(57)【要約】  哺乳類の皮膚の表面領域をその皮膚に９００ｎｍから１５００ｎｍの間の発散電磁放射線源を照射することによって美容治療する方法、及び特定波長の電磁放射線の使用に関する。この美容治療は、皺又は小皺を低減、緩和、除去、又は縮小し、皮膚を若返らせ、老化の明らかな徴候を遅らせ又は回復させ、皮膚の弾性、色調、肌理、及び外観を改善し、及び顔、胸、腕、臀部、太腿、腹、又は首の皮膚を美化する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳類の皮膚の表面領域を美容治療する方法において、前記皮膚に９００ｎｍから１５００ｎｍの間の発散電波放射線源を照射する方法。
【請求項２】
前記美容治療は、皺又は小皺を低減、緩和、除去、又は縮小し、皮膚を若返らせ、老化の明らかな徴候を遅らせ又は回復させ、皮膚の弾性、色調、肌理、及び外観を改善し、及び皮膚を美化する治療である請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記皮膚は、顔、胸、腕、臀部、太腿、腹、又は首の最外表皮、基底層、及び真皮を含む請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記分散光は、１０°から５０°の間にある請求項１〜３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項５】
前記電磁放射線は、約１０ｎｍから１２０ｎｍの帯幅を有する請求項１〜４のいずれか１つに記載の方法。
【請求項６】
前記電磁放射線の波長は、９４０ｎｍ、９５０ｎｍ、１０４０ｎｍ、１０６０ｎｍ、１０７２ｎｍ、及び１２６７ｎｍを含む群から選択される１つ又は多数の特定波長を中心とする請求項１〜５のいずれか１つに記載の方法。
【請求項７】
前記電磁放射線は、連続波又はパルス波である請求項１〜６のいずれか１つに記載の方法。
【請求項８】
前記電磁放射線が連続波であるとき、その強度は、少なくとも５００μワット／ｃｍ2から５００ｍワット／ｃｍ2以下である請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記電磁放射線がパルス波であるとき、その強度は、ピーク電力が少なくとも５００μワット／ｃｍ2であり、平均電力が５００ｍワット／ｃｍ2以下である請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
前記電磁放射線がパルス波であるとき、その強度の平均電力は、５０〜１００μワット／ｃｍ2の範囲内にある請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記電気放射線がパルス波であるとき、前記電磁放射線は、少なくとも１０〜１５μ秒の期間にわたって照射される請求項７、９又は１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記電気放射線がパルス波であるとき、周波数／繰返し率は、３００〜９００Ｈｚの範囲内にある請求項７及び９〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記周波数／繰返し率は、６００Ｈｚ又は約６００Ｈｚである請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記電磁放射線は、前記皮膚に少なくとも３０秒から数分以下にわたって照射される請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記電磁放射線源は、発光ダイオードである請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記放射線源の放射体は、９４０ｎｍ、９５０ｎｍ、１０４０ｎｍ、１０６０ｎｍ、１０７２ｎｍ、及び１２６７ｎｍを含む群から選択される１つ又は多数の波長又はその近傍の波長を中心とする波長を有する放射線を放射するように構成された少なくとも１つ又は多数のＰＮ接合を含む請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記特定の波長又はその近傍の波長を中心とする波長は、１０ｎｍから１２０ｎｍの間の狭帯幅を有する請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記特定の波長又はその近傍の波長を中心とする波長は、約５０ｎｍの狭帯幅を有する請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
哺乳類の皮膚の表面領域の弾性特性を改善する方法において、前記皮膚に９００ｎｍから１５００ｎｍの間の発散電磁放射線源を照射する方法。
【請求項２０】
哺乳類の皮膚の表面領域の表面積と体積を減少させる方法において、前記皮膚に９００ｎｍから１５００ｎｍの間の発散電磁放射線源を照射する方法。
【請求項２２】
哺乳類の皮膚の表面領域のＵＶ光又は光老化によって生じる皮膚損傷を阻止、低減又は回復させる方法において、前記皮膚に９００ｎｍから１５００ｎｍの間の発散電磁放射線源を照射する方法。
【請求項２３】
請求項３〜１９の１つ又は多数の特徴をさらに含む請求項２０、２１又は２２に記載の方法。
【請求項２４】
表面皮膚の領域を美容治療するための９００ｎｍから１５００ｎｍの間の分散電磁放射線の使用。
【請求項２５】
請求項３〜１９の１つ又は多数の特徴をさらに含む請求項２４に記載の使用。
【請求項２６】
免疫細胞の生存率を改善する生体外方法において、末梢血単核細胞を１０７２ｎｍの波長を中心とする狭帯幅の発散電磁放射線に露光させる方法。
【請求項２７】
