(57)【要約】【課題】フィブリン混合型骨折癒合用の半固形性骨芽細胞組成物及びその製造方法を提供する。【解決手段】骨組織から骨芽細胞を分離し、これをＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ'ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ'ｓ  Ｍｅｄｉｕｍ）またはα−ＭＥＭ（Ｍｉｎｉｍｕｍ  Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  Ｍｅｄｉｕｍ、Ａｌｐｈａ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ）培養液中において増殖培養させて骨芽細胞懸濁液を製造する懸濁液製造段階と、前記骨芽細胞懸濁液に凝固因子を混合して骨芽細胞治療剤を製造する治療剤製造段階とからなる構成とした。これにより、骨折癒合のために骨芽細胞とフィブリンの混合物を骨折癒合すべき部位に注入するため、臨床的には拒否反応がなく、均一な細胞分布を表し、患部に固定的に半固形性骨芽細胞組成物を注入するため、効果的で迅速な骨折癒合が可能になる。【選択図】図３
2008532723.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
骨組織から骨芽細胞を分離し、これをＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ'ｓ  Ｍｏｄｉｆｉ
ｅｄ  Ｅａｇｌｅ'ｓ  Ｍｅｄｉｕｍ）またはα−ＭＥＭ（Ｍｉｎｉｍｕｍ  Ｅｓｓｅｎ
ｔｉａｌ  Ｍｅｄｉｕｍ、Ａｌｐｈａ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ）培養液中において増
殖培養して骨芽細胞懸濁液を製造する懸濁液製造段階と、
前記骨芽細胞懸濁液に凝固因子を混合して骨芽細胞治療剤を製造する治療剤製造段階と
、からなることを特徴とする、フィブリン混合型骨折癒合用の半固形性骨芽細胞組成物の
製造方法。
【請求項２】
前記凝固因子は、トロンビン（ｔｈｒｏｍｂｉｎ）とフィブリノーゲン（ｆｉｂｒｉｎ
ｏｇｅｎ）を混合したものであることを特徴とする、請求項１に記載のフィブリン混合型
骨折癒合用の半固形性骨芽細胞組成物の製造方法。
【請求項３】
前記治療剤製造段階は、
凍結乾燥状態のトロンビンをＤＭＥＭまたはα−ＭＥＭ液体培地に溶解させた後、溶解
された前記トロンビン１〜１００ＩＵ／ｍｌを前記骨芽細胞混合液に混合するトロンビン
混合段階と、
凍結乾燥状態のフィブリノーゲンをＤＭＥＭまたはα−ＭＥＭ液体培地に溶解させた後
、溶解された前記フィブリノーゲン２０〜１００ｍｇ／ｍｌを、前記トロンビンの混合さ
れた骨芽細胞混合液に混合するフィブリノーゲン混合段階と、
からなることを特徴とする、請求項２に記載のフィブリン混合型骨折癒合用の半固形性骨
芽細胞組成物の製造方法。
【請求項４】
請求項１のフィブリン混合型骨折癒合用の半固形性骨芽細胞組成物の製造方法によって
製造された骨芽細胞組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、フィブリン混合型骨折癒合用の半固形性骨芽細胞組成物及びその製造方法に
係り、より詳細には、激しい骨折の治療時に骨折癒合のために患部に注入できる、骨芽細
胞とフィブリンとの混合物を含む治療剤を提供できるフィブリン混合型骨折癒合用の半固
形性骨芽細胞組成物及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
一般に、単純骨折の場合には数週間の石膏固定でも充分な治癒ができるが、ひどい骨折
の場合や骨欠損がある場合には骨移植術を施行している。大部分の医者達に好まれている
骨移植の方法は自家移植（ａｕｔｏｇｒａｆｔ）で、これは、患者の身体の一部、特に、
腸骨稜(ｉｌｉａｃ  ｃｒｅｓｔ)から骨を採取して移植するもので、自分の骨を移植する
から最も自然で良い結果が予測できる。
【０００３】
しかし、この自家移植（ａｕｔｏｇｒａｆｔ）には、極ひどい痛みが伴われる他、骨を採
取した部位の圧痛と感覚消失の恐れがあり、骨移植に伴う手術を追加的に受けなければな
