(57)【要約】  本発明は、環状ノナペプチドアミドおよびその製造方法並びに疾患、特に細菌性感染疾患を処置および/または予防する薬剤の製造のためのその使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
2008518986.tif 000146
〈式中、
Ｒ６は、水素またはメチルを表し、
Ｒ７は、式：
【化２】
2008518986.tif 000147
｛ここで、
＊は、アミンに対する結合部位であり、
Ｒ１は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルまたはＣ６−Ｃ１０−アリール
［ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員〜７員のヘテロシクリル、５員〜１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノ
（ここで、この部分に関し、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリルおよびヘテロアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員〜７員のヘテロシクリルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
から成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］を表し、
Ｒ２は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルまたはＣ６−Ｃ１０−アリール
［ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員〜７員のヘテロシクリル、５員〜１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノ
（ここで、この部分に関し、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリルおよびヘテロアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員〜７員のヘテロシクリルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
から成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］を表し、
Ｒ４は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルまたはＣ６−Ｃ１０−アリール
［ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員〜７員のヘテロシクリル、５員〜１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノ
（ここで、この部分に関し、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリルおよびヘテロアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員〜７員のヘテロシクリルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
から成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］を表し、
Ｒ５は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルまたはＣ６−Ｃ１０−アリール
［ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員〜７員のヘテロシクリル、５員〜１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノ
（ここで、この部分に関し、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリルおよびヘテロアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員〜７員のヘテロシクリルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
から成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］を表す｝の基を表す〉
の化合物またはその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物の一つ。
【請求項２】
Ｒ６が、メチルを表し、
Ｒ７が、式：
【化３】
2008518986.tif 000148
［ここで、
＊は、アミンに対する結合部位であり、
Ｒ１は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルブタ−１−イル、トリメチルシリルメチル、１−ヒドロキシ−２−メチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２−エチル−２−メチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジエチルブタ−１−イル、フェニルメチル、１−ヒドロキシ−１−フェニルメチル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチル（ここで、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
を表し、
Ｒ２は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルブタ−１−イル、トリメチルシリルメチル、１−ヒドロキシ−２−メチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２−エチル−２−メチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジエチルブタ−１−イル、フェニルメチル、１−ヒドロキシ−１−フェニルメチル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチル
（ここで、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
を表し、
Ｒ４は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルブタ−１−イル、トリメチルシリルメチル、１−ヒドロキシ−２−メチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２−エチル−２−メチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジエチルブタ−１−イル、フェニルメチル、１−ヒドロキシ−１−フェニルメチル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチル
（ここで、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
を表し、
Ｒ５は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルブタ−１−イル、トリメチルシリルメチル、１−ヒドロキシ−２−メチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２−エチル−２−メチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジエチルブタ−１−イル、フェニルメチル、１−ヒドロキシ−１−フェニルメチル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチル
（ここで、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
を表す］の基を表す、
ことを特徴とする請求項１に記載の化合物またはその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物の一つ。
【請求項３】
Ｒ６が、メチルを表し、
Ｒ７が、式：
【化４】
2008518986.tif 000149
［ここで、
＊は、アミンに対する結合部位であり、
Ｒ１は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチル
（ここで、３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１または２個の置換基によって置換されていてもよい）
を表し、
Ｒ２は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチル
（ここで、３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１または２個の置換基によって置換されていてもよい）
を表し、
Ｒ４は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチル
（ここで、３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１または２個の置換基によって置換されていてもよい）
を表し、
Ｒ５は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチル
（ここで、３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１または２個の置換基によって置換されていてもよい）
を表す］の基を表す、
ことを特徴とする請求項１または２に記載の化合物またはその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物の一つ。
【請求項４】
請求項１に記載の式（Ｉｂ）の化合物の製造方法であって、
［Ａ］式：
【化５】
2008518986.tif 000150
（式中、Ｒ６は、請求項１に示される意味を有する）
の化合物を、最初に式：
【化６】
2008518986.tif 000151
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ５は、請求項１に示される意味を有し、
Ｒ３は、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルまたはベンジルオキシカルボニルを表し、
そして、Ｘ１は、ハロゲン、好ましくは臭素、塩素またはフッ素、またはヒドロキシを表す）
の化合物と反応させ、次いで酸と共におよび/または水素化分解によって反応させる、
または、
［Ｂ］式：
【化７】
2008518986.tif 000152
（式中、Ｒ６は、請求項１に示される意味を有する）
の化合物を、最初に式：
【化８】
2008518986.tif 000153
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ５は、請求項１に示される意味を有する）
の化合物と反応させ、次いで、４段階合成で、
ａ）フッ化物試薬と反応させ、
ｂ）酸と反応させ、
ｃ）必要に応じて塩基の存在下での脱水剤と反応させ、そして、
ｄ）水素化分解する、
ことを特徴とする方法。
【請求項５】
疾患の処置および/または予防のための請求項１〜３の一つに記載の化合物。
【請求項６】
疾患を処置および/または予防する薬剤を製造するための請求項１〜３の一つに記載の化合物の使用。
【請求項７】
細菌感染症を処置および/または予防する薬剤を製造するための請求項１〜３の一つに記載の化合物の使用。
【請求項８】
請求項１〜３の一つに記載の化合物と、不活性で、非毒性の薬学的に許容される補助剤を含んでなる薬剤。
【請求項９】
細菌感染症の処置および/または予防のための請求項８に記載の薬剤。
【請求項１０】
抗菌的に有効な量の少なくとも一つの請求項１〜３の一つに記載の化合物、請求項８に記載の薬剤または請求項６または７によって得られる薬剤を投与することによってヒトおよび動物における細菌感染症を制御する方法。
【請求項１１】
式：
【化９】
2008518986.tif 000154
の化合物、２−（トリメチルシリル）エチル−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−フェニルアラニナート・トリフルオロ酢酸塩（実施例１９Ａ）の製造方法であって、
式：
【化１０】
2008518986.tif 000155
の化合物、メチル  （ｒａｃ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−フェニルプロパノアートを、６段階合成で、
ａ）塩基の存在下で、ジベンジルアザジカルボキシラートと反応させ、
ｂ）Ｎ,Ｎ,Ｎ,Ｎ−テトラメチルグアニジンと反応させ、
ｃ）ラニーニッケルの存在下で水素と反応させ、
ｄ）塩基の存在下でＮ−ベンジルオキシカルボニルオキシスクシンイミドエステルと反応させ、
ｅ）塩基と反応させ、そして、続いてクロマトグラフィーによりエナンチオマー分離し、
そして、
ｆ）ジクロロメタン中のトリフルオロ酢酸またはジオキサン中の塩化水素と反応させる、
ことを特徴とする製造方法。
【請求項１２】
式：
【化１１】
2008518986.tif 000156
の化合物、（３Ｒ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニン（実施例１７Ａおよび実施例３５Ａ）
または、
式：
【化１２】
2008518986.tif 000157
の化合物、２−（トリメチルシリル）エチル  （３Ｒ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニナート（実施例１８Ａ）
または、
式：
【化１３】
2008518986.tif 000158
の化合物、２−（トリメチルシリル）エチル  （３Ｒ）−３−アミノ−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−フェニルアラニナート・トリフルオロ酢酸塩（実施例１９Ａ）
または、
式：
【化１４】
2008518986.tif 000159
の化合物、メチル  （２Ｓ,３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート（実施例３３Ａ）
または、
式：
【化１５】
2008518986.tif 000160
の化合物、メチル  （２Ｓ,３Ｒ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート（実施例３４Ａ）
または、
式：
【化１６】
2008518986.tif 000161
の化合物、（３Ｓ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｄ−フェニルアラニン（実施例３６Ａ）
または、
式：
【化１７】
2008518986.tif 000162
の化合物、２−（トリメチルシリル）エチル  （３Ｓ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｄ−フェニルアラニナート（実施例３７Ａ）
または、
式：
【化１８】
2008518986.tif 000163
の化合物、２−（トリメチルシリル）エチル  （３Ｓ）−３−アミノ−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｄ−フェニルアラニナート・トリフルオロ酢酸塩（実施例３８Ａ）
の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、環状ノナペプチドアミドおよびその製造方法並びに疾患、特に細菌性感染疾患を処置および/または予防する薬剤の製造のためのその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
細菌細胞壁はいくつかの酵素によって合成されており（細胞壁生合成）、微生物の生存および再生に必須である。こうした巨大分子およびその合成に関与しているタンパク質の構造は、高度に細菌内に保存されている。こうした必須の特質および均一性のために、細胞壁生合成は新規な抗生物質の絶好の攻撃ポイントである(D.W. Green, The bacterial cell wall as a source of antibacterial targets, Expert Opin. Ther. Targets, 2002, 6, 1-19)。
【０００３】
バンコマイシン(Vancomycin)およびペニシリンは、細菌の細胞壁生合成阻害剤であり、こうした作用原則の抗菌効果の成功例を示している。これらは、細菌性感染症、特にグラム陽性病原菌による感染症の処置に臨床的に数十年間使用されてきた。耐性微生物、たとえば、メチシリン耐性ブドウ球菌、ペニシリン耐性肺炎球菌およびバンコマイシン耐性腸球菌 (F. Baquero, Gram-positive resistancey: challenge for the development of new antibiotics, J. Antimicrob. Chemother., 1997, 39, Suppl A:1-6; A.P. Johnson, D. M. Livermore, G.S. Tillotson, Antimicrobial susceptibility of Gram-positive bacteria: what's current, what's anticipated?, J. Hosp. Infect., 2001, (49), Suppl A:3-11)、並びに、最近初めてのバンコマイシン耐性ブドウ球菌 (B. Goldrick, First reported case of VRSA in the United States, Am. J. Nurs., 2002, 102, 17) の出現の増大のために、こうした物質はその治療的効果を次第に失いつつある。
【０００４】
本発明は、公知の種類の抗生物質に対する交差耐性のない新規な種類の細胞壁生合成阻害剤を述べている。
【０００５】
天然物質リソバクチン(lysobactin) Ａおよびいくつかの誘導体は、ＵＳ ４,７５４,０１８中に抗菌活性を有するとして述べられている。リソバクチンの単離および抗菌活性はまたＥＰ−Ａ−１９６０４２およびＪＰ ０１１３２６００中にも述べられている。ＷＯ ０４/０９９２３９には、抗菌活性を有するリソバクチン誘導体が述べられている。
【０００６】
リソバクチンおよびカタノシン(katanosin)の抗菌活性については、更にO'Sullivan, J. et al., J. Antibiot. 1988, 41, 1740-1744, Bonner, D. P. et al., J. Antibiot. 1988, 41, 1745-1751, Shoji, J. et al., J. Antibiot. 1988, 41, 713-718およびTymiak, A. A. et al., J. Org. Chem. 1989, 54, 1149-1157中に述べられている。
【０００７】
活性化合物の安定性は、薬剤としての適合性の重要なパラメーターである。他のファクターの間で、安定性は、薬剤の保管および投与の際に重要な役割を演じている。天然物は、薬剤にとって安定性が不十分であることが多い。
【０００８】
抗菌的に活性なデプシペプチドであるリバクチンは、水性の中性から塩基性の媒体（ｐＨ＞７）中で数日以内に加水分解する。これによって、ラクトンが開裂した抗菌的に不活性な“開環リソバクチン”を形成する。それ故、環安定性が高いリソバクチンの活性類似体が望ましい。
【０００９】
本発明の一つの目的は、ヒトおよび動物における細菌性疾患の処置のために、同等または改善された抗菌活性、より優れた耐容性、たとえば、より低い腎毒性、および水性の中性から塩基性の媒体中で改善された安定性を有するリオバスチンの代替化合物を提供することである。
【００１０】
本発明では、驚くべきことに、リソバクチンアミド（環状ノナペプチドアミド）が、リソバクチンと類似した抗菌活性を有し、水性の中性から塩基性の媒体中での加水分解に対して安定であることを見出した。リソバクチンアミドは、リソバクチンのアザアナログであり、これは、これまで述べられておらず、そして、中央のラクトン官能性がラクタム官能性によって置き換えられている。
【発明の開示】
【００１１】
本発明は
式：
【化１】
2008518986.tif 000002
〈式中、
Ｒ６は、水素またはメチルを表し、
Ｒ７は、式：
【化２】
2008518986.tif 000003
｛ここで、
＊は、アミンに対する結合部位であり、
Ｒ１は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルまたはＣ６−Ｃ１０−アリール
［ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員〜７員のヘテロシクリル、５員〜１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、カルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノ
（ここで、この部分に関し、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員〜７員のヘテロシクリルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
から成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていても
よい］を表し、
Ｒ２は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルまたはＣ６−Ｃ１０−アリール
［ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員〜７員のヘテロシクリル、５員〜１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノ
（ここで、この部分に関し、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリルおよびヘテロアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員〜７員のヘテロシクリルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
から成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］を表し、
Ｒ４は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルまたはＣ６−Ｃ１０−アリール
［ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員〜７員のヘテロシクリル、５員〜１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノ
（ここで、この部分に関し、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリルおよびヘテロアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員〜７員のヘテロシクリルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
から成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］を表し、
Ｒ５は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルまたはＣ６−Ｃ１０−アリール
［ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員〜７員のヘテロシクリル、５員〜１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノ
（ここで、この部分に関し、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリルおよびヘテロアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員〜７員のヘテロシクリルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
から成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］を表す｝の基を表す〉
の化合物およびその塩、その溶媒和物およびその塩の溶媒和物に関する。
【００１２】
引き続き後で言及され、式（Ｉ）、（Ｉａ）および（Ｉｂ）によって包含される化合物が塩、溶媒和物、塩の溶媒和物およびプロドラッグでない限りにおいて、本発明化合物は、式（Ｉ）、（Ｉａ）および（Ｉｂ）の化合物およびその塩、溶媒和物、塩の溶媒和物およびプロドラッグであり、式（Ｉ）、（Ｉａ）および（Ｉｂ）およびその塩、溶媒和物、塩の溶媒和物およびプロドラッグによって包含されている下記に明記されている化合物であり、および代表的実施形態として下記に明記され、そして、式（Ｉ）、（Ｉａ）および（Ｉｂ）並びにその塩、溶媒和物、塩の溶媒和物およびプロドラッグによって包含されている化合物は、本発明化合物である。
【００１３】
本発明化合物は、その構造によっては、立体異性体形（エナンチオマー、ジアステレオマー）として存在することができる。それ故、本発明は、エナンチオマーまたはジアステレオマーおよびそのそれぞれの混合物に関連する。立体異性体的に均一な成分はエナンチマーおよび/またはジアステレオマーのこうした混合物から公知の方法で単離することができる。
【００１４】
本発明化合物が、互変異性体の形態で生じることができる場合は、本発明は、互変異性体形態のすべてを含んでなる。
【００１５】
本発明の目的のために好ましい塩は、本発明化合物の生理学的に許容される塩である。しかしながら、製薬的な適用自体に適切でないが、たとえば、本発明化合物の単離または精製に使用することができる混合塩または塩も含まれる。本発明の目的のための混合塩とは、二つまたはそれ以上の異なる酸または塩基、たとえば、トリフルオロアセタート・メシラート塩を包含する付加塩を意味する。
【００１６】
本発明化合物の生理学的に許容される塩には、鉱酸、カルボン酸およびスルホン酸の酸付加塩、たとえば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、フマール酸、マレイン酸および安息香酸の塩が含まれる。
【００１７】
本発明化合物の生理学的に許容される塩には、また、例証かつ好ましいものとして、アルカリ金属塩（たとえば、ナトリウム塩およびカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（たとえば、カルシウム塩およびマグネシウム塩）およびアンモニアから誘導されるアンモニウム塩または１〜１６個の炭素原子を有する有機アミン、例証かつ好ましいものとして、エチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、ジメチルアミノエタノール、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、アルギニン、リシン、エチレンジアミンおよびＮ−メチルピペリジンのような通例の塩基の塩も含まれる。
【００１８】
本発明では、溶媒和物は、溶媒分子と配位結合（coordination)して、固体または液体状態の複合体を形成する本発明化合物のそれらの形態を指す。水和物は、配位結合が、水との間でおこなわれる溶媒和物の特定の形態である。
【００１９】
本発明では、置換基は別途指定されない限り次の意味を有する：
【００２０】
アルキル自体およびアルコキシ、アルキルアミノ、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニルおよびアルキルカルボニルアミノ中の“アルク(alk)”および“アルキル(alkyl)”は、通例１〜６、好ましくは１〜４、特に好ましくは１〜３個の炭素原子を有する直鎖または分枝したアルキルラジカル、例証として、好ましくは、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルブタ−１−イル、ｎ−ペンチルおよびｎ−ヘキシルを表す。
【００２１】
アルコキシは、例証として且つ好ましくは、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｎ−ペントキシおよびｎ−ヘキソキシを表す。
【００２２】
アルケニルは、２〜６個の炭素原子数を有する直鎖または分枝したアルケニルラジカルを表す。２〜４個、特に好ましくは２〜３個の炭素原子数を有する直鎖または分枝したアルケニルラジカルが好ましい。たとえば且つ好ましくは、次のものが言及される：ビニル、アリル、ｎ−プロパ−１−エン−１−イル、ｎ−ブタ−２−エン−１−イル、２−メチルプロパ−１−エン−１−イルおよび２−メチルプロパ−２−エン−１−イル。
【００２３】
アルキルアミノは、一つまたは二つ（互いに独立して選択される）のアルキル置換基を有するアルキルアミノラジカル、例証且つ好ましくは、メチルアミノ、エチルアミノ、ｎ−プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルアミノ、ｎ−ペンチルアミノ、ｎ−ヘキシルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジエチルアミノ、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ、Ｎ−メチル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノ、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノ、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ、Ｎ−エチル−Ｎ−ｎ−ペンチルアミノおよびＮ−ｎ−ヘキシル−Ｎ−メチルアミノを表す。Ｃ１−Ｃ３−アルキルアミノとは、たとえば、１〜３個の炭素原子を有するモノアルキルアミノラジカルまたはアルキル置換基につきそれぞれ１〜３個の炭素原子を有するジアルキルアミノラジカルを表す。
【００２４】
アリールアミノは、アミノ基によって結合しているアリール置換基、所望により、たとえば、アリールまたはアルキルのような別の置換基がアミノ基に結合しているアリール置換基を表し、例証且つ好ましくは、フェニルアミノ、ナフチルアミノ、フェニルメチルアミノまたはジフェニルアミノを表す。
【００２５】
アルキルカルボニルは、例証且つ好ましくは、メチルカルボニル、エチルカルボニル、ｎ−プロピルカルボニル、イソプロピルカルボニル、ｔｅｒｔ−ブチルカルボニル,ｎ−ペンチルカルボニルおよびｎ−ヘキシルカルボニルである。
【００２６】
アルコキシカルボニルは、例証且つ好ましくは、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ｎ−ペントキシカルボニルおよびｎ−ヘキソキシカルボニルを表す。
【００２７】
アリールカルボニルは、カルボニル基によって結合しているアリール置換基、例証且つ好ましくは、フェニルカルボニル、ナフチルカルボニルおよびフェナントレニルカルボニルを表す。
【００２８】
アルキルカルボニルアミノは、例証且つ好ましくは、メチルカルボニルアミノ、エチルカルボニルアミノ、ｎ−プロピルカルボニルアミノ、イソプロピルカルボニルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルアミノ、ｎ−ペンチルカルボニルアミノおよびｎ−ヘキシルカルボニルアミノを表す。
【００２９】
アリールカルボニルアミノは、例証且つ好ましくは、フェニルカルボニルアミノ、ナフチルカルボニルアミノおよびフェナントレニルカルボニルアミノを表す。
【００３０】
シクロアルキルは、通例、３〜６個の炭素原子を有するシクロアルキル基、例証且つ好ましくは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルを表す。
【００３１】
アリールは、通例、６〜１０個までの炭素原子を有する単環から三環までの芳香族炭素環基を表す：フェニルおよびナフチルが例証でき且つ好ましい。
【００３２】
ヘテロシクリルは、通例、５から７個の環原子（ring atoms)を有し、かつ３個まで、好ましくは、２個までのＮ、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２の系列からのヘテロ原子および/またはヘテロ基を有する、好ましくは単環式または二環式ヘテロ環基である単環式または多環式ヘテロ環基を表す。このヘテロシクリル基は、飽和していることもできるし、一部不飽和であってもよい。Ｏ、ＮおよびＳの系から二つまでのヘテロ原子を有する５員〜７員の単環式飽和ヘテロシクリル基が、好ましく、例証且つ好ましくは、テトラヒドロフラニル、ピロリジニル、ピロリニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、ピペラジニル、モルホリニルおよびペルヒドロアゼピニルである。
【００３３】
ヘテロアリールは、通例、５から１０個まで、好ましくは５ないし６個の環原子を有し、且つＳ、ＯおよびＮの系列から５個まで、好ましくは４個までのヘテロ原子を有する芳香族単環もしくは二環式基を表し、例証且つ好ましくは、チエニル、フリル、ピロリル、チアゾリル、オキサゾリル、イミダゾリル、ピリジル、ピリミジル、ピリダジニル、インドリル、インダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、キノリニルおよびイソキノリニルである。
【００３４】
ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素、好ましくは、フッ素および塩素を表す。
【００３５】
図面の説明：
図１： 実施例１２Ａの単結晶Ｘ線構造、オルテップ図（Ortep plot)（５０％）を示す。
図２： 実施例２１Ａの１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ,ｄ５−ピリジン）を示す。
【００３６】
式（Ｉｂ）において、
Ｒ６が、メチルを表し、
Ｒ７が、式：
【化３】
2008518986.tif 000004
｛ここで、
＊は、アミンに対する結合部位を表し、
Ｒ１は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルブタ−１−イル、トリメチルシリルメチル、１−ヒドロキシ−２−メチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２−エチル−２−メチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジエチルブタ−１−イル、フェニルメチル、１−ヒドロキシ−１−フェニルメチル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチル
［ここで、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］
を表し、
Ｒ２は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルブタ−１−イル、トリメチルシリルメチル、１−ヒドロキシ−２−メチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２−エチル−２−メチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジエチルブタ−１−イル、フェニルメチル、１−ヒドロキシ−１−フェニルメチル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチル
［ここで、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］
を表し、
Ｒ４は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルブタ−１−イル、トリメチルシリルメチル、１−ヒドロキシ−２−メチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２−エチル−２−メチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジエチルブタ−１−イル、フェニルメチル、１−ヒドロキシ−１−フェニルメチル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチル
［ここで、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］
を表し、
Ｒ５は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルブタ−１−イル、トリメチルシリルメチル、１−ヒドロキシ−２−メチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２−エチル−２−メチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジエチルブタ−１−イル、フェニルメチル、１−ヒドロキシ−１−フェニルメチル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチル
［ここで、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］
を表す｝の基を表す、
化合物およびその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物が優先される。
【００３７】
式（Ｉｂ）において、
Ｒ６が、メチルを表し、
Ｒ７が、式：
【化４】
2008518986.tif 000005
｛ここで、
＊は、アミンに対する結合部位であり、
Ｒ１は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチル
［ここで、３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１または２個の置換基によって置換されていてもよい］
を表し、
Ｒ２は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチル
［ここで、３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１または２個の置換基によって置換されていてもよい］
を表し、
Ｒ４は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチル
［ここで、３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１または２個の置換基によって置換されていてもよい］
を表し、
Ｒ５は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチル
［ここで、３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１または２個の置換基によって置換されていてもよい］
を表す｝の基を表す、
化合物またはその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物もまた優先される。
【００３８】
式（Ｉｂ）において、
Ｒ６が、メチルを表し、
Ｒ７が、式：
【化５】
2008518986.tif 000006
（ここで、
＊は、アミンに対する結合部位であり、
そしてＲ１およびＲ２は、上記に示された意味を有する）の基を表す、
化合物もまた優先される。
【００３９】
式（Ｉｂ）において、
Ｒ６が、メチルを表し、
Ｒ７が、式：
【化６】
2008518986.tif 000007
（ここで、
＊は、アミンに対する結合部位であり、
Ｒ４およびＲ５は、上記に示された意味を有する）の基を表す、
化合物もまた優先される。
【００４０】
本発明は、また、式：
【化７】
2008518986.tif 000008
｛式中、
Ｒ１は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル
またはＣ６−Ｃ１０−アリール
［ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員〜７員のヘテロシクリル、５員〜１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノ
（ここで、この部分に関し、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリルおよびヘテロアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員〜７員のヘテロシクリルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
から成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］を表し、
Ｒ２は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルまたはＣ６−Ｃ１０−アリール
［ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員〜７員のヘテロシクリル、５員〜１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノ
（ここで、この部分に関し、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリルおよびヘテロアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員〜７員のヘテロシクリルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
から成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］を表す｝
の化合物およびその塩、その溶媒和物およびその塩の溶媒和物に関する。
【００４１】
式（Ｉ）において、
Ｒ１が、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルブタ−１−イル、トリメチルシリルメチル、１−ヒドロキシ−２−メチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２−エチル−２−メチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジエチルブタ−１−イル、フェニルメチル、１−ヒドロキシ−１−フェニルメチル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチル
［ここで、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］
を表し、
Ｒ２が、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルブタ−１−イル、トリメチルシリルメチル、１−ヒドロキシ−２−メチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２−エチル−２−メチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジエチルブタ−１−イル、フェニルメチル、１−ヒドロキシ−１−フェニルメチル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチル
［ここで、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］
を表す、
式（Ｉ）の化合物およびその塩、その溶媒和物およびその塩の溶媒和物もまた優先される。
【００４２】
式（Ｉ）において、
Ｒ１は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチル
［ここで、３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１または２個の置換基によって置換されていてもよい］
