(57)【要約】本発明は、食品からコレステロールを除去するにおいて、吸着剤でβ−シクロデキストリン（以下β−ＣＤとする）を使用する方法に関するものである。より詳細には、β−ＣＤを架橋剤で結合させて架橋化したβ−ＣＤを製造した後、そのβ−ＣＤをコレステロールが含有された食品に添加してコレステロールを除去する方法と、コレステロールが吸着されたβ−ＣＤに有機溶媒を添加してβ−ＣＤを再生してリサイクルする方法に関するものである。本発明は、牛乳、クリーム、ラード、卵黄などに含有されたコレステロールを架橋化したβ−ＣＤで処理して、コレステロール除去率を最適化した乳製品、肉製品、卵製品などを提供することができ、また架橋化されたβ−ＣＤを再生してリサイクルすることができる。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
β−シクロデキストリンに架橋剤を添加して架橋反応させることを特徴とする架橋化β−シクロデキストリンの製造方法。
【請求項２】
架橋剤が、アジピン酸、リン、酸化塩素、３メタリン酸ソーダ、ホルムアルデヒドの中から選択されたいずれかひとつであることを特徴とする、請求項１に記載の架橋化β−シクロデキストリンの製造方法。
【請求項３】
架橋化が、β−シクロデキストリンを精製水に懸濁させて洗浄する工程と、架橋剤を添加してアルカリ溶液でｐＨ１０に調整して常温で１６時間架橋反応させた後、酸性溶液でｐＨ５に調整する工程と、架橋化したβ−シクロデキストリン溶液をろ過及び水洗した後、乾燥する工程を含むことを特徴とする、請求項１に記載の架橋化されたβ−シクロデキストリンの製造方法。
【請求項４】
コレステロールが含有された食品に架橋化されたβ−シクロデキストリンを添加して反応させた後、分離してコレステロールを除去することを特徴とする、β−シクロデキストリンを使用した食品中のコレステロール除去方法。
【請求項５】
架橋化されたβ−シクロデキストリンをコレステロール含有食品に対して、０．５〜３０ｗｔ％添加することを特徴とする、請求項４に記載のβ−シクロデキストリンを使用した食品中のコレステロール除去方法。
【請求項６】
β−シクロデキストリンを添加した後、５〜５０℃で１〜４０分間、５０〜１，６００ｒｐｍで反応させてβ−シクロデキストリンに吸着したコレステロールを分離することを特徴とする、請求項４に記載のβ−シクロデキストリンを使用した食品中のコレステロール除去方法。
【請求項７】
コレステロールが含有された食品が、乳製品、肉製品または卵製品の中から選択されたいずれかひとつであることを特徴とする、請求項４に記載のβ−シクロデキストリンを使用した食品中のコレステロール除去方法。
【請求項８】
乳製品が、牛乳、クリーム、バター、アイスクリーム、ヨーグルトまたはチーズの中から選択されたいずれかひとつであることを特徴とする、請求項７に記載のβ−シクロデキストリンを使用した食品中のコレステロール除去方法。
【請求項９】
肉製品が、ラードまたはソーセージの中から選択されたいずれかひとつであることを特徴とする、請求項７に記載のβ−シクロデキストリンを使用した食品中のコレステロール除去方法。
【請求項１０】
卵製品が、家擒類の卵、卵黄またはマヨネーズであることを特徴とする、請求項７に記載のβ−シクロデキストリンを使用した食品中のコレステロール除去方法。
【請求項１１】
コレステロールを吸着したβ−シクロデキストリンに有機溶媒を添加して反応させて上澄み液を分離した後、乾燥させてβ−シクロデキストリンを再生することを特徴とする、架橋化β−シクロデキストリンの再生方法。
【請求項１２】
有機溶媒は、酢酸とイソプロパノール混合溶液を使用して再生することを特徴とする、請求項１１に記載の架橋化β−シクロデキストリンの再生方法。
【請求項１３】
コレステロールを吸着したβ−シクロデキストリンに有機溶媒を添加して４０〜６０℃で１〜３時間、５０〜１５０ｒｐｍで撹拌した後、室温で冷却させて上澄み液を分離及び乾燥してβ−シクロデキストリンを再生することを特徴とする、請求項１１に記載の架橋化β−シクロデキストリンの再生方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、食品からコレステロールを除去するにおいて、吸着剤にβ−シクロデキストリン（β−ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ、以下β−ＣＤと略称する）を使用する方法に関するもので、より詳細には、β−ＣＤを架橋剤で結合させて架橋化したβ−ＣＤを製造した後、そのβ−ＣＤをコレステロールを含有した食品に添加してコレステロールを除去する方法と、コレステロールが吸着したβ−ＣＤに有機溶媒を添加してβ−ＣＤを再生してリサイクルする方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
最近、西欧式食文化の増加によって、牛乳及び乳製品とその他の動物性食品の消費が非常に増加することによって、動物性食品中に内在するコレステロール含量が循環器系成人病と密接に係わるため、コレステロール含有量が絶えず問題視されている。
【０００３】
動物性食品のコレステロール含有量を詳しくみてみると、バターに２１９ｍｇ／１００ｇ、乳脂肪を３６％含んだクリームに１３７ｍｇ／１００ｇ、チェダーチーズに１０５ｍｇ／１００ｇ、クリームチーズに９５ｍｇ／１００ｇ、そしてブルーチーズに８７．５ｍｇ／１００ｇ、フェタチーズに１２２．９ｍｇ／１００ｇ、ラードに１１２ｍｇ／１００ｇ、卵黄に１，０５０ｍｇ／１００ｇが含有されている。
【０００４】
コレステロールの過多摂取による疾病を予防する方法としては、コレステロールが多量に含有された食品の摂取を減らすしかないので、乳製品を含んだ食品の中から物理的、化学的、生物学的方法でコレステロールを除去する研究が活発に進められている。
【０００５】
乳製品からコレステロールを除去する一番効果的な方法としては、吸着剤であるβ−ＣＤを使用する方法があり、この吸着剤はコレステロールと接触、結合して不溶性を有する複合体（ｃｏｍｐｌｅｘ）を形成するようになり、遠心分離のような方法で沈澱させることによってコレステロールを分離除去する。
【０００６】
