(57)【要約】  組成物は、アンフォテリシンＢの少なくとも約９５重量％を含む粒子を含み、前記粒子は、約１．１μｍ〜約１．９μｍの質量中央径を有する。他の組成物はまた、アンフォテリシンＢの少なくとも約９５重量％を含む粒子を含み、前記粒子の少なくとも約８０重量％は、約１．１μｍ〜約１．９μｍの幾何学的粒径を有する。さらに他の組成物は、アンフォテリシンＢを含む粒子を含み、前記粒子は、約１．９μｍ未満の質量中央径を有し、そして前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約２０％の結晶度を有する。単位剤形、デリバリーシステム、および方法は、同様の組成物を含み得る。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも約９５重量％のアンフォテリシンＢを含む粒子を含む組成物であって、前記粒子が約１．１μｍ〜約１．９μｍの質量中央径を有する前記組成物。
【請求項２】
前記質量中央径が約１．２μｍ〜約１．８μｍである、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記粒子の少なくとも約８０重量％が、約１．１μｍ〜約１．９μｍの幾何学的粒径を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記粒子の少なくとも約９０重量％が、約１．１μｍ〜約１．９μｍの幾何学的粒径を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約２０％の結晶化度を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約７０％の結晶化度を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約９０％の結晶化度を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
前記アンフォテリシンＢは、約５０％〜約９９％の結晶化度を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
少なくとも約９５重量％のアンフォテリシンＢを含む粒子を含む組成物であって、前記粒子の少なくとも約８０重量％が、約１．１μｍ〜約１．９μｍの幾何学的粒径を有する前記組成物。
【請求項１０】
前記粒子の少なくとも約９０重量％は、約１．１μｍ〜約１．９μｍの幾何学的粒径を有する、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記粒子は、約１．１μｍ〜約１．９μｍの質量中央径を有する、請求項９に記載の組成物。
【請求項１２】
前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約２０％の結晶化度を有する、請求項９に記載の組成物。
【請求項１３】
前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約７０％の結晶化度を有する、請求項９に記載の組成物。
【請求項１４】
前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約９０％の結晶化度を有する、請求項９に記載の組成物。
【請求項１５】
前記アンフォテリシンＢは、約５０％〜約９９％の結晶化度を有する、請求項９に記載の組成物。
【請求項１６】
アンフォテリシンＢを含む粒子を含む組成物であって、
前記粒子が、約１．９μｍ未満の質量中央径を有し、
前記アンフォテリシンＢが、少なくとも約２０％の結晶化度を有する、前記組成物。
【請求項１７】
前記質量中央径が、約０．５μｍ〜約１．８μｍである、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
前記粒子の少なくとも約８０重量％は、約３μｍ未満の幾何学的粒径を有する、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１９】
前記粒子の少なくとも約９０重量％は、約３μｍ未満の幾何学的粒径を有する、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２０】
前記アンフォテリシンＢが、少なくとも約７０％の結晶化度を有する、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２１】
前記アンフォテリシンＢが、少なくとも約９０％の結晶化度を有する、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２２】
前記粒子内のアンフォテリシンＢの結晶化度が、約５０％〜約９９％である、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２３】
有効量のアンフォテリシンＢ；及び
薬学的に容認可能な賦形剤、
を含む医薬組成物であって、
約１．１μｍ〜約１．９μｍの質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る、前記医薬組成物。
【請求項２４】
約１．２μｍ〜約１．８μｍの質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
前記粒子の少なくとも約８０重量％は、約１．１μｍ〜約１．９μｍの幾何学的粒径を有する、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
前記粒子の少なくとも約９０重量％は、約１．１μｍ〜約１．９μｍの幾何学的粒径を有する、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約５０％の結晶化度を有する、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約７０％の結晶化度を有する、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約８０％の結晶化度を有する、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
粒子状物質を含む、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
前記粒子状物質が、約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有する、請求項３０に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
少なくとも約８０重量％が、アンフォテリシンＢ及び前記薬学的に容認可能な賦形剤の両方を含む粒子状物質を含む、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
前記医薬組成物が、約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有する粒子状物質を含み、かつ、前記アンフォテリシンＢが、少なくとも約７０％の結晶化度を有する、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、炭水化物、脂質、アミノ酸、緩衝剤、及び塩から選択される少なくとも一つを含む、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、リン脂質を含む、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、金属イオンを含む、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、リン脂質および金属イオンを含む、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
中空および／または多孔性の粒子状物質を含む、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
前記薬学的に容認可能な賦形剤によって形成されたマトリクス内にアンフォテリシンＢを含む粒子状物質を含む、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
前記薬学的に容認可能な賦形剤は、少なくとも一つのリン脂質を含む、請求項３９に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
乾燥粉末を含む、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
推進剤をさらに含む、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
前記推進剤が少なくとも一つのヒドロフルオロアルカンを含む、請求項４２に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有する粒子状物質を含む医薬組成物であって、前記アンフォテリシンＢが少なくとも約７０％の結晶化度を有し、前記医薬組成物の少なくとも約８０重量％が、前記薬学的に容認可能な賦形剤を含むマトリクス内のアンフォテリシンＢを有する粒子状物質を含み、そして、前記薬学的に容認可能な賦形剤が、少なくとも一つのリン脂質を含む、請求項２３に記載の前記医薬組成物。
【請求項４５】
有効量のアンフォテリシンＢ；及び
薬学的に容認可能な賦形剤、
を含む医薬組成物であって、
アンフォテリシンＢを含む粒子から成り、ここで前記アンフォテリシンＢを含む粒子の少なくとも約８０重量％が約１．１μｍ〜約１．９μｍの幾何学的粒径を有する、前記医薬組成物。
【請求項４６】
前記粒子の少なくとも約９０重量％が、約１．１μｍ〜約１．９μｍの幾何学的粒径を有する、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項４７】
約１．２μｍ〜約１．８μｍの質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項４８】
前記アンフォテリシンＢが、少なくとも約５０％の結晶化度を有する、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項４９】
前記アンフォテリシンＢが、少なくとも約７０％の結晶化度を有する、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項５０】
前記アンフォテリシンＢが、少なくとも約８０％の結晶化度を有する、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項５１】
粒子状物質を含む、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項５２】
前記粒子状物質が、約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有する、請求項５１に記載の医薬組成物。
【請求項５３】
前記医薬組成物の少なくとも約８０重量％が、アンフォテリシンＢ及び薬学的に容認可能な賦形剤の両方を含む粒子状物質を含む、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項５４】
１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有する粒子状物質を含み、ここで前記アンフォテリシンＢが少なくとも約７０％の結晶化度を有する、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項５５】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、炭水化物、脂質、アミノ酸、緩衝剤、及び塩から選択される少なくとも一つを含む、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項５６】
前記薬学的に容認可能な賦形剤がリン脂質を含む、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項５７】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が金属イオンを含む、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項５８】
前記薬学的に容認可能な賦形剤がリン脂質および金属イオンを含む、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項５９】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、中空および／または多孔性の粒子状物質を含む、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項６０】
前記薬学的に容認可能な賦形剤によって形成されたマトリクス内にアンフォテリシンＢを含む粒子状物質を含む、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項６１】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、少なくとも一つのリン脂質を含む、請求項６０に記載の医薬組成物。
【請求項６２】
乾燥粉末を含む、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項６３】
推進剤をさらに含む、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項６４】
前記推進剤が少なくとも一つのヒドロフルオロアルカンを含む、請求項６３に記載の医薬組成物。
【請求項６５】
約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有する粒子を含む医薬組成物であって、ここで前記アンフォテリシンＢが少なくとも約７０％の結晶化度を有し、前記医薬組成物の少なくとも約８０重量％が、前記薬学的に容認可能な賦形剤を含むマトリクス内にアンフォテリシンＢを含む粒子状物質を含み、そして前記薬学的に容認可能な賦形剤が少なくとも一つのリン脂質を含む、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項６６】
有効量のアンフォテリシンＢ；及び
薬学的に容認可能な賦形剤を含む医薬組成物であって、前記アンフォテリシンＢが、約２０％〜約９９％の結晶化度を有する、前記医薬組成物。
【請求項６７】
前記アンフォテリシンＢが、約７０％〜約９８％の結晶化度を有する、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項６８】
約３μｍ未満の質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項６９】
約２μｍ未満の質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項７０】
アンフォテリシンＢを含む粒子から成る医薬組成物であり、ここで前記アンフォテリシンＢを含む粒子の少なくとも約８０重量％が約３μｍ未満の幾何学的粒径を有する、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項７１】
アンフォテリシンＢを含む粒子から成る医薬組成物であり、ここで前記アンフォテリシンＢを含む粒子の少なくとも約９０重量％が約３μｍ未満の幾何学的粒径を有する、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項７２】
粒子状物質を含む、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項７３】
前記粒子状物質が、約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有する、請求項７２に記載の医薬組成物。
【請求項７４】
前記粒子状物質が、約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有する、請求項７２に記載の医薬組成物。
【請求項７５】
前記医薬組成物の少なくとも約８０重量％が、アンフォテリシンＢおよび薬学的に容認可能な賦形剤の両方を含む粒子状物質を含む、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項７６】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、炭水化物、脂質、アミノ酸、緩衝剤、塩から選択される少なくとも一つを含む、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項７７】
前記薬学的に容認可能な賦形剤がリン脂質を含む、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項７８】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が金属イオンを含む、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項７９】
前記薬学的に容認可能な賦形剤がリン脂質及び金属イオンを含む、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項８０】
中空および／または多孔性の粒子状物質を含む、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項８１】
前記薬学的に容認可能な賦形剤を有するマトリクス内にアンフォテリシンＢを含む粒子状物質を含む、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項８２】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、少なくとも一つのリン脂質を含む、請求項８１に記載の医薬組成物。
【請求項８３】
乾燥粉末を含む、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項８４】
推進剤をさらに含む、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項８５】
前記推進剤が少なくとも一つのヒドロフルオロアルカンを含む、請求項８４に記載の医薬組成物。
【請求項８６】
約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有する粒子状物質を含む医薬組成物であり、ここで前記医薬組成物の少なくとも約８０重量％が前記薬学的に容認可能な賦形剤を含むマトリクスにアンフォテリシンＢを含む粒子状物質を含み、そして前記薬学的に容認可能な賦形剤が少なくとも一つのリン脂質を含む、請求項６６に記載の医薬組成物。
【請求項８７】
少なくとも約２０％の結晶化度を有するアンフォテリシンＢを含む乾燥粉末であって、
約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有する粒子状物質を含む、前記乾燥粉末。
【請求項８８】
前記アンフォテリシンＢが、約７０％〜約９０％の結晶化度を有する、請求項８７に記載の乾燥粉末。
【請求項８９】
約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有する粒子を含む、請求項８７に記載の乾燥粉末。
【請求項９０】
前記医薬組成物が、約３μｍ未満の質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る、請求項８７に記載の乾燥粉末。
【請求項９１】
前記医薬組成物が、アンフォテリシンＢを含む粒子から成り、かつ、前記アンフォテリシンＢを含む前記粒子の少なくとも約８０重量％が約３μｍ未満の幾何学的粒径を有する、請求項８７に記載の乾燥粉末。
【請求項９２】
前記医薬組成物の少なくとも約８０重量％は、アンフォテリシンＢおよび薬学的に容認可能な賦形剤の両方を含む粒子状物質を含む、請求項８７に記載の乾燥粉末。
【請求項９３】
薬学的に容認可能な賦形剤をさらに含む、請求項８７に記載の乾燥粉末。
【請求項９４】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、炭水化物、脂質、アミノ酸、緩衝剤、及び塩から選択される少なくとも一つを含む、請求項９３に記載の乾燥粉末。
【請求項９５】
前記薬学的に容認可能な賦形剤がリン脂質を含む、請求項９３に記載の乾燥粉末。
【請求項９６】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が金属イオンを含む、請求項９３に記載の乾燥粉末。
【請求項９７】
前記薬学的に容認可能な賦形剤がリン脂質および金属イオンを含む、請求項９３に記載の乾燥粉末。
【請求項９８】
前記乾燥粉末が中空および／または多孔性の粒子を含む、請求項８７に記載の乾燥粉末。
【請求項９９】
薬学的に容認可能な賦形剤を含むマトリクス内にアンフォテリシンＢを含む粒子状物質を含む、請求項８７に記載の乾燥粉末。
【請求項１００】
有効量のアンフォテリシンＢ、及び
薬学的に容認可能な賦形剤、
を含む医薬組成物を収容する容器を含む単位剤形であって、
ここで前記医薬組成物は約１．９μｍ未満の質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る、前記単位剤形。
【請求項１０１】
前記容器がカプセルを含む、請求項１００に記載の単位剤形。
【請求項１０２】
前記医薬組成物が、約０．５μｍ〜約１．８μｍの質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る、請求項１００に記載の単位剤形。
【請求項１０３】
アンフォテリシンＢを含む前記粒子の少なくとも約８０重量％が、約１．９μｍ未満の幾何学的粒径を有する、請求項１００に記載の単位剤形。
【請求項１０４】
アンフォテリシンＢを含む前記粒子の少なくとも約９０重量％が、約１．９μｍ未満の幾何学的粒径を有する、請求項１００に記載の単位剤形。
【請求項１０５】
前記アンフォテリシンＢが、少なくとも約５０％の結晶化度を有する、請求項１００に記載の単位剤形。
【請求項１０６】
前記医薬組成物が、粒子状物質を含む、請求項１００に記載の単位剤形。
【請求項１０７】
前記粒子状物質は１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有する、請求項１０６に記載の単位剤形。
【請求項１０８】
前記粒子状物質は約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有する、請求項１０６に記載の単位剤形。
【請求項１０９】
前記医薬組成物の少なくとも約８０％が、アンフォテリシンＢ及び前記薬学的に容認可能な賦形剤の両方を含む粒子状物質を含む、請求項１００に記載の単位剤形。
【請求項１１０】
前記医薬組成物が、約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有する粒子状物質を含み、かつ、前記アンフォテリシンＢが少なくとも約７０％の結晶化度を有する、請求項１００に記載の単位剤形。
【請求項１１１】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、炭水化物、脂質、アミノ酸、緩衝剤、及び塩から選択される少なくとも一つを含む、請求項１００に記載の単位剤形。
【請求項１１２】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、リン脂質を含む、請求項１００に記載の単位剤形。
【請求項１１３】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、金属イオンを含む、請求項１００に記載の単位剤形。
【請求項１１４】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、リン脂質および金属イオンを含む、請求項１００に記載の単位剤形。
【請求項１１５】
前記医薬組成物が、中空および／また多孔性の粒子状物質を含む、請求項１００に記載の単位剤形。
【請求項１１６】
前記医薬組成物は、前記薬学的に容認可能な賦形剤を含むマトリクス内にアンフォテリシンＢを含む粒子状物質を含む、請求項１００に記載の単位剤形。
【請求項１１７】
前記医薬組成物が約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有する粒子状物質を含み、前記アンフォテリシンＢが少なくとも約７０％の結晶化度を有し、前記医薬組成物の少なくとも約８０重量％が前記薬学的に容認可能な賦形剤を含むマトリクス内に前記アンフォテリシンＢを含む粒子状物質を含み、そして前記薬学的に容認可能な賦形剤が少なくとも一つのリン脂質を有する、請求項１００に記載の単位剤形。
【請求項１１８】
有効量のアンフォテリシンＢ、及び
薬学的に容認可能な賦形剤、
を含む医薬組成物を収容する容器を含む単位剤形であって、
前記医薬組成物はアンフォテリシンＢを含む粒子から成り、かつ、前記アンフォテリシンＢを含む粒子の少なくとも約８０重量％は約１．９μｍ未満の幾何学的粒径を有する、前記単位剤形。
【請求項１１９】
前記容器がカプセルを含む、請求項１１８に記載の単位剤形。
【請求項１２０】
前記医薬組成物が約０．５μｍ〜約１．８μｍの質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る、請求項１１８に記載の単位剤形。
【請求項１２１】
アンフォテリシンＢを含む前記粒子の少なくとも約９０重量％は、約１．９μｍ未満の幾何学的粒径を有する、請求項１１８に記載の単位剤形。
【請求項１２２】
アンフォテリシンＢを含む前記粒子の少なくとも約９５重量％は、約１．９μｍ未満の幾何学的粒径を有する、請求項１１８に記載の単位剤形。
【請求項１２３】
前記アンフォテリシンＢが、少なくとも約５０％の結晶化度を有する、請求項１１８に記載の単位剤形。
【請求項１２４】
前記医薬組成物が、粒子状物質を含む、請求項１１８に記載の単位剤形。
【請求項１２５】
前記粒子状物質は、約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有する、請求項１２４に記載の単位剤形。
【請求項１２６】
前記粒子状物質は、約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有する、請求項１２４に記載の単位剤形。
【請求項１２７】
前記医薬組成物の少なくとも約８０％が、アンフォテリシンＢおよび前記薬学的に容認可能な賦形剤の両方を含む粒子状物質を含む、請求項１１８に記載の単位剤形。
【請求項１２８】
前記医薬組成物は、約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有する粒子状物質を含み、前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約７０％の結晶化度を有する、請求項１１８に記載の単位剤形。
【請求項１２９】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、炭水化物、脂質、アミノ酸、緩衝剤、及び塩から選択される少なくとも一つを含む、請求項１１８に記載の単位剤形。
【請求項１３０】
前記薬学的に容認可能な賦形剤は、リン脂質を含む、請求項１１８に記載の単位剤形。
【請求項１３１】
前記薬学的に容認可能な賦形剤は、金属イオンを含む、請求項１１８に記載の単位剤形。
【請求項１３２】
前記薬学的に容認可能な賦形剤は、リン脂質および金属イオンを含む、請求項１１８に記載の単位剤形。
【請求項１３３】
前記医薬組成物は中空および／または多孔性の粒子状物質を含む、請求項１１８に記載の単位剤形。
【請求項１３４】
前記医薬組成物が、前記薬学的に容認可能な賦形剤を含むマトリクス内にアンフォテリシンＢを含む粒子状物質を含む、請求項１１８に記載の単位剤形。
【請求項１３５】
前記薬学的に容認可能な賦形剤は、少なくとも一つのリン脂質を含む、請求項１３４に記載の単位剤形。
【請求項１３６】
前記医薬組成物が、乾燥粉末を含む、請求項１１８に記載の単位剤形。
【請求項１３７】
前記医薬組成物は、約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有する粒子状物質を含み、前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約７０％の結晶化度を有し、前記医薬組成物の少なくとも約８０重量％は、前記薬学的に容認可能な賦形剤を含むマトリクス内に前記アンフォテリシンＢを含む粒子状物質を含み、そして前記薬学的に容認可能な賦形剤は、少なくとも一つのリン脂質を含む、請求項１１８に記載の単位剤形。
【請求項１３８】
アンフォテリシンＢ；及び
薬学的に容認可能な賦形剤、
を含む医薬組成物を収容する容器を含む単位剤形であって、
前記アンフォテリシンＢは、約２０％〜約９９％の結晶化度を有する、前記単位剤形。
【請求項１３９】
前記アンフォテリシンＢは、約７０％〜約９８％の結晶化度を有する、請求項１３８に記載の単位剤形。
【請求項１４０】
前記医薬組成物は、約３μｍ未満の質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る、請求項１３８に記載の単位剤形。
【請求項１４１】
前記医薬組成物は、アンフォテリシンＢを含む粒子から成り、かつ、前記アンフォテリシンＢを含む粒子の少なくとも約８０重量％は、約３μｍ未満の幾何学的粒径を有する、請求項１３８に記載の単位剤形。
【請求項１４２】
前記医薬組成物は、粒子状物質を含む、請求項１３８に記載の単位剤形。
【請求項１４３】
前記粒子状物質は、約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有する、請求項１４２に記載の単位剤形。
【請求項１４４】
前記粒子状物質は、約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有する、請求項１４２に記載の単位剤形。
【請求項１４５】
前記医薬組成物の少なくとも８０重量％が、アンフォテリシンＢ及び前記薬学的に容認可能な賦形剤の両方を含む粒子状物質を含む、請求項１３８に記載の単位剤形。
【請求項１４６】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、炭水化物、脂質、アミノ酸、緩衝剤、及び塩から選択される少なくとも一つを含む、請求項１３８に記載の単位剤形。
【請求項１４７】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、リン脂質を含む、請求項１３８に記載の単位剤形。
【請求項１４８】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、金属イオンを含む、請求項１３８に記載の単位剤形。
【請求項１４９】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、リン脂質および金属イオンを含む、請求項１３８に記載の単位剤形。
【請求項１５０】
前記医薬組成物が、中空および／または多孔性の粒子状物質を含む、請求項１３８に記載の単位剤形。
【請求項１５１】
前記医薬組成物が、前記薬学的に容認可能な賦形剤を含むマトリクス内にアンフォテリシンＢを含む粒子状物質を含む、請求項１３８に記載の単位剤形。
【請求項１５２】
前記薬学的に容認可能な賦形剤は、少なくとも一つのリン脂質を含む、請求項１５１に記載の単位剤形。
【請求項１５３】
前記医薬組成物が、乾燥粉末を含む、請求項１３８に記載の単位剤形。
【請求項１５４】
前記医薬組成物は、約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有する粒子状物質を含み、前記医薬組成物の少なくとも約８０重量％は、前記薬学的に容認可能な賦形剤を含むマトリクス内にアンフォテリシンＢを含む粒子状物質を含み、そして前記薬学的に容認可能な賦形剤は、少なくとも一つのリン脂質を含む、請求項１３８に記載の単位剤形。
【請求項１５５】
吸入器；並びに
アンフォテリシンＢ；及び
薬学的に容認可能な賦形剤、
を含む粒子状物質を含む医薬組成物、
を含むデリバリーシステムであって、
前記粒子状物質は、約１．９μｍ未満の質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る、前記デリバリーシステム。
【請求項１５６】
前記吸入器が、乾燥粉末吸入器を含む、請求項１５５に記載のデリバリーシステム。
【請求項１５７】
前記吸入器が、前記粒子状物質及び前記推進剤を収容するキャニスターを含み、かつ、前記吸入器が前記キャニスターの内部と連通し、絞り弁を含む、請求項１５５に記載のデリバリーシステム。
【請求項１５８】
前記吸入器は噴霧器を含み、かつ、前記粒子状物質が液体中に懸濁される、請求項１５５に記載のデリバリーシステム。
【請求項１５９】
前記粒子状物質は、約０．５μｍ〜約１．８μｍの質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る、請求項１５５に記載のデリバリーシステム。
【請求項１６０】
アンフォテリシンＢを含む前記粒子の少なくとも約８０重量％は、約１．９μｍ未満の幾何学的粒径を有する、請求項１５５に記載のデリバリーシステム。
【請求項１６１】
前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約５０％の結晶化度を有する、請求項１５５に記載のデリバリーシステム。
【請求項１６２】
前記アンフォテリシンＢは、約７０％〜約９９％の結晶化度を有する、請求項１５５に記載のデリバリーシステム。
【請求項１６３】
前記粒子状物質は、１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有する、請求項１５５に記載のデリバリーシステム。
【請求項１６４】
前記粒子状物質は、約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有する、請求項１５５に記載のデリバリーシステム。
【請求項１６５】
前記医薬組成物の少なくとも約８０重量％が、アンフォテリシンＢおよび前記薬学的に容認可能な賦形剤の両方を含む粒子状物質を含む、請求項１５５に記載のデリバリーシステム。
【請求項１６６】
前記粒子状物質は、約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有し、かつ、前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約７０％の結晶化度を有する、請求項１５５に記載のデリバリーシステム。
【請求項１６７】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、炭水化物、脂質、アミノ酸、緩衝剤、及び塩から選択される少なくとも一つを含む、請求項１５５に記載のデリバリーシステム。
【請求項１６８】
前記薬学的に容認可能な賦形剤は、リン脂質を含む、請求項１５５に記載のデリバリーシステム。
【請求項１６９】
前記粒子状物質は、前記薬学的に容認可能な賦形剤を含むマトリクス内に前記アンフォテリシンＢを含む、請求項１５５に記載のデリバリーシステム。
【請求項１７０】
前記粒子状物質は、約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有し、前記医薬組成物の少なくとも約８０重量％は、前記薬学的に容認可能な賦形剤を含むマトリクス内に前記アンフォテリシンＢを含む粒子状物質を含み、そして前記薬学的に容認可能な賦形剤は少なくとも一つのリン脂質を含む、請求項１５５に記載のデリバリーシステム。
【請求項１７１】
吸入器；並びに
アンフォテリシンＢ、及び
薬学的に容認可能な賦形剤、
を含む粒子状物質を含む医薬組成物、
を含むデリバリーシステムであって、
前記粒子状物質はアンフォテリシンＢを含む粒子から成り、そしてアンフォテリシンＢを含む前記粒子の少なくとも約８０重量％は、約１．９μｍ未満の幾何学的粒径を有する、前記デリバリーシステム。
