(57)【要約】  補酵素である還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）、還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（ＮＡＤＰＨ）及び還元型グルタチオンを含み、前記酵素を所定の時間系列に従って投与するのに適した分割量及び相互作用量で含む、網膜色素変性症の治療用キット。【特許請求の範囲】
【請求項１】
酵素であるニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（酵素Ａ）、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（酵素Ｂ）、及び還元型グルタチオン（酵素Ｃ）を、
ａ）酵素Ａを、生理溶液０．４ｍｌ中に０．２５ｍｇから０．３５ｍｇの間で含む濃度で、３日間連続して、１カ月間隔で、３カ月間、各眼に投与し、
ｂ）酵素Ｂを、酵素Ａの最終投与後１カ月目から開始して、生理溶液０．４ｍｌ中０．２５ｍｇから０．３５ｍｇの濃度で、３日間連続して、１カ月間隔で、３カ月間、各眼に投与し、
ｃ）酵素Ｃを、酵素Ｂの最終投与後１カ月目から開始して、生理溶液０．４ｍｌ中０．９ｍｇから１．１ｍｇの濃度で、３日間連続して、１カ月間隔で、３カ月間、各眼に投与する
のに適した分割量及び相互作用量で含む、網膜色素変性症の治療用医薬キット。
【請求項２】
酵素Ａの濃度が、生理溶液０．４ｍｌ中０．３ｍｇであり、酵素Ｂの濃度が、生理溶液０．４ｍｌ中０．３ｍｇであり、酵素Ｃの濃度が、生理溶液０．４ｍｌ中１．０ｍｇである、請求項１に記載のキット。
【請求項３】
前記酵素を、凍結乾燥された形態で、ａ）からｃ）までの少なくとも一続きの投与に十分な量で含み、各酵素につき、１回３カ月、毎月又は毎日の投与に十分な酵素量を含む分割量に細分されており、場合によって、前記分割量を構成するのに適切な投与量の生理溶液を含む、請求項１又は請求項２に記載のキット。
【請求項４】
前記酵素を、１つ又は複数の分割量に細分されている凍結乾燥された形態で含み、各々０．３０ｍｇから５．４ｍｇまでの酵素Ａ、０．３ｍｇから５．４ｍｇまでの酵素Ｂ、１．０ｍｇから１８ｍｇまでの酵素Ｃ、及び場合によって、各々０．４ｍｌから７．２ｍｌまでの生理溶液の３つ以上の分割量を含む、請求項１から３までのいずれか一項に記載のキット。
【請求項５】
球後組織内注射による網膜色素変性症の治療用の、キット形態の医薬組成物を調製するための、酵素である還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）、還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（ＮＡＤＰＨ）（酵素Ｂ）、及び還元型グルタチオン（酵素Ｃ）の使用であって、前記キットが、前記酵素を、
ａ）酵素Ａを、生理溶液０．４ｍｌ中に０．２５ｍｇから０．３５ｍｇの間で含む濃度で、３日間連続して、１カ月間隔で、３カ月間、各眼に投与し、
ｂ）酵素Ｂを、酵素Ａの最終投与後１カ月目から開始して、生理溶液０．４ｍｌ中０．２５ｍｇから０．３５ｍｇの濃度で、３日間連続して、１カ月間隔で、３カ月間、各眼に投与し、
ｃ）酵素Ｃを、酵素Ｂの最終投与後１カ月目から開始して、生理溶液０．４ｍｌ中０．９ｍｇから１．１ｍｇの濃度で、３日間連続して、１カ月間隔で、３カ月間、各眼に投与する
のに適した分割量及び相互作用量で含む、前記酵素の使用。
【請求項６】
酵素Ａの濃度が、生理溶液０．４ｍｌ中０．３ｍｇであり、酵素Ｂの濃度が、生理溶液０．４ｍｌ中０．３ｍｇであり、酵素Ｃの濃度が、生理溶液０．４ｍｌ中１．０ｍｇである、請求項５に記載の酵素の使用。
【請求項７】
前記キットが、前記酵素を、凍結乾燥された形態で、ａ）からｃ）までの少なくとも一続きの投与に十分な量で含み、各酵素につき、１回３カ月、毎月、毎日、各眼に投与するのに十分な酵素量を含む分割量に細分されており、場合によって、前記分割量を構成するのに十分な酵素量を含む分割量に細分されている、請求項５又は６に記載の酵素の使用。
【請求項８】
前記キットが、前記酵素を、１つ又は複数の分割量に細分されている凍結乾燥された形態で含み、各眼に対して各々０．３ｍｇから５．４ｍｇまでの酵素Ａ、０．３ｍｇから５．４ｍｇまでの酵素Ｂ、１．０ｍｇから１８ｍｇまでの酵素Ｃ、及び場合によって、各々０．４ｍｌから７．２ｍｌまでの生理溶液の３つ以上の分割量を含む、前記請求項のいずれか一項に記載の酵素の使用。
