(57)【要約】  本発明は、還元剤の存在下におけるシアノコバラミン又はヒドロキソコバラミンの炭酸ジメチルでのメチル化を含む、メチルコバラミンを製造する新規な方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
還元剤の存在下におけるシアノコバラミン又はヒドロキソコバラミンの炭酸ジメチルでのメチル化を含む、メチルコバラミンの製造方法。
【請求項２】
メチル化が、水性又は水−有機媒体中、シアノイオンの金属イオン封鎖剤の存在下で生じる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
還元剤が、水素化ホウ素ナトリウムである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
金属イオン封鎖剤が、硫酸鉄（ＩＩ）又は塩化コバルト（ＩＩ）である、請求項１から３までのいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
反応が、水素化ホウ素ナトリウム及び炭酸ジメチルを逐次的に又は同時に添加することによって生じる、請求項１から４までのいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、メチオニンの生合成において有用な補酵素タイプのビタミンＢ１２であり、末梢神経系疾患の管理用の薬剤において広く使用されている、メチルコバラミン（Ｉ）を製造する新規な方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
特公昭４５−３８０５９号は、シアノコバラミン（ＩＩ）を鉄塩の存在下で、ヨウ化メチル及び水素化ホウ素ナトリウムで還元メチル化して、生じるシアノイオンを除去することによるメチルコバラミン（Ｉ）の調製を開示している。
【０００３】
独国特許公開第２，０５８，８９２号は、ｐ−トルエンスルホン酸メチルを介して水素化ホウ素ナトリウムで還元されたシアノコバラミンのメチル化によるメチルコバラミン（Ｉ）の調製を開示している。この反応は、シアノイオンと安定な錯体をもたらす金属塩（銅又は鉄）の存在下、酸素及び光の不存在下で生じる。
【０００４】
独国特許公開第２，１４９，１５０号は、ヒドロキソコバラミン（ＩＩ）の、メチルヨウ化水銀[ＭｅＨｇＩ]又はアンモニウムメチルヘキサフルオロケイ酸塩[（ＮＨ４）ＳｉＦ６Ｍｅ]でのメチル化によるメチルコバラミン（Ｉ）の調製を開示している。
【０００５】
独国特許公開第２，２５５，２０３号は、ヒドロキソコバラミン（ＩＩＩ）の、反応を触媒するコバルト塩の存在下における、シュウ酸メチルモノエステル及び亜鉛粉末を介したメチル化及び還元によるメチルコバラミン（Ｉ）の調製を開示している。
【０００６】
独国特許公開第２，４３４，９６７号は、シアノコバラミン（ＩＩ）の、反応を触媒するコバルト塩の存在下における、シュウ酸メチル及び亜鉛粉末を介したメチル化及び還元によるメチルコバラミン（Ｉ）の調製を開示している。
【０００７】
ベルギー国特許第８８９，７８７号は、シアノコバラミン（ＩＩ）を水素化ホウ素ナトリウムで還元した後に、ヨウ化メチルでメチル化することによってメチルコバラミン（Ｉ）を調製することを開示しており、この反応は、放出されるシアノイオンを封鎖するためにアルデヒドの存在下で行われる。
【０００８】
欧州特許第１２３６７３７号は、シアノコバラミン又はヒドロキソコバラミンの、鉄塩又はコバルト塩の存在下における、水素化ホウ素ナトリウム、及びトリメチルスルホニウム又はトリメチルスルホキソニウムハライドを介した還元メチル化によるメチルコバラミンの調製を開示している。
【０００９】
これらの方法の全ては、市販されていない試薬（シュウ酸モノエステル、アンモニウムメチルヘキサフルオロケイ酸塩）又は有毒な試薬（ヨウ化メチル、ｐ−トルエンスルホン酸メチル）又は環境適合性のない試薬（メチルヨウ化水銀）を使用するために、いくつかの短所を有する。
【００１０】
トリメチルスルホニウム又はトリメチルスルホキソニウムハライドでのメチル化は、副生成物としてジメチル硫黄を生成し、これは、有害であり、及び悪臭がある。副生物としてのジメチルスルホキシドの形成も生じることがあり、これは、有毒ではないが、その高溶解性及び高沸点（１８９℃）のために水相から容易に除去されない。
【００１１】
