(57)【要約】  本発明は、新規ジンセノシド化合物、ジンセノシド化合物を含む組成物（例えば、医薬組成物）、及びこれらのジンセノシド化合物の合成方法を提供する。さらに、本発明は、これらのジンセノシド化合物を使用する、ベータアミロイドペプチド生成を阻害する方法、及び病的状態、特に神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病）を治療及び予防する方法を提供する。
2008506686.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の一般式：
【化１】
2008506686.tif 000070
｛式中、
Ｒ１は、α−ＯＨ、β−ＯＨ、α−Ｏ−Ｘ、β−Ｏ−Ｘ、α−Ｒ６ＣＯＯ−、β−Ｒ６ＣＯＯ−、α−Ｒ６ＰＯ３−、及びβ−Ｒ６ＰＯ３−からなる群より選択され、ここでＸは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり、そしてＲ６はアルケニル、アリール又はアルキルＩであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩであり；及び
Ｒ５は、Ｈ又はＯＨである。｝を有する化合物。
【請求項２】
前記アルキルＩ基が、酸素、窒素又はリンをさらに含む、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記アルキルＩＩ基が、ヒドロキシル、エーテル、ケトン、オキシム、ヒドラゾン、イミン、及びシッフ塩基からなる群より選択される官能基をさらに含む、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
前記糖が、Ｇｌｃ、Ａｒａ（ｐｙｒ）、Ａｒａ（ｆｕｒ）、Ｒｈａ、及びＸｙｌからなる群より選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
前記Ｒ４が、以下の：
【化２】
2008506686.tif 000071
【化３】
2008506686.tif 000072
｛式中、
立体中心の配置はＲ又はＳであり；
ＸはＯＲ又はＮＲであり、ここでＲはアルキル又はアリールであり；
Ｘ’はアルキル、ＯＲ、ＮＲであり、ここでＲはアルキル又はアリールであり；及び
Ｒ’はＨ、アルキル又はアシルである。｝からなる群より選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
病的状態の治療又は予防における、以下の一般式：
【化４】
2008506686.tif 000073
｛式中、
Ｒ１は、α−ＯＨ、β−ＯＨ、α−Ｏ−Ｘ、β−Ｏ−Ｘ、α−Ｒ６ＣＯＯ−、β−Ｒ６ＣＯＯ−、α−Ｒ６ＰＯ３−、及びβ−Ｒ６ＰＯ３−からなる群より選択され、ここでＸは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり、そしてＲ６はアルケニル、アリール又はアルキルＩであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩであり；及び
Ｒ５は、Ｈ又はＯＨである。｝を有する化合物の使用。
【請求項７】
前記アルキルＩ基が、酸素、窒素又はリンをさらに含み；及び
前記アルキルＩＩ基が、ヒドロキシル、エーテル、ケトン、オキシム、ヒドラゾン、イミン、及びシッフ塩基からなる群より選択される官能基をさらに含む、請求項６に記載の使用。
【請求項８】
前記病的状態が神経変性である、請求項６に記載の使用。
【請求項９】
前期病的状態がアルツハイマー病である、請求項８に記載の使用。
【請求項１０】
前記病的状態がＡβ４２関連障害である、請求項６に記載の使用。
【請求項１１】
以下の一般式：
【化５】
2008506686.tif 000074
｛式中、
Ｒ１は、α−ＯＨ、β−ＯＨ、α−Ｏ−Ｘ、β−Ｏ−Ｘ、α−Ｒ６ＣＯＯ−、β−Ｒ６ＣＯＯ−、α−Ｒ６ＰＯ３−、及びβ−Ｒ６ＰＯ３−からなる群より選択され、ここでＸは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり、そしてＲ６はアルケニル、アリール又はアルキルＩであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩであり；及び
Ｒ５は、Ｈ又はＯＨである。｝を有する単離化合物。
【請求項１２】
前記アルキルＩ基が、酸素、窒素又はリンをさらに含み；及び
前記アルキルＩＩ基が、ヒドロキシル、エーテル、ケトン、オキシム、ヒドラゾン、イミン、及びシッフ塩基からなる群より選択される官能基をさらに含む、請求項１０に記載の単離化合物。
【請求項１３】
以下の一般式：
【化６】
2008506686.tif 000075
｛式中、
Ｒ１は、α−ＯＨ、β−ＯＨ、α−Ｏ−Ｘ、β−Ｏ−Ｘ、α−Ｒ６ＣＯＯ−、β−Ｒ６ＣＯＯ−、α−Ｒ６ＰＯ３−、及びβ−Ｒ６ＰＯ３−からなる群より選択され、ここでＸは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり、そしてＲ６はアルケニル、アリール又はアルキルＩであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩであり；及び
Ｒ５は、Ｈ又はＯＨである。｝を有する化合物を含む組成物。
【請求項１４】
前記アルキルＩ基が、酸素、窒素又はリンをさらに含み；及び
前記アルキルＩＩ基が、ヒドロキシル、エーテル、ケトン、オキシム、ヒドラゾン、イミン、及びシッフ塩基からなる群より選択される官能基をさらに含む、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
医薬として許容される担体、及び以下の一般式：
【化７】
2008506686.tif 000076
｛式中、
Ｒ１は、α−ＯＨ、β−ＯＨ、α−Ｏ−Ｘ、β−Ｏ−Ｘ、α−Ｒ６ＣＯＯ−、β−Ｒ６ＣＯＯ−、α−Ｒ６ＰＯ３−、及びβ−Ｒ６ＰＯ３−からなる群より選択され、ここでＸは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり、そしてＲ６はアルケニル、アリール又はアルキルＩであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩであり；及び
Ｒ５は、Ｈ又はＯＨである。｝を有する化合物を含む医薬組成物。
【請求項１６】
前記アルキルＩ基が、酸素、窒素又はリンをさらに含み；及び
前記アルキルＩＩ基が、ヒドロキシル、エーテル、ケトン、オキシム、ヒドラゾン、イミン、及びシッフ塩基からなる群より選択される官能基をさらに含む、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
以下の一般式：
【化８】
2008506686.tif 000077
を有する化合物の合成方法であって、以下のステップ：
（ａ）以下の一般式：
【化９】
2008506686.tif 000078
を有する化合物を酸化剤で処理し、以下の一般式：
【化１０】
2008506686.tif 000079
を有する化合物を形成し；
（ｂ）ステップ（ａ）において形成された化合物を還元剤で処理し、以下の一般式：
【化１１】
2008506686.tif 000080
｛式中、
Ｒ１は、Ｈ又はＯＨであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩである。｝を有する化合物を形成する、
を含む、上記方法。
【請求項１８】
前記酸化剤が無水クロム酸である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記還元剤がＮａＢＨ４である、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
以下の一般式：
【化１２】
2008506686.tif 000081
を有する化合物が、植物から入手される、請求項１７に記載の方法。
【請求項２１】
前記植物が普通株のカバノキからなる群より選択される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
以下の一般式：
【化１３】
2008506686.tif 000082
を有する化合物が、ベチュラフォリエネトリオール（ｂｅｔｕｌａｆｏｌｉｅｎｅｔｒｉｏｌ）である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
以下の一般式：
【化１４】
2008506686.tif 000083
を有する化合物の合成方法であって、以下のステップ：
（ａ）以下の一般式：
【化１５】
2008506686.tif 000084
を有する化合物を酸化剤で処理し、以下の一般式：
【化１６】
2008506686.tif 000085
を有する化合物を形成し；
（ｂ）ステップ（ａ）において形成された化合物を還元剤で処理し、以下の一般式：
【化１７】
2008506686.tif 000086
を有する化合物を形成し：
（ｃ）場合により、ステップ（ｂ）において形成された化合物を保護Ｒ１誘導体で処理し、以下の一般式：
【化１８】
2008506686.tif 000087
を有する化合物を形成し、
（ｄ）ステップ（ｃ）において形成された化合物を脱保護剤で処理し、以下の一般式：
【化１９】
2008506686.tif 000088
｛式中、
Ｒ１は、α−ＯＨ、β−ＯＨ、α−Ｏ−Ｘ、β−Ｏ−Ｘ、α−Ｒ６ＣＯＯ−、β−Ｒ６ＣＯＯ−、α−Ｒ６ＰＯ３−、及びβ−Ｒ６ＰＯ３−からなる群より選択され、ここでＸは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり、そしてＲ６はアルケニル、アリール又はアルキルＩであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩであり；及び
Ｒ５は、Ｈ又はＯＨである。｝を有する化合物を形成する、
を含む、上記方法。
【請求項２４】
前記アルキルＩ基が、酸素、窒素又はリンをさらに含み；及び
前記アルキルＩＩ基が、ヒドロキシル、エーテル、ケトン、オキシム、ヒドラゾン、イミン、及びシッフ塩基からなる群より選択される官能基をさらに含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記酸化剤が無水クロム酸である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
前記還元剤がＮａＢＨ４である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２７】
前記保護Ｒ１誘導体が、保護Ｒ１ハロゲン誘導体である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２８】
前記保護Ｒ１誘導体が、ＡＣ８−基により保護される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２９】
前記化合物が、ＮａＯＭｅを使用して脱保護される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
以下の一般式：
【化２０】
2008506686.tif 000089
を有する前記化合物が、植物から得られる、請求項２３に記載の方法。
【請求項３１】
前記植物が、普通株のカバノキからなる群より選択される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
以下の一般式：
【化２１】
2008506686.tif 000090
を有する化合物が、ベチュラフォリエネトリオール（ｂｅｔｕｌａｆｏｌｉｅｎｅｔｒｉｏｌ）である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
以下の一般式：
【化２２】
2008506686.tif 000091
を有する化合物の合成方法であって、以下のステップ：
（ａ）以下の一般式：
【化２３】
2008506686.tif 000092
を有する化合物を酸化剤で処理し、以下の一般式：
【化２４】
2008506686.tif 000093
を有する化合物を形成し；
（ｂ）ステップ（ａ）において形成された化合物を保護剤で処理し、以下の一般式：
【化２５】
2008506686.tif 000094
を有する化合物を形成し：
（ｃ）ステップ（ｂ）において形成された化合物を還元剤で処理し、以下の一般式：
【化２６】
2008506686.tif 000095
を有する化合物を形成し、
（ｄ）ステップ（ｃ）において形成された化合物をＡＣ８−Ｇｌｃ−Ｇｌｃ−Ｂｒで処理し、以下の一般式：
【化２７】
2008506686.tif 000096
を有する化合物を形成し；
（ｅ）ステップ（ｄ）において形成された化合物を脱保護剤で処理し、以下の一般式：
【化２８】
2008506686.tif 000097
を有する化合物を形成し；
（ｆ）ステップ（ｅ）において形成された化合物をさらに修飾し、以下の一般式：
【化２９】
2008506686.tif 000098
を有する化合物を形成する、
を含む、上記方法。
【請求項３４】
前記酸化剤が無水クロム酸である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記還元剤がＮａＢＨ４である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
前記化合物が、ＮａＯＭｅを使用して脱保護される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３７】
以下の一般式：
【化３０】
2008506686.tif 000099
を有する化合物が、植物から入手される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３８】
前記植物が、普通株のカバノキからなる群より選択される、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
以下の一般式：
【化３１】
2008506686.tif 000100
を有する化合物の合成方法であって、以下のステップ：
以下の一般式：
【化３２】
2008506686.tif 000101
を有する化合物を還元剤で処理し、以下の一般式：
【化３３】
2008506686.tif 000102
を有する化合物を形成する、
を含む、上記方法。
【請求項４０】
前記還元剤がＮａＢＨ４である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
以下の一般式：
【化３４】
2008506686.tif 000103
を有する化合物の合成方法であって、以下のステップ：
（ａ）以下の一般式：
【化３５】
2008506686.tif 000104
を有する化合物を還元剤で処理し、以下の一般式：
【化３６】
2008506686.tif 000105
を有する化合物を形成し；
（ｂ）ステップ（ａ）において形成された化合物をＡＣ８−Ｇｌｃ−Ｇｌｃ−Ｂｒで処理し、以下の一般式：
【化３７】
2008506686.tif 000106
