(57)【要約】  本発明は、本明細書ではアンゲリルまたはチグリルリン酸エステルと称されるγδＴ細胞活性化特性を有する新しい種類の化合物と、これらの化合物のいずれかを含む組成物と、これらの化合物を投与するステップを含む被験者の免疫応答の制御方法とに関する。
2008534489.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2008534489.tif 000048
（式中、Ｃａｔ＋は、１つの（またはいくつかの、同じまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表し、
ｍは、１〜３の整数であり、
Ｂは、Ｏ、ＮＨ、または加水分解することができるその他の基であり、
Ａは、Ｏ、ＮＨ、ＣＨＦ、ＣＦ２またはＣＨ２、あるいはその他の立体的に等価の基であり、
Ｗは、Ｃ−Ｒ６またはＮであり、
Ｒ７は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、あるいはＣＦ３などのその他の立体的に等価の基であり、
同じまたは異なるＲ３、Ｒ４、およびＲ６は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、あるいはＣＦ３などのその他の立体的に等価の基であり、
Ｒ５は、（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、アルデヒド、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコール、または（Ｃ２〜Ｃ３）エステルであり、そして
Ｙ＝Ｏ−Ｃａｔ＋、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、基−Ａ−Ｒ（ここでＲは、直鎖状、分枝状、または環状、芳香族または非芳香族、飽和または不飽和である）、任意で少なくとも１つのヘテロ原子で中断されたＣ１〜Ｃ５０炭化水素基であり、前記炭化水素基は、アルキル、アルキレニル、またはアルキニル、好ましくはアルキルまたはアルキレンを含み、これらは、アルキル、アルキレニル、アルキニル、エポキシアルキル、アリール、複素環、アルコキシ、アシル、アルコール、カルボン酸基（−ＣＯＯＨ）、エステル、アミン、アミノ基（−ＮＨ２）、アミド（−ＣＯＮＨ２）、イミン、ニトリル、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アルデヒド基（−ＣＨＯ）、ハロゲン、ハロゲノアルキル、チオール（−ＳＨ）、チオアルキル、スルホン、スルホキシド、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される１つまたはいくつかの置換基で置換可能であり、
そして式（ＩＩ）の基Ｒ５と、部分−ＣＲ３Ｒ４−Ａ−［ＰＯＯＢ］ｍ−ＰＯＯＹとは、Ｚ（またはシス）配置である）
のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項２】
前記活性化剤が、式（ＩＩ）：
【化２】
2008534489.tif 000049
（式中、Ｃａｔ＋、ｍ、Ｂ、Ａ、Ｒ５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、およびＹは請求項１と同じ意味を有する）の化合物である請求項１に記載のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項３】
前記活性化剤が、式（ＩＩＩ）：
【化３】
2008534489.tif 000050
（式中、Ｃａｔ＋、ｍ、Ｂ、Ａ、Ｒ５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、およびＹは、請求項１と同じ意味を有する）の化合物である請求項１に記載のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項４】
前記活性化剤が、式（Ｖ）：
【化４】
2008534489.tif 000051
（式中、Ｃａｔ＋、ｍ、Ｂ、Ａ、Ｗ、Ｒ５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、およびＹは、請求項１と同じ意味を有する）の化合物である請求項１に記載のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項５】
前記活性化剤が、式（ＩＶ）：
【化５】
2008534489.tif 000052
（式中、Ｃａｔ＋、ｍ、Ｂ、Ａ、Ｗ、Ｒ５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、およびＹは、請求項１と同じ意味を有する）の化合物である請求項１に記載のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項６】
前記活性化剤が、式（ＶＩ）：
【化６】
2008534489.tif 000053
（式中、Ｃａｔ＋、ｍ、Ｂ、Ａ、Ｗ、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、およびＹは、請求項１と同じ意味を有する）の化合物である請求項４または５に記載のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項７】
Ｒ５が−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨＯ、−ＣＯ−ＣＨ３または−ＣＯ−ＯＣＨ３である請求項１〜３のいずれか一項に記載のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項８】
Ｒ５が−ＣＨ２−ＯＨである請求項７に記載のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項９】
Ｒ７がＣＨ３、あるいはＣＨ２Ｆ、ＣＦ２ＨまたはＣＦ３などのその立体的に等価の基である請求項１〜３、７および８のいずれか一項に記載のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項１０】
Ｒ７がＣＨ３である請求項９に記載のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項１１】
ＡがＯである請求項１〜１０のいずれか一項に記載のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項１２】
ＡがＮＨである請求項１〜１０のいずれか一項に記載のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項１３】
ＡがＣＨＦ、ＣＦ２またはＣＨ２である請求項１〜１０のいずれか一項に記載のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項１４】
ＢがＯである請求項１〜１３のいずれか一項に記載のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項１５】
ｍが１である請求項１〜１４のいずれか一項に記載のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項１６】
ＹがＯ−Ｃａｔ＋またはヌクレオシド、好ましくはＯ−Ｃａｔ＋である請求項１〜１５のいずれか一項に記載のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項１７】
前記活性化剤が、式（ＸＩＩ）：
【化７】
2008534489.tif 000054
の化合物である請求項５に記載のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項１８】
前記活性化剤が、式（ＸＩＩＩ）
【化８】
2008534489.tif 000055
の化合物である請求項５に記載のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項１９】
前記活性化剤が、式（ＸＩＶ）：
【化９】
2008534489.tif 000056
の化合物である請求項５に記載のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項２０】
請求項１〜１９のいずれか一項に記載のγδＴ細胞活性化剤を含む医薬組成物。
【請求項２１】
医薬としての請求項１〜１９のいずれか一項に記載のγδＴ細胞活性化剤。
【請求項２２】
ヒト被験者においてγδＴ細胞を制御するための医薬組成物の製造のための、請求項１〜１９のいずれか一項に記載のγδＴ細胞活性化剤の使用。
【請求項２３】
癌、感染症、自己免疫疾患またはアレルギー性疾患を患っているか、あるいは患いやすい被験者を処置するための医薬組成物の製造のための、請求項１〜１９のいずれか一項に記載のγδＴ細胞活性化剤の使用。
【請求項２４】
前記癌が固形腫瘍である請求項１３に記載の使用。
【請求項２５】
請求項１〜１９のいずれか一項に記載のγδＴ細胞活性化剤のワクチンアジュバントとしての使用。
【請求項２６】
請求項１〜１９のいずれか一項に記載のγδＴ細胞活性化剤をワクチンアジュバントとして含むワクチン組成物。
【請求項２７】
請求項１〜１９のいずれか一項に記載のγδＴ細胞活性化剤とγδＴ細胞を接触させることを含む、γδＴ細胞の活性化方法。
【請求項２８】
前記γδＴ細胞が前記γδＴ細胞活性化剤とインビトロで接触された請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
請求項２７または２８の方法に従って活性化されるγδＴ細胞。
【請求項３０】
医薬組成物の製造のための請求項２９に記載のγδＴ細胞の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、本明細書ではアンゲリルリン酸エステルと称されるγδＴ細胞活性化特性を有する新しい種類の化合物と、これらの化合物のいずれかを含む組成物と、これらの化合物を投与するステップを含む被験者の免疫応答の制御方法とに関する。
【背景技術】
【０００２】
ほとんどのヒト末梢血γδＴ細胞は、Ｖγ９／Ｖδ２遺伝子によりコードされるγδＴＣＲヘテロ二量体、ＭＨＣクラスＩのためのいくつかのＮＫ系受容体を発現し、ＣＤ４やＣＤ８はほとんど発現しない。これらの細胞は、ウィルス感染細胞（非特許文献１、２）、寄生虫感染細胞（非特許文献３）、または腫瘍細胞（非特許文献４）に対して強力な非ＭＨＣ拘束性の細胞溶解活性を示すことが明らかにされている。またこれらの細胞は、結核、マラリア、野兎病、大腸菌症などのいくつかの無関係の感染症との関連でも、そしてＢ細胞腫瘍によっても、生理学的に増幅される（非特許文献５をレビューのために参照）。
【０００３】
その抗感染活性のほかに、短期細胞傷害性アッセイにおいて、Ｖγ９／Ｖδ２Ｔ細胞は、非常に多様な起源：Ｂ細胞、Ｔ細胞または骨髄系からのリンパ腫および白血病（非特許文献６、非特許文献７、非特許文献８、非特許文献９、非特許文献１０）、乳癌（非特許文献１１）、神経膠芽腫（非特許文献１２、非特許文献１３）、胃細胞癌（非特許文献１４、非特許文献１５、非特許文献１６）、上咽頭癌（非特許文献１７）、肺腺癌（非特許文献１８）からの様々な種類の腫瘍細胞株を溶解可能であることが明らかにされた。
【０００４】
微生物では、Ｖγ９／Ｖδ２＋リンパ球は、自然のリン酸化抗原（ｐｈｏｓｐｈｏａｎｔｉｇｅｎ）とも呼ばれる非ペプチド抗原およびアルキルアミンの構造的に関連するセットを自然発症的に認識する。Ｂ細胞腫瘍において、γδＴ細胞の抗原の性質は同定されないままである。またＶγ９／Ｖδ２＋リンパ球は、事前に曝露することなく、様々なウィルス感染細胞型、活性化細胞型または腫瘍細胞型に応答する。もう一度言うと、これらの状況では、原因である抗原は未知のままである（非特許文献５をレビューのために参照）。インビトロでは、Ｖγ９／Ｖδ２  ２＋リンパ球は、治療用アミノビスホスホン酸（非特許文献１９においてレビューされる）などの合成薬に応答し、そのインビトロ活性化をもたらすことが明らかにされている。自然の非ペプチド抗原の認識は、Ｖγ９−およびＶδ２−ＣＤＲ３領域の両方に位置するアミノ酸残基を介して、γδＴＣＲによって仲介される。ＣＤ１またはＭＨＣ分子による処理も提示も関係されないが、非ペプチド抗原によるＶγ９／Ｖδ２＋リンパ球の活性化は、細胞間接触を必要とするようである（非特許文献２０、非特許文献２１、非特許文献２２、非特許文献２３）。
【０００５】
刺激的な細菌抗原は、ほとんどの場合にはリン酸基が存在するために典型的にリン酸化抗原と呼ばれる小さい非ペプチド化合物（非特許文献２４、非特許文献２５、非特許文献３、非特許文献２６、非特許文献２７）であることが明らかにされている。
【０００６】
また、Ｖγ９／Ｖδ２Ｔ細胞は、微生物および哺乳類の両方の細胞に共通である従来のメバロン酸経路により産生されるイソペンテニルピロリン酸またはＩＰＰ（非特許文献２８、非特許文献２７）などの内在性代謝産物（マイクロモルの範囲で作用する）によっても活性化され得る。後者の細胞におけるＩＰＰの産生は、細胞ストレスおよび形質転換の状況では上方制御され得る。特に、最近の研究では、腫瘍細胞におけるＩＰＰの内在性の産生レベルと、Ｖγ９／Ｖδ２Ｔ細胞性の溶解に対するその感受性との間の相関関係が報告されている（非特許文献２９）。
【０００７】
また、Ｖγ９／Ｖδ２Ｔ細胞認識に対するメバロン酸経路の内在性代謝産物の直接的な寄与と一致して、ＩＰＰの生合成を防止する薬剤（スタチンなど）またはＩＰＰの蓄積をもたらす薬剤（アミノビスホスホン酸など、以下を参照）による細胞の処置はそれぞれ、処置細胞のＶγ９／Ｖδ２Ｔ細胞刺激特性の低下または増強を引き起こす（非特許文献２９、非特許文献３０）。
【０００８】
アミノビスホスホン酸は、メバロン酸経路の酵素であるＦＰＰシンターゼを阻害すると考えられ、その阻害は、ＩＰＰなどの上流イソプレノイド脂質の蓄積および放出を引き起こす。アミノビスホスホン酸化合物は、癌患者の骨転移を処置するためのヒトの治療において使用され、リン酸化抗原アゴニストにより誘発されるヒトＶγ９／Ｖδ２＋リンパ球のインビボ拡張の最初の一連の証拠を提供し、６０〜９０ｍｇのパミドロン酸の治療的な静脈内注射の後、多発性骨髄腫のある成人において１〜３週間以内に循環γδＴ細胞の増大が報告された（非特許文献３１）。しかしながら、このような化合物は抗原提示細胞による提示を必要とし、純粋なＶγ９／Ｖδ２Ｔ細胞培養物におけるサイトカイン分泌によって評価されるように、Ｖγ９／Ｖδ２Ｔ細胞活性の実質的な刺激を生じることができない。さらにパミドロン酸は、γδＴ細胞の非常に低い活性化効力を示し、最良でもわずか２倍のγδＴ細胞数の増大しか得られないと報告された（非特許文献３２）。
【０００９】
近年、γδＴ細胞を直接活性化するいくつかの非常に強力なγδＴ細胞活性化ピロリン酸含有化合物が記載されている。特に、ホスホハロヒドリンおよびホスホエポキシド化合物が、Ｊ．Ｊ．フルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ）のグループによって記載された。ＢｒＨＰＰ（ブロモヒドリンピロリン酸）とも呼ばれる（Ｒ，Ｓ）−３−（ブロモメチル）−３−ブタノール−１−イル−ジホスフェートは、エキソビボでγδＴ細胞の増殖を刺激するために、進行中のヒトの臨床研究において現在使用されている。高い比活性（ナノモル以上の範囲のＥＣ５０）を有するその他のピロリン酸含有化合物は、「ローマー（Ｒｏｈｍｅｒ）」または「非メバロン酸」経路と呼ばれる原核および真核微生物に特異的なイソプレノイド生合成経路によって産生される（非特許文献３３、非特許文献３４、非特許文献３５、非特許文献３６、非特許文献３７）。
【非特許文献１】ポシア（Ｐｏｃｃｉａ），Ｆ．，シプリアニ（Ｃｉｐｒｉａｎｉ），Ｂ．，ベンデッティ（Ｖｅｎｄｅｔｔｉ），Ｓ．，コリッツィ（Ｃｏｌｉｚｚｉ），Ｖ．，ポケット（Ｐｏｑｕｅｔ），Ｙ．，バティスティニ（Ｂａｔｔｉｓｔｉｎｉ），Ｌ．，ロペス−ボテ（Ｌｏｐｅｚ−Ｂｏｔｅｔ），Ｍ．，フルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．，およびゴウギオン（Ｇｏｕｇｅｏｎ），Ｍ．Ｌ．（１９９７年ａ）．ＣＤ９４／ＮＫＧ２  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｃｏｍｐｌｅｘ  ｍｏｄｕｌａｔｅｓ  ｂｏｔｈ  ａｎｔｉ−ｖｉｒａｌ  ａｎｄ  ａｎｔｉ−ｔｕｍｏｒａｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  ｏｆ  ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌ  ｐｈｏｓｐｈｏａｎｔｉｇｅｎ−ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｖ  ｇａｍｍａ  ９Ｖ  ｄｅｌｔａ  ２  Ｔ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １５９，６００９−６０１７頁
【非特許文献２】ポシア（Ｐｏｃｃｉａ），Ｆ．，マルコフスキ（Ｍａｌｋｏｖｓｋｙ），Ｍ．，ゴウギオン（Ｇｏｕｇｅｏｎ），Ｍ．Ｌ．，ボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．，ロペス−ボテ（Ｌｏｐｅｚ−Ｂｏｔｅｔ），Ｍ．，フルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．，およびコリッツィ（Ｃｏｌｉｚｚｉ），Ｖ．（１９９７年ｂ）．Ｇａｍｍａｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｒ  ａｎｅｒｇｙ  ｄｕｒｉｎｇ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ：  ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｎｏｎｐｅｐｔｉｄｉｃ  ＴＣＲ  ｌｉｇａｎｄｓ  ａｎｄ  ＨＬＡ  ｃｌａｓｓ  Ｉ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ．Ｊ  Ｌｅｕｋｏｃ  Ｂｉｏｌ  ６２，２８７−２９１頁
【非特許文献３】コンスタント（Ｃｏｎｓｔａｎｔ），Ｐ．，ポケット（Ｐｏｑｕｅｔ），Ｙ．，ペイラット（Ｐｅｙｒａｔ），Ｍ．Ａ．，ダボドー（Ｄａｖｏｄｅａｕ），Ｆ．，ボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．，およびフルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．（１９９５年）．Ｔｈｅ  ａｎｔｉｔｕｂｅｒｃｕｌｏｕｓ  Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｏｖｉｓ  ＢＣＧ  ｖａｃｃｉｎｅ  ｉｓ  ａｎ  ａｔｔｅｎｕａｔｅｄ  ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｐｒｏｄｕｃｅｒ  ｏｆ  ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｅｄ  ｎｏｎｐｅｐｔｉｄｉｃ  ａｎｔｉｇｅｎｓ  ｆｏｒ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ  ６３，４６２８−４６３３頁
【非特許文献４】フルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．，およびボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．（１９９６年）．Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ｐｈｏｓｐｈｏａｎｔｉｇｅｎｓ．Ｒｅｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌ，６６ｔｈ  Ｆｏｒｕｍ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１４７，３３８−３４７頁
【非特許文献５】ハイディ（Ｈａｙｄａｙ），Ａ．Ｃ．（２０００年）．［ｇａｍｍａ］［ｄｅｌｔａ］  ｃｅｌｌｓ：  ａ  ｒｉｇｈｔ  ｔｉｍｅ  ａｎｄ  ａ  ｒｉｇｈｔ  ｐｌａｃｅ  ｆｏｒ  ａ  ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ  ｔｈｉｒｄ  ｗａｙ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ．Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １８，９７５−１０２６頁
【非特許文献６】フィッシュ（Ｆｉｓｃｈ），Ｐ．，モリス（Ｍｏｒｉｓ），Ａ．，ラメンジー（Ｒａｍｍｅｎｓｅｅ），Ｈ．Ｇ．，およびハンドグリティンガー（Ｈａｎｄｇｒｅｔｉｎｇｅｒ），Ｒ．（２０００年）．Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ＭＨＣ  ｃｌａｓｓ  Ｉ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｏｎ  ｇａｍｍａｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｔｕｍｏｕｒ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ａｎｄ  ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｔｏｄａｙ  ２１，１８７−１９１頁
【非特許文献７】セリン（Ｓｅｌｉｎ），Ｌ．Ｋ．，スチュアート（Ｓｔｅｗａｒｔ），Ｓ．，シェン（Ｓｈｅｎ），Ｃ．，マオ（Ｍａｏ），Ｈ．Ｑ．，およびウィルキンス（Ｗｉｌｋｉｎｓ），Ｊ．Ａ．（１９９２年）．Ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ｔｈｅ  ｔｕｍｏｕｒ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅ  ＲＰＭＩ  ８２２６：  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｉｔｙ  ｏｆ  ｃｌｏｎａｌ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ＧｒｏＥＬ  ｈｅａｔ  ｓｈｏｃｋ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ．Ｓｃａｎｄ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ３６，１０７−１１７頁
【非特許文献８】シカード（Ｓｉｃａｒｄ），Ｈ．，アル・サーティ（Ａｌ  Ｓａａｔｉ），Ｔ．，デルソル（Ｄｅｌｓｏｌ），Ｇ．，およびフルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．（２００１年）．Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｐｈｏｓｐｈｏａｎｔｉｇｅｎｓ  ｅｎｈａｎｃｅ  ｈｕｍａｎ  Ｖｇａｍｍａ９Ｖｄｅｌｔａ２  Ｔ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  ｋｉｌｌｉｎｇ  ｏｆ  ｎｏｎ−Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓ  Ｂ  ｌｙｍｐｈｏｍａ．Ｍｏｌ  Ｍｅｄ  ７，７１１−７２２頁
【非特許文献９】スターム（Ｓｔｕｒｍ），Ｅ．，ブラークマン（Ｂｒａａｋｍａｎ），Ｅ．，フィッシュ（Ｆｉｓｃｈ），Ｐ．，ブルーデンヒル（Ｖｒｅｕｇｄｅｎｈｉｌ），Ｒ．Ｊ．，ソンデル（Ｓｏｎｄｅｌ），Ｐ．，およびボルフィス（Ｂｏｌｈｕｉｓ），Ｒ．Ｌ．（１９９０年）．Ｈｕｍａｎ  Ｖ  ｇａｍｍａ  ９−Ｖ  ｄｅｌｔａ  ２  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  ｓｈｏｗ  ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ｔｏ  Ｄａｕｄｉ  Ｂｕｒｋｉｔｔ’ｓ  ｌｙｍｐｈｏｍａ  ｃｅｌｌｓ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １４５，３２０２−３２０８頁
【非特許文献１０】ツェン（Ｚｈｅｎｇ），Ｂ．，ラム（Ｌａｍ），Ｃ．，イム（Ｉｍ），Ｓ．，ファン（Ｈｕａｎｇ），Ｊ．，ルク（Ｌｕｋ），Ｗ．，ラウ（Ｌａｕ），Ｓ．Ｙ．，ヤウ（Ｙａｕ），Ｋ．Ｋ．，ウォン（Ｗｏｎｇ），Ｃ．，ヤオ（Ｙａｏ），Ｋ．，およびン（Ｎｇ），Ｍ．Ｈ．（２００１年ａ）．Ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｔｕｍｏｕｒ  ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  ＩＬ−７  ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ  ｏｆ  ＣＤ５６（−）ａｎｄ  ＣＤ５６（＋）ｓｕｂｓｅｔｓ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｓｃａｎｄ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ５３，４０−４８頁
【非特許文献１１】バンク（Ｂａｎｋ），Ｉ．，ブック（Ｂｏｏｋ），Ｍ．，フサール（Ｈｕｓｚａｒ），Ｍ．，バラム（Ｂａｒａｍ），Ｙ．，シュニレー（Ｓｃｈｎｉｒｅｒ），Ｉ．，およびブレンナー（Ｂｒｅｎｎｅｒ），Ｈ．（１９９３年）．Ｖ  ｄｅｌｔａ  ２＋  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  ａｒｅ  ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  ｔｏ  ｔｈｅ  ＭＣＦ  ７  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅ  ａｎｄ  ｃａｎ  ｂｅ  ｄｅｔｅｃｔｅｄ  ａｍｏｎｇ  ｔｈｅ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｔｈａｔ  ｉｎｆｉｌｔｒａｔｅ  ｂｒｅａｓｔ  ｔｕｍｏｒｓ．Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ  ６７，１７−２４頁
【非特許文献１２】フジミヤ（Ｆｕｊｉｍｉｙａ），Ｙ．，スズキ（Ｓｕｚｕｋｉ），Ｙ．，カタクラ（Ｋａｔａｋｕｒａ），Ｒ．，ミヤギ（Ｍｉｙａｇｉ），Ｔ．，ヤマグチ（Ｙａｍａｇｕｃｈｉ），Ｔ．，ヨシモト（Ｙｏｓｈｉｍｏｔｏ），Ｔ．，およびエビナ（Ｅｂｉｎａ），Ｔ．（１９９７年）．Ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １２  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｂｌｏｏｄ  ＣＤ３（＋）ＣＤ５６（＋）ａｎｄ  ＣＤ３（＋）ＣＤ５６（−）ｇａｍｍａｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ  ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ３，６３３−６４３頁
