(57)【要約】本発明は、ニューロン成長の低分子刺激物質、その調製および神経障害の治療のための用途を提供する。一実施形態では、本発明で提供する化合物および組成物を使用して、神経障害に関連するに種々の病状を治療、予防、または回復する方法を提供する。本発明は、ニューロン成長の調節因子である低分子化合物を提供する。本明細書中で提供される化合物は、複数の負荷電部分を有するオリゴ糖類またはオリゴ糖様分子である。また、該化合物を使用する組成物および方法、および神経障害に関連する状態を治療するための組成物を提供する。
2008500372.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
2008500372.tif 000068
（式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、以下のように選択される：
ｉ）Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ３およびＲ４は水素である；
ｉｉ）Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ１およびＲ２は水素である；
ｉｉｉ）Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択されＲ４は水素である；
ｉｖ）Ｒ１、Ｒ２およびＲ４は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ３は水素である；
ｖ）Ｒ２およびＲ４は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ１およびＲ３は水素である；
ｖｉ）Ｒ１は、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は水素である；
ｖｉｉ）Ｒ２は、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は水素である；
ｖｉｉｉ）Ｒ３は、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ２、Ｒ４およびＲ１は水素である；または
ｉｘ）Ｒ４は、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３水素であり、
Ｒ５は、必要に応じて置換されたアルキルおよび必要に応じて置換されたアルケニルから選択され；
ｎは０〜１００である）
で表される化合物、またはその薬学的に受容可能な誘導体。
【請求項２】
ｎが０〜５０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ｎが０〜１０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
ｎが０、１、２、３または４である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ５が低級アルケニルである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ５がアリルである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１が、水素、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ１が硫酸塩である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ１が水素である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ２が、水素、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ２が硫酸塩である、請求項１〜９いずれか１項に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ３が、水素、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択される、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ３が硫酸塩である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ３が水素である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ４が、水素、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ４が硫酸塩である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ４が水素である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１８】
前記化合物が式：
【化２】
2008500372.tif 000069
で表される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１９】
前記化合物が、式：
【化３】
2008500372.tif 000070
で表される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２０】
前記化合物が式：
【化４】
2008500372.tif 000071
で表される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２１】
前記化合物が式：
【化５】
2008500372.tif 000072
で表される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２２】
前記化合物が式：
【化６】
2008500372.tif 000073
で表される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２３】
前記化合物が式：
【化７】
2008500372.tif 000074
で表される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２４】
前記化合物が式：
【化８】
2008500372.tif 000075
で表される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２５】
前記化合物が式：
【化９】
2008500372.tif 000076
で表される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２６】
前記化合物が式：
【化１０】
2008500372.tif 000077
で表される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２７】
前記化合物が式：
【化１１】
2008500372.tif 000078
で表される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２８】
前記化合物が式：
【化１２】
2008500372.tif 000079
で表される、請求項１〜６記載の化合物。
【請求項２９】
請求項１〜２８のいずれか１項に記載の、実質的に純粋な化合物。
【請求項３０】
式Ｉ：
【化１３】
2008500372.tif 000080
（式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、水素、硫酸塩、リン酸塩またはカルボン酸塩から選択され；ただし、
ａ）Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３またはＲ４の少なくとも１個は水素ではなく；
ｂ）Ｒ１が硫酸塩の場合、Ｒ２はＯＨではなく；かつ
ｃ）Ｒ２が硫酸塩の場合、Ｒ１はＯＨではない）
で表される二量体の繰返し単位を含む、多糖類化合物。
【請求項３１】
Ｒ１およびＲ２が硫酸塩である、請求項３０に記載の多糖類化合物。
【請求項３２】
Ｒ１およびＲ２が硫酸塩である、請求項３０に記載の多糖類化合物。
【請求項３３】
二量体の単位が、式：
【化１４】
2008500372.tif 000081
で表される、請求項３０に記載の多糖類化合物。
【請求項３４】
Ｒ−Ｌ−Ｒで表される化合物であって、Ｒは、式：
【化１５】
2008500372.tif 000082
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、以下のように選択される：
ｉ）Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ３およびＲ４は水素である；
ｉｉ）Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ１およびＲ２は水素である；
ｉｉｉ）Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ４は水素である；
ｉｖ）Ｒ１、Ｒ２およびＲ４は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ３は水素である；
ｖ）Ｒ２およびＲ４は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ１およびＲ３は水素である；
ｖｉ）Ｒ１は、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は水素である；
ｖｉｉ）Ｒ２は、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は水素である；
ｖｉｉｉ）Ｒ３は、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ２、Ｒ４およびＲ１は水素である；または
ｉｘ）Ｒ４は、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は水素であり、
Ｒ５は、低級アルキルおよび低級アルケニルから選択され；
ｎは０〜１００である）で表され；
Ｌは、二官能性リンカー分子である、
化合物、またはその薬学的に受容可能な誘導体。
【請求項３５】
前記リンカーが、式：
【化１６】
2008500372.tif 000083
（式中、ｎ１は、１〜１００から選択される整数である）で表される、請求項３４に記載の化合物。
【請求項３６】
ｎ１が、１〜５０である、請求項３５に記載の化合物。
【請求項３７】
ｎ１が、１〜１０である、請求項３５に記載の化合物。
【請求項３８】
ｎ１が、１、２または３である、請求項３５に記載の化合物。
【請求項３９】
前記化合物が、式：
【化１７】
2008500372.tif 000084
で表される、請求項３８に記載の化合物。
【請求項４０】
リンカーＬを介して化合物Ｒに結合された重合体骨格Ｐを含むグリコポリマーであって、
Ｒは、式：
【化１８】
2008500372.tif 000085
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、以下のように選択される。
ｉ）Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ３およびＲ４は水素である；
ｉｉ）Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ１およびＲ２は水素である；
ｉｉｉ）Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ４は水素である；
ｉｖ）Ｒ１、Ｒ２およびＲ４は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ３は水素である；
ｖ）Ｒ２およびＲ４は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ１およびＲ３は水素である；
ｖｉ）Ｒ１は、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は水素である；
ｖｉｉ）Ｒ２は、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は水素である；
ｖｉｉｉ）Ｒ３は、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ２、Ｒ４およびＲ１は水素である；または
ｉｘ）Ｒ４は、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は水素であり；
Ｒ５は、低級アルキルおよび低級アルケニルから選択され；
ｎは０−１００である）で表され、
Ｐは、ポリアクリルアミド、ポリアクリレートおよびポリ（Ｎ−アクリロキシ）スクシンイミドから選択される重合体であり、そして
Ｌは二官能性リンカー分子である、グリコポリマー、またはその薬学的に受容可能な誘導体
【請求項４１】
【化１９】
2008500372.tif 000086
（式中、ｎ１、ｎ２、ｎ３およびｎ４は、それぞれ独立して、１〜１００である）から選択される、請求項４０に記載のグリコポリマー。
【請求項４２】
請求項１〜４１のいずれかに記載の化合物と、薬学的に受容可能なキャリアとを含む、薬学的組成物。
【請求項４３】
ニューロン成長を調整する方法であって、該方法は、請求項１〜４１のいずれか１項に記載の化合物の有効量を投与する工程を包含する、方法。
【請求項４４】
前記化合物が、損傷または切断された神経または神経組織の再生を促進するか、またはニューロン細胞における伸長を促進する、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記ニューロン細胞が、脳、ＣＮＳまたは抹消神経由来のニューロン細胞である、請求項４３または請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記化合物が、培養ニューロン中のニューロン成長を促進する、請求項４４に記載の方法。
【請求項４７】
前記培養ニューロンが、海馬ニューロン、ドーパミン作動ニューロンまたは後根神経節ニューロンである、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
分化したニューロン幹細胞の成長を誘起する方法であって、該方法は、請求項１〜４１のいずれか１項に記載の化合物の有効量を投与する工程を包含する、方法。
【請求項４９】
神経障害に関連する症状を治療する方法であって、該方法は、請求項１〜４１のいずれかに記載の化合物の有効量を被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項５０】
前記障害が、ＣＮＳ病変、神経膠症、パーキンソン病、アルツハイマー病または神経退化である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記障害が、脊髄損傷である、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
線維芽細胞成長因子の活性を調整する方法であって、該方法は、請求項１〜４１のいずれか１項に記載の化合物の有効量を投与する工程を包含する、方法。
【請求項５３】
請求項１〜４１のいずれかに記載の化合物を、神経成長因子と組合わせて投与する、請求項４３〜５１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５４】
請求項１〜４１のいずれかに記載の化合物を、線維芽細胞成長因子と組合わせて投与する、請求項５２に記載の方法。
【請求項５５】
ニューロン成長の低分子誘発因子をスクリーニングする方法であって、該方法は、請求項１〜４１のいずれか１項に記載の低分子を培養ニューロンに適用する工程、および治療されたニューロン対治療されていないニューロンの軸索長さにおける増加を成長率で測定するこ工程を包含する、方法。
【請求項５６】
前記治療していない細胞に対する平均軸索の長さの増加が、約１０％と約５０％との間である、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
包装材料と、該包装材料中の請求項１〜４１のいずれか１項に記載の化合物と、該化合物またはその薬学的に受容可能な誘導体が、神経障害に関連する１以上の症状の治療、予防または回復のために使用されることを表示するラベルと、を含む、製造品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（支援金の情報）
本発明は、Ｈｕｍａｎ  Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｒｏｇｒａｍの支援により、支援金番号ＲＧＹ００７２の下で、政府の支援によりなされた。
【０００２】
（関連出願）
本願は、米国特許法第１１９（ｅ）条の下、２００４年５月２６日に出願された、「ＳＭＡＬＬ  ＭＯＬＥＣＵＬＥ  ＳＴＩＭＵＬＡＴＯＲＳ  ＯＦ  ＮＥＵＲＯＮＡＬ  ＧＲＯＷＴＨ」と題された米国仮特許出願第６０／５７４，４３３号への優先権を主張する。
【０００３】
（分野）
ニューロン成長の低分子刺激物質、その調製および神経障害の治療のための用途が、本明細書中で提供される。他の実施形態では、本発明で提供する化合物および組成物を使用して、神経障害に関連するに種々の病状を治療、予防、または回復する方法を提供する。
【背景技術】
【０００４】
神経障害は、世界中で多くの人々に蔓延している。神経変性疾患（たとえば、アルツハイマー病およびパーキンソン病）から外傷性脊髄損傷に及ぶ障害においては、ニューロン成長を促進する分子が必要とされる。ニューロン成長を刺激することのできるいくつかのタンパク質が知られているが、ニューロン成長を刺激することのできる低分子はほとんど知られていない。
【０００５】
コンドロイチン硫酸（ＣＳ）グリコサミノグリカンは、細胞分裂、ニューロン発生および脊髄損傷に関与する多糖類を硫酸化する（Ｍｉｚｕｇｕｃｈｉ，Ｓ．；Ｕｙａｍａ，Ｔ．；Ｋｉｔａｇａｗａ，Ｈ．；Ｎｏｍｕｒａ，Ｋ．Ｈ．；Ｄｅｊｉｍａ，Ｋ．；Ｇｅｎｇｙｏ−Ａｎｄｏ，Ｋ．；Ｎｉｔａｎｉ，Ｓ．；Ｓｕｇａｈａｒａ，Ｋ．；Ｎｏｍｕｒａ，Ｋ．Ｎａｔｕｒｅ２００３，４２３，４４３−４４８；Ｓｕｇａｈａｒａ，Ｋ．；Ｍｉｋａｍｉ，Ｔ．；Ｕｙａｍａ，Ｔ．；Ｍｉｚｕｇｕｃｈｉ，Ｓ．；Ｎｏｍｕｒａ，Ｋ．；Ｋｉｔａｇａｗａ，Ｈ．Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．２００３，１３，６１２−６２０；Ｂｒａｄｂｕｒｙ，Ｅ．Ｊ．；Ｍｏｏｎ，Ｌ．Ｄ．Ｆ．；Ｐｏｐａｔ，Ｒ．Ｊ．；Ｋｉｎｇ，Ｖ．Ｒ．；Ｂｅｎｎｅｔｔ，Ｇ．Ｓ．；Ｐａｔｅｌ，Ｐ．Ｎ．；Ｆａｗｃｅｔｔ，Ｊ．Ｗ．；ＭｃＭａｈｏｎ，Ｓ．Ｂ．Ｎａｔｕｒｅ  ２００２，４１６，６３６−６４０．）。全てのグリコサミノグリカン類と同様に、コンドロイチン硫酸（ＣＳ）グリコサミノグリカン類の複雑性および不均一性により、その正確な生物学的役割を理解しようという試みが阻まれている。たとえば、ＣＳは、軸索の成長を阻害することが示されていたが、これは発生中の成長許容領域内でもまた見出される（Ｂｒａｄｂｕｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，ｓｕｐｒａ；Ｅｍｅｒｌｉｎｇ，Ｄ．Ｅ．；Ｌａｎｄｅｒ，Ａ．Ｄ．Ｎｅｕｒｏｎ  １９９６，１７，１０８９−１１００）。ＣＳ多糖類は、培養ニューロンの成長を刺激および減弱の両方をすることを示していた（非特許文献１；非特許文献２；非特許文献３）。特に、それらの研究で使用された分子は、約２００個の糖類の長さであり、ほとんど定義されておらず、不均一に硫酸化されていた。これらは、矛盾する観察の主な原因となるかもしれない特徴である。
【０００６】
さらに、特定の硫酸化パターンを持つＣＳ（ＣＳ−Ｅ）は、タンパク質アピカン（神経栄養活性を示すアミロイド前駆体タンパク質のアイソフォーム）上に見出される（非特許文献４）。さらに、ＣＳ−Ｅモチーフ中で濃縮された多糖類は、ニューロン成長を促進することが示されている（非特許文献５）。
【０００７】
