(57)【要約】  本明細書では、精神病、情動障害、認知症、神経障害性疼痛および緑内障を含む神経精神病を治療するための方法が開示される。治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンを神経精神病を患う患者に投与することによって治療がなされる。
2008509147.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
認知機能障害の治療のためのクロザピンを本質的に含有しない薬剤の調製におけるＮ−デスメチルクロザピンの使用。
【請求項２】
精神病の治療のためのクロザピンを本質的に含有しない薬剤の調製におけるＮ−デスメチルクロザピンの使用。
【請求項３】
情動障害の治療のためのクロザピンを本質的に含有しない薬剤の調製におけるＮ−デスメチルクロザピンの使用。
【請求項４】
認知症の治療のためのクロザピンを本質的に含有しない薬剤の調製におけるＮ−デスメチルクロザピンの使用。
【請求項５】
神経障害性疼痛の治療のためのクロザピンを本質的に含有しない薬剤の調製におけるＮ−デスメチルクロザピンの使用。
【請求項６】
緑内障の治療のためのクロザピンを本質的に含有しない薬剤の調製におけるＮ−デスメチルクロザピンの使用。
【請求項７】
Ｍ１ムスカリン受容体の活性レベルを増大させることが有益である場合の状態の治療のためのクロザピンを本質的に含有しない薬剤の調製におけるＮ−デスメチルクロザピンの使用。
【請求項８】
認知機能障害の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、本質的にクロザピンを含有しない治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンを投与するステップを含む認知機能障害を治療する方法。
【請求項９】
認知の改善を必要とする被験者を同定するステップをさらに含む請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記被験者を追加治療薬と接触させるステップをさらに含む請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
前記追加治療薬が、モノアミン再取り込み阻害剤、選択的セロトニン再取り込み阻害剤、ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、二重セロトニン／ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、ドーパミン作動薬、抗精神病薬、逆セロトニン作動薬、セロトニン拮抗薬、セロトニン２逆アゴニスト、セロトニン２拮抗薬、セロトニン１Ａ作動薬、抗てんかん薬および末梢作用性のムスカリン拮抗薬からなる群から選択される請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記被験者が、幻覚、妄想、思考障害、行動障害、攻撃性、自殺傾向、躁病、無快感症、感情鈍麻、情動障害、うつ病、躁病、認知症、神経障害性疼痛、緑内障およびこれらのいずれかの状態の２種類以上からなる群から選択される状態を患う請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
精神病の１つもしくは複数の症状を改善する方法であって、精神病の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、本質的にクロザピンを含有しない治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンを投与するステップを含む、方法。
【請求項１４】
精神病の１つもしくは複数の症状を呈する被験者を同定するステップをさらに含む請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記被験者を１種もしくは複数種の薬剤に暴露させることによって前記精神病が誘発される請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
情動障害の１つもしくは複数の症状を改善する方法であって、情動障害の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、本質的にクロザピンを含有しない治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンを投与するステップを含む、方法。
【請求項１７】
情動障害の１つもしくは複数の症状を呈する被験者を同定するステップをさらに含む請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記情動障害がうつ病である請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記情動障害が躁病である請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
認知症の１つもしくは複数の症状を改善する方法であって、認知症の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、本質的にクロザピンを含有しない治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンを投与するステップを含む、方法。
【請求項２１】
認知症の１つもしくは複数の症状を呈する被験者を同定するステップをさらに含む請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記認知症が認知機能障害を含む請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記認知症が行動障害を含む請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
神経障害性疼痛の１つもしくは複数の症状を改善する方法であって、神経障害性疼痛の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、本質的にクロザピンを含有しない治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンを投与するステップを含む、方法。
【請求項２５】
神経障害性疼痛の１つもしくは複数の症状を呈する被験者を同定するステップをさらに含む請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
緑内障の１つもしくは複数の症状を改善する方法であって、緑内障の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、本質的にクロザピンを含有しない治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンを投与するステップを含む、方法。
【請求項２７】
緑内障の１つもしくは複数の症状を呈する被験者を同定するステップをさらに含む請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記被験者がヒトである請求項８、１３、１６、２０、２４、または２６に記載の方法。
【請求項２９】
前記Ｎ−デスメチルクロザピンが１日の単回用量で投与されるかまたは分割用量で投与される請求項８、１３、１６、２０、２４、または２６に記載の方法。
【請求項３０】
前記Ｎ−デスメチルクロザピンが１日に２回、３回または４回投与される請求項８、１３、１６、２０、２４、または２６に記載の方法。
【請求項３１】
精神病の１つもしくは複数の症状を改善する方法であって、被験者にＮ−デスメチルクロザピンを別の抗精神病薬と組み合わせて投与するステップを含み、前記Ｎ−デスメチルクロザピンの少なくとも一部がＮ−デスメチルクロザピンを前記被験者に直接導入することによって投与される、方法。
【請求項３２】
Ｎ−デスメチルクロザピンを前記被験者に直接導入するステップがＮ−デスメチルクロザピンを経口投与するステップを含む請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
Ｎ−デスメチルクロザピンを前記被験者に直接導入するステップがＮ−デスメチルクロザピンを静脈内注射するステップを含む請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
前記他の抗精神病薬が、フェノチアジン、フェニルブチルピペラジン、デベンザピン、ベンジソキシジル、およびリチウム塩からなる群から選択される請求項３１に記載の方法。
【請求項３５】
前記フェノチアジンが、クロルプロマジン（ソラジン（登録商標））、メソリダジン（セレンチル（登録商標））、プロクロルペラジン（コンパジン（登録商標））、およびチオリダジン（メレリル（登録商標））からなる群から選択される請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記フェニルブチルピペラジンが、ハロペリドール（ハルドール（登録商標））およびピモジド（オラプ（登録商標））からなる群から選択される請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
前記デベンザピンが、クロザピン（クロザリル（登録商標））、ロキサピン（ロキシタン（登録商標））、オランザピン（ジプレキサ（登録商標））およびクエチアピン（セロクエル（登録商標））からなる群から選択される請求項３４に記載の方法。
【請求項３８】
前記ベンジソキシジルが、レスペリドン（レスペリダル（登録商標））およびジプラシドン（ゲオドン（登録商標））からなる群から選択される請求項３４に記載の方法。
【請求項３９】
前記リチウム塩が炭酸リチウムである請求項３４に記載の方法。
【請求項４０】
前記抗精神病薬が、アリピプラゾール（アビリファイ）、クロザピン、クロザリル、コンパジン、エトラフォン、ゲオドン、ハルドール、イナプシン、ロキシタン、メレリル、モーバン、ナバン、オランザピン（ジプレキサ）、オラプ、ペルミチル、プロリクシン、フェナガン、クエチアピン（セロクエル）、レグラン、リスパダール、セレンチル、セロクエル、ステラジン、タラクタン、ソラジン、トリアビル、トリラフォン、およびジプレキサ、またはこれらの医薬的に許容可能な塩からなる群から選択される請求項３１に記載の方法。
【請求項４１】
精神病の１つもしくは複数の症状を改善する方法であって、精神病の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、Ｎ−デスメチルクロザピンおよび医薬的に許容可能な賦形剤または希釈剤を含有する医薬組成物の治療有効量を投与するステップを含み、投与される任意のクロザピンの量がＮ−デスメチルクロザピンおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムをもたらすように十分に低い、方法。
【請求項４２】
情動障害の１つもしくは複数の症状を改善する方法であって、情動障害の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、Ｎ−デスメチルクロザピンおよび医薬的に許容可能な賦形剤または希釈剤を含有する医薬組成物の治療有効量を投与するステップを含み、投与される任意のクロザピンの量がＮ−デスメチルクロザピンおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムをもたらすように十分に低い、方法。
【請求項４３】
認知症の１つもしくは複数の症状を改善する方法であって、認知症の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、Ｎ−デスメチルクロザピンおよび医薬的に許容可能な賦形剤または希釈剤を含有する医薬組成物の治療有効量を投与するステップを含み、投与される任意のクロザピンの量がＮ−デスメチルクロザピンおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムをもたらすように十分に低い、方法。
【請求項４４】
神経障害性疼痛の１つもしくは複数の症状を改善する方法であって、神経障害性疼痛の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、Ｎ−デスメチルクロザピンおよび医薬的に許容可能な賦形剤または希釈剤を含有する医薬組成物の治療有効量を投与するステップを含み、投与される任意のクロザピンの量がＮ−デスメチルクロザピンおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムをもたらすように十分に低い、方法。
【請求項４５】
緑内障の１つもしくは複数の症状を改善する方法であって、緑内障の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、Ｎ−デスメチルクロザピンおよび医薬的に許容可能な賦形剤または希釈剤を含有する医薬組成物の治療有効量を投与するステップを含み、投与される任意のクロザピンの量がＮ−デスメチルクロザピンおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムをもたらすように十分に低い、方法。
【請求項４６】
認知機能障害を治療する方法であって、認知機能障害の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、Ｎ−デスメチルクロザピンおよび医薬的に許容可能な賦形剤または希釈剤を含有する医薬組成物の治療有効量を投与するステップを含み、投与される任意のクロザピンの量がＮ−デスメチルクロザピンおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムをもたらすように十分に低い、方法。
【請求項４７】
Ｍ１ムスカリン受容体の活性レベルを増大させることが有益である場合の状態のうちの少なくとも１つの症状を改善する方法であって、
被験者がＭ１ムスカリン受容体の増大した活性レベルから利益を得るか否かを判定するステップと；
前記Ｍ１ムスカリン受容体の活性レベルを増大させ、かつ前記被験者に対して前記少なくとも１つの症状を改善するのにＮ−デスメチルクロザピンの治療有効量を投与するステップと、
を含み、投与される任意のクロザピンの量がＮ−デスメチルクロザピンおよびクロザピンの併用によって前記Ｍ１ムスカリン受容体で正味のアゴニズムをもたらすように十分に低い、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ジベンゾジアゼピン化合物であるＮ−デスメチルクロザピン、８−クロロ−１１−（１−ピペラジニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｂ，ｅ］［１，４］ジアゼピンの強力なムスカリン受容体作動薬特性の発見に関し、それゆえに、疼痛、緑内障、認知症、情動疾患、および精神病の治療における優れた治療薬としてこの薬剤の臨床使用を支持するものである。
【背景技術】
【０００２】
ホルモン／神経伝達物質であるアセチルコリンの生理作用は、ムスカリン性アセチルコリン受容体によって部分的に媒介される。ムスカリン受容体は、これらの遺伝子を発現する細胞内および組織内での緩徐な調節性シグナル伝達を媒介する５種類（Ｍ１〜Ｍ５）の膜貫通タンパクのファミリーを含む。ムスカリン受容体は多数の治療上有用な薬剤の標的である（１、２）。ムスカリン受容体は、末梢的に副交感神経系におけるアセチルコリンの作用を媒介する。末梢に作用するムスカリン受容体作動薬は、緑内障患者において眼圧を低下させて治療上有用である（３）。アセチルコリンの中枢作用を増強する化合物と中枢作用性のムスカリン受容体作動薬の双方における、多数の神経精神病の治療における臨床的有用性が証明されている（１、２、４〜７）。
【０００３】
アセチルコリンの作用は、アセチルコリンエステラーゼ酵素による分子の分解によって終了する。中枢神経系内でこれらの酵素を阻害することにより、ムスカリン受容体にてアセチルコリンの濃度が増大する結果となる。多数のアセチルコリンエステラーゼ阻害剤が開発されており、認知症における認知促進剤として日常的に臨床使用されている（４）。
【０００４】
多数の中枢作用性のムスカリン作動薬が臨床試験の対象となっている。これらの中のキサノメリンは、精神病、およびアルツハイマー病患者に認められるそれに関連した行動障害を制御する場合に有効性を有することが判明している（５）。さらに最近では、キサノメリンが統合失調症を治療する場合に有効であることが実証されている（６）。興味深いことに、それは陽性症状および陰性症状のいずれに対しても有効性を示し、統合失調症における初期の臨床試験にて有害な運動作用を誘発しなかった。これらのデータは、ムスカリン受容体作動薬特性を有する化合物が、アルツハイマー病などの神経変性疾患に共通の行動障害を治療する場合やヒト精神病を治療する抗精神病薬として、有効性を示す可能性が高いことを示唆するが、それはこれらの患者集団において許容される場合に限られる。さらに、ムスカリン受容体作動薬は神経障害性疼痛状態の前臨床モデルにおける活性を示している（７）。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本明細書では、精神病の１つもしくは複数の症状を患う被験者を同定するステップと；被験者を治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンと接触させることにより精神病の１つもしくは複数の症状が改善されるステップとを含む、精神病を治療する方法が開示される。一実施形態では被験者はヒトである。一部の実施形態では、治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンが単回用量として投与される。他の実施形態では、治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンが複数回用量として投与される。一実施形態では、該方法は、被験者を追加治療薬と接触させるステップをさらに含む。一実施形態では、被験者はＮ−デスメチルクロザピンとの接触に引き続き追加治療薬と接触される。別の実施形態では、被験者はＮ−デスメチルクロザピンとの接触に先立ち追加治療薬と接触される。さらに別の実施形態では、被験者はＮ−デスメチルクロザピンと実質的に同時に追加治療薬と接触される。一部の実施形態では、モノアミン再取り込み阻害剤、選択的セロトニン再取り込み阻害剤、ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、二重セロトニン／ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、ドーパミン作動薬、抗精神病薬、逆セロトニン作動薬、セロトニン拮抗薬、セロトニン２逆アゴニスト、セロトニン２拮抗薬、セロトニン１Ａ作動薬、抗てんかん薬および末梢作用性のムスカリン拮抗薬からなる群から追加治療薬が選択される。
【０００６】
さらに本明細書では、情動障害の１つもしくは複数の症状を患う被験者を同定するステップと；被験者に治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンを投与することにより、情動障害の１つもしくは複数の症状が改善されるステップとを含む、情動障害を治療する方法が開示される。一実施形態では被験者はヒトである。一実施形態では情動障害はうつ病である。別の実施形態では情動障害は躁病である。一部の実施形態では、治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンが単回用量として投与される。他の実施形態では、治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンが複数回用量として投与される。一実施形態では、該方法は、被験者に追加治療薬を投与するステップをさらに含む。一実施形態では、被験者はＮ−デスメチルクロザピンとの接触に引き続き追加治療薬と接触される。別の実施形態では、被験者はＮ−デスメチルクロザピンとの接触に先立ち追加治療薬と接触される。さらに別の実施形態では、被験者はＮ−デスメチルクロザピンと実質的に同時に追加治療薬と接触される。一部の実施形態では、追加治療薬は、モノアミン再取り込み阻害剤、選択的セロトニン再取り込み阻害剤、ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、二重セロトニン／ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、ドーパミン作動薬、抗精神病薬、逆セロトニン作動薬、セロトニン拮抗薬、セロトニン２逆アゴニスト、セロトニン２拮抗薬、セロトニン１Ａ作動薬、抗てんかん薬および末梢作用性のムスカリン拮抗薬からなる群から選択される。
【０００７】
本明細書では、認知症の１つもしくは複数の症状を患う被験者を同定するステップと、治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンを該被験者に投与することにより所望の臨床効果がもたらされるステップとを含む、認知症を治療する方法がさらに開示される。一実施形態では被験者はヒトである。一部の実施形態では、治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンが単回用量として投与される。他の実施形態では、治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンが複数回用量として投与される。一実施形態では、認知症は認知機能障害を来す。別の実施形態では、認知症は行動障害を来す。一実施形態では、該方法は被験者に追加治療薬を投与するステップをさらに含む。一実施形態では、被験者はＮ−デスメチルクロザピンとの接触に引き続き追加治療薬と接触される。別の実施形態では、被験者はＮ−デスメチルクロザピンとの接触に先立ち追加治療薬と接触される。さらに別の実施形態では、被験者はＮ−デスメチルクロザピンと実質的に同時に追加治療薬と接触される。一部の実施形態では、追加治療薬は、モノアミン再取り込み阻害剤、選択的セロトニン再取り込み阻害剤、ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、二重セロトニン／ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、ドーパミン作動薬、抗精神病薬、逆セロトニン作動薬、セロトニン拮抗薬、セロトニン２逆アゴニスト、セロトニン２拮抗薬、セロトニン１Ａ作動薬、抗てんかん薬および末梢作用性のムスカリン拮抗薬からなる群から選択される。
【０００８】
本明細書では、神経障害性疼痛の１つもしくは複数の症状を患う被験者を同定するステップと、該被験者を治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンと接触させることにより神経障害性疼痛の症状が軽減されるステップとを含む、神経障害性疼痛を治療する方法がさらに開示される。一実施形態では、被験者はヒトである。一部の実施形態では、治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンが単回用量として投与される。他の実施形態では、治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンが複数回用量として投与される。一実施形態では、該方法は被験者を追加治療薬と接触させるステップをさらに含む。一実施形態では、被験者はＮ−デスメチルクロザピンとの接触に引き続き追加治療薬と接触される。別の実施形態では、被験者はＮ−デスメチルクロザピンとの接触に先立ち追加治療薬と接触される。さらに別の実施形態では、被験者はＮ−デスメチルクロザピンと実質的に同時に追加治療薬と接触される。一部の実施形態では、追加治療薬は、モノアミン再取り込み阻害剤、選択的セロトニン再取り込み阻害剤、ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、二重セロトニン／ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、ドーパミン作動薬、抗精神病薬、逆セロトニン作動薬、セロトニン拮抗薬、セロトニン２逆アゴニスト、セロトニン２拮抗薬、セロトニン１Ａ作動薬、抗てんかん薬および末梢作用性のムスカリン拮抗薬からなる群から選択される。
【０００９】
本明細書では、緑内障の１つもしくは複数の症状を患う被験者を同定するステップと、該被験者を治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンと接触させることにより緑内障の症状が軽減されるステップとを含む、緑内障を治療する方法がさらに開示される。一実施形態では、被験者はヒトである。一部の実施形態では、治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンが単回用量として投与される。他の実施形態では、治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンが複数回用量として投与される。一部の実施形態では、緑内障の症状が、眼圧上昇、視神経損傷、および視野減少からなる群から選択される。一実施形態では、該方法は被験者を追加治療薬と接触させるステップをさらに含む。一実施形態では、被験者はＮ−デスメチルクロザピンとの接触に引き続き追加治療薬と接触される。別の実施形態では、被験者はＮ−デスメチルクロザピンとの接触に先立ち追加治療薬と接触される。さらに別の実施形態では、被験者はＮ−デスメチルクロザピンと実質的に同時に追加治療薬と接触される。一部の実施形態では、追加治療薬は、モノアミン再取り込み阻害剤、選択的セロトニン再取り込み阻害剤、ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、二重セロトニン／ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、ドーパミン作動薬、抗精神病薬、逆セロトニン作動薬、セロトニン拮抗薬、セロトニン２逆アゴニスト、セロトニン２拮抗薬、セロトニン１Ａ作動薬、抗てんかん薬、プロステノイド、ならびにαおよびβアドレナリン作動薬からなる群から選択される。
【００１０】
本明細書では、Ｎ−デスメチルクロザピンおよび追加治療薬の医薬的有効量を含有する医薬組成物がさらに開示される。一部の実施形態では、追加治療薬は、モノアミン再取り込み阻害剤、選択的セロトニン再取り込み阻害剤、ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、二重セロトニン／ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、ドーパミン作動薬、抗精神病薬、逆セロトニン作動薬、セロトニン拮抗薬、セロトニン２逆アゴニスト、セロトニン２拮抗薬、セロトニン１Ａ作動薬、抗てんかん薬および末梢作用性のムスカリン拮抗薬からなる群から選択される。一部の実施形態では、追加治療薬は、フェノチアジン、フェニルブチルピペラジン、デベンザピン（ｄｅｂｅｎｚａｐｉｎｅ）、ベンジソキシジル（ｂｅｎｚｉｓｏｘｉｄｉｌ）、およびリチウム塩からなる群から選択される。一部の実施形態では、追加治療薬は、クロルプロマジン（ソラジン（Ｔｈｏｒａｚｉｎｅ）（登録商標））、メソリダジン（セレンチル（Ｓｅｒｅｎｔｉｌ）（登録商標））、プロクロルペラジン（コンパジン（Ｃｏｍｐａｚｉｎｅ）（登録商標））、チオリダジン（メレリル（Ｍｅｌｌａｒｉｌ）（登録商標））、ハロペリドール（ハルドール（Ｈａｌｄｏｌ）（登録商標））、ピモジド（オラプ（Ｏｒａｐ）（登録商標））、クロザピン（クロザリル（Ｃｌｏｚａｒｉｌ）（登録商標））、ロキサピン（ロキシタン（Ｌｏｘｉｔａｎｅ）（登録商標））、オランザピン（ジプレキサ（Ｚｙｐｒｅｘａ）（登録商標））、クエチアピン（セロクエル（Ｓｅｒｏｑｕｅｌ）（登録商標））、リスペリドン（リスペリダル（Ｒｉｓｐｅｒｉｄａｌ）（登録商標））、ジプラシドン（ゲオドン（Ｇｅｏｄｏｎ）（登録商標））、炭酸リチウム、アリピプラゾール（アビリファイ）、クロザピン、クロザリル、コンパジン、エトラフォン（Ｅｔｒａｆｏｎ）、ゲオドン、ハルドール、イナプシン、ロキシタン、メレリル、モーバン、ナバン（Ｎａｖａｎｅ）、オランザピン（ジプレキサ）、オラプ、ペルミチル（Ｐｅｒｍｉｔｉｌ）、プロリクシン、フェナガン、クエチアピン（セロクエル）、レグラン、リスパダール、セレンチル、セロクエル、ステラジン、タラクタン、ソラジン、トリアビル、トリラフォン、ジプレキサ、ならびにこれらの医薬的に許容可能な塩からなる群から選択される。一部の実施形態では、選択的セロトニン再取り込み阻害剤は、フルオキセチン、フルボキサミン、セルトラリン、パロキセチン、シタロプラム、エスシタロプラム、シブトラミン、デュロキセチン、ベンラファキシン、ならびにこれらの医薬的に許容可能な塩およびプロドラッグからなる群から選択される。一部の実施形態では、ノルエピネフリン再取り込み阻害剤は、チオニソキセチン（ｔｈｉｏｎｉｓｏｘｅｔｉｎｅ）およびレボキセチンからなる群から選択される。一部の実施形態では、二重セロトニン／ノルエピネフリン再取り込み阻害剤は、デュロキセチン、ミルナクリプラン（ｍｉｌｎａｃｒｉｐｒａｎ）およびフルボキサミンからなる群から選択される。一部の実施形態では、ドーパミン作動薬は、カベルゴリン、アマンタジン、リスリド、ペルゴリド、ロピニロール、プラミペキソール、Ｌ−ＤＯＰＡおよびブロモクリプチンからなる群から選択される。一実施形態では、逆セロトニン作動薬は、Ｎ−（１−メチルピペリジン−４−イル）−Ｎ−（４−フルオロフェニルメチル）−Ｎ’−（４−（２−メチルプロピルオキシ）フェニルメチル）カルバミド、ＭＤＬ１００，９０７、ＳＲ−４３６９４Ｂ（エプリバンセリン）、リタンセリン、ケタンセリン、ミアンセリン、シナンセリン、ミルタゼピン、シプロヘプタジンおよびシンナリジンからなる群から選択される。
