(57)【要約】  尿生殖路における症状を治療および／または予防するための、乳酸およびラクトフェリンおよび／またはそれらのペプチドフラグメントを含む組成物を開示するする。また、このような組成物の、尿生殖路における症状を治療および／または予防するための医薬品を製造するための使用、同様に、それらを治療する方法も開示する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラクトフェリンおよび／またはそのペプチドフラグメントを含むことを特徴とする、尿生殖路における症状を治療および／または予防するための乳酸を含む組成物。
【請求項２】
ラクトフェリンおよび／またはそのペプチドフラグメントの濃度は、０.０００１〜１００ｍｇ／ｍｌの範囲である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
ラクトフェリンおよび／またはそのペプチドフラグメントの濃度は、０.００１〜１０ｍｇ／ｍｌの範囲である、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
ラクトフェリンおよび／またはそのペプチドフラグメントの濃度は、０.０１〜５ｍｇ／ｍｌの範囲である、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
ラクトフェリンは、組換えヒトラクトフェリンである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
ラクトフェリンのペプチドフラグメントは、合成または組換えである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
乳酸の濃度は、１〜１００ｍｇ／ｍｌの範囲である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
中和剤をさらに含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
乳酸および中和剤の含量は、ｐＨが３.５〜４.５の範囲内になるような量である、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
中和剤は、水酸化ナトリウムである、請求項８または９に記載の組成物。
【請求項１１】
乳酸菌種のための増殖基質をさらに含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
乳酸の増殖基質に対する重量比は、２０：１〜５００：１の範囲である、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
乳酸の増殖基質に対する重量比は、５０：１である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
増殖基質は、α（１−６）分岐を含むα（１−４）グルカンである、請求項１１〜１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
増殖基質は、グリコーゲン、アミロペクチン、グルコース、デキストロース、および、ラクトースからなる群より選択される、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
不活性な媒体をさらに含む、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１７】
不活性な媒体は、プロピレングリコール、または、ポリエチレングリコールである、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
増粘剤をさらに含む、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１９】
増粘剤は、セルロースのメチルヒドロキシプロピルエーテルである、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
クリーム、ゲル、膣坐剤、錠剤、または、スプレーの形態である、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２１】
尿生殖路における症状を予防および／または治療するための医薬品を製造するための、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の組成物の使用。
【請求項２２】
医薬品は、抗菌活性を有する、請求項２１に記載の使用。
【請求項２３】
症状は、尿生殖路における高められたｐＨおよび／または乱れた微生物叢を含む、請求項２１または２２に記載の使用。
【請求項２４】
乱れた微生物叢は、異常に低いレベルの乳酸菌と組み合わせた、異常に高いレベルのＢＶ関連細菌（嫌気性グラム陰性菌、嫌気性グラム陽性球菌、ブドウ球菌、連鎖球菌、大腸菌）および／またはカンジダを特徴とする、請求項２３に記載の使用。
【請求項２５】
症状は、細菌性膣症、中間的膣内微生物叢、および、酵母感染症からなる群より選択される、請求項２１〜２４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２６】
尿生殖路における症状を予防および／または治療する方法であって、それを必要とする患者に、医薬上有効量の請求項１〜２０のいずれか一項に記載の組成物を投与することを含む、上記方法。
【請求項２７】
症状は、尿生殖路における高められたｐＨおよび／または乱れた微生物叢を含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
乱れた微生物叢は、異常に低いレベルの乳酸菌と組み合わせた、異常に高いレベルのＢＶ関連細菌（嫌気性グラム陰性菌、嫌気性グラム陽性球菌、ブドウ球菌、連鎖球菌、大腸菌）および／またはカンジダを特徴とする、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
症状は、細菌性膣症、中間的膣内微生物叢、および、酵母感染症からなる群より選択される、請求項２６〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、尿生殖路における症状を治療および／または予防するための、乳酸を含む組成物に関する。
【０００２】
