(57)【要約】【解決手段】  ＩＡＰ結合性分子およびそれらを含有する組成物を開示する。本発明のＩＡＰ結合性分子は、細胞中でＩＡＰ（アポト−シス阻害タンパク質）と相互作用し、そのような分子で処理された細胞中のアポト−シスを改変するのに使用できる。これらの化合物の実施形態では、Ｋｄの値が０．１μＭ未満である。これらのＩＡＰ結合分子を治療、診断、および分析目的に使用する方法も開示する。【選択図】      なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
化学式（２）の構造を有する分子と、薬学的に許容されるその塩とを有する組成物であって、
【化１】
2008506712.tif 000080
ここで、
式中、Ａ１およびＡ２はそれぞれ、水素原子、アルキル基、アリール基、またはアルキルアリール基であり、Ｒ１ａは水素原子またはメチル基であり、Ｒ１ｂはアルキル基またはアリール基であり、Ｘ１は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＨ２−、または−ＮＨ−基であり、更にＪは−ＣＨ−または−Ｎ−基であるが、但しＪが−Ｎ−のときＸ１は−ＣＨ２−または−ＮＨ−基であり、Ｙは水素原子またはアルキル基であり、Ｚは−ＯＨ、アリールオキシ基、アルコキシ基、ベンジルオキシ基、ベンジルオキシ基、アミノ基、アリールアミノ基，アルキルアミノ基、ベンジルアミノ基であり、Ｒ２は検出可能な標識であるか、或いは以下であり、
【化２】
2008506712.tif 000081
ここで、
Ｍはアルキレン基、アルケニレン基、アルキニレン基、ヘテロアルキレン基、ヘテロアルケニレン基、またはヘテロアルキニレン基であり、
Ｇは、結合、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ２ｄ）−（Ｒ２ｄは、水素原子、アルキル、シクロアルキル、またはアリール）、または−Ｓ（Ｏ）ｎ−（ｎは０、１、または２）であり、
Ｒ１０は、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、またはヘテロアリールであり、ｎはそれぞれ０、１、２、３、４、または５の整数である、組成物。
【請求項２】
請求項１記載の組成物および薬学的に許容される担体。
【請求項３】
化学式（３）の構造を有する分子と、薬学的に許容されるその塩とを有する組成物であって、
【化３】
2008506712.tif 000082
ここで、
Ａ１は水素原子、低級アルキル基、または選択的に置換された低級アルキル基であり、Ｒ１ａおよびＲ１ｂはそれぞれ、水素原子、低級アルキル基、選択的に置換された低級アルキル基、低級アルキレン基、選択的に置換された低級アルキレン基であるか、或いはＡ１はＲ１ａまたはＲ１ｂと共に、３〜６個の原子を有する選択的に置換されたヘテロシクロアルキル基であり、
Ｙは水素原子、アルキル基、アルキニル基、炭素数３〜７のシクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、アリールアルキル基、これらの基を選択的に置換したもの、これらの基をヒドロキシ置換したもの、或いはＹは、Ｚ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０と共に、炭素環、または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環を形成し、そこでＹは、Ｚ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０に結合しており、
Ｚは水素原子、アルキル基、ヒドロキシ基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルコキシ基、シクロアルキル基、シクロアルキルオキシ基、アリール基、ヘテロアリール基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いは、ＺはＹ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０と共に、炭素環、または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環を形成し、ここでＺは、Ｙ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０に結合しており、
Ｍは選択的に置換されたアルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基、選択的に置換された炭素数１〜５のアルキル基、炭素数１〜５のアルケニル基、または炭素数１〜５のアルキニル基、選択的に置換された、アルキレン基、アルケニレン基、またはアルキニレン基、或いは、選択的に置換された炭素数１〜５のアルキレン基、炭素数１〜５のアルケニレン基、または炭素数１〜５のアルキニレン基であり、
Ｇは、結合、ヘテロ原子、−（Ｃ＝Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）ｔ−（ｔは０、１、または２）、−ＮＲ１８−、−ＮＣＯＲ１８−、または−ＮＳ（Ｏ）ｘＲ１８−（ｘは、０、１、または２）であり、Ｒ１８は低級アルキル基、選択的に置換された低級アルキル基、またはシクロアルキル基であるか、或いはＲ１８は炭素環、またはＲ１８はＺ、Ｍ、またはＲ１０に結合している１〜５個のヘテロ原子を有する複素環であり、
Ｒ１０はアリ−ル基、ヘテロアリ−ル基、縮合環式のアリ−ル基、縮合環式のヘテロアリ−ル基であるか、或いはＲ１０は（４ａ）、（４ｂ）、（４ｃ）、または（４ｄ）の構造のいずれか１つであり、
【化４】
2008506712.tif 000083
ここで、
Ｘ２はヘテロ原子であり、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各基、またはＲ１４−１７の各基の群はそれぞれ、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、スルホネート基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各基、またはＲ１４−１７の各基はそれぞれ、水素原子、選択的に置換されたアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリーキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかはそれぞれ、アシル基またはアセチル基、カルボキシレート基、スルホネ−ト基、スルホン基、イミン基、またはオキシム基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各基、またはＲ１４−１７の各基の群は、炭素環、または１〜５個のヘテロ原子を有する複素環中に含まれ、ここでＹ、Ｚ、Ｍ、Ｇ、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各基、またはＲ１４−１７の各基の位置の基に結合している、組成物。
【請求項４】
請求項３記載の組成物および薬学的に許容される担体。
【請求項５】
化学式（３）の構造を有する分子および薬学的に許容されるその塩を有する組成物であって、
【化５】
2008506712.tif 000084
ここで、
式中、Ａ１は水素原子、低級アルキル基、または選択的に置換された低級アルキル基であり、Ｒ１ａおよびＲ１ｂはそれぞれ、水素原子、低級アルキル基、選択的に置換された低級アルキル基、低級アルキレン基、選択的に置換された低級アルキレン基であるか、或いはＡ１はＲ１ａまたはＲ１ｂと共に、選択的に置換された３〜６原子のヘテロシクロアルキル基であり、
Ｙは、水素原子、アルキル基、アルキニル基、炭素原子数３〜７のシクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、アリールアルキル基、これらの基が選択的に置換されたもの、これらの基がヒドロキシ置換されたものであるか、或いはＹはＺ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０と共に、炭素環または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環を形成しており、ここでＹはＺ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０に結合しているものであり、
Ｚは水素原子、アルキル基、ヒドロキシ基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルコキシ基、シクロアルキル基、シクロアルキルオキシ基、アリール基、ヘテロアリール基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＺはＹ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０と共に、炭素環または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環を形成しており、ここでＺはＹ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０に結合しており、
Ｍは選択的に置換された、アルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基であるか、或いは選択的に置換された炭素数１〜５の、アルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基であるか、或いは選択的に置換された、アルキレン基、アルケニレン基、またはアルキニレン基であるか、或いは選択的に置換された炭素数１〜５の、アルキレン基、アルケニレン基、またはアルキニレン基であり、
Ｇは、結合、ヘテロ原子、−（Ｃ＝Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）ｔ−（ｔは、０、１、または２）、−ＮＲ１８−、−ＮＣＯＲ１８−、又は−ＮＳ（Ｏ）ｘＲ１８−（ｘは、０、１、または２）であり、更にＲ１８は低級アルキル基、選択的に置換された低級アルキル基、又はシクロアルキル基であるか、或いはＲ１８は炭素環または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環に含まれており、ここでＲ１８は、Ｚ、Ｍ、またはＲ１０に結合しており、
Ｒ１０は、（４ａ）、（４ｂ）、（４ｃ）、または（４ｄ）の構造のいずれか１つであり、
【化６】
2008506712.tif 000085
ここで、
Ｘ２はヘテロ原子であり、、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかはそれぞれ、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、スルホネート基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、又はＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかはそれぞれ、水素原子、選択的に置換された、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、又はＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかはそれぞれ、アシル基またはアセチル基、カルボキシレート基、スルホネート基、スルホン基、イミン基、またはオキシム基であるか、又はＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかは、炭素環または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環に含まれており、Ｙ、Ｚ、Ｍ、Ｇ、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかの位置の基に結合している、組成物。
【請求項６】
請求項５記載の組成物および薬学的に許容される担体。
【請求項７】
化学式（５）の一般構造を有する分子および薬学的に許容されるその塩とを有する組成物であって、
【化７】
2008506712.tif 000086
ここで、
式中、Ａ１は水素原子または低級アルキル基であるか、或いはＡ１およびＲ１ｂは共に３〜５個の原子を有する環を構成しており、
Ｒ１ａは水素原子であり、Ｒ１ｂは低級アルキル基であるか、或いはＡ１と共に３〜５個の原子を有する環を構成しており、
Ｙはアルキル基、アルキニル基、炭素数３〜７のシクロアルキル基、これらの基を選択的に置換したもの、これらの基をヒドロキシ置換したものであるか、或いはＹはＺ１ａ、Ｚ１ｂ、またはＲ１０と共に、炭素環または１〜５個のヘテロ原子を有する複素環を形成しており、ここでＹは、Ｚ１ａ、Ｚ１ｂ、またはＲ１０に結合しており、
Ｚ１ａおよびＺ１ｂはそれぞれ、水素原子、ヒドロキシ基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＺ１ａ、Ｚ１ｂ、は、ＹまたはＲ１０と共に、炭素環または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環を形成しており、ここでＺ１ａまたはＺ１ｂ，は、ＹまたはＲ１０に結合しており、
Ｍは選択的に置換された炭素数１〜５の、アルキル基またはアルキレン基であり、
Ｇは結合、ヘテロ原子、−（Ｃ＝Ｏ）−、−ＮＲ１８−、−ＮＣＯＲ１８−、又は−ＮＳ（Ｏ）ｘＲ１８−（ｘは０、１、または２）であり、Ｒ１８は低級アルキル基または選択的に置換された低級アルキル基であり、
Ｒ１０はアリール基、ヘテロアリール基であるか、或いはＲ１０は（４ａ）、（４ｂ）、（４ｃ）、または（４ｄ）の構造式のいずれか１つであり、
【化８】
2008506712.tif 000087
ここで、
式中、Ｘ２はヘテロ原子であり、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかはそれぞれ、水素原子、ハロゲン、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、スルホネート基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかはそれぞれ、水素原子、選択的に置換された、アルキル基、アリール基、アルケニル基、アルキニル基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、又はＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかはそれぞれ、アシル基またはアセチル基、カルボキシレート基、スルホネート基、スルホン基、イミン基、またはオキシム基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかは、炭素環または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環に含まれており、Ｙ、Ｚ１ａ、Ｚ１ｂ、Ｍ、Ｇ、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかの位置の基に結合している、組成物。
【請求項８】
請求項７記載の組成物において、ＩＡＰに対するＫｄは、約１μＭ未満である。
【請求項９】
請求項７記載の組成物において、Ａ１は、水素原子、メチル基、またはエチル基である。
【請求項１０】
請求項７記載の組成物において、Ｒ１ａは水素原子であり、Ｒ１ｂはメチル基またはエチル基である。
【請求項１１】
請求項７記載の組成物において、Ｙは炭素数１〜１０のアルキル基、炭素数１〜１０の分岐アルキル基、アルキニル基、炭素数３〜７のシクロアルキル基、これらの基を選択的に置換したもの、またはこれらの基をヒドロキシ置換したものである。
【請求項１２】
請求項７記載の組成物において、Ｚ１ａおよびＺ１ｂはそれぞれ、水素原子、ヒドロキシ基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基である。
【請求項１３】
請求項７記載の組成物において、Ｍは炭素原子数１〜５のアルキル基またはアルキレン基である。
【請求項１４】
請求項７記載の組成物において、Ｒ１０は以下の化合物であり、
【化９】
2008506712.tif 000088
ここで、
式中、Ｒ３、Ｒ’３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ’５はそれぞれ、水素原子、アルキル基、シクロアルキル基、アルキレン基、アリール基、ヘテロアリール基、アルコキシ基、選択的に置換されたアルキル基、シクロアルキル基、アルキレン基、アリール基、ヘテロアリール基、ハロ基、シアノ基、−（ＣＨ２）ｐＣ（＝Ｏ）ＯＨ、−（ＣＨ２）ｐＣ（＝Ｏ）Ｏ−アルキル、または−（ＣＨ２）ｐＣ（＝Ｏ）ＮＨ２であり、ｐはそれぞれ０、１、２、または３の整数である。
【請求項１５】
請求項７、８、９、１０、１１、および１２記載の組成物において、Ｒ１０は、（４ａ）、（４ｂ）、（４ｃ）、または（４ｄ）のいずれかあり、
【化１０】
2008506712.tif 000089
ここで、
式中、Ｘ２はヘテロ原子であり、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、選択的に置換された、アルキル基、アリール基、アルケニル基、アルキニル基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、アシル基またはアセチル基、カルボキシレート基、スルホネート基、スルホン基、イミン基、またはオキシム基である。
【請求項１６】
請求項７記載の組成物において、Ｒ１０は化学式（４ａ）の構造を有し、
【化１１】
2008506712.tif 000090
ここで、
式中、Ｘ２はヘテロ原子であり、Ｒ１１、Ｒ１２、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ水素原子であるか、又は選択的に水素原子、或いはハロゲン原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、スルホネート基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基を含む置換基であるか、或いはＲ１１、Ｒ１２、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、選択的に置換された、アルキル基、アリール基、アルケニル基、アルキニル基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ１２、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、アシル基またはアセチル基、カルボキシレート基、スルホネート基、スルホン基、イミン基、またはオキシム基である。
【請求項１７】
請求項７記載の組成物において、ＩＡＰに対するＫｄは、約０．１μＭ未満である。
【請求項１８】
請求項７記載の組成物および薬学的に許容される担体。
【請求項１９】
細胞を治療する方法であって、増殖障害を有する細胞に対して、前記細胞検体中の細胞増殖障害を軽減する量の請求項３または５記載のＩＡＰ結合性化合物を投与する工程を含むものである、方法。
【請求項２０】
請求項１９記載の方法において、前記ＩＡＰ結合性化合物は１μＭ未満のＥＣ５０を有するものである。
【請求項２１】
請求項１９記載の方法において、前記ＩＡＰ結合性化合物は０．０６μＭ未満のＥＣ５０を有するものである。
【請求項２２】
請求項２１記載の方法において、前記化合物は０．１μＭ未満のＩＡＰに対するＫｄを有するものである。
【請求項２３】
化学式（２）の化合物であって、
【化１２】
2008506712.tif 000091
ここで
式中、Ａ１およびＡ２はそれぞれ、水素原子、アルキル基、アリール基、またはアルキルアリール基であり、Ｒ１ａは水素原子またはメチル基であり、Ｒ１ｂはアルキル基またはアリール基であり、Ｘ１は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＨ２−、または−ＮＨ−基であり、Ｊは−ＣＨ−または−Ｎ−基であるが、但し、Ｊが−Ｎ−のとき、Ｘ１は−ＣＨ２−または−ＮＨ−基であり、Ｙは水素原子またはアルキルアリール基であり、Ｚは−ＯＨ、アリールオキシ基、アルコキシ基、ベンジルオキシ基、ベンジルオキシ基、アミノ基、アリールアミノ基、アルキルアミノ基、ベンジルアミノ基であり、Ｒ２は検出可能な標識または以下の化合物であり、
【化１３】
2008506712.tif 000092
ここで、
式中、Ｍは、アルキレン基、アルケニレン基、アルキニレン基、ヘテロアルキレン基、ヘテロアルケニレン基、またはヘテロアルキニレン基であり、
Ｇは、結合、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ２ｄ）−（Ｒ２ｄは、水素原子、アルキル基、シクロアルキル基、またはアリール基）、又は−Ｓ（Ｏ）ｍ−（ｍは、０、１、または２）であり、
Ｒ１０は、シクロアルキル基、アリール基、ヘテロシクロアルキル基、ヘテロシクロアルケニル基、またはヘテロアリール基であり、ｎはそれぞれ０、１、２、３、４、または５の整数である、化合物。
【請求項２４】
化学式（３）の化合物であり、
【化１４】
2008506712.tif 000093
ここで、
式中、Ａ１は水素原子、低級アルキル基、または選択的に置換された低級アルキル基であり、Ｒ１ａおよびＲ１ｂはそれぞれ、水素原子、低級アルキル基、選択的に置換された低級アルキル基、低級アルキレン基、選択的に置換された低級アルキレン基であるか、或いはＡ１はＲ１ａまたはＲ１ｂと共に、３〜６個の原子を有する選択的に置換されたヘテロシクロアルキル基を形成しており、
Ｙは水素原子、アルキル基、アルキニル基、炭素数３〜７のシクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、アリールアルキル基、これらの基を選択的に置換したもの、これらの基をヒドロキシ置換したものであるか、或いはＹは、Ｚ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０と共に、炭素環、または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環を形成しており、ここでＹはＺ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０に結合しており、
Ｚは水素原子、アルキル基、ヒドロキシ基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルコキシ基、シクロアルキル基、シクロアルキルオキシ基、アリール基、ヘテロアリール基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＺはＹ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０と共に、炭素環、または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環を形成しており、ここでＺは、Ｙ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０に結合しており、
Ｍは選択的に置換された、アルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基であるか、或いは炭素数１〜５の選択的に置換された、アルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基であるか、或いは選択的に置換されたアルキレン基、アルケニレン基、またはアルキニレン基であるか、或いは炭素数１〜５の選択的に置換された、アルキレン基、アルケニレン基、またはアルキニレン基であり、
Ｇは、結合、ヘテロ原子、−（Ｃ＝Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）ｔ−（ｔは０、１、または２）、−ＮＲ１８−、−ＮＣＯＲ１８−、或いはＮＳ（Ｏ）ｘＲ１８−であり、ｘは０、１、または２であり、Ｒ１８は低級アルキル基、選択的に置換された低級アルキル基、またはシクロアルキル基であるか、或いはＲ１８は、Ｒ１８がＺ、Ｍ、またはＲ１０に結合した炭素環または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環に含まれており、
Ｒ１０は、アリール基、ヘテロアリール基、縮合環式のアリール基、縮合環式のヘテロアリール基であるか、或いはＲ１０は、以下の（４ａ）、（４ｂ）、（４ｃ）または（４ｄ）の構造のいずれか１つであり、
【化１５】
2008506712.tif 000094
ここで、
式中、Ｘ２はヘテロ原子であり、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、スルホネート基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、選択的に置換された、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、アシル基またはアセチル基、カルボキシレート基、スルホネート基、スルホン基、イミン基、またはオキシム基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々は、炭素環、または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環に含まれ手織り、更にＹ、Ｚ、Ｍ、Ｇ、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかの位置の基に結合しているものである、化合物。
【請求項２５】
化学式（３）の化合物であって、
【化１６】
2008506712.tif 000095
ここで、
式中、Ａ１は、水素原子、低級アルキル基、または選択的に置換された低級アルキル基であり、Ｒ１ａおよびＲ１ｂはそれぞれ、水素原子、低級アルキル基、選択的に置換された低級アルキル基、低級アルキレン基、選択的に置換された低級アルキレン基であるか、或いはＡ１はＲ１ａまたはＲ１ｂのいずれかと共に、３〜６個の原子を有する選択的に置換されたヘテロシクロアルキル基を形成しており、
Ｙは、水素原子、アルキル基、アルキニル基、炭素数３〜７のシクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、アリールアルキル基、これらの基を選択的に置換したもの、これらの基をヒドロキシ置換したものであるか、或いはＹは、Ｚ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０と共に、炭素環、または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環を形成しており、ここでＹはＺ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０に結合しているものであり、
Ｚは、水素原子、アルキル基、ヒドロキシ基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルコキシ基、シクロアルキル基、シクロアルキルオキシ基、アリール基、ヘテロアリール基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＺは、Ｙ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０と共に、炭素環、または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環を形成しており、ここでＺはＹ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０に結合しているものであり、
Ｍは選択的に置換された、アルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基であるか、或いは炭素数１〜５の選択的に置換された、アルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基；選択的に置換された、アルキレン基、アルケニレン基、またはアルキニレン基であるか、或いは炭素数１〜５の選択的に置換された、アルキレン基、アルケニレン基、またはアルキニレン基であり、
Ｇは、結合、ヘテロ原子、−（Ｃ＝Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）ｔ−（ｔは０、１、または２）、−ＮＲ１８−、−ＮＣＯＲ１８−、或いはＮＳ（Ｏ）ｘＲ１８−（ｘは０、１、または２）、Ｒ１８は低級アルキル基、選択的に置換された低級アルキル基、またはシクロアルキル基、或いはＲ１８は炭素環、または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環に含まれ、ここでＲ１８はＺ、Ｍ、またはＲ１０に結合しているものであり、
Ｒ１０は、（４ａ）、（４ｂ）、（４ｃ）、または（４ｄ）の構造のいずれか１つであり、
【化１７】
2008506712.tif 000096
ここで、
Ｘ２はヘテロ原子であり、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、スルホネート基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、選択的に置換された、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いは、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、アシル基またはアセチル基、カルボキシレート基、スルホネート基、スルホン基、イミン基、またはオキシム基であるか、或いは、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかは、炭素環または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環に含まれており、更にＹ、Ｚ、Ｍ、Ｇ、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかの位置の基に結合しているものである、化合物。
【請求項２６】
化学式（５）の化合物であって、
【化１８】
2008506712.tif 000097
ここで、
式中、Ａ１、水素原子または低級アルキル基であるか、或いはＡ１及びＲ１ｂは３〜５個の原子を有する環を構成しており、
Ｒ１ａは水素原子であり、Ｒ１ｂは低級アルキル基であるか、或いはＡ１と共に３〜５個の原子を有する環を構成しており、
Ｙはアルキル基、アルキニル基、炭素数３〜７のシクロアルキル、これらの基を選択的に置換したもの、これらの基をヒドロキシ置換したもの、或いはＹは、Ｚ１ａ、Ｚ１ｂ、またはＲ１０と共に、炭素環、または１〜５個のヘテロ原子を有する複素環を形成しており、ここでＹはＺ１ａ、Ｚ１ｂ、またはＲ１０に結合しており、
Ｚ１ａおよびＺ１ｂはそれぞれ、水素原子、ヒドロキシ基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＺ１ａ、Ｚ１ｂ、は、ＹまたはＲ１０と共に、炭素環、または１〜５個のヘテロ原子を有する複素環を形成しており、ここでＺ１ａまたはＺ１ｂ，はＹまたはＲ１０に結合しており、
Ｍは炭素原子数１〜５の、選択的に置換されたアルキル基または選択的に置換されたアルキレン基であり、
Ｇは結合、ヘテロ原子、−（Ｃ＝Ｏ）−、−ＮＲ１８−、−ＮＣＯＲ１８−、または−ＮＳ（Ｏ）ｘＲ１８−（ｘは、０、１、または２）であり、Ｒ１８は、低級アルキル基、選択的に置換された低級アルキル基であり、
Ｒ１０はアリール基、ヘテロアリール基であるか、或いは（４ａ）、（４ｂ）、（４ｃ）、または（４ｄ）の構造のいずれか１つであり、
【化１９】
2008506712.tif 000098
ここで、
式中、Ｘ２はヘテロ原子であり、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、スルホネート基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、選択的に置換された、アルキル基、アリール基、アルケニル基、アルキニル基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、アシル基またはアセチル基、カルボキシレート基、スルホネート基、スルホン基、イミン基、またはオキシム基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかは、炭素環、または１〜５個のヘテロ原子を有する複素環に含まれており、更にＹ、Ｚ１ａ、Ｚ１ｂ、Ｍ、Ｇ、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかの位置の基に結合しているものである、化合物。
【請求項２７】
一般化学式（５）の化合物であって、
【化２０】
2008506712.tif 000099
ここで、
式中、Ａ１は水素原子または低級アルキル基であり、
Ｒ１ａは水素原子であり、Ｒ１ｂは低級アルキル基であり、
Ｙはアルキル基、炭素原子数３〜７のシクロアルキル基、これらの基が選択的に置換されたもの、これらの基がヒドロキシ置換されたものであり、
Ｚ１ａおよびＺ１ｂはそれぞれ、水素原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であり、
Ｍは選択的に置換された炭素原子数１〜５の、アルキル基または選択的に置換されたアルキレン基であり、
Ｇは結合、ヘテロ原子、または−ＮＣＯＲ１８−であり、Ｒ１８は、低級アルキル基、選択的に置換された低級アルキル基であり、
Ｒ１０は、（４ａ）、（４ｂ）、（４ｃ）、または（４ｄ）の構造のいずれか１つであり、
【化２１】
2008506712.tif 000100
ここで、
式中、Ｘ２はヘテロ原子であり、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、スルホネート基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、選択的に置換された、アルキル基、アリール基、アルケニル基、アルキニル基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、アシル基またはアセチル基、カルボキシレート基、スルホネート基、スルホン基、イミン基、またはオキシム基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかは、炭素環、または１〜５個のヘテロ原子を有する複素環に含まれており、更にＹ、Ｚ１ａ、Ｚ１ｂ、Ｍ、Ｇ、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかの位置の基に結合しているものである、化合物。
【請求項２８】
化学式（５）の化合物であって、
【化２２】
2008506712.tif 000101
ここで、
式中、Ａ１は水素原子またはメチル基であり、
Ｒ１ａは水素原子であり、Ｒ１ｂはメチル基またはエチル基であり、
Ｙは、アルキル基、炭素原子数３〜７のシクロアルキル基、これらの基を選択的に置換したもの、またはこれらの基をヒドロキシ置換したものであり、
Ｚ１ａおよびＺ１ｂはそれぞれ、水素原子、ヒドロキシ基、またはアルコキシ基であり、
Ｍはメチル基であり、
Ｇは結合であり、
Ｒ１０は、アリール基、ヘテロアリール基であるか、或いはＲ１０は（４ａ）または（４ｂ）の構造であり、
【化２３】
2008506712.tif 000102
ここで、
Ｘ２はヘテロ原子であり、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、スルホネート基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、選択的に置換された、アルキル基、アリール基、アルケニル基、アルキニル基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、アシル基またはアセチル基、カルボキシレート基、スルホネート基、スルホン基、イミン基、またはオキシム基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかは、炭素環、または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環に含まれており、更にＹ、Ｚ１ａ、Ｚ１ｂ、Ｍ、Ｇ、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかの位置の基に結合している、化合物。
【請求項２９】
請求項２８記載の化学式（５）の化合物において、Ｒ１０は以下の化合物である。
【化２４】
2008506712.tif 000103
【請求項３０】
請求項２８記載の化学式（５）の化合物において、Ｘ２は窒素原子である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は２００４年７月１５日申請の米国特許仮出願第６０／５８８，０５０号に対して優先権を主張するものであり、その全内容はこの参照により本願明細書中に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
アポトーシス（プログラム細胞死）とは、あらゆる多細胞生物における発達および恒常性において中心的役割を担う。アポトーシス経路の変化は、神経変性疾患のみならず、発達障害、癌、自己免疫疾患等、様々な種類のヒトの病態に関与している。
【０００３】
プログラム細胞死の経路は、治療薬開発のための研究対象となっている。患部細胞の維持よりも破壊の方が容易である場合もあるので、従来法の放射線照射および化学療法等のアポトーシス促進剤を使用した抗癌治療は、ミトコンドリア介在性アポトーシス経路の活性化を引き起こすのに行われてきた。しかしながらこれらの治療法では、分子特異性に欠けており、より具体的な分子標的を必要としている。
【０００４】
アポトーシスは、基質中のアスパラギン酸特異性を有するシステインタンパク質分解酵素のファミリーである、活性化カスパーゼにより主に起こる。カスパーゼは、触媒的に不活性な酵素前駆体として細胞中で生成され、アポトーシス中に活性プロテアーゼとなるようにタンパク質分解により処理されなければならない。アポトーシス刺激を受けていない正常な生存細胞中では、ほとんどのカスパーゼは不活性のままである。カスパーゼが異常に活性化されたとしても、それらのタンパク質分解活性は、ＩＡＰ（アポトーシス阻害タンパク質）と呼ばれる進化的に保存されたタンパク質のファミリーにより十分に阻害されている（ＤｅｖｅｒａｕｘとＲｅｅｄ，Ｇｅｎｅｓ  Ｄｅｖ．１３：２３９〜２５２，１９９９）。各ＩＡＰは、いわゆるＢＩＲ（バキュロウイルスＩＡＰリピート）ドメインの複製物１〜３個を含み、成熟カスパーゼに直接的に相互作用し、その酵素活性を阻害する。ＸＩＡＰ、サバイビン、およびＬＩＶＩＮ／ＭＬ−ＩＡＰ、（ＫａｓｏｆおよびＧｏｍｅｓ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：３２３６〜３２４６、２００１；Ｖｕｃｉｃら、Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．１０：１３５９−１３６６，２０００；ＡｓｈｈａｂらＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．４９５：５６〜６０，２００１）を含む数種の異なる哺乳類のＩＡＰが同定され、これらは細胞培養液中で抗アポトーシス活性を示した（前出のＤｅｖｅｒａｕｘとＲｅｅｄ，１９９９）。ＩＡＰはほとんどの癌細胞中で発現するので、これらは直接腫瘍進行およびその後の薬剤治療に対する耐性に寄与する。
【０００５】
しかしながらアポトーシスを受けるようシグナル伝達された正常細胞では、ＩＡＰ介在性の阻害効果は除去されなければならず、プロセスは少なくとも一部でカスパーゼのＳｍａｃ（Ｓｅｃｏｎｄ  ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ａｃｔｉｖａｔｏｒ）と呼ばれるミトコンドリアタンパク質（Ｄｕら，Ｃｅｌｌ  １０２：３３４２，２０００）、またはＤＩＡＢＬＯ（ｄｉｒｅｃｔ  ＩＡＰ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｗｉｔｈ  ｌｏｗ  ｐＩ；Ｖｅｒｈａｇｅｎら，Ｃｅｌｌ  １０２：４３〜５３，２０００）によって行われる。細胞中で合成されるＳｍａｃ／ＤＩＡＢＬＯは、ミトコンドリアの膜間スペースを標的とする。アポトーシス刺激を受けると、Ｓｍａｃはミトコンドリアから放出され、チトクロームＣと共に細胞質ゾル中に戻る。チトクロムＣがプロカスパーゼ−９およびプロカスパーゼ−３を活性化するためＡｐａｆ−１の多量体化を誘導するのに対し、Ｓｍａｃは複数のＩＡＰの阻害効果を除去する。Ｓｍａｃは、ＸＩＡＰ、ｃ−ＩＡＰ１、ｃ−ＩＡＰ２、ＭＬ−ＩＡＰ、およびサバイビン等のこれまで研究されてきたあらゆるＩＡＰと相互作用する。Ｓｍａｃは、哺乳動物においてアポトーシスの制御因子のように考えられる。カスパーゼの阻害に加え、過剰発現したＩＡＰはＳｍａｃと結合するように機能し、ＸＩＡＰとの結合およびカスパーゼの放出を阻止する（Ｖｕｃｉｃら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３８５（Ｐｔ１）：１１〜２０，２００５）。
【０００６】
Ｓｍａｃは２３９個のアミノ酸からなる前駆体分子として合成され、Ｎ末端５５残基が移入後除去されるミトコンドリアを標的とするシークエンスとして役立つ。成熟型のＳｍａｃは１８４個のアミノ酸を含み、溶液中でオリゴマーのような挙動を示す。Ｓｍａｃおよびその各種フラグメントは治療薬を同定するための標的としての使用に提案されている。Ｓｍａｃの生物学的活性は、そのＮ末端４残基のＢＩＲ３ドメインと呼ばれるＸＩＡＰ部分中の特徴的な表面溝（ｆｅａｔｕｒｅｄ  ｓｕｒｆａｃｅ  ｇｒｏｏｖｅ）への結合に関連すると考えられている。この結合は、ＸＩＡＰが細胞中でアポトーシス抑制機能を及ぼすのを阻害する。ショウジョウバエ由来のアポトーシス促進性タンパク質、Ｈｉｄ、Ｇｒｉｍ、およびＲｅａｐｅｒのＩＡＰ結合性タンパク質由来のＮ末端テトラペプチドは、同様に機能するものと考えられている。
【０００７】