を表し、
Ｒ２は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチル
［ここで、３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１または２個の置換基によって置換されていてもよい］
を表す、
式（Ｉ）の化合物およびその塩、その溶媒和物およびその塩の溶媒和物もまた優先される。
【００４３】
本発明は、また式：
【化８】
2008518986.tif 000009
｛式中、
Ｒ１は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルまたはＣ６−Ｃ１０−アリール
［ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員〜７員のヘテロシクリル、５員〜１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノ
（ここで、この部分に関し、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリルおよびヘテロアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員〜７員のヘテロシクリルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
から成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］を表し、
Ｒ２は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルまたはＣ６−Ｃ１０−アリール
［ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員〜７員のヘテロシクリル、５員〜１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノ
（ここで、この部分に関し、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリルおよびヘテロアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員〜７員のヘテロシクリルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
から成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］を表す｝
の化合物およびその塩、その溶媒和物およびその塩の溶媒和物に関する。
【００４４】
本発明は、更に式（Ｉｂ）の化合物を製造する方法に関連し、
ここで、
［Ａ］式：
【化９】
2008518986.tif 000010
（式中、Ｒ６は、上記に示される意味を有する）
の化合物を、最初に式：
【化１０】
2008518986.tif 000011
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ５は、上記に示される意味を有し、
Ｒ３は、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルまたはベンジルオキシカルボニルを表し、
そして、Ｘ１は、ハロゲン、好ましくは臭素、塩素またはフッ素、またはヒドロキシを表す）
の化合物と反応させ、次いで酸と共におよび/または水素化分解によって反応させるか、
または、
［Ｂ］式：
【化１１】
2008518986.tif 000012
（式中、Ｒ６は、上記に示される意味を有する）
の化合物を、最初に式：
【化１２】
2008518986.tif 000013
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ５は、上記に示される意味を有する）
の化合物と反応させ、次いで、４段階合成で、
ａ）テトラブチルアンモニウムフルオリドのようなフッ化物試薬と反応させ、
ｂ）酸と反応させ、
ｃ）必要に応じて塩基の存在下での脱水剤と反応させ、そして、
ｄ）水素化分解する、
式（Ｉｂ）の化合物の製造方法に関する。
【００４５】
方法［Ａ］：
Ｘ１がハロゲンである場合は、第一段階の反応は、通例不活性溶媒中で行われるが、必要に応じて、塩基の存在下で、好ましくは、大気圧下、−３０℃から５０℃の温度範囲で行われる。
【００４６】
不活性溶媒は、たとえば、テトラヒドロフラン、メチレンクロリド、ピリジン、ジオキサン、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリジンまたはジメチルホルムアミドであり；ピリジンまたはジメチルホルムアミドが好ましい。
【００４７】
塩基は、たとえば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンまたはＮ−メチルモルホリンであり；ジイソプロピルエチルアミンが好ましい。
【００４８】
Ｘ１が、ヒドロキシである場合は、第一段階の反応は、通例不活性溶媒中脱水剤の存在下で行われるが、必要に応じて、塩基の存在下で、好ましくは、大気圧中、−３０℃から５０℃の温度範囲で行われる。
【００４９】
不活性溶媒は、たとえば、ジクロロメタンまたはトリクロロメタンのようなハロゲン化炭化水素類、ベンゼンのような炭化水素類、ニトロメタン、ジオキサン、ジメチルホルムアミドまたはアセトニトリルである。溶媒の混合物を使用することも同様に可能である。ジクロロメタンまたはジメチルホルムアミドが特に好ましい。
【００５０】
適切な脱水剤としては、たとえば、カルボジイミド類、たとえば、Ｎ,Ｎ'−ジエチル−、Ｎ,Ｎ'−ジプロピル−、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピル−、Ｎ,Ｎ'−ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−（３−ジメチルアミノイソプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）、Ｎ−シクロヘキシルカルボジイミド−Ｎ'−プロピルオキシメチルポリスチレン（ＰＳ−カルボジイミド）、または、カルボニルジイミダゾールのようなカルボニル化合物、または２−エチル−５−フェニル−１,２−オキサゾリウム  ３−スルファートのような１,２−オキサゾリウム化合物、または２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−メチルイソオキサゾリウム過塩素酸塩、または２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１,２−ジヒドロキノリンのようなアシルアミノ化合物、またはプロパンホスホニックアンヒドリド（propanephosphonic anhydride)、またはクロロギ酸イソブチル、またはビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスホリルクロリド、またはベンゾトリアゾリルオキシトリ（ジメチルアミノ）ホスホニウム  ヘキサフルオロホスファート（benzotriazolyloxytri(dimethylamino)phosphonium hexafluorophosphate)、またはＯ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（ＨＢＴＵ）、２−（２−オキソ−１−（２Ｈ）−ピリジル）−１,１,３,３−テトラメチルウロニウム  テトラフルオロボラート(ＴＰＴＵ)またはＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロフォスファート(ＨＡＴＵ)、または１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、またはベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウム  ヘキサフルオロホスファート（ＢＯＰ）、またはベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスファート（ＰｙＢＯＰ）、またはＮ−ヒドロキシスクシンイミド、または塩基とこれらの混合物がある。
【００５１】
塩基としては、たとえば、炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウムのようなアルカリ金属の炭酸塩または炭酸水素塩、または、トリアルキルアミン、たとえば、トリエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピペリジン、４−ジメチルアミノピリジンまたはジイソプロピルエチルアミンのような有機塩基がある。
【００５２】
好ましくは、縮合は、ＨＯＢｔの存在下でＨＡＴＵを用いるか、またはＥＤＣを用いて行われる。
【００５３】
このプロセスの第二段階における酸との反応は、好ましくは、大気圧下、０℃から４０℃までの温度範囲で行われる。
【００５４】
ここで、適切な酸は、ジオキサン中の塩化水素、酢酸中での臭化水素、またはメチレンクロリド中でのトリフルオロ酢酸である。
【００５５】
このプロセスの第二段階における水素化分解は、水素およびパラジウム・活性炭の存在下、溶媒中で、好ましくは、大気圧下、０℃から４０℃までの温度範囲で行われる。
【００５６】
溶媒は、たとえば、水と酢酸または塩酸水溶液の混合液中の、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノールまたはイソプロパノールのようなアルコール類であり；エタノール、水および酢酸の混合液、またはイソプロパノールと塩酸水溶液の混合液が好ましい。
【００５７】
方法［Ｂ］：
式（ＩＶ）の化合物と、式（Ｖ）または（ＶＩＩ）の化合物の反応は、通例、脱水剤の存在下、不活性溶媒中で、必要に応じて塩基の存在下、好ましくは、大気圧下、−３０℃から５０℃の温度範囲で行われる。
【００５８】
不活性な溶媒の例には、ジクロロメタンまたはトリクロロメタンのようなハロゲン化炭化水素、ベンゼンのような炭化水素、ニトロメタン、ジオキサン、ジメチルホルムアミドまたはアセトニトリルがある。同様に、溶媒の混合物を使用することも可能である。特に好ましいのは、ジクロロメタンまたはジメチルホルムアミドである。
【００５９】
適切な脱水剤としては、たとえば、カルボジイミド類、たとえば、Ｎ,Ｎ'−ジエチル−、Ｎ,Ｎ−ジプロピル−、Ｎ,Ｎ−ジイソプロピル−、Ｎ,Ｎ'−ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−（３−ジメチルアミノイソプロピル）−Ｎ'−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）、Ｎ−シクロヘキシルカルボジイミド−Ｎ'−プロピルオキシメチルポリスチレン（ＰＳ−カルボジイミド）、または、カルボニルジイミダゾールのようなカルボニル化合物、または２−エチル−５−フェニル−１,２−オキサゾリウム  ３−スルファートのような１,２−オキサゾリウム化合物、または２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−メチルイソキオサゾリウム過塩素酸塩、または２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１,２−ジヒドロキノリンのようなアシルアミノ化合物、またはプロパンホスホニックアンヒドリド（propanephosphonic anhydride)、またはクロロギ酸イソブチル、またはビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスホリルクロリド、またはベンゾトリアゾリルオキシトリ（ジメチルアミノ）ホスホニウム  ヘキサフルオロホスファート（benzotriazolyloxytri(dimethylamino)phosphonium hexafluorophosphate)、またはＯ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスファート（ＨＢＴＵ）、２−（２−オキソ−１−（２Ｈ）−ピリジル）−１,１,３,３−テトラメチルウロニウム  テトラフルオロボラート(ＴＰＴＵ)またはＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロフォスファート(ＨＡＴＵ)、または１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、またはベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウム  ヘキサフルオロホスファート（ＢＯＰ）、またはベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスファート（ＰｙＢＯＰ）、またはＮ−ヒドロキシスクシンイミドまたは塩基とこれらの混合物がある。
【００６０】
塩基としては、たとえば、炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウムのようなアルカリ金属の炭酸塩、または炭酸水素塩、または、トリアルキルアミン、たとえば、トリエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピペリジン、４−ジメチルアミノピリジンまたはジイソプロピルエチルアミンのような有機塩基がある。
【００６１】
好ましくは、縮合は、ＨＯＢｔの存在下でＨＡＴＵを用いるか、またはＥＤＣを用いて行われる。
【００６２】
更なる方法の第一段階（ａ）におけるテトラブチルアンモニウムフロリドとの反応は、通例、不活性溶媒中で、好ましくは大気圧下、０℃から４０℃の温度範囲で行われる。
【００６３】
不活性溶媒は、たとえば、ジクロロメタンまたはトリクロロメタンのようなハロゲン化炭化水素、またはテトラヒドロフランまたはジオキサンのようなエーテルである。テトラヒドロフランが特に好ましい。
【００６４】
この方法の第二段階（ｂ）における酸との反応は、好ましくは大気圧下、０℃から４０℃での温度範囲で行われる。
【００６５】
ここで、適切な酸は、ジオキサン中の塩化水素、酢酸中での臭化水素、またはメチレンクロリド中でのトリフルオロ酢酸である。
【００６６】
この方法の第三段階（ｃ）における反応は、式（ＩＶ）の化合物と式（Ｖ）または（ＶＩＩ）の化合物の反応に準じて行われる。
【００６７】
この方法の第四段階（ｄ）における水素化分解は、通例、水素およびパラジウム・活性炭の存在下、溶媒中で、好ましくは、大気圧下、０℃から４０℃までの温度範囲で行われる。
【００６８】
溶媒は、たとえば、水と酢酸または塩酸水溶液の混合液中の、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノールまたはイソプロパノールのようなアルコール類であり；エタノール、水および酢酸の混合液、またはイソプロパノールと塩酸水溶液の混合液が好ましい。
【００６９】
式（ＩＩ）の化合物は、実施例２Ａ、３Ａおよび２０Ａから２６Ａまでのもとでの実験部分に記述されているように、リソバクチン（実施例１Ａ）またはカタノシンＡから水素添加、酵素開裂および再環化によって合成することができる。式（ＩＶ）の化合物は、この合成手順における中間体である。
【００７０】
式(ＩＩＩ）、（Ｖ）、（ＶＩ）および（ＶＩＩ）の化合物は、公知であるか、または公知の方法または下記に述べられている方法によってしかるべき出発物質から合成することができる。
【００７１】
本発明化合物の製造は、次の合成スキームによって図解することができる。
合成スキーム１：
【化１３】
2008518986.tif 000014
【００７２】
合成スキーム２：
【化１４】
2008518986.tif 000015
【００７３】
この発明は、更に式：
【化１５】
2008518986.tif 000016
の化合物、２−（トリメチルシリル）エチル−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−フェニルアラニナート・トリフルオロアセタート（実施例１９Ａ）の製造方法であって、
式：
【化１６】
2008518986.tif 000017
の化合物、メチル  （ｒａｃ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−フェニルプロパノアートを、６段階合成で、
ａ）塩基、好ましくは、リチウムヘキサメチルジシラジドの存在下で、ジベンジル  アザジカルボキシラートと反応させ、
ｂ）Ｎ,Ｎ,Ｎ,Ｎ−テトラメチルグアニジンと反応させ、
ｃ）ラニーニッケルの存在下で水素と反応させ、
ｄ）塩基、好ましくは、Ｎ−メチルモルホリンの存在下で、Ｎ−ベンジルオキシカルボニルオキシスクシンイミドエステルと反応させ、
ｅ）塩基、好ましくは、水酸化ナトリウムと反応させ、そして、続いてクロマトグラフィーによりエナンチオマー分離し、
そして、
ｆ）ジクロロメタン中のトリフルオロ酢酸またはジオキサン中の塩化水素と（with trifluoroacetic acid in dichloromethane or hydrogen chloride in dioxane）反応させる、ことを特徴とする製造方法に関する。
詳細な合成は、実施例１２Ａから実施例１９Ａの実験部分中に述べられている。
【００７４】
本発明は、更に、
式：
【化１７】
2008518986.tif 000018
の化合物、（３Ｒ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニン（実施例１７Ａおよび実施例３５Ａ）
【００７５】
または、
式：
【化１８】
2008518986.tif 000019
の化合物、２−（トリメチルシリル）エチル  （３Ｒ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニナート（実施例１８Ａ）
【００７６】
または、
式：
【化１９】
2008518986.tif 000020
の化合物、２−（トリメチルシリル）エチル（３Ｒ）−３−アミノ−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−フェニルアラニナート・トリフルオロ酢酸塩（実施例１９Ａ）
【００７７】
または、
式：
【化２０】
2008518986.tif 000021
の化合物、メチル  （２Ｓ,３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート（実施例３３Ａ）
【００７８】
または、
式：
【化２１】
2008518986.tif 000022
の化合物、メチル  （２Ｓ,３Ｒ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート（実施例３４Ａ）
【００７９】
または、
式：
【化２２】
2008518986.tif 000023
の化合物、（３Ｓ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｄ−フェニルアラニン（実施例３６Ａ）
【００８０】
または、
式：
【化２３】
2008518986.tif 000024
の化合物、２−（トリメチルシリル）エチル  （３Ｓ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｄ−フェニルアラニナート（実施例３７Ａ）
【００８１】
または、
式：
【化２４】
2008518986.tif 000025
の化合物、２−（トリメチルシリル）エチル  （３Ｓ）−３−アミノ−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｄ−フェニルアラニナート・トリフルオロ酢酸塩（実施例３８Ａ）
の化合物に関する。
【００８２】
本発明の化合物は、薬理活性の有用なスペクトルを示す。これらは、抗菌活性を示す。
それ故、これらはヒトおよび動物の疾患の処置および/または予防のための薬剤としての使用に適切である。
本発明の化合物は、リソバクチンと比較して腎毒性がより低いという特色がある。
本発明の化合物は、水性の中性から塩基性の媒体中で安定性が改善されたという特色がある。こうした特性によって、本発明化合物の保存および薬剤としての投与が改善される。
この記述されているノナデプシペプチドは、細菌の細胞壁生合成の阻害剤として作用する。
【００８３】
本発明の製剤は、細菌および細菌様微生物に対して特に効果的である。それ故、これらは、ヒトおよび獣医学医療におけるこうした病原体によって引き起こされる局所および全身感染症の予防および化学療法に特に適切である。
【００８４】
基本的には、本発明の製剤は、細菌細胞壁(Murein sacculus)または相当する酵素系を有している細菌および細菌様微生物のすべてに対して使用することができる（たとえば、次の細菌によってまたは次の細菌の混合物によって）：
【００８５】
グラム陰性球菌（ナイセリア・ゴノッロエアエ(Neisseria gonorrhoeae)）およびグラム陰性桿菌、たとえば、腸内細菌科(Enterobacteriaceae)(たとえば、エッシェリキア・コーリ（大腸菌：Escherichia coli、ヘモフィルス・インフルエンザエ（インフルエンザ菌：influenzae)、シュウドモナス属(Pseudomonas)、クレブシエラ属(Klebsiella)、シトロバクター属(Citrobacter)(Ｃ. フランディ(C.freundii)、Ｃ.ディバーニィス(C. divernis)）、サルモネラ属(Salmonella)およびシゲラ属(Shigella)；更にエンテロバクター（腸内細菌属:Enterobacter）（Ｅ.エロゲネス(E.aerogenes)、Ｅ.アグロメランス(E. Agglomerans)）、ハフニア属(Hafnia)、セラチア属(Serratia)(Ｓ.マルセセンス(S. marcescens)、プロビデンシア属(Providencia)、エルジニア属(Yersinia)、およびアシネトバクター属(genus Acinetobacter)、ブランハメラ属(Branhamella)およびクラミジア属(Chlamydia)。更に、抗菌スペクトルには、絶対嫌気性細菌（たとえば、バクテロイデス・フラジリス(Bacteroides fragilis)、ペプトコッカス属(genus Peptococcus)の実例、ペプトストレプトコッカス(Peptostreptococcus)およびクロストリジウム属(genus Clostridium)；更にマイコバクテリア(Mycobacteria)、たとえば、Ｍ.チュウベルクローサス(M.tuberculosus)が含まれる。本発明の化合物は、グラム陽性球菌たとえば、スタフィロコッカス（Ｓ.アウレウス(S.aureus)、Ｓ.エピデルミディス(S.epidermidis)、Ｓ.ヘモリティカス(S. haemolyticus)、Ｓ.カルノサス(S. carnosus)、エンテロコッカス（Ｅ.ファカリス(E. faecalis)、Ｅ.フェシウム（E. faecium)およびストレプトコッカス（Ｓ.アガラクティアエ(S. agalactiae)、Ｓ.ニューモニアエ（S. pneumoniae)、Ｓ.パイオゲネス(S. pyogenes)に特に顕著な効果を示す。
【００８６】
上記の細菌リストは、単なる例示に過ぎないものであって、決して限定的に解釈されない。言及することができ、この言及された細菌類または混合感染によって引き起こされる可能性のある、本発明による製剤によって防止できるか、改善されるか、または治療することができる疾患はたとえば、次の疾患を含む：
たとえば、非複雑性および複雑性尿路感染症、非複雑性皮膚および表在性感染症、複雑性皮膚および柔組織感染症、院内肺炎および外来患者肺炎、病院感染肺炎(nosocomial pneumonia)、慢性気管支炎の急性悪化および二次的細菌感染症、急性中耳炎、急性副鼻腔炎、連鎖球菌性咽頭炎、細菌性髄膜炎、非複雑性淋菌性および非淋菌性尿道炎/子宮頸炎、急性前立腺炎、心内膜炎、非複雑性および複雑性腹腔内感染症、婦人科系感染症、骨盤内炎症疾患、細菌性膣疾患、および急性および慢性骨髄炎、急性感染性関節炎、発熱性好中球減少性患者の経験的治療、更に、菌血症、ＭＲＳＡ感染症、急性細菌性下痢、ヘリコバクターピロリ感染症、術後感染症、歯性感染症、眼科感染症(ophthalmological infections)、術後感染症（直腸周囲膿瘍、傷感染症、胆道感染症（biliary infections)、乳腺炎および急性虫垂炎を含む）、嚢胞性線維症、気管支拡張症のようなヒトの感染症。
【００８７】
ヒトに加えて、他の種の細菌性感染症も、処置することできる。次の例が言及できる。
ブタ：下痢、腸毒血症、敗血症、赤痢、サルモネラ症、子宮炎−乳房炎−乳汁分泌不全症候群（ＭＭＡシンドローム）（metritis-mastitis-agalactiae syndrome）、乳房炎；
反芻動物（ウシ、ヒツジ、ヤギ）：下痢、敗血症、気管支肺炎、サルモネラ症、パスツレラ病、生殖器感染症；
ウマ：気管支肺炎、関節症（joint-ill）、産褥感染（puerperal and postpuerperal infections）、サルモネラ病；
イヌおよびネコ：気管支肺炎、下痢、皮膚炎、中耳炎、尿路感染症、前立腺炎；
家禽（ニワトリ、シチメンチョウ、ウズラ、ハト、鑑賞用鳥およびその他）：大腸菌感染症、慢性気管疾患、サルモネラ症、パスツレラ病、オウム病。
【００８８】
同様に、営利・商業的な魚および観賞魚を育てる際および管理する際の、細菌性の病気を処置することが可能であり、この場合、抗菌スペクトルは上記に述べた細菌を超えて、更に、たとえば、パスツレラ属(Pasteurella)、ブルセラ属(Brucella)、キャンピロバクター(Campylobacter)、リステリア属(Listeria)、エリジペロスリス(Erysipelothris)、コリネバクテリア(corynebacteria)、ボレリア属(Borellia)、トレポネーマ属(Treponema)、ノカルジア属(Nocardia)、リケッチエ(Rikettsie)、エルジニア属(Yersinia)のような他の細菌にまで及ぶ。
【００８９】
本発明は、更に、疾患、特に細菌性感染症の処置および/または予防のための本発明化合物の使用に関する。
本発明は、更に、疾患、特に上記に言及した疾患の処置および/または予防のための本発明化合物の使用に関する。
本発明は、更に、疾患、特に上記に言及した疾患を処置および/または予防する薬剤を製造するための本発明化合物の使用に関する。
本発明化合物は、細菌性疾患の予防および/または処置に適切な薬剤を製造するための使用に好ましい。
本発明は、更に、抗菌的に有効な量の本発明化合物を用いる、疾患、特に上記に言及した疾患の処置および/または予防方法に関する。
【００９０】
本発明は、更に、少なくとも一つの本発明化合物と、特に上記に言及した疾患の処置および/または予防のための少なくとも一つまたはそれ以上の別の活性化合物を含んでなる、薬剤に関する。組み合わせのための好ましい活性化合物は、異なった活性スペクトル、特に補充的な活性スペルル、および/または本発明化合物と相乗性を有する抗菌的に活性な化合物である。
【００９１】
本発明化合物は、全身および/または局所に作用することができる。この目的のために、それは、たとえば、経口、非経口、肺、鼻内、舌下、舌、口内（buccally）、直腸、皮膚、経皮、結膜、または耳のルートのような適切な方法で、またはインプラントまたはステントとして投与することができる。
【００９２】
本発明化合物は、こうした投与ルートに適切な投与形態で投与することができる。
たとえば、錠剤（コーティングを施していない錠剤、または、たとえばエンテリックコーティングまたは不溶性であるか、遅延溶解であるか、および本発明化合物の放出を制御するコーティングを施した錠剤）、口腔で急速に崩壊する錠剤、またはフィルム/オブラート、フィルム/凍結乾燥剤、カプセル剤（たとえば、ハードまたはソフトゼラチンカプセル）、糖衣錠、顆粒剤、ペレット、散剤、乳剤、懸濁剤、エアゾール剤または溶液のような、先行技術に従って機能を果たし、本発明化合物を急速および/または改変された方法で送達し、そして結晶および/または非晶および/または溶解形で本発明化合物を含んでいる投与形態が経口投与に適切である。
【００９３】
非経口投与は、吸収ステップを回避するか（たとえば、静脈内、動脈内、心臓内、髄腔内、または腰椎内）、または吸収を介在（たとえば、筋肉内、皮下、皮内、経皮的または腹腔内）して行うことができる。非経口投与に適した投与形態には、とりわけ、溶液、懸濁液、乳化液、凍結乾燥、または無菌散剤の形態での注射および点滴製剤がある。
【００９４】
他の投与ルートでは、たとえば、吸入医薬形態（とりわけ、粉末吸入器、ネブライザ）、鼻用滴剤、液剤、スプレー；舌、舌下、または口内への投与する錠剤、フィルム/ウェハまたはカプセル剤、坐剤、耳または眼用製剤、膣用カプセル、水溶性懸濁液（ローション、振盪混合物）、脂肪親和性懸濁剤、軟膏、クリーム、経皮治療系（たとえば、貼付剤）、ミルク、ペースト、発泡剤、ダスティングパウダー（dusting powders）インプラントまたはステントが適切である。
【００９５】
本発明化合物は、上述した投与形態に変換することができる。このためには、不活性な非毒性の薬学的に好適な補助剤と混和することによって、それ自体公知の方法で行うことができる。こうした補助剤には、とりわけ、担体（たとえば、微結晶セルロース、乳糖、マンニトール）、溶媒（たとえば、液体ポリエチレングリコール）、乳化剤および分散剤または湿潤剤（たとえば、ドデシル硫酸ナトリウム、ポリオキシソルビタンオレエート)、結合剤（たとえば、ポリビニルピロリドン）、合成および天然高分子(たとえば、アルブミン）、安定化剤（たとえば、アスコルビン酸のような抗酸化剤）、着色剤（たとえば、酸化鉄のような無機色素）および矯味および/または矯臭剤が含まれる。
【００９６】
本発明は、更に、通例、一つまたはそれ以上の不活性な、非毒性の薬学的に適切な補助剤と一緒に、本発明の少なくとも一つの化合物を含んでなる薬剤に関し、そして上記に言及した目的のためのその使用に関する。
【００９７】
一般的に、有効な結果を達成するためには、体重あたり約０.００１から１００ｍｇ/ｋｇ、好ましくは、約０.１から１０ｍｇ/ｋｇまでの量を静脈に投与することが、有利であることが立証されており、経口投与の量は、体重あたり、約０.０１から５０ｍｇ/ｋｇ、好ましくは、０.５から１０ｍｇ/ｋｇである。
【００９８】
しかしながら、適切な場合には、特に、体重、投与ルート、活性成分に対するそれぞれ個々の応答、製剤の特質および投与がなされる時間または間隔いかんによって、上述した量を逸脱することも必要でありうる。したがって、上述の最小量より少ない量で済ますことで十分である場合もありうることであり、一方、他の場合では、上述の上限を超えなければならないこともありうる。より多い量を投与する場合は、それらの量を一日にわたり、複数回のそれぞれ個々の投与量に分割することが望ましいといえる。
【００９９】
以下の試験および実施例におけるパーセンテージは、特に述べない限り、重量によるパーセンテージであり、部（パート）は重量による部である。溶媒比、希釈比、および液体/液体溶液（liquid/liquid solutions）の濃度は、それぞれの場合、容積（volume）に基づくものである。
【実施例】
【０１００】
Ａ.  実施例
略語
【表１】
2008518986.tif 000026
【０１０１】
【表２】
2008518986.tif 000027
【０１０２】
文献
ペプチドおよび環状デプシペプチドの命名法については、次を参照：
有機化合物のＩＵＰＡＣ命名法に関するガイド（勧告 １９９３）、１９９３、ブラックウェル化学出版(Blackwell Scientific publications)。
アミノ酸およびペプチドの命名法および記号による表現(symbolism)。勧告 １９８３。生化学命名法に関するＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ合同委員会、UK. Biochemical Journal 1984, 219, 345-373。そして引用文献。
【０１０３】
一般的方法 ＧＣ−ＭＳ、ＬＣ−ＭＳ、ＨＲ−ＭＳ、ＨＰＬＣおよびゲルクロマトグラフィー
方法１（ＴＯＦ−ＨＲ−ＭＳ）：ＴＯＦ−ＨＲ−ＭＳ−ＥＳＩ＋スペクトルが、Micromass LCT機器（キャピラリーボルテージ：３.２ＫＶ、コーンボルテージ：４２Ｖ、source temperature：１２０℃、脱溶媒温度：２８０℃）を用いて記録される。この目的のためにシリンジポンプ(Harvard Apparatusから)がサンプル供給のために使用される。ロイシンエンセファリンが標準品として使用される（Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ）。
【０１０４】
方法２（分析ＨＰＬＣ；Ｓｙｎｅｒｇｉ）：機器タイプ ＨＰＬＣ：ＨＰ１１００シリーズ；ＵＶ ＤＡＤ；カラム：Phenomenex Synergi ２μ Hydro-RP Mercury ２０ｍｍ×４ｍｍ；溶出剤Ａ：水１ｌ＋５０％ギ酸１.０ｍｌ、溶出剤Ｂ：アセトニトリル１ｌ；グラジエント：０.０分 ９０％Ａ→２.５分 ３０％Ａ→３.０分 ５％Ａ→４.５分 ５％Ａ；流速：０.０分 １ｍｌ/分、２.５分/３.０分/４.５分 ２ｍｌ/分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１０５】
方法３（分析ＨＰＬＣ；Ｓｙｎｅｒｇｉ）：機器タイプ ＨＰＬＣ：ＨＰ１０５０シリーズ；ＵＶ ＤＡＤ；カラム：Phenomenex Synergi ２μ Max-RP Mercury ２０ｍｍ×４ｍｍ；溶出剤Ａ：水１ｌ＋０.０５％トリフルオロ酢酸、溶出剤Ｂ：アセトニトリル１ｌ；グラジエント：０.０分 ９０％Ａ→２.５分 ３０％Ａ→３.０分 ５％Ａ→４.５分 ５％Ａ；流速：０.０分 １ｍｌ/分、２.５分/３.０分/４.５分 ２ｍｌ/分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１０６】
方法４（分析ＨＰＬＣ）：機器タイプ ＨＰＬＣ：ＨＰ１０５０シリーズ；ＵＶ ＤＡＤ１１００シリーズ；カラム：Kromasil Ｃ１８、６０×２ｍｍ、３.５μｍ；溶出剤Ａ：水/０.５％過塩素酸、溶出剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−０.５分 ２％Ｂ、０.５−４.５分 ２−９０％Ｂ、４.５−６.５分 ９０％Ｂ、６.５−６.７分 ９０−２％Ｂ、６.７−７.５分 ２％Ｂ；流速：０.７５分ｍｌ/分；オーブン：３０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１０７】
方法５（ＬＣ−ＭＳ）：機器タイプ ＭＳ：Micromass LCT(ESI pos./neg.)；機器タイプ ＨＰＬＣ：ＨＰ １１００シリーズ；ＵＶ ＤＡＤ １１００シリーズ；カラム SymmetryPrep（商標）Ｃ１８、Waters、 ５０×２.１ｍｍ、３.５μｍ；溶出剤Ａ：水/０.１％ギ酸、溶出剤Ｂ：アセトニトリル/０.１％ギ酸；グラジエント ０−１分 ０％Ｂ、１−６分 ０−９０％Ｂ、６−８分 ９０−１００％Ｂ、８−１０分 １００％Ｂ、１０−１０.１分 １００−０％Ｂ、１０.１−１２分 ０％Ｂ、次いでクロマトグラフィーカラムの再生；オーブン：４０℃、流速：０.５ｍｌ/分（１０.１分では暫時１ｍｌ/分まで）、ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１０８】
方法６（分取ＨＰＬＣ；Xterra、Ｃ１８、０.１％ＴＦＡ）：機器：Gilson Abimed HPLC；バイナリポンプ方式(binary pump system)；カラム；Xterra、Waters、５μｍ；１５０×１０ｍｍ；溶出剤Ａ：水/０.１％トリフルオロ酢酸、溶出剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント；０−７分 ５％Ｂ、７−９分 ５−４０％Ｂ、９−１１分 ４０％Ｂ、１１−１８分 ４０−９０％Ｂ、次いでクロマトグラフィーカラムの再生；流速：８ｍｌ/分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１０９】
方法７（ＬＣ−ＭＳ）：機器タイプ ＭＳ：Micromass ZQ；機器タイプ ＨＰＬＣ：Waters Alliance 2795; カラム：Phenomenex Synergi ２μ Hydro-RP Mercury ２０ｍｍ×４ｍｍ；溶出剤Ａ：水１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ、溶出剤Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分 ９０％Ａ→２.５分 ３０％Ａ→３.０分 ５％Ａ→４.５分 ５％Ａ；流速：０.０分 １ｍｌ/分、２.５分/３.０分/４.５分 ２ｍｌ/分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１１０】
方法８（ＬＣ−ＭＳ）：機器：HPLC Agilent Series 1100付Micromass Quattro LCZ; カラム：Phenomenex Synergi ２μ Hydro-RP Mercury ２０ｍｍ×４ｍｍ；溶出剤Ａ：水１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ、溶出剤Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分 ９０％Ａ→２.５分 ３０％Ａ→３.０分 ５％Ａ→４.５分 ５％Ａ；流速：０.０分 １ｍｌ/分、２.５分/３.０分/４.５分 ２ｍｌ/分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２０８−４００ｎｍ。
【０１１１】
方法９（アミノ酸分析）：アミノ酸分析は、Eppendorf/BiotronikからのLC3000アミノ酸分析器を用いて行われる。Eppendorf/Biotronikからの標準分離プログラムを若干改変して使用される。分離プログラムおよび分析器の機能については、機器のハンドブックに詳しく述べられている(Handbuch des Aminosauureanalysators LC 3000［LC 3000 アミノ酸分析器のハンドブック］、Wissenschaftliche Geraute GmbH Biotronik, Maintal, 1996)。
【０１１２】
方法１０（分取ＨＰＬＣ、Ｎｕｃｌｅｏｄｕｒ、ＴＦＡ）：機器：Gilson Abimed HPLC; バイナリポンプ方式(binary pump system)；カラム：Nucleodur Ｃ１８ Gravity、Macherey-Nagel、５μｍ；２５０×２１ｍｍ；溶出剤Ａ：水/０.１％トリフルオロ酢酸、溶出剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−８分 ５％Ｂ、８−４０分 ５−６０％Ｂ、４０−６０分 ６０％Ｂ、６０−７５分 ６０−１００％Ｂ、７５−８０分 １００％Ｂ、次いでクロマトグラフィーカラムの再生；流速：７−１５ｍｌ/分；ＵＶ検出器 ２１０ｎｍ。
【０１１３】
方法１１（分取ＨＰＬＣ、Ｎｕｃｌｅｏｄｕｒ、酢酸）：機器：Gilson Abimed HPLC；バイナリポンプ方式；カラム：Nucleodur Ｃ１８ Gravity、 Macherey-Nagel、５μｍ；２５０×４０ｍｍ；溶出剤Ａ：水/０.２％酢酸、溶出剤Ｂ：アセトニトリル/０.２％酢酸：グラジエント；０−１０分 １０％Ｂ、１０−２４分 １０−３０％Ｂ、２４−２８分 ３０−５０％Ｂ、２８−３５分 ５０％Ｂ、３５−４５分 ５０−６０％Ｂ、４５−５３分 ６０−７０％Ｂ、６０−７０分 １００％Ｂ、次いでクロマトグラフィーカラムの再生；流速：１５−４５ｍｌ/分；ＵＶ検出器 ２１０ｎｍ。
【０１１４】
方法１２（分取ＨＰＬＣ、Ｓｙｍｍｅｔｒｙ、酢酸）：機器：Gilson Abimed HPLC；バイナリポンプ方式(binary pump system)；カラム：SymmetryPrep（商標）Ｃ１８、Waters、７μｍ；３００×１９ｍｍ；溶出剤Ａ：水/０.５−０.２５％酢酸、溶出剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−２分 ５％Ｂ、２−６０分 ５−９０％Ｂ、６０−８０分 １００％Ｂ、次いでクロマトグラフィーカラムの再生；流速：７ｍｌ/分；ＵＶ検出器 ２１０ｎｍ。
【０１１５】
方法１３（分取ＨＰＬＣ；Ｋｒｏｍａｓｉｌ、酢酸）：機器：Gilson Abimed HPLC；バイナリポンプ方式(binary pump system)；カラム：Kromasil-100A Ｃ１８、５μｍ；２５０×３０ｍｍ；溶出剤Ａ：水/０.２５％酢酸、溶出剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−３分 ５％Ｂ、３−３０分 ５−１００％Ｂ、３０−３８分 １００％Ｂ、次いでクロマトグラフィーカラムの再生；流速：２５ｍｌ/分；ＵＶ検出器 ２１０ｎｍ。
【０１１６】
方法１４（Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ−２０によるゲルクロマトグラフィー）：ゲルクロマトグラフィーが、Sephadex LH-20(Pharmaciaから）を用いて圧力なしで行われる。分画(ISCO Foxy 200フラクションコレクター)がＵＶ活性（ＵＶ検出器 ２５４ｎｍ、Knauer)に従って行われる。カラム寸法：３２×７ｃｍ（１０００−１００μｍｏｌスケール）；３０×４ｃｍ（１００−１０μｍｏｌスケール）。メタノールまたはメタノール/０.２％酢酸が溶出剤として使用される。
【０１１７】
方法１５（キラル分取ＨＰＬＣ）：カラム（スチールカラム、寸法 ２５０×３０ｍｍ）；固定相（セレクター ポリ（Ｎ−メタクリロイル−Ｌ−ロイシン−ジシクロプロピルメチルアミド）に基づいて、キラルシリカ/ポリアミド複合体(composite)KBD 5326）；溶出剤：酢酸エチル、定組成溶媒(isocratic)；流速：２５ｍｌ/分；温度：２４℃；ＵＶ検出：２２５ｎｍ；サンプル：２０００μｌの反復注入。
【０１１８】
方法１６（エナンチオマー純度の決定）：カラム（スチールカラム、寸法 ２５０×４.６ｍｍ）；固定相（セレクター ポリ（Ｎ−メタクリロイル−Ｌ−ロイシン−ジシクロプロピルメチルアミド）に基づいて、キラルシリカ/ポリアミド複合体(composite)KBD 5326）；溶出剤：酢酸エチル、定組成溶媒；流速：１ｍｌ/分；温度：２５℃；ＵＶ検出：２２０ｎｍ；サンプル：１０μｌの注入。
キラルシリカ
【０１１９】
方法１７（分析ＨＰＬＣ）：機器タイプ ＨＰＬＣ：ＨＰ１１００シリーズ；ＵＶ ＤＡＤ カラム：Zorbax Eclipse XBD-C8(Agilent)、１５０ｍｍ×４.６ｍｍ、５μｍ；溶出剤Ａ：５ｍｌのＨＣｌＯ４/ｌ 水、溶出剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−１分 １０％Ｂ、１−４分 １０−９０％Ｂ、４−５分 ９０％Ｂ；流速：２.０ｍｌ/分；オーブン：３０℃；ＵＶ検出：２１０および２５４ｎｍ。
【０１２０】
方法１８（分析ＨＰＬＣ）：カラム：Kromasil RP-18、 ６０ｍｍ×２ｍｍ、３.５μｍ；溶出剤Ａ：５ｍｌのＨＣｌＯ４/ｌ 水、溶出剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０分 ２％Ｂ、０.５分 ２％Ｂ、４.５分 ９０％Ｂ、９分 ９０％Ｂ；流速：０.７５ｍｌ/分；オーブン：３０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１２１】
方法１９（分析ＨＰＬＣ）：カラム：Kromasil RP-18、 ２５０ｍｍ×４ｍｍ、５μｍ；溶出剤Ａ：５ｍｌのＨＣｌＯ４/ｌ 水、溶出剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０分 ５％Ｂ、１０分 ９５％Ｂ；流速：１ｍｌ/分；オーブン：４０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１２２】
方法２０（分析ＨＰＬＣ）：カラム：Kromasil RP-18、 ２５０ｍｍ×４ｍｍ、５μｍ；溶出剤Ａ：２ｍｌのＨＣｌＯ４/ｌ 水、溶出剤Ｂ：アセトニトリル；定組成溶媒：４５％Ｂ、５５％Ａ；流速：１ｍｌ/分；オーブン：４０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１２３】
