(57)【要約】  特性解析しようとする分子を含む液体溶液を収容している第１リザーバー及び特性解析済みの分子を含む液体溶液を収容するための第２リザーバーが設けられている。第１リザーバーへの流体接続を与える分子入口及び第２リザーバーへの流体接続を与える分子出口を有するアパーチャを含む固体状態支持構造物が設けられている。第１及び第２電子輸送プローブの各々が前記支持構造物上に設けられており、表面はアパーチャの外周に接している。プローブの少なくとも１つはフラーレン構造物（例えば、カーボンナノチューブ）からなる。電圧源が電圧バイアスをアパーチャを横切って印加するためにプローブ間に接続されている。電流モニターがアパーチャを介する分子の移動に対応するプローブ間の電子輸送の変化をモニターするためにプローブ間に接続されている。【選択図】図１Ｃ
2008536124.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
特性解析しようとする分子を含む液体溶液を収容している第１リザーバー；
特性解析済みの分子を含む液体溶液を収容するための第２リザーバー；
第１リザーバーに流体接続を与える分子入口及び第２リザーバーに流体接続を与える分子出口を有するアパーチャを含む固体状態支持構造物；
第１及び第２電子輸送プローブであって、そのプローブの少なくとも１つはフラーレン構造物からなり、各プローブは支持構造物上に配置されており且つアパーチャの外周に接している表面を有している、プローブ；
電圧バイアスをアパーチャを横切って印加するためのプローブ間に接続されている電圧源；及び
アパーチャを通過する分子の移動に対応するプローブ間の電子輸送の変化をモニターするためにプローブ間に接続されている電流モニター；
を含む分子特性解析デバイス。
【請求項２】
特性解析しようとする分子が生体分子からなる請求項１に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項３】
分子がポリマー分子からなる請求項１に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項４】
分子がバイオポリマー分子からなる請求項１に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項５】
分子がタンパク質、ポリ核酸、ＤＮＡ及びＲＮＡからなる群から選択される請求項４に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項６】
特性解析しようとする分子がカーボンナノチューブにカップリングしている分子からなる請求項１に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項７】
カーボンナノチューブにカップリングしている分子がカーボンナノチューブにカップリングしているＤＮＡの少なくとも１本の鎖からなる請求項６に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項８】
カーボンナノチューブにカップリングしている分子がカーボンナノチューブにカップリングしているＲＮＡの少なくとも１本の鎖からなる請求項６に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項９】
分子がカップリングしているカーボンナノチューブが、該ナノチューブをアパーチャを通って移動させるために片持ち式作動チップに接続されている請求項６に記載の分子特性解析デバイス
【請求項１０】
第１及び第２電子輸送プローブの各々がフラーレン構造物からなる請求項１に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項１１】
フラーレン構造物がカーボンナノチューブからなる請求項１０に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項１２】
カーボンナノチューブが半導体ナノチューブからなる請求項１１に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項１３】
カーボンナノチューブが金属ナノチューブからなる請求項１１に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項１４】
カーボンナノチューブが単層ナノチューブからなる請求項１１に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項１５】
カーボンナノチューブ電子輸送プローブの少なくとも１つが、ナノチューブ端部がアパーチャ外周に接する向きに置かれている請求項１１に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項１６】
カーボンナノチューブ電子輸送プローブの各々が、ナノチューブ端部がアパーチャ外周に接する向きに置かれている請求項１５に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項１７】
カーボンナノチューブ電子輸送プローブの少なくとも１つが、ナノチューブ側面がアパーチャ外周に接する向きに置かれている請求項１１に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項１８】
カーボンナノチューブ電子輸送プローブの１つが、ナノチューブ端部がアパーチャ外周に接する向きに置かれており、カーボンナノチューブ電子輸送プローブの１つが、ナノチューブ側面がアパーチャ外周に接する向きに置かれている請求項１７に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項１９】
カーボンナノチューブ電子輸送プローブの１つが、第１ナノチューブ端部が分子入口でアパーチャ外周に接する向きに置かれており、第２ナノチューブ端部が分子出口でアパーチャ外周に接する向きに置かれている請求項１１に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項２０】
カーボンナノチューブ電子輸送プローブの少なくとも１つが、分子がアパーチャを通って移動しながらカップリングし得るナノチューブ表面がアパーチャ外周に接する向きに置かれている請求項１１に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項２１】
分子が、アパーチャを通って移動しながらナノチューブ表面にカップリングし得るヌクレオシド塩基からなる請求項２０に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項２２】
更に、支持構造物上に配置されており、分子がカップリングし得る表面が分子入口でアパーチャ外周に接している分子移動速度コントロールナノチューブを含む請求項１１に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項２３】
アパーチャが支持構造物の厚さを貫いて延びる細孔からなり、該細孔は一度に１つの分子しかその細孔を通って移動できないくらい十分に小さい直径を有している請求項１に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項２４】
細孔が約１００ｎｍ未満の直径を有するナノ細孔からなる請求項２３に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項２５】
ナノ細孔が約５０ｎｍ未満の直径を有する請求項２４に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項２６】
ナノ細孔が約２０ｎｍ未満の直径を有する請求項２５に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項２７】
ナノ細孔が約１０ｎｍ未満の直径を有する請求項２６に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項２８】
アパーチャが電気絶縁材料層で被覆されている請求項１に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項２９】
電子輸送プローブがアパーチャ外周に接している部分を除いて電気絶縁材料層で被覆されている請求項１に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項３０】
支持構造物がアパーチャが設けられている電気絶縁膜からなる請求項１に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項３１】
膜が窒化ケイ素膜からなる請求項３０に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項３２】
プローブ間に接続されている電流モニターが、アパーチャを通過する分子の移動に対応するプローブ間の電子トンネリングの変調を検出するように構成されている請求項１に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項３３】
特性解析しようとする分子−ナノチューブ複合体中のカーボンナノチューブにカップリングしている少なくとも１つの分子を含む液体溶液を収容している第１リザーバー；
特性解析済みの分子−ナノチューブ複合体を含む液体溶液を収容するための第２リザーバー；
第１リザーバーに対して流体接続を与える分子入口及び第２リザーバーに対して流体接続を与える分子出口を有するアパーチャを含む固体状態支持構造物；
アパーチャを通過する分子−ナノチューブ複合体の移動を検出するためのアパーチャに対する電気接続；
を含む分子特性解析デバイス。
【請求項３４】
アパーチャに対する電気接続が、分子−ナノチューブ複合体がアパーチャを通って移動するときのアパーチャを通るイオン電流の遮断を検出するように構成されている請求項３３に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項３５】
アパーチャが一度に１つの分子−ナノチューブ複合体しか細孔を通って移動できないくらい十分に小さい直径を有する細孔からなる請求項３３に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項３６】
カーボンナノチューブにカップリングしている分子がタンパク質、ポリ核酸、ＤＮＡ及びＲＮＡからなる群から選択されるポリマー生体分子からなる請求項３３に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項３７】
アパーチャへの電気接続が、第１及び第２電子輸送プローブからなり、その各プローブがアパーチャの外周に接して支持構造物上に設置されている請求項３３に記載の分子特性解析デバイスであって、
更に、電圧バイアスをアパーチャを横切って印加するためにプローブ間に接続されている電圧源、及び
アパーチャを通過する分子−ナノチューブ複合体の移動に対応するプローブ間の電子輸送の変化をモニターするためにプローブ間に接続されている電流モニターを含む、
分子特性解析デバイス。
【請求項３８】
電子輸送プローブの少なくとも１つがフラーレン構造物からなる請求項３７に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項３９】
電子輸送プローブの各々がカーボンナノチューブからなる請求項３８に記載の分子特性解析デバイス。
【請求項４０】
分子を、特性解析しようとする分子を含む液体溶液を収容している第１リザーバーから特性解析済みの分子を含む液体溶液を収容するための第２リザーバーに、支持構造物中のアパーチャを通って移動させ、
分子をカーボンナノチューブの表面にカップリングさせ、
アパーチャの外周にそれぞれ接している２つの電子輸送プローブ間の、アパーチャを通過する分子の移動に対応するアパーチャを横切る電子輸送の変化をモニターする
ことを含む分子特性解析方法。
【請求項４１】
分子がアパーチャを通って移動するときに、分子がカーボンナノチューブの表面にカップリングする、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
分子がカップリングするカーボンナノチューブ表面がアパーチャの外周に接している請求項４０に記載の方法。
【請求項４３】
分子がカップリングするカーボンナノチューブ表面が、第１リザーバーと流体接続状態にあるアパーチャへの分子入口でアパーチャの外周に接している請求項４０に記載の方法。
【請求項４４】
分子がカップリングするカーボンナノチューブ表面がナノチューブ端部である請求項４０に記載の方法。
【請求項４５】
分子をカップリングさせるカーボンナノチューブ表面がナノチューブ側面である請求項４０に記載の方法。
【請求項４６】
更に、アパーチャを通過する分子移動速度をコントロールするために液体溶液に対するナノチューブの電圧バイアスを一時的にコントロールすることを含む請求項４０に記載の方法。
【請求項４７】
電子輸送プローブの各々がカーボンナノチューブからなる請求項４０に記載の方法。
【請求項４８】
分子がＤＮＡヌクレオシド塩基からなり、ＤＮＡ塩基のカーボンナノチューブ表面へのカップリングがナノチューブ表面に対して塩基を空間的に配向させる請求項４０に記載の方法。
【請求項４９】
分子がＲＮＡヌクレオシド塩基からなり、ＲＮＡ塩基のカーボンナノチューブ表面へのカップリングがナノチューブ表面に対して塩基を空間的に配向させる請求項４０に記載の方法。
【請求項５０】
分子のカーボンナノチューブ表面へのカップリングが、まずアパーチャ分子入口でアパーチャ外周に接している第１カーボンナノチューブの表面に分子をカップリングさせ、次いで電子輸送プローブとして構成した第２カーボンナノチューブの表面に分子をカップリングさせることを含む請求項４０に記載の方法。
【請求項５１】
分子を液体溶液中のカーボンナノチューブにカップリングさせて、分子−ナノチューブ複合体を形成し；
カップリングさせた分子−ナノチューブ複合体を、特性解析しようとするカップリングさせた分子−ナノチューブ複合体を含む液体溶液を収容する第１リザーバーから特性解析済みの分子−ナノチューブ複合体を含む液体溶液を収容するための第２リザーバーに、支持構造物中のアパーチャを通って移動させ；
アパーチャを通過する分子−ナノチューブ複合体の移動を検出すること
を含む分子特性解析方法。
【請求項５２】
分子−ナノチューブ複合体の移動の検出が、分子−ナノチューブ複合体がアパーチャを通って移動するときのアパーチャを通るイオン電流の遮断の検出を含む請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
分子−ナノチューブ複合体の移動の検出が、支持構造物上に配置されており、各々がアパーチャの外周に接する表面を有している２つの電子輸送プローブ間の電子輸送の変化を、電圧バイアスをアパーチャを横切って印加しながらモニターすることを含む請求項５１に記載の方法。
【請求項５４】
カーボンナノチューブにカップリングさせる分子がタンパク質、ポリ核酸、ＤＮＡ及びＲＮＡからなる群から選択されるポリマー生体分子からなる請求項５１に記載の方法。
【請求項５５】
分子を、特性解析しようとする分子を含む液体溶液を収容する第１リザーバーから特性解析済みの分子を含む液体溶液を収容するための第２リザーバーに、支持構造物中のアパーチャを通って移動させ；
分子をカーボンナノチューブの表面にカップリングさせ；
アパーチャを通過する分子の移動に対応するナノチューブのコンダクタンスの変化をモニターすることを含む
分子特性解析方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、包括的には分子の検出及び同定に関し、より具体的にはポリヌクレオチドのようなバイオポリマーを含めたポリマーを特性解析(characterization)及び配列決定するための分子分析技術に関する。