前記末梢血単核細胞は、リンパ球である請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記末梢血単核細胞は、フィトヘマグルチニン（ＰＨＡ）によって刺激される請求項２６又は２７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皺又は小皺、特に制限はされないが、顔や首の皺、及び他の老化の徴候を低減、緩和、除去又は縮小させるための電磁放射線の美容における使用に関する。また、本発明は、皮膚を全般的に若返らせ、老化の徴候を遅らせ、皮膚の弾性、色調、及び外観を改善するための電磁放射線の使用を提供する。また、本発明は、老化の明らかな徴候を低減、緩和、遅延、又は回復させ、皮膚を美化するように皮膚を治療する方法、及びこのような美容治療を実行する装置を提供する。
【背景技術】
【０００２】
若い皮膚では、その皮膚の表面の直下のコラーゲンは、良好な弾性と柔軟性とを有する有機的に構造化された格子をなす。女性が更年期に入り、男性が歳を取ると、いずれも皮膚の皺が増え、皮膚の厚みが薄くなる。老化中に、コラーゲンの組織が変化し、皮膚の美容外観に悪影響を与える。コラーゲンの変化は、太陽の紫外線に長期間晒されることによっても促進される。美容業界に、数十億ポンドが年間に費やされ、平均的な女性は、年間に約８００ポンドをスキンケア商品や化粧品に使っていると見込まれている。
【０００３】
皺を阻止又は緩和させるために、又は抗老化剤として、化学的な皮膚の剥離剤又は典型的にはクリームの形態にある美容調合品を用いることが、従来技術から知られている。このような調合品は、合成品、又は天然の植物生成物、及び／又は動物生成物を含むことができる。組成物は、それらの効果を可能な限り大きくするために、局部的に、かつ通常は規則正しく、適用される。しかし、このような組成物を持続的に用いても、老化の明らかな徴候を緩和させるには、それを示す証拠に限界がある。
【０００４】
美容調合品や美容整形の代替案として、生理学的刺激と一般的に呼ばれる皮膚内における光化学的応答を達成するために、低レベルの電磁放射線源を用いることが知られている。美容刺激は、複製と合成を高め、その結果、コラーゲンの生成を増大させ、繊維芽細胞の刺激を増大させ、又はＤＮＡ合成を増大させるという考え方に依存している。光エネルギーは、細胞のミトコンドリア内のシトクロム及びポルフィリンと細胞膜とに吸収され、わずかな量の一重項酸素を生成する。典型的には、患者は、急性の状態の場合、４〜６回の診療期間を必要とし、慢性の状態の場合、６〜８回の治療を必要とする。この種の治療は、長引くと共に、費用が高い。
【０００５】
１９９０年代以降、レーザが、皮膚の再生や皺の除去に用いられてきた。この皺の除去は、組織を層ごとに除去し、真皮に侵入し、第２度熱傷を有効にもたらすという侵襲性の強い技術である。熱は、真皮に滞留し、コラーゲンを収縮させ、皮膚を引き締める。レーザは、真皮内のコラーゲンの変性と架橋の形成を誘発し、その結果、皮膚を伸張させる引締め効果をもたらし、これによって、皺を低減又は除去する。このプロセスは、熱分解（Thermolysis）と呼ばれ、組織の加熱は、治療の必須条件である。熱分解の熱的な閾値は、約７０℃であると考えられている。しかし、従来のレーザ治療に関連する問題は、患者が熱傷を受け、治療後の数週間の間に、滲出性皮膚、瘡蓋、及び発赤が生じる可能性がある点にある。加えて、ＣＯ2レーザによる皺除去治療の後に、皮膚の色素増加が多発することが報告されている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
従って、皺又は小皺を低減、緩和、除去、又は縮小させ、皮膚を若返らせ、老化の徴候を遅らせ、皮膚の弾性、色調、及び外観を改善し、及び皮膚を全般的に美化する効果的で安全な代替的方法が、必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の第１態様によれば、哺乳類の皮膚の表面領域を美容治療する方法において、この皮膚に９００ｎｍから１５００ｎｍの間の発散電波放射源を照射することを特徴とする方法が提供される。
【０００８】
ここで「美容治療する」と呼ばれる用語は、皺又は小皺を低減、緩和、除去、又は縮小し、皮膚を若返らせ、老化の明らかな徴候を遅らせ又は回復させ、皮膚の弾性、色調、肌理、及び外観を改善し、及び皮膚を美化することを含んでいる。
【０００９】
ここで「皮膚」と呼ばれる用語は、顔、胸、腕、臀部、太腿、腹、または首の最外表皮、基底層、及び真皮を含んでいる。
【００１０】
この明細書の説明及び特許請求の範囲の全体にわたって、「comprise（備える）」や「contain（含む）」という用語及びこれらの用語の変形、例えば、「comprising」や「comprises」は、「含むが、制限はされない」ことを意味し、他の部分、追加物、構成要素、整数、又はステップを排除することを意図するものではない。
【００１１】
この明細書の説明及び特許請求の範囲の全体にわたって、単数は、文脈が他のことを要求しない限り、複数を含むものとする。特に、数値の確定されていない物品が用いられる場合、本明細書は、文脈が他のことを要求しない限り、単数と共に複数も考慮していると理解されるべきである。
【００１２】
本発明の特定の態様、実施形態、又は実施例と関連して記載される特徴、整数、特性、化合物、又は化学成分や化学基は、互換性がない限り、ここに記載されるどのような他の態様、実施形態、又は実施例にも適用可能であることが理解されるべきである。
【００１３】
好ましくは、分散光は、１０°から５０°の間にある。「分散」という用語は、電磁源から放射される電磁放射線が、少なくとも５°の分散半角を有することを意味している。好ましくは、電磁放射線の分散は、１５°から２５°の分散半角の範囲内にある。
【００１４】
