(57)【要約】  ３α−７α（β）−ジ−ヒドロキシ−６α（β）−エチル−５β−コラン酸（Ｉ）であってＲが直鎖又は分岐のＣ１〜Ｃ５のアルキルであるもの、並びに中間体である３α−ヒドロキシ−６β−アルキル−７−ケト−５β−コラン酸（ＶＩＩＩ）及び３α−ヒドロキシ−６α−アルキル−７−ケト−５β−コラン酸（ＩＸ）の調製方法。
2008540612.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
【化１】
2008540612.tif 000023
の３α−７α（β）−ジヒドロキシ−６α（β）−アルキル−５β−コラン酸の調製方法であって、
ここで、６及び７位の破線（−−−）の結合は、置換基がα又はβ位であってもよいことを示し、このコラン酸は：
ｉ）一般式（ＩＡ）の３−α，７−α−ジヒドロキシ−６−α−アルキル−５β−コラン酸
【化２】
2008540612.tif 000024
；
ｉｉ）一般式（ＩＢ）の３−α，７−α−ジヒドロキシ−６−β−アルキル−５β−コラン酸
【化３】
2008540612.tif 000025
；
ｉｉｉ）一般式（ＩＣ）の３−α，７−β−ジヒドロキシ−６−α−アルキル−５β−コラン酸
【化４】
2008540612.tif 000026
；
の各クラスからなるものであり、Ｒは、直鎖又は分岐のＣ１〜Ｃ５のアルキルであり、当該方法は：
ａ）３−α−ヒドロキシ−７−ケト−５β−コラン酸（ＩＩ）
【化５】
2008540612.tif 000027
を、酸性環境下、メタノール中でエステル化して、メチル３α−ヒドロキシ−７−ケト−５β−コラネート（ＩＩＩ）
【化６】
2008540612.tif 000028
を得るステージと；
ｂ）メチル３α−ヒドロキシ−７−ケト−５β−コラネート（ＩＩＩ）を、トリメチルクロロシランを用いてシリル化して、対応するメチル３−α−トリメチルシロキシ−７−ケト−５β−コラネート（ＩＶ）
【化７】
2008540612.tif 000029
を得るステージと；
ｃ）ステージｂ）で得たメチル３−α−トリメチルシロキシ−７−ケト−５β−コラネート（ＩＶ）を、強塩基及びトリメチルクロロシランの存在下、シリル化して、メチル３α−，７α−ジ−トリメチルシロキシ−６−エン−５β−コラネート（Ｖ）
【化８】
2008540612.tif 000030
を得るステージと；
ｄ）メチル３α−，７α−ジ−トリメチルシロキシ−６−エン−５β−コラネート（Ｖ）を、Ｒが上記と同様の意味であるアルデヒドであるＲ−ＣＨＯ及びルイス酸と反応して、メチル３α−ヒドロキシ−６−アルキリデン−７−ケト−５β−コラネート（ＶＩ）
【化９】
2008540612.tif 000031
を得るステージと；
ｅ）メチル３−α−ヒドロキシ−６−エチリデン−７−ケト−５β−コラネート（ＶＩ）を、３−α−ヒドロキシ−６−アルキリデン−７−ケト−５β−コラン酸（ＶＩＩ）
【化１０】
2008540612.tif 000032
に加水分解するステージと；
ｆ）３−α−ヒドロキシ−６−アルキリデン−７−ケト−５β−コラン酸を、水性アルキル環境下で、Ｐｄ／Ｃを用いて、３−α−ヒドロキシ−６β−アルキル−７−ケト−５β−コラン酸（ＶＩＩＩ）  
【化１１】
2008540612.tif 000033
に水素化するステージと；
ｇ）中間体（ＶＩＩＩ）を、水性アルカリ環境下で可能な熱処理を行い、対応する３α−ヒドロキシ−６α−アルキル−７−ケト−５β−コラン酸（ＩＸ）
【化１２】
2008540612.tif 000034
を得るステージと；
ｈ）下記の選択的作用条件、つまり：
ｈ’）３α−ヒドロキシ−６α−アルキル−７−ケト−５β−コラン酸（ＩＸ）を、金属ハイドライドを用いて、３α−，７α−ジ−ヒドロキシ−６α−アルキル−５β−コラン酸（ＩＡ）に還元する作用条件；
ｈ’’）金属ナトリウム及びアルコールの存在下、３α−ヒドロキシ−６α−アルキル−７−ケト−５β−コラン酸（ＩＸ）を還元して、３α−，７β−ジ−ヒドロキシ−６α−アルキル−５β−コラン酸（ＩＣ）を得る作用条件；
ｈ’’’）金属ハイドライドの存在下、３α−ヒドロキシ−６β−アルキル−７−ケト−５β−コラン酸（ＶＩＩＩ）を、３α−，７α−ジ−ヒドロキシ−６β−アルキル−５β−コラン酸（ＩＢ）に還元する作用条件；
に従って、７位のケト基を、中間体（ＶＩＩＩ）又は（ＩＸ）の７位のヒドロキシ基に還元するステージと；
を有することを特徴とする方法。
【請求項２】
ステージａ）のエステル化は、酸性環境下、３０〜６０℃の温度で実行されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記の酸は、メタンスルホン酸であることを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項４】
ステージｂ）のシリル化は、水素イオン受容体の存在下、非極性溶媒中で実行されることを特徴とする請求項１乃至３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記非極性溶媒は、芳香性の溶媒であることを特徴とする請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記の芳香性の溶媒は、トルエンであることを特徴とする請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記水素イオン受容体は、脂肪族、脂環族又は複素芳香型の三級アミンであることを特徴とする請求項４乃至６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記三級アミンは、トリエチルアミンであることを特徴とする請求項７に記載の方法。