２００２年５月３１日出願の同時係属の共有国際特許出願、出願番号第ＰＣＴ／ＵＳ０２／１７３４２号をここで参照により本願明細書に組み込むが、該出願ではＩＡＰのＢＩＲドメインに結合してアポトーシスのＩＡＰ介在の抑制を軽減する薬剤の高処理量選別に使用するための分析法を開示している。この分析法では、ＩＡＰのＢＩＲドメインに結合する、標識したＩＡＰ結合性ペプチドまたはペプチド模倣物を使用する。ここで、標識に関する１つ以上の測定可能な特徴は、ＩＡＰに結合または溶液中で遊離しているＩＡＰ結合性化合物に応じて変化する。ＩＡＰのＢＩＲドメインを標識したＩＡＰペプチドまたはペプチド模倣物に接触させて複合体を形成し、この複合体をＢＩＲへの結合性について分析する化合物にさらす。テスト化合物により置換されて該複合体から標識したＩＡＰペプチドまたはペプチド模倣物が脱離する場合それを測定する。診断薬または治療薬として生体内への投与にペプチドを使用する際の不利な点として、ペプチド合成にかかるコストに加え、体内におけるペプチドのタンパク質分解による分解に起因する半減期の短かさ、腸壁での低吸収性、および免疫原性反応の可能性が挙げられる。生理活性ペプチドと同等の生物学的活性を有するが、改善された薬理学的性質を有し合成が容易または低価である非ペプチド性ＩＡＰ結合性化合物を調製することは有益である。
【０００８】
Ｓｍａｃテトラペプチドに関連して、非ペプチド化合物に関連した改良された性質を有しながらアポトーシスを促進するのに使用できるＩＡＰ結合性化合物を開発することは当該技術分野において顕著な進歩となる。このような化合物はアポトーシス関連の症状の治療における診断薬または治療薬として使用できる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の実施形態は、一般化学式（２）で表される化合物または該化合物を含む組成物であり、
【００１０】
【化２５】
2008506712.tif 000002
【００１１】
ここで、式中、
Ａ１およびＡ２はそれぞれ、水素原子、アルキル基、アリール基、またはアルキルアリール基であり、Ｒ１ａは水素原子またはメチル基；Ｒ１ｂはアルキル基またはアリール基であり、Ｘ１は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＨ２−、または−ＮＨ−基であり、Ｊは−ＣＨ−または−Ｎ−基であり、但し、Ｊが−Ｎ−基のとき、Ｘ１は−ＣＨ２−または−ＮＨ−基であり、Ｙは水素原子またはアルキル基であり、Ｚは−ＯＨ、アリールオキシ基、アルコキシ基、ベンジルオキシ基、ベンジルオキシ基、アミノ基、アリールアミノ基、アルキルアミノ基、ベンジルアミノ基であり、Ｒ２は検出可能な標識または以下の化合物であり、
【００１２】
【化２６】
2008506712.tif 000003
【００１３】
ここで、式中、
Ｍは、アルキレン基、アルケニレン基、アルキニレン基、ヘテロアルキレン基、ヘテロアルケニレン基、またはヘテロアルキニレン基であり、Ｇは結合、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ２ｄ）−（但し、Ｒ２ｄは、水素原子、アルキル基、シクロアルキル基、またはアリール基）、又は−Ｓ（Ｏ）ｍ−（ｍは０、１、または２）から選択されるものであり、Ｒ１０はシクロアルキル基、アリール基、ヘテロシクロアルキル基、ヘテロシクロアルケニル基、又はヘテロアリール基であり、ｎはそれぞれ、０、１、２、３、４、または５の整数である。
【００１４】
本発明の別の実施形態は、一般式（３）化合物または該化合物を含む組成物である。
【００１５】
【化２７】
2008506712.tif 000004
【００１６】
ここで、式中、
Ａ１は、水素原子、低級アルキル基、または選択的に置換されたアルキル基であり、Ｒ１ａおよびＲ１ｂはそれぞれ、水素原子、低級アルキル基、選択的に置換された低級アルキル基、低級アルキレン基、選択的に置換された低級アルキレン基であるか、或いはＡ１はＲ１ａまたはＲ１ｂと共に３〜６個の原子を有する選択的に置換されたヘテロシクロアルキル基を形成しており、Ｙは水素原子、アルキル基、アルキニル基、炭素数３〜７のシクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、アリールアルキル基、これらの基を選択的に置換したもの、これらの基をヒドロキシ置換したものであるか、或いはＹはＺ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０と共に、炭素環または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環を形成し、更にここでＹは、Ｚ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０に結合しており、Ｚは、水素原子、アルキル基、ヒドロキシ基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルコキシ基、シクロアルキル基、シクロアルキルオキシ基、アリール基、ヘテロアリール基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＺは、Ｙ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０と共に炭素環または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環を形成し、更にここでＺはＹ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０に結合しており、Ｍは選択的に置換された、アルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基であるか、或いは選択的に置換された炭素数１〜５の、アルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基であるか、或いは選択的に置換された炭素数１〜５の、アルキレン基、アルケニレン基、またはアルキニレン基であり、Ｇは結合、ヘテロ原子、−（Ｃ＝Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）ｔ−（但しｔ＝０、１、または２）、−ＮＲ１８−、−ＮＣＯＲ１８−、または−ＮＳ（Ｏ）ｘＲ１８−（但し、ｘ＝０、１、または２）であり、Ｒ１８は低級アルキル基、選択的に置換された低級アルキル基、またはシクロアルキル基であるか、或いはＲ１８は炭素環または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環（但し、Ｒ１８は、Ｚ、Ｍ、またはＲ１０に結合）に含まれており、、Ｒ１０はアリール基、ヘテロアリール基、縮合環式のアリール基、縮合環式のヘテロアリール基であるか、或いはＲ１０は（４ａ）、（４ｂ）、（４ｃ）または（４ｄ）の構造のいずれかであり、
【００１７】
【化２８】
2008506712.tif 000005
【００１８】
ここで、式中、
Ｘ２はヘテロ原子であり、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、スルホネート基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、選択的に置換された、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、アシル基またはアセチル基、カルボキシレート基、スルホネート基、スルホン基、イミン基、またはオキシム基であるか、或いは、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、Ｒ１４−１７のいずれかは、炭素環または１〜５個のヘテロ原子を有する複素環に含まれ、更にＹ、Ｚ、Ｍ、Ｇ、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、Ｒ１４−１７のいずれかの位置の基に結合しているものである。
【００１９】
別の実施形態は、一般化学式（５）の化合物、または該化合物を含む組成物であり、
【００２０】
【化２９】
2008506712.tif 000006
【００２１】
ここで、式中、
Ａ１は、水素原子または低級アルキル基であり、Ｒ１ａは水素原子であり、Ｒ１ｂは低級アルキル基であり、Ｙはアルキル基、炭素数３〜７のシクロアルキル基、これらの基を選択的に置換したもの、これらの基をヒドロキシ置換したものであり、Ｚ１ａおよびＺ１ｂはそれぞれ、水素原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であり、Ｍは炭素数１〜５の選択的に置換されたアルキル基または選択的に置換されたアルキレン基であり、Ｇは結合、ヘテロ原子、または−ＮＣＯＲ１８−であり、Ｒ１８は低級アルキル基、選択的に置換された低級アルキル基であり、Ｒ１０は（４ａ）、（４ｂ）、（４ｃ）または（４ｄ）の構造のいずれか１つであり、
【００２２】
【化３０】
2008506712.tif 000007
【００２３】
ここで、式中、
Ｘ２はヘテロ原子であり、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、スルホネート基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、選択的に置換された、アルキル基、アリール基、アルケニル基、アルキニル基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、アシル基またはアセチル基、カルボキシレート基、スルホネート基、スルホン基、イミン基、またはオキシム基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、Ｒ１４−１７のいずれかは、炭素環または１〜５個のヘテロ原子を有する複素環に含まれ、更にＹ、Ｚ１ａ、Ｚ１ｂ、Ｍ、Ｇ、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、Ｒ１４−１７のいずれかの位置の基に結合しているものである。
【００２４】
好ましい実施形態において本発明は、一般化学式（５）の化合物または該化合物を含む組成物であり、
【００２５】
【化３１】
2008506712.tif 000008
【００２６】
ここで、式中、
Ａ１は水素原子または低級アルキル基であり、Ｒ１ａは水素原子であり、Ｒ１ｂは低級アルキル基であり、Ｙはアルキル基、炭素数３〜７のシクロアルキル基、これらの基を選択的に置換したもの、これらの基をヒドロキシ置換したものであり、Ｚ１ａおよびＺ１ｂはそれぞれ、水素原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であり、Ｍは炭素数１〜５の選択的に置換されたアルキル基または選択的に置換されたアルキレン基であり、Ｇは結合、ヘテロ原子、または−ＮＣＯＲ１８−であり、Ｒ１８は低級アルキル基、選択的に置換された低級アルキル基であり、Ｒ１０は（４ａ）、（４ｂ）、（４ｃ）、または（４ｄ）の構造のいずれか１つであり、
【００２７】
【化３２】
2008506712.tif 000009
【００２８】
ここで、式中、
Ｘ２はヘテロ原子であり、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、スルホネート基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、選択的に置換された、アルキル基、アリール基、アルケニル基、アルキニル基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、アシル基またはアセチル基、カルボキシレート基、スルホネート基、スルホン基、イミン基、またはオキシム基であるか、或いは、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、Ｒ１４−１７のいずれかは、炭素環または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環に含まれ、更にＹ、Ｚ１ａ、Ｚ１ｂ、Ｍ、Ｇ、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、Ｒ１４−１７のいずれかの位置の基に結合しているものである。さらにより好ましくは、Ｘ２は窒素原子である。
【００２９】
本発明のさらなる実施形態は、細胞中のアポトーシスを改変又は制御するのに有用な分子および組成物を含む。これらのＩＡＰ結合性分子は、様々なＩＡＰ（アポトーシス阻害タンパク質）に結合することができる。これらの分子は、単量体または二量体で、検出可能な標識または治療成分を含有し、これらの分子を含む医薬組成物または診断用組成物として調剤することが可能である。さらに、これらの化合物を治療薬および診断薬として使用する方法も記載する。
【００３０】
ＩＡＰ結合性カーゴ分子とも呼ばれる本発明のＩＡＰ結合性分子は、細胞に浸透して形質移入させるか、又は能動的または受動的に輸送することが可能であり、細胞中のカスパーゼまたはＳｍａｃ等のその他のタンパク質からＩＡＰを取り除くのに使用可能である。少なくともＩＡＰ結合性カーゴ分子の一部は、ＩＡＰのＢＩＲドメインに結合している。ＩＡＰ結合性カーゴ分子は細胞増殖障害に対して治療効果を付与するができ、治療薬、診断薬、またはその他の置換基をその分子中にさらに有していてもよい。当該ＩＡＰ結合性分子の実施形態として、ＩＡＰのＢＩＲドメインに結合するピロリジンの誘導体が含まれる。
【００３１】
本発明の実施形態として、一般式（２）で表される構造を有するＩＡＰ結合性カーゴ分子およびその薬学的に許容される塩が挙げられる。
【００３２】
【化３３】
2008506712.tif 000010
【００３３】
ここで、式中、
Ａ１およびＡ２はそれぞれ、水素原子、アルキル基、アリール基、またはアルキルアリール基、Ｒ１ａは水素原子またはメチル基であり、Ｒ１ｂはアルキル基またはアリール基であり、一部の実施形態において、Ｒ１ｂはメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、またはエテニル基であり、Ｘ１は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＨ２‐、または−ＮＨ−基であり、更にＪは−ＣＨ−または−Ｎ−基であり、但しＪが−Ｎ−のとき、Ｘ１は−ＣＨ２−または−ＮＨ−基であり、Ｙは水素原子またはアルキル基であり、Ｚは水素原子、−ＯＨ、アリールオキシ基、アルコキシ基、ベンジルオキシ基、アミノ基、アリールアミノ基、アルキルアミノ基、ベンジルアミノ基であり、一部の実施形態において、Ｚは−ＯＨ、アリールオキシ基、アルコキシ基、ベンジルオキシ基、ベンジルオキシ基、アミノ基、アリールアミノ基、アルキルアミノ基、ベンジルアミノ基であり、Ｒ２は検出可能な標識または以下であっても良く
【００３４】
【化３４】
2008506712.tif 000011
【００３５】
ここで、式中、
Ｒ２ａはアリール基、シクロアルキル基、選択的に置換されたアラルキル基、またはシクロアルキルアルキル基であり、Ｒ２ｂは水素原子またはアルキル基であり、Ｒ２ｃはアリール基、シクロアルキル基、選択的に置換されたアラルキル基、またはシクロアルキルアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、ヘテロシクロアルケニル基、ヘテロアリール基、またはシクロアルキルアリール基である。一部の実施形態において、Ｒ２ｃはテトラヒドロナフチル基または置換テトラヒドロナフチル基であり、最も好ましくはＲ２ｃは、以下であり、
【００３６】
【化３５】
2008506712.tif 000012
【００３７】
ここで、式中、
不斉炭素（ｉ＊）（但し、ｉ＊＝３〜８）はそれぞれ（Ｒ）または（Ｓ）の立体配置を有していても良く、Ｍはアルキレン基、アルケニレン基、アルキニレン基、ヘテロアルキレン基、ヘテロアルケニレン基、またはヘテロアルキニレン基であり、一部の実施形態において、Ｍは以下である。
【００３８】
【化３６】
2008506712.tif 000013
【００３９】
一部の実施形態において、Ｇは結合（すなわち、Ｇは存在しない）、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ２ｄ）−（但し、Ｒ２ｄは、水素原子、アルキル基、シクロアルキル基、またはアリール基）、または−Ｓ（Ｏ）ｍ−（Ｍは、０、１、または２）であり、
Ｒ１０は、シクロアルキル基、アリール基、ヘテロシクロアルキル基、ヘテロシクロアルケニル基、またはヘテロアリール基であり、一部の実施形態において、Ｒ１０は以下であり、
【００４０】
【化３７】
2008506712.tif 000014
【００４１】
ここで、式中、
Ｒ３、Ｒ’３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ’５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９はそれぞれそれぞれ、水素原子、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ハロ基、シアノ基、−（ＣＨ２）ｐＣ（＝Ｏ）ＯＨ、−（ＣＨ２）ｐＣ（＝Ｏ）Ｏ−アルキル、−（ＣＨ２）ｐＣ（＝Ｏ）ＮＨ２であり、ｎおよびｐは整数であり、好ましくはｎはそれぞれ、０、１、２、３、４、または５の整数であり、ｐはそれぞれ、０，１、２または３の整数であり、好ましくはＲ３、Ｒ’３、Ｒ４、およびＲ’５、Ｒ５のうちの少なくとも１つ、あるいはＲ６、Ｒ７、Ｒ８、およびＲ９のうち少なくとも２つはそれぞれ、水素原子、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ハロ基、またはシアノ基であり、但しＲ３、Ｒ’３、Ｒ’５、およびＲ５のうち１つ若しくはそれ以上がイソプロピル基の場合、Ｒ４はイソプロピル基以外の基であり、Ｒ４がイソプロピル基の場合、Ｒ３、Ｒ’３、Ｒ’５、およびＲ５はそれぞれイソプロピル基以外の基であり、Ｒ８がイソプロピル基の場合、Ｒ９はイソプロピル基以外の基であり、但し治療用組成物において、（２）はＲ２が以下のものであり、
【００４２】
【化３８】
2008506712.tif 000015
【００４３】
更にＲ２ｃが
【００４４】
【化３９】
2008506712.tif 000016
【００４５】
である構造ではなく、
ここで、式中、
Ａ１は水素原子、Ａ２はメチル基、Ｒ１ａは水素原子、Ｒ１ｂはメチル基、Ｘ１は−ＮＨ−、Ｊは−ＣＨ−、Ｙはｔ−ブチル基、Ｚは−ＯＣ６Ｈ５、および（３＊）は（Ｓ）の立体配置、（４＊）は（Ｓ）の立体配置、（５＊）は（Ｓ）または（Ｒ）の立体配置、（６＊）は（Ｓ）または（Ｒ）の立体配置、および（７＊）は（Ｒ）の立体配置をである。構造（２）の化合物の一部の実施形態において、本願明細書記載の方法によって決定したＫｄの値は、例えば、実施例１の場合１００μＭ未満、好ましくは１μＭ未満であり、さらにより好ましくは０．１μＭ未満である。
【００４６】
一部の実施形態において、Ａ２が水素原子、Ｘ１が−ＮＨ−、Ｊが−ＣＨ−、Ｒ２に対するｎが０である構造（２）のＩＡＰ結合性化合物またはＩＡＰ結合性カーゴ分子は、構造式（３）で表すことができる。
【００４７】
【化４０】
2008506712.tif 000017
【００４８】
構造（３）の化合物に係るいくつかの実施形態において、Ａ１は水素原子、低級アルキル基、または選択的に置換された低級アルキル基であり、Ｒ１ａおよびＲ１ｂはそれぞれ、水素原子、低級アルキル基、選択的に置換された低級アルキル基、低級アルキレン基、選択的に置換された低級アルキレン基であるか、あるいはＡ１はＲ１ａまたはＲ１ｂと共に、３〜６個の原子を有する選択的に置換されたヘテロシクロアルキル基を形成し、
Ｙは、水素原子、アルキル基、炭素数１〜１０のアルキル基、炭素数１〜１０の分岐アルキル基、アルキニル基、炭素数３〜７のシクロアルキル基、アリール基、ヘテロアルキニル基、ヘテロアリール基、またはアリールアルキル基、これらの基を選択的に置換したもの、これらの基をヒドロキシ置換したものであるか、あるいはＹはＺ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０と共に、選択的に置換された炭素環または１〜５個のヘテロ原子を有する選択的に置換された複素環を形成し、更にＹはＺ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０に結合しており、好ましくはＹは２０以下の数の原子によって、Ｍ、ＧまたはＲ１０に結合している。
【００４９】
Ｚは水素原子、アルキル基、ヒドロキシ基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルコキシ基、シクロアルキル基、シクロアルキルオキシ基、アリール基、ヘテロアリール基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、あるいはＺはＹ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０と共に、選択的に置換された炭素環または１〜５個のヘテロ原子を含む選択的に置換された複素環を形成し、更にＺはＹ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０に結合しており、好ましくはＺは２０以下の数の原子によって、Ｙ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０に結合している。
【００５０】
Ｍは選択的に置換された、アルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基、炭素数１〜５の選択的に置換された、アルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基、選択的に置換された、アルキレン基、アルケニレン基、またはアルキニレン基であるか、あるいは炭素数１〜５の選択的に置換された、アルキレン基、アルケニレン基またはアルキニレン基である。
【００５１】
Ｇは存在しない（結合として存在）、あるいは−Ｏ−、−ＮＨ−、−（ＣＯ＝）−、Ｓ（Ｏ）ｔ−（ｔは、０、１または２の整数）、−ＮＲ１８−、−ＮＣＯＲ１８−、または−ＮＳ（Ｏ）ｘＲ１８−等のヘテロ原子であり、ｘは０、１、または２の整数であり、Ｒ１８は低級アルキル基、選択的に置換された低級アルキル基、またはシクロアルキル基であるか、あるいはＲ１８は選択的に置換された炭素環または１〜５個のヘテロ原子を含む選択的に置換された複素環に含まれており、更にＲ１８はＺ、Ｍ、またはＲ１０に結合しており、好ましくはＲ１８は２０個以下の数の原子によってＺ、Ｍ、またはＲ１０に結合している。
【００５２】
Ｒ１０はアリール基、ヘテロアリール基、縮合環式のアリール基、縮合環式のヘテロアリール基、またはこれらの基を選択的に置換したものであるか、あるいはＲ１０は、構造式（４ａ）、（４ｂ）、（４ｃ）または（４ｄ）のいずれか１つであり、
【００５３】
【化４１】
2008506712.tif 000018
【００５４】
ここで、式中、
Ｘ２は（４ａ）または（４ｂ）の構造においてヘテロ原子であり、（４ｃ）または（４ｄ）の構造においてＸ２は炭素−炭素結合であり、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、選択的に置換された、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、アシル基またはアセチル基、カルボキシレート基、スルホネート基、スルホン基、イミン基、またはオキシム基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、Ｒ１４−１７のいずれかは、選択的に置換された炭素環または１〜５個のヘテロ原子を含む選択的に置換された複素環に含まれており、更にＹ、Ｚ、Ｍ、Ｇ、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかの位置の基に結合しており、好ましくはこれらの基は約２０個以下の数の原子によって結合されているものである。構造（３）の化合物の実施形態において、本願明細書記載の方法で決定されたＫｄは、実施例１において１００μＭ未満であり、好ましくは１μＭ未満、およびさらにより好ましくは０．１μＭ未満である。
【００５５】
一部の実施形態において、構造（５）の化合物を含み、
【００５６】
【化４２】
2008506712.tif 000019
【００５７】
ここで、式中、
Ａ１は、水素原子または低級アルキル基であるか、あるいはＡ１およびＲ１ｂは共に３〜５個の原子を有する環を形成しており、
Ｒ１ａは水素原子であり、Ｒ１ｂは低級アルキル基、あるいはＡ１と共に３〜５個の原子を有する環を形成しており、
Ｙはアルキル基、炭素数１〜１０のアルキル基、炭素数１〜１０の分岐アルキル基、アルキニル基、ヘテロアルキニル基、炭素数３〜７のシクロアルキル基、これらの基を選択的に置換したもの、これらの基をヒドロキシ置換したものであるか、あるいはＹはＺ１ａ、Ｚ１ｂまたはＲ１０と共に、選択的に置換された炭素環または１〜５個のヘテロ原子を有する選択的に置換された複素環を形成し、更にＹはＺ１ａ、Ｚ１ｂまたはＲ１０に結合しているものであり、好ましくはＹは約２０個以下の数の原子によってＺ１ａ、Ｚ１ｂまたはＲ１０に結合しているものである。
【００５８】
Ｚ１ａおよびＺ１ｂはそれぞれ、水素原子、ヒドロキシ基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、あるいはＺ１ａ、Ｚ１ｂ、はＹまたはＲ１０と共に、炭素環または１〜５個のヘテロ原子を有する複素環を形成し、更にＺ１ａまたはＺ１ｂ、はＹまたはＲ１０に結合しているものであり、好ましくはＺ１ａまたはＺ１ｂは、約２０個以下の数の原子によってＹまたはＲ１０に結合しているものである。
【００５９】
Ｍは炭素数１〜５の、選択的に置換されたアルキル基または選択的に置換されたアルキレン基である。
【００６０】
Ｇは存在しない（結合として存在）、あるいは−Ｏ−、−ＮＨ−、−（ＣＯ＝）−、−ＮＲ１８−、−ＮＣＯＲ１８−、または−ＮＳ（Ｏ）ｘＲ１８−等のヘテロ原子であり、ｘは０１、または２の整数であり、Ｒ１８は低級アルキル基、または選択的に置換された低級アルキル基である。
【００６１】
Ｒ１０はアリール基またはヘテロアリール基であるか、あるいはＲ１０は（４ａ）、（４ｂ）、（４ｃ）または（４ｄ）のいずれか１つの構造であり、
【００６２】
【化４３】
2008506712.tif 000020
【００６３】
ここで、式中、
Ｘ２は構造（４ａ）または（４ｂ）においてヘテロ原子であるか、あるいは（４ｃ）または（４ｄ）に示す構造においてＸ２は炭素−炭素結合であり、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、スルホネート基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、選択的に置換された、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、アシル基またはアセチル基、カルボキシレート基、スルホネート基、スルホン基、イミン基、またはオキシム基であるか、或いはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、Ｒ１４−１７のいずれかは、炭素環または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環に含まれており、更にＹ、Ｚ１ａ、Ｚ１ｂ、Ｍ、Ｇ、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、Ｒ１４−１７のいずれかの位置の基に結合しているものであり、好ましくはこれらの基は約２０個以下の数の原子によって結合しているものである。構造（５）の化合物の実施形態において、本願明細書記載の方法によって決定されたＫｄの値は、例えば実施例１において１００μＭ未満であり、好ましくは１μＭ未満、さらにより好ましくは０．１μＭ未満である。
【００６４】
一部の実施形態において、構造（５）の化合物は以下であり、
【００６５】
【化４４】
2008506712.tif 000021
【００６６】
ここで、式中、
Ａ１は水素原子、メチル基、エチル基であるか、あるいはＡ１およびＲ１ｂは共に３〜５個の原子を有する環を形成するものであっても良い。
【００６７】
Ｒ１ａは水素原子であり、Ｒ１ｂはメチル基またはエチル基であるか、或いはＡ１と共に、３〜５個の原子を有する環を形成するものであっても良い。
【００６８】
Ｙはアルキル基、炭素数１〜１０のアルキル基、炭素数１〜１０の分岐アルキル基、アルキニル基、ヘテロアルキニル基、炭素数３〜７のシクロアルキル基、これらの基を選択的に置換したもの、これらの基をヒドロキシ置換したものであるか、あるいはＹはＺ１ａ、Ｚ１ｂまたはＲ１０と共に、炭素環または１〜５個のヘテロ原子を有する複素環を形成し、更にＹはＺ１ａ、Ｚ１ｂ、またはＲ１０に結合しており、好ましくはＹは約２０個以下の数の原子によって、Ｚ１ａ、Ｚ１ｂまたはＲ１０に結合している。
【００６９】
Ｚ１ａおよびＺ１ｂはそれぞれ、水素原子、ヒドロキシ基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、或いはＺ１ａ、Ｚ１ｂは、ＹまたはＲ１０と共に、炭素環または１〜５個のヘテロ原子を有する複素環を形成し、更にＺ１ａまたはＺ１ｂはＹまたはＲ１０に結合しており、好ましくはＺ１ａまたはＺ１ｂは約２０個以下の数の原子によって、ＹまたはＲ１０に結合している。
【００７０】
Ｍは炭素数１〜５の、選択的に置換されたアルキル基または選択的に置換されたアルキレン基である。
【００７１】
Ｇは存在しない（結合として存在）、あるいは−Ｏ−、−ＮＨ−、−（ＣＯ＝）−、−ＮＲ１８−、−ＮＣＯＲ１８−、または−ＮＳ（Ｏ）ｘＲ１８−等のヘテロ原子であり、ｘは０１、または２の整数であり、Ｒ１８は低級アルキル基、または選択的に置換された低級アルキル基である。
【００７２】
Ｒ１０は、縮合環式のアリール基、縮合環式のヘテロアリール基、または好ましくは、Ｒ１０は、（４ａ）、（４ｂ）、（４ｃ）、または（４ｄ）のいずれか１つの構造であり、
【００７３】
【化４５】
2008506712.tif 000022
【００７４】
ここで、式中、
Ｘ２は（４ａ）または（４ｂ）においてヘテロ原子、あるいは（４ｃ）または（４ｄ）において炭素‐炭素結合であり、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、スルホネート基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、あるいは、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、選択的に置換された、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、あるいはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、アシル基またはアセチル基、カルボキシレート基、スルホネート基、スルホン基、イミン基、またはオキシム基であるか、あるいはＲ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、Ｒ１４−１７のいずれかは、炭素環または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環に含まれ、更にＹ、Ｚ１ａ、Ｚ１ｂ、Ｍ、Ｇ、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、Ｒ１４−１７のいずれかの位置の基に結合し、好ましくはこれらの基は約２０個以下の数の原子によって結合している。
【００７５】
一部の実施形態は以下の構造（５）の化合物を含み、
【００７６】
【化４５】
2008506712.tif 000023
【００７７】
ここで、式中、
Ａ１は水素またはメチル基、Ｒ１ａは水素原子であり、Ｒ１ｂはメチル基またはエチル基である。
【００７８】
構造（５）において、Ｙはアルキル基、炭素数１〜１０のアルキル基、炭素数１〜１０の分岐アルキル基、アルキニル基、ヘテロアルキニル基、炭素数３〜７のシクロアルキル基、これらの基を選択的に置換したもの、これらの基をヒドロキシ置換したものであるか、あるいはＹはＲ１０と共に、炭素環または１〜５個のヘテロ原子を有する複素環を形成し、更にＹはＲ１０に結合し、好ましくはＹは約２０個以下の数の原子によって結合している。
【００７９】
Ｚ１ａおよびＺ１ｂはそれぞれ、水素原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、またはアリールオキシ基である。
【００８０】
Ｍは、メチレン基、炭素数１〜５の、選択的に置換されたアルキル基または選択的に置換されたアルキレン基である。
【００８１】
Ｇは、存在しない（結合として存在）、あるいは、−Ｏ−または−ＮＨ−等のヘテロ原子である。
【００８２】
Ｒ１０は、アリール基、ヘテロアリール基、あるいは一部の実施形態において、Ｒ１０は化学式（４ａ）であっても良く、
【００８３】
【化４７】
2008506712.tif 000024
【００８４】
ここで、式中、
Ｘ２はヘテロ原子であり、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、またはハロゲン原子、アルキル基、アリール基、アルケニル基、アルキニル基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、スルホネート基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基を含む選択的に導入できる置換基であるか、あるいはＲ１１、Ｒ１２、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、選択的に置換された、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であるか、あるいはＲ１１、Ｒ１２、Ｒ１４−１７の各々はそれぞれ、アシル基またはアセチル基、カルボキシレート基、スルホネート基、スルホン基、イミン基、またはオキシム基であるか、あるいはＲ１１、Ｒ１２、Ｒ１４−１７の各々は、炭素環または１〜５個のヘテロ原子を有する複素環に含まれ、更にＹ、Ｚ１ａ、Ｚ１ｂ、Ｍ、Ｇ、Ｒ１１、Ｒ１２またはＲ１４−１７のいずれかの位置の基に結合し、好ましくはこれらの基は約２０個以下の数の原子により結合している。
【００８５】
化学式（２）、（３）、または（５）の様々な実施形態におけるＩＡＰ結合性化合物またはＩＡＰ結合性カーゴ分子は、癌または細胞増殖状態（神経変性疾患のみならず、発達障害、癌、自己免疫疾患等）の治療および予防的処置のための薬物の製造に使用できる。構造式（２）、（３）、または（５）に係る様々な実施形態における、ＩＡＰ結合性化合物またはＩＡＰ結合性カーゴ分子は、癌または細胞増殖障害を治療するための、すぐに使用できる形態の薬剤調製物中に使用できる。該薬剤は、癌または細胞増殖障害を治療または防ぐために患者に投与できる。「すぐに使用できる形態」とは、販売用に提供できる化合物であり、錠剤、液体、またはその他の投与に適した剤形の該化合物、適切なパッケージ、説明書、その他のものを含む。
【００８６】
本発明の一実施形態は、細胞または組織サンプル中の細胞増殖障害を軽減または除去するのに有効な量の（２）、（３）、または（５）の構造に係る種々の実施形態におけるＩＡＰ結合性化合物またはＩＡＰ結合性カーゴ分子を、増殖障害を有する細胞、例えばＩＡＰを過剰発現することで知られるＨｅＬａ細胞（その他の細胞として、これらに限定されないが、神経変性疾患のほか、発達障害、癌、自己免疫疾患を有する細胞が挙げられる）に投与することを含む、細胞または組織の治療方法である。
【００８７】
本発明のさらなる実施形態は、これらには限定されないが、増殖障害および増殖性疾患等の細胞増殖に関連した障害を治療する方法である。このような方法として、本発明の化合物を単独で投与しても、あるいはその他の医薬や化学療法剤等の有効薬剤と併用してもよい。例えば、本発明のＩＡＰ結合性化合物の二量体は、単独で投与しても、あるいは共有の米国特許仮出願第６０／６９２，１１１号に開示されるように化学療法薬と併用してもよい。ここで該仮出願の全内容はこの参照により本願明細書に組み込まれる。
【００８８】
薬学的に許容される塩およびその溶媒和化合物、及び前述のＩＡＰ結合性化合物は、医薬組成物または診断薬、あるいはその両者として製剤化することが可能である。これらの医薬組成物および診断薬は、細胞増殖を改変し細胞増殖障害を検出するための、さらなる診療薬及び治療薬の発見および開発のためのスクリーニング分析、及び細胞増殖障害の治療および検出に使用できる。
【００８９】
本発明は、Ｓｍａｃテトラペプチドまたはその他の種の相同体等のように、ＩＡＰのＢＩＲドメインに結合してアポトーシスのＩＡＰ介在抑制を改変、好ましくは軽減するＩＡＰ結合性化合物の高処理量スクリーニングまたは合理的な薬剤デザインに使用するための分析を含む。テスト化合物の結合は、細胞増殖に関わる疾病の同定、予防、および治療のためのＩＡＰ結合性化合物およびＩＡＰ結合性カーゴ分子の設計に使用できる。本発明の実施形態におけるＩＡＰ結合性カーゴ分子または化合物は、ＩＡＰのＢＩＲドメインのようなタンパク質に結合できる。いくつかの実施形態においては、ＩＡＰ結合性分子は、タンパク質ＸＩＡＰのＢＩＲドメインまたはＤＩＡＰ１のＢＩＲ２ドメインと相互作用する。ＩＡＰ結合性分子は、ＢＩＲドメインの特定の結合溝を通じてタンパク質と相互作用できる。
【００９０】
前出分析法は、（２）、（３）または（５）で表される構造を有しＩＡＰの適切なドメインに結合する、標識されたＩＡＰ結合性化合物またはＩＡＰ結合性カーゴ分子を使用する過程を含む。ここで好ましくは、標識したＩＡＰ結合性化合物の少なくとも１つの測定可能な特徴が、ＩＡＰに結合または溶液中に遊離している標識されたＩＡＰ結合性化合物に応じて変化する。この分析法は、標識されたＩＡＰ結合性化合物のＢＩＲドメインとの結合を可能にする条件下で、ＩＡＰのＢＩＲドメインを標識されたＩＡＰ結合性化合物に接触させ、測定可能な特徴を有する、ＢＩＲが結合した標識されたＩＡＰ結合性化合物複合体を生成する。ＢＩＲが結合した標識されたＩＡＰ結合性化合物複合体は、該複合体から標識されたＩＡＰ結合性化合物の置換を測定することで、他のペプチド、ＩＡＰ結合性化合物、または開発中のテスト化合物のＢＩＲドメインに対する結合性を測定するために、該ペプチド、ＩＡＰ結合性化合物、またはテスト化合物に接触させてもよい。ペプチド、ＩＡＰ結合性化合物、またはテスト化合物による、ＢＩＲが結合した標識されたＩＡＰ結合性化合物複合体からの標識されたＩＡＰ結合性化合物の置換は、標識されたＩＡＰ結合性化合物の測定可能な特徴の変化を測定して、そのテスト化合物のＩＡＰのＢＩＲドメインへの結合の可能性およびその相互作用の強さを決めることで決定できる。
【００９１】
本発明は、細胞増殖の症状および疾患、より詳しくは細胞、組織または個体中のＩＡＰの活性が異常な状態の治療に関する。本発明は、これらには限定されないが、細胞中のＸＩＡＰ、ｃ−ＩＡＰ１、ｃ−ＩＡＰ２、ＭＬ−ＩＡＰ、およびサバイビン等のＩＡＰと結合する、構造式（２）、（３）、または（５）で表される構造を有するＩＡＰ結合性化合物である分子を特徴とする。この擬態分子は、治療または診療機能を含むことのできる、該分子中に内在または該分子に結合したカーゴ部分を含む。ＩＡＰ結合性化合物分子は、細胞増殖状態または疾患の治療または検出が必要な細胞、組織、または患体に投与できる。治療の必要性は、細胞または組織、好ましくは患体由来のこれらのものを、分子が該組織または細胞中でＩＡＰと結合した場合に変化する、検出可能な標識またはカーゴを有するＩＡＰ結合性分子に接触することで確認できる。細胞中でのＩＡＰ結合性化合物分子のＩＡＰとの結合は、細胞増殖状態または疾患を改変させるのに利用でき、放射線治療等のその他の治療処置と併用してもよい。細胞中におけるＩＡＰの活性、または細胞増殖状態または疾患に対する治療の経過進行は、検出可能な標識を有するＩＡＰ結合性カーゴ分子で測定できる。
【００９２】
本発明の一観点によれば、混合細胞集団中の腫瘍性または癌細胞を選択的に同定する方法が提供される。この方法は、混合細胞集団に、（２）、（３）または（５）の構造を有する細胞浸透性のＩＡＰ結合性カーゴ分子を、腫瘍細胞内でＩＡＰ結合性カーゴ分子がＩＡＰ等のタンパク質と結合できる条件下で接触させ、ＩＡＰ結合性カーゴ分子の検出可能な性質によってその腫瘍細胞を選択的に同定する。いくつかの実施形態においては、腫瘍細胞中でＩＡＰ結合性カーゴ分子がＩＡＰと複合体を形成した際の検出可能な性質の変化により同定する。ここで使用する細胞は、患体（ヒトまたは動物）由来の培養細胞または初代細胞でよい。あるいは、該細胞は患体内に存在してもよく、ＩＡＰ結合性カーゴ分子を患体内に導入することで、上記接触を行うことができる。
【００９３】
ＩＡＰ結合性カーゴ分子の実施形態において、該分子のカーゴ部分は色素標識を有する。別の実施形態においては、該分子のカーゴ部分はこれらに限定されないが、ＮＭＲ活性核またはＭＲＩ造影剤でもよい。ＩＡＰを有する組織または細胞の選択的同定は、核磁気共鳴分析法（ＮＭＲ）または磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）により行う。あるいは、標識されたＩＡＰ結合性カーゴ分子は放射性同位元素を含み、該選択的同定を陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）により行う。
【００９４】
本発明の別の態様は、細胞の混合集団中の腫瘍細胞の一部あるいはすべてを死滅させることにより、腫瘍細胞中のアポトーシスを選択的に軽減または誘導する方法を特徴とする。この方法は、構造式（２）、または（３）、または（５）で表される構造を有するＩＡＰ結合性カーゴ分子に混合細胞集団のサンプルを接触させることを含む。該分子のＩＡＰ結合性部分またはカーゴ部分は、これらには限定されないが、例えば放射性元素または光感作薬のような直接または間接的に細胞に対して毒性を示す分子部分または置換基を含んでもよい。該分子のＩＡＰ結合性部分は、腫瘍細胞内のＩＡＰ等のタンパク質に結合して、ＩＡＰ結合性カーゴ分子の毒性部分が直接または間接的に毒性効果を及ぼし、細胞の混合集団中の腫瘍細胞の少なくとも一部を損傷または死滅させる。
【００９５】
本発明の別の実施形態は、細胞およびＩＡＰ結合性カーゴ分子組成物を含有する組成物である。このＩＡＰ結合性カーゴ分子は、ＸＩＡＰ、ｃ‐ＩＡＰ１、ｃ‐ＩＡＰ２、ＭＬ−ＩＡＰまたはサバイビン等のＩＡＰタンパク質に結合、好ましくはＩＡＰタンパク質のＢＩＲ表面溝に結合する。いくつかの実施形態においては、ＩＡＰ結合性分子は、ＸＩＡＰタンパク質のＢＩＲ３の表面溝に結合する。構造（２）、（３）、または（５）のＩＡＰ結合性カーゴ分子は細胞中に浸透または移入でき、例えば、細胞中のカスパーゼから１若しくはそれ以上のＩＡＰタンパク質を置換、またはＩＡＰにより捕捉されたＳｍａｃのようなタンパク質を置換により放出させるのに使用できる。ＩＡＰ結合性カーゴ分子は、ＩＡＰ結合性分子の細胞中におけるＩＡＰタンパク質との化学的、物理的あるいは両者を伴う相互作用で変化する検出可能な性質を有することができる。こ前出組成物は、治療中の細胞におけるＩＡＰの存在をモニターするための対照として有用であり、また、細胞サンプル中の異常なＩＡＰレベルを検出する際の標準として使用できる。検出可能な性質は、該分子のＩＡＰ結合性部分がＩＡＰタンパク質に結合するときに変化する、該分子のカーゴ部分による発光であってもよい。