【請求項１７２】
前記吸入器が、乾燥粉末吸入器を含む、請求項１７１に記載のデリバリーシステム。
【請求項１７３】
前記吸入器が、前記粒子状物質及び前記推進剤を収容するキャニスターを含み、かつ、前記吸入器が前記キャニスターの内部と連通し、絞り弁を含む、請求項１７１に記載のデリバリーシステム。
【請求項１７４】
前記吸入システムは噴霧器を含み、かつ、前記粒子状物質が液体中に懸濁される、請求項１７１に記載のデリバリーシステム。
【請求項１７５】
前記粒子状物質は、約０．５μｍ〜約１．８μｍの質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る、請求項１７１に記載のデリバリーシステム。
【請求項１７６】
アンフォテリシンＢを含む前記粒子の少なくとも約８０重量％は、約１．９μｍの幾何学的粒径を有する、請求項１７１に記載のデリバリーシステム。
【請求項１７７】
前記アンフォテリシンＢが、少なくとも約５０％の結晶化度を有する、請求項１７１に記載のデリバリーシステム。
【請求項１７８】
前記アンフォテリシンＢは、約７０％〜約９９％の結晶化度を有する、請求項１７１に記載のデリバリーシステム。
【請求項１７９】
前記粒子状物質は、約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有する、請求項１７１に記載のデリバリーシステム。
【請求項１８０】
前記粒子状物質は、約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有する、請求項１７１に記載のデリバリーシステム。
【請求項１８１】
前記医薬組成物の少なくとも約８０重量％は、アンフォテリシンＢ及び前記薬学的に容認可能な賦形剤の両方を含む粒子状物質を含む、請求項１７１に記載のデリバリーシステム。
【請求項１８２】
前記粒子状物質が、約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有し、かつ、前記アンフォテリシンＢが、少なくとも約７０％の結晶化度を有する、請求項１７１に記載のデリバリーシステム。
【請求項１８３】
前記薬学的に容認可能な賦形剤が、炭水化物、脂質、アミノ酸、緩衝剤、及び塩から選択される少なくとも一つを含む、請求項１７１に記載のデリバリーシステム。
【請求項１８４】
前記薬学的に容認可能な賦形剤は、リン脂質を含む、請求項１７１に記載のデリバリーシステム。
【請求項１８５】
前記粒子状物質は、前記薬学的に容認可能な賦形剤を含むマトリクス内に前記アンフォテリシンＢを含む、請求項１７１に記載のデリバリーシステム。
【請求項１８６】
前記粒子状物質は、約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有し、前記医薬組成物の少なくとも約８０重量％は、前記薬学的に容認可能な賦形剤を有するマトリクス内に前記アンフォテリシンＢを含む粒子状物質を含み、そして前記薬学的に容認可能な賦形剤は、少なくとも一つのリン脂質を含む、請求項１７１に記載のデリバリーシステム。
【請求項１８７】
吸入器；並びに
約２０％〜約９９％の結晶化度を有するアンフォテリシンＢ、及び
薬学的に容認可能な賦形剤、
を含む粒子状物質を含む医薬組成物を、
を含むデリバリーシステム。
【請求項１８８】
前記呼吸器は、乾燥粉末吸入器を含む、請求項１８７に記載のデリバリーシステム。
【請求項１８９】
前記吸入器は、前記粒子状物質と推進剤を収容するキャニスターを含み、かつ、前記吸入器は、前記キャニスターの内部と連通し絞り弁を含む、請求項１８７に記載のデリバリーシステム。
【請求項１９０】
前記吸入器は噴霧器を含み、そして前記粒子状物質は液体中に懸濁される、請求項１８７に記載のデリバリーシステム。
【請求項１９１】
前記アンフォテリシンＢは、約７０％〜約９８％の結晶化度を有する、請求項１８７に記載のデリバリーシステム。
【請求項１９２】
前記粒子状物質は、約３μｍ未満の質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る、請求項１８７に記載のデリバリーシステム。
【請求項１９３】
前記粒子状物質は、約２μｍ未満の質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る、請求項１８７に記載のデリバリーシステム。
【請求項１９４】
前記粒子状物質は、アンフォテリシンＢを含む粒子から成り、かつ、アンフォテリシンＢを含む前記粒子の少なくとも約８０重量％は、約３μｍ未満の幾何学的粒径を有する、請求項１８７に記載のデリバリーシステム。
【請求項１９５】
前記粒子状物質は、約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有する、請求項１８７に記載のデリバリーシステム。
【請求項１９６】
前記粒子状物質は、約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有する、請求項１８７に記載のデリバリーシステム。
【請求項１９７】
前記医薬組成物の少なくとも約８０重量％は、アンフォテリシンＢ及び前記薬学的に容認可能な賦形剤の両方を有する粒子状物質を含む、請求項１８７に記載のデリバリーシステム。
【請求項１９８】
前記粒子状物質は、約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有し、かつ、前記粒子状物質は、約３μｍ未満の質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る、請求項１８７に記載のデリバリーシステム。
【請求項１９９】
前記薬学的に容認可能な賦形剤は、炭水化物、脂質、アミノ酸、緩衝剤、及び塩から選択される少なくとも一つを含む、請求項１８７に記載のデリバリーシステム。
【請求項２００】
前記薬学的に容認可能な賦形剤は、リン脂質を含む、請求項１８７に記載のデリバリーシステム。
【請求項２０１】
前記粒子状物質は、前記薬学的に容認可能な賦形剤を含むマトリクス内に前記アンフォテリシンＢを含む、請求項１８７に記載のデリバリーシステム。
【請求項２０２】
前記粒子状物質は、約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有し、前記医薬組成物の少なくとも約８０重量％は、前記薬学的に容認可能な賦形剤を有するマトリクス内に前記アンフォテリシンＢを含む粒子状物質を含み、そして前記薬学的に容認可能な賦形剤は少なくとも一つのリン脂質を含む、請求項１８７に記載のデリバリーシステム。
【請求項２０３】
医薬組成物を作るためにアンフォテリシンＢを特徴づける方法であって、以下のステップ：
アンフォテリシンＢ組成物の結晶化度のレベルを決定し；及び
前記医薬組成物を形成するために、薬学的に容認可能な賦形剤との組み合わせのため前記アンフォテリシンＢ組成物を放出する前に、前記結晶化度のレベルが第一既定レベルより高くなることを確実にする、
を含む、前記方法。
【請求項２０４】
前記結晶化度を決定するステップが、前記アンフォテリシンＢ組成物の少なくとも一部のＸ線粉末回折を行うことを含む、請求項２０３に記載の方法。
【請求項２０５】
前記結晶化度を決定するステップが、前記アンフォテリシンＢ組成物の少なくとも一部に対し赤外分光法を行うことを含む、請求項２０３に記載の方法。
【請求項２０６】
前記結晶化度を決定するステップは、前記アンフォテリシンＢ組成物の少なくとも一部に対し動的蒸気収着を行うことを含む、請求項２０３に記載の方法。
【請求項２０７】
前記第一既定レベルが、少なくとも約５０％である、請求項２０３に記載の方法。
【請求項２０８】
前記第一既定レベルが、少なくとも約７０％である、請求項２０３に記載の方法。
【請求項２０９】
前記第一既定レベルが、少なくとも９０％である、請求項２０３に記載の方法。
【請求項２１０】
前記結晶化度が前記第一既定レベルと同じか、又はそれ未満である場合、前記アンフォテリシンＢ組成物を再結晶化するステップをさらに含む、請求項２０３に記載の方法。
【請求項２１１】
前記結晶化度が前記第一既定レベルと同じか、又はそれ未満である場合、前記アンフォテリシンＢ組成物を廃棄するステップをさらに含む、請求項２０３に記載の方法。
【請求項２１２】
前記医薬組成物を形成するために、前記アンフォテリシンＢ組成物と前記薬学的に容認可能な賦形剤を組み合わせるステップをさらに含む、請求項２０３に記載の方法。
【請求項２１３】
前記医薬組成物を形成するために、前記アンフォテリシンＢ組成物と前記薬学的に容認可能な賦形剤を組み合わせるステップが、噴霧乾燥を含む、請求項２０３に記載の方法。
【請求項２１４】
前記医薬組成物の結晶化度を決定するステップをさらに含む、請求項２１２に記載の方法。
【請求項２１５】
前記結晶化度のレベルが、第二既定レベルを超えた場合、患者への投与のために前記医薬組成物を放出するステップをさらに含む、請求項２１４に記載の方法。
【請求項２１６】
前記第二既定レベルが少なくとも約５０％である、請求項２１５に記載の方法。
【請求項２１７】
医薬組成物を作るためにアンフォテリシンＢを特徴づける方法であって、以下のステップ：
アンフォテリシンＢ組成物の非結晶化度を決定し；及び
前記医薬組成物を形成するために、薬学的に容認可能な賦形剤と組み合わせるため前記アンフォテリシンＢ組成を放出する前に、前記非結晶化度が既定レベル未満であることを確実にする、
を含む、前記方法。
【請求項２１８】
前記非結晶化度を決定するステップは、前記アンフォテリシンＢ組成物の少なくとも一部分のＸ線粉末回折を実行するステップを含む、請求項２１７に記載の方法。
【請求項２１９】
前記非結晶化度を決定するステップが、前記アンフォテリシンＢ組成物の少なくとも一部分に関し赤外分光法を実行するステップを含む、請求項２１７に記載の方法。
【請求項２２０】
前記非結晶化度を決定するステップが、前記アンフォテリシンＢ組成物の少なくとも一部分に関し動的蒸気収着を実行するステップを含む、請求項２１７に記載の方法。
【請求項２２１】
前記第一既定レベルは、約５０％未満である、請求項２１７に記載の方法。
【請求項２２２】
前記第一既定レベルは、約３０％未満である、請求項２１７に記載の方法。
【請求項２２３】
前記第一既定レベルは、約１０％未満である、請求項２１７に記載の方法。
【請求項２２４】
前記医薬組成物を形成するために前記アンフォテリシンＢ組成物と前記薬学的に容認可能な賦形剤を組み合わせるステップが、噴霧乾燥を含む、請求項２１７に記載の方法。
【請求項２２５】
前記医薬組成物の非結晶化度を決定するステップをさらに含む、請求項２１７に記載の方法。
【請求項２２６】
前記非結晶化度が、第二既定レベルを超える場合、患者への投与のための前記医薬組成物を放出するステップをさらに含む、請求項２２５に記載の方法。
【請求項２２７】
前記第二既定レベルが、約５０％未満である、請求項２２６に記載の方法。
【請求項２２８】
乾燥粉末医薬組成物を作り、そして特徴づける方法であって、以下のステップ：
前記乾燥粉末医薬組成物を形成するために、アンフォテリシンＢ組成物と薬学的に容認可能な賦形剤を組み合わせ；
前記乾燥粉末医薬組成物の空気力学的質量中央径を決定し；及び、
患者への投与のために前記乾燥粉末医薬組成物を放出する前に、前記空気力学的質量中央径が既定レベル未満であることを確実にするステップ、
を含む、前記方法。
【請求項２２９】
前記空気力学的質量中央径が、カスケードインパクションにより決定される、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２３０】
前記既定レベルは、約１０μｍ未満である、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２３１】
前記既定レベルは、約５μｍ未満である、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２３２】
乾燥粉末医薬組成物を作り、そして特徴づける方法であって、以下のステップ：
前記乾燥粉末医薬組成物を形成するために、アンフォテリシンＢ組成物と薬学的に容認可能な組成を組み合わせ；
前記乾燥粉末医薬組成物の均質性の度合いを決定し；及び
患者への投与のために前記乾燥粉末医薬組成物を放出する前に、前記均質性の度合いが前記既定レベルを超えることを確実にするステップ、
を含む、前記方法。
【請求項２３３】
前記均質性の度合いを決定するステップが、前記乾燥粉末医薬組成物のどれだけの重量パーセントが、アンフォテリシンＢと前記薬学的に容認可能な賦形剤の双方を含む粒子状物質を含むのかを決定するステップを含む、請求項２３２に記載の方法。
【請求項２３４】
前記重量パーセントが少なくとも８０重量％を超えるレベルである場合、前記乾燥粉末医薬組成物が、投与のために放出されるものである、請求項２３２に記載の方法。
【請求項２３５】
前記重量パーセントが少なくとも９０重量％を超えるレベルである場合、前記乾燥粉末医薬組成物が、投与のために放出されるものである、請求項２３２に記載の方法。
【請求項２３６】
噴霧乾燥された粒子を作る方法であって、以下のステップ：
原料を形成するために液体の中にアンフォテリシンＢを含む粒子を懸濁するステップであって、ここで前記粒子は、約３μｍ未満の質量中央径を有し；及び
前記噴霧乾燥された粒子を生成するために、前記原料を噴霧乾燥する、
を含む、前記方法。
【請求項２３７】
アンフォテリシンＢを含む前記粒子は、約１μｍ〜約２μｍを範囲とする質量中央径を有する、請求項２３６に記載の方法。
【請求項２３８】
アンフォテリシンＢを含む前記粒子は、少なくとも約５０％の結晶化度のレベルを有する、請求項２３６に記載の方法。
【請求項２３９】
前記噴霧乾燥された粒子は、約１０μｍ未満の質量中央径を有する、請求項２３６に記載の方法。
【請求項２４０】
前記噴霧乾燥された粒子の少なくとも約８０重量％は、前記アンフォテリシンＢ及び薬学的に容認可能な賦形剤を含む、請求項２３６に記載の方法。
【請求項２４１】
前記噴霧乾燥された粒子は、約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有し、かつ、前記アンフォテリシンＢを含む前記粒子は、少なくとも約５０％の結晶化度のレベルを有する、請求項２３６に記載の方法。
【請求項２４２】
前記原料が、薬学的に容認可能な賦形剤をさらに含む、請求項２３６に記載の方法。
【請求項２４３】
前記原料を噴霧乾燥するステップが、薬学的に容認可能な賦形剤を含む追加の原料を噴霧乾燥するステップをさらに含む、請求項２３６に記載の方法。
【請求項２４４】
前記噴霧乾燥された粒子が、薬学的に容認可能な賦形剤をさらに含む、請求項２３６に記載の方法。
【請求項２４５】
前記噴霧乾燥された粒子を収集するステップをさらに含む、請求項２３６に記載の方法。
【請求項２４６】
前記原料に乳化剤を加えるステップをさらに含む、請求項２３６に記載の方法。
【請求項２４７】
前記乳化剤が、ホスファチジルコリンを含む、請求項２４６に記載の方法。
【請求項２４８】
前記ホスファチジルコリンが、ジステアロイルホスファチジルコリンを含む、請求項２４７に記載の方法。
【請求項２４９】
前記原料に発泡剤を加えるステップをさらに含む、請求項２３６に記載の方法。
【請求項２５０】
前記噴霧乾燥された粒子が、リン脂質マトリクス内にアンフォテリシンＢの結晶を含む、請求項２３６に記載の方法。
【請求項２５１】
前記噴霧乾燥された粒子が、中空および／または多孔質である、請求項２３６に記載の方法。
【請求項２５２】
前記原料が、疎水性アミノ酸をさらに含む、請求項２５１に記載の方法。
【請求項２５３】
噴霧乾燥された粒子を作る方法であって、以下のステップ：
原料を形成するために、液体の中にアンフォテリシンＢを含む粒子を懸濁するステップであって、ここで前記アンフォテリシンＢが、少なくとも約２０％の結晶化度を有する前記ステップ；及び
前記噴霧乾燥された粒子を生成するために、前記原料を噴霧乾燥するステップ、
を含む上記方法。
【請求項２５４】
前記アンフォテリシンＢが、少なくとも約５０％の結晶化度を有する、請求項２５３に記載の方法。
【請求項２５５】
アンフォテリシンＢを含む前記粒子が、約３μｍ未満の質量中央径を有する、請求項２５３に記載の方法。
【請求項２５６】
アンフォテリシンＢを含む前記粒子の少なくとも約８０重量％は、約３μｍ未満の幾何学的粒径を有する、請求項２５３に記載の方法。
【請求項２５７】
前記噴霧乾燥された粒子が、約１０μｍ未満の質量中央径を有する、請求項２５３に記載の方法。
【請求項２５８】
前記噴霧乾燥された粒子の少なくとも約８０重量％は、前記アンフォテリシンＢ及び薬学的に容認可能な賦形剤を含む、請求項２５３に記載の方法。
【請求項２５９】
前記噴霧乾燥された粒子は、約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有し、かつ、アンフォテリシンＢを含む前記粒子は、少なくとも約５０％の結晶化度を有する、請求項２５３に記載の方法。
【請求項２６０】
前記原料が、薬学的に容認可能な賦形剤をさらに含む、請求項２５３に記載の方法。
【請求項２６１】
前記原料を噴霧乾燥するステップが、薬学的に容認可能な賦形剤を含む追加の原料を噴霧乾燥するステップをさらに含む、請求項２５３に記載の方法。
【請求項２６２】
前記噴霧乾燥された粒子は、薬学的に容認可能な賦形剤をさらに含む、請求項２５３に記載の方法。
【請求項２６３】
前記噴霧乾燥された粒子を収集するステップをさらに含む、請求項２５３に記載の方法。
【請求項２６４】
前記原料に乳化剤を加えるステップをさらに含む、請求項２５３に記載の方法。
【請求項２６５】
前記乳化剤が、ホスファチジルコリンを含む、請求項２６４に記載の方法。
【請求項２６６】
前記ホスファチジルコリンが、ジステアロイルホスファチジルコリンを含む、請求項２６５に記載の方法。
【請求項２６７】
前記原料に前記発泡剤を加えるステップをさらに含む、請求項２５３に記載の方法。
【請求項２６８】
前記噴霧乾燥された粒子が、リン脂質マトリクス内にアンフォテリシンＢの結晶を含む、請求項２５３に記載の方法。
【請求項２６９】
前記噴霧乾燥された粒子が、中空および／または多孔質である、請求項２５３に記載の方法。
【請求項２７０】
前記原料は、疎水性アミノ酸をさらに含む、請求項２６９に記載の方法。
【請求項２７１】
真菌感染症を治療するおよび／または、真菌感染症に対する予防を提供する方法であって：
アンフォテリシンＢを含む組成物の有効量を、それらを必要とする患者に、吸入により投与するステップを含み、ここで、前記組成物が、約１．１μｍ〜約１．９μｍの質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から作られる、上記方法。
【請求項２７２】
十分な量の前記組成物は、一定の最小阻止濃度の少なくとも約５倍の、対象肺のアンフォテリシンＢ濃度を、少なくとも約４週間維持するために投与される、請求項２７１に記載の方法。
【請求項２７３】
前記最小阻止濃度は、前記肺の上皮層における前記最小阻止濃度である、請求項２７２に記載の方法。
【請求項２７４】
前記最小阻止濃度は、前記肺の固形組織内における前記最小阻止濃度である、請求項２７２に記載の方法。
【請求項２７５】
前記対象肺のアンフォテリシンＢ濃度は、少なくとも約８週間維持される、請求項２７２に記載の方法。
【請求項２７６】
前記対象肺のアンフォテリシンＢ濃度は、少なくとも約４μｇ／ｇである、請求項２７２に記載の方法。
【請求項２７７】
前記対象肺のアンフォテリシンＢ濃度は、約４．５μｇ／ｇ〜約２０μｇ／ｇの範囲であり、かつ、前記投与は、前記肺のアンフォテリシンＢ濃度を前記対象アンフォテリシンＢの肺濃度の範囲内に維持するために、周期的に前記医薬組成物をデリバリーすることを含む、請求項２７２に記載の方法。
【請求項２７８】
前記投与が、投与の第一週の間に前記組成物の１回分を供給することを含む、請求項２７２に記載の方法。
【請求項２７９】
前記投与が、投与の第一週の間に前記医薬組成物の少なくとも２回分を供給することを含む、請求項２７１に記載の方法。
【請求項２８０】
前記投与は、第一投与期間と第二投与期間を含み、かつ、前記組成物は、前記第二投与期間よりも前記第一投与期間に、より頻繁にまたは、より高い投与量で投与される、請求項２７１に記載の方法。
【請求項２８１】
アンフォテリシンＢを含む前記粒子は、約１．２μｍ〜約１．８μｍの範囲の質量中央径を有する、請求項２７１に記載の方法。
【請求項２８２】
アンフォテリシンＢを含む前記粒子の少なくとも約８０重量％は、約１．９μｍ未満の幾何学的粒径を有する、請求項２７１に記載の方法。
【請求項２８３】
前記アンフォテリシンＢが、少なくとも約５０％の結晶化度を有する、請求項２７１に記載の方法。
【請求項２８４】
前記組成物は、粒子状物質を含む、請求項２７１に記載の方法。
【請求項２８５】
前記粒子状物質が、約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有する、請求項２８４に記載の方法。
【請求項２８６】
前記粒子状物質が、約１μｍ〜約６μｍの空気力学的質量中央径を有する、請求項２８４に記載の方法。
【請求項２８７】
前記組成物の少なくとも約８０重量％は、アンフォテリシンＢ及び薬学的に容認可能な賦形剤の双方を含む粒子状物質を含む、請求項２７１に記載の方法。
【請求項２８８】
前記組成物は、約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有する粒子を含み、かつ、前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約５０％の結晶化度を有する、請求項２７１に記載の方法。
【請求項２８９】
前記組成物は、本質的にアンフォテリシンＢを含む粒子を含む、請求項２７１に記載の方法。
【請求項２９０】
前記組成物は、薬学的に容認可能な賦形剤を含む粒子をさらに含む、請求項２８９に記載の方法。
【請求項２９１】
前記組成物は、前記アンフォテリシンＢ及び薬学的に容認可能な賦形剤を含む粒子状物質を含む、請求項２７１に記載の方法。
【請求項２９２】
前記薬学的に容認可能な賦形剤は、炭水化物、脂質、アミノ酸、緩衝剤、及び塩から選択される少なくとも一つを含む、請求項２９１に記載の方法。
【請求項２９３】
前記薬学的に容認可能な賦形剤は、リン脂質を含む、請求項２９１に記載の方法。
【請求項２９４】
前記薬学的に容認可能な賦形剤は、金属イオンを含む、請求項２９１に記載の方法。
【請求項２９５】
前記薬学的に容認可能な賦形剤は、リン脂質及び金属イオンを含む、請求項２９１に記載の方法。
【請求項２９６】
前記組成物は、中空および／または多孔性粒子を含む、請求項２７１に記載の方法。
【請求項２９７】
前記組成物は、マトリクス材中に結晶性アンフォテリシンＢを含む粒子状物質を含む、請求項２７１に記載の方法。
【請求項２９８】
前記マトリクス材は、少なくとも一つのリン脂質を含む、請求項２９７に記載の方法。
【請求項２９９】
前記投与は、乾燥粉末吸入器を用い、乾燥粉末形状の前記組成物をデリバリーすることを含む、請求項２７１に記載の方法。
【請求項３００】
前記組成物は推進剤を含み、かつ、前記投与は、前記組成物を放出するために弁を開くことにより、前記組成物を噴霧することを含む、請求項２７１に記載の方法。
【請求項３０１】
前記推進剤は、少なくとも一つのヒドロフルオロアルカンを含む、請求項３００に記載の方法。
【請求項３０２】
前記真菌感染症を治療するステップを含む、請求項２７１に記載の方法。
【請求項３０３】
前記真菌感染症に対する予防薬を提供するステップを含む、請求項２７１に記載の方法。
【請求項３０４】
前記真菌感染症が、肺の真菌感染症を含む、請求項２７１に記載の方法。
【請求項３０５】
前記真菌感染症が、鼻の真菌感染症を含む、請求項２７１に記載の方法。
【請求項３０６】
前記投与が、経肺投与を含む、請求項２７１に記載の方法。
【請求項３０７】
前記投与が、経鼻投与を含む、請求項２７１に記載の方法。
【請求項３０８】
肺の真菌感染症に対する予防薬を提供するステップを含む方法であって、
前記投与は経肺投与を含み、
十分な量の前記組成物は、一定の最小阻止濃度の少なくとも約５倍の対象肺のアンフォテリシンＢ濃度を、少なくとも約８週間維持するように投与され、
前記組成物は、約０．５μｍ〜約１．８μｍの範囲の質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成り、
前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約５０％の結晶化度を有し、
前記組成物は、約１μｍ〜約６μｍの範囲の空気力学的質量中央径を有する粒子状物質を含み、及び
前記組成物の少なくとも約８０重量％は、アンフォテリシンＢ及びリン脂質の双方を含む粒子状物質を含む、
請求項２７１に記載の方法。
【請求項３０９】
真菌感染症を治療する、および／または、真菌感染症に対する予防薬を提供する方法であって、以下のステップ：
アンフォテリシンＢを含む有効量の組成物を、それらを必要とする患者に吸入により投与するステップを含み、ここで前記組成物は、アンフォテリシンＢを含む粒子から作られ、そしてアンフォテリシンＢを含む前記粒子の少なくとも約８０重量％は、約１．１μｍ〜約１．９μｍの範囲の幾何学的粒径を有する、上記方法。
【請求項３１０】
真菌感染症を治療する、および／または、真菌感染症に対する予防薬を提供する方法であって、以下のステップ
アンフォテリシンＢを含む有効量の組成物を、それらを必要とする患者に吸入により投与するステップを含み、ここで、前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約２０％の結晶化度を有する、上記方法。
【請求項３１１】
十分量の前記組成物が、一定の最小阻止濃度の少なくとも約５倍の、対象肺のアンフォテリシンＢ濃度を、少なくとも約４週間維持するように投与される、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３１２】
前記最小阻止濃度は、前記肺の上皮層における前記最小阻止濃度である、請求項３１１に記載の方法。
【請求項３１３】
前記最小阻止濃度は、前記肺の固形組織内においての前記最小阻止濃度である、請求項３１１に記載の方法。
【請求項３１４】
前記対象の肺アンフォテリシンＢ濃度が、少なくとも約８週間維持される、請求項３１１に記載の方法。
【請求項３１５】
前記対象の肺アンフォテリシンＢ濃度は、少なくとも約４μｇ／ｇである、請求項３１１に記載の方法。
【請求項３１６】
前記対象の肺アンフォテリシンＢ濃度は、約４．５μｇ／ｇ〜約２０μｇ／ｇの範囲であり、かつ、前記投与は、前記肺のアンフォテリシンＢ濃度を前記対象の肺アンフォテリシンＢ濃度の範囲内に維持するために周期的に前記医薬組成物をデリバリーすることを含む、請求項３１１に記載の方法。
【請求項３１７】
前記投与は、投与の第一週の間に、前記組成物の１回分をデリバリーすることを含む、請求項３１１に記載の方法。
【請求項３１８】
前記投与は、投与の第一週の間に、前記組成物の少なくとも２回分をデリバリーすることを含む、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３１９】
前記投与は、第一投与期間及び第二投与期間を含み、かつ、前記組成物は、前記第二投与期間よりも前記第一投与期間に、より頻繁にまたは、より高い投与量で投与される、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３２０】
前記組成物が、約３μｍ未満の質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から作られる、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３２１】
前記組成物は、アンフォテリシンＢを含む粒子から作られ、かつ、アンフォテリシンＢを含む前記粒子の少なくとも約８０重量％は、約３μｍ未満の幾何学的粒径を有する、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３２２】
前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約７０％の結晶化度を有する、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３２３】
前記組成物は、粒子状物質を含む、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３２４】
前記粒子状物質は、約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有する、請求項３２３に記載の方法。
【請求項３２５】
前記粒子状物質は、約１μｍ〜約６μｍの範囲の空気力学的質量中央径を有する、請求項３２３に記載の方法。
【請求項３２６】
前記組成物の少なくとも約８０重量％は、アンフォテリシンＢ及び薬学的に容認可能な賦形剤の双方を含む粒子状物質を含む、請求項３２３に記載の方法。
【請求項３２７】
前記組成物は、約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有する粒子状物質を含み、かつ、前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約７０％の結晶化度を有する、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３２８】
前記組成物は、本質的にアンフォテリシンＢからなる粒子を含む、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３２９】
前記組成物は、薬学的に容認可能な賦形剤を含む粒子をさらに含む、請求項３２８に記載の方法。
【請求項３３０】
前記組成物は、前記アンフォテリシンＢと薬学的に容認可能な賦形剤を含む粒子状物質を含む、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３３１】
前記薬学的に容認可能な賦形剤は、炭水化物、脂質、アミノ酸、緩衝剤、及び塩から選択される少なくとも一つを含む、請求項３３０に記載の方法。
【請求項３３２】
前記薬学的に容認可能な賦形剤は、リン脂質を含む、請求項３３０に記載の方法。
【請求項３３３】
前記薬学的に容認可能な賦形剤は、金属イオンを含む、請求項３３０に記載の方法。
【請求項３３４】
前記薬学的に容認可能な賦形剤は、リン脂質と金属イオンを含む、請求項３３０に記載の方法。
【請求項３３５】
前記組成物は、中空および／または多孔性粒子を含む、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３３６】
前記組成物は、マトリクス材中に結晶性アンフォテリシンＢを含む粒子状形質を含む、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３３７】
前記マトリクス材は、少なくとも一つのリン脂質を含む、請求項３３６に記載の方法。
【請求項３３８】
前記投与は、乾燥粉末吸入器を用い、乾燥粉末形成において形状の前記配合組成をデリバリーすることを含む、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３３９】
前記組成物は、推進剤を含み、かつ、前記投与は、前記組成物を放出するための弁を開くことにより、前記組成物を噴霧することを含む、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３４０】
前記推進剤は、少なくとも一つのヒドロフルオロアルカンを含む、請求項３３９に記載の方法。
【請求項３４１】
前記真菌感染症を治療するステップを含む、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３４２】
前記真菌感染症に対する予防薬を提供するステップを含む、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３４３】
前記真菌感染症が、肺の真菌感染症を含む、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３４４】
前記真菌感染症が、鼻の真菌感染症を含む、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３４５】
前記投与は、経肺投与を含む、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３４６】
前記投与は、経鼻投与を含む、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３４７】
肺臓真菌感染症に対する予防薬を提供するステップを含む方法であって、
前記投与は経肺投与を含み、
前記組成物の十分量は、一定の最小阻止濃度の少なくとも約５倍の、対象の肺アンフォテリシンＢ濃度を、少なくとも約８週間維持するように投与され、
前記組成物は、約３μｍ未満の範囲の質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から作られ、
前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約７０％の結晶化度を有し、
前記組成物は、約１μｍ〜約６μｍの範囲の空気力学的質量中央径を有する粒子状物質を含み、そして
前記組成物の少なくとも約８０重量％は、アンフォテリシンＢ及びリン脂質の双方を含む粒子状物質を含む、請求項３１０に記載の方法。
【請求項３４８】
真菌感染症を治療する、および／または、真菌感染症に対する予防薬を提供する方法であって、以下のステップ：
アンフォテリシンＢを含む組成物の有効量をそれらを必要とする患者へ吸入により投与するステップを含み、
ここで、前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約２０％の結晶化度を有し、
前記アンフォテリシンＢは、肺組織の生体検査により測定される通り、少なくとも約１週間の肺の固形組織内滞留半減期を有する方法。 
【請求項３４９】
真菌感染症を治療する、および／または真菌感染症に対する予防薬を提供する方法であって、以下のステップ：
アンフォテリシンＢを含む組成物の有効量を、それらを必要とする患者へ吸入により投与するステップを含み、
ここで、前記アンフォテリシンＢは少なくとも約２０％の結晶化度を有し、及び
前記アンフォテリシンＢは、気管支肺胞洗浄によって測定される通り、少なくとも約１０時間の肺上皮の内面の流動体として滞留半減期を有する、上記方法。
【請求項３５０】
真菌感染症を治療する、および／または真菌感染症に対する予防薬を提供する方法であって、以下のステップ：約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜７．０ｍｇ／ｋｇまでの範囲の量のアンフォテリシンＢを含む組成物を、それらを必要とする患者に吸入により投与するステップを含み、
ここで、前記アンフォテリシンＢは少なくとも約２０％の結晶化度を有し、及び
血漿アンフォテリシンＢの濃度が約１０００ｎｇ／ｍＬ未満のままである、上記方法。
【請求項３５１】
真菌感染症を治療する、および／または真菌感染症に対する予防薬を提供する方法であって、以下のステップ：約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜７．０ｍｇ／ｋｇまでの範囲の量のアンフォテリシンＢを含む組成物を、それらを必要とする患者に吸入により投与するステップを含み、
ここで前記アンフォテリシンＢは少なくとも約２０％の結晶化度を有し、及び
血漿アンフォテリシンＢの濃度が腎臓および／または肝障害を避けるために十分な低さのままである、上記方法。
【請求項３５２】
真菌感染症を治療する、および／または真菌感染症に対する予防薬を提供する方法であって、アンフォテリシンＢを含む組成物をそれらを必要とする患者に吸入により投与するステップを含み、
ここで前記アンフォテリシンＢは少なくとも約２０％の結晶化度を有し、
前記肺のアンフォテリシンＢ濃度は、気管支肺胞洗浄によって測定される通り、治療期間の少なくとも一部の間、最小阻止濃度の少なくとも約５倍に達し、及び
血漿アンフォテリシンＢの濃度が約１０００ｎｇ／ｍＬ未満に留まる、上記方法。