【請求項９】
ステージｂ）から得たメチル３−α−トリメチルシロキシ−７−ケト−５β−コラネート（ＩＶ）は、ステージｃ）に使用される前に、単離且つ精製されないことを特徴とする請求項１乃至８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
ステージｃ）において、試薬（ＩＶ）として、水を用いた抽出により、塩を前もって消失したものから反応溶媒の留去の後に得られる、油状の残渣が使用されることを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
ステージｃ）におけるケト基の次なるシリル化は、強塩基として、アンモニアから得られたアルカリ性アミド、又は二級アミンから得られたアルカリ性アミドを用いて行われることを特徴とする請求項１乃至１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記アルカリ性アミドは、リチウムジイソプロピルアミドであることを特徴とする請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記のステージｃ）は、極性非プロトン性溶媒中で実行されることを特徴とする請求項１乃至１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記極性非プロトン性溶媒は、テトラヒドロフランであることを特徴とする請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
ステージｃ）で得られたメチル３−α，７−α−ジ−トリメチルシロキシ−６−エン−５β−コラネート（Ｖ）は、ステージｄ）で使用される前に、単離且つ精製されないことを特徴とする請求項１乃至１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
試薬（Ｖ）として、水を用いた抽出により、塩を前もって消失したものから反応溶媒の留去の後に得られる、油状の残渣が使用されることを特徴とする請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
ステージｄ）は、非極性溶媒中で実行されることを特徴とする請求項１乃至１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記非極性溶媒は、アルキルハライドであることを特徴とする請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記溶媒は、塩化メチレンであることを特徴とする請求項１７又は１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記ルイス酸は、三フッ化ホウ素エーテル塩であることを特徴とする請求項１乃至１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
ステージｄ）は、下記の作用条件、つまり：
反応混合物を、２〜４時間の時間、−９０〜−６０℃の温度に冷却し；
反応混合物を、１〜６時間の時間、０〜３５℃の温度で保持する；
の作用条件に従って、実行されることを特徴とする請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
ステージｄ）で得たメチル３α−ヒドロキシ−６−アルキリデン−７−ケト−５β−コラネート（ＶＩ）は、ステージｅ）に使用される前に、単離且つ精製されないことを特徴とする請求項１乃至２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
ステージｅ）の加水分解は、試薬（ＶＩ）として、水を用いた抽出により、塩及び水溶性成分を消失したものから反応溶媒の留去の後に得られる、油状の残渣を使用して実行されることを特徴とする請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
ステージｅ）の加水分解反応は、アルカリ性の水酸化物の水性溶液の存在下、アルコール性溶媒中で実行されることを特徴とする請求項１乃至２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記反応は、２０〜６０℃の温度で実行されることを特徴とする請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
ステージｆ）の水素化は、１〜３気圧の圧力で、水酸化ナトリウムの水性溶液の存在下、水性環境中で実行されることを特徴とする請求項１乃至２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
ステージｇ）を有する場合、このステージは、ステージｆ）から得られた反応の混合物に対して直接行われることを特徴とする請求項１乃至２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
ステージｇ）は、９５〜１０５℃の温度で、数時間行われることを特徴とする請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
ステージｇ）を含まない場合にステージｆ）から得られる反応産物、又はステージｇ）から得られる反応産物は、下記の作用条件、つまり：
１）濾過により触媒が除去されたものからの水性溶液を、酸性化する作用条件；