を有する化合物を形成し：
（ｃ）ステップ（ｂ）において形成された化合物を脱保護剤で処理し、以下の一般式：
【化３８】
2008506686.tif 000107
を有する化合物を形成する、
を含む、上記方法。
【請求項４２】
前記還元剤がＮａＢＨ４である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記化合物が、ＮａＯＭｅを使用して脱保護される、請求項４１に記載の方法。
【請求項４４】
対象の病的状態を治療又は予防する方法であって、以下の一般式：
【化３９】
2008506686.tif 000108
｛式中、
Ｒ１は、α−ＯＨ、β−ＯＨ、α−Ｏ−Ｘ、β−Ｏ−Ｘ、α−Ｒ６ＣＯＯ−、β−Ｒ６ＣＯＯ−、α−Ｒ６ＰＯ３−、及びβ−Ｒ６ＰＯ３−からなる群より選択され、ここでＸは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり、そしてＲ６はアルケニル、アリール又はアルキルＩであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩであり；及び
Ｒ５は、Ｈ又はＯＨである。｝
を有する化合物を前記対象に投与することを含む、上記方法。
【請求項４５】
前記アルキルＩ基が、酸素、窒素又はリンをさらに含み；及び
前記アルキルＩＩ基が、ヒドロキシル、エーテル、ケトン、オキシム、ヒドラゾン、イミン、及びシッフ塩基からなる群より選択される官能基をさらに含む、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記病的状態が神経変性である、請求項４４に記載の方法。
【請求項４７】
前記病的状態がアルツハイマー病である、請求項４４に記載の方法。
【請求項４８】
前記病的状態が、Ａβ４２関連障害である、請求項４４に記載の方法。
【請求項４９】
前記対象が人間である、請求項４４に記載の方法。
【請求項５０】
対象におけるβアミロイド生成を阻害する方法であって、以下の一般式：
【化４０】
2008506686.tif 000109
｛式中、
Ｒ１は、α−ＯＨ、β−ＯＨ、α−Ｏ−Ｘ、β−Ｏ−Ｘ、α−Ｒ６ＣＯＯ−、β−Ｒ６ＣＯＯ−、α−Ｒ６ＰＯ３−、及びβ−Ｒ６ＰＯ３−からなる群より選択され、ここでＸは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり、そしてＲ６はアルケニル、アリール又はアルキルＩであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩであり；及び
Ｒ５は、Ｈ又はＯＨである。｝
を有する化合物を前記対象に投与することを含む、上記方法。
【請求項５１】
前記アルキルＩ基が、酸素、窒素又はリンをさらに含み；及び
前記アルキルＩＩ基が、ヒドロキシル、エーテル、ケトン、オキシム、ヒドラゾン、イミン、及びシッフ塩基からなる群より選択される官能基をさらに含む、請求項５０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連分野の相互参照
本願は２００４年１０月７日出願された米国出願第１０／９６１，３４６号及び２００４年７月１６日に出願された米国仮出願第６０／５８８，４３３号の利益を主張する。それらの出願をここに全体として本願明細書中に援用する。
【０００２】
技術分野
本発明は、新規ジンセノシド化合物、ジンセノシド化合物を含む組成物（例えば、医薬組成物）、及びこれらのジンセノシド化合物の合成方法を提供する。さらに、本発明は、これらのジンセノシド化合物を使用する、ベータアミロイドペプチド生成を阻害する方法、及び病的状態、特に神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病）を治療及び予防する方法を提供する。
【０００３】
政府の権利に関する陳述
本発明の一部は、ＮＩＨに付与された第ＲＯＩ  Ｎ５４３４６７号の下、政府の支援によりなされた。したがって、合衆国政府は本発明に一定の権利を有する。
【背景技術】
【０００４】
アルツハイマー病（ＡＤ）は、通常の社会的及び／又は職業的活動を維持することが不可能な状態まで最終的に導かれる、進行性の、容赦のない、認識機能の損失により特徴付けられる神経変性疾患である（Ｆｒａｎｃｉｓ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｅｇｕｌｉｎｓ  ａｎｄ  ＥｒｂＢ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｉｎ  ｃｕｌｔｕｒｅｄ  ｎｅｏｎａｔａｌ  ａｓｔｒｏｃｙｔｅｓ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｒｅｓ．，５７：４８７−９４，１９９９）。アルツハイマー病は、加齢に関連する認知症の最も一般的な形であり、そして米国において最も重大な健康上の問題の内の１つである。約４００万人の米国人はアルツハイマー病に苦しみ、少なくとも１０００億ドルの年間コストが、アルツハイマー病を最もコストのかかる加齢障害の内の１つとしている。アルツハイマー病は、通常、男性と比べて２倍の女性に発病し、高齢者の認知症の６５％以上の割合を占める。アルツハイマー病は、米国における死因の第４位である。今日まで、アルツハイマー病の治療は該当がなく、認識衰退は必然的である。当該疾患は２０年余り続き得、ＡＤ患者は、当該疾患と診察された後、平均で８〜１０年の間、通常生存する。
【０００５】
アルツハイマー病の病院は、神経原線維変化（対になったらせん状フィラメント及びタウ蛋白質からなる。）、及び大脳皮質中の神経炎性局面（ｎｅｕｒｉｔｉｃ  ｐｌａｑｕｅ）又は老人斑（ｓｅｎｉｌｅ  ｐｌａｑｕｅ）（アミロイド核周辺の軸策、星状細胞、及びグリア細胞からなる。）の過量に関連する。老人斑及び神経原線維は正常な老化に従って生じるが、それらが、アルツハイマー病の人々において、より広く行き渡っている。特異的な蛋白質異常性もアルツハイマー病において生ずる。特に、ＡＤは、脳のアミロイド斑の中へのアミロイドβペプチド（Ａβ）の蓄積により特徴付けられる（Ｓｅｌｋｏｅ，ｅｔ  ａｌ．，（２００１）Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ：ｇｅｎｅｓ，ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｙ．Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｒｅｖ．８１，７４１−６６；Ｈａｒｄｙ  ａｎｄ  Ｓｅｌｋｏｅ（２００２）．Ｔｈｅ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｈｙｐｏｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ：ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ａｎｄ  ｐｒｏｂｌｅｍｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｒｏａｄ  ｔｏ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２９７，２２０９）。Ａβは、β及びγセクレターゼと呼ばれる一連の膜結合型プロテアーゼにより、アミロイド前駆体蛋白質（ＡＰＰ）の連続蛋白質分解的切断によって生成される（Ｖａｓｓａｒ  ａｎｄ  Ｃｉｔｒｏｎ（２０００）Ａｂｅｔａ−ｇｅｎｅｒａｔｉｎｇ  ｅｎｚｙｍｅｓ：ｒｅｃｅｎｔ  ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  ｂｅｔａ−  ａｎｄ  ｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅ  ｒｅｓａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｎ  ２７，４１９−４２２；Ｊｏｈｎ，ｅｔ  ａｌ．，（２００３）Ｈｕｍａｎ  ｂｅｔａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅ（ＢＡＳＥ）ａｎｄ  ＢＡＣＥ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ．Ｊ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４６，４６２５−４６３０；Ｓｅｌｋｏｅ  ａｎｄ  Ｋｏｐａｎ（２００３）Ｎｏｔｃｈ  ａｎｄ  Ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ：ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｉｎｔｒａｍｅｍｂｒａｎｅ  ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ  ｌｉｎｋｓ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ．Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２６，５６５−５９７；Ｍｅｄｉｎａ  ａｎｄ  Ｄｏｔｔｉ（２００３）ｒｉｐｐｅｄ  ｏｕｔ  ｂｙ  ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅ．Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌ  １５，８２９−８４１）。ＡβのＣ末端での異種βセクレターゼの開裂は、Ａβ４０、及びＡβ４２といったＡβの２つの主なイソ型を生成する。Ａβ４０が主要開裂生成物であるが、より少量の高いアミロイド生成性のＡβ４２が、ＡＤにおける重要な病原因子の内の１つと信じられ（Ｓｅｌｋｏｅ（２００１）Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ'ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ：ｇｅｎｅｓ，ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｙ．Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｒｅｖ．８１，７４１−６６）、増大された大脳皮質のＡβ４２は、ＡＤに関連するシナプスの／ニューロンの機能障害と密接に関連する（Ｓｅｌｋｏｅ，Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｉｓ  ｓｙｎａｐｔｉｃ  ｆａｉｌｕｒｅ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２９８：７８９−７９１，２００２）。
【０００６】
プレセニリンは、アミロイドβ前駆体蛋白質（ＡＰＰ）を含む選択Ｉ型膜蛋白質の膜内蛋白質分解に必要とされ、アミロイドβ蛋白質を産生する（Ｄｅ  Ｓｔｒｏｏｐｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｏｆ  ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ‐１  ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｔｈｅ ｎｏｒｍａｌ  ｃｌｅａｖａｇｅ  ｏｆ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ  ｐｒｏｔｅｉｎ.  Ｎａｔｕｒｅ  ３９１：３８７−９０，１９９８；Ｓｔｅｉｎｅｒ  ａｎｄ  Ｈａａｓｓ,Ｉｎｔｒａｍｅｍｂｒａｎｅ  ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ  ｂｙ  ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎｓ.Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ.１：２１７−２４，２０００;Ｅｂｉｎｕ  ａｎｄ  Ｙａｎｋｎｅｒ，Ａ  ｒｉｐ  ｔｉｄｅ  ｉｎ  ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｓｉｇｎａｌ  ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ．Ｎｅｕｒｏｎ  ３４：４９９−５０２，２００２； Ｄｅ  Ｓｔｒｏｏｐｅｒ  ａｎｄ  Ａｎｎａｅｒｔ，Ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｉｎｔｒａｍｅｍｂｒａｎｅ  ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ：ｆａｃｔｓ  ａｎｄ  ｆｉｃｔｉｏｎ.Ｎａｔ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．３：Ｅ２２１−２５,２００１；Ｓｉｓｏｄｉａ  ａｎｄ  Ｇｅｏｒｇｅ−Ｈｙｓｌｏｐ,γ−Ｓｅｃｒｅｔａｓｅ,Ｎｏｔｃｈ，α−ｂｅｔａ  ａｎｄ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ：ｗｈｅｒｅ  ｄｏ  ｔｈｅ  ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎｓ  ｆｉｔ  ｉｎ？  Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．３：２８１−９０，２００２)。かかる蛋白質分解は、線虫、ハエ、及び哺乳類を含む種を越えて高く保存されることが知られるプレセニリン依存性βセクレターゼ機構により仲介され得る（Ｌ’Ｈｅｒｎａｕｌｔ  ａｎｄ  Ａｒｄｕｅｎｇｏ，Ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｐｕｔａｔｉｖｅ  ｓｐｅｒｍ  ｍｅｍｂｒａｎｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎ  Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ  ｅｌｅｇａｎｓ  ｐｒｅｖｅｎｔｓ  ｓｐｅｒｍ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｉｔｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｍｅｉｏｔｉｃ  ｄｉｖｉｓｉｏｎｓ．Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１１９：５５−５８，１９９２；Ｌｅｖｉｔａｎ  ａｎｄ  Ｇｒｅｅｎｗａｌｄ，Ｆａｃｉｌｉｔａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｌｉｎ−１２−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｂｙ  ｓｅｌ−１２，ａ  Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ  ｅｌｅｇａｎｓ  Ｓ１８２  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｇｅｎｅ．Ｎａｔｕｒｅ  ３７７：３５１−５４，１９９９；Ｌｉ  ａｎｄ  Ｇｒｅｅｎｗａｌｄ，ＨＯＰ−Ｉ，ａ  Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ  ｅｌｅｇａｎｓ  ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ，ａｐｐｅａｒｓ  ｔｏ  ｂｅ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｌｙ  ｒｅｄｕｎｄａｎｔ  ｗｉｔｈ  ＳＥＬ−１２  ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ  ａｎｄ  ｔｏ  ｆａｃｉｌｉｔａｔｅ  ＬＩＮ−１２  ａｎｄ  ＧＬＰ−Ｉ  ｓｈｉｇｎａｌｉｎｇ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９４：１２２０４−２０９，１９９７；Ｓｔｅｉｎｅｒ  ａｎｄ  Ｈａａｓｓ，Ｉｎｔｒａｍｅｍｂｒａｎｅ  ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ  ｂｙ  ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎｓ．Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１：２１７−２４，２０００；Ｓｉｓｏｄｉａ  ａｎｄ  Ｇｅｏｒｇｅ−Ｈｙｓｌｏｐ,γ−Ｓｅｃｒｅｔａｓｅ，Ｎｏｔｃｈ，α−ｂｅｔａ  ａｎｄ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ：ｗｈｅｒｅ  ｄｏ  ｔｈｅ  ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎｓ  ｆｉｔ  ｉｎ？  Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．３：２８１−９０，２００２)。
【０００７】
プレセニリンのヘテロ二量体、及びニカストリンをかくまう高分子量の複数蛋白質複合体であるγ−セクレターゼは、アルツハイマー病においてＡβ生成における最終ステップを仲介する（Ｌｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ  １  ｉｓ  ｌｉｎｋｅｄ  ｗｉｔｈ  β−ｓｅｃｒｅｔａｓｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｄｅｔｅｒｇｅｎｔ  ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｅｄ  ｓｔａｔｅ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９７：６１３８−４３，２０００；Ｅｓｌｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｃｔｉｖｉｔｙ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ−γ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅ  ｃｏｍｐｌｅｘ  ｒｅｖｅａｌｓ  ｎｉｃａｓｔｒｉｎ  ａｎｄ  ａ  ｇａｍｍａ  ｓｕｂｓｔｒａｔｅ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９９：２７２０−２５，２００２）。プレセニリンへテロ二量体及び他の未定義の核成分の安定化（短命のプールから長命のプールへ転換される。）は、γ−セクレターゼ活性について決定的に重要な意味をもつように思われる（Ｔｈｉｎａｋａｒａｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｔｈａｔ  ｌｅｖｅｌｓ  ｏｆ  ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎｓ（ＰＳｌ  ａｎｄ  ＰＳ２）ａｒｅ  ｃｏｏｒｄｉｎａｔｅｌｙ  ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｂｙ  ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｌｉｍｉｔｉｎｇ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｆａｃｔｏｒｓ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：２８４１５−４２２，１９９７；Ｔｏｍｉｔａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｅ  ｆｉｒｓｔ  ｐｒｏｌｉｎｅ  ｏｆ  ＰＡＬＰ  ｍｏｔｉｆ  ａｔ  ｔｈｅ  Ｃ  ｔｅｒｍｉｎｕｓ  ｏｆ  ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎｓ  ｉｓ  ｏｂｌｉｇａｔｏｒｙ  ｆｏｒ  ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ，ｃｏｍｐｌｅｘ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ，ａｎｄ  ｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅ  ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎｓ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：３３２７３−２８１，２００１）。γ−セクレターゼ活性は、標的膜貫通開裂部位付近で非常に緩い配列特異性を表示し、そしてＮｏｔｃｈ［Ｓｃｈｒｏｅｔｅｒ，Ｅ．Ｈ．，ｅｔ  ａｌ．，（１９９８）Ｎｏｔｃｈ−１  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｒｅｑｕｉｒｅｓ  ｌｉｇａｎｄ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ  ｒｅｌｅａｓｅ  ｏｆ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｄｏｍａｉｎ．Ｎａｔｕｒｅ  ３９３，３８２−３８６；Ｄｅ  Ｓｔｒｏｏｐｅｒ，ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ−１−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅ−ｌｉｋｅ  ｐｒｏｔｅａｓｅ  ｍｅｄｉａｔｅｓ  ｒｅｌｅａｓｅ  ｏｆ  Ｎｏｔｃｈ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｄｏｍａｉｎ．Ｎａｔｕｒｅ  ３９８：５１８−５２２］，ＥｒｂＢ４［Ｌｅｅ,ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅ−ｌｉｋｅ  ｉｎｔｒａｍｅｍｂｒａｎｅ  ｃｌｅａｖａｇｅ  ｏｆ  ＥｒｂＢ４．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７，６３１８−６３２３；Ｎｉ，ｅｔ  ａｌ．，（２００１）Ｇａｍｍａ−Ｓｅｃｒｅｔａｓｅ  ｃｌｅａｖａｇｅ  ａｎｄ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＥｒｂＢ−４  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２９４，２１７９−２１８１),及びｐ７５ニューロトロフィン受容体（ｐ７５ＮＴＲ）（Ｊｕｎｇ，ｅｔ  ａｌ．，（２００３）Ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｉｎｔｒａｍｅｍｂｒａｎｅ  ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｐ７５  ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｍｏｄｕｌａｔｅｓ  ｉｔｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  ＴｒｋＡ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７８，４２１６１−４２１６９）を含む他の非ＡＰＰ−Ｉ型膜基質の膜内開裂を仲介するように見られる。
【０００８】
β−セクレターゼ活性の一般的な阻害は、Ａβ産生を廃するだけでなく、他の細胞のβ−セクレターゼ基質の正常プロセッシングをも阻害すると予測される。それ故、γ−セクレターゼ活性の完全な阻害は、潜在的に厳しい副作用を導き得るだろう（Ｄｏｅｒｆｌｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｌｉｎｋｓ  Ｆｒｅｅ  ｉｎ  ＰＭＣ  Ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｍｏｄｕｌａｔｅｓ  ｔｈｙｍｏｃｙｔｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．（２００１）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ９８，９３１２−９３１７；Ｈａｄｌａｎｄ，ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｒｅｐｒｅｓｓ  ｔｈｙｍｏｃｙｔｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ９８，７４８７−７４９１）。
【０００９】
安全な取り組みは、理想的には、他のγ−セクレターゼ基質の膜内蛋白質分解に影響を与えずに、Ａβ４２産生を選択的に低減し得る試薬を使用することであろう。例として、ＥｒｂＢ４のγ−セクレターゼ仲介開裂に重要な影響を与えずに（Ｗｅｇｇｅｎ、ｅｔ  ａｌ．（２００３）．Ａｂｅｔａ４２−ｌｏｗｅｒｉｎｇ  ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｒｕｇｓ  ｐｒｅｓｅｒｖｅ  ｉｎｔｒａｍｅｍｂｒａｎｅ  ｃｌｅａｖａｇｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ  ｐｒｏｔｅｉｎ（ＡＰＰ）ａｎｄ  ＥｒｂＢ−４  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｎｄ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｔｈｅ  ＡＰＰ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｄｏｍａｉｎ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７８，３０７４８−３０７５４）、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）の一部はＡβ４２の生成を低減したことが示された（Ｗｅｇｇｅｎ，ｅｔ  ａｌ．（２００１）．Ａ  ｓｕｂｓｅｔ  ｏｆ  ＮＳＡＩＤｓ  ｌｏｗｅｒ  ａｍｙｌｏｉｄｏｇｅｎｉｃ  Ａｂｅｔａ４２  ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｌｙ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｎａｔｕｒｅ  ４１４，２１２−２１６）。従って、（他のγ−セクレターゼ基質に影響を与えることなしに）選択的にＡβ４２生成を低減することのできる小分子は、魅力的であり、ＡＤを治療するための治療薬として有望である。
【００１０】
若年性家族性アルツハイマー病（ＦＡＤ）の多くの場合は、プレセニリン蛋白質をコードする２つの関連遺伝子、ＰＳ１及びＰＳ２の変異により生ずる（Ｔａｎｚｉ,ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｅ  ｇｅｎｅ  ｄｅｆｅｃｔｓ  ｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅ  ｆｏｒ  ｆａｍｉｌａｌ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ｄｉｓ．３：１５９−６８，１９９６;Ｈａｒｄｙ，Ｊ．，Ａｍｙｌｏｉｄ，ｔｈｅ  ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎｓ  ａｎｄ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ．Ｔｒｅｎｄｓ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２０：１５４−５９，１９９７；Ｓｅｌｋｏｅ，  Ｄ．Ｊ．，Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ：ｇｅｎｅｓ，ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｙ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｖ．８１：７４１−６６，２００１）。プレセニリンにおけるＦＡＤ関連変異は、アミロイド−ベータ（Ａβ４２）のより長い（４２アミノ酸残基）、よりアミロイド生成型の増大生成を生じさせる。プレセニリンに関する病理生理学を解析することは、アルツハイマー病の分子基盤を明らかにする唯一の機会を提供する。過剰のアミロイド生成が、ＡＤの認知症特性の基礎となる神経変性を引き起こすと見られる。
【００１１】