【００１１】
本発明の一実施形態は、認知の改善を要する被験者を同定するステップと、該被験者の認知を改善するのに治療上有効な量のＮ−デスメチルクロザピンを該被験者に投与するステップとを含む、認知機能障害を治療する方法を含む。
【００１２】
本実施形態の一部の態様では、被験者はヒトである。本実施形態の一部の態様では、治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンが単回用量として投与される。本実施形態の他の態様では、治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンが複数回用量として投与される。
【００１３】
本実施形態のさらなる態様では、該方法は被験者を追加治療薬と接触させるステップをさらに含む。例えば、被験者はＮ−デスメチルクロザピンによる該接触に引き続き該追加治療薬と接触されるか、あるいは被験者はＮ−デスメチルクロザピンによる該接触に先立ち該追加治療薬と接触されうる。
【００１４】
一部の場合では、被験者はＮ−デスメチルクロザピンと実質的に同時に該追加治療薬と接触される。一部の場合では、追加治療薬は、モノアミン再取り込み阻害剤、選択的セロトニン再取り込み阻害剤、ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、二重セロトニン／ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、ドーパミン作動薬、抗精神病薬、逆セロトニン作動薬、セロトニン拮抗薬、セロトニン２逆アゴニスト、セロトニン２拮抗薬、セロトニン１Ａ作動薬、抗てんかん薬および末梢作用性のムスカリン拮抗薬からなる群から選択される。この実施形態の一部の態様では、被験者は、幻覚、妄想、思考障害（ｄｉｓｏｒｄｅｒｅｄ  ｔｈｏｕｇｈｔ）、行動障害、攻撃性、自殺傾向、躁病、無快感症、感情鈍麻、情動障害、うつ病、躁病、認知症、神経障害性疼痛、緑内障およびこれらのいずれかの状態の２種類以上からなる群から選択される状態を患っている。
【００１５】
本発明の別の実施形態は、被験者がＭ１ムスカリン受容体の増大された活性レベルから利益を得るか否かを判定するステップと、Ｍ１ムスカリン受容体の活性レベルを増大させ、被験者に対して該少なくとも１つの症状を改善するための治療上有効な量のＮ−デスメチルクロザピンを投与するステップとを含む、Ｍ１ムスカリン受容体の活性レベルを増大させることが有益である場合の少なくとも１つの状態の症状を改善する方法を含む。本実施形態の一部の態様では、治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンが単回用量として投与される。本実施形態の他の態様では、治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンが複数回用量として投与される。本実施形態のさらなる態様では、該方法は被験者を追加治療薬と接触させるステップをさらに含む。例えば、被験者はＮ−デスメチルクロザピンとの該接触に引き続き該追加治療薬と接触されうる。あるいは、被験者はＮ−デスメチルクロザピンとの該接触に先立ち該追加治療薬と接触されうる。一部の場合では、被験者はＮ−デスメチルクロザピンと実質的に同時に該追加治療薬と接触される。一部の場合では、追加治療薬は、モノアミン再取り込み阻害剤、選択的セロトニン再取り込み阻害剤、ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、二重セロトニン／ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、ドーパミン作動薬、抗精神病薬、逆セロトニン作動薬、セロトニン拮抗薬、セロトニン２逆アゴニスト、セロトニン２拮抗薬、セロトニン１Ａ作動薬、抗てんかん薬および末梢作用性のムスカリン拮抗薬からなる群から選択される。本実施形態の一部の態様では、被験者は、幻覚、妄想、思考障害、行動障害、攻撃性、自殺傾向、躁病、無快感症、感情鈍麻、情動障害、うつ病、躁病、認知症、神経障害性疼痛、緑内障およびこれらのいずれかの状態の２種類以上からなる群から選択される状態を患っている。
【００１６】
本発明の別の態様は、精神病の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、本質的にクロザピンを含有しない治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンを投与するステップを含む、精神病の１つもしくは複数の症状を改善するための方法である。一実施形態は、精神病の１つもしくは複数の症状を呈する被験者を同定するステップをさらに含む。一実施形態では、精神病は被験者を１種もしくは複数種の薬剤に暴露させることによって誘発される。一実施形態では被験者はヒトである。一実施形態では、Ｎ−デスメチルクロザピンが１日の単回用量として投与されるかまたは分割投与で投与される。一実施形態では、Ｎ−デスメチルクロザピンが１日に２回、３回または４回投与される。
【００１７】
本発明の別の態様は、情動障害の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、本質的にクロザピンを含有しない治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンを投与するステップを含む、情動障害の１つもしくは複数の症状を改善する方法である。一実施形態は、情動障害の１つもしくは複数の症状を呈する被験者を同定するステップをさらに含む。一実施形態では情動障害はうつ病である。一実施形態では情動障害は躁病である。
【００１８】
本発明の別の態様は、認知症の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、本質的にクロザピンを含有しない治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンを投与するステップを含む、認知症の１つもしくは複数の症状を改善する方法である。一実施形態は、認知症の１つもしくは複数の症状を呈する被験者を同定するステップをさらに含む。一実施形態では、認知症は認知機能障害を含む。一実施形態では、認知症は行動障害を含む。
【００１９】
本発明の別の態様は、神経障害性疼痛の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、本質的にクロザピンを含有しない治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンを投与するステップを含む、神経障害性疼痛の１つもしくは複数の症状を改善する方法である。一実施形態は、神経障害性疼痛の１つもしくは複数の症状を呈する被験者を同定するステップをさらに含む。
【００２０】
本発明の別の態様は、緑内障の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、本質的にクロザピンを含有しない治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンを投与するステップを含む、緑内障の１つもしくは複数の症状を改善する方法である。一実施形態は、緑内障の１つもしくは複数の症状を呈する被験者を同定するステップをさらに含む。
【００２１】
本発明の別の態様は、別の抗精神病薬と組み合わせたＮ−デスメチルクロザピンを被験者に投与するステップを含む、精神病の１つもしくは複数の症状を改善する方法であり、ここでＮ−デスメチルクロザピンを被験者に直接導入することにより、Ｎ−デスメチルクロザピンの少なくとも一部が投与される。一実施形態では、Ｎ−デスメチルクロザピンの被験者への直接導入は、Ｎ−デスメチルクロザピンの経口投与を含む。一実施形態では、Ｎ−デスメチルクロザピンの被験者への直接導入は、Ｎ−デスメチルクロザピンの静脈内注射を含む。一実施形態では、他の抗精神病薬は、フェノチアジン、フェニルブチルピペラジン、デベンザピン、ベンジソキシジル、およびリチウム塩からなる群から選択される。一実施形態では、フェノチアジンは、クロルプロマジン（ソラジン（登録商標））、メソリダジン（セレンチル（登録商標））、プロクロルペラジン（コンパジン（登録商標））、およびチオリダジン（メレリル（登録商標））からなる群から選択される。一実施形態では、フェニルブチルピペラジンは、ハロペリドール（ハルドール（登録商標））およびピモジド（オラプ（登録商標））からなる群から選択される。一実施形態では、デベンザピンは、クロザピン（クロザリル（登録商標））、ロキサピン（ロキシタン（登録商標））、オランザピン（ジプレキサ（登録商標））およびクエチアピン（セロクエル（登録商標））からなる群から選択される。一実施形態では、ベンジソキシジルは、レスペリドン（レスペリダル（Ｒｅｓｐｅｒｉｄａｌ）（登録商標））およびジプラシドン（ゲオドン（登録商標））からなる群から選択される。一実施形態では、リチウム塩は炭酸リチウムである。一実施形態では、抗精神病薬は、アリピプラゾール（アビリファイ）、クロザピン、クロザリル、コンパジン、エトラフォン、ゲオドン、ハルドール、イナプシン、ロキシタン、メレリル、モーバン、ナバン、オランザピン（ジプレキサ）、オラプ、ペルミチル、プロリクシン、フェナガン、クエチアピン（セロクエル）、レグラン、リスパダール、セレンチル、セロクエル、ステラジン、タラクタン、ソラジン、トリアビル、トリラフォン、およびジプレキサ、またはこれらの医薬的に許容可能な塩からなる群から選択される。
【００２２】
本発明の別の態様は、精神病の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、Ｎ−デスメチルクロザピンおよび医薬的に許容可能な賦形剤または希釈剤を含有する治療有効量の医薬組成物を投与するステップを含む、精神病の１つもしくは複数の症状を改善する方法であり、Ｎ−デスメチルクロザピンおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムをもたらすように、投与される任意のクロザピンの量は十分に低い。
【００２３】
本発明の別の態様は、情動障害の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、Ｎ−デスメチルクロザピンおよび医薬的に許容可能な賦形剤または希釈剤を含有する治療有効量の医薬組成物を投与するステップを含む、情動障害の１つもしくは複数の症状を改善する方法であり、Ｎ−デスメチルクロザピンおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムをもたらすように、投与される任意のクロザピンの量は十分に低い。
【００２４】
本発明の別の態様は、認知症の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、Ｎ−デスメチルクロザピンおよび医薬的に許容可能な賦形剤または希釈剤を含有する治療有効量の医薬組成物を投与するステップを含む、認知症の１つもしくは複数の症状を改善する方法であり、Ｎ−デスメチルクロザピンおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムをもたらすように、投与される任意のクロザピンの量は十分に低い。
【００２５】
本発明の別の態様は、神経障害性疼痛の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、Ｎ−デスメチルクロザピンおよび医薬的に許容可能な賦形剤または希釈剤を含有する治療有効量の医薬組成物を投与するステップを含む、神経障害性疼痛の１つもしくは複数の症状を改善する方法であり、Ｎ−デスメチルクロザピンおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムをもたらすように、投与される任意のクロザピンの量は十分に低い。
【００２６】
本発明の別の態様は、緑内障の１つもしくは複数の症状を呈する被験者に、Ｎ−デスメチルクロザピンおよび医薬的に許容可能な賦形剤または希釈剤を含有する治療有効量の医薬組成物を投与するステップを含む、緑内障の１つもしくは複数の症状を改善する方法であり、Ｎ−デスメチルクロザピンおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムをもたらすように、投与される任意のクロザピンの量は十分に低い。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２７】
定義
ＮＤＭＣとしても既知であるＮ−デスメチルクロザピン、すなわち８−クロロ−１１−（１−ピペラジニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｂ，ｅ］［１，４］ジアゼピンは、化学式（Ｉ）で示される分子構造を有する化合物として定義される。
【００２８】
「作動薬（アゴニスト）」は、受容体の基礎活性（すなわち受容体によって媒介されるシグナル伝達）を増大させる化合物として定義される。
【００２９】
「拮抗薬（アンタゴニスト）」は、受容体に結合することによってアゴニストまたは逆アゴニストと競合して、受容体上のアゴニストまたは逆アゴニストの作用の活性を遮断する化合物として定義される。しかし、アンタゴニスト（「中性」（ニュートラル）アンタゴニストとしても知られる）は、恒常的な受容体活性に対して全く作用を示さない。
【００３０】
部分アゴニストは、インビトロで受容体を活性化することなく、インビボにおけるアンタゴニストとして機能するような限定的または決して完全ではない活性を示すアゴニストとして定義される。
【００３１】
「被験者」という用語は、治療、観察または実験の対象である、動物、好ましくは哺乳動物、および最も好ましくはヒトを示す。
【００３２】
「治療有効量」という用語は、活性化合物または医薬品における、適応する生物学的応答または薬剤応答（ｍｅｄｉｃａｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ）を引き起こす量を示すのに用いられる。この応答は、ある研究者、獣医、医師または他の臨床家によって模索される、組織、系、動物またはヒトにおいて生じる可能性があり、治療されている疾患の症状の緩和を含む。
【００３３】
特定の実施形態では、本明細書に開示される方法は、治療有効量のＮＤＭＣを、精神病の治療を目的に被験者に投与するステップを含む。
【００３４】
特定の実施形態では、精神病を治療するための上記の方法が、精神病の１つもしくは複数の症状を患う被験者を同定するステップと、被験者を治療有効量のＮ−デスメチルクロザピンと接触させることにより精神病の１つもしくは複数の症状が改善されるステップとを含む。
【００３５】
一部の実施形態では、症状は精神病に付随する認知機能障害である。他の実施形態では、精神病を患う被験者は、精神病における２つ以上の症状を呈する。特定の実施形態では、症状のうちの１つは認知機能障害である一方、別の症状は、幻覚、妄想、思考障害、行動障害、攻撃性、自殺傾向、躁病、無快感症、または感情鈍麻のうちの１つもしくは複数である。
【００３６】
さらなる実施形態では、該方法は、治療有効量のＮＤＭＣを、うつ病または躁病の治療を目的に被験者に投与するステップを含む。
【００３７】
さらに他の実施形態では、該方法は、治療有効量のＮＤＭＣを、任意の原因の認知症または認知機能障害に特徴的な精神障害および他の行動障害の治療を目的に被験者に投与するステップを含む。
【００３８】
さらに他の実施形態では、該方法は、治療有効量のＮＤＭＣを、神経障害性疼痛の治療を目的に被験者に投与するステップを含む。
【００３９】
本発明者らは、ヒト疾患を治療する場合に、５種類のヒトムスカリン受容体サブタイプでの機能活性において有用性を有する一連の広範な薬剤についてプロファイリングを行っている。既知のムスカリン薬を除いて、試験対象の２種類の薬剤（５００を超える種類の中から）のみがムスカリン受容体のアゴニスト活性を示した。一方は非定型抗精神病薬のクロザピンであった（８）。この化合物は、インビトロにおいてムスカリン性のＭ１、Ｍ２、およびＭ４受容体で弱い部分アゴニスト／アンタゴニスト活性を有することが示されている一方（９、１０）、インビボではムスカリン受容体のアンタゴニスト特性を示すと一般に考えられる。もう一方はそれに関連する化合物であるＮ−デスメチルクロザピンであった。
【００４０】
ヒト被験者にクロザピンを投与する結果、２種類の主要な代謝産物であるＮ−デスメチルクロザピン（ＮＤＭＣ）およびクロザピン−Ｎ−オキシドが形成される（１１）。しかし、クロザピン−Ｎ−オキシドは、速やかに排出されかつ親化合物の生物学的活性に寄与しない可能性が高い極性をもつ代謝産物である。被験者に投与されるクロザピンの用量と総クロザピン部分の血清中濃度との間には相関があるが、ＮＤＭＣの濃度は個々の被験者間で幅広く変化しうる（１２）。一般にＮＤＭＣは、ヒトにおける安定状態の動態を示す間、総血清クロザピン濃度の４０〜７５％を構成する（１３）。ＮＤＭＣにおける、血液脳関門を通過しかつ中枢性の媒介活性を与える能力に関しては矛盾するデータが存在する（１４、１５）。これらの観察結果は、ＮＤＭＣがヒト被験者に日常的に投与されており、良好な耐容性を示すことを示している。ＮＤＭＣの分子特性に関してはデータがほとんど存在しない。ＮＤＭＣは、５ＨＴ２ＣおよびＤ２受容体にてアンタゴニスト活性を有することが判明しているが（１６）、そのムスカリン受容体との相互作用に関するデータについては全く報告されていない。
【００４１】
驚くべきことに、また密接な関係がある化合物のクロザピンと異なり、化合物のＮ−デスメチルクロザピン（ＮＤＭＣ）がムスカリン受容体作動薬としてこれまで正しく評価されなかった機能活性を有することが判明している。エクスビボでの実験によると、ラットにおいてＮＤＭＣが血液脳関門を越えかつ中枢性のムスカリン受容体にてアゴニストとして作用することが示されている。これらの観察結果における実際の応用では、ＮＤＭＣを、抗精神病薬、抗躁薬、抗認知症薬、および緑内障または神経障害性疼痛を治療するための治療薬としての使用を支持している。したがって、一態様では、本明細書において受容体を有効量のＮＤＭＣと接触させるステップを含む、ムスカリン受容体の活性を作動させる方法が開示される。別の態様では、本明細書において、治療を必要とする被験者を同定するステップと、被験者に治療有効量のＮＤＭＣを投与するステップとを含む、ムスカリン受容体関連疾患を患う被験者を治療する方法が開示される。
【００４２】
「ムスカリン関連疾患」とは、ムスカリン受容体を作動させることによって症状が改善される疾患を意味する。
【００４３】
別の態様では、本明細書において、被験者に治療有効量のＮＤＭＣを投与するステップを含む、被験者における統合失調症または任意の原因の精神病と関連した１つもしくは複数の症状を改善する方法が開示される。一部の実施形態では、該方法は、統合失調症またはそれに関連する精神病における陽性（幻覚および妄想）ならびに陰性（無関心、引きこもり、無快感症）の症状を制御することを目的に、被験者を薬理学的活性用量のＮＤＭＣと接触させるステップを含む。一実施形態では、統合失調症または精神病に付随する１つもしくは複数の症状を改善するために投与されるＮＤＭＣは本質的にクロザピンを含有しない。「本質的にクロザピンを含有しない」とは、被験者の血流中にＮＤＭＣが検出可能であるのと同時に被験者の血流中に検出されうるクロザピンの量がほとんどないという意味である。一実施形態では、ＮＤＭＣとともに投与される任意のクロザピンの量は、投与されるＮＤＭＣおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムがもたらされる程度で十分に低い。一実施形態では、ある量のクロザピンが投与されるが、それは投与されるＮＤＭＣおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムがもたらされる程度で十分に低い。一実施形態では、ＮＤＭＣ対クロザピンの比はムスカリン受容体での正味のアゴニズムに起因する有益な効果を有する程度に十分に高い。様々な実施形態では、ＮＤＭＣ対クロザピンの比は少なくとも約１００：１、５０：１、１０：１、９：１、７：１、５：１、または３：１である。
【００４４】
別の態様では、被験者に治療有効量のＮＤＭＣを投与するステップを含む、被験者における、大うつ病、躁病、双極性障害、および自殺を含む、情動障害に付随する１つもしくは複数の症状を改善する方法が本明細書において開示される。一部の実施形態では、該方法は、大うつ病または躁うつ病の間に認められる症状を制御することを目的に被験者を薬理学的活性用量のＮＤＭＣと接触させるステップを含む。一実施形態では、情動障害に付随する１つもしくは複数の症状を改善するために投与されるＮＤＭＣは本質的にクロザピンを含有しない。一実施形態では、ＮＤＭＣとともに投与される任意のクロザピンの量は、投与されるＮＤＭＣおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムがもたらされる程度で十分に低い。一実施形態では、ある量のクロザピンが投与されるが、投与されるＮＤＭＣおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムがもたらされる程度で十分に低い。
【００４５】
別の態様では、被験者に治療有効量のＮＤＭＣを投与するステップを含む、被験者におけるアルツハイマー病および関連する神経変性疾患に付随する１つもしくは複数の症状を改善する方法が本明細書において開示される。一部の実施形態では、該方法は、変性認知症に認められる、認知障害を改善しかつそれに関連した行動障害を制御することを目的に被験者を薬理学的活性用量のＮＤＭＣと接触させるステップを含む。一実施形態では、認知症に付随する１つもしくは複数の症状を改善するために投与されるＮＤＭＣは本質的にクロザピンを含有しない。一実施形態では、ＮＤＭＣとともに投与される任意のクロザピンの量は、投与されるＮＤＭＣおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムがもたらされる程度で十分に低い。一実施形態では、ある量のクロザピンが投与されるが、投与されるＮＤＭＣおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムがもたらされる程度で十分に低い。
【００４６】
別の態様では、症状改善を必要とする被験者を同定するステップと、被験者に治療有効量のＮＤＭＣを投与するステップとを含む、被験者における神経障害性疼痛に付随する１つもしくは複数の症状を改善する方法が本明細書において開示される。一部の実施形態では、該方法は、神経障害性疼痛状態に認められる異常感覚（ｄｙｓｔｈｅｓｔｈｅｔｉｃ）症状、痛覚過敏症状、および他の改変された侵害症状をそれらの病因にかかわらず制御することを目的に被験者を薬理学的活性用量のＮＤＭＣと接触させるステップを含む。一実施形態では、神経障害性疼痛に付随する１つもしくは複数の症状を改善するために投与されるＮＤＭＣは本質的にクロザピンを含有しない。一実施形態では、ＮＤＭＣとともに投与される任意のクロザピンの量は、投与されるＮＤＭＣおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムがもたらされる程度で十分に低い。一実施形態では、ある量のクロザピンが投与されるが、投与されるＮＤＭＣおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムがもたらされる程度で十分に低い。
【００４７】
別の態様では、被験者に治療有効量のＮＤＭＣを投与するステップを含む、被験者における緑内障に付随する１つもしくは複数の症状を改善する方法が本明細書において開示される。一部の実施形態では、該方法は、緑内障に認められる眼圧上昇をそれらの病因にかかわらず制御することを目的に被験者を薬理学的活性用量のＮＤＭＣと接触させるステップを含む。一実施形態では、緑内障に付随する１つもしくは複数の症状を改善するために投与されるＮＤＭＣは本質的にクロザピンを含有しない。一実施形態では、ＮＤＭＣとともに投与される任意のクロザピンの量は、投与されるＮＤＭＣおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムがもたらされる程度で十分に低い。一実施形態では、ある量のクロザピンが投与されるが、投与されるＮＤＭＣおよびクロザピンの併用によってムスカリン受容体で正味のアゴニズムがもたらされる程度で十分に低い。
【００４８】
驚くべきことに、ＮＤＭＣはヒトムスカリン受容体で強力なアゴニスト活性を有する。本明細書では、ＮＤＭＣが血液脳関門を越えかつラット海馬においてＭＡＰキナーゼ活性の活性化を介して測定されるムスカリン受容体作動薬としてインビボで機能することがさらに開示される。類似の分子薬理学的プロフィールを有する化合物における既知の臨床的有効性と組み合わせた、本方法によって同定されるＮＤＭＣの分子の活性によると、ＮＤＭＣを使用することで、ヒト精神病、情動疾患、変性認知症、緑内障、および神経障害性疼痛に関連した疾患または状態が緩和されるか治療されうることが示される。
【００４９】
別の態様では、受容体をＮ−デスメチルクロザピンと接触させるステップを含む、Ｍ１ムスカリン受容体を活性化させる方法が本明細書において開示される。
【００５０】
さらなる態様では、Ｎ−デスメチルクロザピンをそれを必要とする被験者に投与するステップを含む、Ｍ１ムスカリン受容体の活性レベルを増大させることが有益である場合の状態の少なくとも１つの症状を改善する方法が本明細書において開示される。
【００５１】
Ｎ−デスメチルクロザピン（ＮＤＭＣ）の調製
Ｎ−デスメチルクロザピン（ＮＤＭＣ）は化学式（Ｉ）の構造を有する。
【化１】
2008509147.tif 000003
【００５２】
ＮＤＭＣは、上記の如く調製される（１７）。ジベンゾ−ジアゼピン−ラクタム前駆体（ＩＩ）を五硫化リンを用いてチオラクタム（ＩＩＩ）に変換した後、例えば硫酸ジメチルによりアルキル化してイミノチオエーテル（ＩＶ）を生成する。過剰のピペラジンを用いたチオエーテルのアミノリシスにより、所望のＮ−デスメチルクロザピン（Ｉ）が得られる。あるいは、ジベンゾ−ジアゼピン−ラクタム（ＩＩ）は、五塩化リンなどのハロゲン化剤による処理によってイミノ−クロリド（Ｖ）に変換される可能性があり、生成物Ｖはピペラジンとの反応によってＮ−デスメチルクロザピン（Ｉ）に変換される。
【化２】
2008509147.tif 000004
【００５３】