【非特許文献１３】ヤマグチ（Ｙａｍａｇｕｃｈｉ），Ｔ．，フジミヤ（Ｆｕｊｉｍｉｙａ），Ｙ．，スズキ（Ｓｕｚｕｋｉ），Ｙ．，カタクラ（Ｋａｔａｋｕｒａ），Ｒ．，およびエビナ（Ｅｂｉｎａ），Ｔ．（１９９７年）．Ａ  ｓｉｍｐｌｅ  ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｂｌｏｏｄ  ｏｆ  ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｕｓｉｎｇ  ｓｏｌｉｄ−ｐｈａｓｅ  ａｎｔｉ−ＣＤ３  ａｎｔｉｂｏｄｙおよびｓｏｌｕｂｌｅ  ＩＬ−２．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２０５，１９−２８頁
【非特許文献１４】チョーダリー（Ｃｈｏｕｄｈａｒｙ），Ａ．，ダボドー（Ｄａｖｏｄｅａｕ），Ｆ．，モロー（Ｍｏｒｅａｕ），Ａ．，ペイラット（Ｐｅｙｒａｔ），Ｍ．Ａ．，ボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．，およびジョテレウ（Ｊｏｔｅｒｅａｕ），Ｆ．（１９９５年）．Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ  ｔｕｍｏｒ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  ｔｕｍｏｒ−ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  ｆｒｏｍ  ｒｅｎａｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １５４，３９３２−３９４０頁
【非特許文献１５】コバヤシ（Ｋｏｂａｙａｓｈｉ），Ｈ．，タナカ（Ｔａｎａｋａ），Ｙ．，ヤギ（Ｙａｇｉ），Ｊ．，トーマ（Ｔｏｍａ），Ｈ．，およびウチヤマ（Ｕｃｈｉｙａｍａ），Ｔ．（２００１年）．Ｇａｍｍａ／ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｐｒｏｖｉｄｅ  ｉｎｎａｔｅ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ａｇａｉｎｓｔ  ｒｅｎａｌ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ  ５０，１１５−１２４頁
【非特許文献１６】ミトロプーロス（Ｍｉｔｒｏｐｏｕｌｏｓ），Ｄ．，クーイ（Ｋｏｏｉ），Ｓ．，ロドリゲス−ビラヌエバ（Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ−Ｖｉｌｌａｎｕｅｖａ），Ｊ．，およびプラツォウカス（Ｐｌａｔｓｏｕｃａｓ），Ｃ．Ｄ．（１９９４年）．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｆｒｅｓｈ（ｕｎｃｕｌｔｕｒｅｄ）ｔｕｍｏｕｒ−ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ（ＴＩＬ）ａｎｄ  ＴＩＬ−ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅｓ  ｆｒｏｍ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｒｅｎａｌ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｃｌｉｎ  Ｅｘｐ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ９７，３２１−３２７頁
【非特許文献１７】ツェン（Ｚｈｅｎｇ），Ｂ．Ｊ．，チャン（Ｃｈａｎ），Ｋ．Ｗ．，イム（Ｉｍ），Ｓ．，チュア（Ｃｈｕａ），Ｄ．，シャム（Ｓｈａｍ），Ｊ．Ｓ．，ティン（Ｔｉｎ），Ｐ．Ｃ．，ヒー（Ｈｅ），Ｚ．Ｍ．，およびン（Ｎｇ），Ｍ．Ｈ．（２００１年ｂ）．Ａｎｔｉ−ｔｕｍｏｒ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｇａｍｍａｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ａ  ｍｏｕｓｅ  ｔｕｍｏｒ  ｍｏｄｅｌ．Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ  ９２，４２１−４２５頁
【非特許文献１８】フェラリーニ（Ｆｅｒｒａｒｉｎｉ），Ｍ．，ヘルタイ（Ｈｅｌｔａｉ），Ｓ．，プパ（Ｐｕｐａ），Ｓ．Ｍ．，メルナード（Ｍｅｒｎａｒｄ），Ｓ．，およびゾッチ（Ｚｏｃｃｈｉ），Ｒ．（１９９６年）．Ｋｉｌｌｉｎｇ  ｏｆ  ｌａｍｉｎｉｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｈｕｍａｎ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｃｅｒｓ  ｂｙ  ｔｕｍｏｒ  ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  ｂｅａｒｉｎｇ  ｇａｍｍａｄｅｌｔａ（＋）ｔ−ｃｅｌｌ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｊ  Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ  ８８，４３６−４４１頁
【非特許文献１９】エスピノーサ（Ｅｓｐｉｎｏｓａ），Ｅ．，ベルマント（Ｂｅｌｍａｎｔ），Ｃ．，ポント（Ｐｏｎｔ），Ｆ．，ルシアニ（Ｌｕｃｉａｎｉ），Ｂ．，パウポット（Ｐｏｕｐｏｔ），Ｒ．，ロマーニャ（Ｒｏｍａｇｎｅ），Ｆ．，ブライリー（Ｂｒａｉｌｌｙ），Ｈ．，ボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．，およびフルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．（２００１年ａ）．Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｂｒｏｍｏｈｙｄｒｉｎ  ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ，ａ  ｐｏｔｅｎｔ  ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７６，１８３３７−１８３４４頁
【非特許文献２０】ラング（Ｌａｎｇ），Ｆ．，ペイラット（Ｐｅｙｒａｔ），Ｍ．Ａ．，コンスタント（Ｃｏｎｓｔａｎｔ），Ｐ．，ダボドー（Ｄａｖｏｄｅａｕ），Ｆ．，ディビッド−アメリン（Ｄａｖｉｄ−Ａｍｅｌｉｎｅ），Ｊ．，ポケット（Ｐｏｑｕｅｔ），Ｙ．，バイ（Ｖｉｅ），Ｈ．，フルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．，およびボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．（１９９５年）．Ｅａｒｌｙ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  Ｖ  ｇａｍｍａ  ９Ｖ  ｄｅｌｔａ  ２  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｂｒｏａｄ  ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  ＴＮＦ  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｂｙ  ｎｏｎｐｅｐｔｉｄｉｃ  ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｌｉｇａｎｄｓ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １５４，５９８６−５９９４頁
【非特許文献２１】モリタ（Ｍｏｒｉｔａ），Ｃ．Ｔ．，ベックマン（Ｂｅｃｋｍａｎ），Ｅ．Ｍ．，ブコウスキ（Ｂｕｋｏｗｓｋｉ），Ｊ．Ｆ．，タナカ（Ｔａｎａｋａ），Ｙ．，バンド（Ｂａｎｄ），Ｈ．，ブルーム（Ｂｌｏｏｍ），Ｂ．Ｒ．，ゴラン（Ｇｏｌａｎ），Ｄ．Ｅ．，およびブレンナー（Ｂｒｅｎｎｅｒ），Ｍ．Ｂ．（１９９５年）．Ｄｉｒｅｃｔ  ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｏｎｐｅｐｔｉｄｅ  ｐｒｅｎｙｌ  ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ａｎｔｉｇｅｎｓ  ｔｏ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ３，４９５−５０７頁
【非特許文献２２】ミヤガワ（Ｍｉｙａｇａｗａ），Ｆ．，タナカ（Ｔａｎａｋａ），Ｙ．，ヤマシタ（Ｙａｍａｓｈｉｔａ），Ｓ．，およびミナト（Ｍｉｎａｔｏ），Ｎ．（２００１年）．Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ａｎｔｉｇｅｎ  ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｍｏｎｏｃｙｔｅ  ｌｉｎｅａｇｅ  ｃｅｌｌｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ａｍｉｎｏｂｉｓｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅ  ａｎｔｉｇｅｎ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６６，５５０８−５５１４頁
【非特許文献２３】ロハス（Ｒｏｊａｓ），Ｒ．Ｅ．，トレス（Ｔｏｒｒｅｓ），Ｍ．，フルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．，ハーディング（Ｈａｒｄｉｎｇ），Ｃ．Ｖ．，およびブーム（Ｂｏｏｍ），Ｗ．Ｈ．（２００２年）．Ｐｈｏｓｐｈｏａｎｔｉｇｅｎ  ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ  ｔｏ  ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ−ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｖｇａｍｍａ９Ｖｄｅｌｔａ２＋  Ｔ  ｃｅｌｌｓ：  ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｃｈｌｏｒｏｑｕｉｎｅ．Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ  ７０，４０１９−４０２７頁
【非特許文献２４】ベール（Ｂｅｈｒ），Ｃ．，パウポット（Ｐｏｕｐｏｔ），Ｒ．，ペイラット（Ｐｅｙｒａｔ），Ｍ．Ａ．，ポケット（Ｐｏｑｕｅｔ），Ｙ．，コンスタント（Ｃｏｎｓｔａｎｔ），Ｐ．，ドゥボイス（Ｄｕｂｏｉｓ），Ｐ．，ボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．，およびフルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．（１９９６年）．Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ  ｓｔｉｍｕｌｉ  ｆｏｒ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ａｒｅ  ｒｅｌａｔｅｄ  ｔｏ  ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｅｄ  ａｎｔｉｇｅｎｓ  ｏｆ  ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａ．Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ  ６４，２８９２−２８９６頁
【非特許文献２５】ベルマント（Ｂｅｌｍａｎｔ），Ｃ．，エスピノーサ（Ｅｓｐｉｎｏｓａ），Ｅ．，ハレリー（Ｈａｌａｒｙ），Ｆ．，タン（Ｔａｎｇ），Ｙ．，ペイラット（Ｐｅｙｒａｔ），Ｍ．Ａ．，シカード（Ｓｉｃａｒｄ），Ｈ．，コジコウスキ（Ｋｏｚｉｋｏｗｓｋｉ），Ａ．，ベロー（Ｂｕｅｌｏｗ），Ｒ．，パウポット（Ｐｏｕｐｏｔ），Ｒ．，ボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．，およびフルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．（２０００年）．Ａ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｂａｓｉｓ  ｆｏｒ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｏｎｐｅｐｔｉｄｅ  ａｎｔｉｇｅｎｓ  ｂｙ  ｈｕｍａｎ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｆａｓｅｂ  Ｊ  １４，１６６９−１６７０頁
【非特許文献２６】ポケット（Ｐｏｑｕｅｔ），Ｙ．，クロカ（Ｋｒｏｃａ），Ｍ．，ハレリー（Ｈａｌａｒｙ），Ｆ．，ステンマーク（Ｓｔｅｎｍａｒｋ），Ｓ．，ペイラット（Ｐｅｙｒａｔ），Ｍ．Ａ．，ボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．，フルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．，およびシューステット（Ｓｊｏｓｔｅｄｔ），Ａ．（１９９８年）．Ｅｘｐａｎｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｖｇａｍｍａ９  Ｖｄｅｌｔａ２  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｉｓ  ｔｒｉｇｇｅｒｅｄ  ｂｙ  Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ  ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｐｈｏｓｐｈｏａｎｔｉｇｅｎｓ  ｉｎ  ｔｕｌａｒｅｍｉａ  ｂｕｔ  ｎｏｔ  ａｆｔｅｒ  ｔｕｌａｒｅｍｉａ  ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ．Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ  ６６，２１０７−２１１４頁
【非特許文献２７】タナカ（Ｔａｎａｋａ），Ｙ．，モリタ（Ｍｏｒｉｔａ），Ｃ．Ｔ．，ニーブス（Ｎｉｅｖｅｓ），Ｅ．，ブレンナー（Ｂｒｅｎｎｅｒ），Ｍ．Ｂ．，およびブルーム（Ｂｌｏｏｍ），Ｂ．Ｒ．（１９９５年）．Ｎａｔｕｒａｌ  ａｎｄ  ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｎｏｎ−ｐｅｐｔｉｄｅ  ａｎｔｉｇｅｎｓ  ｒｅｃｏｇｎｉｚｅｄ  ｂｙ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｎａｔｕｒｅ  ３７５，１５５−１５８頁
【非特許文献２８】エスピノーサ（Ｅｓｐｉｎｏｓａ），Ｅ．，ベルマント（Ｂｅｌｍａｎｔ），Ｃ．，シカード（Ｓｉｃａｒｄ），Ｈ．，パウポット（Ｐｏｕｐｏｔ），Ｒ．，ボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．，およびフルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．（２００１年ｂ）．Ｙ２Ｋ＋１  ｓｔａｔｅ−ｏｆ−ｔｈｅ−ａｒｔ  ｏｎ  ｎｏｎ−ｐｅｐｔｉｄｅ  ｐｈｏｓｐｈｏａｎｔｉｇｅｎｓ，ａ  ｎｏｖｅｌ  ｃａｔｅｇｏｒｙ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎｏｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ．Ｍｉｃｒｏｂｅｓ  Ｉｎｆｅｃｔ  ３，６４５−６５４頁
【非特許文献２９】ゴバー（Ｇｏｂｅｒ），Ｈ．Ｊ．，キストウスカ（Ｋｉｓｔｏｗｓｋａ），Ｍ．，アングマン（Ａｎｇｍａｎ），Ｌ．，ジェノ（Ｊｅｎｏ），Ｐ．，モリ（Ｍｏｒｉ），Ｌ．，およびデ・リベロ（Ｄｅ  Ｌｉｂｅｒｏ），Ｇ．（２００３年）．Ｈｕｍａｎ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｇａｍｍａｄｅｌｔａ  ｃｅｌｌ  ｒｅｃｏｇｎｉｚｅ  ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ  ｍｅｖａｌｏｎａｔｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ｉｎ  ｔｕｍｏｒ  ｃｅｌｌｓ．Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  １９７，１６３−１６８頁
【非特許文献３０】カトー（Ｋａｔｏ），Ｙ．，タナカ（Ｔａｎａｋａ），Ｙ．，ミヤガワ（Ｍｉｙａｇａｗａ），Ｆ．，ヤマシタ（Ｙａｍａｓｈｉｔａ），Ｓ．，およびミナト（Ｍｉｎａｔｏ），Ｎ．（２００１年）．Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｏｆ  ｔｕｍｏｒ  ｃｅｌｌｓ  ｆｏｒ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ｎｏｎｐｅｐｔｉｄｅ  ａｎｔｉｇｅｎｓ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６７，５０９２−５０９８頁
【非特許文献３１】クンズマン（Ｋｕｎｚｍａｎｎ），Ｖ．，バウアー（Ｂａｕｅｒ），Ｅ．，およびウィルヘルム（Ｗｉｌｈｅｌｍ），Ｍ．（１９９９年）．Ｇａｍｍａ／ｄｅｌｔａ  Ｔ−ｃｅｌｌ  ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｐａｍｉｄｒｏｎａｔｅ．Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３４０，７３７−７３８頁
【非特許文献３２】ウィルヘルム（Ｗｉｌｈｅｌｍ），Ｍ．，クンズマン（Ｋｕｎｚｍａｎｎ），Ｖ．，エクスタイン（Ｅｃｋｓｔｅｉｎ），Ｓ．，ライマー（Ｒｅｉｍｅｒ），Ｐ．，ワイシンガー（Ｗｅｉｓｓｉｎｇｅｒ），Ｆ．，ルーディガー（Ｒｕｅｄｉｇｅｒ），Ｔ．，およびトニー（Ｔｏｎｙ），Ｈ．Ｐ．（２００３年）．｛ｇａｍｍａ｝｛ｄｅｌｔａ｝  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｆｏｒ  ｉｍｍｕｎｅ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｌｙｍｐｈｏｉｄ  ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ．Ｂｌｏｏｄ，１０２（１），２００−６頁
【非特許文献３３】ヒュール（Ｆｅｕｒｌｅ），Ｊ．，エスピノーサ（Ｅｓｐｉｎｏｓａ），Ｅ．，エクスタイン（Ｅｃｋｓｔｅｉｎ），Ｓ．，ポント（Ｐｏｎｔ），Ｆ．，クンズマン（Ｋｕｎｚｍａｎｎ），Ｖ．，フルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．，ヘルドリヒ（Ｈｅｒｄｅｒｉｃｈ），Ｍ．，およびウィルヘルム（Ｗｉｌｈｅｌｍ），Ｍ．（２００２年）．Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ｐｒｏｄｕｃｅｓ  ｐｈｏｓｐｈｏａｎｔｉｇｅｎｓ  ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７７，１４８−１５４頁
【非特許文献３４】ヒンツ（Ｈｉｎｔｚ）ら（２００１年）．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ（Ｅ）−４−ｈｙｄｒｏｘｙ−３−ｍｅｔｈｙｌ−ｂｕｔ−２−ｅｎｙｌ  ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ａｓ  ａ  ｍａｊｏｒ  ａｃｔｉｖａｔｏｒ  ｆｏｒ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ．ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．５０９（２）：３１７−２２頁
【非特許文献３５】ジョマア（Ｊｏｍａａ），Ｈ．，ヒュール（Ｆｅｕｒｌｅ），Ｊ．，ルース（Ｌｕｈｓ），Ｋ．，クンズマン（Ｋｕｎｚｍａｎｎ），Ｖ．，トニー（Ｔｏｎｙ），Ｈ．Ｐ．，ヘルドリヒ（Ｈｅｒｄｅｒｉｃｈ），Ｍ．，およびウィルヘルム（Ｗｉｌｈｅｌｍ），Ｍ．（１９９９年ａ）．Ｖｇａｍｍａ９／Ｖｄｅｌｔａ２  Ｔ  ｃｅｌｌ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｌｏｗ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｍａｓｓ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ｄｅｐｅｎｄｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  １−ｄｅｏｘｙ−Ｄ−ｘｙｌｕｌｏｓｅ  ５−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ｐａｔｈｗａｙ  ｏｆ  ｉｓｏｐｒｅｎｏｉｄ  ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．ＦＥＭＳ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｄ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  ２５，３７１−３７８頁
【非特許文献３６】ジョマア（Ｊｏｍａａ），Ｈ．，ウィースナー（Ｗｉｅｓｎｅｒ），Ｊ．，サンダーブランド（Ｓａｎｄｅｒｂｒａｎｄ），Ｓ．，アルティンシセク（Ａｌｔｉｎｃｉｃｅｋ），Ｂ．，ウィデメイヤー（Ｗｅｉｄｅｍｅｙｅｒ），Ｃ．，ヒンツ（Ｈｉｎｔｚ），Ｍ．，ツルバコバ（Ｔｕｒｂａｃｈｏｖａ），Ｉ．，エバール（Ｅｂｅｒｌ），Ｍ．，ザイドゥラー（Ｚｅｉｄｌｅｒ），Ｊ．，リヒテンターラー（Ｌｉｃｈｔｅｎｔｈａｌｅｒ），Ｈ．Ｋ．ら（１９９９年ｂ）．Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｎｏｎｍｅｖａｌｏｎａｔｅ  ｐａｔｈｗａｙ  ｏｆ  ｉｓｏｐｒｅｎｏｉｄ  ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｓ  ａｎｔｉｍａｌａｒｉａｌ  ｄｒｕｇｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８５，１５７３−１５７６頁
【非特許文献３７】ローマー（Ｒｏｈｍｅｒ），Ｍ．，クナリ（Ｋｎａｎｉ），Ｍ．，シモニン（Ｓｉｍｏｎｉｎ），Ｐ．，サッター（Ｓｕｔｔｅｒ），Ｂ．，およびサーム（Ｓａｈｍ），Ｈ．（１９９３年）．Ｉｓｏｐｒｅｎｏｉｄ  ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｉｎ  ｂａｃｔｅｒｉａ：  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｐａｔｈｗａｙ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｅａｒｌｙ  ｓｔｅｐｓ  ｌｅａｄｉｎｇ  ｔｏ  ｉｓｏｐｅｎｔｅｎｙｌ  ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ．Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ  ２９５（Ｐｔ  ２），５１７−５２４頁
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
上記のことにもかかわらず、γδＴ細胞の活性化を提供する新しい化合物、特に増大した効力および／または好ましい薬力学的特性を有する化合物が依然として必要とされている。このような化合物は、治療が毒性であってはならない命にかかわらない処置または慢性的な治療指標において特に利点を有する。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明はここでγδＴ細胞活性化特性を有する新しい種類の化合物を開示する。この新しい種類の化合物は、アンゲリル（ａｎｇｅｌｙｌ）およびチグリル（ｔｉｇｌｙｌ）リン酸エステル類と称される。本発明者らは、本明細書に記載される種類の化合物が、γδＴ細胞活性を調節することが分かっている他の化合物と比較して高い効力を有することを発見した。好ましくは、本発明の化合物は、単離、精製、または部分的に精製される。
【００１２】
これらの化合物を使用して、被験者においてインビボで、γδＴ細胞の活性、特にγδＴ細胞、好ましくはＶγ９／Ｖδ２Ｔ細胞の活性化および増殖を効率的に制御することができる。これらの新しいγδＴ細胞活性化剤は、本明細書において記載される方法のいずれかに従って使用することができる。これらの化合物は、特に、腫瘍のある被験者、または他の疾患、特に感染症、自己免疫疾患またはアレルギー性疾患を患っている被験者を処置するための免疫療法に特に適する。本発明に従う化合物は、ワクチンアジュバントとしても使用することができる。
【００１３】
従って、本発明は、式（Ｉ）：
【化１】
2008534489.tif 000003
のγδＴ細胞活性化剤を提供し、式中、
Ｃａｔ＋は、１つの（またはいくつかの、同じまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表し、
ｍは、１〜３の整数であり、
Ｂは、Ｏ、ＮＨ、または加水分解することができるその他の基であり、
Ａは、Ｏ、ＮＨ、ＣＨＦ、ＣＦ２またはＣＨ２、あるいはその他の立体的に等価の基であり、
Ｗは、Ｃ−Ｒ６またはＮであり、
Ｒ７は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、またはＣＦ３などのその他の立体的に等価の基であり、
同じまたは異なるＲ３、Ｒ４、およびＲ６は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、あるいはＣＦ３などのその他の立体的に等価の基であり、
Ｒ５は、（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、アルデヒド、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコール、または（Ｃ２〜Ｃ３）エステルであり、そして
