(57)【要約】  本発明は、動物、例えば、過体重または肥満の患者（例えば、ヒトまたはコンパニオン動物）において、体重及び／または体脂肪を減少させる方法、或いは、食用動物（例えば、ウシ、ニワトリ、ブタ）において赤身の肉を生産する手段、治療を必要とする患者において、PDE10阻害剤を（単独で又は他の治療剤とともに）投与することによって、インスリン非依存性糖尿病（NIDDM）、メタボリックシンドローム、または耐糖能障害を治療する方法、上記の治療的用途のためのキット、並びに上記の治療的用途のためのPDE10阻害剤を同定する方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
体脂肪または体重を減少させるため、或いはインスリン非依存性糖尿病、メタボリックシンドローム、または耐糖能障害を治療するために対象を治療する方法であって、治療を必要とする対象に治療的有効量のホスホジエステラーゼ１０（PDE10）アンタゴニストを投与することを含む、前記方法。
【請求項２】
前記対象が過体重である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記対象が肥満である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記PDE10アンタゴニストがPDE10選択的アンタゴニストである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記PDE10アンタゴニストが対象に経口投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記対象がヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記PDE10アンタゴニストがPDE10選択的であり、前記PDE10アンタゴニストが経口投与され、かつ前記対象がヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
さらに、第二の治療剤を対象に投与することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記第二の治療剤が抗肥満薬である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記抗肥満薬が以下の：リモナバント、オルリスタット、シブトラミン、ブロモクリプチン、エフェドリン、レプチン、シュードエフェドリン、ペプチドYY3-36、及びそのアナログから成る群から選ばれる、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記PDE10アンタゴニストが、以下の：
６，７−ジメトキシ−４−［８−（モルホリン−４−スルホニル）−３，４−ジヒドロ−１H−イソキノリン−２−イル］−キナゾリン；
４−（２−フルオロ−フェニル）−６，７−ジメトキシ−２−ピペラジン−１−イル−キナゾリン；
６，７−ジメトキシ−４−［３−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリン；
２−［４−（１−メチル−４−ピリジン−４−イル−１H−ピラゾール−３−イル）−フェノキシメチル］−キノリン；
２−［４−（４−ピリジン−４−イル−２H−ピラゾール−３−イル）−フェノキシメチル］−キノリン；及び
医薬として許容可能なその塩、或いは該化合物または該塩の水和物または溶媒和物からなる群から選ばれる、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
体脂肪または体重を減少させるため、或いはＮＩＤＤＭ、メタボリックシンドローム、または耐糖能障害を治療するために使用可能な作用物質を同定する方法であって、以下の：
（ｉ）ＰＤＥ１０アンタゴニスト候補を被験対象に投与し；そして
(ｉｉ）上記ＰＤＥ１０アンタゴニストが、被験対象における体脂肪または体重を減少させること、或いはＮＩＤＤＭ、メタボリックシンドローム、または耐糖能障害を治療することにおいて有効であるか否かを決定する、
を含む、前記方法。
【請求項１３】
さらに、前記ＰＤＥ１０アンタゴニスト候補を前記被験対象に投与する前に、前記ＰＤＥ１０アンタゴニスト候補をインビトロの試験において、ＰＤＥ１０アンタゴニスト活性について試験することを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
ＰＤＥ１０アンタゴニスト、及び対象において体脂肪または体重を減少させるため、或いはインスリン非依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）、メタボリックシンドローム、または耐糖能障害を治療するために該アンタゴニストを上記対象に投与するための指示書を含むキット。
【請求項１５】
前記ＰＤＥ１０アンタゴニストがＰＤＥ１０選択的アンタゴニストである、請求項１４に記載のキット。
【請求項１６】
前記ＰＤＥ１０アンタゴニストが、以下の：
６，７−ジメトキシ−４−［８−（モルホリン−４−スルホニル）−３，４−ジヒドロ−１H−イソキノリン−２−イル］−キナゾリン；
４−（２−フルオロ−フェニル）−６，７−ジメトキシ−２−ピペラジン−１−イル−キナゾリン；
６，７−ジメトキシ−４−［３−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリン；
２−［４−（１−メチル−４−ピリジン−４−イル−１H−ピラゾール−３−イル）−フェノキシメチル］−キノリン；
２−［４−（４−ピリジン−４−イル−２H−ピラゾール−３−イル）−フェノキシメチル］−キノリン；及び
医薬として許容可能なその塩、或いは該化合物または該塩の水和物または溶媒和物からなる群から選ばれる、請求項１４に記載のキット。
【請求項１７】
さらに、第二の治療剤を含む、請求項１４に記載のキット。
【請求項１８】
前記第二の治療剤が抗肥満薬である、請求項１７に記載のキット。
【請求項１９】
前記抗肥満薬が、以下の：リモナバント、オルリスタット、シブトラミン、ブロモクリプチン、エフェドリン、レプチン、シュードエフェドリン、ペプチドYY3-36、及びそのアナログから成る群から選ばれる、請求項１８に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、過体重または肥満の患者などの治療において、体重及び／または体脂肪を減少させるための方法、及びホスホジエステラーゼ10（PDE10）阻害剤を投与することによってメタボリックシンドローム、インスリン非依存性糖尿病、または耐糖能障害を治療する方法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
肥満または過体重と診断された個人は、冠動脈心疾患、脳卒中、高血圧、II型糖尿病、異脂肪血症、睡眠時無呼吸、骨関節炎、胆嚢疾患、うつ病および一定の形態の癌（例えば、子宮内膜、乳房、前立腺、及び結腸）などの他の健康状態を発生するリスクが高い。肥満の負の健康上の結果は、肥満を米国における予防できる死の第２の原因かつ社会に対して経済的及び精神的に顕著な影響を及ぼす公衆衛生上の主要な問題としている（例えば、McGinnis and Foege, JAMA 270: 2207-2212, 1993を参照のこと）。
【０００３】
今や、肥満はそれに結びつく健康上のリスクを低下させるための治療を必要とする慢性疾患として認識されている。体重減少自体は重要な治療結果であるが、肥満の管理の主要な目的のひとつは、循環器および代謝の数値を改善して、肥満に関連した罹患率及び死亡率を減少させることである。５〜１０％の体重減少が、血中グルコース、血圧、及び脂質濃度などの代謝及び循環器の数値を実質的に改善することができることが示された。したがって、５〜１０％の体重減少が罹患率及び死亡率を減少させることができると考えられている。
【０００４】
サイクリックヌクレオチドホスホジエステラーゼ（PDE）は、セカンドメッセンジャーであるcAMP（サイクリックアデノシン３’，５’−モノホスフェート）及びcGMP（サイクリックグアニン３’，５’−モノホスフェート）などのサイクリックヌクレオチドの加水分解を触媒する。したがって、PDEは、広く多様なシグナル伝達経路において中心的な制御の役割を演じる（Beavo, Physiol Rev. 75: 725-748, 1995）。例えば、PDEは、視覚（McLaughlin et al., Nat. Genet. 4; 130-134, 1993）、嗅覚（Yan et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92: 9677-81, 1995）、血小板凝集（Dickinson et al., Biochem. J. 323：371-377、1997）、アルドステロン合成（MacFarland et al., J. Biol. Chem. 266：136-142、1991）、インスリン分泌（Zhao et al, J. Clin. Invest. 102: 869-873, 1998）、T細胞活性化（Li et al., Science 283: 848-851, 1999）、及び平滑筋弛緩（Boolell et al., Int. J. Impot. Res. 8: 47-52, 1996; Ballard et al., J. Urol. 159: 2164-171, 1998）に関与するプロセスを仲介する。
【０００５】
PDEは、１１の主要な遺伝子ファミリーにさらに分けられる酵素のスーパーファミリーを形成する（Beavo, Physiol。Rev. 75: 725-748, 1995; Beavo et al, Mol. Pharmacol. 46: 399-405, 1994; Soderling et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95: 8891-8996, 1998; Fisher et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 246: 570-577, 1998; Hayashi et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 250: 751-756, 1998; Soderling et al., J. Biol. Chem. 273: 15553-58, 1998; Fisher et al., J. Biol. Chem. 273: 15559-15564, 1998; Soderling et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96: 7071-7076, 1996;及びFawcett et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA97：3702-3707、2000）。
【０００６】
各PDE遺伝子ファミリーは、独特の酵素特性及び薬理学的プロフィールによって機能的に識別されるホスホジエステラーゼをコードする。さらに、各ファミリーは異なる組織、細胞、及び細胞内発現パターンを示す（Beavo et al., Mol. Pharmacol. 46: 399-405, 1994; Soderling et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95: 8991-8996、1998; Fisher et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 246: 570-577, 1998: Hayashi et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 250: 751-756, 1998; Soderling et al., J. Biol. Chem. 273: 15553-15558, 1998; Fisher et al., J. Biol. Chem. 273: 15559-15564, 1998; Soderling et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96: 7071-7076, 1999; Fawcett et. al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97: 3702-3707, 2000; Boolell et al., Int. J. Impot. Res. 8: 47-52, 1996; Ballard et al., J. Urol. 159: 2164-2171, 1998; Houslay, Semin. Cell Dev. Biol. 9: 161-167, 1998及びTorphy et al., Plum. Pharmacol. Ther. 12: 131-135, 1999）。したがって、PDE酵素の1つのファミリーまたはサブファミリーを選択的に制御する化合物を投与することによって、細胞または組織特異的なやり方でcAMP及び／またはcGMPシグナル伝達を制御することが可能である。
【０００７】
PDE10は、アミノ酸配列情報及び特徴的な酵素活性に基づいて独特のPDEとして同定される。ESTデータベースのホモロジースクリーニングは、時にはPDE１０Aと称されるPDE10が、ホスホジエステラーゼのPDE遺伝子ファミリーの最初の、そしてこれまでのところ唯一のメンバーであることを明らかにした（Fujishige et al., J. Biol. Chem. 274: 18438-18445, 1999; Loughney et al., Gene 234: 109-117, 1999）。ヒト、ラット及びマウスの相同体がクローン化され、そしてN-末端スプライスバリアントがラット及びヒト遺伝子の両方について同定され（Kotera et al., Biochem. Biophs. Res. Commun. 261: 551-557, 1999; Fujishige et al., Eur. J. Biochem. 266: 1118-1127, 1999; Soderling et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96: 7071-7076, 1999及びLanfear and Robas, 米国特許出願公開第2004/0018542号）；種間で高度のホモロジーが存在する。PDE10は、cAMP及びcGMPをそれぞれAMPとGMPに加水分解する。
【０００８】