医薬的に許容可能な希釈剤または賦形剤とともにＮＤＭＣを含有する医薬組成物として、ＮＤＭＣを調合することが可能である。適切な形式で、かつＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、ジェナーロ（Ｇｅｎｎａｒｏ）編、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、ペンシルバニア州Ｅａｓｔｏｎ、１９９０年での開示内容などの認められた慣行に従い、かかる組成物を調合することが可能である。一部の実施形態では、本質的にクロザピンを含有しない、ＮＤＭＣを含有する医薬組成物が提供される。
【００５４】
都合よく、ＮＤＭＣは毎日単回用量で投与されるかまたは１日の総用量が複数回用量として投与されうる（例えば１日に２回、３回または４回といった分割用量）。さらに、本発明における化合物は、適切な鼻腔内用賦形剤の局所使用を介した鼻腔内形態で、または経皮経路を介し、または眼製剤の局所使用を介し、あるいは当業者に周知の経皮皮膚パッチのこれらの形態を使用して投与されうる。
【００５５】
種々の因子に従い、ＮＤＭＣの投与計画を選択してもよい。これらには患者のタイプ、種、年齢、体重、性別および病状；治療されるべき状態の重症度；投与経路；患者の腎臓および肝臓機能；および使用される特定の化合物が含まれる。通常の技量をもつ医師は、治療中の疾患または障害の進行について予防し、対抗し、または阻止するのに必要な薬剤の有効量を容易に決定しかつ処方することができる。
【００５６】
同製品の１日用量は、ヒト成人につき１日当たり０．０１〜１０００ｍｇの広範囲にわたり変化しうる。薬剤の有効量は、通常、１日当たり約０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇ体重の用量レベルで供給される。好ましくは、同範囲は１日当たり約０．００１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、および特に１日当たり約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜１ｍｇ／ｋｇ体重である。化合物は１日当たり１〜４回の計画で投与されうる。
【００５７】
ＮＤＭＣは、最適な薬理学的効果を得るために、任意の潜在的な毒性作用やその他の望まれない作用を最小限にする一方、定期試験によって規定される適切な用量で単独使用されうる。加えて、ＮＤＭＣを既知の薬剤を用いた補助療法として使用することで、これらの従来の薬剤において必要とされる用量を低下させ、それによりそれらの副作用を低減することが可能であると考えられている。
【００５８】
一部の実施形態では、ＮＤＭＣは１種もしくは複数種の追加治療薬と組み合わせて投与される。追加治療薬には神経精神薬（ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ  ａｇｅｎｔ）を含めてもよいがこれに限定されない。本明細書において使用される「神経精神薬」は、脳内のニューロンに直接的もしくは間接的に作用するかまたは脳内のニューロンに伝達されるシグナルに作用する化合物または化合物の組み合わせを示す。したがって、神経精神薬は、個人の気分、知覚、痛覚、認知、敏感さ、記憶などの個人の精神に作用しうる。特定の実施形態では、神経精神薬は、モノアミン再取り込み阻害剤、選択的セロトニン再取り込み阻害剤、ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、二重セロトニン／ノルエピネフリン再取り込み阻害剤、ドーパミン作動薬、抗精神病薬、逆セロトニン作動薬、セロトニン拮抗薬、セロトニン２逆アゴニスト、セロトニン２拮抗薬、セロトニン１Ａ作動薬、抗てんかん薬および末梢作用性のムスカリン拮抗薬からなる群から選択されうる。
【００５９】
一部の実施形態では、抗精神病薬は、フェノチアジン、フェニルブチルピペラジン、デベンザピン、ベンジソキシジル、およびリチウム塩からなる群から選択されうる。化合物のフェノチアジン基は、クロルプロマジン（ソラジン（登録商標））、メソリダジン（セレンチル（登録商標））、プロクロルペラジン（コンパジン（登録商標））、およびチオリダジン（メレリル（登録商標））からなる群から選択されうる。化合物のフェニルブチルピペラジングループは、ハロペリドール（ハルドール（登録商標））およびピモジド（オラプ（登録商標））からなる群から選択されうる。化合物のデベンザピングループは、クロザピン（クロザリル（登録商標））、ロキサピン（ロキシタン（登録商標））、オランザピン（ジプレキサ（登録商標））およびクエチアピン（セロクエル（登録商標））からなる群から選択されうる。化合物のベンジソキシジルグループは、レスペリドン（レスペリダル（登録商標））およびジプラシドン（ゲオドン（登録商標））からなる群から選択されうる。リチウム塩は、炭酸リチウムでありうる。一部の実施形態では、抗精神病薬は、アリピプラゾール（アビリファイ）、クロザピン、クロザリル、コンパジン、エトラフォン、ゲオドン、ハルドール、イナプシン、ロキシタン、メレリル、モーバン、ナバン、オランザピン（ジプレキサ）、オラプ、ペルミチル、プロリクシン、フェナガン、クエチアピン（セロクエル）、レグラン、リスパダール、セレンチル、セロクエル、ステラジン、タラクタン、ソラジン、トリアビル、トリラフォン、およびジプレキサ、またはこれらの医薬的に許容可能な塩からなる群から選択されうる。
【００６０】
特定の実施形態では、選択的セロトニン再取り込み阻害剤は、フルオキセチン、フルボキサミン、セルトラリン、パロキセチン、シタロプラム、エスシタロプラム、シブトラミン、デュロキセチン、およびベンラファキシン、ならびにこれらの医薬的に許容可能な塩またはプロドラッグからなる群から選択される。
【００６１】
他の実施形態では、ノルエピネフリン再取り込み阻害剤は、チオニソキセチンおよびレボキセチンからなる群から選択される。
【００６２】
さらなる実施形態では、ドーパミン作動薬は、カベルゴリン、アマンタジン、リスリド、ペルゴリド、ロピニロール、プラミペキソール、およびブロモクリプチンからなる群から選択される。
【００６３】
別の実施形態では、逆セロトニン２Ａ作動薬は、Ｎ−（１−メチルピペリジン−４−イル）−Ｎ−（４−フルオロフェニルメチル）−Ｎ’−（４−（２−メチルプロピルオキシ）フェニルメチル）カルバミド、ＭＤＬ  １００，９０７、ＳＲ−４３６９４Ｂ（エプリバンセリン）、リタンセリン（ｒｔｉａｎｓｅｒｉｎ）、ケタンセリン、ミアンセリン、シナンセリン、ミルタゼピン、シプロヘプタジンおよびシンナリジンである。
【００６４】
別の態様では、本開示は、それを必要とする患者を同定するステップと、該患者に、化学式（Ｉ）および神経精神薬の化合物を含有する医薬組成物の治療有効量を投与するステップとを含む、患者における精神神経疾患を治療する方法に関する。さらに別の態様では、本開示は、それを必要とする患者を同定するステップと、該患者に治療有効量の化学式（Ｉ）の化合物および治療有効量の神経精神薬を投与するステップとを含む、患者における精神神経疾患を治療する方法に関する。
【００６５】
一部の実施形態では、ＮＤＭＣおよび追加治療薬がほぼ同時に投与される。これらの実施形態は、化合物が同一の投与可能な組成物中に含有される場合のものを含む。すなわち、単一の錠剤、ピル、もしくはカプセル、または静脈内注射用の単一の溶液、または単一の飲用溶液、または単一のドラジェ（ｄｒａｇｅｅ）製剤またはパッチが化合物を含有する。これらの実施形態は、各化合物が別々の投与可能な組成物中に含有される場合のものも含むが、患者は別々の組成物をほぼ同時に服用するように指示される。すなわち１個のピルが他のピルの直後に服用されるかまたは１種類の化合物の１回の注入が別の化合物の注入直後になされるなどである。
【００６６】
他の実施形態では、ＮＤＭＣの１つおよび追加的治療化合物が最初に投与され、次いでＮＤＭＣの他の１つおよび追加的治療化合物が２番目に投与される。これらの実施形態では、患者に化合物の１つを含有する組成物が投与され、次いでそのうち、数分後もしくは数時間後に、化合物の他の１つを含有する別の組成物が投与されうる。さらにこれらの実施形態には、患者に化合物の１つを含有する組成物が定期的にまたは連続ベースで投与される一方、他の化合物を含有する組成物が不定期に投与される場合のものが含まれる。
【００６７】
併用投与の一部の実施形態では、ＮＤＭＣが別の治療薬とともに併用投与され、ここでＮＤＭＣを被験者に直接導入することによってＮＤＭＣの少なくとも一部が投与される。したがって例えば、クロザピンをＮＤＭＣと併用投与することが可能であり、ここではクロザピンとＮＤＭＣの両方が被験者に直接投与される。患者に投与されるＮＤＭＣの一部は、クロザピンの代謝によるものであろう。しかし、ＮＤＭＣの別の部分はＮＤＭＣの直接投与によるものであろう。一実施形態では、被験者がＮＤＭＣを経口摂取することによってＮＤＭＣの被験者への直接導入を行うことが可能である。一実施形態では、ＮＤＭＣの被験者への静脈内注射によってＮＤＭＣの被験者への直接導入を行うことが可能である。
【００６８】
種々の方法により、ＮＤＭＣの所定の受容体での機能的な薬理学的活性の定義づけを行うことが可能である。現行の好ましいアッセイは、米国特許第５，７０７，７９８号明細書中に開示された受容体選択および増幅技術（Ｒ−ＳＡＴ）のアッセイであり、同明細書の内容は、本明細書にてその全体が参照により援用される。
【００６９】
種々の方法により、ＮＤＭＣの所定の受容体での機能的な薬理学的活性の定義づけを行うことが可能である。別の現行の好ましいアッセイはＰＩ加水分解アッセイである（１８）。
【００７０】
種々の方法により、ＮＤＭＣが血液脳関門を通過しかつ有意義な生物学的応答を誘発する能力の定義づけを行うことが可能である。現行の好ましいアッセイは、海馬ＭＡＰキナーゼ活性化アッセイである（１９）。
【００７１】
本発明は以下の実施例においてさらに開示され、これらが特許請求する本発明の範囲を限定することを決して意図するものではない。
【実施例】
【００７２】
実施例１：受容体選定および増幅技術
受容体選定および増幅技術（Ｒ−ＳＡＴ）の機能的受容体アッセイを用い（米国特許第５，７０７，７９８号明細書中に本質的に開示され、本明細書においてその全体が参照により援用される）、既知の薬剤（多数のそれらの代謝産物を含む）に関する機能的な薬理学的特性を検討した。これらの実験により、これらの各薬剤における分子プロフィール、またはフィンガープリントが得られている。すべての試験薬の中でＮＤＭＣだけが強力なＭ１アセチルコリン受容体アゴニスト活性を示した。図１は、ヒトＭ１ムスカリン受容体を活性化するクロザピン（塗りつぶした三角形）およびＮ−デスメチルクロザピン（塗りつぶした円形）の濃度応答関係を示す。データは上記のＲ−ＳＡＴアッセイから得られた（２０）。完全ムスカリン受容体作動薬のカルバコールに相対的な活性化率（％）に対する薬剤濃度としてデータをプロットする。Ｖｅｈは賦形剤を示す。
【００７３】
図１に示す如く、クロザピンは高力価を示すが（ｐＥＣ５０が７．２）、ヒトＭ１受容体での固有の有効性は限られている（相対的有効性が２５％未満）。したがってクロザピンは、弱い部分アゴニストとして定義される。部分アゴニストには、完全アゴニストと同様に受容体を刺激するための十分な固有のアゴニスト活性が欠如している。したがって、それらはインビボにおけるアンタゴニストとして作用する。それに対し、ＮＤＭＣはヒトＭ１受容体にて高力価（ｐＥＣ５０が７．２）も示すが、Ｍ１受容体で顕著により高い固有のアゴニスト活性を示し（カルバコールに対する相対的有効性が６５％）、Ｒ−ＳＡＴアッセイでは強力なアゴニストとして作用する。この増強された有効性は、ＮＤＭＣがインビボにおいてアゴニストとして作用し、機能プロフィールがクロザピンにおけるそれとは異なることを示唆している。
【００７４】
ＮＤＭＣがＭ１受容体でアゴニストの有効性が増強されることを示す観察結果を確認するため、ＰＩ加水分解アッセイを行い、図２および表１にその結果を開示する。図２中のデータは（１８）に記載のＰＩアッセイから得られる。図２では、ヒトＭ１ムスカリン受容体を活性化するカルバコール（塗りつぶした正方形）、クロザピン（塗りつぶした三角形）、およびＮ−デスメチルクロザピン（塗りつぶした円形）の濃度応答関係を示す。カウント毎分に対する薬剤濃度として測定された放射活性としてデータをプロットする。
【表１】
2008509147.tif 000005
【００７５】
表１では、効力をｐＥＣ５０値として、効力を完全アゴニストのカルバコールに相対的な有効性として、いずれも±の標準偏差で報告する。「ｎ」は実験的測定値の数を示す。この系では、ＮＤＭＣは完全な有効性（カルバコールに対して６５％を超える相対的有効性）を有し、Ｍ１作動薬として高力価を示す（ｐＥＣ５０＝７．０）。したがって、２つの異なる機能アッセイによると、ＮＤＭＣが以前には評価されなかった、ヒトＭ１ムスカリン性アセチルコリン受容体での強力かつ完全に有効なアゴニスト活性を有することが確認される。ＮＤＭＣにおけるこの著しく正に高まる固有活性は、それがインビボでＭ１受容体作動薬として作用することを示唆している。
【００７６】
他のムスカリン受容体サブタイプにてクロザピンおよびＮＤＭＣを試験した。表２にこれらのデータを開示する。表２中のデータは上記のＲ−ＳＡＴアッセイから得られる（２０）。効力をｐＥＣ５０値として、有効性を完全アゴニストのカルバコールに相対的な有効性として、いずれも±の標準偏差で報告する。Ｎは実験的測定値の数を示す。
【表２】
2008509147.tif 000006
【００７７】
ＮＤＭＣは、クロザピンと比較した場合、５種類のムスカリン受容体サブタイプ全部で固有活性が増強されることを示す。ヒトムスカリン受容体でのＮＤＭＣのプロフィールは、治験中の薬剤であるキサノメリンにて観察されるプロフィールに酷似するが、キサノメリンにはヒトＭ３受容体で有効性が著しく低下するという１つの重要な差異がある。
【００７８】
この分子プロフィールの態様をインビボで確認しかつＮＤＭＣが中枢神経系に接近する能力を評価するのに、ＮＤＭＣを非経口でラットに投与し、Ｍ１受容体に媒介される海馬ＭＡＰキナーゼ（ＭＡＰＫ）活性の活性化を測定し、これを図３に開示する。ＮＤＭＣ治療によってＣＡ１錐体神経内のＭＡＰＫが活性化される。Ｃ５７ＢＬ６マウスを、図３に記載の用量での、賦形剤であるＮ−デスメチルクロザピン、クロザピン、またはＮＤＭＣおよびスコポラミンの（腹腔内への）皮下注射で処理し、次いで免疫組織化学を介して標識化を施した。ＮＤＭＣ治療に伴い、ＣＡ１錐体神経の細胞体および近位樹状突起では、賦形剤治療またはクロザピン治療と比べると、ホスホ−ＭＡＰＫの免疫反応性が増強されることが示された。さらにスコポラミンでは、ＣＡ１領域内でムスカリン受容体の媒介機構を示す、ＮＤＭＣによって誘発されるＭＡＰＫの活性化が低下した。３０ｍｇ／ｋｇの用量で強力な活性化を観察した。これにより、ＮＤＭＣが血液脳関門を通過し、インビボにおいてムスカリン受容体作動薬として機能することが確認される。
【００７９】
実施例２：非臨床でのＮＤＭＣの薬理
既知の生体アミンであるＧ−タンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）の大部分での、ほぼすべての既知の抗精神病薬および多数のそれらの代謝産物に関する包括的、機能的で薬理学的なスクリーニングにより、薬理学的に固有のものとしてＮＤＭＣを同定した。ＮＤＭＣは、Ｄ２ドーパミン受容体のアンタゴニストであり、５ＨＴ２Ａ受容体の強力な逆アゴニストである。しかし、ＮＤＭＣは任意の他の試験化合物とは異なり、強力かつ有効なムスカリン受容体作動薬である。具体的には、ＮＤＭＣはＭ１受容体（Ｋｉ＝５０ｎＭ）およびＭ５受容体（Ｋｉ＝２５ｎＭ）の強力な部分アゴニストである。ＮＤＭＣは、Ｍ２、Ｍ３、およびＭ４受容体のアゴニズムも示すが、この相互作用は他のサブタイプとの相互作用よりも１０倍低い効力を示し、当然ながら、ＮＤＭＣは生理的条件下でＭ３受容体に競合的に拮抗することが可能である。それに対し、クロザピンはＭ１、Ｍ３、およびＭ５受容体の強力な競合的アンタゴニスト、Ｍ２受容体の弱いアゴニスト、ならびにＭ４受容体の強力な部分アゴニストである。さらに、抗精神病薬のオランザピンは、ＮＤＭＣに構造的に関連があり、クロザピンはすべての５つのムスカリン性サブタイプのアンタゴニストである。ハロペリドール、リスペリドン、およびジプラシドンは、最大１μＭの濃度のこれらの受容体のいずれとも相互作用しない。したがって、ムスカリン受容体、特にＭ１およびＭ５受容体でのＮＤＭＣのアゴニスト活性は、抗精神病薬の中では独特である。
【００８０】
ＮＤＭＣは、Ｄ２、５ＨＴ２Ａ、およびムスカリン受容体でのその活性に加え、リガンド結合アッセイにおいて、α１、α２、Ｄ１、Ｈ１、δ２、５ＨＴ１Ａ、５ＨＴ１Ｂ、５ＨＴ３、５ＨＴ６、および５ＨＴ７受容体、ならびにＣａ２＋チャネルに親和性を有する。それは機能的に、５ＨＴ２Ｃ、Ｈ１、およびα１Ａ受容体の強力な競合的アンタゴニストならびに５ＨＴ６Ａおよび５ＨＴ７Ａ受容体の逆アゴニストである。
【００８１】
ＮＤＭＣは、抗精神病活性を予測すると考えられる２つのモデルで経口活性を示す。ＮＤＭＣは、クロザピンのように、マウスにおいて自発活性を低減する用量よりも低いかまたはそれに類似する用量でＭＫ−８０１によって誘発される多動性およびアンフェタミンによって誘発される多動性の双方を軽減する。ＮＤＭＣは、クロザピンやハロペリドールと異なり、マウスにおけるアポモルヒネによって誘発されるよじ登り（ｃｌｉｍｂｉｎｇ）を軽減しない。これはＤ２受容体に対し、これらの他の抗精神病薬と比べてＮＤＭＣの親和性が低下したことを反映している。ＮＤＭＣの投与は海馬のＣＡ１領域内でマイトジェンで活性化されたタンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）の用量依存的な活性化をもたらし、この活性化は非選択的ムスカリン拮抗薬のスコポラミンによって遮断されうる。Ｍ１受容体が海馬のＣＡ１領域内でのＭＡＰＫ活性化を担うムスカリン受容体の主なサブタイプであると仮定すると、この成果はインビボでのＮＤＭＣによるＭ１受容体のアゴニズムについて支持している。クロザピンの投与がＭＡＰＫの活性化を招くことはない。ＮＤＭＣの薬理学的活性に関するさらなる証拠は、ＮＤＭＣの投与によってｃＦＯＳの発現が前頭前野および側坐核では増大するが、線条体では増大しないという観察から得られる。線条体におけるｃＦＯＳ発現の欠如は、ＮＤＭＣが錐体外路への副作用をもたらす可能性が低いことを示唆している。
【００８２】
実施例３：非臨床でのＮＤＭＣの薬物動態および代謝
ラットとイヌにてＮＤＭＣおよびクロザピンの薬物動態について検討した。双方の種にて、ＮＤＭＣの単回用量を経口で（１０ｍｇ／ｋｇ）または静脈内に（１ｍｇ／ｋｇ）投与し、投与後、血液試料を定期的に採取した。データは、ＮＤＭＣの経口バイオアベイラビリティがラットとイヌでそれぞれ２５％と４４％であることを示した。それと比較し、クロザピンの経口バイオアベイラビリティはラットとイヌでそれぞれ１．５％と７％である。したがって、これらのデータはＮＤＭＣがクロザピンよりも優れた経口バイオアベイラビリティを有することを示す。
【００８３】
クロザピンの投与を受けた動物では、相当に高い濃度のＮＤＭＣを検出した。ラットでは、ＣｍａｘでのＮＤＭＣ濃度がそのＣｍａｘでのクロザピン濃度よりも約２０倍高かった。イヌでは、ＮＤＭＣの最高濃度はクロザピンの最高濃度の約１６％であった。これらのデータは、マウス、ウサギ、イヌ、ブタ、サル、およびヒトを含む数種類の種でのＮＤＭＣに対するクロザピンの代謝について実証する公表された試験結果を裏付けるものである。
【００８４】
ラットにおいてＮＤＭＣの脳対血漿（ｂｒａｉｎ−ｔｏ−ｐｌａｓｍａ）比を算出した。同比は、ＮＤＭＣの経口投与の２４０分後には１．０、クロザピンの経口投与の２４０分後には２．６であった。文献から得られるデータを加味すると、これらの結果はＮＤＭＣがＣＮＳ内に分布することを示す。
【００８５】
実施例４：インビトロでのＮＤＭＣの薬理
ＮＤＭＣの５０種類の受容体に対する親和性、イオンチャネル、およびトランスポーターについて、単回の高用量（１０μＭ）で評価した。このスクリーニングにより、ＮＤＭＣによって９０％以上の結合阻害が生じる１６の部位を同定した。これらはα１、α２、Ｄ１、Ｄ２Ｓ、Ｈ１、Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３、δ２、５ＨＴ１Ａ、５ＨＴ１Ｂ、５ＨＴ２Ａ、５ＨＴ３、５ＨＴ６、および５ＨＴ７受容体、ならびにＣａ２＋チャネルであった。これらのアッセイでは、リガンド結合の阻害によってＮＤＭＣのこれらの受容体に対する結合に関する情報が得られるが、それは相互作用の性質を示すものではない。
【００８６】
実施例５：複数のＧ−タンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）に対するＮＤＭＣの機能的スクリーニング
専用の受容体選定および増幅技術（Ｒ−ＳＡＴ；２、３）を用いた広範なＧＰＣＲ機能アッセイにて、ＮＤＭＣの薬理学的プロフィールについての大規模試験を行った。表３では、ＮＤＭＣの機能的な薬理学的活性およびヒトモノアミン作動性受容体サブセットでの主な定型および非定型抗精神病薬について報告する。同受容体ではこれらの薬剤は最高の効力を示す。
【表３】
2008509147.tif 000007
【００８７】
ＮＤＭＣの薬理学的活性は、既存の、臨床的に有効な非定型抗精神病薬のそれと類似していた。ＮＤＭＣは、すべての非定型抗精神病薬の如く、５−ＨＴ２Ａ受容体で高力価、競合的アンタゴニスト活性および逆アゴニスト活性を示した。それはドーパミンＤ２受容体拮抗薬としてクロザピンよりも低い効力を示したことから、より高い５−ＨＴ２Ａ／Ｄ２受容体の効力比を有する。ＮＤＭＣはＨ１およびα１Ａ受容体拮抗薬としてクロザピンよりも低い効力も示したことから、これらの受容体サブタイプによって媒介される、鎮静および起立性低血圧を含む有害な臨床効果が誘発される傾向が低下することが示唆される。公表された報告では、これらのデータと一致して、インビトロにおけるＤ２および５−ＨＴ２Ｃ受容体でのＮＤＭＣの強力な競合的アンタゴニスト活性（コッパマキ  Ｍ（Ｋｏｕｐｐａｍａｅｋｉ  Ｍ．）、シバラヒチ  Ｅ．（Ｓｙｖａｅｌａｈｔｉ  Ｅ．）およびヒエタラ  Ｊ．（Ｈｉｅｔａｌａ  Ｊ．）（１９９３年）「Ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ａｎｄ  Ｎ−ｄｅｓｍｅｔｈｙｌｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ａｒｅ  ｐｏｔｅｎｔ  ５−ＨＴ１Ｃ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ．」  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ、２４５：１７９−１８２頁）、ヒスタミンＨ３受容体での強力な活性の欠如（アルヴェス・ロドリゲス  Ａ．（Ａｌｖｅｓ−Ｒｏｄｒｉｑｕｅｓ  Ａ．）、ルー  Ｒ．（Ｌｅｕｒｓ  Ｒ．）、ウィレムズ  Ｅ．（Ｗｉｌｌｅｍｓ  Ｅ．）およびティマーマン  Ｈ．（Ｔｉｍｍｅｒｍａｎ  Ｈ．）（１９９６年）「Ｂｉｎｄｉｎｇ  ｏｆ  Ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ａｎｄ  ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｈｉｓｔａｍｉｎｅ  Ｈ３  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｉｎ  ｒａｔ  ｂｒａｉｎ  ｃｏｒｔｅｘ．」Ａｒｃｈ  Ｐｈａｒｍ  Ｐｈａｒｍ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ、３２９：４１３−４１６頁；シリッカー  Ｅ．（Ｓｃｈｌｉｃｋｅｒ  Ｅ．）およびマール  Ｉ．（Ｍａｒｒ  Ｉ．）（１９９６年）「Ｔｈｅ  ｍｏｄｅｒａｔｅ  ａｆｆｉｎｉｔｙ  ｏｆ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ａｔ  Ｈ３  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｉｓ  ｎｏｔ  ｓｈａｒｅｄ  ｂｙ  ｉｔｓ  ｔｗｏ  ｍａｊｏｒ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ａｎｄ  ｂｙ  ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｌｙ  ｒｅｌａｔｅｄ  ａｎｄ  ｕｎｒｅｌａｔｅｄ  ａｔｙｐｉｃａｌ  ｎｅｕｒｏｌｅｐｔｉｃｓ．」Ｎａｕｎｙｎ−Ｓｃｈ  Ａｒｃｈ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、３５３：２９０−２９４頁）、ならびにＧＡＢＡＡ受容体との相互作用が極めて弱いこと（ウォン  Ｇ．（Ｗｏｎｇ  Ｇ．）、コッパマキ  Ｍ．（Ｋｏｕｐｐａｍａｅｋｉ  Ｍ．）、ヒエタラ  Ｊ．（Ｈｉｅｔａｌａ  Ｊ．）、ルデンズ  Ｈ（Ｌｕｅｄｄｅｎｓ  Ｈ．）、シバラヒチ  Ｅ（Ｓｙｖａｅｌａｈｔｉ  Ｅ．）およびコルピ  Ｅ．Ｒ．（Ｋｏｒｐｉ  Ｅ．Ｒ．）（１９９６年）「Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ａｎｄ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｎ  ｒａｔ  ｂｒａｉｎ  ＧＡＢＡＡ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．」  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ、３１４：３１９−３２３頁）が示されている。
【００８８】
スクリーニングされた抗精神病薬に関し、ＮＤＭＣおよびクロザピンのみがムスカリン受容体作動薬の特性を有していた（表２；スー  Ｃ（Ｓｕｒ  Ｃ）、マジョルガ  Ｐ．Ｊ．（Ｍａｌｌｏｒｇａ  Ｐ．Ｊ．）、ヴィットマン  Ｍ．（Ｗｉｔｔｍａｎｎ  Ｍ．）、ヤコブセン  Ｍ．Ａ．（Ｊａｃｏｂｓｅｎ  Ｍ．Ａ．）、パスカレッリャ  Ｄ．（Ｐａｓｃａｒｅｌｌａ  Ｄ．）、ウィリアムズ  Ｊ．Ｂ．（Ｗｉｌｌｉａｍｓ  Ｊ．Ｂ．）、ブランディッシュ  Ｐ．Ｅ．（Ｂｒａｎｄｉｓｈ  Ｐ．Ｅ．）、ペティボーン  Ｄ．Ｊ．（Ｐｅｔｔｉｂｏｎｅ  Ｄ．Ｊ．）、スコルニック  Ｅ．Ｍ．（Ｓｃｏｌｎｉｃｋ  Ｅ．Ｍ．）およびコン  Ｐ．Ｊ．（Ｃｏｎｎ  Ｐ．Ｊ．）  （２００３年）  「Ｎ−ｄｅｓｍｅｔｈｙｌｃｌｏｚａｐｉｎｅ，ａｎ  ａｌｌｏｓｔｅｒｉｃ  ａｇｏｎｉｓｔ  ａｔ  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  １  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｐｏｔｅｎｔｉａｔｅｓ  Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ  −Ｄ−ａｓｐａｒｔａｔｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｃｔｉｖｉｔｙ．」ＰＮＡＳ、１００：１３６７４−１３６７９頁）。ＮＤＭＣは、ヒトＭ１およびＭ５受容体での効力の強い部分アゴニストおよびヒトＭ２およびＭ４受容体での効力が低下した完全アゴニストであり（表２）；類似の条件下でこれらの受容体でアンタゴニスト活性の欠如を示した（表１）。統合失調症におけるＭ２およびＭ５アゴニズムの生理的意義は分かっていない。しかし、Ｍ１およびＭ４受容体のアゴニズムは抗精神病薬活性と関連している（バイマスター  Ｆ．Ｐ．（Ｂｙｍａｓｔｅｒ  Ｆ．Ｐ．）、フェルダー  Ｃ．（Ｆｅｌｄｅｒ  Ｃ．）、アームネド  Ｓ．（Ａｈｍｎｅｄ  Ｓ．）およびマッキンジー  Ｄ．（ＭｃＫｉｎｚｉｅ  Ｄ．）（２００２年）「Ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ａｓ  ａ  Ｔａｒｇｅｔ  ｆｏｒ  Ｄｒｕｇｓ  Ｔｒｅａｔｉｎｇ  Ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ．」  Ｃｕｒｒ  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇ  ＣＮＳ  Ｎｅｕｒｏｌ  Ｄｉｓ、１：１６３−１８１頁；フェルダー  Ｃ．Ｃ．（Ｆｅｌｄｅｒ  Ｃ．Ｃ．），バイマスター  Ｆ．Ｐ．（Ｂｙｍａｓｔｅｒ  Ｆ．Ｐ．）、ワード  Ｊ．（Ｗａｒｄ  Ｊ．）およびデラップ  Ｎ．（ＤｅＬａｐｐ  Ｎ．）（２０００年）「Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ  ｆｏｒ  Ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｃｅｎｔｒａｌ  Ｎｅｒｖｏｕｓ  Ｓｙｓｔｅｍ．」Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ、４３：４３３３−４３５３頁）。さらに、Ｍ１受容体のアゴニズムはＮＤＭＣに認知促進活性をもたらす可能性がある（バイマスター  Ｆ．Ｐ．（Ｂｙｍａｓｔｅｒ  Ｆ．Ｐ．）、フェルダー  Ｃ．（Ｆｅｌｄｅｒ  Ｃ．）、アームネド  Ｓ．（Ａｈｍｎｅｄ  Ｓ．）およびマッキンジー  Ｄ．（ＭｃＫｉｎｚｉｅ  Ｄ．）（２００２年）「Ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ａｓ  ａ  Ｔａｒｇｅｔ  ｆｏｒ  Ｄｒｕｇｓ  Ｔｒｅａｔｉｎｇ  Ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ．」  Ｃｕｒｒ  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇ  ＣＮＳ  Ｎｅｕｒｏｌ  Ｄｉｓ、１：１６３−１８１頁）。ＮＤＭＣは、Ｍ３受容体で効力が最低のアゴニスト活性を示し、この部位ではアンタゴニストとして作用する（表３および表４）。ムスカリン性Ｍ３受容体は、著明なアゴニスト活性があれば発汗、眼および胃腸の機能障害を含��治療が限られた副交感神経の副作用が容易にもたらされるように、ヒトにおいて副交感神経の活性化に関するコリン作動性効果を媒介する主な受容体サブタイプである。Ｍ３でのＮＤＭＣのアンタゴニスト活性は、臨床試験において重度の副交感神経模倣作用が観察されないことを示唆している。その他によってムスカリン受容体でのＮＤＭＣの薬理学的活性が観察されている（スル（Ｓｕｒ）ら、ＰＮＡＳ  ２００３年）。
