(57)【要約】  本発明は、眼疾患を治療するために、光に暴露すると活性成分を放出する感光性プロドラッグを用意する工程、医薬品として許容されるビヒクル中のプロドラッグを対象に投与する工程、および対象の眼を外部光源に暴露してプロドラッグに活性成分を放出させる工程を含む、患者における眼疾患を治療する方法を提供する。また、本発明は、クラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテルを含むクロメンまたはジアゼン誘導体にキレートしたリチウムイオンを含む化合物および医薬品として許容される担体を含む緑内障の治療のための組成物を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
a)眼疾患を治療するために、光に暴露すると活性成分を放出する感光性プロドラッグを用意する工程、
b)医薬品として許容される担体中の該プロドラッグを対象の眼に投与する工程、および
c)該対象の眼を外部光源に暴露して該プロドラッグに該活性成分を放出させる工程
を含む、対象における網膜神経節細胞の変性を保護する方法。
【請求項２】
前記網膜神経節細胞の変性が眼疾患により引き起される、請求項1に記載の方法。
【請求項３】
前記眼疾患が緑内障である、請求項2に記載の方法。
【請求項４】
前記プロドラッグがリチウムを放出する、請求項1に記載の方法。
【請求項５】
前記プロドラッグが、該プロドラッグを対象の血流中に導入することにより対象の眼に投与される、請求項1に記載の方法。
【請求項６】
前記プロドラッグが、クロメン、ジアゼンまたはその誘導体のクラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテル部分からリチウムを放出する、請求項1に記載の方法。
【請求項７】
前記プロドラッグが、対象の眼に入る光への暴露によってリチウムを放出する、請求項5に記載の方法。
【請求項８】
前記リチウムイオンが、クラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテル部分にキレートして、光への暴露によりリチウムイオンを放出するキレート化リチウム化合物を形成する、請求項4に記載の方法。
【請求項９】
前記リチウムイオンが、クラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテル部分を介してジアゼンまたはクロメン誘導体に可逆的に結合してリチウムイオン放出クロメンまたはジアゼン誘導体を形成することにより、該リチウムイオンが、前記対象の眼の光への暴露により放出される、請求項4に記載の方法。
【請求項１０】
クロメン、ジアゼンまたはその誘導体におけるリチウム放出クラウンエーテルまたはアザクラウンエーテル部分の有効量および医薬品として許容される担体を含む、網膜神経節細胞の変性の保護のための組成物。
【請求項１１】
前記網膜神経節細胞の変性が、緑内障の症状に起因するか緑内障の症状である、請求項10に記載の組成物。
【請求項１２】
経口で投与されてもよい形態で提供される、請求項10に記載の組成物。
【請求項１３】
請求項10に記載の組成物を含む遮光アンプルまたはシリンジ、および対象へのその投与のための指示書を含む緑内障の治療のためのキット。
【請求項１４】
次の構造：
【化１】
2008524268.tif 000009
(式中、Qは任意のサイズのクラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテルであり、
R1、R2、R3、R'1、R'2、R'3、X1およびX2は同じか異なり、それぞれ、フェニル環または置換フェニル環の全部もしくは一部、水素;ハロゲン、ヒドロキシル基、ならびに非置換または置換低級アルキル、シクロアルキル、アリール、アシル、アルコキシ、アシルアミノ、アラルキル、シアノカルボキシル、チオ、ビニル、スチリル、アルコキシカルボニル、カルバモイル、アミノカルボニル、フェノキシカルボニルからなる群から選択され、置換基は、前記列挙の金属、水素、ハロゲンおよびヒドロキシル基、ならびに認知された供与体および受容体基であり、
該置換基は一緒に結合して任意の数の構成員を有する置換または非置換、飽和または不飽和環を形成してもよい)
のいずれか1つを有する化合物。
【請求項１５】
次の構造：
【化２】
2008524268.tif 000010
(式中、Qは任意のサイズのクラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテルであり、XはHまたはt-ブトキシ-である)
を有する化合物。
【請求項１６】
プロドラッグを得るためにリチウムを請求項14に記載の組成物に可逆的に結合する工程、緑内障の治療を必要とする患者の眼に対して医薬品として許容されるビヒクル中の緑内障を治療するのに有効な該プロドラッグの量を投与する工程、および患者の眼を外部光源に暴露して該リチウムを該患者の眼に放出する工程を含む、緑内障の治療方法。
【請求項１７】
