(57)【要約】  この発明は、分子イメージング並びにターゲッティング診断及び治療用のターゲッティング造影剤を合成する方法、ターゲッティング造影剤及びターゲッティング治療剤、並びにそれらの使用を開示する
2008524202.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ターゲッティング造影剤又は治療剤の生産用の方法であって、
当該方法は、
ａ）コアを提供する；
ｂ）自由選択で該コアにシェルを加える；
ｃ）バインディングユニットの少なくとも一つの分子を付けることによって該コア又は該シェルを修飾する；及び
ｄ）適当な触媒を使用することによって、該修飾されたコア又は該修飾されたシェルへ、少なくとも一つのイミダゾールの官能性をもつ、少なくとも一つの配位子を連結する
：のステップを含む、方法。
【請求項２】
ステップｂ）において、一つよりも多いシェルが、前記コアへ加えられる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記単数のシェル又は複数のシェルは、単層又は多層を含む、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
各々のシェルは、同じ材料又は異なる材料を含む、請求項１乃至３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記単数のシェル又は複数のシェルは、少なくとも部分的に前記コアを覆う、請求項１乃至４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記コアとして使用された材料は、鉄（Ｆｅ）、鉄の酸化物γ−Ｆｅ２Ｏ３若しくはＦｅ３Ｏ４、又は、スピネル構造を備えたフェライトＭＦｅ２Ｏ４（Ｍ＝Ｍｎ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｃｄ）若しくはガーネット構造を備えたフェライトＭ３Ｆｅ５Ｏ１２（Ｍ＝Ｙ、Ｌａ、Ｃｅ、Ｐｒ、Ｎｄ、Ｓｍ、Ｅｕ、Ｇｄ、Ｔｂ、Ｄｙ、Ｈｏ、Ｅｒ、Ｔｍ、Ｙｂ、Ｌｕ）、若しくは磁鉛鉱構造を備えたフェライトＭＦｅ１２Ｏ１９（Ｍ＝Ｃａ、Ｓｒ、Ｂａ、Ｚｎ）、若しくはＢａ２Ｍ２Ｆｅ１２Ｏ２２（Ｍ＝Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｚｎ、Ｍｇ）のような他の六方晶系のフェライト構造；のような強磁性の、反強磁性の、フェリ磁性の、又は超常磁性の材料：より選択され、
全ての場合において、前記コアを、付加的な０．０１から５．００モル％までのＭｎ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｚｎ、又はＦ；常磁性のイオン（例．ランタニド、マンガン、鉄、銅）に基づいたコントラストを向上させるユニット、例．Ｇｄ（ＤＴＰＡ）、Ｇｄ（ＢＭＡ−ＤＴＰＡ）、Ｇｄ（ＤＯＴＡ）、Ｇｄ（ＤＯ３Ａ）のようなガドリウムキレート類；オリゴマーの構造；アルブミンＧｄ（ＤＴＰＡ）２０−３５、デキストランＧｄ（ＤＴＰＡ）、Ｇｄ（ＤＴＰＡ）−２４−カスケードポリマー、ポリリジン−Ｇｄ（ＤＴＰＡ）、ＭＰＥＧポリリジン−Ｇｄ（ＤＴＰＡ）のような巨大分子の構造；ランタニドに基づいたコントラストを向上させるユニットのデンドリマーの構造；Ｍｎ（ＤＰＤＰ）、Ｍｎ（ＥＤＴＡ−ＭＥＡ）、ポリ−Ｍｎ（ＥＥＤ−ＥＥＡ）、及びポリマーの構造のようなマンガンに基づいたコントラストを向上させるユニット；リポソームのＧｄ（ＤＴＰＡ）のような常磁性のイオンの担体としてのリポソーム類；非プロトン性のイメージング剤でドープすることができる、請求項１乃至５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記コアとして使用された材料は、ナノ発光体（例．希土類でドープされたＹＰＯ４又はＬａＰＯ４）のような発光材料又は（量子ドット；例．ＣｄＳ、ＣｄＳｅ、ＺｎＳ／ＣｄＳｅ、ＺｎＳ／ＣｄＳと称された）半導体性のナノ結晶；カルボシアニン色素；テトラピロールに基づいた色素（ポリフィリン類、クロリン類、フタロシアニン類、及び関係した構造）；デルタアミノレブリン酸；蛍光性のランタニドキレート類；フルオレセイン若しくは５−アミノフルオレセイン若しくはフルオレセイン−イソチオシアナート（ＦＩＴＣ）又はＯｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ、ナフトフルオレセインのような他のフルオレセインに関係した蛍光体：より選択される、請求項１乃至５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記コアとして使用された材料は、（ＡｍｅｒｓｈａｍからのＯｐｔｉｓｏｎ、ＳｃｈｅｒｉｎｇからのＬｅｖｏｖｉｓｔのような）カプセル化された気体（例．空気、ペルフルオロプロパン、ドデカフルオロカーボン、六フッ化硫黄、ペルフルオロカーボン）の泡；カプセル化された小滴；ナノ粒子（例．白金、金、タンタル）：より選択される、請求項１乃至５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記コアとして使用された材料は、２，４，６−トリ−ヨードベンゼンのイオン性の及び非イオン性の誘導体のようなヨウ化されたコントラストを向上させるユニット；硫酸バリウムに基づいたコントラストを向上させるユニット；ガドリニウムに基づいた化合物のような金属イオンキレート類；高い割合のヨウ素を備えたホウ素クラスター類；ヨウ化された多糖類、ポリマーのトリヨードベンゼン類のような高分子；低い水溶性を示すヨウ化された化合物からの粒子；ヨウ化された化合物を含有するリポソーム類；トリグリセリド類、脂肪酸と同様のヨウ化された脂質：より選択される、請求項１乃至５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記コアと使用された材料は、１８Ｆ−ＦＤＧ（グルコース代謝）；１１Ｃ−メチオニン、１１Ｃ−チロシン、１８Ｆ−ＦＭＴ、１８Ｆ−ＦＭＴ、又は１８Ｆ−ＦＥＴ（アミノ酸）；１８Ｆ−ＦＭＩＳＯ、６４Ｃｕ−ＡＴＳＭ（低酸素症）；１８Ｆ−ＦＬＴ、１１Ｃ−チミジン、１８Ｆ−ＦＭＡＵ（増殖）のような１１Ｃ、１３Ｎ、１５Ｏ、６６／８Ｇａ、６０Ｃｕ、５２Ｆｅ、５５Ｃｏ、６１／２／４Ｃｕ、６２／３Ｚｎ、７０／１／４Ａｓ、７５／６Ｂｒ、８２Ｒｂ、８６Ｙ、８９Ｚｒ、１１０Ｉｎ、１２０／４Ｉ、１２２Ｘｅ、及び１８Ｆに基づいたトレーサー：より選択される、請求項１乃至５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記コアと使用された材料は、９９ｍＴｃ、１２３／５／１３１Ｉ、６７Ｃｕ、６７Ｇａ、１１１Ｉｎ、２０１Ｔｌのような放射性ヌクレオチドに基づいたコントラストを向上させるユニット：より選択される、請求項１乃至５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記コアとして使用された材料は、毒素、放射性同位体、及び化学療法剤；ＹＰＯ４：ＰｒのようなＵＶ−Ｃを放出するナノ粒子；拡張されたポルフィリンの構造に基づいた化合物のような光線力学的治療（ＰＤＴ）剤；１５７Ｓｍ、１７７Ｌｕ、２１２／３Ｂｉ、１８６／８Ｒｅ、６７Ｃｕ、９０Ｙ、１３１Ｉ、１１４ｍＩｎ、Ａｔ、Ｒａ、Ｈｏのような放射線治療用のヌクレオチド類：より選択される、請求項１乃至５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記コアとして使用された材料は、化学交換飽和移動（ＣＥＳＴ）；温度感受性ＭＲＩ造影剤（例．リポソームのもの）；ｐＨ感受性のＭＲＩ造影剤；酸素圧力又は酵素応答性のＭＲＩ造影剤；金属イオン濃度依存性ＭＲＩ造影剤：より選択される、請求項１乃至５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記コアとして使用された材料は、二つの又はより多くの材料の組み合わせである、請求項１乃至１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
