(57)【要約】  式（Ｉ）の新規ピラゾロピリミジンが議論される。これらのピラゾロピリミジンは、サイクリン依存性キナーゼ、最も詳細には、サイクリン依存性キナーゼ１（Ｃｄｋ１）、サイクリン依存性キナーゼ２（Ｃｄｋ２）およびサイクリン依存性キナーゼ４（Ｃｄｋ４）の活性を阻害でき、したがって、癌、特に固形腫瘍の治療または抑制に特に有用である。本発明は、そのような化合物を含む医薬組成物も提供し、癌の治療または抑制、最も詳細には、乳房、肺、結腸および前立腺の腫瘍の治療または抑制の方法を提供する。
2008501744.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物
【化１】
2008501744.tif 000063
あるいは、その医薬として許容される塩またはエステル、
｛式中、
Ｒ1が以下からなる群から選択され：
（ａ）以下からなる群から独立に選択される最大で４の置換基により置換されていてよい複素環：
（ｉ）ＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよい低級アルキル；および
（ｉｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7またはＳ（Ｏ）nＲ8；
（ｂ）以下からなる群から独立に選択される最大で４の置換基に置換されていてよいアリール：
（ｉ）Ｓ（Ｏ）nＲ8、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキル、ＯＲ7、ハロゲンあるいはＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7により置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉ）ＣＯＯＨ；および
（ｉｉｉ）低級アルキル、ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されているカルボニル；
（ｃ）ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよいシクロアルキル；および
（ｄ）以下により置換されていてよい低級アルキル：
（ｉ）ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、Ｓ（Ｏ）nＲ8、ＨＮＳ（Ｏ）nＲ8またはＣＯ2Ｒ3；
（ｉｉ）低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよい複素環；
（ｉｉｉ）低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよいヘテロアリール；および
（ｉｖ）低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3、ハロゲン、ＣＯＲ4またはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよいアリール；
Ｒ2が以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；
（ｉｉ）低級アルキルまたはＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7により置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉｉ）ハロゲン、ＮＯ2、ＣＮ、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキル、低級アルコキシおよびハロゲンまたはＯＲ7により置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
（ｉｖ）低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲンおよびＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7により置換されていてよい低級アルキルにより置換されていてよいヘテロアリール；
Ｒ3が以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；
（ｉｉ）ＯＲ7、ＣＯＲ4、ＮＲ5Ｒ6またはＣＯＮＲ5Ｒ6により置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉｉ）低級アルキル、ハロゲンおよびＮＲ5Ｒ6からなる群から独立に選択される最大で３の置換基により置換されていてよいアリール；および
（ｉｖ）ＯＨまたはＮＨ2により置換されていてよいシクロアルキル；
Ｒ4が以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；および
（ｉｉ）ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよい低級アルキル；
Ｒ5およびＲ6が、それぞれ独立に、以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；
（ｉｉ）ＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ10Ｒ11、複素環またはヘテロアリールにより置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＳＯ2Ｒ4、ＯＲ7またはＮＲ10Ｒ11により置換されていてよいシクロアルキル；
（ｉｖ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ10Ｒ11、ハロゲン、低級アルキルおよびハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＯＲ7、ＮＲ10Ｒ11またはＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
（ｖ）ＳＯ2Ｒ3；
（ｖｉ）ＣＯ2Ｒ3、および
（ｖｉｉ）ＣＯＲ3、または
或いは、ＮＲ5Ｒ6が合計で３−７の環原子を有する環を形成してよく、前記環原子が、Ｒ5およびＲ6が結合している窒素に加え炭素環原子を含んでなり、前記炭素環原子が任意に１つまたは複数の追加のＮまたはＯ環原子またはＳＯ2基により置換されており、前記環原子が任意に、ＯＨ、オキソ、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキルおよびＯＲ7により置換されている低級アルキルにより置換されており；
Ｒ7が、Ｈおよび任意にＮＲ5Ｒ6またはＯＲ9により置換されている低級アルキルからなる群から選択され；
Ｒ8が、以下からなる群から選択され：
（ｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲン、低級アルキルまたは、ハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6およびＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
（ｉｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲン、低級アルキルまたは、ハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいヘテロアリール；
（ｉｉｉ）ＮＲ5Ｒ6；
（ｉｖ）ハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＯＨにより置換されていてよい低級アルキル；および