従って、本発明の方法は、電磁放射線源としてレーザの使用を含まないことが理解されるだろう。
【００１５】
驚くことだか、小さい帯幅（好ましくは、約１０ｎｍから１２０ｎｍの間、さらに好ましくは、５０ｎｍ）の低強度の電磁放射線が、皮膚を美容治療するのに有効であることが、確認されている。電磁放射線は、細胞成分／細胞小器官、及び酵素、例えば、制限はされないが、誘導型一酸化窒素合成酵素（ｉＮＯＳ）を通るエネルギー伝達によって、その作用を果たすことが前提とされている。様々な波長の電磁放射線が通過する水分子が、いくつかの伝達ピークを生成する。これらの伝達ピークは、本発明の好ましい治療用の電磁放射線の波長範囲と関連し、従って、作用の一般的な機構における役割を水分子に担わせている。
【００１６】
好ましくは、電磁放射線の波長は、９４０ｎｍ、９５０ｎｍ、１０４０ｎｍ、１０６０ｎｍ、１０７２ｎｍ、及び１２６７ｎｍを含む群から選択される１つ又は多数の特定波長を中心としている。
【００１７】
本発明者らの研究によれば、前述のように特定された波長を中心とする波長、特に、１０７２ｎｍ又は１２６７ｎｍを中心とする単一の狭帯幅の波長の光が、皺の長さ及び面積を低減させるのに特に効果的であることが判明している。これらの２つの波長は、水分子の光伝達プロフィルのピーク放射波長に対応していることに留意されたい。従って、本発明者らは、電磁放射線の作用の機構は、水膜と場合によっては細胞膜とに関連していると考えている。
【００１８】
また、本発明者らの研究によれば、１０７２ｎｍと８８０ｎｍは、リンパ球、生存能力、生体外応答に相反する効果をもたらし、前者の波長が保護機能を果たし、後者の波長が細胞毒性を呈することが判明している。さらに、本研究者らは、１０７２ｎｍが紫外線の介在するリンパ球毒性を防止する証拠を得ている。
【００１９】
好ましくは、電磁放射線は、連続波又はパルス波である。
【００２０】
好ましくは、電磁放射線が連続波であるとき、その強度は、少なくとも５００μワット／ｃｍ2から５００ｍワット／ｃｍ2以下である。
【００２１】
好ましくは、電磁放射線がパルス波であるとき、その強度は、ピーク電力が少なくとも５００μワット／ｃｍ2であり、平均電力が５００ｍワット／ｃｍ2以下である。平均電力は、放射線が照射される全時間の比率をピーク電力に掛けた値である。例えば、ピーク電力が５００μワット／ｃｍ2で、６００Ｈｚの周波数のパルスが１０μ秒間放射された場合、平均電力は、３０μワット／ｃｍ2である。
【００２２】
加温に依存する従来の方法は、下限値を０．５ワット／ｃｍ2に特定しているが、熱的な効果を避けることを意図する本発明では、このレベルよりも低い電力で操作される。
【００２３】
好ましくは、電磁放射線がパルス波であるとき、その強度の平均電力は、５０〜１００μワット／ｃｍ2の範囲内にある。
【００２４】
本発明者らによって、皮膚に照射されるとき、５００μワット／ｃｍ2ピーク電力から５００ｍワット／ｃｍ2連続電力又はピーク電力の範囲内にある電力が適切であることが見出されている。典型的には、２０ｍワット／ｃｍ2が皮膚に対して用いられるが、この値は、患者がいかに肥満体又は筋肉質であるか、従って、いかに皺が深く刻まれているかに依存している。
【００２５】
好ましくは、電磁放射線がパルス波であるとき、その電磁放射線は、少なくとも１０〜１５μ秒の期間にわたって照射され、さらに好ましくは、３００〜９００Ｈｚの範囲内の周波数／繰返し率、さらに好ましくは、６００Ｈｚ又は約６００Ｈｚの周波数／繰返し率で照射される。
【００２６】
本発明者らの研究によれば、電磁放射線は、コヒーレント又はインコヒーレントのいずれであってもよく、臨床結果は、このパラメータによって影響されないことが判明している。
【００２７】
好ましくは、電磁放射線は、少なくとも３０秒から数分以下にわたって、患部に照射される。典型的な露光時間は、３分の範囲内にあるが、より深い皺の場合、この時間は、被検者の脂肪層の深さによって増加され、この場合、露光は、１０分以下とすることができる。
【００２８】
電磁放射線を放射する電源は、臨床結果にとって必要な強度よりも大きい強度をもたらさなければならないことが理解されるべきである。何故なら、本発明者らによれば、照射される治療光量の略９９％が、治療中に皮膚の表面を横切って失われることが判明しているからである。従って、照射される放射線の強度は、治療を実行するとき、矯正されねばならない。
【００２９】
前述の説明から、電磁放射線は、連続方式又は切換方式（パルス方式）で目的部位に向けられることを理解されたい。切換の主な利点は、電力節約を可能にし、より高いピーク電力の出力を容易にし、これによって、美容応答を改善することにある。
【００３０】
好ましくは、電磁放射線の治療源は、治療部位に入射する大気の放射線の量を低減する手段を含んでいる。
【００３１】
好ましくは、電磁放射線源は、発光ダイオードである。このような装置からの放射線は、電気的に操作されてもよく、又は光ファイバ送達システムを介して、照射装置に送達されてもよい。
【００３２】
好ましくは、放射線の放射体は、前述した特定の波長又はその近傍の波長を中心とする波長を有する放射線を放射するように構成されたＰＮ接合を含んでいる。単一の光ダイオードアセンブリは、複数の配向された接合を備えていてもよい。赤外線放射ダイオードは、特定の周波数の放射線を放射するのみならず、高強度発散ビームを放射するように構成されてもよい。発散光は、光放射ポリマーから放射されてもよい。
【００３３】
