(57)【要約】本発明は、新規β２アドレナリン作用性アゴニスト化合物を提供する。本発明はまた、そのような新規β２アドレナリン作用性アゴニスト化合物を含む薬学的組成物を提供する。本発明はまた、そのような新規β２アドレナリン作用性アゴニスト化合物を使用してβ２アドレナリン作用性レセプター活性に関連する疾患を処置するための方法を提供する。本発明はまた、そのような新規β２アドレナリン作用性アゴニスト化合物を調製するために有用なプロセスおよび中間体を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物：
【化１】
2008501705.tif 000024
または、その薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体であって、
ここで：
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４の各々は、水素、ヒドロキシ、アミノ、ハロ、−ＣＨ２ＯＨおよび−ＮＨＣＨＯから独立して選択されるか、あるいはＲ１およびＲ２が一緒になって、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｓ−；および−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＨ−から選択され；
Ｒ５は、水素、−ＯＲａおよび−ＮＲａＲｂから選択され、ここでＲａおよびＲｂが、各々、独立して、水素またはＣ１−３アルキルであり；
ｎは、０〜７の整数であり；
ｍは、０〜５の整数であり；そして
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０の各々は、独立して、水素またはＣ１−６アルキルであるが；
但し、ｍが、０である場合、Ｒ５は、水素である、
化合物、または、その薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体。
【請求項２】
Ｒ９およびＲ１０が、各々、水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ５およびＲ６が、各々、水素である、請求項１または請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
式（ＩＩ）の化合物：
【化２】
2008501705.tif 000025
である請求項１に記載の化合物、または、その薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体であって、
ここで：
Ｒ１は、−ＣＨ２ＯＨまたは−ＮＨＣＨＯであり、そしてＲ２は、水素であり；あるいは、Ｒ１およびＲ２は一緒になって、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−または−ＣＨ＝ＣＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−であり；
ｎは、２〜６の整数であり；
ｍは、０〜３の整数である、
化合物、または、その薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体。
【請求項５】
ｎが、４である、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
ｍが、１である、請求項４または請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１およびＲ２が一緒になって、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−または−ＣＨ＝ＣＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−である、請求項４〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
ヒドロキシル基を有する前記アルキレン炭素における立体化学が、（Ｒ）である、請求項４〜７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
８−ヒドロキシ−５−［（Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−（６−フェネチルアミノ−ヘキシルアミノ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの化合物名を有する請求項１に記載の化合物；あるいは、その薬学的に受容可能な塩または溶媒和物または立体異性体。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物の治療有効量と、薬学的に受容可能なキャリアとを含む、薬学的組成物。
【請求項１１】
前記組成物が、１つ以上の他の治療剤の治療有効量をさらに含む、請求項１０に記載の薬学的組成物。
【請求項１２】
前記他の治療剤が、コルチコステロイド、抗コリン作用性因子、またはＰＤＥ４インヒビターである、請求項１１に記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
前記組成物が、吸入による投与用に処方される、請求項１０〜１２のいずれか１項に記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物と、１つ以上の他の治療剤とを含む、組み合わせ。
【請求項１５】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物と、以下の化合物から選択される化合物とを含む組み合わせであって、該化合物が、プロピオン酸フルチカゾン、６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロメチルエステル、および６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−１７α−プロピオニルオキシ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−（２−オキソ−テトラヒドロフラン−３Ｓ−イル）エステルから選択される、組み合わせ。
【請求項１６】
治療における使用のための、請求項１〜９のいずれか１項の記載の化合物。
【請求項１７】
前記医薬の製造における、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物の使用、あるいは、請求項１４または請求項１５に記載の組み合わせの使用。
【請求項１８】
前記医薬が、β２アドレナリン作用性レセプター活性に関連する疾患または状態を有する哺乳動物の処置のためのものである、請求項１７に記載の使用。
【請求項１９】
前記疾患または状態が、肺疾患または肺の状態である、請求項１８に記載の使用。
【請求項２０】
前記肺疾患または肺の状態が、喘息または慢性閉塞性肺疾患である、請求項１９に記載の使用。
【請求項２１】
前記医薬が、吸入による投与用に適する、請求項１８に記載の使用。
【請求項２２】
β２アドレナリン作用性レセプター活性に関連する疾患または状態を有する哺乳動物の処置のために、１つ以上の治療剤と組み合わせた投与のための、医薬の製造における請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項２３】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物を調製するプロセスであって、該プロセスは、以下：
（ａ）式（ＩＩＩ）の化合物：
【化３】
2008501705.tif 000026
を、式（ＩＶ）の化合物：
【化４】
2008501705.tif 000027
と反応させ、式（Ｖ）の化合物：
【化５】
2008501705.tif 000028
を提供する工程であって、
ここで式（ＩＩＩ）において：
Ｐ１は、ヒドロキシ保護基であり、Ｌは、脱離基であり、Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、およびＲ４ａの各々は、独立して、請求項１〜９のいずれか１項に定義されるようなＲ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４と同じであるか、−ＯＰ２であるかのいずれか一方であり、ここでＰ２が、ヒドロキシ保護基であり；
ここで式（ＩＶ）において：
Ｒ１１は、水素またはＰ３であり、Ｐ３が、アミノ保護基である、工程
（ｂ）該保護基Ｐ１を除去し、式（ＶＩ）の化合物：
【化６】
2008501705.tif 000029
を提供する工程；および
（ｃ）Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、またはＲ４ａのいずれかが、−ＯＰ２である場合、あるいは、Ｒ１１が、Ｐ３である場合に、存在するならば、該保護基Ｐ２および該保護基Ｐ３を除去し、式（Ｉ）の化合物あるいはその塩または立体異性体を提供する工程、
を包含する、プロセス。
【請求項２４】
請求項２３のプロセスにより調製される、生成物。
【請求項２５】
β２アドレナリン作用性レセプター活性に関連する疾患または状態を有する哺乳動物を処置する方法であって、該方法は、該哺乳動物に、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物の治療有効量を投与する工程を、
包含する、方法。
【請求項２６】
１つ以上の治療剤の治療有効量を投与する工程をさらに包含する、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記他の治療剤が、コルチコステロイド、抗コリン作用性因子、またはＰＤＥ４インヒビターである、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記方法が、吸入により前記化合物を投与する工程を包含する、請求項２５〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
β２アドレナリン作用性レセプターを含む生物学系または生物学的試料を研究する方法であって、該方法が、以下：
（ａ）生物学系または生物学的試料を、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物と接触させる工程；および、
（ｂ）生物学系または生物学的試料に関して、該化合物により引き起こされる効果を測定する工程、
を包含する、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明分野）
本発明は、新規のβ２アドレナリン作用性レセプターアゴニストに関する。本発明はまた、そのような化合物を含む薬学的組成物、β２アドレナリン作用性レセプター活性に関連する疾患を処置するためにそのような化合物を使用する方法、ならびにそのような化合物を調製するために有用なプロセスおよび中間体に関する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
β２アドレナリン作用性レセプターアゴニストは、喘息および慢性閉塞性肺疾患（例えば、慢性気管支炎および気腫）のような肺疾患を処置するための効果的な薬物として認識されている。β２アドレナリン作用性レセプターアゴニストはまた、早期分娩（ｐｒｅ−ｔｅｒｍ  ｌａｂｏｒ）を処置するために有用であり、神経障害および心障害の処置のために潜在的に有用である。特定のβ２アドレナリン作用性レセプターアゴニストを用いて成功を収めているにもかかわらず、現時点の薬剤は、作用の望ましい低い持続時間、低い効力、低い選択性、および／または発症に関する望ましい低い持続時間を有する。したがって、改善された作用持続時間、効力、選択性、および／または発症のような持続時間のような、改善された特性を有するさらなるβ２アドレナリン作用性レセプターアゴニストに関する必要性が存在する。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
（本発明の要旨）
本発明は、β２アドレナリン作用性レセプターアゴニスト活性を有する新規化合物を提供する。本発明の化合物は、他の特性の中でも、強力かつ選択的なβ２アドレナリン作用性レセプターアゴニストである。さらに、例示的な本発明の化合物は、１日１度の投薬またはさらに少ない頻度の投薬を許容し、驚く程に、思いがけなく長い作用の持続時間を有することが示されている。
【０００４】
したがって、本発明は、式（Ｉ）の化合物：
【０００５】
【化７】
2008501705.tif 000002
またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体を提供し、
ここで：
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４の各々は、水素、ヒドロキシ、アミノ、ハロ、−ＣＨ２ＯＨおよび−ＮＨＣＨＯから独立して選択されるか、または、Ｒ１およびＲ２が一緒になって、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｓ−；および−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＨ−から選択され；
Ｒ５は、水素、−ＯＲａおよび−ＮＲａＲｂから選択され、ここでＲａおよびＲｂは、各々、独立して、水素またはＣ１−３アルキルであり；
ｎは、０〜７の整数であり；
ｍは、０〜５の整数であり；そして
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、およびＲ１０の各々は、独立して、水素またはＣ１−６アルキルであるが；
但し、ｍが、０である場合、Ｒ５は、水素である。
【０００６】
本発明はまた、本発明の化合物と薬学的に受容可能なキャリアとを含む薬学的組成物を提供する。本発明は、さらに、本発明の化合物と１つ以上の他の治療剤との組み合わせ、ならびに、本発明の化合物、１つ以上の他の治療剤、および薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物を提供する。
【０００７】
本発明はまた、β２アドレナリン作用性レセプターアゴニスト活性に関連する疾患または状態（例えば、肺疾患（例えば、喘息または慢性閉塞性肺疾患）、早期分娩、神経障害、心障害、または炎症）を有する哺乳動物を処置する方法を提供し、この方法は、その哺乳動物に、本発明の化合物の治療有効量を投与する工程を包含する。特に、本発明は、哺乳動物における、喘息または慢性閉塞性肺疾患を処置する方法を提供し、この方法は、その哺乳動物に、本発明の化合物の治療有効量を投与する工程を包含する。
【０００８】
本発明は、さらに、本発明の化合物と１つ以上の治療剤との組み合わせの治療有効量を投与する工程を包含する処置方法を提供する。
【０００９】
本発明はまた、β２アドレナリン作用性レセプターアゴニスト活性に関連する疾患または状態を有する哺乳動物を処置する方法を提供し、この方法は、哺乳動物に、本発明の薬学的組成物の治療有効量を投与する工程を包含する。
【００１０】