単数のシェル又は複数のシェルとして使用された材料は、カルボン酸、酸ハロゲン化物、アミン類、酸無水物、活性化されたエステル類、マレイミド類、イソチオシアナート類、金、ＳｉＯ２、脂質、界面活性剤、ポリホスファート（例．ポリリン酸カルシウム）、アミノ酸（例．システイン）、有機高分子（例．ポリエチレングリコール／ＰＥＧ、ポリビニルアルコール／ＰＶＡ、ポリアミド、ポリアクリラート、ポリ尿素）、官能性の末端基を備えた有機高分子（例．１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［カルボキシ（ポリエチレングリコール）２０００］アンモニウム塩）、生体高分子（例．デキストラン、キシラン、グリコーゲン、ペクチン、セルロースのような多糖類若しくはコラーゲン、グロブリンのようなポリペプチド）、システイン若しくは高いシステインの含有率を備えたペプチド、又はリン脂質：より選択される、請求項１乃至１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
さらなる成分を、前記単数のシェル又は複数のシェルへ組み込むことができる、請求項１乃至１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記バインディングユニットは、アリールボロン酸、アリールボロン酸の官能性を含むシェル、又は、配位子のヒスチジンユニットと共有結合的にカップリングするシェルへの少なくとも一つのアリールボロン酸の結合である、請求項１乃至１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記バインディングユニットは、超原子価のアリールシロキサン、超原子価のアリールシロキサンの酸の官能性を含むシェル、又は、配位子のヒスチジンユニットと共有結合的にカップリングするシェルへの少なくとも一つの超原子価のアリールシロキサンの結合である、請求項１乃至１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記バインディングユニットは、ヨードベンゼン、ヨードベンゼンの官能性を含むシェル、又は、配位子のヒスチジンユニットと共有結合的にカップリングするシェルへの少なくとも一つのヨードベンゼンの結合である、請求項１乃至１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記コア又は前記単数のシェル若しくは複数のシェル及び少なくとも一つの配位子は、アリールボロン酸とヒスチジンユニットとの間の共有結合的なカップリングによって、連結される、請求項１乃至１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記コア又は前記単数のシェル若しくは複数のシェル及び少なくとも一つの配位子は、超原子価のアリールシロキサンとヒスチジンユニットとの間の共有結合的なカップリングによって、連結される、請求項１乃至１６及び１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記コア又は前記単数のシェル若しくは複数のシェル及び少なくとも一つの配位子は、ヨードベンゼンとヒスチジンユニットとの間で共有結合的なカップリングによって、連結される、請求項１乃至１６及び１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
配位子として使用された材料は、トラスツズマブ（乳ガン）、リツキシマブ（非ホジキンリンパ腫）、アレムツズマブ（慢性的なリンパ性白血病）；ゲムツズマブ（急性の骨髄性の白血病）；エドレコロマブ（大腸癌）；イブリツモマブ（非ホジキンリンパ腫）；セツキシマブ（大腸癌）；トシツモマブ（非ホジキンリンパ腫）；エプラツズマブ（非ホジキンリンパ腫）；ベバシズマブ（肺及び大腸癌）；抗−ＣＤ３３（急性の骨髄性の白血病）；ペムツモマブ（卵巣及び胃癌）；ミツモマブ（肺及び皮膚癌）；抗−ＭＵＣ１（腺癌）；抗−ＣＥＡ（腺癌）；抗−ＣＤ６４（溶菌斑）のような抗体（単クローン性のもの、多クローン性のもの、マウスのもの、マウス−ヒトのキメラのもの、ヒトのもの、単鎖、二重特異性抗体、など）；ペプチド類；ポリペプチド類、ソマトスタチン類似体、血管作用性のペプチド類似体、ニューロペプチドＹ、ＲＧＤペプチドのような擬ペプチド類；アネキシンＶ、組織プラスミノーゲン活性化因子のタンパク質、輸送タンパク質のようなタンパク質；ヒアルロナン、アプシタイド、デルマタン硫酸塩のような巨大分子；アパタマー、アンチセンスＤＮＡ／ＲＮＡ、／ＰＮＡ、低分子干渉性ＲＮＡのような核酸；リン脂質のような脂質；白血球刺激性レクチンのようなレクチン類、及び多糖類：より選択される、請求項１乃至２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記修飾されたコア又は前記修飾されたシェルへ少なくとも一つの配位子を連結させるために使用された触媒は、［Ｃｕ（ＯＨ）ＴＭＥＤＡ］２Ｃｌ２又はＣｕ（ＡｃＯ）２である、請求項１乃至２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
イミダゾールの官能性とのアリールボロン酸の官能性又はヨードベンゼンの官能性の反応を触媒するために使用された触媒は、［Ｃｕ（ＯＨ）ＴＭＥＤＡ］２Ｃｌ２である、請求項１乃至１７、１９、２０、２２乃至２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
イミダゾールの官能性との超原子価のアリールシロキサンの反応を触媒するために使用された触媒は、Ｃｕ（ＡｃＯ）２である、請求項１乃至１６、１８、２１、２３及び２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
コア、少なくとも一つのシェル、及び少なくとも一つの配位子を含むターゲッティング造影剤。
【請求項２８】
請求項１乃至２６のいずれか一項に記載の方法によって生産されたターゲッティング造影剤又はターゲッティング治療剤。
【請求項２９】
診断又は治療に用いる請求項２７又は２８に記載のターゲッティング造影剤又はターゲッティング治療剤。
【請求項３０】
ターゲッティング分子イメージングに用いる請求項２７又は２８に記載のターゲッティング造影剤又はターゲッティング治療剤。
【請求項３１】
ＣＴ、ＭＲＩ、ＰＥＴ、ＳＰＥＣＴ、又はＵＳに用いる請求項２７又は２８に記載のターゲッティング造影剤。
【請求項３２】
診断又は治療に適切な化合物の生産用の請求項２７又は２８に記載のターゲッティング造影剤又はターゲッティング治療剤の使用。
【請求項３３】
ターゲッティング分子イメージングに適切な化合物の生産用の請求項２７又は２８に記載のターゲッティング造影剤又はターゲッティング治療剤の使用。
【請求項３４】
ＣＴ、ＭＲＩ、ＰＥＴ、ＳＰＥＣＴ、又はＵＳに適切な化合物の生産用の請求項２７又は２８に記載のターゲッティング造影剤の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ターゲティング造影剤及びターゲッティング治療剤に、並びに、それらの生産及び使用のための方法に関係する。
【背景技術】
【０００２】
医学的な診断における多大な重要性を備えた知られたイメージングの技術は、陽電子射出断層撮影法（ＰＥＴ）、コンピュータ断層撮影法（ＣＴ）、核磁気共鳴映像法（ＭＲＩ）、単一光子放射型コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）、及び超音波（ＵＳ）である。今日のイメージングの技術が、良好に開発されるとはいえ、それらは、ほとんど、正常な組織から病理学的なものを区別する非特異的な、巨視的な、物理的な、生理学的な、又は、代謝的な変化に頼る。
