(57)【要約】  本開示は、線維組織誘導タンパク質を含む組成物を使用する、ヘルニア修復、および筋膜組織の増殖刺激方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物における筋膜欠損の治療方法であって、治療有効量の線維組織誘導タンパク質を含む組成物を筋膜欠損部位に投与することを含む治療方法。
【請求項２】
線維組織誘導タンパク質が、（１）ＢＭＰ−１２，ＢＭＰ−１３、またはＭＰ−５２に対して少なくとも７０％同一であるか、あるいは（２）線維組織を誘導することができる（１）のフラグメントである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
線維組織誘導タンパク質がＢＭＰ−１２である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
線維組織誘導タンパク質がＢＭＰ−１３である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
線維組織誘導タンパク質がＭＰ−５２である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
筋膜欠損が創傷と関連している、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
筋膜欠損がヘルニアと関連している、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
ヘルニアが鼠径部または大腿部である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
哺乳動物がヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
哺乳動物が糖尿病を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
組成物が、組織接着剤をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
組織接着剤が、フィブリン、フィブリノーゲン、トロンビン、アプロチニン、第ＶＩＩＩ因子、およびシアノアクリル酸２−オクチルからなる群から選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
組成物が、ヘルニア修復用に構成された外科的インプラントを使用して送達される、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
外科的インプラントがメッシュを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
メッシュが、ポリプロピレン、ポリテトラフルオロエチレン、ポリウレタン、またはポリエステルを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
メッシュが、生体吸収性物質を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
生体吸収性物質が、コラーゲン、ゼラチン、ケラチン、ラミニン、フィブリン、フィブロネクチン、アルギネート、ヒアルロン酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸、ポリグリコリド、またはこれらの組合せである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
外科的インプラントが、抗癒着化合物または癒着遮断物を含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１９】
抗癒着化合物が、化学的に修飾されたヒアルロン酸ナトリウムおよびカルボキシメチルセルロース、またはヒアルロン酸、またはコラーゲンである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
（ａ）対象の筋膜欠損を修復するために構成され、かつ治療有効量の線維組織誘導タンパク質を含むメッシュ様部材、および所望により
（ｂ）メッシュ様部材を筋膜の部位に固定するための手段
を含む、ヘルニア修復デバイス。
【請求項２１】
線維組織誘導タンパク質が、（１）ＢＭＰ−１２、ＢＭＰ−１３、またはＭＰ−５２に対して少なくとも７０％同一であるか、あるいは（２）線維組織を誘導することができる（１）のフラグメントである、請求項２０に記載のデバイス。
【請求項２２】
哺乳動物の筋膜欠損を修復するための薬剤またはデバイスの製造における治療有効量の線維組織誘導タンパク質の使用。
【請求項２３】
線維組織誘導タンパク質が、（１）ＢＭＰ−１２、ＢＭＰ−１３、またはＭＰ−５２に対して少なくとも７０％同一であるか、あるいは（２）線維組織を誘導することができる（１）のフラグメントである、請求項２２に記載の使用。
【請求項２４】
線維組織誘導タンパク質がＢＭＰ−１２である、請求項２２に記載の使用。
【請求項２５】
線維組織誘導タンパク質がＢＭＰ−１３である、請求項２２に記載の使用。
【請求項２６】
線維組織誘導タンパク質がＭＰ−５２である、請求項２２に記載の使用。
【請求項２７】
筋膜欠損が創傷と関連している、請求項２２に記載の使用。
【請求項２８】
筋膜欠損がヘルニアと関連している、請求項２２に記載の使用。
【請求項２９】
ヘルニアが鼠径部または大腿部である、請求項２８に記載の使用。
【請求項３０】
哺乳動物がヒトである、請求項２２に記載の使用。
【請求項３１】
哺乳動物が糖尿病を有する、請求項２２に記載の使用。
【請求項３２】
薬剤が、組織接着剤をさらに含む、請求項２２に記載の使用。
【請求項３３】
組織接着剤が、フィブリン、フィブリノーゲン、トロンビン、アプロチニン、第ＶＩＩＩ因子、およびシアノアクリル酸２−オクチルからなる群から選択される、請求項３２に記載の使用。
【請求項３４】
デバイスが、ヘルニア修復用に構成されたインプラントを含む、請求項２２に記載の使用。
【請求項３５】
インプラントがメッシュを含む、請求項３４に記載の使用。