本発明の化合物はまた、研究道具（すなわち、生物学系または生物学的試料を研究するため、または、他の化合物の活性を研究するため）として用いられ得る。したがって、本発明の方法の別の局面において、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体を用いる方法を、生物学系または生物学的試料を研究するための研究道具、またはβ２アドレナリン作用性レセプターアゴニストを発見するための研究道具として使用する方法を提供する。
【００１１】
別の異なる局面において、本発明はまた、本明細書中に記載される合成プロセスおよび中間体を提供し、これらは、本発明の化合物を調製するために有用である。
【００１２】
本発明はまた、医学的治療において使用される本明細書中に記載されるとおりの本発明の化合物、および、β２アドレナリン作用性レセプターアゴニスト活性に関連する疾患または状態（例えば、肺疾患（例えば、喘息または慢性閉塞性肺疾患）、早期分娩、神経障害、心障害、または炎症）を有する哺乳動物を処置するための、処方物または医薬の製造における本発明の化合物の使用を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
（発明の詳細な説明）
本発明はまた、式（Ｉ）の新規のジアミンβ２アドレナリン作用性レセプターアゴニスト、またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体を提供する。以下の置換基および値は、本発明の種々の局面の代表的な実施例を提供することを意図している。これらの代表的な値は、そのような局面をさらに定義することを意図するのであって、他の値を除くことまたは本発明の範囲を限定することを意図しない。
【００１４】
本発明の特定の局面において、Ｒ１は、ハロ、−ＣＨ２ＯＨ、または−ＮＨＣＨＯである。
【００１５】
他の特定の局面において、Ｒ１は、ハロ、−ＣＨ２ＯＨ、または−ＮＨＣＨＯであるか；または、Ｒ１は、−ＣＨ２ＯＨまたは−ＮＨＣＨＯである。
【００１６】
特定の局面において、Ｒ２は、水素である。
【００１７】
特定の局面において、Ｒ３は、ヒドロキシまたはアミノであり；別の特定の局面において、Ｒ３は、ヒドロキシである。
【００１８】
特定の局面において、Ｒ４は、水素またはハロであるか；または、Ｒ４は、水素またはクロロである。
【００１９】
特定の局面において、Ｒ１は、−ＮＨＣＨＯであり、Ｒ３は、ヒドロキシであり、そしてＲ２およびＲ４は、各々、水素である。
【００２０】
別の特定の局面において、Ｒ１およびＲ２は一緒になって、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−または−ＣＨ＝ＣＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−であり、Ｒ３は、ヒドロキシであり、そしてＲ４は、水素である。
【００２１】
別の特定の局面において、Ｒ１は、−ＣＨ２ＯＨであり、Ｒ３は、ヒドロキシであり、そしてＲ２およびＲ４は、各々、水素である。
【００２２】
さらなる別の特定の局面において、Ｒ１およびＲ４は、クロロであり、Ｒ３は、アミノであり、そしてＲ２は、水素である。
【００２３】
さらなる別の特定の局面において、Ｒ１およびＲ２は一緒になって、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｓ−または−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＨ−であり、Ｒ３は、ヒドロキシであり、そしてＲ４は、水素である。
【００２４】
特定の局面において、Ｒ５は、水素または−ＯＲａである。本発明の局面内における代表的なＲ５値としては、水素、ヒドロキシ、メトキシ、およびエトキシが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２５】
別の特定の局面において、Ｒ５は、水素または−ＮＲａＲｂである。本発明の局面内における代表的なＲ５値としては、水素、アミノ、メチルアミノ、ジメチルアミノ、エチルアミノ、およびジエチルアミノが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２６】
別の特定の局面において、Ｒ５は、水素である。
【００２７】
特定の局面において、Ｒ７は、水素である。
【００２８】
別の特定の局面において、Ｒ７は、メチルである。
【００２９】
特定の局面において、Ｒ８は、水素である。
【００３０】
別の特定の局面において、Ｒ８は、メチルである。
【００３１】
特定の局面において、Ｒ９は、水素である。
【００３２】
別の特定の局面において、Ｒ９は、メチルである。
【００３３】
特定の局面において、Ｒ１０は、水素である。
【００３４】
別の特定の局面において、Ｒ１０は、水素である。
【００３５】
特定の局面において、ｎは、２、３、４、５、または６である。
【００３６】
別の特定の局面において、ｎは、４である。
【００３７】
特定の局面において、ｍは、０、１、２、または３である。
【００３８】
別の特定の局面において、ｍは、１である。
【００３９】
一局面において、本発明は、式（ＩＩ）の化合物：
【００４０】
【化８】
2008501705.tif 000003
または、その薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体を提供し、
ここで：
Ｒ１は、−ＣＨ２ＯＨまたは−ＮＨＣＨＯであり、そしてＲ２は、水素であり；あるいは、Ｒ１およびＲ２は一緒になって、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−または−ＣＨ＝ＣＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−であり；
ｎは、２〜６の整数であり；
ｍは、０〜３の整数である。
【００４１】
特定の言及は、以下の化合物：
８−ヒドロキシ−５−［（Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−（６−フェネチルアミノ−ヘキシルアミノ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オン
【００４２】
【化９】
2008501705.tif 000004
に関するものであり得、ここで化学命名法は、ＭＤＬ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，ＧｍｂＨ（Ｆｒａｎｋｆｕｒｔ、ドイツ）によって提供されるとおりの自動命名プログラムＡｕｔｏＮｏｍの命名法に従う。
【００４３】
上記で記載されるように、本発明の化合物は、１つ以上のキラル中心を含む。したがって、本発明は、そうではないと示されない限り、ラセミ混合物、純粋な立体異性体（すなわち、単一の鏡像異性体または単一のジアステレオマー）および立体異性体が富化されたそのような異性体の混合物を含む。特定の立体異性体が示される場合、組成物の全体としての有用性が、少量の他の異性体の存在によって排除されない限り、そうでないと示されない限り、そのような少量の他の異性体が本発明の組成物に存在してよいことが、当業者によって理解される。
【００４４】
とりわけ、本発明の化合物は、式（Ｉ）および（ＩＩ）中のヒドロキシ基が結合するアルキレン炭素において、キラル中心を含む。立体異性体の混合物が、使用される場合、ヒドロキシ基を有するキラル中心において（Ｒ）配置を備える立体異性体の量は、対応する（Ｓ）立体異性体の量よりも多いことが有利である。同じ化合物の立体異性体と比較する場合、この（Ｒ）立体異性体は、（Ｓ）立体異性体よりも好ましい。
【００４５】
（定義）
本発明の化合物、組成物、および方法を説明する場合、以下の用語は、そうでないと示されない限り、以下の意味を有する。
【００４６】
「アルキル」との用語は、直鎖もしくは分枝またはその組み合わせであり得る、一価の飽和炭化水素基を意味する。そうでないと定義されない限り、そのようなアルキル基は、典型的に１〜１０個の炭素原子を含む。代表的なアルキル基としては、例えば、メチル，エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル，ｎ−デシルなどが挙げられる。
【００４７】
「ハロ」との用語は、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードを意味する。
【００４８】
本明細書中で用いられる「処置」との用語は、患者（例えば、哺乳動物（特にヒト））における疾患または医学的状態の処置を意味し、これは以下：
（ａ）疾患または医学的状態が発症するのを予防すること（すなわち、患者の予防的処置）；
（ｂ）疾患または医学的状態を改善すること（すなわち、患者における疾患または医学的状態の排除または後退を引き起こすこと）；
（ｃ）疾患または医学的状態を抑制すること（すなわち、患者における疾患または医学的状態の発展を阻止または遅延すること）；または
（ｄ）患者における疾患または医学的状態の症状を緩和すること
を包含する。
【００４９】
「治療有効量」との用語は、処置を必要とする患者に投与する場合、効果のある処理をするのに十分な量を意味する。
【００５０】
「β２アドレナリン作用性レセプター活性に関連する疾患または状態」との句としては、β２アドレナリン作用性レセプター活性に関連すると、現在認められているか、または将来見出される、疾患状況（ｓｔａｔｅ）および／または疾患状態（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の全てが挙げられる。そのような疾患状態としては、肺疾患（例えば、喘息または慢性閉塞性肺疾患（例えば、慢性気管支炎および気腫））、神経障害、および心障害が挙げられるが、これらに限定されない。β２アドレナリン作用性レセプター活性はまた、早期分娩（米国特許第５，８７２，１２６号）およびいくつかの型の炎症（国際特許出願公開第ＷＯ  ９９／３０７０３号および米国特許第５，２９０，８１５号）に関連すると公知である。
【００５１】
「薬学的に受容可能な塩」との用語は、患者（例えば、哺乳動物）に投与するために受容可能である塩基または酸から調製される塩を意味する。そのような塩は、薬学的に受容可能な無機塩基または有機塩基と、薬学的に受容可能な無機酸または有機酸から誘導され得る。
【００５２】
薬学的に受容可能な酸から誘導される塩としては、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、ショウノウスルホン酸塩、クエン酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩、マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩、ムチン酸塩、硝酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、キシナホ酸塩（１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸）などが挙げられるが、これらに限定されない。フマル酸、臭化水素酸、塩酸、酢酸、硫酸、メタンスルホン酸、キシナホ酸および酒石酸に由来する酸は、特に重要である。
【００５３】
薬学的に受容可能な無機塩基から誘導される塩としては、アルミニウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、銅塩、鉄（ＩＩ）塩、鉄（ＩＩＩ）塩、リチウム塩、マグネシウム塩、マンガン（ＩＩＩ）塩、亜マンガン塩、カリウム塩、ナトリウム塩、亜鉛塩などが挙げられる。特に好ましいのは、アンモニウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩、およびナトリウム塩である。薬学的に受容可能な有機塩基から誘導される塩としては、第一級アミン塩、第二級アミン塩および第三級アミン塩（例えば、置換アミン塩、環状アミン塩、天然に存在するアミン塩など（例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン（ｐｉｐｅｒａｄｉｎｅ）、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン類、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなど））が挙げられる。
【００５４】
「溶媒和物」との用語は、１つ以上の溶質分子により形成される複合体または凝集物（すなわち、本発明の化合物またはその薬学的に受容可能な塩と、１つ以上の溶媒分子）を意味する。そのような溶媒和物は、典型的に、溶質と溶媒に関する実質的に固定されたモル比を有する結晶性固体である。代表的な溶媒としては、例えば、水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、酢酸などが挙げられる。溶媒が水である場合、形成される溶媒和物は、水和物である。
【００５５】
「またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体」との用語は、塩、溶媒和物、および立体異性体の全ての並べ替え（例えば、式（Ｉ）の化合物の立体異性体の薬学的に受容可能な塩の溶媒和物）を含むことを意図すると理解される。
【００５６】
「脱離基」との用語は、置換反応（例えば、求核置換反応）における別の官能基または原子によって置き換えられ得る官能基または原子を意味する。例えば、代表的な脱離基としては、クロロ基、ブロモ基、ヨード基；スルホン酸エステル基（例えば、メシラート、トシラート、ブロシラート、ノシラートなど；およびアシロキシ基（例えば、アセトキシ、トリフルオロアセトキシなど）が挙げられる。
【００５７】
「アミノ保護基」との用語は、アミノの窒素における望ましくない反応を防ぐために適切な保護基を意味する。代表的なアミノ保護基としては、ホルミル；アシル基（例えば、アルカノイル基（例えば、アセチル））；アルコキシカルボニル基（例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ））；アリールメトキシカルボニル基（例えば、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）および９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ））；アリールメチル基（例えば、ベンジル（Ｂｎ）、トリチル（Ｔｒ）、および１，１−ジ−（４’−メトキシフェニル）メチル）；シリル基（例えば、トリメチルシリル（ＴＭＳ）およびｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ））；などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５８】