【００９６】
本発明の実施形態における、構造（２）、（３）、または（５）のＩＡＰ結合性化合物またはＩＡＰ結合性カーゴ分子は、ＩＡＰ結合解離定数Ｋｄを有することで特徴づけられる。本願明細書中の実施例１に記載の方法または当業者に公知の同等の方法により決定した場合、いくつかの実施形態においては、Ｋｄは約１０μＭ未満であり、別の実施形態では、Ｋｄは約１μＭ未満であり、また別の実施形態では、Ｋｄは０．１μＭ未満である。Ｋｄの値が約１０μＭの、構造（２）、（３）、または（５）の分子は、ＩＡＰのＢＩＲドメイン、いくつかの実施形態においては、ＸＩＡＰのＢＩＲ３ドメインへの生体外結合分析に使用できる。ＩＡＰ結合性カーゴ分子、好ましくは該分子のカーゴ部分は、これらには限定されないが、発蛍光基、放射性元素、またはその他の発色基を含む。さらなる実施形態においては、ＩＡＰ結合性カーゴ分子は、別のペプチドまたはペプチド模倣物単位（例えば、二量体）を含んでもよい。ＩＡＰ結合性カーゴ分子は、ＮＭＲ活性核またはＭＲＩ造影剤を含んでもよく、核磁気共鳴分析法または磁気共鳴画像法により該分子のカーゴ部分の選択的同定を行う。該組成物中の１若しくはそれ以上の細胞は、これらに限定されないが、動物、哺乳動物、またはヒト由来の、体液、組織、腫瘍、類繊維腫由来の細胞、腫瘍細胞、幹細胞、神経系細胞、またはこれらの組み合わせたものが使用できる。該組成物中の細胞は、理学的検査、運動機能検査、または体の一部のしこりの触診による検出に基づいた、異常なＩＡＰレベルを示す疑いのある組織から採取できる。該組成物は、１若しくはそれ以上の薬学的に許容される賦形剤を含有してもよい。
【００９７】
本発明の別の実施形態は、細胞中のＩＡＰの同定法であり、構造（２）、（３）または（５）の１若しくはそれ以上のＩＡＰ結合性カーゴ分子またはその二量体の混合物を１若しくはそれ以上のサンプル細胞と共に、ＩＡＰ結合性カーゴ分子からの検出可能な標識の存在についてモニターしたり、該混合物中の１若しくはそれ以上のＩＡＰ結合性カーゴ分子の検出可能な性質の変化についてモニターすることを含む。好ましくは、ＩＡＰ結合性カーゴ分子の検出可能な性質は、ＩＡＰ結合性カーゴ分子およびＩＡＰタンパク質のＢＩＲドメインとで複合体を形成する際に変化し、該ＩＡＰとして、これらには限定されないが、サンプル細胞中のＸＩＡＰ、ｃ‐ＩＡＰ１、ｃ‐ＩＡＰ２、ＭＬ−ＩＡＰ、またはサバイビンが含まれる。該サンプル中で、ＩＡＰは、カスパーゼ、Ｓｍａｃ等のその他のタンパク質、またはこれらを組み合わせたものに細胞内で結合する。液体サンプル、流動液、精製後の液体中で、細胞およびＩＡＰ結合性カーゴ分子についてモニターしてもよい。本発明は、細胞中におけるＩＡＰの異常な発現、すなわちＩＡＰの過剰発現または過小発現の検出に使用でき、異常発現の兆候の検出は、その細胞に対する一連の治療処置を開始するのに利用できる。好ましくは、ＩＡＰ結合性カーゴ分子は、細胞中のＩＡＰの過剰発現の検出に使用される。当該方法は、１若しくはそれ以上の対照細胞と混合した１若しくはそれ以上のＩＡＰ結合性カーゴ分子の検出可能な性質の変化と、１若しくはそれ以上のサンプル細胞と混合した１若しくはそれ以上のＩＡＰ結合性カーゴ分子の性質の検出可能な変化と比較する操作をさらに含む。この比較は、サンプル細胞中のＩＡＰの量または活性に関連している。該方法は、１若しくはそれ以上のＩＡＰ結合性カーゴ分子を、これらには限定されないが、サンプル細胞、対照細胞、またはこれらの細胞を様々に組み合わせたもの等の１若しくはそれ以上の細胞と配合する操作を含む。モニタリングは、ＩＡＰ結合性カーゴ分子と細胞の混合物による放射エネルギーの吸収または放出を利用し、これらには限定されないが、例えば、磁気共鳴法、蛍光法、化学発光法、磁気共鳴画像法、および陽電子放射断層撮影法が用いられる。好ましくは混合物中で化学的または物理的に細胞中のＩＡＰに結合している１若しくはそれ以上のＩＡＰ結合性カーゴ分子の検出可能な性質の変化は、ＩＡＰ結合性分子の蛍光放出の強度変化である。いくつかの実施形態においては、カスパーゼからＩＡＰを置換、またはサンプル細胞中のＩＡＰからＳｍａｃを置換させることのできる１若しくはそれ以上のＩＡＰ結合性カーゴ分子の蛍光放出に変化が生じる。
【００９８】
本発明の細胞治療法は、細胞中ＩＡＰの発現を同定し、細胞浸透性ＩＡＰ結合性カーゴ分子またはその他の治療薬を、細胞中のＩＡＰの活性を改変させる量を細胞に投与することを含む。ＩＡＰ結合性カーゴ分子は、薬学的に許容される賦形剤と共に処方してもよい。例えば、（細胞の対照サンプルと選択的に比較して）細胞サンプル中のＩＡＰの異常なレベルを確認後、アポトーシスを誘導するため、精製したＳｍａｃ、ＩＡＰ結合性化合物、またはＩＡＰ結合性カーゴ分子を細胞に添加することができる。本発明は、治療の必要な細胞を特定したり、その細胞を治療したり、異常なＩＡＰレベルを有する細胞の治療進度をモニターするのに使用できる。異常なＩＡＰ発現を有する細胞を特定する操作として、１若しくはそれ以上のＩＡＰ結合性カーゴ分子と１若しくはそれ以上のサンプル細胞の混合物を１若しくはそれ以上のＩＡＰ結合性カーゴ分子の検出可能な性質についてモニターする操作を含む。該検出可能な性質は、サンプル細胞中でＩＡＰ結合性分子とＩＡＰが複合体形成する際に変化する。
【００９９】
本発明の別の実施形態は、構造（２）、（３）または、（５）のＩＡＰ結合性化合物またはＩＡＰ結合性カーゴ分子またはその二量体を含む組成物等を包装材料で包装したものまたはキットである。該包装材料には、どのようにしてＩＡＰ結合性カーゴ組成物を投与、治療、または細胞サンプル中のＩＡＰレベルの検出に使用できるかを表示してある。この表示には、医薬組成物中に含まれるＩＡＰ結合性カーゴ分子または別のＩＡＰ結合性カーゴ分子が、ＩＡＰ発現の異常なレベルが決定された細胞を治療するのにどのように使用できるかをさらに示してもよい。
【０１００】
本発明の実施形態は、細胞混合集団中で腫瘍細胞を選択的に特定する方法である。本方法では、ＩＡＰ結合性カーゴ分子を腫瘍細胞内でＩＡＰに結合させて選択的に腫瘍細胞を特定できる条件下で、混合された細胞集団のサンプルを構造式（２）、（３）または（５）で表される構造を有する１若しくはそれ以上のＩＡＰ結合性カーゴ分子または二量体に接触させる。該細胞として、これらには限定されないが、培養細胞、生検により患体から採取した細胞、または体液由来細胞が挙げられる。標識されたＩＡＰ結合性カーゴ分子を、腫瘍細胞を有する、またはその疑いのある生体中の組織サンプルまたは組織に導入することにより、上記接触を行うことができる。ＩＡＰ結合性カーゴ分子は、色素標識カーゴ部分を有することができ、好ましくは該色素として発蛍光性色素を使用する。標識されたＩＡＰ結合性カーゴ分子は、ＮＭＲ活性核または造影剤を含むことができ、上記選択的同定は、核磁気共鳴分析法または磁気共鳴画像法により行う。標識されたＩＡＰ結合性カーゴ分子において、該分子のカーゴ部分は放射性元素を含んでいてもよく、個の場合の選択的同定は陽電子放射断層撮影法により行う。該ＩＡＰ結合性カーゴ分子は、薬学的に許容される賦形剤、およびサンプル細胞中のアポトーシスを選択的に変化させるための治療剤と共に処方してもよい。
【０１０１】
本発明の別の実施形態は、正常細胞と腫瘍細胞の混合集団中の腫瘍細胞を選択的に損傷または死滅させる方法である。本方法は、細胞に直接または間接的に毒性を有する薬剤を含む、構造（２）、（３）、または（５）の細胞浸透性ＩＡＰ結合性カーゴ分子またはそれらの二量体に混合細胞集団のサンプルを接触させることを含む。好ましくは該分子のカーゴ部分は、細胞に対して直接または間接的に毒性を有する。腫瘍細胞内でＩＡＰ結合性カーゴ分子をＩＡＰに結合させる条件下では、該薬剤は、直接または間接的に毒性効果を及ぼし、腫瘍細胞の少なくとも一部を損傷または死滅させる。本方法では、毒剤として放射性元素を使用してもよい。本方法では光感作性毒剤を使用してもよく、この場合、細胞集団を露光することで腫瘍細胞を選択的に損傷あるいは死滅できる。  
【課題を解決するための手段】
【０１０２】
ＩＡＰ結合性分子およびこれらの分子を含む組成物を開示する。ＩＡＰ結合性分子は、細胞中のＩＡＰ（アポトーシス阻害タンパク質）と相互作用し、そのような分子で処理された細胞内のアポトーシスを変化させる。これらの組成物の実施形態において、Ｋｄ値は０．１μＭ未満である。これらのＩＡＰ結合性分子を治療、診断または分析用途に使用する方法も開示する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０１０３】
本発明の組成物および方法について説明する前に、本願明細書に記載の個々の分子、組成物、方法論、あるいはプロトコルは種々変更可能であり、本発明はこれらに限定されないことが理解される。また、本発明に関する記述において使用される用語は、特定の説明または実施形態を説明する目的のみに使用されており、添付の特許請求の範囲のみにより限定される本発明の範囲を限定する意図で使用されていないこともまた理解される。
【０１０４】
本願明細書および添付の特許請求の範囲において単数で記載されているもの（英語の原文中で「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」のつく単数形扱いのもの）は、特に記載のない限り複数のものも含む。例えば、「細胞」と記載のある場合、１若しくはそれ以上の細胞および当業者に既知のそれらの同等物等を含む。特に定義されていない限り、本願明細書で使用する全ての科学技術用語は、当業者が通常理解する意味と同じ意味を有する。本願明細書記載の方法および材料と同様または同等物は、本発明の実施形態を実施または試験するにあたり使用できるが、実施形態の方法、装置、および材料を本願明細書で記述する。本願明細書記載のすべての出版物は、その内容を参照により本願明細書に組み込む。本願明細書中のいずれの記載も、先行発明に基づいてその開示に先行する権利を本発明が享受しないことを認めていると解釈されるべきではない。
【０１０５】
「選択的」または「選択的に」は、続いて記載される事柄や状況が起こる場合も起こらない場合もあり、記載内容はその事柄が起こる場合の例と起こらない場合の例を包含する。
【０１０６】
本発明のＩＡＰ結合性分子およびこれらの化合物を含有する医薬組成物は、これらには限定されないが、ＸＩＡＰ、ｃ−ＩＡＰ１、ｃ−ＩＡＰ２、サバイビン、およびＬＩＶＩＮ／ＭＬ−ＩＡＰ等のＩＡＰ（アポトーシス阻害タンパク質）に結合できる。これらの化合物は、該分子のＩＡＰ結合性部分あるいはその結合性部分に結合した部分の一部として、診断または治療用の部分構造または置換基を含む。ＩＡＰ結合性カーゴ分子は、ＩＡＰ結合性部分およびカーゴ部分を含むように任意に分けることができる。該分子のＩＡＰ結合性部分は、ＩＡＰタンパク質、好ましくはＩＡＰタンパク質のＢＩＲドメインと相互作用し、単量体または二量体でもよい。一部の実施形態において、該分子のＩＡＰ結合部分は、ＸＩＡＰのＢＩＲ３の表面溝（ｓｕｒｆａｃｅ  ｇｒｏｏｏｖｅ）と相互作用する。該分子のカーゴ部分は，主鎖または該分子のＩＡＰ結合部分の一部でもよく、カーゴ部分は化学的に該分子のＩＡＰ結合性部分に結合していてもよい。該分子のカーゴ部分として、これらには限定されないが、造影、治療、プローブ、標識、またはマーカーのための構造、部分構造、および置換基が挙げられる。該分子のカーゴ部分およびＩＡＰ結合性部分は、これらには限定されないが、ＩＡＰ結合性部分に対するアミド、エステル、またはジスルフィド結合、キレート化等の化学的結合、あるいは該分子のＩＡＰ結合性部分をその分子のカーゴ部分から離した方が望ましい場合、ジアミノブタンまたはエチレングリコールおよびそのオリゴマー等の結合基により結合できる。ＩＡＰ結合性カーゴ分子のどの部分の１若しくはそれ以上の原子を放射性元素とし、検出または治療に使用してもよい。その他の実施形態において、カーゴ部分は、第二の単量体を構成し、結合基を介して二量体を形成していてもよい。ＩＡＰ結合性化合物のＩＡＰ結合性部分は、ＩＡＰ標的タンパク質特異性を分子に付与し、カーゴ部分は、その分子の位置をモニターまたは評価したり、哺乳動物の細胞サンプルまたは組織内のその位置に対して治療を行うために、官能基をその分子に付与できる。ＩＡＰ結合性化合物は、例えば、ＩＡＰと相互作用するカスパーゼ−３、７、または９、あるいはＳｍａｃ等の細胞で捕捉されたタンパク質を置換により放出させるのに使用でき、放出されたたタンパク質をその細胞内でのアポトーシスの促進に使用できる。該分子のカーゴ部分をそのＩＡＰ結合性部分に結合する場合、ＩＡＰへの結合性、細胞浸透性、または細胞への移入に悪影響を及ぼさないように、該カーゴ部分はその分子のＩＡＰ結合性部分のどの部分にも結合または化学的に結合できる。該分子のＩＡＰ結合性部分とカーゴ部分間で化学的相互作用は起こりうるが、それらの組み合わせにより該分子の細胞浸透性、ＩＡＰ結合性、およびカーゴ部分の機能が悪影響を受けないように該分子は形成されている。本願明細書で開示の方法により生成されるいずれのＩＡＰ結合性カーゴ分子の好適性は、これらには限定されないが、腎細胞癌、非小細胞肺癌、ＨｅＬａ細胞、またはその他のＩＡＰを過剰発現するものとして既知の細胞、または増殖障害を有する細胞等の細胞中で、蛍光標識したペプチド［ＡｂｕＲＰＦ−Ｋ（５−Ｆａｍ）−ＮＨ２］に対���て試験できる。本発明のＩＡＰ結合性分子は、所望の細胞に浸透させ、その細胞中でＩＡＰに結合させて、選択的にカーゴを細胞に送達することができる。
【０１０７】
構造（２）、（３）、または（５）の化合物の実施形態において、本願明細書記載の方法で測定されたＫｄの値は、実施例１において１００μＭ未満、好ましくは１μＭ未満、さらに好ましくは０．１μＭ未満であり、２−置換ピロリジン−１−カルボニルまたは２，４−独立置換ピロリジン−１−カルボニルが含まれる。
【０１０８】
本願明細書において、ＩＡＰに結合することでアポトーシスを促進する治療上の有用性を強調するために、本発明の医薬的有効化合物を薬剤と称する。しかし、本発明の別の実施形態では、生体外、切片上、または生体内でのＩＡＰの検出、またはＩＡＰ結合分析を目的とした診断薬として該化合物を使用する。これらの実施形態において、本発明の該化合物を、例えばフルオロフォアを用いて検出可能であるように標識する。本発明の別の実施形態において、該化合物を標的剤として使用し、すなわち、それらの構造中に放射性核種等の殺腫瘍細胞剤あるいはその他の抗腫瘍剤または治療薬を組み入れて使用する。従って、本願明細書中で薬剤とは、治療薬、予防薬、または診断薬として使用するための、本発明の医薬的／生物学的に有効な（すなわちＩＡＰ結合性を有する）化合物を意味する。
【０１０９】
ヘテロ原子という用語は、選択的に酸化されていたり、窒素原子の場合は選択的に四級化されている窒素原子、酸素原子、硫黄原子、その他の原子に言及する。満たされていない価電子を有するいずれのヘテロ原子においても、その価電子を満たすように水素原子を有するものとみなす。一部の実施形態において、例えば、ヘテロ原子が窒素原子であり、窒素原子の価電子を満たすように水素原子またはその他の基を有する場合、同様の構造における窒素原子をその他のへテロ原子、例えば酸素原子で置換することは、窒素原子に結合していた水素原子または置換基を喪失することになる。ヘテロ原子という用語は、これらには限定されないが、例えば、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｎ−、−Ｎ（Ｈ）−、および−Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）が含まれていても良い。
【０１１０】
アルキルという用語は、炭素原子数約１〜約３０の、飽和直鎖状、分岐状、または環状炭化水素（およびこれらの炭化水素と特定の炭素数範囲において、組み合わせたものおよび組み合わせ部分）に言及する。低級アルキル基とは、炭素原子数１〜１０、より好ましくは炭素原子数１〜５の飽和直鎖状、分岐状、または環状炭化水素、およびこれらの炭化水素およびこの特定炭素数範囲において、組み合わせたものおよび組み合わせ部分に言及する。アルキル基は、これらには限定されないが、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、シクロプロピル基、メチルシクロプロピル基、シクロペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｎ−ヘキシル基、イソヘキシル基、シクロヘキシル基、シクロオクチル基、アダマンチル基、３−メチルペンチル基、２，２−ジメチルブチル基、および２，３−ジメチルブチル基を含む。
【０１１１】
置換アルキル基という用語は、１〜５個の置換基を有し、炭素原子数約１〜約３０の飽和した、直鎖状、分岐状、または環状炭化水素（およびこれらの炭化水素と特定の炭素数範囲において、組み合わせたものおよび組み合わせ部分）に言及する。置換低級アルキル基は、１〜５個の置換基を有し、炭素原子数１〜１０、より好ましくは炭素原子数１〜５の、飽和した、直鎖、分岐、または環状炭化水素、（およびこれらの炭化水素と炭素数範囲において、組み合わせたものおよび組み合わせ部分）に言及する。置換アルキルラジカルおよび置換低級アルキル基は、これらには限定されないが、アルコキシ基、置換アルコキシ基、アシルアミノ基、チオカルボニルアミノ基、アシルオキシ基、アミノ基、アミジノ基、アルキルアミジノ基、アミドアルキル基（−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２または−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２等）、チオアミジノ基、アシルアルキルアミノ基、シアノ基、‐ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＣＨ２ＣＦ２Ｃｌ等のハロゲン化または部分ハロゲン化アルキル基を与えるようなハロゲン原子（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、ヒドロキシ基、ニトロ基、カルボキシル基、カルボキシルアルキル基、カルボキシル複素環基、カルボキシル置換複素環基、シクロアルキル基、グアニジノ基、ヘテロアリール基、アリール基、ヘテロ環状、アルキルアミノ、ジアルキルアミノまたは上述の基で選択的に置換されたもの等の置換基を１〜５個有しうる。
【０１１２】
本願明細書で使用されるアルキレンラジカルという用語は、炭素原子数１〜３０の二官能性の飽和した分岐または非分岐炭化水素ラジカルに言及し、例えば、メチレン基（−ＣＨ２‐）、エチレン基（−ＣＨ２ＣＨ２−）、ブロピレン基（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、２−メチル基（−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−）、ヘキシレン基（−（ＣＨ２）６−）等を含む。低級アルキレンとして、炭素原子数１〜１０、より好ましくは炭素原子数１〜５のアルキレン基を含む。
【０１１３】
置換アルキレンラジカルという用語は、１〜５個の置換基を有し、炭素原子数１〜３０の、二官能性の飽和した分岐または非分岐アルキレンラジカルまたは基に言及する。低級置換アルキレンラジカルは、１〜５個の置換基を有し、炭素原子数１〜１０、好ましくは炭素数１〜５の、置換アルキレンラジカル基に言及。置換基は、これらには限定されないが、アルキル基に対する置換基を含む。
【０１１４】
アルケニルラジカルという用語は、炭素原子数２〜３０の、１若しくはそれ以上の炭素−炭素二重結合を有する、分岐又は環状の炭化水素または非分岐炭化水素ラジカルを称し、例えば、エテニル基、ｎ−プロペニル基、イソプロペニル基、ｎ−ブテニル基、イソブテニル基、ｔ−ブテニル基、オクテニル基、デセニル基、テトラデセニル基、ヘキサデセニル基、エイコセニル（ｅｉｃｏｓｅｎｙｌ）基、テトラコセニル（ｔｅｔｒａｃｏｓｅｎｙｌ）基等が挙げられる。低級アルケニル基として、炭素原子数２〜１０、好ましくは炭素数２〜５で、１若しくはそれ以上の炭素−炭素二重結合を有する、アルケニル基が挙げられる。１若しくはそれ以上の炭素−炭素二重結合はそれぞれ、シスまたはトランスの立体配置を有することができる。置換アルケニルラジカルとは、これらには限定されないが、アルキル基に対する置換基等の置換基を有する、アルケニルラジカルまたは低級アルケニル基を称する。
【０１１５】
本願明細書中で使用される語、アルケニレンラジカルとして、炭素数２〜３０で、１若しくはそれ以上の炭素−炭素二重結合を有する、二官能性の分岐または非分岐炭化水素ラジカルまたは基をを含む。「低級アルケニレン」として、１つの炭素−炭素二重結合を有し、炭素数２〜１０、好ましくは炭素数２〜５のアルケニレン基が挙げられる。置換アルケニレンラジカルとは、これらには限定されないが、アルキル基に対する置換基等の置換基を１〜５個有する、アルケニレンラジカルまたは低級アルケニル基を称する。
【０１１６】
アルキニルラジカルまたはアルキニル基とは、炭素数２〜１２の、１若しくはそれ以上の三重結合を有する、直鎖状または分岐鎖炭化水素ラジカルを称し、いくつかの実施形態として、１つの三重結合を有する、炭素数２〜６のアルキニル基が挙げられる。置換アルキニルは、置換アルキル基で定義されたように、１、２、または３つの置換基を有する。アルキニレンとは、１つ以上の炭素−炭素三重結合を有し、炭素数２〜１２の二官能性の分岐または非分岐炭化水素鎖を称し、いくつかの実施形態として、１つの三重結合を有し、炭素数２〜６のアルキニレン基が挙げられる。置換アルキニレンは、置換アルキル基で定義されたように、１、２、または３つの置換基を有する。
【０１１７】
本願明細書で使用されるように、「ハロ基」または「ハロゲン原子」とは、Ｉ、Ｂｒ、Ｃｌ、またはＦ等の各ハロゲン原子を意味する。本願明細書で使用されるように、"シアノ基"とは、−Ｃ≡Ｎ基を意味する。
【０１１８】
アリールラジカルまたはアリール基とは、炭素原子数約５〜約１４、好ましくは炭素原子数約６〜約１０の選択的に置換された、単環式または二環式芳香環ラジカル（およびこれらの炭化水素と炭素原子数範囲において、組み合わせたものおよび組み合わせ部分）を称する。アリール基の非限定的な例として、例えば、フェニル基およびナフチル基が挙げられる。置換アリール基は、置換アルキル基で定義されたように、１若しくはそれ以上の置換基を有する。
【０１１９】
アラルキルラジカルとは、アリール置換基を有し、炭素数約６〜約２０、好ましくは炭素数約６〜約１２の、アルキルラジカル（およびこれらの炭化水素と炭素数範囲において、組み合わせたものおよび組み合わせ部分）を称する。アラルキル基は、選択的に置換されていてもよい。アラルキル基の非限定的例として、例えば、ベンジル基、ナフチルメチル基、ジフェニルメチル基、トリフェニルメチル基、フェニルエチル基、およびジフェニルエチル基が挙げられる。置換アリールアルキル基は、置換アルキル基で定義されたように、アリール基またはアルキル基に、１若しくはそれ以上の置換基を有する。
【０１２０】
シクロアルキルアリールラジカルまたはシクロアルキルアリール基とは、それぞれ置換されたアルキルシクロアルキルアリール基、シクロアルキル基、およびアリール基を２個の原子を共有して組み合わせた全ての組み合わせを含む、アリール基に縮合したシクロアルキルラジカルを称する。本発明の化合物に使用される縮合環式のシクロアルキルアリール基の例として、１−インダニル基、２−インダニル基、１−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル）基等が挙げられる。より具体的には、テトラヒドロナフチル基として、それぞれ置換されたアルキルテトラヒドロナフチル基のあらゆる組み合わせを含む、縮合環式の多環式炭化水素から誘導される、一価のラジカルまたは基を称する。これらのラジカルは、構造式（１１）で示す構造において、（Ｃ１）または（Ｃ４）の位置で別の基に結合、あるいは構造式（１１ａ）で示す構造において（Ｃ２）または（Ｃ３）の位置で標識されていてもよい。テトラヒドロナフタレンそのアルキル置換誘導体のキラル炭素原子Ｃ１−４は（Ｒ）または（Ｓ）の立体配置のいずれかを有することができる。
【０１２１】
【化４８】
2008506712.tif 000025
【０１２２】
シクロアルキルラジカルまたはシクロアルキル基とは、より具体的には、その構造中で１若しくはそれ以上の環を有し、炭素数約３〜１４、好ましくは炭素数約３〜７の、一価の飽和炭素環アルキルラジカル（およびこれらの炭化水素と炭素数範囲において、組み合わせたものおよび組み合わせ部分）を称する。多環構造は、架橋環でも縮合環式の環構造でもよい。これらの環は、アルキル基に対する置換基のうちの１若しくはそれ以上で選択的に置換されていてもよい。シクロアルキル基の例として、これらには限定されないが、、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロオクチル基、およびアダマンチル基が挙げられる。置換シクロアルキル基は、置換アルキル基で定義されたように、１若しくはそれ以上の置換基を有する。
【０１２３】
シクロアルキルアルキルラジカルとは、より具体的には、シクロアルキル置換基を有し、炭素数約４〜約２０、好ましくは炭素数約６〜約１２のアルキルラジカル（およびこれらの炭化水素と炭素数範囲において、組み合わせたものおよび組み合わせ部分）を称し、これらには限定されないが、例として、メチルシクロプロピル基、メチルシクロヘキシル基、イソプロピルシクロヘキシル基、およびブチルシクロヘキシル基が挙げられる。シクロアルキルアルキルラジカルまたはシクロアルキルアルキル基は、アルキル基に対する置換基のうちの１若しくはそれ以上で選択的に置換されていてもよく、例として、これらには限定されないが、ヒドロキシ基、シアノ基、アルキル基、アルコキシ基、チオアルキル基、ハロ基、ハロアルキル基、ヒドロキシアルキル基、ニトロ基、アミノ基、アルキルアミノ基、およびジアルキルアミノ基が挙げられる。
【０１２４】
本願明細書中で使用の語、アシル基とは、上記定義の、アルキル基、置換アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル基、アリール基、ヘテロアリール基、またはヘテロシクリル基が、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒの構造を構成するように、１若しくはそれ以上のカルボニル基、−Ｃ（＝Ｏ）−を介して結合している基を称する。ここでＲは、置換アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、シクロアルケニル基、アリール基、ヘテロアリール基、またはヘテロシクリル基である。本願明細書中で「アシル」という語を、アシルアミノ基等のように、別の基に結び付けた形で使用する場合、「アシル」とは、その基の二番目に示される基に結合したカルボニル基｛−Ｃ（＝Ｏ）｝を意味する。従って、アシルアミノ基またはカルバモイル基とは、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２を意味し、アシルアルキルアミノ基とは、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ’Ｒ"等の基を意味する。ここで、Ｒ’およびＲ"は、水素原子またはアルキル基である。アミドアルキル基とは、−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、より一般には、−（ＣＨ２）ｐＣ（＝Ｏ）ＮＨ２等を意味する。カルボキシとは、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨラジカルまたは基を意味し、カルボキシアルキルとは、‐（ＣＨ２）ｐＣ（＝Ｏ）ＯＨ等の基を意味し、アルキルカルボキシアルキルとは、（−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（アルキル））等の基を意味し、アルコキシカルボニルまたはアシルアルコキシとは、（−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ａｌｋｙｌ））基を意味する。ここで、アルキル基とは前記定義のとおりである。本願明細書で使用されるように、アロイルまたはアシルアリールとは、（−Ｃ（＝Ｏ）（アリール））基のことであり、ここでアリールとは前記定義のとおりである。アロイル基の例として、ベンゾイル基およびナフトイル基が挙げられる。アセチルとは、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３基を意味し、表５に示すように「Ａｃ」と略記される。ホルミルとは、−Ｃ（＝Ｏ）Ｈラジカルまたは基を意味する。上述の基において、ｐはそれぞれ０、１、２または３の整数である。
【０１２５】
アリールオキシラジカルとは、炭素数約５〜約１４の、選択的に置換された単環または二環式芳香族ラジカルであり、（アリール）−Ｏ−ラジカル基を意味する。ここでアリールとは、前記定義のとおりである。このようなアリールオキシラジカルとして、これらには限定されないが、構造（１２）で記載されるラジカルが挙げられる。アリールオキシラジカルのアリール環上を選択的に置換する置換基として、これらには限定されないが、水素原子、アルキル基、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アルコキシカルボニル基、またはその他の置換基が含まれる。本発明のＩＡＰ結合性化合物の実施形態として、これらには限定されないが、表５中の化合物等の、ピロリジン環に結合したフェノキシラジカル等の選択的に置換されたアリールオキシ基が含まれる。ＩＡＰ結合性化合物の一部の実施形態において、フェノキシラジカルが含まれ、本願明細書記載の方法で決定したＫｄの値は、例えば、実施例１では約０．１μＭ未満である。
【０１２６】
本願明細書中で使用される「アルコキシ」および「アルコキシル」の用語は、選択的に置換された（アルキル）−Ｏ−ラジカルまたは基であり、ここでアルキルとは、前記定義のとおりである。アルコキシラジカルまたはアルコキシ基の例として、メトキシ、エトキシ、ｎ‐プロポキシ、ｉ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、シクロプロピルメトキシ、およびヘプトキシが含まれる。アルコキシラジカルとして、（アルキル）−Ｏ−基中でアルキルが選択的に置換されたものも含まれる。アルコキシは、前記定義および構造（１３）で非限定的に示されるラジカルで表されるように選択的に置換されたアリール基を有していてもよい。「低級アルコキシ」基とは、炭素原子数１〜５の選択的に置換されたアルコキシ基を意味する。「ポリエーテル」とは、これらには限定されないが、ポリエチレングリコール類またはポリブロピレングリコール類等のように複数のエーテル結合を有する化合物または分子構造部分である。「ポリアルキルエーテル」とは、実施例１６のスキームＶＩＩＩ中の構造式（８５）で非限定的に示される、複数のエーテル結合で相互に結合あるいは複数のエーテル結合を有するアルキルを意味する。「アリールアルキルオキシ」とは、アリールアルキル−Ｏ−基を意味し、ここでアリールアルキル基とは前述のとおりである。アリールアルキルオキシ基の例として、ベンジルオキシラジカル（すなわち、Ｃ６Ｈ５ＣＨ２Ｏ−またはＢｎＯ−）、あるいは１−または２−ナフタレンメトキシが含まれる。ベンジルオキシラジカル中のアリール環を選択的に置換する置換基は、アルキル基について定義したように、これらには限定されないが、水素原子、アルキル基、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、およびアルコキシカルボニル基、またはその他の置換基を含む。
【０１２７】
【化４９】
2008506712.tif 000026
【０１２８】
アリールアミノラジカルとは、炭素原子数約５〜約１４の、選択的に置換された単環または二環式の芳香族ラジカルであり、（−ＮＨ（アリール））ラジカル基を意味する。ここでアリールは、前述のアルキルについて定義されたように、選択的に置換されていてもよい。アリールアミノラジカル中のアリール環上で選択的に置換する置換基として、これらには限定されないが、水素原子、アルキル基、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、およびアルコキシカルボニル基が含まれる。アリールアミノ基の例として、アニリノラジカルまたはアニリノ基が含まれる。アミノ基とは−ＮＨ２基であり、アルキルアミノ基とは、（−ＮＨＲ’）ラジカル基である。ここでＲ’は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、または前記定義のように、これらの基を選択的に置換したものである。アルキルアミノラジカル基の例として、メチルアミノ、エチルアミノ、ｎ‐プロピルアミノ、ｉ−プロピルアミノ、ｎ−ブチルアミノ、およびヘプチルアミノが挙げられる。ベンジルアミノラジカルとは、アリールアミノ基（Ｃ６Ｈ５ＣＨ２ＮＨ−）を意味し、その構造中に含まれるアリール基は、これらには限定されないが、水素原子、アルキル基、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、およびアルコキシカルボニル基、またはその他の置換基等の置換基を選択的に有していてもよい。
【０１２９】
ジアルキルアミノとは、（−ＮＲ’Ｒ"）ラジカルを意味する。ここで、Ｒ’およびＲ"は、各々それぞれ、水素原子、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、または前記定義のように、これらの基を選択的に置換したものである。ジアルキルアミノラジカルの例として、これらには限定されないが、ジメチルアミノ、メチルエチルアミノ、ジエチルアミノ、ジ（１−メチルエチル）アミノ等が含まれる。
【０１３０】
ヘテロアリールとは、１、２、または３つのヘテロ原子（窒素原子、酸素原子または硫黄原子から選ばれる）を環内に含み、１若しくはそれ以上の環を有する、一価の芳香族ラジカルまたは基を意味する。これらのヘテロアリール基において、その水素原子は、１若しくはそれ以上のその他の置換基で置換されていてもよい。これらのヘテロアリールラジカルの例として、選択的に置換された、ベンゾフラン、ベンゾ［ｂ］チオフェン１−オキシド、インドール、２−または３−チエニル、またはチオフェニル、チアゾイル、ピラジン、ピリジン、または（４ａ）または（４ｂ）の構造を有するものが挙げられる。例えば、誘導体と共に表９に列挙の構造式（Ｅ１０）で表される構造は、ヘテロ原子Ｘ２（窒素原子、酸素原子、またはその他の原子）、およびこれらには限定されないが、水素原子、ハロゲン原子、ピリジン、ベンゾフラン、インドール、チアゾイル、ピラジン等の選択的に置換されたヘテロアリール、メトキシピリジン等のアルコキシヘテロアリール、またはその他の基等のＲ１１またはＲ’１１等の置換基を有する縮合環式の環Ｒ１０を含んでもよい。
【０１３１】
本願明細書中で使用される語、ヘテロアルキル、ヘテロアルキレン、ヘテロアルケニル、ヘテロアルケニレン、ヘテロアルキニル、およびヘテロアルキニレンとは、１若しくはそれ以上の炭素原子が、これらには限定されないが、単結合のまたは多重結合の窒素原子、硫黄原子、酸素原子、または原子価を満たすために１若しくはそれ以上の水素原子を有するこれらの原子で置換されているアルキル、アルキレン、アルケニル、アルケニレン、アルキニル、およびアルキニレンラジカルまたは基を意味する。このような置換は、これらには限定されないが、アミン、エーテル、およびスルフィド等の官能基を有する分子を生成するのに使用できる。ヘテロアルキニル基の非限定的例として、−ＣＨ（Ｍｅ）ＯＣＨ２Ｃ≡ＣＨ基が挙げられる。
【０１３２】
ヘテロシクロアルキルラジカルとは、１、２または３つのヘテロ原子（窒素原子、酸素原子、または硫黄原子から選ばれる）を含み、１若しくはそれ以上の環からなる一価の飽和炭素環ラジカルまたは基であり、１若しくはそれ以上の置換基で選択的に置換されていてもよい。
【０１３３】
ヘテロシクロアルケニルとは、１若しくはそれ以上の炭素−炭素二重結合を有する１若しくはそれ以上の環からなる一価の不飽和炭素環ラジカルを意味し、その構造中に含まれる炭素原子は、その１若しくはそれ以上の環内で１、２または３つのヘテロ原子で置換されている。ヘテロ原子は、窒素原子、酸素原子または硫黄原子から選ばれ、ヘテロシクロアルケニルは、１若しくはそれ以上の置換基で選択的に置換されていてもよい。
【０１３４】
本発明の分子に使用される様々な基は、化学構造部分またはその他の置換基で１若しくはそれ以上の水素原子が置換されていてもよい。このような置換基として、これらには限定されないが、ハロ基またはハロゲン原子（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、−ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＦ３、−ＣＨ２ＣＦ３等のハロアルキル基、チオアルキル基、ニトロ基、選択的に置換されたアルキル基、シクロアルキル基、アラルキル基、アリール基、ベンゾフラン、インドール、チエニル、チオフェニル、チアゾイル、ピラジン、ピリジン等のヘテロアリール基、アルコキシピリジン基、ヒドロキシ基（−ＯＨ）、アルコキシ基（−ＯＲ）、アリールオキシ基、アルコキシヘテロアリール基、シアノ基（−ＣＮ）、カルボニル基‐Ｃ（＝Ｏ）−、カルボキシル基（−ＣＯＯＨ）およびカルボン酸塩、−（ＣＨ２）ｐＣ（＝Ｏ）ＯＨ、−（ＣＨ２）ｐＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、および−（ＣＨ２）ｐＣ（＝Ｏ）ＮＨ２基またはラジカルであり、ｐはそれぞれ０、１、２または３の整数であり、これらには限定されないが、トシル、ブロシル（ｂｒｏｓｙｌ）、またはメシル等のスルホネート基；スルホン基、イミン基、またはオキシム基、−（Ｃ＝Ｏ）Ｏ−アルキル等の基、アミノカルボニルまたはカルバモイル基、すなわち−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ２、Ｎ‐置換アミノカルボニル基すなわち−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨＲ"、アミノ基、アルキルアミノ基すなわち（−ＮＨＲ’）、およびジアルキルアミノ基すなわち（−ＮＨＲ’Ｒ"）等が挙げられる。上述のアミノおよびそれに関連した基に関して、Ｒ’またはＲ"の各部分はそれぞれ、水素原子、アルキル基、シクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、アラルキル基、または選択的に置換された、アルキル基、シクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、アラルキル基等が挙げられる。１若しくはそれ以上の水素原子を化学構造部分またはその他の置換基で置換する場合、それらの置換基は、それらを含む、構造（２）、（３）、または（５）のＩＡＰ結合性化合物の本願明細書記載の方法で決定したＫｄの値が、例えば、実施例１では、約１００μＭ未満、いくつかの実施形態では、Ｋｄの値が１μＭ未満、およびその他の実施形態ではＫｄの値が０．１μＭ未満となるように、選択できる。１若しくはそれ以上の水素原子が化学構造部分またはその他の置換基で置換されている実施形態において、それらを有する（２）、（３）または（５）の構造のＩＡＰ結合性化合物は、例えば実施例２に記載の方法で測定したＥＣ５０の値が約０．５μＭ未満、一部の実施形態においてはＥＣ５０が約０．０６μＭ未満となるように該置換基を選択することが出来る。１若しくはそれ以上の水素原子が化学構造部分またはその他の置換基で置換されている実施形態において、それらを有する構造（２）、（３）または（５）のＩＡＰ結合性化合物の結合解離定数Ｋｄの値が約１μＭ未満、好ましくは０．１μＭ未満で、ＥＣ５０の値が約１μＭ未満、好ましくは約０．５μＭ未満であり、一部の実施形態においてＥＣ５０の値が約０．０６μＭ未満となるように置換基が選べる。
【０１３５】
アミノ酸を本発明のＩＡＰ結合性化合物中に使用してもよく、そのようなアミノ酸は、２０種類の天然アミノ酸、ベータまたはガンマアミノ酸等の既知の人工アミノ酸、および非天然側鎖および／またはヒドロキシ酸等のその他の同様の単量体等を含むアミノ酸が含まれる。好ましくは、本発明のＩＡＰ結合性化合物に使用されるアミノ酸は、２０種類の天然アミノ酸である。使用するアミノ酸または人工アミノ酸は、対応するＩＡＰ結合性化合物がＩＡＰに結合、好ましくはＩＡＰのＢＩＲドメインに結合し、その結果得られるＩＡＰ結合化合物が細胞に浸透できる効果をもとに選ぶ。このようなアミノ酸の非限定的例として、Ａｂｕ（２−アミノブチル酸）をＩＡＰ結合性カーゴ分子中のアミノ酸として使用することが挙げられる。構造（２）、（３）または（５）の分子がアミノ酸を含む場合、そのＮ末端アミノ酸がＡｌａまたはＡｂｕであることが好ましい。
【０１３６】
１若しくはそれ以上のキラル中心が、アミノ酸、人工アミノ酸、または構造（２）、（３）または（５）のＩＡＰ結合性化合物の原子に存在する場合、いずれの鏡像異性体、Ｄ体またはＬ体、より一般的には、ＲまたはＳの立体配置、またはジアステレオ異性体も、ＩＡＰ結合性化合物中に選択的に使用できる。
【０１３７】
各構成成分中または各構造式中でどのような変形でも１度以上起こる場合も、各変形における定義は、その他の各々の変形の場合の定義とは独立している。置換基の組み合わせおよび／または変形例は、そのような組み合わせによって安定な化合物が得られる場合のみ可能である。
【０１３８】
本願明細書中で使用される化学構造式および名称は、正しく的確にその根本的な化学化合物を反映するものと考えられる。しかし、本発明の本質および価値は、全体あるいは一部としてこれらの構造式の理論的な正確性に基づくものではない。従って、対応して示される化合物に対する化学名はもちろん、本願明細書で使用される構造式は、立体化学について明確に定義している場合を除き、具体的な互変異体または具体的な光学異性体あるいは幾何異性体に限定する等、本発明をどのような形ででも限定する意図のものではないことは明らかである。
【０１３９】
構造（２）、（３）、または（５）の化合物の実施形態において、Ａ１、Ａ２、Ｒ１ａおよびＲ１ｂ、Ｒ２、Ｘ１，Ｙ、Ｚ、Ｍ、ＧまたはＲ１０等の置換基はそれぞれ、構造（２）、（３）、または（５）の化合物が、例えばＡＶＰＩまたはＡＶＰ等のアミノ酸のトリペプチドまたはテトラペプチドとならないようにそれぞれ選択できる。
【０１４０】
構造式（２）で表される構造を有する化合物の一部の実施形態は、Ａ２が水素原子であり、Ｘ１が−ＮＨ−であり、Ｊが−ＣＨ−であり、Ｒ２のｎが０である構造（３）で表される。