【０００３】
ターゲッティング分子イメージング（ＭＩ）は、医学的な診断における新しい次元に到達する可能性を有する。用語“ターゲッティング”は、試験管内の又は生体内の関心のある分子（分子のターゲット）への天然の又は合成の配位子（バインダー）の選択的な且つ高特異的なバインディングに関係させられる。
【０００４】
ＭＩは、無処置の生体内における細胞の及び亜細胞のレベルでの生物学的な過程の可視の表現、特性決定、及び定量化として定義されることもある急速に明らかになる生物医学的な調査の学問分野である。それは、新規な多学科的な分野であり、その分野において、生じさせられた画像が、細胞の及び分子の経路並びに疾患の原因である分子的な事象を識別することよりもむしろ生理学的に真正の環境の背景内に存在する疾患の生体内の機構を反映する。
【０００５】
数個の異なるコントラスト向上剤が、今日知られ、且つ、それらの非特異的な又は非ターゲッティングの形態は、既に臨床的な日常業務である。下に述べられたいくつかの例が、文献に報告される。
【０００６】
例えば、Ｗ．Ｋｒａｕｓｅによる“Ｃｏｎｔｒａｓｔ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｉ”（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ  ２００２，ｐａｇｅ  １及び後に続く頁）（非特許文献１）に従って、Ｇｄ錯体を、ＭＲＩ用の造影剤として使用することができるであろう。さらには、超常磁性の粒子は、コントラスト向上剤の別の例であり、それら粒子を、ＭＲＩ用の造影剤としてもまた使用することができるであろう（Ｃｏｎｔｒａｓｔ  Ｍｅｄｉａ，Ｓｕｐｅｒｐａｒａｍａｇｎｅｔｉｃ  Ｏｘｉｄｅｓ，Ｄａｗｓｏｎ，Ｃｏｓｇｒｏｖｅ  ａｎｄ  Ｇｒａｉｎｇｅｒ  Ｉｓｉｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｍｅｄｉａ  Ｌｔｄ，１９９９，ｐａｇｅ  ３７３及び後に続く頁の教科書）（非特許文献２）。Ｗ．Ｋｒａｕｓｅによる“Ｃｏｎｔｒａｓｔ  Ａｇｅｎｔｓ  ＩＩ”（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ  ２００２，ｐａｇｅ  ７３及び後に続く頁）（非特許文献３）に記載されたように、気体で充填されたマイクロバブルを、超音波用の造影剤と類似の方式で使用することができるであろう。その上、Ｗ．Ｋｒａｕｓｅによる“Ｃｏｎｔｒａｓｔ  Ａｇｅｎｔｓ  ＩＩ”（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ，２００２，ｐａｇｅ  １５１及び後に続く頁）（非特許文献４）は、Ｘ線イメージング用の造影剤としてのヨウ化されたリポソーム又は脂肪酸の使用を報告する。
【０００７】
機能的なイメージングにおいて使用することができるコントラスト向上剤は、主として、ＰＥＴ及びＳＰＥＣＴ用に開発される。
【０００８】
これらの造影剤の一つの例は、デオキシグルコースのような１８Ｆで標識付けられた分子である（Ｂｅｕｔｈｉｅｎ−Ｂａｕｍａｎｎ  Ｂ  ｅｔ  ａｌ．，（２０００），Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．，３２７，１０７）（非特許文献５）。ＰＥＴ用の造影剤としてのこれらの標識付けされた分子の使用は、Ｗ．Ｋｒａｕｓｅによる“Ｃｏｎｔｒａｓｔ  Ａｇｅｎｔｓ  ＩＩ”に記載される（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ，２００２，ｐａｇｅ  ２０１及び後に続く頁）（非特許文献６）。しかしながら、それらは、いずれの先行する特異的な細胞の相互作用無しに腫瘍の組織に蓄積するのみである。さらには、抗体又はペプチド類のような９９Ｔｃで標識付けられた分子を、ＳＰＥＣＴ用のターゲッティング造影剤として使用することができるであろう（Ｖｅｒｂｒｕｇｇｅｎ  Ａ．Ｍ．，Ｎｏｓｃｏ  Ｄ．Ｌ．，Ｖａｎ  Ｎｅｒｏｍ  Ｃ．Ｇ．ｅｔ  ａｌ．，９９ｍＴｃ−Ｌ，Ｌ−エチレンジシステイン：腎性のイメージング剤，Ｂｕｃｌ．Ｍｅｄ．１９９２，３３，５５１−５５７）（非特許文献７）が、しかし、このような錯体分子の標識付けは、非常に困難な且つコストの大きいものである。
【０００９】
ＰＥＴ／ＳＰＥＣＴにおける使用のために既に存在する数個の他の配位子、例．Ｌ−ＤＯＰＡ（ドーパミン受容体，Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ）（Ｌｕｘｅｎ  Ａ．，Ｇｕｉｌｌａｕｍｅ  Ｍ，Ｍｅｌｅｇａ  ＷＰ，Ｐｉｋｅ  ＶＷ，Ｓｏｌｉｎ  Ｏ，Ｗａｎｇｅｒ  Ｒ，（１９９２）Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄ．Ａｐｐｌ．Ｉｎｓｔｒｙｍ．Ｂ  １９，１４９）（非特許文献８）；セロトニン類似体（セロトニン受容体）（Ｄｙｃｋ  ＣＨ，  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，４１，２３４）（非特許文献９）；ソマトスタチン類似体（ソマトスタチン，腫瘍学）（Ｍａｅｃｋｅ，Ｈ．Ｒ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｍｏｌ．Ｉｍａｇｉｎｇ，２００４，Ｍａｒ．１７）（非特許文献１０）、インテグリン受容体用のペプチド（血管形成）（Ｗｉｃｋｌｉｎｄｅ，Ｓ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２００３  Ｓｅｐ．１５，６３（１８），５８３８−４３（非特許文献１１）；Ｗｉｃｋｌｉｎｄｅ，Ｓ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ２００３  Ｎｏｖ．４，１０８，（１８），２２７０−４）（非特許文献１２）についても、同じことを、言うことができる。
【００１０】
その上、アリールボロン酸とのイミダゾール類のＣｕで触媒された反応（例．Ｃｏｌｌｍａｎ，Ｚｈｏｎｇ，Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，２０００，ｖｏｌ．２，ｎｏ．９，１２３３−１２３６）（非特許文献１３）もまた報告されてきた。
【００１１】
しかしながら、疾患の原因である特異的な分子の事象の識別は、医学においてますます重要になっている。従って、生体内で又は試験管内である一定の組織において特異的にコントラストを向上させる材料を豊富にするための且つ分子病理学への洞察を可能にする分子の認識の機構が備え付けられるターゲッティング剤は、同様にして、診断に本質的な且つ未来の治療である。
【非特許文献１】Ｗ．Ｋｒａｕｓｅ，“Ｃｏｎｔｒａｓｔ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｉ”，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ  ２００２，ｐａｇｅ  １〜
【非特許文献２】Ｃｏｎｔｒａｓｔ  Ｍｅｄｉａ，Ｓｕｐｅｒｐａｒａｍａｇｎｅｔｉｃ  Ｏｘｉｄｅｓ，Ｄａｗｓｏｎ，Ｃｏｓｇｒｏｖｅ  ａｎｄ  Ｇｒａｉｎｇｅｒ  Ｉｓｉｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｍｅｄｉａ  Ｌｔｄ，１９９９，ｐａｇｅ  ３７３〜
【非特許文献３】Ｗ．Ｋｒａｕｓｅ，“Ｃｏｎｔｒａｓｔ  Ａｇｅｎｔｓ  ＩＩ”，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ  ２００２，ｐａｇｅ  ７３〜
【非特許文献４】Ｗ．Ｋｒａｕｓｅ，“Ｃｏｎｔｒａｓｔ  Ａｇｅｎｔｓ  ＩＩ”，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ，２００２，ｐａｇｅ  １５１〜