【請求項９】
球後組織内注射によって、
ａ）還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）（酵素Ａ）を、生理溶液０．４ｍｌ中に０．２５ｍｇから０．３５ｍｇの間で含む濃度で、３日間連続して、１カ月間隔で、３カ月間、各眼に、
ｂ）還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（ＮＡＤＰＨ）（酵素Ｂ）を、酵素Ａの最終投与後１カ月目から開始して、生理溶液０．４ｍｌ中０．２５ｍｇから０．３５ｍｇの濃度で、３日間連続して、１カ月間隔で、３カ月間、各眼に、
ｃ）還元型グルタチオン（酵素Ｃ）を、酵素Ｂの最終投与後１カ月目から開始して、生理溶液０．４ｍｌ中０．９ｍｇから１．１ｍｇの濃度で、３日間連続して、１カ月間隔で、３カ月間、各眼に
投与することを企図する、網膜色素変性症の治療方法。
【請求項１０】
酵素Ａの濃度が、生理溶液０．４ｍｌ中０．３ｍｇであり、酵素Ｂの濃度が、生理溶液０．４ｍｌ中０．３ｍｇであり、酵素Ｃの濃度が、生理溶液０．４ｍｌ中１．０ｍｇである、請求項９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、酵素による網膜色素変性症の治療及びこの治療に使用することができるキット形態の医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
網膜色素変性症は、多くの種々の病理学的症状を発現する網膜の疾患である。すなわち、網膜辺縁部には、杆体細胞の大部分が存在しており、この杆体細胞によって、半陰における視力及び外側領域における運動知覚が可能になるが、網膜辺縁部が影響を受ける場合には、視野が制限されることがあり、暗所及び半陰に順応することがますます困難になってくることがある。また、錐体細胞が変性する場合には、中心部の視力を失う恐れがある。この病気の進行度は患者によってそれぞれ異なる。原則として、網膜色素変性症は若年にその徴候が現れるが、子供が罹患することもあり、知らない間に作用することも多い。
【０００３】
この病気の原因は今のところ不明であり、したがってこの病気に罹患した患者の治療法は全く存在しない。専門家の思い通りになる唯一確かな知識によると、網膜色素変性症には遺伝的原因があり、遺伝学者に知られている機序に従って、遺伝によって代々部分的に伝達されると考えられている。網膜色素変性症の形態の大部分は遺伝性のものであり、これまでに３種の伝達様式が確認されている。すなわち常染色体優性、常染色体劣性、及び伴性（Ｘ連鎖性）である。
【０００４】
この病気の主な症状は、薄明盲症及び夜盲症である。すなわち、照明の状態が悪い場合に視覚に困難を生じ、明るい環境から暗い環境へ又はその逆への適応に問題を生じる。この現象は、少なくとも大部分の症例では、病気の初期発生段階における浸襲が杆体細胞に集中しているという事実に起因している。他の典型的な症状は、非常に強い光に対して反応したり（眩惑）、視野が徐々に狭くなったりすることであり、これは片側にある物体を感知することが困難になったり、又は階段若しくは他の低い障害物につまずいたりする形で現れ、完全に失明してしまう。
【０００５】
病気の進行の期間は極めて変わりやすいが、常に、徐々に及び最終的には失明に至る。大部分の症例では前述の症状は悪化し、視野はますます制限されるようになり、最終的には完全に閉ざされてしまう。発現する傾向にあるその他の愁訴には、中でも、眩惑、色の識別ができないこと、及び特殊な型の白内障がある。多くの症例において最終的な転帰は、不幸にも、完全な失明である。
【０００６】
病気を診断する目的で、眼底検査、視野検査、網膜電図、蛍光血管造影法、及び視力検査などの検査に依存するのが通常である。
【０００７】
眼底検査の目的は、網膜の状態を評価すること、及び網膜表面上の特徴的な色素斑の存在を探すことであり、病気の状態では、かかる色素斑は特徴的な「骨芽細胞様」の外観を呈する。しかし、たとえ同じ症状を示しても、網膜色素変性症の一部のまれな型は、眼底の斑を特徴としない。
【０００８】
視野検査により、光刺激に対する網膜の様々な部分の感受性を評価することが可能になる。視野検査は、患者が経験する視覚困難を客観的に証明するために有用であろう。
【０００９】
