(57)【要約】  本発明は、安定化した油、前記油を製造する方法、およびその使用に関する。それゆえ、本発明は、油の安定化のためのフラーレン（Ｃ６０）の使用を含み、フラーレンが油中で非常に有効な抗酸化性であると考えられる。０．０５重量％までのフラーレンが安定化した油に添加され、栄養剤として適する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
フラーレン（Ｃ６０）を含むことを特徴とする安定化した油。
【請求項２】
前記油が０．０５重量％までのフラーレン、好ましくは０．００１重量％までのフラーレンを含むことを特徴とする、請求項１に記載の安定化した油。
【請求項３】
前記油がホスホグリセリドを含むことを特徴とする、請求項１または２に記載の安定化した油。
【請求項４】
前記油が魚油を含むことを特徴とする、請求項１−３のうちの１項またはそれ以上に記載の安定化した油。
【請求項５】
前記油がサケ油を含むことを特徴とする、請求項４に記載の安定化した油。
【請求項６】
前記油が栄養剤として適することを特徴とする、請求項１−５のうちの１項またはそれ以上に記載の安定化した油。
【請求項７】
貯蔵した時の前記油の味および臭いが改善されることを特徴とする、請求項１−６のうちの１項またはそれ以上に記載の安定化した油。
【請求項８】
栄養補助剤としての請求項１−７のうちの１項またはそれ以上に記載の安定化した油の使用。
【請求項９】
前記油に抗酸化剤としてフラーレン（Ｃ６０）を添加することを特徴とする、油を安定化する方法。
【請求項１０】
前記油に０．０５重量％までのフラーレン、好ましくは０．００１重量％までのフラーレンを添加することを特徴とする、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
フラーレン（Ｃ６０）およびホスホグリセリドを含む濃縮物が最初に製造され、次いで前記濃縮物が前記油と混合されて安定化されることを特徴とする、請求項９または１０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、安定化した油、前記油の製造方法、およびその使用に関する。それゆえ、本発明は、油を安定化するためのフラーレン（Ｃ６０）の使用を含み、フラーレンが油中で非常に有効な抗酸化剤であると考えられる。
【０００２】
（序論）
本出願の出願人、ユニファルマホールディングＡＳは、１９９９−２０００年にかけて、ノルウェー、トロンヘイムのＳＩＮＴＥＦ  Ｆｉｓｈｅｒｉｅｓ  ａｎｄ  Ａｑｕａｃｕｌｔｅｒｅと共同して、オメガ−３の製品、ＵＮＩＣ  オメガ−３およびアニメガ（ＡｎｉＭｅｇａ）を開発した。その時点では、有効期間テストにおいて、薬草のローズマリーがサケ／魚油の最も有効な抗酸化剤（安定化剤）であることが示された。
【０００３】
ロシアのサンクト・ペテルブルクの研究所は、２００１年からユニファルマホールディングＡＳのために広範な研究を行ってきた。１０年間のフラーレン研究を通して、前記研究所は数回の有効期間テストを実施し、フラーレン分子Ｃ６０が非常に良い抗酸化剤であることを立証した。
【背景技術】
【０００４】
（背景）
２０年前、米国（ヒューストンのＲａｉｓ大学）および英国（Ｓｕｓｓｅｃｓ大学）の独立した研究者がフラーレンと名付けられた炭素の新規の中間形態（ｍｅｓｏｍｏｒｐｈ）を発見した。
【０００５】
当初、純粋な炭素（炭素のみを含む分子）は２つの同素形の形態：グラファイトおよびダイアモンドからしか見出すことできないと考えられていた。新規形態の構造は非常に特殊である。すなわち、フラーレン分子は６０個の炭素原子を有し、サッカーボールに類似する。それゆえ、英語ではｂｕｃｋｙｂａｌｌという異なる名前が存在する。フラーレンの化学構造の模式図である図１を参照のこと。
【０００６】
フラーレン分子の特性についての長年の研究が強化され、９０年代から数千の文献が印刷され、情報の電子断片が公表された。１９９６年には、オーストラリア人研究者Ｐｅｔｅｒ  Ｃ．Ｄｏｃｈｅｒｔｙおよびスイス人研究者Ｒｏｌｆ  Ｍ．Ｚｉｎｋｅｒｎａｇｅｌがフラーレンの研究に関して化学分野でノーベル賞を受賞した。
【０００７】
９０年代半ばには、フラーレン分子の生物学的な活性に関する論文および特許文献が出始めた。そこには、薬物中におけるこの分子またはその複合体（他の化合物に添加するものとして）およびヒトの体の機能に関する他の目的に使用することが示唆されていた。
【０００８】