本発明はまた、このような組成物の、尿生殖路における症状を治療および／または予防するための医薬品を製造するための使用、同様に、尿生殖路における症状の治療および／または予防方法にも関する。
【背景技術】
【０００３】
酸性度は、膣の防御機構の１つと考えられる。この酸性度は、クラミジア、生殖器のマイコプラスマ、トリコモナス症、尿路感染のような感染の危険の減少と、さらに、膣入り口での細菌の運送の減少とに関連している（Ｈａｎｎａ，Ｎ等  １９８５，１９７５，Ｓｔａｍｅｙ  ＴＡおよびＫａｕｆｍａｎ  ＭＦ  １９７５，Ｓｔａｍｅｙ  ＴＡおよびＴｉｍｏｔｈｙ  ＭＭ  １９７５）。
【０００４】
それに対して、膣内微生物叢の不均衡、すなわち細菌性膣症（ＢＶ）は、早産、性感染症の危険の増加、ＨＩＶ感染の危険の増加および骨盤内炎症性疾患に関連している（Ｓｃｈｗｅｂｋｅ，ＪＲ，２００３，Ｏｂｓｔｅｔ  Ｇｙｎｅｃｏｌ  Ｃｌｉｎ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍ．３０：６８５〜９４；Ｅｓｃｈｅｎｂａｃｈ，ＤＡ，１９９３，Ａｍ  Ｊ  Ｏｂｓｔｅｔ  Ｇｙｎｅｃｏｌ，第１６９巻：４４１〜５；Ｔａｈａ等，Ａｉｄｓ，１９９８，第１２巻：１６９９〜７０６，Ｈｉｌｌｉｅｒ，ＳＬ等，１９９６，Ａｍ  Ｊ  Ｏｂｓｔｅｔ  Ｇｙｎｅｃｏｌ，第１７５巻：４３５〜４１）。
【０００５】
膣は、周産期中や初経から閉経への期間が最も酸性である。膣は、膣内のグリコーゲンを、酸性の生成物（主として酢酸および乳酸）に嫌気的に代謝することによって酸性化されていると考えられている。この代謝が、膣内細菌および／または上皮細胞によって行われているのかどうかは、なお論争中である（ＰｙｂｕｓおよびＯｎｄｅｒｄｏｎｋ  １９９９の総説を参照）。
【０００６】
通常、乳酸産生微生物叢にとって望ましい環境が存在し、粘膜分泌物中に約４のｐＨをもたらす。しかしながら、この環境は、月経周期の特定の期間中および閉経の際のエストロゲン濃度の変動のような要因ならびに、例えば長期化する月経の出血、月経前の血性帯下、中間期出血および射精液に起因する様々なタイプの分泌物の発生の増加によっても障害を起こす可能性がある。また、膣内の異物、例えばコイル、ペッサリーならびに、例えば抗生物質治療に関連して、および洗浄の際に挿入されたものも、ｐＨが上昇するような健康な微生物叢の崩壊を引き起こす可能性がある。ｐＨが４.５を超えると、嫌気性細菌が増殖する傾向が増加する。
【０００７】
粘膜で炎症反応を起こさない膣内の正常な微生物叢の崩壊はＢＶと言われており、これは、悪臭の発散や４.５を超えるｐＨをもたらすが、ＢＶは、一般的には、実際の疾患とはみなされていない。しかしながら、ＢＶは、低いｐＨによって部分的に付与される感染に対する防御が弱まっている指標であり、さらに、好ましくない環境下でＢＶは実際の感染症を引き起こす。
【０００８】
微生物叢の変化は、膣内のｐＨの変化と関連している（Ｃａｉｌｌｏｕｅｔｔｅ  ＪＣ等  １９９７）。ＢＶの間、膣内のｐＨが上昇し、乳酸菌の優勢な相から、ガードネレラ・バジナリス（Ｇａｒｄｎｅｒｅｌｌａ  ｖａｇｉｎａｌｉｓ）や嫌気性細菌が優勢な生物相への移行が観察される。嫌気性細菌の存在は、高くなったｐＨ（４.５を超える）で、悪臭の発散や揮発性アミンを発生させる。
【０００９】
ＢＶにおける膣液のｐＨ上昇によって発生した臭いは、アミンの存在によるものである。ＢＶ中の発散は、嫌気性細菌の脱炭酸反応によって生産される数種のアミンの濃度上昇を含む。プロトン化されていない型（遊離塩基）で存在する場合、アミンは揮発性になりそして臭気を発する。しかしながら、強酸を添加すると、アミンはプロトン化型（塩）に変換され、揮発性ではなくなる。乳酸は強酸であるため、悪臭の発散を減少させるのに適している。
【００１０】
乳酸を用いて膣内のｐＨを低くすることによって、乳酸菌類が膣内に再び定着し、それにより、ＢＶ関連細菌の異常増殖に対する本来の耐性の回復が、より簡単になると思われる。乳酸塩（すなわち乳酸の塩）を、乳酸菌のための増殖基質（グリコーゲン）を含むゲル中に添加することが、ＢＶにおける高いｐＨと悪臭に対して有効であることが示された。（ＥＰ０２５７００７を参照）。
【００１１】
この乳酸塩ゲルは、保存剤を含まずグリコーゲンを含む、酸性の乳酸クリームを提供する。グリコーゲンは、妊娠可能な女性の膣上皮細胞に大量に見出され、乳酸菌のための重要な栄養基質である。
【００１２】
乳酸しか含まないクリーム、または、保存剤を含む酸性のクリームと比較して、この乳酸塩ゲルは、インビトロで、乳酸菌の生存に関して２倍の望ましい作用を有することが示されている。従って、これは、ＢＶの症例において、正常な環境を再び確立するのに用いることができる。
【００１３】
また、この乳酸塩ゲルは、その低いｐＨのために、ある種のＢＶ関連細菌種に対してある程度の抗菌作用を有することも示されている。（Ａｎｄｅｒｓｃｈ  Ｂ等；“Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ｖａｇｉｎｏｓｉｓ  ｗｉｔｈ  ａｎ  Ａｃｉｄ  Ｃｒｅａｍ：Ａ  Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｔｈｅ  Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｌａｃｔａｔｅ−Ｇｅｌ  ａｎｄ  Ｍｅｔｒｏｎｉｄａｚｏｌｅ”，Ｇｙｎｅｃｏｌ  ｏｂｓｔｅｔ  Ｉｎｖｅｓｔ  ２１：１９〜２５（１９８６）を参照）。しかしながら、カンジダ・アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）やカンジダ・クルセイ（Ｃ．ｋｒｕｓｅｉ）のような酵母に対する効果は、観察されていない。
【００１４】
膣における真菌感染症を治療するための従来の方法は、通常、抗生物質（例えばイミダゾール誘導体）の投与を含む。当然ながら、例えば耐性の発生のために、抗生物質の使用を減らすための多くの動機がある。
【００１５】
さらに、患者がＢＶまたは真菌感染症に罹っているかどうかを診断することは難しい。そのため、用心としての抗生物質が処方され、抗生物質の不必要な過剰投与が起こる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