【請求項３５３】
真菌感染症を治療する、および／または真菌感染症に対する予防薬を提供する方法であって、アンフォテリシンＢを含む組成物をそれらを必要とする患者に吸入により投与するステップを含み、
ここで前記アンフォテリシンＢは少なくとも約２０％の結晶化度を有し、
治療期間が約１５週間〜約２０週間の範囲であって、及び
肺のアンフォテリシンＢの濃度が、気管支肺胞洗浄によって測定される通り、前記治療期間の少なくとも一部の間、最小阻止濃度の少なくとも約５倍に達する、上記方法。
【請求項３５４】
真菌感染症を治療する、および／または真菌感染症に対する予防薬を提供する方法であって、約２ｍｇ〜約５０ｍｇまでの範囲の量のアンフォテリシンＢを含む組成物をそれらを必要とする患者に吸入により投与するステップを含み、
ここで前記アンフォテリシンＢは少なくとも約２０％の結晶化度を有し、及び
前記投与は約５分未満で行われる、上記方法。
【請求項３５５】
真菌感染症を治療する、および／または真菌感染症に対する予防薬を提供する方法であって、アンフォテリシンＢを含む乾燥粉末の有効量をそれらを必要とする患者に吸入により投与するステップを含み、
ここで前記アンフォテリシンＢは少なくとも約２０％の結晶化度を有し、及び
前記乾燥粉末は約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有する粒子を含む、上記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の一つ又は複数の実施態様は、アンフォテリシンＢを含む組成物、アンフォテリシンＢの組成物を生成および使用する方法、およびアンフォテリシンＢの組成物を使用するためのシステムを含む。
【背景技術】
【０００２】
侵襲性糸状真菌感染症（ＩＦＰＦＩ）などの肺真菌感染症は、免疫不全患者における罹病および死亡の主な原因である。個人の免疫系は、後天性免疫不全症（ＡＩＤＳ）などの一部の病気により損なわれ得る、および／または免疫抑制療法により意図的に損なわれ得る。免疫抑制療法は、癌治療を受けている患者および／または移植手順中の患者に施されることが多い。免疫不全患者は、肺および／または鼻の真菌感染症にかかりやすくなる。持続性好中球減少患者や、免疫抑制剤に加えて少なくとも１ｍｇ／ｋｇ／日のプレドニゾン投与が２１日以上連続して必要である患者などの重度の免疫不完患者は、特に、肺および／または鼻の真菌感染症を起こしやすい。免疫不全患者の間で、全体的な真菌感染症の割合は０．５から２８％である。Ｆｒｅｄ  Ｈｕｔｃｈｉｎｓｏｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｎｔｅｒでの特発性肺炎症候群（ＩＰＳ）を患っていた病理解剖された骨髄移植患者のうち、７．３％がＩＦＰＦＩに罹患していた。Ｖｏｇｅｓｅｒらによる別の研究において、１９９３年から１９９６年の期間に何らかの原因で亡くなった欧州人患者を継続的に１１８７件病理解剖した結果、４％の割合でＩＦＰＦＩが発見された。これらの欧州人患者の圧倒的大多数は、（１）高容量のステロイド投与（２）悪性腫瘍の治療（３）固形臓器の移植、または（４）ある種の骨髄移植手術、を受けていた。
【０００３】
最も一般的な免疫不全患者における肺および／または鼻の真菌感染症は、肺および／または鼻のアスペルギルス症である。アスペルギルス症は、主に肺を通って体内に侵入するＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ真菌種（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｓｐｐ．）が原因で起こる疾患である。アスペルギルス症の罹患率は、好中球減少の期間および深刻度、患者要素（例えば、年齢、コルチコステロイドの使用、および既に肺および／または鼻の疾患に罹患しているか）、環境汚染のレベル、診断の基準、および疾患の原因を判断することにおける持続によって決まる。
【０００４】
その他の糸状および二相性の菌も同様に、肺真菌感染症の原因となり得る。これらの追加の菌は、通常、風土性および地域性があり、例えば、ブラストミセス症、播種性カンジタ症、コクシジオイデス症、クリプトコッカス症、ヒストプラスマ症、ムコール症、およびスポロトリクム症を含み得る。一般的に、肺系統に影響を及ぼさないが、通常全身性で、ほとんどの場合、留置器具または静脈カテーテル、創傷、もしくは汚染された固形臓器移植による感染の結果起こる、Ｃａｎｄｉｄａ  ｓｐｐ．により引き起こされる感染は、免疫不全患者における真菌感染症の５０から６７％を占める。
【０００５】
アンフォテリシンＢは、アスペルギルス症を治療するために現在使用されている唯一の認可された化合物で、一般的に静脈内に投与される。アンフォテリシンＢは、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｎｏｄｏｓｕｓの菌株から得られる両性ポリエンマクロライドである。市販の形状において、アンフォテリシンＢは、非結晶質および結晶質の形状の両方において存在する。デソキシコール酸ナトリウムで製剤されたアンフォテリシンＢは、市販される最初の元のアンフォテリシンＢの調合であった。全身性静脈療法は、治療の効果の妨げとなり、アンフォテリシンＢの予防的使用の望ましさの度合いを低める、腎臓毒性および肝毒性などの用量依存的毒性により制限される。認可された療法を用いても、アスペルギルス症の罹患率は増加しており、治療を受ける感染した人のうち５０％を超える死亡率を引き起こすと推定される。
【０００６】
当技術分野において、安全かつ効果的なアンフォテリシンＢの組成物、その組成物を生成および使用する方法、およびその組成物を使用するためのシステムの必要性が残る。例えば、肺および／または鼻の真菌感染症にかかった患者を安全かつ効果的に治療するため、および／または肺および／または鼻の真菌感染症の発病に対する予防薬を提供するための、組成物および方法の必要性が残る。
【発明の開示】
【０００７】
したがって、一つ又は複数の本発明の実施態様は、アンフォテリシンＢを含む組成物、アンフォテリシンＢを生成および使用する方法、およびアンフォテリシンＢの組成物を使用するためのシステムを含む。本発明の実施態様のその他の機能および利点は、以下の発明の説明において記述され、説明により明白である部分もあり、または本発明の実行により確認されることができる部分もある。本発明の実施態様は、本明細書に書かれている説明および請求項において具体的に示される組成物および方法により、実現および達成される。
【０００８】
一側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、少なくとも約９５重量％のアンフォテリシンＢを含む粒子を含む組成物を対象とする。前記粒子は、約１．１μｍから約１．９μｍの質量中央径を有する。
【０００９】
別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、アンフォテリシンＢの少なくとも約９５重量％を含む粒子を含む組成物を対象とする。前記粒子の少なくとも約８０重量％は、約１．１μｍから約１．９μｍの幾何学的粒径を有する。
【００１０】
さらに別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、アンフォテリシンＢを含む粒子を含む組成物を対象とする。前記粒子は、約１．９μｍ未満の質量中央径を有し、前記アンフォテリシンＢは少なくとも約２０％の結晶化度を有する。
【００１１】
さらに別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、アンフォテリシンＢの有効量および薬学的に容認可能な賦形剤を含む粒子を含む医薬組成物を対象とする。前記医薬組成物は、約１．１μｍから約１．９μｍの質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る。
【００１２】
別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、アンフォテリシンＢの有効量および薬学的に容認可能な賦形剤を含む医薬組成物を対象とする。前記医薬組成物は、アンフォテリシンＢを含む粒子から成り、アンフォテリシンＢを含む粒子の少なくとも約８０重量％の前記粒子は、約１．１μｍから約１．９μｍの幾何学的粒径を有する。
【００１３】
さらに別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、アンフォテリシンＢの有効量および薬学的に容認可能な賦形剤を含む医薬組成物を対象とする。前記アンフォテリシンＢは、約２０％から約９９％の結晶度を有する。
【００１４】
別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、少なくとも約２０％の結晶度を有するアンフォテリシンＢを含む乾燥粉末を対象とする。前記乾燥粉末は、約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有する粒子を含む。
【００１５】
さらなる側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、医薬組成物を収容する容器を含む単位剤形を対象とする。前記医薬組成物は、アンフォテリシンＢの有効量および薬学的に容認可能な賦形剤を含む。前記薬学的組成物は、約１．９μｍ未満の質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る。
【００１６】
別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、医薬組成物を収容する容器を含む単位剤形を対象とする。前記医薬組成物は、アンフォテリシンＢの有効量および薬学的に容認可能な賦形剤を含む。前記医薬組成物は、アンフォテリシンＢを含む粒子から成り、アンフォテリシンＢを含む前記粒子の少なくとも約８０重量％は、約１．９μｍ未満の幾何学的粒径を有する。
【００１７】
さらに別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、医薬組成物を収容する容器を含む単位剤形を対象とする。前記医薬組成物は、アンフォテリシンＢおよび薬学的に容認可能な賦形剤を含む。前記アンフォテリシンＢは、約２０％から約９９％の結晶度を有する。
【００１８】
さらに別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、吸入器および医薬組成物を含むデリバリーシステムを対象とする。前記医薬組成物は、アンフォテリシンＢを含む粒子状物質および薬学的に容認可能な賦形剤を含む。前記粒子状物質は、約１．９μｍ未満の質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る。
【００１９】
さらなる側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、吸入器および医薬組成物を含むデリバリーシステムを対象とする。前記医薬組成物は、アンフォテリシンＢを含む粒子状物質および薬学的に容認可能な賦形剤を含む。前記粒子状物質は、アンフォテリシンＢを含む粒子からなり、アンフォテリシンＢを含む前記粒子の少なくとも約８０重量％は、約１．９μｍ未満の幾何学的粒径を有する。
【００２０】
さらに別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、吸入器および医薬組成物を含むデリバリーシステムを対象とする。前記医薬組成物は、約２０％から約９９％の結晶度を有するアンフォテリシンＢを含む粒子物質、および薬学的に容認可能な賦形剤を含む。
【００２１】
さらに別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、医薬組成物を生成するために、アンフォテリシンＢを特徴付ける方法を対象とする。前記方法は、アンフォテリシンＢの組成物の結晶度を決定するステップを含む。前記方法はまた、医薬組成物を生成するために、薬学的に容認可能な賦形剤との混合のため、前記アンフォテリシンＢを放出する前に、前記結晶度が第一の既定の結晶度を超えることを確実にするステップも含む。
【００２２】
別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、医薬組成物を生成するために、アンフォテリシンＢを特徴付ける方法を対象とする。前記方法は、アンフォテリシンＢの組成物の非結晶化度を決定するステップを含む。前記方法はまた、前記医薬組成物を生成するために、薬学的に容認可能な賦形剤との混合のため、前記アンフォテリシンＢを放出する前に、前記非結晶度が規定の非結晶化度未満であることを確実にするステップも含む。
【００２３】
別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、乾燥粉末の医薬組成物を生成するおよび特徴付ける方法を対象とする。前記方法は、前記乾燥粉末の医薬組成物を生成するために、アンフォテリシンＢの組成物を、薬学的に容認可能な賦形剤と混合するステップを含む。前記方法はまた、乾燥粉末の医薬組成物の空気力学的質量中央径を決定するステップも含む。前記方法は、患者への投与のために前記乾燥粉末の医薬組成物を放出する前に、前記空気力学的質量中央径が、既定のレベル未満であることを確実にするステップをさらに含む。
【００２４】
さらに別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、乾燥粉末の医薬組成物を生成するおよび特徴付ける方法を対象とする。前記方法は、前記乾燥粉末の医薬組成物を生成するために、アンフォテリシンＢの組成物を、薬学的に容認可能な賦形剤と混合するステップを含む。前記方法はまた、前記乾燥粉末の医薬組成物の均一性の度数を決定するステップも含む。前記方法は、患者への投与のために前記乾燥粉末の薬学的組成物を放出する前に、前記均一性の度数が、既定のレベルを超えていることを確実にするステップをさらに含む。
【００２５】
別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、噴霧乾燥された粒子を生成する方法を対象とする。前記方法は、原料を生成するために、液体中に、アンフォテリシンＢを含む粒子を懸濁するステップを含む。前記粒子は、約３μｍ未満の質量中央径を有する。前記方法はまた、前記噴霧乾燥された粒子を生成するために、前記原料を噴霧乾燥するステップも含む。
【００２６】
さらに別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、噴霧乾燥された粒子を生成する方法を対象とする。前記方法は、原料を生成するために、液体中にアンフォテリシンＢを含む粒子を懸濁するステップを含み、ここで前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約２０％の結晶度を有する。前記方法は、前記噴霧乾燥された粒子を生成するために、前記原料を噴霧乾燥するステップをさらに含む。
【００２７】
別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、真菌感染症を治療する、および／または真菌感染症に対する予防薬を提供する方法を対象とする。前記方法は、吸入によって、アンフォテリシンＢを含む組成物の有効量を、それらを必要としている患者に投与するステップを含み、ここで前記組成物は、約１．１μｍから約１．９μｍの質量中央径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る。
【００２８】
さらに別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、真菌感染症を治療する、および／または真菌感染症に対する予防薬を提供する方法を対象とする。前記方法は、吸入によって、アンフォテリシンＢを含む組成物の有効量を、それを必要としている患者に投与するステップを含み、ここで前記組成物は、アンフォテリシンＢを含む粒子から成り、そしてアンフォテリシンＢを含む前記粒子の少なくとも約８０重量％は、約１．１μｍから約１．９μｍの幾何学的粒径を有するアンフォテリシンＢを含む粒子から成る。
【００２９】
別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、真菌感染症を治療する、および／または真菌感染症に対する予防薬を提供する方法を対象とする。前記方法は、吸入によって、アンフォテリシンＢを含む組成物の有効量を、それらを必要としている患者に投与するステップを含み、ここで前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約２０％の結晶度を有する。
【００３０】
さらなる側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、真菌感染症を治療する、および／または真菌感染症に対する予防薬を提供する方法を対象とする。前記方法は、吸入によって、アンフォテリシンＢを含む組成物の有効量を、それらを必要としている患者に投与するステップを含む。前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約２０％の結晶度を有し、前記アンフォテリシンＢは、肺組織の生体検査により測定されるように、少なくとも約一週間の肺の固形組織の滞留半減期を有する。
【００３１】
別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、真菌感染症を治療する、および／または真菌感染症に対する予防薬を提供する方法を対象とする。前記方法は、吸入によって、アンフォテリシンＢを含む組成物の有効量を、それを必要としている患者に投与するステップを含む。前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約２０％の結晶度を有し、前記アンフォテリシンＢは、気管支肺胞洗浄により測定されるように、少なくとも約１０時間の肺の上皮層洗浄液滞留半減期を有する。
【００３２】
さらに別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、真菌感染症を治療する、および／または真菌感染症に対する予防薬を提供する方法を対象とする。前記方法は、０．０１ｍｇ／ｋｇから７．０ｍｇ／ｋｇのアンフォテリシンＢの量を含む組成物を、それらを必要としている患者に吸入により投与するステップを含む。前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約２０％の結晶度を有し、血漿中のアンフォテリシンＢ濃度は、約１０００ｎｇ／ｍＬ未満のままである。
【００３３】
別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、真菌感染症を治療する、および／または真菌感染症に対する予防薬を提供する方法を対象とする。前記方法は、０．０１ｍｇ／ｋｇから７．０ｍｇ／ｋｇのアンフォテリシンＢの量を含む組成物を、それらを必要としている患者に吸入により投与するステップを含む。前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約２０％の結晶度を有し、血漿中のアンフォテリシンＢ濃度は、腎臓および／または肝毒性を回避するのに十分低いままである。
【００３４】
さらに別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、真菌感染症を治療する、および／または真菌感染症に対する予防薬を提供する方法を対象とする。前記方法は、アンフォテリシンＢを含む組成物を、それらを必要としている患者に吸入により投与するステップを含む。前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約２０％の結晶度を有する。前記肺のアンフォテリシンＢ濃度は、気管支肺胞洗浄により測定されるように、治療期間の少なくとも一部の間、最小阻止濃度の少なくとも約５倍に達する。血漿中のアンフォテリシンＢ濃度は、約１０００ｎｇ／ｍＬ未満のままである。
【００３５】
別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、真菌感染症を治療する、および／または真菌感染症に対する予防薬を提供する方法を対象とする。前記方法は、アンフォテリシンＢを含む組成物を、それらを必要としている患者に吸入により投与するステップを含む。前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約２０％の結晶度を有する。治療期間は約１５週から２０週に及ぶ。肺のアンフォテリシンＢ濃度は、気管支肺胞洗浄により測定されるように、前記治療期間の少なくとも一部の間、最小阻止濃度の少なくとも約５倍に達する。
【００３６】
さらなる側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、真菌感染症を治療する、および／または真菌感染症に対する予防薬を提供する方法を対象とする。前記方法は、吸入によって、約２ｍｇから約５０ｍｇのアンフォテリシンＢの量を含む組成物を、それらを必要としている患者に吸入により投与するステップを含む。前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約２０％の結晶度を有する。前記投与は、約５分未満以内で実行される。
【００３７】
別の側面において、本発明の一つ以上の実施態様は、真菌感染症を治療する、および／または真菌感染症に対する予防薬を提供する方法を対象とする。前記方法は、アンフォテリシンＢを含む乾燥粉末の有効量を、それらを必要としている患者に吸入により投与するステップを含む。前記アンフォテリシンＢは、少なくとも約２０％の結晶度を有し、前記乾燥粉末は、約１０μｍ未満の空気力学的質量中央径を有する粒子を含む。
【００３８】
本発明の実施態様は、記載の限定されない図を参照して、以下の発明の説明においてさらに詳しく述べられる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３９】
他に特に明記しない限り、本発明は、特定の処方組成物、薬物デリバリーシステム、製造技術、投与方法、または同様なものには、変化する可能性があるので、限定されないことを理解されるべきである。この点において、他に特に明記しない限り、合成物または組成物への言及は、合成物または組成物それ自体の他に、合成物の混合物などの他の合成物または組成物と混合する合成物も含む。
【００４０】
さらなる説明の前に、以下の用語の定義が、本発明の実施態様の理解に役立つだろう。
【００４１】
本明細書で使用される際、単数形の「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、内容が別途明確に述べない限り、複数形の言及も含む。したがって、例えば、「リン酸質（「ａ  ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ」）」は、内容が別途明確に述べない限り、単数のリン酸質だけでなく、結合または結合した二つ以上のリン酸質を言及する。
【００４２】
本明細書で使用される際、「粒子状物質」は、アンフォテリシンＢおよび少なくとも１つの薬学的に容認可能な賦形剤を含む粒子を言及する。粒子状物質は、中空および／または多孔性の微細構造などの様々な形および形状であり得る。中空および／または多孔性の微細構造は、空隙、孔隙、欠陥、中空、隙間、間質腔、開口、せん孔、または穴を示し、明示し、または含み、球状、崩壊性、変形の、または亀裂性の粒子である可能性がある。
【００４３】
活性物質を言及する際、用語は、特定の分子的実体だけでなく、塩、エステル、アミド、ヒドラジド、Ｎ―アルキル誘導体、Ｎ―アシル誘導体、プロドラッグ、共役、活性代謝物、およびその他のそのような誘導体、アナログ、および関連の共役化合物を含むがそれだけに限られない、薬学的に容認可能な、薬学的に活性なアナログを含む。したがって、本明細書で使用される際、用語の「アンフォテリシンＢ」は、アンフォテリシンＢ自体、又は誘導体、アナログ、または上記に述べられる関連の化合物を言及するが、そのようなアンフォテリシンＢの誘導体、アナログ、または関連の化合物が、抗真菌活性を明示する場合に限る。
【００４４】
本明細書で使用される際、用語「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」および「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、症状および／または根底にある原因の重度および／または頻度における低減、症状および／または根底にある原因の発生の可能性における縮小、および損傷の改善または修復を言及する。したがって、本明細書に述べられるように、活性物質で患者を「治療する」ことは、感染を受けやすい個人における特定の状態、疾患、または障害の予防の他に、臨床的に症状を示す個人における治療も含む。
【００４５】
本明細書で使用される際、「有効量」は、有効な量および予防的に有効な量を言及する。
【００４６】
本明細書で使用される際、「治療的に有効量」は、所望の治療結果を達成するために有効である量を言及する。一定の活性物質の治療的に有効量は、一般的に、治療されている障害や疾患の種類および重度、および年齢、性別、および患者の体重などの要素によって変化する。
【００４７】
本明細書で使用される際、「予防的に有効量」は、所望の予防結果を達成するために有効である量を言及する。予防線量用量は、疾患の発病前に患者に投与されるため、予防的に有効量は、一般的に、治療的に有効量よりも少ない。
【００４８】
本明細書で使用される際、「質量中央径」または「ＭＭＤ」は、一般的に多分散粒子集団における、すなわち様々な粒サイズの範囲を含む、複数の粒子の中央径を言及する。本明細書において報告されるＭＭＤ値は、文中で別途明確に述べられない限り、レーザー回折により決定される（Ｓｙｍｐａｔｅｃ  Ｈｅｌｏｓ，Ｃｌａｕｓｔｈａｌ―Ｚｅｌｌｅｒｆｅｌｄ，Ｇｅｒｍａｎｙ）。一般的に、粉末試料は、Ｓｙｍｐａｔｅｃ  ＲＯＤＯＳ乾燥粉末の分散装置の供給ファンネルに直接加えられる。この作業は、手動またはＶＩＢＲＩ振動性供給エレメントの端から機械的にかき混ぜることによって達成される。試料は、真空減圧（ｖａｃｕｕｍ  ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ）（吸引力）を一定の分散圧力のために最大限にした状態で、圧搾空気（２から３バール）の適用を経て一次粒子に分散される。分散粒子は、分散粒子の軌跡を直角に交差する６３２．８ｎｍのレーザービームで精査される。粒子の集団から散乱されたレーザー光線は、逆フーリエレンズ集合アッセンブリを使用して、光電子増倍管検知素子の同心性の列に記録される。散光は、５ｍｓのタイムスライスで得られる。粒子サイズ分布は、専用のアルゴリズムを使用して、散光の空間／強度分布から逆計算される。
【００４９】
本明細書で使用される際、「幾何学的粒径」は、文中で別途明確に述べられない限り、顕微鏡により決定される、単一粒子の直径を言及する。
【００５０】
本明細書で使用される際、「空気力学的質量中央径」または「ＭＭＡＤ」は、一般的に多分散集団における、複数の粒子または粒子状物質の空気力学的の中央サイズを言及する。「空気力学的直径」は、粉末として通常空中に同一の沈降速度を有する単位密度球（ｕｎｉｔ  ｄｅｎｓｉｔｙ  ｓｐｈｅｒｅ）の直径であり、したがって、沈殿挙動の点から見ると、噴霧された粉末噴霧粉末、またはその他の分散粒子または粒子状物質の処方を特徴付けるために有用な方法である。空気力学的直径は、粒子または粒子状物質の形態、密度、および粒子または粒子状物質の物理的な大きさを含む。本明細書で使用される際、ＭＭＡＤは、空気力学的粒子またはカスケードインパクションにより決定された噴霧粉末の粒子状物質のサイズ分布の中央値を言及する。
【００５１】
本明細書で使用される際、「結晶化度」は、アンフォテリシンＢの総量に対する、結晶性形状におけるアンフォテリシンＢの割合を言及する。文中でこれとは異なって別途明確に述べられない限り、本文書における結晶度は、広角粉末Ｘ線回折測定される。粉末Ｘ線回折パターンは、例１でさらに詳細に説明されるように、２秒の滞留時間（固定時間スキャン）、０．０２°２θの刻み幅、３〜４２°２θの走査範囲、０．５°の発散スリット、１°の散乱スリット、および０．３ｍｍの受けスリットで、ＳｈｉｍａｚｕＸ線回折計モデルＸＲＤ―６０００で測定された。  
【００５２】
本明細書で使用される際、「非結晶化度」は、アンフォテリシンＢの総量に対する、非晶性形状におけるアンフォテリシンＢの割合を言及する。文中でこれとは異なって別途明確に述べられない限り、本文書における非結晶化度は、広角粉末Ｘ線回折測定される。
【００５３】
本明細書で使用される際、用語「放出線量」または「ＥＤ」は、粉末装置または容器からの作動／分散事象後の、吸入器からの乾燥粉末のデリバリーの表示を言及する。ＥＤは、通常の線量（すなわち、熱で乾燥させる前に適切な吸入器に置かれた単位線量当たりの粉末の塊）に対する、吸入器により供給された線量の割合として定義される。ＥＤは、実験的に決定した量であり、患者の服用を再現するように設置された生体外装置を使用して、決定され得る。本明細書に使用されるように、ＥＤ値を決定するために、米国特許第４，０６９，８１９号および同４，９９５，３８５号に説明されるように、乾燥粉末の通常の線量（上記に定義されたとおり）は、Ｔｕｒｂｏｓｐｉｎ（登録商標）ＤＰＩ装置（ＰＨ＆Ｔ、Ｉｔａｌｙ）に置かれる、ここで前記米国特許の内容全てを本明細書中に援用する。Ｔｕｒｂｏｓｐｉｎ（登録商標）ＤＰＩは、作動され、粉末を分散する。得られたエアロゾル雲は、その後、作動後２．５秒間の真空（３０Ｌ／ｍｉｎ）により装置から取り出され、装置の口に取り付けられている風袋計量されたガラス繊維ろ紙（Ｇｅｌｍａｎ，４７ｍｍ直径）の上で回収される。ろ紙に集まる粉末の総量は、デリバリーされた線量を構成する。例えば、吸入装置に置かれた乾燥粉末の５ｍｇを含むカプセルについて、粉末の分散により、上記に説明のとおり、風袋計量されたろ紙の上に粉末の４ｍｇの回収をもたらす場合、乾燥粉末組成物のＥＤは８０％［＝４ｍｇ（デリバリーされた線量／５ｍｇ（通常の線量））］である。
【００５４】
本明細書で使用される際、「受動的乾燥粉末吸入器」は、容器または単位剤形における装置内に含まれる医薬組成物を分散および噴霧するために、患者の吸気努力に依存する吸入装置を言及し、医薬組成物を分散および噴霧するために、加圧ガスおよびエレメントを振動または回転させることのようなエネルギーを提供するための手段を含む吸入装置は含まない。
【００５５】
本明細書に使用される際、「能動的乾燥粉末吸入器」は、容器または単位剤形における装置内に含まれる医薬組成物を分散および噴霧するために、単に患者の吸気努力に依存しない吸入装置を言及し、医薬組成物を分散および噴霧するために、加圧ガスおよびエレメントを振動または回転させることのようなエネルギーを提供するための手段を含む吸入装置を含む。
【００５６】
本発明のいくつかの実施態様の要約は、本文書の「発明の開示」において説明される。簡潔にするため、この要約は、その内容の全てを本願明細書中に援用される。
【００５７】
本発明の一つ以上の実施態様は、特定のアンフォテリシンＢの組成物が毒性を減少させたという驚くべきかつ予想外の発見に関する。理論に縛られることなく、いくつかの要因は、アンフォテリシンＢの毒性に影響を及ぼすと思われる。これらの要因は、アンフォテリシンＢの結晶化度、アンフォテリシンＢの粒子のサイズ、アンフォテリシンＢの粒子を含む粒子状物質の均一性、およびアンフォテリシンＢの粒子を含む粒子状物質のサイズ、を非制限的に含む。状況によって、これらの要因のうちの複数は、毒性に影響を与えると思われる。
【００５８】
本発明の一つ以上の実施態様において、組成物はアンフォテリシンＢを含む。アンフォテリシンＢは、トランスポジションにおいて７つの共役二重結合、およびグリコシド結合により主環につながれる３−アミノ−３、６−デオキシマンノース（マイコサミン）部分を含むヘプタエンマクロライドである。アンフォテリシンＢのバルク製剤物質は、Ｄｅｎｍａｒｋ、ＣｏｐｅｎｈａｇｅｎのＡｌｐｈａｒｍａ、またはＣｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔ、ＷｏｏｄｂｒｉｄｇｅのＣｈｅｍｗｅｒｔｈから入手され得る。
【００５９】
本発明の一つ以上の実施態様において、組成物は、抗真菌活性を有するアンフォテリシンＢ誘導体を含む。当該アンフォテリシンＢ誘導体は、エステル、アミド、ヒドラジド、Ｎ−アルキル、および／またはＮ−アミノアシルである可能性がある。アンフォテリシンＢのエステル誘導体の例は、メチルエステル、コリンエステル、およびジメチルアミノプロピルを非制限的に含む。アンフォテリシンＢのアミド誘導体の例は、アンフォテリシンＢの一級、二級、および三級アミドを非制限的に含む。アンフォテリシンＢのヒドラジド誘導体は、Ｎ−メチルピペラジンヒドラジドを非制限的に含む。アンフォテリシンＢのＮ−アルキル誘導体の例は、アンフォテリシンＢメチルエステルのＮ’、Ｎ’、Ｎ’−トリメチルおよびＮ’、Ｎ’−ジメチルアミノプロピル−サクシニミジル  スクシンイミジル誘導体を非制限的に含む。アンフォテリシンＢのＮ−アミノアシル誘導体の例は、Ｎ−オミチル（ｏｍｉｔｈｙｌ）、Ｎ−ジアミノプロピオニル−、Ｎ−リシル−、Ｎ−ヘキサメチルリシル−、およびＮ−ピペリジン  ピペリジン（ｐｉｐｅｒｄｉｎｅ）−プロピオニル−またはＮ’、Ｎ−メチル−１−ピペラジン−プロピオニル−アンフォテリシンＢメチルエステル、を非制限的に含む。
【００６０】
アンフォテリシンＢを含む組成物は、様々な量のアンフォテリシンＢを含む。例えば、アンフォテリシンＢの量は、少なくとも０．０１重量％からなり得、例えば少なくとも約１重量％、少なくとも約１０重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９５重量％、または少なくとも約９８重量％などの範囲である。
【００６１】
上記に説明されたとおり、アンフォテリシンＢの結晶化度は、毒性を減少させることにおける要因であると思われる。例えば、肺に投与される場合、アンフォテリシンＢの結晶性形状が多いほどより遅く溶解され、アンフォテリシンのより多い非結晶性形状よりも長い半減期を有する。理論によって縛られることは望まないが、低速溶解およびより長い半減期は、毒性を減少させると思われる。対照的に、理論によって縛られることは望まないが、非結晶性形状は、肺組織に有毒であると思われる可溶性会合体を発生させると思われる。理論によって縛られることを望まないが、これらの原理は、肺に限定されないと考えられている。
【００６２】
アンフォテリシンＢの所望の結晶化度は、投与量および治療計画などの要因によって決まる。アンフォテリシンＢの結晶化度は、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または少なくとも約９９％などの、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％である可能性がある。したがって、結晶化度は、約１０％から約１００％となり得、例えば約２０％から約９９％、約５０％から約９９％、約７０％から約９９％、約７０％から約９８％、約８０％から約９８％、または約９０％から約９７％などとなり得る。
【００６３】
結晶度は、いくつかの周知の技術のうちのいずれかによって決定され得る。例えば、結晶度は、Ｘ線回折、ラマンおよび／または赤外分光法、動的蒸気収着、溶解熱測定、または等温微小熱量測定である可能性がある。上記に説明されたように、文中でこれとは異なって別途明確に述べられない限り、本文書における結晶化度は、実施例１に説明される方法を使用してＸ線回折により測定される。
【００６４】
場合により、小口径アンフォテリシンＢ粒子が使用される。一例において、アンフォテリシンＢの粒子は、約２．５μｍ未満、約２μｍ未満、約１．９μｍ未満、または約１．５μｍ未満などの、約３μｍ未満の質量中央径を有する。例えば、アンフォテリシンＢの粒子は、約０．５μｍから約１．８μｍ、約０．８μｍから約２．５μｍ、約１．１μｍから約１．９μｍ、約１．２μｍから約１．８μｍ、または約１μｍから約２μｍなどの、約０．５μｍから約３μｍの質量中央径を有する。いくつかの例において、アンフォテリシンＢ粒子の少なくとも約２０％は、約３μｍ未満の大きさであり、例えば、少なくとも約５０％は約３μｍ未満であり、少なくとも約９０％は３μｍ未満であり、又は少なくとも約９５％は約３μｍ未満である。例えば、粒子の６０重量％、７０重量％、８０重量％、または９０重量％は、約１．１μｍから約１．９μｍの質量中央径を有する可能性がある。