ニューロン成長および分化の研究における関心のため、ニューロン成長の低分子調節因子が必要である。
【非特許文献１】Ｂｒｉｔｔｉｓ，Ｐ．Ａら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９９２，２５５，７３３−７３６；
【非特許文献２】Ｄｏｕ，Ｃ．Ｌ．，Ｌｅｖｉｎｅ，Ｊ．Ｍ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１９９５，１５，８０５３−８０６６
【非特許文献３】Ｎａｄａｎａｋａ，Ｓ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９８，２７３，３２９６−３３０７
【非特許文献４】Ｔｓｕｃｈｉｄａ，Ｋ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００１，２７６，３７１５５−３７１６０
【非特許文献５】Ｎａｄａｎａｋａ，Ｓ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９８，２７３，３２９６−３３０７
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、ニューロン成長の調節因子である低分子化合物を提供する。本明細書中で提供される化合物は、複数の負荷電部分を有するオリゴ糖類またはオリゴ糖様分子である。また、該化合物を使用する組成物および方法、および神経障害に関連する状態を治療するための組成物を提供する。
【０００９】
ある実施形態では、ここで提供される化合物は、式Ｉ：
【００１０】
【化２０】
2008500372.tif 000003
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、水素、または硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩（これらに限定されない）を含む負荷電基から選択される。ただし、
ａ）Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３またはＲ４の少なくとも１つは水素ではなく、
ｂ）Ｒ１が硫酸塩のとき、Ｒ２はＯＨではなく、
ｃ）Ｒ２が硫酸塩のとき、Ｒ１はＯＨではない）
で表される二量体の繰返し単位を含む多糖類である。
【００１１】
ある実施形態では、本発明で提供される化合物は、式ＩＩ：
【００１２】
【化２１】
2008500372.tif 000004
で表され、またはその薬学的に受容可能な誘導体であって、
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、水素または硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩（これらに限定されない）を含む負荷電基から選択され、Ｒ６は、必要に応じて置換されたアルキル、必要に応じて置換されたアルケニルまたは必要に応じて置換されたアルキニルから選択され、ｎは０〜１００である。ただし、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３またはＲ４の少なくとも１つは水素ではない。
【００１３】
本明細書中で記載される化合物の塩、エステル、エノールエーテル、エノールエステル、溶媒和物、水和物およびプロドラッグを含む、薬学的に受容可能な誘導体が本発明において提供される。さらに、本発明で提供される化合物と、薬学的に受容可能なキャリアとを含む薬学的組成物が提供される。１つの実施形態では、薬学的組成物は、単一投与量投与用に製剤化される。
【００１４】
本発明の化合物および組成物を使用した、治療方法が提供される。本発明の化合物および組成物を使用して、神経障害に関連する１以上の症状を治療、予防または回復する方法を提供する。該方法の実行に当たっては、有効量の該化合物または治療効果のある濃度の該化合物を含む組成物を投与する。ある実施形態では、本発明で提供される化合物を、タンパク質または移植した組織の成長を刺激する他の因子と併用して使用する。ある実施形態では、本発明で提供される化合物は、成長因子およびサイトカイン（たとえば、腫瘍壊死因子−αまたはＴＮＦαおよび神経成長因子またはＮＧＦ）と相互作用する。
【００１５】
包装材と、本発明の化合物および組成物を使用して、神経障害に関連する１以上の症状を治療、予防または回復するのに有用な、本発明で提供される化合物または組成物と、該化合物または組成物が１以上の神経障害に関連する症状を治療、予防、または回復するために有用であることが示されたラベルとを含む製造品が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
（Ａ．定義）
他に記載がない限り、本明細書で使用される全ての専門用語および科学用語は、本発明が属する分野の当業者に普通に理解される意味と同じ意味を持つ。全ての特許、特許出願、公開された出願および他の刊行物は参考としてその全体を本明細書に援用する。本明細書で使用する１つの用語に複数の定義がある場合、他に記載しない限り、この項での定義が優先する。
【００１７】
本明細書で使用される用語「伸長」は、軸索がニューロンから生じる過程をいう。伸長によって、全く新しい軸索の発生、または部分的に損なわれた軸索の修復をすることができる。
【００１８】
本明細書で使用される用語「ＣＮＳニューロン」は、神経成長因子（ＮＧＦ）に反応しない脳および脊髄のニューロンを含むものである。
【００１９】
本明細書で使用される用語「損傷」は、直接または間接的にＣＮＳの正常な機能に悪影響を及ぼす傷害を含む。損傷は網膜神経節細胞を損なう可能性があり、外傷性脳損傷、脳卒中関連損傷、大脳動脈瘤関連損傷；単麻痺、両麻痺、対麻痺、片麻痺および四肢麻痺を始めとする脊髄損傷、神経増殖性障害または神経因性疼痛症候群が挙げられる。
【００２０】
本発明で使用される、化合物の薬学的に受容可能な誘導体としては、該化合物の塩、エステル、エノールエーテル、エノールエステル、アセタール、ケタール、オルソエステル、ヘミアセタール、ヘミケタール、酸、塩基、溶媒和物、水和物またはプロドラッグが挙げられる。このような誘導体は、そのような誘導体形成のための公知の方法を使用して、当業者によって簡単に調製され得る。製造された化合物は、動物またはヒトに投与され、実質的に毒性がなく、薬学的に活性なまたはプロドラッグとして作用する。薬学的に受容可能な塩として、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、アンモニア、ジエタノールアミンおよび他のヒドロキシアルキルアミン類、エチレンジアミン、Ｎ−メチルグルカミン、プロカイン、Ｎ−ベンジルフェネチルアミン、１−パラ−クロロベンジル−２−ピロリジン−１’−イルメチル−ベンズイミダゾール、ジエチルアミンおよび他のアルキルアミン、ピペラジンおよびトリス（ヒドロキシメチル）アミノメンタン（これらに限定されない）のようなアミンの塩；リチウム、カリウムおよびナトリウム（これらに限定されない）のようなアルカリ金属の塩；バリウム、カルシウムおよびマグネシウム（これらに限定されない）のようなアルカリ土類金属の塩；亜鉛（これに限定されない）のような遷移金属の塩；ナトリウム水素リン酸塩および２ナトリウムリン酸塩（これらに限定されない）のような他の金属の塩；さらに、硝酸塩類、ホウ酸塩類、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩およびトルエンスルホン酸塩（これらに限定されない）、塩酸塩、臭化水素酸、ヨウ化水素酸塩および硫酸塩（これらに限定されない）のような鉱酸塩；および酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、アルコルビン酸塩、コハク酸塩、酪酸塩、吉草酸塩およびフマル酸塩（これらに限定されない）のような有機酸の塩類が挙げられるが、これらに限定されない。薬学的に受容可能なエステルとしては、カルボン酸、リン酸、ホスフィン酸、スルホン酸、スルフィン酸およびホウ素酸（これらに限定されない）を含む酸性基のアルキル、アルケニル、アルキニルおよびシクロアルキルエステルが挙げられるが、これらに限定されない。薬学的に受容可能なエノールエーテルとしては、式：Ｃ＝Ｃ（ＯＲ）（式中、Ｒは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニルおよびシクロアルキルである）で示される誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。薬学的に受容可能なエノールエステルとしては、式：Ｃ＝Ｃ（ＯＣ（Ｏ）Ｒ）（式中、Ｒは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルである）で表される誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。薬学的に受容可能な溶媒和物および水和物は、化合物と、１個以上の溶媒または水分子との、または１〜約１００個の、１〜約１０個の、または１個から約２、３または４個の溶媒または水分子との複合体である。
【００２１】
本明細書で使用されるグリコポリマーは、主鎖にぶら下がる糖類の基を有する重合体を言う。
【００２２】
本明細書で使用される「リンカー」は、２つの糖類の基、または糖類の基と重合体鎖との間に介在する原子を言う。リンカーは、該リンカーの第１末端を第一糖類へ結合する第一化学的官能基と、該リンカーの第２末端を重合体骨格の第二糖類へ結合する第二化学的官能基とを特徴とする。
【００２３】
本明細書で使用される治療は、１以上の疾患または障害の症状を回復するかまたはその他有利に変更する、任意の方法を意味する。治療はまた、神経障害に関連する状態を治療するための用途のような、本発明の組成物の薬学的用途も包含する。
【００２４】
本明細書で使用される、特定の化合物または薬学的組成物の投与による特定の障害の症状の回復は、永久的であろうと一時的であろうと、永続するものであろうと一過性のものあろうと、本発明で提供される化合物または組成物の投与の結果であり得るかまたは関連し得る、軽減されること全てを言う。
【００２５】
本明細書で使用されるＥＣ５０は、特定の試験化合物によって誘発されるか、引き起こされるか、または増強される、特定の応答の最大発現の５０％の用量依存性応答を引き起こす、特定の試験化合物の投与量、濃度または量を言う。
【００２６】
本明細書で使用されるプロドラッグは、インビボ投与の際に、生物学的、医学的、または治療的に活性な形態に、１以上のステップまたは過程によって代謝されるかまたは他の方法で変換される化合物である。プロドラッグを製造するには、医学的に活性な化合物を、該活性化合物が代謝過程によって再生するように修飾する。プロドラッグは、薬物の代謝安定性または輸送特性を変更するため、副作用または毒性をマスクするため、薬物の風味を改善するため、または薬物の他の特徴または特性を変更するために、設計され得る。一旦医学的に活性な化合物が知られれば、薬学動力学プロセスおよびインビボ薬物代謝の知識に基づいて、当業者であれば、該化合物のプロドラッグを設計することができる（たとえば、Ｎｏｇｒａｄｙ（１９８５）、Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ａ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，３８８−３９２頁参照）。ここで使用される他のプロドラッグは、本明細書の他の箇所でも開示されている。
【００２７】
当然のことながら、本発明で提供される化合物は、不斉中心を含んでもよい。該不斉中心は、（Ｒ）または（Ｓ）配置、およびこれらの混合物のものであってもよい。したがって、本発明で提供される化合物は、鏡像異性的に純粋であっても、立体異性的であっても、またはジアステレオマー混合物であってもよい。本発明は、本明細書で記載する有用な特性を有する、本発明の化合物のラセミ体、光学活性体、多形体、立体異性体またはこれらの混合物を包含し、光学活性体をどのように調製するか、および本明細書で記載する標準試験または当該分野で周知の他の類似の試験を使用して、抗増殖活性をどのように測定するかについては、当該分野では周知のことであることが理解される。
【００２８】
本明細書で使用される「実質的に純粋」とは、そのような純度を調べるために当業者によって使用される、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）、ゲル電気泳動法、高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）および質量スペクトル分析法（ＭＳ）のような、標準的な分析方法によって測定されたときに、容易に検出されうる不純物が存在しないようである程度に充分に均質であるか、あるいは、さらに精製を行っても、物質の酵素的および生物学的活性のような物理的および化学的特性が検出可能には変化しない程度に充分純粋であることを言う。実質的に、化学的に純粋な化合物を生成するための化合物の精製法は、当業者には公知である。しかし、実質的に化学的に純粋な化合物は、立体異性体の混合物であってもよい。このような場合、さらに精製すると、化合物の特異的活性を増加させるかもしれない。
【００２９】
本明細書で使用される用語「アルキル」は、１価の直鎖または分岐鎖、または環式ラジカルを言う。ある実施形態では、アルキル基は、１〜２４個の炭素原子を含み、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ヘキシル、オクタデシル、ノナデシル、エイコシル、１８−メチル−ノナデシル、１９−メチル−エイコシル、などが含まれる。本明細書で使用される低級アルキルは、１〜６個の炭素原子のアルキル基を言う。
【００３０】
本明細書で使用される「置換アルキル」は、さらに１個以上の置換基を有するアルキル基を言い、置換基として、低級アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ（低級アルキル基の）、メルカプト（低級アルキル基の）、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロ環、置換ヘテロ環、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、ハロゲン、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ニトロ、ニトロン、アミノ、アミド、−Ｃ（Ｏ）Ｈ、アシル、オキシアシル、カルボキシル、カルバメート、スルホニル、スルホンアミドおよびスルフリルなどが挙げられるが、これらに限定されず、またこれらは、Ｇｒｅｅｎｅら，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，第２版、１９９１（この文献は、参考として本明細書中に援用される）で教示するように、必要に応じて保護されていてもよいし保護されていなくてもよい。
【００３１】
本明細書で使用される「アルケニル」は、１個以上の炭素−炭素二重結合を有する直鎖または分岐鎖炭化水素基を言う。ある実施形態では、アルケニル基は、２個から２４個までの炭素原子を含む。「置換されたアルケニル」は、さらに前記置換基を１個以上有するアルケニル基を言う。
【００３２】
本明細書で使用される「アルキニル」は、１個以上の炭素−炭素三重結合を有する直鎖または分岐鎖炭化水素基を言う。ある実施形態では、アルキニル基は、２個から２４個までの炭素原子を含む。「置換されたアルキニル」は、さらに前記置換基を１個以上有するアルキニル基を言う。
【００３３】
任意の所定の置換基の数が特定されない場合（たとえば、ハロアルキル）、存在する置換基は１個以上であってよい。たとえば、「ハロアルキル」は、１個以上の同じまたは異なるハロゲンを含む。
【００３４】
本明細書で使用される「被験体」は、患者のようなヒトを含む、動物（代表的には、哺乳動物）である。
【００３５】
本明細書で使用される語句「有効量」は、神経障害に関連する１以上の症状の予防、治療、または回復のために必要な量を意味する。有効量は、当業者に知られている任意の方法で測定することができる。ある実施形態では、有効量は、周知の方法を使用して、ニューロンまたは神経節細胞の生存率、軸索の再生または神経変性、および軸索切断後の接続度の改善によって、測定することができる。たとえば、Ｂｒａｙら、“Ｎｅｕｒｏｎａｌ  ａｎｄ  Ｎｏｎｎｅｕｒｏｎａｌ  Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ  ｏｎ  Ｒｅｔｉｎａｌ  Ｇａｎｇｌｉｏｎ  Ｃｅｌｌ  Ｓｕｒｖｉｖａｌ，  Ａｘｏｎａｌ  Ｒｅｇｒｏｗｔｈ，ａｎｄ  Ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ  Ａｆｔｅｒ  Ａｘｏｔｏｍｙ”，Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ｐｐ２１４−２２８（１９９１）を参照のこと。
【００３６】
本明細書で使用される用語「非経口的」は、皮下、静脈内、動脈内、筋肉内、腔内または硝子体内注射または輸液技術を含む。
【００３７】
語句「局所的」は、直腸投与、スプレーによる吸入投与、および口および鼻の皮膚および粘膜のよる一般的な経路、および練り歯磨きによる投与を含む。
【００３８】
本明細書で使用される任意の保護基、アミノ酸および他の化合物の略語は、他に記載のない限り、一般的な用法、または生化学命名法（（１９７２）Ｂｉｏｃｈｅｍ．１１：９４２−９４４を参照のこと）のＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ  Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎに従う。
【００３９】
（Ｂ．化合物）
１つの実施形態では、本発明で提供される組成物および方法で使用されうる化合物は、式：
【００４０】
【化２２】
2008500372.tif 000005
（式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、以下のように選択される。
ｉ）Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ３およびＲ４は水素である；
ｉｉ）Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ１およびＲ２は水素である；
ｉｉｉ）Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択されＲ４は水素である；
ｉｖ）Ｒ１、Ｒ２およびＲ４は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ３は水素である；
ｖ）Ｒ２およびＲ４は、それぞれ独立して、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ１およびＲ３は水素である；
ｖｉ）Ｒ１は、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は水素である；
ｖｉｉ）Ｒ２は、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は水素である；
ｖｉｉｉ）Ｒ３は、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ２、Ｒ４およびＲ１は水素である；または
ｉｘ）Ｒ４は、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択され、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３であり、
Ｒ５は、必要に応じて置換されたアルキルおよび必要に応じて置換されたアルケニルから選択され；
ｎは０〜１００である）で表される化合物、またはその薬学的に受容可能な誘導体である。
【００４１】