らないため、長い入院期間と回復期間が必要とされ、その分治療費が上昇するなどの問題
点がある。しかも、身体は骨移植のための余分の骨を有しているわけではなく、骨移植の
供与部を確保するのには限界がある。多くの骨移植術が必要な脊椎手術において自家骨移
植による合併症は２３％程度と高く報告されている。
【０００４】
このような問題点を補完するために実施されている同種移植（ａｌｌｏｇｒａｆｔ）は
、主として死体から骨を得ているもので、骨移植のための追加的な二次手術が必要でない
という利点がある反面、滅菌過程中に骨の強度が弱くなる他、拒否反応の発生、肝炎やＡ
ＩＤＳのような伝染性疾患に感染されるという致命的な欠点がある。また、骨形成効果が
不十分である他、免疫反応、吸収、再骨折などの不具合からその使用は極めて制約的であ
る。したがって、この術式は、食品医薬品局（Ｆｏｏｄ  ＆  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓ
ｔｒａｔｉｏｎ）で感染に対する骨組織銀行への規制を強化した１９９３年後半からは次
第に使用が減少してきた。
【０００５】
骨髄注入術（ｂｏｎｅ  ｍａｒｒｏｗ  ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）は、骨髄内の骨生成前駆
細胞（ｏｓｔｅｏｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  ｃｅｌｌ）が骨形成を誘導し促進するというハ
ギンス（Ｈｕｇｇｉｎｓ；１９３１）、フリーデンシュタイン（Ｆｒｉｅｄｅｎｓｔｅｉ
ｎ；１９７３）、アシュトン（Ａｓｈｔｏｎ；１９８０）等による主張に基礎付けられる
ものである。骨髄注入術は、主に骨折治癒のために単独で遂行されることもあるが、骨移
植と並行して遂行されることもある。なお、この術式は、他の骨移植術とは違い、供与部
位の皮膚切開による手術でないため、供与部位の罹病率(ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ)、合併症や
副作用がないという大きな利点を有する。
【０００６】
その後、多くの臨床適用ケースから良い結果も発表されたが、この骨髄注入術は、多く
の結果に一貫性がなく、一つの部位から採取できる骨髄の量が制限されており、また骨髄
に含まれた骨形成前駆細胞の数は極めて制限されるという理由から、理論的根拠が不明確
である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は上記の問題点を解決するためのもので、その目的は、骨折癒合のために骨芽細
胞とフィブリンの混合物を骨折癒合すべき部位に注入することによって臨床的には拒否反
応がなく、また、骨芽細胞懸濁液のみを注入することに起因する問題点、すなわち、注入
された骨芽細胞が骨折癒合部位を外れて血流に乗って他の部位に伝播され、不所望の部位
に骨組織を形成する問題点なども補完するよう、ある程度成形された組成物を注入するこ
とによって効果的で迅速に骨折癒合を可能にする、フィブリン混合型骨折癒合用の半固形
性骨芽細胞組成物及びその製造方法を提供することにある。
【０００８】
また、本発明の他の目的は、骨芽細胞とフィブリンを骨折癒合すべき部位に注入する際
に最小限の切開で手術が可能であり、放射線を用いる際に傷部位の切開なしに簡便で効果
的に骨芽細胞とフィブリンの混合組成物を注入して骨折癒合ができる、フィブリン混合型
骨折癒合用の半固形性骨芽細胞組成物及びその製造方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
上記の一特徴において上記目的は、骨組織から骨芽細胞を分離し、これをＤＭＥＭ（ダ
ルベッコ変法イーグル培地；Ｄｕｌｂｅｃｃｏ'ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ'ｓ  
Ｍｅｄｉｕｍ）またはα−ＭＥＭ（Ｍｉｎｉｍｕｍ  Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  Ｍｅｄｉｕｍ
、Ａｌｐｈａ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ）培養液中において増殖培養して骨芽細胞懸濁