【請求項３６】
メッシュが、ポリプロピレン、ポリテトラフルオロエチレン、ポリウレタン、またはポリエステルを含む、請求項３５に記載の使用。
【請求項３７】
メッシュが、生体吸収性物質を含む、請求項３５に記載の使用。
【請求項３８】
生体吸収性物質が、コラーゲン、ゼラチン、ケラチン、ラミニン、フィブリン、フィブロネクチン、アルギネート、ヒアルロン酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸、ポリグリコリド、またはこれらの組合せである、請求項３７に記載の使用。
【請求項３９】
インプラントが、抗癒着化合物または癒着遮断物を含む、請求項３４に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる２００５年３月２４日出願の米国特許仮出願第６０／６６４，９３３号に基づく優先権を主張する。
【０００２】
本発明は、ヘルニア修復の分野、および筋膜組織を強化または修復するその他の方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
ヘルニアは、例えば、腹壁などの構造体の筋膜欠損であり、その構造体を通して器官、器官の一部、組織、組織の一部が突出できる。それは、正常であれば器官または組織を収容している構造体における筋膜の減弱、突出、または事実上の断裂を伴うのが通常である。多くのタイプのヘルニアが存在する。例えば、下腹部領域の場合、ヘルニアは、腹壁の欠損中にまたは欠損を通して通過する腸またはその他の組織などの腹内要素を伴うことが多い。鼠径部領域に発生する少なくとも２つのタイプのヘルニア、鼠径および大腿ヘルニアが存在する。男性より女性でより一般的である大腿ヘルニアは、大腿輪を通る組織または器官の貫通を伴う。鼠径ヘルニアは、浅鼠径輪を通る器官または組織の貫通を伴う。間接鼠径ヘルニアは、鼠径輪に腹腔を残し、鼠径管を下降するが、直接ヘルニアは、ヘッセルバッハ三角の鼠径管の床を通って突出する。鼠径と異なる部位の腹壁で発生するヘルニアは、腹壁ヘルニアと呼ばれる。腹壁ヘルニアの例には、臍および切開創ヘルニアが含まれる。その他のタイプのヘルニアは、外科教科書で詳しく特徴付けられている。
【０００４】
ヘルニアの周知の原因には、肥満、妊娠、窮屈な衣類、ウェイトリフティングなどの突然の身体運動、咳き込み、および腹部損傷が含まれる。米国国立保健統計センターによれば、毎年、ほぼ５００万人のアメリカ人がヘルニアを発症している。鼠径ヘルニアは、特に、陰嚢中に降下した睾丸の後に鼠径中に残された不支持空間のため、男性でより一般的である。腿の上部の大腿部領域でのヘルニアは、女性でより一般的であり、妊娠および分娩に起因する。
【０００５】
患者がヘルニア領域の腹部に対して外部圧力を印加する脱腸帯を着用することによって、ヘルニア症状からの一時的軽減を得ることができるヘルニアもある。これは、よく知られた古くからの治療であり、稀ではあっても、一時的以上の苦痛の軽減を提供するが、脱腸帯を着用することに由来する不快を患者にもたらす場合がある。永続的軽減には、一般に、もし存在するなら不快感を与える器官または組織をその元来の正しい位置に戻すための侵襲性手術、それに続く、正常であればその器官または組織を収容する構造体の筋膜欠損を修復および強化することが必要とされる。
【０００６】
さらに、それを通して内部の器官または組織が突出できる構造体に形成された開口部または穴を修復するために、メッシュ型のパッチが使用されてきた。典型的には、これらのパッチは、患者の身体に永続的に埋め込まれ、患者に術後不快を引き起こす場合がある。さらに、それらは、細菌の住処となり、それによって感染症につながる可能性を有することが報告されている。
【０００７】
メッシュ型パッチは、ヘルニアの修復に広く使用されているが、それらの使用にしばしば関連する１つの問題が再発である。再発は、少なくとも一部は、ヘルニアの修復に必要とされる時間の長さに起因すると考えられており、例えば、メッシュ型パッチは、患者に埋め込まれた後のある期間後に取り外されるか、あるいは生体吸収性メッシュの場合のように、適切な修復に十分な長さで身体内に留まることができないので、要求を満たさないことが多い。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、対象における筋膜組織の増殖を刺激する方法を対象とする。筋膜は、筋肉、器官および身体のその他の軟質構造体を包み、隔離し、または一緒に束ねる線維結合組織からなる板または帯である。筋膜組織の増殖刺激は、例えば、筋膜組織における傷害または欠損を含むことの多いヘルニアを治療するうえで重要である。本明細書に記載の外科的インプラントおよび組成物は、鼠径（直接および間接）、大腿、切開創、および再発ヘルニアを含む、腹腔におけるヘルニアなどの筋膜組織欠損を修復するのに特に有用である。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
具体的には、本発明は、線維組織誘導タンパク質、例えば、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）ファミリーのメンバー、例えば、ＢＭＰ−１２、ＢＭＰ−１３、またはＭＰ−５２などを含む、筋膜組織欠損を治療するための組成物およびデバイス、ならびに関連方法を提供する。このような組成物は、さらに、組織接着剤、例えばフィブリンを含むことができる。このような組成物の使用は、より迅速かつ／またはより効果的な筋膜の修復をもたらす。１種または複数の線維組織誘導タンパク質（および所望により１種または複数の組織接着剤）を含む組成物は、線維組織欠損部位に直接的に、または例えばメッシュなどの外科的インプラントを使用して送達することができる。別法として、１種または複数の線維組織誘導タンパク質を含む組成物および１種または複数の組織接着剤を含む別個の組成物は、筋膜組織欠損部位に直接的に、または外科的インプラントを使用して送達することができる。サイズおよび形状を異にする適切な筋膜組織欠損修復インプラントは、移動を防ぐため、取り囲んでいる健全な組織に固定できる。インプラントは、例えばヘルニアにおいて、筋膜欠損の壁を実質上閉塞し、かつ壁に一致するように構成することもできる。