プロドラッグを得るためにリチウムを請求項15に記載の組成物に可逆的に結合する工程、緑内障の治療を必要とする患者の眼に対して医薬品として許容されるビヒクル中の緑内障を治療するのに有効な該プロドラッグの量を投与する工程、および患者の眼を外部光源に暴露して該リチウムを該患者の眼に放出する工程を含む、緑内障の治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、本出願に参照として組み込まれる2004年12月22日出願の米国特許仮出願第60/638100号の優先権を主張する。
【０００２】
本出願を通して様々な刊行物が参照される。これらの刊行物に対する完全な引用は特許請求の範囲の直前に見出すことができる。これらの刊行物の開示は、本明細書において記載され特許請求された本発明のその時点での従来技術の状態をさらに十分に記述するために本出願に参照として本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００３】
緑内障は漸進的な視野の喪失を特徴とする人間の疾患であり、世界的に回復のできない失明の主たる原因の1つである。世界保健機構(WHO)は、緑内障患者の合計数が1977年に1億500万人であったと推定している。中国だけで、フォスター(Foster)およびジョンソン(Johnson)は、2001年に、この疾患が推定940万人(40歳以上の年齢層に対して)を冒し、その内の520万人(55%)が少なくとも片眼を失明していることを報告している。
【０００４】
緑内障における網膜神経節細胞の喪失に内在する1つの仮説は、逆行性軸索輸送の閉塞または眼における毒性物質の産生の増加による細胞死遺伝子の誘発である。したがって、実験の目的は、房水の流出を強膜上および辺縁静脈のレーザー光凝固で阻止することにより増加した眼圧を伴う我々の確立した緑内障の動物モデルを使用することである。さらに、我々の先の研究は、塩化リチウムが眼における神経保護因子であることを示した。LiClまたはその他の感光性リチウム化合物は、ネズミの緑内障モデルにおける網膜神経節細胞の死を保護するこれらの役割を試験するためにネズミに注射された。このモデルは緑内障における細胞死を阻止するリチウムのメカニズムを研究するのに有用である。感光性リチウム化合物は眼の内部でのみ活性化されるので副作用がさらに低く、したがってこの方法は緑内障疾患を伴う患者にとって潜在的に有用である。
【０００５】
緑内障の主たる病理学的特徴は網膜神経節細胞(RGS)の死、および視野の喪失を引き起す視神経頭の陥凹および萎縮である(Leske、1983;Osborne、1999、Quigley、1979)。緑内障性視神経症は、視野を徐々に、多くの場合兆候を伴うことなく減少させる。多くの患者は、完全な失明に進行するまで緑内障の初期段階での病理学的状態に気付かない。中枢神経系(CNS)におけるその他の神経細胞に似て、RGCはこれらが一度損傷を受けると一般的に再生しない。しかしながら、RGC軸索を冒す眼の疾患の多くのタイプにおける進行性視野の喪失は、初期段階で治療を受ければ防ぐことができる。したがって、あらゆる種類の視神経症におけるRGCの変性を防ぐことが重要である。
【０００６】
これまで、緑内障における網膜神経節細胞の死に対して保護するための適切な治療は存在していないと思われる。緑内障に対する現在の臨床治療は数少ない利用可能な神経保護剤でRGCの進行性喪失を遅延することであるが、多くの研究努力はRGCの死および種々の視神経症状態におけるアポトーシスの防止に向けられている。種々の視神経症状態、例えば、緑内障性視神経症、虚血性視神経症、炎症性視神経症、圧迫性視神経症および外傷性視神経症等に応答可能なメカニズムの知識は、これらのための新たな治療の開発において重要である。多数の動物緑内障モデルは視神経横断(Cheung、2002; Cho、1999; Cho、2001; Lu、2003; You、2002)、および高眼圧症(Garcia-Valenzuela、1995; Laquis、1998; McKinnon、2002; Mittag、2000; Morrison、1997; Sawada、1999; Ueda、1998)を含む病原状態を模倣するために確立されている。本発明者等は、アルゴンレーザーを使用して辺縁および強膜上静脈に対して光凝固の高眼圧モデルを開発した(Ji、2004; WoldeMussie、2001; WoldeMussie、2002)。
【０００７】
塩化リチウムは、躁病および鬱病の臨床治療のための通常の薬剤である。最近の研究は、それが抗アポトーシス遺伝子Bcl-2のアップレギュレーションを含めた多数の細胞間シグナル経路により傷ついたCNSについての神経保護効果およびグリコーゲン合成酵素キナーゼ-3β(GSK-3β)の抑制を有することを示唆している。リチウム誘発Bcl-2アップレギュレーションは、グルタミン酸塩興奮毒性に対する神経保護および傷ついた軸索の本来の成長性を支持することにおいて重要な役割を演じる。GSK-3βは、傷ついたCNSにおけるアポトーシスを調節するPI3-キナーゼ/Aktシグナル経路の鍵となる下流標的である。緑内障の病理生理学を研究するために高眼圧モデルを使用して、ソー(So)および彼の仲間は塩化リチウムがRGCの変性を防ぐことができることを示した(Ji、2002)。
【０００８】
