(57)【要約】  ノブドウ属植物及びその抽出物が睡眠障害を予防治療する薬物と保健品調製での応用。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ノブドウ属植物を用いた睡眠障害を予防治療する薬物および保健品調製への応用。
【請求項２】
ノブドウ属植物抽出物を用いた睡眠障害を予防治療する薬物および保健品調製への応用。
【請求項３】
前記ノブドウ属植物は、顕歯ノブドウ、広東ノブドウ、楝歯玉ブドウ、東北ノブドウ、大葉ノブドウ、閃光ノブドウ、ノブドウ、小葉ノブドウ、三裂葉ノブドウ、白れん、烏頭葉ノブドウ、掌裂草ブドウ、クリンノブドウ、烏律葉ノブドウ、異葉ノブドウ、羽葉ノブドウなどを含むことを特徴とする、請求項１または２に記載のノブドウ属植物を用いた睡眠障害を予防治療する薬物および保健品調製への応用。
【請求項４】
前記ノブドウ属植物は、薬用担体または食品担体と混合可能であることを特徴とする、請求項１または２に記載のノブドウ属植物を用いた睡眠障害を予防治療する薬物および保健品調製への応用。
【請求項５】
前記ノブドウ属植物抽出物は、水、低級アルコール、低級ケトンもしくは酢酸エチルを溶媒として、またはこれらの溶媒から選択するいずれかの混合溶媒で抽出して獲得する抽出物であることを特徴とする、請求項２に記載のノブドウ属植物抽出物を用いた睡眠障害を予防治療する薬物および保健品調製への応用。
【請求項６】
抽出用溶媒に用いられる前記低級アルコールは、メチルアルコール、エチルアルコールまたはｎーブタノールであり、
前記低級ケトンは、アセトンであり、
前期抽出方法は、浸漬抽出、還流抽出、超音波抽出、逆流抽出、超臨界抽出から選択することを特徴とする、請求項５に記載のノブドウ属植物抽出物を用いた睡眠障害を予防治療する薬物および保健品調製への応用。
【請求項７】
前記ノブドウ属植物抽出物は、主に蛋白質、アミノ酸、多糖類、無機栄養元素、フェノール類化合物および／またはフラボンを含有することを特徴とする、請求項５に記載のノブドウ属植物抽出物を用いた睡眠障害を予防治療する薬物および保健品調製への応用。
【請求項８】
前記ノブドウ属植物抽出物は、主にアミノ酸、多糖類、フェノール類化合物および／またはフラボンを含有することを特徴とする、請求項７に記載のノブドウ属植物抽出物を用いた睡眠障害を予防治療する薬物および保健品調製への応用。
【請求項９】
前記ノブドウ属植物抽出物は、主にフェノール類化合物および／またはフラボンを含有することを特徴とする、請求項８に記載のノブドウ属植物抽出物を用いた睡眠障害を予防治療する薬物および保健品調製への応用。
【請求項１０】
ノブドウ属植物および／またはノブドウ属植物抽出物を含有すること特徴とする、睡眠障害を予防治療する組合せ物。
【請求項１１】
前記ノブドウ属植物は、顕歯ノブドウ、広東ノブドウ、楝歯玉ブドウ、東北ノブドウ、大葉ノブドウ、閃光ノブドウ、ノブドウ、小葉ノブドウ、三裂葉ノブドウ、白れん、烏頭葉ノブドウ、掌裂草ブドウ、クリンノブドウ、烏律葉ノブドウ、異葉ノブドウ、羽葉ノブドウなどを含むことを特徴とする、請求項１０に記載の組合せ物。
【請求項１２】
前記ノブドウ属植物抽出物は、水、低級アルコール、低級ケトンもしくは酢酸エチルを溶媒として、またはこれらの溶媒から選択する何れかの混合溶媒で抽出して獲得する抽出物であることを特徴とする、請求項１０に記載の組合せ物。
【請求項１３】
抽出用溶媒に使われる前記低級アルコールは、メチルアルコール、エチルアルコールまたはｎーブタノールであり、
前記低級ケトンは、アセトンであり、
前記抽出方法は、浸漬抽出、還流抽出、超音波抽出、逆流抽出、超臨界抽出から選択することを特徴する、請求項１２に記載の組合せ物。
【請求項１４】
前記ノブドウ属植物抽出物は、主に蛋白質、アミノ酸、多糖類、無機栄養元素、フェノール類化合物および／またはフラボンを含有することを特徴とする、請求項１０に記載の組合せ物。
【請求項１５】
前記ノブドウ属植物抽出物は、主にアミノ酸、多糖類、フェノール類化合物および／またはフラボンを含有することを特徴とする、請求項１４に記載の組合せ物。
【請求項１６】