【００６５】
いくつかの例において、アンフォテリシンＢは高結晶化度を有し、アンフォテリシンＢの粒子サイズは小さい。結晶化度は上記に説明されたもののいずれかであり、粒子サイズは上記に説明されたもののいずれかであり得る。例えば、一例において、結晶化度は少なくとも約５０％で、質量中央径は、約３μｍ未満である。その他の例において、結晶化度は少なくとも約７０％で、質量中央径は約２．８μｍ未満である。さらにその他の例において、結晶化度は少なくとも約８０％で、質量中央径は約２．６μｍ未満である。さらにその他の例において、結晶化度は少なくとも約９０％で、質量中央径は約２．４μｍ未満である。
【００６６】
結晶化度は上記に説明されたレベルであり得るが、アンフォテリシンＢの粒子サイズは上記に説明されたサイズより大きい可能性がある。例えば、結晶化度は少なくとも約５０％で、質量中央径は約３μｍを超える可能性がある。反対に、アンフォテリシンＢの粒子サイズは、上記に説明されたサイズ内であり得るが、結晶化度は上記に説明されたレベル外である可能性がある。例えば、質量中央径は約３μｍ未満で、結晶化度は約５０％未満である可能性がある。
【００６７】
本発明の一つ以上の実施態様に基づく医薬組成物は、アンフォテリシンＢおよび、場合により、一つ以上のその他の活性成分および／または薬学的に容認可能な賦形剤を含む可能性がある。例えば、当該医薬組成物は、アンフォテリシンの純粒子を含む可能性があり、その他の粒子とともにアンフォテリシンＢの純粒子を含む可能性があり、および／またはアンフォテリシンＢを含む粒子状物質および一つ以上の活性成分および／または一つ以上の薬学的に容認可能な賦形剤を含む可能性がある。
【００６８】
したがって、本発明の一つ以上の実施態様に基づく医薬組成物は、必要に応じて、アンフォテリシンＢおよび一つ以上のその他の活性成分の混合を含む可能性がある。その他の活性成分の例は、肺腔または鼻腔を通ってデリバリーされる薬剤を含むがそれだけに限定されない。例えば、その他の活性成分は、抗ウイルス剤、抗真菌剤、および／または抗生物質の如き肺および／または鼻の感染に対する長時間作用型薬剤および／または活性物質である。
【００６９】
抗ウイルス剤の例は、アシクロビル、ガンシクロビル、アジドチミジン、シチジンアラビノシド、リバビリン、リファンパシン、アマンタジン、イドクスウリジン、ポスカルネット（ｐｏｓｃａｒｎｅｔ）、トリフルウリジンを含むがそれだけに限定されない。
【００７０】
抗真菌剤の例は、アゾール（例えば、イミダゾール、イトラコナゾール、ポザコナゾール（ｐｏｚａｃｏｎａｚｏｌｅ））、ミカファンギン、カスパファンギン（ｃａｓｐａｆｕｎｇｉｎ）、サリチル酸、硝酸オキシコナゾール、シクロピロクス  オラミン、ケトコナゾール、硝酸ミコナゾール、および硝酸ブトコナゾール、を含むがそれだけに限定されない。
【００７１】
抗生物質の例は、ペニシリン−Ｇ、ペニシリン−Ｖ、フェネチシリン、アンピシリン、アモキサシリン、シクラシリン、バカンピシリン、ヘタシリン、クロキサシリン、ジクロキサシリン、メチシリン、ナフシリン、オキサシリン、アズロシリン、カルベニシリン、メズロシリン、ピペラシリン、チカリシリン（ｔｉｃａｒｉｃｉｌｌｉｎ）、およびイミペネムを含むがそれだけに限定されないペニシリンおよび抗菌薬のペニシリン系の薬剤；セファロドキシル、セファゾリン、セファレキシン、セファロチン、セファピリン、セフラジン、セファクロール、セファマンドール、セフォニシド、セフォキシン、セフロキシム、セフォラニド、セフォテタン、セフィネタゾル（ｃｅｆｉｎｅｔａｚｏｌｅ）、セフォペラゾン、セフォタキシム、セフチゾキシム、セフチゾン（ｃｅｆｔｉｚｏｎｅ）、モキサラクタム、セフタジジム、及びセフィキシムを含むがそれだけに限定されないセファロスポリンおよびセファロスポリン系の薬剤；ストレプトマイシン、ネオマイシン、カナマイシン、ゲンタマイシン、トブラマイシン、アミカシン、およびネチルミシンを含むがそれだけに限定されないアミノグリコシド薬剤およびアミノグリコシド系の薬剤；アジスロマイシン、クラリスロマイシン、ロキシスロマイシン、エリストマイシン、及びリンコマイシン、クリンダマイシンなどのマクロライドおよびマクロライド系の薬剤；例えば、テトラサイクリン、オキシテトラサイクリン、デモクロサイクリン（ｄｅｍｏｃｌｏｃｙｃｌｉｎ）、メタサイクリン、ドキシサイクリン、及びミノサイクリンなどのテトラサイクリンおよびテトラサイクリン系の薬剤；例えば、ナリジクス酸（ｎａｌａｄｉｘｉｃ  ａｃｉｄ）、シノキサシン、ノルフロキサシン、シプロフロキサシン、オフロキサシン、エノキサシン、及びペフロキサシンなどのキノリンおよびキノリン様薬剤；ポリミクシンＢ、コリスチン、およびバカトラシン（ｂａｃａｔｒａｃｉｎ）、並びに、デフェンシン、マゲイニン、セクロピン、及びその他の如き他の抗菌ペプチドであって、天然、または、工学の結果として、病原体特異的プロテアーゼおよび他の不活性酵素の活性に対するペプチド耐性を提供されるものを含むがそれだけに限定されない抗菌ペプチド；クロラムフェニコール、バンコマイシン、リファンピシン、メトロニダゾール、ボリコナゾール、フルコナゾール、エタンブトール、ピラジナミド、スルホンアミド、イソニアジド、およびエリスロマイシンを含むその他の抗菌薬、を含むがそれだけに限定されない。
【００７２】
活性物質の混合が使用される場合、薬剤は、医薬組成物の一種類において、または医薬組成物の別の種類において個々に、混合して提供され得る。さらに、当該医薬組成物は、所望の分散安定性または粉末分散性を提供する一つ以上の活性物質または生物活性物質と混合され得る。
【００７３】
当該医薬組成物における、活性物質、例えばアンフォテリシンＢの量は変化する可能性がある。活性物質の量は、一般的に、医薬組成物の総量の少なくとも約１０重量％、少なくとも約２０重量％、少なくとも約３０重量％、少なくとも約４０重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約７０重量％、または少なくとも約８０重量％など、少なくとも約５重量％である。活性物質の量は、通常、約５重量％から約９５重量％、約１０重量％から約９０重量％、約３０重量％から約８０重量％、約４０重量％から約７０重量％、または約５０重量％から約６０重量％など、約０．１重量％から１００重量％の間で変化する。
【００７４】
上記に説明のとおり、当該医薬組成物は、一つ以上の薬学的に容認可能な賦形剤を含み得る。薬学的に容認可能な賦形剤の例は、脂質、金属イオン、界面活性剤、アミノ酸、炭水化物、緩衝剤、塩、ポリマー、および同様なもの、およびそれらの混合、を含むがそれだけに限定されない。
【００７５】
脂質の例は、リン脂質、糖脂質、ガングリオシドＧＭ１、スフィンゴミエリン、ホスファチジン酸、カルジオリピン；ポリエチレングリコール、キチン、ヒアルロン酸、またはポリビニルピロリドンなどの、ポリマー鎖を有する脂質；スルホン酸化したモノ−、ジ−、および多糖類を有する脂質；パルミチン酸、ステアリン酸、およびオレイン酸などの脂肪酸；コレステロール、コレステロールエステル、およびコレステロールヘミコハク酸エステルを含むがそれだけに限定されない。
【００７６】
一つ以上の実施態様において、リン脂質は、一つ以上のホスファチジルコリンなどの、一つ以上の飽和リン脂質を含む。典型的なアシル鎖長は、１６：０および１８：０（すなわちパルミトイルおよびステアロイル）である。リン脂質含有量は、活性物質の活性、デリバリー方式、およびその他の要因により決定され得る。
【００７７】
自然源および合成源の両方からのリン脂質は、様々な量で使用され得る。リン酸質が存在する場合、量は、一般的に、当該活性物質をリン脂質の少なくとも単一の分子層で被覆するのに十分量である。一般的に、リン脂質含有量は、約２０重量％から約８０重量％などの約５重量％から約９９．９重量％である。
【００７８】
通常、適合性のあるリン脂質は、約６０℃を超える、又は約８０℃を超えるなどの、約４０℃を超えるゲル−液晶相転移を有するものを含む。組み入れられるリン脂質は、比較的長鎖（例えば、Ｃ16〜Ｃ22）飽和脂質であり得る。開示される安定化された製剤において有用な例示的リン脂質は、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジステアロイルホスファチジルコリンホスファチジルコリン、ジアラキドイルホスファチジルコリン、ジベヘノイルホスファチジルコリン、ジホスファチジルグリセロール、短鎖ホスファチジルコリン、水素化ホスファチジルコリン、Ｅ−１００−３（Ｌｉｐｏｉｄ  ＫＧ、Ｌｕｄｗｉｇｓｈａｆｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙより入手可能）、長鎖飽和ホスファチジルエタノールアミン、長鎖飽和ホスファチジルセリン、長鎖飽和ホスファチジルグリセロール、長鎖飽和ホスファチジルイノシトール、ホスファチジン酸、ホスファチジルイノシトール、およびスフィンゴミエリンなどの、ホスホグリセリドを含むがそれだけに限定されない。
【００７９】
金属イオンの例は、カルシウム、マグネシウム、亜鉛、鉄、および同様なものを含む二価カチオンを含むがそれだけに限定されない。例えば、リン脂質が使用される場合、当該医薬組成物はまた、ＷＯ  ０１／８５１３６およびＷＯ  ０１／８５１３７において開示されるように、多価カチオンも含む可能性があり、前記国際特許公開は、その全内容を本願明細書中に援用する。多価カチオンは、リン脂質の融解温度（Ｔm）を上げるために有効な量において存在し、少なくとも約４０℃などの、少なくとも約２０℃で、当該医薬組成物が保存温度（ＴS）を超えるＴmを明示するようにする。リン脂質に対する多価カチオンのモル比は、約０．０５：１から約２．０：１または約０．２５：１から約１．０：１などの、少なくとも０．０５：１である可能性がある。多価カチオン：リン脂質のモル比の例は、約０．５０：１である。多価カチオンがカルシウムである場合、塩化カルシウムの形状である場合がある。カルシウムなどの金属イオンがリン脂質に含まれる場合が多いが、何も必要ない。
【００８０】
上記に説明されるように、当該医薬組成物は、一つ以上の界面活性剤を含む可能性がある。例えば、一つ以上の界面活性剤は、一つ以上のものが当該組成物の固形粒子または粒子状物質と関連している状態で、液相に存在し得る。「関連していること」によって、当該医薬組成物は、界面活性剤を取り入れ、吸着し、吸収し、被覆され、または生成されることを意味する。界面活性剤は、飽和および非飽和脂質、非イオン性洗剤、非イオン性ブロック共重合体、イオン性界面活性剤、およびそれらの混合などの、フッ素および非フッ素化合物を含むがそれだけに限定されない。上記界面活性剤に加えて、適切なフッ素界面活性剤が、本明細書における示唆に対応し、及び所望の製剤を提供するために使用され得ることが強調されるべきである。
【００８１】
非イオン性洗剤の例は、三オレイン酸塩ソルビタン（Ｓｐａｎ８５）（登録商標）、セスキオレイン酸ソルビタン、モノオレイン酸ソルビタン、モノラウリン酸ソルビタン、ポリオキシエチレン（２０）モノラウリン酸ソルビタン、およびポリオキシエチレン（２０）モノオレイン酸ソルビタン、オレイン酸ポリオキシエチレン（２）エステル、ステアリルポリオキシエチレン（２）エステル、ラウリルポリオキシエチレン（４）エステル、グリセロールエステル、およびショ糖エステルを含むソルビタンエステルを含むがそれだけに限定されない。その他の適切な非イオン性洗剤は、ＭｃＣｕｔｃｈｅｏｎ‘ｓ  Ｅｍｕｌｓｉｆｉｅｒ  ａｎｄ  Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ（ＭｃＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｇｌｅｎ  Ｒｏｃｋ，Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｒｙ）を使用して、容易に特定されることが可能であり、その内容全てを本願明細書中に援用する。
【００８２】
ブロック共重合体の例は、ポロキサマー１８８（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ―６８）（登録商標）、ポロキサマー４０７（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ―１２７）（登録商標）、およびポロキサマーｐｏｌｏｘａｍｅｒ３３８を含む、ポリオキシエチレンおよびポリオキシプロピレンのジブロックおよびトリブロック共重合体を含むがそれだけに限定されない。
【００８３】
イオン性界面活性剤の例は、スルホコハク酸ナトリウム、および脂肪酸せっけんを含むがそれだけに限定されない。
【００８４】
アミノ酸の例は、疎水性アミノ酸を含むがそれだけに限定されない。薬学的に容認可能な賦形剤としてのアミノ酸の使用は、ＷＯ９５／３１４７９、ＷＯ９６／３６０９６、およびＷＯ９６／３２１４９において開示されるように、当技術分野において周知であり、その内容全てを本願明細書中に援用する。
【００８５】
炭水化物の例は、単糖類、二糖類、および多糖類を含むがそれだけに限定されない。例えば、ブドウ糖（無水および一水和物）、ガラクトース、マンニトール、Ｄ−マンノース、ソルビトール、ソルボース、および同様なものなどの単糖類；乳糖、麦芽糖、ショ糖、トレハロース、および同様なものなどの二糖類；ラフィノースおよび同様なものなどの多糖類；でんぷん（ヒドロキシエチルでんぷん）、シクロデキストリン、及びマルトデキストリンなどのその他の炭水化物である。
【００８６】
緩衝剤の例は、トリスまたはクエン酸を含むがそれだけに限定されない。
【００８７】
酸の例は、カルボン酸を含むがそれだけに限定されない。
【００８８】
塩の例は、塩化ナトリウム、カルボン酸の塩（例えば、クエン酸ナトリウム、アスコルビン酸ナトリウム、グルコン酸マグネシウム、グルコン酸ナトリウム、塩酸トロメタミン、など）、炭酸アンモニウム、酢酸アンモニウム、塩化アンモニウム、および同様なもの、を含むがそれだけに限定されない。
【００８９】
有機固体の例は、ショウノウ、および同様なものを含むがそれだけに限定されない。
【００９０】
本発明の一つ以上の実施態様の医薬組成物は、生分解性高分子、共重合体、または混合、またはその他のそれらの混合などの、生体適合性を有する物質である。この点において、有用なポリマーは、ポリラクチド、ポリラクチド−グリコリド、シクロデキストリン、ポリアクリル酸塩、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルアルコール、ポリ無水物、ポリラクタム、ポリビニルピロリドン、多糖類（デキストラン、でんぷん、キチン、キトサンなど）、ヒアルロン酸、タンパク質（アルブミン、コラーゲン、ゼラチンなど）を含む。当業者は、適切なポリマーを選択することによって、当該組成物のデリバリー効果および／または分散の安定性は、活性物質の効果を最大限に利用するために調整されることを正しく理解するでしょう。
【００９１】
上記の薬学的に容認可能な賦形剤に加え、粒子物質の剛性、生産収率、放出線量および沈着、保管寿命、および患者の承諾を改善するために、その他の薬学的に容認可能な賦形剤を当該医薬組成物に加えることが望ましい。そのような選択可能な薬学的に容認できる賦形剤は、着色剤、味覚マスキング剤、緩衝剤、吸湿剤、抗酸化物質、および化学安定剤、を含むがそれだけに限定されない。さらに、様々な薬学的に容認可能な賦形剤は、粒子状物質の組成物（例えば、ラテックス粒子）に、構造および形状を提供するために使用され得る。この点において、成分を厳密にすることが、選択的溶媒抽出法などの生成後の技術を使用して、取り除かれ得ることが正しく理解されるでしょう。
【００９２】
当該医薬組成物はまた、薬学的に容認可能な賦形剤の混合も含む可能性がある。例えば、炭水化物およびアミノ酸の混合は、本発明の範囲内である。
【００９３】
本発明の一つ以上の態様の組成物は、推進剤（例えば、クロロフルオロカーボン、ハイドロフルオロアルカン）などの非水相を含む、乾燥粉末、カプセル、タブレット、再構成粉末、懸濁液、または分散液などの様々な形状を取る可能性がある。乾燥粉末の含水率は、約１０重量％未満、約５重量％未満、約２重量％未満、約１重量％未満、または約０．５重量％未満などの、約１５重量％未満である可能性がある。そのような粉末は、ＷＯ９５／２４１８３、ＷＯ９６／３２１４９、ＷＯ９９／１６４１９、ＷＯ９９／１６４２０、およびＷＯ９９／１６４２２に説明され、その内容を本願明細書中に援用する。
【００９４】
本発明の一つ以上の実施態様は、アンフォテリシンＢ粒子を組み込まないものはたとえあったとしてもほとんどない、マトリクス材に組み込まれるアンフォテリシンＢの均質な組成物を含む。例えば、当該組成物の、少なくとも約４０重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０重量％、少なくとも約９５重量％、または少なくとも約９９重量％は、アンフォテリシンＢおよびマトリクス材の両方を含む粒子状物質を含む可能性がある。
【００９５】
しかし場合により、不均一な組成物は、投与されるアンフォレリシンＢの所望の薬物動態統計データを提供するために望ましく、これらの場合において、アンフォテリシンＢの大きな粒子（例えば、約３μｍから約１０μｍ、またはそれよりも大きい質量中央径）が使用される。
【００９６】
均一な組成物は、アンフォテリシンＢの小粒子を含む可能性がある。上記に説明されるように約３μｍ未満の質量中央径を有するアンフォテリシンＢ粒子は、マトリクス材に組み込まれるアンフォレリシンＢの均一の組成物の生成を容易にすることができる。アンフォテリシンＢの質量中央径が約３μｍを超える場合、結果は、マトリクス材に組み込まれるアンフォテリシンＢ、およびマトリクス材無しのアンフォテリシンＢを含む粒子を含む不均一な組成物になり得る。これらの不均一な組成物は、粉末流および分散性の悪さを明示することが多く、結果として線量変化をもたらす。アンフォテリシンＢのより大きい粒子で形成された組成物はまた、ネズミにおいて結果的に毒性を引き起こした。しかしながら、不均一な分散は、噴霧プロセスを通して改善される可能性があり、そのことはアンフォテリシンＢのより大きな粒子に関して、均一な分散を可能にすることに留意すべきである。
【００９７】
上記を考慮し、いくつかの例において、当該医薬組成物は高い均一性を有し、当該アンフォテリシンＢは高結晶度を有し、および当該組成物を形成するアンフォテリシンＢの粒子のサイズは小さい。均一性の度合い、結晶化度、および粒子サイズは、上記に説明されたもののうちのいずれかであり得る。例えば、一例において、結晶化度は、少なくとも約５０％で、質量中央径は約３μｍ未満である。その他の例において、結晶化度は少なくとも約７０％で、質量中央径は２．８μｍ未満である。さらにその他の例において、結晶化度は少なくとも約８０％で、質量中央径は約２．６μｍ未満である。さらにその他の例において、結晶化度は少なくとも約９０％で、質量中央径は約２．４μｍ未満である。
【００９８】
しかしながら、場合により、均一性の度合いは高く、そして一つ以上の結晶化度およびアンフォテリシンＢは上記に説明された範囲外である。あるいは、場合により、均一性の度合いは低く、一つ以上の結晶化度およびアンフォテリシンＢは上記に説明された範囲外である。
【００９９】
一例において、当該医薬組成物は、リン脂質のマトリクスに組み込まれるアンフォテリシンＢを含む。当該医薬組成物は、全内容を本明細書に援用する上記のＷＯ９９／１６４１９、ＷＯ９９／１６４２０、ＷＯ９９／１６４２２、ＷＯ０１／８５１３６、およびＷＯ０１／８５１３７において説明されるように、活性物質を組み込み、及び中空および／または多孔性の微細構造である粒子状物質の形状である、リン脂質のマトリクスを含む可能性がある。中空および／または多孔性の微細構造は、中空および／多孔性の微細構造の密度、サイズ、および空力特性が、使用者の吸入中に肺の深部までの到達を容易にするため、アンフォテリシンＢを肺にデリバリーすることにおいて有効である。加えて、リン脂質ベースの中空および／多孔性の微細構造は、粒子状物質間の引力を減少させ、当該医薬組成物を噴霧中に凝集させないようにするのを容易にし、そしてプロセスを容易にする当該医薬組成物の流動性を改善する。
【０１００】
一例において、当該医薬組成物は、約１．０ｇ／ｃｍ3未満、約０．５ｇ／ｃｍ3未満、約０．３ｇ／ｃｍ3未満、約０．２ｇ／ｃｍ3未満、または約０．１ｇ／ｃｍ3未満のかさ密度を有する中空および／または多孔性の微細構造から成る。低かさ密度の粒子または粒子状物質を提供することにより、単位線量容器に満たされる最小の粉末の塊が減らされ、担体粒子の必要性を取り除く。つまり、本発明の一つ以上の実施態様の比較的低密度の粉末は、比較的低線量の医薬組成物の再現性のある投与を提供する。さらに、担体粒子の排除は、例えば乳糖粒子などの担体大粒子が喉や上気道にそのサイズゆえに衝撃を与えるため、喉の沈着および咽頭反射的効果または咳を潜在的に軽減する。
【０１０１】
一例において、医薬組成物は、乾燥粉末の形状であり、当該医薬組成物の単位線量を噴霧するための噴霧器にはめ込まれているまたは近くに存在し得る単位線量容器内に含まれる。この例は、乾燥粉末形状が単位線量容器内に安定して保管され得るという点において有用である。場合により、本発明の一つ以上の実施態様の医薬組成物は、少なくとも約二年間安定している。いくつかの例において、安定性を得るために、冷凍をする必要はない。その他の例において、例えば２〜８℃などの下げられた温度は、安定保存を長引かせるために使用される可能性がある。多くの例において、保存安定性は、外部電源で噴霧を可能にする。
【０１０２】
本明細書で開示される医薬組成物は、空隙、孔隙、欠陥、中空、隙間、間質腔、開口、せん孔、または穴を示し、明示し、または含む構造マトリクスを含むことが正しく理解されるだろう。多孔の微細構造の完全な形（形態とは対照的に）は、通常は重要ではなく、所望の特性を提供する全体の構造が本発明の範囲内にあるものとして企図される。したがって、いくつかの実施態様は、大体において球状の形状を含む。しかしながら、崩壊性、変形の、または亀裂性の粒子状物質も適合する。
【０１０３】
一例において、アンフォテリシンＢは、離散粒子状物質を生成するマトリクスに組み込まれ、当該医薬組成物は、複数の離散粒子状物質を含む。当該離散粒子状物質は、効果的に投与されるように、および／または必要な時に利用可能であるように大きさを等しくされ得る。例えば、噴霧可能な医薬組成物に関して、粒子状物質は、当該粒子状物質が噴霧され、そして使用者吸入中に、使用者の気道にデリバリーされることを可能にするサイズのものである。
【０１０４】
いくつかの例において、医薬組成物は、約１０μｍ未満、約７μｍ未満、約５μｍ未満などの、約２０μｍ未満の質量中央径を有する粒子状物質を含む。当該粒子状物質は、約１．５μｍから約５μｍ、または約２μｍから約４μｍなどの、約１μｍから約６μｍの空気力学的質量中央径を有する可能性がある。粒子状物質が大きすぎる場合、ネズミにおいて毒性が観測された。粒子状物質が小さすぎる場合、粒子状物質のより多くの割合が消散される可能性があった。
【０１０５】
上記を考慮して、いくつかの例において、医薬組成物は、小さい空気力学的質量中央径を有する粒子状物質を含み、当該医薬組成物は高い均一性を有し、アンフォテリシンＢは高い結晶化度を有し、および当該医薬組成物を形成するアンフォテリシンＢの粒子のサイズは小さい。空気力学的質量中央径、均一性の度数、結晶化度、アンフォテリシンＢの粒子サイズは、上記に説明されたもののうちのいずれかであり得る。一例において、空気力学的質量中央径は約２０ｍ未満で、医薬組成物の少なくとも約６０重量％はアンフォテリシンＢおよびマトリクス材を含み、結晶化度は少なくとも約５０％で、そして質量中央径は約３μｍ未満である。その他の例において、空気力学的質量中央径は約１０μｍ未満で、医薬組成物の少なくとも約７０重量％は、アンフォテリシンＢおよびマトリクス材を含み、結晶化度は少なくとも約７０％であり、そして質量中央径は約２．８μｍ未満である。さらにその他の例において、空気力学的質量中央径は、約７μｍ未満であり、医薬組成物の少なくとも約８０重量％はアンフォテリシンＢおよびマトリクス材を含み、結晶化度は少なくとも約８０％で、質量中央径は約２．６μｍ未満である。さらにその他の例において、空気力学的質量中央径は約７μｍ未満であり、医薬組成物の少なくとも約９０重量％はアンフォテリシンＢおよびマトリクス材を含み、結晶化度は少なくとも約９０％で、質量中央径は約２．４μｍ未満である。
【０１０６】
しかしながら、場合により、空気力学的質量中央径は小さく、均一性、結晶化度、およびアンフォテリシンＢの粒径粒子サイズのうちの一つ以上は、上記に説明された範囲外である。同様に、その他の場合において、空気力学的質量中央径は大きく、均一性、結晶化度、およびアンフォテリシンＢの粒子サイズ粒径のうちの一つ以上は、上記に説明された範囲内である。
【０１０７】
上記を考慮して、ネズミにおける、吸入されたアンフォテリシンＢの粒子状物質または粒子の毒性は、いくつかの要因によって決まる。理論により縛られることは望まないが、これらの要因は、アンフォテリシンＢの結晶化度、吸入された粒子または粒子状物質を生成形成するために使用されるアンフォテリシンＢの粒子サイズ、吸入された粒子状物質の均一性、および吸入された粒子または粒子状物質のサイズ、を含むと思われるが、それだけに限定されない。
【０１０８】
マトリクス材は、疎水性または部分的に疎水性の物質材料を含む可能性がある。例えば、マトリクス材は、リン脂質などの脂質、および／またはロイシンまたはトリロイシンなどの疎水性のアミノ酸、を含む可能性がある。リン脂質マトリクスの例は、全内容を本明細書に援用するＷＯ９９／１６４１９、ＷＯ９９／１６４２０、ＷＯ９９／１６４２２、ＷＯ０１／８５１３６、およびＷＯ０１／８５１３７、ならびに米国特許第５，８７４，０６４号、５，８５５，９１３号、５，９８５，３０９号、および６，５０３，４８０号、ならびに２００３年１２月３１日に申請された同時係属および共同所有の米国特許申請第１０／７５０，９３４において説明される。疎水性アミノ酸マトリクスの例は、全内容を本明細書に援用する米国特許第６，３７２，２５８および６，３５８，５３０、および２００１年１２月２１日に申請された米国特許申請第１０／０３２，２３９に説明される。
【０１０９】
リン脂質がマトリクス材として利用される場合、医薬組成物はまた、全内容を本明細書に援用するＷＯ０１／８５１３６およびＷＯ０１／８５１３７に開示されるように、多価カチオンも含む。
【０１１０】
その他の実施態様に基づいて、組成物を含む活性物質の放出速度を制御する。一つ以上の実施態様に基づいて、本発明の組成物は、活性物質の即時放出を提供する。あるいは、本発明のその他の実施態様の組成物は、抗真菌剤の望ましい放出率を提供するために、マトリクス材に組み込まれる活性物質と組み込まれていない活性物質の不均一の混合として提供され得る。この実施態様に基づいて、本発明の一つ以上の実施態様のエマルジョンベースの製造プロセスを使用して製剤された抗真菌剤は、気道に投与される場合に、即時放出の用途において有用性を有する。迅速な放出は、（ａ）低密度多孔性の粉末の高比表面積；（ｂ）そこに組み込まれる小さいサイズの薬剤結晶、および；（ｃ）粒子状物質の低表面エネルギーにより促進される。
【０１１１】
あるいは、活性物質の持続放出がもたらされるように、粒子状物質のマトリクスを処理することが望ましい。この処理は、活性物質が迅速に肺から除去される場合、または持続放出が必要な場合に特に望ましい。例えば、リン脂質分子の相挙動の性質は、原料を噴霧乾燥することおよび乾燥条件およびその他の組成物成分を利用することにおける、化学構造および／または調合方法の性質により影響される。小単層ベシクル（ＳＵＶ）または多重膜ベシクル（ＭＬＶ）内で可溶化された活性物質を噴霧乾燥する場合、当該活性物質は、多重の二重層内でカプセル化され、長時間にわたって放出される。
【０１１２】
対照的に、本明細書の教示に基づくエマルジョン滴、および分散または溶解された活性物質から成る、原料の噴霧乾燥は、より少ない長距離秩序を有するリン脂質マトリクスをもたらし、ゆえに迅速な放出を促進する。いかなる特定の理論にも縛られることは望まないが、これは、活性物質がリン脂質において正式にカプセル化されないという事実、およびリン脂質が単分子層（リポソームの場合としての二重層ではない）としてエマルジョン滴の表面に最初に存在しているという事実によものであると考えられる。本発明の一つ以上の実施態様のエマルジョンベースの製造プロセスによって調合された噴霧乾燥された粒子状物質は、多くの場合、高度の障害を有する。また、噴霧乾燥された粒子状物質は、一般的に低表面エネルギーを有し、その値は２０ｍＮ／ｍが噴霧乾燥されたＤＳＰＣ粒子状物質について観測されるほど低かった（逆ガスクロマトグラフィーにより決定される）。噴霧乾燥されたリン脂質の粒子状物質で実行された小角Ｘ線散乱（ＳＡＸＳ）法はまた、不鮮明になった散乱ピーク、およびある場合には最近傍を越えて延長している長さスケールの状態で、脂質について高度の障害を示した。
【０１１３】
液晶相転移温度に対する高いゲルを有するマトリクスは、活性物質の持続放出を達成するためにはそれ自体で十分ではないことに留意すべきでない。二層構造のための十分な秩序を有することも、持続放出を達成するために重要である。迅速な放出を促進するために、エマルジョン系の高空隙率（高い表面積）、および製剤原料とリン脂質の間の最小限の相互作用が使用され得る。医薬組成物の形成過程は、二層構造を壊すために、その他の組成物成分（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ―６８などの小ポリマー、炭水化物、塩、ヒドロトロープ（ｈｙｄｒｏｔｒｏｐｅｓ））の添加も含む可能性があることが企図される。
【０１１４】
持続放出を達成するために、特に活性物質がそこにカプセル化される場合に、二重層形状におけるリン脂質の取り込みが使用され得る。この場合、リン脂質のＴmを増加させることは、二価対イオン又はコレステロールの取り込みを通して利点を提供し得る。同様に、イオン対の生成（負電荷の活性＋ステアリルアミン（ｓｔｅａｙｌａｍｉｎｅ）、正電荷の活性＋ホスファチジルグリセロール）を通して、リン脂質と製剤原料の間の相互作用を増加させることは、溶解率を減少させる傾向がある。その活性が両親媒性である場合、界面活性剤／界面活性剤相互作用も、活性溶解を遅らせる可能性がある。
【０１１５】
二価対イオンの長鎖飽和ホスファチジルコリンへの添加（例えば、カルシウムまたはマグネシウムイオン）は、両性イオン頭部基の負電荷のリン酸塩部分と、正電荷の金属イオンの間の相互作用をもたらす。これは、水和水の置換、およびリン脂質の脂質頭部基およびアシル鎖のパッキングの縮合を引き起こす。さらに、これは、リン脂質のＴmにおける増加を引き起こす。頭部基水和における減少は、水に接触している噴霧乾燥されたリン脂質の粒子状物質の拡散特性に大きな効果をもたらすことが可能である。完全に水和したホスファチジルコリン分子は、非常にゆっくりと、水相を経て分子拡散を介して分散された結晶へ分散する。当該プロセスは、水におけるリン脂質の溶解度が、とても低い（ＤＰＰＣについて約１０-10モル／Ｌ）ため、極めて遅い。従来技術のこの事象を克服するための試みは、リン脂質の存在下で結晶を均一化することを含む。この場合、均一化された結晶の曲率のせん断および半径は、結晶上のリン脂質の被覆を促進する。対照的に、本発明の一つ以上の実施態様に基づく「乾燥」リン脂質粉末は、水相と接触する場合に迅速に拡散することが可能で、ゆえに高エネルギーを適用する必要なく、分散された結晶を被覆する。
【０１１６】
例えば、再構成後、できるだけ早く測定し、空気／水界面での噴霧乾燥されたＤＳＰＣ／Ｃａ混合の表面張力は、平衡値（約２０ｍＮ／ｍ）に減少する。対照的に、ＤＳＰＣのリポソームは、表面張力（約５０ｍＮ／ｍ）を、何時間にもわたり、ほとんど減少させず、この減少は、リン脂質における遊離脂肪酸などの加水分解の分解産物の存在に起因している可能性がある。単一末端脂肪酸は、疎水性の親化合物よりもさらに迅速に空気／水界面に分散できる。このようにして、カルシウムイオンのホスファチジルコリンへの添加は、結晶薬剤の迅速なカプセル化を、迅速にかつ低エネルギー適用で促進することができる。
【０１１７】
その他の例において、医薬組成物は、水中ペルフルオロカーボンのエマルジョンでナノ結晶を共同噴霧乾燥することによって達成された低密度粒子状物質を含む。ナノ結晶は沈殿により生成され、例えばサイズは約４５μｍから約８０μｍである可能性がある。ペルフルオロカーボンの例は、ペルフルオロヘキサン、臭化ペルフルオロオクチル、ペルフルオロオクチルエタン、ペルフルオロデカリン、ペルフルオロブチルエタンを含むがそれだけに限定されない。
【０１１８】
本明細書の教示に基づいて、粒子状物質の組成物は、好ましくは、「乾燥」状態で提供される。つまり、一つ以上の実施態様において、粒子状物質は、大気温度または低下させた温度で保存中に粉末を化学的および物質的に安定し、分散性を保つことを可能にする、水分量を有する。この点において、最初の粒子状物質のサイズ、含有量、純度、および空気力学的粒子状物質のサイズ分散において、ほとんどまたは全く変化がない。
【０１１９】
そのようなものとして、粒子状物質の水分量は、約６重量％未満、約３重量％未満、または約１重量％未満などの、一般的に約１０重量％未満である。水分量は、少なくとも一部分において、組成物により決定づけられ、使用されるプロセス条件、例えば吸込温度、フィード供給濃度、ポンプ速度、および発泡剤の種類、濃度、ならびに乾燥後によって統制される。結合水における減少は、リン脂質ベースの粉末の分散性および流動性において重要な改善をもたらし、粉末の肺表面活性剤、またはリン脂質において分散される活性剤を含む粒子状物質の組成物の、非常に効果的なデリバリーの可能性をもたらす。改善された分散性は、単一の受動的のＤＰＩ装置がこれらの粉末を効果的にデリバリーするために使用されることを可能にする。
【０１２０】
医薬組成物のさらにその他の例は、接触の時点で滞留時間を長引かせる、または粘膜を介して浸透を増進する荷電種を含み得、または当該荷電種で部分的にまたは完全に被覆される粒子状物質の組成物を含む。例えば、アニオン電荷は、粘膜接着を助けることで知られているが、一方、カチオン電荷は、生成された粒子状物質を、遺伝物質などの負電荷の生物活性剤と結合させるために使用され得る。当該電荷は、ポリアクリル酸、ポリリシン、ポリ乳酸、およびキトサンなどの、ポリアニオンまたはポリカチオン性の原料の結合または取り込みを通じて与えられ得る。
【０１２１】
これらの単位線量の医薬組成物は、容器に入れられ得る。容器の例は、カプセル、ブリスター、バイアル、アンプル、または金属、ポリマー（例えば、プラスチック、エラストマー）、ガラス、または同様なものから作られる容器密封方式、を含むがそれだけに限定されない。
【０１２２】
容器は噴霧器に取り付けられ得る。容器は、医薬組成物を入れるため、および使用可能な状態で医薬組成物を提供するために適切な形、サイズ、および材質である。例えば、カプセルまたはブリスターは、医薬組成物に悪い反応をしない材質を含む壁を含み得る。加えて、壁は、カプセルが、医薬組成物が噴霧されるようにすることを可能にするために開放される材質を含み得る。一例において、壁は、１つ一つ以上のゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリエチレングリコール配合ＨＰＭＣ、ヒドロキシプロピルｐｒｏｐｌｙセルロース、寒天、アルミホイル、または同様なものを含む。一例において、カプセルは、全内容を本明細書に援用する、例えば米国特許第４，２４７，０６６で説明されるように、伸縮自在に隣接している部分を含み得る。カプセルのサイズは、医薬組成物の線量を適切に含むように選択され得る。サイズは、通常、それぞれ約４．９１ｍｍから９．９７ｍｍの外形、約１１．１０ｍｍから約２６．１４の高さを有し、および０．１３ｍＬから約１．３７ｍＬの体積を有する、サイズ５からサイズ０００である。適切なカプセルは、例えば、日本国、奈良県のＳｈｉｏｎｏｇｉ  Ｑｕａｌｉｃａｐｓ  Ｃｏ．および  Ｓｏｕｔｈ  Ｃａｒｏｌｉｎａ、ＧｒｅｅｎｗｏｏｄのＣａｐｓｕｇｅｌより市販されている。充てん後、全内容を本明細書に援用する米国特許４，８４６，８７６号および６，３５７，４９０号、およびＷＯ００／０７５７２において説明されるように、上部分は、カプセル内に粉末を入れるために下部分の真上に置かれる。上部が下部の真上に置かれた後、カプセルは任意で縛られる。