β−ＣＤは、微生物から抽出したシクロデキストリン−グリコシルトランスフェラーゼ（ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ−ｇｌｙｃｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ）を使用して澱粉を分解した後、再合成する方法で生産されるので、安全性が高いことが知られている。したがって、β−ＣＤは食品中のコレステロール除去のための適切な物質であると考えられている（図１参照）。
【０００７】
β−ＣＤが多様な食品からコレステロールを９０％以上除去する利点がある一方、使い捨てによる経済的効率の低下と環境汚染を惹起させる問題を抱いている。そのため、β−ＣＤを回収して再使用する研究が進められていて、本発明では有機溶媒によるβ−ＣＤ回収方法を用いてβ−ＣＤをリサイクルした（図２参照）。前記の溶媒による方法は簡単で、経済的効率性があり、産業的に応用しやすいという長所がある。しかし、β−ＣＤの適用時、牛乳ではある程度の分離が可能だが、食品への使用頻度が高いクリームではβ−ＣＤの分離が難しく、クリームに残存するβ−ＣＤが少なくないため、クリームに使用したβ−ＣＤのリサイクルは容易ではない。
【０００８】
本発明と係わる従来技術としては、韓国特許公開第１９９９−００１５１９１号（クリームコレステロール除去方法）、韓国特許公開第１９９９−００１５１９２号（牛乳のコレステロール除去方法）、韓国特許公開第２００３−００３５４８３号（サイクロデキストリン誘導体が結合した固定体を使用したコレステロールの除去方法）、韓国特許公開第２００４−００５４３１９号（コレステロールが除去されたホイッピングクリームの製造方法）、韓国特許公開第２００３−００７８５３２号（チーズのコレステロール除去方法）、韓国特許公開第２００３−００３５３４１号（サイクロデキストリン誘導体が固体基質に結合した固定体及びその製造方法）などがあるが、本発明とは技術的構成が異なるものである。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、β−ＣＤは多様な食品からコレステロールを９０％以上除去する利点がある一方、１回使用後に廃棄されるため環境汚染と経済性などの問題点を抱いている、そのような欠点を補うためにβ−ＣＤを架橋化する研究を行なった。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、β−ＣＤをリサイクルするためにβ−ＣＤを架橋化する方法と、一度使用したβ−ＣＤを有機溶媒反応によってβ−ＣＤを再生してそれをリサイクルすることにある。
【００１１】
したがって本発明の目的は、前記のような架橋剤で架橋させたβ−ＣＤをコレステロールを含有した食品に処理してコレステロール除去の最適条件を確立し、架橋剤で架橋させたβ−ＣＤのリサイクル率を最大化し、また架橋化β−ＣＤで処理した牛乳、クリーム、ラード、卵黄を使用して製造した乳製品、肉製品、卵製品などのコレステロール除去率を最大化することにある。
【００１２】
本発明の第１側面である架橋化β−シクロデキストリンの製造方法は、β−シクロデキストリンに架橋剤を添加して架橋反応させる工程を含む。
【００１３】
前記で架橋剤は、アジピン酸、リン、酸化塩素、３メタリン酸ソーダ、ホルムアルデヒドの中から選択したいずれか一つを使用することができる。
【００１４】
前記でβ−シクロデキストリンの架橋化は、β−シクロデキストリンを精製水に懸濁させて洗浄する工程と、架橋剤を添加してアルカリ溶液のｐＨ１０に調整して常温で１０〜２０時間、より好ましくは１６時間架橋反応させた後、酸性溶液のｐＨ５に調整する工程と、架橋化したβ−シクロデキストリン溶液をろ過及び水洗した後、乾燥する工程を含む。
【００１５】
本発明の第２側面のβ−シクロデキストリンを使用した食品中のコレステロール除去方法は、コレステロールを含有した食品に架橋化したβ−シクロデキストリンを添加して反応させた後、分離してコレステロールを除去することができる。
【００１６】
前記で架橋化したβ−シクロデキストリンをコレステロール含有食品に対して、０．５〜３０ｗｔ％添加することができる。
【００１７】
前記でβ−シクロデキストリンを添加した後、５〜５０℃で１〜４０分間、５０〜１，６００ｒｐｍで反応させて、β−シクロデキストリンに吸着したコレステロールを分離することができる。
【００１８】
前記でコレステロールが含有された食品は、乳製品、肉製品または卵製品の中から選択されるいずれか一つである。
【００１９】
前記コレステロールを含有した食品の中で乳製品は、牛乳、クリーム、バター、アイスクリーム、ヨーグルトまたはチーズの中から選択されるいずれか一つで、肉製品はラード、ソーセージの中から選択されるいずれか一つで、卵製品は家擒類の卵、卵黄またはマヨネーズである。
【００２０】
本発明の第２側面の架橋化β−シクロデキストリンは、コレステロールが吸着したβ−シクロデキストリンに有機溶媒を添加して反応させて上澄み液を分離した後、乾燥させてβ−シクロデキストリンを再生することができる。
【００２１】
前記で有機溶媒は、酢酸とイソプロパノールが１：９〜９：１の体積割合、より好ましくは３：１の体積割合で混合したものを使用し、β−シクロデキストリンを再生することができる。その他に、ブタノール、ヘキサンまたはエチルアルコールにβ−ＣＤの再生効果があるが、食品に使用するには不適切であるので、酢酸とイソプロパノールの混合物を使用した。
【００２２】
前記でコレステロールを吸着したβ−シクロデキストリンに有機溶媒を添加して、４０〜６０℃で１〜３時間、５０〜１５０ｒｐｍで撹拌した後、室温に冷却させて上澄み液を分離及び乾燥してβ−シクロデキストリンを再生することができる。
【発明の効果】
【００２３】
本発明は、β−ＣＤを架橋剤で結合させて架橋化したβ−ＣＤを製造し、コレステロールを含有した食品に添加すると、牛乳の場合最大９３％、クリームの場合９１％、ラードの場合９３％、卵黄の場合９５％までコレステロールの除去が可能である。
【００２４】
またコレステロールが吸着したβ−ＣＤに有機溶媒を添加してβ−ＣＤを再生して、牛乳に添加時は、コレステロール除去率が７回再使用時に９０％、１０回再使用時に８１％まで除去することができ、クリームに添加時は６回で９０％、１０回で８３％まで除去することができる。
【００２５】
したがって、従来β−ＣＤを使い捨てすることにより発生した環境汚染を防止することができ、β−ＣＤを再使用することによる費用節減可能な経済的なコレステロール除去方法を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２６】