液を製造する懸濁液製造段階と、前記骨芽細胞懸濁液に凝固因子を混合して骨芽細胞治療
剤を製造する治療剤製造段階と、からなるフィブリン混合型骨折癒合用の半固形性骨芽細
胞組成物の製造方法によって達成される。
【００１０】
ここで、前記凝固因子は、トロンビン（ｔｈｒｏｍｂｉｎ）とフィブリノーゲン（ｆｉ
ｂｒｉｎｏｇｅｎ）とを混合してなる。
【００１１】
ここで、上記治療剤製造段階は、凍結乾燥状態のトロンビンをＤＭＥＭまたはα−ＭＥ
Ｍ液体培地に溶解させた後、該溶解されたトロンビン１〜１００ＩＵ／ｍｌを前記骨芽細
胞混合液に混合するトロンビン混合段階と、凍結乾燥状態のフィブリノーゲンをＤＭＥＭ
またはα−ＭＥＭ液体培地に溶解させた後、該溶解された前記フィブリノーゲン２０〜１
００ｍｇ／ｍｌを、前記トロンビンの混合された骨芽細胞混合液に混合するフィブリノー
ゲン混合段階と、からなる。
【００１２】
本発明の他の特徴によれば、上記のフィブリン混合型骨折癒合用の半固形性骨芽細胞組
成物の製造方法によって製造された骨芽細胞組成物が提供される。
【発明の効果】
【００１３】
本発明のフィブリン混合型骨折癒合用の半固形性骨芽細胞組成物及びその製造方法によ
れば、骨折癒合のために骨芽細胞とフィブリンとの混合物を骨折癒合すべき部位に注入す
るため、臨床的には拒否反応がなく、また、注入された骨芽細胞が骨折癒合部位を外れて
血流に乗って他の部位に伝播され、不所望の部位に骨組織を生成してしまう、骨芽細胞懸
濁液のみを注入することから生じる問題点なども補完するよう、ある程度成形された組成
物を注入するため、効果的で迅速に骨折癒合をすることが可能になる。
【００１４】
また、本発明によれば、骨芽細胞とフィブリンを骨折癒合すべき部位に注入する際に最
小限の切開で手術が可能であり、かつ、放射線を用いる際に傷部位の切開なしに簡便で効
果的に骨芽細胞とフィブリンの混合組成物を注入して骨折癒合をすることが可能になる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
以下、本発明に係るフィブリン混合型骨折癒合用の半固形性骨芽細胞組成物及びその製
造方法の好適な実施形態を、添付の図面を参照しつつ詳細に説明する。
【００１６】
インプラントや骨移植などの既存の骨関連疾患の治療法がもつ欠点を克服するためには
、既存の治療方法の改善と共に、窮極的な治療方法として、骨芽細胞を培養し、患部に副
作用のない自己由来骨芽細胞を移植する技術が開発されてきた。
【００１７】
しかし、より速い骨折癒合のためには細胞とマトリクスとの混合が必須であり、そうす
れば、より多様な損傷の治療が可能となり、細胞のみからなる液状の骨芽細胞懸濁液注入
では治療不可能なより多くの骨疾患が治療可能になる。
【００１８】
骨芽細胞とフィブリンの混合物である骨折癒合用の半固形性骨芽細胞治療剤は、細胞治
療（ｃｅｌｌ  ｔｈｅｒａｐｙ）に基礎付けられる液状の骨芽細胞懸濁液注入法のより進
歩した製品であるといえる。すなわち、既存の細胞のみを移植する液状の骨芽細胞懸濁液
注入法は、限定された類型の骨欠損のみ治療可能であり、また、注入された骨芽細胞が骨
形成部位を離脱して血流に乗って他の部位に伝播され、不所望の部位に骨組織を生成させ
るという問題点があるのに対し、本発明のフィブリン混合型半固形性骨芽細胞治療剤は、
骨芽細胞とフィブリンの混合体としたため、より広範囲の骨折と深刻な骨疾患も迅速で效
果的に治療できる。
【００１９】
フィブリングルー（Ｆｉｂｒｉｎ  ｇｌｕｅ）は、動物モデル（ａｎｉｍａｌ  ｍｏｄ
ｅｌ）で新血管形成（ｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ）を促進することが報告さ
れており（Ｓｃｈｌａｇ  Ｇ．Ｃｌｉｎｕｃａｌ  Ｏｒｔｈｏｐｅｄｉｃｓ、１９８８）
、そして、ミネラルを除いた骨粉（ｄｅｍｉｎｅｒａｌｉｚｅｄ  ｂｏｎｅ  ｐｏｗｄｅ
ｒ）、生理活性ガラス（ｂｉｏａｃｔｉｖｅ  ｇｌａｓｓ）、ヒドロキシアパタイト（ｈ
ｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅ）及び珊瑚顆粒（ｃｏｒａｌ  ｇｒａｎｕｌｅｓ）のような