リチウムの素晴らしい治療価値にも拘わらず、重大な長期間同伴する合併症が存在する。これらは、激しい粗大振戦、皮膚障害の悪化、白血球増加症、甲状腺機能低下症、副甲状腺機能低下症および腎臓機能の破壊を含む(Birch、1999および1999)。望ましくない副作用は、血液脳関門を通り、その他の膜を横断するリチウムのゆっくりとした浸透により引き起される可能性があり、高い投与量を必要とする作用の遅発性をもたらす(Shanzer、1983)。
【特許文献１】米国特許仮出願第60/638100号
【非特許文献１】Leske、1983;Osborne、1999、Quigley、1979
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
したがって、本発明は、種々の疾患を治療するために感光性化合物の新規な使用を利用する新たな治療および方法を提供することを目的とする。
【００１０】
ホトクロミック単位、例えば、ジアゼンまたはクロメン等を有するものを含めた感光性系は、関連のない分野、例えば、光学記録および情報記憶装置 (Ishige、1980; Loerincz、2003; Matsui、1994)、光制御媒体(Levy、1997; Natansohn、1999; Nunzi、1996)、液晶ディスプレーおよび有機発光装置(Shinbo、2002; Zhang X. H.、2001)、分子スイッチ(Ikeda、2000; Yoon、2003; Zhang Zhihua、2003)ならびに偽装商標防止のための機密保護インク(Fan、1997)等で広く使用されている。さらに具体的に言えば、本発明において言及される光応答系は、キレート部分に結合したまたはその中に導入された感光性部分を含む。その様な光応答性キレーターは、金属イオンの感知(Alward、1998; Rompotis、2002)および抽出(Alward、1998; Blank、1981; Shinkai、1980; Shinkai、1981)のために使用されている。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、眼疾患を治療するために、光に暴露すると活性成分を放出する感光性プロドラッグを用意する工程、医薬品として許容される担体中のプロドラッグを対象に投与する工程、および対象の眼を外部光源に暴露してプロドラッグに活性成分を放出させる工程を含む、対象における眼疾患を治療する方法を提供する。
【００１２】
本発明は、またa)眼疾患を治療するために、光に暴露すると活性成分を放出する感光性プロドラッグを用意する工程、b)医薬品として許容される担体中のプロドラッグを対象の眼に投与する工程、およびc)対象の眼を外部光源に暴露してプロドラッグに活性成分を放出させる工程を含む、対象における網膜神経節細胞の変性を保護する方法を提供する。
【００１３】
本発明は、さらに、次のいずれかの構造:
【００１４】
【化１】
2008524268.tif 000002
【００１５】
(式中、Qは任意のサイズのクラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテルであり、R1、R2、R3、R'1、R'2、R'3、X1およびX2は同じか異なり、それぞれ、フェニル環または置換フェニル環の全部もしくは一部、水素;ハロゲン、ヒドロキシル基、ならびに非置換または置換低級アルキル、シクロアルキル、アリール、アシル、アルコキシ、アシルアミノ、アラルキル、シアノカルボキシル、チオ、ビニル、スチリル、アルコキシカルボニル、カルバモイル、アミノカルボニル、フェノキシカルボニルからなる群から選択され、置換基は、前記列挙の金属、水素、ハロゲンおよびヒドロキシル基、ならびに認知された供与体および受容体基であり、該置換基は一緒に結合して任意の数の構成員を有する置換または非置換、飽和または不飽和環を形成してもよい)の1つを有する化合物を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
(定義)
本明細書において使用される作用薬を「投与すること」は、当業者に知られている任意の様々な方法および送達系を使用して達成しまたは行うことができる。投与は、例えば、脳脊髄液を介して静脈内に、経口で、インプラントを介して鼻腔に、粘膜間に、経皮的に、筋肉注射で、および皮下に行うことができる。
【００１７】
本明細書において使用される「医薬品として許容される担体」とは、当業者に知られている任意の様々な担体を意味するものである。
【００１８】
多数の日常的に使用される薬学的担体を使用する以下の送達系は、本発明の組成物を投与するために想定される多くの実施形態の代表に過ぎない。
【００１９】
注射可能な薬剤送達系としては、溶液、懸濁液、ゲル、微小球体およびポリマー性注射可能物質が挙げられ、溶解度変更剤(例えば、エタノール、プロピレングリコールおよびスクロース)およびポリマー(例えば、ポリカプリルラクトンおよびPLGA)等の賦形剤を含むことができる。移植可能な系としては、ロッドおよびディスクが挙げられ、PLGAおよびポリカプリルラクトン等の賦形剤を含むことができる。
【００２０】
経口送達系としては錠剤およびカプセルが挙げられる。これらは結合剤(例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、その他のセルロース物質およびデンプン)、希釈剤(例えば、ラクトースおよびその他の糖、デンプン、リン酸二カルシウムおよびセルロース物質)、崩壊剤(例えば、デンプンポリマーおよびセルロース物質)および潤滑剤(例えば、ステアレートおよびタルク)等の賦形剤を含むことができる。
