(57)【要約】本発明により、新規の活性薬剤（例えば、ペプチド、小さい有機分子、アミノ酸の対など）であるペプチドが、提供される。これらのペプチドは、アテローム性動脈硬化症および／または炎症反応を特徴とする他の病状の１つ以上の兆候を、緩和する。特定の実施形態においては、このペプチドは、アポリポタンパク質ＪのＧ＊両親媒性ヘリックスと似ている。これらの物質は、非常に安定であり、そして、経口経路によって容易に投与される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
アテローム性動脈硬化症の兆候を緩和するペプチドであって、表４、表５、または表６に列挙されるペプチドのアミノ酸配列またはレトロアミノ酸配列が含まれている、ペプチド。
【請求項２】
前記ペプチドにはさらに、アミノ末端またはカルボキシル末端に結合させられた保護基が含まれている、請求項１に記載のペプチド。
【請求項３】
前記ペプチドにはさらに、アミノ酸末端に結合させられた第１の保護基と、カルボキシル末端に結合させられた第２の保護基が含まれている、請求項１に記載のペプチド。
【請求項４】
前記保護基が以下：アセチル、アミド、および３個から２０個の炭素のアルキル基、Ｆｍｏｃ、Ｔｂｏｃ、９−フルオレンアセチル基、１−フルオレンカルボン酸基、９−フルオレンカルボン酸基、９−フルオレノン−１−カルボン酸基、ベンジルオキシカルボニル、キサンチル（Ｘａｎ）、トリチル（Ｔｒｔ）、４−メチルトリチル（Ｍｔｔ）、４−メトキシトリチル（Ｍｍｔ）、４−メトキシ−２，３，６−トリメチル−ベンゼンスルホニル（Ｍｔｒ）、メシチレン−２−スルホニル（Ｍｔｓ）、４，４−ジメトキシベンズヒドリル（Ｍｂｈ）、トシル（Ｔｏｓ）、２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニル（Ｐｍｃ）、４−メチルベンジル、（ＭｅＢｚｌ）、４−メトキシベンジル（ＭｅＯＢｚｌ）、ベンジルオキシ（ＢｚｌＯ）、ベンジル（Ｂｚｌ）、ベンゾイル（Ｂｚ）、３−ニトロ−２−ピリジンスルフェニル（Ｎｐｙｓ）、１−（４，４−ジメチル−２，６−ジアキソシクロヘキシリデン）エチル（Ｄｄｅ）、２，６−ジクロロベンジル（２，６−ＤｉＣｌ−Ｂｚｌ）、２−クロロベンジルオキシカルボニル（２−Ｃｌ−Ｚ）、２−ブロモベンジルオキシカルボニル（２−Ｂｒ−Ｚ）、ベンジルオキシメチル（Ｂｏｍ）、ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、シクロヘキシルオキシ（ｃＨｘＯ）、ｔ−ブトキシメチル（Ｂｕｍ）、ｔ−ブトキシ（ｔＢｕＯ）、ｔ−ブチル（ｔＢｕ）、アセチル（Ａｃ）、およびトリフルオロアセチル（ＴＦＡ）からなる群より選択される保護基である、請求項２に記載のペプチド。
【請求項５】
前記ペプチドが含まれている１つ以上のアミノ酸が「Ｄ」アミノ酸である、請求項１に記載のペプチド。
【請求項６】
前記ペプチドが含まれているアミノ酸の全てが「Ｄ」アミノ酸である、請求項１に記載のペプチド。
【請求項７】
前記ペプチドが薬理学的に許容される賦形剤と混合される、請求項１に記載のペプチド。
【請求項８】
前記ペプチドが、哺乳動物への経口投与に適している薬理学的に許容される賦形剤と混合される、請求項１に記載のペプチド。
【請求項９】
前記ペプチドにアミノ末端に結合させられた保護基が含まれており、前記アミノ末端保護基が、アセチル、プロペオニル、および３個から２０個の炭素のアルキルからなる群より選択される保護基である、請求項２〜８に記載のペプチド。
【請求項１０】
前記ペプチドに、カルボキシル末端に結合させられた保護基が含まれており、前記カルボキシル末端保護基がアミドである、請求項９に記載のペプチド。
【請求項１１】
前記ペプチドに以下：
アミノ末端に結合させられた第１の保護基であって、アセチル、プロペオニル、および３個から２０個の炭素のアルキルからなる群より選択される、保護基；および
カルボキシル末端に結合させられた第２の保護基であって、アミドである、保護基
が含まれている、請求項９に記載のペプチド。
【請求項１２】
哺乳動物の、血管の症状、および／または炎症反応を特徴とする症状、および／または酸化型反応種の形成を特徴とする症状を処置する方法であって：
表４、表５、または表６に列挙されるペプチドのアミノ酸配列またはレトロアミノ酸配列が含まれているペプチドを、前記症状の１つ以上の兆候を緩和するために十分な量で、それが必要な哺乳動物に投与する工程
が含まれている、方法。
【請求項１３】
前記投与が、経口投与、鼻腔投与、直腸投与、腹腔内注射、および静脈内注射、皮下注射、経皮投与、ならびに筋肉内注射からなる群より選択される経路によって行われる、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記活性薬剤が、以下：ＣＥＴＰ阻害剤、ＦＴＹ７２０、Ｃｅｒｔｉｃａｎ、ＤＰＰ４阻害剤、カルシウムチャネルブロッカー、ＡｐｏＡ１誘導体または模倣物またはアゴニスト、ＰＰＡＲアゴニスト、ステロイド、Ｇｌｅｅｖｅｃ、コレステロール吸収ブロッカー（Ｚｅｔｉａ）、Ｖｙｔｏｒｉｎ、任意のレニンアンギオテンシン経路のブロッカー、アンギオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト（Ｄｉｏｖａｎなど）、ＡＣＥ阻害剤、レニン阻害剤、ＭＲアンタゴニスト、およびアルドステロンシンターゼ阻害剤、β−ブロッカー、α−アドレナリン作動性アンタゴニスト、ＬＸＲアゴニスト、ＦＸＲアゴニスト、スカベンジャー受容体Ｂ１アゴニスト、ＡＢＣＡ１アゴニスト、アディポネクチン受容体アゴニストまたはアディポネクチンインデューサー、ステアロイル−ＣｏＡデサチュラーゼＩ（ＳＣＤ１）阻害剤、コレステロール合成の阻害剤（非スタチン）、ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼＩ（ＤＧＡＴ１）阻害剤、アセチルＣｏＡカルボキシラーゼ２阻害剤、ＰＡＩ−１阻害剤、ＬＰ−ＰＬＡ２阻害剤、ＧＬＰ−１、グルコキナーゼ活性化因子、ＣＢ−１アゴニスト、ＡＧＥ阻害剤／ブレーカー、ＰＫＣ阻害剤、抗血栓剤／凝固剤；アスピリン、ＡＤＰ受容体ブロッカー（例えば、クロピドグレル、第Ｘａ因子阻害剤、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ阻害剤、第ＶＩＩａ因子阻害剤、ワーファリン、低分子量ヘパリン、組織因子阻害剤、抗炎症剤；プロブコールおよび誘導体（例えば、ＡＧＩ−１０６７など）、ＣＣＲ２アンタゴニスト、ＣＸ３ＣＲ１アンタゴニスト、ＩＬ−１アンタゴニスト、硝酸塩およびＮＯドナー、ならびにホスホジエステラーゼ阻害剤からなる群より選択される薬物と一緒に投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
アテローム斑の形成、アテローム性の病変の形成、心筋梗塞、脳卒中、うっ血性心不全、細動脈機能、細動脈疾患、加齢が関係している細動脈疾患、アルツハイマー病が関係している細動脈疾患、慢性腎疾患が関係している細動脈疾患、高血圧が関係している細動脈疾患、多発梗塞性認知症が関係している細動脈疾患、クモ膜下出血が関係している細動脈疾患、末梢血管疾患、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺気腫、喘息、特発性肺線維症、肺線維症、成人呼吸窮迫症候群、骨粗鬆症、ページェット病、冠動脈石灰化、関節リウマチ、節性多発性動脈炎、リウマチ性多発性筋痛、紅斑性狼瘡、多発性硬化症、ヴェーゲナー肉芽腫症、中枢神経系脈管炎（ＣＮＳＶ）、シェーグレン症候群、強皮症、多発性筋炎、ＡＩＤＳによる炎症反応、細菌感染、真菌感染、ウイルス感染、寄生虫感染、インフルエンザ、鳥インフルエンザ、ウイルス性肺炎、内毒素ショック症候群、敗血症、敗血症症候群、外傷／創傷、臓器移植、移植によるアテローム性動脈硬化症、移植拒絶、角膜潰瘍、慢性／治癒していない創傷、潰瘍性大腸炎、再潅流損傷（予防および／または処置）、虚血性再潅流損傷（予防および／または処置）、脊髄損傷（軽減効果）、ガン、骨髄腫／多発性骨髄腫、卵巣ガン、乳ガン、結腸ガン、骨肉種、変形性関節症、炎症性腸疾患、アレルギー性鼻炎、悪液質、糖尿病、アルツハイマー病、埋め込まれた補綴物、生体膜の形成、クローン病、皮膚炎、急性および慢性の湿疹、乾癬、接触性皮膚炎、強皮症、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、若年発症型糖尿病、糖尿病の発症の予防、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、糖尿病性網膜症、勃起障害、黄斑変性、多発性硬化症、腎症、神経障害、パーキンソン病、抹消血管疾患、および髄膜炎からなる群より選択される症状の処置における、表４、表５、または表６に列挙されるペプチドのアミノ酸配列またはレトロアミノ酸配列が含まれているペプチドの使用。
【請求項１６】
アテローム斑の形成、アテローム性の病変の形成、心筋梗塞、脳卒中、うっ血性心不全、細動脈機能、細動脈疾患、加齢が関係している細動脈疾患、アルツハイマー病が関係している細動脈疾患、慢性腎疾患が関係している細動脈疾患、高血圧が関係している細動脈疾患、多発梗塞性認知症が関係している細動脈疾患、クモ膜下出血が関係している細動脈疾患、末梢血管疾患、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺気腫、喘息、特発性肺線維症、肺線維症、成人呼吸窮迫症候群、骨粗鬆症、ページェット病、冠動脈石灰化、関節リウマチ、節性多発性動脈炎、リウマチ性多発性筋痛、紅斑性狼瘡、多発性硬化症、ヴェーゲナー肉芽腫症、中枢神経系脈管炎（ＣＮＳＶ）、シェーグレン症候群、強皮症、多発性筋炎、ＡＩＤＳによる炎症反応、細菌感染、真菌感染、ウイルス感染、寄生虫感染、インフルエンザ、鳥インフルエンザ、ウイルス性肺炎、内毒素ショック症候群、敗血症、敗血症症候群、外傷／創傷、臓器移植、移植によるアテローム性動脈硬化症、移植拒絶、角膜潰瘍、慢性／治癒していない創傷、潰瘍性大腸炎、再潅流損傷（予防および／または処置）、虚血性再潅流損傷（予防および／または処置）、脊髄損傷（軽減効果）、ガン、骨髄腫／多発性骨髄腫、卵巣ガン、乳ガン、結腸ガン、骨肉種、変形性関節症、炎症性腸疾患、アレルギー性鼻炎、悪液質、糖尿病、アルツハイマー病、埋め込まれた補綴物、生体膜の形成、クローン病、皮膚炎、急性および慢性の湿疹、乾癬、接触性皮膚炎、強皮症、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、若年発症型糖尿病、糖尿病の発症の予防、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、糖尿病性網膜症、勃起障害、黄斑変性、多発性硬化症、腎症、神経障害、パーキンソン病、抹消血管疾患、および髄膜炎からなる群より選択される症状の処置のための医薬品の製造のための、表４、表５、または表６に列挙されるペプチドのアミノ酸配列またはレトロアミノ酸配列が含まれているペプチドの使用。
【請求項１７】
ステントのフレームワークであってその中に形成された複数のレザーバーが含まれているステントのフレームワーク、および表４、表５、または表６に列挙されるペプチドのアミノ酸配列またはレトロアミノ酸配列が含まれているペプチドが含まれる、体内の血管に薬物を送達するためのステント。
【請求項１８】
前記活性薬剤がポリマーの中に含まれている、請求項１７に記載のステント。
【請求項１９】
前記ステントのフレームワークに、金属をベースとするもの、またはポリマーをベースとするものが含まれる、請求項１７に記載のステント。
【請求項２０】
前記ステントのフレームワークのベースに、ステンレス鋼、ニチノール、タンタル、ＭＰ３５Ｎ合金、白金、チタン、適切な生体適合性の合金、適切な生体適合性ポリマー、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される材質が含まれる、請求項１７に記載のステント。
【請求項２１】
前記レザーバーに微小孔が含まれている、請求項１７に記載のステント。
【請求項２２】
前記微小孔が約２０ミクロンまたはそれ未満の直径を有している、請求項２１に記載のステント。
【請求項２３】
前記微小孔が約２０ミクロンから約５０ミクロンの範囲の直径を有している、請求項２１に記載のステント。
【請求項２４】
前記微小孔が約１０から約５０ミクロンの範囲の深さを有している、請求項２１に記載のステント。
【請求項２５】
前記微小孔が約５０ミクロンの深さを有している、請求項２１に記載のステント。
【請求項２６】
前記微小孔が、前記ステントの内表面にある開口部と、ステントの外表面にある開口部を有しているステントのフレームワークを通り抜けて伸びる、請求項２１に記載のステント。
【請求項２７】
前記ステントのフレームワークの内表面上に配置されたキャップ層がさらに含まれており、前記キャップ層は、前記貫通孔の少なくとも一部をカバーしており、そして、前記ステントのフレームワークの内表面からの薬物ポリマー中の薬物の溶出速度を制御するための特徴を有するバリアを提供する、請求項２１に記載のステント。
【請求項２８】
前記レザーバーに、前記ステントのフレームワークの外表面に沿ったチャネルが含まれている、請求項１７に記載のステント。
【請求項２９】
前記ポリマーに、第１の薬学的特徴を有している第１の薬物ポリマーの第１層が含まれており、そして、前記ポリマー層には、第２の薬学的特徴を有している第２の薬物ポリマーが含まれている、請求項１８に記載のステント。
【請求項３０】
前記活性薬剤が含まれている前記ポリマーの間に配置されたバリア層がさらに含まれている、請求項１８に記載のステント。
【請求項３１】
前記ステントのフレームワークに接続されたカテーテルがさらに含まれている、請求項１７に記載のステント。
【請求項３２】
前記カテーテルに、前記ステントを展開させるために使用されるバルーンが含まれている、請求項３１に記載のステント。
【請求項３３】
前記カテーテルに、引っ込んで前記ステントを展開させる鞘が含まれている、請求項３１に記載のステント。
【請求項３４】
薬物ポリマーステントを製造する方法であって：ステントのフレームワークを提供する工程；前記ステントのフレームワークの中に複数のレザーバーを削って作る工程；表４、表５、または表６に列挙されるペプチドのアミノ酸配列またはレトロアミノ酸配列が含まれている１つ以上のペプチドを含む組成物を、少なくとも１つのレザーバーに適用する工程；および前記組成物を乾燥させる工程が含まれる、方法。
【請求項３５】
さらに、前記乾燥させられた組成物にポリマー層を適用する工程；および前記ポリマー層を乾燥させる工程が含まれる、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
血管の症状を処置する方法であって：
請求項１７に記載のステントを体の血管の中に配置する工程；
前記ステントを展開させる工程；および、
前記ステントの少なくとも１つの表面から少なくとも１つの活性薬剤を溶出させる工程
が含まれる、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、米国特許出願第６０／６９７，４９５号（２００５年７月７日出願）および米国特許出願第６０／６７６，４３１号（２００５年４月２９日出願）に対する優先権を主張し、これらは両方とも、本明細書中で全ての目的のためにその全体が参考として援用される。
【０００２】
（政府支援を受けた研究および開発の下で行われた発明に対する権利の宣言）
本研究は、部分的に、ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｈｅａｒｔ  Ｂｌｏｏｄ  Ｌｕｎｇ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈからの助成金番号ＨＬ３０５６８によって支援された。米国政府は、本発明に対して一定の権利を有し得る。
【０００３】
（発明の分野）
本発明は、アテローム性動脈硬化症と、炎症および／または様々な酸化種の形成を特徴とする他の症状の分野に関する。具体的には、本発明は、経口投与することができ、そして、炎症反応および／または様々な酸化種の形成を特徴とする症状の１つ以上の兆候を緩和させる、複数のクラスの活性薬剤の同定に関する。
【背景技術】
【０００４】
（発明の背景）
スタチン（例えば、Ｍｅｖａｃｏｒ（登録商標）、Ｌｉｐｉｔｏｒ（登録商標）など）が導入されたことにより、熱中症および脳卒中による死亡率がおよそ３分の１に減少した。しかし、熱中症および脳卒中は、特に、米国および西欧諸国において、依然として主要な死亡および身体障害の原因である。熱中症および脳卒中は慢性的な炎症の症状の結果である。これは、アテローム性動脈硬化症と呼ばれる。
【０００５】
いくつかの原因となる要因が、心臓血管疾患の発症に関係しており、これには、疾患についての遺伝的素因、性別、生活様式による要因（例えば、喫煙および食事療法）、年齢、高血圧、ならびに、脂質異常症（高コレステロール血症が含まれる）が含まれる。これらの要因のうちのいくつか（具体的には、脂質異常症と高コレステロール血症（高い血中コレステロール濃度））によっては、アテローム性動脈硬化症に関係する有意なリスクファクターが提供される。
【０００６】
コレステロールは、一般的にはカイロミクロンと呼ばれるリポタンパク質粒子、超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）、および高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）中の遊離のコレステロールおよびエステル化コレステロールとして、血中に存在している。血中の全コレステロール濃度は、（１）消化管からのコレステロールの吸収、（２）炭水化物、タンパク質、脂質、およびエタノールのような食品成分からのコレステロールの合成、ならびに（３）組織（特に、肝臓）による血液からのコレステロールの除去、およびその後の、コレステロールの胆汁酸、ステロイドホルモン、および胆汁性コレステロールへの変換によって影響を受ける。
【０００７】
血中コレステロール濃度の維持は、遺伝的要因と環境的要因の両方の影響を受ける。遺伝的要因としては、コレステロール生合成の律速酵素の濃度、肝臓の中の低密度リポタンパク質の受容体の濃度、コレステロールの胆汁酸への変換の律速酵素の濃度、リポタンパク質の合成および分泌速度、ならびにヒトの性別が挙げられる。ヒトの血中コレステロール濃度のヘモスタシス（ｈｅｍｏｓｔａｓｉｓ）に影響を与える環境的要因としては、食事療法の成分、喫煙の発生率、身体的活動、および様々な薬剤の使用が挙げられる。食事療法の変数としては、脂質の量およびタイプ（飽和脂肪酸および多価不飽和脂肪酸）、コレステロールの量、繊維の量およびタイプ、ならびに、おそらくビタミン（例えば、ビタミンＣおよびＤ）およびミネラル（例えば、カルシウム）の量が挙げられる。
【０００８】
低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）の酸化はアテローム性動脈硬化症の発症に強く関係している。高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）はＬＤＬの酸化に対して防御できることが明らかになっているが、いくつかの場合には、ＬＤＬの酸化を加速させることが明らかになっている。アテローム性動脈硬化症における重要な開始要因は、ＬＤＬによって誘導される酸化型リン脂質の生産である。
【０００９】
正常なＨＤＬは、これらの酸化型リン脂質の形成を妨げる能力を有しており、そして、それらは一旦形成されるとこれらの酸化型リン脂質を不活化させる能力も有している。しかし、いくつかの状況下では、ＨＤＬは、抗炎症性分子から、これらの酸化型リン脂質の形成を実際に促進するプロ炎症性分子へと変換させられ得る。
【００１０】
生まれながらに持っている免疫システムの一部としてのＨＤＬとＬＤＬの機能が示唆されている（非特許文献１）。抗炎症性ＨＤＬの生成は、ＨＤＬの主要なタンパク質であるアポリポタンパク質Ａ−Ｉ（ａｐｏＡ−Ｉ）を模倣するクラスＡ両親媒性ヘリックスペプチドを使用して行うことができる（例えば、特許文献１を参照のこと）。
【特許文献１】国際公開第０２／１５９２３号パンフレット
【非特許文献１】Ｎａｖａｂら、Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｖａｓｃ．Ｂｉｏｌ．、２００１年、２１：４８１−４８８
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１１】
（発明の要旨）
本発明により、血管の症状、および／または炎症反応を特徴とする症状、および／または哺乳動物の中での酸化型反応種の形成を特徴とする症状の１つ以上の兆候を緩和するための新規の組成物と方法が提供される。この方法には、哺乳動物（例えば、それが必要なヒト）への１つ以上の活性薬剤（例えば、クラスＡ両親媒性ヘリックスペプチド、特定のトリペプチド、テトラペプチド、ペンタペプチド、およびアミノ酸の対、特定のＡｐｏ−Ｊ（Ｇ＊）ペプチド、および特定の小さい有機分子）の投与が含まれる。
【００１２】
特定の実施形態においては、本発明により、アテローム性動脈硬化症の兆候を緩和するペプチドが提供される。この場合、上記ペプチドには表２〜１８（例えば、表４、表５、または表６など）のいずれかに列挙されるペプチドに列挙されるペプチドのアミノ酸配列またはレトロアミノ酸配列が含まれる。特定の実施形態においては、ペプチド（単数または複数）にはさらに、アミノ末端またはカルボキシル末端に結合させられた保護基が含まれる。特定の実施形態においては、ペプチドには、アミノ末端に結合させられた第１の保護基と、カルボキシル末端に結合させられた第２の保護基が含まれる。特定の実施形態においては、これらの保護基は、以下からなる群より別々に選択することができる：アセチル、アミド、および３個から２０個の炭素のアルキル基、Ｆｍｏｃ、Ｔｂｏｃ、９−フルオレンアセチル基、１−フルオレンカルボン酸基、９−フルオレンカルボン酸基、９−フルオレノン−１−カルボン酸基、ベンジルオキシカルボニル、キサンチル（Ｘａｎ）、トリチル（Ｔｒｔ）、４−メチルトリチル（Ｍｔｔ）、４−メトキシトリチル（Ｍｍｔ）、４−メトキシ−２，３，６−トリメチル−ベンゼンスルホニル（Ｍｔｒ）、メシチレン−２−スルホニル（Ｍｔｓ）、４，４−ジメトキシベンズヒドリル（Ｍｂｈ）、トシル（Ｔｏｓ）、２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニル（Ｐｍｃ）、４−メチルベンジル、（ＭｅＢｚｌ）、４−メトキシベンジル（ＭｅＯＢｚｌ）、ベンジルオキシ（ＢｚｌＯ）、ベンジル（Ｂｚｌ）、ベンゾイル（Ｂｚ）、３−ニトロ−２−ピリジンスルフェニル（Ｎｐｙｓ）、１−（４，４−ジメチル−２，６−ジアキソシクロヘキシリデン）エチル（Ｄｄｅ）、２，６−ジクロロベンジル（２，６−ＤｉＣｌ−Ｂｚｌ）、２−クロロベンジルオキシカルボニル（２−Ｃｌ−Ｚ）、２−ブロモベンジルオキシカルボニル（２−Ｂｒ−Ｚ）、ベンジルオキシメチル（Ｂｏｍ）、ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、シクロヘキシルオキシ（ｃＨｘＯ）、ｔ−ブトキシメチル（Ｂｕｍ）、ｔ−ブトキシ（ｔＢｕＯ）、ｔ−ブチル（ｔＢｕ）、アセチル（Ａｃ）、およびトリフルオロアセチル（ＴＦＡ）。
【００１３】
特定の実施形態においては、ペプチドには、アミノ末端に結合させられた保護基が含まれ、そして、アミノ酸末端保護基は、アセチル、プロペオニル、および３個から２０個の炭素のアルキルからなる群より選択される保護基である。特定の実施形態においては、ペプチドには、カルボキシル末端に結合させられた保護基が含まれ、そしてカルボキシル末端保護基はアミドである。特定の実施形態においては、ペプチドには：アミノ酸末端に結合させられた第１の保護基（ここでは、保護基は、アセチル、プロペオニル、および３個から２０個の炭素のアルキルからなる群より選択される保護基である）；およびカルボキシル末端に結合させられた第２の保護基（カルボキシル末端保護基はアミドである）が含まれる。
【００１４】
様々な実施形態において、ペプチドに含まれている１つ以上のアミノ酸は「Ｄ」アミノ酸である。様々な実施形態においては、ペプチドに含まれる全てのアミノ酸が「Ｄ」アミノ酸である。ペプチド（単数または複数）は、状況に応じて、薬理学的に許容される賦形剤と混合する／組み合わせることができる。特定の実施形態においては、賦形剤は、哺乳動物への経口投与に適している賦形剤である。
【００１５】
特定の実施形態においては、本発明により、哺乳動物の血管の症状、および／または炎症反応を特徴とする症状、および／または酸化型反応種の形成を特徴とする症状を処置する方法が提供される。この方法には、通常、表２〜１８（例えば、表４、表５、または表６など）に記載される活性薬剤の１つ以上、ならびに／あるいは、本明細書中に記載される小さい有機分子を、症状の１つ以上の兆候を緩和するために十分な量で、それが必要な哺乳動物に投与する工程が含まれる。特定の実施形態においては、活性薬剤は、４Ｆ（配列番号５）のアミノ酸配列が含まれているポリペプチドである。特定の実施形態においては、投与は、経口投与、鼻腔投与、直腸投与、腹腔内注射、および静脈内投与、皮下注射、経皮投与、ならびに筋肉内注射からなる群より選択される経路によって行われる。特定の実施形態においては、活性薬剤は、以下からなる群より選択される薬剤と組み合わせて投与される：ＣＥＴＰ阻害剤、ＦＴＹ７２０、Ｃｅｒｔｉｃａｎ、ＤＰＰ４阻害剤、カルシウムチャネルブロッカー、ＡｐｏＡ１誘導体または模倣物またはアゴニスト、ＰＰＡＲアゴニスト、ステロイド、Ｇｌｅｅｖｅｃ、コレステロール吸収ブロッカー（Ｚｅｔｉａ）、Ｖｙｔｏｒｉｎ、任意のレニンアンギオテンシン経路のブロッカー、アンギオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト（Ｄｉｏｖａｎなど）、ＡＣＥ阻害剤、レニン（Ｒｅｎｉｎ）阻害剤、ＭＲアンタゴニスト、およびアルドステロンシンターゼ阻害剤、β−ブロッカー、α−アドレナリン作動性アンタゴニスト、ＬＸＲアゴニスト、ＦＸＲアゴニスト、スカベンジャー受容体Ｂ１アゴニスト、ＡＢＣＡ１アゴニスト、アディポネクチン受容体アゴニストまたはアディポネクチンインデューサー、ステアロイル−ＣｏＡデサチュラーゼＩ（ＳＣＤ１）阻害剤、コレステロール合成の阻害剤（非スタチン）、ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼＩ（ＤＧＡＴ１）阻害剤、アセチルＣｏＡカルボキシラーゼ２阻害剤、ＰＡＩ−１阻害剤、ＬＰ−ＰＬＡ２阻害剤、ＧＬＰ−１、グルコキナーゼ活性化因子、ＣＢ−１アゴニスト、ＡＧＥ阻害剤／ブレーカー、ＰＫＣ阻害剤、抗血栓剤／凝固剤；アスピリン、ＡＤＰ受容体ブロッカー（例えば、クロピドグレル（Ｃｌｏｐｉｄｉｇｒｅｌ）、第Ｘａ因子阻害剤、ＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ阻害剤、第ＶＩＩａ因子阻害剤、ワーファリン、低分子量ヘパリン、組織因子阻害剤、抗炎症剤；プロブコール（Ｐｒｏｂｕｃｏｌ）および誘導体（例えば、ＡＧＩ−１０６７など）、ＣＣＲ２アンタゴニスト、ＣＸ３ＣＲ１アンタゴニスト、ＩＬ−１アンタゴニスト、硝酸塩およびＮＯドナー、ならびにホスホジエステラーゼ阻害剤。
【００１６】
以下からなる群より選択される症状の処置における、表４、表５、または表６に列挙されるペプチドのアミノ酸配列またはレトロアミノ酸配列が含まれているペプチドの使用もまた提供される：アテローム斑の形成、アテローム性の病変の形成、心筋梗塞、脳卒中、うっ血性心不全、細動脈機能、細動脈疾患、加齢が関係している細動脈疾患、アルツハイマー病が関係している細動脈疾患、慢性腎疾患が関係している細動脈疾患、高血圧が関係している細動脈疾患、多発梗塞性認知症が関係している細動脈疾患、クモ膜下出血が関係している細動脈疾患、末梢血管疾患、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺気腫、喘息、特発性肺線維症、肺線維症、成人呼吸窮迫症候群、骨粗鬆症、ページェット病、冠動脈石灰化、関節リウマチ、節性多発性動脈炎、リウマチ性多発性筋痛、紅斑性狼瘡、多発性硬化症、ヴェーゲナー肉芽腫症、中枢神経系脈管炎（ＣＮＳＶ）、シェーグレン症候群、強皮症、多発性筋炎、ＡＩＤＳによる炎症反応、細菌感染、真菌感染、ウイルス感染、寄生虫感染、インフルエンザ、鳥インフルエンザ、ウイルス性肺炎、内毒素ショック症候群、敗血症、敗血症症候群、外傷／創傷、臓器移植、移植によるアテローム性動脈硬化症（ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、移植拒絶、角膜潰瘍、慢性／治癒していない創傷、潰瘍性大腸炎、再潅流損傷（予防および／または処置）、虚血性再潅流損傷（予防および／または処置）、脊髄損傷（軽減効果）、ガン、骨髄腫／多発性骨髄腫、卵巣ガン、乳ガン、結腸ガン、骨肉種、変形性関節症、炎症性腸疾患、アレルギー性鼻炎、悪液質、糖尿病、アルツハイマー病、埋め込まれた補綴物、生体膜の形成、クローン病、皮膚炎、急性および慢性の湿疹、乾癬、接触性皮膚炎、強皮症、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、若年発症型糖尿病、糖尿病の発症の予防、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、糖尿病性網膜症、勃起障害、黄斑変性、多発性硬化症、腎症、神経障害、パーキンソン病、抹消血管疾患、および髄膜炎。
【００１７】
なお別の実施形態においては、本発明により、以下からなる群より選択される症状の処置のための医薬品の製造のための、表４、表５、または表６に列挙されるペプチドのアミノ酸配列またはレトロアミノ酸配列が含まれているペプチドの使用が提供される：アテローム斑の形成、アテローム性の病変の形成、心筋梗塞、脳卒中、うっ血性心不全、細動脈機能、細動脈疾患、加齢が関係している細動脈疾患、アルツハイマー病が関係している細動脈疾患、慢性腎疾患が関係している細動脈疾患、高血圧が関係している細動脈疾患、多発梗塞性認知症が関係している細動脈疾患、クモ膜下出血が関係している細動脈疾患、末梢血管疾患、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺気腫、喘息、特発性肺線維症、肺線維症、成人呼吸窮迫症候群、骨粗鬆症、ページェット病、冠動脈石灰化、関節リウマチ、節性多発性動脈炎、リウマチ性多発性筋痛、紅斑性狼瘡、多発性硬化症、ヴェーゲナー肉芽腫症、中枢神経系脈管炎（ＣＮＳＶ）、シェーグレン症候群、強皮症、多発性筋炎、ＡＩＤＳによる炎症反応、細菌感染、真菌感染、ウイルス感染、寄生虫感染、インフルエンザ、鳥インフルエンザ、ウイルス性肺炎、内毒素ショック症候群、敗血症、敗血症症候群、外傷／創傷、臓器移植、移植によるアテローム性動脈硬化症、移植拒絶、角膜潰瘍、慢性／治癒していない創傷、潰瘍性大腸炎、再潅流損傷（予防および／または処置）、虚血性再潅流損傷（予防および／または処置）、脊髄損傷（軽減効果）、ガン、骨髄腫／多発性骨髄腫、卵巣ガン、乳ガン、結腸ガン、骨肉種、変形性関節症、炎症性腸疾患、アレルギー性鼻炎、悪液質、糖尿病、アルツハイマー病、埋め込まれた補綴物、生体膜の形成、クローン病、皮膚炎、急性および慢性の湿疹、乾癬、接触性皮膚炎、強皮症、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、若年発症型糖尿病、糖尿病の発症の予防、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、糖尿病性網膜症、勃起障害、黄斑変性、多発性硬化症、腎症、神経障害、パーキンソン病、抹消血管疾患、および髄膜炎。
【００１８】