２）酢酸エチルを、ステージ１）で得た混合物に添加し、全体を、４０〜７０℃の温度に加熱する作用条件；
３）０〜３０℃の温度に冷却し、得た沈殿物を濾過し、且つ乾燥する作用条件；
に従って、反応混合物から単離されることを特徴とする請求項１乃至２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
ステージｈ）の還元がステージｈ’）に包含される作用条件、又は作用条件ｈ’’’）に従って実行される場合、金属ハイドライドは、水素化ホウ素ナトリウムを有する、アルカリ性の水酸化物が溶解された水性溶液であることを特徴とする請求項１乃至２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
アルカリ性の水酸化物は、３０％の水酸化ナトリウムの溶液からなることを特徴とする請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記反応は、７０〜１０５℃の温度で、１時間実行されることを特徴とする請求項３０又は３１に記載の方法。
【請求項３３】
得た産物は、下記の作用条件、つまり：
１’）水和性溶媒を、上記の反応混合物に添加し、リン酸を用いて混合物を酸性化する作用条件；
２’）混合物を攪拌し、停止して、水相を除去する作用条件；
３’）有機相から、水及びアンモニアを用いて、産物を抽出する作用条件；
４’）このようにして得た水相に、リン酸を添加して、全体を、２０〜５０℃の温度で、攪拌する条件；
５’）沈殿した産物を濾過により回収し乾燥する作用条件；
に従って、単離されることを特徴とする請求項３０乃至３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
ステージｈ）を作用条件ｈ’’）に従って実行される場合、還元反応は、溶媒還流温度において、直鎖又は分岐のＣ１〜Ｃ５のアルコール中で実行されることを特徴とする請求項１乃至２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
前記アルコールは、ｓｅｃ−ブチルアルコールであることを特徴とする請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
Ｒは、好ましくは、メチルであることを特徴とする請求項１乃至３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
３−α，７−α−ジヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン酸を調製することを特徴とする請求項１乃至３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
３α−ヒドロキシ−６−β−アルキル−７−ケト−５β−コラン酸（ＶＩＩＩ）
【化１３】
2008540612.tif 000035
であって、Ｒは、直鎖又は分岐のＣ１〜Ｃ５のアルキルであることを特徴とする３α−ヒドロキシ−６−β−アルキル−７−ケト−５β−コラン酸。
【請求項３９】
３−α−ヒドロキシ−６−α−アルキル−７−ケト−５β−コラン酸（ＩＸ）
【化１４】
2008540612.tif 000036
であって、Ｒは、直鎖又は分岐のＣ１〜Ｃ５のアルキルであることを特徴とする３−α−ヒドロキシ−６−α−アルキル−７−ケト−５β−コラン酸。
【請求項４０】
一般式（ＩＢ）
【化１５】
2008540612.tif 000037
の３−α，７−α−ジヒドロキシ−６−β−アルキル−５β−コラン酸であって、Ｒは、直鎖又は分岐のＣ１〜Ｃ５のアルキルであることを特徴とする３−α，７−α−ジヒドロキシ−６−β−アルキル−５β−コラン酸。
【請求項４１】
一般式（ＩＣ）
【化１６】
2008540612.tif 000038
の３−α，７−β−ジヒドロキシ−６−α−アルキル−５β−コラン酸であって、Ｒは、直鎖又は分岐のＣ１〜Ｃ５のアルキルであることを特徴とする３−α，７−β−ジヒドロキシ−６−α−アルキル−５β−コラン酸。
【請求項４２】
活性本体として、請求項４０に記載の３−α，７−α−ジヒドロキシ−６−β−アルキル−５β−コラン酸の少なくともひとつ、又は適当な賦形剤及び／若しくは希釈剤と組み合わせた医薬的に許容可能な関連する塩を含有することを特徴とする医薬組成物。
【請求項４３】
活性本体として、請求項４１に記載の３−α，７−β−ジヒドロキシ−６−α−アルキル−５β−コラン酸の少なくともひとつ、並びに適当な賦形剤及び／又は希釈剤と組み合わせた医薬的に許容可能な関連する塩を含有することを特徴とする医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、３α（β）−７α（β）−ジヒドロキシ−６α（β）−アルキル−５β−コラン酸の調製方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
核内受容体（ＦＸＲ）は、当初、ラット肝のｃＤＮＡライブラリーから最初に同定されたオーファン受容体であって（非特許文献１）、ステロイド、レチノイド及び甲状腺ホルモンなどのリガンド活性化転写因子の核レセプターのファミリーのメンバーである（非特許文献２）。
【０００３】
天然型の複数の胆汁酸は、共に結合し、特許文献１に記載の生理的な濃度でＦＸＲを活性化するものであって、特に、ケノデオキシコール酸、デオキシコール酸、リトコール酸、並びにタウリン及びグリシンを有する関連コンジュゲートである。
【０００４】
また、ＦＸＲは、胆汁酸及びコレステロールの恒常性の制御に関与すると考えられている。