【０１２３】
一例において、結晶性のアンフォテリシンを含む医薬組成物は、患者の吸入中に患者の肺にデリバリーされるように噴霧される。この方法において、医薬組成物におけるアンフォテリシンＢは、感染部位に直接デリバリーされる。これは全身投与に有利である。なぜなら活性物質は、腎臓またはその他の毒性を有し、全身暴露を最小限度に抑えることが、一般的に望ましいからである。したがって、肺にデリバリーされ得る活性物質の量は、好ましくは、最小の薬学的有効量に限られる。活性物質を肺に投与することにより、全身暴露を低下させる一方、治療が必要である部位により多くの量がデリバリーされ得る。さらに、主に結晶形状でアンフォテリシンＢをデリバリーすることにより、アンフォテリシンＢの所望の濃度が、肺内で毒性作用の発生の可能性を低めて、ある期間にわたって感染部位で維持されることができる。
【０１２４】
１つ以上の実施態様の医薬組成物は味がない。この点において、味覚マスキング剤は任意で組成物に含まれるけれども、当該組成物は多くの場合、味覚マスキング剤がなくても味がない。
【０１２５】
本発明の１つ以上の実施態様の粒子、粒子状物質、および組成物は、当業者に周知かつ利用可能な様々な方法および技術のうちのいずれかにより生成される。
【０１２６】
上記に説明のとおり、アンフォテリシンＢの結晶化度は、性能に影響を及ぼす。当業者は、結晶化条件を調整することによって、アンフォテリシンＢの結晶化度を調整することができる。例えば、結晶化度は、溶剤、アンフォテリシンＢ濃度、ｐＨ、ｐＨ調整率、純度、温度、冷却／過熱速度、アニーリング時間、種結晶の使用、溶剤添加率、かくはん速度、共溶剤の種類／濃度、および結晶化中に使用される保有期間を変更することにより調整され得る。
【０１２７】
あるいは、結晶化度は再結晶を介して調整される。再結晶技術は当技術分野において周知である。典型的な再結晶技術は、以下のとおり説明される。
【０１２８】
再結晶プロセス中、アンフォテリシンＢは、好ましくは光から保護される。アンフォテリシンＢは、溶剤に溶解し得る。溶剤の例は、メタノール、ジメチルホルムアミド、クエン酸一水和物を含むものなどの溶媒系を含む。固体物が本質的に溶解された後、溶剤は任意でろ過される。
【０１２９】
ろ過後、例えばジクロロメタンなどの追加溶剤が、ろ液に加えられ得る。その後、冷水がかき混ぜながら加えられる。
【０１３０】
アンフォテリシンＢの沈殿は、例えばトリエタノールアミンなどの塩基の添加によって、例えばｐＨ−７への溶剤のｐＨ調整を介して達成され得る。理論によって縛られることを望まないが、沈殿率は、結晶化度のレベルに影響を及ぼす。遅い沈殿は、通常より高い結晶化度をもたらす。
【０１３１】
したがって、より多くの非結晶性のアンフォテリシンＢを得るために、例えば、かき混ぜながら一注ぎで、塩基がすばやく添加され得る。得られた比較的非結晶性のアンフォテリシンＢは、その後分離される。例えば、非結晶性のアンフォテリシンＢは、当該スラリーの遠心分離を介して分離され得、その後上清がデカントされる。生成物は、例えば冷却メタノールなどにおける固形の再懸濁により洗浄され、その後、遠心分離及びデカンテーションが続く。洗浄プロセスは、繰り返されるか、例えば室温でアセトンを使用するなどの追加の洗浄処置を伴う可能性がある。
【０１３２】
より多くの結晶性アンフォテリシンＢを得るために、例えば、かき混ぜながら滴をたらすように、塩基はゆっくりと添加され得る。得られたスラリーは、その後例えば４４から４６℃で９０分間加熱され、その後例えば３０分間室温まで冷却されて、次に２から８℃まで６０分間冷却される。結晶性形状は次に分離をできる状態である。例えば、アンフォテリシンＢの結晶性形状は真空ろ過により得られる。生成物は、例えば、冷却された４０％のメタノールを使用するなどによって洗浄され、後に室温でアセトンにより洗浄され得る。
【０１３３】
アンフォテリシンＢが分離および洗浄された後、それは乾燥され得る。例えば、アンフォテリシンＢは、生成物が光から保護された状態で、例えば室温で１から３日間真空乾燥される。任意により、乾燥プロセス中、残留溶剤の蒸発を促進するために、例えばへらを使用するなどして大きめの凝集体は砕いてもつぶしてもよい。
【０１３４】
上記に説明されるように、より小さいアンフォテリシンＢの粒子サイズが、多くの場合において望ましい。多くの場合において、バルク形状のアンフォテリシンＢは、３．０μｍより大きく、多くは約１０μｍより大きい質量中央径を有する。したがって、本発明の一つ以上の実施態様において、バルクアンフォテリシンＢは、使用前に質量中央径を約３μｍ未満に減少させる粉砕プロセスに供される。適切な粉砕プロセスは、当技術分野において周知であり、全内容を本明細書に援用するＷＯ９５／０１２２１、ＷＯ９６／００６１０、およびＷＯ９８／３６８２５に開示されるような超臨界流体プロセス法、低温粉砕、湿式粉砕、超音波、高圧均質化、超流動化、晶析プロセス、および全内容を本明細書に援用する米国特許第５，８５８，４１０に開示されるプロセスを含む。
【０１３５】
本発明の一つ以上の実施態様において、医薬組成物を生成する方法は、アンフォテリシンＢの粒子を出発原料として提供するステップであって、当該アンフォテリシンＢの少なくとも約５０％が結晶性形状であるステップを含む。その他の例において、アンフォテリシンＢの少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または少なくとも約９９％は、結晶性形状である。出発物質のアンフォテリシンＢの粒子は、任意で一つ以上の薬学的に容認可能な賦形剤を含む液体原料において懸濁され得る。懸濁原料はその後、結晶性のアンフォテリシンＢおよび一つ以上の薬学的に容認可能な賦形剤を含む粒子状物質を生成するために、例えば噴霧乾燥することなどにより乾燥される。一例において、アンフォテリシンＢを含む生成された粒子状物質において、生成された粒子状物質におけるアンフォテリシンＢの少なくとも約７０％は、結晶性形状である。その他の例において、生成された粒子状物質におけるアンフォテリシンＢの少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または少なくとも約９９％は、結晶性形状である。
【０１３６】
ある場合において、アンフォテリシンＢの粒子の出発物質の結晶化度が決定される。例えば、原料を導入する前に、原料の粉末Ｘ線回折パターンが測定され得る。このデータから、結晶化度が決定され得る。あるいは、赤外分光法、ラマン分光法、動的蒸気収着、溶液熱量測定法の加熱、または等温微小熱量測定が代わりに結晶化度を決定するために使用され、当業者によって認識されるだろう。結晶化度が、上記の割合の如き既定量を超える場合、当該出発原料が使用される。結晶化度が既定量未満である場合、出発原料は、例えば破棄または再結晶される可能性がある。
【０１３７】
その他の例において、アンフォテリシンＢの非結晶度が決定される。したがって、一例において、医薬組成物を生成する方法は、アンフォテリシンＢの粒子を出発原料として提供するステップであって、アンフォテリシンＢの約５０％未満が非結晶性形状であるステップを含む。その他の例において、アンフォテリシンＢの約４０％未満、約３０％未満、約２０％未満、約１０％未満、約５％未満、または約１％未満は、非結晶性形状である。出発原料のアンフォテリシンＢの粒子は、任意で一つ以上の薬学的に容認可能な賦形剤を含む液体原料において懸濁され得る。懸濁原料はその後、アンフォテリシンＢおよび一つ以上の薬学的に容認可能な賦形剤を含む粒子状物質を生成するために、例えば噴霧乾燥することなどにより乾燥される。一例において、アンフォテリシンＢを含む生成された粒子状物質において、生成された粒子状物質におけるアンフォテリシンＢの少なくとも約７０％は、結晶性形状である。その他の例において、生成された粒子状物質におけるアンフォテリシンＢの少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または少なくとも約９９％は、結晶性形状である。
【０１３８】
非結晶度は、周知の技術を使用して決定される。例えば、非結晶度は、赤外分光法、ラマン分光法、動的蒸気収着、示差走査熱量測定、および同様なものを使用して決定され得る。非結晶化度が、上記の割合の如き既定量未満である場合、出発原料が使用される。非結晶化度が既定量を越える場合、出発原料は、例えば破棄または再結晶される可能性がある。
【０１３９】
さらに別の例において、結晶化度の決定に加えて、再結晶プロセスが調合プロセスの一部として実行され得る。再結晶プロセスは、エタノールまたは極性溶剤などの適切な溶剤においてアンフォテリシンＢを溶解し、および結晶性のアンフォテリシンＢを生成するために溶液をゆっくりと乾燥、または結晶性のアンフォテリシンＢを当該溶液から沈殿させることによって、実行され得る。一例において、超臨界流体は、全内容を本明細書に援用するＷＯ９５／０１２２１、ＷＯ９６／００６１０、およびＷＯ９８／３６８２５において開示されるように、結晶性の原料を同時に分散および抽出するために使用され得る。別の例において、全内容を本明細書に援用するＷＯ０１／００３１２において開示されるように、マルチゾーン噴霧乾燥プロセスが、結晶性のアンフォテリシンＢを生成するために使用され得る。
【０１４０】
別の例は、結晶性のアンフォテリシンＢ、および任意で薬学的に容認可能な賦形剤および／またはその他の活性成分を含む可能性のある、生成された粒子または粒子状物質の結晶化度を決定することを含む。生成された粒子または粒子状物質における結晶化度が、約７０％を越える、約８０％を越える、約９０％を越える、約９５％を越える、または約９９％を越えるなどの、既定の割合を越える場合、生成された粒子または粒子状物質は、患者への投与のために放出され得る。結晶化度が既定の量未満である場合、生成された粒子または粒子状物質は破棄または再処方され得る。
【０１４１】
医薬組成物は、様々な周知の技術を使用して生成される可能性がある。例えば、当該組成物は、噴霧乾燥、凍結乾燥、粉砕（例えば、湿式粉砕、乾式粉砕）、および同様なものにより生成され得る。
【０１４２】
噴霧乾燥の際、噴霧乾燥される調合または原料は、選択された噴霧乾燥器を使用して噴霧され得るいかなる溶液、粗懸濁、スラリー、コロイド分散、またはペーストである可能性がある。不溶性物質の場合、原料は、上記に説明のとおり懸濁液を含む可能性がある。代わりに希薄溶液および／または一つ以上の溶剤が原料において利用される、一つ以上の実施態様において、原料は、エマルジョン、逆エマルジョン、マイクロエマルジョン、多重エマルジョン、粒子分散、またはスラリーなどのコロイド系を含む。
【０１４３】
一例において、アンフォテリシンＢおよびマトリクス剤は、原料溶液、懸濁液、またはエマルジョンを生成するために水性原料に添加される。原料は、次に、マトリクス材および結晶性のアンフォテリシンＢを含む噴霧乾燥された粒子状物質を生成するために噴霧乾燥される。適切な噴霧乾燥プロセスは、全内容を本明細書に援用する、例えば、ＷＯ９９／１６４１９および米国特許６，０７７，５４３；６，０５１，２５６；６，００１，３３６；５，９８５，２４８；および５，９７６，５７４において開示されるように、当技術分野において周知である。
【０１４４】
どの成分が選択されても、粒子状物質の生成における第一段階は、一般的に原料調合を含む。リン脂質ベースの粒子状物質が、アンフォテリシンＢの担体としての役割を果たすためのものである場合、選択された活性物質は、高濃度混濁液を生成するために、水などの液体に導入され得る。アンフォテリシンＢの濃度および任意の活性物質は、一般的に、最終の粉末および使用されるデリバリー装置の性能において必要とされる薬剤の量によって決まる（例えば、定量吸入器（ＭＤＩ）または乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）のための微粒子用量）。一般的に最終の粉末および使用される供給装置（例えば、定量吸入器（ＭＤＩ）のための微粒子線量、またはドライパウダー吸入器（ＤＰＩ））の性能において必要とされる薬剤の量によって決まる。
【０１４５】
いかなる追加活性物質も、複数の活性物質を含む単一の医薬組成物の種類を提供するために、単一の原料調合に取り込まれ、噴霧乾燥される。反対に、個々の活性分子は、異なる成分を有する複数の医薬組成物の種類を提供するために、別々の原料に添加され、別々に噴霧乾燥される。これらの個々の種類は、所望の割合で区分を調剤し、以下に説明されるような噴霧デリバリーシステムに置かれる、懸濁媒体または乾燥粉末に添加されることができる。
【０１４６】
多価カチオンは、アンフォテリシンＢの懸濁液と混合、リン脂質エマルジョンと混合、または別々の容器で生成された水中油型エマルジョンと混合され得る。当該アンフォテリシンＢも、エマルジョンにおいて直接分散され得る。
【０１４７】
例えば、多価カチオンおよびリン脂質は、高せん断機械式混合器（例えば、Ｕｌｔｒａ−ＴｕｒｒａｘモデルＴ−２５混合器）を８０００ｒｐｍで２分から５分間使用して、熱い蒸留水（例えば、７０℃）において均質化される。一般的に過フッ化炭素水素の５から２５ｇが、混ぜている間中、分散された界面活性剤溶液に滴をたらすように添加される。水エマルジョンにおいて結果として生じる多価カチオンを含むフッ化炭素水素は、次に、粒子サイズを減少するために、高圧均質器を使用して処理され得る。一般的に、エマルジョンは、１２，０００から１８，０００ＰＳＩで５つの離散パスのために処理され、約５０℃から約８０度で保存される。
【０１４８】
多価カチオンが、水中油型エマルジョンと混合される場合、噴霧乾燥された医薬組成物の分散安定性および分散性は、全内容を本明細書に援用するＷＯ９９／１６４１９において説明される、発泡剤を使用して改善されることができる。このプロセスは、取り込まれた界面活性剤によって任意で安定化され、一般的に水連続相において分散された水と非混和の発泡剤のサブミクロンの液滴を含むエマルジョンを生成する。発泡剤は、噴霧乾燥プロセス中に蒸発するフッ素化合物（例えば、ペルフルオロヘキサン、臭化ペルフルオロオクシル、ペルフルオロエタン、ペルフルオロデカリン、ペルフルオロブチルエタン）であり、中空で、多孔性の、気力学的に軽い粒子状物質を残す。その他の適切な液体の発泡剤は、非フッ素化オイル、クロロホルム、Ｆｒｅｏｎ（登録商標）、過フッ化炭化水素、酢酸エチル、アルコール、炭水化物、窒素、および炭酸ガスを含む。発泡剤は、リン脂質で乳化される可能性がある。
【０１４９】
医薬組成物は、上記に説明のとおり、発泡剤を使用して生成され得るが、いくつかの例においては、追加の発泡剤は必要ではなく、アンフォテリシンＢおよび／または薬学的に容認可能な賦形剤の水分散液および界面活性剤は直接噴霧乾燥されることを、正しく理解するだろう。その場合、当該医薬組成物は、そのような技術における使用に特に適する、一定の物理化学的特性（例えば、結晶化度、溶融温度、表面活性、など）を有する。
【０１５０】
必要に応じて、ポロキサマー１８８やスパン８０などの共界面活性剤は、添加アネックス（ａｎｎｅｘ）溶液に分散され得る、あるいは、糖質やでんぷんなどの薬学的に容認可能な賦形剤もまた、添加され得る。
【０１５１】
原料は、噴霧乾燥器に入れられる。一般的に、原料は、溶剤を蒸発する温かいろ過空気の流れに噴霧され、乾燥された生成物はコレクタへ運ばれる。使用済みの空気は、その後溶剤とともに排気される。Ｂｕｃｈｉ  Ｌｔｄ．またはＮｉｒｏ  Ｃｏｒｐ．によって製造される市販用の噴霧乾燥器は、医薬組成物を生成するための使用のために変更され得る。本発明の１つ一つ以上の実施態様の乾燥粉末を生成するための、噴霧乾燥の方法およびシステムの例は、全内容を本明細書に援用する米国特許第６，０７７，５４３；６，０５１，２５６；６，００１，３３６；５，９８５，２４８；および５，９７６，５７４で説明される。
【０１５２】
吸込温度および吐出し温度、供給量、噴霧圧力、乾燥空気の流量、およびノズル配置などの噴霧乾燥器の動作条件は、必要な粒子状物質のサイズ、および結果として生じる乾燥粒子状物質の生産収率を生成するために調整されることができる。適切な装置およびプロセス条件の選択は、本明細書の教示を考慮すると、当業者の権限の範囲内であり、過剰な実験をすることに達成され得る。典型的な設定は、以下のとおりである：約６０℃から約１７０℃の空気吸入温度；約４０℃から約１２０℃の空気吐出し温度；約３ｍｌ／分から約１５ｍｌ／分の供給量；約３００Ｌ／分の吸引空気の流量；および約２５Ｌ／分から約５０Ｌ／分の噴霧空気の流量である。設定は、当然ながら使用される装置の種類によって変化する。いかなる場合も、これらの使用および同様の方法が、肺への噴霧沈着に適する直径を有する空気力学的に軽い粒子物質の生成を可能にする。
【０１５３】
中空および／または多孔性の微細構造は、全内容を本明細書に援用するＷＯ９９／１６４１９に説明されるように、噴霧乾燥により生成される。噴霧乾燥プロセスは、大きな内部空隙を示す比較的薄い孔壁を有する粒子状物質を含む医薬組成物の生成をもたらすことが可能である。噴霧乾燥プロセスはまた、生成された粒子状物質がプロセス中または分離中に、破断する可能性が低いという点においてその他のプロセスよりも有用であることが多い。
【０１５４】
本発明の一つ以上の実施態様において有用である医薬組成物は、あるいは、凍結乾燥により生成され得る。凍結乾燥は、凍結された後に水が組成物から昇華される凍結乾燥プロセスである。凍結乾燥プロセスは、しばしば使用されるが、それは、水溶液において比較的不安定である生物学的製剤および調合薬が、高温へ暴露することなく乾燥され、安定性の問題が少ない乾燥状態で保存されるからである。本発明の一つ以上の実施態様に関して、このような技術は、生理活動を侵害することなく、医薬組成物におけるペプチド、プロテイン、遺伝物質、およびその他の天然および合成の高分子の取り込みに特に適合する。細かい泡のような構造を含む凍結乾燥固体は、所望のサイズの粒子状物質を提供するために、当技術分野において周知の技術を使用して微粉にされる。
【０１５５】
本発明の一つ以上の実施態様における組成物は、吸入、経口、筋肉内、静脈内、気管内、腹腔内、皮下、および経皮などの周知の技術により投与され得る。
【０１５６】
例えば、本発明の一つ以上の実施態様の医薬組成物は、肺および／または鼻の真菌感染症の補助療法を含む治療において有用である。アンフォテリシンＢは、肺および／または鼻の真菌感染症を治療するため、および／または、肺および／または鼻の真菌感染症の発症を防ぐために、抗真菌薬としての役割を果たす。アンフォテリシンＢは、感染しやすい菌の増殖および繁殖を抑制するための役割を果たすと考えられる。アンフォテリシンＢの濃度が十分高い場合、菌を破滅することもできる。アンフォテリシンＢは、菌の細胞膜状で作用し、細胞膜の完全性を変化させると考えられている。
【０１５７】
一例において、吸入される際、組成物は、有用なアンフォテリシンＢ濃度を達成するために、上皮層流体、肺胞マクロファージ、および好中球を含む感染性分泌物、肺組織などの鼻腔および／または肺の気道に浸透する。さらに、吸入される組成物の線量は、真菌感染の部位を直接対象標的にして的を効果的に絞るので、一般的に、その他の手段により投与され、かつ同様の抗真菌効果を得るために必要である量よりかなり少ない。
【０１５８】
本発明の一つ以上の実施態様において、アンフォテリシンＢの既定量が結晶性形状である、アンフォテリシンＢを含む医薬組成物は、それを必要とする患者の肺に投与される。例えば、患者は、肺および／または鼻の真菌感染症と診断され得るか、または肺および／または鼻の感染の影響を受けやすい。肺および／または鼻の真菌感染症の例は、アスペルギルス症、ブラストミセス症、播種性カンジタ症、コクシジオイデス症、ヒストプラスマ症、ムコール症、スポロトリクム症、Ｃａｎｄｉｄａ  ｓｐｐにより引き起こされるいくつかの感染症、および当技術において周知であるその他のものを含む。
【０１５９】
したがって、本発明の一つ以上の実施態様の医薬組成物は、幅広い患者のための治療予防薬を処理および／または予防を提供するために使用されることができる。本明細書で説明される治療および／または予防薬を受けるための適切な患者は、それを必要とするいかなる哺乳類の患者であり、好ましくはその哺乳類は、ヒトである。患者の例は、小児患者、成人患者、および高齢者、を含むがそれだけに限定されない。患者は、一般的に真菌感染症にかかる危険性がある。
【０１６０】
一例において、本発明の一つ以上の実施態様の医薬組成物は、肺および／または鼻の真菌感染症の予防において、例えば、癌の免疫不全患者などの化学療法または放射線治療を受けている者、臓器移植の提供者、例えばＨＩＶなどの免疫系に悪影響を及ぼす状態の患者、または患者を肺および／または鼻の真菌感染症にかかりやすくするその他の状態を患う患者のために有用である。当該医薬組成物はまた、アスペルギルス症（アルペルギルスフミガーツス、アルペルギルスフラバス（ｆｌａｖｕｓ）、黒色アスペルギルス、アスペルギルスニドランス（ｎｉｄｕｌａｎｓ）、およびアスベルギルステレウスに、最も一般的に帰因する）、コクシジオイデス症、ヒストプラスマ症、ブラストミセス症、およびその他の菌類病原体などの、活動性の肺および／または鼻の真菌感染症の治療においても使用され得る。
【０１６１】
一例において、アンフォテリシンＢを含む噴霧可能な医薬組成物は、真菌の最小阻止濃度（ＭＩＣ）を越えるアンフォテリシンＢの濃度をもたらす方法で、患者の肺および／または鼻腔に投与される。ＭＩＣは、真菌の増殖を阻止する最低濃度のアンフォテリシンＢとして定義される。ＭＩＣは、特定の濃度値として、または濃度の範囲として示され得る。本発明の一つ以上の実施態様に基づく方法は、ＭＩＣ値の範囲内または特定のＭＩＣ値を超えるアンフォテリシンＢの標的対象肺の濃度を達成するために、医薬組成物の十分な量を投与する。別の例において、アンフォテリシンＢの標的対象肺の濃度は、ＭＩＣの範囲を越える。別の例において、標的対象のアンフォテリシンＢの濃度は、ＭＩＣの範囲を越える濃度であり、ＭＩＣ範囲の少なくとも約３倍、少なくとも約４倍、または少なくとも約５倍など、少なくとも約２倍である。当該標的アンフォテリシンＢの濃度は、標的肺の濃度範囲となり得る。一例において、標的肺のアンフォテリシンＢ濃度の範囲は、ＭＩＣの範囲の中間値の、約３から約１０倍の中間値、または約５倍の中間値など、約２から約２０倍である値の上下を変動する。一例において、アンフォテリシンＢの濃度およびＭＩＣの決定は、上皮層流体における濃度に基づく。別の例において、アンフォテリシンＢの濃度およびＭＩＣの決定は、固形肺組織における濃度に基づく。本明細書で使用される際、別途特に規定がない限り、ＭＩＣ値は、特定のＭＩＣ値が決定される際に特定値であると解釈され、ＭＩＣ値の範囲が決定される際に中間値であると解釈される。ＭＩＣの決定は、当技術分野で周知のプロセスに基づいて行なわれ得る。
【０１６２】
一例において、アンフォテリシンＢを含む医薬組成物は、標的の対象濃度が所望の期間に渡って維持されるように投与される。例えば、決定されたＭＩＣ値の少なくとも約３倍の如き少なくとも約２倍のアンフォテリシンＢの標的濃度を維持する、投与手段が、肺および／または鼻の真菌感染症に対する予防薬を処置および／または提供することにおいて有用であることが分かる。アンフォテリシンＢの肺濃度を、標的肺の濃度で、少なくとも約２週間、少なくとも約３週間など、少なくとも約１週間の期間、維持することによって、肺および／または鼻の真菌感染症は、患者において効果的に治療されることが可能であることがさらに分かる。さらに、またはあるいは、免疫不全患者において、アンフォテリシンＢの肺濃度を標的の濃度で上記の期間維持することによって、肺および／または鼻の真菌感染症を発達する患者の可能性は軽減されることができる。多くの場合、治療期間および／または予防期間は、約１ヶ月超、約２ヶ月超、約３ヶ月超（例えば、１７週）、約４ヶ月超、またそれ以上延長され得る。
【０１６３】
一例において、結晶性アンフォテリシンＢの投与の方法は、アンフォテリシンＢを含む医薬組成物の肺の滞留特性を活用する。この点において、本発明の一つ以上の実施態様は、当該医薬組成物のアンフォテリシンＢが、（１）気管支肺胞洗浄により測定されるように、肺上皮流動体において、少なくとも約１５時間、または少なくとも約２０時間など、少なくとも約１０時間のアンフォテリシンＢの肺滞留半減期、および／または（２）肺組織均質化により測定されるように、肺組織において少なくとも約２週間など、少なくとも約一週間のアンフォテリシンＢの肺滞留半減期を有するという発見を含む。
【０１６４】
アンフォテリシンＢは、長い肺滞留半減期を有し、及び一つ以上の実施態様において低線量が使用され得るため、全身暴露（血液／血漿アンフォテリシンＢ濃度）は、腎臓および／または肝毒性を回避するには十分低いままとなる。例えば、吸入されたアンフォテリシンＢの５ｍｇの後、アンフォテリシンＢの血液のレベルは、約７５０ｎｇ／ｍＬ未満、約５００ｎｇ／ｍＬ未満、約２５０ｎｇ／ｍＬ未満、約１００ｎｇ／ｍＬ未満、約８０ｎｇ／ｍＬ未満、約６０ｎｇ／ｍＬ未満、または約４０ｎｇ／ｍＬ未満など、約１０００ｎｇ／ｍＬ未満のままとなることが可能である。
【０１６５】
長い滞留半減期を考慮して、いったん標的の対象肺組織のアンフォテリシンＢ濃度に達すると、限られた投与が肺組織のアンフォテリシンＢ濃度を維持するために必要である。例えば、当該医薬組成物は、肺の対象標的内のアンフォテリシンＢ濃度を維持するために、一週間に一度、投与される可能性がある。
【０１６６】
アンフォテリシンＢ濃度を標的の対象濃度範囲内に維持するために必要な、投与量および投与の頻度は、組成物内のアンフォテリシンＢの組成物および濃度によって決まる。投与計画のうちの各々において、投与量および頻度は、一定の標的範囲内に維持される肺のアンフォテリシンＢ濃度が与えられるように決定される。一例において、アンフォテリシンＢは、週に一度投与され得る。この例において、アンフォテリシンＢの週に一度の用量は、約２ｍｇから約５０ｍｇ、約４ｍｇから約２５ｍｇ、約５ｍｇから約２０ｍｇ、および約７ｍｇから約１０ｍｇなど、約２ｍｇから約７５ｍｇである。
【０１６７】
用線量は、単一の吸入中に投与、またはいくつかの吸入中に投与され得る。肺のアンフォテリシンＢ濃度の変動は、当該医薬組成物を投与することによりかなり多くの場合低減され、当該医薬組成物を投与することにより増加することはあまりない。したがって、本発明における一つ以上の実施態様の医薬組成物は、１日に約１度から２週間おきに約１度、２日おきに約１度から１週間に約１度、および１週間につき約一度など、一日に約３度から一ヶ月に約１度、投与され得る。
【０１６８】
一例において、当該組成物は、免疫不全である可能性がある患者に予防的に投与される。例えば、骨髄移植手術を受ける患者の如き薬物免疫抑制療法を受ける患者は、免疫不全の危険性のある期間中、真菌感染症を患う可能性を低めるために、結晶性のアンフォテリシンＢを含む医薬組成物で、予防的に治療されることができる。この例において、当該アンフォテリシンＢの投与は、肺のアンフォテリシンＢ濃度が標的の濃度に達することを可能にするために、患者が免疫不全になるとき、又は十分前に開始される。線量が週１回投与される場合、予防期間は約１週間から約２０週間の間で変化し、それは組成物および投与量に依存する。しかしながら、本発明の一つ以上の実施態様において、有用な予防的アンフォテリシンＢ濃度に対する期間は、初期予防期間中アンフォテリシンの高線量を提供すること、および／または初期予防期間中投与量をさらに頻繁に投与すること（例えば、負荷量）によって、短縮される。この例において、追加の線量は、治療の第一週中に投与される。例えば、線量は、１日目、２日目、３日目、および４日目に（または一日目に４線量）投与され、その後は７日おきに投与され得る。この早期投与は、標的肺のアンフォテリシンＢの濃度を素早く達成することを可能とする。したがって、有用な予防を達成するための期間は縮小され、患者は、各自の免疫不全期間をより早くはじめることができる。場合によって、肺および／または鼻の真菌感染症を発展させる可能性がかなり少ない状態で、患者は１〜４日後に免疫不全になる可能性がある。さらに、またはあるいは、免疫不全になる前の期間中の投与される量は、標的の肺のアンフォテリシンＢ濃度を維持するために投与される線量（例えば、負荷量）よりもより多い可能性がある。例えば、一例において、第一の線量は、標的の肺のアンフォテリシンＢ濃度に達する場合の定常状態の投与量の少なくとも約２倍となり得る。
【０１６９】
したがって、一例において、アンフォテリシンＢは、負荷量として投与され、後に続いて維持量として投与される。アンフォテリシンの負荷量は、約１０ｍｇから約５０ｍｇ、約１５ｍｇから約４０ｍｇ、または例えば２５ｍｇなどの約２０ｍｇから約３０ｍｇなど、例えば約５ｍｇから約７５ｍｇであり得る。維持量は、負荷量の後に、例えば週１度定期的に投与され得る。維持量は、一般的に、約３ｍｇから約１５ｍｇ、または約５ｍｇなどの約４ｍｇから約１０ｍｇなど、約２ｍｇから約２０ｍｇである。
【０１７０】
初期負荷は、肺および／または鼻の真菌感染症と診断された患者を治療する場合に望ましい。初期負荷によって、標的の肺のアンフォテリシンＢ濃度は、初期負荷が投与されない場合よりも早く達成される。したがって、肺および／または鼻の真菌感染症の治療は、さらに迅速に開始または提供され得る。
【０１７１】
特定の治療方法において、肺および／または鼻の真菌感染症の予防は、免疫抑制療法を受けている患者に提供される。本例に基づいて、患者は、初期期間中に一週間に少なくとも約２度、患者の吸入中に、噴霧されたアンフォテリシンＢの約５ｍｇから約１０ｍｇなどの、少なくとも約５ｍｇを投与される。噴霧されたアンフォテリシンＢは、初期期間中に１週間に少なくとも約３度投与されることができる。ある例において、初期期間は、約１週から約３週間続く。初期期間の後、患者は、同一線量をより少ない頻度で投与される。例えば、噴霧されたアンフォテリシンＢは、２週間おきに１度投与され、さらに好ましくは約１週間に１度投与され得る。初期期間の後、または初期期間の終わり近くに、免疫抑制療法は開始されることが可能である。投与の第２期間は、標的の肺のアンフォテリシンＢ濃度が少なくとも免疫不全の危険性のある期間および必要であればそれより長い間維持されるように、または肺および／または鼻の真菌感染症が発現する場合に、続けられる。さらに、またはあるいは、第１期間中に投与される量は、第２期間中に投与される量よりも大きい可能性がある。例えば、第１期間中、アンフォテリシンＢの約１０ｍｇから約２０ｍｇが投与され、より少ない量、例えば約５ｍｇから約１０ｍｇが第２期間中に投与される。任意により、第３の投与期間は、投与量がよりより少ない頻度で投与される場合、および／または第２期間より少ない量で投与される場合、に提供され得る。第３の投与期間は、免疫不全期間の終わり近くに、免疫抑制療法が終了した場合、または重度が低下した場合に開始されるなどにより、開始され得る。
【０１７２】
一例において、アンフォテリシンＢ濃度は、全内容を本明細書に援用する、２００３年１２月３１日に申請された米国特許第１０／７５１，３４２に説明されるように、決定された最小阻止濃度を超える濃度に、ある期間維持される。肺のアンフォテリシンＢ濃度は、上皮層におけるアンフォテリシンＢ濃度、または固形の肺組織におけるアンフォテリシンＢ濃度であり、好ましくは後者である。いくつかの例において、肺のアンフォテリシンＢ濃度は、少なくとも約９μ／ｇなどの少なくとも約４μ／ｇであり、約９μ／ｇから約１５μ／ｇなどの、約４．５μ／ｇから約２０μ／ｇである。
【０１７３】
予防に関して、アンフォテリシンＢの用量当たりの量は、真菌による肺および／または鼻の感染症を防ぐために有用である量であり、約０．４ｍｇ／ｋｇから約４．０ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇから約３．０ｍｇ／ｋｇなど、通常約０．０１ｍｇ／ｋｇから約５．０ｍｇ／ｋｇである。
【０１７４】
医薬組成物は、真菌による肺感染を防ぐために有用であるいかなる計画においても、患者に投与され得る。実例となる予防計画は、本明細書で説明されるように、１週から６週間の時間的経過にわたって、１週間につき１から２１回、抗真菌乾燥粉末を投与することを含み、必要であればその後に、１週間に１度か２度の投与が続く。
【０１７５】
噴霧された主に結晶性のアンフォテリシンＢの投与のための、本発明の実施態様の例は、予防的負荷を示す図１に示される。この例におけるアンフォテリシンＢのＭＩＣ値は、ブロック３００により示されるように、約０．５μｇ／ｇから約４μｇ／ｇであるように決定された。中間のＭＩＣ値３００′は、約２．２５μｇ／ｇである。曲線３０１は、特定の投与計画に基づく予測の肺のアンフォテリシンＢ濃度を示す。見てわかるように、アンフォテリシンＢ濃度は、ＭＩＣの範囲３００を越え、少なくとも中間のＭＩＣ値３００′の少なくとも二倍である、対象の肺のアンフォテリシンＢ濃度の範囲３０２に達する。対象の肺のアンフォテリシンＢ濃度の範囲３０２は、この例においては、４μｇ／ｇから５０μｇ／ｇであり、さらに好ましくは４．５μｇ／ｇから２０μｇ／ｇであり得る。示される特定の例において、対象の肺のアンフォテリシンＢ濃度の範囲３０２は、９μｇ／ｇから１５μｇ／ｇの範囲であり、ＭＩＣの範囲３００の中間値３００′の約５倍である濃度値あたりを変動する。
【０１７６】
本発明の一つ以上の実施態様に基づく、対象の肺のアンフォテリシンＢ濃度範囲内の肺のアンフォテリシンＢ濃度の維持は、真菌感染症に対する治療および／または予防を提供することにおける有効性において有用であり、また、従来の治療よりも安全である。図２は、本発明の一つ以上の実施態様に基づくアンフォテリシンＢの投与中の、得られる予測された血漿アンフォテリシンＢ濃度４００を示す。見てわかるように、アンフォテリシンＢ濃度は、血漿アンフォテリシンＢ濃度の最小毒性濃度４０１よりもかなり少なく、したがって投与の安全性を高める。
【０１７７】
肺および／または鼻の真菌感染症を患う患者を治療するために、投与されるアンフォテリシンＢの用量ごとの量は、その感染症を治療するのに有効である量であり得る。感染症の治療のためのアンフォテリシンＢの量は、通常、予防のために使用される量よりも多くなり、一般的に約０．２ｍｇ／ｋｇから約６．０ｍｇ／ｋｇ、または約０．８ｍｇ／ｋｇから約５．０ｍｇ／ｋｇなど、０．０１ｍｇ／ｋｇから７．０ｍｇ／ｋｇである。典型的な治療計画において、本発明の一つ以上の実施態様に基づく抗真菌粉末は、約７から約２８日の間に、１日に約１から約８回、好ましくは１日に約２から約６回投与される可能性がある。
【０１７８】
これらの呼吸器の真菌状態を治療することにおいて、医薬組成物は、一般的に、原因となる真菌病原体のＭＩＣの約３から約１０倍、またはそれを超える用量で投与される。通常、患者に供給されるアンフォテリシンＢの用量は、１日約１０ｍｇから２００ｍｇなど、１日約２ｍｇから約４００ｍｇであり、治療される状態、患者の年齢および体重、および同様なものに依存する。
【０１７９】
理論によって縛られることを望まないが、本発明の一つ以上の実施態様に基づいてアンフォテリシンＢを提供することによって、アンフォテリシンＢの局所毒性は、アンフォテリシンＢの溶解率を低下させること、および／または肺全体への沈着を増加させ、上肺における局所毒性を防ぐことによって、減少されることが可能である。したがって、結晶性のアンフォテリシンＢの投与は、アンフォテリシンＢの主に非結晶性形状の投与よりも安全であると考えられる。さらに、小さめのアンフォテリシンＢの粒子状物質から生成された小さめの吸入された粒子状物質の投与は、安全性を向上させる傾向がある。
【０１８０】
より多くの用量が投与されると、安全性はさらに重要な問題となる。したがって、より高い結晶性のアンフォテリシンＢ、より小さいアンフォテリシンＢの粒径、およびより小さい吸入された粒子または粒子状物質の粒径が、より多くの用量のために提案される。例えば、５０ｍｇを越える用量のために、当業者は、アンフォテリシンＢの結晶化度が少なくとも約９０％であり、アンフォテリシンＢの質量中央径が少なくとも約２．８μｍ未満、そして吸入された粒子または粒子状物質が約２．８μｍ未満のＭＭＡＤを有する組成物を使用することを望む場合がある。