【０１４１】
【化５０】
2008506712.tif 000027
【０１４２】
構造（３）の化合物の一部の実施形態において、Ａ１は水素原子、低級アルキル基、または選択的に置換された低級アルキル基、アシルアミノ基またはアシルアルキルアミノ基等のＮ−アシル誘導体、ｔ−ブトキシカルボニル基、アセチル基、ホルミル基、カルバモイル基、またはアルキレン基等であり、Ｒ１ａおよびＲ１ｂは別々に、水素原子、低級アルキル、選択的に置換された低級アルキル基、低級アルキレン基、または選択的に置換された低級アルキレン基であるか、あるいはＡ１はＲ１ａまたはＲ１ｂと共に、表５中の化合物の非限定的な実施形態の一部に図示されるような、３〜６個の原子を有する選択的に置換されたヘテロシクロアルキル基を形成する。
【０１４３】
構造（３）のＩＡＰ結合性化合物において、Ｙは水素原子、アルキル基、炭素原子数１〜１０のアルキル基、炭素原子数１〜１０の分岐アルキル基、アルキニル基、ヘテロアルキニル基、炭素数３〜７のシクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、アリールアルキル基、選択的に置換されたアルキル基等の上述の基を選択的に置換したもの、炭素数１〜１０の選択的に置換されたアルキル基、炭素数１〜１０の選択的に置換された分岐アルキル基、選択的に置換されたアルケニル基、選択的に置換されたアルキニル基、選択的に置換されたヘテロアルキニル基、炭素数３〜７の選択的に置換されたシクロアルキル基、選択的に置換されたアリール基、選択的に置換されたヘテロアリール基、選択的に置換されたアリールアルキル基であり、一部の実施形態において、上述の置換された置換基またはその化学構造部分は、１若しくはそれ以上のヒドロキシ基を含むものであるか、あるいはＹはＺ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０と共に、選択的に置換された炭素環、または１〜５個のヘテロ原子を含む選択的に置換された複素環を形成し、ここでＹは、Ｚ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０に結合し、好ましくはＹは約２０以下の数の原子により、Ｙ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０に結合にしている。このような複素環の非限定的例は、実施例１２中の化学式（Ｅ１２−２）の構造を有するＩＡＰ結合性分子により図示される。
【０１４４】
構造（３）のＩＡＰ結合性化合物において、Ｚは水素原子、アルキル基、ヒドロキシ基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルコキシ基、シクロアルキル基、シクロアルキルオキシ基、アリール基、ヘテロアリール基、アリールオキシ基、ヘテロアリールオキシ基、これらの基を選択的に置換したもの、であり１若しくはそれ以上のヒドロキシル基を有するこれらの基を選択的に置換したもの、あるいはＺはＹ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０と共に、選択的に置換された炭素環、または１〜５個のヘテロ原子を含む選択的に置換された複素環を形成しており、ここで更にＺはＹ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０に結合しており、好ましくはＺは、約２０以下の数の原子によりＹ、Ｍ、Ｇ、またはＲ１０に結合している。一部の実施形態において、Ｚはアルキル基、ヒドロキシ基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルコキシ基、シクロアルキル基、シクロアルキルオキシ基、アリール基、ヘテロアリール基、アリールオキシ基またはヘテロアリールオキシ基である。Ｚ置換基またはＺ基の立体化学は、当該頁の紙面からとびだす形のＺ基を示す場合は太字の楔形を用いて示し、または当該頁の紙面の裏側にあるＺ基を示す場合は破線の楔形を用いて示す。（３）の実施形態の場合、該ＩＡＰ結合性分子は、そのＺ基が当該頁の紙面の外側に向いている構造を有していてもよく、該ＩＡＰ結合性分子はそのＺ基が当該頁の紙面の裏側に向いている構造を有していてもよく、あるいは該ＩＡＰ結合性分子は、そのＺ基はこれらの組み合わさった混合物を含んでいてもよい。
【０１４５】
構造（３）のＩＡＰ結合性化合物において、Ｍは選択的に置換されたアルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基であるか、或いはＭは選択的に置換された炭素数１〜５の、アルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基であるか、或いはＭは選択的に置換されたアルキレン基、アルケニレン基、またはアルキニレン基、あるいは選択的に置換された炭素数１〜５の、アルキレン基、アルケニレン基、またはアルキニレン基であってもよい。一部の実施形態において、例えば、構造（Ｅ６）または（Ｅ１４）のＩＡＰ結合性化合物を限定するものではないが、Ｍは、一端がピロリジン環の２位に結合し、他端がアリール基、ヘテロアリール基、またはベンゾフラン基またはインドール基等の選択的に置換されたヘテロアリール基、または構造（４ａ〜ｄ）の基を選択的に置換したものに結合するメチレン基等の２価のアルキレン基、アルキレン基である。
【０１４６】
構造（３）のＩＡＰ結合性化合物において、構造（Ｅ６）または（Ｅ１４）の化合物の非限定的例のようにＧは存在しなくても（結合として存在して）よく、Ｇはこれらには限定されないが、−Ｏ−、−ＮＨ−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）ｔ−、−ＮＲ１８−；−ＮＣＯＲ１８−であるか、あるいは−ＮＳ（Ｏ）ｘＲ１８−等のヘテロ原子であってもよい。ここでｔは０、１または２の整数であり、ｘは０、１または２の整数であり、Ｒ１８は、低級アルキル基、選択的に置換された低級アルキル基、またはシクロアルキル基であるか、あるいはＲ１８は選択的に置換された炭素環または１〜５個のヘテロ原子を含む選択的に置換された複素環に含まれていてもよく、ここで更にＲ１８は、Ｚ、Ｍ、またはＲ１０に結合しており、好ましくはＲ１８は、Ｚ、Ｍ、またはＲ１０に約２０個以下の数の原子により結合しているものである。
【０１４７】
構造（３）のＩＡＰ結合性化合物において、Ｒ１０は、アリール基、ヘテロアリール基、縮合環式のアリール基、または縮合環式のヘテロアリール基であってもよい。例えば、これらには限定されないが、表５中の化合物等の一部の実施形態において、Ｒ１０は、置換アリール基、置換ヘテロアリール基、置換縮合環式のアリール基、または置換縮合環式のヘテロアリール基であってもよい。一部の実施形態において、Ｒ１０は、構造（４ａ）、（４ｂ）、（４ｃ）、または（４ｄ）のいずれか１つであり、
【０１４８】
【化５１】
2008506712.tif 000028
【０１４９】
ここで、式中、
構造（４ａ）または（４ｂ）においてＸ２はヘテロ原子、あるいは構造（４ｃ）または（４ｄ）のにおいてＸ２は炭素−炭素結合であり、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７各々またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、ハロゲン原子、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、スルホネート基、アリールオキシ基、ヘテロアリールオキシ基、その他の置換基またはこれらの基を選択的に置換したものである。Ｒ１１またはＲ’１１がヘテロアリール基である実施形態において、該ヘテロアリール基は、２−または３−チエニル基すなわちＳＣ４Ｈ３−（チオフェニル基）、ピリジン基、ピラジン基、またはこれらの基で選択的に置換したものでもよい。一部の実施形態において、Ｒ１２はアリール基、またはこれらには限定されないが、ベンゾフラン、インドール、ベンゾ［ｂ］チオフェン−１−オキシドまたはベンゾ［ｂ］チオフェン−１，１−ジオキシドまたはこれらを選択的に置換したもの等のヘテロアリール基でもよい。Ｘ２が−Ｏ−または−Ｓ（Ｏ）ｋ−のいずれかの場合、ｋがそれぞれ、０、１、または２の整数であるのに対し、Ｒ１２は存在しない。Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、水素原子、選択的に置換された、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、ポリアルキルエーテル基、カルボキシアルキル基、アルキルカルボキシアルキル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルオキシアルキル基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基でもよい。Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々はそれぞれ、アシル基またはアセチル基、カルボキシレート基、スルホネート基、スルホン基、イミン基、またはオキシム基でもよく、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７の各々、またはＲ１４−１７の各々は、炭素環、または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環に含まれ、ここで更にＹ、Ｚ、Ｍ、Ｇ、Ｒ１１、Ｒ’１１、Ｒ１２、Ｒ１３−１７のいずれか、またはＲ１４−１７のいずれかの基の位置に結合しており、好ましくは、これらの基は、約２０以下の数の原子により結合していてもよい。一部の実施形態において、Ｒ１０は、シクロアルキル基、アリール基、ヘテロシクロアルキル基、ヘテロシクロアルケニル基、ヘテロアリール基、またはこれらを選択的に置換したものでもよい。一部の実施形態において、Ｒ１０は、以下の基であっても良く、
【０１５０】
【化５２】
2008506712.tif 000029
【０１５１】
ここで、式中、
Ｒ３、Ｒ’３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ’５は各々それぞれ、水素原子、アルキル基、シクロアルキル基、アルキレン基、アリール基、ヘテロアリール基、アルコキシ基、選択的に置換された、アルキル基、シクロアルキル基、アルキレン基、アリール基、ヘテロアリール基、ハロ基、シアノ基、−（ＣＨ２）ｐＣ（＝Ｏ）ＯＨ、−（ＣＨ２）ｐＣ（＝Ｏ）Ｏ−アルキル、−（ＣＨ２）ｐＣ（＝Ｏ）ＮＨ２等の置換基であり、ｐはそれぞれ０、１、２または３の整数である。例えば、構造（Ｅ４）のＩＡＰ結合性化合物において、Ｍはアルケニレンであり、Ｇは−Ｏ−等のヘテロ原子であり、Ｒ１０は、例えば、これらには限定されないが、水素原子、塩素基、臭素基，アルキル基、アルキレン基、アルコキシ基、またはこれらを組み合わせたもの等の置換基を有する選択的に置換されたアリール基であってもよい。
【０１５２】
化学式（３）のＩＡＰ結合性化合物の一部の実施形態において、構造（５）の化合物は以下のものを含み、
【０１５３】
【化５３】
2008506712.tif 000030
【０１５４】
ここで、式中
Ａ１は水素原子または低級アルキル基であるか、あるいはＡ１およびＲ１ｂは共に３〜５個の原子を有する環を形成する。これらの実施形態において、Ｒ１ａは水素原子であり、Ｒ１ｂは低級アルキル基であるか、あるいはＡ１と共に３〜５個の原子を有する環を形成する。
【０１５５】
構造（５）のＩＡＰ結合性化合物の実施形態において、Ｙはアルキル基、炭素数１〜１０のアルキル基、炭素数１〜１０の分岐アルキル基、アルキニル基、ヘテロアルキニル基、炭素数３〜７のシクロアルキル基、上述の基を選択的に置換したもの、および／または上述の基をヒドロキシ置換したものであってもよく、あるいはＹは、Ｚ１ａ、Ｚ１ｂまたはＲ１０と共に、炭素環または１〜５個のヘテロ原子を含む複素環を形成してもよく、ここでＹはＺ１ａ、Ｚ１ｂ、またはＲ１０に結合しており、好ましくはＹは、Ｚ１ａ、Ｚ１ｂまたはＲ１０に、約２０以下の数の原子により結合しているものである。
【０１５６】
構造（５）のＩＡＰ結合性化合物の実施形態において、Ｚ１ａおよびＺ１ｂはそれぞれ、水素原子、ヒドロキシ基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、またはヘテロアリールオキシ基であってもよく、あるいはＺ１ａまたはＺ１ｂは、ＹまたはＲ１０と共に、炭素環あるいは１〜５個のヘテロ原子を含む複素環を形成してもよく、ここでＺ１ａまたはＺ１ｂは、ＹまたはＲ１０に結合し、好ましくはＺ１ａまたはＺ１ｂは、約２０以下の数の原子によりＹまたはＲ１０に結合しているものである。
【０１５７】
構造（５）のＩＡＰ結合性化合物の実施形態において、Ｍは選択的に置換されたアルキル基または炭素数１〜５の選択的に置換されたアルキレン基であってもよい。これらの構造において、Ｇは存在しなくても（結合として存在）よく、あるいは−Ｏ−、−ＮＨ−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−ＮＲ１８−、−ＮＣＯＲ１８−、または−ＮＳ（Ｏ）ｘＲ１８−等のヘテロ原子であってもよい。ここで、ｘは０、１、または２であり、Ｒ１８は、低級アルキル基、または選択的に置換された低級アルキル基である。
【０１５８】
構造（２）、（３）、または（５）のＩＡＰ結合性化合物または分子は様々な反応方法によって調製することが可能であり、これらの反応方法は実施例中の非限定的なスキームに記載しており、本発明の主題の一部でもある。これらのＩＡＰ結合性分子は、構造（６ａ）または（６ｂ）の分子から調製することが可能であり、
【０１５９】
【化５４】
2008506712.tif 000031
【０１６０】
ここで、式中、
Ｙ、Ｍ、Ｚ、Ｇ、Ｒ２、およびＲ１０は上述のとおりであり、Ｒ’およびＲ"は、水素原子または保護基である。ＺまたはＭ置換基または基の立体化学は、当該頁の紙面からとびだす基を示す太字楔形で示される結合、または該頁紙面の裏側にあるＺまたはＭ基を示す破線の楔形で示される結合を使用して示してもよい。構造式（６ａ）または（６ｂ）で表される構造の実施形態において、ＩＡＰ結合性分子は、ＺまたはＭ基が当該頁の紙面からとびだすように向いている構造を有するか、ＩＡＰ結合性分子は、ＺまたはＭ基が当該頁の紙面の裏面に向いている構造を有するか、ＩＡＰ結合性分子がＺまたはＭ基がこれらを組み合わせたものを含む混合物を含んでいてもよい。化学構造式（６ａ）または（６ｂ）の構造は、これらには限定されないが、スキームＩ中の（１）、またはスキームＩＶａ中の（２９）等のピロリジン類等の化合物から、本願明細書に記載される手順または同様の反応方法により調製できる。化学構造式（６ａ）または（６ｂ）の構造は、構造（２）、（３）、または（５）のＩＡＰ結合性分子を得るように、Ｎ−Ｂｏｃ−アミノ酸またはＡ１、Ａ２、Ｒ１ａまたはＲ１ｂまたは本願明細書に記載されるようなこれらを組み合わせたもの等の化学構造部分を有するその他の好適なアミンで処理することにより、さらに反応させてもよい。
【０１６１】
本発明の特定の酸性または塩基性化合物として、双生イオンとして存在するものも含まれる。遊離酸、遊離塩基、および双生イオン等の当該化合物の全ての形態は、本発明範囲内であると考えられる。アミノ基およびカルボキシル基を共に有する化合物の多くは双生イオンの形で平衡状態で存在することは当該技術分野で既知である。従って、本願明細書を通じて記載されるいずれの化合物も、例えば、アミノ基およびカルボキシル基を共に含むものは、それらの対応する双生イオンも意味することになる。
【０１６２】
上記のいずれの教示においても、本発明のＩＡＰ結合性カーゴ分子またはその他のＩＡＰ結合性化合物は、本願明細書中に記載した化学式の１つの化合物、または立体異性体、プロドラッグ、薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和化合物、酸性塩水和物、またはこれらの同形結晶でもよい。
【０１６３】
薬学的に許容される塩とは、生物学的またはその他の理由で望ましくないことのないような、遊離塩基または遊離酸の生物学的効果および特性、細胞浸透性およびＩＡＰへの結合性を保持する、構造式（２）、（３）、または（５）で表される構造を有するＩＡＰ結合性カーゴ分子およびＩＡＰ結合性化合物、およびそれらの二量体を意味する。該化合物が遊離塩基として存在する場合、望ましい塩は、該化合物を塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の無機酸、あるいは、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息酸、桂皮酸、マンデリン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸等の有機酸で処理する等の当業者に既知の方法により調製できる。該化合物が遊離酸として存在する場合、望ましい塩は、化合物を無機塩基または有機塩基で処理する等の当業者に既知の方法により調製できる。無機塩基から誘導される塩として、これらには限定されないが、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、マンガン塩、アルミニウム塩等が挙げられる。有機塩基から誘導される塩として、これらには限定されないが、、第１、第２、および第３アミン類の塩、天然の置換アミン類等の置換アミン類、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２−ジメチルアミノエタノール、２−ジエチルアミノエタノール、トリメタミン（ｔｒｉｍｅｔｈａｍｉｎｅ）、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン（ｈｙｄｒａｂａｍｉｎｅ）、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン類、ピペラジン、ピペリジン、Ｎ−エチルピペリジン、ポリアミン樹脂等の環状アミン類および塩基性イオン交換樹脂が挙げられる。
【０１６４】
ＩＡＰ結合性カーゴ分子またはそれらの薬学的に許容される塩として、それらの結晶格子内で薬学的に許容される溶媒分子を含んでいてもよい。ここで溶媒とは水であり、該化合物は水和物を生成し、その他の溶媒、これらには限定されないが、特にエタノール等の有機溶媒の場合、該化合物は溶媒和化合物を生成する。構造式（２）、（３）、または（５）の構造を有するＩＡＰ結合性カーゴ分子またはＩＡＰ結合性化合物、およびその同族体は、溶媒和化合物として調剤、単離、または精製してもよい。
【０１６５】
本発明の方法で使用する化合物は、プロドラッグの形態で存在していてもよい。プロドラッグとして、該プロドラッグを哺乳動物被験体に投与する場合において、例えば本発明の方法で生体内に使用される、構造式（２）またはその他の構造式で表される構造を有するものあるいは化合物のように、有効な親薬物を放出する、共有結合で結合された各種担体を含む。プロドラッグは医薬品の数多くの望ましい性質（例えば、溶解性、生物学的利用度、製造等）を向上させるこが知られているので、本発明の方法で使用される該化合物は、所望の場合、プロドラッグの形態で送達してもよい。従って本発明は、プロドラッグの送達方法も考慮にいれている。本発明において使用される、例えば構造式（２）の構造を有する該化合物のプロドラッグは、所定操作または生体内で親化合物に対して開裂するように、該化合物中に存在する官能基を修飾することで調製できる。
【０１６６】
従って、プロドラッグとして、プロドラッグを哺乳動物被験体に投与するとヒドロキシ基、アミノ基、またはカルボキシ基がそれぞれ遊離ヒドロキシル基、遊離アミノ基、またはカルボン酸をそれぞれ生成するように開裂する基に結合している、本願明細書に記載の化合物が挙げられる。例としてこれらには限定されないが、アルコールおよびアミン官能基を有する、アセテート、フォルメート、およびベンゾエートの誘導体、およびメチルエステル、エチルエステル、ｎ‐プロピルエステル、イソプロピルエステル、ブチルエステル、イソブチルエステル、ｓｅｃ‐ブチルエステル、ｔｅｒｔ‐ブチルエステル、シクロプロピルエステル、フェニルエステル、ベンジルエステル、およびフェネチルエステル類等のアルキルエステル、環状エステル（ｃａｒｏｂｃｙｃｌｉｃ  ｅｓｔｅｒ）、アリールエステル、およびアルキルアリールエステル等が挙げられる。
【０１６７】
本発明の方法で使用される化合物は、当業者に既知の多くの方法により調製できる。例えば、該化合物は合成することができ、本願明細書および実施例中に記載されている方法、または当業者により理解されるであろうこれらの変形法により合成できる。本発明に関連して開示されている全過程は、マイクログラム、ミリグラム、グラム、マルチグラム、キログラム、マルチキログラム、または商業的工業規模等、どのような規模でも実施されると考えられる。
【０１６８】
構造（２）、（３）、または（５）のＩＡＰ結合性化合物は、薬学的に許容される賦形剤と混合または併用したり、凍結乾燥処理できる。これらの医薬組成物は、局所的（ｔｏｐｉｃａｌ／ｌｏｃａｌ）または全身的に細胞、組織、または患者のサンプルに投与できる。局所的投与により、医薬組成物の適用を上手く調節できる。構造式（２）、（３）、または（５）で表される構造を単独または組み合わさせて含む、ＩＡＰ結合性分子または化合物は、適切な医薬担体を投与する前に混合できる。ＩＡＰ結合性分子の医薬、診断または治療用組成物を生成するのに使用できる一般に使用される医薬的担体および添加剤の例として、これらには限定されないが、従来使用されている希釈剤、結合剤、滑沢剤、着色剤、崩壊剤、緩衝材、等張化剤、保存剤、麻酔薬等が挙げられる。使用できる医薬担体として、これらには限定されないが、水、生理食塩水、エタノール、デキストラン、スクロース、ラクトース、マルトース、キシロース、トレハロース、マンニトール、キシリトール、ソルビトール、イノシトール、血清アルブミン、ゼラチン、クレアチニン、ポリエチレングリコール、非イオン性界面活性剤（例えば、ポリオキシエチレソルビタン脂肪酸エステル類、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、スクロース脂肪酸エステル類、ポリオキシエチレンポリオキシブロピレングリコール）および同様の化合物が挙げられる。ＩＡＰ結合性分子はもちろん、医薬的担体および賦形剤は併用してもよい。
【０１６９】
立体異性体とは、同一の分子構造式および結合特性または配列を有するが、それらの原子の空間における配置で異なる化合物であり、光学異性体および幾何異性体を含む。本発明の化合物またはそれらの薬学的に許容される塩は、その構造中に、１若しくはそれ以上の非対称炭素原子またはその他の非対称原子を有することができ、それ故単一の立体異性体、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、ラセミ体、および鏡像異性体またはジアステレオ異性体の混合物として存在しうる。これらの化合物として、幾何異性体も含まれる。本発明のＩＡＰ結合性化合物およびＩＡＰ結合性カーゴ分子のすべてのこのような立体異性体、ラセミ体、およびその混合物は、具体的な立体化学または異性体が記載されていない限り、本発明の範囲内であるとする。そのような光学的活性体の調製または単離法は、当該技術分野で既知である。例えば、立体異性体の混合物は、これらには限定されないが、ラセミ体の分割、順相、逆相、およびキラルクロマトグラフィ、優先的塩形成法（ｐｒｅｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｓａｌｔ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ）、再結晶等の標準的な方法、あるいはキラル出発物質を使用したキラル合成または標的キラル中心の意図的な合成等により分離できる。
【０１７０】
キラル中心を分子中に有する構造（２）、（３）、または（５）のＩＡＰ結合性分子は、単一の鏡像異性体でも鏡像異性体のラセミ混合物でもよい。場合によっては、即ちある特定のＩＡＰ結合性分子の構造に関して、置換基または基のキラリティ（すなわち、相対的立体化学）は、当該頁の紙面から飛び出す基を示す太字楔形で示される結合、または該頁紙面の裏側にあるＺまたはＭ基を示す破線楔形で示される結合で示している構造中に示している。その他の場合においては立体化学を示しておらず、そのような構造は、鏡像異性体のラセミ混合物はいうまでもなく、鏡像異性的に純粋または精製された化合物も包含するものとする。
【０１７１】
容易にわかるように、構造中に存在する官能基は、合成過程の中で保護基を有することもある。保護基は、アミン、ヒドロキシル基、またはカルボキシル基等の官能基に選択的に付加またはそれらの官能基から選択的に脱離できる化学的官能基である。これらの基は化合物の置かれている化学反応条件に対して官能基を不活性にするために、化学化合物に存在する。どうような保護基も本発明で使用できる。このような保護基として、ベンジルオキシカルボニル基およびｔｅｒｔ‐ブチルオキシカルボニル基が挙げられる。本願明細書中で使用される語、「保護基」または「ブロック基」とは、１若しくはそれ以上のヒドロキシル基、アミノ基、カルボキシル基、または該化合物（アミノラクタム、アミノラクトン等の該化合物の中間体を含む）のその他の基に結合させて、これらの基が反応しないようにするものであり、保護基は、ＩＡＰ結合性化合物で使用できるようにヒドロキシル基、アミノ基、カルボキシル基を再形成するために、従来の化学的または酵素による方法により、選択的に脱離させることができる。使用できる個々の脱離可能なブロック基は重要ではなく、好ましい脱離可能なヒドロキシルまたはアミンブロック基として、アリル基、ベンジル基、アセチル基、クロロアセチル基、チオベンジル基、ベンジリデン基、フェナシル基、ｔ‐ブチル−ジフェニルシリル基、ｔ‐ブチルカルバメート基、ベンジルカルバメート基等の通常使用される基、およびヒドロキシル基、アミン基、またはその他の官能基に導入でき、後に化学または酵素による方法により生成物の性質に適した温和な条件下で選択的に脱離できる基が挙げられる。
【０１７２】
該分子のカーゴ部分は、該分子の主鎖の一部またはＩＡＰ結合性部分であり、カーゴ部分は、該分子のＩＡＰ結合性部分に化学的に結合していてもよい。例えば、カーゴ部分は、第一ユニットに結合基によって結合し、二量体を形成またはカーゴ部分をさらに構成する、構造式（２）、（３）、または（５）で表される構造を有する別のユニットでもよい。カーゴ部分は、構造式（２）で表される構造を有する分子中のＡ１、Ａ２、Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ、Ｙ、Ｒ２、またはＺのいずれの置換基でもよく、好ましくはカーゴ部分は構造式（２）で表される構造を有する分子中でＹ、Ｒ２、またはＺに結合している。構造式（３）または（５）で表される構造を有する分子において、カーゴ部分は、Ａ１、Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ、Ｒ１０、Ｙ、Ｍ、Ｇ、またはＺ（Ｚ１ａおよびＺ１ｂを含む）のいずれの置換基でもよく、好ましくはカーゴ部分として、Ｙ、Ｚ（Ｚ１ａおよびＺ１ｂを含む）、またはＲ１０で結合した置換基が挙げられる。該分子のカーゴ部分としてこれらには限定されないが、造影、治療薬、検出可能な基、プローブ、標識またはマーカーのための構造、分子構造部分、および置換基が挙げられる。該分子のカーゴ部分およびＩＡＰ結合性部分は、これらには限定されないが、アミド結合、エステル結合、またはジスルフィド結合、キレート化等の化学結合、あるいは分子のＩＡＰ結合性部分を分子のカーゴ部分から分離するのが望ましい場合、ジアミノブタンまたはエチレングリコールおよびそのオリゴマー等の結合基により、ＩＡＰ結合性部分に結合していてもよい。ＩＡＰ結合性カーゴ分子の各部分にある１若しくはそれ以上の原子は、放射性元素で検出または治療に使用してもよい。
【０１７３】
タンパク質−タンパク質相互作用を阻害する効果について小分子を迅速に分析する能力は、有望な薬剤候補の開発に利用できる。本発明の一態様は、例えば哺乳動物のＸＩＡＰのＢＩＲ３ドメイン等のアポトーシス阻害タンパク質（ＩＡＰ）のＢＩＲドメインに結合する能力について、ＩＡＰ結合性化合物のライブラリの結合親和性を試験するのに使用できる分析を含む。この分析は、ＩＡＰ結合性カーゴ分子のカーゴ部分、蛍光発生色素分子等の検出可能な標識に基づいて行える。検出可能な標識は、構造式（２）、（３）、または（５）で表される構造を有する分子中のどのような置換基でもよい。例えば、検出可能な標識は、置換基Ｒ２に結合、または構造式（２）で表される構造を有する分子の上記置換基Ｒ２ａ−ｃに結合していてもよい。
【０１７４】
【化５５】
2008506712.tif 000032
【０１７５】
同様に、検出可能な標識は、Ｙ、Ｚ、Ｍ、Ｇ、Ｒ１０等の置換基、または構造（３）または（５）の分子およびその薬学的に許容される塩中のその他の置換基に結合していてもよい。
【０１７６】
構造（２）、（３）、または（５）の分子に含まれる検出可能な標識として、発光が色素の環境に敏感な蛍光発生色素等の色素を使用してもよい。しかし、ＩＡＰ結合性カーゴ分子の検出可能な標識部分は、ＮＭＲ活性核または造影剤でもよく、選択的同定は、核磁気共鳴分析法または磁気共鳴画像法により行う。ＩＡＰ結合性カーゴ分子中の検出可能な標識は放射性元素でもよく、この場合の選択的同定は陽電子放射断層撮影法により行う。該分子のカーゴ部分は、該分子のカーゴ部分が有する毒性効果により細胞を破壊するのにも使用できる。
【０１７７】
理論とらわれることなく、構造（２）、（３）、または（５）の分子はＩＡＰのＢＩＲドメイン中に集合すると考えられている。構造（２）、（３）、または（５）の分子がカーゴ置換基として蛍光発生色素を有する場合、好ましくは構造（２）、（３）、または（５）の分子のＩＡＰのＢＩＲの溝への集合が、ＩＡＰ結合性カーゴ分子の環境が水から疎水性ポケットに変化した場合に、最大発光および色素強度で大きなシフトを引き起こしたり、ＩＡＰの溝の中または近傍で結合する。分子（例えば、未変性のＳｍａｃタンパク質またはテストＩＡＰ結合性化合物）が、構造（２）、（３）、または（５）で表される構造を有し蛍光発生色素を有するＩＡＰ結合性カーゴ分子をＩＡＰから脱離させた場合、発光は水中における蛍光発生色素を有するＩＡＰ結合性カーゴ分子について観測されるスペクトルに変化する。発光強度は、テストペプチドまたはＩＡＰ結合性化合物のＩＡＰとの結合に関連しているので、該強度は、構造（２）、（３）、または（５）の分子のＩＡＰ結合性化合物による置換に関する平衡定数Ｋａを評価するのに利用できる。ここでＫａとは、解離定数Ｋｄ  ＝１／Ｋａと逆数の関係にある結合に関する平衡定数を意味する。この平衡定数Ｋａが大きければ、ＩＡＰ結合性化合物のＢＩＲまたはＢＩＲ３に対する親和性は大きい。このことにより最も期待できる阻害剤を迅速に決定でき、効果的な阻害剤の構造上の情報を次回の試験に向けて候補化合物のデザインに組み込むことができる。構造式（２）で表される構造を有し検出可能な標識を有するＩＡＰ結合性カーゴ分子をＩＡＰに複合化させ、その他のＩＡＰ結合化合物を選別するのに使用してもよい。
【０１７８】
当業者には周知あるが、上記の構造（２）、（３）、または（５）のＩＡＰ結合性カーゴ分子はあくまで例であって、本発明の実施においては好ましいものであるが、ＩＡＰ結合性化合物、異なるＩＡＰのＢＩＲ結合ドメイン、および検出可能な標識は種々組み合わせて互換的に使用し、上記分析を多様化してもよい。
【０１７９】
上記の構造（２）、（３）、または（５）のＩＡＰ結合性カーゴ分子またはそれらの二量体は、ＩＡＰ結合性カーゴ分子のＩＡＰのＢＩＲドメイン、好ましくはＸＩＡＰのＢＩＲ３溝への結合がＩＡＰ結合性カーゴ分子中の検出可能な標識または治療薬の存在に悪影響を受けないように、これらには限定されないが、フルオロフォア、放射性元素、またはＮＭＲ活性核等のどのような好適な治療薬分子または検出可能な標識を有していてもよい。好ましくは、該分子は細胞浸透性を示す。構造（２）、（３）、または（５）のＩＡＰ結合性化合物およびＩＡＰ結合性カーゴ分子に結合する検出可能な標識の非限定的例として、蛍光発生色素である、６−ブロモアセチル−２−ジメチルアミノナフタレン（ＢＡＤＡＮ）色素が挙げられる。ＢＡＤＡＮは、蛍光発生色素であり、その環境変化に対する感度からタンパク質結合相互作用の精査に以前から使用されている。
【０１８０】
構造（２）、（３）、または（５）のＩＡＰ結合性カーゴ分子は、ＩＡＰのＢＩＲドメインに結合できるテスト化合物の分析に使用される。これらの分子は、例えば、アポトーシス抑制の軽減、または細胞中でＳｍａｃ等の捕捉されたタンパク質をＩＡＰから放出させるのに使用できる。構造（２）、（３）、または（５）の化合物についての高処理量の無細胞分析は、ＡｂｕＲＰＦ‐Ｋ（５‐Ｆａｍ）−ＮＨ２等の蛍光標識ペプチドを使用して準備してもよい。様々なＩＡＰ結合性化合物を、それらのＩＡＰのＢＩＲドメインへの結合能力について選別または分析できる。天然のＳｍａｃに比べ強い結合能力を有するＩＡＰ結合性分子または細胞中で捕捉されたＳｍａｃをＩＡＰから放出できるＩＡＰ結合性分子は、このような分析により同定できる。これらの化合物は、細胞増殖が関与する疾患または病状を治療する際のアポトーシスの改変、好ましくは促進するための治療薬や医薬組成物として開発できる。これらの同定した化合物は予防薬として使用でき、検出可能な標識または毒剤を含むように変化させてもよい。上記分析は、コンビナトリアル化学またはその他のドラッグデザイン手段により生成された大グループの化合物の高処理量スクリーニングにさらに使用できる。当該蛍光分析は、Ｓｍａｃおよびその相同体の結合、好ましくはＳｍａｃのＮ終端の結合をモデル化したＩＡＰ結合性カーゴ分子のライブラリの、ＸＩＡＰのＢＩＲ３領域の表面ポケットへの結合を試験するのに使用できる。このようなスクリーニングの結果により、ＩＡＰ結合性カーゴ分子の構造中の各部分の、相互作用の全結合に対する寄与を解析することができる。例えば、表５中の分子（５−５４）および（５−５５）の構造を有する分子の結合を大きさの異なるアルキル基Ｒ１ｂについてＫｄの値で比較することで、メチレン基のＩＡＰとの結合への寄与Ｋｄを分子をさらに変形するのに利用できる。
【０１８１】
本発明は、ＩＡＰ結合性化合物、およびこれらの化合物をＸＩＡＰ、ｃ‐ＩＡＰ１、ｃ‐ＩＡＰ２、サバイビン、ＭＬ−ＩＡＰまたはこれらを組み合わせたもの等のアポトーシス阻害タンパク質（ＩＡＰ）への結合に使用する方法を特徴とする。ＩＡＰの機能の１つがプログラム細胞死の抑制であるのに対し、Ｓｍａｃまたは構造（２）、（３）、または（５）のＩＡＰ結合性化合物は、その抑制を軽減するのに使用できる。哺乳動物のＩＡＰ結合性タンパク質であるＳｍａｃは、そのＮ末端４残基のＢＩＲ３ドメインと呼ばれるＸＩＡＰ部分にある特徴的な表面溝への結合に支配される。この結合は、細胞中でＸＩＡＰがアポトーシス抑制機能をカスパーゼに対して及ぼすのを妨ぐ。構造（２）、（３）、または（５）の分子等のＩＡＰ結合性カーゴ分子は、哺乳動物細胞におけるＸＩＡＰ介在またはその他のＩＡＰ介在型のアポトーシス抑制に使用でき、検出可能な性質または治療機能を有する官能基を選択的に付与するのに使用できる。構造（２）、（３）、または（５）の分子等のＩＡＰ結合性カーゴ分子は、細胞中でＳｍａｃ等の捕捉されたタンパク質をＩＡＰから放出させるのに使用できる。
【０１８２】
本発明の一実施形態は、構造（２）、（３）、または（５）の様々なＩＡＰ結合性化合物の使用法であり、該方法として、これらには限定されないが、例えば、ＳＫ‐ＯＶ‐３細胞、ＨｅＬａ細胞、またはその他の細胞等の、神経変性疾患はもちろん、発達障害、癌、自己免疫疾患に関連するその他の株化細胞はもとより、ＩＡＰを過剰発現していると知られている異常細胞または組織に、細胞サンプルのＩＡＰ異常発現性の軽減、除去、または治療に効果のある量の、構造（２）、（３）、または（５）に係る様々な実施形態のＩＡＰ結合性化合物またはＩＡＰ結合性カーゴ分子を投与することが挙げられる。上記記載の量の、構造（２）、（３）、または（５）の各種実施形態におけるＩＡＰ結合性化合物またはＩＡＰ結合性カーゴ分子を、対照薬として正常な細胞または組織に投与してもよい。構造（２）、（３）、または（５）の化合物、これらの併用物、または増殖状態を軽減するのに効果的なその他の治療用化合物を含む併用物の量は、該化合物または併用物で処理済みの細胞または組織サンプルおよび対照用の細胞または組織サンプルの光学濃度の変化から決定できる。いくつかの実施形態において投与した構造（２）、（３）、または（５）の化合物は、本願明細書記載の方法で測定したＥＣ５０の値が、例えば、実施例１のＩＡＰ結合化合物で約１μＭ未満、別の実施例において約０．５μＭ未満、また別の実施例において構造（２）、（３）、または（５）の化合物のＥＣ５０の値が約０．０６μＭ未満のものを含む。
【０１８３】
本願明細書中で使用される語、ＩＡＰ結合性化合物とは、ＩＡＰのＢＩＲ含有タンパク質の機能ドメイン（例えば、結合モチーフまたは活性部位）に三次結合または活性を与える分子をさす。これらのＩＡＰ結合性化合物は、構造（２）、（３）、または（５）の低分子薬剤等の非ペプチド剤でもよく、また構造（２）、（３）、または（５）の分子を含む。Ｓｍａｃおよびその相同体等の天然ＩＡＰ結合性カーゴ分子の構造的特徴および結合を知り、Ｓｍａｃおよびその相同体のコアＩＡＰ結合性Ｎ末端テトラペプチドと比較して、同等またはそれ以上の結合性を有するＩＡＰ結合化合物を生成することは有利である。本発明の様々な実施形態における構造（２）、（３）、または（５）のＩＡＰ結合性カーゴ分子のさらなる利点のひとつは、この大きさおよび構造の化合物が、大規模の合成により調製でき、水溶液中での溶解性が高めるように化学的に改変でき、浸透性を高めることができ、生体内で選択された標的に対して容易な送達ができることである。
【０１８４】
遺伝的にコード化されたアミノ酸の自然発生の側鎖の１若しくはそれ以上を除去、置換、改変することで、ＩＡＰ結合性化合物を生成するように、アミノ酸が改変される場合、分子と同様に、アミノ酸も本発明のＩＡＰ結合性カーゴ分子として含まれる。置換として、１若しくはそれ以上のＬ‐アミノ酸をＤ‐アミノ酸に交換することが含まれる。アミノ酸の自然発生側鎖を置換する場合、アルキル基、低級アルキル基、４、５、６、および７員環までの環状アルキル基、アミド基、低級アルキルアミド基、ジ（低級アルキル）アミド、低級アルコキシ基、ヒドロキシ基、カルボキシ基、およびこれらの低級エステル誘導体、および４、５、６、および７員環までの複素環基が使用できる。例えば、プロリン類似体は、プロリン残基の環の大きさが５員環から４、６、または７員環に変化するように生成可能であり、環状の様々な位置（２、３、４、または５位）に置換基を付加できる。例えば、構造（２）においては、置換基はエステル基Ｒ２、またはアリールオキシ基Ｚでもよい。環状基は飽和または不飽和でもよく、不飽和の場合、芳香環基でも非芳香環基でもよい。複素環基は、構造（２）、（３）、または（５）の分子中のＲ２の側基に使用できる。複素環基は、窒素原子、酸素原子、および／または硫黄等のヘテロ原子を１若しくはそれ以上有していてもよい。このような複素環基の例として、フラザニル、フリル、イミダゾリジニル、イミダゾリル、イミダゾリニル、イソチアゾリル、イソキサゾリル、モルフォリニル（例えば、モルフォリノ）、オキサゾリル、ピペラジニル（例えば、１−ピペラジニル）、ピペリジル（例えば、１−ピペリジル、ピペリジノ）、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリジニル（例えば、１−ピロリジニル）、ピロリニル、ピロリル、チアジアゾリル、チアゾリル、チエニル、チオモルフォリニル（例えば、チオモルフォリノ）、およびトリアゾリルが挙げられる。これらの複素環基は、置換されていてもまたは置換されていなくてもよい。この基が置換されている場合、その置換基として、アルキル基、アルコキシ基、ハロゲン原子、酸素原子、あるいは置換または非置換フェニル基が挙げられる。ＩＡＰ結合性化合物は、リン酸化、スルホン化、ビオチン化、またはその他の化学構造部分の付加または脱離により化学的に修飾されたアミノ酸残基も有していてもよい。
【０１８５】
当業者に既知の様々な合成技術は、対応する未変性のペプチドと同一または同等の所望の生物学的活性を有するが、溶解性、安定性、細胞浸透性、免疫原性、および／または加水分解またはタンパク質分解に対する感受性の点でより好ましい活性を有するＩＡＰ結合化合物の構築に有用である。これらのＩＡＰ結合性カーゴ分子は、選択したＳｍａｃペプチドまたは相同体の３次元構造に基づいた３次元構造（すなわち、"ペプチドモチーフ"）を有する合成化合物である。ペプチドモチーフは、ＩＡＰ結合性化合物に所望の生物学活性すなわちＩＡＰに対する結合性を付与し、ＩＡＰ結合性化合物の結合活性を実質的に低減させず、多くの場合ＩＡＰ結合性化合物のモデルとした未変性のペプチドと比べて結合活性を同一または高くする。本発明のＩＡＰ結合性カーゴ分子は、合成コストの削減、浸透性の向上、放射線的要素に対する安定性の向上、標的ＩＡＰに対する親和性および／または結合活性の向上、および生物学的半減期の延長等、治療目的の適用を向上させる有利な特徴をさらに有することができる。
【０１８６】
ある種のＩＡＰ結合性化合物においては、ＩＡＰ結合性カーゴ化合物のＩＡＰ結合性を改変するために、エステル結合、チオエステル結合、チオアミド結合、レトロアミド結合、還元型カルボニル（ｒｅｄｕｃｅｄ  ｃａｒｂｏｎｙｌ）結合、ジメチレン結合、およびケトメチレン結合等の様々な化学結合を含むことができる。
【０１８７】
カスパーゼは細胞質ゾルの酵素であるので、ＩＡＰタンパク質と化学的に結合する診断、造影、予防薬、および治療用ＩＡＰ結合性カーゴ分子は、好ましくは細胞膜を通過する。本発明の細胞膜浸透性ＩＡＰ結合性カーゴ分子複合体は、好ましくは所望の細胞内転移およびＩＡＰへの結合性をＩＡＰ結合性カーゴ分子にもたらすことのできるものである。好ましくはこれらのＩＡＰ結合性カーゴ分子は、無処置の細胞、組織、または器官の外面に適用した場合に、構造（２）、（３）、または（５）の複合ＩＡＰ結合性カーゴ分子の膜貫通転位および内部移行をさせる能力によって特徴付けられる。本発明のＩＡＰ結合性カーゴ分子の細胞浸透性および細胞質および／または細胞核区画内への局在化能力は、例えば、蛍光顕微鏡観察、共焦点顕微鏡観察、電子顕微鏡観察、オートラジオグラフィ、または免疫組織化学等の種々の検出法により実証できる。
【０１８８】
理論に関係づけるまでもなく、構造（２）、（３）、または（５）のＩＡＰ結合性カーゴ分子は細胞中でＩＡＰに結合でき、例えば、細胞中でカスパーゼに結合したＩＡＰを競合的に置換したり、細胞中でＩＡＰに捕捉されたたＳｍａｃを放出したりできる。ＩＡＰ結合性カーゴ分子は、化学的、物理的、またはこれらの併用によりＩＡＰタンパク質に結合し、細胞中で成熟カスパーゼまたはＳｍａｃタンパク質からＩＡＰタンパク質を脱離させうる。ＩＡＰ結合性カーゴ分子のＩＡＰ結合性部分とＩＡＰタンパク質間の物理的な相互作用は、細胞中のアポトーシスを改変するのに利用できる。