本発明の特定の実施形態においては、体内の血管への薬剤の送達のためのステントが提供される。ステントには、通常、その中に形成された複数のレザーバーが含まれているステントのフレームワークと、表２〜１８（例えば、表４、表５、または表６など）に列挙されるペプチドのアミノ酸配列またはレトロアミノ酸配列、ならびに／あるいはその逆が含まれているペプチドが含まれる。特定の実施形態においては、ステントには、４Ｆ（配列番号５）のアミノ酸配列が含まれているペプチド、またはその逆が含まれる。特定の実施形態においては、活性薬剤は、ポリマーの中に含まれる。特定の実施形態においては、ステントのフレームワークには、金属塩またはポリマー塩の１つが含まれる。特定の実施形態においては、ステントのフレームワークベースにはステンレス鋼、ニチノール、タンタル、ＭＰ３５Ｎ合金、白金、チタン、適切な生体適合性の合金、適切な生体適合性ポリマー、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される材質が含まれる。レザーバー（単数または複数）が含まれている上記のステントには、いくつかの実施形態においては、微小孔（例えば、約２０ミクロンまたはそれ未満の直径を有している孔）が含まれ得る。特定の実施形態においては、微小孔は、約２０ミクロンから約５０ミクロンまでの範囲の直径を有する。様々な実施形態においては、微小孔は、約１０ミクロンから約５０ミクロンまでの範囲の深さを有する。微小孔は、特定の実施形態においては、ステントの内表面の開口部と、ステントの外表面にある開口部を有しているステントのフレームワークを通り抜けて伸びる。様々な実施形態においては、ステントにはさらに、ステントのフレームワークの内表面上にあるキャップ層がさらに含まれ得、キャップ層は、貫通孔の少なくとも一部をカバーしており、そして、ステントのフレームワークの内表面からの薬物ポリマー中の薬物の溶出速度を制御するための特徴的なバリアを提供している。様々な実施形態においては、レザーバーには、ステントのフレームワークの外表面に沿ったチャネルが含まれる。様々な実施形態においては、ポリマーには、第１の薬学的特徴を有している第１の薬物ポリマーの第１層が含まれ、そして、ポリマー層には、第２の薬学的特徴を有している第２の薬物ポリマーが含まれる。特定の実施形態においては、ステントにはさらに、活性薬剤が含まれているポリマーの間に配置されたバリア層が含まれる。様々な実施形態においては、カテーテルを、ステントのフレームワークに接続することができる。特定の実施形態においては、カテーテルには、ステントを展開させるために使用されるバルーンが含まれ得る。特定の実施形態においては、カテーテルには、引っ込んでステントを展開させる鞘が含まれる。
【００１９】
薬物ポリマーステントを製造する方法もまた提供される。この方法には、通常、ステントのフレームワークを提供する工程；ステントのフレームワークの中に複数のレザーバーを削って作る工程（ｃｕｔｔｉｎｇ）；表２〜１８のいずれかに列挙されるペプチドのアミノ酸配列またはレトロアミノ酸配列が含まれている１つ以上のペプチドを含む組成物を、少なくとも１つのレザーバーに適用する工程；および組成物を乾燥させる工程が含まれる。この方法にはさらに、乾燥させられた組成物にポリマー層を適用する工程；およびポリマー層を乾燥させる工程が含まれ得る。
【００２０】
本発明によってはまた、血管の症状を処置する方法が提供される。この方法には、上記のようなステントを体の血管の中に配置する工程：ステントを展開させる工程；および、ステントの少なくとも１つの表面から少なくとも１つの活性薬剤（例えば、表２〜１８のいずれかの活性薬剤）を溶出させる工程が含まれる。
【００２１】
特定の実施形態においては、本発明では、以下に記載されているペプチドの１つ以上は明らかに排除される：米国特許第６，０３７，３２３号；同第４，６４３，９８８号；同第６，９３３，２７９号；同第６，９３０，０８５号；同第６，６６４，２３０号；同第３，７６７，０４０号；同第６，０３７，３２３号；米国特許公開番号２００５／０１６４９５０；同２００４／０２６６６７１；同２００４／０２５４１２０；同２００４／００５７８７１；同２００３／０２２９０１５；同２００３／０１９１０５７；同２００３／０１７１２７７；同２００３／００４５４６０；同２００３／００４０５０５；ＰＣＴ公開番号ＷＯ２００２／１５９２３；同ＷＯ１９９９／１６４０８；同ＷＯ１９９７／３６９２７；および／またはＧａｒｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９２）Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ，１２：８８６−８９４（引用により本明細書中に組み入れられる）。
【００２２】
（定義）
用語「処置」は、例えば、病状または疾患を処置することに関して使用される場合には、その病状または疾患の１つ以上の兆候の緩和および／または解消、ならびに／あるいは、その病状または疾患の１つ以上の兆候の発症の速度または重篤度の低下、ならびに／あるいは、その病状または疾患の予防を意味する。
【００２３】
用語「単離された」、「精製された」、または「生物学的に純粋」は、単離されたポリペプチドについて言及される場合には、その自然界での状態で見られるような通常はそれに付随している成分を実質的にまたは原則として含まない物質を意味する。核酸および／またはポリペプチドに関しては、この用語は、自然界においてそれらと通常は隣接している配列がもはや隣接していない核酸またはポリペプチドを意味することができる。化学合成されたポリペプチドは、それらが自然界での状況においては（例えば、血液、血清などの中）見られないので、「単離されている」。特定の実施形態においては、用語「単離された」は、ポリペプチドが自然界では見られないことを示す。
【００２４】
用語「ポリペプチド」、「ペプチド」、および「タンパク質」は、アミノ酸残基のポリマーを意味するように、本明細書中では同義的に使用される。これらの用語は、その中の１つ以上のアミノ酸残基が、対応する自然界に存在しているアミノ酸の人工的な化学的アナログであるアミノ酸ポリマー、ならびに、自然界に存在しているアミノ酸ポリマーに適用される。
【００２５】
用語「両親媒性ヘリックスペプチド」は、少なくとも１つの両親媒性ヘリックス（両親媒性ヘリックスドメイン）が含まれているペプチドを意味する。本発明の特定の両親媒性ヘリックスペプチドには、２つ以上（例えば、３個、４個、５個など）の両親媒性ヘリックスが含まれ得る。
【００２６】
用語「クラスＡ両親媒性ヘリックス」は、極性−非極性界面に存在している正電荷を有している残基と、極性表面の中央に存在している負電荷を有している残基を含む、極性表面と非極性表面の分離を生じるα−ヘリックスを形成するタンパク質構造を意味する（例えば、Ｓｅｇｒｅｓｔ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９０）Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ８：１０３−１１７を参照のこと）。
【００２７】
「アポリポタンパク質Ｊ」（ａｐｏＪ）は、クラステリン（ｃｌｕｓｔｅｒｉｎ）、ＴＲＰＭ２、ＧＰ８０、およびＳＰ４０を含む様々な名称で知られている（例えば、Ｆｒｉｔｚ（１９９５）Ｐｐ１１２：Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎ：Ｒｏｌｅ  ｉｎ  Ｖｅｒｔｅｂｒａｔｅ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ａｄａｐｔａｔｉｏｎ（Ｈａｒｍｏｎｙ  ＪＡＫ  Ｅｄ．）、Ｒ．Ｇ．Ｌａｎｄｅｓ，Ｇｅｏｒｇｅｔｏｗｎ，ＴＸを参照のこと）。これは、ヘテロ二量体である糖タンパク質として、そして培養されたラットのＳｅｒｔｏｌｉ細胞の分泌型タンパク質の成分として最初に記載された（例えば、Ｋｉｓｓｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８２）Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．，２７：２３３２４０を参照のこと）。翻訳された産物は一本鎖の前駆体タンパク質であり、これは、ジスルフィド結合した３４ｋＤａのαサブユニットと、４７ｋＤａのβサブユニットへと、細胞内での切断を受ける（例えば、Ｃｏｌｌａｒｄ  ａｎｄ  Ｇｒｉｓｗｏｌｄ（１９８７）Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２６：３２９７−３３０３を参照のこと）これは、細胞の損傷、脂質の輸送、アポトーシスに関係しており、そして、細胞の損傷または細胞死によって引き起こされる細胞の破片のクリアランスに関係している可能性がある。クラステリンは、様々な分子（脂質、ペプチド、およびタンパク質、ならびに疎水性プローブ１−アニリノ−８−ナフタレンスルホネートが含まれる）に対して、高い親和性で結合することが示されている（Ｂａｉｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，（２００１）Ｂｉｏｃｈｅｍ．，４０：１１８２８−１１８４０）。
【００２８】
クラスＧ両親媒性ヘリックスは球状タンパク質であることが明らかになっており、したがって、クラスＧと命名されている。このクラスの両親媒性ヘリックスの特徴は、これが狭い非極性表面を有している極性表面上に正電荷を有している残基と負電荷を有している残基のランダムな分布を有していることである。狭い非極性の表面が原因で、このクラスは、リン脂質と容易には会合しない（例えば、Ｓｅｇｒｅｓｔ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９０）Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ．８：１０３−１１７；Ｅｒｒａｔｕｍ（１９９１）Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，９：７９を参照のこと）。いくつかの交換可能なアポリポタンパク質は、Ｇ両親媒性ヘリックスに対して類似する特徴を有しているが、同一ではない。クラスＧ両親媒性ヘリックスと同様に、この他のクラスも、極性の表面上に正電荷を有している残基と負電荷を有している残基のランダムな分布を有している。しかし、狭い非極性表面を有しているクラスＧ両親媒性ヘリックスとは対照的に、このクラスには広い非極性表面があり、これによって、このクラスはリン脂質に容易に結合することができ、そしてこのクラスは、これを両親媒性ヘリックスのＧクラスと区別するために、Ｇ＊と呼ばれる（例えば、Ｓｅｇｒｅｓｔ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９２）Ｊ．Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．，３３：１４１−１６６；Ａｎａｎｔｈａｒａｍａｉａｈ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９３）Ｐｐ．１０９−１４２：Ｔｈｅ  Ａｍｐｈｉｐａｔｈｉｃ  Ｈｅｌｉｘ，Ｅｘｐａｎｄ，Ｒ．Ｍ．Ｅｄ  ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，Ｆｌｏｒｉｄａを参照のこと）。両親媒性ヘリックスドメインを同定およびクラス分類するためのコンピュータープログラムは、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９２）Ｊ．Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．３３：２８７−２９６に記載されており、これには、以下が含まれるが、これらに限定はされない：ヘリックスホイールプログラム（ＷＨＥＥＬまたはＷＨＥＥＬ／ＳＮＯＲＫＥＬ）、ヘリックスネットプログラム（ＨＥＬＮＥＴ、ＨＥＬＮＥＴ／ＳＮＯＲＫＥＬ、ＨＥＬＮＥＴ／Ａｎｇｌｅ）、ヘリックスホイールを加えるためのプログラム（ＣＯＭＢＯまたはＣＯＭＢＯ／ＳＮＯＲＫＥＬ）、ヘリックスネットを加えるためのプログラム（ＣＯＭＮＥＴ、ＣＯＭＮＥＴ／ＳＮＯＲＫＥＬ、ＣＯＭＢＯ／ＳＥＬＥＣＴ、ＣＯＭＢＯ／ＮＥＴ）、コンセンサスホイールプログラム（ＣＯＮＳＥＮＳＵＳ、ＣＯＮＳＥＮＳＵＳ／ＳＮＯＲＫＥＬ）など。
【００２９】
用語「緩和する」は、「アテローム性動脈硬化症の１つ以上の兆候を緩和する」ことに関して使用される場合には、アテローム性動脈硬化症および／または関連する病状の特徴的な１つ以上の兆候の軽減、予防、または解消を意味する。このような軽減には酸化型リン脂質の減少または排除、アテローム斑の形成および破裂の減少、熱中症、狭心症、または脳卒中のような臨床的事象の軽減、高血圧の低下、炎症性タンパク質の生合成の減少、血漿コレステロールの減少などが含まれるが、これらに限定はされない。
【００３０】
用語「エナンチオマーアミノ酸」は、互いに重ね合わせることができない鏡像である、少なくとも２つの形態で存在することができるアミノ酸を意味する。ほとんどのアミノ酸（グリシンを除く）はエナンチオマーであり、いわゆるＬ型（Ｌアミノ酸）またはＤ型（Ｄアミノ酸）で存在する。ほとんどの自然界に存在しているアミノ酸は「Ｌ」アミノ酸である。用語「Ｄアミノ酸」および「Ｌアミノ酸」は、平面偏光の特定の回転方向ではなく、アミノ酸の絶対的な立体配置を意味するように使用される。本明細書中での使用方法は、当業者による標準的な使用方法と一致している。アミノ酸は、標準的な１文字または３文字コード（例えば、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  Ｏｎ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｐｒｏｐｅｒｔｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ＤｏｃｕｍｅｎｔａｔｉｏｎのＳｔａｎｄａｒｄ  ＳＴ．２５で指定されている）を使用して、本明細書中で指定される。
【００３１】
用語「保護基」は、アミノ酸中の官能基（例えば、側鎖、αアミノ基、αカルボキシル基など）に結合させると、その官能基の特性をブロックするかまたはマスクする、化学基を意味する。好ましいアミノ末端保護基としては、アセチル基またはアミノ基が挙げられるが、これらに限定はされない。他のアミノ末端保護基としては、脂肪酸、プロペオニル、ホルミルなどの中のアルキル鎖が挙げられるが、これらに限定はされない。好ましいカルボキシル末端保護基としては、アミドまたはエステルを形成する基が挙げられるが、これらに限定はされない。
【００３２】
表現「酸化剤による酸化からリン脂質を保護する」は、リン脂質を酸化剤（例えば、過酸化水素、１３−（Ｓ）−ＨＰＯＤＥ、１５−（Ｓ）−ＨＰＥＴＥ、ＨＰＯＤＥ、ＨＰＥＴＥ、ＨＯＤＥ、ＨＥＴＥなど）と接触させると、リン脂質の酸化の速度（または生産される酸化型リン脂質の量）を低下させる化合物の能力を意味する。
【００３３】
用語「低密度リポタンパク質」、すなわち「ＬＤＬ」は、当業者の一般的な使用方法にしたがって定義される。一般的には、ＬＤＬは、限外濾過によって単離された場合に、ｄ＝１．０１９からｄ＝１．０６３までの密度範囲で見られる脂質−タンパク質複合体を意味する。
【００３４】
用語「高密度リポタンパク質」、すなわち「ＨＤＬ」は、当業者の一般的な使用方法にしたがって定義される。一般的には、「ＨＤＬ」は、限外濾過によって単離された場合に、ｄ＝１．０６３からｄ＝１．２１までの密度範囲で見られる脂質−タンパク質複合体を意味する。
【００３５】
用語「グループＩ  ＨＤＬ」は、酸化型脂質（例えば、低密度リポタンパク質の中の）を還元する、または酸化剤による酸化から酸化型脂質を保護する、高密度リポタンパク質またはその成分（例えば、ａｐｏＡ−Ｉ、パラオキソナーゼ、血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼなど）を意味する。
【００３６】
用語「グループＩＩ  ＨＤＬ」は、脂質を酸化から保護することにおいて、または酸化型脂質を修復する（例えば、還元する）ことにおいては、低い活性を付与するか、または活性を有していないＨＤＬを意味する。
【００３７】
用語「ＨＤＬ成分」は、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）を含む成分（例えば、分子）を意味する。脂質を酸化から保護するか、またはそれを修復する（例えば、酸化型脂質を還元する）ＨＤＬについてのアッセイにはまた、このような活性を示すＨＤＬの成分（例えば、ａｐｏＡ−Ｉ、パラオキソナーゼ、血小板活性化因子アセチルヒドロラーゼなど）についてのアッセイが含まれる。
【００３８】
用語「ヒトａｐｏＡ−Ｉペプチド」は、全長のヒトａｐｏＡ−Ｉペプチド、または、クラスＡ両親媒性ヘリックスが含まれているその断片もしくはドメインを意味する。
【００３９】
本明細書中で使用される場合は、「単球性の反応」は、アテローム斑の形成に関係している「炎症反応」に特徴的な単球の活性を意味する。単球の反応は、血管壁の細胞（例えば、血管内皮の細胞）への単球の接着、および／または内皮細胞下の空間への化学走化性、および／または単球のマクロファージへの分化を特徴とする。
【００４０】
用語「変化がないこと」は、酸化型リン脂質の量について言及される場合には、検出できる変化がないこと、より好ましくは、統計学液に有意な変化（例えば、少なくとも８５％、好ましくは、少なくとも９０％、より好ましくは、少なくとも９５％、そして最も好ましくは、少なくとも９８％、または９９％の信頼水準）がないことを意味する。検出できる変化がないことはまた、酸化型リン脂質レベルが変化するが、本明細書中に記載されるタンパク質（単数または複数）が存在しない場合、または他のポジティブもしくはネガティブ対照と比較するとそれほど変化しないアッセイをもまた意味する。
【００４１】
以下の省略形が本明細書中で使用され得る：ＰＡＰＣ：Ｌ−α−１−パルミトイル−２−アラキドノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；ＰＯＶＰＣ：１−パルミトイル−２−（５−オキシバレリル）−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；ＰＧＰＣ：１−パルミトイル−２−グルタリル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；ＰＥＩＰＣ：１−パルミトイル−２−（５，６−エポキシイソプロスタンＥ２）−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；ＣｈＣ１８：２：コレステリルリノール酸；ＣｈＣ１８：２−ＯＯＨ：コレステリルリノール酸ヒドロペルオキシド；ＤＭＰＣ：１，２−ジテトラデカノイル−ｒａｃ−グリセロール−３−ホスホコリン；ＰＯＮ：パラオキソナーゼ；ＨＰＦ：標準的な高倍率視野；ＰＡＰＣ：Ｌ−α−１−パルミトイル−２−アラキドノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；ＢＬ／６：Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ；Ｃ３Ｈ：Ｃ３Ｈ／ＨｅＪ。
【００４２】
用語「保存的置換」は、分子の活性（特異性（例えば、リポタンパク質に対する特異性））または結合親和性（例えば、脂質もしくはリポタンパク質に対する結合親和性）を実質的には変化させることのないアミノ酸置換を反映するタンパク質またはペプチドに関して使用される。典型的な保存的アミノ酸置換には、１つのアミノ酸の、類似する化学的特性（例えば、電荷または疎水性）を有している別のアミノ酸での置換が含まれる。以下の６つのグループのそれぞれには、通常は、互いに典型的な保存的置換であるアミノ酸が含まれる：１）アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、スレオニン（Ｔ）；２）アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸（Ｅ）；３）アスパラギン（Ｎ）、グルタミン（Ｑ）；４）アルギニン（Ｒ）、リジン（Ｋ）；５）イソロイシン（Ｉ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、バリン（Ｖ）；および６）フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）、トリプトファン（Ｗ）。
【００４３】
用語「同一性」または「パーセント同一性」は、２つ以上の核酸またはポリペプチド配列の状況では、以下の配列比較アルゴリズムの１つを使用して、または目視検査によって測定した場合に、最大の対応となるように比較し、アラインメントされた場合に、同じであるか、あるいは、同じである特定の割合のアミノ酸残基またはヌクレオチドを有している、２つ以上の配列またはサブ配列を意味する。本発明のペプチドに関しては、配列同一性は、ペプチドの全長にわたって決定される。
【００４４】
配列比較のためには、通常、１つの配列が参照配列とされ、それに対して試験配列が比較される。配列比較アルゴリズムが使用される場合には、試験配列と参照配列がコンピューターに入力され、続いて、必要に応じて座標が設定され、そして配列アルゴリズムプログラムのパラメーターが設定される。その後、配列比較アルゴリズムによって、参照配列に対する試験配列（単数または複数）のパーセント配列同一性が、設定されたプログラムのパラメーターに基づいて計算される。
【００４５】
比較のための配列の最適なアラインメントは、例えば、Ｓｍｉｔｈ  ＆  Ｗａｔｅｒｍａｎ，Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．２：４８２（１９８１）の局所相同性アルゴリズムによって、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ  ＆  Ｗｕｎｓｃｈ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３（１９７０）の相同性アラインメントアルゴリズムによって、Ｐｅａｒｓｏｎ  ＆  Ｌｉｐｍａｎ（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８５：２４４４の類似性の検索方法によって、これらのアルゴリズムのコンピューターによる実行によって（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｐａｃｋａｇｅ，Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，５７５  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｄｒ．，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩにおけるＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＦＡＳＴＡ、およびＴＦＡＳＴＡ）、あるいは、目視検査（一般的には、Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．（前出）を参照のこと）によって、行うことができる。
【００４６】
有用なアルゴリズムの一例は、ＰＩＬＥＵＰである。ＰＩＬＥＵＰによっては、進行性の対合アルゴリズムを使用して関連する配列のグループから複数の配列アラインメントが作成され、関連性とパーセント配列同一性が示される。これによってまた、アラインメントを作成するために使用されるクラスタ化の関連を示すツリーまたは系統樹もプロットされる。ＰＩＬＥＵＰでは、Ｆｅｎｇ  ＆  Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ（１９８７）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｅｖｏｌ．３５：３５１−３６０の進行性のアラインメント方法の単純化が使用される。使用されるこの方法は、Ｈｉｇｇｉｎｓ  ＆  Ｓｈａｒｐ（１９８９）ＣＡＢＩＯＳ  ５：１５１−１５３に記載されている方法と類似している。このプログラムによって、それぞれ５，０００ヌクレオチドまたはアミノ酸の最大長の３００個までの配列をアラインメントすることができる。複数のアラインメント手順が、２つの最も類似している配列の対合アラインメントを用いて開始され、これによって２つのアラインメントされた配列のクラスタが生じる。このクラスタは、その後、次の最も関係している配列またはアラインメントされた配列のクラスタに対してアラインメントされる。配列の２つのクラスタが、２つの個々の配列の対合アラインメントの単純な伸張によってアラインメントされる。最終的なアラインメントは、一連の進行性の対合アラインメントによって行われる。このプログラムは、配列比較の領域についての特異的な配列およびそれらのアミノ酸またはヌクレオチドの座標を設計し、そしてプログラムパラメーターを設計することによって、実行される。例えば、参照配列は、以下のパラメーターを使用してパーセント配列同一性の関係を決定するために、他の試験配列と比較することができる：デフォルトギャップ重量（３．００）、デフォルトギャップ長重（ｄｅｆａｕｌｔ  ｇａｐ  ｌｅｎｇｔｈ  ｗｅｉｇｈｔ）（０．１０）、および重量末端ギャップ（ｗｅｉｇｈｔｅｄ  ｅｎｄ  ｇａｐ）。
【００４７】
パーセント配列同一性および配列類似性を決定するために適しているアルゴリズムの別の例は、ＢＬＡＳＴアルゴリズムである。これは、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−４１０に記載されている。ＢＬＡＳＴ分析を行うためのソフトウェアは、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／）を通じて公に入手することができる。このアルゴリズムには、データベース配列の中の同じ長さのワードとアラインメントされた場合に、いくらかのポジティブな評価された閾値と適合するかまたはそれを満たすかのいずれかである、照会配列（ｑｕｅｒｙ  ｓｅｑｕｅｎｃｅの）中の長さＷの短いワードを特定することにより、高スコアの配列対（ＨＳＰ）を最初に特定する工程が含まれる。Ｔは、周辺のワードスコア閾値と呼ばれる（Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．（前出））。これらの最初の周辺ワードのヒットは、それらが含まれるより長いＨＳＰを見つけるための最初の検索のための種となる。このワードは、その後、累積アラインメントスコアを増大させることができる限りは、それぞれの配列に沿って両方の方向に伸ばされる。累積スコアは、ヌクレオチド配列については、パラメーターＭ（適合する残基の対についての見返りスコア（ｒｅｗａｒｄ  ｓｃｏｒｅ）；常に、＞０）、およびＮ（適合していない残基についてのペナルティースコア；常に、＜０）を使用して計算される。アミノ酸配列については、スコアリングマトリックスが、累積スコアを計算するために使用される。それぞれの方向のワードのヒットの伸張は、累積アラインメントスコアが、その最大に達した値から照会Ｘによって低下した場合；累積スコアが、１つ以上のネガティブにスコアされる残基のアラインメントの累積が原因で０またはそれ未満になった場合；あるいは、いずれかの配列の末端に達した場合には、停止させられる。ＢＬＡＳＴアルゴリズムのパラメーターＷ、Ｔ、およびＸによって、アルゴリズムの感度と速度が決定される。ＢＬＡＳＴＮプログラム（ヌクレオチド配列について）では、１１のワード長（Ｗ）、１０の期待値（Ｅ）、Ｍ＝５、Ｎ＝−４、および両方の鎖の比較がデフォルトとして使用される。アミノ酸配列については、ＢＬＡＳＴＰプログラムでは、３のワード長（Ｗ）、１０の期待値（Ｅ）、およびＢＬＯＳＵＭ６２スコアリングマトリックスがデフォルトとして使用される（Ｈｅｎｉｋｏｆｆ  ＆  Ｈｅｎｉｋｏｆｆ（１９８９）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：１０９１５を参照のこと）。
【００４８】
パーセント配列同一性を計算することに加えて、ＢＬＡＳＴアルゴリズムによってはまた、２つの配列間での類似性の統計分析を行うこともできる（例えば、Ｋａｒｌｉｎ  ＆  Ａｌｔｓｃｈｕｌ（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：５８７３−５７８７を参照のこと）。ＢＬＡＳＴアルゴリズムによって提供される類似性の１つの尺度は、最少和可能性（ｓｍａｌｌｅｓｔ  ｓｕｍ  ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｙ）（Ｐ（Ｎ））である。これによっては、２つのヌクレオチドまたはアミノ酸配列の間で適合が偶然に発生する可能性の目安が提供される。例えば、核酸は、参照核酸に対する試験核酸の比較における最少和可能性が、約０．１未満、より好ましくは、約０．０１未満、そして最も好ましくは、約０．００１未満である場合に、参照配列に対して類似であると考えられる。
【００４９】
表現「〜と組み合わせて」は、本明細書中に記載される１つ以上の活性薬剤と組み合わせた１つ以上の薬物の使用に関して使用される場合には、薬物（単数または複数）と活性薬剤（単数または複数）が、生物体に対するそれらの生理学的活性において少なくともいくらかの時間的重複があるように投与される。したがって、薬物（単数または複数）と活性薬剤（単数または複数）は、同時に投与することができ、そして／また、連続的に投与することもできる。連続投与においては、最初に投与された薬物／物質が、２回目に投与された物質が投与されるかまたは生物体の中で活性となる時に、生物体に対していくらかの生理学的変化を発揮する限りは、いくらかの実質的な遅延（例えば、数分、またはさらには数時間、または数日）が、第２の部分の投与の前に存在する場合がある。
【００５０】
表現「ペプチドのヘリックスホイール図において互いに隣接している」または「ペプチドのヘリックスホイール図において連続している」は、ヘリックスペプチドの中の残基について言及される場合には、ヘリックスホイールの表現においては、残基は、それらが直鎖状ペプチドにおいては隣接していないかまたは連続していない場合にもなお、隣接しているまたは連続しているように見えることを示している。したがって、例えば、残基「Ａ、Ｅ、Ｋ、Ｗ、Ｋ、およびＦ」は、これらの残基が直鎖状ペプチドにおいては連続していない場合にもなお、図１５に示されるヘリックスホイール図においては連続している。
【発明を実施するための最良の形態】
【００５１】
（詳細な説明）
Ｉ．処置方法
本明細書中に記載される活性薬剤（例えば、ペプチド、小さい有機分子、アミノ酸の対など）は、本明細書中に記載される１つ以上の適応症の症状を軽減するため、ならびに／または、その発症の速度および／もしくは重篤度を低下させるために有効である。具体的には、本明細書中に記載される活性薬剤（例えば、ペプチド、小さい有機分子、アミノ酸の対など）は、アテローム性動脈硬化症の１つ以上の兆候を緩和させるために有効である。特定の理論に束縛されることなく、ペプチドは、Ｏｘ−ＰＡＰＣ、ＰＯＶＰＣ、ＰＧＰＣ、およびＰＥＩＰＣのようなプロ炎症性の酸化型リン脂質の形成に必要な「種子分子」に結合すると考えられている。
【００５２】
加えて、多くの炎症の症状および／または他の病状は、酸化型脂質によって少なくともその一部が媒介されるので、本発明者らは本発明のペプチドが、生物学的に活性な酸化型脂質の形成を特徴とする症状を緩和することにおいて有効であると考えている。加えて、本明細書中に記載される活性薬剤がそれについて有効であるようである他の症状は多数存在している。
【００５３】
本明細書中に記載される活性薬剤がそれを緩和および／または阻止するであろう多数の病状が以下に記載される。
【００５４】
Ａ）アテローム性動脈硬化症および関連する病状
本発明者らは、正常なＨＤＬが穏やかに酸化されたＬＤＬの形成の３つの工程を阻害することを発見した。具体的には、本発明者らは、ａｐｏＡ−ＩまたはａｐｏＡ−Ｉ模倣ペプチド（３７ｐＡ）で、インビトロにおいて、ヒトＬＤＬを処理することによって、ＨＰＯＤＥおよびＨＰＥＴＥを含むＬＤＬから種子分子が除去されることを発見した。これらの種子分子は、ＬＤＬを酸化させることができるヒトの動脈壁細胞の共培養に、およびＬＤＬについては、単球の化学走化活性を生じるように動脈壁細胞を誘導するために必要である。本発明者らはまた、ａｐｏＡ−Ｉのマウスへの注射、またはヒトへの注入後には、ａｐｏＡ−Ｉの注射／注入後にマウスまたはヒトボランティアから単離されたＬＤＬが、ヒトの動脈壁細胞による酸化に抵抗性であり、そして動脈壁細胞培養物中で単球の化学走化活性を誘導することはないことを明らかにした。
【００５５】
本発明の様々な活性薬剤の保護機能は、親特許（２０００年８月２４日に提出された０９／６４５，４５４、２００１年６月２９日に提出された０９／８９６，８４１、および２００１年６月２９日に提出された、ＷＯ０２／１５９２３（ＰＣＴ／ＵＳ０１／２６４９７）、例えば、ＷＯ０２／１５９２３の図１〜５を参照のこと）。ＷＯ０２／１５９２３の図１のパネルＡ、Ｂ、Ｃ、およびＤは、ＡｐｏＥヌルマウスの血液成分との１４Ｃ−Ｄ−５Ｆの会合を示している。アテローム発生性（ａｔｈｅｒｏｇｅｎｉｃ）の餌を与えられ、そしてＰＢＳを注射されたマウスに由来するＨＤＬは、ヒトＬＤＬの酸化を阻害することができず、そして、ヒトの動脈壁の共培養物の中のＬＤＬによって誘導される単球の化学走化活性を阻害することができなかったことも、明らかになった。対照的に、アテローム発生性の餌を与えられ、本明細書中に記載されるペプチドを毎日注射されたマウスに由来するＨＤＬは、ヒトＬＤＬの酸化を阻害すること、および共培養物中のＬＤＬによって誘導される単球の化学走化活性を妨げることにおいて、正常なヒトＨＤＬと同様に有効であった（ＷＯ０２／１５９２３の図２Ａおよび２Ｂ）。加えて、アテローム発生性の餌を与えられ、そしてＰＢＳを毎日注射されたマウスから得られたＬＤＬは、同じ餌を与えられたが、２０μｇのペプチド５Ｆを毎日注射されたマウスから得られたＬＤＬよりも、迅速に酸化され、そしてより容易に単球の化学走化活性を誘導した。Ｄペプチドは、免疫原性ではないようであった（ＷＯ０２／１５９２３の図４）。