【０１８１】
アンフォテリシンＢを含む固形粒子または粒子状物質が、肺に投与される場合、肺内で固形の粒子または粒子状物質の溶解率を制御することが望ましいことが決定された。溶解率が、不適切に高い場合、肺内の局所部位において、可溶性で、超分子の凝集体が生成される。これらの可溶性凝集体は、いくつかの例において、肺組織に毒性である。しかしながら、溶解率が十分低い場合、可溶性の毒性凝集体が発生する可能性は低い。理論によって縛られることは望まないが、結晶性のアンフォテリシンＢを含む固形の粒子または粒子状物質を提供することは、非結晶性形状におけるアンフォテリシンＢと比較すると、溶解率を下げると考えられる。さらに、結晶性形状における肺のアンフォテリシンＢ濃度は、毒性の可溶性凝集体の発生を減少または防止する一方で、肺および／または鼻の真菌感染症に対して治療効果を提供するのに十分高い濃度で維持され得る。
【０１８２】
したがって、一例において、当該医薬組成物は、乾燥粉末の形状で患者の肺にデリバリーされ得る。したがって、当該医薬組成物は、肺の深部または別の対象部位まで効果的にデリバリーされ得る乾燥粉末を含む。この医薬組成物は、肺胞への浸透を可能にするために選択された大きさを有する粒子または粒子状物質を含む乾燥粉末の形状である。
【０１８３】
いくつかの例において、アンフォテリシンＢの５ｍｇまたは１０ｍｇまたはそれを超えるなどの単位用量を、単一吸入で肺にデリバリーすることが望ましい。上記に説明されたリン脂質の中空および／または多孔性の乾燥粉末の粒子状物質は、単一の吸入においてデリバリーされる約５ｍｇまたはそれを超え、多くの場合約１０ｍｇを超える場合が多く、場合によっては約２５ｍｇを超える用量を可能にする。あるいは、投与量は、２回以上の吸入にわたってデリバリーされ得る。たとえば、１０ｍｇの投与量は、それぞれ５ｍｇの２回の単位用量を提供することによってデリバリーされ、その２回の単位用量は、別々に吸入され得る。
【０１８４】
分散または粉末の医薬組成物は、噴霧器を使用して投与され得る。噴霧器は、ネブライザー、定量吸入器、液体用量注入器、または乾燥粉末吸入器であり得る。粉末の医薬組成物は、全内容を本明細書に援用する、ＷＯ９９／１６９４２０において説明されるように、ネブライザーによってデリバリーされ、ＷＯ９９／１６４２２において説明されるように、定量吸入器によってデリバリーされ、ＷＯ９９／１６４２１において説明されるように、液体用量注入器によってデリバリーされ、そして２００１年６月２２日に申請された米国特許申請第０９／８８８，３１１号、ＷＯ９９／１６４１９、ＷＯ０２／８３２２０、米国特許第６，５４６，９２９、および２００３年７月８日に申請された米国特許申請第１０／６１６，４４８号において説明されるように、乾燥粉末吸入器によってデリバリーされ得る。当該吸入器は、粒子または粒子状物質および推進剤を含むキャニスターを含み、当該吸入器は、キャニスターの外部と接続する絞り弁を含む。推進剤は、ヒドロフルオロアルカンであり得る。
【０１８５】
本発明の一つ以上の実施態様の医薬組成物は、放出用量効果を改善した。したがって、当該医薬組成物の高用量は、様々な噴霧器および噴霧技術を使用してデリバリーされ得る。
【０１８６】
これらの粉末の放出用量（ＥＤ）は、約４０％を越える、約５０％を越える、約６０％を越える、または約７０％を越えるなど、約３０％を越える可能性がある。
【０１８７】
本発明の一つ以上の実施態様に基づいて、医薬組成物１００を噴霧することにおいて特に有用である乾燥粉末の噴霧装置の例は、図３Ａにおいて図式的に示される。噴霧装置２００は、一つ以上の空気吸入口２１５および一つ以上の空気吹出し口２２０を有するチャンバー２１０を特徴とする本体２０５を含む。チャンバー２１０は、結晶性のアンフォテリシンＢを含む噴霧可能な医薬組成物を含むカプセル２２５を受けるための大きさである。穿刺機構２３０は、チャンバー２１０内で可動である穿刺員２３５を含む。吹出し口２２０と接続している端面２４０における開口部２４５から、使用者が吸入することができるように、使用者の口または鼻で受けられるような大きさおよび形であり得る端面２４０は、吹出し口２２０の近接または隣接している。
【０１８８】
乾燥粉末の噴霧装置２００は、カプセル２２５における医薬組成物を噴霧するために、チャンバー２１０を流れる空気を利用する。例えば、図３Ａから３Ｅは、吸込口２１５を流れる空気が、医薬組成物を噴霧するために使用され、端面２４０における開口部２４５から使用者にデリバリーされるように、噴霧された医薬組成物が吹出し口２２０に流れる噴霧装置２００の例の操作を示す。乾燥粉末の噴霧装置２００は、図３Ａにおける初期状態において示される。カプセル２２５は、チャンバー２１０内に位置しており、医薬組成物はカプセル２２５内に含まれる。
【０１８９】
噴霧装置２００を使用するために、カプセル２２５における医薬組成物が、噴霧されることを可能にするために暴露される。図３Ａから３Ｅの例において、穿刺機構２３０は、穿刺機構２３０への力２５０を適用することによって、チャンバー２１０内に進められる。例えば、図３Ｂに示されるように、使用者は、穿刺員２３５がチャンバー２１０内のカプセル２２５に接触するように、穿刺機構２３０を本体２０５内に滑り込ませるために、穿刺機構２３０の表面２５５を押すことができる。力２５０を適用し続けることによって、穿刺員２３５は、図３Ｃに示されるように、カプセル２５２の壁にまで突き進む。穿刺員は、カプセル２２５の壁を突き進むことを容易にするために、一つ以上の鋭い先端２５２を含む。穿刺機構２３０は、次に、図３Ｄに示される位置に戻り、カプセル２２５内の薬学的組成物を暴露するために、開口部２６０をカプセル２２５の壁が貫通している状態にする。
【０１９０】
図３Ｅの矢印２６５によって示されるように、空気またはその他のガスは、次に、吸入口２１５から流れる。気流によって医薬組成物は噴霧される。使用者が端面２４０から吸入２７０する場合、噴霧された医薬組成物は、使用者の気道にデリバリーされる。一例において、気流２６５は、使用者の吸入２７０によって引き起こされ得る。別の例において、圧縮空気またはその他のガスは、噴霧している気流２６５を発生させるために、吸入口２１５に噴出される。
【０１９１】
乾燥粉末の噴霧装置２００の特定の例は、全内容を本明細書に援用する米国特許第４，０６９，８１９号および４，９９５，３８５号において説明される。そのような装置において、チャンバー２１０は、通常、吸入方向に存在する縦軸を含み、カプセル２２５は、カプセルの縦軸がチャンバー２１０の縦軸に平衡になるように、チャンバー２１０に挿入可能なくらいの縦方向の長さである。チャンバー２１０が、カプセルがチャンバー２１０内で移動できるような方法で、医薬組成物を含むカプセル２２５を受けるような大きさである。吸入口２１５は、複数の接線方向に向けられたスロットを含む。使用者が、末端部を通して吸入する場合、外気は、接線方向のスロットを流れるようになる。この気流は、チャンバー２１０内で旋回気流を生成する。旋回気流によって、カプセル２２５は仕切りに接触し、その後、医薬組成物がカプセル２２５から出て、旋回気流内で噴流されるという方法で、チャンバー２１０内で動く。この例は、医薬組成物の高用量を持続的に噴霧することにおいて特に有効である。一例において、カプセル２２５は、カプセルの縦軸が８０度未満の角度、好ましくはチャンバーの縦軸から４５度未満の角度にある方法で、チャンバー２１０内を回転する。チャンバー２１０内のカプセル２２５の動きは、カプセル２２５の長さ未満であるチャンバー２１０の幅により引き起こされる。特定の一例において、チャンバー２１０は、端で終らせる先細りになった部分を備える。チャンバー２１０内の旋回気流中、カプセル２２５の前端は仕切りに接触し、カプセル２２５の側壁は端に接触し、端に沿ってスライドおよび／または回転する。カプセルのこの動きは、大量の医薬組成物を、カプセル２２５の後部における一つ以上の開口部２６０に通すようにすることにおいて特に有効である。
【０１９２】
別の受動的乾燥粉末吸入器の例において、乾燥粉末噴霧装置２００は、図３Ａから３Ｅに示されるようなものとは異なって構成され得る。例えば、チャンバー２１０は、全内容を本明細書に援用する米国特許第３，９９１，７６１号に説明されるように、カプセル２２５が吸入方向に直角になるように、カプセル２２５を受けるような大きさおよび形であり得る。米国特許第３，９９１，７６１においても説明されるように、穿刺機構２３０は、カプセル２２５の両端を貫通し得る。別の例において、チャンバーは、米国特許第４，３３８，９３１号および５，６１９，９８５号における例について説明されるように、空気がカプセル２２５を流れる方法で、カプセル２２５を受け得る。別の例において、医薬組成物の噴霧は、参照することにより本明細書に援用する米国特許第５，４５８，１３５号；５，７８５，０４９号；および６，２５７，２３３号における例について説明されるように、吸入口を流れる圧縮ガス、またはＷＯ００／７２９０４および米国特許第４，１１４，６１５号において説明されるような推進剤によって、達成され得る。この種類の乾燥粉末吸入器は、通常、能動的乾燥粉末吸入器と呼ばれる。
【０１９３】
本明細書で開示される医薬組成物は、患者の肺気道および／または鼻気道に、定量吸入器の使用など、噴霧を介して投与され得る。そのような安定化された調合は、全内容を本明細書に援用するＷＯ９９／１６４２２において開示されるように、優れた用量の再現性および改善された肺沈着を提供する。ＭＤＩは、当技術分野において周知であり、アンフォテリシンＢの投与のために用いられることが可能である。呼気活性化ＭＤＩの他、開発されてきた、またはこれから開発されるその他の種類の改善を含むものも、本発明の一つ以上の実施態様の医薬組成物に適合する。
【０１９４】
ネブライザーは当技術分野において周知であり、不必要な実験なしで請求の範囲の分散の投与のために容易に用いられることが可能である。呼気活性化ネブライザーの他、開発されてきた、またはこれから開発されるその他の種類の改善を含むものも安定化された分散に適合し、それらは本発明の一つ以上の実施態様の範囲内であるものとして考えられる。上述の実施態様の他に、本発明の一つ以上の実施態様の安定化された分散は、全内容を本明細書に援用するＷＯ９９／１６４２０にいおいて開示されるように、それを必要としている患者の肺気道および／または鼻気道に投与され得る噴霧された薬剤を提供するために、ネブライザーと併用して使用され得る。
【０１９５】
ＤＰＩ、ＭＤＩ、およびネブライザーと同様に、本発明の一つ以上の実施態様の安定化された分散は、例えば全内容を本明細書に援用するＷＯ９９／１６４２１に開示されるように、液体の用量滴下またはＬＤＩ技術と併用して使用され得る。液体の用量滴下は、安定化された分散の肺への直接投与を伴う。この点において、生物活性化合物の肺および／または鼻への直接投与は、肺の病んだ部分の血管循環の不全が静脈内の薬物デリバリーの効果を低下する際の障害の治療において特に有効である。ＬＤＩに関して、安定化された分散は、好ましくは、部分的液体換気または全体的液体換気と併用して使用される。さらに、本発明の一つ以上の実施態様は、生理学的に容認可能なガス（一酸化炭素または酸素など）の治療的に有用な量を、投与の前、最中、または後に、医薬の微粒分散に導入することをさらに含む。
【０１９６】
投与の時間は、一般的に短い。１つのカプセル（例えば５ｍｇ用量）に関して、総投与時間は、通常約１分未満である。２つのカプセル用量（例えば１０ｍｇ）は、通常約１分かかる。５つのカプセル用量（例えば２５ｍｇ）は、投与するのに約３．５分かかかる可能性がある。したがって、投与の時間は、約４分未満、約３分未満、約２分未満、または約１分未満など、約５分未満である。
【０１９７】
先述の説明は、以下の実施例を参照してさらに完全に理解される。しかしながら、そのような実施例は、本発明の一つ以上の実施態様を実践する方法を単に代表するものではなく、本発明の範囲を限定するものとして読まれるべきではない。
【実施例】
【０１９８】
実施例１
異なるロット間でのアンフォテリシンＢの結晶化度の変動
この実施例は、定量粉末Ｘ線回折によるアンフォテリシンＢの各ロットの結晶化度値を百分率で決定することを含む。この実施例は、アンフォテリシンＢの異なるロットの結晶化度の範囲を示す。
装置と材料
装置
試料保持器
島津製作所のＸ線解析装置モデルＸＲＤ−６０００
【０１９９】
材料
シリコン標準品、ＮＩＳＴ（全国科学技術情報システム）６４０ｃ
フッ化リチウム、粒径＜５μｍ
アンフォテリシンＢ結晶標準、し過＜４８μｍ
アンフォテリシンＢ「非晶質」、し過＜４８μｍ
媒体粉末（２：１のモル比でのＤＳＰＣ／ＣａＣｌ2）
【０２００】
方法
島津製作所のＸ線解析装置モデルＸＲＤ−６０００のアラインメント検査を、シリコン標準品で実行した。アラインメント検査の間、発散スリットを１°に設定し、散乱スリットを、１．０°に設定し、受け取りスリットを、０．１５ｍｍで設定した。
【０２０１】
回折計を測定した場合、Ｘ線粉末回折データを、較正基準及び多くの未知の結晶化度に関して、必要とした（約６０ｍｇのサンプルサイズ）。以下の設定を、このデータ取得のために使用した。
滞留時間：２秒（定期走査）
刻み幅：０．０２°２θ
走査範囲：３−４２°２θ
スリット：０．５°の発散スリット、１°の散乱スリット、０．３ｍｍの受け取りスリット
【０２０２】
サンプル内のアンフォテリシンＢの結晶化度を決定するための較正プロットを準備するために、内標準法を使用した。内標準は、ＬｉＦであった。結晶質で広角Ｘ線非結晶標準の物理的混合物を準備した。今後は、この実施例において、当該広角Ｘ線非結晶標準を、「非晶質」として参照するだろう。次いで、これらの物理的混合物を、２０重量％でのＬｉＦでドープ塗料で塗った。
【０２０３】
結晶標準を、高結晶化度のアンフォテリシンＢのいくつかのロットの中から選択した。Ｘ線粉末回折パターンの定性的比較に基づいて、最小の非結晶質バックグラウンドを持つ材料を選択した。非結晶質標準を、結晶質材料（すなわち、アンフォテリシンＢの同じロットが、非結晶質及び結晶アンフォテリシンＢ標準の双方で使われた）を低温で製粉することにより準備した。双方の標準を、物理的混合物の準備前に４８μｍ未満にし過した。物理的混合物を、４０±５％ＲＨ（２０から２５Ｃ°）で準備した。すべての計量を、少なくとも０．０１ｍｇの分解能で、化学天秤上で行った。
【０２０４】
データ分析
ＬｉＦのピークに対する結晶アンフォテリシンＢの回折ピークの積分強度の割合を、各ＬｉＦのドープされた物理的混合物の回折パターンから算出した。当該積分強度の割合であるＩＩＲは、以下のように与えられる。
【０２０５】
【化１】
2008503586.tif 000003
【０２０６】
ＩAmB、Cr及びＩLiFは、それぞれの結晶アンフォテリシンＢ及びＬｉＦの選択された参照ピークの積分強度である。単一の回折ピーク（３８から３９．５°２θ）を、ＬｉＦとして選択し、狭度範囲を、アンフォテリシンＢ（１２．７５から１６．２５°２θ）として選択した。曲線基線を描く／挿入する必要を取り除くために、一組のアンフォテリシンＢピークだけを使い、これらのピークは、初期結晶化度に敏感に反応した。ピークを、ジェード・ソフトウェア（ＭＤＩ  Ｉｎｃ．）のバージョン７．１．２を用い、積分した。
【０２０７】
結果と議論
表１は、アンフォテリシンＢのいくつかのロットの結晶化度の結果を示す。製剤原料法の最大分散は、約±１０％の結晶であり、結晶化度の百分率に依存する。理論に固定されないように、選択された標準の大いに異なるかさ密度に起因し、結果の不確実性は、試料保持器を満たすために使われた圧縮の変動によるものである。正確さの改善は、より低いサンプル量を使うことにより得られる（サンプル圧縮の必要性がより少ない結果をもたらす）。
【０２０８】
【表１】
2008503586.tif 000004
【０２０９】
実施例２
スプレー乾燥されたアンフォテリシンＢ粒子状物質の調合
アンフォテリシンＢ粒子状物質を、２つのステップ処理により調合した。第一ステップでは、１０．５２ｇのアンフォテリシンＢ（デンマーク、コペンハーゲンのＡｌｐｈａｒｍａ社）と１０．１２ｇのジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）（マサチューセッツ州ケンブリッジのＧｅｎｚｙｍｅ社）と、０．８４ｇの塩化カルシウム（ニュージャージー州フィリップスバーグのＪＴ  Ｂａｋｅｒ社）を、２分から５分間、１０，０００ｒｐｍで、ウルトラ・トラックス・ミキサー（モデルＴ−２５）を用い、１０４５ｇの熱い脱イオン水（Ｔ＝７０℃）中に分散した。混合を、ＤＳＰＣとアンフォテリシンＢが分散されていることが視覚的にはっきりするまで、続けた。
【０２１０】
次いで３８１ｇのペルフルオロオクチルエタン（ＰＦＯＥ）を、混合中に、毎分約５０から６０ｍＬの割合で、ゆっくりと添加した。添加が完了した後、乳剤／ドラッグ分散を、１２，０００ｒｐｍで５分未満の添加期間で混合した。次いで、粗乳剤を、１２，０００から１８，０００ｐｓｉの３回通過、その後、２０，０００から２３，０００ｐｓｉの２回通過で、高圧ホモゲナイザー（カナダ、オタワのＡｖｅｓｔｉｎ社）を通した。
【０２１１】
得られた良質の乳剤を、第二ステップ、すなわち、Ｎｉｒｏ  Ｍｏｂｉｌｅ  Ｍｉｎｏｒ上のスプレー乾燥における原料として利用した。以下のスプレー条件を、用いた：流速の合計＝７０ＳＣＦＭ、入口温度＝１１０℃、出口温度＝５７℃、給水ポンプ＝毎分３８ｍＬ、噴霧圧＝１０５ｐｓｉｇ、噴霧流速＝１２ＳＣＦＭである。
【０２１２】
流通黄白色粉末を、サイクロン分離器を用い、集めた。収集効率は、６０％だった。アンフォテリシンＢ粒子状物質の幾何学的粒径を、レーザー回折（ドイツ、クラウスタール−ツェラーフェルトのＳｙｍｐａｔｅｃ  Ｈｅｌｏｓ社）により確認し、２．４４μｍの体積加重平均粒径（ＶＭＤ）を見つけた。走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）解析は、当該粉末が高表面粗度で小さい多孔質の粒子状物質であることを示した。各集電装置からの粉末の５ＳＥＭ視野内に合体されていないアンフォテリシンＢ結晶の証拠は、なかった。乾燥粒子状物質の示差走査熱量測定解析では、７８℃にした粉末中において、ジステアロイルホスファチジルコリンのＴmを示し、そしてそれは、スプレー乾燥された、純ジステアロイルホスファチジルコリンとして観測されたものと類似している。
【０２１３】
実施例３
スプレー乾燥されたアンフォテリシンＢ粒子状物質のエアロゾル機能
実施例２で調合した得られた乾燥アンフォテリシンＢを、室温で、一晩中、１５から２０％ＲＨで平衡を保たせた＃２ＨＰＭＣカプセル（日本、塩野義製薬）に手で詰めた。約１０ｍｇの充てん質量を使い、それは、＃２ＨＰＭＣカプセルの中詰め容積の約１／２に相当した。
【０２１４】
空力粒子サイズ分布を、Ａｎｄｅｒｓｅｎカスケードインパクター（ＡＣＩ）上の重量測定法で決定した。粒子サイズ分布を、米国特許４，０６９，８１９と４，９９５，３８５に説明されたＴｕｒｂｏｓｐｉｎ（登録商標）ＤＰＩ装置を用い、毎分２８．３Ｌの流速（すなわち、快適な吸入作用）と毎分５６．６Ｌの流速（すなわち、強引な吸入作用）で測定した、ここでそれらの米国特許の全内容を本願明細書中に援用する。２Ｌの総容積を、当該装置を通して、くみ出した。より高流速で、２つのＡＣＩを、毎分２８．３Ｌの較正流速と毎分５６．６Ｌの装置を通過する総流量とで同時に使用した。双方の場合において、設定は、ＡＣＩインパクタープレートが較正されている条件を示す。卓越したエアロゾル特性を、２．６μｍ未満のＭＭＡＤ及び７２％超のＦＰＦ<3.3μmからでもわかるように観測した。機能上の流速の効果を、また、同時に使用された２つのＡＣＩに毎分５６．６Ｌで操作されたＴｕｒｂｏｓｐｉｎ（登録商標）（イタリア、ＰＨ＆Ｔ社）ＤＰＩ装置を用い（図４）、評価した。最小の流速依存機能を例証した際、高速の流速で観測された沈着データにおける、著しい違いは観測されなかった。
この上記で述べられた実施例は、現存の粉末のエアロゾル機能は、流速とは独立しており、さらに再現可能な患者への投薬をもたらすべきである。
【０２１５】
実施例４
アンフォテリシンＢ粒子状物質のエアロゾル化における保存効果
実施例２で調合した得られた乾燥アンフォテリシンＢを、一晩中、１５から２０％ＲＨで平衡を保たせた＃２ＨＰＭＣカプセル（日本、塩野義製薬）に手で詰めた。約１０ｍｇの充てん質量を使い、それは、＃２ＨＰＭＣカプセルの中詰め容積の約１／２に相当した。充てんされたカプセルを、ラミネート加工されたフォイルシールされた小袋に包装された独立インデックス付きのガラスのバイアル瓶中に置き、続いて、２５℃／６０％ＲＨまたは、４０℃／７５％ＲＨで保存した。
【０２１６】
放出投与（ＥＤ）測定は、米国特許４，０６９，８１９と４，９９５，３８５に説明され、毎分６０Ｌの最適サンプリング流速で操作されるＴｕｒｂｏｓｐｉｎ（登録商標）（ＰＨ＆Ｔ、Ｉｔａｌｙ）ＤＰＩ装置を用い、及び２Ｌの総容積を用いて実施された。総計１０の測定は、各保存変化を決定するものであった。
【０２１７】
空力粒子サイズ分布を、Ａｎｄｅｒｓｅｎカスケードインパクター（ＡＣＩ）上の重量測定法で決定した。粒子サイズ分布を、Ｔｕｒｂｏｓｐｉｎ（登録商標）ＤＰＩ装置を用い、２Ｌの総容積を用いて、毎分２８．３Ｌの流速で測定した。
【０２１８】
卓越したエアロゾル特性を、９３％±５．３％の平均ＥＤ、ＭＭＡＤ＝２．６μｍと、ＦＰＦ<3.3μm＝７２％（図５と６）からわかるように観測した。エアロゾル機能（ＥＤ、ＭＭＡＤまたはＦＰＦ）における著しい変化を、上昇温度及び湿度での保存後、卓越した持続特性を表すものとして、観測しなかった。ＥＤ機能に関する現行のＵＳＰ（米国薬局方）条件は、９０％を超える投与量がラベル表示用量の±２５％でなければならず、用量の１０％未満は±２５％を超えるが±３５％の範囲内でなければならないと規定している。ＦＤＡ（食品医薬品局）が発行した最近の指針草案は、限度量が抑えられるべきであり、９０％を超える投与量がラベル表示用量の±２０％でなければならず、±２５％を超えてはならないと提案している。統計的にいえば、提案されているＦＤＡ規格に適合するためには、ＲＳＤで６％であることが必要とされる。
【０２１９】
前記現行の指針内である前記実施例の結果だけでなく、それらは、提案された指針の限度内でもある。したがって、前記組成物物は良好な分散性、エアロゾル特性、安定性を有した。
【０２２０】
実施例５
さまざまなホスファチジルコリンを用いて噴霧乾燥したアンフォテリシンＢ粒子状物質
約５０重量％のアンフォテリシンＢを含む噴霧乾燥した粒子状物質を、さまざまなホスファチジルコリン（ＰＣ）を表面活性剤として用い、実施例２に記載の二段階ステップにしたがって調製した。組成物物を、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）（マサチューセッツ州ケンブリッジＧｅｎｚｙｍｅ社）、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）（マサチューセッツ州ケンブリッジＧｅｎｚｙｍｅ社）、及びＳＰＣ―３（ドイツ、ＬｕｄｗｉｇｓｈａｆｅｎのＬｉｐｏｉｄ  ＫＧ社）を用いて調製した。供給溶液を、ここに記載された同一の装置を用い、および同一の条件において調製した。前記５０重量％アンフォテリシンＢの組成物は以下のとおりである。
【０２２１】
アンフォテリシンＢ  ０．７３３ｇ
ＰＣ                ０．７１４ｇ
ＣａＣｌ2           １２．６０ｍｇ
ＰＦＯＢ            ３２ｇ
純水                ７５ｇ
【０２２２】
得られた多粒子乳剤を、例として、Ｂ−１９１  Ｍｉｎｉ  Ｓｐｒａｙ―Ｄｒｉｅｒ（スイス、フラウィルのＢｕｃｈｉ社）による噴霧乾燥などをおこなう第二ステップへの供給原料として利用した。以下の公称噴霧条件、吸引＝１００％、吸気温度＝８５℃、出口温度＝６０℃、給水ポンプ＝１．９ｍＬ／分、噴霧圧力＝６０−６５ｐｓｉｇ、噴霧流量＝３０−３５ｃｍを用いた。前記吸気流量（６９−７５％）を、排出袋の圧力を３０−３１ｍｂａｒに保つよう調節した。自由流動する黄色粉末を、標準的なサイクロ（登録商標）ン分離器を用いて収集した。アンフォテリシンＢ粒子状物質の幾何学的粒径を、レーザー回折（ドイツ、クラウスタール−ツェラーフェルトのＳｙｍｐａｔｅｃ  Ｈｅｌｏｓ社）により計測し、２．６５から２．７５μｍの体積加重平均粒径（ＶＭＤ）を見つけた。走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）検査解析では、前記粉末は高い表面粗度を持つ多孔性微粉末であるという結果を示した。
【０２２３】
空気力学的粒子径の分布を、図７のとおり、重量分析によって、アンダーセンカスケードインパクター（ＡＣＩ）を用いて測定した。粒子径の分布を、Ｔｕｒｂｏｓｐｉｎ（登録商標）ＤＰＩ装置を用い、毎分５６．６Ｌ（すなわち、強制的な吸入力）の流速で測定した。全量で２リットルを、前記装置を介して流入した。較正流量は２８．３Ｌ／分、総流量は５６．６Ｌ／分で、二台のＡＣＩを同時に使用した。三つの型のホスファチジルコリンとともに生じた、２．５μｍ未満のＭＭＡＤおよび７２％を超えるＦＰＦ<3.3μmを有するアンフォテリシンＢにおいて、類似のエアロゾル特性を観察した。この上述の実施例は、使用されたホスファチジルコリンから独立してアンフォテリシンＢ粉末を生成する組成物技術の柔軟性を明示する。
【０２２４】
実施例６
７０重量％アンフォテリシンＢ噴霧乾燥微粉末の調製
アンフォテリシン微粉末を、実施例２に記載の二段階ステップにしたがって調製した。前記供給溶液を、ここに記載された同一の装置を用い、および同一の条件において調製した。前記７０重量％アンフォテリシンＢの組成物は以下のとおりである。
【０２２５】
アンフォテリシンＢ  ０．７０ｇ
ＤＳＰＣ            ０．２６５ｇ
ＣａＣｌ2           １２．２４ｍｇ
ＰＦＯＢ            １２ｇ
純水                ３５ｇ
【０２２６】
得られた多粒子乳剤を、例として、Ｂ−１９１  Ｍｉｎｉ  Ｓｐｒａｙ―Ｄｒｉｅｒ（Ｂｕｃｈｉ、Ｆｌａｗｉｌ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）による噴霧乾燥などをおこなう第二ステップへの供給原料として利用した。以下の公称噴霧条件、吸引＝１００％、吸気温度＝８５℃、出口温度＝６０℃、給水ポンプ＝１．９ｍＬ／分、噴霧圧力＝６０−６５ｐｓｉ、噴霧流量＝３０−３５ｃｍを用いた。前記吸気流量（６９−７５％）を、排出袋の圧力を３０−３１ｍｂａｒに保つよう調節した。自由流動する黄色粉末を、標準的なサイクロン分離器を用いて収集した。アンフォテリシンＢ粒子状物質の幾何学的粒径を、レーザー回折（ドイツ、クラウスタール−ツェラーフェルトのＳｙｍｐａｔｅｃ  Ｈｅｌｏｓ社）により計測し、２．９６μｍの体積加重平均粒径（ＶＭＤ）を見つけた。走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）検査解析では、前記粉末は高い表面粗度を持つ多孔性微粉末であるという結果を示した。この上述の実施例は、ここに記述された多粒子の手法により、高含有アンフォテリシンＢ粉末を生成する、呈示された粉末工学の柔軟性を明示する。
【０２２７】
実施例７
噴霧乾燥アンフォテリシンＢ粒子状物質のエアロゾル機能
得られた、実施例６において調製された乾燥アンフォテリシンＢ粒子状物質を、＃２  ＨＰＭＣカプセル（日本、塩野義製薬）もしくは＃３  ＨＰＭＣ  （サウスカロライナ州グリーンウッドＣａｐｓｕｇｅｌ社）に手で詰め、一晩室温にて、１５から２０％ＲＨで平衡に供した。約１０ｍｇの充填質量を使い、それは、＃２ＨＰＭＣカプセルの中詰め容積の約１／２、または＃３  ＨＰＭＣカプセルの中詰め容積の約５／８に相当した。エアロゾル機能を、Ｔｕｒｂｏｓｐｉｎ（登録商標）（イタリア、ＰＨ＆Ｔ社）Ｅｃｌｉｐｓｅ（登録商標）（イギリス、Ａｖｅｎｔｉｓ社）またはＣｙｃｌｏｈａｌｅｒ（登録商標）（スイス、Ｎｏｖａｒｔｉｓ社）ＤＰＩ装置を用いて評価した。前記Ｃｙｃｌｏｈａｌｅｒ（登録商標）は＃３  ＨＰＭＣ  カプセルを使用し、一方、前記Ｔｕｒｂｏｓｐｉｎ（登録商標）ならびに前記Ｃｙｃｌｏｈａｌｅｒ（登録商標）装置は＃２  ＨＰＭＣのサイズのカプセルを使用した。
【０２２８】
空気力学的粒子径の分布を、図８のとおり、重量分析によって、アンダーセンカスケードインパクター（ＡＣＩ）を用いて測定した。粒子径の分布を、Ｔｕｒｂｏｓｐｉｎ（登録商標）とＥｃｌｉｐｃｅ（登録商標）の両ＤＰＩ装置においては強制的な吸入力であり、Ｃｙｃｌｏｈａｌｅｒ（登録商標）装置においては快適である、毎分５６．６Ｌの流速で測定した。全量で２リットルを前記装置を介して流入した。較正流量は２８．３Ｌ／分、総流量は５６．６Ｌ／分で、二台のＡＣＩを同時に使用した。２．５μｍ未満のＭＭＡＤおよび７１％を超えるＦＰＦ<3.3μmによって明示されるとおり、類似のエアロゾル機能をすべての装置において観察した。この上述の実施例は、前記呈示の粉末の前記エアロゾル機能が、中間および低い耐性に設計された装置に依存せず、またカプセルサイズにも依存しないことを明示し、これは検査されたアンフォテリシンＢ粉末の分散性を証明するものである。
【０２２９】
実施例８
噴霧乾燥アンフォテリシンＢ微粉末のエアロゾル機能
本実施例はさらに、アンフォテリシンＢ微粉末の開発ロットの前記エアロゾル機能を調査する。
【０２３０】
実施例２に記述の工程を用いて、以下のアンフォテリシンＢ微粉末を生成し、前記アンフォテリシンＢをＡｌｐｈａｒｍａ社から得た。
・４０００Ｔ
・４００１Ｔ
【０２３１】
図９および図１０はそれぞれ、放出投与（ＥＤ）（ｍｇ／カプセル）を示し、コレクタあたり、およびロットあたりのＥＤを意味する。前記ＥＤの測定には、米国特許出願Ｎｏ．１０／２９８、１７７に示された吸引器装置を使用し、参照することにより全内容を本願明細書中に援用する。
【０２３２】
図１１および図１２はそれぞれ、空気力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）と、コレクタあたりの粒子状物質用量（％ＦＰＤ＜３．３μｍ）を示す。
【０２３３】
実施例２に記述の工程を用いて、以下のアンフォテリシンＢ微粉末を生成し、前記アンフォテリシンＢをＣｈｅｍｗｅｒｔｈから得た。
・４０２４Ｔ
・４０２５Ｔ
・４０２６Ｔ
・４０２７Ｔ
・４０２８Ｔ
・４０２９Ｔ
・４０３０Ｔ
【０２３４】
図１３と図１４はそれぞれ、放出投与（ＥＤ）（ｍｇ／カプセル）を示し、コレクタあたり、およびロットあたりのＥＤを意味する。
【０２３５】
図１５と図１６はそれぞれ、空気力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）と、コレクタあたりの粒子状物質用量（％ＦＰＤ＜３．３μｍ）を示す。
【０２３６】
下記にさらに詳述されるとおり、実施例２に記述の工程を用いて、下記アンフォテリシンＢ粒子状物質を生成した。
・Ｎ０２０２２６（高結晶質ＡＰＩによる）
・Ｎ０２０２２７（高非晶質ＡＰＩによる）
【０２３７】
これらのアンフォテリシンＢを、実施例２に記述の工程の変形を用いて生成し、ここで前記アンフォテリシンＢはそもそもＡｌｐｈａｎｎａから製造されたものである。しかしながら、噴霧乾燥の前に、前記アンフォテリシンＢを（ｉ）高非晶質または（ii）高結晶質のどちらかのＡＰＩバッチ（Ｘ線粉末回折によって測定されたとおり）へ到達するよう処理した。
【０２３８】
具体的には、アンフォテリシンＢの再処理のための前記過程を下記に示す。下記工程系統図および次に続く説明が示すように、結晶質形および非晶質形の両方を、同一の出発原料より生成した。
【０２３９】
【表２】
2008503586.tif 000005
【０２４０】
アンフォテリシンＢ製剤原料の再処理工程の説明（ＡＰＩ）
可溶化およびろ過
室温において、約２０ｇのアンフォテリシンＢを、１１３０ｍＬのメタノールに、攪拌しながら添加した。約４５０ｍＬのジメチルホルムアミド、３９ｇのクエン酸一水和物を、アンフォテリシンＢ懸濁液に、連続して攪拌しながら添加した。すべての固体を基本的に融解したのち、その溶液をろ過によって清澄した。
【０２４１】
約２８０ｍＬの塩化メチレンを前記ろ過物に添加した。前記生成物が入った容器を、処理中において光があたらないよう遮断した。約４５０ｍＬの冷水（２−８℃）を添加し、そして前記溶液を１５分間攪拌した。
【０２４２】
ｐＨ調整および沈澱／結晶
アンフォテリシンＢの沈澱を、４０％トリエタノールアミン（〜１４０ｍＬ）を使用し、前記溶液をｐＨ〜７にすることで達成した。非晶質形に関して、前記塩基を攪拌しながら一度に添加した。前記非晶質形はその後下記に示すとおり、分離が可能な状態となった。
【０２４３】
結晶質形に関して、前記塩基を攪拌しながら３０分超かけて滴状で添加した。前記スラリーはその後９０分間、４４−４６℃まで熱せられ、次に３０分間室温で冷却された。最後に、前記スラリーは６０分間、２−８℃で冷却された。前記結晶質系はこうして、分離が可能な状態となった。
【０２４４】
前記結晶質系の収集および洗浄
アンフォテリシンＢの前記結晶質形を、内側に濾紙を敷いた大型ステンレス製ブーフナー漏斗を用いて真空濾過により取得した。前記生成物を、１７０ｍＬの４０％冷却メタノール（２−８℃）で、次に１００ｍＬアセトン（室温）で洗浄した。
【０２４５】
前記非晶質形の収集および洗浄
アンフォテリシンＢの前記非晶質形を、前記スラリーの遠心分離、その後上清のデカントにより取得した。前記生成物を、６００ｍＬの４０％冷却メタノール（２−８℃）における前記固形物の再懸濁により洗浄し、次に遠心分離、デカンテーションをおこなった。前記洗浄工程を、６００ｍＬのアセトン（室温）にて繰り返した。
【０２４６】
前記結晶質形および非晶質形の乾燥
前記洗浄済み結晶質アンフォテリシンＢを含んだ濾紙を、真空槽内のステンレスのトレイ内に設置した。同様に、洗浄済み結晶質アンフォテリシンＢを前記遠心分離瓶から除去し、前記槽内の濾紙を敷いたステンレス製トレイ上に広げた。前記乾燥処理は、室温にて１から３日間、前記生成物が光から遮断された状態でおこなった。前記乾燥工程において、比較的大きな粒子を、残留溶媒の蒸発を促進するため、ヘラを用いて粉砕することがときどきあった。最終生成物であるアンフォテリシンＢは、アンバーガラスの瓶に入れられ、２−８℃で保存された。
【０２４７】
上記に記載のとおり、実施例２に記載の工程を用いて、前記アンフォテリシンＢ粒子をその後生成した。図１７は、Ｎ０２０２２６とＮ０２０２２７の両方についての前記放出投与（ＥＤ）（ｍｇ／カプセル）を示す。Ｎ０２０２２６とＮ０２０２２７の空気力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）はそれぞれ、２．４μｍと２．６μｍであることがわかった。Ｎ０２０２２６とＮ０２０２２７の前記％ＦＰＤ＜３．３μｍはそれぞれ、５５％と４７％であることがわかった。
【０２４８】
実施例９および比較例１
気管内および静脈内の投与に関する比較
本実施例は、アンフォテリシンＢ溶液の気管内投与、もしくは市販のアンフォテリシンＢデオキシコール酸塩の静脈内投与後における、血漿、肺洗浄液、および肺組織内のアンフォテリシンＢの濃度判定に関するものだった。
【０２４９】
材料および方法
本実施例においては、カニューレ挿入済み（頸静脈カニューレ〔ＪＶＣ〕）で供給され、体重３３４ｇから３６６ｇのＳＤ系ラット（ペンシルベニア州スコッツデールのＨｉｌｌｔｏｐ  Ｌａｂ  Ａｎｉｍａｌｓ  Ｉｎｃ）を使用した。アンフォテリシンＢを、気管内注入または静脈注射によって投与した。研究デザインは表２に示される。
【０２５０】
【表３】
2008503586.tif 000006
【０２５１】
ＢＡＬ＝気管支肺胞洗浄（ｂｒｏｎｃｈｏａｌｖｅｏｌａｒ  ｌａｖａｇｅ）
Ｍ＝オス（Ｍａｌｅ）
【０２５２】
気管内注入用の前記アンフォテリシンＢ溶液を、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中にて、アンフォテリシンＢ１３．３ｍｇ／ｍＬの濃度で調製した。前記アンフォテリシンＢデオキシコール酸塩静脈注射用製剤を、アンフォテリシンＢ５０ｍｇの凍結乾燥塊として供給し、それを１ｍｇ／ｍＬ溶液に再構成した。
【０２５３】
研究評価項目および手順には、投与前体重、採血、ＢＡＬおよび薬物濃度分析のための組織採取ならびに全体剖検所見を含む。
【０２５４】
血液、ＢＡＬ、肺組織試料を、投薬後１２時間、１、２、４、６、８、１１および１４日後に採取した。各採取時に、ＩＴ群内の４匹およびＩＶ群内の３匹の動物を犠牲にし、血液、肺洗浄液および肺組織試料を採取した。