【００２１】
粘膜間送達系としては、パッチ、錠剤、座薬、ペッサリー、ゲルおよびクリームが挙げられ、可溶化剤およびエンハンサー(例えば、プロピレングリコール、胆汁酸塩およびアミノ酸)、およびその他のビヒクル(例えば、ポリエチレングリコール、脂肪酸エステルおよび誘導体、ならびにヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびヒアルロン酸等の親水性ポリマー)等の賦形剤を含むことができる。
【００２２】
皮膚送達系としては、例えば、水性および非水性ゲル、クリーム、複合エマルション、ミクロエマルション、リポソーム、軟膏、水性および非水性溶液、ローション、エアロゾル、炭化水素塩基および粉末が挙げられ、可溶化剤、浸透エンハンサー(例えば、脂肪酸、脂肪酸エステル、脂肪族アルコールおよびアミノ酸)、および親水性ポリマー(例えば、ポリカーボフィルおよびポリビニルピロリドン)等の賦形剤を含むことができる。1つの実施形態においては、医薬品として許容される担体はリポソームまたは経皮エンハンサーである。
【００２３】
再構成可能な送達系のための溶液、懸濁液および粉末としては、懸濁剤(例えば、ゴム、キサンタン、セルロースおよび糖)、湿潤剤(例えば、ソルビトール)、可溶化剤(例えば、エタノール、水、PEGおよびプロピレングリコール)、界面活性剤(例えば、ラウリル硫酸ナトリウム、Spans、Tweens、およびセチルピリジン)、防腐剤および耐酸化剤(例えば、パラベン、ビタミンEおよびC、ならびにアスコルビン酸)、凝結防止剤およびコーティング剤等のビヒクルが挙げられる。
【００２４】
本明細書において使用される「有効な量」とは、眼疾患またはこの合併症に冒されている患者を治療するのに十分な量を意味する。
【００２５】
本明細書において使用される疾患を「治療すること」とは、疾患の進行を緩やかにすること、停止することまたは逆転することを意味する。
【００２６】
(好ましい実施態様)
本発明を例示するために、リチウムを使用する緑内障のための光線療法が例として使用されるが、緑内障の治療またはリチウムを使用する治療に限定されるものとして解釈されるべきものではない。この目的は眼治療のためのリチウムの制御された送達を達成することにある。リチウムイオンを運ぶ薬剤送達系を含む無傷で安定なリチウムプロドラッグは、それが暗所ではリチウムの不活性形態であるが、UVまたは可視光線の照射により活性なリチウムイオンを放出する様に設計される。リチウムイオンは、暗所において薬剤送達系によりカプセル化することもできれば、好ましくは薬剤送達系にキレートすることもできる。リチウムプロドラッグは不活性形態で体全体に存在することができ、外部光線と直接接触する眼においてのみ治癒作用を有する。この方法は活性投与量を下げることができ、利用可能な治療を現に妨げている望ましくない副作用を最小限にすることができる。プロドラッグは経口で、局所にまたは注射で送達することができる。
【００２７】
薬剤送達系は、キレート部分に結合したまたは導入された感光性部分から成る。感光性部分における放射線誘発変化は、キレート部分の結合性に可逆的にまたは不可逆的に影響を及ぼすことができる。例えば、照射により薬剤送達系においては2種類の変化が存在できる:
1. 感光性部分は異性化を受けて薬剤送達系において全体的な構造変化を引き起し、これによってキレート部分の結合能力にハンディキャップを付ける;または
2. 感光性部分はキレート部分の外側に電子密度を移動させてキレート部分にその結合能力を喪失させる。
【００２８】
これらの実施例は概念を例示するために示されるが、決して本発明を限定しようとするものではない。系は、感光性部分が任意の放射線のタイプへの暴露によってキレート部分の結合能力に可逆的にまたは不可逆的に影響を及ぼすことができる様に設計することができる。
【００２９】
好ましくは、キレート部分はクラウンエーテルもしくはその誘導体の1つ、またはアザ-クラウンエーテルもしくはその誘導体の1つである。異なる環サイズのクラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテルまたはこれらの誘導体は、例えば、異なる金属イオンに対する選択的結合のために選択することができる。しかしながら、キレート部分の選択は環状化合物に限定されない。
【００３０】
好ましくは、感光性部分は、クラウンエーテル誘導体の電子密度を変更することのできる共役分子、またはクラウンエーテル誘導体の環サイズを変更することができ、これによってその選択的結合能力に影響を及ぼすことのできる光異性体である。感光性部分は必ずしも共役でなければならないものではなく、キレート部分の電子密度を変更する能力を有さねばならないものでもなく、また光異性化を受けることができなければならないものでもない。
【００３１】
この目的のために、薬剤送達系は、便利のために以降においては感光性リチウムイオノホア(X)またはリガンド(X)として参照される。感光性リチウムイオノホア(X)またはリガンド(X)においてキレートしたリチウムイオンを含むプロドラッグは、便利のために以降においてはリチウム錯体(X)として参照される。