【０００５】
特許文献２は、下記の一般式（Ａ）に記載の３−α，７−α−ジヒドロキシ−６α−アルキル−（アリル）−５β−コラン酸を開示する。
【０００６】
【化１７】
2008540612.tif 000003
【０００７】
ここで、Ｒ’は、エチル、プロピル、又はアリルであって、核内受容体（ＦＸＲ）のアゴニストでもある。
【０００８】
特に、Ｒ’がエチルである式（Ｉ）の化合物は、天然型で最な強力なＦＸＲアゴニストであるケノデオキシコール酸よりも２桁のオーダーでより強力なものである。
【０００９】
特にＨＤＬコレステロールを増加させるのに使用され、胆汁由来の肝臓疾患の予防及び処置用でトリグリセリドを低下させる一般式（Ａ）の化合物は、下記のステージを有する方法により調製される。
【００１０】
ｉ）式（ＩＩ）の３−α−ヒドロキシ−７−ケト−５β−コラン酸を、ジヒドロピランと反応させて、対応する式（Ｂ）の３−α−テトラヒドロピラニルオキシ−７−ケト−５β−コラン酸を得るステージ。
【００１１】
【化１８】
2008540612.tif 000004
【００１２】
【化１９】
2008540612.tif 000005
【００１３】
ｉｉ）化合物（Ｂ）を、Ｒ’Ｂｒの臭化アルキルと反応して、化合物（Ｃ）を得るステージであって、Ｒ’は、上記と同様の意味を有する、ステージ。
【００１４】
【化２０】
2008540612.tif 000006
【００１５】
ｉｉｉ）化合物（Ｃ）を、水素化ホウ素ナトリウムにより還元して、化合物（Ｄ）を得るステージ。
【００１６】
【化２１】
2008540612.tif 000007
【００１７】
ｉｖ）化合物（Ｄ）を加水分解して、化合物（Ａ）を得るステージ。
【特許文献１】国際公開第００／３７０７７号パンフレット
【特許文献２】国際公開第０２／０７２５９８号パンフレット
【非特許文献１】Ｂ．Ｍ．Ｆｏｒｍａｎら著、Ｃｅｌｌ、１９９５年、８１巻、ｐ．６８７−６９３
【非特許文献２】Ｄ．Ｊ．Ｍａｎｇｅｌｓｄｏｒｆら著、Ｃｅｌｌ、１９９５年、８３巻、ｐ．８４１−８５０
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１８】
この方法は、数次のステージを有するにも関わらず、一連の欠点がある。
【００１９】
第一に、全てのステージにおいて、反応生成物は、クロマトグラフィー用カラムで精製され、すなわち、非常に高価な分離方法であって、工業スケールで実行され得ないものである。
【００２０】
さらに、ステージ（ｉｉ）の反応収率は、非常に低く（１２〜１３％）、全体の収率は、３．５％未満と、かなり低くなる。
【００２１】
さらに、このステージにおいて、未だ、反応剤として、公知の発ガン剤であるヘキサメチレンホスホンアミドを使用する。
【課題を解決するための手段】
【００２２】
本願出願人は、一般式（Ｉ）の化合物を得ることができる方法を見出した。
【００２３】
【化２２】
2008540612.tif 000008
【００２４】
ここで、６位及び７位の破線（−−−）は、置換基がα又はβの位置に存在してもよい。この化合物は、下記のクラスからなるものである。
【００２５】
ｉ）一般式（ＩＡ）の３−α，７−α−ジヒドロキシ−６−α−アルキル−５β−コラン酸
【００２６】
【化２３】
2008540612.tif 000009
【００２７】
ｉｉ）一般式（ＩＢ）の３−α，７−α−ジヒドロキシ−６−β−アルキル−５β−コラン酸
【００２８】
【化２４】
2008540612.tif 000010
【００２９】
ｉｉｉ）一般式（ＩＣ）の３−α，７−β−ジヒドロキシ−６−α−アルキル−５β−コラン酸
【００３０】
【化２５】
2008540612.tif 000011
【００３１】
Ｒは、直鎖又は分岐のＣ１〜Ｃ５のアルキルである。また、上記の方法は、下記のステージを有する。
【００３２】
ａ）３α−ヒドロキシ−７−ケト−５β−コラン酸（ＩＩ）を、酸性環境下、メタノール中でエステル化して、メチル３α−ヒドロキシ−７−ケト−５β−コラネート（ｃｈｏｌａｎａｔｅ）（ＩＩＩ）を得るステージ。
【００３３】
【化２６】
2008540612.tif 000012
【００３４】
【化２７】
2008540612.tif 000013
【００３５】
ｂ）メチル３α−ヒドロキシ−７−ケト−５β−コラネート（ＩＩＩ）を、トリメチルクロロシランでシリル化して、対応する３−α−トリメチルシロキシ−７−ケト−５β−コラネート（ＩＶ）を得るステージ。
【００３６】
【化２８】
2008540612.tif 000014
【００３７】
ｃ）ステージｂ）で得たメチル３−α−トリメチルシロキシ−７−ケト−５β−コラネート（ＩＶ）を、強塩基存在下で、トリメチルクロロシランを用いてシリル化して、メチル３α−，７α−ジ−トリメチルシロキシ−６−エン−５β−コラネート（Ｖ）を得るステージ。
【００３８】
【化２９】
2008540612.tif 000015
【００３９】
ｄ）メチル３α−，７α−ジ−トリメチルシロキシ−６−エン−５β−コラネート（Ｖ）を、アルデヒドであるＲ−ＣＨＯ及びルイス酸と反応するステージであって、Ｒは、上記と同様の意味を有し、メチル３α−ヒドロキシ−６−アルキリデン−７−ケト−５β−コラネート（ＶＩ）を得るステージ。
【００４０】
【化３０】
2008540612.tif 000016
【００４１】
ｅ）メチル３α−ヒドロキシ−６−アルキリデン−７−ケト−５β−コラネートを、３α−ヒドロキシ−６−アルキリデン−７−ケト−５β−コラン酸に加水分解するステージ。
【００４２】
【化３１】