他の実施形態では、ｎは０〜５０である。他の実施形態では、ｎは０〜２５である。他の実施形態では、ｎは０〜２０である。他の実施形態では、ｎは０〜１５である。他の実施形態では、ｎは０〜１０である。他の実施形態では、ｎは０〜５である。他の実施形態では、ｎは０〜４である。他の実施形態では、ｎは２〜４である。他の実施形態では、ｎは４である。他の実施形態では、ｎは３である。他の実施形態では、ｎは２である。他の実施形態では、ｎは１である。他の実施形態では、ｎは、０、１、２、３または４である。
【００４２】
他の実施形態では、Ｒ５は低級アルケニルである。他の実施形態では、Ｒ５はアリルである。
【００４３】
他の実施形態では、Ｒ１は水素、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択される。他の実施形態では、Ｒ１は硫酸塩である。
【００４４】
他の実施形態では、Ｒ２は、水素、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択される。他の実施形態では、Ｒ２は硫酸塩である。他の実施形態では、Ｒ１は水素である。
【００４５】
他の実施形態では、Ｒ３は、水素、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択される。他の実施形態では、Ｒ３は硫酸塩である。他の実施形態では、Ｒ３は水素である。
【００４６】
他の実施形態では、Ｒ４は、水素、硫酸塩、リン酸塩およびカルボン酸塩から選択される。他の実施形態では、Ｒ４は硫酸塩である。他の実施形態では、Ｒ４は水素である。
【００４７】
１つの実施形態では、本発明で提供される化合物は、式ＩＩＩ：
【００４８】
【化２３】
2008500372.tif 000006
（式中、各記号は本明細書の別の箇所に記載した通りである）で表される。
【００４９】
１つの実施形態では、本発明で提供される化合物は、式ＩＶ：
【００５０】
【化２４】
2008500372.tif 000007
（式中、各記号は本明細書の別の箇所に記載した通りである）で表される。
【００５１】
１つの実施形態では、本発明で提供される化合物は、式Ｖ：
【００５２】
【化２５】
2008500372.tif 000008
（式中、各記号は本明細書の別の箇所に記載した通りである）で表される。
【００５３】
１つの実施形態では、本発明で提供される化合物は、式ＶＩ：
【００５４】
【化２６】
2008500372.tif 000009
（式中、各記号は本明細書の別の箇所に記載した通りである）で表される。
【００５５】
１つの実施形態では、本発明で提供される化合物は、式ＶＩ：
【００５６】
【化２７】
2008500372.tif 000010
１つの実施形態では、本発明で提供される化合物は、式ＶＩＩ：
【００５７】
【化２８】
2008500372.tif 000011
（式中、各記号は本明細書の別の箇所に記載した通りである）で表される。
【００５８】
１つの実施形態では、本発明で提供される化合物は、式ＶＩＩＩ：
【００５９】
【化２９】
2008500372.tif 000012
（式中、各記号は本明細書の別の箇所に記載した通りである）で表される。
【００６０】
１つの実施形態では、本発明で提供される化合物は、式ＩＸ：
【００６１】
【化３０】
2008500372.tif 000013
（式中、各記号は本明細書の別の箇所に記載した通りである）で表される。
【００６２】
１つの実施形態では、本発明で提供される化合物は、式Ｘ：
【００６３】
【化３１】
2008500372.tif 000014
（式中、各記号は本明細書の別の箇所に記載した通りである）で表される。
【００６４】
１つの実施形態では、本発明で提供される化合物は、式ＸＩ：
【００６５】
【化３２】
2008500372.tif 000015
（式中、各記号は本明細書の別の箇所に記載した通りである）で表される。
【００６６】
１つの実施形態では、本発明で提供される化合物は、
【００６７】
【化３３】
2008500372.tif 000016
（式中、各記号は本明細書の別の箇所に記載した通りである）から選択される。
【００６８】
１つの実施形態では、本発明で提供される化合物は、
【００６９】
【化３４】
2008500372.tif 000017
から選択される。
【００７０】
１つの実施形態では、化合物は、
【００７１】
【化３５】
2008500372.tif 000018
から選択される。
【００７２】
１つの実施形態では、化合物は、
【００７３】
【化３６】
2008500372.tif 000019
で表される。
【００７４】
ある実施形態では、本発明で提供される化合物は、実質的に純粋である。ある実施形態では、本発明で提供される化合物における負荷電基は、たとえば、開裂してカルボキシレートとなりうるエステルのような、生物学的環境において非保護である保護誘導体として調製することができる。
【００７５】
ある実施形態では、本発明で提供される化合物は、式Ｉ：
【００７６】
【化３７】
2008500372.tif 000020
（式中、Ｒ１およびＲ２は硫酸塩であり、他の記号は本明細書の別の箇所に記載した通りである）で表される二量体の繰返し単位を含む多糖類である。ある実施形態では、本発明で提供される化合物は、式Ｉ（式中、Ｒ１およびＲ２は硫酸塩であり、Ｒ３およびＲ４は水素である）で表される二量体の繰返し単位を含む多糖類である。
【００７７】
ある実施形態では、本発明で提供される化合物は、種々の多価リンカー部位と結合する。１つの実施形態では、使用されるリンカー部位は、生物学的状態に曝された時、リンカーが切断され、本発明で提供される化合物を放出するように、生物学的条件下で不安定である。そのようなリンカーは当該分野で公知である。
【００７８】
ある実施形態では、リンカーは、２個の糖類部位の間で結合を形成できる２官能性分子である。該リンカーは、ホモ２官能性であってもヘテロ２官能性であってもよい。該リンカー上の官能基の例として、−ＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）、−ＯＨ、−ＣＨＯ、−ＣＯ２Ｈおよび−ＳＨが挙げられるが、これらに限定されない。これらの官能基のそれぞれは、２個の糖類の間に供有結合を形成することができる。
【００７９】
リンカーは、直鎖または非環状部分、環状部分、芳香族環またはこれらの組合わせを含むことができる。ある実施形態では、リンカーは、Ｃ、Ｎ、Ｏ、Ｓ、ＰおよびＳｉから選択される、水素原子以外の主鎖原子を１〜１００個含むことができる。ある実施形態では、リンカーは、５０個までの水素以外の主鎖原子を、４０個までの、３０個までの、２０個までの、１５個までの、１０個までの、５個までの、または２個までの水素以外の主鎖原子を含む。ある実施形態では、リンカーは非環式である。ある実施形態では、リンカーは、エチレングリコールまたはアルキレン鎖またはこれらの混合物のオリゴマーを含む。
【００８０】
ある実施形態では、リンカーは、式：
【００８１】
【化３８】
2008500372.tif 000021
（式中、ｎ１は、１〜１００、１〜５０、１〜４０、１〜３０、１〜２０、１〜１０、１〜９、１〜８、１〜７、１〜６、１〜５、１〜４、１〜３、２または１であり、Ｒは、
【００８２】
【化３９】
2008500372.tif 000022
（式中各記号は本明細書の別の箇所に記載した通りである）で表される。
【００８３】
ある実施形態では、リンカーを持つ化合物は、リンカーを介して、繰返し二糖類単位を含む。ある実施形態では、化合物は、式：
【００８４】
【化４０】
2008500372.tif 000023
で表される二量体ＣＳ−Ｅである。
【００８５】
ある実施形態では、式Ｉで表される繰返し単位を持つ糖類化合物または式ＩＩで表される化合物は、共重合され、または重合体骨格に移植され、グリコポリマーを形成する。ある実施形態における重合体骨格は直鎖であり、別の実施形態では分岐状重合体である。ある実施形態では、本明細書で提供されるグリコポリマーは、約２個と約１０００個の間のペンダント糖類部位を含む。
【００８６】
式Ｉで表される繰返し単位を持つ糖類化合物または式ＩＩで表される化合物は、リンカーを介して、重合体骨格に結合することができる。リンカーは、糖類と重合体骨格との間で結合を形成することができる二官能性分子である。該リンカーは、ホモ２官能性であってもヘテロ２官能性であってもよい。該リンカー上の官能基の例として、−ＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）、−ＯＨ、−ＣＨＯ、−ＣＯ２Ｈおよび−ＳＨが挙げられるが、これらに限定されない。これらの官能基のそれぞれは、糖類と重合体骨格との間に供有結合を形成することができる。
【００８７】
リンカーは、直鎖または非環状部分、環状部分、芳香族環またはこれらの組合わせを含むことができる。ある実施形態では、リンカーは、Ｃ、Ｎ、Ｏ、Ｓ、ＰおよびＳｉから選択される、水素原子以外の主鎖原子を１〜１００個含むことができる。ある実施形態では、リンカーは、５０個までの水素以外の主鎖原子を、４０個までの、３０個までの、２０個までの、１５個までの、１０個までの、５個までの、または２個までの水素以外の主鎖原子を含む。ある実施形態では、リンカーは非環式である。ある実施形態では、リンカーは、エチレングリコールまたはアルキレン鎖またはこれらの混合物のオリゴマーを含む。
【００８８】
本発明で使用される重合体骨格は、当該分野で公知である。ある実施形態では、重合体骨格は、ポリアクリルアミド系である。別の実施形態では、重合体は、ポリアクリルアミド、ポリアクリレートおよびポリ（Ｎ−アクリロキシ）スクシンイミドから選択される。
【００８９】
ある実施形態では、本発明で提供されるグリコポリマーは、
【００９０】
【化４１】
2008500372.tif 000024
（式中、ｎ１、ｎ２、ｎ３およびｎ４は、それぞれ独立して、１〜１００、１〜５０、１〜４０、１〜３０、１〜２０、１〜１０、１〜９、１〜８、１〜７、１〜６、１〜５、１〜４、１〜３、２または１であり、他の記号は本明細書の別の箇所に記載した通りである）から選択される。
【００９１】
（Ｃ．化合物の調製）
本発明で提供される化合物は、当該分野で公知の日常的な化学反応を使用して調製することができる。ある実施形態では、収束方法（スキーム１〜３で示される）を使用することによって、ブロック４を構築する単一の二糖類から、種々のＣＳ−Ｅ分子に近づいて、化合物を調製することができる。Ｄ−ガラクトサミンの硫酸化４−および６−水酸基は、ｐ−メトキシベンジリデンアセタールでマスクされた。この基は、他の硫酸化モチーフ（たとえば、ＣＳ−Ａ、ＣＳ−Ｃ）にアクセスすることを可能にする。ある実施形態では、該反応は、固相法まで広げることができる。特に、ある実施形態では、ＤＤＱを使用する酸化的除去（Ｚｈａｎｇ，Ｚ．Ｙ．；Ｍａｇｎｕｓｓｏｎ，Ｇ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９６，６１，２３９４−２４００）または、アセタール環の位置選択的開環（Ｔａｍｕｒａ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．１９９７，３０５，４３−６３；Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ，Ｒ．；Ｓａｍｕｅｌｓｓｏｎ，Ｂ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．−Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．１  １９８４，２３７１−２３７４）は、４−および６−水酸基のどちらかあるいは両方の選択的脱保護を可能にし、水素化分解の必要性を解消する。直行性のｔ−ブチルジメチルシリル基は、４の非還元末端のＣ−４位に入り、鎖延長を助長することができる。β−グリコシド結合の立体選択的形成を達成するため、Ｎ−トリクロロアセチルおよびベンゾイル関与基を使用する（Ｃｏｕｔａｎｔ，Ｃ．；Ｊａｃｑｕｉｎｅｔ，Ｊ．Ｃ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．−Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．１  １９９５，１５７３−１５８１）。最後に、４のアノマー水酸基を、アリル基でマスクする。これは、活性化グリコシル供与体に変換され、ＣＳを低分子、タンパク質または表面に結合する便利な手段を提供すし得る。
【００９２】
標的化合物の合成をスキーム１に示す。単糖類５および６は、公知のｐ−トリル−１−チオ−β−Ｄ−グルコピラノース（Ｃｌｉｎｇｍａｎ，Ａ．Ｌ．；Ｒｉｃｈｔｍｙｅｒ，Ｎ．Ｋ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９６４，２９，１７８２−１７８７）または１，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−２−アジド−２−デオキシ−Ｄ−ガラクトピラノース（Ｌｅｍｉｅｕｘ，Ｒ．Ｕ．；Ｒａｔｃｌｉｆｆｅ，Ｒ．Ｍ．Ｃａｎ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．−Ｒｅｖ．Ｃａｎ．Ｃｈｉｍ．１９７９，５７，１２４４−１２５１）から、それぞれ（スキーム２および３）生成した。トリクロロアセトイミダート手順（Ｓｃｈｍｉｄｔ，Ｒ．Ｒ．；Ｋｉｎｚｙ，Ｗ．Ｉｎ  Ａｄｖ．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９９４，Ｖｏｌ５０，ｐｐ２１−１２３）による５と６とのカップリングによって、収率７４％で、β結合二糖類４を排他的に得た。この段階で、ある実施形態では、アリル基のラクトールへの変換によって、二糖類の活性化を進める。しかし、ＰｄＣｌ２、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４、［Ｉｒ（ＣＯＤ）（ＰＭｅＰｈ２）２］ＰＦ６およびウィルキンソン触媒のような従来の方法では、おそらく隣り合うトリクロロアセタミド（関連２−アセタミド誘導体は、［Ｉｒ（ＣＯＤ）（ＰＭｅＰｈ２）２］ＰＦ６での処理で容易に異性化を受けた）による妨害により、所望の異性化は得られない。Ｈ２の存在下でのグラブスの第二世代触媒での処置（Ｓｃｈｏｌｌ，Ｍ．；Ｄｉｎｇ，Ｓ．；Ｌｅｅ，Ｃ．Ｗ．；Ｇｒｕｂｂｓ，Ｒ．Ｈ．Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．１９９９，１，９５３−９５６）により、所望の結果物を得る。エノールエーテルの加水分解およびトリクロロアセトイミダート７への変換は、標準条件（Ｄｒｉｇｕｅｚ，Ｐ．Ａ．；Ｌｅｄｅｒｍａｎ，Ｉ．；Ｓｔｒａｓｓｅｌ，Ｊ．Ｍ．；Ｈｅｒｂｅｒｔ，Ｊ．Ｍ．；Ｐｅｔｉｔｏｕ，Ｍ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９９，６４，９５１２−９５２０；Ｓｈｉｏｚａｋｉ，Ｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．１９９１，２２２，５７−６８）下で円滑に進んだ。また、二糖類４が、脱シリル化によってグリコシル受容体８へのアクセスを容易にした。続く７および８のグリコシル化によって、良好な立体選択性を持つ所望の四糖類を得た。
【００９３】
完全に保護された二糖類および四糖類を、最後の脱保護工程−硫酸化工程に供した。Ｎ−トリクロロアセチル基のＮ−アセチルへのラジカル−介在変換（Ｃｏｕｔａｎｔ，Ｃ．；Ｊａｃｑｕｉｎｅｔ，Ｊ．Ｃ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．−Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．１，１９９５，１５７３−１５８１）、続くｐ−メトキシベンジリデンアセタールの酸化開裂（Ｚｈａｎｇ，Ｚ．Ｙ．；Ｍａｇｎｕｓｓｏｎ，Ｇ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９６，６１，２３９４−２４００）により、９および１０を得た。９および１０を、ＤＭＦ中、ＳＯ３・トリメチルアミン複合体で処理し、それぞれ収率６７％および９３％でそれらの硫酸化化合物を得た。Ｔａｍｕｒａ，Ｊ．；Ｎｅｕｍａｎｎ，Ｋ．Ｗ．；Ｋｕｒｏｎｏ，Ｓ．；Ｏｇａｗａ，Ｔ．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．１９９７，３０５，４３−６３参照のこと。目的のＣＳ−Ｅ二糖類および四糖類１および２は、Ｃ−４位でのβ−脱離を最小にするため、ＮａＯＨまたは逐次ＬｉＯＯＨ−ＮａＯＨ処理を利用したシリル脱保護およびケン化（Ｌｕｃａｓ，Ｈ．；Ｂａｓｔｅｎ，Ｊ．Ｅ．Ｍ．；Ｖａｎ  Ｄｉｎｔｈｅｒ，Ｔ．Ｇ．；Ｍｅｕｌｅｍａｎ，Ｄ．Ｇ．；Ｖａｎ  Ａｅｌｓｔ，Ｓ．Ｆ．；Ｖａｎ  Ｂｏｅｃｋｅｌ，Ｃ．Ａ．Ａ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９９０，４６，８２０７−８２２８）の後、得た。類似の状態下での９の脱保護により、非硫酸化四糖類３を得た。
（スキーム１：四糖類の合成）
【００９４】
【化４２】
2008500372.tif 000025
ａａ）ＴＭＳＯＴｆ、ＣＨ２Ｃｌ２、−４０℃→−１５℃、７４％。ｂ）Ｌ（ＰＣｙ３）Ｃｌ２Ｒｕ＝ＣＨＰｈ、Ｌ＝１，３−ジメシチルイミダゾールイリデン（２０モル％）、Ｈ２、７７％。（ｃ）Ｉ２、Ｈ２Ｏ、ｐｙｒ／ＴＨＦ、８１％。（ｄ）ＤＢＵ、ＣＣｌ３ＣＮ、ＣＨ２Ｃｌ２、９０％。（ｅ）ＨＦ・ｐｙｒ、ｐｙｒ／ＴＨＦ、０℃、８５％。（ｆ）ＴＭＳＯＴｆ、ＣＨ２Ｃｌ２、−１５℃、３１％。（ｇ）ＴＢＴＨ、ＡＩＢＮ、ＤＭＡ／ベンゼン、２５℃→８０℃、８５％。（ｈ）ＤＤＱ、Ｈ２Ｏ／ＣＨ２Ｃｌ２、７５％。（ｉ）ＳＯ３・Ｍｅ３Ｎ、ＤＭＦ、５０℃、６７％。（ｊ）ＨＦ・ｐｙｒ、ｐｙｒ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ、０℃。（ｋ）ＬｉＯＨ、Ｈ２Ｏ２、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ２、次いでＮａＯＨ、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、３工程で２５％。（ｌ）ＴＢＴＨ、ＡＩＢＮ、ベンゼン、２５℃→８０℃、８５％。（ｍ）ＤＤＱ、Ｈ２Ｏ／ＣＨ２Ｃｌ２、６２％  （ｎ）ＳＯ３・Ｍｅ３Ｎ、ＤＭＦ、５０℃、９３％  （ｏ）ＨＦ・ｐｙｒ、ｐｙｒ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ、０℃。（ｐ）ＮａＯＨ、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、２工程で５５％。（ｑ）ＨＦ・ｐｙｒ、ｐｙｒ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ、０℃。（ｒ）ＬｉＯＨ、Ｈ２Ｏ２、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ次いでＮａＯＨ、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、３工程で５２％。
（スキーム２：グルクロン酸モノマー５の合成）
【００９５】
【化４３】
2008500372.tif 000026
（スキーム３：ガラクトサミンモノマー６の合成）
【００９６】
【化４４】
2008500372.tif 000027
スキーム４は、本発明で提供される例示的な化合物の合成を示す。
（スキーム４）
【００９７】
【化４５】
2008500372.tif 000028
本発明で提供される糖複合体の調製は、以下のとおりである。
ａ）アクリルアミドと、本明細書で記載する式ＩまたはＩＩの化合物を持つアクリルアミドの１つである、低分子量アクリルアミドとの共重合
（スキーム５）
【００９８】
【化４６】
2008500372.tif 000029
（式中、記号は本明細書の別の箇所に記載した通りである。）
ｂ１）オキシドリンカーに基づく、ポリ［（Ｎ−アクリロキシ）スクシンイミド］への求核性リガンドのグラフト結合