【表４】
2008509147.tif 000008
【００８９】
ムスカリン受容体でのＮＤＭＣの薬理学的プロフィールは、クロザピンのそれとは異なる。クロザピンは、Ｍ１受容体にて強力なアゴニスト活性を示したが、この相互作用の有効性は極めて低く（表４）、クロザピンは、類似する条件下でＭ１受容体の活性化における強力なアンタゴニストであった（表３）。さらにクロザピンは、ＮＤＭＣとは異なり、Ｍ３およびＭ５での強力なアンタゴニズムを示した。クロザピンは、Ｍ２およびＭ４受容体では部分的なアゴニズムを示した。これらのデータは、ＮＤＭＣがインビボでＭ１作動薬として作用する可能性が高い一方で、クロザピンはＭ１アンタゴニストとして作用する可能性が高いことを予測している。
【００９０】
実施例６：スイスマウスでないアルビノマウスを対象としたＭＫ−８０１によって誘発される多動性における自発運動および反転に対するＮＤＭＣの作用
スイスマウスでないアルビノ（ＮＳＡ）成体雄マウスに対し、１、１０、または３０ｍｇ／ｋｇのＮＤＭＣを皮下投与するかまたは経口投与した。皮下投与時および経口投与時のいずれでもＮＤＭＣの１０および３０ｍｇ／ｋｇで自発活性が大幅に低下した。皮下への１０ｍｇ／ｋｇでは、投与の３０分後に最大の低下が得られ、実験期間の１２０分にわたりそれが維持された。このＮＤＭＣの作用は、皮下および経口での３および１０ｍｇ／ｋｇのクロザピンによって見られる自発運動を低下させる作用に類似していた。
【００９１】
臨床上有効な抗精神病薬は、ＭＫ−８０１などの非競合的Ｎ−メチル−Ｄ−アスパルテートアゴニストの行動的影響を遮断しうる。ＮＤＭＣにおける成体雄ＮＳＡマウスでのＭＫ−８０１によって誘発される多動性に対する緩和能を評価し、このアッセイにてその活性をクロザピンの活性と比較した。ＮＤＭＣにより、抗精神病薬様の有効性に一致する、最小有効用量１ｍｇ／ｋｇの皮下投与および１０ｍｇ／ｋｇの経口投与に伴い、ＭＫ−８０１によって誘発される多動性が緩和された。これらの用量は自発運動を低下させた用量よりも少ないかまたはそれと類似しており、これは抗精神病薬様作用を一般的な運動行動上の崩壊と区別可能であることを示唆している。同様に、クロザピンにより、最小有効用量１ｍｇ／ｋｇの皮下投与および３ｍｇ／ｋｇの経口投与に伴い、ＭＫ−８０１によって誘発される多動性が低下した。
【００９２】
実施例７：スイスマウスでないアルビノマウスにおけるアンフェタミンによって誘発される運動行動の反転に対するＮＤＭＣの作用
Ｎ−メチル−Ｄ−アスパルテートアゴニストによって誘発される多動性の緩和と同様、臨床上有効な抗精神病薬によっても齧歯類においてドーパミンによって媒介される多動性が緩和された。したがって、マウスにおけるアンフェタミンによって誘発される多動性は、インビボでの抗精神病薬様の活性に対して一般に用いられるアッセイである。ＮＤＭＣ１０ｍｇ／ｋｇの皮下または経口投与の後、成体雄ＮＳＡマウスではアンフェタミンによって誘発される多動性が緩和された。クロザピンにおける最小有効用量３ｍｇ／ｋｇの経口投与によっても、アンフェタミンによって誘発される多動性が低下した。これらの結果は、ヒトでの抗精神病薬様の有効性を予測している。
【００９３】
実施例８：スイスマウスでないアルビノマウスにおけるアポモルヒネによって誘発されるよじ登りの反転に対するＮＤＭＣの作用
齧歯類におけるドーパミンによって媒介される行動の遮断を評価する別の方法は、マウスにおけるアポモルヒネによって誘発されるよじ登りを緩和することである。直接的なＤ２受容体拮抗薬は、ドーパミン受容体作動薬のアポモルヒネによって誘発されるよじ登りを最も有効に遮断する。ドーパミンＤ２受容体に高親和性を有する神経遮断性の定型抗精神病薬であるハロペリドールにおける０．１ｍｇ／ｋｇの皮下投与により、成体雄ＮＳＡマウスでのアポモルヒネによって誘発されるよじ登りが完全に緩和された。クロザピンにおける最小有効用量１０ｍｇ／ｋｇを皮下投与することによっても、用量依存的にアポモルヒネによって誘発されるよじ登りが低下した。それに対し、ＮＤＭＣにおける最大用量１００ｍｇ／ｋｇの皮下投与により、アポモルヒネによって誘発されるよじ登りが緩和しなかった。これは、クロザピンおよびハロペリドールと比較した場合の、ＮＤＭＣのＤ２受容体に対する親和性の低下を反映しうる。
【００９４】
実施例９：Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおける脳内でのＭＡＰＫ活性化に対するＮＤＭＣの作用
インビボでＮＤＭＣのムスカリン作動薬特性を確認することを目的に、海馬のＣＡ１領域内でのマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の活性化について検討した。Ｃ５７ＢＬ／６マウスにＮＤＭＣを３、１０、３０、および１００ｍｇ／ｋｇの用量で皮下投与した。２時間後に動物を死滅させ、脳全体を取り出し、それらの海馬内のＭＡＰＫ活性に対し免疫検出を施した。ＮＤＭＣの投与により、すべての用量で用量依存的にＭＡＰＫ活性の刺激がもたらされた。それに対し、３０ｍｇ／ｋｇのクロザピンにより、脳のＣＡ１領域内でＭＡＰＫの活性化は生じなかった。非選択的ムスカリン受容体拮抗薬のスコポラミン（０．３ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）によってＮＤＭＣによって誘発されるＭＡＰＫ活性の刺激が遮断され、それによりインビボでＮＤＭＣがムスカリン受容体作動薬として作用することを確認した。インビトロにおいてＭ１受容体が前脳内でのＭＡＰＫの活性化を担うムスカリン受容体の主なサブタイプであることは実証されている（ハミルトン  Ｓ．Ｅ．（Ｈａｍｉｌｔｏｎ  Ｓ．Ｅ．）およびナサンソン  Ｎ．Ｍ．（Ｎａｔｈａｎｓｏｎ  Ｎ．Ｍ．）（２００１年）「Ｔｈｅ  Ｍ１  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｉｓ  ｒｅｑｕｉｒｅｄ  ｆｏｒ  Ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｉｔｏｇｅｎ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  （ＭＡＰ）  Ｋｉｎａｓｅ  ｉｎ  Ｍｕｒｉｎｅ  Ｃｅｒｅｂｒａｌ  Ｃｏｒｔｉｃａｌ  Ｎｅｕｒｏｎｓ．」  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ、２７６：１５８５０−１５８５３頁；バークレー  Ｊ．Ｌ．（Ｂｅｒｋｅｌｅｙ  Ｊ．Ｌ．）、ゴメザ  Ｊ．（Ｇｏｍｅｚａ  Ｊ．）、ウェス  Ｊ．（Ｗｅｓｓ  Ｊ．）、ハミルトン  Ｓ．Ｅ．（Ｈａｍｉｌｔｏｎ  Ｓ．Ｅ．）、ナサンソン  Ｎ．Ｍ．（Ｎａｔｈａｎｓｏｎ  Ｎ．Ｍ．）、レヴィー  Ａ．Ｉ．（Ｌｅｖｅｙ  Ａ．Ｉ．）  （２００１年）  「Ｍ１  Ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  Ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  Ａｃｔｉｖａｔｅ  Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｓｉｇｎａｌ−Ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  Ｋｉｎａｓｅ  ｉｎ  ＣＡ１  Ｐｙｒａｍｉｄａｌ  Ｎｅｕｒａｎｓ  ｉｎ  Ｍｏｕｓｅ  Ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ  Ｓｌｉｃｅｓ．」Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ、１８：５１２−５２４頁；バークレー  Ｊ．Ｌ．（Ｂｅｒｋｅｌｅｙ  Ｊ．Ｌ．）およびレヴィー  Ａ．Ｉ．（Ｌｅｖｅｙ  Ａ．Ｉ．）（２００３年）「Ｃｅｌｌ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｓｉｇｎａｌ−ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  Ｋｉｎａｓｅ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｇ  Ｐｒｏｔｅｉｎ−ｃｏｕｐｌｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｆａｍｉｌｉｅｓ  ｉｎ  Ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ．」Ｍｏｌ  Ｐｈａｒｍ、６３：１２８−１３５頁）。それ故、これらのデータは、インビボでのＮＤＭＣによるムスカリンＭ１受容体のアゴニズムを支持している。
【００９５】
実施例１０：前脳内でのＦｏｓタンパク質の発現に対するデスメチルクロザピンの作用：インビボでのクロザピン代謝産物の生物学的活性
ＮＤＭＣ（デスメチルクロザピン）の薬理学的活性の最初のインビボでの実証は、ラット脳での前初期遺伝子ｃＦＯＳの発現の用量依存的な誘発であった（ヤング  Ｃ．Ｄ．（Ｙｏｕｎｇ  Ｃ．Ｄ．）、メルツァー  Ｈ．Ｙ．（Ｍｅｌｔｚｅｒ  Ｈ．Ｙ．）およびドイチュ  Ａ．Ｙ．（Ｄｅｕｔｃｈ  Ａ．Ｙ．）（１９９７年）「Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｄｅｓｍｅｔｈｙｌｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｏｎ  Ｆｏｓ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｆｏｒｅｂｒａｉｎ：Ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ．」Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍ、１９：９９−１０３頁）。ＮＤＭＣにおける７．５および３０．０ｍｇ／ｋｇの用量を成体雄スプラグドウリー（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ）ラットに皮下投与し、２時間後に動物を殺害し、様々な脳領域由来の均質化組織に対し、ウエスタンブロッティングによるｃＦＯＳの免疫検出を実施した。ＮＤＭＣにより、前頭前野内および側坐核内ではｃＦＯＳの発現が誘発されるに至ったが、線条体内では発現が誘発されることはなく、これらの作用は、クロザピンにおいて観察されたものに対する規模および局所選択性の点で類似していた。ＮＤＭＣで処理された動物の線条体内でのｃＦＯＳ発現の欠如は、ＮＤＭＣがＥＰＳを生じる傾向性が低いことを示しうる。
【００９６】
実施例１１：クロザピンおよびＮ−デスメチルクロザピンにおける、覚醒したスプラグドウリーラットを対象とする静脈内への単回用量または経口での単回用量の投与後における薬物動態学的評価
ラットにおいてクロザピンおよびＮ−デスメチルクロザピン（ＮＤＭＣ）の薬物動態について静脈内投与後および経口投与後に評価した。経口投与後のＣｍａｘ、Ｔｍａｘおよびバイオアベイラビリティ、ならびに静脈内投与後の分布容積（Ｖｓｓ）、末梢血漿半減期（Ｔ１／２）およびクリアランス（ＣＬ）を測定した。静脈内投与と経口投与の双方を行った後、ＮＤＭＣの脳対血漿比も測定した。全部で１８匹の雄スプラグドウリーラットに、経口でクロザピン（Ｎ＝６、１０ｍｇ／ｋｇ）、経口でＮＤＭＣ（Ｎ＝６、１０ｍｇ／ｋｇ）、静脈内にクロザピン（Ｎ＝６、１ｍｇ／ｋｇ）、または静脈内にＮＤＭＣ（Ｎ＝６、１ｍｇ／ｋｇ）を投与し、投与後０〜２４０分の間に定期的に生物分析的分析用の血清試料を得た。動物を安楽死させ、試験群に応じて投与の６０分後もしくは２４０分後に脳および血漿試料を得た。各試料中のＮＤＭＣおよびクロザピンの濃度を測定した。表５〜８にＮＤＭＣの薬物動態学的データを示す。
【表５】
2008509147.tif 000009
【表６】
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【表７】
2008509147.tif 000011
【表８】
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【００９７】
これらのデータは、ＮＤＭＣが経口投与後に胃腸管から速やかに吸収され、３０分経過するまでに５８２ｎｇ／ｍＬのＣｍａｘが得られたことを示している。ＮＤＭＣは、循環からの低いクリアランス、低い分布容積を有し、かつその経口バイオアベイラビリティは約２５％であった。クロザピンは、到達した薬剤濃度のピークが著しく低下し（１０．８ｎｇ／ｍＬ；ＮＤＭＣの場合の１／５０）、高いクリアランスを有し、かつ経口投与後にバイオアベイラビリティが不良となった（１．５％）。これらのデータは、ＮＤＭＣがヒトにおいて経口投与後に許容可能な薬物動態学的特性を示し、当然ながらクロザピンと比べて改善された薬物動態学的特性を示しうることを示唆している。
【００９８】
クロザピンの経口投与後、ＮＤＭＣにおける高血漿濃度が観察され、ＮＤＭＣの最高血漿濃度はクロザピンにおいて観察される場合よりもほぼ２０倍大きかった（１９４ｎｇ／ｍＬ対１０．８ｎｇ／ｍＬ）。その他（ワイグマン  Ｈ．（Ｗｅｉｇｍａｎｎ  Ｈ．）、ヘルター  Ｓ．（Ｈａｅｒｔｅｒ  Ｓ．）、フィッシャー  Ｖ．（Ｆｉｓｃｈｅｒ  Ｖ．）、ダーメン  Ｎ．（Ｄａｈｍｅｎ  Ｎ．）およびヒエムケ  Ｃ．（Ｈｉｅｍｋｅ  Ｃ．）（１９９９年）「Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ａｎｄ  ｄｅｓｍｅｔｈｙｌｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｂｌｏｏｄ  ａｎｄ  ｂｒａｉｎ  ｉｎ  ｒａｔｓ．」Ｅｕｒ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍ、９：２５３−２５６頁；バルデッサリーニ  Ｒ．Ｊ．（Ｂａｌｄｅｓｓａｒｉｎｉ  Ｒ．Ｊ．）、チェントルリーノ  Ｆ．（Ｃｅｎｔｏｒｒｉｎｏ  Ｆ．）、フルード  Ｊ．Ｇ．（Ｆｌｏｏｄ  Ｊ．Ｇ．）、ボルピチェッリ  Ｓ．Ａ．（Ｖｏｌｐｉｃｅｌｌｉ  Ｓ．Ａ．）、ハストン・リオンズ  Ｄ（Ｈｕｓｔｏｎ−Ｌｙｏｎｓ  Ｄ）およびコーヘン  Ｂ．Ｍ．（Ｃｏｈｅｎ  Ｂ．Ｍ．）（１９９３年）「Ｔｉｓｓｕｅ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｒａｔ．」Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍ、９：１１７−１２４頁）により、同様の観察結果が得られている。ワイグマン（Ｗｅｉｇｍａｎｎ）ら（Ｅｕｒ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍ  １９９９年）は、雄スプラグドウリーラットに５用量（２０ｍｇ／ｋｇ）のクロザピンを１．５時間の間隔をおいて経口投与すると、ＮＤＭＣの血漿濃度がクロザピンのそれを最大２．２倍上回ることを示した。別の試験では、様々な（１〜６０ｍｇ／ｋｇ）用量のクロザピンをスプラグドウリーラットに腹腔内投与すると、高濃度に循環するＮＤＭＣが観察された（Ｂａｌｄｅｓｓａｒｉｎｉら；Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍ  １９９３年）。したがって、ＮＤＭＣはラットにおいてクロザピンの経口投与後に形成される主要な化学物質成分である。ＮＤＭＣがラット肝臓の小胞体によって形成される主要なクロザピン代謝産物であることもインビトロで示されている（バン  Ｈ．（Ｂｕｎ  Ｈ．）、ディスディエール  Ｂ．（Ｄｉｓｄｉｅｒ  Ｂ．）、オベルト  Ｃ．（Ａｕｂｅｒｔ  Ｃ．）およびカタリン  Ｊ．（Ｃａｔａｌｉｎ  Ｊ．）（１９９９年）「Ｉｎｔｅｒｓｐｅｃｉｅｓ  ｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  ｄｒｕｇ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｂｙ  ｍｉｃｒｏｓｏｍｅｓ．」  Ｆｕｎｄ  Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍ、１３：５７７−５８１頁）。
【００９９】
上記の薬物動態学的試験には、ＮＤＭＣの脳内への分布に関する初期評価が含まれた。１０ｍｇ／ｋｇのＮＤＭＣのスプラグドウリーラットへの経口投与後、ＮＤＭＣの脳対血漿濃度比は６０分で０．３６±０．１６および２４０分で１．０±０．４であった。さらにクロザピンの経口投与後、ＮＤＭＣにおける脳対血漿比は６０分で０．２６±０．０７および２４０分で２．６±０．８であった。この後者の結果は、クロザピンを雄スプラグドウリーラットに経口投与することで脳内でのＮＤＭＣ濃度が血清中で観察されるものよりも最大で３．９倍高くなったこと（バルデッサリーニ（Ｂａｌｄｅｓｓａｒｉｎｉ）ら；Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍ  １９９３年）や、クロザピン２０、３０、および６０ｍｇ／ｋｇをスプラグドウリーラットに腹腔内投与することで脳内でＮＤＭＣが検出されるに至ったこと（バン（Ｂｕｎ）ら；Ｆｕｎｄ  Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍ  １９９９年）を示す先に公表された知見を裏付ける。これらとともに、インビボでのデータはＮＤＭＣが経口投与後にＣＮＳ内に分布することを明示している。
【０１００】
実施例１２：雄ビーグル犬におけるクロザピンおよびＮ−デスメチルクロザピンのバイオアベイラビリティ評価
静脈内投与後および経口投与後に、イヌにおけるクロザピンおよびＮ−デスメチルクロザピン（ＮＤＭＣ）の薬物動態について評価した。経口投与後のＣｍａｘ、Ｔｍａｘおよびバイオアベイラビリティならびに静脈内投与後の分布容積（Ｖｓｓ）、末端血漿半減期（Ｔ１／２）およびクリアランス（ＣＬ）を測定した。経口投与でクロザピン（Ｎ＝３、１０ｍｇ／ｋｇ）、経口投与でＮＤＭＣ（Ｎ＝３、１０ｍｇ／ｋｇ）、静脈内投与でクロザピン（Ｎ＝３、１ｍｇ／ｋｇ）、または静脈内投与でＮＤＭＣ（Ｎ＝３、１ｍｇ／ｋｇ）を、全部で６匹のビーグル犬に投与した。経口投与の前用量（ｐｒｅ−ｄｏｓｅ）と１０分、３０分、１時間、２時間、３時間、４時間、および６時間後の後用量（ｐｏｓｔ  ｄｏｓｅ）、ならびに静脈内投与の前用量と２分、５分、１０分、３０分、１時間、２時間、３時間、および４時間後で、生物分析的分析用の血清試料を得た。各試料におけるＮＤＭＣおよびクロザピンの濃度を測定した。表９〜１２にＮＤＭＣにおける薬物動態学的データを示す。
【表９】
2008509147.tif 000013
【表１０】
2008509147.tif 000014
【表１１】
2008509147.tif 000015
【表１２】
2008509147.tif 000016
【０１０１】
ＮＤＭＣを経口投与後に胃腸管から吸収させ、３．３時間で２８６．３ｎｇ／ｍＬのＣｍａｘが得られた。ＮＤＭＣにおける循環からのクリアランスは低く、分布容積は低く、かつ経口バイオアベイラビリティは約４４％であった。クロザピンにおける経口バイオアベイラビリティはより小さかった（７％）。これらのデータは、ＮＤＭＣはヒトにおいて経口投与後に許容可能な薬物動態学的特性を有し、当然ながらその薬物動態学的特性がクロザピンと比べて改善される可能性があることを示唆している。
【０１０２】
ＮＤＭＣは、クロザピンの静脈内投与と経口投与の双方において血漿中で容易に検出可能であった。クロザピンの静脈内投与後におけるＮＤＭＣ／クロザピンの平均ＡＵＣ比は０．０５６であり、経口投与後では０．１６１（すなわち１６％）であった。これらのデータは、イヌにおけるインビトロ（バン（Ｂｕｎ）らＦｕｎｄ  Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍ  １９９９年）およびインビボ（モジェ  Ｋ．Ｅ．（Ｍｏｓｉｅｒ  Ｋ．Ｅ．）、ソング  Ｊ．（Ｓｏｎｇ  Ｊ．）、マッケイ  Ｇ．（ＭｃＫａｙ  Ｇ．）、ハバード  Ｊ．Ｗ．（Ｈｕｂｂａｒｄ  Ｊ．Ｗ．）およびファン  Ｊ．（Ｆａｎｇ  Ｊ．）（２００３年）「Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｌｏｚａｐｉｎｅ，ａｎｄ  ｉｔｓ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ，Ｎ−ｄｅｓｍｅｔｈｙｌｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ａｎｄ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  Ｎ−ｏｘｉｄｅ  ｉｎ  ｄｏｇ  ｐｌａｓｍａ  ｕｓｉｎｇ  ｈｉｇｈ−ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．」Ｊ  Ｃｈｒｏｍａｔ  Ｂ、７８３：３７７−３８２頁）でクロザピンのＮ−デスメチルクロザピンに対する代謝を実証した最近の研究を裏付けている。モジェ（Ｍｏｓｉｅｒ）および同僚は、クロザピンのイヌへの経口投与後において、デスメチルクロザピンのＣｍａｘがクロザピンのそれの約２０％（すなわちＮＤＭＣ／クロザピン比が約０．２）であることを示した。初期の試験では、イヌにおいて経口投与後にＮ−デスメチルクロザピンは検出されなかった（ガウチ  Ｒ．（Ｇａｕｃｈ  Ｒ．）およびミカエリス  Ｗ．（Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ  Ｗ．）（１９７０年）「Ｔｈｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｏｆ  ８−ｃｈｌｏｒｏ−１１−（４−ｍｅｔｈｙｌ−１−ｐｉｐｅｒａｚｉｎｙｌ）−５Ｈ−ｄｉｂｅｎｚｏ［ｂ，ｅ］［１，４］ｄｉａｚｅｐｉｎｅ（Ｃｌｏｚａｐｉｎｅ）ｉｎ  ｍｉｃｅ，ｄｏｇｓ，ａｎｄ  ｈｕｍａｎ  ｓｕｂｊｅｃｔｓ．」Ｉｌ  Ｆａｒｍａｃｏ、２６：６６７−６８１頁）が、これは低感度の分析技術に起因している可能性がある。
【０１０３】
実施例１３：クロザピンの固有の臨床効果におけるＮ−デスメチルクロザピンのＭ１ムスカリン受容体のアゴニズムの役割
方法
受容体選定および増幅技術（Ｒ−ＳＡＴ）のアッセイを用い、ドーパミンＤ４、セロトニン５Ａ、およびヒスタミンＨ４受容体以外のすべての既知のモノアミン受容体サブタイプで臨床的に意義のある薬剤に関する分子プロファイリングを行った。つまり、製造者のプロトコルに記載のポリフェクト（Ｐｏｌｙｆｅｃｔ）試薬（キアジェン（Ｑｉａｇｅｎ  Ｉｎｃ．））を使用し、７０〜８０％の集密度で蒔いたＮＩＨ／３Ｔ３細胞に様々な受容体のｃＤＮＡ（９６ウェルプレートの１ウェル当たり１０〜１００ｎｇの受容体および２０ｎｇのβ−Ｇａｌレポーター）をトランスフェクトした。トランスフェクションの１日後、ペニシリン（１００Ｕ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍｌ）および２％のＣｙｔｏ−ＳＦ３を加えたドゥルベッコ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ）製の修飾したイーグル培地内でリガンドを添加した。４〜６日後、培地を吸引排出し、細胞を溶解させ、Ｏ−ニトロフェニル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（ＯＮＰＧ）を添加し、得られる吸光度を分光光度的に測定した。抗精神病薬の最大濃度が１０〜２５マイクロモルで変化する場合、２通りに実行した８ポイントでの濃度応答実験として濃度応答曲線を描き、Ｅｘｃｅｌでのフィットおよびグラフパッドプリズム（Ｇｒａｐｈ  Ｐａｄ  Ｐｒｉｓｍ）を用いてデータを分析した。記録されたＥＣ５０値は他のリガンドの非存在下で受容体から最大半量の応答をもたらすリガンドの濃度を表し、ＩＣ５０値はアゴニストによって誘発される活性の半分を阻害するリガンドの濃度を表す。式Ｋｉ＝ＩＣ５０／{１＋［アゴニスト］／ＥＣ５０アゴニスト}を用い、競合的アンタゴニストのＩＣ５０データをアゴニストの占有に対して調節した。負のログ値（ｐＥＣ５０およびｐＫｉ）としてデータを記録する。シグマ（Ｓｉｇｍａ，Ｉｎｃ．）から入手したＮ−デスメチルクロザピン、およびＡＣＡＤＩＡ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓによって合成されたＮ−デスメチルオランザピンを除き、この試験において利用される薬剤の供給源はワイナー（Ｗｅｉｎｅｒ）ら（２００１年）およびウェレンドルフ（Ｗｅｌｌｅｎｄｏｒｐｈ）ら（２００２年）に記載されている。スクリーニングした一連の化合物は補足情報として見出しうる。
【０１０４】
スパルディング（Ｓｐａｌｄｉｎｇ）ら（２００２年）による記載の如く、ヒトＭ１ムスカリン受容体のｃＤＮＡを安定的にトランスフェクトしたチャイニーズハムスター卵巣細胞に対してＰＩ加水分解アッセイを実施し、２通りに実行した６もしくは８ポイントでの濃度応答実験からデータを得る。
【０１０５】