【００１０】
本発明の組成物およびデバイスを製造および使用する方法も提供する。
【００１１】
本発明の実施形態には、限定はしないが、次の形態が含まれる。
哺乳動物の筋膜欠損を修復するための薬剤またはデバイスの製造における治療有効量の線維組織誘導タンパク質の使用：ここで、該線維組織誘導タンパク質は、（１）ＢＭＰ−１２、ＢＭＰ−１３、またはＭＰ−５２に対して少なくとも７０％同一であるか、あるいは（２）線維組織を誘導する能力のある（１）のフラグメントであり、ここで、線維組織誘導タンパク質はＢＭＰ−１２であり、線維組織誘導タンパク質はＢＭＰ−１３であり、かつ／または線維組織誘導タンパク質はＭＰ−５２である。
【００１２】
哺乳動物の筋膜欠損を修復するための薬剤またはデバイスの製造における治療有効量の線維組織誘導タンパク質の使用：ここで、筋膜欠損は創傷と関連しており、かつ／また筋膜欠損は例えば鼠径または大腿ヘルニアなどのヘルニアと関連している。
【００１３】
例えばヒトなどの哺乳動物（場合によっては、哺乳動物は糖尿病を有する）の筋膜欠損を修復するための薬剤またはデバイスの製造における治療有効量の線維組織誘導タンパク質の使用。
【００１４】
哺乳動物の筋膜欠損を修復するための薬剤またはデバイスの製造における治療有効量の線維組織誘導タンパク質の使用：ここで、該薬剤は、例えば、フィブリン、フィブリノーゲン、トロンビン、アプロチニン、第ＶＩＩＩ因子、およびシアノアクリル酸２−オクチルなどの組織接着剤をさらに含む。
【００１５】
哺乳動物の筋膜欠損を修復するための薬剤またはデバイスの製造における治療有効量の線維組織誘導タンパク質の使用：ここで、該デバイスは、例えば、ポリプロピレン、ポリテトラフルオロエチレン、ポリウレタン、またはポリエステルを含む例えばメッシュなどの、ヘルニア修復用に構成されたインプラントを含み、該メッシュは、生体吸収性物質を含み、該生体吸収性物質は、コラーゲン、ゼラチン、ケラチン、ラミニン、フィブリン、フィブロネクチン、アルギネート、ヒアルロン酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸、ポリグリコリド、またはこれらの組合せであり、所望により、該インプラントは、例えば化学的に修飾されたヒアルロン酸ナトリウムおよびカルボキシメチルセルロース、またはヒアルロン酸、またはコラーゲンなどの抗癒着化合物、または癒着遮断物を含む。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
本明細書に記載の外科的インプラント、組成物、および方法は、一般に、例えばヘルニア修復などにおける筋膜組織欠損の治療に関する。より詳細には、外科的インプラント、組成物、および方法は、線維組織誘導タンパク質、例えば、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）ファミリーのメンバー、例えば、ＢＭＰ−１２、ＢＭＰ−１３、またはＭＰ−５２などを採用する。証拠は、コラーゲン代謝の欠損が、特定タイプのヘルニア、例えば成人の鼠径ヘルニアなどの病因に含まれており、ヘルニアの効果的な修復に問題を引き起こし、加えて、修復に続く再発の可能性を増大する横断筋膜組織の減弱につながっていることを示唆している。筋膜が傷つけられた場合、筋膜は、ＩＩＩ型と呼ばれる特定タイプのコラーゲン線維を用いて回復する。したがって、限定としてではなく理論として、本発明の線維組織誘導タンパク質は、コラーゲン代謝の修正に寄与し、それによって筋膜欠損を治療すると仮定される。
【００１７】
一般に、本発明は、線維組織誘導タンパク質を含む組成物を筋膜欠損部位へ送達することを含む、筋膜組織欠損の治療方法を提供する。このような組成物は、組織接着剤、例えばフィブリンをさらに含むことができる。組成物は、直接的に、または筋膜組織欠損の修復に適した例えば外科的インプラントなどの埋め込み可能なデバイスを使用してヘルニア部位に送達できる。外科的インプラント、組成物、および方法を以下で詳細に説明する。
【００１８】
線維組織誘導タンパク質
本発明の組成物、インプラント、および方法で使用される繊維組織誘導タンパク質は、トランスフォーミング増殖因子ベータ（ＴＧＦ−β）スーパーファミリーとして知られているタンパク質ファミリーから選択される。このファミリーには、アクチビン、インヒビン、および骨形成タンパク質（ＢＭＰ）が含まれる。特定のＢＭＰは、線維組織の増殖を誘導するのに特に有用である。好ましい実施形態において、線維組織誘導タンパク質は、ＢＭＰファミリーのタンパク質のサブグループを構成する、ＢＭＰ−１２、ＢＭＰ−１３およびＭＰ−５２（それぞれ、ＧＤＦ−７、ＧＤＦ−６、およびＧＤＦ−５としても知られている）から選択される。ＢＭＰ−１２、ＢＭＰ−１３およびＭＰ−５２のヌクレオチドおよびタンパク質配列は、米国特許第５，６５８，８８２号に開示されており、それらのデータベースアクセッション番号を表１に示す。
【００１９】
【表１】
2008534064.tif 000002
【００２０】
その他のＢＭＰおよびＴＧＦ−βファミリーメンバーに対するヌクレオチドおよびタンパク質配列は当技術分野で周知である。
【００２１】
