(57)【要約】【課題】慢性変性疾患に対する効果が改善された、適用可能な化合物を提供すること。【解決手段】ミスフォールドタンパク質と関連した疾患を処置するための、一般式（１）で表される化合物及び／又はそれらのエナンチオマー、ジアステレオマー並びに薬理学的に許容できる塩、並びにそのための薬剤の製造のためのその使用。【選択図】なし
2008531648.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の一般式（１）で表される化合物、及び／又はそれらのエナンチオマー、ジアステレオマー及びそれらの薬理学的に許容できる塩。
【化１】
2008531648.tif 000027
（式中、不飽和又は飽和の６員環であり、Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３、Ｑ４は各々独立にＣＨ、Ｃ−ハロゲン、ＣＯ−（Ｃ１−Ｃ１０）−アルキル、Ｃ−ＣＦ３、Ｃ−ＣＮ及び／又はＣＨ２からなる群から選択され、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４，Ｒ５、Ｒ６は各々独立に水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ１−Ｃ１０−アルケニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキルオキシ、ＣＦ３、ＮＨ２、ＮＨＲ９からなる群から選択され、ラジカルＲ９はＣ１−Ｃ１０−アルキル及び／又はＣ１−Ｃ１０−アシル、（ＮＯ２）及び／又はＣＮからなる群から選択され、Ｘ１、Ｘ２は各々水素であるか、又はＸ１及びＸ２は共にＸを形成し、ＸはＣＨ２、ＣＨ２−ＣＨ２、ＣＨ＝ＣＨ、Ｏ及び／又はＳからなる群から選択され、Ｙ１、Ｙ２は各々独立して分岐状の、又は分岐状でないＣ１−Ｃ１０−アルキル基であり、Ｚは上記されたような構造要素Ｚ１又はＺ２であり、Ｚ１は以下の一般式（２）で表され、
【化２】
2008531648.tif 000028
式中、ｍは１、２、３、４、５又は６であり、Ｒ７及びＲ８は各々独立に水素、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル基からなる群から選択され、Ｒ７及びＲ８は、必要に応じてＣＨ２−ＣＨ２グループを介して環及び／又はＣ１−Ｃ１０−アシル基を形成し、Ｚ２は以下の一般式（３）で表され、
【化３】
2008531648.tif 000029
式中、ｎは２、３、４、５又は６である。）
【請求項２】
Ｚ１が以下の一般式（７）を有する、請求項１記載の化合物。
【化４】
2008531648.tif 000030
【請求項３】
前記化合物が以下の一般式（９）の化合物及び／又はそれらのエナンチオマー、ジアステレオマー、並びにそれらの薬理学的に許容できる塩である、請求項１又は２記載の化合物。
【化５】
2008531648.tif 000031
（式中、Ａは不飽和であるか飽和の６員環であり、Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３、Ｑ４は各々独立にＣＨ、Ｃ−ハロゲン、ＣＯ−（Ｃ１−Ｃ１０）−アルキル、Ｃ−ＣＦ３、Ｃ−ＣＮ及び／又はＣＨ２からなる群から選択され、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６は各々独立に水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ１−Ｃ１０−アルケニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキルオキシ、ＣＦ３、ＮＨ２、ＮＨＲ９からなる群から選択され、ラジカルＲ９はＣ１−Ｃ１０−アルキル及び／又はＣ１−Ｃ１０−アシル（ＮＯ２）及び／又はＣＮからなる群から選択され、ＸはＣＨ２、ＣＨ２−ＣＨ２、ＣＨ＝ＣＨ、Ｏ及び／又はＳからなる群から選択され、Ｙ１、Ｙ２は各々独立に分岐状又は分岐状でないＣ１−Ｃ１０−アルキル基である。）
【請求項４】
Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３及びＱ４が各々ＣＨグループを形成し、構造要素Ｑ２はＣＨ及び／又はＣ−Ｏ−ＣＨ３からなる群から選択される、請求項１から３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項５】
Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３及びＱ４がＣＨ２である、請求項１から４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項６】
Ｙ１及びＹ２が各々独立に、−（ＣＨ２）ｏ−及び／又はＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）ｐ−からなる群から選択され、ｏが２、３、４、５又は６であり、ｐが２、３、４又は５である、請求項１から５のいずれか１項記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４，Ｒ５及びＲ６が各々独立に水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ及び／又はＢｒからなる群から選択される）、ＮＨ２、ＮＨＲ９からなる群から選択され、ラジカルＲ９は、好ましくはＣ１−Ｃ５−アルキル基からなる群から選択され、好ましくはＣ１−Ｃ５−アシル基）、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ５−アルキル基からなる群から選択され、好ましくはメチル、エチル、イソプロピル及び／又はｔｅｒｔ−ブチル基及び／又はＣ１−Ｃ１０−アルキルオキシ基からなる群から選択され、好ましくは−Ｏ−メチル、−Ｏ−エチル、−Ｏ−イソプロピル及び／又はＯ−ｔｅｒｔ−ブチル基からなる群から選択される、請求項１から６のいずれか１項記載の化合物。
【請求項８】
ＸがＳ又は−ＣＨ２−ＣＨ２−である、請求項１から７のいずれか１項記載の化合物。
【請求項９】
Ｙ１及びＹ２が各々独立に、−（ＣＨ２）ｏ−及び／又はＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）ｐ−からなる群から選択され、ｏが２、３、４、５又は６であり、ｐが２、３、４又は５である、請求項４記載の化合物。
【請求項１０】
Ｙ１及びＹ２が各々独立に−（ＣＨ２）０−であり、ｏが３、４又は５である、請求項４記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６が各々独立に水素及び／又はＣｌからなる群から選択される、請求項１０記載の化合物。
【請求項１２】
以下の式（１０）で表される化合物、及び／又はそれらのエナンチオマー、ジアステレオマー、並びにそれらの薬理学的に許容できる塩である、請求項１から１１のいずれか１項記載の化合物。
【化６】
2008531648.tif 000032
【請求項１３】
以下の式（１２）で表される化合物、及び／又はそれらのエナンチオマー、ジアステレオマー、並びにそれらの薬理学的に許容できる塩である、請求項１から１２のいずれか１項記載の化合物。
【化７】
2008531648.tif 000033
【請求項１４】
以下の式（１３）で表される化合物、及び／又はそれらのエナンチオマー、ジアステレオマー、並びにそれらの薬理学的に許容できる塩である、請求項１から１２のいずれか１項記載の化合物。
【化８】
2008531648.tif 000034
【請求項１５】