【００５６】
アテローム発生性の餌を与えられ、そして本発明のペプチドを注射されたマウスに由来するＨＤＬおよびＬＤＬに対するヒトの動脈壁細胞のインビトロでの応答は、そのようなペプチドによってインビボで示された防御作用と一致している。それにもかかわらず、類似する総コレステロール濃度、ＬＤＬ−コレステロール濃度、ＩＤＬ＋ＶＬＤＬ−コレステロール濃度、および総コレステロールの割合としての低いＨＤＬ−コレステロール濃度は、アテローム発生性の餌を与えられ、そしてペプチドを注射された動物は、有意に低い病変のスコアを有していた（ＷＯ０２／１５９２３の図５）。したがって、本発明のペプチドは、アテローム発生性の餌を与えられたマウスにおいてアテローム性の病変の進行を妨げた。
【００５７】
したがって、１つの実施形態においては、本発明により、本明細書中に記載される活性薬剤の１つ以上を投与することによる、アテローム性動脈硬化症の１つ以上の症状を緩和するおよび／または予防するための方法が提供される。
【００５８】
ｃ−反応性タンパク質（炎症のマーカー）が、うっ血性心不全においても高いこともまた注目される。また、うっ血性心不全においては、反応性酸素種の蓄積と血管運動の異常も存在している。様々な酸化種の形成を妨げる／減少させることにおけるそれらの効果の理由から、ならびに／あるいは、血管反応性および／または細動脈機能を改善することにおけるそれらの効果（下記を参照のこと）の理由から、本明細書中に記載される活性薬剤は、うっ血性心不全を処置することにおいても有効であろう。
【００５９】
Ｂ）細動脈／血管の適応症
最も小さい動脈（すなわち、細動脈）が肥厚したよりもなお小さい血管は機能不全となり、そして、脳および腎臓のような様々な組織に対して終末器官の損傷を引き起こす。本明細書中に記載される活性薬剤は、アテローム発生性の構造と機能を改善するように、ならびに／あるいは、アテローム発生性の機能不全の速度を低下させるおよび／または重篤度を下げるように作用することができる。特定の理論には束縛されず、細動脈の機能不全は、様々な脳および腎臓の疾患の原因因子であると考えられている。したがって、本明細書中に記載される物質の使用によっては、細動脈の構造と機能を改善させ、そして脳および腎臓のような終末器官の機能を保つための方法が提供される。
【００６０】
したがって、例えば、本明細書中に記載される活性薬剤の１つ以上の投与は、加齢、および／またはアルツハイマー病、および／またはパーキンソン病、および／または多発脳梗塞性認知症、および／またはクモ膜下出血などに関係している細動脈疾患の１つ以上の兆候を軽減するか、あるいは、それらの発症を遅らせるまたはその重篤度を低下させると予想される。同様に、本明細書中に記載される１つ以上の物質の投与は、慢性腎疾患、および／または高血圧の１つ以上の兆候を軽くする、ならびに／あるいは、その発症を遅らせる、および／またはその重篤度を下げると予想される。
【００６１】
同様に、本明細書中に記載される物質は、血管反応性を改善するようである。血管反応性および／または細動脈機能の改善の理由から、本明細書中に記載される物質は、末梢血管疾患、勃起不全などの処置に適している。
【００６２】
Ｃ）肺の適応症
本明細書中に記載される物質はまた、様々な肺の適応症の処置にも適している。これらには、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺気腫、肺疾患、喘息、特発性肺線維症、肺線維症などが含まれるが、これらに限定はされない。
【００６３】
Ｄ）冠動脈石灰化および骨粗鬆症に関係している兆候または症状の軽減
血管の石灰化および骨粗鬆症は、多くの場合は同じ被験体に同時に存在している（Ｏｕｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９３）Ａｎｎ  ＮＹ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ．，６７６：２９７−３０７；Ｂｏｕｋｈｒｉｓ  ａｎｄ  Ｂｅｃｋｅｒ（’１９７２）ＪＡＭＡ、２１９：１３０７−１３１１；Ｂａｎｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９４）Ｅｕｒ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ．，２４：８１３−８１７；Ｌａｒｏｃｈｅ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９４）Ｃｌｉｎ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．，１３：６１１−６１４；Ｂｒｏｕｌｉｋ  ａｎｄ  Ｋａｐｉｔｏｌａ（１９９３）Ｅｎｄｏｃｒ  Ｒｅｇｕｌ．，２７：５７−６０；Ｆｒｙｅ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９２）Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅ．，１９：１８５−１９４；Ｂａｒｅｎｇｏｌｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９８）Ｃａｌｃｉｆ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｉｎｔ．，６２：２０９−２１３；Ｂｕｒｎｅｔｔ  ａｎｄ  Ｖａｓｉｋａｒａｎ（２００２）Ａｎｎ  Ｃｌｉｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．，３９：２０３−２１０。Ｐａｒｈａｍｉ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌ  Ｔｈｒｏｍｂ  Ｖａｓｃ  Ｂｉｏｌ．，１７：６８０−６８７では、穏やかに酸化されたＬＤＬ（ＮＭ−ＬＤＬ）と、ＭＭ−ＬＤＬ中の生物学的活性のある脂質［すなわち、酸化型の１−パルミトイル−２−アラキドニル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホリルコリン（Ｏｘ−ＰＡＰＣ）］、ならびにイソプロスタン、８−イソプロスタグランジンＥ２（しかし、酸化されていないリン脂質（ＰＡＰＣ）またはイソプロスタン８−イソプロスタグランジンＦ２αはそうではない）はアルカリホスファターゼ活性と、石灰化血管細胞（ＣＶＣ）の造骨性分化を誘導したが、ＭＣ３Ｔ３−Ｅ１骨細胞の分化を阻害したことが示されている。
【００６４】
骨単位は、マトリックスと繊維芽細胞様の細胞が含まれている内皮細胞下の空間に取り囲まれている内皮細胞によって内層された内腔上に中心がある動脈壁に似ており、これは次いで、動脈壁の中の平滑筋細胞と同様の位置を占有している前骨芽細胞および骨芽細胞に取り囲まれている（Ｉｄ．）。骨梁の骨芽細胞は、また、骨髄の内皮細胞下空間とも面を接している（Ｉｄ．）。Ｐａｒｈａｍｉ  ｅｔ  ａｌ．は、リポタンパク質が骨動脈（ｂｏｎｅ  ａｒｔｅｒｙ）の内皮細胞を横切ることができ、それらが冠動脈の中と同様に酸化を受けることができる内皮細胞下空間に蓄積すると主張している。彼らのインビトロでのデータに基づいて、彼らは、骨動脈の内皮細胞下空間および骨髄の中でのＬＤＬの酸化が、骨粗鬆症に関係している骨芽細胞の分化と石化の減少を導くと予想した（Ｉｄ．）。彼らの仮説によってはさらに、ＬＤＬレベルは、これらが冠動脈の石灰化を伴うので（Ｐｏｈｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，（２００１）Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，１０４：１９２７−１９３２）、骨粗鬆症とポジティブな相関関係にあり、しかし、ＨＤＬレベルは、骨粗鬆症とはネガティブな関係にあると予測されている。（Ｐａｒｈａｍｉ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌ  Ｔｈｒｏｍｂ  Ｖａｓｃ  Ｂｉｏｌ．，１７：６８０−６８７）。
【００６５】
インビトロでは、骨髄間質細胞株Ｍ２−１０Ｂ４の骨芽細胞の分化は、ＭＭ−ＬＤＬによって阻害されるが、自然界に存在しているＬＤＬによっては阻害されない（Ｐａｒｈａｍｉ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９９）Ｊ  Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ  Ｒｅｓ．，１４：２０６７−２０７８）。低脂肪の餌による食事療法が与えられたアテローム性動脈硬化症に罹患しやすいＣ５７ＢＬ／６（ＢＬ６）マウスに由来する骨髄間質細胞が培養されると、活発な骨形成性の分化が生じた（Ｉｄ．）。対照的に、高脂肪の、アテローム発生性の食事療法後にマウスから採取された骨髄間質細胞が培養された場合には、これらは骨形成性の分化は受けなかった（Ｉｄ．）。この観察は、これによって骨粗鬆症の発症における骨髄間質細胞の骨形成能力の低下についての考えられる解釈が提供されるので、特に重要である（Ｎｕｔｔａｌｌ  ａｎｄ  Ｇｉｍｂｌｅ（２０００）Ｂｏｎｅ，２７：１７７−１８４）。インビボでは、骨形成能力の低下には、骨粗鬆症の骨の中での脂質生成の増加が伴う（Ｉｄ．）。
【００６６】
ａｐｏＥヌルマウスの飲み水に６週間の間Ｄ−４Ｆを加えることにより、骨梁の骨ミネラル濃度が劇的に上昇したことが明らかになった。そして、本発明の他の活性薬剤も同様に作用するであろうと考えられる。
【００６７】
本発明者らのデータは、骨粗鬆症が「骨のアテローム性動脈硬化症」と考えられ得ることを示している。これは、酸化型脂質の作用の結果であると考えられる。ＨＤＬはこれらの酸化型脂質を分解させ、そして骨芽細胞の分化を促進する。本発明者らのデータは、本発明の活性薬剤（単数または複数）の哺乳動物への投与（例えば、ａｐｏＥヌルマウスの飲み水の中での投与）によっては、わずか数週間で骨梁が劇的に増加することを示している。
【００６８】
これは、本明細書中に記載される活性薬剤が、骨粗鬆症の１つ以上の症状を軽減するために（例えば、脱石灰化を阻害するために）、または骨粗鬆症の骨の再石灰化を誘導するために有用であることを示している。活性薬剤はまた、哺乳動物（例えば、骨粗鬆症のリスクがある患者）において骨粗鬆症の兆候（単数または複数）の発症を防ぐための予防としても有用である。
【００６９】
本発明者らは、同様の機構が、冠動脈石灰化（例えば、石灰沈着性大動脈狭窄）の原因であると考えている。したがって、特定の実施形態においては、本発明により、疾患（例えば、冠動脈石灰化、石灰沈着性大動脈狭窄、骨粗鬆症など）の兆候を阻止または予防するための、本明細書中に記載される活性薬剤の使用が意図される。
【００７０】
Ｅ）炎症性および自己免疫性の適応症
慢性的な炎症および／または自己免疫の症状もまた、多数の反応性酸素種の形成を特長としており、そして本明細書中に記載される活性薬剤の１つ以上を使用する処置に適している。したがって、特定の理論に束縛されることなく、本発明者らはまた、本明細書中に記載される活性薬剤が、様々な他の症状（関節リウマチ、紅斑性狼瘡、結節性多発性動脈炎、リウマチ性多発性筋痛、強皮症、多発性硬化症などが含まれるが、これらに限定はされない）の発症、および／またはその１つ以上の兆候を軽減するために、予防的または治療的にも有用であると考えている。
【００７１】
特定の実施形態においては、活性薬剤は、これらの症状における炎症反応によって引き起こされる、そのような炎症反応が関係している１つ以上の兆候を軽減することにおいて有用である。
【００７２】
また、特定の実施形態においては、活性薬剤は、ＡＩＤＳが関係している炎症反応によって引き起こされるか、またはそのような炎症反応が関係している１つ以上の兆候を軽減することにおいて有用である。
【００７３】
Ｆ）感染／外傷／移植
本発明者らは、インフルエンザ感染および他の感染の結果が、ＨＤＬ中でのパラオキソナーゼおよび血小板活性化アセチルヒドロラーゼ活性の減少であることを観察した。特定の理論には束縛されず、本発明者らは、これらのＨＤＬ酵素活性の消失の結果として、また、急性期反応の間のＨＤＬとの酸化促進剤タンパク質の結合の結果として、ＨＤＬがもはやＬＤＬの酸化を妨げることはできず、そして内皮細胞による単球の化学走化活性のＬＤＬによって誘導される生産ももはや妨げることはできないと考えている。
【００７４】
本発明者らは、Ａ型インフルエンザへの感染後に毎日、非常に低い用量の本発明の特定の物質を注射した被験体（例えば、マウスについては２０マイクログラム）においては、パラオキソナーゼレベルは低下せず、生物学的に活性な酸化型リン脂質は、バックグランドを超えるほどには産生されなかったことを観察した。これは、４Ｆ、Ｄ４Ｆ（および／または本発明の他の物質）を患者（例えば、インフルエンザ感染の間、または、急性期炎症反応を生じることができる他の事象（例えば、ウイルス感染、細菌感染、外傷、移植、様々な自己免疫の症状などを原因とするもの）の間に冠動脈疾患傾向のある患者が含まれる）に投与することができ（例えば、経口または注射による）、したがって、本発明者らは、このような炎症状態を生じる病状に関係している心臓発作および脳卒中の発症率を、この短期間の処置によって予防することができる。
【００７５】
加えて、パラオキソナーゼ（ｐａｒｏｘｏｎａｓｅ）レベルおよび／または単球活性を回復させるおよび／または維持することにより、本発明の物質（単数または複数）は、感染（例えば、ウイルス感染、細菌感染、真菌感染）、ならびに／あるいは、感染（例えば、髄膜炎）および／または外傷が関係している炎症の病状の処置に有用である。
【００７６】
特定の実施形態においては、抗炎症活性と抗感染活性の組み合わせの理由から、本明細書中に記載される物質はまた、創傷または他の外傷の処置、臓器または組織の移植、および／または臓器または組織の移植拒絶、および／または埋め込まれた補綴物、および／または移植によるアテローム性動脈硬化症、および／または生体膜の形成が関係している有害な作用を軽減させること、においても有用である。加えて、本発明者らは、Ｌ−４Ｆ、Ｄ−４Ｆ、および／または本明細書中に記載される他の物質もまた、脊髄損傷の影響を軽くすることにおいて有用であると考えている。
【００７７】
Ｇ）糖尿病および関連する症状
本明細書中に記載されている様々な活性薬剤は、糖尿病が関係している１つ以上の兆候を軽減および／または予防することにおいて有効性を示すことが観察されている。したがって、様々な実施形態においては、本発明により、糖尿病および／または関連する病状（例えば、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、若年発症型糖尿病、糖尿病性腎症、ネフロパシー、糖尿病性神経障害、糖尿病性網膜症など）を処置する方法（治療的および／または予防的）が提供される。
【００７８】
Ｈ）ガン
ＮＦκＢは、通常は、プロ炎症性サイトカインに応答して活性化され、そして２００種類を超える遺伝子の発現を調節している転写因子である。多くの腫瘍細胞株は、ＮＦκＢのシグナル伝達の構成的な活性化を示す。腸の腫瘍および乳房の腫瘍のマウスモデルの様々な実験によって、ＮＦκＢ経路の活性化によって腫瘍の発達が促進され、そしてこれは腫瘍発生の後期の段階で主に役割を担っている可能性があると結論付けられた（例えば、（２００４）Ｃｅｌｌ  １１８：２８５；（２００４）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１１４：５６９を参照のこと）。ＮＦκＢのシグナル伝達の阻害によっては、腫瘍の発達が抑制された。特定の理論には束縛されず、この抑制の機構には、腫瘍細胞のアポトーシスの増加、周辺の間質細胞によって供給される腫瘍細胞増殖因子の発現の低下、および／または腫瘍の侵襲／転移に重要である腫瘍細胞の脱分化プログラムの破棄が含まれていると考えられる。
【００７９】
特定の理論には束縛されず、本明細書中に記載される１つ以上の活性薬剤の投与によっては、ＮＦκＢの発現および／または分泌および／または活性が阻害されるであろうと考えられる。したがって、特定の実施形態においては、本発明により、本明細書中に記載される１つ以上の活性薬剤を投与することによる、高いＮＦκＢを特徴とする病状の処置方法が提供される。したがって、様々な実施形態において、本発明では、本明細書中に記載される１つ以上の活性薬剤を（状況に応じて適切なガン治療薬と組み合わせて）投与することによる、ガンが関係しているＮＦκＢの活性化を阻害することが意図される。
【００８０】
Ｉ）生化学的活性
本明細書中に記載される活性薬剤（単数または複数）は、多数の特異的な生物学的活性を示すことが示されている。したがって、例えば、これらはヘムオキシゲナーゼ１を増大させ、これらは細胞外スーパーオキシドジスムターゼを増大させ、これらはａｐｏＡ−Ｉとのミエロペルオキシダーゼの結合を減少させるかまたは妨げ、これらはａｐｏＡ−Ｉ中のチロシンのニトロシル化を減少させるかまたは妨げ、これらはＨＤＬを抗炎症性またはさらに抗炎症性にし、そしてこれらはプレ−β  ＨＤＬの形成サイクルを増加させ、これらは逆方向のコレステロールの輸送（具体的には、マクロファージからの逆方向のコレステロールの輸送）を促進し、そしてこれらはスタチンの活性に相乗作用を与える。したがって、本明細書中に記載される活性薬剤は、例えば、症状／病状を処置するために、これらの活性のいずれかを促進するために哺乳動物に投与することができる。症状／病状の重篤度および／または発症の可能性は、これらの活性の１つ以上によって低下させられる。
【００８１】
Ｊ）急性炎症反応が関係しているアテローム性動脈硬化症の兆候の軽減
本発明の活性薬剤はまた、多数の状況においても有用である。例えば、本発明者らは、心臓血管の合併症（例えば、アテローム性動脈硬化症、脳卒中など）には頻繁に、急性期炎症反応（例えば、再発性炎症疾患、ウイルス感染（例えば、インフルエンザ）、細菌感染、真菌感染、臓器移植、創傷、または外傷などを伴うもの）が頻繁に付随するか、またはそれらが後に続くことを観察した。
【００８２】
したがって、特定の実施形態においては、本発明では、本明細書中に記載される活性薬剤の１つ以上を、急性の炎症反応のリスクがあるかまたはそれらに罹患している、ならびに／あるいは、アテローム性動脈硬化症および／または関連する病状の兆候のリスクがあるかまたはそれらに罹患している被験体に対して投与することが意図される。
【００８３】
したがって、例えば、冠動脈疾患を有しているかまたはそのリスクがあるヒトに、ｆｌｕの季節の間に本発明の１つ以上の活性薬剤が予防的に投与される場合がある。炎症症状（例えば、関節リウマチ、様々な自己免疫疾患など）に罹患しているヒト（または、動物）被験体は、アテローム性動脈硬化症または脳卒中を軽減させる、あるいはその発症を予防するために、本明細書中に記載される１つ以上の物質で処置することができる。外傷（例えば、急性損傷、組織移植など）については、ヒト（または、動物）被験体は、アテローム性動脈硬化症または脳卒中の発症を少なくするために、本発明のポリペプチドで処置することができる。
【００８４】
特定の例においては、このような方法により、急性の炎症反応の発症またはリスクの診断が可能であろう。急性の炎症反応には、通常、肝臓での代謝および遺伝子の調節の変化が関係している。免疫システム、心臓血管システム、および中枢神経システムに加えて、体の主要なシステムの全てに関係している活発な恒常性のプロセスが存在している。通常は、急性期反応はわずか数日間しか持続しない；しかし、慢性的な炎症または再発性の炎症の場合には、急性期反応のいくつかの態様の異常な持続には、疾患を伴う根底にある組織損傷に寄与している場合があり、また、これによってさらなる合併症（例えば、心臓血管疾患、またはアミロイドーシスのようなタンパク質沈着症）に至る場合もある。
【００８５】
急性期反応の重要な態様は、根本的に変化してしまった肝臓の生合成プロフィールである。通常の状況下では、肝臓では、一定濃度で特徴的な範囲の血漿タンパク質が合成される。これらのタンパク質の多くは重要な機能を有しており、そして、これらの急性期反応物質（ＡＰＲ）または急性期タンパク質（ＡＰＰ）の高い血漿レベルが、炎症刺激後の急性期反応の間に必要とされる。ほとんどのＡＰＲは肝細胞によって合成されるが、いくつかは他の細胞タイプ（単球、内皮細胞、線維芽細胞、および含脂肪細胞が含まれている）によって生産される。ほとんどのＡＰＲは、通常のレベルの５０％から７倍の間で誘導される。対照的に、主要なＡＰＲによっては通常のレベルの１０００倍にまで増大させられ得る。このグループには、血清アミロイドＡ（ＳＡＡ）およびヒトのＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）のいずれか、またはマウスにおけるそのホモログ、血清アミロイドＰ成分（ＳＡＰ）が含まれる。いわゆるネガティブなＡＰＲは、急性期反応の間に血漿濃度を低下させて、誘導されたＡＰＲを合成する肝臓の能力を高めることができる。
【００８６】
特定の実施形態においては、したがって、急性期反応、またはリスクは、１つ以上のＡＰＰを測定することによって評価される。このようなマーカーを測定することは当業者に周知であり、そのような測定を提供する商業的な会社が存在している（例えば、Ｃａｒｄｉｏｔｅｃｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，Ｌｏｕｉｓｖｉｌｌｅ，ＫＹによって測定されるＡＧＰ）。
【００８７】
Ｋ）他の適応症
様々な実施形態においては、本明細書中に記載される活性薬剤が、角膜潰瘍、内皮細胞の腐肉形成、クローン病、急性および慢性皮膚炎（湿疹および／または乾癬が含まれるが、これらに限定はされない）、黄斑変性、神経障害、強皮症、および潰瘍性大腸炎の処置（例えば、軽減および／または予防）に有用であることが意図される。
【００８８】
それについて活性薬剤が有効であることが示されている、および／または有効であると考えられている適応症／症状のまとめは、表１に示される。
【００８９】
【表１−１】
2008539235.tif 000002
【００９０】
【表１−２】
2008539235.tif 000003
【００９１】
【表１−３】
2008539235.tif 000004
【００９２】
【表１−４】
2008539235.tif 000005
表１に列挙される症状は例示であって、限定ではないと意図されることに留意されたい。
【００９３】
Ｌ）投与
通常は、活性薬剤は、それが必要な哺乳動物（例えば、ヒト）に投与されるであろう。このような哺乳動物には、通常、本明細書中に記載される病状の１つ以上を有しているか、またはそのリスクがある哺乳動物（例えば、ヒト）が含まれる。
【００９４】
活性薬剤（単数または複数）は、本明細書中に記載されるように、多数の標準的な方法のいずれかにしたがって投与することができる。これには、注射、坐剤、鼻腔スプレー、徐放性の移植物、経皮パッチなどが含まれるが、これらに限定はされない。１つの特定の好ましい実施形態においては、ペプチド（単数または複数）は経口（例えば、シロップ剤、カプセル剤、または錠剤として）投与される。
【００９５】
これらの方法には、本発明の１つの活性薬剤の投与、または２つ以上の異なる活性薬剤の投与が含まれる。複数の活性薬剤は、単量体として（例えば、別々に、もしくは混合された処方物において）提供することができ、また、二量体、オリゴマー、もしくはポリマーの形態で提供することもできる。特定の実施形態においては、多量体の形態には、会合させられた複数の単量体（例えば、イオン結合させられたか、もしくは疎水性によって結合させられた）が含まれる場合があり、一方、特定の他の多量体形態には共有結合させられた複数の単量体（直接結合させられたか、もしくはリンカーを介して結合させられた）が含まれる。
【００９６】
本発明はヒトでの使用に関して記載される、これはまた、動物（例えば、脊椎動物）への使用にも適している。したがって、特定の好ましい生物体としては、ヒト、ヒト以外の霊長類、イヌ、ウマ、ネコ、ブタ、有蹄動物、ｌａｒｇｏｍｏｒｐｈｓなどが挙げられるが、それらに限定はされない。
【００９７】
本発明の方法は、本明細書中に記載される病状の１つ以上の兆候（単数または複数）を示しているヒトまたはヒト以外の動物に限定はされないが、これは予防の状況においても有用である。したがって、本発明の活性薬剤は、本明細書中に記載される病状（例えば、アテローム性動脈硬化症、脳卒中など）の１つ以上の兆候の発症／進行を防ぐために、生物体に投与することができる。この状況での特に好ましい被験体は、その病状についての１つ以上のリスクファクターを示している被験体である。したがって、例えば、アテローム性動脈硬化症の場合には、リスクファクターとしては、家族の病歴、高血圧、肥満、多量のアルコール摂取量、喫煙、高い血中コレステロール濃度、高い血中トリグリセリド濃度、高い血中ＬＤＬ、ＬＶＤＬ、ＩＤＬ、または低いＨＤＬ、糖尿病、または、家族の糖尿病の病歴、高い血中脂質濃度、心臓発作、狭心症、あるいは、脳卒中などが挙げられる。
【００９８】
ＩＩ．活性薬剤
多種多様な活性薬剤が、上記で議論されている適応症の１つ以上の処置に適している。これらの成分としては、クラスＡ両親媒性ヘリックスペプチド、非極性表面の中に芳香族残基もしくは脂肪族残基を有しているａｐｏＡ−ＩのクラスＡ両親媒性ヘリックスペプチド模倣物、小さいペプチド（ペンタペプチド、テトラペプチド、トリペプチド、ジペプチド、およびアミノ酸の対が含まれる）、Ａｐｏ−Ｊ（Ｇ＊ペプチド）、ならびに、ペプチド模倣物（例えば、以下に記載されるもの）が挙げられるが、これらに限定はされない。
【００９９】
Ａ）クラスＡ両親媒性ヘリックスペプチド
特定の実施形態においては、本発明の方法で使用される活性薬剤には、クラスＡ両親媒性ヘリックスペプチド（例えば、米国特許第６，６６４，２３０号、ならびに、ＰＣＴ公開番号ＷＯ０２／１５９２３およびＷＯ２００４／０３４９７７に記載されているもの）が含まれる。クラスＡ両親媒性ヘリックス（「クラスＡペプチド」）が含まれているペプチドは、アテローム性動脈硬化症の１つ以上の兆候を軽減することができることに加えて、本明細書中に記載される他の適応症の１つ以上の処置にも有用であることが発見されている。
【０１００】
クラスＡペプチドは、α−ヘリックスの形成を特徴とし、これは、極性残基と非極性残基の分離を生じ、それによって極性−非極性界面に存在している正電荷を有している残基と、極性表面の中心に存在している負電荷を有している残基を有している、極性表面と非極性表面を形成する（例えば、Ａｎａｎｔｈａｒａｍａｉａｈ（１９８６）Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ，１２８：６２６−６６８を参照のこと）。ａｐｏＡ−Ｉの４番目のエキソンは、３．６６７残基／ターンに折り畳まれると、クラスＡ両親媒性ヘリックス構造を生じることが注目される。
【０１０１】
１８Ａ（例えば、Ａｎａｔｈａｒａｍａｉａｈ（１９８６）Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ，１２８：６２６−６６８を参照のこと）と指定されている１つのクラスＡペプチドは、経口で投与することができ、そしてアテローム性動脈硬化症および／または本明細書中に記載される他の適応症の１つ以上の兆候を阻害もしくは予防することにおいて非常に有効なペプチドを生じるように、本明細書中に記載されるように修飾されている。特定の理論に束縛はされないが、本発明のペプチドは、ＬＤＬの酸化を少なくする種子分子（単数または複数）を拾い上げることによって、インビボで作用することができると考えられる。
【０１０２】
本発明者らは、１８Ａの疎水性表面上にあるＰｈｅ残基の数が増えると、Ｐａｌｇｕｎａｃｈａｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９６）Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ，＆  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌ．１６：３２８−３３８に記載される計算結果によって決定される脂質親和性が理論的に増大することを決定した。理論上は、Ｐｈｅでの１８Ａの非極性表面にある残基の系統だった置換によっては、６種類のペプチドが生じ得る。さらに２個、３個、および４個のＰｈｅを有しているペプチドはそれぞれ、１３、１４、および１５単位の理論上の脂質親和性（λ）値を有している。しかし、λの値は、さらなるＰｈｅが４個から５個に増加すると、４単位跳ね上がる（１９λ単位になる）。６個または７個のＰｈｅにまで増加してもそれほど劇的な増加は生じない（それぞれ、２０λ単位および２１λ単位になる）。
【０１０３】
４Ｆ、Ｄ４Ｆ、５Ｆ、およびＤ５Ｆと指定されているペプチドなどを含む、多数のこれらのクラスＡペプチドが作成されている。様々なクラスＡペプチドは、アテローム性動脈硬化症に罹患しやすいマウスにおいて病変の発生を阻害した。加えて、ペプチドは、様々な、しかし有意な程度の、本明細書中に記載される様々な病状の１つ以上の兆候を緩和することにおける効力を示す。多数のこのようなペプチドは、表２に示される。
【０１０４】
【表２−１】
2008539235.tif 000006
【０１０５】
【表２−２】
2008539235.tif 000007
【０１０６】
【表２−３】
2008539235.tif 000008
特定の好ましい実施形態においては、ペプチドには、４Ｆのバリエーション（（表２の配列番号５）、Ｌ−４Ｆ（ここでは、全ての残基はＬ型アミノ酸である）またはＤ−４Ｆ（ここでは、１つ以上の残基がＤ型のアミノ酸である）としても知られている））が含まれる。本明細書中に記載されるペプチドの任意のものにおいては、Ｃ末端および／またはＮ末端および／または内部残基を、本明細書中に記載される１つ以上のブロック基でブロックすることができる。
【０１０７】
表２の様々なペプチドは、アミノ末端を保護するアセチル基またはＮ−メチルアントラニリル基、およびカルボキシル末端を保護するアミノ基と共に示されているが、これらの保護基の任意のものが排除される場合があり、そして／また、本明細書中に記載される別の保護基で置き換えられる場合もある。特に好ましい実施形態においては、ペプチドには本明細書中に記載されるように、１つ以上のＤ型アミノ酸が含まれる。特定の実施形態においては、表２のペプチドの全てのアミノ酸（例えば、全ての鏡像異性体アミノ酸）がＤ型のアミノ酸である。
【０１０８】
表２が完全な包括ではないことにも留意されたい。本明細書中で提供される教示を使用して、他の適切なクラスＡ両親媒性ヘリックスペプチドを日常的に行われるように（例えば、保存的置換または半保存的置換（例えば、ＤをＥで置き換える）、伸張、欠失など）生産することができる。したがって、例えば、１つの実施形態では、本明細書中に示されるペプチドの任意の１つ以上の短縮型（例えば、表２の配列番号２〜２０、および３９〜によって特定されたペプチド）が利用される。したがって、例えば、配列番号２１では、１つ以上のＤアミノ酸が含まれている、１８ＡのＣ末端からの１４個のアミノ酸が含まれているペプチドが説明されており、一方、配列番号２２〜３８では、他の短縮型が説明されている。
【０１０９】
より長いペプチドもまた適している。このような長いペプチドは、クラスＡ両親媒性ヘリックス全体を形成することができるか、または、クラスＡ両親媒性ヘリックス（ヘリックス）はペプチドの１つ以上のドメインを形成することができる。加えて、本発明により、ペプチドの多量体バージョン（例えば、コンカタマー）が意図される。したがって、例えば、本明細書中で説明されるペプチドは、互いに（直接、または１つ以上の介在アミノ酸を含むリンカー（例えば、炭素リンカー、もしくは１つ以上のアミノ酸）を介して）結合させることができる。例示的なポリマーペプチドとしては、１８Ａ−Ｐｒｏ−１８Ａ、および配列番号７８〜８５のペプチドが挙げられる。特定の実施形態においては、これらには、１つ以上のＤアミノ酸が含まれており、より好ましくは、本明細書中に記載されるように、全てのアミノ酸がＤアミノ酸であり、そして／または一方もしくは両方の末端が保護されている。
【０１１０】