方法２１（分取ＨＰＬＣ；Ｎｕｃｌｅｏｄｕｒ、０.０５−０.１％ＴＦＡ）：機器：Gilson Abimed HPLC; バイナリポンプ方式；カラム：Nucleodur Ｃ１８ Gravity、 Macherey-Nagel、５μｍ、２５０×２１ｍｍ；溶出剤Ａ：水/０.０５−０.１％ＴＦＡ、溶出剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−８分 ５％Ｂ、８−４０分 ５−６０％Ｂ、６０−７５分 ６０−１００％Ｂ、７５−８０分 １００％Ｂ、次いでクロマトグラフィーカラムの再生；流速：７−１５ｍｌ/分；ＵＶ検出器：２１０ｎｍ。
【０１２４】
方法２２（分析ＨＰＬＣ）：機器タイプ ＨＰＬＣ：ＨＰ１０５０シリーズ；ＵＶ ＤＡＤ １１００シリーズ；カラム：Kromasil Ｃ１８、６０ｍｍ×２ｍｍ、３.５μｍ；溶出剤Ａ：水/０.５％ 過塩素酸、溶出剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−０.５分 ２％Ｂ、０.５−４.５分 ２−９０％Ｂ、４.５−９.０分 ９０％Ｂ、９.０−９.２分 ９０−２％Ｂ、９.２−１０.０分 ２％Ｂ；流速：０.７５ｍｌ/分、オーブン：３０℃、ＵＶ検出 ２１０ｎｍ。
【０１２５】
方法２３（分析ＨＰＬＣ）：DAD(G1315B)付Agilent 1100、バイナリポンプ(G1312A)、オートサンプラー(autosampler)(G1313A)、脱ガス剤(G1379A)およびカラムサーモスタット(G1316A);カラム：Synergi ４μ Hydro-RP 80A、４.６×１５０×５ｍｍ；溶出剤Ａ：水＋０.０５％ ７０％過塩素酸；溶出剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−１分 １０％Ｂ、ランプ(ramp)、４−５分 ９０％Ｂ、ランプ、５.５分 １０％Ｂ；流速：２.００ｍｌ/分；オーブン温度：３０℃。
【０１２６】
方法２４（分析ＨＰＬＣ）：機器：DAD(G1315B)付Agilent 1100、バイナリポンプ(G1312A)、オートサンプラー(autosampler)(G1313A)、溶媒脱ガス剤(G1379A)およびカラムサーモスタット(G1316A);カラム：Agilent Eclipse XDB-C8、 ４.６×１５０×５ｍｍ；溶出剤Ａ：０.０５％ ７０％過塩素酸（水中）；溶出剤Ｂ：メタノール；定組成溶媒：０−７分 ５５％Ｂ；流速：２.００ｍｌ/分；カラム温度：４０℃。
【０１２７】
方法２５（分析ＨＰＬＣ）:機器タイプ ＨＰＬＣ：ＨＰ１０５０シリーズ；ＵＶ ＤＡＤ；カラム：Zorbax 300 mSB-C18 ３.５μ,４.６ｍｍ×１５０ｍｍ；溶出剤Ａ：水１ｌ＋０.１％トリフルオロ酢酸、溶出剤Ｂ：アセトニトリル４００ｍｌ/水６００ｍｌ＋０.１％トリフルオロ酢酸；グラジエント：０.０分 １００％Ａ、１.３分 １０％Ｂ、１８.０分 ８０％Ｂ、２０.０分 ８０％Ｂ、２１.０分 １００％Ｂ、２５.０分 １００％Ｂ、２６.０分 ０％Ｂ、３０.０分 ０％Ｂ。流速：１ｍｌ/分；オーブン：４０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１２８】
方法２６（キラルＨＰＬＣ）：Gilson Abimed HPLC; カラム：Daicel Chiralpak AD-H ５μｍ；２５０ｍｍ×２０ｍｍ；溶出剤Ａ：イソヘキサン、溶出剤Ｂ：０.２％酢酸/１％水/２−プロパノール；定組成溶媒：流速：１５ｍｌ/分；ＵＶ検出器 ２１２ｎｍ。
【０１２９】
方法２７（エナンチオマー純度の決定）：スチールカラム、寸法 ２５０ｍｍ×４.６ｍｍ；固定相：Daicel Chirapak AD-H, ５μｍ；溶出剤：エタノール/水/酢酸 １０００：１０：２、定組成溶媒；流速：０.７ｍｌ/分；温度：４５℃；ＵＶ検出：２１５ｎｍ；サンプル：５μｌ注入。
【０１３０】
方法２８（エナンチオマー純度の決定）：カラム（スチールカラム、寸法 ２５０ｍｍ×４.６ｍｍ）；固定相（Chirapak IA）;溶出剤：イソヘキサン/イソプロパノール ４：１、定組成溶媒；流速：１ｍｌ/分；温度：２５℃；ＵＶ検出：２５４ｎｍ；サンプル：１０μｌの注入。
【０１３１】
方法２９（ＬＣ−ＭＳ）：ＵＶ検出：２１０ｎｍ。機器タイプ ＭＳ：Micromass ZQ; 機器タイプＨＰＬＣ：Waters Alliance 2795; カラム：Phenomenex Synergi ２μ Hydro-RP Mercury ２０ｍｍ×４ｍｍ；溶出剤Ａ：水１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ、溶出剤Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分 ９０％Ａ→２.５分 ３０％Ａ→３.０分 ５％Ａ→４.５分 ５％Ａ；流速：０.０分 １ｍｌ/分、２.５分/３.０分/４.５分 ２ｍｌ/分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１３２】
方法３０（ＬＣ−ＭＳ）：機器：HPLC Agilent Series 1100付Micromass Platform LCZ；カラム：Phenomenex Synergi ２μ Hydro-RP Mercury ２０ｍｍ×４ｍｍ；溶出剤Ａ：水１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ、溶出剤Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分 ９０％Ａ→２.５分 ３０％Ａ→３.０分 ５％Ａ→４.５分 ５％Ａ；流速：０.０分 １ｍｌ/分、２.５分/３.０分/４.５分 ２ｍｌ/分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１３３】
方法３１（ＭＡＬＤＩ−ＭＳ）：ＭＡＬＤＩ−ＭＳ/ＭＳによる検討が、ＴＯＦ/ＴＯＦイオン光学および２００ＨＺ Ｎｄ：ＹＡＧ Ｌａｓｅｒ(３５５ｎｍ）を備え付けている4700 Proteomics Analyzer(Applied Biosystems, Framingham, MA, USA)を用いて行われる。準分子イオンは、８ｋＶのイオン源中で加速され、エレクトリカルデフレクター(electrical deflector)（ＭＳ１）を用いて選択され、ＭＳ１とＭＳ２の間に配置された衝撃セル中でアルゴン原子を用いて衝撃される。この結果生じる分離片イオンは、１５ｋＶを用いて再加速され、二回目の飛行時間型質量分析器（ＭＳ２）を用いて特徴付けられる。
【０１３４】
方法３２（キラル分取ＨＰＬＣ）：スチールカラム、寸法 ４２０ｍｍ×７５ｍｍ；固定相：セレクター ポリ（Ｎ−メタクリロイル−Ｌ−ロイシン−ジシクロプロピルメチルアミド）を有しているシリカゲル相；溶出剤Ａ：ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、溶出剤Ｂ：メタノール；グラジエント：０−２２.１７分 １００％Ａ、２２.１８−２７.２４分 １００％Ｂ、２７.２５−４０.３０分 １００％Ａ；流速：１００ｍｌ/分；温度：２４℃；ＵＶ検出：２６０ｎｍ；サンプル：５００００μｌの反復注入。
【０１３５】
方法３３（分取ＨＰＬＣ、Ｎｕｃｌｅｏｄｕｒ、０.０５−０.１％ＴＦＡ）：機器：Gilson Abimed HPLC; バイナリポンプ方式；カラム：Nucleodur Ｃ１８ Gravity、 Macherey-Nagel、 ５μｍ；２５０ｍｍ×４０ｍｍ；溶出剤Ａ：水/０.０５−０.１％トリフルオロ酢酸、溶出剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−１０分 １０％Ｂ,１０−２４分 １０−３０％Ｂ、２４−２８分 ３０−５０％Ｂ、２８−３５分 ５０％Ｂ、３５−４５分 ５０−６０％Ｂ、４５−５３分 ６０−７０％Ｂ、５３−６０分 ６０−９０％Ｂ、６０−７０分 １００％Ｂ、次いでクロマトグラフィーカラムの再生；流速：１５−４５ｍｌ/分；ＵＶ検出器 ２１０ｎｍ。
【０１３６】
方法３４（分取ＨＰＬＣ、Ｋｒｏｍａｓｉｌ、０.０５％ＴＦＡ）：機器：Gilson Abimed HPLC；ＵＶ検出器 ２１０ｎｍ；バイナリポンプ方式；カラム：Kromasil Ｃ１８、５μｍ、１００Å,２５０ｍｍ×２０ｍｍ；溶出剤Ａ：０.０５％トリフルオロ酢酸（水中）、溶出剤Ｂ：０.０５％トリフルオロ酢酸（アセトニトリル中）：流速：２０ｍｌ/分；０−３分 １０％Ｂ、ランプ、３０−３８分 ９０％Ｂ、３０−４５分 １０％Ｂ。
【０１３７】
方法３５（分取ＨＰＬＣ、Ｎｕｃｌｅｏｄｕｒ C18 Gravity、０.０５−０.１％ＴＦＡ）：機器：Gilson Abimed HPLC; バイナリポンプ方式；カラム：Nucleodur Ｃ１８ Gravity、 ５μｍ；２５０ｍｍ×３０ｍｍ；溶出剤Ａ：水/０.０５−０.１％トリフルオロ酢酸、溶出剤Ｂ：アセトニトリル；０−１０分 １０％Ｂ、ランプ、１０.０１−５５分 １００％Ｂ、：流速：１０−６０ｍｌ/分；ＵＶ検出器 ２１０ｎｍ。
【０１３８】
方法３６（分取ＨＰＬＣ、Ｋｒｏｍａｓｉｌ、０.０５％ＴＦＡ）：機器：Gilson Abimed HPLC；バイナリポンプ方式；カラム：Kromasil−１００Ａ Ｃ１８、５μｍ；２５０ｍｍ×３０ｍｍ；溶出剤Ａ：水/０.０５％トリフルオロ酢酸、溶出剤Ｂ：アセトニトリル；０−１０分 １０％Ｂ、ランプ、１０.０１−５５分 １００％Ｂ；流速：３０ｍｌ/分；ＵＶ検出器 ２１０ｎｍ。
【０１３９】
方法３７（分取ＨＰＬＣ、Ｋｒｏｍａｓｉｌ、０.０５％ＴＦＡ）：機器：Gilson Abimed HPLC；バイナリポンプ方式；カラム：Kromasil−１００Ａ Ｃ１８、５μｍ；２５０ｍｍ×２１ｍｍ；溶出剤Ａ：水/０.０５％トリフルオロ酢酸、溶出剤Ｂ：アセトニトリル；０−１０分 １０％Ｂ、ランプ、１０.０１−５５分 １００％Ｂ；流速：２０ｍｌ/分；ＵＶ検出器 ２１０ｎｍ。
【０１４０】
方法３８（分取ＨＰＬＣ、Ｋｒｏｍａｓｉｌ、０.０５％ＴＦＡ）：機器：Gilson Abimed HPLC；；バイナリポンプ方式；カラム：Kromasil−１００Ａ Ｃ１８、５μｍ；２５０ｍｍ×２１ｍｍ；溶出剤Ａ：水/０.０５％トリフルオロ酢酸、溶出剤Ｂ：アセトニトリル/水 ５０/５０；０−１０分 １０％Ｂ、ランプ、１０.０１−５５分 １００％Ｂ；流速：２０ｍｌ/分；ＵＶ検出器 ２１０ｎｍ。
【０１４１】
方法３９（分取ＨＰＬＣ、Ｋｒｏｍａｓｉｌ、０.０５％ＴＦＡ）：機器：Gilson Abimed HPLC；バイナリポンプ方式；カラム：Kromasil−１００Ａ Ｃ１８、５μｍ；２５０ｍｍ×３０ｍｍ；溶出剤Ａ：水/０.０５％トリフルオロ酢酸、溶出剤Ｂ：アセトニトリル ；０−１０分 １０％Ｂ、ランプ、１０.０１−５５分 １００％Ｂ；流速：１０−６０ｍｌ/分；ＵＶ検出器 ２１０ｎｍ。
【０１４２】
方法４０（分取ＨＰＬＣ）：機器：Gilson Abimed HPLC；ＵＶ検出器 ２１０ｎｍ；バイナリポンプ方式；カラム：Waters Symmetry-Prep(商標) Ｃ１８、７μｍ、３００ｍｍ×１９ｍｍ；溶出剤Ａ：０.０５％トリフルオロ酢酸（水中）、溶出剤Ｂ：０.０５％トリフルオロ酢酸（アセトニトリル中）：流速：２０ｍｌ/分；０−３分 １０％Ｂ、ランプ、３０−３８分 ９０％Ｂ、３８−４５分 １０％Ｂ。
【０１４３】
方法４１（分取ＨＰＬＣ、Ｇｒｏｍ−Ｓｉｌ、０.１％ＴＦＡ）：機器：Gilson Abimed HPLC；ＵＶ検出器 ２１０ｎｍ；バイナリポンプ方式；カラム：Grom-Sil SNr.4051 120 ODS-4HE、１０μｍ、２５０ｍｍ×４０ｍｍ；溶出剤Ａ：０.１％トリフルオロ酢酸（水中）、溶出剤Ｂ：０.１％トリフルオロ酢酸（アセトニトリル中）；流速：５０ｍｌ/分；０−３分 １０％Ｂ、３−２７分 グラジエント ランプ、２７−３５分 ９５％Ｂ、３５−４０分 １０％Ｂ。
【０１４４】
方法４２（キラル分取ＨＰＬＣ）：カラム（スチールカラム、寸法 ５００ｍｍ×５０ｍｍ）；固定相(Chirapak AD、２０μｍ)；溶出剤Ａ：イソヘキサン、溶出剤Ｂ：イソプロパノール；グラジエント：０−１１.７４分 １５％Ｂ、１１.７４−１１.７５分 １００％Ｂ、１５.７４分 １００＆Ｂ、１５.７５分 １５％Ｂ、２１.２５分 １５％Ｂ；サンプル調製：５０ｍｌのイソプロパノール/２００ｍｌのイソヘキサンに溶解；注入容量：３０ｍｌ、温度：２４℃；ＵＶ 検出：２２０ｎｍ。
【０１４５】
方法４３（分取ＨＰＬＣ）：機器：Gilson Abimed HPLC；ＵＶ検出器 ２５４ｎｍ；バイナリポンプ方式；カラム：Nucleosil RP-18、 ７μｍ；２５０×５０ｍｍ；流速：３０ｍｌ/分；溶出剤Ａ：水/０.１％トリフルオロ酢酸、溶出剤Ｂ：アセトニトリル/０.１％トリフルオロ酢酸；グラジエント：０−４０分 ２０−２５％Ｂ、４０−６０分 ２５％Ｂ、６０−１１０分 ２５−５０％Ｂ、１１０−１２０分 ５０％Ｂ、１２０−１３０分 ５０−１００％Ｂ、１３０−１６０分 １００％Ｂ、次いでクロマトグラフィーカラムの再生。
【０１４６】
方法４４（分取ＨＰＬＣ）：機器：Gilson Abimed HPLC；ＵＶ検出器 ２５４ｎｍ；バイナリポンプ方式；カラム：Nucleosil RP-18、７μｍ；２５０×５０ｍｍ；流速：４０ｍｌ/分；溶出剤Ａ：水/０.０５％トリフルオロ酢酸、溶出剤Ｂ：アセトニトリル/０.０５％トリフルオロ酢酸；グラジエント：０−１０５分 ２０−２５％Ｂ、１０５−１１１分 ２５％Ｂ、１１１−１３１分 ２５−２７％Ｂ、１３１−１５７分 ２７−３５％Ｂ、１５７−１９２分 ３５−４０％Ｂ、１９２分−２０７分 ４０−４５％Ｂ、次いでクロマトグラフィーカラムの再生。
【０１４７】
一般的な操作手順
操作手順１（ＴＦＡによるＢｏｃ保護基の除去）
Ｂｏｃによって保護された化合物は、ジクロロメタン（反応溶液の１/５−１/１０）に懸濁させ、次いでジクロロメタン（３０％；１００−１ミリモルスケールで出発物質約１ｍｌ/１０ｍｇ、１００−１マイクロモルスケールで約１ｍｌ/１ｍｇ）中のトリフルオロ酢酸をアルゴン保護ガス雰囲気下で加え、この混合物を室温でＨＰＬＣクロマトグラム（方法２）が完全な変換を示すまで撹拌する。次いでこの溶媒を真空中で留去するが、この際浴温度は３０℃を超えないようにする。粗生成物をトルエン中で懸濁させ、再びロータリーエバポレーターで濃縮し、次に高真空下で乾燥する。この手順をトルエンまたはジクロロメタンを用いて数回（２〜５回）繰り返す。
【０１４８】
操作手順２（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基、ジオキサン、４Ｎ塩化水素の除去）
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）によって保護された化合物（１ｍｍｏｌ）が、アルゴン保護ガス雰囲気下、ジオキサン（２−３ｍｌ）中に供給される。室温でかつ激しく撹拌しながら、ジオキサン（３０ｍｌ）中の４Ｎ−塩酸を滴下する。この混合物を分析ＨＰＬＣ（方法２）が完全な変換を示すまで撹拌する（約２時間）。この反応混合物を室温で真空中で蒸発させる。粗生成物を少量のジクロロメタン中に加え、次に真空中で再度溶媒を除去する。この操作を数回、トルエンで（２回）、ジクロロメタンで（２回）繰り返す。最後に、粗生成物を凍結乾燥するか、高真空乾燥の直後に更に反応させる。
【０１４９】
操作手順３（水素化分解によるエステル開裂、Ｃｂｚ保護基の除去）
ペプチドのベンジルエステルあるいはペプチドのＮ−Ｃｂｚによって保護されたアミン（１.２ｍｍｏｌ）を、メタノール（６０ｍｌ）中で溶解し、次に１０％のパラジウム−炭素（１００ｍｇ）をアルゴン保護ガス雰囲気下で加える。この混合物に室温でそして、大気圧下で分析ＨＰＬＣ（方法２）が完全な変換を示すまで水素添加する。この反応混合物をろ過（たとえば、キーゼルグール、セライト（登録商標）に通して）し、真空中で濃縮し次に高真空下で乾燥する。
【０１５０】
操作手順４(加水分解によるエステル開裂、加水分解)
カルボン酸エステル（３ｍｍｏｌ）がアルゴン保護ガス雰囲気下でＴＨＦ/水/ＤＭＦ ２００/１００/２.５（２０ｍｌ）中に提供される。０℃で厳しく温度管理をしながら、粉末(powdered)水酸化リチウム（３.６ｍｍｏｌ、１.２当量）を激しく撹拌した溶液に少量ずつ加える。２時間後、分析ＨＰＬＣによって完全な変換が観察されないときは、固体の水酸化リチウムを再び加える（３.３ｍｍｏｌ、１.１当量）。こうした操作を完全な変換まで繰り返し、そこで、次いでこの反応混合物を０℃でｐＨ３−４に０.１Ｎ塩酸を用いて調整し、次いで凍結乾燥する。次いで粗生成物をゲルクロマトグラフで処理し（方法１４）および/または分取ＨＰＬＣ（方法１３）によって高純度精製する。
【０１５１】
操作手順５（アミドカップリング）
ＨＡＴＵ（１.５−１.８当量）を最初に−２０℃でアルゴン保護ガス雰囲気下で、乾燥ＤＭＦ中のアミンシクロペプチド（１.０当量）、ジペプチド酸（１.５−１.８当量）およびＮＭＭ（１.０−２.０当量）の溶液に加える。この反応混合物を撹拌し（約１５分）そしてＮＭＭ（２.５−３.０当量）を再び加える。この反応混合物を−１０℃から室温までゆっくり暖め、次にこの混合物を更にこの温度でアミン成分の完全な変換が見出されるまで更に撹拌する。固体リン酸二水素カリウム（１０当量、５００μｍｏｌ）を加え、次いでこの反応混合物を高真空下で蒸発させ、次にクロマトグラフィーによって精製する。
あるいは、水およびメタノールを、変換終了次第この反応に加えることができ、次いで分取ＲＰ−ＨＰＬＣまたはゲルクロマトグラフィーによって精製後、生成物が得られる。
【０１５２】
出発物質
実施例１Ａ
Ｄ−ロイシル−Ｎ１−｛（３Ｓ,６Ｓ,１２Ｓ,１５Ｓ,１８Ｒ,２１Ｓ,２４Ｓ,２７Ｓ,２８Ｒ）−６−［（１Ｓ）−２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチル］−１８−（３−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝プロピル）−１２−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−３−（ヒドロキシメチル）−２４−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−メチルプロピル］−２１−イソブチル−１５−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５,８,１１,１４,１７,２０,２３,２６−ノナオキソ−２８−フェニル−１−オキサ−４,７,１０,１３,１６,１９,２２,２５−オクタアザシクロオクタコサン−２７−イル｝−Ｌ−ロイシンアミド ビストリフルオロアセタート（リソバクチン)
【化２５】
2008518986.tif 000028
【０１５３】
醗酵：
培地：
ＹＭ：イースト−モルト寒天：Ｄ−グルコース（４ｇ/ｌ）、イースト抽出物（４ｇ/ｌ）、モルト抽出物（１０ｇ/ｌ）、１リットルのレワティット水（Lewatit water)。滅菌（１２１℃、２０分）の前に、ｐＨを７.２に調整する。
ＨＰＭ：マンニトール（５.４ｇ/ｌ）、イースト抽出物（５ｇ/ｌ）、肉ペプトン（３ｇ/ｌ）。
作業用一時保存物:凍結乾燥株（ＡＴＣＣ ５３０４２）は、５０ｍｌのＹＭ培地中で増殖する。
【０１５４】
フラスコ醗酵：１ｌエルレンマイヤーフラスコ中の１５０ｍｌのＹＭ培地または１００ｍｌのＨＰＭ培地に２ｍｌの作業用一時保存物を接種し、２８℃で３０−４８時間、２４０ｒｐｍでシェーカーを用いて増殖させる。
【０１５５】
３０ ｌ醗酵：３００ｍｌのフラスコ醗酵（ＨＰＭ培地）が、滅菌した３０ｌ栄養培地溶液（１ｍｌのＳＡＧ ５６９３/ｌ 泡止め剤）を接種するために使用される。この培養物を２８℃で２１時間、３００ｒｐｍ、０.３ｖｖｍの滅菌空気を通気させて、増殖させる。ｐＨは、１Ｍ塩酸で常時ｐＨ＝７.２に保たれる。培養期間の間に、全体で８８０ｍｌの１Ｍ塩酸が加えられる。
【０１５６】
主培養（２００ ｌ）：１ｌのエルレンマイヤーフラスコ中の１５×１５０ｍｌのＹＭ培地に２ｍｌの作業用一時保存物を接種し、２８℃で４８時間、２４０ｒｐｍでシェーカーを用いて増殖させる。この培養物２２５０ｍｌは、滅菌した２００ ｌの栄養培地溶液（ＹＭ）（１ｍｌの泡止め剤ＳＡＧ ５６９３/ｌ）を接種するために用いられ、２８℃で１５０ｒｐｍ、１８.５時間、０.３ｖｖｍの滅菌空気を通気させて増殖させる。
【０１５７】
１時間毎にサンプル（５０ｍｌ）が醗酵過程のチェックのために取られる。１ｍｌのメタノール（０.５％ トリフルオロ酢酸）をこの培養ブロス２ｍｌに加え、次にこの混合物を０.４５μｍフィルターに通してろ過する。この３０μｌの懸濁液をＨＰＬＣ（方法１７および方法１８）によって、分析する。
１８.５時間後、主培養の培養ブロスを１７０００ｒｐｍで、上清および沈殿物に分離する。
【０１５８】
単離：
この上清（１８３ l)を濃トリフルオロ酢酸または水酸化ナトリウム溶液を用いて、ｐＨ６.５−７に調整し、次にLewapol column(OC 1064, 容量６０ ｌ）に装填する。次に溶出は、純粋な水、水/メタノール １：１で、続いて純粋なメタノール（０.１％トリフルオロ酢酸を含む）で行われる。この有機相を真空中で濃縮し残存している水性残渣を１１.５ ｌとする。
【０１５９】
この残存している水相をシリカゲルＣ１８で結合させ、分離する（MPLC, Biotage Flash ７５, ７５×３０ｃｍ,KP-C18-WP, １５−２０μｍ, 流速：３０ｍｌ；溶出剤：アセトニトリル/水（０.１％トリフルオロ酢酸を含む）；グラジエント：１０％、１５％、および４０％アセトニトリル）。十分な量の実施例１Ａを含んでいるこの４０％アセトニトリル相は、真空中で濃縮し、続いて凍結乾燥する（約１３ｇ）。この固形物の混合物を、最初に、分取ＨＰＬＣ（方法４３）で、続いて、Sephadex LH-20(５×７０ｃｍ,アセトニトリル/水 １：１、それぞれのケースにおいて、０.０５％トリフルオロ酢酸を含む）でゲルろ過によって、そして更に分取ＨＰＬＣ（方法４４）によって１.２ｇ分に分割される。
この工程によって２２５０ｍｇの実施例１Ａが生じる。
【０１６０】
この沈殿物を４ ｌのアセトン/水 ４:１中に加え、２ｋｇのセライトを加え、この混合物をトリフルオロ酢酸を用いてｐＨ＝６に調整し、撹拌し、遠心分離する。この溶媒を真空中で濃縮し、次に残渣を凍結乾燥する。この得られた凍結乾燥物（８９.９ｇ）をメタノール中に加え、ろ過し、濃縮し、次にシリカゲル（方法２０）で分離する。次いで実施例１Ａをゲルろ過（Sephadex LH-20、５×６８ｃｍ、水/アセトニトリル ９：１（０.０５％トリフルオロ酢酸を含む）、流速：２.７ｍｌ/分、フラクションサイズ １３.５ｍｌ）で精製すると、純粋な物質が生成される。
この工程によって、４４７ｍｇの実施例１Ａが生じる。
【０１６１】
HPLC (方法 17): Rｔ = 6.19 分
MS (ESIpos): m/z = 1277 (M+H)＋
１H NMR (500.13 MHz, d６-DMSO): δ = 0.75 (d, 3H), 0.78 (d, 6H), 0.80 (t, 3H), 0.82 (d, 3H), 0.90 (d, 3H), 0.91 (d, 3H), 0.92 (d, 3H), 0.95 (d, 3H), 0.96 (d, 3H), 1.05 (m, 1H), 1.19 (d, 3H), 1.25 (m, 2H), 1.50 (m, 4H), 1.51 (m, 2H), 1.55 (m, 1H), 1.61 (m, 1H), 1.65 (m, 1H), 1.84 (m, 1H), 1.85 (m, 1H), 1.86 (m, 1H), 1.89 (m, 1H), 1.95 (m, 1H), 2.75 (m, 2H), 3.40 (m, 1H), 3.52 (m, 2H), 3.53 (dd, 1H), 3.64 (m, 2H), 3.66 (m, 1H), 3.68 (dd, 1H), 3.73 (m, 2H), 4.00 (dd, 1H), 4.02 (br., 1H), 4.13 (br., 1H), 4.32 (dd, 1H), 4.39 (t, 1H), 4.55 (m, 1H), 4.75 (dd, 1H), 5.19 (t, 1H), 5.29 (d, 1H), 5.30 (br., 1H), 5.58 (m, 2H), 6.68 (m, 3H), 6.89 (d, 1H), 6.93 (m, 3H), 6.94 (br., 1H), 6.98 (d, 1H), 7.12 (br., 1H), 7.20 (br., 2H), 7.23 (m, 2H), 7.42 (m, 2H), 7.54 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 8.32 (br., 1H), 9.18 (br., 1H), 9.20 (m, 2H), 9.50 (br., 1H).
【０１６２】
１３C NMR (125.77 MHz, d６-DMSO): δ = 10.3, 15.3, 19.0, 19.2, 19.6, 20.0, 20.9, 22.0, 22.4, 23.0, 23.2, 24.3, 24.4, 25.0, 25.4, 26.0, 27.8, 30.9, 35.4, 39.5, 40.8, 40.9, 41.6, 44.1, 51.5, 52.7, 55.9, 56.2, 56.4, 57.9, 58.8, 60.2, 61.1, 62.6, 70.1, 71.6, 71.7, 75.5, 128.1, 128.6, 136.7, 156.8, 168.2, 170.1, 170.4, 171.2, 171.5, 171.9, 172.2, 172.4, 173.7.
このシグナルの割当ては、文献に記載の割当てに従い実施した (T.Kato, H.Hinoo, Y. Terui, J. Antibiot., 1988, 61, 719-725)。
【０１６３】
実施例２Ａ
ジヒドロリソバクチントリフルオロアセタート ｛Ｄ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−［（３Ｒ）−Ｌｅｕ（３−ＯＨ）］−Ｌｅｕ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−ａＴｈｒ−Ｇｌｙ−［（３Ｓ）−３−Ａｓｎ（３−ＯＨ）］−Ｓｅｒ トリフルオロアセタート｝およびオクタヒドロリソバクチントリフルオロアセタート｛Ｄ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ（３−シクロヘキシル）−［（３Ｒ）−Ｌｅｕ（３−ＯＨ）］−Ｌｅｕ−Ｄ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−ａＴｈｒ−Ｇｌｙ−［（３Ｓ）−３−Ａｓｎ（３−ＯＨ）］−Ｓｅｒ トリフルオロアセタート｝の混合物
【化２６】
2008518986.tif 000029
【化２７】
2008518986.tif 000030
【０１６４】
リソバクチンビストリフルオロアセタート（実施例１Ａ、５００ｍｇ、０.３３ｍｍｏｌ）をイソプロパノール/水 ２：１（３０ｍｌ）中に溶解する。アルゴン保護ガス雰囲気下で、パラジウム・炭素（１０％；１００ｍｇ）を加える。この反応混合物を（脱ガス後）８０−７０バール水素圧下、室温で４８時間、加圧オートクレーブ中で撹拌する。この反応では、パラジウム・炭素（１０％；１００ｍｇ）を再び加える。この反応混合物を（脱ガス後）８０−７０バール水素圧下、室温で４８時間、加圧オートクレーブ中で再び撹拌する。この時点では、リソバクチンはＨＰＬＣ（方法２）によってもはや検出されない。この反応混合物を真空中でガラスフリット（ポアサイズ ４）または、キーゼルグールに通してろ過し、再び、メタノール/０.２％酢酸中に加え、シリンジフィルター（Biotage, PTFE)に通してろ過し、真空中で濃縮し、高真空下で乾燥する。生成物４９６ｍｇ（定量的）（８０％ジヒドロリソバクチン、２０％オクタヒドロリソバクチン）が得られる。
【０１６５】
実施例３Ａ
［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］―Ｌ−セリン  トリフルオロアセタート
｛エドマン３.０分解生成物 トリフルオロアセタート｝
【化２８】
2008518986.tif 000031
【０１６６】
ジヒドロリソバクチンおよびオクタヒドロリソバクチン７７５ｍｇを７７.５ｍｌのメタノールに溶解し、次いで切断バッファー(cleavage buffer)（０.１Ｍ 炭酸水素アンモニウム溶液/０.５Ｍ尿素,ｐＨ ８）６６７ｍｌを加える。酵素を加える前に、この溶液を乾燥キャビネット中で３７℃に加熱する。３１ｍｇのキモトリプシン（１：１ 水/エチレングリコール中キモトリプシン溶液３１ｍｌ、１ｍｇ/１ｍｌ；１：２５；３７℃に予熱して）を加え、この反応は３７℃で行う。６０分後、酵素反応を３０ｍｌのアセトニトリルおよび約６ｍｌのＴＦＡを用いて終了させる。この溶液のｐＨは、１から２の間である。この溶液を−２０℃で分取分離まで保存することができる。
【０１６７】
フラグメント１−３および４−１１の分取分離
約８００ｍｌの切断バッファーをフィルター（０.２μｍ）に通してろ過し、次にそれぞれ約４００ｍｌの二つの部分をアセトニトリル/ＴＦＡ グラジエントを用いたSource 15RPCカラム（４０ｍｌ）でクロマトグラフ処理をする。条件：溶出剤Ａ：０.１％ＴＦＡ、溶出剤Ｂ：０.１％ＴＦＡ/アセトニトリル；グラジエント：４０分以内に０％Ｂから４５％Ｂ；流速：２ｍｌ/分；ＵＶ検出２１０ｎｍ；フラクションサイズ １.５ｍｌ。
【０１６８】
フラグメント４−１１（Ｒｔ＝約１５分）および１−３（ＬＬＦ）（Ｒｔ＝約２５分）および１−３（ＬＬＡ（３−シクロヘキシル））（Ｒｔ＝約３０分）が結合され、次に凍結乾燥される。このようにして、この表題化合物がフラグメント４−１１として得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 3): Rｔ = 1.2 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.0 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 453.5 (100) [M + 2H]２＋, 906 (10) [M + H]＋.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 904 (100) [M - H]−.
LC-MS (方法 5): Rｔ = 3.6 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 453.5 (100) [M + 2H]２＋.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 904 (100) [M - H]−.
【０１６９】
実施例４Ａ
メチル  （Ｚ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４,４−ジメチルペンタ−２−エノアート
【化２９】
2008518986.tif 000032
【０１７０】
ピバルアルデヒド（３０３.２ｇ、３.４１ｍｏｌ、１０当量）およびメチル  ｛［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル］アミノ｝−（ジメトキシホスホリル）アセタート（１０１.５ｇ、０.３４１ｍｏｌ、１.０当量）をテトラヒドロフラン（８００ｍｌ）中に溶解し、−７０℃に冷却する。−７０℃で、Ｎ,Ｎ,Ｎ,Ｎ−テトラメチルグアニジン（７８.７ｇ、０.６８３ｍｍｏｌ、６.９５ｍｌ、２.０当量）をゆっくり滴下し、次いでこの混合物を−７０℃で４時間撹拌し、続いて、この混合物を室温で４日間撹拌する。この反応混合物を濃縮し、次いで、酢酸エチルで水に対して抽出し（２×５００ｍｌ）、集められた有機相を飽和塩化ナトリウム溶液（１００ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥する。濃縮後、粗生成物をクロマトグラフ処理する（１.５ｋｇのシリカゲル、溶出剤：シクロヘキサン/酢酸エチル５：１）。表題化合物６７ｇ（理論量の７６％）が得られる。
【０１７１】
あるいは、粗生成物を水性ワークアップの後、シクロヘキサン/酢酸エチルから結晶化によって精製することができる。
Ｒｆ（シリカゲル、４：１シクロヘキサン/酢酸エチル）＝０.５
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.5 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 158 (100) [M - Boc + H]＋, 280 (5) [M + Na]＋.
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO): δ = 1.08 (s, 9H, C(CH３)３), 1.38 (s, 9H, OC(CH３)３), 3.61 (s, 3H, CO２CH３), 6.40 (s, 1H, CβH), 8.14 (s, 1H, NH).
HR-TOF-MS (方法 1): C１３H２３NO４ [M + H]＋ 実測値 258.1696, 計算値. 258.1700.
【０１７２】
実施例５Ａ
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニン メチルエステル
【化３０】
2008518986.tif 000033
メチル  （２Ｚ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４,４−ジメチルペンタ−２−エノアート（実施例４Ａ、６０ｇ、２３３.２ｍｍｏｌ）をエタノールp.a./ジオキサン ３：１（１０００ｍｌ）中に溶解する。アルゴンを約１０分間、カニューレを用いて通過させる。この溶液を超音波浴）中に置き（約５分、次に（＋）−１,２−ビス［（２Ｒ,５Ｒ）ジエチルホスホラノ］ベンゼン（シクロオクタジエン）ロジウム（Ｉ）トリフラート（６００ｍｇ、１％（重量））を加える。この混合物を３.５バール水素圧下、室温で、３日間水素添加する。この反応混合物をキーゼルグールに通してろ過し、溶出剤を濃縮する。粗生成物をクロマトグラフィー処理（シリカゲル、溶出剤：シクロヘキサン/酢酸エチル ４：１）する。表題化合物６０ｇ（理論量の９９％）が得られる。
[α]２０Ｎａ = +5°(c = 0.33 CHCl３中).
DCI-MS (NH３): m/z (%) = 221 (100), 260 (40) [M + H]＋, 277 (100) [M + NH4]＋.
１H NMR (400 MHz, CDCl３): δ = 0.93 (s, 9H), 1.40 (m, 10H), 1.68 (dd, J = 3.7, 14.5 Hz, 1H),3.68 (s, 3H), 4.30 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 4.81 (d, br, J = 7.7 Hz, 1H).
１３C NMR (126 MHz, CDCl３): δ = 28.30 (3C), 29.52 (3C), 30.61, 46.27, 51.19, 52.17, 79.79, 155.11, 174.39.
HR-TOF-MS (方法 1): C２６H５１N２O８ 計算値 519.3640, 実測値 519.3634 [M + H]＋.
【０１７３】
実施例６Ａ
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニン
【化３１】
2008518986.tif 000034
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニン メチルエステル（実施例５Ａ、６０ｇ、２３１ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフランp.a.（４６３ｍｌ）中に溶解する。室温で、水（４６３ｍｌ）中の水酸化リチウム一水和物（１９.４ｇ、４６２.７ｍｍｏｌ）溶液をゆっくり滴下する。ＨＰＬＣクロマトグラム（方法２）が完全な変換を示してから（約２０時間）、この反応混合物を注意深く１Ｎ塩酸水溶液で氷冷しながらｐＨ ３−４に調整する。塩化ナトリウム（１５０ｇ）を、次に酢酸エチル（２×５００ｍｌ）で抽出するために、この反応混合物に加える。集められた有機相を飽和塩化ナトリウム溶液次いで硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過する。ろ液をロータリーエバポレーターで濃縮し、高真空下で乾燥する。表題化合物５５.４ｇ（理論量の９８％）が得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rｔ = 4.2 分.
DCI-MS (NH３): m/z (%) = 263 (100) [M + NH４]＋, 280 (5) [M + N２H７]＋.
１H NMR (400 MHz, CDCl３): δ = 0.96 (s, 9H, C(CH３)３), 1.42 (m, 10H, OC(CH３)３, Hβ), 1.79 (“d”, J = 14.4 Hz, 1H, Hβ), 4.31 (t, J = 8.0 Hz, 1H, Hα), 4.82 (d, J = 8.4 Hz, 1H, NH).
１３C NMR (126 MHz, CDCl３): δ = 28.32 (3C), 29.54 (3C), 30.74, 45.92, 51.24, 80.19, 155.41, 178.93.
HR-TOF-MS (方法 1): C２４H４７N２O８ 計算値 491.3327, 実測値 491.3328 [2M + H]＋.
【０１７４】
実施例７Ａ
３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン メチルエステル・塩酸塩
【化３２】
2008518986.tif 000035
この表題化合物を製造するには、S.D.Bull, S.G. Davies, A.C. Garner, M.D. O'Shea, J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 2001, 3281-3287参照。
この表題化合物は、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン メチルエステル（２８.０ｇ、１０８ｍｍｏｌ）およびジオキサン（２８０ｍｌ）中の４Ｎ塩酸から操作手順２に従って得られる。収量 ２２ｇ（定量的）。この生成物は精製することなく更に反応させる。
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO): δ = 0.95 (s, br, 9H, tBu), 1.65 (dd, 1H), 1.80 (dd, 1H), 3.75 (s, 3H, OCH３), 3.90 (dd, 1H), 8.60 (s, br, 3H).
【０１７５】
実施例８Ａ
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン メチルエステル
【化３３】
2008518986.tif 000036
ＨＯＢｔ（３当量、３９.４ｇ、２９２ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（３当量、３２.１ｍｌ、２９１.８ｍｍｏｌ）,Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニン（実施例６Ａ、１.０当量、９７.３ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（２当量、３７.３ｇ、１９４.６ｍｍｏｌ）および再度Ｎ−メチルモルホリン（２当量、２１.４ｍｌ、１９４.５ｍｍｏｌ）を−２０℃で連続的にジクロロメタンp.a.（１.４ｌ）中の３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン メチルエステル・塩酸塩（１.１当量、２１ｇ、１０７ｍｍｏｌ）の溶液に加える。この反応混合物をゆっくり（約１２時間）室温まで暖めると、アミン成分の完全な変換がＨＰＬＣによって観察される。次いでこの反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３００ｍｌ）、５％クエン酸水溶液（２×５００ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５００ｍｌ）および飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄する。この反応混合物を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過する。この混合物を真空中で濃縮・乾燥し、次いで更に高真空下で乾燥する。表題化合物３６ｇ（理論量の９６％）が得られるが、これは、更に精製することなく反応させる。
DCI-MS (NH３): m/z (%) = 387 (40) [M + H]＋, 404 (100) [M + NH４]＋.
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO): δ = 0.95 (s, br, 18H, tBu), 1.35 (dd, 1H), 1.45 (s, 9H, OtBu), 1.50 (dd, 1H), 1.65 (dd, 1H), 1.95 (dd, br, 1H), 3.70 (s, 3H, OCH３), 4.15 (“t”, br, 1H), 4.55 (“t”, br, 1H), 4.80 (d, 1H), 6.65 (d, br, 1H).
【０１７６】
実施例９Ａ
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−ロイシル−Ｌ−ロイシン ベンジルエステル
【化３４】
2008518986.tif 000037
ＨＯＢｔ（４当量、５４０ｍｇ、４ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（３当量、３ｍｍｏｌ）、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｄ−ロイシン（１.０当量、２３０ｍｇ、１ｍｍｏｌ；Bachem）、ＥＤＣ（２当量、３８０ｍｇ、２ｍｍｏｌ）および再度Ｎ−メチルモルホリン（２当量、２ｍｍｏｌ）を−１０℃で連続的にジクロロメタンp.a.（３０ｍｌ）中のＬ−ロイシン ベンジルエステル・塩酸塩（１.１当量、３００ｍｇ、１.１ｍｍｏｌ；T. Wakamiya, M. Kamata, S. Kusumoto, H. Kobayashi, Y. Sai, et al., Bull. Chem. Soc. Jpn., 1998, 71, 699-710参照）の溶液に加える。この反応混合物をゆっくり（約１２時間）室温まで暖めると、アミン成分の完全な変換がＨＰＬＣによって観察される。この反応混合物を真空中で濃縮し、アセトニトリルに加え、分取ＨＰＬＣ（方法１３）によって精製する。表題化合物３６２ｍｇ（理論量の８０％）が得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rｔ = 5.3 分.
[α]２０Ｎａ = +19°(c = 0.10 メチレンクロリド中で)
【０１７７】
実施例１０Ａ
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン
【化３５】
2008518986.tif 000038
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン メチルエステル（実施例８Ａ、３６ｇ、９３.１ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフランp.a.（２７９ｍｌ）中に溶解する。約１０℃で、水（１８７ｍｌ）中の水酸化リチウム一水和物（７.８２ｇ、１８６.３ｍｍｏｌ、２当量）の溶液をゆっくり滴下する。ＨＰＬＣクロマトグラム（方法２）が完全な変換を示した（約２０時間）後、この反応混合物から２００ｍｂａｒでＴＨＦを除去し、次いで、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２００ｍｌ）で抽出する。この有機相を酢酸エチル（５００ｍｌ）で希釈し、次いで水を加え、続いてこの混合物を１Ｎ塩酸水溶液でｐＨ３−４に注意深く調整する。集められた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空中で蒸発させ、次に高真空下で乾燥する。表題化合物９７.４ｇ（理論量の９７％）が得られる。
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.26 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 373 (100) [M + H]＋.