Ｙ＝Ｏ−Ｃａｔ＋、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、基−Ａ−Ｒ（ここでＲは、直鎖状、分枝状、または環状、芳香族または非芳香族、飽和または不飽和である）、任意で少なくとも１つのヘテロ原子で中断されたＣ１〜Ｃ５０炭化水素基であり、前記炭化水素基は、アルキル、アルキレニル、またはアルキニル、好ましくはアルキルまたはアルキレンを含み、これらは、アルキル、アルキレニル、アルキニル、エポキシアルキル、アリール、複素環、アルコキシ、アシル、アルコール、カルボン酸基（−ＣＯＯＨ）、エステル、アミン、アミノ基（−ＮＨ２）、アミド（−ＣＯＮＨ２）、イミン、ニトリル、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アルデヒド基（−ＣＨＯ）、ハロゲン、ハロゲノアルキル、チオール（−ＳＨ）、チオアルキル、スルホン、スルホキシド、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される１つまたはいくつかの置換基で置換可能である。
【００１４】
好ましくは、ＡはＯまたはＣＨ２である。より好ましくは、ＡはＯである。より好ましくは、Ｒ３、Ｒ４およびＲ６は水素である。好ましくは、Ｒ５は−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨＯ、−ＣＯ−ＣＨ３または−ＣＯ−ＯＣＨ３である。より好ましくは、Ｒ５は−ＣＨ２−ＯＨである。好ましくは、Ｒ７はＣＨ３、あるいはＣＨ２Ｆ、ＣＦ２ＨまたはＣＦ３などのその立体的に等価の基である。好ましくは、ｍは１である。
【００１５】
１つの実施形態では、式（Ｉ）の基Ｒ５および部分−ＣＲ３Ｒ４−Ａ−［ＰＯＯＢ］ｍ−ＰＯＯＹはＺ（またはシス）配置である。もう１つの実施形態では、式（Ｉ）の基Ｒ５および部分−ＣＲ３Ｒ４−Ａ−［ＰＯＯＢ］ｍ−ＰＯＯＹは、二重結合の位置に関してＥ（またはトランス）配置である。基Ｒ５および部分−ＣＲ３Ｒ４−Ａ−［ＰＯＯＢ］ｍ−ＰＯＯＹがＺ配置である式（Ｉ）のγδＴ細胞活性化剤が、γδＴ細胞の活性化においてＥ配置よりも著しく大きい活性を有することが本明細書（実施例を参照）で観察される限りにおいて、Ｚ配置が好ましい。
【００１６】
１つの態様では、前記活性化剤は、
式（ＩＩ）：
【化２】
2008534489.tif 000004
（式中、Ｃａｔ＋、ｍ、Ｂ、Ａ、Ｒ５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、およびＹは、式（Ｉ）の場合と同様に定義される）の化合物と、
式（ＩＩＩ）：
【化３】
2008534489.tif 000005
（式中、Ｃａｔ＋、ｍ、Ｂ、Ａ、Ｒ５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７、およびＹは、式（Ｉ）の場合と同様に定義される）の化合物と、
式（ＩＶ）：
【化４】
2008534489.tif 000006
（式中、Ｃａｔ＋、ｍ、Ｂ、Ａ、Ｗ、Ｒ５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、およびＹは、式（Ｉ）の場合と同様に定義される）の化合物と、
式（Ｖ）：
【化５】
2008534489.tif 000007
（式中、Ｃａｔ＋、ｍ、Ｂ、Ａ、Ｗ、Ｒ５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、およびＹは、式（Ｉ）の場合と同様に定義される）の化合物と、
式（ＶＩ）：
【化６】
2008534489.tif 000008
（式中、Ｃａｔ＋、ｍ、Ｂ、Ａ、Ｗ、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、およびＹは、式（Ｉ）の場合と同様に定義される）の化合物と、
式（ＶＩＩ）：
【化７】
2008534489.tif 000009
（式中、Ｃａｔ＋、ｍ、Ｂ、Ｗ、Ｒ５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、およびＹは、式（Ｉ）の場合と同様に定義され、Ｒ８はＨまたはＦであり、そしてＲ９はＨまたはＦである）の化合物と、
式（ＶＩＩＩ）：
【化８】
2008534489.tif 000010
（式中、Ｃａｔ＋、ｍ、Ｂ、Ｗ、Ｒ５、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７、およびＹは、式（Ｉ）の場合と同様に定義される）の化合物と、
式（ＩＸ）：
【化９】
2008534489.tif 000011
（式中、Ｃａｔ＋、ｍ、Ｂ、Ｗ、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、およびＹは、式（Ｉ）の場合と同様に定義される）の化合物と、
式（Ｘ）：
【化１０】
2008534489.tif 000012
（式中、Ｃａｔ＋、ｍ、Ｂ、Ｗ、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、およびＹは、式（Ｉ）の場合と同様に定義され、Ｒ８はＨまたはＦであり、そしてＲ９はＨまたはＦである）の化合物と、
式（ＸＩ）：
【化１１】
2008534489.tif 000013
（式中、Ｃａｔ＋、ｍ、Ｂ、Ｗ、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、およびＹは、式（Ｉ）の場合と同様に定義される）の化合物と
からなる群から選択される化合物である。
【００１７】
好ましい実施形態では、γδＴ細胞活性化剤は、式（ＸＩＩ）または（ＸＩＩ’）：
【化１２】
2008534489.tif 000014
（Ｚ）−４−ヒドロキシ−２−メチルブタ−２−エニルピロリン酸（ＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰとも呼ばれる）、
【化１３】
2008534489.tif 000015
（Ｅ）−４−ヒドロキシ−２−メチルブタ−２−エニルピロリン酸（ＨＴｉｇｌｙｌＰＰとも呼ばれる）
の化合物である。
【００１８】
さらに好ましい実施形態では、γδＴ細胞活性化剤は、式（ＸＩＩＩ）または（ＸＩＩＩ’）：
【化１４】
2008534489.tif 000016
（Ｚ）−５−ヒドロキシ−３−メチルペンタ−３−エニルピロホスホン酸（Ｃ−ＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰとも呼ばれる）
【化１５】
2008534489.tif 000017
（Ｅ）−５−ヒドロキシ−３−メチルペンタ−３−エニルピロホスホン酸（Ｃ−ＨＴｉｇｌｙｌＰＰとも呼ばれる）
の化合物である。
【００１９】
さらに好ましい実施形態では、γδＴ細胞活性化剤は、式（ＸＩＶ）または（ＸＩＶ’）：
【化１６】
2008534489.tif 000018
（Ｚ）−４−ヒドロキシ−２−メチルブタ−２−エニルピロホスホルアミド酸（Ｎ−ＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰとも呼ばれる）
【化１７】
2008534489.tif 000019
（Ｅ）−４−ヒドロキシ−２−メチルブタ−２−エニルピロホスホルアミド酸（Ｎ−ＨＴｉｇｌｙｌＰＰとも呼ばれる）
の化合物である。
【００２０】
さらなる実施形態では、γδＴ細胞活性化剤は、式（ＸＶ）：
【化１８】
2008534489.tif 000020
（式中、Ｃａｔ＋およびＡは式（Ｉ）の場合と同様に定義され、ＸがＨであり、そしてＺがＣＨ３であるか（デオキシリボヌクレオシドはチミジンである）、あるいはＸがＯＨであり、そしてＺがＨである（リボヌクレオシドはウリジンである）の化合物である。１つの実施形態では、式（ＸＶＩ）の化合物は、Ｅ（またはトランス）配置である。好ましい実施形態では、式（ＸＶＩ）の化合物はＺ（またはシス）配置である。
【００２１】
また本発明は、本明細書において記載される実施形態のいずれか１つに従うγδＴ細胞活性化剤を含む医薬組成物も提供する。好ましい実施形態では、Ｃａｔ＋カチオンは薬学的に許容可能なカチオンであり得る。また、γδＴ細胞を調節、好ましくは活性化する方法も提供され、該方法は、γδＴ細胞を本明細書において記載されるγδＴ細胞活性化化合物と接触させることを含む。認識されるように、本発明の化合物は、インビトロまたはインビボでγδＴ細胞を活性化するために使用することができる。インビトロで活性化されたγδＴ細胞は、疾患の治療または予防を含む、活性化に続く任意の適切な方法において使用され得る。１つの好ましい例では、活性化γδＴ細胞は、哺乳類、好ましくはヒトに投与される。好ましい態様では、本発明は、（ａ）γδＴ細胞を本明細書において記載されるγδＴ細胞活性化化合物と接触させるステップと、（ｂ）ステップ（ａ）のγδＴ細胞を被験者に投与するステップとを含む処置方法を包含する。このような用途のためのγδＴ細胞の調製方法は当該技術分野において知られており、例えば、いずれもロマーニャ（Ｒｏｍａｇｎｅ）およびラプラス（Ｌａｐｌａｃｅ）による米国特許出願公開第２００５１９６３８５号明細書および国際公開第０３０７０９２１号パンフレットに記載されるように実行することができ、これらの開示は参照によって本明細書中に援用される。
【００２２】
また、本明細書において記載されるγδＴ細胞活性化剤を被験者に投与することを含むγδＴ細胞の調節方法、好ましくは活性化方法も提供される。好ましい実施形態では、本発明は、本明細書において記載されるγδＴ細胞活性化剤を、疾患を回復させるまたは予防するのに十分な量で被験者に投与することを含む、疾患の処置または予防方法を提供する。また、ヒト被験者においてγδＴ細胞を制御し、好ましくはそれによって疾患を処置するための医薬組成物の製造のための本発明のγδＴ細胞活性化剤の使用も提供される。好ましくは、前記疾患は、腫瘍または増殖性の障害、感染症、自己免疫疾患、あるいはアレルギー性疾患である。
【００２３】
さらなる実施形態および詳細は本明細書においてさらに提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２４】
定義
本発明の文脈の中では、「γδＴ細胞の活性を制御する」という表現は、被験者においてこのような細胞の数および／または生物活性の増大を引き起こすまたは支持することを示す。従って、制御には、被験者におけるこのような細胞の拡張の調節（例えば、刺激）および／または例えばサイトカイン分泌（例えば、ＴＮＦαまたはＩＦＮγ）の誘発が含まれるが、これらに限定されない。示されるように、γδＴ細胞は、通常、健康な成人被験者において全循環リンパ球の約１〜１０％を表す。本発明を使用して、被験者におけるγδＴ細胞集団を大幅に増大させることができ、特に、全循環リンパ球の少なくとも１０％、１２％、１５％、２０％、または３０〜９０％、通常は４０〜９０％、より好ましくは５０〜９０％に達することができる。典型的な実施形態では、本発明は、被験者におけるγδＴ細胞の選択的な拡張を可能にし、全循環リンパ球の６０〜９０％、好ましくは７０〜９０％、より好ましくは８０〜９０％に達する。制御には、さらにあるいは代替的に、被験者のγδＴ細胞の生物活性、特にその細胞溶解活性またはそのサイトカイン分泌活性の調節も含まれる。本発明は、標的細胞に対するγδＴ細胞の生物活性を増大させるための新規の条件および戦略を定義する。
【００２５】
「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」が使用される場合、これは好ましくは、「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」、より好ましくは「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」で置き換えることができる。
【００２６】
上文および下文において数値が使用される場合、これらは、上限および下限を表す数を含むことを意味する。例えば、「１と３の間」は「１から３まで、そして１および３を含む」範囲を表し、「１〜３の範囲」は、「１から３まで、そして１および３を含む」範囲を表すであろう。数（例えば、３）の代わりに数を示す言葉（例えば、「三（ｔｈｒｅｅ）」）が使用される場合も同じことが言える。
【００２７】
数に関連して「約」が使用される場合には、これは、好ましくは、その数の±１５％の数、より好ましくはその数のプラス５％、最も好ましくは「約」の付かないその数自体を意味する。例えば、「約１００」は、「８５から１１５まで、そして８５および１１５を含む」ことを表すであろう。例えば、「約１〜約３」、または「約１とおよび約３の間」など、数の範囲に関連して「約」が使用される場合、好ましくは、すぐ前の文で数について与えられた「約」の定義は、範囲の最初及び最後を定義するそれぞれの数に別々に適用される。好ましくは、任意の数値に関連して「約」が使用される場合、「約」は削除することができる。
【００２８】
「毎週」は「１週間に約１回」（処置と処置の間に約１週間の間隔を隔てて、複数回の処置が行われることを意味する）を表し、ここで「約」は、好ましくは、±１日（すなわち、「６〜８日ごと」と言い換えられる）を意味し、最も好ましくは「毎週」は、「７日ごとに１回」を表す。
【００２９】
本明細書で使用される場合、γδＴ細胞の活性の制御に関する「ＥＣ５０」という用語は、その最大の応答の５０％を生じる主題組成物の効率的な濃度、すなわちγδＴ細胞のこのような活性に関する効果を指す。
【００３０】
「単離」という用語は、混合物中に少なくとも３０％、より好ましくは少なくとも５０％、６０％または７０％、そして最も好ましくは少なくとも８０％、９０％、９５％または９８％存在する化合物を表す化合物、または化合物を指す生成物を指す。
【００３１】
「精製」リン酸化抗原またはリン酸化抗原組成物は、実質的に純粋なリン酸化抗原、本質的に純粋なリン酸化抗原、またはその塩、あるいは別の化合物を実質的に含まない、本質的に含まないまたは含まないリン酸化抗原またはその塩を指す。
【００３２】
「部分的に精製した」リン酸化抗原またはリン酸化抗原組成物は、９０％未満が純粋のリン酸化抗原、またはその塩を指す。
【００３３】
新しい種類のγδＴリンパ球活性化剤：アンゲリルおよびチグリルリン酸エステル
本発明者らによって記載される新しい種類の化合物は、アンゲリルおよびチグリルリン酸エステルを含む。本発明者らは、この種類の化合物が、γδＴ細胞活性の調節において他の化合物を超えた著しい効力を示すことを発見した。その生物学的標的によるアンゲリルリン酸エステル化合物の認識は、化合物の酵素処理を含み得る。この処理は、不安定なリン酸部分の加水分解（またはエネルギー放出）と協奏的な分子内環化反応に依存すると考えられる。Ｚ異性体のアンゲリルリン酸エステル化合物は、チグリルリン酸エステルのＥ異性体と比較して、分子内環化を好むと予測される。アンゲリルリン酸エステル類の化合物は増大した効力を有することができ（例えば、より少ない化合物が必要とされ、毒性の可能性が低い）、あるいはこれらの組成物は、γδＴ細胞の既に知られている活性化剤を超えた明確な薬理学的特性、例えば標的結合親和性、ＡＤＭＥ特性（吸収、分配、代謝および排泄）を提供することができる。さらに好ましい実施形態では、それぞれが異なる特性を有する本発明の特定の化合物が提供され、要求される用途に応じて使用することができる。例えば、化合物はインビボ安定性に関して異なり、例えば異なる循環半減期またはγδＴ細胞の異なる最大活性化をもたらすことができる。
【００３４】
本発明に従う新しい種類のγδＴリンパ球活性化剤は、式（Ｉ）：
【化１９】
2008534489.tif 000021
の化合物を含み、式中、
Ｃａｔ＋は、１つの（またはいくつかの、同じまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表し、
ｍは、１〜３の整数であり、              
Ｂは、Ｏ、ＮＨ、または加水分解することができるその他の基であり、
Ａは、Ｏ、ＮＨ、ＣＨＦ、ＣＦ２またはＣＨ２、あるいはその他の立体的に等価の基であり、
Ｗは、Ｃ−Ｒ６またはＮであり、
Ｒ７は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基またはＣＦ３などのその他の立体的に等価の基であり、
同じまたは異なるＲ３、Ｒ４、およびＲ６は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、あるいはＣＦ３などのその他の立体的に等価の基であり、
Ｒ５は、（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、アルデヒド、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコール、または（Ｃ２〜Ｃ３）エステルであり、そして
Ｙ＝Ｏ−Ｃａｔ＋、Ｃ１〜Ｃ３アルキル基、基−Ａ−Ｒ（ここでＲは、直鎖状、分枝状、または環状、芳香族または非芳香族、飽和または不飽和である）、任意で少なくとも１つのヘテロ原子で中断されたＣ１〜Ｃ５０炭化水素基であり、前記炭化水素基は、アルキル、アルキレニル、またはアルキニル、好ましくはアルキルまたはアルキレンを含み、これらは、アルキル、アルキレニル、アルキニル、エポキシアルキル、アリール、複素環、アルコキシ、アシル、アルコール、カルボン酸基（−ＣＯＯＨ）、エステル、アミン、アミノ基（−ＮＨ２）、アミド（−ＣＯＮＨ２）、イミン、ニトリル、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アルデヒド基（−ＣＨＯ）、ハロゲン、ハロゲノアルキル、チオール（−ＳＨ）、チオアルキル、スルホン、スルホキシド、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される１つまたはいくつかの置換基で置換可能である。
【００３５】
「立体的に等価の基」は、異なる分子式を有するが類似または同一の物理特性を示す元素、官能基、置換基、分子またはイオンを指す。例えば、ＣＦ３は、ＣＨ３の立体的に等価の基である。通常、２つの立体的に等価の基は、類似または同一の体積および形状を有する。
【００３６】
特定の実施形態では、Ｙは、ヌクレオシド、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、核酸、アミノ酸、ペプチド、タンパク質、単糖、オリゴ糖、多糖、脂肪酸、単純脂質、複合脂質、葉酸、テトラヒドロ葉酸、リン酸、イノシトール、ビタミン、補酵素、フラボノイド、アルデヒド、エポキシドおよびハロヒドリンからなる群から選択されるラジカルであり得る。
【００３７】
１つの実施形態では、式（Ｉ）の基Ｒ５および部分−ＣＲ３Ｒ４−Ａ−［ＰＯＯＢ］ｍ−ＰＯＯＹは、Ｚ（またはシス）配置である。もう１つの実施形態では、式（Ｉ）の基Ｒ５および部分−ＣＲ３Ｒ４−Ａ−［ＰＯＯＢ］ｍ−ＰＯＯＹはＥ（またはトランス）配置である。基Ｒ５および部分−ＣＲ３Ｒ４−Ａ−［ＰＯＯＢ］ｍ−ＰＯＯＹがＺ配置である式（Ｉ）のγδＴ細胞活性化剤が、γδＴ細胞の活性化においてＥ配置よりも著しく大きい活性を有することが本明細書（実施例を参照）で観察される限りにおいて、Ｚ配置が好ましい。
【００３８】
特定の実施形態では、上記で定義される置換基は、上記で特定された少なくとも１つの置換基によって置換される。
【００３９】
好ましくは、置換基は、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキレニル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニル、（Ｃ２〜Ｃ６）エポキシアルキル、アリール、複素環、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ２〜Ｃ６）アシル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコール、カルボン酸基（−ＣＯＯＨ）、（Ｃ２〜Ｃ６）エステル、（Ｃ１〜Ｃ６）アミン、アミノ基（−ＮＨ２）、アミド（−ＣＯＮＨ２）、（Ｃ１〜Ｃ６）イミン、ニトリル、ヒドロキシル（−ＯＨ）、アルデヒド基（−ＣＨＯ）、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ６）ハロゲノアルキル、チオール（−ＳＨ）、（Ｃ１〜Ｃ６）チオアルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）スルホン、（Ｃ１〜Ｃ６）スルホキシド、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００４０】
より好ましくは、置換基は、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）エポキシアルキル、（Ｃ２〜Ｃ６）アルキレニル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ２〜Ｃ６）アシル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルコール、（Ｃ２〜Ｃ６）エステル、（Ｃ１〜Ｃ６）アミン、（Ｃ１〜Ｃ６）イミン、ヒドロキシル、アルデヒド基、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ６）ハロゲノアルキル、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００４１】
さらにより好ましくは、置換基は、（Ｃ３〜Ｃ６）エポキシアルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコール、（Ｃ２〜Ｃ３）エステル、（Ｃ１〜Ｃ３）アミン、（Ｃ１〜Ｃ３）イミン、ヒドロキシル、ハロゲン、（Ｃ１〜Ｃ３）ハロゲノアルキル、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００４２】
好ましくは、前記炭化水素基は（Ｃ３〜Ｃ２５）炭化水素基であり、より好ましくは（Ｃ５〜Ｃ１０）炭化水素基である。
【００４３】
本発明との関連では、「アルキル」という用語は、より具体的には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、ノナデシル、エイコシル、ヘンエイコシル、ドコシルおよびこれらの他の異性体型などの基を意味する。（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルは、より具体的には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシルおよびこれらの他の異性体型を意味する。（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルは、より具体的には、メチル、エチル、プロピル、またはイソプロピルを意味する。
【００４４】
「アルケニル」という用語は、少なくとも１つの不飽和エチレン結合を有する上文で定義されたアルキル基を指し、そして「アルキニル」という用語は、少なくとも１つの不飽和アセチレン結合を有する上文で定義されたアルキル基を指す。（Ｃ２〜Ｃ６）アルキレンは、エテニル、プロペニル（１−プロペニルまたは２−プロペニル）、１−または２−メチルプロペニル、ブテニル（１−ブテニル、２−ブテニル、または３−ブテニル）、メチルブテニル、２−エチルプロペニル、ペンテニル（１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、４−ペンテニル）、ヘキセニル（１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、４−ヘキセニル、５−ヘキセニル）、およびこれらの他の異性体型を含む。（Ｃ２〜Ｃ６）アルキニルは、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、３−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−ペンチニル、４−ペンチニル、１−ヘキシニル、２−ヘキシニル、３−ヘキシニル、４−ヘキシニル、または５−ヘキシニルおよびこれらの他の異性体型を含む。
【００４５】
「エポキシアルキル」という用語は、エポキシド基を有する上文で定義されたアルキル基を指す。より詳細には、（Ｃ２〜Ｃ６）エポキシアルキルは、エポキシエチル、エポキシプロピル、エポキシブチル、エポキシペンチル、エポキシヘキシルおよびこれらの他の異性体型を含む。（Ｃ２〜Ｃ３）エポキシアルキルは、エポキシエチルおよびエポキシプロピルを含む。
【００４６】
「アリール」基は、６〜１８個の炭素原子を有する単環式、二環式または三環式芳香族炭化水素である。例としては、特に、フェニル、α−ナフチル、β−ナフチルまたはアントラセニル基がある。
【００４７】
「複素環」基は、１つまたは複数のへテロ原子、好ましくは１〜５個の環内へテロ原子を含む５〜１８個の環を含有する基である。これらは、単環式、二環式または三環式でよい。これらは芳香族でもそうでなくてもよい。好ましくは、そしてＲ５としてより具体的には、これらは芳香族複素環である。芳香族複素環の例には、ピリジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、フラン、チオフェン、ピロール、オキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、イミダゾール、ピラゾール、オキサジアゾール、トリアゾール、チアジアゾールおよびトリアジン基が含まれる。二環式の例には、特に、キノリン、イソキノリンおよびキナゾリン基（２つの６員環に対して）、ならびにインドール、ベンズイミダゾール、ベンゾキサゾール、ベンゾチアゾールおよびインダゾール（６員環および５員環に対して）が含まれる。非芳香族複素環は、特に、ピペラジン、ピペリジンなどを含む。
【００４８】
「アルコキシ」基は、−Ｏ−（エーテル）結合によって分子に結合された上文で定義されたアルキル基に相当する。（Ｃ１〜Ｃ６）アルコキシは、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、ブチルオキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシおよびこれらの他の異性体型を含む。（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシは、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、およびイソプロピルオキシを含む。
【００４９】
「アルシル（Ａｌｃｙｌ）」基は、−ＣＯ−（カルボニル）基によって分子に結合された上文で定義されたアルキル基に相当する。（Ｃ２〜Ｃ６）アシルは、アセチル、プロピルアシル、ブチルアシル、ペンチルアシル、ヘキシルアシルおよびこれらの他の異性体型を含む。（Ｃ２〜Ｃ３）アシルは、アセチル、プロピルアシルおよびイソプロピルアシルを含む。
【００５０】
「アルコール」基は、少なくとも１つのヒドロキシル基を含有する上文で定義されたアルキル基に相当する。アルコールは、第１級、第２級、または第３級であり得る。（Ｃ１〜Ｃ６）アルコールは、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ペンタノール、ヘキサノールおよびこれらの他の異性体型を含む。（Ｃ１〜Ｃ３）アルコールは、メタノール、エタノール、プロパノールおよびイソプロパノールを含む。
【００５１】
「エステル」基は、−ＣＯＯ−（エステル）結合によって分子に結合された上文で定義されたアルキル基に相当する。（Ｃ２〜Ｃ６）エステルは、メチルエステル、エチルエステル、プロピルエステル、ブチルエステル、ペンチルエステルおよびこれらの他の異性体型を含む。（Ｃ２〜Ｃ３）エステルは、メチルエステルおよびエチルエステルを含む。