PDE10の発現についての最近のデータは、PDE10が哺乳動物において、他のPDEファミリーに比べて独特に局在化されることを示す。PDE10のためのメッセンジャーRNAは、睾丸及び脳において高度に発現される（Lanfear and Robas,米国特許出願公開第2004/0018542号；Fujishige et al., Eur. J. Biochem. 266: 1118-1127, 1999; Soderling et al, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96: 7071-7076, 1999; Loughney et al., Gene 234: 109-117, 1999）。PDE10アンチセンス標識されたマウス脳切片のオートラジオグラフは、高度に特異的なハイブリダイゼーションシグナルを表す。これまで、３つの領域：背側線条体（尾状核及び被殻）、腹側線条体（側坐核）及び嗅結節においては密な標識が見出されている。線条体及び側坐核内では、PDE10mRNAは、線条体の中型有棘ニューロンにおいて高度に発現され、これは、これらの構造において見出されるすべてのニューロンの約９５％を示す。標識の低い密度が、歯状回、海馬のCA層、及び小脳の顆粒細胞層を含む他の領域において注目される。
【０００９】
PDE10mRNAの局在領域とドパミン受容体の高い発現と古典的に結びついた領域の間には、非常によい対応関係がある。エマルジョンオートラジオグラフにおいて、銀粒子の密な取り込みが線条体、側坐核、及び嗅結節全体に見出され、そしてこれらの３つの領域における神経細胞体の大部分を覆うことが注目される。さらに、低いが測定可能なレベルのドパミン受容体を発現する領域も、それらの相対的なDA受容体密度と大まかに対応する粒子の沈着を示す。注目すべきことに、これらは、内側及び脳溝の前頭前野皮質並びに歯状回及び海馬のCA層を含む（Seeger et al., Brain Res. 985: 113-126, 2003）。
【００１０】
高いmＲＮＡレベルと一致して、高レベルのPDE10タンパク質が線条体（尾状核及び被殻）、側坐核及び嗅結節において示される。PDE10タンパク質は神経細胞体及び神経網全体に観察される。さらに、高レベルの、PDE10mRNAではなくPDE10が、線条体中型有棘ニューロンがそこへ投射する、内包、淡蒼球、脳脚内核及び黒質を含む脳の領域において観察される。PDE10タンパク質のこの高いレベルは、線条体中型有棘ニューロンの軸索及び末端から生じることができる（Seeger et al., Brain Res. 985: 113-126, 2003）。
【発明の開示】
【００１１】
発明の要約
本発明は、（単独で、または他の治療剤とともに）PDE10阻害剤を投与することによって、体重及び／又は体脂肪を減少させる方法、メタボリックシンドローム、インスリン非依存性糖尿病（NIDDM）、または耐糖能障害を治療する方法、並びに関連するキット、そして、上記の治療用途のためのPDE10阻害剤をスクリーニングする方法を提供する。
【００１２】
1つの好ましい実施態様において、本発明は、体脂肪または体重を減少させるため、或いはNIDDM、メタボリックシンドローム、または耐糖能障害を治療するために対象を治療する方法であって、それらを必要とする対象に治療的有効量のホスホジエステラーゼ１０（PDE10）アンタゴニストを投与することを含む方法を提供する。好ましい実施態様において、対象はヒトであり、該対象は過体重または肥満であり、該PDE10アンタゴニストはPDE10選択的アンタゴニスト、例えば、パパベリンまたは６，７−ジメトキシ−４−[８−（モルホリン−４−スルホニル）−3，４−ジヒドロ−１H−イソキノリン−２−イル］−キナゾリン、であり、及び／または該アンタゴニストは経口投与される。他の好ましい実施態様において、該方法は、第二の治療剤を対象に投与すること、好ましくはリモナバント（rimonabant）、オルリスタット（orlistat）、シブトラミン（sibutramine）、ブロモクリプチン（bromocriptine）、エフェドリン（ephedrine）、レプチン（leptin）、シュードエフェドリン（pseudoephedrine）などの抗肥満剤、またはペプチドYY3-36またはそのアナログを投与することをさらに含む。 
【００１３】
本発明の第２の側面は、体脂肪または体重を減少させるため、或いはNIDDM、メタボリックシンドロームまたは耐糖能障害を治療するために使用可能な作用物質を同定する方法であって、以下の：（ｉ）被験対象にＰＤＥ１０アンタゴニスト候補を投与し、そして（ｉｉ）該ＰＤＥ１０アンタゴニストが、被験対象において、体脂肪または体重を減少させるのに、或いはNIDDM、メタボリックシンドロームまたは耐糖能障害を治療するのに有効であるかを決定する、を含む方法である。関連する側面として、該方法はさらに、PDE10アンタゴニスト候補を被験対象に投与する前に、該PDE10アンタゴニスト候補をインビトロの試験においてPDE10アンタゴニスト活性について試験することを含む。他の好ましい実施態様においては、該被験対象は実験動物である。
【００１４】
本発明の側面として特徴的なのは、PDE10アンタゴニスト及び対象において体脂肪または体重を減少させるため、或いはNIDDM、メタボリックシンドロームまたは耐糖能障害を治療するために該アンタゴニストを対象に投与するための指示書を含むキットである。好ましくは、該PDE10アンタゴニストは、PDE10選択的アンタゴニスト、例えば、パパベリンまたは６，７−ジメトキシ−４−［８−（モルホリン−４−スルホニル）−３，４−ジヒドロ−１H−イソキノリン−２−イル］−キナゾリンである。他の好ましい実施態様においては、該キットはさらに、第二の治療剤、より好ましくはリモナバント、オルリスタット、シブトラミン、ブロモクリプチン、エフェドリン、レプチン、シュードエフェドリンなどの抗肥満剤、またはペプチドYY3-36、またはそのアナログを含む。
【００１５】
当業者は、本発明を記載するための本明細書及び添付の請求項において使用される用語を完全に理解するであろう。別に示されない限り、以下の用語はこのすぐ後に記載されるとおりである。
【００１６】
定義
「PDE10阻害剤」または「PDE10アンタゴニスト」によって、細胞中でのPDE10ポリペプチドの生理活性を減少または減弱する作用物質が意味される。かかる作用物質は、抗PDE10抗体などのタンパク質、PDE10アンチセンスまたはRNA干渉（RNAi）核酸などの核酸、アミノ酸、ペプチド、炭化水素、（有機または無機）小分子、或いは細胞中に存在するPDE10量を有効に減少させるかまたはPDE10ポリペプチドの酵素活性を減少させるかのいずれかによって、PDE10ポリペプチドの活性を低下させる任意の他の化合物または組成物を含んでよい。PDE10阻害剤である化合物は、該化合物のすべての溶媒和物、水和物、医薬として許容可能な塩、互変異性体、立体異性体、及びプロドラッグを含む。好ましくは、本発明において使用される小分子PDE10阻害剤は、１０μM未満、好ましくは１μM未満、そしてさらにより好ましくは０．１μM未満のIC50を有する。その発現を阻害するためのPDE10遺伝子またはRNAに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドは、標準的な技術によって作製される（例えば、Agrawal et al., Methods in Molecular Biology: Protocols for Oligonucleotides and Analogs, Vol.20, 1993を参照のこと）。同様に、細胞内でのPDE10産生を減少させるように機能するRNA干渉分子は、当業者に知られた標準的な技術によって生成されることができる（例えば、Hannon, Nature 418: 244-251, 2002: Shi, Trends in Genetics 19: 9-12, 2003; Shuey et al., Drug Discovery Today 7: 1040-1046, 2002を参照のこと）。PDE10阻害剤の例は、米国特許出願公開第2003/0032579号に記載のパパベリン、並びに２００４年２月１８日に出願された「キナゾリン及びイソキノリンのテトラヒドロイソキノリニル誘導体」と題する米国仮特許出願第60/466,639号に開示された化合物を含み、これらは本明細書中でさらに記載される。
【００１７】
本発明において使用される任意のPDE10アンタゴニスト（阻害剤）は、好ましくは、他のPDEのいくつかまたはすべてに対しても選択的であり、好ましくはPDE1A、PDE1B、PDE1C、PDE2、PDE3A、PDE3B、PDE4A、PDE4B、PDE4C、PDE4D、PDE5、PDE6、PDE7A、PDE7B、PDE8A、PDE8B、PDE9及び／又はPDE11に対して選択的である。
【００１８】
作用物質がPDE10活性を阻害する場合に、「選択的」PDE10阻害剤によって、１つ以上の他のPDEに対するKiよりも少なくとも１０倍低い、好ましくは少なくとも１００倍低いKiでPDE10活性を低下させる作用物質が意味される。好ましくは、かかる作用物質は医薬として許容可能な送達ビヒクルまたは担体と併合される。作用物質が細胞中でのPDE10の量を減少させる場合、「選択的」PDE10阻害剤によって、定量的PCRで測定して、細胞中のPDE10ポリペプチドを減少させるが、他の１つ以上のPDEを減少させない作用物質が意味される。
【００１９】
「減少したPDE10活性」は、細胞内での機能的PDE10ポリペプチドのレベルの低下を引き起こす、PDE10遺伝子機能の遺伝的破壊又は操作の結果として又はPDE10活性を阻害する薬理的作用物質の投与の結果としての、PDE10酵素のポリペプチド活性全体の操作された減少を意味する。
【００２０】
「医薬として許容可能」という句は、指し示された担体、ビヒクル、希釈剤、賦形剤及び／又は塩が、一般的に化学的及び／又は物理学的に、製剤を含む他の成分と適合性であり、かつその受容者と生理学的に適合性であることを示す。
【００２１】
「プロドラッグ」という用語は、投与後に（生理学的pHとされた後又は酵素活性を通じてなどの）化学的又は生理学的プロセスを介してインビボで薬物を放出する薬物前駆体である化合物をさす。プロドラッグの合成及び使用についての考察は、Higuchi and Stella, Prodrugs as Novel Delivery Systems, vol.14 of the ACS Symposium Series, 及びBioreversible Carriers in Drug Design, ed Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987により提供される。
【００２２】
「塩」及び「医薬として許容可能な塩」という用語は、化合物、化合物の立体異性体、又は化合物のプロドラッグの有機及び無機塩をさす。
【００２３】
１８歳以上の成人における「過体重」及びより重篤な「肥満」状態は、理想体重を超えており（より特別には、理想的な体脂肪を超える）、かつ一般的には、総体脂肪及び過体重又は肥満状態の結果としての早期死亡又は障害にかかる相対的リスクと相関する肥満度指数（BMI）によって定義される。BMIは、キログラムで表した体重をメーターで表した身長の二乗でわるか（kg/m2）、或いはポンドで表した体重に７０３をかけたものをインチで表した身長の二乗でわる（ポンド×７０３／インチ2）ことによって計算される。典型的には、「過体重」は、２５．０及び２９．９の間のBMIを構成する。「肥満」は、典型的には、３０以上のBMIとして定義される（例えば、National Heart, Lung, and Blood Institute, Clinical Guidlines on the Identification, Evaluation, and Treatment of Overweight and Obesity in Adults, The Evidence Report, Washington, DC: U.S. Department of Heath and Human Services, NIH publication no. 98-4083, 1998を参照のこと）。筋肉の多い個体では、BMI、体脂肪、及び病気のリスクの間の相関は、他の個体よりも低い。したがって、かかる筋肉の多い個体が実際に過体重又は肥満であるかどうかの評価は、総体脂肪の直接測定又はウエスト対ヒップ比の評価などの他の基準によってより正確に行われることができる。
【００２４】
本明細書で定義され、そしてAdult Treatment Panel III （ATP III：National Institutes of Health: Third Report of the National Cholesterol Education Program Expert Panel on Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adult Treatment Panel III), Executive Summary; Bethesda, MD, National Institutes of Health, National Heart, Lung and Blood Institute, 2001(NIH pub, no. 01-3670)）による「メタボリックシンドローム」は、人が以下の症状のうちの3つ以上を有する場合に発生する：
１． 腹部肥満：ウエスト周囲が男性においては１０２cm超、そして女性においては８８cm超；
２． 高トリグリセリド血症：１５０mg/dl以上（１．６９５ミリモル／l)
３． 低HDLコレステロール：男性において４０mg/dl（１．０３６ミリモル／l）未満及び女性において５０mg/dl（１．２９５ミリモル／l）未満
４． 高血圧：１３０／８５mmHg以上
５． 高空腹時血糖：１１０mg/dl（６．１ミリモル／l）以上；或いは
World Health Organizationの基準で（Alberti and Zimmet, Diabet Med. 15: 539-53, 1998）によってその個人が糖尿病、耐糖能障害、絶食時糖障害、またはインスリン耐性プラス２つ以上の以下の異常：
１．高血圧：１６０／９０ｍｍHg以上
２．高脂血症：トリグリセリド濃度が１５０mg/dl以上（１．６９５ミリモル/ｌ）及び／又は男性においてHDLコレステロールが３５mg/dl未満（０．９ミリモル/ｌ）そして、女性において３９mg/dl未満（１．０ミリモル/ｌ）；
３．中心性肥満：ウエスト対ヒップ比が、男性において０．９０超及び女性において０．８５超、及び／又はBMIが３０kg/m2超；
４．ミクロアルブミン症：尿中アルブミン排泄速度が２０μg/分以上又はアルブミン対クレアチニン比が２０mg/kg以上