（ｖ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ3、ＳＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよい複素環；
Ｒ9が、Ｈ、低級アルキルおよびＯＨまたはハロゲンにより置換されている低級アルキルからなる群から選択され；
Ｒ10およびＲ11が、それぞれ独立に、以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；
（ｉｉ）ＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、複素環またはヘテロアリールにより置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよいシクロアルキル；
（ｉｖ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲン、低級アルキルあるいはハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
（ｖ）ＳＯ2Ｒ3；
（ｖｉ）ＣＯ2Ｒ3；および
（ｖｉｉ）ＣＯＲ3；または
或いは、ＮＲ10Ｒ11が合計で３−７の環原子を有する環を形成してよく、前記環原子が、Ｒ10およびＲ11が結合している窒素に加え炭素環原子を含んでなり、前記炭素環原子が任意に１つまたは複数の追加のＮまたはＯ環原子またはＳＯ2基により置換されており、前記環原子が任意に、ＯＨ、オキソ、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキルおよびＯＲ7により置換されている低級アルキルにより置換されており；
ｎが１または２である｝。
【請求項２】
Ｒ1が、ピペリジン、ピペラジン、ピロリジン、フェニル、トリル、キシリル、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、２−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ1が、ピペリジン、フェニル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、２−ブチルおよびペンチルからなる群から選択される、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ1が、ＳＯ2ＣＨ3、ＣＨ3、ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3、ＳＯ2ＮＨ2、Ｆ、ＯＣＨ3、ＯＨ、ＮＨ2またはＮ（ＣＨ3）2により置換されている、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ2が、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、２−ブチル、ペンチル、ヘキシル、フェニル、トリルおよびキシリルからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ2が、Ｈ、メチルあるいはフッ素またはメトキシにより置換されていてよいフェニルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ2が、Ｈ、メチルあるいはフッ素およびメトキシにより置換されていてよいフェニルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
以下からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物：
［３−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン
（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）−アミン
（１−メタン−ピペリジン−４−イル）−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）−アミン
［３−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン
［３−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン
［３−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン
（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−アミン；トリフルオロ酢酸が付加した化合物
［３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン
（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−（３−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）−アミン
［３−（３−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン。
【請求項９】
以下からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物：
４−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イルアミノ］−ベンゼンスルホンアミド；トリフルオロ酢酸が付加した化合物
［３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（４−フルオロ−フェニル）−アミン
２−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イルアミノ］−エタノール
［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−ペンタン−１，５−ジアミン；トリフルオロ酢酸が付加した化合物
Ｎ’−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチル−プロパン−１，３−ジアミン
Ｎ−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ペンタン−１，５−ジアミン；トリフルオロ酢酸が付加した化合物
［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−フェニル−アミン
（４−メトキシ−フェニル）−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−アミン；トリフルオロ酢酸が付加した化合物
［３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（２−メトキシ−フェニル）−アミン；トリフルオロ酢酸が付加した化合物
４−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イルアミノ）−ベンゼンスルホンアミド；トリフルオロ酢酸が付加した化合物。
【請求項１０】
以下からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物：
２−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イルアミノ）−エタノール；トリフルオロ酢酸が付加した化合物