【背景技術】
【０００２】
生体分子、例えばバイオポリマー核酸分子ＤＮＡ、ＲＮＡ及びペプチド核酸（ＰＮＡ）のようなポリヌクレオチド及びタンパク質、並びに他の生物学的分子を含めた分子の検出、特性解析、同定及び配列決定は重要で広がりつつある研究の分野である。現在、ポリマー分子のハイブリダイゼーション状態、立体配置、モノマースタッキング及び配列を迅速に、信頼性をもって安価な方法で調べることができる方法が非常に要望されている。ポリマー合成及び作成の進歩及び生物学的開発及び医薬の進歩、特に遺伝子治療、新しい医薬品の開発及び適切な治療の患者へのマッチングの分野での進歩が前記方法にかなり依存している。
【０００３】
分子分析のための１つの方法では、分子（例えば、核酸及びタンパク質）が天然または合成のナノスケールの細孔、すなわちナノ細孔を通って輸送され得ること及び分子の同定、ハイブリダイゼーション状態、他の分子との相互作用、配列（すなわち、ポリマーを構成するモノマーのポリマー鎖上の順序）を含めた分子の特性解析は、ナノ細孔を通過する輸送により、その輸送中に識別され得ることが判明した。分子のナノ細孔を通過しての輸送は、例えば電気泳動または他の移動（トランスロケーション(translocation)）メカニズムにより達成され得る。
【０００４】
ナノ細孔の寸法が伸びた核酸分子が移動中ナノ細孔の断面積の大部分を占めているようであるならば、ポリマー分子は少なくとも２つのメカニズムによって、ナノ細孔を通過する輸送により、その輸送中に特性解析され得る。前記したメカニズムの第１では、移動分子は、ナノ細孔の各端部に接触している２つの仕切られた液体イオン含有溶液間に電圧を印加することにより発生するイオン電流を一時的に減らしたり遮断する。前記したメカニズムの第２では、移動分子は、ナノスケールの空隙を生ずるように配置されている２つの近接した局所プローブ間にバイアスを印加することにより発生するトンネル電子電流を含めた電子電流を、ナノ細孔の外周の並置点または非常に短いナノ細孔の対向する端部で一時的に変化させる。ナノ細孔を通過中にポリマー中の各ヌクレオチドがイオン電流または電子電流の特性解析上明確な変調をもたらすならば、その得られたイオン電流または電子電流の変調シーケンスが移動ポリマー分子の特性を反映し得る。
【０００５】
理想的には、すでに提案されている他の技術と同様に上記した分子分析技術は１回のモノマー分割で分子特性解析できなければならない。生体分子の配列決定用途のような信頼できる用途のためには個々のモノマー特性の明白な解明が重要である。しかしながら、分子検出及び分析のアスペクトは通常幾つかあるために、上記した可能性は実際達成困難である。
【０００６】
第１に、分子配向に関して、分子を特性解析する速度（例えば、ヌクレオチドの配列を検出する速度）は有用な分子特性解析シグナルの発生に影響を及ぼす恐れがある。１つのモノマーから次のモノマーへの特性解析シグナルまたは他の指標の変化を識別する能力はヌクレオチドを特性解析する速度に対して非常に敏感であり得る。例えば、ヌクレオチドがナノ細孔を通って輸送される速度は該ヌクレオチドに起因するイオン電流遮断または電子電流変調の程度に影響を与える恐れがあり、またはナノ細孔でのイオン電流測定またはトンネル電流測定に典型的な非常に小さいピコ−またはナノアンペア電流を検出するように製作され得る測定機器のバンド幅を超える恐れがある。
【０００７】
第２に、特性解析するときの所与のヌクレオチドの物理的配向は該ヌクレオチドの特性の検出に影響を及ぼす恐れがある。この問題は、ナノスケールの空隙を生ずるように配向された２つの近接する局所プローブ間の電子電流の変調を検知しようとするときに特に深刻である。２つの近接するプローブ間のトンネル電流を含めた電子電流の変調は２つのプローブ間の距離の原子スケールの変化または２つのプローブ間の分子の正確な配向に対して特に敏感であることが公知である。よって、例えばＤＮＡ鎖内のそれぞれ互い違いのヌクレオチド配向は異なる検出及び特性解析シグナルまたは他の指標が発生し得、前記シグナルは複数のヌクレオチドまたは複数の分子特徴にとって曖昧なことがある。例えば、位置特異的限界アスペリティ(location-specific limiting asperity)を有するナノ細孔を通過するときのヌクレオチドの配向は、アスペリティの位置での該ヌクレオチドに起因する電子電流変調を変更させ得る。各種ヌクレオチド及び各種分子属性により、ナノ細孔を通って輸送されるときのその配向に応じて類似または区別不能な電子電流変調が生じ得る。これらの例は、概して、速度コントロール及びナノスケールの空間配向という難問により正確で高解像度の分子特性解析（例えば、バイオポリマー配列決定）を達成する能力が制限されることを示している。
【発明の開示】
【０００８】
本発明は、ナノ細孔を通って移動する分子のモノマーを配向させる特性解析デバイス及び特性解析方法を提供することにより従来の分子特性解析技術の速度コトロール及び配向コントロールの問題を解決する。本発明の分子特性解析デバイスの１例では、特性解析しようとする分子を含む液体溶液を収容している第１リザーバー及び特性解析済みの分子を含む液体溶液を収容するための第２リザーバーが設けられている。第１リザーバーに対して流体接続(fluidic connection)を与える分子入口及び第２リザーバーに対して流体接続を与える分子出口を有するアパーチャ(aperture)を含む固体状態支持構造物が設けられている。
【０００９】
分子特性解析デバイスには、第１及び第２電子輸送プローブが設けられている。プローブの少なくとも１つはフラーレン構造物（例えば、カーボンナノチューブ）からなり、両プローブをカーボンナノチューブとして設けてもよい。プローブの各々は支持構造物上に配置されており、アパーチャの外周(perimeter)に接する表面を有している。電圧源は、電圧バイアスをアパーチャを横切って印加するためにプローブ間に接続されている。電流モニターは、アパーチャを通過する分子の移動に対応するプローブ間の電子輸送の変化をモニターするためにプローブ間に接続されている。
【００１０】
この分子特性解析デバイス及び特性解析技術により、広範囲の分子及び分子立体配置を迅速に、信頼性をもって且つ再現可能で単純に特性解析することができる。本発明の他の特徴及び作用効果は以下の説明及び添付図面、請求の範囲から明らかであろう。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
図１Ａを参照すると、本発明が提供する分子特性解析デバイス１０の実施形態の第１例を概略的に示す。論議を明瞭とするために、図１に示すデバイスの形状構成は一定の縮尺で示されていない。図１Ａに示すように、デバイスでは支持構造物１４中にナノスケールのアパーチャ、すなわちナノ細孔１２が設けられている。支持構造物の第１側に特性解析しようとする分子を含む液体溶液を収容している第１液体区画１６、すなわちリザーバーがあり、支持構造物の反対側に特性解析済みの分子をナノ細孔を通って移動することにより輸送させる第２液体区画１８、すなわちリザーバーがある。アパーチャへの入口の分子入口は第１リザーバー１６とアパーチャ間の流体連通(fluidic communication)を与え、アパーチャの出口の分子出口はアパーチャと第２リザーバー１８間の流体連通を与える。
【００１２】
本発明の分析デバイスにより可能な分子特性解析には、例えば配列決定、ハイブリダイゼーション検出、分子相互作用検出及び分析、立体配置検出及び他の分子特性解析を含めた広範囲の分析が含まれる。特性解析しようとする分子は一般的には任意の分子であり、この中にはポリマー及び生体分子（例えば、タンパク質、ポリヌクレオチドＤＮＡやＲＮＡのような核酸、糖ポリマー及び他の生体分子）が含まれる。この図に示す１つの用途において、特性解析しようとする分子は、例えば各一本鎖ＤＮＡ分子（ｓｓＤＮＡ）骨格に沿った塩基の配列の同一性を調べることにより特性解析しようとする、ヌクレオシド塩基２２の配列を有するｓｓＤＮＡ２０を含む。論議を明瞭とするために、この配列決定の例を以下の説明で使用するが、これが本発明の分子特性解析デバイスの排他的用途ではない。加えて、下記する配列決定操作はＤＮＡの例に限定されない。ポリヌクレオチドＲＮＡも同様に特性解析され得る。従って以下の論議は特定の実行例に限定することを意図せず、分子特性解析のための広範囲の実施形態の１例の詳細を与えているにすぎない。
【００１３】
図１Ａの分子特性解析デバイスの操作において、２つの液体区画１６，１８に図中に「−」及び「＋」と付した電圧バイアスを印加すると、第１区画１６中に含まれる分子（例えば、ｓｓＤＮＡ分子）は一つずつ電気泳動的にナノ細孔に入り、細孔を通って第２区画１８に追いやられる。これは、溶液中ではＤＮＡ骨格が負に荷電しているからである。この電圧バイアスは、例えば２つの区画１６，１８の溶液中にそれぞれに浸漬させた塩化銀電極１７，１９及び各溶液の電圧をコントロールするための対応の電圧源２１，２３を設けることにより加えられ得る。ナノ細孔を通して輸送させる前に第１区画１６中のＤＮＡ鎖を構造化されていない一本鎖形態で維持するためには、以下に詳細に説明するように高ｐＨまたは特定の変性剤を含む電解溶液を使用する。
【００１４】
支持構造物１４中のナノ細孔１２の位置に、移動ＤＮＡ分子中のヌクレオシドを局所電子輸送測定法により直接電子的に特性解析するために電気接触しているプローブ２４，２６が設けられている。プローブ２４，２６は、ナノ細孔の外周上の任意の点（例えば、ナノ細孔外周の対向する点）でナノ細孔１２と接している２つのナノスケールの電極として役立つ。プローブ２４，２６は、プローブ間の選択電圧バイアスをナノ細孔１２を横切って加えるために外部電気回路２８において電圧源３０と接続している。分子を含有する電解溶液がプローブ間のナノ細孔を通過することを考慮すると、支持構造物が電気絶縁性構造物として設けられており、図１Ａに示すようにナノ細孔１２の外周に接しているプローブの先端部または非常に小さな局所領域を除いてプローブを電気的に絶縁させるために電気絶縁層１５すなわち支持構造物領域が設けられていることが好ましい。こうした電気絶縁条件により、プローブ間に選択した電圧バイアスを印加することができる。
【００１５】
ナノ細孔がナノスケールの空隙であるならば、プローブ２４，２６間に電圧バイアスを印加すると電子が２つのプローブ間のナノ細孔を横切って輸送されてプローブ回路２８が完成する。分子（例えば、ｓｓＤＮＡヌクレオシド塩基３２）がプローブ２４，２６間のナノ細孔１２中に位置していると、前記塩基の原子構造がナノ細孔を横切る電子輸送に影響を与える。ヌクレオチドに関連する電流を測定するために電流計３４または他の電流測定デバイスが回路２８中に設けられている。このようにして、ナノスケールのアパーチャを通って移動する分子が特性解析され得る。この例では、ｓｓＤＮＡ分子に沿ったヌクレオチドの各々が明白に特性解析（例えば、同定）され得る。
【００１６】
ナノスケールのアパーチャ（例えば、ナノ細孔１２）の場合、ナノ細孔における絶縁ＤＮＡ分子または他の分子及び局所電解液環境を用いる主たる電子輸送メカニズムは多くの用途で量子力学的電子トンネリングであると理解される。本明細書中、用語「トンネリング」は、ナノ細孔中の分子の存在により変調されるナノ細孔を横切るあらゆるタイプの電子輸送（例えば、電子状態から電子状態への「ホッピング」）及び他の輸送を指す。電子輸送は局所原子構造に対して非常に感受性であることは公知であり、従って明白に特性解析するため（例えば、ヌクレオシド塩基を同定するために）うまく適合している。しかし、ナノ細孔を横切る電子トンネルの代わりにまたはそれに加えて他の電子輸送メカニズムが存在し得、分子特性解析（例えば、ＤＮＡ配列決定操作）のために利用され得る。例えば、誘起電荷効果、非弾性電子輸送またはＤＮＡ分子骨格の長さの一部に沿った輸送に関連するメカニズムも使用され得、ヌクレオシド塩基がナノ細孔を通って輸送されるとき異なるヌクレオチド原子構造物を識別するために十分な感度を与えると理解される。
【００１７】
どんな電子輸送メカニズムが起ころうとも、外部回路２８により検知される電流はｓｓＤＮＡ分子２０がナノ細孔１２を通って移動するとき個々のヌクレオシド塩基２２により変調される。この個々のヌクレオチドの特性解析は、ナノ細孔の幾何学的構造により可能となり、これにより、ヌクレオチドが、プロープ２４，２６間のナノスケールのアパーチャを厳密に逐次的に一列で通ることになる。走査トンネル顕微鏡チップと表面間の電子流が表面上の原子を同定できるので、プローブ間の電子流を測定するとヌクレオチドが同定される。よって、プローブ間に電圧バイアスを印加すると移動分子のトランスバース電気伝導度を動的に検知することができる。
【００１８】
このトランスバース電気伝導度は、上記した電子トンネリングまたは他の電子輸送メカニズムにより本発明に従って検知することができる。本発明は、特定の電子輸送メカニズムに限定されない。以下の論議において、電子トンネリングの電子輸送メカニズムを言及しているが、本発明はこれに限定されない。トンネル顕微鏡での典型的な電子電流はナノアンペアである。こうした比較的高い電子電流及び付随する比較的大きい信号／雑音比はプローブが接続されている外部回路２８を用いて生じ得る。
【００１９】
ここでプローブ２４，２６の詳細に転ずると、プローブの少なくとも１つはフラーレン構造物（例えば、カーボンナノチューブ）として設けられている。本明細書中、用語「フラーレン構造物」は炭素原子の規則的な六角形(hexagonal)及び五角形(pentagonal)群(groups)から構成されるケージ様中空分子構造物を指す。プローブの１つを金属導体として設けてもよいが、多くの用途でプローブ２４，２６の両方をフラーレン構造物（例えば、カーボンナノチューブ）として設置することが好ましい。カーボンナノチューブは主に炭素原子の六角形群から構成される中空管である。単層カーボンナノチューブ（ＳＷＮＴ）は、結晶性の六方晶系フラーレン原子構造を有するグラファイトを筒状に巻いた一層のシートから構成される一次元のチューブである。７Åほどの小さい直径及びサブミクロン〜ミリメートルの長さを有するカーボンナノチューブが合成され得る。カーボンナノチューブは極度に高い機械的強さと化学的安定性を特徴とし、グラファイトの高い電気伝導性または半導体のバンドギャップを持った電子構造を示すように選択され得る。よって、カーボンナノチューブの結晶性構造により、水性環境およびナノ細孔の高い局所的電場条件に耐えることができる明確で所定の規則的な強いモルホロジーが得られる。多くの用途に対して、金属導体はそのようにすると予想されないこともある。
【００２０】
加えて、カーボンナノチューブの電気的特性が原子スケールの摂動に対して非常に感受性であるので、ナノチューブは、ナノ細孔を通って移動する４つの異なるＤＮＡヌクレオシド塩基を電子的に区別するための好ましいナノスケールのプローブである。具体的には、ナノチューブにカップリングしているＤＮＡまたはＲＮＡヌクレオシドのファンデルワールス相互作用及びＤＮＡまたはＲＮＡヌクレオシドの電気的特性は、ナノチューブの自由電荷キャリア濃度及び電荷キャリアエネルギーレベルの位置並びに対応する導電率に影響を及ぼすことによりナノチューブの電子的特性に大きく影響を与え得る。従って、カップリングさせたＤＮＡ塩基−ナノチューブハイブリッドのナノチューブ部分の電子特性は、分析されたＤＮＡ塩基間の測定可能なコントラストを測定する際に配列決定しようとする分子、分子−ナノチューブハイブリッドの付近の局所環境、及びナノチューブプローブ及びｓｓＤＮＡ電解溶液に印加される電圧により確立される電気条件くらい重要な役割を果たす。
【００２１】