β−ＣＤの架橋化は、β−ＣＤをホスホラス（ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｕｓ）、オキシクロライド（ｏｘｙｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ナトリウムトリメタホスファート（ｓｏｄｉｕｍ  ｔｒｉｍｅｔａｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、ホルムアルデヒド（ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ）、アジピン酸（ａｄｉｐｉｃ  ａｃｉｄ）等の架橋剤で製造することができる。これらの中でアジピン酸は、アメリカＦＤＡのＧＲＡＳ（一般的に安全な物質）に指定されていて食品に制限なしに使用することが可能で、国内食品添加物公典に登録されていて酸味料及び食品保存剤として使用されている。β−ＣＤとコレステロールの結合は、アルカリ状態でアジピン酸のような架橋剤が添加されると、二つのヒドロキシ基（−ＯＨ）が反応に関与して起きるようになる。すなわち、架橋結合はβ−ＣＤを構成する分子内でまたは隣接した位置にある分子間で化学的結合を形成して、β−ＣＤ粒子の構造を大きく強化させる。
【００２７】
その外の架橋剤としてホスホリルクルロライド（Ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ）またはホスホラスオキシクロライド（ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｕｓ  ｏｘｙｃｈｌｏｒｉｄｅ）を架橋剤に使用時、次のようなスキーム（１）によってβ−ＣＤを架橋結合させる。
【００２８】
【化１】
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【００２９】
その他にホルムアルデヒドを架橋剤に使用時、次のようなスキーム（２）によってβ−ＣＤを架橋結合させる。
【００３０】
【化２】
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【００３１】
コレステロール除去実験のために、牛乳は、乳脂肪含量が平均３．６％である市販乳を使用して、クリームは（株）ビンゴレから原乳供給を受け、クリーム分離器を使用して乳脂肪含有量が３６％であるクリームを生産して使用し、ラードはマジャン洞畜産物市場から購入して熱処理した後、油を抽出して実験に使用し、卵黄はヨンシン養鶏営農組合で生産した卵を購入して実験に使用した。
【００３２】
乳脂肪定量のために、試薬は、イソアミルアルコールと硫酸を使用し、検量線（ｓｔａｎｄａｒｄ  ｃｕｒｖｅ）を作成するために純度９９％のコレステロールと５α−コレスタン（５α−ｃｈｏｌｅｓｔａｎｅ，Ｓｉｇｍａ、米国）、β−ＣＤ（日本食品化学）、β−ＣＤ架橋化のために架橋剤としてアジピン酸（Ａｄｉｐｉｃ  Ａｃｉｄ、Ａｃｒｏｓ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ、米国）、β−ＣＤ再生のために純度９９．００％の酢酸とイソプロパノールを使用した。
【００３３】
乳脂肪定量は、ゲルベル（Ｇｅｒｂｅｒ）法で遠心分離して分離した脂肪をデバイダー（ｄｅｖｉｄｅｒ）を使用して測定した。
【００３４】
ＧＣで定量するために試料の中から１ｇを取ってスクリューキャップチューブ（ｓｃｒｅｗ  ｃａｐ  ｔｕｂｅ）に入れて、１ｍｌ内部標準物質５００μｌ（５α−コレスタン  １ｍｌ／ｍｌ  ９９．８％エタノール）と２Ｍエタノール性水酸化カリウム（ｅｔｈａｎｏｌｉｃ  ｐｏｔａｓｓｉｕｍ  ｈｙｄｒｏｘｉｄｅ）溶液５ｍｌを添加した後、よく混合した。６０℃の水槽で３０分間ゴム化した後、室温に冷却させた。そして、５ｍｌヘキサン（ｈｅｘａｎｅ）を添加してコレステロールを抽出し、これを４回繰り返し実施した。
【００３５】
抽出液を丸いフラスコ（ｒｏｕｎｄ  ｆｌａｓｋ）に入れて４０℃で減圧濃縮器で濃縮した後、１ｍｌヘキサンに溶解してマイクロチューブ（ｍｉｃｒｏｔｕｂｅ）に保管した。このように分離した抽出液２μｌを取ってＧＣに注入（ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）してコレステロールとコレスタン（ｃｈｏｌｅｓｔａｎｅ）のとどまる時間とそれぞれのピーク（ｐｅａｋ）面積によって定量分析を実施した。
【００３６】
（発明のためのモード）  
本発明の第１側面である架橋化β−シクロデキストリンの製造方法は、β−シクロデキストリンに架橋剤を添加して架橋反応させる工程を含む。
【００３７】
前記で架橋剤は、アジピン酸、リン、酸化塩素、３メタリン酸ソーダ、ホルムアルデヒドの中から選択したいずれか一つを使用することができる。
【００３８】
前記でβ−シクロデキストリンの架橋化は、β−シクロデキストリンを精製水に懸濁させて洗浄する工程と、架橋剤を添加してアルカリ溶液のｐＨ１０に調整して常温で１０〜２０時間、より好ましくは１６時間架橋反応させた後、酸性溶液のｐＨ５に調整する工程と、架橋化したβ−シクロデキストリン溶液をろ過及び水洗した後、乾燥する工程を含む。
【００３９】
本発明の第２側面のβ−シクロデキストリンを使用した食品中のコレステロール除去方法は、コレステロールを含有した食品に架橋化したβ−シクロデキストリンを添加して反応させた後、分離してコレステロールを除去することができる。
【００４０】
前記で架橋化したβ−シクロデキストリンをコレステロール含有食品に対して０．５〜３０ｗｔ％添加することができる。
【００４１】
前記でβ−シクロデキストリンを添加した後、５〜５０℃で１〜４０分間、５０〜１，６００ｒｐｍで反応させて、β−シクロデキストリンに吸着したコレステロールを分離することができる。
【００４２】
前記でコレステロールを含有した食品は、乳製品、肉製品または卵製品の中から選択されたいずれか一つである。
【００４３】
前記コレステロールを含有した食品の中で乳製品は、牛乳、クリーム、バター、アイスクリーム、ヨーグルトまたはチーズの中から選択されたいずれか一つで、肉製品はラード、ソーセージの中から選択されたいずれか一つで、卵製品は家擒類の卵、卵黄またはマヨネーズである。
