(57)【要約】【課題】脱毛症患者において美容的に許容できるより高い割合の発毛を生み出す能力を有する化合物を提供する。【解決手段】４−（２−メトキシ−フェノキシ）−２−トリフルオロメチル−ベンゾニトリル、アンドロゲンモジュレーターとしてのその使用、及びこの化合物を含有する医薬組成物を提供した。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
４−（２−メトキシ−フェノキシ）−２−トリフルオロメチル−ベンゾニトリル又はその塩。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物であって、薬学的に許容できる塩として存在する化合物。
【請求項３】
医薬としての請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項４】
アンドロゲン受容体の活性化を阻害するための医薬品の製造における請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項５】
ホルモン依存性癌、前立腺の良性過形成、座瘡、男性型多毛症、過剰皮脂、脱毛症、月経前症候群、肺癌、及び思春期早発症から成る群より選択される状態を軽減するための医薬品の製造における請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項６】
座瘡、脱毛症、及び油性肌から成る群より選択される状態を軽減するための医薬品の製造における請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項７】
一つ又はそれより多くの薬学的に許容できる賦形剤と混合された請求項１に記載の化合物を含んでなる医薬組成物。
【請求項８】
皮膚適用に適した一つ又はそれより多くの薬学的に許容できる賦形剤と混合された請求項１に記載の化合物を含んでなる局所医薬製剤。
【請求項９】
小売り流通のために包装された請求項１に記載の化合物を含んでなる製造物品であって、座瘡、脱毛症、及び油性肌から成る群より選択される状態を軽減するには該化合物をどのように利用するかについて消費者に助言する物品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なフェノキシベンゾニトリル及びアンドロゲン受容体モジュレーターとしてのその使用に関する。本発明の他の側面は、皮脂分泌を減少させるため及び発毛を刺激するためのこの化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
脱毛又は禿げることは、医療科学が今なお解決しなければならない一般的な問題である。アンドロゲンは、頭が禿げることと関連しているが、この脱毛が生じる生理学的機構は未知である。しかしながら、発毛は、脱毛症に苦しんでいる個体ごとで異なることが知られている。
【０００３】
毛髪は、連続的に成長せず、成長期、休止期及び脱落期を含む活動のサイクルを経る。ヒトの頭皮は、典型的には、１００，０００〜３５０，０００の毛髪繊維又は毛幹を含んでおり、それらは、３つの特徴的な段階で変化する：
（ａ）成長期（アナゲン（anagen））の間、毛嚢（即ち、毛根）は真皮内へ貫入し、毛嚢の細胞が急速に分割し、毛髪の主成分であるケラチンを合成する過程に分化する。禿げていないヒトではこの成長段階は１〜５年続く；
（ｂ）退行期（カタゲン（catagen））は、有糸分裂の休止により特色付けられ２〜３週間続く；そして
（ｃ）休止期（テロゲン（telogen））においては、毛髪は、頭皮下部からの新しい毛嚢成長により追い出されるまで頭皮内に１２週まで保持される。
【０００４】
ヒトにおいて、この成長サイクルは同調していない。個体は、これら３期の各々にある数千の毛嚢を有するであろう。しかしながら、毛嚢のほとんどはアナゲン期であるであろう。健康な若い成人において、アナゲンのテロゲンに対する比は９対１ほどの高さでありうる。脱毛症の個体において、この比は２：１ほどの低さにまで減少する。
【０００５】
雄性（androgenetic）脱毛症は、循環している雄性ホルモンに対する遺伝的感受性の活性化に起因する。それは脱毛の最も一般的なタイプである。それは、主にコーカサス起源の男性（５０％）及び女性（３０％）の両方に影響する。時間の経過及び年齢が増加するにつれて、ある場合には早まって、毛幹の幅及び長さの斬新的な変化が経験される。末端毛は、短い、ほっそりとした、無色の軟毛へ徐々に変換される。その結果、２０歳代の男性及び３０歳代や４０歳代の女性は、毛がより細くそして短くなっていることに気付き始める。男性において、脱毛のほとんどは頭冠で生じる。女性は、全頭皮にわたって薄くなることを経験する。上で議論したアナゲンのテロゲンに対する比は有意に減少し、毛髪成長の減退に帰着する。
【０００６】
カリウムチャンネルオープナーであるミノキシジルは発毛を促進する。ミノキシジルは、Ｒｏｇａｉｎｅ（登録商標）の商標で米国において商業的に入手可能である。ミノキシジルの作用の正確な機構は未知であるが、発毛サイクルに対するその影響はよく実証されている。ミノキシジルは、毛嚢の成長を促進し、毛嚢がアナゲン期に存在する期間を増加させる（即ち、アナゲンのテロゲンに対する比を増加させる）。
【０００７】
ミノキシジルは発毛を促進するが、この発毛の美容的有効性は多様に変化しうる。例えば、Roenigk は、３％ミノキシジル局所溶液を１９ヶ月の期間試用した８３人の男性を含む臨床試験の結果を報告している。発毛は、対象の５５％で起こっていた。しかしながら、対象の２０％のみが、発毛は美容的に適ったものであると考えられた。(Clin.Res., 33, No. 4, 914A, 1985)。Tosti は、対象の１８．１％において、美容的に許容できる再発毛を報告している。(Dermatologica, 173, No. 3, 136-138, 1986)。それ故、本分野において、脱毛症患者において美容的に許容できるより高い割合の発毛のを生み出す能力を有する化合物に対する要求が存在している。
【発明の開示】
【０００８】
【発明の要旨】
【０００９】
本発明に従えば、新規なフェノキシベンゾニトリルが発見された。この化合物、その塩、水和物、溶媒和物、及びそれらのプロドラッグは、下式により表すことができる。それは、４−（２−メトキシ−フェノキシ）−２−トリフルオロメチル−ベンゾニトリルと呼ぶこともできる。