HR-TOF-MS (方法 1): C１９H３７N２O５ 計算値. 373.2702, 実測値 373.2717 [M + H]＋.
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO): δ = 0.83 (s, br, 18H, tBu), 1.31 (s, 9H, OtBu), 1.40 (d, J = 6.1 Hz, 2H, ββ-CH２), 1.48 (dd, J = 14.1, 9.4 Hz, 1H, ββ-CH), 1.59 (dd, J = 14.1, 2.7 Hz, 1H, β-CH´), 3.98 (m, 1H, α-CH), 4.12 (m, 1H, α-CH), 6.73 (d, J = 9.1 Hz, 1H, NH), 7.72 (d, J = 7.9 Hz, 1H, NH), 12.42 (s, br, 1H, CO2H).
１３C NMR (125 MHz, d６-DMSO): δ = 28.49 (3C), 29.66 (3C), 29.78 (3C), 30.52, 30.58, 44.63 (β-CH２), 45.24 (β-CH２), 49.67 (α-CH), 52.40 (α-CH), 78.29, 155.05, 172.97, 174.61.
【０１７８】
実施例１１Ａ
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−ロイシル−Ｌ−ロイシン
【化３６】
2008518986.tif 000039
Ｎ−（ブトキシカルボニル）−Ｄ−ロイシル−Ｌ−ロイシン ベンジルエステル（実施例９Ａ、３０８ｍｇ、０.６９ｍｍｏｌ）を操作手順３に従って、反応させる。表題化合物が２４４.６ｍｇ（理論量の９９％）得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rｔ = 4.5 分.
HR-TOF-MS (方法 1): C１８H３５N２O５ [M + H]＋ 実測値 359.2535, 計算値. 359.2546.
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO): δ = 0.85 (m, 14H, 4×CH３, 2×γ-CH), 1.35 (m, 10H, OtBu, β-CH), 1.50-1.65 (m, 3×β-CH), 4.00 (dd, 1H, α-CH), 4.20 (“t”, 1H, α-CH), 6.70 (d, 1H, NH), 7.90 (d, 1H, NH), 12.50 (s, br, 1H, CO２H).
【０１７９】
実施例１２Ａ
メチル  （２Ｒ＊,３Ｒ＊）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート
【化３７】
2008518986.tif 000040
【０１８０】
アルゴン保護ガス雰囲気下で、ＴＨＦ中の１Ｎ リチウムヘキサメチルジシラジドlithium hexamethyldisilazide)（１５７.５ｍｍｏｌ、１５７.５ｍｌ、２.２当量）溶液が反応溶媒ＴＨＦ（３００ｍｌ）中に提供される。−７８℃で、メチル  （ｒａｃ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−フェニルプロパノアートの溶液(A.V.Rao Rama, A.K.Singh, Ch.V.N.S.Varaprasad, Tetrahedron Lett., 32, 1991, 4393-4396)（２０ｇ、７１.２ｍｍｏｌ）をゆっくり滴下する。この混合物を−２５℃で１０分間撹拌し、次いで、再び−７８℃まで冷却する。ジベンジル アザジカルボキシラート(３４.２ｇ、１１４.６ｍｍｏｌ、１.６当量）をこの反応混合物に１回で加える。この混合物を−６０から−４５℃で３時間撹拌する。反応を終了させるために、この混合物を再び、−７８℃まで冷却し、次に酢酸（２０.５ｍｌ、３５８ｍｍｏｌ、５当量）を加え、次いで０℃まで暖め、最後に室温まで暖める。この反応混合物を真空中で蒸発させ、次に酢酸エチル（１０００ｍｌ）中に加える。この懸濁液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２回）、水（１回）、５％クエン酸水溶液（２回）、そして飽和塩化ナトリウム水溶液（１回）で洗浄する。水相の全部をそれぞれ酢酸エチルで再抽出する。有機相の全部を真空中で蒸発させ、次にジクロロメタン（２０００ｍｌ）中に再度加え、ろ過し、硫酸ナトリウムで乾燥し、再びろ過し、高真空下で乾燥する。表題化合物７.２ｇ（理論量の１８％）が固体として得られる。次いでジクロロメタン相（上記参照）のろ液を濃縮し、再度、メタノールから再結晶して表題化合物１３.２ｇ（理論量の２６％）を得る。
【０１８１】
別の合成方法：アルゴン保護ガス雰囲気下で、ＴＨＦ中の１Ｎリチウムヘキサメチルジシラジド（５９０.７ｍｍｏｌ、５９０.７ｍｌ、２.２当量）の溶液が反応溶媒ＴＨＦ（２５００ｍｌ）中に提供される。−７８℃で、メチル  （ｒａｃ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−フェニルプロパノアート（７５ｇ、２６８.５ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくり滴下する（内部温度は約−７０℃）。この混合物を−２５℃で１０分間撹拌し、次いで、再び−７０℃まで冷却する。乾燥ジベンジル アザジカルボキシラート(１２８.２ｇ、４２９.６ｍｍｏｌ、１.６当量）を固体としてのこの反応混合物に４回で加える。この混合物を−６０℃から−５０℃で２時間撹拌する。反応を終了させるために、この混合物を再び、−７８℃まで冷却し、次に酢酸（７６.９ｍｌ、１３４２ｍｍｏｌ、５当量）を加え、次いでこの混合物を０℃まで暖め、最後に室温まで暖める。これによって、この表題化合物は、固体として沈殿し、これを真空乾燥キャビネット中で乾燥する（４.１ｇ、理論量の２.２％,結晶 １）。この反応混合物を真空中で蒸発させ、残渣を酢酸エチル中で再結晶し、これによって表題化合物が固体として得られる（３８.８ｇ、理論量の２４.３％,結晶 ２）。母液を酢酸エチルで希釈し、次いで水で（２回）、そして飽和塩化ナトリウム水溶液（２回）で洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空中で蒸発させ、高真空下で乾燥する。粗生成物を酢酸エチル−ジエチルエーテルから再結晶する。表題化合物が固体として得られる（５０.４ｇ、理論量の２８％,結晶 ３）。母液を蒸発させ、次にフラッシュクロマトグラフィーによって精製する（シリカゲル１.５ｋｇ、トルエン/酢酸エチル ４：１）。表題化合物４.７ｇ（理論量の１.７％）が得られる。表題化合物の全収量：９８.０ｇ（理論量の５６.２％）。
LC-MS (方法 5): Rｔ = 6.8 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 578 (40) [M + H]＋, 1156 (100) [2M + H]＋.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 576 (100) [M - H]−.
HR-TOF-MS (方法 1): C３１H３６N３O８ [M + H]＋ 実測値 578.2490, 計算値. 578.2497.
表題化合物の相対的立体化学は、Ｘ線構造によって確認される（図１）。
【０１８２】
実施例１３Ａ
メチル  （２Ｓ＊,３Ｒ＊）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート
【化３８】
2008518986.tif 000041
【０１８３】
アルゴン保護ガス雰囲気下で、Ｎ,Ｎ,Ｎ,Ｎ−テトラメチルグアニジン（５０ｍｌ、３９９ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦp.a.（７５０ｍｌ）中のメチル  （２Ｒ＊,３Ｒ＊）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート（実施例１２Ａ、２０.５ｇ、３５.５ｍｍｏｌ）の溶液に０℃で加える。この反応混合物を解凍し、ＨＰＬＣクロマトグラム（方法２）が完全な変換（約６０％生成物）を示すまで撹拌し（約１２時間）、そして、酢酸（ｐＨ ４−６）を加えて、反応を終了させる。この反応混合物を真空中、室温で蒸発させ、次に酢酸エチルに加える。有機相を水（２回）、５％クエン酸（２回）、水（１回）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２回）、飽和塩化ナトリウム水溶液（１回）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、蒸発させ、高真空下で乾燥させる。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（方法１１）またはフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、シクロヘキサン/酢酸エチル ３：１）によって精製する。表題化合物７.７ｇ（理論量の３７％）および出発物質５ｇ（理論量の２５％）が得られる。
【０１８４】
別の合成方法：
アルゴン保護ガス雰囲気下で、Ｎ,Ｎ,Ｎ,Ｎ−テトラメチルグアニジン（５０ｍｌ、３９９ｍｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタンp.a.（５４０ｍｌ）中のメチル  （２Ｒ＊,３Ｒ＊）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート（実施例１３Ａ、２２.０ｇ、３８.１ｍｍｏｌ）の溶液に０℃で加える。この反応混合物を解凍し、ＨＰＬＣクロマトグラムが完全な変換（約６５％生成物）を示すまで撹拌し（約１２時間）、そして、酢酸（２３ｍｌ、ｐＨ ４−６）を加えて、反応を終了させる。有機相を水（２回）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２回）および飽和塩化ナトリウム水溶液（１回）で洗浄する。水相をジクロロメタンで再抽出する。集められた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空中で蒸発させ、高真空下で乾燥させる。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル６ ｌ、シクロヘキサン/酢酸エチル ３：１）によって精製する。表題化合物１３.７ｇ（回収される出発物質６９％に基づいて、理論量の６２％）および出発物質３.１ｇ（理論量の１０％）が得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 3.0 分.
LC-MS (方法 8): Rｔ = 3.0 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 478 (100) [M -Boc + H]＋, 578 (30) [M + H]＋.
LC-MS (方法 5): Rｔ = 7.0 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 578 (40) [M + H]＋, 1156 (100) [2M + H]＋.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 576 (100) [M - H]−.
HR-TOF-MS (方法 1): C３１H３６N３O８ [M + H]＋ 実測値 578.2483, 計算値. 578.2497.
【０１８５】
実施例１４Ａ
メチル  （２Ｓ＊,３Ｒ＊）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート
【化３９】
2008518986.tif 000042
【０１８６】
アルゴン保護ガス雰囲気下で、ラニーニッケル（６１ｍｇ、約１０ｍｏｌ％）を、メタノール/ジクロロメタン １：１（４２ｍｌ）中のメチル  （２Ｓ＊,３Ｒ＊）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート（実施例１３Ａ、７０５ｍｇ、１.２２ｍｍｏｌ）の溶液に加える。この反応混合物を８０バール水素圧下、室温で加圧オートクレーブ中で水素添加する（４０時間）。ＨＰＬＣクロマトグラムは、完全な変換を示す。この反応混合物をアルゴン保護ガス雰囲気下でガラスフリットに通してろ過する；このガラスフリットはメタノール/水/０.２％酢酸で数回洗浄する。このろ液を真空中で蒸発させ、高真空下で乾燥する。固体（約３ｇ）が得られるが、次いでこれを超音波浴中で酢酸エチル中に懸濁する。７％の炭酸水素ナトリウム水溶液（４００ｍｌ）中のＥＤＴＡ（４００ｍｇ）の溶液をこの懸濁液に加える。水相を酢酸エチル（１００ｍｌ、３回）で抽出する。次いで集められた有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１回）および飽和塩化ナトリウム水溶液（２回）で洗浄する。水相全部を個々に酢酸エチルで再抽出する。次いで集められた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、高真空下で乾燥する。得られた生成物は固体（１.２６ｇ、定量的）であり、これは、更に高純度精製することなく反応させる。
HPLC/UV-Vis (方法 3): Rｔ = 1.7 分.
LC-MS (方法 5): Rｔ = 4.1 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 239 (100), 295 (80) [M + H]＋.
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO): δ = 1.36 (s, 9H), 3.34 (s, 3H), 3.60 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 4.89 (dd, J = 9.6, 4.9 Hz, 1H), 7.20-7.34 (m, 5H), 7.41 (d, J = 9.4 Hz, 1H).
１３C NMR (125 MHz, d６-DMSO): δ = 28.24 (3C), 52.84, 54.91, 56.86, 79.23, 127.14 (2C), 128.44, 128.88 (2C), 137.28, 154.86, 168.16.
HR-TOF-MS (方法 1): C１５H２２N２O４ [M + H]＋ 実測値 295.1658, 計算値. 295.1653.
【０１８７】
実施例１５Ａ
メチル  （２Ｓ＊,３Ｒ＊）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート
【化４０】
2008518986.tif 000043
【０１８８】
アルゴン保護ガス雰囲気下で、Ｎ−メチルモルホリン（２６０ｍｇ、２.６ｍｍｏｌ、２.１当量）を０℃でＴＨＦ（２５ｍｌ）中のメチル  （２Ｓ＊,３Ｒ＊）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート（実施例１４Ａ、３６０ｍｇ、１.２ｍｍｏｌ）およびＮ−ベンジルオキシカルボニルオキシスクシンイミド エステル（６１０ｍｇ、２.４４ｍｍｏｌ、２当量）の溶液に加える。この反応混合物をゆっくり（１２時間）暖めると、完全な変換がＨＰＬＣ（方法２）によって観察される。続いて、酢酸（０.７ｍｌ）を加え、次にこの混合物を真空中で濃縮し、分取ＨＰＬＣ（方法１３）によって精製する。表題化合物３９６ｍｇ（理論量の７６％）が得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 3): Rｔ = 2.7 分.
LC-MS (方法 5): Rｔ = 6.4 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 329 (100) [M -Boc + H]＋, 429 (80) [M + H]＋, 858 (60) [2M + H]＋.
１H NMR (500 MHz, d６-DMSO): δ = 1.35 (s, 9H), 3.63 (s, 3H), 4.57 (dd, J = 9.5, 4.0 Hz, 1H), 4.93 (m, 2H), 5.27 (dd, J = 10.1, 4.1 Hz, 1H), 7.19-7.34 (m, 10H), 7.50 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 10.2 Hz, 1H).
１３C NMR (126 MHz, d６-DMSO): δ = 28.26 (3C), 52.33, 54.67, 59.06, 65.73, 78.73, 126.66 (2C), 127.42, 127.65 (2C), 128.00, 128.44 (2C), 128.53 (2C), 136.91, 139.26, 154.98, 156.25, 170.91.
HR-TOF-MS (方法 1): C２３H２８N２O６Na [M + Na]＋ 実測値 451.1823, 計算値. 451.1845.
【０１８９】
実施例１６Ａ
（２Ｓ＊,３Ｒ＊）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニン
【化４１】
2008518986.tif 000044
【０１９０】
アルゴン保護ガス雰囲気下で、メチル  （２Ｓ＊,３Ｒ＊）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート（実施例１５Ａ、７５５ｍｇ、１.７６ｍｍｏｌ）が、ＴＨＦ/水 ２：１（３０ｍｌ）中に提供される。０℃で、激しく撹拌しながら、脱ガスした１％水酸化リチウム一水和物水溶液（８６.５ｍｇ、３.６ｍｍｏｌ、２当量）をゆっくり滴下する。ＨＰＬＣクロマトグラム（方法２）が完全な変換を示すまで（約１時間）、この混合物を室温で撹拌する。続いて、酢酸（０.５ｍｌ）をこの反応混合物に加え、この反応混合物を真空中で濃縮し、酢酸エチル（１００ｍｌ）で相分離させる。この水相を５％クエン酸（ｐＨ ２−３）ですぐに酸性にし、次いで、酢酸エチル（５０ｍｌ、３回）で抽出する。集められた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液（２０ｍｌ、２回）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空中で濃縮し、高真空下で乾燥する。表題化合物の粗生成物７５０ｍｇ（定量的）が得られるが、これは、分取ＨＰＬＣ（方法１３）によって高純度に精製する。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 2.4 分.
LC-MS (方法 5): Rｔ = 6.1 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 359 (100), 415 (60) [M + H]＋, 829 (60) [2M + H]＋.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 413 (100) [M - H]−.
１H NMR (500 MHz, d６-DMSO): δ = 1.31 (s, 9H), 4.42 (dd, J = 10.0, 3.9 Hz, 1H), 4.87 (s, 2H), 5.22 (dd, J = 10.0, 3.7 Hz, 1H), 7.14-7.28 (m, 10H), 7.43-7.46 (m, 2H), 12.91 (s, br, 1H).
１３C NMR (126 MHz, d６-DMSO): δ = 28.33 (3C), 54.84 (Cα), 58.94 (Cβ), 65.54, 78.56, 126.52 (2C), 127.22, 127.53 (2C), 127.92, 128.37 (2C), 128.49 (2C), 137.03, 140.14, 155.08, 156.29, 171.60.
HR-TOF-MS (方法 1): C２２H２６N２O６ [M + H]＋ 実測値 415.1860, 計算値. 415.1864.
【０１９１】
実施例１７Ａ
（３Ｒ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニン
【化４２】
2008518986.tif 000045
【０１９２】
（２Ｓ＊,３Ｒ＊）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニン（実施例１６Ａ、７５０ｍｇ、１.８ｍｍｏｌ）のエナンチオマー混合物を分取ＨＰＬＣ（方法１５）によって分離する。（２Ｓ,３Ｒ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニン（表題化合物）３３４ｍｇ（９８％ｅｅ、理論量の４５％）および（２Ｒ,３Ｓ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニン（別のエナンチオマー）２７５ｍｇ（９８％ｅｅ、理論量の３７％）が得られる。
方法１６によるエナンチオマーの同定
[α]２０Ｎａ = +22°(c = 0.50 クロロホルム中) (表題化合物).
[α]２０Ｎａ = −20°(c = 0.49 クロロホルム中) (別のエナンチオマー).
１H NMR (500 MHz, d６-DMSO): δ = 1.35 (s, 9H), 4.46 (dd, J = 9.6, 3.6 Hz, 1H), 4.91 (s, 2H), 5.26 (dd, J = 9.9, 3.6 Hz, 1H), 7.18-7.32 (m, 10H), 7.48-7.51 (m, 2H), 12.95 (s, br, 1H).
１３C NMR (126 MHz, d６-DMSO): δ = 28.34 (3C), 54.84, 58.96, 65.55, 78.56, 126.53 (2C), 127.23, 127.55 (2C), 127.93, 128.39 (2C), 128.51 (2C), 137.05, 140.16, 155.09, 156.30, 171.62.
HR-TOF-MS (方法 1): C２２H２６N２O６ [M + H]＋ 実測値 415.1864, 計算値. 415.1864.
【０１９３】
実施例１８Ａ
２−（トリメチルシリル）エチル−（３Ｒ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニナート
【化４３】
2008518986.tif 000046
【０１９４】
乾燥ジクロロメタンp.a.（２.７ｍｌ）中の（３Ｒ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニン（実施例１７Ａ、１５１ｍｇ、０.３６ｍｍｏｌ）、２−（トリメチルシリル）エタノール（４３１ｍｇ、３.６４ｍｍｏｌ、１０当量）および４Å分子篩（約１０ｍｇ）の混合物をアルゴン保護ガス雰囲気下、室温で３０分間撹拌する。続いて、ＤＣＣ（１５０ｍｇ、０.７３ｍｍｏｌ、２当量）およびＤＭＡＰ（４４.５ｍｇ、０.３６ｍｍｏｌ、１当量）を−３０℃で加える。この反応混合物を解凍し（約１２時間）、次に室温で、ＨＰＬＣクロマトグラムが完全な変換を示すまで（１２−７２時間）室温で撹拌する。この反応混合物を真空中、室温で蒸発させ、分取ＨＰＬＣ（方法１３）によって精製する。表題化合物１４５ｍｇ（理論量の７７％）が得られる。
[α]２０Ｎａ = +7.8°(c = 0.45 クロロホルム中)
HPLC/UV-Vis (方法 3): Rｔ = 3.3 分.
LC-MS (方法 5): Rｔ = 7.3 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 515 (100) [M + H]＋, 1030 (60) [2M + H]＋.
１H NMR (500 MHz, d６-DMSO): δ = -0.02 (s, 9H), 0.88 (t, J = 8.6 Hz, 2H), 1.31 (s, 9H), 4.01-4.15 (m, 2H), 4.48 (dd, J = 9.5, 4.0 Hz, 1H), 4.86 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 4.90 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 5.25 (dd, J = 10.0, 4.0 Hz, 1H), 7.14-7.29 (m, 10H), 7.48 (d, 1H, J = 10.2 Hz), 7.51 (d, 1H, J = 9.5 Hz).
１３C NMR (126 MHz, d６-DMSO): δ = -1.67 (3C), 16.78, 27.96 (3C), 54.38, 58.83, 62.95, 65.34, 78.30, 126.29 (2C), 127.06, 127.30 (2C), 127.66, 128.13 (2C), 128.20 (2C), 136.63, 139.17, 154.58, 155.95, 170.02.
HR-TOF-MS (方法 1): C２７H３８N２O６Si [M + H]＋ 実測値 515.2564, 計算値. 515.2572.
【０１９５】
実施例１９Ａ
２−（トリメチルシリル）エチル  （３Ｒ）−３−アミノ−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−フェニルアラニナート トリフルオロアセタート
【化４４】
2008518986.tif 000047
【０１９６】
２−（トリメチルシリル）エチル  （３Ｒ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニナート（実施例１８Ａ、５５０ｍｇ、１.７ｍｍｏｌ）を操作手順１に従って、反応させる（反応時間：１０分）。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（方法２１）によって精製する。表題化合物４２４ｍｇ（理論量の７５％）が得られる。
[α]２０Ｎａ = -11.2°(c = 0.47 クロロホルム中)
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 1.9 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.0 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 387.2 (60), 415 (100) [M + H]+.
１H NMR (500 MHz, d６-DMSO): δ = -0.07 (s, 9H), 0.52 (m, 2H), 3.77 (m, 1H), 3.88 (m, 1H), 4.50 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.58 (“t”, J = 約 8.2 Hz, 1H), 5.08 (s, 2H), 7.34-7.43 (m, 10H), 8.12 (d, 1H, J = 8.5 Hz, 1H), 8.67 (s, br, 2H).
１３C NMR (126 MHz, d６-DMSO): δ = -1.46 (3C), 16.51, 55.14, 57.92, 63.36, 66.28, 128.02 (2C), 128.18, 128.22 (2C), 128.56 (2C), 128.95 (2C), 129.54, 134.00, 136.70, 156.14, 169.06.
HR-TOF-MS (方法 1): C２２H３０N２O４Si [M + H]＋ 実測値 415.2036, 計算値. 415.2048.
【０１９７】
実施例２０Ａ
Ｎ２.１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン トリフルオロアセタート
【化４５】
2008518986.tif 000048
【０１９８】
アルゴン保護ガス雰囲気下で、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル  ジカルボナート(di-tert-butyl dicarbonate)（３６９ｍｇ、１.６９ｍｍｏｌ、２.５当量）およびＮ−メチルモルホリン（６８ｍｇ、６８０μｍｏｌ、１当量）を水/ジオキサン １：２（３０ｍｌ）中のエドマン３.０前駆体（実施例３Ａ、６９０ｍｇ、６８０μｍｏｌ、１当量）の溶液に加える。この反応混合物をＨＰＬＣクロマトグラムが完全な変換を示すまで（約４８時間）撹拌する。リン酸二水素カリウム（５当量）をこの反応混合物に加え、この混合物を真空中で濃縮し、分取ＨＰＬＣ（方法２１または方法１１に続いてＴＦＡ（２０００μｍｏｌ、アセトニトリル−水 １：１中の０.０５％溶液として）を添加することによるクロマトグラフィー生成物のその後の塩交換(subsequent salt exchange)）によって精製する。表題化合物５３１ｍｇ（理論量の７０％）が得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 3): Rｔ = 1.7 分.
LC-MS (方法 5): Rｔ = 4.6 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 453.5 (60) [M - Boc + 2H]２＋, 1006 (100) [M + H]＋.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1004 (100) [M - H]−.
HR-TOF-MS (方法 1): C４２H７７N１２O１６ [M + H]＋ 実測値 1005.5560,
計算値. 1005.5576.
【０１９９】
実施例２１Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｎ３―｛Ｎ２.１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｒ）−３−アミノ−１−フェニルアラニン ２−（トリメチルシリル）エチル エステル トリフルオロアセタート
【化４６】
2008518986.tif 000049
【０２００】
アルゴン保護ガス雰囲気下で、ＨＡＴＵ（１.５当量、３８.２ｍｇ、１００μｍｏｌ）を最初に０℃で乾燥ジメチルホルムアミド（２ｍｌ）中のジアミノ酸（実施例１９Ａ、１.２当量、４２.５ｍｇ、８０μｍｏｌ）、オクタペプチド酸（実施例２０Ａ、１.０当量、７５.０ｍｇ、７０μｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（１.０当量、７０μｍｏｌ）の溶液に加える。この反応混合物を撹拌し（約１５分）、次にＮ−メチルモルホリン（２.５当量、１７５μｍｏｌ）を再び加える。この反応混合物をゆっくり（約１２時間）室温に暖めるとアミン成分の完全な変換を示す（ＨＰＬＣモニタリング）。固体のリン酸二水素カリウム（５当量、３５０μｍｏｌ）を反応混合物に加え、次いでこの混合物を高真空の下で蒸発させ、クロマトグラフィー（方法２１または方法１３に引き続いて、ＴＦＡ（２００μｍｏｌ、アセトニトリル−水 １：１中の０.０５％溶液として）を添加することによるクロマトグラフィー生成物のその後の塩交換(subsequent salt exchange)）によって精製する。生成物７３.５ｍｇ（理論量の７２％）が得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 2.3 分.
LC-MS (方法 5): Rｔ = 5.5 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 637.6 (60), 1402 (100) [M + H]＋.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1400 (100) [M - H]−, 1447 (20) [M - HCO２H - H]−.
【０２０１】
実施例２２Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｎ３―｛Ｎ２.１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニン トリフルオロアセタート
【化４７】
2008518986.tif 000050
【０２０２】
アルゴン保護ガス雰囲気下で、ノナペプチド トリメチルシリル エステル（実施例２１Ａ、７０ｍｇ、４６μｍｏｌ）および４Å分子篩（約１０ｍｇ）が乾燥ＴＨＦ（３ｍｌ）中に提供される。室温で、１Ｎ ＴＢＡＦ−ＴＨＦ溶液（３２０μｌ、７当量）を激しく撹拌しながら滴下し、この混合物をＨＰＬＣクロマトグラム（方法２）が完全な変換を示すまで（約１時間）撹拌する。この反応混合物を酢酸（５０μｌ、約２０当量）ですぐに中性にする。この反応混合物を真空中で蒸発させ、分取ＨＰＬＣ（方法２１または方法１３に引き続いて、ＴＦＡ（２００μｍｏｌ、アセトニトリル−水 １：１中の０.０５％溶液として）を添加することによるクロマトグラフィー生成物のその後の塩交換(subsequent salt exchange)）によって精製する。表題化合物５０.２ｍｇ（理論量の７７％）が得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 2.1 分.
LC-MS (方法 5): Rｔ = 5.2 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 601.6 (60) [M - Boc + 2H]２＋, 1302 (100) [M + H]＋.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1300 (100) [M - H]−.
【０２０３】
実施例２３Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｎ３―｛Ｎ２.１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニン ペンタフルオロフェニルエステル トリフルオロアセタート
【化４８】
2008518986.tif 000051
【０２０４】
アルゴン保護ガス雰囲気下で、ノナペプチド酸（実施例２２Ａ、５４.４ｍｇ、３８μｍｏｌ）がジクロロメタン（１ｍｌ）中に提供される。−２０℃でペンタフルオロフェノール（７１ｍｇ、３８０μｍｏｌ、１０当量）、ＥＤＣ（１７ｍｇ、１９２μｍｏｌ、２.３当量）およびＤＭＡＰ（１ｍｇ、８μｍｏｌ、０.２当量）を連続的に加える。この混合物をゆっくり（約３時間）解凍し、ＨＰＬＣクロマトグラムが完全な変換（方法２）を示すまで、室温で（約１２時間）撹拌する。粗生成物は更に精製することなく反応させる。
LC-MS (方法 8): Rｔ = 2.3 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 685 (100) [M - Boc + 2H]２＋, 1468 (10) [M + H]＋.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1282 (100), 1465 (40) [M - H]−.
【０２０５】
実施例２４Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｎ３―｛［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニン ペンタフルオロフェニルエステル ビスヒドロクロリド
【化４９】
2008518986.tif 000052
【０２０６】
操作手順２に従って、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）シクロペプチド（実施例２３Ａ、６０ｍｇ、４０μｍｏｌ）をアルゴン保護ガス雰囲気の下で反応させる。凍結乾燥の後、生成物５０ｍｇ（理論量の９６％）が得られるが、これは、更に精製することなく直接反応させる。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 1.9 分,
λmax (定性的) = 210 nm (s), 255-270 (w).
LC-MS (方法 5): Rｔ = 4.7 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 684.3 (100) [M + 2H]２＋, 1368 (50) [M + H]＋.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1366 (100) [M - H]−.
【０２０７】
実施例２５Ａ
Ｎ２.１−（ベンジルオキシカルボニル）−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.９−Ｎ３.１−ラクタム トリフルオロアセタート
【化５０】
2008518986.tif 000053
【０２０８】
ＤＭＦ（１ｍｌ）中のペンタフルオロフェノールエステル（実施例２４Ａ、１５.８ｍｇ、１１μｍｏｌ）の溶液をジオキサン（２０ｍｌ）を用いて希釈し、次いでアルゴン保護ガス雰囲気下で激しく撹拌しながら、８０℃にあらかじめ加熱したピリジンp.a.（８０ｍｌ）中に滴下する（懸濁液として）。ＨＰＬＣクロマトグラム（方法２）が完全に変換を示すまで（約１時間）、この反応混合物を８５℃で撹拌する。次いでこの混合物を真空中で濃縮する。粗生成物は、最初にゲルクロマトグラフ処理し（方法１４）、次いで分取ＨＰＬＣ（方法１０）によって高度に精製する。表題化合物４.３ｍｇ（理論量の３３％）が得られる。
【０２０９】
別の合成方法（遊離のノナペプチドアミノ酸の直接環化）：
ＨＡＴＵ（２４５ｍｇ、０.６５ｍｍｏｌ、３当量）をＤＭＦ（７０ｍｌ）およびＮＭＭ（１４２μｌ、６当量）中の遊離のノナペプチド（Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｎ３−｛［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニン トリフルオロアセタート,２８０ｍｇ、０.２２ｍｍｏｌ）の溶液に加える。この反応混合物を完全な変換（１.５時間,ＨＰＬＣモニタリング）まで撹拌する。次いで、この反応混合物をメタノール（１０ｍｌ）でクエンチし、真空中で濃縮し、分取ＨＰＬＣ（方法３５）によって直接的に精製する。生成物は、固体として得られる（２０１.５ｍｇ、理論量の７０％）。
LC-MS (方法 5): Rｔ = 4.8 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 592.6 (20) [M + 2H]２＋, 1184 (100) [M + H]＋.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1182 (100) [M - H]−.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.8 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 592.7 (50) [M + 2H]２＋, 1184 (100) [M + H]＋.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 536.6 (100), 1182 (50) [M - H]−, 1229 [M - H + HCO２H]−
HR-TOF-MS (方法 1): C５４H８３N１４O１６ [M + H]＋ 実測値 1183.6122,
計算値 1183.6106.
【０２１０】
実施例２６Ａ
［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.９−Ｎ３.１−ラクタム ビスヒドロクロリド
【化５１】
2008518986.tif 000054
【０２１１】
Ｃｂｚによって保護されたシクロペプチド（実施例２５Ａ、４.３ｍｇ、３.３μｍｏｌ）をメタノール（４ｍｌ）中に溶解し、１０％パラジウム−炭素（１００ｍｇ）および１Ｎ塩酸水溶液（２００μｌ）をアルゴン保護ガス雰囲気下で加える。分析ＨＰＬＣ（方法２）が完全な変換を示すまで、この混合物を室温、大気圧で（約１時間）、水素添加する。この反応混合物をろ過し（キーゼルグール、セライト（登録商標）またはシリンジフィルター、Biotage, PTFEに通して)、真空中で濃縮し、高真空下で乾燥する。表題化合物４ｍｇ（定量的）が得られる。
【０２１２】
別の合成方法（トリフルオロアセタートとしての表題化合物）：
Ｃｂｚによって保護されたシクロペプチド（実施例２５Ａ、３３０ｍｇ、２５４μｍｏｌ）を、メタノール（２００ｍｌ）中に溶解し、１０％パラジウム−炭素（１２７ｍｇ）および塩酸（１５２６μｌ、６当量）をアルゴン保護ガス雰囲気下で加える。この混合物を約１時間水素添加し、次に触媒（１００ｍｇ）および塩酸（３当量、 ７６０μｌ）を再び加える。分析ＨＰＬＣ（方法２）が完全な変換を示すまで（約１時間）、水素添加を室温、大気圧で継続する。この反応混合物をろ過し（キーゼルグール、セライト通して）、真空中で濃縮し、高真空下で乾燥する。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（方法３３）によって精製する。表題化合物２５０ｍｇ（理論量の７７％）がトリフルオロアセタートとして得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 3): Rｔ = 1.4 分,
λmax (定性的) = 210 nm (s), 255-270 (w).
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.1 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 525.6 (100) [M + 2H]２＋.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1048 (100) [M - H]−, 1095 [M - H + HCO２H]−.
HR-TOF-MS (方法 1): C４６H７７N１４O１４ [M + H]＋ 実測値 1049.5728, 計算値. 1049.5739.
【０２１３】
実施例２７Ａ
Ｎ２.１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル）］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル)］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム トリフルオロアセタート
【化５２】
2008518986.tif 000055
【０２１４】
アルゴン保護ガス雰囲気下で、ＨＡＴＵ（４.１当量、１４.６ｍｇ、４０μｍｏｌ）を最初に乾燥ジメチルホルムアミド（２７０μｌ）中のシクロペプチド（実施例２６Ａ、１.０当量、１１.０ｍｇ、 １０μｍｏｌ）、ジペプチド酸 Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン（４.０当量、１４.６ｍｇ、４０μｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（２.０当量、 ２０μｍｏｌ）の溶液に０℃で加える。この反応混合物を撹拌し（約１５分）次にＮ−メチルモルホリン（５.０当量、５０μｍｏｌ）を再び加える。この反応混合物をゆっくり（約１２時間）室温まで暖め、次いでアミン成分(amine component)の完全な変換が示す（ＨＰＬＣモニタリング,方法３）。固体のリン酸二水素カリウム（１０当量、５００μｍｏｌ）をこの反応混合物に加え、次いでこの混合物を高真空下で蒸発させ、次にクロマトグラフィー（方法２１または方法１３に続いてＴＦＡ（１００μｍｏｌ、アセトニトリル−水 １：１中の０.０５％溶液として）を添加することによるクロマトグラフィー生成物のその後の塩交換）によって精製する。生成物１０.５ｍｇ（理論量の７０％）が得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 3): Rｔ = 2.5 分,
λmax (定性的) = 210 nm (s), 255-270 (w).
LC-MS (方法 5): Rｔ = 5.5 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 702.6 (30) [M + 2H]２＋, 1404 (20) [M + H]＋.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 700.7 (50) [M - 2H]２−, 1402 (10) [M - H]−, 1448 [M - H + HCO２H]−.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.3 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 653 (100) [M - Boc + 2H]２＋, 1404 (50) [M + H]＋.
HR-TOF-MS (方法 1): C６５H１１１N１６O１８ [M + H]＋ 実測値 1403.8232,
計算値. 1403.8257.
【０２１５】
実施例２８Ａ
Ｎ２.１−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｄ−ロイシル−Ｌ−ロイシル−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム トリフルオロアセタート
【化５３】
2008518986.tif 000056
【０２１６】
実施例２６Ａからの化合物（９００μｇ、０.８μｍｏｌ）およびＮ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｄ−ロイシル−Ｌ−ロイシン（実施例３０Ａ、１２００μｇ、３.２μｍｏｌ、４当量）から実施例２７Ａに準じて製造。粗生成物をゲルクロマトグラフィー（方法１４）によって精製するが、生成物５００μｇ（理論量の４１％）が凍結乾燥後固体として得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 3): Rｔ = 2.3 分,
LC-MS (方法 5): Rｔ = 5.2 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 706.2 (100) [M + 2H]２＋, 1410 (20) [M + H]＋.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1408 (100) [M - H]−.