前記ノブドウ属植物抽出物は、主にフェノール類化合物および／またはフラボンを含有することを特徴とする、請求項１５に記載の組合せ物。
【請求項１７】
睡眠障害の予防治療に用いられる保健品に適用することを特徴とする、請求項１０に記載の組合せ物。
【請求項１８】
睡眠障害の予防治療に用いられる薬品に適用することを特徴とする、請求項１０に記載の組合せ物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はノブドウ属植物およびその抽出物の薬品および保健品調製への応用に関する。
【背景技術】
【０００２】
不眠症は、よく見受けられるものであり、十分に重視し、治療する必要のある睡眠障害であって、毎年３５〜４９％の成年者が不眠症患者になる。人の睡眠調節センターは、大脳の視床下部に位置し、当該部位には数多くの視床下部神経伝達物質があり、睡眠と覚醒の周期を調節する（Ｍｉｇｎｏｔ，  Ｅ．，  Ｔａｈｅｒｉ，  Ｓ．，  ａｎｄ  Ｎｉｓｈｉｎｏ，  Ｓ．，  Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  ｈｙｐｏｔｈａｌａｍｕｓ：  ｅｍｅｒｇｉｎｇ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｔａｒｇｅｔｓ  ｆｏｒ  ｓｌｅｅｐ  ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ．  Ｎａｔ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，  ２００２，  ５  Ｓｕｐｐｌ：  １０７１−１０７５．を参照。）。睡眠に影響し、睡眠を調節するメカニズム、または経路は、数多くの神経伝達物質システム、例えばγ−アミノ酪酸、アデノシン［プリンヌクレオシド］、ドパミン、ｈｙｐｏｃｒｅｔｉｎｓ系、モノアミン系（例えば、５−ヒドロキシトリプタミン、ノルアドレナリン、ヒスタミン）に波及する。
【０００３】
現在、睡眠障害を治療する薬物にはある程度の副作用があるため、薬草と睡眠に役立つその他の天然薬物がますます重視されてくる。ブドウ科ノブドウ属植物は、世界で２５種類あり、そのうち１７種が中国に存在し、広西、広東、雲南、貴州、湖南、湖北、江西及び福建などに幅広く分布する。常用の漢方薬白れん［Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ｊａｐｏｎｉｃａ  （Ｔｈｕｎｂ．）  Ｍａｋｉｎｏ］を除くほか、ノブドウ属植物の大多数は、民間の中草薬であり、活血散お（「お」は、やまいだれに於）、消炎止痛、清熱解毒などの効力を持っており、特にノブドウ属の顕歯ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ．  ｇｒｏｓｅｄｅｎｔａｔａ  ［Ｈａｎｄ．−Ｍａｚｚ．］  Ｗ．  Ｔ．  Ｗａｎｇ）、広東ノブドウ、楝歯玉ブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ｍｅｌｉａｅｆｏｌｉａ）、東北ノブドウ、大葉ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ｍｅｇａｌｏｐｈｙｌｌａ  Ｄｉｅｌｓ  ｅｔ  Ｇｉｌｇ）などは、黄疸型肝炎、風邪風熱、咽喉痛、リウマチ痛、熱中症、酒酔いなどの症状を予防治療し、薬理実験によって、当類の植物の主要成分は、去痰、血脂降下、抗炎、利尿と肝保護の効力があることが実証されている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、睡眠障害を治療できる植物、及びこの種類の植物の中から睡眠障害を治療できる部位を篩い分けて、研究する技術問題を解決しょうとすることを目的とする。睡眠に影響し、睡眠を調節するメカニズムまたは経路は、多くの神経伝達物質システムに関係するため、本発明は、睡眠に影響し、睡眠を調節する多種類のメカニズムまたは経路に総合的な役割を果たす植物抽出物を篩い分けて、研究する。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