【０１８９】
構造（２）、（３）、または（５）のＩＡＰ結合性分子またはカーゴ分子は、例えば、分子あるいは成熟カスパーゼまたは蛍光標識ペプチド（ＡｂｕＲＰＦ‐Ｋ（５‐Ｆａｍ）−ＮＨ２）等のポリペプチドをＩＡＰのＢＩＲドメインから脱離させることができるＩＡＰ結合性部分を有する。細胞中でのアポトーシス増加が望ましい場合、構造（２）、（３）、または（５）のＩＡＰ結合分子の本願明細書記載の方法により決定された結合解離定数Ｋｄの値は、例えば、実施例１におけるＡｂｕＲＰＦ‐Ｋ（５‐Ｆａｍ）−ＮＨ２のＩＡＰのＢＩＲドメインからの脱離について、約１０μＭ未満であり、いくつかの実施例においてはＫｄの値が約１μＭ未満、また別の実施例においてはＫｄの値が０．１μＭ未満でもよい。
【０１９０】
構造（２）、（３）、または（５）の標識されたＩＡＰ結合性カーゴ分子として、フルオロフォア、蛍光団、蛍光ナノ粒子、およびその他の色素、放射性同位元素、金属、小分子等、いずれの好適な検出可能な標識を含んでもよい。標識がその分子のＩＡＰ性結合部分に結合している場合、好ましくは、その標識は該分子の細胞浸透性またはＩＡＰに対する結合性に実質上干渉せず、診療または治療目的の適用を可能にする。標識を選択する際、好ましくは、その標識の検出可能な性質が、ＩＡＰ結合性カーゴ分子のＩＡＰタンパク質のＢＩＲドメインへの結合と共に変化する。該分子がＩＡＰに結合して検出可能な性質が向上または低減する場合該標識の細胞環境との相互作用が変化するため、該標識の検出可能な性質は変化しうる。
【０１９１】
ＩＡＰ結合性カーゴ分子は、治療薬としての用途が見出されている。一例において、細胞中でのＩＡＰ結合性カーゴ分子のＩＡＰへの結合は、治療の必要な細胞中のアポトーシスを改変させるのに使用できる。その他の例において、カーゴ部分が放射標識されている場合、ＩＡＰ結合性カーゴ分子は放射線治療に使用できる。これらのカーゴ分子を利用することで、放射性原子を、腫瘍、組織、またはＩＡＰタンパク質を過剰発現しているその他の癌細胞集団に投与できる。腫瘍中のＩＡＰは、放射核でＩＡＰ結合性カーゴ分子に結合する。同様に、ＩＡＰ結合性カーゴ分子は、光線力学的治療で活性を示す色素を組み込むようにもできる。その他のこのような治療用途は、当業者にとって明白であろう。
【０１９２】
細胞中のＩＡＰの異常レベルを検出するために分析される細胞は、容器またはマイクロプレート等のウェルにいれた液体サンプル、流動液体、または精製後液体中でＩＡＰ結合カーゴ分子と共に混合し選択的に定温放置してもよい。これらのサンプルを、ＩＡＰ結合性カーゴ分子の検出可能な特性変化についてモニターしてもよい。例えば、流動細胞計測法は、蛍光プローブ分子で標識した細胞をフローサイトメーターで分析する方法である。フローサイトメーターでは、細胞は一線状に集束レーザー光を通過し、このとき細胞は、サイトメーターの光電子倍増菅のチューブで検出できる蛍光を細胞内でのプローブから放出する。ＩＡＰの高発現または低発現といった異常発現を生じている細胞は、蛍光プローブカーゴ分子を有する、構造（２）、（３）、または（５）のＩＡＰ結合性カーゴ分子に接触させ選択的に定温放置してもよい。細胞中でのＩＡＰ結合性カーゴ分子のＩＡＰタンパク質への結合は、フローサイトメーターにより検出できる。蛍光放出強度を測定・デジタル化しコンピューターディスクに保存し、データの分析および対照サンプル、処理済細胞サンプル、またはＩＡＰ発現を決定するその他の細胞サンプルとの比較に使用できる。
【０１９３】
本発明では、ＩＡＰタンパク質のＢＩＲドメインに結合する分子を用いて細胞中のＩＡＰタンパク質を選別する方法を提供する。本方法は、構造（２）、（３）、または（５）のＩＡＰ結合性カーゴ分子と細胞由来のＩＡＰタンパク質を、ＩＡＰ結合性カーゴ分子とＩＡＰカーゴ分子が結合できる条件下で、結合させることを含む。本方法は、ＩＡＰ結合カーゴ分子と共に細胞サンプルを定温放置する工程を含んでいてもよい。該分子のＩＡＰへの結合、すなわち細胞中でのＩＡＰの存在は、ＩＡＰ結合性カーゴ分子の検出可能な結合特性をモニターすることで決定できる。ＩＡＰ結合性分子の検出可能な特性の変化は、細胞中でのＩＡＰ発現を決定するのに利用できる。ＩＡＰタンパク質が細胞中で過剰発現している場合、ＩＡＰ結合性カーゴ分子は、ＩＡＰに結合させて、細胞中でのＩＡＰ介在カスパーゼ活性阻害を軽減するのに使用できる。あるいは、ＩＡＰタンパク質がＳｍａｃ等のタンパク質またはアポトーシスに関わるその他のタンパク質を捕捉している場合、構造（２）、（３）、または（５）のＩＡＰ結合性カーゴ分子は、捕捉されたＳｍａｃまたはその他のタンパク質をＩＡＰから放出させ、細胞内でアポトーシスを改変するのに使用できる。治療中の所望や必要性に応じて、その他のＩＡＰ結合性カーゴ分子を細胞に投与してもよい。これらの追加的なＩＡＰ結合性カーゴ分子は、ＩＡＰに対して異なる結合親和性を有していてもよく、また放射性元素等の治療薬となるカーゴ部分を選択的に含んでいてもよい。
【０１９４】
ＩＡＰ結合性カーゴ分子、例えば、構造（２）の分子は、細胞内でＩＡＰ‐カスパーゼタンパク質またはＩＡＰ−Ｓｍａｃ間の相互作用に対して作用薬または拮抗薬として作用できる化合物の選別および同定を目的とした種々の分析に使用できる。例えば、ＩＡＰ−カスパーゼ間の相互作用を阻害できるＩＡＰ結合性カーゴ分子は、該相互作用の拮抗薬であるが、この分子は、癌等の細胞増殖性疾患の治療のためのアポトーシス促進性薬剤として有用であると考えられる。該相互作用に対する作用薬は、例えば、アルツハイマー病等の変性疾患当、アポトーシスの阻害が必要な場合の疾患の治療用の抗アポトーシス薬として有用となりうる。
【０１９５】
生物系として、植物、動物、単細胞および多細胞生物、および昆虫が含まれる。本願明細書中で使用される語、哺乳動物として、ヒト、およびウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコ等を限定することなく含む、すべての家畜および野生動物を包含する。
【０１９６】
本願明細書中で有効な量とは、構造（２）、（３）、または（５）の本発明のＩＡＰ結合性カーゴ分子を、治療の必要な組織または動物好ましくは哺乳動物等の生物系の１若しくはそれ以上の細胞のサンプルに投与する場合に、組織または細胞中のＩＡＰの検出、組織または細胞の予防、あるいは細胞または組織好ましくは生物系中のＩＡＰの治療処置に効果を及ぼすのに十分な量である。ＩＡＰ活性の阻害により緩和された疾患状態に対して、組織または被験体を含む１若しくはそれ以上の細胞中におけるアポトーシスの改変または促進に治療上有効な量となる本発明の化合物の量は、該化合物、疾患状態、疾患の重篤度、治療する哺乳動物により異なるが、当該技術分野に関する知識および本願発明の開示内容について通常の技術を有する者により当然のごとく決定できる。診断に有効な量とは、細胞または組織中のＩＡＰ検出を可能にするのに十分なＩＡＰ結合性カーゴ分子の量であり、例えば、その細胞または組織の位置や該ＩＡＰ結合性カーゴ分子の安定性によって異なりうる。予防に有効な量とは、疾患状態が起こるのを予防するＩＡＰ結合性カーゴ分子の量であり、例えば、ＩＡＰ結合性カーゴ分子を細胞、組織、または試験動物に対照サンプルと共に投与し、その後これらを異常細胞を増殖誘発させることがわかっている条件下におき、予防に有効なＩＡＰ結合性カーゴ分子の量を決定することができる。
【０１９７】
細胞試料、組織、哺乳動物、特にヒトにおける疾患状態の治療として、構造（２）、（３）、または（５）の本発明の化合物を用いて細胞中の疾患の存在を検出してもよく、疾患が検出された場合、本発明の化合物を１若しくはそれ以上の細胞あるいはヒトの被験体を含む動物または組織に対して、アポトーシスを改変、好ましくは促進するように選択的に投与する。細胞中でＩＡＰタンパク質が過剰発現している場合の疾患状態は、本発明のＩＡＰ結合性カーゴ分子を細胞に投与してその疾患状態を後退させ、ＩＡＰ−カスパーゼ間相互作用またはＩＡＰ−Ｓｍａｃ間相互作用を阻害することで軽減できる。この治療として、哺乳動物に疾患状態が起こるのを防ぐことも含んでいてもよい。例えば、アポトーシス阻害で特徴づけられる疾患状態の罹患傾向を有するが、罹患の診断がされていない哺乳動物において、本発明のＩＡＰ結合性化合物の有効量を細胞または患体に投与することで該疾患状態の阻害またはその進行の抑止ができる。
【０１９８】
一実施形態において、構造（２）、（３）、または（５）の分子は、経口投与、頬側投与、非経口投与等によってＩＡＰ結合性分子を全身に分配させる組成物として哺乳動物またはヒトに投与できる。この投与は、増殖障害に罹患またはその恐れのある哺乳動物、特にヒトを治療する方法に含まれる。ここで、「（罹患の）恐れがある」とは、遺伝子型、家族歴、またはその他の危険因子が、未治療で放置した場合の増殖障害の罹患率が通常よりも高いことを示しているヒト等の哺乳動物を意味する。
【０１９９】
細胞中でのＩＡＰの発現は、手術することなく患体内で検出できる。従って、本発明は、細胞中へ移動し、介在組織の存在により細胞から除去され少し離れた位置で生細胞中で検出可能な本発明のＩＡＰ結合性カーゴ分子を投与することで、全動物、組織、または細胞等の生物系における細胞内での生化学的活性を検出するための化合物および方法を包含する。本方法および本組成物は、１若しくはそれ以上の細胞または組織中で、ＩＡＰの異常発現を起こしている細胞または組織を同定したり、ＩＡＰ結合性カーゴ分子がサンプル細胞中でＩＡＰに結合する有効量を投与して、その細胞または組織中でのＩＡＰの活性を改変するために使用できる。本発明の方法および組成物が適用できる組織の例として、例えば、癌細胞、特に、中枢神経系腫瘍、乳癌、肝臓癌、肺、頭頸部癌、リンパ腫、白血病、多発性骨髄腫、膀胱癌、卵巣癌、前立腺癌、腎臓腫瘍、肉腫、大腸およびその他の消化器癌、転移、および黒色腫等が挙げられる。アポトーシスの改変または異常なＩＡＰ活性が関わり、本発明の方法および組成物が適用できる、疾患、病状、または障害のその他の例として、これらには限定されないが、感染症、炎症、アルツハイマー病およびパーキンソン病等の神経変性疾患が挙げられる。増殖障害として、ＩＡＰ活性がアポトーシス刺激を受けて細胞中のアポトーシスを阻害する障害も含まれる。
【０２００】
細胞でアポトーシスを促進するのに有効な量のＩＡＰ結合性カーゴ分子を細胞に投与することにより、細胞サンプル中でアポトーシスを促進することができる。これらの細胞は、培養細胞、組織内の細胞、および組織、好ましくは生存している生物内、好ましくは動物、より好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトの中に位置する組織でもよい。これらの後者の実施形態は、治療に有効な量の本発明のＩＡＰ結合性カーゴ分子を哺乳動物被験体に投与するための医薬調整物として処方することにより実施できる。このような医薬調整物は、本発明の別の態様を構成する。
【０２０１】
アポトーシスを刺激または阻害する医薬剤の能力は、ＩＡＰの下流標的の無細胞活性分析により試験できる。ＩＡＰ結合性カーゴ分子が存在しない場合、ＩＡＰ自身が、例えば、Ｓｍａｃと相互作用し、カスパーゼの活性を阻害し、アポトーシスを抑止する。このような分析として、これらには限定されないが、、直接的カスパーゼ−９活性分析およびカスパーゼ活性分析（プロカスパーゼの切断）が挙げられる。このような分析で予め活性レベルの決定された本発明のＩＡＰ結合性カーゴ分子は、該分析で正の対照として使用され、該分析で活性でないことがわかっている対応分子は、負の対照として使用される。分析は、これらの対照を使用して行われ、治療中の細胞は、構造式（２）、（３）、または（５）の構造を有するＩＡＰ結合性カーゴ分子の存在下でのＩＡＰによるＳｍａｃまたはカスパーゼの活性阻害の軽減について評価できる。アポトーシスが進行している細胞は、明確な形態変化、または染色体をヌクレオソームラダー（核ＤＮＡ染色で検出）に切断する等の分子マーカーにより、正常細胞と区別できる。
【０２０２】
医薬的に活性または生物学的に活性な本発明のＩＡＰ結合性カーゴ分子は、ＩＡＰ（アポトーシス阻害タンパク質）、具体的にはＩＡＰのＢＩＲドメイン、より具体的には、ＸＩＡＰのＢＩＲ３結合溝に結合する分子である。この生物学的な活性は、これらには限定されないが、ＸＩＡＰ、ｃ‐ＩＡＰ１、ｃ‐ＩＡＰ２、サバイビン、ＭＬ−ＩＡＰ、およびＤＩＡＰ等のどのようなＩＡＰについても測定できる。
【０２０３】
本発明の様々な態様は、以下に示す非限定的な実施例を参照しながら説明していく。
【実施例１】
【０２０４】
結合定数（Ｋｄ）は、Ｚａｎｅｔａ  Ｎｉｋｏｌｏｖｓｋａ−Ｃｏｌｅｓｋａ，Ｒｅｎｘｉａｏ  Ｗａｎｇ，Ｘｕｅｌｉａｎｇ  Ｆａｎｇ，Ｈｏｎｇｇｕａｎｇ  Ｐａｎ，Ｙｏｒｋ  Ｔｏｍｉｔａ，Ｐｅｎｇ  Ｌｉ，Ｐｅｔｅｒ  Ｐ．Ｒｏｌｌｅｒ，Ｋｒｚｙｓｚｔｏｆ  Ｋｒａｊｅｗｓｋｉ，Ｎａｏｙｕｋｉ  Ｓａｉｔｏ，Ｊｅａｎｎｅ  Ｓｔｕｃｋｅｙ、及びＳｈａｏｍｅｎｇ  Ｗａｎｇによる「Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ａｎｄ  Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  Ｂｉｎｄｉｎｇ  Ａｓｓａｙ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ＸＩＡＰ  ＢＩＲ３  Ｄｏｍａｉｎ  Ｕｓｉｎｇ  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  Ｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ」（Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２００４，３３２，２６１〜２７３）において記載されているように、蛍光偏光法を用いて測定した。簡潔に述べると、結合測定のための様々な濃度における検体ＩＡＰ結合化合物を、１００μｇ／ｍｌウシγ−グロブリンを含有したｐＨ７．５の０．１Ｍカリウムリン酸緩衝液１００μＬ中、５ｎＭの蛍光標識したペプチド（ＡｂｕＲＰＦ−Ｋ（５−Ｆａｍ）−ＮＨ２）及び４０ｎＭのＸＩＡＰ−ＢＩＲ３と共に室温で１５分間混合した。インキュベーション後、４８５ｎｍ励起フィルター及び５２０のｎｍ発光フィルターを用いたＶｉｃｔＯｒ２Ｖにおいて偏光度（ｍＰ）を測定した。ＩＣ５０値は、ＧｒａｐｈＰａｄプリズム用いた非線形最小２乗分析によるプロットから決定した。競合的阻害剤のＫｄ値は、測定されたＩＣ５０値、プローブ及びＸＬＡＰ  ＢＬＲ３複合体のＫｄ値、及び競合アッセイ中のタンパク質及びプローブの濃度に基づき、Ｚａｎｅｔａ  Ｎｉｋｏｌｏｖｓｋａ−Ｃｏｌｅｓｋａらによって記載された方程式を用いて算出した。Ｋｄ値のためのＩＡＰ結合又はＩＡＰ結合カーゴ分子のＫｄ値の範囲は、グループＡはＫｄ<０．１μＭ、グループＢはＫｄ＝０．１〜１μＭ、グループＣはＫｄ＝１〜１０μＭ、グループＤはＫｄ>１０μＭである。
【実施例２】
【０２０５】
この実施例は、細胞の処理方法において使用することが可能な本発明の実施形態の化合物の使用方法について図示する。これらのＩＡＰ結合化合物を用いた方法は、検体細胞を削減、除去、または他の方法で処理するのに有効な化学式（２）、（３）、又は（５）の様々な実施形態においてＩＡＰ結合化合物又はＩＡＰ結合カーゴ分子のある量を異常細胞に投与する工程を含む場合があり、前記異常細胞は、ＩＡＰを過剰発現すると周知の細胞、更に例えばこれらに限らないがＳＫ−ＯＶ−３細胞、ＨｅＬａ細胞、又は別の細胞などの発達障害、癌、自己免疫疾患、及び神経変性障害に関連する別の細胞株である。
【０２０６】
ＭＭＴアッセイは、以前に記載されているように（Ｈａｎｓｅｎ，Ｍ．Ｂ．，Ｎｉｅｌｓｅｎ，Ｓ．Ｅ．，ａｎｄ  Ｂｅｒｇ，Ｋ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  １９８９，１１９，２０３−２１０）細胞増殖を測定するために使用されてきたアッセイの例であり、前記引用はこの参照により本願明細書に完全に組み込まれる。簡潔に述べると、ＳＫ−ＯＶ−３細胞は１０％ウシ胎児血清アルブミン含有ＭｃＣｏｙ’ｓ培地中、９６ウェルプレートに播種し（１ウェルあたり２０，０００個）、３７℃で一晩インキュベートした。翌日、検体化合物を主に約１０〜約０．０００１μＭの種々濃度で加え、このプレートを更に３７℃で７２時間インキュベートした。このインキュベート時間は、様々な類似体の阻害効果を測定するために最適であった。５ｍｇ／ｍＬのＭＴＴ試薬を各ウェルに５０マイクロリットルずつ加え、このプレートを３７℃で３時間インキュベートした。インキュベート期間の終わりに、ＤＭＳＯを各ウェルに５０マイクロリットルずつ加えて細胞を溶解させ、マイクロプレートリーダー（Ｖｉｃｔｏｒ２１４２０，フィンランド，Ｗａｌｌａｃ）を用いて前記ウェルの５３５ｎｍでの吸光度（ＯＤ）を測定した。細胞生存（ＣＳ）は以下の方程式で算出した。
【０２０７】
ＣＳ＝（処理細胞のＯＤ／対照ウェルのＯＤ平均）×１００％
【０２０８】
５０％ＣＳをもたらす薬物濃度として定義されるＥＣ５０は、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍを用いて、用量反応曲線が５０％のＣＳ点と交差する点を算出することにより導き出した。
【０２０９】
ＩＡＰ結合化合物に対する代表的結果を以下に示す；
【化５６】
2008506712.tif 000033
【０２１０】
【表１】
2008506712.tif 000034
【実施例３】
【０２１１】
この実施例は、表２のピロリジン誘導体の調製について図示した。この実施例は、ヘテロアルキニル置換基を含む化学式（Ｅ３）の分子を含む。
【０２１２】
スキームＩ
【化５７】
2008506712.tif 000035
【０２１３】
２Ｓ−ＡｍＵｉｏ−Ｎ−［２−メチル−ｌ−１Ｓ−（４Ｓ−フェノキシ−２Ｓ−フェノキシメチル−ピロリジン−１−カルボニル）−プロピル］−プロピオンアミド塩酸塩（７）の調製。
【０２１４】
Ａ．（４Ｓ）−フェノキシ−（２Ｓ）−フェノキシメチル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２）：無水ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のアルコール１（０．５３ｇ，１．８ｍｍｏｌ）の溶液に、フェノール（０．２１ｇ，２．３ｍｍｏｌ）、Ｐｈ３Ｐ（０．５２ｇ，２．０ｍｍｏｌ）、及び１，１’−（アゾジカルボニル）−ジピペリジン（ＡＤＤＰ，０．５０ｇ，１．９ｍｍｏｌ）を順番に加えた。周囲温度で２時間後、前記不均一反応混合物を濾過した。白色固体をＤＣＭで洗浄し、浄化した濾液を２Ｍ  ＮａＯＨ、水、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過して濃縮した。フラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３：１  ヘキサン／酢酸エチル）により未精製アリールエーテルを精製し、無色の油として２が０．３６ｇ（５４％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．２９〜７．２４（ｍ，４Ｈ），６．９４〜６．８２（ｍ，６Ｈ），４．９１（ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），４．３７〜４．２８（ｍ，２Ｈ），４．１２〜４．０５（ｍ，１Ｈ），３．７９〜３．６４（ｍ，２Ｈ），２．４８（ａｐｐ  ｄ，Ｊ＝１３．８Ｈｚ，１Ｈ），２．３２〜２．２５（ｍ，１Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ）ｐｐｍ。
【０２１５】
Ｂ．（４Ｓ）−フェノキシ−（２Ｓ）−フェノキシメチル−ピロリジン（３）：２（０．３６ｇ，０．９８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を周囲温度で加えた。１．５時間後、前記溶液を濃縮乾固、未精製生成物を酢酸エチルに溶解させた。前記有機溶液をＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた後、濾過して濃縮した。前記未精製ピロリジンをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製し、褐色−オレンジ色の油として３が０．２３ｇ（８８％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．３２〜７．２６（ｍ，４Ｈ），６．９８〜６．８７（ｍ，６Ｈ），４．９０〜４．８７（ｍ，１Ｈ），４．０７〜４．０１（ｍ，２Ｈ），３．６３〜３．５７（ｍ，１Ｈ），３．３５（ａｐｐ  ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，１Ｈ），３．１７（ａｐｐ  ｑ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ），２．７７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），２．４５〜２．３５（ｍ，１Ｈ），１．９３〜１．８６（ｍ，１Ｈ）ｐｐｍ。
【０２１６】
Ｃ．［２−メチル−１−（４Ｓ−フェノキシ−２Ｓ−フェノキシメチル−ピロリジン−１−カルボニル）−プロピル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４）：Ｎ−Ｂｏｃ−Ｖａｌ（０．２８ｇ，１．３ｍｍｏｌ）の無水ＮＭＰ（５ｍｌ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムＰＦ６（ＨＡＴＵ，０．３８ｇ，１．０ｍｍｏｌ）を周囲温度で添加した。この反応混合物に、Ｎ−メチルモルホリン（０．１ｍＬ）を加えた。１０分後、ＮＭＰ（５ｍＬ）中のピロリジン３（０．２３ｇ，０．８６ｍｍｏｌ）を加えた。２時間後、前記反応混合物を酢酸エチルで希釈し、ＮａＨＣＯ３希薄水溶液、１Ｎ  ＨＣｌ、水、食塩水で洗浄した。前記有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過して濃縮した。前記未精製アミドをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３：１  ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、無色の油として４が０．３６ｇ（９０％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．３４〜７．２６（ｍ，４Ｈ），７．０３〜６．８２（ｍ，６Ｈ），５．３０（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ），５．０１〜４．９９（ｍ，１Ｈ），４．６９〜４．６５（ｍ，１Ｈ），４．３８〜４．３４（ｍ，１Ｈ），４．２７〜４．０７（ｍ，３Ｈ），３．８３〜３．７８（ｍ，１Ｈ），２．５３〜２．４８（ｍ，１Ｈ），２．３８〜２．３１（ｍ，１Ｈ），２．００〜１．９４（ｍ，１Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ），０．９７（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），０．９３（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０２１７】
Ｄ．２−アミノ−３−メチル−１−（４Ｓ−フェノキシ−２Ｓ−フェノキシメチル−ピロリジン−１−イル）−ブタン−１−オン（５）：４（０．３６ｇ，０．７９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を周囲温度で加えた。１．５時間後、前記溶液を濃縮乾固し、未精製生成物を酢酸エチルに溶解した。前記有機相をＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮した。フラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により前記未精製アミンを精製し、淡黄色の油として５が０．２７ｇ（９６％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．３２〜７．０１（ｍ，４Ｈ），７．０１〜６．８２（ｍ，６Ｈ），４．９９（ｍ，１Ｈ），４．６７〜４．４８（ｍ，１Ｈ），４．３８〜４．２７（ｍ，１Ｈ），４．１６〜４．０５（ｍ，１Ｈ），３．９９（ａｐｐ  ｑ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），３．７８〜３．７２（ｍ，１Ｈ），２．５０〜２．２８（ｍ，２Ｈ），１．８６（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），０．９７（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），０．９１（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０２１８】
Ｅ．｛１Ｓ−［２−メチル−１Ｓ−（４Ｓ−フェノキシ−２Ｓ−フェノキシメチル−ピロリジン−１−カルボニル）−プロピルカルボニル］−エチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（６）：Ｎ−Ｂｏｃ−Ａｌａ（０．１４ｇ，０．７４ｍｍｏｌ）の無水ＮＭＰ（３ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムＰＦ６（ＨＡＴＵ，０．２３ｇ，０．６１ｍｍｏｌ）を周囲温度で加えた。前記反応混合物にＮ−メチルモルホリン（０．１ｍＬ）を加えた。１０分後、ＮＭＰ（５ｍＬ）中のピロリジン５（０．１７ｇ，０．４８ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間後、前記反応混合物を酢酸エチルで希釈し、ＮａＨＣＯ３希薄水溶液、１Ｎ  ＨＣｌ、水、及び食塩水で洗浄した。前記有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮した。フラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１：１  ヘキサン／酢酸エチル）によって未精製アミドを精製し、無色の油として６が０．２３ｇ（９２％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．３３〜７．２３（ｍ，４Ｈ），７．０２〜６．８７（ｍ，６Ｈ），５．０２〜４．９９（ｍ，２Ｈ），４．６８〜４．４８（ｍ，２Ｈ），４．３３（ｄｄ，Ｊ＝３．９，９．３Ｈｚ，１Ｈ），４．２３〜４．０９（ｍ，４Ｈ），３．８３〜３．７８（ｍ，１Ｈ），２．５２〜２．４７（ｍ，１Ｈ），２．３８〜２．２８（ｍ，１Ｈ），２．０８〜１．９９（ｍ，１Ｈ），１．８０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ），１．３６（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ），０．９５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ），０．９０（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０２１９】
Ｆ．２Ｓ−アミノ−Ｎ−［２−メチル−１Ｓ−（４Ｓ−フェノキシ−２Ｓ−フェノキシメチル−ピロリジン−１−カルボニル）−プロピル］−プロピオンアミド塩酸塩（７）：６（０．２３ｇ，０．４４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を周囲温度で加えた。１．５時間後、前記溶液を濃縮乾固し、未精製生成物を酢酸エチルに溶解した。前記有機相をＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮した。未精製アミンをジエチルエーテルに溶解した後、ＨＣｌ（ｇ）で処理した。前記未精製塩をジエチルエーテル及びヘキサンを用いて粉末化し、白色固体として７が０．１３ｇ（６５％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ，遊離塩基（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．８９〜７．８７（ｍ，１Ｈ），７．３２〜７．２４（ｍ，４Ｈ），７．０１〜６．７９（ｍ，５Ｈ），５．０１〜４．９８（ｍ，１Ｈ），４．６８〜４．６２（ｍ，１Ｈ），４．５１〜４．４３（ｍ，１Ｈ），４．３６〜４．２６（ｍ，２Ｈ），４．１８〜４．１０（ｍ，１Ｈ），３．８４〜３．７８（ｍ，１Ｈ），２．５１〜２．４６（ｍ，１Ｈ），２．３５〜２．２８（ｍ，１Ｈ），２．０９〜２．０２（ｍ，１Ｈ），１．３８〜１．２５（ｍ，４Ｈ），０．９６〜０．９２（ｍ，６Ｈ）ｐｐｍ。質量スペクトル，ｍ／ｚ＝４４０［（Ｍ＋Ｈ）＋］。
【０２２０】
【化５８】
2008506712.tif 000036
【０２２１】
【表２】
2008506712.tif 000037
【実施例４】
【０２２２】
この実施例は表３の置換ピロリジンの調整について図示した。
【０２２３】
【化５９】
2008506712.tif 000038
【０２２４】
トランス−２Ｓ−アミノ−Ｎ−（１Ｓ−｛２Ｓ−［３−（２−エチル−フェノキシ）−プロペニル］−４Ｓ−フェノキシ−ピロリジン−１−カルボニル｝−２−メチル−プロピル）−プロピオンアミド（１４）の調製。
【０２２５】
Ａ．トランス−２Ｓ−［３−（２−エチル−フェノキシ）−プロペニル］−４Ｓ−フェノキシ−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（９）：アルコール８（０．３ｇ，０．９４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（６ｍＬ）溶液に、２−エチルフェノール（０．１４ｇ，１．１６ｍｍｏｌ）及びＰｈ３Ｐ（０．２７ｇ，１．０３ｍｍｏｌ）を加えた。前記溶液を０℃に冷却し、ＡＤＤＰ（０．２８ｇ，１．１３ｍｍｏｌ）を１度に加えた。１０分後、前記反応混合物を周囲温度に温め、１６時間攪拌した。白い沈殿物を濾過して除去し、ＤＣＭで洗浄した。前記浄化した濾液を連続的に１Ｍ  ＮａＯＨ、水、及び食塩水で洗浄した。前記有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮した。この未精製エーテルをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３：１，ヘキサン／酢酸エチル）により精製し、無色の油として９が０．１８ｇ（４５％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．３０〜７．２６（ｍ，２Ｈ）；７．１５（ｍ，２Ｈ）；７．００〜６．７９（ｍ，４Ｈ）；６．０１〜５．９８（ｍ，１Ｈ），５．８４（ｍ，１Ｈ）；４．９２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）；４．５３〜４．４３（ｍ，３Ｈ）；３．７６（ｍ，２Ｈ）；２．６５（ｑ，２Ｈ）；２．３９（ｍ，１Ｈ）；２．１６（ｄ，１Ｈ）；１．４６（ｓ，９Ｈ），１．２１（ｔ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０２２６】
Ｂ．トランス−２Ｓ−［３−（２−エチル−フェノキシ）−プロペニル］−４Ｓ−フェノキシ−ピロリジン（１０）：９（０．１８ｇ，０．４３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を周囲温度で加えた。１時間後、前記溶液を濃縮乾固し、未精製生成物を酢酸エチルに溶解した。前記有機相をＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮した。前記未精製アミン（１０）は更なる精製をせずに使用した（０．１３ｇ得られた）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．３１〜７．２５（ｍ，３Ｈ）；７．１７〜７．１１（ｍ，２Ｈ）；６．９７〜６．８０（ｍ，４Ｈ）；５．９７〜５．８８（ｍ，２Ｈ）；４．８６（ｍ，１Ｈ）；４．５４〜４．５０（ｍ，２Ｈ）；３．７０（ｑ，１Ｈ）；３．３４（ｄ，１Ｈ）；３．０７（ｄｄ，１Ｈ）；２．６６（ｑ，２Ｈ）；２．４８〜２．４１（ｍ，１Ｈ）；１．８２〜１．７５（ｍ，２Ｈ）；１．２０（ｔ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０２２７】
Ｃ．トランス−（１Ｓ−｛２Ｓ−［３−（２−エチル−フェノキシ）−プロペニル］−４Ｓ−フェノキシ−ピロリジン−１−カルボニル｝−２−メチル−プロピル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１１）：Ｎ−Ｂｏｃ  Ｖａｌ（０．１８ｇ，０．８２ｍｍｏｌ）の無水ＮＭＰ（３ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムＰＦ６（ＨＡＴＵ，０．２３ｇ，０．６２ｍｍｏｌ）を周囲温度で加えた。Ｎ−メチルモルホリン（０．１２ｍＬ）を反応混合物に加えた。１０分後、ＮＭＰ（３ｍＬ）中のアミン１０（０．１３ｇ，０．４１ｍｍｏｌ）加えた。１６時間後、前記反応混合物を酢酸エチルで希釈し、ＮａＨＣＯ３希薄水溶液、１Ｎ  ＨＣｌ、水、及び食塩水で洗浄した。前記有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮した。前記未精製アミドをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３：２  ヘキサン／酢酸エチル）によって精製し、無色の油として１１が０．２０ｇ（９２％，２段階）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．３２〜７．２４（ｍ，２Ｈ）；７．１５〜７．０６（ｍ，２Ｈ）；６．９９（ｔ，１Ｈ）；６．８９〜６．７７（ｍ，４Ｈ）；５．９６〜５．９１（ｍ，２Ｈ）；５．２３〜５．２０（ｍ，１Ｈ）；５．０１〜４．８６（ｍ，２Ｈ）；４．５３（ｍ，２Ｈ）；４．２１〜４．０９（ｍ，２Ｈ）；４．０９〜３．９７（ｍ，１Ｈ）；２．６８（ｑ，２Ｈ）；２．３６〜２．３２（ｍ，１Ｈ）；２．１８（ｄ，１Ｈ）；１．９７〜１．９１（ｍ，１Ｈ）；１．４４（ｓ，９Ｈ）；１．２９〜１．１８（ｍ，６Ｈ）；０．９９〜０．８１（ｍ，６Ｈ）ｐｐｍ。
【０２２８】
Ｄ．トランス−２Ｓ−アミノ−１−｛２Ｓ−［３−（２−エチル−フェノキシ）−プロペニル］−４Ｓ−フェノキシ−ピロリジン−１−イル｝−３−メチル−ブタン−１−オン（１２）：１１（０．２０ｇ，０．３９ｍｍｏｌのＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液にトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を周囲温度で加えた。１時間後、前記溶液を濃縮乾固し、未精製生成物を酢酸エチルに溶解した。前記有機溶液をＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮した。この未精製アミン（１２）を更なる精製せずに使用した（０．１４ｇ得た）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．２８〜７．２６（ｍ，２Ｈ）；７．１５（ｍ，２Ｈ）；６．９９（ｍ，１Ｈ）；６．８９〜６．７６（ｍ，４Ｈ）；６．１０〜５．８６（ｍ，２Ｈ）；５．０１〜４．９５（ｍ，２Ｈ）；４．５６（ｍ，３Ｈ）；３．９２〜３．７９（ｍ，１Ｈ）；３．３１（ｍ，１Ｈ）；２．６６（ｑ，２Ｈ）；２．３２〜２．１６（ｍ，１Ｈ）；１．６８（ｍ，４Ｈ）；１．２８〜１．１９（ｍ，３Ｈ）；０．９７〜０．８１（ｍ，６Ｈ）ｐｐｍ。
【０２２９】
Ｅ．トランス−［１Ｓ−（１Ｓ−｛２Ｓ−［３−（２−エチル−フェノキシ）−プロペニル］−４Ｓ−フェノキシ−ピロリジン−１−カルボニル｝−２−メチル−プロピルカルバモイル）−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１３）：Ｎ−Ｂｏｃ−Ａｌａ（０．１３ｇ，０．６７ｍｍｏｌ）の無水ＮＭＰ（３ｍＬ）溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムＰＦ６（ＨＡＴＵ，０．１９ｇ，０．５１ｍｍｏｌ）を周囲温度で加えた。Ｎ−メチルモルホリン（０．１ｍＬ）を反応混合物に加えた。１０分後、ＮＭＰ（３ｍＬ）中のアミン１２（０．１４ｇ，０．３４ｍｍｏｌ）を加えた。７２時間後、前記反応混合物を酢酸エチルで希釈し、ＮａＨＣＯ３希薄水溶液、１Ｎ  ＨＣｌ、水、及び食塩水で洗浄した。前記有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過して濃縮した。前記未精製アミドをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１：１  ヘキサン／酢酸エチル）で精製することにより、無色の油として１３が０．１１ｇ（４９％，２工程）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．３１〜７．２２（ｍ，２Ｈ）；７．１５〜６．９５（ｍ，３Ｈ）；６．８８〜６．７６（ｍ，４Ｈ）；５．９６〜５．８７（ｍ，２Ｈ）；５．１９（ｂｒ，１Ｈ）；５．００（ｍ，１Ｈ）；４．８６（ｔ，１Ｈ）；４．５１〜４．４９（ｍ，３Ｈ）；４．１７〜４．１０（ｍ，２Ｈ）；３．８９〜３．８０（ｍ，１Ｈ）；２．６４（ｑ，２Ｈ）；２．３４〜２．２９（ｍ，１Ｈ）；２．２１〜２．１４（ｍ，１Ｈ）；２．０４〜１．９８（ｍ，１Ｈ）；１．４４（ｓ，９Ｈ）；１．３５〜１．２３（ｍ，４Ｈ）；１．１７（ｔ，３Ｈ）；０．９７〜０．８７（ｍ，６Ｈ）ｐｐｍ。
【０２３０】
Ｆ．トランス−２Ｓ−アミノ−Ｎ−（１Ｓ−｛２Ｓ−［３−（２−エチル−フェノキシ）−プロペニル］−４Ｓ−フェノキシ−ピロリジン−１−カルボニル｝−２−メチルｌ−プロピル）−プロピオンアミド（１４）：１３（０．１１ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を周囲温度で加えた。１時間後、前記溶液を濃縮乾固し、未精製生成物を酢酸エチルに溶解した。前記有機溶液をＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮することにより、白色固体として１４が０．０６８ｇ（７６％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．８６（ｂｒ，１Ｈ）；７．３１〜７．２２（ｍ，２Ｈ）；７．１５〜７．０５（ｍ，２Ｈ）；６．９８（ｔ，１Ｈ）；６．８８〜６．７６（ｍ，４Ｈ）；５．９７〜５．８６（ｍ，２Ｈ）；５．００〜４．９８（ｍ，１Ｈ）；４．８８〜４．８３（ｍ，１Ｈ）；４．５７〜４．５１（ｍ，２Ｈ）；４．４４（ｔ，１Ｈ）；４．２１（ｄｄ，１Ｈ）；３．８９〜３．８２（ｍ，１Ｈ）；２．６４（ｑ，２Ｈ）；２．３３〜２．２９（ｍ，１Ｈ）；２．１７（ｄ，１Ｈ）；２．０４〜２．００（ｍ，１Ｈ）；１．３６〜１．２５（ｍ，６Ｈ）；１．１７（ｔ，３Ｈ）；０．９９〜０．８８（ｍ，６Ｈ）ｐｐｍ。
【０２３１】
【化６０】
2008506712.tif 000039
【０２３２】
【表３】
2008506712.tif 000040
【実施例５】
【０２３３】
この実施例は表４のピロリジン誘導体の調整について図示した。
【０２３４】
【化６１】
2008506712.tif 000041
【０２３５】
２Ｓ−アミノ−Ｎ−（１Ｓ−｛２Ｓ−［３−（２−エチル−フェノキシ）−プロピル］−４Ｓ−フェノキシ−ピロリジン−１−カルボニル｝−２−メチル−プロピル）−プロピオンアミド（２１）の調整。
【０２３６】
Ａ．２Ｓ−（３−ヒドロキシ−プロピル）−４Ｓ−フェノキシ−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１５）：［Ｒｅ：ＳＲＲ−００６−６２］パラジウム炭素（１０％，０．３ｇ）をアルコール８（３ｇ，９．４ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（３０ｍＬ）溶液に加えた。前記反応混合物をＰａｒｒ攪拌器に設置し、４５ＰＳＩ  Ｈ２（ｇ）に加圧した。前記不均一混合物を周囲温度で２４時間攪拌した。０．４５μｍのＰＶＤＦフィルターディスク（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｍｉｌｌｅｘ−ＨＶ（登録商標））を用いて濾過して結晶を除去し、浄化した濾液を真空で濃縮することにより、１５が２．９ｇ（９７％）得られ、これは更なる精製をせずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．２９（ｔ，２Ｈ）；６．９６（ｔ，１Ｈ）；６．８５（ｄ，２Ｈ）；４．８８（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）；４．０８〜３．７４（ｍ，２Ｈ）；３．６７〜３．６５（ｍ，２Ｈ）；３．５５（ｄ，１Ｈ）；２．２７〜２．２３（ｍ，２Ｈ）；２．０５〜１．９０（ｍ，２Ｈ）；１．７６〜１．６５（ｍ，１Ｈ）；１．５５（ｑ，２Ｈ）；１．４７（ｓ，９Ｈ）ｐｐｍ。
【０２３７】
Ｂ．２Ｓ−［３−（２−エチル−フェノキシ）−プロピル］−４Ｓ−フェノキシ−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１６）：アルコール１５（０．６１ｇ，１．９１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、２−エチルフェノール（０．２８ｇ，２．３３ｍｍｏｌ）及びＰｈ３Ｐ（０．５５ｇ，２．０９ｍｍｏｌ）を加えた。前記溶液を０℃に冷却し、ＡＤＤＰ（０．５８ｇ，２．２９ｍｍｏｌ）を一度に加えた。１０分後、前記反応混合物を周囲温度に温め、１６時間攪拌し続けた。白い沈殿物を濾過により除去し、ＤＣＭで洗浄した。前記浄化した濾液を１Ｎ  ＮａＯＨ、水、及び食塩水で連続的に洗浄した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過して濃縮した。フラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３：１  ヘキサン／酢酸エチル）により前記未精製エーテルを精製することにより、無色の油として１６が０．４６ｇ得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．２８（ｔ，２Ｈ）；７．１３（ｔ，２Ｈ）；６．９６（ｔ，１Ｈ）；６．８９〜６．８４（ｍ，３Ｈ）；６．７８（ｄ，１Ｈ）；４．９１〜４．８７（ｍ，１Ｈ）；３．９６（ｂｒ，４Ｈ）；３．５６（ｄ，１Ｈ）；２．６３（ｑ，２Ｈ）；２．２８〜２．２６（ｍ，１Ｈ）；２．１１〜２．０６（ｍ，２Ｈ）；１．８６〜１．７７（ｍ，３Ｈ）；１．４６（ｓ，９Ｈ）；１．１７（ｔ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０２３８】