朝鮮人参は、ｐａｎａｘ属の植物の乾燥根に与えられた一般名であって、総体的健康強壮剤、及び一連の疾患を治療するための薬として、数千年間アジアにおいて広く使用されてきた（Ｃｈｏ,ｅｔ  ａｌ．（１９９５）Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｋｏｒｅａｎ  ｇｉｎｓｅｎｇ.  Ｉｎ  ｔｈｅ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｋｏｒｅａｎ  Ｇｉｎｓｅｎｇ  (版）:Ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ  Ｋｏｒｅａｎ  Ｇｉｎｓｅｎｇ,  Ｓｅｏｕｌ:  Ｈａｎｌｉｍ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，ｐｐ  ３５−５４; Ｓｈｉｂａｔａ  Ｓ．(２００１）  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  ｃａｎｃｅｒ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ  ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ｇｉｎｓｅｎｇ  ｓａｐｏｎｉｎｓ  ａｎｄ  ｓｏｍｅ  ｒｅｌａｔｅｄ ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ．Ｊ  Ｋｏｒｅａｎ  Ｍｅｄ  Ｓｃｉ  １６  Ｓｕｐｐｌ:Ｓ２８−３７; Ａｔｔｅｌｅ，ｅｔ  ａｌ．（１９９９);Ｇｉｎｓｅｎｇ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ:ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ  ａｎｄ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ａｃｔｉｏｎｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５８:１６８５−１６９３;Ｃｏｌｅｍａｎ，ｅｔ  ａｌ．（２００３)．Ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｐａｎａｘ  ｇｉｎｓｅｎｇ  ｏｎ  ｑｕａｌｉｔｙ  ｏｆ  ｌｉｆｅ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍ．Ｔｈｅｒ.２８，５−１５；Ｃｏｏｎ  ａｎｄ  Ｅｒｎｓｔ（２００２)．Ｐａｎａｘ  ｇｉｎｓｅｎｇ：ａ  ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ａｄｖｅｒｓｅ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ａｎｄ  ｄｒｕｇ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ．Ｄｒｕｇ Ｓａｆ．２５：３２３−４４)。当該ｐａｎａｘ属は、東アジア原産の約６種、及び北アメリカ東部原産の２種を含む。朝鮮人参（アジアの人参）及びアメリカ人参Ｌ（北アメリカの人参）は、栄養補助食品及び医薬組成物に最も一般的に使用される２つの種である。当該根及びそれらの抽出物は、サポニンを含む様々な基質を含む。
【００１２】
人参は、肝機能の改善、及び免疫促進、並びに抗動脈硬化、抗血栓症、抗ストレス、抗糖尿病、抗項血圧、及び抗腫瘍効果を含む特異的な薬理効果を有するとして知られている。当該人参の根から単離された化合物のいくつかの種類間において、人参のサポニンは、その薬理効果に貢献する化学成分であると知られる。これらの化合物は、ジンセノシドＲｘ（ｘはその極性に依存して「ａ」〜「ｋ」のインデックスである。）と名付けられたトリテルペングリコシドである。当該極性は、薄層クロマトグラフィープレート上のそれらの移動性により決定され、分子の糖鎖中の単糖類残基数の関数である。
【００１３】
今日まで、少なくとも３１のジンセノシドが、白及び赤人参から単離されている。当該ジンセノシドの全ては、それらのアグリコンに依存して３つの群に分けられ得、プロトパナキサジオール型ジンセノシド（例えば、Ｒｂ１、Ｒｂ２、Ｒｃ、Ｒｄ、（２０Ｒ）Ｒｇ３、（２０Ｓ）Ｒｇ３、Ｒｈ２）、プロトパナキサトリオール型ジンセノシド（例えば、Ｒｅ、Ｒｆ、Ｒｇ１、Ｒｇ２、Ｒｈ１）、及びオレアノール酸型ジンセノシド（例えば、Ｒｏ）である。プロトパナキサジオール型及びプロトパナキサトリオール型ジンセノシドの双方は、ダマランとして知られるトリテルペン骨格構造を有する（Ａｔｔｅｌｅ，ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｇｉｎｓｅｎｇ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ：ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ  ａｎｄ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ａｃｔｉｏｎｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５８：１６８５−１６９３）。Ｒｋ１、Ｒｇ５、（２０Ｒ）Ｒｇ３、及び（２０Ｓ）Ｒｇ３は、熱処理された人参中にほとんど独自に存在するジンセノシドであるが、未処理の人参中に微量元素として存在する事は見つかっていない(Ｋｗｏｎ， ｅｔ  ａｌ．（２００１) Ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ  ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｌｅｓｓ  ｐｏｌａｒ  ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ  ｉｎ  ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ  ｇｉｎｓｅｎｇ．Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．Ａ．９２１；３３５−３３９；Ｐａｒｋ，ｅｔ  ａｌ．(２００２)；Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  ｄａｍｍａｒａｎｅ  ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ  ｆｒｏｍ  ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ  ｇｉｎｓｅｎｇ．Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ.Ｂｕｌ．５０，５３８−５４０  Ｐａｒｋ，ｅｔ  ａｌ．(２００２)；Ｔｈｒｅｅ  ｎｅｗ  ｄａｍｍａｒａｎｅ  ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ  ｆｒｏｍ  ｈｅａｔ−ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ  ｇｉｎｓｅｎｇ．Ａｒｃｈ．Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．２５，４２８−４３２；Ｋｉｍ，ｅｔ  ａｌ．(２０００)；Ｓｔｅａｍｉｎｇ  ｏｆ  ｇｉｎｓｅｎｇ  ａｔ  ｈｉｇｈ  ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ  ｅｎｈａｎｃｅｓ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ.Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．６３：１７０２−１７０２)。グルコピラノシル、アラビノピラノシル、アラビノフラノシル、及びラムノピラノシルを含む炭水化物は、特定のジンセノシドとも化学的に関連し得る。
【００１４】
高温での蒸気による人参の処理は、新規薬理活性を有すると思われる、これらの固有のジンセノシドＲｋ１、Ｒｇ５、（２０Ｒ）Ｒｇ３、及び（２０Ｓ）Ｒｇ３の含有量をさらに促進する。人参の有利な特質の少なくともいくつかは、ジンセノシドとして集合的に言及される人参の混合物である、そのトリテルペンサポニン含有物のせいとなり得る。
【００１５】
米国特許第５，７７６，４６０号（以下「’４６０特許」とする。）は、促進された薬理効果を有する処理された人参製品を開示する。この人参製品は、商業的に「サン人参（ｓｕｎ  ｇｉｎｓｅｎｇ）」として知られ、特定の期間、高温での当該人参の熱処理に起因する効果的な医薬成分の増大された値を含む。’４６０特許中に特に開示されることについて、人参の熱処理は、１２０°〜１８０℃の温度で、０．５〜２０時間の間、実施され得、及び好ましくは、１２０°〜１４０℃の温度で、２〜５時間の間、実施され得る。当該加熱時間は、より低い温度はより長い時間を必要とし、一方、より高い温度は比較的短い時間を必要とするように、加熱温度に依存して変化する。当該’４６０特許は、当該処理された人参製品が、特に抗酸化活性、及び血管拡張活性を含む薬理特性を有することも開示する。
【００１６】
最近、Ｔａｅ−Ｗａｎ  Ｋｉｍ他は、’４６０特許に開示された熱処理された人参製品の独自の成分は、細胞中のＡβ４２の産生を著しく低くすることを例証した（特許出願中）。特に、発明者等は、少なくとも３つのジンセノシド、Ｒｋ１、（２０Ｓ）Ｒｇ３、及びＲｇ５であって、「サン人参（Ｓｕｎ  Ｇｉｎｓｅｎｇ）」として知られる熱処理された人参の固有の成分、並びに、（２０Ｒ）Ｒｇ３、（２０Ｓ）Ｒｇ３、Ｒｇ５、及びＲｋ１の混合物であるＲｇｋ３５１は、哺乳類細胞においてＡβ４２の産生を低減することを発見した。Ｒｇｋ３５１及びＲｋ１は、最も効果的にＡβ４２値を低減する。さらに、Ｒｋ１は、部分的に精製されたγ−セクレターゼ複合体を使用する無細胞試験において、Ａβ４２生成を阻害することも示し、Ｒｋ１が当該γ−セクレターゼ酵素の選択性及び／又は活性のいずれも調節することを示唆した。さらに、Ｔａｅ−Ｗａｎ  Ｋｉｍ他は、生体外でＡβ４２低減活性を有さないあるジンセノシドが、生体内でＡβ４２を低減するのに効果的であることを見出した。例えば、Ｒｇ１の如き２０（Ｓ）−プロトパナキサトリオール（ＰＰＴ）群ジンセノシドは、経口摂取後、ＰＰＴに転換される。それ故、Ｒｇ１は生体外でアミロイド低減活性を一般的に有さないが、Ｒｇ１は生体内で活性アミロイド低減成分ＰＰＴに転換され得る。
【発明の開示】
【００１７】
本発明は、アルツハイマー病の如き神経変性疾患を予防する及び治療する組成物及び方法を提供する。
【００１８】
１つの態様において、本発明は、以下の一般式：
【化１】
2008506686.tif 000003
｛式中、
Ｒ１は、α−ＯＨ、β−ＯＨ、α−Ｏ−Ｘ、β−Ｏ−Ｘ、α−Ｒ６ＣＯＯ−、β−Ｒ６ＣＯＯ−、α−Ｒ６ＰＯ３−、及びβ−Ｒ６ＰＯ３−からなる群より選択され、ここでＸは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり、そしてＲ６はアルケニル、アリール又はアルキルＩであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩであり；及び
Ｒ５は、Ｈ又はＯＨである。｝を有する化合物を提供する。
【００１９】
当該アルキルＩ基が、酸素、窒素又はリンをさらに含み、及び当該アルキルＩＩ基が、ヒドロキシル、エーテル、ケトン、オキシム、ヒドラゾン、イミン、及びシッフ塩基からなる群より選択される官能基をさらに含む。ある態様において、当該糖群は、Ｇｌｃ、Ａｒａ（ｐｙｒ）、Ａｒａ（ｆｕｒ）、Ｒｈａ、及びＸｙｌからなる群より選択される。
【００２０】
他の態様において、Ｒ４は、以下の：
【化２】
2008506686.tif 000004
｛式中、
立体中心の配置はＲ又はＳであり；
ＸはＯＲ又はＮＲであり、ここでＲはアルキル又はアリールであり；
Ｘ’はアルキル、ＯＲ、ＮＲであり、ここでＲはアルキル又はアリールであり；
Ｒ’はＨ、アルキル又はアシルである。｝からなる群より選択される。
【００２１】
他の態様において、本発明は、以下の一般式：
【化３】
2008506686.tif 000005
｛式中、
Ｒ１は、α−ＯＨ、β−ＯＨ、α−Ｏ−Ｘ、β−Ｏ−Ｘ、α−Ｒ６ＣＯＯ−、β−Ｒ６ＣＯＯ−、α−Ｒ６ＰＯ３−、及びβ−Ｒ６ＰＯ３−からなる群より選択され、ここでＸは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり、そしてＲ６はアルケニル、アリール又はアルキルＩであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩであり；及び
Ｒ５は、Ｈ又はＯＨである。｝を有する化合物を含む組成物、特に医薬組成物を提供する。
【００２２】
本発明は、以下の一般式：
【化４】
2008506686.tif 000006
を有する化合物の合成方法であって、以下のステップ：
（ａ）以下の一般式：
【化５】
2008506686.tif 000007
を有する化合物を酸化剤で処理し、
（ｂ）以下の一般式：
【化６】
2008506686.tif 000008
を有する化合物を形成し；
（ｃ）ステップ（ｂ）において形成された化合物を還元剤で処理し、以下の一般式：
【化７】
2008506686.tif 000009
｛式中、
Ｒ１は、Ｈ又はＯＨであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；及び
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩである。｝を有する化合物を形成する、を含む、上記方法も提供する。
【００２３】
他の態様において、当該酸化剤は無水クロム酸であり、当該還元剤はＮａＢＨ４である。
【００２４】
本発明は、以下の一般式：
【化８】
2008506686.tif 000010
を有する化合物の合成方法であって、以下のステップ：
（ａ）以下の一般式：
【化９】
2008506686.tif 000011
を有する化合物を酸化剤で処理し、以下の一般式：
【化１０】
2008506686.tif 000012
を有する化合物を形成し；
（ｂ）ステップ（ａ）において形成された化合物を還元剤で処理し、以下の一般式：
【化１１】
2008506686.tif 000013
を有する化合物を形成し：
（ｃ）場合により、ステップ（ｂ）において形成された化合物を保護Ｒ１誘導体で処理し、以下の一般式：
【化１２】
2008506686.tif 000014
を有する化合物を形成し、
（ｄ）ステップ（ｃ）において形成された化合物を脱保護剤で処理し、以下の一般式：
【化１３】
2008506686.tif 000015
｛式中、
Ｒ１は、α−ＯＨ、β−ＯＨ、α−Ｏ−Ｘ、β−Ｏ−Ｘ、α−Ｒ６ＣＯＯ−、β−Ｒ６ＣＯＯ−、α−Ｒ６ＰＯ３−、及びβ−Ｒ６ＰＯ３−からなる群より選択され、ここでＸは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり、そしてＲ６はアルケニル、アリール又はアルキルＩであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩであり；及び
Ｒ５は、Ｈ又はＯＨである。｝を有する化合物を形成する、
を含む、上記方法をさらに提供する。
【００２５】
さらに、本発明は、以下の一般式：
【化１４】
2008506686.tif 000016
を有する化合物の合成方法であって、以下のステップ：
（ａ）以下の一般式：
【化１５】
2008506686.tif 000017