を有するときに発生する。
【００２５】
「治療的有効」によって、適切なコントロールに関して、体脂肪、体重の減少及び／又はNIDDM、メタボリックシンドローム、又は耐糖能障害の一つ以上の症状の軽減が生じたことが意味される。
【００２６】
本発明の他の特徴及び利益は、以下の詳細な説明及び請求項からさらに明らかとなるであろう。本発明が特定の実施態様に関して記載される一方、実行されることのできる他の変化及び改変も本発明の一部であり、添付の請求項の範囲内にあることは理解されるであろう。本出願は、概して、本開示から離れた本分野において知られた又は慣例であるもの、及び過度の実験なしに確認することができるものを含む、本発明の原理に従う任意の本発明の等価物、変更物、使用又は改作をも含むことを意図される。本明細書中で示される、公開された特許出願及び付与された特許を含むすべての文献は、参考文献としてその全体が本明細書中に援用される。
【００２７】
詳細な説明
本発明は、過体重又は肥満の患者（例えば、ヒト又はコンパニオン動物）の治療などにおいて、動物において体重及び／又は体脂肪を減少させる方法、又は（ウシ、ニワトリ、ブタなどの）食用動物において赤身の肉を生産する手段、及びPDE10阻害剤を投与することによって、治療を必要とする患者においてメタボリックシンドローム、インスリン非依存性糖尿病及び／又は耐糖能障害を治療する方法を対象とする。本明細書中の実施例において開示されるとおり、PDE10ノックアウトマウスは、高脂肪食への曝露後の体重増加の発生、体脂肪蓄積の増加の発生及びメタボリックシンドロームの症状に対して比較的耐性である。実施例は、PDE10活性の減少を起こすことが、体重及び／又は体脂肪を減少させ、メタボリックシンドロームの症状を軽減することができ、過体重、肥満及び／又はメタボリックシンドロームの１つ以上の症状を有する患者（ヒト及びコンパニオン動物）を治療することなどに使用されることができ、そして、食用動物種を処置して赤身の肉を生産する有効な方法であることを実証する。
【００２８】
例示的なPDE10阻害剤
PDE10阻害剤は、当業者に知られており、そして、Fawcett et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 97: 3702-3707, 2000(PDE11Aと呼ばれる)、米国特許公報第2003/0032579号、同第2003/0096323号に開示され、及び以下においてさらに記載される、当業者に知られた標準的アッセイによって同定されることもできる。
【００２９】
本発明の方法において使用されるPDE阻害剤は、パパベリン（米国特許公報第2003/0032579号）及び２００５年２月１８日に出願され、「キナゾリン及びイソキノリンのテトラヒドロイソキノリニル誘導体」と題された米国特許出願第11/062133号中に記載されたものを含む。上記の米国特許出願中にPDE10阻害剤として開示された化合物は以下の式（I）：
【化１】
2008501776.tif 000002
｛式中、
QはN又はCHであり、
R1及びR2はそれぞれ独立して、水素、ハロゲン、（C1-C9）アルキル、（C2-C9）アルケニル、（C2-C9）アルキニル、（C3-C8）シクロアルキル、−O−（C1-C9）アルキル、−O−（C2-C9）アルケニル、（C1-C6）アルキルO−（C1-C6）アルキル、−C≡N、−NO2、−COOR3、−CONR3R4、−NR3R4、−COR4、又は−COOHであり、
前記アルキル、アルケニル及びアルキニルは場合により、１〜３のハロゲンで置換さ
れ；
R3及びR4は、独立してH、C1-C6アルキル、又は（C2-C6）アルケニルであり、
前記アルキル及びアルケニルは場合により１〜３個のハロゲン原子で置換され；かつ
R1及びR2が独立して−O−アルキル、−O−アルケニル、又はアルキル、アルケニル又はアルキニルである場合、R1及びR2は場合により結合して５〜６員環を形成することができ、
R5及びR6は、独立して水素、−C(O)−X、−SO2−X、−N(Y)−SO2−X,又は−N(Y)−C(O)−Xであり、ここで、
Xは、非置換又は１以上のハロゲンで置換されたC1-C6アルキル基、非置換又は１つ以上のハロゲンで置換された−O−C1-C6アルキル、非置換又は１つ又は２つの置換基で置換された（C6-C14）アリール基、−NR7R8基又は
【化２】
2008501776.tif 000003
であり、ここで、
前記（C6-C14）アリール置換基は、独立してC1-C6アルキル、−O−C1-C6アルキ
ル、ハロゲン、−C≡N、−NO2、−COOR3、−CONR3R4、−NR3R4、−COR3及
び−COOH、及び１〜３個のハロゲンで置換された（C1-C6）アルキルから選ばれ、
Yは、水素又は（C1-C6）アルキルであり；
ｎは、０又は１であり；
R7及びR8は、それぞれ独立して（C1-C6）アルキル又は水素であり；
Zは、酸素又はNR9であり、ここで、R9は、水素または(C1-C6)アルキルであり；
R10及びR11は、独立してH、ハロゲン、C≡N、−COOH、−COOR3、−CONR3R4、COR3、−NR3R4、−OH、（C6-C14）アリール、５〜１２員へテロアリール、（C1-C6）アルキル、（C2-C6）アルケニル、（C2-C6）アルキニル又は（C3-C8）シクロアルキルであり、ここで、前記アルキル、アルケニル、及びアルキニルは、場合により独立して１〜３個のハロゲンで置換される｝
により表される化合物並びに医薬として許容可能なその塩、溶媒和物及びプロドラッグである。
【００３０】
本発明の特別な実施態様は、QがNであり、かつR1及びR2がそれぞれ−OCH3である、式（I）の化合物に関する。
【００３１】
本発明の他の実施態様は、式（I）の化合物に関し、ここで、QはNであり、R1及びR2はそれぞれ−OCH3であり、かつR5及びR6のうちの一つ又は両方は−SO2−X又は−N(Y)−SO2−Xであり、ここで、X及びYは上記で定義したとおりである。
【００３２】
本発明の好ましい実施態様は、式（I）の化合物に関し、ここで、QはNであり、R1及びR2はそれぞれ−OCH3であり、R5及びR6の一つ又は両方は、−SO2−Xであり、ここで、Xは４−メチルピペラジンである。
【００３３】
本発明の他の好ましい実施態様は、式（I）の化合物に関し、ここで、QはNであり、R1及びR2はそれぞれ−OCH3であり、かつR5及びR6のうちの一つ又は両方は、−NH−SO2−Xであり、ここで、Xは一置換又は二置換アリールである。好ましくは、アリールはフェニル又はナフチルであり、場合によりC1-C6アルキル、C1-C6アルコキシ、−C≡N、−NO2、−COOR3、−CONR3R4、−NR3R4、−COR3、及び−COOHで置換され、ここで、R3及びR4は上記で定義されたとおりである。
【００３４】
本発明の他の実施態様は、式（I）の化合物に関し、ここで、QはNであり、R1及びR2はそれぞれ−OCH3であり、かつR5及びR6のうちの一つ又は両方は、−N(Y)−C(O)−Xであり、ここで、X及びYは上記で定義されたとおりである。
【００３５】
本発明の他の実施態様は、式（I）の化合物に関し、ここで、QはCHであり、R1及びR2はそれぞれ−OCH3であり、かつR5、R6、R10及びR11は水素である。
【００３６】
他の実施態様において、R10及びR11は、水素、（C1-C6）アルキル、（C2-C6）アルケニル、（C2-C6）アルキニル、及び（C3-C8）シクロアルキルから独立して選ばれる。かかる実施態様においては、Qは好ましくはNである。
【００３７】
式（I）の化合物の具体例は、以下の：
N-［２−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−７−イル］−４−イソプロピル−ベンゼンスルホンアミド；N−［２−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−７−イル］−２，５−ジメチル−ベンゼンスルホンアミド；N−［２−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−７−イル］−２，２−ジメチルプロピオンアミド； N-［２−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−７−イル］−アセタミド；４−クロロ−N−［２−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−７−イル］−ベンゼンスルホンアミド；N−［２−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−７−イル］−アセタミド；N−［２−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−７−イル］−４−エチル−ベンズアミド；４−クロロ−N−［２−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−７−イル］−ベンズアミド；３−クロロ−N−［２−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−７−イル］−ベンズアミド；４−tert−ブチル−N−［２−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−７−イル］−ベンゼンスルホンアミド；N−［２−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−７−イル］−４−エトキシベンズアミド；N−［２−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−７−イル］−４−トリフルオロメチル−ベンゼンスルホンアミド；N−［２−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−７−イル］−３，４−ジメトキシ−ベンゼンスルホンアミド；６，７−ジメトキシ−４−［８−（モルホリン−４−スルホニル）−３，４−ジヒドロ−１H−イソキノリン−２−イル］キナゾリン；６，７−ジメトキシ−４−［８−（４−メチル−ピペラジン−１−スルホニル）−３，４−ジヒドロ−１H−イソキノリン−２−イル］キナゾリン；４−（７，８−ジメトキシ−３，４−ジヒドロ−１H−イソキノリン−２−イル）−６−エトキシ−７−メトキシ−キナゾリン；４−（６，７−ジメトキシ−３，４−ジヒドロ−１H−イソキノリン−２−イル）−６−エトキシ−７−メトキシ−キナゾリン；４−（６，７−ジメトキシ−３−メチル−３，４−ジヒドロ−１H−イソキノリン−２−イル）−６−エトキシ−７−メトキシ−キナゾリン；４−（３，４−ジヒドロ−１H−イソキノリン−２−イル）−６−エトキシ−７−メトキシ−キナゾリン；４−（３，４−ジヒドロ−１H−イソキノリン−２−イル）−７−メトキシ−キナゾリン；２−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−７−イルアミン；６，７−ジメトキシ−３‘，４’−ジヒドロ−１‘H−［１，２’］バイイソキノリニル；及び６，７−ジメトキシ−４−（３−プロピル−３，４−ジヒドロ−１H−イソキノリン−２−イル）−キナゾリンである。
【００３８】
上で列挙された化合物からの好ましい化合物は、以下の構造（IA）：
【化３】
2008501776.tif 000004
を有する、６，７−ジメトキシ−４−［８−（モルホリン−４−スルホニル）−３，４−ジヒドロ−１H−イソキノリン−２−イル］−キナゾリンである。
【００３９】
他の好適なPDE10阻害剤は、２００４年１２月３１日に出願され、「ヘテロ芳香族化合物の新規ピロリジル誘導体」と題された、米国仮特許出願第60/640405号に開示された化合物を含む。この米国仮特許出願に開示された化合物は、以下の式（II）：
【化４】
2008501776.tif 000005
｛式中、
X、Y及びZは、それぞれ独立して、CH又はNであるが、ただし、X、Y及びZのうちの3つ全部でなく少なくとも１つ又は２つはNであり；
R1、R2及びR5は、独立して、H、ハロゲン、C≡N、−COOH、−COOR3、−CONR3R4、COR3、−NR3R4、−NHCOR3、−OH、（C6-C10）アリール、５〜７員環へテロアリール、（C1-C6）アルキル、（C2-C6）アルケニル、（C2-C6）アルキニル、−O−（C1-C6）アルキル、−O−（C2-C6）アルケニル、又は（C3-C8）シクロアルキルであるか；或いはR1、R2及びR5は独立して、−O−（C1-C6）アルキル、−O−（C2-C6）アルケニル、（C1-C6）アルキル、（C2-C6）アルケニル、又は（C2-C6）アルキニルであり、R1及びR2又はR1及びR5は、場合により結合して５〜６員環を形成し；
R3及びR4は独立してH、（C1-C6）アルキル、又は（C6-C10）アリールであり、前
記アリールは場合により１つ以上の（C1-C6）アルキル基で置換され；
R6及びR7は、それぞれ独立して、H、−COOR3、−CONR3R4、−COR4、NR3R4、
−NHCOR3、−OH、−（C1-C6）アルキレン−OH、−HNCOOR3、−CN、−HNCONHR4  、（C1-C6）アルキル、（C2-C6）アルコキシ、C6-C10アリール又は以下の：
【化５】
2008501776.tif 000006
｛式中、ｎは０又は１である。｝であり；
Zは、酸素又はNR8であり、ここで、R8は水素又は（C1-C6）アルキルであり；
Arがフェニル、ナフチル、又は５〜６員環へテロアリールであるとき、該へテロアリールは場合により、ベンゾ基に縮合し、そして該へテロアリールは、酸素、窒素、及びイオウから選ばれる１〜４個のヘテロ原子を含むが、ただし、前記へテロアリール環は２つの隣接した酸素原子又は２つの隣接したイオウ原子を含むことは出来ず、かつ、上記フェニル、ナフチル、ヘテロアリール、又はベンゾ縮合したヘテロアリール環は、それぞれ、場合により、（C1-C8）アルキル、クロロ−、ブロモ−、ヨード、フルオロ−、（C1-C8）ヒドロキシアルキル−、（C1-C8）アルコキシ−（C1-C8）アルキル−、（C3-C8）ヒドロキシシクロアルキル−、（C3-C8）シクロアルコキシ−、（C1-C8アルコキシ）−（C3-C8）シクロアルキル−、（３〜８員環）ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシ（３〜８員環）ヘテロシクロアルキル、及び（C1-C8）アルコキシ−（３〜８員環）ヘテロシクロアルキル、から独立して選ばれる１〜３個の置換基で置換されてもよく、ここで、前記アルキル、アルコキシ及びシクロアルキルは場合により１〜３個のハロで置換され、且つここで、各（C3-C8）シクロアルキル又はへテロシクロアルキル部分は独立して１〜３個の（C1-C6）アルキル又はベンジル基で置換されるか；或いは