【非特許文献５】Ｂｅｕｔｈｉｅｎ−Ｂａｕｍａｎｎ  Ｂ  ｅｔ  ａｌ．，（２０００），Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．，３２７，１０７
【非特許文献６】Ｗ．Ｋｒａｕｓｅ，“Ｃｏｎｔｒａｓｔ  Ａｇｅｎｔｓ  ＩＩ”，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ，２００２，ｐａｇｅ  ２０１〜
【非特許文献７】Ｖｅｒｂｒｕｇｇｅｎ  Ａ．Ｍ．，Ｎｏｓｃｏ  Ｄ．Ｌ．，Ｖａｎ  Ｎｅｒｏｍ  Ｃ．Ｇ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｕｃｌ．Ｍｅｄ．１９９２，３３，５５１−５５７
【非特許文献８】Ｌｕｘｅｎ  Ａ．，Ｇｕｉｌｌａｕｍｅ  Ｍ，Ｍｅｌｅｇａ  ＷＰ，Ｐｉｋｅ  ＶＷ，Ｓｏｌｉｎ  Ｏ，Ｗａｎｇｅｒ  Ｒ，（１９９２）Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄ．Ａｐｐｌ．Ｉｎｓｔｒｙｍ．Ｂ  １９，１４９）
【非特許文献９】Ｄｙｃｋ  ＣＨ，  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，４１，２３４
【非特許文献１０】Ｍａｅｃｋｅ，Ｈ．Ｒ．ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｍｏｌ．Ｉｍａｇｉｎｇ，２００４，Ｍａｒ．１７
【非特許文献１１】Ｗｉｃｋｌｉｎｄｅ，Ｓ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２００３  Ｓｅｐ．１５，６３（１８），５８３８−４３
【非特許文献１２】Ｗｉｃｋｌｉｎｄｅ，Ｓ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ２００３  Ｎｏｖ．４，１０８，（１８），２２７０−４
【非特許文献１３】Ｃｏｌｌｍａｎ，Ｚｈｏｎｇ，Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，２０００，ｖｏｌ．２，ｎｏ．９，１２３３−１２３６
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
このように、本発明の目的は、鑑別診断のみならず高い感度及び特定性を備えた早期の診断を可能にする、新しい世代の改善された造影剤を提供すること、及び、前記の改善された造影剤を生産するためにあまり高価な且つ時間を浪費するものではない方法を提供することである。この点において、生産の工程及び生産されたターゲッティング剤を提供すること、それによって、それらを、短い時間内に且つ費用及び労働力に関する低い努力で解決する必要がある現実に起こる問題に容易に適合させることができることは、また、好都合であろう。イメージング診断についてのそれらの可能性は別として、ターゲッティング造影剤は、また、新しい治療論の開発において重大な役割を果たすことになる。このようなターゲッティング治療剤は、現在、利用可能ではない。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明の目的は、都合良くは、以下に記載されたように、本発明によって解決され、且つ、付加的に、特許請求の範囲及び例において定義される。好適な非限定的な変形は、図に記載され、且つ、本発明の説明に使用される。
【００１４】
本発明は、ターゲッティング造影剤又は治療剤の生産用の方法に関係し、その方法は、
ａ）コアを提供する；
ｂ）自由選択で、そのコアにシェルを加える；
ｃ）バインディングユニットの少なくとも一つの分子を付けることによってそのコア又はそのシェルを修飾する；及び
ｄ）適当な触媒を使用することによって、少なくとも一つのイミダゾール官能性をもつ、少なくとも一つの配位子を、その修飾されたコア又はその修飾されたシェルへ、連結する
：のステップを含む。
【００１５】
前記の方法のさらなる実施形態においては、一つよりも多いシェルを、ステップｂ）において、そのコアへ加えることができる。言い換えれば、その外側のシェルを、一つから数個の内側のシェルによって、そのコアから分離することができる。本発明の好適な実施形態において、そのコアを、１個から１００個までの内側のシェルによって、より好ましくは、１個から５０個までの内側のシェルによって、その外側のシェルから分離することができる。そのシェル又はそれらシェルは、単層又は多層を含むこともある。これらのシェルの各々（それらシェルは、本発明の好適な実施形態において適当な材料の単層又は多層を含むこともある）は、約０．５ｎｍから１００ｎｍまでの厚さを有する。本発明の好適な実施形態においては、各々のシェルは、約０．５ｎｍから５００ｎｍまでの厚さを有する。さらには、各々のシェル又は数個のシェルでさえも、同じ材料又は異なる材料を含むこともある。
【００１６】
本発明のさらなる変形において、そのシェル又はそれらシェルは、少なくとも部分的にそのコアを覆うこともある。これは、好ましくは、例．有機高分子（例．ポリエチレングリコール／ＰＥＧ、ポリビニルアルコール／ＰＶＡ、ポリアミド、ポリアクリラート、ポリ尿素）、官能性の末端基を備えた有機高分子（例．１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［カルボキシ（ポリエチレングリコール）２０００］アンモニウム塩）、生体高分子（例．デキストラン、キシラン、グリコーゲン、ペクチン、セルロースのような多糖類、又は、コラーゲン、グロブリンのようなポリペプチド）、システイン若しくは高いシステインの含有率を備えたペプチド、又は、リン脂質は、単数のシェル又は複数のシェルとして使用されるときの事例である。本発明の意味では、そのコアにシェルを加えるステップは、そのコアを完全に囲むこと、いくつかの明瞭なエリアのみを、及び、好ましくはこれらの状況の間における全ての範囲を、覆うことを意味する。
【００１７】
ターゲッティング造影剤又はターゲッティング治療剤の生産用の現行の方法の好都合な変形は、従属請求項に定義される。
【００１８】
詳細には、本発明は、以下に記載されるように数個の特に好都合な変形を提供する。
【００１９】
−  “コア”：本ターゲッティング造影剤のコントラストを向上させる部分及び／又は治療的な部分として適切な材料。前記のコアは、連結するユニットとして使用されたポリペプチドの特定の構造のために、配位子と共有結合性の及びイオン性の結合を有する。
【００２０】
−  “単数のシェル又は複数のシェル”：シェルとして使用される材料に依存して、そのターゲッティング造影剤の良好な分散を可能にすることができる材料は、それの毒性を減少させることができるものであるか、又は、悪影響を予防することができる。ナノ粒子が、そのコアと使用されるとすれば、適当なシェル（例．ＺｎＳのシェル）の使用は、それらナノ粒子の表面の欠陥の数を低減することができる。これらの欠陥は、それらナノ粒子によって発生させられたコントラストをかなり低減する。従って、欠陥の数の低減は、より良好なターゲッティングコントラスト向上剤に至る。
【００２１】
本発明の状況においては、“コア”及び“修飾されたコア”を、類義語として使用することができ、且つ、“修飾されたコア”は、少なくとも一つの付けられたバインディングユニットによって修飾されたコアである。
【００２２】
本発明の状況においては、“単数のシェル又は複数のシェル”及び“修飾された単数のシェル又は複数のシェル”を、類義語として使用することができ、且つ、“修飾されたシェル”は、少なくとも一つの付けられたバインディングユニットによって修飾されたシェルである。
【００２３】