「ヒドロキシ保護基」との用語は、ヒドロキシ基における望ましくない反応を防ぐために適切な保護基を意味する。代表的なヒドロキシ保護基としては、アルキ基（例えば、メチル、エチル、およびｔｅｒｔ−ブチル）；アシル基（例えば、アルカノイル基（例えばアセチル））；アリールメチル基（例えば、ベンジル（Ｂｎ）、ｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）、９−フルオレニルメチル（Ｆｍ）およびジフェニルメチル（ベンズヒドリル、ＤＰＭ）；シリル基（例えば、トリメチルシリル（ＴＭＳ）およびｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）；などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５９】
（一般合成手順）
本発明の化合物は、容易に入手可能な出発物質から、以下の一般方法および一般手順を用いて調製され得る。本発明の特定の局面は、以下のスキームにおいて示されるが、本発明の全ての局面が、本明細書中に記載される方法を用いてか、当業者に公知の他の方法、試薬および出発物質を使用することによって調製され得ることを、当業者は認識する。典型的または好ましいプロセス条件（すなわち、反応温度、反応時間、反応物のモル比、溶媒、圧力、など）が与えられる場合、他のプロセス条件もまた、そうでないと記載されない限り、用いられ得ることがまた理解される。最適な反応条件は、用いられる特定の反応物または溶媒によって異なり得るが、そのような条件は、当業者によって、通常の最適化手順により決定され得る。
【００６０】
さらに、従来の保護基が、特定の官能基が望ましくない反応を受けることを防ぐために必要であることは、当業者にとって明白である。特定の官能基のための適切な保護基の選択、ならびに保護および脱離保護のための適切な条件の選択は、当該分野において周知である。例えば、多数の保護基、ならびに、それらの導入および除去が、Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＧ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９９および、その中で引用される引用文献に記載される。
【００６１】
一合成方法において、式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物は、スキームＡに示されるように調製される。（以下のスキームに示される置換基および可変部は、そうでないと示されない限り、上で提供された定義を有する）
【００６２】
【化１０】
2008501705.tif 000005
ここで、Ｐ１は、ヒドロキシ保護基を示し、Ｐ２は、ヒドロキシ保護基を示し、そしてＬは、脱離基（例えば、ブロモ）を示す。可変部Ｒ１１は、水素であり得るか、Ｒ１１は、Ｐ３であり得、この場合Ｐ３は、アミノ保護基を示す。
【００６３】
スキームＡにおいて示されるように、式１の化合物は、初めに、ジアミン２と反応し、式３の中間体を提供する。典型的に、この反応は、極性非プロトン性溶媒中において必要に応じて塩基の存在下で加熱して行なわれる。保護基Ｐ１は、典型的に、シリル保護基であり、この基は典型的に、フッ化物試薬（例えば、トリエチルアミントリヒドロフルオリド）または酸を用いて式３の中間体から除去され、式４の中間体を提供する。保護基Ｐ２は、典型的に、ベンジル保護基であり、この基は、式４の中間体からルイス酸を用いるか、炭素担持パラジウム触媒を用いる水素化反応によって除去される。Ｒ１１が、アミノ保護基Ｐ３である場合、この保護基は、ヒドロキシ保護基Ｐ１に対する条件と同様である脱保護条件下において、除去され得るように選択され得る。例えば、Ｐ１が、ベンジルである場合、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）は、Ｐ３として用いられ得、そしてルイス酸（例えば、三塩化ホウ素）または水素化反応による中間体４の処理により、生成物を提供し得る。
【００６４】
本出願に記載される反応において使用される式１の化合物は、当該分野において公知の手順によって容易に調製される。例えば、米国特許第６，６５３，３２３  Ｂ２号および同第６，６７０，３７６  Ｂ１号において記載され、（これら特許文献は本明細書中に参考として援用される）およびそこで引用された引用文献に記載されている。
【００６５】
式２の中間体は、容易に入手可能な出発物質から調製され得る。例えば、中間体２’（Ｒ１１が、アミノ保護基Ｐ３を示す保護基である中間体）を調製する手順は、スキームＢに示される。
【００６６】
【化１１】
2008501705.tif 000006
スキームＢにおいて、Ｐ４は、アミノ保護基（例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）基）を表す。
【００６７】
保護されたジアミン５は、典型的に、還元剤（例えば、水素化シアノほう素ナトリウム）の存在下、アルデヒド６とカップリングされ、式７の中間体を提供する。保護基Ｐ３を、中間体７の内部の窒素原子に加え、中間体８を形成する。保護基Ｐ３は、保護基Ｐ４が、Ｐ３の存在下で選択的に除去され得るように選択される。例えば、Ｃｂｚが、Ｐ３として用いられる場合、中間体７は、典型的に、塩基（例えば、水酸化ナトリウム）の存在下、クロロギ酸ベンジルで処理され、中間体８を形成し、そしてこの中間体から保護基Ｐ４が除去され、例えば、酸性条件下、中間体２’を形成する。
【００６８】
中間体２’’（Ｒ１１が水素である中間体）の調製手順は、スキームＣに示される。
【００６９】
【化１２】
2008501705.tif 000007
スキームＣによると、保護されたアミノで置換されたカルボン酸９は、アミン１０とカップピングされ、アミド中間体１１を提供する。この反応は、カップリング試薬（例えば、１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣ））の存在下で行なわれ、触媒（例えば、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（ＨＯＢＴ））が用いられ得る。中間体１１は、適切な条件下で脱保護され、式１２の中間体を提供し、そしてこの中間体が、例えば、ボラン還元剤または水素化リチウムアルミニウムを用いて還元され、中間体２’’を形成する。
【００７０】
本発明の代表的な化合物またはそれに関する中間体を調製するための、特定の反応条件および他の手順に関するさらなる詳細は、下記の実施例において記載される。
【００７１】
したがって、方法の局面において、本発明は、式（Ｉ）の化合物、またはその塩もしくは立体異性体もしくは保護された誘導体を調製するためのプロセスを提供し、このプロセスは以下：
式（ＩＩＩ）の化合物：
【００７２】
【化１３】
2008501705.tif 000008
を、式（ＩＶ）の化合物：
【００７３】
【化１４】
2008501705.tif 000009
と反応させ、式（Ｖ）の化合物：
【００７４】
【化１５】
2008501705.tif 000010
を提供する工程であって、
ここで式（ＩＩＩ）において：
Ｐ１は、ヒドロキシ保護基であり、Ｌは、脱離基であり、Ｒ６は、式（Ｉ）において定義されたとおりであり、Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、およびＲ４ａの各々は、式（Ｉ）におけるＲ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４と同じであると定義されるか、または、Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、およびＲ４ａの各々は、独立して、−ＯＰ２であるかであり、ここでＰ２は、ヒドロキシ保護基であり；
ここで式（ＩＶ）において：
Ｒ５、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、ｎ、およびｍは、式（Ｉ）のように定義され、そしてＲ１１は、水素またはＰ３であり、ここでＰ３は、アミノ保護基である工程：
上記保護基Ｐ１を除去し、式（ＶＩ）の化合物：
【００７５】
【化１６】
2008501705.tif 000011
を提供する工程；ならびに
Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、またはＲ４ａのいずれかが−ＯＰ２である場合、あるいは、Ｒ１１が、Ｐ３である場合に、存在するならば、上記保護基Ｐ２およびＰ３を除去し、式（Ｉ）の化合物はたはその塩もしくは立体異性体を提供する。
【００７６】
（薬学的組成物）
本発明はまた、本発明の化合物と薬学的に受容可能なキャリアとを含む薬学的組成物を提供する。したがって、この化合物は、好ましくは薬学的に受容可能な塩の形態において、任意の適切な投与形態（例えば、経口投与、非経口投与、または吸入による投与）として処方され得る。
【００７７】
例証として、上記化合物は、従来の薬学的キャリアおよび賦形剤と混合され得、そして、散剤、錠剤、カプセル、エリキシル、懸濁液、シロップ、オブラートなどの剤形において用いられ得る。そのような薬学的組成物としては、約０．０５〜約９０重量％の活性化合物、より一般的には、約０．１〜約３０重量％の活性化合物を含む。上記薬学的組成物は、一般的なキャリアおよび賦形剤（例えば、コーンスターチまたはゼラチン、乳糖、硫酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、ショ糖、微結晶性セルロース、カオリン、マンニトール、リン酸二カルシウム、塩化ナトリウム、およびアルギニン酸を含み得る。本発明の処方物において一般的に用いられる崩壊剤としては、クロスカルメロース、微結晶性セルロース、コーンスターチ、デンプングリコ−ル酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ  ｓｔａｒｃｈ  ｇｌｙｃｏｌａｔｅ）およびアルギニン酸を含む。
【００７８】
液体組成物は、一般的に、適切な液体キヤリア［（例えば、エタノール、グリセリン、ソルビトール、非水系溶媒（例えば、ポリエチレングリコール）油または水］中の上記化合物もしくは薬学的に受容可能な塩の懸濁液または溶液から、必要に応じて、分散剤、可溶化剤（例えば、シクロデキストリン）、保存剤、界面活性剤、湿潤剤、矯味矯臭薬または着色剤を用いて構成される）。あるいは、液体処方物は、再構成可能な粉末から調製され得る。
【００７９】
例えば、活性化合物、懸濁剤、ショ糖、および甘味料は、水で再構成され懸濁液を形成し得る。シロップ剤は、活性成分、ショ糖、および甘味料を含む粉末から調製され得る。
【００８０】
錠剤の剤形における組成物は、固形組成物を調製するために通常用いられる任意の適切な薬学的キヤリアを用いて調製され得る。そのようなキヤリアの例としては、ステアリン酸マグネシウム、デンプン、乳糖、ショ糖、微結晶性セルロースおよび結合剤（例えば、ポリビニルピロリドン）が挙げられる。錠剤はまた、色の付いた薄膜被膜、またはキヤリアの一部に含まれる色を備えて提供され得る。さらに、活性化合物は、親水性または疎水性のマトリックスを含む錠剤として、制御放出の投薬形態において処方され得る。
【００８１】
カプセル剤の剤形における組成物は、通常の被包手順（例えば、硬質ゼラチンカプセル中の活性化合物と賦形剤の導入による）を用いて調製され得る。あるいは、活性化合物の半固形マトリックスおよび高分子量のポリエチレングリコールが、調製され、硬質ゼラチンカプセル中に詰められ得るか；または、ポリエチレングリコール中の活性化合物の溶液もしくは食用に適する油（例えば、液体パラフィンもしくは分留されたヤシ油）中の懸濁液が、調製され、軟質ゼラチンカプセル中に詰められ得る。
【００８２】
含有され得る錠剤の結合剤は、アカシア、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニルピロリドン（ポビドン）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ショ糖、デンプンおよびエチルセルロースである。用いられ得る潤滑剤としては、ステアリン酸マグネシウムまたは他のステアリン酸金属塩、ステアリン酸、シリコーン流体、滑石、ろう、油、およびコロイド状シリカが挙げられる。
【００８３】
矯味矯臭薬（例えば、ペパーミント、ウインターグリーン油、さくらんぼの矯味矯臭薬など）もまた、用いられ得る。さらに、着色料を、投与剤形を外見上においてより魅力的にするため、または生成物を確認することに役立てるために添加することが望まれ得る。
【００８４】
非経口で与えられる場合に、活性である本発明の化合物およびそれらの薬学的に受容可能な塩は、筋肉投与、髄腔内投与、または静脈投与として処方され得る。
【００８５】
筋肉内投与または髄腔内投与のための典型的な組成物としては、油（例えば、落花生油またはゴマ油）中の活性成分の懸濁液または溶液から構成される。静脈内投与または髄腔内投与の典型的な組成物は、滅菌の等張水溶液（例えば、活性成分とブドウ糖もしくは塩化ナトリウム、または、ブドウ糖および塩化ナトリウムの混合物を含む）から構成される。他の例としては、乳酸リンゲル液、乳酸リンゲル液に加えたブドウ糖の液、Ｎｏｒｍｏｓｏｌ−Ｍおよびブドウ糖、Ｉｓｏｌｙｔｅ  Ｅ、アシル化されたリンゲル液などがある。必要に応じて、共溶媒（例えば、ポリエチレングリコール；キレート試薬（例えば、エチレンジアミン四酢酸）；可溶化剤（例えば、シクロデキストリン）；および抗酸化剤（例えば、メタ重亜硫酸ナトリウム）は、処方物において含まれ得る。あるいは、上記溶液は凍結乾燥され得、次いで、投与の直前に適切な溶媒で再構成され得る。
【００８６】
局所投与の状態で活性である本発明の化合物および薬学的に受容可能な塩は、経皮組成物または経皮送達デバイス（パッチ）として処方され得る。そのような組成物としては、例えば、裏装（ｂａｃｋｉｎｇ）、活性化合物レザーバー（ｒｅｓｅｒｖｏｉｒ）、制御膜、ライナーおよび接触性接着剤が挙げられる。そのような経皮性パッチは、制御された量における本発明の化合物で、連続的または非連続的に浸す状態（ｉｎｆｕｓｉｏｎ）を提供し得る。薬学的因子の送達のための送達パッチの構成物および使用は、当該分野において周知である。例えば、米国特許第５，０２３，２５２号を参照のこと。そのようなパッチは、薬学的因子の連続的送達、拍動性送達、またはオンデマンド送達（ｏｎ  ｄｅｍａｎｄ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ）のであり得る。
【００８７】
本発明の化合物を投与するための好ましい一様式は、吸入である。吸入は、因子を直接的に気道に送達するために効果的な様式である。３つの一般的な型の薬学的吸入デバイスがある：噴霧吸入器、乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）、および定量吸入器（ＭＤＩ）。従来の噴霧吸入は、高速の空気流れを生じ、これにより、治療剤は、患者の気道に運ばれるミストとして、噴霧される。この治療剤は、液状剤形（例えば、吸入可能な大きさの微小化粒子の溶液または懸濁液）において処方され、この場合、微粉化は、典型的に、約１０μｍ未満の直径を有する粒子を約９０％以上有するものとして定義される。
【００８８】
従来の噴霧デバイスにおける使用のための典型的な処方物は、約０．０５μｇ／ｍＬ〜約１ｍｇ／ｍＬの間の活性剤の濃度における活性剤の薬学的塩の等張水溶液である。適切な噴霧デバイスは、例えば、ＰＡＲＩ  ＧｍｂＨ（Ｓｔａｒｎｂｅｒｇ、ドイツ）により商業的に提供される。他の噴霧デバイスは、例えば、米国特許第６，１２３，０６８号において開示されている。