【０２１７】
実施例２９Ａ
Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｄ−ロイシル−Ｌ−ロイシン メチルエステル
【化５４】
2008518986.tif 000057
【０２１８】
ＨＯＢｔ（４当量、２０３８ｍｇ、１５.０８ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（３当量、１１.３ｍｍｏｌ）、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−ロイシン（１.０当量、１０００ｍｇ、３.８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（２当量、１４４１ｍｇ、７.５ｍｍｏｌ）および再度Ｎ−メチルモルホリン（２当量、７.５ｍｍｏｌ）をジクロロメタンp.a.（２０ｍｌ）中のＬ−ロイシンメチルエステルヒドロクロリド（１.１当量、７５３.２ｍｇ、４.１５ｍｍｏｌ）の溶液に−１０℃で順に加える。この反応混合物をゆっくり（約１２時間）室温まで暖めると、アミン成分の完全な変換がＨＰＬＣによって観察される。この反応混合物を濃縮し、酢酸エチル（約２００ｍｌ）中に加え、次いで飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１回）、５％クエン酸水溶液（２回）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１回）および飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄する。この混合物を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過する。この混合物を真空中で蒸発・乾燥し、次いで更に高真空下で乾燥する。表題化合物１４８３ｍｇ（理論量の９３％）が得られるが、これは、更に精製することなく反応させる。
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.59 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 393 (100) [M + H]＋.
【０２１９】
実施例３０Ａ
Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｄ−ロイシル−Ｌ−ロイシン
【化５５】
2008518986.tif 000058
【０２２０】
Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｄ−ロイシル−Ｌ−ロイシン メチルエステル（実施例２９Ａ、１.１２ｇ、２.８５ｍｍｏｌ）がＴＨＦ/水 ２：１（１５ｍｌ）に０℃で提供され、次いで水酸化リチウム一水和物（１４０ｍｇ、５.７１ｍｍｏｌ、２当量）を加える。ＨＰＬＣクロマトグラム（方法２）が完全な変換（約１時間）を示した後、この反応混合物を酢酸でｐＨ ３−４に調整し、冷却条件下で真空中で濃縮し、次いで一晩凍結乾燥することによって溶媒を除去する。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（方法１３）によって精製し、表題化合物９５８ｍｇ（理論量の８８.７％）が得られる。
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.33 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 379 (100) [M + H]＋.
HR-TOF-MS (方法 1): C２０H３１N２O５ [M + H]＋ 実測値 379.2227, 計算値. 379.2233.
【０２２１】
実施例３１Ａ
メチル  （２Ｒ,３Ｒ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート
【化５６】
2008518986.tif 000059
【０２２２】
方法Ａ（５ｇスケール）：ＴＨＦ中の１Ｎ リチウムヘキサメチルジシラジド溶液（３９.４ｍｍｏｌ、３９.４ｍｌ、２.２当量）が反応溶媒ＴＨＦ（２００ｍｌ）中に提供される。−７８℃で、メチル  （Ｓ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−フェニルプロパノアート（５.０ｇ、１７.９ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくり滴下する。この混合物を−２５℃で１０分間撹拌し、次いで、再び−７８℃まで冷却する。ジベンジル アザジカルボキシラート(８.５４ｇ、２８.６ｍｍｏｌ、１.６当量）をこの反応混合物に１回で加える。この混合物を−５０から−６０℃で３時間撹拌する。反応を終了させるために、この混合物を再び、−７８℃まで冷却し、次に酢酸（５.１ｍｌ、８９.５ｍｍｏｌ、５当量）を加え、次いでこの混合物を０℃まで暖め、最後に室温まで暖める。実施例１２Ａ（方法Ｂ）に準じてワークアップ。表題化合物４.８ｇ（理論量の４４％）が固体として得られる。
【０２２３】
方法Ｂ（５０ｇスケール）：アルゴン保護ガス雰囲気下で、ＴＨＦ中の１Ｎリチウムヘキサメチルジシラジド溶液（４５２.９ｍｍｏｌ、４５２.９ｍｌ、２.２当量）が反応溶媒ＴＨＦ（１８００ｍｌ）中に提供される。−７０℃で、ＴＨＦ（６００ｍｌ）中のメチル  （Ｓ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−フェニルプロパノアート（５７.５ｇ、２０５.８ｍｍｏｌ）溶液をゆっくり滴下する。この混合物を−２５℃で１０分間撹拌し、次いで、再び−７０℃まで冷却する。ジベンジル アザジカルボキシラート(９８.２ｇ、３２９.４ｍｍｏｌ、１.６当量）をこの反応混合物に４回で加える。この混合物を−５０から−６０℃で２時間撹拌する。反応を終了させるために、この混合物を再び、−７０℃まで冷却し、次に酢酸（６１.７ｍｌ、１ｍｏｌ、５当量）を加え、次いでこの混合物を室温まで暖める。反応溶液中の沈殿物を吸引ろ過によって回収する。フィルター残渣を高真空下５０℃で乾燥する（４６.１ｇ、粗生成物１）。このフィルター母液（反応混合物）を真空中で濃縮する（粗生成物２）。この二つの粗生成物１および２を加熱酢酸エチルから再結晶する（２×５００ｍｌ）（還流、１時間；生成物フラクション１（３１.７ｇ）および２（３７.４ｇ））。この母液を再び蒸発させ、tert-ブチルメチルエーテル（３７０ｍｌ）から再結晶する。この結果、生成物フラクション３（１４.５ｇ）が得られる。総計で、表題化合物８３.６ｇ（理論量の７０％）が固体として得られる。
[α]２０Ｎａ = -13°(c = 0.20 クロロホルム中で).
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 2.88 分.
LC-MS (方法 29): Rｔ = 2.8 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 478 (100) [M -Boc + H]＋, 578 (70) [M + H]＋, 1156 (20) [2M + H]＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 576 (100) [M - H]−.
１H NMR (500 MHz, d６-DMSO, 335 K, ブロードシグナル(broad signals)): δ = 1.35 (s, 9H), 3.15 (s, 3H), 3.30 (s, 3H), 4.90-5.15 (m, 6H), 7.20-7.40 (m, 10H), 8.30, 8.95 (3s, br, 2H).
【０２２４】
実施例３２Ａ
メチル  （２Ｓ,３Ｒ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート
【化５７】
2008518986.tif 000060
【０２２５】
アルゴン保護ガス雰囲気下で、Ｎ,Ｎ,Ｎ,Ｎ−テトラメチルグアニジン（１６.６ｍｌ、１３２ｍｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタンp.a.（１７０ｍｌ）中のメチル  （２Ｒ,３Ｒ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート（３.９５ｇ、６.８４ｍｍｏｌ）の溶液に０℃で加える。この反応混合物を解凍し、ＨＰＬＣクロマトグラム（方法２）が完全な変換（約６０％生成物）を示すまで撹拌し（約１２時間）、そして、酢酸（１０.５ｍｌ、ｐＨ ４−６）を加えて、反応を終了させる。有機相を水（２回）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２回）および飽和塩化ナトリウム水溶液（１回）で洗浄する。水相をジクロロメタンで再抽出する。集められた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空中で蒸発させ、高真空下で乾燥させる。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、トルエン/酢酸エチル ４：１）によって精製する。表題化合物２.４ｇ（回収した出発物質６８％に基づいて理論量の６１％）および出発物質４９０ｍｇ（理論量の１２％）が得られる。
【０２２６】
[α]２０Ｎａ = -120.7°(c = 0.52 クロロホルム中).
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 2.99 分.
LC-MS (方法 29): Rｔ = 2.9 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 478 (100) [M -Boc + H]＋, 578 (50) [M + H]＋, 1156 (10) [2M + H]＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 502 (100), 576 (40) [M - H]−.
HR-TOF-MS (方法 1): C３１H３６N３O８ [M + H]＋ 実測値 578.2505, 計算値. 578.2497.
【０２２７】
実施例３３Ａ
メチル  （２Ｓ,３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート
【化５８】
2008518986.tif 000061
アルゴン保護ガス雰囲気下で、ラニーニッケル（８６ｍｇ）を、メタノール/ジクロロメタン １：１（１２ｍｌ）中のメチル  （２Ｓ,３Ｒ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニルアミノ］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート（６００ｍｇ、１.０４ｍｍｏｌ）の溶液に加える。この反応混合物を８０バール水素圧下、室温で加圧オートクレーブ中で水素添加する（７２時間）。ＨＰＬＣクロマトグラムは、完全な変換を示す。この反応混合物をアルゴン保護ガス雰囲気下で（キーゼルグール層）ガラスフリットに通してろ過する。このガラスフリットはメタノール/水/０.２％酢酸で繰り返し洗浄する。このろ液を水で洗浄し（２回）、次に真空中で蒸発させる。粗生成物が固体として得られる（２８０ｍｇ、理論量の９２％）が、これは、更に高純度に精製することなく、反応させる。分析目的のために、ゲルクロマトグラフィー高純度精製（方法１４、メタノール/０.１％ＴＦＡ）が行われうる。
【０２２８】
[α]２０Ｎａ = +11°(c = 0.25 クロロホルム中) (TFA 塩).
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 1.5 分.
LC-MS (方法 29): Rｔ = 1.2 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 239 (100), 295 (40) [M + H]＋.
１H NMR (500 MHz, d６-DMSO, TFA 塩): δ = 1.36 (s, 9H), 3.50 (s, 3H), 4.30 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 5.05 (“t”, J = 8.0 Hz, 1H), 7.30-7.39 (m, 5H), 7.60 (d, J = 9.7 Hz, 1H).
１３C NMR (125 MHz, d６-DMSO, TFA 塩): δ = 28.25 (3C), 52.87, 54.88, 56.87, 79.29, 127.12 (2C), 128.45, 128.89 (2C), 137.18, 154.83, 168.14.
HR-TOF-MS (方法 1): C１５H２２N２O４ [M + H]＋ 実測値 295.1663, 計算値. 295.1653.
【０２２９】
実施例３４Ａ
メチル  （２Ｓ,３Ｒ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート
【化５９】
2008518986.tif 000062
アルゴン保護ガス雰囲気下で、固体の炭酸水素ナトリウム（８０ｍｇ、０.９３ｍｍｏｌ）,１.５当量）をジクロロメタン（２０ｍｌ）および水（４５ｍｌ）の混合液中のメチル  （２Ｓ,３Ｒ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート（２５０ｍｇ、０.６２ｍｍｏｌ）およびＮ−ベンジルオキシカルボニルオキシスクシンイミド エステル（１８０ｍｇ、０.７１ｍｍｏｌ、１.１５当量）溶液に０℃で加える。この反応混合物をゆっくり（１２時間）暖めると、完全な変換がＨＰＬＣ（方法２）によって観察される。水相をジクロロメタンで再抽出し、次いで５％クエン酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、および飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、次に真空中で濃縮する。続いて、精製がフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル,トルエン/酢酸エチル ４：１）で行われる。表題化合物の１４４ｍｇ（理論量の４７％）が得られる。
【０２３０】
[α]２０Ｎａ = +13.3°(c = 0.70 クロロホルム中).
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 2.6 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.7 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 329 (100) [M -Boc + H]＋, 373 (80), 429 (60) [M + H]＋, 858 (10) [2M + H]＋.
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO): δ = 1.37 (s, 9H), 3.62 (s, 3H), 4.58 (dd, J = 9.5, 4.2 Hz, 1H), 4.94 (m, 2H), 5.27 (dd, J = 10.4, 4.0 Hz, 1H), 7.21-7.35 (m, 10H), 7.50 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 9.4 Hz, 1H).
１３C NMR (126 MHz, d６-DMSO): δ = 28.25 (3C), 52.31, 54.66, 59.03, 65.71, 78.72, 126.64 (2C), 127.40, 127.63 (2C), 127.99, 128.42 (2C), 128.51 (2C), 136.90, 139.24, 154.97, 156.23, 170.89.
HR-TOF-MS (方法 1): C２３H２９N２O６ [M + H]＋ 実測値 429.2011, 計算値. 429.2021.
【０２３１】
実施例３５Ａ
（３Ｒ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニン
【化６０】
2008518986.tif 000063
アルゴン保護ガス雰囲気下で、ＴＨＦ/水 ２：１（２２.５ｍｌ）中のメチル  （２Ｓ,３Ｒ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］フェニルアラニナート溶液（１５２ｍｇ、０.３０ｍｍｏｌ）が提供される。０℃で、脱ガスした１％水酸化リチウム一水和物水溶液（１４.８ｍｇ、０.６２ｍｍｏｌ、２当量）を激しく撹拌しながら、ゆっくり滴下する。ＨＰＬＣクロマトグラム（方法２）が完全な変換を示すまで（約１時間）、この混合物を室温で撹拌する。続いて、酢酸（０.１ｍｌ）をこの反応混合物に加え、この反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を凍結乾燥する。この粗生成物を分取ＨＰＬＣ（方法１３）によって高純度に精製する。表題化合物７４ｍｇ（理論量の５９％）が生成物として得られる。
【０２３２】
[α]２０Ｎａ = +22°(c = 0.50 クロロホルム中) (キラルクロマトグラフィーによる);
[α]２０Ｎａ = +21.5°(c = 0.51 クロロホルム中) (エナンチオ選択性合成による)
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.4 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 315 (90), 359 (100), 415 (80) [M + H]＋, 729 (30), 829.5 (50) [2M + H]＋.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 413 (100) [M - H]−.
キラル HPLC/UV-Vis (方法 24): Rｔ = 5.4 分 （ナローピーク）.
１H NMR (500 MHz, d６-DMSO): δ = 1.35 (s, 9H), 4.46 (dd, J = 9.6, 3.6 Hz, 1H), 4.91 (s, 2H), 5.26 (dd, J = 9.9, 3.6 Hz, 1H), 7.18-7.32 (m, 10H), 7.48-7.51 (m, 2H), 12.95 (s, br, 1H).
１３C NMR (126 MHz, d６-DMSO): δ = 28.34 (3C), 54.84, 58.96, 65.55, 78.56, 126.53 (2C), 127.23, 127.55 (2C), 127.93, 128.39 (2C), 128.51 (2C), 137.05, 140.16, 155.09, 156.30, 171.62.
HR-TOF-MS (方法 1): C２２H２６N２O６ [M + H]＋ 実測値 415.1864, 計算値. 415.1864.
【０２３３】
実施例３６Ａ
（３Ｓ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｄ−フェニルアラニン
【化６１】
2008518986.tif 000064
製造方法の実施例３５Ａ参照。
[α]２０Ｎａ = −20°(c = 0.49 クロロホルム中).
キラル HPLC/UV-Vis (方法 24): Rｔ = 11.4 分 (ブロードピーク).
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.5 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 315 (40), 359 (40), 415 (50) [M + H]＋, 729 (20), 829.5 (10) [2M + H]＋.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 413 (100) [M - H]−.
１H NMR (500 MHz, d６-DMSO): δ = 1.35 (s, 9H), 4.45 (dd, J = 9.6, 3.2 Hz, 1H), 4.91 (s, 2H), 5.26 (dd, J = 9.4, 3.6 Hz, 1H), 7.18-7.30 (m, 10H), 7.47-7.52 (m, 2H), 12.95 (s, br, 1H).
HR-TOF-MS (方法 1): C２２H２６N２O６ [M + H]＋ 実測値 415.1869, 計算値. 415.1864.
【０２３４】
実施例３７Ａ
２−（トリメチルシリル）エチル（３Ｓ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｄ−フェニルアラニナート
【化６２】
2008518986.tif 000065
【０２３５】
乾燥ジクロロメタンp.a.（７７ｍｌ）中の（３Ｓ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｄ−フェニルアラニン（３.９６ｇ、９.５５ｍｍｏｌ）、２−（トリメチルシリル）エタノール（１１.３ｇ、９５.６ｍｍｏｌ、１０当量）および４Å分子篩（約２００ｍｇ、新たに微粉末化される）の混合物をアルゴン保護ガス雰囲気下、室温で３時間撹拌する。続いて、ＤＣＣ（３.９４ｇ、１９.１１ｍｍｏｌ、２当量）およびＤＭＡＰ（１.１７ｇ、９.５５ｍｍｏｌ、１当量）を−３０℃で加える。この反応混合物を解凍し（約１２時間）、次にＨＰＬＣクロマトグラム（方法２）が完全な変換を示すまで（約１２時間）室温で撹拌する。この反応混合物をキーゼルグールに通してろ過し、次いで真空中、室温で蒸発させる。粗生成物ＲＰ１８カートリッジ（溶出剤：水、次いでアセトニトリル）でプレフラクショニングし、分取フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル１.５ｋｇ、トルエン/酢酸エチル ４：１）によって精製する。表題化合物３.６ｇ（理論量の７３％）が得られる。
[α]２０Ｎａ = -8.0°(c = 0.52 クロロホルム中)
HPLC/UV-Vis (方法 3): Rｔ = 3.2 分.
LC-MS (方法7): Rｔ = 3.3 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 387 (100), 515 (90) [M + H]＋.
１H NMR (500 MHz, d６-DMSO): δ = -0.02 (s, 9H), 0.88 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 1.31 (s, 9H), 4.02-4.15 (m, 2H), 4.48 (dd, J = 9.6, 4.3 Hz, 1H), 4.86 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 4.90 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 5.25 (dd, J = 10.0, 3.8 Hz, 1H), 7.14-7.29 (m, 10H), 7.47 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 9.7 Hz, 1H).
HR-TOF-MS (方法 1): C２７H３８N２O６Si [M + H]＋ 実測値 515.2567, 計算値 515.2572.
【０２３６】
実施例３８Ａ
２−（トリメチルシリル）エチル  （３Ｓ）−３−アミノ−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｄ−フェニルアラニナート トリフルオロアセタート
【化６３】
2008518986.tif 000066
２−（トリメチルシリル）エチル  （３Ｓ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｄ−フェニルアラニナート（３６００ｍｇ、７.０ｍｍｏｌ）を操作手順１に従って反応させる（反応時間：１０分）。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（方法１３、方法２１）によって精製する。表題化合物３０６０ｍｇ（理論量の８３％）が得られる。
[α]２０Ｎａ = +15.0°(c = 0.22 クロロホルム中)
HPLC/UV-Vis (方法 3): Rｔ = 1.9 分.
LC-MS (方法 8): Rｔ = 1.8 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 387.2 (60), 415 (100) [M + H]＋.
１H NMR (500 MHz, d６-DMSO): δ = -0.06 (s, 9H), 0.52 (m, 2H), 3.76 (m, 1H), 3.88 (m, 1H), 4.49 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.58 (“t”, J = 9.0 Hz, 1H), 5.08 (s, 2H), 7.34-7.44 (m, 10H), 8.12 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.62 (s, br, 2H).
HR-TOF-MS (方法 1): C２２H３０N２O４Si [M + H]＋ 実測値 415.2042, 計算値. 415.2048.
【０２３７】
実施例３９Ａ
（３Ｓ）−Ｎ−Ｂｏｃ−β−フェニルアラニン メチルエステル
【化６４】
2008518986.tif 000067
（ｒａｃ）−Ｎ−Ｂｏｃ−β−フェニルアラニン メチルエステル（６２.８ｇ、２２４.８ｍｍｏｌ）のエナンチオマー混合物を、分取ＨＰＬＣ（方法３２）によってエナンチオマーに分離する。（３Ｒ）−Ｎ−Ｂｏｃ−β−フェニルアラニン メチルエステル（９５.７％ｅｅ、理論量の４６％、実施例４０、後に溶出）２９.１ｇおよび（３Ｓ）−Ｎ−Ｂｏｃ−β−フェニルアラニン メチルエステル（＞９９％ ｅｅ、理論量の４９％,表題化合物、先に溶出）３０.５ｇが得られる。
[α]２０Ｎａ = -30°(c = 0.52 クロロホルム中).
HPLC/UV-Vis (方法 3): Rｔ = 2.5 分.
１H NMR (500 MHz, d６-DMSO): δ= 1.35 (s, 9H), 2.67 (dd, J = 15.4, 6.0 Hz, 1H), 2.75 (dd, J = 15.7, 8.6 Hz, 1H), 3.55 (s, 3H), 4.92 (m, 1H), 7.23 (m, 1H), 7.29-7.33 (m, 4H), 7.48 (d, J = 8.3 Hz, 1H).
１３C NMR (126 MHz, d６-DMSO): δ = 28.38 (3C, (C(CH３)３)), 41.19 (CβH２), 51.25 (CαH), 51.54 (OCH３), 78.07 (C(CH３)３), 126.47 (2C), 127.17, 128.46 (2C), 142.95, 154.90, 170.86.
HR-TOF-MS (方法 1): C１５H２２NO４ [M + H]＋ 実測値 280.1533, 計算値. 280.1544.
【０２３８】
実施例４０Ａ
（３Ｒ）−Ｎ−Ｂｏｃ−β−フェニルアラニン メチルエステル
【化６５】
2008518986.tif 000068
この合成は、実施例３９Ａに従って行われる。
[α]２０Ｎａ = +30°(c = 0.52 クロロホルム中).
１H NMR (500 MHz, d６-DMSO): δ = 1.35 (s, 9H), 2.68 (dd, J = 15.2, 6.0 Hz, 1H), 2.75 (dd, J = 15.6, 8.8 Hz, 1H), 3.55 (s, 3H), 4.92 (m, 1H), 7.23 (m, 1H), 7.30-7.33 (m, 4H), 7.48 (d, J = 8.7 Hz, 1H).
HR-TOF-MS (方法 1): C１５H２１NO４ [M + H]＋ 実測値 280.1555, 計算値. 280.1544.
【０２３９】
実施例４１Ａ
メチル  ３−（６−メチルピリジン−２−イル）−Ｌ−アラニナート
【化６６】
2008518986.tif 000069
エタノール（８０ｍｌ）中のメチル  Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−３−（６−メチルピリジン−２−イル）−Ｌ−アラニナート（７.２５ｇ、２２.１ｍｍｏｌ）[S. W. Jones, C. F. Palmer, J. M. Paul, P. D. Tiffin, Tetrahedron Lett. 1999, 40, 1211-1214]および１０パーセントパラジウム・炭素（０.６９０ｇ）の混合物を室温、大気圧下で１時間水素添加する。この反応混合物をシリンジフィルター（ミリポア(Millipore),０.４５μ,疎水性ＰＴＦＥ）に通し、これをエタノール（２×１０ｍｌ）で洗浄する。この残渣をロータリーエバポレーターで（トルエンで飛沫同伴(entrainment)によって溶媒残渣を除去、２回）濃縮し、高真空下で乾燥する。生成物が油状物として得られる（３.８９ｇ、収率 理論量の９１％）。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 0.3 分.
LC-MS (方法 30): Rｔ = 0.70 分, ブロードピーク; MS (ESIpos.): m/z (%) = 195 (100) [M + H]＋.
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO): δ = 1.95 (m, 2H), 2.41 (s, 3H), 2.86 (dd, J = 7.4 Hz, 1H), 2.99 (dd, J = 5.9 Hz, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.73 (dd, J = 7.4, 5.7 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.56 (t, J = 7.5 Hz, 1H).
【０２４０】
実施例４２Ａ
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル−３−（６−メチルピリジン−２−イル）−Ｌ−アラニン メチルエステル
【化６７】
2008518986.tif 000070
【０２４１】
ＮＭＭ（２当量、１３.１ｍｍｏｌ）および最後にＨＡＴＵ（１.３当量、３.２ｇ、８.５ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（２６ｍｌ）中のＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニン（実施例６Ａ、１.０当量、１.６ｇ、６.６ｍｍｏｌ）およびメチル  ３−（６−メチルピリジン−２−イル）−Ｌ−アラニナート（実施例４１Ａ、１.１当量、１.４ｇ、７.２ｍｍｏｌ）の溶液に０℃でゆっくり加える。この反応混合物をゆっくり（約１２時間）室温まで暖めると、完全な変換がＨＰＬＣ（方法２）によって観察される。ワークアップのために、この反応混合物をロータリーエバポレーター（湯浴 ３５℃）で濃縮し、酢酸エチル（１００ｍｌ）で希釈し、次に飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２×２０ｍｌ）、５パーセントクエン酸（２×２０ｍｌ）および飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、そして濃縮する。生成物が固体として得られる（２.８８ｇ、理論量の９９％）が、これは、分取ＨＰＬＣ（方法１３）によって高純度に精製することができる。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 2.1 分.
LC-MS (方法 29): Rｔ = 1.73 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 422 (100) [M + H]＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 420 (20) [M - H]−, 466 (100) [M - H + HCO２H]−.
HR-TOF-MS (方法 1): C２１H３４N３O５ [M + H]＋ 計算値. 408.2498, 実測値 408.2503.
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO): δ = 0.79 (s, 9H), 1.23-1.43 (m, 11H), 2.42 (s, 3H), 2.99-3.13 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.95 (dt, J = 8.9, 3.8 Hz, 1H), 4.64 (m, 1H), 6.83 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.54 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 7.9 Hz, 1H).
【０２４２】
実施例４３Ａ
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル−３−（６−メチル−２−ピリジル）−Ｌ−アラニン
【化６８】
2008518986.tif 000071
メチル  Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル−３−（６−メチル−２−ピリジル）−Ｌ−アラニナート（実施例４２Ａ、８５０ｍｇ、２.０２ｍｍｏｌ）を一般的操作手順４に従って変換する。生成物７６６ｍｇ（理論量の９３％）が得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 1.8 分.
LC-MS (方法 8): Rｔ = 1.63 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 353 (100), 408 (90) [M + H]＋; MS (ESIneg.): m/z (%) = 332 (70), 406 (100) [M - H]−.
HR-TOF-MS (方法 1): C２１H３４N３O５ [M + H]＋ 計算値. 408.2498, 実測値 408.2503.
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO): δ = 0.79 (s, 9H), 1.26-1.37 (m, 11H), 2.43 (s, 3H), 3.01 (dd, J = 8.6 Hz, 1H), 3.10 (dd, J = 5.3 Hz, 1H), 3.94 (dt, J = 9.2 Hz, 3.4 Hz, 1H), 4.57 (m, 1H), 6.81 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.54 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 7.9 Hz, 1H).
【０２４３】
実施例４４Ａ
Ｎ２.１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−（６−メチルピリジ−２−イル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム ビストリフルオロアセタート
【化６９】
2008518986.tif 000072
【０２４４】
ＮＭＭ（１７.２μｌ、１５６.５８μｍｏｌ、５当量）およびＨＡＴＵ（２１.４３ｍｇ、５６.３６μｍｏｌ、１.８当量）を使用して、操作手順５に従って、シクロペプチド（実施例２６Ａ、４０.０ｍｇ、３１.３２μｍｏｌ）およびジペプチド酸（実施例４３Ａ、２２.９ｍｇ、５６.３７μｍｏｌ、１.８当量）をＤＭＦ（１５ｍｌ）中のアミドと−１０℃で２.５時間以内反応させる。クロマトグラフィー精製（方法３７）後、表題化合物が固体として得られる（２９.４ｍｇ、理論量の５５％）。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 2.25 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.05 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 1439 (5) [M + H] ＋, 720 (100) [M + 2H]２＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1436 (100) [M - H]−, 718 [M - 2H]２−.
HR-TOF-MS (方法 1): C６７H１０８N１７O１８ [M + H]＋ 計算値. 1438.8053,
実測値 1438.8060.
【０２４５】
実施例４５Ａ
Ｎ２.１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−（ピリジ−２−イル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム ビストリフルオロアセタート
【化７０】
2008518986.tif 000073
【０２４６】
ＮＭＭ（４３.０μｌ、１５６.５８μｍｏｌ、５当量）およびＨＡＴＵ（２１.４３ｍｇ、３９１.４６μｍｏｌ、１.８当量）を使用して、操作手順５に従って、シクロペプチド（実施例２６Ａ、１００.０ｍｇ、７８.２９μｍｏｌ）およびＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−メチル−Ｄ−ロイシル−３−ピリジン−２−イル−Ｌ−アラニン（５５.５ｍｇ、１４０.６３μｍｏｌ、１.８当量）（ＷＯ２００４０９９２３９参照）をＤＭＦ（８ｍｌ）中のアミドと室温で一晩反応させる。クロマトグラフィー（方法３５）後、表題化合物が固体として得られる（１１１.３ｍｇ、理論量の８６％）。
HPLC/UV-Vis (方法 25): Ｒｔ = 19.44 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.15 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 1424 (25) [M + H] ＋, 713 (100) [M + 2H]２＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1422 (100) [M - H]−, 711 [M - 2H]２−.
HR-TOF-MS (方法 1): C６６H１０６N１７O１８ [M + H]＋ 計算値 1424.7897,
実測値 1424.7906.
【０２４７】
実施例４６Ａ
４−メチル−Ｄ−ロイシン トリフルオロアセタート
【化７１】
2008518986.tif 000074
操作手順１に述べられているように、Ｂｏｃによって保護されたアミノ酸（実施例６Ａ、２０.０ｇ、８１.５３ｍｍｏｌ）から表題化合物を粗収量で２１.７ｇ（定量的）得る。
MS (ESIpos): m/z (%) = 146 (100) [M+H]＋.
HR-TOF-MS (方法 1): C７H１６N２O２C２H３N [M + CH３CN + H]＋ 計算値 187.1442, 実測値 187.1450.
１H NMR (500 MHz, d６-DMSO): δ = 0.95 (m, 9H), 1.58 (dd, J = 14.5 Hz, 5.2 Hz, 1H), 1.81 (dd, J = 14.5 Hz, 6.3 Hz, 1H), 3.79 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 8.32 (s, br., 3H).
１３C NMR (126 MHz, d６-DMSO): δ = 29.27 (3C), 30.26, 44.30, 50.01, 172.23.
【０２４８】
実施例４７Ａ
Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−４−メチル−Ｄ−ロイシン
【化７２】
2008518986.tif 000075
アミノ酸（実施例４６Ａ、１０.０ｇ、３８.６ｍｍｏｌ）およびＮ−ベンジルオキシカルボニルオキシスクシンイミドエステル（１１.１ｇ、４４.４ｍｍｏｌ、１.１５当量）をジクロロメタン/水 ４：１（２５０ｍｌ）中に溶解する。固体の炭酸水素ナトリウム（４.８６ｇ、５７.９ｍｍｏｌ、１.５当量）および固体のテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムブロミド（１.２ｇ、３.９ｍｍｏｌ、０.１当量）を反応混合物に０℃で加え、この反応混合物を室温で一晩撹拌する。ＨＰＬＣクロマトグラムが完全な変換を示す。塩基性水相をジクロロメタンで洗浄する（６回）。続いて、ｐＨを１Ｎ塩酸水溶液で２−３に調整する。次いでこの水相を酢酸エチルで抽出する（３回）。集められた有機相を濃塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空中で濃縮する。この結果生じる粗生成物を分取ＨＰＬＣ（方法３５）によって精製する。表題化合物６.８６ｇ（理論量の６４％）が得られる。
【０２４９】
[α]２０Ｎａ = +2°(c = 0.17 CHCl３中).
HPLC/UV-Vis (方法 3): Rｔ = 2.2 分.
LC-MS (方法 29): Rｔ = 2.0 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 236 (100), 280 (50) [M + H]＋;
MS (ESIneg): m/z (%) = 170 (100), 278 (40) [M - H]−.
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO): δ = 0.81 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 0.86 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.89 (s, 9H), 1.48 (m, 3H), 1.57 (m, 2H), 3.61 (s, 3H), 4.14 (m, 1H), 4.23 (m, 1H), 5.03 (s, 2H), 7.27-7.40 (m, 6H), 8.19 (d, J = 7.9 Hz, 1H).
１３C NMR (126 MHz, d６-DMSO): δ = 29.53 (3C), 30.50, 44.11, 51.49, 65.47, 127.75 (2C), 127.95, 128.51 (2C), 137.34, 156.03, 174.97.
HR-TOF-MS (方法 1): C１５H２２NO４ 計算値 280.1544, 実測値 280.1535 [M + H]＋.
【０２５０】
実施例４８Ａ
メチル  Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｌ−ロイシナート
【化７３】
2008518986.tif 000076
メチル−Ｌ−ロイシナート・塩酸塩（６００.９ｍｇ、３.３１ｍｍｏｌ、１.１当量）がアルゴン保護ガス雰囲気下でジクロロメタン（２５０ｍｌ）中に提供され、ＨＯＢｔ（１６２５.３ｍｇ、１２.０３ｍｍｏｌ、４当量）、ＮＭＭ（９９２μｌ、９.０２ｍｍｏｌ、３当量）、ベンジルオキシカルボニルによって保護されたアミノ酸（実施例４７Ａ、８４０.０ｍｇ、３.０ｍｍｏｌ、１当量）、ＥＤＣ（１１４９.７ｍｇ、６.０１ｍｍｏｌ、２当量）および更にＮＭＭ（６６１μｌ、６.０２ｍｍｏｌ、２当量）を−１０℃で溶液に加え、次にこの反応混合物を一晩撹拌しながら変換を完全にする。ワークアップのために、この反応溶液をロータリーエバポレーターで３０℃浴温度で濃縮し、残渣を酢酸エチルおよび飽和重炭酸ナトリウム溶液中に溶解し、分離した水相を酢酸エチルで抽出し、次に集められた有機相を５％クエン酸溶液、飽和重炭酸ナトリウム溶液および飽和塩化ナトリウム溶液で連続的に洗浄し、次に硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤を除去後、溶媒をロータリーエバポレーターで３０℃浴温度で完全に除去する。凍結乾燥後、生成物が得られる（収量１２００ｍｇ（理論量の９８％））。
HPLC (方法 2): Rｔ = 2.65 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.84 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 407 (100), 813 (27) [2M + H]＋.
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO): δ = 0.81 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 0.86 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 0.89 (s, 9H), 1.42-1.55 (m, 5H), 3.61 (s, 3H) 4.15 (m, 1H), 4.23 (m, H), 5.03 (s, 2H), 7.28-7.41 (m, 6H), 8.01 (d, J = 7.9 Hz, 1H).
HR-TOF-MS (方法 1): C２２H３５N２O５ 計算値. 407.2541, 実測値 407.2534 [M + H]＋.
【０２５１】
実施例４９Ａ
Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｌ−ロイシン
【化７４】
2008518986.tif 000077
表題化合物は、操作手順４に従って加水分解によってメチルエステル（実施例４８Ａ、１.１ｇ、２.７１ｍｍｏｌ）から製造される。反応時間４時間後、ＨＰＬＣクロマトグラム（方法２）は、ほとんど完全な変換を示す。高純度精製のために、粗生成物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣ（方法３６）によってクロマトグラフィー処理を行い、続いて生成物９８０ｍｇ（理論量の９２％）が得られる。
HPLC (方法 2): Rｔ = 2.40 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.56 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 393 (100) [M + H]＋, 785 (72) [2M + H]＋,
MS (ESIneg): m/z (%) = 391 (57) [M - H]−, 783 (100) [2M - H]−.
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO): δ = 0.81 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 0.86 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 0.88 (s, 9H), 1.42-1.55 (m, 5H), 4.11-4.23 (m, 2H), 5.03 (s, 2H), 7.27-7.39 (m, 6H), 8.01 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 12.52 (s, br., 1H).
HR-TOF-MS (方法 1): C２１H３３N２O５ 計算値. 393.2384, 実測値 393.2383 [M + H]＋.
【０２５２】
実施例５０Ａ
Ｎ２.１−（ベンジルオキシカルボニル）−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−Ｌ−ロイシル−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム トリフルオロアセタート
【化７５】
2008518986.tif 000078
【０２５３】
ＮＭＭ（５２μｌ、４６９.７５μｍｏｌ、５当量）およびＨＡＴＵ（６４.３ｍｇ、１６９.１１μｍｏｌ、１.８当量）を使用して、操作手順５に従って、シクロペプチド（実施例２６Ａ、１２０.０ｍｇ、９３.９５μｍｏｌ）およびジペプチド酸（実施例４９Ａ、６３.３８ｍｇ、１６９.１１μｍｏｌ、１.８当量）をＤＭＦ（１５ｍｌ）中のアミドと一晩室温で反応させる。クロマトグラフィー（方法３５）後、表題化合物を収量１３８ｍｇ（理論量の９６％）で得られる。
HPLC (方法 25): Rｔ = 21.46 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.19 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 1424 (25) [M + H]＋, 712 (100) [M +2 H]２＋,
MS (ESIneg): m/z (%) = 1422 (22) [M - H]−, 710 (100) [M -2 H]２−.