本発明は、可視光から赤外線の範囲内において、９４０ｎｍ、９５０ｎｍ、１０４０ｎｍ、１０６０ｎｍ、１０７２ｎｍ、又は１２６７ｎｍを中心とする波長を有する分散電磁放射線によって、皮膚を美容治療する方法に関する。電磁放射線は、熱損傷又は加熱が皮膚又はその治療領域の近傍の他の組織や器官に生じないように、低強度で照射される。このように、本発明の方法は、その効果が非熱的でかつ熱分解を避けているので、従来技術と異なっている。加えて、本発明は、直感的に判断しても、生理学的刺激とは逆である。何故なら、複製と合成を向上させる考え方が、積極的に避けられているからである。実際、本発明者らによれば、本発明に用いられる波長が、特に、ＤＮＡ合成を阻止し、コラーゲンの生成を抑止し、繊維芽細胞の複製を阻止することが判明している。本発明者らによる結果によれば、所望の効果を達成するために、従来技術のようにコラーゲン密度を増加させるよりもむしろコラーゲンの生成を抑止することによって、細胞間の結合組織の品質が驚くほど改良されることが判明している。
【００３４】
本発明の第２態様によれば、哺乳類の皮膚の表面領域の弾性特性を改善する方法において、この皮膚に９００ｎｍから１５００ｎｍの間の発散電磁放射線源を照射することを特徴とする方法が提供される。
【００３５】
本発明者らによれば、本発明の方法を用いることによって、弾性繊維は、破砕され難く、より均一になり、従って、皮膚の弾性特性を改良することが判明している。例えば、胸の皮膚を治療するとき、本発明者らによって、皮膚の弾性のみならず、組織の色調も改善されることが見出されている。また、本発明者らによれば、本発明の方法は、細胞の生存率を改善することも見出されている。
【００３６】
本発明の第３態様によれば、哺乳類の皮膚の表面領域の組織の表面積及び体積を低減させる方法において、この皮膚に９００ｎｍから１５００ｎｍの間の発散電磁放射線源を照射することを特徴とする方法が提供される。
【００３７】
本発明の方法によって得られた結果として、目の上及び目の下の皮膚の体積を低減することによって、顔の両側の垂れの外観を低減し得ることが実証されている。本発明者らによれば、このように弾性特性を改善すると共に皮膚の組織の体積及び表面積を低減することによって、所望の美容効果が得られることが判明している。
【００３８】
本発明の方法の第４態様として、本発明の方法が、紫外線又は光老化によって生じた皮膚の損傷を阻止、低減、又は回復するのに用いられてもよいことが理解されるだろう。
【００３９】
本発明の第５態様によれば、表面皮膚の領域を美容治療するための９００ｎｍから１５００ｎｍの間の分散電磁放射線の使用が提供される。
【００４０】
好ましくは、本発明の第２、第３、第４、及び第５態様は、本発明の第１態様の前述したどのような１つまたは多数の特徴をもさらに含んでいる。
【００４１】
レーザやＬＥＤによる光治療は、多くの治療領域において臨床的な利得をもたらすことが分かっている。様々な単一又は多数の照射手順を用いる１０７２nｍ及び８８０ｎｍの波長を中心とする光は、フィトヘマグルチニン（ＰＨＡ）によって刺激された新たに準備されたヒトのリンパ球に対して、独自の影響を及ぼすことが検証されている。５日間にわたって毎日１回の照射の後、生存する細胞の数は、未治療のものと比較して、１０７２ｎｍの放射線を照射した後では、著しく高く維持され、８８０ｎｍの放射線を照射した後では、著しく低くなっている。加えて、１０７２ｎｍの予備治療と紫外線の露光を行なった後、紫外線のみによって治療されたものと比較して、細胞の数が著しく高くなっている。収穫後の３日目に種々の波長で２回照射した細胞について、５日目に、１０７２ｎｍの照射及び１０７２ｎｍと１２６８ｎｍの交互の照射の後では、細胞生存率％が増加し、８８０ｎｍの照射のみの後では、細胞生存率％が減少することが、確認されている。これらの観察によって、本発明者らは、１０７２ｎｍの波長を中心とする光は、免疫細胞の生存率を改善する生体外の方法に有用であると考えるに至っている。
【００４２】
本発明の第６の態様によれば、免疫細胞の生存率を改善する生体外方法において、末梢血単核細胞を１０７２ｎｍの波長を中心とする狭帯幅の発散電磁放射線に露光させることを特徴とする方法が提供される。
【００４３】
好ましくは、末梢血単核細胞は、リンパ球である。
【００４４】
好ましくは、末梢血単核細胞は、フィトヘマグルチニン（ＰＨＡ）によって刺激される。
【００４５】
細胞は、次いで、免疫系を増強するために、収穫されたヒト内に再び導入されてもよいことが理解されるだろう。
【００４６】
本発明のさらに他の態様によれば、皮膚を美容治療するための携帯発光装置が提供される。この装置は、電力を９００ｎｍから１５００ｎｍの間の分散電磁放射線を生じる発光手段に供給する電力手段と、光が通過する柔軟な又は成形されたパネルと、柔軟な又は成形されたパネルが取り付けられたハウジングとを備え、美容治療を必要とする人体の部分の周りに適合されるようになっているとよい。
【００４７】
好ましくは、電力手段は、バッテリ又は電源コード線である。
【００４８】
好ましくは、発光装置は、ＬＥＤ、さらに好ましくは、複数のＬＥＤである。本発明の装置は、レーザ装置ではないことが理解されるだろう。
【００４９】
好ましくは、装置は、９４０ｎｍ、９５０ｎｍ、１０４０ｎｍ、１０６０ｎｍ、１０７２ｎｍ、及び１２６７ｎｍを含む群から選択される１つ又は多数の波長又はその近傍の波長を中心とする波長を有する放射線を放射するように構成された少なくとも１つ又は多数のＰＮ接合を含んでいる。
【００５０】
本発明を、以下の図面に基づいて説明する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００５１】
青、黄、又は赤の波長の非熱光を利用して、小皺や皺を治療するのに有効であると主張するいくつかの製品がある。本発明において、発明者らは、波長に依存するどのような生理学的な応答をも確認する試みを行なった。６６０ｎｍから１２６８ｎｍの範囲内の波長を用いて、種々の狭帯幅について、単独で又は組合せて、検討した。本発明者らは、１０７２ｎｍを中心とする単一の狭帯幅の光が、ヒトのリンパ球に好ましい効果をもたらすことを見出した。この波長の光は、知られている光老化因子である紫外線の悪影響に対してヒトのリンパ球を保護することが、判明した。