図１Ａのナノチューブプローブ配置の例では、ナノ細孔は、ナノチューブ端部がナノ細孔を横切る電子輸送のための電子源及びシンクとして役立ち得るように単一ナノチューブの切断端部間または２つのナノチューブ間の端部間で安定な電子輸送空隙を与える。この配置では、個別のヌクレオシド塩基構造のナノスケールの分割が直接達成され得、その電気特性により配列を含めたポリヌクレオチドの多くのアスペクトを検出し、特性解析することができる。ナノチューブを合成し、ナノチューブプローブ配置を製作するための技術の例を以下に詳記する。
【００２２】
ナノチューブプローブは金属性または半導体構造物として設けられ得るが、多くの用途のためには合理的なプローブ電圧バイアスで測定可能な電子輸送電流が生じ得るように小空隙の半導体ナノチューブプローブが好ましい。単層ナノチューブプローブ構造物も好ましいこともある。本発明ではナノ細孔プローブとして使用される広範囲のフラーレン構造物が意図されている。例えば、バッキーボールフラーレン球体を電気伝導性媒体中に組み込んだものがナノ細孔プローブとして使用され得る。半導体ナノワイヤー構造物もナノ細孔プローブとして使用され得る。以下の論議において、ナノチューブの例が使用されているが、これに限定されると意図されない。
【００２３】
本発明によれば、塩基がナノ細孔を通って移動すると同時に移動塩基の指標である直接電子シグナルを発生するので、塩基を特性解析するためにヌクレオシド塩基を物理的に配向させるようにナノチューブプローブ２４，２６が使用され得ることが見出された。この物理的配向は、カーボンナノチューブの表面と密接にカップリングさせるためにＤＮＡ鎖のアフィニティーを利用することにより本発明に従って達成される。フラーレン構造物（例えば、カーボンナノチューブ）の存在下では、ＤＮＡ分子の各ヌクレオシド塩基はナノチューブフラーレン構造物とπ−スタッキング相互作用を形成する傾向にある。例えば、Ｚｈｅｎｇら，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ，２：３３８−３４２（２００３年５月）を参照されたい。ＤＮＡ分子は糖−ホスフェート骨格内での結合ねじれがかなり柔軟であると理解されており、この柔軟性がヌクレオシド塩基−ナノチューブカップリングを適合させる。カップリングでは、ＤＮＡ分子の平面塩基は個々に塩基の平面がナノチューブ表面に対してフラット(flat)に並べられるような条件で非共有結合性の吸着プロセスによりナノチューブ表面に会合またはカップリングされ得る。その結果として、この配置で、ＤＮＡヌクレオシド塩基はナノチューブ表面配向に対応する配向に対してナノチューブ表面により物理的に整列される。
【００２４】
このＤＮＡ−ナノチューブカップリングの現象は、自由エネルギーの考察、電荷状態、ＤＮＡ塩基とカーボンナノチューブ間の相補的疎水性／親水性特性及びＤＮＡ骨格により、一部はヌクレオシド塩基とナノチューブの表面構造間のファンデルワールス相互作用により引き起こされると理解される。ヌクレオシド塩基をナノチューブ表面にカップリングできるように特定の条件を付与する必要はない。実際、ＤＮＡまたはＲＮＡがそれ自体凝集するのではなくナノチューブ表面に優先的にカップリングすることが示唆された。
【００２５】
本発明によれば、図１Ａの構成の例では、ＤＮＡ塩基がナノ細孔を通って移動するときＤＮＡ塩基がナノチューブの表面と整列しやすいようにナノ細孔の長さに沿った点に近接ナノチューブプローブが設けられている。図１Ｂは、塩基にカップリングさせるのに有効な各種ナノチューブ表面及び前記表面に対して本発明で使用される用語を明確とするナノチューブ２４の概略図である。ナノチューブ２４は塩基がカップリングし得る側面２７を含み、塩基がカップリングし得る端部２９及び３１を含む。前記端部は端部２９の場合のようにグラファイト表面の連続延長部として設けられていても、端部３１の場合のように切断面端部であってもよい。
【００２６】
図１Ｃは図１Ａの分子特性解析デバイスの概略図であり、ここでは塩基がナノ細孔を通って移動するときナノチューブプローブ２４がヌクレオシド塩基３２を物理的に整列させている時点を示す。ヌクレオシド塩基３２は、ｓｓＤＮＡ２０がナノ細孔１２を通って移動するときナノチューブプローブの１つ２４の端部にカップリングしている。先に説明したように、平面ヌクレオシド塩基３２はナノチューブに対してフラットに並ぶ傾向を有している。この構成により、塩基を明確に表す電子輸送電流を検出するためにナノ細孔中に塩基を正確に配向させることができる。図１Ｃに示す塩基とナノチューブ端部のカップリングは概要にすぎず、ナノチューブ２４に対する塩基配向の具体的詳細を表すものではない。
【００２７】
図１Ｃに示す移動及びカップリングを可能とするためには、ヌクレオシド塩基３２をナノチューブ端部に沿ってスライドさせることができるようにナノ細孔を横切る電気泳動力がコントロールされ、電気泳動力はある時間経過後塩基をナノチューブ端部から脱カップリングさせるのに十分に強い。この電気泳動力コントロールは、図１Ａ及び１Ｃ中の電圧源２１，２３のコントロールからそれぞれ２つの液体区画１６，１８間の相対電圧をコントロールすることにより実行される。
【００２８】
ｓｓＤＮＡとナノチューブ間の結合エネルギーは約−１．０ｅＶ／ｎｍであると推定された。例えば、Ｚｈｅｎｇら，“ＤＮＡ−ａｓｓｉｓｔｅｄ  ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃａｒｂｏｎ  ｎａｎｏｔｕｂｅｓ”，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ，２：３３８−３４２（２００３）を参照されたい。従って、ヌクレオシドを非バイアスナノチューブから除去するために必要な対応力は約３〜約６ｐＮであり、これはほぼナノ細孔を横切る約１００ｍＶ〜２００ｍＶの電圧バイアスを有するナノ細孔を移動するｓｓＤＮＡに対して印加される電気泳動力である。例えば、Ｓａｕｅｒ−Ｂｕｄｇｅら，“Ｕｎｚｉｐｐｉｎｇ  ｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  ｄｏｕｂｌｅ−ｓｔｒａｎｄｅｄ  ＤＮＡ  ｉｎ  ａ  ｎａｎｏｐｏｒｅ”，Ｐｈｙｓ．Ｒｅｖ．Ｌｅｔｔ．，９０：２３８１０１１−２３８１０１４（２００３）を参照されたい。この場合、ナノ細孔を横切って２００ｍＶバイアスを印加することは、ナノチューブプローブにバイアスが存在せず、図１Ｃに示すようにヌクレオシドをナノチューブ端部を横切ってスライドさせる。従って、分子とカーボンナノチューブ間で生ずるカップリングは非共有結合性で、非永久的なものであり、表面にカップリングさせながら分子をナノチューブ表面に沿ってスライドさせることができる性質のものであると理解される。
【００２９】
図１Ｃに示すように、塩基３２がカップリングしているナノチューブ２４は第２ナノチューブ２６に対して正にバイアスされている。ナノチューブ２４の電圧によりナノ細孔中の電解溶液に対して前記ナノチューブの正バイアスが生ずるならば、ナノチューブ２６の正バイアスが短時間減るかまたは２つの液体区画間のナノ細孔を横切るバイアスが、ヌクレオチドがナノチューブを横切ってスライドするのに十分に上昇するまで、負に荷電したヌクレオチドがナノチューブを横切ってスライドするのが防止される。従って、本発明は、ヌクレオチドがナノ細孔を通って移動するときのヌクレオチドの移動速度及びヌクレオチドの配向をコントロールすることができる。
【００３０】
図１Ａ及び１Ｃの配置の例において、ナノチューブプローブ２４，２６は、ナノチューブの端部がナノ細孔の外周(perimeter)に接する(abutting)向きに置かれるように示されている。ナノチューブの端部はナノチューブの側面と同様な六角形炭素表面構造または他のより複雑な幾何特性を有し、従ってナノチューブの側面によって示されるのと同一のヌクレオチド配向影響を与え得ると理解される。所与の用途または構成でナノチューブの端部が十分な配向影響を与えないことが分かった場合には、ナノチューブ端部を以下に記載されている方法で官能化または他の方法で処理することにより、必要なヌクレオチド配向特性を有する末端表面を付与することができる。
【００３１】
この例で、ナノチューブプローブにより直接的分子特性解析及び分子配向コントロールが可能であり、以下に記載されているように分子移動速度をコントロールすることができることが判明した。従って、ナノチューブプローブは従来の金属製プローブの単なる代替ではなく、その代わりに本発明の知見に基づいて分子特性解析の正確なコントロールを可能とするために使用され得る。
【００３２】
図２Ａを参照すると、本発明が提供する更なる実施形態では、ナノチューブプローブの１つの分子配向表面はナノチューブ端部ではなくナノチューブの側面として設けられている。図２Ａに示すように、第１ナノチューブプローブ２４は、上記したように端部がナノ細孔１２の長さに沿った点に配置されるように設けられている。他のナノチューブプローブ５０は、このプローブ５０の側面がナノ細孔１２の外周と接するように第１プローブ２４に対して直交して配置されている。
【００３３】
図２Ａは、明瞭とするために支持構造物１４中のナノ細孔及びナノチューブプローブのみを示す構成の破断側面図であるが、図１Ａのような液体区画、広がった支持構造物及び電気接続が含まれていると理解されたい。加えて、図２Ａに示すように、ナノ細孔外周と接しているところを除いて２つのナノチューブを電気絶縁するために支持構造物及び電気絶縁領域１５が設けられている。
【００３４】
上記アセンブリの上から見た概略平面図である図２Ｂには、この構成のための電気接続が示されている。ここには支持構造物１４中のナノ細孔１２が示されており、Ｔ形プローブ配置が生ずるように２つのナノチューブプローブ２４，５０が直交して配置されている。明瞭とするために、ナノチューブプローブの上部に位置する電気絶縁支持構造物及び被覆材料は図２Ｂには示されておらず、ナノチューブプローブの位置を直接見ることができる。図２Ｂの配置では、ナノチューブプローブ２４，５０間に選択した電圧バイアス３０を印加するために、図１Ａ〜１Ｂの実施形態を参照して上記したように第１外部回路２８が設けられている。この電気バイアスは、ＤＮＡ分子のヌクレオシド塩基が上記したようにナノ細孔を通って輸送されるとき、ナノ細孔を横切る電子輸送を刺激するためにナノ細孔のアパーチャを横切って選択した電圧を付与する。
【００３５】
図２Ｃも参照すると、ｓｓＤＮＡ２０がナノ細孔を通って移動するときヌクレオシド塩基３２がナノチューブプローブの一方５０の側面にカップリングされる状態が示されている。この構成により、塩基を明確に表す電子輸送電流を検出するためにナノ細孔中で塩基を正確に配向させることができる。塩基は、塩基を特性解析するときナノチューブ５０の側面に沿ってスライドすることができる。図２Ｃにおいても、図２Ｂに示す電圧源３０の極性によって側面配向（side-oriented）ナノチューブプローブ５０が端部配向(end-oriented)ナノチューブプローブ２４に対して電気的に正にバイアスされていることに注目されたい。この正のバイアスが電解溶液に対しても正であるならば、結果としてヌクレオシド塩基３２がナノ細孔１２を通って引き出されるとき、負に荷電したＤＮＡ骨格は側面配向プローブ５０に電気的に引き寄せられる。ヌクレオシド塩基３２はプローブ５０の側面と相互作用し、カップリングし、バイアスが逆転するまでカップリングされたままである。
【００３６】
結果として、側面配向ナノチューブプローブ５０は更に、塩基がナノ細孔を通って輸送されるときヌクレオシド塩基移動速度のコントロールを可能とするためにコントロールされ得る。再び図２Ｂを参照すると、側面配向ナノチューブプローブ５０の端部５８，６０は、縦方向ナノチューブプローブ５０の電圧を別にコントロールするために電圧源５４を備えている第２外部回路５２において接続されている。第２外部回路５２には電流計または他の電流制御及び測定デバイス５６も含め得る。
【００３７】
先に説明したように、ＤＮＡ鎖とナノチューブ表面のカップリングは、前記鎖とナノチューブ表面の相対的電気電荷により少なくとも部分的にコントロールされ得る。溶液中にあるときＤＮＡ骨格は本質的に負に荷電しているので、溶液に対して正に荷電しているナノチューブ表面はＤＮＡ骨格をナノチューブ表面に引き寄せる傾向にある。逆に、負に荷電しているナノチューブ表面はＤＮＡ骨格をナノチューブ表面からはね返す傾向にある。これらの条件は、本発明に従ってヌクレオシド塩基と側面配向ナノチューブプローブのカップリングの持続時間をコントロールするために利用される。
【００３８】
再び図２Ｃを参照すると、側面配向ナノチューブプローブ５０が電解溶液に対して電気的に正にバイアスされているとき、ＤＮＡ骨格は側面配向ナノチューブプローブ５０に引き寄せられる傾向にあり、ヌクレオシド塩基３２は側面配向ナノチューブプローブ５０とカップリングする。このカップリングの間、ＤＮＡ塩基を通ってナノ細孔を横断してナノチューブプローブ間で起こる電子輸送が塩基を同定するために測定され得る。
【００３９】
この塩基同定測定が完了したら、電圧源５４及び側面配向ナノチューブプローブ５０の対応する電気バイアスを調節するために第２外部回路５２をコントロールする。ここで、電圧バイアスは、側面配向ナノチューブプローブ５０が電解溶液に対して負にバイアスされ、よってＤＮＡ骨格が側面配向ナノチューブプローブ５０からはね返される傾向にあるように選択される。反発力が生じ始めると、ヌクレオシド塩基３２は側面配向ナノチューブプローブ５０から脱カップリングし、これにより図２Ａの構成が生じ、電気泳動力によりナノ細孔を通って更に下方に輸送される。同定しようとする次に続くヌクレオシド塩基は、次の塩基同定サイクルのために同様にしてナノチューブプローブの位置に輸送される。
【００４０】
この塩基同定サイクルを可能とすることにより、図２Ａ〜２Ｃの実施形態は、ＤＮＡ鎖に対してヌクレオチドがナノ細孔を通って移動するとき該鎖のヌクレオチドに対する移動速度コントロール及び物理的配向コントロールの両方を与える。図２Ａ〜２Ｃの実行の例は、側面配向ナノチューブプローブ５０がナノ細孔から離れたナノチューブ端部５８，６０を備え、端部５８，６０で外部回路５２に対する電気接続を形成し得る点で特に有利である。しかし、所与の実行のために必要に応じてまたは所望により、代わりに、端部配向ナノチューブプローブ２４を第２外部回路５２にて別個にコントロールして、側面配向ナノチューブプローブ５０ではなく端部配向ナノチューブプローブ２４に対してＤＮＡヌクレオチドをコントロール下でカップリング及び脱カップリングさせてもよい。
【００４１】
先に説明したように、ＤＮＡヌクレオチドはナノチューブの端部及びナノチューブの側面の両方にカップリングする傾向にあると理解されたい。ＤＮＡカップリングのためにナノチューブ端部が使用されるとしても側面が使用されるとしても、本発明は、すべてのヌクレオシド塩基がナノチューブ表面により同一に配向されることを必要としない。その代わり、共通するタイプのすべてのヌクレオシド塩基が実質的に同様に配向されること、すなわちすべてのＴ塩基が同様に配向される、すべてのＧ塩基が同様に配向される、等々が好ましい。この条件を満たすと、所与の塩基タイプの各例において予想された配向または限定されたクラスの配向が生じ、よって４種のＤＮＡ塩基間の対比を助け、配列決定の正確さが促進されるであろう。
【００４２】
更に、本発明はヌクレオシド塩基をナノチューブ表面に対してカップリングさせるための特定の配向を必要としない。多くの条件下で、ヌクレオシド塩基の面が先に説明したようにナノチューブ表面に対してフラットに並ぶ傾向にあると理解されたい。しかしながら、このことが本発明において普遍的に必要とされるわけではない。ヌクレオシド塩基は、ナノチューブ表面に対してある角度をもって配置されていても、表面から効果的に離れていても(stick off)、または同一性の電子検出を可能にする適当な様式で配向していてもよい。先に説明したように、所与の塩基タイプの各例は塩基コントラストの精度を増強させるために同様に配向させることが好ましいが、特定の配向であることは必要とされない。
【００４３】