結論として、非毒性及び／又は環境適合性のメチル化剤を使用する、メチルコバラミンを製造する工業的方法は、現在利用できない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明は、メチル化剤として、非毒性及び環境適合性の試薬、炭酸ジメチル（ＩＶ）を使用することを含む、メチルコバラミン（Ｉ）を製造する新規な方法を提供する。
【化１】
2008534458.tif 000002
【００１３】
近年、炭酸ジメチルは、有機化学において、とりわけ、いわゆる物質環境化学の分野においてメチル化剤として出現してきた。炭酸ジメチルの利点は、その無毒性、低商業的コスト、及び副生物として二酸化炭素及びメタノールだけが形成されることである。
【００１４】
しかし、炭酸ジメチルは、その乏しい反応性及び水への不溶性により、通常、無水の及び激しい条件を必要とする。加工条件は、通常、高温において、強塩基性媒体中である。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明において、炭酸ジメチルは、水に不溶な試薬であるにもかかわらず（Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ、１３版、＃６０６５）、シアノコバラミン（ＩＩ）又はヒドロキソコバラミン（ＩＩＩ）のいずれかの還元によって得られるコバラミンＣｏＩ還元形態（Ｂ１２Ｓ）の優れたメチル化剤であることが実証されている。これが、いわゆる超求核的Ｂ１２Ｓアニオンが、有機化学において最も強力な求核的試薬の１つであることが知られている理由である（Ｎ．Ｎ．Ｇｒｅｅｎｗｏｏｄ  ａｎｄ  Ａ．Ｅａｒｎｓｈａｗ、「元素の化学（Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｅｌｅｍｅｎｔｓ」、Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、Ｏｘｆｏｒｄ、Ｅｎｇｌａｎｄ、１９８４、１３２１〜１３２２頁）。
【００１６】
事実、前述の求核的形態ＣｏＩ（Ｂ１２Ｓ）は、以下のスキーム（Ｄ．Ａｕｔｉｓｓｅｒ等、Ｂｕｌｌ．Ｓｏｃ．Ｃｈｉｍ．Ｆｒａｎｃｅ  １９８０、ｐａｒｔ２、１９２）によりコバラミンＢ１２の還元から得られる：
【化２】
2008534458.tif 000003
及び、後に、炭酸ジメチルのメチル基でＢ１２Ｓを求核的に攻撃することでメチルコバラミンが得られる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
したがって、本発明の主な実施形態は、シアノコバラミン（ＩＩ）又はヒドロキソコバラミン（ＩＩＩ）を還元し、及び引き続いて炭酸ジメチル（ＩＶ）でメチル化することによるメチルコバラミン（Ｉ）の製造である：
【化３】
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【００１８】
したがって、本発明の効果は、非無水の穏やかな条件下での、炭酸ジメチルでのメチルコバラミンの調製に基づいているので、このことから、反応は非常に選択された条件下で実施されることが可能になる。
【００１９】
事実、メチル化反応は、還元剤（Ｖ）の存在下で水性媒体中、有機共溶剤と共に又は有機共溶剤なしで、ほぼ周囲温度において僅かに塩基性の媒体中で生じる。
【００２０】
これらの条件下で、メチルコバラミンは良好な収率及び品質を有して得られる。さらに、炭酸ジメチルによるメチル化は、安全、毒性又は環境問題を生じる恐れがある副生物を形成しない。
【００２１】
炭酸ジメチルの使用されるべき量は、１から２５当量まで変動し得るが、好ましくは３から１５当量である。
【００２２】
還元剤（Ｖ）として、Ｃｏ（ＩＩＩ）の原子をＣｏ（Ｉ）に還元する能力のあるもの、特にハライド、及びさらに特に水素化ホウ素ナトリウムを使用することができる。
【００２３】
還元剤（Ｖ）の使用されるべき量は、決定的ではないが、４から２５当量まで、好ましくは１０から２０当量が、一般に使用される。
【００２４】
反応温度は、５から６０℃まで変動し得るが、２０から４０℃の温度が推奨される。
【００２５】
反応は、文献に記載されている標準条件下で、シアノイオンの金属イオン封鎖剤の存在下で実施される。硫酸第一鉄などの鉄塩、及び塩化コバルト（ＩＩ）などのコバルト塩の使用が特に効率的である。