以下の式（１４）で表される化合物、及び／又はそれらのエナンチオマー、ジアステレオマー、並びにそれらの薬理学的に許容できる塩である、請求項１から１２のいずれか１項記載の化合物。
【化９】
2008531648.tif 000035
【請求項１６】
請求項１から１５のいずれか１項記載の化合物の、薬剤の製造のための使用。
【請求項１７】
本発明に特有の化合物、好ましくは一般式（１０）の化合物の、治療的及び／又は予防的な疾患治療用薬剤の製造への使用であって、当該疾患が以下からなる群から選択される使用：
−タンパク質のミスフォールディングに関連する疾患（プリオン病及び／又は慢性変性疾患（特に神経変性及び／又は神経精神病学的疾患））
−増加した血中コレステロールに関連する疾患、
−脂質代謝の異常に関連する疾患及び／又は高脂血症、
−慢性炎症などの炎症に関連する疾患、
−動植物の循環器病（特に動脈硬化及び／又は感染症、特にヒト及び商業的に有用な動物において、寄生虫によって生じる）、
−原生動物及び／又は虫によって生じる疾患（特に寄生虫及び／又は原生動物によって生じる脳感染症）。
【請求項１８】
プリオン病がクロイツェル−ヤコブ症候群、Ｇｅｒｓｔｍａｎｎ−Ｓｔｒａｅｕｓｓｌｅｒ−Ｓｃｈｅｉｎｋｅｒ症候群、致死性家族性不眠症（ＦＦＩ）クーズー、スクラピ及び／又は牛スポンジ様脳症（ＢＳＥ）からなる群から選択される、請求項１７記載の化合物の使用。
【請求項１９】
慢性変性疾患（特に神経変性の及び／又は神経精神病学的疾患）がアルツハイマー症、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ピック病、パーキンソン病、多発性硬化症、ハンチントン舞踏病、Ｉ型及びＩＩ型糖尿病、自閉症、統合失調症、双極性疾患、うつ病、ポリグルタミン病、前頭側頭骨痴呆、タウオパシー、並列式萎縮、睡眠妨害、プラスマ細胞疾患、家族性アミロイドポリニューロパシ、甲状腺髄様癌、慢性腎不全、うっ血性心不全、心臓アミロイドーシスのようなアミロイドーシス、全身アミロイドーシス及び／又は家族性アミロイドーシスからなる群から選択される、請求項１７記載の化合物の使用。
【請求項２０】
寄生虫により引き起こされる感染症がマラリア、トリパノソーマ症、眠り病、アメーバ症、リーシュマニア症及び／又はトキソプラズマ症からなる群から選択される、請求項１７記載の化合物の使用。
【請求項２１】
請求項１から１５のいずれか１項記載の化合物、好ましくは式（１０）の化合物を含んでなる薬剤。
【請求項２２】
請求項１から１５のいずれか１項記載の化合物、好ましくは式（１０）の化合物を含んでなる抗プリオン剤。
【請求項２３】
請求項１から１５のいずれか１項記載の化合物、好ましくは式（１０）の化合物の、特に細胞懸濁液からのミスフォールドタンパク質（好ましくはプリオン）を含む体液を精製するための使用。
【請求項２４】
細胞懸濁液が血液又は血液製剤である、請求項２３記載の化合物の使用。
【請求項２５】
タンパク質（好ましくはプリオン）を含む体液の精製方法であって、請求項１から１５のいずれか１項記載の化合物、好ましくは式（１０）の化合物を、精製しようとする体液、特に血液又は血液製剤などの細胞懸濁液に使用する精製方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は新規化合物、それらのエナンチオマー、ジアステレオマー及びそれらの薬理学的に許容できる塩、並びに薬剤製造のためのそれらの使用に関する。当該化合物はミスフォールドタンパク質に関連する疾患治療に適する。
【背景技術】
【０００２】
プリオン病は、ヒト（例えばクロイツェル−ヤコブ病（ＣＪＤ））及び動物（例えば牛におけるウシスポンジ様脳症（ＢＳＥ）又はヒツジのスクラピ）において発症しうる致命的な神経変性疾患である。感染因子はいわゆるプリオンであり、それは生物体に存在するタンパク質のミスフォールドされた形（プリオンタンパク質）からなる。疾患の場合にはこのプリオンは中枢神経系に蓄積し、細胞が死に至る。これらの疾患はヒトでほとんど生じないにもかかわらず、近年公の関心がその動向に向いている。なぜなら、牛に存在するＢＳＥがヒトに食物連鎖を介して移る可能性があり、ＣＪＤがそこで誘発されうることが解明されたからである。
【０００３】
細胞外又は細胞内のタンパク質凝集は、慢性変性疾患、特に神経変性及び／又は神経精神病学的な疾患の表現型（例えばアルツハイマー型、パーキンソン型又はタウオパシー型）の徴候でもある。
【０００４】
最先端の研究により、プリオンに対して効果を示す様々な物質が公知である。しかしながら、周知の物質の欠点としては、それらが有する極性上の理由から、それらが血液脳関門を通過できず、ゆえに脳に入ることができないことである。更に、多くの物質は低用量では効果的でなく、高い投与量では毒性を示すことである。
【０００５】
例えば、特許文献１で開示されているアクリジン及びフェノチアジンの誘導体は、少用量では効果的でないか又はわずかな効果しか示せないことが知られている。更に、アクリジン（特にビスアクリジン）は毒性を有しうる。また、これらの物質は単に疾患徴候を一過性に改善するみ留まり、持続的な治療効果を有さないことが明らかとされている。以上の事実は、進行した、又は臨床段階での疾患にはジ効果を有さないという、公知の物質の欠点を更に明らかにするものである。
【特許文献１】国際公開第０２／０９６４３１号パンフレット
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、最先端技術の欠点の少なくとも１つを克服する、利用可能な化合物の提供である。本発明の具体的な目的は、慢性変性疾患に対する効果が改善された、適用可能な化合物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
これらの課題は、以下の一般式（１）で表される化合物、及び／又はそれらのエナンチオマー、ジアステレオマー及びそれらの薬理学的に許容できる塩により解決される。
【化１】
2008531648.tif 000003
式中、不飽和又は飽和の６員環であり、Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３、Ｑ４は各々独立にＣＨ、Ｃ−ハロゲン、ＣＯ−（Ｃ１−Ｃ１０）−アルキル、Ｃ−ＣＦ３、Ｃ−ＣＮ及び／又はＣＨ２からなる群から選択され、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４，Ｒ５、Ｒ６は各々独立に水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ１−Ｃ１０−アルケニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキルオキシ、ＣＦ３、ＮＨ２、ＮＨＲ９からなる群から選択され、ラジカルＲ９はＣ１−Ｃ１０−アルキル及び／又はＣ１−Ｃ１０−アシル、（ＮＯ２）及び／又はＣＮからなる群から選択され、Ｘ１、Ｘ２は各々水素であるか、又はＸ１及びＸ２は共にＸを形成し、ＸはＣＨ２、ＣＨ２−ＣＨ２、ＣＨ＝ＣＨ、Ｏ及び／又はＳからなる群から選択され、Ｙ１、Ｙ２は各々独立して分岐状の、又は分岐状でないＣ１−Ｃ１０−アルキル基であり、Ｚは上記されたような構造要素Ｚ１又はＺ２であり、Ｚ１は以下の一般式（２）で表され、
【化２】
2008531648.tif 000004
式中、ｍは１、２、３、４、５又は６であり、Ｒ７及びＲ８は各々独立に水素、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル基からなる群から選択され、Ｒ７及びＲ８は、必要に応じてＣＨ２−ＣＨ２グループを介して環及び／又はＣ１−Ｃ１０−アシル基を形成し、Ｚ２は以下の一般式（３）で表され、
【化３】
