(57)【要約】本発明は、デバイス上における、バイオフィルムに包埋された微生物の生育または増殖を防止するための組成物であって、（ａ）カチオン性ポリペプチドおよび（ｂ）ビスグアニド、またはそれらの塩を備えている組成物を提供する。本発明はさらに、そのような組成物を用いて医療用デバイスを作製する方法を提供する。
2008546812.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
デバイス上における、バイオフィルムに包埋された微生物の生育または増殖を防止するための組成物であって、（ａ）カチオン性ポリペプチドおよび（ｂ）ビスグアニド、またはそれらの塩を備えている組成物。
【請求項２】
前記カチオン性ポリペプチドは組成物中で約１２．５ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌである、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記ビス・グアニジンは組成物中で約１００ｍｇ／ｍｌ〜約４００ｍｇ／ｍｌである、請求項１または請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記微生物は細菌である、請求項１から請求項３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
前記細菌は、大腸菌（Escherichia coli）、プロテウス・ミラビリス（Proteus mirabilis）、肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae）、緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa）、クレブシエラ・オキシトカ（Klebsiella oxytoca）、プロビデンティア・ステュアルティイ（Providentia stuartii）およびセラチア・マルセッセンス（Serratia marcescens）から成る群から選択されたグラム陰性細菌である、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
前記細菌は、エンテロコッカス・フェカーリス（Enterococcus faecalis）、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）、ヴィリダンス型連鎖球菌（Streptococcus viridans）、表皮ブドウ球菌（Staphylococcus epidermidis）、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）およびスタフィロコッカス・サプロフィティクス（Staphylococcus saprophyticus）から成る群から選択されたグラム陽性細菌である、請求項４に記載の組成物。
【請求項７】
前記微生物は真菌である、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
前記真菌はカンジダ・アルビカンス（Candida albicans）である、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
前記カチオン性ポリペプチドは、硫酸プロタミン、デフェンシン、ラクトペルオキシダーゼおよびリゾチームから成る群から選択される、請求項１から請求項８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記カチオン性ポリペプチドは硫酸プロタミンである、請求項１から請求項８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記ビスグアニドは、クロルヘキシジン、アレキシジンおよびポリマー性のビスグアニドから成る群から選択される、請求項１から請求項１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
前記ビスグアニドはクロルヘキシジン塩である、請求項１から請求項１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記クロルヘキシジン塩は、ジグルコン酸クロルヘキシジン、二酢酸クロルヘキシジンおよび二塩酸クロルヘキシジンから成る群から選択される、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記カチオン性ポリペプチドは硫酸プロタミンであり、ビスグアニドはクロルヘキシジン塩である、請求項１から請求項８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
前記硫酸プロタミンは約１００ｍｇ／ｍｌであり、クロルヘキシジン塩は約４００ｍｇ／ｍｌである、請求項４に記載の組成物。
【請求項１６】
水；結合剤、接合剤もしくはカップリング剤；ビスフェノール；第四級アンモニウム化合物；マレイミド；抗生物質；およびｐＨ調整剤から成る群から選択された一つ以上の成分をさらに備える、請求項１から請求項１５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１７】
追加の抗菌性成分をさらに備える、請求項１から請求項１６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１８】
前記追加の抗菌性成分は、ビスフェノール、Ｎ置換マレイミド、および第四級アンモニウム化合物から成る群から選択される、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
前記ビスフェノールは、トリクロサンおよびヘキサクロロフェンから成る群から選択される、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記Ｎ置換マレイミドは、Ｎ−エチルマレイミド（ＮＥＭ）、５，５−ジチオビス−（２−ニトロ安息香酸）（ＤＴＮＢ）、Ｎ−フェニルマレイミド（ＰｈｅＭ）、Ｎ−（１−ピレニル）マレイミド（ＰｙｒＭ）、ナフタレン−１，５−ジマレイミド（ＮＤＭ）、Ｎ，Ｎ’−（１，２−フェニレン）ジマレイミド（ｏＰＤＭ）、Ｎ，Ｎ’−１，４−フェニレンジマレイミド（ｐＰＤＭ）、Ｎ，Ｎ’−１，３−フェニレンジマレイミド（ｍＰＤＭ）、および１，１−（メチレンジ−４，１−フェニレン）ビスマレイミド（ＢＭ）から成る群から選択される、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２１】
前記第四級アンモニウム化合物は、塩化ベンザルコニウム、トリドデシル・メチル塩化アンモニウム、およびジデシル・ジメチル塩化アンモニウムから成る群から選択される、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２２】
請求項１から請求項２１のいずれか一項に記載の組成物を用いてデバイスの少なくとも一つの表面を処理する工程を含む、デバイスの作製方法。
【請求項２３】
請求項１から請求項２１のいずれか一項に記載の組成物をポリマーに組み込む行程を備えるデバイスの作製方法であって、前記ポリマーがデバイスの形成に使用される方法。
【請求項２４】
デバイスの作製方法であって、請求項１から請求項２１のいずれか一項に記載の組成物でデバイスの少なくとも一つの表面上をコーティングする行程を備える方法。
【請求項２５】
前記組成物は有効な量の硫酸プロタミンおよびクロルヘキシジン塩を備える、請求項２２から請求項２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記デバイスは医療用デバイスである、請求項２２から請求項２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記デバイスはカテーテルである、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記カテーテルは留置カテーテルである、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記留置カテーテルは、中心静脈カテーテル、末梢静脈内カテーテル、動脈カテーテル、血液透析カテーテル、臍帯カテーテル、経皮的非トンネル式シリコーン・カテーテル、カフ付トンネル式中心静脈カテーテルおよび皮下中心静脈ポートから成る群から選択される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記留置カテーテルは、尿道カテーテル、腹腔カテーテルおよび中心静脈カテーテルから成る群から選択される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記デバイスは、カテーテル、ペースメーカー、人工心臓弁、人工関節、ボイスプロテーゼ、コンタクトレンズおよび子宮内避妊器具から成る群から選択される、請求項２２から請求項２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
デバイスに関連した感染を防止するための組成物であって、（ａ）カチオン性ポリペプチドおよび（ｂ）ビスグアニド、またはそれらの塩を備えている組成物。
【請求項３３】