Ｃ．２Ｓ−［３−（２−エチル−フェノキシ）−プロピル］−４Ｓ−フェノキシ−ピロリジン（１７）：１６（０．４６ｇ，１．０８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を周囲温度で加えた。１時間後、前記溶液を濃縮乾固し、未精製生成物を酢酸エチルに溶解した。有機相をＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過して濃縮することにより、無色の油として１７が０．３０ｇ（８５％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．３２〜７．２６（ｍ，３Ｈ）；７．１６〜７．１２（ｍ，２Ｈ）；６．９８６．７８（ｍ，４Ｈ）；４．８６（ｓ，１Ｈ）；３．９９〜３．９７（ｍ，２Ｈ）；３．３５（ｄ，１Ｈ）；３．２３（ｍ，１Ｈ）；３．０８（ｍ，１Ｈ）；２．７４〜２．６０（ｍ，３Ｈ）；２．４２（ｍ，２Ｈ）；１．９０〜１．８５（ｍ，３Ｈ）；１．６７〜１．６１（ｍ，１Ｈ）；１．１６（ｔ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０２３９】
Ｄ．（１Ｓ−｛２Ｓ−［３−（２−エチル−フェノキシ）−プロピル］−４Ｓ−フェノキシ−ピロリジン−１−カルボニル｝−２−メチル−プロピル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１８）：Ｎ−Ｂｏｃ−Ｖａｌ（０．３０ｇ，１．３８ｍｍｏｌ）の無水ＮＭＰ（３ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムＰＦ６（ＨＡＴＵ，０．３９ｇ，１．０３ｍｍｏｌ）を周囲温度で加えた。前記混合物にＮ−メチルモルホリン（０．２ｍＬ）を加えた。１０分後、ＮＭＰ（３ｍＬ）中のアミン１７（０．２２ｇ，０．６７ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間後、前記反応混合物を酢酸エチルで希釈し、ＮａＨＣＯ３希薄水溶液、１Ｎ  ＨＣｌ、水、及び食塩水で洗浄した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮した。前記未精製アミドをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３：１  ヘキサン／酢酸エチル）で精製することにより、無色の油として１８が０．３０ｇ（８３％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．３３〜７．２６（ｍ，２Ｈ）；７．１２（ｔ，２Ｈ）；６．９９（ｔ，１Ｈ）；６．８９〜６．７７（ｍ，４Ｈ）；５．２８〜５．２４（ｍ，１Ｈ）；５．００〜４．９８（ｍ，１Ｈ）；４．３９〜４．３６（ｍ，１Ｈ）；４．２２〜４．１７（ｍ，２Ｈ）；４．０２〜３．９４（ｍ，２Ｈ）；３．７２（ｄｄ，１Ｈ）；２．６１（ｑ，２Ｈ）；２．３０〜２．２４（ｍ，１Ｈ）；２．１４〜２．０７（，１Ｈ）；１．９８〜１．８９（ｍ，１Ｈ）；１．８２〜１．７４（ｍ，４Ｈ）；１．４４（ｓ，９Ｈ）；１．１８〜１．１３（ｍ，３Ｈ）；０．９９〜０．９３（ｍ，６Ｈ）ｐｐｍ。
【０２４０】
Ｅ．２Ｓ−アミノ−１−｛２Ｓ−［３−（２−エチル−フェノキシ）−プロピル］−４Ｓ−フェノキシ−ピロリジン−１−イル｝−３−メチル−ブタン−１−オン（１９）：１８（０．３０ｇ，０．５７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を周囲温度で加えた。１時間後、前記溶液を濃縮乾固し、この未精製生成物を酢酸エチルに溶解した。有機相をＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮することにより、無色の油として１９が０．２３ｇ得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．３３〜７．２８（ｍ，２Ｈ）；７．１７〜７．１２（ｍ，２Ｈ）；６．９９（ｔ，１Ｈ）；６．８９〜６．８３（ｍ，３Ｈ）；６．７８（ｄ，１Ｈ）；４．９８（ｂｒ，２Ｈ）；４．３９（ｂｒ，１Ｈ），４．０７〜３．９２（ｍ，４Ｈ）；３．７５〜３．６７（ｍ，１Ｈ）；２．６１（ｑ，２Ｈ）；２．３１〜２．２４（ｍ，２Ｈ）；２．１３〜２．０８（ｍ，２Ｈ）；１．９４〜１．７５（ｍ，６Ｈ）；１．１６（ｔ，３Ｈ）；１．０１〜０．８５（ｍ，６Ｈ）ｐｐｍ。
【０２４１】
Ｆ．［１Ｓ−（１Ｓ−｛２Ｓ−［３−（２−エチル−フェノキシ）−プロピル］−４Ｓ−フェノキシ−ピロリジン−１−カルボニル｝−２−メチル−プロピルカルバモイル）−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２０）：Ｎ−Ｂｏｃ−Ａｌａ（０．０７ｇ，０．３７ｍｍｏｌ）の無水ＮＭＰ（３ｍＬ）溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムＰＦ６（ＨＡＴＵ，０．１１ｇ，０．２７ｍｍｏｌ）を周囲温度で加えた。前記反応混合物にＮ−メチルモルホリン（０．０５ｍＬ）を加えた。１０分後、ＮＭＰ（１ｍＬ）中のアミン１９（０．０７８ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間後、前記反応混合物を酢酸エチルで希釈し、ＮａＨＣＯ３希薄水溶液、１Ｎ  ＨＣｌ、水、及び食塩水で洗浄した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮した。フラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１：１  ヘキサン／酢酸エチル）によって未精製アミドを精製することにより、無色の油として２０が０．０３８ｇ得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）７．３３〜７．２６（ｍ，２Ｈ）；７．１２（ｔ，２Ｈ）；６．９９（ｔ，１Ｈ）；６．８８〜６．７６（ｍ，４Ｈ）；５．０８〜５．００（ｍ，１Ｈ）；４．９８〜４．９６（ｍ，１Ｈ）；４．５２〜４．４７（ｍ，１Ｈ）；４．３７〜４．３４（ｍ，１Ｈ）；４．２１〜４．１６（ｍ，２Ｈ）；３．９８〜３．９２（ｍ，２Ｈ）；３．７５（ｄ，１Ｈ）；２．６１（ｑ，２Ｈ）；２．３２〜２．２２（ｍ，１Ｈ）；２．１４〜１．９９（ｍ，４Ｈ）；１．８６〜１．７７（ｍ，３Ｈ）；１．４４〜１．４１（ｍ，８Ｈ）；１．３６〜１．１３（ｍ，４Ｈ）；１．１６（ｔ，３Ｈ）；０．９６〜０．８８（ｍ，６Ｈ）ｐｐｍ。
【０２４２】
Ｇ．２Ｓ−アミノ−Ｎ−（１Ｓ−｛２Ｓ−［３−（２−エチル−フェノキシ）−プロピル］−４Ｓ−フェノキシ−ピロリジン−１−カルボニル｝−２−メチル−プロピル）−プロピオンアミド（２１）：２０（０．０３８ｇ，０．０６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）水溶液に、トリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を周囲温度で加えた。１時間後、前記溶液を濃縮乾固し、未精製生成物を濃縮乾固し、未精製生成物を酢酸エチルに溶解した。有機相をＮａＨＣＯ３及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮した。未精製アミンをジエチルエーテルに溶解した後、ＨＣｌ（ｇ）で処理した。未精製塩をジエチルエーテル及びヘキサンによって粉末化することにより、白色固体として２１が０．０２２ｇ得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．８７（ｂｒ，１Ｈ）；７．３３〜７．２５（ｍ，２Ｈ）；７．１２（ｔ，２Ｈ）；６．９６（ｔ，１Ｈ），６．８９〜６．７７（ｍ，４Ｈ）；４．９８〜４．９６（ｍ，１Ｈ）；４．４５（ｔ，１Ｈ）；４．３７〜４．２５（ｍ，２Ｈ）；４．００〜３．９４（ｍ，２Ｈ）；３．７７（ｄ，１Ｈ）；２．６１（ｑ，２Ｈ）；２．３２〜２．２１（ｍ，１Ｈ）；２．１４〜２．０４（ｍ，３Ｈ）；１．６１（ｂｒ，２Ｈ）；１．３５〜１．２５（ｍ，４Ｈ）；１．１６（ｔ，３Ｈ）；０．９７〜０．８９（ｍ，６Ｈ）ｐｐｍ。
【０２４３】
【化６２】
2008506712.tif 000042
【０２４４】
【表４】
2008506712.tif 000043
【実施例６】
【０２４５】
この実施例は表５のピロリジン誘導体について図示した。
【０２４６】
【化６３】
2008506712.tif 000044
【０２４７】
２Ｓ−アミノ−Ｎ−［１Ｓ−（２Ｓ−ベンゾフラン−３イルメチル−ピロリジン−１−カルボニル）−２−メチル−プロピル］−プロピオンアミド（２９）の調製
Ａ．トランス−２Ｓ−［３−（２−ヨード−フェノキシ）−プロペニル］−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２３）：アルコール２２（１０．４ｇ，０．０４ｍｏｌ）のＤＣＭ（３００ｍＬ）溶液に、２−ヨードフェノール（１２．１ｇ，０．０５ｍｏｌ）及びＰｈ３Ｐ（１４．４ｇ，０．０５ｍｏｌ）を加えた。周囲温度において、ＡＤＤＰ（１３．８ｇ，０．０５ｍｏｋ）を一度に加えた。１６時間後、白色沈殿物を濾過して除去し、ＤＣＭで洗浄した。浄化した濾液を１Ｍ  ＮａＯＨ、水、及び食塩水で連続的に洗浄した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した後、シリカゲルの短カラムによって濾過した。生成物をＤＣＭで溶出した後、１：１  ヘキサン／酢酸エチルで溶出すると、無色の油として２３が１５．５ｇ（７９％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．７６（ｄｄ，Ｊ＝７．６，１．１Ｈｚ，１Ｈ），７．２７（ａｐｐ  ｔ，Ｊ＝７．６，１．１Ｈｚ，１Ｈ），６．７８（ｄｄ，Ｊ＝７．６，１．１Ｈｚ，１Ｈ），６．７０（ａｐｐ  ｔ，Ｊ＝７．６，１．１Ｈｚ，１Ｈ），５．７４（ｍ，２Ｈ），４．５８（ａｐｐｄ，Ｊ＝４．７Ｈｚ，２Ｈ），４．３３（ｍ，１Ｈ），３．４０（ｍ，２Ｈ），２．０２〜１．７５（ｍ，４Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ）ｐｐｍ。
【０２４８】
Ｂ．２Ｓ−ベンゾフラン−３−イルメチル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２４）：２３（１５．５ｇ，３６．１ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（２５０ｍＬ）溶液に、ｎ−Ｂｕ４ＮＣｌ（１０．０ｇ，３６．１ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（５．０ｇ，３６．１ｍｍｏｌ）、ＮａＨＣＯ３（２．４５ｇ，３６．１ｍｍｏｌ）、及びＰｄ（ＯＡｃ）２（０．１６ｇ，０．７２ｍｍｏｌ）を加えた。橙褐色の前記反応混合物をあらかじめ加熱しておいた（１００℃）オイルバスに浸した。２時間後、前記反応混合物を周囲温度にまで冷却した後、ジエチルエーテル及び水で希釈した。前記相を分離し、水相をジエチルエーテルで２回抽出した。一緒に集めた有機抽出物を水及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４により乾燥し、濾過して濃縮した。未精製ベンゾフランをフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（４：１  ヘキサン／酢酸エチル）、及びその後順相ＨＰＬＣ（３０％  酢酸エチル／ヘキサン）を用いて精製することにより、無色の油として２４が４．６ｇ（４２％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．６２（ｍ，１Ｈ），７．４６（ｍ，１Ｈ），７．２６（ｍ，３Ｈ），４．１３（ｍ，１Ｈ），３．４０〜３．２１（ｍ，２Ｈ），３．１５（ｍ，１Ｈ），２．６８（ｍ，１Ｈ），１．８０〜１．６１（ｍ，４Ｈ），１．５１（ｓ，９Ｈ）ｐｐｍ。
【０２４９】
Ｃ．２Ｓ−ベンゾフラン−３−イルメチル−ピロリジン（２５）：２４（０．５ｇ，１．６５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４０ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を０℃で加えた。２時間後、更にＴＦＡ（２ｍＬ）を加えた。１時間後、前記反応物にＮａＨＣＯ３水溶液を注意深く加えることによりクエンチした。前記反応混合物を水で希釈し、未精製反応物をジエチルエーテルで抽出した。有機抽出物をＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過して濃縮した。未精製アミンを逆相ＨＰＬＣ（Ｃ１８；１０〜１００％  ＡＣＮ／水，０．１％ＴＦＡ）で精製し、その後中和することにより、無色の油として２５が０．２４ｇ（７２％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．５３（ａｐｐ  ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２７（ｄｄ，Ｊ＝７．０，８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２１（ｄｄ，Ｊ＝７．０，８．７Ｈｚ，１Ｈ），６．９６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），３．５９（ｍ，１Ｈ），３．１６〜２．８６（ｍ，４Ｈ），１．９６〜１．７５（ｍ，３Ｈ），１．６０（ｍ，１Ｈ）ｐｐｍ。
【０２５０】
Ｄ．［１Ｓ−（２Ｓ−ベンゾフラン−３−イルメチル−ピロリジン−１−カルボニル）−２−メチル−プロピル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２６）：Ｎ−Ｂｏｃ  Ｌ−バリン（１２１ｍｇ，０．５６ｍｍｏｌ）のＮＭＰ（３ｍＬ）溶液を室温でＨＡＴＵ（１８２ｍｇ，０．４８ｍｍｏｌ）に引き続き、Ｎ−メチルモルホリン（０．１ｍＬ，０．９ｍｍｏｌ）で処理した。１０分後、ＮＭＰ（５ｍＬ）中のアミン２５（８０ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。１６時間後、前記反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３、１Ｎ  ＨＣｌ、及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過して濃縮した。残渣の油をＨＰＬＣ（２０％  酢酸エチル／ヘキサン）で精製することにより、無色の油として２６が１１１ｍｇ（６９％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．８７（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），７．４８〜７．３２（ｍ，２Ｈ），７．３０〜７．２４（ｍ，４Ｈ），５．３５（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ），４．５３〜４．４７（ｍ，１Ｈ），４．３１（ｄｄ，Ｊ＝６．６．９．６Ｈｚ，１Ｈ），３．７２〜３．５６（ｍ，２Ｈ），３．３１（ｄｄ，Ｊ＝３．０，１３．２Ｈｚ，１Ｈ），２．４９（ｄｄ，Ｊ＝１０．５，１３．５Ｈｚ，１Ｈ），２．０５〜１．７４（ｍ，６Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ），１．０３（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ），０９７（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０２５１】
Ｅ．２Ｓ−アミノ−１−（２Ｓ−ベンゾフラン−３−イルメチル−ピロリジン−１−イル）−３−メチル−ブタン−１−オン（２７）：カルバミン酸エステル２６（０．２８ｍｍｏｌ，１１１ｍｇ）のＤＣＭ（１０ｍｌ）溶液を室温でＴＦＡ（１ｍＬ）により処理した。２時間後、前記反応混合物を濃縮し、酢酸エチルで希釈し、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過して濃縮することにより、淡黄色の油として２７が６７ｍｇ（８０％）得られた。前記生成物は更なる精製をせずに使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．８９（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），７．４７〜７．４４（ｍ，２Ｈ），７．３２〜７．２７（ｍ，３Ｈ），４．５４〜４．４９（ｍ，１Ｈ），３．５９〜３．５３（ｍ，２Ｈ），３．３３（ｄ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ，１Ｈ），２．５０（ｄｄ，Ｊ＝１０．８，１３．５Ｈｚ，１Ｈ），２．０３〜１．７２（ｍ，６Ｈ），１．０４（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），０．９９（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０２５２】
Ｆ．｛１Ｓ−［１Ｓ−（２Ｓ−ベンゾフラン−３−イルメチル−ピロリジン−１−カルボニル）−２−メチル−プロピルカルバモイル］−エチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２８）：Ｎ−Ｂｏｃ  Ｌ−アラニン（４６ｍｇ，０．２４ｍｍｏｌ）のＮＭＰ（３ｍＬ）溶液を、室温において、ＨＡＴＵ（７２ｍｇ，０．１９ｍｍｏｌ）で処理した後、Ｎ−メチルモルホリン（０．１ｍＬ，０．９ｍｍｏｌ）で処理した。１０分後、ＮＭＰ（５ｍＬ）中のアミン２７（４１ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。１６時間後、前記反応物を酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３、１Ｍ  ＨＣｌ、及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過して濃縮した。残渣の油をフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：１  ヘキサン／酢酸エチル）で精製することにより、無色の油として２８が６２ｍｇ（９３％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．８５（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），７．４８〜７．４４（ｍ，２Ｈ），７．３３〜７．２５（ｍ，３Ｈ），６．９３（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），５．０８（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），４．６２（ｄｄ，Ｊ＝６．３，８．７Ｈｚ，１Ｈ），４．５０〜４．４３（ｍ，１Ｈ），４．２３〜４．１６（ｍ，１Ｈ），３．７４〜３．５５（ｍ，３Ｈ），３．３２（ｄｄ，Ｊ＝２．４，１４．１Ｈｚ，１Ｈ），２．４９（ｄｄ，Ｊ＝１０．８，１３．５Ｈｚ，１Ｈ），２．１４〜１．７１（ｍ，６Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），１．３７（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ），１．０２（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ），０．９７（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０２５３】
Ｇ．２Ｓ−アミノ−Ｎ−［１Ｓ−（２Ｓ−ベンゾフラン−３−イルメチル−ピロリジン−１−カルボニル）−２−メチル−プロピル］−プロピオンアミド（２９）：カルバミン酸エステル２８（６２ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液を室温においてＴＦＡ（１ｍＬ）で処理した。１．５時間後、前記反応物を濃縮し、酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（５％  ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製することにより、無色の油として２９が３８ｍｇ（７２％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．９２（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ），７．８７〜７．８４（ｍ，１Ｈ），７．４８〜７．４４（ｍ，２Ｈ），７．３２〜７．２３（ｍ，２Ｈ），４．５９（ｄｄ，Ｊ＝６．９，９．３Ｈｚ，１Ｈ），４．５２〜４．４５（ｍ，１Ｈ），３．８４〜３．７６（ｍ，１Ｈ），３．６７〜３．６０（ｍ，１Ｈ），３．５７〜３．５０（ｍ，１Ｈ），３．３４（ｄｄ，Ｊ＝３．０，１３．０Ｈｚ，１Ｈ），２．５０（ｄｄ，Ｊ＝１０．５，１３．８Ｈｚ，１Ｈ），２．１６〜１．９１（ｍ，３Ｈ），１．８２〜１．６９（ｍ，２Ｈ），１．６５（ｂｓ，２Ｈ），１．３８（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），１．０３（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ），０．９９（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。前記遊離アミン（２９）をジエチルエーテルで希釈し、ＨＣｌ（ｇ）で処理しすることにより、白色固体が形成された。前記溶液を濃縮し、前記固体をジエチルエーテル及びヘキサンで粉末化することにより、２９−ＨＣｌが得られた。
【０２５４】
【化６４】
2008506712.tif 000045
【０２５５】
【表５−１】
2008506712.tif 000046
【０２５６】
【表５−２】
2008506712.tif 000047
【実施例７】
【０２５７】
この実施例は表６のピロリジン誘導体について図示した。
【０２５８】
【化６５】
2008506712.tif 000048
【０２５９】
２−アミノ−Ｎ−｛１−［２−（５−ヒドロキシ−ベンゾフラン−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−プロピオンアミド（３２）の調整。
【０２６０】
Ａ．（１−｛１−［２−（５−ヒドロキシ−ベンゾフラン−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピルカルバモイル｝−エチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３１）：酢酸エチル（２５ｍＬ）中の３０（０．５２ｇ，０．９０ｍｍｏｌ）及び１０％のパラジウム炭素（０．０５ｇ）の混合物をＰａｒｒ装置に設置し、４５ＰＳＩ  Ｈ２雰囲気に加圧した。前記反応混合物を２４時間振とうした。ＴＬＣ分析によって消費されていない出発物質のみが見られたため、前記触媒を濾過して除去し、浄化した濾液を濃縮乾固した。残渣を酢酸エチル（２５ｍＬ）に再溶解させ、１０％パラジウム炭素（０．２０８ｇ）を加えた。反応混合物をＨ２雰囲気下（４５ＰＳＩ）４時間振とうし、この時点で２度目のパラジウム触媒（０．０５ｇ）を加えた。前記出発物質が全て消費されるまで（〜２時間）水素化を続けた。前記触媒を濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮した。フラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン，１：１）で未精製生成物を精製することにより、白色固体として３１が０．３７ｇ（８４％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．３７（ｓ，１Ｈ）；７．３３〜７．３１（ｍ，１Ｈ）；７．２８〜７．２６（ｍ，１Ｈ），６．８８〜６．８５（ｍ，２Ｈ）；５．１８（ｂｒ，１Ｈ）；４．５６（ｔ，１Ｈ）；４．４５〜４．２４（ｍ，３Ｈ）；３．８２〜３．７４（ｍ，１Ｈ）；３．６６〜３．５８（ｍ，１Ｈ）；３．２２（ｄ，１Ｈ）；２．４４〜２．３６（ｍ，１Ｈ）；２．１２〜２．０９（ｍ，１Ｈ）；２．０３〜１．８９（ｍ，２Ｈ）；１．７３〜１．６７（ｍ，２Ｈ）；１．４５（ｓ，９Ｈ）；１．３７（ｄ，３Ｈ）；１．０２〜０．９７（ｍ，６Ｈ）ｐｐｍ。
【０２６１】
Ｂ．２−アミノ−Ｎ−｛１−［２−（５−ヒドロキシ−ベンゾフラン−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−プロピオンアミド（３２）：３１（０．０４ｇ，０．０８２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液に室温でＴＦＡ（１ｍＬ）を加えた。１時間後、減圧下で前記溶媒を除去した。残渣を酢酸エチルに溶解させ、ＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過して濃縮した。この未精製生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０％  ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）で精製することにより、白色固体として３２が０．０１１ｇ（３７％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ８．５４（ｄ，１Ｈ）；７．３７（ｓ，１Ｈ）；７．３１（ｄ，１Ｈ）；７．０９（ｄ，１Ｈ）；６．８３（ｄｄ，１Ｈ）；４．６４（ｔ，１Ｈ）；４．５６〜４．５１（ｍ，１Ｈ）；４．０９〜３．９３（ｍ，２Ｈ）；３．７３〜３．６５（ｍ，１Ｈ）；３．３６（ｄｄ，１Ｈ）；２．３５（ｔ，１Ｈ）；２．１９〜１．９４（ｍ，３Ｈ）；１．７７〜１．６９（ｍ，２Ｈ）；１．３３（ｄ，２Ｈ）；１．２５〜１．１９（ｍ，１Ｈ）；１．０４〜１．００（ｍ，５Ｈ）；０．９４（ｔ，１Ｈ）ｐｐｍ。
【０２６２】
【化６６】
2008506712.tif 000049
【０２６３】
【表６】
2008506712.tif 000050
【実施例８】
【０２６４】
この実施例は表７のピロリジン誘導体について図示した。
【０２６５】
【化６７】
2008506712.tif 000051
【０２６６】
２−アミノ−Ｎ−｛１−［２−（５−メトキシ−ベンゾフラン−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−プロピオンアミド（３４）の調製。
【０２６７】
Ａ．（１−｛１−［２−（５−メトキシ−ベンゾフラン−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピルカルバモイル｝−エチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３３）：３２（０．０６ｇ，０．１２ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（３ｍＬ）溶液にＭｅＯＨ（１０μＬ）、Ｐｈ３Ｐ（０．０３６ｇ，０．１３ｍｍｏｌ）、及びＡＤＤＰ（０．０３７ｇ，０．１４ｍｍｏｌ）を加えた。前記反応混合物を周囲温度で１６時間維持し、この時点のＴＬＣ分析により反応が不完全であることが示された。２度目のＭｅＯＨ（１００μＬ）、Ｐｈ３Ｐ（０．０３６ｇ，０．１３ｍｍｏｌ）、及びＡＤＤＰ（０．０３７ｇ，０．１４ｍｍｏｌ）を加え、この反応混合物を５時間周囲温度で維持した。前記反応混合物をＤＣＭで希釈し、１Ｎ  ＮａＯＨで２回洗浄した後、食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、濾過して濃縮した。この未精製生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン，２：１）で精製することにより、白色固体として３３が０．０５７ｇ（９１％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．４１（ｓ，１Ｈ）；７．３８〜７．３３（ｍ，１Ｈ）；７．３０〜７．２８（ｍ，１Ｈ）；６．９０（ｄｄ，１Ｈ）；６．７７（ｄ，１Ｈ）；４．９８（ｂｒ，１Ｈ）；４．６４〜４．５９（ｍ，１Ｈ）；４．４８〜４．４３（ｍ，１Ｈ）；４．２１〜４．１４（ｍ，１Ｈ）；３．８８（ｓ，３Ｈ）；３．７２〜３．５３（ｍ，２Ｈ）；３，３０〜３．２５（ｍ，１Ｈ）；２．５１〜２．４３（ｍ，１Ｈ）；２．１３〜１．７２（ｍ，５Ｈ）；１．４５（ｓ，９Ｈ）；１．３７（ｄ，３Ｈ）；１．０３〜０．９５（ｍ，６Ｈ）ｐｐｍ。
【０２６８】
Ｂ．２−アミノ−Ｎ−｛１−［２−（５−メトキシ−ベンゾフラン−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−プロピオンアミド（３４）：３３（０．０５７ｇ，０．１１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液に、周囲温度でＴＦＡ（１ｍＬ）を加えた。１時間後、前記溶媒を減圧下で除去した。残渣を酢酸エチルに溶解させ、ＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、濾過して濃縮した。この未精製生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（１０％  ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）で精製することにより、白色固体として３４が０．０１５ｇ（３５％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．４２（ｍ，１Ｈ）；７．３５（ｄ，１Ｈ）；  ７．２８（ｍ，１Ｈ）；６．９０（ｄｄ，１Ｈ）；４．６０（ｍ，１Ｈ）；４．４８〜４．４５（ｍ，１Ｈ）；３．８９〜３．７６（ｍ，４Ｈ）；３．６５〜３．５６（ｍ，２Ｈ）；３．３１（ｄｄ，１Ｈ）；２．５２〜２．４４（ｍ，１Ｈ）；２．１３〜１．７２（ｍ，６Ｈ）；１．４３〜１．２７（ｍ，５Ｈ）；１．０５〜０．９７（ｍ，６Ｈ）ｐｐｍ。
【０２６９】
【化６８】
2008506712.tif 000052
【０２７０】
【表７】
2008506712.tif 000053
【実施例９】
【０２７１】
この実施例において、表８のピロリジン誘導体を図示した。
【０２７２】
【化６９】
2008506712.tif 000054
【０２７３】
２−アミノ−Ｎ−｛２−メチル−１−［２−（５−ピリジン−２−イル−ベンゾフラン−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−プロピル｝−プロピオンアミド（３７）の調製。
【０２７４】
Ａ．トリフルオロ−メタンスルホン酸  ３−｛１−［２−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロピオニルアミノ）−３−メチル−ブチリル］−ピロリジン−２−イルメチル｝−ベンゾフラン−５−イルエステル（３５）：３２（０．１６ｇ，０．３２ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（６０μＬ，０．３２ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（４ｍＬ）溶液に、Ｎ−フェニル−ビス（トリフルオロメタンスルホンイミド）（０．１４ｇ，０．３８ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。１０分後、前記反応混合物を周囲温度まで温めた後、１６時間そのまま維持した。前記反応混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶解させ、水及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮した。この未精製生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン  １：１）で精製することにより、白色固体として３５が１２６ｍｇ（６３％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．７３（ｄ，１Ｈ）；７．５５〜７．４８（ｍ，２Ｈ）；７．２０（ｄｄ，１Ｈ）；６．７８〜６．７５（ｍ，１Ｈ）；４．９９（ｂｒ，１Ｈ）；４．６３〜４．５８（ｍ，１Ｈ）；４．４１〜４．３５（ｍ，１Ｈ）；４．１９（ｍ，１Ｈ）；３．７５〜３．６８（ｍ，１Ｈ）；３．６４〜３．５７（ｍ，１Ｈ）；３．２９（ｄｄ，１Ｈ）；２．５４〜２．４６（ｍ，１Ｈ）；１．９９〜１．８４（ｍ，３Ｈ）；１．７１〜１．６６（ｍ，２Ｈ）；１．４５（ｓ，９Ｈ）；１．３７（ｄ，３Ｈ）；１．０２〜０．９４（ｍ，６Ｈ）ｐｐｍ。
【０２７５】
Ｂ．（１−｛２−メチル−１−［２−（５−ピリジン−３−イル−ベンゾフラン−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−プロピルカルバモイル｝−エチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３６）：無水トルエン（５ｍＬ）中、３５（０．０６３ｇ，０．１０ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（７０ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）、３−ピリジンボロン酸（０．０１５ｇ，０．１２ｍｍｏｌ）、及び（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（５ｍｇ，３ｍｏｌ％）の混合物を密閉管中１００℃で１時間加熱した。前記反応混合物を室温にまで冷却し、酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮した。この未精製生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル）で精製することにより、油として３６が４０ｍｇ（７２％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ８．９４（ｄ，１Ｈ）；８．５９（ｄ，１Ｈ）；８．０１〜７．９５（ｍ，１Ｈ）；７．７４〜７．６４（ｍ，１Ｈ）；７．５８〜７．３７（ｍ，４Ｈ）；６．９４（ｄ，１Ｈ）；４．６１（ｔ，１Ｈ）；４．５０〜４．４７（ｍ，１Ｈ）；４．３０（ｔ，  １Ｈ）；４．２１（ｂｒ，１Ｈ）；３．７９〜３．７１（ｍ，１Ｈ）；３．６６〜３．５９（ｍ，１Ｈ）；２．４２〜３．３６（ｍ，１Ｈ）；２．５８〜２．５０（ｍ，１Ｈ）；２．１３〜２．０９（ｍ，１Ｈ）；２．０１〜１．７１（ｍ，４Ｈ）；１．４５（ｍ，９Ｈ）；１．３７（ｄ，３Ｈ）；１．０３〜０．９４（ｍ，６Ｈ）ｐｐｍ。
【０２７６】
Ｃ．２−アミノ−Ｎ−｛２−メチル−１−［２−（５−ピロリジン−２−イル−ベンゾフラン−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−プロピル｝−プロピオンアミド（３７）：ＤＣＭ（５ｍＬ）中の３６（０．０４ｇ，０．０７ｍｍｏｌ）溶液に周囲温度でＴＦＡ（１ｍＬ）を加えた。１時間後、前記溶媒を減圧下で除去した。残渣を酢酸エチルに溶解させ、ＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮した。前記未精製生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０％  ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）で精製することにより、白色固体として３７が０．０２４ｇ（７６％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ８．０（ｓ，１Ｈ）；７．９５（ｄ，１Ｈ）；７．７１〜７．６４（ｍ，２Ｈ）；７．５６〜７．４６（ｍ，４Ｈ）；４．６１〜４．４８（ｍ，２Ｈ）；４．２９（ｔ，１Ｈ）；３．８３〜３．７７（ｍ，１Ｈ）；３．６７〜３．５４（ｍ，２Ｈ）；３．４１（ｄｄ，１Ｈ）；２．５８〜２．４９（ｍ，１Ｈ）；２．１３〜１．７０（ｍ，５Ｈ）；１．４０〜１．２５（ｍ，５Ｈ）；１．０４〜０．８４（ｍ６Ｈ）ｐｐｍ。
【０２７７】
【化７０】
2008506712.tif 000055
【０２７８】
【表８】
2008506712.tif 000056
【実施例１０】
【０２７９】
この実施例において表９のピロリジン誘導体を図示した。
【０２８０】
【化７１】
2008506712.tif 000057
【０２８１】
２Ｓ−アミノ−Ｎ−｛２−メチル−１Ｓ−［２Ｓ−（２−ピリジン−４−イル−ベンゾフラン−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−プロピル｝−プロピオンアミド（４４）の調製。
【０２８２】
Ａ．２Ｓ−（２−ブロモ−ベンゾフラン−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３８）：２２（１．４ｇ，４．７ｍｍｏｌ）のＣＨＣｌ３（２０ｍＬ）溶液を０℃に冷却し、酢酸カリウム（２．５ｇ，２６ｍｍｏｌ）で処理した。臭素（０．３ｍＬ，５．８ｍｍｏｌ）のＣＨＣｌ３（１０ｍＬ）溶液を３０分かけて滴下して加えた。添加後、前記溶液は黄橙色を維持していた。ＴＬＣにより出発物質の消費が示された後、前記反応混合物をＨ２Ｏで希釈し、飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ８で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、濾過して濃縮した。前記残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３：１  ヘキサン／酢酸エチル）により精製することにより、黄色の油として３８が１．１ｇ（６１％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．５７〜７．５２（ｍ，１Ｈ），７．４３〜７．４１（ｍ，１Ｈ），７．２６〜７．２０（ｍ，２Ｈ），４．２０（ｍ，１Ｈ），３．４３〜３．３０（ｍ，２Ｈ），３．１７〜３．０１（ｍ，１Ｈ），２．７３〜２．５８（ｍ，１Ｈ），１．８９〜１．６９（ｍ，４Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ）ｐｐｍ。
【０２８３】
Ｂ．２Ｓ−（２−ブロモ−ベンゾフラン−３−イルメチル）−ピロリジン（３９）：３８（１．１ｇ，２．９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）溶液を室温においてＴＦＡ（ｍＬ）で処理した。１．５時間後、前記反応混合物を濃縮し、酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、濾過して濃縮することにより、橙色の油として３９が０．８ｇ得られ、これは更なる精製をせずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ８．８４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．４２〜７．３９（ｍ，２Ｈ），７．２８〜７．２１（ｍ，２Ｈ），３．７０〜３．６６（ｍ，１Ｈ），３．４８〜３．３９（ｍ，１Ｈ），３．３１〜３．２１（ｍ，２Ｈ）２，９５（ｄｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，１３．５Ｈｚ，１Ｈ），２．０６〜１．９９（ｍ，１Ｈ），１．９１〜１．７９（ｍ，２Ｈ），１．７４〜１．６６（ｍ，１Ｈ）ｐｐｍ。
【０２８４】
Ｃ．｛１Ｓ−［２Ｓ−（２−ブロモ−ベンゾフラン−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４０）：室温において、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−バリン（６５６ｍｇ，３．０ｍｍｏｌ）のＮＭＰ（６ｍＬ）溶液をＨＡＴＵ（１．２ｇ，３．１ｍｍｏｌ）で処理した後、Ｎ−メチルモルホリン（０．４ｍＬ，３．６ｍｍｏｌ）で処理した。１０分後、ＮＭＰ（６ｍＬ）中の未精製３９（０．８ｇ，２．９ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。１６時間後、前記反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、濾過して濃縮した。残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３：１  ヘキサン／酢酸エチル）で精製することにより、黄色の泡状物質として４０が８５３ｍｇ（６１％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．８９−７．８６（ｍ，１Ｈ），７．４２〜７．３８（ｍ，１Ｈ），７．２９〜７．２５（ｍ，３Ｈ），５．３５（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ），４．５５〜４．５１（ｍ，１Ｈ），４．２９（ｄｄ，Ｊ＝６．０，９．６Ｈｚ，１Ｈ），３．７１〜３．６６（ｍ，１Ｈ），３．２７（ｄｄ，Ｊ＝３．３，１３．５Ｈｚ，１Ｈ），２．４５（ｄｄ，Ｊ＝１０．８，１３．５Ｈｚ，１Ｈ），２．１５〜１．９２（ｍ，３Ｈ），１．７９〜１．７４（ｍ，２Ｈ），１．４２（ｓ，９Ｈ），１．０３（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ），０．９６（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０２８５】