当然ながら、膣のｐＨを低くし、さらに臭いを減少させるという上述の特徴を有するだけでなく、ＢＶおよび／または真菌感染症、特に酵母感染症の治療または予防に有効な、抗生物質を用いない治療を得ることは極めて有用と思われる。理想的には、このような治療は、患者がＢＶまたは真菌感染症に罹っているかどうか、または、ＢＶまたは真菌感染症に罹る危険性があるかどうかに関わりなく有効であるべきである。これまで、このような可能性は提供されていない。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明の目的は、泌尿生殖器の症状を治療するためのより効率的な組成物を提供することであり、本組成物は、ｐＨを低くし、悪臭に対して有効であり、さらに、細菌性膣症および真菌感染症、特に酵母種によって引き起こされる真菌感染症の治療にも有効である。
【００１８】
この目的は、ラクトフェリン（ＬＦ）、および／または、それらのペプチドフラグメントを含むことを特徴とする、乳酸を含む組成物によって達成される。
【００１９】
ＬＦおよび／またはそれらのペプチドフラグメントを取り込むと、組成物の抗菌活性が高められるため、本組成物は、尿生殖路、特に膣内の望ましくない細菌や真菌の増殖を阻害および／またはそれらを死滅させるために用いることができる。
【００２０】
ＬＦおよび／またはそれらのペプチドフラグメントの濃度は、０.０００１〜１００ｍｇ／ｍｌの範囲、特に０.００１〜１０ｍｇ／ｍｌ、または、０.０１〜５ｍｇ／ｍｌの範囲が可能であり、前記ＬＦは、組換えヒトＬＦであってもよい。前記ラクトフェリンのペプチドフラグメントは、合成でもよいし、または、組換えでもよい。
【００２１】
乳酸の濃度は、０.１〜１０％（すなわち１〜１００ｍｇ／ｍｌ）の範囲が可能である。
【００２２】
本組成物は、中和剤をさらに含んでいてもよく、そして乳酸および中和剤の含量は、好ましくは、ｐＨが３.５〜４.５の範囲内になるような量である。
【００２３】
本組成物は、乳酸菌のための増殖基質をさらに含んでいてもよく、そして乳酸の増殖基質に対する重量比は、好ましくは２０：１〜５００：１の範囲、より特定すれば約５０：１の範囲である。
【００２４】
本組成物は、不活性な媒体および／または増粘剤をさらに含んでいてもよい。
【００２５】
本組成物は、例えば、クリーム、ゲル、膣坐剤、錠剤、または、スプレーの形態が可能である。
【００２６】
その上、本発明は、尿生殖路における症状を予防および／または治療するための医薬品を製造するための上述の組成物の使用に関する。このような医薬品は、抗菌活性を有する。
【００２７】
治療および／または予防しようとする症状は、尿生殖路における高められたｐＨ、および／または、乱れた微生物叢を含む。乱れた膣内微生物叢は、異常に低いレベルの乳酸菌と組み合わせた、異常に高いレベルのＢＶ関連細菌（嫌気性グラム陰性菌、嫌気性グラム陽性球菌、ブドウ球菌、連鎖球菌、大腸菌）および／またはカンジダを特徴とする。
【００２８】
本発明はまた、上述の症状を予防および／または治療する方法に関する。
【００２９】
本発明に係る組成物を用いる利点は、いくつかある:
・  本組成物は、乳酸菌に対しては寛容である。
・  単一の組成物中で乳酸とＬＦとを組み合わせると、ｐＨを低くし、臭いを減らし、さらにＢＶ関連細菌および酵母の増殖を阻害するため、予想外の相乗効果が生じる。
・  本組成物は、患者がＢＶまたはカンジダ感染症に罹っているかどうかに関わりなく有効であり、これは当然ながら、信頼できる診断が確立できない場合、特に自己療法の場合に、有利である。
・  抗生物質の使用を減少させることができる。
【００３０】
〔発明の詳細な説明〕
ラクトフェリン（ＬＦ）は、抗菌物質、炎症性反応のモジュレーターおよび免疫調節タンパク質と記載されており、これは、単鎖の鉄結合性糖タンパク質である。ＬＦは、初乳および成熟乳に２〜７ｇ／ｌのレベルで見出される。初乳において、ＬＦは、総タンパク質含量の４３％を構成している。また、唾液、涙、気管支粘液、および、膣頚管分泌物のようなその他の外分泌腺の分泌物もＬＦを含む（表１）。
【００３１】
これは、トリプシンやトリプシン様酵素によるタンパク質分解に対して著しい耐性を有する。しかしながら、ペプシン消化によりペプチドフラグメントであるラクトフェリシンが生産され、これは、インビトロで広範囲の細菌に対する強い殺菌性を有する。ＬＦとラクトフェリシンはいずれも、インビトロで殺菌性および殺真菌性を有する。
【００３２】
【表１】
2008503576.tif 000002
【００３３】
膣内の微生物間の均衡を維持することは、極めて重要性である。ＢＶの治療において（炎症を伴わない、膣内の生物相における不均衡によって引き起こされる悪臭の発散）、乳酸菌の優勢な生物相を再び確立することが重要である。
【００３４】
本発明に至る研究において、驚くべきことに、上述の既知の乳酸塩と、ＬＦおよび／またはそれらのペプチドフラグメントとを組み合わせることによって、優れた相乗効果が得られることが見出された。
【００３５】
従って、本発明は、ＬＦおよび／またはそのペプチドフラグメントを含む酸性の乳酸組成物を提供する。本発明に係る組成物は、乳酸菌にとって生産的な環境の再確立を補助し、ｐＨを低くし、さらに、多数の微生物、例えばＣ．アルビカンス、大腸菌、黄色ブドウ球菌、Ｇ．バジナリスおよびプレボテラ属に対する抗菌活性を及ぼすことによって、膣内の粘膜の本来の防御機構を強化する。
【００３６】
本発明で使用するためのＬＦとしては、ヒトＬＦ、組換えヒトＬＦ（ｒＨＬＦ）、または、ウシＬＦが可能である。
【００３７】
ヒトＬＦは、ヒト、例えばヒトの乳汁から精製したＬＦを意味する。
組換えヒトＬＦは、ハイブリッドＤＮＡ技術によって原核または真核細胞（細菌、真菌細胞、植物または動物）中で生産されたＬＦを意味する。
【００３８】
また、ＬＦのペプチドフラグメントも本発明で使用可能であり、これは、単独でもよいし、または、ＬＦと組み合わせてもよい。１種のペプチドフラグメント、または、２またはそれ以上の異なる種類のペプチドフラグメントのいずれを使用してもよい。
【００３９】