2008531648.tif 000005
式中、ｎは２、３、４、５又は６である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
驚くべきことに、本発明に特有の化合物が細胞膜を通過できることを見出した。
【０００９】
これらの化合物が低用量での使用も可能であるという点、特にヒトにおける当該化合物の適用を可能にするという点で、化合物の具体的な利点が得られる。
【００１０】
特徴的な優位性は、本発明に特有の化合物では毒性が低下しているということである。
【００１１】
更に驚くべきことに、本発明に特有の化合物がタンパク質のミスフォールディングに対して好適な影響を及ぼすことができることを見出した。
【００１２】
特に驚くべきことに、式（１）で表す本発明に特有の化合物の側鎖の第２級アミノ基が、第３級アミノ基と比較して著しく効果を増強できることを見出した。
【００１３】
構造要素Ａは不飽和又は部分的に飽和の６員環であり、Ａは炭素環である。Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３、Ｑ４は、炭素環を形成するための対応する炭素原子を含む。構造要素Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３及びＱ４は、Ａ環の飽和によりＣＨ又はＣＨ２基を形成できる。
【００１４】
構造要素Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３及びＱ４は、炭素原子上に更に置換基を有してもよく、当該置換基は水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ１０−アルキルオキシ、ＣＦ３及び／又はＣＮからなる群から選択される。好ましい置換基は、各々独立に水素、Ｆ、Ｃｌ及び／又はＢｒからなる群のハロゲン、及び／又はＣ１−Ｃ５アルキルオキシ基（好ましくは−Ｏ−メチル、−Ｏ−エチル、−Ｏ−イソプロピル、及び／又はＯ−ｔｅｒｔ−ブチル基）からなる群から選択される。
【００１５】
構造要素Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３及びＱ４は各々独立にＣＨ、ＣＨ２、Ｃ−ハロゲン、Ｃ−Ｏ−（Ｃ１−Ｃ１０）−アルキル、Ｃ−ＣＦ３及び／又はＣ−ＣＮからなる群から適切なものを選択してもよい。好ましくは、構造要素Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３及びＱ４は各々独立にＣＨ、Ｃ−ハロゲン及び／又はＣＯ−（Ｃ１−Ｃ１０）−アルキル、Ｃ−Ｏ−イソプロピル及び／又はＣ−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル基からなる群から選択される。特に好ましくは、構造要素Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３及びＱ４は各々独立にＣＨ、Ｃ−Ｃｌ及び／又はＣ−Ｏ−メチルからなる群から選択される。
【００１６】
好ましい実施態様では、構造要素Ａは６員環の不飽和の炭素環である。更に、構造要素Ｑ２は好ましくは置換基を有する。好ましくは、構造要素Ｑ１、Ｑ３及びＱ４は各々ＣＨ基を形成し、構造要素Ｑ２はＣＨ及び／又はＣ−Ｏ−ＣＨ３からなる群から選択される。
【００１７】
更なる好ましい実施態様では、構造要素Ａは６員環（部分的に飽和の炭素環）、特に好ましくは非置換の６員環（部分的に飽和の環）である。これらの実施態様では、構造要素Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３及びＱ４全てが好ましくはＣＨ２基を形成する。
【００１８】
本発明に特有の化合物からのラジカルＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は、各々に独立に水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ１−Ｃ１０−アルケニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキルオキシ、ＣＦ３、ＮＨ２、ＮＨＲ９からなる群から選択され、ラジカルＲ９はＣ１−Ｃ１０−アルキル及び／又はＣ１−Ｃ１０−アシル（ＮＯ２）及び／又はＣＮからなる群から選択される。
【００１９】
好ましくは、ラジカルＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は各々独立に水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ及び／又はＢｒからなる群から選択される）、ＮＨ２、ＮＨＲ９からなる群から選択され、ラジカルＲ９は、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル基（好ましくはＣ１−Ｃ５−アルキル（好ましくはメチル、エチル、イソプロピル及び／又はｔｅｒｔ−ブチルからなるグループ選択される））、及び／又は、Ｃ１−Ｃ１０−アシル基（好ましくはＣ１−Ｃ５−アシル）、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル基（好ましくはメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル及び／又はｎ−オクチルからなる群から選択される（好ましくはＣ１−Ｃ５−アルキル（好ましくはメチル、エチル、イソプロピル及び／又はＯ−ｔｅｒｔ−ブチルからなる群から選択される）））からなる群から選択される。本発明に特有の化合物の好ましい実施態様では、ラジカルＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は各々独立に水素、Ｃｌ及び／又はＯ−メチル基からなる群から、特に好ましくは各々独立に水素及び／又はＣｌからなる群から選択される。
【００２０】
各々独立に水素及び／又はＣｌからなる群から選択されるＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４，Ｒ５及びＲ６基による置換により、化合物の効果を顕著に増大させることができる。
【００２１】
構造要素Ｘ１及びＸ２は、各々水素であるか、又は共に構造要素Ｘを形成する。構造要素Ｘ１及びＸ２の各々がいずれも水素である実施態様では、例えば以下の式（４）で表す部分構造を有してもよい。
【化４】
2008531648.tif 000006
【００２２】
構造要素Ｘ１及びＸ２が共に構造要素Ｘを形成する場合、以下の式（５）で表される部分構造が形成される。
【化５】
2008531648.tif 000007
【００２３】
構造要素Ｘは、ヘテロ原子（例えばＯ又はＳ）であってもよく、又はＣＨ２、ＣＨ２−ＣＨ２及び／又はＣＨ＝ＣＨからなる群から選択されてもよい。好ましくは、中心に６又は７員環を有する環構造が結果的に形成される。
【００２４】
特に好ましい本発明特有の化合物は、Ｓ及び／又はＣＨ２−ＣＨ２−からなる群から選択される構造要素Ｘを有する。
【００２５】
好ましくは、本発明特有の化合物は、構造要素Ｚ１を含む。構造要素Ｚ１を含む好ましい実施態様は、以下の式（６）で表される。
【化６】
2008531648.tif 000008
【００２６】
ラジカルＲ７及びＲ８は好ましくは水素又はメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル及び／又はｎ−オクチル基（好ましくはＣ１−Ｃ５−アルキル、特にメチル、エチル、イソプロピル及び／又はｔｅｒｔ−ブチル基からなる群から選択される）のようなＣ１−Ｃ１０アルキル基である。これらの実施態様では、ｍは好ましくは１、２、３、４、５又は６である。