本発明の状況においては、“バインディングユニット”は、アリールボロン酸、超原子価アリールシロキサン、又は、ヨードベンゼンの少なくとも一つの分子であることが、理解される。本発明の好適な実施形態においては、シェル、修飾されたシェル、及び修飾されたコアの組み合わせは、バインディングユニットである（例．ＰＥＧシェルによって部分的に覆われた修飾されたコア、ＰＥＧシェルによって部分的に覆われた且つアリールボロン酸に連結されたカルボン酸で修飾されたシェルによって部分的に覆われたコア）。
【００２４】
表現“配位子”を、バインダーと共に、又は、好ましくは生物学的に活性な配位子と共に、本発明の状況においては、類義語として使用することができる。
【００２５】
本発明の状況においては、“適当な触媒”は、例．Ｃｕに基づいた触媒である。前記の触媒は、好ましくは穏やかな条件で、コア又はそのコアへ付けられた単数のシェル若しくはシェルへ付けられた、アリールボロン酸、超原子価のアリールシロキサン、又はヨードベンゼンへ少なくとも一つのヒスチジンユニットをもつ配位子（例．ポリ−ＨＩＳタグ）を共有結合的に連結させることによって、ターゲッティング造影剤の合成を可能にする。
【００２６】
“穏やかな条件”は、好ましくは技術で知られた条件を意味することが、理解され、それら条件の下では、その配位子は、それの活性及び特異性を、それぞれ、例．水溶液又は血液若しくは血清様の溶液における条件、生理学的なｐＨの値及び室温を、保持することになる。
【００２７】
本発明は、さらに、ターゲッティング造影剤及びターゲッティング治療剤並びにそれらの使用に関係する。
【００２８】
そのターゲッティング造影剤は、非限定的な例によって本発明を記述する、以下に続く特性を有する。
【００２９】
コントラストを向上させる材料に依存して、そのターゲッティング造影剤を、ＭＲＩ、ＵＳ、ＳＰＥＣＴ、ＣＴ、ＰＥＴ、光学的なイメージング、又は、ＰＥＴ／ＣＴと同様の多様式のアプローチのような異なるイメージングの手順において適用することができる。
【００３０】
そのターゲッティング造影剤は、コントラストを向上させるコア（例．磁気のナノ粒子）又は安定性及び／又は生体適合性を改善するために及び／又は生体内での毒性を低減するために一つ又はより多くのシェル（例．ＰＥＧシェル）によって覆うことができる治療的なコアを含む。
【００３１】
ナノ粒子が、そのコアとして使用されるとすれば、これらの粒子の大きさは、約１ｎｍから２００ｎｍまで変動することもある。本発明の好適な実施形態においては、それら粒子の大きさは、１ｎｍから１００ｎｍまで変動することもある。
【００３２】
高分子が、シェルとして使用されるとすれば、これらの高分子の分子量は、２００ｇ／ｍｏｌから２００，０００ｇ／ｍｏｌまで変動することもある。本発明の好適な実施形態においては、これらの高分子の分子量は、２００ｇ／ｍｏｌから１００，０００ｇ／ｍｏｌまで変動することもある。
【００３３】
そのターゲッティング造影剤は、ターゲッティング配位子を含む。
【００３４】
さらなる実施形態においては、それらターゲッティング造影剤又はそれらターゲッティング治療剤は、その配位子に連結された、修飾されたコア又は修飾された単数のシェル若しくは複数のシェルを含む。
【００３５】
そのターゲッティング造影剤は、配位子を含み、その配位子は、生体内における又は試験管内におけるターゲット分子を特異的に認識することができるものである。
【００３６】
ターゲッティング造影剤の本合成の一つの利点は、そこでは、その修飾されたコア又はその修飾された単数のシェル若しくは複数のシェルが、ヒスチジンとボロン酸、超原子価のアリールシロキサン又はヨードベンゼンの触媒された反応によって、その配位子（バインダー）へ共有結合させられるが、この反応によって形成される結合が、生体内でさえも、特に安定であるというものである。このように、その配位子及びその修飾されたコアは、生体内で連結されたままであり、望まれないエリア（例．組織）の造影を回避する。
【００３７】
その修飾されたコア又はその修飾された単数のシェル若しくは複数のシェルとその配位子との間の記述された結合を、水性の媒体において穏やかな条件の下で発生させることができるが、そのことは、その配位子が、それの十分な生物学的な活性を保つことを可能にする。これは、その反応を、室温で水中における銅の触媒によって触媒することができるために、及び、その修飾されたコア又はその修飾された単数のシェル若しくは複数のシェル及びその得られたターゲッティング造影剤が、水又は血液若しくは血清に溶解性であるために、可能である。これらの穏やかな反応条件は、その配位子が変性させられないことを可能にする。
【００３８】
その修飾されたコア又はその修飾された単数のシェル若しくは複数のシェル及びその配位子の“連結させること”を、その配位子へ合成で付けられたポリヒスチジンのタグ（“ＨＩＳタグ”：６個のヒスチジンのアミノ酸の伸張）を使用することによって、行うことができる。ペプチド類、タンパク質、酵素、及び抗体と同様の生体分子は、しばしば日常的に、例．アフィニティー・クロマトグラフィーを介して、これらの生体分子を精製することを助けるこのようなポリヒスチジンのタグと共に合成される。本発明は、その修飾されたコア又はその修飾された単数のシェル若しくは複数のシェルへ少なくとも一つの配位子を連結するためのこれらのヒスチジンのタグの使用を可能にする。このように、別のタグをその配位子へ加える必要がない。従って、それら配位子の合成は、単純化される。加えて、合成の後におけるその配位子へ付けられたポリヒスチジンのタグは、それら配位子の合成の後における付加的な精製のステップの間に消化されること又は分裂することを必要ではない。
【００３９】
その配位子へのその修飾されたコア又はその修飾された単数のシェル若しくは複数のシェルの“連結させること”を、サイト特異的に、例．ＨＩＳタグサイトで、行うことができる。従って、その配位子の認識の中心は、それの活性を保持することになる。それらポリヒスチジンのタグを、制御された且つ選択的な方式で（例えば、配位子として役に立つ、アミノ酸配列のいずれの与えられたアミノ酸における選択性も）その配位子におけるどの場所でも固定することができるので、その配位子は、それの活性を保ち、このようにその配位子の失活を回避すると共にこのようにその配位子における望まれないサイトへのその修飾されたコア又はその修飾された単数のシェル若しくは複数のシェルの連結もまた回避する。
【００４０】
記述した方法を、同様にしてターゲッティング治療剤へ移すことができる。この発明において記述された方法は、穏やかな反応条件のために、いずれの配位子にも及びいずれのコアにも潜在的に適用可能であり、いずれのタイプのターゲッティング造影剤又はターゲッティング治療剤の調製のための非常に多角的な且つ容易に適合可能な系を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４１】
本ターゲッティング造影剤の最も好適な変形は、図１に概略的に記載される。
【００４２】
詳細な図の説明
図１：
コア（１）：例．以下のもの：用の（これらに限定されない）コントラストを向上させる材料；又は治療的な材料
−  ＭＲＩ：例．（これらに限定されない）鉄（Ｆｅ）、鉄の酸化物γ−Ｆｅ２Ｏ３若しくはＦｅ３Ｏ４、又は、スピネル構造を備えたフェライトＭＦｅ２Ｏ４（Ｍ＝Ｍｎ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｃｄ）若しくはガーネット構造を備えたフェライトＭ３Ｆｅ５Ｏ１２（Ｍ＝Ｙ、Ｌａ、Ｃｅ、Ｐｒ、Ｎｄ、Ｓｍ、Ｅｕ、Ｇｄ、Ｔｂ、Ｄｙ、Ｈｏ、Ｅｒ、Ｔｍ、Ｙｂ、Ｌｕ）、若しくは磁鉛鉱構造を備えたフェライトＭＦｅ１２Ｏ１９（Ｍ＝Ｃａ、Ｓｒ、Ｂａ、Ｚｎ）、若しくは例．Ｂａ２Ｍ２Ｆｅ１２Ｏ２２（Ｍ＝Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｚｎ、Ｍｇ）のような他の六方晶系のフェライト構造のような強磁性の、反強磁性の、フェリ磁性の、又は超常磁性の材料；全ての場合において、そのコアを、付加的な０．０１から５．００モル％までのＭｎ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｚｎ、又はＦでドープすることができる。