【００２６】
シアノイオンの金属イオン封鎖剤の使用されるべき量は少なく、通常０．１と１．０当量の間の範囲、好ましくは０．２と０．５当量の間である。
【００２７】
反応は、前述の条件下で、還元剤及び炭酸ジメチルの各溶液を逐次的に又は同時に添加することによって実施することができる。
【００２８】
反応は、水性又は水性−有機媒体において実施される。有機溶剤を使用する場合には、その極性は、水性反応媒体において可溶化を得るのと同様に十分であるべきである。例えば、アルコール、ケトン、エーテル、エステル、ニトリル、アミド及び尿素、好ましくはアルコール及び低級ケトンが有用である。好ましい溶剤は、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、ｉ−プロパノールなどのＣ１〜Ｃ４アルコール；アセトン及びメチルエチルケトンなどのケトン；テトラヒドロフラン及びジオキサンなどのエーテル；アセトニトリル及びジメチルホルムアミドである。
【００２９】
反応は、メチルコバラミンの光酸化分解を回避するために、酸素及び光の不存在下で実施される（Ｒ．Ｊ．Ａｎｄｅｒｓｏｎ等、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９９２、４３７、２２７−３３７）。
【００３０】
次に、本発明を以下の限定しない実施例によって詳細に記載する。
【実施例】
【００３１】
（実施例１）メチルコバラミン（Ｉ）
不活性雰囲気及び赤色光において、水１２５ｍｌ中の、シアノコバラミン１０ｇ（０．００７４モル）、塩化コバルト（ＩＩ）六水和物０．６５ｇ（０．００２７モル）、炭酸ジメチル６．６５ｇ（０．０７５モル）の撹拌混合物に、水２５ｍｌ中の水素化ホウ素ナトリウム４．２ｇ（０．１１モル）及び１Ｎ水酸化ナトリウム０．４２ｇの溶液を、３５〜４０℃において２時間にわたり添加した。４時間その同じ温度で撹拌した後に、この混合物を１０℃において冷却させ、さらに３時間撹拌し、次いで濾過した。得られた固体をアセトン／水（６０：４０ｖ／ｖ）２００ｍｌにより処理し、濾過した。得られた溶液を、アセトンが除去されるまで減圧下で濃縮した。この水溶液を非極性樹脂（Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ  ＸＡＤ−２）５００ｍｌを通してクロマトグラフィーにかけた。一定不変の導電率になるまで最初に水で洗浄することによって、全ての無機塩を除去し、次いでメチルコバラミンをメタノール／水（５０／５０ｖ／ｖ）の混合液により溶出した。純粋な生成物を含む溶出液を、減圧下で濃縮し、次いでアセトン１０容量により沈殿させて、８．４ｇ（８５％）を得た。
ＵＶスペクトル、ｐＨ２．０溶液：２６２〜２６６、３０３〜３０７及び４５９〜４６３ｎｍにおいて最大吸収。
ＵＶスペクトル、ｐＨ７．０溶液：２６５〜２６９、３４０〜３４４及び５２０〜５２４ｎｍにおいて最大吸収。
クロマトグラフィー評価（ＨＰＬＣ）による純度は、＞９９％であった。
【００３２】
（実施例２）メチルコバラミン（Ｉ）
シアノコバラミン１３ｇ（０．００９６モル）の溶液に、水１６９ｍｌ中の塩化コバルト（ＩＩ）六水和物０．９１ｇ（０．００３８モル）を添加した。この混合物を３５〜３７℃において加熱し、窒素雰囲気下、光を遮断し、メチルエチルケトン１３ｍｌ中の炭酸ジメチル４．７５ｇ（０．０５３モル）の溶液、及び２Ｎ水酸化ナトリウム０．２６ｍｌを含む水２６ｍｌ中の水素化ホウ素ナトリウム５．２ｇ（０．１３８モル）の溶液を３時間にわたり同時に添加した。１時間３５〜３７℃で撹拌した後に、この混合物を１２℃で冷却させ、さらに３時間撹拌し、濾過した。得られた固体を３５〜４０℃においてアセトン／水（５０：５０ｖ／ｖ）１８２ｍｌにより処理し、濾過した。得られた溶液を、アセトンが除去されるまで減圧下で濃縮した。この水溶液を非極性樹脂（Ｄｉａｉｏｎ  ＨＰ２０Ｌ）５００ｍｌを通してクロマトグラフィーにかけた。一定不変の導電率になるまで最初に水で洗浄することによって、全ての無機塩を除去し、次いでメチルコバラミンをメタノール／水（５０／５０ｖ／ｖ）の混合液により溶出した。純粋な生成物を含む画分を、減圧下で濃縮し、次いでアセトン１０容量により沈殿させて、１１．６ｇ（９０％）を得た。
【国際調査報告】
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