Ｄ．２Ｓ−アミノ−１−［２Ｓ−（２−ブロモ−ベンゾフラン−３−イルメチル）−ピロリジン−１−イル］−３−メチル−ブタン−１−オン（４１）：カルバミン酸エステル４０（８５３ｍｇ，１．８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）溶液を室温においてＴＦＡ（２ｍＬ）で処理した。１．５時間後、前記反応混合物を濃縮し、酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮することにより、黄色の泡状物質として４１が０．６６ｇ得られ、これは更なる精製をせずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．９２〜７．８９（ｍ，１Ｈ），７．４４〜７．３９（ｍ，１Ｈ），７．３０〜７．２５（ｍ，３Ｈ），４．５５（ｍ，１Ｈ），３．６６〜３．５１（ｍ，２Ｈ），３．２９（ｄｄ，Ｊ＝２．４，１３．５Ｈｚ，１Ｈ），２．４５（ｄｄ，Ｊ＝１１．１，１２．９Ｈｚ，１Ｈ），２．１５〜１．９７（ｍ，２Ｈ），１．７８〜１．７１（ｍ，２Ｈ），１．０６（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ），１．０１（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０２８６】
Ｅ．（１Ｓ−｛１Ｓ−［２Ｓ−（２−ブロモ−ベンゾフラン−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピルカルバモイル｝−エチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４２）：室温において、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−アラニン（３９４ｍｇ，２．１ｍｍｏｌ）のＮＭＰ（６ｍＬ）溶液をＨＡＴＵ（７６３ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ）で処理した後、Ｎ−メチルモルホリン（０．３ｍＬ，２．７ｍｍｏｌ）で処理した。１０分後、ＮＭＰ（６ｍＬ）中の未精製４１（０．６６ｍｇ，１．７ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。１６時間後、前記反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３、１Ｍ  ＨＣｌ、及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、濾過して濃縮した。前記残渣の油をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（２：１  ヘキサン／酢酸エチル−１：１ヘキサン／酢酸エチル）で精製することにより、オフホワイト色の泡状物質として４
２が０．９ｇ（９６％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．８６〜７．８４（ｍ，１Ｈ），７．４３〜７．４０（ｍ，１Ｈ），７．２９〜７．２５（ｍ，２Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），５．１０（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），４．６２（ｄｄ，Ｊ＝６．３，８．７Ｈｚ，１Ｈ），４．５３〜４．４８（ｍ，１Ｈ），４．２３〜４．１９（ｍ，１Ｈ），３．７５〜３．６６（ｍ，２Ｈ），３．２７（ｄｄ，Ｊ＝３．３，１３．５Ｈｚ，１Ｈ），２．４５（ｄｄ，Ｊ＝１０．５，１３．５Ｈｚ，１Ｈ），２．１６〜２．０８（ｍ，２Ｈ），２．０２〜１．９７（ｍ，２Ｈ），１．７９〜１．７３（ｍ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ），１．３６（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ），１．０２（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ），０．９７（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０２８７】
Ｆ．（１Ｓ−｛２−メチル−１Ｓ−［２Ｓ−（２−ピリジン−４−イル−ベンゾフラン−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−プロピルカルバモイル｝−エチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４３）：４２（３６ｍｇ，０．０７ｍｍｏｌ）のトルエン（４ｍＬ）溶液をＫ２ＣＯ３（３８ｍｇ，０．２８ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＰＰｈ３）４（２ｍｇ）で処理した後、エタノール（２ｍＬ）中の４−ピリジンボロン酸（１２ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）で処理した。前記反応物を一晩加熱還流した。前記溶液を室温まで冷却し、Ｈ２Ｏで希釈し、酢酸エチル及び食塩水で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮することにより、淡黄色の油として４３が４４ｍｇ得られ、これは更なる精製をせずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ８．７４（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ），７．８６〜７．８１（ｍ，１Ｈ），７．７１〜７．６４（ｍ，１Ｈ），７．５６〜７．４６（ｍ，３Ｈ），７．４１〜７．２７（ｍ，２Ｈ），６．８７（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），５．０１（ｍ，１Ｈ），４．６２（ａｐｐ  ｔ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），４．５６〜４．４６（ｍ，１Ｈ），４．２０（ｍ，１Ｈ），３．７２〜３．６７（ｍ，２Ｈ），２．８４（ｄｄ，Ｊ＝１１．７，１３．５Ｈｚ，１Ｈ），２．１６〜１．９３（ｍ，２Ｈ），１．７８〜１．６２（ｍ，２Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），１．３７（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），１．０４（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ），０．９８（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０２８８】
Ｇ．２Ｓ−アミノ−Ｎ−｛２−メチル−１Ｓ−［２−（２Ｓ−ピリジン−４−イル−ベンゾフラン−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−プロピル｝−プロピオンアミド（４４）：４３（４４ｍｇ，０．０８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液を室温においてＴＦＡ（１ｍＬ）で処理した。１．５時間後、前記反応混合物を濃縮し、酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、濾過して濃縮した。残渣を逆相ＨＰＬＣ（Ｃ１８；０．１％ＡｃＯＨ緩衝液含有１０〜１００％  ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ）により精製した。純粋な生成物を含む画分を凍結乾燥することにより、白色固体として４４が２１ｍｇ得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ８．７５（ｂｓ，１Ｈ），８．００（ｍ，１Ｈ），７．９０〜７．８２（ｍ，１Ｈ），７．７１〜７．６４（ｍ，１Ｈ），７．５５〜７．４７（ｍ，３Ｈ），７．３８〜７．２７（ｍ，２Ｈ），４．６１〜４．５２（ｍ，１Ｈ），３．８３〜３．６２（ｍ，２Ｈ），３．０７〜３．００（ｍ，１Ｈ），２．８４（ｄｄ，Ｊ＝１１．１，１３．５Ｈｚ，１Ｈ），２．１６〜１．９４（ｍ，２Ｈ），１．７４〜１．６１（ｍ，２Ｈ），１．４１（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ），１．０５（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ），０．９９（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０２８９】
【化７２】
2008506712.tif 000058
【０２９０】
【表９】
2008506712.tif 000059
【実施例１１】
【０２９１】
この実施例において、表１０のピロリジン誘導体を図示した。
【０２９２】
【化７３】
2008506712.tif 000060
【０２９３】
３−（３−｛１−［２−（２−アミノ−プロピオニルアミノ）−３−メチル−ブチリル］−ピロリジン−２−イルメチル｝−ベンゾフラン−２−イル）−プロピオン酸エチルエステル（５２）の調製。
【０２９４】
Ａ．２−（２−ブロモ−ベンゾフラン−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル（４６）：４５（４．１ｇ，１２．２ｍｍｏｌ）のＣＨＣｌ３（７０ｍＬ）の冷却（０℃）溶液に酢酸カリウム（３．６ｇ，３６．７ｍｍｏｌ）を加えた後、ＣＨＣｌ３（３０ｍＬ）中のＢｒ２（２．３ｇ，１４．６）を２０分かけて滴下して加えた。３０分後、前記反応混合物を食塩水で希釈し、Ｎａ２Ｓ２Ｏ８で飽和させた。生成物をＤＣＭで抽出し、一緒にしたＤＣＭ抽出物を食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮することにより、橙色の油として４６が５ｇ（定量的）得られ、これは更なる精製をせずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．７５〜７．７２及び６．９８（回転異性体，ｍ及びａｐｐ  ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４４〜７．１０（ｍ，８Ｈ），５．２４〜５．１７（ｍ，２Ｈ），４．２８及び４．１７（回転異性体，２ｍ，１Ｈ），３．５４〜３．３８（ｍ，２Ｈ），３．２１及び３．００（回転異性体，２ｄｄ，Ｊ＝２．４，１３．５Ｈｚ，１Ｈ），２．７２〜２．５５（ｍ，１Ｈ），１．９７〜１．７５（ｍ，４Ｈ）ｐｐｍ。
【０２９５】
Ｂ．２−［２−（２−エトキシカルボニル−ビニル）−ベンゾフラン−３−イルメチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル（４７）：未精製４６（５．０ｇ，１２．１ｍｍｏｌ）、アクリル酸エチル（２．７ｇ，２７．７ｍｍｏｌ）、テトラブチル塩化アンモニウム（３．５ｇ，１２．６ｍｍｏｌ）、ＮａＨＣＯ３（２．０ｇ，２３．８ｍｍｏｌ）、及びＰｄ（ＯＡｃ）２（０．１０７ｇ，０．４６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（４０ｍＬ）中に含む溶液を１００℃で１６時間加熱した。周囲温度に冷却した後、前記反応混合物をジエチルエーテルで希釈し、水及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮した。前記未精製生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン  １：３）で精製することにより、橙色の油として４７が３．７ｇ（７０％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）７．８１及び６．９９（回転異性体，ａｐｐ  ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，ａｐｐ  ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．６１（ｄｄ，Ｊ＝１５．９，１８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．４７〜７．２０（ｍ，８Ｈ），６．５８（ｄｄ，Ｊ＝５．７，１５．６Ｈｚ，１Ｈ），５．２７〜５．１６（ｍ，２Ｈ），４．２４（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），４．１７〜４．０８（ｍ，１Ｈ），３．５１〜３．３５（ｍ，２Ｈ），３．３８及び３．１７（回転異性体，２ｄｄ，Ｊ＝３．６，１４．１Ｈｚ，１Ｈ），２．８９〜２．６９（ｍ，１Ｈ），１．９４〜１．６４（ｍ，４Ｈ），１．３６（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）ｐｐｍ。
【０２９６】
Ｃ．３−（３−ピロリジン−２−イルメチル−ベンゾフラン−２−イル）−プロピオン酸エチルエステル（４８）：無水ＭｅＯＨ（２０ＭＬ）中、４７（１．０ｇ，２．３ｍｍｏｌ）及び１０％パラジウム炭素（〜１ｇ）を含む混合物を水素雰囲気下（４５ＰＳＩ）、Ｐａｒｒ装置を用いて１時間振とうした。前記触媒を濾過して除去し、固体を酢酸エチル及びＭｅＯＨで洗浄した。浄化した濾液を濃縮することにより、橙色の油として４８が６３４ｍｇ（９１％）得られ、これは更なる精製をせずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．５１〜７．４９（ｍ，１Ｈ），７．３８〜７．３５（ｍ，１Ｈ），７．２１〜７．１７（ｍ，２Ｈ），４．１６〜４．０９（ｍ，２Ｈ），３．６８〜３．５９（ｍ，２Ｈ），３．１２〜３．０７（ｍ，２Ｈ），２．８８〜２．７３（ｍ，４Ｈ），１．８４〜１．６９（ｍ，４Ｈ），１．４３〜１．３９（ｍ，１Ｈ），１．２６〜１．２０（ｍ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０２９７】
Ｄ．３−｛３−［１−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−メチル−ブチリル）−ピロリジン−２−イルメチル］−ベンゾフラン−２−イル｝−プロピオン酸エチルエステル（４９）：周囲温度において、ＮＭＰ（３ｍＬ）中にＢｏｃ−Ｌ−バリンを含む溶液をＨＡＴＵ（５４３ｍｇ，１．４ｍｍｏｌ）で処理した後、ＮＭＭ（０．２ｍＬ，１．８ｍｍｏｌ）を加えた。１０分後、ＮＭＰ（５ｍＬ）中のアミン４８（０．４ｇ，１．３ｍｍｏｌ）滴下法で加えた。１６時間後、前記反応混合物をジエチルエーテルで希釈し、ＮａＨＣＯ３、１Ｍ  ＨＣｌ、水、及び食塩水で連続的に洗浄した。有機抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮することにより、４９が６３０ｍｇ（９６％）えられ、これは更なる精製をせずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．８２〜７．７９（ｍ，１Ｈ），７．３８〜７．３５（ｍ，１Ｈ），７．２８〜７．２１（ｍ，２Ｈ），５．３７（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ），４．５０〜４．４４（ｍ，１Ｈ），４．３１（ｄｄ，Ｊ＝６．０，９．０Ｈｚ，１Ｈ），４．１４（ｑ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），３．７２〜３．６０（ｍ，３Ｈ），３．３８（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），３．２９（ｄｄ，Ｊ＝３．０，１３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．１２（ａｐｐ  ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．８０〜２．７４（ｍ，４Ｈ），２．４６〜２．３５（ｍ，２Ｈ），２．１１〜１．９２（ｍ，２Ｈ），１．８１〜１．７３（ｍ，１Ｈ），１．６９〜１．６５（ｍ，１Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ），１．２５（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ），１．０３（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ），０．９６（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。マススペクトル：ｍ／ｚ５０１［Ｍ＋Ｈ］＋及び５２３［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０２９８】
Ｅ．３−｛３−［１−（２−アミノ−３−メチル−ブチリル）−ピロリジン−２−イルメチル］−ベンゾフラン−２−イル｝−プロピオン酸エチルエステル（５０）：４９（３０２ｍｇ，０．６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液にＴＦＡ（２ｍＬ）を周囲温度で加えた。２時間後、前記溶媒を減圧下で除去した。残渣を酢酸エチルに溶解し、ＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮することにより、橙色の油として５０が２３５ｍｇ（９７％））得られ、これは更なる精製をせずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．８６〜７．８３（ｍ，１Ｈ），７．４３〜７．３４（ｍ，１Ｈ），７．２７〜７．１９（ｍ，３Ｈ），４．４９（ｍ，１Ｈ），４．１４（ｑ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），３．６０〜３．５３（ｍ，２Ｈ），３．３２（ｄ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ，１Ｈ），３．１２（ａｐｐ  ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），２．８１〜２．７４（ｍ，２Ｈ），２．４２（ａｐｐ  ｔ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，１Ｈ），２．１０〜１．９１（ｍ，２Ｈ），１．７４〜１．６６（ｍ，２Ｈ），１．２４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），１．０６〜０．９９（ｍ，６Ｈ）ｐｐｍ。マススペクトル：ｍ／ｚ４０１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０２９９】
Ｆ．３−（３−｛１−［２−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−プロピオニルアミノ）−３−メチル−ブチリル］−ピロリジン−２−イルメチル｝−ベンゾフラン−２−イル）−プロピオン酸エチルエステル（５１）：周囲温度において、ＮＭＰ（３ｍＬ）中にＢｏｃ−Ｌ−アラニン（６９ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）を含む溶液をＨＡＴＵ（１３１ｍｇ，０．３４ｍｍｏｌ）で処理した後、ＮＭＭ（０．１ｍＬ，０．９ｍｍｏｌ）で処理した。１０分後、ＮＭＰ（５ｍＬ）中のアミン５０（１１１ｍｇ，０．２８ｍｍｏｌ）を滴下法で加えた。５時間後、前記反応混合物をジエチルエーテルで希釈し、ＮａＨＣＯ３、１Ｍ  ＨＣｌ、水、及び食塩水で連続的に洗浄した。有機抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮することにより、５１が１６０ｍｇ（定量的）得られ、これは更なる精製をせずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．８１〜７．７８（ｍ，１Ｈ），７．３８〜７．３６（ｍ，１Ｈ），７．２８〜７．２１（ｍ，３Ｈ），６．８６（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），５．０４（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），４．６１（ｄｄ，Ｊ＝６．３，８．７Ｈｚ，１Ｈ），４．４８〜４．４２（ｍ，１Ｈ），４．２２（ｍ，１Ｈ），４．１３（ｑ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），３．７３〜３．６２（ｍ，２Ｈ），３．４１〜３．３６（ｍ，２Ｈ），３．２８（ｄｄ，Ｊ＝３．０，１３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．１１（ａｐｐ  ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），２．８５〜２．７３（ｍ，４Ｈ），２．３８（ａｐｐ  ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），２．１３〜１．９８（ｍ，２Ｈ），１．８０〜１．６４（ｍ，１Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ），１．３７（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ），１．２６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），１．０３〜０．９５（ｍ，６Ｈ）ｐｐｍ。質量スペクトル：ｍ／ｚ５７２［Ｍ＋Ｈ］＋及び５９４［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０３００】
Ｇ．３−（３−｛１−［２−（２−アミノ−プロピオニルアミノ）−３−メチル−ブチリル］−ピロリジン−２−イルメチル｝−ベンゾフラン−２−イル）−プロピオン酸エチルエステル（５２）：５１（１６０ｍｇ，０．２８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（２ｍＬ）を周囲温度で加えた。２．５時間後、前記溶媒を減圧下で除去した。残渣を酢酸エチルに溶解し、更にＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、濾過して濃縮した。前記未精製物質の一部（〜５０％）を逆相ＨＰＬＣ（Ｃ１８，０．１％酢酸含有１０〜１００％  ＡＣＮ／水）で精製することにより、白色固体として５２が５６ｍｇ得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ，３００ＭＨｚ）δ８．０３（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），７．７７（ｍ，１Ｈ），７．４３〜７．４１（ｍ，１Ｈ），７．２１（ｍ，２Ｈ），４．３７（ａｐｐ  ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），４．１９（ｍ，１Ｈ），４．０１（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．６５（ｍ，１Ｈ），３．５６（ａｐｐ  ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），３．２８（ｍ，１Ｈ），３．０６〜３．０１（ｍ，３Ｈ），２．６８（ａｐｐ  ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），２．０７〜１．９６（ｍ，１Ｈ），１．６３（ｍ，１Ｈ），１．５４（ｍ，１Ｈ），１．１３〜１．０９（ｍ，６Ｈ），０．９０（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ），０．８５（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）  ｐｐｍ。質量スペクトル：ｍ／ｚ４７２［Ｍ＋Ｈ］＋及び４９４［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０３０１】
【化７４】
2008506712.tif 000061
【０３０２】
【表１０】
2008506712.tif 000062
【実施例１２】
【０３０３】
この実施例において、表１１及び表１２のピロリジン誘導体を図示した。
【０３０４】
【化７５】
2008506712.tif 000063
【０３０５】
オルニチン誘導体ラクタム（５９）の調製。
【０３０６】
Ａ．３−｛３−［１−（５−ベンジロキシカルボニルアミノ−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ペンタノイル）−ピロリジン−２−イルメチル］−ベンゾフラン−２−イル｝−プロピオン酸エチルエステル（５３）：ＮＭＰ（５ｍＬ）中にＢｏｃ−Ｌ−オルニチン（２．３ｇ，６．３ｍｍｏｌ）を含む溶液を、周囲温度においてＨＡＴＵ（２．４ｇ，６．３ｍｍｏｌ）を用いて処理した後、ＮＭＭ（１．５ｍＬ，１３．７ｍｍｏｌ）で処理した。１０分後、ＮＭＰ（１０ｍＬ）中のアミン４８（１．６ｇ，５．３ｍｍｏｌ）を滴下法により加えた。１６時間後、前記反応混合物をジエチルエーテルで希釈し、ＮａＨＣＯ３、１Ｍ  ＨＣｌ、水、食塩水で連続的に洗浄した。有機抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、濾過して濃縮することにより、橙色の油として５３が３．０ｇ（８７％）得られ、これは更なる精製をせずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．７８〜７．７５（ｍ，１Ｈ），７．４０〜７．２０（ｍ，８Ｈ），５．４８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．１０（ｓ，２Ｈ），４．４８〜４．４２（ｍ，１Ｈ），４．１７〜４．０９（ｍ，２Ｈ），３．６４〜３．５６（ｍ，１Ｈ），３．２７〜３．１９（ｍ，  １Ｈ），３．１２（ａｐｐ  ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），２．８１〜２．７４（ｍ，２Ｈ），２．５２〜２．３５（ｍ，１Ｈ），２．０９〜１．９５（ｍ，２Ｈ），１．８３〜１．６３（ｍ，４Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ），１．２９〜１．１９（ｍ，６Ｈ）ｐｐｍ。
【０３０７】
Ｂ．３−｛３−［１−（５−ベンジロキシカルボニルアミノ−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ペンタノイル）−ピロリジン−２−イルメチル］−ベンゾフラン−２−イル｝−プロピオン酸（５４）：ＴＨＦ（２０ｍＬ）中に未精製５３（３．０ｇ，４．６ｍｍｏｌ）を含む溶液を、周囲温度において、３Ｍ  ＮａＯＨ（８ｍＬ）で処理した。その後前記反応混合物を穏やかに還流するまで温め、２．５時間維持した。前記反応混合物を真空で濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶解した。有機溶液を１Ｎ  ＨＣｌで洗浄した後、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮することにより、オフホワイト色の泡状物質として５４が３ｇまで（〜３ｇ，定量的）の量で得られ、これは更なる精製をせずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．６９〜７．６７（ｍ，１Ｈ），７．３９〜７．２０（ｍ，８Ｈ），５．７０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．１３〜５．０９（ｍ，２Ｈ），４．５０〜４．４５（ｍ，１Ｈ），３．６７〜３．５４（ｍ，１Ｈ），３．２２〜３．１８（ｍ，２Ｈ），３．１３（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），２．８５〜２．７８（ｍ，２Ｈ），２．０９〜１．９７（ｍ，３Ｈ），１．７６〜１．６２（ｍ，４Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ）ｐｐｍ。
【０３０８】
Ｃ．３−｛３−［１−（５−アミノ−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ペンタノイル）−ピロリジン−２−イルメチル］−ベンゾフラン−２−イル｝−プロピオン酸（５５）：未精製５４（〜３ｇ，４．８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３０ｍＬ）溶液を１０％パラジウム炭素（〜１ｇ）で充填し、水素ガス（４５ＰＳＩ）雰囲気下に設置した。前記反応混合物をＰａｒｒ装置を用いて２時間振とうした。前記触媒をセライト濾過により除去し、浄化した濾液を真空下で濃縮した。この未精製残渣をＤＣＭ中に投入し、無水Ｎａ２ＳＯ４を用いて乾燥させ、濾過して濃縮することにより、泡状物質の残渣として５５が２．３ｇ（定量的）得られ、これは更なる精製をせずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．５１（ｍ，１Ｈ），７．３４〜７．３２（ｍ，１Ｈ），７．１８〜７．１５（ｍ，２Ｈ），６．１９（ｍ，１Ｈ），４．３６（ｍ，２Ｈ），３．６２〜３．４８（ｍ，２Ｈ），３．１０〜２．９９（ｍ，２Ｈ），２．８５〜１．８１（ｍ，２Ｈ），２．６６〜２．６０（ｍ，２Ｈ），１．９９〜１．７１（ｍ，６Ｈ），１．４１（ｓ，９Ｈ）ｐｐｍ。質量スペクトル：ｍ／ｚ４８８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３０９】
Ｄ．Ｂｏｃ保護Ｄｅｓ−アラニンオルニチン誘導体ラクタム（５６）：５５（２．３ｇ，４．７ｍｍｏｌ）を含む１：１のＮＭＰ／ＤＣＭ（３０ｍＬ）溶液を周囲温度においてＨＡＴＵ（２．１ｇ，５．５ｍｍｏｌ）及びＮＭＭ（０．６ｍＬ，５．５ｍｍｏｌ）で処理した。１８時間後、前記反応混合物をジエチルエーテルで希釈し、Ｎａ２ＳＯ４水溶液、ＨＣｌ希薄水溶液、水、及び食塩水で連続的に洗浄した後、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮することにより、オフホワイト色の泡状物質として５６が１．５ｇ（６８％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．７０〜７．６６（ｍ，１Ｈ），７．３３（ｍ，１Ｈ），７．１９〜７．１８（ｍ，２Ｈ），５．７０（ｍ，１Ｈ），４．４２（ｍ，１Ｈ），４．１０（ｍ，１Ｈ），３．５５（ｍ，３Ｈ），３．２４〜３．０９（ｍ，４Ｈ），２．６１〜２．４６（ｍ，２Ｈ），１．６３（ｍ，７Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ）ｐｐｍ。質量スペクトル：ｍ／ｚ４７０［Ｍ＋Ｈ］＋，４９２［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０３１０】
Ｅ．Ｄｅｓ−アラニンオルニチン誘導体ラクタム（５７）：未精製５６（１．５ｇ，３．１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）溶液にＴＦＡ（４ｍＬ）を周囲温度で加えた。２時間後、前記溶媒を減圧下で除去した。残渣を酢酸エチルに溶解させ、ＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄した。一緒にした水溶液を５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで逆抽出した。一緒にした有機抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮することにより、オフホワイト色の泡状物質として５７が０．８ｇ（６８％）得られ、これは次の反応に直接使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．４１〜７．３８（ｍ，１Ｈ），７．２７〜７．２０（ｍ，３Ｈ），５．９９（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ），４．３９〜４．３３（ｍ，１Ｈ），３．９６〜３．８４（ｍ，１Ｈ），３．７０〜３．６５（ｍ，２Ｈ），  ３．５５〜３．３８（ｍ，２Ｈ），３．２０〜３．０５（ｍ，２Ｈ），２．９０〜２．８３（ｍ，３Ｈ），２．７７〜２．７１（ｍ，２Ｈ），２．６６〜２．６２（ｍ，２Ｈ），２．１９〜１．９８（ｍ，２Ｈ），１．７８〜１．６６（ｍ，２Ｈ），１．３８〜１．０８（ｍ，２Ｈ）ｐｐｍ。
【０３１１】
Ｆ．Ｂｏｃ保護オルニチン誘導体ラクタム（５８）：ＮＭＰ中（５ｍＬ）中にＢｏｃ−Ｌ−アラニン（５２６ｍｇ，２．８ｍｍｏｌ）含む溶液を周囲温度においてＨＡＴＵ（１．１ｇ，２．９ｍｍｏｌ）で処理した後、ＮＭＭ（０．３ｍＬ，２．９ｍｍｏｌ）で処理した。１０分後、ＮＭＰ（１０ｍＬ）中の未精製アミン５７（０．８ｍｇ，２．２ｍｍｏｌ）を滴下法により加えた。２日後、前記反応混合物をジエチルエーテルで希釈し、ＮａＨＣＯ３、１Ｍ  ＨＣｌ、水、及び食塩水で連続的に洗浄した。有機抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮することにより黄色の油として５８が〜１ｇ（８４％）得られ、これは更なる精製をせずに使用した。質量スペクトル：ｍ／ｚ５４１［Ｍ＋Ｈ］＋及び５６３［Ｍ＋Ｎａ］＋。
Ｇ．オルニチン−誘導ラクタム（５９）：未精製５８（〜１ｇ，１．９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液にＴＦＡを周囲温度で加えた。１時間後、前記溶媒を減圧下で除去した。残渣を酢酸エチルに溶解し、ＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄した。一緒にした水溶液を５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭで逆抽出し、一緒にした有機抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮した。前記未精製生成物の一部を逆相ＨＰＬＣ（Ｃ１８，０．１％酢酸含有１０〜１００％ＡＣＮ／水）により精製することにより、白色固体として５９が２８ｍｇ得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ，３００ＭＨｚ）δ８．１４（ｍ，１Ｈ），７．８８（ｍ，１Ｈ），７．６８〜７．６６（ｍ，１Ｈ），７．３５（ｍ，１Ｈ），７．１２（ｍ，２Ｈ），４．４３（ｍ，１Ｈ），４．１２（ｍ，１Ｈ），３．４８（ｍ，２Ｈ），２．９１（ｍ，４Ｈ），１．４８〜１．３６（ｍ，４Ｈ），１．１０（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。質量スペクトル：ｍ／ｚ４４１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３１２】
【化７６】
2008506712.tif 000064
【０３１３】
【表１１】
2008506712.tif 000065
【０３１４】
【化７７】
2008506712.tif 000066
【０３１５】
【表１２】
2008506712.tif 000067
【実施例１３】
【０３１６】
この実施例において表１３のピロリジン誘導体を図示した。
【０３１７】
【化７８】
2008506712.tif 000068
【０３１８】
チロシン誘導環状エーテル（６６）の調製。
【０３１９】
Ａ．２−［２−（３−ヒドロキシ−プロペニル）−ベンゾフラン−３−イルメチル］−ピロリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル（６０）：−７８℃において、無水ＤＣＭ（４０ｍＬ）中に４７（１．７ｇ，３．９ｍｍｏｌ）含む溶液に、ＢＦ３エテラート（０．６ｍＬ，４．８ｍｍｏｌ）を加えた。１０分後、ＤＩＢＡＬ（１Ｍ／ＤＣＭ，１０ｍＬ，１０ｍｍｏｌ）を滴下漏斗から滴下して加えた、５分後、ＤＩＢＡＬ溶液の添加が完了した後、酢酸エチル（１０ｍＬ）を加えて過剰な試薬をクエンチした。ＨＣｌ希薄水溶液をゆっくり加え、前記反応混合物をゆっくり周囲温度に温めた。前記生成物をＤＣＭ及び酢酸エチルで抽出し、一緒にした有機相をＨＣｌ希薄水溶液、水、及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、濾過して濃縮した。前記未精製生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン，１：２）で精製することにより、黄色の油として６０が１．１ｇ（７２％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）７．６５及び７．０３（回転異性体，ｄ及びａｐｐ  ｔ，Ｊ＝６．９，７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｍ，５Ｈ），７．２６〜７．１９（ｍ，２Ｈ），６．７０〜６．５２（ｍ，２Ｈ），５．２６〜５．１４（ｍ，２Ｈ），４．３８（ｍ，１Ｈ），４．２８（ｍ，１Ｈ），４．１４（ｍ，１Ｈ），３．４３（ｍ，２Ｈ），３．２７及び３．０２（回転異性体，２ｍ，１Ｈ），２．７６〜２．６８（ｍ，１Ｈ），２．４５（ｍ，１Ｈ），１．７７〜１．６８（ｍ，５Ｈ）ｐｐｍ。
【０３２０】
Ｂ．３−（３−ピロリジン−２−イルメチル−ベンゾフラン−２−イル）−プロパン−１−オール（６１）：ＭｅＯＨ（４０ｍＬ）中、６０（１．１ｇ，２．８ｍｍｏｌ）及び１０％パラジウム炭素（１ｇ）の混合物を水素ガス（４５ＰＳＩ）の雰囲気下に設置し、Ｐａｒｒ装置を用いて２時間振とうした。前記触媒をセライト床の濾過により除去し、浄化した濾液を真空下で濃縮することにより、黄色の油として６１が７２５ｍｇ（定量的）得られ、これは更なる精製をせずに用いた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．４７〜７．３６（ｍ，２Ｈ），７．２１〜７．１７（ｍ，２Ｈ），４．５９（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），３．５７〜３．５０（ｍ，２Ｈ），３．４０〜３．３１（ｍ，１Ｈ），３．０８〜２．９４（ｍ，１Ｈ），２．８９〜２．６９（ｍ，２Ｈ），２．０５〜１．９５（ｍ，２Ｈ），１．９３〜１．４９（ｍ，２Ｈ）ｐｐｍ。
【０３２１】
Ｃ．（１−（４−ヒドロキシル−ベンジル）−２−｛２−［２−（３−ヒドロキシ−プロピル）−ベンゾフラン−３−イルメチル］−ピロリジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（６２）：無水ＮＭＰ（６ｍＬ）中にＢｏｃ−Ｌ−チロシン（５７７ｍｇ，２．１ｍｍｏｌ）及びＨＡＴＵ（７１６ｍｇ，１．８ｍｍｏｌ）を含む溶液を周囲温度においてＮＭＭ（０．３ｍＬ，２．７ｍｍｏｌ）で処理した。１０分後、ＮＭＰ（５ｍＬ）中に６１（４２９ｍｇ，１．７ｍｍｏｌ）を含む溶液を加えた。２日後、前記反応混合物を水で希釈し、生成物をジエチルエーテルで抽出した。一緒にしたエーテル抽出物を水で洗浄し、ＮａＨＣＯ３希薄水溶液及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、濾過して濃縮した。この未精製生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）で精製することにより、淡黄色の泡状物質として６２が８２１ｍｇ（９２％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ８．５４（ｂｒ２，１Ｈ），７．６６〜７．６３（ｍ，１Ｈ），７．３６〜７．３２（ｍ，１Ｈ），７．２１〜７．０６（ｍ，５Ｈ），６．８３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），５．５８（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），４．６４〜４．５６（ｍ，１Ｈ），４．３４〜４．３１（ｍ，１Ｈ），３．９２〜３．８８（ｍ，１Ｈ），３．７０（ａｐｐ  ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ），３．５１〜３．２６（ｍ，１Ｈ），３．１８〜２．７９（ｍ，４Ｈ），２．０１〜１．９７（ｍ，２Ｈ），１．６９〜１．４７（ｍ，１Ｈ），１．４２（ｓ，９Ｈ）ｐｐｍ。
【０３２２】
Ｄ．Ｂｏｃ保護Ｄｅｓ−アラニン  チロシン誘導環状エーテル（６３）：６２（８２１ｍｇ，１．６ｍｍｏｌ）を含むＤＣＭ（４０ｍＬ）溶液に、周囲温度においてＰｈ３Ｐ（４３１ｍｇ，１．６ｍｍｏｌ）及びＡＤＤＰ（４９１ｍｇ，１．９ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間後、前記反応混合物を真空下で濃縮した後、ジエチルエーテルに再溶解した。不溶性の白色固体を濾過して除去し、浄化した濾液を濃縮した。前記未精製生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン，１：２〜１：１）を用いて精製することにより、淡黄色の泡状物質として６３が１６０ｍｇ（１９％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．４７（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２８〜７．２４（ｍ，２Ｈ），７．２２〜７．１１（ｍ，２Ｈ），７．００（ｄｄ，Ｊ＝２．７，８．１Ｈｚ，１Ｈ），６．６９（ｄｄ，Ｊ＝３．０，８．７Ｈｚ，１Ｈ），５．２８（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ），４．８８〜４．７９（ｍ，１Ｈ），４．５１〜４．４１（ｍ，１Ｈ），４．２３〜４．１７（ｍ，１Ｈ），３．９７〜３．８９（ｍ，１Ｈ），３．８４〜３．７６（ｍ，１Ｈ），３．４６〜３．２９（ｍ，２Ｈ），２．７５〜２．６２（ｍ，４Ｈ），２．１７〜２．０９（ｍ，１Ｈ），１．９９〜１．９０（ｍ，１Ｈ），１．７２〜１．５４（ｍ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）ｐｐｍ。
【０３２３】