Arが５〜６員環へテロアリールである場合、該へテロアリールは、イミダゾ、ピリド、ピリミド、ピラゾ、ピリダゾ又はピローロ基に縮合し、かつ該へテロアリールは、酸素、窒素及びイオウから選ばれる１〜４個のヘテロ原子を含むが、ただし、前記へテロアリール環は２つの隣接した酸素原子又は2つの隣接したイオウ原子を含むことは出来ず、かつ、上記の各縮合へテロアリール環は、場合により（C1-C8）アルキル、クロロ−、ブロモ−、ヨード、フルオロ−、ハロ（C1-C8）アルキル、（C1-C8）ヒドロキシアルキル、（C1-C8）アルコキシ−（C1-C8）アルキル−、−O−（C1-C8）アルキル−ハロ、（C3-C8）ヒドロキシシクロアルキル−、（C3-C8）シクロアルコキシ−、（C1-C8）アルコキシ−（C3-C8）シクロアルキル−、（３〜８員環）ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシ（３〜８員環）ヘテロシクロアルキル、及び（C1-C8）アルコキシ−（３〜８員環）ヘテロシクロアルキル、から独立して選ばれる１〜３個の置換基で置換されてもよく、ここで、各（C3-C8）シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキル部分は、１〜３個の（C1-C6）アルキルまたはベンジル基で独立して置換されてもよく；
或いは、Arがフェニル、ナフチル、又はへテロアリール環である場合には、各環は、以下の：（ａ）−（CH2）ｔOHとオルト−COOHから形成されるラクトン、ここでｔは１、２又は３である；（ｂ）−CONR14R15、ここで、R14及びR15は（C1-C8）アルキル及びベンジルから独立して選ばれるか或いはR14とR15はそれらが結合している窒素と一緒になって、−CONR14R15基の窒素に加えて、窒素、イオウ、及び酸素から選ばれる０〜３個のヘテロ原子を含む、５〜７員環へテロアルキル環を形成し、ここで、任意の前記へテロ原子が窒素である場合、それは場合により（C1-C8）アルキル又はベンジルで置換されてよいが、ただし、前記環は２つの隣接した酸素原子又は２つの隣接したイオウ原子を含むことは出来ないか；或いは（ｃ）−（CH2）vNCOR14R15、ここで、ｖは０、１、２又は３であり、かつCOR14R15はそれらが結合する窒素と一緒になって４〜６員ラクタム環を形成する、から独立して選ばれる１〜３個の置換基で置換されてもよい。｝
により表される化合物、医薬として許容可能なその塩、又は該化合物又は塩の水和物又は溶媒和物を含む。
【００４０】
本発明の実施において使用されることのできる、式（II）を有する好適な化合物は、以下の：４−［３−アリル−４−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−６，７−ジメトキシ−キナゾリン；６，７−ジメトキシ−４−［３−プロピル−４−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリン；１−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−３−メチル−４−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−３−カルボン酸エチルエステル；６，７−ジメトキシ−４−［３−メチル−３−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリン；［１−（６、７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−４−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−３−イル］−イソプロピル−メチル−アミン；［１−（６、７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−４−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−３−イル］−ジエチルアミン；［１−（６、７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−４−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−３−イル］−エチル−メチル−アミン；［１−（６、７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−４−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−３−イル］−ジメチル−アミン；［１−（６、７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−４−（キノリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−３−イル］−ジメチル−アミン；［１−（６、７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−４−（キノリン−３−イルオキシ）−ピロリジン−３−イル］−ジメチル−アミン；６，７−ジメトキシ−４−［４‘−（キノキサリン−２−イルオキシ）−［１，３’］バイピロリジニル−１‘−イル］−キナゾリン；６，７−ジメトキシ４−［３−モルホリン−４−イル−４−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリン；６，７−ジメトキシ−４−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−４−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリン；［１−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−４−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−３−イル］−メチル−アミン；N-［１−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−４−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−３−イル］−N-メチル−アセタミド；６，７−ジメトキシ−４−［３−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］キナゾリン；４−［３−（４−エトキシ−フェノキシ）−ピロリジン−１−イル］−６，７−ジメトキシ−キナゾリン；６，７−ジメトキシ−４−［３−（ナフタレン−２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリン；４−［３−（４−tert−ブチル−フェノキシ）−ピロリジン−１−イル］−６，７−ジメトキシ−キナゾリン；４−［１−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−ピロリジン−３−イルオキシ］−ベンゾニトリル；６，７−ジメトキシ−４−［３−（４−トリフルオロメトキシ−フェノキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリン；４−［３−（３−エトキシ−フェノキシ）−ピロリジン−１−イル］−６，７−ジメトキシ−キナゾリン；４−［３−（３��４−ジメトキシ−フェノキシ）−ピロリジン−１−イル］−６，７−ジメトキシ−キナゾリン；４−［３−（３−イソプロポキシ−フェノキシ）−ピロリジン−１−イル］−６，７−ジメトキシ−キナゾリン；４−［３−（インダン−５−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−６，７−ジメトキシ−キナゾリン；６，７−ジメトキシ−４−［３−（キノリン−６−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリン；N４−［３−（ビフェニル−３−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−６，７−ジメトキシ−キナゾリン；６，７−ジメトキシ−４−［３−（２−メチル−キノリン−６−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリン；６，７−ジメトキシ−４−［３−（７−メトキシ−ナフタレン−２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリン；６，７−ジメトキシ−４−［３−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリン；６，７−ジメトキシ−４−［３−（キノリン−７−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリン；６，７−ジメトキシ−４−［３−（ナフタレン−１−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリン；４−［３−（イソキノリン−３−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−６，７−ジメトキシ−キナゾリン；４−［３−（イソキノリン−７−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−６，７−ジメトキシ−キナゾリン；６，７−ジメトキシ−４−［３−（ピリジン−２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリン；６，７−ジメトキシ−４−［３−（ピリジン−３−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリン；６，７−ジメトキシ−４−［３−（ピリジン−４−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリン；４−［３−（５−クロロ−ピリミジン−２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−６，７−ジメトキシ−キナゾリン；３−［１−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−ピロリジン−３−イルオキシ］−キナゾリン−６−カルボニトリル酸tert−ブチルエステル；６，７−ジメトキシ−４−［３−メトキシ−４−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリン．テトラヒドロフラン（ピロリジン−３−イルオキシ）−キノキサリン；１−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−４−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−３−オール；［４−ベンジル−１−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−ピロリジン−３−イル］−ジメチル−アミン；６，７−ジメトキシ−４−［３−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−シンノリン；６，７−ジメトキシ−４−［４’−（キノキサリン−２−イルオキシ）−［１，３‘］バイピロリジニル−１’−イル］−シンノリン；［１−（６，７−ジメトキシ−シンノリン−４−イル）−４−（キノリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−３−イル］−エチル−メチル−アミン；［１−（６，７−ジメトキシ−シンノリン−４−イル）−４−（キノリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−３−イル］−ジエチル−アミン；６，７−ジメトキシ−４−［３−モルホリン−４−イル−４−（キノキサリンー２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−シンノリン；［１−（６，７−ジメトキシ−シンノリン−４−イル）−４−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−３−イル］−ジエチル−アミン；［１−（６，７−ジメトキシ−シンノリン−４−イル）−４−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−３−イル］−エチル−メチル−アミン；［１−（６，７−ジメトキシ−シンノリン−４−イル）−４−（キノリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−３−イル］−ジメチル−アミン；６，７−ジメトキシ−４−［３−モルホリン−４−イル−４−（キノリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］シンノリン；６，７−ジメトキシ−４−［４’−（キノリン−２−イルオキシ）−［１，３’］バイピロリジニル−１’−イル］−シンノリン；４−［３−（４a、５、６、７、８、８a−ヘキサヒドロ−キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−６，７−ジメトキシ−キナゾリン；１−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−４−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−２−カルボン酸ジメチルアミド；［１−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）‐４−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−２−イル］−メタノールハイドロクロライド；及び２−［１−（６，７−ジメトキシ−キナゾリン−４−イル）−４−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−２−イル］−プロパン−２−オールハイドロクロライドを含む。好ましい化合物は、６，７−ジメトキシ−４−［３−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリンであり、これは以下の実施例（IIA）において記載された通りに製造されることができる。他の誘導体は、この方法に類似の方法を用いて製造されることができる。
【００４１】
本発明の実施において有用な他の組の化合物は、以下の式（III）：