網膜電図（ＥＲＧ）は、特定の光刺激に反応した網膜の電気的活性を記録することを含むので、２つの異なるタイプの光受容体（すなわち、錐体細胞及び杆体細胞）の機能を明確に評価することが可能になる。網膜電図は、網膜色素変性症の診断には重要な検査である。この理由は、病気が初期の段階にある場合でさえも、ほとんどの場合、得られた線の変化が非常に少ないか、又は全くないかのどちらかであるためである。
【００１０】
蛍光血管造影法は、蛍光物質を静脈内注射した後、種々の時間に網膜の写真を撮影することによって行われる。実際には、血液循環によって蛍光物質は網膜に到達する。網膜では蛍光物質は動脈、毛細血管及び静脈を着色し、ひいてはこれらを可視化し、これらの壁の機能状態をも可視化する。
【００１１】
視力検査は視力を評価することができ、３メートルの距離にある種々の大きさの文字を患者が読むことを含む。
【００１２】
網膜色素変性症は前世紀の中ばから終わりにかけて確認及び分類されたが、可能な治療法、又はこの病気の進行を決定し統制する原因を理解するという同様に重要なことに関して、具体的な進歩を遂げることはこれまでほとんどなかった。現在、国際的な研究によって最も広範囲に取られている方法は、遺伝的方法、移植方法及び免疫的方法である。遺伝的方法は、病気の原因となる遺伝子又は遺伝子群を同定し、現在の遺伝子工学技術を用いてその後の治療行為を可能にしようとするものである。移植方法は、網膜組織の移植、又は少なくとも健康な細胞を病気の網膜に移植することくらいは可能にする技術を完成させることを目的としている。また、免疫的方法は、この病気の根底には免疫系の多少の変化があると仮定する、いくつかの理論を証明することを目指すものである。
【００１３】
ＷＯ２００４／０３０６９３には、同じ出願人らの名前で、酵素であるグルタチオンペルオキシダーゼ、プロリダーゼ、グルコース−６．リン酸デヒドロゲナーゼを含む、網膜色素変性症の治療用キット、及び所定の投与の時間系列について開示されている。この治療方法を用いると、やや長期間の後も有効であるが、黄斑部の色素斑の消失に関しては、患者の反応はむしろ遅く、注射後長期間を経ても視力がぼんやりした状態が続く。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
本発明の目的は、ＷＯ２００４／０３０６９３による治療を用いるよりも、網膜色素変性症をより効果的に治療することができるキット形態の医薬組成物を提供することである。
【００１５】
本発明の別の目的は、視力の段階的な回復及び視野の拡大、像の鮮明度並びに色覚が、ＷＯ２００４／０３０６９３に開示されている治療を用いるものに対して、より速くなることを可能にし、最終的には正常な網膜電図を再構築することを可能にする、網膜色素変性症の治療方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明によると、これらの目的は、球後組織内注射によって網膜色素変性症を治療するために使用される、キット形態の医薬組成物中に、混合するのに適した特別な酵素を使用することにより達成されるが、そのすべては請求項１に明記の通りである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
より具体的には、使用される酵素は、還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）（以下、酵素Ａと称する）、還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（ＮＡＤＰＨ）（以下、酵素Ｂと称する）、及び還元型グルタチオン（以下、酵素Ｃと称する）であり、これらは、以下にさらに明記される時間系列及び様式に従って投与される。
【００１８】
本発明よる、治療に使用される酵素は、凍結乾燥された形態で市販されており、生理溶液に溶解することにより治療に使用することができる。
【００１９】
各酵素は、酵素溶液の形態で、球後注射により各眼に３日間連続して投与され、さらにあと２回、それぞれ１カ月の間隔を置いて投与を繰り返す（各酵素について）。実際には、手順は以下の通りである。
【００２０】
治療開始時に、酵素Ａの１回量を、３日間連続して各眼の球後組織に注射し、次いで治療を２カ月目及び３カ月目に繰り返す。
【００２１】
４カ月目、５カ月目及び６カ月目に、酵素Ｂの１回量を、３日間連続して各眼の球後組織に注射する。
【００２２】
７カ月目、８カ月目及び９カ月目に、酵素Ｃの１回量を、３日間連続して各眼の球後組織に注射する。