前記カチオン性ポリペプチドは組成物中で約１２．５ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌである、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３４】
前記ビス・グアニジンは組成物中で約１００ｍｇ／ｍｌ〜約４００ｍｇ／ｍｌである、請求項３２または請求項３３に記載の組成物。
【請求項３５】
前記感染は細菌感染である、請求項３２から請求項３４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３６】
前記細菌は、大腸菌（Escherichia coli）、プロテウス・ミラビリス（Proteus mirabilis）、肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae）、緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa）、クレブシエラ・オキシトカ（Klebsiella oxytoca）、プロビデンティア・ステュアルティイ（Providentia stuartii）およびセラチア・マルセッセンス（Serratia marcescens）から成る群から選択されたグラム陰性細菌である、請求項３５に記載の組成物。
【請求項３７】
前記細菌は、エンテロコッカス・フェカーリス（Enterococcus faecalis）、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）、ヴィリダンス型連鎖球菌（Streptococcus viridans）、表皮ブドウ球菌（Staphylococcus epidermidis）、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）およびスタフィロコッカス・サプロフィティクス（Staphylococcus saprophyticus）から成る群から選択されたグラム陽性細菌である、請求項３５に記載の組成物。
【請求項３８】
前記感染は真菌感染である、請求項３２に記載の組成物。
【請求項３９】
前記真菌はカンジダ・アルビカンス（Candida albicans）である、請求項３８に記載の組成物。
【請求項４０】
前記カチオン性ポリペプチドは、硫酸プロタミン、デフェンシン、ラクトペルオキシダーゼおよびリゾチームから成る群から選択される、請求項３９に記載の組成物。
【請求項４１】
前記カチオン性ポリペプチドは硫酸プロタミンである、請求項３２から請求項４０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４２】
前記ビスグアニドは、クロルヘキシジン、アレキシジンおよびポリマー性のビスグアニドから成る群から選択される、請求項３２から請求項４１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４３】
ビスグアニドはクロルヘキシジン塩である、請求項３２から請求項４２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４４】
前記クロルヘキシジン塩は、ジグルコン酸クロルヘキシジン、二酢酸クロルヘキシジンおよび二塩酸クロルヘキシジンから成る群から選択される、請求項４３に記載の組成物。
【請求項４５】
前記カチオン性ポリペプチドは硫酸プロタミンであり、ビスグアニドはクロルヘキシジン塩である、請求項３２から請求項４４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４６】
前記硫酸プロタミンは約１００ｍｇ／ｍｌであり、クロルヘキシジン塩は約４００ｍｇ／ｍｌである、請求項４５に記載の組成物。
【請求項４７】
水、結合剤、接合剤もしくはカップリング剤、ビスフェノール、第四級アンモニウム化合物、マレイミド、抗生物質、およびｐＨ調整剤から成る群から選択された一つ以上の成分をさらに含む、請求項３２から請求項４６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４８】
請求項３２から請求項４７のいずれか一項に記載の組成物を用いて前記デバイスの少なくとも一つの表面を処理する行程を備える、デバイスの作製方法。
【請求項４９】
請求項３２から請求項４８のいずれか一項に記載の組成物をポリマーに組み込む行程を備えるデバイスの作製方法であって、前記ポリマーがデバイスの形成に使用される方法。
【請求項５０】
請求項３２から請求項４７のいずれか一項に記載の組成物で前記デバイスの少なくとも一つの表面上をコーティングする行程を備える、デバイスの作製方法。
【請求項５１】
前記組成物は有効な量の硫酸プロタミンおよびクロルヘキシジン塩を備える、請求項４８から請求項５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５２】
前記デバイスは医療用デバイスである、請求項４８から請求項５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５３】
前記デバイスはカテーテルである、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記カテーテルは留置カテーテルである、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記留置カテーテルは、中心静脈カテーテル、末梢静脈内カテーテル、動脈カテーテル、血液透析カテーテル、臍帯カテーテル、経皮的非トンネル式シリコーン・カテーテル、カフ付トンネル式中心静脈カテーテルおよび皮下中心静脈ポートから成る群から選択される、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記留置カテーテルは、尿道カテーテル、腹腔カテーテルおよび中心静脈カテーテルから成る群から選択される、請求項５４に記載の方法。
【請求項５７】
前記デバイスは、カテーテル、ペースメーカー、人工心臓弁、人工関節、ボイスプロテーゼ、コンタクトレンズおよび子宮内避妊器具から成る群から選択される、請求項４８から請求項５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５８】
前記組成物は、前記カチオン性ポリペプチドおよび前記ビス・グアニジン、またはそれらの塩のコーティング、組み込み、または処理がなされている医療用デバイスをさらに備える、請求項３２から請求項４７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５９】
前記医療用デバイスはカテーテルである、請求項５８に記載の組成物。
【請求項６０】
前記カテーテルは留置カテーテルである、請求項５９に記載の組成物。
【請求項６１】
前記留置カテーテルは、中心静脈カテーテル、末梢静脈内カテーテル、動脈カテーテル、血液透析カテーテル、臍帯カテーテル、経皮的非トンネル式シリコーン・カテーテル、カフ付トンネル式中心静脈カテーテルおよび皮下中心静脈ポートから成る群から選択される、請求項６０に記載の組成物。
【請求項６２】
前記留置カテーテルは、尿道カテーテル、腹腔カテーテルおよび中心静脈カテーテルから成る群から選択される、請求項６１に記載の組成物。
【請求項６３】
前記医療用デバイスは、カテーテル、ペースメーカー、人工心臓弁、人工関節、ボイスプロテーゼ、コンタクトレンズおよび子宮内避妊器具から成る群から選択される、請求項５９に記載の組成物。
【請求項６４】
哺乳動物に移植するための医療用デバイスの作製における、請求項３２から請求項４７のいずれか一項に記載の組成物の使用方法。
【請求項６５】
前記医療用デバイスの組成物によるコーティング、組み込み、または処理がなされる、請求項６５に記載の使用方法。
【請求項６６】
前記医療用デバイスは、カテーテル、ペースメーカー、人工心臓弁、人工関節、ボイスプロテーゼ、コンタクトレンズおよび子宮内避妊器具から成る群から選択される、請求項６４または請求項６５に記載の使用方法。
【請求項６７】
前記カテーテルは留置カテーテルである、請求項６６に記載の使用方法。
【請求項６８】
前記留置カテーテルは、尿道カテーテル、腹腔カテーテルおよび中心静脈カテーテルから成る群から選択される、請求項６７に記載の使用方法。
【請求項６９】
前記留置カテーテルは、中心静脈カテーテル、末梢静脈内カテーテル、動脈カテーテル、血液透析カテーテル、臍帯カテーテル、経皮的非トンネル式シリコーン・カテーテル、カフ付トンネル式中心静脈カテーテルおよび皮下中心静脈ポートから成る群から選択される、請求項６８に記載の使用方法。
【請求項７０】
組成物により尿路感染症が防止される、請求項６４から請求項６９のいずれか一項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、デバイス、特にカテーテルのような医療用デバイスの表面または内部における、バイオフィルムに包埋された微生物の生育および増殖を抑制する抗菌性組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
（関連出願への相互参照）
本願は、２００５年７月１日出願の米国仮特許出願第６０／６９５，５４６号明細書ならびに２００５年１２月６日出願の米国仮特許出願第６０／７４２，９７２号明細書に関連し、同出願の優先権を主張する。
【０００３】
（背景）
