−（４−フェノキシフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝プロピオン酸
【化３７】
2008509894.tif 000046
２−メチル−２−｛（１Ｒ，３Ｓ）−３−［５−メチル−２−（４−フェノキシフェニル）オキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝プロピオン酸を、２−（（１Ｓ，３Ｒ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル及び４−ヨードメチル−５−メチル−２−（４−フェノキシフェニル）オキサゾールから実施例１２と類似の方法で得た。
Ｃ２９Ｈ３５ＮＯ６（４９３.６１）：ＬＣＭＳ（ＥＳＩ）：４９４.２９［ＭＨ+］。
【０１１１】
〔実施例２１〕
２−｛（１Ｒ，３Ｓ）−３−［２−（３，４−ジメチルフェニル）−５−エチルオキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸
【化３８】
2008509894.tif 000047
２−｛（１Ｒ，３Ｓ）−３−［２−（３，４−ジメチルフェニル）−５−エチルオキサゾール−４−イルメトキシメチル］シクロヘキシルメトキシ｝−２−メチルプロピオン酸を、２−（（１Ｓ，３Ｒ）−３−ヒドロキシメチルシクロヘキシルメトキシ）−２−メチルプロピオン酸ｔｅｒｔ−ブチル及び２−（３，４−ジメチルフェニル）−５−エチル−４−ヨードメチルオキサゾールから実施例１２と類似の方法で得た。
Ｃ２６Ｈ３７ＮＯ５（４４３.５９）：ＬＣＭＳ（ＥＳ−）：４４２.２０［Ｍ−Ｈ+］。
【国際調査報告】
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