２０００年までに、高分子重量キャリアと複合体を形成したフラーレン分子が少なくとも２つの側面：抗ウイルスおよび抗炎症剤として能力を有することが立証された。いくつかの文献は、フラーレンが遊離の酸素に結合しうること、すなわちフラーレンが遊離の酸素ラジカルを受容する能力を有することを示した。
【０００９】
従って、本発明による安定化した油は、フラーレン（Ｃ６０）を含むことを特徴とする。
【００１０】
従って、本発明による方法は、フラーレン（Ｃ６０）が抗酸化剤として油に添加されることを特徴とする。
【００１１】
従って、本発明による使用は、栄養添加剤としての安定化した油の使用を特徴とする。
【００１２】
本発明のさらなるバリエーションが請求項２−７および１０−１１によって与えられる。
【００１３】
（発明の詳細な説明）
本発明は、下記の図を参照にして詳細に説明される。
【００１４】
図１。フラーレンＣ６０の構造式。
【００１５】
図２。フラーレンまたはローズマリーで安定化したサケ油の有効期間テスト。結果を、油中における脂肪酸の酸化レベルの変化として示す。抗酸化剤のローズマリーおよびフラーレンは、各々０．１重量％および０．００１重量％であった。
【００１６】
多数の研究；物理学と化学的な研究室の実験、ならびに科学および特許文献の知見に基づいて、本発明者らは、油の主なパラメーターを変化させることなく、サケ油中のフラーレンを０．０５重量％まで添加することが可能である方法を見出した。
【００１７】
サケ油は、異なる構成要素からなる複雑な混合物質を含み、その主な構成要素は脂質である。サケ油の脂質は、以下の主な群：トリグリセリド、リン脂質、アルコキシジグリセリド、バックス（ｖａｘｅｓ）、スフィンゴ脂質またはセレブロシド、中性プラスモーゲン（ｐｌａｓｍｏｇｅｎｓ）、炭水化物、スチレンおよびスチライド（ｓｔｙｒｉｄｅｓ）、ビタミンならびにカロテノイドに分けられてよい。
【００１８】
油の内容物の組成は変動し、それは製造される魚の部分、出漁期、出漁区域などに依存する。例えば、タイセイヨウサケからの新鮮な魚に由来する油は、８３％のトリグリセリド、５．５％のリン脂質、および３．７−５．３％の他の脂質を含む。
【００１９】
可溶性の形態中でフラーレンをサケ油に添加する前提において、フラーレンの有用な特性を利用することができた。油中にフラーレンを溶解させることは、サケ油中におけるフラーレンおよび脂質間の相互作用によって確保され、それらは疎水性物質−親水性物質（ｈｙｄｒｏｆｏｂ−ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｅ）のバイブリッドである。脂質にフラーレンを溶解させることは、油中にフラーレンを溶解させ、必要なフラーレン濃度を含むサケ油を基にしたフラーレン含有組成物を作成することを可能にする。加えて、このことは、生体内におけるフラーレンの消化率、および腸の血液への取り込みを高める。
【００２０】
科学文献より、フラーレンはモノエタノールアミドおよびその誘導体に容易に溶解し、安定な溶液を形成することが知られている（J.Saut Afrika Chem.1996）。
【００２１】
サケ油中にフラーレンを溶解させる我々の新しい方法は、ホスホグリセリド−レシチンとフラーレンの特異的なΠ−Π相互作用に関連する。これらの化合物の一般式は：
【００２２】
【化１】
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である。
【００２３】
ここで、Ｒ１およびＲ２は脂肪酸の断片である。これらの結合はアミンエチルアルコール−ホリン（モノエタノールアミン）のエーテル結合である。
【００２４】
【化２】
2008546420.tif 000004
【００２５】
この様式では、リン脂質とフラーレン間、またはスフィンゴリン脂質とフラーレン間の相互作用が達成される：
【００２６】
【化３】
2008546420.tif 000005
ここでｎ＝１２−１８である。
【００２７】
このことがサケ油中におけるフラーレンの溶解を保証する。溶解はフラーレンのΠ−電子と窒素および／またはリンからの遊離ｎ−電子対の相互作用によって起こる。形成された（６個の配位を有する）複合体は安定である。
【００２８】
現在の分光法を用いる分析研究は、サケ油中におけるフラーレンの存在を示す。このことは、ＵＦ−テストの結果：３２８ｎｍにおけるフラーレンＣ６０の吸収ピークの存在から確認される。
【００２９】
分光器ＪＭＲ１３Ｃ（機器：ＡＭ−５００「Ｕｓｅｒ」）によるさらなる研究は、実験物質中のフラーレンの存在を裏付け、さらにサケ油中のフラーレン複合体形成の仮説メカニズムをも立証する。