「ＬＦのペプチドフラグメント」は、Ｎ末端からのＬＦ分子の抗菌性の領域をベースとした様々なサイズのペプチドを意味する。このペプチドフラグメント配列は、ヒトＬＦのＮ末端から数えて１〜４０位のアミノ酸（ａ．ａ．）、特に１２〜４０位のアミノ酸で構成される配列をベースとする。合成ペプチドおよび組換えペプチドを用いることができる。ＬＦペプチドの例は、ラクトフェリシンである。その他の例は、Ｎ末端からそれぞれ１６位または１８位のアミノ酸残基から始まる２５個または２３個のアミノ酸長さのペプチドが可能である。本発明で用いるのに適したＬＦペプチドは、公報番号ＷＯ００／０１７３０の国際出願に記載されている。
【００４０】
ＬＦおよび／またはそれらのペプチドフラグメントの濃度は、例えば、０.０００１〜１００ｍｇ／ｍｌ、０.０００１〜１ｍｇ／ｍｌ、０.００１〜１０ｍｇ／ｍｌ、０.０１〜５ｍｇ／ｍｌ、または、１〜５０ｍｇ／ｍｌの範囲が可能である。特に、ＬＦおよび／またはそれらのペプチドフラグメントの濃度は、０.００１〜１０ｍｇ／ｍｌの範囲、または、０.０１〜５ｍｇ／ｍｌの範囲である。
【００４１】
乳酸の濃度は、例えば、１〜１００ｍｇ／ｍｌ、または、１０〜１００ｍｇ／ｍｌの範囲が可能である。
さらに、本発明において、乳酸塩、すなわち乳酸の塩を用いてもよい。
本組成物は、乳酸のｐＨを緩衝するための中和剤を含んでいてもよい。中和剤の例は、水酸化ナトリウムおよびアンモニアである。
【００４２】
乳酸および中和剤の含量は、３.５〜４.５の範囲内、好ましくは３.８の近傍になるような量が可能である。ｐＨは、酸が組織に刺激を与えたり、または、中程度の酸性の環境を必要とする乳酸菌のための環境を損なったりするほど低くないことが有利である。ｐＨ３.７〜３.９が、特に有利であることが示されている。
【００４３】
本組成物は、乳酸菌のための増殖基質をさらに含んでいてもよい。増殖基質は、好ましくはα（１−６）分岐を含むα（１−４）グルカンである。
【００４４】
適切な増殖基質の例はグリコーゲンであり、これは、妊娠可能な女性の膣上皮細胞で大量に見出され、そして、乳酸菌のための重要な栄養基質である。治療によって、乳酸を供給することによってｐＨレベルをより低い数値に調節するだけでなく、本来の状態を再生するために乳酸菌の増殖に有利な環境が再び確立するように、乳酸菌のための増殖基質としてグリコーゲンが用いられる。増殖基質のその他の例は、ラクトース、デキストロース、グルコース、および、アミロペクチンである。
【００４５】
乳酸は、増殖基質より相当大きい重量比率で含まれ、例えば、２０：１〜５００：１の重量比、特に５０：１の重量比で含まれる。
【００４６】
本発明に係る組成物は、クリーム、ゲル、スプレー、錠剤または膣坐剤の形態が可能である。その結果として、本発明に係る組成物は、クリームまたはゲルの粘稠度、錠剤の粘稠度、スプレー投与に適した粘稠度を有するか、または、膣坐剤または膣錠の形態が与えられる。
本発明に係る組成物は、膣内、経口または経皮投与が可能である。
【００４７】
使用に適した医薬品を形成するために、本組成物の活性成分のための媒体を添加してもよい。本発明に係る組成物は、本発明において不活性なタイプであり、クリームまたはゲル様の粘稠度またはスプレー投与に適した粘稠度を提供する媒体を含んでいてもよい。あるいは、不活性な媒体は、体温で、および、体液中で溶ける物質である。
【００４８】
膣坐剤を製造しようとする場合、室温で乾燥した環境では比較的固体だが、体温で、さらに体液と接触すると溶ける物体の形成を可能にする媒体が必要である。この点について、膣内の環境で徐々に解けるポリエチレングリコール、ＰＥＧを用いてもよい。
【００４９】
クリームに適した媒体の一つはプロピレングリコールだが、例えばトリグリセリドのような不活性な性質を有するその他の物質も、この関連で媒体として有用であることがわかっている。
【００５０】
本発明に係る組成物は、増粘剤をさらに含んでいてもよく、例えば、クリームおよびゲルの場合、セルロースのメチルヒドロキシプロピルエーテルである。市販品の例としては、ヒプロメローサム(Ｈｙｐｒｏｍｅｌｌｏｓｕｍ)（Ｒ）９０ ＨＧ ４０００が挙げられる。増粘剤のその他の例は、コーンスターチである。
【００５１】
「尿生殖路における症状」は、雌および／または雄の尿路または生殖器官におけるあらゆる障害または疾患を意味する。特に、本発明は、膣内の症状を治療するのに適している。
【００５２】
本発明に従って治療しようとする症状は、尿生殖路における高められたｐＨおよび／または乱れた微生物叢を含む。「高められたｐＨ」は、４.５を超えるｐＨを意味する。
【００５３】
「乱れた微生物叢」は、異常に高いレベルのＢＶ関連細菌、例えばＧ．バジナリス、嫌気性グラム陰性菌（プレボテラ属、バクテロイド属およびフゾバクテリウム属）、嫌気性グラム陽性球菌、モビルンカス属（Ｍｏｂｉｌｕｎｃｕｓ）、および／または、異常に高いレベルの大腸菌、黄色ブドウ球菌および連鎖球菌を、いずれも異常に低いレベルの乳酸菌と組み合わせて含む生物相を意味する。また、膣炎で発生する可能性がある高レベルのカンジダも、乱れた膣内微生物叢とみなされる。
【００５４】
「異常に高いレベル」は、正常なヒトでのレベルより１００〜１０００倍多いレベルを意味する。
【００５５】
「異常に低いレベル」は、優勢ではないことを意味し、すなわち、顕微鏡の液浸視野あたり、乳酸菌の形態型が存在しないか、または、１個未満しか存在しないこと、または、液浸視野あたり、その他の形態型より少ないか、または、その他の形態型と等しいことを意味する。（「ニュージェントの採点法（Ｎｕｇｅｎｔ  ｓｃｏｒｉｎｇ  ｓｙｓｔｅｍ）」による評価であって、これは、膣内の分泌における細菌の不均衡を記載するために国際的に用いられている。Ｎｕｇｅｎｔ  ＲＰ等  １９９１，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  ２９：２９７〜３０１を参照）。
【００５６】
「抗菌活性」は、静菌、静真菌、殺菌および／または殺真菌活性を意味し、すなわち、ある種の細菌および真菌の増殖をそれぞれ妨害し、および死滅させる能力を意味する。
【００５７】
「症状の予防および／または治療」は、上述したような症状を治癒もしくは緩和する、または、このような症状の発症を予防するためのあらゆる処置を意味する。
【００５８】
本発明に係る組成物を用いて治療しようとする症状の例は、細菌性膣症、中間的膣内微生物叢および酵母感染症、例えばカンジダ感染（カンジダ膣炎、カンジダ性亀頭炎）である。
【００５９】