（スキーム６）
【００９９】
【化４７】
2008500372.tif 000030
ｂ２）オキシムリンカーに基づく、ポリアクリルアミド系重合体
（スキーム７）
【０１００】
【化４８】
2008500372.tif 000031
ｃ１）２−アミノエタンチオールに基づく、ポリアクリルアミド系重合体
（スキーム８）
【０１０１】
【化４９】
2008500372.tif 000032
ｃ２）２−アミノエタンチオールに基づく、ポリアクリルアミド系重合体
（スキーム９）
【０１０２】
【化５０】
2008500372.tif 000033
ｄ）他のポリアクリルアミド系重合体
（スキーム１０）
【０１０３】
【化５１】
2008500372.tif 000034
ｅ）スキーム９は、グラブスメタセシス（Ｇｓｕｂｂｓ  ｍｅｔａｔｈｅｓｉｓ）が、本発明で提供される例示的な化合物で、グリコポリマーに対して接近するのを示す。
（スキーム１１）
【０１０４】
【化５２】
2008500372.tif 000035
本発明で提供されるリンカーを介して結合された糖類の合成を、以下のスキーム１０および１１において示す。
１．オキシムリンカー
（スキーム１２）
【０１０５】
【化５３】
2008500372.tif 000036
（式中、記号は、本明細書の別の箇所に記載した通りである。）
２．アミンリンカー
（スキーム１３）
【０１０６】
【化５４】
2008500372.tif 000037
（式中、記号は、本明細書の別の箇所に記載した通りである。）
ある実施形態では、Ｒは、
【０１０７】
【化５５】
2008500372.tif 000038
である。
【０１０８】
（Ｄ．薬学的組成物の製剤化）
本発明で提供される薬学的組成物は、治療的有効量の、１種以上の神経障害に関連する症状の予防、治療または回復に有用な、１種以上の本発明で提供される化合物と、薬学的に受容可能なキャリアとを含む。本発明で提供される化合物の投与に適する薬学的キャリアとしては、特定の投与方式に適するものとして当業者に公知の任意のキャリアを含む。
【０１０９】
さらに、該化合物を、組成物中で唯一の薬学的に活性な成分として製剤化してもよいし、他の活性成分と組合わせて製剤化してもよい。
【０１１０】
組成物は、本発明で提供される１種以上の化合物を含む。１つの実施形態では、化合物を、経口投与用に、溶液、懸濁液、錠剤、分散性錠剤、ピル、カプセル、粉末、持続放出性製剤またはエリキシル剤のような適切な薬学的製剤、非経口的投与用に、無菌溶液または懸濁液、および経皮パッチ製剤および乾燥粉末吸入製剤に製剤化する。１つの実施形態では、前記化合物を、当該分野で周知の技術および手順（たとえば、Ａｎｓｅｌ  Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ，Ｆｏｕｒｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  １９８５，１２６参照）を用いて薬学的組成物に製剤化する。
【０１１１】
該組成物では、有効濃度の１種以上の化合物またはその薬学的に受容可能な誘導体を適切な薬学的キャリアと混合する。該化合物は、先に記載したように、製剤化する前に、対応する塩、エステル、エノールエーテルまたはエステル、アセタール、ケタール、オルソエステル、ヘミアセタール、ヘミケタール、酸、塩基、溶媒和物、水和物またはプロドラッグに誘導体化してもよい。組成物中の化合物濃度は、投与時、神経障害に関連する１以上の症状を治療、予防または回復する量の送達に有効な値である。１つの実施形態では、組成物を単一投与量投与用に製剤化する。組成物を製剤化するために、化合物の重量フラクションを、治療状態を軽減、予防する、または１以上の症状を回復するのに有効な濃度で、選択されたキャリアに溶解、懸濁、分散、あるいは混合する。
【０１１２】
活性化合物は、治療を受ける患者に、望ましくない副作用がなく、治療的に有用な効果を発揮するのに充分な量で、薬学的に受容可能なキャリア中に含まれる。治療的に有効な濃度は、当業者に周知のインビトロおよびインビボ系において、化合物を試験することによって経験的に測定し、次いで、そこからヒト用に投与量を推定し得る。
【０１１３】
薬学的組成物中の活性化合物の濃度は、活性化合物の吸収性、不活性化および排出速度、該化合物の物理化学的特徴、投与計画および投与量、さらに当業者に公知の他の因子に依存する。たとえば、送達される量は、本明細書で記載する神経障害に関連する１以上の症状を回復するのに充分な量である。
【０１１４】
１つの実施形態では、治療効果のある投与量としては、活性成分の血清濃度が約０．１ｎｇ／ｍｌから約５０〜１００μｇ／ｍｌとなるべきである。他の実施形態では、薬学的組成物の投与量は、約０．００１ｍｇ〜約２０００ｍｇの化合物／ｋｇ体重／日であるべきである。薬剤投与単位形態は、約０．０１ｍｇ、０．１ｍｇまたは１ｍｇから約５００ｍｇ、１０００ｍｇ、または２０００ｍｇまで１つの実施形態では、投与単位形態当たり、約１０ｍｇから約５００ｍｇの活性成分または必須成分の組合わせを供給するように製剤化される。
【０１１５】
活性成分は、１度に投与してもよいし、投与すべき用量を複数に分割して、時間をあけて投与してもよい。正確な投与量および治療の期間は治療する疾患の関数であり、公知の試験プロトコルを使用してか、またはインビボおよびインビトロ試験データからの推論によって、経験的に決定されてもよいことは当然である。また、濃度および投与量の値は、緩和された状態の程度によって変化することも留意すべきである。さらに、任意の特定の被験体に関し、特定の投与量レジメンが、個々の必要および組成物を投与するかまたはその投与を監督する人間の専門的な判断に従って長期に渡って調整されるべきで、本明細書で説明した濃度範囲は、単なる例示であり、請求項の組成物の範囲または実行を限定するものではないことは当然のことである。
【０１１６】
化合物が充分な溶解度を示さない場合は、化合物の可溶化方法を使用してもよい。そのような方法は、当業者に公知であり、ジメチルスルフォキシド（ＤＭＳＯ）のような共溶剤を使用する方法、ＴＷＥＥＮ（登録商標）のような界面活性剤を使用する方法、または炭素水素ナトリウム水溶液中での溶解などを使用する方法が挙げられるが、これらに限定されない。また、化合物のプロドラッグのような化合物の誘導体も、効果的な薬学的組成物を処方するのに使用してもよい。
【０１１７】
化合物を混合または添加する際、得られる混合物は、溶液、懸濁液、乳化液などであってもよい。得られる混合物の形態は、企図される投与方式および選択されたキャリアまたは賦形剤中の化合物の溶解性などを始めとする多くに因子によって決まる。効果的な濃度は、治療される疾患、障害または状態の症状を回復するのに十分なものであり、経験的に決定されてもよい。
【０１１８】
薬学的組成物は、該化合物またはその薬学的に受容可能な誘導体を適切な量含む、錠剤、カプセル、ピル、粉末、顆粒、無菌非経口溶液または懸濁液、および経口溶液または懸濁液、油−水乳液のような単位投与量形態で、ヒトおよび動物に投与するように調製される。１つの実施形態では、医薬的、治療的に活性な化合物およびその誘導体は、単位投与形態または複数投与形態の形に製剤化され、投与される。本明細書で使用される単位投与形態は、当該分野で知られているような、ヒトおよび動物被験体に適切な、物理的に分離された単位であり、個々に包装されているものを言う。各単位投与量は、必要な薬学的キャリア、ビヒクルまたは希釈剤と一緒になって、所望の治療効果を生み出すのに充分な、治療的に活性な化合物の所定量を含む。単位投与形態の例として、アンプル、注射器および個々に包装された錠剤またはカプセルが挙げられる。単位投与形態は、画分として投与してもその複数を投与してもよい。複数投与形態は、分離された単位投与形態において、投与する単一の容器に包装された複数の独立した単位投与形態を言う。複数投与形態の例として、バイアル、錠剤のボトル、またはパイントまたはガロンのカプセルまたはボトルが挙げられる。したがって、複数投与形態は、包装としては分離されていない複数の単位投与である。
【０１１９】
投与可能な液体薬学的組成物は、たとえば、先に規定した活性化合物と、任意のキャリア中の薬学的添加物、たとえば、水、食塩水、デキストロース水溶液、グリセリン、グリコール、エタノールなどとを溶解、分散、または混合し、溶液または懸濁液を形成することによって調製することができる。また、所望であれば、投与すべき薬学的組成物は、湿潤剤、乳化剤、可溶化剤、ｐＨ緩衝剤などのような少量の非毒性補助剤（たとえば、酢酸塩、クエン酸ナトリウム、シクロデキストリン誘導体、ソルビタンモノラウレート、トリエタノールアミン酢酸ナトリウム、トリエタノールアミンオレエート、および他のこのような薬剤）を含んでもよい。
【０１２０】
このような投与形態を調製する実際の方法は、当業者に公知であり、あるいは明白である。たとえば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１５ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９７５を参照のこと。
【０１２１】
活性成分を０．００５％〜１００％の範囲と残りが非毒性キャリアから造られる投与形態または組成物を調製してもよい。これらの組成物の調製法は、当業者に公知である。期待される組成物は、０．００１％〜１００％の活性成分を含んでもよく、１つの実施形態では０．１〜９５％、他の実施形態では７５〜８５％含んでもよい。
【０１２２】
（１．経口投与用組成物）
薬学的経口投与形態は、固体、ゲルまたは液体のどれでもよい。固体投与形態は、錠剤、カプセル、顆粒およびバルクパウダーである。経口錠剤のタイプとしては、圧縮された、チュアブルトローチおよび錠剤があり、これらは腸溶性被覆、糖衣またはフィルム被覆されていてもよい。カプセルは、当業者に公知の他の成分と一緒になっていて、硬質または軟質ゼラチンカプセルでもよく、一方顆粒および粉末は、非発泡性または発泡性形態で提供されてもよい。
【０１２３】
（ａ．経口投与用の固形組成物）
ある実施形態では、剤形は固形投与形態であり、１つの実施形態ではカプセルまたは錠剤である。錠剤、ピル、カプセル、トローチなどは、バインダー、滑剤、希釈剤、滑走剤、崩解剤、着色剤、甘味剤、風味剤、湿潤剤、催吐性皮膜およびフィルム皮膜などの成分またはこれに似た特質の化合物を１種以上含み得る。バインダーの例として、微結晶性セルロース、トラガントガム、ブドウ糖溶液、アカシア粘液、ゼラチン溶液、糖蜜、ポリビニルピロリジン、ポビドン、クロスポビドン、ショ糖およびデンプン糊が挙げられる。滑剤として、タルク、デンプン、マグネシウムまたはカルシウムステアリン酸塩、ライカポジウムおよびステアリン酸が挙げられる。希釈剤としては、たとえば、ラクトース、ショ糖、デンプン、カオリン、塩、マンニトールおよびジカルシウムリン酸塩が挙げられる。滑走剤としては、コロイドシリコンジオキサイドが挙げられるが、これに限定されない。崩解剤としては、クロスカルメロースナトリウム、ナトリウムデンプングリコレート、アルギン酸、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、ベントナイト、メチルセルロース、寒天およびカルボキシメチルセルロースが挙げられる。着色剤としては、たとえば、認証済みの水溶性ＦＤおよびＣ染料およびその混合物の任意のもの、アルミナ水和物に懸濁された水不溶性ＦＤおよびＣ染料が挙げられる。甘味剤として、ショ糖、ラクトース、マンニトールおよびサッカリンのような人口甘味料、および多くの噴霧乾燥風味剤が挙げられる。風味剤としては、果物などの植物から抽出される天然の風味剤、ペパーミントおよびサリチル酸メチルのような（これらに限定されない）気持ちのよい感覚を作り出す合成化合物のブレンドが挙げられる。湿潤剤としては、プロピレングリコールモノステアレート、ソルビタンモノオレエート、ジエチレングリコールモノラウレートおよびポリオキシエチレンラウレルエーテルが挙げられる。催吐性皮膜としては、脂肪酸、脂肪、ワックス、シェラック、アンモニア化シェラック、および酢酸フタル酸セルロースが挙げられる。フィルム皮膜としては、ヒドロキシエチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール４０００および酢酸フタル酸セルロースが挙げられる。
【０１２４】
化合物またはその薬学的に受容可能な誘導体は、胃の酸性環境から保護する組成物中で提供されうる。たとえば、組成物は、胃の中でその成分を維持し、腸の中で活性化合物を放出する腸溶皮膜で製剤化しうる。また、組成物は、制酸剤またはそのような他の成分と組合わせて製剤化することもできる。
【０１２５】
投与単位形態がカプセルの場合、前記材料に加えて、脂肪油のような液体キャリアを含むことができる。さらに、投与単位形態は、投与単位の物理的形態を変形するほかの種々の材料、たとえば、砂糖の皮膜および他の腸溶剤を含むこともできる。また、化合物は、エリキシル剤、懸濁液、シロップ、オブラート、スプリンクル、チューインガムなどの成分として投与することもできる。シロップは、活性化合物、甘味剤としてのショ糖およびある防腐剤に加えて、染料、着色剤および風味剤を含んでもよい。
【０１２６】
また、活性材料は、所望の作用を妨害しない他の活性材料、またはたとえば、制酸剤、Ｈ２ブロッカー、および利尿剤のような所望の作用を補助する材料と混合してもよい。活性成分は、本明細書で記載した化合物またはその薬学的に受容可能な誘導体である。活性成分を、高い濃度（９８重量％まで）含みうる。
【０１２７】
全ての実施形態において、錠剤およびカプセル製剤を、当業者に公知なように、活性成分の溶解性を変性または持続するために被覆してもよい。したがって、たとえば、それらはフェニルサリチル酸、ワックスまたは酢酸フタル酸セルロースのような、従来の腸溶分解皮膜で被覆してもよい。
【０１２８】
（ｂ．経口投与用の液体組成物）
液体経口投与形態には、水溶液、乳液、懸濁液、非発泡性顆粒から再構成された溶液および／または懸濁液、および発泡性顆粒から再構成された発泡性製剤が含まれる。水溶液として、たとえば、エリキシル剤およびシロップが挙げられる。乳液は、水中油、油中水のどちらでもよい。
【０１２９】
エリキシル剤は、透明の、ハイドロアルコール製剤である。エリキシル剤で使用される薬学的に受容可能なキャリアとして溶剤が挙げられる。シロップは、たとえば、ショ糖のような糖の濃縮水溶液であって、防腐剤を含んでもよい。乳液は、１つの液体が小さな液滴の形でもう１つの液体全体に分散している２相系である。乳液で使用される薬学的に受容可能なキャリアは、薬剤および防腐剤を乳化する非水性液体である。懸濁液は、薬学的に受容可能な懸濁剤および防腐剤を使用する。液状経口投与形態に再構成すべき非発泡性顆粒に使用される薬学的に受容可能な基材として、希釈剤、甘味剤および湿潤剤が挙げられる。液状経口投与形態に再構成すべき、発泡性顆粒において使用される薬学的に受容可能な基材としては、有機酸および二酸化炭素源が挙げられる。着色剤および風味剤は前記投与形態の全てに使用される。
【０１３０】
溶剤としては、グリセリン、ソルビトール、エチルアルコールおよびシロップが挙げられる。防腐剤の例として、グリセリン、メチルおよびプロピルパラベン、安息香酸、安息香酸ナトリウムおよびアルコールが挙げられる。乳液で利用される非水性液体の例として、鉱油および綿実油が挙げられる。乳化剤の例として、ゼラチン、アカシア、トラガカント、ベントナイトおよびポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートのような界面活性剤が挙げられる。懸濁剤として、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ペクチン、トラガカント、Ｖｅｅｇｕｍおよびアカシアが挙げられる。甘味剤としては、ショ糖、シロップ、グリセリンおよびサッカリンのような人口甘味料が挙げられる。湿潤剤としては、プロピレングリコールモノステアレート、ソルビタンモノオレエート、ジエチレングリコールモノラウレートおよびポリオキシエチレンラウリルエーテルが挙げられる。有機酸としては、クエン酸および酒石酸が挙げられる。二酸化炭素源としては、炭酸水素ナトリウム、および炭酸ナトリウムが挙げられる。着色剤としては、認証された水溶性ＦＤおよびＣ染料の任意のもの、およびその混合物が挙げられる。風味剤としては、果物のような植物から抽出される天然の風味剤、および好ましい味覚を生み出す化合物の合成ブレンドが挙げられる。
【０１３１】
固形投与形態については、１つの実施形態では、溶液または懸濁液（たとえば、プロピレンカーボネート、植物油またはトリグリセリド）は、ゼラチンカプセルに封入される。そのような溶液、製剤およびカプセル化については、米国特許第４，３２８，２４５号、第４，４０９，２３９号および第４，４１０，５４５号明細書に記載されている。液体投与形態に関し、溶液、たとえば、ポリエチレングリコールにおいては、投与のために簡単に計れるように、充分な量の薬学的に受容可能な液体キャリア（たとえば、水）で希釈してもよい。
【０１３２】
あるいは、液体または半固体経口製剤は、活性化合物または塩を、植物油、グリコール類、トリグリセリド類、プロピレングリコールエステル類（たとえば、プロピレンカルボネート）および他のそのうなキャリアに溶解または分散させ、これらの溶液または懸濁液を硬質または軟質ゼラチンカプセル殻に封入することにより調製してもよい。他の有用な製剤として、米国特許ＲＥ第２８，８１９号および米国特許第４，３５８，６０３号明細書に記載されているものが挙げられる。つまり、そのような製剤として、本発明で提供される化合物と、１，２−ジメトキシメタン、ジグライム、トリグライム、テトラグライム、ポリエチレングリコール−３５０−ジメチルエーテル、ポリエチレングリコール−５５０−ジメチルエーテル、ポリエチレングリコール−７５０−ジメチルエーテル（３５０、５５０および７５０は、ポリエチレングリコールのおおよその平均分子量を表す）を始めとする（これらに限定されない）ジアルキル化モノ−またはポリ−アルキレングリコールと、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、プロピルガレート、ビタミンＥ、ヒドロキノン、ヒドロキシクマリン、エタノールアミン、レクチン、セファリン、アスコルビン酸、リンゴ酸、ソルビトール、リン酸、チオジプロピオン酸およびそのエステル類、およびジチオカルバメートのような１種以上の抗酸化剤とを含むものが挙げられるが、これに限定されない。
【０１３３】
他の製剤として、薬学的に受容可能なアセタールを含むアルコール性水溶液が挙げられるがこれに限定されない。これらの製剤に使用されるアルコール類として、薬学的に受容可能な、１個以上の水酸基を持つ水混和性溶剤の任意のもの、プロピレングリコールおよびエタノールが挙げられるが、これらに限定されない。アセタール類として、アセタルデヒドジエチルアセタールのような、低級アルキルアルデヒドのジ（低級アルキル）アセタールが挙げられるがこれに限定されない。
【０１３４】
（２．注射可能な溶液および乳液）
１つの実施形態では、皮下的、筋肉内または静注的な注射を特徴とする、非経口的投与も、本発明において企図される。注射液は、液状溶液または懸濁液、または注射の前に液体中に溶解または懸濁するのに適切な固形状形体として、または乳液として、従来の形態に調製することができる。また、注射可能な溶液および乳液は、１種以上の賦形剤を含んでもよい。適切な賦形剤として、たとえば、水、食塩水、デキストロース、グリセロールまたはエタノールが挙げられる。また、もし所望であれば、投薬すべき薬学的組成物は、膨潤剤、乳化剤、ｐＨ緩衝剤、安定剤、可溶化促進剤、および他のこのような薬剤、たとえば、酢酸ナトリウム、ソルビタンモノラウレート、トリエタノールアミンオレエートおよびシクロデキストリンのような非毒性補助剤を少量含んでもよい。
【０１３５】