【００３２】
(実施例1)
感光性リチウムイオノホア(1)/リガンド(1)
感光性リチウムイオノホア(1)/リガンド(1)は、ジアゼン架橋クラウンエーテルであり(Shinkai、1980)、感光性部分はジアゼンまたはアゾ-ベンゼン誘導体であり、キレート部分はジアザ-18-クラウン-6エーテルである。ジアゼン部分は、暗所でEまたはトランス構造を取り入れ、クラウンエーテルはリチウムイオンにキレートする。数秒間近-UV光線に暴露すると、ジアゼン部分は光異性化を受けてZまたはシス構造を取り入れてクラウンエーテル部分の環拡大を引き起し、これによってリチウムイオンを放出する(図1)。異なるサイズの異なるジアゼンまたはクラウンエーテルまたはジアザ-クラウンエーテルあるいはジアゼン架橋クラウンエーテルは、感光性リチウムイオノホア(1)/リガンド(1)と同じ方法において機能すると考えられる(図2)。
【００３３】
ジアゼン架橋クラウンエーテルの誘導体(図2)は、任意のサイズおよびジアゼンにおけるR1〜R3および/またはR'1〜R'3および/またはX1および/またはX2基(ここで、R1、R2、R3、R'1、R'2、R'3、X1およびX2は同じか異なり、それぞれ、フェニル環または置換フェニル環の全部もしくは一部、水素;ハロゲン、ヒドロキシル基、ならびに非置換または置換低級アルキル、シクロアルキル、アリール、アシル、アルコキシ、アシルアミノ、アラルキル、シアノカルボキシル、チオ、ビニル、スチリル、アルコキシカルボニル、カルバモイル、アミノカルボニル、フェノキシカルボニルからなる群から選択され、置換基は、前記列挙の金属、水素、ハロゲンおよびヒドロキシル基、ならびに認知された供与体および受容体基であり、該置換基は一緒に結合して任意の数の構成員を有する置換または非置換、飽和または不飽和環を形成してもよい)のクラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテルを含んでもよい。
【００３４】
(実施例2)
感光性リチウムイオノホア(2)
感光性リチウムイオノホア(2)/リガンド(2)は、クロメンを含むクラウンエーテルであり(Stauffer、1997)、感光性部分はクロメン誘導体であり、キレート部分はベンゾ-15-クラウン-5エーテルである。暗所で、ベンゾ-クラウンエーテルはリチウムイオンにキレートする。数秒から数分間近-UV光線に暴露すると、クロメン部分はベンゾ-クラウンエーテルから電子密度を引き出してクラウンのその金属イオン結合応力を喪失させる(図3)。異なるサイズのクラウンエーテルを含むクロメン系のその他の誘導体は、感光性リチウムイオノホア(2)/リガンド(2)と同じ方法において機能すると考えられる(図4)。
【００３５】
本発明は、眼疾患を治療するために、光に暴露すると活性成分を放出する感光性プロドラッグを用意する工程、医薬品として許容されるビヒクル中のプロドラッグを対象に投与する工程、および対象の眼を外部光源に暴露してプロドラッグに活性成分を放出させる工程を含む、患者における眼疾患を治療する方法を提供する。
【００３６】
本発明は、さらに、プロドラッグが不活性形態で体全体に存在し、外部光線と直接接触する場合にのみ眼において治癒作用を有する上記方法を提供する。
【００３７】
本発明は、さらに、緑内障の治療またはプロドラッグがリチウムプロドラッグである上記方法を提供する。リチウムプロドラッグは、リチウムに対するキレート部分に結合したまたは導入された感光性部分を含む薬剤送達系を含んでもよい。
【００３８】
本発明は、さらに、リチウムプロドラッグにおけるリチウムイオンが暗所でキレート化され、照射により放出される上記方法を提供する。プロドラッグは感光性部分およびキレート部分を含んでもよく、感光性部分は照射においてリチウムイオンに対するキレート部分の結合能力に不可逆的にまたは可逆的に影響を及ぼす。プロドラッグは、さらに、放出可能な活性剤を含む。放出可能な活性剤はリチウムであってもよい。リチウムは光への暴露により放出されてもよい。感光性部分はキレート部分に結合されてもよくまたは導入されてもよい。感光性部分はキレート部分の結合性に不可逆的にまたは可逆的に影響を及ぼしてもよい。感光性部分はジアゼンまたはその誘導体またはクロメンまたはその誘導体であってもよい。キレート部分はクラウンエーテルまたはその誘導体、アザ-クラウンエーテルまたはその誘導体であってもよい。
【００３９】
感光性部分は照射により異性化を受けてもよく、これによりキレート部分の構造およびサイズを変化させてキレート部分にリチウムイオンを結合するためのその能力を喪失させる。感光性部分は、また照射によりキレート部分から電子密度を引き出し、これによりキレート部分にリチウムイオンを結合するためのその能力を喪失させる。
【００４０】
本発明は、さらに、眼疾患が緑内障であり、プロドラッグがリチウムを放出し、プロドラッグが患者に注射で投与される上記方法を提供する。
【００４１】
本発明は、さらに、プロドラッグが、クロメンまたはジアゼン誘導体を含むクラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテルからリチウムを放出する上記方法を提供する。
【００４２】