【００５２】
本発明の方法を実行する好ましい装置は、バッテリ又は電源コードのいずれかによって作動される携帯発光装置１である。この装置は、治療される領域、すなわち、顔、目、腕、太腿、又は胸の外形に追従する外形２を有している。
【００５３】
図１Ａ、図１Ｂ、及び図１Ｃ、１Ｄは、それぞれ、目にとって使い勝手のよい形状を有する携帯発光装置の平面図、側面図、及び断面図である。赤外線が、透明パネル３を介して、治療されるべき皮膚を通過する。領域４を介して、電源がユニットに接続され、装置は、本体５によって、適所に保持される。パネル３は、治療されるべき領域の外形に追従するために、また眼窩の上に配置されたときに過度の圧力が眼に加えられるのを避けるために、わずかに凹んでいる。スペーサ６は、治療サイクルの強さと期間を制御する制御電子機器を含んでいる。また、装置は、ＬＥＤ７を収容している。図２は、皮膚の大きな部分の上に配置するための装置の代替的実施形態を示している。
【００５４】
添付の図面の図３〜５を参照すると、本発明による第２実施形態は、多重パネル狭波長放射線源の形態にある。この場合、複数のパネル７が、ヒンジ８によって、互いに並んで取り付けられ、これらのヒンジ８は、アーム１０、１１によって、スタンド９に接続されている。この装置は、パネルが互いに対して移動することができ、スタンドが照射の方向を変更するように調整され得るように構成されている。スタンドは、床から延在させるか又は椅子やベッドに取り付けられる。
【００５５】
各パネル７の前壁は、透明であり、この前壁の下に、列をなす放射線を放射する装置１２が、取り付けられている。
【００５６】
前述の装置の実施形態と同様に、本発明のこの実施形態も、放射線を照射する時間を制限すると共に、大気の放射線を監視し、その大気の放射線が閾値を越えたときに警報を鳴らす制御電子機器を備えている。
【００５７】
本発明の装置は、臀部や脚に溜まる脂肪や胸部の組織の色調を美容改善するのに用いることができ、また顔を全般的に治療するのに用いられてもよい。
【００５８】
「方法及び材料」
［細胞の調製］
健康な志願者からヘパリンを添加したヒトの全血を得て、末梢血単核球細胞（PBMC）をリンパ球分離液（Axis-Shield Poc AS、オスロ、ノルウエー）を用いて分離し、４００×ｇを２５分間遠心分離した。ＰＢＭＣを界面層から隔離し、Ｌ−グルタミンを含まないＲＰＭ１洗浄液（GibcoTM）中で２回洗浄し、ＲＰＭ１ｃｍ（ＲＭＰ１洗浄液＋１０体積％のウシ胎仔血清＋１体積％のペニシリン／ストレプトマイシン＋１体積％のＬ−グルタミン）内に再懸濁させた。細胞の密度は、ＲＰＭ１ｃｍによって、１×１０6細胞数／ｍｌに調整した。１００μｌのＰＨＡ（「レクチン（Lectin）」、Sigma）を細胞に添加し、ＰＨＡ母細胞を作製した。細胞は、３７℃の５％ＣＯ2内において培養した。
【００５９】
［実験の準備］
５つの手順を以下のように設定した。
【００６０】
１．収穫後、３日目、４日目、及び５日目に、ＰＨＡ母細胞を赤外線源ＩＲ１０７２に露光させた。３５ｍｍの培養皿を用いて、全ての細胞を１回×３分の治療条件で赤外線に露光させた。毎日の治療の後、５日目に、個々の複製細胞試料を細胞生存率％に関して分析した。
【００６１】
２．ＰＨＡ母細胞を３日目と５日目に５回×３分の治療条件でＩＲ１０７２＆ＩＲ８８０に露光させ、５日目に分析した。細胞生存率とｉＮＯＳの発現を５日目の各治療の後に測定した。
【００６２】
３．ＰＨＡ母細胞を１日目から継続して毎日１回×３分の露光量でＩＲ１０７２及びＩＲ８８０に露光させた。毎日の照射の後、細胞を細胞生存率に関して分析した。
【００６３】
４．ＰＨＡ母細胞を３日目に４回×３分の治療条件でかつ４日目に１回×３分の治療条件でＩＲ１０７２に露光させた。次いで、細胞を４時間放置した後、紫外線に４０分露光させ、細胞生存率を測定した。
【００６４】
５．細胞を３日目まで組織培養チューブ内で培養し、３日目に２回×３分の治療条件で種々の帯幅の光に露光させた。帯幅は、ＩＲ６６０ｎｍ、ＩＲ８８０ｎｍ、ＩＲ９５０ｎｍ、ＩＲ１２６７ｎｍ、ＩＲ１０７２ｎｍ、ＩＲ１０７２とＩＲ１２６８ｎｍを交互、ＩＲ１０７２＋ＩＲ１２６７ｎｍ、１μｓパルスのＩＲ１０７２ｎｍ、及び７μｓパルスのＩＲ１０７２ｎｍとした。照射の直後に、細胞を細胞生存率％に関して分析した。
【００６５】
用いた手順の全てにおいて、皿の全ての温度は、ＩＲ治療及び未治療の全体を通して、室温に維持されたことに留意されたい。
【００６６】
［アネキシンＶ細胞自然死（アポトーシス）検出キット］
細胞生存率は、アネキシン（Annexin）Ｖ細胞自然死検出キット（Autogen Bioclear、英国）を用いて、分析した。細胞自然死は、細胞膜内のホスファチジルセリン（ＰＳ）の位置の変化によって、検出することができる。自然死していない細胞では、殆どのＰＳ分子は、形質膜の内層に局部的に集中している。しかし、細胞が自然死するやいなや、ＰＤは、形質膜の外層に再分布される。露出したＰＳは、アネキシンＶによって、容易に検出することができる。束縛されているアネキシンＶと一緒に存在する細胞は、その形質膜に緑の染色を呈する。しかし、膜の一体性を失った細胞は、細胞質の全体にわたって、赤の染色（ＰＩ）を呈すると共に、細胞の表面（形質膜）に緑の円光を呈する。１皿当り１×１０5〜１×１０6個の細胞を洗浄し、分析用結合バッファに再懸濁させた。５μｌのアネキシンＶと１０μｌのヨウ化プロピジウム（ＰＩ）を細胞に加えた後、室温の暗室において、１５〜３０分間培養した。ＦＩＴＣ＄ローダミン用の二重フィルタセットによって、蛍光顕微鏡検査法を用いて、細胞を観察し、少なくとも二人の検査の目的を知らない観察者によって、個数を数えた。