上述する問題を解決するために、本発明は以下の技術プランを提供する。
ノブドウ属植物を用いた睡眠障害を予防治療する薬物と保健品の調製への応用。  
ノブドウ属植物抽出物を用いた睡眠障害を予防治療する薬物と保健品の調製への応用。
【０００６】
上述するノブドウ属植物は、顕歯ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ．  ｇｒｏｓｅｄｅｎｔａｔａ  ［Ｈａｎｄ．−Ｍａｚｚ．］  Ｗ．  Ｔ．  Ｗａｎｇ）、広東ノブドウ、楝歯玉ブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ｍｅｌｉａｅｆｏｌｉａ）、東北ノブドウ、大葉ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ｍｅｇａｌｏｐｈｙｌｌａ  Ｄｉｅｌｓ  ｅｔ  Ｇｉｌｇ）、閃光ノブドウ（Ａ．ｂｏｄｉｎｉｅｒｉ  （Ｌｅｖｌ．  ｅｔ  Ｖａｎｔ．）  Ｒｅｈｄ．）、ノブドウ、小葉ノブドウ（Ｗｉｋｉｐｅｄｉａ）、三裂葉ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ｄｅｌａｖａｙａｎａ  （Ｆｒａｎｃｈ．）Ｐｌａｎｃｈ）、白れん、烏頭葉ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ａｃｏｎｉｔｉｌｏｌｉａ  Ｂｕｎｇｅ）、掌裂草ブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ａｃｏｎｉｔｉｆｏｌｉａ  Ｂｇｅ．ｖａｒ．  ｇｌａｂｒａ  Ｄｉｅｌｓ  ｅｔ  Ｇｒｉｇ）、クリンノブドウ、烏律葉ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ｈｕｍｕｌｉｆｏｌｉａ  Ｂｇｅ．）、異葉ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ｈｅｔｅｒｏｐｈｙｌｌａ  （Ｔｈｕｎｂ．）  Ｓｉｅｂ．  ｅｔ  Ｚｕｃｃ．）、羽葉ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ｃｈａｆｆａｎｊｏｎｉ  （Ｌｅｖｌ．  ｅｔ  Ｖａｎｔ．）  Ｒｅｈｄ．などを含む。
【０００７】
上述するノブドウ属植物および／またはノブドウ属植物抽出物は、薬用キャリアまたは食品キャリアと混合可能であり、睡眠障害を予防治療する薬物および／または保健品の調製に用いられる。
【０００８】
上述するノブドウ属植物抽出物は、水、低級アルコール、低級ケトンもしくは酢酸エチルを溶媒として、または、これらの溶媒から任意に選択する混合溶媒で抽出して獲得する抽出物を含む。抽出用溶媒に使われる低級アルコールは、メチルアルコール、エチルアルコールまたはｎーブタノールであり、低級ケトンは、アセトンである。また、抽出方法は、浸漬抽出、還流抽出、超音波抽出、逆流抽出、超臨界抽出を含み、例えば、エチルアルコール：水（体積比９０−１０：１０：９０）の混合溶媒で抽出し、またはエチルアルコール：水（体積比７０：３０）の混合溶媒で抽出する。また、アセトン／水（体積比５０：５０）の還流抽出または直接水で浸漬抽出しても良い。
【０００９】
上述のノブドウ属植物抽出物は、主に蛋白質、アミノ酸、多糖類、無機栄養元素、フェノール類化合物および／またはフラボンを含有し、そのうち、主にアミノ酸、多糖類、フェノール類化合物および／またはフラボンを含有しても良い。また、上述するノブドウ属植物の抽出物は、主にフェノール類化合物および／またはフラボンを含有しても良い。
【発明の効果】
【００１０】