【００３０】
油の脂質との相互作用後、フラーレンの化学的な移動度はよりゆっくりとした緩和へと変化する。このことが前記スペクトルからのフラーレンＣ６０シグナル（１４６ｍ．ｄ）の排除を招く。同時に、新しいシグナルがフラーレンとの相互作用の結果としてリン脂質スペクトルに現れる。それらはフラーレンＣ６０と脂質間の連結点を示す（６０−６４ｍ．ｄ．−モノエタノールアミンとリン酸の断片）。
【００３１】
フラグメントによるリン脂質への結合がなされる場合、フラーレンの安定な状態が確保され、長期間においてフラーレンが「活性な」状態でサケ油中に存在することになる。
【００３２】
この方法で作成した濃縮物が製品に添加されることにより、栄養添加物中の抗酸化剤としての望ましいフラーレンの濃度が達成されうる。
【００３３】
本発明の１つの目的は、栄養製品および医薬品の製造における使用、および長期間にわたりサケ油／魚油の製品を高品質に貯蔵するための新しい添加物に関する。本発明の別の目的は、製品中に微量なフラーレンと名付けられたナノ構造炭素分子を含めることによる、製品の好ましい特性を増感させる新しい方法に関する。
【００３４】
サケ油が下記の実験で用いられているが、他の油がフラーレンを用いるのと同一の方法で安定化できない理論的な理由はない。それゆえ、フラーレンは、一般的には、安定化した油を製造するための抗酸化剤として用いられうる。
【００３５】
フラーレンの添加は、製品の特性を変化させず、有毒ではなく、保存品質を高める。それゆえ、フラーレンで安定化された油は、栄養製品中、例えば、オメガ脂肪酸補給用の魚油を注入したカプセルのごとき栄養補助食品として用いられる魚油中への添加に好適である。
【００３６】
水中に１００ｍＭまでのフラーレン濃度を用いたインビトロ実験では、フラーレンが毒性または発癌性を有さず、細胞呼吸または膜触媒活性を阻害しないことが示された。また、フラーレンの抗酸化活性がイオノール（ｉｏｎｏｌ）、ビタミンＥ、およびベータカロテンより高く、フラーレンが望ましくない状態にある細胞膜を安定化し、それらの安定性を改善し、血流の細動に関係しないことも示された。
【００３７】
さらに、水溶液中に２５ｍｇ／ｋｇ（０．００２５重量％）までのフラーレン濃度を用いたインビボ実験では、フラーレンが毒性、免疫原性またはアレルゲンでないことが示された。
【００３８】
それゆえ、０．０５重量％までの濃度で油を安定化するためにフラーレンを使用することは安全である。好ましくは、０．００１重量％までの濃度が用いられる。
【００３９】
実施例１：サケ油中のフラーレン濃縮物の製造
５ｇのフラーレン粉末を１リットルのサケ油に添加し、次いで室温（摂氏２０℃）で２０時間撹拌した。次に、懸濁液を１０ＫＨｚの超音波周波数により５分間超音波細断にかけた。続いて、懸濁液をさらに５時間撹拌した。次いで全手順を２回繰り返し、懸濁液を、圧力を加えることなく、二重にしたワットマンの５９５番のろ紙を介してろ過した。生じた濃縮物は青紫色であり、サケの脂肪１リットルあたり１ｇのフラーレン（０．１重量％のフラーレン、約０．０００５重量％の全不純物）を含有した。フラーレン濃度の測定を、キシレン中のフラーレン標準溶液と比較することにより、３３５ｎｍ波長における分光分析によって容易に行いうる。
【００４０】
濃縮物は、フラーレンの望ましいレベルに達するまで油と混合することで利用されうる。
【００４１】
実施例２：抗酸化剤としてのフラーレン（Ｃ６０）およびローズマリーの比較分析
実験の目的：並行テストを実施し、サケ油中における抗酸化剤としてのフラーレンＣ６０およびローズマリーの効果を確かめ、より高品質の抗酸化剤の選択に関して推奨を行う。
【００４２】
ローズマリーは、特に長期貯蔵用として最もよく知られる抗酸化剤のうちの１つである。実験では、ローズマリーと比較してフラーレンで安定化された魚油によって貯蔵期間が３００日から６００日までの二倍になった。
【００４３】
ロシア、サンクト・ペテルスブルクの研究所、ロシア科学アカデミー（Ｔｈｅ  Ｒｕｓｓｉａｎ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ａｃａｄｅｍｙ）は、ノルウェー、ビクホールメン（Ｖｉｋｈｏｌｍｅｎ）の製造業者、ビクホールメンバイオプロセス（Ｖｉｋｈｏｌｍｅｎ  Ｂｉｏｐｃｏｃｅｓｓ）ＡＳからサケ油を入手した。フラーレンをロシア、カレリアの研究所から購入した。ローズマリーの抽出物（Ｈｅｒｂａｌｏｘ）をロシア、サンクト・ペテルスブルクの研究所によって得られた。