さらに、本発明に係る組成物は、クラミジア、生殖器のマイコプラスマ、トリコモナス症、尿路感染症、骨盤内炎症性疾患、および、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）によって引き起こされる感染症の治療に用いてもよい。加えて、上述の症状のあらゆる組み合わせを、本発明に係る組成物で治療することもできる。
【００６０】
また、本発明に係る組成物は、例えば性感染症に対する予防として、または、潤滑剤として、真菌性湿疹、潰瘍性乳頭の治療に用いてもよい。
【００６１】
また、本発明に係る組成物は、口、喉および／または鼻の細菌感染症および／またはウイルス感染症を治療するのに用いてもよい。さらに、本発明に係る組成物は、細菌および／またはウイルスによって引き起こされる皮膚感染症を治療するのに用いてもよい。
【００６２】
「治療有効量」は、本発明に係る組成物の、望ましい薬理学的効果および／または治療効果をもたらすであろう量を意味する。望ましい薬理学的効果および／または治療効果は、上述したように、尿生殖路における症状が治癒もしくは緩和されること、および／または、尿生殖路における症状の発症を予防することである。
【００６３】
「患者」は、本発明に係る組成物および／または方法で治療することが必要な、雌性または雄性のあらゆるヒトまたはヒト以外の哺乳動物を意味する。
【００６４】
本発明に係る組成物はさらに、その他の物質を含んでいてもよく、例えばアジュバント、キャリアー、保存剤、ビタミン、無機物、エストロゲンなどであり、これらは当業者周知である。
【００６５】
その上、本発明に係る組成物を、例えば抗生物質および／または抗真菌薬（例えばイミダゾール製剤）での治療のような、その他の慣用の尿生殖路の症状の薬理学的な治療と組み合わせることも可能である。
【００６６】
本組成物は、使用者が使用前に希釈することを意図した濃縮物の形態でもよい。このような濃縮物は、適切には、例えば純水、水溶液または食塩水で希釈される。
【００６７】
本発明に係る組成物の具体的な例を、以下の典型的な組成物で示す。
【表２】
2008503576.tif 000003
【実施例】
【００６８】
材料および方法
細菌株と真菌株
マイクロプレート分析では、細菌株、Ｓ．アウレウス１８００（ＣＣＵＧ １８００）、Ｅ．コリＯ６、および、酵母、Ｃ．アルビカンス（ＡＴＣＣ６４５４９）を使用した。全ての微生物を、脳心臓浸出液培地（ＢＨＩ）で、振盪機で、３７℃で一晩培養した。培養物をＢＨＩを含む新しい試験管に移し、振盪機で２時間以上インキュベートした。細菌を対数期で回収し、１回洗浄し、その後、マイクロプレート分析のために用いるブロスに懸濁した。この懸濁液を分光光度法で調節し、６５０ｎｍで約４×１０6細胞／ｍｌの濃度に希釈した。
【００６９】
Ｌ．ガセリとラクトバシラス・イエンセン（Ｌ．ｊｅｎｓｅｎｉｉ）を、チョコレート寒天プレートで、５％ＣＯ2／９５％空気中で２４時間培養した。その後これらを回収し、ＢＨＩ（０.３４％）に添加した。洗浄した後に、細菌溶液を分光光度法により調節し、８×１０6細菌／ｍｌに希釈した。
【００７０】
Ｇ．バジナリスとＰ．ビビア（Ｐ．ｂｉｖｉａ）を、チョコレート−ＧＬ−プレートで、嫌気性環境で４８時間培養した。細菌を回収し、さらなるインキュベーション（３７℃で４時間）のためのＢＨＩに懸濁した。細菌を、バクトペプトン（ＢＰ，０.２％）で２回洗浄した。濃度を分光光度法により調節し、１×１０7細菌／ｍｌに希釈した。
【００７１】
ＬＦおよびペプチド
ヒトの乳汁からのＬＦを、シグマ（Ｓｉｇｍａ，セントルイス，米国）から購入した。組換えヒトＬＦを、アジェニックス（Ａｇｅｎｎｉｘ）から得た。ｆｍｏｃ法で、ヒトＬＦの抗菌性の領域をベースとした２３個のアミノ酸で構成されるペプチドフラグメントを合成した。
【００７２】
最小殺菌および阻害濃度（ＭＭＣ）
洗浄した細胞を、０.２％ＢＰ（ｐＨ７.０）、または、１０分の１に希釈したＢＨＩ培地（０.３４％、ｐＨ６.７〜６.９）（ディフコ（Ｄｉｆｃｏ），米国）に懸濁した。細菌または真菌細胞の濃度を、分光光度法により調節した。２回の工程で（特に他の指定がない限り）ＢＨＩ希釈液またはＢＰで連続的に希釈したＬＦまたはペプチドを、マイクロタイタープレートのウェルに三連で添加した（２００μｌ／ウェル）。細菌または酵母細胞溶液を１０μｌの量で添加し、最終濃度を約２×１０5細胞／ｍｌとした。ストック溶液の濃度を、生菌数によって常にチェックした。マイクロプレートを、加湿チャンバーで、３７℃で２時間（特に他の指定がない限り）インキュベートした。各ウェルから５μｌを採取し、血液寒天プレート上に滴加し、３７℃で一晩インキュベートした。数回の実験で、さらに徹底した生菌数を行い、それらの死滅を、接種菌に対して残存したコロニー形成単位として示した。微生物の検出下限は２００ＣＦＵ／ｍｌであった。
【００７３】
Ｇ．バジナリスおよびＰ．ビビアに関する殺菌性分析の手法は上述の通りであるが、マイクロプレートを嫌気条件下でインキュベート（２時間）したことを除く。その後、嫌気条件下で３７℃で４８時間インキュベートした後に、この溶液の液滴を、血液寒天プレート上で生存可能な細菌に関して解析した。
【００７４】
実施例１
乳酸塩およびＬＦの抗菌活性
ヒトＬＦの抗菌活性を、上述の殺菌性分析によって解析した。Ｃ．アルビカンス、大腸菌および黄色ブドウ球菌のような様々な微生物を、ＬＦを含む乳酸塩（殺菌性分析に不適切なゲルを形成する不活性ゲルベースを含まない）中で、それらの生存に関して解析した。
【００７５】
図１は、乳酸塩（ａ）および塩化水素（ｂ）の存在下でのＣ．アルビカンスに対するＬＦの抗真菌活性を示す。ＬＦを、０.２％バクトペプトンで希釈した種々の濃度の乳酸塩、および、Ｃ．アルビカンスと共に２時間インキュベートした。その後、それぞれの溶液の生菌数を解析した。
【００７６】
我々の結果によれば、全てのＬＦ濃度について乳酸塩を５倍またはそれ以上（≦１％）に希釈した場合、ＬＦは、Ｃ．アルビカンスに対する乳酸塩の抗菌作用を強化することが示された（ただし乳酸塩の１％希釈での０.５ｍｇの場合を除く）（図１ａ）。ＬＦは、乳酸塩濃度が０.２％、０.０４％および０％乳酸塩で酵母細胞を９９.９％減少させた。希釈していない乳酸塩では、抗真菌活性が観察された。乳酸塩１％は、カンジダを６５％減少させた。しかしながら、接種菌の９２および９８.２％が、それぞれ２および５ｍｇ／ｍｌのＬＦの存在下で死滅した。乳酸塩をＨＣｌで置き換え、乳酸塩と同じｐＨにしたところ、希釈していない場合で、殺カンジダ性の活性の減少が起こった（図１ｂ）。また、これらの実験から、低いｐＨだけでなく、乳酸塩それ自身も、抗真菌活性に重要である（希釈していない乳酸塩溶液で）ことも示された。