を有する化合物を酸化剤で処理し、以下の一般式：
【化１６】
2008506686.tif 000018
を有する化合物を形成し；
（ｂ）ステップ（ａ）において形成された化合物を保護剤で処理し、以下の一般式：
【化１７】
2008506686.tif 000019
を有する化合物を形成し：
（ｃ）ステップ（ｂ）において形成された化合物を還元剤で処理し、以下の一般式：
【化１８】
2008506686.tif 000020
を有する化合物を形成し、
（ｄ）ステップ（ｃ）において形成された化合物をＡＣ８−Ｇｌｃ−Ｇｌｃ−Ｂｒで処理し、以下の一般式：
【化１９】
2008506686.tif 000021
を有する化合物を形成し；
（ｅ）ステップ（ｄ）において形成された化合物を脱保護剤で処理し、以下の一般式：
【化２０】
2008506686.tif 000022
を有する化合物を形成し；
（ｆ）ステップ（ｅ）において形成された化合物をさらに修飾し、以下の一般式：
【化２１】
2008506686.tif 000023
【化２２】
2008506686.tif 000024
を有する化合物を形成する、を含む、上記方法を提供する。
【００２６】
ある態様において、当該出発物質、ベチュラフォリエネトリオール（ｂｅｔｕｌａｆｏｌｉｅｎｅｔｒｉｏｌ）は、例えば普通株のカバノキの如き植物から入手される。
【００２７】
他の態様において、本発明は、以下の一般式：
【化２３】
2008506686.tif 000025
を有する化合物の合成方法であって、以下のステップ：
以下の一般式：
【化２４】
2008506686.tif 000026
を有する化合物を、ＮａＢＨ４の如き還元剤で処理する、
を含む、上記方法を提供する。
【００２８】
他の態様において、本発明は、以下の一般式：
【化２５】
2008506686.tif 000027
を有する化合物の合成方法であって、以下のステップ：
（ａ）以下の一般式：
【化２６】
2008506686.tif 000028
を有する化合物を還元剤で処理し、以下の一般式：
【化２７】
2008506686.tif 000029
を有する化合物を形成し；
（ｂ）ステップ（ａ）において形成された化合物をＡＣ８−Ｇｌｃ−Ｇｌｃ−Ｂｒで処理し、以下の一般式：
【化２８】
2008506686.tif 000030
を有する化合物を形成し：
（ｃ）ステップ（ｂ）において形成された化合物を脱保護剤で処理し、以下の一般式：
【化２９】
2008506686.tif 000031
を有する化合物を形成する、
を含む、上記方法を提供する。
【００２９】
さらに、本発明は、対象の病的状態を治療又は予防する方法であって、以下の一般式：
【化３０】
2008506686.tif 000032
｛式中、
Ｒ１は、α−ＯＨ、β−ＯＨ、α−Ｏ−Ｘ、β−Ｏ−Ｘ、α−Ｒ６ＣＯＯ−、β−Ｒ６ＣＯＯ−、α−Ｒ６ＰＯ３−、及びβ−Ｒ６ＰＯ３−からなる群より選択され、ここでＸは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり、そしてＲ６はアルケニル、アリール又はアルキルＩであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩであり；及び
Ｒ５は、Ｈ又はＯＨである。｝
を有する化合物を前記対象に投与することを含む、上記方法を提供する。
【００３０】
ある態様において、当該病的状態が神経変性であり、好ましくはアルツハイマー病、Ａβ４２関連障害である。
【００３１】
本発明は、対象におけるβアミロイド生成を阻害する方法であって、生体内事象においてβアミロイド生成を阻害することを含み、以下の一般式：
【化３１】
2008506686.tif 000033
｛式中、
Ｒ１は、α−ＯＨ、β−ＯＨ、α−Ｏ−Ｘ、β−Ｏ−Ｘ、α−Ｒ６ＣＯＯ−、β−Ｒ６ＣＯＯ−、α−Ｒ６ＰＯ３−、及びβ−Ｒ６ＰＯ３−からなる群より選択され、ここでＸは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり、そしてＲ６はアルケニル、アリール又はアルキルＩであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩであり；及び
Ｒ５は、Ｈ又はＯＨである。｝
を有する化合物を前記対象に投与することを含む、上記方法を提供する。
【００３２】
本発明のさらに他の態様は、以下の記載を考慮して明らかとなるだろう。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３３】
本明細書及び特許請求の範囲内に使用されるように、単数形の「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、明らかな他の指示がなければ、複数形も含む。それ故、例えば、「単数の剤」の言及はそのような剤の複数を含み、「その（ｔｈｅ）ジンセノシド」の言及は、１又は複数のジンセノシド及び当業者により知られるそれらの等価物などを言及する。本明細書中に言及される全刊行物、特許出願、特許、及び他の引用文献の全内容を、本源明細書中に援用する。
【００３４】
本発明に関して、アルツハイマー病、神経変性疾患を治療するための、及びアミロイド−ベータ蛋白質（Ａβ）の生成を調節するための化合物及び方法を提供する。
【００３５】
ある態様において、本発明は、以下の一般式：
【化３２】
2008506686.tif 000034
｛式中、
Ｒ１は、α−ＯＨ、β−ＯＨ、α−Ｏ−Ｘ、β−Ｏ−Ｘ、α−Ｒ６ＣＯＯ−、β−Ｒ６ＣＯＯ−、α−Ｒ６ＰＯ３−、及びβ−Ｒ６ＰＯ３−からなる群より選択され、ここでＸは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり、そしてＲ６はアルケニル、アリール又はアルキルＩであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩであり；及び
Ｒ５は、Ｈ又はＯＨである。｝を有する化合物を提供する。当該アルキルＩ基は、酸素、窒素又はリンをさらに含み；及び当該アルキルＩＩ基は、ヒドロキシル、エーテル、ケトン、オキシム、ヒドラゾン、イミン、及びシッフ塩基からなる群より選択される官能基をさらに含み得る。ある態様において、当該糖は、Ｇｌｃ、Ａｒａ（ｐｙｒ）、Ａｒａ（ｆｕｒ）、Ｒｈａ、及びＸｙｌからなる群より選択される。
【００３６】
他の態様において、当該Ｒ４は、以下の：
【化３３】
2008506686.tif 000035
｛式中、
立体中心の配置はＲ又はＳであり；
ＸはＯＲ又はＮＲであり、ここでＲはアルキル又はアリールであり；
Ｘ’はアルキル、ＯＲ、ＮＲであり、ここでＲはアルキル又はアリールであり；
Ｒ’はＨ、アルキル又はアシルである。｝からなる群より選択される。本明細書に使用される通り、当該化合物はダマラン、特にジンセノシド及びそれらの類似体である。本明細書に使用される「ジンセノシド」は、特定化合物、Ｒａ１、Ｒａ２、Ｒａ３、Ｒｂ１、Ｒｂ２、Ｒｂ３、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｆ、Ｒｇ１、（２０Ｒ）Ｒｇ２、（２０Ｓ）Ｒｇ２、（２０Ｒ）Ｒｇ３、（２０Ｓ）Ｒｇ３、Ｒｇ５、Ｒｇ６、Ｒｈ１、（２０Ｒ）Ｒｈ２、（２０Ｓ）Ｒｈ２、Ｒｈ３、Ｒｈ４、（２０Ｒ）Ｒｇ３、（２０Ｓ）Ｒｇ３、Ｒｋ１、Ｒｋ２、Ｒｋ３、Ｒｓ１、Ｒｓ２、Ｒｓ３、Ｒｓ４、Ｒｓ５、Ｒｓ６、Ｒｓ７、Ｆ４、Ｒｇｋ３５１、プロトパナキサジオール（ＰＰＤ）、プロトパナキサトリオール（ＰＰＴ）、ＤＨＰＰＤ−Ｉ、ＤＨＰＰＤ−ＩＩ、ＤＨＰＰＴ−Ｉ、ＤＨＰＰＴ−ＩＩ、サン人参、白人参又は赤人参、又はそれらの相同体のブタノール溶解画分を非制限的に含むトリテルペングリコシドの集合を言及する。本発明のジンセノシドは、グルコピラノシル、アラビノピラノシル、アラビノフルラノシル、及びラムノピラノシルを非制限的に含む炭水化物と化学的に結合し得る。本発明のジンセノシドは単離されたジンセノシド化合物又は単離され、さらに合成されたジンセノシドとなり得る。本発明の単離されたジンセノシドは、熱、光、化学的、酵素的方法、又は当業者に通常知られる他の合成方法を非制限的に含む方法を使用してさらに合成され得る。
【００３７】
本発明は、以下の一般式：
【化３４】
2008506686.tif 000036
を有する化合物の合成方法であって、以下のステップ：
（ａ）以下の一般式：
【化３５】
2008506686.tif 000037
を有する化合物を酸化剤で処理し、以下の一般式：
【化３６】
2008506686.tif 000038
を有する化合物を形成し；
（ｂ）ステップ（ａ）において形成された化合物を還元剤で処理し、以下の一般式：
【化３７】
2008506686.tif 000039
｛式中、
Ｒ１は、Ｈ又はＯＨであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩである。｝を有する化合物を形成する、
を含む、上記方法をさらに提供する。ある態様において、当該酸化剤は無水クロム酸であり、そして当該還元剤はＮａＢＨ４である。
【００３８】
当該出発物質、すなわち、以下の一般式：
【化３８】
2008506686.tif 000040
を有する化合物であって、特にベチュラフォリエネトリオール（ｂｅｔｕｌａｆｏｌｉｅｎｅｔｒｉｏｌ）は、普通株のカバノキを非制限的に含む植物から入手され得る。これらの抽出物は、ベチュラフォリエネトリオールを豊富に含み、ジンセノシドを製造するための所望の出発物質である、なぜならば、人参よりもそれらの方が著しくコストが安いからである。
【００３９】
本発明は、以下の一般式：
【化３９】
2008506686.tif 000041
を有する化合物の合成方法であって、以下のステップ：
（ａ）以下の一般式：
【化４０】
2008506686.tif 000042
を有する化合物を酸化剤で処理し、以下の一般式：
【化４１】
2008506686.tif 000043
を有する化合物を形成し；
（ｂ）ステップ（ａ）において形成された化合物を還元剤で処理し、以下の一般式：
【化４２】
2008506686.tif 000044
を有する化合物を形成し：
（ｃ）場合により、ステップ（ｂ）において形成された化合物を保護Ｒ１誘導体で処理し、以下の一般式：
【化４３】
2008506686.tif 000045
を有する化合物を形成し、
（ｄ）ステップ（ｃ）において形成された化合物を脱保護剤で処理し、以下の一般式：
【化４４】
2008506686.tif 000046
｛式中、
Ｒ１は、α−ＯＨ、β−ＯＨ、α−Ｏ−Ｘ、β−Ｏ−Ｘ、α−Ｒ６ＣＯＯ−、β−Ｒ６ＣＯＯ−、α−Ｒ６ＰＯ３−、及びβ−Ｒ６ＰＯ３−からなる群より選択され、ここでＸは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり、そしてＲ６はアルケニル、アリール又はアルキルＩであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩであり；及び
Ｒ５は、Ｈ又はＯＨである。｝を有する化合物を形成する、
を含む、上記方法も提供する。
【００４０】
当該アルキルＩ基は、酸素、窒素又はリンをさらに含み；及び当該アルキルＩＩ基が、ヒドロキシル、エーテル、ケトン、オキシム、ヒドラゾン、イミン、及びシッフ塩基からなる群より選択される官能基をさらに含み得る。ある態様において、当該酸化剤は無水クロム酸であり、当該還元剤はＮａＢＨ４である。ある態様において、当該保護Ｒ１誘導体は、保護Ｒ１ハロゲン誘導体である。例えば、当該保護Ｒ１誘導体は、ＡＣ８−基により保護され得る。当該保護Ｒ１基は、ＮａＯＭｅの如き剤を使用して脱保護され得る。
【００４１】
さらに、本発明は、以下の一般式：
【化４５】
2008506686.tif 000047
を有する化合物の合成方法であって、以下のステップ：
（ａ）以下の一般式：
【化４６】
2008506686.tif 000048
を有する化合物を酸化剤で処理し、以下の一般式：
【化４７】
2008506686.tif 000049
を有する化合物を形成し；
（ｂ）ステップ（ａ）において形成された化合物を保護剤で処理し、以下の一般式：
【化４８】
2008506686.tif 000050
を有する化合物を形成し：
（ｃ）ステップ（ｂ）において形成された化合物を還元剤で処理し、以下の一般式：
【化４９】
2008506686.tif 000051
を有する化合物を形成し、
（ｄ）ステップ（ｃ）において形成された化合物をＡＣ８−Ｇｌｃ−Ｇｌｃ−Ｂｒで処理し、以下の一般式：
【化５０】
2008506686.tif 000052
を有する化合物を形成し；
（ｅ）ステップ（ｄ）において形成された化合物を脱保護剤で処理し、以下の一般式：
【化５１】
2008506686.tif 000053
を有する化合物を形成し；
（ｆ）ステップ（ｅ）において形成された化合物をさらに修飾し、以下の一般式：
【化５２】
2008506686.tif 000054
を有する化合物を形成する、を含む、上記方法を提供する。
【００４２】
本発明は、以下の一般式：
【化５３】
2008506686.tif 000055
を有する化合物の合成方法であって、以下のステップ：
以下の一般式：
【化５４】
2008506686.tif 000056
を有する化合物をＮａＢＨ４の如き還元剤で処理する、
を含む上記方法も提供する。
【００４３】
本発明は、以下の一般式：
【化５５】
2008506686.tif 000057
を有する化合物の合成方法であって、以下のステップ：
（ａ）以下の一般式：
【化５６】
2008506686.tif 000058
を有する化合物を還元剤で処理し、以下の一般式：
【化５７】
2008506686.tif 000059
を有する化合物を形成し；
（ｂ）ステップ（ａ）において形成された化合物をＡＣ８−Ｇｌｃ−Ｇｌｃ−Ｂｒで処理し、以下の一般式：
【化５８】
2008506686.tif 000060
を有する化合物を形成し：
（ｃ）ステップ（ｂ）において形成された化合物を脱保護剤で処理し、以下の一般式：
【化５９】
2008506686.tif 000061
を有する化合物を形成する、
を含む、上記方法も提供する。ある態様において、当該還元剤はＮａＢＨ４であり、当該化合物は、ＮａＯＭｅを使用して脱保護される。
【００４４】
さらに、本発明は、対象におけるアミロイド−ベータ生成を調節し、アルツハイマー病を治療及び予防し、並びに神経変性疾患を治療及び予防する際に使用するためのジンセノシド組成物であって、単離された又は単離され、さらに合成されたジンセノシドの混合を含む当該ジンセノシド組成物を提供し、ここで、１又は複数の当該ジンセノシドは、Ｒａ１、Ｒａ２、Ｒａ３、Ｒｂ１、Ｒｂ２、Ｒｂ３、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｆ、Ｒｇ１、（２０Ｒ）Ｒｇ２、（２０Ｓ）Ｒｇ２、（２０Ｒ）Ｒｇ３、（２０Ｓ）Ｒｇ３、Ｒｇ５、Ｒｇ６、Ｒｈ１、（２０Ｒ）Ｒｈ２、（２０Ｓ）Ｒｈ２、Ｒｈ３、Ｒｈ４、（２０Ｒ）Ｒｇ３、（２０Ｓ）Ｒｇ３、Ｒｋ１、Ｒｋ２、Ｒｋ３、Ｒｓ１、Ｒｓ２、Ｒｓ３、Ｒｓ４、Ｒｓ５、Ｒｓ６、Ｒｓ７、Ｆ４、プロトパナキサジオール（ＰＰＤ）、プロトパナキサトリオール（ＰＰＴ）、ＤＨＰＰＤ−Ｉ、ＤＨＰＰＤ−ＩＩ、ＤＨＰＰＴ−Ｉ、ＤＨＰＰＴ−ＩＩ、サン人参、白人参又は赤人参又はそれらの相同体のブタノール溶解画分からなる群より選択される。ある態様において、当該ジンセノシド組成物は、Ｒｇｋ３５１である。