【００４４】
サケ油の貯蔵に関する研究を、２００３年６月１１日から２００４年１１月１０日まで（１７ヶ月）の間に２５℃および５℃の温度で実施した。サケ油中における酸化剤としてのローズマリーおよびフラーレンＣ６０の品質を実験の全継続期間中に並行して調べた。
【００４５】
実験で用いる２つの選択した抗酸化剤の濃度を、０．１％のローズマリー（製品ＵＮＩＣオメガ−３およびアニメガで用いられるものと同濃度）および０．００１％のフラーレンＣ６０の添加によって得た。
【００４６】
テストの結果を下記の表１に示す。貯蔵テスト中の選択した期間において、脂肪酸中の酸化の程度を調べる一般的な方法を用いた。図２は貯蔵温度５℃によるデータを表す。
【００４７】
表１に示すように、テストは、５℃の温度においてはフラーレンＣ６０がローズマリーより効果的な添加剤であることを示す。２週間に１度、実験材料のスペクトル（ＨЯＭ３）特性をモニターした。不飽和脂肪酸の受容度（５．０−５．５ｍ．ｄ．および４．０−４．５ｍ．ｄ．）における顕著な変化は見られなかった。この方法はサケ油が全てのテストで同一であることを示した。
【００４８】
【表１】
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表１．
【００４９】
実施例３：フラーレンで安定化したサケ油の官能特性
栄養補助剤としてのサケ油に基づいた官能特性（味覚および臭覚による油の質の検定）もまた重要である。官能テストの一般的な方法を利用した：１滴のサケ油を腕（ａｒｍ）に滴下し、ガラス片を用いて薄層にした。１分後、油の質を味覚と臭覚により調べた。独立した結果を得るために、異なる５人が、１週間に１度、テストを行った。これらのテスト結果は、１７ヶ月後に添加剤としてフラーレンＣ６０を含むサケ油が良い使用適用性を示すものであった。臭覚と味覚の両方について、ローズマリーでは３００日間のみ良質であるのに比べてフラーレンでは６００日間良質であった。
【図面の簡単な説明】
【００５０】
【図１】フラーレンＣ６０の構造式。
【図２】フラーレンまたはローズマリーで安定化したサケ油の有効期間テスト。結果を、油中における脂肪酸の酸化レベルの変化として示す。抗酸化剤のローズマリーおよびフラーレンは、各々０．１重量％および０．００１重量％であった。
【図１】
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【図２】
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【手続補正書】
【提出日】平成20年2月28日(2008.2.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
フラーレン（Ｃ６０）およびホスホグリセリドを含むことを特徴とする安定化した油。
【請求項２】
前記油が０．０５重量％までのフラーレン、好ましくは０．００１重量％までのフラーレンを含むことを特徴とする、請求項１に記載の安定化した油。
【請求項３】
前記油が魚油を含むことを特徴とする、請求項１−２のうちの１項またはそれ以上に記載の安定化した油。
【請求項４】
前記油がサケ油を含むことを特徴とする、請求項３に記載の安定化した油。
【請求項５】
前記油が栄養剤として適することを特徴とする、請求項１−４のうちの１項またはそれ以上に記載の安定化した油。
【請求項６】
前記油に抗酸化剤としてフラーレン（Ｃ６０）を添加することを特徴とする、ホスホグリセリドを含む油を安定化する方法。
【請求項７】
前記油に０．０５重量％までのフラーレン、好ましくは０．００１重量％までのフラーレンを添加することを特徴とする、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
フラーレン（Ｃ６０）およびホスホグリセリドを含む濃縮物が最初に製造され、次いで前記濃縮物が前記油と混合されて安定化されることを特徴とする、請求項６または７に記載の方法。
【請求項９】
栄養補助剤としての請求項１−５のうちの１項またはそれ以上に記載の安定化した油の使用。
【請求項１０】
貯蔵した時の前記油の味および臭いを改善するための請求項１−５のうちの１項またはそれ以上に記載の安定化した油の使用あるいは請求項６−８のいずれか１項に記載の方法。
【国際調査報告】
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