筋膜組織欠損の修復に有用である可能性のあるその他の候補タンパク質は、例えば、候補タンパク質の存在下で組織統合力を測定することによって、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏもしくはｉｎ  ｖｉｖｏでの細胞によるコラーゲン（特に、ＩＩＩ型コラーゲン）切断を測定することによってヘルニア修復を評価する本明細書に記載の１つまたは複数のアッセイを使用して同定することもできる。ＢＭＰ−１３およびＭＰ−５２は、互いに８６％同一であり、ＢＭＰ−１２に対して８０％同一であるが、それらは、ＴＧＦ−βスーパーファミリーの次の最も相同なメンバー、ＢＭＰ−２に対してわずか５７％同一である（例えば、米国特許第６，０９６，５０６号の図４を参照されたい）。したがって、ＢＭＰ−１２、ＢＭＰ−１３およびＭＰ−５２のいずれか１つに対して少なくとも約７０％の同等であるタンパク質は、必要とされる線維組織誘導活性を所持すると予想される。したがって、若干の実施形態には、ＢＭＰ−１２、ＢＭＰ−１３またはＭＰ−５２に対して例えば７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、９９％同一である線維組織誘導タンパク質の使用が含まれる。このようなタンパク質は、例えば、いくつかの非保存性アミノ酸残基、例えば、配列を整列した場合に、対応するマウスとヒト（またはその他の種）の配列間で相違する残基、あるいはＢＭＰ−１２、ＢＭＰ−１３、およびＭＰ−５２の中のいずれか２つの間で相違するそれらの残基を突然変異させることまたは削除することによって作り変えることができる。天然配列中の保存性アミノ酸の置換も考えられる。別法として、本発明の方法では、線維組織誘導活性を保持するこのような相同または改質タンパク質のフラグメント、および天然繊維組織誘導タンパク質のフラグメントを使用できる。
【００２２】
線維組織誘導タンパク質は、組換えで産生され、あるいは天然供給源から精製される。好ましい実施形態において、該タンパク質は、ヒト起源で、かつ組換えである。タンパク質を組換えで産生する方法は、周知であり、例えば、米国特許第５，６５８，８８２号に記載されている。
【００２３】
若干の実施形態において、本明細書に記載の組成物およびインプラントで使用できる線維組織誘導タンパク質の有効量は、線維組織誘導タンパク質の不在下での対応する修復よりも１０％、２０％、３０％、５０％またはそれ以上速い速度で対象の筋膜を修復するのに十分な量であり、一般に、修復されている筋膜欠損の大きさおよび性質、および／または採用されているインプラントの表面積に左右される。他の実施形態で、線維組織誘導タンパク質の有効量は、線維組織誘導タンパク質の不在下での増殖よりも１０％、２０％、３０％、５０％またはそれ以上速い速度で筋膜組織増殖を刺激するのに十分な量である。
【００２４】
一般に、筋膜欠損を修復するのに、および／または筋膜組織の増殖を刺激するのに使用されるタンパク質の量は、必要とされる材料の立方センチメートル当たり０．００１〜１０ｍｇ、０．０１〜１ｍｇ、または０．１〜０．５ｍｇの範囲である。場合によっては、適用量を、メッシュに適用される組成物のタンパク質濃度から導き出すことができる。例えば、メッシュに適用される組成物は、０．００１〜１０ｍｇ／ｍＬ、０．０１〜１．０ｍｇ／ｍＬ、または０．１〜０．５ｍｇ／ｍＬの１種または複数の線維組織誘導タンパク質を含むことができる。例えば、メッシュが、１ｃｃの体積を有し、同量の液体を吸収できるなら、１００％の含浸量の場合、メッシュに対して１ｍＬの組成物が適用される。含浸量は、２５％〜２００％、５０％〜１５０％、または７５％〜１００％で変化できる。個々の適用量は、扱われている臨床症状によって、および種々の患者変数（例えば、体重、年齢、性）および臨床的具体像（例えば、筋膜欠損の程度および／または部位など）によって決定される。
【００２５】
組織接着剤
本発明の組成物および外科的インプラントで使用するための組織接着剤には、フィブリン、フィブリノーゲン、トロンビン、アプロチニン、および第ＶＩＩＩ因子が含まれる。市販の組織接着剤としては、ＴＩＳＳＥＥＬ（登録商標）（フィブリノーゲン、イリノイ州、Ｄｅｅｒｆｉｅｌｄ、Ｂａｘｔｅｒ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｃｏｒｐ．）およびＤＥＲＭＡＢＯＮＤ（商標）（シアノアクリル酸２−オクチル、ニュージャージー州、Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ、Ｅｔｈｉｃｏｎ）が挙げられる。これらの接着剤は、線維組織誘導タンパク質と直接組み合わせることができ、あるいは線維組織誘導タンパク質の前、後、またはそれと同時に筋膜欠損部位に適用できる。接着剤を、線維組織誘導タンパク質について説明したものと同様の方法で外科的インプラント中に組み込むこともできる。組織接着剤を含む組成物を、筋膜組織の増殖を刺激するために使用することもできる。若干の実施形態において、組織接着剤は、単独または少なくとも１種の線維組織誘導タンパク質と組み合わせて、ペーストまたはゲル形態の組成物で送達される。
【００２６】
その他の添加剤
本明細書に記載の組成物および外科的インプラントで有用である可能性のある添加剤としては、限定はしないが、薬学上許容される塩、多糖、ペプチド、タンパク質、アミノ酸、合成ポリマー、天然ポリマー、および／または界面活性剤が挙げられる。周辺組織および器官の外科的インプラントに対する癒着を低減または防止するのを助ける添加剤は、特に有用であり、本明細書では抗癒着化合物と呼ばれる。このような添加剤の非制限的例には、例えば、化学的に修飾されたヒアルロン酸ナトリウムおよびカルボキシメチルセルロース［活性化剤１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）で修飾された、およびＳＥＰＲＡＦＩＬＭ（登録商標）癒着遮断物（マサチューセッツ州、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、Ｇｅｎｚｙｍｅ  Ｃｏｒｐ．）として市販されている］、ヒアルロン酸、およびコラーゲンが含まれる。
【００２７】
若干の実施形態において、本明細書に記載の組成物および外科的インプラントは、抗生物質などの抗微生物剤を含む。抗生物質の投与は、感染症を防止するのに役立つ。使用できる抗生物質の例には、限定はしないが、ＴＹＧＡＣＩＬ（登録商標）（チゲサイクリン、ニュージャージー州、Ｍａｄｉｓｏｎ、Ｗｙｅｔｈ）、セファゾリンおよびセファマンドールなどのセファロスポリン類、ネチルマイシン、オキサシリンまたはメズロシリンなどのペニシリン類、テトラサイクリン、メトロニダゾール、ゲンタマイシンまたはネオマイシンなどのアミノグリコシド、ならびにリファンピシンが含まれる。一般に、使用される抗生物質の量は、必要とされる材料の立方センチメートルにつき０．００１〜１０ｍｇ、０．０１〜１ｍｇ、または０．１〜０．５ｍｇの範囲である。