【００４５】
本発明は、医薬として認容される担体及びジンセノシド化合物を含む、アミロイド−ベータ生成を低減する際における使用のための方法及び医薬組成物を提供する。認容される医薬担体、当該医薬組成物の製剤、及び当該製剤の製造方法の例は、本明細書中に記載される。当該医薬組成物は、本明細書中に記載されるような神経変性、及び／又はその関連徴候を含む様々な障害を治療するために、本発明のダマリン及びジンセノシド化合物を対象に投与することについて有用となり得る。当該ジンセノシドは、当該医薬組成物を投与される対象における障害（例えば、神経変性）を治療するのに有効な十分量で提供される。上記のように、当業者は、この量を容易に決定する。ある態様において、本発明は、対象のβ−アミロイド生成を治療又は予防する方法であって、以下の一般式：
【化６０】
2008506686.tif 000062
｛式中、
Ｒ１は、α−ＯＨ、β−ＯＨ、α−Ｏ−Ｘ、β−Ｏ−Ｘ、α−Ｒ６ＣＯＯ−、β−Ｒ６ＣＯＯ−、α−Ｒ６ＰＯ３−、及びβ−Ｒ６ＰＯ３−からなる群より選択され、ここでＸは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり、そしてＲ６はアルケニル、アリール又はアルキルＩであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩであり；及び
Ｒ５は、Ｈ又はＯＨである。｝
を有する化合物を当該対象に投与することを含む、上記方法を提供する。本明細書中に使用される用語「対象」は、例えば、ヒト、ラット、マウス、ウサギ、イヌ、ヒツジ、及びウシの如き動物、並びに培養された細胞、組織、及び器官の如き生体内系を含む。
【００４６】
本発明は、対象の細胞（好ましくは、ＣＮＳの細胞）と当該細胞中のアミロイド−ベータ生成を低減するのに効果的な量のジンセノシド化合物又は組成物とを接触すること、それ故当該神経変性を治療することにより、治療を必要とされる当該対象における神経変性の治療法をも提供する。本発明の方法により治療され得る神経変性の例は、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ルーゲーリック病）、ビンスヴァンガー病、皮質基底核変性（ＣＢＤ）、特有の組織病理を欠如する痴呆（ＤＬＤＨ）、前頭側頭骨痴呆（ＦＴＤ）、ハンチントン舞踏病、多発性硬化症、重症筋無力症、パーキンソン病、ピック病、及び進行性核上性麻痺（ＰＳＰ）を非制限的に含む。本発明の好ましい態様において、当該神経変性は、アルツハイマー病（ＡＤ）又は散発性アルツハイマー病（ＳＡＤ）である。本発明のさらなる他の態様において、当該アルツハイマー病は、早期家族性アルツハイマー病（ＦＡＤ）である。当業者は、いつ神経変性の臨床症状が改善され及び最小化されるのか容易に測定できる。
【００４７】
本発明は、神経変性を治療する有効量において１又は複数のジンセノシド化合物を対象に投与することを含む、治療を必要とする当該対象における当該神経変性及びＡβ４２関連障害の如き病的状態を治療又は予防するための方法も提供する。当該Ａβ４２関連障害は、Ａβ４２により生ずる障害であり、又は異常Ａβ４２蓄積の症状を有し得る。本明細書中に使用される語句「神経変性を治療するのに効果的」とは、当該神経変性の臨床的機能障害又は徴候を改善又は最小化するのに効果的であることを意味する。例えば、当該神経変性がアルツハイマー病の場合、当該神経変性の臨床的機能障害又は徴候は、アミロイド−ベータの生成、並びに老人斑及び神経原線維変化の発達を低減し、それ故、認知機能の進行性欠如を最小化又は弱力化することにより改善又は最小化され得る。治療を必要とする対象における神経変性を治療するための阻害剤の有効量は、神経変性の型、当該神経変性のステージ、当該対象の重さ、当該対象の状態の重篤度、及び投与方法を含む各場合の特定因子に依存して変化するだろう。この量は、当業者により容易に決定される。
【００４８】
ある態様において、本発明は、対象の神経変性を治療又は予防する方法であって、以下の一般式：
【化６１】
2008506686.tif 000063
｛式中、
Ｒ１は、α−ＯＨ、β−ＯＨ、α−Ｏ−Ｘ、β−Ｏ−Ｘ、α−Ｒ６ＣＯＯ−、β−Ｒ６ＣＯＯ−、α−Ｒ６ＰＯ３−、及びβ−Ｒ６ＰＯ３−からなる群より選択され、ここでＸは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり、そしてＲ６はアルケニル、アリール又はアルキルＩであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、ＯＡｃ、及びＯ−Ｘからなる群より選択され、ここで、Ｘは１又は複数の糖又はそれらのアシル化誘導体を含む炭水化物であり；
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨ、及びＯＡｃからなる群より選択され；
Ｒ４は、アルケニル、アリール又はアルキルＩＩであり；及び
Ｒ５は、Ｈ又はＯＨである。｝
を有する化合物を前記対象に投与することを含む、上記方法を提供する。
【００４９】
本発明のある態様において、アルツハイマー病は、治療が必要な対象において、当該対象に、当該アルツハイマー病を効果的に治療するための治療有効量のジンセノシド組成物、ジンセノシド、あるいは、それらの類似体又は相同体を投与することにより治療される。当該対象は、好ましくは哺乳類（例えば、ヒト、家畜、並びにウシ、イヌ、サル、マウス、ブタ、及びラットを含む商業的動物である。）であり、最も好ましくはヒトである。本願明細書中に使用される用語「類似体」は、他の化合物と構造的に類似し、理論上、当該他の化合物から誘導されるが、組成において僅かに異なる化合物をいう。例えば、当該ジンセノシド（２０Ｓ）Ｒｇ３の類似体は、（２０Ｓ）Ｒｇ３と僅かに（例えば、異なる元素の原子による１つの原子の置換、又は特定の官能基の存在のような）異なる化合物であり、（２０Ｓ）Ｒｇ３から誘導され得る。本明細書中に使用される用語「相同体」とは、各構成体が一定の化学的単位により他の構成体と異なる、一連の化合物の構成体をいう。本明細書中に使用される用語「合成」とは、当分野において知られる合成方法を使用して、その構成要素からの特定の化合物の形成をいう。かかる合成方法は、特定の化合物を形成するために、例えば、光、熱の使用、酵素的又は他の手段を含む。
【００５０】
本明細書中に使用される用語「治療有効量」又は「有効量」は、単回投与又は複数回投与のいずれかにおいて、アルツハイマー病に関連する臨床的機能障害、徴候、又は合併症を、防ぐ、治療する、改善する、又は少なくとも最小化するのに必要な本発明の組成物の量を意味する。アルツハイマー病を治療するために有効なジンセノシドの量は、アルツハイマー病のステージ又は重篤度、当該対象の重さ、当該対象の状態、及び投与方法を含む各場合の特定因子に依存して変化するだろう。これらの量は、当業者により容易に決定される。例えば、アルツハイマー病の臨床的機能障害又は徴候は、認知症又は対象により苦しめられる不快症状を縮小することにより；かかる治療がない際に予期されるにもかかわらず、それを超えて対象の生存を延長することにより；又は、当該アルツハイマー病の進行を阻害する又は防ぐことにより改善又は最小化され得る。
【００５１】
本明細書中に使用されるような「アルツハイマー病を治療すること」とは、神経変性、老人斑、神経原線維変化、神経伝達物質欠損、痴呆、及び老化を非制限的に含むアルツハイマー病の基となる１又は複数の症状を治療することをいう。本明細書中に使用される「アルツハイマー病を防ぐ」とは、アルツハイマー病の発生を防ぐ、アルツハイマー病の発生を遅らせる、アルツハイマー病の進行又は発達を防ぐ、アルツハイマー病の進行又は発達を遅くする、及びアルツハイマー病の進行又は発達を遅らせることを含む。
【００５２】
本発明以前に、ベータアミロイド蛋白質の生成に関するダマラン及びジンセノシドの効果は知られていなかった。本発明は、（２０Ｓ）Ｒｇ３、Ｒｋ１、及びＲｇ５あるいはそれらの類似体又は相同体の如きジンセノシドが、アルツハイマー病を妨害及び治療するためにも使用できることを確立する。この新たな治療は、Ａβ４２の生成を調節することによりアルツハイマー病に関連する神経変性及び認知症を治療及び妨害するための唯一の戦略を提供する。さらに、アルツハイマー病に関連しない神経変性及び認知症もまた、Ａβ４２の生成を調節するために本発明のジンセノシドを使用して、治療又は防ぐことができる。
【００５３】
本発明のジンセノシドは、ジンセノシドの生物学的活性を有する天然の又は合成の機能的変異体、並びにジンセノシドの生物学的活性を有するジンセノシドの断片を含む。さらに本願明細書中に使用されるように、用語「ジンセノシド生物学的活性」とは、高いアミロイド生成性のＡβ４２、アミロイドβ−ペプチドの４２−アミノ酸イソ型の産生を調節する活性をいう。本発明のある態様において、当該ジンセノシドは、対象の細胞内のＡβ４２の産生を低減する。通常知られるジンセノシド及びジンセノシド組成物は、Ｒａ１、Ｒａ２、Ｒａ３、Ｒｂ１、Ｒｂ２、Ｒｂ３、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｆ、Ｒｇ１、（２０Ｒ）Ｒｇ２、（２０Ｓ）Ｒｇ２、（２０Ｒ）Ｒｇ３、（２０Ｓ）Ｒｇ３、Ｒｇ５、Ｒｇ６、Ｒｈ１、（２０Ｒ）Ｒｈ２、（２０Ｓ）Ｒｈ２、Ｒｈ３、Ｒｈ４、（２０Ｒ）Ｒｇ３、（２０Ｓ）Ｒｇ３、Ｒｋ１、Ｒｋ２、Ｒｋ３、Ｒｓ１、Ｒｓ２、Ｒｓ３、Ｒｓ４、Ｒｓ５、Ｒｓ６、Ｒｓ７、Ｆ４、Ｒｇｋ３５１、プロトパナキサジオール（ＰＰＤ）、プロトパナキサトリオール（ＰＰＴ）、ＤＨＰＰＤ−Ｉ、ＤＨＰＰＤ−ＩＩ、ＤＨＰＰＴ−Ｉ、ＤＨＰＰＴ−ＩＩ、サン人参、白人参又は赤人参、又はそれらの相同体のブタノール溶解画分を非制限的に含む。本発明のある態様において、当該ジンセノシドはＲｋ１である。本発明の他の態様において、当該ジンセノシドは（２０Ｓ）Ｒｇ３である。さらなる態様において、当該ジンセノシドはＲｇ５である。さらに他の態様において、当該ジンセノシドは、Ｒｇｋ３５１である（２０Ｓ）Ｒｇ３、Ｒｇ５、及びＲｋ１の混合物である。
【００５４】
Ｒｋ１、（２０Ｓ）Ｒｇ３、及びＲｇ５、並びにそれらの類似体及び相同体は、本分野においてよく知られている。例えば、米国特許第５，７７６，４６０号は、（Ｒｃ＋Ｒｄ＋Ｒｂ１＋Ｒｂ２）に対する（Ｒｇ３＋Ｒｇ５）の比率が１．０である加工された人参製造物を記載し、本願明細書中にその内容全体を援用する。米国特許第５，７７６４６０号に開示された加工製品は、１２０°〜１８０°の高温で、０．５〜２０時間の間、人参を熱処理することにより製造される。本発明のジンセノシドは、単離されたジンセノシド化合物、又は単離されそしてさらに合成されたジンセノシド化合物である。本発明の単離されたジンセノシドは、熱、光、化学的、酵素的又は当業者に一般的に知られる他の合成を非制限的に含む方法を使用してさらに合成され得る。
【００５５】
本発明の方法において、当該ジンセノシド化合物は、１又は複数の異なるジンセノシド化合物との組み合わせで対象に投与される。『１又は複数の異なるジンセノシド化合物との「組み合わせ」で対象に投与』とは、当該治療薬の併用投与をいう。同時併用投与は、実質的に同時に異なるジンセノシド化合物を投与することをいう。同時併用投与について、複数の異なるジンセノシドによる治療過程は、同時に実施され得る。例えば、互いに物理的に結合する状態において、特定のジンセノシド化合物の量と第２の異なるジンセノシド化合物の量の両方を含む、単一製剤、複合製剤が当該対象に投与される。当該単一製剤、複合製剤は、当該対象に経口投与され得る両方のジンセノシド化合物の量を含む経口製剤、当該対象に注入され得る当該両方のジンセノシド化合物の量を含む液体混合物を構成し得る。
【００５６】
ある特定のジンセノシド化合物の量、及び１又は複数の異なるジンセノシド化合物の量が、各々の製剤を、別々に、対象に同時に投与され得ることは、本発明の範囲内でもある。従って、本発明の方法は、互いに物理的に結合する状態における異なるジンセノシド化合物の同時併用投与に限定されない。
【００５７】
本発明のある態様において、当該ジンセノシド化合物は、組み合わせの最大効果を得るために、時間帯の一定の間隔をとって各々の製剤を別々に、対象に併用投与され得る。各治療薬の投与は、持続時間中における、簡単で素早い投与から連続かん流まで及ぶ。時間帯の一定の間隔をとるとき、当該ジンセノシド化合物の併用投与は、順次的に又は交互になり得る。順次的併用投与について、当該治療薬の１つは、単独で投与され、その後もう一方が投与される。例えば、Ｒｇ５誘導体による治療の全過程が達成され、次いで、その後にＲｋ１誘導体による治療の全過程が実施され得る。あるいは、順次敵併用投与について、Ｒｋ１誘導体による治療の全過程が達成され、次いで、その後にＲｇ５誘導体による治療の全過程が実施され得る。交互併用投与について、それぞれの全治療薬が投与されるまで、当該Ｒｋ１誘導体による治療の一部の過程が、Ｒｇ５誘導体による治療の一部の過程により入れ替わり得る。
【００５８】
本発明の治療薬（すなわち、ジンセノシド及び類似体及びそれらの類似体）は、経口投与、非経口的投与（例えば、筋肉内、腹腔内、血管内、静脈、又は皮下投与）、及び経皮投与を非制限的に含む既知の手段により、ヒト及び動物対象に投与され得る。好ましくは、本発明の治療薬は、経口又は静脈投与される。
【００５９】
経口投与について、当該ジンセノシドの製剤は、カプセル、タブレット、粉末、顆粒、又は懸濁液として与えられ得る。当該製剤は、乳糖、マンニトール、トウモロコシでんぷん、又はジャガイモでんぷんの如き慣習として認められた添加剤を有し得る。当該製剤は、クリスタリンセルロース、セルロース類似体、アカシア、コーンスターチ、又はゼラチンの如き結合剤を有しても提供され得る。さらに、当該製剤は、コーンスターチ、ジャガイモでんぷん、又はカルボキシ・メチルセルロース・ナトリウムの如き分解物を有しても提供され得る。当該製剤は、無水第２リン酸カルシウム又はでんぷんグリコール酸ナトリウムを有しても提供され得る。最終的に、当該製剤は、タルク又はでんぷんグリコール酸の如き滑剤を有して提供され得る。
【００６０】
非経口的投与について、当該ジンセノシドの製剤は、好ましくは当該対象の血液と等浸透圧である滅菌水溶液と混合され得る。かかる製剤は、水溶液を生成するために、塩化ナトリウム、グリシンなどの如き生理的に適合性のある物質を含み、かつ生理条件で緩衝ｐＨ適合性物質を有する水に、固形活性成分を溶解することにより製造され得、次いで、上記溶液を滅菌する。当該製剤は、単体、あるいは密閉されたアンプル剤又はバイアル瓶の如き複数の薬物容器中に提供される。さらに、当該製剤は、注入の様々な様式によりデリバリーされ、当該注入は、筋膜上、のう内、皮内、筋肉内、眼か内、腹腔内（特に限局性局所治療の場合）、髄膜内、胸骨内、血管中、静脈、実質、又は皮下を非制限的に含む。
【００６１】