【００４４】
本発明の第２側面の架橋化β−シクロデキストリンは、コレステロールを吸着したβ−シクロデキストリンに有機溶媒を添加し、反応させて上澄み液を分離した後、乾燥させてβ−シクロデキストリンを再生することができる。
【００４５】
前記で有機溶媒は、酢酸とイソプロパノールが１：９〜９：１の体積割合、より好ましくは３：１の体積割合で混合したものを使用してβ−シクロデキストリンを再生することができる。その他にブタノール、ヘキサンまたはエチルアルコールは、β−ＣＤの再生効果があるが食品に使用するには不適切なので酢酸とイソプロパノールの混合したものを使用した。
【００４６】
前記でコレステロールを吸着したβ−シクロデキストリンに有機溶媒を添加して４０〜６０℃で１〜３時間、５０〜１５０ｒｐｍで撹拌した後、室温に冷却して上澄み液を分離及び乾燥してβ−シクロデキストリンを再生することができる。
【００４７】
以下、本発明の内容を実施例を通じて具体的に説明する。しかし、これらは本発明をより詳細に説明するためのもので、本発明の権利範囲がこれらによって限定されるものではない。
【００４８】
実施例１：β−ＣＤの架橋化方法
β−ＣＤ１００ｇを蒸留水８０ｍｌに懸濁させて常温で２時間撹拌して水洗後、様々な架橋剤の中から選択したアジピン酸をβ−ＣＤに２％添加した。そこに１Ｍ  ＮａＯＨ溶液を加えてｐＨを１０に調整して常温で１６時間撹拌しながら架橋反応を進行させた後、酢酸を使用してｐＨ５に調整した。
【００４９】
この溶液をろ紙（Ｗｈａｔｍａｎ  Ｎｏ．２）でろ過した後、１５０ｍｌの精製水でそれぞれ３回水洗してろ過し、架橋化したβ−ＣＤを６０℃で約２０時間乾燥後、１００メッシュ篩を通過させてβ−ＣＤを架橋化させた。
【００５０】
実施例２：架橋化β−ＣＤによる牛乳のコレステロール除去
１）架橋化β−ＣＤの濃度
本実験では、一番効果的な架橋化β−ＣＤ添加量を選択するために、室温で水１００ｇ当たり１．８５ｇしか溶解されないβ−ＣＤ溶解度を考慮して、牛乳に対する架橋化β−ＣＤ添加量を０．５％、１．０％、１．５％、２．０％、２．５％にして試料にそれぞれ添加した後、撹拌速度８００ｒｐｍ、撹拌温度１０℃、撹拌時間１０分、遠心分離速度１７５×ｇ、遠心分離時間１０分、遠心分離温度１０℃に一定に維持しながら比較実験を行なった。
【００５１】
コレステロール除去率を実験した結果を、表１に示す。アジピン酸で架橋させたβ−ＣＤの量が牛乳の１％の時、９３．１３％でコレステロール除去率が一番高く、０．５％の時は８５．０５％、１．５％の時は９３．０２％、２．０％の時は９２．６４％、そして２．５％の時は９２．５８％と現われた。
【００５２】
【表１】
2008546884.tif 000005
【００５３】
２）撹拌温度
牛乳は一般的に品質低下を防ぐために４℃以下で保存して流通するので、そのように低い撹拌温度で、アジピン酸で架橋させたβ−ＣＤ添加による牛乳のコレステロール除去効果を調べるために、撹拌温度を変化させて除去率を実験した結果を表２に示す。
【００５４】
温度が２０℃の時、９３．０８％でコレステロール除去率が一番高く、０℃では８５．１４％、５℃では８５．３３％、１０℃では９２．３８％、そして１５℃では９２．５６％と現われた。本実験では、２０℃で一番高いコレステロール除去率を示したが牛乳は４℃で一番高い新鮮度を維持するので、牛乳の新鮮度を維持しながらコレステロールを除去させることができる最適温度は１０℃であると判断される。
【００５５】
【表２】
2008546884.tif 000006
【００５６】
３）撹拌時間
架橋化β−ＣＤを使用して牛乳からコレステロール除去時の撹拌時間を変化させてコレステロール除去率を実験した結果を表３に示す。
【００５７】
撹拌時間５分が９２．４８％で、コレステロール除去率が一番高く、１分が８６．９４％、１０分が９２．０１％、１５分が９０．４４％、そして２０分が９０．４２％と現われた。また撹拌時間を一定水準以上にずっと長くした時、コレステロール除去にはほとんど変化が見られず、β−ＣＤとコレステロールが吸着するのに大きな影響を与えないと判断される。
【００５８】
【表３】
2008546884.tif 000007
【００５９】
４）撹拌速度
架橋化β−ＣＤを使用して牛乳からコレステロール除去時の撹拌速度を変化させて除去率を実験した結果を表４に示す。
【００６０】
撹拌速度が４００ｒｐｍの時９２．０５％でコレステロール除去率が一番高く、６００ｒｐｍの時９１．６３％、８００ｒｐｍの９０．８１％、１，０００ｒｐｍの８８．７２％、そして１，２００ｒｐｍの時８７．２２％と現われた。上の実験で撹拌速度を８００ｒｐｍ以上に増加させた時、コレステロール除去率がむしろ減少する現象は、安定した状態で結合されていたβ−ＣＤとコレステロール複合体が過度な撹拌速度によって再び不安定な状態に転換したためとみられる。
【００６１】
本実験からアジピン酸で架橋させたβ−ＣＤによる牛乳のコレステロール除去最適条件を捜すために、多様な方法で実験した結果、アジピン酸で架橋させたβ−ＣＤを１％添加して、撹拌温度１０℃、撹拌時間５分、撹拌速度４００ｒｐｍの時、平均９２．３９％の除去率を示した。
【００６２】
【表４】
2008546884.tif 000008
【００６３】
実施例３：架橋化β−ＣＤによるクリームのコレステロール除去
１）架橋化β−ＣＤの濃度
架橋化β−ＣＤをクリームに添加した量を変化させてコレステロール除去率を実験した結果を表５に示す。
【００６４】
アジピン酸で架橋させたβ−ＣＤの量がクリームの１０％の時、９０．７２％でコレステロール除去率が一番高く、１％の時は８１．７３％、５％の時は８５．３２％、１５％の時は９０．５４％、そして２０％の時は８９．９８％と現われた。
【００６５】
【表５】
2008546884.tif 000009
【００６６】
２）撹拌温度
アジピン酸で架橋させたβ−ＣＤを使用してクリームからコレステロール除去時の撹拌温度を変化させて除去率を実験した結果を表６に示す。
【００６７】
温度が４０℃の時９１．０３％でコレステロール除去率が一番高く、４５℃では９０．５６％、５０℃では８８．７２％、５５℃では８６．３２％、そして６０℃では８５．０１％と現われた。本実験でクリームは普通４℃以下で保存されて流通するが、温度が非常に低くなればクリームの粘度が高くなる現象を示し、４０℃未満では実験進行が困難であったので、クリームがコレステロールを吸着することができる最適温度は４０℃と判断される。また撹拌温度が増加するほどコレステロール除去率が減少する現象は、高い温度でクリームの脂肪が分離して上層に存在するため、β−ＣＤと接触する機会が減るためであると考えられる。