【００７７】
大腸菌および黄色ブドウ球菌に対する乳酸塩の抗細菌活性は、ＬＦの非存在下または存在下のどちらでも優れていた（表２および３）。
【００７８】
また、膣内で頻繁に見出される２種の乳酸菌株（Ｌ．ガセリ、および、Ｌ．イエンセン）を用いてＬＦおよび乳酸塩の効果も解析した（図２）。
【００７９】
図２は、Ｌ．ガセリおよびＬ．イエンセンに対するＬＦ（２ｍｇ／ｍｌ）の効果を示す。これらの細菌を、０.３４％ＢＨＩで希釈した種々の濃度の乳酸塩中で３時間インキュベートし、そしてＣＯ2中でインキュベートした。このアッセイ系において、Ｌ．ガセリは、Ｌ．イエンセンよりもよく生存した。希釈していない乳酸塩（５％）は、乳酸菌の生存に影響を与えた。乳酸塩１％で、Ｌ．イエンセンは生存しなかったが、ＬＦで処理したＬ．ガセリは１８％生存した。
【００８０】
次の実験で、異なるインキュベート条件（０.３４％ＢＨＩ，ＣＯ2インキュベーター）でＬＦの作用が変化するかどうかを調べるために、大腸菌とＬ．ガセリとの比較を行った。従って、大腸菌はＬ．ガセリと同じ方法で処理した。
【００８１】
以前見出されたように、乳酸塩中で、大腸菌は乳酸塩に感受性を有し、そしてＬ．ガセリは、ＬＦを含んでいても、含んでいなくても、大腸菌よりも高い耐性を有していた（図３）。
【００８２】
表２
殺菌性のマイクロプレート液滴アッセイで解析した、種々の濃度の乳酸塩におけるＬＦの殺活性である。数値は、接種菌に対して残存した細菌の割合を示す。＋＋＋は、液滴５μｌ中に含まれるコロニー形成単位数（ＣＦＵ）が、細菌の平滑層を形成したことを意味し、＋＋は、「しわくちゃ（ruffled）」の領域が観察されたことを意味し、最後に、０は、５μｌの三連サンプル中でＣＦＵは見出されなかった（接種菌の９９.９５％より多くが死滅した）ことを意味する。
【表３】
2008503576.tif 000004
【００８３】
表３
殺菌性のマイクロプレート液滴アッセイで解析した、種々の濃度の乳酸塩におけるＬＦの殺活性である。数値は、接種菌に対して残存した細菌の割合を示す。＋＋＋＝液滴５μｌ中に含まれるコロニー形成単位数が、細菌の平滑層を形成した（かっこ＝コントロールと比較してしわくちゃ領域への傾向）。０＝５μｌの三連サンプル中に細菌なし（接種菌の９９.９５％より多くが死滅した）。
【表４】
2008503576.tif 000005
【００８４】
これらの実験より、乳酸塩を含まないＬＦにおけるＬ．ガセリの生存は不良であったが、Ｌ．ガセリは、乳酸塩とＬＦを組み合わせた作用に対しては、大腸菌よりも高い耐性を有することが示された。
【００８５】
また、Ｇ．バジナリスおよびＰ．ビビアに対するＬＦの抗細菌活性も解析した。この実験において、これらの細菌株は、嫌気性条件にもかかわらず、我々の試験システムでは生存しなかった。（さらなる実験に関しては、以下の実施例２を参照）。
【００８６】
まとめると、ＬＦは、Ｃ．アルビカンスおよび大腸菌に対する乳酸塩の抗菌活性を強化する。（しかしながら、Ｃ．アルビカンスに関しては、活性の強さは、ＬＦだけでなく、乳酸塩濃度にも、いくらか依存する）。
【００８７】
Ｃ．アルビカンス、黄色ブドウ球菌および大腸菌に関して、希釈していない乳酸塩濃度では、ＬＦを用いずに、抗菌活性は完全であった。それにより、抗菌活性に重要なのはｐＨだけではなく、ｐＨを低くする分子のタイプも重要であるとも結論付けることができる。従って、α−ヒドロキシプロピオン酸である乳酸塩は、ＬＦ存在下において、ＨＣｌよりも活性である（図１）。
【００８８】
乳酸塩と組み合わせたＬＦが、宿主にとって、不快な臭いと抗菌性の不均衡の両方に対して有益であるように思われる。
【００８９】
実施例２
Ｇ．バジナリスおよびＰ．ビビアに対するＬＦの抗菌活性
Ｇ．バジナリスおよびＰ．ビビアに関する生存条件を得るために、殺菌性アッセイを改変した。０．２％ＢＰの代わりに、０.３４％ＢＨＩを用いた。ＬＦのみ（乳酸塩非含有）を種々の濃度でウェルに添加してこれらの菌株を解析した。プレートを２０時間インキュベートした。
試験された全ての株で、ＬＦによる増殖の阻害が観察された（図４）。
【００９０】
第二の一連の実験において、Ｇ．バジナリスの７種の株で、９９％が死滅する最小殺細菌濃度（ＭＢＣ）が測定された（表４）。これらのなかで、ＬＦ２.５ｍｇとインキュベートした場合、多少の増殖を示したものは一つだけであった。従って、Ｐ．ビビアおよびＧ．バジナリスに対するＬＦの抗菌活性も同様に確認された。
【００９１】
表４
ＬＦの殺菌活性である。ＬＦを、５回の連続工程で希釈した。９９％の死滅が達成された濃度をＭＢＣ99と定義した。
【表５】
2008503576.tif 000006
【００９２】
実施例３
乳酸塩およびｒＨＬＦの抗菌活性
ｒＨＬＦが、ヒトの乳汁から精製されたＬＦ（シグマ）と同じ程度に乳酸塩の抗菌作用を強化するかどうかを試験することを目的とした。
【００９３】
ｒＨＬＦを含む乳酸塩（ゲルベースを含まない）の抗菌活性を、マイクロプレートアッセイで解析した。微生物Ｃ．アルビカンス、大腸菌および黄色ブドウ球菌を解析した。
【００９４】
我々の第一の実験において、ｒＨＬＦとＬＦを、乳酸塩を含まない条件下で比較した（示さず）。マイクロプレートアッセイでの解析によれば、いずれのＬＦ調製物も、大腸菌に対するそれらの殺菌活性は類似していたが、ＬＦは、０.２５および０.１２５ｍｇ／ｍｌの濃度で（インキュベート２時間）、黄色ブドウ球菌とＣ．アルビカンスに対しては、いくらか高い活性を有していたことが示された。
【００９５】
乳酸塩の存在下で、希釈していない乳酸塩（５％）を用いたところ、酵母細胞が全く生存しなかったことから、Ｃ．アルビカンスに対する最大の活性が得られた（図５ａ）。しかしながら、乳酸塩濃度１％では、ｒＨＬＦ（０.５〜１.０ｍｇ／ｍｌ）は、接種菌のほぼ９９％の死滅を達成した。０.２％乳酸塩の濃度で、１ｍｇ／ｍｌのＬＦ調製物はいずれも、ほぼ９９％の死滅を達成した。大腸菌の死滅に関して、希釈していない乳酸塩（５％）では生存した細菌はなかったが、ＬＦ調製物はいずれも、１％の乳酸塩濃度で死滅を強化した（図５ｂ）。乳酸塩濃度０.２％で、乳酸塩を含まない溶液中で、２種のＬＦのうち１ｍｇ／ｍｌのｒＨＬＦが最も有効であった。