経皮投与について、当該ジンセノシドの製剤は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、イソプロパノール、エタノール、オレイン酸、Ｎ−メチルピロリドンなどの如き皮膚浸透促進剤と混合され得、当該皮膚浸透促進剤は、皮膚の浸透性を増大し、皮膚を通して及び血流内に当該治療薬が浸透することを可能とする。当該治療剤／促進剤の組成物は、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、エチレン／ビニルアセテート、ポリビニルピロリドンなどの如きポリマー物質ともさらに混合され得、ゲル形態の組成物を提供し、そして塩化メチレンの如き溶媒中に溶解され、所望の粘度まで濃縮され、次いで基材に適用され、パッチを提供する。
【００６２】
本発明のジンセノシドの薬物は、浸透圧ミニポンプからも放出又はデリバリーされる。当該簡単な浸透圧ミニポンプからの放出速度は、微細孔、放出開口部に配置された高速応答ゲルで調節され得る。浸透圧ミニポンプは、当該治療剤の制御放出、又は標的デリバリーに有用となるだろう。
【００６３】
当該ジンセノシドの製剤が、医薬として認容される担体とさらに結合すること、それにより医薬組成物を含むことは、本発明の範囲内である。当該医薬として認容される担体は、当該組成物の他の成分と相性が良いという意味において「認容」されなければならず、それらの受け取り側にとって有害となってはならない。認容される医薬担体の例は、特に、カルボキシメチルセルロース、クリスタリンセルロース、グリセリン、アラビアゴム、乳糖、ステアリン酸マグネシウム、メチルセルロース、粉末、生理食塩水、アルギン酸ナトリウム、スクロース、でんぷん、滑石、及び水を非制限的に含む。当該医薬組成物の配合は、便利なことに、単位用量中に提供される。
【００６４】
本発明の製剤は、医薬分野においてよくしられる方法により製造される。例えば、当該活性化合物は、懸濁液又は溶液のような担体又は希釈剤と結合して入手され得る。場合により、１又は複数の補助成分（例えば、緩衝液、香料、界面活性剤など）も加えられ得る。担体の選択は投与経路に依存する。当該医薬組成物は、アルツハイマー病を治療するために、対象に本発明の治療剤（すなわち、複数のジンセノシド、複数のそれらの類似体、それぞれ別々の個別の剤形であり、又は単一剤、混合剤である。）を投与するために有用である。当該治療薬は、当該対象におけるアルツハイマー病を治療又は予防するために有効な量で提供される。これらの量は、当業者により容易に決定される。
【００６５】
当該ジンセノシドの治療有効量は、アルツハイマー病のステージ、当該対象の重さ、当該対象の状態の重篤度、及び投与方法を含む各場合の特定因子に依存して変化するだろう。例えば、（２０Ｓ）Ｒｇ３は、約５μｇ／日〜１５００ｍｇ／日の用量において投与され得る。好ましくは、（２０Ｓ）Ｒｇ３は、約１ｍｇ／日〜１０００ｍｇ／日の用量で投与される。Ｒｇ５は、約５μｇ／日〜１５００ｍｇ／日の用量で投与されるが、好ましくは、１ｍｇ／日〜１０００ｍｇ／日の用量で投与される。Ｒｋ１は、約５μｇ／日〜１５００ｍｇ／日の用量で投与されるが、好ましくは、１ｍｇ／日〜１０００ｍｇ／日の用量で投与される。さらに、当該ジンセノシド組成物Ｒｇｋ３５１は、約５μｇ／日〜１５００ｍｇ／日の用量で投与されるが、好ましくは、１ｍｇ／日〜１０００ｍｇ／日の用量で投与される。提示された範囲内の特定のジンセノシド化合物の好適な治療有効量は、各場合の特定の因子に依存して、当業者に容易に決定され得る。
【００６６】
本発明は、ジンセノシド化合物の治療有効量を対象に投与することを含む、アルツハイマー病の前状態の対象におけるアルツハイマー病を予防する方法をさらに包含する。本明細書中に使用される用語「アルツハイマー病の前状態」は、アルツハイマー病に先立つ状態をいう。アルツハイマー病の典型的な症状のいくつかを示しているにもかかわらず、及び／又は病歴がアルツハイマー病を進展させる対象のリスクを増大しそうであるにもかかわらず、アルツハイマー病の前状態の対象は、アルツハイマー病を有するというように診断されない。
【００６７】
本発明は、ジンセノシド化合物の治療有効量を当該対象に投与することを含む、対象におけるアルツハイマー病を治療及び予防するための方法をさらに提供する。
【実施例】
【００６８】
以下の実施例は、上記の事項を例証するためのものであり、本発明の理解を補助するために説明され、添付の特許請求の範囲において定義されるような本願発明の範囲を制限するように解釈すべきではない。
【００６９】
本発明は、少なくとも３つのジンセノシド化合物、Ｒｋ１、（２０Ｓ）Ｒｇ３、及びＲｇ５、並びに混合物Ｒｇｋ３５１が、細胞内のＡβ４２の生成を低減し、それ故、ＡＤ及び非ＡＤ関連神経病発生を治療し、及び／又は、ＡＤ及び非ＡＤ関連神経病発生の進行を予防することを、予期せずに見出した。Ｒｇｋ３５１及びＲｋ１は、Ａβ４２の値を低減するのに最も有効だった。さらに、Ｒｋ１は、部分的に精製されたγ−セクレターゼ複合体を使用する無細胞分析において当該Ａβ４２生成を阻害することが示され、このことは、当該γ−セクレターゼ酵素の選択性及び／又は活性のいずれかを調節することを示唆した。
【００７０】
実施例１
ＡＤを治療するジンセノシド及びそれらの類似体の潜在効果を試験した。第１に、多くのジンセノシドを、Ａβ産生に関するそれらの効果に基づいてスクリーニングした。Ａβ（例えば、Ａβ４０、及びＡβ４２）の産生に関する様々なジンセノシドの効果を、未処理のジンセノシド（「白人参」として知られる。）から精製された各ジンセノシドと共にヒトＡＰＰを発現するチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞（ＣＨＯ−ＡＰＰ細胞）を培養することにより、まずは、入手した。これらの典型的ジンセノシドは、Ｒｂ１、Ｒｂ２、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｆ、Ｒｇ１及びＲｇ２並びにそれらの側鎖及び糖成分において異なるものを含んだ。
【００７１】
図１〜３は、当該試験において利用されたジンセノシドの構造及びＡβ４２産生に関するそれらの効果を示す。それらは、ダマランとして知られる共通のトリテルペン骨格に結合された２又は３の側鎖で異なる。ジンセノシドの各群についての当該共通構造骨格を上部分に示した。Ａβ４２の低減活性を保有するジンセノシドを、当該表の最も右の欄に示した：Ａβ４２低減活性（「あり」）、全く効果なし（「なし」）、及び測定不能（「ＮＤ」）である。細胞の生存率に影響を与えるジンセノシドを、「細胞毒性」として示した。炭水化物の略語を、以下のようにした。Ｇｌｃ、Ｄ−グルコピラノシル；Ａｒａ（ｐｙｒ）、Ｌ−アラビノピラノシル；Ａｒａ（ｆｕｒ）、Ｌ−アラビノフラノシル；Ｒｈａ、Ｌ−ラムノピラノシルである。
【００７２】
【表１】
2008506686.tif 000064
【００７３】
【表２】
2008506686.tif 000065
【００７４】
【表３】
2008506686.tif 000066
【００７５】
【表４】
2008506686.tif 000067
【００７６】
培養８時間後、当該培地を回収し、分泌されたＡβ４０及びＡβ４２の値をＥＬＩＳＡにより測定した。当該群Ｒｂ１、Ｒｂ２、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｆ、Ｒｇ１及びＲｇ２からのジンセノシドの内、Ａβ４０及びＡβ４２の生成に関して阻害的な効果を示したものはなかった（図１０）。
【００７７】
人参を高温で蒸らすことで、促進された薬理活性を有する追加のジンセノシドであって、（２０Ｓ）Ｒｇ３、Ｒｋ１、及びＲｇ５（２２−２５）を含む当該ジンセノシドを生じた。次いで、Ａβ４０及びＡβ４２産生に関する、これらの熱加工由来のジンセノシド（例えば、（２０Ｓ）Ｒｇ３、Ｒｈ１、Ｒｈ２、Ｒｋ１、Ｒｇ６、Ｒｇ５）の効果を試験した。初期スクリーニングは、Ａβ４２の分泌を選択的に低減した、３つの構造に関係があるジンセノシド、Ｒｋ１、（２０Ｓ）Ｒｇ３、及びＲｇ５を同定した（図１１）。
【００７８】
対照的に、Ａβ４２の値は、（２０Ｒ）Ｒｇ３、Ｒｈ１、及びＲ６により影響を受けなかった。Ａβ４０の値は、試験された当該ジンセノシドによる処理により変化しなかった。Ａβ４２低減活性の潜在性は、Ｒｋ１及び（２０Ｓ）Ｒｇ３で最も高かった。Ｒｇ５は、Ｒｋ１又は（２０Ｓ）Ｒｇ３と比較して、有効性のより低いＡβ４２低減試薬だった（図２）。Ａβ４０の分泌は非常に高濃度（〜１００μＭ）でのＲｋ１処理のときのみ影響を受け、そして、細胞の生存性はこれらの条件下でのＲｋ１による処理により影響を受けなかった（１００μＭまでで８時間処理した、データは示していない。）。興味深いことに、ＰＳ１デルタＥ９ＦＡＤ変異体（図１１Ｂ）は、（２０Ｓ）Ｒｇ３、Ｒｋ１、及びＲｇ５処理に対するＡβ４２低減反応を、ＰＳ１野生型発現細胞（図１１Ａ）と比較して減退した。
【００７９】
さらに、分析により、Ｒｋ１及びＲｇ５は用量依存的にＡβ４２を低減することが明らかとなった（図１２Ａ）。Ｒｇｋ３５１、Ｒｋ１、及びＲｇ５での一晩の処理は、ＣＨＯ−ＡＰＰ細胞におけるＡβ４２生成も低減した（図１２Ｂ）。Ｒｋ１のＡβ４２低減活性は、既知のＡβ４２低減ＮＳＡＩＤの内の１つであるスリンダクスルフィドの低減活性と類似した。一晩の処理の間、Ａβ生成は、Ｒｋ１又はスリンダクスルフィドでの処理によっても僅かに影響を受けた（図１２Ｂ）。これらの試験は、ジンセノシドの化学構造とＡβ４２低減活性との構造活性相関を提供し、さらなるＡβ４２を低減する類似体をデザインすること、並びにＡβ４２低減活性を有する化合物の種類を定義することをさらに提供する。
【００８０】
Ｒｋ１は、ＣＨＯ−ＡＰＰ細胞及びＮｅｕｒｏ２ａ−ＡＰＰｓｗ細胞の両方において、全長ＡＰＰの定常値に影響を与えなかった（図１３）、このことはＡβ４２減少がＡＰＰの変化した翻訳後プロセッシングに起因しそうであることを提示する。全長型とは対照的に、Ｒｋ１による処理は、Ｃ末端ＡＰＰ断片の定常値を上昇した（図１３）。これらのデータは、Ｒｋ１がｇ−セクレターゼ開裂ステップ（例えば、Ａβ４２開裂）に影響を及ぼし得、それ故、一般的なγ−セクレターゼ阻害剤化合物Ｅについて示されるとおり、ＡＰＰのＣ末端断片の蓄積を引き起こすことを提示する。各対応サンプルの培地中のＡβ４２値を下段に示す。
【００８１】
Ｒｋ１の効果は、細胞に基づいた分析においてＡβ４２（Ａβ４０ではなく）に対して非常に選択的であるので、Ａβ４０又はＡβ４２のいずれかからＡＰＰ末端の膜貫通開裂部位から生じたＡＩＣＤの産生を含む、他のγ−セクレターゼ仲介開裂、及びＮｏｔｃｈ１又はｐ７５ＮＴＲ膜内ドメイン（各々、ＮＩＣＤ又はｐ７５−ＩＣＤ）を産生するためのＮｏｔｃｈ１又はｐ７５ニューロトロフィン受容体（ｐ７５ＮＴＲ）のγ−セクレターゼ仲介膜内開裂に、Ｒｋ１が影響を与えるかどうかの問題を試験した。ＩＣＤ、ＮＩＣＤ、及びｐ７５−ＩＣＤの無細胞産生に、Ｒｇｋ３５１又はＲｋ１と一緒の培養は影響を与えなかった（図５）。これらの条件下において、化合物ＥはＩＣＤの無細胞産生を効果的に阻害し、スリンダクスルフィドはＡＰＰ、Ｎｏｔｃｈ１又はｐ７５ＮＴＲからのＩＣＤ産生に影響を与えなかった。これらのデータは、Ｒｋ１がγ−セクレターゼ開裂の一般的な阻害剤ではなく、Ｎｏｔｃｈ１又はｐ７５ＮＴＲの如き他のγ−セクレターゼ物質の膜内開裂に影響を与えないことを示す。
【００８２】
次に、生体外γ−セクレターゼ分析におけるＡβ産生に関するＲｋ１及び（２０Ｓ）Ｒｇ３の妨害作用を試験した。Ｒｋ１及びスリンダクスルフィドは、生体内Ａβ４２産生を強く阻害した（図１５）。対照的に、Ａβ４２低減活性なしのＮＳＡＩＤであるナプロキセンは、Ａβ４２生成に関して効果がなかった（図１５Ａ）。Ａβ４２低減活性ＮＳＡＩＤとして報告されるもの（Ｗｅｇｇｅｎ,ｅｔ  ａｌ．，Ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｔｈａｔ  ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｄｒｕｇｓ  ｄｅｃｒｅａｓｅ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｂｅｔａ  ４２  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｂｙ  ｄｉｒｅｃｔ  ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ,Ｊ．Ｂｉｏｌ.Ｃｈｅｍ.２７８：３１８３−３１８７ (２００３))と同様に、Ａβ４０及びＡβ４２低減ジンセノシド（例えば、ＲｋＩ、及び(２０Ｓ)Ｒｇ３）は、当該両化合物は細胞に基づく分析ではＡβ４２生成に主に影響を与えるけれども、無細胞γセクレターゼ分析において同様の有効性を有するＡβ４０及びＡβ４２の両方を阻害した（図１５Ｂ）。
【００８３】
ジンセノシドは、人参抽出物の経口投与後、ヒト腸内細菌により代謝される（Ｋｏｂａｙａｓｈｉ  Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｏｆ  ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ  ｂｙ  ｈｕｍａｎ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｂａｃｔｅｒｉａ  [ＩＩ]  Ｇｉｎｓｅｎｇ  Ｒｅｖｉｅｗ  １９９４；１８：１０−１４；Ｈａｓｅｇａｗａ  Ｈ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｍａｉｎ  ｇｉｎｓｅｎｇ  ｓａｐｏｎｉｎ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ｆｏｒｍｅｄ  ｂｙ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｂａｃｔｅｒｉａ.  Ｐｌａｎｔａ  Ｍｅｄ.  １９９６；  ６２：  ４５３−４５７）。それ故、Ａβ４２産生に関する２０（Ｓ）プロトパナキサトリオール（ＰＰＴ）、及び２０（Ｓ）プロトパナキサジオール（ＰＰＤ）を含む、ジンセノシドの２つの主要な代謝体の効果を試験した。２０（Ｓ）−パナキサトリオール（ＰＴ）及び２０（Ｓ）−パナキサジオール（ＰＤ）は、それぞれＰＰＴ及びＰＰＤの人工誘導体である。ＰＰＴ又はＰＴのいずれかによる処理は、ヒトＡＰＰのスウェーデン突然変異体（Ｎｅｕｒｏ２ａ−ＳＷ）を発現するＮｅｕｒｏ２ａ細胞中の並びに野生型ヒトＡＰＰを発現するＣＨＯ細胞中のＡβ４２の値に影響を与えることなしに、Ａβ４２の生成を低減した（図１６）。ＰＰＤ及びＰＤは、Ａβ４０及びＡβ４２の産生に関するいかなる阻害効果をも与えなかった。
【００８４】
要約すると、熱加工された人参由来のＡβ４２低減天然化合物を同定した。Ｒｋ１及び（２０Ｓ）Ｒｇ３を含むＡβ４２低減ジンセノシドは、Ａβ４２生成に関するγ−セクレターゼ活性を特に調節するように思われる。構造活性は、ＡＤの治療のための効果的な治療薬の開発のための基礎として役立ち得る化合物の種類を定義する。
【００８５】
実施例２
ＡＤ関連神経変性を治療するためのジンセノシド治療の利益を、ＡＤのマウスモデルにおいて例証し得た。特に、当該ジンセノシド化合物である（２０Ｓ）Ｒｇ３、Ｒｋ１、Ｒｇ５、及びＲｇｋ３５１を、ＡＤ関連神経変性に瀕するマウスを治療するために使用し得た。