本発明は、さらに、プロドラッグが患者の眼を除く体において不活性のままである上記方法を提供する。
【００４３】
本発明は、さらに、リチウムイオンがクラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテル誘導体にキレートして、光への暴露によりリチウムを放出するキレート部分を含むキレート化リチウムを形成する上記方法を提供する。
【００４４】
本発明は、さらに、リチウムイオンが、ジアゼンまたはクロメン誘導体を含むクラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテルに可逆的に結合してリチウム放出クロメンまたはジアゼン化合物を形成し、リチウムが、患者の眼を光に暴露すると放出される上記方法を提供する。
【００４５】
本発明は、さらに、感光性部分が照射で異性化を受け、これによってキレート部分の構造および/またはサイズを変化させてキレート部分にリチウムイオンを結合するためのその能力を喪失させる上記方法を提供する。
【００４６】
本発明は、さらに、感光性部分が照射によりキレート部分から電子密度を引き出し、これによりキレート部分にリチウムイオンを結合するためのその能力を喪失させる上記方法を提供する。
【００４７】
本発明は、さらに、リチウムイオンがクラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテル含有化合物によりキレート化される、リチウムイオン-ジアゼンまたはクロメン誘導体を含む注射可能な化合物を含む、緑内障の治療のための組成物を提供する。
【００４８】
本発明は、さらに、医薬品として許容される担体中の、クラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテル部分を介してクロメンまたはジアゼン誘導体に結合したリチウムイオンを含む感光性部分を含む、緑内障の治療のための組成物を提供する。
【００４９】
本発明は、また、感光性部分およびキレート部分を含むプロドラッグであって、光に暴露することにより、感光性部分が対象に対するキレート部分の結合性に影響を及ぼすプロドラッグの有効量を投与する工程、および対象の眼を光に暴露して眼疾患を治療することのできる活性剤の放出を引き起す工程を含む、対象における眼疾患を治療する方法を提供する。眼疾患は緑内障であってもよい。薬剤組成物は、静脈内に、局所に、経口で、または患者の眼に直接に投与されてもよい。対象は人間であってもよい。
【００５０】
本発明は、さらに、少なくとも1つのリチウムイオンおよびリチウムイオンがクラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテル部分によりキレート化されるクラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテル誘導体から形成されるキレートの有効量を含む、緑内障の治療のための組成物を提供する。
【００５１】
最後に、本発明は、クラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテル含有クロメンまたはジアゼン誘導体においてキレートしたリチウムイオンを含む注射可能な化合物を含む、緑内障の治療のための組成物を含む遮光アンプルまたはシリンジおよび患者に対するその投与のための指示書を含む緑内障の治療のためのキットを提供する。
【００５２】
実施例3および4において使用されるプロドラッグは、リチウムイオンが感光性リチウムイオノホア(1)/リガンド(1)においてキレート化されているリチウム錯体(1)である。また、対アニオンとして作用する塩素アニオンも存在する。
【００５３】
(実施例3)
リチウム錯体(1)で処理された緑内障モデル
この実験ではネズミを3つのグループに分けた:プラセボ群(12時間光に暴露)、暗所(24時間暗闇)群および光(12時間光に暴露)群。暗所群および光群に、85μg/kgLiClの投与量当量で、腹腔内注射により連続して14日間、リチウム錯体(1)を与えた。次いで、ネズミを処分して網膜を用意し、網膜神経節細胞を数えた。
【００５４】
結果は、プラセボおよび暗所群は、約6〜7%の網膜神経節細胞の喪失であったが、12時間光暴露群のデータは、上記2つの群とは統計的に顕著な差を有することを示した(図5)。12時間光暴露群では網膜において必然的な網膜神経節細胞の喪失は存在しなかった。したがって、神経保護効果は、光群におけるリチウム錯体(1)での治療に対して観察された。
【００５５】
(実施例4)
リチウム錯体(1)の1/10投与量で処理された緑内障モデル
この実験は、実施例3において記載された3つのグループに加えて、特別なグループ、1/10投与量群を含む。1/10投与量群のネズミに、元の投与量の1/10、すなわち8.5μg/kgLiClの投与量当量でリチウム錯体(1)を与え、実施例3における光群と同じ条件下で12時間光に暴露する。
【００５６】
結果は、1/10投与量群が実施例3における光群と同様の神経保護効果を示すことを示した。1/10投与量群および元の投与量を使用する光群との間に神経保護効果について統計的に顕著な差は存在しなかった(図6)。また、1/10投与量群は、網膜における網膜神経節細胞の喪失を必然的に示さなかった。