【００２７】
好ましくは、構造要素Ｚ１は環状構造を有し、それによって環はラジカルＲ７及びＲ８を介して閉環する。環は好ましくは、ラジカルＲ７及びＲ８の各々がＣＨ２基を形成し、共にＣＨ２−ＣＨ２基を形成することにより形成される。これらの実施態様では、ｍは好ましくは１又は２であり、その結果、複素環式の６又は７員環が形成される。
【００２８】
好ましい実施態様では、ｍは１であり、構造要素Ｚ１はピペラジンヘテロ環を含む。それにより好ましい実施態様では、構造要素Ｚ１は以下の式（７）で表される。
【化７】
2008531648.tif 000009
更なる好ましい実施態様では、構造要素Ｚ２が以下の式（８）で表される構造を含み、式中、ｎは好ましくは２、３、４又は５である。
【化８】
2008531648.tif 000010
【００２９】
構造要素Ｙ１、Ｙ２は各々独立に分岐状の又は分岐状でないＣ１−Ｃ１０−アルキル基である。
【００３０】
特に好ましい化合物及び／又はそれらのエナンチオマー、ジアステレオマー、並びにそれらの薬理学的に許容できる塩は、以下の一般式（９）で表される。
【化９】
2008531648.tif 000011
式中、Ａは不飽和であるか飽和の６員環であり、Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３、Ｑ４は各々独立にＣＨ、Ｃ−ハロゲン、ＣＯ−（Ｃ１−Ｃ１０）−アルキル、Ｃ−ＣＦ３、Ｃ−ＣＮ及び／又はＣＨ２からなる群から選択され、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６は各々独立に水素、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ１０−アルキル、Ｃ１−Ｃ１０−アルケニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキニル、Ｃ１−Ｃ１０−アルキルオキシ、ＣＦ３、ＮＨ２、ＮＨＲ９からなる群から選択され、ラジカルＲ９はＣ１−Ｃ１０−アルキル及び／又はＣ１−Ｃ１０−アシル（ＮＯ２）及び／又はＣＮからなる群から選択され、ＸはＣＨ２、ＣＨ２−ＣＨ２、ＣＨ＝ＣＨ、Ｏ及び／又はＳからなる群から選択され、Ｙ１、Ｙ２は各々独立に分岐状又は分岐状でないＣ１−Ｃ１０−アルキル基である。
【００３１】
好ましくは、本発明に特有の化合物中の構造要素Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３及びＱ４は各々ＣＨグループを形成し、構造要素Ｑ２はＣＨ及び／又はＣ−Ｏ−ＣＨ３からなる群から選択される。特に好ましい実施態様では、構造要素Ｑ１、Ｑ３及びＱ４は各々ＣＨ２基を形成し、構造要素Ｑ２はＣ−Ｏ−ＣＨ３である。更なる好ましい実施態様では、全ての構造要素Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３及びＱ４は好ましくはＣＨ２基を形成する。
【００３２】
好ましくは、ラジカルＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は各々独立に水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ及び／又はＢｒからなる群から選択される）、ＮＨ２、ＮＨＲ９からなる群から選択され、ラジカルＲ９は、好ましくはＣ１−Ｃ５−アルキル基（好ましくはメチル、エチル、イソプロピル及び／又はｔｅｒｔ−ブチル基からなる群から選択される）、及び／又はＣ１−Ｃ１０−アシル基（好ましくはＣ１−Ｃ５−アシル基）、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ５−アルキル基（好ましくはメチル、エチル、イソプロピル及び／又はｔｅｒｔ−ブチル基からなる群から選択される）、及び／又はＣ１−Ｃ５−アルキルオキシ基（好ましくは−Ｏ−メチル、−Ｏ−エチル、−Ｏ−イソプロピル及び／又はＯ−ｔｅｒｔ−ブチル基からなる群から選択される）からなる群から選択される。本発明に特有の化合物の好ましい実施態様では、ラジカルＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は各々独立に水素をＣｌ及び／又はＯ−メチル基からなる群から選択され、特に好ましくは水素及び／又はＣｌからなる群から独立に選択される。
【００３３】
特に好ましい化合物は、Ｓ及び／又はＣＨ２−ＣＨ２からなる群から選択される構造要素Ｘを有する。
【００３４】
本発明に特有の化合物中の構造要素Ｙ１及びＹ２は各々独立に少なくとも１つの分岐を有してもよく、特にメチル及び／又はエチル側鎖が好ましい。好ましくは、構造要素Ｙ１及びＹ２は各々独立に、−（ＣＨ２）ｏ−（ｏは２、３、４、５又は６、好ましくは３又は４である）、及び／又はＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）ｐ−（ｐは２、３、４、又は６、好ましくは３又は５、特に好ましくは３である）からなる群から選択される。更に特に好ましい実施態様では、構造要素Ｙ１及びＹ２は各々独立に−（ＣＨ２）ｏ−（ｏは３、４又は５である）である。
【００３５】
特に好ましい化合物では、構造要素Ｙ１−Ｚ−Ｙ２の基によって形成される、構造要素Ｙ１及びＹ２に結合している各々の窒素原子間の距離は、１０Å〜１５Åの長さである。
【００３６】
特に好ましい化合物は、構造要素Ｑ１、Ｑ３及びＱ４を有し、各々ＣＨ２基を形成し、構造要素Ｑ２はＣＨ及び／又はＣ−Ｏ−ＣＨ３からなる群から選択される。この場合、構造要素Ｑ２は好ましくはＣ−Ｏ−ＣＨ３であり、構造要素Ｙ１及びＹ２は各々独立に、−（ＣＨ２）ｏ−及び／又はＣＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）ｐ−（ｏは２、３、４、５又は６であり、ｐは２、３、４又は５である）からなる群から選択される。
【００３７】
更なる好ましい化合物は、構造要素Ｑ１、Ｑ３及びＱ４を有し、各々ＣＨ２基を形成し、構造要素Ｑ２はＣＨ及び／又はＣ−Ｏ−ＣＨ３からなる群から選択される。この場合、構造要素Ｑ２は好ましくはＣ−Ｏ−ＣＨ３であり、構造要素Ｙ１及びＹ２は各々独立に−（ＣＨ２）ｏ−（ｏが３、４又は５である）である。
【００３８】
更に特に適切な化合物は、構造要素Ｑ１、Ｑ３及びＱ４を含み、各々ＣＨ２基を形成し、構造要素Ｑ２がＣＨ及び／又はＣ−Ｏ−ＣＨ３からなる群から選択される。この場合、構造要素Ｑ２は好ましくはＣ−Ｏ−ＣＨ３であり、構造要素Ｙ１及びＹ２は各々独立に−（ＣＨ２）ｏ−（ｏは３、４又は５である）であり、ラジカルＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４，Ｒ５及びＲ６は各々独立に水素及び／又はＣｌからなる群から選択される。
【００３９】
特に本発明に特有の化合物の好ましい実施態様では、以下の式（１０）で表される化合物、及び／又はそれらのエナンチオマー、ジアステレオマー、並びにそれらの薬理学的に許容できる塩である。
【化１０】
2008531648.tif 000012
【００４０】
本発明に特有の化合物の更なる好ましい実施態様では、以下の式（１１）で表される化合物、及び／又はそれらのエナンチオマー、ジアステレオマー、並びにそれらの薬理学的に許容できる塩である。
【化１１】
2008531648.tif 000013
【００４１】
本発明に特有の化合物の別の好ましい実施態様では、以下の式（１２）で表される化合物、及び／又はそれらのエナンチオマー、ジアステレオマー、並びにそれらの薬理学的に許容できる塩である。