本発明が提供する更なる実施形態では、分子移動コントロールは電子輸送ナノチューブプローブ構成とは別に実行され得る。図３Ａは前記配置の例の概略断面図（正確な縮尺ではない）である。上の図２Ａ及びＣのように、液体区画及び関連する電圧源が図１Ａのように含まれており、両ナノチューブプローブは電気絶縁されており、ただしナノ細孔に接するナノチューブの端部のみが絶縁されていないことを理解されたい。
【００４４】
図３Ａには、図１Ａのように、ナノ細孔１２を横切って支持構造物１４中に２つのナノチューブプローブ２４，２６が示されている。この例のナノチューブプローブはナノ細孔外周に端部配向して配置されている。ＤＮＡ鎖２０がナノ細孔１２に進入する支持構造物表面６３には、ナノ細孔１２の外周に側面配向した（側面が位置決めされた(side-positioned)）ナノチューブ６５が設けられている。この表面に位置決めされたナノチューブ６５の電気バイアスは、ナノ細孔１２を通って輸送されるＤＮＡ鎖の移動速度をコントロールしてナノチューブプローブ２４，２６の位置で塩基を同定するために、図２Ａ〜２Ｃにおける側面配向ナノチューブプローブ５０のようにコントロールされる。
【００４５】
図３Ｂは図３Ａの構成を上から見た平面図であり、ここには構成のための外部回路接続が含まれている。この図では、ナノチューブプローブ２４，２６は、ナノ細孔１２の長さに沿った点で支持構造物１４の表面の下にあるものとしてドット付クロスハッチングで示されている。表面に位置するナノチューブ６５は、その位置が支持構造物１４の表面上のナノチューブプローブ２４，２６の上にあることを示すために普通にクロスハッチングされている。図１Ａと同様の第１外部回路２８が２つのナノチューブプローブ２４，２６に対して設けられている。回路２８中の電圧源３０によりナノチューブプローブ２４，２６間に選択した電圧バイアスを印加することが可能となり、先に説明したように、ナノ細孔を横切る電子輸送を生じさせ、ヌクレオシド塩基同定のための電流測定を可能にする。
【００４６】
図２Ｂと同様に、表面に位置するナノチューブ
６５を電気的にバイアスするために第２外部回路５２が設けられている。表面に位置するナノチューブ６５の端部６６，６８は、表面に位置するナノチューブ６５の電圧をコントロールするために電圧源５４が設けられている第２外部回路５２に接続されている。第２外部回路５２には電流計または他の電流コントロール及び測定デバイス５６も含まれ得る。
【００４７】
図３Ｃをも参照すると、表面に位置するナノチューブ６５が電解溶液に対して電気的に正にバイアスされると、ＤＮＡ骨格は表面に位置するナノチューブ６５に引き寄せられる傾向にあり、ヌクレオシド塩基３２は表面に位置するナノチューブ６５とカップリングする。これは、ナノ細孔を通るＤＮＡ鎖の前進移動速度をコントロールするように作用する。塩基３２が表面に位置するナノチューブ６５にカップリングすると、塩基がナノチューブ表面上に配向されることにより塩基が空間的に配向する。同時に、第１外部回路２８はナノチューブプローブ２４，２６間に電圧バイアスを与える。ナノチューブプローブ２４，２６の位置にあるＤＮＡ塩基によってナノ細孔を横切ってナノチューブプローブ２４，２６間で生ずる電子輸送をこの時点で測定することにより、ナノチューブプローブ２４，２６の位置の塩基を同定することができる。
【００４８】
この塩基同定測定が完了したら、表面に位置するナノチューブ６５の電圧源５４及び対応する電気バイアスを調節するために第２外部回路５２をコントロールする。この場合、電圧バイアスは、表面に位置するナノチューブ６５が電解溶液に対して負にバイアスされ、それによりＤＮＡ骨格が表面に位置するナノチューブ６５からはね返されやすくなるように選択される。この反発力が生じ始めると、ヌクレオシド塩基３２は表面に位置するナノチューブ６５から脱カップリングして、図３Ａの構成が生じ、電気泳動力によりナノ細孔内に輸送される。同定しようとする次に続くヌクレオシド塩基は、同様に次の塩基同定サイクルのためにナノチューブプローブの位置に輸送される。表面に位置するナノチューブ６５で実施したヌクレオシド塩基配向は、塩基がナノ細孔の長さに応じてナノ細孔に進入し、ナノチューブプローブに近づくときその塩基とともにそのままであってもよい。この場合、この配向コントロールは、塩基がナノ細孔の長さに沿ってナノチューブプローブの位置に達したときナノチューブプローブの１つに塩基がカップリングすることにより強められる。
【００４９】
別の実行例では、表面に位置するナノチューブ６５をナノ細孔１２の外周で側面配向させるのではなくナノ細孔１２の外周で端部配向させてもよい。表面に位置するナノチューブの端部配向では、上記した端部配向ナノチューブプローブ２４，２６と同様にナノ細孔の縁に端部が配置される。この実行例は、ナノチューブに接触させるためにナノ細孔外周から離れた位置に２つのナノチューブ端部を設けていない点であまり好ましくないことがある。しかしながら、所与の用途が表面に位置するナノチューブの端面に配向している表面への接触を認めるならば、前記構成は可能な場合に使用され得る。
【００５０】
本発明の更なる実施形態では、図１及び３の実行の例に示す第１外部回路２８は、端部配向ナノチューブトンネルプローブ２４，２６（図１及び３）に一時的にバイアスをかけるために図２Ｂ及び３Ｂに示す第２外部回路５２のようにコントロールされ得る。一時的なナノチューブプローブバイアスは、図２Ｂの実行の例のように第２外部回路５２により達成される移動コントロールを１つの回路のみで可能とすべく加えられる。本発明に従って、先に説明したように、２つのナノチューブプローブの電荷により負に荷電したＤＮＡ骨格は電解溶液に対して最も正にバイアスされているナノチューブプローブに引き寄せられると理解される。電圧バイアスをナノチューブプローブ間に印加すると、ＤＮＡ骨格は正に荷電しているナノチューブプローブに引き寄せられ、この位置のヌクレオシド塩基は正に荷電しているナノチューブプローブとカップリングする。このカップリングは、鎖がナノ細孔を通って前進するのを遅らすかまたは停止させるように作用する。電圧バイアスが電解溶液に対して反転すると、ＤＮＡ骨格は塩基がカップリングしているナノチューブからはね返され、ＤＮＡ鎖はナノ細孔を通って前進し得る。こうして、ＤＮＡ鎖移動がコントロールされる。
【００５１】
図１の実行例で一時的なナノチューブプローブシナリオを用いることにより、２つのナノチューブプローブ２４，２６は空間的分子配向コントロール及び分子移動速度コントロールを実施することができる。図３の実行例では、この一時的なナノチューブプローブバイアスコントロールにより、表面に位置するナノチューブ６６及びナノチューブプローブ２４，２６により与えられる二重の移動速度コントロールが可能である。この２つの移動コントロールは、ナノ細孔を通過してのＤＮＡ鎖のラチェット様の移動を生じさせるように同期的に操作され得る。
【００５２】
本発明によれば、図１〜３の構成の例に組み込まれる各種形状構成及びコントロール技術は、広範囲の代替配置において所与の分子特性解析用途に対して所望通りに選択され得る。例えば、図４Ａの破断断面図に示すように、ナノチューブトンネルプローブは端部配向プローブ２４及び側面配向ナノチューブプローブ５０として設けられ得る。追加の分子移動速度コントロールを付与するために表面に位置するナノチューブ６５が更に設けられ得る。ナノチューブはいずれもナノ細孔に接しているナノチューブの端部または側面を除いて電気絶縁されている。図４Ｂに示すように、ナノチューブプローブは更に、例えば端部配向プローブ２４と、ナノ細孔の内側長さに沿って支持構造物の厚さを貫いて水平に延びている側面配向ナノチューブプローブ６７として設けられていてもよい。この配置で、ヌクレオシド塩基は十分にコントロールされた配向でナノ細孔の全長を貫いて側面配向ナノチューブ６７に沿ってスライドすることができる。この条件を可能とするために、側面配向プローブは、以下の例において説明しているようにナノ細孔内の露出したプローブ領域に沿って絶縁されていない。認識され得るように、端部配向プローブ２４は、図４Ａに示す側面配向プローブ５０のように側面配向プローブとしても設けられ得る。
【００５３】
これらのデバイス配置の各々は、時間依存的配向及び移動速度コントロールを与えるために１つ以上の選択した外部バイアス回路によりコントロールされ得る。例えば、図１Ａの外部回路２８のような第１バイアス回路はナノチューブプローブ２４，５０間に使用され得、図２Ｂの外部回路のような第２バイアス回路は縦方向ナノチューブプローブ５０のバイアスを別にコントロールするために使用され得る。更に、図３Ｂの外部回路５２のような追加コントロール回路が表面配向ナノチューブ６５のバイアスをコントロールするために使用され得る。
【００５４】
上で検討したデバイス構成の例は、ナノ細孔中の分子による電子輸送をナノチューブプローブ間で測定することにより操作するものとして記載されている。しかしながら、本発明はデバイス構成を前記操作に限定するものではない。ナノチューブへの分子の近接は、上記したようにナノチューブの長さに沿った電子輸送に利用可能なナノチューブ電子キャリアの濃度を変化させることにより及び／または電子キャリアの電気輸送度を変調することによりナノチューブのコンダクタンスをナノチューブの長さに沿って変化させることができるとも認識され得る。従って、分子とカーボンナノチューブの側面との相互作用に適合するデバイス構成のすべてが「ＦＥＴモード」と称され得るように操作され得る。前記構成の例は図２Ａ〜Ｃ（ナノチューブプローブ５０）、図３Ａ〜３Ｃ（ナノチューブ６５）及び図４Ａ（ナノチューブ５０及び６５）に示されているものである。
【００５５】
ＦＥＴモードの操作では、分子接触及び配向表面を形成する側面を有するナノチューブ（例えば、図２〜４のナノチューブ５０及び６５）の対向端部を横切って電気バイアス電圧が印加される。このバイアスは、ナノチューブ５０及び６５に接続している図２Ｂ及び３Ｂの回路５２に印加され得る。これらのナノチューブのコンダクタンスはナノ細孔中の分子の接近及び特性に対して感受性である。よって、分子がナノ細孔を通って移動するときにナノチューブ５０または６５を通る電流を回路５２において測定することにより、分子を側面配向ナノチューブをベースとする特性解析デバイスを用いて電子的に特性解析するための代替方法が提供される。よって、本発明は、本発明の分子特性解析デバイスの特定モードの操作に限定されない。
【００５６】
加えて、図１〜４の実行例のすべてにおいて２つの液体区画中の各溶液の電圧バイアスは、先に説明したように分子−ナノチューブカップリング力に対するナノ細孔を通って分子を推進させる電気泳動力をコントロールするために時間依存的に調節され得る。例えば、第１液体区画１６及び第２液体区画１８中の電極１７，１９（図１Ａ）はそれぞれ経時的に、例えば適切なナノチューブプローブバイアスコントロール及び移動速度バイアスコントロールと同期的に選択的にバイアスされ得る。前記した液体バイアスは電解溶液に対するナノチューブプローブのバイアスに対して更なるコントロールレベルを与え、よって分子移動コントロールの精度を高める。この精度は測定エレクトロニクスの感度及びバンド幅に比例する移動速度を達成することが望ましい。例えば約１０４塩基／秒の移動速度で、連続塩基に対する明確な電子輸送シグナルの測定を分離することができる。よって、ナノチューブ及び外部回路の選択配置に電気バイアスコントロールを加えると、異なるヌクレオシド塩基間の明確な電子識別に適合する様式でＤＮＡ移動の速度及びＤＮＡヌクレオシド塩基の物理的配向をコントロールし得る。
【００５７】
上記可能性の結果として、本発明の分子分析デバイスは、ナノ細孔が単一の分子検出器として動作するとしても非常に高い処理量配列決定デバイスとして機能する。本発明の分子分析デバイスを用いると、数千の異なる分子または数千の同一分子を数分以内に探査することができる。ナノ細孔デバイスの操作方法は移動分子の特徴を電気シグナルに直接変換するので、変換及び認識は分子単位基準でリアルタイムでなされ得る。更に、長さの長いＤＮＡがこのリアルタイム様式で探査され得る。サンプル調製または特定の用途を実際に考慮すると、ＤＮＡ鎖がナノ細孔を通って移動するとき分析され得るＤＮＡ鎖の長さが制限されるが、分析される鎖の長さは理論的に限定されない。
【００５８】
本発明の分子分析技術の別の実施形態に転ずると、図５Ａを参照すると、本発明の別の分子分析技術において、ＤＮＡ配列決定は自由ナノチューブにカップリングしたＤＮＡ鎖の複合体がナノチューブ連節(articulated)ナノ細孔を通って移動することにより実施される。この方法を実施するための図５Ａに示すような本発明が提供するデバイスでは、第１液体区画１６中にナノチューブ１０２にカップリングしたｓｓＤＮＡ分子１００が別のナノチューブ１０２にカップリングしている少なくとも１つのＤＮＡ鎖１００と共に溶解している。ＤＮＡ−ナノチューブ複合体の溶液は、参照により組み込まれるＪａｇｏｔａらの米国特許出願公開第２００５／０００９０３９号“Ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｃａｒｂｏｎ  Ｎａｎｏｔｕｂｅｓ  ｂｙ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ”に教示されているように所望の分子−ナノチューブ複合体を提供するべく例えばゲル電気泳動により形成され、加工され得る。
【００５９】
第１液体区画は、上記したように支持構造物１４中に設けられているナノ細孔１２と連通している。ナノ細孔の長さに沿った点にナノチューブプローブ２４，２６が配置されている。ナノチューブプローブは図５Ａに示すように端部配向プローブとして設けられ得、図２Ａに示すように側面配向されていてもよい。
【００６０】
図に「−」及び「＋」で示す電圧バイアスを２つの液体区画１６，１８間に印加すると、第１区画１６中のＤＮＡ−ナノチューブ複合体は一度にナノ細孔１２を通って第２区画１８に電気泳動的に推進する。この電圧バイアスは、例えば塩化銀電極１７，１９をそれぞれ２つの区画１６，１８の溶液中に浸漬させて設け、各溶液の電圧をコントロールするために対応の電圧源２１，２３を設けることにより与えられ得る。
【００６１】
電圧バイアスは、コントロール可能な電圧源３０を有する外部回路２８によりナノ細孔を横切ってナノチューブプローブ２４，２６間に印加される。ＤＮＡ−ナノチューブ複合体１０４がナノ細孔に移動し、ナノチューブプローブ２４，２６間に移動すると、ナノチューブプローブ２４，２６間の電子輸送はＤＮＡ−ナノチューブ複合体１０４の存在により影響される。ＤＮＡ−ナノチューブ複合体の塩基を同定すべく生じた電流をモニターするために電流計３４または他の電流測定エレメントが外部回路に設けられている。ＤＮＡ分子の各ヌクレオシド塩基がＤＮＡ−ナノチューブ複合体中のナノチューブの縦方向側壁にカップリングするならば、ＤＮＡ−ナノチューブ複合体がナノ細孔１２を通って移動したときカップリングしたＤＮＡ鎖の各ヌクレオシド塩基はナノチューブプローブ間の電子輸送の変化により別々に且つ明確に同定される。ＤＮＡ分子がカーボンナノチューブにカップリングすると、ナノチューブの存在に起因したナノ細孔近くの流体の付加粘性抵抗のためにカップリングしていないＤＮＡ鎖に比してナノ細孔を通る分子輸送速度が減少が生じ得ることが認識されている。しかしながら、ブラウン運動のためのＤＮＡ鎖運動のゆらぎは、ナノチューブの大きな質量及び剛性のためにナノチューブへのＤＮＡ鎖のカップリングにより減少する。
【００６２】
この移動ＤＮＡ−ナノチューブ複合体の電子分析に加えて、上記したようにナノ細孔を通って第１液体区画１６から第２液体区画１８への溶液中を流れるイオン電流の変化は移動ＤＮＡ−ナノチューブ複合体の位置を確認するためにモニターされ得る。複合体が移動中ナノ細孔の断面積の大部分を占めるようにナノ細孔の寸法がＤＮＡ−ナノチューブ複合体の寸法に相当するならば、前記複合体は上記したように第１及び第２液体区画に印加された電圧から生ずるイオン電流を一時的に減少または遮断する。その結果、第１及び第２液体区画間のイオン電流の測定は、ＤＮＡ−ナノチューブ複合体がナノ細孔内にあるかどうかの指標とするために使用され得る。ＤＮＡ−ナノチューブ複合体がナノ細孔中に存在することが確認されたら、前記指標は電子輸送電流の測定を開始するために外部回路のコントロールと同期され得る。