本明細書中ではっきりと説明されるペプチド配列に加えて、本発明ではまた、これらのペプチドのそれぞれのレトロ形態およびレトロインバース（ｒｅｔｒｏ−ｉｎｖｅｒｓｏ）形態も意図される。レトロ形態においては、配列の方向が逆である。インバース形態においては、構成アミノ酸の対掌性が逆である（すなわち、Ｌ型アミノ酸がＤ型アミノ酸になっており、そしてＤ型アミノ酸がＬ型アミノ酸になっている）。レトロ−インバース形態では、アミノ酸の順序と対掌性のいずれもが逆である。したがって、例えば、４Ｆペプチド（ＤＷＦＫＡＦＹＤＫＶＡＥＫＦＫＥＡＦ、配列番号５）のレトロ形態（ここでは、アミノ末端にアスパラギン酸（Ｄ）があり、そしてカルボキシル末端にはフェニルアラニン（Ｆ）がある）は同じ配列を有しているが、アミノ末端がフェニルアラニンであり、カルボキシ末端がアスパラギン酸である（すなわち、ＦＡＥＫＦＫＥＡＶＫＤＹＦＡＫＦＷＤ、配列番号１０４）。４Ｆペプチドに全てＬ型のアミノ酸が含まれている場合には、レトロ−インバース形態には、上記に示されている配列（配列番号１０４）を有しており、そして全てＤ型のアミノ酸が含まれている。図１５のヘリックスホイール図に示されるように、４Ｆおよびレトロインバース（Ｒｅｖ−４Ｆ）は互いに胸像であり、極性−非極性界面に存在している正電荷を有している残基と、極性表面の中心に存在している負電荷を有している残基を含む、極性表面と非極性表面の同じ分離を有している。アミノ酸の同じポリマーのこれらの鏡像は、極性−非極性界面に存在している正電荷を有している残基と、極性表面の中心に存在している負電荷を有している残基を含む、極性表面と非極性表面の分離に関しては同じである。したがって、４ＦとＲｅｖ−４Ｆは互いに鏡像異性体である。レトロペプチドおよびレトロ−インバースペプチドの議論については、例えば、Ｃｈｏｒｅｖ  ａｎｄ  Ｇｏｏｄｍａｎ，（１９９５）ＴｉｂＴｅｃｈ，１３：４３９−４４５を参照のこと。
【０１１１】
配列と方向について行われる言及が明確には示されていない場合には、配列は、アミノからカルボキシルの方向のアミノ酸配列、レトロ形態（すなわち、カルボキシルからアミノの方向のアミノ酸配列）、レトロ形態（ここでは、Ｌアミノ酸がＤアミノ酸で置き換えられているか、またはＤアミノ酸がＬアミノ酸で置き換えられている）、およびレトロ−インバース形態（ここでは、順序が逆であり、そしてアミノ酸の対掌性も逆である）を示していると見ることができる。
【０１１２】
Ｃ）非極性表面に芳香族残基または脂肪族残基を有しているａｐｏＡ−ＩのクラスＡ両親媒性ヘリックスペプチド模倣物
特定の実施形態においては、本発明によってはまた、修飾されたクラスＡ両親媒性ヘリックスペプチドも提供される。特定の好ましいペプチドには、非極性表面の中心に１つ以上の芳香族残基（例えば、３ＦＣπ（４Ｆの中に存在しているような））または非極性の表面の中心に１つ以上の脂肪族残基（例えば、３ＦＩπ）が組み込まれる。例えば、表３を参照のこと。特定の理論には束縛されず、本発明者らは、ペプチド３ＦＣπの非極性表面上の中心の芳香族残基は、非極性表面の中心にあるπ電子の存在が原因で、ペプチド−脂質複合体の近くの疎水性脂質のアルキル鎖に水分子を浸透させることができ、これは次いで、細胞表面からそれらを遮蔽する反応性酸素種（例えば、脂質ヒドロペルオキシド）の侵入を可能にすると考えている。同様に、本発明者らはまた、非極性表面の中心にある脂肪族残基（例えば、３ＦＩπ）を有しているペプチドも同様に作用するが、３ＦＣπほどは有効ではないと考えている。
【０１１３】
好ましいペプチドは、プロ炎症性ＨＤＬを抗炎症性ＨＤＬに変換させるか、または、抗炎症性ＨＤＬをより抗炎症性にし、そして／また、Ｄ４Ｆもしくは表２に示されている他のペプチドと同様もしくはそれよりも大きく、動脈壁によって生じるＬＤＬによって誘導される単球の化学走化活性を低下させるであろう。
【０１１４】
【表３】
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Ｃ）他のクラスＡおよびいくつかのクラスＹ両親媒性ヘリックスペプチド
特定の実施形態においては、本発明ではまた、上記のクラスａ両親媒性ヘリックスペプチドの１つ以上と同じのアミノ酸組成を有しているクラスａ両親媒性ヘリックスペプチドも意図される。したがって、例えば、特定の実施形態においては、本発明では、４Ｆと同じアミノ酸組成を有しているペプチドが意図される。したがって、特定の実施形態においては、本発明には、１８個のアミノ酸からなるペプチドが含まれている活性薬剤が含まれる。この場合、１８個のアミノ酸は、３個のアラニン（Ａ）、２個のアスパラギン酸（Ｄ）、２個のグルタミン酸（Ｅ）、４個のフェニルアラニン（Ｆ）、４個のリジン（Ｋ）、１個のバリン（Ｖ）、１個のトリプトファン（Ｗ）、および１個のチロシン（Ｙ）からなり；そしてペプチドはクラスＡ両親媒性ヘリックスを形成し；そして酸化剤による酸化に対してリン脂質を保護する。様々な実施形態においては、ペプチドには、少なくとも１個の「Ｄ」アミノ酸残基が含まれ；そして特定の実施形態においては、ペプチドには全て「Ｄ」型のアミノ酸残基が含まれる。多様なこのようなペプチドは表４に例示される。これらのペプチドの逆（レトロ）、インバース、レトロ−インバース、および環状に順序を変えられた（ｃｉｒｃｕｌａｒｌｙ  ｐｅｒｍｕｔｅｄ）形態もまた意図される。
【０１１５】
【表４−１】
2008539235.tif 000010
【０１１６】
【表４−２】
2008539235.tif 000011
【０１１７】
【表４−３】
2008539235.tif 000012
【０１１８】
【表４−４】
2008539235.tif 000013
【０１１９】
【表４−５】
2008539235.tif 000014
【０１２０】
【表４−６】
2008539235.tif 000015
【０１２１】
【表４−７】
2008539235.tif 000016
【０１２２】
【表４−８】
2008539235.tif 000017
【０１２３】
【表４−９】
2008539235.tif 000018
【０１２４】
【表４−１０】
2008539235.tif 000019
【０１２５】
【表４−１１】
2008539235.tif 000020
【０１２６】
【表４−１２】
2008539235.tif 000021
【０１２７】
【表４−１３】
2008539235.tif 000022
【０１２８】
【表４−１４】
2008539235.tif 000023
【０１２９】
【表４−１５】
2008539235.tif 000024
【０１３０】
【表４−１６】
2008539235.tif 000025
図１５に示されるヘリックスホール図に基づいて、生物学的に活性であり、有用なペプチドを容易に同定することが可能である。したがって、例えば、以下のペプチドが、活性であるとして正確に同定されている：３Ｆ１；３Ｆ２；４Ｆ、その逆（レトロ）形態およびそのレトロ−インバース形態。したがって、特定の実施形態においては、本発明により、１８アミノ酸長であり、クラスＡ両親媒性ヘリックスを形成するペプチドが含まれている活性薬剤が意図される。この場合、ペプチドは、２個のアスパラギン酸、２個のグルタミン酸、４個のリジン、１個のトリプトファン、１個のチロシン、多くとも１個のロイシン、多くとも１個を超えないバリン、少なくとも１個そして３個を超えないアラニンと、フェニルアラニン、α−ナフトアラニン、β−ナフトアラニン、ヒスチジンからなる群から３個から６個のアミノ酸のアミノ酸組成を有しており、そしてペプチドには、極性表面と非極性表面の間の界面に存在している正電荷を有している残基のうちの２個と、極性表面上に存在している４個の正電荷を有している残基のうちの２個（これらは連続しており、フェニルアラニン、α−ナフトアラニン、β−ナフトアラニン、ヒスチジからなる群より選択されるアミノ酸残基のうちの非極性表面上にある２個であり、これらもまた連続しており、非極性表面上にこの群に由来するアミノ酸が４個以上存在している場合には、連続していないこの群より少なくとも２個の残基が存在している）を含み、中性ｐＨで正電荷を有している４個のアミノ酸を含むクラスＡ両親媒性ヘリックスのヘリックスホイール提示において極性表面上にある９個または１０個のいずれかのアミノ酸が含まれる。
【０１３１】
特定の実施形態においては、本発明によってはまた、クラスＹ、さらにはクラスＡ両親媒性ヘリックスペプチドが意図される。クラスＹ両親媒性ヘリックスペプチドは当業者には公知である（例えば、Ｓｅｇｒｅｓｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｊ．Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．３３：１４１−１６６；Ｏｒａｍ  ａｎｄ  Ｈｅｉｎｅｃｋｅ（２００５）Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｒｅｖ．８５：１３４３−１３７２などを参照のこと）。様々な実施形態においては、これらのペプチドには、クラスＡ両親媒性ヘリックスを形成する１８アミノ酸長のペプチド、または式ＩＩＩによって記載されるクラスＹ両親媒性ヘリックス（配列番号３５１）が含まれるが、これらに限定はされない：
【０１３２】
【化１】
2008539235.tif 000026
式中、Ｄ’は独立して、ＡｓｐまたはＧｌｕであり；Ｋｓは独立して、ＬｙｓまたはＡｒｇであり；Ｘｓは独立してＬｅｕ、ｎｏｒＬｅｕ、Ｖａｌ，Ｉｌｅ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、β−Ｎａｌ、またはα−Ｎａｌであり、そしてＸ残基は、２つのＫ残基の間の極性表面上に存在できる１つを除いて、全てが非極性表面上に存在しており（例えば、ヘリックスホイール図において見た場合）；Ｙ’は独立して、Ａｌａ、Ｈｉｓ、Ｓｅｒ、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、または非極性表面上のＴｈｒであり（例えば、ヘリックスホイール図において見た場合）、そしてＹ’は独立して、極性表面上の１つのＡｌａ、１つのＨｉｓ、１つのＳｅｒ、１つのＧｌｎ，１つのＡｓｎ、または極性表面上の１つのＴｈｒであり（例えば、ヘリックスホイール図において見た場合）、この場合、２個までのＫが連続しており（例えば、例えば、ヘリックスホイール図において見た場合）；そして、この場合、３個までのＤ’が連続しており（例えば、ヘリックスホイール図において見た場合）、そして４番目のＤは他のＤ’とはＹによって隔てられている。ヒスチジンおよび／またはα−ナフトアラニンおよび／またはβ−ナフトアラニンを有しているペプチドが含まれているこの種の例示的なペプチドは、表５に示される。これらのペプチドの逆（レトロ）、インバース、レトロ−インバース、および環状に順序を変えられた形態もまた意図される。
【０１３３】
【表５−１】
2008539235.tif 000027
【０１３４】
【表５−２】
2008539235.tif 000028
【０１３５】
【表５−３】
2008539235.tif 000029
【０１３６】
【表５−４】
2008539235.tif 000030
【０１３７】
【表５−５】
2008539235.tif 000031
【０１３８】
【表５−６】
2008539235.tif 000032
【０１３９】
【表５−７】
2008539235.tif 000033
【０１４０】
【表５−８】
2008539235.tif 000034
本明細書中に記載されるペプチドのうちの任意のものには、本明細書中で同定される対応する自然界に存在しているアミノ酸に加えて、またはその代わりに、自然界には存在しないアミノ酸を含めることができる。このような修飾としては、アセチル化、アミド化、ホルミル化、メチル化、硫酸化などが挙げられるが、これらに限定はされない。例示的な自然界には存在しないアミノ酸としては以下が挙げられるが、これらに限定はされない：オルニチン、ノルロイシン、ノルバリン、Ｎ−メチルバリン、６−Ｎ−メチルリジン、Ｎ−メチルイソロイシン、Ｎ−メチルグリシン、サルコシン、イノシン、アロ−イソロイシン、イソデスモリジン、４−ヒドロキシプロリン、３−ヒドロキシプロリン、アロ−ヒドロキシリジン、ヒドロキシリジン、Ｎ−エチルアスパラギン、Ｎ−エチルグリシン、２，３−ジアミノプロピオン酸、２，２’−ジアミノプロピオン酸、デスモシン、２，４−ジアミノ酪酸、２−アミノピメリン酸、３−アミノイソ酪酸、２−アミノイソ酪酸、２−アミノヘプタン酸、６−アミノカプロン酸、４−アミノ酪酸、２−アミノ酪酸、β−アラニン、３−アミノアジピン酸、２−アミノアジピン酸など。特定の実施形態においては、本明細書中に記載されるペプチドの「自然界に存在している」アミノ酸の１つ以上を、対応する自然界には存在しないアミノ酸で置換することができる（例えば、上記を参照のこと）。
【０１４１】
特定の実施形態においては、本発明により、修飾されたリジンの使用が具体的に意図される。このような修飾としては、εリジンのビオチン修飾および／またはεリジンのメチル化が挙げられるが、これらに限定はされない。εがメチル化されたリジンが含まれている例示的なペプチドとしては、Ａｃ−Ｄ−Ｗ−Ｆ−Ｋ（ｅＣＨ３）２−Ａ−Ｆ−Ｙ−Ｄ−Ｋ（ｅＣＨ３）２−Ｖ−Ａ−Ｅ−Ｋ（ｅＣＨ３）２−Ｆ−Ｋ（ｅＣＨ３）２−Ｅ−Ａ−Ｆ−ＮＨ（ＣＨ３）２（配列番号５８４）、および：Ａｃ−ＤＷＦＫ（ｅＣＨ３）２ＡＦＹＤＫ（ｅＣＨ３）２ＶＡＥＫ（ｅＣＨ３）２ＦＫ（ｅＣＨ３）２ＥＡＦ−ＮＨ（ＣＨ３）（配列番号５８５）が挙げられるが、これらに限定はされない。他の修飾されたアミノ酸としては、オルニチンアナログ、およびホモアミノアラニンアナログ［Ｌｙｓについては（ＣＨ２）４−ＮＨ２の代わり、これは、Ｈａａについては−（ＣＨ２）２−ＮＨ２、そしてＯｒｎについては（ＣＨ２）３−ＮＨ２であり得る］などが挙げられる。これらの修飾が例示であり、限定とは意図されないことに留意されたい。修飾されたアミノ酸を有している例示的な４Ｆアナログは表６に示される。
【０１４２】
【表６−１】
2008539235.tif 000035
【０１４３】
【表６−２】
2008539235.tif 000036
上記に示されているペプチドおよび修飾は、例示のために意図され、限定とは意図されない。
【０１４４】
Ｄ）小さいペプチド
驚くべきことに、アミノ酸のＤ−立体異性体である１つ以上のアミノ酸を優先的に（しかし、必ずしもそうではない）含む少なくとも３個のアミノ酸ならなり、そして、脂質タンパク質の相互作用を可能にするための疎水性ドメインと、ある程度の水溶性を可能にするための親水性ドメインを有している特定の小さいペプチドもまた、有意な抗炎症特性を有しており、そして本明細書中に記載される１つ以上の病状を処置することにおいて有用であることもまた、発見された。「小さいペプチド」は、通常、２アミノ酸から約１５アミノ酸までの長さの範囲であり、より好ましくは、約３アミノ酸から約１０もしくは１１アミノ酸まで、そして最も好ましくは、約４から約８もしくは１０アミノ酸までの長さの範囲である。様々な実施形態においては、ペプチドは、通常、疎水性の末端アミノ酸、または１つ以上の疎水性の「保護」基の結合によって疎水性にさせられた末端アミノ酸を有していることを特徴とする。様々な「小さいペプチド」が、２００３年８月２６日に提出された同時係属中の出願ＵＳＳＮ１０／６４９，３７８、２００４年８月６日に提出されたＵＳＳＮ１０／９１３，８００、およびＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２６２８８に記載されている。
【０１４５】
特定の実施形態においては、ペプチドは以下の式Ｉによって特徴付けることができる：
【０１４６】
【化２】
2008539235.tif 000037
（配列番号６２０）
式中、ｎは０または１であり、Ｘ１は疎水性アミノ酸である、および／または疎水性保護基を有しており、Ｘ４は、疎水性アミノ酸である、および／または疎水性保護基を有しており；そして、ｎが０である場合は、Ｘ２は酸性または塩基性アミノ酸であり；ｎが１である場合は、Ｘ２およびＸ３は独立して、酸性アミノ酸、塩基性アミノ酸、脂肪族アミノ酸、もしくは芳香族アミノ酸であり、その結果、Ｘ２が酸性アミノ酸である場合は、Ｘ３は、塩基性アミノ酸、脂肪族アミノ酸、もしくは芳香族アミノ酸であり；Ｘ２が塩基性アミノ酸である場合は、Ｘ３は、酸性アミノ酸、脂肪族アミノ酸、もしくは芳香族アミノ酸であり；そしてＸ２が脂肪族もしくは芳香族アミノ酸である場合は、Ｘ３は、酸性アミノ酸もしくは塩基性アミノ酸である。
【０１４７】
より長いペプチド（例えば、１０、１１、または１５アミノ酸まで）もまた、本発明の範囲内であると意図される。通常、より短いペプチド（例えば、式Ｉのペプチド）が、酸性アミノ酸、塩基性アミノ酸、脂肪族アミノ酸、または芳香族アミノ酸として特徴付けられる場合は、より長いペプチドは、そのタイプの２つ以上のアミノ酸が含まれている、酸性ドメイン、塩基性ドメイン、脂肪族ドメイン、または芳香族ドメインとして特徴付けられるによって特徴付けられる。
【０１４８】
１）活性のある小さいペプチドの機能的特性
多数の物理的特性によって、哺乳動物において、ＨＤＬをさらに抗炎症性にし、そしてアテローム性動脈硬化症および／または炎症反応を特長とする他の病状を軽減する、本発明の小さいペプチド（例えば、１０アミノ酸未満、好ましくは、８アミノ酸未満、より好ましくは、３アミノ酸から５もしくは６アミノ酸まで）の能力が推定されることは本発明の驚くべき発見であった。物理的特性としては、酢酸エチルの中での高い溶解度（例えば、約４ｍｇ／ｍＬより大きい）、およびｐＨ７．０での水性緩衝液中での溶解度が挙げられる。水性の環境の中でリン脂質（例えば、１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＭＰＣ））と接触させると、特に有効な小さいペプチドは、およそ７．５ｎｍ（±０．１ｎｍ）の直径を有している粒子の形成を誘導するかもしくはそれに関与しており、そして／または、およそ２ｎｍの重なりの二重層の間に空間を有している３．４から４．１ｎｍ程度の二重層の大きさを有している重なった二重層の形成を誘導するかもしくはそれに関与しており、そして／または、およそ３８ｎｍの多孔質構造の形成を誘導するかもしくはそれに関与している。特定の好ましい実施形態においては、小さいペプチドは、約９００Ｄａ未満の分子量を有している。
【０１４９】
したがって、特定の実施形態においては、本発明により、本明細書中に記載される適応症／病状（例えば、炎症症状）の１つ以上の兆候を緩和する小さいペプチドが意図される。この場合、ペプチド（単数または複数）は、約３から約８アミノ酸、好ましくは、約３から約６もしくは７アミノ酸、そしてより好ましくは、約３から約５アミノ酸の長さの範囲であり、これは、約４ｍｇ／ｍＬより大きい濃度で酢酸エチルの中に溶解し；ｐＨ７．０の水性緩衝液に可溶性であり；水性環境下でリン脂質と接触させられると、およそ７．５ｎｍの直径を有している粒子を形成する、そして／または、およそ２ｎｍの重なりの二重層の間に空間を有している３．４から４．１ｎｍ程度の二重層の大きさを有している重なった二重層を形成し；約９００ダルトン未満の分子量を有しており；プロ炎症性ＨＤＬを抗炎症性ＨＤＬへと変換させるか、または抗炎症性ＨＤＬをより抗炎症性にし；そして、アミノ酸配列Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ（配列番号７５１）（特に、Ｌｙｓ−Ａｒｇ−ＡｓｐおよびＳｅｒは全てＬアミノ酸であるもの）は有さない。特定の実施形態においては、これらのペプチドにより、酸化剤による酸化に対してリン脂質が保護される。
【０１５０】
これらの小さいペプチドにはそのような限定は必要はないが、特定の実施形態においては、これらの小さいペプチドには、以下に記載される小さいペプチドを含めることができる。
【０１５１】
２）トリペプチド
本明細書中に記載される望ましい特性（例えば、プロ炎症性ＨＤＬを抗炎症性ＨＤＬに変換させる能力、ＬＤＬによって誘導される、動脈細胞壁によって生じる単球の化学走化活性を低下させる能力、プレ−βＨＤＬを増加させる能力など）を示す特定のトリペプチド（３アミノ酸のペプチド）を合成することができることが発見された。特定の実施形態においては、ペプチドは、式ＩＩによって以下に示される、Ｎが０である式Ｉによって特徴付けられる：
【０１５２】
【化３】
2008539235.tif 000038
（配列番号６２１）
式中、末端アミノ酸（Ｘ１およびＸ４）は、疎水性側鎖が原因であるか、あるいは側鎖またはＣおよび／またはＮ末端が１つ以上の疎水性反応基（単数または複数）でブロックされている（例えば、Ｎ末端がＢｏｃ−、Ｆｍｏｃ−、ニコチニル−などでブロックされている、およびＣ末端が（ｔＢｕ）−ＯｔＢｕでブロックされているなど）ことが原因であるかのいずれかにより、疎水性である。特定の実施形態においては、Ｘ２アミノ酸は酸性（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸など）または塩基性（例えば、ヒスチジン、アルギニン、リジンなど）のいずれかである。ペプチドは、全てＬアミノ酸であり得るか、または１つ以上のＤアミノ酸が含まれ得るか、または全てがＤアミノ酸であり得る。
【０１５３】
本発明の特定のトリペプチドには、表７に示されるペプチドが含まれるが、これらに限定はされない。
【０１５４】
【表７−１】
2008539235.tif 000039
【０１５５】
【表７−２】
2008539235.tif 000040
【０１５６】
【表７−３】
2008539235.tif 000041
【０１５７】
【表７−４】
2008539235.tif 000042
【０１５８】
【表７−５】
2008539235.tif 000043
表７のペプチドは、特定の保護基を用いて説明されているが、これらの基は本明細書中に記載される他の保護基で置き換えることができ、そして／または、示されている保護基の１つ以上を排除することもできることに留意されたい。
【０１５９】
３）中心に酸性および塩基性アミノ酸を有している小さいペプチド
特定の実施形態においては、本発明のペプチドは、４アミノ酸から約１０アミノ酸までの範囲である。末端アミノ酸は、通常、疎水性側鎖の理由によるか、または末端アミノ酸が１つ以上の疎水性保護基を有しているとの理由によるかのいずれかにより、疎水性である。末端アミノ酸（Ｘ１およびＸ４）は、疎水性側鎖が原因で、あるいは側鎖もしくはＣ末端および／もしくはＮ末端が１つ以上の疎水性保護基（単数または複数）でブロックされている（例えば、Ｎ末端がＢｏｃ−、Ｆｍｏｃ−、ニコチニル−などでブロックされている、およびＣ末端が（ｔＢｕ）−ＯｔＢｕでブロックされているなど）ことが原因であるかのいずれかにより、疎水性である。通常、ペプチドの中心部分には、塩基性アミノ酸と酸性アミノ酸（例えば、４マー）が含まれるか、または、より長い分子においては、塩基性ドメインおよび／もしくは酸性ドメインが含まれる。
【０１６０】
これらの４マーは、Ｘ１およびＸ４が疎水性であるか、および／または本明細書中に記載される疎水性保護基（単数または複数）を有しており、そしてＸ２が酸性であるがＸ３は塩基性である、あるいは、Ｘ２は塩基性であるがＸ３は酸性である、式Ｉによって示すことができる。ペプチドは全てがＬアミノ酸であり得るか、または１つ以上のＤアミノ酸が含まれるか、または全てがＤアミノ酸であり得る。
【０１６１】
本発明の特定の好ましいペプチドには、表８に示されるペプチドが含まれるが、これらに限定はされない。
【０１６２】
【表８−１】
2008539235.tif 000044
【０１６３】
【表８−２】
2008539235.tif 000045
【０１６４】
【表８−３】
2008539235.tif 000046
【０１６５】
【表８−４】
2008539235.tif 000047
【０１６６】
【表８−５】
2008539235.tif 000048
【０１６７】
【表８−６】
2008539235.tif 000049
表８のペプチドは、特定の保護基を用いて説明されているが、これらの基は本明細書中に記載される他の保護基で置き換えることができ、そして／または、示されている保護基の１つ以上を排除することもできることに留意されたい。
【０１６８】
４）中心の脂肪族アミノ酸とともに、中心に酸性または塩基性アミノ酸のいずれかを有している小さいペプチド
特定の実施形態においては、本発明のペプチドは、４アミノ酸から約１０アミノ酸の範囲である。末端アミノ酸は、通常、疎水性側鎖の理由によるか、または末端アミノ酸が１つ以上の疎水性保護基を有しているとの理由によるかのいずれかにより、疎水性である。末端アミノ酸（Ｘ１およびＸ４）は、疎水性側鎖が原因で、あるいは側鎖もしくはＣ末端および／もしくはＮ末端が１つ以上の疎水性保護基（単数または複数）でブロックされている（例えば、Ｎ末端がＢｏｃ−、Ｆｍｏｃ−、ニコチニル−などでブロックされている、およびＣ末端が（ｔＢｕ）−ＯｔＢｕでブロックされているなど）ことが原因であるかのいずれかにより、疎水性である。通常、ペプチドの中心部分には、塩基性アミノ酸もしくは酸性アミノ酸と、脂肪族アミノ酸（例えば、４マー）が含まれるか、または、より長い分子においては、塩基性ドメインもしくは酸性ドメインと、脂肪族ドメインが含まれる。
【０１６９】
これらの４マーは、Ｘ１およびＸ４が疎水性であるか、および／または本明細書中に記載される疎水性保護基（単数または複数）を有しており、そしてＸ２が酸性もしくは塩基性であるがＸ３は脂肪族である、あるいは、Ｘ２は脂肪族であるがＸ３は酸性もしくは塩基性である、式Ｉによって示すことができる。ペプチドは全てがＬアミノ酸であり得るか、または１つ以上のＤアミノ酸が含まれ得るか、または全てがＤアミノ酸であり得る。
【０１７０】
本発明の特定の好ましいペプチドには、表９に示されるペプチドが含まれるが、これらに限定はされない。
【０１７１】
【表９】
2008539235.tif 000050
表９のペプチドは、特定の保護基を用いて説明されているが、これらの基は本明細書中に記載される他の保護基で置き換えることができ、そして／または、示されている保護基の１つ以上を排除することもできることに留意されたい。
【０１７２】
５）中心の芳香族アミノ酸とともに、中心に酸性または塩基性アミノ酸のいずれかを有している小さいペプチド
特定の実施形態においては、本発明の「小さい」ペプチドは、４アミノ酸から約１０アミノ酸の範囲である。末端アミノ酸は、通常、疎水性側鎖の理由によるか、または末端アミノ酸が１つ以上の疎水性保護基を有しているとの理由によるかのいずれかにより、疎水性である。末端アミノ酸（Ｘ１およびＸ４）は、疎水性側鎖が原因で、あるいは側鎖もしくはＣ末端および／もしくはＮ末端が１つ以上の疎水性保護基（単数または複数）でブロックされている（例えば、Ｎ末端がＢｏｃ−、Ｆｍｏｃ−、ニコチニル−などでブロックされている、およびＣ末端が（ｔＢｕ）−ＯｔＢｕでブロックされているなど）ことが原因であるかのいずれかにより、疎水性である。通常、ペプチドの中心部分には、塩基性アミノ酸もしくは酸性アミノ酸と、芳香族アミノ酸（例えば、４マー）が含まれるか、または、より長い分子においては、塩基性ドメインもしくは酸性ドメインと、芳香族ドメインが含まれる。
【０１７３】
これらの４マーは、Ｘ１およびＸ４が疎水性であるか、および／または本明細書中に記載される疎水性保護基（単数または複数）を有しており、そしてＸ２は酸性もしくは塩基性であるがＸ３は芳香族である、あるいは、Ｘ２は芳香族であるがＸ３は酸性もしくは塩基性である、式Ｉによって示すことができる。ペプチドは全てがＬアミノ酸であり得るか、または１つ以上のＤアミノ酸が含まれるか、または全てがＤアミノ酸であり得る。５マーは、Ｘ５が表１０に示されているように挿入されており、Ｘ５は通常は芳香族アミノ酸である、式Ｉの重要ではない修飾によって示すことができる。
【０１７４】
本発明の特定の好ましいペプチドには、表１０に示されるペプチドが含まれるが、これらに限定はされない。
【０１７５】
【表１０】
2008539235.tif 000051
表１０のペプチドは、特定の保護基を用いて説明されているが、これらの基は本明細書中に記載される他の保護基で置き換えることができ、そして／または、示されている保護基の１つ以上を排除することもできることに留意されたい。
【０１７６】
６）中心にヒスチジン（単数または複数）によって分離されている芳香族アミノ酸または芳香族アミノ酸を有している小さいペプチド
特定の実施形態においては、本発明のペプチドは、分子の中心に露出しているπ電子を特徴とする。これにより、粒子を水和することができ、そして、ペプチド粒子が、ｓｎ−２位にアラキドン酸の酸化産物を含む脂肪酸ヒドロペルオキシドおよびリン脂質のようなプロ炎症性酸化型脂質を捕捉できるようにすることができる。
【０１７７】
特定の実施形態においては、これらのペプチドは、少なくとも４アミノ酸から最大で約１０アミノ酸からなり、好ましくは（必ずしもそうではないが）１つ以上のアミノ酸がアミノ酸のＤ−立体異性体であり、末端アミノ酸は、疎水性側鎖の理由によるか、または末端アミノ酸（単数または複数）が１つ以上の疎水性保護基を有している（例えば、Ｎ末端がＢｏｃ−、Ｆｍｏｃ−、ニコチニル−などでブロックされている、およびＣ末端が（ｔＢｕ）−ＯｔＢｕ基でブロックされているなど）との理由によるかのいずれかにより、疎水性である。中心に酸性アミノ酸または塩基性アミノ酸を有する代わりに、これらのペプチドは通常、中心に芳香族アミノ酸を有しているか、または、ペプチドの中心にヒスチジンによって分離された複数の芳香族アミノ酸を有している。
【０１７８】
本発明の特定の好ましいペプチドには、表１１に示されるペプチドが含まれるが、これらに限定はされない。
【０１７９】
【表１１】
2008539235.tif 000052
表１１のペプチドは、特定の保護基を用いて説明されているが、これらの基は本明細書中に記載される他の保護基で置き換えることができ、そして／または、示されている保護基の１つ以上を排除することもできることに留意されたい。
【０１８０】
７）トリペプチドおよびテトラペプチドのまとめ
明確化のために、本発明の多数のトリペプチドおよびテトラペプチドを、以下の表１２におおまかにまとめる。
【０１８１】
【表１２】
2008539235.tif 000053
より長いペプチドが所望される場合には、Ｘ２およびＸ３は、個々のアミノ酸ではなく複数のドメイン（例えば、特定のタイプの２つ以上のアミノ酸の領域）を示すことができる。表１２は、説明と意図され、限定とは意図されない。本明細書中に提供される教示を使用して、他の適切なペプチドを容易に特定することができる。
【０１８２】
８）対のアミノ酸およびジペプチド
特定の実施形態においては、本発明は、ジペプチドと互いに一緒に、またはジペプチドの形態に連結させられて投与されたアミノ酸の特定の対が、本明細書中に記載される特性の１つ以上を有することを発見したことに関する。したがって、特定の理論には束縛されないが、アミノ酸の対が、本明細書中に記載されるように互いに一緒に投与された場合には、これらは、インビボでのミセルの形成に関係しているまたはその形成を誘導することができると考えられる。
【０１８３】
本明細書中に記載される他の小さいペプチドと同様に、ペプチドの対はインビボで会合し、そして酢酸エチルの中での高い溶解度（例えば、約４ｍｇ／ｍＬを超える）、ｐＨ７．０での水性緩衝液中での溶解度を含む物理的特性を示すと考えられる。水性の環境の中でリン脂質（例えば、１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＭＰＣ））と接触させると、アミノ酸の対は、およそ７．５ｎｍ（±０．１ｎｍ）の直径を有している粒子の形成を誘導するかもしくはそれに関与しており、そして／または、およそ２ｎｍの重なりの二重層の間に空間を有している３．４から４．１ｎｍ程度の二重層の大きさを有している重なった二重層の形成を誘導するかもしくはそれに関与しており、そして／または、およそ３８ｎｍの多孔質構造の形成を誘導するかもしくはそれに関与していると考えられる。
【０１８４】
さらに、アミノ酸の対は、以下の生理学的に関係する特性の１つ以上を示すことができると考えられる：
１．これらは、プロ炎症性ＨＤＬを抗炎症性ＨＤＬに変換させるか、または、抗炎症性ＨＤＬをさらに抗炎症性にする；
２．これらは、ＬＤＬによって誘導される、動脈細胞壁によって生じる単球の化学走化活性を低下させる；
３．これらは、プレ−βＨＤＬの形成および循環を刺激する；
４．これらは、ＨＤＬコレステロールを惹起する；ならびに／あるいは
５．これらは、ＨＤＬパラオキソナーゼ活性を増大させる。
【０１８５】
アミノ酸の対は、別々のアミノ酸として投与することができ（連続して、または同時に（例えば、混合された処方物として）投与される）、また、これらは、直接もしくはリンカー（例えば、ＰＥＧリンカー、炭素リンカー、分岐したリンカー、直鎖リンカー、複素環リンカー、誘導された脂質から形成されたリンカーなど）を介して共有結合させることもできる。特定の実施形態においては、アミノ酸の対は、ジペプチドを形成するようにペプチド結合によって共有結合させられる。様々な実施形態においては、ジペプチドには通常、２つのアミノ酸が含まれ、これらはそれぞれが保護基に結合させられているが、本発明ではまた、アミノ酸の一方だけが１つ以上の保護基を有しているジペプチドも意図される。