尿路感染症（ＵＴＩ）は、すべての院内感染のうち最大で４０％を占める最も一般的な院内感染である。ＵＴＩ症例の大多数は、経尿道的フォリーカテーテル、恥骨上カテーテル、および腎臓瘻術カテーテルを含む尿道カテーテルの使用に関係している。これらの尿道カテーテルは、高齢者、脳卒中の犠牲者、脊髄を負傷した患者、手術後の患者および閉塞性尿路疾患の患者を含む様々な人々に挿入される。尿道カテーテルの挿入およびメンテナンスに関する無菌ガイドラインを遵守しても、カテーテルに関連したＵＴＩは大きな問題を提起し続けている。例えば、脊髄を負傷した入院患者のほぼ４分の１が入院中に症候性ＵＴＩを発症すると推測される。カテーテルに関連するＵＴＩ症例の原因は、グラム陰性桿菌がほぼ６０〜７０％であり、腸球菌が約２５％であり、カンジダ属菌種が約１０％である。更に、血管カテーテルを含む医療用留置デバイスは、静脈へのアクセスを提供することから入院患者の管理において不可欠になりつつある。これらのカテーテルならびに他のタイプの医療用デバイス、たとえば腹腔カテーテル、心臓血管デバイス、整形外科用インプラントおよび他の人工器官などからもたらされる恩恵は、感染合併症によってしばしば相殺されてしまう。これらの感染合併症を引き起こす最も一般的な生物は表皮ブドウ球菌（Staphylococcus epidermidis）および黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）である。血管カテーテルの場合、これら２種の生物がすべての感染生物のほぼ７０〜８０％を占め、表皮ブドウ球菌が最も一般的な生物である。真菌病原体であるカンジダ・アルビカンス（Candida albicans）は、カテーテル感染の１０〜１５％の原因となっている。
【０００４】
近年、デバイスに関連した感染の発生率を減少させる手段として、脈管構造内または尿路に配置されることになるデバイスの表面上または内部に抗菌剤および抗生物質を封じ込める多大な努力がなされてきた。これらの抗菌物質は様々な化学組成のものであり、カチオン性ポリペプチド（プロタミン、ポリリシン、リゾチームなど）、防腐剤（クロルヘキシジン、トリクロサンなど）、界面活性剤（硫酸ドデシルナトリウム、トゥイーン（Ｒ）−８０、サーファクチンなど）、第四級アンモニウム化合物（塩化ベンザルコニウム、トリドデシル・メチル塩化アンモニウム、ジデシル・ジメチル塩化アンモニウムなど）、銀イオン／銀化合物およびニトロフラゾンを含むことができる。
【０００５】
抗菌カテーテルの主な作製方法には、浸漬またはフラッシング、コーティング、薬物とポリマーとの共役、および含浸が挙げられる（ターメイ（Ｔｕｒｍｅｙ）ら、Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．、第７巻第４号、ｐ．１９５−２０５、１９９６年）。臨床的には、適切なカテーテルに、一定の状況において臨床医に可撓性とコントロールとを提供する浸漬処理を、配置の直前に施すことができる。いくつかの研究により、抗菌物質でコーティングされたカテーテルの臨床的有効度が検討されている。ミノサイクリンおよびＥＤＴＡでコーティングされたポリウレタン・カテーテルは、血管カテーテルに関連した再発性の感染を低減する可能性を示した（ラード（Ｒａａｄ）ら、Ｃｌｉｎ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．、第２５巻、ｐ．１４９−１５１、１９９７年）。ミノサイクリンおよびリファンピンによるコーティングは、カテーテルに関連する感染のリスクを著しく減少させることが示された（ラード（Ｒａａｄ）ら、Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．、第２６巻、ｐ．２１９−２２４、１９９８年）。尿道カテーテル上にコーティングされたミノサイクリンは、コロニー形成に対しある程度の防御を呈することが示された（ダルーシェ（Ｄａｒｏｕｉｃｈｅ）ら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇ．、第８巻、ｐ．２４３−２４７、１９９７年）。ジョンソン（Ｊｏｈｎｓｏｎ）らは、ニトロフラゾンでコーティングされた市販のシリコーン・カテーテルの生体外（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）における大きな抗菌活性について述べている（ジョンソン（Ｊｏｈｎｓｏｎ）ら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．、第４３巻、ｐ．２９９０−２９９５、１９９９年）。医療用デバイス用の抗菌コーティング剤としての銀含有化合物の抗細菌活性は、広く調査されている。クロルヘキシジンと併用されたスルファジアジン銀は、中心静脈カテーテルのコーティング剤として特に関心を集めてきた（スティクラー（Ｓｔｉｃｋｌｅｒ）、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．、第１３巻、ｐ．３８９−３９３、２０００年およびダルーシェ（Ｄａｒｏｕｉｃｈｅ）ら、Ｎｅｗ  Ｅｎｇ．Ｊ．Ｍｅｄ．、第３４０巻、ｐ．１−８、１９９９年）。
【０００６】
浸漬またはコーティングの技術による医療用デバイス中への抗菌物質の装入は、比較的簡単であるという長所を有する。しかしながら、組み込むことができる薬物量に限界があるため抗菌効果の延長には不十分な場合があり、また、デバイスを臨床的に挿入した後の薬物の放出が急速で比較的抑制しにくい。これらの問題を軽減する手段は、医療用デバイスのポリマーマトリクス中に、該ポリマーの合成工程またはデバイスの製造工程で抗菌物質を直接組み込むことによる。リファンピシンは、髄液シャントでの感染を防止すべくシリコーンに組み入れられ、ある程度の成功を収めている（シェルホルツ（Ｓｃｈｉｅｒｈｏｌｚ）ら、Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ、第１８巻、ｐ．８３９−８４４、１９９７年）。ヨウ素も医療用デバイスの生体材料に組み入れられている。冠状動脈のステントは、シリコーンにヘパリンを共有結合させた後、このヘパリン処理された表面に結合した架橋コラーゲン中へ抗生物質を取り込むことによって、抗血栓作用および抗菌活性を有するように修飾されている（フォールグレン（Ｆａｌｌｇｒｅｎ）ら、Ｚｅｎｔｒａｌｂｌ．Ｂａｋｔｅｒｉｏｌ．、第２８７巻、ｐ．１９−３１、１９９８年）。
【０００７】
ウェル（Ｗｅｌｌｅ）らは、医療用デバイスをフラッシング処理するためのキットの作製方法を開示した（米国特許第６，１８７，７６８号明細書）。このキットは、抗生物質、抗凝血薬（硫酸プロタミン）、およびカテーテル中の細菌増殖によって引き起こされる感染を防ぐのに有用な抗血栓剤またはキレート剤を含んだ溶液を備えている。
【０００８】
ラード（Ｒａａｄ）らは、ミノサイクリンとＥＤＴＡとの混合物の医薬組成物がカテーテル・ポートの開通性を維持するのに役立つことを明らかにした（米国特許第５，３６２，７５４号明細書）。最近、ラード（Ｒａａｄ）およびシェレツ（Ｓｈｅｒｅｔｚ）は、有効なカテーテルのフラッシング溶液を、非グリコペプチド抗菌物質、抗トロンビン剤、抗凝血薬、ならびに、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡおよびＤＴＰＡから成る群から選択されたキレート剤を用いて調製可能であることをさらに示した（米国特許第５，６８８，５１６号明細書）。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
ウェル（Ｗｅｌｌｅ）らは、医療用デバイスで使用される、硫酸プロタミンを含むいくつかの抗凝血薬の使用を教示している（米国特許第６，１８７，７６８号明細書）。硫酸プロタミンとある種の抗生物質との併用は、緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa）および表皮ブドウ球菌（Staphylococcus epidermidis）のような、カテーテルに関連した細菌に対して相乗効果を有することが示されている（ソボー（Ｓｏｂｏｈ）ら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．、第３９巻、ｐ．１２８１−１２８６、１９９５年およびリチャーズ（Ｒｉｃｈａｒｄｓ）ら、ＡＳＡＩＯ  Ｔｒａｎｓ、第３６巻、ｐ．２９６−２９９）。キム（Ｋｉｍ）ら（キム（Ｋｉｍ）ら、Ａｍ．Ｊ．Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓ．、第３９巻、ｐ．１６５−１７３、２００２年）は、カフおよびチューブ材のポリマーマトリクス中にクロルヘキシジン、スルファジアジン銀およびトリクロサンを含浸させることにより、抗菌剤を含浸させた腹膜透析カテーテルを開発した。フォックス（Ｆｏｘ）らは、銀塩およびクロルヘキシジンを含んでなる相乗効果のある組成物を有する医療用デバイスを開示している（米国特許第５，０１９，０９６号明細書）。ソロマン（Ｓｏｌｏｍａｎ）らは、クロルヘキシジンを含んだ抗感染性の医療用品を開示している（米国特許第６，２６１，２７１号明細書）。モダク（Ｍｏｄａｋ）らは、米国特許第６，７０６，０２４号明細書および米国特許第６，８４３，７８４号明細書において、クロルヘキシジン、トリクロサン、および銀化合物を含んだ医療用デバイスを開示している。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明の実施形態は、デバイス上における、バイオフィルムに包埋された微生物の生育および増殖を防止するための組成物であって、（ａ）カチオン性ポリペプチドおよび（ｂ）ビスグアニド、またはそれらの塩を備えている組成物を提供する。