４−［３−（３−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル；トリフルオロ酢酸が付加した化合物
（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）−アミン。
【請求項１１】
［３−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）−アミンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
［３−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
［３−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−アミン；トリフルオロ酢酸が付加した化合物である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１６】
［３−（３−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１７】
４−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イルアミノ］−ベンゼンスルホンアミド；トリフルオロ酢酸が付加した化合物である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１８】
癌である患者に抗癌量（ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  ａｍｏｕｎｔ）の式（Ｉ）の化合物
【化２】
2008501744.tif 000064
あるいはその医薬として許容される塩またはエステルを投与する工程を含んでなる、癌を有する患者を治療する方法
｛式中、
Ｒ1が以下からなる群から選択され：
（ａ）以下からなる群から独立に選択される最大で４の置換基により置換されていてよい複素環：
（ｉ）ＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよい低級アルキル；および
（ｉｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7またはＳ（Ｏ）nＲ8；
（ｂ）以下からなる群から独立に選択される最大で４の置換基に置換されていてよいアリール：
（ｉ）Ｓ（Ｏ）nＲ8、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキル、ＯＲ7、ハロゲンあるいはＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7により置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉ）ＣＯＯＨ；および
（ｉｉｉ）低級アルキル、ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されているカルボニル；
（ｃ）ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよいシクロアルキル；および
（ｄ）以下により置換されていてよい低級アルキル：
（ｉ）ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、Ｓ（Ｏ）nＲ8、ＨＮＳ（Ｏ）nＲ8またはＣＯ2Ｒ3；
（ｉｉ）低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよい複素環；
（ｉｉｉ）低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよいヘテロアリール；および
（ｉｖ）低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3、ハロゲン、ＣＯＲ4またはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよいアリール；
Ｒ2が以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；
（ｉｉ）低級アルキルまたはＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7により置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉｉ）ハロゲン、ＮＯ2、ＣＮ、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキル、低級アルコキシおよびハロゲンまたはＯＲ7により置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
（ｉｖ）低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲンおよびＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7により置換されていてよい低級アルキルにより置換されていてよいヘテロアリール；
Ｒ3が以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；
（ｉｉ）ＯＲ7、ＣＯＲ4、ＮＲ5Ｒ6またはＣＯＮＲ5Ｒ6により置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉｉ）低級アルキル、ハロゲンおよびＮＲ5Ｒ6からなる群から独立に選択される最大で３の置換基により置換されていてよいアリール；および
（ｉｖ）ＯＨまたはＮＨ2により置換されていてよいシクロアルキル；
Ｒ4が以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；および
（ｉｉ）ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよい低級アルキル；
Ｒ5およびＲ6が、それぞれ独立に、以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；
（ｉｉ）ＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ10Ｒ11、複素環またはヘテロアリールにより置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＳＯ2Ｒ4、ＯＲ7またはＮＲ10Ｒ11により置換されていてよいシクロアルキル；
（ｉｖ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ10Ｒ11、ハロゲン、低級アルキルおよびハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＯＲ7、ＮＲ10Ｒ11またはＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
（ｖ）ＳＯ2Ｒ3；
（ｖｉ）ＣＯ2Ｒ3、および
（ｖｉｉ）ＣＯＲ3、または
或いは、ＮＲ5Ｒ6が合計で３−７の環原子を有する環を形成してよく、前記環原子が、Ｒ5およびＲ6が結合している窒素に加え炭素環原子を含んでなり、前記炭素環原子が任意に１つまたは複数の追加のＮまたはＯ環原子またはＳＯ2基により置換されており、前記環原子が任意に、ＯＨ、オキソ、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキルおよびＯＲ7により置換されている低級アルキルにより置換されており；