【００１０】
【化１】
2008509986.tif 000002
【００１１】
式Ｉの化合物はアンドロゲン受容体モジュレーターである。それはアンドロゲン受容体に対する親和性を有しており、受容体への結合により、生物学的作用を生じるであろう。典型的には、それはアンタゴニストとして働くことができる。選択された態様において、それは組織選択的アゴニストとして働くことができる。本化合物は、アンドロゲン受容体の不適切な活性化に付随する状態を治療又は軽減するために使用することが可能である。こうした状態の例には、限定されるわけではないが、座瘡、過剰な皮脂分泌、雄性脱毛、前立腺癌のようなホルモン依存性癌、及び男性型多毛症（hirsutism）が含まれる。
【００１２】
本発明は、アンドロゲン受容体の活性化をモジュレートするための有効量で、その化合物を含有する医薬組成物にも関する。さらなる態様において、本発明は、小売り流通のために包装された該化合物を含有する製造物品であって、アンドロゲン受容体の不適切な活性化に付随する状態を軽減するためにその化合物をどのように使用するかについて消費者に助言する説明書が付けられている製造物品に向けられている。追加の態様は、アンドロゲン受容体の不適切な活性化を検出するための診断剤としてのその化合物の使用に向けられている。
【００１３】
さらなる態様において、本化合物は、発毛を誘導及び／又は刺激するため及び／又は脱毛を遅らせるため局所的に使用される。本化合物は、過剰皮脂及び／又は座瘡の治療に局所的に使用されることもできる。
【発明の詳細な説明】
【００１４】
本書内の表題は、読者が本書を読み易いようにするためにのみ利用される。それらは本発明又は特許請求の範囲をいかなるやり方でも制限するものと解釈されるべきではない。
【００１５】
定義及び例示
特許請求の範囲を含む本明細書を通して使用される以下の用語は、特別に断らない限り下記に定義した意味を有する。
【００１６】
複数形及び単数形は、数字がない場合以外は、相互交換的に扱われるべきである。
【００１７】
ａ．「アンドロゲン」とは、テストステロン及びその前駆体及び代謝物及び５−アルファ還元型アンドロゲンを指し、限定されるわけではないが、ジヒドロテストステロンを含む。アンドロゲンは、精巣、副腎及び卵巣からのアンドロゲン、ならびに天然、合成及び置換又は修飾アンドロゲンのすべての形態を指す。
【００１８】
ｂ．「薬学的に許容できる」とは、哺乳動物における使用に適していることを意味する。
【００１９】
ｃ．「塩」とは、薬学的に許容できる塩、及び、化合物の析出のような工業的プロセスで使用するのに適した塩を指すことを意図する。
【００２０】
ｄ．「薬学的に許容できる塩」とは、「薬学的に許容できる酸付加塩」を指すことを意図する。
【００２１】
ｅ．「薬学的に許容できる酸付加塩」とは、式Ｉにより表される塩基化合物又はいずれかのその中間体の、いずれかの無毒な有機又は無機酸付加塩へ適用することを意図する。適した塩を形成する無機酸の例には、塩酸、臭化水素酸、硫酸及びリン酸、そしてオルトリン酸一水素ナトリウム及び硫酸水素カリウムのような酸金属塩が含まれる。適した塩を形成する有機酸の例にはモノ、ジ及びトリカルボン酸が含まれる。こうした酸の例は、例えば、酢酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、安息香酸、ヒドロキシ安息香酸、フェニル酢酸、桂皮酸、サリチル酸、２−フェノキシ安息香酸、ｐ−トルエンスルホン酸、そしてメタンスルホン酸及び２−ヒドロキシエタンスルホン酸のようなスルホン酸である。こうした塩は、水和又は実質的に無水の形で存在することが可能である。一般に、これらの化合物の酸付加塩は、水及び多様な親水性有機溶媒に可溶性であり、そしてそれらの遊離塩基形と比較して、一般的により高い融点を示す。
【００２２】
ｆ．「プロドラッグ」とは、例えば、血中での加水分解により、インビボで迅速に転換されて上記の式の親化合物をもたらす化合物を指す。徹底的な議論は、T. Higuchi and V. Stella, "Pro-drugs as Novel Delivery Systems," Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series  中、及びBioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987 中、（両方とも本明細書において参照により取り込まれる）に提供されている。
【００２３】
ｇ．「式Ｉの化合物」、「本発明の化合物」、「本化合物」及び「本化合物類」は本出願を通して相互交換的に使用され、同義語として扱われるべきである。
【００２４】
ｈ．「患者」とは、例えば、モルモット、マウス、ラット、アレチネズミ、ネコ、ウサギ、イヌ、サル、チンパンジー、スタンプテイルマカック（stump tail macques ）及びヒトのような温血動物を指す。
【００２５】
ｉ．「治療する」とは、患者の疾患（又は状態）又は疾患に付随する何らかの組織損傷の進行を和らげる、軽減する又は遅延する化合物の能力を指す。
【００２６】
本発明の化合物は、未溶媒和形ならびに水、エタノールなどのような薬学的に許容できる溶媒との溶媒和形で存在することが可能である。一般に、溶媒和形は、本発明の目的については未溶媒和形と同等と考えられる。本化合物は、一つ又はそれより多くの結晶状態（即ち、多形）で存在することもでき、または非晶質固形物として存在することもできる。こうした形態のすべてが、特許請求の範囲に包含される。
【００２７】
合成
式Ｉの化合物は、エーテルの製造について当該技術分野で周知の方法を使用して製造することが可能である。こうした反応の記述については、その内容が本明細書において参照により取り込まれ、１９８２年９月１日に公開された、欧州特許出願第５８９３２号に読者は注目されたい。
【００２８】
下記スキームＩは一つのこうした技術の概要を提供する：
【００２９】
【化２】
2008509986.tif 000003
【００３０】
上に示したごとく、出発物質の一つは、構造１で示されるアルコールである。このアルコールは、当該技術分野において周知であり、周知の商業的供給元から購入することができる。もしくは、それを文献に記載されているように製造することができる。
【００３１】