【００８９】
ＤＰＩの吸入器は、典型的に、治療剤を、呼気の間、患者の気流に分散され得る自由流動粉末の剤形において投与する。粉末を分散するために外部のエネルギー源を用いる代替的なＤＰＩデバイスもまた、開発されている。自由流動粉末を獲得するために、上記治療剤は、適切な賦形剤（例えば、乳糖またはデンプン）を用いて処方され得る。乾燥粉末剤形は、例えば、乾燥した乳糖粒子を、本発明の化合物（すなわち、活性剤）の適切な形態（代表的に、薬学的に受容可能な塩）の微小化粒子と組み合わせ、そして乾燥混合することにより作製され得る。あるいは、この薬は、賦形剤なしに処方され得る。この処方物を、乾燥粉末分配器（ｄｒｙ  ｐｏｗｄｅｒ  ｄｉｓｐｅｎｓｅｒ）に装填するか、または、乾燥粉末の送達デバイスと用いるための吸入カートリッジもしくはカプセル中に詰め入れられる。
【００９０】
商業的に提供されるＤＰＩ送達デバイスの例としては、Ｄｉｓｋｈａｌｅｒ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ，Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｔｒｉａｎｇｌｅ  Ｐａｒｋ，  ＮＣ）（例えば、米国特許第５，０３５，２３７号を参照のこと）；Ｄｉｓｋｕｓ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）（例えば、米国特許第６，３７８，５１９号を参照のこと）；Ｔｕｒｂｕｈａｌｅｒ（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ，Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＤＥ）（例えば、米国特許第４，５２４，７６９号を参照のこと）；およびＲｏｔａｈａｌｅｒ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）（例えば、米国特許第４，３５３，３６５号を参照のこと）が挙げられる。適切なＤＰＩデバイスのさらなる例は、米国特許第５，４１５，１６２号，同第５，２３９，９９３号、米国特許第５，７１５，８１０号、およびそれら中における引用文献に記載される。
【００９１】
ＭＤＩは、典型的に、圧縮推進剤ガスを用いて、測定された治療剤の量を排出する。ＭＤＩ投与のための処方物としては、液化推進剤ガスにおける、活性成分の溶液または懸濁液が挙げられる。クロロフルオロカーボン（例えば、ＣＣｌ３Ｆ）が、従来、推進剤ガスとして用いられているが、そのようなガスのオゾン層に対する有害な影響に関する懸念に起因して、ヒドロフルオロアルカン類（ＨＦＡ）、（例えば、１，１，１，２−テトラフルオロエタン（ＨＦＡ  １３４ａ）および１，１，１，２，３，３，３，−ヘプタフルオロ−ｎ−プロパン（ＨＦＡ  ２２７））を用いる処方物が、開発されている。ＭＤＩ投与のためのＨＦＡ処方物のさらなる成分としては、共溶媒（例えば、エタノールまたはペンタン）および界面活性剤（例えば、ソルビタントリオレエート、オレイン酸、レシチン、およびグリセリン）（例えば、米国特許第５，２２５，１８３号、ＥＰ  ０７１７９８７  Ａ２およびＷＯ  ９２／２２２８６を参照のこと）が挙げられる。
【００９２】
したがって、ＭＤＩ投与のための適切な処方物としては、約０．００１重量％〜約２重量％の本発明の化合物、約０重量％〜約２０重量％のエタノール、および約０重量％〜約５重量％の界面活性剤含み、そしてその残りはＨＦＡ推進剤ガスである。一アプローチにおいて、この処方物を調製するために、冷却されたか圧縮されたヒドロフルオロアルカンは、本発明の結晶形態、エタノール（存在するならば）および界面活性剤（存在するならば）を含む小瓶に添加される。懸濁液を調製するために、上記化合物は、典型的に塩の形態であり、微小化された粒子として提供される。この処方物は、噴霧キャニスターに装填され、ＭＤＩデバイスの一部分を構成する。特にＨＦＡ推進剤ガスを使用するために開発されたＭＤＩデバイスの例は、米国特許第６，００６，７４５号および同第６，１４３，２２７号において提供される。
【００９３】
代替的な調製において、懸濁液の処方物は、界面活性剤の被覆を、活性化合物の薬学的塩の微小化粒子上にスプレー乾燥することにより調製される（例えば、ＷＯ  ９９／５３９０１およびＷＯ  ００／６１１０８参照のこと）。吸入可能な粒子を調製するプロセス、ならびに、吸入投与に適した処方物およびデバイスに関しては、米国特許第６，２６８，５３３号、第５，９８３，９５６号、第５，８７４，０６３号、および第６，２２１，３９８号、ならびにＷＯ  ９９／５５３１９およびＷＯ  ００／３０６１４を参照のこと。
【００９４】
特定の投与形態に適した、任意の本発明の化合物の投与形態（すなわち、遊離塩基、薬学的塩、または溶媒和物）は、上に記載される薬学的組成物において用いられ得ることが理解される。
【００９５】
活性化合物は、広範な用量範囲にわたって効果的であり、治療有効量において投与されると予想される。しかしながら、実際に投与される化合物の量は、関連する状況（例えば、処置される状態、投与経路の選択、投与される実際の化合物およびその相対活性、個々の患者の年齢、体重、および反応、患者の症状の重篤度などを含むに関する）観点から医師により決定される。
【００９６】
化合物は、定期的な投薬において投与され得る：週に１度、週に複数回、１日１度、または、１日あたり複数回の投薬。この処置レジメンは、広範な時間の期間（例えば、数週もしくは数ヶ月）にわたって投与を必要とし得るか、または、この処置レジメンは、慢性投与を必要とし得る。
【００９７】
吸入投与のための治療剤の適切な用量は、１日あたり約０．０５μｇ〜約１０００μｇ（例えば、１日あたり約０．１μｇ〜約５００μｇ）である。特定の送達デバイスに特徴的な肺に送達される活性剤の割合は、吸入投与のために適切な用量を決定する際に考慮されると、理解される。経口投与のための適切な用量は、１日あたり約０．０５μｇ〜約１００ｍｇの一般的な範囲（例えば、１日あたり約０．５〜約１０００μｇ）である。
【００９８】
他の特性の中で、本発明の化合物は、驚くほどに予想外な作用期間を示す。下記の実施例において説明されるように、本発明の化合物は、気管支保護（ｂｒｏｎｃｈｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ）の動物モデルにおいて、２４時間より長い作用期間を示した。さらに、本発明の化合物は、強力かつ選択的なβ２アドレナリン作用性レセプターのアゴニストである。特に、本発明の化合物は、β１アドレナリン作用性レセプターおよびβ３アドレナリン作用性レセプターと比較した場合、β２アドレナリン作用性レセプターに関して選択的である。
【００９９】
したがって、本発明は、β２アドレナリン作用性レセプター活性に関連する疾患または状態を有する哺乳動物を処置する方法を提供し、ここでこの方法は、哺乳動物に、本発明の化合物の治療有効量を投与する工程、または、本発明の化合物を含む薬学的組成物を投与する工程を包含する。
【０１００】
本発明の活性剤はまた、１つ以上の他の治療剤をさらに含む組み合わせの一部分として用いられ得る。例えば、本発明の薬は、１つ以上の以下の治療剤と共に投与され得、これら治療剤としては、抗炎症薬（例えば、コルチコステロイド類および非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、抗コリン作用薬（特に、ムスカリンレセプターアンタゴニスト類）、他のβ２アドレナリン作用性レセプター、抗感染薬（例えば、抗生物質または抗ウイルス薬）または抗ヒスタミンが挙げられる。したがって、本発明は、さらなる局面において、本発明の化合物と１つ以上の治療剤とを含む組み合わせを提供し、例えば、この治療剤としては、抗炎症薬、抗コリン作用薬、他のβ２アドレナリン作用性レセプターアゴニスト、抗感染薬または抗ヒスタミン薬が挙げられる。
【０１０１】
他の治療剤は、薬学的に受容可能な塩または溶媒和物の形態で用いられ得る。適切な方法で、他の治療剤は、光学的に純粋な立体異性体として用いられ得る。
【０１０２】
適切な抗炎症薬としては、コルチコステロイド類およびＮＳＡＩＤ類が挙げられる。本発明の化合物との組み合わせにおいて用いられ得る適切コルチコステロイドは、経口用および吸引用のコレステロイド類もしくはそれらのプロドラッグ類である。例としては、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、デキサメサゾン、プロピオン酸フルチカゾン、６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオン酸Ｓ−フルオロメチルエステル、６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−１７α−プロピオニルオキシ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオン酸Ｓ−（２−オキソ−テトラヒドロ−フラン−３Ｓ−イル）エステル、ベクロメタゾンエステル（例えば、１７−プロピオン酸エステル、または、１７，２１−ジプロピオン酸エステル）、ブデソニド、フルニソリド、モメタゾンエステル類（例えば、フランカルボン酸エステル）、トリアムシノロンアセニド、ロフレポニド、シクレソニド、プロピオン酸ブチキソコルト、ＲＰＲ−１０６５４１およびＳＴ−１２６が挙げられる。好ましいコルチコステロイドとしては、プロピオン酸フルチカゾン、６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−１７α−［（４−メチル−１，３−チアゾール−５−カルボニル）オキシ］−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオン酸Ｓ−フルオロメチルエステルおよび６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオン酸Ｓ−フルオロメチルエステル、より好ましくは、６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオン酸Ｓ−フルオロメチルエステルが挙げられる。
【０１０３】
適切なＮＳＡＩＤとしては、クロモグリク酸ナトリウム；ネドクロミルナトリウム；ホスホジエステルラーゼ（ＰＤＥ）インヒビター（例えば、テオフィリン、ＰＤＥ４インヒビターまたは混合ＰＤＥ３／ＰＤＥ４インヒビター）；ロイコトリエンアンタゴニスト（例えば、モンテルロイカスト（ｍｏｎｔｅｌｅｕｋａｓｔ））；ロイコトリエン合成のインヒビター；ｉＮＯＳインヒビター；プロテアーゼインヒビター（例えば、トリプターゼインヒビターおよびエラスターゼインヒビター）；β−２インテグリンアンタゴニストおよびアデノシンレセプターアゴニストまたはアンタゴニスト（例えば、アデノシン２ａアゴニスト）；サイトカインアンタゴニスト（例えば、ケモカインアンタゴニスト（例えば、インターロイキン抗体（αＩＬ抗体）、具体的には、αＩＬ−４療法、αＩＬ−１３療法、またはそれらの組み合わせ；またはサイトカイン合成のインヒビターが挙げられる。適切な他のβ２アドレナリン作用性レセプターアゴニストとしては、サルメテロール（例えば、キシナホ酸塩）、サルブタモール（例えば、硫酸塩または遊離塩基）、ホルモテロール（例えば、フマル酸塩）、フェノテロール（例えば、フマル酸塩）またはテルブタリン、およびそれらの塩が挙げられる。
【０１０４】
ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）インヒビターまたは混合ＰＤＥ３／ＰＤＥ４インヒビターとの組み合わせにおける本発明の活性剤の使用はまた、重要である。代表的なホスホジエステラーゼ−４（ＰＤＥ４）インヒビターまたは混合ＰＤＥ３／ＰＤＥ４インヒビターとしては、シス４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）シクロへキサン−１−カルボン酸、２−カルボメトキシ−４−シアノ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシフェニル）シクロへキサン−１−オン；シス−［４−シアノ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシフェニル）シクロヘキサン−１−オール］；シス−４−シアノ−４−［３−（シクロペンチルオキシ）−４−メトキシフェニル］シクロヘキサン−１−カルボン酸など、またはそれらの薬学的に受容可能な塩が挙げられるが、これらに限定されない。他の代表的なＰＤＥ４または混合のＰＤＥ４／ＰＤＥ３インヒビターとしては、ＡＷＤ−１２−２８１（ｅｌｂｉｏｎ）；ＮＣＳ−６１３（ＩＮＳＥＲＭ）；Ｄ−４４１８（ＣｈｉｒｏｓｃｉｅｎｃｅおよびＳｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ）；ＣＩ−１０１８またはＰＤ−１６８７８７（Ｐｆｉｚｅｒ）；Ｗ０９９／１６７６６で開示されたベンゾジオキソール化合物（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ）；Ｋ−３４（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ）；Ｖ−１１２９４Ａ（Ｎａｐｐ）；ロフルミラスト（ｒｏｆｌｕｍｉｌａｓｔ）（Ｂｙｋ−Ｇｕｌｄｅｎ）；ＷＯ９９／４７５０５で開示されたフタラジノン化合物（Ｂｙｋ−Ｇｕｌｄｅｎ）；プマヘントリン（Ｂｙｋ−Ｇｕｌｄｅｎ，現在Ａｌｔａｎａ）；アロフィリン（Ａｌｍｉｒａｌｌ−Ｐｒｏｄｅｓｆａｒｍａ）；ＶＭ５５４／ＵＭ５６５（Ｖｅｒｎａｌｉｓ）；Ｔ−４４０（Ｔａｎａｂｅ  Ｓｅｉｙａｋｕ）；およびＴ２５８５（Ｔａｎａｂｅ  Ｓｅｉｙａｋｕ）が挙げられる。
【０１０５】
適切な抗コリン作用薬は、ムスカリンレセプターにおいてアンタゴニストとして作用する化合物であり、特に、Ｍ１レセプター、Ｍ２レセプターまたはＭ３レセプターのアンタゴニストであるそれらの化合物、または、その組み合わせの化合物である。例示的な化合物としては、ベラドンナ植物のアルカロイド類（例えば、アトロピン、スコポラミン、ホマトロピン、ヒオスシアミンの様なものによって示されような）が挙げられ；これらの化合物は、第三級アミンであるが、通常、塩、として投与される。それらの薬物は、特に、塩の形態は、多数の販売元から容易に入手し得るか、または以下の化合物に関する文献のデータから作製もしくは調製し得る。すなわち、：
アトロピン−ＣＡＳ−５１−５５−８またはＣＡＳ−５１−４８−１（無水形態）、硫酸アトロピン−ＣＡＳ−５９０８−９９−６；アトロピンオキシド−ＣＡＳ−４４３８−２２−６またはそのＨＣｌ塩−ＣＡＳ−４５７４−６０−１および硝酸メチルアトロピン−ＣＡＳ−５２−８８−０。
【０１０６】
ホマトロピン−ＣＡＳ−８７−００−３、臭化水素酸塩−ＣＡＳ−５１−５６−９、臭化メチル塩−ＣＡＳ−８０−４９−９。
【０１０７】
ヒヨスチアミン（ｄ，ｌ）−ＣＡＳ−１０１−３１−５、臭化水素酸塩−ＣＡＳ−３０６−０３−６および硫酸塩−ＣＡＳ−６８３５−１６−１。
【０１０８】