【０１８６】
アミノ酸の対には通常、個々のアミノ酸が少なくとも１つの保護基（例えば、本明細書中に記載されるような疎水性保護基）に結合させられているアミノ酸が含まれる。アミノ酸はＤ型であっても、また、Ｌ型であってもよい。特定の実施形態においては、対を含むアミノ酸が互いに結合させられていない場合には、それぞれのアミノ酸は２つの保護基を有する（例えば、表１３の分子１および２）。
【０１８７】
【表１３】
2008539235.tif 000054
アミノ酸の適切な対は、保護されているアミノ酸の対および／またはジペプチドを提供すること、その後、上記に記載された物理的および／または生理学的特性の１つ以上についてアミノ酸の対／ジペプチドをスクリーニングすることによって容易に同定することができる。特定の実施形態においては、本発明では、アスパラギン酸とフェニルアラニンを含むアミノ酸の対および／またはジペプチドは排除される。特定の実施形態においては、本発明では、１つのアミノ酸が（−）−Ｎ−［（トランス−４−イソプロピルシクロヘキサン）カルボニル］−Ｄ−フェニルアラニン（ナテグリニド）であるアミノ酸の対および／またはジペプチドは排除される。
【０１８８】
特定の実施形態においては、対を含むアミノ酸は、酸性アミノ酸（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸など）、塩基性（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジンなど）、および非極性アミノ酸（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、トリプトファン、メチオニンなど）からなる群より別々に選択される。特定の実施形態においては、第１のアミノ酸が酸性または塩基性である場合には、第２のアミノ酸は非極性であり、そして、第２のアミノ酸が酸性または塩基性である場合には、第１のアミノ酸は非極性である。特定の実施形態においては、第１のアミノ酸が酸性である場合には、第２のアミノ酸は塩基性である、そしてその逆である（例えば、表１４を参照のこと）。
【０１８９】
同様の組み合わせを、ジペプチドの対を投与することによって得ることができる。したがって、例えば、特定の実施形態においては、表１３の分子３および４は、互いに一緒に投与されるであろう。
【０１９０】
【表１４】
2008539235.tif 000055
これらのアミノ酸の対／ジペプチドは例示と意図され、限定とは意図されないことに留意されたい。本明細書中に提供される教示を使用して、他の適切なアミノ酸の対／ジペプチドを容易に決定することができる。
【０１９１】
Ｅ）Ａｐｏ−Ｊ（Ｇ＊ペプチド）
特定の実施形態においては、ａｐｏＪの両親媒性ヘリックスドメインを模倣するペプチドがアテローム性動脈硬化症および／または本明細書中に記載される他の病状の１つ以上の兆候を軽減することができることが、本発明によって発見された。アポリポタンパク質Ｊは、球状タンパク質様、またはＧ＊両親媒性ヘリックスドメインと呼ばれる、広い非極性表面を有している。クラスＧ両親媒性ヘリックスは球状タンパク質として見られ、したがって、クラスＧと命名されている。このクラスの両親媒性ヘリックスは、狭い非極性表面を含む極性表面上の、正電荷を有している残基と負電荷を有している残基のランダムな分布を特徴とする。狭い非極性表面が原因で、このクラスは、リン脂質と容易には会合しない。両親媒性ヘリックスのＧ＊は、Ｇ両親媒性ヘリックスと類似している（しかし、同じではない）特徴を有している。クラスＧ両親媒性ヘリックスと同様に、Ｇ＊クラスのペプチドは、極性表面上に正電荷を有している残基と負電荷を有している残基のランダムな分布を有している。しかし、狭い非極性表面を有しているクラスＧ両親媒性ヘリックスとは対照的に、このクラスは広い非極性表面を有しており、これにより、このクラスはリン脂質に容易に結合することができ、このクラスは、両親媒性ヘリックスのＧクラスとこれを区別するためにＧ＊と呼ばれる。
【０１９２】
多数の適切なＧ＊両親媒性ペプチドが、２００２年４月５日に提出された同時係属中の出願ＵＳＳＮ１０／１２０，５０８、２００３年４月１日に提出されたＵＳＳＮ１０／５２０，２０７、および２００３年４月１日に提出されたＰＣＴ出願ＰＣＴＵＳ０３／０９９８８に記載されている。加えて、ａｐｏＪのＧ＊両親媒性ヘリックスドメインに関係している本発明の様々な適切なペプチドが、表１５に説明される。
【０１９３】
【表１５】
2008539235.tif 000056
しかし、本発明のペプチドは、ａｐｏＪのＧ＊変異体に限定はされない。一般的に言うと、原則として任意の他のタンパク質（好ましくは、ａｐｏタンパク質）に由来するＧ＊ドメインもまた適している。このようなタンパク質の特定の適切性は、例えば、実施例において本明細書中で説明されるように、保護活性（例えば、酸化からＬＤＬを保護するなど）についてのアッセイを使用して容易に決定することができる。いくつかの特に好ましいタンパク質としては、タンパク質（ａｐｏＡＩ、ａｐｏＡＩＶ、ａｐｏＥ、ａｐｏＣＩＩ、ａｐｏＣＩＩＩなどが含まれるが、これらに限定はされない）のＧ＊両親媒性ヘリックスドメインまたはその変異体（例えば、保存的置換など）が挙げられる。
【０１９４】
ａｐｏＪ以外のアポタンパク質に関係しているＧ＊両親媒性ヘリックスドメインに関係している特定の好ましいペプチドは、表１６に説明される。
【０１９５】
【表１６】
2008539235.tif 000057
さらなる例示的なＧ＊ペプチドが表１７に示される。
【０１９６】
【表１７−１】
2008539235.tif 000058
【０１９７】
【表１７−２】
2008539235.tif 000059
【０１９８】
【表１７−３】
2008539235.tif 000060
【０１９９】
【表１７−４】
2008539235.tif 000061
【０２００】
【表１７−５】
2008539235.tif 000062
【０２０１】
【表１７−６】
2008539235.tif 000063
【０２０２】
【表１７−７】
2008539235.tif 000064
【０２０３】
【表１７−８】
2008539235.tif 000065
他の適切なペプチドとしては、表１８のペプチドが挙げられるが、これらに限定はされない。
【０２０４】
【表１８】
2008539235.tif 000066
本明細書中に記載されているペプチド（Ｖ２Ｗ３Ａ５Ｆ１０，１７−Ｄ−４Ｆ；Ｖ２Ｗ３Ｆ１０−Ｄ−４Ｆ；Ｗ３−Ｄ−４Ｆ）は、もとのＤ−４Ｆよりも強力である可能性がある。
【０２０５】
なお他の適切なペプチドとしては、Ｐ１−ジメチルチロシン−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−Ｐ２（配列番号１１２１）およびＰ１−ジメチルチロシン−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｐ２が挙げられるが、これらに限定はされない。この場合、Ｐ１およびＰ２は、本明細書中に記載されているような保護基である。特定の実施形態においては、これらのペプチドには、Ｂｏｃジメチルチロシン−Ｄ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ（ＯｔＢｕ）（配列番号１１２２）およびＢｏｃジメチルチロシン−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ（ＯｔＢｕ）（配列番号１１２３）が含まれるが、これらに限定はされない。
【０２０６】
特定の実施形態においては、本発明のペプチドには、アミノ酸配列ＬＡＥＹＨＡＫ（配列番号１１２４）が含まれているか、またはそれから構成されるペプチドが含まれ、これには、少なくとも１つのＤアミノ酸および／または少なくとも１つもしくは２つの末端保護基が含まれている。特定の実施形態においては、本発明には、炎症症状の１つ以上の兆候を緩和するペプチドが含まれる。この場合、ペプチドは、約３アミノ酸から約１０アミノ酸の長さの範囲であり；配列に、芳香族アミノ酸もしくは疎水性アミノ酸と交互に酸性アミノ酸もしくは塩基性アミノ酸が含まれているアミノ酸配列が含まれており；疎水性の末端アミノ酸または疎水性保護基を有している末端アミノ酸が含まれており；これは、全てがＬアミノ酸である配列ＬＡＥＹＨＡＫ（配列番号１１２５）ではなく；この場合、ペプチドは、プロ炎症性ＨＤＬを抗炎症性ＨＤＬに変換させる、および／または抗炎症性ＨＤＬをさらに抗炎症性にする。
【０２０７】
本明細書中の表に列挙されているペプチドは完全な包括ではないことにも留意されたい。本明細書中で提供される教示を使用して、他の適切なペプチドを日常的に行われているように（例えば、保存的置換または半保存的置換（例えば、ＤがＥで置き換えられる）、伸張、欠失などによって）生産することができる。したがって、例えば、１つの実施形態では、配列番号９６１〜９８９として特定されているペプチドの任意の１つ以上の短縮型が利用される。
【０２０８】
より長いペプチドもまた適している。このようなより長いペプチドは、クラスＧまたはＧ＊両親媒性ヘリックス全体を形成することができるか、あるいは、Ｇ両親媒性ヘリックス（ヘリックス）は、ペプチドの１つ以上のドメインを形成することができる。加えて、本発明では、ペプチドの多量体のバージョンが意図される。したがって、例えば、本明細書中の表で説明されるペプチドは、互いに（直接またはリンカー（例えば、炭素リンカー、もしくは１つ以上のアミノ酸）を介して１つ以上の介在するアミノ酸と）結合させることができる。適切なリンカーとしては、プロリン（−Ｐｒｏ−）、Ｇｌｙ４Ｓｅｒ３（配列番号１１２６）などが挙げられるが、これらに限定はされない。したがって、本発明にしたがう１つの例示的な多量体ペプチドは、（Ｄ−Ｊ３３６）−Ｐ−（Ｄ−Ｊ３３６）（すなわち、Ａｃ−Ｌ−Ｌ−Ｅ−Ｑ−Ｌ−Ｎ−Ｅ−Ｑ−Ｆ−Ｎ−Ｗ−Ｖ−Ｓ−Ｒ−Ｌ−Ａ−Ｎ−Ｌ−Ｔ−Ｑ−Ｇ−Ｅ−Ｐ−Ｌ−Ｌ−Ｅ−Ｑ−Ｌ−Ｎ−Ｅ−Ｑ−Ｆ−Ｎ−Ｗ−Ｖ−Ｓ−Ｒ−Ｌ−Ａ−Ｎ−Ｌ−Ｔ−Ｑ−Ｇ−Ｅ−ＮＨ２、配列番号１１２７）である。
【０２０９】
本発明によってはまた、１つ以上のＧまたはＧ＊両親媒性ヘリックスドメインと１つ以上のクラスＡ両親媒性ヘリックスが含まれている「ハイブリッド」ペプチドの使用も意図される。適切なクラスＡ両親媒性ヘリックスペプチドは、ＰＣＴ公開番号ＷＯ０２／１５９２３に記載されている。したがって、例として、１つのこのような「ハイブリッド」ペプチドは、（Ｄ−Ｊ３３６）−Ｐｒｏ−（４Ｆ）（すなわち、Ａｃ−Ｌ−Ｌ−Ｅ−Ｑ−Ｌ−Ｎ−Ｅ−Ｑ−Ｆ−Ｎ−Ｗ−Ｖ−Ｓ−Ｒ−Ｌ−Ａ−Ｎ−Ｌ−Ｔ−Ｑ−Ｇ−Ｅ−Ｐ−Ｄ−Ｗ−Ｆ−Ｋ−Ａ−Ｆ−Ｙ−Ｄ−Ｋ−Ｖ−Ａ−Ｅ−Ｋ−Ｆ−Ｋ−Ｅ−Ａ−Ｆ−ＮＨ２、配列番号１１２８）などである。
【０２１０】
本明細書中で提供される教示を使用することにより、当業者は、本発明の他の適切なａｐｏＪ変異体ならびに／あるいは両親媒性Ｇおよび／またはＡヘリックスペプチドを生じるように、説明された両親媒性ヘリックスペプチドを日常的に行われているように修飾することができる。例えば、日常的に行われている保存的または半保存的置換（例えば、ＥのＤでの置換）を、既存のアミノ酸について行うことができる。得られるペプチドについての様々な置換の効果および脂質親和性は、Ｐａｌｇｕｎａｃｈａｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９６）Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ，＆  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １６：３２８−３３８に記載されているコンピューター方法を使用して推定することができる。ペプチドは、クラスヘリックス構造（単数または複数）が保存される限りは、さらに長くすることも、また、短くすることもできる。加えて、被験体種によって内因的に生産されるペプチド（単数または複数）にさらに類似しているペプチドが得られるようにするための置換を行うことができる。
【０２１１】
一方、好ましい実施形態においては、本発明のペプチドでは、自然界に存在しているアミノ酸または自然界に存在しているアミノ酸のＤ型、自然界には存在しないアミノ酸での置換（例えば、メチオニンスルホキシド、メチオニンメチルスルホニウム、ノルロイシン、ε−アミノカプロン酸、４−アミノブタン酸、テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸、８−アミノカプリル酸、４−アミノ酪酸、Ｌｙｓ（Ｎ（イプシロン）−トリフルオロアセチル）、α−アミノイソ酪酸など）が利用されることもまた意図される。
【０２１２】
新しいペプチドは、コンピューター方法を使用して設計し、そして／または評価することができる。両親媒性ヘリックスドメインを特定しそして分類するためのコンピュータープログラムは当業者に周知であり、多くのプログラムが、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９２）Ｊ．Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．３３：２８７−２９６）に記載されている。このようなプログラムとしては、以下が挙げられるが、これらに限定はされない：ヘリックスホイールプログラム（ＷＨＥＥＬまたはＷＨＥＥＬ／ＳＮＯＲＫＥＬ）、ヘリックスネットプログラム（ＨＥＬＮＥＴ、ＨＥＬＮＥＴ／ＳＮＯＲＫＥＬ、ＨＥＬＮＥＴ／Ａｎｇｌｅ）、ヘリックスホイールを加えるためのプログラム（ＣＯＭＢＯまたはＣＯＭＢＯ／ＳＮＯＲＫＥＬ）、ヘリックスネットを加えるためのプログラム（ＣＯＭＮＥＴ、ＣＯＭＮＥＴ／ＳＮＯＲＫＥＬ、ＣＯＭＢＯ／ＳＥＬＥＣＴ、ＣＯＭＢＯ／ＮＥＴ）、コンセンサスホイールプログラム（ＣＯＮＳＥＮＳＵＳ、ＣＯＮＳＥＮＳＵＳ／ＳＮＯＲＫＥＬ）など。
【０２１３】
Ｆ）ブロック基およびＤ残基
本明細書中に記載されている様々なペプチドおよび／またはアミノ酸の対は保護基を伴わずに示されている場合があるが、特定の実施形態（特に、経口投与について）においては、これらは、１個、２個、３個、４個、またはそれ以上の保護基を有することができる。保護基は、ペプチド（単数または複数）のＣ末端および／またはＮ末端に対して、ならびに／あるいは、ペプチド（単数または複数）が含まれている１つ以上の内部残基に対して結合させることができる（例えば、構成成分であるアミノ酸上の１つ以上のＲ基をブロックすることができる）。したがって、例えば、特定の実施形態においては、本明細書中に記載されるペプチドの任意のものは、例えば、アミノ酸末端を保護するアセチル基、および／またはカルボキシル末端を保護するアミド基を有することができる。このような「二重に保護されたペプチド」の一例は、Ａｃ−Ｌ−Ｌ−Ｅ−Ｑ−Ｌ−Ｎ−Ｅ−Ｑ−Ｆ−Ｎ−Ｗ−Ｖ−Ｓ−Ｒ−Ｌ−Ａ−Ｎ−Ｌ−Ｔ−Ｑ−Ｇ−Ｅ−ＮＨ２（ブロック基を有している配列番号９６１）であり、これらの保護基のいずれかまたは両方を排除することができ、そして／または本明細書中に記載される別の保護基で置き換えることもできる。
【０２１４】
特定の理論には束縛されないが、ブロック（具体的には、本発明の目的のペプチドのアミノ酸末端および／またはカルボキシル末端のブロック）によって、経口送達が大幅に改善され、そして血清半減期が有意に長くなることは、本発明の発見であった。
【０２１５】
幅広い多数の保護基がこの目的に適している。このような基としては、アセチル、アミド、およびアセチルを有しているアルキル基が挙げられるが、これらに限定はされず、そして、Ｎ末端の保護についてはアルキル基が特に好ましく、そしてカルボキシル末端の保護についてはアミド基が好ましい。特定の特に好ましい実施形態においては、保護基としては、脂肪酸、プロペオニル、ホルミルなどの中に存在しているようなアルキル鎖が挙げられるが、これらに限定はされない。特に好ましいカルボキシル保護基としては、アミド、エステル、およびエーテルを形成する保護基が挙げられる。１つの好ましい実施形態においては、アセチル基がアミノ末端を保護するために使用され、そしてアミド基がカルボキシル末端を保護するために使用される。これらのブロック基により、ペプチドのヘリックスを形成する傾向が高められる。特定の特に好ましいブロック基としては、様々な長さのアルキル基（例えば、以下の式を有している基：ＣＨ３−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−、式中、ｎは約１から約２０の範囲であり、好ましくは、約１から約１６もしくは１８、より好ましくは、約３から約１３、そして最も好ましくは、約３から約１０の範囲である）が挙げられる。
【０２１６】
特定の特に好ましい実施形態においては、保護基としては、脂肪酸、プロペオニル、ホルミルなどの中に存在しているようなアルキル鎖が挙げられるが、これらに限定はされない。特に好ましいカルボキシル保護基としては、アミド、エステル、およびエーテルを形成する保護基が挙げられる。１つの好ましい実施形態においては、アセチル基がアミノ末端を保護するために使用され、そしてアミド基がカルボキシル末端を保護するために使用される。これらのブロック基により、ペプチドのヘリックスを形成する傾向が高められる。特定の特に好ましいブロック基としては、様々な長さのアルキル基（例えば、以下の式を有している基：ＣＨ３（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−、式中、ｎは約３から約２０の範囲であり、好ましくは、約３から約１６、より好ましくは、約３から約１３、そして最も好ましくは、約３から約１０の範囲である）が挙げられる。
【０２１７】
他の保護基としては以下が挙げられるが、これらに限定はされない：Ｆｍｏｃ、ｔ−ブトキシカルボニル（ｔ−Ｂｏｃ）、９−フルオレンアセチル基、１−フルオレンカルボン酸基、９−フルオレンカルボン酸基、９−フルオレノン−１−カルボン酸基、ベンジルオキシカルボニル、キサンチル（Ｘａｎ）、トリチル（Ｔｒｔ）、４−メチルトリチル（Ｍｔｔ）、４−メトキシトリチル（Ｍｍｔ）、４−メトキシ−２，３，６−トリメチル−ベンゼンスルホニル（Ｍｔｒ）、メシチレン−２−スルホニル（Ｍｔｓ）、４，４−ジメトキシベンズヒドリル（Ｍｂｈ）、トシル（Ｔｏｓ）、２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニル（Ｐｍｃ）、４−メチルベンジル、（ＭｅＢｚｌ）、４−メトキシベンジル（ＭｅＯＢｚｌ）、ベンジルオキシ（ＢｚｌＯ）、ベンジル（Ｂｚｌ）、ベンゾイル（Ｂｚ）、３−ニトロ−２−ピリジンスルフェニル（Ｎｐｙｓ）、１−（４，４−ジメチル−２，６−ジアキソシクロヘキシリデン）エチル（Ｄｄｅ）、２，６−ジクロロベンジル（２，６−ＤｉＣｌ−Ｂｚｌ）、２−クロロベンジルオキシカルボニル（２−Ｃｌ−Ｚ）、２−ブロモベンジルオキシカルボニル（２−Ｂｒ−Ｚ）、ベンジルオキシメチル（Ｂｏｍ）、シクロヘキシルオキシ（ｃＨｘＯ）、ｔ−ブトキシメチル（Ｂｕｍ）、ｔ−ブトキシ（ｔＢｕＯ）、ｔ−ブチル（ｔＢｕ）、アセチル（Ａｃ）、およびトリフルオロアセチル（ＴＦＡ）。
【０２１８】
保護基／ブロック基は当業者に周知であり、本発明のペプチドが含まれている適切な残基（単数または複数）に対してそのような基を結合させる方法も同様である（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第２版，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．Ｓｏｍｅｒｓｅｔ，Ｎ．Ｊ．を参照のこと）。１つの好ましい実施形態においては、例えば、アセチル化は、ペプチドが樹脂上に存在している場合には、酢酸無水物（ａｃｅｔｉｃ  ａｎｈｙｄｒｉｄｅ）を使用して合成の間に行われる。アミド保護は、合成のための適切な樹脂を選択することによって行うことができる。実施例において本明細書中に記載されるペプチドの合成の間には、ｒｉｎｋアミド樹脂が使用された。合成の完了後、酸性の二官能性アミノ酸（例えば、ＡｓｐおよびＧｌｕ）および塩基性アミノ酸（Ｌｙｓ）、Ｔｙｒのヒドロキシル上の半永久的な保護基は、全て同時に除去される。酸での処理を使用してこのような樹脂から解離させられたペプチドは、アセチルとして保護されたｎ−末端、およびＮＨ２として保護されたカルボキシル末端を有するようになり、そして全ての他の保護基が同時に除去される。
【０２１９】
特定の特に好ましい実施形態においては、ペプチドには、本明細書中に記載される１つ以上のＤ型（ｌｅｖｏではなくｄｅｘｔｒｏ）が含まれる。特定の実施形態においては、少なくとも２つの鏡像異性体アミノ酸、より好ましくは、少なくとも４個の鏡像異性体アミノ酸、そして最も好ましくは、少なくとも８個もしくは１０個の鏡像異性体アミノ酸が「Ｄ」型アミノ酸である。特定の実施形態においては、本明細書中に記載されるペプチドの１つおきの、またはさらには全てのアミノ酸（例えば、全ての鏡像異性体アミノ酸）がＤ型アミノ酸である。
【０２２０】
特定の実施形態においては、鏡像異性体アミノ酸の少なくとも５０％が「Ｄ」型であり、より好ましくは、鏡像異性体アミノ酸の少なくとも８０％が「Ｄ」型であり、そして最も好ましくは、少なくとも９０％またはさらには全ての鏡像異性体アミノ酸が「Ｄ」型アミノ酸である。
【０２２１】
Ｇ）ペプチド模倣物
本明細書中に記載されるペプチドに加えて、ペプチド模倣物もまた意図される。ペプチドアナログは、製薬業界では、鋳型ペプチドの特性と同様の特性を有している非ペプチド薬物として一般的に使用されている。これらのタイプの非ペプチド化合物は、「ペプチド模倣物（ｐｅｐｔｉｄｅ  ｍｉｍｅｔｉｃｓ）」または「ペプチド模倣物（ｐｅｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ）」と呼ばれており（Ｆａｕｃｈｅｒｅ（１９８６）Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓ．１５：２９；Ｖｅｂｅｒ  ａｎｄ  Ｆｒｅｉｄｉｎｇｅｒ（１９８５）ＴＩＮＳ、ｐ．３９２；およびＥｖａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８７）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３０：１２２９）、そして、通常は、コンピューターによる分子モデリングの補助によって開発される。治療上有用であるペプチドと構造的に類似しているペプチド模倣物は、同等の治療効果または予防効果を生じるように使用することができる。
【０２２２】
一般的には、ペプチド模倣物は、実例のポリペプチド（例えば、表１に示される配列番号５）と構造的に類似しているが、当該分野で公知であり、そして以下の参考文献にさらに記載されている方法によって、−ＣＨ２ＮＨ−、−ＣＨ２Ｓ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−（シスおよびトランス）、−ＣＯＣＨ２−、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＳＯ−などからなる群より選択される結合によって状況に応じて置き換えられる１つ以上のペプチド結合を有している：Ｓｐａｔｏｌａ（１９８３）ｐ．２６７、Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ，Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｂ．Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ，編．，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，；Ｓｐａｔｏｌａ（１９８３）Ｖｅｇａ  Ｄａｔａ  １（３）Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｂａｃｋｂｏｎｅ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ．（一般論）；Ｍｏｒｌｅｙ（１９８０）Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ  ｐｐ．４６３−４６８（一般論）；Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９７９）Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｅｐｔ  Ｐｒｏｔ  Ｒｅｓ  １４：１７７−１８５（−ＣＨ２ＮＨ−、ＣＨ２ＣＨ２−）；Ｓｐａｔｏｌａ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８６）Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ  ３８：１２４３−１２４９（−ＣＨ２−Ｓ）；Ｈａｎｎ，（１９８２）Ｊ  Ｃｈｅｍ  Ｓｏｃ  Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ  Ｉ  ３０７−３１４（−ＣＨ−ＣＨ−，シスおよびトランス）；Ａｌｍｑｕｉｓｔ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８０）Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．２３：１３９２−１３９８（−ＣＯＣＨ２−）；Ｊｅｎｎｉｎｇｓ−Ｗｈｉｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８２）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．２３：２５３３（−ＣＯＣＨ２−）；Ｓｚｅｌｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，欧州特許出願番号ＥＰ  ４５６６５（１９８２）ＣＡ：９７：３９４０５（１９８２）（−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−）；Ｈｏｌｌａｄａｙ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８３）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ  ２４：４４０１−４４０４（−Ｃ（ＯＨ）ＣＨ２−）；ならびに、Ｈｒｕｂｙ（１９８２）Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．，３１：１８９−１９９（−ＣＨ２−Ｓ−））。
【０２２３】
１つの特に好ましい非ペプチド結合は−ＣＨ２ＮＨ−である。このようなペプチド模倣物は、ポリペプチドの実施形態を上回る有意な利点を有している場合があり、これには例えば、より経済的な生産、より大きな化学的安定性、高い薬学的特性（半減期、吸収、有効性、効力など）、低い抗原性などが含まれる。
【０２２４】
加えて、コンセンサス配列または実質的に同じコンセンサス配列のバリエーションが含まれている本明細書中に記載されるペプチドの環状に順序を変えられた形態（ｃｉｒｃｕｌａｒｌｙ  ｐｅｒｍｕｔａｔｉｏｎｓ）、または拘束されたペプチド（環化されたペプチドが含まれる）を、当該分野で公知の方法によって（Ｒｉｚｏ  ａｎｄ  Ｇｉｅｒａｓｃｈ（１９９２）Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．６１：３８７）；例えば、ペプチドを環化させる分子内ジスルフィド架橋を形成することができる内部システイン残基を付加することによって、作成することができる。
【０２２５】
Ｈ）小さい有機分子
特定の実施形態においては、本発明の活性薬剤には、小さい有機分子（例えば、２００４年８月１１日に提出された同時係属中の出願ＵＳＳＮ６０／６００，９２５に記載されているもの）が含まれる。様々な実施形態においては、小さい有機分子は、２００３年８月２６日に提出された同時係属中の出願ＵＳＳＮ１０／６４９，３７８、および８月１１日に提出されたＵＳＳＮ６０／４９４，４４９に記載されているテトラペプチドおよびペンタペプチドに類似しており、そして特定の場合には、テトラペプチドおよびペンタペプチドの模倣物である。
【０２２６】
本発明の小さい有機分子は、通常、約９００ダルトン未満の分子量を有している。通常、分子は、酢酸エチルの中での溶解度が高く（例えば、４ｍｇ／ｍＬまたはそれより高い濃度で溶解する）、そしてｐＨ７．０の水性緩衝液中でも可溶性である。
【０２２７】
１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＭＰＣ）のようなリン脂質を、水性の環境下で本発明の小さい有機分子と接触させることによっては、通常は、およそ７．５ｎｍ（±０．１ｎｍ）の直径を有している粒子の形成が生じる。加えて、多くの場合には、およそ２ｎｍの重なりの二重層の間に空間を有している３．４から４．１ｎｍ程度の二重層の大きさを有している重なった二重層が形成される。およそ３８ｎｍの多孔質構造もまた、多くの場合に、形成される。さらに、本発明の分子が哺乳動物に投与されると、これらは、ＨＤＬをより抗炎症性にし、そして、アテローム性動脈硬化症および／または炎症反応を特徴とする他の症状の１つ以上の兆候を緩和する。
【０２２８】
したがって、特定の実施形態においては、小さい有機分子は、哺乳動物の炎症反応を特長とする病状（例えば、アテローム性動脈硬化症）の１つ以上の兆候を緩和するものである。この場合、小さい分子は、４ｍｇ／ｍＬより高い濃度で酢酸エチルの中に溶解し、ｐＨ７．０の水性緩衝液中に可溶性であり、そして水性環境下でリン脂質と接触させられると、およそ７．５ｎｍの直径を有している粒子を形成し、そして、およそ２ｎｍの重なりの二重層の間に空間を有している３．４から４．１ｎｍ程度の二重層の大きさを有している重なった二重層を形成し、そして、９００Ｄａ未満の分子量を有している。
【０２２９】
特定の実施形態においては、分子は以下の式を有する：
【０２３０】
【化４】
2008539235.tif 000067
式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、およびＰ４は別々に選択された疎水性保護基である；Ｒ１およびＲ４は、アミノ酸Ｒ基から別々に選択される；ｎ、ｉ、ｘ、ｙ、およびｚは独立して０または１であり、その結果、ｎとｘがいずれも０である場合にはＲ１は疎水性基であり、そしてｙとｉがいずれも０である場合には、Ｒ４は疎水性基であり；Ｒ２とＲ３がｐＨ７．０で酸性基または塩基性基である場合には、Ｒ２が酸性であればＲ３は塩基性であり、Ｒ２が塩基性であればＲ３は酸性であり；そしてＲ５は、存在する場合には、芳香族基、脂肪族基、正電荷を有している基、または負電荷を有している基からなる群より選択される。特定の実施形態においては、Ｒ２またはＲ３は、−（ＣＨ２）ｊ−ＣＯＯＨ（式中、ｊ＝１、２、３、または４）および／または−（ＣＨ２）ｊ−ＮＨ２（式中、ｊ＝１、２、３、４、または５）、または、（ＣＨ２）ｊ−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（式中、ｎ＝１、２、３、または４）である。特定の実施形態においては、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ５は、存在する場合は、アミノ酸Ｒ基である。したがって、例えば、様々な実施形態においては、Ｒ２およびＲ３は別々に、アスパラギン酸Ｒ基、グルタミン酸Ｒ基、リジンＲ基、ヒスチジンＲ基、またはアルギニンＲ基（例えば、表１に説明されるもの）である。
【０２３１】
特定の実施形態においては、Ｒ１は、ＬｙｓＲ基、ＴｒｐＲ基、ＰｈｅＲ基、ＬｅｕＲ基、ＯｒｎＲ基、またはｎｏｒＬｅｕＲ基からなる群より選択される。特定の実施形態においては、Ｒ４は、ＳｅｒＲ基、、ＴｈｒＲ基、ＩｌｅＲ基、ＬｅｕＲ基、ｎｏｒＬｅｕＲ基、ＰｈｅＲ基、またはＴｙｒＲ基からなる群より選択される。
【０２３２】
様々な実施形態においては、ｘは１であり、そしてＲ５は芳香族基（例えば、ＴｒｐＲ基）である。
【０２３３】