【００６３】
ＤＮＡカーボンナノチューブハイブリッド複合体の減速及び配向効果はイオン電流または電子電流分子特性解析デバイスを用いる分子特性解析のために有利に使用され得る。本発明は、上記したナノチューブプローブ構成での電子電流またはイオン電流測定技術によりＤＮＡ−ナノチューブ複合体を特性解析することを意図している。第１及び第２液体区画間のイオン電流の測定は、ナノチューブと複合体を形成しているＤＮＡ分子の各種特徴を示すために使用され得る。例えば、ポリヌクレオチド鎖内で「ヘアピン」ループを形成するモノマーの相補的塩基対配列はナノチューブ上に明確に配向され、非相補的配列のものとは異なるイオン電流の変調が生ずる。よって、ＤＮＡ−ナノチューブ複合体は、電子電流変調の検出を含めることなく適当な方法で（例えば、イオン電流のモニター）特性解析され得る。
【００６４】
図５Ａの実施形態の例では、自由ナノチューブ１０２の各々は該ナノチューブにカップリングしたＤＮＡ鎖１００のヌクレオチドを物理的に配向させる。ＤＮＡ−ナノチューブ複合体１０４がナノ細孔１２を通って移動すると、ナノチューブプローブ２４，２６により上記したように追加の配向コントロールが付与され得る。例えば、ナノチューブプローブ２４，２６間の電圧バイアスは、負に荷電しているＤＮＡ骨格及びそこにカップリングしているナノチューブを正に荷電しているナノチューブプローブ２４に引き寄せるようにコントロールされ得る。これにより、ナノ細孔内でＤＮＡ−ナノチューブ複合体の空間的配向をナノチューブプローブ間でコントロールすることができる。
【００６５】
所与の用途に対して所望ならば、図１〜４の例の各種ナノチューブ構成が、ＤＮＡ−ナノチューブ複合体がナノ細孔を通って移動するとき前記複合体の配向及び移動速度をコントロールするように実行され得る。加えて、先に説明したように、２つの液体区画間の電気泳動力は、ＤＮＡ−ナノチューブ複合体移動速度を更にコントロールするために２つの液体区画の電圧バイアスを調節することによりコントロールされ得る。
【００６６】
図５Ｂに転ずると、本発明の更なる実施形態では、ＤＮＡ−ナノチューブ複合体のナノ細孔通過移動が外部からコマンドされる作動素子により厳密にコントロールされ得る。本発明が提供するこの配置で、分析しようとするＤＮＡ−ナノチューブ複合体１０４はコントロールメカニズム１１２により作動され得るカンチレバー１１０または他の移動可能な素子のチップ１０８上に載置される。実施形態の１例では、マウンティングチップ１０８は原子間力顕微鏡（ＡＦＭ）のカンチレバー１１０の末端に置かれている。適当な作動・移動可能なチップ構造物がマウンティングチップとして使用され得る。ＤＮＡ−ナノチューブ複合体マウンティングチップに対して走査トンネル顕微鏡チップ、微小電気機械（ＭＥＭ）構造物（例えば、作動微小機械加工したカンチバレービーム及びブリッジ）、及び他のシステム装置または特注の機械配置が使用され得る。
【００６７】
どのようなチップ構成を使用しても、チップ載置したＤＮＡ−ナノチューブ複合体は支持構造物１４中のナノ細孔１２を通って移動し、２つのナノチューブプローブ２４，２６間を動く。チップ１０８及びカンチレバー１１０を正確にコントロールすると、チップ載置したＤＮＡ−ナノチューブ複合体はナノ細孔１２を通ってゆっくり、例えば約１ヌクレオシド塩基／秒ほどの遅い移動速度で前進し得る。ナノチューブプローブ２４，２６の位置で、ＤＮＡ−ナノチューブ複合体を介してナノ細孔を横切る電子輸送はＤＮＡ−ナノチューブ複合体の存在により影響される。上記した方法で、ＤＮＡ−ナノチューブ複合体中のＤＮＡ分子のヌクレオシド塩基を識別すべく電子輸送を測定するために外部回路が使用され得る。外部回路測定バンド幅が制限され得る用途のために、この配置は回路バンド幅を適合させる様式で移動速度を正確にコントロールするために便利であり得る。
【００６８】
検討を明確にするために図５Ｂに示されていないが、図５Ａの外部バイアス及び測定回路２８はナノチューブプローブバイアス及び電子輸送測定を可能とするために図５Ｂの構成にも含まれると理解されたい。更に、多くの用途のために、ＤＮＡ−ナノチューブ分子がナノ細孔を通って容易に移動され得る媒体を提供し、追加のバイアスコントロールを可能とするために更に図５Ａの液体区画１６，１８をこの構成に含めることが好ましい。
【００６９】
更なるコントロール技術では、ナノ細孔を通って移動するＤＮＡ−ナノチューブ複合体１０４を電気的にバイアスするために追加の電圧源１１４をも設けてもよい。慣用のトランジスターのゲートまたはベースをバイアスするのと同様に、ＤＮＡ−ナノチューブ複合体のバイアスはナノチューブプローブ間の電子輸送に影響を及ぼす。ＤＮＡ−ナノチューブ複合体に印加される電圧により、ナノチューブへのＤＮＡカップリングの空間的近密関係が変化し、対応してナノチューブプローブ間で輸送された電子に利用されるＤＮＡ−ナノチューブ複合体のエネルギーレベルが調節される。従って、ＤＮＡ−ナノチューブ複合体に印加される電圧は、ヌクレオシド塩基同定のための電子輸送測定の解像度及びコントラストを調節し、強化するためにコントロール可能に変更され得る。ＤＮＡ−ナノチューブ複合体が移動する液体溶液の静電ポテンシャルも電子輸送を更にチューニングするために上記したように調節され得る。
【００７０】
電圧をＤＮＡ−ナノチューブ複合体に印加すると、複合体のナノチューブはそれ自体ナノチューブプローブ２４，２６のように電子輸送プローブとして使用され得る。このシナリオでは、ナノチューブプローブ２４，２６の１つは、ヌクレオチド分析のための電子輸送が１つのナノチューブプローブ（例えば、プローブ２４）とＤＮＡ−ナノチューブ複合体１０４のナノチューブ間で生ずるように排除され得る。この場合、電流を測定するための外部回路（例えば、図５Ａの回路２８）は１つのナノチューブプローブ２４とカンチレバーアクチュエーター１１２間を接続されている。
【００７１】
本発明は、図５Ａ〜５Ｂのデバイスにより分析しようとするＤＮＡ−ナノチューブ複合体の種類及び特性を確認するための実験的構成を提供する。この実験的構成の実行の１例を図５Ｃに示す。図５Ｃに示すように、ＤＮＡ−ナノチューブ複合体１０４が２つの電気的に接触している電極１２０，１２２間に懸架されている。電極１２０，１２２は適当な導体（例えば、金属性電極またはナノチューブ）として設けられ得る。電極１２０，１２２は、懸架されているＤＮＡ−ナノチューブ複合体１０４を電気的にバイアスするために回路において電圧源１２４と接続している。
【００７２】
電気的に接触しているプロービングナノチューブ１１６は、例えばＡＦＭ１１２により設けられているカンチレバー１１０のチップ１０８上に載置されている。電圧源１１４は、チップ載置されているプロービングナノチューブ１１６を電気的にバイアスするために設けられている。この構成で、ＡＦＭはまず、チップ載置されているプロービングナノチューブ１１６が懸架されているＤＮＡ−ナノチューブ複合体１０４を配置できるように一般的なＡＦＭモードで操作される。次いで、ＡＦＭは、プロービングナノチューブ１１６を懸架されている複合体１０４に沿ってスキャンしているとき、ＤＮＡ−ナノチューブ複合体の電子像を記録するために走査トンネル顕微鏡モード（ＳＴＭ）で操作される。生じた像は、カップリングしたＤＮＡ鎖の骨格に沿って各塩基を幾何学的に表している。
【００７３】
所要により、懸架されているＤＮＡ−ナノチューブ複合体の走査は乾燥状態の複合体を用いて実施され得る。この場合、例えば揮発性塩（例えば、酢酸アンモニウム）及び表面張力を乾燥過程で複合体構造を破壊する値以下に低下させるのに十分な量のメタノールを含む溶液から複合体を乾燥させることが好ましい。多くの用途のために、図５Ａ〜５Ｂの配列決定構成で使用される液体溶液をシミュレートする液体環境でスキャンを実施することが好ましい。
【００７４】
どんなスキャン環境でも、スキャンが進行するにつれて、ＤＮＡ鎖に沿った各ヌクレオシド塩基に達したら該塩基の電子輸送特性を調べるためにプロービングナノチューブ１１６のトンネルバイアス電圧を調節することができる。次いで、この情報を、本発明に従って４つの異なるＤＮＡ塩基間のコントラストを高めるべく、図５Ａ〜５Ｂの構成中のナノチューブプローブに印加されるバイアスを最適とするために使用する。
【００７５】
上記した分子特性解析デバイスの例は、一般的には固体状態支持構造物、例えば参照により本明細書に組み入れるＢｒａｎｔｏｎらの米国特許第６，６２７，０６７号“Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ａｔｏｍｉｃ  Ｓｃａｌｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ”に教示されている材料及び配置を用いて超小型電子材料から形成される構造物中で構成され得る。
【００７６】
分子特性解析デバイス製作要件の特定の態様に転ずると、ナノ細孔が設けられている固体状態支持構造物は通常超小型電子材料、例えばシリコーンベース材料（例：単結晶ケイ素、窒化ケイ素またはポリシリコーン）を用いて形成されている。１つの特に適した配置で、ナノ細孔が設けられている支持構造物は支持構造物上に膜が形成されている（例えば、シリコン支持フレーム上に形成された窒化ケイ素膜）。この構成は図６に示されている。ここで、慣用方法で製作されたシリコン支持フレーム１６２上には懸架された窒化ケイ素膜１６０が設けられている。窒化ケイ素は、概して電気絶縁性であり、広範囲の液体による分解に対して耐性があるために特に適した材料である。しかしながら、ナノ細孔が設けられている膜に対して広範囲の他の材料が使用され得る。膜材料は通常化学的に不活性及び／または耐性であることが好ましい。材料の例にはシリカ、アルミナ、プラスチック、ポリマー、エラストマー、ガラスまたは他の適当な材料が含まれる。
【００７７】
カーボンナノチューブ２４，２６は膜１６０上に下記する様式で設けられており、膜の中央にナノ細孔がある。ナノ細孔外周と接しているナノチューブの表面を除いて、電解分子を含む溶液と接触するデバイスの表面はすべて電気絶縁されている。電気絶縁状態の窒化ケイ素膜は本質的にナノ細孔壁を絶縁するために設けられている。ナノチューブ２４，２６及びケイ素支持フレーム１６２に電気絶縁材料（例えば、アルミナ、酸化ハフニウムまたは他の特定の絶縁材料）の層１５を被覆することが好ましい。
【００７８】
膜及び支持構造物中のナノ細孔としてサイジングされ得るアパーチャの形成の詳細を以下に検討する。通常、ナノ細孔は対象分子との相互作用のためにサイジングされる。すなわち、ナノ細孔は対象分子の原子幅に類似の直径を有している。例えば一本鎖ポリヌクレオチドをナノ細孔を通って移動させる用途のためには、約１〜２０ｎｍのナノ細孔直径が好ましい。ナノ細孔幾何構造に特別な拘束はなく一度にたった１個のポリマー分子しかナノ細孔を横断できないようにするのに十分であり且つ分子が拡張コンホメーションで、例えば二次構造なしに移動するものであればよい。一般的な円形幾何構造が好ましいが必須ではなく、非円形ナノ細孔プロフィールも使用され得る。
【００７９】
更に、ナノ細孔の長さに特別の要件はない。例えば約０．１〜８００ｎｍのナノ細孔の長さが使用され得、例えば窒化ケイ素膜で加工処理することにより作成され得る。先に説明したように、ナノ細孔を横切る電子輸送に適合させるために、ナノ細孔の壁は電気絶縁性である。膜それ自体が絶縁材料であるならば、下記する考慮は別として追加のナノ細孔壁加工処理は必要でない。膜が電気導電性であるならば、ナノ細孔の壁を選択した絶縁層で下記するように被覆してもよい。
【００８０】
図７は、図６のような微細加工した分子特性解析デバイスシステムを包装し、前記デバイスシステムを必要な回路に接続させるためのハウジング構成例１３０の概略図である。図７に示すように、ハウジング構成の例は、分子を有する電解液をナノ細孔を通って移動させる液体区画を提供するために例えばシリコーンゴム（ＰＤＭＳ）チップホルダー１３７中に液体チャネル１３６，１３８と一緒に液体リザーバー１３２，１３４を含む。微細加工した構造物（例えば、シリコーンフレーム１４０）が、例えばナノ細孔１４２が設けられている膜を支持するために設けられている。外部バイアス、測定回路１５４及びナノチューブプローブを電気的に接触させるためにナノチューブプローブ接触パッド接続１５０，１５２が設けられている。最後に液体が２つの液体区画から漏れることなく前記液体区間を電気的にバイアスすべく外部回路１５８を適用できるために密封接続１５６が設けられている。
【００８１】
この配置で、システムのキャパシタンスを最小限とすべく支持構造物のシス（すなわち、上部）側面に対する液体の接触面積をできるだく小さく（例えば、約１，０００μｍ２未満）なければならない。液体をナノ細孔のシス側面にデリバリーするためのチャネル１３６がナノ細孔の約３００μｍ未満内にデリバリーされるように構成されることが好ましい。チャネルは、好ましくは約２００μｍ未満の直径を有し、気泡なしに液体区画を満たすのに必要なサンプル容量を最小とするために好ましくは約２００μｍ未満の直径を有するチューブに接続している。
【００８２】
本発明の分子特性解析デバイスの製作方法のより詳細に転ずると、ナノ細孔を適当な方法で支持構造物中に形成し得る。支持構造物が膜として設けられている場合、膜は慣用の方法により、例えば参照により組み入れる米国特許第６，６２７，０６７号に教示されているように形成される。次いで、最初のアパーチャを膜に形成し、その後ナノ細孔の直径を最終的により小さくするために膜を加工処理する。本発明に従う１つの技術では、最初のアパーチャを膜に例えばイオンビームミリング、電子ビームエッチング、プラズマエッチング、ウェットエッチング、または膜の厚さを貫いてアパーチャを形成するための他の選択技術により形成する。次いで、最初のアパーチャ直径を選択されたプロセスにより縮小させる。その技術の１例では、アパーチャ直径を参照により組み入れるＧｏｌｏｖｃｈｅｎｋｏらの米国特許出願公開第２００５／０００６２２４号“Ｐｕｌｓｅｄ  Ｉｏｎ  Ｂｅａｍ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  Ｓｏｌｉｄ  Ｓｔａｔｅ  Ｆｅａｔｕｒｅｓ”に教示されているようにイオンビーム彫刻の方法によりナノ細孔の直径に縮小する。
【００８３】
ナノ細孔を形成する方法において、ナノ細孔の長さに沿ったナノ細孔の表面は、ｓｓＤＮＡがナノ細孔を通って移動するときｓｓＤＮＡがナノ細孔表面に吸着するのを最小限にするかまたは抑制すべく加工され得る。各種生体分子（例えば、ｓｓＤＮＡ）が鎖のアニオン性骨格を通って親水性及びカチオン性表面のいずれかに結合する傾向があったり、ヌクレオチドを通って疎水性表面に結合する傾向があることは公知である。従って、ナノチューブ連節ナノ細孔構成の製作方法においてナノ細孔が形成されている支持構造物を対象分子（例えば、ｓｓＤＮＡ）に不活性な材料から作成するか、またはナノ細孔及び支持構造物を対象分子に対して不活性な材料層で被覆することが好ましい。よって、分子を有する電解溶液と接触するとき中性の表面電荷を有する絶縁表面層をナノ細孔上に設けることが好ましい。分子を有する電解溶液がｐＨ７またはその近くにあるならば、酸化アルミニウムが理想的な被覆材料である。分子を有する電解溶液がｐＨ≧９であるならば、分解することなく高ｐＨ環境に無限に耐えるので代わりに酸化ハフニウムが好ましい。
【００８４】