【００４３】
−  常磁性のイオン（例．ランタニド、マンガン、鉄、銅）に基づいたコントラストを向上させるユニット、例．Ｇｄ（ＤＴＰＡ）、Ｇｄ（ＢＭＡ−ＤＴＰＡ）、Ｇｄ（ＤＯＴＡ）、Ｇｄ（ＤＯ３Ａ）のようなガドリウムキレート類；オリゴマーの構造；アルブミンＧｄ（ＤＴＰＡ）２０−３５、デキストランＧｄ（ＤＴＰＡ）、Ｇｄ（ＤＴＰＡ）−２４−カスケードポリマー、ポリリジン−Ｇｄ（ＤＴＰＡ）、ＭＰＥＧポリリジン−Ｇｄ（ＤＴＰＡ）のような巨大分子の構造；ランタニドに基づいたコントラストを向上させるユニットのデンドリマーの構造；Ｍｎ（ＤＰＤＰ）、Ｍｎ（ＥＤＴＡ−ＭＥＡ）、ポリ−Ｍｎ（ＥＥＤ−ＥＥＡ）、及びポリマーの構造のようなマンガンに基づいたコントラストを向上させるユニット；例．リポソームのＧｄ（ＤＴＰＡ）のような常磁性のイオンの担体としてのリポソーム類；非プロトン性のイメージング剤；
光学的なもの：例．（これらに限定されない）ナノ発光体（例．希土類でドープされたＹＰＯ４又はＬａＰＯ４）のような発光材料又は（量子ドット；例．ＣｄＳ、ＣｄＳｅ、ＺｎＳ／ＣｄＳｅ、ＺｎＳ／ＣｄＳと称された）半導体性のナノ結晶；カルボシアニン色素；テトラピロールに基づいた色素（ポリフィリン類、クロリン類、フタロシアニン類、及び関係した構造）；デルタアミノレブリン酸；蛍光性のランタニドキレート類；フルオレセイン若しくは５−アミノフルオレセイン若しくはフルオレセイン−イソチオシアナート（ＦＩＴＣ）又はＯｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ、ナフトフルオレセインのような他のフルオレセインに関係した蛍光体；
−  ＵＳ：例．（これらに限定されない）（ＡｍｅｒｓｈａｍからのＯｐｔｉｓｏｎ、ＳｃｈｅｒｉｎｇからのＬｅｖｏｖｉｓｔのような）シェル（例．タンパク質、脂質、界面活性剤、又はポリマー）にカプセル化された気体（例．空気、ペルフルオロプロパン、ドデカフルオロカーボン、六フッ化硫黄、ペルフルオロカーボン）の泡；シェル（例．タンパク質、脂質、界面活性剤、又はポリマー）にカプセル化された小滴；ナノ粒子（例．白金、金、タンタル）；
−  Ｘ線：例．（これらに限定されない）例．２，４，６−トリ−ヨードベンゼンのイオン性の及び非イオン性の誘導体のようなヨウ化されたコントラストを向上させるユニット；硫酸バリウムに基づいたコントラストを向上させるユニット；例．ガドリニウムに基づいた化合物のような金属イオンキレート類；高い割合のヨウ素を備えたホウ素クラスター類；ヨウ化された多糖類、ポリマーのトリヨードベンゼン類のような高分子；低い水溶性を示すヨウ化された化合物からの粒子；ヨウ化された化合物を含有するリポソーム類；トリグリセリド類、脂肪酸のようなヨウ化された脂質；
−  ＰＥＴ：例．（これらに限定されない）例．１８Ｆ−ＦＤＧ（グルコース代謝）；１１Ｃ−メチオニン、１１Ｃ−チロシン、１８Ｆ−ＦＭＴ、１８Ｆ−ＦＭＴ、又は１８Ｆ−ＦＥＴ（アミノ酸）；１８Ｆ−ＦＭＩＳＯ、６４Ｃｕ−ＡＴＳＭ（低酸素症）；１８Ｆ−ＦＬＴ、１１Ｃ−チミジン、１８Ｆ−ＦＭＡＵ（増殖）のような１１Ｃ、１３Ｎ、１５Ｏ、６６／８Ｇａ、６０Ｃｕ、５２Ｆｅ、５５Ｃｏ、６１／２／４Ｃｕ、６２／３Ｚｎ、７０／１／４Ａｓ、７５／６Ｂｒ、８２Ｒｂ、８６Ｙ、８９Ｚｒ、１１０Ｉｎ、１２０／４Ｉ、１２２Ｘｅ、及び１８Ｆに基づいたトレーサー；
−  ＳＰＥＣＴ：例．（これらに限定されない）例．９９ｍＴｃ、１２３／５／１３１Ｉ、６７Ｃｕ、６７Ｇａ、１１１Ｉｎ、２０１Ｔｌのような放射性ヌクレオチドに基づいたコントラストを向上させるユニット；
−  治療的な材料：例．（これらに限定されない）毒素、放射性同位体、及び化学療法剤；ＹＰＯ４：ＰｒのようなＵＶ−Ｃを放出するナノ粒子；例．拡張されたポルフィリンの構造に基づいた化合物のような光線力学的治療（ＰＤＴ）剤；例．１５７Ｓｍ、１７７Ｌｕ、２１２／３Ｂｉ、１８６／８Ｒｅ、６７Ｃｕ、９０Ｙ、１３１Ｉ、１１４ｍＩｎ、Ａｔ、Ｒａ、Ｈｏのような放射線治療用のヌクレオチド類；
−  例．（これらに限定されない）化学交換飽和移動（ＣＥＳＴ）；温度感受性ＭＲＩ造影剤（例．リポソームのもの）；ｐＨ感受性のＭＲＩ造影剤；酸素圧力又は酵素応答性のＭＲＩ造影剤；金属イオン濃度依存性ＭＲＩ造影剤：のような小さいコントラストを向上させるユニット；
−  多様性：上記のものの組み合わせ
−  単数のシェル又は複数のシェル（２）：は、例．（これらに限定されない）カルボン酸、酸ハロゲン化物、アミン類、酸無水物、活性化されたエステル類、マレイミド類、イソチオシアナート類、金、ＳｉＯ２、ポリホスファート（例．ポリリン酸カルシウム）、アミノ酸（例．システイン）、有機高分子（例．ポリエチレングリコール／ＰＥＧ、ポリビニルアルコール／ＰＶＡ、ポリアミド、ポリアクリラート、ポリ尿素）、有機の官能性の高分子（例．１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［カルボキシ（ポリエチレングリコール）２０００］アンモニウム塩）、生体高分子（例．デキストラン、キシラン、グリコーゲン、ペクチン、セルロースのような多糖類若しくはコラーゲン、グロブリンのようなポリペプチド）、システイン若しくは高いシステインの含有率を備えたペプチド、又はリン脂質を含むこともある。
【００４４】
−  一個から数個のシェル、好ましくは、１個から１００個までのシェル（２）を、そのコア、より好ましくは１個から５０個の内側のシェルへ加えることができる。これらのシェルの各々（そのシェルは、本発明の好適な実施形態において適当な材料の単層又は多層を含むこともある）は、約０．５ｎｍから１００ｎｍまでの厚さを有する。本発明の好適な実施形態においては、各々のシェルは、約０．５ｎｍから５００ｎｍまでの厚さを有し、且つ、異なる材料で又は同じ材料で作られることができる。さらには、そのシェルは、少なくとも部分的に、そのコアを覆うことができる。
【００４５】
−  単数又は複数のバインディングユニット（３）：例．（これらに限定されない）アリールボロン酸、生体配位子（例．抗体又は抗体のフラグメント、ペプチド、小さい分子）のヒスチジンユニット（例．ポリ−ＨＩＳタグ）との共有結合的なカップリングを媒介するアリールボロン酸の官能性を含むシェル
例．（これらに限定されない）超原子価のアリールシロキサン類、生体配位子（例．抗体又は抗体のフラグメント、ペプチド、小さい分子）のヒスチジンユニット（例．ポリ−ＨＩＳタグ）との共有結合的なカップリングを媒介する超原子価のアリールシロキサン類を含むシェル
例．（これらに限定されない）ヨードベンゼン、ヨードベンゼンを含むシェル、又は、生体配位子（例．抗体又は抗体のフラグメント、ペプチド、小さい分子）のヒスチジンユニット（例．ポリ−ＨＩＳタグ）との共有結合的なカップリングを媒介するシェルへの少なくとも一つのヨードベンゼンの結合
加えて、タンパク質のようなさらなる生体分子を、例．細胞膜（例．ＨＩＶタグペプチド、など）を通じた完全な集合体の通過を可能とすることで、生体適合性を増加させることで、又は、毒性を減少させることで、組み込むことができる。
【００４６】
−  配位子（４）：
−  例．（これらに限定されない）配位子、その配位子は、（例．抗体抗原相互作用によって）それの特異的な認識機構を通じて、関心のある明瞭な組織又はターゲット領域における造影剤の濃縮を含む
−  例．（これらに限定されない）配位子、その配位子は、付けられたポリ−ＨＩＳタグを有する
−  ターゲッティングユニットは、