【００１１】
本発明の一実施形態では、カチオン性ポリペプチドは組成物中で約１２．５ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌである。
本発明の別の実施形態では、ビスグアニドは組成物中で約１００ｍｇ／ｍｌ〜約４００ｍｇ／ｍｌである。
【００１２】
さらなる実施形態では、本発明の組成物はバイオフィルムに包埋された細菌の生育および増殖の防止に有効である。
細菌は、大腸菌（Escherichia coli）、プロテウス・ミラビリス（Proteus mirabilis）、肺炎桿菌（Klebsiella pneumoniae）、緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa）、クレブシエラ・オキシトカ（Klebsiella oxytoca）、プロビデンティア・ステュアルティイ（Providentia stuartii）およびセラチア・マルセッセンス（Serratia marcescens）から成る群から選択されたグラム陰性細菌でもよい。
【００１３】
細菌は、エンテロコッカス・フェカーリス（Enterococcus faecalis）、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）、ヴィリダンス型連鎖球菌（Streptococcus viridans）、表皮ブドウ球菌（Staphylococcus epidermidis）、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）およびスタフィロコッカス・サプロフィティクス（Staphylococcus saprophyticus）から成る群から選択されたグラム陽性細菌でもよい。
【００１４】
別の実施形態では、組成物はバイオフィルムに包埋された真菌の生育および増殖の防止に有効であり、真菌はカンジダ・アルビカンス（Candida albicans）を含んでもよい。
さらなる実施形態では、カチオン性ポリペプチドは、硫酸プロタミン、デフェンシン、ラクトペルオキシダーゼおよびリゾチームから成る群から選択される。
【００１５】
さらに別の実施形態では、ビスグアニドは、クロルヘキシジン、アレキシジンおよびポリマー性のビスグアニドから成る群から選択される。
さらに別の実施形態では、ビスグアニドはクロルヘキシジン塩である。
【００１６】
クロルヘキシジン塩は、ジグルコン酸クロルヘキシジン、二酢酸クロルヘキシジンおよび二塩酸クロルヘキシジンから成る群から選択されうる。
さらなる実施形態では、カチオン性ポリペプチドは硫酸プロタミンであり、ビスグアニドはクロルヘキシジン塩である。
【００１７】
さらに別の実施形態では、組成物は約１００ｍｇ／ｍｌの硫酸プロタミンと約４００ｍｇ／ｍｌのクロルヘキシジン塩とを含む。
また別の実施形態では、本発明による組成物は、水；結合剤、接合剤もしくはカップリング剤または架橋剤；ビスフェノール；第四級アンモニウム化合物；マレイミド；抗生物質；およびｐＨ調整剤から成る群から選択された一つ以上の成分をさらに含む。
【００１８】
別の態様では、本発明は、本発明による組成物を用いてデバイスの少なくとも一つの表面を処理する行程を含む、デバイスの作製方法を提供する。
さらなる態様では、本発明は、本発明の組成物をポリマーに組み込む行程を備えるデバイスの作製方法であって、ポリマーがデバイスの形成に使用される方法を提供する。
【００１９】
別の態様では、本発明は、デバイスの作製方法であって、該デバイスの少なくとも一つの表面上を本発明の組成物でコーティングする行程を備える、デバイスの作製方法を提供する。
【００２０】
一実施形態では、組成物は有効な量の硫酸プロタミンおよびクロルヘキシジン塩を含む。
本発明の一実施形態では、デバイスは医療用デバイスである。
【００２１】
本発明の別の実施形態では、デバイスはカテーテルであってもよい。
カテーテルは、中心静脈カテーテル、末梢静脈内カテーテル、動脈カテーテル、血液透析カテーテル、臍帯カテーテル、経皮的非トンネル式シリコーン・カテーテル、カフ付トンネル式中心静脈カテーテルおよび皮下中心静脈ポートから成る群から選択された留置カテーテルであってよい。
【００２２】
カテーテルは、尿道カテーテル、腹腔カテーテルおよび中心静脈カテーテルから成る群から選択された留置カテーテルであってもよい。
別の実施形態では、デバイスは、カテーテル、ペースメーカー、人工心臓弁、人工関節、ボイスプロテーゼ、コンタクトレンズおよび子宮内避妊器具から成る群から選択されてもよい。
【００２３】
さらなる態様では、本発明は、デバイスに関連した感染を防止するための組成物であって、（ａ）カチオン性ポリペプチドおよび（ｂ）ビスグアニド、またはそれらの塩を備える組成物を提供する。
【００２４】
さらなる態様では、本発明は、（ａ）カチオン性ポリペプチドおよび（ｂ）ビスグアニド、またはそれらの塩を用いてデバイスの少なくとも一つの表面を処理する行程を備える、デバイスの作製方法を提供する。
【００２５】
さらなる態様では、本発明は、（ａ）カチオン性ポリペプチドおよび（ｂ）ビスグアニド、またはそれらの塩を備える組成物と、（ｃ）前記カチオン性ポリペプチドおよび前記ビス・グアニジン、またはそれらの塩のコーティング、組み込み、または処理がなされている医療用デバイスとを提供する。
【００２６】
さらなる態様では、本発明は、哺乳動物に移植するための医療用デバイスの作製における、本願に記載された組成物のうちのいずれかの使用方法を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２７】
少なくとも一つのカチオン性ポリペプチドおよび少なくとも一つのビスグアニドを備えている組成物は、増強された抗菌活性を有する。特に前記の化合物は、バイオフィルムに包埋された、細菌および真菌のいずれも含む微生物の生育および増殖の防止に有効である。抗菌活性の増強は、有効な抗菌性組成物を生産するために使用すべき上記の各化合物の量が少ないことによって証拠づけられる。必要とされる化合物の全体量は、化合物のうちいずれかが単独で使用された場合に必要な量よりも少ない。特に、生物学的に許容可能なカチオン性ポリペプチド少量と、低濃度では生物学に許容可能であり有効な抗菌剤であるビスグアニド少量とを使用することが可能である。
【００２８】
従って、本発明の実施形態は、バイオフィルムに包埋された微生物の生育および増殖を防止するための組成物であって、（ａ）カチオン性ポリペプチドおよび（ｂ）ビスグアニド、またはそれらの塩を備える組成物を提供する。
【００２９】
本発明の実施形態はまた、留置カテーテルによって引き起こされる尿路感染症のような、植え込み型医療用デバイスまたはカテーテルによって引き起こされる感染または悪化する感染を、組成物で前記医療用デバイスまたはカテーテルをコーティングすることによって防止するための組成物を提供し、そのような組成物は、（ａ）カチオン性ポリペプチドおよび（ｂ）ビスグアニド、またはそれらの塩を備える。
【００３０】
本発明の相乗効果を有する抗菌性組成物は、効果を発揮するために（過去に使用されてきたものと比較して）極めて少量の有効成分しか必要としない。本発明に係る組成物は、個々の化合物の特性を含むが効能と適用範囲とにおいて個々の化合物を越える特性を有することができる。活性化合物または活性成分が、非常に低濃度で、従って効能が高いことにより、本発明の実施形態は非常に望ましく、かつ製造するのに比較的経済的なものとなるが、ある種の適用について望まれる場合にはこれらの化合物をより高い濃度で使用することもできる。これらの組成物を使用するさらなる利点は、バイオフィルムに包埋された細菌および真菌、特にカテーテルのような医療用デバイスにコロニーを形成する細菌種および真菌種の生育を防止する有効性である。本発明の組成物を作製するのに有用なカチオン性ポリペプチドの例には、硫酸プロタミン、デフェンシン、ラクトペルオキシダーゼおよびリゾチームが挙げられるが、これらに限定はされない。本発明の好ましい実施形態では、カチオン性ポリペプチドは硫酸プロタミンである。
【００３１】
組成物に含まれるカチオン性ポリペプチドの量は、好ましくは約１０〜２００ｍｇ／ｍｌであり、より好ましくは約１２．５〜１００ｍｇ／ｍｌである。この範囲のうち高濃度域は、使用に先立って希釈可能な濃縮製品を作製するために使用することができる。
【００３２】
本発明の組成物を作製するのに有用なビスグアニドの例には、クロルヘキシジン、アレキシジンまたはポリマー性のビスグアニドが挙げられるが、これらに限定はされない。ビスグアニドは、適切な塩の形態であってもよい。ビスグアニド塩は周知である。本発明の好ましい実施形態では、組成物は、クロルヘキシジン塩、より好ましくはジグルコン酸クロルヘキシジン、二酢酸クロルヘキシジンまたは二塩酸クロルヘキシジンを使用して作製される。
【００３３】
組成物に含まれるビスグアニドの量は、好ましくは約１０〜４００ｍｇ／ｍｌであり、より好ましくは約１００〜４００ｍｇ／ｍｌである。この範囲のうち高濃度域は、使用に先立って希釈可能な濃縮製品を作製するために使用することができる。