【化６】
2008501776.tif 000007
｛式中、
Rは、置換フェニルである。｝
のキナゾリン化合物；医薬として許容可能なその塩、或いは、該化合物又は塩の水和物又は溶媒和物を含む。好ましい式（III）の化合物は、４−（２−フルオロ−フェニル）−６，７−ジメトキシ−２−ピペラジン−１−イル−キナゾリンであり、これは以下の実施例に記載のように製造されることができる（化合物IIIA）。他の誘導体は、実施例における化合物IIIAの製造に用いられたものに類似した方法を用いて製造可能である。
【００４２】
本発明の実施において有用な他のPDE10阻害剤のクラスは、２００５年１月７日に出願され、「ヘテロ芳香族キノリン化合物」と題された米国仮特許出願第60/642058号に開示された化合物を含む。この米国仮特許出願からの好適は化合物は、以下の式（IV）：
【化７】
2008501776.tif 000008
｛式中、
R1は水素、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、（C1-C8）アルキル、（C2-C8）アルケニル、（C2-C8）アルキニル、（C1-C8）アルコキシ、ハロで置換された（C1-C8）アルキル、（C3-C8）シクロアルキル、（C2-C7）ヘテロシクロアルキル、（C1-C8）アルキルチオ、NR3R3、−O-CF3、−S(O)n−R3、C(O)−NR3R3、又は窒素、酸素又はイオウで置換された（C1-C8）アルキルであり、ここで、各R3はそれぞれ独立して水素、（C1-C8）アルキル、（C2-C8）アルケニル、（C2-C8）アルキニル、ハロ置換（C1-C8）アルキル、又は（C3-C8）シクロアルキルであり、かつ、ｎは０、１又は２であり；
R2は、水素、（C1-C8）アルキル、（C2-C8）アルケニル、又は（C2-C8）アルキニルであり；
Xは、酸素、イオウ、炭素又は窒素であり、ここで、炭素及び窒素は（C1-C8）アルキル、（C2-C8）アルケニル、（C2-C8）アルキニル、又はハロ置換（C1-C8）アルキルから選ばれる置換基で置換されてよく；
Yは、炭素又は窒素であるが、ただし、１つを超えないYが窒素であり、かつYが炭素である場合、それはR7で置換され、ここで、R7は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、（C1-C8）アルキル、（C2-C8）アルケニル、（C2-C8）アルキニル、（C1-C8）アルコキシ、（C1-C8）シクロアルキル、（C1-C8）アルキルチオ、ハロ置換（C3-C8）アルキル、NR8R8、−OCF3、−S(O)m−R8、及び−C(O)−NR8R8から選ばれ、ここで、各R8は、独立して水素又は（C1-C8）アルキルであり、かつ、ｍは０、１又は２である。｝
の化合物；医薬として許容可能なその塩或いは該化合物又は塩の水和物又は溶媒和物を含む。
【００４３】
好ましい式（IV）の化合物は、２−［４−（４−ピリジン−４−イル−２H−ピラゾール−３−イル）−フェノキシメチル］−キノリンであり、これは以下の実施例に記載されたように製造されることができ（化合物IVA）、及び２−［４−（１−メチル−４−ピリジン−４−イル−１H−ピラゾール−３−イル）−フェノキシメチル］−キノリンである。他の誘導体は、実施例中で化合物IVAの製造に使用された方法に類似の方法を用いて製造されることができる。
【００４４】
当業者は、上記に列挙された化合物のすべての立体異性体、互変異性体、溶媒和物、水和物、プロドラッグ及び医薬として許容可能な塩も、本発明において使用可能なPDE10阻害剤として含まれることを理解するであろう。
【００４５】
先に記載のとおり、PDE10選択的阻害剤を含む他のPDE10阻害剤は、当業者に知られた標準的アッセイを用いて同定されることができる。すなわち、PDE10選択的調節剤を同定するための１つのスクリーニングのタイプは、Sf9昆虫細胞（Fawcett, Proc. Natl. Acad. Sci. USA,97:3702-07,2000）、酵母細胞（Loughney et al., 米国特許第5,932,465号）、または、COS-7細胞（Yuasa, J. Biol. Chem. 275: 31469-79, 2000）などのトランスフェクトされた宿主細胞から単離された組み換え酵素又は組織から単離された未変性の酵素を用いる。好ましくは、PDE10酵素は、ヒト（例えば、Loughney et al., 米国特許第5,932、465号、Lanfear et al., EP967284）、マウス（例えば、Lanfear et al., EP976294）、又はラット（例えば、配列番号２）のものである。
【００４６】
PDE10活性は、たとえば、適切な基質、［3H］cAMP又は［3H］cGMP、の加水分解速度として測定される。活性は例えば、SPAに基づく方法（Fawcett, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97: 3702-07, 2000；Phillips et al., WO00/40733及び（Amasham Int’l Ltd., Buckhamshire, England製品コードTRKQ7090/7100を用いて改変した、）Thompson et al., Biochem. 18: 5228, 1979）によって測定される。PDE10酵素を含むサンプルは、その一部（例えば、1/4〜1/2）が3H標識（Amersham）されたcAMP又はcGMP基質（Sigma Chemicals）と接触させられる。反応は、例えば、マイクロタイタープレート（例えば、Microfluor（登録商標）プレート、Dynex Technologies, Chantilly, VA）中で実施され、そして過剰の非標識サイクリックヌクレオチドを含むケイ酸イットリウムSPAビーズ（Amersham）の添加によって終結される。ビーズが暗所中で沈降された後、プレートはマイクタイタープレートリーダー（例えば、TopCount （登録商標）、Packard, Meriden, CT）によって読み取られる。
【００４７】
PDE10活性は、（例えば、Loughney et al., J. Biol. Chem. 271: 796-806,1996及びLoughney,米国特許第5,932,465号に記載された）32P-cAMPまたは32P-cGMPから放出された32P−リン酸の検出によって、又は（例えば、FlashPlate（商標）技術、NEN（登録商標）Life Sciences Products, Boston, MAを用いる）PDE基質、cGMP又はcAMP、及びそれらの加水分解生成物を識別するための抗体を用いてもアッセイされることができる。
【００４８】
例えば、（リン酸化などの）翻訳後修飾を介して、（GAFドメインを介するなどの（Fawcett, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97: 3702-07, 2000））アロステリックリガンド結合の調節、又は触媒部位又はアロステリック制御部位のいずれかにおいてPDE10自身に結合することによって作用物質が間接的にPDE10触媒活性を調節する場合、PDE10の触媒活性をアッセイするかわりに、作用物質はPDE10陽性調節剤又は陰性調節剤（アンタゴニスト）として同定されることができる。PDE10リン酸化及びアロステリックリガンド結合を測定する方法は、文献に記載されている（例えば、McAllister-Lucas et al., J. Biol. Chem. 270: 30671-79,1995及びCorbin et al., Eur. J. Biochem. 267:2760-67, 2000を参照のこと）。
【００４９】
PDE10阻害剤のスクリーニングに使用されるための被験物質は、個別に選択されるか又は化合物ライブラリーから得られてもよい。かかる作用物質は、ペプチド、D-及び／又はL-構成アミノ酸から作られるコンビナトリアルケミストリー由来の分子ライブラリー、ホスホペプチド、抗体及び小有機及び無機化合物を含む。ライブラリーは、生物学的ライブラリー、天然化合物のライブラリー、ペプトイドライブラリー（ペプチドの機能を有するが、酵素による分解に対して耐性であり、生理活性を有する、新規な非ペプチド骨格を有する分子のライブラリー）（例えば、Zuckermann J. Med Chem. 37: 2678-85, 1994を参照のこと）、空間的にアドレス可能なパラレル固相又は溶液相ライブラリー、デコンボルーションを必要とする合成ライブラリー方法、「１−ビーズ１−化合物」ライブラリー法、及びアフィニティークロマトグラフィー選択を用いる合成ライブラリー法を含む。
【００５０】
分子ライブラリーの合成方法の例は、例えば、DeWitt et al., Proc. Natl. Acad Sci. 90:6909, 1993; Erd et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 91: 11422, 1994; Zuckermann et al., J Med.Chem. 37: 2678, 1994; Cho et al., Science, 261: 1303, 1995；Carrell et al., Angew. Chem. Int Ed. Engl 33: 2061, 1994; 及びGallop et al., J. Med. Chem. 37: 1233, 1994中など、本分野で見出されることができる。
【００５１】
化合物のライブラリーは、溶液中（例えば、Houghten, Biotechniques, 13: 412-421, 1992）、又はビーズ上（Lam, Nature 354: 82-841, 1991）、チップ上（Fodor, Nature 364: 555-556, 1993）、細菌又は胞子（Ladner, 米国特許第5,223,409号）、プラスミド（Cull et al, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89: 1865-1869, 1992）、又はファージ上（Scott et al, Science 249: 386-390, 1990;Devin, Science 249: 404-406, 1990; Cwirla et al., Proc. Natl. Acad. Sci. (USA)87: 6378-6382, 1990; Felici, J. Mol. Biol. 222: 301-310, 1991; 上記のLadner ）で提示されることができる。
【００５２】
スクリーニング法
上記のように、本発明は、本明細書に記載の治療方法において使用可能な作用物質を同定するためのスクリーニング法も含む。これらの方法は、作用物質がPDE10を阻害するか否かを決定すること、その後にそれが体重の減少、体脂肪の減少、又は上記のようなメタボリックシンドロームの症状を治療することにおいて有効であるか否かを決定することも含むことができる。或いは、スクリーニング法は、単純に、かかる治療法におけるその有効性のためにPDE10アンタゴニストとして知られる被験作用物質を含むことができる。
【００５３】
作用物質をPDE10活性の阻害におけるその有効性について試験することは、本分野で周知の方法を用いて実施可能である（例えば、Fawcett et al, Proc. Natl. Acad. Sci. 97: 3702-3707, 2000及び米国特許公報第2003/0032579号を参照のこと）。
【００５４】
かかる活性化合物の治療的有効性は、ED50（最大効果の５０％を生じさせる化合物濃度）を決定するためなどの細胞培養又は動物モデルにおける標準的な治療手順によって決定されることができる。ある作用物質がPDE10アンタゴニストであると決定されるか又は既知のPDE10アンタゴニトが試験された場合、その作用物質は次に本明細書に記載の治療方法において有効であることを確認されることができる。かかる試験は、本明細書に記載の状態のための適切な動物モデルにおいて実施されることができる。例えば、遺伝的に肥満のマウス（例えば、C57BL（ob/ob））、食事誘発性肥満マウス（すなわち、DIOマウス）又はラットは候補作用物質で治療されることができ、本明細書に記載の状態に関連するさまざまなパラメータに対するその作用物質の効果が、候補作用物質で治療されていない以外は同様の条件下で飼育された動物におけるものと比較されることができる。この目的のために試験されることのできるパラメータは、体重、体脂肪、インスリン、グルコース、トリグリセリド、遊離脂肪酸、アディポネクチン、ヘモグロビンA1c、コレステロール、レプチン、及び／又はフルクトサミンなどを含む。これらの試験の例が以下の実施例において提供される。これらのパラメータに陽性の影響を有することが発見された作用物質は、次に、当業者によって決定されることのできる他の前臨床又は臨床試験における試験のために選択されることができる。
【００５５】
PDE10アンタゴニストの特徴づけ
本明細書中で検討される治療方法に関連するパラメータに陽性の影響を与えることが発見されたPDE10アンタゴニスト作用物質は、当業者によって決定可能であるように、前臨床又は臨床試験において試験されることができる。
【００５６】
細胞培養アッセイ及び動物モデルからえられるデータは、ヒトにおける使用のための用量範囲の製剤化において使用可能である。用量は、採用される剤型及び投与経路に依存して変化してよい。本発明の方法において使用される任意の化合物について、治療的有効用量は最初に細胞培養アッセイから推定されることができる。用量は、IC50を含む循環血漿濃度を達成するために、動物モデルにおいて製剤化されることができる。かかる情報は、ヒトにおいて有用な用量をより正確に決定するために使用可能である。例えば、高速液体クロマトグラフィーによって血漿中のレベルが測定されることができる。
【００５７】
治療方法
PDE10阻害剤として同定された作用物質が、1つ以上の脂肪の沈着の質量を減少させることなどにより体重又は体脂肪を減少させるか又はメタボリックシンドロームの症状を軽減するのに充分な容量で投与される。かかる治療的有効量は、患者又は動物の状態、投与経路、製剤、医師の判断、及びこの開示を参照した当業者に明らかな因子に依存する日常的な最適化技術を用いて決定されるであろう。
【００５８】
本発明による使用に適したPDE10阻害剤は、単独で投与されることができるが、ヒトの治療においては、一般的に、意図した投与経路及び標準的な医薬の実施に関して選択された、好適な医薬賦形剤、希釈剤、又は担体と混合して投与されるであろう。
【００５９】