ナノ細孔を選択材料層で被覆しようとするときには、原子層堆積（ＡＬＤ）の方法が堆積技術として好ましい。ＡＬＤは、正確な１回のオングストローム厚さコントロールで高いアスペクト比の構造物でも多くの異なる材料の高い絶縁保護段差被覆(conformal step coverage)を与えながら、電荷及び表面の材料特性を変化させることができるので、ナノ細孔製作と併せて特に好ましい。加えて、ＡＬＤ方法は、以下に詳記するように孔径をコントロールするため及びナノチューブ電極を分子検出領域から絶縁させるために使用され得る。
【００８５】
酸化アルミニウムが選択被覆層材料であるとき、それは、例えば原子層堆積（ＡＬＤ）により、例えば参照により組み入れるＢｒａｎｔｏｎらの米国特許出願公開第２００５／０２４１９３３号“Ｍａｔｅｒｉａｌ  Ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ｆｏｒ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  Ｓｏｌｉｄ  Ｓｔａｔｅ  Ａｐｅｒｔｕｒｅ  Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ”に教示されているような単相堆積をコントロールできる方法で堆積され得る。
【００８６】
ナノ細孔上にフィルムをＡＬＤにより作成する方法の１例において、第１方法ステップではフィルムを堆積させようとする構造物の表面を、１つ以上の選択分子前駆体と反応するように作成する。多くの用途のために、ＡＬＤ方法用に金属前駆体が使用される。例えば、ＡＬＤ金属前駆体はＭＬｘ（ここで、ＭはＡｌ、Ｈａ、Ｍｇ、Ｗ、Ｔａ、Ｓｉまたは他の金属であり、ＬはＣＨ３、Ｃｌ、Ｆ、Ｃ４Ｈ９、または揮発性分子を生成する他の原子または分子リガンドである）として用意され得る。例えば、ナノ細孔上にＡｌ２Ｏ３層を堆積するためには、アルミナ層を形成するための金属前駆体に対して高い反応性であるヒドロキシル化表面を形成すべくＡＬＤ堆積の直前に構造物をまず例えばＵＶ／オゾンに曝す。
【００８７】
ヒドロキシ基が構造物の表面上に生成したら、表面上で生成したヒドロキシと反応させるために前駆体（例えば、アルミナを堆積させるためには金属前駆体トリメチルアルミニウム［Ａｌ（ＣＨ３）３］（ＴＭＡ））が使用され得る。すなわち、Ａｌ（ＣＨ３）３分子を含むガス状前駆体を表面−ＯＨ部位と反応させるために用意する。この反応により、揮発性ＣＨ４ガス分子が生じ、最初の表面−ＯＨ部位でＡｌ（ＯＨ）２、（ＣＨ３）またはＡｌ（ＯＨ）（ＣＨ３）２が形成される。そのようなアルミナ形成方法のための適当な反応ゾーン温度は約２００〜約３００℃である。
【００８８】
Ａｌ（ＣＨ３）３とヒドロキシ基の反応は、反応中最初の表面リガンド−ＯＨが消費され、表面に金属前駆体と更に反応できないＬリガンドが占めるようになる点で自己終結性である。この自己限定性反応プロセスにより、構造物及び細孔表面上に材料の単層未満またはそれ以上の堆積が生ずる。次のＡＬＤ方法ステップで、残存する未反応のＡｌ（ＣＨ３）３前駆体及び生じたＣＨ４ガスを反応チャンバから、例えば乾燥窒素または他の適当なキャリアガスを用いてフラッシュさせる。次の方法ステップで、堆積した層の表面を選択前駆体と反応性とすべく水蒸気を反応チャンバに導入する。このアルミナ堆積例では、水蒸気を露出ＣＨ３基と反応させるために用意する。水蒸気と有効ＣＨ３基との反応によりＣＨ４ガスが遊離し、各−ＣＨ３部位で−ＯＨ基が結合し、こうして新しくヒドロキシル化された表面が生ずる。このヒドロキシル化プロセスは、すべての−ＣＨ３部位が水蒸気と反応したら自己終結する。このプロセス中、隣接するＡｌ（ＯＨ）２部位は架橋して水分子及び連結したＡｌ−Ｏ−Ａｌネットワークが生成する。
【００８９】
次の方法ステップで、残存する水蒸気及び遊離したＣＨ４基を例えば上記したように窒素フラッシングステップを用いて排出させる。これにより１つのＡＬＤ反応サイクルが完了し、構造物並びに細孔の表面及び側壁上にアルミナ層が生成される。次いで、堆積した層を次のサイクルの水蒸気と反応させた後、Ａｌ（ＣＨ３）３を反応のために反応チャンバに導入する。１つのＡＬＤ反応サイクルにおける各方法ステップの期間は、過剰の前駆体または排出物を与えることなく十分な反応時間を得ることができるように選択する。例えば、アルミナ堆積方法の例では、１つのＡＬＤサイクルは金属前駆体蒸気を１秒間反応チャンバに流した後、５秒間窒素をパージし、次いで水蒸気を１秒間流し、その後窒素を５秒間パージするとして使用され得る。例えば単層の厚さの約１／３であり得るアルミナ層が前記した各サイクル後形成される。
【００９０】
アルミナ層のＡＬＤに対する上記方法条件で、サイクル回数の総数に関係なくＡｌ２Ｏ３の堆積速度は０．９９±０．１２Å／反応サイクルであることが実験的に決定された。この堆積速度は２０〜５００サイクルで確証された。よって、２ｎｍ直径のナノ細孔から出発して、ナノ細孔直径は５サイクルのＡｌ２Ｏ３堆積プロセスでたった約±１．２Åの誤差で１ｎｍに縮小され得る。
【００９１】
本発明が提供する代替技術では、例えば参照により組み入れるＧｌｅａｓｏｎらの米国特許第５，８８８，５９１号“Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｖａｐｏｒ  Ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｆｌｕｏｒｏｃａｒｂｏｎ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｔｈｉｎ  Ｆｉｌｍｓ”に教示されているようにテフロン（登録商標）様層をナノ細孔及び支持構造物の表面に堆積し得る。
【００９２】
固体状態ナノ細孔にナノチューブプローブを連節するためには、選択された支持構造物においてナノチューブをナノ細孔と一体化させることが好ましい。１つの製作技術では、カーボンナノチューブを参照により組み入れるＧｏｌｏｖｃｈｅｎｋｏらの米国特許出願公開第２００５／０００７００２号“Ｃａｒｂｏｎ  Ｎａｎｏｔｕｂｅ  Ｄｅｖｉｃｅ  Ｆａｂｒｉｃａｔｉｏｎ”に教示されているように対象支持構造物上で直接合成する。
【００９３】
この技術では、触媒特性が正確にコンロールでき、それに対応してナノチューブ成長を正確にコントロールできるので、ナノチューブプローブを構成するために水平方向に配向し、支持体表面に対して平行な単層ナノチューブが選択的に合成される。この方法で、固体触媒材料の蒸着、スパッタリング、分子ビームエピタキシー、ゾルゲル形成、電子ビーム蒸着、熱蒸着または他の選択蒸着方法により触媒層を支持構造物上に形成する。どんな蒸着方法を選択しても、選択した触媒材料の幾つかの単層しか膜または支持基板上に堆積されないように蒸着フィルムの被覆率を非常に低くできるようにコントロールすることが好ましい。
【００９４】
蒸着方法の１例では、選択厚さのＦｅ触媒層を形成するために、Ｆｅホイルを溶接したタングステンボートスポットを用いたＦｅの熱蒸着を真空条件下で（例えば、約１０−５または１０−６トールの圧力下で）実施し得る。どんな触媒材料及び蒸着方法を使用しても、生ずる触媒層の厚さが約２ｎｍ未満であることが好ましく、または触媒層が約８×１０１５原子／ｃｍ２以下の層被覆率を特徴とすることが好ましい。触媒層が厚くなると触媒層から水平に合成されるナノチューブの直径が対応して大きくなり、触媒層厚さの閾値を超えると単層よりも多層の水平ナノチューブが形成される。例えば２ｎｍ以下の厚さの薄い触媒層でも単層ナノチューブを予測可能に、信頼可能に形成するために十分であると理解される。
【００９５】
製作シーケンスの１例では、まず接触パッドを選択支持構造物上に慣用方法で、例えばナノチューブプローブとのオーム接点を形成するためのパラジウム層として形成する。接触パッドは、ナノ細孔を配置しようとする場所の近くに形成する。次いで、ナノチューブ触媒層を一層以上の金属接触パッド層の上に形成する。次いで、パターン化フォトレジスト層を慣用のリフトオフ技術を用いて除去すると、パターン化触媒／電極領域が生ずる。この技術は、ナノチューブプローブ接触パッド及び触媒層を１ステップでパターン化することができるので特に有利であり得る。従って、触媒領域の範囲をナノチューブプローブ接触パッドの範囲と一致させることが許容され得る用途のためにはこの方法が好ましい。
【００９６】
所与の用途のために触媒領域が接触パッドを完全に被覆しないことが好ましいならば、その場合接触層の一部から触媒材料を除去するために追加のリソグラフィー及びエッチングシーケンスを実施し得る。方法の１例では、触媒層を例えばパターン化フォトレジスト層でマスキングし、除去しようとする触媒層の領域を露出させる。次いで、ドライエッチング方法（例えば、プラズマエッチング、イオンビームエッチングまたは他の技術）を使用して望ましくない触媒層領域を除去する。多くの触媒層エッチング方法が下にある金属電極材料の上の触媒材料をエッチングする際に余り選択的でないこともあることが認識されている。従って、金属接触パッド材料の完全性の維持を確保するために触媒エッチング方法をタイムドプロセス(timed process)としてまたは他のコントロールを用いてコントロールすることが好ましい。
【００９７】
代替方法では、ナノチューブプローブ接触パッド層のために使用したものとは別のステップのシーケンスで触媒層をパターン化し、エッチングし得る。例えば、接触パッド層を例えば上記した慣用のリフトオフ法によりパターン化した後、触媒層を第２の別のリフトオフ法により堆積し、パターン化し得る。このシナリオで、フォトレジスト層を生成した接触パッド上に形成し、パターン化して、ナノチューブ触媒層の領域を与えたいところに接触パッドの領域を露出させる。次いで、触媒層を、好ましくは上記したような選択蒸着法によりブランケット堆積させる。次いで、フォトレジスト層のリフトオフを実施して触媒層の一部を除去して、接触パッドの頂上にパターン化触媒領域を生じさせる。
【００９８】
触媒層をリフトオフ法によりパターン化することは必須ではない。その代わりに、触媒層を接触パッド上にブランケット堆積させ、その後例えば触媒層の上に適用されているフォトレジスト層をリソグラフィックパターン化することによりエッチングし、パターン化して、別個の触媒アイランドを規定する。次いで、フォトレジストパターンにより露出した触媒領域のエッチングを慣用方法で実施し得る。触媒リフトオフアプローチのようにこのアプローチは、必ずしも電極接触パッド全体を横切って広がっておらず、従ってナノチューブ合成の位置をより正確に規定する触媒アイランドを正確に形成することができるという作用効果を有している。
【００９９】
接触パッド及び触媒領域を生成するためにどんな方法シーケンスを使用しても、本発明によれば、意図するアパーチャ位置を横切って接触パッド及び触媒領域を広げることことにより、接触パッド及び触媒領域を貫いてアパーチャを生成せせて接触パッド及び触媒領域をアパーチャの端部と自己整列させることが好ましい。こうすると、アパーチャにより分離されている２つの接触パッドが生ずる。触媒層領域もアパーチャ端部に隣接し得、接触パッドの広い部分に広がっていなくてもよい。前記条件は、上記した各種触媒層エッチングシーケンスにより生じ得る。どんな触媒パターンが望ましくても、触媒領域の位置及び範囲を正確に規定できるリソグラフィック方法により作成することが好ましい。このリソグラフィック触媒規定と薄い触媒層の蒸着の組み合わせでナノチューブを正確に合成することができる。
【０１００】
この触媒領域のリソグラフィック規定は触媒層をエッチングする必要がない。例えば、触媒層のブランケット堆積を上記したように実施し、その後キャッピング層を堆積し、パターン化し得る。キャッピング層パターンによりナノチューブを合成したいところに触媒層の領域を露出させ、触媒層の残りはナノチューブ合成を抑制するために被覆されている。この構成で、触媒層それ自体はエッチングされないが、リソグラフィーによりナノチューブ合成のための触媒露出を正確に位置づけることができる。
【０１０１】
触媒層領域を接触パッド上の選択部位に形成したら、その上にナノチューブを設けたい膜または他の支持構造物を貫いてアパーチャを形成する。方法の１例では、各種層をアパーチャと自己整列できるように触媒、接触パッド及び膜材料の集束イオンビームミリングを上記した方法で直接実施する。生じた構造物により、アパーチャは接触パッド及び触媒領域と整列している。或いは、エッチングしようとする各層のリソグラフィックパターン化は連続して実施され、１つ以上の層を所与のエッチング方法によりできるだけ一緒にエッチングする。更に、所与の用途に適した配列または他の構成で所与の基板、膜または他の支持構造物に複数のアパーチャを形成してもよい。
【０１０２】
１つ以上の選択アパーチャが生成したら、ナノチューブ合成を基板または膜上で実施し得る。ナノチューブ合成は、アパーチャの端部または接触パッドと接続するために各アパーチャを橋掛けする１つ以上のナノチューブを生成させるべく特に実施される。合成方法の１例では、ナノチューブ成長を適当なシステム（例えば、電気炉システム）で実施する。ナノチューブを成長させたい基板を電気炉システムに入れ、システムの温度を所望の成長温度まで上昇させる。成長温度は例えば約６００〜１５００℃、好ましくは約９００℃であり得る。この温度上昇中、接触パッド材料、触媒材料、膜及び／または基板材料、及び構成中に含まれる他の材料の酸化を抑えるために不活性ガス（例えば、アルゴン）を流すことが好ましい。
【０１０３】
所望の合成温度に達したら、ガス流を炭化水素ガス流（例えば、メタンガス流）に切り替える。メタンガス流を約１００〜約４００ｓｃｃｍ、好ましくは約２００ｓｃｃｍの流速に維持することが好ましい。本発明によれば、この比較的遅いガス流で、合成したナノチューブ及び基板域の上及びその周りでの非晶質炭素形成が実質的に抑制されることが見出されている。その結果、本発明によれば、非晶質炭素形成を抑制するためにメタンに加えて水素ガスまたは他のガス流を配合する必要はない。本発明によれば、合成したときのナノチューブの配向に対するガス流の方向の影響は無視でき、従って基板をガス流に対して特別に配向させる必要はないと理解される。
【０１０４】
触媒材料のメタンガス流暴露は、選択直径及び量を有するナノチューブを生成するために所与の用途に必要な時間実施し得る。多くの用途のために、単層ナノチューブを反復合成するためにはメタンガス流暴露を１０分以下実施することが好ましい。こうしたことが必須ではない場合、ガス流は所望のナノチューブ壁厚さに対応する選択期間継続させ得る。しかしながら、ナノチューブ及び周りの構造物上での非晶質炭素の生成を減らす点でナノチューブ合成時間を最小限とすることが好ましいことが見出された。
【０１０５】
この方法で、ナノチューブは、以下の方法でナノ細孔中に形成したいアパーチャの場所またはその近くの支持構造物の表面上で選択的に合成され得る。合成したナノチューブの電気的特徴は、選択ナノチューブがプローブとして機能するために必要な電気的特性を備えていることを確保するために好ましいものであると認識される。ナノチューブを所望するナノ細孔の場所の近くで合成した所望の直径及び電気的特性を有するナノチューブをその後例えばＡＦＭカンチレバーチップにより手動で所定位置に押し入れることもできる。
【０１０６】
チップ載置したＤＮＡ−ナノ細孔複合体をナノ細孔を通って移動させるためにナノチューブをアクチュエーター構造物のチップ（例えば、ＡＦＭカンチレバービームのチップ）に載置させたい用途の場合、本発明は、参照により組み入れるＧｏｌｏｖｃｈｅｎｋｏらの米国特許出願第１１／００８，４０２号“Ｐａｔｔｅｒｎｉｎｇ  ｂｙ  Ｅｎｅｒｇｅｔｉｃａｌｌｙ−Ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ  Ｌｏｃａｌ  Ｒｅｍｏｖａｌ  ｏｆ  Ｓｏｌｉｄ−Ｃｏｎｄｅｎｓｅｄ−Ｇａｓ  Ｌａｙｅｒｓ  ａｎｄ  Ｓｏｌｉｄ  Ｓｔａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ  Ｐｒｏｄｕｃｅｄ  Ｗｉｔｈ  Ｓｕｃｈ  Ｌａｙｅｒｓ”に教示されているように載置チップ上に選択ナノチューブ長さを生成する技術を提供する。この技術は、ナノチューブプローブとしてまたはＤＮＡ−ナノチューブハイブリッド複合体中で作動させるために所望のナノチューブ長さを生じさせるためにも適用され得る。