スコポラミン−ＣＡＳ−５１−３４−３、臭化水素酸塩−ＣＡＳ−６５３３−６８−２、臭化メチル塩−ＣＡＳ−１５５−４１−９。
【０１０９】
好ましい抗コリン作用薬としては、イプラトロピウム（例えば、臭化物）（Ａｔｒｏｖｅｎｔとの名前で市販される）オキシトロピウム（ｏｘｉｔｒｏｐｉｕｍ）（例えば、臭化物）およびチオトロピウム（例えば、臭化物）（ＣＡＳ−１３９４０４−４８−１）が挙げられる。また、重要な物は、以下である：メタンテリン（ＣＡＳ−５３−４６−３）、臭化プロパンテリン（ＣＡＳ−５０−３４−９）、臭化アニソトロピンメチルまたはＶａｌｐｉｎ  ５０（ＣＡＳ−８０−５０−２）、臭化クリデニウム（ｃｌｉｄｉｎｉｕｍ）（Ｑｕａｒｚａｎ，ＣＡＳ−３４８５−６２−９）、コピロラート（ｃｏｐｙｒｒｏｌａｔｅ）（Ｒｏｂｉｎｕｌ）、ヨウ化イソプロパミド（ＣＡＳ−７１−８１−８）、臭化メペンゾレート（米国特許第２，９１８，４０８号）、塩化トリジヘキセチル（Ｐａｔｈｉｌｏｎｅ，  ＣＡＳ−４３１０−３５−４）およびメチル硫酸ヘキソシクリウム（Ｔｒａｌ，ＣＡＳ−１１５−６３−９）。また、以下を参照のこと：塩酸シクロペントレート（ＣＡＳ−５８７０−２９−１）、トロピカミド（ＣＡＳ−１５０８−７５−４）、塩酸トリヘキシフェニジル（ＣＡＳ−１４４−１１−６）、ピレンゼピン（ＣＡＳ−２９８６８−９７−１）、テレンゼピン（ｔｅｌｅｎｚｅｐｉｎｅ）（ＣＡＳ−８０８８０−９０−９）、ＡＦ−ＤＸ  １１６またはメトクトルアミンおよびＷＯ０１／０４１１８中に開示される化合物（この特許文献の開示は、本明細書中に参考として援用される）。
適切な抗ヒスタミン類（また、Ｈ１−セプターアンタゴニストとも称される）としては、Ｈ１−レセプターを阻害し、ヒトへの使用のために安全である既知の多数のアンタゴニストのうち１つ以上が挙げられる。全ては、ヒスタミンとＨ１−レセプターとの相互作用に関する可逆的な競合インヒビターである。これらのインヒビターの大多数、概して、第一世代のアンタゴニストは、それらのコア構造に基づいて、エタノールアミン類、エチレンジアミン類、およびアルカリアミン類として特徴付けられる。さらに、他の第一世代の抗ヒスタミン類としては、ピペリジンおよびフェノチアジン類に基づき特徴付けられ得る抗ヒスタミン類が挙げられる。第二世代のアンタゴニスト類は、非鎮静であり、コアのエチレン基（アルキルアミン類）を保持するか、または、ピペラジン（ｐｉｐｅｒｉｚｉｎｅ）もしくはピペリジンの第三級アミン基を模倣するという点で、類似の構造活性相関を有する。例示的なアンタゴニスト類としては、以下が挙げられる：
エタノールアミン類：マレイン酸カルビノキサミン、フマル酸クレマスチン、塩酸ジフェニルヒドラアミン、およびジメンヒドリナート。
【０１１０】
エチレンジアミン類：マレイン酸ピリラミン（ｐｙｒｉｌａｍｉｎｅ  ａｍｌｅａｔｅ）、トリペレンアミンＨＣｌ、およびクエン酸トリペレンアミン。
【０１１１】
アルキルアミン類：クロルペニラミンおよびその塩（例えば、マレイン酸塩、およびアクリバスチン）
ピペラジン類：ヒドロキシジンＨＣｌ、ヒドロキシイジンパモエート（ｐａｍｏａｔｅ）、シクリジンＨＣｌ、乳酸シクリジン、メクリジンＨＣｌ、およびセチリジンＨＣｌ。
ピペリジン類：アステミゾール、レボカバスチンＨＣｌ、ロラタジンまたはそのデスカルボエトキシアナログ、塩酸テルフェナジン、および塩酸フェキソフェナンジン、または別の薬学的に受容可能な塩。
【０１１２】
塩酸アゼラスチンは、本発明の化合物と共に組み合わせて用いられ得るさらなる別のＨ１レセプターアンタゴニストである。
【０１１３】
好ましい抗ヒスタミン類としては、メタピリレンおよびロラタジンが挙げられる。
【０１１４】
したがって、さらなる局面において、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体と、コルチコステロイドとの組み合わせを提供する。特に、本発明は、上記コルチコステロイドが、プロピオン酸フルチカゾンであるか、または、このコルチコレステロイドが、６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオン酸Ｓ−フルオロメチルエステルまたは６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−  メチル−３−オキソ−１７α−プロピオニルオキシ−アンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオン酸Ｓ−（２−オキソ−テトラヒドロ−フラン−３Ｓ−イル）エステルである組み合わせを提供する。
【０１１５】
したがって、さらなる局面において、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体と、ＰＤＥ４インヒビターとを含む組み合わせを提供する。
【０１１６】
したがって、さらなる局面において、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体と、抗コリン作用薬とを含む組み合わせを含む提供する。
【０１１７】
したがって、さらなる局面において、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体と、抗ヒスタミンとを含む組み合わせを提供する。
【０１１８】
したがって、さらなる局面において、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体を、ＰＤＥ４インヒビターおよびコルチコステロイドと共に含む組み合わせを提供する。
【０１１９】
したがって、さらなる局面において、本発明は、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体を、抗コリン作用薬およびコルチコステロイドと共に含む組み合わせを提供する。
上記の組み合わせにおいて用いられるように、「式（Ｉ）の化合物」との用語は、式（ＩＩ）の化合物およびその好ましい基、ならびに個々に開示される任意の化合物または任意の化合物類を含む。
【０１２０】
したがって、本発明は、さらに、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体と、上記で開示されるような、１つ以上の他の治療剤とを含む薬学的組成物を提供する。
【０１２１】
そのような組み合わせの本発明の化合物は、薬学的処方物を、別個または組み合わされた状態で、連続してか同時かのいずれか一方で投与され得る。公知の治療剤の適切な投与形態は、当業者により容易に理解される。したがって、本発明の処置方法は、そのような組み合わせの個々の化合物を、別個または組み合わされた薬学的処方物の状態で、連続してか同時かのいずれか一方で投与する工程を包含する。
【０１２２】
したがって、さらなる局面によると、本発明は、β２アドレナリン作用性レセプター活性に関連する疾患または状態を有する哺乳動物を処置する方法を提供し、この方法は、哺乳動物に、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体および１つ以上の治療剤、ならびに、１つ以上の他の治療剤の治療受容可能量（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｌｌｙ−ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ  ａｍｏｕｎｔ）を投与する工程を包含する。
【０１２３】
本発明の化合物は、β２アドレナリン作用性レセプターアゴニストであるので、そのような化合物としては、また、β２アドレナリン作用性レセプターを有する生物学系または生物学的試料を調査または研究するためのまたは、新規β２アドレナリン作用性レセプターアゴニストを見出すための研究道具として有用である。さらに、本発明の化合物は、他のβアドレナリン作用性サブタイプのレセプターに関する結合活性および機能活性と比較した場合、β２アドレナリン作用性レセプターに対する選択性を示す。したがって、そのような化合物はまた、生物学系または生物学的試料において、β２アドレナリン作用性レセプターの選択的作用性（ａｇｏｎｉｓｍ）の影響を研究するために有用である。β２アドレナリン作用性レセプターを有する、任意の適切な生物学系または生物学的試料は、インビボまたはインビトロのいずれか一方において行われ得るそのような研究において、使用され得る。
【０１２４】
そのような研究のために適切である代表的な生物学系または生物学的試料は、細胞、細胞抽出物、原形質膜、組織試料、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、モルモット、ウサギ、イヌ、ブタなど）などが挙げられるが、これらに限定されない。β２アドレナリン作用性レセプターを作用する影響は、従来の手順およびデバイス（例えば、放射性リガンド結合アッセイおよび機能性アッセイ（例えば、下に記載される細胞内の環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）におけるリガンド媒介性変化）または類似の種類のアッセイ）を用いて決定される。本発明の化合物のβ２アドレナリン作用性レセプターの作用量は、典型的に、約１ナノモーラー〜約１０００ナノモーラーの範囲である。本発明の化合物が、新規のβ２アドレナリン作用性レセプターアゴニストを見つけるための研究道具として用いられる場合、本発明は、また、別個の実施形態として、目的の試験化合物を同定するための、比較データの生成（適切なアッセイを使用する）と試験データの解析との両方を含む。
【０１２５】
以下の非限定的な実施例は、本発明の代表的な薬学的組成物を示す。本発明の活性化合物の処方のためのさらなる適切なキャリアは、また、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ，２０００中に見出され得る。
【実施例】
【０１２６】
（処方実施例Ａ）
本実施例は、本発明の化合物の経口投与のための代表的な薬学的組成物の調製を示す。
【０１２７】
【化１７】
2008501705.tif 000012
上の成分を、混合し、硬質のゼラチンカプセル中に導入する。
【０１２８】
（処方実施例Ｂ）
本実施例は、本発明の化合物の経口投与のための別の代表的な薬学的組成物の調製を示す。
【０１２９】
【化１８】
2008501705.tif 000013
上の成分を、充分に混合し、1つに収められた錠剤に圧縮する。
【０１３０】
（処方実施例Ｃ）
本実施例は、本発明の化合物の経口投与のための代表的な薬学的組成物の調製を示す。
【０１３１】
経口懸濁液を、以下の組成を有して調製する。
【０１３２】
【化１９】
2008501705.tif 000014
（処方実施例Ｄ）
本実施例は、本発明の化合物を含む代表的な薬学的組成物の調製を示す。
【０１３３】
ｐＨ  ４に緩衝された注射可能な調製を、以下の組成を有して調製する。
【０１３４】
【化２０】
2008501705.tif 000015
（処方実施例Ｅ）
本実施例は、本発明の化合物の注射のための代表的な薬学的組成物の調製を示す。
【０１３５】
再構成した溶液は、２０ｍＬの滅菌水を、１ｍｇの本発明の化合物に添加することによって調製される。次いで、使用の前に、この溶液を、活性化合物と適合性である２００ｍＬの静脈注射流体で希釈する。そのような流体を、５％  ブドウ糖溶液、０．９％  塩化ナトリウムまたは５％  ブドウ糖および０．９％  塩化ナトリウムから選択する。他の実施例は、乳酸リンゲル注射液、乳酸リンゲル注射液＋５％  ブドウ糖注射液、Ｎｏｒｍｏｓｏｌ−Ｍおよび５％  ブドウ糖、Ｉｓｏｌｙｔｅ  Ｅ、ならびにアシル化リンゲル注射液である。
【０１３６】
（処方実施例Ｆ）
本実施例は、本発明の化合物の局所適用のための代表的な薬学的組成物の調製を示す。      
【０１３７】
【化２１】
2008501705.tif 000016
上記成分の全てを、水を除き、合わせて、そして攪拌しながら６０℃まで加熱する。次いで、６０℃の充分な量の水を、激しく攪拌しながら加えて、上記成分を乳状にし、次いで水を、１００ｇにするに適切な量だけ添加する。
【０１３８】
（処方実施例Ｇ）
本実施例は、本発明の化合物を含む代表的な薬学的組成物の調製を示す。
【０１３９】
噴霧器における使用のための水性噴霧処方物を、クエン酸で酸性にした０．９％  塩化ナトリウム中に（活性化合物の薬学的塩  ０．１ｍｇ）を溶解させることにより調製する。この混合物を、攪拌し、そして活性塩が溶解するまで超音波粉砕にかける。この溶液のｐＨを、ゆっくりとＮａＯＨを添加することにより、３〜８の範囲の値に調製する。
【０１４０】
（処方実施例Ｈ）
本実施例は、吸入カートリッジでの使用のための本発明の化合物を含む乾燥粉末処方物の調製を示す。
【０１４１】
ゼラチン吸入カートリッジを、以下の成分を有する薬学的組成物で満たす。
【０１４２】
【化２２】
2008501705.tif 000017
活性化合物の薬学的塩を、乳糖の混合の前に微小化する。カートリッジの含有物を、粉末吸入器を用いて投与する。
【０１４３】
（処方実施例Ｉ）
本実施例は、乾燥粉末吸入デバイスに使用する本発明の化合物を含む乾燥粉末処方物の調製を示す。
【０１４４】
薬学的組成物を、乳糖に対する微小化薬学的塩：乳糖＝１：２００のバルク処方比を有し調製する。この組成物を、用量あたり約１０μｇ〜約１００μｇの間の活性剤成分を送達可能な乾燥粉末吸入デバイスに詰め込む。
【０１４５】
（処方実施例Ｊ）
実施例は、定量吸入器に使用する本発明の化合物を含む処方物の調製を示す。
【０１４６】
５％  活性化合物の薬学的塩、０．５％  レシチン、および０．５％  トレハロースを含む懸濁液を、１００ｍＬの脱ミネラル化された水に溶解させた０．５ｇのトレハロースおよび０．５ｇのレシチンから形成されるコロイド状溶液中に１０μｍ未満の平均サイズの微小化粒子として、５ｇの活性化合物を分散することにより調製する。この懸濁液を、スプレー乾燥し、そして得られた物質を、１．５μｍ未満の平均直径を有する粒子に微小化する。これら粒子を、圧縮された１，１，１，２−テトラフルオロエタンを用いてキャニスターに詰める。
【０１４７】
（処方実施例Ｋ）
本実施例は、定量吸入器の使用のための本発明の化合物を含む処方物の調製を示す。
【０１４８】
５％  活性化合物の薬学的塩および０．１％  レシチンを含む懸濁液を、平均１０μｍ未満の平均サイズの微小化粒子として、１０ｇの活性化合物を、２００ｍＬの脱ミネラル水中に溶解させた０．２ｇのレシチンから形成される溶液中に分散させることにより調製する。この懸濁液を、スプレー乾燥し、そして得られた物質を、１．５μｍ未満の平均直径を有する粒子に微小化する。これらの粒子を、圧縮された１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロ−ｎ−プロパンとキャニスターに詰め込む。
【０１４９】
（処方実施例Ｌ）
本実施例は、吸入カートリッジにおける使用のための、本発明の化合物およびコルチコルステロイドを含む乾燥粉末処方物の調製を示す。
【０１５０】
ゼラチン吸入カートリッジを、以下の成分を含む薬学的組成物で充填する。
【０１５１】
【化２３】
2008501705.tif 000018
活性化合物の薬学的塩およびコルチコレステロイドは、乳糖を混合する前に微小化する。カートリッジのこの含有物を、粉末吸入器を用い投与する。