【００９６】
以下の実験で、Ｃ．アルビカンスに対する殺真菌作用に関して、より高い濃度のＬＦおよびｒＨＬＦで研究した（図６）。ｒＨＬＦを用いたところ、再度、乳酸塩濃度１％のＬＦより強い効果が得られた。０.２％の乳酸塩で、より長いインキュベート時間（２０時間、図６）の後にのみ、より強いｒＨＬＦの作用が観察された。
【００９７】
ｒＨＬＦ ２ｍｇで得られた結果（図６を参照）に基づいて、ＬＦ調製物を、膣内微生物叢由来の２種の乳酸菌種、Ｌ．ガセリおよびＬ．イエンセンに対するそれらの効果に関して解析した（図７）。インキュベート２時間で、乳酸塩の存在によって示される効果に比べて、ｒＨＬＦは、Ｌ．ガセリの生存に対する追加の効果は示さなかったが（図７ａ）、ＬＦ調製物はいずれも、１％乳酸塩でＬ．イエンセンの死滅を強化した。０.２％乳酸塩で、Ｌ．イエンセンは、ｒＨＬＦの抗菌作用により高い耐性を有していた。従って、Ｌ．イエンセンは、ＬＦ調製物の作用に対して、特に１％乳酸塩でＬ．ガセリよりも高い感受性を有し（図７ｂ）、これらの乳酸菌種はいずれも、ｒＨＬＦに対して、より高い耐性を有していた。
【００９８】
まとめると、ｒＨＬＦを乳酸塩に添加することによって相乗効果が得られた。ｒＨＬＦは、薄いＢＨＩ培地（０.３４％）で試験した場合、その抗菌活性において、ＬＦと比較していくらか弱いようであった。それに対して、ｒＨＬＦは、乳酸塩の存在下で（１または０.２％）、ＬＦよりもいくらか強かった（ただし、乳酸菌を用いた場合を除く）。乳酸菌は、健康な正常な微生物叢に属するため、この乳酸菌における逆の作用は宿主にとって有益である。この結果から、２ｍｇ／ｍｌのｒＨＬＦは、乳酸塩において適切な濃度であり得ることが示される。
【００９９】
実施例４
乳酸塩およびＬＦペプチド、ＨＬ２の抗菌活性
２３個のアミノ酸を含むＬＦ分子の抗菌性の領域に基づくペプチドフラグメントを、乳酸塩の存在下でのその殺真菌活性に関して解析した。図８からわかるように、全ての乳酸塩濃度だけでなく、乳酸塩が添加されなかった場合も、ＨＬ２の添加により酵母細胞生存率が減少した。しかしながら、希釈していない乳酸塩濃度（５％）では、ＨＬ２の非存在下でも乳酸塩の効果は完全であった。従って、短いＬＦペプチドフラグメントは、乳酸塩溶液に抗真菌活性を追加した。
【０１００】
まとめ
実施例をまとめると、乳酸塩にＬＦを添加することにより、それらの抗菌作用が強化される。
乳酸塩とＬＦ／ｒＨＬＦとを組み合わせると、大腸菌のような細菌に関して相乗効果が得られた（図５ｂ）。カンジダに対する乳酸塩の抗真菌活性に関しても、特にｒＨＬＦを乳酸塩に添加すると相乗効果が示された（図５ａおよび図６）。
【０１０１】
負電荷を有する分子（乳酸塩）を添加すると、カチオン性ＬＦとの相互作用に関して細菌表面の負電荷を有する基と競合すると予想されていたため、この相乗効果は予想外であった。一般的に、微生物の負電荷を有する表面との静電的相互作用は、ＬＦの殺菌活性における第一工程であると考えられている。例えば、リン酸塩および重炭酸塩の濃度を高めると、ヒトＬＦの殺真菌活性が減少する可能性があることが示されている（Ｓｏｕｋｋａ等，１９９２，ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ｌｅｔｔｅｒｓ  ９０：２２３〜２２８）。
【０１０２】
また、意外なことに、Ｌ．ガセリのような乳酸菌は、ｒＨＬＦ（図７ａ）が添加されたかまたは添加されていないかにかかわらず、乳酸塩中でも同様によく生存することを強調すべきである。
【図面の簡単な説明】
【０１０３】
【図１】乳酸塩（ａ）および塩化水素（ｂ）の存在下でのＣ．アルビカンスに対するＬＦの抗真菌活性を示す。ＬＦを、０.２％バクトペプトンで希釈した種々の濃度の乳酸塩、および、Ｃ．アルビカンスと共に２時間インキュベートした。その後それぞれの溶液の生菌数を解析した。
【図２】膣内微生物叢で一般的に見出される２種の乳酸菌株に対するＬＦ（２ｍｇ／ｍｌ）の作用を示す。これらの細菌を、０.３４％ＢＨＩで希釈した種々の濃度の乳酸塩中で３時間インキュベートし、さらにＣＯ2中でインキュベートした。
【図３】同じ条件下（０.３４％ＢＨＩ、ＣＯ2、インキュベート２時間）で試験されたラクトバシラス・ガセリ（Ｌ．ｇａｓｓｅｒｉ）および大腸菌に対するＬＦおよび乳酸塩の抗菌活性を示す。
【図４】種々の濃度のＬＦの存在下での、Ｇ．バジナリス（Ｇｖ１４）、および、２種のプレボテラ・ビビア（Ｐ．ｂｉｖｉａ）株（Ｐｂ５７、Ｐｂ６２）の増殖の阻害を示す。これらの細菌を、０.３４％ＢＨＩ中で、嫌気条件下で２０時間インキュベートした。増殖の阻害を分光光度法により解析した。
【図５】乳酸塩の存在下での（濃度５および１％、０.２％バクトペプトンで希釈）、Ｃ．アルビカンス、および、大腸菌に対するＬＦおよびｒＨＬＦの殺菌活性を示す。この溶液を２時間インキュベートし、その後、生菌数によって解析した。
【図６】乳酸塩の存在下での（濃度１および０.２％、０.２％バクトペプトン中）、Ｃ．アルビカンスに対するＬＦおよびｒＨＬＦの殺真菌活性を示す。この溶液を２および２０時間インキュベートし、生菌数によって解析した。
【図７】乳酸塩の存在下での（５、１および０.２％、０.２％バクトペプトンで希釈）、ＬＦ（２ｍｇ／ｍｌ）およびｒＨＬＦ（２ｍｇ／ｍｌ）の殺菌活性を示す。この溶液を２時間インキュベートし、生菌数によって解析した。
【図８】種々の濃度の乳酸塩の存在下での（５、１、０.２および０.０４％、０.２％バクトペプトンで希釈）、ＬＦペプチドＨＬ２（２５０μｇ／ｍｌ）の殺真菌活性を示す。この溶液を２時間インキュベートし、生菌数で解析した。バーの上に示されたパーセンテージは、接種菌の生存画分を示す。
【図１】
2008503576.tif 000007
【図２】
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【図３】
2008503576.tif 000009
【図４】
2008503576.tif 000010
【図５】
2008503576.tif 000011
【図６】
2008503576.tif 000012
【図７】
2008503576.tif 000013
【図８】
2008503576.tif 000014
【手続補正書】
【提出日】平成18年7月31日(2006.7.31)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