Ｅ．Ｄｅｓ−アラニン  チロシン誘導環状エーテル（６４）：６３（１６０ｍｇ，０．３２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液にＴＦＡ（２ｍＬ）を周囲温度で加えた。１．５時間後、前記溶媒を減圧下で除去した。残渣を酢酸エチルに溶解し、ＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮することによりオフホワイトの固体として６４が１３０ｍｇ（定量的）得られ、これは次の反応に直接使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．４６（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２１〜７．１９（ｍ，２Ｈ），７．１６〜７．１０（ｍ，２Ｈ），６．９７（ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．１Ｈｚ，１Ｈ），６．７０〜６．６８（ｍ，１Ｈ），４．４７（ｍ，１Ｈ），４．２１〜４．１３（ｍ，２Ｈ），３．９３（ｔ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ），３．５１〜３．３６（ｍ，４Ｈ），２．７３〜２．６８（ｍ，４Ｈ），２．１５〜２．０７（ｍ，１Ｈ），１．９８〜１．９０（ｍ，１Ｈ），１．７０〜１．４６（ｍ，３Ｈ），１．１９〜１．１３（ｍ，１Ｈ），０．６４〜０．５５（ｍ，１Ｈ）ｐｐｍ。
【０３２４】
Ｆ．Ｂｏｃ保護されたチロシン誘導環状エーテル（６５）：Ｂｏｃ−Ｌ−アラニン（６３ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）を含むＮＭＰ（３ｍＬ）溶液を周囲温度においてＨＡＴＵ（１２５ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）で処理した後、ＮＭＭ（０．１ｍＬ，０．９ｍｍｏｌ）で処理した。１０分後、ＮＭＰ（５ｍＬ）中の未精製アミン６４（１２５ｍｇ，０．３１ｍｍｏｌ）を滴下法により加えた。１６時間後、前記反応混合物をジエチルエーテルで希釈し、ＮａＨＣＯ３、１Ｍ  ＨＣｌ、水、及び食塩水により連続的に洗浄した。有機抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮した。この未精製生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン，１：１〜２：１）を用いて精製することにより、淡黄色の固体として６５が１３７ｍｇ（７６％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．４６（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１９〜７．１２（ｍ，３Ｈ），７．０５〜６．９９（ｍ，２Ｈ），６．７０（ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．１４〜５．０８（ｍ，２Ｈ），４．４８〜４．４２（ｍ，１Ｈ），４．２６〜４．１８（ｍ，２Ｈ），３．９３（ａｐｐ  ｔ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ），３．８４〜３．７６（ｍ，１Ｈ），３．４７〜３．３１（ｍ，２Ｈ），２．８４〜２．６４（ｍ，４Ｈ），２．１５〜２．０８（ｍ，１Ｈ），１．９７〜１．９３（ｍ，１Ｈ），１．７１〜１．５２（ｍ，３Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ），１．３８（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），１．１８〜１．１２（ｍ，１Ｈ），０．６４〜０．５６（ｍ，１Ｈ）ｐｐｍ。
Ｇ．チロシン誘導環状エーテル（６６）：６５（１３７ｍｇ，０．２３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液にＴＦＡ（２ｍＬ）を周囲温度で加えた。１．５時間後、前記溶媒を減圧下で除去した。残渣を酢酸エチルに溶解し、ＮａＨＣＯ３水溶液及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮した。未精製生成物を逆相ＨＰＬＣ（Ｃ１８，０．１％酢酸含有１０〜１００％ＡＣＮ／水）を用いて精製することにより、白色固体として６６が９０ｍｇ（８２％）得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ，３００ＭＨｚ）δ８．２３（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），７．４６〜７．３９（ｍ，３Ｈ），７．２３〜７．１２（ｍ，２Ｈ），７．０１〜６．９９（ｍ，２Ｈ），６．８５〜６．８２（ｍ，１Ｈ），４．８６（ｍ，１Ｈ），４．２７（ｍ，１Ｈ），４．１６（ｍ，１Ｈ），３．９８〜３．８４（ｍ，１Ｈ），３．４４〜３．３３（ｍ，１Ｈ），３．１６〜３．１０（ｍ，１Ｈ），２．７６〜２．６７（ｍ，３Ｈ），１．９９（ｍ，１Ｈ），１．５７（ａｐｐ  ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ），１．４５〜１．３９（ｍ，１Ｈ），１．１６（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ），１．０２〜０．９７（ｍ，１Ｈ），０．５８〜０．４９（ｍ，１Ｈ）ｐｐｍ。質量スペクトル：ｍ／ｚ４７６．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３２５】
【化７９】
2008506712.tif 000069
【０３２６】
【表１３】
2008506712.tif 000070
【実施例１４】
【０３２７】
この実施例において、表１４のピロリジン誘導体を図示した。
【０３２８】
【化８０】
2008506712.tif 000071
【０３２９】
２Ｓ−アミノ−Ｎ−｛１Ｓ−［２Ｓ−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−プロピオンアミド（７６）の調製。
【０３３０】
Ａ．トランス−２Ｓ−（３−メタンスルホニルオキシ−プロペニル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（６７）：２２（２ｇ，８．８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（２．５ｍＬ，１７．６ｍｍｏｌ）を加えた。前記溶液を氷浴で冷却し、塩化メタンスルホニル（０．７４ｍＬ，９．６８ｍｍｏｌ）を滴下して加え、室温で３０分攪拌した。水（１０ｍＬ）を加え、生成物をＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を一緒にし、５ｍＬの１Ｎ  ＨＣｌ、水（１０ｍＬ）、及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で蒸発させることにより６７が９．５ｇ得られ、これは精製せずに使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ４．４〜４．０（ｍ，２Ｈ），３．４２〜３．２１（ｍ，３Ｈ），３．０（ｓ，３Ｈ），２〜１．６（ｍ，４Ｈ），１．４２（ｓ，９Ｈ）ｐｐｍ。
【０３３１】
Ｂ．トランス−２Ｓ−｛３−［アセチル−（２−ヨード−フェニル）−アミノ］−プロペニル｝−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（６８）：ｏ−ヨードアセトニトリル（１．１ｇ，４．２１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液を氷浴において冷却し、ＮａＨ（鉱油中６０％分散物，０．２４ｇ，６．３１ｍｍｏｌ）を一度に加え、室温で１０分間攪拌した。ＤＭＦ（５ｍＬ）中の未精製メシラート６７（１．２８ｇ，４．２１ｍｍｏｌ）を室温で滴下して加え、３０分間攪拌した。水（１０ｍＬ）を加え、生成物をジエチルエーテル（３×５０ｍＬ）で抽出した。一緒にしたエーテル抽出物を水（３×５０ｍＬ）及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で蒸発させ、フラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３：１，ヘキサン／酢酸エチル）を用いて精製することにより、白色固体として６８が１．１７ｇ得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．８５（ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，１Ｈ），７．４〜７．０（ｍ，３Ｈ），５．６（ｍ，１Ｈ），５．２８（ｍ，１Ｈ），４．８６（ｍ，１Ｈ），３．３（ｍ，３Ｈ），２．０〜１．６（ｍ，４Ｈ），１．４（ｓ，９Ｈ）ｐｐｍ。
【０３３２】
Ｃ．２Ｓ−（１−アセチル−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（６９）：６８（１．１ｇ，２．３３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）溶液にＫ２ＣＯ３（０．４１ｇ，３．０２ｍｍｏｌ）、ＮａＨＣＯ２（０．１６ｇ，２．４４ｍｍｏｌ）を加えた後、塩化テトラブチルアンモニウム（０．６４ｇ，２．３３ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＯＡｃ）２（０．０２ｇ，０．０７ｍｍｏｌ）を加え、反応フラスコをあらかじめ温めておいたオイルバス（１００℃）に浸した。４０分後、水（１０ｍＬ）を加え、生成物をジエチルエーテル（３×５０ｍＬ）で抽出した。前記ジエチルエーテル抽出物を水（３×５０ｍＬ）及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で蒸発させて、フラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３：１，ヘキサン／酢酸エチル）で精製することにより、白色固体として６９が０．３７ｇ得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ８．４（ｓ，１Ｈ），７．７８〜７．６（ｄｄ，Ｊ＝１０．７，１０．７Ｈｚ，１Ｈ），４．２〜４．０（ｍ，１Ｈ），３．４５〜３．０（ｍ，３Ｈ），２．７〜２．６（ｍ，１Ｈ），２．６（ｓ，３Ｈ），１．９〜１．６５（ｍ，４Ｈ），１．５（ｓ，９Ｈ）ｐｐｍ。
【０３３３】
Ｄ．１−（３−ピロリジン−２Ｓ−イルメチル−インドール−１−イル）−エタノン（７０）：６９（０．３７ｇ，１．０８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）溶液にＴＦＡ（４ｍＬ）を加え、室温で３０分間攪拌した。ＮａＨＣＯ３水溶液（５ｍＬ）を加え、この反応混合物を減圧下で濃縮した。生成物をＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出し、有機抽出物をＮａＨＣＯ３水溶液、水、及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。減圧下で溶媒を除去した後、シリカゲルクロマトグラフィー（１０：１，ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）で精製することにより、白色固体として７０が０．２６ｇ得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ８．６（ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，１Ｈ），７．５（ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，１Ｈ），７．４〜７．２（ｍ，３Ｈ），３．８〜３．６（ｍ，１Ｈ），３．２〜２．９（ｍ，４Ｈ），２．８（ｓ，３Ｈ），２．２〜１．６（ｍ，４Ｈ）ｐｐｍ。
【０３３４】
Ｅ．｛１Ｓ−［２Ｓ−（１−アセチル−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（７１）：Ｂｏｃ−Ｌ−バリン（０．２５ｇ，１．１８ｍｍｏｌ）のＮＭＰ（５ｍＬ）溶液にＨＡＴＵ（０．４４ｍｇ，１．１８ｍｍｏｌ）を加えた後、ＮＭＭ（０．３ｍＬ，２．６７ｍｍｏｌ）を加えた。５分後、７０（０．２５ｇ，０．１１ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分間攪拌した。酢酸エチル（２０ｍＬ）を加え、この有機溶液をＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）、１Ｎ  ＨＣｌ（１０ｍＬ）、水、及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーを用いて精製することにより、白色固体として７１が０．３６ｍｇ得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ８．４（ｍ，１Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，１Ｈ），７．４〜７．２（ｍ，３Ｈ），４．４〜４．２（ｍ，１Ｈ），３．８〜３．４（ｍ，３Ｈ），３．３８（ｄ，Ｊ＝１１  Ｈｚ，１Ｈ），２．６５（ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，１Ｈ），２．６（ｓ，３Ｈ），２．５〜２．４（ｍ，１Ｈ），２．１〜１．７（ｍ，４Ｈ），１．４（ｓ，９Ｈ），１．０５（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，３Ｈ），０．９５（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０３３５】
Ｆ．１−［２Ｓ−（１−アセチル−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−ピロリジン−１−イル］−２Ｓ−アミノ−３−メチル−ブタン−１−オン（７２）：７１（０．３６ｇ，０．８１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（４ｍＬ）を加え、この反応混合物を室温で３０分間攪拌した。ＮａＨＣＯ３水溶液を前記反応混合物に加え、ＴＦＡ及びＤＣＭを減圧下で除去した。反応生成物ＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出し、一緒にしたＤＣＭ抽出物を水及び食塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去した後、生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０：１，ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）で精製することにより、白色固体として７２が０．２７ｇ得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ８．４（ｍ，１Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，１Ｈ），７．４〜７．２（ｍ，３Ｈ），４．４〜４．２（ｍ，１Ｈ），３．８〜３．４（ｍ，３Ｈ），３．３８（ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，１Ｈ），２．６５（ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，１Ｈ），２．６（ｓ，３Ｈ），２．５〜２．４（ｍ，１Ｈ），２．１〜１．７（ｍ，４Ｈ），１．０５（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，３Ｈ），０．９５（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０３３６】
Ｇ．（１Ｓ−｛１Ｓ−［２Ｓ−（１−アセチル−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピルカルバモイル｝−エチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（７３）：Ｂｏｃ−Ｌ−アラニン（０．１３ｇ，０．３８ｍｍｏｌ）のＮＭＰ（３ｍＬ）溶液にＨＡＴＵ（０．１６ｍｇ，０．４１ｍｍｏｌ）を加えた後、ＮＭＭ（０．１ｍＬ，０．９５ｍｍｏｌ）を加えた。５分後、７２（０．１２ｇ，０．３４ｍｍｏｌ）を加え、この反応混合物を室温で３０分間攪拌した。前記反応混合物に酢酸エチル（２０ｍＬ）を加え、有機溶液をＮａＨＣＯ３水溶液（１０ｍＬ）、１Ｎ  ＨＣｌ（１０ｍＬ）、水、及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。減圧下で溶媒を除去し、生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーを用いて精製することにより、白色固体として７３が０．１５ｍｇ得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ８．４（ｍ，１Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ），７．４〜７．２（ｍ，３Ｈ），７．０〜６．８（ｍ１Ｈ），４．６（ｍ，１Ｈ），４．５〜４．４（ｍ，１Ｈ），４．２（ｍ，１Ｈ），３．８〜３．６（ｍ，２Ｈ），３．３８（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ），２．６５（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ），２．６（ｓ，３Ｈ），２．５〜２．４（ｍ，１Ｈ），２．１〜１．７（ｍ，４Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ），１．４（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，３Ｈ），１．０５（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，３Ｈ），０．９５（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０３３７】
Ｈ．Ｎ−｛１Ｓ−［２Ｓ−（１−アセチル−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−２Ｓ−アミノ−プロピオンアミド（７４）：７３（０．１５ｇ，０．２９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）溶液にＴＦＡ（４ｍＬ）を加え、この反応混合物を室温で３０分間攪拌した。前記反応混合物にＮａＨＣＯ３水溶液を加え、ＴＦＡ及びＤＣＭを減圧下で除去した。生成物をＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出し、ＤＣＭ抽出物を水、食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０：１，ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）を用いて精製することにより、白色固体として７４が０．１２ｇ得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ８．４（ｍ，１Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ），７．８５（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ），７．４〜７．２（ｍ，３Ｈ），４．６（ｍ，１Ｈ），４．５〜４．４（ｍ，１Ｈ），３．８（ｍ，１Ｈ），３．７５〜３．４（ｍ，２Ｈ），３．３８（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ），２．６５（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ），２．６（ｓ，３Ｈ），２．５〜２．４（ｍ，１Ｈ），２．１〜１．７（ｍ，４Ｈ），１．４（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，３Ｈ），１．０５（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，３Ｈ），０．９５（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０３３８】
２Ｓ−アミノ−Ｎ−｛１Ｓ−［２Ｓ−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピル｝−プロピオンアミド（７５）：７４（０．１２ｇ，０．２９１ｍｍｏｌ）の乾燥ＭｅＯＨ（３ｍＬ）の溶液に、１０％ＮａＯＨ／ＭｅＯＨを３ｍＬ加えた。１５分後、前記反応混合物に水（２ｍＬ）を加え、減圧下で溶媒を除去した。生成物を酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出し、有機抽出物を水及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。減圧下で溶媒を除去し、生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０：１，ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）を用いて精製することにより、白色固体として７５が０．０６ｇ得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ８．４（ｍ，１Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ），７．８５（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ），７．４〜７．２（ｍ，３Ｈ），４．６（ｍ，１Ｈ），４．５〜４．４（ｍ，１Ｈ），３．８（ｍ，１Ｈ），３．７５〜３．４（ｍ，２Ｈ），３．３８（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ），２．６５（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ），２．５〜２．４（ｍ，１Ｈ），２．１〜１．７（ｍ，４Ｈ），１．４（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，３Ｈ），１．０５（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，３Ｈ），０．９５（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０３３９】
【化８１】
2008506712.tif 000072
【０３４０】
【表１４】
2008506712.tif 000073
【実施例１５】
【０３４１】
この実施例において、表１５のピロリジン誘導体を図示した。
【０３４２】
【化８２】
2008506712.tif 000074
【０３４３】
２Ｓ−アミノ−Ｎ−（２−メチル−１Ｓ−｛２Ｓ−［１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−インドール−３−イルメチル］−ピロリジン−１−カルボニル｝−プロピル）−オロピオンアミド（７８）の調製。
【０３４４】
Ａ．（１Ｓ−｛１Ｓ−［２Ｓ−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボニル］−２−メチル−プロピルカルバモイル｝−エチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（７６）：７３（０．７０ｇ，１．３６ｍｍｏｌ）の乾燥ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）溶液に、１０％ＮａＯＨ／ＭｅＯＨを５ｍＬ加え、１５分間攪拌した。前記反応混合物に水（５ｍＬ）を加えて、減圧下で溶媒を除去した。生成物を酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出し、有機抽出物を水及び食塩水を用いて洗浄し、更にＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０：１，ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）で精製することにより、白色固体として７６が０．５３ｇ得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ８．０（ｓ，１Ｈ），７．９（ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，１Ｈ），７．３〜７．１（ｍ，３Ｈ），６．８（ｍ，１Ｈ），４．６２（ｍ，１Ｈ），４．５〜４．４（ｍ，１Ｈ），４．４〜４．０（ｍ，２Ｈ），３．７〜３．５（ｍ，２Ｈ），３．４（ｍ，１Ｈ），２．５（ｍ，１Ｈ），２．２〜１．８（ｍ，４Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ），１．３５（ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，３Ｈ），１．０５（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，３Ｈ），０．９５（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０３４５】
Ｂ．［１Ｓ−（２−メチル−１Ｓ−｛２Ｓ−［１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−インドール−３−イルメチル］−ピロリジン−１−カルボニル｝−プロピルカルバモイル）−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（７７）：７６（０．０５ｇ，０．１１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１ｍＬ）溶液にＮａＯＨ（０．０１ｇ，０．１３ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分間攪拌した。トシルクロリド（０．０３ｇ，０．１６ｍｍｏｌ）を加え、更にこの反応混合物を３５℃で１時間加熱した。前記反応混合物に水（５ｍＬ）を加え、生成物をＤＣＭ（３×３０ｍＬ）で抽出した。ＤＣＭ抽出物は水及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。減圧下で溶媒を除去し、生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（３：１，ヘキサン／酢酸エチル）で精製することにより、白色固体として７７が６１ｍｇ得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．９５（ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，１Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，１Ｈ），７．７（ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，２Ｈ），７．４〜７．２（ｍ，５Ｈ），６．８（ｍ，１Ｈ），４．６（ｍ，１Ｈ），４．４（ｍ，１Ｈ），４．３〜４．１８（ｍ，２Ｈ），３．８〜３．５（ｍ，２Ｈ），３．３（ｍ，１Ｈ），２．４５（ｍ，１Ｈ），２．３５（ｓ，３Ｈ），２．２〜１．８（ｍ，４Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ），１．３８（ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，３Ｈ），１．０５（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，３Ｈ），０．９５（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０３４６】
Ｃ．２Ｓ−アミノ−Ｎ−（２−メチル−１Ｓ−｛２Ｓ−［１−（トルエン−４−スルホニル）−１Ｈ−インドール−３−イルメチル］−ピロリジン−１−カルボニル｝−プロピル）−プロピオンアミド（７８）：７７（０．０６ｇ，０．０９６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液にＴＦＡ（２ｍＬ）を加え、この反応混合物を室温で３０分攪拌した。前記反応混合物にＮａＨＣＯ３水溶液を加え、ＴＦＡ及びＤＣＭを減圧下で除去した。生成物をＤＣＭ（３×２５ｍＬ）で抽出し、ＤＣＭ抽出物を水及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。減圧下で溶媒を除去し、生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（１０：１，ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）で精製することにより、白色固体として７８が０．０４ｇ得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．９５（ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，１Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，１Ｈ），７．７（ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，２Ｈ），７．４〜７．２（ｍ，５Ｈ），６．８（ｍ，１Ｈ），４．６（ｍ，１Ｈ），４．４（ｍ，１Ｈ），４．３〜４．１８（ｍ，２Ｈ），３．８〜３．５（ｍ，２Ｈ），３．３（ｍ，１Ｈ），２．４５（ｍ，１Ｈ），２．３５（ｓ，３Ｈ），２．２〜１．８（ｍ，４Ｈ），１．３８（ｄ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，３Ｈ），１．０５（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，３Ｈ），０．９５（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，３Ｈ）ｐｐｍ。
【０３４７】
【化８３】
2008506712.tif 000075
【０３４８】
【表１５】
2008506712.tif 000076
【実施例１６】
【０３４９】
この実施例において表１６のピロリジン誘導体を図示した。
【０３５０】
【化８４】
2008506712.tif 000077
【０３５１】
Ｎ−｛１−シクロヘキシル−２−［２−（６−フルオロ−１−｛２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エチル｝−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−ピロリジン−１−イル］−２−オキソ−エチル｝−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（８５）の調製。
【０３５２】
Ａ．２−（６−フルオロ−１−｛２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エチル｝−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−２Ｓ−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（８０）：ＮａＨ（７２ｍｇ，１．８ｍｍｏｌ，６０％鉱油懸濁物）のＤＭＦ（１ｍＬ）懸濁物をＤＭＦ（１ｍＬ）中の７９（１８０ｍｇ，０．６０ｍｍｏｌ）を室温で加えた。前記混合物を室温で１時間攪拌した後、ＤＭＦ（１ｍＬ）中のトリ（エチレングリコール）モノメチルエーテル（１８２ｍｇ，０．５７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で一晩攪拌し、０℃でＮＨ４Ｃｌ水溶液を加えてクエンチした。未精製生成物を酢酸エチルで抽出した。有機相を食塩水で洗浄し、更にＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。前記溶媒を除去した後、残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中５０％酢酸エチル）で精製することにより、８０が２５０ｍｇ（９３％）得られた。［ＴＬＣ（６０％酢酸エチル／ヘキサン）：Ｒｆ（８０）＝０．２２］。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．６５〜７．７６（１Ｈ），７．３３（ｍ，１Ｈ），７．２０（ｍ，１Ｈ），７．０９（ｍ，１Ｈ），６．９５（ｓ，１Ｈ），４．２７（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），３．７９（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ），３．４０〜３．７０（９Ｈ），３．３７（ｓ，３Ｈ），３．１０〜３．４０（２Ｈ），２．６５（ｍ，１Ｈ），１．７５（ｂｒｓ，４Ｈ），１．５５（ｓ，９Ｈ）ｐｐｍ。
【０３５３】
Ｂ．６−フルオロ−１−｛２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エチル｝−３−ピロリジン−２−イルメチル−１Ｈ−インドール（８１）：８０（２５０ｍｇ，０．５６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液を室温においてＴＦＡ（１ｍＬ）で処理した。２時間後、前記反応混合物を濃縮し、酢酸エチルで希釈し、１Ｎ  ＮａＯＨ水溶液及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過して濃縮することにより、淡黄色の油として８１が１９０ｍｇ（９８％）得られた。生成物は更なる精製をせずに使用した。
【０３５４】
Ｃ．｛１−シクロヘキシル−２−［２−（６−フルオロ−１−｛２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エチル｝−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−ピロリジン−１−イル］−２−オキソ−エチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（８２）：Ｂｏｃ−Ｌ−シクロヘキシルグリシン（１７２ｍｇ，０．６７ｍｍｏｌ）のＮＭＰ（２ｍＬ）溶液にＨＡＴＵ（２５５ｍｇ，０．６７ｍｍｏｌ）を加えた後、ＮＭＭ（０．１ｍＬ，０．９５ｍｍｏｌ）を加えた。５分後、ＤＣＭ（１ｍＬ）中の８１（１９０ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）を加え、この反応混合物を室温で一晩攪拌した。前記反応混合物に酢酸エチル（２０ｍＬ）を加え、前記有機溶液を水、１Ｎ  ＨＣｌ（５ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）水溶液、及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。減圧下で溶媒を除去し、生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーで精製することにより、ろう状物質として８２が２８０ｍｇ（８５％）得られた。［ＴＬＣ（６０％酢酸エチル／ヘキサン）：Ｒｆ（８２）＝０．１８］。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ３００ＭＨｚ）δ７．８３（ｍ，１Ｈ），７．３２（ｍ，１Ｈ），７．２０（ｍ，１Ｈ），７．０９（ｍ，１Ｈ），６．９８（ｓ，１Ｈ），５．３２（ｍ，１Ｈ），４．０〜４．６（５Ｈ），３．７９（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ），３．４０〜３．７０（９Ｈ），３．３７（ｓ，３Ｈ），２．６５（ｍ，１Ｈ），１．６〜２．０（１０Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），１．０〜１．４（６Ｈ）ｐｐｍ。
【０３５５】
Ｄ．２−アミノ−２−シクロヘキシル−１−［２−（６−フルオロ−１−｛２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エチル｝−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−ピロリジン−１−イル］−エタノ（８３）：８２（２５０ｍｇ，０．４３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液を室温においてＴＦＡ（１ｍＬ）で処理した。２時間後、反応混合物を濃縮し、酢酸エチルで希釈し、１Ｎ  ＮａＯＨ及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、濾過して濃縮することにより、淡黄色のろう状物質として８３が２１０ｍｇ（１００％）得られた。生成物は更なる精製をせずに使用した。
【０３５６】
Ｅ．（１−｛１−シクロヘキシル−２−［２−（６−フルオロ−１−｛２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エチル｝−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−ピロリジン−１−イル］−２−オキソ−エチルカルバモイル｝−エチル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（８４）：Ｂｏｃ−Ｌ−Ｎ−メチルアナリン（９１ｍｇ，０．４８ｍｍｏｌ）のＮＭＰ溶液にＨＡＴＵ（１８３ｍｇ，０．４８ｍｍｏｌ）を加えた後、ＮＭＭ（０．１ｍＬ，０．９５ｍｍｏｌ）を加えた。５分後、ＤＣＭ（１ｍＬ）中の８３（２１０ｍｇ，０．４３ｍｍｏｌ）を加え、更にこの反応混合物を室温で一晩攪拌した。前記反応混合物に酢酸エチル（２０ｍＬ）を加え、有機溶液を水、１Ｎ  ＨＣｌ（５ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）、及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。減圧下で溶媒を除去し、生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーで精製することにより、ろう状物質として８４が１８８ｍｇ（６５％）得られた。［ＴＬＣ（８０％酢酸エチル／ヘキサン）：Ｒｆ（８４）＝０．２０］。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．８０（ｍ，１Ｈ），７．３５（ｍ，１Ｈ），７．１９（ｍ，１Ｈ），７．１０（ｍ，１Ｈ），６．９５（ｓ，１Ｈ），４．６２（ｍ，１Ｈ），４．４６（ｍ，１Ｈ），４．２０（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ），３．７７（，ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ），３．２〜３．７（５Ｈ），３．３６（ｓ，３Ｈ），２．４８（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ），３．４０〜３．７０（９Ｈ），３．３７（ｓ，３Ｈ），２．６５（ｍ，１Ｈ），２．５７（ｍ，１Ｈ），１．６〜２．０（８Ｈ），１．５１（Ｓ，９Ｈ），１．３８（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ），１．０〜１．４（４Ｈ）ｐｐｍ。
【０３５７】
Ｆ．２−（６−フルオロ−１−｛２−［２−（２−メトキシ−エトキシ）−エトキシ］−エチル｝−１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−２Ｓ−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（８５）：８４（１８８ｍｇ，０．２８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液を室温においてＴＦＡ（１ｍＬ）で処理した。２時間後、前記反応混合物を濃縮し、酢酸エチルで希釈し、１Ｎ  ＮａＯＨ水溶液及び食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、濾過して濃縮した。残渣をＨＰＬＣで精製することにより、白色固体として８５の酢酸塩が１１０ｍｇ（６５％）得られた。［ＴＬＣ（２０％ＭｅＯＨ含有酢酸エチル溶液）：Ｒｆ（８５）＝０．２０］。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）δ７．７９（ｂｒ  ｄ，２Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２１（ｍ，１Ｈ），７．１０（ｍ，１Ｈ），６．９６（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），６．２３（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），４．６１（ｍ，１Ｈ），４．４４（ｍ，１Ｈ），４．２４（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ），３．７８（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ），３．４〜３．８（１２Ｈ），３．３６（ｓ，３Ｈ），２．６０（ｍ，１Ｈ），２．４８（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），１．６〜２．０（８Ｈ），１．３９（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ），１．０〜１．４（４Ｈ）ｐｐｍ。質量スペクトル：ｍ／ｚ５７１．３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３５８】
【化８５】
2008506712.tif 000078
【０３５９】
【表１６】
2008506712.tif 000079
【０３６０】
本発明は、特定の好ましい実施形態に関してかなり詳細に記載したが、別の解釈も可能である。従って、添付の請求項の観点及び範囲は、本願明細書に含まれる説明及び好ましい解釈もまた含まれるものである。
【国際調査報告】
2008506712.tif 000104
2008506712.tif 000105
2008506712.tif 000106