2008540612.tif 000017
【００４３】
ｆ）水性アルカリ環境で、３α−ヒドロキシ−６−アルキリデン−７−ケト−５β−コラン酸を、Ｐｄ／Ｃを用いて、３α−ヒドロキシ−６β−アルキル−７−ケト−５β−コラン酸に水素化するステージ。
【００４４】
【化３２】
2008540612.tif 000018
【００４５】
ｇ）中間体（ＶＩＩＩ）を、水性アルカリ環境下、任意に熱処理して、対応する３α−ヒドロキシ−６α−アルキル−７−ケト−５β−コラン酸（ＩＸ）を得るステージ。
【００４６】
【化３３】
2008540612.tif 000019
【００４７】
ｈ）下記の作用条件のいずれかに従って、７位のケトン基を、７−ヒドロキシ基の中間体（ＶＩＩＩ）又は（ＩＸ）に還元するステージ：
ｈ’）３α−ヒドロキシ−６α−アルキル−７−ケト−５β−コラン酸化合物（ＩＸ）を、金属ハイドライドを用いて、３α，７α−ジ−ヒドロキシ−６α−アルキル−５β−コラン酸（ＩＡ）に還元する作用条件；
ｈ’’）ナトリウム及びアルコールの存在下、３α−ヒドロキシ−６α−アルキル−７−ケト−５β−コラン酸化合物（ＩＸ）を還元して、３α−，７β−ジ−ヒドロキシ−６α−アルキル−５β−コラン酸化合物（ＩＣ）を得る作用条件；
ｈ’’’）金属ハイドライドの存在下、３α−ヒドロキシ−６β−アルキル−７−ケト−５β−コラン酸（ＶＩＩＩ）を、３α−，７α−ジ−ヒドロキシ−６β−アルキル−５β−コラン酸（ＩＢ）に還元する作用条件。
【００４８】
特に３α−，７α−ジ−ヒドロキシ−６α−アルキル−５β−コラン酸（ＩＡ）を得る本発明による方法は、上記の公知の方法に対してかなりの利点を示す。事実、多くのステージを包含するにも関わらず、種々の公知の方法よりも明らかに高く明らかに満足のいく全収率（２４．６％）で、式（Ｉ）の産物を得ることが可能となる。さらに、上記の中間体は、クロマトグラフィーによる精製を必要とせず、且つ例えば高い毒性を有するヘキサメチレンフォスフォンアミドなどの試薬を使用することが回避される。
【００４９】
最後に、本発明の方法及び上記の事項について、特に胆汁うっ滞に由来する肝疾患の処置及び予防用の肝保護剤に使用され得る式（ＩＢ）及び（ＩＣ）の新規の化合物を得ることが可能である。
【００５０】
従って、本発明は、活性本体として、式（ＩＢ）及び（ＩＣ）の酸の少なくともひとつの化合物を含有する医薬組成物、並びに適当な賦形剤及び／又は希釈剤と組み合わせた医薬的に許容される関連する塩に関する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００５１】
本発明の方法のステージａ）における３−α−ヒドロキシ−７−ケト−５β−コラン酸（ＩＩ）のエステル化反応は、酸性条件下、３０〜６０℃の温度で好ましく実行され、この酸は、好ましくは、メタンスルホン酸である。
【００５２】
本発明の方法のステージｂ）に包含されるメチル３α−ヒドロキシ−７−ケト−５β−コラネートの３α位の水酸基のシリル化反応は、非極性の溶媒中、より好ましくは芳香性溶媒中、よりさらに好ましくはトルエン中で、脂肪族、脂環族又は複素芳香型の三級アミンから好ましくなる水素イオン受容体の存在下で、好ましく実行され、上記の三級アミンは、トリエチルアミンであることがよりさらに好ましい。
【００５３】
特に好適実施例によると、ステージｃ）で使用される前に、メチル３−α−トリメチルシロキシ−７−ケト−５β−コラネートは、単離且つ精製されないが、逆に、このステージにおいて、塩が水抽出により前もって単離されたものから反応溶媒を蒸発させた後に得られる油状の残渣を使用する。
【００５４】
本発明の方法のステージｃ）に包含される７位のケト基の次なるシリル化は、強塩基として、アンモニアから得られたアルカリ性アミド、又は脂肪族の二級アミンから得られたアルカリ性アミドを使用して、実行される。特に好適な溶液としては、上記の強塩基として、リチウムジイソプロピルアミドを使用する。この反応は、極性非プロトン性溶媒中で好ましく実行され、よりさらに好ましくは、この溶媒は、テトラヒドロフランである。
【００５５】
好適実施例によると、ステージｄ）に使用される前のステージｃ）で得られる産物は、単離且つ精製されないが、逆に、この場合もまた、塩が水により前もって抽出されたものから反応溶媒を蒸発させた後に得られる油状の残渣を使用する。
【００５６】
ステージｄ）は、好ましくはアルキルハライドから好ましく選択された非極性溶媒中で好ましく実行され、さらにより好ましくは、この溶媒は、塩化メチレンである。
【００５７】
ステージｄ）は、アルデヒドであるＲ−ＣＨＯの存在下で、ルイス酸として三フッ化ホウ素エーテル塩を使用して、−９０〜−６０℃の温度で２〜４時間、好ましく実行される。なお、Ｒは、好ましい意味を有する。
【００５８】
次に、上記の反応混合物は、０〜３５℃の温度で１〜６時間、反応される。
【００５９】
この場合もまた、下記のステージｅ）に使用される前に、ステージｄ）で得られた産物は、単離且つ精製されないが、塩及び水溶性成分が水抽出により抽出されたものから反応溶媒を蒸発させた後に得られる油状の残渣を使用する。
【００６０】
ステージｅ）は、アルカリ性の水酸化物の存在下、好ましくはメタノールなどのアルコール性溶媒中で好ましく実行され、よりさらに好ましくは、上記のアルカリ性の水酸化物は、３０％の水酸化ナトリウムの水溶液である。
【００６１】
上記の温度は、好ましくは、２０〜６０℃である。
【００６２】
ステージｅ）の反応産物は、酸性化した後に、可能であれば水の存在下、酢酸エチル及びアセトンから好ましく選択された有機溶媒を用いた結晶化により、好ましく単離される。