【００６８】
【表６】
2008546884.tif 000010
【００６９】
３）撹拌時間
架橋化β−ＣＤを使用してクリームからコレステロール除去時の撹拌時間を変化させて除去率を実験した結果を表７に示す。
【００７０】
撹拌時間が３０分の時９１．２０％でコレステロール除去率が一番高く、１０分の時８４．２７％、２０分の時８５．０５％、４０分の時９０．９８％、そして５０分の時９０．６４％と現われた。本実験からアジピン酸で架橋させたβ−ＣＤを使用してコレステロール除去時の撹拌時間を一定水準以上にさらに増加させても、コレステロール除去にはほとんど類似の効率を示し、β−ＣＤとコレステロールが吸着するのに大きい影響を与えないと考えられる。
【００７１】
【表７】
2008546884.tif 000011
【００７２】
４）撹拌速度
架橋化β−ＣＤを使用してクリームからコレステロール除去時の撹拌速度を変化させて除去率を実験した結果を表８に示す。
【００７３】
撹拌速度が１，４００ｒｐｍの時９２．７４％でコレステロール除去率が一番高く、８００ｒｐｍの時８５．３２％、１，０００ｒｐｍの時８７．４９％、１，２００ｒｐｍの時９０．９１％、そして１，６００ｒｐｍの時８８．８２％と現われた。本実験で撹拌速度は架橋化β−ＣＤとコレステロール結合時の撹拌速度を増加させるほど、高いコレステロール除去率を示し、撹拌速度１，６００ｒｐｍ以上では速すぎる撹拌速度によって牛乳と同様にクリームの脂肪が分離して上層に存在するようになることによって、β−ＣＤと接触する機会が減ったためであると考えられる。
【００７４】
【表８】
2008546884.tif 000012
【００７５】
本実験で架橋化β−ＣＤによるクリームのコレステロール除去最適条件を捜すために多様な方法で実験した結果、アジピン酸で架橋させたβ−ＣＤを１０％使用して撹拌温度４０℃、撹拌時間３０分、撹拌速度１，４００ｒｐｍの時、平均９１．４２％のコレステロール除去率を示した。
【００７６】
実施例４：架橋化β−ＣＤによるラードのコレステロール除去
１）架橋化β−ＣＤの濃度
本実験では一番効果的な架橋化β−ＣＤ添加量を選択するために、ラードに対する架橋化β−ＣＤの添加量を１％、３％、５％、７％、９％にして試料にそれぞれ添加した後、撹拌速度１５０ｒｐｍ、撹拌温度３０℃、撹拌時間１時間、遠心分離速度２４０×ｇ、遠心分離時間１５分、遠心分離温度２７℃に一定に維持しながら比較実験をした。コレステロール除去率を実験した結果を表９に示す。
【００７７】
アジピン酸で架橋させたβ−ＣＤの量がラードの５％の時９３．０２％でコレステロール除去率が一番高く、１％の時は６４．０５％、３％の時は８５．１３％、７％の時は９２．９２％、そして９％の時は９２．５８％と現われて、５％のβ−ＣＤ添加時がラードからコレステロール除去に最適であることが分かった。
【００７８】
【表９】
2008546884.tif 000013
【００７９】
２）撹拌温度
ラードは一般的に１０℃以下では早い時間内に脂肪が固化するので、脂肪を液状に維持しながら品質低下を防ぐために１０℃以上の様々の温度で撹拌実験をしてみた。アジピン酸で架橋させたβ−ＣＤ添加によるラードのコレステロール除去効果を調べるために撹拌温度を変化させて除去率を実験した結果を表１０に示す。
【００８０】
温度が３０℃の時９２．３８％でコレステロール除去率が一番高く、１０℃では９０．１１％、２０℃では９０．３２％、４０℃では９２．３１％、そして５０℃では９２．０８％と現われた。
【００８１】
【表１０】
2008546884.tif 000014
【００８２】
３）撹拌時間
架橋化β−ＣＤを使用してラードからコレステロール除去時の撹拌時間を変化させてコレステロール除去率を実験した結果を表１１に示す。
【００８３】
撹拌時間が１時間の時９２．０１％でコレステロール除去率が一番高く、０．５時間の時８７．１４％、１．５時間の時９１．４７％、２．０時間の時９１．４８％を示した。他の色々条件に比べて撹拌時間は一定水準以上にさらに増加させた時、コレステロール除去にはほとんど変化が見られず、β−ＣＤとコレステロールが吸着するのに大きな影響を与えないと考えられる。
【００８４】
【表１１】
2008546884.tif 000015
【００８５】
４）撹拌速度
架橋化β−ＣＤを使用してラードからコレステロール除去時の撹拌速度を変化させて除去率を実験した結果を表１２に示す。
【００８６】
撹拌速度が１５０ｒｐｍの時９３．１１％でコレステロール除去率が一番高く、５０ｒｐｍで８９．０５％、１００ｒｐｍで９０．４８％、２００ｒｐｍで９３．００％、そして２５０ｒｐｍで９２．８５％と現われた。撹拌速度の増加は、安定した状態に結合されていたβ−ＣＤとコレステロール複合体が過度な撹拌速度によって再び不安定な状態に転換されることを留意しなければならない。
【００８７】
本実験からアジピン酸で仮橋させたβ−ＣＤによるラードのコレステロール除去最適条件を捜すために多様な方法で実験した結果、アジピン酸で架橋させたβ−ＣＤを５％添加して撹拌温度３０℃、撹拌時間１時間、撹拌速度１５０ｒｐｍの時、平均９２．６３％の除去率を示した。
【００８８】
【表１２】
2008546884.tif 000016
【００８９】
実施例５：架橋化β−ＣＤによる卵黄のコレステロール除去
１）架橋化β−ＣＤの濃度
本実験では卵黄の過度なコレステロール含量によって、架橋化β−ＣＤ添加量を１０％、１５％、２０％、２５、３０％にして試料にそれぞれ添加した後、撹拌速度８００ｒｐｍ、撹拌温度４０℃、撹拌時間３０分、遠心分離速度５２０×ｇ、遠心分離時間１０分、遠心分離温度２０℃に一定に維持しながら比較実験をした。コレステロール除去率を実験した結果を表１３に示す。
【００９０】
アジピン酸で架橋させたβ−ＣＤの量が卵黄の２５％の時９５．７５％でコレステロール除去率が一番高く、１０％の時は７８．５３％、１５％の時は８２．７３％、２０％の時は９３．２８％、そして３０％の時は９３．６８％と現われた。ゆえに、経済性観点から２０％が最適であると判断される。
【００９１】
【表１３】
2008546884.tif 000017
【００９２】
２）撹拌温度