【化１２】
2008531648.tif 000014
【００４２】
本発明に特有の化合物の別の好ましい実施態様では、以下の式（１３）で表される化合物、及び／又はそれらのエナンチオマー、ジアステレオマー、並びにそれらの薬理学的に許容できる塩である。
【化１３】
2008531648.tif 000015
【００４３】
本発明に特有の化合物の別の好ましい実施態様では、以下の式（１４）で表される化合物、及び／又はそれらのエナンチオマー、ジアステレオマー、並びにそれらの薬理学的に許容できる塩である。
【化１４】
2008531648.tif 000016
【００４４】
好ましい化合物は、（６−クロル−２−メトキシ−アクリジン−９−イル）−（４−｛４−［３−（１０，１１−ジヒドロジベンゾ［ｂ，ｆ］アゼピン−５−イル）−プロピル］−ピペラジン−１−イル｝−ブチル）−アミン、及び／又は（６−クロル−２−メトキシ−アクリジン−９−イル）−（３−｛４−［３−（ジヒドロジベンゾ［ｂ，ｆ］アゼピン−５−イル）−プロピル］−ピペラジン−１−イル｝−ブチル）−アミンからなる群から選択される（前者の名称は化合物（１０）に該当する）。
【００４５】
本発明に特有の化合物の更なる好ましい実施態様では、以下の式（１５）から式（２４）の化合物、及び／又は、それらのエナンチオマー、ジアステレオマー、並びにそれらの薬理学的に許容できる塩である。
【化１５】
2008531648.tif 000017
【化１６】
2008531648.tif 000018
【化１７】
2008531648.tif 000019
【化１８】
2008531648.tif 000020
【化１９】
2008531648.tif 000021
【化２０】
2008531648.tif 000022
【化２１】
2008531648.tif 000023
【化２２】
2008531648.tif 000024
【化２３】
2008531648.tif 000025
【化２４】
2008531648.tif 000026
化合物は、慣習的な合成方法に従って製造できる。
【００４６】
好ましい実施態様では、これらの化合物が細胞膜を通過できるという点が当該化合物の１つの優位性として挙げられる。特に、本発明に特有の化合物は血液脳関門を通過する良好な能力を有する。これは、本発明に特有の化合物のインビボ及びインヴィトロでの使用を可能にする。本発明に特異的な化合物は例えば、細胞培養において使用できる。特に好ましい実施態様では、本発明に特異的な化合物は組織又は器官でも使用できる。特に、本発明に特有の化合物は生物体でのそれらを使用も可能である。
【００４７】
それらの有利な特性のため、本発明に特有の化合物は薬剤としての使用に適する。
【００４８】
本発明の更なる主題は、薬剤を製造するための、本発明に特有の化合物（特に一般式（１０）から（１４）の化合物）の使用である。
【００４９】
本発明に特有の化合物は、慣習的な方法で投与してもよく、経口投与又は経皮投与が好ましく、及び／又は例えば静脈内、皮下及び／又は筋肉内注射などの方法も可能である。経口投与が特に好ましい。
【００５０】
本発明に特有の化合物の１つの効果は、それらの血液脳関門を通過する能力が高いということである。そのため、当該化合物はそれらの活性部位（特に脳細胞）で非常に効果的である。本発明における「血液脳関門を通過する」の用語は、化合物が血液脳関門を通過し、脳細胞（特に神経単位）脳に浸透することを意味する。特に有利な実施態様では、化合物の全て又はほとんど全てが脳細胞に到達し、及び／又は、脳細胞において完全に、又はほとんど完全に利用される。
【００５１】
本発明に特有の化合物によって投与される化合物の量は、血液脳関門を通過する能力に乏しい物質と比較し顕著に少なくできるという点で特に有利である。有利な態様では、小さい投与量のために副作用を減少させることができる。
【００５２】
本発明に特有の化合物の、ヒトへの投与における好ましい投与量は、７５ｋｇの体重あたり、１ｍｇ／日〜１０００ｍｇ／日、好ましくは１０ｍｇ／日〜５００ｍｇ／日、より好ましくは３０ｍｇ／日〜１００ｍｇ／日、特に好ましくは３０ｍｇ／日〜５０ｍｇ／日（数値範囲の両端の数値を含む）である。
【００５３】
有利な実施態様では、本発明に特有の化合物は、特にタンパク質のミスフォールディングに関連する疾患の治療的及び／又は予防的処置、診断及び／又は治療のために使用できる。例えば、プリオン病及び／又は慢性変性疾患（特に神経変性的及び／又は神経精神病学的疾患）は、これらの疾患の１つである。
【００５４】
本発明におけるタンパク質の「ミスフォールディング」の用語は、タンパク質のフォールディングのミス又は不正確なプロセシングを意味する。
【００５５】
有利な態様において、本発明に特有の化合物は、植物及び／又は動物、組織及び／又は細胞の治療に使用できる。特に本発明に特有の化合物は、哺乳類（例えばヒト）の治療に使用できる。
【００５６】
本発明に特有の化合物は、タンパク質のミスフォールディングに好影響を及ぼすことができる。特に、細胞培養モデルを用いた化合物の好ましい実施態様において、意外なことに、ミスフォールドしたプリオンタンパク質の量を減少させることがでることを見出した。有利な態様において、本発明に特有の化合物では、現在公知の化合物と比較し、タンパク質のミスフォールディングに対する高い有効性が示される。特に本発明に特有のタンパク質では、現在公知の物質の組合せよりも、高い有効性を示すことができる。
【００５７】
本発明に特有の化合物の特定の効果の１つは、本発明に特有の化合物の投与により、感染症から疾患の発生までの期間の長期化、及び／又は疾患の発生からの生存期間の長期化が可能となることである。
【００５８】
疾患が進行した場合又は臨床段階に入った場合にも、本発明に特有の化合物が、ミスフォールドタンパク質（特にプリオンタンパク質）の減少をもたらすことができることは特に有利である。
【００５９】
実験により、本発明に特有の化合物（ｉ．ｓ．ｃ．）が細胞表面上のコレステロール濃度を減少させることが明らかとなっている。ゆえに、ｉ．ｓ．ｃ．はまた脂質コレステロール代謝の障害への適用も可能である。更に、アクリジン及びフェノチアジン系化合物の寄生虫及び原生動物の駆除効果は公知である。この効果は同様にｉ．ｓ．ｃ．によって達成され、この結果はすなわち原生動物及び寄生虫症の治療への適用が可能であることを示す。我々は特に、本発明に特有の化合物が溶トリパノソーマの治療に良好な効果を示すことができると考える。
【００６０】
特定の理論に拘束されないが、我々は、本発明に特有の化合物が更にアルツハイマー性疾患の治療及び／又は防止に良好な効果、特にアルツハイマー性疾患の予防に対する良好な効果を示しうると考える。
【００６１】
それに伴い、本発明は更に、本発明に特有の化合物、主に一般式（１０）から（１４）の化合物の、治療的及び／又は予防的な疾患治療用薬剤の製造への使用に関する。当該疾患は、以下からなる群から選択される。
−タンパク質のミスフォールディングに関連する疾患（プリオン病及び／又は慢性変性疾患（特に神経変性及び／又は神経精神病学的疾患））
−増加した血中コレステロールに関連する疾患、
−脂質代謝の異常に関連する疾患及び／又は高脂血症、
−慢性炎症などの炎症に関連する疾患、
−動植物の循環器病（特に動脈硬化及び／又は感染症、特にヒト及び商業的に有用な動物において、寄生虫によって生じる）、
−原生動物及び／又は虫によって生じる疾患（特に寄生虫及び／又は原生動物によって生じる脳感染症）。
【００６２】
プリオン病としては特に、クロイツェル−ヤコブ症候群、Ｇｅｒｓｔｍａｎｎ−Ｓｔｒａｅｕｓｓｌｅｒ−Ｓｃｈｅｉｎｋｅｒ症候群、致死性家族性不眠症（ＦＦＩ）クーズー、スクラピ及び／又は牛スポンジ様脳症（ＢＳＥ）からなる群から選択されうる。