一定濃度の投与量を維持する（たとえば、米国特許第３，７１０，７９５号明細書参照）ような、徐放または持続放出システムの移植も本発明において使用を意図するものである。つまり、本発明で提供される化合物を、固形の内側マトリックス、たとえば、ポリメタクリル酸メチル、ポリメタクリル酸ブチル、可塑化または未可塑化ポリ塩化ビニル、可塑化ナイロン、可塑化ポリエチレンテレフタレート、天然ゴム、ポリイソプレン、ポリイソブチレン、ポリブタジエン、ポリエチレン、エチレン−酢酸ビニル共重合体、シリコーンゴム、ポリジメチルシロキサン、シリコーン・炭酸塩共重合体、アクリル酸およびメタクリル酸のエステルのヒドロゲルのような親水性ポリマー、コラーゲン、外側高分子膜、たとえば、ポリエチレン、ポリプロピレン、エチレン／プロピレン共重合体、エチレン／アクリル酸エチル共重合体、エチレン／酢酸ビニル共重合体、シリコーンゴム、ポリジメチルシロキサン、ネオプレンゴム、塩素化ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、酢酸ビニルとの塩化ビニル共重合体、塩化ビニリデン、エチレンおよびプロピレンによって取り囲まれている、架橋ポリビニルアルコールおよび架橋部分加水分解ポリ酢酸ビニル、アイオノマーポリエチレンテレフタレート、ブチルゴムエピクロルヒドリンゴム、エチレン／ビニルアルコール共重合体、エチレン／酢酸ビニル／ビニルアルコール三元ポリマー、および体液不溶性エチレン／ビニルオキシエタノール共重合体に分散させる。該化合物は、放出速度制御工程で外側重合膜に拡散する。このような非経口組成物中に含まれる活性化合物の割合は、特異的な性質と、化合物の活性および被験体の必要性とに大きく依存する。
【０１３６】
組成物の非経口的投与としては、静脈内投与、皮下投与および筋肉内投与が挙げられる。非経口的投与のための調製物としては、注射用無菌溶液、凍結乾燥粉末のような無菌乾燥可溶性製剤であって使用の直前に溶剤と混合するための製剤、たとえば皮下注射錠剤、注射用の無菌懸濁液、無菌乾燥不溶性製剤であって、使用直前にビヒクルと混合するための製剤、および無菌乳液が挙げられる。溶液は、水性でも非水性でもよい。静脈内に投与する場合の適切なキャリアとしては、生理食塩水またはリン酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）、、およびブドウ糖、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ならびにこれらの混合物のような増粘剤および可溶化剤を含む溶液が挙げられる。
【０１３７】
非経口調製物において使用される薬学的に受容可能なキャリアとしては、水性ビヒクル、非水性ビヒクル、抗菌剤、等張剤、緩衝液、酸化防止剤、局所麻酔剤、懸濁および分散剤、乳化剤、封止剤またはキレート剤および他の薬学的に受容可能な物質が挙げられる。
【０１３８】
水性ビヒクルの例としては、塩化ナトリウム注射剤、リンゲル注射剤、等張デキストロース注射剤、無菌水注射剤、デキストロースおよび乳酸化リンゲル注射剤が挙げられる。非水性非経口ビヒクルとしては、植物由来の不揮発性油、綿実油、トウモロコシ油、ゴマ油、およびピーナッツ油が挙げられる。静菌性または静真菌性濃度の抗菌剤は、フェノールまたはクレゾール、水銀剤、ベンジルアルコール、クロロブタノール、メチルおよびプロピルｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル類、チメロサール、塩化ベンザルコニウムおよび塩化ベンゼトニウムを含む、複数回投与容器中に包装されている非経口調製物に加えなければならない。等張剤としては、塩化ナトリウムおよびデキストロースが挙げられる。緩衝液としては、リン酸塩およびクエン酸塩が挙げられる。酸化防止剤としては、硫酸水素ナトリウムが挙げられる。局所麻酔剤としては、プロカイン・塩酸塩が挙げられる。懸濁および分散剤としては、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびポリビニルピロリドンが挙げられる。
【０１３９】
乳化剤としては、ポリソルベート８０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０）が挙げられる。金属イオンの封止剤またはキレート剤としては、ＥＤＴＡが挙げられる。また、薬学的キャリアとしては、エチルアルコール、水混和性ビヒクル用エチルアルコール、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコール、およびｐＨ調整用水酸化ナトリウム、塩酸、クエン酸または乳酸が挙げられる。
薬学的に活性な化合物の濃度は、所望の薬学的効果を生じるために注射剤が有効量を与えるように調整される。正確な用量は、当該分野で公知のように、患者または動物の年齢、体重および状態に依る。
【０１４０】
単位投与非経口的調製物は、アンプル、バイアルまたは針付き注射器に装入される。当該分野で公知でありかつ実行されているように、非経口投与用調製物は全て無菌でなければならない。
【０１４１】
たとえば、活性化合物を含む無菌水溶液の静脈内または動脈内注射は、効果的な投与方式である。別の実施形態では、活性材料を含む無菌水性または油性溶液または懸濁液を必要に応じて注射し、所望の薬学的効果を生み出す。
【０１４２】
注射剤は、局所または全身的投与用に設計される。１つの実施形態では、少なくとも約０．１％ｗ／ｗから約９０％ｗ／ｗまたはそれ以上の濃度を含むように、またある実施形態では、組織（複数を含む）を治療するために活性化合物を１％ｗ／ｗ超える量含むように、治療効果のある投与量を製剤化する。
【０１４３】
化合物を、微細化した形態または他の適切な形で懸濁してもよいし、誘導体化して、より溶解性の活性な生成物を生成してもよいし、プロドラッグを生成してもよい。結果として得られる混合物の形態は、意図する投与方式および選択されたキャリアまたはビヒクルにおける該化合物の溶解性を始めとする、数多くの要因に依存する。有効濃度は、状態の症状を回復するのに充分な量であり、経験的に決定してもよい。
【０１４４】
（３．凍結乾燥粉末）
また、本発明の関心事の中には、溶液、乳液および他の混合物として投与するために再構成することのできる凍結乾燥粉末もある。それらは、固形物またはゲルとして再構成し、製剤化してもよい。
【０１４５】
無菌凍結乾燥粉末は、本発明で提供される化合物またはその薬学的に受容可能な誘導体を適切な溶剤に溶解することによって調製する。溶剤は、粉末または他の薬学的成分、あるいは該粉末から調整される再構成溶液の安定性を向上させる賦形剤を含んでもよい。使用してもよい賦形剤としては、デキストロース、ソルビタル、果糖、トウモロコシシロップ、キシリトール、グリセリン、ブドウ糖、ショ糖または他の薬剤が挙げられるが、これらに限定されない。また、溶剤は、クエン酸塩、ナトリウムまたはカリウムのリン酸塩、または当業者に公知の他のそのような緩衝液、１つの実施形態ではほぼ中性のｐＨであるもののような緩衝液を含んでもよい。次に、溶液の無菌ろ過、続いて当業者に公知の標準の状態における凍結乾燥を行って、所望の製剤が提供される。１つの実施形態では、得られた溶液を、凍結乾燥用のバイアルに分配する。各バイアルは、化合物を１回投与量または複数回投与量含む。凍結乾燥粉末は、約４℃〜室温のような適正な条件下で貯蔵することができる。
【０１４６】
この凍結乾燥粉末と水とを用いて注射剤に再構成することで、非経口投与用途のための製剤が提供される。再構成の際は、凍結乾燥粉末を無菌水または他の適切なキャリアに加える。正確な量は、選択される化合物に依る。そのような量を経験的に決定することができる。
【０１４７】
（４．局部投与）
局部混合物は、局所および全身投与において記載したように調製する。得られる混合物は、溶液、懸濁液、乳液などであってもよく、クリーム、ゲル、軟膏、乳液、溶液、エリキシル剤、ローション、懸濁液、チンキ剤、ペースト、フォーム、噴霧剤、かん注剤、スプレー、座剤、包帯、皮膚用パッチ、または局部投与に適した任意の他の製剤に製剤化する。
【０１４８】
化合物またはその薬学的に受容可能な誘導体は、局部適用のために吸入薬のような噴霧剤（たとえば、炎症性疾患、特に気管支喘息の治療に有用なステロイドの送達のための噴霧剤を記載する、米国特許第４，０４４，１２６号、第４，４１４，２０９号、第４，３６４，９２３号明細書参照）として製剤化してもよい。これらの呼吸器官への投与製剤は、ネブライザー用の噴霧剤または溶液の形に、あるいは吸入剤用の微細粉末として、単独であるいはラクトースのような不活性キャリアと組合わせて製剤化してもよい。このような場合、１つの実施形態では、製剤の粒子径が５０ミクロン未満であり、１つの実施形態では、１０ミクロン未満である。
【０１４９】
化合物は、たとえば、眼のような皮膚および粘膜局所適用のような、局所または局部適用の、眼に適用するため、または槽内または脊髄内適用のために、ゲル、クリームおよびローションの形に製剤化してもよい。局部投与は、経皮送達、眼や粘膜への投与、あるいは吸入治療も意図する。活性化合物単独または他の薬学的に受容可能な賦形剤との組合わせの経鼻溶液としても投与することができる。
【０１５０】
経鼻投与に関し、調製物は、液体キャリアに溶解または懸濁させたエステル化リン酸塩化合物、特に噴霧剤適用のための水性キャリア、を含んでもよい。キャリアは、プロピレングリコールのような可溶化剤、界面活性剤、レクチンまたはシクロデキストリンのような吸収促進剤、または防腐剤を含んでもよい。
【０１５１】
これらの溶液、特に眼科用途を意図するものは、適正な塩で、０．０１％〜１０％等張溶液（ｐＨ約５〜７）に製剤化してもよい。
【０１５２】
（５．他の投与経路の組成物）
イオン泳動および電気泳動装置を含む、経皮パッチのような他の投与経路、および直腸投与もまた本発明で意図するものである。
【０１５３】
イオン泳動および電気泳動装置を含む、経皮パッチは、当業者には周知である。たとえば、そのようなパッチとして、米国特許第６，２６７，９８３号、第６，２６１，５９５号、第６，２５６，５３３号、第６，１６７，３０１号、第６，０２４，９７５号、第６，０１０７１５号、第５，９８５，３１７号、第５，９８３，１３４号、第５，９４８，４３３号および第５，８６０，９５７号明細書に記載がある。
【０１５４】
たとえば、直腸投与の薬学的投与形態としては、全身効果用の直腸座剤、カプセルおよび錠剤がある。本明細書で使用される直腸座剤は、直腸に挿入され、体温で溶けまたは柔らかくなり、１種以上の薬学的または治療活性成分を放出する固体を意味する。直腸座剤において利用される薬学的に受容可能な物質は、融点を上げる基剤またはビヒクルおよび薬剤である。基剤の例として、ココアバター（セオブロマ油）、グリセリン−ゼラチン、カーボワックス（ポリオキシエチレングリコール）および脂肪酸のモノ−、ジ−およびトリグリセリドの適正な混合物が挙げられる。種々の基剤の組合わせを使用してよい。座剤の融点を上げる薬剤として、ゲイロウおよびワックスが挙げられる。直腸座剤は、圧縮法でも成形によっても調整し得る。１つの実施形態では、直腸座剤の重さは、約２〜３ｇｍである。直腸投与用の錠剤およびカプセルは、同じ薬学的に受容可能な物質を使用して、経口投与用の製剤方法と同じ方法によって製造する。
【０１５５】
（６．標的製剤）
本発明で提供される化合物またはその薬学的に受容可能な誘導体は、治療すべき被験体の体の特定の組織、受容体、または他の領域を標的として、製剤化してもよい。そのような標的化方法の多くは、当業者に周知である。そのような標的化方法全てを、本発明の組成物において使用することが本明細書の意図するところである。標的化方法の例として、たとえば、米国特許第６，３１６，６５２号、第６，２７４，５５２号、第６，２７１，３５９号、第６，２５３，８７２号、第６，１３９，８６５号、第６，１３１，５７０号、第６，１２０，７５１号、第６，０７１，４９５号、第６，０６０，０８２号、第６，０４８，７３６号、第６，０３９，９７５号、第６，００４，５３４号、第５，９８５，３０７号、第５，９７２，３６６号、第５，９００，２５２号、第５，８４０，６７４号、第５，７５９，５４２号および第５，７０９，８７４号明細書を参照のこと。ただし、これらに限定されない。
【０１５６】
１つの実施形態では、腫瘍標識化リポソームのような、組織標的化リポソームを含むリポソーム懸濁液も、また、薬学的に受容可能なキャリアとして適切である。これらは、当業者に公知の方法に従って調製すればよい。たとえば、リポソーム製剤は、米国特許第４，５２２，８１１号明細書に記載するように調製してもよい。つまり、多重ラメラ小胞体（ＭＬＶ’ｓ）のようなリポソームを、卵ホスファチジルコリンおよび脳フォスファチジルセリン（モル比７：３）をフラスコの内側で吹いて乾かすことによって形成してもよい。本明細書で提供される化合物の２価カチオンを含まないリン酸塩緩衝食塩水の溶液（ＰＢＳ）を加え、脂質フィルムが分散するまでフラスコを振盪する。得られた小胞を洗浄し、カプセル化されていない化合物を取り除き、遠心分離によってペレットとし、次いでＰＢＳに再懸濁する。
【０１５７】
（７．製造製品）
化合物または薬学的に受容可能な誘導体は、包装材料と、該包装材料内にある、神経障害に関連する１以上の症状の治療、予防または回復に効果のある本発明で提供される化合物またはその薬学的に受容可能な誘導体と、該化合物または組成物、またはその薬学的に受容可能な誘導体が、神経障害に関連する１以上の症状の治療、予防または回復のために使用されることが示唆されているラベルとを含む、製造製品として包装されてもよい。
【０１５８】
本発明で提供される製造製品は、包装材料を含む。医薬品を包装するのに使用される包装材料は、当業者に周知である。たとえば、米国特許第５，３２３，９０７号、第５，０５２，５５８号および第５，０３３，２５２号明細書を参照のこと。医薬品用包装材料の例として、ブリスターパック、ボトル、チューブ、吸入製剤、ポンプ剤、バッグ、バイアル、容器、注射器、ボトル、および選択された製剤および意図される投与方式および治療に適した任意の包装材料が挙げられるが、これらに限定されない。神経障害に関連する任意の症状のための治療が様々であるように、本発明で提供される化合物および組成物の種々の製剤が考えられる。
【０１５９】
（Ｅ．化合物の活性の評価）
本発明で提供される化合物の活性は、当業者に公知の方法および分析によって評価することができる。たとえば、生物学的活性は、コンドロイチン硫酸の活性を試験することで知られる分析で評価することができる。
【０１６０】
ある実施形態では、ニューロン成長を調整する本発明で提供される化合物の活性は、培養一次海馬ニューロンを使用して試験することができる。一次海馬ニューロンを、各化合物のあるまたはない、ポリ−ＤＬ−オルニチンが塗布されたカバーガラスで培養する。４８時間後、ニューロンを固定し、抗タウ抗体で免疫染色し、共焦点蛍光顕微鏡によって調べる。ニューロンの形態および成長における硫酸化四糖類ＣＳ−Ｅの効果を図１Ａ、Ｂに示す。細胞体から出てくる神経線維の数が増加し、大きな拡張の成長が、ポリ−ＤＬ−オルニチンコントロールに対し３９．３±３．６％まで刺激された。これに対し、硫酸化二糖類および非硫酸化四糖類は、ニューロン伸長に関し、有意な効果は示さなかった。
【０１６１】
脊髄からのドーパミン作動ニューロンおよび脊髄神経節（ＤＲＧ）ニューロンの成長における、二糖類ＣＳ−Ｅ、四糖類ＣＳ−Ｅおよび非硫酸化四糖類の効果を、図２Ａ、Ｂおよび図４Ａ、Ｂにそれぞれ示す。ある実施形態では、ＣＳ−Ｅ四糖類は、培養ドーパミン作動およびＤＲＧニューロンの伸長を、未治療のコントロールに対し、３０〜４０％まで促進した。図５および７に、四糖類ＣＳ−Ｅ、ＣＳ−Ｃおよび二糖類ＣＳ−Ｅの腫瘍壊死因子−αおよびミドカインへの結合をそれぞれ示す。
【０１６２】
（Ｆ．使用方法）
１つの実施形態では、本発明で提供される化合物は、ニューロン成長の調節因子として有用である。したがって、本発明では、損傷を負ったまたは切断された神経または神経組織の再生を促進する方法、またはニューロン細胞伸長が必要な種々の神経性状態下でのニューロン細胞の伸長を促進する方法が提供される。該方法は、ニューロン細胞、または損傷を負ったあるいは切断された神経を、本発明で提供される化合物を、ニューロン伸長を促進するために効果的な量で接触させることを含む。該方法はインビトロで行ってもインビボで行ってもよい。
【０１６３】
ある実施形態では、該化合物は、ニューロン成長のインビトロ研究で使用される。脳からのニューロン細胞、ＣＮＳ、抹消神経などを始めとする、種々の哺乳動物のニューロン細胞のいかなるものも、本発明で提供される方法によって治療することができる。さらに、細胞は、ヒト、マウス、ニワトリ、および家畜および飼い慣らされていない哺乳動物も含む他の任意の哺乳動物種などの任意の種々の哺乳動物種を起源とし得る。ある実施形態では、化合物は、培養海馬ニューロン、ドーパミン作動ニューロンおよび脊髄からの脊髄神経節（ＤＲＧ）ニューロン（これらに限定されない）を始めとする、培養ニューロンのニューロン成長を誘発するために使用される。ある実施形態では、本発明で提供される化合物は、移植前に、分化した神経幹細胞の成長を誘発するのに有用である。たとえば、パーキンソン病の場合、移植した組織は、ドーパミン作動ニューロンを着色するための代替物として有望である。
【０１６４】
ある実施形態では、本発明で提供される方法は、身体的または外科的トラウマ、梗塞、細菌性またはウィルス性感染、毒の被爆、変性疾患、または抹消あるいは中央ニューロンに悪影響を及ぼす悪性疾患に関連する抹消神経傷害の治療において、または脳、脊髄または背根神経節から新しいニューロン細胞が導入され、移植片からのニューロン伸長の刺激とレシピエント組織への神経支配が要求される手術または移植において有用である。さらにそのような疾患として、ＣＮＳ病変、神経膠症、パーキンソン病、アルツハイマー病、神経退化などが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１６５】
他の実施形態では、該化合物は、インビボ適用において、脳障害または脊髄損傷が起因の神経障害（これに限定されない）を含む、種々の状態を治療するため治療薬として使用される。脊髄損傷の場合、ある実施形態では、本発明で提供される化合物は、損傷を受けた軸索の再構築を補助する。
【０１６６】
ある実施形態では、本発明で提供される化合物は、線維芽細胞成長因子の活性を調整する。別の実施形態では、本発明で提供される化合物を、線維芽細胞成長因子と併用して、脳卒中、パーキンソンおよび他の神経性疾患の治療で使用する。
【０１６７】
ある実施形態では、本発明で提供される化合物を、ニューロン成長を誘発あるいは阻害するタンパク質と組合わせて投与する。ある実施形態では、本発明で提供される化合物を、移植した組織の成長を刺激するために、タンパク質または成長を刺激する他の因子と併用して使用する。ある実施形態では、本発明で提供される化合物を、腫瘍壊死因子−αまたはＴＮＦ−αおよび神経成長因子またはＮＧＦと組合わせて投与する。ある実施形態では、本発明で提供される化合物は、成長因子およびサイトカイン（たとえば、腫瘍壊死因子−αまたはＴＮＦ−αおよび神経成長因子またはＮＧＦ）と相互作用する。
【０１６８】
ある実施形態において、本発明では、ニューロン成長の低分子誘発因子をスクリーニングするための方法が提供される。該方法は、培養ニューロンに、複数の負荷電基を持つ低分子を塗布することと、未治療細胞に対する治療細胞の軸索長さの増加を測定することとを含む。ある実施形態では、本発明で提供される化合物では、平均軸索長さが、未治療細胞に対して約１から約５０％の間で増加する。ある実施形態では、本発明で提供される化合物によって起こされる平均軸索長さの増加は、約１％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％または約５０％を超える。ある実施形態では平均軸索長さの増加は、未治療細胞に対して約１０％を超え、別の実施形態では２０％を超え、他の実施形態では３０％を超える。
【０１６９】
以下の実施例は、説明の目的のためだけに提供されるものであり、本発明の範囲を限定するものではない。
【実施例】
【０１７０】
（一般的方法および実験の詳細）