【０１５２】
（生物学的アッセイ）
本発明の化合物およびそれらの薬学的に受容可能な塩は、生物学的活性を示し、かつ、医学的処置のために有用である。β２アドレナリン作用性レセプターに結合する化合物の性能、その選択性、アゴニスト効力、および固有活性は、下の試験Ａ〜Ｂを用いて実証され得るか、または、当該分野において公知の他の試験を用いて実証される。
【０１５３】
（略語）
％Ｅｆｆ  ％効力
ＡＴＣＣ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  
ＢＳＡ  ウシ血清アルブミン
ｃＡＭＰ  アデノシン３’：５’−環状アデノシン一リン酸
ＤＭＥＭ  ダルベッコ変性イーグル培地
ＤＭＳＯ  ジメチルスルホキシド
ＥＤＴＡ  エチレンジアミン四酢酸
Ｅｍａｘ  最大効力
ＦＢＳ  ウシ胎仔血清
Ｇｌｙ  グリシン
ＨＥＫ−２９３  ヒト胚性腎臓細胞−２９３
ＰＢＳ  リン酸緩衝生理食塩水
ｒｐｍ  １分間あたりの回転数
Ｔｒｉｓ  トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン。
【０１５４】
（ヒトβ１アドレナリン作用性レセプターまたはヒトβ２アドレナリン作用性レセプターを発現する細胞からの膜の調製）
クローン化β１アドレナリン作用性レセプターまたはクローン化β２アドレナリン作用性レセプターを安定に発現するＨＥＫ−２９３由来の細胞株を、それぞれ、１０％の透析したＦＢＳを有するＤＭＥＭにおいて、５００μｇ／ｍＬ  Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎの存在下、ほぼコンフルーエンシー（ｃｏｎｆｌｕｅｎｃｙ）まで増殖させた。これら細胞の単一層を、Ｖｅｒｓｅｎｅ  １：５，０００（ＰＢＳ中０．２ｇ／Ｌ  ＥＤＴＡ）ともに細胞スクレーパー（ｓｃｒａｐｅｒ）を用い取り上げた。細胞を、１，０００ｒｐｍで遠心分離によりペレットにし、そして細胞ペレットを、−８０℃で冷凍貯蔵するか、膜をすぐに調製するかのいずれかを行なった。調製のために、細胞ペレットを、溶解緩衝液（１０ｍＭ  トリス／ＨＣＬ  ｐＨ７．４、４℃での、５０ｍＬ緩衝液あたり１錠の「Ｃｏｍｐｌｅｔｅ  Ｐｒｏｔｅａｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  Ｃｏｃｋｔａｉｌ  Ｔａｂｌｅｔｓ  ｗｉｔｈ  ２ｍＭ  ＥＤＴＡ」（Ｒｏｃｈｅカタログ番号１６９７４９８、Ｒｏｃｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ））中に再懸濁させ、そしてきつくはめ込んだＤｏｕｎｃｅガラスホモジナイザー（２０ストローク）を用いて氷上でホモジナイズした。ホモジネ−トを、２０，０００×ｇで遠心分離し、ペレットを、上記の再懸濁および遠心分離により、溶解緩衝溶液で１度洗浄した。最終ペレットを、膜緩衝溶液（２５℃の７５ｍＭ  トリス／ＨＣｌ  ｐＨ７．４、１２．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＥＤＴＡ）中に再懸濁させた。膜懸濁液のタンパク質濃度を、Ｂｒａｄｆｏｒｄの方法（Ｂｒａｄｆｏｒｄ  ＭＭ．，Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｅｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９７６，７２，２４８−５４）により決定した。膜を、−８０℃においてアリコートで凍結貯蔵した。
【０１５５】
（試験Ａ）
（ヒトβ１アドレナリン作用性レセプターおよびヒトβ２アドレナリン作用性レセプターに関する放射性リガンド結合アッセイ）
結合アッセイを、アッセイ緩衝溶液（２５℃で７５ｍＭ  トリス／ＨＣｌ  ｐＨ７．４，１２．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２，１ｍＭ  ＥＤＴＡ，０．２％  ＢＳＡ）中の、ヒトβ２アドレナリン作用性レセプターを含む膜に関する５μｇ膜タンパク質を有するか、またはヒトβ１アドレナリン作用性レセプターを含む膜に関する２．５μｇ膜タンパク質を有する１００μＬの全アッセイ体積に関して、９６マイクロウェルタイタープレートで実施した。放射性リガンドのＫｄ値の決定のための飽和結合研究を、［３Ｈ］ジヒドロアルプレノロール（ＮＥＴ−７２０，１００Ｃｉ／ｍｍｏｌ，ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）を用い、０．０１ｎＭ〜２００ｎＭの範囲の１０個の異なる濃度で行なった。化合物のｐＫｉ値を決定するための置換アッセイは、１ｎＭの［３Ｈ］ジヒドロアルプレノール中で、４０ｐＭ〜１０μＭの範囲の１０個の異なる濃度の化合物で行なった。化合物を、溶解緩衝液（５０％  ＤＭＳＯを含む２５ｍＭ  Ｇｌｙ−ＨＣＩ  ｐＨ３．０）中１０ｍＭの濃度で溶解させ、次いで、５０ｍＭ  Ｇｌｙ−ＨＣｌ  ｐＨ３．０中１ｍＭまで希釈し、そしてそこから系列的にアッセイ緩衝液中に希釈した。非特異な結合は、１０μＭ  非標識アルプレノールの存在下において決定した。アッセイを、９０分間、室温でインキュベートし、結合反応を、０．３％  ポリエチレンイミン中に予め浸したＧＦ／Ｂガラスファイバーフィルタープレート（Ｐａｃｋａｒｄ  ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ  Ｃｏ．，Ｍｅｒｉｄｅｎ，ＣＴ）を通す高速濾過により終らせた。フィルタープレートを、濾過緩衝液（４℃での７５ｍＭ  トリス／ＨＣｌ  ｐＨ７．４，１２．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２，１ｍＭ  ＥＤＴＡ）で３度洗浄し、非結合の放射性活性物を除去した。プレートを、乾燥し、５０μＬ  Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ−２０液体シンチレーション流体（Ｐａｃｋａｒｄ  ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ  Ｃｏ．，Ｍｅｒｉｄｅｎ，ＣＴ）を添加し、そしてプレートを、Ｐａｃｋａｒｄ  Ｔｏｐｃｏｕｎｔ液体シンチレーションカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ  ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ  Ｃｏ．，Ｍｅｒｉｄｅｎ，ＣＴ）を用い計数した。結合データを、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  ｐａｃｋａｇｅ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用し、一部位競合（ｏｎｅ−ｓｉｔｅ  ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎ）に関する３パラメーターモデルを用い非回帰分析により分析した。曲線の最小値を、１０μＭアルプレノロール存在下において測定されるような、非特異性結合に関する値に固定した。化合物に関するＫｉ値は、実測ＩＣ５０値および放射性リガンドのＫｄ値から、Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式（Ｃｈｅｎｇ  Ｙ，ａｎｄ  Ｐｒｕｓｏｆｆ  ＷＨ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１９７３，２２，２３，３０９９−１０８）を用い計算した。レセプターサブタイプ活性を、Ｋｉ（β１）／Ｋｉ（β２）の比を用い算出した。
【０１５６】
結合結果は、Ｋｉ値の負の１０の対数、ｐＫｉとして表した。このアッセイにおいて高いｐＫｉ値を有する化合物は、β２アドレナリン作用性レセプターに関する高い結合親和力を有する。
【０１５７】
（試験Ｂ）
（ヒトβ１アドレノセプター、ヒトβ２アドレノセプター、およびヒトβ３アドレノセプターを、それぞれに、異種発現する細胞株を用いる全細胞ｃＡＭＰフラッシュプレートアッセイ）
クローン化ヒトβ１アドレナリン作用性レセプター（クローンＨ３４．１）を安定に発現するＨＥＫ−２９３細胞株を、約７０％〜９０％のコンフルエンシーまで、１０％  ＦＢＳおよび５００μｇ／ｍＬ  Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎを添加したＤＭＥＭからなる培地中で成長させた。クローン化ヒトβ２−アドレノセプター（クローンＨ２４．１４）を安定に発現するＨＥＫ−２９３細胞株を、同じ培地中で、完全なコンフルエンシーまで成長させた。クローン化ヒトβ３−アドレノセプターを安定に発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞株を、５継代毎に加えた１０％  ＦＢＳおよび８００μｇ／ｍＬ  Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎを補充したＨａｍ’ｓ  Ｆ−１２培地において、約７０％〜９０％  コンフルエンシーまで成長させた。アッセイの前日に、培養物を、抗生物質なしの同じ成長培地に交換した。
【０１５８】
ｃＡＭＰアッセイは、１２５Ｉ−ｃＡＭＰを有するＦｌａｓｈｐｌａｔｅ  Ａｄｅｎｙｌｙｌ  Ｃｙｃｌａｓｅ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍ（ＮＥＮ  ＳＭＰ００４，ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）を用い、製造者の指示に従い放射免疫アッセイフォーマットにおいて行なった。
【０１５９】
アッセイの日に、細胞を、ＰＢＳで一度リンスし、Ｖｅｒｓｅｎｅ  １：５，０００（ＰＢＳ中０．２ｇ／Ｌ  ＥＤＴＡ）から取り上げ、そして計数した。細胞を、１，０００ｒｐｍの遠心分離によりペレット化し、そして、予め３７℃まで温めた刺激緩衝溶液中に再懸濁させた。β１アドレナリン作用性レセプターを発現している細胞に関し、１０ｎＭ  ＩＣＩ  １１８，５５１を、刺激緩衝溶液に添加し、そして細胞を、３７℃で１０分間インキュベートした。細胞は、β１−アドレノセプター発現細胞、β２−アドレノセプター発現細胞、およびβ３−アドレノセプター発現細胞に対して、それぞれ、３０，０００、４０，０００および７０，０００細胞／ウェルの最終濃度で用いた。化合物を、ＤＭＳＯ中１０ｍＭの濃度まで溶解させ、次いで、５０ｍＭ  Ｇｌｙ−ＨＣｌ  ｐＨ３．０中１ｍＭに希釈し、そしてそこから、連続的にアッセイ緩衝液（２５℃での７５ｍＭトリス／ＨＣｌ  ｐＨ７．４，１２．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＥＤＴＡ，０．２％  ＢＳＡ）中に溶解させた。化合物を、アッセイにおいて１０μＭ〜９．５ｐＭの範囲の異なる１１の濃度で試験した。反応物を、３７℃で１０分間インキュベートし、そして１００μＬの氷冷測定緩衝液の添加により停止した。プレートを、密封し、４℃で一晩中インキュベートし、そして翌朝ｔｏｐｃｏｕｎｔ  ｓｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎ  ｃｏｕｎｔｅｒ（Ｐａｃｋａｒｄ  ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ  Ｃｏ．，Ｍｅｒｉｄｅｎ，ＣＴ）を用い計数した。反応に関し１ｍＬあたりに生成したｃＡＭＰの量を、製造者の使用マニュアル中に記載されるような、試料に対し観測されたおよび標準ｃＡＭＰに対し観測された計数に基づき算出した。データは、Ｓ字状（ｓｉｇｍｏｉｄａｌ）の用量応答（Ｈｉｌｌスロープ＝１）に関する３パラメーターモデルを用い、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  ｐａｃｋａｇｅ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）で非線形回帰分析により分析した。アゴニスト効力を、ｐＥＣ５０値として示した。機能性β２／β１選択性を、ＥＣ５０（β１）／ＥＣ５０（β２）の比として定義し、そして同様に機能性β２／β３選択性を、ＥＣ５０（β３）／ＥＣ５０（β２）の比として定義した。
【０１６０】
（試験Ｃ）
（ヒトβ２アドレナリン作用性レセプターを内因性発現する肺上皮細胞株に関する全細胞ｃＡＭＰフラッシュプレートアッセイ）
β２アドレナリン作用性レセプターの内因的レベルを発現する細胞株において肺上皮細胞株を有するアゴニストの効力および有効性（固有活性）の測定のために、ヒト肺上皮細胞株（ＢＥＡＳ−２Ｂ）を用いた（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−９６０９，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）（Ｊａｎｕａｒｙ  Ｂ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１９９８，１２３，４，７０１−１１）。細胞を、７５〜９０％  コンフルエンシーまで、完全無血清培地（エピネフリンおよびレチン酸を含むＬＨＣ−９培地，カタログ番号１８１−５００，Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｃａｍａｒｉｌｌｏ，ＣＡ）において増殖させた。アッセイの前日に、培地を、ＬＨＣ−８（エピネフリンなしおよびレチン酸なし，カタログ番号１４１−５００，Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｃａｍａｒｉｌｌｏ，ＣＡ）に切り換えた。
【０１６１】
ｃＡＭＰアッセイを、製造者の指示に従い、１２５Ｉ−ｃＡＭＰ（ＮＥＮ  ＳＭＰ００４，ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）を用いるＦｌａｓｈｐｌａｔｅ  Ａｄｅｎｙｌｙｌ  Ｃｙｃｌａｓｅ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍを使用し、放射免疫アッセイ形式で行なった。
【０１６２】
アッセイの日、細胞を、ＰＢＳでリンスし、ＰＢＳ中５ｍＭ  ＥＤＴＡともに剥すことにより取り上げ、計数した。細胞を、１，０００ｒｐｍで遠心分離することによりペレット化し、そして６００，０００細胞／ｍＬの最終濃度にて、３７℃まで予め温めた刺激緩衝液中に再懸濁させた。細胞を、アッセイにおいて３０，０００細胞／ウェルの最終濃度で用いた。化合物を、溶解緩衝液（５０％  ＤＭＳＯを用いる２５ｍＭ  Ｇｌｙ−ＨＣｌ  ｐＨ３．０）中１０ｍＭ  濃度まで溶解させ、次いで、５０ｍＭ  Ｇｌｙ−ＨＣｌ  ｐＨ３．０中１ｍＭまで希釈し、そしてそこから系列的にアッセイ緩衝液（２５℃での７５ｍＭ  トリス／ＨＣｌ  ｐＨ７．４，１２．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２，１ｍＭ  ＥＤＴＡ，０．２％  ＢＳＡ）中に希釈した。