【００６３】
慢性変性疾患（特に神経変性の及び／又は神経精神病学的疾患）は例えば、アルツハイマー症、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ピック病、パーキンソン病、多発性硬化症、ハンチントン舞踏病、Ｉ型及びＩＩ型糖尿病、自閉症、統合失調症、双極性疾患、うつ病、ポリグルタミン病、前頭側頭骨痴呆、タウオパシー、並列式萎縮、睡眠妨害、プラスマ細胞疾患、家族性アミロイドポリニューロパシ、甲状腺髄様癌、慢性腎不全、うっ血性心不全、心臓アミロイドーシスのようなアミロイドーシス、全身アミロイドーシス及び／又は家族性アミロイドーシスからなる群から、好ましくは選択される。
【００６４】
好ましい、神経変性及び／又は神経精神病学的疾患は、アルツハイマー病、前頭側頭骨痴呆、パーキンソン病、タウオパシー、並列式萎縮、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、統合失調症、双極性の疾患、うつ病、ポリグルタミン病、多発性硬化症及び／又は睡眠妨害からなる群から選択される。
【００６５】
特にヒトの神経変性疾患の処理では、本発明に特有の化合物を用いることにより、有益な効果が疾患の過程中に得られ、特にミスフォールドタンパク質を外観上からも減少させることができる。本発明に特有の化合物の更なる効果は、それらが低用量においても得られるという事実から生じうる。更に、その結果、副作用がなくなるか、又はごくわずかな副作用のみ生じる。これは、より長い期間にわたる本発明に特有の化合物の投与を可能にする。それにより、特定の状況下で数ヶ月又は数年の間続けなければならない、例えば、神経変性疾患の治療のための投与を可能にする。
【００６６】
特に有利な実施態様では、本発明に特有の化合物は、血中コレステロールを低下させる。これにより、例えば脂質代謝の障害又は高脂血症への応用が可能となる。更に、当該化合物は明らかな抗炎症効果を示し、循環器病の治療的及び／又は予防的処置（特に動脈硬化の予防）に使用できる。
【００６７】
更に、当該化合物はまた、マラリア及び生存する生物、動植物、特に商業的に有用な動物及びヒトにおける、他の寄生虫により引き起こされる感染症（例えばマラリア、トリパノソーマ症、眠り病、アメーバ症、リーシュマニア症及び／又はトキソプラズマ症）の治療的及び／又は予防的処置に対しても好適に使用できる。また、抗原虫薬として及び／又は抗蠕虫薬としての用途、例えば蟯虫（ｅｎｔｅｒｏｂｉｕｓ）などのネマトーダ、蛔虫、イヌ及びネコの蛔虫（ｔｏｘｏｃａｒａ）、鞭虫（ｔｒｉｃｈｕｒｉｓ）、十二指腸虫（ｎａｃａｔｏｒ、ａｎｃｈｙｌｏｓｔｏｍａ）、円虫様線虫（ｓｐｏｂｎｇｙｌｏｉｄｅｓ）、糸状虫（ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ）又は糸状虫、ｚｅｓｔｏｄｅｓ及び／又は吸虫に対する薬剤として使用できる。
【００６８】
本発明に特有の化合物、好ましくは式（１０）の化合物を使用する際の１つの大きな効果として、それらが血液脳関門を通過するより良好な能力を備え、大脳マラリア、トキソプラズマ症及び／又は脳膿腫などの寄生虫及び／又は原生動物による脳の感染症に対してより良好な効果を示すという点が挙げられる。
【００６９】
特定の理論に拘束されないが、我々は更に、本発明に特有の化合物、好ましくは式（１０）がいわゆる薬剤多剤耐性（ＭＤＲ）タンパク質（Ｐ糖蛋白質のような）に対する阻害効果を示し、その結果、周知の物質と比較して、より良好な効果及び生物学的利用能が提供されうると考える。
【００７０】
有利な態様では、本発明に特有の化合物は、投与の際にごくわずかな（又は検出できない程の）毒性を呈する。これにより、例えば高用量の薬剤の投与が可能となり、単回及び／又は多回投与、一時的な限定的投与において、７５ｋｇの体重当たり１０ｍｇ／日以上、１０００ｍｇ／日以下で、例えば少なくとも３ヵ月以上の期間で投与してもよい。本発明に特有の化合物のごくわずかな毒性により、いわゆるパルス治療における投与が可能となる。これにより、７５ｋｇの体重あたり、１０ｍｇ／日以上、１０００ｍｇ／日以下における投与量で例えば１週間、好ましくは少なくとも１週間で２回、投与なし期間を含めつつ投与する。このような投与により、ミスフォールドタンパク質に対する化合物の効果を更に高めることができる。
【００７１】
本発明は更に、本発明に特有の化合物、好ましくは式（１０）から（１４）の化合物を含んでなる薬剤に関する。
【００７２】
本発明に特有の化合物を含む薬剤は、インビボ及びインヴィトロでの治療に適用できる。本発明に特有の化合物を含む薬剤の１つの好ましい使用としては、タンパク質のミスフォールディング、プリオン病様及び／又は慢性変性疾患（特に神経変性及び／又は神経精神病学的疾患）に関連する疾患の治療的及び／又は予防的処置が挙げられる。
【００７３】
本発明は更に。本発明に特有の化合物（好ましくは式（１０）の化合物）を含む抗プリオン剤に関する。
【００７４】
本発明の「抗プリオン剤」という用語は、本発明に特有の化合物を含む薬品がプリオン病に対して好適な影響を与えることができることを意味する。特に、ミスフォールドのプリオンタンパク質（ＰｒＰＳｃ）の量を減少させることができるという意味である。
【００７５】
好ましい実施態様では、本発明に特有の化合物の使用は試験する培地、細胞、組織及び／又は器官におけるミスフォールドタンパク質（特にプリオンタンパク質（ＰｒＰＳｃ））の量の減少をもたらすことができ、及び／又はミスフォールドタンパク質を外観上完全に、又はほぼ完全に除去できる。
【００７６】
例えば、実験で、本発明に特有の化合物はそれ自体、周知の物質又はそれらの組合せと比較して活性が高い。このように、本発明に特有の化合物により、個々の周知の物質又はそれらの組合せの投与の場合と比較し、ミスフォールドプリオンタンパク質の量を顕著に減少させることができる。
【００７７】
本発明は更に、特に細胞懸濁液からの体液（特にミスフォールドタンパク質、好ましくはプリオンを含む体液）を精製するための、本発明に特有の化合物、好ましくは一般式（１０）の化合物の使用に関する。本発明に特有の化合物は、特にミスフォールドタンパク質（好ましくはプリオン）が混入した体液の精製に使用できる。
【００７８】
本発明における「精製」の用語は、体液で、ミスフォールドタンパク質の量が本発明に特有の化合物の投与後減少していることを意味し、特に本発明の用語における「精製」のの用語は、用語「清浄」又は「クリアランス」の意味として理解することができる。特に、本発明に特有の化合物は、特に有利な実施態様の形態では、ミスフォールドタンパク質を完全、又はほぼ完全に除去できる。
【００７９】
細胞懸濁液は例えば脳脊髄液であってもよく、好ましくは細胞懸濁液は血液及び／又は血液製剤からなる群から選択されてもよい。
【００８０】
この場合、体液を生物体から回収し、本発明に特有の化合物を生物体の外部で添加してもよく、又は、これらを生物体から回収せずに本発明に特有の化合物を液体に添加してもよい。
【００８１】
本発明は更に、ミスフォールドタンパク質（好ましくはプリオン）を含む体液の精製方法であって、本発明に特有の化合物好ましくは式（１０）から（１４）の化合物を、精製しようとする体液、特に血液又は血液製剤などの細胞懸濁液に添加する方法に関する。変法として、例えばインキュベーション後、クロマトグラフィ（透析及び／又は吸着）精製を行って体液から化合物を再度分離してもよい。
【００８２】
方法の更に有利な実施態様では、適切な方法を使用して、本発明に特有の化合物の投薬の前後で体液中に含まれるミスフォールドタンパク質の量を試験してもよい。
【００８３】