【００５２】
「アミン」基は、−Ｎ−（アミン）結合によって分子に結合された上文で定義されたアルキル基に相当する。（Ｃ１〜Ｃ６）アミンは、メチルアミン、エチルアミン、プロピルアミン、ブチルアミン、ペンチルアミン、ヘキシルアミンおよびこれらの他の異性体型を含む。（Ｃ１〜Ｃ３）アミンは、メチルアミン、エチルアミン、およびプロピルアミンを含む。
【００５３】
「イミン」基は、（−Ｃ＝Ｎ−）結合を有する上文で定義されたアルキル基に相当する。（Ｃ１〜Ｃ６）イミンは、メチルイミン、エチルイミン、プロピルイミン、ブチルイミン、ペンチルイミン、ヘキシルイミンおよびこれらの他の異性体型を含む。（Ｃ１〜Ｃ３）イミンは、メチルイミン、エチルイミン、およびプロピルイミンを含む。
【００５４】
ハロゲンは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはＦであり、より好ましくはＢｒまたはＦであり得る。
【００５５】
「ハロゲノアルキル」基は、少なくとも１つのハロゲンを有する上文で定義されたアルキル基に相当する。該基はモノハロゲン化またはポリハロゲン化されてもよく、同じまたは異なるハロゲン原子を含有する。例えば、該基は、トリフルオロアルキル（ＣＦ３−Ｒ）であり得る。（Ｃ１〜Ｃ６）ハロゲノアルキルは、ハロゲノメチル、ハロゲノエチル、ハロゲノプロピル、ハロゲノブチル、ハロゲノペンチル、ハロゲノヘキシルおよびこれらの他の異性体型を含む。（Ｃ１〜Ｃ３）ハロゲノアルキルは、ハロゲノメチル、ハロゲノエチル、およびハロゲノプロピルを含む。
【００５６】
「チオアルキル」基は、−Ｓ−（チオエーテル）結合によって分子に結合された上文で定義されたアルキル基に相当する。（Ｃ１〜Ｃ６）チオアルキルは、チオメチル、チオエチル、チオプロピル、チオブチル、チオペンチル、チオヘキシルおよびこれらの他の異性体型を含む。（Ｃ１〜Ｃ３）チオアルキルは、チオメチル、チオエチル、およびチオプロピルを含む。
【００５７】
「スルホン」基は、−ＳＯＯ−（スルホン）結合によって分子に結合された上文で定義されたアルキル基に相当する。（Ｃ１〜Ｃ６）スルホンは、メチルスルホン、エチルスルホン、プロピルスルホン、ブチルスルホン、ペンチルスルホン、ヘキシルスルホンおよびこれらの他の異性体型を含む。（Ｃ１〜Ｃ３）スルホンは、メチルスルホン、エチルスルホンおよびプロピルスルホンを含む。
【００５８】
「スルホキシド」基は、−ＳＯ−（スルホキシド）基によって分子に結合された上文で定義されたアルキル基に相当する。（Ｃ１〜Ｃ６）スルホキシドは、メチルスルホキシド、エチルスルホキシド、プロピルスルホキシド、ブチルスルホキシド、ペンチルスルホキシド、ヘキシルスルホキシドおよびこれらの他の異性体型を含む。（Ｃ１〜Ｃ３）スルホキシドは、メチルスルホキシド、エチルスルホキシド、プロピルスルホキシドおよびイソプロピルスルホキシドを含む。
【００５９】
「へテロ原子」は、Ｎ、ＳまたはＯを示す。
【００６０】
「ヌクレオシド」は、アデノシン、チミン、ウリジン、シチジンおよびグアノシンを含む。
【００６１】
特定の実施形態では、炭化水素基は、シクロペンタジエンまたはフェニルなどのシクロアルキレニル、あるいはフラン、ピロール、チオフェン、チアゾール、イミダゾール、トリアゾール、ピリジン、ピリミジン、ピラン、またはピラジンなどの複素環である。好ましくは、シクロアルキレニルまたは複素環は、シクロペンタジエン、ピロールまたはイミダゾールからなる群から選択される。好ましい実施形態では、シクロアルキレニルまたは複素環は、アルコールで置換される。好ましくは、前記アルコールは、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコールである。
【００６２】
その他の実施形態では、炭化水素基は、１つまたはいくつかの二重結合を有するアルキレニルである。好ましくは、アルキレニル基は、１つの二重結合を有する。好ましくは、アルキレニル基は、（Ｃ３〜Ｃ１０）アルキレニル基であり、より好ましくは（Ｃ４〜Ｃ７）アルキレニル基である。好ましくは、前記アルキレニル基は、少なくとも１つの官能基によって置換される。より好ましくは、官能基は、ヒドロキシ、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ、アルデヒド、（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、または（Ｃ２〜Ｃ３）エステルからなる群から選択される。より好ましい実施形態では、炭化水素基は、基−ＣＨ２ＯＨによって置換されたブテニルである。任意で、前記アルケニル基は、トランス（Ｅ）またはシス（Ｚ）のアイソフォームでよく、より好ましくはトランスアイソフォーム（Ｚ）である。１つの例では、アルキレニル基は、（ＥまたはＺ）−４−ヒドロキシ−２−メチルブタ−２−エニルである。特定の実施形態では、化合物は、（ＥまたはＺ）５−ヒドロキシ−３−メチルペンタ−３−エニルピロホスホン酸または（ＥまたはＺ）４−ヒドロキシ−２−メチルブタ−２−エニルピロホスホルアミド酸である。
【００６３】
さらなる実施形態では、炭化水素基は、アシルで置換されたアルキル基である。より好ましくは、炭化水素基は、（Ｃ１〜Ｃ３）アシルで置換された（Ｃ４〜Ｃ７）アルキル基である。
【００６４】
さらに特に好ましい実施形態では、Ｒは、
【化２０】
2008534489.tif 000022
（式中、ｎは２〜２０の整数であり、Ｒ１は（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基であり、そしてＲ２は、ハロゲン化（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ−（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル、ハロゲン化（Ｃ２〜Ｃ３）アシルまたは（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ−（Ｃ２〜Ｃ３）アシルである。好ましくは、Ｒ１は、メチルまたはエチル基であり、そしてＲ２はハロゲン化メチル（−ＣＨ２−Ｘ、Ｘはハロゲン）、ハロゲン化（Ｃ２〜Ｃ３）アセチル、または（Ｃ１〜Ｃ３）アルコキシ−アセチルである。ハロゲン化メチルまたはアセチルは、モノ−、ジ−、またはトリ−ハロゲン化され得る。好ましくは、ｎは２〜１０の整数、または２〜５の整数である。より好ましい実施形態では、ｎは２である。最も好ましい実施形態では、ｎは２、Ｒ１はメチル、そしてＲ２はハロゲン化メチル、より好ましくはモノハロゲン化メチル、さらにより好ましくはブロモメチルまたはヨードメチルである。特に好ましい実施形態では、ｎは２、Ｒ１はメチル、Ｒ２はブロモメチルである。最も好ましい実施形態では、Ｒは３−（ブロモメチル）−３−ブタノール−１−イルである）と、
【化２１】
2008534489.tif 000023
（式中、ｎは２〜２０の整数であり、そしてＲ１はメチルまたはエチル基である。好ましくは、ｎは２〜１０の整数、または２〜５の整数である。より好ましい実施形態では、ｎは２、そしてＲ１はメチルである）と、
【化２２】
2008534489.tif 000024
（式中、同じまたは異なるＲ３、Ｒ４、およびＲ６は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基あるいはその他の立体的に等価の基であり、Ｗ’はＣＨまたはＮであり、そしてＲ５は、（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、アルデヒド、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコール、または（Ｃ２〜Ｃ３）エステルである。より好ましくは、Ｒ６はメチルであり、そしてＲ３およびＲ４は水素である。好ましくは、Ｒ５は、−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨＯ、−ＣＯ−ＣＨ３または−ＣＯ−ＯＣＨ３である。より好ましくは、Ｒ５は−ＣＨ２−ＯＨである。より好ましくは、Ｗ’はＣＨである。任意で、ＷとＣの間の二重結合は、トランス（Ｅ）またはシス（Ｚ）の立体配座にある。より好ましくは、ＷとＣの間の二重結合はトランス（Ｅ）の立体配座にある）と
からなる群から選択される。
【００６５】
Ｙ基は、プロドラッグの設計を可能にできる。そのため、Ｙは、特定の領域で切断することができる酵素不安定性の（ｅｎｚｙｍｏｌａｂｉｌｅ）基である。基Ｙは、標的基でもあり得る。好ましい実施形態では、ＹはＯ−Ｃａｔ＋、基−Ａ−Ｒ、またはヌクレオシド、単糖、エポキシドおよびハロヒドリンからなる群から選択されるラジカルである。好ましくは、Ｙは酵素不安定性の基である。好ましくは、ＹはＯ−Ｃａｔ＋、基−Ａ−Ｒ、またはヌクレオシドである。第１の好ましい実施形態では、ＹはＯ−Ｃａｔ＋である。第２の好ましい実施形態では、Ｙはヌクレオシドである。
【００６６】
好ましい実施形態では、Ｃａｔ＋は、Ｈ＋、Ｎａ＋、ＮＨ４＋、Ｋ＋、Ｌｉ＋、（ＣＨ３ＣＨ２）３ＮＨ＋、リシン、または他の任意の適切な薬学的に許容可能なカチオンである。
【００６７】
好ましい実施形態では、Ａは、Ｏ、ＮＨ、ＣＨＦ、ＣＦ２またはＣＨ２である。好ましくは、Ａは、Ｏ、ＮＨまたはＣＨ２である。より好ましくは、ＡはＯ、またはＣＨ２である。さらにより好ましくは、ＡはＯである。
【００６８】
好ましい実施形態では、ＢはＯまたはＮＨである。より好ましくは、ＢはＯである。
【００６９】
好ましい実施形態では、ｍは１または２である。より好ましくは、ｍは１である。
【００７０】
好ましい実施形態では、Ｒ３、Ｒ６およびＲ４は水素である。
【００７１】
好ましい実施形態では、Ｒ５は、−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨＯ、−ＣＯ−ＣＨ３または−ＣＯ−ＯＣＨ３である。より好ましくは、Ｒ５は−ＣＨ２−ＯＨである。
【００７２】
好ましい実施形態では、Ｒ７は、ＣＨ３、あるいはＣＨ２Ｆ、ＣＦ２ＨまたはＣＦ３などのその立体的に等価の基である。より好ましくは、Ｒ７はＣＨ３である。
【００７３】
さらなる態様では、前記活性化剤は、
式（ＩＩ）：
【化２３】
2008534489.tif 000025
（式中、Ｃａｔ＋は、１つの（またはいくつかの、同じまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表し、
ｍは、１〜３の整数であり、
Ｂは、Ｏ、ＮＨ、または加水分解することができるその他の基であり、
Ａは、Ｏ、ＮＨ、ＣＨＦ、ＣＦ２またはＣＨ２、あるいはその他の立体的に等価の基であり、
Ｒ７は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基またはＣＦ３などのその他の立体的に等価の基であり、
同じまたは異なるＲ３、Ｒ４、およびＲ６は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、あるいはＣＦ３などのその他の立体的に等価の基であり、
Ｒ５は、（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、アルデヒド、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコール、または（Ｃ２〜Ｃ３）エステルであり、そして
Ｙは式（Ｉ）と同様に定義される。
好ましくは、ＡはＯまたはＣＨ２である。より好ましくは、ＡはＯである。より好ましくは、Ｒ３、Ｒ６およびＲ４は水素である。好ましくは、Ｒ７はＣＨ３またはその立体的に等価の基である。より好ましくは、Ｒ７はＣＨ３である。好ましくは、Ｒ５は−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨＯ、−ＣＯ−ＣＨ３または−ＣＯ−ＯＣＨ３である。より好ましくは、Ｒ５は−ＣＨ２−ＯＨである。好ましくは、ＹはＯ−Ｃａｔ＋である。好ましくは、ｍは１である。好ましくは、ＢはＯである。１つの実施形態では、式（ＩＩ）の基Ｒ５および部分−ＣＲ３Ｒ４−Ａ−［ＰＯＯＢ］ｍ−ＰＯＯＹは、Ｅ（またはトランス）配置である。好ましい実施形態では、式（ＩＩ）の基Ｒ５および部分−ＣＲ３Ｒ４−Ａ−［ＰＯＯＢ］ｍ−ＰＯＯＹは、Ｚ（またはシス）配置である）の化合物と、
式（ＩＩＩ）：
【化２４】
2008534489.tif 000026
（式中、Ｃａｔ＋は、１つの（またはいくつかの、同じまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表し、
ｍは、１〜３の整数であり、
Ｂは、Ｏ、ＮＨ、または加水分解することができるその他の基であり、
Ａは、Ｏ、ＮＨ、ＣＨＦ、ＣＦ２またはＣＨ２、あるいはＣＦ３などのその他の立体的に等価の基であり、
Ｒ７は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、またはＣＦ３などのその他の立体的に等価の基であり、
同じまたは異なるＲ３、およびＲ４は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、あるいはＣＦ３などのその他の立体的に等価の基であり、
Ｒ５は、（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、アルデヒド、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコール、または（Ｃ２〜Ｃ３）エステルであり、そして
Ｙは式（Ｉ）と同様に定義される。
好ましくは、ＡはＯまたはＣＨ２である。より好ましくは、ＡはＯである。より好ましくは、Ｒ３およびＲ４は水素である。好ましくは、Ｒ５は−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨＯ、−ＣＯ−ＣＨ３または−ＣＯ−ＯＣＨ３である。より好ましくは、Ｒ５は−ＣＨ２−ＯＨである。好ましくは、ＹはＯ−Ｃａｔ＋である。好ましくは、ｍは１である。好ましくは、ＢはＯである。好ましくは、Ｒ７はＣＨ３、あるいはＣＨ２Ｆ、ＣＦ２ＨまたはＣＦ３などのその立体的に等価の基である。より好ましくは、Ｒ７はＣＨ３である。１つの実施形態では、式（ＩＩＩ）の基Ｒ５および部分−ＣＲ３Ｒ４−Ａ−［ＰＯＯＢ］ｍ−ＰＯＯＹは、Ｅ（またはトランス）配置である。好ましい実施形態では、式（ＩＩＩ）の基Ｒ５および部分−ＣＲ３Ｒ４−Ａ−［ＰＯＯＢ］ｍ−ＰＯＯＹは、Ｚ（またはシス）配置である）の化合物と、
式（ＩＶ）：
【化２５】
2008534489.tif 000027
（式中、Ｃａｔ＋は、１つの（またはいくつかの、同じまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表し、
ｍは、１〜３の整数であり、
Ｂは、Ｏ、ＮＨ、または加水分解することができるその他の基であり、
Ａは、Ｏ、ＮＨ、ＣＨＦ、ＣＦ２またはＣＨ２であり、そして
Ｗは、Ｃ−Ｒ６またはＮであり、
Ｒ７は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、またはＣＦ３などのその他の立体的に等価の基であり、
同じまたは異なるＲ３、Ｒ４、およびＲ６は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、あるいはその他の立体的に等価の基であり、そして
Ｙは式（Ｉ）と同様に定義される。
好ましくは、ＡはＯまたはＣＨ２である。より好ましくは、ＡはＯである。より好ましくは、Ｒ３、Ｒ６およびＲ４は水素である。好ましくは、Ｒ７はＣＨ３またはその立体的に等価の基である。より好ましくは、Ｒ７はＣＨ３である。好ましくは、ＹはＯ−Ｃａｔ＋である。好ましくは、ｍは１である。好ましくは、ＢはＯである。１つの実施形態では、式（ＩＶ）の基−ＣＨ２−ＯＨおよび部分−ＣＲ３Ｒ４−Ａ−［ＰＯＯＢ］ｍ−ＰＯＯＹは、Ｅ（またはトランス）配置である。好ましい実施形態では、式（ＩＶ）の基−ＣＨ２−ＯＨおよび部分−ＣＲ３Ｒ４−Ａ−［ＰＯＯＢ］ｍ−ＰＯＯＹは、Ｚ（またはシス）配置である）の化合物と、
式（Ｖ）：
【化２６】
2008534489.tif 000028
（式中、Ｃａｔ＋は、１つの（またはいくつかの、同じまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表し、
ｍは、１〜３の整数であり、
Ｂは、Ｏ、ＮＨ、または加水分解することができるその他の基であり、
Ａは、Ｏ、ＮＨ、ＣＨＦ、ＣＦ２またはＣＨ２であり、
Ｗは、Ｃ−Ｒ６またはＮであり、
同じまたは異なるＲ３、Ｒ４、およびＲ６は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、あるいは立体的に等価の基であり、
Ｒ５は、（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、アルデヒド、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコール、または（Ｃ２〜Ｃ３）エステルであり、そして
Ｙは式（Ｉ）と同様に定義される。
好ましくは、ＡはＯまたはＣＨ２である。より好ましくは、ＡはＯである。より好ましくは、Ｒ３、Ｒ６およびＲ４は水素である。好ましくは、Ｒ５は、−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨＯ、−ＣＯ−ＣＨ３または−ＣＯ−ＯＣＨ３である。より好ましくは、Ｒ５は−ＣＨ２−ＯＨである。好ましくは、ＹはＯ−Ｃａｔ＋である。好ましくは、ｍは１である。好ましくは、ＢはＯである。１つの実施形態では、式（Ｖ）の化合物はＥ（またはトランス）配置である。好ましい実施形態では、式（Ｖ）のグループ化合物はＺ（またはシス）配置である）の化合物と、
式（ＶＩ）：
【化２７】
2008534489.tif 000029
（式中、Ｃａｔ＋は、１つの（またはいくつかの、同じまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表し、
ｍは、１〜３の整数であり、
Ｂは、Ｏ、ＮＨ、または加水分解することができるその他の基であり、
Ａは、Ｏ、ＮＨ、ＣＨＦ、ＣＦ２またはＣＨ２であり、
Ｗは、Ｃ−Ｒ６またはＮであり、
同じまたは異なるＲ３、Ｒ４、およびＲ６は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、あるいは立体的に等価の基であり、
Ｙは式（Ｉ）と同様に定義される。
好ましくは、ＡはＯまたはＣＨ２である。より好ましくは、ＡはＯである。より好ましくは、Ｒ３、Ｒ６およびＲ４は水素である。好ましくは、ＹはＯ−Ｃａｔ＋である。好ましくは、ｍは１である。好ましくは、ＢはＯである。１つの実施形態では、式（ＶＩ）の化合物はＥ（またはトランス）配置である。好ましい実施形態では、式（ＶＩ）の化合物はＺ（またはシス）配置である）の化合物と、
式（ＶＩＩ）：
【化２８】
2008534489.tif 000030
（式中、Ｃａｔ＋は、１つの（またはいくつかの、同じまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表し、
ｍは、１〜３の整数であり、
Ｂは、Ｏ、ＮＨ、または加水分解することができるその他の基であり、
Ｗは、Ｃ−Ｒ６またはＮであり、
Ｒ７は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、またはＣＦ３などの立体的に等価の基であり、
同じまたは異なるＲ３、Ｒ４、およびＲ６は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、あるいはＣＦ３などの立体的に等価の基であり、
Ｒ８はＨまたはＦであり、
Ｒ９はＨまたはＦであり、
Ｙは式（Ｉ）と同様に定義され、そして
Ｒ５は、（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、アルデヒド、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコール、または（Ｃ２〜Ｃ３）エステルである。
好ましくは、Ｒ３、Ｒ６およびＲ４は水素である。好ましくは、Ｒ５は、−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨＯ、−ＣＯ−ＣＨ３または−ＣＯ−ＯＣＨ３であり、より好ましくは−ＣＨ２−ＯＨである。好ましくは、Ｒ７はＣＨ３またはその立体的に等価の基であり、より好ましくはＣＨ３である。好ましくは、ＹはＯ−Ｃａｔ＋である。好ましくは、ｍは１である。好ましくは、ＢはＯである。好ましくは、Ｒ８およびＲ９は水素である。１つの実施形態では、式（ＶＩＩ）の基Ｒ５および部分−ＣＲ３Ｒ４−Ａ−［ＰＯＯＢ］ｍ−ＰＯＯＹは、Ｅ（またはトランス）配置である。好ましい実施形態では、式（ＶＩＩ）の基Ｒ５および部分−ＣＲ３Ｒ４−Ａ−［ＰＯＯＢ］ｍ−ＰＯＯＹは、Ｚ（またはシス）配置である）の化合物と、
式（ＶＩＩＩ）：
【化２９】
2008534489.tif 000031
（式中、Ｃａｔ＋は、１つの（またはいくつかの、同じまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表し、
ｍは、１〜３の整数であり、
Ｂは、Ｏ、ＮＨ、または加水分解することができるその他の基であり、
Ｗは、Ｃ−Ｒ６またはＮであり、
Ｒ７は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、またはＣＦ３などの立体的に等価の基であり、
同じまたは異なるＲ３、Ｒ４、およびＲ６は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、あるいはＣＦ３などの立体的に等価の基であり、
Ｙは式（Ｉ）と同様に定義され、そして
Ｒ５は、（Ｃ２〜Ｃ３）アシル、アルデヒド、（Ｃ１〜Ｃ３）アルコール、または（Ｃ２〜Ｃ３）エステルである。
好ましくは、Ｒ３、Ｒ６およびＲ４は水素である。好ましくは、Ｒ５は、−ＣＨ２−ＯＨ、−ＣＨＯ、−ＣＯ−ＣＨ３または−ＣＯ−ＯＣＨ３であり、より好ましくは−ＣＨ２−ＯＨである。好ましくは、Ｒ７はＣＨ３またはその立体的に等価の基であり、より好ましくはＣＨ３である。好ましくは、ＹはＯ−Ｃａｔ＋である。好ましくは、ｍは１である。好ましくは、ＢはＯである。１つの実施形態では、式（ＶＩＩＩ）の基Ｒ５および部分−ＣＲ３Ｒ４−Ａ−［ＰＯＯＢ］ｍ−ＰＯＯＹはＥ（またはトランス）配置である。好ましい実施形態では、式（ＶＩＩＩ）の基Ｒ５および部分−ＣＲ３Ｒ４−Ａ−［ＰＯＯＢ］ｍ−ＰＯＯＹは、Ｚ（またはシス）配置である）の化合物と、
式（ＩＸ）：
【化３０】
2008534489.tif 000032
（式中、Ｃａｔ＋は、１つの（またはいくつかの、同じまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表し、
ｍは、１〜３の整数であり、
Ｂは、Ｏ、ＮＨ、または加水分解することができるその他の基であり、
Ｗは、Ｃ−Ｒ６またはＮであり、
同じまたは異なるＲ３、Ｒ４、およびＲ６は、水素、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、またはＣＦ３などの立体的に等価の基であり、
Ｙは式（Ｉ）と同様に定義される。
好ましくは、Ｒ３、Ｒ６およびＲ４は水素である。好ましくは、ＹはＯ−Ｃａｔ＋である。好ましくは、ｍは１である。好ましくは、ＢはＯである。１つの実施形態では、式（ＩＸ）の化合物は、Ｅ（またはトランス）配置である。好ましい実施形態では、式（ＩＸ）の化合物は、Ｚ（またはシス）配置である）の化合物と、
式（Ｘ）：
【化３１】
2008534489.tif 000033
（式中、Ｃａｔ＋は、１つの（またはいくつかの、同じまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表し、
ｍは、１〜３の整数であり、
Ｂは、Ｏ、ＮＨ、または加水分解することができるその他の基であり、
Ｗは、Ｃ−Ｒ６またはＮであり、
同じまたは異なるＲ３、Ｒ４、およびＲ６は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、あるいはＣＦ３などの立体的に等価の基であり、
Ｒ８はＨまたはＦであり、
Ｒ９はＨまたはＦであり、そして
Ｙは式（Ｉ）と同様に定義される。
好ましくは、Ｒ３、Ｒ６およびＲ４は水素である。好ましくは、ＹはＯ−Ｃａｔ＋である。好ましくは、ｍは１である。好ましくは、ＢはＯである。好ましくは、Ｒ８およびＲ９は水素である。１つの実施形態では、式（Ｘ）の化合物は、Ｅ（またはトランス）配置である。好ましい実施形態では、式（Ｘ）の化合物は、Ｚ（またはシス）配置である）の化合物と、
式（ＸＩ）：
【化３２】
2008534489.tif 000034
（式中、Ｃａｔ＋は、１つの（またはいくつかの、同じまたは異なる）有機またはミネラルカチオン（プロトンを含む）を表し、
ｍは、１〜３の整数であり、
Ｂは、Ｏ、ＮＨ、または加水分解することができるその他の基であり、
Ｗは、Ｃ−Ｒ６またはＮであり、
同じまたは異なるＲ３、Ｒ４、およびＲ６は、水素または（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基、あるいはＣＦ３などの立体的に等価の基であり、そして
Ｙは式（Ｉ）と同様に定義される。
好ましくは、Ｒ３、Ｒ６およびＲ４は水素である。好ましくは、ＹはＯ−Ｃａｔ＋である。好ましくは、ｍは１である。好ましくは、ＢはＯである。１つの実施形態では、式（ＸＩ）の化合物は、Ｅ（またはトランス）配置である。好ましい実施形態では、式（ＸＩ）の化合物は、Ｚ（またはシス）配置である）の化合物と、
からなる群から選択される化合物である。
【００７４】
さらなる実施形態では、γδＴ細胞活性化剤は、式（ＸＩＩ）または（ＸＩＩ’）：
【化３３】
2008534489.tif 000035
（Ｚ）−４−ヒドロキシ−２−メチルブタ−２−エニルピロリン酸（ＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰとも呼ばれる）
【化３４】
2008534489.tif 000036
（Ｅ）−４−ヒドロキシ−２−メチルブタ−２−エニルピロリン酸（ＨＴｉｇｌｙｌＰＰとも呼ばれる）
の化合物である。
【００７５】
さらなる実施形態では、γδＴ細胞活性化剤は、式（ＸＩＩＩ）または（ＸＩＩＩ’）：
【化３５】
2008534489.tif 000037
（Ｚ）−５−ヒドロキシ−３−メチルペンタ−３−エニルピロホスホン酸（Ｃ−ＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰとも呼ばれる）
【化３６】
2008534489.tif 000038
（Ｅ）−５−ヒドロキシ−３−メチルペンタ−３−エニルピロホスホン酸（Ｃ−ＨＴｉｇｌｙｌＰＰとも呼ばれる）
の化合物である。
【００７６】
さらなる実施形態では、γδＴ細胞活性化剤は、式（ＸＩＶ）または（ＸＩＶ’）：
【化３７】
2008534489.tif 000039
（Ｚ）−４−ヒドロキシ−２−メチルブタ−２−エニルピロホスホルアミド酸（Ｎ−ＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰとも呼ばれる）
【化３８】
2008534489.tif 000040
（Ｅ）−４−ヒドロキシ−２−メチルブタ−２−エニルピロホスホルアミド酸（Ｎ−ＨＴｉｇｌｙｌＰＰとも呼ばれる）
の化合物である。
【００７７】
さらなる実施形態では、γδＴ細胞活性化剤は、式（ＸＶ）：