【０１６３】
化合物を、１０μＭ〜４０ｐＭの範囲の１０個の異なる濃度で試験した。最大応答を、１０μＭ  イソプロテレノールの存在下において測定した。反応物を、３７℃で１０分間、インキュベートし、そして、１００μｌ  氷冷検出緩衝液の添加により停止した。プレートを密封し、４℃で一晩中インキュベートし、そして、翌朝、ｔｏｐｃｏｕｎｔ  ｓｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎ  ｃｏｕｎｔｅｒ（Ｐａｃｋａｒｄ  ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ  Ｃｏ．，Ｍｅｒｉｄｅｎ，ＣＴ）で計数した。反応の１ｍＬあたり生成したｃＡＭＰの量を、試料に対して観測されたおよび標準ｃＡＭＰに対して観測されたカウントに基づき、製造者の使用マニュアルに記載されるように算出した。データを、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  ｐａｃｋａｇｅ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を用い、シグモイド用量応答に関する可変のスロープを用いる４−パラメーターモデルを使用し、非線形回帰分析により分析した。化合物効力（％Ｅｆｆ）を、観察のされたＥｍａｘ（近似曲線の頂点）と１０μＭ  イソプロテレノールに関し観察された最大応答との比から算出し、そしてイソプロテレノールに対する％Ｅｆｆとして示した。
【０１６４】
（試験Ｄ）
（モルモットモデルにおけるアセチルコリン誘導性気管支痙攣を防ぐ気管支保護に関するアッセイ）
体重２５０〜３５０ｇの間の６匹のモルモット（Ｄｕｎｃａｎ−Ｈａｒｔｌｅｙ（ＨｓｄＰｏｃ：ＤＨ）Ｈａｒｌａｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を、個々にケージカードにより認識した。研究の間中、動物が、適宜、餌および水を摂取可能とした。
【０１６５】
試験化合物を、１０分間にわたり、全身が曝露される投薬チャンバ（ｃｈａｍｂｅｒ）中で吸入投与した。この投薬チャンバは、エアロゾルが、同時に中心のマニフォールドから６つのチャンバに送達されるように配置した。６０分間の順化期間および注射（ＷＦＩ）用の霧状水に１０分間の曝露に次いで、モルモットは、試験化合物またはビヒクル（ＷＦＩ）のエアロゾルに曝された。これらのエアロゾルは、水性溶液から、２２ｐｓｉの圧力の混合ガス（ＣＯ２＝５％，Ｏ２＝２１％およびＮ２＝７４％）により駆動されるＬＣ  Ｓｔａｒ  Ｎｅｂｕｌｉｚｅｒ  Ｓｅｔ（Ｍｏｄｅｌ  ２２Ｆ５１，ＰＡＲＩ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ，Ｉｎｃ．Ｍｉｄｌｏｔｈｉａｎ，ＶＡ）を用いて生成した。この操作圧においてこの噴霧器を通るガス流は、約３Ｌ／分であった。生成したエアロゾルを、陽圧により、チャンバ中に送達した。希釈空気を、エアロゾル溶液の送達期間中使用しなかった。１０分間の噴霧化の間、約１．８ｍＬの溶液を噴霧化した。このことを、噴霧化前と噴霧後の充填した噴霧器の重さを比較することにより、重量測定した。
【０１６６】
吸入投与による化合物の気管支保護効果は、投与後、１．５、２４、４８および７２時間に全身プレチスモグラフを用いて評価した。肺の評価を開始する４５分前に、各モルモットを、ケタミン（４３．７５ｍｇ／ｋｇ）、キシラジン（３．５０ｍｇ／ｋｇ）およびアセプロマジン（１．０５ｍｇ／ｋｇ）の筋肉注射を用い麻酔した。手術部位を剃毛し、７０％  アルコールで消毒した後、首の腹側面の２〜５ｃｍ  正中切開を、施した。次いで、頸静脈を、単離し、そして、生理食塩水充填ポリエチレンカテーテル（ＰＥ−５０，Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ，Ｓｐａｒｋｓ，ＭＤ）でカニューレ挿入し、生理食塩中の０．１ｍｇ／ｍＬアセチルコリン（Ａｃｈ）溶液（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）の静脈輸液をし得た。次いで、気管を解剖して取り除き、そして１４Ｇテフロン（登録商標）チューブ（番号ＮＥ−０１４，Ｓｍａｌｌ  Ｐａｒｔｓ，Ｍｉａｍｉ  Ｌａｋｅｓ，ＦＬ）でカニューレ挿入した。必要な場合、上述の麻酔薬カクテルのさらなる筋肉内注射により麻酔を維持した。麻酔の深さを、モニターし、そして、動物が、動物の足をつままれることに反応する場合または呼吸速度が、１００呼吸／分より大きい場合、麻酔の深さを調節した。
【０１６７】
一旦カニューレ挿入が完了すると、上記動物を、プレチスモグラフ（番号ＰＬＹ３１１４，Ｂｕｘｃｏ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ，Ｉｎｃ．，Ｓｈａｒｏｎ，ＣＴ）中に置き、そして食道圧カニューレを挿入し、肺の駆動圧（圧力）（ｄｒｉｖｉｎｇ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ）を計測した。テフロン（登録商標）製気管チューブを、プレチスモグラフの開口部に取り付け、モルモットが、チャンバの外から部屋の空気を呼吸し得るようにした。次いでこのチャンバを、密閉した。加熱灯を用い体温を維持し、そしてモルモットの肺を、４ｍＬの空気で３度膨らませ、１０ｍＬ検定シリンジ（番号５５２０  Ｓｅｒｉｅｓ，Ｈａｎｓ  Ｒｕｄｏｌｐｈ，Ｋａｎｓａｓ  Ｃｉｔｙ，ＭＯ）を用いて、確実に、下気道が、崩壊しないこと、および動物が、呼吸亢進にならないようにした。
【０１６８】
一旦、ベースライン値が、コンプライアンスに関し０．３〜０．９ｍＬ／ｃｍ  Ｈ２Ｏの範囲内であり、抵抗に関し１秒あたり０．１〜０．１９９ｃｍ  Ｈ２Ｏ／ｍＬの範囲内であることが決定されると、肺の評価を開始した。Ｂｕｘｃｏ肺の評価コンピュータープログラムから、肺の値の収集および誘導をし得た。このプログラムを開始することにより、実験プロトコルおよびデータ収集を開始した。各々呼吸に関するプレチスモグラフ内に生じた時間にわたる体積変化を、Ｂｕｘｃｏ圧力トランスデューサーを用いて測定した。このシグナルを時間に対して積分し、流量の測定値を、各々の呼吸に関して算出した。Ｓｅｎｓｙｍ圧力トランスデューサー（番号ＴＲＤ４１００）を用いて収集したこのシグナルを、肺の駆動圧変化と共に、Ｂｕｘｃｏ（ＭＡＸ２２７０）プリアンプを介して、データ収集インターフェース（番号ＳＦＴ３４００および番号ＳＦＴ３８１３）に接続した。全ての他の肺のパラメーターを、これらの２つの入力から得た。
【０１６９】
モルモットに、Ａｃｈを与え（ｃｈａｌｌｅｎｇｅ）た後、ベースライン値を、５分間収集した。Ａｃｈを、シリンジポンプ（ｓｐ２１０ｉｗ，Ｗｏｒｌｄ  Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｉｎｃ．，Ｓａｒａｓｏｔａ，ＦＬ）から、以下の用量および実験開始からの所定時間にて、１分間静脈内に注入した：５分で１．９μｇ／分、１０分で３．８μｇ／分、１５分で７．５μｇ／分、２０分で１５．０μｇ／分、２５分で３０μｇ／分、および３０分で６０μｇ／分。抵抗またはコンプライアンスが、各Ａｃｈ用量のあと、３分間でベースライン値まで戻らなかった場合、モルモットの肺を、１０ｍＬ  検定シリンジからの４ｍＬの空気で３度膨張した。記録された肺のパラメーターとしては、呼吸頻度（呼吸／分）、コンプライアンス（ｍＬ／ｃｍ  Ｈ２Ｏ）および肺の抵抗（１秒あたりｃｍ  Ｈ２Ｏ／ｍＬ）（Ｇｉｌｅｓら，１９７１）が挙げられる。一旦、肺の機能測定が、このプロトコルの３５分間で完了し、モルモットを、プレチスモグラフから取り出し、そしてＣＯ２窒息により安楽死させた。
【０１７０】
肺の抵抗のベースライン値の倍増を生じるために必要とされるＡｃｈの量として定義される量ＰＤ２を、以下の式を用いて、与えたＡｃｈの範囲にわたり、流量および圧力から導かれる肺の抵抗値を用い算出した。これは、臨床でＰＣ２０値を算出するために用いられる式から導かれる（Ａｍ．Ｔｈｏｒａｃｉｃ  Ｓｏｃ，２０００）。
【０１７１】
【化２４】
2008501705.tif 000019
ここで：
Ｃ１＝第２〜最後のＡｃｈ濃度（Ｃ２に先立つ濃度）
Ｃ２＝Ａｃｈの最終濃度（肺の抵抗（ＲＬ）において２倍増を生じる結果の濃度）
Ｒ０＝ＲＬ値のベースライン
Ｒ１＝Ｃ１後のＲＬ値
Ｒ２＝Ｃ２後のＲＬ値。
【０１７２】
データの統計的解析は、一元配置分散解析（Ｏｎｅ−Ｗａｙ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ｖａｒｉａｎｃｅ）に続き、Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉ／Ｄｕｎｎ試験を用いるポストホック（ｐｏｓｔ−ｈｏｃ）解析を用い行なった。Ｐ−値＜０．０５を、有意と考慮した。
【０１７３】
用量応答曲線を、Ｗｉｎｄｏｗｓ（登録商標）用のＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ，ｖｅｒｓｉｏｎ  ３．００（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）を用いる４つのパラメーターの以下の論理式で近似し、
Ｙ＝Ｍｉｎ＋（Ｍａｘ−Ｍｉｎ）／（１＋１０＾（（ｌｏｇＥＤ５０−Ｘ）＊Ｈｉｌｌスロープ）
ここでＸは、用量の対数であり、Ｙは、応答（ＰＤ２）であり、そしてＹは、Ｍｉｎで始まり、シグモイド形でＭａｘに漸近的に近づく。
【０１７４】
以下の実施例は、本発明を説明するために提供されるのであって、本発明の範囲を限定するとは、決して解釈されるべきではない。
【０１７５】
（実施例）
一般的事項：そうでないと記載されない限り、試薬、出発物質、および溶媒を、販売元（例えば、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ），Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ（Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ，ＮＪ）ならびにＨｏｎｅｙｗｅｌｌ  ＢｕｒｄｉｃｋおよびＪａｃｋｓｏｎ（Ｍｕｓｋｅｇｏｎ，ＭＩ））から購入し、さらなる精製なしに用いた；反応は、窒素雰囲気下において行った；反応混合物を、薄層クロマトグラファイー（シリカＴＬＣ）、分析用高速液体クロマトグラフィー（分析用ＨＰＬＣ）、または質量分析によりモニターした；反応混合物を、通常、シリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィーまたは分取ＨＰＬＣにより、下に記載される一般的なプロトコルを用いて精製した；ＮＭＲ試料を、重溶媒（ＣＤ３ＯＤ、ＣＤＣｌ３、またはＤＭＳＯ−ｄ６）中に溶解させ、そして、スペクトルを、標準パラメーターの下、Ｖａｒｉａｎ  Ｇｅｍｉｎｉ  ２０００機器（３００ＭＨｚ）を用いて得た；そして、質量分析的同定を、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ機器（ＰＥ  ＳＣＩＥＸ  ＡＰＩ  １５０  ＥＸ）でエレクトロスプレーイオン化法（ＥＳＭＳ）により行った。
【０１７６】
（実施例１：８−ヒドロキシ−５−［（Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−（６−フェニルアミノ−ヘキシルアミノ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの合成）
（ａ．（６−フェニルアミノヘキシル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製）
（６−アミノヘキシル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル塩酸塩（５ｇ、２０ｍｍｏｌ）を、５０％  ジクロロメタン／メタノール（５０ｍＬ）中に溶解させ、そして周囲温度で、フェニルアセトアルデヒド（２．３ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を用い1時間処理した。シアノ水素ホウ素ナトリウム（１．２ｇ、１９ｍｍｏｌ）を添加し、そして、この混合物を一晩中攪拌した。次いで、水を添加し、その後飽和炭酸水素ナトリウムおよびさらなるジクロロメタンを添加した。この混合物を、分配し、有機物を硫酸ナトリウムにより乾燥させ、そして揮発物を減圧下で取り除き、標題の中間体を得、これをさらなる精製なしに用いた。
【０１７７】
（ｂ．（６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ヘキシル）フェネチルカルバミン酸ベンジルエステルの調製）
前の工程の生成物を、周囲温度で一晩、クロロギ酸ベンジル（２．８ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）および水酸化ナトリウム水溶液（１Ｍ、３０ｍＬ）を用いて処理した。この混合物を、酢酸イソプロピルで抽出した。有機物を、飽和炭酸水素ナトリウムに次いで、クエン酸水溶液（０．５Ｍ）で洗浄した。この混合物を、ジクロロメタンで抽出し、有機物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、揮発物を減圧下において取り除き、標題の中間体（９ｇ）を得、これをさらなる精製なしに使用した。
【０１７８】
（ｃ．（６−アミノヘキシル）フェニルカルバミン酸ベンジルエステルの調製）
前工程の生成物（９ｇ、未精製）を、ジクロロメタン（４５ｍＬ）中に溶解させ、周囲温度にてトリフルオロ酢酸（４５ｍＬ）を用い処理した。揮発物を減圧下除去し、そして残渣を、水に取り込み、水酸化ナトリウムで塩基性にした。混合物を、ジクロロメタンで抽出し、そして有機物を、硫酸ナトリウムを用い乾燥させた。揮発物を、減圧下除去し、標題の化合物を得、そしてこの化合物を乾固までエバポレートし、さらなる精製なしに用いた。
【０１７９】
（ｄ．［（Ｒ）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）−２−（８−ベンジルオキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−キノリン−５−イル）エチル］−（６−フェニルアミノ−ヘキシル）カルバミン酸ベンジルエステルの調製）
前工程の生成物（６．５ｇ  未精製、１８ｍｍｏｌ）、８−ベンジルオキシ−５−［（Ｒ）−２−ブロモ−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オン（４．５ｇ、９．２ｍｍｏｌ）およびジメチルスルホキシド（１３ｍＬ）を、１１０℃に１時間加熱し、次いで、周囲温度まで一晩冷却した。この混合物を、水と酢酸イソプロピルの間で分配した。有機物を、飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムを用いて乾燥させ、そして乾固までエバポレートした。この混合物を、逆相ＨＰＬＣにより精製し、標題の化合物をＴＦＡ塩として得た。
【０１８０】