骨代替用インプラント材を外科的に移植する際に、移植に用いる方法の適用性を高めるの
に非常に有効である。
【００２０】
また、ＴＧＦ−β−１(Ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ−β
−１)、ＴＧＦ−β−ｒｅｌａｔｅｄ  ＢＭＰ（Ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ  ｇｒｏｗｔ
ｈ  ｆａｃｔｏｒ−β  ｒｅｌａｔｅｄ  Ｂｏｎｅ  ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ  ｐｒ
ｏｔｅｉｎ）のような生物活性剤の骨基質への効果的な伝達体として機能し、最近では、
組織工学的適用において細胞を効果的に伝達するマトリクス構成物質として注目を受けて
いると報告されたことがある（Ｈｕａｎｇ  Ｑ．Ｔｉｓｓｕｅ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ
２００２）。本組成物においてフィブリングルーをマトリクスの材料とし、これを骨芽
細胞と混合して骨折癒合に適用するにおいて、フィブリングルーの上記特性によって早い
骨折癒合が進行される。
【００２１】
図１は、フィブリン重合カスケード（Ｆｉｂｒｉｎ  ｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ  
ｃａｓｃａｄｅ）を示す図であり、図２は、フィブリンマトリクス（Ｆｉｂｒｉｎ  ｍａ
ｔｒｉｘ）の重合を示す模式図である。
【００２２】
骨折治癒のためには骨折部位の固定が先行されなければならない他、骨折部位に充分な
血液供給と適当な応力が作用しなければならない。一旦骨折すると、その周囲の皮膚、筋
肉、靭帯、血管、神経及び関節などの損傷につながる場合が多い。
【００２３】
骨折の治癒過程は組織学的に炎症期、復元期、再形成期の３段階に区分されるか、これ
らの段階は厳格に区分されるものではなく、連続的に重複しながら進行される。
【００２４】
炎症期(Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ)は、骨折誘発外傷によって骨基質内の細胞、血管だ
けでなく、骨折周辺部の骨膜と筋肉などの軟部組織も損傷され、骨髄腔内及び骨膜下に血
腫が形成される段階である。損傷された細胞から遊離される炎症誘導体は、血管拡張及び
血しょう滲出を誘発し、結果的に急性浮腫を招く。新しい基質の形成が始まりながら復元
期に移る。
【００２５】
復元期（Ｒｅｐａｉｒ）は、骨折部に形成された血腫の基質化によって始まる。血腫は
、繊維素骨格を生成して復元細胞を取り入れ、これらの細胞によって形成される成長因子
や他のタンパク質が、骨折復元の一番目の段階である細胞移動及び増殖と復元基質の生成
を誘導する。骨折治癒時に骨組織を生成する大部分の細胞は、骨折部位に肉芽組織と共に
現れ、繊維組織、軟骨及び織骨等で構成された仮骨を、骨折部の周囲に形成する。仮骨の
無機質化過程は、骨原性細胞の一連の活動によって始まる。これらの細胞が合成する基質
には、規則的な空間を持っている１型膠原性繊維を多量含有し、この空間中にリン酸カル
シウム複合体（ｃａｌｃｉｕｍ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ）が沈着でき
る条件を提供する。しかし、この復元期は、骨癒合が完成した段階ではなく、よって、未
熟な骨折仮骨は正常骨組織よりも弱く、再形成期で正常骨組織の強度を得るようになる。
【００２６】
再形成期（Ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ）では、仮骨内の織骨は成熟層板骨に取り替えられ、
不要で且つ過形成された仮骨は次第に吸収される。放射性同位元素検査から、Ｘ線写真上
、骨折癒合が完成し、骨折部の機能が正常に回復した後にも、長期間骨折部位に同位元素
の活動性増加を見ることができる。したがって、骨折の臨床的癒合がおきて数年間、再形
成期は続く。
【００２７】
図３は、本発明によるフィブリン混合型骨折癒合用の半固形性骨芽細胞組成物の製造工
程を示すフローチャートである。
【００２８】
図３を参照すると、本発明によるフィブリン混合型骨折癒合用の半固形性骨芽細胞組成