【化３９】
2008534489.tif 000041
（式中、Ｃａｔ＋およびＡは式（Ｉ）と同様に定義され、ＸはＨであり、そしてＺはＣＨ３である（デオキシリボヌクレオシドはチミジン）か、あるいはＸはＯＨであり、そしてＺはＨ（リボヌクレオシドはウリジン）である。１つの実施形態では、式（ＸＶ）の化合物はＥ（またはトランス）配置である。好ましい実施形態では、式（ＸＶ）の化合物はＺ（またはシス）配置である）の化合物である。
【００７８】
合成
典型的な方法の一般的原理として、第１のステップでアルキル部分が調製され、リン含有部分に結合される。簡単にするため、以下のスキームは、ＹがＯ−Ｃａｔ＋である化合物について示される。異なるＹ基が所望される場合、これは、本明細書に記載されるさらなるステップにおいて調製することができる。
【００７９】
アルキル部分（以下の議論ではＲで表される）によって提供される官能基のタイプおよび反応性に依存して、当業者は、必要であれば、感受性の官能基またはカップリング反応と相互作用し得る基の保護／脱保護の段階を含め、本明細書に提示される合成例を適合させることができる。
【００８０】
カップリングステップは通常、合成および精製のための重要なステップである。位置Ａにおける同一性に応じて、以下のように多数のカップリングの例が提供される。
【００８１】
ＡがＯであり、そしてＹがＯ−Ｃａｔ＋である式ＩまたはＩＩのリン酸モノエステルは、刊行物：ダビソン（Ｄａｖｉｓｓｏｎ）ら（１９８４年）およびダビソン（Ｄａｖｉｓｓｏｎ）ら（１９８７年）およびベルマント（Ｂｅｌｍａｎｔ）らの米国特許第６，６６０，７２３号明細書（それぞれの開示は参照によって本明細書中に援用される）のいずれかに記載されるものと同様の条件に従うカップリングステップを用いて調製することができる。
【００８２】
ＡがＮＨであり、そしてＹがＯ−Ｃａｔ＋である式ＩまたはＩＩのホスホルアミド酸モノエステルは、刊行物：コックス（Ｃｏｘ）ら（２００２年）およびサトー（Ｓａｔｏ）ら（１９９０年）ならびに係属中のベルマント（Ｂｅｌｍａｎｔ）らのＰＣＴ特許出願第ＰＣＴ／ＩＢ２００４／００４３１１号明細書および６０／５７９，２３７号明細書（それぞれの開示は参照によって本明細書中に援用される）のいずれかに記載されるものと同様の条件に従うカップリングステップを用いて調製することができる。
【００８３】
ＡがＣＨ２であり、そしてＹがＯ−Ｃａｔ＋である式ＩまたはＩＩのホスホン酸モノエステルは、刊行物：バレンタイン（Ｖａｌｅｎｔｉｊｎ）（１９９１年）、コックス（Ｃｏｘ）ら（２００２年）、ティオリエル（Ｔｉｏｌｌｉｅｒ）の米国仮特許出願第６０／６２９，０６９号明細書、６０／５６４，９５９号明細書およびＰＣＴ特許出願の国際公開第０３／０５０１２８号パンフレット（それぞれの開示は参照によって本明細書中に援用される）に記載されるものと同様の条件に従うカップリングステップを用いて調製することができる。
【００８４】
ＡがＣＦまたはＣＦ２であり、そしてＹがＯ−Ｃａｔ＋である式ＩまたはＩＩのジフルオロ−およびモノフルオロホスホン酸モノエステルは、刊行物：コックス（Ｃｏｘ）ら（２００２年）、ワシュブッシュ（Ｗａｓｃｈｂｕｓｃｈ）ら（１９９７年）およびバートン（Ｂｕｒｔｏｎ）ら（１９８９年）、（それぞれの開示は参照によって本明細書中に援用される）に記載されるものと同様の条件に従うカップリングステップを用いて調製することができる。
【００８５】
アンゲリルリン酸エステルは、チャン（Ｚｈａｎｇ）＆ポールター（Ｐｏｕｌｔｅｒ）（１９９３年）により報告される方法に従うＣ１８における調製用逆相ＨＰＬＣによって、塩基性媒体中で良好な化学安定性を有する化合物（ホスホン酸およびアンゲリルリン酸エステル）のための２００２年１２月５日に出願された国際特許公開第０３／０５０１２８号パンフレットの方法に従ってアンモニアイソプロパノール（ａｍｍｏｎｉａｃ  ｉｓｏｐｒｏｐａｎｏｌ）溶離液を用いるシリカゲルにおける調製用クロマトグラフィによって、あるいはダビソン（Ｄａｖｉｓｓｏｎ）ら（１９８４年）のセルロースにおけるクロマトグラフィによって、精製することができる。上記の参考文献の開示は、参照によって本明細書中に援用される。
【００８６】
Ｙ基としてヌクレオシドを含む化合物は、例えば、以下の反応によって調製することができる。
【化４０】
2008534489.tif 000042
式中、−Ｏ−Ｖは、例えば、トシル、メシル、トリフリル（ｔｒｉｆｌｙｌｅ）、ブロシルまたはブロミウム（ｂｒｏｍｉｕｍ）の中から選択されるＶで始まる良好な脱離基であり、ＰＰはピロリン酸基を表し、ＰＰＰは三リン酸基を表し、Ｒ−Ａ−は上記の意味を有し、およびＮｕｃｌはヌクレオシドである。好ましくは、Ｎｕｃｌ−Ｏ−Ｖは、５’−Ｏ−トシルアデノシン、５’−Ｏ−トシルウリジン、５’−Ｏ−トシルシチジン、５’−Ｏ−トシルチミジンまたは５’−Ｏ−トシル−２’−デオキシアデノシンからなる群から選択される。
【００８７】
Ｙにより提供される官能基のタイプおよび反応性に応じて、専門家は、感受性の官能基またはカップリング反応と相互作用し得る基の保護／非保護の段階を含め、必要であれば以下の例を適合させることができる。
【００８８】
例えば、以下に示されるようにＲを有する化合物については、反応手順は次の通りであり得る。
【化４１】
2008534489.tif 000043
式中、ＰＧはアルコール官能基の保護基を表し、そして−Ｏ−Ｖは、例えばトシル、メシル、トリフリル（ｔｒｉｆｌｙｌｅ）、ブロシルまたはブロミウム（ｂｒｏｍｉｕｍ）の中から選択されるＶで始まる良好な脱離基である。ＰＰはピロリン酸基を表し、Ｎｕｃｌはヌクレオシドである。好ましくは、Ｎｕｃｌ−Ｏ−Ｖは、ダビソン（Ｄａｖｉｓｓｏｎ）ら、（１９８７年）（その開示は参照によって本明細書中に援用される）に記載されるように５’−Ｏ−トシルアデノシン、５’−Ｏ−トシルウリジン、５’−Ｏ−トシルシチジン、５’−Ｏ−トシルチミジンまたは５’−Ｏ−トシル−２’−デオキシアデノシンからなる群から選択される。
【００８９】
中性ｐＨは、ダビソン（Ｄａｖｉｓｓｏｎ）ら（１９８７年）、およびダビソン（Ｄａｖｉｓｓｏｎ）ら（１９８６年）（その開示は参照によって本明細書中に援用される）により記載されるものと同様の条件で実行することができる求核試薬置換反応である。
【００９０】
この反応は、基Ｙとして単糖を含む化合物を調製するためにも使用することができる。この場合、Ｎｕｃｌ−Ｏ−Ｖは、ＭｏｎｏＳａｃ−Ｏ−Ｖ（ここで、Ｍｏｎｏｓａｃは単糖である）で置換される。例えば、刊行物：ニルソン（Ｎｉｌｓｓｏｎ）およびモスバッハ（Ｍｏｓｂａｃｈ）（１９８０年）（その開示は参照によって本明細書中に援用される）において記載されるような化合物メチル−６−Ｏ−トシル−アルファ−Ｄ−ガラクトピラノシド、または市販のマンノーストリフレート化合物に相当するＭｏｎｏＳａｃ−Ｏ−Ｙ基を使用することが可能である。
【００９１】
この反応はさらに、基Ｙとしてオリゴ糖を含む化合物を調製するために使用することができる。この場合、Ｎｕｃｌ−Ｏ−Ｖは、ｏｌｉｇｏＳａｃ−Ｏ−Ｖ（ここで、ｏｌｉｇｏＳａｃはオリゴ糖である）によって置換される。例えば、刊行物（Ｏｒｇａｎｉｃ  ｓｙｎｔｈｅｓｅｓ、第７７巻、２２５−２２８頁、その開示は参照によって本明細書中に援用される）に開示されるような化合物６Ａ−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニル−β−シクロデキストリンに相当するｏｌｉｇｏＳａｃ−Ｏ−Ｙ基を使用することが可能である。
【００９２】
この反応は、基Ｙとして多糖を含む化合物を調製するために使用することができる。この場合、Ｎｕｃｌ−Ｏ−Ｖは、ｐｏｌｙＳａｃ−Ｏ−Ｖ（ここで、ｐｏｌｙＳａｃは多糖である）によって置換される。例えば、刊行物：ニルソン（Ｎｉｌｓｓｏｎ）ら、（１９８１年）、ならびにニルソン（Ｎｉｌｓｓｏｎ）およびモスバッハ（Ｍｏｓｂａｃｈ）、（１９８０年）（その開示は参照によって本明細書中に援用される）に記載されるようなトシル化多糖に相当するｐｏｌｙＳａｃ−Ｏ−Ｙ基を使用することが可能である。トシル化により支持される多糖のヒドロキシル基の活性化に基づくこのカップリング技法は、水性または有機媒体中の共有カップリングを可能にする。
【００９３】
またこの反応は、Ｎｕｃｌの代わりに、アセタールまたこの官能基を保護する任意の他の基の形で保護されたアルデヒド官能基を含む誘導体を選択することによって、基Ｙとしてアルデヒド誘導体を含む化合物を調製するためにも使用することができる。
【００９４】
あるいは、Ｙ基としてヌクレオシドを含む化合物は、以下の反応：
【化４２】
2008534489.tif 000044
によって調製することができ、式中、ＰＰＰは三リン酸基を表し、ＡはＯまたはＮＨであり、Ｒ−ＡＨは第１級アルコール（Ｒ−ＯＨ）または第１級アミン（Ｒ−ＮＨ２）を表し、ＤＭＦはジメチルホルムアミドであり、そしてＮｕｃｌはヌクレオシドである。この反応は、アルコールおよび式Ｎｕｃｌ−Ｏ−ＰＰＰを有するヌクレオチドから、ノール（Ｋｎｏｒｒｅ）ら（１９７６年）、またはブルーム（Ｂｌｏｏｍ）ら、米国特許第５，６３９，６５３号明細書（１９９７年）（その開示は参照によって本明細書中に援用される）によって記載されるものと同様の条件で実行することができる。
【００９５】
例えば、以下に示されるＲを有する化合物については、反応手順は次の通りであり得る。
【化４３】
2008534489.tif 000045
式中、ＰＧはアルコール官能基の保護基を表し、ＵＴＰはウリジン三リン酸であり、ＰＰＰは三リン酸基を表し、ＤＭＦはジメチルホルムアミドであり、そしてＮｕｃｌはヌクレオシドである。
【００９６】
この反応は、刊行物：ノール（Ｋｎｏｒｒｅ）ら（１９７６年）の著者によって示されるようなオリゴヌクレオチド５’−三リン酸γ−エステルの調製にも適用することができる。
【００９７】
Ｙ基として核酸、より詳細にはリボ核酸を含む化合物は、刊行物：Ｆ．ファン（Ｈｕａｎｇ）ら（１９９７年）において記載されるものと同様の条件で調製することができる。著者らは、フリーの末端リン酸基を含む任意の分子に適用できる触媒ＲＮＡからの一般的な方法について記載している。これらの著者によって、イソペンテニルピロリン酸またはチアミンピロリン酸などのホスホハロヒドリン基に構造的に関連する化合物が使用または言及されている（Ｆ．ファン（Ｈｕａｎｇ）ら（１９９７年）の８９６８頁を参照）。また、８９６５頁のセクション「求核試薬を含有するリン酸を有する６ｐｐｐＲＮＡの単離反応（Ｒｅａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｉｓｏｌａｔｅ  ６  ｐｐｐＲＮＡ  ｗｉｔｈ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  Ｎｕｃｌｅｏｐｈｉｌｅｓ）」に記載されるカップリング手順のための実験条件（特に、ｐＨ条件）は、ハロヒドリン官能基の存在に適合できることに注意すべきである。
【００９８】
Ｙ基としてアミノ酸、ペプチドまたはタンパク質誘導体を含む化合物は、これらの第１級アミンまたはチオール官能基のエポキシド官能基に対するよく知られた反応性（ＳＮ２反応）を用いて得ることができる。このタイプのカップリングは、典型的に、エポキシド官能基を有するまだ「リンカー」と呼ばれる中間基を含む。このタイプのカップリングを用いる反応手順の一例は、以下のスキームによって提供される。
【化４４】
2008534489.tif 000046
式中、ＰＰはピロリン酸基を表し、Ｒ−Ａは上記の意味を有し、そしてＲ’−ＳＨはアミノ酸、ペプチドまたはタンパク質誘導体である。第１の段階は、ダビソン（Ｄａｖｉｓｓｏｎ）ら（１９８７年）およびダビソン（Ｄａｖｉｓｓｏｎ）ら（１９８６年）（これらの開示は参照によって本明細書中に援用される）によって記載されるものと同様の条件で、最初の化合物のテトラブチルアンモニウム塩、およびグリシジルトシレートまたはエピクロロヒドリンなどの市販の化合物から実行することができる。この反応は、三リン酸（ｔｈｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ）化合物によって実行することもできる。あるいは、Ｒ’−ＳＨの代わりに第１級アミンＲ’−ＮＨ２を使用することもできる。Ｒ’−ＳＨとの反応なしに、第１の反応を用いて、エポキシド誘導体を含む化合物を調製することができる。
【００９９】
あるいは、Ｙ基としてアミノ酸、ペプチドまたはタンパク質誘導体を含む化合物は、次の反応：
【化４５】
2008534489.tif 000047
によって調製することができ、式中、ＰＰＰは三リン酸基を表し、ＰＰはピロリン酸基を表し、Ｐはリン酸基を表し、Ｒ−Ａは上記の意味を有し、そしてＲ’−ＮＨはアミノ酸、ペプチドまたはタンパク質誘導体である。反応は、ノール（Ｋｎｏｒｒｅ）ら（１９７６年）（その開示は参照によって本明細書中に援用される）によって記載されるものと同様の条件で、化合物（Ｒ−Ａ−ＰＰＰ）および式Ｒ−ＮＨ２を有するアミノ酸、ペプチドまたはタンパク質から実行することができる。この反応は、化合物Ｒ−ＮＨ２の感受性官能基の保護を含み、すなわちカルボジイミド（特に、カルボキシル官能基）と反応させることができる。
【０１００】
リン酸、ピロリン酸、三リン酸、四リン酸またはポリリン酸のトリまたはテトラ−ｎ−ブチルアンモニウム塩は、対応する市販の酸から調製することができる。刊行物：リュー（Ｌｉｕ）ら（１９９９年）（その開示は参照によって本明細書中に援用される）に記載されるメタントリスホスホン酸の誘導体などの関連構造を有する誘導体も、該反応手順に従って調製することができる。
【０１０１】
上記の反応は、ヒドロキシル、アミン、リン酸またはチオール官能基の反応性を用いることによって、非常に大きい範囲の分子または生体分子まで推定することができる。それにより、イノシトール誘導体は、反応ＡまたはＢに従って、ヒドロキシル官能基の活性化により調製することができる。葉酸（ビタミンＢ９）の誘導体またはテトラヒドロ葉酸は、反応ＤまたはＥに従って、第１級アミン官能基の反応性を用いることにより調製することができる。
【０１０２】
当然ながら、他のタイプのカップリングを考えることができ、専門家は、大きな選択範囲の反応を利用することができる。
【０１０３】
それによって、カルボン酸またはフェノール基のリン酸化によるカップリングは、脂肪酸、脂質または特定のフラボノイド誘導体の形成のために使用することができる。
【０１０４】
化合物の活性の評価
アンゲリルおよびチグリルリン酸エステルは、エキソビボまたはインビトロで製造することができる。これらは、精製または人工的に製造（例えば、化学合成によって、あるいは微生物学的な方法によって）され得る。本発明に従うアンゲリルリン酸エステルは、好ましくは、Ｖγ９Ｖδ２Ｔリンパ球を活性化することができる。好ましい実施形態では、化合物は、Ｖγ９Ｖδ２Ｔリンパ球を選択的に活性化することができ、これは化合物が特定の細胞集団に対して選択的な活性を有することを示し、そして本質的に、Ｖδ１Ｔ細胞などの他のＴ細胞のサブタイプを直接活性化しない。本出願において開示されるこのような選択性は、好ましい化合物がＶγ９Ｖδ２Ｔリンパ球の増殖または生物活性の選択的または標的活性化を生じ得ることを示唆する。
【０１０５】
アンゲリルリン酸エステルは、δＴ細胞の増殖または拡張を刺激して、あるいは刺激することなく、好ましくはγδＴ細胞の生物活性を増大させるか、またはγδＴ細胞の増殖を引き起こし、好ましくはγδＴ細胞の活性化を増大させ、特に、γδＴ細胞からのサイトカイン分泌を増大させる、あるいはγδＴ細胞の細胞溶解活性を増大させる。従って、アンゲリルまたはチグリルリン酸エステルは、被験者のγδＴ細胞の活性を増大させるのに十分な量および条件、好ましくは、γδＴ細胞によるサイトカイン分泌を増大させる、そして／またはγδＴ細胞の細胞溶解活性を増大させるのに十分な量および条件で投与される。サイトカイン分泌および細胞溶解活性ならびにγδＴ細胞増殖は、任意の適切なインビトロアッセイを用いて評価することができる。
【０１０６】
最も好ましくは、本明細書において言及されるγδＴ細胞はＶγ９Ｖδ２Ｔ細胞であり、そして好ましくは、アンゲリルおよびチグリルリン酸エステルは、Ｖγ９Ｖδ２Ｔ細胞の活性を制御する。
【０１０７】
１つの例では、γδＴ細胞の活性化は、化合物を個体（ヒトまたはヒト以外の霊長類）に投与して、Ｖγ９Ｖδ２Ｔ細胞の活性化または増殖を評価することによって評価することができる。典型的なプロトコルでは、Ｖγ９Ｖδ２Ｔ細胞集団の拡張が評価される：ＩＬ−２（皮下注射により０．９百万単位を１日２回、５日間）と併用して、アンゲリルリン酸エステルが静脈点滴によってカニクイザルなどのヒト以外の霊長類に投与され（ゆっくりとした点滴による１回投与、３０分間にわたって５０ｍｌ）、抗ＣＤ３−ＰＥ抗体および抗Ｖガンマ９−ＦＩＴＣ抗体および／または抗Ｖｄ２抗体による二重染色の後、サルの血液全体についてのフローサイトメトリーによって抹消γδリンパ球が分析され、細胞がフローサイトメトリーによりカウントされる。Ｖγ９Ｖδ２Ｔ細胞集団の最大の拡張は、アンゲリルリン酸エステルの投与の３日〜８日後、通常は約４〜６日後に観察される。
【０１０８】
細胞増殖を評価するために他のどの適切な試験でも用いることができる。増殖または抹消γδリンパ球の評価は、通常、抗ＣＤ３−ＰＥ抗体および抗Ｖガンマ９−ＦＩＴＣ抗体および／または抗Ｖｄ２抗体（ＣＤ３−ＰＥ：ＳＰ３４クローン、仏国レ・ポント・ド・クライクスのＢＤバイオサイエンシーズ・ファルミンゲン（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ，Ｌｅ  Ｐｏｎｔ  ｄｅ  Ｃｌａｉｘ，Ｆｒａｎｃｅ）による二重染色の後、血液全体（例えば、サルから得られる血液全体）におけるフローサイトメトリーによって分析することができる。抗Ｖガンマ９、クローン７Ｂ６は、ヒトＶガンマ９に生じた単クローンであるが、カニクイザル細胞と交差反応する。これは、タンパク質Ａにおけるアフィニティクロマトグラフィによって精製され、ＦＩＴＣに結合される。５０μｌのサルの血液は、５μｌの抗ＣＤ３−ＰＥおよび６μｌの抗デルタ２−ＦＩＴＣまたは１０μｌの抗ガンマ９−ＦＩＴＣ抗体と共に室温で１５分間インキュベートされる。抗体は３ｍｌの１×ＰＢＳで洗浄され、室温において１３００ｒｐｍで４分間遠心分離され、そして上澄みが廃棄される。赤血球は、製造業者の説明書に従ってオプティライズ（ＯｐｔｉＬｙｓｅ）Ｃ試薬（仏国マルセイユのイムノテック−ベックマン−コールター（Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈ−Ｂｅｃｋｍａｎ−Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｍａｒｓｅｉｌｌｅｓ，Ｆｒａｎｃｅ）により溶解される。最後のステップでは、染色された白血球が遠心分離により回収され、３００μｌＰＢＳ＋０．２％ＰＦＡ中に再懸濁される。分析の直前に、５０μｌの較正したフロー・カウント（Ｆｌｏｗ  ＣｏｕｎｔＴＭ）フルオロスフェアズ（Ｆｌｕｏｒｏｓｐｈｅｒｅｓ）（仏国マルセイユのイムノテック−ベックマン−コールター）が、対象とする集団の絶対数のカウントのために細胞に添加される。
【０１０９】
好ましくは、アンゲリルリン酸エステルは、培養物中のγδＴ細胞クローンの集団においてγδＴ細胞の活性を制御することができる。アンゲリルリン酸エステルは、より好ましくは、ミリモル濃度において、好ましくはアンゲリルリン酸エステルが培養物中に１００ｍＭ未満の濃度で存在する場合に、培養物中のγδＴ細胞クローンのγδＴ細胞集団の活性を制御することができる。１つの例では、サイトカインの産生または放出が評価される。Ｖｇ９Ｖｄ２細胞は、アンゲリルリン酸エステルを投与した場合にインビトロでＴＮＦαおよびＩＦＮγの産生細胞であることが分かっている。アンゲリルリン酸エステル処理の直後に、血清サンプルが個体から採取され、ＴＮＦαまたはＩＦＮγに特異的なＥＬＩＳＡによって評価される。
【０１１０】
γδＴ細胞の活性の制御は、任意の適切な手段によって、好ましくはサイトカイン分泌、最も好ましくは本明細書に記載されるようにＴＮＦ−α分泌を算定することによって評価することができる。純粋なγδＴ細胞クローンの集団を得るための方法は、ダボドー（Ｄａｖｏｄｅａｕ）ら（１９９３年）およびモロー（Ｍｏｒｅａｕ）ら（１９８６年）において記載されており、その開示は参照によって本明細書中に援用される。
【０１１１】
任意の典型的なアッセイでは、サイトカイン分泌は、ＴＮＦ−α−感受性細胞を用いるバイオアッセイにおけるＴＮＦ−α放出の測定について記載するエスピノーサ（Ｅｓｐｉｎｏｓａ）ら（２００１年ａ）において記載される方法に従って決定することができる。簡単に言うと、１０４γδＴ細胞／ウェルを、３７℃で２４時間の間、１００μｌの培地中で刺激＋２５単位のＩＬ２／ウェルと共にインキュベートした。次に、培地＋アクチノマイシンＤ（２μｇ／ｍｌ）およびＬｉＣｌ（４０ｍＭ）中に３×１０４細胞／ウェルでプレーティングした５０μｌのＷＥＨＩ細胞に、５０μｌの上澄みを添加し、３７℃で２０時間インキュベートした。３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミドアッセイによりＴＮＦ−α−感受性細胞の生存率が測定される。ウェルあたり５０μｌの３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド（シグマ（Ｓｉｇｍａ）、リン酸緩衝食塩水中２．５ｍｇ／ｍｌ）を添加し、３７℃で４時間のインキュベーションの後、５０μｌの可溶化緩衝液（２０％ＳＤＳ、６６％ジメチルホルムアミド、ｐＨ４．７）を添加し、そして吸光度（５７０ｎｍ）を測定した。次に、精製ヒトｒＴＮＦ−α（ニュージャージー州ロッキーヒルのペプロテック社（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ，Ｉｎｃ．，Ｒｏｃｋｙ  Ｈｉｌｌ，ＮＪ））を用いて得られる標準曲線から、ＴＮＦ−αの放出レベルを計算した。サンドイッチ酵素結合免疫吸着アッセイによって、活性化Ｔ細胞により放出されるインターフェロン−γを測定した。５×１０４γδＴ細胞／ウェルを、３７℃で２４時間の間、１００μｌの培地中で刺激＋２５単位のＩＬ２／ウェルと共にインキュベートした。次に、マウス単クローン抗体（カリフォルニア州カマリロのバイオソース（ＢＩＯＳＯＵＲＣＥ，Ｃａｍａｒｉｌｌｏ，ＣＡ）を用いる酵素結合免疫吸着アッセイのために、５０μｌの上澄みを収集した。
【０１１２】
細胞溶解活性のために好ましいアッセイは、５１Ｃｒ放出アッセイである。典型的なアッセイでは、γδＴ細胞の細胞溶解活性は、４時間の５１Ｃｒ放出アッセイにおいて、自己の正常および腫瘍標的細胞株、またはダウディ（Ｄａｕｄｉ）などの対照感受性標的細胞株、およびラジ（Ｒａｊｉ）などの対照耐性標的細胞株に対して測定される。特定の例では、標的細胞を２×１０３細胞／ウェルの量で使用し、１００μＣｉ５１Ｃｒで６０分間標識化した。エフェクター／標的（Ｅ／Ｔ）比は、３０：１〜３．７５：１の範囲であった。溶解比（百分率で表される）は、標準式［（実験の自発的放出／合計の自発的放出）×１００］を用いて計算される。
【０１１３】
本発明に従うリン酸エステルの使用
本発明は、本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステルを含む医薬組成物に関する。より詳細には、前記医薬組成物は、任意で薬学的に許容可能なキャリアと一緒に、治療的に有効な量のアンゲリルまたはチグリルリン酸エステルを含む。本発明は、医薬としての、本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステルに関する。また、好ましくは癌、感染症、自己免疫疾患またはアレルギー性疾患の処置のための医薬品を製造するための、本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステルの使用も本発明によって包含される。
【０１１４】
１つの態様では、本発明は、ヒト被験者においてγδＴ細胞の活性を制御するための方法を開示しており、該方法は、少なくとも１回の処置で、任意で薬学的に許容可能なキャリアと一緒に、治療的に有効な量の本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステルを投与するステップを含む。より詳細には、該方法は、ヒト被験者においてγδＴ細胞の活性を活性化または刺激する。
【０１１５】
特定の実施形態では、前記アンゲリルまたはチグリルリン酸エステルの量は、全循環リンパ球の少なくとも１０％、１５％、２０％、３０％、４０％、５０％または６０％、あるいは３０〜９０％の間まで到達するように被験者のγδＴ細胞集団を拡張するのに十分な量である。もう１つの実施形態では、前記アンゲリルまたはチグリルリン酸エステルの量は、被験者のγδＴ細胞集団の少なくとも１０倍の増大を誘発するのに十分な量である。好ましくは、前記γδＴ細胞集団は、前記アンゲリルリン酸エステルの投与の４日後〜８日後の間に、より好ましくは前記アンゲリルリン酸エステルの投与の５、６または７日後に評価される。好ましくは、前記γδＴ細胞集団は、フローサイトメトリーにより評価される。好ましくは、前記γδＴ細胞は、Ｖγ９／Ｖδ２Ｔ細胞である。
【０１１６】
好ましい実施形態では、本発明は、被験者の癌、感染症、自己免疫疾患またはアレルギー性疾患を処置するための方法に関し、該方法は、少なくとも１回の処置で、任意で薬学的に許容可能なキャリアと一緒に、治療的に有効な量の本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステルを投与するステップを含む。
【０１１７】
上記の方法および使用において、被験者は好ましくは、癌、感染症、自己免疫疾患またはアレルギー性疾患を有する被験者などのヒト被験者である。本発明は、γδＴ細胞の溶解に感受性である病理細胞の存在によって引き起こされる、またはそれに関連する全ての状態を処置するために実に適切である。
【０１１８】
本発明は、固体または造血器腫瘍を有する被験者の抗腫瘍免疫を刺激するのに特に適する。好ましくは、前記腫瘍は、肺腫瘍、結腸直腸腫瘍、前立腺腫瘍、胸部腫瘍あるいは類表皮頭部または頚部腫瘍からなる群から選択される。本発明の好ましい態様では、前記腫瘍は、腎臓癌、好ましくは転移性の腎臓癌である。あるいは、前記腫瘍は、メラノーマ、卵巣癌、膵臓癌、神経芽細胞腫、頭部または頚部癌、膀胱癌、腎臓癌、脳癌および胃癌からなる群から選択される。好ましい実施形態では、化合物は、国際特許出願公開第２００４０５００９６号パンフレット（その開示は参照によって本明細書中に援用される）に記載されるような癌を処置するために使用することができる。
【０１１９】
また本発明は、被験者の抗ウィルス免疫応答を刺激するためにも適切である。例えば、本発明の化合物は、ＨＩＶ、ＣＭＶ、ＥＢＶ、インフルエンザウィルス、ＨＰＶ、ＨＣＶおよびＨＢＶから選択されるウィルスによる感染を有する個体を処置するために使用することができる。
【０１２０】
また本発明の化合物は、結核、マラリア、野兎病、大腸菌症などを引き起こす病原体による感染を有する被験者の免疫応答を刺激する方法においても適切である。
【０１２１】
また本発明の化合物は、糖尿病、多発性硬化症、関節リュウマチなどの自己免疫疾患を有する被験者、または喘息、気道過敏症などを含むアレルギー性疾患を有する被験者を処置する（例えば、被験者の免疫応答を刺激する）方法においても適切である。好ましい実施形態では、化合物は、治療指標において、ゲルファンド（Ｇｅｌｆａｎｄ）、ボーン（Ｂｏｒｎ）、ラーン（Ｌａｈｎ）、およびカネヒロ（Ｋａｎｅｈｉｒｏ）により２０００年９月２８日に出願された国際特許公開第２０００ＵＳ００２６６８４号パンフレット、ジョマア（Ｊｏｍａａ）により１９９９年６月２４日に出願された国際特許公開第００／００１８２号パンフレット、およびティオリエル（Ｔｉｏｌｌｉｅｒ）による国際特許公開第２００５／１０２３８５号パンフレット（それぞれの参考文献の開示は参照によって本明細書中に援用される）の教示に従って使用される。