（ｅ．［（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−（８−ベンジルオキシ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−キノリン−５−イル）エチル］−（６−フェニルアミノ−ヘキシル）カルバミン酸ベンジルエステルの調製）
前工程の生成物を、テトラヒドロフラン中に溶解させ、周囲温度でＨＰＬＣにより反応が完了したと判断されるまでトリエチルアミントリヒドロフルオリドで処理した。この反応物を、１Ｍ水酸化ナトリウムと酢酸イソプロピルとの間に分配した。有機物を、硫酸ナトリウムにより乾燥させ、そして乾固までエバポレートし、標題の中間体を得た。
【０１８１】
（ｆ．８−ヒドロキシ−５−［（Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−（６−フェネチルアミノ−ヘキシルアミノ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの調製）
前工程の生成物（２５０ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン中に周囲温度で溶解させ、そして三塩化ホウ素（ジクロロメタン中１Ｍ）を、アリコートで添加した。反応を、さらなる三塩化ホウ素を用いＨＰＬＣによりモニターし、反応が完了したと判断されるまで添加した。水中の１０％  酢酸を添加し、そしてジクロロメタンを減圧下除去した。残渣を、逆相ＨＰＬＣにより精製し、標題の化合物をビストリフルオロ酢酸塩として得た。
【０１８２】
（実施例２：８−ヒドロキシ−５−［（Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−（６−フェニルアミノ−ヘキシルアミノ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの代替的な合成）
（ａ．（５−フェニルカルバモイル−ペンチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル）の調製）
フェニルアミン（３４０μＬ、４．３ｍｍｏｌ）、６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルバモイルアミノ−ヘキサン酸（１．０ｇ、４．３ｍｍｏｌ）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（７００ｍｇ、５．１ｍｍｏｌ）を、窒素下、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中に溶解させ、そして０℃まで冷却した。塩酸１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドを添加し、そして、この混合物を、一晩攪拌し、放置し室温まで温めた。この混合物を、水と酢酸イソプロピルの間で分配させた。有機物を、０．５Ｍ  クエン酸で洗浄し、次いで、飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、そして乾固までエバポレートした。残渣を、さらなる精製なしに用いた。
【０１８３】
（ｂ．６−アミノ−Ｎ−（２−フェネチルアミノ）ヘキサンアミドの調製）
前工程の生成物を、ジクロロメタン（１０ｍＬ）中に溶解させ、そして、室温にて１時間、トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）を用い処理した。揮発物を、減圧下除去し、そして残渣を、ジクロロメタンに入れ、１Ｎ  水酸化ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムを用い乾燥させ、乾固までエバポレートし、標題の中間体（８３０ｍｇ、３．５ｍｍｏｌ）を得、これをさらなる精製なしに用いた。
【０１８４】
（ｃ．Ｎ１−フェネチルヘキサン−１，６−ジアミンの調製）
前工程の生成物（３３０ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）を、室温にて窒素下、テトラヒドロフラン（４ｍＬ）中に溶解させ、そして、ボラン−メチルスルフィド錯体（５００μＬ）を添加した。この混合物を、一晩還流し、次いで、氷浴中で冷却した。メタノールを、注意深く添加し、そして揮発物を、減圧下除去した。残渣を、メタノール中に再溶解させ、そして再濃縮し、標題の中間体（３６０ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）を得、これをさらなる精製なしに用いた。
【０１８５】
（ｄ．８−ベンジルオキシ−５−［（Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）−２−（６−フェネチルアミノ−ヘキシルアミノ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの調製）
前工程の生成物（２００ｍｇ、０．９１ｍｍｏｌ）、８−ベンジルオキシ−５−［（Ｒ）−２−ブロモ−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オン（３４０ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）、炭酸水酸化ナトリウム（１８０ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）およびジメチルスルホキシド（１．７ｍＬ）を、１１０℃で５５分間加熱し、室温まで冷却し、酢酸イソプロピルと水の間で分配させた。有機物を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、そして乾固までエバポレートした。残渣を、逆相ＨＰＬＣにより精製し、標題の中間体をビストリフルオロ酢酸塩（７５ｍｇ、８８μｍｏｌ）として得た。
【０１８６】
（ｅ．８−ベンジルオキシ−５−［（Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−（６−フェニルアミノ−ヘキシルアミノ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの調製）
前工程の生成物（７５ｍｇ、８８μｍｏｌ）を、テトラヒドロフラン（１ｍＬ）中に溶解させ、そして、トリエチルアミントリヒドロフルオリド（６０μＬ、３７０μｍｏｌ）を用いて室温で１８時間処理した。この混合物を、１Ｍ  水酸化ナトリウムと酢酸イソプロピルとの間で分配させた。有機物を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、そして乾固までエバポレートし、標題の中間体を得た。
【０１８７】
（ｆ．８−ヒドロキシ−５−［（Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−（６−フェネチルアミノ−ヘキシルアミノ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの合成）
前工程の生成物を、ジクロロメタン中において室温で溶解させ、そして、三塩化ホウ素（ジクロロメタン中１Ｍ）を、一部分に添加した。反応を、さらなる三塩化ホウ素を用いてＨＰＬＣによりモニターし、この反応が完了したと判断されるまで添加した。水中の１０％酢酸を添加し、そしてジクロロメタンを、減圧下除去した。残渣を、逆相ＨＰＬＣにより精製し、標題の化合物をビストリフルオロ酢酸塩として得た。
【０１８８】
【化２５】
2008501705.tif 000020
（比較実施例：８−ヒドロキシ−５−［（Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−（６−フェネチルオキシ−ヘキシルアミノ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの合成）
（ａ．６−フェニルオキシヘキサンニトリルの調製）
６−ブロモヘキサンニトリル（３．０ｍＬ、２３ｍｍｏｌ）および臭化テトラブチルアンモニルム（３５０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフラン（５ｍＬ）および５０％水酸化ナトリウム水溶液（１５ｍＬ）中に溶解させた。フェネチルアルコール（３．０ｍＬ、２５ｍｍｏｌ）を、添加し、結果として沈殿物を得た。この混合物を、固体が溶解する６５℃で加熱した。この混合物を、６５℃で４時間攪拌し、次いで、室温まで冷却し、そして１１日間放置した。水、ヘキサン、および酢酸エチルを、添加し、そしてこの混合物を、分配させた。有機物を、水、飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、そして乾固までエバポレートし、標題の中間体（５．３ｇ、２４ｍｍｏｌ）を得、これをさらなる精製なしに用いた。
【０１８９】
（ｂ．６−フェネチルオキシヘキシルアミンの調製）
前工程の生成物（５．３ｇ、２４ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）中に溶解させ、そしてボラン−メチルスルフィド錯体（６ｍＬ）で処理した。この混合物を、３．５時間還流し、次いで、ボラン−メチルスルフィド錯体（２ｍＬ）を添加し、この混合物を、さらに２０時間還流し、室温まで冷却し、そしてメタノールを注意深く添加した。揮発物を、減圧下除去し、そして混合物を、メタノールから再びエバポレートし、標題の中間体（５．７ｇ、２６ｍｍｏｌ）を得、これをさらなる精製なしに用いた。
【０１９０】
（ｃ．８−ベンジルオキシ−５−［（Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）−２−（６−フェネチオキシ−ヘキシルアミノ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの調製）
前工程の生成物（３．４ｇ、１５ｍｍｏｌ）、８−ベンジルオキシ−５−［（Ｒ）−２−ブロモ−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オン（３．４ｇ、７．０ｍｍｏｌ）、炭酸水素ナトリウム（２．３ｇ、２７ｍｍｏｌ）およびジメチルスルホキシド（７ｍＬ）を、１００℃で１３５分間加熱し、次いで、室温まで冷却し、そして１６時間放置し続けた。この混合物を、水と酢酸イソプロピルとの間で分配させ、そして、有機物を、水で洗浄し、次いで、飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムにより乾燥させ、そして乾固までエバポレートした。生成物を、逆相ＨＰＬＣにより精製し、標題の化合物をトリフルオロ酢酸塩（１．５ｇ、２．０ｍｍｏｌ）として得た。
【０１９１】
（ｄ．８−ベンジルオキシ−５−［（Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−（６−フェネチルエチルオキシ−ヘキシルアミノ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの調製）
前工程の生成物（１．５ｇ、２．０ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフラン（１５ｍＬ）中に溶解させ、そしてトリエチルアミントリヒドロフルオリド（６６０μＬ、４．０ｍｍｏｌ）を用いて室温で３日間処理した。この混合物を、１Ｍ  水酸化ナトリウムと酢酸エチルとの間で分配させた。有機物を、飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムにより乾燥させ、そして乾固までエバポレートし、標題の中間体（１．４ｇ、２．７ｍｍｏｌ）を得、これをさらなる精製なしに用いた。
【０１９２】
（ｅ．８−ヒドロキシ−５−［（Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−（６−フェネチルオキシ−ヘキシルアミノ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オンの合成）
前工程の生成物（１．４ｇ、２．７ｍｍｏｌ）および炭素担持水酸化パラジウム（２０％  Ｐｄ、水分含有量約６０％、３００ｍｇ）を、テトラヒドロフラン（３０ｍＬ）中に懸濁させ、そして室温にて水素圧下、２時間攪拌した。パラジウムを、ろ過により取り除き、そして混合物を、減圧下エバポレートした。残渣を、逆相ＨＰＬＣにより精製し、標題の化合物をトリフルオロ酢酸塩として得た。
【０１９３】
【化２６】
2008501705.tif 000021
（実施例４：生物学的アッセイの結果）
本発明の代表的な化合物、実施例１および実施例２の化合物、８−ヒドロキシ−５−［（Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−（６−フェネチルアミノ−ヘキシルアミノ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オンおよび比較実施例の化合物、８−ヒドロキシ−５−［（Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−（６−フェネチルオキシヘキシルアミノ）エチル］−１Ｈ−キノリン−２−オンを、上で記載される生物学的アッセイを用い試験した。アッセイの結果を、以下の表中に要約する。
【０１９４】
【表１】
2008501705.tif 000022
【０１９５】
【表２】
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＊実施例１において調製された化合物。
【０１９６】
本発明の試験した化合物は、比較化合物がそうであるようにβ２アドレナリン作用性レセプターに対して、上で記載されるインビトロにおける結合親和性アッセイおよび機能性アッセイに関し活性であった。驚くべきことに、本発明の化合物は、投与後７２時間に、モルモットモデルにおいて気管支保護を示し、他方比較化合物は、インビトロにおいて投与後７２時間に活性でなかった。さらに、本発明の化合物は、試験Ｂの機能性アッセイにおけるβ１レセプターサブタイプおよびβ３レセプターサブタイプと比較した場合、β２レセプターに対し優れた選択性を示した。上記アッセイの結果は、本発明が、非常に長い作用期間を有し、強力かつ選択的なβ２アドレナリン作用性レセプターアゴニストを提供することを示す。
【０１９７】
本発明は、その特定の実施形態を参照して記載されているが、本発明の真意および本発明の範囲から逸脱することなしに、種々の変更がなされ得、かつ等価物が、代用され得ることは、当業者により理解される。さらに、多くの改変は、特定の状況、材料、材料の組成物、プロセス、プロセス工程（単数または複数）を、本発明の目的の真意および目的の範囲に適合するようにし得る。そのような変更は、添付の請求項の範囲内に存在することを意図している。さらに、上記の本明細書において引用される全ての刊行物、特許、および特許文献は、それらが個々に参考として援用されるかのごとく、全体が本明細書中において参考として援用される。
【国際調査報告】
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