物の製造方法は、骨組織から骨芽細胞を分離し、これをＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ'ｓ
Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ'ｓ  Ｍｅｄｉｕｍ）またはα−ＭＥＭ（Ｍｉｎｉｍｕ
ｍ  Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  Ｍｅｄｉｕｍ、Ａｌｐｈａ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ）培養
液に増殖培養して骨芽細胞懸濁液を製造する懸濁液製造段階（Ｓ１００）と、骨芽細胞懸
濁液に凝固因子を混合して骨芽細胞治療剤を製造する治療剤製造段階（Ｓ２００）とから
なる。
【００２９】
ここで、凝固因子は、トロンビン（ｔｈｒｏｍｂｉｎ）とフィブリノーゲン（ｆｉｂｒ
ｉｎｏｇｅｎ）を混合したものとする。
【００３０】
ここで、また、治療剤製造段階は、凍結乾燥状態のトロンビンをＤＭＥＭまたはα−Ｍ
ＥＭ液体培地に溶解させた後、溶解されたトロンビン１〜１００ＩＵ／ｍｌを前記骨芽細
胞混合液に混合するトロンビン混合段階（Ｓ２１０）と、凍結乾燥状態のフィブリノーゲ
ンをＤＭＥＭまたはα−ＭＥＭ液体培地に溶解させた後、溶解されたフィブリノーゲン２
０〜１００ｍｇ／ｍｌを、当該トロンビンの混合された骨芽細胞混合液に混合するフィブ
リノーゲン混合段階（Ｓ２２０）とからなる。
【００３１】
一方、トロンビンの濃度によってフィブリン（Ｆｉｂｒｉｎ）の重合時間（ｐｏｌｙｍ
ｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｔｉｍｅ）が決定される。すなわち、トロンビンの濃度によって重
合時間が４時間〜３秒の時間範囲に短縮されることができる。本発明の組成物が、骨折癒
合部位への注入時に、骨芽細胞と凝固因子が損傷位置から流下しないように造形され、該
組成物が患部に注入されて迅速にマトリクスを形成し、骨芽細胞による骨形成のための最
適のフィブリン孔マトリクス（ｆｉｂｒｉｎ  ｐｏｒｅ  ｍａｔｒｉｘ）を形成するよう
に、トロンビンの濃度を適合させた。
【実施例】
【００３２】
以下、本発明の実施例によるフィブリン混合型骨折癒合用の半固形性骨芽細胞組成物の
効果を、添付の図面を参照しつつ詳細に説明する。
【００３３】
まず、組織から細胞を分離し、これをＤＭＥＭまたはα−ＭＥＭ培養液中で４週間増殖
培養して充分な数の骨芽細胞を増殖した後、ＤＭＥＭまたはα−ＭＥＭ培養液で浮遊して
骨芽細胞懸濁液を用意する。
【００３４】
医薬品として市販中のフィブリングルーセット（ｆｉｂｒｉｎ  ｇｌｕｅ  ｓｅｔ）を
室温に用意した後、凍結乾燥状態のフィブリノーゲンの小瓶（ｖｉａｌ）に適量のＤＭＥ
Ｍまたはα−ＭＥＭ液体培地を入れてフィブリノーゲンを溶解させる。また、凍結乾燥状
態のトロンビンの小瓶（ｖｉａｌ）にも適量のＤＭＥＭまたはα−ＭＥＭ液体培地を添加
して溶解させる。液状の骨芽細胞懸濁液に溶解させたトロンビンを１/５体積で添加した
のちよく混合する。トロンビンと混合された骨芽細胞懸濁液とフィブリノーゲンを同量混
合して５００μＬの骨芽細胞組成物を用意する。
【００３５】
体重３ｋｇ内外のニュージーランド白色うさぎ（雌雄区別なし）３０匹を、１５匹は骨
移植のための対照群とし、残りの１５匹はフィブリン混合型骨折癒合用の半固形性骨芽細
胞組成物移植のための実験群とした。
【００３６】
うさぎの前腕部をＨｅｎｒｙ到達法によって縦切開して橈骨幹部を露出した後、鋸（ｓ
ａｗ）を用いて１５ｍｍの骨欠損を作り、骨欠損部位の骨膜は完全に除去した。対照群は
予め長骨から海綿骨を採取した後、骨欠損部位に骨移植をし、皮膚及び皮下組織を縫合し
た。実験群は欠損部位を空いた空間にするために丁寧に皮膚及び皮下組織を縫合した後、
３週後に図４に示すように骨芽細胞組成物を注入した。
【００３７】
実験３週、６週、９週にＸ線撮影をした後、上部折骨部、下部折骨部、骨欠損部の骨癒
合度合によってそれぞれ点数を付け、これらの和で骨折癒合を評価した。
【００３８】
損傷毎の骨折癒合を測定するための方法
【表１】
2008532723.tif 000003