例えば、本発明にしたがって使用されるのに適したPDE10阻害剤又はその塩もしくは溶媒和物は、経口、頬側、又は舌下に、錠剤、（ソフトゼラチンカプセルを含む）カプセル、マルチ微粒子、ゲル、フィルム、オブール、エリキシル、溶液又は懸濁剤の形態で投与されることができ、これらはフレーバー剤、又は着色剤を含んでもよく、即時、遅延型、改変、徐放性、二重、放出制御型またはパルス型送達適用のためのものであることができる。かかる化合物は、分散速度の速い又は溶解速度の速い剤型によって、或いは高エネルギー分散の形態で又は被覆粒子として投与されてもよい。好適な医薬製剤は、所望の被覆又は非被覆形態であることができる。
【００６０】
錠剤などの固体医薬組成物は、微結晶セルロース、ラクトース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸２カルシウム、グリシン及び（好ましくは、コーン、ジャガイモ、又はタピオカデンプンである）デンプンなどの賦形剤、デンプングリコール酸ナトリウム、クロスカルメロースナトリウム及び一定のケイ酸錯体などの崩壊剤、並びにポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（HPMC）、ヒドロキシプロピルセルロース（HPC）、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート（HPMCAS）、シュークロース、ゼラチン及びアカシアなどの顆粒化結合剤を含んでよい。さらに、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ベヘン酸グリセリル及びタルクなどの潤滑剤も含まれてよい。
【００６１】
類似のタイプの固体組成物も、ゼラチンカプセル又はHPMCカプセル中の充填剤として使用されてよい。この意味で好ましい賦形剤は、ラクトース、デンプン、セルロース、乳糖、または高分子量ポリエチレングリコールを含む。水性懸濁液及び／またはエリキシルのためには、PDE10阻害剤化合物は多様な甘味料またはフレーバー剤と、着色料または染料、乳化剤及び／又は懸濁剤と、そして水、エタノール、プロピレングリコールおよびグリセリン及びそれらの組み合わせなどの希釈剤と併合されることができる。
【００６２】
改変された放出の及びパルス状の放出の剤形は、即時放出型剤形について詳説したような賦形剤を、放出速度調節剤として作用する追加の賦形剤とともに含んでもよく、これらはデバイスの本体上に被覆され及び／又はその中に含まれる。放出速度調節剤は、HPMC、HPMCAS、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、セルロ−スアセテート、ポリエチレンオキシド、キサンタンゴム、カルボマー、アムモニオメタクリレートコポリマー、水素化ヒマシ油、カルナバワックス、パラフィンワックス、酢酸フタルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、メタクリル酸コポリマー及びそれらの混合物を含むが、これらに限られない。改変された放出の及びパルス状の放出の剤形は、放出速度調節賦形剤の１つ又は組み合わせを含むことができる。放出速度調節賦形剤は、剤形内、すなわち、マトリックス内及び／又は剤形上、すなわち、表面又はコーティング上に存在することができる。
【００６３】
分散又は溶解の速い製剤（FDDF）は、以下の成分：アスパルテーム、カリウムアセスルファム、クエン酸、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、ジアスコルビン酸、アクリル酸エチル、エチルセルロース、ゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、マンニトール、メチルメタクリレート、ミントフレーバー剤、ポリエチレングリコール、ヒュームドシリカ、二酸化ケイ素、デンプングリコール酸ナトリウム、ステアリルフマル酸ナトリウム、ソルビトール、キシリトールを含むことができる。本明細書においてFDDFを記述するために使用される用語、分散または溶解は、使用される薬物物質の溶解度に依存する、すなわち、該薬物物質が不溶性である場合、分散速度の速い剤形が製剤可能であり、そして、該薬物物質が溶解性である場合、溶解速度の速い剤形が製剤可能である。
【００６４】
本発明による使用に好適はPDE10阻害剤は、非経口投与、例えば、陰核海綿状体内、静脈内、動脈内、腹腔内、くも膜下腔内、心室内、尿道内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内又は皮下に投与されることができるか、或いは、それらは輸注又は針を使わない技術によって投与されることができる。かかる非経口投与のために、それらは、溶液を血液と等張とするための溶液をつくるために十分な塩又はグルコースなどの他の物質を含んでもよい滅菌水溶液の形態で使用されるのが最適である。水溶液は、必要に応じて適切に（好ましくは、約３〜９のpH）緩衝化される。滅菌条件下における好適な非経口製剤の製剤化は、当業者に周知の標準的な医薬の技術によって容易に達成される。
【００６５】
ヒト患者への経口および非経口投与のためには、本発明において使用されるPDE10阻害剤の日用量レベルは、（単一又は分割用量で）通常１〜５００mgである。好ましい用量範囲は、約１mg〜約１００mgである。用量は、単一用量、分割された日用量、又は複数日用量によることができる。或いは、（速度の遅いなどの）徐放性剤形による連続的投薬が毎日、又は1度に１日超で投与されることができる。
【００６６】
したがって、例えば、本発明による使用に好適なPDE10阻害剤の錠剤又はカプセルは、適宜、1度に１つ又は２つ以上投与されるための１mg〜２５０mgの活性化合物を含むことができる。好ましい錠剤又はカプセルは、適宜、1度に１つ又は２つ以上投与されるための約１mg〜約５０mgの活性化合物を含むであろう。医者は、いずれにしても、いかなる個々の患者のためにも最適である実際の用量を決定し、それは特定の患者の年齢、体重及び応答によって変化するであろう。もちろん、より高い又は低い用量範囲にメリットがある個々の場合もあり得、そのようなものも本発明の範囲内にある。
【００６７】
本発明による使用に好適なPDE10阻害剤は、鼻腔内に、又は吸入により投与されることもでき、かつ、好適な噴射剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、１、１，1，２−テトラフルオロエタン（HFA134A（商標））又は１，１，１，２，３，３，３−へプタフルオロプロパン（HFA227EA（商標））、二酸化炭素又は他の好適な気体、を使用する加圧容器、ポンプ、スプレー又はネブライザーからの乾燥粉末吸入剤又はエアロゾルスプレーの形態でも便利に送達される。加圧エアロゾルの場合、単位用量は、計量された量を送達するためにバルブを提供することによって決定される。加圧容器、ポンプ、スプレー又はネブライザーは、エタノール及び噴射剤の混合物を溶媒として用いるなどして活性化合物の溶液又は懸濁液を含むことができ、これはさらにソルビタントリオレエートなどの潤滑剤を含むことができる。吸入器又はインサフレーターにおいて使用するための（例えば、ゼラチンから作られる）カプセル及びカートリッジは、本発明の化合物及びラクトース又はデンプンなどの好適な粉末基剤を含むように製剤される。
【００６８】
エアロゾル又は乾燥粉末製剤は、各計量された用量又は「ひと吹き」が、治療される動物に送達するための１〜５０mgのPDE10阻害剤を含むように準備されるのが好ましい。エアロゾルによる総日用量は、単一用量又はより普通には1日を通して分割用量で投与されることのできる、１〜５０mgの範囲である。
【００６９】
本発明による使用に好適なPDE10阻害剤は、アトマイザーを介する送達のために製剤されてもよい。アトマイザー装置のための製剤は、溶解剤、乳化剤又は懸濁剤として、以下の成分：水、エタノール、グリセロール、プロピレングリコール、低分子量ポリエチレングリコール、塩化ナトリウム、フッ化炭素、ポリエチレングリコールエーテル、ソルビタントリオレエート、オレイン酸、を含んでもよい。
【００７０】
或いは、本発明による使用に好適なPDE10阻害剤は、坐剤又はペッサリーの形態で投与可能であるか、又はそれらはゲル、ヒドロゲル、ローション、溶液、クリーム、軟膏又はダスティングパウダーの形態で局所適用可能である。本発明による使用に好適なPDE10阻害剤は、例えば、皮膚パッチの使用により、経皮的又は皮膚を通して投与されてもよい。それらは、肺又は直腸経路で投与されてもよい。
【００７１】
PDE10阻害剤は、眼内経路で投与されてもよい。眼科的使用のためには、化合物は、等張のpH調節された滅菌食塩水中の微粒子化懸濁液として、又は好ましくは、場合により塩化ベンザルコニウムなどの保存剤とともに、等張のpH調節された滅菌食塩水中の溶液として製剤化されることもできる。或いは、それらはワセリンなどの軟膏に製剤化されてもよい。
【００７２】
皮膚への局所投与のためには、本発明による使用に好適なPDE10阻害剤は、以下の：鉱油、液体ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン化合物、乳化ワックスのうちの１つ以上と水の混合物中に懸濁または溶解された、活性成分又は作用物質を含む好適な軟膏として製剤可能である。
【００７３】
本発明による使用に好適なPDE10阻害剤は、シクロデキストリンと併用して使用されることもできる。シクロデキストリンは、薬物分子と包接錯体又は非包接錯体を形成することが知られている。薬物−シクロデキストリン錯体の形成は、薬物分子の溶解度、溶解速度、バイオアベイラビリティー、及び／または安定性を調節することができる。薬物−シクロデキストリン錯体は、一般に、ほとんどの剤形及び投与経路に有用である。薬物との錯体に向かう代わりに、シクロデキストリンは、担体、希釈剤又は溶解剤などとして、補助的添加物として使用されてもよい。アルファ−、ベータ−、及びガンマ−シクロデキストリンは、最も一般的に使用されるもののいくつかであり、そして、好適な例はPCT国際公開第WO91/11172号、同第WO94/02518号、及び同第WO98/55148号に記載されている。
【００７４】
一般に、ヒトにおいては、経口投与が好ましい経路であり、しばしば最も便利である。受容者が嚥下障害を有するか又は経口投与後の薬物吸収障害を有する状況では、薬物は非経口、舌下又は頬側に投与されることができる。
【００７５】
獣医学的使用のためには、PDE10阻害剤は通常の獣医学的実施により適切に許容可能な製剤として投与され、獣医は、特定の動物に最も適した投薬計画及び投与経路を決定するであろう。かかる動物は、過体重、肥満或いは過体重又は肥満の危険性のあるコンパニオン動物を含む。本発明によって治療されることのできる他の動物は、本発明による治療を受けないものよりもより赤身の多い肉を得るための食用動物である。
【００７６】
本発明により使用されるPDE10阻害剤は、本明細書に記載の病気、状態及び／又は障害を治療するための他の医薬とともに使用されることもできる。したがって、他の医薬とともにPDE10阻害剤を投与することを含む治療方法も提供される。本発明の化合物とともに使用されることのできる好適な医薬は、アポリポプロテイン−B分泌／ミクロソームトリグリセリド輸送タンパク質（アポ−B／MTP）阻害剤、１１β−ヒドロキシステロイドデヒトロゲナーゼ−１（１１β−HSD１型）阻害剤、ペプチドYY3-36又はそのアナログ、MCR-4アゴニスト、コレシストキニン−A（CCK-A）アゴニスト、（シブトラミン（sibutramine）などの）モノアミン再取り込み阻害剤、（リモナバント（rimonabant）などの）カンナビノイド受容体−１アンタゴニスト、交感神経模倣薬、β3アドレナリン受容体アゴニスト、（ブロモクリプチン（bromocriptine）などの）ドパミンアゴニスト、メラニン細胞刺激ホルモン受容体アナログ、5HT2cアゴニスト、メラニン凝集ホルモンアンタゴニスト、レプチン（OBたんぱく質）、レプチンアナログ、レプチン受容体アゴニスト、ガラニンアンタゴニスト、（テトラヒドロリプスタチン、すなわちオルリスタット（orlistat）などの）リパーゼ阻害剤、（ボンベシンアゴニストなどの）食欲低下薬、（米国特許第6,566,367号、同第6,649,624号、同第6,638,942号、同第6,605,720号、同第6,495,559号、同第6,462,053号、同第6,388,077号、同第6,335,345号及び同第6,326,375号；米国特許出願公開第2002/0151456号及び同第2003/036652号；並びにPCT国際特許出願公開第WO03/010175号、同第WO03/082190号及び同第WO02/048152号に記載されたスピロ化合物などのNPY Y5受容体アンタゴニストなどの）神経ペプチド−Y受容体アンタゴニスト、甲状腺模倣薬、デヒドロエピアンドロステロンまたはそのアナログ、グルココルチコイド受容体アゴニスト又はアンタゴニスト、オレキシン受容体アンタゴニスト、グルカゴン様ペプチド−１受容体アゴニスト、（Regeneron Pharmaceuticals, Inc., Tarrytown, NY 及びProcter & Gamble Company, Cincinnati, OHからのアキソキン（登録商標）（Axokine）などの）繊毛様神経栄養因子、ヒトアグーチ関連タンパク質（AGRP）、グレリン受容体アンタゴニスト、ヒスタミン３受容体アンタゴニストまたは逆アゴニスト、ニューロメディンU受容体アゴニストなどを含む。以下に示す好ましい作用物質を含む他の抗肥満薬は、当業者にとって周知であるか又は本開示を参照することによって容易に明らかになる。
【００７７】
特に好ましいのは、オルリスタット、シブトラミン、ブロモクリプチン、エフェドリン、レプチン、リモナバント、シュードエフェドリン；ペプチドYY3-36又はそのアナログ；及び２−オキソ−N−（５−フェニルピラジニル）スピロ−［イソベンゾフラン−１（３H），４’−ピペリジン］−１’−カルボキサミドから選ばれる抗肥満薬である。好ましくは、本発明の化合物及び併用療法は、エクササイズ及び賢明な食事とともに投与される。
【００７８】
本発明の組み合わせ、医薬組成物、及び方法における使用のための代表的な抗肥満薬は、当業者に知られた方法を用いて製造可能であり、例えば、シブトラミンは米国特許第4,929,629号に記載のとおりに製造可能であり；ブロモクリプチンは米国特許第3,752,814号及び同第3,752,888号に記載の通りに製造可能であり；オルリスタットは米国特許第5,274,143号、同第5,420,305号、同第5,540,917号及び同第5,643,874号に記載のとおりに製造可能であり；リモナバントは米国特許第5,624,941号に記載の通りに製造可能であり；（そのアナログを含む）PYY3-36は、米国特許出願公開第2002/0141985号及びPCT国際出願公開第WO03/027637号に記載のとおりに製造可能であり；NPY Y5受容体アンタゴニスト、２−オキソ−N−（５−フェニルピラジニル）スピロ［イソベンゾフラン−１（３H），４’−ピペリジン］−１’−カルボキサミドは、米国特許出願公開第2002/0151456号に記載の通りに製造可能である。