他に記載がない限り、新鮮な蒸留溶剤を使用して、窒素またはアルゴン環境下、火炎乾燥ガラス容器内で行った。他の市販の試薬は全て受け取ったまま使用した。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、Ｅ．Ｍｅｒｃｋシリカゲル６０Ｆ２５４を予備被膜したプレート（０．２５ｍｍ）を使用して行った。展開したクロマトグラムの可視化は、蛍光消光法、セリウムモリブデン酸アンモニウム染色法、または必要に応じてニンヒドリン染色法により行った。ＩＣＮシリカゲル（粒径０．０３２〜０．０６３ｍｍ）は、フラッシュクロマトグラフィー用に使用した。ゲルろ過クロマトグラフィー（Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）Ｇ−１０およびＧ−２５超微粒子）は、最終生成物の精製を達成するために使用した。
【０１７１】
１ＨＮＭＲおよびプロトンデカップリング実験は、Ｖａｒｉａｎ  Ｍｅｒｃｕｒｙ３００（３００ＭＨｚ）およびＶａｒｉａｎ  Ｍｅｒｃｕｒｙ６００（６００ＭＨｚ）スペクトル計で記録し、Ｍｅ４Ｓｉに対するｐｐｍ（δ）（０．０ｐｐｍ）で示す。１Ｈのデータは、以下のように示す。ケミカルシフト（δｐｐｍ）、多重度（ｓ＝１重項、ｄ＝２重項、ｔ＝３重項、ｑ＝４重項、多重項）、Ｈｚにおける結合定数、および集積。１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルは、Ｖａｒｉａｎ  Ｍｅｒｃｕｒｙ３００（７５ＭＨｚ）スペクトル計で得、ケミカルシフトで示す。ＩＲスペクトルは、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｐａｒａｇｏｎ１０００スペクトル計で記録し、吸収周波数（ｃｍ−１）で示す。ＪＡＳＣＯ  Ｐ−１０１０は、旋光度を測定するために使用した。質量スペクトルは、ｔｈｅ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、ｔｈｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ／Ｐｅｐｔｉｄｅ  ＭｉｃｒｏＡｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｅｒｙおよび質量スペクトル分析装置から得た。
【０１７２】
（実施例１）
Ａ）グルクロン酸モノマー５の合成
Ａ１）ｐ−メチルフェニル４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−１−チオ−β−Ｄ−グルコピラノシド（２’）
２’の調製手順は、Ｙｅら（Ｙｅ，Ｘ．−Ｓ．；Ｗｏｎｇ，Ｃ．−Ｈ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２０００，６５，２４１０−２４３１）から採用した。ｐ−メチルフェニル−１−チオ−β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃｌｉｎｇｍａｎ，Ａ．Ｌ．；Ｒｉｃｈｔｍｙｅｒ，Ｎ．Ｋ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９６４，２９，１７８２−１７８７）１’（３６．７ｇ、１２８ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（３０．０ｍＬ）およびＣＨ３ＣＮ（３００  ｍＬ）に溶解した。ｐ−アニスアルデヒドジメチルアセタール（４４．０ｍＬ、２５６ｍｍｏｌ）およびＤＬ−１０−カンフルスルホン酸（６．００ｇ、２５．６ｍｍｏｌ）を加えた。反応系を室温で１２時間撹拌した。反応系をＴＥＡで急冷し、濃縮して、オレンジ色のシロップ状物を得た。生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（５０％次いで７０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）で精製し、２’（３６．３ｇ、７０％）を白色結晶性固体として得た。Ｒｆ  ０．２６（５０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。［α］Ｄ２１＝−３８（ｃ＝１．０、ＣＨ２Ｃｌ２）；ＩＲ（ＮａＣｌ上の薄膜）：
【０１７３】
【化５６】
2008500372.tif 000039
Ａ２）ｐ−メチルフェニル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−１−チオ−β−Ｄ−グルコピラノシド（３’）
２’（２３．７ｇ、５８．６ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（６７０ｍＬ）に溶解した。別のフラスコで、ＣＨ２Ｃｌ２（２２５ｍＬ）中、塩化ベンゾイル（１７．０ｍＬ、１４６ｍｍｏｌ）を、４−（ジメチルアミノ）ピリジン（ＤＭＡＰ、２５．１ｇ、２０５ｍｍｏｌ）溶液に滴下した。次いで、塩化ベンゾイル／ＤＭＡＰ溶液をゆっくりと２’の溶液に加えた。ＣＨ２Ｃｌ２の追加量（１９．０ｍＬ）を使用して、溶液を完全に移行した。反応系を室温で２５分撹拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で急冷した。水層をＣＨ２Ｃｌ２（２回）で抽出した。組合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、濃縮して、淡黄色固体を得た。この粗物質をＭｅＯＨで洗浄し、ＥｔＯＡｃから結晶化し、３’を白色固体（３０．８ｇ，８６％）として得た。Ｒｆ０．４３（３０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。
【０１７４】
【化５７】
2008500372.tif 000040
Ａ３）ｐ−メチルフェニル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジル−１−チオ−β−Ｄ−グルコピラノシド（４’）
３’の位置選択的開環の手順は、Ｊｏｈａｎｓｓｏｎら（Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ，Ｒ．；Ｓａｍｕｅｌｓｓｏｎ，Ｂ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ，Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．１  １９８４，２３７１−２３７４）から採用した。３’（１２．０ｇ、１９．６ｍｍｏｌ）をシアノホウ水素化ナトリウム（６．１５ｇ、９７．９ｍｍｏｌ）と組合わせ、３Å粉末モレキュラーシーブ（１２．０ｇ）を活性化し、ＤＭＦ（２６１ｍＬ）に溶解した。反応系を０℃に冷却した。トリフルオロ酢酸（１５．３ｍＬ、１９６ｍｍｏｌ）を反応系に滴下した。反応系を０℃で１時間撹拌し、次いで放置し室温まで暖めた。反応系を室温で１ｄ撹拌した。次いで、ろ過し、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、冷飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で急冷した。水層を分離し、ＣＨ２Ｃｌ２（２×）抽出した。合わせた有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３（１×）水溶液およびブライン（１×）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、濃縮した。残存するシアノホウ水素化ナトリウムを取り除くため、粗物質をＣＨ２Ｃｌ２（２５０ｍＬ）に再溶解し、ブラインで洗浄（３×）した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過紙、濃縮し、所望のアルコールを含む白色固体を得た。Ｒｆ０．２３（３０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。
【０１７５】
粗アルコールをＣＨ２Ｃｌ２（４７６ｍＬ）に溶解し、ＴＥＡ（８．２０ｍＬ、５８．６ｍｍｏｌ）を加え、反応系を０℃に冷却した。ｔ−ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート（１１．２ｍＬ、４８．８ｍｍｏｌ）を反応系に滴下した。反応系を放置し室温まで暖め、３時間撹拌した。次いで、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で急冷し、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈した。水層を分離し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出（３×）した。合わせた有機層を、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、濃縮し、オレンジ色のシロップ状物を得た。生成物をフラッシュクロマトグラフィー（１０％→１２％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）で精製し、４’（１３．２ｇ、９４％）を白色発泡体として得た。Ｒｆ０．６４（３０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。
【０１７６】
【化５８】
2008500372.tif 000041
Ａ４）ｐ−メチルフェニル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１−チオ−β−Ｄ−グルコピラノシド（５’）
アルミ箔で覆ったフラスコ中で、４’（１３．２ｇ、１８．１ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（４４０ｍＬ）に溶解した。水（２３．０ｍＬ）および２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４−ベンゾキノン（４．９３ｇ、２１．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応系を室温で１３時間撹拌した。次いで、反応系をＮａＨＣＯ３水溶液で急冷し、水を加えて固体全てを溶解した。水層を分離し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出（３×）した。合わせた有機層を、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、濃縮し、桃色の固体を得た。生成物をフラッシュクロマトグラフィー（４０％ＣＨ２Ｃｌ２：ヘキサン→１００％ＣＨ２Ｃｌ２→１０％ＥｔＯＡｃ：ＣＨ２Ｃｌ２）で精製し、５’（９．４２ｇ、８６％）を白色発泡体として得た。Ｒｆ０．４１（２０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。［α］Ｄ２２＝＋６２（ｃ＝１．０、ＣＨ２Ｃｌ２）；ＩＲ（ＮａＣｌ上の薄膜）：
【０１７７】
【化５９】
2008500372.tif 000042
Ａ５）ｐ−メチルフェニル（メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−１−チオ−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート（６’）
５’（９．４２ｇ、１５．５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１１５ｍＬ）に溶解した。二クロム酸ピリジニウム（３４．９ｇ、９２．８ｍｍｏｌ）を加え、反応系を室温で３ｄ撹拌した。クロミウム塩を除去した析出物にＥｔＯＡｃを加え、反応系をろ過し、濃縮（３×）した。残存する塩をフラッシュクロマトグラフィー（１００％ＥｔＯＡｃ）によって除去し、所望のカルボン酸を含む白色発泡体を得た。Ｒｆ０．１７（３０％  ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。
【０１７８】
粗酸をＣＨ２Ｃｌ２（１８７ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した。ジアゾメタン（９３．０ｍＬ、ジエチルエーテル中０．２Ｍ、１８．６ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。反応系を０℃で１時間撹拌した。氷酢酸を加え反応系を急冷した。次いで、濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（１０％→１５％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製し、６’（６．０４ｇ、６１％）を白色固体として得た。
【０１７９】
【化６０】
2008500372.tif 000043
Ａ６）メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−α／β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート（７’）
６’（６．０９ｇ、９．５６ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（６７．０ｍＬ）に溶解し、水（０．７００ｍＬ）を加えた。２．９３ｇのＮ−ヨードスクシンイミド、１２７ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２、３．１０ｍＬのＴＨＦおよび７８．０μＬのトリフルオロメタンスルホン酸を含む溶液を調製した。該溶液１３０ｍＬを反応混合物に加えた。反応系を室温で５．５時間撹拌した。次いで、１ＭのＮａ２Ｓ２Ｏ３で急冷し、ＣＨ２Ｃｌ２で希釈した。水層を分離し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出（３×）した。合わせた有機層をブラインおよび水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ろ過し、濃縮した。生成物をフラッシュクロマトグラフィー（１５％→３０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）で精製し、７’（４．２７ｇ、８４％、６．２β：１α）を白色発泡体として得た。Ｒｆ０．３０，０．３６（３０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。
【０１８０】
【化６１】
2008500372.tif 000044
Ａ７）メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−α−Ｄ−グルコピラノシルウロネートトリクロロアセトイミダート（５）
５の調製は、Ｄｒｉｇｕｅｚら（Ｄｒｉｇｕｅｚ，Ｐ．−Ａ．；Ｌｅｄｅｒｍａｎ，Ｉ．；Ｓｔｒａｓｓｅｌ，Ｊ．−Ｍ．；Ｈｅｒｂｅｒｔ，Ｊ．−Ｍ．；Ｐｅｔｉｔｏｕ，Ｍ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９９，６４，９５１２−９５２０）を修正した手順を使用して行った。７’（３．３２ｇ、６．２６ｍｍｏｌ）をトルエン（２×２０ｍＬ）と共蒸発し、一晩、真空乾燥した。次いで、ＣＨ２Ｃｌ２（４９．０ｍＬ）に溶解した。トリクロロアセトニトリル（３．８０ｍＬ、３７．５ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（０．８２０ｇ、２．５０ｍｍｏｌ）を加えた。室温で４時間撹拌した後、追加のトリクロロアセトニトリル（０．９５０ｍＬ、９．５０ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（０．２００ｇ、０．６００ｍｍｏｌ）を加えた。反応系をさらに４時間撹拌し、次いで、濃縮した。生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（１０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＋０．１％ＴＥＡ）で精製し、微量のβアノマーとともに、５（３．７７ｇ、８９％）を白色発泡体として得た。Ｒｆ０．５７（３０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。
【０１８１】
【化６２】
2008500372.tif 000045
Ｂ）ガラクトサミンモノマー６の合成
Ｂ１）１，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−２−トリクロロアセタミドα／β−Ｄ−ガラクトピラノシド（９’）
ＴＨＦ（５．００ｍＬ）中の１，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−２−アジド−２−デオキシ−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｌｅｍｉｅｕｘ，Ｒ．Ｕ．；Ｒａｔｃｌｉｆｆｅ，Ｒ．Ｍ．Ｃａｎ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．−Ｒｅｖ．Ｃａｎ．Ｃｈｉｍ．１９７９，５７，１２４４−１２５１）８’（０．１００ｇ、０．２６８ｍｍｏｌ）に、ｐ−トシル酸一水和物（０．０５１ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）、次いでＰｄ／Ｃ（０．０１７ｇ、６モル％）を加えた。次いで、反応系をＨ２雰囲気下に置き、室温で１８時間撹拌した。Ｐｄ／Ｃをセライトによるろ過によって除去し、溶剤を濃縮し、粗アミン類のアノマー混合物を淡黄色発泡体として得た。該粗混合物を精製することなく、次の工程で使用した。０℃に冷却した、ＴＨＦ（５ｍＬ）中の粗アミンの溶液に、塩化トリクロロアセチル（０．２２０ｇ、１．２１ｍｍｏｌ、０．１３０ｍＬ）、次いでＴＥＡ（０．１８０ｇ、１．７９ｍｍｏｌ、０．２５０ｍＬ）を加えた。反応混合物を０℃で１５分撹拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で急冷した。水層を分離し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出（２×）し、合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、溶剤を真空除去し、黄色の油状物を得た。この油状物をフラッシュクロマトグラフィー（３０％→４０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製し、９’（０．０９９ｇ、７５％、３．１β：１α）を白色固体として得た。Ｒｆ０．６１および０．５３（６０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。
【０１８２】
【化６３】
2008500372.tif 000046
Ｂ２）ｐ−メチルフェニル２−デオキシ−２−トリクロロアセタミド−３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−１−チオ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１０’）
９’（０．０５０ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（０．３５ｍＬ）溶液に、ｐ−トルエンチオール（０．０４２ｇ、０．３４ｍｍｏｌ）、次いでＢＦ３・ＯＥｔ２（０．０４３ｇ、０．３０ｍｍｏｌ、３８μＬ）を加え、反応混合物を室温で撹拌した。２時間後、さらにｐ−トルエンチオール（０．０１２ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）およびＢＦ３・ＯＥｔ２（０．０１４ｇ、０．１０ｍｍｏｌ、１３μＬ）を加え、室温で１時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で急冷し、有機相を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液および水で２回洗浄した。水層をＣＨ２Ｃｌ２で逆抽出（３×）し、合わせた有機相をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、こはく色の油状物を得た。この油状物をフラッシュクロマトグラフィー（２０％→２５％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製し、１０’（０．０４４ｇ、８０％）を白色固体として得た。Ｒｆ０．５１（５０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。