他の出発物質は、構造２で示される４−フルオロ−ベンゾニトリルである。このベンゾニトリルは、当該技術分野において周知であり、そして日本特許出願番号０１０９７９３７号に記載されているように合成することができる。
【００３２】
上に示した求核置換は、当該技術分野で周知である通りに実施することができる。構造１のアルコールを、水素化ナトリウム、カリウムｔ−ブトキシド、炭酸カリウム等のような、わずかに過剰の塩基と接触させてアルコキシドイオンを生成させる。反応は、テトラヒドロフランのような非プロトン性溶媒中、不活性（典型的には窒素）雰囲気下、約０℃の温度で実施する。アルコールを５〜６０分の範囲の時間塩基と攪拌する。
【００３３】
次ぎに、１当量の構造２の４−フルオロ−ベンゾニトリルを反応媒質に加え、そして、その反応体を、アルコキシドイオンをベンゾニトリルからのフッ素と置換させるのに十分な時間攪拌する。これには、典型的には３０分から２４時間を要する。その反応液は、典型的には室温まで温められる。
【００３４】
式Ｉの所望の生成物は、抽出、蒸発又は当該技術分野では周知の他の技術により回収することが可能である。次ぎに、それは、場合により、クロマトグラフィー、再結晶、蒸留又は当該技術分野では周知の他の技術により精製されることができる。
【００３５】
当業者により理解されるように、こうした化合物の製造に有用な上で議論した方法のいくつかは、例えば、分子内の他の部位での反応における特定の官能基による干渉を防止するため、又はそうした官能基の一体性を保持するため、そうした官能基の保護を必要とするであろう。こうした保護の必要性及びタイプは、当業者により容易に決定され、例えば、官能基の性質及び選択された製造法の条件に依存して変動するであろう。例えば、T.W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1991 を参照されたい。
【００３６】
本発明の化合物は、薬学的に許容できるアニオンと塩を形成することができる。すべてのこうした塩は、本発明の範囲内であり、それらは、適切な水性、非水性又は部分的水性媒質中で通常は化学量論的比で混合するような慣用的方法により製造することが可能である。塩は、適切に、濾過により、貧溶媒による沈殿、続いての濾過により、溶媒の蒸発により、又は、水性溶液の場合における凍結乾燥により、回収される。本化合物は、エタノール、ヘキサン又は水／エタノール混合物のごとき、適切な溶媒への溶解によるような、当該技術分野では周知の手法に従って、結晶形態で得られる。
【００３７】
医療及び美容用途
本化合物は、アンドロゲン受容体モジュレーターである。それは、アンドロゲン受容体の不適切な活性化に付随する状態を軽減するために使用することができる。より具体的には、本化合物は、アンドロゲンアンタゴニストであり、前立腺癌腫のごときホルモン依存性癌、前立腺の良性過形成、座瘡、男性型多毛症、過剰皮脂、脱毛症、多毛症（hypertrichosis）、思春期早発症、前立腺肥大症、男性化及び多嚢胞性卵巣症候群を治療又は軽減するために使用することができる。
【００３８】
上に記載した治療的特性を発揮するため、本化合物は、アンドロゲン受容体の活性化をモジュレートするのに十分な量で投与されなければならない。この量は、治療している特定の疾患／状態、患者の疾患／状態の重度、患者自身、投与されている特定の化合物、投与経路、そして患者内の他の根底にある疾患状態の存在などに依存して変動してもよい。全身的に投与される場合、上に列挙したいずれかの疾患又は状態について、本化合物は、典型的には約０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日の投与量範囲でそれらの作用を示す。反復的に毎日投与することが望ましいが、上に概説した状態に従って変動するであろう。
【００３９】
本化合物は、種々の経路で投与することができる。それは経口で投与することができる。本化合物は、非経口的に（即ち、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内又はクモ膜下腔内）、直腸的にあるいは局所的に投与することもできる。
【００４０】
典型的な態様において、本化合物は局所的に投与される。局所投与は男性型多毛症、脱毛症、座瘡及び過剰皮脂に特に適している。用量は変動するであろうが、一般的ガイドラインとして、本化合物は、皮膚病学的に許容できる担体中、約０．０１〜５０ｗ／ｗ％、そしてより典型的には、約０．１〜１０ｗ／ｗ％の量で存在するであろう。皮膚病学的製剤は、毎日１〜４回冒された領域へ適用されるであろう。「皮膚病学的に許容できる」とは、皮膚又は毛髪へ適用することができ、そして作用部位へ薬剤を拡散させることを許容するであろう担体を指している。より具体的には、それはアンドロゲン受容体の活性化の阻害が望まれる部位を指している。
【００４１】
さらなる態様においては、脱毛症、特に雄性脱毛症を軽減するために、本化合物を局所的に使用する。アンドロゲンは、発毛及び脱毛の両方に顕著な効果を有している。アンドロゲンは、顎髭及び陰毛のごときほとんどの体の部位において、発毛サイクルの成長期（アナゲン）を延長し、そして毛嚢サイズを増加させることにより発毛を刺激する。頭皮上の発毛は、アンドロゲンを必要としないが、アナゲンの持続及び毛嚢サイズの進行的減退が起こる遺伝的素因を有する個体（雄性脱毛症）においては、逆説的に、頭皮上が禿げるのにアンドロゲンが必要である。雄性脱毛症は女性においても一般的であり、男性で観察されるパターン形成を示すというよりもむしろ、通常は散在性脱毛を呈する。
【００４２】
本化合物は、最も典型的には、雄性脱毛症を軽減するために使用されるであろうが、本発明はこの具体的状態に限定されない。本化合物は、脱毛症のいずれのタイプを軽減するためにも使用することができる。非雄性脱毛症の例には、円形脱毛症、放射線療法又は化学療法による脱毛症、瘢痕性脱毛症、ストレス関連脱毛症等が含まれる。本明細書において使用される「脱毛症」とは、頭皮上の部分的又は完全脱毛を指す。
【００４３】
それ故、本化合物は、禿げることを防止又は軽減するために、頭皮及び毛髪へ局所的に応用することが可能である。さらに、本化合物は、頭皮上の毛髪の成長を誘導又は促進するため、局所的に応用することが可能である。
【００４４】