【００６７】
［ウエスタンブロティング分析］
解凍した細胞ペレット検査液をダウンスホモゲナイザ（Dounce homogeniser）によって、氷上で均質化した。細胞検査液におけるタンパクレベルは、ウシ血清アルブミンを標準として用いるローリ法（Lowry Assay）によって、測定した。タンパクレベルを１０μｇに調整し、タンパクを各レーンに装填した。６％のポリアクリルアミドゲルを用いる標準的な電気泳動を行なった。電気泳動の後、タンパクは、５０Ｖで２．５時間の間にニトロセルロース（ＮＣ）膜に移動した。０．２％のツイーン２０（Tween 20）（sigma、英国）を含む１・トリス緩衝サリン（ＴＢＳ）内に５％の無脂肪乾燥ミルクを含ませたものによって、ＮＣ膜を室温で１時間ブロッキングした。ＮＣ膜を一次抗体であるｉＮＯＳ（１：２５００で希釈）と共に４℃で一晩培養した。ＮＣ膜を洗浄緩衝液（２．５％無脂肪乾燥ミルク又はトリス緩衝液に含まれる０．２％ツイーン２０）によって、４回×１０分間洗浄し、抗ウサギホースラディシュペルオキシダーゼが結合された二次抗体（１：２０００で希釈）と共に、１時間培養した。ＮＣ膜を、洗浄緩衝液で４回×１０分間洗浄した。ＮＣからのタンパクバンドを、６８ｍＭのルミノール、１．２５ｍＭのｐ−カ−ラム酸（ｐ−couramic acid）、３０％の過酸化水素の基質を用いて視覚化した。免疫ブロットを、室温のフィルムカセット内において３分間ハイパーフィルム（HyperfilmTM）に晒し、現像し、定着した。タンパクバンドは、フィルムの線状範囲において、イメージクアント（ImageQuant（登録商標））濃度計を用いて、定量化し、相対的なｉＮＯＳの発現を測定した。（βアクチンによって標準化された）光学的な密度値を、有意水準値ｐをｐ＜０．０５とする多重ＡＮＯＶＡ（分散分析）を用いて比較した。データは、３人（ｎ＝３）のヒトの繰り返し実験から得た。
【００６８】
［統計］
細胞自然死は、細胞生存率％、すなわち、
細胞生存率％＝［（生存細胞の数）／（全細胞の数）］×１００
を用いて、測定した。データは、平均値＋標準偏差として、得た。未治療細胞と治療細胞との比較は、信頼区間を９５％とする多重ＡＮＯＶＡによって行い、平均値＋標準偏差として表した。統計分析は、プリズム３．２（Prism 3.2）を用いて行なった。
【００６９】
［光源］
８８０ｎｍ及び１０７２ｎｍの光源は、５０ｎｍ未満の帯幅のマルチモード光を５ｍｗ／ｃｍ2の連続モードの光電力で放射するものとした。
【００７０】
［ヒトを対象とする研究］
６６０ｎｍから１２６８ｎｍの範囲内の波長を用いて、種々の狭帯幅について、単独で及び組合せて、検討した。
【００７１】
一般集団から、４０人の志願者、具体的には、４５歳から６５歳の間の年齢の３８人の女性と２人の男性を採用した。照明と距離を固定して、各志願者の写真を撮影した。写真は、顔の中心の左、顔の中心の右、顔の左側面、及び顔の右側面とした。距離と照明を一定にすることによって、「治療前」と「治療後」の写真を直接的に比較するのが容易になった。
【００７２】
「治療後」の写真を撮影するとき、「治療前」の写真と比較して、眼を同じ開度で開けることを確実にした。これによって、眼の上の皮膚の襞と眼の下の眼袋を比較することが可能になった。志願者に、写真を撮影するとき、笑わないように又は顔にどのような表情も造らないように、特に指示した。志願者の各々に使える状態の装置を与え、各日に眼の周囲の皮膚領域を略３０分間（各眼の領域ごとに１５分間）治療するように指示した。眼の周囲の皮膚として、より動きがあると共に皮膚の弾性の改善をはっきりと示しやすい個所の皮膚を選択した。
【実施例】
【００７３】
［実施例１］
様々な手順を用いることによって、ＩＲ１０７２による治療は、一貫して、ＰＨＡ母細胞の生存に著しい保護効果を誘発した。対照的に、ＩＲ８８０は、一貫して、未治療細胞及びＩＲ１０７２によって治療された細胞と比較して、細胞毒性をもたらした。
【００７４】
３日目と５日目に１回×３分と５回×３分の治療を行なう手順の後、ＩＲ１０７２の照射を行なった場合、未治療のデータと比較して、５日目の細胞生存率％（ｐ＜０．０５）が著しく増加した（図６）。次の手順では、細胞にＩＲ１０７２とＩＲ８８０を５回×３分照射した後、ＩＲ８８０による治療を行なった場合、ＩＲ１０７２によって治療した細胞と比較して、５日目の治療の後の細胞生存率％（ｐ＜０．０１）が著しく減少した（図６）。毎日行なう治療手順では、８日間にわたってＩＲ８８０によって治療した細胞の細胞生存率は、並行実験においてＩＲ１０７２を照射した細胞と比較して、著しい減少を示した（１日目（ｐ＜０．０１）、３日目（ｐ＜０．０１）、４日目（ｐ＜０．０５）、５日目（ｐ＜０．０５）、及び８日目（ｐ＜０．０５））（図７）。ＩＲ１０７２によって予備治療した後、続いて、紫外線に露光した場合、紫外線のみによって治療した細胞と比較して、細胞生存率％は、著しく高く維持された（ｐ＜０．０１）（図８）。種々の帯幅で照射した後、再び、ＩＲ８８０に露光した細胞は、細胞生存率％が著しく減少し（ｐ＜０．０１）、ＩＲ１０７２による治療（ｐ＜０．０１）及び代替的なＩＲ１０７２／ＩＲ１２６８の帯幅の光による治療（ｐ＜０．０１）の場合、細胞生存率％は、高かった（図９）。なお、これらは、全て、未治療のものと比較した。試験された他の全ての波長及び条件では、細胞生存率に著しい影響を及ぼさなかった。
【００７５】