【０１８３】
【化６４】
2008500372.tif 000047
Ｂ３）ｐ−メチルフェニル２−デオキシ−２−トリクロロアセタミド−３−Ｏ−トリイソプロピルシリル−４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−１−チオ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１１’）
１０’（１７．９ｇ、０．０３２０ｍｏｌ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（８５ｍＬ）およびＭｅＯＨ（４３５ｍＬ）溶液を、室温で３０分攪拌し、次いで、ＮａＯＭｅ（２５重量％ＭｅＯＨ溶液、０．５１７ｇ、９．５８ｍｍｏｌ、２．０７ｍＬ）を加えた。混合物を２時間撹拌し、ＤＯＷＥＸ５０Ｘ８−２００を加え、さらに３０分撹拌し続けた。ＤＯＷＥＸをろ過により除去し、溶剤を真空除去し、１１’（１３．５ｇ、９８％）を黄色の固体として得た。この化合物は精製することなく次の工程に適していた。
【０１８４】
Ｂ４）ｐ−メチルフェニル２−デオキシ−２−トリクロロアセタミド−４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−１−チオ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１２’）
１１’（１３．５ｇ、０．０３１０ｍｏｌ）のアセトニトリル（８００ｍＬ、最小量）溶液に、ｐ−アニスアルデヒドジメチルアセタール（１１ｇ、０．０６３ｍｏｌ、１２ｍＬ）およびＤＬ−１０−カンフルスルホン酸（１０モル％）を加え、混合物を室温で１２時間撹拌した。反応混合物をＴＥＡで急冷し、溶剤を濃縮して、黄色の固体を得た。この固体をフラッシュクロマトグラフィー（４０％→８０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製し、１２’（１３ｇ、７６％）を白色固体として得た。Ｒｆ０．２５（５０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。
【０１８５】
【化６５】
2008500372.tif 000048
Ｂ５）ｐ−メチルフェニル２−デオキシ−２−トリクロロアセタミド−３−Ｏ−トリイソプロピルシリル−４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１３’）
１２’（５．６ｇ、０．０１０ｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液に、室温で塩化トリイソプロピルシリル（６．３ｇ、０．０３３ｍｏｌ、７．０ｍＬ）、イミダゾール（２．７ｇ、０．０４０ｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（０．４９ｇ、４０モル％）を加えた。反応混合物を４時間撹拌し、そこに、さらに塩化トリイソプロピルシリル（３．２ｇ、０．０１６ｍｏｌ、３．５ｍＬ）、イミダゾール（１．４ｇ、０．０２０ｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（０．２５ｇ、２０モル％）を加えた。反応混合物を１２時間撹拌し、飽和水溶液で急冷した。水層をＥｔＯＡｃで抽出（３×）し、合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、淡黄色の油状物を得た。この油状物をフラッシュクロマトグラフィー（１０％→１５％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製し、１３’（５．３ｇ、７５％）を白色固体として得た。Ｒｆ０．５７（３０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。
【０１８６】
【化６６】
2008500372.tif 000049
Ｂ６）アリル２−デオキシ−２−トリクロロアセタミド−３−Ｏ−トリイソプロピルシリル−４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１４’）
１３’（１１ｇ、０．０１６ｍｏｌ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（６７５ｍＬ）溶液に、４Å粉末モレキュラーシーブを加え、混合物を１時間撹拌した。アリルアルコール（９．３ｇ、０．１６ｍｏｌ、１１ｍＬ）およびＮ−ヨードスクシンイミド（５．３ｇ、０．０２３ｍｏｌ）を加え、混合物を０℃に冷却した。トリフルオロメタンスルホン酸（０．５ＮＣＨ２Ｃｌ２溶液、１．４４ｇ、９．６０ｍｍｏｌ、１９．２ｍＬ）を加え、反応系を０℃で１０分撹拌した。混合物をＴＥＡで急冷し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。溶剤を真空除去し、黄色の油状物を得た。この油状物をフラッシュクロマトグラフィー（５％→１５％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）により精製し、１４’（８．１ｇ、７９％）を白色固体として得た。Ｒｆ０．４１（３０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。
【０１８７】
【化６７】
2008500372.tif 000050
Ｂ７）アリル２−デオキシ−２−トリクロロアセタミド−４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（６）
１４’（８．００ｇ、１２．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２９０ｍＬ）溶液に、フッ化テトラブチルアンモニウム（１ＮＴＨＦ溶液、４．９１ｇ、１８．８ｍｍｏｌ、１８．８  ｍＬ）を加え、混合物を室温で８時間撹拌した。この時、２度目のフッ化テトラブチルアンモニウム（２．５ｇ、９．４ｍｍｏｌ、９．４ｍＬ）の添加を行い、反応系をさらに１２時間撹拌した。溶剤を真空除去し、黄色の油状物を得た。この油状物をフラッシュクロマトグラフィー（４０％→８０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）で精製し、６（５．１４ｇ、８５％）を白色固体として得た。Ｒｆ０．１７（５０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。
【０１８８】
【化６８】
2008500372.tif 000051
Ｃ．グルクロン酸モノマー５とガラクトサミンモノマー６との反応
Ｃ１．アリル（メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔ−ブチルジメチルシリル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−２−デオキシ−２−トリクロロアセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（４）
供与体５（０．５０ｇ、０．７４ｍｍｏｌ）および受容体６（０．３０ｇ、０．６２ｍｍｏｌ）の混合物をトルエン（３×３ｍＬ）とともに共蒸留し、真空下で一晩乾燥した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（１６ｍＬ）に溶解し、活性４Å粉末モレキュラーシーブを加えた。反応系を室温で１．５時間撹拌した。次いで、反応系を−４０℃に冷却し、さらに３０分撹拌した。トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート（ＣＨ２Ｃｌ２中１Ｍ、１２５μＬ、０．１２３ｍｍｏｌ）を−４０℃で反応系に滴下した。反応系をさらに３０分撹拌した。次いで、３０分かけて−１０℃まで暖め（分離できないオルソエステルの形成を避けるために、注意深くコントロールした温度勾配が必須であった）、ＴＥＡで急冷し、放置して室温まで暖めた。反応系をろ過し、濃縮して、黄色のシロップ状物を得た。生成物をフラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製し、４（０．４６ｇ、７４％）を白色固体として得た。Ｒｆ０．１２（３０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。
【０１８９】
【化６９】
2008500372.tif 000052
Ｃ２．メチル（２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔ−ブチルジメチルシリル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−２−デオキシ−２−トリクロロアセタミド−α−Ｄ−ガラクトピラノシドトリクロロアセトイミダート（７）
４（２．５ｇ、２．５ｍｍｏｌ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）溶液に、グラブスの第二世代触媒（Ｓｃｈｏｌｌ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．１９９９，１，９５３−９５６）（０．４３ｇ、２０モル％）を加え、混合物を室温で２時間撹拌した。溶剤を真空除去し、褐色の油状物を得た。この油状物をフラッシュクロマトグラフィー（１５％→２０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製し、Ｅ／Ｚ−プロピ−２−エニル（メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔ−ブチルジメチルシリル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−２−デオキシ−２−トリクロロアセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１．９２ｇ、７７％）を白色固体として得た。Ｒｆ（ＥおよびＺ）０．６８（６０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。
【０１９０】
【化７０】
2008500372.tif 000053
Ｅ／Ｚ−プロパ−２−エニル（メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔ−ブチルジメチルシリル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−２−デオキシ−２−トリクロロアセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（６．２ｇ、６．３ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（１１８ｍＬ）溶液、水（２４ｍＬ）およびピリジン（１．９ｍＬ）にヨウ素（３．１ｇ）を加え、混合物を周囲温度で３０分撹拌した。溶剤を真空除去し、黄色の油状物を得た。該油状物をＥｔＯＡｃで処理し、５％Ｎａ２ＳＯ３水溶液、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。溶剤を真空除去し、淡黄色の油状物を得た。この油状物をフラッシュクロマトグラフィー（４０％→６０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）で精製し、メチル（２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔ−ブチルジメチルシリル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−２−デオキシ−２−トリクロロ−アセタミド−α／β−Ｄ−ガラクトピラノシドのアノマー混合物（４．８ｇ、８１％）を淡黄色固体として得た。Ｒｆ０．２８および０．１８（５０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。
【０１９１】
【化７１】
2008500372.tif 000054
０℃に冷却した、メチル（２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔ−ブチルジメチルシリル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−２−デオキシ−２−トリクロロアセタミド−α／β−Ｄ−ガラクトピラノシド（４．６ｇ、４．８ｍｍｏｌ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（１９０ｍＬ）溶液に、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデセ−７−エン（０．２９ｇ、１．９ｍｍｏｌ、０．２９μＬ）およびトリクロロアセトニトリル（１０ｇ、７１ｍｍｏｌ、７．２ｍＬ）を加え、混合物を１５分撹拌した。混合物をＴＥＡで急冷し、真空で濃縮し、黄色の油状物を得た。この油状物をフラッシュクロマトグラフィー（３５％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、＋２％ＴＥＡ）で精製し、７（４．７ｇ、９０％）を淡黄色発泡体として得た。Ｒｆ０．７４（５０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。
【０１９２】
【化７２】
2008500372.tif 000055
Ｃ３．アリル（メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−２−デオキシ−２−トリクロロアセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（８）
０℃に冷却した４（２．５ｇ、２．５ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（４０ｍＬ）およびピリジン（４０ｍＬ）溶液に、ＨＦ・ピリジン（１３ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温まで暖め、１８時間撹拌した。次いで、混合物を、ＥｔＯＡｃで希釈し、１０％ＣｕＳＯ４水溶液で洗浄した。水相を、ＥｔＯＡｃで抽出（３×）し、合わせた有機相を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。溶剤を真空除去し、黄色の油状物を得た。この油状物をフラッシュクロマトグラフィー（３０→６０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）で精製し、８（１．９ｇ、８５％）を白色固体として得た。Ｒｆ０．３５（６０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。
【０１９３】
【化７３】
2008500372.tif 000056
Ｃ４．アリル（メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔ−ブチルジメチルシリル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−２−デオキシ−２−アセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１０）
１０を、Ｂｅｌｏｔら（Ｂｅｌｏｔ，Ｆ．；Ｊａｃｑｕｉｎｅｔ，Ｊ．−Ｃ．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．２０００，３２６，８８−９７）を修正した手順を使用して行った。４（２５０ｍｇ、０．２５１ｍｍｏｌ）をベンゼン（７．８０ｍＬ）に溶解した。トリブチルスタンナン（３０５μＬ、１．５１ｍｍｏｌ）および２，２’−アゾビスイソブチロニトリル（８０．０ｍｇ）を加えた。反応系を室温で４５分撹拌した。次いでそれを８０℃まで加熱し、さらに１．５時間撹拌した。反応系を室温まで冷却し、濃縮して、白色固体を得た。生成物をフラッシュクロマトグラフィー（５０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製し、アリル（メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔ−ブチルジメチルシリル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−２−デオキシ−２−アセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１９０ｍｇ、８５％）を白色固体として得た。Ｒｆ０．１９（５０％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。
【０１９４】
【化７４】
2008500372.tif 000057
アリル（メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔ−ブチルジメチルシリル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−２−デオキシ−２−アセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１９０ｍｇ、０．２１３ｍｍｏｌ）を、ＣＨ２Ｃｌ２（２．４０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．５６０ｍＬ）に溶解した。２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４−ベンゾキノン（７３．０ｍｇ、０．３２０ｍｍｏｌ）を加えた。反応系を室温で３時間撹拌し、ＭｅＯＨで急冷し、濃縮して、赤色固体を得た。生成物を、セファデックスＬＨ−２０（５０％ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ）、続いてシリカゲルクロマトグラフィー（１００％ＥｔＯＡｃ）で精製し、所望のジオール１０を含む橙色の固体（１０２ｍｇ、６２％）を得た。Ｒｆ０．２３（１００％ＥｔＯＡｃ）。
【０１９５】
【化７５】
2008500372.tif 000058
Ｃ５．アリル（ナトリウムβ−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−４，６−ジ−Ｏ−ナトリウムスルホネート−２−デオキシ−２−アセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１）
粗ジオール１０（１０２ｍｇ、０．１３２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解した。ＳＯ３・ＴＭＡ（０．５５０ｇ、３．９６ｍｍｏｌ）を加えた。反応系を５０℃で一晩撹拌した。それを、室温まで冷却し、ＭｅＯＨで急冷し、濃縮して、黄色の固体を得た。生成物を、セファデックスＬＨ−２０（５０％ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ）、続いてシリカゲルクロマトグラフィー（１０％→２０％ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２）で精製し、アリル（メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔ−ブチルジメチルシリル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−４，６−ジ−Ｏ−ナトリウムスルホネート−２−デオキシ−２−アセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１１５ｍｇ、９３％）を白色固体として得た。