本発明のさらなる態様において、本化合物は、発毛が望まれない領域における毛の成長を防止するために局所的に適用される。こうした使用の一つは、男性型多毛症を軽減するためであろう。男性型多毛症は、典型的には毛を有していない領域（即ち、女性の顔）における過剰な発毛である。こうした不適切な発毛は、最も一般には女性で生じ、しばしば閉経期に観察される。本化合物の局所投与は、この状態を軽減し、この不適切な又は望まれない発毛の減少又は消失を導くであろう。
【００４５】
本化合物は、皮脂産生を減少させるために局所的に使用することもできる。皮脂は、トリグリセリド、ワックスエステル、脂肪酸、ステロールエステル及びスクアレンから成っている。皮脂は、皮脂腺の腺房細胞で産生され、そしてこれらの細胞が加齢するにつれて蓄積される。成熟時、腺房細胞が溶けて内腔管路内へ皮脂を放出する結果、皮脂が皮膚の表面上に沈着するようになる。
【００４６】
いくつかの個体において、過剰な量の皮脂が皮膚上に分泌される。このことは、多数の有害な結果を示しうる。皮脂は、座瘡の原因病原体であるプロピオンバクテリウム・アクネス（Propionbacterium acnes）の主たる食物源であるので、座瘡を悪化しうる。皮脂は、典型的には、美容的に魅力がないと考えられている皮膚に脂じみた外観を与えうる。
【００４７】
皮脂の形成は、増殖因子及びアンドロゲンを含む種々のホルモンにより調節されている。アンドロゲンが皮脂腺に影響を及ぼす細胞的及び分子的機構は未だ十分には解明されていない。しかしながら、臨床的経験では、アンドロゲンが皮脂産生に影響を有することが記述されている。皮脂産生は、アンドロゲンレベルが最も高い時期、即ち思春期の間に有意に増加する。フィナステリドのような抗アンドロゲン剤は、アンドロゲン分泌を減少させることが示されている。皮脂産生及び皮膚代謝におけるアンドロゲンの役割についてのさらなる情報は、Moshell et al, Progress in Dermatology, vol. 37, No. 4, Dec. 2003 を参照されたい。
【００４８】
従って、本化合物は、皮脂の分泌を抑制し、そして皮膚表面上の皮脂量を減少させる。本化合物は、座瘡又は脂漏性皮膚炎のような、多様な皮膚疾患を治療するために使用することが可能である。
【００４９】
過剰な皮脂産生に付随する疾患を治療することに加え、本化合物は、美容的効果を達成するために使用することも可能である。消費者の中には、過敏性皮脂腺で苦しんでいると思っている人がいる。これら人は、皮膚が油性であり、そのため魅力的ではないと感じている。これらの個体は、皮膚上の皮脂量を減少させるために、式Ｉの化合物を利用することが可能である。皮脂の分泌を減少させることは、こうした状態に苦しんでいる個体の油性肌を軽減するであろう。
【００５０】
同時投与
本発明のさらなる態様において、本化合物は、その活性をさらに増強するため、あるいは潜在的副作用を最小にするため、他の化合物と同時投与することが可能である。例えば、ミノキシジルのようなカリウムチャンネルオープナーは、発毛を刺激し、そしてアナゲンを誘導することが知られている。他のカリウムチャンネルオープナーの例には、（３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−４−（２，３−ジヒドロ−２−メチル−３−オキソピリダジン−６−イル）オキシ−３−ヒドロキシ−６−（３−ヒドロキシフェニル）スルホニル−２，２，３−トリメチル−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］ピラン、ジアキソジド、及びLeo Pharmaceuticals により開発中のＰ１０７５が含まれる。こうした化合物は、脱毛症を軽減するため、式Ｉの化合物と共に同時投与することが可能である。
【００５１】
甲状腺ホルモンも発毛を刺激することが知られている。合成甲状腺ホルモン交換体（即ち、サイロミメチックス（thyromimetics ））も発毛を刺激することが示されている。こうしたサイロミメチックスは、以前に文献に記載されている。こうした化合物及び脱毛症を軽減するためのそれらの使用についての議論について、その内容が本明細書において参照として取り込まれる欧州特許第１２６２１７７号に注目されたい。興味の対象である一つの特定化合物は、２−｛４−［３−（４−フルオロ−ベンジル）−４−ヒドロキシ−フェノキシ］−３，５−ジメチル−フェニル｝−２Ｈ−［１，２，４］トリアジン−３，５−ジオンである。こうした化合物は、脱毛症を軽減するため、式Ｉの化合物と同時投与することが可能である。
【００５２】
抗アンドロゲン剤は、多数の異なった機構で働き得る。例えば、いくつかの化合物は、多くの組織において生物学的効果の原因となる、５−α−ジヒドロテストステロンへのテストステロンの変換を阻止する。フィナステリドのような５−アルファ−レダクターゼ阻害剤は、発毛を刺激し、皮脂産生を減少させることが示されている。フィナステリドはＰｒｏｐｅｃｉａ（登録商標）の商標で、Merck から商業的に入手可能である。他の５−α−レダクターゼ阻害剤の例には、デュタステリド（Glaxo Smithkline ）が含まれる。こうした化合物は、脱毛症を軽減するため、及び／又は皮脂産生を減少させるために、式Ｉの化合物と同時投与することが可能である。
【００５３】
プロテインキナーゼＣ阻害剤も発毛を刺激しそしてアナゲンを誘導することが示されている。プロテインキナーゼＣの選択的阻害剤であるカルホスチンＣは、アナゲンを誘導することが示されている。ヘキサデシルホスホコリン、パルミトイル−ＤＬ−カルニチンクロリド及び硫酸ポリミキシンＢのような他の選択的プロテインキナーゼＣ阻害剤もアナゲンを誘導することが示されている。［Skin Pharmacol Appl Skin Physiol 2000 May-Aug;13(3-4):133-42 ］。いずれのこうしたプロテインキナーゼＣ阻害剤も、脱毛症を軽減するため、式Ｉの化合物と同時投与することが可能である。
【００５４】
イムノフィリンは細胞質タンパク質のファミリーである。それらのリガンドには、シクロスポリン及びＦＫ５０６が含まれる。これらは、真菌から誘導され、最初はその強力な免疫抑制特性について開発された。シクロスポリンは、タンパク質、シクロフィリンに結合する一方で、ＦＫ５０６は、ＦＫ結合タンパク質（ＦＫＢＰ）に結合する。全てのこれらの化合物は、発毛を刺激しそしてアナゲンを誘導することが示された。いずれのこうしたイムノフィリンリガンドも、脱毛症を軽減するため、式Ｉの化合物と同時投与することが可能である。
【００５５】
アシルＣｏＡコレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＡＣＡＴ）阻害剤は、最初は上昇した血清コレステロールの治療について評価された。その後、これらの化合物は皮脂産生を減少させることが発見された（米国特許第６，１３３，３２６号）。こうしたＡＣＡＴ阻害剤のいずれも、皮脂産生を減少させ、油性肌を軽減するなどのため、式Ｉの化合物と同時投与することが可能である。
【００５６】
テトラサイクリン及びクリンダマイシンのような抗生物質が、座瘡を軽減するために使用されてきた。これら抗生物質は、微生物、プロピオンバクテリウム・アクネスを根絶し、患者の座瘡の減少を導いている。式Ｉの化合物は、座瘡の治療に適したいずれの抗生物質とも同時投与することが可能である。
【００５７】
イソトレチノインのようなレチノイドは、皮脂産生を減少させることが示されており、座瘡を治療するために使用されている。これらのレチノイドは、皮脂産生を減少させ及び／又は座瘡を治療するために、式Ｉの化合物と同時投与することが可能である。
【００５８】
エストロゲン及びプロゲステロンは、皮脂産生を減少させることが示されている。これらの化合物、又はこうした化合物のいずれの合成アゴニストも、皮脂産生を減少させるために、式Ｉの化合物と同時投与することができる。
【００５９】
本出願において使用される「同時投与」とは、所望の結果を促進させる投与計画を使用して、典型的には異なった作用機構を有する第二の医薬とともに式Ｉの化合物を投与することを指す。このことは、同時投与、一日の間の異なった時間での投与、あるいは異なった日の投与さえも指すことができる。本化合物は、別々に投与することが可能であり、あるいは単一製剤内へ組み合わせることも可能である。こうした製剤を調製するための技術は、以下に記載されている。
【００６０】
製剤
望むなら、本化合物をいずれの担体も用いずに直接投与することが可能である。しかしながら、投与を容易にするため、それは典型的には医薬担体内へ配合されるであろう。同様に、それは最も典型的には、皮膚学的担体又は化粧用担体内に配合されるであろう。本出願において、用語「皮膚学的担体」及び「化粧用担体」は相互交換的に使用する。これらは皮膚又は毛髪へ直接的に投与するために設計された製剤を指す。
【００６１】
医薬組成物及び化粧用組成物は、当該技術分野において周知の技術を利用して製造することが可能である。典型的には、本化合物の有効量が、薬学的／化粧品的に許容できる担体と混合されるであろう。
【００６２】
経口投与のためには、本化合物を、カプセル剤、丸剤、錠剤、ロゼンジ剤、溶融物剤、散剤、懸濁液剤、又は乳液剤のような固体又は液体製剤内へ配合することができる。固体単位剤形は、例えば、界面活性剤、滑沢剤及び乳糖、スクロース及びコーンスターチのような不活性賦形剤を含む、通常のゼラチンタイプのカプセルでありうるし、あるいはそれは徐放性製剤でもありうる。
【００６３】
別の態様において、式Ｉの化合物は、アカシア、コーンスターチ又はゼラチンのような結合剤、ジャガイモデンプン又はアルギン酸のような崩壊剤、及びステアリン酸又はステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤と組み合わされた、乳糖、スクロース及びコーンスターチのような慣用的錠剤基剤で錠剤化することが可能である。液体製剤は、活性成分を水性又は非水性の薬学的に許容できる溶媒中に溶解することにより調製され、それは、当該技術分野で周知の懸濁剤、甘味剤、芳香剤及び保存剤も含むことができる。
【００６４】
非経口投与のためには、本化合物を生理学的に許容できる医薬担体に溶解し、溶液か又は懸濁液として投与することができる。適した医薬担体の例は、水、食塩水、デキストロース溶液、フルクトース溶液、エタノール、あるいは動物、植物又は合成起源の油である。医薬担体は、当該技術分野で知られている、保存剤、緩衝剤なども含むことができる。本化合物が鞘内投与される場合、本化合物は、当該技術分野で知られている髄液にも溶解することができる。
【００６５】
本発明の化合物は、典型的には、局所的に投与されるであろう。本明細書において、局所的とは、皮膚及び／又は毛髪への直接的な本化合物（及び場合により担体）の適用を指す。本発明に従った局所的組成物は、溶液剤、ローション剤、膏薬剤、クリーム剤、軟膏剤、リポソーム剤、スプレー剤、ゲル剤、フォーム剤、ローラースティック剤、又は皮膚学で日常的に使用されるいずれか他の製剤の形態であることが可能である。
【００６６】
従って、さらなる態様は、本化合物を含有する化粧用又は医薬組成物、特に皮膚学的組成物に関する。こうした皮膚学的組成物は、皮膚学的に許容できる担体と混合された０．００１％〜１０％（ｗ／ｗ％）の化合物、より典型的には、０．１〜５ｗ／ｗ％の本化合物を含むであろう。こうした組成物は、典型的には、１日に１〜４回適用されるであろう。こうした製剤をどのように調製するかの議論については、Remington's Pharmaceutical Science, Edition 17, Mack Publishing Co., Easton, PA を参照されたい。
【００６７】
本発明に従った組成物は、クレンジング石鹸又はバーを構成する固形調製物から成ることも可能である。これらの組成物は、通常の方法に従って製造する。
【００６８】
本化合物は、毛髪のために、水性、アルコール性又は水−アルコール性溶液剤の形態で、又はクリーム剤、ゲル剤、乳液剤又はムース剤の形態で、あるいは、減圧下のスプレー剤も含んでなるエアロゾル組成物の形態で使用されることができる。本発明に従った組成物は、ヘアケア組成物、特にシャンプー、ヘアセッティングローション、トリーティングローション、スタイリングクリーム又はゲル、染料組成物、脱毛を予防するためのローション剤又はゲル剤等であることができる。本発明に従った皮膚学的組成物中の種々の構成成分の量は、考慮される分野で慣用的に使用される量である。
【００６９】
本化合物を含有する医薬品及び化粧品は、典型的には、小売り流通のために包装されるであろう（即ち、製造物品又はキット）。こうした物品は、製品をどのように使用するのかを患者に助言する様式でラベルが付され、そして包装されているであろう。こうした説明書は、治療されるべき状態、治療の期間、投与計画等を含んでいるであろう。
【００７０】