【００２８】
接着剤と同様、これらの添加剤は、線維組織誘導タンパク質と直接的に組み合わせるか、あるいは線維組織誘導タンパク質の前、後、またはそれと同時に筋膜欠損部位に適用できる。添加剤は、線維組織誘導タンパク質について説明したと同様の方法で外科的インプラント中に組み込むこともできる。
【００２９】
本発明の方法で有用な組成物は、筋膜欠損の部位に直接送達できる。それらは、さもなければ欠損が伝統的な外科技術を使用して修復される部位へ適用（例えば注入）できる。組成物は、また、このような組成物で処理されていない外科的インプラントと一緒にして使用できる。別法として、本明細書に記載の組成物は、外科的インプラントを所定の場所に埋め込む前に、または埋め込んだ後に、影響を受けた区域に適用できる。
【００３０】
外科的インプラント
ヘルニア修復のための外科的インプラントとしては、典型的には、メッシュ、または構造支持のためのその他の手段が挙げられる。インプラントは、タンパク質を時間依存方式で放出することおよびヘルニア修復のための構造的支持を提供することの双方に役立つ可能性のある構造体である。外科的インプラントは、少なくとも１種の線維組織誘導タンパク質、および所望により少なくとも１種の組織接着剤を含むことができる。外科的インプラントは、その方法が線維組織誘導タンパク質（群）を対象の筋膜欠損部位に送達することを可能にする限り、任意の方法で処理することができる。例えば、メッシュを、線維組織誘導タンパク質（群）の溶液中に、例えば１分間〜１時間、１０分間〜４５分間、または１５分間〜３０分間、浸漬または液漬することによって線維組織誘導タンパク質（群）でコーティングできる。コーティングは、例えば、メッシュにこのような溶液を噴霧することによって達成することもできる、さらに他の実施形態では、メッシュを、化学架橋剤を使用することによって線維組織誘導タンパク質で含浸できる。
【００３１】
外科的インプラントとして採用できるメッシュとしては、例えば、ヘルニアの腹部欠損修復のための組織増殖に必要な強度および支持を提供するのにヘルニア修復で広範に使用されてきたポリプロピレンメッシュ（ＰＰＭ）が挙げられる。その他の例には、延伸ポリテトラフルオロエチレン（ｅＰＴＦＥ）、セプラメッシュバイオサージカル（ｓｅｐｒａｍｅｓｈ  ｂｉｏｓｕｒｇｉｃａｌ）複合体、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、およびチタンが含まれる、理想的なメッシュ特性には、限定はしないが、不活性、メッシュを埋込み部位での感染に対する抵抗性、分子浸透性、柔軟性、透明性、機械的な一体性および強度、ならびに生体適合性が含まれる。
【００３２】
インプラントは、背側表面および内臓側表面を有することができる。背側表面は、筋膜欠損から離れて外に面するインプラント部分であり、内臓側表面は、欠損に向かって内に面する部分である。埋め込みに先立って、本明細書に記載のインプラントの若干は、非応力状態で、平坦なまたは平面的形状をとるか、あるいは１つまたは複数の表面に関して凹状および／または凸状形状をとることができる。
【００３３】
さらに他の実施形態において、インプラントは、例えば、スポンジ形態のメッシュを含み、メッシュは、線維組織誘導タンパク質および所望により組織接着剤を含む組成物中に液漬または浸漬され、その結果、組成物は、スポンジの細孔に十分浸透する。このようなスポンジは、ポリビニルアルコールなどの合成材料から、あるいはコラーゲン、ゼラチン、ケラチン、ラミニン、フィブリン、またはフィブロネクチンなどの生体吸収性物質から作製できる。例には、ＨＥＬＩＳＴＡＴ（登録商標）、ＨＥＬＩＴＥＮＥ（登録商標）、およびＶＩＴＡＧＵＡＲＤ（登録商標）（ニュージャージー州、Ｐｌａｉｎｓｂｏｒｏ、Ｉｎｔｅｇｒａ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ならびにＵＬＴＲＡＦＯＡＭ（登録商標）（ロードアイランド州、Ｃｒａｎｓｔｏｎ、Ｄａｖｏｌ，Ｉｎｃ．）が含まれる。特定の例では、対象の身体中に一時的にのみ存在する生体吸収性スポンジを使用することが好ましい。本明細書に記載のメッシュおよびスポンジは、例えばパッドまたはガーゼなどのその他の用語で呼ばれる場合もある。
【００３４】
若干の実施形態において、インプラントは、外科医がインプラントを操作して手術部位に適合させ、かつ／または腹腔鏡処置中でのデリバリーを容易にすることを可能にするのに十分な柔軟性があればよい。しかし、いくつかの状況では、インプラントの圧縮および／または膨張を制約する堅い配置が好ましい場合もある。特定の実施形態において、インプラントは、腹腔鏡装置の狭い管腔を通して送達できるように、折り畳み、巻き込み、または他の方法などによって細長い形態に折り畳める場合もある。インプラントの柔軟性は、インプラントを構成している材料、インプラントに適用される処理、またはインプラント本体の任意のその他の特徴を含む多くの要因により影響される。
【００３５】
メッシュインプラントは、単一のメッシュを含むか、あるいは連結または重なり合った２つまたはそれ以上のメッシュセグメントから形成できる。若干の実施形態において、メッシュは、少なくとも１種の線維組織誘導タンパク質および所望により少なくとも１種の組織接着剤を対象の筋膜欠損部位に連続的に送達し、それによって欠損の修復をもたらすように構成される。メッシュは、少なくとも１種の線維組織誘導タンパク質を、例えば、ほぼ１５日、２０日、および３０日間連続的に送達するように構成できることも考えられる。しかし、時間の長さは、修復する欠損の程度および部位、患者の年齢、および外科医が典型的に考慮するその他の臨床パラメーターに応じて変化する。
【００３６】
本発明の方法で使用するための外科的インプラントは、製造し、滅菌し、外科的処置で使用するために開封するまで包装内に納めることができる。従来からの物理的または化学的方法、あるいは例えばガンマ線またはベータ線などのイオン化放射線での処理を含む、任意の適切な滅菌方法を使用できる。
【００３７】
デリバリー方法