【００７９】
キット
本発明は、本明細書中に記載の病気および状態の予防及び治療において使用されるためのPDE10アンタゴニストを含む、キット又は医薬パッケージも提供する。キット又はパッケージは、錠剤、カプセル、又は凍結乾燥粉末の形態の１つ以上のPDE10アンタゴニストに加えて、かかる病気又は状態の予防又は治療における該アンタゴニストの使用についての指示書を含むことができる。アンタゴニストは、瓶又は（ブリスターパックなどの）他の適切な形態でキット又はパッケージ中で提供されることができる。場合により、該キット又は医薬パッケージは、他の医薬としての活性物質（例えば、抗肥満薬などの上記で列挙された作用物質）及び／又は希釈剤、針、シリンジ、アプリケーターなどの薬物の投与に使用される品も提供することができる。
【００８０】
本発明は、部分的に以下の実験結果に基づく。本発明が特定の実施態様との関係で記載される一方、実行可能な他の変更及び改変は、本発明の一部であり、かつ、添付の請求項の範囲内にある。本出願は、本分野において知られた又は慣行に含まれそして過度の実験なしに確認されることのできる、本開示から離れたものを含む、任意の等価物、変更物、使用、又は一般的に本発明の原理に従う本発明の適応物を網羅することを意図される。
【実施例】
【００８１】
以下の方法において使用される化合物は、本明細書中の以下において記載されるとおりに製造した。
【００８２】
（ACOMPLIAの商標でも知られる）リモナバントは、Sanofi-Synthelabo Inc., New York, NYから入手可能であるか、又は米国特許第5,624,941号に記載されたとおりに製造される。
【００８３】
６、７−ジメトキシ−４−［３−（キノキサリン−２−イルオキシ）−ピロリジン−１−イル］−キナゾリン（化合物IIA）の製造
【化８】
2008501776.tif 000009
【００８４】
THF（５００mL）中の２−（ピロリジン−３−イルオキシ）−キノキサリン（１０．５ｇ、４８．９ミリモル）、６，７−ジメトキシ−４−クロロキナゾリン（１１．０ｇ、４８．９ミリモル）、及び炭酸カリウム（３３．８ｇ、２４４ミリモル）の混合物及び水（１００mL）を７５℃で１６時間加熱した。混合物を真空下で濃縮し、残渣を塩化メチレンに溶解した。溶液を１N NaOHで洗浄し、綿栓を通して乾燥した。そして、溶液を濃縮し、そして得られた茶色の泡状物をシリカゲル上のクロマトグラフィーにかけ、９：１の酢酸エチル／メタノールで溶出して、１７．３ｇのオフホワイトの粉末を得た。酢酸エチル／メタノールによる研和で１５．０ｇのオフホワイトの粉末を得た。固体をイソプロパノールに懸濁し、そして１．０モル当量のリン酸で処理した。一夜攪拌後、固体を濾過して集め、１８．０ｇの標題化合物（IIA）を白色粉末として得た。マススペクトル（M+N）m/z＝４０４．２．
【００８５】
４−（２−フルオロ−フェニル）−６，７−ジメトキシ−２−ピペラジン−１−イル−キナゾリン（IIIA）の製造
【化９】
2008501776.tif 000010
【００８６】
ステップ１：ジオキサン（３．６ml、０．５M）中の２，４−ジクロロ−６，７−ジメトキシ−キナゾリン（５５５mg、２．１４ミリモル）溶液に、２−フルオロフェニルボロン酸（２５０mg、１．７８ミリモル）、トリシクロヘキシルホスフィン（３０mg、０．０６当量）、炭酸セシウム（８６７mg、１．５当量）及びトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（３２mg、０．０２当量）を加えた。反応混合物をN2下で１８時間１００℃で加熱した。反応混合物をセライトを通して濾過し、濃縮した。バイオテージ（biotage）４０Mカラムを使用するMPLC精製法により５〜４０％の酢酸エチル／へキサンで溶出して、標題化合物を白色固体として得た（３３３mg、５９％）。
【００８７】
最終ステップ：
エタノール（２ml、０．５M）中の２−クロロ−４−（２−フルオロフェニル）−６，７−ジメトキシキナゾリン（２８７mg、０．９ミリモル）の溶液に、ピペラジン（３８９mg、５当量）を加えた。反応混合物を１００℃で１８時間加熱した。反応混合物を濃縮し、バイオテージ２５Mカラムを用いて０．５%の水酸化アンモニウムを含む０−１５％メタノール／クロロホルムで溶出するMPLCで精製して、標題化合物を黄色の固体（２３１mg、７１％）として得た。加速器質量分析：（C20H22N4O2FについてのAPCI m/z=３６９．１７４２、分子量計算値３６９．１７２７）。
【００８８】
２−［４−（４−ピリジン−４−イル−２H−ピラゾール−３−イル）−フェノキシメチル］−キノリン（化合物IVA）の製造
【化１０】
2008501776.tif 000011
【００８９】
ステップ１：アセトン（４７ml、０．２M）中の２−クロロメチルキノリン（２ｇ、９．３ミリモル）の溶液に、４−ヒドロキシ安息香酸メチルエステル（１．４２ｇ、１．０当量）及び炭酸カリウム（３．８６ｇ、３当量）を加えた。反応混合物をN2雰囲気下で１６時間６０℃に加熱し、周囲温度に冷却し、１N 水酸化ナトリウム（５０ml）／酢酸エチル（１００ml）中に注いだ。層分離し、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過して濃縮した。４０Mカラム上の５〜３０％の酢酸エチル／へキサン勾配で溶出するバイオテージMPLCを行い、標題化合物を白色固体として得た（１．６６ｇ、６１％）。
【化１１】
2008501776.tif 000012
【００９０】
ステップ２：テトラヒドロフラン（８．５ml）及びメタノール（３ml）中の４−（キノリン−２−イルメトキシ）−安息香酸メチルエステル（５００mg、１．７ミリモル）に１N NaOH（３．４ml、２当量）を加えた。反応混合物を周囲温度で１６時間攪拌した。反応混合物に、５０mlの塩水を加え、そして、1N HClでpHを３に調節して、白色沈殿を得て、これを濾過し、乾燥して標題化合物を白色固体として得た（４６３mg、９８％）。
【化１２】
2008501776.tif 000013
【００９１】
ステップ３：４−（キノリン−２−イルメトキシ）−安息香酸（２５．９８ｇ、９３ミリモル）の溶液に２５０mlの塩化チオニルをN2下で加えた。反応混合物を３時間攪拌し、そして過剰の塩化チオニルを真空下で除去した。酸塩化物をテトラヒドロフラン（４５０ml）に溶解し、そしてトリエチルアミン（５０ml、４当量）をゆっくりと加えた。O，N−ジメチルヒドロキシルアミンハイドロクロライド（２７ｇ、３当量）を加え、そして反応物を１８時間攪拌した。反応混合物をロータリーエバポレーター上に置き、溶媒を除去し、１N NaOH及び塩化メチレン間で分配し、分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルを通して濾過し、３０〜７０％酢酸エチル／ヘキサンで溶出して、標題化合物が茶色のオイルであることを示した（２６．２６ｇ、８７％）。
【化１３】
2008501776.tif 000014
【００９２】
ステップ４：テトラヒドロフラン中のリチウムジイソプロピルアミド（１．０M）の溶液に、４−ピコリン（７．５５ml、５当量）を０℃、N2下で滴下して加えた。３０分後、アニオンを−７８℃に冷却した。分離用丸底フラスコ中で、N-メトキシ−N−メチル−４−（キノリン−２−イルメトキシ）−ベンズアミド（５．０、１５．５ミリモル）をテトラヒドロフラン（７７ml、０．２M）に溶解し、そしてN2下で−７８℃に冷却した。１．２当量の４−ピコリンアニオンを該アミド溶液に滴下して加えた。４５分後、さらに１当量の４−ピコリンアニオンを加えた。添加の３０分後、酢酸（４０ml）を滴下して加え、そして反応物をゆっくりと周囲温度まで温めた。固体生成物（酢酸塩）を濾過し、そして飽和炭酸水素ナトリウム及びジクロロメタン間で分配した。層分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、そして濃縮して標題化合物を褐色固体として得た（４．４１ｇ、８０％）。
【化１４】
2008501776.tif 000015
【００９３】
ステップ５：２−ピリジン−４−イル−１−［４−（キノリン−２−イルメトキシ）−フェニル］−エタノン（４．０ｇ、１１．３ミリモル）に、ジメトキシメチル−ジメチルアミン（１０ml）を加え、そして反応混合物を還流温度で１時間加熱した。濃縮すると、定量的収量の標題化合物を得て、これを次のステップで使用した。
LC/MS：RT＝１．４分、MS(M+H m/z=４１０．２）
【００９４】
最終ステップ：メタノール中の３−ジメチルアミノ−２−ピリジン−４−イル−１−［４−（キノリン−２−イルメトキシ）−フェニル］−プロペノン（9.57ｇ、２７ミリモル）に、ヒドラジン水和物（３．３３ｇ、４０．５ミリモル）を加え、そして反応混合物を還流温度で１時間加熱した。溶媒を蒸発させて白色固体を得た。固体を水およびエチルエーテルで洗浄した。固体を熱エタノール／酢酸エチル（１０ml/g）から再結晶化して、８．３４ｇの標題化合物を得た（IVA：８２％）。
【化１５】
2008501776.tif 000016
【００９５】
方法
年齢を合わせた雄性PDE10 KO （−／−）マウス（米国特許公報第2003・0121069号）（ｎ＝２０）及び野生型（＋／＋）の同腹仔対照（ｎ＝２０）を、試験開始前に２週間、気候順化させ、水とPurina5001げっ歯類固形飼料（Purina, Brentwood, MO）を自由摂取させた。
【００９６】
マウスを個別にケージに入れ、そして２つの群に分けた：Purina5001固形飼料のままの対照マウス群；及び４５kcal％脂肪からなる飼料（D12331 Rodent Diet, Research Diets, Inc., New Brunswick, NJ）に切り替えて６週間の試験を持続した他の群。食物摂取を２４時間、５日／週（月曜日−金曜日）のサイクルで測定した。体重を、第０日及びその後は食物摂取を測定するのと同じときに測定した。
【００９７】
体組成を第０日及び試験の第６週後にPIXImus（商標）装置（GE Lunar Corporation, Madison, WI）を用いて分析した。脂肪蓄積量を評価するために、マウスの３６０°X線画像を商業的に入手可能なマイクロコンピュータトモグラフィー（CT）システム（MicroCAT（登録商標）、ImTek Inc., Oak Ridge, TN)と高分解能CCD/リンスクリーン検出器を用いて得た。スキャナーは、空間分解能が５０μM未満の円柱状の直径／長視野（long field view）が３６mm／３６mmから成る。X線源は、０．４mAに陰極電流をセットして、４０KeVでバイアスした。麻酔したマウスを解剖学的に正しい仰臥位でＸ線透過マウスベッドに置き、尾の末端をマイクロCTに最も近く、そして頭部末端を麻酔デリバリチューブに対して保持した。スキャン獲得領域の中心を各マウスの腸骨の一番高いところのレベルに合わせることによって、マウスの正しい位置決めをしマウスベッド平面に対して９０°で最初のX線画像を得た。一旦正しいアラインメントを確認したら、各動物をスキャンした。各スキャンは、２５０μ秒／投射の露出時間で１９６の別々の投射からなり；総画像獲得時間は、１４５μM解像度でおよそ１２分であった。
【００９８】
それによってマウスのマイクロCTスキャンにおいて獲得した１９６投射が操作されて、マウスの２次元断層画像画像が作られる、画像再構成を、MicroCAT（登録商標）Reconstruction, Visualization and Analysis Software(In Tek Inc., Oak Redge, TN)(Paulus et al., Neoplasia 2: 62-70, 2000)を用いて実施した。個々の脂肪蓄積量を測定するために、スキャンあたり２組の再構成画像を各マウスについて作製した。６つの再構成画像の最初の組は、鼠頚部及び精巣上体の脂肪組織蓄積量の分析のためのモンタージュを提供した。椎間及び椎骨の中心の両方を目印として決定した、９枚の切片からなる第二の再構成の組は、後腹膜及び腸間膜の脂肪組織蓄積量を決定するのに使用した。
【００９９】
画像分析のために、再構成したビットマップ画像をTIFF画像に変換した。TIFF画像を次に分析し、そして脂肪蓄積量をWindows（登録商標）のためのScion Image（Scion Corporation, Frederick MD）を用いて測定した。ペイントブラッシュツール（画素サイズ＃３）を用いて個々の蓄積脂肪を分離する限界ラインを設置し、そして、各脂肪領域の画素カウントをScion Image ソフトウエアによって測定した。上部及び下部の画素強度閾値を選び、この試験においては、１１５〜１８７の間のルックアップテーブル（LUT）を蓄積脂肪を捕捉するのに最適であると決定した。
【０１００】
各切片間の平均画素数を計算した（切片n＋切片n+1）／２。個々の蓄積脂肪を表す総画素数を、各切片間の平均画素数に各切片の平均画素数を乗じることによって計算した。最後に、画素カウント数を以下の式:脂肪量（mg）＝0.000915g／μl×0.000757μl／ボクセル×1000ｍｇ／ｇ×ボクセルカウントにしたがって蓄積量に変換した。第一の因子は、脂肪組織中の油脂の主要な貯蔵物であるトリグリセリドの密度を表す、トリオレイン酸グリセリルの比重に合わせて補正する。第二の因子は、画素あたりの体積であり、第三の因子は得られた質量をmg単位に変換する。
【０１０１】
体組成の測定に続いて、Oxymaxシステム（Columbus Instruments, Columbus, OH）を用いて、エネルギー支出及び酸素消費量を測定した。マウスを標準的な実験条件下で飼育し、そして実験食を与えた。マウスを密閉した熱量計のチャンバー（８インチ×４インチ×５．５インチ）に気候順化させた（チャンバー当たりマウス１匹）。チャンバーを活動モニター中に置いた。熱量計を各使用の前に較正し、空気流を１．６リッター／分に調節し、そして系の設定及びサンプリング時間をそれぞれ、６０秒及び１５秒に設定した。酸素消費、二酸化炭素生成、及び移動活動を１０分ごとに４時間測定した。
【０１０２】