本発明のいわゆる睡眠障害を治療することは具体的に睡眠を促進する作用があることを指し、日常生活の中に使用でき、様々な原因による各種の睡眠障害を緩和し、改善することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明のノブドウ属植物、例えば顕歯ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ．  ｇｒｏｓｅｄｅｎｔａｔａ  ［Ｈａｎｄ．−Ｍａｚｚ．］  Ｗ．  Ｔ．  Ｗａｎｇ）が睡眠障害を予防治療する場合の投薬量は、体重によって０．０５〜５０００ｍｇ／ｋｇ／日であり、最適な投薬量は、０．０５〜２５００ｍｇ／ｋｇ／日である。本発明のノブドウ属植物、例えば顕歯ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ．  ｇｒｏｓｅｄｅｎｔａｔａ  ［Ｈａｎｄ．−Ｍａｚｚ．］  Ｗ．  Ｔ．  Ｗａｎｇ）抽出物が睡眠障害を予防治療する場合の投薬量は、体重によって０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ／日であり、最適な投薬量は、０．０１〜５０ｍｇ／ｋｇ／日である。睡眠障害の種類、程度と個体差（年齢、性別など）が異なるため、本発明の植物またはその抽出物の投薬量は、上述する範囲に限定しない。
【００１２】
本発明の睡眠障害を予防治療する組合せ物は、ノブドウ属植物および／またはノブドウ属植物抽出物を含有することを特徴とする。本発明は、睡眠障害を予防治療する組合せ物を含有する保健品を含み、当該保健品は、睡眠障害の予防治療に適用される。本発明は、睡眠障害を予防治療する組合せ物を含有する薬品も含み、睡眠障害の予防治療に適用される。
【００１３】
上述するノブドウ属植物は、顕歯ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ．  ｇｒｏｓｅｄｅｎｔａｔａ  ［Ｈａｎｄ．−Ｍａｚｚ．］  Ｗ．  Ｔ．  Ｗａｎｇ）、広東ノブドウ、楝歯玉ブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ｍｅｌｉａｅｆｏｌｉａ）、東北ノブドウ、大葉ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ｍｅｇａｌｏｐｈｙｌｌａ  Ｄｉｅｌｓ  ｅｔ  Ｇｉｌｇ）、閃光ノブドウ（Ａ．ｂｏｄｉｎｉｅｒｉ  （Ｌｅｖｌ．  ｅｔ  Ｖａｎｔ．）  Ｒｅｈｄ．）、ノブドウ、小葉ノブドウ（Ｗｉｋｉｐｅｄｉａ）、三裂葉ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ｄｅｌａｖａｙａｎａ  （Ｆｒａｎｃｈ．）Ｐｌａｎｃｈ）、白れん、烏頭葉ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ａｃｏｎｉｔｉｌｏｌｉａ  Ｂｕｎｇｅ）、掌裂草ブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ａｃｏｎｉｔｉｆｏｌｉａ  Ｂｇｅ．ｖａｒ．  ｇｌａｂｒａ  Ｄｉｅｌｓ  ｅｔ  Ｇｒｉｇ、クリンノブドウ、烏律葉ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ｈｕｍｕｌｉｆｏｌｉａ  Ｂｇｅ．）、異葉ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ｈｅｔｅｒｏｐｈｙｌｌａ  （Ｔｈｕｎｂ．）  Ｓｉｅｂ．  ｅｔ  Ｚｕｃｃ．）、羽葉ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ｃｈａｆｆａｎｊｏｎｉ  （Ｌｅｖｌ．  ｅｔ  Ｖａｎｔ．）  Ｒｅｈｄ．）などを含む。
【００１４】
上述するノブドウ属植物抽出物は、水、低級アルコール、低級ケトンもしくは酢酸エチルを溶媒として、またはこれらの溶媒から任意に選択する混合溶媒で抽出して獲得する抽出物を含む。抽出用溶媒に使われる低級アルコールは、メチルアルコール、エチルアルコールまたはｎーブタノールであり、低級ケトンは、アセトンである。また、抽出方法は、浸漬抽出、還流抽出、超音波抽出、逆流抽出、超臨界抽出を含む。本発明のノブドウ属植物抽出物は、主に蛋白質、アミノ酸、多糖類、無機栄養元素、フェノール類化合物および／またはフラボンを含有し、そのうち、主にアミノ酸、多糖類、フェノール類化合物および／またはフラボンを含有しても良い。また、主にフェノール類化合物および／またはフラボンを含有してもよい。