乳酸および／またはその塩、およびラクトフェリンおよび／またはそのペプチドフラグメントを含み、ペプチドフラグメントはＮ末端からラクトフェリン分子の抗菌領域を基にしており、ラクトフェリンおよび／またはそのペプチドフラグメントの濃度は、０.０００１〜１００ｍｇ／ｍｌの範囲であることを特徴とする、尿生殖路における症状を治療および／または予防するための組成物。
【請求項２】
ラクトフェリンおよび／またはそのペプチドフラグメントの濃度は、０.００１〜１０ｍｇ／ｍｌの範囲である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
ラクトフェリンおよび／またはそのペプチドフラグメントの濃度は、０.０１〜５ｍｇ／ｍｌの範囲である、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
ラクトフェリンは、組換えヒトラクトフェリンである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
ラクトフェリンのペプチドフラグメントは、合成または組換えである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
乳酸および／またはその塩の濃度は、１〜１００ｍｇ／ｍｌの範囲である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
中和剤をさらに含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
乳酸および／またはその塩、および中和剤の含量は、ｐＨが３.５〜４.５の範囲内になるような量である、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
中和剤は、水酸化ナトリウムである、請求項７または８に記載の組成物。
【請求項１０】
乳酸菌種のための増殖基質をさらに含む、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
乳酸および／またはその塩の増殖基質に対する重量比は、２０：１〜５００：１の範囲である、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
乳酸および／またはその塩の増殖基質に対する重量比は５０：１である、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
増殖基質は、α（１−６）分岐を含むα（１−４）グルカンである、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
増殖基質は、グリコーゲン、アミロペクチン、グルコース、デキストロース、およびラクトースからなる群より選択される、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
不活性な媒体をさらに含む、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１６】
不活性な媒体は、プロピレングリコール、または、ポリエチレングリコールである、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
増粘剤をさらに含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１８】
増粘剤は、セルロースのメチルヒドロキシプロピルエーテルである、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
クリーム、ゲル、膣坐剤、錠剤、または、スプレーの形態である、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２０】
尿生殖路における症状を予防および／または治療するための医薬品を製造するための、乳酸および／またはその塩、およびラクトフェリンおよび／またはそのペプチドフラグメントを含み、該ペプチドフラグメントはＮ末端からラクトフェリン分子の抗菌領域を基にしている組成物の使用。
【請求項２１】
医薬品は、抗菌活性を有する、請求項２０に記載の使用。
【請求項２２】
症状は、尿生殖路における高められたｐＨおよび／または乱れた微生物叢を含む、請求項２０または２１に記載の使用。
【請求項２３】
乱れた微生物叢は、異常に低いレベルの乳酸菌と組み合わせた、異常に高いレベルのＢＶ関連細菌（嫌気性グラム陰性菌、嫌気性グラム陽性球菌、ブドウ球菌、連鎖球菌、大腸菌）および／またはカンジダを特徴とする、請求項２２に記載の使用。
【請求項２４】
症状は、細菌性膣症、中間的膣内微生物叢、および、酵母感染症からなる群より選択される、請求項２０〜２３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２５】
尿生殖路における症状を予防および／または治療する方法であって、それを必要とする患者に、医薬上有効量の乳酸および／またはその塩、およびラクトフェリンおよび／またはそのペプチドフラグメントを含み、該ペプチドフラグメントはＮ末端からラクトフェリン分子の抗菌領域を基にしている組成物を投与することを含む、上記方法。
【請求項２６】
症状は、尿生殖路における高められたｐＨおよび／または乱れた微生物叢を含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
乱れた微生物叢は、異常に低いレベルの乳酸菌と組み合わせた、異常に高いレベルのＢＶ関連細菌（嫌気性グラム陰性菌、嫌気性グラム陽性球菌、ブドウ球菌、連鎖球菌、大腸菌）および／またはカンジダを特徴とする、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
症状は、細菌性膣症、中間的膣内微生物叢、および、酵母感染症からなる群より選択される、請求項２５〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【国際調査報告】
2008503576.tif 000015
2008503576.tif 000016
2008503576.tif 000017
2008503576.tif 000018