【００３４】
標的とする細菌および処理しようとするデバイスに応じた一定の適用に対して、より高い濃度の化合物を使用することができる。適切な作用濃度は、既知の方法を使用して容易に決定することができる。
【００３５】
本発明の好ましい実施形態では、組成物は、カチオン性ポリペプチドとしての硫酸プロタミン、およびビスグアニドとしてのクロルヘキシジン塩を含む。さらに好ましい実施形態では、組成物は約１００ｍｇ／ｍｌの硫酸プロタミンおよび約４００ｍｇ／ｍｌのクロルヘキシジン塩を含む。
【００３６】
本発明の組成物を既知の方法を使用して作製することができる。一般に、構成成分を、水、グリセロール、有機酸およびその他の適切な溶媒などの適切な溶媒に溶解する。
本発明の組成物は、任意の数の周知の活性成分および基剤を含んでもよい。組成物は、成分、例えば水のような適切な溶媒；抗細菌剤および抗真菌剤のような抗生物質； 結合剤、接合剤、もしくはカップリング剤、架橋剤；またはｐＨ調整剤など（これらに限定はされない）をさらに含んでもよい。
【００３７】
本発明の組成物は、ビスフェノール、Ｎ置換マレイミド、および第四級アンモニウム化合物のような追加の抗菌性成分をさらに含んでもよい。本発明の組成物を作製するのに有用なビスフェノールの例には、トリクロサンおよびヘキサクロロフェンが含まれるが、これらに限定はされない。本発明の組成物を作製するのに有用なＮ置換マレイミドの例には、Ｎ−エチルマレイミド（ＮＥＭ）、５，５−ジチオビス−（２−ニトロ安息香酸）（ＤＴＮＢ）、Ｎ−フェニルマレイミド（ＰｈｅＭ）、Ｎ−（１−ピレニル）マレイミド（ＰｙｒＭ）、ナフタレン−１，５−ジマレイミド（ＮＤＭ）、Ｎ，Ｎ’−（１，２−フェニレン）ジマレイミド（ｏＰＤＭ）、Ｎ，Ｎ’−１，４−フェニレンジマレイミド（ｐＰＤＭ）、Ｎ，Ｎ’−１，３−フェニレンジマレイミド（ｍＰＤＭ）、および１，１−（メチレンジ−４，１−フェニレン）ビスマレイミド（ＢＭ）が含まれるが、これらに限定はされない。本発明の組成物を作製するのに有用な第四級アンモニウム化合物の例には、塩化ベンザルコニウム、トリドデシル・メチル塩化アンモニウム、およびジデシル・ジメチル塩化アンモニウムが含まれるが、これらに限定はされない。
【００３８】
組成物の構成成分になりうるその他のものとしては、緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水、生理食塩水、ポリビニル、ポリエチレン、ポリウレタン、ポリプロピレン、シリコーン（例えばシリコーン・ラッソー（silicone lassoers）およびシリコーン接着剤）、ポリカルボン酸（例えばポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリマレイン酸、ポリ（マレイン酸モノエステル）、ポリアスパラギン酸、ポリグルタミン酸、アルギン酸またはペクチン酸）、ポリカルボン酸無水物（例えば、ポリマレイン無水物、ポリメタクリル無水物、ポリアクリル酸無水物）、ポリアミン、ポリアミン・イオン（例えばポリエチレン・イミン、ポリビニルアミン、ポリリシン、ポリ（ジアルキルアミノエチル・メタクリル酸）、ポリ（ジアルキルアミノメチル・スチレン）またはポリ（ビニルピリジン）、ポリアンモニウムイオン（例えばポリ（２−メタクリルオキシエチル・トリアルキル・アンモニウムイオン）、ポリ（ビニルベンジル・トリアルキル・アンモニウムイオン）、ポリ（Ｎ，Ｎ−アルキルピリジニウムイオン）またはポリ（ジアルキルオクタメチレン・アンモニウムイオン）およびポリスルホネート（例えば、ポリ（ビニルスルホネート）またはポリ（スチレンスルホネート）、コロジオン、ナイロン、ゴム、プラスチック、ポリエステル、ダクロン（ＴＭ）（ポリエチレンテトラフタラート）、テフロン（ＴＭ）（ポリテトラフルオロエチレン）、ラテックス、およびこれらの誘導体、エラストマーおよびダクロン（ゼラチン、コラーゲンあるいはアルブミンで封孔されたもの、シアノアクリレート、メタクリル酸塩、多孔性のバリアフィルムを備えた紙材、接着剤、例えば、ホットメルト接着剤、溶剤系接着剤、および接着性ヒドロゲル、織物、ならびに架橋ヒドロゲルおよび非架橋ヒドロゲル、ならびに、その他のポリマー性材料であって、活性成分の分散と、バイオフィルム浸透性コーティング剤の少なくとも一つの医療用デバイス表面への付着とを促進する材料が含まれるが、これらに限定はされない。上記の例証されたポリマーの構成分子をモノマーとして含んでいる線状コポリマー、架橋コポリマー、グラフトポリマーおよびブロックポリマーが使用されてもよい。
【００３９】
本発明の組成物を使用して抑制可能な、バイオフィルムに包埋された細菌の例には、グラム陰性菌、限定するものではないが例えば大腸菌、プロテウス・ミラビリス、肺炎桿菌、緑膿菌、クレブシエラ・オキシトカ、プロビデンティア・ステュアルティイまたはセラチア・マルセッセンス、ならびにグラム陽性菌、限定するものではないが例えばエンテロコッカス・フェカーリス、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）、ヴィリダンス型連鎖球菌、表皮ブドウ球菌、および黄色ブドウ球菌またはスタフィロコッカス・サプロフィティクスが挙げられる。これらの細菌は一般にカテーテルなどの医療用デバイスに関連して見出されている。
【００４０】
本発明に係る組成物は、カンジダ・アルビカンス、カンジダ・パラシローシス（Candida parapsilosis）およびカンジダ・ユチリス（Candida utilis）などの、バイオフィルムに包埋された真菌の生育および増殖を抑制するために使用することも可能である。別の態様では、本発明は、本発明に係るカチオン性ポリペプチドおよびビスグアニドの組成物でデバイスの少なくとも一つの表面を処理する行程を含む、デバイスの作製方法を提供する。本発明の好ましい実施形態では、デバイスの作製に使用される組成物は、有効な量の、カチオン性ポリペプチドとしての硫酸プロタミンと、ビスグアニドとしてのクロルヘキシジン塩とを備えている。
【００４１】
用語「有効な」とは、ある具体的な組成物でコーティングされた医療用デバイスの少なくとも一つの表面上で、バイオフィルムに包埋された微生物の生育または増殖をほぼ防止するために十分な量の活性成分を意味し；かつ、十分な量の活性成分としては、医療用デバイスの少なくとも一つの表面上のバイオフィルムに十分に浸透し、またはバイオフィルムを破壊し、その結果として活性成分、抗菌物質および／または抗真菌物質がバイオフィルムに包埋された微生物に接近し易くなり、したがって、具体的な組成物の溶液で処理された医療用デバイスの少なくとも一つの表面からほぼすべての微生物が除去されるものである。量は、各活性成分によって、ならびに薬学的特性；医療用デバイスのタイプ；バイオフィルムに包埋された微生物による汚染の程度；および使用期間のような既知の要因によって変化可能である。
【００４２】
本発明の組成物を用いて処理することが可能なデバイスの例には、チューブ材のような医療用デバイス、ならびにカテーテル、ペースメーカー、人工心臓弁、人工関節、ボイスプロテーゼ、コンタクトレンズおよび子宮内避妊器具のような他の医療用デバイスが含まれる。
【００４３】
医療用デバイスには、使い捨てもしくは恒久的な留置カテーテル（例えば中心静脈カテーテル、透析カテーテル、長期型トンネル式中心静脈カテーテル、短期型中心静脈カテーテル、末梢挿入中心カテーテル、末梢静脈カテーテル、肺動脈スワン−ガンツカテーテル、尿道カテーテルおよび腹腔カテーテル）、長期型泌尿器用デバイス、組織接着性泌尿器用デバイス、人工血管、血管カテーテル・ポート、創傷排液用チューブ、心室カテーテル、水頭症シャント用人工弁、心臓補助装置（例えば左室補助装置）、ペースメーカー・カプセル、失禁デバイス、ペニス・インプラント、小型または一時性の代替関節、尿道拡張器、カニューレ、エラストマー、ヒドロゲル、外科用器具、歯科用器具、静脈チューブ、呼吸管、歯科用水ライン、歯科用排液チューブおよび栄養管などのチューブ材、織物、紙材、インジケータ・ストリップ（例えば、紙製インジケータ・ストリップまたはプラスチック製インジケータ・ストリップ）、接着剤（例えばヒドロゲル接着剤、ホットメルト接着または溶剤系接着剤）、包帯、整形外科用インプラント、ならびに医療分野で使用されるその他の任意のデバイスが挙げられる。
【００４４】
医療用デバイスはさらに、ヒトまたは他の動物に挿入または移植される可能性があるか、または挿入部位もしくは移植部位近くの皮膚などの挿入部位もしくは移植部位に配置される可能性があり、かつ、バイオフィルムに包埋された微生物によるコロニー形成が生じやすい少なくとも一つの表面を備えた、あらゆるデバイスを含んでいる。
【００４５】
本発明に適した医療用デバイスには、手術室、緊急処置室、病室、クリニックおよび浴室内の設備の表面が含まれる。
移植可能な医療用デバイスには、バイオフィルムに包埋された微生物による汚染または感染の有無について内視鏡検査を使用して調査することができる、整形外科用インプラントが含まれる。挿入可能な医療用デバイスには、内視鏡検査のような侵襲性の技法を用いずに検査することができるカテーテルおよびシャントが含まれる。
【００４６】