Ｒ7が、Ｈおよび任意にＮＲ5Ｒ6またはＯＲ9により置換されている低級アルキルからなる群から選択され；
Ｒ8が、以下からなる群から選択され：
（ｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲン、低級アルキルまたは、ハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6およびＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
（ｉｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲン、低級アルキルまたは、ハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいヘテロアリール；
（ｉｉｉ）ＮＲ5Ｒ6；
（ｉｖ）ハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＯＨにより置換されていてよい低級アルキル；
（ｖ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ3、ＳＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよい複素環；
Ｒ9が、Ｈ、低級アルキルおよびＯＨまたはハロゲンにより置換されている低級アルキルからなる群から選択され；
Ｒ10およびＲ11が、それぞれ独立に、以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；
（ｉｉ）ＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、複素環またはヘテロアリールにより置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよいシクロアルキル；
（ｉｖ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲン、低級アルキルあるいはハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
（ｖ）ＳＯ2Ｒ3；
（ｖｉ）ＣＯ2Ｒ3；および
（ｖｉｉ）ＣＯＲ3；または
或いは、ＮＲ10Ｒ11が合計で３−７の環原子を有する環を形成してよく、前記環原子が、Ｒ10およびＲ11が結合している窒素に加え炭素環原子を含んでなり、前記炭素環原子が任意に１つまたは複数の追加のＮまたはＯ環原子またはＳＯ2基により置換されており、前記環原子が任意に、ＯＨ、オキソ、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキルおよびＯＲ7により置換されている低級アルキルにより置換されており；
ｎが１または２である｝。
【請求項１９】
式（Ｉ）の化合物あるいは、その医薬として許容される塩またはエステル
【化３】
2008501744.tif 000065
｛式中、
Ｒ1が以下からなる群から選択され：
（ａ）以下からなる群から独立に選択される最大で４の置換基により置換されていてよい複素環：
（ｉ）ＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよい低級アルキル；および
（ｉｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7またはＳ（Ｏ）nＲ8；
（ｂ）以下からなる群から独立に選択される最大で４の置換基に置換されていてよいアリール：
（ｉ）Ｓ（Ｏ）nＲ8、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキル、ＯＲ7、ハロゲンあるいはＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7により置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉ）ＣＯＯＨ；および
（ｉｉｉ）低級アルキル、ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されているカルボニル；
（ｃ）ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよいシクロアルキル；および
（ｄ）以下により置換されていてよい低級アルキル：
（ｉ）ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、Ｓ（Ｏ）nＲ8、ＨＮＳ（Ｏ）nＲ8またはＣＯ2Ｒ3；
（ｉｉ）低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよい複素環；
（ｉｉｉ）低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよいヘテロアリール；および
（ｉｖ）低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3、ハロゲン、ＣＯＲ4またはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよいアリール；
Ｒ2が以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；
（ｉｉ）低級アルキルまたはＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7により置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉｉ）ハロゲン、ＮＯ2、ＣＮ、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキル、低級アルコキシおよびハロゲンまたはＯＲ7により置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
（ｉｖ）低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲンおよびＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7により置換されていてよい低級アルキルにより置換されていてよいヘテロアリール；
Ｒ3が以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；
（ｉｉ）ＯＲ7、ＣＯＲ4、ＮＲ5Ｒ6またはＣＯＮＲ5Ｒ6により置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉｉ）低級アルキル、ハロゲンおよびＮＲ5Ｒ6からなる群から独立に選択される最大で３の置換基により置換されていてよいアリール；および
（ｉｖ）ＯＨまたはＮＨ2により置換されていてよいシクロアルキル；
Ｒ4が以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；および
（ｉｉ）ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよい低級アルキル；
Ｒ5およびＲ6が、それぞれ独立に、以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；
（ｉｉ）ＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ10Ｒ11、複素環またはヘテロアリールにより置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＳＯ2Ｒ4、ＯＲ7またはＮＲ10Ｒ11により置換されていてよいシクロアルキル；