様々な実施形態においては、ｎ、ｘ、ｙ、およびｉの少なくともが１であり、そしてＰ１、Ｐ２、Ｐ３、およびＰ４は、存在する場合は、以下からなる群より別々に選択される：ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アセチル、アミド、３個から２０個の炭素のアルキル基、ｆｍｏｃ、９−フルオレンアセチル基、１−フルオレンカルボン酸基、９−フルオレンカルボン酸基、９−フルオレノン−１−カルボン酸基、ベンジルオキシカルボニル、キサンチル（Ｘａｎ）、トリチル（Ｔｒｔ）、４−メチルトリチル（Ｍｔｔ）、４−メトキシトリチル（Ｍｍｔ）、４−メトキシ−２，３，６−トリメチル−ベンゼンスルホニル（Ｍｔｒ）、メシチレン−２−スルホニル（Ｍｔｓ）、４，４−ジメトキシベンズヒドリル（Ｍｂｈ）、トシル（Ｔｏｓ）、２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニル（Ｐｍｃ）、４−メチルベンジル、（ＭｅＢｚｌ）、４−メトキシベンジル（ＭｅＯＢｚｌ）、ベンジルオキシ（ＢｚｌＯ）、ベンジル（Ｂｚｌ）、ベンゾイル（Ｂｚ）、３−ニトロ−２−ピリジンスルフェニル（Ｎｐｙｓ）、１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキシリデン）エチル（Ｄｄｅ）、２，６−ジクロロベンジル（２，６−ＤｉＣｌ−Ｂｚｌ）、２−クロロベンジルオキシカルボニル（２−Ｃｌ−Ｚ）、２−ブロモベンジルオキシカルボニル（２−Ｂｒ−Ｚ）、ベンジルオキシメチル（Ｂｏｍ）、ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、シクロヘキシルオキシ（ｃＨｘＯ）、ｔ−ブトキシメチル（Ｂｕｍ）、ｔ−ブトキシ（ｔＢｕＯ）、ｔ−ブチル（ｔＢｕ）、プロピル基、ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、およびトリフルオロアセチル（ＴＦＡ）。特定の実施形態においては、Ｐ１は、存在する場合には、および／またはＰ２は、存在する場合には、Ｂｏｃ−、Ｆｍｏｃ−、およびニコチニル−からなる群より別々に選択され、そしてあるいは、Ｐ３は、存在する場合には、および／またはＰ４は、存在する場合には、ｔＢｕおよびＯｔＢｕからなる群より別々に選択される。
【０２３４】
多数の保護基（Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４）が上記で説明されているが、これは例示として意図され、限定とは意図されない。本明細書中に提供される教示を参照して、多数の他の保護基／ブロック基もまた当業者に公知であろう。このようなブロック基は、消化を最少にし（例えば、経口による薬剤の送達について）、そして／または、取り込み／生体利用性を増大させる（例えば、鼻腔送達、吸入治療、直腸投与における粘膜表面から）、そして／または、血清／血漿半減期を増大させるように選択することができる。特定の実施形態においては、保護基は、賦形剤として、または賦形剤の成分として提供することができる。
【０２３５】
特定の実施形態においては、ｚは０であり、そして分子は以下の式を有する：
【０２３６】
【化５】
2008539235.tif 000068
式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、ｎ、ｘ、ｙ、およびｉは上記のとおりである。
【０２３７】
特定の実施形態においては、ｚは０であり、そして分子は以下の式を有する：
【０２３８】
【化６】
2008539235.tif 000069
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は上記のとおりである。
【０２３９】
１つの実施形態においては、分子は以下の式を有する：
【０２４０】
【化７】
2008539235.tif 000070
特定の実施形態においては、本発明では、本明細書中に記載されている物理的特性および／または機能的特性の１つ以上を有しており、そして以下の式を有している小さい分子が意図される：
【０２４１】
【化８】
2008539235.tif 000071
式中、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、およびＰ４は別々に、上記に記載されたような選択された疎水性保護基であり、ｎ、ｘ、およびｙは別々に、０または１であり；ｊ、ｋ、およびｌは別々に０、１、２、３、４、または５であり；そしてＲ２およびＲ３は、ｐＨ７．０で酸性または塩基性の基であり、その結果、Ｒ２が酸性である場合はＲ３は塩基性であり、そしてＲ２が塩基性である場合はＲ３は酸性である。特定の好ましい実施形態においては、小さい分子は水に可溶性であり；そして小さい分子は約９００ダルトン未満の分子量を有している。特定の実施形態においては、ｎ、ｘ、ｙ、ｊ、およびｌは１であり；そしてｋは４である。
【０２４２】
特定の実施形態においては、Ｐ１および／またはＰ２は芳香族保護基である。特定の実施形態においては、Ｒ２およびＲ３はアミノ酸Ｒ基（例えば、上記に記載されるもの）である。様々な実施形態においては、ｎ、ｘ、およびｙの少なくとも１つが１であり、そしてＰ１、Ｐ２、Ｐ３、およびＰ４は、存在する場合は、独立した保護基（例えば、上記に記載されるもの）である。特定の実施形態においては、保護基は、存在する場合は、以下からなる群より別々に選択される：ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アセチル、アミド、３個から２０個の炭素のアルキル基、Ｆｍｏｃ、９−フルオレンアセチル基、１−フルオレンカルボン酸基、９−フルオレンカルボン酸基、９−フルオレノン−１−カルボン酸基、ベンジルオキシカルボニル、キサンチル（Ｘａｎ）、トリチル（Ｔｒｔ）、４−メチルトリチル（Ｍｔｔ）、４−メトキシトリチル（Ｍｍｔ）、４−メトキシ−２，３，６−トリメチル−ベンゼンスルホニル（Ｍｔｒ）、メシチレン−２−スルホニル（Ｍｔｓ）、４，４−ジメトキシベンズヒドリル（Ｍｂｈ）、トシル（Ｔｏｓ）、２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニル（Ｐｍｃ）、４−メチルベンジル、（ＭｅＢｚｌ）、４−メトキシベンジル（ＭｅＯＢｚｌ）、ベンジルオキシ（ＢｚｌＯ）、ベンジル（Ｂｚｌ）、ベンゾイル（Ｂｚ）、３−ニトロ−２−ピリジンスルフェニル（Ｎｐｙｓ）、１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキシリデン）エチル（Ｄｄｅ）、２，６−ジクロロベンジル（２，６−ＤｉＣｌ−Ｂｚｌ）、２−クロロベンジルオキシカルボニル（２−Ｃｌ−Ｚ）、２−ブロモベンジルオキシカルボニル（２−Ｂｒ−Ｚ）、ベンジルオキシメチル（Ｂｏｍ）、ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、シクロヘキシルオキシ（ｃＨｘＯ）、ｔ−ブトキシメチル（Ｂｕｍ）、ｔ−ブトキシ（ｔＢｕＯ）、ｔ−ブチル（ｔＢｕ）、プロピル基、ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、およびトリフルオロアセチル（ＴＦＡ）。特定の実施形態においては、Ｐ１は、存在する場合には、および／またはＰ２は、存在する場合には、Ｂｏｃ−、Ｆｍｏｃ−、およびニコチニルからなる群より別々に選択され、そしてあるいは、Ｐ３は、存在する場合には、および／またはＰ４は、存在する場合には、ｔＢｕおよびＯｔＢｕからなる群より別々に選択される。
【０２４３】
ＩＩＩ．活性薬剤の機能のアッセイ
本発明の方法において使用される特定の活性薬剤は、様々な式（例えば、上記の式Ｉ）によって、および／または特定の配列によって本明細書中で記載される。特定の実施形態においては、本発明の好ましい活性薬剤は、以下の機能的特性の１つ以上を特徴とする：
１．これらは、プロ炎症性ＨＤＬを抗炎症性ＨＤＬに変換させるか、または、抗炎症性ＨＤＬをさらに抗炎症性にする；
２．これらは、ＬＤＬによって誘導される、動脈細胞壁によって生じる単球の化学走化活性を低下させる；
３．これらは、プレ−βＨＤＬの形成および循環を刺激する；
４．これらは、ＨＤＬコレステロールを惹起する；ならびに／あるいは
５．これらは、ＨＤＬパラオキソナーゼ活性を増大させる。
【０２４４】
本明細書中に開示される特異的な物質、および／または本明細書中に記載される様々な式に対応する物質は、所望されるこれらの活性の１つ以上について容易に試験することができる。
【０２４５】
これらの機能的特性のそれぞれについてのスクリーニング方法は、当業者に周知である。具体的には、単球の化学走化活性、ＨＤＬコレステロール、およびＨＤＬ  ＨＤＬパラオキソナーゼ活性についてのアッセイがＰＣＴ／ＵＳ０１／２６４９７（ＷＯ２００２／１５９２３）において説明されていることに留意されたい。
【０２４６】
ＩＶ．ペプチドの調製
本発明で使用されるペプチドは、標準的な化学的ペプチド合成技術を使用して化学的に合成することができるか、または、特に、ペプチドに「Ｄ」アミノ酸残基が含まれない場合には、組み換えによって発現させることができる。特定の実施形態においては、「Ｄ」アミノ酸残基が含まれているペプチドもなお、組み換えによって発現させられる。ポリペプチドが組み換えによって発現される場合には、宿主生物（例えば、細菌、植物、真菌細胞など）は、アミノ酸の１つ以上がＤ型だけで生物体に提供される環境で培養される。したがって、そのようなシステムにおいて組み換えによって発現されたペプチドには、Ｄアミノ酸が組み込まれる。
【０２４７】
好ましい実施態様においては、ペプチドは、当業者に公知の多数の液相または固相ペプチド合成技術の任意のものによって化学的に合成される。配列のＣ末端アミノ酸が不溶性の支持体に結合させられ、その後、配列の中の残りのアミノ酸が連続して付加される固相合成が、本発明のポリペプチドの化学合成の好ましい方法である。固相合成のための技術は当業者に周知であり、例えば、Ｂａｒａｎｙ  ａｎｄ  Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ（１９６３）Ｓｏｌｉｄ−Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ；ｐｐ．３−２８４、Ｔｈｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ：Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｂｉｏｌｏｇｙ．Ｖｏｌ．２：Ｓｐｅｃｉａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｐａｒｔ  Ａ．；Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，（１９６３）Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，８５：２１４９−２１５６、およびＳｔｅｗａｒｔ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８４）Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，２ｎｄ  ｅｄ．Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍ．Ｃｏ．，Ｒｏｃｋｆｏｌｄ，ＩＩＩに記載されている。
【０２４８】
特定の実施形態においては、ペプチドは、ベンズヒドリルアミン樹脂（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｂｉｏｐｒｏｄｕｃｔｓ，０．５９ｍｍｏｌのＮＨ２／樹脂１ｇ）を固体支持体として使用して、固相ペプチド合成手順によって合成される。ＣＯＯＨ末端アミノ酸（例えば、ｔ−ブチルカルボニル−Ｐｈｅ）は、４−（オキシメチル）フェンアセチル基を介して固体支持体に結合させられる。これは、従来のベンジルエステル結合よりも安定な結合であるが、なおも最終的なペプチドは水素化によって切断することができる。水素のドナーとしてギ酸を使用する移動水素化がこの目的のために使用される。ペプチド合成および合成されたペプチドの分析のために使用される詳細なプロトコールは、Ａｎａｎｔｈａｒａｍａｉａｈ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８５）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６０（１６）：１０２４８−１０２５５に付随するミニプリントの補足（ｍｉｎｉｐｒｉｎｔ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）に記載されている。
【０２４９】
ペプチド（具体的には、Ｄアミノ酸が含まれているペプチド）の化学合成においては、合成によっては、通常、所望される全長の産物に加えて、多数の短縮型が生じることに留意されたい。精製プロセス（例えば、ＨＰＬＣ）によっては、通常、全長の産物の有意な量の消失が生じる。
【０２５０】
Ｄペプチド（例えば、Ｄ−４）の合成においては、最も長い形態を精製することにおける消失を防ぐために、当業者は透析を行うことができ、そして混合物を使用することができ、それによって最後のＨＬＰＣによる精製を省略することができることが、本発明の発見であった。このような混合物は、高度に精製された産物の有効性の約５０％（例えば、タンパク質産物の重量あたり）が失われるが、混合物には、約６倍多くのペプチドが含まれ、したがって、全体の活性はより大きい。
【０２５１】
Ｖ．薬学的処方物およびデバイス
Ａ）薬学的処方物
本発明の方法を実行するためには、本発明の１つ以上の活性薬剤が、例えば、アテローム性動脈硬化症の１つ以上の兆候を有している、または、アテローム性動脈硬化症もしくは本明細書中に記載される様々な他の病状のリスクがあると診断された個体に、投与される。活性薬剤（単数または複数）は、「自然界に存在している」形態で投与することができ、また、所望される場合には、塩、エステル、アミド、プロドラッグ、または誘導体が、薬理学的に適している、すなわち、本発明において有効であるという条件で、塩、エステル、アミド、プロドラッグ、誘導体などの形態で投与することができる。活性薬剤の塩、エステル、アミド、プロドラッグ、および他の誘導体は、有機合成化学の当業者に公知であり、例えば、Ｍａｒｃｈ（１９９２）Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ；Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，第４版．Ｎ．Ｙ．Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ編に記載されている標準的な手順を使用して調製することができる。
【０２５２】
例えば、酸付加塩は、従来法を使用して、遊離の塩基から調製される。これには、通常は適切な酸との反応が含まれる。一般的には、薬物の塩基形態が極性有機溶媒（例えば、メタノールまたはエタノール）に溶解させられ、そしてそれに対して酸が添加される。得られる塩は、極性が低い溶媒の添加によって沈殿するか、または溶液となることができるかのいずれかである。酸付加塩を調製するための適切な酸としては、有機酸（例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸など）、ならびに無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸など）の両方が挙げられる。酸付加塩は、適切な塩基での処理によって、遊離の塩基に再度変換することができる。本明細書中の活性薬剤の特に好ましい酸付加塩は、ハロゲン化物塩であり、例えば、塩酸または臭化水素酸を使用して調製することができるものである。逆に、本発明の活性薬剤の塩基性塩の調製物は、薬学的に許容される塩基（例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カルシウム、トリメチルアミンなど）を使用して同様の様式で調製される。特に好ましい塩基性塩としては、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム塩、および銅塩）が挙げられる。
【０２５３】
エステルの調製には、通常、薬物の分子構造の中に存在し得るヒドロキシル基および／またはカルボキシル基の機能化が含まれる。エステルは、通常、遊離のアルコール基（すなわち、式ＲＣＯＯＨのカルボン酸に由来する部分（式中、Ｒはアルキルであり、好ましくは、低級アルキルである））のアシル置換誘導体である。エステルは、所望される場合には、従来の水素化分解または加水分解手順を使用することにより、遊離の酸に再度変換させることができる。
【０２５４】
アミドおよびプロドラッグもまた、当業者に公知である技術、または適切な文献に記載されている技術を使用して調製することができる。例えば、アミドは、エステルから、適切なアミド反応物質を使用して調製することができ、またこれらは、アンモニアまたは低級アルキルアミンとの反応によって、無水物または酸塩化物から調製することもできる。プロドラッグは、通常、個体の新陳代謝システムによって修飾されるまで治療的に有効である化合物を生じる部分の共有結合によって調製される。
【０２５５】
本明細書中で同定された活性薬剤は、本明細書中に記載される病状／適応症（例えば、アテローム性動脈硬化症および／またはその兆候）の１つ以上の予防的および／または治療的処置のための、全身、局所、経口、鼻腔（または、別の方法では吸入）、直腸、もしくは局所投与（例えば、エアゾールまたは経皮的方法による）に有用である。薬学的組成物は、投与方法に応じてさまざまな単位投与量形態で投与することができる。適切な単位投与量形態としては、散剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、トローチ剤、坐剤、パッチ、鼻腔スプレー、注入物質、埋め込むことができる徐放処方物、脂質複合体などが挙げられるが、これらに限定はされない。
【０２５６】
本発明の活性薬剤は、通常、薬学的組成物を形成するように薬学的に許容される担体（賦形剤）と混合される。薬学的に許容される担体には、例えば、組成物を安定化させるように、あるいは、活性薬剤（単数または複数）の吸収を増大させるかまたは減少させるように作用する、１つ以上の生理学的に許容される化合物（単数または複数）が含まれ得る。生理学的に許容される化合物としては、例えば、炭水化物（例えば、グルコース、スクロース、またはデキストラン）、抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸またはグルタチオン）、キレート化剤、低分子量タンパク質、保護物、およびそのような脂質の取り込みのエンハンサー、活性薬剤のクリアランスまたは加水分解を減少させる組成物、あるいは、賦形剤または他の安定化剤および／または緩衝液を挙げることができる。
【０２５７】
他の生理学的に許容される化合物としては、湿潤剤、乳化剤、分散剤、または保存剤（特に、微生物の増殖または作用を防ぐために有用である）が挙げられる。様々な保存剤が周知であり、これには例えば、フェノールおよびアスコルビン酸が含まれる。当業者は薬学的に、許容される担体（単数または複数）（生理学的に許容される化合物が含まれる）の選択が、例えば、活性薬剤（単数または複数）の投与経路、および活性薬剤（単数または複数）の特定の生理化学的特性に応じて様々であることを理解するであろう。
【０２５８】
賦形剤は、好ましくは、滅菌であり、通常は、望ましくない物質は含まれない。これらの組成物は、従来の周知の滅菌技術によって滅菌することができる。
【０２５９】
治療適用においては、本発明の組成物は、本明細書中に記載される１つ以上の病状の１つ以上の兆候に罹患しているか、あるいは、本明細書中に記載される病状の１つ以上についてリスクがある患者に、疾患および／またはその合併症を予防するおよび／または治癒させるおよび／または少なくとも一部防ぐかもしくは停止させるために十分な量で投与される。これを行うために適している量は、「治療有効用量」として定義される。この使用に有効な量は、疾患の重篤度、および患者の全体的な健康状態に応じて様々であろう。組成物の単回投与または複数回投与が、患者によって必要とされ、そして寛容化される投与量および頻度に応じて投与され得る。任意の事象においては、組成物により、患者を有効に処置する（１つ以上の兆候を緩和する）ための本発明の処方物の活性薬剤の十分な量が提供されるはずである。
【０２６０】
活性薬剤（単数または複数）の濃度は大きく変わる場合があり、そして、選択される特定の投与形式と患者の必要性にしたがって、液体の容量、粘度、体重などに主に基づいて選択されるであろう。しかし、濃度は、通常、約０．１または１ｍｇ／ｋｇ／日から約５０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲、および場合によってはそれよりも多い投与量を提供するように選択されるであろう。典型的な投与量は、約３ｍｇ／ｋｇ／日から約３．５ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは、約３．５ｍｇ／ｋｇ／日から約７．２ｍｇ／ｋｇ／日、より好ましくは、約７．２ｍｇ／ｋｇ／日から約１１．０ｍｇ／ｋｇ／日、そして最も好ましくは、約１１．０ｍｇ／ｋｇ／日から約１５．０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。特定の好ましい実施形態においては、投与量は、約１０ｍｇ／ｋｇ／日から約５０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。特定の実施形態においては、投与量は、約２０ｍｇから約５０ｍｇの範囲で、１日に２回、経口で投与される。このような投与量は、特定の被験体または被験体のグループにおいて治療レジュメを最適化するために変化させることができることが理解されるであろう。
【０２６１】
特定の好ましい実施形態においては、本発明の活性薬剤は経口投与（例えば、錠剤によって）、または当業者に周知の標準的な方法に従う注入物質として投与される。他の好ましい実施形態においては、ペプチドはまた、従来の経皮薬物送達システムを使用して、すなわち、経皮「パッチ」を使用して皮膚から送達される場合もある。この場合は、活性薬剤（単数または複数）は、通常、皮膚に固定される薬物送達デバイスとなる積層構造の中に含められる。このような構造においては、薬物組成物は、通常、層の中に含まれるか、上部の裏層の基部にある「レザーバー」の中に含められる。用語「レザーバー」は、この状況では、最終的には皮膚の表面への送達に利用することができる「活性薬剤（単数または複数）」の量を意味することが理解されるであろう。したがって、例えば、「レザーバー」には、パッチの裏層の粘着剤の中に、または、当業者に公知の多種多様なマトリックス処方物の任意のものの中に活性薬剤が含まれる場合がある。パッチには、１つのレザーバーが含まれる場合も、またこれには複数のレザーバーが含まれる場合もある。
【０２６２】
１つの実施形態においては、レザーバーには、薬物送達の際に皮膚のシステムに張り付けられる薬学的に許容される接着性の材料のポリマーマトリックスが含まれる。適切な皮膚用の接着性の材料の例としては、ポリエチレン、ポリシロキサン、ポリイソブチレン、ポリアクリレート、ポリウレタンなどが挙げられるが、これらに限定はされない。あるいは、薬物が含まれているレザーバーと皮膚用接着剤は、別の異なる層として存在し、レザーバーの下に接着剤が存在する。この場合は、レザーバーは、上記に記載されたようなポリマーマトリックスであり得るか、またはこれは、液体もしくはヒドロゲルレザーバーであり得るのいずれかであるか、あるいはいくつかの他の形態を取る場合もある。これらの積層の中の裏層は、デバイスの上部表面となり、好ましくは、「パッチ」の第１の構造エレメントとして機能し、そして十分なその柔軟性を有しているデバイスが提供される。裏層に選択される材料は、好ましくは、活性薬剤（単数または複数）および存在するあらゆる他の物質を実質的には透過させない。
【０２６３】
局所薬物送達のための他の好ましい処方物としては、軟膏およびクリーム剤が挙げられるが、これらに限定はされない。軟膏は、通常はワセリンまたは他のワセリン誘導体をベースとする半固体の調製物である。選択された活性薬剤が含まれているクリーム剤は、通常は、粘性のある液体または半固体のエマルジョンであり、多くの場合は、油中水または水中油のいずれかである。クリーム基剤は、通常は水洗性であり、これには、油相、乳化剤、および水相が含まれる。油相は、「内部」層と呼ばれる場合もあり、これには一般的にはワセリンと脂肪アルコール（例えば、セチルアルコールまたはステアリルアルコール）からなる；水相は、通常、（必ずしもそうではないが）、油相よりも大きい容量であり、一般的には、保湿剤が含まれている。クリーム処方物の中の乳化剤は、一般的には、非イオン性、陰イオン性、陽イオン性、または両親媒性の界面活性剤である。使用される特異的な軟膏またはクリーム基剤は、当業者に明らかであるように、最適な薬物送達を提供することができるものである。他の担体または媒体を用いる場合と同様に、軟膏基剤は不活性であり、安定であり、刺激性がなく、そして非感作性でなければならない。
【０２６４】
典型的なペプチド処方物とは異なり、Ｄ型アミノ酸が含まれている本発明のペプチドは、胃酸などによるタンパク質分解に対して保護されることなく、経口でも投与することができる。それにもかかわらず、特定の実施形態においては、ペプチドの送達は、保護用の賦形剤の使用によって高めることができる。これは通常、ポリペプチドを酸加水分解および酵素による加水分解に対して耐性にする組成物とポリペプチドを複合体化させることによって、あるいは、ポリペプチドをリポソームのような適切な耐性の担体の中にパッケージすることによってのいずれかで、行われる。経口送達のためのポリペプチドを保護する手段は当該分野で周知である（例えば、治療薬の経口送達のための脂質組成物が記載されている米国特許第５，３９１，３７７号を参照のこと）。
【０２６５】
長い血清半減期は、徐放タンパク質「パッケージング」システムの使用によって維持することができる。このような徐放システムは当業者に周知である。１つの好ましい実施形態においては、タンパク質およびペプチド（Ｔｒａｃｙ（１９９８）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｐｒｏｇ．，１４：１０８；Ｊｏｈｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９６）Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．２：７９５；Ｈｅｒｂｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９８），Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ．Ｒｅｓ．１５，３５７）、乾燥粉末についてのＰｒｏＬｅａｓｅ生体分解性マイクロスフェア送達システムは、他の薬剤と共にまたは他の薬剤を伴わずに乾燥処方物として調合することができるポリマーマトリックスの中に活性薬剤が含まれている生体分解性ポリマーマイクロスフェアから構成される。
【０２６６】
ＰｒｏＬｅａｓｅマイクロスフェアの製造プロセスは、特に、活性薬剤の完全性を維持しつつ、高いカプセル化効率を得るように設計された。このプロセスは、（ｉ）安定化賦形剤とともに薬物の溶液を噴霧凍結乾燥させることによる、バルクからの凍結乾燥させられた薬物粒子の調製、（ｉｉ）薬物−ポリマー懸濁液の調製と、その後の薬物粒子の大きさを小さくするための超音波処理またはホモジナイゼーション、（ｉｉｉ）液体窒素への霧化による凍結させられた薬物−ポリマーマイクロスフェアの生産、（ｉｖ）エタノールでのポリマー溶媒の抽出、ならびに（ｖ）最終的な乾燥−粉末産物を生じさせるための濾過および減圧乾燥から構成される。得られる粉末には、固体形態の活性薬剤が含まれており、これは、多孔性ポリマー粒子の中に均質に、そして厳しく分散させられる。このプロセスにおいて最も一般的に使用されるポリマーである、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧ）は、生体適合性であり、かつ生体分解性である。
【０２６７】
カプセル化は、低温（例えば、−４０℃）で行うことができる。カプセル化の間は、タンパク質は、水が存在しない場合には固相で維持され、したがって、タンパク質の水によって誘導される立体構造の流動性が最少となり、反応物質として水が含まれるタンパク質分解反応が妨げられ、そしてタンパク質が変性を受ける可能性がある有機物−水界面が回避される。好ましいプロセスでは、ほとんどのタンパク質がその中で不溶性である溶媒が使用され、それにより高いカプセル化効率（例えば、９５％を超える）が得られる。
【０２６８】
別の実施形態においては、溶液の１つ以上の成分が、例えば、稀釈に備えられた保存容器の中（例えば、予め測定された容量の中）、または一定の容量の水の添加に備えられた可溶性カプセルの中に、「濃縮物」として提供され得る。
【０２６９】
上記の処方物および投与方法は、説明と意図され、限定とは意図されない。本明細書中で提供される教示を使用して、他の適切な処方物および投与形態を容易に考案できることは、明らかであろう。
【０２７０】
Ｂ）脂質をベースとする処方物
特定の実施形態においては、本発明の活性薬剤は、１つ以上の脂質と一緒に投与される。脂質は、活性薬剤を保護するおよび／またはその輸送／取り込みを促進する賦形剤として処方することができ、また、これらは別々に投与することもできる。
【０２７１】
特定の理論には束縛されないが、特定のリン脂質の投与（例えば、経口投与）によってＨＤＬ／ＬＤＬ比が有意に大きくなり得ることが、本発明の発見であった。加えて、特定の中程度の長さのリン脂質は、一般的な脂質の輸送に関係しているものとは異なるプロセスによって輸送されると考えられる。したがって、特定の中程度の長さのリン脂質の、本発明の活性薬剤との同時投与によって多数の利点がもたらされる：これらによって、活性薬剤が消化または加水分解から保護される、これらによって取り込みが改善される、そしてこれらによってＨＤＬ／ＬＤＬ比が改善される。
【０２７２】
脂質は、本発明の活性薬剤をカプセル化するリポソームの中に処方することができ、および／またはこれらは、活性薬剤と複合体化させる／同時投与することができる、および／またはこれらを活性薬剤に共有結合させることができる。リポソームおよびカプセル化試薬を作成する方法は当業者に周知である（例えば、Ｍａｒｔｉｎ  ａｎｄ  Ｐａｐａｈａｄｊｏｐｏｕｌｏｓ（１９８２）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２５７：２８６−２８８；Ｐａｐａｈａｄｊｏｐｏｕｌｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８８：１１４６０−１１４６４；Ｈｕａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９２）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，５２：６７７４−６７８１；Ｌａｓｉｃ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９２）ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．，３１２：２５５−２５８．，などを参照のこと）。
【０２７３】
これらの方法で使用される好ましいリン脂質は、ｓｎ−１およびｓｎ−２の位置に約４個の炭素から約２４個の炭素の範囲の脂肪酸を有している。特定の好ましい実施形態においては、脂肪酸は飽和脂肪酸である。他の好ましい実施形態においては、脂肪酸は不飽和脂肪酸である。様々な好ましい脂肪酸が表１９に説明される。
【０２７４】
【表１９】
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これらの位置にある脂肪酸は同じであっても、また異なっていてもよい。特に好ましいリン脂質は、ｓｎ−３位置にホスホリルコリンを有している。
【０２７５】
Ｃ）特異的な送達／デバイス
１．薬物溶出（ｄｒｕｇ−ｅｌｕｔｉｎｇ）ステント
再狭窄は、以前に狭窄し、その後に拡張させられた末梢または冠状血管の再度の閉鎖であり、有意な割合（例えば、これらの処置については２０〜５０％）で起こり、そして、多数の臨床的および形態学的な変量に依存する。再狭窄は、血管形成術のすぐ後に始まる場合があるが、通常は、およそ６ヶ月の終わりには止まる。
【０２７６】
最近の技術は、血管内ステントの中での再狭窄の問題の処置を行うために開発されている。ステントは、通常、冠状血管および末梢血管の中に取り外せないように埋め込まれる（展開させられる）デバイスである。これらのステントの目的は、罹患している（狭窄している）血管についての長期にわたる「足場」または支持体を提供することである。血管が中から支えられると、これはつぶれる、または再度狭窄することはないであろうという理論である。