【０１２２】
好ましくは、本発明に従うアンゲリルリン酸エステル化合物の処置のための投与量（単回投与）は、約１μｇ／ｋｇと約１．２ｇ／ｋｇの間である。
【０１２３】
上記の投与量は化合物の群に関連し、それぞれの特定の化合物は、典型的な化合物について本明細書中でさらに記載されるように最適用量が異なり得ることは認識されるであろう。それでもやはり、化合物は、γδＴ細胞の生物活性を著しく増大させるため、または被験者のγδＴ細胞集団を著しく増大させるために十分な用量で投与されるのが好ましい。前記用量は好ましくは、２〜１８０分間、好ましくは２〜１２０分間、より好ましくは約５〜約６０分間、あるいは最も好ましくは約３０分間または約６０分間、静脈内（ｉ．ｖ．）投与によってヒトに投与される。
【０１２４】
好ましい典型的な化合物では、式Ｉ〜ＸＶＩＩＩの化合物は、約１μｇ／ｋｇと約１．２ｇ／ｋｇの間、好ましくは約１０μｇ／ｋｇと約１．２ｇ／ｋｇの間、より好ましくは約２０μｇ／ｋｇと約１００ｍｇ／ｋｇの間の投与量（単回投与）で投与される。最も好ましくは、３週間ごとまたは４週間ごとの処置（３週間おきの処置または３週目ごとの処置）のための投与量（単回投与）は、約１μｇ／ｋｇと約１．２ｇ／ｋｇの間、好ましくは約１０μｇ／ｋｇと約２０ｍｇ／ｋｇとの間、より好ましくは約１０μｇ／ｋｇと約１００ｍｇ／ｋｇの間である。この用量は好ましくは、２〜１８０分間、好ましくは２〜１２０分間、より好ましくは約５〜約６０分間、あるいは最も好ましくは約３０分間または約６０分間、静脈内（ｉ．ｖ．）投与によってヒトに投与される。
【０１２５】
活性成分は、異なる経路で、通常は注射または経口投与によって投与されてもよい。注射は、静脈内、腹腔内、動脈内、筋肉内、皮膚内、皮下などにより様々な組織内へ実行され得る。活性化剤のための好ましい投与経路は、静脈内および筋肉内である。サイトカインのための好ましい投与経路は、皮下、静脈内および筋肉内である。
【０１２６】
本発明は、哺乳類被験者におけるγδＴ細胞の活性を制御する方法を提供し、該方法は、γδＴ細胞活性、好ましくはγδＴ細胞の割合（γδＴ細胞の数）が化合物の２回目の投与の前に実質的に基本の割合に戻ることができる処置サイクルに従って、有効な量のアンゲリルまたはチグリルリン酸エステルを、それを必要としている被験者に投与することを含む。本明細書においてさらに記載されるように、好ましい実施形態では、患者のγδＴ細胞の割合が実質的に基本の割合まで戻るためには、少なくとも約１週間、しかしより好ましくは少なくとも約２週間が必要とされる。
【０１２７】
約７日よりも短いサイクルでは、γδＴ細胞活性の適切な刺激を可能にできないことがある。好ましいサイクルの過程は、少なくとも１週間サイクル、しかしより好ましくは少なくとも２週間サイクル（少なくとも約１４日間）、またはより好ましくは少なくとも３週間または４週間ごとであるが、２週間と４週間の間のどこかのサイクルが好ましい。また、８週間までのサイクル、例えば５週間、６週間、７週間または８週間のサイクルは有効であり考慮される。
【０１２８】
１つの好ましい実施形態では、アンゲリルまたはチグリルリン酸エステルの投与は、２週間〜４週間サイクル（すなわち、約１４〜２８日ごとの繰り返しサイクル）の初日に生じる。好ましい実施形態では、アンゲリルリン酸エステルは、２週間〜４週間、好ましくは３週間サイクルの初日にだけ投与される。
【０１２９】
言及されるように、被験者は好ましくは、少なくとも２サイクル、またはより好ましくは少なくとも３サイクルの間、処置されるであろう。他の態様では、処置はより多いサイクル数の間継続されてもよく、例えば、少なくとも４、５、６またはそれ以上のサイクルを想定することができる。
【０１３０】
任意で、本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステルは、特に癌の処置のためにサイトカインと併用して使用することもできる。好ましくは、前記サイトカインは、インターロイキン２（ＩＬ−２）（プロロイキン（ＰｒｏｌｅｕｋｉｎＴＭ、米国カリフォルニア州エメリービルのカイロン（Ｃｈｉｒｏｎ，Ｅｍｅｒｙｖｉｌｌｅ  ＣＡ，ＵＳＡ）またはその生物学的に活性な任意の断片、変異体または類似体、すなわち本発明の方法においてＩＬ−２受容体に結合し、γδＴ細胞活性化を誘発することができる任意の断片、変異体または類似体である。他の実施形態では、サイトカインはインターロイキン７またはインターロイキン１５である。好ましくは、前記アンゲリルまたはチグリルリン酸エステルと前記インターロイキンポリペプチドとは、被験者に別々に投与される。
【０１３１】
そのため、本発明の方法は、サイトカインをさらに投与することを含む。本発明の化合物はさらなる投与を伴って使用されても、あるいは伴わずに使用されてもよいが、好ましい態様では、サイトカインを投与することができ、前記サイトカインは、アンゲリルまたはチグリルリン酸エステル化合物で処置されたγδＴ細胞集団の拡張を増大させることができ、好ましくは、該サイトカインは、前記サイトカインを存在させずにアンゲリルまたはチグリルリン酸エステル化合物の投与から得られる拡張よりも大きいγδＴ細胞集団の拡張を誘発することができる。好ましいサイトカインは、インターロイキン−２ポリペプチドである。
【０１３２】
γδＴ細胞増殖誘発活性を有するサイトカイン、最も好ましくはインターロイキン−２ポリペプチドは、通常は１日と１０日の間を含む期間にわたって低用量で投与される。アンゲリルリン酸エステルは、好ましくは、単一用量で、そして通常はサイクルの初めに投与される。好ましくは、インターロイキン−２ポリペプチドは、１日あたり０．２ＭＵと２ＭＵの間、さらにより好ましくは０．２ＭＵと１．５ＭＵの間、さらに好ましくは０．２ＭＵと１ＭＵの間を含む１日量で投与される。サイトカイン、好ましくはインターロイキン−２ポリペプチドの１日量は１回の注射または２回の注射で投与される。
【０１３３】
好ましい態様では、サイトカイン、最も好ましくはＩＬ−２は、約１０日間までの間、好ましくは約３日と１０日の間の期間、あるいは最も好ましくは約７日間、毎日投与される。好ましくは、サイトカインの投与は、γδＴ細胞活性化剤の投与と同じ日（例えばその２４時間以内）に始まる。例えば、１つの態様では、サイトカインは毎日投与されるが、他の態様ではサイトカインは毎日投与する必要はない。サイトカインが約７〜約１４日間投与される場合、４週間の処置サイクルが好ましい。第１の成分が約４日間投与される場合には、３週間の処理サイクルが好ましい。好ましい実施形態では、化合物は、国際特許出願公開第２００４０５００９６号パンフレット（その開示は参照によって本明細書中に援用される）に記載される方法のいずれかに従って使用することができる。
【０１３４】
上記の方法および処置は単独で使用されてもよいし、あるいは他の活性剤または処置と組み合わせて使用されてもよい。例えば、腫瘍の処置の場合、本発明は、他の抗腫瘍剤、あるいは化学療法、放射線療法または遺伝子療法などの処置と組み合わせて使用され得る。
【０１３５】
また本発明は、哺乳類被験者のγδＴ細胞の活性を制御するために、別々に使用するための本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステルおよびインターロイキン−２ポリペプチドを含む製品にも関する。
【０１３６】
本発明は、本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステルを含むワクチン組成物に関する。また本発明は、本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステルのワクチンアジュバントとしての使用にも関する。
【０１３７】
従って、本発明は、（ｉ）抗原を含む組成物および（ｉｉ）本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステル化合物を含むアジュバントによる哺乳類の連携免疫化を含む、哺乳類、特にヒトにおいて抗原に対する免疫応答を増強および／または増大させるための方法および組成物を開示する。好ましくは、抗原を含む前記組成物は、死滅、不活性化または弱毒した病原体、微生物または寄生虫を含む。他の態様では、抗原を含む前記組成物は、好ましくは、濃縮または精製されたポリペプチド、脂質、多糖、糖タンパク質、糖脂質または核酸抗原を含む。好ましくは、前記組成物は、少なくとも１、２、３、４、５、１０または１５の別個の抗原、例えば少なくとも１、２、３、４、５、１０または１５の別個のポリペプチド、またはこのようなポリペプチドをコードする核酸を含む。好ましい実施形態では、化合物は、２００４年４月２６日に出願された米国仮特許出願第６０／５６４，９５９号明細書（その開示は参照によって本明細書中に援用される）に記載されるように使用することができる。
【０１３８】
アジュバント組成物は、有効な量の本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステル化合物を含むことができ、前記量は、少なくとも１つの抗原に関するアジュバント組成物の体液性応答の誘発、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）応答の誘発、または体液性応答およびＣＴＬ応答の両方の誘発を可能にするのに有効な量である。好ましくは、本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステル化合物は、抗原と連携投与された場合に、体液性応答、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）応答または体液性応答およびＣＴＬ応答の両方の誘発において、アジュバントなしに前記抗原が投与された場合に生じる免疫学的効果よりも大きい免疫学的効果を生じるために有効な量で存在する。
【０１３９】
組成物の抗原成分は、事実上、医学的または獣医学的に対象となる、特に免疫原性の増大が所望される抗原のために、抗原、抗原決定基またはハプテンのどれからでも選択することができる。
【０１４０】
そのため、本発明は、本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステル化合物、より好ましくは式Ｉ〜ＸＶの化合物の、ワクチンアジュバントとしての使用に関する。本発明はさらに、抗原または抗原の組み合わせと、本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステル化合物、より好ましくは式Ｉ〜ＸＶの化合物とを含むワクチン組成物に関する。好ましくは、前記組成物は、治療的に有効な量の抗原と、免疫応答を増強または免疫応答を強化する量のアンゲリルまたはチグリルリン酸エステルとを含む。好ましくは、前記ワクチン組成物は、微生物感染を防ぐ。前記微生物感染は、ウィルス、菌類、寄生虫、酵母、細菌、および原生動物からなる群から選択される微生物によって起こる。特定の実施形態では、前記ワクチン組成物はＢＣＧワクチン組成物である。あるいは、前記ワクチン組成物は腫瘍を予防するか、または腫瘍に対する処置である。
【０１４１】
本発明はさらに、本発明に従うワクチン組成物を含有する適切な容器を含む、より詳細には、抗原または抗原の組み合わせと、本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステル化合物、より好ましくは式Ｉ〜ＸＶの化合物とを含むワクチンキットに関する。任意で、前記ワクチンは２つの別々の適切な容器を含むことができ、一方は抗原または抗原の組み合わせを含有し、他方は本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステル化合物、より好ましくは式Ｉ〜ＸＶの化合物を含有する。任意で、前記容器はシリンジでもよい。あるいは、前記ワクチンキットは１つまたは２つの容器およびシリンジを含む。
【０１４２】
本発明は、被験者においてワクチンの効力を改善する方法、または疾患、より詳細には微生物感染に対して被験者を免疫化する方法に関し、該方法は、
抗原または抗原の組み合わせを含む組成物を前記被験者に投与するステップと、
本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステル化合物、より好ましくは式Ｉ〜ＸＶの化合物を、より詳細にはその免疫応答を増強する量で前記被験者に連携して投与するステップと、
を含む。好ましくは、本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステル化合物は、抗原を含む組成物と連携して投与される場合に、アンゲリルリン酸エステルなしに抗原を含む前記組成物で観察されるよりも免疫応答を増強するのに十分な量で投与される。好ましくは、抗原を含む前記組成物は、死滅、不活性化または弱毒された病原体、微生物または寄生虫を含む。他の態様では、抗原を含む前記組成物は、好ましくは、濃縮または精製されたポリペプチド、脂質、多糖、糖タンパク質、糖脂質または核酸抗原を含む。
【０１４３】
また本発明は、被験者の疾患、より詳細には微生物感染に対して被験者を免疫化する方法に関し、該方法は、（ｉ）抗原を含む組成物、および（ｉｉ）より好ましくは式Ｉ〜ＸＶの本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステル化合物を前記被験者に投与することを含む。好ましくは、本発明に従うアンゲリルまたはチグリルリン酸エステル化合物は、免疫応答を増強する量で投与される。好ましくは、アンゲリルまたはチグリルリン酸エステル、および抗原を含む組成物は、単一のワクチン組成物として、治療的に有効な量で投与される。
【０１４４】
好ましくは、前記アンゲリルまたはチグリルリン酸エステルは、薬学的に許容可能なキャリアと一緒に提供または投与される。第１の態様では、前記抗原または抗原の組み合わせ、および前記アンゲリルまたはチグリルリン酸エステルの前記投与は、同時に行われる。第２の態様では、前記抗原または抗原の組み合わせ、および前記アンゲリルまたはチグリルリン酸エステルの前記投与は経時的に投与される。より詳細には前記アンゲリルまたはチグリルリン酸エステルは、免疫化のために抗原または抗原の組み合わせを被験者に投与する前、同時、または後に投与することができる。好ましくは、前記抗原または抗原の組み合わせは微生物抗原であり、好ましくは、ウィルス、細菌、真菌、原生動物、酵母または寄生虫の抗原である。好ましい実施形態では、前記抗原は、マイコバクテリウム・ボビス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｏｖｉｓ）の抗原である。任意で、前記抗原または抗原の組み合わせは、腫瘍抗原である。
【０１４５】
本発明のさらなる態様および利点は、説明のためのものであって本出願の範囲を限定しないと考えられるべき以下の実施例において開示されるであろう。
【実施例】
【０１４６】
実施例１
（Ｅ）−４−ヒドロキシ−２−メチル−ブタ−２−エニルピロリン酸（ヒドロキシチグリルピロリン酸またはＨＴｉｇｌｙｌＰＰ）の合成
市販の２−メチル−２−ビニルオキシランから出発して、図１に示されるスキームに従ってＨＴｉｇｌｙｌＰＰの合成を実行した。
【０１４７】
（Ｅ）−４−クロロ−２−メチルブタ−２−エン−１−オールの調製：
１６ｍｌ（１７９ｍｍｏｌ）のＴｉＣｌ４を窒素下で３６０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２に添加した。溶液を９０℃まで冷却し、温度を−８０℃よりも低く保ちながら、５０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２中１０．０ｇ（１１９ｍｍｏｌ）の２−メチル−２−ビニルオキシランの溶液を液滴状で添加した。次に、赤色の溶液を８０℃で２時間攪拌し、６００ｍｌの１ＭのＨＣｌで失活させた。有機相を分離し、３×５００ｍｌのＥｔ２Ｏで水相を抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、そして２５℃において３５０ｍｂａｒで蒸発させて、１２．０２ｇ（９９．７ｍｍｏｌ、８４％収率）の４−クロロ−２−メチルブタ−２−エン−１−オールが、茶色がかったオイルとして得られた。粗生成物を次のステップで直接使用した。
【０１４８】
（Ｅ）−２−（４−クロロ−２−メチルブタ−２−エニルオキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピランの調製：
１２０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２中１１．５ｇ（９５．３７ｍｍｏｌ）の４−クロロ−２−メチルブタ−２−エン−１−オールの溶液に、２６ｍｌ（２８６．１１ｍｍｏｌ）のジヒドロピラン（ＤＨＰ）を添加した。溶液を０℃に冷却し、２．４ｇ（９．５３ｍｍｏｌ）のｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム（ＰＰＴＳ）を一部ずつ添加した。溶液を０℃で３時間攪拌した。有機相を３×５０ｍｌの水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、ろ過および濃縮して、粗生成物が得られた。次に、溶離液としてヘプタン／ＥｔＯＡｃ（９／１）を用いて、シリカゲルにおけるクロマトグラフィによって生成物を精製した。１２．３５ｇ（６０．３３ｍｍｏｌ、６４％収率）の保護アリルアルコールを無色のオイルとして単離した。
【０１４９】
（Ｅ）−３−メチル−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）ブタ−２−エニルアセテートの調製：
３０ｍｌのＤＭＦ中１．０ｇ（５ｍｍｏｌ）の保護アリルアルコール（Ｅ）−２−（４−クロロ−２−メチルブタ−２−エニルオキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピランの溶液に、８２０ｍｇ（１０ｍｍｏｌ）の酢酸ナトリウムを添加し、その後触媒量のＮａＩ（２０ｍｇ）を添加した。反応混合物を８０℃で６時間加熱した。反応混合物を冷却し、２００ｍｌの水に注いだ。溶液を３×５０ｍｌのＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、ろ過および濃縮して、粗生成物が得られた。次に、溶離液としてヘプタン／ＥｔＯＡｃ（８／２）を用いて、シリカゲルにおけるクロマトグラフィによってこの生成物を精製した。４６３ｍｇ（２．０３ｍｍｏｌ、４０％）の（Ｅ）−３−メチル−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）ブタ−２−エニルアセテートを無色のオイルとして単離した。
【０１５０】
（Ｅ）−４−ブロモ−３−メチルブタ−２−エニルアセテートの調製：
２０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２中４６０ｍｇ（２．０ｍｍｏｌ）の（Ｅ）−３−メチル−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）ブタ−２−エニルアセテートの溶液に、１０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２中１．３３ｇ（４ｍｍｏｌ）のＣＢｒ４の溶液を添加した。溶液を０℃まで冷却し、１．０５ｇ（４ｍｍｏｌ）のトリフェニルホスフィン溶液を液滴状で添加した。溶液を６時間で室温まで温め、同じ温度でさらに１時間攪拌した。沈殿物をろ過し、ろ液を蒸発させた。溶離液としてヘプタン／ＥｔＯＡｃ（８／２）を用いて、シリカゲルにおけるクロマトグラフィによって残渣を精製した。３１４ｍｇ（１．５２ｍｍｏｌ、７６％）の（Ｅ）−４−ブロモ−３−メチルブタ−２−エニルアセテートを無色のオイルとして単離した。
【０１５１】
（Ｅ）−４−ヒドロキシ−２−メチルブタ−２−エニルピロリン酸の調製：
１０ｍｌのＣＨ３ＣＮ中９００ｍｇ（４．３５ｍｍｏｌ）の（Ｅ）−４−ブロモ−３−メチルブタ−２−エニルアセテートの溶液を、１５ｍｌのＣＨ３ＣＮ中５．９ｇ（６．５２ｍｍｏｌ）のＴＴＡＰＰの溶液に液滴状で添加した。反応混合物を室温で一晩攪拌し、溶媒を蒸発させた。次に、残渣をダウエックス（Ｄｏｗｅｘ）５０ＷＸ８（ＮＨ４＋型）樹脂カラムに通して、２体積の４０ｍＭのＮＨ４ＨＣＯ３水溶液で溶出させた。４０〜４５℃において高真空下でフラクションを蒸発させた。残渣を４〜５ｍｌのｉＰｒＯＨ／ＮＨ４ＯＨ２８％（１／１）で攪拌し、不溶性の固体をろ過して除去した。溶離液としてｉＰｒＯＨ／ＮＨ４ＯＨ２８％１／１）を用いて、ろ液をシリカゲルにおけるクロマトグラフィで精製した。１９７ｍｇ（０．７５２ｍｍｏｌ、１７％）の（Ｅ）−４−ヒドロキシ−２−メチルブタ−２−エニルピロリン酸アンモニウム塩を白色固体として単離した。これらの条件下で、シリカゲルにおけるクロマトグラフィの間にアセテート部分（アルコール保護基）の脱保護が行われた。精製した生成物の異性体比（Ｅ：Ｚ）は、イオンクロマトグラフィ（ＨＰＡＥＣ）分析に基づいて９６：４であった。
【０１５２】
多数のクロマトグラフィ流路が結合されたイオンパック（ＩｏｎＰａｃ（登録商標））ＡＳ１１カラムによるクロマトグラフィ精製（ＨＰＡＥＣ）によって、４−ヒドロキシ−２−メチルブタ−２−エニルピロリン酸のＥおよびＺ立体異性体をそれぞれ純粋な化合物として得た。
【０１５３】
生物学的試験を実施する目的で、０．２μｍフィルタでろ過することによって生成物の中性水溶液を滅菌し、−２０℃で貯蔵した。インビボで実施される試験の場合、溶液は、あらかじめ、２カラム体積の脱イオン水で溶出されるダウエックス（ＤＯＷＥＸ）５０ＷＸ８−２００カチオン樹脂カラム（Ｎａ＋型）に通される。
【０１５４】
実施例２
（Ｚ）−４−ヒドロキシ−２−メチル−ブタ−２−エニルピロリン酸（ヒドロキシアンゲリルピロリン酸またはＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰ）の合成
（Ｚ）−４−ヒドロキシ−２−メチルブタ−２−エニルピロリン酸（ＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰ）の合成は、市販のＴＢＤＭＳ保護されたプロパルギルアルコールから出発して、図２に示されるスキームに従って実行される。この合成スキームの各ステップについて、さらなる手引きのために以下の参考文献が使用され得る。
【０１５５】
ステップａ（クロロギ酸メチルからのプロパルギルエステルの形成）：
アンドリュー（Ａｎｄｒｅｗ）Ｔ．コッピシュ（Ｋｏｐｐｉｓｃｈ）ら、Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、第２巻、第２号（２０００年）、２１５−２１７頁、
マイケル（Ｍｉｃｈａｅｌ）Ｓ．レオナルド（Ｌｅｏｎａｒｄ）ら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．（２００４年）、６９、２５２６−２５３１頁、
ステップｂ（ジメチル銅−リチウム試薬のα，βアセチレンエステルへの立体選択的な共役付加）：
Ｅ．Ｊ．コーリー（Ｃｏｒｅｙ）およびジョン（Ｊｏｈｎ）Ａ．カッツェネレンボーゲン（Ｋａｔｚｅｎｅｌｌｅｎｂｏｇｅｎ）、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９６９年）、９１、１８５１−１８５２頁、
アンドリュー（Ａｎｄｒｅｗ）Ｔ．コッピシュ（Ｋｏｐｐｉｓｓｃｈ）ら、Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、第２巻、第２号（２０００年）２１５−２１７頁、
マイケル（Ｍｉｃｈａｅｌ）Ｓ．レオナルド（Ｌｅｏｎａｒｄ）ら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．（２００４年）、６９、２５２６−２５３１頁、
ステップｃ（水素化ＤＩＢＡＬによるエステル還元）：
アンドリュー（Ａｎｄｒｅｗ）Ｔ．コッピシュ（Ｋｏｐｐｉｓｃｈ）ら、Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、第２巻、第２号（２０００年）２１５−２１７頁、
マイケル（Ｍｉｃｈａｅｌ）Ｓ．レオナルド（Ｌｅｏｎａｒｄ）ら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．（２００４年）、６９、２５２６−２５３１頁、
ステップｄ：
アリルアルコールは、実施例１に報告される手順に従って、あるいはミヤシタ（Ｍｉｙａｓｈｉｔａ）ら（ミヤシタ（Ｍｉｙａｓｈｉｔａ）ら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．４２（１９７７年）３７７２−３７７４頁）により記載されるように、ジヒドロピラン（ＤＨＰ）を用いる反応によってＴＨＰ保護された形態に転化される。
ステップｅ（ｔ−ブチルジメチルシリル保護基の非酸性切断）：
Ｅ．Ｊ．コーリー（Ｃｏｒｅｙ）およびＡ．ベンケテスラール（Ｖｅｎｋａｔｅｓｗａｒｌｕ）、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９７２年）、９４、６１９０頁、
この脱保護反応の代替条件は、ジョン・ウィリー＆サンズ社（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．）（１９９９年）により刊行された「有機合成における保護基（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）」第３版、テオドラ（Ｔｈｅｏｄｏｒａ）Ｗ．グリーン（Ｇｒｅｅｎｅ）およびピーター（Ｐｅｔｅｒ）Ｇ．Ｍ．ウッツ（Ｗｕｔｓ）においても見ることができる。
ステップｆ（塩素化ステップ）：
標準手順において、トリエチルアミンは、２５℃においてＣＨ２Ｃｌ２中のアリルアルコール溶液に添加される。得られる透明な反応混合物は、次に、塩化メシルを液滴状で２０分間添加することによって処理される。完全に添加したら、完全に転化するまで、反応混合物は室温で少なくとも１．５時間攪拌される。反応混合物は、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、０．１ＭのＨＣｌ水および脱イオン水で連続して洗浄され、次に減圧下で濃縮される。粗生成物は、ＳｉＯ２および酢酸エチル：ヘプタン＝１：９の溶離溶媒を用いて、クロマトグラフィによって精製される。
ステップｇ：
二リン酸水素トリステトラ−ｎ−ブチルアンモニウム（ＴＴＡＰＰ）によるＴＨＰ保護された塩化アンゲリルのピロリン酸化は、ポールター（Ｐｏｕｌｔｅｒ）および共同研究者ら（ディビッド（Ｄａｖｉｄ）Ｔ．フォックス（Ｆｏｘ）およびＣ．デール・ポールター（Ｄａｌｅ  Ｐｏｕｌｔｅｒ）、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．（２００２年）、６７、５００９−５０１０頁、ダビソン（Ｄａｖｉｓｓｏｎ）Ｖ．Ｊ．ら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、１９８６年、５１、４７６８−４７７９頁によって報告される一般的な手順に従って得られる。テトラヒドロピラニル基の脱保護は、ダウエックス（ＤＯＷＥＸ）５０ＷＸ８（Ｈ＋型）カチオン交換樹脂によるピロリン酸エステルの処理、そしてその後、得られた酸性溶液の水酸化アンモニウムによる中和によって達成される。