【０１０７】
前記した方法シーケンスの第１ステップでは、構造物の電気的及び熱的状態をコントロールするために、電気的及び熱的な接続を可能にする構造物ホルダー上に設けられ得るナノチューブホルダーにナノチューブを設ける。好ましくは、ナノチューブに熱的及び電気的接続を与え得るようにナノチューブホルダーを構造物ホルダーと組み合わせてもよい。ナノチューブホルダーは、意図する用途に応じてナノ細孔を通ってコントロールして移動させるためにナノチューブを載置し、作動させ得る例えばＡＦＭチップとして、または別の適当な機械的に剛性な構造物（例えば、カンチレバー構造物）として設けられ得る。
【０１０８】
ナノチューブはいろいろな方法でナノチューブホルダーに配置され得る。多くの用途で、ナノチューブをその場で上記した技術に従ってホルダー上で成長させることが好ましい。しかし、ナノチューブを成長させるときカーボンナノチューブをナノチューブホルダー上に配置させるために適当なカーボンナノチューブ合成技術が使用され得る。或いは、カーボンナノチューブをナノチューブホルダー以外の位置で合成した後ホルダーに移動または堆積させてもよい。或いは、ナノチューブを慣用の方法で基板から垂直方向に成長させた後、チューブの長さに沿った点でホルダーをナノチューブと接触させることによりホルダー上に直接ピックアップさせてもよい。ナノチューブのホルダーへの固定付着は、例えばホルダーとナノチューブ間の接着メカニズムとして作用し得るカーボン残渣を蓄積させるべくホルダーに電子ビームを当てることにより生じさせ得る。この付着技術は挑戦的である場合があると認識されている。従って、ナノチューブを直接当該ホルダー上で現場成長させることが好ましい。
【０１０９】
ナノチューブをナノチューブホルダー上に配置したら、ナノチューブ及びホルダーを加工チャンバ中の構造物ホルダー上に置く。次いで、ナノチューブを約１３０Ｋ未満のナノチューブ温度及び約１０−４Ｔ未満の局所圧力下で水蒸気に曝すことにより固体氷凝縮物層をナノチューブ上に形成する。こうした条件下で、１μｍくらいの厚さを有する固体氷凝縮物マスキング層をナノチューブ上にコントロール可能に堆積させることができる。固体氷凝縮物マスキング層の形成はナノチューブのような３次元構造物に対してかなり指向性であり得、従ってプロセスチャンバ上の部位の蒸気インジェクタをナノチューブホルダー位置に近接させることが好ましいと考えられることを見出した。マスキング層の形成はその場で、例えば蒸気凝縮プロセスが進行するときナノチューブをＳＥＭイメージングすることによりモニターされ得る。
【０１１０】
マスキング層をナノチューブ上に形成したら、ナノチューブを短くするために切断しようとするナノチューブに沿った点に相当するマスキング層の位置にエネルギービームを当てる。出発長さを測定し、チューブの長さを短くするために切断しようとするチューブの点を同定するためにナノチューブをイメージングすべくＳＥＭまたは他のイメージングシステム及び技術が使用され得る。次いで、ナノチューブ切断のために望ましい位置ぴったりにと固体凝縮物マスキング層を局所的に除去するためにエネルギービーム、例えば３ＫｅＶ，５０ｐＡ電子ビームまたはイオンビーをその点に当てる。
【０１１１】
固体凝縮物マスキング層の局所除去が完了し、その下のナノチューブの場所が露出したら、ナノチューブそれ自体を切断する。固体凝縮物層を局所除去することにより露出したナノチューブの長さに沿った断面でナノチューブにエネルギービームを当てて、ナノチューブを所望の長さに切断する。ナノチューブを切断するために使用するエネルギービームは、固体凝縮物マスキング層を局所的に除去するために使用したエネルギービームと同じであっても異なっていてもよい。ナノチューブ切断ビーム種がいずれであっても、固体凝縮物マスキング層はナノチューブを保護するように作用し、或いはまがったり、または切断ビーム種を露出したナノチューブ断面に当てた後、露出した断面に焦点を合わせるときエネルギービームから外れるの防止するように作用する。更に、固体凝縮物マスキング層はナノチューブを露出断面で切断するときナノチューブ剛性を保護し、維持するように作用する。その結果、高度に集束する切断ビーム種は必要としない。局所的に除去された固体凝縮物マスキング層の線幅を使用することによりナノチューブ切断プロセスの分解能を設定することができる。
【０１１２】
上記シナリオの１例では、カーボンナノチューブ上の固体氷凝縮物マスキング層の領域を局所的に除去するために電子ビームが使用され得る。例えば、ナノチューブ上に１２８Ｋの温度及び１０−４Ｔの圧力で形成された氷マスキング層を局所的に除去するためには上記した３ＫｅＶ，５０ｐＡビームが使用され得る。次いで、氷マスキング層を局所的に除去したナノチューブの位置でナノチューブを切断するためにイオンビームが使用され得る。例えば、３０ＫｅＶのエネルギー及び１０ｐＡのアンペア数を有するＧａ＋イオンビームがナノチューブを切断するために使用され得る。ここで、固体氷凝縮物層でナノチューブを保護しながらナノチューブを切断するために余り集束されないイオンビームが使用される。
【０１１３】
ナノチューブを切断したら、固体凝縮物マスキング層を除去し得る。多くの用途のために、マスキング層を固相から蒸気相に逆変換することにより除去することが好ましい。前記蒸発により、ナノチューブ上の残渣の形成及びナノチューブに対する起こり得る損傷が最小限となる。方法の１例では、ナノチューブの温度を当該プロセス圧力で昇華させるのに十分な温度に上昇させることにより氷凝縮物マスキング層を昇華させる。例えば、約１０−４Ｔの圧力では、少なくとも約１８０Ｋの温度で氷凝縮物層を昇華させることができる。このようにして容易に曲げられまたは損傷を受けるナノチューブに対して実質的に残渣または害を与えることなく氷凝縮物層が蒸気相に完全に除去される。凝縮物マスキング層は、湿潤化学並びにプラズマまたは他の蒸気方法を含めた先に説明した適当な方法により除去され得る。この除去ステップで、選択した長さのナノチューブが生ずる。
【０１１４】
選択した分子分析デバイス構成を製造するために上記した各種製作方法が所要により使用され得る。下記実施例は広範囲のデバイス構成を製造するための製作技術を説明する。
【実施例１】
【０１１５】
図８Ａ〜８Ｂを参照すると、本発明に従う電子分子分析デバイスを製造するための製作シーケンスの第１例では、支持構造物２００（例えば、厚さが約２００ｎｍの窒化ケイ素膜）を慣用の方法で、Ｇｏｌｏｖｃｈｅｎｋｏらの米国特許出願公開第２００５／０００６２２４号“Ｐｕｌｓｅｄ  Ｉｏｎ  Ｂｅａｍ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  Ｓｏｌｉｄ  Ｓｔａｔｅ  Ｆｅａｔｕｒｅｓ”に教示されているように用意する。図８Ａのトップダウン平面図に示すように膜には例えば電子ビームエッチング、イオンビームミリング、ウエットエッチング、プラズマエッチング、イオンビーム彫刻または他の適当な方法により出発アパーチャ２０５が設けられている。
【０１１６】
１例では、出発アパーチャは通常約例えば５０〜１００ｎｍの直径を有する円形である。図８Ａの平面図及び図８Ｂの側面図に示すように、支持構造物２００には構造物の上面に上部トレンチ、すなわち溝２０８、構造物の底面に下部トレンチ２１０が設けられている。上部及び下部トレンチ２０８，２１０は相互に直交しており、アパーチャ２０５は２つのトレンチの交点に形成されている。この配向により、以下に説明するようにナノチューブプローブ配置のために自己整列が可能である。
【０１１７】
上部及び下部トレンチは、集束イオンビーム方法を用いてまたは標準パターン化マスキング及びエッチング手順により生成され得る。多くの用途のために、トレンチは約１００ｎｍ未満の幅、支持構造物膜の厚さの約１／２の深さとして形成され得る。所与の手順で生成されるトレンチの正確な深さは、所与のバッチの窒化ケイ素膜に対する手順を検定するために、一連の段階的に深くなるトレンチ（例えば、２００ｎｍ厚さの膜の場合５０ｎｍ、７０ｎｍ、９０ｎｍ、１１０ｎｍ等のトレンチ深さ）を試験することにより決定され得る。次いで、所望の直径（例えば、約５０〜約１００ｎｍ）の出発ナノ細孔を生成するトレンチの深さはその後の製作のために開ループ様式でルーチンに使用され得る。
【０１１８】
この支持構造物の構成が完了したら、ナノチューブ２１２をアパーチャ２０５を横切って上部トレンチ２０８に設ける。ナノチューブ２１２は、アパーチャでナノチューブを現場合成することにより、またはアパーチャに自由ナノチューブを配置することによりトレンチのアパーチャ位置に配置し得る。ナノチューブの現場合成は上記した方法で実施され得、例えば上部トレンチに触媒堆積し、パターン化した後ＣＶＤナノチューブ合成をする。或いは、非水性溶液中で用意した予備合成ナノチューブを支持構造物の表面上に分配し、選択したナノチューブをトレンチに機械的に輸送させる。
【０１１９】
この選択したナノチューブの機械的輸送は、予め特定した位置に正確に輸送及び配置できるように実験的に実証されている。前記した輸送及び配置のための１つの技術では、ナノチューブを表面を横切ってトレンチに下向きにアパーチャの位置にローリングさせるためにＡＦＭチップを使用する。明瞭とするために、図８の構成要素は縮尺どおりに示されていないことに留意されたい。ナノチューブ直径は典型的にはトレンチの直径及び幅よりも何倍も小さい。加えて、ファンデルワールス力のような表面引力作用により、ナノチューブが表面上の適所に保持される傾向にある。その結果として、ナノチューブはＡＦＭチップによりうまくコントロールされ、表面を横切って、トレンチの壁を下方にアパーチャの位置の所望の場所にローリングされ得る。
【０１２０】
選択したナノチューブは、上記したように合成前に形成した接触パッドにより電気的に接触され得、またはその後例えばＡ．Ｊａｖｅｙら，Ｎａｔｕｒｅ，４２４：６５４（２００３）及びＡ．Ｊａｖｅｙら，Ｎａｎｏ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，４：４４７（２００４）に記載されているように例えばパラジウム接触パッドを形成した後、これを慣用の方法によりオフチップ回路に接続したより大きな金接触パッドに接続することにより電気接触させ得る。この方法では、パラジウムをマスクを介してアパーチャ外周の近くの所望位置でナノチューブ上で蒸発させる。
【０１２１】
図１０Ｃ〜１０Ｄを参照すると、次の方法ステップで、ナノチューブ−支持構造物アセンブリ上に選択したコーティングを堆積させる。特に適した堆積技術は上記した原子層堆積（ＡＬＤ）方法である。材料の堆積がコーティングを堆積させようとする材料の表面に近づきやすいヒドロキシまたは他の官能基と気相分子間の化学的相互作用に厳密に依存しているので、ＡＬＤ方法が特に適している。前記官能基が存在しないと、気相分子は堆積しない。合成したばかりのカーボンナノチューブは一般的には気相材料を堆積させるために必要なヒドロキシまたは他の官能基を有する官能化表面を持っていない。よって、絶縁材料（例えば、酸化アルミニウムまたは酸化ハフニウム）をシリコーン、窒化ケイ素及びナノチューブを含むデバイス構成上にＡＬＤにより堆積するならば、酸化アルミニウムまたは酸化ハフニウムは新しく形成された酸化アルミニウムまたは酸化ハフニウム表面を含めた構造物のすべての表面での化学反応により均一に成長するが、成長させるときその表面にヒドロキシ基のような官能基を有していないカーボンナノチューブからは成長しない。この条件を利用して、非支持ナノチューブ上にまたは前記チューブから直接ではなく（例えば、細孔またはボイド上に懸垂しているナノチューブの領域上ではなく）、支持構造物上に材料を部位特異的に堆積させることができる。材料がナノチューブ上に堆積したとしても、以下の製作シーケンスが使用され得る。
【０１２２】
１つの上記シナリオで、選択した数のＡＬＤサイクルを上記したように実施し、アパーチャの壁及びトレンチ２１０を含めた支持構造物２００のすべての表面上に材料を堆積させる。選択材料の堆積は広がり、窒化ケイ素または新たに成長したＡＬＤ材料により支持されているかまたはその近くのナノチューブの領域を被覆し得るが、それ自体ナノチューブ表面から生じない。材料堆積を継続させると、アパーチャでの堆積材料の蓄積によりアパーチャの範囲が縮小する。従って、選択した最終ナノ細孔直径（例えば、約２〜約１０ｎｍの直径）が生ずるまで堆積プロセスを継続させる。ＡＬＤ法の非常に正確な特性のために、各ＡＬＤサイクルにより生ずる材料厚さは所与の支持構造物及びナノチューブ配置及び寸法に対して正確に特徴づけられ、ナノチューブの上面が被覆され、選択した最終ナノ細孔直径を達成するようにコントロールされ得る。例えば、５０ｎｍの出発アパーチャから、各サイクルで層１Åの層厚さを付加して２２０ＡＬＤサイクルを実施すると、直径６ｎｍの最終細孔が生ずる。
【０１２３】
ＡＬＤ法により最終ナノ細孔直径が得られたら、ナノ細孔の外周にナノチューブプローブ構成を設ける。図８Ｅ〜８Ｆを参照すると、この構成は、ナノ細孔外周に接している２つのナノチューブ端部２１６，２１８を生成するように最終ナノ細孔を横切って露出しているナノチューブを切り開くことにより得られる。ナノチューブ切断技術の１例では、エネルギービーム２２０（例えば、高エネルギー電子ビーム、または好ましくはイオンビーム）を支持構造物の底部または上部からナノ細孔を通して当てる。エネルギービームにより、ナノ細孔から露出している非保護ナノチューブ材料が除去され、酸化アルミニウムまたは他のＡＬＤコーティングはナノチューブ及び支持構造物のＡＬＤ被覆領域をビームから保護する。よって、ナノ細孔は、ナノ細孔を横切ってナノ細孔から除去しようとする裸のナノチューブを露出させるエッチマスクとして作用し、構造物の残りは最終ナノ細孔の直径内に存在しないＡＬＤコーティングにより保護される。裸のナノチューブが最終ナノ細孔を横切って最終ナノ細孔から除去されたら、ナノ細孔外周に接するナノチューブプローブの端部を有する図１Ａのような機能的分子特性解析デバイスが得られる。
【実施例２】
【０１２４】
図９Ａ〜９Ｃを参照すると、電子分子分析デバイスを製造するための別の製作シーケンスでは、支持構造物２００（例えば、窒化ケイ素膜）に実施例１のようにアパーチャ２０５を設ける。直交トレンチ２０８，２１０のそれぞれが支持構造物の上面及び底面に設けられており、アパーチャは実施例１のようにトレンチの交差点に位置している。
【０１２５】
この構成を適所に設けたら、ナノチューブ２２５を実施例１のように下部トレンチ２２５に配置する。図９Ａはアパーチャを横切ったナノチューブを示している構造物の上部平面を描いており、図９Ｃはアパーチャを横切った底部トレンチにおけるナノチューブを示している構造物の底部平面を描いている。
【０１２６】
図９Ｂの端面図に示されているように、次の方法ステップで、エネルギービーム２２６（例えば、イオンビーム）を、アパーチャを通して膜の上側面から、製作シーケンスの最後に最終ナノ細孔外周に接して残る位置でナノチューブを切断するように選択された角度で、例えば図示した特定幾何構造の場合約６４度の角度で向ける。所与の幾何構造に対して対応の角度が決められる。この角度をつけたビームを入射させ、ビームの経路にあるアパーチャ中のナノチューブの部分を除去する。生じた構造を図９Ｄ〜Ｆに示す。イオンビームの経路になかったアパーチャ中のナノチューブ２２５の部分２２８はアパーチャに突出して残っている。
【０１２７】
図９Ｇ〜Ｉを参照すると、次の方法ステップで、アパーチャを横切って中心から外れて延びるように上部トレンチ２０８に第２ナノチューブ２３０が設けられる。この第２ナノチューブ２３０は、上記実施例１のようにトレンチの部位で現場合成しても、またはトレンチに機械的に配置してもよく、所望によりアパーチャを横切って中心から外してもよい。いずれの場合も、所望により第２ナノチューブ２３０はアパーチャの中心に配置されておらず、その代わりに図９Ｇ〜Ｉに示されているように側面が最終ナノ細孔の外周にちょうど接するようなトレンチの点に配置されている。