医療用デバイスは任意の適切な金属材料あるいは非金属材料から形成することができる。金属材料の例には、チタン、ステンレス鋼、およびそれらの誘導体または組み合わせが含まれるが、これらに限定はされない。非金属材料の例には、熱可塑性またはポリマー性材料、たとえばゴム、プラスチック、ポリエステル、ポリエチレン、ポリウレタン、シリコーン、Ｇｏｒｔｅｘ（ＴＭ）（ポリテトラフルオロエチレン）、ダクロン（ＴＭ）（ポリエチレンテトラフタラート）、テフロン（ＴＭ）（ポリテトラフルオロエチレン）、ラテックス、エラストマー、およびゼラチン、コラーゲンもしくはアルブミンで封孔されたダクロン（ＴＭ）、ならびにこれらの誘導体または組み合わせが含まれるが、これらに限定はされない。
【００４７】
好ましい実施形態では、医療用デバイスの少なくとも一つの表面を処理する方法は、医療用デバイスを本発明の組成物と接触させる行程を含む。本願において使用されるように、用語「接触」には、コーティング、スプレー、浸漬、すすぎ、フラッシング、サブマージおよび洗浄が含まれる。医療用デバイスを、処理された医療用デバイス表面からバイオフィルムに包埋された微生物をほぼすべて除去するのに十分な期間、組成物と接触させる。
【００４８】
より好ましい実施形態では、医療用デバイスを少なくとも５分間組成物中に沈める。あるいは、医療用デバイスを組成物でフラッシングしてもよい。歯科用排液チューブなどチューブ材の医療用デバイスの場合には、組成物を歯科用排液チューブ内に注入し、該チューブの両端を留め、組成物がチューブのルーメン内に保持されるようにすればよい。その後、医療用デバイスの少なくとも一つの表面から微生物をほぼすべて除去するのに十分な時間、一般には少なくとも約１分間から約４８時間、チューブ材が組成物で満たされ続けるようにする。別例として、バイオフィルムに包埋された微生物すべての実質的な生育を防止するのに十分な時間、チューブ材のルーメンに組成物を流し込むことにより、チューブ材をフラッシングしてもよい。組成物中の活性成分の濃度は、組成物が医療用デバイスと接触する時間を減少させることが望ましいかまたはその必要があるときは、変更可能である。
【００４９】
デバイスの表面を処理する方法の別の実施形態では、本発明の組成物はさらに、医療用デバイスの表面と組成物との反応性を増強するために、有機溶媒、医療用デバイス材料への浸透剤を含んでもよいし、または組成物へのアルカリ化剤の添加を含んでもよい。有機溶媒、医療用デバイス材料への浸透剤および／またはアルカリ化剤は、医療用デバイスの少なくとも一つの表面への組成物の付着を一層促進するものである。
【００５０】
別の態様は、デバイスの少なくとも一つの表面上を本発明の組成物でコーティングする方法を提供する。好ましくは、デバイスは医療用デバイスである。概して、医療用デバイスをコーティングする方法は、医療用デバイスを提供するステップと；組成物コーティング剤を提供または形成するステップと；医療用デバイスの少なくとも一つの表面上におけるバイオフィルムに包埋された微生物の生育または増殖をほぼ防止するのに十分な量の組成物コーティング剤を医療用デバイスの少なくとも一つの表面に施用するステップとを含む。特定の一実施形態では、医療用デバイスをコーティングする方法は、活性成分の活性化のために有効な濃度の本発明の組成物を形成し、その結果として医療用デバイスの少なくとも一つの表面上の微生物の生育または増殖をほぼ防止するステップを含み、本発明の組成物が活性成分と基剤とを組み合わせることにより形成されることを特徴とする。その後、医療用デバイスの少なくとも一つの表面を、本発明の組成物が医療用デバイスの少なくとも一つの表面を被覆する条件の下で、本発明の組成物と接触させる。用語「接触」はさらに、含浸、複合、混合、統合、コーティング、スプレーおよびディッピングを含むが、これらに限定はされない。
【００５１】
医療用デバイスをコーティングする方法の別の実施形態では、組成物コーティング剤は、活性成分と基剤とを室温で組み合わせ、デバイスの表面に組成物を施用するのに先立って組成物中の活性物質を均一に分散させるのに十分な時間混合することにより、形成させることが好ましい。医療用デバイスを、組成物がデバイスの少なくとも一つの表面に付着するのに十分な時間、組成物と接触させればよい。組成物をデバイスの表面に施用した後、乾燥させる。
【００５２】
デバイスは、約２５℃〜約６０℃の範囲の温度で約３０秒間〜約１８０分間の範囲の時間、医療用デバイスを組成物中にディッピングすることにより、組成物と接触させておくことが好ましい。好ましくは、デバイスは、約３７℃の温度で約６０分間、医療用デバイスを組成物中にディッピングすることにより、組成物と接触させておく。デバイスを組成物から取り出し、次に乾燥させる。医療用デバイスを、組成物が乾くのに十分な時間、オーブンまたは他の加熱環境に置けばよい。
【００５３】
組成物を１つの層またはコーティングとしても所望の組成物コーティングが得られると考えられるが、多層とするのが好ましい。組成物の多層は、上述のステップを繰り返すことにより医療用デバイスの少なくとも一つの表面に施用されることが好ましい。好ましくは、医療用デバイスを組成物と３回接触させるものとし、医療用デバイスの少なくとも一つの表面上で組成物を乾燥させてからそれぞれ次の層のために該医療用デバイスを組成物と接触させる。したがって、医療用デバイスは、該医療用デバイスの少なくとも一つの表面上に組成物の被膜または層を３つ含むことが好ましい。
【００５４】
別の実施形態では、組成物コーティング剤で医療用デバイスをコーティングする方法は、医療用デバイスの少なくとも一つの表面上におけるバイオフィルムに包埋された微生物の生育または増殖をほぼ防止するために有効な濃度の組成物コーティング剤を形成するステップを含み、コーティング剤の形成は、活性成分を有機溶媒に溶解し、この活性成分および有機溶媒と医療用デバイス材料への浸透剤とを組み合わせ、医療用デバイス材料の反応性を改善するためにアルカリ化剤を組み合わせることにより行われる。その後、組成物を約３０℃〜約６０℃の範囲の温度に加熱して、デバイスの少なくとも一つの表面への組成物コーティング剤の付着を増強する。組成物コーティング剤は、好ましくは、組成物コーティングが医療用デバイスの少なくとも一つの表面に付着するのに十分な時間、医療用デバイスの少なくとも一つの表面に組成物コーティング剤を接触させることにより、医療用デバイスの少なくとも一つの表面に施用される。医療用デバイスを組成物コーティング剤から取り出し、好ましくは室温で少なくとも１８時間乾燥させる。その後、医療用デバイスを水などの液体ですすぎ、少なくとも２時間、好ましくは４時間乾燥させてから殺菌することができる。医療用デバイスの表面上での本発明の組成物の乾燥を促進するために、医療用デバイスをオーブンなどの加熱環境に置いてもよい。
【００５５】
別の態様では、本発明は、デバイス中に本発明の組成物を組み込む方法を提供する。好ましくは、デバイスは医療用デバイスであり、組成物は、該医療用デバイスの形成時に医療用デバイスを形成する材料に組み込まれる。例えば、組成物は、医療用デバイスを形成する材料、例えばシリコーン、ポリウレタン、ポリエチレン、Ｇｏｒｔｅｘ（ＴＭ）（ポリテトラフルオロエチレン）、ダクロン（ＴＭ）（ポリエチレンテトラフタラート）、テフロン（ＴＭ）（ポリテトラフルオロエチレン）、および／またはポリプロピレンと組み合わされて、医療用デバイスを形成する材料とともに押出し加工され、その結果として組成物が医療用デバイスを形成する材料中に組み込まれてもよい。この実施形態では、組成物は、医療用デバイスの挿入部位または移植部位に位置するセプタムまたは接着剤に組み込まれてもよい。この実施形態に従って医療用デバイスを形成する材料中に組成物が組み込まれている医療用デバイスの一例は、下記にさらに詳細に述べる、接着剤層を有するカテーテル挿入シールである。材料中に組成物が組み込まれている医療用デバイスの別例は、接着剤である。本発明の組成物は、テープなどの接着剤に溶け込ませることが可能であり、その結果として、該接着剤の少なくとも一つの表面上におけるバイオフィルムに包埋された微生物の生育または増殖を防止することのできる接着剤を提供することができる。
【００５６】
本発明について、例示的な実施形態に関連して述べてきたが、当業者には当然のことながら、本発明はこれらの正確な実施形態に限定されるものではなく、様々な変更および改良を施すことが可能である。変更および修正はすべて、添付の特許請求の範囲に包含されるものとする。
【実施例】
【００５７】
実施例１  バイオフィルムに包埋された、カテーテルに関連した細菌に対する、硫酸プロタミン（ＰＳ）とクロルヘキシジン塩（ＣＨＸ）との組み合わせの増強効果
バイオフィルムに包埋された、大腸菌、緑膿菌および表皮ブドウ球菌のようなカテーテル関連のバイオフィルム形成細菌の生育に対する、硫酸プロタミンとクロルヘキシジン塩との組み合わせの増強効果を測定するために、生体外におけるマイクロプレート分析を実施した。ルリア＝ベルターニ（ＬＢ）またはトリプティックソイブロス（ＴＳＢ）中で生育させた各菌株の一晩培養物を植菌物として使用した。細菌は、１２ウェル・マイクロプレートにてコロニー形成抗原（ＣＦＡ）培地（グラム陰性菌用）またはＴＳＢ（グラム陽性菌用）中で、各試験化合物（ＰＳまたはＣＨＸ）単独の存在下または非存在下ならびに共存下（ＰＳ＋ＣＨＸ）において、試験化合物を１２．５μｇ／ｍｌ、２５μｇ／ｍｌまたは５０μｇ／ｍｌとして生育させた。プレートを３７℃で２４時間インキュベートした。各ウェル中のプランクトン様細胞を含んだ培地を静かに取り出し、滅菌水ですすいだ。既知体積の水を各ウェルに加えて３０秒間超音波処理した。各ウェルの内容物を滅菌チューブに移して１分間攪拌した後、１０倍希釈系列とし、スプレッダを使用して寒天プレート上に塗り拡げた。プレートを３７℃で２４時間インキュベートした後、コロニー形成単位（ＣＦＵ）を計数した。クロルヘキシジン塩は、バイオフィルムに包埋された３種の供試生物すべての生育の抑制において硫酸プロタミンよりも有効であったが、硫酸プロタミンとクロルヘキシジン塩との組み合わせは、緑膿菌および表皮ブドウ球菌に対して増強された抑制作用を有していた（図１〜３）。