【００３９】
対照群と実験群の骨移植９週後の結果
【表２】
2008532723.tif 000004
図５は、うさぎの前腕部を１５ｍｍ骨折させた後、フィブリンと骨芽細胞を混合した半
固形性骨芽細胞治療剤注入６週後に撮ったＸ線写真で、完全な骨折癒合ができたことがわ
かる。
【００４０】
図６は、うさぎの前腕部を１５ｍｍ骨折させた後、フィブリンと骨芽細胞を混合した半
固形性骨芽細胞治療剤注入６週後に撮った組織切片のＨｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ−Ｅｏｓｉ
ｎ染色写真で、単独で形成された骨（ｂｏｎｅ  ｉｓｌａｎｄ）が観察できる。
【００４１】
図７は、うさぎの前腕部を１５ｍｍ骨折させた後、フィブリンと骨芽細胞混合物注入６
週後に撮った組織切片のマッソントリクローム（Ｍａｓｓｏｎ'Ｔｒｉｃｈｒｏｍｅ）染
色写真で、膠原質が所定のパターンに沿って生成されて骨形成が進行されており、それら
の間に血管（赤色の楕円破線）が形成されたことが確認できる。
【００４２】
したがって、本発明によれば、激しい骨折によって骨折癒合が進行されない時、骨芽細
胞とフィブリンとを混合して骨折癒合のために患部上に注入するため、免疫拒否反応がな
く、ある程度成形された組成物を注入するため、効果的で迅速な骨折癒合効果が得られる
。
【産業上の利用可能性】
【００４３】
上記のように構成される本発明のフィブリン混合型骨折癒合用の半固形性骨芽細胞組成
物及びその製造方法によれば、骨折癒合のために骨芽細胞とフィブリンとの混合物を骨折
癒合すべき部位に注入するため、臨床的には拒否反応がなく、また、注入された骨芽細胞
が骨折癒合部位を外れて血流に乗って他の部位に伝播され、不所望の部位に骨組織を生成
してしまう、骨芽細胞懸濁液のみを注入することから生じる問題点なども補完するよう、
ある程度成形された組成物を注入するため、効果的で迅速に骨折癒合をすることが可能に
なる。
【００４４】
また、本発明によれば、骨芽細胞とフィブリンを骨折癒合すべき部位に注入する際に最
小限の切開で手術が可能であり、かつ、Ｘ-線などの放射線を用いる際に傷部位の切開な
しに簡便で効果的に骨芽細胞とフィブリンの混合組成物を注入して骨折癒合をすることが
可能になる。
【００４５】
以上の説明は本発明の技術思想を例示的に説明したもので、本発明の属する技術分野で
における通常の知識を持つ者にとっては、請求範囲に開示された本発明の技術思想を逸脱
しない範囲で様々な修正及び変形が可能であるということは明らかである。
【図面の簡単な説明】
【００４６】
【図１】フィブリン重合カスケードを示す図である。
【図２】フィブリンマトリクス（Ｆｉｂｒｉｎ  ｍａｔｒｉｘ）の重合を示す模式図である。
【図３】本発明によるフィブリン混合型骨折癒合用の半固形性骨芽細胞組成物の製造工程を示すフローチャートである。
【図４】うさぎの前腕部を１５ｍｍ骨折させた後、フィブリンと骨芽細胞の混合物を注入した図面代用光学写真である。
【図５】うさぎの前腕部を１５ｍｍ骨折させた後、フィブリンと骨芽細胞を混合した半固形性骨芽細胞治療剤注入６週後に撮った図面代用Ｘ線写真である。
【図６】うさぎの前腕部を１５ｍｍ骨折させた後、フィブリンと骨芽細胞を混合した半固形性骨芽細胞治療剤注入６週後に撮った組織切片の図面代用ヘマトキシリン−エオジン（Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ−Ｅｏｓｉｎ）染色写真である。
【図７】うさぎの前腕部を１５ｍｍ骨折させた後、フィブリンと骨芽細胞の混合物注入６週後に撮った組織切片の図面代用マッソントリクローム（Ｍａｓｓｏｎ'Ｔｒｉｃｈｒｏｍｅ）染色写真である。
【図１】
2008532723.tif 000005
【図２】
2008532723.tif 000006
【図３】
2008532723.tif 000007
【図４】
2008532723.tif 000008
【図５】
2008532723.tif 000009
【図６】
2008532723.tif 000010
【図７】
2008532723.tif 000011
【国際調査報告】
2008532723.tif 000012
2008532723.tif 000013