【００６３】
ステージｆ）に包含される水素化反応は、１〜３気圧の圧力で、水酸化ナトリウムの水溶液の存在下、水性環境において好ましく実行される。本発明の方法がステージｇ）を包含する場合、特に、一般式（ＩＡ）又は（ＩＣ）の化合物が調製されるべき場合、このステージは、水素化反応に由来する反応混合物について、直接好ましく実行され、この反応を９５〜１０５℃の温度で数時間加熱することにより、好ましく実行され、６−β−エチル基が６−α−エチルへとエピマー化される。
【００６４】
ステージｆ）又は可能なステージｇ）に由来する反応産物は、下記の作用条件を好ましく用いて、反応混合物から単離される。
【００６５】
１）上記の水性溶液を添加する条件であって、ここから、濾過により触媒が除去され、８５％のリン酸を好ましく用いて酸性化される、条件；
２）酢酸エチルを、ステージ１）で得た混合物に添加し、全体を、４０〜７０℃の温度に加熱する条件；
３）これを、その後、０〜３０℃の温度に冷却し、得た沈殿物を濾過し、その後乾燥する条件。
【００６６】
ステージｈ）の還元が本発明の方法の式（ＩＡ）の化合物を得るようにステージｈ’）に包含される作用条件に従って実行される場合、又は本発明の方法の式（ＩＢ）の化合物を得るようにステージｈ’’’）に包含される作用条件に従って実行される場合、上記の金属ハイドライドは、好ましくは水素化ホウ素ナトリウムであり、還元反応は、アルカリ性の水溶液中で実行される。この反応は、７０〜１０５℃で１時間、好ましく実行される。
【００６７】
代わって、ステージｈ）の還元がステージｈ’’）に包含される作用条件に従って実行される場合、直鎖又は分岐のＣ１〜Ｃ５のアルコール、よりさらに好ましくはｓｅｃ−ブチルアルコール中で、溶媒還流温度（ｓｏｌｖｅｎｔ  ｒｅｆｌｕｘ  ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ）で好ましく実行される。ステージｈ’）又はｈ’’’）で得られた産物は、下記の作用条件に従って、好ましく単離される。
【００６８】
１’）好ましくは塩化メチレンなどの非極性溶媒である水和性溶媒を、上記の反応混合物に添加し、好ましくはリン酸を用いて混合物を酸性化する条件；
２’）その後得た混合物を攪拌し、停止して、水相を除去する条件；
３’）有機相から、水及びアンモニアを用いて、産物を抽出する条件；
４’）このようにして得た水相に、リン酸を添加して、全体を、数時間、２０〜５０℃の温度で、攪拌する条件；
５’）沈殿した産物を濾過により回収し乾燥する条件。
【００６９】
本発明の方法は、Ｒが好ましくはメチルである式（Ｉ）の化合物の調製に特に適する。
【００７０】
例証を目的とし、限定することを目的とすることなく、本発明の方法に従った、式（Ｉ）の化合物、特に、Ｒがメチルである式（ＩＡ）、（ＩＢ）又は（ＩＣ）の化合物の調製について、数次の例を挙げる。
【実施例】
【００７１】
（例１）Ｒがメチルである式（ＩＡ）の３α−，７α−ジヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン酸の調製方法
ａ）メチル３α−ヒドロキシ−７−ケト−５β−コラネート（ＩＩＩ）の調製
１７．０ｋｇの３−α−ヒドロキシ−７−ケト−５β−コラン酸、６８ｋｇのメタノール、及び０．１７ｋｇのメタンスルホン酸を、反応器に充填する。この反応混合物を、その後、１時間、３０〜６０℃に加熱し、２５．５ｋｇの脱塩水を添加する。得た混合物を、その後、攪拌し、良好な沈殿が達成されるまで、２０〜２５℃に冷却し、その後、０〜１５℃にさらに冷却する。沈殿物を、濾過し、水及びメタノールの混合物で洗浄し、約４０℃でオーブン中でさらに乾燥する。このようにして、１５ｋｇのメチル３α−ヒドロキシ−７−ケト−５β−コラネート（ＩＩＩ）を得る。化学量論的収率：８５．２％。
【００７２】
ｂ）メチル３−α−トリメチルシロキシ−７−ケト−５β−コラネート（ＩＶ）の調製
１５．０ｋｇのメチル３α−ヒドロキシ−７−ケト−５β−コラネート、４５ｋｇのトルエン、７．５ｋｇのトリエチルアミン、及び７．５ｋｇのトリメチルクロロシランを反応器に充填する。
【００７３】
この混合物を、７０〜８０℃に加熱し、この温度で、約１時間、攪拌下で保持し、その後、３７．５ｋｇの水を添加し、この混合物を、１５〜２０℃で攪拌する。
【００７４】
底部の水相をその後分離し消失させる。油状の残渣が得られるまでその有機相を濃縮し、これに、１５ｋｇのテトラヒドロフランを添加する。
【００７５】
このようにして得た、メチル３−α−トリメチルシロキシ−７−ケト−５β−コラネート（ＩＶ）を含有する溶液を、下記のステージｃ）に用いる。
【００７６】
ｃ）メチル３α−，７α−ジ−トリメチルシロキシ−５β−コラネート（Ｖ）の調製
３０ｋｇのテトラヒドロフランを、反応器に充填し、その後、この混合物を、−９０〜−６０℃の温度とし、９．８ｋｇの１００％リチウムジイソプロピルアミド、及び９．３ｋｇのトリメチルクロロシランを添加し、上記ｂ）で調製し、メチル３−α−トリメチルシロキシ−７−ケト−５β−コラネートを含有するテトラヒドロフランの全溶液を注入する。その後、この混合物を、約１時間、−６０〜−９０℃の温度で攪拌する。その後、４．５０ｋｇの重炭酸ナトリウム、及び６０ｋｇの水からなる溶液を注入し、この混合物を、０〜１０℃で攪拌し、底部の水相を分離し消失させる。その底部の相を、その後、油状の残渣が得られるまで、濃縮し、これに、４５．０ｋｇの塩化メチレンを添加する。
【００７７】
このようにして得たメチル３α−，７α−ジ−トリメチルシロキシ−５β−コラネートを、次のステージｄ）に送る。