【００５８】
実施例２  硫酸プロタミン（ＰＳ）とクロルヘキシジン塩（ＣＨＸ）との組み合わせでコーティングされたシリコーン・カテーテルの、カテーテルに関連する細菌に対する抑制活性
１ｃｍ長のシリコーン・カテーテル片をＰＳ＋ＣＨＸでコーティング処理したもの、および未処理のものの抗菌活性を、シェレツ（Ｓｈｅｒｅｔｚ）らが先に述べたように（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．、第３３巻、ｐ．１１７４−１１７８、１９８９年）カービー＝バウアー法を使用して評価した。カテーテルは、米国特許第６，４７５，４３４号明細書に記載のように、ＰＳ（１００ｍｇ／ｍｌ）＋ＣＨＸ（４００ｍｇ／ｍｌ）溶液中にディッピングした後で乾燥させることによりコーティングした。カテーテルをエチレンオキサイドでガス滅菌した。大腸菌、プロテウス・ミラビリス、緑膿菌、肺炎桿菌、エンテロコッカス・フェカーリス、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）、表皮ブドウ球菌、黄色ブドウ球菌およびカンジダ・アルビカンスのようなカテーテルに関連する微生物を、３７℃で１８時間普通ブロスにおいて生育させた。適切な植菌量の各細菌株または酵母株を用いて塗布プレートを作製した。その後、コーティング処理したカテーテル片および未処理のカテーテル片を、各プレートの中央に注意深く押しつけた。３７℃で２４時間インキュベートした後、各カテーテル片を囲む阻止帯を、長軸に垂直な向きに計測した。阻止帯は生物によって６ｍｍ〜２１ｍｍの範囲で変動した（表１）。コーティングされたカテーテルは、大腸菌、表皮ブドウ球菌、黄色ブドウ球菌およびカンジダ・アルビカンスに対し顕著な抑制活性を有していた。
【００５９】
【表１】
2008546812.tif 000003
実施例３  硫酸プロタミン（ＰＳ）とクロルヘキシジン塩（ＣＨＸ）との組み合わせでコーティングされたシリコーン・カテーテルの、カテーテルに関連する細菌に対する抗付着効果
細菌コロニー形成に抵抗するためにＰＳ＋ＣＨＸ、ＰＳおよびＣＨＸでコーティングしたシリコーン・カテーテルの能力について、コーティング処理片と未処理片とを大腸菌、緑膿菌および表皮ブドウ球菌に曝露することにより三連で試験した。シリコーン・カテーテルを、ＰＳ（１００ｍｇ／ｍｌ）、ＣＨＸ（１００ｍｇ／ｍｌ）およびＰＳ（１００ｍｇ／ｍｌ）＋ＣＨＸ（１００ｍｇ／ｍｌ）でコーティングし、エチレンオキサイドでガス滅菌した。このコーティング処理カテーテル片を、細菌に曝露する前に滅菌人工尿中で３７℃にて２４時間、１００ｒｐｍ（毎分回転数）でインキュベートした。インキュベートした後、カテーテル片を滅菌水ですすぎ、ＢＨＩ培地中の細菌培養物中で３７℃にて３時間、１００ｒｐｍでインキュベートした。３時間インキュベートした後、カテーテル片を穏やかに２度洗浄した。洗浄した各カテーテル片を、１ｍｌの滅菌水が入った滅菌チューブに移し、３０秒間超音波処理した後に１分間攪拌した。さらに、滅菌水を使用して各区分を段階希釈し、ＬＢ寒天プレート上に塗り拡げた。プレートを３７℃で２４時間インキュベートし、コロニー（ＣＦＵ）を計数した。ＣＨＸのみでコーティングしたカテーテルは、ＰＳおよびＰＳ＋ＣＨＸでコーティングしたカテーテルよりも、大腸菌および表皮ブドウ球菌の付着の抑制において優れていた（図４および６）。しかしながら、ＰＳ＋ＣＨＸの組み合わせでコーティングしたカテーテルは、緑膿菌に対して増強された抗付着効果を示した（図５）。
【００６０】
実施例４  硫酸プロタミン（ＰＳ）とクロルヘキシジン塩（ＣＨＸ）との組み合わせでコーティングされたシリコーン・カテーテルの抑制活性の耐久性
ＰＳ＋ＣＨＸでコーティングした１ｃｍ長のシリコーン・カテーテル片の抗菌活性を、シェレツ（Ｓｈｅｒｅｔｚ）らが先に述べたように（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．、第３３巻、ｐ．１１７４−１１７８、１９８９年）カービー＝バウアー法を使用して評価した。カテーテルは、米国特許第６，４７５，４３４号明細書の記載のように、ＰＳ（１００ｍｇ／ｍｌ）＋ＣＨＸ（４００ｍｇ／ｍｌ）溶液中にディッピングした後で乾燥させることによりコーティングした。カテーテルをエチレンオキサイドでガス滅菌した。大腸菌、プロテウス・ミラビリス、緑膿菌、肺炎桿菌、エンテロコッカス・フェカーリス、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）、表皮ブドウ球菌、黄色ブドウ球菌およびカンジダ・アルビカンスのようなカテーテルに関連する微生物を、３７℃で１８時間普通ブロスにおいて生育させた。適切な植菌量の各細菌株を用いて塗布プレートを作製した。その後、コーティング処理したカテーテル片を、各プレートの中央に注意深く押しつけた。３７℃で２４時間インキュベートした後、各カテーテル片を囲む阻止帯を、長軸に垂直な向きに計測した。阻止帯を計測した後、カテーテル片を、それぞれの供試生物が植菌された新しいプレート上に移し、再び３７℃で２４時間インキュベートした。各カテーテル片を囲む阻止帯を再び計測した。コーティング処理したカテーテル片の抑制活性の耐久性を測定するために、各供試生物を用いて３日間、７日間、および１０日間、上記の手順を繰り返した。コーティング処理したカテーテル片の、肺炎桿菌、ＶＲＥおよび緑膿菌に対する抑制活性は、３日しか続かなかった（表２）。しかしながら、コーティングされたカテーテル片は、１０日間経過した後でも大腸菌、表皮ブドウ球菌、黄色ブドウ球菌およびカンジダ・アルビカンスに対する顕著な抑制活性を示した。
【００６１】
【表２】
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実施例５  硫酸プロタミン（ＰＳ）とクロルヘキシジン塩（ＣＨＸ）との組み合わせでコーティングされたシリコーン・カテーテルの抗付着活性の耐久性
ＰＳ＋ＣＨＸでコーティングしたシリコーン・カテーテルが７日間細菌コロニー形成に抵抗する能力について、コーティング処理片と未処理片とを大腸菌および表皮ブドウ球菌に（二連で）曝露することにより試験した。シリコーン・カテーテルを、ＰＳ（１００ｍｇ／ｍｌ）＋ＣＨＸ（４００ｍｇ／ｍｌ）でコーティングし、エチレンオキサイドでガス滅菌した。コーティング処理したカテーテル片および未処理片を、細菌に曝露する前に別々に滅菌人工尿中で３７℃にて７日間、１００ｒｐｍでインキュベートした。フラスコ中の人工尿は２４時間ごとに新しい人工尿に取り替えた。コーティング処理したカテーテル片および未処理のカテーテル片（三連）を、１、３、５および７日目の時点で取り出し、滅菌水で穏やかにすすいだ。さらに、これらをひとつずつ上記の供試生物に曝露した。インキュベートした後、カテーテル片を滅菌水で穏やかに３回すすぎ、供試生物の培養ブロス中で３７℃にて３時間、１００ｒｐｍでインキュベートした。３時間インキュベートした後、カテーテル片を穏やかに２回洗浄した。洗浄した各片を１ｍｌの滅菌水が入った滅菌チューブに移し、３０秒間超音波処理してから１分間攪拌した。さらに、滅菌水を使用して各区分を段階希釈し、ＬＢ寒天プレート上に塗り拡げた。プレートを３７℃で２４時間インキュベートし、コロニー形成単位（ＣＦＵ）を計数した。この手順を各時点について同様に実施した。ＰＳ＋ＣＨＸでコーティングしたカテーテル片は細菌細胞の付着防止において有効であり、第７日ではいずれの細菌株の付着についても約８０％の抑制が観察された（図７〜８）。
【００６２】
実施例６  硫酸プロタミン（ＰＳ）とクロルヘキシジン塩（ＣＨＸ）との組み合わせでコーティングされたシリコーン・カテーテルの生体内（ｉｎ  ｖｉｖｏ）における有効性
生体内における有効性の検討は、以前に報告されたウサギモデル（ダルーシェ（Ｄａｒｏｕｉｃｈｅ）ら、Ｊ．Ｈｅａｒｔ．Ｖａｌｖｅ．Ｄｉｓ．、第１１巻、ｐ．９９−１０４、２００２年）に軽微な改良を加えて実施した。この予備的検討は、ＰＳ（１００ｍｇ／ｍｌ）＋ＣＨＸ（４００ｍｇ／ｍｌ）でコーティングしたシリコーン・カテーテルの生体内における有効性を、皮下に注入されたシリコーン・カテーテル片の大腸菌感染の防止において評価するものとした。シリコーン・カテーテルを、ＰＳ（１００ｍｇ／ｍｌ）＋ＣＨＸ（４００ｍｇ／ｍｌ）でコーティングし、エチレンオキサイドでガス滅菌した。合計１５個のコーティングしていない１ｃｍ長のシリコーン・カテーテル片と、１５個のコーティングしたカテーテル片とを、グラム陽性の皮膚微生物相に対する予防のためにバンコマイシン（体重１ｋｇあたり２０ｍｇ）を１回投与済みの合計４羽のウサギの背部に皮下移植した。各デバイスに、大腸菌の臨床分離株を２×１０４ＣＦＵ／ｍｌとして５０μｌ植菌し、次いで創傷部を閉じた。体重１ｋｇあたり２ｍｇのケトプロフェンを、抗炎症剤／鎮痛剤として各ウサギに毎日筋肉内（ＩＭ）注射した。７日後にこの４羽のウサギを殺処分した。デバイスを体外に取り出し、超音波処理法およびプレート塗布を用いて培養した。周囲の流体を回収してスワブ培養物を得た。コーティングしていないカテーテル片１５個のうちの３個（２０％）には大腸菌のコロニーが形成されたが、コーティングされたカテーテル片１５個ではすべて細菌のコロニー形成が全くなかった（表３）。