【００１５】
本発明の植物またはその抽出物は、睡眠障害を予防治療する薬物または保健品の調製に用いる際、更に各種の鉱質、特に生物体に不足しやすい必須元素、微量必須元素を補充できる効力がある鉱質を加えても良い。
【００１６】
そのほか、本発明の植物またはその抽出物を、睡眠障害を予防治療する薬物或いは保健品の調製に用いる際、更に他の天然薬物、アミノ酸および／またはビタミンを加えても良い。ここで、いわゆる天然薬物は特殊な制限がなく、特に精神に効力がある霊芝、じおう、棗、ごみし、酸棗仁などを薦める。そのほか、鎮静作用がある薫衣草、柏子仁、遠志、合歓皮などを選択しても良い。これらの植物薬の形態は、抽出されたエキス剤、精油、薬茶などがあり、特殊な制限はない。アミノ酸についても特殊な制限はなく、グルタミン、トリブタミン、リジン、ロイシン、グルタミン酸、イソロイシン、メチオニンなどがある。ビタミンについても特殊な制限はなく、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、葉酸、ビタミンＣ、ビタミンＥなどがある。
【００１７】
本発明の抽出物を、睡眠障害を予防治療する薬物または保健品の調製に用いる際、更に他の成分、例えばアロエ、へリックス、イチョウの葉、ビフィドバクテリウムなどを加えても良い。
【００１８】
本発明のノブドウ属植物またはその抽出物は、各種の薬品または保健品の製造に用いられ、本発明のいわゆる保健品は、本発明のノブドウ属植物または本発明のノブドウ属植物の抽出物を食品の中に入れて、保健食品を製造することを含む。
【００１９】
本発明の薬品または保健品は、ノブドウ属植物またはノブドウ属植物の抽出物を含有さえすればよく、特殊な制限がない。例えば、その形態は、溶液、懸濁液、粉、固体成型物などの如何なる一種でも良く、剤型が錠剤、カプセル、粉末、顆粒などであっても良い。また、他の薬品とともに使用しても良い。
【００２０】
（実施例１）
＜調製方法１＞
乾燥茎葉を３００グラム取り（顕歯ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ．ｇｒｏｓｅｄｅｎｔａｔａ  ［Ｈａｎｄ．−Ｍａｚｚ．］  Ｗ．  Ｔ．  Ｗａｎｇ）、その茎葉は藤茶（出所：海南、香港中国語大学こう毓林（「こう」は糸偏に侯）が鑑定する）と呼ばれる。この乾燥茎葉を水の中に浸し、還流抽出の方法で３回抽出し、毎回４５分間かけて、抽出液を熱いうちに濾過し、濾過液を小さい体積まで蒸発させ、濃縮された水溶液を乾燥させ、抽出物９２グラム（コード：ＥＣＢＲＣ−  Ｔ１）を得た。その回収率は、３０．７％である。測定によって、フラボン８１．２％、ポリフェノール類成分１．１％、それに少量なアミノ酸、多糖類を含有することが証明された。
【００２１】
＜調製方法２＞
乾燥茎葉を３００グラム取り（Ａ．ｇｒｏｓｅｄｅｎｔａｔａ  ［Ｈａｎｄ．−Ｍａｚｚ．］  Ｗ．  Ｔ．  Ｗａｎｇ）、エチルアルコール／水（７０：３０）の中に浸し、還流抽出の方法で３回抽出し、毎回３０分間かけて、抽出液を熱いうちに濾過し、濾過液を回転蒸発させ（４０℃を上回らない）、エチルアルコールを除去し、濃縮された溶液を冷凍乾燥させた後、粉末状の抽出物８１グラム（コード：ＥＣＢＲＣ−Ｔ２）を得た。その回収率は、２７％である。測定によって、フラボン９０．３％、ポリフェノール類成分１．３％、それに少量のアミノ酸、多糖類を含有することが証明された。
【００２２】
＜調製方法３＞
乾燥ノブドウ属植物の抽出物（Ａ．ｇｒｏｓｅｄｅｎｔａｔａ［Ｈａｎｄ．−Ｍａｚｚ．］Ｗ．Ｔ．Ｗａｎｇ）を１００グラム取り、２００ミルのアセトンの中に溶けて、加熱して、還流抽出（４５℃）し、抽出液を熱いうちに濾過し、濾過液を２０ミルぐらいまで回転蒸発させ、２０〜５０倍の蒸留水で希釈し、４℃で約１２〜２４時間放置し、大量な結晶を析出させた。濾過を通じて結晶を獲得し、乾燥を経た後、結晶物３９グラム（コード：ＥＣＢＲＣ−Ｔ３）を得た。その回収率は、３９％である。測定によって、フラボン９８％、および、ポリフェノール類成分、アミノ酸と多糖類を含有することが証明された。