本明細書に記載の外科的インプラントおよび組成物は、外科医が線維組織欠損の修復のために使用する任意の外科的処置で使用できる。若干の実施形態において、切開は、対象のヘルニア部位で行われ、本明細書に記載の外科的インプラントは、欠損領域を覆うように挿入される。他の実施形態では、腹腔鏡法を使用して患者に外科的インプラントを配置する。筋膜組織欠損の修復は、全身、部位、または局所麻酔を使用して実施できる。局所麻酔の利点の中には、短い回復時間および修復を手術の間に試験できることが含まれる。さらに、局所麻酔は、全身麻酔に関わる呼吸および免疫抑制効果を回避する。
【００３８】
前に言及したように、本明細書に記載の組成物は、筋膜欠損部位に直接的に適用できるか、欠損部位に注入できるか、あるいは筋膜欠損部位に配置する前または後の外科的インプラントに適用できる。若干の実施形態において、本明細書に記載の組成物は、正常であれば器官または組織を収容する、例えば腹壁などの構造体の筋膜欠損を覆うメッシュと結合して使用できる。例えば、線維組織誘導タンパク質および所望により組織接着剤を含む組成物は、該組成物をヘルニア部位にまたは近くに投与するのに適したデバイスを使用してヘルニア部位に送達できる。このようなデリバリー方法は、対象に埋め込むに先立ってメッシュまたはその他の外科的インプラントを組成物中で処理または液漬する必要性を排除できるであろう。
【００３９】
ヘルニア修復の各種方法およびヘルニア修復で使用するのに適したインプラントは、周知であり、例えば、米国特許第５，１７６，６９２号、５，５６９，２７３号，６，８００，０８２号、５，８２４，０８２号、６，１６６，２８６号、５，２９０，２１７号、および５，３５６，４３２号に記載されている。一般に、このようなデバイスには、（ａ）対象の筋膜欠損を修復するために構成されたメッシュ様部材、および所望により（ｂ）該メッシュ様部材を筋膜部位に固定するための手段が含まれる。本発明のデバイスは、外科的インプラントまたはメッシュ様部材が、治療有効量の１種または複数の線維組織誘導タンパク質および所望により１種または複数の組織接着剤を含むことにおいて独特である。
【００４０】
使用
本明細書に記載の組成物および外科的インプラントは、筋膜組織欠損の修復に関する広範な種類の広く知られ利用可能な動物モデルで試験できる。例えば、ヘルニア修復の強度は、Ｕｅｎの「Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ  Ｌａｐａｒｏｓｃｏｐｉｃ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＰＲＯＬＥＮＥ  ｐｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅ  ｈｅｒｎｉａ  ｓｙｓｔｅｍ  ｖｓ．ｔｈｅ  ＰｅｒＦｉｘ  ｐｌｕｇ  ｒｅｐａｉｒ  ｉｎ  ａ  ｐｏｒｃｉｎｅ  ｇｒｏｉｎ  ｈｅｒｎｉａ  ｒｅｐａｉｒ  ｍｏｄｅｌ」Ｊ．Ｌａｐａｒｏｅｎｄｏｓｃ．Ａｄｖ．Ｓｕｒｇ．Ｔｅｃｈ．１４（６）：３６８〜７３（２００４）に教示されているブタ鼠径ヘルニア修復ストレス荷重試験に従って試験できる。Ｂｅｒｎｄｓｅｎらが「Ｄｏｅｓ  ｍｅｓｈ  ｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ａｆｆｅｃｔ  ｔｈｅ  ｓｐｅｒｍａｔｉｃ  ｃｏｒｄ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ａｆｔｅｒ  ｉｎｇｕｉｎａｌ  ｈｅｒｎｉａ  ｓｕｒｇｅｒｙ？  Ａｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｓｔｕｄｙ  ｉｎ  ｒａｔｓ」Ｅｕｒ．Ｓｕｒｇ．Ｒｅｓ．３６（５）：３１８〜２２（２００４）で教示しているように、光学顕微鏡を使用してヘルニアに近いその他の構造の健康状態を評価できる。
【００４１】
ヘルニアを修復することおよび筋膜組織の増殖を刺激することに加えて、本発明の方法は、例えば、結腸手術、直腸手術、形成手術、外傷手術、血管手術、骨盤床修復、または創傷に関連した筋膜組織に対する傷害、ならびに慢性緊張および固定によって引き起こされた筋膜欠損を修復することにも適用できると考えられる。
【００４２】
したがって、本発明を使用して、例えば、重症ヘルニア、再発性ヘルニア、糖尿病または損なわれた創傷回復と関連したその他の健康状態を有する患者のヘルニア、あるいは糖尿病または損なわれた創傷回復と関連したその他の健康状態を有する患者の任意のその他の筋膜欠損を含む、種々のタイプの筋膜欠損を治療できる。
【００４３】
次の実施例は、本発明の例示であり、いかなる意味でも本発明を限定するものではない。変更形態、変形形態および軽微な強化は、想定されており、本発明の範囲に包含される。
【実施例】
【００４４】
以下の実施例では、以下の材料および方法を使用する。実施例ではＢＭＰ−１２を使用するが、それらの実施例は、ＢＭＰ−１３、ＭＰ−５２、または任意の別な線維組織誘導タンパク質を用いて同様の方式で実施できることを当業者は認識するであろう。同様に、その他の組織接着剤および外科的インプラントも、実施例に記載のものの代わりになることができる。
【００４５】
以下の実施例で外科的インプラントとして採用される各種メッシュとしては、ポリプロピレンメッシュ（ＰＰＭ）であるバード（Ｂａｒｄ）メッシュ、メッシュに対する組織癒着を最小にするためにＰＰＭの２層と延伸ポリテトラフルオロエチレンの１層を有するバードコンポジックス（Ｂａｒｄ  Ｃｏｍｐｏｓｉｘ）メッシュ（ロードアイランド州、Ｃｒａｎｓｔｏｎ、Ｄａｖｏｌ，Ｉｎｃ．）が挙げられる。
【００４６】
さらに、セプラメッシュバイオサージカル（ｓｅｐｒａｍｅｓｈ  ｂｉｏｓｕｒｇｉｃａｌ）複合物（マサチューセッツ州、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、Ｇｅｎｚｙｍｅ  Ｓｕｒｇｉｃａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）も使用され、これは、化学的に修飾されたヒアルロン酸ナトリウム／カルボキシメチルセルロース（ＨＡ／ＣＭＣ）でコーティングされたＰＰＭを含む。本明細書に記載の外科的インプラントで使用できる生体吸収性メッシュの例には、ポリグラクチンビクリルメッシュ（ニュージャージー州、Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ、Ｅｔｈｉｃｏｎ）が含まれる。