【０２５５】
血漿および洗浄液試料を、カナダ、モントリオールのＭＤＳ  Ｐｈａｒｍａ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ社によって、アンフォテリシンＢ濃度について分析した。肺組織試料をミネソタ州セントポールのＭｅｄＴｏｘ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社によって、アンフォテリシンＢ濃度について分析した。
【０２５６】
結果
全体剖検所見
気管内注入によってアンフォテリシンＢを投与されたラットは、全体的に肺毒性を示した。所見には、肺水腫、肺出血、肺組織の変色を含む。
【０２５７】
ＢＡＬ、肺組織および血漿内におけるアンフォテリシンＢ濃度
前記血漿、ＢＡＬおよび肺組織内におけるアンフォテリシンＢ濃度、ならびにアンフォテリシンＢの気管内注入１００および静脈内注入２００後における予測ＥＬＦアンフォテリシンＢ濃度を、図１８に示した。図に示すように、気道に投与されたとき、少量のアンフォテリシンＢが全身に存在した。これに対し、静脈内注入後は、高濃度のアンフォテリシンＢが最長４日間にわたり血中に存在した。また、図１８に示されるとおり、前記肺内アンフォテリシンＢ濃度は、気管内注入１００よりも静脈内注入２００のほうが高かった。実施された前記実験において、前記肺内アンフォテリシンＢ濃度は、多くの場合において気管内投与のほうが静脈内投与にくらべて高かったが、前記血漿中アンフォテリシンＢ濃度は、気管内投与のほうが低かった。
【０２５８】
結果および考察
気管内液体注入によってアンフォテリシンＢを投与されたラットは、全身に毒性を示した。所見は、肺水腫、肺出血および肺組織の変色を含む。
【０２５９】
アンフォテリシンＢは、気管内投与によって前記被検物質を投与された動物から採取されたどの血漿試料からも測定不可能であった。気管内投与によってアンフォテリシンＢを投与された動物からの前記ＢＡＬおよび肺組織内において、測定可能な濃度のアンフォテリシンＢを検出した。薬物を、ＩＴ投与後２日間にわたり、すべての動物の前記ＢＡＬにおいて測定し、４匹のうち１匹は、投与の８日後に測定した。薬物を、すべての動物の肺組織において、ＩＴ投与の１４日後に測定した。
【０２６０】
静脈内にアンフォテリシンＢを投与された動物において、血漿中の薬物を、投与後最長２日間にわたり測定したが、前記動物の前記肺中には、どの測定時においても、測定可能な薬物は見られず、また一匹の動物にのみ、投与１２時間後、ＢＡＬに測定可能なアンフォテリシンＢ濃度が検出された。
【０２６１】
結論として、濃度１３．３ｍｇ／ｍＬのアンフォテリシンＢ液の１１ｍｇ／ｋｇの気管投与は、肺に局所毒性をもたらす結果となった。気管投与はまた、投与後１４日間にわたり、定量限度を超える濃度をもたらす結果となった。これに対し、アンフォテリシンＢの静脈内投与を受けた動物の前記肺組織内における前記アンフォテリシンＢ濃度は、定量限度を下回った。
【０２６２】
実施例１０および比較例２
噴霧投与と静脈内投与の比較
エアロゾル化可能なアンフォテリシンＢ粉末を、犬に１４日間にわたり気管投与した。前記アンフォテリシンＢを、一日の摂取量１１．５ｍｇ／ｋｇを限度に投与した。前記アンフォテリシンＢを、呼気に一方向弁を取り付け、吸気ラインが前記アンフォテリシンＢ粉末を含んだ中央の保持チャンバーに繋がれたフェイスマスクを使用し、覚醒イヌに対して投与した。前記処方アンフォテリシンＢ粉末の呼吸用乾燥エアロゾル粉末を、回転ブラシジェネレーターを用いて前記粉末を分散させて作成し、３０分間の吸入暴露用に中央のチャンバーに投入した。
【０２６３】
図１９は、投与後のイヌ１０１における平均肺内アンフォテリシンＢ濃度−時間分析結果を示す。図に示すように、前記アンフォテリシンＢは前記肺内に投与後数日間留まり、約１９日間で半減期を観察した。これに対し、前記静脈内投与２０１は長く保持されず、約２８時間で半減期を観察した。
【０２６４】
実施例１１
予防的投与に伴う生存率の増加
概要
本実施例は、吸入によるアンフォテリシンＢの予防的投与が免疫抑制ウサギモデルのアスペルギルス・フミガーツスに有効であるかどうかを判定するものである。本研究の目的は、アスペルギルス・フミガーツス接種前にアンフォテリシンＢを一回吸入投与した場合、生存時間が延長および／または合計死亡数が減少するかどうか判定することであった。
【０２６５】
本研究では、１０羽の動物を三つの群に分けて使用した。第一群は、静脈内シタラビンおよびメチルプレドニソロンならびに擬似生理食塩水の接種という、前記免疫抑制措置を受けた。第二群は、前記免疫抑制措置ならびにＡ．フミガーツス５×１０7分生胞子の接種を受けた。第三群は、前記免疫抑制措置ならびにＡ．フミガーツス５×１０7分生胞子接種の一日前にアンフォテリシンＢ推定量１．５ｍｇ／ｋｇを吸入にて投与された。前記アンフォテリシンＢ乾燥粉末処方およびＡ．フミガーツスを、気管内チューブを通して麻酔ウサギに投与した。前記免疫抑制剤を、静脈注射にて投与した。細菌感染の予防目的で、静脈注射もしくは飲み水に混ぜて抗生物質を投与した。
【０２６６】
本研究においておこなわれた判定は、死亡数および罹病率、毎日の臨床観察、体重、臨床病理学（血液学および臨床化学）、全体剖検、肺重量、可視肺感染数値、ＢＡＬ、血液、および肺組織試料内における菌性コロニー形成ユニット（ＣＦＵ）測定、組織病理学的評価を含む。
【０２６７】
本研究の計画終了である第１４日目までの、前記動物の生存率は以下のとおりであった。第一群は６０％、第二群は２０％、第三群は７０％。第一群および第三群の動物の平均生存時間は１３日間であり、両群の死亡もしくは犠牲の平均日は第１４日目であった。一方、第二群の動物における平均生存は１０日間であり、死亡もしくは犠牲の平均日は第１０日目であった。Ｋａｐｌａｎ―Ｍｅｉｅｒ（ＫＭ）分析は、Ａ．フミガーツス接種の一日前にアンフォテリシンＢを投与した動物（第三群）の生存数が、Ａ．フミガーツスのみを接種された動物（第二群）と比較して、著しく（ｐ＜０．０５）増加していることを示した。第一群（対照）の動物の生存数はまた、第二群と比較して著しく増加した。第一群と第三群を比較したとき、著しい差はなかった。
【０２６８】
喘ぎ、喘鳴音、またはラ音を含む呼吸への影響に関する臨床的症状を、第二群および第三群の動物において観察した。これらの症状は、第一群の動物においては観察されなかった。第二群において、７羽の動物において研究第７日目より喘ぎ、喘鳴音、またはラ音が見られた。第二群の呼吸への影響に関する臨床的症状が見られたすべての動物は、前記症状を示し始めてから一日以内に、死亡または瀕死の状態で発見された。第三群において、５羽の動物において喘ぎ、喘鳴音、またはラ音が見られた。しかしながら、早期の呼吸症状の発生は同様に第７日目であったが、呼吸への影響に関する症状を示した動物のうち２羽の動物のみが瀕死状態となった。残りの３羽の動物は、第１４日目までに呼吸への影響に関する症状が消えた３羽のうち２羽（どちらもラ音のあった）の動物とともに、計画されていた剖検まで生存した。
【０２６９】
すべての群において、体重への影響を観察した。ほぼ第８日目までに、すべての群において体重が減少した。第８日目までに、すべての群において、約６％の体重減少が見られた。この初期減少ののち、第一群および第二群の生存動物の体重は、本研究の間一定であった。これに対し、第三群の動物の平均体重は減少し続け、第１４日目までには開始体重から１８％減となり、これは第一群の平均体重を１０％下回るものであった。
【０２７０】
すべての群において計測された血液学および臨床化学の指標に影響が見られた。血液学指標に見られた前記最初の影響は、分葉核好中球（ＡＮＳ）および血小板（ＰＬＣ）の減少を含む白血球（ＷＢＣ）レベルの減少であった。これらの影響は、全ての群において見られた。
【０２７１】
第二群および第三群において、白血球レベル、ヘモグロビン、ヘマトクリット値、総タンパク量、アルブミン、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、アラニン・アミノトランスフェラーゼ、総ビリルビン、直接ビリルビン、コレステロール、グロブリン、およびトリグリセリドにおいてさらなる影響を示した。第二群および第三群に見られる赤血球（ＲＢＣ）、ヘモグロビン（ＨＧＢ）およびヘマトクリット値（ＨＣＴ）の減少は、貧血を示唆し、顕微鏡によって肺組織内に見られる出血と整合する。第二群および第三群において見られた総タンパク量（ＴＰＲ）、アルブミン（ＡＬＢ）の減少と、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）、アラニン・アミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）、総ビリルビン（ＴＢＩ）および直接ビリルビン（ＤＢＴ）の増加、およびコレステロール（ＣＨＯ）は、肝臓効果と整合する。前記グロブリン（ＧＬＯ）の増加は、おそらく前記菌感染および／または肺内において顕微鏡にて観察された炎症への反応の結果と思われる。前記トリグリセリド（ＴＲＩ）値の増加は、本研究において観察された食欲の減退および体重の減少とともに見られた脂肪動員と整合する。
【０２７２】
全体剖検を、第１４日目に生存動物と瀕死状態となったのちに犠牲となった動物に対しておこなった。各動物の肺梗塞の数を、前記全体剖検において数えた。第一群において、可視の梗塞は見られなかった。第二群中の８羽中、剖検が可能であった７羽（８８％）の動物において、可視の梗塞が見られ、８羽中６羽（７５％）の動物において、２０を超える全体的に可視の梗塞が見られた。第三群において、１０羽中８羽（８０％）の動物において可視の肺梗塞が見られたが、第二群と異なり、１０羽中２羽（２０％）のみに２０を超える全体的に可視の肺梗塞が見られた。
【０２７３】
気管支肺胞洗浄液、血液および肺組織試料における微生物学的評価を、剖検中におこなった。第一群から採取されたどの試料からも、コロニー形成ユニット（ＣＦＵ）を検出しなかった。第二群については、培養のための試料を１０羽中８羽の動物から採取した。死亡した状態で見つかった２羽の動物からは、試料の採取は不可能であった。評価されたうちの６羽（７５％）の動物において、菌に対する反応が陽性である組織を１つかそれ以上有していた。第三群において、１０羽中９羽の動物から培養のための試料を採取し、うち４羽（４４％）の動物が菌に対する反応が陽性である組織を１つ以上有していた。
【０２７４】
肺の絶対重量と前記肺一対一の体重の重量は、第二群および第三群において、第一群と比較して増加した。
【０２７５】
前記肺の病理組織的評価は、対照ウサギから評価されたどの肺組織の中にも真菌菌糸が存在しなかったことを示した。真菌菌糸は、第二群の評価された動物のうち４４％、第三群の動物のうち５０％に存在した。顕微鏡的には、どの群の組織においても差異はなかった。真菌感染ウサギの肺断面にも、関連する続発的な変化がみられ、それには水腫、類壊死、出血、肺胞マクロファージ増殖、間質性炎症および／または血管周囲炎が含まれた。前記存在した変化は、重症度および罹患率において類似していた。前記評価可能な組織断面の前記顕微鏡評価は、評価されたうちの約半数の動物に真菌性感染を確認することができた。顕微鏡的に、第二群と第三群の組織または真菌菌糸に差異はなかった。
【０２７６】
結論として、臨床的観察の裏付け、顕微鏡的データおよび肺梗塞と前記死亡数データに基づき、アンフォテリシンＢは本研究に使用された免疫抑制ウサギモデルの死亡を誘発したＡ．フミガーツスに対する予防効果を発揮した。
【０２７７】
研究デザイン
本実験において、三つの研究群があり、各群にはそれぞれ１０の動物が存在した。
第一群は、静脈内シタラビンおよびメチルプレドニゾンの前記免疫抑制措置ならびに擬似生理食塩水の接種を受けた。第二群は、前記免疫抑制措置ならびにＡ．フミガーツス分生胞子５×１０7を与えられた。第三群は、前記免疫抑制措置ならびに、Ａ．フミガーツス分生胞子５×１０7を与えられる一日前に１．５ｍｇ／ｋｇのアンフォテリシンＢ経肺投薬を受けた。デザインの概略は、下記表３に示される。
【０２７８】
【表４】
2008503586.tif 000007
【０２７９】
哺乳類検査システムおよび家畜学
血管アクセスポート（ＶＡＰ）付きカテーテル二本を挿入された、研究当初体重２．５から４．０ｋｇのニュージーランドホワイトＳＰＦウサギを使用した。このウサギは、コンピュータによる体重層化無作為抽出法によって選ばれた。
【０２８０】
各群の数／性別
各群１０／メス、全三群
【０２８１】
免疫抑制および好中球減少
下記表４に示されるとおり、人間の患者の状態を模擬するため、ウサギに免疫抑制を施した。
【０２８２】
【表５】
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【０２８３】
小動物エアロゾル投与システムのインビトロ投薬効果判定
乾燥粉末アンフォテリシンＢを、前記吸気経路（ＩＨ）にて、小動物エアロゾル投与システムに接続された気管内チューブを使用して麻酔されたウサギにデリバリーした、このことは、米国特許出願Ｎｏ．６，２５７，２３３に示された小動物人工呼吸器に接続されたエアロゾルデリバリーシステムに関し、当該特許出願は参照することによりその内容全てを本明細書中に援用する。この点について、ブリスターパックから出た粉末は前記吸入器からチャンバーへ移動した。前記小動物人工呼吸器は前記分散粉末を気管内チューブへと押し込んだ。前記動物に対するデリバリー効果を、前記気管内チューブの末端に取り付けられたフィルターから採取された前記粉末を重量測定した質量を測定することによって判定した。前記フィルターから採取された質量を、実際のブリスターパックの重量と比較した。前記デリバリー効果を、前記インビボ実験用の推定投与量（ｍｇ）の計測に使用した。
【０２８４】
処置群
下記表５は、処置方法の概要を示す。
【０２８５】
【表６】
2008503586.tif 000009
【０２８６】
図２０は、前記好中球減少ウサギのＫａｐｌａｎ―Ｍｅｉｅｒ曲線を示す。免疫抑制措置を施され、アスペルギウス・フミガーツス６００に有効に曝露したウサギのうち、たった５０％のみが９日間を超えて生存した。これに対し、免疫抑制措置を施され、アスペルギウス・フミガーツスに曝露し、アンフォテリシンＢ６０１を投与されたウサギのうち、１００％が９日間を超えて生存した。曲線６０２は、免疫抑制措置のみを施された対照群のウサギを示す。より長期的には、曝露した処置なしウサギ６００のうち２５％未満が１４日間を超えて生存したのに対し、曝露した処置ありウサギ６０２のうち約７０％が１４日間を超えて生存した。
【０２８７】
実施例１２
ウサギに吸入により投与されたアンフォテリシンＢの薬物動態
本実施例は、吸入によるアンフォテリシンＢ粉末一回投与後のウサギの血漿中、気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）液中、および肺組織内のアンフォテリシンＢ濃度の判定に関するものである。本実施例は、血漿中および肺組織内から得た結果のみについて説明する。
【０２８８】
材料と方法
アンフォテリシンＢ（ＡｍＢ）を、実施例２に記述の前記工程を用い、吸入可能な粉末として、有効成分含有５０重量％で調剤した。前記調剤のロット番号はＮ０２００４２であった。前記試験粉末をブリスターパックに手詰めし、一袋あたり約１．５ｍｇの適正充填重量であり、３４０°Ｆにて一秒間接触密封した。
【０２８９】
前記被検物質を、小動物エアロゾル投与システムに接続された気管内チューブを使用して前記吸入（ＩＨ）経路にて麻酔されたウサギに投与した、ここで米国特許出願Ｎｏ．６，２５７，２３３に示された小動物エアロゾル投与システムを使用し、小動物人工呼吸器に接続し、当該文献の全内容を本願明細書中に援用する。前記試験吸入を、一度の吸入曝露で実施した。
【０２９０】
本研究は、二つの群を使用し、各群に４８羽のウサギを有する。第一群および第二群に、それぞれ、目的投与量である０．２５または１．５ｍｇ／ｋｇアンフォテリシンＢＩＨを投与した。投薬後以下の時点で４羽の動物を犠牲にした。０．１６、０．３、１、１．３、２、３、４、５、１４、２１、２８、４５日後である。血漿および肺組織を採集し、ＬＣ／ＭＳを用いてアンフォテリシンＢ含有量を分析した。前記分析の定量限度（ＬＯＱ）は、血漿中５ｎｇ／ｍｌおよび肺組織内２０ｎｇ／ｇであった。
【０２９１】
考察および結論
本実施例の目的は、吸入によるアンフォテリシンＢ粉末一回投与後のウサギの血漿中、ＢＡＬ液中および肺組織内のアンフォテリシンＢ濃度を判定することであった。二つの目標肺投与量、０．２５および１．５ｍｇ／ｋｇを試験した。本実施例は、血漿中および肺組織内から得た結果のみについて説明する。
【０２９２】
血漿中の定量限度（ＬＯＱ）は５ｎｇ／ｍｌであった。すべての動物、すべての時点の、試験された両方の投与量における血漿のアンフォテリシンＢ濃度はＬＯＱを下回った。したがって、アンフォテリシンＢのＩＨ投与後の全身曝露は少量であった。
【０２９３】
しかし、アンフォテリシンＢのＩＨ投与は、肺内における前記薬物の高濃度で持続的な凝縮という結果をもたらした。薬物の凝縮を急速に達成した。最初のサンプリング時である４時間までに、４．２および２４．２μｇ／ｇの群平均濃度を達成した。当該Ｔｍａｘ値を、第一群および第二群において、０．２５および１．５ｍｇ／ｋｇの投与後、それぞれ３２および２４時間で観察した。群平均Ｃｍａｘ値を、０．２５および１．５ｍｇ／ｋｇの投与に対し、それぞれ８．０と４６．６μｇ／ｇであった。Ｃｍａｘ値は投与量に比例する。
【０２９４】
薬物濃度を、ＩＨ投与後数週間にわたり維持した。図２１および図２２に示すとおり、群平均アンフォテリシンＢ濃度は最終サンプリング時においてもなお上昇しており、それはすなわち投与の４５日後であった。前記肺からのアンフォテリシンＢ消失の半減期（Ｔ1/2）は、０．２５ｍｇ／ｋｇ投与では２９２時間、１．５ｍｇ／ｋｇ投与では２５４時間であった。
【０２９５】
本実施例の結果は、ウサギに対するアンフォテリシンＢのＩＨ投与は、血漿中アンフォテリシンＢ濃度が一様にＬＯＱを下回る（＜５ｎｇ／ｍｌ）という結果をもたらすことを示す。さらに、それはアンフォテリシンＢの高濃度で持続的な凝縮が肺組織内で達成されることをも示す。
【０２９６】
実施例１３
吸入されたアンフォテリシンＢのウサギにおける予防的有効性
本実施例は、（１）上皮層の分泌液（ＥＬＦ）中または肺実質内のアンフォテリシンＢ（ＡｍＢ）濃度が、Ａ．フミガーツスの罹病の予防にさらに関連があるかどうかを判定すること、および（２）効果的な予防投与量を立証することに関するものである。
【０２９７】
材料と方法
実施例１４の前記吸入可能なアンフォテリシンＢ粉末、ロット番号Ｎ０２００４２を、使用した。前記試験粉末をブリスターパックに手詰めし、一袋あたり約１．５ｍｇの適正充填重量であり、３４０°Ｆにて一秒間接触密封した。
【０２９８】
前記被検物質を、小動物エアロゾル投与システムに接続された気管内チューブを使用して前記吸入（ＩＨ）経路にて麻酔されたウサギに投与した、ここで米国特許出願Ｎｏ．６，２５７，２３３に示された小動物エアロゾル投与システムを使用し、小動物人工呼吸器に接続し、当該文献の全内容を本願明細書中に援用する。前記試験吸入を、一度の吸入曝露で実施した。
【０２９９】
血管アクセスポート付きカテーテル二本を大腿静脈に挿入された、研究当初体重〜２．５から４．０ｋｇのニュージーランドホワイトＳＰＦウサギを、Ｃｏｖａｎｃｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、Ｄｅｎｖｅｒ  ＰＡより入手した。
【０３００】
アスペルギルス・フミガーツス、ＮＩＨ株４２１５を、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）より入手した。Ａ．フミガーツスの接種剤を、サブローデキストロースフラスコで調製した。分生胞子を、０．９％塩化ナトリウム水溶液中に０．０２５％のＴｗｅｅｎ２０が含有する溶液によって集め、円錐チューブに入れ、洗浄し、カウントした。前記濃度を、同一の溶液によって分生胞子は３００μＬ中５×１０7に調節した。投与群の動物に同量を接種した。接種を、麻酔されたウサギに実施した。ウサギを、気管チューブを用いて挿管し、つぎに、気管内チューブ内に導入されたカテーテルに取り付けたツベルクリン注射器を用いて、気管内に接種を実施した。
【０３０１】
本研究は、六つの群を使用し、各群に１０羽のウサギを有する。この群については、下記表６で説明する。すべての群に免疫抑制をほどこし、細菌感染を予防する目的で抗生物質を投与した。前記免疫抑制および抗生物質保護措置については、下記表７に詳述する。第一群は、Ａ．フミガーツスおよびアンフォテリシンＢのどちらも投与せず、免疫抑制の対照をつとめる。第二群は、Ａ．フミガーツスを接種したが、しかしアンフォテリシンＢ処置を実施しなかった。第三群は、Ａ．フミガーツス接種の１２日前に、アンフォテリシンＢ１．５ｍｇ／ｋｇ処置を受けた。第四群は、Ａ．フミガーツス接種の１日前に、アンフォテリシンＢ０．１５ｍｇ／ｋｇ処置を受けた。第五群は、Ａ．フミガーツス接種の１日前に、アンフォテリシンＢ０．５ｍｇ／ｋｇ処置を受けた。第六群は、Ａ．フミガーツス接種の１日前に、アンフォテリシンＢ１．５ｍｇ／ｋｇ処置を受けた。
【０３０２】
【表７】
2008503586.tif 000010
【０３０３】
【表８】
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【０３０４】
結果
生存データを、図２３に示す。第一群に、免疫抑制措置をほどこしたが、アンフォテリシンＢの投与およびＡ．フミガーツスの接種のどちらも実施しなかった。本群において、一羽を除く全てのうさぎが１４日目の本研究最終日まで生存し、生存率は９０％であった。
【０３０５】
第二群に、免疫抑制措置をほどこし、フミガーツスの接種を実施したが、アンフォテリシンＢの投与を、実施しなかった。本群において、全てのうさぎが死亡し、生存率は０％であった。平均生存時間は６日間であった。
【０３０６】
第三群に、免疫抑制措置をほどこし、アンフォテリシンＢの投与を１２日目に１．５ｍｇアンフォテリシンＢ／ｋｇで実施し、フミガーツスを接種した。本群において、全てのウサギが死亡し、生存率は０％であった。平均生存時間は１０日間であった。
【０３０７】
第四群に、免疫抑制措置をほどこし、アンフォテリシンＢの投与を１日目に０．１５ｍｇアンフォテリシンＢ／ｋｇで実施し、フミガーツスを接種した。本群において、９羽のウサギが死亡し、生存率は１０％であった。平均生存時間は９日間であった。
【０３０８】
第五群に、免疫抑制措置をほどこし、アンフォテリシンＢの投与を１日目に０．５ｍｇアンフォテリシンＢ／ｋｇで実施し、フミガーツスを接種した。本群において、やはり９羽のウサギが死亡し、生存率は０％であった。平均生存時間は１０．５日間であった。
【０３０９】
第六群に、免疫抑制措置をほどこし、アンフォテリシンＢの投与を１日目に１．５ｍｇアンフォテリシンＢ／ｋｇで実施し、フミガーツスを接種した。本群において、９羽のウサギが死亡し、生存率は１０％であった。平均生存時間は１０日間であった。
【０３１０】
第二群対第三群、第二群対第四群、第二群対第五群、第二群対第六群の、ログランク検定法を用いた一対統計比較は、吸入されたアンフォテリシンＢは、Ａ．フミガーツス投与に対して著しい（Ｐ＜０．００１）予防を付与することを示す。同一の検定法を用いた第三、第四、第五、第六群の一対統計比較は、異なる処置の結果として、生存率曲線にいかなる差異も示さなかった。
【０３１１】
考察および結論
本実施例は、Ａ．フミガーツス胞子を接種された、免疫抑制処置をほどこしたウサギによって吸入されたアンフォテリシンＢの前記予防効果について検査したものである。Ａ．フミガーツスを接種したが、処置をほどこしていない第２群と、処置をほどこした全ての群との比較において、吸入によるアンフォテリシンＢによる処置が、免疫抑制ウサギを保護したことを示す。これは、試験した全ての投薬量（０．１５、０．５、および１．５ｍｇ／ｋｇ）において同様であった。また、前記ウサギに処置をほどこしたのが、Ａ．フミガーツス投与の１日前、または１２日前であっても同様であった。
【０３１２】
実施例１４
ネズミを使用した一ヶ月吸入毒性試験
本実施例は、ネズミを使用したアンフォテリシンＢ乾燥粉末製剤形態の吸入投与後の毒性査定、および約一ヶ月間の回復期を経たのちの全ての効果についての可逆性評価に関するものである。本実施例は、気道内に局部的に誘発された毒性および全身の毒性を捜すことによりおこなわれた。
【０３１３】
５０重量％有効成分を含有するアンフォテリシンＢ粉末を、実施例２に記載の工程を用いて製剤した。その結果得られた粉末は、下記表８に示す特徴を有した。
【０３１４】
【表９】
2008503586.tif 000012
【０３１５】
ネズミ（雄１９８匹、雌１９８匹）を、六つの投与量群に分け、下記表９に示すとおり処置した。
【０３１６】
【表１０】
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【０３１７】
動物４１０Ｍは第１日目に早期に死亡し、７０１Ｍと入れ替えた。続いておこなわれた眼底検査により、動物３４５Ｆ、４３６Ｆおよび５４１Ｆを、それぞれ７１１Ｆ，７１２Ｆ，および７１３Ｆと入れ替えた。
【０３１８】
前記動物に、口吻単独暴露技術を使用し、約６０分間、５回にわたり、一週間間隔で投薬した。回収した動物を、投与後約１ヶ月間の回復期の間保持した。
【０３１９】
次の調査をおこなったが、それは臨床観察、体重、飼料消費、眼科学、血液学、臨床化学、尿検査、組織病理学、および毒物動態学に関するものであった。
【０３２０】
群全体の賦形剤処方エアロゾルの平均暴露チャンバー濃度は、２．３５ｍｇ／Ｌであった。群全体のアンフォテリシンＢ処方の平均暴露チャンバー濃度は、第３、第４および第５群においてそれぞれ、第１日目は０．０６、０．３９および０．９１ｍｇ／Ｌ、以降の日は０．０２、０．０６および０．１６ｍｇ／Ｌであった。群全体のアンフォテリシンＢ処方単独（分析により確定）の平均暴露チャンバー濃度は、第３、第４および第５群においてそれぞれ、第１日目は０．０２９０、０．１５２および０．３８９ｍｇ／Ｌ、以降の日は０．００８４７、０．０２１４および０．０５１９であった。第６群に関しては、群全体のアンフォテリシンＢ処方の平均暴露チャンバー濃度は、アンフォテリシンＢ単独で２．２２ｍｇ／Ｌもしくは０．６９４ｍｇ／Ｌであった。
【０３２１】
群全体（性別混在）の賦形剤処方の平均予測到達投与量は、７３．５６ｍｇ／ｋｇ／用量であった。群全体（性別混在）のアンフォテリシンＢ処方の平均予測到達投与量は、第３、第４および第５群においてそれぞれ、第１日目は１．８９、１２．２７および２８．４５ｍｇ／ｋｇ、以降の日は０．５２８、１．７４および４．８７ｍｇ／ｋｇ／日であった。群全体（性別混在）のアンフォテリシンＢ処方単独（分析により確定）の平均予測到達投与量は、第３、第４および第５群においてそれぞれ、第１日目は０．９１４、４．７８および１２．３６ｍｇ／ｋｇ、以降の日は０．２５６、０．６４６および１．５８ｍｇ／ｋｇであった。第６群に関しては、群全体（性別混在）のアンフォテリシンＢ処方の平均予測到達投与量は、アンフォテリシンＢ処方単独で、６８．２４ｍｇ／ｋｇ／用量もしくは２１．６４ｍｇ／ｋｇ／用量であった。
【０３２２】
粒度分布データは、６４．７％の前記媒体エアロゾル粒子が３．５μｍ未満であり、空気力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）（±幾何学的標準偏差（ＧＳＤ））は１．６１μｍ（３．２４４）であり、第３、第４および第５群においてそれぞれ、第１日目はアンフォテリシンＢ処方の粒子状物質の８１．２％、６０．６％、および７０．７％が３．５μｍ未満であり、以降の日は６８．２％、５９．０％および８３．６％が３．５μｍ未満であり、第１日目のＭＭＡＤおよび（ＧＳＤ）は１．３５μｍ（２．３８２）、１．４６μｍ（４．５０８）および１．４３μｍ（２．５６０）であり、以降の日は１．４２μｍ（３．５７２）、１．８９μｍ（２．７１０）および０．８１μｍ（４．３２９）であることを示した。
【０３２３】
アンフォテリシンＢ単独（分析により確定）では、第３、第４および第５群においてそれぞれ、第１日目は６８．１％、５８．１％および６８．６％の粒子状物質が３．５μｍ未満であり、以降の日は６６．２％、５５．６％および７１．１％は３．５μｍ未満であり、ＭＭＡＤおよび（ＧＳＤ）は、第１日目は１．６９μｍ（２．７５５）、１．７１μｍ（３．３５１）および１．５５μｍ（２．６５２）であり、以降の日は１．４７μｍ（３．５９９）、２．２９μｍ（２．５２５）および１．０６μｍ（６．０７７）であった。第６群に関しては、粒度データは、アンフォテリシンＢ処方の粒子状物質の５７．８％が３．５μｍ未満であり、ＭＭＡＤ（±ＧＳＤ）は２．１１μｍ（３．０８９）であることを示した。アンフォテリシンＢ単独（分析により確定）では、粒子状物質の５４．３％が３．５μｍ未満であり、ＭＭＡＤ（±ＧＳＤ）は２．２９μｍ（２．９６６）であった。
【０３２４】
前記粒子状物質は試験生物に対し、呼吸可能であると考えられた。
【０３２５】
体重、飼料消費、眼科学、血液学、臨床化学および臓器重量において、副作用は認められなかった。
【０３２６】
本研究において、１８１匹が死亡し、その多くは、呼吸困難を示す喘鳴音、ラ音、あえぎ呼吸などの臨床徴候と相互関係があり、これはアンフォテリシンＢを処方されたすべての群内の動物において観察された。一匹が試験開始前に死亡し、これは処置と関連があるとは見なさなかった。
【０３２７】
アンフォテリシンＢの投与と関連のある肺の剖検所見には、質量、癒着、異常内容物、隆起部／病巣、白色病巣、硬化、ならびに暗色病巣、暗色、変色または海綿状肺を含む。異常内容物は、第６群（高用量）の２匹の動物の気管または気管支に認められた。約一ヶ月間の回復期ののち、第３群（低用量）の一匹の雌の動物に、肺癒着が見られた。
【０３２８】
アンフォテリシンＢによる処置を受けた動物の肺の顕微鏡における所見は、肺炎、胸膜炎、肺葉虚脱、気管／気管支内の管腔滲出、気管支粘膜肥大、炎症性細胞浸潤の増加、肺胞の炎症および好酸球浸潤、ならびに鬱血／出血を含んだ。肺炎／胸膜炎、虚脱もしくは肺胞の炎症は、主要研究の第３群から第６群までの動物１１０匹のうち１７匹に認められた。
【０３２９】
肺の剖検所見と組織学所見との間に相互関係があり、特に癒着と胸膜炎、質量、硬化、隆起部／病巣または異常内容物と肺炎との間にそれが認められた。肺炎の影響によるその他の所見は、脾臓および肝臓内の炎症をともなう壊死、胸骨および大腿の顆粒球形成の増加、リンパ組織の萎縮、末梢肝細胞空胞化および広範性副腎皮質細胞肥大を含んだ。
【０３３０】
アンフォテリシンＢによる処置を受けたどの群の間にも、これらの所見の発生率もしくは重症度において、著しい差異は認められなかった。
【０３３１】
約一ヶ月間の回復期ののち、アンフォテリシンＢを処方されたいくつかの動物において、極小もしくは軽度の気管粘膜肥大がまだ存在した。回復試験において、第３群および第４群内の動物１８匹のうち、動物３４４の肺に慢性の炎症および胸膜炎が認められた。前記炎症は、リンパ球の病巣および有色マクロファージの集積を特徴的とした。
【０３３２】
毒物動態学分析により、最大血漿濃度は、投与量に伴い徐々に増加し、また投薬停止から４時間以内に徐々に到達したことが判明した。定量化可能な量のアンフォテリシンＢは、空気制御または溶剤制御試料においては検出されなかった。
【０３３３】
結論として、２１．６４ｍｇ／ｋｇ／用量を上限とするアンフォテリシンＢの口吻単独暴露投与は、呼吸困難を示す重篤な臨床的症状を示し、また、すべてのアンフォテリシンＢ処置を受けた群内の、第５群および第６群のすべての動物を含む多くの動物の早期死亡という結果をもたらした。すべての用量のアンフォテリシンＢ吸入投与は、管腔滲出および／または広範性炎症性細胞浸潤に関連する気管粘膜肥大に関連し、また、胸膜炎、肺炎、肺葉虚脱、気管／気管支内の管腔滲出、気管粘膜肥大および炎症性細胞浸潤の増加、肺胞の炎症および好酸球浸潤、ならびに硬化／出血のある肺に関連するものである。約一ヶ月間の回復期ののち、気管粘膜肥大および肺の炎症における、発生率ならびに重症度の減少がみられた。
【０３３４】
実施例１５
ネズミを使用した毎日もしくは毎週投与による、乾燥粉末毒物学試験
本実施例は、ネズミを使用した、二つの異なるアンフォテリシンＢ乾燥粉末バッチの二つの異なる投薬措置による吸入投与後の毒性の判定に関するものである。得られた情報を、その後の毒性試験における用量および／または投薬措置の選択に使用した。
【０３３５】
５０重量％有効成分を含有するアンフォテリシンＢ粉末を、実施例２に記載の工程を用いて製剤された。その結果得られた粉末は、下記表１０に示す特徴を有した。さらに、図２４に示すとおり、前記粉末は、本願明細書中とその全内容を援用する米国特許出願Ｎｏ．１０／２９８、１７７に示される吸引器装置を使用し、薬物固有のエアロゾル粒度対重量粒度の分析により測定されるとおり同質でない。
【０３３６】
【表１１】
2008503586.tif 000014
【０３３７】
９０匹の雄のネズミを、１０の投与量群に分け、下記表１１に示されるとおり処置した。
【０３３８】
【表１２】
2008503586.tif 000015
【０３３９】
前記動物に、口吻単独暴露技術を使用し、１日１回１時間、上記表１１のとおり投薬した。
【０３４０】
次の調査がおこなわれたが、それは臨床観察、体重、血液学、臨床化学、臓器重量、組織病理学、毒物動態学、および生物分析化学に関するものであった。
【０３４１】
群全体の賦形剤処方エアロゾルの平均暴露濃度は、第１群および第６群においてそれぞれ、２．２３ｍｇおよび２．１１ｍｇ／Ｌであった。群全体のアンフォテリシンＢ処方の平均暴露チャンバー濃度は、第２、第４、第７、および第９群においてそれぞれ、第１日目は１．０１、０．８８、１．０１ｍｇおよび０．８８／Ｌであり、以降の日は、０．１８、０．１７、０．１７および０．１８ｍｇ／Ｌであった。群全体のアンフォテリシンＢ処方の平均暴露チャンバー濃度は、第３、第５、第８および第１０群においてそれぞれ、２．２５、２．３３、２．５１および２．４１ｍｇ／Ｌであった。
【０３４２】
群全体のアンフォテリシンＢ処方単独（分析により確定）の平均暴露チャンバー濃度は、第２、第４、第７および第９群においてそれぞれ、第１日目０．３５３、０．３０６、０．３５３および０．３０６ｍｇ／Ｌであり、以降の日は０．０６８４、０．０５９８、０．０６１５および０．０７８３ｍｇ／Ｌであった。群全体のアンフォテリシンＢ処方単独（分析により確定）の平均暴露チャンバー濃度は、第３、第５、第８および第１０群においてそれぞれ、０．８５６、０．９２７、０．９６３および０．９８７ｍｇ／Ｌであった。
【０３４３】
群全体の賦形剤処方の平均予測到達投与量は、第１群および第６においてそれぞれ、７２．７９および６６．３４ｍｇ／ｋｇ／日であった。群全体のアンフォテリシンＢ処方の平均予測到達投与量は、第２、第４、第７および第９群においてそれぞれ、第１日目３３．４４、２９．１４、３３．４４および２８．９５ｍｇ／ｋｇ、以降の日は２．２５、５．５５、５．２２および５．４９ｍｇ／ｋｇであった。群全体のアンフォテリシンＢ処方の平均予測到達投与量は、第３、第５、第８および第１０群においてそれぞれ、７４．８５、７５．００、７７．８１および７７．４１ｍｇ／ｋｇ／用量であった。
【０３４４】
群全体のアンフォテリシンＢ処方単独（分析により確定）の平均予測到達投与量は、第１日目は、第２、第４、第７および第９群においてそれぞれ、１１．６９、１０．１３、１１．６９および１０．０７ｍｇ／ｋｇであり、以降の日は２、２５、１．９６、１．８９および２．２８ｍｇ／ｋｇであった。群全体のアンフォテリシンＢ処方単独（分析により確定）の平均予測到達投与量は、第３、第５、第８および第１０群においてそれぞれ、２４．４５、２９．９７、２９．９１および３０．６０であった。
【０３４５】