【００２３】
＜調製方法４＞
乾燥茎葉３００グラムを取り（広東ノブドウＡ．ｃａｎｔｏｎｉｅｎｓｉｓ（Ｈｏｏｋ．  ｅｔ  Ａｒｎ．）Ｐｌａｎｃｈ．，中国語大学のこう毓林（「こう」は糸偏に侯）によって鑑定される）、アセトン／水（５０：５０）で２回還流抽出し、抽出液を熱いうちに濾過し、濾過液を小さい体積まで蒸発させ、濃縮された水溶液を乾燥させ、抽出物２０グラム（コード：ＥＣＢＲＣ−Ｔ４）を得た。測定によって、フラボン５３．９４％、およびポリフェノール類、アミノ酸、多糖類などを含有することが証明された。
【００２４】
＜調製方法５＞
乾燥茎葉３００グラムを取り（楝歯玉ブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ｍｅｌｉａｅｆｏｌｉａ）Ａ．ｍｅｌｉａｅｆｏｌｉａ、中国語大学のこう毓林（「こう」は糸偏に侯）によって鑑定される）、一定濃度のメチルアルコール（メチルアルコール／水９０：１０）の中に浸し、３回超音波抽出を行い、毎回６０分間かけて、抽出液を濾過し、濾過液を回転蒸発させ、メチルアルコールを除去した。濃縮された溶液を乾燥させ、抽出物５９グラム（ＥＣＢＲＣ−Ｔ５）を得た。測定によって、フラボン１４．８％、および、ポリフェノール類、アミノ酸、多糖類を含有することが証明された。
【００２５】
＜調製方法６＞
乾燥茎葉３００グラムを取り（東北ノブドウＡ．ｂｒｅｖｉｐｅｄｕｎｃｕｌａｔ  （Ｍａｘｉｍ．）Ｔｒａｕｔｖ．中国語大学のこう毓林（「こう」は糸偏に侯）によって鑑定される）、酢酸エチルの中に浸し、逆流抽出を２時間行い、抽出液を回転蒸発させ、溶媒を除去した。濃縮された溶液に対し、石油エーテルで脱色を行い、抽出物３６グラム（ＥＣＢＲＣ−Ｔ６）を得た。測定によって、フラボン４６．１％、ポリフェノール類成分９．６％、および、少量のアミノ酸、多糖類を含有することが証明された。
【００２６】
＜調製方法７＞
乾燥茎葉３００グラムを取り（大葉ノブドウ（Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ  ｍｅｇａｌｏｐｈｙｌｌａ  Ｄｉｅｌｓ  ｅｔ  Ｇｉｌｇ）Ａ．ｍｅｇａｌｏｐｈｙｌｌａ  Ｄｉｅｌｓ  ｅｔ．  Ｇｉｌｇ、中国語大学のこう毓林（「こう」は糸偏に侯）によって鑑定される）、ｎ−ブタノールの中に浸し、４回還流抽出し、抽出液を熱いうちに濾過し、濾過液を回転蒸発させ、溶媒を除去した。濃縮された溶液に対しクロロホルム処理を行い、抽出物４４グラム（ＥＣＢＲＣ−Ｔ７）を得た。測定によって、フラボン２０．１％、ポリフェノール類成分２２．３％、および、アミノ酸、多糖類などを含有することが証明された。
【００２７】
＜調製方法８：藤茶粉末の調製方法＞
乾燥茎葉３００グラムを取り（Ａ．ｇｒｏｓｅｄｅｎｔａｔａ［Ｈａｎｄ．−Ｍａｚｚ．］Ｗ．Ｔ．Ｗａｎｇ）、１００メッシュの細かい粉で磨き、必要な時に使うために用意した。
【００２８】
（実施例２）
雄のＣ５７／Ｂ６マウスを取り、フェノバルビタール（３２ｍｇ／ｋｇ）を腹腔に注射し、キャスティングした。続いて、ＥＣＢＲＣ−Ｔ２（３０ｍｇ／ｋｇ）、メラトニン（３０ｍｇ／ｋｇ）とカノコ草（１４０ｍｇ／ｋｇ）をそれぞれ経胃投与し、立ち直り反射の欠失を観察した。単側ＡＮＯＶＡＲの統計分析によると、各群は、対照群（蒸留水）と比べると、睡眠時間の面で顕著な差異（ｐ＜０．０５，ｎ＞４）があり、睡眠時間の増加が高いほうから順に、メラトニン（Ｓｉｇｍａ，ロット番号１２Ｋ１４７１）、ＥＣＢＲＣ−Ｔ２、カノコ草（Ｒｏｈａ  Ａｒｚｎｅｉｍｉｔｔｅｌ，ロット番号００７４２０９２０）となった。この結果は、ＥＣＢＲＣ−Ｔ２が、メラトニンと相似する睡眠補助作用を持つことを表している（図１を参照。）。
【００２９】
（実施例３）
Ｃ５７／Ｂ６マウスをランダムに群を分け、フェノバルビタールナトリウム（１６ｍｇ／ｋｇ）（Ｓｉｇｍａ）を低い投与量で腹腔に注射し、３０分間経過後に、ＥＣＢＲＣ−Ｔ２（３０ｍｇ／ｋｇ）、メラトニン（３０ｍｇ／ｋｇ）とカノコ草（１４０ｍｇ／ｋｇ）をそれぞれ経口投与する。動物を３７℃の熱いプレートに置いて、立ち直り反射の欠失によって、睡眠開始の潜伏期と睡眠持続時間を測定した。実験によって、ＥＣＢＲＣ−Ｔ２は、鎮静催眠作用があることが実証された（表１）。