卵黄のコレステロール除去効果を調べるために撹拌温度を変化させて除去率を実験した結果を表１４に示す。
【００９３】
温度が３０℃では８２．６９％、３５℃では８７．９９％、４０℃では９０．０５％、４５℃では８８．０７％、そして５０℃では８８．１５％と現われた。本実験では４０℃で一番高いコレステロール除去率を示したので、コレステロールを除去させることができる最適温度は４０℃であると考えられる。
【００９４】
【表１４】
2008546884.tif 000018
【００９５】
３）撹拌時間
架橋化β−ＣＤを使用して卵黄からコレステロール除去時の撹拌時間を変化させてコレステロール除去率を実験した結果を表１５に示す。
【００９６】
撹拌時間３０分のとき９１．４９％でコレステロール除去率が一番高く、１０分で８４．５４％、２０分で８８．０７％、４０分で９１．３９％、そして５０分で７８．９２％と測定された。したがって、コレステロール除去のための最適の撹拌時間は３０分であると分かった。
【００９７】
【表１５】
2008546884.tif 000019
【００９８】
４）撹拌速度
架橋化β−ＣＤを使用して卵黄からコレステロール除去時の撹拌速度を変化させて除去率を測定した結果を表１６に示す。
【００９９】
撹拌速度が８００ｒｐｍで９１．６４％でコレステロール除去率が一番高く、４００ｒｐｍで８５．１０％、６００ｒｐｍで９０．５０％、１，０００ｒｐｍで８８．５９％、そして１，２００ｒｐｍで７５．８９％と現われた。
【０１００】
【表１６】
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【０１０１】
５）希釈倍数
架橋化β−ＣＤを使用して卵黄からコレステロール除去時の蒸留水の希釈倍数を変化させて除去率を測定した結果を表１７に示す。
【０１０２】
同量の蒸留水で希釈した時が９４．５５％でコレステロール除去率が一番高く、０．５倍の時７６．５２％、１．５倍の時９３．２４％、２倍の時９３．５３％、そして３倍の時８４．６１％と現われた。
【０１０３】
【表１７】
2008546884.tif 000021
【０１０４】
６）遠心分離速度
架橋化β−ＣＤを使用して卵黄からコレステロール除去時の遠心分離速度を変化させて除去率を測定した結果を表１８に示す。
【０１０５】
４６０×ｇで遠心分離の時９０．９２％でコレステロール除去率が一番高く、４００×ｇで８９．６０％、５２０×ｇで８９．３０％、５８０×ｇで８９．２７％、そして６４０×ｇで８７．８８％でコレステロールを除去させるための最適の遠心分離速度は４６０×ｇであると考えられる。
【０１０６】
本実験からアジピン酸で架橋させたβ−ＣＤによる卵黄のコレステロール除去最適条件を捜すために多くの条件で実験した結果、アジピン酸で架橋させたβ−ＣＤを２０％添加して同量の蒸留水を混合した卵黄を撹拌温度４０℃、撹拌時間３０分、撹拌速度８００ｒｐｍ、遠心分離を４６０×ｇで処理する時、平均９２．７０％の除去率を示した。
【０１０７】
【表１８】
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【０１０８】
実施例６：架橋化β−ＣＤの再生及びリサイクル
牛乳とクリームから架橋化β−ＣＤのリサイクル率を調べるための実験で、コレステロールを吸着したβ−ＣＤを集めて有機溶媒（酢酸：イソプロパノール＝３：１）と６：１の割合で一定に混合した後、よく溶解すようにウルトラソニッククリーナ（ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ  ｃｌｅａｎｅｒ）で１０分間処理した。溶解した試料を撹拌温度５０℃、撹拌時間２時間、撹拌速度１００ｒｐｍの一定条件で撹拌をしながら、２０分間隔で試料を取り出して５分間充分に溶解させた。
【０１０９】
撹拌した試料を室温で冷却させて６３０×ｇで５分間遠心分離してβ−ＣＤを沈澱させて、上澄み液を分離した後、沈澱したβ−ＣＤをドライオーブン（ｄｒｙ  ｏｖｅｎ）で５０℃で６時間乾燥してβ−ＣＤをリサイクルするように処理した。
【０１１０】
一度使用したβ−ＣＤを有機溶媒で再生した後、牛乳に対して架橋化β−ＣＤのリサイクル率（ｒｅｃｙｃｌｅ）を調べるために実験した結果を表１９に示す。
【０１１１】
１回リサイクルした結果、架橋化β−ＣＤリサイクル率が１００％以上と現われ、５回リサイクル率も１００％以上、５回使用時までほとんど１００％に近いリサイクル率を示した。９回リサイクル時に９０．９４％以上のリサイクル率を示し、１０回リサイクル時には８８．１３％と現われた。実験結果、牛乳での架橋化β−ＣＤのリサイクル率は９７．３０％と現われた。
【０１１２】
【表１９】
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【０１１３】
実施例７：再生された架橋化β−ＣＤの再使用によるクリームのコレステロール除去
実施例６と同様に再生したβ−ＣＤを使用し、クリームに対する架橋化β−ＣＤのリサイクル率を表２０に示す。
【０１１４】
一回目リサイクルした結果１００％以上のリサイクル率を示し、三回目リサイクル時１００．０２％で三回使用するまでほとんど１００％のリサイクル率を示した。十回リサイクルした結果９０．２７％のリサイクル率を示して、クリームでの架橋化β−ＣＤリサイクル率は平均９７．８２％で非常に高く現われた。
【０１１５】
【表２０】
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【０１１６】
実施例８：ヨーグルト
＊コレステロール除去のための架橋化β−ＣＤのヨーグルトに応用するために架橋化β−ＣＤ１％を牛乳に添加して撹拌（１０℃、５分、４００ｒｐｍ）し、遠心分離（２５℃、１０分、１４０×ｇ）した。５０℃で１，０００ｐｓｉの圧力で均質した後、４０℃で脱脂乳３．７％とスターターカルチャー（ｓｔａｒｔｅｒ  ｃｕｌｔｕｒｅ）０．０２％を添加した。インキュベーター（Ｉｎｃｕｂａｔｏｒ）に入れて４３℃で６時間醗酵させた後、１０℃で一日間安定化させて４℃で保存した。その中の１ｇを取ってＧＣを使用してコレステロールを定量した結果、９１．３８％のコレステロールが除去された。
【０１１７】
実施例９：ホイッピングクリーム（ｗｉｐｐｉｎｇ  ｃｒｅａｍ）