ＭＡＰキナーゼアッセイでは、スコポラミンの有無にかかわらず賦形剤、クロザピン、もしくはＮ−デスメチルクロザピンの皮下投与により処理し、２時間後に殺害したＣ５７ＢＬ６マウスを利用し、バークレー（Ｂｅｒｋｅｌｅｙ）ら（２００１年）による記載の如く、ホスホ−ＭＡＰＫの免疫反応性についてアッセイした。つまり、６０分経過時に皮下投与された処理を行った後、マウスに１００ｍｌの４％パラホルムアルデヒド、次いで１００ｍｌの１０％スクロースを潅流させた。脳を取り除き、３０％スクロース中で４℃で一晩にわたり凍結防止した。翌日、スライディングミクロトームの上で５０μｍの切片を切断した。切片をすすぎ、３％のＨ２Ｏ２で室度で１０分間処理し、再びすすいだ。１０μｇ／ｍｌのアビジン（ベクター・ラボラトリーズ（Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）  Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ、カリフォルニア州）、０．１％の三重陽子−Ｘおよび４％の正常なヤギ血清（ＮＧＳ）を含有するＰＢＳで切片を１時間遮断した。切片をすすぎ、５０μｇ／ｍｌのビオチン（ベクター・ラボラトリーズ（Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）  Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ、カリフォルニア州）、２％のＮＧＳ、およびホスホ−ＥＲＫ１／２抗体（セルシグナル・テクノロジーズ（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、Ｂｅｖｅｒｌｙ、マサチューセッツ州）を含有するＰＢＳ中、１：２５０の濃度でインキュベートし、４℃で一晩インキュベート状態にした。翌日、切片をすすぎ、２％のＮＧＳおよびビオチン化したヤギ抗−ウサギ（ベクター・ラボラトリーズ（Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）  Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ、カリフォルニア州）を含有するＰＢＳ中に１：１００の濃度、４℃で１時間かけて蒔いた。切片をすすぎ、西洋わさびペルオキシターゼと共役したアビジン−ビオチン複合体（ベクター・ラボラトリーズ（Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）  Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ、カリフォルニア州）中に４℃で１時間かけて蒔いた。切片をすすぎ、ＴＳＡフルオレセインチラミド（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ  ｔｙｒａｍｉｄｅ）中、室温で１０分間インキュベートした。切片を１０ｍＭ  ＣｕＳＯ４で３０分間かけて処理し、ベクタシールド（Ｖｅｃｔａｓｈｉｅｌｄ）封入剤（ベクター・ラボラトリーズ（Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）  Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ、カリフォルニア州）を用いてスライドガラス上に載せた。蛍光顕微鏡を介して切片を可視化し、シオン（Ｓｃｉｏｎ）画像解析ソフトウェア（シオン（Ｓｃｉｏｎ  Ｃｏｒｐ．）  Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ、メリーランド州）によってデジタル画像を解析した。
【０１０６】
従属尺度（ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｍｅａｓｕｒｅ）、用量、年齢、および性別を含む段階的重回帰分析を用い、統合失調症の被験者におけるＮＤＭＣの治療応答への寄与を評価した（ハセガワ（Ｈａｓｅｇａｗａ）ら、１９９３年およびリー（Ｌｅｅ）ら、１９９９年）。用量を固定したことから、症状の重症度、年齢、および用量のベースラインレベルに対して分析結果を調節した。治療開始の６週間後および６か月後、分析物用に選択した血漿試料を得て、これら試料をそれらの時期に得た臨床尺度と関連させ、最終のクロザピン投与の１２時間後に取り出した。分析では１日に少なくとも１００ｍｇのクロザピン投与を受けた被験者のみを含めたが、いくつかの時点ではこれらの被験者に対して使えないデータも一部存在した。抗コリン作動薬との同時治療については、この試料中でベンズトロピンで治療したのは２名の被験者だけであった。これらの２名の被験者からのデータを割愛した場合、結果は異ならなかった（データは示さず）。最後にクロザピンおよびＮＤＭＣの濃度の測定時に、この試験における１０名の患者に対し、ベンゾジアゼピンで治療した。ベンゾジアゼピンがクロザピンの代謝に作用することが報告されている。
【０１０７】
臨床クラスによってグループ分けし、スクリーニングした薬剤には以下のものが含まれる。
【０１０８】
抗精神病薬：アモキサピン、アミスルピリド、アンペロジド、ブロムペリドール、ブタクラモール、クロルプロエタジン、クロルプロマジン、クロルプロチキセン、シス−フルペンチキソール、クロチアピン、クロザピン、ドロペリドール、ファナンセリン、フルフェナジン、フルスピリリン（Ｆｌｕｓｐｉｒｉｌｉｎｅ）、ハロペリドール、ロキサピン、マザペルチン、Ｍ１００９０７、メルペロン、メソリダジン、モリンドン、Ｎ−デスメチルクロザピン、Ｎ−デスメチルオランザピン、オカペリドン、オクトクロセピン（Ｏｃｔｏｃｌｏｔｈｅｐｉｎ）、オランザピン、ペラジン、ペルラピン、ピモジド、ピンパンペロン（Ｐｉｍｐａｍｐｅｒｏｎｅ）、プロマジン、プロチペンジル、クエチアピン、レモキシプリド、リスペリドン、セルチンドール、スピペロン、スルピリド、スルトプリド、テルフルダジン（Ｔｅｌｆｌｕｄａｚｉｎｅ）、チオリダジン、チオチキセン、チアプリド、モペロン、チオスピロン、トランス−フルペンチキソール、トリフルオペラジン、トリフルオペリドール、トリフルプロマジン、およびジプラシドン。
【０１０９】
抗うつ薬／抗不安薬：アセチルトリプトファン、アセチルトリプトファンアミド、アラプロケート（Ａｌａｐｒｏｃａｔｅ）、アルプラゾラン、アミトリプチリン、バルビタール、ブロマゼパム、ブプロプリオン、ブスピロン、クロラール水和物、クロバザム、クロナゼパム、クロミプラミン、クロルジリン、クロルジアゼポキシド、クロルメザノン、コンチニン、コンパジン、デシプラミン、デプレニール、デスメチルジアゼパム、ジアゾキシド、ドクサピン、フルマゼニル、フルニトラゼパム、フルオキセチン、フルラゼパム、フルボキサミン、イミプラミン、インダトラリン、イプロニアジド、マプロチリン、メプロバメート、ミルナシプラム、ミナプリン、ミルタゼピン、モダフィニル、ニトラゼパム、ノミフェンシン、ノルトリプチリン、オキサゼパム、パルギリン、フェネルジン、プラゼパム、プロトリピトリン（Ｐｒｏｔｒｉｐｙｔｌｉｎｅ）、ロリプラム、トラカゾレート、トラニルシプロミン、トラザドン、トリアゾラム、トリヘキサフェンジル（Ｔｒｉｈｅｘａｐｈｅｎｄｙｌ）、トリミプラミン、ヴィロキサジン、ジメリジン、ゾルピデム、およびゾピクロン。
【０１１０】
他のＣＮＳ薬：３ＰＰＰ、５−アミノペンタン酸、５−ヒドロキシＭＤＡ、５−メトキシＤＭＴ、５−メトキシトリプタミン、アセトアミノフェン、アセチルサリチル酸、アルプレネロール（Ａｌｐｒｅｎｅｌｏｌ）、アマンタジン、アミオダロン、ＡＭＰＡ、アポコデイン、アポモルヒネ、アトロピン、バクロフェン、バルペリドン（Ｂａｌｐｅｒｉｄｏｎｅ）、ベンズトロピン、ビククリン、ブラジキニン、ブレチリウム、ＢＲＬ３７３４４、ブロモクリプチン、カンナビジオール、カルバマゼピン（Ｃａｒｂｅｍａｚｅｐｉｎｅ）、カルビドパ、シプロヘプタジン、シラゾリン、Ｄ−アンフェタミン、（Ｄ−Ｓｅｒ２）−ロイエンケファリン−Ｔｈｒ、（Ｌｅｕ５）エンケファリン、Ｄ−フェニルアラニン、ジブカイン、ジクロフェナク、ジヒドロエルゴタミン、ＤＯＩ、ドンペリドン、エバルゾタン、エドロフォニウム、エフェドリン、エトドラク（Ｅｔａｄｏｌａｃ）、エトスクサミド（Ｅｔｈｏｓｕｘａｍｉｄｅ）、フェルバメート、フェンブフェン、ＧＡＢＡ、ガバクサドール（Ｇａｂａｘａｄｏｌ）、ガランタミン、γ−ビニルＧＡＢＡ、ガバペンチン、（−）ＧＭＣ  ＩＩＩ、（＋）ＧＭＣ  ＩＩＩ、ヘロイン、ヒムバシン（Ｈｉｍｂａｃｉｎｅ）、Ｉ−４−ＡＡ、ＩＣＩ２０４４４８、インドプロフェン、イソグバシン、ケタミン、ケタプロフェン（Ｋｅｔａｐｒｏｆｅｎ）、ラベタロール、ラモトリジン、レバロルファン、リドカイン、リスリド、Ｌ−７４５−８７０、メラトニン、メトクロプロミド、メマンチン、メスカリン、ナフトピジル、ナルブフィン、Ｎ−アリルＳＫＦ３８３９３、ナロキソン、ナルトレキソン、ナルトリンドール、ネオスチグミン、ニコチン、ニペコチン酸、Ｎ−メチル  ＩＣＩ  １１８−５５１、Ｎ−メチルドーパミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルＭＤＡ、ノルアポモルヒネ、ノルコデイン、ノルフェンフルラミン（Ｎｏｒｆｅｎｆｕｌｒａｍｉｎｅ）、ノルメタゾシン、オキセタジン、ペモリン、ペルゴリド、ＰＣＰ、ファクロフェン、フェナセチン、フェンテラミン（Ｐｈｅｎｔｅｒａｍｉｎｅ）、フェノキシベンズアミン、フェニトイン、フィゾスチグミン、Ｐ−ヨードクロニジン（Ｉｏｄｏｃｌｏｎｉｄｉｎｅ）、ピレンゼピン、プリロカイン、プリモドン（Ｐｒｉｍｏｄｏｎｅ）、プロカイン、プロクロルペラジン、プロプラノロール、偽エフェドリン、キンピロール、ラクロプライド、ラウウォルシン、レセルピン、リムカゾール、ＲＯ−０５−３６６３、ＲＳ１００３２９、ＲＸ８２１００２、サクロフェン、サリチルアミド、ＳＣＨ１２６７９、ＳＣＨ２３３９０、スコポラミン、ＳＫＦ８１２９７、ＳＫＦ３８３９３、ＳＫＦ８２９４８、ＳＫＦ８２９５７、ＳＫＦ８３５６６、ＳＲ１４１７１６Ａ、ＳＲ１４４５２８、サクシニルコリン、テノキシカム、テルグリド、テトラカイン、トラゾリン、トロピカミド、ＵＫ１４３０４、バルプロエート、ビガバトリン、ＷＩＮ５５２１２−２、キシラジン、ヨヒンビン、およびゾメピラク。
【０１１１】
モノアミン作動薬：７−ＯＨ−ＤＰＡＴ、８−０Ｈ−ＤＰＡＴ、αメチルセロトニン、アレコリン、アステミゾール、ベタネコール、カルバコール、ＣＧＳ  １２０６６Ａ、シナンセリン、クロルフェニラミン、シメチジン、クロベンプロピット、ＣＰＰ、ジヒドロエルゴクリスチン、ジマプリット、ジフェンヒドラミン、ドキシラミン、エルトプラジン、ファモチジン、ヒスタミン、イメタイト、イソマルタン（Ｉｓｏｍａｌｔａｎｅ）、ケタンセリン、ロペラミド、Ｌ−トリプトファン、ＬＹ５３８５７、ｍＣＰＰ、メスルエルジン（Ｍｅｓｕｌｅｒｇｉｎｅ）、メテルゴリン、メテルギン、メチオテピン、メチセルギド、メキサミン（Ｍｅｘａｍｉｎｅ）、ミアンセリン、ＭＫ  ２１２、メピラミン、フェニラミン、フェニルビグアニド、ピメチキセン、ピペラジン、ピレンピロン（Ｐｉｒｅｎｐｉｒｏｎｅ）、プラゾシン、プロメタジン、ピリラミン、キアパジン（Ｑｕｉａｐａｚｉｎｅ）、ラニチジン、リタンセリン、ＳＢ２０４７４１、ＳＢ２０６５５３、セロトニン、スピロキサトリン、スミトリプタン、チオペラミド、トリペレナミン、トリプロリジン、およびＷＢ４１０１。
【０１１２】
心臓血管薬：アセタゾラミド、アデノシン、アルブテロール、アテノロール、アミロリド、アムリノン、ベプリジル、カフェイン、カプトプリル（Ｃａｔｏｐｒｉｌ）、ＣＧＳ−１５９４３、ＣＧＳ−２１６８０、ＣＧＰ−１２１７７Ａ、クロロチアジド、クロニジン、デブリソキン、ジギトキシン、ジゴキシン、ジルチアゼム、ジピリダモール、ジソピラミド、ドブタミン、ドキサゾシン、ＤＰＣＰＸ、エピネフリン、エナラプリル、フルナリジン、フロセミド、グアナベンズ、グアネチジン、ヒドララジン、ヒドロクロロチアジド、イソプロテレノール、イソソルビド、リドカイン、リシノプリル（Ｌｉｎｉｓｏｐｒｉｌ）、メタプロテレノール、メトキサミン、メトリフジル、メトラゾン、メトプロロール、ミドドリン、ミノキシジル、Ｎ−アセチルポカイナミド（Ａｃｅｔｈｙｌｐｏｃａｉｎａｍｉｄｅ）、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニトレンジピン、ノルエピネフリン、ニリドリン、オキシメタゾリン、パラキサンチン、ペントキシフィリン、フェントラミン、ピナシジル、ピンドロール、プロカインアミド、プロプラナロール（Ｐｒｏｐｒａｎａｌｏｌ）、キニジン、スピロノラクトン、テオフィリン、テオイフィリン（Ｔｈｅｏｙｐｈｙｌｌｉｎｅ）１−３、チモロール、トリアムテレン、ウラピジル、ベラパミル、およびワルファリン。
【０１１３】
他の全身薬：アシクロビル、アデフェニン（Ａｄｅｐｈｅｎｉｎｅ）、アルプリノール（Ａｌｌｕｐｕｒｉｎｏｌ）、アモジアキン、６−ブロモ−ＡＰＢ、アルテミシニン、アザチオプリン、アジスロマイシン、カンフル、カプサイチン、カルベタペンタン、カリソプロドール、セフォタキシム、シンコニジン、クロラムフェニコール、クロロキン、クロルプロパミド、クロルゾキサゾン、クラリスロマイシン、クロフィリウム、クロトリマゾール、シクロベンザプリン、Ｄ−シクロセリン、ダナゾール、ダントロレン、デキストロメトルファン、ジメタジオン、ドロプロピジン、Ｅ−カプサイチン、エドクスジン、エチニメート（Ｅｔｈｉｎｉｍａｔｅ）、フィペキシド、フルコナゾール、ホスカルネット、ガラミン、グリベンクラミド、グリピザイド、ヒペリシン、イブプロフェン、イフェンプロジル、インドメタシン、イソブチルメチルキサンチン、カイニン酸、ケトコナゾール、レボルファノール、リノピリジン、マジンドール、メクリジン、メフェクサミド（Ｍｅｆｅｘａｍｉｄｅ）、メフロキン、メフェネシン、メスベベリン（Ｍｅｓｂｅｖｅｒｉｎｅ）、メトカルバモール、メトクロプラミド、メトロニダゾール、ＭＫ８０１、Ｎ−アミノヘキシル−５−クロロナフタレン−１−スルホンアミド、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸、ＮＣＳ３８２、ネオフェスペリジン、ニクソキセチン（Ｎｉｘｏｘｅｔｉｎｅ）、ノカピン（Ｎｏｃａｐｉｎｅ）、オクトパミン、オメプラゾール、オルフェナドリン、オキシフェンブタゾン、パパベリン、ペニシラミン、ペンタミジン、フェナセミド、ピクロトキシン、ピトラゼピン、ピラセタム、ピロキシカム、プリマキン、プロベネシド、ピリメタミン、キニーネ、リトドリン、サッカリン、スリンダク、スラミン、ＳＢ  ２１８７９５、サリドマイド、チロロン、トリメプラジン、トラザミド、トルブタミド、トルペリゾン、ウリジン、ビダラビン、ザレプロン、およびジドブジン。
【０１１４】
結果および考察
哺乳類細胞をベースとする機能アッセイにおける受容体選定および増幅技術（Ｒ−ＳＡＴ）を用い、４６２種類の臨床的に関連した薬剤のライブラリにおいて、３６種類の既知のヒトモノアミン性Ｇ−タンパク質共役受容体のうちの３３種類の機能活性についてプロファイリングを行った。表１３は、最も強力な活性が観察される受容体に対する代表的な抗精神病薬に関するデータを図示する。１３種類のヒトモノアミン受容体サブタイプでの５種類の代表的な抗精神病薬およびクロザピン代謝産物のＮ−デスメチルクロザピン（ＮＤＭＣ）における効力データを示す。競合的アンタゴニスト試験におけるｐＫｉ値として効力データを報告する一方、ｐＥＣ５０値として逆アゴニストのデータを示す。これら双方は３〜８種類の別々の測定値の±の標準誤差から得られる。表１４にムスカリン受容体作動薬の効力を報告する場合、アスタリスク（＊）はアゴニスト活性の存在について示す。ジプラシドンは、ヒト５−ＨＴ１Ａ受容体でわずかであるが検出可能なアゴニストの有効性を示し（８−ＯＨ−ＤＰＡＴに相対的に３０％未満）、かつ競合的アンタゴニストとしてアッセイされる場合にはＫｉ＞１マイクロモルを示す。ＮＤＭＣ−Ｎ−デスメチルクロザピン、５−ＨＴ−セロトニン、Ｈ−ヒスタミン、Ｍ−ムスカリン、Ｄ−ドーパミン、およびα−αアドレナリン性、ならびに最大１マイクロモルの濃度で有意でないアンタゴニストまたは逆アゴニスト活性として定義されるｎｒ−無応答といった略称が用いられる。
【表１３】
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【０１１５】
低い５ＨＴ２Ａ／Ｄ２比を示す定型薬および高い同比を示す非定型薬によるＤ２受容体の競合的アンタゴニズムおよび５−ＨＴ２Ａ受容体の逆アゴニズムは、このクラス全体でほぼ均一であった（メルツァー（Ｍｅｌｔｚｅｒ）ら、１９８９年およびワイナー（Ｗｅｉｎｅｒ）ら、２００１年）。クロザピンおよびオランザピンが特に高力価を示す場合、Ｈ１受容体の逆アゴニズムがよく観察された（ワイナー（Ｗｅｉｎｅｒ）ら、２００１年）。多数、特にリスペリドンが５−ＨＴ７受容体で強力な逆アゴニスト活性を示す一方、多数の化合物がα１−アドレナリン受容体でアンタゴニスト活性を示し、強力な５−ＨＴ６活性を示す薬剤はほとんどなかった。クロザピン、オランザピン、および多数の定型薬（例えばチオリダジン、データは示さず）が強力なムスカリン受容体のアンタゴニスト特性を有することが見出された。重要なことに、クロザピンを他のすべての薬剤と区別する単一のアンタゴニスト活性はなかった。
【０１１６】
これらの化合物が広範なアンタゴニスト活性を示したことに対し、アゴニスト活性を有する薬剤は極めて少なかった。図４Ａは、ヒトＭ１ムスカリン性アセチルコリン受容体でのこの化合物ライブラリにおける機能アゴニストのスクリーニング結果を示す。同定したのは、クロザピンの主要な代謝産物である、既知のムスカリン受容体作動薬のアレコリン、カルバコール、モペロンおよびＮ−デスメチルクロザピン（ＮＤＭＣ）という４種類の化合物のみであった（ガウチ（Ｇａｕｃｈ）およびミカエリス（Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ）、１９７１年）。モペロンは極めて低い効力（ＥＣ５０＞１マイクロモル）の相互作用を示すに過ぎなかった。それに対し、ＮＤＭＣはこの試験において（カルバコールに相対的に）８０％の有効性で１００ｎＭのＥＣ５０を示した。さらに、第２の機能アッセイであるＰＩ加水分解においてこの結果を確認した。図４Ｂに示される如く、このアッセイではクロザピンが示すアゴニストの有効性が限定されることで正確な効力の測定が妨げられる一方、ＮＤＭＣは、高力価（９３±２２ｎＭ、ｎ＝３）およびカルバコールと比べてより高いアゴニストの有効性（５６±８％、ｎ＝３）を示した。実際、カルバコールに対し、競合的アンタゴニスト活性についてアッセイする場合、クロザピンがアンタゴニストとして作用する一方、ＮＤＭＣは、Ｒ−ＳＡＴにおいてＭ１受容体での競合的アンタゴニストとしてＮＤＭＣを試験する場合に観察される拮抗性の応答の欠如に一致して（表１３）、カルバコールによって誘発されるＰＩ加水分解を部分的に無効にしたに過ぎなかった（図４Ｃ）。最後に、アトロピンとクロザピンの双方によってＮＤＭＣのアゴニスト活性を遮断した（図４Ｄ）。これらの結果はＮＤＭＣが強力かつ有効なＭ１受容体作動薬であることを裏付け、これによりＮＤＭＣがクロザピンのＭ１受容体のアンタゴニスト特性と区別される。
【０１１７】
本発明者らは、複数のインビトロでの機能アッセイにおいてＮＤＭＣのヒトＭ１受容体でのアゴニスト活性を示しており、次いでＲ−ＳＡＴを用い、５種類全部のヒトムスカリン受容体サブタイプでの、カルバコール、クロザピン、ＮＤＭＣ、オランザピン、主なオランザピン代謝産物のＮ−デスメチルオランザピン、およびムスカリン作動薬のキサノメリンに対するプロファイリングを行った（シャノン（Ｓｈａｎｎｏｎ）ら、１９９４年）（表１４）。
【表１４】
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【０１１８】
クロザピンは、Ｍ１受容体で極めて弱い部分アゴニスト、Ｍ２およびＭ４受容体ではより有効なアゴニストであり、かつＭ３およびＭ５受容体ではアゴニスト活性が欠如することが判明した。ＮＤＭＣは、全部で５種類のヒトムスカリン受容体と高力価の相互作用も示したが、クロザピンと比較した場合、Ｍ１、Ｍ４、およびＭ５受容体ではアゴニストの有効性が増強された（表１４）。それに対し、オランザピンおよびＮ−デスメチルオランザピンはいずれも、ヒトムスカリン受容体でアゴニスト活性が欠如したクロザピンおよびＮＤＭＣと構造的に関連した。興味深いことに、キサノメリンは、ムスカリン受容体特性を示し、ＮＤＭＣの場合に観察されるそれと類似し、その注目すべき例外としてＭ３受容体でのより高いアゴニストの有効性が挙げられる。ヒトムスカリン受容体サブタイプでのクロザピン、ＮＤＭＣ、およびキサノメリンのアゴニスト活性は、試験対象のすべての神経精神薬の中で独特である（図４、ならびに表１３および表１４）。
【０１１９】
本発明者らは、ＮＤＭＣにおける特にムスカリン受容体のアゴニズム、およびＭ１受容体のアゴニズムがクロザピンによる薬物療法の間にインビボで得られることを見出した。クロザピンおよびＮＤＭＣにおける、マウス海馬のＣＡ１領域でのマイトジェンで活性化されたタンパク質キナーゼ（ＭＡＰキナーゼ）のリン酸化、すなわちＭ１受容体の活性化に作用することが判明している応答に対する増強能を試験した（バークレー（Ｂｅｒｋｅｌｅｙ）ら、２００１年）。図５に示される如く、賦形剤（図５Ａ）、クロザピン（図５Ｂ）、またはスコポラミン単独（データは示さず）の皮下投与では、海馬ＭＡＰキナーゼのリン酸化が刺激されることはない。それに対し、ＮＤＭＣは、用量依存的に海馬ニューロンにおけるＭＡＰキナーゼのリン酸化（図５Ｃ、５Ｄ、および５Ｅ）、すなわちスコポラミンによる前処理によって遮断される作用（図５Ｆ）を誘発した。この作用の定量により、ＮＤＭＣの３０ｍｇ／ｋｇ以上の用量でＭ１受容体の統計的に有意な活性化が示される（図６）。クロザピンは、これらの実験条件下でアゴニストとして作用することはなく、マウスへの急性投与後のＮＤＭＣに対する不十分な代謝またはインビトロでの試験において実証されたＭ１受容体での直接的なアンタゴニスト作用のいずれかを示す可能性が高い。これらのデータによると、ＮＤＭＣがインビボにおいて血液脳関門を通過しかつ海馬のＭ１受容体を活性化させることが確認される。
【０１２０】
中枢ムスカリン受容体のアンタゴニズムが抗精神病薬によって誘発されたＥＰＳを緩和可能であることが長い間理解されている（ミラー（Ｍｉｌｌｅｒ）およびハイリー（Ｈｉｌｅｙ）、１９７４年）。抗精神病薬の抗−ムスカリン性に関する初期の検討では、クロザピンの齧歯類脳内のこれらの受容体に対する高力価が規定され、ムスカリン受容体のアンタゴニズムとＥＰＳを生じる傾向との間の逆相関が解明された（スナイダー（Ｓｎｙｄｅｒ）ら、１９７４年）。５種類のムスカリン性アセチルコリン受容体サブタイプの解明後（ボナー（Ｂｏｎｎｅｒ）ら、１９８７年）、クロザピンが強力な競合的アンタゴニストとして示された（ボルデン（Ｂｏｌｄｅｎ）ら、１９９１年）。それに続き、様々な細胞系における機能研究では、本明細書にて報告された結果に一致して、クロザピンはＭ２およびＭ４受容体で顕著なアゴニスト活性、およびＭ１受容体で低いアゴニストの有効性を有することが立証された（ゾーン（Ｚｏｒｎ）ら、１９９４年およびオリアナス（Ｏｌｉａｎａｓ）ら、１９９９年）。ヒトでは、クロザピンは２種類の主要な代謝産物であるＮＤＭＣおよびクロザピン−Ｎ−オキシドを有する（ガウチ（Ｇａｕｃｈ）およびミカエリス（Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ）、１９７１年）。安定状態での投与後、ＮＤＭＣは、クロザピンにおいて観察される濃度の２０〜１５０％の範囲の、６０〜８０％の平均値を有する濃度にて検出可能な部分全体のうちの大部分を表す（ボンデッソン（Ｂｏｎｄｅｓｓｏｎ）およびリンドストーム（Ｌｉｎｄｓｔｒｏｍ）、１９８８年およびペリー（Ｐｅｒｒｙ）ら、１９９１年）。ＮＤＭＣが活性代謝産物であることは、現行のデータに加え、Ｄ１、Ｄ２、および５−ＨＴ２Ｃ受容体の競合的アンタゴニスト活性について記録した先行技術（コッパマキ（Ｋｕｏｐｐａｍａｋｉ）ら、１９９３年）、ならびにＭ１受容体のアゴニスト活性に関する最近の報告（スー（Ｓｕｒ）ら、２００３年）によって支持される。それに対し、他の主要なクロザピン代謝産物のクロザピン−Ｎ−オキシドは、ヒトモノアミン受容体できわめて低い効力（ｐＫＩの効力＜６．０）の機能活性を示すに過ぎない（データは示さず）。齧歯類においてＮＤＭＣが様々な程度で脳を通過することが報告されている一方（バルデッサリーニ（Ｂａｌｄｅｓｓａｒｉｎｉ）ら、１９９３年およびワイグマン（Ｗｅｉｇｍａｎｎ）ら、１９９９年）、本結果、全身投与されたＮＤＭＣが齧歯類の脳においてｃＦＯＳの発現を活性化するという観察（ヤング（Ｙｏｕｎｇ）ら、１９９８年）、およびクロザピンの非経口的投与後におけるヒト脳脊髄液中でのＮＤＭＣの検出（ノルディン（Ｎｏｒｄｉｎ）ら、１９９５年）は、ＮＤＭＣが脳への浸透剤でありかつ中枢作用性があることを示す。
【０１２１】
本発明者らは、クロザピンがその主要な代謝産物のＮＤＭＣによって作用し、インビボで直接作用性のムスカリン受容体作動薬として機能することを発見している。クロザピンを用いた薬物療法の間、ＮＤＭＣの作動薬作用は親化合物のアンタゴニスト作用によって緩和される。したがって、高いＮＤＭＣ濃度および特に高いＮＤＭＣ／クロザピン比は、質量作用およびアゴニスト／アンタゴニスト混合試験による予測の如く、ムスカリン受容体でのアゴニストの有効性を増強する（ブラウナー（Ｂｒａｕｎｅｒ）−オズボーン（Ｏｓｂｏｒｎｅ）ら、１９９６年）。臨床データはこの概念を支持する。クロザピン治療には通常、従来のムスカリン拮抗薬に共通の、口渇、かすみ目、および尿貯留といった従来の抗コリン作動性の副作用がないだけでなく、それはその流涎症を頻繁に発症させる能力（バルデッサリーニ（Ｂａｌｄｅｓｓａｒｉｎｉ）およびフランケンブルグ（Ｆｒａｎｋｅｎｂｕｒｇ）、１９９１年）や、ムスカリン拮抗薬のピレンゼピンによって遮断可能な作用（フリッツェ（Ｆｒｉｔｚｅ）およびエリガー（Ｅｌｌｉｇｅｒ）、１９９５年）において独特である。したがって、ＮＤＭＣにおけるムスカリン受容体アゴニスト活性はこの末梢作用を媒介しやすく、関連のムスカリン受容体サブタイプはまだ知られていない一方、Ｍ３とともに受容体サブタイプが関与している（バイマスター（Ｂｙｍａｓｔｅｒ）ら、２００３年）。
【０１２２】
本明細書において報告されるＮＤＭＣのムスカリン作動薬特性は、クロザピンによる治療に固有の中枢作用の一部をなす。複数系統の証拠がアセチルコリンエステラーゼ阻害剤および直接作用性のムスカリン受容体作動薬の臨床効果を含む、中枢性のコリン作動性神経伝達を増強する認知促進（ｐｒｏ−ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ）効果を支持する（デイビス（Ｄａｖｉｓ）ら、１９９３年）。難治性統合失調症の治療における高用量のクロザピン療法は、実際には脳内のＮＤＭＣ濃度を上昇させることで、クロザピンおよびＮＤＭＣが有するさらに効力が低下した受容体相互作用を動員するのではなく、特にＭ１受容体を刺激する中枢性のムスカリン受容体アゴニスト活性を得るのに役立ちうる（表１３）。したがって、ＮＤＭＣ／クロザピン比は、絶対クロザピン濃度よりも、特に認知を対象とする、クロザピンに対する治療応答に関してより優れた予測因子である。
【０１２３】
５９名の神経遮断抵抗性患者（ハセガワ（Ｈａｓｅｇａｗａ）ら、１９９３年）および統合失調症を患う３３名の神経遮断応答性患者（リー（Ｌｅｅ）ら、１９９９年）を含めた２つの臨床試験の一環としてプロスペクティブに集められた、クロザピンおよびＮＤＭＣの血漿濃度ならびに臨床応答に関するデータについて再分析を行った。標準的基準によって治療抵抗性の有無で患者を分類し（ケーン（Ｋａｎｅ）ら、１９８８年）、血漿中薬物濃度に対して盲検化した訓練を受けた評価者によって臨床評価および神経心理検査スコアを得た。表１５Ａに、治療の６週間後および６か月後におけるクロザピンの平均１日用量、ならびにクロザピンおよびＮＤＭＣの血清中濃度、およびＮＤＭＣ／クロザピン比を報告する。
【表１５】
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【表１６】
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【０１２４】
クロザピンによって精神病理および認知が改善するのに６か月以上かかる可能性があることから両方の時点を分析した（ハガー（Ｈａｇｇｅｒ）ら、１９９３年）。患者９２名のうちの１３名（１４．１％）が有するＮＤＭＣ／クロザピン比は１以上であった。これら１３名の患者における最高比率は１．７７であり中央値は１．０５であった。クロザピン濃度とＮＤＭＣ濃度の間のスピアマンの順位相関は、６週間および６か月でそれぞれ０．８２および０．８９であった（Ｐ＝０．０００１）。６週間および６か月でのＮＤＭＣ／クロザピン比の間の相関は０．９２（Ｐ＝０．０００１）であり、これは被験者内部におけるＮＤＭＣ／クロザピン比がかなり安定化していることを示した。重要なことに、神経遮断抵抗性でも神経遮断応答性でもない患者において、用量とＮＤＭＣ／クロザピン比にはいずれの時点（ｒｈｏ＜０．１０）でも有意な相関がなかった。
【０１２５】
段階的な重回帰を利用し、従属尺度、用量、年齢、および性別のベースラインレベルを含むこれらの尺度すべてがクロザピンに対する応答性を有意に予測することが示されていることから、同尺度の各々から転帰の最良の予測因子を決定した（表１５Ｂ）。
【０１２６】