【０１９６】
【化７６】
2008500372.tif 000059
アリル（メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔ−ブチルジメチルシリル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−４，６−ジ−Ｏ−ナトリウムスルホネート−２−デオキシ−２−アセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１１５ｍｇ、０．１２３ｍｍｏｌ）をピリジン（１．７ｍＬ）およびＴＨＦ（１．７ｍＬ）に溶解した。反応系を０℃に冷却し、ＨＦ・ピリジン（０．６０ｍＬ）を加え、これをゆっくりと室温まで一晩で暖めた。１２時間後、混合物をセファデックスＬＨ−２０カラム（５０％ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ）に流し、濃縮された残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（１０％→２０％ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２）によって精製し、白色固体（９０．０ｍｇ）を得た。Ｒｆ０．５０（ＥｔＯＡｃ：ｐｙＲ：Ｈ２Ｏ：ＡｃＯＨ，８：５：３：１
粗アルコール（９０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１．８ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１．８ｍＬ）に溶解し、これに、２ＭのＮａＯＨ（０．７２ｍＬ）を加えた。室温で１２時間後、反応系をアンバーリストＩＲ−１２０樹脂で中和し、ろ過し、凍結乾燥して、橙色の固体を得た。生成物を、セファデックスＧ−１０（１００％Ｈ２Ｏ）およびセファデックスＳＰＣ２５（１００％Ｈ２Ｏ）で精製し、凍結乾燥して、１（４５ｍｇ、５５％、２工程）を白色固体として得た。
【０１９７】
【化７７】
2008500372.tif 000060
Ｃ６．アリル（メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔ−ブチルジメチルシリル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−（４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−２−デオキシ−２−トリクロロアセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−（１→４）−（メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−２−デオキシ−２−トリクロロアセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１５’）
７（０．２０ｇ、０．１８２ｍｍｏｌ）および８（０．１３ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を組合わせ、トルエン（３×）とともに共蒸留し、一晩高真空下に置き、乾燥した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（３．０ｍＬ）に溶解し、４Å粉末モレキュラーシーブを加えた。混合物を室温で１時間撹拌し、次いで−１５℃に冷却した。トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート（０．５ＮのＣＨ２Ｃｌ２溶液、０．００６８ｇ、０．０３１ｍｍｏｌ、６１μＬ）を加え、反応系を−１５℃で３０分撹拌し、次いでＴＥＡで急冷した。混合物をろ過し、濃縮して、黄色の油状物を得た。この油状物をフラッシュクロマトグラフィー（３０→４０％ＥｔＯＡｃ：０．１％ＴＥＡ含有ヘキサン）によって精製し、１５’（８５ｍｇ、３１％）を白色固体として得た。
【０１９８】
【化７８】
2008500372.tif 000061
Ｃ７．アリル（メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔ−ブチルジメチルシリル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−（４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−２−デオキシ−２−アセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−（１→４）−（メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−４，６−Ｏ−ｐ−メトキシベンジリデン−２−デオキシ−２−アセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１６’）
１５’（５０ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）をベンゼン（０．８８ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルアセタミド（０．２２ｍＬ）に溶解し、これにトリブチルスタンナン（０．１０ｍＬ、０．４９ｍｍｏｌ）および２，２’−アゾビスイソブチロニトリル（２．０ｍｇ）を加えた。反応系を室温で３０分撹拌し、次いで８０℃で５時間加熱した。これを室温まで冷却し、濃縮して、黄白色の固体を得、シリカゲルクロマトグラフィー（８０％→１００％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）で精製して、１６’を白色固体（３７ｍｇ、８５％）として得た。Ｒｆ０．６９（１００％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）。
【０１９９】
【化７９】
2008500372.tif 000062
Ｃ８．アリル（メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔ−ブチルジメチルシリル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−（２−デオキシ−２−アセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−（１→４）−（メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−２−デオキシ−２−アセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（９）
１６’（１３ｍｇ、０．００８３ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２００μＬ）およびＨ２Ｏ（２４μＬ）に溶解し、反応系をアルミ箔で多い、暗所で撹拌した。２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４−ベンゾキノン（６．０ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）を加え、反応系を室温で２時間撹拌した。反応系をＭｅＯＨで急冷し、濃縮して、赤色固体を得た。粗生成物をセファデックスＬＨ−２０（５０％ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ）に供し、９を黄色の固体（８．５ｍｇ、７５％）として得た。Ｒｆ０．２（１００％ＥｔＯＡｃ）。
【０２００】
【化８０】
2008500372.tif 000063
Ｃ９．アリル（メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−４−Ｏ−ｔ−ブチルジメチルシリル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−（４，６−ジ−Ｏ−ナトリウムスルホネート−２−デオキシ−２−アセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−（１→４）−（メチル２，３−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−４，６−ジ−Ｏ−ナトリウムスルホネート−２−デオキシ−２−アセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１７’）
９（１３ｍｇ、０．００９５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３１５μＬ）に溶解し、これにＳＯ３・ＴＭＡ（５０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を加え、反応系を５０℃で２ｄ撹拌した。これをＭｅＯＨで急冷し、濃縮して、黄色の固体を得、セファデックスＬＨ−２０（５０％ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ）およびセファデックスＳＰＣ２５（５０％Ｈ２Ｏ：ＭｅＯＨ）で精製して、１７’を白色固体（１１ｍｇ、６７％）として得た。Ｒｆ０．２９（ＥｔＯＡｃ：ｐｙｒ：Ｈ２Ｏ：ＡｃＯＨ，８：５：３：１）
【０２０１】
【化８１】
2008500372.tif 000064
Ｃ１０．アリル（ナトリウムβ−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−（４，６−ジ−Ｏ−ナトリウムスルホネート−２−デオキシ−２−アセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−（１→４）−（ナトリウム−β−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−４，６−ジ−Ｏ−ナトリウムスルホネート−２−デオキシ−２−アセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（２）
１７’（１１ｍｇ、０．００６２ｍｍｏｌ）をピリジン（１５０μＬ）、ＴＨＦ（１５０μＬ）およびＨ２Ｏ（３５μＬ）に溶解した。反応系を０℃に冷却し、これにＨＦ・ピリジン（４１μＬ）を加えた。これを０℃で１時間、室温で一晩撹拌し、この後、セファデックスＬＨ−２０（５０％ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ）カラムに供した。生成物を濃縮し、Ｈ２Ｏで処理し、凍結乾燥して、白色固体（４．９ｍｇ）を得、これを直ちに次の反応で使用した。
【０２０２】
該アルコールをＬｕｃａｓら（Ｌｕｃａｓ，Ｈ．；Ｂａｓｔｅｎ，Ｊ．Ｅ．Ｍ．；ｖａｎ  Ｄｉｎｔｈｅｒ，Ｔ．Ｇ．；Ｍｅｕｌｅｍａｎ，Ｄ．Ｇ．；ｖａｎ  Ａｅｌｓｔ，Ｓ．Ｆ．；ｖａｎ  Ｂｏｅｃｋｅｌ，Ｃ．Ａ．Ａ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９９０，４６，８２０７−８２２８）の手順に類似の方法で脱保護した。アルコール（４．９ｍｇ、０．００３３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１９０μＬ）およびＨ２Ｏ（９４μＬ）に溶解し、０℃に冷却した。これに１ＭのＬｉＯＨ水溶液（７５μＬ）および３０％Ｈ２Ｏ２（３８μＬ）を加えた。反応系を０℃で１時間、室温で１２時間撹拌した。この時、４ＭのＮａＯＨ（５６μＬ）およびＭｅＯＨ（２８０μＬ）を加え、反応系をさらに１２時間撹拌した。次いで、これをアンバーリストＩＲ−１２０樹脂で中和し、ろ過し、凍結乾燥して、橙色の固体を得た。生成物をセファデックスＧ−２５ＵＦ（０．９％ＮａＣｌ水溶液）で精製し、セファデックスＧ−２５ＵＦ（１００％Ｈ２Ｏ）で脱塩し、凍結乾燥して、２を白色固体として得た（１．９ｍｇ、１７’から２５％）
【０２０３】
【化８２】
2008500372.tif 000065
Ｃ１１．アリル（ナトリウムβ−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−（２−デオキシ−２−アセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−（１→４）−（ナトリウムβ−Ｄ−グルコピラノシルウロネート）−（１→３）−２−デオキシ−２−アセタミド−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（３）
９（８．５ｍｇ、０．００６２ｍｍｏｌ）をピリジン（１１０μＬ）およびＴＨＦ（１１０μＬ）に溶解した。反応系を０℃に冷却し、これにＨＦ・ピリジン（３０μＬ）を加えた。反応系を、０℃で１時間、室温で一晩撹拌した。この後、混合物をセファデックスＬＨ−２０（５０％ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ）カラムに供し、生成物を黄色の固体（５．３ｍｇ）として得、これを直ちに次の工程で使用した。
【０２０４】
該アルコール（５．３ｍｇ、０．００４２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１２０μＬ）およびＨ２Ｏ（６０μＬ）に溶解し、０℃に冷却した。これに、１ＭのＬｉＯＨ水溶液（４７μＬ）および３０％Ｈ２Ｏ２（２３μＬ）を加えた。反応系を０℃で１時間、室温で１２時間撹拌した。この時、４ＭのＮａＯＨ（３５μＬ）およびＭｅＯＨ（１７３μＬ）を加え、反応系をさらに１２時間撹拌した。これを、アンバーリストＩＲ−１２０樹脂で中和し、ろ過し、凍結乾燥して、橙色の固体を得た。生成物をセファデックスＧ−２５ＵＦ（１００％Ｈ２Ｏ）で精製し、凍結乾燥して、３を白色固体（２．６ｍｇ、９から５２％）として得た。
【０２０５】
【化８３】
2008500372.tif 000066
（実施例２）
以下の四糖類を、実施例１で記載した手順と類似する手順で合成した。
【０２０６】
【化８４】
2008500372.tif 000067
（実施例３）
（海馬ニューロン成長における効果）
海馬ニューロン培養物
海馬ニューロン培養物を、ＧｏｓｌｉｎおよびＢａｎｋｅｒのプロトコル（Ｇｏｓｌｉｎ，Ｋ．；Ｂａｎｋｅｒ，Ｇ．Ｃｕｌｔｕｒｉｎｇ  Ｎｅｒｖｅ  Ｃｅｌｌｓ；Ｂａｎｋｅｒ，Ｇ．；Ｇｏｓｌｉｎ，Ｋ．；Ｅｄｓ．；ＭＩＴ  Ｐｒｅｓｓ：Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，Ｍａｓｓ．，１９９１；ｐｐ２５１−２８１）の修正版を使用して調製した。妊娠時のＳｐｒａｇｕｅ−ＤａｗｌｅｙラットからＥ１８ステージの胚を得、各胚からの海馬を切開した。１試料由来の全ての海馬を、４．５ｍＬの氷冷されたカルシウムおよびマグネシウムを含まないハンクスの平衡塩溶液（ＣＭＦ−ＨＢＳＳ）（ＧＩＢＣＯ）を含む、１５ｍＬ三角管に移した。トリプシン（２．５％、ＥＤＴＡを含まず；ＧＩＢＣＯ）を５ｍＬに加え、組織を３７℃で１５分分解した。トリプシン溶液を除去し、組織を５ｍＬのＣＭＦ−ＨＢＳＳで３回濯いだ。次いで、１ｍＬのＣＭＦ−ＨＢＳＳ中で、Ｐ１０００ピペットの先端を１２回通すことにより、組織を解離した。細胞を血球計数器で計測し、カバーガラス上に８０細胞／ｍｍ２で置き、Ｎ２混合物（ＧＩＢＣＯ）および０．１ｍＭピルビン酸塩が補給された、最小イーグル培地（ＭＥＭ）（ＧＩＢＣＯ）中で培養した。培養物を３７℃で５％ＣＯ２中に維持した。カバーガラスをＣｌｅｍｅｎｔら（Ｃｌｅｍｅｎｔ，Ａ．Ｍ．；Ｎａｄａｎａｋａ，Ｓ．；Ｍａｓａｙａｍａ，Ｋ．；Ｍａｎｄｌ，Ｃ．；Ｓｕｇａｈａｒａ，Ｋ．；Ｆａｉｓｓｎｅｒ，Ａ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９８，２７３，２８４４４−２８４５３）が記載するように被覆した。簡単に言うと、カバーガラスを、３７℃の５％ＣＯ２中で１時間かけて０．０１５ｍｇ／ｍＬのポリ−ＤＬ−オルニチン（ＳＩＧＭＡ）で、予備被覆し、再蒸留Ｈ２Ｏで３回洗浄し、３７℃の５％ＣＯ２中で一晩かけて、ＰＢＳ中の０．５ｍｇ／ｍＬの化合物１〜３で被覆した。次いで、該カバーガラスをＰＢＳで３回洗浄し、ＭＥＭ＋Ｎ２培地で溢れさせた。
【０２０７】
海馬ニューロン培養物の免疫細胞化学
培養４８時間後、カバーガラス上の海馬ニューロンを免疫染色した。細胞をＰＢＳで１回濯ぎ、４％パラホルムアルデヒド中、室温で２０分固定し、ＰＢＳで２回洗浄し、０．３％トリトンＸ−１００中、室温で５分透過し、ＰＢＳで２回洗浄した。非特異的結合を、室温で１時間、３％ＢＳＡでブロックした。ブロック溶液をＰＢＳで１回洗い流した。次いで、細胞を、３％ＢＳＡ中、室温で２時間、抗タウ抗体（ウサギポリクローナル、１：６００；ＳＩＧＭＡ）で培養した。過剰の抗体をＰＢＳで５回濯ぎ流した。蛍光体−結合二次抗体をＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓから購入し、３％ＢＳＡ中、３７℃で１時間かけて加えた。使用した二次抗体は、抗ウサギＩｇＧ  ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ４８８（１：６００）であった。過剰の二次抗体をＰＢＳで５回洗い流した。カバーガラスを、Ｖｅｃｔａｓｈｉｅｌｄ封入剤（Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｓ）を使用して、ガラススライド上に載せ、透明マニキュア液で封止した。次いで、細胞を、共焦点レーザー顕微鏡にかけた。
【０２０８】
共焦点レーザー顕微鏡
全細胞を、カルテックのＢｅｃｋｍａｎ  ＩｎｓｔｉｔｕｔｅのＢｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｃｅｎｔｅｒで、Ｚｅｉｓｓ  Ａｘｉｏｖｅｒｔ１００Ｍ逆転共焦点レーザー顕微鏡上に画像を写した。画像を、４０Ｘｐｌａｎ−ｎｅｏｆｌｕａｒ油対物レンズを使用して、ＬＳＭ  Ｐａｓｃａｌソフトで取り込んだ。全細胞を４８８ｎｍ光で励起した。
【０２０９】
形態計測分析
定量分析に関して、１カバーガラス当たり５０個の細胞を分析した。１細胞体直径より長い神経芽を持つ細胞だけをカウントした。染色された細胞のうち最も長い神経芽の長さは、ＮＩＨ  Ｉｍａｇｅ１．５２ソフトを使用して測定した。平均神経芽長さは、統計解析プログラムＳｔａｔＶｉｅｗ（ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｉｎｃ．，Ｃａｒｙ，ＮＣ．）を使用してＡＮＯＶＡ試験によって、異なる基質条件において比較した。
【０２１０】
変更は当業者に明らかであるため、本発明は、添付の請求項の範囲によってのみ限定されることが意図される。
【図面の簡単な説明】
【０２１１】
【図１】図１ＡおよびＢは、ニューロンの形態および海馬ニューロンの成長における、二糖類ＣＳ−Ｅ、四糖類ＣＳ−Ｅおよび非硫酸化四糖類の効果を示す。
【図２】図２ＡおよびＢは、ドーパミン作動ニューロンの成長における、二糖類ＣＳ−Ｅ、四糖類ＣＳ−Ｅおよび非硫酸化四糖類の効果を示す。
【図３】図３ＡおよびＢは、脊髄からの脊髄神経節（ＤＲＧ）ニューロンの成長における、二糖類ＣＳ−Ｅ、四糖類ＣＳ−Ｅおよび非硫酸化四糖類の効果を示す。
【図４】海馬ニューロンのニューロン成長における、四糖類ＣＳ−Ｅ、ＣＳ−Ｃ、ＣＳ−ＲおよびＣＳ−Ｅ二量体の効果を示す。
【図５】四糖類ＣＳ−ＥおよびＣＳ−Ｃ、および二量体ＣＳ−Ｅの腫瘍壊死因子−αに対する結合選択性を示す。
【図６】競合ＥＬＩＳＡによって確認されるような、ＴＮＦαのその受容体への結合における、ＣＳ−Ｅ、ＣＳ−ＣおよびＣＳ−Ａ硫酸化パターン中に豊富なＣＳ多糖類の拮抗作用を示す。
【図７】四糖類ＣＳ−Ｅ、ＣＳ−Ｃおよび二糖類ＣＳ−Ｅのニューロン成長因子ミドカインへの結合を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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2008500372.tif 000096