【００４７】
外科的インプラントとして採用できる各種生体吸収性スポンジとしては、コラーゲンスポンジＨＥＬＩＳＴＡＴ（登録商標）およびＨＥＬＩＴＥＮＥ（登録商標）（ニュージャージー州、Ｐｌａｉｎｓｂｏｒｏ、Ｉｎｔｅｇｒａ）、およびＵＬＴＲＡＦＯＡＭ（登録商標）（ロードアイランド州、Ｃｒａｎｓｔｏｎ、Ｄａｖｏｌ，Ｉｎｃ．）が挙げられる。
【００４８】
最後に、組織接着剤ＴＩＳＳＥＥＬ（登録商標）（イリノイ州、Ｄｅｅｒｆｉｅｌｄ、Ｂａｘｔｅｒ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｃｏｒｐ．）が、ＴＩＳＳＥＥＬ（登録商標）およびｒｈＢＭＰ−１２を含む組成物を調製するのに使用される。
【００４９】
Ａ．ヘルニア修復に使用するための外科的インプラントの調製
現在入手できる任意のメッシュおよび／またはスポンジを外科的インプラントとして使用できることがわかっている。メッシュの場合、該メッシュは、少なくとも１種の線維組織誘導タンパク質、例えばｒｈＢＭＰ−１２を含む組成物でコーティングされるか、あるいは、少なくとも１種の線維組織誘導タンパク質を含む組成物で含浸される。
【００５０】
製造業者からの受領に続いて、バードメッシュ、バードコンポジックスメッシュ、セプラメッシュバイオサージカル複合物およびポリグラシンバイクリルメッシュのそれぞれを、ｒｈＢＭＰ−１２を含む組成物でコーティングする。メッシュの両側表面、または埋め込み後に欠損から外側に面する表面、すなわち、背側表面などの片側表面のみをコーティングできる。さらに、メッシュ埋込み領域での感染症を防ぐため、メッシュを抗生物質でコーティングできる。適切な抗生物質を、線維組織誘導タンパク質と同じ組成物中に含めることができ、あるいはメッシュ上に別途コーティングできる。
【００５１】
場合によっては、メッシュに、線維組織誘導タンパク質、例えばｒｈＢＭＰ−１２を含む組成物を含浸させる。このことは、繊維をメッシュ中に織り込む前に、線維組織誘導タンパク質をメッシュの繊維に架橋することによって達成される。しかし、ヘルニア修復において、メッシュにコーティングするか、あるいはメッシュを線維組織誘導タンパク質で含浸するかどうかの差異は存在しないと予想される。
【００５２】
外科的インプラントで使用されるスポンジは、少なくとも１種の線維組織誘導タンパク質を含む組成物に液漬されるか、あるいは少なくとも１種の線維組織誘導タンパク質をスポンジ材料、例えば、コラーゲンに架橋できる。架橋は、任意の適切な架橋剤を使用して達成できる。
【００５３】
Ｂ．ヘルニアのための動物モデルの産生
ヘルニア用の動物モデルを次のように産生する。動物研究のための指針は、実験動物の管理に関する指針（Ｇｕｉｄｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｃａｒｅ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌｓ）（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、１９９６）に記載されているＮＩＨ指針に従う。それぞれ体重が３．５〜４．５ｋｇの成熟雌性ニュージーランド白ウサギ（Ｏｒｙｃｔｏｌａｇｕｓ  ｃｕｎｉｃｕｌｕｃ）をアセプロマジン（０．５ｍｇ／ｋｇ、皮下）で予備麻酔する。予備麻酔剤を投与して１０〜３０分後に、動物を塩酸ケタミン（３０ｍｇ／ｋｇ、筋肉内）および塩酸キシラジン（１０ｍｇ／ｋｇ、筋肉内）で麻酔する。動物に挿管し、イソフルラン（１．０〜３．０％）および酸素（１．５〜２．０リットル／分）、続いて鎮痛薬としてブプレノルフィン（０．０２〜０．０５ｍｇ／ｋｇ、皮下）を投与して動物を完全に麻酔した。
【００５４】
各動物の腹部を剃り、ポビドン／ヨードの擦り洗いおよびそれに続くアルコール拭き取りで準備処置を施す。剣状突起部に対してほぼ２ｃｍ尾側から始まる１０〜１２ｃｍの皮膚切開を行い、白線（ｌｉｎｅａ  ａｌｂａ）の周囲部分を摘出することによって、５〜７ｃｍの全厚筋肉腹膜腹壁欠損を作り出す。必要なら、止血のため動脈をクランプする。動物の盲腸を腹腔から外に出し、滅菌したナイロン外科ブラシで擦りむく。盲腸を視覚的に４つの部分に分け、各部分を斑点状出血が発生するように１５回の往復運動で擦りむく。続いて、盲腸を腹腔に戻し、動物に、外科的インプラントおよび線維組織誘導タンパク質組成物の埋め込み準備を整える。
【００５５】
Ｃ．組織学
筋膜欠損修復を評価するため、各動物群から元々の欠損を取り囲む全組織領域を摘出し、ＰＢＳ中の４％パラホルムアルデヒド（ペンシルベニア州、Ｗａｒｒｉｎｇｔｏｎ、Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ）で固定する。組織標本をパラフィンに包埋し、厚さ５μｍの切片に切断し、ヘマトキシリンおよびエオシンで染色し、盲検分析にかける。細胞応答および組織の内向き増殖の形態論的特徴づけをそれぞれのメッシュについて書き留める。
【００５６】
Ｄ．組織統合力のアッセイ
組織統合力アッセイを使用して、本明細書に記載の各種方法を使用するヘルニア修復に続く組織の強度を評価する。インプラント、組織／インプラント界面、および動物の回復に続く正常組織を含む、約２×５ｃｍの細長い一片をインプラントの横軸に対して並行に切断する。各組織標本の引張強度を、ロードセルを利用する張力計を使用して測定する。各標本に関して組織／インプラント界面が壊れる最大荷重を記録する。
【００５７】
実施例１：動物モデルにおけるより効果的でより強力なヘルニア修復を目指して設計された、線維組織誘導タンパク質を含む組成物でコーティングされたメッシュ