原乳を７２℃で１５秒間殺菌した後、５５℃でクリーム分離して乳脂肪含量３６％のクリームに標準化させた。５℃でオーバーナイト（ｏｖｅｒｎｉｇｈｔ）を実施した後、架橋化β−ＣＤ１０％を添加して撹拌（４０℃、３０分、１４００ｒｐｍ）して、遠心分離（２５℃、１０分、１４０×ｇ）した。乳化剤（α−セルロース０．２％、アビセル（ａｖｉｃｅｌ）ｌ０．２％、アルギン酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ  ａｌｇｉｎａｔｅ）０．２％、シュガーエステル（ｓｕｇａｒ  ｅｓｔｅｒ）０．１％、スクロース（ｓｕｃｒｏｓｅ）０．３％）処理した後、１００ｐｓｉの圧力で６０℃で均質化した。均質が終わったクリームを４℃に冷却した後、２４時間熟成させた。ＥＧＳタイプ０６（Ｅ３２９０  Ｍｏｄｅｌ  ２９６、ドイツ）を使用してクリーム内に泡がたつようにした。その中の１ｇを取ってＧＣを使用してコレステロールを定量した結果、８８．９４％のコレステロールが除去された。
【０１１８】
実施例１０：バター（ｂｕｔｔｅｒ）
乳脂肪含量３６％のクリームに架橋化β−ＣＤを１０％添加して撹拌（４０℃、３０分、１４００ｒｐｍ）と、処理されたクリームからコレステロールと架橋化β−ＣＤを除去するために、遠心分離（２５℃、１０分、１４０×ｇ）した。クリームを約一日間熟成させた後、バター撹乳器（ｃｈｕｒｎ）に入れて８〜１０℃に合わせた後、一定した速度で撹乳（ｃｈｕｒｎｉｎｇ）を実施した。バター粒子が生成するとより遅い速度で約１０回回転させた後、撹乳を止めてバターミルクを排出させた。排出した量と同じ程度冷却水を入れて遅い速度で２回水洗をした。バター粒子を集めてバターの中の水気が完全に抜けるようにかき混ぜながらバター重量の１％で加塩した。バターをフレームに入れて形を作った後、真空包装して−２０℃で冷却保管した。この中の１ｇを取ってＧＣを使用してコレステロールを定量した結果、９１．１０％のコレステロールが除去された。
【０１１９】
実施例１１：チェダーチーズ（ｃｈｅｄｄａｒ  ｃｈｅｅｓｅ）
原乳を７２℃で１５秒間殺菌した後、５５℃でクリームを分離した。分離したクリームを乳脂肪含量３６％で標準化させて、架橋化β−ＣＤ１０％を添加した後、撹拌（４０℃、３０分、１４００ｒｐｍ）処理してコレステロールを除去した後、遠心分離（２５℃、１０分、１４０×ｇ）した。コレステロールを除去したクリームを脱脂乳と混合して１，０００ｐｓｉの圧力で均質を実施して、３２℃でスターターカルチャー（ｓｔａｒｔｅｒ  ｃｕｌｔｕｒｅ）を添加（０．００４％）して均一にかき混ぜて３０分間放置した。１０％ＣａＣｌ２（０．０３％）とレネット（ｒｅｎｎｅｔ：０．０１９％）を添加した後、４５分間静置させた。カードが適切に形成されると切断した後、５分間カードが塊にならないように徐々に撹拌した後、カード加温のために３０分間一定温度間隔で３８℃まで昇温した。適正酸度が０．１５〜０．１７％になると乳清を放出した。カードはチーズバット（ｖａｔ）両側に集めて積んだ後、１５分間隔でチェダーリング（Ｃｈｅｄｄａｒｉｎｇ）して酸度が０．５％になるまで繰り返した。約１時間後に作業が終わると、カードを粉砕した後、カード量の２．０％で加塩し、２．５ｋｇ／ｃｍ２の圧力でチーズをオーバーナイト（ｏｖｅｒｎｉｇｈｔ）した。その後、一定サイズに切って真空包装して７℃で熟成した。この中の１ｇを取ってＧＣを使用してコレステロールを定量した結果、８８．２４％のコレステロールが除去された。
【０１２０】
実施例１２：モッツァレラチーズ（ｍｏｚｚａｒｅｌｌａ  ｃｈｅｅｓｅ）
乳脂肪含量３．６％の原乳を７２℃で１５秒間殺菌して、５５℃でクリームを分離してクリームを乳脂肪含量３６％に標準化させて、架橋化β−ＣＤ１０％添加して撹拌（４０℃、３０分、１，４００ｒｐｍ）処理した後、遠心分離（２５℃、１０分、１４０×ｇ）した。処理されたクリームと脱脂乳を混合した後、５５℃で７０ｋｇ／ｃｍ２の圧力で均質化を実施して２０℃に冷却させてスターターカルチャー（ｓｔａｒｔｅｒ  ｃｕｌｔｕｒｅ）０．００４％とＣａＣｌ２  ０．０３％を添加した。３０分間静置した後にレネット（ｒｅｎｎｅｔ）０．０１９％を添加して、３０分後にカード（ｃｕｒｄ）が形成されるとカードナイフ（ｃｕｒｄ  ｋｎｉｆｅ）で切断後、１５分間静置した。４５℃で４０分間加熱して乳清の酸度が０．１８〜０．１９％になると乳清を排出した。乳清の酸度が０．２３％に至ると排出した乳清と同量の４５℃の水で水洗して、０．５％に至るまで１５分ごとに引っくり返して、７５℃に加熱した。約１０分間カードをつかんで広げ、２時間４℃に冷却させた。２３％の塩水に２時間浸けた後、真空包装して４℃で冷蔵保管した。この中の１ｇを取ってＧＣを使用してコレステロールを定量した結果、８６．９８％のコレステロールが除去された。
【０１２１】
実施例１３：クリームチーズ（ｃｒｅａｍ  ｃｈｅｅｓｅ）
原乳を７２℃で１５秒間殺菌して、５５℃でクリームを分離した。分離したクリームを乳脂肪含量３６％に標準化させて架橋化β−ＣＤ１０％を添加して撹拌（４０℃、３０分、１４００ｒｐｍ）した後、遠心分離（２５℃、１０分、１４０×ｇ）した。クリームを乳脂肪含量１１％に標準化させて５０℃で６８０ｐｓｉの圧力で均質した。３０℃に冷却させて０．０５％のスターターカルチャー（ｓｔａｒｔｅｒ  ｃｕｌｔｕｒｅ）を添加して３０分間静置をした後、０．００５％のレネット（ｒｅｎｎｅｔ）と０．０３％のＣａＣｌ２を入れて１時間放置した後、カッティングナイフ（ｃｕｔｔｉｎｇ  ｋｎｉｆｅ）で切断して、３０℃でｐＨ４．７になるまで約６時間放置した。乳清のｐＨが４．７になった時、４５℃で２０分間熱処理をして、乳清を放出した後、それぞれ１時間、２時間後にターニング（ｔｕｒｎｉｎｇ）を実施した。２８℃で４時間放置して、２４時間２０℃でオーバーナイト（ｏｖｅｒｎｉｇｈｔ）した。１％加塩後、４℃で保存した。この中の１ｇを取ってＧＣを使用してコレステロールを定量した結果、９１．３６％のコレステロールが除去された。
【０１２２】
実施例１４：ブルーチーズ（ｂｌｕｅ  ｃｈｅｅｓｅ）