【００７８】
ｄ）Ｒがメチルであるメチル３α−ヒドロキシ−６−エチリデン−７−ケト−５β−コラネート（ＶＩ）の調製
上記の例に由来するメチル３α，７−α−ジ−トリメチルシロキシ−５β−コラネートを有する塩化メチレンの全溶液を反応器に充填し、−９０／−６０℃の冷却し、その後、１．９７ｋｇのアセトアルデヒド、及び５．５ｋｇの三フッ化ホウ素エーテル塩を添加する。この反応混合物を、上記の温度で、２／４時間、攪拌下で保持する。その後、３０〜３５℃に加熱し、約２／４時間、この温度で保持する。その後、６０ｋｇの水を添加する。得た混合物を、攪拌し、その水相を分離する。このようにして得た、メチル３α−ヒドロキシ−６−エチリデン−７−ケト−５β−コラネートを含有する溶液を、次のステージに送る。
【００７９】
ｅ）ＲがＣＨ３である３α−ヒドロキシ−６−エチリデン−７−ケト−５β−コラン酸７（ＶＩＩ）の調製
上記のステージで得たメチル３−α−ヒドロキシ−６−エチリデン−７−ケト−５β−コラネートを有する塩化メチレンの溶液を、反応器に充填する。その後、油状の残渣が得られるまで、その溶媒を、蒸留により、除去し、これに、１５ｋｇのメタノールを添加する。
【００８０】
その後、この反応混合物を、４５〜５０℃に加熱し、７．５ｋｇの３０％の水酸化ナトリウムを注入し、反応混合物を、約１時間、上記の温度で保持する。その後、３０ｋｇの水を添加する。その後、４５．０ｋｇの塩化メチレン、及び７．５ｋｇの８５％のリン酸を添加する。底部の有機相を分離し、続いて、水相を、消失させた。有機相から、蒸留により、ペースト状の残渣を得るまで、溶媒を除去する。この残渣に、約３７．５ｋｇの酢酸エチルを添加し、この混合物を、６５〜７５℃に加熱し、その後、１０〜３５℃に冷却する。このようにして得、濾過し、且つ酢酸エチルで洗浄した沈殿物を、乾燥する。
【００８１】
メチル３−α−ヒドロキシ−７−ケト−５β−コラネートに対して計算した５１．８％の化学量論的収率で、８．０ｋｇの３α−ヒドロキシ−６−エチリデン−７−ケト−５β−コラン酸を得る。
【００８２】
ｆ）ＲがＣＨ３である３−α−ヒドロキシ−６−β−エチル−７−ケト−５β−コラン酸（ＩＸ）の調製
８．０ｋｇの３−α−ヒドロキシ−６−α−エチリデン−７−ケト−５β−コラン酸、４８．０ｋｇの水、５．１ｋｇの３０％の水酸化ナトリウム、及び０．８０ｋｇの５％のパラジウム／炭素を、反応器に充填する。この反応混合物を、水素の吸収が観察されなくなるまで、１〜３気圧の圧力で水素化する。
【００８３】
ｇ）３α−ヒドロキシ−６−α−エチル−７−ケト−５β−コラン酸（ＩＸ）の調製
反応の終期において、混合物を９５〜１０５℃に加熱し、この温度で数時間保持して、３α−ヒドロキシ−６−β−エチル−７−ケト−５β−コラン酸（ＶＩＩＩ）を、所望の３α−ヒドロキシ−６−α−エチル−７−ケト−５β−コラン酸（ＩＸ）の対応するエピマーに変換させる。
【００８４】
この懸濁液を濾過し、触媒を除去する。５．１ｋｇの８５％のリン酸、及び９．６ｋｇの酢酸エチルを、濾過した溶液に添加し、この反応混合物を、４０〜７０℃の温度に加熱する。これを、０〜３０℃の温度に冷却し、沈殿物を、濾過により回収する。酢酸エチルで洗浄した後、沈殿物を、６５℃のオーブン中で乾燥する。５．０ｋｇの３α−ヒドロキシ−６α−エチル−７−ケト−β−コラン酸を得る。化学量論的収率：６２．２％。
【００８５】
【化３４】
2008540612.tif 000020
【００８６】
（分析）
３−α−ヒドロキシ−６−α−エチル−７−ケト−５β−コラン酸（ＩＸ）
Ｃ２６Ｈ４２Ｏ４、融点１８５〜１８８℃
【００８７】
Ｂｒｕｋｅｒ社製のＤＲＸ−ＡＤＶＡＮＣＥ−４００ＭＨｚを用い、ＣＤ３ＯＤに溶解した試料の１Ｈ−ＮＭＲ分析により、下記の結果を得た。
【００８８】
０．６２ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ，Ｃ１８のメチル）；０．７６ｐｐｍ，Ｊ＝７．４Ｈｚ（ｔ，３Ｈ，Ｃ２６のメチル）；０．８９ｐｐｍ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，（ｄ，３Ｈ，Ｃ２１のメチル）；１．１８ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ，Ｃ１９のメチル），２．２１ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，Ｃ２３の−ＣＨ２−）；２．５０ｐｐｍ，Ｊ＝１１．１７Ｈｚ（ψｔ，Ｃ８のＣＨ）；２．８５ｐｐｍ  Ｊ＝１３Ｈｚ及びＪ＝５．４Ｈｚ（ｄｄ，Ｃ６の１Ｈ），３．５０ｐｐｍ（ｍ，Ｃ３のＣＨ）
【００８９】
Ｂｒｕｋｅｒ社製のＤＲＸ−ＡＤＶＡＮＣＥ−２００ＭＨｚを用い、ＣＤ３ＯＤ及びＣＤＣｌ３の混液に溶解した分析対象の試料の１３Ｃ−ＮＭＲ分析により、下記の結果を得た。
【００９０】
２１２．８２ｐｐｍ（Ｃ７）；１７９．４４ｐｐｍ（Ｃ２４），７１．２６ｐｐｍ（Ｃ３），５４．７７ｐｐｍ（Ｃ１７），５１．９８ｐｐｍ（Ｃ１４），１８．８４ｐｐｍ（Ｃ２１），１８．３４ｐｐｍ（Ｃ２６），１２．０９ｐｐｍ（Ｃ１８）
【００９１】
ｈ’）Ｒがメチルである式（Ｉ）の３α，７α−ジヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン酸の調製