すべての試験モデルにおいて、従属尺度のベースラインレベルにより、モデル中の分散量の最大占有率が予測された。ＮＤＭＣ／クロザピン比は、応答において２番目に頻出する予測因子であり、すべてが望ましい方向にあるモデルの８／２４（３３．３％）で有意に予測される応答の比でかつ高くなれば転帰が良くなる比であった。この結果は、クロザピン濃度単独、ＮＤＭＣ濃度単独、またはそれらの総計に関する予測力の欠如とは対照的である。例外は、ＮＤＭＣ濃度のみの上昇により、クオリティ・オブ・ライフ尺度のうちの２つの下位尺度においてより顕著な改善が予測される点であった（ハインリッヒ（Ｈｅｉｎｒｉｃｈｓ）ら、１９８４年）（データは示さず）。表１５Ｂに示すように、ＮＤＭＣ／クロザピン比の上昇により、認知に関する複数の尺度、ならびに陰性症状と比べて認知への関連性が大きいことが示唆されている、陰性症状−注意の評価（Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｎｅｇａｔｉｖｅ  Ｓｙｍｐｔｏｍｓ−Ａｔｔｅｎｔｉｏｎ）の下位尺度についての尺度における改善が予測された。同比では、認知状態に依存することが示されているインストルメンタル・ロール・ファンクション（Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌ  Ｒｏｌｅ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ）因子、および認知と相関することが見出されている陰性症状を含むクオリティ・オブ・ライフ−全体尺度における改善も予測された（グリーン（Ｇｒｅｅｎ）、１９９６年）。該比では、クロザピン治療による妄想における改善も予測されたが幻覚の場合には予測されなかった。表１５Ｂ中のどのモデルの予測にも用量が寄与することはなかった。用量はクロザピンおよびＮＤＭＣの血漿濃度（Ｐ＝０．０１〜０．００１）と有意に相関するが、上記の如くＮＤＭＣ／クロザピン比とは相関しない。これは、クロザピンおよびＮＤＭＣの絶対濃度が応答者および非応答者の同定において重要である一方（ファブラッツォ（Ｆａｂｒａｚｚｏ）ら、２００２年）、従属尺度のベースラインレベルがモデルに含められる場合にはそれらの比ほど重要ではない点についてさらなる証拠をもたらす。大規模コホートにおいてさらなる分析が必要であるが、この分析ならびに最近の報告（フレイジャー（Ｆｒａｚｉｅｒ）ら、２００３年およびマウリ（Ｍａｕｒｉ）ら、２００３年）のすべてにおいて、ＮＤＭＣ／クロザピン比が、クロザピン濃度単独よりも優れた、クロザピンに対する臨床応答における予測因子であることが示唆され、かつＮＤＭＣがクロザピン作用の重大なメディエーターであるという仮説が支持されている。
【０１２７】
ＮＤＭＣのムスカリン受容体作動薬特性は、陽性症状に対するクロザピン治療の有効性にも寄与する。高いＮＤＭＣ／クロザピン比では、上記の如く妄想への応答が予測されるだけでなく、ムスカリン受容体作動薬およびドーパミンＤ２受容体拮抗薬の中枢作用の間にいくつかの類似点があるという観察からさらなる支持が得られる（ファイファー（Ｐｆｅｉｆｆｅｒ）およびジェニー（Ｊｅｎｎｅｙ）、１９５７年ならびにミルツァ（Ｍｉｒｚａ）ら、２００３年）。例えば、５種類のムスカリン受容体サブタイプの各々の標的の欠失を有するマウスを用いた行動の薬理学的実験によると、Ｍ１受容体がＤＡによって媒介される行動における中心的役割を担うことが示されている（ガーバー（Ｇｅｒｂｅｒ）ら、２００１年）。さらに、キサノメリン（Ｍ１およびＭ４受容体に対する一部の選択性を示す）はアンフェタミンによって誘発される運動を阻害する（シャノン（Ｓｈａｎｎｏｎ）ら、２０００年）。キサノメリンは、アルツハイマー病患者における幻覚症および攻撃性性を軽減することが臨床的に見出され（ボディック（Ｂｏｄｉｃｋ）ら、１９９７年）、最近行われた統合失調症に対する小規模第２相試験において陽性と陰性の両症状に対して活性を示すことが示されている（シェハル（Ｓｃｈｅｋｈａｒ）ら、未公表データ）。
【０１２８】
中枢性のドーパミン性およびムスカリン性コリン作動系が機能的に相関することは周知である（ミラー（Ｍｉｌｌｅｒ）およびハイリー（Ｈｉｌｅｙ）、１９７４年）。クロザピンのムスカリンアンタゴニスト特性はそのＥＰＳを生じる傾向の低さに寄与すると考えられるが、クロザピンの抗−ＥＰＳ作用は、トリヘキシフェニジルのように抗コリン作動薬の補助的使用によって得られるものよりも強力であり、抗精神病薬、例えばチオリダジンをもたらす一部のＥＰＳは、強力なムスカリン受容体のアンタゴニスト特性も有する。これらの観察結果は、中枢性ムスカリン受容体のアンタゴニズムが抗−ＥＰＳ作用を生じる可能性があるが、Ｄ２受容体を遮断する運動作用におけるコリン作動性修飾がこれまでの理解よりも複雑であることを示唆する。現行のデータは、重要な基底核構造内部に発現した、特定のムスカリン受容体サブタイプのアンタゴニズムではないアゴニズムが、これらの有害な運動作用を低減するのにより有効な機序であることを示す（ワイナー（Ｗｅｉｎｅｒ）ら、１９９０年）。さらに、ＮＤＭＣの中枢性のムスカリン受容体作動薬特性によってもたらされる認知促進的な利益に関する現行のデータを考慮に入れて補助的な抗コリン作動薬の広範な使用を再評価する必要がある。
【０１２９】
要約すれば、治療上有用な神経精神薬の機能的特徴づけにより、ＮＤＭＣの強力かつ有効なムスカリン受容体アゴニスト活性が示されている。この活性が１つのクラスとして神経精神薬の中で固有であることが見出された。ＮＤＭＣが血液脳関門を越え、かつインビボでＭ１受容体作動薬として機能しうることが示される。ＮＤＭＣがクロザピンで治療される患者での認知およびクオリティ・オブ・ライフにおける改善に寄与することを考慮すると、ＮＤＭＣが、クロザピンを統合失調症の治療に使用される他の薬剤と区別する、治療応答上の臨床的に関連した態様を媒介することが示される。これらの成果は、ムスカリン受容体アゴニズムがクロザピンの固有の臨床特性を媒介し、ＮＤＭＣ自体を含むＭ１ムスカリン受容体作動薬（スパルディング（Ｓｐａｌｄｉｎｇ）ら、２００２年）が有効な非定型抗精神病薬でありうることを示す。
【０１３０】
実施例１４：Ｎ−デスメチルクロザピン／クロザピン混合物における正味のアゴニズム
上記の如くＲ−ＳＡＴアッセイを用いてクロザピンとＮ−デスメチルクロザピンの混合物の作用を評価した。１５０ｎＭのＮ−デスメチルクロザピンに様々な濃度のクロザピンを加えた。図７は、クロザピン濃度の関数としてのＲ−ＳＡＴアッセイの結果を示す。図７中の点線で示すように、約１００ｎＭおよびそれ未満のクロザピン濃度に対する正味のアゴニスト活性を観察した。したがって、約１．５以上のＮＤＭＣ対クロザピン比は、正味のアゴニスト作用をもたらす。
【０１３１】
上記の如く、ＰＩ加水分解アッセイを用い、Ｒ−ＳＡＴアッセイの結果を確認した。１５０ｎＭのＮ−デスメチルクロザピンに再び様々な濃度のクロザピンを加えた。図８は、クロザピン濃度の関数としてのアッセイの結果を示す。図８中の点線は、正味のアゴニスト作用が観察される場合のクロザピンの最大濃度を示す。Ｒ−ＳＡＴアッセイの結果と同様に、約１００ｎＭおよびそれ未満のクロザピン濃度において正味のアゴニスト活性が観察されたことから、約１．５以上のＮＤＭＣ対クロザピン比が正味のアゴニスト作用をもたらすことが確認される。
【０１３２】
実施例１５：統合失調症患者へのＮＤＭＣの単回用量の投与
単一施設での入院患者を対象とした無作為化二重盲検プラセボ対照の単回用量試験を２つの一連の患者群に対して実施する。患者６名ずつの２つの異なる群を登録する。第１の患者群の中の各患者は、無作為な順序で連続的にプラセボ、ＮＤＭＣ２５ｍｇ、ＮＤＭＣ５０ｍｇの単回用量投与を受ける。第２の患者群の中の各患者は、無作為な順序で連続的にプラセボ、ＮＤＭＣ７５ｍｇ、およびＮＤＭＣ１００ｍｇの単回用量投与を受ける。粉剤のＮＤＭＣおよびプラセボをゼラチンカプセルで経口投与する。試験には２０〜５０歳の統合失調症または統合失調性感情障害の病歴があるがそれ以外では健康な男性または女性患者を選択する。患者は、７５を超える陽性および陰性症候群尺度（ＰＡＮＳＳ）スコアとして定義される重度の精神病の急性増悪期を経ていない。
【０１３３】
試験１日前には、試験開始に先立つ４〜７日間の導入期間中、患者におけるすべての中枢作用薬の使用を中止する。試験１日前に、計画としてＮＤＭＣ：プラセボが２：１になるように患者を無作為化する。試験１日目に、患者は午前中に試験薬またはプラセボの経口投与を受け、用量投与から２４時間以内に血液試料を連続的に採取する。投与の８時間後に、連続的なリード２本のＥＣＧ監視によって患者を監視する。試験日を通して、バイタルサイン、ＥＣＧ、臨床検査、および有害事象記録を含む、臨床評価、臨床評価尺度、および安全性の頻回評価を定期的に行う。試験２日目および３日目には試験薬を投与しない。試験４日目には、被験者は午前中に再び試験薬またはプラセボの経口投与を受け、用量投与から２４時間以内に血液試料を連続的に採取する。投与の８時間後に、連続的なリード２本のＥＣＧ監視によって患者を監視する。試験４日目を通して、バイタルサイン、ＥＣＧ、臨床検査、および有害事象記録を含む、臨床評価、臨床評価尺度、および安全性の頻回評価を定期的に行う。試験５日目および６日目には試験薬またはプラセボを投与しない。試験８日目には、被験者は午前中に再び試験薬またはプラセボの経口投与を受け、用量投与から２４時間以内に血液試料を連続的に採取する。投与の８時間後に、連続的なリード２本のＥＣＧ監視によって患者を監視する。試験８日目を通して、バイタルサイン、ＥＣＧ、臨床検査、および有害事象記録を含む、臨床評価、臨床評価尺度、および安全性の頻回評価を定期的に行う。試験８日目の後３〜５日かけて試験終了時の評価を行い、臨床評価、臨床評価尺度の管理、および安全性評価を行う。
【０１３４】
試験終了時の評価後および群２の無作為化前に、群１から得た安全性変数および薬物動態学的データの中間分析を行う。群２で投与されるべき用量を決定するのに、ＰＩにより安全性変数を再検討する。もし群１の間でＮＤＭＣの投与が安全と見なされる場合、第２の患者のコホートをスクリーニングし、無作為化し、登録する。もし群２におけるＮＤＭＣの用量が群１で投与された用量よりも大きい場合、導入期間の間、ＮＤＭＣのプレコンディショニング（ｐｒｅ−ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ）用量２５ｍｇを各被験者に投与する。この試験用量を使用し、ＮＤＭＣの用量を高くすると特に高い感受性を示しうる任意の患者を同定し、同用量を試験１日前に先立つ少なくとも３日間において投与する。群２における試験に関連する手続きは、ＮＤＭＣの用量は別として、群１における手続きと一致する。
【０１３５】
薬物動態分析
ＮＤＭＣの濃度について血漿試料を分析する。Ｃｍａｘ（最大血漿濃度）、ｔｍａｘ（最大血漿濃度に至るまでの時間）、ＡＵＣ０−ｚ（線形の対数台形の合計によって算出される、ゼロ時間から定量可能な最終時点にかけての血漿濃度時間曲線下面積）、ＡＵＣ０−∞（線形の対数台形の合計によって算出されかつ消失速度定数λＺで除される定量可能な最終血漿濃度の和によって無限に至るまで外挿される、ゼロ時間から無限にかけての血漿濃度時間曲線下面積）、λＺ（対数線形の血漿濃度−時間曲線の終点の直線回帰によって決定される消失速度定数）、ｔ１／２（ｌｎ（２）／λＺとして決定される最終半減期）、およびＣＬｐｏ（用量／ＡＵＣ（０−∞）によって算出される見かけの経口クリアランス）を含む薬物動態学的パラメータを算出する。
【０１３６】
耐容性
シンプソン・アンド・アングス・スケール（Ｓｉｍｐｓｏｎ  ａｎｄ  Ａｎｇｕｓ  Ｓｃａｌｅ）（ＳＡＳ）およびバーンズ・アカシジア・スケール（Ｂａｒｎｅｓ  Ａｋａｔｈｉｓｉａ  Ｓｃａｌｅ）（ＢＡＳ）を用いて錐体外路（ＥＰＳ）運動作用を測定することにより、ＮＤＭＳの耐容性を測定する。これらの尺度を、ベースライン時（試験１日前）、試験１日目、４日目、および８日目での薬剤投与の３〜５時間後、ならびに試験終了時における評価に適用する。
【０１３７】
抗精神病薬の有効性
ＰＡＮＳＳおよびクリニカル・グローバル・インプレッション・スケール・スキゾフレニア（Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｇｌｏｂａｌ  Ｉｍｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｓｃａｌｅ−Ｓｃｈｉｓｏｐｈｒｅｎｉａ）（ＣＧＩ−Ｓ）尺度を用いて抗精神病薬の有効性を測定する。これらの尺度を、ベースライン時（試験１日目）、試験１日目、４日目、および８日目、ならびに試験最終日における評価に適用する。
【０１３８】
安全性
スクリーニングの間および試験手続き終了後を除き、３つの位置での血圧および脈拍数（仰臥位５分、座位１分、立位３分）、呼吸数、ならびに口腔体温を含むバイタルサインを測定することにより、安全性を評価する。
【０１３９】
リード１２本のＥＣＧを記録し、ＱＲＳ、ＰＲ、ＱＴ、およびＱＴｃ間隔を含む標準的な心電図パラメータを測定する。さらに、ＮＤＭＣまたはプラセボの各々を用量投与してから１日目、４日目、および８日目における最初の８時間に連続的なリード２本のＥＣＧ監視を行う。
【０１４０】
診療所で臨床に携わる医師が神経学的スクリーニングを行う。神経学的スクリーニングは、筋肉末端における緊張の定性評価、振戦、線維束収縮（ｆａｓｉｃｕｌａｔｉｏｎｓ）、および眼振の存在、ならびに小脳の協調に関する様々な試験（指鼻試験、拮抗運動反復不全、ヒール・シン試験（ｈｅｅｌ−ｓｈｉｎ  ｔｅｓｔ）、および歩行）からなる。
【０１４１】
試験１日目、４日目、８日目に少なくとも８時間の絶食後に臨床検査値を測定し、試験終了時に評価を行う。それは以下のものを含む。
赤血球：赤血球数、ヘマトクリット、ヘモグロビン、平均赤血球ヘモグロビン（ＭＣＨ）、平均赤血球ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）、平均赤血球容量（ＭＣＶ）、ＲＤＷ、および網状赤血球数
白血球：絶対値として報告される白血球の数および区別（好塩基球、好酸球、リンパ球、単球、および好中球）
凝固物：血小板数、ＩＮＲとしてのＰＴ、およびａＰＴＴ
肝臓：アルカリホスファターゼ、ＡＬＴ（血清グルタミン酸−ピルビン酸トランスアミナーゼ［ＳＧＰＴ］）、ＡＳＴ（血清グルタミン酸−オキサロ酢酸トランスアミナーゼ［ＳＧＯＴ］）、ビリルビン（総、直接、間接）、γ−グルタミルトランスフェラーゼ（ＧＧＴＰ）、クレアチニンホスホキナーゼ（ＣＰＫ）およびＬＤＨ
腎臓：血中尿素窒素（ＢＵＮ）、クレアチニン、および尿酸
電解質：二酸化炭素、塩化物、マグネシウム、カリウム、およびナトリウム
一般：アルブミン、カルシウム、グルコース（絶食）リン酸塩、およびタンパク質（総）
エンドクリン：プロラクチン
脂質：コレステロール（総）、ＨＤＬコレステロール、ＬＤＬコレステロール、およびトリグリセリド
肉眼による尿分析：ｐＨ、特定の比重、グルコース、ケトン、白血球エステラーゼ、亜硝酸塩、潜血、およびタンパク質
顕微鏡による尿分析：赤血球／高電場、白血球／高電場、細菌、円柱、上皮細胞、粘膜刺および結晶
【０１４２】
実施例１６：統合失調症患者に対するＮＤＭＣの複数回用量での投与
単一施設での入院患者を対象とした無作為化二重盲検プラセボ対照の複数回用量試験を２つの一連の群に対して実施する。患者６名ずつの２つの異なる群内において患者１２名を登録する。各患者は５日間にわたり毎日プラセボまたはＮＤＭＣの投与を受ける。粉剤のＮＤＭＣおよびプラセボをゼラチンカプセルで経口投与する。試験には２０〜５０歳の統合失調症または統合失調性感情障害の病歴があるがそれ以外では健康な男性または女性患者を選択する。患者は７５を超える陽性および陰性症候群尺度（ＰＡＮＳＳ）スコアとして定義される重度の精神病の急性増悪期を経ていない。
【０１４３】
試験１日前には、試験開始に先立つ４〜７日間の導入期間中、患者におけるすべての中枢作用薬の使用を中止する。もし実施例１４の単回用量試験によって測定されたＮＤＭＣの安全性プロフィールが漸増投与が保証されることを示唆する場合、かつもしＮＤＭＣの薬物動態特性がｔ１／２が８時間未満であることを示す場合、試験に登録された患者は試験１日前に先立ちＮＤＭＣのプレコンディショニング用量の投与を受ける。必要であれば、被験者は、試験の導入部の間に、計画された用量の２５％に相当するＮＤＭＣの単回用量、引き続きその翌日に計画された用量の５０％に相当する第２の用量の投与を受ける。もしこれらの用量が安全と見なされる場合、試験１日前に被験者をＮＤＭＣまたはプラセボのいずれかに無作為化する。実施例１４の単回用量安全性試験の間に観察される安全性および薬物動態に基づき、ＮＤＭＣの投与（ＱＤまたはＢＩＤ）の用量および頻度を決定する。
【０１４４】
試験１日目に、患者は試験薬またはプラセボの経口投与を受け、用量投与から２４時間以内に血液試料を連続的に採取する。投与の８時間後に、連続的なリード２本のＥＣＧ監視によって患者を監視する。試験１日目を通して、バイタルサイン、ＥＣＧ、臨床検査、および有害事象記録を含む、臨床評価、臨床評価尺度、および安全性の頻回評価を定期的に行う。
【０１４５】
患者は次の４日間にわたって毎日、試験薬またはプラセボの投与を受ける。試験の２日目、３日目、および４日目に、薬物動態学的分析用の前用量の血清試料を得、投与の８時間後に、連続的なリード２本のＥＣＧ監視によって患者を監視する。試験２〜４日目を通して、バイタルサイン、ＥＣＧ、臨床検査、および有害事象記録を含む、臨床評価、臨床評価尺度、および安全性の頻回評価を定期的に行う。
【０１４６】
試験５日目に、薬物動態学的分析用に前用量の血清試料ならびに試験薬またはプラセボの投与から２４時間以内に連続的に採取された血液試料を得、投与の８時間後に、連続的なリード２本のＥＣＧ監視によって患者を監視する。試験５日目を通して、バイタルサイン、ＥＣＧ、臨床検査、および有害事象記録を含む、臨床評価、臨床評価尺度、および安全性の頻回評価を定期的に行う。
【０１４７】
試験５日目の能動的投与の中止から５〜７日後に、試験終了時の最後の評価を行う。バイタルサイン、ＥＣＧ、臨床検査、ＮＤＭＣ血清測定、および有害事象記録を含むこの臨床評価の間に安全性評価を行う。すべての患者を、ＮＤＭＣの能動的投与の中止後に適応があれば、入院患者として臨床的に追跡される。
【０１４８】
試験終了時の評価後および群２の無作為化前に、群１から得た安全性変数および薬物動態学的データの中間分析を行う。群２で投与されるべき用量を決定するのに、ＰＩにより安全性変数を再検討する。もし群１の間でＮＤＭＣの投与が安全と見なされる場合、第２の患者のコホートをスクリーニングし、無作為化し、登録する。群２における試験に関連する手続きは、ＮＤＭＣの用量および／または投与頻度は別として、群１における手続きと一致する。
【０１４９】
薬物動態分析
ＮＤＭＣの濃度について血漿試料を分析する。試験１日目の単回用量投与後に、Ｃｍａｘ（最大血漿濃度）、ｔｍａｘ（最大血漿濃度に至るまでの時間）、ＡＵＣ０−ｚ（線形の対数台形の合計によって算出される、ゼロ時間から定量可能な最終時点にかけての血漿濃度時間曲線下面積）、ＡＵＣ０−∞（線形の対数台形の合計によって算出され、かつ消失速度定数λＺで除される定量可能な最終血漿濃度の和によって無限に至るまで外挿される、ゼロ時間から無限にかけての血漿濃度時間曲線下面積）、λＺ（対数線形の血漿濃度−時間曲線の終点の直線回帰によって決定される消失速度定数）、ｔ１／２（ｌｎ（２）／λＺとして決定される最終半減期）、およびＣＬｐｏ（用量／ＡＵＣ（０−∞）によって算出される見かけの経口クリアランス）を含む薬物動態学的パラメータを算出する。
【０１５０】
試験５日目の最終投与後に、Ｃｍａｘ，ｓｓ（最大安定状態血漿濃度）、Ｃｍｉｎ，ｓｓ（最小安定状態血漿濃度）、Ｃａｖｇ，ｓｓ（投与間隔τで除されるＡＵＣ（０−τ）ｓｓとして算出される平均安定状態血漿濃度）、ｔｍａｘ，ｓｓ（最大安定状態血漿濃度に至るまでの時間）、ｔｍｉｎ，ｓｓ（最小安定状態血漿濃度に至るまでの時間）、ＡＵＣ０−ｚ（線形の対数台形の合計によって算出される、ゼロ時間から定量可能な最終時点にかけての血漿濃度時間曲線下面積）、ＡＵＣ０−τｓｓ（線形の対数台形の合計によって算出される、ゼロ時間から安定状態投与間隔の終点にかけての血漿濃度時間曲線下面積）、λＺ，ｓｓ（対数線形の血漿濃度−時間曲線の終点の直線回帰によって決定される安定状態消失速度定数）、ｔ１／２，ｓｓ（ｌｎ（２）／λＺ，ｓｓとして決定される安定状態最終半減期）、およびＣＬｐｏ，ｓｓ（用量／ＡＵＣ（０−τ）ｓｓによって算出される見かけの経口クリアランス）を含む薬物動態学的パラメータも算出する。
【０１５１】
耐容性
シンプソン・アンド・アングス・スケール（Ｓｉｍｐｓｏｎ  ａｎｄ  Ａｎｇｕｓ  Ｓｃａｌｅ）（ＳＡＳ）およびバーンズ・アカシジア・スケール（Ｂａｒｎｅｓ  Ａｋａｔｈｉｓｉａ  Ｓｃａｌｅ）（ＢＡＳ）を用いて錐体外路（ＥＰＳ）運動作用を測定することにより、ＮＤＭＳの耐容性を測定する。これらの尺度を、ベースライン時（試験１日前）、試験１〜５日目での薬剤投与の６時間後、ならびに試験終了時における評価に適用する。
【０１５２】
抗精神病薬の有効性
ＰＡＮＳＳおよびクリニカル・グローバル・インプレッション・スケール・スキゾフレニア（Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｇｌｏｂａｌ  Ｉｍｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｓｃａｌｅ−Ｓｃｈｉｓｏｐｈｒｅｎｉａ）（ＣＧＩ−Ｓ）尺度を用いて抗精神病薬の有効性を測定する。これらの尺度を、ベースライン時（試験１日前）、試験１日目、５日目、および試験最終日における評価に適用する。
【０１５３】
安全性
スクリーニングの間および試験手続き終了後を除き、３つの位置での血圧および脈拍数（仰臥位５分、座位１分、立位３分）、呼吸数、ならびに口腔体温を含むバイタルサインを測定することにより、安全性を評価する。
【０１５４】
リード１２本のＥＣＧを記録し、ＱＲＳ、ＰＲ、ＱＴ、およびＱＴｃ間隔を含む標準的な心電図パラメータを測定する。さらに、ＮＤＭＣまたはプラセボの各々を用量投与してから１〜５日目における最初の８時間に連続的なリード２本のＥＣＧ監視を行う。
【０１５５】
診療所で臨床に携わる医師が神経学的スクリーニングを行う。神経学的スクリーニングは、筋肉末端における緊張の定性評価、振戦、線維束収縮、および眼振の存在、ならびに小脳の協調に関する様々な試験（指鼻試験、拮抗運動反復不全、ヒール・シン試験（ｈｅｅｌ−ｓｈｉｎ  ｔｅｓｔ）、および歩行）からなる。
【０１５６】
少なくとも８時間の絶食後に臨床検査値を測定する。それは以下のものを含む。
赤血球：赤血球数、ヘマトクリット、ヘモグロビン、平均赤血球ヘモグロビン（ＭＣＨ）、平均赤血球ヘモグロビン濃度（ＭＣＨＣ）、平均赤血球容量（ＭＣＶ）、ＲＤＷ、および網状赤血球数
白血球：絶対値として報告される白血球の数および区別（好塩基球、好酸球、リンパ球、単球、および好中球）
凝固物：血小板数、ＩＮＲとしてのＰＴ、およびａＰＴＴ
肝臓：アルカリホスファターゼ、ＡＬＴ（血清グルタミン酸−ピルビン酸トランスアミナーゼ［ＳＧＰＴ］）、ＡＳＴ（血清グルタミン酸−オキサロ酢酸トランスアミナーゼ［ＳＧＯＴ］）、ビリルビン（総、直接、間接）、γ−グルタミルトランスフェラーゼ（ＧＧＴＰ）、クレアチニンホスホキナーゼ（ＣＰＫ）およびＬＤＨ
腎臓：血中尿素窒素（ＢＵＮ）、クレアチニン、および尿酸
電解質：二酸化炭素、塩化物、マグネシウム、カリウム、およびナトリウム
一般：アルブミン、カルシウム、グルコース（絶食）リン酸塩、およびタンパク質（総）
エンドクリン：プロラクチン
脂質：コレステロール（総）、ＨＤＬコレステロール、ＬＤＬコレステロール、およびトリグリセリド
肉眼による尿分析：ｐＨ、特定の比重、グルコース、ケトン、白血球エステラーゼ、亜硝酸塩、潜血、およびタンパク質
顕微鏡による尿分析：赤血球／高電場、白血球／高電場、細菌、円柱、上皮細胞、粘膜刺および結晶
【０１５７】
参考文献
本明細書では、以下の各参考文献が、任意の図面を含む全体として参照により援用される。
【０１５８】
本明細書では、以下の参考文献が、任意の図面を含む全体として参照により援用される。
エグレン  Ｒ．Ｍ．（Ｅｇｌｅｎ  Ｒ．Ｍ．）、ショパン  Ａ．（Ｃｈｏｐｐｉｎ  Ａ．）およびワトソン  Ｎ．（Ｗａｔｓｏｎ  Ｎ．）（２００１年）「Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ  ｆｒｏｍ  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｒｅｓｅａｒｃｈ．」Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．２２（８）：４０９−４１４頁
ブラウン  Ｊ．Ｈ．（Ｂｒｏｗｎ  Ｊ．Ｈ．）およびテイラー  Ｐ．（Ｔａｙｌｏｒ  Ｐ．）（１９９６年）「Ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｇｏｎｉｓｔｓ  ａｎｄ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ」Ｔｈｅ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｂａｓｉｓ  ｏｆ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ．ハーディマン  Ｊ．Ｇ．（Ｈａｒｄｉｍａｎ  Ｊ．Ｇ．）、およびリンバード  Ｌ．Ｅ．（Ｌｉｍｂｉｒｄ  Ｌ．Ｅ．）編、Ｍｃｇｒａｗ−Ｈｉｌｌ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１４１−１６１頁
モロイ  Ｓ．Ｅ．（Ｍｏｒｏｉ  Ｓ．Ｅ．）、およびリヒター  Ｐ．Ｒ．（Ｌｉｃｈｔｅｒ  Ｐ．Ｒ．）（１９９６年）「Ｏｃｕｌａｒ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ」Ｔｈｅ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｂａｓｉｓ  ｏｆ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ．ハーディマン  Ｊ．Ｇ．（Ｈａｒｄｉｍａｎ  Ｊ．Ｇ．）、およびリンバード  Ｌ．Ｅ．（Ｌｉｍｂｉｒｄ  Ｌ．Ｅ．）編、Ｍｃｇｒａｗ−Ｈｉｌｌ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１６１９−１６４７頁
デイビス  Ｒ．Ｅ．（Ｄａｖｉｓ  Ｒ．Ｅ．）；ドイル  Ｐ．Ｄ．（Ｄｏｙｌｅ  Ｐ．Ｄ．）；キャロル  Ｒ．Ｔ．（Ｃａｒｒｏｌｌ  Ｒ．Ｔ．）；エマリング  Ｍ．Ｒ．（Ｅｍｍｅｒｌｉｎｇ  Ｍ．Ｒ．）；ジャン  Ｊ．（Ｊａｅｎ  Ｊ．）「Ｃｈｏｌｉｎｅｒｇｉｃ  ｔｈｅｒａｐｉｅｓ  ｆｏｒ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ'ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ：Ｐａｌｌｉａｔｉｖｅ  ｏｒ  ｄｉｓｅａｓｅ  ａｌｔｅｒｉｎｇ？」Ａｒｚｎｅｉｍｉｔｔｅｌ−Ｆｏｒｓｃｈｕｎｇ、４５、４２５−４３１頁、１９９５年
シェカー  Ａ．（Ｓｈｅｋｈａｒ  Ａ．）、ポッター  Ｗ．Ｚ．（Ｐｏｔｔｅｒ  Ｗ．Ｚ．）、リーネマン  Ｊ．（Ｌｉｅｎｅｍａｎｎ  Ｊ．）ら（２００１年）「Ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｏｆ  ｘａｎｏｍｅｌｉｎｅ，ａ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ａｇｏｎｉｓｔ，ｉｎ  ｔｒｅａｔｉｎｇ  ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ：ａ  ｄｏｕｂｌｅ  ｂｌｉｎｄ  ｐｌａｃｅｂｏ  ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｓｔｕｄｙ．」ＡＣＮＰ  ａｂｓｔｒａｃｔｓ  １３５：１７３頁