【００５７】
(実験の詳細)
(SDネズミにおける緑内障モデルおよび網膜神経節細胞の死)
250〜300gの体重の成体の雌のSDネズミを使用する。全ての動物は、全ての操作に対して、キシラジン/ケタミン混合物またはペントバルビトンで麻酔する。
【００５８】
実験的緑内障を各動物の右眼において誘発し、左眼は対照として使用する。右眼の強膜上および辺縁静脈は、アルゴンレーザーを使用して(コヒーレント、出力、1V;スポット、50〜100μmおよび持続時間、0.1秒)光凝固する(Siu et al., 2002; Ji et al., 2003)。2つの強膜上静脈上に約15〜20のスポットおよび辺縁静脈の周りに60のスポットを適用する。同じ設定で2番目のレーザー治療をその後7日適用する。この方法は、動物における正常の1.5倍を超える眼圧を常に高める。
【００５９】
それぞれのネズミの両眼のIOPを、処置前および処置後は週に一度Tonopen XL眼圧計を使用して測定する。IOPの10回の測定の平均をそれぞれの眼に対して得る。
【００６０】
動物を、最初のレーザー後2、4または8週間、各時間点において6匹の動物で生存させる。処分前の1週間、重複皮質の除去後に両方の上丘の表面に6%Fluoro-Gold(FG)を適用する。FGは、網膜神経節細胞(RGC)の軸索末端により捕捉され、両方の網膜における細胞体に逆行的に運ばれる。
【００６１】
適当な生存時間で動物をキシラジン/ケタミン混合物の過剰投与量で処分する。両眼を摘出し、4%パラホルムアルデヒドで60分間固定する。完全に標本化された網膜を用意し、FG標識化されたRGCを、蛍光顕微鏡を使用してカウントする。RGCは、網膜の視神経円板から周辺境界までの各象眼の中線に沿って500μm間隔で接眼グリッド(200×200μm)の下でカウントする。RGCの平均密度を全体の網膜、すなわち中央の網膜(視神経円板から1〜1.5mm)および周辺網膜(視神経円板から3.5〜4mm)に対して計算する。RGCの密度変化を、同じ動物のレーザー処理された対側の対照眼と比較したRGCの喪失割合として表示する。
【００６２】
結果は、2、4および8週の動物においてそれぞれに、約13%、21%および25%のRGCの喪失が存在することを示す。したがって、我々は、RGCの死と一致するネズミにおける慢性緑内障モデルを作り出した。
【００６３】
(塩化リチウムまたは感光性リチウム化合物で処理した緑内障)
右眼の緑内障を誘発させて、この動物に、リチウム(LiCl、Sigma、St. Louis、USA; 滅菌水における85μg/kg)またはリチウム錯体(1)(2mLのSigma C5135 Cremophor、1mLのエタノールおよび36mLの滅菌水における63.5または6.35mg/kg(85または8.5μg/kg LiClに対応する)を、毎日2回、14日間腹腔内注射する。動物を14日で処分した(n=グループ当たり8匹)。緑内障および対照の網膜を適当な生存時間で除去し、上述の3つの方法で処理した。必要に応じて、早い時間点を使用する。
【００６４】
(網膜神経節細胞の細胞死のメカニズム)
アポトーシスが緑内障モデルにおける細胞死の主たるメカニズムである場合、およびLiがアポトーシスを阻止するかどうかを検討するために、TUNEL法、DAPI核染色法およびCleaved Caspase-3免疫組織化学を、RGCのアポトーシスを定量的に分析するために使用する。上記の様に緑内障を誘発した右眼を有するネズミを用意する。レーザー凝固後の初期状態を検討するために、動物を最初のレーザー後に2、4、8および14日間生存させる(グループ毎に各時間点に対してn=3)。適当な生存時点で動物を潅流し、両眼を除去し、パラフィン包埋のために準備する。網膜の放射連続断面(5μm)を得て、隣接断面をTUNEL法、DAPI核染色法およびCleaved Capase-3免疫組織化学で処理する。結果は、多数の細胞がその後の時間点で観察されるさらなるアポトーシス細胞を伴う時間依存方法において網膜神経節細胞層においてアポトーシスを受けることを示す。
【００６５】
(参考文献)
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【図面の簡単な説明】
【００６６】
【図１】感光性リチウムイオノホア(1)/リガンド(1)、暗所においてリチウムイオンを結合し、照射でリチウムイオンを放出するジアゼン架橋クラウンエーテル(Shinkai、1980)を示す図である。
【図２】異なるサイズの異なるジアゼンまたはジアゼン-クラウンエーテルおよび感光性リチウムイオノホア(1)/リガンド(1)と同じ方法において機能すると考えられるジアゼン架橋クラウンエーテルの誘導体を含む系を示す図である。
【図３】感光性リチウムイオノホア(2)/リガンド(2)、暗所においてリチウムイオンを結合し、照射でリチウムイオンを放出するクロメンを含むクラウンエーテル(Stauffer、1997)を示す図である。
【図４】感光性リチウムイオノホア(2)/リガンド(2)と同じ方法において機能すると考えられる異なるサイズのクラウンエーテル含むクロメン系の誘導体を示す図である。
【図５】リチウム錯体(1)で処理されたネズミの3つの異なるグループにおける網膜神経節細胞喪失の割合を示す結果を示す図である。