８５５ｎｍ〜９０５ｎｍの範囲の波長は、繊維芽細胞の増殖を刺激し得るが、本発明者らは、この範囲内の光がリンパ毒性を呈することを見出した。細胞に及ぶ細胞毒性と保護効果は、分析をＩＲ光への露光の２時間以内に行なっているように、急速に現われる。また、これらの効果は、後治療の少なくとも２日目にも観察されるように、長期にわたって継続される。本発明者らの研究は、１０５０ｎｍ〜１１００ｎｍの範囲の光が、一回及び多数回の治療手順に従って、細胞生存率を改良することを明らかに示している。また、菌体内毒素や菌体外毒素及び白血球毒因子のような副作用の存在下において、リンパ球の生存率を維持することに意義がある。すなわち、１０７２ｎｍ±２５ｎｍの光による炎症性細胞への照射によって、これらの毒素の影響を低減することができる。ＩＲ光が紫外線に対して保護効果を有することは、古くから認められているが、その正確な波長の範囲は、知られていなかった。本発明によるこれらの結果は、１０７２ｎｍ±２５ｎｍの光が紫外線の損傷をもたらす影響のいくつかに対して保護効果を有することを示唆している。
【００７６】
［実施例２］
酸化窒素は、様々な種類の細胞における細胞自然死（アポトーシス）の有力な阻止物質であることが分かっている。ＮＯ（一酸化窒素）は、水膜及び細胞膜の両方を通って極めて急速に拡散し、ｉＮＯＳ（誘導型ＮＯ合成酵素）がｅＮＯＳ（血管内皮型ＮＯ合成酵素）やｎＮＯＳ（神経型ＮＯ合成酵素）よりも急速かつ効率的に生成される。ｉＮＯＳは、細胞内カルシウムレベルを上昇させることなく機能することができ、シトキンや微生物代謝産物に晒された後、その活性は、免疫細胞、例えば、一次的に活性化された単核白血球やマクロファージ内に急速に誘導可能である。
【００７７】
ＩＲ１０７２への露光によって誘発される長期にわたって観察される細胞保護機能の基礎をなす有力な機構を説明するために、未治療及びＩＲ８８０ｎｍによる治療の場合と比較して、ｉＮＯＳの発現を検出の手段とする定量的な免疫ブロティングを行なった。ＩＲ１０７２による予備的な治療を行なった結果、未治療の場合と比較して、５日目に４．９±２．１倍（ｐ＜０．０５）まで著しく増加したｉＮＯＳの免疫活性が検出された。対照的に、並行実験でなされたＩＲ８８０の場合、ｉＮＯＳの著しい増加は、観察されなかった（５日目に、２．１±２．２倍）（ｐ＜０．０５）（図１０）。
【００７８】
生物化学的に、本発明のこれらの結果は、未治療の場合と比較して、ｉＮＯＳが波長に依存して上昇したことを示している。ＮＯは、２つの異なる機構によって、細胞自然死の阻止物質として作用すると考えられる。第１の機構は、ＮＯが、カスパーゼ−３様プロテアーゼの活性レベルで作用するか又はこの上流側でプロテアーゼの活性を阻止するように作用するｃＧＭＰ依存機構である。第２の機構は、ＮＯが、酵素のＳ−ニトロソ化によって、カスパーゼ−３様プロテアーゼの活性を阻止する機構である。従って、カスパーゼ−３様プロテアーゼの活性を抑止することが、遺伝的なプログラムによる細胞の死を救済することになる。
【００７９】
［実施例３］
光源による顔と眼の皮膚の治療に続いて、本発明者らは、皺の深さ、長さ、及び面積が減少することを観察した。また、本発明者らは、眼の上の皮膚の表面積が減少し、眼の下の眼袋の出っ張りが減少することを観察した。人為性の減少を最小限にすることを確実にするために、一定の照度のライトボックスを用いた。これによって、被検者からカメラのレンズまでの距離と露出とを一定するのが容易になった。被検者には、同一点に焦点を合せ、かつ個々の写真間での回転を最小限にするのを確実にするために、鼻を糸に接触させて顎を固定点に載せるように指示した。次いで、被検者に光源を与え、１日に少なくとも１回、好ましくは、１日に２回、治療を行なうように指示した。一ヶ月後に、最初の追跡写真を撮り、その後、２ヶ月目に他の一連の写真を撮影した。写真を撮影するとき、いかなる場合でも常に、顔に表情を造らず、眼の上の皮膚を直接的に比較することを可能とするために、眼は同じ開度で開き、かつ視線をいかなる場合でもライトボックスにおける同一スポットに向けることを、必須事項とした。４枚の写真、すなわち、左正面、右正面、左側面、及び右側面の写真を撮影した。これによって、眼の下の目袋と皺の長さ及び深さを直接比較するのが容易になった。垂直面又は水平面にない皺は、わずかな回転の差を与えれば検出できるが、そのようなわずかな回転の差は人為的な回転になるので、検出しなかった。また、本発明者らは、電磁的美容治療が施された人体の様々な他の部分における組織及び筋肉の色調の改善を観察した。これらの結果は、老化の明らかな徴候を低減させ、上眼蓋に影響を与える余分な皮膚を減少させ、かつ顔の組織の色調を維持し、従って、若々しい鼻唇溝と顔の輪郭を維持する点において、質的な改善を示している。
【００８０】
本発明の方法によれば、皮膚の肌理及び輪郭が改善され、その結果、滑らかな皮膚が得られた。これらの効果は、治療が中断された後、１〜３ヶ月にわたって維持することができ、場合によっては、１０年に至る長期にわたって、老化の明らかな徴候を回復することができる。
【００８１】
光を太腿及び臀部に照射することによって、目立った皮下脂肪が著しく改善され、重力の影響による臀部の垂れの程度が低減された。
【００８２】
図１１Ａを参照すると、ＩＲ１０７２ｎｍによって２ヶ月間毎日治療した効果が、治療をする前の同一の被検者（図１１Ｂ）と比較して示されている。図１１Ｃは、治療前の写真と、同一の被検者をＩＲ１０７２ｎｍによって１ケ月治療した後の写真とを重ね合わせた写真を示している。本発明者らは、１ケ月の治療の後、上目蓋が角膜を同じ場所で切っていること、及び角膜での光の反射が未治療の場合と試験の場合のいずれにおいても同じであることから、眼蓋の上の皮膚の襞を直接比較することができることを観察した（図１１Ｃ）。本発明者らは、治療の後、上眼蓋の垂れが少なくなっているのを観察した。この垂れは、２ヶ月の治療の後、さらに改善されている（図１１Ａ）。
【００８３】
［実施例４］