式Ｉの化合物は、当該技術分野で周知であるように、いずれかの不活性担体と混合し、患者の血清、尿などの中の本化合物の濃度を決定するため実験室アッセイで利用することができる。本化合物は、研究ツールとして使用することもできる。
【００７１】
本発明をそれらの具体的態様に関連して説明してきたが、さらなる修飾が可能であり、そして本出願は、一般に本発明の原理に従ういずれの本発明の変形、使用又は適応も包含することを意図しており、そして本発明の技術内の、周知の又は慣用的実施内形態に入る、本開示からのこうした逸脱を含んでいることを理解されたい。以下の実施例及び生物学的データは、本発明をさらに例示するために示されている。この開示はいかなる様式でも本発明を限定していると解釈すべきではない。
【実施例】
【００７２】
実施例１Ａ
４−（２−メトキシ−フェノキシ）−２−トリフルオロメチル−ベンゾニトリル
【００７３】
【化３】
2008509986.tif 000004
【００７４】
４−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）−ベンゾニトリル（０．２５ｍｍｏｌ）及び２−メトキシ−フェノール（０．２５ｍｍｏｌ）の無水ジメチルホルムアミド「ＤＭＦ」（１．２５ｍＬ）溶液を含有するＢｏｈｄａｎミニブロック反応試験管に、水素化ナトリウム（鉱油中の６０％分散液）の０．８５Ｍ無水ＤＭＦスラリー１ｍＬ（３．４当量、０．８５ｍｍｏｌ）を加えた。Ｂｏｈｄａｎミニブロックにキャップし、反応物を室温で１８時間振盪した。５００μＬのメタノール及び２１０ｍｇの多孔性トシル酸樹脂「ＭＰ−ＴｓＯＨ」（４．０７ｍｍｏｌ／ｇ、３．４当量、０．８５ｍｍｏｌ）を加え、反応物を周囲温度で２０ｈ振盪した。反応物を濾過し、固形物をメタノールでよく洗浄し、窒素吹き出しラック、次ぎに回転エバポレーター、Genevac HT-12 を利用して濃縮した。試料は、逆相ＨＰＬＣ（BHK 30x100mm ODS-O/B C18 5μm；Ａ＝アセトニトリル／３％プロパノール、Ｂ＝水／３％１−プロパノール；０〜６．５分：１５％Ａ、８５％Ｂ；６．５〜１０．５分：１００％Ａ）により精製した。
【００７５】
MS:294.16 (M+1 C15H10F3NO2); RT 3.74、純度:100。LCMS: Atlantis C18 50mm x 4.6mm, 3mmカラム（溶媒：Ａ＝水／０．００５Ｍギ酸；Ｂ＝アセトニトリル／０．００５Ｍギ酸、方法：０〜３分：８５％Ａ、１５％Ｂ；３〜５．１分：２％Ａ、９８％Ｂ；５．１〜７分：８５％Ａ、１５％Ｂ）。
【００７６】
実施例１Ｂ
この実施例は、４−（２−メトキシ−フェノキシ）−２−トリフルオロメチル−ベンゾニトリルの代替製造法を例示する。５００ｍｌのアセトニトリルに、３６．７ｇの４−フルオロ−２−（トリフルオロメチル）−ベンゾニトリル、３０ｇの炭酸カリウム及び２２ｇの２−メトキシ−フェノールを加えた。その混合物をおよそ５．５ｈ加熱還流した。工程内ＮＭＲを実施し、それは、〜１５％４−（２−メトキシ−フェノキシ）−２−トリフルオロメチル−ベンゾニトリル及び１０％２−メトキシ−フェノールを示した。追加の１ｍｌの２−メトキシ−フェノールを加え、その混合物をさらに（およそ）２ｈ還流温度で攪拌した。混合物をおよそ３０℃に冷却し、濾過し、アセトニトリルで洗浄し、油状物に濃縮した。
【００７７】
ＨＮＭＲは、およそ６％の未反応ニトリルをこの生成物中に示した。次の朝、生成物を、５００ｍｌのアセトニトリル、１．２ｍｌの２−メトキシ−フェノール、１．８ｇの炭酸カリウムと接触させ、さらに５時間加熱還流した。次ぎに１００ｍｌのヘプタンを加え、混合物を２０℃に冷却し、濾過した。濾液を３０ｍｌのアセトニトリルで２回洗浄し、油状物に濃縮すると、それは放置により固化した。固形物を５０ｍｌの１：１イソプロピルアルコール／水でスラリーとした。それを５０℃で３時間乾燥させると、生成物を得た。
【００７８】
HPLC 99.87% 。CHN 理論値: C, 61.44 ; H, 3.44; N, 4.78 、実測値: C, 61.28; H, 3.36; N, 4.75 。MS: 294 (M+1 C15H10F3NO2)。
【００７９】
実施例２
式Ｉの化合物は、アンドロゲン受容体について親和性を有する。この親和性は、ヒト受容体を使用し、選択された化合物について証明されている。以下の記述は、どのようにアッセイを実施するのかを記載している。
【００８０】
競合的結合分析を、試験剤の不存在下又は異なった濃度の存在下でのバキュロウイルス／Ｓｆ９発生ｈＡＲ抽出物、及びトレーサーとしての固定濃度の３Ｈ−ジヒドロテストステロン（３Ｈ−ＤＨＴ）に関して実施した。この結合アッセイ法は、以前に記載されているプロトコール（Liao S. , et. al. J. Steroid Biochem. 20:11-17 1984 ）の変法である。簡単に説明すると、ｈＡＲ抽出物（Chang et al. P.N.A.S. Vol. 89, pp. 5546-5950, 1992 ）、ヒドロキシルアパタイト及び１ｎＭ  ３Ｈ−ＤＨＴ存在下、連続的に減少させた濃度の化合物を、４℃で１時間インキュベートする。引き続いて、過剰の未結合３Ｈ−ＤＨＴを完全に除去するために、結合反応物を３回洗浄する。ｈＡＲ結合３Ｈ−ＤＨＴレベルを、化合物の存在下（即ち、競合的結合）で決定し、競合相手が存在しない場合（＝即ち、最大結合）に結合されたレベルと比較した。ｈＡＲに対する化合物結合親和性は、最大結合の半分が阻害される化合物の濃度として表現されている。下記の表Ｉは、化合物について得られた結果を提供している（報告されているデータは下に示されているように、複数回の試験の平均である）。
【００８１】
【表１】
2008509986.tif 000005
【００８２】
実施例３
アンドロゲン受容体へのアンドロゲンの作用に拮抗する本化合物の能力は、直下に記載されている全細胞アッセイにおいて決定した。
【００８３】
ＡＲアンタゴニスト細胞アッセイについての実験手法
細胞株：ＭＤＡ−ＭＢ４５３−ＭＭＴＶクローン５４−１９。この細胞株は、ＭＤＡ−ＭＢ４５３細胞バックグラウンドを有する安定にトランスフェクトされた細胞株である（アンドロゲン受容体を発現しているヒト乳腺腫瘍細胞株）。ＡＲＥを含有するＭＭＴＶ最小プロモーターを、ホタルルシフェラーゼレポーター遺伝子の前に最初にクローン化した。次ぎに、カスケードを、トランスフェクションベクターｐＵＶ１２０ｐｕｒｏ内にクローン化した。ＭＤＡ−ＭＢ−４５３細胞をトランスフェクトするためには、エレクトロポレーション法を使用した。ピューロマイシン耐性安定細胞株を選択した。