【図６】リチウム錯体(1)を使用する投与量実験における網膜神経節細胞喪失の割合を示す結果を示す図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【手続補正書】
【提出日】平成18年5月22日(2006.5.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
a)眼疾患を治療するために、光に暴露すると活性成分を放出する感光性プロドラッグを用意する工程、
b)医薬品として許容される担体中の該プロドラッグを対象の眼に投与する工程、および
c)該対象の眼を外部光源に暴露して該プロドラッグに該活性成分を放出させる工程
を含む、対象における網膜神経節細胞の変性を保護する方法。
【請求項２】
前記網膜神経節細胞の変性が眼疾患により引き起される、請求項1に記載の方法。
【請求項３】
前記眼疾患が緑内障である、請求項2に記載の方法。
【請求項４】
前記プロドラッグがリチウムを放出する、請求項1に記載の方法。
【請求項５】
前記プロドラッグが、該プロドラッグを対象の血流中に導入することにより対象の眼に投与される、請求項1に記載の方法。
【請求項６】
前記プロドラッグが、クロメン、ジアゼンまたはその誘導体のクラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテル部分からリチウムを放出する、請求項1に記載の方法。
【請求項７】
前記プロドラッグが、対象の眼に入る光への暴露によってリチウムを放出する、請求項5に記載の方法。
【請求項８】
前記リチウムイオンが、クラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテル部分にキレートして、光への暴露によりリチウムイオンを放出するキレート化リチウム化合物を形成する、請求項4に記載の方法。
【請求項９】
前記リチウムイオンが、クラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテル部分を介してジアゼンまたはクロメン誘導体に可逆的に結合してリチウムイオン放出クロメンまたはジアゼン誘導体を形成することにより、該リチウムイオンが、前記対象の眼の光への暴露により放出される、請求項4に記載の方法。
【請求項１０】
クロメンまたはジアゼンまたはその誘導体である錯体、あるいはリチウムイオンがクラウンエーテルまたはアザクラウンエーテル部分から放出される錯体から放出されるリチウムの有効量を含む、網膜神経節細胞の変性の保護のための組成物。
【請求項１１】
前記網膜神経節細胞の変性が、緑内障の症状に起因するか緑内障の症状である、請求項10に記載の組成物。
【請求項１２】
経口で投与されてもよい形態で提供される、請求項10に記載の組成物。
【請求項１３】
請求項10に記載の組成物を含む遮光アンプルまたはシリンジ、および対象へのその投与のための指示書を含む緑内障の治療のためのキット。
【請求項１４】
次の構造：
【化１】
2008524268.tif 000017
(式中、Qは任意のサイズのクラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテルであり、
R1、R2、R3、R'1、R'2、R'3、X1およびX2は同じか異なり、それぞれ、フェニル環または置換フェニル環の全部もしくは一部、水素;ハロゲン、ヒドロキシル基、ならびに非置換または置換低級アルキル、シクロアルキル、アリール、アシル、アルコキシ、アシルアミノ、アラルキル、シアノカルボキシル、チオ、ビニル、スチリル、アルコキシカルボニル、カルバモイル、アミノカルボニル、フェノキシカルボニルからなる群から選択され、置換基は、前記列挙の金属、水素、ハロゲンおよびヒドロキシル基、ならびに認知された供与体および受容体基であり、
該置換基は一緒に結合して任意の数の構成員を有する置換または非置換、飽和または不飽和環を形成してもよい)
のいずれか1つを有する化合物。
【請求項１５】
次の構造：
【化２】
2008524268.tif 000018
(式中、Qは任意のサイズのクラウンエーテルまたはアザ-クラウンエーテルであり、XはHまたはt-ブトキシ-である)
を有する化合物。
【請求項１６】
プロドラッグを得るためにリチウムを請求項14に記載の組成物に可逆的に結合する工程、緑内障の治療を必要とする患者の眼に対して医薬品として許容されるビヒクル中の緑内障を治療するのに有効な該プロドラッグの量を投与する工程、および患者の眼を外部光源に暴露して該リチウムを該患者の眼に放出する工程を含む、緑内障の治療方法。
【請求項１７】
プロドラッグを得るためにリチウムを請求項15に記載の組成物に可逆的に結合する工程、緑内障の治療を必要とする患者の眼に対して医薬品として許容されるビヒクル中の緑内障を治療するのに有効な該プロドラッグの量を投与する工程、および患者の眼を外部光源に暴露して該リチウムを該患者の眼に放出する工程を含む、緑内障の治療方法。
【国際調査報告】
2008524268.tif 000019
2008524268.tif 000020
2008524268.tif 000021
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