HR-TOF-MS (方法 1): C６７H１０７N１６O１８ 計算値. 1423.7944, 実測値 1423.7964 [M + H]＋.
【０２５４】
実施例５１Ａ
メチル  （２Ｚ）−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−３−（６−トリフルオロメチルピリジン−３−イル）アクリラート
【化７６】
2008518986.tif 000079
６−トリフルオロメチルピリジン−３−カルボアルデヒド(6-Trifluoromethylpyridine-3-carbaldehyde)（４.８５ｇ、２７.７０ｍｍｏｌ）およびメチル  ｛［ベンジルオキシカルボニル］アミノ｝（ジメトキシホスホリル）アセタート（９.１７ｇ、２７.７０ｍｍｏｌ、１.０当量）をＴＨＦ（７０ｍｌ）中に溶解し、−７０℃まで冷却する。−７０℃で、Ｎ,Ｎ,Ｎ,Ｎ−テトラメチルグアニジン（６.３８ｇ、５５.３９ｍｍｏｌ、６.９５ｍｌ、２.０当量）をゆっくり滴下し、次いでこの混合物を−７０℃で、４時間、続いて、室温で１２時間撹拌する。この反応混合物を濃縮し、次に水に対して酢酸エチルで抽出する（２×１００ｍｌ）。集められた有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過する。濃縮後、粗生成物をクロマトグラフ処理（シリカゲル、溶出剤：トルエン、次いでトルエン：酢酸エチル １０：１）する。表題化合物６.９３ｇ（理論量の６６％）が得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 22): Rｔ = 4.60 分.
HPLC/UV-Vis (方法 17): Rｔ = 4.54 分.
LC-MS (方法 29): Rｔ = 2.44 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 381 (100) [M + H]＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 379 (100) [M - H]−.
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO): δ = 3.74 (s, 3H), 5.10 (s, 2H), 7.27 (s, 1H), 7.33-7.38 (m, 5H), 7.94 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.93 (s, 1H), 9.51 (s, 1H).
HR-TOF-MS (方法 1): C１８H１６N２O４F３ [M + H]＋ 計算値. 381.1062, 実測値 381.1065.
【０２５５】
実施例５２Ａ
Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−（６−トリフルオロメチルピリジン−３−イル）−Ｌ−アラニン メチルエステル
【化７７】
2008518986.tif 000080
実施例化合物５１Ａ（１０.１５ｇ、２６.６９ｍｍｏｌ）をメタノールp.a.（１００ｍｌ）中に溶解する。アルゴンをカニューレを用いて約５分間通過させ、次いで（＋）−１,２−ビス［（２Ｓ,５Ｓ）ジエチルホスホラノ］ベンゼン（シクロオクタジエン）ロジウム（Ｉ）トリフラート（２８９ｍｇ、４００μｍｏｌ、０.０１５当量）を加える。この混合物に４バールの水素圧下、室温で１２時間にわたって水素添加する。次いでこの混合物をキーゼルグール（メタノール）に通してろ過し、次に溶出剤を濃縮する。粗生成物をクロマトグラフで処理する（シリカゲル、溶出剤：トルエン：酢酸エチル ５：１）。表題化合物９.９ｇ（理論量の９７％）が得られる。
[α]２０Ｎａ=−24°(c = 0.093 メタノール中).
HPLC/UV-Vis (方法 22): Rｔ = 4.5 分.
HPLC/UV-Vis (方法 17): Rｔ = 4.49 分.
LC-MS (方法 29): Rｔ = 2.40 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 383 (100) [M + H]＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 273 (100), 381 (50) [M - H]−.
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO): δ = 2.99 (dd, J = 3.5 and 11.0 Hz, 1H), 3.22 (dd, J = 3.5 and 11.0 Hz, 1H), 3.66 (s, 3H), 4.40 (m, 1H), 4.97 (s, 2H), 7.23 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.29-7.33 (m, 3H), 7.83 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 7.93-7.98 (m, 2H), 8.65 (s, 1H).
HR-TOF-MS (方法 1): C１８H１８N２O４F３ [M + H]＋ 計算値. 383.1219, 実測値 383.1223.
【０２５６】
実施例５３Ａ
３−（６−トリフルオロメチルピリジン−３−イル）−Ｌ−アラニン メチルエステル
【化７８】
2008518986.tif 000081
実施例化合物５２Ａ（９.９０ｇ、２５.８９ｍｍｏｌ）をメタノール（１００ｍｌ）に溶解する。アルゴンをカニューレを用いて約５分間通過させ、次いでＰｄ・Ｃ（１０％,９９０ｍｇ）を加える。この混合物を４バールの水素圧下室温で１２時間にわたって、水素添加する。次いでこの混合物をキーゼルグールに通してろ過し、濃縮し、高真空下で乾燥する。収量：表題化合物５.８ｇ（理論量の９０％）。
[α]１９.９Ｎａ = +3°(c = 0.186 メタノール中).
HPLC/UV-Vis (方法 22): Rｔ = 3.34 分.
HPLC/UV-Vis (方法 17): Rｔ = 3.22 分.
IR νmax (NaCl, cm−１) : 3415, 1734, 1339, 1136, 1087.
LC-MS (方法 29): Rｔ = 1.74 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 249 (100) [M + H]＋.
１H NMR (500 MHz, d６-DMSO): δ = 2.85 (dd, J = 5.5 および 13.5 Hz, 1H), 3.01 (dd, J = 5.5 および 13.5 Hz, 1H), 3.61 (s, 3H), 3.63-3.69 (m, 1H), 7.82 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 8.61 (s, 1H).
HR-TOF-MS (方法 1): C１２H１５N３O２F３ [M + H]＋ 計算値. 290.1116, 実測値 290.1122.
【０２５７】
実施例５４Ａ
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｄ−アラニル−３−（６−トリフルオロメチルピリジン−３−イル）−Ｌ−アラニン メチルエステル
【化７９】
2008518986.tif 000082
ＮＭＭ（１２.９２ｇ、１２７.７２ｍｍｏｌ、１４.０４ｍｌ、５当量）およびＨＡＴＵ（９.７１ｇ、２５.５４ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＤＭＦ（２４０ｍｌ）中の実施例化合物５３Ａ（６.３４ｇ、２５.５４ｍｍｏｌ）およびＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニン（６.２７ｇ、２５.５４ｍｍｏｌ、１.０当量）の溶液に−３０℃でゆっくり加える。この反応混合物をゆっくり（約３時間）室温まで暖めると、ＨＰＬＣ（方法１７）によって完全な変換が観察される。リン酸二水素カリウム（３４.７６ｇ、２５５.４４ｍｍｏｌ、１０当量）を加え、次にこの反応混合物を２０分間撹拌し、次いでろ過し、酢酸エチルを加え、この混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１０ｍｌ）で洗浄する。この有機相を硫酸ナトリウムによって乾燥し、ろ過し、そして濃縮する。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル,溶出剤：シクロヘキサン：酢酸エチル グラジエント １０：１から２：１）によって精製し、表題化合物９.７４ｇ（理論量の７３％）が得られる。
【０２５８】
[α]１９.９Ｎａ = +7.0°(c = 0.044 メタノール中).
HPLC/UV-Vis (方法 22): Rｔ = 4.89 分.
HPLC/UV-Vis (方法 17): Rｔ = 4.75 分.
LC-MS (方法 29): Rｔ = 2.67 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 476 (100), [M + H]＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 400 (80), 474 (40) [M - H]−.
１H NMR (500 MHz, d６-DMSO): δ = 0.74 (s, 9H), 0.97-1.00 (m, 1H), 1.20-1.25 (m, 1H), 1.35 (s, 9H), 2.99-3.05 (m, 1H), 3.23-3.26 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.94 (m, 1H), 4.60 (m, 1H), 6.82 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.94 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.34 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.64 (s, 1H).
IR νmax (NaCl, cm−１) : 2959, 1742, 1655, 1520, 1336, 1160, 1136, 1087, 1050, 1027.
HR-TOF-MS (方法 1): C２２H３３N３O５F３ [M + H]＋ 計算値. 476.2372, 実測値 476.2364.
【０２５９】
実施例５５Ａ
Ｎ２.１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−（６−トリフルオロメチルピリジ−３−イル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム トリフルオロアセタート
【化８０】
2008518986.tif 000083
【０２６０】
ＮＭＭ（７５μｌ、０.６９ｍｍｏｌ、５当量）およびＨＡＴＵ（９３.８ｍｇ、０.２５ｍｍｏｌ、１.８当量）を使用して、操作手順５に従って、シクロペプチド（実施例２６Ａ、１７５.０ｍｇ、０.１４ｍｍｏｌ）およびジペプチド酸（実施例５４Ａ、１１３.８ｍｇ、０.２５μｍｏｌ、１.８当量）をＤＭＦ（１５ｍｌ）中のアミドと一晩−１０℃で反応させる。クロマトグラフィー（方法３５）後、表題化合物を収量１９０ｍｇ（理論量の８６％）で得られる。
HPLC (方法 25): Rｔ = 21.51 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.27 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 1494 (33) [M + H]＋, 747 (100) [M +2 H]２＋,
MS (ESIneg): m/z (%) = 1492 (10) [M - H]−, 745 (100) [M -2 H]２−.
HR-TOF-MS (方法 1): C６７H１０５N１７O１８F３ 計算値. 1492.7771,
実測値 1492.7778 [M + H]＋.
【０２６１】
実施例５６Ａ
メチル  （２Ｚ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−シクロペンチルアクリラート
【化８１】
2008518986.tif 000084
メチル  ｛［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル］アミノ｝（ジメトキシホスホリル）アセタート（３９.２ｇ、１３２.００ｍｍｏｌ）およびシクロペンタンカルボアルデヒド（３８.９ｇ、３９６.００ｍｍｏｌ、３当量）がＴＨＦ（３２０ｍｌ）に提供され、次にＮ,Ｎ,Ｎ,Ｎ−テトラメチルグアニジン（２４.８ｍｌ、２２.８１ｇ、１９８.００ｍｍｏｌ、１.５当量）を−７０℃でこの溶液に加える。冷浴を解凍して、この反応をゆっくり室温にする。２日以内に、完全な変換が達成される。ワークアップのために、酢酸エチル（１６００ｍｌ）および水（８００ｍｌ）をこの反応に加え、次に分離した有機相を硫酸ナトリウムで乾燥する。乾燥剤は、ろ過によって分離され、ろ液をロータリーエバポレーターで濃縮する。生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０：１ｋｇ、溶出剤：シクロヘキサン/酢酸エチル ４：１）によって残渣から単離する（収量３４.８ｇ（理論量の９８％））。
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rｔ = 4.76 分.
１H NMR (300 MHz, CDCl３) δ = 1.28-1.43 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.52-1.78 (m, 4H), 1.83-1.97 (m, 2H), 2.71 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 5.79 (s, br., 1H), 6.50 (d, J = 9.9 Hz, 1H).
【０２６２】
実施例５７Ａ
メチル  Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−シクロペンチル−Ｌ−アラニナート
【化８２】
2008518986.tif 000085
実施例化合物５６Ａ（１３.０ｇ、４８.２７ｍｍｏｌ）をエタノール（２２０ｍｌ）中に溶解し、次にこの溶液をアルゴンで１０分間フラッシングし、５分間超音波浴に置く。（＋）−１,２−ビス［（２Ｓ,５Ｓ）ジエチルホスホラノ］ベンゼン（シクロオクタジエン）ロジウム（Ｉ）トリフラート（１００.０ｍｇ、０.１３ｍｍｏｌ）を添加後、この混合物を再度アルゴンで１回フラッシングし（３０分間）、超音波浴中で５分間脱ガスし、次いで室温で３.５バールの水素圧下で３日間水素添加する。ワークアップのために、溶媒をロータリーエバポレーターで完全に除去し、次に残渣をシリカゲル６０を用いるクロマトグラフィー処理（３００ｍｌ、溶出剤：シクロヘキサン/酢酸エチル ２/１）する。表題化合物が１２.９ｇ（理論量の９４％）得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 4): Rｔ = 4.88 分.
DCI-MS (NH３): m/z = 289 (100) [M + NH４]＋, 560 (15) [2M +NH４]＋.
１H NMR (200 MHz, CDCl３) δ = 1.00-1.25 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.48-1.95 (m, 9H), 3.72 (s, 3H), 4.28 (m, 1H), 4.95 (d, J = 8.4 Hz, 1H).
【０２６３】
実施例５８Ａ
メチル  ３−シクロペンチル−Ｌ−アラニナート・塩酸塩
【化８３】
2008518986.tif 000086
操作手順２に従って、表題化合物がＮ−保護アミノ酸（実施例５７Ａ、５.０ｇ、１８.４３ｍｍｏｌ）から粗収量３.９ｇ（定量的）が得られる。
LC-MS (方法 30): Rｔ = 2.02 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 172 (100) [M + H]＋.
１H NMR (300 MHz, d６) δ = 0.98-1.18 (m, 2H), 1.40-1.67 (m, 4H) 1.68-1.85 (m, 4H この中で1.82 (d, J = 6.6 Hz, 2H)), 1.92 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.90 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 8.63 (s, br., 3H).
【０２６４】
実施例５９Ａ
メチル  Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−シクロペンチル−Ｄ−アラニナート
【化８４】
2008518986.tif 000087
アクリラート（実施例５６Ａ、１３.０ｇ、４８.２７ｍｍｏｌ）および（＋）−１,２−ビス［（２Ｒ,５Ｒ）ジエチルホスホラノ］ベンゼン（シクロオクタジエン）ロジウム（Ｉ）トリフラート（１００.０ｍｇ、０.１３ｍｍｏｌ）を、実施例５７Ａの方法で述べられているように使用して、表題化合物１２.６ｇ（理論量の９６％）を得る。
MS (DCI, NH３): m/z (%) = 289 (100) [M + NH４]＋, 560 (15) [2M + NH４]＋.
１H NMR (300 MHz, CDCl３) δ = 1.00-1.21 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.48-1.93 (m, 9H), 3.73 (s, 3H), 4.28 (m, 1H), 4.95 (m, 1H).
【０２６５】
実施例６０Ａ
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−シクロペンチル−Ｄ−アラニン
【化８５】
2008518986.tif 000088
操作手順４に従って、実施例化合物５９Ａ（５.０ｇ、１８.４３ｍｍｏｌ）を２時間以内、Ｎ−保護アミノ酸と反応させる。表題化合物５.１１ｇ（定量的）が得られる。
[α]２０Ｎａ = +7°(c = 0.13 CH２Cl２中).
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 2.33 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.26 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 158 (100) [M -C４H８-CO２+ H]＋;
MS (ESIneg): m/z (%) = 256 (58) [M - H]−.
１H NMR (300 MHz, d６-DMSO) δ = 1.05 (m, 2H), 1.38 (s, 9H), 1.42-1.78 (m, 8H), 1.83 (m, 1H), 3.85 (m, 1H), 7.04 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 12.27 (s, br., 1H).
【０２６６】
実施例６１Ａ
メチル  Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−シクロペンチル−Ｄ−アラニル−３−シクロペンチル−Ｌ−アラニナート
【化８６】
2008518986.tif 000089
ペプチドアミン（実施例５８Ａ、０.９ｇ、４.２７ｍｍｏｌ、１.１当量）がアルゴン保護ガス雰囲気下でジクロロメタン（２５０ｍｌ）中に提供され、この溶液を−１０℃まで冷却し、次にＨＯＢｔ（２.１ｇ、１５.５４ｍｍｏｌ、４当量）、ＮＭＭ（１.３ｍｌ、１.２ｇ、１１.６７ｍｍｏｌ、３当量）、ペプチド酸（実施例６０Ａ、１.０ｇ、３.８９ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（１.５ｇ、７.７７ｍｍｏｌ、２当量）および再び、ＮＭＭ（０.８ｍｌ、０.８ｇ、７.７６ｍｍｏｌ、２当量）を順に加える。この反応は、冷却浴中でゆっくり室温まで導き、一晩完全に変換させる。ワークアップのために、水をこの反応に加え、この混合物をロータリーエバポレーターで（水浴 ３５℃）濃縮し、酢酸エチルおよび飽和炭酸水素ナトリウム溶液を加え、次に分離した水相を酢酸エチルで２回抽出し、次に集められた有機相を飽和５％クエン酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム溶液および飽和塩化ナトリウム溶液で順に洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮する。表題化合物１.６４ｇ（定量的）が粗生成物として得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 2.97 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.94 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 411 (100) [M + H]＋, 311 (57) [M -C４H８-CO２+ H]＋.
【０２６７】
実施例６２Ａ
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−シクロペンチル−Ｄ−アラニル−３−シクロペンチル−Ｌ−アラニン
【化８７】
2008518986.tif 000090
操作手順４に従って、ジペプチド（実施例６１Ａ、１.５ｇ、３.６５ｍｍｏｌ）を１時間以内、ジペプチドカルボン酸と反応させる。凍結乾燥粗生成物を高純度精製（方法１３）後、表題化合物を９２３.４ｍｇ（理論量の６４％）単離する。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Ｒｔ = 2.65 分.
LC-MS (方法 7): Ｒｔ = 2.60 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 397 (100) [M + H]＋, 297 (60) [M -C４H８-CO２+ H]＋, 793 (46) [2M + H]＋;
MS (ESIneg): m/z (%) = 395 (57) [M - H]−, 791 (100) [2M - H]−.
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO) δ = 1.05 (m, 4H) 1.38 (s, 9H), 1.43 (m, 4H), 1.55 (m, 6H), 1.61-1.86 (m, 8H), 3.96 (m, 1H), 4.16 (m, 1H), 6.75 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 7.9 Hz, 1H) 12.55 (s, br., 1H).
HR-TOF-MS (方法 1): C２１H３８N２O５ 計算値. 397.2702, 実測値 397.2697 [M + H]＋.
【０２６８】
実施例６３Ａ
Ｎ２.１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−［３−シクロペンチル−Ｄ−アラニル］−［３−シクロペンチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム トリフルオロアセタート
【化８８】
2008518986.tif 000091
【０２６９】
ＮＭＭ（１３μｌ、１１７.４３μｍｏｌ、５当量）およびＨＡＴＵ（１６.１ｍｇ、４０.５４ｍｍｏｌ、１.８当量）を使用して、操作手順５に従って、シクロペプチド（実施例２６Ａ、３０.０ｍｇ、２３.４９μｍｏｌ）およびジペプチド酸（実施例６２Ａ、１６.８ｍｇ、４２.２８μｍｏｌ、１.８当量）を、ＤＭＦ（２ｍｌ）中のアミドと−１０℃で、２.５時間以内、反応させる。表題化合物がクロマトグラフィー処理（方法３７）後、収量２６.６ｍｇ（理論量の６７％）で得られる。
HPLC (方法 2): Rｔ = 2.30 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.21 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 1428 (35) [M + H]＋, 664 (100) [M +2 H]２＋,
MS (ESIneg): m/z (%) = 1426 (100) [M - H]−.
HR-TOF-MS (方法 1): C６７H１１１N１６O１８ 計算値. 1427.8257,
実測値 1427.8242 [M + H]＋.
【０２７０】
実施例６４Ａ
Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｄ−アラニル−３−（ピリジン−３−イル）−Ｌ−アラニン メチルエステル・トリフルオロアセタート
【化８９】
2008518986.tif 000092
３−ピリジン−３−イル−Ｌ−アラニン（８００ｍｇ、３.１６ｍｍｏｌ）およびＮ−（ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニン（１.４７ｇ、３.１６ｍｍｏｌ、１当量）をＤＭＦ（１２ｍｌ）に０℃で溶解する。次いで４−メチルモルホリン（１.７４ｍｌ、１５.８ｍｍｏｌ、５当量）およびＨＡＴＵ（１.８ｇ、４.７４ｍｍｏｌ、１.５当量）を加え、次にこの混合物を室温で約３時間にわたって撹拌する。この混合物を濃炭酸水素ナトリウムに対して酢酸エチルで（２回）抽出し、次に集められた有機相を１Ｍクエン酸および再び濃炭酸水素ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空中で濃縮する。クロマトグラフィー精製（方法３９）後、表題化合物１.１ｇ（理論量の６３％）が得られる。
[α]１９.９Ｎａ = +6°(c = 0.13 メタノール中).
HPLC (方法 17): Rｔ = 3.92 分.
HPLC (方法 23): Rｔ = 4.06 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.03 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 442 (100) [M+H]＋.
IR νmax (NaCl, cm−１): 3295, 2952, 2359, 1715, 1659, 1522, 1435, 1365, 1283, 1243, 1138, 1048, 1326.
HR-TOF-MS (方法 1): C２４H３２N３O５ [M + H]＋ 計算値. 442.2342, 実測値 442.2342.
【０２７１】
実施例６５Ａ
Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｄ−アラニル−３−（ピリジン−３−イル）−Ｌ−アラニン
【化９０】
2008518986.tif 000093
実施例６４Ａ（１.１ｇ、１.９８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ−水 ３：１（４８ｍｌ）に入れ、次に−２０℃に冷却する。水酸化リチウム（１１９ｍｇ、２.５ｍｍｏｌ、４.９５当量）を加え、次にこの混合物を室温で１２時間撹拌する。この反応をリン酸二水素カリウム（１.３５ｇ）を加えることによって終了させ、真空中で濃縮する。クロマトグラフィー精製（方法１４）後、表題化合物０.５７ｇ（理論量の６７％）が固体として得られる。
[α]２０Ｎａ = +44°(c = 0.15 メタノール中).
HPLC (方法 17): Rｔ = 3.73 分.
HPLC (方法 23): Rｔ = 3.88 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.72 分,
MS (ESIpos.): m/z (%) = 428 (100) [M+H]＋.
IR νmax (NaCl, cm−１): 3290, 2956, 1659, 1613, 1537, 1414, 1251, 1205, 1184, 1136, 1050, 1028.
HR-TOF-MS (方法 1): C２３H２９N３O５ [M + H]＋ 計算値. 428.2180, 実測値 428.2169.
【０２７２】
実施例６６Ａ
Ｎ２.１−（ベンジルオキシカルボニル）−［３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｄ−アラニル］−［３−（ピリジン−３−イル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル)］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム ビストリフルオロアセタート
【化９１】
2008518986.tif 000094
【０２７３】
ＮＭＭ（９μｌ、７８.３μｍｏｌ、５当量）およびＨＡＴＵ（１０.７ｍｇ、２８.１９μｍｏｌ、１.８当量）を使用して、操作手順５に従って、シクロペプチド（実施例２６Ａ、２０.０ｍｇ、１５.６６μｍｏｌ）およびジペプチド酸（実施例６５Ａ、１２.０ｍｇ、２８.１９μｍｏｌ、１.８当量）を、ＤＭＦ（６ｍｌ）中のアミドと−２０℃で、２.５時間以内反応させる。表題化合物がクロマトグラフィー処理（たとえば方法３６）後、１６.５ｍｇ（理論量の６１％）で得られる。
HPLC (方法 25): Rｔ = 18.55 分.
LC-MS (方法 29): Rｔ = 1.73 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 1458 (20) [M + H]＋, 730 (100) [M +2 H]２＋,
MS (ESIneg): m/z (%) = 1456 (27) [M - H]−, 728 (100) [M -2 H]２−.
HR-TOF-MS (方法 1): C６９H１０４N１７O１８ 計算値 1458.7740,
実測値 1458.7739 [M + H]＋.
【０２７４】
実施例６７Ａ
メチル  ３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アラニナート トリフルオロアセタート
【化９２】
2008518986.tif 000095
トリフルオロ酢酸/ジクロロメタン ３：１（２２０ｍｌ）をメチル  Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アラニナート（１６ｇ、６１.７０ｍｍｏｌ）［J. A. Bajgrowicz, et al., Tetrahedron Lett., 1984, 2759-2762］に加え、次にこの混合物を室温で１.５時間撹拌する。次にこの混合物を真空中で濃縮し、残渣をＨＶ下で乾燥する。収量は、定量的である（１６.５ｇ）。
MS (DCI, NH３): m/z = 160 (100) [M+H]＋.
１H NMR (300 MHz, d６-DMSO): δ = 0.92 (s, 9H), 1.59 (dd, J = 4.7, 14.5 Hz, 1H), 1.80 (dd, J = 7.6, 14.5 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.95 (dd, J = 4.7, 7.6 Hz, 1H), 8.5-8.3 (br. s, 3H).
【０２７５】
実施例６８Ａ
メチル  Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−ロイシル−３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アラニナート
【化９３】
2008518986.tif 000096
ペプチドアミン（実施例７７Ａ、４.０ｇ、１４.６８ｍｍｏｌ、１.１当量）を、アルゴン保護ガス雰囲気下でジクロロメタン（３６５ｍｌ）中に提供し、次にＨＯＢｔ（７.２ｇ、５３.２３ｍｍｏｌ、４当量）、ＮＭＭ（４.３ｍｌ、３９,９２ｍｍｏｌ、３当量）、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−ロイシン（３.１ｇ、１３.３１ｍｍｏｌ、１当量）［T. Kato, N.Izumiya, Bull. Chem. Soc. Jpn., 1966, 39, 2242-2249］、ＥＤＣ（５.１ｇ、２６.６２ｍｍｏｌ、２当量）および更にＮＭＭ（３ｍｌ、２６.６１ｍｍｏｌ、２当量）を順に−１０℃でこの溶液に加え、次にこの混合物を一晩撹拌して、完全に変換する。ワークアップのために、この反応溶液をロータリーエバポレーターで３０℃浴温度で濃縮し、次いで、分取ＨＰＬＣ（たとえば、方法３５）によってクロマトグラフィー処理する。表題化合物５.５ｇ（理論量の８０％）が得られる。
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.72 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 373 (78) [M + H]＋, 273 (100) [M -C４H８-CO２+ H]＋.
【０２７６】
実施例６９Ａ
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−ロイシル−３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アラニン
【化９４】
2008518986.tif 000097
操作手順４に従って、実施例化合物６８Ａ（４００ｍｇ、１.０７ｍｍｏｌ）を１時間以内ジペプチドカルボン酸と反応させる。ワークアップのために、リン酸二水素カリウム（２１９.２ｍｇ、１.６１ｍｍｏｌ、１.５当量）をこの溶液に加え、この混合物を冷却条件下でロータリーエバポレーターで濃縮し、次に分取ＨＰＬＣ（たとえば、実施例３５）によって高純度精製する。表題化合物が凍結乾燥物として（２８２.０ｍｇ、理論量の６５％）得られる。（分析データについては、ＷＯ ２００４０９９２３９参照）。
【０２７７】
実施例７０Ａ
Ｎ２.１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−ロイシル−［３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アラニル）］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム フルオロアセタート
【化９５】
2008518986.tif 000098
【０２７８】
ＮＭＭ（１３μｌ、１１７.４５μｍｏｌ、５当量）およびＨＡＴＵ（１６.１ｍｇ、４２.２８μｍｏｌ、１.８当量）を使用して、操作手順５に従って、シクロペプチド（実施例２６Ａ、３０.０ｍｇ、２３.４９μｍｏｌ）およびジペプチド酸（実施例６９Ａ、１５.２ｍｇ、４２.２８μｍｏｌ、１.８当量）を、ＤＭＦ（１０ｍｌ）中のアミドと一晩室温で反応させる。表題化合物がクロマトグラフィー処理（方法３６）後、収量３４.０ｍｇ（理論量の９６％）で得られる。
HPLC (方法 2): Rｔ = 2.25 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.18 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 1390 (77) [M + H]＋, 645 (100) [M -C４H８-CO２+2 H]２＋,
MS (ESIneg): m/z (%) = 1387 (73) [M - H]−, 693 (100) [M -2 H]２−
HR-TOF-MS (方法 1): C６４H１０９N１６O１８ 計算値. 1389.8101,
実測値 1389.8101 [M + H]＋.
【０２７９】
実施例７１Ａおよび７２Ａ
（２Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（トリメチルシリル）−Ｄ−アラニン（７１Ａ）および
（２Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（トリメチルシリル）−Ｌ−アラニン（７２Ａ）
合成は、M.Merget, et al., J. Organomet. Chem. 2001 628, 183-194に従って行われる。エナンチオマーの分離は、キラル相の分取ＨＰＬＣ（方法２６）によって行われる。異性体は、ＨＰＬＣによって標準サンプル Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−３−トリメチルシリルアラニン（２Ｒ化合物、Mercachem AMR 39.260）と比較して特定される。
【０２８０】
実施例７１Ａ  Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−トリメチルシリル−Ｄ−アラニン
【化９６】
2008518986.tif 000099
キラル HPLC (方法 26): Rｔ = 4.16 分, e.e.> 99%.
[α]Ｄ２０ = +1.1 (c = 0.83, メタノール)
【０２８１】
実施例７２Ａ  Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−トリメチルシリル−Ｌ−アラニン
【化９７】
2008518986.tif 000100
キラル HPLC (方法 26): Rｔ = 9.27 分, e.e.> 99%
[α]Ｄ２０ = -1.6 (c = 0.66, メタノール)
【０２８２】
実施例７３Ａ
３−トリメチルシリル−Ｌ−アラニン メチルエステル・塩酸塩
【化９８】
2008518986.tif 000101
実施例７２Ａからの化合物（３００ｍｇ）をメタノール（３ｍｌ）中に溶解し、０℃に冷却する。トリメチルシリルクロリド（５９０ｍｇ、４.７当量）を３０分以内滴下し、この混合物を室温まで一晩暖める。揮発性成分をロータベイパー(Rotavapor)および続いて高真空下で除去する。標的化合物が得られる（２２４ｍｇ、理論量の９２％）。
１H NMR (d６-DMSO, 300 MHz): δ = 0.03 (s, 9H), 0.97-1.71 (m, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.93 (dd, J = 5.3, 10.9 Hz, 1H), 8.40 (br s, 3H).
【０２８３】
実施例７４Ａ
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−３−トリメチルシリル−Ｌ−アラニン メチルエステル
【化９９】
2008518986.tif 000102
実施例７３Ａからの化合物（２.０ｇ）がアルゴン下でＴＨＦ（４０ｍｌ）中に０℃で提供される。トリエチルアミン（２.３ｇ、２.４当量）を加え、次いでＴＨＦ（２０ｍｌ）中のＮ−ベンジルオキシカルボニルオキシスクシンイミド（２.８３ｇ、１.２当量）の溶液を滴下する。次いでこの混合物を室温で一晩撹拌し、半分に濃縮し、酢酸エチルで希釈し、次に水で２回、飽和塩化ナトリウム溶液で１回洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ロータリーエバポレーターで濃縮する。残渣を分取ＨＰＬＣ（方法４１）によって精製する。標的化合物が得られる（２.３２ｇ、理論量の７９％）。
HPLC (方法 18): Ｒｔ= 4.96 分.
MS (DCI, NH３): m/z = 327 [M+NH４]＋ (100), 310 (3) [M+H]＋.
【０２８４】
実施例７５Ａ
（２Ｒ）−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−３−トリメチルシリル−Ｌ−アラニノール
【化１００】
2008518986.tif 000103
塩化リチウム（０.６４ｇ、１５ｍｍｏｌ）および水素化ホウ素ナトリウム（０.５７ｇ、１５ｍｍｏｌ）および次いでエタノール（２２ｍｌ）をＴＨＦ（１４ｍｌ）中の実施例７４Ａの溶液（２.３２ｇ、７.５ｍｍｏｌ）に加える。この混合物を室温で一晩撹拌する。ワークアップのために、氷水で冷却しながら、混合物をクエン酸溶液（水中１０％）でｐＨ ４に調整し、次いで水２００ｍｌで希釈し、次にジクロロメタンで３回抽出する。集められた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、次に真空中で濃縮する。残渣をＨＰＬＣ（方法４１）によって分離し、次にしかるべきフラクションを真空中で濃縮する。表題化合物が油状物として得られる（１.２４ｇ、理論量の５９％）。
HPLC (方法 4): Ｒｔ = 4.48 分.
MS (DCI, NH３): m/z = 299 [M+NH４]＋ (100), 282 (13) [M+H]＋.
１H NMR (CDCl３, 300 MHz): δ = 0.03 (s, 9H), 0.58-0.84 (m, 2H), 2.13 (br.s, 1H), 3.45 (br.m, 1H), 3.65 (br.m, 1H), 3.83 (br.m, 1H), 4.72 (br.m, 1H), 5.08 (s, 2H), 7.33 (m, 5H).
【０２８５】
実施例７６Ａ
（２Ｒ）−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−３−トリメチルシリル−Ｌ−アラニナール
【化１０１】
2008518986.tif 000104
無水ＤＭＳＯ（１２ｍｌ）中のピリジン−ＳＯ３コンプレックス（２.０４ｇ、１２.８ｍｍｏｌ）の溶液を７ｍｌのＤＭＳＯ中の実施例７５Ａ（０.３６ｇ、１.２８ｍｍｏｌ）およびＮ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１.６５ｇ、１２.８ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン下、１０℃で加える。冷却浴を取り除き、次にこの混合物を更に２０分間撹拌する。氷水４００ｍｌを加え、次にこの溶液をジエチルエーテルで３回抽出する。集められた有機相をクエン酸溶液（水中１０％）で２回、水で１回、飽和重炭酸ナトリウム溶液で１回、飽和塩化ナトリウム溶液で１回、洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、ロータリーエバポレーターで濃縮する。表題化合物が油状物として得られ（０.３９ｇ、理論量の９３％）、これは、粗生成物として更に直接使用する。
MS (DCI, NH３): m/z = 297 [M+NH４]＋ (100), 280 (25) [M+H]＋.
１H NMR (CDCl３, 300 MHz): δ = 0.07 (s, 9H), 0.78 (dd, J = 9.4, 14.0 Hz, 1H), 1.12 (dd, J = 5.8, 14.0 Hz, 1H), 5.13 (s, 2H), 7.35 (m, 5H), 9.53 (s, 1H).
【０２８６】
実施例７７Ａ
３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アラニン メチルエステル トリフルオロアセタート
【化１０２】
2008518986.tif 000105
（２Ｓ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン メチルエステル（５２９ｍｇ、２.０４ｍｍｏｌ）をＴＦＡ/ジクロロメタン １：３（３ｍｌ）中で室温で撹拌し、この溶液をロータリーエバポレーターで濃縮し、高真空下で乾燥する。生成物５４０ｍｇ（理論量の９７％）が得られる。
１H NMR (d６-DMSO, 300 MHz): δ = 0.92 (s, 9H), 1.59 (dd, J = 4.7, 14.4 Hz, 1H), 1.80 (dd, J = 7.5, 14.4 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.95 (dd, J = 4.7, 7.5 Hz, 1H), 8.33 (br.s, 3H).
【０２８７】
実施例７８Ａ
Ｎ−［（２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−トリメチルシリルプロピル］−３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アラニン メチルエステル ヒドロトリフルオロアセタート
【化１０３】
2008518986.tif 000106
アルゴン下で、実施例化合物７７Ａ（４.３３ｇ、１５.９ｍｍｏｌ）、実施例化合物７６Ａ（７.２ｇ、２０.６ｍｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（１.３ｇ、１５.９ｍｍｏｌ）がＤＭＦ（１４０ｍｌ）中に０℃で提供される。水素化ホウ素シアノナトリウム(sodium cyanoborohydride)(１.９９ｇ、３１.７ｍｍｏｌ)を加え、この混合物を０℃で２時間撹拌する。ワークアップのために、この混合物を１ｌの酢酸エチルによって希釈し、次に５％重炭酸ナトリウム溶液で２回洗浄する。この水相を酢酸エチルで再抽出する。集められた有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、濃縮する。残渣を分取ＨＰＬＣ（方法３９）によって精製する。表題化合物６.０２ｇ（理論量の７１％）が結晶として得られる。
HPLC (方法 4): Rｔ = 4.8 分.
ESI-MS (pos.): m/z = 423 (100) [M+H]＋.
１H NMR (CDCl３, 300 MHz): δ = 0.03 (s, 9H), 0.76 (dd, J = 5.1, 14.7 Hz, 1H), 0.94 (s, 9H), 0.95 (dd, J = 10.2, 14.7 Hz, 1H), 1.95-1.80 (m, 2H), 2.93 (dd, J = 2.5, 12.5 Hz, 1H), 3.35 (dd, J = 9.8, 11.3 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.85 (dd, J = 4.5, 7.9 Hz, 1H), 4.07-3.90 (m, 1H), 5.05 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 5.16 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 5.63 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 7.33 (s, 5H).