−  例．（これらに限定されない）トラスツズマブ（乳ガン）、リツキシマブ（非ホジキンリンパ腫）、アレムツズマブ（慢性的なリンパ性白血病）；ゲムツズマブ（急性の骨髄性の白血病）；エドレコロマブ（大腸癌）；イブリツモマブ（非ホジキンリンパ腫）；セツキシマブ（大腸癌）；トシツモマブ（非ホジキンリンパ腫）；エプラツズマブ（非ホジキンリンパ腫）；ベバシズマブ（肺及び大腸癌）；抗−ＣＤ３３（急性の骨髄性の白血病）；ペムツモマブ（卵巣及び胃癌）；ミツモマブ（肺及び皮膚癌）；抗−ＭＵＣ１（腺癌）；抗−ＣＥＡ（腺癌）；抗−ＣＤ６４（溶菌斑）、などのような抗体（単クローン性のもの、多クローン性のもの、マウスのもの、マウス−ヒトのキメラのもの、ヒトのもの、単鎖、二重特異性抗体、など）
：であることもある。
【００４７】
−  例．（これらに限定されない）ペプチド類；ポリペプチド類、ソマトスタチン類似体、血管作用性のペプチド類似体、ニューロペプチドＹ、ＲＧＤペプチド、などのような擬ペプチド類
−  例．（これらに限定されない）アネキシンＶ、組織プラスミノーゲン活性化因子のタンパク質、輸送タンパク質、などのようなタンパク質
−  例．（これらに限定されない）巨大分子、例．ヒアルロナン、アプシタイド、デルマタン硫酸塩
−  例．（これらに限定されない）アパタマー、アンチセンスＤＮＡ／ＲＮＡ、／ＰＮＡ、低分子干渉性ＲＮＡ、などのような核酸
−  例．（これらに限定されない）リン脂質などのような脂質
−  例．（これらに限定されない）レクチン類、例．白血球刺激性レクチン
−  例．（これらに限定されない）多糖類
−  触媒
−  例．（これらに限定されない）イミダゾールの官能性とのアリールボロン酸の官能性の反応を触媒すると共に、生体配位子が、カップリング反応（例．水溶液、ｐＨ＝７、室温）の間に損傷されないという点で反応の窓を許容する、例．［Ｃｕ（ＯＨ）ＴＭＥＤＡ］２Ｃｌ２；（ＴＭＥＤＡ＝テトラメチルエチレンジアミン）例えば、Ｃｏｌｌｍａｎ，Ｚｈｏｎｇ，Ｚｅｎｇ，Ｃｏｓｔａｎｚａ，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２００１，６６，１５２８−１５３１を参照のこと。
【００４８】
−  例．（これらに限定されない）イミダゾールの官能性との超原子価のアリールシロキサンの反応を触媒すると共に、生体配位子が、カップリング反応の間に損傷されないという点で反応の窓を許容する、例．Ｃｕ（ＡｃＯ）２、例えば、Ｌａｍ，Ｄｅｕｄｏｎ，Ａｖｅｒｉｌｌ，Ｌｉ，Ｈｅ，ＤｅＳｈｏｎｇ，Ｃｌａｒｋ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２０００，１２２，７６００−７６０１を参照のこと。
【００４９】
−  例．（これらに限定されない）イミダゾールの官能性とのヨードベンゼンの反応を触媒する、例．［Ｃｕ（ＯＨ）ＴＭＥＤＡ］２Ｃｌ２；例えば、Ｌａｍ，Ｄｅｕｄｏｎ，Ａｖｅｒｉｌｌ，Ｌｉ，Ｈｅ，ＤｅＳｈｏｎｇ，Ｃｌａｒｋ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２０００，１２２，７６００−７６０１を参照のこと。
【００５０】
−  ターゲッティング造影剤又は治療剤（５）
−  例．（これらに限定されない）コントラストを向上させる又は治療的なコア、異なる官能性を備えたシェル、カップリングユニット（フェニルイミダゾール）、及び特異的なターゲッティング配位子からなる
図２：ｏ−アシルイソ尿素の中間体を形成する（室温，ｐＨ〜５）ための、１−エチル−３−（ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）との、そのコアに連結された、カルボン酸のワンポット反応による、フェニルボロン酸でのコントラストを向上させるユニット（ＣＯＯＨで被覆されたＣｄＳｅ／ＺｎＳの量子ドット）の表面の修飾についての反応スキーム  この中間体は、スルホ−ＮＨＳエステルの中間体を与えるように、スルホ−ＮＨＳと反応する。過剰のＥＤＣは、２−メルカプトエタノールの追加によって消滅させられる。最後に、３−アミノフェニルボロン酸との反応は、所望のアミド結合に至る（室温、ｐＨ〜７）。
【００５１】
図３：
Ｃｏｌｌｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２００１，６６，１５２８−１５３１）に従って行われたイミダゾールとのｐ−トリルボロン酸のカップリングについての反応スキーム
図４：
イミダゾール、ｐ−トリルボロン酸、及びそのカップリング生産物の吸光度が、２５０ナノメートルと５００ナノメートルとの間の入射する放射の（ｎｍでの）波長の関数として（任意単位で）測定される。ＵＶ／Ｖの間に見られた差異は、二つの出発の生産物（イミダゾール及びｐ−トリルボロン酸）のスペクトル並びに、反応の後に得られた、カップリング生産物のスペクトルであり、そのカップリングが、記述された条件の下で起こることを証明する。
【００５２】
図５：
クロロホルム、イミダゾール、ｐ−トリルボロン酸、及びそのカップリング生産物の透過性が、０ｃｍ−１と４０００ｃｍ−１との間の、及び、１０００ｃｍ−１と１５００ｃｍ−１との間の、入射する放射の（ｃｍ−１での）波数の関数として（任意単位で）測定される。二つの出発の生産物（イミダゾール及びｐ−トリルボロン酸）の溶媒（クロロホルム）のＦＴＩＲスペクトルと、反応の後に得られたカップリング生産物のスペクトルとの間に見られた差異は、そのカップリングが、記述された条件の下で起こることを証明する。
【００５３】
図６：
イミダゾール、ｐ−トリルボロン酸、及びそのカップリング生産物について記録された信号の強度が、ガスクロマトグラフィーによる（カップリング反応によって得られた）１−（４−トリル）イミダゾールの単離の後に、質量分析による（ｍ／ｚ単位での）質量の関数として（任意単位で）測定される。記述された条件の下でのイミダゾールとのｐ−トリルボロン酸のカップリングによって得られた、１−（４−トリル）イミダゾールのＧＣ／ＭＳスペクトルとスペクトル登録集に見出された１−（３−トリル）イミダゾールのＧＣ／ＭＳスペクトルの間の類似性は、所望のカップリング生産物が得られることを証明する。
【００５４】
図７：
イミダゾール、ｐ−トリルボロン酸、及びそのカップリング生産物の信号の強度が、ＮＭＲによって（ｐｐｍでの）化学シフトの関数として測定される。二つの出発の生産物（イミダゾール及びｐ−トリルボロン酸）の溶媒（クロロホルム）のＮＭＲスペクトルと反応の後に得られた、カップリング生産物のスペクトルとの間に見られた差異は、そのカップリングが、記述された条件の下で起こることを証明する。
【００５５】
図８：
室温での［Ｃｕ（ＯＨ）ＴＭＥＤＡ２］Ｃｌ２によって一晩中触媒された、（Ｈｉｓ）６−Ａｈｘ−ＦＩＴＣタグのヒスチジンユニットとのｐ−トリルボロン酸の反応を介した、（Ｈｉｓ）６−Ａｈｘ−ＦＩＴＣとのｐ−トリルボロン酸のカップリングについての反応スキーム。
【００５６】
図９：
反応の後に得られた生産物について記録された信号の強度は、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ（マトリックス支援レーザー脱離イオン化−飛行時間）質量分析によって（ｍ／ｚ単位での）質量の関数として（任意単位で）測定される。（Ｈｉｓ）６−Ａｈｘ−ＦＩＴＣとのｐ−トリルボロン酸のカップリング反応の後に得られた、その生産物のＭＡＬＤＩ−ＴＯＦスペクトルは、そのカップリングが、記述された条件の下で起こることを証明する。所望のカップリング生産物（ｐ−トリル−Ｈｉｓ６−Ａｈｘ−ＦＴＣ）に対応するｍ／ｚ＝１４３３でのピークは、この生産物の形成を証明する。
【００５７】
図１０：
ｏ−アシルイソ尿素の中間体を形成するための、１−エチル−３−（ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩との、コントラストを向上させるユニットへ連結された、カルボン酸のワンポット反応による、フェニルボロン酸でのコア（１８Ｆで標識を付けられた分子）の修飾についての反応スキーム（室温、ｐＨ〜５）。この中間体は、スルホ−ＮＨＳエステルの中間体を与えるために、スルホ−ＮＨＳと反応する。過剰のＥＤＣは、２−メルカプトエタノールの追加によって、消滅させられる。最後に、３−アミノフェニルボロン酸との反応は、所望のアミド結合に至る（室温、ｐＨ〜７）。