原乳を７２℃で１５秒間殺菌して、５５℃でクリームを分離した。クリームを乳脂肪含量３６％に標準化させて、架橋化β−ＣＤを添加して撹拌（４０℃、３０分、１４００ｒｐｍ）と遠心分離（２５℃、１０分、１４０×ｇ）した。処理したクリームを５００ｐｓｉで一次均質をして１０００ｐｓｉで二次均質をした。脱脂乳とクリームを混合してスターター（ｓｔａｒｔｅｒ）を２％添加して一時間静置させて、０．０１５４％のレネット（ｒｅｎｎｅｔ）を入れて３０分間静置させておいた後、カードナイフで切断した。３０℃で乳清の酸度が０．０３％で上昇するまで加温し、加温時、５分ごとに１回ずつかき混ぜて乳清を排出する直前に３３℃に温度を上昇させた。乳清を排出した後、２％の塩と０．０６１％のペニシリウム・ロクフォルティ（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｒｏｑｕｅｆｏｒｔｉ）を添加し、２時間の間、１５分に１回ずつチーズを反転させた。オーバーナイト（Ｏｖｅｒｎｉｇｈｔ）後に加塩ク処理して、５日間４回以上加塩した。６日後には洗浄してクライオバック（ｃｒｙｏｖａｃ）で包んでチーズの両面に０．３ｃｍの針を使用して穴を開けた後、熟成させた。チーズが適当に熟成した時、被覆物を除去してアルミホイルでチーズを密封した後、２．２℃で保存した。この中の１ｇを取ってＧＣを使用してコレステロールを定量した結果、８９．２６％のコレステロールが除去された。
【０１２３】
実施例１５：フェタチーズ（ｆｅｔｔａ  ｃｈｅｅｓｅ）
原乳を７２℃で１５秒間殺菌した後、５５℃でクリームを分離した。分離したクリームを乳脂肪含量３６％に標準化させて架橋化β−ＣＤ１０％を添加して撹拌（４０℃、３０分、１４００ｒｐｍ）した後、遠心分離（２５℃、１０分、１４０×ｇ）した。処理したクリームを乳脂肪含量５％に標準化させた後、５００ｐｓｉで均質した。３２℃に冷却させてスターター（ｓｔａｒｔｅｒ）０．０２％を添加した後、１時間後に０．０２％レネット（ｒｅｎｎｅｔ）を添加して３０分間静置させた。カードを切断して２０分間静置した後、２０分間よくかき混ぜた。カードの  ｐＨが４．６になるまで放置して、容器に入れて２０時間圧搾した。適当なサイズに切った後、２３％の塩水に一日間浸けておいて、最後に１４％のあら塩をチーズの上に振りまいて２〜３ヶ月間熟成させた。この中の１ｇを取ってＧＣを使用してコレステロールを定量した結果、９０．８６％のコレステロールが除去された。
【０１２４】
実施例１６：アイスクリーム
乳脂肪含量３６％のクリームに架橋化β−ＣＤ１０％添加して撹拌（４０℃、３０分、１４００ｒｐｍ）処理した後、遠心分離（２５℃、１０分、１４０×ｇ）した。処理したクリームを５０℃に維持された配合タンク（ｍｉｘ  ｔａｎｋ）に入れて脱脂粉乳、砂糖、安定剤（ｃａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌ  ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、水を添加した。混合物を７２℃で１５秒間殺菌した後、６０℃で二工程（１工程；１７５ｋｇ／ｃｍ２、２工程；３５ｋｇ／ｃｍ２）にわたって均質化した。
【０１２５】
これを４℃に冷却させて２４時間熟成した。アイスクリーム冷凍機で−３．８℃に７分間冷却させた後、−２０℃で包装して−２６℃で２時間硬化を実施した。これを−２０℃で２週間保存した後、貯蔵した。この中の１ｇを取ってＧＣを使用してコレステロールを定量した結果、８８．４６％のコレステロールが除去された。
【０１２６】
実施例１７：ソーセージ
ソーセージの原料にラード（ｌａｒｄ）を使用し、ラード１００ｇに５％の架橋化β−ＣＤを添加した後、ラードと同量の水を添加して試料を準備した。２７℃を維持した後、１５０ｒｐｍで１時間撹拌して２３０×ｇで１５分間遠心分離してコレステロールが除去されたラードを抽出した。処理されたラードに２％のＮａＣｌと発色剤（０．１％のＫＮＯ３と０．０１％のＮａＮＯ２混合）を添加して４℃で３日間保管した後、１０℃以下でグラインディング（ｇｒｉｎｄｉｎｇ）を実施した。冷却したボウル（ｂｏｗｌ）にラードを入れて氷水を２０％添加後、１０℃で１０分間カッティングした。そこに香辛料、結着剤、調味料、抗酸化剤、食用色素を添加してよく混合した後、５％のとうもろこし澱粉を添加した。空気が混合しないように１０分間よく混合して粘性がでると混合を中断した。クレハロン（Ｋｕｒｅｈａｒｏｎ）ケーシングフィルムでキャスティング（ｃａｓｉｎｇ）した後、６３℃で３０分間加熱処理して４℃に冷却させて真空包装した。この中の１ｇを取ってＧＣを使用してコレステロールを定量した結果、９２．０２％のコレステロールが除去された。
【０１２７】
実施例１８：マヨネーズ
茶色卵から卵黄と卵白を分離した後、卵黄を５０メッシュ篩を通過させて卵黄膜及びカラザを除去した。同量の蒸留水で希釈した後、架橋化β−ＣＤ１０％を添加して２０℃で１０分間４００ｒｐｍで撹拌した後、２０℃で１０分間１４０×ｇの速度で遠心分離してβ−ＣＤとコレステロール複合体を除去した。コレステロールが除去された卵黄１４０ｇを撹拌機（ｂｌｅｎｄｅｒ）に入れて撹拌した後、少量の砂糖と塩を添加して撹拌した。同時に大豆油８００ｍｌと酢３５ｍｌを少しずつ交互に添加して乳化が完了すると、しばらくの間低速で撹拌してマヨネーズを製造した。この中の１ｇを取ってＧＣを使用してコレステロールを定量した結果、８７．９０％のコレステロールが除去された。
【産業上の使用可能性】
【０１２８】
本発明は、β−ＣＤを架橋剤で結合させて架橋化されたβ−ＣＤを製造してコレステロールが含有された食品に添加すると、牛乳の場合最大９３％、クリームの場合９１％、ラードの場合９３％、卵黄の場合９５％までコレステロールの除去が可能である。
【０１２９】
また、コレステロールが吸着したβ−ＣＤに有機溶媒を添加してβ−ＣＤを再生し、牛乳に添加時コレステロール除去率が７回再使用時９０％、１０回再使用時８１％まで除去することができ、クリームに添加時６回９０％、１０回８３％まで除去することができる。
【０１３０】
したがって、従来β−ＣＤを１回使用後に廃棄して発生した環境汚染を防止することができ、β−ＣＤを再使用することにより費用節減をすることができる経済的なコレステロール除去方法を提供する。
【０１３１】
本発明は、現代人が好んで食べている乳製品、肉製品、卵製品に架橋化されたβ−ＣＤを使用してコレステロールを除去して健康食品を提供する。
【図面の簡単な説明】
【０１３２】
【図１】β−ＣＤの化学構造である。
【図２】β−ＣＤがコレステロールを結合している状態を示した図である。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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