５．０ｋｇの３α−ヒドロキシ−６α−エチル−７−ケト−β−コラン酸、５．０ｋｇの水、及び２．５０ｋｇの水酸化ナトリウムを、反応器に充填する。その後、この混合物を、７０〜１０５℃に加熱し、２．５０ｋｇの水に溶解した水素化ホウ素ナトリウムの混合物を注入し、その後、この混合物を、１時間、熱状態で保持し、室温に冷却し、１０．０ｇの脱塩水、１５．０ｋｇの塩化メチレン、及び３．００ｋｇの８５％のリン酸を添加する。この混合物を、攪拌し、底部の有機相を分離し、水相を除去する。
【００９２】
有機溶液を冷却することにより、粗産物の結晶化を行う。この産物を、５０ｋｇの脱塩水、及び１．１０ｋｇの３０％のアンモニアに溶解する。その後、完全な溶液となるまで、この混合物を、攪拌し、この混合物を２０〜５０℃で保持し、１．５０ｋｇのリン酸を注入する。２０〜５０℃の温度に常に保ちながら、沈殿した混合物を攪拌し、その後、濾過により沈殿物を回収し、水で洗浄し、乾燥する。
【００９３】
Ｒがメチルである式（Ｉ）の３α−，７α−ジ−ヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン酸４．５０ｋｇを得る。化学量論的収率：８９．６％。
【００９４】
（例２）Ｒがメチルである式（ＩＢ）の３−α，７α−ジ−ヒドロキシ−６β−エチル−５β−コラン酸の調製
上記の例１のステージａ）〜ｆ）で言及したように調製し、且つステージｇ）で言及したように単離した式（ＶＩＩＩ）の３α−ヒドロキシ−６−β−エチル−７−ケト−５β−コラン酸を、例１のステージｈ’）に述べたのと同様の作用条件を用いて、還元する。その後、Ｒがメチルである式（ＩＢ）の３α，７α−ジ−ヒドロキシ−６β−エチル−５β−コラン酸を得る。
【００９５】
（分析）
【００９６】
【化３５】
2008540612.tif 000021
【００９７】
式（ＩＢ）の３−α，７−α−ジ−ヒドロキシ−６−β−エチル−５β−コラン酸
Ｃ２６Ｈ４４Ｏ４、融点１１５〜１１８℃
【００９８】
Ｂｒｕｋｅｒ社製のＤＲＸ−ＡＤＶＡＮＣＥ−４００ＭＨｚを用い、ＣＤ３ＯＤに溶解した試料の１Ｈ−ＮＭＲ分析により、下記の結果を得る。
【００９９】
０．７０ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ，Ｃ１８のメチル）；０．９５ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ，Ｃ１９のメチル），１．００ｐｐｍ，Ｊ＝７．６５Ｈｚ（ｔ，３Ｈ，Ｃ２６のメチル）；１．４５ｐｐｍ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，（ｄ，３Ｈ，Ｃ２１のメチル）；２．２５ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，Ｃ２３の−ＣＨ２−）；３．４０ｐｐｍ（ｍ，Ｃ３のＣＨ），３．６２ｐｐｍ（ｍ，Ｃ７のＣＨ）
【０１００】
Ｂｒｕｋｅｒ社製のＤＲＸ−ＡＤＶＡＮＣＥ−２００ＭＨｚを用い、ＣＤ３ＯＤ及びＣＤＣｌ３の混液に溶解した分析対象の試料の１３Ｃ−ＮＭＲ分析により、下記の結果を得た。
【０１０１】
１７７．９１ｐｐｍ（Ｃ２４），７２．１８ｐｐｍ（Ｃ３），７１．６８ｐｐｍ（Ｃ７）；５５．７９ｐｐｍ（Ｃ１７），５０．８３ｐｐｍ（Ｃ１４），１８．１７ｐｐｍ（Ｃ２１），１４ｐｐｍ（Ｃ２６），１１．６０ｐｐｍ（Ｃ１８）
【０１０２】
（例３）Ｒがメチルである式（ＩＣ）の３−α，７β−ジ−ヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン酸の調製
例１のステージａ）〜ｇ）に言及した作用条件に従って、中間体（ＩＸ）を調製し、これに、完全な溶液となるまで、ｓｅｃ−ブチルアルコールを添加する。ここで、ナトリウムは、式（ＩＸ）の化合物に対して、３：１〜３：２のモル量で前もって溶解されている。Ｒがメチルである式（ＩＣ）の３−α，７β−ジ−ヒドロキシ−６α−エチル−５β−コラン酸を得る。
【０１０３】
（分析）
式（ＩＣ）の３−α，７−β−ジ−ヒドロキシ−６−α−エチル−５β−コラン酸
Ｃ２６Ｈ４４Ｏ４、融点２１７〜２１９℃
【０１０４】
【化３６】
2008540612.tif 000022
【０１０５】
Ｂｒｕｋｅｒ社製のＤＲＸ−ＡＤＶＡＮＣＥ−４００ＭＨｚを用い、ＣＤ３ＯＤに溶解した試料の１Ｈ−ＮＭＲ分析により、下記の結果を得た。
【０１０６】
０．５６ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ，Ｃ１８のメチル）；０．７３ｐｐｍ，Ｊ＝７．４Ｈｚ（ｔ，３Ｈ，Ｃ２６のメチル）；０．８１ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ，Ｃ１９のメチル），０．８２ｐｐｍ，Ｊ＝４．６０Ｈｚ，（ｄ，３Ｈ，Ｃ２１のメチル）；２．２１ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ，Ｃ２３の−ＣＨ２−），３．８０ｐｐｍ（ｂｒ，Ｃ３の水酸基、Ｃ７、及びＣ２４のカルボキシルのＯ−Ｈ）；３．１０ｐｐｍ（ｍ，Ｃ７のＣＨ）；３．４４ｐｐｍ（ｍ，Ｃ３のＣＨ）
【０１０７】
Ｂｒｕｋｅｒ社製のＤＲＸ−ＡＤＶＡＮＣＥ−２００ＭＨｚを用い、ＣＤ３ＯＤ及びＣＤＣｌ３の混液に溶解した分析対象の試料の１３Ｃ−ＮＭＲ分析により、下記の結果を得た。
【０１０８】
１７９ｐｐｍ（Ｃ２４），７５．６５ｐｐｍ（Ｃ７），７１．８７ｐｐｍ（Ｃ３），５６ｐｐｍ（Ｃ１７），５５ｐｐｍ（Ｃ１４），１８．４ｐｐｍ（Ｃ２１），１２．２４ｐｐｍ（Ｃ２６），１１．２０ｐｐｍ（Ｃ１８）
【国際調査報告】
2008540612.tif 000039
2008540612.tif 000040
2008540612.tif 000041