【０２７７】
既知のステントのデザインとしては、モノフィラメントワイヤーコイルステント（例えば、米国特許第４，９６９，４５８号を参照のこと）；溶接された金属製のケージ（ｗｅｌｄｅｄ  ｍｅｔａｌ  ｃａｇｅ）（例えば、米国特許第４，７３３，６６５号、および同第４，７７６，３３７号を参照のこと）、円く囲むように形成された軸方向スロットを有している薄い壁の金属製のシリンダー（ｔｈｉｎ−ｗａｌｌｅｄ  ｍｅｔａｌ  ｃｙｌｉｎｄｅｒ）（例えば、米国特許第４，７３３，６６５号、同第４，７３９，７６２号、同第４，７７６，３３７号などを参照のこと）が挙げられるが、これらに限定はされない。ステントに使用される構造がわかっている材質としては、ポリマー、有機繊維、および生態適合性材料（例えば、ステンレス鋼、金、銀、タンタル、チタン、および形状記憶合金（例えば、ニチノール（Ｎｉｔｉｎｏｌ）））が挙げられるが、これらに限定はされない。
【０２７８】
再狭窄をさらに防ぐためには、例えば、再狭窄に関係している細胞増殖を阻害するための徐放処方物においては、ステントを、１つ以上の医薬品で覆う、および／またはステントに１つ以上の医薬品をしみこませることができる。最も一般的なそのような「薬物溶出」ステントは、様々な抗ガン剤（細胞毒素）を送達するように設計される。
【０２７９】
しかし、炎症反応を軽減すること、酸化型脂質および／または他の酸化種を減少させるならびに／あるいは排除すること、マクロファージの化学走化活性を阻害することなどにおけるそれらの活性が原因で、本明細書中に記載される活性薬剤は、再狭窄を予防することに十分に適している。したがって、特定の実施形態においては、本発明により、本明細書中に記載されている活性薬剤の１つ以上で表面がコーティングされたステント、および／または本明細書中に記載されている活性薬剤の１つ以上がステントの表面にある孔または微小空洞の中に保持されているステントが意図される。
【０２８０】
特定の実施形態においては、活性薬剤は、生体適合性マトリックス（例えば、ウレタン、シリコンなどのような生体適合性ポリマー）の中に含められる。適切な生体適合性材料は、例えば、米国特許公開番号２００５００８４５１５、同２００５００７９１９９１、同２００５００７０９９６などに記載されている。様々な実施形態においては、ポリマーとしては、シリコン−ウレタンコポリマー、ポリウレタン、フェノキシ、エチレン酢酸ビニル、ポリカプロラクトン、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）、ポリラクチド、ポリスルホン、エラスチン、フィブリン、コラーゲン、コンドロイチン硫酸、生体適合性ポリマー、生体安定性ポリマー、生体分解性ポリマーが挙げられるが、これらに限定はされない。
【０２８１】
したがって、特定の実施形態においては、本発明により、体内の血管に薬物を送達するためのステントが提供される。ステントには、通常、その中に形成された複数のレザーバーが含まれているステントのフレームワークが含まれる。レザーバーには、通常、レザーバーの中に配置された、および／またはステントの表面上にコーティングされた、活性薬剤および／または活性薬剤が含まれているポリマーが含まれる。様々な実施形態においては、ステントは、金属をベースとするものであるか、またはポリマーをベースとするものである。特定の好ましいステント材料としては、ステンレス鋼、ニチノール、タンタル、ＭＰ３５Ｎ合金、白金、チタン、適切な生体適合性の合金、適切な生体適合性ポリマー、および／またはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定はされない。
【０２８２】
ステントに孔（例えば、レザーバー）が含まれている様々な実施形態においては、孔には微小孔（例えば、約１０から約５０μｍ、好ましくは、約２０μｍ未満の範囲の直径を有しているもの）が含まれ得る。様々な実施例においては、微小孔は、約１０μｍから約５０μｍの範囲の深さを有する。様々な実施形態においては、微小孔は、ステントの内表面上にある開口部と、ステントの外表面上にある開口部を有しているステントのフレームワークを通じて伸びる。特定の実施形態においては、ステントには、状況に応じて、ステントのフレームワークの内表面上に配置されるキャップ層を含めることができる。キャップ層は、貫通孔の少なくとも一部を覆い、そして、ステントのフレームワークの内表面からのポリマー中の活性薬剤（単数または複数）の溶出速度を制御するための特徴的なバリアを提供する。様々な実施形態においては、レザーバーには、ステントのフレームワークの外表面に沿ったチャネルが含まれる。ステントは、状況に応じて、多層のポリマーを有することができ、この場合、異なる層のポリマーは異なる活性薬剤（単数または複数）および／または他の薬物を有する。
【０２８３】
特定の実施形態においては、ステントには以下が含まれる：ステントのフレームワークとポリマーの間に配置された接着層。適切な接着層としては、ポリウレタン、フェノキシ、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）−、ポリラクチド、ポリスルホン、ポリカプロラクトン、接着促進剤、および／またはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定はされない。
【０２８４】
ステントに加えて、活性薬剤は、血管外および／または血管内の位置に埋め込まれるように構成された基本的にあらゆる埋め込み型の医療用デバイス上にコーティングすることができ、また、その中に含めることもできる。
【０２８５】
薬物−ポリマーステントを製造する方法も提供される。この方法には、ステントのフレームワークを提供する工程；ステントのフレームワークの中に複数のレザーバーを削って作る工程（例えば、高出力レーザーを使用する）；活性薬剤の１つ以上および／または薬物ポリマーを、少なくとも１つのレザーバーに適用する工程；薬物ポリマーを乾燥させる工程；乾燥させられた薬物ポリマー層にポリマー層を適用する工程；およびポリマー層を乾燥させる工程が含まれる。活性薬剤（単数または複数）および／またはポリマー（単数または複数）は、任意の従来の方法（噴霧、ディッピング、プリンティング、ブラッシング、および／または分散が含まれるがこれらに限定はされない）によって適用することができる。
【０２８６】
血管の症状および／または炎症反応を特徴とする症状および／または酸化型反応種の形成を特徴とする症状を処置するための方法もまた提供される。この方法には、通常、体内に（例えば、体の血管内に）上記のようなステントまたは他の埋め込み型のデバイスを配置する工程、およびインプラントの少なくとも１つの表面から何らかの活性薬剤を溶出させる工程が含まれる。
【０２８７】
２．含浸させられた移植片および移植物
血管移植片は、生物学的または合成のいずれかとして分類することができる。一般的に使用される生物学的移植片には２つのタイプがある。自家移植片は、患者の別の部位から得られたものである。末梢血管の外科手術においては、間違いなく最も一般的に使用されるそのような移植片は長い伏在静脈である。これは、内腔を切るバルブトーム（ｉｎｔｒａｌｕｍｉｎａｌ  ｃｕｔｔｉｎｇ  ｖａｌｖｕｔｏｍｅ）によって外科手術によって壊された弁とともに、インサイチュで使用することができる。
【０２８８】
あるいは、静脈を取り出し、逆さまにすることができるが、これによっては、通常は、動脈と静脈の吻合の大きさに相違が生じる。胸部手術においては、冠動脈バイパス手術のために内胸動脈を使用することが、自家移植の別の例である。同種移植片は、同じ種の別の動物から得られるものである。外部から支えられた臍帯静脈がまれに使用されるが、このような移植片は一例にすぎない。
【０２８９】
合成の移植片は、Ｄａｃｒｏｎから、またはポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）から最も一般的に作成されている。Ｄａｃｒｏｎ移植片は、大動脈および大動脈腸骨動脈の外科手術において頻繁に使用されている。鼠径靱帯より下では、全ての合成の移植片の結果は、静脈の移植片の使用によって得られる結果よりも劣っている。適切な静脈は必ずしも得られるわけではなく、この状況では、ＰＴＦＥが通常使用される。これは、複合移植片として静脈と組み合わせて使用することができる。遠位吻合での新生内膜過形成は、移植片の長期にわたる開通性を改善するために、Ｍｉｌｌａｒ  ＣｕｆｆまたはＴａｙｌｏｒ  Ｐａｔｃｈのいずれかとして静脈の断片を取り込ませることによって軽減することができる。
【０２９０】
血管移植片の使用に伴う最も一般的な合併症には、移植片の閉塞、移植片の感染、吻合部位の真性および偽性動脈瘤、末梢の閉塞、ならびに、隣接する構造の腐食（例えば、大動脈−腸瘻孔）が含まれる。これらの症状の多くは、炎症反応、その部位へのマクロファージの移動、および／または反応性酸素種の形成（例えば、酸化型脂質）に関係している。このような合併症を軽くするために、移植片（合成のものまたは生物学的なもの）を、本明細書中に記載される活性薬剤の１つ以上に浸すことができ、また、別の方法によって本明細書中に記載される活性薬剤の１つ以上でコーティングすることもできる。
【０２９１】
加えて、同様に、他の埋め込み型の組織または物質に、本発明の１つ以上の活性薬剤を含浸させることができ、また、他の埋め込み型の組織または物質を本発明の１つ以上の活性薬剤でコーティングすることもできることが意図される。したがって、例えば、特定の実施形態においては、本発明では、炎症および／または感染および／または組織拒絶を最少にするために含浸された縫合糸の使用が意図される。
【０２９２】
３．皮下マトリックス
特定の実施形態においては、本明細書中に記載される１つ以上の活性薬剤は、単独で投与されるか、または、埋め込み型（例えば、皮下）マトリックスの中で本明細書中に記載される他の治療薬と組み合わせて投与される。
【０２９３】
標準的な薬物の投与に伴う主要な問題は、典型的な薬物の送達によって、投与時に医薬品の迅速な破裂が生じ、これには、体による薬物の迅速な消費が続く。薬物の副作用のほとんどは、血流へのその放出の爆発期の間に生じる。第２に、薬物が血流中で治療レベルにある時間は非常に短く、ほとんどが使用され、そして一気にクリアされる。
【０２９４】
徐放のための様々なマトリックス材料の中に埋め込まれた薬物（例えば、本明細書中に記載される活性薬剤）によって、これらの問題のいくつかの解決が提供される。（例えば、ポリマービーズの中、またはポリマーのウェハーの中に）埋め込まれた薬物にはいくつかの利点がある。第１に、ほとんどのシステムによって、薬物のゆっくりとした放出が可能であり、したがって、少量の薬物の持続的な体への投与量を生じることができる。これにより、通常は、通常の注射された薬物または丸剤をベースとする薬物の高度な爆発に伴う副作用を防ぐことができる。第２に、これらのポリマーは数時間から数ヶ月間にわたって放出を行うことができるので、この薬物での治療期間は顕著に長くなる。多くの場合には、様々な比で同じポリマー成分を混合することにより、様々な分解速度を有している複数のポリマーを作成することができ、これによっては、使用される薬剤に応じて顕著な可撓性が得られる。長期にわたる薬物の放出は、通常の投与について問題がある可能性があるヒト（例えば、高齢者）に有効であるが、これはまた、誰もが利用することができる使用の改善も容易にする。ほとんどのポリマーは、時間と共に体内で分解され、そしてクリアされ、結果として、これらは治療期間後に体に留まることはなくなるであろう。
【０２９５】
ポリマーをベースとする薬物送達の別の利点は、ポリマーは多くの場合は安定であり得るか、または、そうでなければ医薬品としては使用できないタンパク質、ペプチド、および他の大きな分子を可溶化させることができることである。最後に、多くの薬物／ポリマー混合物を、疾患の領域に直接置くことができ、それによって、「初回通過」効果のために薬物をロスする必要のない、医薬品の特異的な標的化が可能となる。これは、脳の処置に特に有効であり、これによって、多くの場合は、血液／脳関門を透過することができない医薬がなくなる。
【０２９６】
多数の埋め込み型のマトリックス（徐放）システムが当業者に公知であり、これらは、本明細書中に記載される活性薬剤の１つ以上と共に使用することに容易に適応させることができる。適切な徐放システムとしては、ＭａｃｒｏＭｅｄによるＲｅ−Ｇｅｌ（登録商標）、ＳＱ２Ｇｅｌ（登録商標）、およびＯｌｉｇｏｓｐｈｅｒｅ（登録商標）、ＡｌｋｅｒｍｅｓによるＰｒｏＬｅａｓｅ（登録商標）およびＭｅｄｉｓｏｒｂ（登録商標）、Ｇｕｉｌｆｏｒｄ  ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓによるＰａｃｌｉｍｅｒ（登録商標）およびＧｌｉａｄｅｌ（登録商標）Ｗａｆｅｒ、ＡｌｚａによるＤｕｒｏｓ移植片、Ｐｏｉｎｔ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌによるａｃｏｕｓｔｉｃ  ｂｉｏＳｐｈｅｒｅ、Ｓｃｉｎｔｉｐｈａｒｍａ，Ｉｎｃ．，ｎによるＩｎｔｅｌｓｉｔｅカプセルなどが挙げられるが、これらに限定はされない。
【０２９７】
４．他の「特別な送達システム」
他の「特別な」送達システムとしては、Ｇｅｎｅｒｅｘ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙによって開発された口腔粘膜を通過する薬物の吸収を可能にする脂質をベースとする経口ミスト、Ａｎｅｓｔａ  Ｃｏｒｐ．による口腔粘膜吸収システム（ＯＴＳ（登録商標））、Ｉｎｈａｌｅ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓによる吸入可能な乾燥粉末およびＰｕｌｍｏＳｐｈｅｒｅ技術、ＡｒａｄｉｇｍによるＡＥＲｘ（登録商標）Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍ、ＡｌｋｅｒｍｅｓによるＡＩＲ機構などが挙げられるが、これらに限定はされない。
【０２９８】
Ａｌｋｅｒｍｅｓによって開発された送達のための別のアプローチは、高齢者および小児（丸剤を摂取することがしばしば困難である２つの集団）への使用を標的としたシステムであり、Ｄｒｕｇ  Ｓｉｐｐｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（ＤＳＴ）として知られている。医薬品は、そのいずれかの末端上にあるフィルターによって落下が防がれている飲料用ストローデバイスの中に入れられる。患者は、ストローを通じて透明な液体（水、ジュース、ソーダ）をただ飲むだけでよい。薬物は、吸われると同時に液体の中に溶解し、そして患者に摂取される。フィルターは、医薬品が全て摂取されると、ストローの先端に上がる。この方法には、使用が簡単である、液体により、多くの場合には、医薬品の味が隠される、および薬物はより効率のよい吸収のために予め溶解させられるという利点がある。
【０２９９】
これらの使用および送達システムは、説明のために意図され、限定とは意図されないことに留意されたい。本明細書中に記載される技術を使用することにより、他の用途および送達システムが当業者に公知であろう。
【０３００】
ＶＩ．さらに別の薬理学的活性のある物質
混合された活性薬剤
様々な実施形態においては、記載される２つ以上の活性薬剤の組み合わせの使用が、本明細書中に記載される様々な病状／適応症の処置において意図される。活性薬剤の組み合わせの使用によって、薬理学的活性、生体利用性などを変化させることができる。
【０３０１】
例として、Ｄ−４Ｆがプレ−βＨＤＬおよびＨＤＬと迅速に会合し、その後、循環から迅速にクリアされ（これは、原則として経口投与の６時間後には検出できない）が、Ｄ−［１１３−１２２］ａｐｏＪはプレ−βＨＤＬとゆっくりと、そしてＨＤＬとの会合よりも少ない程度で会合するが、少なくとも３６時間はこれらのＨＤＬ画分と会合したままである。ＦＲＥＬはＨＤＬと会合し、そしてＨＤＬとだけしか会合しないが、Ｄ−４Ｆよりもはるかに長い間、ＨＤＬの中に検出可能なまま留まる（すなわち、マウスにおいては１回の経口投与後、４８時間の間ＨＤＬの中で検出することができる）。したがって、特定の実施形態においては、本発明により、例えば、製造経皮を削減するために量を減少させるため、および／または、投与レジュメ、治療プロフィールなど投与レジュメを最適化するための、これらの３種類のペプチドの組み合わせが意図される。特定の実施形態においては、本明細書中に記載される活性薬剤の組み合わせは、単純に同時に投与することができ、そして／または、１つの薬学的処方物を形成するように一緒に加えることができる。特定の実施形態においては、様々な活性薬剤（単数または複数）を一緒に複合体化させることができ（例えば、水素結合による）、それによって、もとの物質よりも有効な活性薬剤の複合体が形成される。
【０３０２】
さらに別の薬理学的活性のある材料を伴う使用
さらに別の薬理学的活性のある物質（すなわち、薬物）を、本明細書中に記載される活性薬剤の１つ以上と一緒に送達させることができる。特定の実施形態においては、このような物質としては、アテローム性動脈硬化症の事象および／またはその合併症のリスクを低下させる物質が挙げられるが、これに限定はされない。このような物質としては、βブロッカー、βブロッカーとチアザイド系利尿剤の組み合わせ、スタチン、アスピリン、ａｃｅ阻害剤、ａｃｅ受容体阻害剤（ＡＲＢ）などが挙げられるが、これらに限定はされない。
【０３０３】
低用量の活性薬剤（例えば、Ｄ−４Ｆ）をａｐｏＥヌルマウスの飲み水に２４時間加えることによっては、ＨＤＬ機能は有意には改善されなかったことが明らかにされている（例えば、２００３年４月２５日に提出された関連出願ＵＳＳＮ１０／４２３，８３０（引用により本明細書中に組み入れられる）を参照のこと）。加えて、ａｐｏＥヌルマウスの飲み水に２４時間、０．０５ｍｇ／ｍｌのアトロバスタチンまたはプラバスタチンを単独で加えることによっても、ＨＤＬ機能は有意には改善されなかった。しかし、１μｇ／ｍｌのＤ−４Ｆを、０．０５ｍｇ／ｍｌのアトロバスタチンまたはプラバスタチンと一緒に飲み水に加えた場合には、ＨＤＬ機能が有意に改善された。実際、プロ炎症性ａｐｏＥヌルＨＤＬは、３５０μｇ／ｍｌの正常なヒトＨＤＬ（ｈ，ＨＤＬ、例えば、関連出願ＵＳＳＮ１０／４２３，８３０を参照のこと）と同程度に抗炎症性となった。
【０３０４】
したがって、Ｄ−４Ｆだけ、またはスタチンだけの用量は、それらが一緒に相乗作用する場合には、ＨＤＬ機能に対するそれら自体の効果はなかった。Ｄ−４ＦおよびスタチンをａｐｏＥヌルマウスに一緒に投与した場合には、５０μｇ／ｍｌのＨＤＬ−コレステロールでのそれらのプロ炎症性ＨＤＬは、ヒトの動脈壁細胞の共培養物においてＰＡＰＣを酸化させるＨＰＯＤＥの作用によって誘導される炎症反応を防ぐことにおいて、３５０μｇ／ｍｌのＨＤＬ−コレステロールの正常なヒトＨＤＬと同程度に有効となった。
【０３０５】
したがって、特定の実施形態においては、本発明により、スタチンの活性を高めるための方法が提供さえる。この方法には、一般的には、本明細書中に記載される活性薬剤の１つ以上を、本明細書中に記載されるように、１つ以上のスタチンと一緒に投与する工程が含まれる。これらの活性薬剤は、スタチンと成分（単数または複数）との間で相乗作用を行って、アテローム性動脈硬化症の１つ以上の兆候を緩和する。この状況では、スタチンは、有意に低い投与量で投与することができ、これにより高用量のスタチンの使用に伴う様々な有害な副作用（例えば、筋肉疲労）を回避することができ、そして／または、任意の所定の用量でのスタチンの抗炎症特性が有意に高められる。
【０３０６】
適切なスタチンとしては、プラバスタチン（Ｐｒａｖａｃｈｏｌ／Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、シムバスタチン（Ｚｏｃｏｒ／Ｍｅｒｃｋ）、ロバスタチン（Ｍｅｖａｃｏｒ／Ｍｅｒｃｋ）などが挙げられるが、これらに限定はされない。
【０３０７】
様々な実施形態においては、本明細書中に記載される活性薬剤（単数または複数）は、１つ以上のβブロッカーと共に投与される。適切なβブロッカーとしては、心選択性βブロッカー（選択性β１ブロッカー）、例えば、アセブトロール（Ｓｅｃｔｒａｌ（登録商標））、アテノロール（Ｔｅｎｏｒｍｉｎ（登録商標））、ベタキソロール（Ｋｅｒｌｏｎｅ（登録商標））、ビスプロロール（Ｚｅｂｅｔａ（登録商標））、メトプロロール（Ｌｏｐｒｅｓｓｏｒ（登録商標））などが挙げられるが、これらに限定はされない。適切な非選択性ブロッカー（ブロックβ１およびβ２、同等）としては、カルテオロール（Ｃａｒｔｒｏｌ（登録商標））、ナドロール（Ｃｏｒｇａｒｄ（登録商標））、ペンブトロール（Ｌｅｖａｔｏｌ（登録商標））、ピンドロール（Ｖｉｓｋｅｎ（登録商標））、プロプラノロール（Ｉｎｄｅｒａｌ（登録商標））、チモロール（Ｂｌｏｃｋａｄｒｅｎ（登録商標））、ラベタロール（Ｎｏｒｍｏｄｙｎｅ（登録商標）、Ｔｒａｎｄａｔｅ（登録商標））などが挙げられるが、これらに限定はされない。
【０３０８】
適切なβブロッカーとチアザイド利尿剤の組み合わせとしては、Ｌｏｐｒｅｓｓｏｒ  ＨＣＴ、ＺＩＡＣ、Ｔｅｎｏｒｅｔｉｃ、Ｃｏｒｚｉｄｅ、Ｔｉｍｏｌｉｄｅ、Ｉｎｄｅｒａｌ  ＬＡ  ４０／２５、Ｉｎｄｅｒｉｄｅ、Ｎｏｒｍｏｚｉｄｅなどが挙げられるが、これらに限定はされない。
【０３０９】
適切なａｃｅ阻害剤としては、以下が挙げられるが、これらに限定はされない：カプトプリル（例えば、ＳｑｕｉｂｂによるＣａｐｏｔｅｎ（登録商標））、ベナゼプリル（例えば、ＮｏｖａｒｔｉｓによるＬｏｔｅｎｓｉｎ（登録商標））、エナラプリル（例えば、ＭｅｒｃｋによるＶａｓｏｔｅｃ（登録商標））、フォシノプリル（例えば、Ｂｒｉｓｔｏｌ−ＭｙｅｒｓによるＭｏｎｏｐｒｉｌ（登録商標））、リシノプリル（例えば、ＭｅｒｃｋによるＰｒｉｎｉｖｉｌ（登録商標）、またはＡｓｔｒａ−ＺｅｎｅｃａによるＺｅｓｔｒｉｌ（登録商標））、キナプリル（例えば、Ｐａｒｋｅ−ＤａｖｉｓによるＡｃｃｕｐｒｉｌ（登録商標））、ラミプリル（例えば、Ｈｏｅｃｈｓｔ  Ｍａｒｉｏｎ  Ｒｏｕｓｓｅｌ，Ｋｉｎｇ  ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓによるＡｌｔａｃｅ（登録商標））、イミダプリル、プレンドプリルエルブミン（例えば、Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｌｅｎｃ  ＲｏｒｅｒによるＡｃｅｏｎ（登録商標））、トランドラプリル（例えば、Ｋｎｏｌｌ  ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌによるＭａｖｉｋ（登録商標））など。適切なＡＲＢＳ（Ａｃｅ受容体ブロッカー）としては、以下が挙げられるが、これらに限定はされない：ロサルタン（例えば、ＭｅｒｃｋによるＣｏｚａａｒ（登録商標））、イルベサルタン（例えば、ＳａｎｏｆｉによるＡｖａｐｒｏ（登録商標））、カンデサルタン（例えば、Ａｓｔｒａ  ＭｅｒｃｋによるＡｔａｃａｎｄ（登録商標））、バルサルタン（例えば、ＮｏｖａｒｔｉｓによるＤｉｏｖａｎ（登録商標））など。
【０３１０】
様々な実施形態においては、本明細書中に記載される１つ以上の物質が、以下に記載される薬物の１つ以上と一緒に投与される。
【０３１１】
したがって、特定の実施形態においては、１つ以上の活性薬剤は、以下の物質と一緒に投与される：コレステリルエステルトランスファータンパク質（ＣＥＴＰ）阻害剤（例えば、トルセトラピブ、ＪＴＴ−７０５．ＣＰ−５２９４１４）、および／またはアシル−ＣｏＡ：コレステロールＯ−アシルトランスフェラーゼ（ＡＣＡＴ）阻害剤）（例えば、Ａｖａｓｉｍｉｂｅ（ＣＩ−１０１１）、ＣＰ−１１３８１８、Ｆ−１３９４など）、および／または免疫賦活剤（例えば、ＦＴＹ７２０（スフィンゴシン−１−リン酸受容体アゴニスト）、サロミド（サリドマイド）、Ｉｍｕｒａｎ（アザチオプリン）、コパキソン（酢酸ガラティラメル）、Ｃｅｒｔｉｃａｎ（登録商標）（エヴェロリムス）、Ｎｅｏｒａｌ（登録商標）（シクロスポリン）など）、および／またはジペプチジル−ペプチダーゼ−４（ＤＰＰ４）阻害剤（例えば、２−ピロリジンカルボニトリル、１−［［［２−［（５−シアノ−２−ピリジニル）アミノ］エチル］アミノ］アセチル］（米国特許公開番号２００５−００７０５３０もまた参照のこと）、および／またはカルシウムチャネルブロッカー（例えば、Ａｄａｌａｔ、Ａｄａｌａｔ  ＣＣ、Ｃａｌａｎ、Ｃａｌａｎ  ＳＲ、Ｃａｒｄｅｎｅ、Ｃａｒｄｉｚｅｍ、Ｃａｒｄｉｚｅｍ  ＣＤ、Ｃａｒｄｉｚｅｍ  ＳＲ、Ｄｉｌａｃｏｒ−ＸＲ、ＤｙｎａＣｉｒｃ、Ｉｓｏｐｔｉｎ、Ｉｓｏｐｔｉｎ  ＳＲ、Ｎｉｍｏｔｏｐ、Ｎｏｒｖａｓｃ、Ｐｌｅｎｄｉｌ、Ｐｒｏｃａｒｄｉａ、Ｐｒｏｃａｒｄｉａ  ＸＬ、Ｖａｓｃｏｒ、Ｖｅｒｅｌａｎ）、および／またはペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）アゴニスト（例えば、α、γ；δ受容体についてのアゴニスト（例えば、アゼラオイル（Ａｚｅｌａｏｙｌ）ＰＡＦ、２−ブロモヘキサデカン酸、シグリチゾン（Ｃｉｇｌｉｔｉｚｏｎｅ）、クロフィブレート（Ｃｌｏｆｉｂｒａｔｅ）、１５−デオキシ−δ１２，１４−プロスタグランジンＪ２、フェノフィブレート、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、ＧＷ１９２９、ＧＷ７６４７、８（Ｓ）−ヒドロキシ−（５Ｚ，９Ｅ，１１Ｚ，１４Ｚ）−エイコサテトラエン酸（８（Ｓ）−ＨＥＴＥ）、ロイコトリエンＢ４、ＬＹ−１７１、８８３（Ｔｏｍｅｌｕｋａｓｔ）、プロスタグランジンＡ２、プロスタグランジンＪ２、テトラデシルチオ酢酸（ＴＴＡ）、トログリタゾン（ＣＳ−０４５）、ＷＹ−１４６４３（ピリニキシル酸（Ｐｉｒｉｎｉｘｉｃ  ａｃｉｄ））など。
【０３１２】
特定の実施形態においては、１つ以上の活性薬剤は、以下の物質と一緒に投与される：フィブラート（例えば、クロフィブラート（アトロミド）、ジェムフィブロジル（ロピッド）、フェノフィブラート（トリコール）など）、胆汁酸抑制薬（例えば、コレスチルアミン、コレスチポールなど）、コレステロール吸収ブロッカー（例えば、エゼチミブ（Ｚｅｔｉａ）など）、Ｖｙｔｏｒｉｎ（（エゼチミブ／シムバスタチンの併用）、および／またはステロイド、ワーファリン、および／またはアスピリン、および／またはＢｃｒ−Ａｂｌ阻害剤／アンタゴニスト（例えば、Ｇｌｅｅｖｅｃ（メシル酸イマチニブ）、ＡＭＮ１０７、ＳＴＩ５７１（ＣＧＰ５７１４８Ｂ）、ＯＮ０１２３８０、ＰＬＸ２２５など）、および／またはレニンアンギオテンシン経路のブロッカー（例えば、Ｌｏｓａｒｔａｎ（Ｃｏｚａａｒ（登録商標））、バルサルタン（Ｄｉｏｖａｎ（登録商標））、イルベサルタン（Ａｖａｐｒｏ（登録商標））、カンデサルタン（Ａｔａｃａｎｄ（登録商標））など）、および／またはアンギオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト（例えば、ロサルタン（Ｃｏｚａａｒ）、バルサルタン（Ｄｉｏｖａｎ）、イルベサルタン（Ａｖａｐｒｏ）、カンデサルタン（Ａｔａｃａｎｄ）、およびテルミサルタン（Ｍｉｃａｒｄｉｓ）など）、および／またはＰＫＣ阻害剤（例えば、カルホスチンＣ（Ｃａｌｐｈｏｓｔｉｎ  Ｃ）、セレリスリンクロライド（Ｃｈｅｌｅｒｙｔｈｒｉｎｅ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、セレリスリンクロライド（Ｃｈｅｌｅｒｙｔｈｒｉｎｅ．ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、銅ビス−３，５−ジイソプロピルサリチル酸、Ｅｂｓｅｌｅｎ、ＥＧＦ受容体（ヒト）（６５１−６５８）（Ｎ−ミリストイル化）、Ｇo６９７６、Ｈ−７、ジヒドロクロライド、１−Ｏ−ヘキサデシル−２−Ｏ−メチル−ｒａｃ−グリセロール、ヘキサデシル−ホスホコリン（Ｃ１６：０）；ミルテフォシン（Ｍｉｌｔｅｆｏｓｉｎｅ）、ハイペリシン（Ｈｙｐｅｒｉｃｉｎ）、メリチン（Ｍｅｌｉｔｔｉｎ）（自然界に存在しているもの）、メリチン（Ｍｅｌｉｔｔｉｎ）（合成）、ＭＬ−７．ヒドロクロライド、ＭＬ−９．ヒドロクロライド、パルミトイル−ＤＬ−カルニチン．ヒドロクロライド、プロテインキナーゼＣ（１９−３１）、プロテインキナーゼＣ（１９−３６）、ケルセチン．ジヒドレート、ケルセチン．ジヒドレート、Ｄ−エリスロ−スフィンゴシン（単離されたもの）、Ｄ−エリスロ−スフィンゴシン（合成のもの）、スフィンゴシン、Ｎ，Ｎ−ジメチル、Ｄ−エリスロ−スフィンゴシン、ジヒドロ−、Ｄ−エリスロ−スフィンゴシン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−、Ｄ−エリスロ−スフィンゴシンクロライド、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル−、スタウロスポリン、ビスインドリルマレイミドＩ、Ｇ−６２０３など）。
【０３１３】
特定の実施形態においては、１つ以上の活性薬剤は、以下の物質と一緒に投与される：ＡｐｏＡＩ、ＡｐｏＡ−Ｉ誘導体および／またはアゴニスト（例えば、ＡｐｏＡＩ  ｍｉｌａｎｏ、例えば、米国特許公開番号２００５０００４０８２、２００４０２２４０１１、２００４０１９８６６２、２００４０１８１０３４、２００４０１２２０９１、２００４００８２５４８、２００４００２９８０７、２００３０１４９０９４、２００３０１２５５５９、２００３０１０９４４２、２００３００６５１９５、２００３０００８８２７、および２００２００７１８６２、ならびに、米国特許第６，８３１，１０５号、同６，７９０，９５３号、同６，７７３，７１９号、同６，７１３，５０７号、同６，７０３，４２２号、同６，６９９，９１０号、同６，６８０，２０３号、同６，６７３，７８０号、同６，６４６，１７０号、同６，６１７，１３４号、同６，５５９，２８４号、同６，５０６，８７９号、同６，５０６，７９９号、同６，４５９，００３号、同６，４２３，８３０号、同６，４１０，８０２号、同６，３７６，４６４号、同６，３６７，４７９号、同６，３２９，３４１号、同６，２８７，５９０号、同６，０９０，９２１号、同５，９９０，０８１など）、レニン阻害剤（例えば、ＳＰＰ６３０およびＳＰＰ６３５、ＳＰＰ１００、Ａｌｉｓｋｉｒｅｎなど）、および／またはＭＲアンタゴニスト（例えば、スピロノラクトン、アルドステロングルクロナイドなど）、および／またはアルドステロン合成酵素阻害剤、および／またはαアドレナリン作動性アンタゴニスト（例えば、Ａｌｄｏｍｅｔ（登録商標）（メチルドーパ（Ｍｅｔｈｙｌｄｏｐａ））、Ｃａｒｄｕｒａ（登録商標）（Ｄｏｘａｚｏｓｉｎ）、Ｃａｔａｐｒｅｓ（登録商標）；Ｃａｔａｐｒｅｓ−ＴＴＳ（登録商標）；Ｄｕｒａｃｌｏｎ（登録商標）（Ｃｌｏｎｉｄｉｎｅ）、Ｄｉｂｅｎｚｙｌｉｎｅ（登録商標）（フェノキシベンズアミン（Ｐｈｅｎｏｘｙｂｅｎｚａｍｉｎｅ））、Ｈｙｌｏｒｅｌ（登録商標）  （Ｇｕａｎａｄｒｅｌ）、Ｈｙｔｒｉｎ（登録商標）（テラゾシン（Ｔｅｒａｚｏｓｉｎ））、Ｍｉｎｉｐｒｅｓｓ（登録商標）（プラゾシン（Ｐｒａｚｏｓｉｎ））、Ｔｅｎｅｘ（登録商標）（グアノファシン（Ｇｕａｎｆａｃｉｎｅ））、Ｇｕａｎａｂｅｎｚ、フェントールアミン（Ｐｈｅｎｔｏｌａｍｉｎｅ）、レセルピン（Ｒｅｓｅｒｐｉｎｅ）など）、および／または肝臓のＸ受容体（ＬＸＲ）アゴニスト（例えば、Ｔ０９０１３１７、ＧＷ３９６５、ＡＴＩ−８２９、アセチルポドカルピック（ａｃｅｔｙｌ−ｐｏｄｏｃａｒｐｉｃ）二量体（ＡＰＤ）など）、および／またはファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニスト（例えば、ＧＷ４０６４、６α−エチル−ケノデオキシコール酸（６−ＥＣＤＣＡ）、Ｔ０９０１３１７など）、および／またはプラスミノーゲン活性化因子−１（ＰＡＩ−１）阻害剤（例えば、オキシム系ＰＡＩ−１阻害剤、米国特許第５，６３９，７２６などもまた参照のこと）、および／または低分子量のへパリン、および／またはＡＧＥ阻害剤／遮断薬（例えば、ベンフォチアミン（Ｂｅｎｆｏｔｉａｍｉｎｅ）、アミノグアニジン、ピリドキサミン、テニルセタム（Ｔｅｎｉｌｓｅｔ���ｍ）、ピマゲジン（Ｐｉｍａｇｅｄｉｎｅ）など）、および／またはＡＤＰ受容体ブロッカー（例えば、クロピジグレール（Ｃｌｏｐｉｄｉｇｒｅｌ）、ＡＺＤ６１４０など）、および／またはＡＢＣＡ１アゴニスト、および／またはスカベンジャー受容体Ｂ１アゴニスト、および／またはアディポネクチン受容体アゴニストもしくはアディポネクチンインデューサー、および／またはステアロイル−ＣｏＡデサチュラーゼＩ（ＳＣＤ１）阻害剤、および／またはコレステロール合成の阻害剤（スタチン以外）、および／またはジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼＩ（ＤＧＡＴ１）阻害剤、および／またはアセチルＣｏＡカルボキシラーゼ２阻害剤、および／またはＬＰ−ＰＬＡ２阻害剤、および／またはＧＬＰ−１、および／またはグルコキナーゼ活性化因子、および／またはＣＢ−１アゴニスト、および／または  抗血栓薬／凝固剤、および／または第Ｘａ因子阻害剤、および／またはＧＰＩＩｂ／ＩＩＩａ阻害剤、および／または第ＶＩＩａ因子阻害剤、および／または組織因子阻害剤、および／または抗炎症薬、および／または  プロブコールと誘導体（例えば、ＡＧＩ−１０６７など）、および／またはＣＣＲ２  アンタゴニスト、および／またはＣＸ３ＣＲ１アンタゴニスト、および／またはＩＬ−１アンタゴニスト、および／または硝酸塩とＮＯドナー、および／またはホスホジエステラーゼ阻害剤など。