経口耐糖能試験を、試験の第８週が終わったあと、一夜の絶食後、午前８時３０分ころにマウスに対して実施した。眼窩後血液サンプルを０時間に採取し、その後、２g/kg体重の経口グルコース負荷を投与した。グルコースチャレンジの後、３０、７５及び１２０分でさらなる血液サンプルを採取した。２５μLの血液を、マイクロ試験管（Denville Scientific, Inc., Metuchen, NJ）中の１００μLの０．０２５パーセントヘパリン加食塩水に加えた。試験管をMicrofuge（登録商標）１２（Beckman Coulter, Fullerton, CA）において最高設定において２分間回転させた。以下に記載する血漿グルコースの測定のために血漿を集めた。
【０１０３】
試験最終日の朝に、体重及び核心部体温を測定し、そして血漿グルコース、トリグリセリド、コレステロール、及び遊離脂肪酸の測定のために、血液サンプルを眼窩後洞から採取した。その後、マウスをと殺し、そして約１ミリリッターの血液を、リチウムヘパリン（Beckton-Dickinson, Inc., Franklin Lakes, NJ）を入れたMicrotainer（登録商標）血漿分離管に集めた。管をBeckman Microfuge 12中で最大設定で５分間回転させた。血漿を１．５mlのエッペンドルフチューブに採取し、そして液体窒素中で凍結した。精巣上体の脂肪体も切除し、重量測定し、そして液体窒素中で即時凍結した。肝臓及び筋肉のバイオプシーも採取した。すべてのサンプルを−８０℃で保存した。
【０１０４】
血漿グルコース、トリグリセリド、コレステロール、ヘモグロビンA1c、及びフルクトサミンを、Roche/Hitachi 912 Clinical Chemistry Analyzer 及び製造者により供給されたキット（Roche Diagnostics Corp., Indianapolis, IN）を用いて測定した。血漿中の遊離脂肪酸（FFA）を、上記の分析計とNEFACキット（Wako Chemicals USA Richmond, VA）を用いて測定した。血漿中のcGMPを、BioTrak(商標)酵素−免疫測定系（Amersham, Piscataway, NJ）を用いて測定した。血漿中のインスリン及びレプチンは、どちらもALPCO Diagnostics(Windham, NH)から供給されたMercodia ELISA Insulin キット及びmLeptin ELISAキットをそれぞれ用いて、同様の技術で評価した。血漿中のアディポネクチンを、マウスアディポネクチンELISAキット（Linco Research, St. Charles, MO）を用いて定量した。すべてのアッセイを各製造者の指示にしたがって行った。
【０１０５】
酸素消費
PDE10阻害剤の体重及び酸素消費に対する効果を試験するために、食事誘発性肥満（DIO）のマウスモデルを使用した。マウスを４５％脂肪食で１４週間超、維持して肥満を誘発した。DIOマウスに化合物IVAを１４日間毎日２回投与し、１用量１５mg/kgで処置した。対照マウスに０．５％メチルセルロースのビヒクルを投与した。先に記載のとおりに測定を行った。
【０１０６】
絶食誘発性の摂食アッセイ
食餌の中止後の急性の再摂食応答の低下における有効性についても、PDE10阻害剤を試験した。雄性CDラットを一夜絶食した。PDE10阻害剤（別の実験における化合物IIA及びIIIA）を、食物の復帰の３０分前にラットに投与した。食物消費をモニターし、所定の時点で重量測定し、PDE10阻害剤の効果をビヒクル処置した対照ラットと比較した。
【０１０７】
実施例１
高脂肪食を与えたマウス（KOマウス）における体重、体脂肪及び代謝速度に対するPDE10阻害の効果
PDE10 KOマウスにおけるPDE10遺伝子破壊の結果としてのPDE10阻害は、HFDを消費する一方、肥満の発生に対して耐性の頑強な表現型を生じた。図１に示すように、HFDを摂取した野生型マウスは、固形飼料を摂食した野生型マウスに比べて体重の増加を示したが、HFD-摂食PDE10 KOは、固形飼料−摂食PDE10 KOマウスに匹敵して体重を維持した。体重をベースライン体重のパーセントとして計算した場合、HFD-摂食PDE10 KOマウスの肥満耐性表現型は図２にしめすように明白であった。ベースライン体重よりも約３０〜３５％高い体重増加をちょうど７週間で示すHFD-摂食野生型マウスとは対照的に、HFD−摂食PDE10 KOマウスはそのベースライン体重から５〜１０％しか増加せず、固形飼料−摂食PDE10 KOマウス及び固形飼料−摂食野生型マウスの両方において観察した増加に匹敵した。図３に示す、体組成の結果は、HFD-摂食野生型マウスが経験した体重増加は、体脂肪蓄積の増加によるものであった。HFD-摂食PDE10 KOマウスにおいて体重のいくらか増加した一方、HFD−摂食野生型群に比べれば、劇的に少ないものであった（それぞれ、総体重の７％対１９％）。
【０１０８】
HFD-摂食野生型マウス及びHFD-摂食PDE10 KOマウス間の体重の相違は、PDE10 KOマウスにおける食物消費の減少または活動レベルの増加のいずれでも説明できるものではなかった。PDE10 KOマウスは、対応する野生型に比べて、同じ程度、またはもしかするとより高い程度までHFDを消費した（図４）。さらに、PDE10 KOマウスはいかなる活動レベルの増加も示さなかった。反対に、PDE10 KOマウスは野生型マウスに比べて活動の低下を示す傾向にあった（図５）。
【０１０９】
しかしながら、代謝速度における変化は明白であった。総VO2（図６）または安静時VO2（図７）として測定した酸素消費（VO2）は、HFD-摂食KOマウスにおいて増加した。安静時VO2は、固形飼料−摂食PDE10 KO マウスについての数値で１９％増加した。HFD及び固形飼料で飼育された野生型マウスについての安静時VO2値は、固形飼料−摂食PDE10 KOマウスと等しかった。
【０１１０】
実施例２
高脂肪食を与えたマウス（KOマウス）における代謝パラメータに対するPDE10阻害剤の効果
以下の表１は、固形飼料−摂食及びHFD-摂食野生型及びPDE10 KO群のそれぞれについての血漿中代謝物（平均±S.E.M.）を比較したものである。一方、固形飼料では、PDE10 KOマウスは、固形飼料−摂食野生型マウスに比べて、脂肪体重量、トリグリセリド、FFA、及びレプチンの減少を示し、並びにコレステロール及びヘモグロビンA1c（HbA1c）の減少に向かう傾向があった。アディポネクチンが固形飼料−摂食PDE10 KOマウスにおいて減少傾向を示した一方、脂肪のグラムについて正規化するとアディポネクチンはPDE10 KOマウスにおいて増加していた。HFDを摂食した場合、PDE10 KOマウスは野生型に比べて、脂肪体重量、トリグリセリド、FFA、レプチン、及びインスリンの減少を示した。HFD-摂食PDE10 KOマウスもコレステロール、アディポネクチン、及びフルクトサミンの減少傾向を示した。固形飼料−摂食マウスとともに、HFD-摂食PDE10 KOマウスも、値を脂肪のグラムに正規化すると、アディポネクチンの増加を示した。
【０１１１】
【表１】
2008501776.tif 000017
【０１１２】
HFDを摂食しても高インスリン血症の発生に対して比較的耐性であることに加えて、PDE10 KOマウスは、耐糖能障害の発生に対して比較的耐性であった。図８Bに示すように、HFD-摂食野生型マウスについての曲線の下の面積は、HFD-摂食PDE10 KOマウスについてのものよりも大きかった。耐糖能におけるこの相違は、固形飼料−摂食野生型及びPDE10 KOマウスを比較した場合には明らかでなかった（図８Aを参照のこと）。
【０１１３】
実施例３
絶食誘発性の再摂食に対するPDE10阻害剤投与の効果（CDラット）
上記の絶食誘発性摂食アッセイにおいて化合物IIA、化合物IIIA及びリモナバントを試験した。化合物IIAは、１０mg/kg、１mg/kg、及び０．１mg/kgで試験し；化合物IIIAは、３２mg/kg、１０mg/kg、３mg/kg及び１mg/kgで試験し；そしてリモナバントは３mg/kgで試験した。化合物IIA及び化合物IIIAはどちらも１０mg/kgで有効であった。化合物IIA及び化合物IIIAは、どちらもラットにおける絶食誘発性の再摂食を、ヒトにおける体重損失を促進することが知られている対照化合物（CB-1アンタゴニスト、リモナバント）に比べて濃度依存性の様式で減少させることを示した（図９A、９B及び９Cを参照のこと）。
【０１１４】
実施例４
体重に対するPDE10阻害剤投与の効果（DIOマウス）
毎日２回、１５mg/kgの用量で投与（po）した化合物IAで、DIOマウスを処置した。対照マウスには、ビヒクル、０．５％メチルセルロースを投与した。化合物IVAによる処置は、DIOマウスにおいて体重減少を引き起こした（図１０）。体重損失の開始は、３日間の処置の後であった（第４日には明らかであった）。化合物IVA処置したマウスにおいて少量の食物摂取の減少もあり、これは体重損失に寄与した（図１１を参照のこと）。化合物IV及びビヒクル処置したマウスにおいて試験の最後に酸素消費を測定した。化合物IV処置マウスにおいて、わずかな、有意でない酸素消費の増加があった（図１２を参照のこと）。これらの結果は、PDE10A阻害剤による慢性的な治療が、肥満に対して有益な効果を有することができることを示している。
【０１１５】
上記の実施例に記載の結果は、PDE10の阻害が、体重減少、体脂肪減少及び脂肪蓄積増加に関連する障害の治療の有効な手段であることを実証している。これらの結果はまた、体重、体脂肪の減少、そして、脂肪蓄積の増加に関連する障害の治療に加えて、PDE10阻害剤がNIDDM、耐糖能障害、インスリン耐性及びメタボリックシンドロームに関連する障害の治療においても有効であることも示している。
【図面の簡単な説明】
【０１１６】
【図１】図１は、４つの実験群：固形飼料を摂食した野生型（WT）マウス（WT-固形飼料）；固形飼料を摂食したPDE10ノックアウト（KO）マウス（KO-固形飼料）；高脂肪食を摂食した野生型マウス（WT-HFD）；高脂肪食を摂食したPDE10ノックアウト（KO）マウス（KO-HFD）についての、グラムで表した体重の経時変化を示す。WT-固形飼料マウスに比べて、WT-HFDマウスは体重の増加を示した。しかしながら、KO-固形飼料-マウスに比べて、KO-HFDマウスは同様の増加をしなかった。
【図２】図２は、体重をベースラインのパーセンテージで表した、体重の同じ経時変化を示す。
【図３】図３は、固形飼料及び高脂肪食の後の４つの実験群についての体組成を示す棒グラフである。図１及び図２に示すような、他の群に比較したWT-HFDにおける体重増加は、脂肪質量と体脂肪％の増加と対応する。
【図４】図４は、4つの実験群についての、体重について正規化した食物消費の詳細な経時変化を示す。図１及び２に示すように、WT-HFDマウスに比べてKO-HFDマウスの体重増加は少ないが、KO-HFDマウスは、WT-マウスに比較して、同じまたはわずかに多い量の高脂肪食（HFD）を消費した。
【図５】図５は、活動レベルを示す棒グラフである。PDE10KOマウスは、食餌とは独立してWTマウスに比べて活動の低下の傾向のあることが観察された。
【図６】図６は、酸素消費（VO2）を示し、そして他の群に比べて、KO-HFDマウスにおいては、総VO２が増加していることを示す。
【図７】図７は、他の3つの群に比べて、KO-HFDマウスにおいて安静時VO2も増加していることを示す。
【図８Ａ】図８Aは、４つの実験群における経口耐糖能試験で通常の固形飼料を用いた結果を示す。
【図８Ｂ】図８Bは、４つの実験群における経口耐糖能試験で高脂肪食（HFD）を用いた結果を示す。HFD-摂食PDE10ノックアウト（KO）マウスは、対応するその野生型（WT）に比べて耐糖能の改善を示した。
【図９Ａ】図９Aは、Obesity Food Intake Model-Fasted Induced Feeding Assayを用いる、絶食CDラットにおける化合物IIAの経時食物摂取に対する効果を示す棒グラフである。化合物IIAは、１０mg/kgで有効であった。リモナバント（アコンプリア（Acomplia）（商標））は、比較対象として３mg/kgで使用する。
【図９Ｂ】図９Bは、Obesity Food Intake Model-Fasted Induced Feeding Assayを用いる、絶食CDラットにおける化合物IIIAの経時食物摂取に対する効果を示す棒グラフである。化合物IIIAは、１０mg/kgで有効であった。リモナバント（アコンプリア（Acomplia）（商標））は、比較対象として３mg/kgで使用する。
【図９Ｃ】図９Cは、絶食CDラットにおける化合物IIA及び化合物IIIAの有効性を、Obesity Food Intake Model-Fasted Induced Feeding Assayを用いて、１０mg/kgと３２mg/kgで比較した棒グラフである。リモナバント（アコンプリア（Acomplia）（商標））は、比較対象として３mg/kgで使用する。
【図１０】図１０は、化合物IVAで処置した食事誘発性肥満（DIO）マウスにおける体重変化を示す折れ線グラフである。DIOマウスを、１５mg/kgの用量で1日２回（po）投与した化合物IVAで処置した。対照マウスには、ビヒクル、0.5%メチルセルロースを投与した。
【図１１】図１１は、化合物IVAで処置した食事誘発性肥満（DIO）マウスにおける食物摂取の経時変化を示す折れ線グラフである。DIOマウスを、１５mg/kgの用量で1日２回（po）投与した化合物IVAで処置した。対照マウスには、ビヒクル、0.5%メチルセルロースを投与した。
【図１２】図１２は、食事誘発性肥満（DIO）マウスを化合物IVAで処置したあとの酸素消費の変化を示す折れ線グラフである。DIOマウスを、１５mg/kgの用量で1日２回（po）投与した化合物IVAで処置した。対照マウスには、ビヒクル、0.5%メチルセルロースを投与した。
【図１】
2008501776.tif 000018
【図２】
2008501776.tif 000019
【図３】
2008501776.tif 000020
【図４】
2008501776.tif 000021
【図５】
2008501776.tif 000022
【図６】
2008501776.tif 000023
【図７】
2008501776.tif 000024
【図８Ａ】
2008501776.tif 000025
【図８Ｂ】
2008501776.tif 000026
【図９Ａ】
2008501776.tif 000027
【図９Ｂ】
2008501776.tif 000028
【図９Ｃ】
2008501776.tif 000029
【図１０】
2008501776.tif 000030
【図１１】
2008501776.tif 000031
【図１２】
2008501776.tif 000032
【国際調査報告】
2008501776.tif 000033
2008501776.tif 000034
2008501776.tif 000035