【００３０】
【表１】
2008501647.tif 000002
【００３１】
（実施例４）
Ｃ５７／Ｂ６マウスをランダムに群を分け、フェノバルビタールナトリウム（１６ｍｇ／ｋｇ）を腹腔に注射し、３０分間してから、異なる投与量でそれぞれＥＣＢＲＣ−Ｔ１（１０、５０、１００、５００ｍｇ／ｋｇ）を経口投与する。動物を３７℃の熱いプレートに置いて、立ち直り反射の欠失によって、睡眠開始の潜伏期と睡眠持続時間を測定する。実験によって、ＥＣＢＲＣ−Ｔ１が睡眠促進の作用があり、しかも投与量と効力が一定の関係がある（表２）ことが実証された。
【００３２】
【表２】
2008501647.tif 000003
【００３３】
（実施例５）
Ｃ５７／Ｂ６マウスをランダムに群を分け、フェノバルビタールナトリウム（１６ｍｇ／ｋｇ）を腹腔に注射し、３０分間してから、異なる投与量でそれぞれＥＣＢＲＣ−Ｔ３とメラトニン（Ｓｉｇｍａ，ロット番号１２Ｋ１４７１）を経口投与する。動物を３７℃の熱いプレートに置いて、立ち直り反射の欠失によって、睡眠開始の潜伏期と睡眠持続時間を測定する。実験によって、ＥＣＢＲＣ−Ｔ１が睡眠促進の作用があり、しかも投与量と効力が一定の関係があって、それに、ＥＣＢＲＣ−Ｔ３がマウスの睡眠時間を投与量によって延長できて、しかもメラトニン群と同期に増加することが実証された。（表３）
【００３４】
【表３】
2008501647.tif 000004
【００３５】
（実施例６：マウス活動の遠隔測定）
Ｃ５７／Ｂ６雄のマウスの腹腔に、麻酔薬ケタミン（Ａｌｆａｓａｎ，ロット番号１１２３１９）７５ｍｇ／ｋｇとキシラジン（Ａｌｆａｓａｎ，ロット番号０７３２１０）１０ｍｇ／ｋｇを注射し、手術を通じてモニター（活動と温度を遠隔測定する）を包埋した後Ｘ線で撮影し、包埋の正確な位置を確定した。２週間で回復適応させ、ＥＣＢＲＣ−Ｔ３、ｚｏｐｉｃｌｏｎｅ（Ｔｏｃｒｉｓ，ロット番号１０９４）と安神補脳液（吉林敖東延辺薬業株式有限コンス、ロット番号：０３０６５９）をそれぞれ経口投与した。投与してから６時間の後、蒸留水群と比べると、ＥＣＢＲＣ−Ｔ３（２０ｍｇ／ｋｇ）群マウスの睡眠時間が、顕著に延長された（表４）。また、２％エチルアルコール群と比べると、ｚｏｐｉｃｌｏｎｅ（２０ｍｇ／ｋｇ）群マウスの睡眠時間が、顕著に延長された（表５）。その結果は、ＥＣＢＲＣ−Ｔ３（２０ｍｇ／ｋｇ）が、ｚｏｐｉｃｌｏｎｅ（２０ｍｇ／ｋｇ）と相似する程度の鎮静催眠作用を有することを表している。
【００３６】
【表４】
2008501647.tif 000005
【００３７】
【表５】
2008501647.tif 000006
【００３８】
（実施例７：生体器官実験）
成年雄のモルモットに対し安楽死を実施し、頸切断でモルモットの大動脈を分離した。環状動脈を、炭酸ガスをいれるクレブス液の中に浸し、そのうち、３μＭのインドメサシン環（内因性環前立腺素の生成を防ぐ）を含有し、静止張力が１ｇであった。慎重に操作し、環上の内皮細胞内層を除去・損害せずに、一酸化炭素に依存する弛緩作用の中断を防止した。当該組織を１〜２時間平衡させ、４０ｍＭＫＣｌでプリ収縮させた。洗浄した後、ＥＣＢＲＣ−Ｔ３を直接静止張力の動脈に入れ、收縮を引き起す性能を測定し、１μＭのｐｈｅｎｙｌｅｐｈｅｒｉｎｅで動脈をプリ収縮させ、弛緩効力を評価した。ＥＣＢＲＣ−Ｔ３は、動脈平滑筋に対し収縮作用がないが、その後のプリ収縮実験によって、抽出物５がモルモット動脈に対し濃度によって弛緩作用があり、その半数の有効濃度が６００μＭであって、ＥＣＢＲＣ−Ｔ３が血管平滑筋を拡張することによって睡眠補助の役割を果たすことができることが実証された（図２を参照。）。
【００３９】
（実施例８：亜急性毒性実験）
ＯＥＣＤ指南によると、半数の致死量は、薬物毒性測定の受け入れられる方法と見なされない。これに代わって、一回で高い投与量または２４時間以内に多い投与量を投与する方法を採用する。実験と結果を以下に示す。
【００４０】