ロドリゲス  Ｍ．Ａ．（Ｒｏｄｒｉｑｕｅｚ  Ｍ．Ａ．）、ホイップルＢ．（Ｗｈｉｐｐｌｅ  Ｂ．）、オカンポ  Ｇ．（Ｏｃａｍｐｏ  Ｇ．）ら（２００２年）  「Ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ａｇｏｎｉｓｔｓ  ｉｎ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｉｃ  ａｎｄ  ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｖｅ  ｐａｉｎ  ａｓｓａｙｓ  ｉｎ  ｒａｔｓ．」  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  Ｐａｉｎ’ｓ  １０ｔｈ  Ｗｏｒｌｄ  Ｃｏｎｇｒｅｓｓ、１１６０−Ｐ７６：３８８頁
バルデッサリーニ  Ｒ．Ｊ．（Ｂａｌｄｅｓｓａｒｉｎｉ  Ｒ．Ｊ．）およびフランケンブルグ  Ｆ．Ｒ．（Ｆｒａｎｋｅｎｂｕｒｇ  Ｆ．Ｒ．）（１９９１年）「Ｃｌｏｚａｐｉｎｅ．Ａ  ｎｏｖｅｌ  ａｎｔｉｐｓｙｃｈｏｔｉｃ  ａｇｅｎｔ．」Ｎｅｗ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．、３２４（１１）：７４６−７５４頁
ジャン  Ｍ．Ｗ．（Ｊａｎｎ  Ｍ．Ｗ．）、グリムスレイ  Ｓ．Ｒ．（Ｇｒｉｍｓｌｅｙ  Ｓ．Ｒ．）、グレイ  Ｅ．Ｃ．（Ｇｒａｙ  Ｅ．Ｃ．）、およびチャン  Ｗ．（Ｃｈａｎｇ  Ｗ．）（１９９３年）「Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ  ａｎｄ  ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓ  ｏｆ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ．」Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ．２４（２）：１６１−１７６頁
チェントルリーノ  Ｆ．（Ｃｅｎｔｏｒｒｉｎｏ  Ｆ．）、バルデッサリーニ  Ｒ．Ｊ．（Ｂａｌｄｅｓｓａｒｉｎｉ  Ｒ．Ｊ．）、カンド  Ｊ．Ｃ．（Ｋａｎｄｏ  Ｊ．Ｃ．）ら（１９９４年）「Ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ａｎｄ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ：ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｓｅｒｕｍ  ａｎｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｆｉｎｄｉｎｇｓ  ｄｕｒｉｎｇ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃｈｒｏｎｉｃａｌｌｙ  ｐｓｙｃｈｏｔｉｃ  ｐａｔｉｅｎｔｓ．」Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌ．１４：１１９−１２５頁
ハンジカー  Ｆ．（Ｈｕｎｚｉｋｅｒ  Ｆ．）、フィッシャー  Ｅ．（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｅ．）、およびスクムツ  Ｊ．（Ｓｃｍｕｔｚ  Ｊ．）（１９６７年）「１１−ａｍｉｎｏ−５Ｈ−ｄｉｂｅｎｚｏ［ｂ，ｅ］−１，４−ｄｉａｚｅｐｉｎｅ．」  Ｍｉｔｔｅｉｌｕｎｇ  ｕｂｅｒ  ｓｉｅｂｅｎｇｌｉｅｎｒｉｇｅ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｎ．」Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ、５０：１５８８−１５９９頁
ジャンセン  Ａ．Ａ．（Ｊｅｎｓｅｎ  Ａ．Ａ．）、スパルディング  Ｔ．Ａ．（Ｓｐａｌｄｉｎｇ  Ｔ．Ａ．）、バースタイン  Ｅ．Ｓ．（Ｂｕｒｓｔｅｉｎ  Ｅ．Ｓ．）ら（２０００年）「Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｌａ（１１６）−Ｐｒｏ（１３６）  ｒｅｇｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｃａｌｃｉｕｍ−ｓｅｎｓｉｎｇ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ．  Ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｎｄ  ｉｎｖｅｒｓｅ  ａｇｏｎｉｓｍ  ｉｎ  ａ  ｆａｍｉｌｙ  Ｃ  Ｇ−ｐｒｏｔｅｉｎ−ｃｏｕｐｌｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ．」Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２７５（３８）：２９５４７−５５頁
バルデッサリーニ  Ｒ．Ｊ．（Ｂａｌｄｅｓｓａｒｉｎｉ  Ｒ．Ｊ．）、フランケンブルグ  Ｆ．Ｒ．（Ｆｒａｎｋｅｎｂｕｒｇ  Ｆ．Ｒ．）（１９９１年）「Ｃｌｏｚａｐｉｎｅ：ａ  ｎｏｖｅｌ  ａｎｔｉｐｓｙｃｈｏｔｉｃ  ａｇｅｎｔ．」Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３２４：７４６−７５４頁
バルデッサリーニ  Ｒ．Ｊ．（Ｂａｌｄｅｓｓａｒｉｎｉ  Ｒ．Ｊ．）、チェントルリーノ  Ｆ．（Ｃｅｎｔｏｒｒｉｎｏ  Ｆ．）、フルード  Ｊ．Ｇ．（Ｆｌｏｏｄ  Ｊ．Ｇ．）、ボルピチェッリ  Ｓ．Ａ．（Ｖｏｌｐｉｃｅｌｌｉ  Ｓ．Ａ．）、ハストン・リオンズ  Ｄ（Ｈｕｓｔｏｎ−Ｌｙｏｎｓ  Ｄ）、コーヘン  Ｂ．Ｍ．（Ｃｏｈｅｎ  Ｂ．Ｍ．）（１９９３年）「Ｔｉｓｓｕｅ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｒａｔ．」Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ９：１１７−１２４頁
バークレー  Ｊ．Ｌ．（Ｂｅｒｋｅｌｅｙ  Ｊ．Ｌ．）、ゴメザ  Ｊ．（Ｇｏｍｅｚａ  Ｊ．）、ウェス  Ｊ．（Ｗｅｓｓ  Ｊ．）、ハミルトン  Ｓ．Ｅ．（Ｈａｍｉｌｔｏｎ  Ｓ．Ｅ．）、ナサンソン  Ｎ．Ｍ．（Ｎａｔｈａｎｓｏｎ  Ｎ．Ｍ．）、レヴィー  Ａ．Ｉ．（Ｌｅｖｅｙ  Ａ．Ｉ．）（２００１年）「Ｍ１  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ａｃｔｉｖａｔｅ  ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｓｉｇｎａｌ−ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｋｉｎａｓｅ  ｉｎ  ＣＡ１  ｐｙｒａｍｉｄａｌ  ｎｅｕｒｏｎｓ  ｉｎ  ｍｏｕｓｅ  ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ  ｓｌｉｃｅｓ．」Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  １８：５１２−５２４頁
ボディック  Ｎ．Ｃ．（Ｂｏｄｉｃｋ  Ｎ．Ｃ．）、オッフェン  Ｗ．Ｗ．（Ｏｆｆｅｎ  Ｗ．Ｗ．）、レヴィー  Ａ．Ｉ．（Ｌｅｖｅｙ  Ａ．Ｉ．）、カトラー  Ｎ．Ｒ．（Ｃｕｔｌｅｒ  Ｎ．Ｒ．）、ゴーティエ  Ｓ．Ｇ．（Ｇａｕｔｈｉｅｒ  Ｓ．Ｇ．）、サトリン  Ａ．（Ｓａｔｌｉｎ  Ａ．）、シャノン  Ｈ．Ｅ．（Ｓｈａｎｎｏｎ  Ｈ．Ｅ．）、トレフソン  Ｇ．Ｄ．（Ｔｏｌｌｅｆｓｏｎ  Ｇ．Ｄ．）、ラスムッセン  Ｋ．（Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ  Ｋ．）、バイマスター  Ｆ．Ｐ．（Ｂｙｍａｓｔｅｒ  Ｆ．Ｐ．）、ハーレイ  Ｄ．Ｊ．（Ｈｕｒｌｅｙ  Ｄ．Ｊ．）、ポッター  Ｗ．Ｚ．（Ｐｏｔｔｅｒ  Ｗ．Ｚ．）、ポール  Ｓ．Ｍ．（Ｐａｕｌ  Ｓ．Ｍ．）（１９９７年）「Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｘａｎｏｍｅｌｉｎｅ，ａ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｇｏｎｉｓｔ，ｏｎ  ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ  ｓｙｍｐｔｏｍｓ  ｉｎ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ  ｄｉｓｅａｓｅ．」  Ａｒｃｈ  Ｎｅｕｒｏｌ  ５４：４６５−４７３頁
ボルデン  Ｃ．（Ｂｏｌｄｅｎ  Ｃ．）、クサック  Ｂ．（Ｃｕｓａｃｋ  Ｂ．）、リケルソン  Ｅ．（Ｒｉｃｈｅｌｓｏｎ  Ｅ．）（１９９１年）「Ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｉｓ  ａ  ｐｏｔｅｎｔ  ａｎｄ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ  ａｔ  ｔｈｅ  ｆｉｖｅ  ｃｌｏｎｅｄ  ｈｕｍａｎ  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  ｉｎ  ＣＨＯ−Ｋ１  ｃｅｌｌｓ．」  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １９２：２０５−２０６頁
ボンデッソン  Ｕ．（Ｂｏｎｄｅｓｓｏｎ  Ｕ．）、リンドストーム  Ｌ．Ｈ．（Ｌｉｎｄｓｔｒｏｍ  Ｌ．Ｈ．）（１９８８年）「Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ａｎｄ  ｉｔｓ  Ｎ−ｄｅｍｅｔｈｙｌａｔｅｄ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ  ｉｎ  ｐｌａｓｍａ  ｂｙ  ｕｓｅ  ｏｆ  ｇａｓ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−ｍａｓｓ  ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ  ｗｉｔｈ  ｓｉｎｇｌｅ  ｉｏｎ  ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ．」Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ９５：４７２−４７５頁
ボナー  Ｔ．Ｉ．（Ｂｏｎｎｅｒ  Ｔ．Ｉ．）、バックレイ  Ｎ．Ｊ．（Ｂｕｃｋｌｅｙ  Ｎ．Ｊ．）、ヤング  Ａ．Ｃ．（Ｙｏｕｎｇ  Ａ．Ｃ．）、ブラン  Ｍ．Ｒ．（Ｂｒａｎｎ  Ｍ．Ｒ．）（１９８７年）「Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｆａｍｉｌｙ  ｏｆ  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｇｅｎｅｓ．」Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３７：５２７−５３２頁
ブライナー・オズボーン  Ｈ．（Ｂｒａｕｎｅｒ−Ｏｓｂｏｒｎｅ  Ｈ．）、エバート  Ｂ．（Ｅｂｅｒｔ  Ｂ．）、ブラン  Ｍ．Ｒ．（Ｂｒａｎｎ  Ｍ．Ｒ．）、ファルチ  Ｅ．（Ｆａｌｃｈ  Ｅ．）、クロスゴー・ラーセン  Ｐ．（Ｋｒｏｇｓｇａａｒｄ−Ｌａｒｓｅｎ  Ｐ．）（１９９６年）「Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｐａｒｔｉａｌ  ａｇｏｎｉｓｍ  ａｔ  ｃｌｏｎｅｄ  ｈｕｍａｎ  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．」  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ３１３：１４５−１５０頁
バイマスター  Ｆ．Ｂ．（Ｂｙｍａｓｔｅｒ  Ｆ．Ｂ．）、カーター  Ｐ．Ａ．（Ｃａｒｔｅｒ  Ｐ．Ａ．）、ヤマダ  Ｍ．（Ｙａｍａｄａ  Ｍ．）、ゴメザ  Ｊ．（Ｇｏｍｅｚａ  Ｊ．）、ウェス  Ｊ．（Ｗｅｓｓ  Ｊ．）、ハミルトン  Ｓ．（Ｈａｍｉｌｔｏｎ  Ｓ．）、ナサンソン  Ｎ．Ｍ．（Ｎａｔｈａｎｓｏｎ  Ｎ．Ｍ．）、マッキンジー  Ｄ．Ｌ．（ＭｃＫｉｎｚｉｅ  Ｄ．Ｌ．）、フェルダー  Ｃ．Ｃ．（Ｆｅｌｄｅｒ  Ｃ．Ｃ．）  （２００３年）  「Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｕｂｔｙｐｅｓ  ｉｎ  ｃｈｏｌｉｎｅｒｇｉｃ  ｐａｒａｓｙｍｐａｔｈｏｍｉｍｅｔｉｃ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ，ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｐｈｏｓｐｈｏｉｎｏｓｉｔｉｄｅ  ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ，ａｎｄ  ｐｉｌｏｃａｒｐｉｎｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｓｅｉｚｕｒｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ．」  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  １７：１４０３−１４１０頁
カールソン  Ａ．（Ｃａｒｌｓｓｏｎ  Ａ．）（１９７８年）「Ａｎｔｉｐｓｙｃｈｏｔｉｃ  ｄｒｕｇｓ，ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒｓ，ａｎｄ  ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ．」Ａｍ  Ｊ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  １３５（２）：１６５−１７３頁
デイビス  Ｒ．Ｅ．（Ｄａｖｉｓ  Ｒ．Ｅ．）、エマリング  Ｍ．Ｒ．（Ｅｍｍｅｒｌｉｎｇ  Ｍ．Ｒ．）、ジーン  Ｊ．Ｃ．（Ｊａｅｎ  Ｊ．Ｃ．）、ムース  Ｗ．Ｈ．（Ｍｏｏｓ  Ｗ．Ｈ．）、スピーゲル  Ｋ．（Ｓｐｉｅｇｅｌ  Ｋ．）  （１９９３年）「Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ  ｉｎ  ｄｅｍｅｎｔｉａ．」Ｃｒｉｔ  Ｒｅｖ  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ  ７：４１−８３頁
ファブラッツォ  Ｍ．（Ｆａｂｒａｚｚｏ  Ｍ．）、ラ・ピア  Ｓ．（Ｌａ  Ｐｉａ  Ｓ．）、モンテレオーネ  Ｐ．（Ｍｏｎｔｅｌｅｏｎｅ  Ｐ．）、エスポシト  Ｇ．（Ｅｓｐｏｓｉｔｏ  Ｇ．）、ピント  Ａ．（Ｐｉｎｔｏ  Ａ．）、デ・シモーネ  Ｌ．（Ｄｅ  Ｓｉｍｏｎｅ  Ｌ．）、ベンチベンガ  Ｒ．（Ｂｅｎｃｉｖｅｎｇａ  Ｒ．）、マジュ  Ｍ．（Ｍａｊ  Ｍ．）（２００２年）「Ｉｓ  ｔｉｍｅ  ｃｏｕｒｓｅ  ｏｆ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｔｉｍｅ  ｃｏｕｒｓｅ  ｏｆ  ｐｌａｓｍａ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｌｅｖｅｌｓ?  Ａ  ｏｎｅ−ｙｅａｒ  ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ  ｓｔｕｄｙ  ｉｎ  ｄｒｕｇ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ．」Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ２７：１０５０−１０５５頁
フレイジャー  Ｊ．Ａ．（Ｆｒａｚｉｅｒ  Ｊ．Ａ．）、グラスナー・コーエン  Ｌ．（Ｇｌａｓｓｎｅｒ  Ｃｏｈｅｎ  Ｌ．）、ヤコブセン  Ｌ．（Ｊａｃｏｂｓｅｎ  Ｌ．）、グローテ  Ｄ．（Ｇｒｏｔｈｅ  Ｄ．）、フルード  Ｊ．（Ｆｌｏｏｄ  Ｊ．）、バルデッサリーニ  Ｒ．Ｊ．（Ｂａｌｄｅｓｓａｒｉｎｉ  Ｒ．Ｊ．）、ピシテッリ  Ｓ．（Ｐｉｓｃｉｔｅｌｌｉ  Ｓ．）、キム  Ｇ．Ｓ．（Ｋｉｍ  Ｇ．Ｓ．）、ラポポート  Ｊ．Ｌ．（Ｒａｐｏｐｏｒｔ  Ｊ．Ｌ．）（２００３年）「Ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｉｎ  ｃｈｉｌｄｒｅｎ  ａｎｄ  ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｃｈｉｌｄｈｏｏｄ−ｏｎｓｅｔ  ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ．」Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌ  ２３（１）：８７−９１頁
フリッツェ  Ｊ．（Ｆｒｉｔｚｅ  Ｊ．）、エリガー  Ｔ．（Ｅｌｌｉｇｅｒ  Ｔ．）  （１９９５年）  「Ｐｉｒｅｎｚｅｐｉｎｅ  ｆｏｒ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｈｙｐｅｒｓａｌｉｖａｔｉｏｎ．」Ｌａｎｃｅｔ  ３４６：１０３４頁
ガウチ  Ｒ．（Ｇａｕｃｈ  Ｒ．）、ミカエリス  Ｗ．（Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ  Ｗ．）（１９７１年）「Ｔｈｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｏｆ  ８−ｃｈｌｏｒｏ−１１−（４−ｍｅｔｈｙｌ−１−ｐｉｐｅｒａｚｉｎｙｌ）−５Ｈ−ｄｉｂｅｎｚｏ［ｂ，ｅ］［１，４］ｄｉａｚｅｐｉｎｅ（ｃｌｏｚａｐｉｎｅ）ｉｎ  ｍｉｃｅ，ｄｏｇｓ，ａｎｄ  ｈｕｍａｎ  ｓｕｂｊｅｃｔｓ．」Ｆａｒｍａｃｏ  ２６：６６７−６８１頁
ガーバー  Ｄ．Ｊ．（Ｇｅｒｂｅｒ  Ｄ．Ｊ．）、ソトニコバ  Ｔ．Ｄ．（Ｓｏｔｎｉｋｏｖａ  Ｔ．Ｄ．）、ガイネトジノブ  Ｒ．Ｒ．（Ｇａｉｎｅｔｄｉｎｏｖ  Ｒ．Ｒ．）、ファン  Ｓ．Ｙ．（Ｈｕａｎｇ  Ｓ．Ｙ．）、キャロン  Ｍ．Ｇ．（Ｃａｒｏｎ  Ｍ．Ｇ．）、トネガワ  Ｓ．（Ｔｏｎｅｇａｗａ  Ｓ．）  （２００１年）  「Ｈｙｐｅｒａｃｔｉｖｉｔｙ，ｅｌｅｖａｔｅｄ  ｄｏｐａｍｉｎｅｒｇｉｃ  ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ，ａｎｄ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  ａｍｐｈｅｔａｍｉｎｅ  ｉｎ  Ｍ１  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ  ｍｉｃｅ．」Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ９８（２６）：１５３１２−１５３７１頁
グリーン  Ｍ．Ｆ．（Ｇｒｅｅｎ  Ｍ．Ｆ．）（１９９６年）「Ｗｈａｔ  ａｒｅ  ｔｈｅ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｎｅｕｒｏｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  ｄｅｆｉｃｉｔｓ  ｉｎ  ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ？」Ａｍ  Ｊ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  １５３：３２１−３３０頁
ハガー  Ｃ．（Ｈａｇｇｅｒ  Ｃ．）、バックレイ  Ｐ．（Ｂｕｃｋｌｅｙ  Ｐ．）、ケニー  Ｊ．Ｔ．（Ｋｅｎｎｙ  Ｊ．Ｔ．）、フリードマン  Ｌ．（Ｆｒｉｅｄｍａｎ  Ｌ．）、ウボジ  Ｄ．（Ｕｂｏｇｙ  Ｄ．）、メルツァー  Ｈ．Ｙ．（Ｍｅｌｔｚｅｒ  Ｈ．Ｙ．）（１９９３年）「Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ  ｉｎ  ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ  ｓｙｍｐｔｏｍｓ  ｉｎ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ−ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ  ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉｃ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｒｅｃｅｉｖｉｎｇ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ．」  Ｂｉｏｌ  Ｐｙｓｃｈｉａｔｒｙ  ３４：７０２−７１２頁
ハセガワ  Ｍ．（Ｈａｓｅｇａｗａ  Ｍ．）、グティエレス−エステイヌ  Ｒ．（Ｇｕｔｉｅｒｒｅｚ−Ｅｓｔｅｉｎｏｕ  Ｒ．）、ウェイ  Ｌ．（Ｗａｙ  Ｌ．）、メルツァー  Ｈ．Ｙ．（Ｍｅｌｔｚｅｒ  Ｈ．Ｙ．）（１９９３年）「Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ａｎｄ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｐｌａｓｍａ  ｉｎ  ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ：ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｓｍｏｋｉｎｇ．」Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌ  １３：３８３−３９０頁
ハインリッヒ  Ｄ．Ｗ．（Ｈｅｉｎｒｉｃｈｓ  Ｄ．Ｗ．）、ハンロン  Ｔ．Ｅ．（Ｈａｎｌｏｎ  Ｔ．Ｅ．）、カーペンター  Ｗ．Ｔ．（Ｃａｒｐｅｎｔｅｒ  Ｗ．Ｔ．）（１９８４年）「Ｔｈｅ  Ｑｕａｌｉｔｙ  ｏｆ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃａｌｅ：ａｎ  ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  ｆｏｒ  ｒａｔｉｎｇ  ｔｈｅ  ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ  ｄｅｆｉｃｉｔ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ．」  Ｓｃｈｉｚｏｐｈｒ  Ｂｕｌｌ  １０：３８８−３９８頁
ケーン  Ｊ．（Ｋａｎｅ  Ｊ．）、ホニグフェルド  Ｇ．（Ｈｏｎｉｇｆｅｌｄ  Ｇ．）、シンガー  Ｊ．（Ｓｉｎｇｅｒ  Ｊ．）、メルツァー  Ｈ．（Ｍｅｌｔｚｅｒ  Ｈ．）、Ｃｌｏｚａｒｉｌ  Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｖｅ  Ｓｔｕｄｙ  Ｇｒｏｕｐ（１９８８年）「Ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉｃ．」  Ａｒｃｈ  Ｇｅｎ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  ４５：７８９−７９６頁
コッパマキ  Ｍ．（Ｋｕｏｐｐａｍａｋｉ  Ｍ．）、シバラヒチ  Ｅ．（Ｓｙｖａｌａｈｔｉ  Ｅ．）、ヒエタラ  Ｊ．（Ｈｉｅｔａｌａ  Ｊ．）（１９９３年）「Ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ａｎｄ  Ｎ−ｄｅｓｍｅｔｈｙｌｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ａｒｅ  ｐｏｔｅｎｔ  ５−ＨＴ１Ｃ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ．」Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ２４５：１７９−１８２頁
リー  Ｍ．Ａ．（Ｌｅｅ  Ｍ．Ａ．）、ジャヤチラケ  Ｋ．（Ｊａｙａｔｈｉｌａｋｅ  Ｋ．）、メルツァー  Ｈ．Ｙ．（Ｍｅｌｔｚｅｒ  Ｈ．Ｙ．）（１９９９年）「Ａ  ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｗｉｔｈ  ｔｙｐｉｃａｌ  ｎｅｕｒｏｌｅｐｔｉｃｓ  ｏｎ  ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｎｅｕｒｏｌｅｐｔｉｃ−ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ  ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ．」Ｓｃｈｉｚｏｐｈｒ  Ｒｅｓ  ３７：１−１１頁
ロイヒト  Ｓ．（Ｌｅｕｃｈｔ  Ｓ．）、ウォールベック  Ｋ．（Ｗａｈｌｂｅｃｋ  Ｋ．）、ハマン  Ｊ．（Ｈａｍａｎｎ  Ｊ．）、キスリング  Ｗ．（Ｋｉｓｓｌｉｎｇ  Ｗ．）（２００３年）「Ｎｅｗ  ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｔｉｐｓｙｃｈｏｔｉｃｓ  ｖｅｒｓｕｓ  ｌｏｗ−ｐｏｔｅｎｃｙ  ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ  ａｎｔｉｐｓｙｃｈｏｔｉｃｓ：ａ  ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  ｒｅｖｉｅｗ  ａｎｄ  ｍｅｔａ−ａｎａｌｙｓｉｓ．」  Ｌａｎｃｅｔ  ３６１（９３６９）：１５８１−１５８９頁
マウリ  Ｍ．Ｃ．（Ｍａｕｒｉ  Ｍ．Ｃ．）、ボロンテリ  Ｌ．Ｓ．（Ｖｏｌｏｎｔｅｒｉ  Ｌ．Ｓ．）、デロッソ  Ｂ．（Ｄｅｌｌ’Ｏｓｓｏ  Ｂ．）、レジスパニ  Ｆ．（Ｒｅｇｉｓｐａｎｉ  Ｆ．）、パパ  Ｐ．（Ｐａｐａ  Ｐ．）、バルディ  Ｍ．（Ｂａｌｄｉ  Ｍ．）、バレッギ  Ｓ．Ｒ．（Ｂａｒｅｇｇｉ  Ｓ．Ｒ．）（２００３年）「Ｐｒｅｄｉｃｔｏｒｓ  ｏｆ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｏｕｔｃｏｍｅ  ｉｎ  ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉｃ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ  ｔｏ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ．」  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌ  ２３（６）：６６０−６６４頁
メルツァー  Ｈ．Ｙ．（Ｍｅｌｔｚｅｒ  Ｈ．Ｙ．）、マツバラ  Ｓ．（Ｍａｔｓｕｂａｒａ  Ｓ．）、リー  Ｊ．Ｃ．（Ｌｅｅ  Ｊ．Ｃ．）（１９８９年）「Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｙｐｉｃａｌ  ａｎｄ  ａｔｙｐｉｃａｌ  ａｎｔｉｐｓｙｃｈｏｔｉｃ  ｄｒｕｇｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｂａｓｉｓ  ｏｆ  ｄｏｐａｍｉｎｅ  Ｄ−１，Ｄ−２  ａｎｄ  ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ２  ｐＫｉ  ｖａｌｕｅｓ．」  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ  ２５１：２３８−２４６頁