【００８４】
細胞培養培地及び試薬：
培養培地：ＤＭＥＭ（高グルコース，Ｇｉｂｃｏカタログ番号１１９６０−０４４）、１０％ＦＢＳ及び１％Ｌ−グルタミン
プレーティング培地：ＤＭＥＭ（フェノールレッドを含まない）、１０％活性炭処理ＨｙＣｌｏｎｅ血清、１％Ｌ−グルタミン
アッセイ培地：ＤＭＥＭ（フェノールレッドを含まない）、１％活性炭処理ＨｙＣｌｏｎｅ血清、１％Ｌ−グルタミン及び１％ペニシリン／ストレプトマイシン
３Ｘルシフェラーゼ緩衝液：細胞溶解緩衝液中に、２％ベータ−メルカプトエタノール、０．６％  ＡＴＰ、０．０１３５％ルシフェリン。
【００８５】
アッセイ手法：
１．細胞を培養培地中で維持し、細胞が８０〜９０％コンフルエントに達した時に細胞を分割し；
２．化合物を試験するため、１０，０００細胞／ウェルを不透明な９６ウェル培養プレートの、１００μｌ／ウェルプレーティング培地中に蒔き、細胞培養インキュベーター中、３７℃で一夜培養し；
３．プレーティング培地を注意深く除去し、前もって温めた８０μｌ／ウェルのアッセイ培地を加え、１０μｌ／ウェルの試験化合物を加え（１０００ｎＭ、２００ｎＭ、４０ｎＭ、８ｎＭ、１．６ｎＭ及び０．３２ｎＭの最終濃度）、３７℃で３０分インキュベートし；
４．１０μｌ／ウェルの新しく調製したＤＨＴ（１００ｐＭの最終濃度）を各ウェルに加え、３７℃で１７時間（一夜）インキュベートし；
５．５０μｌ／ウェルの３Ｘルシフェラーゼ緩衝液を加え、室温で５分インキュベートし、次ぎにルミノメーターで計数する。
【００８６】
試験化合物不存在下、１００ｐＭ  ＤＨＴによるバックグラウンドに対する倍数誘導を１００％として規格化し、実験結果を、試験化合物による阻害のパーセンテージとして表現する。
【００８７】
化合物について得られた結果を、下記の表ＩＩＩに記載する。結果は、下に示されているように、複数回の試験の平均として報告されている（試験の回数は注に示されている）。
【００８８】
【表２】
2008509986.tif 000006
【００８９】
実施例４
皮脂産生の阻害についての動物モデル
Luderschmidt らは、化合物が皮脂分泌をモジュレートできるかどうかを試験するための動物モデルを記述している。Arch. Derm. Res. 258, 185-191 (1977)。このモデルは、耳に皮脂腺を含んでいるシリアンハムスターを使用する。実施例１の生成物をこのモデルでスクリーニングした。
【００９０】
皮脂抑制のための試験は、以下の様式で実施した。９〜１０週齢のオスシリアンハムスターを実験室環境に導入し、研究での使用に先立って２週間順化した。各群は５匹の動物から成っており、ビヒクル及び陽性対照と平行して実験した。投与に先立って、各化合物の十分な量を、エタノール、トランスクタノール及びプロピレングリコール（６０／２０／２０ｖ／ｖ／ｖ）から成る１ｍＬの溶媒に溶解し、３．０ｗ／ｖ％の最終濃度を達成した。
【００９１】
動物には、日に２回、週に５日、２週間にわたって局所的に投与した。各用量は２５マイクロリットルのビヒクル対照又は薬剤から成っていた。用量は、右及び左両耳の腹側表面に適用した。全ての動物を、最終投与のおよそ１８〜２４時間後に殺した。各動物から右耳を集め、皮脂分析に使用した。
【００９２】
耳は以下の様式でＨＰＬＣ分析のために調製した。試料領域を基準化するため、耳の解剖学的「Ｖ」マークの直ぐ上で、一つの８ｍｍ遠位バイオプシーパンチを採取した。パンチを引き離した。腹側バイオプシー表面（局所投与が皮脂腺へ直接適用された領域）を試験のために保持し、そしてバイオプシーパンチの背側表面は廃棄した。
【００９３】
組織試料にＮ２ガスを吹きつけ、ＨＰＬＣ分析まで、窒素下、−８０℃で保存した。耳試料に加え、各薬剤及びビヒクルの一部（少なくとも２５０μｌ）を、ＨＰＬＣ分析に包含させるために−８０℃で保存した。
【００９４】
ＨＰＬＣ分析は、組織試料の抽出物について実施した。組織試料は３ｍｌの溶媒（２，２，４−トリメチルペンタン及びイソプロピルアルコールの４：１混合物）と接触させた。混合物を１５分間振盪し、光から保護して室温で一夜保存した。次の朝、試料に１ｍｌの水を加え、１５分間振盪した。試料は次ぎにおよそ１５００ｒｐｍで１５分遠心分離した。有機相（上層）の２ｍｌをガラスバイアルに移し、窒素下、３７℃でおよそ１時間乾燥し、次ぎにおよそ４８時間凍結乾燥した。試料を凍結乾燥機から取りだし、各バイアルは、６００μｌの溶媒Ａ（トリメチルペンタン：テトラヒドロフラン  ９９：１）で戻した。試料に再びキャップをかぶせて５分間ボルテックスした。
【００９５】
２００μｌの各試料を、２００μＬガラスインサートで前標識された２００μｌＨＰＬＣバイアルへ移した。ＨＰＬＣバイアルをAgilent 1100 シリーズＨＰＬＣユニットのオートサンプラートレーに置いた。Agilent 1100 ＨＰＬＣシステムは、サーモスタットを備えたオートサンプラー、クォータナリポンプ、カラムヒーターそしてＡ／Ｄインターフェースモジュールから構成されていた。すべての構成部分をAgilent ChemStation ソフトウェアにより制御した。Waters Spherisorb S3W 4.6x100mm 分析カラムは、Agilent カラムヒーターユニットにより３０℃に維持した。ＨＰＬＣオートサンプラーは、実験を通して試料温度を２０℃に維持するようにプログラムした。
【００９６】
１０μＬの各試料をカラムに３重に注入した。溶媒濃度勾配のために２溶媒を使用した。溶媒Ａはトリメチルペンタン及びテトラヒドロフラン（９９：１）の混合物であった。溶媒Ｂは酢酸エチルであった。利用した濃度勾配は以下の表に記載されている：
【００９７】
【表３】
2008509986.tif 000007
【００９８】
Sedex 75 蒸発光散乱検出器（ＥＬＳＤ）は、５のゲインで４５℃にて作動させ、そしてＮ２圧は３．１ｂａｒに維持した。装置により得られたアナログ信号はAgilent A/D インターフェースモジュールへ送り、そこでデジタル出力へ変換した。変換は、１００００ｍＡＵ／ボルトセットポイントに基づいており、データ転送速度は１０Ｈｚ（０．０３分）に設定した。生じたデジタル出力は次ぎに、ピーク面積の積算のため、Agilent ChemStation ソフトウェアへ送り込んだ。
【００９９】