粒度分布データは、６９．７％および７７．６％の賦形エアロゾル粒子が３．５μｍ未満であり、空気力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）（±幾何学的標準偏差（ＧＳＤ））は第１および第６群においてそれぞれ、１．３８μｍ（２．８８０）および１．４３（２．２８１）であった。第１日目は、第２、第４、第７および第９群においてそれぞれ、アンフォテリシンＢ処方の粒子状物質の６３．０％、６９．２％、６３．０％および６９．２％が３．５μｍ未満であり、ＭＭＡＤおよび（ＧＳＤ）は１．３６μｍ（４．６０３）、１．５４μｍ（２．５０２）１．３６μｍ（４．６０３）および１．５４μｍ（２．５０２）であった。以降の日は、第２、第４、第７および第９群においてそれぞれ、アンフォテリシンＢ処方の粒子状物質の７７．２％、６９．８％、７１．３％および６１．３％が、３．５μｍ未満であり、ＭＭＡＤおよび（ＧＳＤ）は０．７９μｍ（４．５４１）、１．７５μｍ（２．４５５）１．５６μｍ（３．６１８）および２．１６μｍ（３．２２８）であった。第３、第５、第８および第１０群においてそれぞれ、アンフォテリシンＢ処方の粒子状物質の６９．２％、６３．４％、６４．７％および６１．８％が３．５μｍ未満であり、ＭＭＡＤおよび（ＧＳＤ）は０．９５μｍ（４．３４４）、１．４４μｍ（４．３１２）１．１０μｍ（４．７５９）および１．５２μｍ（４．２３３）であった。
【０３４６】
アンフォテリシンＢ単独（分析により確定）では、第１日目は、第２、第４、第７および第９群においてそれぞれ、５６．４％、６１．９％、５６．４％および６１．９％のエアロゾルの粒子状物質が３．５μｍ未満であり、ＭＭＡＤおよび（ＧＳＤ）は、１．５８μｍ（３．５６３）、１．７１μｍ（３．３０９）１．５８μｍ（３．５６３）および１．７１μｍ（３．３０９）であった。以降の日は、第２、第４、第７および第９群においてそれぞれ、６６．８％、５７．４％、６２．０％および６３．０％のエアロゾルの粒子状物質が３．５μｍ未満であり、ＭＭＡＤおよび（ＧＳＤ）は、１．０９μｍ（４．１８１）、１．９５μｍ（３．３８６）１．４２μｍ（３．３７２）および１．８３μｍ（３．０７５）であった。
【０３４７】
第３、第５、第８および第１０群についてはそれぞれ、６１．９％、５７．６％、６３．８％および６１．５％のアンフォテリシンＢ単独（分析により確定）が３．５μｍ未満であり、ＭＭＡＤおよび（ＧＳＤ）は、１．３０μｍ（４．２０８）、１．７７μｍ（３．７８２）、１．２０μｍ（４．６０８）および１．５８μｍ（４．０９７）であった。
【０３４８】
アンフォテリシンＢ吸入の剖検所見には、肺の暗色病巣、暗色、赤色もしくは海綿状の肺、気管、腫大した気管支または頸部リンパ節内部の異常内容物を含む。さらに、早期に死亡した動物において、膨張した胃および腸が認められた。
【０３４９】
組織学的判定では、吸入によって両方のロットのアンフォテリシンＢによる、両方の投薬措置による処置を受けたほとんどの動物において、気管内の広範性粘膜肥大が明らかになった。第１投薬措置（第１、２および３日目アンフォテリシンＢ吸入）と比較して、第２投薬措置（第１、８、および１５日目アンフォテリシンＢ吸入）において、前記粘膜肥大の重症度の上昇が見られた。本所見における発生率および重症度に関して、ロット４００１Ｔ（Ａ）とロット４０１９Ｔ（Ｂ）の間に著しい差異は認められなかった。
【０３５０】
吸入によるアンフォテリシンＢ投与において、さらに粘膜下炎症性細胞浸潤および管腔滲出をも予期した。これらの所見は、主に、第２投薬措置（第１、８、および１５日目アンフォテリシンＢ吸入）を受けた動物に見られた。これらの所見における低い発生率および第１投薬措置群における明確な用量反応関係の欠如を、この措置が短期間であったためであると考えた（第１、２および３日目アンフォテリシンＢ吸入、第４日目動物致死）。
【０３５１】
肺内に、気管支管腔滲出、気管支肺炎ならびに気管支周囲および／または細気管支周囲の炎症または炎症性細胞浸潤が認められ、またアンフォテリシンＢ投与に伴う所見として予測されたものであった。さらに、気管支肺炎および気管支浸出のある動物が見られ、気管支肺炎はより大きな気道につないだことによる続発的な感染によって引き起こされたものであると考えられた。第１投薬措置群における肺内の気管支管腔滲出の低い発生率は、この措置が短期間であったためであると考えられた。高用量群における肺所見の前記発生率は、低用量群と比較して概して高かった。
【０３５２】
毒物動態分析により、血漿濃度が投与量に伴って上昇することが明らかになった。媒体対照サンプルにおいて、定量化できる量のアンフォテリシンＢは検出されなかった。
【０３５３】
結論として、３０．６０ｍｇ／ｋｇ／用量を上限とするアンフォテリシンＢ（単独）の口吻単独暴露投与は、呼吸困難および／または過敏を示す重篤な臨床的症状を示し、また、動物３匹の早期致死という結果となった。すべての用量によるアンフォテリシンＢ吸入投与は、気管内の広範囲の粘膜肥大、粘膜下炎症性細胞浸潤、気管支および気管内管腔滲出、気管支肺炎および気管支周囲および／または細気管支周囲の炎症または肺内の炎症性細胞浸潤と関連した。これら所見の重症度は、第２投薬措置（第１、８および１５日目アンフォテリシンＢ吸入）において上昇した。前記肺所見は、肺重量において明白な用量依存的増加に相関し、これは第２措置によって処置された動物により顕著であった。前記上昇は、アンフォテリシンＢロット４００１Ｔで処置された動物にもっとも顕著であった。
【０３５４】
実施例１６
ネズミを使用した毎日もしくは毎週投与による、二種の乾燥粉末の毒性
本実施例は、ネズミを使用した、二つの異なるアンフォテリシンＢ乾燥粉末バッチの二つの異なる投薬措置による吸入投与後の毒性の判定に関するものである。
【０３５５】
５０重量％有効成分を含有するアンフォテリシンＢ粉末を、実施例８に記載の工程を用いて製剤した。その結果得られた粉末は、下記表１２に示す特徴を有した。
【０３５６】
【表１３】
2008503586.tif 000016
【０３５７】
１２０の雄ネズミを、１０の投与群に分け、下記表１３に示すとおり処置した。
【０３５８】
【表１４】
2008503586.tif 000017
【０３５９】
前記動物に、口吻単独暴露技術を使用し、１日１回１時間、上記表１３のとおり投薬した。
【０３６０】
次の調査がおこなわれたが、それは臨床観察、体重、呼吸測定、血液学、臨床化学、組織病理学、毒物動態学、および生物分析化学に関するものであった。
【０３６１】
賦形剤処方の平均暴露濃度は、第１群および第６群においてそれぞれ、０．９１ｍｇ／Ｌ、以降の日は０．２２および０．１７ｍｇ／Ｌであった。アンフォテリシンＢ処方の平均暴露チャンバー濃度は、第２、第４、第７および第９群においてそれぞれ、第１日目は０．３１、０．３６、０．３１および０．３６ｍｇ／Ｌ、以降の日は０．０５６、０．０７８、０．０７３および０．０８８ｍｇ／Ｌであり、第３、第５、第８および第１０群においてそれぞれ、第１日目は１．０４、０．９４、１．０４および０．９４ｍｇ／Ｌ、以降の日は０．１８、０．２１、０．１８および０．１９ｍｇ／Ｌであった。
【０３６２】
群全体のアンフォテリシンＢ処方単独（分析により確定）の平均暴露チャンバー濃度は、第２、第４、第７および第９群においてそれぞれ、第１日目は０．１２５、０．１２４、０．１２５および０．１２４ｍｇ／Ｌであり、以降の日は０．０１６６、０．０２４９、０．０２７７および０．０２７８ｍｇ／Ｌであり、第３、第５、第８および第１０群においてはそれぞれ、第１日目は０．４５５、０．３３０、０．４５５および０．０．３３０ｍｇ／Ｌ、以降の日は０．０６８６、０．０７１７、０．０７２４および０．０６８７ｍｇ／Ｌであった。
【０３６３】
群全体の賦形剤処方の平均予測到達投与量は、第１群および第６群においてそれぞれ、第１日目は２９、２９および２９．４０ｍｇ／ｋｇであり、以降の日は６．８７および４．９８であった。群全体のアンフォテリシンＢ処方の平均予測到達投与量は、第２、第４、第７および第９群においてそれぞれ、第１日目は１０．０３、１１．６３、９．９３および１１．６５ｍｇ／ｋｇであり、以降の日は１．８０、２．５０、２．１９および２．６６ｍｇ／ｋｇであり、第３、第５、第８および第１０群においてはそれぞれ、第１日目は３３．４８、３０．５４、３３．８３および３０．５８ｍｇ／ｋｇであり、 以降の日は５．７５、６．７６、５．４７および５．８１ｍｇ／ｋｇであった。
【０３６４】
群全体のアンフォテリシンＢ処方単独（分析により確定）の平均予測到達投与量は、第１日目は、第２、第４、第７および第９群においてそれぞれ、４．０４、４．０１、４．００および４．０１ｍｇ／ｋｇであり、以降の日は０．５３、０．７９、０．８３および０．８４ｍｇ／ｋｇであり、第３、第５、第８および第１０群においてはそれぞれ、第１日目は１４．６５、１０．７２、１４．８０および１０．７４ｍｇ／ｋｇであり、以降の日は２．１９、２．３１、２．２０および２．１１ｍｇ／ｋｇであった。
【０３６５】
粒度分布データは、第１および第６群においては、第１日目は７０．８％の媒体エアロゾル粒子が３．５μｍ未満であり、以降の日はそれぞれ、７７．１％および７５．６％が３．５μｍ未満であり、空気力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）（±幾何学的標準偏差（ＧＳＤ））は第１および第６群において、第１日目は１．５６μｍ（２．８３２）であり、以降の日はそれぞれ、０．８４μｍ（３．４４６）および１．２４（２．９４８）であった。第２、第４、第７および第９群においては、第１日目はそれぞれ、アンフォテリシンＢ処方エアロゾルの粒子状物質の６５．１％、７５．７％、６５．１％および７５．７％が３．５μｍ以下であり、以降の日はそれぞれ、５２．２％、７９．４％、６５．８％および７５．２％が３．５μｍ未満であり、ＭＭＡＤおよび（ＧＳＤ）は、第１日目はそれぞれ、１．７７μｍ（３．７８７）、２．０６μｍ（２．８０５）、１．７７μｍ（３．７８７）、２．０６μｍ（２．８０５）であり、以降の日はそれぞれ、２．８８μｍ（２．２６９）、１．８１μｍ（２．５４０）、１．９７μｍ（２．７１９）、２．１４μｍ（２．２８８）であった。第３、第５、第８および第１０群において第１日目はそれぞれ、アンフォテリシンＢ処方の粒子状物質の７２．０％、７８．９％、７２．０％および７８．９％が３．５μｍ未満であり、以降の日はそれぞれ、６８．６％、７６．０％、７２．４％および７７．５％が３．５μｍ未満であり、ＭＭＡＤおよび（ＧＳＤ）は、第１日目はそれぞれ、２．０７μｍ（２．３６８）、１．８７μｍ（２．４６４）、２．０７μｍ（２．３６８）および１．８７μｍ（２．４６４）であり、以降の日はそれぞれ、１．６７μｍ（３．４６６）、１．７７μｍ（２．３７８）、１．４２μｍ（２．９６５）および１．４０μｍ（２．９１１）であった。
【０３６６】
アンフォテリシンＢ単独（分析により確定）では、第２、第４、第７および第９群においては、第１日目はそれぞれ、粒子状物質の７０．４％、７２．６％、７０．４％および７２．６％が３．５μｍ未満であり、以降の日は、６８．０％、７５．３％、７７．３％および６３．０％が３．５μｍ未満であり、ＭＭＡＤおよび（ＧＳＤ）は、第１日目はそれぞれ、１．８０μｍ（２．５６３）、２．０６μｍ（２．７０２）、１．８０μｍ（２．５６３）および２．０６（２．７０２）であり、以降の日はそれぞれ、２．０５μｍ（２．２３０）、２．０１μｍ（２．７５２）、１．９９μｍ（２．００５）および２．６０μｍ（２．４６３）であった。第３、第５、第８および第１０群において第１日目はそれぞれ、粒子状物質の５５．４％、６９．９％、６８．０％および６９．６％が３．５μｍ以下であり、以降の日はそれぞれ、６７．９％、６３．６％、６７．８％および６３．３％が３．５μｍ未満であり、ＭＭＡＤおよび（ＧＳＤ）は、第１日目はそれぞれ、２．７４μｍ（２．１１６）、２．０３μｍ（２．７８８）、２．０５μｍ（２．２３０）および２．０３ μｍ（２．７８８）であり、以降の日はそれぞれ、１．８１μｍ（２．４２８）、 １．９４μｍ（３．３１０）、１．９２μｍ（２．４０２）および２．０４μｍ（３．２３６）であった。
【０３６７】
毒物動態分析により、アンテフォリシンＢの血漿濃度が投与量に伴って上昇することが明らかになった。媒体対照試料において、定量化できる量のアンフォテリシンＢは検出されなかった。
【０３６８】
アンフォテリシンＢ吸入に伴う注目すべき剖検所見はなかった。
【０３６９】
組織学的判定では、吸入によって両方のロットのアンフォテリシンＢによる、両方の投薬措置による処置を受けたほとんどの動物において、気管内の広範性粘膜肥大が明らかになった。アンフォテリシンＢ  Ｎ０２０２２６（高結晶質）と比較して、アンフォテリシンＢ  Ｎ０２０２２７（高非晶質）使用時において、前記粘膜肥大の発生率および重症度の上昇が見られた。また、第１投薬措置（第１、２および３日目）と比較して、第２投薬措置（第１、８および１５日目）において、前記粘膜肥大の発生率および重症度の限界上昇が見られた。
【０３７０】
また、アンフォテリシンＢ吸入に伴う広範囲の気管の炎症も予測されていた。これらの病変の発生率および重症度は、アンフォテリシンＢ  Ｎ０２０２２６（高結晶質）と比較して、アンフォテリシンＢ  Ｎ０２０２２７（高非晶質）使用時において上昇した。病変の発生率は、第１投薬措置（毎日）と比較して、第２投薬措置（毎週）において下降した。
【０３７１】
気管および気管支の管腔滲出は、アンフォテリシンＢ  Ｎ０２０２２７（高度非結晶質）を投与された動物においてのみ見られた。
【０３７２】
結論として、１４．８０ｍｇ／ｋｇを上限とするアンフォテリシンＢ（単独）の口吻単独暴露投与は、呼吸困難を示す臨床的症状を示した。第１、２および３日目あるいは第１、８、１５日目のアンフォテリシンＢ乾燥粉末製剤Ｎ０２０２２６（高結晶質）およびＮ０２０２２７（非晶質）の吸入は、気管および気管支の粘膜肥大、気管の炎症、気管支粘膜の炎症性細胞浸潤および気管および気管支の管腔滲出と関連があった。所見は、発生率ならびに重症度において、アンフォテリシンＢ  Ｎ０２０２２６（高結晶質）と比較して、アンフォテリシンＢ  Ｎ０２０２２７（高非晶質）使用時において増加した。第１投薬措置（第１、２および３日目）と比較して、第２投薬措置（第１、８および１５日目）において、気管の炎症の発生率および重症度は下降したが、肥大の発生率および重症度の限界上昇が見られた。アンフォテリシンＢ  Ｎ０２０２２７（高非晶質）を投与された、どの措置による高用量群と低用量群の間にも、わずかな差異しか認められなかった。両方の措置における、アンフォテリシンＢ  Ｎ０２０２２６（高結晶質）を投与された低用量群において、効果は比較的軽度であり、発生率は下降した。
【０３７３】
実施例１７
イヌを使用した毎日もしくは毎週投与による、二種の乾燥粉末の毒性
本実施例は、ビーグル犬を使用した、二つの異なるアンフォテリシンＢ乾燥粉末バッチの吸入経路による投与後の毒性の判定に関するものである。
【０３７４】
５０重量％有効成分を含有するアンフォテリシンＢ粉末を、実施例８に記載の工程を用いて製剤した。その結果得られた粉末は、下記表１４に示す特徴を有した。
【０３７５】
【表１５】
2008503586.tif 000018
【０３７６】
４頭の雄ビーグル犬および４頭の雌ビーグル犬を、４の投与群に分け、下記表１５に示すとおり処置した。
【０３７７】
【表１６】
2008503586.tif 000019
【０３７８】
動物に、ぴったりと装着できるフェイスマスク（マウスチューブによって装着）システムを使用して、下記表１５のとおり、１日に３０分間投薬した。
【０３７９】
次の調査がおこなわれたが、それは臨床観察、体重、試料消費、血液学、臨床化学、呼吸測定（一回呼吸気量、呼吸速度、毎分換気量）、組織病理学、毒物動態学、および生物分析化学に関するものであった。
【０３８０】
賦形剤処方の平均暴露濃度は、第１日目は１．３４ｍｇ／Ｌ、以降の日は０．３１ｍｇ／Ｌであった。アンフォテリシンＢ処方の平均暴露チャンバー濃度は、第２、第３、第４群においてそれぞれ、第１日目は、０．７３、１．８０および１．５８ ｍｇ／Ｌであり、以降の日は０．１３、０．３３および０．３３ｍｇ／Ｌ であった。群全体のアンフォテリシンＢ処方単独（分析により確定）の平均暴露チャンバー濃度は、第２、第３および第４群においてそれぞれ、第１日目は、０．２３６、０．５２１および０．７６９ｍｇ／Ｌであり、 以降の日は０．０４２７、０．１２０および０．１５４ｍｇ／Ｌであった。
【０３８１】
群全体の賦形剤処方の平均（性別混在）予測到達投与量は、第２、第３および第４群においてそれぞれ、第１日目は２９．３ｍｇ／ｋｇであり、以降の日は６．９ｍｇ／ｋｇであった。群全体のアンフォテリシンＢ処方の平均（性別混在）予測到達投与量は、第２、第３、および第４群においてそれぞれ、第１日目は１６．３、４５．１および３３．０ｍｇ／ｋｇ、以降の日は２．９、８．１および６．７ｍｇ／ｋｇであった。群全体のアンフォテリシンＢ単独（分析により確定）の平均（性別混在）予測到達投与量は、第２、第３および第４群においてそれぞれ、第１日目は５．３、１３．０および１６．０ｍｇ／ｋｇ、以降の日は０．９６、３．０および３．２ｍｇ／ｋｇであった。
【０３８２】
粒度分布データは、第１日目は８１．１％の賦形エアロゾル粒子が５μｍ未満であり、以降の日は７８．９％が５μｍ未満であり、空気力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）（±幾何学的標準偏差（ＧＳＤ））は、第１日目は０．８４μｍ（４．５５３）であり、以降の日は１．４１μｍ（３．１０４）であった。第２、第３および第４群において、アムホテリシンアンフォテリシンＢ処方微粒子粒子状物質は、第１日目が６９．０％、８３．１％および４３．３％が５μｍ未満であり、以降の日は８５．９％、６７．６％および５７．３％が５μｍ未満であり、ＭＭＡＤおよび（ＧＳＤ）は、第１日目は１．９６μｍ（２．４０６）、１．１７μｍ（２．７２５）および３．２６μｍ（２．７８９）であり、以降の日は０．６９μｍ（４．６２３）、１．６２μｍ（３．１３７）および２．８５μｍ（２．６９２）であった。アムホテリシンアンフォテリシンＢ単独（分析により確定）では、第２、第３および第４群においては、第１日目はそれぞれ、微粒子粒子状物質の５７．７％、７３．６％および４６．２％が５μｍ未満であり、以降の日は、７２．６％、６３．６％および６２．８％が５μｍ未満であり、ＭＭＡＤおよび（ＧＳＤ）は、第１日目はそれぞれ、２．２０μｍ（２．６４４）、１．７９μｍ（２．３７８）および３．３２μｍ（２．４８２）であり、以降の日はそれぞれ、１．９６μｍ（２．５０７）、２．００μｍ（２．５２６）および２．４８μｍ（２．１６８）であった。
【０３８３】
臨床観察、体重、血液学、臨床化学、飼料消費、および呼吸測定変数に関して、顕著な変化は認められなかった。
【０３８４】
すべての剖検所見は、この年齢のイヌの自然発生的な背景所見に典型的なものであった。アンフォテリシンＢの投与に帰する可能性のある剖検所見は見られなかった。
【０３８５】
すべての組織病理学所見は、この年齢のイヌの自然発生的な背景所見に典型的なものであった。アンフォテリシンＢの投与に帰する可能性のある組織病理学所見は見られなかった。
【０３８６】
毒物動態分析は、定量化可能な量のアンフォテリシンＢが、処置を受けたすべての動物（第４群の動物４Ｍを除く）の血漿内において検出されたことを示した。検出された量は、処置を受けたすべての投与群において類似していた。媒体対照試料において、定量化可能な量のアムホテリシンアンフォテリシンＢは検出されなかった。
【０３８７】
結論として、８．２（３．２）ｍｇ／ｋｇを上限とするビーグル犬に対するアンフォテリシンＢ処方（もしくは分析により確定したアンフォテリシンＢ）の毎週一回吸入投与は、すべての投与群（溶剤制御を含む）において流涎と関連があった。発赤した歯茎を含む偶発的な臨床徴候が、第２群および第４群の個別の動物において観察され、第２群の一頭の動物において発赤した耳が観察された。嘔吐および飼料の吐出は、第３群の一頭の動物において観察された。体重、飼料消費、血液学、臨床化学、および呼吸測定グラフにおいて、変化は認められなかった。アンフォテリシンＢの投与に帰すると思われる剖検または組織病理学的所見は認められなかった。粒度分布測定により、高用量のアンフォテリシンＢロット番号Ｎ２０２２７（高非晶質）は、アンフォテリシンＢロット番号Ｎ０２０２２６（高結晶質）と比較して著しく大きな粒度を持つことが判明した。
【０３８８】
実施例１８
ラットを使用した１４日間吸入毒性試験
本実施例は、実施例２に記載の方法を用いて用意されたアンフォテリシンＢ製剤の１４日間毒性試験に関連する。８０匹のラットに口吻単独暴露技術を使用し、毎日６０分間、少なくとも１４日間にわたり目標投与量０ｍｇ（空気制御もしくは媒体のみ）、２．５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇもしくは２５ｍｇ／ｋｇで投薬された。
【０３８９】
回収した動物を、投与後１４日間の回復期の間保持した。第１および１４試験日に、投薬前、投薬２時間後、投薬４時間後において、媒体のみの群および高用量（２５ｍｇ／ｋｇ）群の動物のうち指定された動物から、毒物動態分析用の血液試料を採取した。毒物動態血液試料はまた、前記１４日間の回復期にも、オスは回復期７日および１４日目に、メスは低体重のため、回復期１４日目にのみ採取した。
【０３９０】
すべての試験動物を、１４日間の処置期間満了時（１５日目）または１４日間の回復期間満了時（２９日目）に、詳細な剖検に供した。剖検の間、毒物動態分析用にすべての動物から肺組織試料を採取した。血漿中のアンフォテリシンＢ濃度を、液体クロマトグラフィータンデム質量分析分光光度計法（ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ−ｔａｎｄｅｍ ｍａｓｓ  ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ）（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）（下限定量（ＬＬＱ）＝１０ｎｇ／ｍＬ）を使用して測定し、肺組織内のアンフォテリシンＢを、高速液体クロマトグラフィー法（ｈｉｇｈ  ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）（ＨＰＬＣ）および可視光線検知（ｖｉｓｉｂｌｅ  ｌｉｇｈｔ  ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ）（ＬＬＱ＝４μｇ／ｇ）を使用して測定した。
【０３９１】
血漿中および肺組織内のアンフォテリシンＢは、アンフォテリシンＢを投与されたすべての動物から採取した試料において検知可能であった。血漿中または肺組織内の濃度−時間グラフは、性、投与量に関わらず類似していた。
【０３９２】
アンフォテリシンＢは、投与１４日後、検知が可能なほどには血漿中において集積しておらず、静脈内（ＩＶ）投与後のアンフォテリシンＢ排出半減期に公表された値によって予測され得たとおり、減少した。リポソームアンフォテリシンＢの類似ＩＶ投与について発見された血漿Ｃmax値は、１／１０００から１／３０００であった。
【０３９３】
肺の濃度は、投薬量の上昇に伴って上昇するが、比例的性質を下回る。投薬終了時の平均肺濃度は、リポソームアンフォテリシンＢの類似投与量のＩＶ投与後、報告された肺内のアンフォテリシンＢの１０から３０倍であった。本実施例における肺組織暴露は、長期ＩＶ投与に続いてこれまでに報告された例よりも著しく大きかった。回復期間内において、肺濃度はそれぞれ１．１および１２．４ｍｇ／ｋｇ投薬量で２２及び３４日間の排出半減期（ｔ1/2）の値を示す速度で下降し、リポソームアンフォテリシンＢのＩＶおよび吸入投与後の肺内アンフォテリシンＢ報告例と類似する。
【０３９４】
実施例１９
イヌを使用した１４日間吸入毒性試験
本実施例は、合計２８頭のイヌ（オス１４頭、メス１４頭）において、実施例２に記載の方法を用いて調剤されたアンフォテリシンＢ製剤の、連続１４日間吸入投与後の肺および体系的な毒性の評価、ならびに高用量における、１４日間の回復期間を経たのちの効果に関する回復度に関連する。
【０３９５】
活性薬剤を、１．４、５．６および１１，．５ｍｇ／ｋｇの投与量にて、ぴったりと装着できるフェイスマスクシステムを使用して、毎日３０分間投与した。試験１日目および１４日目の血液試料を、賦形剤群および高用量群から選出された指定の動物から、投与前および投与から２、４、８、１２および２４時間後、ならびに１４日間の回復期間中毎日、毒物動態分析のために採取した。主要試験の動物を、第１５日目に、回復動物を、第２９日目に、安楽死ののち剖検し、各動物の右前葉を毒物動態分析のために採取した。血漿中のアンフォテリシンＢ濃度を、液体クロマトグラフィータンデム質量分析分光光度計法（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）（下限定量（ＬＬＱ）＝１０ｎｇ／ｍＬ）を使用して測定し、肺組織内のアムホテリシンアンフォテリシンＢを高速液体クロマトグラフィー法（ＨＰＬＣ）および可視光線検知（ＬＬＱ＝４μｇ／ｇ）を使用して測定した。
【０３９６】
本実施例において、投与後１４日目に血漿中にアンフォテリシンＢが集積し、排出半減期に公表された値によって予測されたとおり減少したことが観察された。１１．５ｇｍ／ｋｇ投与されたイヌの血漿平均Ｃmax値は、ＩＶアンフォテリシンデソキシコールを投与されたイヌにおいて報告されたものの１／２５であり、ＩＶリポソームアンフォテリシンＢを、おなじ期間毎日投与されたイヌの１／１０００であった。
【０３９７】
肺中のアンフォテリシンＢ濃度は、投与量に伴って上昇したが、比例的性質を下回る。暴露期の終了時において、平均アンフォテリシンＢ肺内濃度は、報告されたアンフォテリシンＢデソキシコールもしくはリポソールアンフォテリシンＢのＩＶ投与後の２２倍から２４倍であった。本イヌ試験における肺組織の暴露は、先立って報告された長期ＩＶ投与後のものよりも明らかに大きかった。回復期間中、肺濃度は見かけ排出半減期１８．８日を示す速度にて下降し、これはラットに対するリポソールアンフォテリシンＢのＩＶおよび吸入投与後に報告されたものと類似する。
【０３９８】
実施例２０
製剤安定性試験
アンフォテリシンＢ粉末の安定性を、下記表１６に示されるとおり評価した。各事例において、粉末をＨＰＭＣカプセルに充填した。当該カプセルを、２５ｃｃＨＤＰＥボトル内に入れた。各ボトルを、外側のパウチ内に脱湿剤を含む二重パウチ包装した。
【０３９９】
【表１７】
2008503586.tif 000020
【０４００】
これらの安定性観察についての要約および結論を下記に示す。
【０４０１】
外観
３つのロットすべてが、すべての試験項目およびすべての条件での体裁において合否基準を満たした。
【０４０２】
内容
５重量％アンフォテリシンＢ：ロット１００１７において、初期結果物は粉末ｍｇ毎のアンフォテリシンＢの０．０５３ｍｇであった。１８ヶ月超の両保管条件において、結果物は粉末ｍｇ毎のアンフォテリシンＢの０．０４９から０．０５３の間で変動した。
【０４０３】
５０重量％アンフォテリシンＢ：ロット１００２９において、初期結果物は粉末ｍｇ毎のアンフォテリシンＢの０．５０７ｍｇであった。１８ヶ月超の両保管条件において、結果物は粉末ｍｇ毎のアンフォテリシンＢの０．４６９から０．５０８の間で変動した。
【０４０４】
ロット１０２４７において、初期結果物は粉末ｍｇ毎のアンフォテリシンＢの０．４７０ｍｇであった。９ヶ月間超の２−８℃の保管後、当該結果物は、粉末ｍｇ毎のアンフォテリシンＢの０．４４８から０．４４６の間で変動した。２５℃／６０％ＲＨの保管条件において、１ヶ月間、３ヶ月間および６ヶ月間の結果物は、それぞれ、０．４４１、０．３９９および０．３８５の粉末ｍｇ毎のアンフォテリシンＢであった。
【０４０５】
含水量
３つのロット初期結果物は、３−５重量％の間であった。当該含水量は、普通および加速保存条件の両方において、３−６重量％の間であった。
【０４０６】
放出投与
すべてのロットにおける初期平均ＥＤは、８９から９４％（８．９ｍｇ／カプセルから１０．０ｍｇ／カプセル）の間であった。普通および加速条件での保存ののち、当該結果物は８８から９６％（８．８から１０．２ｍｇ／カプセル）の間であった。
【０４０７】
残留パーフルブロン（ＰＦＯＢ）
ＰＦＯＢ分析は、カプセル充填前に原末において実施される。試験されたすべてのロットにおける原末に関する結果物は、＜０．１重量％であった。ＰＦＯＢを、１２ヶ月間の時点において、ロット１００１７と１００２９で試験した。値は＜０．０５−０．１重量％であった。
【０４０８】
好気性菌数および特定病原菌
微生物リミット試験を、初期試験時点で、すべてのロットにおいて行った。ロット１００１７および１００２９において、２５℃／６０％ＲＨにて１２ヶ月間の保管後にも試験を行い、合否基準を満たした。
【０４０９】
純度
すべてのロットにおいて、初期部分基準化主要頂点純度は９３．６％から９６．４％の間であった。普通および加速条件下での保存中において、主要頂点純度は９４．０％から９６．５％であった。
【０４１０】
エアロゾル粒度
ＭＭＡＤ：当該ロットの空気力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）の初期結果物は、２．７から３．０μｍの間であった。普通および加速条件下での保存中において、ＭＭＡＤは２．６から３．１μｍであった。
【０４１１】
結論
ここに示す安定性結果は、５重量％のアンフォテリシンＢ粉末（１０ｍｇ）および５０重量％のアンフォテリシンＢ（１０ｍｇ）は安定であることを表し、製品特質に適合することを示し、当該特質は２℃から８℃にて充填および保存時の体裁、アンフォテリシンＢの包含、純度、含水量、微生物計数およびエアロゾル性能を含む。
【０４１２】
実施例２１
高湿度への暴露後の機能
適切な時間周期があるカプセルの規定に関係するこの実施例は、７０％ＲＨで小袋から外すことができ、それでもやはり放出される量の合格判定基準に達する。（％ＥＤ＞８５％およびＥＤ≧８．５ｍｇ）
【０４１３】
二つの製剤形態、５重量％のアンフォテリシンＢ粉末（ロットＸ１４２９）および５０重量％アンフォテリシンＢ粉末（ロットＮ０２０２４２）を分析した。前記製剤形態を、子袋の中に包含されたカプセルの中に包含した。ＥＤを決定するために、本願明細書中にその全内容を援用する米国出願番号１０／２９８，１７７に示される吸入器装置を使用した。前記装置を２５Ｃ／７０％ＲＨで平衡にした。
【０４１４】
前記カプセルを特定の間隔で作動前に２５Ｃ／７０％ＲＨで暴露した。当該ＥＤを、下記表１７に示すように、製剤形態ごとに合計１０のＥＤ作動について１０時点で測定した。
【０４１５】
【表１８】
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【０４１６】
ロットＮ０２０２４２の結果を下記表１８に示す。
【０４１７】
【表１９】
2008503586.tif 000022
【０４１８】
ロットＸ１２４９の結果を下記表１９に示す。
【０４１９】
【表２０】
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【０４２０】
上記のデータは、高湿度への増加した暴露とのＥＤ機能における相関関係を示していない。平均的なＥＤ機能は高湿度環境のもとで減少するが、それでもやはり合格判定基準に達する。ロットＮ０２００４２（５０重量％剤形）の平均的なＥＤ機能は合格判定基準に達したが、全ての個別のＥＤが、≧８５％および＞８．５ｍｇとは限らなかった。
【０４２１】
選択された実施例の概要
選択された実施例の概要を下記表２０に示す。
【０４２２】
【表２１】
2008503586.tif 000024
【０４２３】
【表２２】
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【０４２４】
【表２３】
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【０４２５】
【表２４】
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【０４２６】
【表２５】
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【０４２７】
【表２６】
2008503586.tif 000029
【０４２８】
本発明の態様をいくつか、その一部の好ましい種類に関して、かなり詳細に説明してきたが、その他の種類も可能であり、示した種類の改変、置換および相当物は、明細書を読む時点および図を調査する時点で当業者には明白となるであろう。例えば、エアロゾル化装置の要素の相対位置は変更されてもよく、曲がりやすい部分はちょうつがいで連結されたより硬い部分により置換されてもよく、あるいはそうでなければ曲がりやすい部分の動作を模倣するように移動可能としてもよい。さらに、通路は必ずしもしっかりとした直線である必要はなく、図に示すように、例えば曲線でもまたは斜めでもよい。ここでの種類の多様な特性は本発明の追加的な実施例を提供するために多様な方法で組み合わせることができる。さらに、特定の専門用語が記述的に明瞭にすることを目的として使用されてきたが、本発明を制限するものではない。従って、この開示に関連して提起された添付の請求項は、ここに含めた好ましい種類の説明を制限すべきではなく、本発明の本質及び本発明の範囲の中に含まれるような改変、置換および相当物全てを含むべきである。
【図面の簡単な説明】
【０４２９】
【図１】図１は、本発明に基づいて、医薬組成物を投与した後の、肺における予測されるアンフォテリシンＢ濃度を示す。
【図２】図２は、本発明に基づいて、医薬組成物を投与した後の、予測されるアンフォテリシンＢの血漿濃度を示す。
【図３】図３（３Ａ〜３Ｅ）は、本発明の医薬組成物を噴霧するために使用され得る乾燥粉末吸入器の働きを示す略図の側断面図である。
【図４】図４は、本発明のアンフォテリシンＢの粉末について、Ａｎｄｅｒｓｏｎ  Ｃａｓｃａｄｅ  Ｉｍｐａｃｔｏｒ（ＡＣＩ）における沈着の流速依存性の座標を示すグラフ表示である。
【図５】図５は、６０Ｌ／分でＴｕｒｂｏｓｐｉｎ（登録商標）ＤＰＩ装置を使用する、本発明の放出投与（ＥＤ）のアンフォテリシンＢの粉末の安定性を示すグラフ表示である。
【図６】図６は、２８．３Ｌ／分でＴｕｒｂｏｓｐｉｎ（登録商標）ＤＰＩ装置を使用する、本発明の噴霧性能のアンフォテリシンＢの粉末の安定性の座標を示すグラフ表示である。
【図７】図７は、アンフォテリシンＢおよび様々なホスファチジルコリンを含む、本発明の医薬組成物の噴霧性能の座標を示すグラフである。
【図８】図８は、５６．６Ｌ／分で様々な受動的なＤＰＩ装置を使用する、７０重量％のアンフォテリシンＢを含む、本発明の医薬組成物の噴霧性能の座標を示すグラフである。
【図９】図９は、本発明の粉末からコレクタごとに得られたＥＤを示す。
【図１０】図１０は、本発明の粉末からのロットごとの平均のＥＤを示す。
【図１１】図１１は、本発明の粉末のコレクタごとの空気力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）を示す。
【図１２】図１２は、本発明の粉末のコレクタごとの微粒子薬（％ＦＰＤ＜３．３μｍ）を示す。
【図１３】図１３は、本発明の粉末のコレクタごとのＥＤ（ｍｇ／カプセル）を示す。
【図１４】図１４は、本発明の粉末のコレクタごとおよびロットごとの平均のＥＤを示す。
【図１５】図１５は、本発明の粉末のコレクタごとのＭＭＡＤを示す。
【図１６】図１６は、本発明の粉末のコレクタごとの％ＦＰＤ＜３．３μｍを示す。
【図１７】図１７は、本発明の２つの粉末のためのＥＤ（ｍｇ／カプセル）を示す。
【図１８】図１８は、気管内投与および静脈内投与後の、ネズミの体の様々な場所での、アンフォテリシンＢ濃度を示すグラフ表示である。
【図１９】図１９は、肺内投与の１４日後の、犬の肺における、平均のアンフォテリシンＢの濃度−時間統計データを示すグラフ表示である。
【図２０】図２０は、本発明の一剤形の効果を示すＫａｐｌａｎ―Ｍｅｉｅｒ生存曲線である。
【図２１】図２１は、吸入によってウサギにデリバリーされた肺組織における群平均のアンフォテリシンＢ濃度を示す。
【図２２】図２２は、吸入によってウサギにデリバリーされた肺組織における郡平均のアンフォテリシンＢを示す。
【図２３】図２３は、本発明の一剤形の効果を示すＫｅｐｌａｎ―Ｍｅｉｅｒ生存曲線である。
【図２４】図２４は、本発明の２つの粉末の重力測定のおよび薬物固有の粒径分布を比較する座標である。
【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図３Ｅ】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【国際調査報告】
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