【０１５６】
生物学的試験を実施する目的で、０．２μｍフィルタでろ過することによって生成物の中性水溶液を滅菌し、−２０℃で貯蔵した。インビボで実施される試験の場合、溶液は、あらかじめ、２カラム体積の脱イオン水で溶出されるダウエックス（ＤＯＷＥＸ）５０ＷＸ８−２００カチオン樹脂カラム（Ｎａ＋型）に通される。
【０１５７】
実施例３
（Ｚ）−５−ヒドロキシ−３−メチルペンタ−３−エニルピロホスホン酸（ヒドロキシアンゲリルピロホスホン酸またはＣ−ＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰ）の合成
（Ｚ）−５−ヒドロキシ−３−メチルペンタ−３−エニルピロホスホン酸（Ｃ−ＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰ）の合成は、その調製は実施例１において記載されるＴＨＰ保護されたクロロメチルブテニル中間体（ステップｆの生成物）から、図２に示されるスキームに従って実行される。
【０１５８】
ピロホスホン酸部分のカップリングを伴うステップｈおよびステップｉの化学反応は、ファルネシルピロリン酸類似体の調製のためのバレンタイン（Ｖａｌｅｎｔｉｊｎ）ら（バレンタイン（Ｖａｌｅｎｔｉｊｎ）ら、Ｓｙｎｌｅｔｔ（１９９１年）６６３−６６４頁）の手順に従って実行される。
【０１５９】
ステップｉ：
モルホリンおよびメタノールによる市販のメチルホスホン酸ジクロリドの処理によって、ホスホニル化剤（メチルメチルホスホノモルホリデート）が調製される。ＴＨＰ保護されたクロロメチルブテニル中間体と、ＴＨＦ中のホスホニル化剤およびｎ−ブチルリチウムからその場で調製されるメチルリチオメチルホスホノモルホリデートとの反応によってカップリング生成物が得られる。
【０１６０】
ステップｈ：
Ｃ−ＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰの粗溶液が３段階手順で得られる：
１）ファン（Ｐｈａｎ）およびポールター（Ｐｏｕｌｔｅｒ）、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．（２００１年）、６６、６７０５−６７１０頁によって記載されるメタノール中のテトラ−ｎ−ブチル水酸化アンモニウムでの処理によるステップｉの生成物の脱メチル化（加水分解）
２）バレンタイン（Ｖａｌｅｎｔｉｊｎ）らの方法に従うリン酸（トリブチルアンモニウム塩として）によるピロリン酸化
３）ダウエックス（ＤＯＷＥＸ）５０ＷＸ８（Ｈ＋型）カチオン交換樹脂を用いるピロホスホン酸エステルの処理と、その後の水酸化アンモニウムによる得られた酸性溶液の中和によるテトラヒドロピラニル基の脱保護
【０１６１】
得られた粗溶液の精製は、溶離液として２５％アンモニア溶液／２−プロパノール５０／５０（ｖ／ｖ）を用いてシリカゲルのクロマトグラフィによって実施される。生物学的試験を実施する目的で、０．２μｍフィルタでろ過することによって生成物の水溶液を滅菌し、−２０℃で貯蔵した。インビボで実施される試験の場合、溶液は、あらかじめ、２カラム体積の脱イオン水で溶出されるダウエックス（ＤＯＷＥＸ）５０ＷＸ８−２００カチオン樹脂カラム（ナトリウム型）に通される。
【０１６２】
実施例４
ＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰおよびＨｔｉｇｌｙｌＰＰ化合物の投与量応答
サイトカイン放出アッセイ
細胞（インビトロで拡張され、拡張の１２〜１５日目に凍結貯蔵された一次ポリクローナルヒトＶγ９Ｖδ２Ｔ細胞）は解凍され、２回洗浄されて遠心分離される。上澄みを除去して細胞を再懸濁して、細胞は、ＩＬ２  １００ＩＵ／ｍｌ（最終濃度）の存在下、３７℃で２４時間インキュベートされる。細胞は洗浄され、遠心分離された後、上澄みが除去され、細胞は再懸濁され、適切な最終濃度に調整される。細胞は９６ウェルプレートのウェルに添加される。
【０１６３】
１つの列のウェルには、（Ｒ，Ｓ）−３−（ブロモメチル）−３−ブタノール−１−イル−ジホスフェート（Ｒ，Ｓ−ＢｒＨＰＰ）の標準希釈系列が添加される。試験すべき化合物、この場合は（Ｅ）−４−ヒドロキシ−３−メチル−２−ブテニルピロリン酸（（Ｅ）−ＨＤＭＡＰＰ）ならびにアンゲリル／チグリルリン酸エステル系列のＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰおよびＨＴｉｇｌｙｌＰＰ化合物は、いくつかの希釈の後、実験ウェルに添加される。
【０１６４】
以下にさらに記載されるように、全部のプレートは、試験化合物および基準化合物、この場合はＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰおよびＨＴｉｇｌｙｌＰＰ、（Ｒ，Ｓ）−ＢｒＨＰＰおよび（Ｅ）−ＨＤＭＡＰＰによるγδ細胞の刺激のために、３７℃で２４時間インキュベートされる。この時間の後、１００μｌの培養物の上澄みをＴＮＦα投与量のために取った。放出されたＴＮＦα投与量の測定は、ＴＮＦα酵素イムノアッセイキット（ｒｅｆ．１１１２１、イムノテック−ベックマン・コールター（Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈ−Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ））において製造業者の説明書に記載されるように実施される。４０５ｎｍにおけるＯＤが読み取られる。ＯＤは、培養物の上澄み中の放出ＴＮＦαの濃度に比例する。データはエクセル（Ｅｘｃｅｌ）ソフトウェアで処理され、ＴＮＦαの濃度に対して試験化合物の濃度を比較し、それぞれの試験化合物のＥＣ５０を計算する。
【０１６５】
ＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰのインビトロの生物活性
化合物ＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰの生物活性は、上記のようにＴＮＦα放出アッセイを用いて評価した。インビトロ活性は図３に示される。化合物（Ｒ，Ｓ）−ＢｒＨＰＰおよび（Ｅ）−ＨＤＭＡＰＰは、比較のために含まれた。このインビトロの相対的なスクリーニング試験において次にインビトロＥＣ５０を評価した。ここで（Ｒ，Ｓ）−ＢｒＨＰＰ−標準組成物を用いて較正した細胞による事前のアッセイは、基準（Ｒ，Ｓ）−ＢｒＨＰＰ化合物に対して約１５ｎＭのＥＣ５０を示した。認識されるように、細胞増幅などの他の任意の適切なアッセイが、化合物の評価において使用されてもよい。ＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰ（Ｚ異性体）のインビトロＥＣ５０は０．８５ｎＭであると決定され、ＨＴｉｇｌｙｌＰＰ（Ｅ異性体）のインビトロＥＣ５０は１５ｎＭであったが、（Ｅ）−ＨＤＭＡＰＰのインビトロＥＣ５０は２．１ｎＭであり、（Ｒ，Ｓ）−ＢｒＨＰＰのインビトロＥＣ５０は３７．７ｎＭであった。このアッセイは絶対的なＥＣ５０値ではなく相対的な結果を提供するので、結果は、ＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰおよびＨＴｉｇｌｙｌＰＰ化合物はいずれも非常に強力であり、試験された中でＺ異性体（ＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰ）が最も強力な化合物であることを示す。
【０１６６】
参考文献
引用文献はすべて、参照によって本明細書中に援用される。
アッツィ（Ａｚｚｉ），Ａ．，ケーシー（Ｃａｓｅｙ），Ｒ．Ｐ．＆ナレツ（Ｎａｌｅｃｚ），Ｍ．（１９８４年）Ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｎ，Ｎ’−ｄｉｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌｃａｒｂｏｄｉｉｍｉｄｅ  ｏｎ  ｅｎｚｙｍｅｓ  ｏｆ  ｂｉｏｅｎｅｒｇｅｔｉｃ  ｒｅｌｅｖａｎｃｅ．Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，７６８（３−４）：２０９−２２６頁
バンク（Ｂａｎｋ），Ｉ．，ブック（Ｂｏｏｋ），Ｍ．，フサール（Ｈｕｓｚａｒ），Ｍ．，バラム（Ｂａｒａｍ），Ｙ．，シュニレー（Ｓｃｈｎｉｒｅｒ），Ｉ．，およびブレンナー（Ｂｒｅｎｎｅｒ），Ｈ．（１９９３年）．Ｖ  ｄｅｌｔａ  ２＋  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  ａｒｅ  ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  ｔｏ  ｔｈｅ  ＭＣＦ  ７  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅ  ａｎｄ  ｃａｎ  ｂｅ  ｄｅｔｅｃｔｅｄ  ａｍｏｎｇ  ｔｈｅ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｔｈａｔ  ｉｎｆｉｌｔｒａｔｅ  ｂｒｅａｓｔ  ｔｕｍｏｒｓ．Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ６７，１７−２４頁
ベール（Ｂｅｈｒ），Ｃ．，パウポット（Ｐｏｕｐｏｔ），Ｒ．，ペイラット（Ｐｅｙｒａｔ），Ｍ．Ａ．，ポケット（Ｐｏｑｕｅｔ），Ｙ．，コンスタント（Ｃｏｎｓｔａｎｔ），Ｐ．，ドゥボイス（Ｄｕｂｏｉｓ），Ｐ．，ボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．，およびフルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．（１９９６年）．Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ  ｓｔｉｍｕｌｉ  ｆｏｒ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ａｒｅ  ｒｅｌａｔｅｄ  ｔｏ  ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｅｄ  ａｎｔｉｇｅｎｓ  ｏｆ  ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａ．Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ  ６４，２８９２−２８９６頁
ベルマント（Ｂｅｌｍａｎｔ），Ｃ．，エスピノーサ（Ｅｓｐｉｎｏｓａ），Ｅ．，ハレリー（Ｈａｌａｒｙ），Ｆ．，タン（Ｔａｎｇ），Ｙ．，ペイラット（Ｐｅｙｒａｔ），Ｍ．Ａ．，シカード（Ｓｉｃａｒｄ），Ｈ．，コジコウスキ（Ｋｏｚｉｋｏｗｓｋｉ），Ａ．，ベロー（Ｂｕｅｌｏｗ），Ｒ．，パウポット（Ｐｏｕｐｏｔ），Ｒ．，ボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．，およびフルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．（２０００年）．Ａ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｂａｓｉｓ  ｆｏｒ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｏｎｐｅｐｔｉｄｅ  ａｎｔｉｇｅｎｓ  ｂｙ  ｈｕｍａｎ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｆａｓｅｂ  Ｊ  １４，１６６９−１６７０頁
ブコウスキ（Ｂｕｋｏｗｓｋｉ），Ｊ．Ｆ．，モリタ（Ｍｏｒｉｔａ），Ｃ．Ｔ．，タナカ（Ｔａｎａｋａ），Ｙ．，ブルーム（Ｂｌｏｏｍ），Ｂ．Ｒ．，ブレンナー（Ｂｒｅｎｎｅｒ），Ｍ．Ｂ．，およびバンド（Ｂａｎｄ），Ｈ．（１９９５年）．Ｖ  ｇａｍｍａ  ２Ｖ  ｄｅｌｔａ  ２  ＴＣＲ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｏｎ−ｐｅｐｔｉｄｅ  ａｎｔｉｇｅｎｓ  ａｎｄ  Ｄａｕｄｉ  ｃｅｌｌｓ  ａｎａｌｙｚｅｄ  ｂｙ  ＴＣＲ  ｇｅｎｅ  ｔｒａｎｓｆｅｒ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １５４，９９８−１００６頁
バートン（Ｂｕｒｔｏｎ）  Ｄ．Ｊ．，およびスプレーグ（Ｓｐｒａｇｕｅ），Ｌ．Ｇ．（１９８９年）．Ａｌｌｙｌａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ［（Ｄｉｅｔｈｏｘｙｐｈｏｓｐｈｉｎｙｌ）ｄｉｆｌｕｒｏｍｅｔｈｙｌ］ｚｉｎｃ  Ｂｒｏｍｉｄｅ  ａｓ  ａ  ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ  ｒｏｕｔｅ  ｏｆ  １，１−Ｄｉｆｌｕｏｒｏ−３−ａｌｋｅｎｅｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅｓ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５４，６１３−６１７頁
チョーダリー（Ｃｈｏｕｄｈａｒｙ），Ａ．，ダボドー（Ｄａｖｏｄｅａｕ），Ｆ．，モロー（Ｍｏｒｅａｕ），Ａ．，ペイラット（Ｐｅｙｒａｔ），Ｍ．Ａ．，ボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．，およびジョテレウ（Ｊｏｔｅｒｅａｕ），Ｆ．（１９９５年）．Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ  ｔｕｍｏｒ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  ｔｕｍｏｒ−ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  ｆｒｏｍ  ｒｅｎａｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １５４，３９３２−３９４０頁
チュー（Ｃｈｕ），Ｂ．Ｃ．Ｆ．，ウォール（Ｗａｈｌ），Ｇ．Ｍ．およびオーゲル（Ｏｒｇｅｌ），Ｌ．Ｅ／，Ｎｕｃｌｅｉｄ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，第１１巻，第１８号（１９８３年）．
コンスタント（Ｃｏｎｓｔａｎｔ），Ｐ．，ポケット（Ｐｏｑｕｅｔ），Ｙ．，ペイラット（Ｐｅｙｒａｔ），Ｍ．Ａ．，ダボドー（Ｄａｖｏｄｅａｕ），Ｆ．，ボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．，およびフルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．（１９９５年）．Ｔｈｅ  ａｎｔｉｔｕｂｅｒｃｕｌｏｕｓ  Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｏｖｉｓ  ＢＣＧ  ｖａｃｃｉｎｅ  ｉｓ  ａｎ  ａｔｔｅｎｕａｔｅｄ  ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｐｒｏｄｕｃｅｒ  ｏｆ  ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｅｄ  ｎｏｎｐｅｐｔｉｄｉｃ  ａｎｔｉｇｅｎｓ  ｆｏｒ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ  ６３，４６２８−４６３３頁
コーリー（Ｃｏｒｅｙ）  Ｅ．Ｊ．およびカッツェネレンボーゲン（Ｋａｔｚｅｎｅｌｌｅｎｂｏｇｅｎ）  Ｊ．Ａ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９６９年），９１，１８５１−１８５２頁
コーリー（Ｃｏｒｅｙ）  Ｅ．Ｊ．およびＡ．ベンケテスラール（Ｖｅｎｋａｔｅｓｗａｒｌｕ），Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９７２年），９４，６１９０頁
コックス（Ｃｏｘ）  Ｒ．Ｊ．，ギブソン（Ｇｉｂｓｏｎ）  Ｊ．Ｓ．，マヨ・マーティン（Ｍａｙｏ  Ｍａｒｔｉｎ）  Ｍ．Ｂ．，Ｃｈｅｍ  ＢｉｏＣｈｅｍ，２００２年，３，８７４−８８６頁
ダビソン（Ｄａｖｉｓｓｏｎ）ら，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．，１９８４年，１１０，１３０〜１４５頁
ダビソン（Ｄａｖｉｓｓｏｎ）ら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９８６年，５１，４７６８−４７７９頁
ダビソン（Ｄａｖｉｓｓｏｎ）ら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９８７年，５２，１７９４−１８０１頁
ダボドー（Ｄａｖｏｄｅａｕ）ら，（１９９３年）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １５１（３）：  １２１４−１２２３）頁
エスピノーサ（Ｅｓｐｉｎｏｓａ），Ｅ．，ベルマント（Ｂｅｌｍａｎｔ），Ｃ．，ポント（Ｐｏｎｔ），Ｆ．，ルシアニ（Ｌｕｃｉａｎｉ），Ｂ．，パウポット（Ｐｏｕｐｏｔ），Ｒ．，ロマーニャ（Ｒｏｍａｇｎｅ），Ｆ．，ブライリー（Ｂｒａｉｌｌｙ），Ｈ．，ボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．，およびフルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．（２００１年ａ）．Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｂｒｏｍｏｈｙｄｒｉｎ  ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ，ａ  ｐｏｔｅｎｔ  ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７６，１８３３７−１８３４４頁
エスピノーサ（Ｅｓｐｉｎｏｓａ），Ｅ．，ベルマント（Ｂｅｌｍａｎｔ），Ｃ．，シカード（Ｓｉｃａｒｄ），Ｈ．，パウポット（Ｐｏｕｐｏｔ），Ｒ．，ボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．，およびフルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．（２００１年ｂ）．Ｙ２Ｋ＋１  ｓｔａｔｅ−ｏｆ−ｔｈｅ−ａｒｔ  ｏｎ  ｎｏｎ−ｐｅｐｔｉｄｅ  ｐｈｏｓｐｈｏａｎｔｉｇｅｎｓ，ａ  ｎｏｖｅｌ  ｃａｔｅｇｏｒｙ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎｏｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ．Ｍｉｃｒｏｂｅｓ  Ｉｎｆｅｃｔ  ３，６４５−６５４頁
フェラリーニ（Ｆｅｒｒａｒｉｎｉ），Ｍ．，ヘルタイ（Ｈｅｌｔａｉ），Ｓ．，プパ（Ｐｕｐａ），Ｓ．Ｍ．，メルナード（Ｍｅｒｎａｒｄ），Ｓ．，およびゾッチ（Ｚｏｃｃｈｉ），Ｒ．（１９９６年）．Ｋｉｌｌｉｎｇ  ｏｆ  ｌａｍｉｎｉｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｈｕｍａｎ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｃｅｒｓ  ｂｙ  ｔｕｍｏｒ  ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  ｂｅａｒｉｎｇ  ｇａｍｍａｄｅｌｔａ（＋）ｔ−ｃｅｌｌ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｊ  Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ  ８８，４３６−４４１頁
ヒュール（Ｆｅｕｒｌｅ），Ｊ．，エスピノーサ（Ｅｓｐｉｎｏｓａ），Ｅ．，エクスタイン（Ｅｃｋｓｔｅｉｎ），Ｓ．，ポント（Ｐｏｎｔ），Ｆ．，クンズマン（Ｋｕｎｚｍａｎｎ），Ｖ．，フルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．，ヘルドリヒ（Ｈｅｒｄｅｒｉｃｈ），Ｍ．，およびウィルヘルム（Ｗｉｌｈｅｌｍ），Ｍ．（２００２年）．Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ｐｒｏｄｕｃｅｓ  ｐｈｏｓｐｈｏａｎｔｉｇｅｎｓ  ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７７，１４８−１５４頁
フィッシュ（Ｆｉｓｃｈ），Ｐ．，モリス（Ｍｏｒｉｓ），Ａ．，ラメンジー（Ｒａｍｍｅｎｓｅｅ），Ｈ．Ｇ．，およびハンドグリティンガー（Ｈａｎｄｇｒｅｔｉｎｇｅｒ），Ｒ．（２０００年）．Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ＭＨＣ  ｃｌａｓｓ  Ｉ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｏｎ  ｇａｍｍａｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｔｕｍｏｕｒ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ａｎｄ  ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｔｏｄａｙ  ２１，１８７−１９１頁
フルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．，およびボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．（１９９６年）．Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ｐｈｏｓｐｈｏａｎｔｉｇｅｎｓ．Ｒｅｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌ，６６ｔｈ  Ｆｏｒｕｍ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，１４７，３３８−３４７頁
フォックス（Ｆｏｘ）  Ｄ．Ｔ．およびポールター（Ｐｏｕｌｔｅｒ）  Ｃ．Ｄ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．（２００２年），６７，５００９−５０１０頁
フジミヤ（Ｆｕｊｉｍｉｙａ），Ｙ．，スズキ（Ｓｕｚｕｋｉ），Ｙ．，カタクラ（Ｋａｔａｋｕｒａ），Ｒ．，ミヤギ（Ｍｉｙａｇｉ），Ｔ．，ヤマグチ（Ｙａｍａｇｕｃｈｉ），Ｔ．，ヨシモト（Ｙｏｓｈｉｍｏｔｏ），Ｔ．，およびエビナ（Ｅｂｉｎａ），Ｔ．（１９９７年）．Ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ  １２  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｂｌｏｏｄ  ＣＤ３（＋）ＣＤ５６（＋）ａｎｄ  ＣＤ３（＋）ＣＤ５６（−）ｇａｍｍａｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ  ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ３，６３３−６４３頁
ゴバー（Ｇｏｂｅｒ），Ｈ．Ｊ．，キストウスカ（Ｋｉｓｔｏｗｓｋａ），Ｍ．，アングマン（Ａｎｇｍａｎ），Ｌ．，ジェノ（Ｊｅｎｏ），Ｐ．，モリ（Ｍｏｒｉ），Ｌ．，およびデ・リベロ（Ｄｅ  Ｌｉｂｅｒｏ），Ｇ．（２００３年）．Ｈｕｍａｎ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｇａｍｍａｄｅｌｔａ  ｃｅｌｌ  ｒｅｃｏｇｎｉｚｅ  ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ  ｍｅｖａｌｏｎａｔｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ｉｎ  ｔｕｍｏｒ  ｃｅｌｌｓ．Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  １９７，１６３−１６８頁
ハイディ（Ｈａｙｄａｙ），Ａ．Ｃ．（２０００年）．［ｇａｍｍａ］［ｄｅｌｔａ］  ｃｅｌｌｓ：  ａ  ｒｉｇｈｔ  ｔｉｍｅ  ａｎｄ  ａ  ｒｉｇｈｔ  ｐｌａｃｅ  ｆｏｒ  ａ  ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ  ｔｈｉｒｄ  ｗａｙ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ．Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １８，９７５−１０２６頁
ヒンツ（Ｈｉｎｔｚ）ら（２００１年）．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ（Ｅ）−４−ｈｙｄｒｏｘｙ−３−ｍｅｔｈｙｌ−ｂｕｔ−２−ｅｎｙｌ  ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ａｓ  ａ  ｍａｊｏｒ  ａｃｔｉｖａｔｏｒ  ｆｏｒ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ．ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．５０９（２）：３１７−２２頁
ジョマア（Ｊｏｍａａ），Ｈ．，ヒュール（Ｆｅｕｒｌｅ），Ｊ．，ルース（Ｌｕｈｓ），Ｋ．，クンズマン（Ｋｕｎｚｍａｎｎ），Ｖ．，トニー（Ｔｏｎｙ），Ｈ．Ｐ．，ヘルドリヒ（Ｈｅｒｄｅｒｉｃｈ），Ｍ．，およびウィルヘルム（Ｗｉｌｈｅｌｍ），Ｍ．（１９９９年ａ）．Ｖｇａｍｍａ９／Ｖｄｅｌｔａ２  Ｔ  ｃｅｌｌ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｌｏｗ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｍａｓｓ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ｄｅｐｅｎｄｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  １−ｄｅｏｘｙ−Ｄ−ｘｙｌｕｌｏｓｅ  ５−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ｐａｔｈｗａｙ  ｏｆ  ｉｓｏｐｒｅｎｏｉｄ  ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．ＦＥＭＳ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｄ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  ２５，３７１−３７８頁