【００５８】
例：
【実施例１】
【００５９】
例１：
ＣｄＳｅ／ＺｎＳ量子ドット（コア）を、一方の末端でカルボン酸の機能を且つ他方の末端で１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミンの機能をもつ水溶性の高分子によって、酸によってカルボン酸の官能性で表面修飾した。
【００６０】
ＣＯＯＨで被覆された量子ドットは、混合することによって得られた（５０℃で４時間）：
−  １００μｌのＣｄＳｅ／ＺｎＳ（クロロホルム中、１重量／体積％）
−  １００μｌのクロロホルム
−  ２００μｌのＤＰＰＣ（５ｍＭ）−ＤＰＰＣ＝１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン
２００μｌのＤＳＰＥ−ＰＥＧ２０００−ＣＯＯＨ（５ｍＭ）−ＤＰＳＥ−ＰＥＧ２０００−ＣＯＯＨ：
１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［カルボキシ（ポリエチレングリコール）２０００］アンモニウム塩、
並びに、真空によってクロロホルムを最後に取り除くこと、及び、超音波処理によって水にＣＯＯＨで被覆された量子ドットを分散させること
１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［カルボキシ（ポリエチレングリコール）２０００］アンモニウム塩は、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミンの末端基による疎水性の相互作用（又は吸着）によって、ナノ粒子の表面に結び付く。さらには、その１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［カルボキシ（ポリエチレングリコール）２０００］アンモニウム塩は、カルボキシの機能を提供し、その機能は、カルボン酸を得るために、酸のｐＨで、プロトン化される。
【００６１】
ＤＰＰＣは、それらナノ粒子に固定されたＣＯＯＨの機能の間にスペースを残すためのダミー（又はスペーサー）として使用される。現実に、ＣＯＯＨの機能によってのみ全体のナノ粒子の表面の覆いは、相互作用を作り出すことによって悪影響を、且つ、従って、体の望まれない組織又は望まれないエリアでのコントラストを、有し得るであろう。
【００６２】
１）フェニルボロン酸でのシェルの表面修飾
コントラストを向上させるユニットを、カルボン酸を介したカップリングによって、ボロン酸の官能性で表面修飾することができる。
【００６３】
他の例は、例．活性化されたエステルを介した、マレイミドを介した、又は、イソチオシアナートを介した、カップリングであるであろう。
【００６４】
これは、水溶性のＣｄＳｅ／ＺｎＳ量子ドットを修飾することによって、実験的になされる：
−  ５５μｌの水
−  ４０μｌの１０倍のＰＢＳ溶液（ＰＢＳ＝リン酸塩緩衝液の生理食塩水：０．０１Ｍのリン酸塩緩衝液、０．００２７Ｍの塩化カリウム、０．１３７Ｍの塩化ナトリウム、ｐＨ７．４）
−  １００μｌの０．１ＭのＥＤＣ溶液（ＥＤＣ＝１−エチル−３−ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸塩）
−  ５μｌの２０ｍＭのスルホ−ＮＨＳ溶液（Ｎ−ヒドロキシスルホスクシンイミドのナトリウム塩）
−  ２００μｌの２μＭのＣｄＳｅ／ＺｎＳ（ＣＯＯＨで末端処理された）溶液
−  室温での温置（３０分）
−  １０μｌの２−メルカプトエタノール
−  １５分間の混合
−  ５０μｌの２０ｍＭの３−アミノフェニルボロン酸の溶液
−  室温での混合（２時間）
−  遠心分離によるＱＤの分離
反応スキーム、図２を参照のこと。
【００６５】
１）イミダゾールとのｐ−トリルボロン酸のカップリング
初期のステップとして、文献に記載されたイミダゾールとのトリルボロン酸の反応を、首尾良く再現した。Ｃｏｌｌｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２００１，６６，１５２８−１５３１）に従って行われた合成。
【００６６】
反応スキーム、図３を参照こと。
【００６７】
２）（Ｈｉｓ）６−Ａｈｘ−ＦＩＴＣとのｐ−トリルボロン酸のカップリング
イミダゾールとのフェニルボロン酸の触媒された反応を、ポリ−ＨＩＳタグを備えたペプチドとのフェニルボロン酸の反応に適合させることができ、その反応を、実験的に証明することができるであろう：
合成：
−  １９μｌの１００μＭの［Ｃｕ（ＯＨ）ＴＭＥＤＡ］２Ｃｌ２の溶液
−  ３８μｌの１ｍＭのｐ−トリルボロン酸の溶液
−  ３１．９μｌのＨｉｓ６−Ａｈｘ−ＦＩＴＣ（０．８ｍｇ／ｍｌ）（Ｈｉｓ６＝オリゴヒスチジン；Ａｈｘ＝６−アミノヘキサ炭酸；ＦＩＴＣ＝フルオレセインイソチオシアナート（ＩｓｏｍｅｒＩＫ））
−  １９１１．１μｌの水
−  酸素雰囲気における温置（室温で一晩中）
反応スキーム、図４を参照のこと。
【実施例２】
【００６８】
例２：ボロン酸によって修飾された１８Ｆで標識を付けられた分子：
これは、
−  ５５μｌの水
−  ４０μｌの１０倍のＰＢＳ溶液（ＰＢＳ＝リン酸塩緩衝液の生理食塩水：０．０１Ｍのリン酸塩緩衝液、０．００２７Ｍの塩化カリウム、０．１３７Ｍの塩化ナトリウム、ｐＨ７．４）
−  １００μｌの０．１ＭのＥＤＣ溶液（ＥＤＣ＝１−エチル−３−（ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩）
−  ５μｌの２０ｍＭのスルホ−ＮＨＳ溶液（Ｎ−ヒドロキシスルホスクシンイミドのナトリウム塩）
−  ２００μｌの２μＭのＦ−１８−Ｌ−ＤＯＰＡ溶液
−  室温での温置（３０分）
−  １０μｌの２−メルカプトエタノール
−  １５分間の混合
−  ５０μｌの２０ｍＭのｍ−アミノフェニルボロン酸
−  室温での混合（２時間）
−  遠心分離による副産物の除去
：によって実験的に行われる。
【図面の簡単な説明】
【００６９】
【図１】図１は、本ターゲッティング造影剤の最も好適な変形を概略的に記載する。
【図２】図２は、フェニルボロン酸でのコントラストを向上させるユニットの表面の修飾についての反応スキームを示す。
【図３】図３は、イミダゾールとのｐ−トリルボロン酸のカップリングについての反応スキームを示す。
【図４】図４は、入射する放射の（ｎｍでの）波長の関数として（任意単位で）測定されるイミダゾール、ｐ−トリルボロン酸、及びそのカップリング生産物の吸光度を示す。
【図５】図５は、入射する放射の（ｃｍ−１での）波数の関数として（任意単位で）測定されるクロロホルム、イミダゾール、ｐ−トリルボロン酸、及びそのカップリング生産物の透過性を示す。
【図６】図６は、質量分析による（ｍ／ｚ単位での）質量の関数として（任意単位で）測定されるイミダゾール、ｐ−トリルボロン酸、及びそのカップリング生産物について記録された信号の強度を示す。
【図７】図７は、ＮＭＲによって（ｐｐｍでの）化学シフトの関数として測定されるイミダゾール、ｐ−トリルボロン酸、及びそのカップリング生産物の信号の強度を示す。
【図８】図８は、（Ｈｉｓ）６−Ａｈｘ−ＦＩＴＣとのｐ−トリルボロン酸のカップリングについての反応スキームを示す。
【図９】図９は、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析によって（ｍ／ｚ単位での）質量の関数として（任意単位で）測定される、反応の後に得られた生産物について記録された信号の強度を示す。
【図１０】図１０は、フェニルボロン酸でのコア（１８Ｆで標識を付けられた分子）の修飾についての反応スキームを示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【国際調査報告】
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