【０３１４】
ＩＸ．１つ以上の適応症の処置のためのキット
別の実施形態においては、本発明により、アテローム性動脈硬化症の１つ以上の兆候の緩和のため、アテローム性動脈硬化症のリスクがある被験体（ヒトまたは動物）の予防的処置および／または本明細書中に記載される症状の１つ以上の処置もしくは予防のためのキットが提供される。このキットには、好ましくは、本明細書中に記載される活性薬剤の１つ以上が含まれている容器が含まれる。活性薬剤（単数または複数）は、単位投与量の処方物（例えば、坐剤、錠剤、カプレット、パッチなど）で提供することができ、そして／また、状況に応じて１つ以上の薬学的に許容される賦形剤と混合される場合もある。
【０３１５】
キットには、状況に応じてさらに、目的の症状／病状の処置に使用される１つ以上の他の薬剤を含めることができる。このような物質としては、βブロッカー、血管拡張剤、アスピリン、スタチン、ａｃｅ阻害剤、またはａｃｅ受容体阻害剤（ＡＲＢ）など（例えば、上記のもの）が挙げられるが、これらに限定はされない。
【０３１６】
加えて、キットには、状況に応じて、ラベルおよび／または説明用の物質が含まれ、これにより、本発明の方法の実施、または、「治療薬」もしくは「予防薬」の使用のための説明（すなわち、プロトコール）が提供される。好ましい説明用の物質には、アテローム性動脈硬化症（もしくは本明細書中に記載される他の病状）の１つ以上の兆候を軽減させるため、および／またはアテローム性動脈硬化症（もしくは本明細書中に記載される他の病状）のリスクがある個体においてそのような兆候の１つ以上の発症もしくは拡大を予防するための、本発明の１つ以上の活性薬剤（単数または複数）の使用が記載される。説明用の物質によってはまた、状況に応じて、投与量／治療レジュメ、対応する適応症なども教示される場合がある。
【０３１７】
説明用の物質には、通常、記載されたまたは印刷された物質が含まれるが、それらに限定はされない。そのような説明書を保存することができ、そして末端の使用者に対してそれらを伝えることができる任意の媒体が、本発明によって意図される。このような媒体としては、電気記憶媒体（例えば、磁気ディスク、テープ、カートリッジ、チップ）、光学媒体（例えば、ＣＤ  ＲＯＭ）などが挙げられるが、これらに限定はされない。このような媒体には、そのような説明用の物質を提供するインターネットサイトへのアドレスが含まれる場合がある。
【実施例】
【０３１８】
以下の実施例は、説明のために提供され、請求される本発明を限定するためではない。
【０３１９】
（実施例１）
アテローム性動脈硬化症の兆候を媒介するＡｐｏＪ関連ペプチドの使用
ＬＤＬによって誘導される単球の化学走化活性の阻止
図１は、Ｄアミノ酸から作成されたａｐｏＪペプチド（Ｄ−Ｊ３３６、Ａｃ−Ｌ−Ｌ−Ｅ−Ｑ−Ｌ−Ｎ−Ｅ−Ｑ−Ｆ−Ｎ−Ｗ−Ｖ−Ｓ−Ｒ−Ｌ−Ａ−Ｎ−Ｌ−Ｔ−Ｑ−Ｇ−Ｅ−ＮＨ２、配列番号１１２９）の、同時インキュベーションの中でのインビトロのＬＤＬによって誘導される単球の化学走化活性を妨げることに対する効果との、Ｄ−４Ｆの効果（Ａｎａｎｔｈａｒａｍａｉａｈ  ｅｔ  ａｌ．，（２００２）Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，１０５：２９０−２９２）の比較を説明する。ヒトの動脈内皮細胞を、培地のみ（添加物なし）とともに、対照のヒトＬＤＬ（２００μｇのタンパク質／ｍｌ）とともに、または対照のヒトＬＤＬ＋対照のヒトＨＤＬ（３５０μｇのＨＤＬタンパク質／ｍｌ）と共にインキュベートした。Ｄ−Ｊ３３６またはＤ−４Ｆを、示した濃度範囲で、対照のヒトＬＤＬ（２００μｇのタンパク質／ｍｌ）と共に、他のウェルに添加した。一晩のインキュベーションの後、上清を、単球の化学走化活性についてアッセイした。図１に示すように、ヒトの動脈壁細胞によるＬＤＬによって誘導される単球の化学走化活性を妨げるａｐｏＪ変異体ペプチドのインビトロでの濃度は、Ｄ−４Ｆペプチドについて必要な濃度よりも１０倍から２５倍少ない。
【０３２０】
Ｄ−Ｊ３３６での動脈壁細胞のプレ処理による、ＬＤＬによって誘導される単球の化学走化活性の阻止
図２は、プレインキュベーションにおけるＬＤＬによって誘導される単球の化学走化活性を妨げることに対する、Ｄ−Ｊ３３６の効果との、Ｄ−４Ｆの効果の比較を示す。ヒトの動脈内皮細胞を、Ｄ−Ｊ３３６またはＤ−４Ｆとともに、ＤＪ３３６については４、２、および１μｇ／ｍｌ、そしてＤ−４Ｆについては１００、５０、２５、および１２．５μｇ／ｍｌで、６時間プレインキュベートした。その後、培養物を洗浄し、そしてアッセイの対照としての、培地のみ（添加物なし）とともに、または対照のヒトＬＤＬ（２００μｇのタンパク質／ｍｌ）とともに、またはヒトＬＤＬ＋対照のヒトＨＤＬ（３５０μｇのＨＤＬタンパク質／ｍｌ）と共にインキュベートした。ペプチドで予め処理したウェルに、対照のヒトＬＤＬ（２００μｇのタンパク質／ｍｌ）を加えた。一晩のインキュベーションの後、上清を、単球の化学走化活性についてアッセイした。
【０３２１】
図２に示すように、ＡｐｏＪ変異体ペプチドは、インビトロでの動脈壁細胞によるＬＤＬの酸化を防ぐことにおいて、１０〜２５倍さらに強力であった。
【０３２２】
ＬＤＬ受容体ヌルマウスにおけるＨＤＬ保護能力に対するａｐｏＪペプチド模倣物の効果。
【０３２３】
Ｆと指定されたＤ−４Ｆ、またはＤアミノ酸から作成されたａｐｏＪペプチド（Ｄ−Ｊ３３６、Ｊと指定された）を、飲料水１ｍｌあたり０．２５または０．５ｍｇで、ＬＤＬ受容体ヌルマウス（１つのグループについて４匹）の飲料水に添加した。２４時間後または４８時間後に、血液をマウスから採取し、それらのＨＤＬを単離し、そしてＬＤＬによって誘導される単球の化学走化活性から保護するその能力について試験した。アッセイの対照には、リポタンパク質を添加しないウェル（添加物なし）、または対照のヒトＬＤＬのみを添加したウェル（ＬＤＬと指定した、２００μｇのコレステロール／ｍｌ）、または対照のＬＤＬ＋対照のヒトＨＤＬを添加したウェル（＋ＨＤＬと指定した、３５０μｇのＨＤＬコレステロール）を含めた。マウスＨＤＬを試験するために、対照のＬＤＬを、マウスＨＤＬ（＋Ｆ  ＨＤＬまたは＋Ｊ  ＨＤＬ）と一緒に動脈壁細胞の培養物に添加した。マウスＨＤＬを、それぞれ１００μｇのコレステロール／ｍｌで添加した。Ｄ−４ＦまたはＤ−Ｊ３３６のいずれかでの処理の後、１００μｇ／ｍｌのマウスＨＤＬは、単球の化学走化活性を生じるように動脈壁細胞を誘導することから対照ＬＤＬを防ぐことにおいて、３５０μｇ／ｍｌの対照のヒトＨＤＬと同程度に活性であった。インビトロとインビボの間での、Ｄ−４Ｆと比較したＤ−Ｊ３３６ペプチドについて必要な相対的な用量の間の不一致の理由は、水の中でのペプチドの溶解度に関係している可能性があり、そして本発明者らは、同等の溶解度が得られるように測定が行われる場合には、Ｄ−Ｊペプチドは、それらがインビトロで活性であるよりも、インビボではるかに活性であるであろうと考えている。
【０３２４】
経口でペプチドを投与されたａｐｏＥヌルマウス由来のＨＤＬによるＬＤＬによって誘導される単球の化学走化活性に対する保護。
【０３２５】
図４は、ＨＤＬ保護能力に対する経口でのａｐｏＡ−１ペプチド模倣物とａｐｏＪペプチドの効果を示す。ＡｐｏＥヌルマウス（１つのグループについて４匹）に、飲料水１ｍｌあたり５０、３０、２０、１０、５μｇのＤ−４Ｆ（Ｆと指定した）、または飲料水１ｍｌあたり５０、３０、または２０μｇのａｐｏＪペプチド（Ｊと指定した）を投与した。２４時間後に血液を採取し、ＦＰＬＣによって血漿を分画し、そしてＬＤＬを含む画分（マウスＬＤＬについてはｍＬＤＬと指定した）とＨＤＬを含む画分（ｍＨＤＬと指定した）を別々にプールし、そしてＬＤＬによって誘導される単球の化学走化活性によって決定されるＬＤＬの酸化に対するＨＤＬの保護能力を決定した。アッセイの対照のために、培養ウェルにリポタンパク質を添加しなかった（添加物なし）、ｍＬＤＬだけを添加した（２００μｇのコレステロール／ｍｌ）、またはｍＬＤＬ＋標準の正常なヒトＨＤＬを添加した（Ｃｏｎｔ．ｈ  ＨＤＬと指定した、３５０μｇのＨＤＬコレステロール／ｍｌ）。
【０３２６】
マウスＨＤＬを試験するために、マウスＨＤＬと一緒にｍＬＤＬ（＋Ｆ  ｍＨＤＬまたは＋Ｊ  ｍＨＤＬ）を、動脈壁細胞培養物に添加した。彼らの飲料水にいずれのペプチドも添加しなかったマウスに由来するＨＤＬは、ペプチドを加えていないｍＨＤＬ（ｎｏ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ＨＤＬ）と指定した。マウスＨＤＬは、１００μｇのコレステロール／ｍｌで使用した。Ｄ−４ＦまたはＤ−Ｊ３３６を投与した後、１００μｇ／ｍｌのマウスＨＤＬは、３５０μｇ／ｍｌの正常なヒトＨＤＬと同程度に活性であった。図４に示すように、飲料水に添加した場合には、Ｄ−Ｊペプチドは、ａｐｏＥヌルマウスにおいてはＨＤＬ保護能力を高めることにおいてＤ−４Ｆと同程度に強力であった。
【０３２７】
経口でペプチドを投与されたａｐｏＥヌルマウスから得られたＬＤＬの単球の化学走化活性を誘導する能力。
【０３２８】
図５は、ＬＤＬの酸化されやすさに対する経口でのａｐｏＡ−１ペプチド模倣物およびａｐｏＪペプチドの効果を示す。ａｐｏＥヌルマウス（１つのグループについて４匹）に、彼らの飲料水の中で、飲料水１ｍｌあたり５０、３０、２０、１０、５μｇのＤ−４Ｆ（Ｆと指定した）、または飲料水１ｍｌあたり５０、３０、または２０μｇのａｐｏＪペプチド（Ｄアミノ酸から作成されたＤ−Ｊ３３６、Ｊと指定した）を投与した。２４時間後、図４に示したマウスから血液を採取し、ＦＰＬＣによって血漿を分画し、そしてＬＤＬを含む画分（マウスＬＤＬについてはｍＬＤＬと指定した）をプールし、そして、単球の化学走化活性の誘導によって決定されるＬＤＬの酸化されやすさを決定した。アッセイの対照のために、培養ウェルにリポタンパク質を添加しなかった（添加物なし）、ｍＬＤＬだけを添加した（２００μｇのコレステロール／ｍｌ）、またはｍＬＤＬ＋標準の正常なヒトＨＤＬ（Ｃｏｎｔ．ｈ  ＨＤＬと指定した、３５０μｇのＨＤＬコレステロール／ｍｌ）を添加した。
【０３２９】
Ｄ−４Ｆを投与したマウスに由来するマウスＬＤＬ（ｍＬＤＬ）（Ｆ  ｍＬＤＬ）、またはａｐｏＪペプチドを投与したマウスに由来するマウスＬＤＬ（ｍＬＤＬ）（Ｊ  ｍＬＤＬ）を、動脈壁細胞培養物に添加した。飲料水の中にいずれのペプチドも投与しなかったマウスに由来するＬＤＬは、ペプチドを加えていないｍＨＤＬ（Ｎｏ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ＨＤＬ）と指定した。
【０３３０】
図５に示すように、飲料水に添加した場合には、Ｄ−Ｊ３３６は、単球の化学走化活性の誘導によって決定した場合には、ａｐｏＥヌルマウスに由来するＬＤＬをヒト動脈壁細胞による酸化に対して耐性にすることにおいて、Ｄ−４Ｆよりもわずかにより強力であった。
【０３３１】
経口でペプチドを投与したａｐｏＥヌルマウスから得られたＨＤＬによる、リン脂質の酸化および単球の化学走化活性の誘導に対する保護。
【０３３２】
図６は、ＨＤＬ保護能力に対する経口でのａｐｏＡ−１ペプチド模倣物およびａｐｏＪペプチドの効果を示す。ａｐｏＥヌルマウス（１つのグループについて４匹）に、飲料水１ｍｌあたり５０、３０、２０、１０、５μｇのＤ−４Ｆ（Ｆと指定した）、または飲料水１ｍｌあたり５０、３０、または２０μｇのａｐｏＪペプチド（Ｄアミノ酸から作成されたＤ−Ｊ３３６、Ｊと指定した）を投与した。２４時間後、血液を採取し、ＦＰＬＣによって血漿を分画し、そしてＨＤＬを含む画分（ｍＨＤＬと指定した）をプールし、そして、単球の化学走化活性の誘導によって決定されるＰＡＰＣの酸化に対するＨＤＬの保護能力を決定した。アッセイの対照のために、培養ウェルにリポタンパク質を添加しなかった（添加物なし）、２０μｇ／ｍｌのリン脂質ＰＡＰＣ＋１．０μｇ／ｍｌのＨＰＯＤＥを添加した、あるいは、ＰＡＰＣ＋ＨＰＯＤＥと標準の正常なヒトＨＤＬを添加した（３５０μｇのＨＤＬコレステロール／ｍｌ、Ｃｏｎｔ．ｈ  ＨＤＬと指定した）。
【０３３３】
マウスＨＤＬを試験するために、ＰＡＰＣ＋ＨＰＯＤＥを、マウスＨＤＬ（＋Ｆ  ｍＨＤＬ  または＋Ｊ  ｍＨＤＬ）とともに、動脈壁細胞培養物に添加した。飲料水の中にいずれのペプチドも投与しなかったマウスに由来するＨＤＬは、ペプチドを加えていないｍＨＤＬと指定した。マウスＨＤＬは、１００μｇのコレステロール／ｍｌで使用した。
【０３３４】
図６に示すデータは、飲料水に添加した場合には、Ｄ−Ｊ３３６は、単球の化学走化活性を生じることによって測定した場合には、ＨＤＬに、ヒトの動脈壁共培養物中での酸化剤ＨＰＯＤＥによるリン脂質ＰＡＰＣの酸化の阻害を生じさせることにおいて、Ｄ−４Ｆと同程度に強力であったことを示している。
【０３３５】
マウスの中での血漿パラオキソナーゼ活性に対する経口でのａｐｏＡ−１ペプチド模倣物およびａｐｏＪペプチドの効果。
【０３３６】
図７は、マウスにおける血漿パラオキソナーゼ活性に対する経口でのａｐｏＡ−１ペプチド模倣物およびａｐｏＪペプチドの効果を示す。ａｐｏＥヌルマウス（１つのグループについて４匹）に、飲料水１ｍｌあたり５０、１０、５、または０μｇのＤ−４Ｆ（Ｆと指定した）、または飲料水１ｍｌあたり５０、１０、または５μｇのａｐｏＪペプチド（Ｄアミノ酸から作成されたＤ−Ｊ３３６、Ｊと指定した）を投与した。２４時間後、血液を採取し、血漿をＰＯＮ１活性についてアッセイした。これらのデータは、飲料水に添加した場合には、Ｄ−Ｊ３３６は、ａｐｏＥヌルマウスのパラオキソナーゼ活性を増大させることにおいて、Ｄ−４Ｆと少なくとも同程度に強力であったことを示している。
【０３３７】
（実施例２）
経口でのＧ＊ペプチドはＡｐｏＥ欠損マウスにおいてＨＤＬ保護能力を高める。
【０３３８】
雌の４ヶ月齢のａｐｏＥ欠損マウス（１つのグループについてｎ＝４）を、以下のアミノ酸配列を有しているＧ＊ペプチドで処置した。ペプチド１１３〜１２２＝Ａｃ−ＬＶＧＲＱＬＥＥＦＬ−ＮＨ２（配列番号１１３０）、ペプチド３３６〜３５７＝Ａｃ−ＬＬＥＱＬＮＥＱＦＮＷＶＳＲＬＡＮＬＴＱＧＥ−ＮＨ２（配列番号１１３１）、およびペプチド３３７〜３９０＝Ａｃ−ＰＳＧＶＴＥＶＶＶＫＬＦＤＳ−ＮＨ２（配列番号１１３２）。
【０３３９】
それぞれのマウスに、胃のチューブから２００μｇのペプチドを投与した。４時間後、血液を採取し、血漿を分離し、リポタンパク質を分画し、そしてＨＤＬ（１ｍｌあたり２５μｇ）を、ヒト動脈壁細胞の培養物中でのＬＤＬ（１ｍｌあたり１００μｇ）の酸化に対する保護能力についてアッセイした。データは図８に示す。ペプチドは、マウスにおいては、有意なＨＤＬ保護能力を提供する。
【０３４０】
別の実験では、雌の４ヶ月齢のａｐｏＥ欠損マウス（１つのグループについてｎ＝４）を、以下の１１アミノ酸配列を有しているＧ＊ペプチド１４６〜１５６で処置した：Ａｃ−ＱＱＴＨＭＬＤＶＭＱＤ−ＮＨ２（配列番号１１３３）。マウスには、示した濃度で、彼らの飲料水の中でペプチドを投与した（図９を参照のこと）。１８時間後、血液を採取し、血漿を分離し、リポタンパク質を分画し、そしてＨＤＬ（１ｍｌあたり５０μｇのコレステロール）を、ヒト動脈壁細胞の培養物中でＰＡＰＣ（１ｍｌあたり２５μｇ）＋ＨＰＯＤＥ（１ｍｌあたり１．０μｇ）の酸化に対する保護能力についてアッセイした。アッセイの対照には、添加物を加えていないもの（Ｎｏ  ａｄｄｉｔｉｏｎｓ）、ＰＡＰＣ＋ＨＰＯＤＥ、およびＰＡＰＣ＋ＨＰＯＤＥと対照のＨＤＬ（＋ＨＤＬと指定した）を含めた。データは、３連の培養物中の９個の高倍率視野において移動した単球の数の平均±ＳＤである。アスタリスクは、水である対照（０μｇ／ｍｌ）に対するｐ＜０．０５のレベルの有意性を示す。
【０３４１】
（実施例３）
ペプチド合成のための液相化学
特定の実施形態においては、液相合成化学によって、本発明のペプチドを合成するより経済的な手段が提供される。
【０３４２】
本発明の以前には、合成は通常、全ての固相合成化学を使用して行われてきた。９個未満のアミノ酸のペプチドの固相合成は、９個を超えるアミノ酸のペプチドの固相合成よりもはるかに経済的である。９個を超えるアミノ酸のペプチドの合成によっては、樹脂から伸びているアミノ酸鎖の物理的な解離が原因で、物質の有意な消失が生じる。９個未満のアミノ酸が含まれているペプチドの固相合成は、樹脂から伸びている鎖の消失が比較的少ないので、はるかに経済的である。
【０３４３】
特定の実施形態においては、液相合成は、１８アミノ酸のａｐｏＡ−Ｉ模倣ペプチドである４Ｆ（および他の関連するペプチド）の合成を、全て固相合成から全て液相合成に、または３つの鎖（それぞれが、例えば、６個のアミノ酸を含んでいる）の固相合成と、その後の溶液の中での３つの鎖のアセンブリの組み合わせのいずれかに変換させることにより機能する。これにより、はるかにより経済的な全体的な合成が提供される。この手順は、ペプチドが１８アミノ酸の長さではない場合にも容易に改変される。したがって、例えば、１５マーを、３つの５マーの固相合成、その後の３つの鎖の溶液の中でのアセンブリによって合成することができる。１４マーは、２つの５マーと１つの４マーの固相合成、その後の３つの鎖の溶液の中でのアセンブリなどによって合成することができる。
【０３４４】
Ａ）合成プロトコールのまとめ
ペプチドＤ４Ｆ（Ａｃ−Ｄ−Ｗ−Ｆ−Ｋ−Ａ−Ｆ−Ｙ−Ｄ−Ｋ−Ｖ−Ａ−Ｅ−Ｋ−Ｆ−Ｋ−Ｅ−Ａ−Ｆ−ＮＨ２（配列番号５））の合成のための反応図式を表２０に説明する（この反応図式と合成の収率を表２０に示す）。
【０３４５】
【表２０】
2008539235.tif 000073
Ｂ）合成プロトコールの詳細
１．Ｄ−４Ｆを合成するための断片の縮合手順
固相上での断片の縮合のために合成した断片は以下である：
断片１：Ａｃ−Ｄ（ＯＢｕｔ）−Ｗ−Ｆ−Ｋ（εＢｏｃ）−Ａ−Ｆ−ＣＯＯＨ（配列番号１１４１）；
断片２：Ｆｍｏｃ−Ｙ（ＯＢｕｔ）−Ｄ（ＯＢｕｔ）−Ｋ（εＢｏｃ）−Ｖ−Ａ−Ｅ（ＯＢｕｔ）−ＣＯＯＨ（配列番号１１４２）；および  
断片３：Ｆｍｏｃ−Ｋ（εＢｏｃ）Ｆ−Ｋ（εＢｏｃ）−Ｅ（ＯＢｕｔ）−Ａ−Ｆ−Ｒｉｎｋアミド樹脂（配列番号１１４３）。
【０３４６】
断片１は、ＴＦＡでの処理の後に最終的なペプチドを得るために樹脂の左側にした。
【０３４７】
断片１を合成するために：Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ（１．２等量）を、ＤＭＦ：ジクロロメタン（１：１）中の６等量のＤＩＥＡの存在下でクロロトリチル樹脂（Ｎｏｖａ  Ｂｉｏｃｈｅｍ、１．３ｍＭｏｌ／ｇの代用物、５ｍＭｏｌまたは６．５ｇを使用した）に添加し、４時間攪拌した。樹脂上での過剰な官能性を、ジクロロメタンおよびＤＩＥＡの存在下でメタノールでキャプした。Ｆｍｏｃ−Ｆｍｏｃの除去後、アミノ酸誘導体（２等量）を、上記のようにＨＯＢｔ／ＨＢＴＵ試薬を使用して添加した。最終的なＦｍｏｃ−Ｄ（ＯＢｕｔ）−Ｗ−Ｆ−Ｋ（εＢｏｃ）−Ａ−Ｆクロロトリチル樹脂を、Ｆｍｏｃ脱ブロッキング剤で処理し、ジイソプロピルエチルアミンの存在下で６等量の酢酸無水物でアセチル化した。得られたＡｃ−Ｄ（ＯＢｕｔ）−Ｗ−Ｆ−Ｋ（εＢｏｃ）−Ａ−Ｆ−樹脂を、トリフルオロエタノール−酢酸−ジクロロメタン（２：２：６、１０ｍｌ／樹脂１ｇ）の混合物で室温で４時間処理した。濾過による樹脂の除去後、溶媒を、減圧下でｎ−ヘキサンを用いた共沸蒸留によって除去した。樹脂（１．８ｇ）を、Ａｃ−Ｄ（ＯＢｕｔ）−Ｗ−Ｆ−Ｋ（εＢｏｃ）−Ａ−Ｆ−ＣＯＯＨ（配列番号１１４４）であると、質量スペクトル分析によって決定した。
【０３４８】
断片２であるＦｍｏｃ−Ｙ（ＯＢｕｔ）−Ｄ（ＯＢｕｔ）−Ｋ（εＢｏｃ）−Ｖ−Ａ−Ｅ（ＯＢｕｔ）−ＣＯＯＨ（配列番号１１４５）を、断片１について記載した手順を使用して得た。最終的な収量は２．２ｇであった。
【０３４９】
断片３．０．９ｇ（０．５ｍｍｏｌ）のＲｉｎｋアミド樹脂（Ｎｏｖａ  Ｂｉｏｃｈｅｍ）を使用して断片を得、Ｒｉｎｋアミド樹脂を、ジクロロメタン中の２０％のピペチジンで５分間を１回、そして１５分間を２回、処理した（Ｆｍｏｃ脱ブロッキング剤）。１．２等量のＦｍｏｃ−Ｐｈｅを、縮合剤ＨＯＢｔ／ＨＢＴＵ（数滴のジイソプロピルエチルアミンの存在下で２等量）を使用して縮合した（アミノ酸縮合）。残りのアミノ酸の脱ブロッキングと縮合を継続して行い、Ｆｍｏｃ−Ｋ（εＢｏｃ）Ｆ−Ｋ（εＢｏｃ）−Ｅ（ＯＢｕｔ）−Ａ−Ｆ−ｒｉｎｋアミド樹脂（配列番号１１４６）を得た。Ｆｍｏｃを切断し、そしてペプチド樹脂Ｋ（εＢｏｃ）Ｆ−Ｋ（εＢｏｃ）−Ｅ（ＯＢｕｔ）−Ａ−Ｆ−ｒｉｎｋ樹脂（配列番号１１４６）を、以下に記載するような断片の縮合に使用した。
【０３５０】
ＤＭＦ中の断片２を、ＤＩＥＡの存在下でＨＯＢｔ−ＨＢＴＵ手順を使用して、一晩かけて断片３（１．２等量）に付加した。ＤＭＦおよび脱ブロッキングによって樹脂を洗浄した後、Ｆｍｏｃ−断片１（１．２等量）を、ＨＯＢｔ−ＨＢＴＵ手順を使用して、一晩かけてドデカペプチド樹脂に付加した。
【０３５１】
最終的なペプチド樹脂（３．３ｇ）をＴＦＡ−フェノール−トリイソプロピルシラン−チオアニソール−水（８０：５：５：５）の混合物で１．５時間（１０ｍｌの試薬／樹脂１ｇ）で処理した。樹脂を濾過し、溶液を、１０倍容量のエーテルで稀釈した。沈殿したペプチドを遠心分離によって単離し、エーテルで２回洗浄した。１ｇの粗ペプチドについてＨＰＬＣ精製を行って、１００ｍｇのペプチドを得た。
【０３５２】
２．ペプチドの特性決定
ペプチドを、質量スペクトル法および分析ＨＰＬＣ法によって同定した。
【０３５３】
図１４に示すように、液相合成の反応図式による生成物は、ａｐｏＥヌルマウスにおいてＬＤＬによって誘導される単球の化学走化性を阻害するＨＤＬおよびプレ−βＨＤＬを生産することにおいて、生物学的に非常に活性である。ａｐｏＥヌルマウスには、上記のように合成した５マイクログラムのＤ−４Ｆを与えた（Ｆｒｇｍｎｔ）か、または、マウスには、同じ量のＤ−４Ｆを含まないマウス用の餌を与えた（Ｃｈｏｗ）。餌を与え始めてから１２時間後に、マウスを採血し、それらの血漿をＦＰＬＣ上で分画した。ＬＤＬ（１００マイクログラムのＬＤＬ−コレステロール）を、ヒトの動脈壁細胞だけ（ＬＤＬ）、またはヒト動脈壁細胞（ＬＤＬ）と対照のヒトＨＤＬ（対照ＨＤＬ）との共培養物、またはヒト動脈壁細胞（ＬＤＬ）と、Ｄ−４Ｆを与えた（Ｆｒｇｍｎｔ）もしくはＤ−４Ｆを与えなかった（Ｃｈｏｗ）マウスに由来するＨＤＬ（５０マイクログラムのＨＤＬ−コレステロール）もしくはポスト−ＨＤＬ（ｐＨＤＬ；プレβＨＤＬ）との共培養物に対して添加した。
【０３５４】
（実施例４）
Ｄ−４Ｆと逆（レトロ−）Ｄ−４Ｆの活性の比較
図１６に示すように、Ｄ−４ＦおよびＲＤ−４Ｆの生物学的活性には、有意な差はなかった。雌のａｐｏＥヌルマウスに、胃のチューブから、０、３、６、１２、または２５マイクログラムのＤ−４Ｆもしくは逆Ｄ−４Ｆを、１００マイクロリットルの水の中で投与した。７時間後に、血液を採取し、血漿をＦＰＬＣによって分離した。標準の対照のヒトＬＤＬを、１００マイクログラムのＬＤＬ−コレステロール／ｍＬ（ＬＤＬ）の濃度でヒト動脈壁細胞に添加した。得られた単球の化学走化活性を１．０に正規化した。同じ濃度の同じＬＤＬを、正常なヒトに由来する５０マイクログラムのＨＤＬ−コレステロール／ｍＬ（ｈＨＤＬ）、あるいは、Ｘ軸に示したＤ−４Ｆまたは逆Ｄ−４Ｆの用量を投与したａｐｏＥヌルマウスに由来する５０マイクログラムのＨＤＬ−コレステロール／ｍＬで、ＨＤＬと共にヒト動脈壁細胞に添加した。得られる単球の化学走化活性を、ＨＤＬを添加しなかったＬＤＬの化学走化活性に対して正規化した。得られる値は、ＨＤＬ炎症指数（ＨＤＬ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ｉｎｄｅｘ）である。結果は、３回の独立した実験によるデータについての平均±Ｓ．Ｄ．である。
【０３５５】
本明細書中に記載される実施例および実施形態は説明の目的のためのものにすぎず、それに照らした様々な改変または変更が当業者に示唆され、そしてそれらが本出願の精神および範囲、ならびに添付の特許請求の範囲の範囲に含まれるであろうことが理解される。本明細書中で引用される全ての刊行物、特許、および特許出願は、全ての目的のためにそれらの全体が引用により本明細書中に組み入れられる。
【図面の簡単な説明】
【０３５６】
【図１】図１は、Ｄ４Ｆ（Ｎａｖａｂ，ｅｔ  ａｌ．，（２００２）Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，１０５：２９０−２９２）と、Ｄアミノ酸から作成されたａｐｏ−Ｊペプチド３３６（Ｄ−Ｊ３３６＊）の、同時インキュベーション実験におけるインビトロでのＬＤＬによって誘導される単球の化学走化活性の阻止に対する効果の比較を示す。このデータは、４連の培養物中について９個の高倍率視野において移動した単球の数の平均±ＳＤである（Ｄ−Ｊ３３６＝Ａｃ−ＬＬＥＱＬＮＥＱＦＮＷＶＳＲＬＡＮＬＴＱＧＥ−ＮＨ２、配列番号１）。
【図２】図２は、Ｄ−４Ｆと比較した、Ｄ−Ｊ３３６を用いた動脈壁の細胞の前処理による、ＬＤＬによって誘導される単球の化学走化活性の阻止を示す。データは、４連の培養物中について９個の高倍率視野において移動した単球の数の平均±ＳＤである。
【図３】図３は、ＬＤＬ受容体ヌルマウスの中でのＨＤＬ保護能力に対するａｐｏ  Ｊペプチド模倣物の効果を示す。値は、４連のアッセイウェルのそれぞれによる９個の高倍率視野において移動した単球の数の平均±ＳＤである。
【図４】図４は、経口でペプチドを投与したａｐｏＥヌルマウスに由来するＨＤＬによる、ＬＤＬによって誘導される単球の化学走化活性に対する保護を示す。値は、４連のアッセイウェルのそれぞれによる９個の高倍率視野において移動した単球の数の平均±ＳＤである。アスタリスクは、ペプチドを加えていないｍＨＤＬ（Ｎｏ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  ｍＨＤＬ）と比較した有意差（ｐ＜０．０５）を示す。
【図５】図５は、酸化に対するＬＤＬの感度についての、経口のａｐｏＡ−１ペプチド模倣物とａｐｏ  Ｊペプチドの効果を示す。値は、４連のアッセイウェルのそれぞれによる９個の高倍率視野において移動した単球の数の平均±ＳＤである。アスタリスクは、ペプチドを加えていないＬＤＬと比較した有意差（ｐ＜０．０５）を示す。
【図６】図６は、ＨＤＬ保護能力に対する経口のａｐｏＡ−１ペプチド模倣物およびａｐｏ  Ｊペプチドの効果を示す。値は、４連のアッセイウェルのそれぞれによる９個の高倍率視野において移動した単球の数の平均±ＳＤである。アスタリスクは、ペプチドを加えていないｍＨＤＬと比較した有意差（ｐ＜０．０５）を示す。
【図７】図７は、血漿のパラオキソナーゼ活性に対する経口のａｐｏＡ−１ペプチド模倣物およびａｐｏＪペプチドの効果を示す。値は、４連の血漿のアリコートからの読み取り値の平均±ＳＤである。アスタリスクは、ペプチドを加えていない対照の血漿と比較した有意差（ｐ＜０．０５）を示す。
【図８】図８は、ａｐｏＥ−／−マウスのＨＤＬ保護能力に対する経口のＧ＊ペプチドの効果を示す。値は、４連の血漿のアリコートからの読み取り値の平均±ＳＤである。アスタリスクは、ペプチドを加えていない血漿と比較した有意差（ｐ＜０．０５）を示す。
【図９】図９は、ＡｐｏＥ−／−マウスのＨＤＬ保護能力に対する、経口のＧ＊ペプチド、１４６〜１５６の効果を示す。
【図１０Ａ】図１０Ａは、本発明の特定のペプチドのヘリックスホイール図を示す。図１０Ａ：Ｖ２Ｗ３Ａ５Ｆ１０，１７−Ｄ−４Ｆ。
【図１０Ｂ】図１０Ｂは、本発明の特定のペプチドのヘリックスホイール図を示す。図１０Ｂ：Ｗ３−Ｄ−４Ｆ。
【図１０Ｃ】図１０Ｃは、本発明の特定のペプチドのヘリックスホイール図を示す。図１０Ｃ：Ｖ２Ｗ３Ｆ１０−Ｄ−４Ｆ。
【図１１】図１１Ａ：標準的なヒトＬＤＬ（ＬＤＬ）を、ヒトＨＤＬを含まない（添加なし（Ｎｏ  Ａｄｄｉｔｉｏｎ））もしくはヒトＨＤＬを含む（＋対照ＨＤＬ）、またはＣｈｏｗを一晩与えた（＋Ｃｈｏｗ  ＨＤＬ）、もしくは、ｃｈｏｗ中で一晩Ｄ−４Ｆ与えた（＋Ｄ４Ｆ  ＨＤＬ）、もしくはｃｈｏｗ中で一晩Ｇ５−Ｄ−４Ｆ与えた（＋Ｇ５  ＨＤＬ）、もしくはｃｈｏｗ中で一晩Ｇ５，１０−Ｄ−４Ｆ与えた（＋５−１０ＨＤＬ）、もしくは、ｃｈｏｗ中で得一晩Ｇ５，１１−Ｄ−４Ｆ与えた（＋５−１１  ＨＤＬ）ａｐｏＥヌルマウスに由来するマウスＨＤＬを含む、ヒトの動脈壁共培養物に添加した。得られた単球の化学走化活性を、以前に記載されたように決定した（Ｎａｖａｂ  ｅｔ  ａｌ．，（２００２）Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，１０５：２９０−２９２）。
【図１２】図１２は、本発明のペプチドが糖尿病の兆候（例えば、血中グルコース）を軽減させることにおいて有効であることを示している。Ｏｂｅｓｅ  Ｚｕｃｋｅｒラット（２６週齢）を採血し、その後、Ｄ−４Ｆ（５．０ｍｇ／ｋｇ／日）の１日１回の腹腔内注射で処置した。１０日後、ラットを再び採血して、血漿グルコースと脂質ヒドロペルオキシド（ＬＯＯＨ）を決定した。＊ｐ＝０．０２７；＊＊ｐ＝０．００１７。
【図１３】図１３は、１６週齢のＯｂｅｓｅ  ＺｕｃｋｅｒラットにＤ−４Ｆ（５ｍｇ／ｋｇ／日）を１週間にわたり注射し、その時点で、総頸動脈のバルーン損傷を行った。２週間後、ラットを屠殺し、血管内膜の中膜の割合を決定した。
【図１４】図１４は、液相合成スキームの産物が、ＨＤＬ、およびａｐｏＥヌルマウスにおいてはＬＤＬによって誘導される単球の化学走化を阻害するプレ−βＨＤＬを生産することにおいて生物学的に非常に活性であることを示している。ａｐｏＥヌルマウスには、上記に記載されるように合成された５マイクログラムのＤ−４Ｆを与え（Ｆｒｇｍｎｔ）、また、マウスには、同量のＤ−４Ｆを含まないマウス用の餌を与えた（Ｃｈｏｗ）。餌を与え始めてから１２時間後に、マウスを採血し、それらの血漿をＦＰＬＣ上で分画した。ＬＤＬ（１００マイクログラムのＬＤＬ−コレステロール）を、ヒトの動脈壁細胞のみ（ＬＤＬ）、またはヒトの動脈壁細胞と対照のヒトＨＤＬの共培養物（対照ＨＤＬ（Ｃｏｎｔｒｏｌ  ＨＤＬ））、またはヒトの動脈壁細胞と、Ｄ−４Ｆ与えたマウス（Ｆｒｇｍｎｔ）もしくはＤ−４Ｆを投与していないマウス（Ｃｈｏｗ）に由来するＨＤＬ（５０マイクログラムのＨＤＬ−コレステロール）もしくはポスト−ＨＤＬ（ｐＨＤＬ；プレβＨＤＬ）との共培養物に添加し、そして生じた単球の化学走化活性を決定した。
【図１５】図１５は、４Ｆおよび逆（レトロ）４Ｆのヘリックスホイール表示を示す。逆−４Ｆは、互いにアミノ酸の相対的な位置を有しており、親水性面および疎水性面が同じである４Ｆの鏡像である。
【図１６】図１６は、Ｄ−４Ｆ対逆Ｄ−４ＦのＨＤＬ炎症指数の比較を示す。
【図１】
2008539235.tif 000074
【図２】
2008539235.tif 000075
【図３】
2008539235.tif 000076
【図４】
2008539235.tif 000077
【図５】
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【図６】
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【図７】
2008539235.tif 000080
【図８】
2008539235.tif 000081
【図９】
2008539235.tif 000082
【図１０Ａ】
2008539235.tif 000083
【図１０Ｂ】
2008539235.tif 000084
【図１０Ｃ】
2008539235.tif 000085
【図１１】
2008539235.tif 000086
【図１２】
2008539235.tif 000087
【図１３】
2008539235.tif 000088
【図１４】
2008539235.tif 000089
【図１５】
2008539235.tif 000090
【図１６】
2008539235.tif 000091
【手続補正書】
【提出日】平成20年2月27日(2008.2.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2008539235000001.app
【国際調査報告】
2008539235.tif 000092