ＳＤ大鼠（８週齢、雌と雄がそれぞれ半数）２群用意し、１群は、５匹である。藤茶抽出物（方法２，ＥＣＢＲＣ−Ｔ２）（２０００ｍｇ／ｋｇ／２４時間）または蒸留水（１０ｍｌ／ｋｇ／２４時間）をそれぞれ経胃投与し、毎日繰り返して投与した。１４日間継続し、動物の毒副反応を観察した。その後、無痛の致死術を行い、毒物切片検査を行った。その結果によると、対照群と比べて、大鼠の体重が増加し、食物摂取量、皮毛のカラーと艶は、顕著な差異がないことがわかった。また、心、肺、腎、肝臓、脾臓、生殖器官、副腎、脳下垂体などの臓器指数は、顕著な差異がなかった。また、白血球数、赤血球数、血小板、血色素と血球容積などの血液学指標は、顕著な差異がなかった。また、総ビリルビン量、ＳＧＯＴ、ＳＧＰＴ、カルバミド、クレアチニン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、塩素イオンと二酸化炭素などの生物化学指標も、顕著な差異がなかった。
【００４１】
この結果によると、ＳＤ大鼠に藤茶抽出物（ＥＣＢＲＣ−Ｔ２）２０００ｍｇ／ｋｇ／２４時間を毎日投与することを１４日間継続後、動物は、如何なる急性毒副反応および死亡が発生しないため、その半数致死量は、２０００ｍｇ／ｋｇ（人の投与量の２００倍程度）を上回ることがわかった。
【００４２】
（実施例９：Ｉ期臨床実験）
鄭州大学で初歩的な臨床実験（Ｉ期臨床）を行った。２９人の健康な志願者を対象とし、これらの志願者は、かつて不眠症に罹ったことがなく、健康状況は良好である。脳電図テストを三日間連続して行い、測定時間は毎晩１１：３０〜翌日の６：３０であり、毎日７時間行った。１日目は、基線テストと環境適応性考察を行い、２日目と３日目は、それぞれプラシーボ（２００ｍｇ  小麦澱粉）または藤茶抽出物（方法２，ＥＣＢＲＣ−Ｔ２）２００ｍｇを投与した。二重盲検法を採用し、如何なるプラシーボの影響または観察偏差を取り除いた。平均基線値で対合ｔ検定を行った。その結果は、プラシーボと比べて、藤茶抽出物がＮＲＥＭ睡眠時間を６％顕著に増加すると同時に、睡眠ウエイト時間を３％減少できることを示した。被検者の基線値の大きい偏差を考慮すると、当該分析は顕著な統計学の意義を持つが、個別の被検者の薬物医療への反応を正確に反映できない。詳細なデータ分析によると、総体サンプル９１％の被検者が薬物治療に陽性反応があり、即ち、睡眠ウエイト時間を減少できたり、ＮＲＥＭ睡眠時間を増加できたり、または両者の効果がともに現れた。自身の対照分析によると、７１％の被検者の睡眠ウエイト時間が改善され、睡眠ウエイト時間が平均して５３．８ρ４．７％低減した。また、８３％の被検者のＮＲＥＭ睡眠時間が改善され、そのＮＲＥＭ睡眠時間が平均して２４．２ρ６．１％向上した。この詳しい分析によると、藤茶抽出物は、人体に対し鎮静催眠作用があることが明らかになった（表６を参照。）。
【００４３】
以下の表において、ＮＲＥＭＳは非速眼動睡眠（正相睡眠または除波睡眠とも呼ばれる。）を表し、ＲＥＭＳは速眼動睡眠（異相睡眠または速波睡眠とも呼ばれる。）を表す。
【００４４】
【表６】
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【００４５】
（実施例１０：初歩的な臨床プリ実験）
不眠症患者４人を対象とし、これらの不眠症患者は、他の生理的な病気はない。不眠症患者に対して、毎晩就寝する前に、それぞれ藤茶粉末１グラム（実施例１の調製方法８）を飲ませ、これを連続して一ヶ月行った。その結果、４人の患者は、毎日飲んでから３０分後に、眠気が起きて、しかも眠りこむことができた。夜間の睡眠時間が延長し、翌日の精神感覚が良好であった。統計データによると、藤茶粉末が人体に対し睡眠に助力し、熟睡を増加する作用があることがわかった。
【図面の簡単な説明】
【００４６】
【図１】Ｃ５７／Ｂ６モデルマウスの睡眠時間への影響を示したグラフ図である。
【図２】ＥＣＢＲＣ−Ｔ３濃度が生体モルモットの動脈弛緩作用への影響を示したグラフ図である。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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