有利な実施態様の方法では、精製しようとする体液、特に血液などの細胞懸濁液又は血液製剤は、最初に例えば直接採取法により生物体から回収し、精製の後、例えば血漿分離交換法により生物体に戻してもよい。特に細胞懸濁液など（特に血液）の体液の精製の方法における有利な実施態様では、以下の手順が含まれる。
ａ）生物体からの体液の任意の回収（例えば直接採取法）、
ｂ）本発明に特有の化合物と体液とのインキュベーション、
ｃ）任意の化合物の分離（例えばクロマトグラフィ、透析及び／又は吸着）、
及び任意の体液の再注入（例えば血漿分離交換法）。
【００８４】
あるいは、例えば液体を保存血液の形で保存してもよく、及び／又は一定期間の経過後にそれらを回収した生物体に戻してもよい。
【００８５】
本発明の例示に有用な実施例及び図を、以下に示す。
【００８６】
＜実施例１＞６−クロル−２−メトキシ−アクリジン−９−イル）−（４−｛４−［３−（１０，１１−ジヒドロジベンゾ［ｂ，ｆ］アゼピン−５−イル）−プロピル］−ピペラジン−１−イル｝−ブチル）−アミンの製造
【００８７】
Ｎａ（Ｏａｃ）３ＢＨ３（１７１ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）を、３−（１０，１１−ジヒドロジベンゾ［ｂ，ｆ］アゼピン−５−イル）−プロピオンアルデヒド（１００ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）及びＮ−（３−シアノプロピル）−ピペラジン（１２２ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍｌ）中溶液に添加した。１６時間撹拌後、混合物をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍｌ）で希釈し、ＮａＨＣＯ３の飽和溶液で洗浄した。有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させた。得られた残余物を、フラッシュクロマトグラフィを使用して精製し、Ｎ−［３−（１０，１１−ジヒドロジベンゾ［ｂ，ｆ］アゼピン−５−イル）−プロピル］−Ｎ’−（３−シアノプロピル）−ピペラジン（収率：１０６ｍｇ（６８％））を得た。
【００８８】
Ｎ−［３−（１０，１１−ジヒドロジベンゾ［ｂ，ｆ］アゼピン−５−イル）−プロピル］−Ｎ’−（３−シアノプロピル）−ピペラジン（６０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を無水ジエチルエーテル（Ｅｔ２Ｏ）（５ｍｌ）中に溶解し、０℃でＬｉＡｌＨ４（Ｅｔ２Ｏ中１．０Ｍ、０．１５ｍｌ、０．１５ｍｍｏｌ）と混合した。３時間反応後、３滴の０．５Ｎ  ＮａＯＨを添加し、混合液をシリカゲル（セライト（登録商標）５２１ＡＷ）及びＭｇＳＯ４で濾過した。溶媒を蒸発させ、４８ｍｇのＮ−［３−（１０，１１−ジヒドロジベンゾ、［ｂ，ｆ］アゼピン−５−イル）−プロピル］−Ｎ’−（３−アミノプロピル）−ピペラジンを得、１．５ｇのフェノール中に緩やかに加熱しながら溶解させた。６，０−ジクロロ−２−メトキシ−アクリジン（７０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を添加し、１００℃で１時間撹拌を継続させた。続いてＮａＯＨ水溶液を添加し、ＥｔＯＡｃで抽出し、有機相を蒸発させ、６−クロル−２−メトキシ−アクリジン−９−イル）−（４−｛４−［３−（１０，１１−ジヒドロジベンゾ［ｂ，ｆ］アゼピン−５−イル）−プロピル］−ピペラジン−１−イル｝−ブチル）−アミンを得、フラッシュクロマトグラフィで精製し、２１％の収率で得た。
【００８９】
＜実施例２＞ポリクローン性のチキン抗マウスプリオンタンパク質抗体の単離及び精製免疫グロブリンの単離：
【００９０】
組み換えマウスプリオンタンパク質（ｒｅｃＭｏＰｒＰ）を免疫した鶏からの卵を回収した。卵黄を冷却した２０ｍＭの酢酸ナトリウム溶液（ｐＨ５．２）で１：５の比率に希釈し、４℃で一晩静置した。２０分間２０，０００×ｇで遠心分離し不溶性物質を除去した後、２０％（ｗ／ｖ）の（ＮＨ４）ＳＯ４を添加して免疫グロビンを沈殿させ、２時間後、４℃で２０分間、２０，０００×ｇで遠心分離した。ペレット化した免疫グロビンを、２０ｍＭのトリス（ｐＨ８）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．１％のＴｗｅｅｎ２０、１ｍＭのＥＤＴＡ溶液に溶解させた。
【００９１】
精製：
組み換えマウスプリオンタンパク質（ｒｅｃＭｏＰｒＰ）を、５０ｍＭのＮａＨＣＯ３、（ｐＨ８．３）、１％のＴｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、２０％のＤＭＳＯを含む冷却（４℃）溶液中で、ＮＨＳで活性化したアマシャムファルマシア製のセファロース（製造業者のプロトコルに従いプレウォッシュした）の懸濁液中に溶解（樹脂１ｍｌ当たり３ｍｇのタンパク質）させた。この懸濁液を４℃で一晩撹拌した。フリーのＮＨＳ基を室温で１時間、５０ｍＭのグリシンでブロッキングした。次いで樹脂を５０ｍＭのトリス（ｐＨ９）、５０ｍＭのグリシン（ｐＨ３）の溶液、及び最後に２０ｍＭのトリス（ｐＨ８）、１５０のＮａＣｌ、０．２％のＴｒｉｔｏｎＸ１００、０．２％のＴｗｅｅｎ−２０、２ｍＨ  ＥＤＴＡの溶液で連続的に洗浄した。このバッファ中で、固定した組み換えマウスプリオンタンパク質（ｒｅｃＭｏＰｒＰ）を、抗マウスプリオンタンパク質免疫グロビン（マウスプリオンタンパク質１ｍｇあたりほぼ２００ｍｇの免疫グロビン）と混合し、４℃で一晩撹拌した。次いで樹脂を回収し、十分洗浄し、更に１００ｍＭのグリシン（ｐＨ３）、１ＭのＮａＣｌ、１％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００の溶液で洗浄し、更にｐＨを８に調整した。次いで製造業者のプロトコルに従い、精製された抗マウスプリオンタンパク質免疫グロビンを、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）活性化ＥＺ−Ｌｉｎｋ（登録商標）マレイミド（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ社、ロックフォード、イリノイ、）でタグを付与した。
【００９２】
この抗体は、非及びモノグルコシル化された形のプリオンタンパク質（ミスフォールドプリオンタンパク質に対応する）のみを認識し、ジグリコシル化された形を認識しない。
【００９３】
＜実施例３＞式（１２）（１３）及び（１４）の化合物による細胞培養試験
【００９４】
マウス神経芽腫細胞（Ｎ２ａ）を、マウス由来のスクラピプリオンで感染させ、サブクローニング（Ｂｏｓｑｕｅ，Ｐ．Ｊ．及びＳ．Ｂ．Ｐｒｕｓｉｎｅｒ（２０００）“Ｃｕｌｔｕｒｅｄ  ｃｅｌｌ  ｓｕｂｌｉｎｅｓ  ｈｉｇｈｌｙ  ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ  ｔｏ  ｐｒｉｏｎ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ”−Ｊ  Ｖｉｒｏｌ７４（９）：４３７７−８６）し、培養した。コンフルエントな１０ｃｍペトリ皿の細胞を分割し、マウス由来のスクラピプリオンに感染させたマウス神経芽腫細胞（ＳｃＮ２ａ）を２〜５×１０４ずつ６０ｍｍ細胞ペトリ皿に添加し、ウシ胎仔血清（ＦＣＳ）１０％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）、ペニシリン−ストレプトマイシン（１００単位／１ｍｌ）及びＬ−グルタミン（２ｍＭ）を含む４ｍｌのＭＥＭ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）中で、０．１μＭ、０．５μＭ及び１μＭの化合物（１２）及び（１４）、並びに０．１μＭ及び０．５μＭの化合物（１３）を添加して１週間培養した。その週の間に、２日ごとに、培地を交換し、試験化合物を適当量培地に添加した。