【００６３】
【表３】
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実施例７  クロルヘキシジン／プロタミンでコーティングされたシリコーン膀胱カテーテルの生体内における有効性
本実施例の目的は、（１）クロルヘキシジン／プロタミンでコーティングしたカテーテルの生体内における有効性を、コーティングしていないカテーテルと比較して確認すること、（２）クロルヘキシジン／プロタミンでコーティングしたカテーテルと、ヒドロゲル銀でコーティングしたカテーテルとについて、大腸菌によるデバイスでのコロニー形成およびデバイスに関連した感染の割合を比較すること、（３）クロルヘキシジン／プロタミンでコーティングしたカテーテルがバイオフィルムに包埋された微生物の生育または増殖の防止に有用であることを示すこと、ならびに（４）クロルヘキシジン／プロタミンでコーティングしたカテーテルがデバイス関連の感染に対する防御に有用であることを示すこと、とした。
【００６４】
動物実験は、ウサギの背部に皮下挿入された医療用デバイスの大腸菌感染の確立モデルを使用して行った。特定病原体未感染の、雌のニュージーランドホワイト種のウサギ（体重２〜３ｋｇ）を、ケタミン（体重１ｋｇあたり７０ｍｇ）およびアセプロマジン（体重１ｋｇあたり２ｍｇ）の混合物の筋肉内注射（体重１ｋｇあたり０．５ｍｌ）により麻酔した。ヒト患者において手術時に抗生物質による予防処置を施す習慣をシミュレートするために、各動物について、麻酔の導入直後に、グラム陽性生物に対して活性を有するが大腸菌に対しては活性のないバンコマイシン（２０ｍｇ／ｋｇ）の筋肉内注射を行った。ウサギ背部の毛刈りを行い、次いで無菌的に下処理して布で覆った。６個（クロルヘキシジン／プロタミンコーティング２個、ヒドロゲル−銀コーティング２個、および未コーティング２個）の２ｃｍ長のカテーテル片を、脊椎の３〜４ｃｍ外側に、互いに離して皮下挿入した。合計８４個のデバイスを１４羽のウサギに配置した。１０５ＣＦＵの病原性大腸菌株２１３１（カテーテル関連のＵＴＩ患者由来の臨床分離株）を、挿入したデバイスの表面上に植菌して創傷部を縫合した。局所感染、敗血症または重大な苦痛の徴候についてウサギを毎日観察した。ウサギを１週間の時点で殺処分し、以下の実験：
ａ．超音波処理法の使用によるデバイスからの定量培養
ｂ．デバイスに隣接している部位の定性的スワブ培養を実施した。
【００６５】
この実験の第１の結果２つは、デバイスでのコロニー形成（定量的な超音波処理培養から大腸菌の生育として定義される；検出限界は１０ＣＦＵ）ならびにデバイス関連の感染（デバイスでのコロニー形成に加えてデバイス周辺部位の定性的なスワブ培養から大腸菌の生育として定義される）であった。デバイスでのコロニー形成およびデバイス関連の感染の割合を、異なる群の間でフィッシャーの直接法（両側、検出力９０％）を使用して比較した。Ｐ値≦０．０５のとき有意差を示す。
【００６６】
取り出したカテーテルから回収された細菌の平均ＣＦＵである第２の結果は、３群の間で連続変数を用いた２サンプルＴ検定を使用して比較した。Ｐ値≦０．０５のとき有意差を示す。
【００６７】
クロルヘキシジン／プロタミンでコーティングしたカテーテル２８個のうち２個（７％）、銀／ヒドロゲルでコーティングしたカテーテル２８個のうち２５個（８９％）、およびコーティングしていないカテーテル２８個のうち１８個（６４％）について、大腸菌のコロニー形成が生じた。クロルヘキシジン／プロタミンでコーティングしたカテーテルは、銀／ヒドロゲルでコーティングしたカテーテル（Ｐ＜０．００１）またはコーティングしていないカテーテル（Ｐ＝０．００１６）のいずれよりも有意にコロニー形成が生じにくかった。銀／ヒドロゲルでコーティングしたカテーテルとコーティングしていないカテーテルとではコロニー形成の割合に有意差はなかった（Ｐ＝０．５１）。
【００６８】
クロルヘキシジン／プロタミンでコーティングしたカテーテル２８個のうち１個（４％）、銀／ヒドロゲルでコーティングしたカテーテル２８個のうち１２個（４３％）、およびコーティングしていないカテーテル２８個のうち１４個（５０％）について、大腸菌によるデバイスに関連した感染が生じた。クロルヘキシジン／プロタミンでコーティングしたカテーテルは、銀／ヒドロゲルでコーティングしたカテーテル（Ｐ＝０．０４６）またはコーティングしていないカテーテル（Ｐ＝０．０１３）のいずれよりもデバイスに関連した感染を引き起こしにくかった。銀／ヒドロゲルでコーティングしたカテーテルとコーティングしていないカテーテルとではデバイス関連の感染の割合に有意差はなかった（Ｐ＝１．６９）。
【００６９】
ＣＦＵの平均数は、クロルヘキシジン／プロタミンの群では４．６×１０５であり、銀−ヒドロゲルの群では２．５×１０６であり、および非コーティング群では８．３×１０６であった。ＣＦＵの平均数は、コーティングしていないカテーテルよりもクロルヘキシジン／プロタミンでコーティングしたカテーテルの表面で有意に低かった（Ｐ＝０．０３１）。銀／ヒドロゲルでコーティングしたカテーテルを、クロルヘキシジン／プロタミンでコーティングしたカテーテル（Ｐ＝０．２２）またはコーティングしていないカテーテル（Ｐ＝０．１３）と比較しても、ｃｆｕの平均数に有意差はなかった。
【００７０】
これらの結果（表４）は、クロルヘキシジン／プロタミンを用いたカテーテルのコーティングによりデバイスでのコロニー形成およびデバイス関連の感染に対する防御がもたらされるが、銀／ヒドロゲルを用いた場合には防御はもたらされないことを示す。デバイス培養物に関する最小検出力は１デバイス当たり１０ＣＦＵであった。２×１０６ＣＦＵ／ｍｌを５０μｌ、すなわち絶対量として１×１０５ＣＦＵの植菌量を使用した。抗炎症剤／鎮痛剤として２ｍｇ／ｋｇのケトプロフェンを各ウサギに毎日ＩＭ注射した。予防的な抗生物質として２０ｍｇ／ｋｇのバンコマイシンを手術前に与えた。シリコーン尿道カテーテルの外径は４ｍｍであった。コーティングされていないカテーテルの２ｃｍ片を使用した。ウサギの殺処分前に採取した血液からの培養物はいずれも陰性であった。
【００７１】
【表４】
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【図面の簡単な説明】
【００７２】
【図１】バイオフィルムに包埋された大腸菌の数（ＣＦＵ）に対する、陰性対照（ＮＣ）（有効成分を含まない溶液）、５０μｇ／ｍｌの硫酸プロタミン（ＰＳ）、１２．５μｇ／ｍｌのクロルヘキシジン塩（ＣＨＸ）、および５０μｇ／ｍｌの硫酸プロタミンと１２．５μｇ／ｍｌのクロルヘキシジン塩との組み合わせ（ＰＳ＋ＣＨＸ）の効果を示す棒グラフ。
【図２】バイオフィルムに包埋された緑膿菌の数（ＣＦＵ）に対する、陰性対照（ＮＣ）、２５μｇ／ｍｌの硫酸プロタミン（ＰＳ）、２５μｇ／ｍｌのクロルヘキシジン塩（ＣＨＸ）、および２５μｇ／ｍｌの硫酸プロタミンと２５μｇ／ｍｌクロルヘキシジン塩との組み合わせ（ＰＳ＋ＣＨＸ）の効果を示す棒グラフ。
【図３】バイオフィルムに包埋された表皮ブドウ球菌の数（ＣＦＵ）に対する、陰性対照、１２．５μｇ／ｍｌの硫酸プロタミン（ＰＳ）、１２．５μｇ／ｍｌのクロルヘキシジン塩（ＣＨＸ）、および１２．５μｇ／ｍｌの硫酸プロタミンと１２．５μｇ／ｍｌのクロルヘキシジン塩との組み合わせ（ＰＳ＋ＣＨＸ）の、増強された効果を示す棒グラフ。
【図４】１００ｍｇ／ｍｌの硫酸プロタミン（ＰＳ）、１００ｍｇ／ｍｌのクロルヘキシジン塩（ＣＨＸ）、および１００ｍｇ／ｍｌの硫酸プロタミンと１００ｍｇ／ｍｌのクロルヘキシジン塩との組み合わせ（ＰＳ＋ＣＨＸ）でコーティングされたシリコーン・カテーテルの、大腸菌に対する抗付着効果を示す棒グラフ。
【図５】１００ｍｇ／ｍｌの硫酸プロタミン（ＰＳ）、１００ｍｇ／ｍｌのクロルヘキシジン塩（ＣＨＸ）、および１００ｍｇ／ｍｌの硫酸プロタミンと１００ｍｇ／ｍｌのクロルヘキシジン塩との組み合わせ（ＰＳ＋ＣＨＸ）でコーティングされたシリコーン・カテーテルの、緑膿菌に対する増強された抗付着効果を示す棒グラフ。
【図６】１００ｍｇ／ｍｌの硫酸プロタミン（ＰＳ）、１００ｍｇ／ｍｌのクロルヘキシジン塩（ＣＨＸ）、および１００ｍｇ／ｍｌの硫酸プロタミンと１００ｍｇ／ｍｌのクロルヘキシジン塩との組み合わせ（ＰＳ＋ＣＨＸ）でコーティングされたシリコーン・カテーテルの、表皮ブドウ球菌に対する抗付着効果を示す棒グラフ。
【図７】１００ｍｇ／ｍｌの硫酸プロタミン（ＰＳ）および４００ｍｇ／ｍｌのクロルヘキシジン塩（ＣＨＸ）でコーティングされたシリコーン・カテーテルの、大腸菌に対する抗付着活性の耐久性を示す線グラフ。
【図８】１００ｍｇ／ｍｌの硫酸プロタミン（ＰＳ）および４００ｍｇ／ｍｌのクロルヘキシジン塩（ＣＨＸ）でコーティングされたシリコーン・カテーテルの、表皮ブドウ球菌に対する抗付着活性の耐久性を示す線グラフ。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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