【０２８８】
実施例７９Ａ
Ｎ−［（２Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−トリメチルシリルプロピル］−３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アラニン・塩酸塩
【化１０４】
2008518986.tif 000107
実施例化合物７８Ａ（６.０２ｇ、１１.２ｍｍｏｌ）をメタノール（２２５ｍｌ）中に溶解し、次に水中の１Ｎ水酸化リチウム溶液（１０１ｍｌ）（９当量）を加える。室温でこの反応混合物を室温で一晩（１８時間）撹拌し、次いで１Ｎ塩酸で酸性にし、ロータリーエバポレーターでメタノールを除去する。残存している懸濁液を２００ｍｌの水で希釈し、酢酸エチルで３回抽出する。集められた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮する。残渣を高真空下で乾燥する。表題化合物５.３ｇ（定量的）が得られ、これは、更に精製することなく反応させる。
HPLC (方法 4): Rｔ = 4.6 分.
MS (ESIpos): m/z (%) = 409 (100) [M+H]＋,
MS (ESIneg): m/z (%) = 407 (10) [M-H]−.
１H-NMR (d６-DMSO, 400 MHz): δ = 0.03 (s, 9H), 0.82 (m, 2H), 0.95 (s, 9H), 1.68 (br.d, J = 14.5, 1H), 1.84 (dd, J = 9.0, 14.5, 1H), 2.88 (m, 1H), 3.10 (m, 1H), 3.80-4.03 (m, 2H), 5.01 (d, J = 12, 1H), 5.13 (d, J = 12, 1H), 7.29 (d, J = 9.0, 1H), 7.43-7.56 (m, 5H), 8.7-9.2 (br, 2H, NH２＋).
【０２８９】
実施例８０Ａ
Ｎ２.１−［（２Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−（トリメチルシリル）プロピル］−［３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１０−Ｎ３.２−ラクタム ビストリフルオロアセタート
【化１０５】
2008518986.tif 000108
【０２９０】
ＮＭＭ（１３μｌ、１１７.４５μｍｏｌ、５当量）およびＨＡＴＵ（１６.１ｍｇ、４２.２８μｍｏｌ、１.８当量）を使用して、操作手順５に従って、シクロペプチド（実施例２６Ａ、３０.０ｍｇ、２３.４９μｍｏｌ）およびジペプチド酸（実施例６９Ａ、１８.８ｍｇ、４２.２８μｍｏｌ、１.８当量）を−２０℃から−１０℃でＤＭＦ（１５ｍｌ）中、２.５時間以内で、アミドに変換させる。クロマトグラフィー（方法３６）後、表題化合物が得られる（収量３４.０ｍｇ、理論量の９６％）。
HPLC (方法 25): Ｒｔ = 19.59 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.97 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 720 (100) [M + 2H]２＋.
HR-TOF-MS (方法 1): C６７H１１１N１６O１７ 計算値. 1439.8077,
実測値 1439.8036 [M + H]＋.
【０２９１】
実施例８１Ａ
（２Ｓ）−Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニナール
【化１０６】
2008518986.tif 000109
この化合物は、Ｚ−β−ｔｅｒｔ−ブチル−アラニン メチルエステルから実施例７５Ａおよび実施例７６Ａの合成手順に準じて製造される。
MS (DCI, NH３): m/z = 281 [M+NH４]＋ (100); 264 (20) [M+H]＋.
１H NMR (CDCl３, 300 MHz): δ = 1.00 (s, 9H), 1.30 (dd, J = 8.3, 14.7 Hz, 1H), 1.83 (dd, J = 3.8, 14.6 Hz, 1H), 4.33 (dt, J = 3.8, 8.7 Hz, 1H), 5.06 (m, 1H), 5.12 (s, 2H), 7.36 (m, 5H), 9.58 (s, 1H).
【０２９２】
実施例８２Ａ
Ｎ−［（２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−４,４−ジメチルペンチル］−３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アラニン メチルエステル トリフルオロアセタート
【化１０７】
2008518986.tif 000110
この化合物は、実施例８１Ａおよび実施例７７Ａから実施例７８Ａに準じて製造される。収量：８６０ｍｇ（理論量の３６％）。
HPLC (方法 4): Rｔ = 4.7 分.
MS (ESI pos): m/z = 407 (100) [M+H]＋.
１H NMR (CDCl３, 300 MHz): δ = 0.91 (s, 1H), 0.93 (s, 9H), 1.34 (br.d, J = 15, 1H), 1.53 (dd, J = 8.7, 14.7, 1H), 1.68-1.95 (m, 2H), 2.89 (dd, J = 3.5, 12 Hz, 1H), 3.33 (dd, J = 10.5, 12 Hz, 1H), 3.84 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.99 (m, 1H), 5.04 (d, J= 12 Hz, 1H), 5.13 (d, J= 12 Hz, 1H), 5.73 (br.d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.32 (m, 5H).
【０２９３】
実施例８３Ａ
Ｎ−［（２Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−４,４−ジメチルペンチル］−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン トリフルオロアセタート
【化１０８】
2008518986.tif 000111
この化合物は、実施例８３Ａ（１.１０ｇ、２.１１ｍｍｏｌ）および１Ｎ水酸化リチウム溶液（１９ｍｌ）から実施例７９Ａに準じて製造される。収量：８９５ｍｇ（理論量の８３％）。
HPLC (方法 4): Rｔ = 4.47 分.
MS (ESIpos.): m/z (%) = 393 (100) [M+H]＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 391 (4) [M-H]−.
１H NMR (d６-DMSO, 300 MHz): δ = 0.89 (s, 9H), 0.93 (s, 9H), 1.30-1.45 (m, 2H), 1.64 (dd, J = 2, 14 Hz, 1H), 1.81 (dd, J = 9.7, 14 Hz, 1H), 2.88 (m, 1H), 2.98 (m, 1H), 3.85-3.99 (m, 2H), 4.99 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 5.12 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.27-7.40 (m, 5H).
１３C NMR (126 MHz, d６-DMSO): δ = 29.00 (3C), 29.38 (3C), 29.96 (2C), 42.22, 45.10, 45.64, 50.52, 56,97, 65,39, 127.56 (2C), 127.73, 128.23 (2C), 136.83, 155.47, 171.47.
HR-TOF-MS (方法 1): C２２H３７N２O４ [M + H]＋ 実測値 393.2753, 計算値. 393.2748
【０２９４】
実施例８４Ａ
Ｎ２.１−［（２Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチル）プロピル］−［３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１０−Ｎ３.２−ラクタム ビストリフルオロアセタート
【化１０９】
2008518986.tif 000112
【０２９５】
操作手順５に従って、シクロペプチド（実施例２６Ａ、１７０.０ｍｇ、０.１３ｍｍｏｌ）、ジペプチド酸（実施例８３Ａ、１２１.４ｍｇ、０.２４ｍｍｏｌ、１.８当量）、ＮＭＭ（７３μｌ、０.６７μｍｏｌ、５当量）およびＨＡＴＵ（９１.１ｍｇ、４２.２８μｍｏｌ、１.８当量）を、ＤＭＦ（６ｍｌ）中のアミドと−２０℃から−１０℃までで、２.５時間以内反応させる。表題化合物のクロマトグラフィー処理（たとえば方法３５）後、表題化合物が３４.０ｍｇ（理論量の９６％）得られる。
HPLC (方法 2): Rｔ = 2.08 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.9 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 712.7 (100) [M + 2H]２＋, 1424 (5) [M + H]＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1422.7 (100) [M - H]−.
HR-TOF-MS (方法 1): C６８H１１１N１６O１７ [M + H]＋ 実測値 1423.8318,
計算値. 1423.8313.
【０２９６】
実施例８５Ａ
Ｎ２.１−［（２Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−（ｔｅｒｔ−ブチル）プロピル］−［３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１０−Ｎ３.２−ラクタム ビストリフルオロアセタート
【化１１０】
2008518986.tif 000113
【０２９７】
操作手順５に従って、シクロペプチド（実施例２６Ａ、４２.０ｍｇ、３２.８８μｍｏｌ）、Ｎ−（（２Ｒ）−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−４,４−ジメチルペンチル）−３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アラニン トリフルオロアセタート（２９.９８ｍｇ、５９.１８μｍｏｌ、１.８当量）、ＮＭＭ（１８μｌ、１６４.４０μｍｏｌ、５当量）およびＨＡＴＵ（２２.５ｍｇ、５９.１８μｍｏｌ、１.８当量）を、ＤＭＦ（１５ｍｌ）中のアミドと−２０℃から−１０℃までで、２.５時間以内反応させる。クロマトグラフィー（方法１０）後、表題化合物が３７.５ｍｇ（理論量の６９％）得られる。
【０２９８】
ジペプチド酸、Ｎ−（（２Ｒ）−２−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−４,４−ジメチルペンチル）−３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アラニン ヒドロトリフルオロアセタートは、化合物７７ＡおよびＮ−ベンジルオキシカルボニル−３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｄ−アラニナールから実施例８２Ａの手順およびそれに続く加水分解（実施例８３Ａ参照）に準じて製造することができる。
HPLC (方法 2): Rｔ = 2.13 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.98 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 712 (100) [M + 2H]２＋,
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1422 (100) [M - H]−, 710 (40) [M - 2H]２−.
HR-TOF-MS (方法 1): C６８H１１１N１６O１７ [M + H]＋ 実測値 1423.8282,
計算値 1423.8308.
【０２９９】
実施例８６Ａ
メチル  Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（ピリジン−３−イル）−Ｌ−アラニナート
【化１１１】
2008518986.tif 000114
（２Ｓ）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（ピリジン−３−イル）アラニン（２５.００ｇ、９３.８８ｍｍｏｌ）をアルゴン下で３００ｍｌのジクロロメタン中に溶解する。メタノール（１１.４ｍｌ、９.０２ｇ、２８１ｍｍｏｌ、３当量）および極微量のＤＭＡＰを加える。次いでこの混合物を０℃に冷却する。ＥＤＣ（１９.８０ｇ、１０３ｍｍｏｌ、１.１当量）を加える。５分後、氷浴を除き、次にこの混合物を室温で１時間にわたって撹拌したままにしておく。次いでこの混合物を真空中で濃縮し、次に酢酸エチルをこの残渣に加え、この混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液に対して抽出する。水相を酢酸エチルで１回再抽出し、次いで集められた有機相を０.５Ｍクエン酸で洗浄し、次いで再び、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で１回洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空中で乾燥する。オイルポンプによる真空中乾燥の間に結晶化する油状物が残留する。収量：２３.６０ｇ（理論量の９０％）。
HPLC/UV-Vis (方法 17): Ｒｔ = 3.28 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.21 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 281 (100) [M + H]＋.
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO) δ = 1.30 (s, 9H), 2.86 (m, 1H), 3.04 (m, 1H), 3.63 (s, 3H), 4.22 (m, 1H), 7.28-7.39 (m, 2H), 7.69 (d, 1H), 8.43 (m, 2H).
【０３００】
実施例８７Ａ
３−（ピリジン−３−イル）−Ｌ−アラニン メチルエステル ビストリフルオロアセタート
【化１１２】
2008518986.tif 000115
実施例８６Ａからの化合物（１１.８ｇ、４２.０９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１６０ｍｌ；３０％溶液）中のトリフルオロ酢酸中に溶解し、室温で３０分間撹拌する。次いでこの混合物を真空中で濃縮する。残渣を少量の水に加え、凍結乾燥する。次いでトルエンを凍結乾燥物に加え、この混合物を真空中で濃縮する。最後に、生成物をオイルポンプ真空中で一定の重量まで乾燥する。収量：１７.１５ｇ（定量的）。
HPLC/UV-Vis (方法 23): Rｔ = 0.88 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 0.46 分,
MS (ESIpos.): m/z (%) = 181 (100) [M + H]＋.
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO) δ = 2.79 (dd, 1H), 2.92 (dd, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.63 (m, 1H), 7.30 (m, 1H), 7.62 (d, 1H), 8.41 (m, 2H).
【０３０１】
実施例８８Ａ
メチル  Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（トリメチルシリル）−Ｄ−アラニル−３−（ピリジン−３−イル）−Ｌ−アラニナート
【化１１３】
2008518986.tif 000116
実施例８７Ａからの化合物（１０.３１ｇ、３９.４ｍｍｏｌ）および実施例７１Ａからの化合物（１６.１０ｇ、３９.４ｍｍｏｌ、１当量）をＤＭＦ（１８６ｍｌ）中０℃で溶解する。次いでＮＭＭ（１７.３４ｍｌ、１６.００ｇ、４当量）およびＨＡＴＵ（２２.４９ｇ、５９.１６ｍｍｏｌ、１.５当量）を加える。この混合物を室温で２時間撹拌する。ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルをこの混合物に加え、この混合物を飽和炭酸ナトリウム溶液で洗浄する。水相をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで１回再抽出し、次に集められた有機相を１Ｍクエン酸水溶液および飽和炭酸ナトリウム溶液で再び１回洗浄し、硫酸ナトリムで乾燥し、ろ過し、真空中で濃縮する。この混合物をシリカゲル（シクロヘキサン/酢酸エチル ２：１）に通してろ過する。収量：１４.１ｇ（理論量の８４％）。
HPLC/UV-Vis (方法 17): Rｔ = 3.91 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.90 分,
MS (ESIpos.): m/z (%) = 424 (100) [M + H]＋.
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO) δ = -0.09 (s, 9H), 0.56 - 0.75 (m, 2H), 1.47 (s, 9H), 2.90 (dd, 1H), 3.09 (dd, 1H), 3.62 (s, 3H), 3.98 (m, 1H), 4.49 (m, 1H), 6.68 (d, 1H), 7.26 (dd, 1H), 7.61 (m, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.40 (m, 2H).
【０３０２】
実施例８９Ａ
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−（トリメチルシリル）−Ｄ−アラニル−３−（ピリジン−３−イル）−Ｌ−アラニン
【化１１４】
2008518986.tif 000117
実施例８８Ａからの化合物（７.４ｇ、１７.５６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ−水（６：４）中に加え、０℃に冷却し、次に水酸化リチウム一水和物（１.４７ｇ、３５.１３ｍｍｏｌ、２当量）を加える。この混合物を０℃で撹拌する。１時間後、更なる当量（０.７４ｇ）の水酸化リチウム一水和物を加え、次にこの混合物を更に１時間撹拌する。ＴＨＦの大半を真空中で留去し、残渣を２回分のＭＴＢＥで洗浄し、次いで水相をクエン酸を加えてｐＨ ４に調整する。固形物が析出する。この混合物を３回分の酢酸エチルで抽出すると、固形物は溶解する。集められた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮する。粗生成物をゲルクロマトグラフィー（方法３、溶出剤：メタノール）によって精製する。収量：６.６７ｇ（理論量の９３％）。
HPLC/UV-Vis (方法 17): Rｔ = 3.73 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.68 分,
MS (ESIpos.): m/z (%) = 410 (40) [M + H]＋.
１H NMR (300 MHz, d６-DMSO) δ = -0.090 (s, 9H), 0.56 - 0.75 (m, 2H), 1.35 (s, 9H), 2.90 (dd, 1H), 3.09 (dd, 1H), 3.98 (m, 1H), 4.41 (m, 1H), 6.70 (d, 1H), 7.26 (dd, 1H), 7.60 (m, 1H), 8.00 (d, 1H), 8.37 (m, 2H).
【０３０３】
実施例９０Ａ
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ベンジルオキシカルボニル）−３−（トリメチルシリル）−Ｄ−アラニル−３−ピリジン−３−イル−Ｌ−アラニン
【化１１５】
2008518986.tif 000118
実施例８９Ａからの化合物（５００ｍｇ、１.２２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２０ｍｌ）中の３０％ＴＦＡ中に溶解し、室温で３０分間撹拌する。次いでこの混合物を濃縮し、次に残渣を水の中に入れ、凍結乾燥する。この凍結乾燥物（６００ｍｌの固形物）をアルゴン下でＴＨＦ（２５ｍｌ）中に提供し、次いでＮ−（ベンジルオキシカルボニルオキシ）スクシンイミド（３２０ｍｇ、１.２８ｍｍｏｌ、１.１５当量）および最後に４−メチルモルホリン（１５０μｌ、１.３４ｍｍｏｌ、１.２当量）を０℃で加える。この混合物を室温まで暖め、更に一晩撹拌する。この反応を氷酢酸を添加することにより終了させ、真空中で濃縮する。残渣を酢酸エチル中に入れ、０.５Ｍクエン酸に対して２回振とうさせる。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空中で濃縮する。残渣をクロマトグラフィー（方法３４）によって精製する。収量：３９５ｍｇ（０.７１ｍｍｏｌ、理論量の５８％）。
HPLC (方法 17): Rｔ= 3.79 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.84 分, MS (ESIpos.): m/z (%) = 444.1 (100) [M+H]＋.
１H NMR (400 MHz, d６-DMSO) δ = -0.07 (s, 9H), 0.60-0.75 (m, 2H), 2.97-3.03 (m, 1H), 3.28 (m, 1H), 3.88 (m, 1H), 4.54 (m, 1H), 4.98 (d, J = 12.7, 1H), 4.98 (d, J = 12.7, 1H), 5.07 (d, J = 12.7, 1H) 7.27-7.35 (m, 6H), 7.65 (m, 1H), 8.08 (d, J = 7.04, 1H), 8.19 (d, J = 8.8, 1H), 8.62 (s, 2H).
【０３０４】
実施例９１Ａ
Ｎ２.１−（ベンジルオキシカルボニル）−［３−（トリメチルシリル）−Ｄ−アラニル］−［３−（ピリジ−３−イル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム ビストリフルオロアセタート
【化１１６】
2008518986.tif 000119
【０３０５】
ＨＡＴＵ（１.６当量、８.９ｍｇ、２３μｍｏｌ）を最初に乾燥ＤＭＦ（２００μｌ）中のシクロペプチド（実施例２６Ａ、１.０当量、１８.６ｍｇ、１５μｍｏｌ）、ジペプチド酸（実施例９０Ａ、１.５当量、９.７ｍｇ、２２μｍｏｌ）およびＮＭＭ（１.０当量、１５μｍｏｌ）の溶液にアルゴン保護ガス雰囲気下、−２０℃で、加える。この反応混合物を撹拌し（約１５分）、次にＮＭＭ（２.５当量、３８μｍｏｌ）を再度加える。この反応混合物をゆっくり（約１２時間）室温まで暖めると、次いでアミン成分の完全な変換を示される（ＨＰＬＣモニタリング、方法２）。固体のリン酸二水素カリウム（１０当量、５００μｍｏｌ）をこの反応混合物に加え、次いでこの混合物を真空中で蒸発させ、次にクロマトグラフィー（方法２１）によって精製する。生成物が１５.８ｍｇ（理論量の６３％）が得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 1.9 分, λmax (定性的) = 210 nm (s), 255-270 (m).
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.0 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 738 (100) [M - Boc + 2H]２＋, 1475 (15) [M + H]＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 682 (100), 736 (80) [M - 2H]２−, 1473 (60) [M - H]−.
【０３０６】
実施例９２Ａ
３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン・塩酸塩
【化１１７】
2008518986.tif 000120
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン（４.５ｇ、１２.１ｍｍｏｌ、実施例１０Ａ）をあらかじめジオキサン（３ｍｌ）に溶解する。室温で、ジオキサン（３０.２ｍｍｏｌ、１２０ｍｍｏｌ、１０当量）中の４Ｎ塩化水素溶液を滴下する。この反応混合物を３０分間撹拌し、真空中で蒸発させ、高真空下で乾燥する。表題化合物が固体として得られる（３.５ｇ、理論量の９９％）。
LC-MS (方法 7): Ｒｔ = 1.52 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 273.6 (100) [M + H]＋;
MS (ESIneg): m/z (%) = 271.5 (100) [M - H]−.
１H NMR (500 MHz, d６-DMSO): δ = 0.85 (s, 9H), 0.86 (s, 9H), 1.49 (dd, J = 14.3, 1.6 Hz, 1H), 1.50 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 1.64 (dd, J = 14.3, 4.0 Hz, 1H), 1.71 (dd, J = 14.3, 6.9 Hz, 1H), 3.77 (“t”, J = 6.5 Hz, 1H), 4.14 (m, 1H), 8.27 (s, br, 3H), 8.94 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 12.58 (s, br, 1H).
１３C NMR (126 MHz, d６-DMSO): δ = 28.41 (3C), 29.50 (3C), 30.08, 30.38, 44.46, 44.80, 50.03, 50.30, 169.10, 173.98.
HR-TOF-MS (方法 1): C１４H２９N２O３ 計算値. 273.2173, 実測値 273.2167 [M + H]＋.
【０３０７】
実施例９３Ａ
Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン
【化１１８】
2008518986.tif 000121
３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン（３.７３ｇ、１２.１ｍｍｏｌ、実施例９２Ａ）をアルゴン保護ガス雰囲気下でＴＨＦ（１７０ｍｌ）中に溶解する。水（１７０ｍｌ）、ベンジルオキシカルボニルオキシスクシンイミドエステル（４.５２ｇ、１８.１ｍｍｏｌ、１.５当量）およびＮ−メチルモルホリン（４.２８ｇ、４.２３ｍｍｏｌ、３.５当量）を０℃で添加後、この混合物を出発物質のすべてが変換するまで（数時間、ＨＰＬＣモニタリング、方法２）室温で激しく撹拌する。この混合物を氷酢酸でクエンチする。ＴＨＦを真空中で除去する。残存する水相を酢酸エチルで層分離(layered)し、４Ｎ塩酸でｐＨ＜３に調整し、次いで酢酸エチルで数回抽出する。有機相を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮する。この結果生じる泡をアセトニトリルと共に撹拌し、ろ過によって回収される固形物を少量のアセトニトリルで洗浄する。このプロセスは、濃縮したらろ液と共に数回以上繰り返すことができる。集められた固体を高真空下で乾燥し、表題化合物を固体として得る。残存する母液を濃縮し、分取ＨＰＬＣ（方法１０）によって精製する。表題化合物（集められた固体およびＨＰＬＣ分離からの精製生成物）が固体として得られる（３.４９ｇ、理論量の７１％）。
【０３０８】
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 2.6 分.
LC-MS (方法 8): Rｔ = 2.46 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 363 (60), 407 (100) [M + H]＋.
MS (ESIneg): m/z (%) = 297 (100), 405.5 (40) [M - H]−.
１H NMR (500 MHz, d６-DMSO): δ = 0.81 (s, 9H), 0.83 (s, 9H), 1.40-1.44 (m, 2H), 1.49 (dd, J = 14.3, 9.7 Hz, 1H), 1.58 (dd, J = 13.5, 1.4 Hz, 1H), 4.07 (m, 1H), 4.13 (m, 1H), 4.94 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 4.99 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 7.25-7.32 (m, 5H), 7.92 (d, J = 8.5 Hz, 1H).
１３C NMR (126 MHz, d６-DMSO): δ = 29.49 (3C), 29.75 (3C), 30.41, 30.46, 44.52, 45.11, 49.55, 52.73, 65.49, 127.70 (2C), 127.91, 128.48 (2C), 137.31, 155.59, 172.52, 174.50.
HR-TOF-MS (方法 1): C２２H３４N２O５ 計算値. 407.2541, 実測値 407.2531 [M + H]＋.
【０３０９】
実施例９４Ａ
Ｎ２―（ベンジルオキシカルボニル−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル）−［（３Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−Ｌ−フェニルアラニン］メチルエステル
【化１１９】
2008518986.tif 000122
【０３１０】
ＨＯＢｔ（４当量、５.５１ｇ、４０.７７ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（４当量、４０.７７ｍｍｏｌ）、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル ジペプチド（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン,１.１当量、４.５６ｇ、１１.２１ｍｍｏｌ、実施例９３Ａ）およびＥＤＣ（２当量、３.９１ｇ、２０.３８ｍｍｏｌ）をジクロロメタンp.a.（１００ｍｌ）中のラセミ体のアミノ酸メチルエステル（１.０当量、４.１６ｇ、１０.１９ｍｍｏｌ、実施例１４）の溶液に−３０℃で順に加える。この反応混合物をゆっくり（約１２時間）室温まで暖めると、アミン成分の完全な変換がＨＰＬＣ（方法２）によって観察される。この反応混合物をリン酸二水素カリウム（５.０当量、６.９３ｇ、５０.９６ｍｍｏｌ）でクエンチし、真空中で濃縮し、酢酸エチル（約４００ｍｌ）中に加え、次いで５％クエン酸水溶液（２回）、蒸留水および飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄する。この混合物を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過する。続いて、粗生成物をシリカゲルに通してろ過する。この溶液を真空中で濃縮・乾燥し、次いで更に高真空下で乾燥する。表題化合物５.３６ｇ（理論量の７７％）が、相対（２Ｓ＊,３Ｒ＊）立体配置(stereochemistry)がアミノフェニルアラニンにあるジアステレオマー混合物として得られる。このジアステレオマーは、更なるクロマトグラフィー工程（方法４２）において互いに分離される。表題化合物２.８７ｇ（理論量の４１％）が得られる（de＞９９％,方法２８）。この反応は、またエナンチオマー的に純粋なアミノメチルエステルの場合に類似して行うこともできる。ジアステレオマー的に純粋な生成物が、直接的に得られる。
【０３１１】
HPLC/UV-Vis (方法 3): Rｔ = 3.1 分.
HPLC/UV-Vis (方法 28): Rｔ = 4.84 分.
LC-MS (方法 8): Rｔ = 2.7 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 583.5 (100) [M + H - CO２ -C４H８]＋, 683.5 (60) [M + H]＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 681.6 (10) [M - H]−, 727.6 (100) [M - H + HCO２H]−.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 3.1 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 583.5 (100) [M + H - CO２ -C４H８]＋, 683.5 (40) [M + H]＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 573 (100), 681.6 (5) [M - H]−, 727.6 (40) [M - H ＋ HCO２H]−.
【０３１２】
実施例９５Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル）−［（３Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−Ｌ−フェニルアラニン］
【化１２０】
2008518986.tif 000123
【０３１３】
アルゴン保護ガス雰囲気下で、トリペプチドメチルエステル（実施例９４Ａ、１.００ｇ、１.４６ｍｍｏｌ）の溶液がＴＨＦ/水 ２：１（３００ｍｌ）中に提供される。０℃で、脱ガスした５％水酸化リチウム水溶液（５９.６ｍｇ、２.５ｍｍｏｌ、１.７当量）を激しく撹拌しながら、ゆっくり滴下する。この混合物をＨＰＬＣクロマトグラム（方法２）が完全な変換を示すまで（約６時間）０℃で撹拌する。過剰に長い反応時間の場合には、エピマー化の危険性がある。次に酢酸（０.４ｍｌ）を加え、この反応混合物を真空中で濃縮し、酢酸エチル（１００ｍｌ）で層分離する。水相をすぐに５％クエン酸（ｐＨ ２−３）で酸性にし、次いで酢酸エチルで抽出する（５０ｍｌ、３回）。集められた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液（２０ｍｌ、２回）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空中で濃縮し、次に高真空下で乾燥する。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（方法３８）によって高純度に精製する。表題化合物６８２ｍｇ（理論量の５６％）が得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 2.9 分.
HPLC/UV-Vis (方法 25): Rｔ = 24.6 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.9 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 569.2 (100), 669.3 (50) [M + H]＋, 1337.4 (40);
MS (ESIneg.): m/z (%) = 667.2 (100) [M - H]−, 1335.4 (80).
HR-TOF-MS (方法 1): C３６H５３N４O８ [M + H]＋ 実測値 669.3881, 計算値. 669.3858.
【０３１４】
実施例９６Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル）−［（３Ｒ）―３−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ−Ｌ−フェニルアラニン］ ２−（トリメチルシリル）エチルエステル
【化１２１】
2008518986.tif 000124
【０３１５】
乾燥ジクロロメタンp.a.（６.５ｍｌ）中の、トリペプチド酸（実施例９６Ａ、７３３ｍｇ、１.１０ｍｍｏｌ）、２−（トリメチルシリル）エタノール（１.３０ｇ、１１.０ｍｍｏｌ、１０当量）および４Å分子篩（約１００ｍｇ）の混合物をアルゴン保護ガス雰囲気下、室温で３０分間撹拌する。次に、ＤＣＣ（４５２ｍｇ、２.２０ｍｍｏｌ、２当量）およびＤＭＡＰ（１３４ｍｇ、１.１０ｍｍｏｌ、１当量）を−３０℃で加える。この反応混合物を解凍せしめ（約１２時間）、ＨＰＬＣクロマトグラム（方法２）が完全な変換を示すまで（約１２時間）、室温で撹拌する。この反応混合物を氷酢酸（１２５μｌ）でクエンチし、次いで室温、真空中で蒸発させ、少量のジクロロメタン（６.５ｍｌ）中に懸濁し、ec ＲＰ１８−ＨＰＬＣカートリッジ(Macherey Nagel)に通してろ過し、再び濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣ（方法３５）によって高純度精製する。表題化合物７０６ｍｇ（理論量の８４％）が得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 3.4 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 3.4 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 669.5 (80), 769.6 (100) [M + 2H]２＋, 1556 (30).
HR-TOF-MS (方法 1): C４１H６５N４O８Si [M + H]＋ 実測値 769.4548, 計算値. 769.4567.
【０３１６】
実施例９７Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル）−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニン ２−（トリメチルシリル）エチルエステル・トリフルオロアセタート
【化１２２】
2008518986.tif 000125
【０３１７】
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）によって保護されたトリペプチド（７２０ｍｇ、０.９４ｍｍｏｌ、実施例９６Ａ）がアルゴン保護ガス雰囲気下で提供される。室温で且つ激しく撹拌しながら、ジオキサン（４０ｍｌ）中の４Ｎ塩酸を滴下する。この混合物を分析ＨＰＬＣ（方法２）が完全な変換を示すまで撹拌する（約３０分）。この反応混合物を室温で真空中で蒸発させる。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（方法１０）によって精製し、次に凍結乾燥する。表題化合物が凍結乾燥物として得られる（３９４ｍｇ、理論量の５４％）。
HPLC/UV-Vis (方法 25): Rｔ = 25.2 分.
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 2.4 分.
LC-MS (方法 8): Rｔ = 2.3 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 669.6 (100) [M + H]＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 703.6 (100) [M - H + HCO２H]−.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.6 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 669.4 (100) [M + H]＋.
【０３１８】
実施例９８Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル）−Ｎ３−｛ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニン ２−（トリメチルシリル）エチル エステル・トリフルオロアセタート
【化１２３】
2008518986.tif 000126
【０３１９】
ＨＡＴＵ（１.５当量、５８.３ｍｇ、０.１５ｍｍｏｌ）を最初に乾燥ＤＭＦ（３.０ｍｌ）中のＢｏｃ−オクタペプチド（実施例２０Ａ、１.０当量、１１４.４ｍｇ、０.１０ｍｍｏｌ）、トリペプチド（実施例９７Ａ、１.０当量、８０.０ｍｇ、０.１０ｍｍｏｌ、実施例９７Ａ）およびＮ−メチルモルホリン（１.０当量、０.１０ｍｍｏｌ）の溶液にアルゴン保護ガス雰囲気下−１５℃で加える。この反応混合物を撹拌し（約１５分）次にＮＭＭ（１.０当量、０.１０ｍｍｏｌ）を再び加える。この反応混合物を０℃まで暖め、次にＨＡＴＵ（２.５当量、０.２５ｍｍｏｌ）を再び加える。この反応混合物をゆっくり室温まで暖め（約１２時間）ると、アミン成分の完全な変換を示す（ＨＰＬＣモニタリング,方法３）。固体のリン酸二水素カリウム（５当量、０.５０ｍｍｏｌ）をこの反応混合物に加え、次いでこの混合物を高真空下で蒸発させ、クロマトグラフィー（方法２１または１３）によって精製し、続いて、ＴＦＡ（１００μｍｏｌ、アセトニトリル−水 １：１の０.０５％の溶液として）を添加することによるクロマトグラフィー生成物のその後の塩交換）によって精製する。生成物１４０.５ｍｇ（理論量の７８％）が得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 2.6 分.
HPLC/UV-Vis (方法 25): Rｔ = 26.6 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.5 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 1656.8 (100) [M + H]＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1655 (100) [M - H]−.
HR-TOF-MS (方法 1): C７８H１３１N１６O２１Si [M + H]＋ 実測値 1655.9467,
計算値. 1655.9439.
【０３２０】
実施例９９Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル）−Ｎ３−｛ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニン・トリフルオロアセタート
【化１２４】
2008518986.tif 000127
【０３２１】
４Å分子篩を乾燥ＴＨＦ（８ｍｌ）中のＴＭＳＥエステル（４６０ｍｇ、０.２６０ｍｍｏｌ、実施例９８Ａ）の溶液に加え、次にこの混合物をアルゴン保護ガス雰囲気下室温で撹拌する（１５分）。続いて、ＴＨＦ（４.１６ｍｌ、４.１６ｍｍｏｌ、１６当量）中のテトラブチルアンモニウムフロリドの１Ｎ溶液を２時間にわたり、乾燥溶液に２回で加える。この混合物を完全な変換が観察されるまで撹拌する（ＨＰＬＣ,方法２）。この反応混合物を氷酢酸（２９８μｌ、５.１９８ｍｍｏｌ、２０当量）でクエンチし、真空中で濃縮し、分取ＨＰＬＣ（方法２１）によって直接精製する。凍結乾燥後、生成物が凍結乾燥物として得られる（３７５ｍｇ、理論量の８６％）。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 2.4 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.3 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 728.8 (100) [M + 2H - CO２ - C４H８]２＋, 778.8 (30) [M + 2H]２＋, 1556.9 (40) [M + H]＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1554 (100) [M - H]−.
HR-TOF-MS (方法 1): C７３H１１９N１６O２１ [M + H]＋ 実測値 1555.8737,
計算値. 1555.8731.
【０３２２】
実施例１００Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル）−Ｎ３−｛（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニン・ビストリフルオロアセタート
【化１２５】
2008518986.tif 000128
【０３２３】
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）によって保護された化合物（１００ｍｇ、０.０６ｍｍｏｌ、実施例９９Ａ）がアルゴン保護ガス雰囲気下で提供される。室温で且つ激しく撹拌しながら、ジオキサン（１５ｍｌ）中の４Ｎ塩酸を滴下する。この混合物を分析ＨＰＬＣ（方法２）が完全な変換を示すまで撹拌する（約３０分）。この反応混合物を室温で真空中で蒸発させる。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（方法３５）によって精製し、次に凍結乾燥する。表題化合物が凍結乾燥物として得られる（８５.５ｍｇ、理論量の８５％）。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 1.9 分.
HPLC/UV-Vis (方法 25): Rｔ = 18.4 分, λmax (定性的) = 210 nm (s), 255-270 (w).
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.8 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 728.7 (100) [M + 2H]２＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1454 (100) [M - H]−
HR-TOF-MS (方法 1): C６８H１１１N１６O１９ [M + H]＋ 実測値 1455.8192,
計算値 1455.8206.
【０３２４】
実施例１０１Ａ
Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｎ３−｛［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニン・トリフルオロアセタート
【化１２６】
2008518986.tif 000129
【０３２５】
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）によって保護されたノナペプチド（実施例２２Ａ、１２００ｍｇ、０.８４８ｍｍｏｌ）がアルゴン保護ガス雰囲気下でジオキサン（１０ｍｌ）中に提供される。室温で且つ激しく撹拌しながら、ジオキサン（２３０ｍｌ）中の４Ｎ塩酸を加える。この混合物を分析ＨＰＬＣ（方法２）が完全な変換を示すまで撹拌する（約１時間）。この反応混合物をロータリーエバポレーターで濃縮し、次いで残渣を室温で水と混和し、次いで真空中で蒸発させる。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（方法１１）によって精製し、次に凍結乾燥する。表題化合物が無色固体として得られる（９１８ｍｇ、９５％純度,理論量の８３％）。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 1.6 分.