図１３Ａを参照すると、治療前の被検者の側面が示されている。図１３Ｂでは、治療後の同一の被検者が示されている。被検者は、角膜の縁の下方に着色傷からなる識別可能な指標を有している。黒色の標識ラインと直交するラインを描き、以下の測定を行なった。
【００８４】
【表１】
2008503295.tif 000003
【００８５】
（鼻までの距離を基準とする）尺度の変更による調整を行い、ラインから着色傷までの距離を（３８．３／３４．２）×２０．３＝２２．７ｍｍとし、ラインから眼袋までの距離を（（３８．３／３４．２）×１８＝２０．２ｍｍとした。
【００８６】
【表２】
2008503295.tif 000004
【００８７】
８人の志願者に対して、前述の技術を利用して、眼袋の減少を測定した。その内、７人が、眼の下の眼袋の大きさの減少を示した。
【００８８】
［実施例５］
治療前と治療後の両方において、眼の開度を確実に同じにすることによって、図１４Ｃでは、「治療前」の写真（図１４Ａ）における片方の眼の一部を切って、「治療前」の写真（図１４Ｂ）の眼の相補的な側部と合せた。これによって、皮膚の品質の改善を容易に見分けることができる。
【００８９】
結果指標、眼袋の大きさ、及び弛んだ皮膚の測定では、年配者の場合、眼の周辺の皺を単に判断するときのバラツキは排除した。
【００９０】
【表３】
2008503295.tif 000005
【００９１】
この研究に参加した２０人の志願者のうち、１９人は、１０７２ｎｍの光による治療が有効である（ｐ＝０．０００４）であることに満足した。
【００９２】
基準となる写真を美容試験の制御の側面として利用することによって、上記のデータは、発明の方法と装置が有効であることを実証している。治療を毎日行なうことによって、多数の志願者が、さらに若々しい外観を呈する好ましい成果を達成した。
【図面の簡単な説明】
【００９３】
【図１】本発明の方法を実行する装置の１つの平面図（１Ａ）、側面図（１Ｂ）、及び断面図（１Ｃ、１Ｄ）である。
【図２】本発明の方法を実行する装置の代替品の側面図である。
【図３．４．５】本発明の方法を実行する装置のさらに他の代替品の正面図（図３）、側面図（図４）、及び後面図（図５）である。
【図６】柱１及び２は、３日目と５日目のＩＲ１０７２による１回×３分の治療に続いて、５日目に細胞自然死の試験を行なった後のＰＨＡ母細胞の細胞生存率％を示している。データは、それぞれ、未処理のものと比較し、分散分析（ＡＮＯＶＡ）を用いて分析した（*ｐ＜０．０５）。柱３、４、５は、３日目と５日目のＩＲ１０７２＆ＩＲ８８０による５回×３分の治療に続いて、５日目に細胞生存率の試験を行なった後のＰＨＡ母細胞の細胞生存率％を示している。データは、それぞれ、５日目の各未処理のものと比較し、ＡＮＯＶＡを用いて分析した（**ｐ＜０．０１）。
【図７】ＩＲ１０７２又はＩＲ８８０のいずれかを照射する１回×３分の治療を毎日行なった後のＰＨＡ母細胞の細胞生存率％を示している。細胞生存率は、アネキシンＶ細胞自然死検出キットを用いて測定した。ＡＮＯＶＡを用いて、ＩＲ１０７２のデータを、それぞれ、ＩＲ８８０のデータと比較して分析した。１日目、３日目、４日目、及び５日目において、有意差が見られ、（*ｐ値＜０．０１）、２日目において、有意性の傾向が見られた。
【図８】ＩＲ１０７２によって３日目に４回×３分、４日目に１回×３分の予備治療を行い、４時間の培養を行なった後、紫外線に４０分露光させたＰＨＡ母細胞を示している。試料を細胞生存率に関して分析した。データは、紫外線のみで治療したものと比較して、ＡＮＯＶＡを用いて分析した（**ｐ＜０．０１）。
【図９】３日目に２回×３分の治療を施したＰＨＡ母細胞に及ぼす種々の帯幅の影響を分析した結果を示している。データを、未治療のものと比較して、多重ＡＮＯＶＡを用いて分析した（**ｐ＜０．０１）。
【図１０】ｉＮＯＳタンパクの発現レベルに及ぼすＩＲ治療の効果を示すウエスタンブロティングを示している。ＰＨＡ母細胞を１回×３分の条件で赤外源であるＩＲ１０７２又はＩＲ８８０に毎日露光させ、３日目と５日目に分析した。ｉＮＯＳタンパクの発現は、定量的な免疫ブロットを用いて、選択的なｉＮＯＳ抗体（Autogen Bioclear、英国）によって分析した。免疫ブロットは、再検定し、β−アクチン抗体（Sigma、英国）によって標準化した。レーン１は、未治療細胞（５日目）であり、レーン２は、ＩＲ１０７２によって治療された細胞（５日目）であり、レーン３は、ＩＲ８８０によって治療された細胞（５日目）である。データを、多重ＡＮＯＶＡによって、比較した。有意性のレベルは、ｐ＜０．０１に設定した。
【図１１】図１１Ａは、２ケ月間毎日１０７２ｎｍで治療した効果を同一の被検者の治療の前（図１１Ｂ）と比較した結果を示し、図１１Ｃは、治療前の写真を同一の被検者に１０７２ｎｍで治療した１ケ月後の写真と重ね合わせた写真を示している。
【図１２】ヒトを対象とする研究のための手順の概略図である。
【図１３】図１３Ａは、治療前を示し、図１３Ｂは、多数回の治療を行なって目の下の眼袋が減少した効果を示している。
【図１４】同じ手順を行なった図１２とは異なる被検者を示している。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１１Ｃ】
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【図１２】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１４Ｃ】
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【国際調査報告】
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