メルツァー  Ｈ．Ｙ．（Ｍｅｌｔｚｅｒ  Ｈ．Ｙ．）、アルフズ  Ｌ．（Ａｌｐｈｓ  Ｌ．）、グリーン  Ａ．Ｉ．（Ｇｒｅｅｎ  Ａ．Ｉ．）、アルタムラ  Ａ．Ｃ．（Ａｌｔａｍｕｒａ  Ａ．Ｃ．）、アナンド  Ｒ．（Ａｎａｎｄ  Ｒ．）、バートルディ  Ａ．（Ｂｅｒｔｏｌｄｉ  Ａ．）、ブルジョア  Ｍ．（Ｂｏｕｒｇｅｏｉｓ  Ｍ．）、ショイナード  Ｇ．（Ｃｈｏｕｉｎａｒｄ  Ｇ．）、ザハー・イスラム  Ｍ．（Ｚａｈｕｒ  Ｉｓｌａｍ  Ｍ．）、ケーン  Ｊ．（Ｋａｎｅ  Ｊ．）、クリシュナン  Ｒ．（Ｋｒｉｓｈｎａｎ  Ｒ．）、リンデンマイヤー  Ｊ．Ｐ．（Ｌｉｎｄｅｎｍａｙｅｒ  Ｊ．Ｐ．）、ポトキン  Ｓ．（Ｐｏｔｋｉｎ  Ｓ．）（２００３年）「Ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｆｏｒ  ｓｕｉｃｉｄａｌｉｔｙ  ｉｎ  ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ．」Ａｒｃｈ  Ｇｅｎ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  ６０：８２−９１頁
ミラー  Ｒ．Ｊ．（Ｍｉｌｌｅｒ  Ｒ．Ｊ．）、ハイリー  Ｃ．Ｒ．（Ｈｉｌｅｙ  Ｃ．Ｒ．）（１９７４年）  Ａｎｔｉ−ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ｎｅｕｒｏｌｅｐｔｉｃｓ  ａｎｄ  ｄｒｕｇ−ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｐａｒｋｉｎｓｏｎｉｓｍ．」Ｎａｔｕｒｅ  ２４８：５９６−５９７頁
ミルツァ  Ｎ．Ｒ．（Ｍｉｒｚａ  Ｎ．Ｒ．）、ピーターズ  Ｄ．（Ｐｅｔｅｒｓ  Ｄ．）、スパークス  Ｒ．Ｇ．（Ｓｐａｒｋｓ  Ｒ．Ｇ．）（２００３年）「Ｘａｎｏｍｅｌｉｎｅ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ａｎｔｉｐｓｙｃｈｏｔｉｃ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｏｆ  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｕｂｔｙｐｅ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ａｇｏｎｉｓｔｓ．」  ＣＮＳ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｖ  ９（２）：１５９−１８６頁
ノルディン  Ｃ．（Ｎｏｒｄｉｎ  Ｃ．）、アルメ  Ｂ．（Ａｌｍｅ  Ｂ．）、ボンデッソン  Ｕ．（Ｂｏｎｄｅｓｓｏｎ  Ｕ．）（１９９５年）「ＣＳＦ  ａｎｄ  ｓｅｒｕｍ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｄｅｍｅｔｈｙｌ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ：ａ  ｐｉｌｏｔ  ｓｔｕｄｙ．」Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  １２２：１０４−１０７頁
オリアナス  Ｍ．Ｃ．（Ｏｌｉａｎａｓ  Ｍ．Ｃ．）、マウリュ  Ｃ．（Ｍａｕｌｌｕ  Ｃ．）、オナリ  Ｐ．（Ｏｎａｌｉ  Ｐ．）（１９９９年）「Ｍｉｘｅｄ  ａｇｏｎｉｓｔ−ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ａｔ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｈｕｍａｎ  ｃｌｏｎｅｄ  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｕｂｔｙｐｅｓ  ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  ｉｎ  ｃｈｉｎｅｓｅ  ｈａｍｓｔｅｒ  ｏｖａｒｙ  ｃｅｌｌｓ．」  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ２０（３）：２６３−２７０頁
ペリー  Ｐ．Ｊ．（Ｐｅｒｒｙ  Ｐ．Ｊ．）、ミラー  Ｄ．Ｄ．（Ｍｉｌｌｅｒ  Ｄ．Ｄ．）、アルント  Ｓ．Ｖ．（Ａｒｎｄｔ  Ｓ．Ｖ．）、カドレ  Ｒ．Ｊ．（Ｃａｄｏｒｅｔ  Ｒ．Ｊ．）  （１９９１年）  「Ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ａｎｄ  ｎｏｒｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｐｌａｓｍａ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｏｆ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ−ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ  ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉｃ  ｐａｔｉｅｎｔｓ．」  Ａｍ  Ｊ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  １４８（２）：２３１−１３５頁
ファイファー  Ｃ．Ｃ．（Ｐｆｅｉｆｆｅｒ  Ｃ．Ｃ．）、ジェニー  Ｅ．Ｈ．（Ｊｅｎｎｅｙ  Ｅ．Ｈ．）（１９５７年）「Ｔｈｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｃｏｕｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ  ｂｙ  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｂｒａｉｎ．」  Ａｎｎ  ＮＹ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ６６：７５３−７６４頁
シャノン  Ｈ．Ｅ．（Ｓｈａｎｎｏｎ  Ｈ．Ｅ．）、バイマスター  Ｆ．Ｐ．（Ｂｙｍａｓｔｅｒ  Ｆ．Ｐ．）、カリガロ  Ｄ．Ｏ．（Ｃａｌｌｉｇａｒｏ  Ｄ．Ｏ．）、グリーンウッド  Ｂ．（Ｇｒｅｅｎｗｏｏｄ  Ｂ．）、ミッチ  Ｃ．Ｈ．（Ｍｉｔｃｈ  Ｃ．Ｈ．）、ソーヤー  Ｂ．Ｄ．（Ｓａｗｙｅｒ  Ｂ．Ｄ．）、ワード  Ｊ．Ｓ．（Ｗａｒｄ  Ｊ．Ｓ．）、ウォン  Ｄ．Ｔ．（Ｗｏｎｇ  Ｄ．Ｔ．）、オルセン  Ｐ．Ｈ．（Ｏｌｅｓｅｎ  Ｐ．Ｈ．）、シアダウン  Ｍ．Ｊ．（Ｓｈｅａｒｄｏｗｎ  Ｍ．Ｊ．）、スウェドバーグ  Ｍ．Ｄ．Ｂ．（Ｓｗｅｄｂｅｒｇ  Ｍ．Ｄ．Ｂ．）、スズダック  Ｐ．Ｄ．（Ｓｕｚｄａｋ  Ｐ．Ｄ．）、サウアーバーグ  Ｐ．（Ｓａｕｅｒｂｅｒｇ  Ｐ．）（１９９４年）「Ｘａｎｏｍｅｌｉｎｅ：ａ  ｎｏｖｅｌ  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｇｏｎｉｓｔ  ｗｉｔｈ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ  ｆｏｒ  Ｍ１  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．」Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ  ２６９（１）：２７１−２８１頁
シャノン  Ｈ．Ｅ．（Ｓｈａｎｎｏｎ  Ｈ．Ｅ．）、ラスムセン  Ｋ．（Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ  Ｋ．）、バイマスター  Ｆ．Ｐ．（Ｂｙｍａｓｔｅｒ  Ｆ．Ｐ．）、ハート  Ｊ．Ｃ．（Ｈａｒｔ  Ｊ．Ｃ．）、ピーターズ  Ｓ．Ｃ．（Ｐｅｔｅｒｓ  Ｓ．Ｃ．）、スウェドバーグ  Ｍ．Ｄ．（Ｓｗｅｄｂｅｒｇ  Ｍ．Ｄ．）、ジェプセン  Ｌ．（Ｊｅｐｐｅｓｅｎ  Ｌ．）、シアダウン  Ｍ．Ｊ．（Ｓｈｅａｒｄｏｗｎ  Ｍ．Ｊ．）、サウアーバーグ  Ｐ．（Ｓａｕｅｒｂｅｒｇ  Ｐ．）、フィンク・ジェンセン  Ａ．（Ｆｉｎｋ−Ｊｅｎｓｅｎ  Ａ．）（２０００年）「Ｘａｎｏｍｅｌｉｎｅ，ａｎ  Ｍ（１）／Ｍ（４）  ｐｒｅｆｅｒｒｉｎｇ  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ｃｈｏｌｉｎｅｒｇｉｃ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｇｏｎｉｓｔ，ｐｒｏｄｕｃｅｓ  ａｎｔｉｐｓｙｃｈｏｔｉｃ−ｌｉｋｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  ｒａｔｓ  ａｎｄ  ｍｉｃｅ．」Ｓｃｈｉｚｏｐｈｒ  Ｒｅｓ  ４２：２４９−２５９頁
スナイダー  Ｓ．（Ｓｎｙｄｅｒ  Ｓ．）、グリーンバーグ  Ｄ．（Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ  Ｄ．）、ヤマムラ  Ｈ．Ｉ．（Ｙａｍａｍｕｒａ  Ｈ．Ｉ．）（１９７４年）「Ａｎｔｉ−ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉｃ  ｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  ｂｒａｉｎ  ｃｈｏｌｉｎｅｒｇｉｃ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ａｆｆｉｎｉｔｙ  ｆｏｒ  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ｓｉｔｅｓ  ｐｒｅｄｉｃｔｓ  ｅｘｔｒａｐｙｒａｍｉｄａｌ  ｅｆｆｅｃｔｓ．」Ａｒｃｈ  Ｇｅｎ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  ３１：５８−６１頁
スパルディング  Ｔ．Ａ．（Ｓｐａｌｄｉｎｇ  Ｔ．Ａ．）、トロッター  Ｃ（Ｔｒｏｔｔｅｒ  Ｃ．）、スカーベック  Ｎ．（Ｓｋｊａｅｒｂａｅｋ  Ｎ．）、メシエ  Ｔ．Ｌ．（Ｍｅｓｓｉｅｒ  Ｔ．Ｌ．）、クーリエ  Ｅ．Ａ．（Ｃｕｒｒｉｅｒ  Ｅ．Ａ．）、バースタイン  Ｅ．Ｓ．（Ｂｕｒｓｔｅｉｎ  Ｅ．Ｓ．）、リ  Ｄ．（Ｌｉ  Ｄ．）、ハックセル  Ｕ．（Ｈａｃｋｓｅｌｌ  Ｕ．）、ブラン  Ｍ．Ｒ．（Ｂｒａｎｎ  Ｍ．Ｒ．）（２００２年）「Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  ａｎ  ｅｃｔｏｐｉｃ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｓｉｔｅ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｍ（１）  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ．」  Ｍｏｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ６１：１２９７−１３０２頁
スピナ  Ｅ．（Ｓｐｉｎａ  Ｅ．）、アベノソ  Ａ．（Ａｖｅｎｏｓｏ  Ａ．）、ファッチオーラ  Ｇ．（Ｆａｃｃｉｏｌａ  Ｇ．）、サレミ  Ｍ．（Ｓａｌｅｍｉ  Ｍ．）、スコルド  Ｍ．Ｇ．（Ｓｃｏｒｄｏ  Ｍ．Ｇ．）、アンチオーネ  Ｍ．（Ａｎｃｉｏｎｅ  Ｍ．）、マディア  Ａ．Ｇ．（Ｍａｄｉａ  Ａ．Ｇ．）、ペルッカ  Ｅ．（Ｐｅｒｕｃｃａ  Ｅ．）  （２００１年）  「Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｐｌａｓｍａ  ｒｉｓｐｅｒｉｄｏｎｅ  ａｎｄ  ９−ｈｙｄｒｏｘｙｒｉｓｐｅｒｉｄｏｎｅ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ．」Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  １５３：２３８−２４３頁
スー  Ｃ．（Ｓｕｒ  Ｃ．）、マジョルガ  Ｐ．Ｊ．（Ｍａｌｌｏｒｇａ  Ｐ．Ｊ．）、ヴィットマン  Ｍ．（Ｗｉｔｔｍａｎｎ  Ｍ．）、ヤコブソン  Ｍ．Ａ．（Ｊａｃｏｂｓｏｎ  Ｍ．Ａ．）、パスカレッリャ  Ｄ．（Ｐａｓｃａｒｅｌｌａ  Ｄ．）、ウィリアムズ  Ｊ．Ｂ．（Ｗｉｌｌｉａｍｓ  Ｊ．Ｂ．）、ブランディッシュ  Ｐ．Ｅ．（Ｂｒａｎｄｉｓｈ  Ｐ．Ｅ．）、ペティボーン  Ｄ．Ｊ．（Ｐｅｔｔｉｂｏｎｅ  Ｄ．Ｊ．）、スコルニック  Ｅ．Ｍ．（Ｓｃｏｌｎｉｃｋ  Ｅ．Ｍ．）、コン  Ｐ．Ｊ．（Ｃｏｎｎ  Ｐ．Ｊ．）  （２００３年）  「Ｎ−ｄｅｓｍｅｔｈｙｌｃｌｏｚａｐｉｎｅ，ａｎ  ａｌｌｏｓｔｅｒｉｃ  ａｇｏｎｉｓｔ  ａｔ  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  １  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｐｏｔｅｎｔｉａｔｅｓ  Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ−ｄ−ａｓｐａｒｔａｔｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｃｔｉｖｉｔｙ．」Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  １００（２３）：１３６７４−１３６７９頁
Ｔｈｅ  Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ  Ｓｔｕｄｙ  Ｇｒｏｕｐ  （１９９９年）「Ｌｏｗ−ｄｏｓｅ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｄｒｕｇ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｐｓｙｃｈｏｓｉｓ  ｉｎ  Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ．」  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３４０：７５７−７６３頁
ワイグマン  Ｈ．（Ｗｅｉｇｍａｎｎ  Ｈ．）、ハーター  Ｓ．（Ｈａｒｔｔｅｒ  Ｓ．）、フィッシャー  Ｖ．（Ｆｉｓｃｈｅｒ  Ｖ．）、ダーメン  Ｎ．（Ｄａｈｍｅｎ  Ｎ．）、ヒエムケ  Ｃ．（Ｈｉｅｍｋｅ  Ｃ．）（１９９９年）  「Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ａｎｄ  ｄｅｓｍｅｔｈｙｌｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｂｌｏｏｄ  ａｎｄ  ｂｒａｉｎ  ｉｎ  ｒａｔｓ．」Ｅｕｒ．Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌ  ９：２５３−２５６頁
ワイナー  Ｄ．Ｍ．（Ｗｅｉｎｅｒ  Ｄ．Ｍ．）、レビー  Ａ．Ｉ．（Ｌｅｖｅｙ  Ａ．Ｉ．）、ブラン  Ｍ．Ｒ．（Ｂｒａｎｎ  Ｍ．Ｒ．）（１９９０年）「Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ  ａｎｄ  ｄｏｐａｍｉｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｍＲＮＡ’ｓ  ｉｎ  ｒａｔ  ｂａｓａｌ  ｇａｎｇｌｉａ．」Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．８７：７０５０−７０５４頁
ワイナー  Ｄ．Ｍ．（Ｗｅｉｎｅｒ  Ｄ．Ｍ．）、バースタイン  Ｅ．Ｓ．（Ｂｕｒｓｔｅｉｎ  Ｅ．Ｓ．）、ナッシュ  Ｎ．（Ｎａｓｈ  Ｎ．）、クロストン  Ｇ．Ｅ．（Ｃｒｏｓｔｏｎ  Ｇ．Ｅ．）、クーリエ  Ｅ．Ａ．（Ｃｕｒｒｉｅｒ  Ｅ．Ａ．）、バノーバー  Ｋ．Ｅ．（Ｖａｎｏｖｅｒ  Ｋ．Ｅ．）、ハーベイ  Ｓ．Ｃ．（Ｈａｒｖｅｙ  Ｓ．Ｃ．）、ドナヒュー  Ｅ．（Ｄｏｎｏｈｕｅ  Ｅ．）、ハンセン  Ｈ．Ｃ．（Ｈａｎｓｅｎ  Ｈ．Ｃ．）、アンデルソン  Ｃ．Ｍ．（Ａｎｄｅｒｓｓｏｎ  Ｃ．Ｍ．）、スパルディング  Ｔ．Ａ．（Ｓｐａｌｄｉｎｇ  Ｔ．Ａ．）、ギブソン  Ｄ．Ｆ．Ｃ．（Ｇｉｂｓｏｎ  Ｄ．Ｆ．Ｃ．）、クレプス・トムソン  Ｋ．（Ｋｒｅｂｓ−Ｔｈｏｍｓｏｎ  Ｋ．）、パウエル  Ｓ．Ｂ．（Ｐｏｗｅｌｌ  Ｓ．Ｂ．）、ゲイヤー  Ｍ．Ａ．（Ｇｅｙｅｒ  Ｍ．Ａ．）、ハックセル  Ｕ．（Ｈａｃｋｓｅｌｌ  Ｕ．）、ブラン  Ｍ．Ｒ．（Ｂｒａｎｎ  Ｍ．Ｒ．）（２００１年）「５−ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ２ａ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｉｎｖｅｒｓｅ  ａｇｏｎｉｓｔｓ  ａｓ  ａｎｔｉｐｓｙｃｈｏｔｉｃｓ．」Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ  ２９９：２６８−２７６頁
ワイスマン  Ｊ．Ｔ．（Ｗｅｉｓｓｍａｎ  Ｊ．Ｔ．）、マ  Ｊ．（Ｍａ  Ｊ．）、エセックス  Ａ．（Ｅｓｓｅｘ  Ａ．）、ガオ  Ｙ．（Ｇａｏ  Ｙ．）、バースタイン  Ｅ．Ｓ．（Ｂｕｒｓｔｅｉｎ  Ｅ．Ｓ．）（２００３年）「Ｇ−ｐｒｏｔｅｉｎ−ｃｏｕｐｌｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒａｐ  ＧＴＰａｓｅｓ：ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｎｏｖｅｌ  Ｇｉ  ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｐａｔｈｗａｙ．」  Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ２３（１）：２４１−２４９頁
ウェレンドルフ  Ｐ．（Ｗｅｌｌｅｎｄｏｒｐｈ  Ｐ．）、グッドマン  Ｍ．Ｗ．（Ｇｏｏｄｍａｎ  Ｍ．Ｗ．）、バースタイン  Ｅ．Ｓ．（Ｂｕｒｓｔｅｉｎ  Ｅ．Ｓ．）、ナッシュ  Ｎ．Ｒ．（Ｎａｓｈ  Ｎ．Ｒ．）、ブラン  Ｍ．Ｒ．（Ｂｒａｎｎ  Ｍ．Ｒ．）、ワイナー  Ｄ．Ｍ．（Ｗｅｉｎｅｒ  Ｄ．Ｍ．）  （２００２年）  「Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｃｌｏｎｉｎｇ  ａｎｄ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｌｙ  ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｉｓｏｆｏｒｍｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｈｕｍａｎ  ｈｉｓｔａｍｉｎｅ  Ｈ３  ｒｅｃｅｐｔｏｒ．」  Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ４２：９２９−９４０頁
ウォン  Ａ．Ｈ．（Ｗｏｎｇ  Ａ．Ｈ．）、ヴァン・トル  Ｈ．Ｈ．（ＶａｎＴｏｌ  Ｈ．Ｈ．）  （２００３年）「Ｓｃｈｉｚｏｐｈｒｅｎｉａ：ｆｒｏｍ  ｐｈｅｎｏｍｅｎｏｌｏｇｙ  ｔｏ  ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ．」Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｂｉｏｂｅｈａｖ  Ｒｅｖ  ２７（３）：２６９−３０６頁
ヤング  Ｃ．Ｄ．（Ｙｏｕｎｇ  Ｃ．Ｄ．）、メルツァー  Ｈ．Ｙ．（Ｍｅｌｔｚｅｒ  Ｈ．Ｙ．）、ドイチュ  Ａ．Ｙ．（Ｄｅｕｔｃｈ  Ａ．Ｙ．）  （１９９８年）「Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｄｅｓｍｅｔｈｙｌｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｏｎ  ｆｏｓ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｆｏｒｅｂｒａｉｎ：ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ．」Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  １９：９９−１０３頁
ゾーン  Ｓ．Ｈ．（Ｚｏｒｎ  Ｓ．Ｈ．）、ジョーンズ  Ｓ．Ｂ．（Ｊｏｎｅｓ  Ｓ．Ｂ．）、ワード  Ｋ．Ｍ．（Ｗａｒｄ  Ｋ．Ｍ．）、リストン  Ｄ．Ｒ．（Ｌｉｓｔｏｎ  Ｄ．Ｒ．）（１９９４年）「Ｃｌｏｚａｐｉｎｅ  ｉｓ  ａ  ｐｏｔｅｎｔ  ａｎｄ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｍｕｓｃａｒｉｎｉｃ  Ｍ４  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｇｏｎｉｓｔ．」Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ２６９：Ｒ１−Ｒ２頁
【図面の簡単な説明】
【０１５９】
【図１】Ｒ−ＳＡＴアッセイにおけるＭ１ムスカリン性アセチルコリン受容体でのＮ−デスメチルクロザピンのアゴニスト活性の結果を示すグラフである。
【図２】ホスファチジルイノシトールのアッセイにおけるＭ１ムスカリン性（ｍｕｓａｃｒｉｎｉｃ）アセチルコリン受容体でのＮ−デスメチルクロザピンのアゴニスト活性の結果を示すグラフである。
【図３】Ｎ−デスメチルクロザピンの非経口的投与後におけるラット海馬でのＭＡＰキナーゼ活性化についての写真を示す。
【図４Ａ】Ｒ−ＳＡＴアッセイによって測定された４６２種類の化合物ライブラリのムスカリン性Ｍ１受容体アゴニスト活性のグラフを示す。示されるＭ１受容体の有効性データは、１マイクロモルの濃度の化合物から得られ、カルバコールにおける４０マイクロモル濃度での飽和（１００％）において観察される最大応答に相対的な有効性の百分率として報告される。
【図４Ｂ】ヒトＭ１受容体遺伝子を安定的にトランスフェクトしたチャイニーズハムスター卵巣細胞を利用したＰＩ加水分解データのグラフを示す。パネルＢは、カルバコールに対して観察された応答の百分率として報告されたアゴニスト応答を表す。表される薬剤は、カルバコール（正方形）、クロザピン（三角形）、およびＮ−デスメチルクロザピン（円形）であり、ここで観察された効力（ｐＥＣ５０）は、カルバコール（５．７）、Ｎ−デスメチルクロザピン（６．７）、およびクロザピン（非応答）である。パネルＣは、３マイクロモルの濃度のカルバコールの存在下で観察された競合的アンタゴニスト応答を表し、アトロピン（１００％）において観察された応答の百分率として報告される。表される薬剤は、アトロピン（正方形）、クロザピン（三角形）、およびＮ−デスメチルクロザピン（円形）であり、ここで観察された効力（ｐＫｉ）は、アトロピン（８．５）、Ｎ−デスメチルクロザピン（非応答）、およびクロザピン（７．１）である。パネルＤは、０．１５マイクロモルの濃度のＮ−デスメチルクロザピンの存在下で観察された競合的アンタゴニスト応答を表し、アトロピン（１００％）において観察された応答の百分率として報告される。表される薬剤は、アトロピン（正方形）およびクロザピン（三角形）であり、ここで観察された効力（ｐＫｉ）はアトロピン（８．４）およびクロザピン（７．６）である。
【図４Ｃ】ヒトＭ１受容体遺伝子を安定的にトランスフェクトしたチャイニーズハムスター卵巣細胞を利用したＰＩ加水分解データのグラフを示す。パネルＢは、カルバコールに対して観察された応答の百分率として報告されたアゴニスト応答を表す。表される薬剤は、カルバコール（正方形）、クロザピン（三角形）、およびＮ−デスメチルクロザピン（円形）であり、ここで観察された効力（ｐＥＣ５０）は、カルバコール（５．７）、Ｎ−デスメチルクロザピン（６．７）、およびクロザピン（非応答）である。パネルＣは、３マイクロモルの濃度のカルバコールの存在下で観察された競合的アンタゴニスト応答を表し、アトロピン（１００％）において観察された応答の百分率として報告される。表される薬剤は、アトロピン（正方形）、クロザピン（三角形）、およびＮ−デスメチルクロザピン（円形）であり、ここで観察された効力（ｐＫｉ）は、アトロピン（８．５）、Ｎ−デスメチルクロザピン（非応答）、およびクロザピン（７．１）である。パネルＤは、０．１５マイクロモルの濃度のＮ−デスメチルクロザピンの存在下で観察された競合的アンタゴニスト応答を表し、アトロピン（１００％）において観察された応答の百分率として報告される。表される薬剤は、アトロピン（正方形）およびクロザピン（三角形）であり、ここで観察された効力（ｐＫｉ）はアトロピン（８．４）およびクロザピン（７．６）である。
【図４Ｄ】ヒトＭ１受容体遺伝子を安定的にトランスフェクトしたチャイニーズハムスター卵巣細胞を利用したＰＩ加水分解データのグラフを示す。パネルＢは、カルバコールに対して観察された応答の百分率として報告されたアゴニスト応答を表す。表される薬剤は、カルバコール（正方形）、クロザピン（三角形）、およびＮ−デスメチルクロザピン（円形）であり、ここで観察された効力（ｐＥＣ５０）は、カルバコール（５．７）、Ｎ−デスメチルクロザピン（６．７）、およびクロザピン（非応答）である。パネルＣは、３マイクロモルの濃度のカルバコールの存在下で観察された競合的アンタゴニスト応答を表し、アトロピン（１００％）において観察された応答の百分率として報告される。表される薬剤は、アトロピン（正方形）、クロザピン（三角形）、およびＮ−デスメチルクロザピン（円形）であり、ここで観察された効力（ｐＫｉ）は、アトロピン（８．５）、Ｎ−デスメチルクロザピン（非応答）、およびクロザピン（７．１）である。パネルＤは、０．１５マイクロモルの濃度のＮ−デスメチルクロザピンの存在下で観察された競合的アンタゴニスト応答を表し、アトロピン（１００％）において観察された応答の百分率として報告される。表される薬剤は、アトロピン（正方形）およびクロザピン（三角形）であり、ここで観察された効力（ｐＫｉ）はアトロピン（８．４）およびクロザピン（７．６）である。
【図５】マウス海馬におけるＮ−デスメチルクロザピンのＭ１ムスカリン受容体アゴニスト活性を示す。賦形剤（Ａ）、３０ｍｇ／ｋｇのクロザピン（Ｂ）、１０（Ｃ）、３０（Ｄ）、１００（Ｅ）のＮ−デスメチルクロザピン、またはＮ−デスメチルクロザピン（３０ｍｇ／ｋｇ）およびスコポラミン（０．３ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）（Ｆ）の投与後における、ＣＡ１錐体細胞の細胞体および近位樹状突起におけるホスホ−ＭＡＰＫ免疫反応性（矢印により強調）が示される。
【図６】マウス海馬におけるＮ−デスメチルクロザピンのＭ１ムスカリン受容体アゴニスト活性の定量結果を示す。マウス４匹由来の海馬のＣＡ１領域におけるコンピュータで算出された光学密度の測定値を介してホスホ−ＭＡＰＫの免疫反応性の定量が行われた。ここで（＊）は１つの因子であるアノバ・ポストホック・ダンネット・テスト（ＡＮＯＶＡ  ｐｏｓｔ−ｈｏｃ  Ｄｕｎｎｅｔｔ'ｓ  ｔｅｓｔ）（Ｆ（５，２３）=１０．８８：Ｐ＜０．０００１）を用いた、賦形剤治療に対する有意差を示す。
【図７】１５０ｎＭのＮＤＭＣと様々な濃度のクロザピンとを組み合わせたＲ−ＳＡＴアッセイの結果を示す。
【図８】１５０ｎＭのＮＤＭＣと様々な濃度のクロザピンとを組み合わせたＰＩ加水分解アッセイの結果を示す。
【図１】
2008509147.tif 000021
【図２】
2008509147.tif 000022
【図３】
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【図４Ａ】
2008509147.tif 000024
【図４Ｂ】
2008509147.tif 000025
【図４Ｃ】
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【図４Ｄ】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
2008509147.tif 000030
【図８】
2008509147.tif 000031
【国際調査報告】
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