【００９５】
７日後に細胞をＰＢＳ（１３７ｍＭのＮａＣｌ、２．７ｍＭのＫＣｌ、１０ｍＭのＮａ２ＨＰＯ４、２ｍＭのＫＨ２ＰＯ４）で一度洗浄し、溶解バッファー（１０ｍＭのトリス、（ｐＨ８．０）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．５％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００、０．５％のデオキシコール酸）で溶解させた。更にライゼートをプロテイナーゼＫ（メルク社製）で１ｍｌあたり２０μｇ、３０分、３７℃で処理し、反応液を２ｍＭのＰＭＳＦ（フッ化フェニルメチルスルホニル）で停止させた。更に、溶解したライゼートを４℃、１００，０００ｇで４５分間遠心分離し、余分を除去し、ペレットを黄色の荷電バッファー（１００ｍＭのトリス−Ｃｌ（ｐＨ６．８）、４％（ｗ／ｖ）のＳＤＳ、０．２％（ｗ／ｖ）のブロムフェノールブルー、２０％（ｖ／ｖ）のグリセロール、２００ｍＭのβ−メルカプトエタノール）に吸収させた。サンプルをＳＤＳゲル（４〜２０％、Ｂｉｏｒａｄ）で分離し、プリオンタンパク質をウエスタンブロット法（アマシャムファルマシア製、Ｅｎｈａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ（ＥＣＬ）システム）によって、実施例２に従って１ｍｌあたり０．３μｇの抗体で検出した。
【００９６】
マウス由来のスクラピプリオンに感染させたマウス神経芽腫細胞を、キナクリン無処理のネガティブコントロールとして使用した。試験条件下で抗プリオン物質として周知のキナクリン１μＭで処理した細胞を、ポジティブコントロールとして使用した。
【００９７】
ミスフォールド形のプリオンタンパク質はプロテイナーゼＫ処理で分解されず、ウエスタンブロットで検出可能だった。
【００９８】
化合物（１２）（１３）及び（１４）による感染細胞におけるミスフォールドプリオンタンパク質の除去、また化合物（１４）より高い化合物（１２）及び（１３）の効果が示された。
【００９９】
＜実施例４＞
【０１００】
実施例３の条件に従い、マウス由来のスクラピプリオンに感染させたマウス神経芽腫細胞を、０．０５μＭ、０．０７５μＭ、０．１μＭ及び０．３μＭの式（１０）の化合物でインキュベートし、処理し、ミスフォールドプリオンタンパク質をウエスタンブロッティングで検出した。
【０１０１】
マウス由来のスクラピプリオンに感染させたマウス神経芽腫細胞を、キナクリン無処理のネガティブコントロールとして使用した。試験条件下で抗プリオン物質として周知のキナクリン１μＭで処理した細胞を、ポジティブコントロールとして使用した。比較用に、キナクリン０．１μＭ及び０．３μＭで処理された細胞を用いた。
【０１０２】
式（１０）の化合物０．１μＭ及び０．３μＭの濃度でインキュベートした細胞培養のライゼートではミスフォールドプリオンタンパク質が検出されず、一方で、同一濃度のキナクリンで処理した細胞ではミスフォールドプリオンタンパク質がまだ含まれていることが示された。化合物（１０）はキナクリンより約１０倍活性が高かった。
【０１０３】
図１で示すウエスタンブロッティングにより、実施例４中の試験結果が明らかになった。
【０１０４】
＜実施例５＞フィリピン染色
【０１０５】
細胞をカバーガラス上へ添加し、実施例３及び４と同様に化合物（１０）０．２５μＭ及びキナクリン１μＭで処理した。処理後６日目に、細胞を氷冷ＰＢＳ（１３７ｍＭのＮａＣｌ、２．７ｍＭのＫＣｌ、１０ｍＭのＮａ２ＨＰＯ４、２ｍＭ  ＫＨ２ＰＯ４）で一度洗浄した。次いで細胞を室温で３０分間ＰＢＳ中のパラホルムアルデヒド４％（ｗ／ｖ）で固定した。更に、パラホルムアルデヒド溶液を除去し、細胞を室温で、３０分間フィリピン（Ｓｉｇｍａ社製、ＰＢＳ１ｍｌあたり５０μｇ）でインキュベートした。カバーガラスをＰＢＳで４回洗浄し、適切なフィルタセットを有する顕微鏡下で観察した。フィリピン染色で細胞コレステロールを検出した。
【０１０６】
無処理の細胞（ＳｃＮ２ａ）では、コレステロールが主に細胞表面で検出されることが明らかとなった。化合物（１０）で処理した細胞では、キナクリンで処理した細胞と同様の再分布が細胞内の区画で観察された。これは、コレステロールに対する化合物の効果を示す。
【０１０７】
＜実施例６＞マウスモデルにおけるインビボ活性試験
【０１０８】
インビボプリオン感染症に対する式（１０）の化合物の効果を、プリオン病モデルのマウスで解析した。
【０１０９】
遺伝子導入マウス（ＴＧ２０、フィッシャーその他、１９９６、ＥＭＢＯ  Ｊｏｕｒｎａｌ、第１５巻、ｐｐ．１２５５−６４）（内因性のマウスＰｒＰ−Ｇｅｎに加えて内因性のマウスタンパク質ＰｒＰを過剰発現する）を用いた。これらのマウスにおけるプリオンとのインキュベーション時間を９２±４日に短縮した。その理由は、脳内の高濃度のプリオンタンパク質（ＰｒＰＣ）により、プリオンが特に急速に増加するため、この転換速度の上昇に反して操作する必要があるからである。
【０１１０】
これらのマウスを、大脳内に１０−５に希釈したＲＭＬスクラピ含有脳ホモジェネート（Ｃｈａｎｄｌｅｒ、Ｌａｎｃｅｔ、１９６１、第１巻、ｐｐ．１３７８−７９）１００μｌによる試験開始の３週間前に免疫した。以上より、神経毒性効果及び／又は準臨床的な脳損傷が生じうるため、すでに試験開始時には好適な効果が存在しない。
【０１１１】
式（１０）の化合物を最初にエタノールに溶解させ、更にディステル油に、１ｍｌあたり１０ｍｇの最終濃度となるように希釈した。更に、１１匹のマウスのグループに、マウスあたり２ｍｇ／２００μｌの投与量で８週間、強制経口投与で週３回（月曜日、水曜日及び金曜日）胃プローブを介して化合物を注入した。
【０１１２】
式（１０）の化合物で処理しなかったマウスの対照群はプリオン病発症の９２±４日後に死亡したが、一方では、式（１０）の化合物で処理したマウスは１００±５日後にようやく死亡した。
【０１１３】
以上の結果を、試験条件下でのスチューデントｔ検定（ｐ＜０．０００１）で解析し、１０％の生存期間の延長を確認した。これらの条件は、クロイツフェルト‐ヤコブ病患者が後期段階の医学的援助を求めるだけである臨床条件に近い状況に該当するものである。
【図面の簡単な説明】
【０１１４】
【図１】プロテアーゼＫで溶解させたＳｃＮａ２細胞の細胞可溶化物のウエスタンブロット（ミスフォールドプリオンタンパク質のバンドを示す）。Ｓｃ：無処理細胞のネガティブチェック（ミスフォールドのプリオンタンパク質の明瞭なバンドを示す）。Ｑ：１μＭのキナクリンで処理した細胞（ポジティブコントロール、ミスフォールドプリオンタンパク質のバンドを示さない）。０．１μＭ〜０．３μＭの濃度の式（１０）の化合物でインキュベートした細胞培養では、ライゼート中にミスフォールドプリオンタンパク質が検出されなかったが、一方で、同一の濃度のキナクリンで処理した細胞ではミスフォールドプリオンタンパク質が依然含まれている。
【図１】
2008531648.tif 000036
【国際調査報告】
2008531648.tif 000037
2008531648.tif 000038
2008531648.tif 000039
2008531648.tif 000040
2008531648.tif 000041
2008531648.tif 000042
2008531648.tif 000043
2008531648.tif 000044