ジョマア（Ｊｏｍａａ），Ｈ．，ウィースナー（Ｗｉｅｓｎｅｒ），Ｊ．，サンダーブランド（Ｓａｎｄｅｒｂｒａｎｄ），Ｓ．，アルティンシセク（Ａｌｔｉｎｃｉｃｅｋ），Ｂ．，ウィデメイヤー（Ｗｅｉｄｅｍｅｙｅｒ），Ｃ．，ヒンツ（Ｈｉｎｔｚ），Ｍ．，ツルバコバ（Ｔｕｒｂａｃｈｏｖａ），Ｉ．，エバール（Ｅｂｅｒｌ），Ｍ．，ザイドゥラー（Ｚｅｉｄｌｅｒ），Ｊ．，リヒテンターラー（Ｌｉｃｈｔｅｎｔｈａｌｅｒ），Ｈ．Ｋ．ら（１９９９年ｂ）．Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｎｏｎｍｅｖａｌｏｎａｔｅ  ｐａｔｈｗａｙ  ｏｆ  ｉｓｏｐｒｅｎｏｉｄ  ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｓ  ａｎｔｉｍａｌａｒｉａｌ  ｄｒｕｇｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８５，１５７３−１５７６頁
カトー（Ｋａｔｏ），Ｙ．，タナカ（Ｔａｎａｋａ），Ｙ．，ミヤガワ（Ｍｉｙａｇａｗａ），Ｆ．，ヤマシタ（Ｙａｍａｓｈｉｔａ），Ｓ．，およびミナト（Ｍｉｎａｔｏ），Ｎ．（２００１年）．Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｏｆ  ｔｕｍｏｒ  ｃｅｌｌｓ  ｆｏｒ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ｎｏｎｐｅｐｔｉｄｅ  ａｎｔｉｇｅｎｓ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６７，５０９２−５０９８頁
ノール（Ｋｎｏｒｒｅ）ら，Ｆｅｂｓ  ｌｅｔｔｅｒｓ，１９７６年，７０，１０５−１０８頁
コバヤシ（Ｋｏｂａｙａｓｈｉ），Ｈ．，タナカ（Ｔａｎａｋａ），Ｙ．，ヤギ（Ｙａｇｉ），Ｊ．，トーマ（Ｔｏｍａ），Ｈ．，およびウチヤマ（Ｕｃｈｉｙａｍａ），Ｔ．（２００１年）．Ｇａｍｍａ／ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｐｒｏｖｉｄｅ  ｉｎｎａｔｅ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ａｇａｉｎｓｔ  ｒｅｎａｌ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ  ５０，１１５−１２４頁
コッピシュ（Ｋｏｐｐｉｓｃｈ）  Ａ．Ｔ．ら，Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，第２巻，第２号（２０００年）２１５−２１７頁
Ｅ．Ｍ．コソワー（Ｋｏｓｏｗｅｒ），Ｂ．パゼンシェブスキー（Ｐａｚｈｅｎｃｈｅｖｓｋｙ），Ｈ．ドディック（Ｄｏｄｉｕｋ），Ｈ．ケネティ（Ｋａｎｅｔｙ），およびＤ．ファウスト（Ｆａｕｓｔ），Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，４６，１６６８頁（１９８１年）
クンズマン（Ｋｕｎｚｍａｎｎ），Ｖ．，バウアー（Ｂａｕｅｒ），Ｅ．，およびウィルヘルム（Ｗｉｌｈｅｌｍ），Ｍ．（１９９９年）．Ｇａｍｍａ／ｄｅｌｔａ  Ｔ−ｃｅｌｌ  ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｐａｍｉｄｒｏｎａｔｅ．Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３４０，７３７−７３８頁
ラング（Ｌａｎｇ），Ｆ．，ペイラット（Ｐｅｙｒａｔ），Ｍ．Ａ．，コンスタント（Ｃｏｎｓｔａｎｔ），Ｐ．，ダボドー（Ｄａｖｏｄｅａｕ），Ｆ．，ディビッド−アメリン（Ｄａｖｉｄ−Ａｍｅｌｉｎｅ），Ｊ．，ポケット（Ｐｏｑｕｅｔ），Ｙ．，バイ（Ｖｉｅ），Ｈ．，フルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．，およびボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．（１９９５年）．Ｅａｒｌｙ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  Ｖ  ｇａｍｍａ  ９Ｖ  ｄｅｌｔａ  ２  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｂｒｏａｄ  ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  ＴＮＦ  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｂｙ  ｎｏｎｐｅｐｔｉｄｉｃ  ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｌｉｇａｎｄｓ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １５４，５９８６−５９９４頁
レオナルド（Ｌｅｏｎａｒｄ）  Ｍ．Ｓ．ら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．（２００４年），６９，２５２６−２５３１頁
リュー（Ｌｉｕ）ら，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．１９９９年，３８，第９号，１２４５−１２４７頁
ミトロプーロス（Ｍｉｔｒｏｐｏｕｌｏｓ），Ｄ．，クーイ（Ｋｏｏｉ），Ｓ．，ロドリゲス−ビラヌエバ（Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ−Ｖｉｌｌａｎｕｅｖａ），Ｊ．，およびプラツォウカス（Ｐｌａｔｓｏｕｃａｓ），Ｃ．Ｄ．（１９９４年）．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｆｒｅｓｈ（ｕｎｃｕｌｔｕｒｅｄ）ｔｕｍｏｕｒ−ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ（ＴＩＬ）ａｎｄ  ＴＩＬ−ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅｓ  ｆｒｏｍ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｒｅｎａｌ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｃｌｉｎ  Ｅｘｐ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ９７，３２１−３２７頁
ミヤシタ（Ｍｉｙａｓｈｉｔａ）ら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．４２（１９７７年）３７７２−３７７４頁）
ミヤガワ（Ｍｉｙａｇａｗａ），Ｆ．，タナカ（Ｔａｎａｋａ），Ｙ．，ヤマシタ（Ｙａｍａｓｈｉｔａ），Ｓ．，およびミナト（Ｍｉｎａｔｏ），Ｎ．（２００１年）．Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ａｎｔｉｇｅｎ  ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｍｏｎｏｃｙｔｅ  ｌｉｎｅａｇｅ  ｃｅｌｌｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ａｍｉｎｏｂｉｓｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅ  ａｎｔｉｇｅｎ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６６，５５０８−５５１４頁
モロー（Ｍｏｒｅａｕ）ら，（１９８６年）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．７８：８７４）
モリタ（Ｍｏｒｉｔａ），Ｃ．Ｔ．，ベックマン（Ｂｅｃｋｍａｎ），Ｅ．Ｍ．，ブコウスキ（Ｂｕｋｏｗｓｋｉ），Ｊ．Ｆ．，タナカ（Ｔａｎａｋａ），Ｙ．，バンド（Ｂａｎｄ），Ｈ．，ブルーム（Ｂｌｏｏｍ），Ｂ．Ｒ．，ゴラン（Ｇｏｌａｎ），Ｄ．Ｅ．，およびブレンナー（Ｂｒｅｎｎｅｒ），Ｍ．Ｂ．（１９９５年）．Ｄｉｒｅｃｔ  ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｏｎｐｅｐｔｉｄｅ  ｐｒｅｎｙｌ  ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ａｎｔｉｇｅｎｓ  ｔｏ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ３，４９５−５０７頁
ニコライデス（Ｎｉｋｏｌａｉｄｅｓ）ら，Ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ  Ｏｆ  Ａｍｉｎｅｓ  Ｔｏ  Ｐｈｏｓｐｈｏｅｓｔｅｒｓ：Ｄｅｃｙｌ  Ｄｉｅｔｈｙｌ  Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ，Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｅｓ，ＣＶ  ９，１９４頁
ニルソン（Ｎｉｌｓｓｏｎ）ら，Ａｃｔａ  Ｃｈｅｍｉｃａ  Ｓｃａｎｄｉｎａｖｉａ  Ｂ  ３５，１９８１年，１９−２７頁
ニルソン（Ｎｉｌｓｓｏｎ）およびモスバッハ（Ｍｏｓｂａｃｈ），Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９８０年，第１１２巻，３９７−４０２頁
ファン（Ｐｈａｎ）およびポールター（Ｐｏｕｌｔｅｒ），Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．（２００１年），６６，６７０５−６７１０頁
ポシア（Ｐｏｃｃｉａ），Ｆ．，シプリアニ（Ｃｉｐｒｉａｎｉ），Ｂ．，ベンデッティ（Ｖｅｎｄｅｔｔｉ），Ｓ．，コリッツィ（Ｃｏｌｉｚｚｉ），Ｖ．，ポケット（Ｐｏｑｕｅｔ），Ｙ．，バティスティニ（Ｂａｔｔｉｓｔｉｎｉ），Ｌ．，ロペス−ボテ（Ｌｏｐｅｚ−Ｂｏｔｅｔ），Ｍ．，フルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．，およびゴウギオン（Ｇｏｕｇｅｏｎ），Ｍ．Ｌ．（１９９７年ａ）．ＣＤ９４／ＮＫＧ２  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｃｏｍｐｌｅｘ  ｍｏｄｕｌａｔｅｓ  ｂｏｔｈ  ａｎｔｉ−ｖｉｒａｌ  ａｎｄ  ａｎｔｉ−ｔｕｍｏｒａｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  ｏｆ  ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌ  ｐｈｏｓｐｈｏａｎｔｉｇｅｎ−ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｖ  ｇａｍｍａ  ９Ｖ  ｄｅｌｔａ  ２  Ｔ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １５９，６００９−６０１７頁
ポシア（Ｐｏｃｃｉａ），Ｆ．，マルコフスキ（Ｍａｌｋｏｖｓｋｙ），Ｍ．，ゴウギオン（Ｇｏｕｇｅｏｎ），Ｍ．Ｌ．，ボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．，ロペス−ボテ（Ｌｏｐｅｚ−Ｂｏｔｅｔ），Ｍ．，フルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．，およびコリッツィ（Ｃｏｌｉｚｚｉ），Ｖ．（１９９７年ｂ）．Ｇａｍｍａｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｒ  ａｎｅｒｇｙ  ｄｕｒｉｎｇ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ：  ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｎｏｎｐｅｐｔｉｄｉｃ  ＴＣＲ  ｌｉｇａｎｄｓ  ａｎｄ  ＨＬＡ  ｃｌａｓｓ  Ｉ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ．Ｊ  Ｌｅｕｋｏｃ  Ｂｉｏｌ  ６２，２８７−２９１頁
ポケット（Ｐｏｑｕｅｔ），Ｙ．，クロカ（Ｋｒｏｃａ），Ｍ．，ハレリー（Ｈａｌａｒｙ），Ｆ．，ステンマーク（Ｓｔｅｎｍａｒｋ），Ｓ．，ペイラット（Ｐｅｙｒａｔ），Ｍ．Ａ．，ボンネビル（Ｂｏｎｎｅｖｉｌｌｅ），Ｍ．，フルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．，およびシューステット（Ｓｊｏｓｔｅｄｔ），Ａ．（１９９８年）．Ｅｘｐａｎｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｖｇａｍｍａ９  Ｖｄｅｌｔａ２  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｉｓ  ｔｒｉｇｇｅｒｅｄ  ｂｙ  Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ  ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｐｈｏｓｐｈｏａｎｔｉｇｅｎｓ  ｉｎ  ｔｕｌａｒｅｍｉａ  ｂｕｔ  ｎｏｔ  ａｆｔｅｒ  ｔｕｌａｒｅｍｉａ  ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ．Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ  ６６，２１０７−２１１４頁
ローマー（Ｒｏｈｍｅｒ），Ｍ．，クナリ（Ｋｎａｎｉ），Ｍ．，シモニン（Ｓｉｍｏｎｉｎ），Ｐ．，サッター（Ｓｕｔｔｅｒ），Ｂ．，およびサーム（Ｓａｈｍ），Ｈ．（１９９３年）．Ｉｓｏｐｒｅｎｏｉｄ  ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｉｎ  ｂａｃｔｅｒｉａ：  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｐａｔｈｗａｙ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｅａｒｌｙ  ｓｔｅｐｓ  ｌｅａｄｉｎｇ  ｔｏ  ｉｓｏｐｅｎｔｅｎｙｌ  ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ．Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ  ２９５（Ｐｔ  ２），５１７−５２４頁
ロハス（Ｒｏｊａｓ），Ｒ．Ｅ．，トレス（Ｔｏｒｒｅｓ），Ｍ．，フルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．，ハーディング（Ｈａｒｄｉｎｇ），Ｃ．Ｖ．，およびブーム（Ｂｏｏｍ），Ｗ．Ｈ．（２００２年）．Ｐｈｏｓｐｈｏａｎｔｉｇｅｎ  ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ  ｔｏ  ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ−ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｖｇａｍｍａ９Ｖｄｅｌｔａ２＋  Ｔ  ｃｅｌｌｓ：  ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｃｈｌｏｒｏｑｕｉｎｅ．Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ  ７０，４０１９−４０２７頁
サトー（Ｓａｔｏ），Ｅ．，ヨシカワ（Ｙｏｓｈｉｋａｗａ），Ｍ．，およびカナオカ（Ｋａｎａｏｋａ），Ｙ．Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ，３８（８），２２８７−２２８９頁（１９９０年）
セガール（Ｓｅｇｈａｌ），Ｄ，ビジャイ（Ｖｉｊａｙ），Ｉ．Ｋ．，Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ，２１８，８７（１９９４年）
セリン（Ｓｅｌｉｎ），Ｌ．Ｋ．，スチュアート（Ｓｔｅｗａｒｔ），Ｓ．，シェン（Ｓｈｅｎ），Ｃ．，マオ（Ｍａｏ），Ｈ．Ｑ．，およびウィルキンス（Ｗｉｌｋｉｎｓ），Ｊ．Ａ．（１９９２年）．Ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ｔｈｅ  ｔｕｍｏｕｒ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅ  ＲＰＭＩ  ８２２６：  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｉｔｙ  ｏｆ  ｃｌｏｎａｌ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ＧｒｏＥＬ  ｈｅａｔ  ｓｈｏｃｋ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ．Ｓｃａｎｄ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ３６，１０７−１１７頁
シェン（Ｓｈｅｎ），Ｙ．，チョウ（Ｚｈｏｕ），Ｄ．，チゥ（Ｑｉｕ），Ｌ．，レイ（Ｌａｉ），Ｘ．，サイモン（Ｓｉｍｏｎ），Ｍ．，シェン（Ｓｈｅｎ），Ｌ．，コウ（Ｋｏｕ），Ｚ．，ワン（Ｗａｎｇ），Ｑ．，ジャン（Ｊｉａｎｇ），Ｌ．，エステプ（Ｅｓｔｅｐ），Ｊ．ら．（２００２年）．Ａｄａｐｔｉｖｅ  ｉｍｍｕｎｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｏｆ  Ｖｇａｍｍａ２Ｖｄｅｌｔａ２＋Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｄｕｒｉｎｇ  ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２９５，２２５５−２２５８頁
シカード（Ｓｉｃａｒｄ），Ｈ．，アル・サーティ（Ａｌ  Ｓａａｔｉ），Ｔ．，デルソル（Ｄｅｌｓｏｌ），Ｇ．，およびフルニエ（Ｆｏｕｒｎｉｅ），Ｊ．Ｊ．（２００１年）．Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｐｈｏｓｐｈｏａｎｔｉｇｅｎｓ  ｅｎｈａｎｃｅ  ｈｕｍａｎ  Ｖｇａｍｍａ９Ｖｄｅｌｔａ２  Ｔ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  ｋｉｌｌｉｎｇ  ｏｆ  ｎｏｎ−Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓ  Ｂ  ｌｙｍｐｈｏｍａ．Ｍｏｌ  Ｍｅｄ  ７，７１１−７２２頁
スターム（Ｓｔｕｒｍ），Ｅ．，ブラークマン（Ｂｒａａｋｍａｎ），Ｅ．，フィッシュ（Ｆｉｓｃｈ），Ｐ．，ブルーデンヒル（Ｖｒｅｕｇｄｅｎｈｉｌ），Ｒ．Ｊ．，ソンデル（Ｓｏｎｄｅｌ），Ｐ．，およびボルフィス（Ｂｏｌｈｕｉｓ），Ｒ．Ｌ．（１９９０年）．Ｈｕｍａｎ  Ｖ  ｇａｍｍａ  ９−Ｖ  ｄｅｌｔａ  ２  Ｔ  ｃｅｌｌ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  ｓｈｏｗ  ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ｔｏ  Ｄａｕｄｉ  Ｂｕｒｋｉｔｔ’ｓ  ｌｙｍｐｈｏｍａ  ｃｅｌｌｓ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １４５，３２０２−３２０８頁
タナカ（Ｔａｎａｋａ），Ｙ．，モリタ（Ｍｏｒｉｔａ），Ｃ．Ｔ．，ニーブス（Ｎｉｅｖｅｓ），Ｅ．，ブレンナー（Ｂｒｅｎｎｅｒ），Ｍ．Ｂ．，およびブルーム（Ｂｌｏｏｍ），Ｂ．Ｒ．（１９９５年）．Ｎａｔｕｒａｌ  ａｎｄ  ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｎｏｎ−ｐｅｐｔｉｄｅ  ａｎｔｉｇｅｎｓ  ｒｅｃｏｇｎｉｚｅｄ  ｂｙ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｎａｔｕｒｅ  ３７５，１５５−１５８頁
テオドラ（Ｔｈｅｏｄｏｒａ）  Ｗ．グリーン（Ｇｒｅｅｎｅ）およびピーター（Ｐｅｔｅｒ）Ｇ．Ｍ．ウッツ（Ｗｕｔｓ），ジョン・ウィリー＆サンズ社（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．）（１９９９年）により刊行された「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」，第３版
バレンタイン（Ｖａｌｅｎｔｉｊｎ），バン・デル・マレル（ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｍａｒｅｌ），コーヘン（Ｃｏｈｅｎ），バン・ブーム（ｖａｎ  Ｂｏｏｍ），Ｓｙｎ．ｌｅｔｔ．１９９１年，６６３−６６４頁
バレンタイン（Ｖａｌｅｎｔｉｊｎ），Ａ．Ｒ．Ｐ．Ｍ．，Ｏ．バン・デル・ベルグ（ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｂｅｒｇ），Ｇ．Ａ．バン・デル・マレル（ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｍａｒｅｌ），Ｌ．Ｈ．コーヘン（Ｃｏｈｅｎ），Ｊ．Ｈ．バン・ブーム（ｖａｎ  Ｂｏｏｍ），Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，第５１−７巻，１９９５年，２０９９−２１０８頁
ワシュブッシュ（Ｗａｓｃｈｂｕｓｃｈ）ら（１９９７年）．Ａ  ｎｅｗ  ｒｏｕｔｅ  ｔｏ  ａｌｐｈａ−ｆｌｕｏｒｏａｌｋｙｌｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅｓ．Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．１，１１３５−１１３９頁
ウィルヘルム（Ｗｉｌｈｅｌｍ），Ｍ．，クンズマン（Ｋｕｎｚｍａｎｎ），Ｖ．，エクスタイン（Ｅｃｋｓｔｅｉｎ），Ｓ．，ライマー（Ｒｅｉｍｅｒ），Ｐ．，ワイシンガー（Ｗｅｉｓｓｉｎｇｅｒ），Ｆ．，ルーディガー（Ｒｕｅｄｉｇｅｒ），Ｔ．，およびトニー（Ｔｏｎｙ），Ｈ．Ｐ．（２００３年）．｛ｇａｍｍａ｝｛ｄｅｌｔａ｝  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｆｏｒ  ｉｍｍｕｎｅ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｌｙｍｐｈｏｉｄ  ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ．Ｂｌｏｏｄ，１０２（１），２００−６頁
ヤマグチ（Ｙａｍａｇｕｃｈｉ），Ｔ．，フジミヤ（Ｆｕｊｉｍｉｙａ），Ｙ．，スズキ（Ｓｕｚｕｋｉ），Ｙ．，カタクラ（Ｋａｔａｋｕｒａ），Ｒ．，およびエビナ（Ｅｂｉｎａ），Ｔ．（１９９７年）．Ａ  ｓｉｍｐｌｅ  ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｂｌｏｏｄ  ｏｆ  ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｕｓｉｎｇ  ｓｏｌｉｄ−ｐｈａｓｅ  ａｎｔｉ−ＣＤ３  ａｎｔｉｂｏｄｙおよびｓｏｌｕｂｌｅ  ＩＬ−２．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２０５，１９−２８頁
チャン（Ｚｈａｎｇ）  ドングル（Ｄｏｎｇｌｕ）およびポールター（Ｐｏｕｌｔｅｒ）  Ｃ．デール（Ｄａｌｅ）「Ａｎａｌｙｓｉｓ  ａｎｄ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｅｄ  Ｉｓｏｐｒｅｎｏｉｄｓ  ｂｙ  Ｒｅｖｅｒｓｅｄ−Ｐｈａｓｅ  ＨＰＬＣ」，Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，第２１３巻，３５６−３６１頁（１９９３年）
ツェン（Ｚｈｅｎｇ），Ｂ．，ラム（Ｌａｍ），Ｃ．，イム（Ｉｍ），Ｓ．，ファン（Ｈｕａｎｇ），Ｊ．，ルク（Ｌｕｋ），Ｗ．，ラウ（Ｌａｕ），Ｓ．Ｙ．，ヤウ（Ｙａｕ），Ｋ．Ｋ．，ウォン（Ｗｏｎｇ），Ｃ．，ヤオ（Ｙａｏ），Ｋ．，およびン（Ｎｇ），Ｍ．Ｈ．（２００１年ａ）．Ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｔｕｍｏｕｒ  ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  ＩＬ−７  ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ  ｏｆ  ＣＤ５６（−）ａｎｄ  ＣＤ５６（＋）ｓｕｂｓｅｔｓ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｇａｍｍａ  ｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｓｃａｎｄ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ５３，４０−４８頁
ツェン（Ｚｈｅｎｇ），Ｂ．Ｊ．，チャン（Ｃｈａｎ），Ｋ．Ｗ．，イム（Ｉｍ），Ｓ．，チュア（Ｃｈｕａ），Ｄ．，シャム（Ｓｈａｍ），Ｊ．Ｓ．，ティン（Ｔｉｎ），Ｐ．Ｃ．，ヒー（Ｈｅ），Ｚ．Ｍ．，およびン（Ｎｇ），Ｍ．Ｈ．（２００１年ｂ）．Ａｎｔｉ−ｔｕｍｏｒ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｇａｍｍａｄｅｌｔａ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ａ  ｍｏｕｓｅ  ｔｕｍｏｒ  ｍｏｄｅｌ．Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ  ９２，４２１−４２５頁
【図面の簡単な説明】
【０１６７】
【図１】実施例１で実行されるような化合物ＨＴｉｇｌｙｌＰＰの調製のための合成スキームである。
【図２】実施例２および３で実行されるような化合物Ｈ−ＡｎｇｅｌｙｌＰＰおよびＣ−ＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰの調製のための合成スキームである。
【図３】本発明の化合物ＨＡｎｇｅｌｙｌＰＰおよびＨＴｉｇｌｙｌＰＰ、ならびに基準化合物（Ｒ，Ｓ）−ＢｒＨＰＰおよび（Ｅ）−ＨＤＭＡＰＰのインビトロ用量応答曲線およびＥＣ５０値を示す。
【図１】
2008534489.tif 000057
【図２】
2008534489.tif 000058
【図３】
2008534489.tif 000059
【国際調査報告】
2008534489.tif 000060
2008534489.tif 000061
2008534489.tif 000062
2008534489.tif 000063