ＨＰＬＣ分析の結果は以下の表ＩＶに報告されている。結果は、ビヒクル対照と比較した場合のコレステロールエステル（ＣＥ）及びワックスエステル（ＷＥ）産生の減少として報告されている。負の値は、皮脂の増加を反映し、一方、正の値は、減少を反映する。
【０１００】
【表４】
2008509986.tif 000008
【０１０１】
実施例５
雄性脱毛の動物モデル
上に記載したように、脱毛症は、医学がかなりの力を入れてきた問題である。いずれの疾患プロセスも、科学者が、化合物のその潜在的相対有効性をスクリーニングすることを可能にするために動物モデルが開発されてきた。これらの動物モデルにおいて最も大きな有効性を示している化合物が、さらなるヒトでの研究のために考慮される。脱毛症のため、現在まで二つの異なった動物モデルが開発されている。第一は、メスＣ３Ｈ／ＨｅＮマウスを使用するテロゲン変換アッセイである。第二のモデルは、雄性脱毛症を罹患しているサルである、スタンプテイルマカックを使用する。
【０１０２】
テロゲン変換アッセイは、マウスにおいて、発毛サイクルの休止期（「テロゲン」）を発毛サイクルの活性期（「アナゲン」）へ変換する、化合物の可能性を測定する。このアッセイは、７週齢Ｃ３Ｈ／ＨｅＮマウスの柔毛（ｆｕｒ）（即ち、毛）はテロゲン期にあることを利用する。この期は約７５日の年齢まで続く。このアッセイでは、マウスの選択された領域を剪毛し、試験剤又は対照と接触させ、発毛の速度における相違を測定する（即ち、アナゲン期の誘導）。アナゲンの最初の徴候は、色素性毛の産生の準備に、毛嚢中のメラノサイトがメラニンを合成し始めるので、皮膚の色の黒化である。このモデルは多数の利点を有している。これには、メスＣ３Ｈ／ＨｅＮマウスの容易な入手可能性、多数の化合物を迅速にスクリーニングする能力、及びこうした動物の飼育及び取り扱いの容易さ、が含まれる。
【０１０３】
このモデルの主な欠点は、その雄性依存性の欠如である。ヒト禿頭症の正確な原因はわかっていないが、アンドロゲンが頭皮における毛嚢の退行を誘導することがよく実証されている。この青年期後の退行性変化は、男性型禿頭症（即ち、雄性脱毛症）の基本的な原因である。この現象は、以前に述べられているように、脱毛症の遺伝的形質を受け継いだ男性及び女性の両方に生じる。ヒト頭皮に対するアンドロゲンの効果のより詳細な議論については、Trueb, RM, Molecular Mechanisms of Androgenic Alopecia, Exp. Gerontology, 2002, 27:981-990 、を読者は注目されたい。
【０１０４】
研究者は、その発毛がヒトと類似している他の動物を探した。これらのことが、研究者をスタンプテイルマカックへ導いた。これらの霊長類はまた、雄性脱毛を罹患する。本質的に、すべての青年期後マカックは、両方の性において、禿頭症の発生を示す。ヒトにおける男性型禿頭症の発生と同様に、アンドロゲンは、マカック禿頭症において、不可欠な引き金をひく因子である。前部頭皮毛髪の希薄化は、オス動物でテストステロンの血清レベルが劇的に上昇し始める時と同一の年齢（４歳）付近で始まるように思われる。メスにおけるテストステロンの上昇は、オスレベルのおよそ１０分の１であるが、オス及びメススタンプテイルマカック間に、禿頭症の発症の発生率及び年齢には相違はない。抗アンドロゲンの局所適用は、両方の性において、この禿頭症を逆行させた（Pan, H J et al, Evaluation of RU58841 as an anti-androgen in prostate PC3 cells and a topical anti-alopecia agent in the bald scalp of stump tailed macaques.  Endocrine 1998; 9:39-43 ）。
【０１０５】
このモデルは、ヒト禿頭症についてのモデルとして、テロゲン変換アッセイよりも著しい改善であるが、多くの実用的な欠点に悩まされる。マカックは高価であり、比較的珍しく、維持するために大きな労力を要し、そして試験間の長い洗い流し期間を必要とする。それ故、マカックは、多数の化合物のスクリーニングには実用的なモデルではない。
【０１０６】
抗アンドロゲン試験化合物を評価する場合、オスＣ３Ｈ／ＨｅＮマウスがテロゲン変換アッセイで使用できることが発見されている。それ故、本モデルは、存在するテロゲン変換アッセイの変法に関する。およそ７週齢のオスＣ３Ｈ／ＨｅＮマウスを利用した。これらの動物はまた、それらのメス対応物と同様に、テロゲンにおいて一様である。しかしながら、一度剪毛すると、これらのオスマウスに本質的に存在するアンドロゲンが、アナゲン期への毛嚢の変換を阻害する。抗アンドロゲンは、この雄性効果を阻止し、そして、それらのメス対応物と同様に、毛嚢はアナゲンへ変換するであろう。
【０１０７】
実施例５Ａ
実施例１に記載した化合物を、上記の改変テロゲン変換アッセイを利用する、さらなる試験にかけた。試験は、以下の様式で実施した。
【０１０８】
６〜７週齢のオスＣ３Ｈ／ＨｅＮマウス（Charles River Laboratories, Raleigh, NC ）を本研究に使用した。柔毛を、研究の開始に先立って、マウスの背側領域から刈り込んだ。テロゲン期の視覚的指標である、ピンク色の皮膚のマウスのみを本研究が包含するように選択した。
【０１０９】
試験化合物を、プロピレングリコール（３０％）及びエタノール（７０％）から成るビヒクルに溶解して、１％ｗ／ｖの濃度とした。関連する用量を、一試験群（７〜１０マウス）のマウスの刈り込んだ背側領域に、２０μｌ／ｃｍ２の容量で、局所的に適用した。動物の第二の群は、対照として働くビヒクルのみを与えた。処理を、４週の間、１日２回適用した。
【０１１０】
発毛の徴候について、１日おきに処理領域を観察し、そして類別した。発毛応答は、各動物について、処理した領域にわたって発毛の徴候が最初に現れた日を記録することにより数量化した。アナゲンの最初の徴候は、色素性毛の産生の準備に、毛嚢中のメラノサイトがメラニンを合成し始めるので、皮膚の色の黒化である。マウスを３５日又はそれより長く観察した。
【０１１１】
１％（ｗ／ｖ）の濃度では、ビヒクル対照群中のアナゲンの出現に先だっては、試験群において、アナゲンは惹起されなかった。
【国際調査報告】
2008509986.tif 000009
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