【００２３】
各注射に使用する種々の酵素の投与量は（各眼について）以下の通りである。
酵素Ａ  ０．２５〜０．３５ｍｇ
酵素Ｂ  ０．２５〜０．３５ｍｇ
酵素Ｃ  ０．９〜１．１ｍｇ
【００２４】
各注射における種々の酵素の好ましい投与量は以下の通りである。
酵素Ａ  ０．３ｍｇ
酵素Ｂ  ０．３ｍｇ
酵素Ｃ  ０．３ｍｇ
【００２５】
これらの投与量は、内容変更の類型とは全く関係なく、すべての患者に対して同一となる。特に、酵素溶液は、上述の量を０．４ｍｌの注射液中に含むことができるような方法で調製される。例えば、上述の好ましい酵素量を含む０．４ｍｌの注射可能量を提供するのに適した酵素溶液は、以下の通り調製することができる。
酵素Ａ：
凍結乾燥された酵素１０ｍｇを含む薬瓶に生理溶液を加えて１２．５ｍｌとする。
酵素Ｂ：
凍結乾燥された酵素１０ｍｇを含む薬瓶に生理溶液を加えて１２．５ｍｌとする。
酵素Ｃ：
凍結乾燥された酵素２５ｍｇを含む薬瓶に生理溶液を加えて１０ｍｌとする。
【００２６】
当然のこととして、該酵素のうちのいずれか一種の投与量を、上述の用量範囲内で変更することが決定される場合には、これらの比は変更される必要があろう。
【００２７】
該酵素は上記の順番で投与され、該注射サイクルは中断されることなく継続される必要がある。
【００２８】
本発明による、網膜色素変性症の治療に使用されるキットは、
ａ）酵素Ａを、生理溶液０．４ｍｌ中に０．２５〜０．３５ｍｇの間で含む濃度で、３日間連続して、１カ月間隔で、３日間連続して及び各眼に投与し、
ｂ）酵素Ｂを、酵素Ａの最終投与後１カ月目から開始して、生理溶液０．４ｍｌ中０．２５〜０．３５ｍｇの濃度で、３日間連続して、１カ月間隔で、３カ月間、各眼に投与し、
ｃ）酵素Ｃを、酵素Ｂの最終投与後１カ月目から開始して、生理溶液０．４ｍｌ中０．９〜１．１ｍｇの濃度で、３日間連続して、１カ月間隔で、３カ月間、各眼に投与するのに適した分割量及び相互作用量の当該酵素を含む。
【００２９】
具体的には、該酵素は、凍結乾燥された形態で、及び少なくとも完全な一続きの投与に十分な量で、各キットに納められ、各酵素は、１回３カ月の注射サイクル、すなわち１８回分の注射、又は１日の投与、すなわち２回分の注射に十分な量を含む分割量に細分されており、場合によって、前記分割量を構成するのに適切な投与量の生理溶液が納められている。具体的には、各キットにおいて、種々の酵素は、１つ又は複数の分割量に細分されており、これらの各々は、上述の好ましい投薬形態で、０．３０ｍｇ〜５．４ｍｇの酵素Ａ、０．３ｍｇ〜５．４ｍｇの酵素Ｂ、１．０ｍｇ〜１８ｍｇの酵素Ｃを含む。場合によって、各々０．４〜７．２ｍｌの生理溶液の３つ以上の分割量も存在することができる。
【００３０】
本発明による治療を受けた患者は、視力及び視野、色覚並びに像の鮮明度（解像力）が徐々に改善することが分かった。患者の網膜電図は次第に改善し、最終的には長期的に再構築されるようになった。特に、ＷＯ２００４／０３０６９３による治療と比較して、黄斑部の色素斑の消失に関して患者の反応がより速かった。ＷＯ２００４／０３０６９３による治療が原因で頻繁に起こることとは対照的に、患者は以前よりはっきり見えるようになり、特に、注射後２４〜４８時間で既に視力がぼんやりしなくなったと報告した。様々な期間にわたったものの、投与治療によって、すべての患者が陽性反応を示した。２〜３年後の追跡調査により、得られた改善は永続的なものであり、いかなる種類の副作用も全く生じないことが示された。
【００３１】
下記の表１に、本発明による治療上の投与の、網膜色素変性症に罹患している患者２３例に関する結果をまとめる。下記項目、すなわち、治療前及び治療後の、右眼及び左眼に関する、視力、視野及び網膜電図についての平均値及び標準偏差を示す。
【表１】
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（＊）側頭部、鼻側部、上部及び下部の視野等感度線に関する平均値
【００３２】
各項目の統計解析により、治療前及び治療後の数値間の差は統計的に有意であることが示された。
【００３３】
網膜色素変性症は、網膜の代謝を変え、視覚過程を変更するだけでなく、この病気の特徴である色素の蓄積をも促進する酵素欠損に起因する可能性があるという仮説を、本実験データは確証するものである。
【国際調査報告】
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