【００８６】
ヒトＡＰＰを発現するマウス並びにＡＰＰのスウェーデン家族性アルツハイマー病突然変異型を発現するマウスを、Ｊａｃｋｓｏｎ研究所，６００  Ｍａｉｎ  Ｓｔｒｅｅｔ，Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｍａｉｎｅ０４６０９から入手した。次いで、４つの群のマウスを試験し得た。（１）ジンセノシド治療のないＡＰＰマウス（プラセボ）；（２）ジンセノシド治療のないスウェーデンマウス（プラセボ）；（３）ＡＰＰマウス＋Ｒｇ５（１００μｇ／μｌ／日）、及び（４）スウェーデンマウス＋Ｒｇ５（１００μｇ／μｌ／日）である。注入治療の約１６週間後、当該マウスの血清中のＡβ４２の量を測定し得た。この試験の結果は、ＡＤ関連神経変性を治療するためのジンセノシド治療の一般的利益を例証するだろうと予期した。ジンセノシド処置しないＡＰＰ及びスウェーデンマウスは、著しく高い血清Ａβ４２値を有し、そしてジンセノシド処置を受けたＡＰＰ及びスウェーデンマウスと比較して、神経変性の挙動特性を例証した。
【００８７】
実施例３
人参グリコシドの純種のサポゲニンは、他の植物の化学成分と構造的に類似する。カバノキの葉から単離されたベチュラフォリエネトリオール（ダマル−２４−エン−３α，１２β，２０（Ｓ）−トリオール）は、Ｃ−３での配置のみ、人参グリコシドの純種サポゲニンと異なる。それ故、安価で比較的入手しやすいベチュラフォリエネトリオールは、２０（Ｓ）−プロトパナキサジオール及びそのグリコシドＲｇ３、Ｒｇ５、及びＲｋ１を製造するための所望の基質を構成する。
【００８８】
【化６２】
2008506686.tif 000068
【００８９】
ベチュラフォリエネトリオールを、カバノキ（Ｂｔｕｌａ  ｐｅｎｄｕｌａ）の葉のエーテル抽出物から単離し、その後、シリカゲルクロマトグラフィーをかけ、アセトンから結晶化した：ｍｐ１９５−１９５°，ｌｉｔ．１９７−１９８°（Ｆｉｓｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９５９）Ｊｕｓｔｕｓ  Ｌｉｅｂｉｇｓ  Ａｎｎ．Ｃｈｅｍ．６２６：１８５）。
【００９０】
２０（Ｓ）−プロトパナキサジオール（３）の１２−Ｏ−アセチル誘導体を、スキーム１に示される一連の反応により、ベチュラフォリエネトリオールから製造した。ベチュラフォリエネトリオールを酸化させ、ケトン１であるダマル（ｄａｍｍａｒ）−２４−エン−１２β，２０（Ｓ）−ジオール−３−オン，ｍｐ１９７−１９９°，ｌｉｔ．１９６−１９９°，（収率：６０％）とし、ピリジン中において無水酢酸でアセチル化し、化合物２である１２−Ｏ−アセチル−ダマル−２４−エン−１２β，２０（Ｓ）−ジオール−３−オン（収率：１００％？）（Ｎａｇａｉ  ｅｔ  ａｌ．，（１９７３）Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．９：２０６１）を得た。当該化合物２の１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣ１３）は、以下：０．９０（ｓ,３Ｈ)，０．９５(ｓ,３Ｈ),１．０(ｓ,６Ｈ),１．１(ｓ,３Ｈ),１．１(ｓ,３Ｈ),１．６５(ｓ,３Ｈ),１．７２(ｓ,３Ｈ),２．１(ｓ,３Ｈ),３．０４(ｓ,１Ｈ),４．７３(ｔｄ,１Ｈ),５．１７(ｔ,１Ｈ)である。２−プロパノール中における化合物２の水素化ホウ素ナトリウム還元により、化合物３である１２−Ｏ−アセチル−ダマル−２４−エン−３β，１２β，２０（Ｓ）−トリオール（収率：９０％）を得た。当該化合物３の１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣ１３）は、以下：０．７８(ｓ,３Ｈ),０．８６(８,３Ｈ),０．９５(ｓ,３Ｈ),１．０(ｓ,３Ｈ),１．０２(ｓ,３Ｈ),１．１３(ｓ,３Ｈ),１．６４(ｓ,３Ｈ),１．７１(ｓ,３Ｈ),２．０５(ｓ,３Ｈ,ＯＡｃ）,３．２０(ｄｄ,１Ｈ,Ｈ−３α),４．７３(ｔｄ,１Ｈ,Ｈ−１２α),５．１６(ｔ,１Ｈ,Ｈ−２４)である。
【００９１】
ジクロロエタン中における酸化銀及びモレキュラーシーブ４Ａの存在下、Ｏ−アセチル化−炭水化物ブロマイドによる化合物３の縮合により、化合物４の形態を得た（収率５０％）。特に、化合物３（１．０８ｇ、２ｍｍｏｌ）、酸化銀（１．４ｇ、６ｍｍｏｌ）、α−アセトブロモグルコース（２．４７ｇ、６ｍｍｏｌ）、モレキュラーシーブ４Ａ（１．０ｇ）、及びジクロロエタン（２０ｍｌ）の混合物を、アセトブロモグルコースが反応しきるまで（ＴＬＣ）、周囲温度で撹拌した。次いで、当該反応混合物をＣＨＣｌ３で希釈し、ろ過した。当該溶媒を蒸発し、そして残留物を熱水で洗浄し、余分なグルコース誘導体を除去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（８：１  ｎ−へキサン−アセトン）により、化合物４を得た（８５３ｍｇ）。グルコシド４を脱保護し、２つのステップにおいてＲｋ１又はＲｇ５と調整されるジンセノシドＲｇ３を得た。
【００９２】
【化６３】
2008506686.tif 000069
【００９３】
明らかにする、かつ理解することを目的として先行発明を詳細に記載しているけれども、請求項に記載の本発明の真の範囲を逸脱することなく、形態及び詳細の様々な変更が可能であることは、開示内容から当業者によって理解されるだろう。
【図面の簡単な説明】
【００９４】
【図１】図１は、β−及びγ−セクレターゼにより仲介される、β−アミロイド前駆体蛋白質（ＡＰＰ）の蛋白質分解順序過程を示す。
【図２】図２は、（ａ）白人参；（ｂ）赤人参；及び（ｃ）Ｓｕｎ人参（熱処理された人参）のＨＰＬＣ分析結果を示す。
【図３】図３は、（ａ）Ｒｇ３、（ｂ）Ｒｋ１、及び（ｃ）Ｒｇ５の一般化学式を示す。
【図４】図４は、Ｒｇｋ３５１、（２０Ｓ）Ｒｇ３、Ｒｋ１、及びＲｇ５が、ヒトＡＰＰ６９５で安定的にトランスフェクトされたＣＨＯ細胞におけるＡβ４２の生成を低減することを示す。当該ＣＨＯ細胞を、表示された化合物により（５０μｇ／ｍｌで）８時間処理した。培地中のＡβ４２の値を、ＥＬＩＳＡにより測定し、細胞内全長ＡＰＰに対して標準化した。
【図５】図５は、Ｒｇｋ３５１、Ｒｋ１、及びＲｇ５での処理が、用量依存性方法において、ヒトＡＰＰを発現するＣＨＯ細胞の培地中のＡβ４２を低減したことを示す。
【図６】図６は、Ｒｇｋ３５１、Ｒｋ１及びＲｇ５の処理が、用量依存的方法において、ヒトＡＰＰを発現するＣＨＯ細胞の培地中のＡβ４２（対Ａβ４０）を選択的に低減することを例証する。ＡβとＡβ４２の相対値は、未処理の細胞及び媒体で処理された細胞から得られた値に対して標準化された。同様のデータを、ヒトＡＰＰを発現するＮｅｕｒｏ２ａ−ｓｗ（ＡＰＰのスウェーデン家族性アルツハイマー病突然変異型を発現するマウスＮｅｕｒｏ２ａ細胞）及び２９３細胞を使用して得た。
【図７】図７は、細胞ライセートの分析を示し、Ｒｇｋ３５１、Ｒｋ１、及びＲｇ５はＡＰＰのＣ末端断片（γ−セクレターゼ物質）の蓄積増大を生ずるが、全長ホロＡＰＰの値には影響を与えないことを示す。
【図８】図８は、Ｒｇｋ３５１及びＲｋ１の処理が、野生型プレセニリン１又はプレセニリン１の家族性アルツハイマー連関突然変異型（デルタＥ９ａｄＬ２８６Ｖ）のいずれかと一緒にヒトＡＰＰを共発現するＣＨＯ細胞におけるＡβ４２の値を低減することを例証する。Ａβ４２生成に関するＲｇ５の効果は、Ｒｇｋ３５１とＲｋ１と比較して非常に小さかった。
【図９】図９は、Ａβ４２特異的γ−セクレターゼ活性に関するＲｋ１（Ｒ１）及びＲｇ５（Ｒ５）の効果を示す。ナプロキセン（ＮＰ）及びスリンダクスルフィド（ＳＳ）を、同時に試験した。
【図１０】図１０は、Ａβ４２に関する天然ジンセノシドの効果を示す。試験された７つの標準ジンセノシド（Ｒｂ１、Ｒｂ２、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｇ１及びＲｇ２）の構造を表１に示す。野生型（Ａ、ＣＨＯ−ＡＰＰ／ＰＳ１細胞）かデルタＥ９ＦＡＤ突然変異体（Ｂ、ＣＨＯ−ＡＰＰ／デルタＥ９ＰＳ１細胞）かのいずれかと共にヒトＡＰＰ６９５で安定的にトランスフェクトされたＣＨＯ細胞を使用した。細胞を、表示された化合物で（５０μＭで）８時間処理した。培地中に分泌されたＡβ４２及びＡβ４０の値をＥＬＩＳＡにより測定し、細胞内全長ＡＰＰに対して標準化した。ＣＨＯ−ＡＰＰ／ＰＳ１細胞において、対象サンプル中のＡβ量は、Ａβ４０について３２０ｐＭ、及びＡβ４２について７９ｐＭだった。Ａβ及びＡβ４２の相対値を、未処理の細胞及び媒体処理された細胞から得られた値に対して標準化し、対照＋標準偏差に対する％として示した。３つの典型的試験の内の１つを示す。
【図１１】図１１は、熱又は蒸気で処理された人参由来のいくつかのジンセノシドのＡβ４２低減活性を示す。ＣＨＯ−ＡＰＰ／ＰＳ１（Ａ）及びＣＨＯ−ＡＰＰ／デルタＥ９ＰＳ１（Ｂ）細胞を、表示された化合物により５０μＭで８時間処理し、分泌されたＡβ４０及びＡβ４２の値を図１に記載されるように測定した。Ａβ４２低減活性の有効性は、Ｒｋ１＞／＝（２０Ｓ）Ｒｇ３＞Ｒｇ５＞（２０Ｒ）Ｒｇ３の順であり、Ｒｈ１及びＲｇ６の効果は顕著ではなかった。Ｒｈ２もＡβ４２低減活性を示したが、細胞生存能力が５０μＭ処理で部分的に影響を受けた（データは示していない。）。当該ＰＳ１−デルタＥ９ＦＡＤ突然変異体は、Ｒｋ１処理に対するＡβ４２応答を弱めた（Ｂ）。
【図１２】図１２は、用量依存的方法において、ＣＨＯ−ＡＰＰ細胞の培地中のＲｇｋ３５１、Ｒｋ１、及びＲｇ５での処理が、Ａβ４２を低減することを示す。（Ａ）Ｒｋ１及びＲｇ５のＡβ４２低減活性の用量反応。Ｒｋ１のＩＣ５０は約２０μＭだった。（Ｂ）Ｒｋ１は、培養されたＣＨＯ−ＡＰＰ細胞において、Ａβ４２（対Ａβ４０）を選択的に低下し、そしてＲｋ１のＡβ４２の阻害パターンは、スリンダクスルフィド（ＳＳ）の阻害パターンと似ている。Ａβ４０とＡβ４２の相対値を、未処理の細胞及び媒体処理された細胞から入手された値に対して標準化した。似たようなデータを、Ｎｅｕｒｏ２ａ−ｓｗ（ＡＰＰのスウェーデン家族性アルツハイマー病変異型を発現するマウスＮｅｕｒｏ２ａ細胞）、及びヒトＡＰＰを発現する２９３細胞を使用して得た（データは示されていない。）。Ａβ４２生成に関するＲｇ５の効果は、Ｒｇｋ３５１及びＲｋ１と比較して非常に少なかった。
【図１３】図１３は、Ｒｋ１処理後のＡＰＰプロセッシングの分析を示す。全長ＡＰＰ及びＡＰＰのＣ末端断片（ＡＰＰ−ＣＴＦｓ）の定常状態値を、抗Ｒ１抗体を使用して、ウェスタンブロット分析により試験した。Ｒｇｋ３５１（Ｒｇ３、Ｒｇ５、及びＲｋ１の混合物）、Ｒｋ１、及びＲｇ５処理は、ＣＨＯ−ＡＰＰ細胞、及びＡＰＰのスウェーデンＦＡＤ突然変異型（ＫＭ６７０／６７１ＮＬ）（ＡＰＰｓｗ）を安定して発現するマウス神経芽細胞腫ｎｅｕｒｏ２ａ細胞中のＡＰＰのＣ末端断片（γ−セクレターゼ基質）の増大された蓄積を生ずる。各サンプルについての相関性のあるＡβ４２の値を、下のパネル中に示す。
【図１４】図１４は、Ａβ４２を低減するジンセノシドＲｋ１が、ＡＰＰ（Ａ、ＡＩＣＤ）、Ｎｏｔｃｈ１（Ｂ、ＮＩＣＤ）又はｐ７５ニューロトロフィン受容体（ｐ７５ＮＴＲ、ｐ７５−ＩＣＤ）からの細胞内ドメイン（ＩＣＤｓ）の生成に著しい影響を与えないことを示す。膜画分を、ＡＰＰ（Ａ）、Ｎｏｔｃｈ−デルタＥ（Ｂ）、又はｐ７５−デルタＥ（Ｃ）のいずれかを過剰発現する２９３細胞から単離し、表示された化合物：化合物Ｅ（ＣｐｄＥ、一般的なγ−セクレターゼ阻害剤）、Ｒｇｋ３５１、Ｒｋ１、及びスリンダクスルフィド（ＳＳ）の存在下でインキュベートした。非常に少ない量のＡＩＣＤ、ＮＩＣＤ、及びｐ７５−ＩＣＤを、対照サンプル（−インキュベート）又はＣｐｄ．Ｅで処理したサンプル中において検出したが、Ｒｇｋ３５１、Ｒｋ１、及びＳＳと共にインキュベートされたサンプル中において、ＡＩＣＤ、ＮＩＣＤ、及びｐ７５−ＩＣＤが豊富に生成された。
【図１５】図１５は、Ａβ４２を低減するジンセノシドＲｋ１、及び（２０Ｓ）Ｒｇ３が、無細胞γ−セクレターゼ分析において、Ａβ産生を阻害することを示す。（Ａ）ＣＨＡＰＳＯ溶解された膜画分を、表示された化合物（１００μＭで）と一緒に組み換えγ−セクレターゼ基質と培養し、上記の通りＡβ４２及びＡβ４０の値をＥＬＩＳＡにより測定した。（Ｂ）無細胞γ−セクレターゼ分析における、Ｒｋ１及び（２０Ｓ）Ｒｇ３のＡβ４２及びＡβ４０低減活性の用量反応。Ｒｋ１のＩＣ５０は、Ａβ４０について２７±３μＭであり、Ａβ４２について３２±５だった。（２０Ｓ）Ｒｇ３のＩＣ５０は、Ａβ４０について２７±４μＭであり、Ａβ４２について２６±７だった。
【図１６】図１６は、Ａβ４２産生に関する２０（Ｓ）−プロトパナキサトリオール（ＰＰＴ）及び２０（Ｓ）プロトパナキサジオール（ＰＰＤ）を含む、ジンセノシドの２つの主な代謝体の効果を示す。２０（Ｓ）−パナキサトリオール（ＰＴ）及び２０（Ｓ）パナキサジオール（ＰＤ）は、各々ＰＰＴ及びＰＰＰＤの人工誘導体である。ＰＰＴ又はＰＴのいずれかによる処理は、ＡＰＰのヒトスウェーデン突然変異型を発現するＮｅｕｒｏ２ａ細胞内において、Ａβ４２の値に影響を与えることなくＡβ４２の産生を低減し（Ｎｅｕｒｏ２ａ−ＳＷ、下図）、並びにヒトＡＰＰの野生型を発現するＣＨＯ細胞においても同様だった（データを示していない。）。ＰＰＤ及びＰＤは、Ａβ４０又はＡβ４２産生に関するいかなる阻害効果も与えなかった。
【図１７】図１７は、ＤＭＳＯ（媒体）、Ｒｋ１、又は（２０Ｓ）Ｒｇ３で処理されたＣＨＯ−ＡＰＰ細胞から生成されたＡβ種の質量分析を示す。処理がＡβ４２種（１−４２）における低減、並びにＡβ３７（１−３７）及びＡβ３８（１−３８）の双方の上昇を導くことに留意する。Ａβ種の質量分析を、以前に記載された通り実施した（Ｗａｎｇ  Ｒ，Ｓｗｅｅｎｙ  Ｄ，Ｇａｎｄｙ  ＳＥ，Ｓｉｓｏｄｉａ  ＳＳ．Ｔｈｅ  ｐｒｏｆｉｌｅ  ｏｆ  ｓｏｌｕｂｌｅ  ａｍｙｌｏｉｄ  β−ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎ  ｃｕｌｔｕｒｅｄ  ｃｅｌｌ  ｍｅｄｉａ．Ｊ．Ｂｉｏ．Ｃｈｅｍ．１９９６；２７１：３１８９４−３１９０２）。
【図１８】図１８は、ＤＭＳＯ（対照１）、ナプロキセン（対照２）、Ｒｋ１、又は（２０Ｓ）Ｒｇ３によるＣＨＯ−ＡＰＰ細胞の処理後、分泌されたＡβ値の分析を示す。Ａβを、４Ｇ８抗体（Ｓｅｎｅｔｅｋから購入された。）を使用して免疫沈澱し、トリシン／尿素ゲルを使用してＳＤＳ−ＰＡＧＥに供し（プロトコールは東京大学のＹ．Ｉｈａｒａ博士により提供された。）、そして６Ｅ１０抗体（Ｓｅｎｅｔｅｋ）を使用してウエスタンブロット分析により分析した。合成Ａβ４０及びＡβ４２ペプチドを対応するＡβ種を同定するために使用した。
【図１９】図１９は、Ｔｇ２５７６トランスジェニックマウス由来の初期胎児皮質神経細胞におけるＡβ４０、及びＡβ４２分泌に関するジンセノシド、Ｒｋ１、及び（２０Ｓ）Ｒｇ３の効果を示す。ＲＫ１及びＲｇ３の処理は、分泌されたＡβ４０及びＡβ４２の値を低減した。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【国際調査報告】
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