【０１２８】
第２ナノチューブを適所に設けたら、図９Ｊ〜Ｌに示すように支持構造物上に上記したように例えばＡＬＤにより選択材料を堆積させる。上記実施例１のように、堆積した材料が非支持ナノチューブの表面を除くすべての表面に層２３２を形成し、図９Ｊに示す構造物が生ずる。
【０１２９】
図９Ｋに示すように、材料堆積が進むと、アパーチャ直径は堆積材料により縮小する。堆積材料が蓄積すると、第１ナノチューブ２２５の突出部分２２８及び第２ナノチューブ２３０の上面が徐々に被覆される。選択したナノ細孔直径に達するまで材料堆積を継続し、突出ナノチューブ部分２２８の端部及び第２ナノチューブ２３０を最終ナノ細孔外周に位置している。この状態を可能とするために、図９Ｌに示されているようにちょうどナノ細孔外周の領域を除いて突出ナノチューブ部分２２８及び第２ナノチューブ２３０が材料で被覆されている点で所望のナノ細孔直径が確実に得られるように所与の支持体及びナノチューブ配置に対して選択した堆積方法（例えば、ＡＬＤ）が特徴づけられる。
【０１３０】
この堆積が完了したら、図２Ａ〜２Ｃの配置を有する完全に機能性の分子特性解析デバイスが製造される。図９Ｉに戻って参照すると、突出部分２２８に対向する第１ナノチューブ２２５のナノチューブ部分２３４は電気的に接続されておらず、図２Ｂに示す回路２８，５２の一部を形成していない。突出ナノチューブ部分２２８及び第２ナノチューブ２３０は、端部配向及び側部配向でナノ細孔を通って移動されるＤＮＡのコントロール及び分析のために２つの回路に接続されている２つのナノチューブプローブを構成している。
【実施例３】
【０１３１】
実施例２の製作シーケンスは、上記した図３Ａ〜Ｃ及び図４Ａの分子分析デバイスを製造するために敷衍され得る。図１０Ａ〜Ｃを参照すると、この敷衍プロセスでは、図９Ａ〜Ｃに示すように底部トレンチ２１０と上部トレンチ２０８の交差点にアパーチャ２０５を有する支持膜２００の底部トレンチ２１０にナノチューブ２２５が設けられている。次いで、実施例２及び図９Ｂのようにエネルギービームを使用してナノチューブ２２５の一部を除去すると、図１０Ａ〜Ｃに示すようにアパーチャにナノチューブの突出部２２８が生ずる。次いで、図９Ｇ〜Ｉ及び１０Ｄ〜Ｆに示すように第２ナノチューブ２３０を所望によりアパーチャの外周に、支持構造物の上部トレンチ２０８に配置する。
【０１３２】
図１０Ｇ〜Ｉを参照すると、第３ナノチューブ２３４が、支持構造物２００の上面上に、上部トレンチ２０８中の第２ナノチューブ２３０と直交するように、アパーチャの外周の位置に配置されている。いずれも上記されているように、この第３ナノチューブ２３４を現場合成しても、または選択位置に手動で配置してもよい。
【０１３３】
図１０Ｊ〜Ｌを参照すると、最終方法ステップで、選択材料を支持構造物上に例えばＡＬＤにより上記したように堆積させる。堆積材料は支持構造物の上面及び上部トレンチ上に層２３６を形成するが、図９Ｊに示すように第２ナノチューブ２３０を起点としない。第３ナノチューブ２３４は、ナノチューブ表面が官能化されておらず、アパーチャ中の第３ナノチューブの周りに膜材料がないためにアパーチャの領域は被覆されていないままである。その結果、第３ナノチューブはアパーチャの外周で露出されたままである。
【０１３４】
堆積材料層２３２は、図１０Ｌに示されているように支持構造物の底面も覆っている。図１０Ｋに示されているように、材料堆積が進むにつれてアパーチャ直径は堆積材料により縮小する。堆積材料の蓄積により、第１ナノチューブ２２５の突出部分２２８及び第２ナノチューブ２３０の上面が徐々に被覆される。選択したナノ細孔直径に達するまで材料堆積は続けられ、突出ナノチューブ部分２２８の端部及び第２ナノチューブ２３０は最終ナノ細孔外周に位置している。この状態を可能とするために、図１０Ｌに示されているように、堆積過程でちょうどナノ細孔外周の領域を除く突出ナノチューブ部分２２８及び第２ナノチューブ２３０が材料で被覆されている点で所望のナノ細孔直径が確実に得られるように所与の支持体及びナノチューブ配置に対して選択した堆積方法（例えば、ＡＬＤ）が特徴づけられる。
【０１３５】
堆積が完了すると、側面配向移動コントロールナノチューブ２３４、端部配向ナノチューブプローブ２２８及び側面配向ナノチューブプローブ２３０を有するナノ細孔が設けられる。この例の製作シーケンスにより、側面配向ナノチューブプローブ２３０に直交している移動コントロールナノチューブ２３４が生ずる。図４Ａには、移動コントロールナノチューブ６５が側面配向ナノチューブプローブ５０と平行しているデバイス配置が示されている。いずれの配置も本発明に従って使用され得、この例は各種構成が選択した製作シーケンスを用いて得られ得ることを立証している。
【０１３６】
図３Ａ〜３Ｃの配置のように移動コントロールナノチューブと共に２つの端部配向ナノチューブプローブを使用したいならば、実施例１及び３の製作シーケンスを組み合わせ得る。図８Ｃ〜８Ｆの堆積及びナノチューブ除去ステップの前に、図１０Ｇ〜Ｉの第３ナノチューブ２３４を支持構造物の上面に設けてもよい。その後、堆積及びエッチングステップを実施すると、図３Ａ〜３Ｃの構造物が製造され得る。
【実施例４】
【０１３７】
本発明に従って分子分析デバイスを製造するための別の製作シーケンスでは、図４Ｂの配置のようにナノ細孔の長さに沿って配置されている端部配向ナノチューブプローブ及び側面配向ナノチューブプローブが設けられている。図１１Ａ〜Ｂを参照すると、この製作シーケンスの第１ステップでは、比較的に厚い支持構造物（例えば、厚い窒化ケイ素膜）が用意される。ここでは、例えば約８００ｎｍの厚さを有する窒化物膜が使用され得る。一連のアパーチャを上記したように膜に設ける。図１１Ａは２つのアパーチャ２４２，２４４が設けられている厚い膜２４０の領域のトップダウン平面図である。図１１Ｂは図１１Ａの膜構造物の側面図である。
【０１３８】
図１１Ｃ〜Ｄに示されている次の方法ステップで、エネルギービーム２４６（例えば、イオンビームまたは一般的なリソグラフィック加工処理）を使用して、元の膜表面に対して直交している新しい膜表面が元の膜アパーチャの直径と交差するように膜材料を膜の上部から例えば約１／３除去する。次いで、このプロセスを膜の底部で繰り返して、膜材料を膜の底部から例えば約１／３除去する。こうして、元の膜表面に直交し、元の膜アパーチャの直径と交差する新しい膜表面が生成する。その結果、元の膜の一部は元の膜の厚さのたった１／３であり、元の膜の他の部分は元の厚さのままである。上面及び底面から膜の除去された部分の端部は元のアパーチャの直径を超えて延びているので、縦方向溝２４８，２５０が元の膜表面に対して直交している新しく生成された膜表面の長さに沿って曝されている。これらの溝は、元の膜表面に平行な表面を有する残留膜の厚さを貫いてアパーチャとして延びている。
【０１３９】
図１１Ｅ〜Ｆを参照すると、次の方法ステップで、ナノチューブを上記したように膜構造物上で現場合成する。触媒材料を、新しく生成した直交膜表面の１つ及び元の膜表面に平行な表面を有する残留膜上の溝に隣接し、その溝の中に、アパーチャに隣接する位置で堆積させ、パターン化する。次いで、ナノチューブを膜構造物上で合成する。図１１Ｅ〜Ｆは膜支持構造物上の多数の合成ナノチューブ、例えば２５２、２５４、２５６、２５８を示している。多数のアパーチャが膜構造物に設けられているとすると、少なくとも１つの合成ナノチューブが図１１Ｅにおける膜のアパーチャ２４２に示すナノチューブ２５６のように、溝に沿って且つ元の膜表面に平行な表面を有する残留膜の厚さを貫くアパーチャを通って成長すると予想され得ると認識される。
【０１４０】
アパーチャ２４２を通ってナノチューブ２５６が合成されていることを同定したら、図１１Ｇ〜Ｈに示す次の方法ステップで、選択した第２ナノチューブ２６０の端部２６２がアパーチャ２４２に十分に突出しているように第２ナノチューブ２６０をアパーチャ２４２に対して手動で配置する。或いは、この第２ナノチューブは、ナノチューブの長い側面が上記実施例１のように中心を外してアパーチャを横切って延びるように配置され得る。この場合、第２ナノチューブはアパーチャの中心に配置されておらず、その代わりに実施例２に側面が接しているナノチューブについて示されているように側面が最終ナノ細孔の外周にちょうど接するように膜表面上の位置にある。図１１Ｉ〜Ｊを参照すると、次の方法ステップで、露出している膜構造物のすべてを被覆し、アパーチャを最終所望ナノ細孔サイズ（例えば、直径約２〜約１０ｎｍ）に縮小させるために材料の層２６５を例えばＡＬＤにより堆積させる。
【０１４１】
ナノチューブ２６０の端部が最終ナノ細孔の外周に正確に接するようにナノチューブ２６０の端部を手動で配置することは困難であるので、まず第２ナノチューブ２６０を配置して、その端部をアパーチャ２４２に、その直径を横切って十分に突出させる。この突出ナノチューブ端部２６２は最終ナノ細孔直径をＡＬＤにより生成させたとき新しく堆積したＡＬＤ材料により未保護のままであるので、支持構造物の底部または上部からナノ細孔を通って向けられる電子ビーム、イオンビームまたは他のエネルギービームを用いて除去され得る。実施例１の場合のように、エネルギービームにより露出されている非保護ナノチューブ材料はナノ細孔から除去され、酸化アルミニウムまたは他のＡＬＤ被覆はナノチューブ及び支持構造物のＡＬＤ被覆領域をビーム種から保護する。
【０１４２】
また膜構造物の左側端面図を図示している図１１Ｍを参照すると、図１１Ｉ〜１１Ｌに示す材料堆積の前にナノ細孔２４２中の垂直ナノチューブ２５６の端部上に金属接触パッドを設けることが好ましい。前記金属接触領域により、垂直ナノチューブ２５６の端部が堆積される材料により被覆されるのが防止され、金属接続を適所に置く。材料堆積が完了したら、ナノ細孔の長さを通って垂直に配向している第１ナノチューブプローブ及び第２端部配向ナノチューブプローブを有する図４Ｂのような分子特性解析デバイスが製造される。
【０１４３】
この製作例は、多くの代替分子特性解析デバイス構成を製造するために使用され得る各種方法を立証している。本発明は特定の製作方法を必要としない。しかしながら、所望の分子特性解析デバイス配置を製造するのに適した製作方法が使用され得る。
【０１４４】
この論議で、本発明のナノ細孔をベースとする分子特性解析装置が広範囲の分子特性解析用途に適用され得ることが判明した。分子特性解析デバイスは、装置が、ＤＮＡ塩基の配列を異なる物理的及び電気的特性に基づいて直接電子シグナルに変換し得るため、そして装置によりＱ２０塩基の約７．７倍の配列適用範囲(sequence coverage)または約６．５倍の適用範囲を、＜１０６の標的ゲノムからのＤＮＡを用いるサンプリングにわたって達成できる単一分子分析技術を可能にするため、１，０００ドル／哺乳動物ゲノムアッセイの要件を満たすことができる。これは約２ナノグラムのヒトゲノム材料に相当し、標準サンプリング方法を用いて増幅させることなく直接得られ得る。塩基を約１０４塩基／秒の速度でナノ細孔中を通過させるとき塩基配列中の各ＤＮＡヌクレオシド塩基の正体が明らかになれば、１００個のナノ細孔を有するアレーを有する装置は１つの哺乳動物ゲノムの高品質ドラフト配列を約２０時間で生じ得る。
【０１４５】
ナノ細孔配置により可能となる高処理量及び空間閉じ込めとナノチューブプローブ構成により可能となる直接電子分析、分子配向コントロール及び分子移動速度コントロールの組合せにより、広範囲の生物学的及び医学的用途に必要な迅速、信頼可能且つ安価な分子分析及び特性解析を達成する高帯幅分子特性解析方法が得られる。当業者は本発明の趣旨及び範囲を逸脱することなく上記した実施形態に各種の修飾及び付加を加えることができることを認識している。従って、本発明により与えられる保護は本発明の主題及びまさしく本発明の範囲内のその均等物に及ぶと見なされるべきである。
【図面の簡単な説明】
【０１４６】
【図１Ａ】端部配向カーボンナノチューブプローブと連節されている本発明が提供する分子特性解析デバイスの第１実施形態の概略断面図である。
【図１Ｂ】ナノチューブの端部及び側面を同定するカーボンナノチューブの概略側面図である。
【図１Ｃ】ｓｓＤＮＡ分子を特性解析するときｓｓＤＮＡ分子が配向されていることを示している図１Ａのデバイスの概略断面図である。
【図２Ａ】１つの端部配向ナノチューブプローブ及び１つの側面配向ナノチューブプローブと連節されている本発明が提供する分子特性解析デバイスの実施形態の更なる例の概略断面図である。
【図２Ｂ】図２Ａの実施形態の概略平面図である。
【図２Ｃ】ｓｓＤＮＡ分子を特性解析するときｓｓＤＮＡ分子が配向されていることを示す図２Ａの実施形態の概略断面図である。
【図３Ａ】端部配向カーボンナノチューブプローブ及び側面配向移動コントロールカーボンナノチューブと連節されている本発明が提供する分子特性解析デバイスの実施形態の更なる例の概略断面図である。
【図３Ｂ】図３Ａの実施形態の概略平面図である。
【図３Ｃ】ｓｓＤＮＡ分子を特性解析するときの移動スピードがコントロールされ、ｓｓＤＮＡ分子が配向されていることを示す図３Ａの実施形態の概略断面図である。
【図４Ａ】１つの端部配向カーボンナノチューブプローブ、１つの側面配向ナノチューブプローブ及び側面配向移動コントロールカーボンナノチューブと連節されている本発明が提供する分子特性解析デバイスの実施形態の更なる例の概略断面図である。
【図４Ｂ】１つの端部配向カーボンナノチューブプローブ及びナノ細孔の長さを貫いて延びている１つの側面配向ナノチューブプローブと連節されている本発明が提供する分子特性解析デバイスの実施形態の更なる例の概略断面図である。
【図５Ａ】端部配向カーボンナノチューブプローブと連節されており、ナノ細孔を通過するＤＮＡ−ナノチューブ複合体の移動及び特性解析のために構成されている本発明が提供する分子特性解析デバイスの実施形態の更なる例の概略断面図である。
【図５Ｂ】端部配向カーボンナノチューブプローブと連節されており、ナノ細孔を通過するアクチュエータチップ載置したＤＮＡ−ナノチューブ複合体の移動のために構成されている本発明が提供する分子特性解析デバイスの実施形態の更なる例の概略断面図である。
【図５Ｃ】ＤＮＡ−ナノチューブ複合体を検知するためのアクチュエータチップ載置したカーボンナノチューブプローブを有して構成されている本発明が提供する分子特性解析デバイスの実施形態の更なる例の概略断面図である。
【図６】ケイ素支持フレーム上の窒化ケイ素膜中にナノ細孔を有して構成されている本発明が提供する分子特性解析デバイスの概略断面図である。
【図７】流体リザーバー及びチャネルを含む本発明が提供する包装分子特性解析デバイスの概略図である。
【図８】分子特性解析デバイスの製造方法の１例における製作ステップを示す概略断面図である。
【図９】分子特性解析デバイスの製造方法の更なる例における製作ステップを示す概略断面図である。
【図１０】分子特性解析デバイスの製造方法の更なる例における製作ステップを示す概略断面図である。
【図１１−１】図１１Ａ〜Ｈは、分子特性解析デバイスの製造方法の更なる例における製作ステップを示す概略断面図である。
【図１１−２】図１１Ｉ〜Ｍは、分子特性解析デバイスの製造方法の更なる例における製作ステップを示す概略断面図である。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１−１】
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【図１１−２】
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【国際調査報告】
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