ウサギは上記の通り準備し、メッシュ、すなわちバードメッシュ、バードコンポジックスメッシュ、およびセプラメッシュバイオサージカル複合物のそれぞれに対して２群を分配する。各場合において、一方の群には、滅菌生理食塩水中で事前水和されたメッシュを埋め込み、他の群には、前記のように線維組織誘導タンパク質、ｒｈＢＭＰ−１２を含む組成物でコーティングされたメッシュを埋め込む。
【００５８】
各場合に、メッシュは、前記のように作り出された５×７ｃｍの欠損縁端部分に、３−０プロリン（Ｐｒｏｌｅｎｅ）を用い単純連続パターンで固定される。皮下組織は、吸収性縫合糸を用い連続サブクチクラパターンで縫い合わせる。動物は、抜管され、インキュベーター中での回復が可能になる。６つの群（すなわち、バードメッシュおよびバードメッシュ＋ｒｈＢＭＰ、バードコンポジックスメッシュおよびバードコンポジックスメッシュ＋ｒｈＢＭＰ−１２、ならびにセプラメッシュバイオサージカル複合体およびセプラメッシュバイオサージカル複合体＋ｒｈＢＭＰ−１２）のそれぞれにおいて、若干の動物を手術後約１５日の時点で安楽死させ、若干の動物を手術後約２０日の時点で安楽死させ、残りを手術後ほぼ１カ月の時点で安楽死させ、処理および非処理メッシュの総合的成績を経時的に監視する。前記の組織学的プロトコールおよび組織統合力を使用して各群における腹部欠損の修復を評価する。
【００５９】
各群において、ヘルニア修復は、メッシュ単独を埋め込んだ動物と比較して、ｒｈＢＭＰ−１２でコーティングされたメッシュを埋め込んだ動物群でより強力であることが予想される。
【００６０】
実施例２：動物モデルにおけるヘルニアのより迅速な修復を目指して設計された、線維組織誘導タンパク質を含む組成物で処理された外科的インプラント
ウサギを上で考察したように準備し、２群に分ける。ウサギの一方の群にはＰＰＭメッシュを埋め込み、もう１つの群には生体吸収性スポンジを埋め込む。具体的には、前記のように、１つの群では、ヘルニア欠損を線維組織誘導タンパク質、例えば、ｒｈＢＭＰ−１２を含む組成物でコーティングされたＰＰＭメッシュで覆うか、あるいはヘルニア欠損を上で考察したように滅菌生理食塩水で処理したＰＰＭメッシュで覆う。第２群のウサギでは、ヘルニア欠損を線維組織誘導タンパク質、例えば、ｒｈＢＭＰ−１２を含む組成物中に浸したコラーゲンスポンジを使用して覆うか、あるいは、滅菌生理食塩水に浸したスポンジで覆う。
【００６１】
動物の各群において、外科的インプラント、すなわち、ＰＰＭメッシュまたは生体吸収性スポンジを上記の方法を用いて生み出された５×７ｃｍの欠損縁端部分に固定する。動物を回復させ、各群からの若干の動物をほぼ１カ月の時点で安楽死させヘルニア修復を評価した。
【００６２】
各群において、ヘルニア修復は、メッシュ単独を埋め込んだ動物と比較して、ｒｈＢＭＰ−１２でコーティングされたメッシュを埋め込んだ動物群でより迅速であることが予想される。
【００６３】
実施例３：単独でまたはメッシュ上にコーティングされた場合に効果的であるように設計された、ＢＭＰ−１２および組織接着剤を含む組成物
ウサギを前記の通り準備し、３群、すなわち、メッシュ単独、ｒｈＢＭＰ−１２およびＴＩＳＳＥＥＬ（登録商標）を含む組成物、メッシュに塗布されたｒｈＢＭＰ−１２およびＴＩＳＳＥＥＬ（登録商標）を含む組成物に分ける。
【００６４】
メッシュを用いる群では、メッシュは、前記のように作り出された５×７ｃｍの欠損縁端部分に３−０プロリンを用いて単純連続パターンで固定される。皮下組織は、吸収性縫合糸を用い連続サブクチクラパターンで縫い合わせる。動物は抜管され、インキュベーター中で回復することが可能になる。
【００６５】
ｒｈＢＭＰ−１２およびＴＩＳＳＥＥＬ（登録商標）を含む組成物を用いる群では、ヘルニアを前記のように外科的に修復し、ｒｈＢＭＰ−１２およびＴＩＳＳＥＥＬ（登録商標）組成物をヘルニア部位に注入する。皮下組織は、吸収性縫合糸を用いて連続サブクチクラパターンで縫い合わせる。動物は抜管され、インキュベーター中で回復することが可能になる。
【００６６】
３つの群のそれぞれにおいて、若干の動物を手術後約１５日の時点で安楽死させ、若干の動物を手術後約２０日の時点で安楽死させ、残りを手術後ほぼ１カ月後に安楽死させ、治療の総合成績を経時的に監視する。各群における腹部欠損の修復を、前記の組織学的プロトコールおよび組織統合力アッセイを使用して評価する。
【００６７】
ヘルニア修復は、メッシュ単独を埋め込んだ動物と比較して、ｒｈＢＭＰ−１２およびＴＩＳＳＥＥＬ（登録商標）でコーティングされたメッシュを埋め込んだ動物群でより迅速であり、ｒｈＢＭＰ−１２およびＴＩＳＳＥＥＬ（登録商標）を含む組成物でその次に迅速であることが予想される。
【００６８】
明細書は、参照により本明細書に組み込まれる、本明細書中で引用する参照文献の教示を考慮することによって最も完全に理解される。明細書中の実施形態は、本発明の実施形態の実例を提供するものであり、本発明の範囲を限定するものと解釈すべきでない。当業者は、その他の多くの実施形態も本明細書に包含されることを容易に認識するであろう。引用される刊行物、特許、および配列は、すべて、参照によりその全体で組み込まれる。参照により組み込まれる材料が本明細書と矛盾するまたは相反する範囲まで、本明細書は、任意のこのような材料に取って代わる。本明細書の任意の文献の引用は、そのような文献が先行技術であると認めるものではない。
【００６９】
特記しない限り、成分量、処理条件等々を表している、特許請求の範囲を含む本明細書中で使用されるすべて数字は、すべての場合に用語「約」により修飾されているものと解釈すべきである。したがって、それと反対のことを特記しない限り、数値パラメーターは、近似値であり、得ようとする所望の特性に応じて変動することができる。特記しない限り、一連の要素に先行する用語「少なくとも」は、一連のあらゆる要素を指すと解釈すべきである。当業者は、定型業務を超えない実験を使用して、本明細書に記載の特定の実施形態に対する多くの等価形態を認識し、あるいは確認できるであろう。このような等価形態は、以下の特許請求の範囲に包含されると解釈される。
【国際調査報告】
2008534064.tif 000003
2008534064.tif 000004
2008534064.tif 000005