HPLC/UV-Vis (方法 25): Rｔ = 14.3 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.4 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 601.6 (100) [M + 2H]２＋, 1201.7 (20) [M + H]＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1199.8 (100) [M - H]−.
【０３２６】
実施例１０２Ａ
Ｎ２.１−（ベンジルオキシカルボニル）−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム トリフルオロアセタート
【化１２７】
2008518986.tif 000130
【０３２７】
ＨＡＴＵ（１.６当量、９.４ｍｇ、２５μｍｏｌ）を最初に乾燥ＤＭＦ（２５０μｌ）中のシクロペプチド（実施例２６Ａ、１.０当量、１６.１ｍｇ、１５μｍｏｌ）、ジペプチド酸 Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニン（９.４ｍｇ、２３μｍｏｌ、１.５当量、実施例９３Ａ）およびＮ−メチルモルホリン（１.０当量、１５μｍｏｌ）の溶液にアルゴン保護ガス雰囲気下０℃で加える。この反応混合物を撹拌し（約１５分）次にＮ−メチルモルホリン（３.５当量、５４μｍｏｌ）を再び加える。この反応混合物をゆっくり室温まで暖め（約１２時間）ると、アミン成分の完全な変換を示す（ＨＰＬＣモニタリング 方法３）。固体のリン酸二水素カリウム（１０当量、１５０μｍｏｌ）をこの反応混合物に加え、次いでこの混合物を高真空下で蒸発させ、クロマトグラフィーによって精製（方法１０）する。生成物１７.７ｍｇ（理論量の７４％）が得られる。
【０３２８】
別の製造方法：０℃で、ＨＡＴＵ（４７ｍｇ、１２５μｍｏｌ、３当量）をＤＭＦ（３０ｍｌ）中の遊離のウンデカペプチド （Ｎ２−（ベンジルオキシカルボニル−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル）−Ｎ３−｛（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリル｝−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニン ビストリフルオロアセタート、実施例１００Ａ、７０ｍｇ、４２μｍｏｌ）およびＮＭＭ（３２μｌ、６当量）の溶液に加える。この反応混合物を完全な変換まで撹拌する（１２時間、ＨＰＬＣモニタリング）。続いて、この反応混合物をリン酸二水素カリウム（１０当量、５６.６ｍｇ）でクエンチし、真空中で濃縮し、分取ＨＰＬＣ（方法３６）によって直接精製する。生成物が固体として得られる（７４.４ｍｇ、理論量の７３％）。
【０３２９】
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 2.3 分.
HPLC/UV-Vis (方法 25): Rｔ = 24.0分, λmax (定性的) = 210 nm (s), 255-270 (w).
１H NMR (500 MHz, d５-ピリジン) δ 0.98-1.21 (m, 39H, 12 CH３), 1.36 (m, 1H), 1.52 (s, br, 1H), 1.60 (d, J = 4.1 Hz, 3H, CH３), 1.89 (m, 1H), 1.96-2.03 (m, 2H), 2.09−2.35 (m, 5H), 2.47 (“d”, J = 15.3 Hz, 1H), 3.15 (s, br, 2H), 3.87 (“d”, J = 14.2 Hz, 1H), 4.04 (“d”, J = 9.5 Hz, 1H), 4.17 (s, br, 1H), 4.37-4.55 (m, 4H), 4.66 (s, br, 1H), 4.74 (q, J = 5.2 Hz, 1H), 4.83 (“t”, J = 9.3 Hz, 1H), 4.91 (s, br, 1H), 5.20 (s, 1H), 5.36-5.42 (m, 2H), 5.62 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 5.70 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 5.99-6.06 (m, 2H), 6.73 (s, br, 2H), 7.24 (“t”, J = 7.6 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.34 (“t”, J = 7.6 Hz, 2H), 7.40 (m, 1H), 7.46 (“t”, J = 7.2 Hz, 2H), 7.57 (m, 2H), 7.62 (s, br, 1H), 7.68 (s, br, 1H), 7.82 (s, br, 1H), 7.97 (“d”, J = 6.5 Hz, 2H), 8.19 (s, br, 1H), 8.24-8.29 (m, 2H), 8.35 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.57 (m, 1H), 8.63 (m, 1H), 8.85 (s, br, 1H), 9.05 (s, 1H), 9.75 (s, 1H), 11.30 (s, br, 1H). ８個のプロトンでは、シグナルは帰属できない。
LC-MS (方法 7): Rｔ = 2.1 分; MS (ESIpos.): m/z (%) = 719.8 (100) [M + 2H]２＋, 1437.9 (30) [M + H]＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 663.7 (100), 1435.9 (100) [M - H]−.
HR-TOF-MS (方法 1): C６８H１０９N１６O１８ [M + H]＋ 実測値 1437.8135,
計算値. 1437.8101.
【０３３０】
実施例１０３Ａ
Ｄ−ロイシル−Ｎ１−｛（３Ｓ,６Ｓ,１２Ｓ,１５Ｓ,１８Ｒ,２１Ｓ,２４Ｓ,２７Ｓ,２８Ｒ）−６−［（１Ｓ）−２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチル］−１８−（３−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝プロピル）−１２−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−３−（ヒドロキシメチル）−２４−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−メチルプロピル］−２１−イソブチル−１５−イソプロピル−２,５,８,１１,１４,１７,２０,２３,２６−ノナオキソ−２８−フェニル−１−オキサ−４,７,１０,１３,１６,１９,２２,２５−オクタアザシクロオクタコサン−２７−イル｝−Ｌ−ロイシンアミド ビストリフルオロアセタート
【化１２８】
2008518986.tif 000131
カタノシン(katanosin)Ａの合成については、ＷＯ ０４/０９９２３９ 実施例２Ａ参照。
【０３３１】
代表的実施形態
実施例１
［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム ビストリフルオロアセタート
【化１２９】
2008518986.tif 000132
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）シクロペプチド（実施例２７Ａ、１０ｍｇ、１０μｍｏｌ）を、操作手順１に従って反応させる。分取ＨＰＬＣ（方法１０）によるクロマトグラフィー精製後、生成物６.５ｍｇ（理論量の６４％）が凍結乾燥によって得られる。
【０３３２】
別のプロセスにおいて、表題化合物は操作手順３に従ってＣｂｚによって保護されたシクロペプチド（実施例１０２Ａ）から製造される。
HPLC/UV-Vis (方法 3): Rｔ = 1.9 分,
λmax (定性的) = 210 nm (s), 265 (m).
LC-MS (方法 5): Rｔ = 4.51 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 652.8 (100) [M + 2H]２＋, 1304.9 (10) [M + H]＋.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 650.7 (10), 1301.9 (10) [M - H]−, 1347.9 [M - H + HCO２H]−.
１H NMR (500 MHz, d５-ピリジン) δ = 0.82 (3H), 0.95 (3H), 0.99 (3H), 1.05 (9H), 1.07 (3H), 1.11 (9H), 1.12 (3H), 1.18 (3H), 1.32, 1.46, 1.61 (3H), 1.93, 1.97, 2.02, 2.03, 2.13 (2H), 2.19 (2H), 2.27, 2.32, 2.35, 2.35, 2.35, 3.18 (2H), 3.94, 4.02, 4.15, 4.31, 4.36, 4.37, 4.47, 4.50, 4.58, 4.59, 4.75, 4.99, 5.17, 5.33, 5.38, 6.00, 6.00, 6.40, 7.21 (2H), 7.45 (2H), 7.64, 7.72, 7.73, 7.92, 8.02, 8.17, 8.23, 8.30, 8.50, 8.55, 8.85, 9.09, 11.29. 明白な１H シグナルは見出されない: tBuAla１ NH２, tBuAla２ NH, HyLeu４ NH, HyLeu４ OH, Arg６ NζH, Arg６ NζH２, alloThr８ OH, HyAsn１０ OH, Ser１１ OH.
１３C NMR (126 MHz, d５-ピリジン) δ = 10.40, 16.00, 19.20, 19.20, 20.70, 21.30, 23.90, 24.70, 26.20, 26.50, 28.60, 29.40 (3C), 29.80 (3C), 30.90, 36.00, 41.10, 41.30, 44.00, 44.23, 44.60, 47.00, 47.20, 51.50, 52.80, 54.30, 55.50, 55.60, 56.60, 57.70, 58.40, 60.30, 60.60, 62.60, 63.00, 70.20, 71.90, 75.20, 128.20 (2C), 128.30, 129.10 (2C), 137.70, 158.23, 169.38, 171.04, 172.23, 172.43 (2C), 173.12, 174.04, 174.29, 174.66, 174.84, 175.41, 176.64.
HR-TOF-MS (方法 1): C６０H１０３N１６O１６ [M + H]＋ 実測値 1303.7719,
計算値. 1303.7733.
この構造は、単結晶Ｘ線構造分析によって確認される。
【０３３３】
実施例２
Ｄ−ロイシル−Ｌ−ロイシル−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム ビストリフルオロアセタート
【化１３０】
2008518986.tif 000133
アルゴン保護ガス雰囲気下、Ｃｂｚによって保護されたシクロペプチド（実施例２８Ａ、８００μｇ、０.５μｍｏｌ）をメタノール（１ｍｌ）中に溶解し、次いで１Ｎ塩酸水溶液（５０μｌ）および１０パーセントパラジウム・炭素（１ｍｇ）を加える。この混合物に、分析ＨＰＬＣ（方法２）が完全な変換を示すまで（約１時間）、室温、大気圧下で水素添加する。この反応混合物をろ過(シリンジフィルター Biotage, PTFE)し、真空中で濃縮し、高真空下で乾燥する。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（方法１０）によって精製する。固体６００μｇ（理論量の７６％）が生成物として得られる。
【０３３４】
[α]２０Ｎａ = -66.0°(c = 0.24 メタノール中).
HPLC/UV-Vis (方法 3): Rｔ = 1.7 分,
λmax (定性的) = 210 nm (s), 265 (m).
LC-MS (方法 5): Rｔ = 4.3 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 638.7 (100) [M + 2H]２＋.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1274 (100) [M - H]−.
１H NMR (500 MHz, d５-ピリジン) δ = 0.72 (3H), 0.77 (3H), 0.89 (3H), 0.96 (3H), 0.99 (3H), 1.02 (3H), 1.02 (3H), 1.08 (3H), 1.09 (3H), 1.22 (3H), 1.29, 1.44, 1.58 (3H), 1.75, 1.99, 2.00, 2.09 (2H), 2.10, 2.14 (2H), 2.17, 2.21 (2H), 2.21, 2.29, 2.29, 2.39, 2.39, 3.18, 3.33, 4.00, 4.10, 4.21, 4.35, 4.35, 4.48, 4.53, 4.61, 4.71, 4.80, 5.06, 5.17, 5.35, 5.36, 6.04, 6.05, 6.63, 7.25 (2H), 7.50 (2H), 7.67, 7.70, 7.88, 8.07, 8.11, 8.24, 8.24, 8.26, 8.47, 8.54, 8.95, 9.23, 9.31, 11.26. 明白な１H シグナルは見出されない: Leu１ NH２, Leu２ NH, HyLeu４ OH, Arg６ NζH, Arg６ NζH２, alloThr８ OH, HyAsn１０ OH, Ser１１ OH.
１３C NMR (126 MHz, d５-ピリジン) δ = 16.27, 19.17, 19.90, 20.49, 20.87, 21.11, 21.70, 22.63, 23.40, 24.19, 24.81, 25.23, 25.23, 26.06, 26.61, 21.70, 28.97, 31.04, 36.52, 40.00, 41.31, 41.94, 42.40, 45.43, 52.60, 53.26, 53.72, 56.09, 56.62, 57.94, 58.53, 58.75, 60.83, 60.83, 62.61, 63.47, 70.50, 72.11, 75.39, 128.09 (2C), 128.19, 128.99 (2C), 138.52, 158.12, 169.39, 170.44, 172.25, 172.46, 173.13, 173.58, 174.16, 174.32, 174.59, 174.59, 174.69, 176.64.
MALDI-MS: m/z (%) = 1275 (100) [M + H]＋, 1297 (5) [M + Na]＋, 1313 (5) [M + K]＋.
MALDI-MS/MS@1275: m/z (%) = 86 (100), 199 (50), 1049 (20).
HR-TOF-MS (方法 1): C５８H９９N１６O１６ [M + H]＋ 実測値 1275.7424,
計算値. 1275.7420.
この構造は、単結晶Ｘ線構造分析によって確認される。
【０３３５】
アミノ酸分析（方法９）が行われる（表Ａ）。
表Ａ
【表３】
2008518986.tif 000134
Ｈｙ−Ａｓｎ、Ｈｙ−Ｌｅｕは、標準が存在していないので定量化されなかった。
Ｈｙ−Ａｓｎは、Ｈｙ−Ａｓｐとして存在している可能性がかなりある。
【０３３６】
実施例３
［３−（トリメチルシリル）−Ｄ−アラニル］−［３−（ピリジ−３−イル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ−３.３−ラクタム トリストリフルオロアセタート
【化１３１】
2008518986.tif 000135
【０３３７】
Ｃｂｚによって保護されたシクロペプチド（実施例９１Ａ、１９.９ｍｇ、１２μｍｏｌ）を操作手順３に従って、反応させる。分取ＨＰＬＣによるクロマトグラフィー精製（方法２１）の後、１４.７ｍｇ（理論量の９９％）の生成物が凍結乾燥によって得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 1.4 分, λmax (定性的) = 210 nm (s), 265 (m).
LC-MS (方法 5): Rｔ = 1.50 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 671.0 (100) [M + 2H]２＋, 1340.4 (10) [M + H]＋;
MS (ESIneg.): m/z (%) = 668.8 (100), 1338.4 (10) [M - H]−.
HR-TOF-MS (方法 1): C６０H９７N１７O１６Si [M + H]＋ 実測値 1340.7117,
計算値 1340.7142.
この構造は、単結晶Ｘ線構造分析によって確認される。
【０３３８】
実施例４
［３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｄ−アラニル］−［３−（ピリジ−３−イル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム トリストリフルオロアセタート
【化１３２】
2008518986.tif 000136
【０３３９】
Ｃｂｚによって保護されたシクロペプチド（実施例６６Ａ、１５.０ｍｇ、８.８９μｍｏｌ）を操作手順３に従って、反応させる。分取ＨＰＬＣによるクロマトグラフィー精製（方法３８）の後、１１.７ｍｇ（理論量の７９％）の生成物が凍結乾燥によって得られる。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 1.51 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.36 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 1326 (10) [M + H]＋, 663 (100) [M + 2H]２＋,
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1324 (28) [M - H]−, 662 (100) [M - 2H]２−.
HR-TOF-MS (方法 1): C６１H９８N１７O１６ [M + H]＋ 実測値 1324.7352,
計算値 1324.7372.
【０３４０】
実施例５
Ｎ２.１−［（２Ｓ）−２−アミノ−３−（ｔｅｒｔ−ブチル）プロピル］−［３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１０−Ｎ３.２−ラクタム トリストリフルオロアセタート
【化１３３】
2008518986.tif 000137
【０３４１】
Ｃｂｚによって保護されたシクロペプチド（実施例８４Ａ、１６９.０ｍｇ、０.１１ｍｍｏｌ）を操作手順３に準じて、反応させる。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる高純度精製（たとえば方法３５）の後、収量１４０.０ｍｇ（理論量の８４％）の生成物が単離される。
HPLC/UV-Vis (方法 25): Rt = 15.01 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.54 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 645 (100) [M + 2H]２＋,
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1288 (100) [M - H]−, 643.8 (16) [M - 2H]２−.
HR-TOF-MS (方法 1): C６０H１０５N１６O１５ [M + H]＋ 実測値 1289.7950,
計算値 1289.7940.
【０３４２】
実施例６
［３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｄ−アラニル］−［３−（６−メチルピリジ−２−イル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム トリストリフルオロアセタート
【化１３４】
2008518986.tif 000138
【０３４３】
ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルによって保護されたシクロペプチド（実施例４４Ａ、１４２.０ｍｇ、８５.２０μｍｏｌ）を操作手順１に準じて、反応させる。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる高純度精製（方法３９）の後、収量１１８.０ｍｇ（理論量の８２％）の生成物が単離される。
HPLC/UV-Vis (方法 25): Rｔ = 12.88 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.58 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 1339 (5) [M + H] ＋, 670 (100) [M + 2H]２＋,
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1337 (100) [M - H]−, 668 (6) [M - 2H]２−.
HR-TOF-MS (方法 1): C６２H１０１N１７O１６ [M + H]＋ 実測値 1338.7507,
計算値 1338.7529.
【０３４４】
実施例７
［３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｄ−アラニル］−［３−（６−トリフルオロメチルピリジ−３−イル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ−３.３−ラクタム ビストリフルオロアセタート
【化１３５】
2008518986.tif 000139
【０３４５】
ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルによって保護されたシクロペプチド（実施例５５Ａ、１８０.０ｍｇ、０.１１ｍｍｏｌ）を操作手順１に準じて、反応させる。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる高純度精製（方法３９）の後、収量１８２.０ｍｇ（理論量の９７％）の生成物
が単離される。
HPLC/UV-Vis (方法 2): Rｔ = 1.71 分.
LC-MS (方法 29): Rｔ = 1.30 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 1392 (10) [M + H] ＋, 697 (100) [M + 2H]２＋,
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1391 (20) [M - H]−, 695 (100) [M - 2H]２−.
HR-TOF-MS (方法 1): C６２H９７N１７O１６F３ [M + H]＋ 実測値 1392.7267,
計算値 1392.7260.
【０３４６】
実施例８
Ｎ２.１−［（２Ｒ）−２−アミノ−３−（トリメチルシリル）プロピル］−［３−（ｔｅｒｔ−ブチル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１０−Ｎ３.２−ラクタム トリストリフルオロアセタート
【化１３６】
2008518986.tif 000140
【０３４７】
ベンジルオキシカルボニルによって保護されたシクロペプチド（実施例８０Ａ、３２ｍｇ、１９.１９μｍｏｌ）を操作手順３に準じて、反応させる。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる高純度精製（方法３９）の後、収量２１.３ｍｇ（理論量の６７％）の生成物が単離される。
HPLC/UV-Vis (方法 25): Rｔ = 15.60 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.74 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 653 (100) [M + 2H]２＋,
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1304 (100) [M - H]−, 651 (95) [M - 2H]２−.
HR-TOF-MS (方法 1): C５９H１０５N１６O１５Si [M + H]＋ 実測値 1305.7667,
計算値 1305.7710.
【０３４８】
実施例９
Ｄ−ロイシル−［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム ビストリフルオロアセタート
【化１３７】
2008518986.tif 000141
【０３４９】
ベンジルオキシカルボニルによって保護されたシクロペプチド（実施例７０Ａ、３２.０ｍｇ、２１.２８μｍｏｌ）を操作手順３に準じて、反応させる。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる高純度精製（方法３５）の後、収量２２.７ｍｇ（理論量の７０％）の生成物が単離される。
HPLC/UV-Vis (方法 25): Rｔ= 14.00 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.63 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 1289 (4) [M + H] ＋, 645 (100) [M + 2H]２＋,
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1287 (100) [M - H]−
HR-TOF-MS (方法 1): C５９H１０１N１６O１６ [M + H]＋ 実測値 1289.7583,
計算値 1289.7576.
【０３５０】
実施例１０
［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−［３−（ピリジ−２−イル）−Ｌ−アラニル］−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム トリストリフルオロアセタート
【化１３８】
2008518986.tif 000142
【０３５１】
ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルによって保護されたシクロペプチド（実施例４５Ａ、１０５.０ｍｇ、６５.５３μｍｏｌ）を操作手順１に準じて、反応させる。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる高純度精製（方法３５）の後、収量８４.４ｍｇ（理論量の８０％）の生成物
が単離される。
HPLC/UV-Vis (方法 25): Rｔ = 14.16 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.30 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 1325 (15) [M + H]＋, 663 (100) [M + 2H]２＋,
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1323 (100) [M - H]−.
HR-TOF-MS (方法 1): C６１H９８N１７O１６ [M + H]＋ 実測値 1324.7351,
計算値 1324.7372.
【０３５２】
実施例１１
［３−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｄ−アラニル］−Ｌ−ロイシル−［（３Ｒ）−３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム トリストリフルオロアセタート
【化１３９】
2008518986.tif 000143
【０３５３】
ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルによって保護されたシクロペプチド（実施例５０Ａ、１３１.０ｍｇ、８５.１９μｍｏｌ）を操作手順１に準じて、反応させる。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる高純度精製（方法３５）の後、収量４９.５ｍｇ（理論量の３８％）の生成物が単離される。
HPLC/UV-Vis (方法 25): Rｔ = 14.56 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.58 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 1290 (5) [M + H] ＋, 645 (100) [M + 2H]２＋,
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1288 (100) [M - H]−, 643 (100) [M - 2H]２−.
HR-TOF-MS (方法 1): C５９H１０１N１６O１６ [M + H]＋ 実測値 1289.7567,
計算値 1289.7576.
【０３５４】
実施例１２
［３−シクロ−ペンチル−Ｄ−アラニル］−［３−シクロ−ペンチル−Ｌ−アラニル）−［（３Ｒ）３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニル）］−［（３Ｒ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−ロイシル］−Ｌ−ロイシル−Ｄ−アルギニル］−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−アロトレオニル−グリシル−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｌ−アスパラギニル］−Ｌ−セリン Ｃ１.１１−Ｎ３.３−ラクタム ビストリフルオロアセタート
【化１４０】
2008518986.tif 000144
【０３５５】
ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルによって保護されたシクロペプチド（実施例６３Ａ、２５.０ｍｇ、１５μｍｏｌ）を操作手順１に準じて、反応させる。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる高純度精製（方法３５）の後、収量２４.５ｍｇ（定量的）の生成物が単離される。
HPLC/UV-Vis (方法 25): Rｔ = 17.2 分.
LC-MS (方法 7): Rｔ = 1.66 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 664.8 (100) [M + 2H]２＋, 1328 (10) [M+H]＋,
MS (ESIneg.): m/z (%) = 1326 (100) [M - H]−.
HR-TOF-MS (方法 1): C６２H１０３N１６O１６ [M + H]＋ 実測値 1327.7761,
計算値 1327.7733.
【０３５６】
Ｂ．生理活性の評価
本発明化合物のインビトロ活性を次のアッセイ中で示すことができる：
最小阻止濃度（ＭＩＣ）の決定
ＭＩＣは、ＮＣＣＬＳガイドラインに従って液体希釈試験において決定される。終夜培養スタフィロコッカス アウレウス１３３、エンテロコッカス フェカリス２７１５９、Ｅ.フェシウム４１４７およびストレプトコッカス ニューモニエＧ９ａを記述した試験物質と共に１：２希釈系列でインキュベートする。ＭＩＣの決定は、Ｓ.ニューモニエを除いて（これは、１０％ウシ血清を含んでいるＢＨＩブロス(Difco, Irvine/USA)中で１ｍｌ当たり１０６個の微生物の細胞数で試験される）、Isosensitest培地(Difco, Irvine/USA)中で１ｍｌあたり１０５個の微生物の細胞数を用いて行われる。培養は、３７℃で１８−２４時間インキュベート（Ｓ.ニューモニエでは、１０％ＣＯ２の存在下）する。
それぞれの場合において、認識できる細菌の増殖がもはや発現しない最も低い薬物物質濃度がＭＩＣとして特定される。ＭＩＣ値はμｇ/ｍｌで報告される。
【０３５７】
本発明化合物のイン−ビトロ活性データの代表例が表Ｂに示される：
表Ｂ
【表４】
2008518986.tif 000145
【０３５８】
本発明化合物の細菌性感染症の処置に対する適合性は、次の動物モデルにおいて示すことができる：
スタフィロコッカス アウレウス １３３による全身感染：
Ｓ.アウレウス １３３の細胞をＢＨIブロス(Oxoid, New York/USA)中で終夜培養する。この終夜培養は、新鮮なＢＨＩブロス中で１：１００に希釈し、３時間インキュベートする。対数増殖期中の細胞を遠心分離し、次に生理食塩水緩衝溶液で２回洗浄する。次いで生理食塩水中の細胞懸濁液を、吸光係数(extinction)５０ユニットに光度計によって調整する。希釈ステップ（１：１５）後、この懸濁液を１０％ムチン(mucin)溶液と１：１混和する。この感染溶液（０.２５ｍｌ/２０ｇマウス）を腹腔内投与する（これは１×１０６個細菌/マウスに相当する）。治療は、感染の３０分後、腹腔内または静脈内で行われる。雌ＣＦＷ１マウスが感染実験に使用される。動物の生存が６日の期間にわたって記録される。
【０３５９】
腎臓耐容性に関する本発明化合物の特性は、次の動物モデル中で示すことができる：
腎毒性効果を決定するためのマウスモデル：
ノナデプシペプチド(nonadepsipeptides)の腎毒性副作用が、特定用量を多投与して、マウスの腎臓の組織病理学的検討によって分析される。このために、５〜６匹の動物を毎日、薬物物質を静脈内(i.v.)または腹腔内(i.p.)に水溶液に溶解するか、あるいは、ソルトール(Solutol)を添加して処理する。腎毒性効果をヘマトキシリンおよびエオシン(H&E)によって染色した腎臓のパラフィン部分を光学顕微鏡評価によって決定する。所望により、過ヨウ素酸シッフ(PAS)反応を糖タンパク質の十分な視覚化のために行う。腎毒性効果を尿細管の好塩基球増多(tubular basophilia)および出現する変性/再生の重症度の程度として各動物のために半定量的に定義される（重症の程度：０＝効果なし；１＝最少効果；２＝わずかな効果；３＝適度な効果；４＝重大な病変）。尿細管の変性/再生および発病率の重症度の平均の程度（影響された動物の数）が動物群または派生物(derivative)あたり、計算される。尿細管拡張(tubular dilataion)およびネクローシスおよび壊死性の物質の蓄積のようなこうしたものを超える腎臓変化は、同様に列挙される。
【０３６０】
Ｃ．薬剤組成物の例示的態様
本発明化合物は次の方法で薬剤製剤に変換することができる：
錠剤：
組成：
実施例１の化合物１００ｍｇ、乳糖（一水和物）５０ｍｇ、トウモロコシ澱粉（天然）５０ｍｇ、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ２５）（BASF, Ludwigshafen, Germany）１０ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム２ｍｇ。
錠剤重量２１２ｍｇ。直径８ｍｍ、曲率半径  １２ｍｍ。
製造：
活性化合物、乳糖および澱粉の混合物を、水中の５％強度ＰＶＰ溶液（ｍ/ｍ）で顆粒化する。顆粒を、乾燥し、次いで５分間ステアリン酸マグネシウムと混合する。この混合物を通常の錠剤圧縮機を用いて圧縮する（錠剤のフォーマット：上記参照）。圧縮に用いられる圧縮力の基準は１.５ｋＮである。
【０３６１】
経口投与用懸濁剤：
組成：
実施例１の化合物１０００ｍｇ、エタノール（９６％）１０００ｍｇ、ロジゲル（Rhodigel）（キサンタンガム（FMC、ペンシルバニア、USA))４００ｍｇおよび水９９ｇ。
経口用懸濁剤１０ｍｌは、本発明化合物１回分の投与量１００ｍｇに相当する。
製造：
ロジゲルをエタノール中で懸濁し、そして、活性化合物を懸濁液に加える。水を攪拌しながら加える。混合物を、ロジゲルが完全に、膨潤するまで約６時間攪拌する。
【０３６２】
静脈内投与用溶液：
組成
実施例１の化合物を１００−２００ｍｇ、１５ｇのポリエチレングリコール４００および２５０ｇの注射用水。
製造
実施例１の化合物を水中のポリエチレングリコール４００と一緒に撹拌しながら溶解する。この溶液をろ過（ポア直径０.２２μｍ）によって滅菌し、無菌条件下のもとで熱滅菌注射ボトルに分注する。後者を注入栓および圧着キャップを用いて封鎖する。
【図面の簡単な説明】
【０３６３】
【図１】実施例１２Ａの単結晶Ｘ線構造、オルテップ図（５０％）を示す。
【図２】実施例２１Ａの１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ,ｄ５−ピリジン）を示す。
【図１】
2008518986.tif 000164
【図２】
2008518986.tif 000165
【手続補正書】
【提出日】平成18年9月2日(2006.9.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
2008518986.tif 000166
〈式中、
Ｒ６は、水素またはメチルを表し、
Ｒ７は、式：
【化２】
2008518986.tif 000167
｛ここで、
＊は、アミンに対する結合部位であり、
Ｒ１は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルまたはＣ６−Ｃ１０−アリール
［ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員〜７員のヘテロシクリル、５員〜１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノ
（ここで、この部分に関し、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリルおよびヘテロアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員〜７員のヘテロシクリルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
から成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］を表し、
Ｒ２は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルまたはＣ６−Ｃ１０−アリール
［ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員〜７員のヘテロシクリル、５員〜１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノ
（ここで、この部分に関し、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリルおよびヘテロアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員〜７員のヘテロシクリルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
から成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］を表し、
Ｒ４は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルまたはＣ６−Ｃ１０−アリール
［ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員〜７員のヘテロシクリル、５員〜１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノ
（ここで、この部分に関し、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリルおよびヘテロアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員〜７員のヘテロシクリルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
から成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］を表し、
Ｒ５は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルまたはＣ６−Ｃ１０−アリール
［ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員〜７員のヘテロシクリル、５員〜１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノ
（ここで、この部分に関し、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリルおよびヘテロアリールは、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員〜７員のヘテロシクリルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
から成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい］を表す｝の基を表す〉
の化合物またはその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物の一つ。
【請求項２】
Ｒ６が、メチルを表し、
Ｒ７が、式：
【化３】
2008518986.tif 000168
［ここで、
＊は、アミンに対する結合部位であり、
Ｒ１は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルブタ−１−イル、トリメチルシリルメチル、１−ヒドロキシ−２−メチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２−エチル−２−メチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジエチルブタ−１−イル、フェニルメチル、１−ヒドロキシ−１−フェニルメチル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチル（ここで、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
を表し、
Ｒ２は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルブタ−１−イル、トリメチルシリルメチル、１−ヒドロキシ−２−メチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２−エチル−２−メチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジエチルブタ−１−イル、フェニルメチル、１−ヒドロキシ−１−フェニルメチル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチル
（ここで、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
を表し、
Ｒ４は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルブタ−１−イル、トリメチルシリルメチル、１−ヒドロキシ−２−メチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２−エチル−２−メチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジエチルブタ−１−イル、フェニルメチル、１−ヒドロキシ−１−フェニルメチル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチル
（ここで、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
を表し、
Ｒ５は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルブタ−１−イル、トリメチルシリルメチル、１−ヒドロキシ−２−メチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルプロパ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２−エチル−２−メチルブタ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジエチルブタ−１−イル、フェニルメチル、１−ヒドロキシ−１−フェニルメチル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチル
（ここで、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１、２または３個の置換基によって置換されていてもよい）
を表す］の基を表す、
ことを特徴とする請求項１に記載の化合物またはその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物の一つ。
【請求項３】
Ｒ６が、メチルを表し、
Ｒ７が、式：
【化４】
2008518986.tif 000169
［ここで、
＊は、アミンに対する結合部位であり、
Ｒ１は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチル
（ここで、３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１または２個の置換基によって置換されていてもよい）
を表し、
Ｒ２は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチル
（ここで、３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１または２個の置換基によって置換されていてもよい）
を表し、
Ｒ４は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチル
（ここで、３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１または２個の置換基によって置換されていてもよい）
を表し、
Ｒ５は、２−メチルプロパ−１−イル、２,２−ジメチルプロパ−１−イル、トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチル
（ここで、３−ピリジルメチルは、互いに独立して、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルから成る群より選択される０、１または２個の置換基によって置換されていてもよい）
を表す］の基を表す、
ことを特徴とする請求項１または２に記載の化合物またはその塩、その溶媒和物またはその塩の溶媒和物の一つ。
【請求項４】
請求項１に記載の式（Ｉｂ）の化合物の製造方法であって、
［Ａ］式：
【化５】
2008518986.tif 000170
（式中、Ｒ６は、請求項１に示される意味を有する）
の化合物を、最初に式：
【化６】
2008518986.tif 000171
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ５は、請求項１に示される意味を有し、
Ｒ３は、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルまたはベンジルオキシカルボニルを表し、
そして、Ｘ１は、ハロゲン、好ましくは臭素、塩素またはフッ素、またはヒドロキシを表す）
の化合物と反応させ、次いで酸と共におよび/または水素化分解によって反応させる、
または、
［Ｂ］式：
【化７】
2008518986.tif 000172
（式中、Ｒ６は、請求項１に示される意味を有する）
の化合物を、最初に式：
【化８】
2008518986.tif 000173
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ５は、請求項１に示される意味を有する）
の化合物と反応させ、次いで、４段階合成で、
ａ）フッ化物試薬と反応させ、
ｂ）酸と反応させ、
ｃ）必要に応じて塩基の存在下での脱水剤と反応させ、そして、
ｄ）水素化分解する、
ことを特徴とする方法。
【請求項５】
疾患の処置および/または予防のための請求項１〜３の一つに記載の化合物。
【請求項６】
疾患を処置および/または予防する薬剤を製造するための請求項１〜３の一つに記載の化合物の使用。
【請求項７】
細菌感染症を処置および/または予防する薬剤を製造するための請求項１〜３の一つに記載の化合物の使用。
【請求項８】
請求項１〜３の一つに記載の化合物と、不活性で、非毒性の薬学的に許容される補助剤を含んでなる薬剤。
【請求項９】
細菌感染症の処置および/または予防のための請求項８に記載の薬剤。
【請求項１０】
抗菌的に有効な量の少なくとも一つの請求項１〜３の一つに記載の化合物、請求項８に記載の薬剤または請求項６または７によって得られる薬剤を投与することによってヒトおよび動物における細菌感染症を制御する方法。
【請求項１１】
式：
【化９】
2008518986.tif 000174
の化合物、２−（トリメチルシリル）エチル−（３Ｒ）−３−アミノ−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−フェニルアラニナート・トリフルオロ酢酸塩（実施例１９Ａ）の製造方法であって、
式：
【化１０】
2008518986.tif 000175
の化合物、メチル  （ｒａｃ）−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−フェニルプロパノアートを、６段階合成で、
ａ）塩基の存在下で、ジベンジルアザジカルボキシラートと反応させ、
ｂ）Ｎ,Ｎ,Ｎ,Ｎ−テトラメチルグアニジンと反応させ、
ｃ）ラニーニッケルの存在下で水素と反応させ、
ｄ）塩基の存在下でＮ−ベンジルオキシカルボニルオキシスクシンイミドエステルと反応させ、
ｅ）塩基と反応させ、そして、続いてクロマトグラフィーによりエナンチオマー分離し、
そして、
ｆ）ジクロロメタン中のトリフルオロ酢酸またはジオキサン中の塩化水素と反応させる、
ことを特徴とする製造方法。
【請求項１２】
式：
【化１１】
2008518986.tif 000176
の化合物、（３Ｒ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニン（実施例１７Ａおよび実施例３５Ａ）
または、
式：
【化１２】
2008518986.tif 000177
の化合物、２−（トリメチルシリル）エチル  （３Ｒ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニナート（実施例１８Ａ）
または、
式：
【化１３】
2008518986.tif 000178
の化合物、２−（トリメチルシリル）エチル  （３Ｒ）−３−アミノ−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−フェニルアラニナート・トリフルオロ酢酸塩（実施例１９Ａ）
または、
式：
【化１６】
2008518986.tif 000179
の化合物、（３Ｓ）−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｄ−フェニルアラニン（実施例３６Ａ）
または、
式：
【化１７】
2008518986.tif 000180
の化合物、２−（トリメチルシリル）エチル  （３Ｓ）−Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−３−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−Ｄ−フェニルアラニナート（実施例３７Ａ）
または、
式：
【化１８】
2008518986.tif 000181
の化合物、２−（トリメチルシリル）エチル  （３Ｓ）−３−アミノ−Ｎ２−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｄ−フェニルアラニナート・トリフルオロ酢酸塩（実施例３８Ａ）
の化合物。
【国際調査報告】
2008518986.tif 000182
2008518986.tif 000183
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