（ｉｖ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ10Ｒ11、ハロゲン、低級アルキルおよびハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＯＲ7、ＮＲ10Ｒ11またはＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
（ｖ）ＳＯ2Ｒ3；
（ｖｉ）ＣＯ2Ｒ3、および
（ｖｉｉ）ＣＯＲ3、または
或いは、ＮＲ5Ｒ6が合計で３−７の環原子を有する環を形成してよく、前記環原子が、Ｒ5およびＲ6が結合している窒素に加え炭素環原子を含んでなり、前記炭素環原子が任意に１つまたは複数の追加のＮまたはＯ環原子またはＳＯ2基により置換されており、前記環原子が任意に、ＯＨ、オキソ、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキルおよびＯＲ7により置換されている低級アルキルにより置換されており；
Ｒ7が、Ｈおよび任意にＮＲ5Ｒ6またはＯＲ9により置換されている低級アルキルからなる群から選択され；
Ｒ8が、以下からなる群から選択され：
（ｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲン、低級アルキルまたは、ハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6およびＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
（ｉｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲン、低級アルキルまたは、ハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいヘテロアリール；
（ｉｉｉ）ＮＲ5Ｒ6；
（ｉｖ）ハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＯＨにより置換されていてよい低級アルキル；
（ｖ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ3、ＳＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよい複素環；
Ｒ9が、Ｈ、低級アルキルおよびＯＨまたはハロゲンにより置換されている低級アルキルからなる群から選択され；
Ｒ10およびＲ11が、それぞれ独立に、以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；
（ｉｉ）ＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、複素環またはヘテロアリールにより置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよいシクロアルキル；
（ｉｖ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲン、低級アルキルあるいはハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
（ｖ）ＳＯ2Ｒ3；
（ｖｉ）ＣＯ2Ｒ3；および
（ｖｉｉ）ＣＯＲ3；または
或いは、ＮＲ10Ｒ11が合計で３−７の環原子を有する環を形成してよく、前記環原子が、Ｒ10およびＲ11が結合している窒素に加え炭素環原子を含んでなり、前記炭素環原子が任意に１つまたは複数の追加のＮまたはＯ環原子またはＳＯ2基により置換されており、前記環原子が任意に、ＯＨ、オキソ、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキルおよびＯＲ7により置換されている低級アルキルにより置換されており；
ｎが１または２である｝
および医薬として許容される賦形剤を含んでなる医薬製剤。
【請求項２０】
癌の治療のための請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
固形腫瘍の治療のための請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
乳房、肺、結腸または前立腺の腫瘍の治療のための請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
癌の治療のための請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項２４】
固形腫瘍の治療のための請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項２５】
乳房、肺、結腸または前立腺の腫瘍の治療のための請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項２６】
癌治療用の医薬品の製造のための請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項２７】
固形腫瘍の治療用の医薬品の製造のための請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項２８】
乳房、肺、結腸または前立腺の腫瘍の治療用の医薬品の製造のための請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項２９】
本明細書中に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式（Ｉ）の新規ピラゾロピリミジンを提供する：
【化１】
2008501744.tif 000003
【０００２】
新規ピラゾロピリミジンは、サイクリン依存性キナーゼ、最も詳しくは、サイクリン依存性キナーゼ１（Ｃｄｋ１）、サイクリン依存性キナーゼ２（Ｃｄｋ２）およびサイクリン依存性キナーゼ４（Ｃｄｋ４）の活性を阻害することができる。これらの化合物ならびにその医薬として許容される塩およびエステルは増殖阻害活性を有し、とりわけ、癌、詳細には固形腫瘍の治療または抑制に有用である。本発明は、そのような化合物を含む医薬組成物を提供し、癌の治療または抑制、最も詳しくは乳房、肺、結腸および前立腺の腫瘍の治療または抑制の方法を提供する。
【背景技術】
【０００３】
抑制されない細胞増殖は癌の特徴である。癌性腫瘍細胞は、典型的には、細胞分裂周期を直接または間接に制御する遺伝子に対するある形態の損傷を有する。
【０００４】
細胞周期の様々な期の間の細胞の発達は、調節タンパク質、サイクリンおよびキナーゼからなる一連のマルチ酵素複合体により抑制されている。これらのキナーゼは、サイクリン依存性キナーゼ（Ｃｄｋ）と呼ばれている。Ｃｄｋは細胞周期の間に発現するが、サイクリンのレベルは細胞周期の段階により変わる。
【０００５】
細胞周期制御の４つの基本的な期は、一般的にＧ1、Ｓ、Ｇ2およびＭと記される。細胞周期制御のためのいくつかの基本的な酵素は、サイクリンＤ／Ｃｄｋ４、サイクリンＤ／Ｃｄｋ６、サイクリンＥ／Ｃｄｋ２、サイクリンＡ／Ｃｄｋ２およびサイクリンＢ／Ｃｄｋ１（Ｃｄｃ２／サイクリンＢとしても知られる）のようである。サイクリンＤ／Ｃｄｋ４、サイクリンＤ／Ｃｄｋ６およびサイクリンＥ／Ｃｄｋ２は、網膜芽細胞腫リンタンパク質、ｐＲｂのリン酸化により、Ｇ1期への経路およびＧ1からＳ期への移行を制御する。サイクリンＡ／Ｃｄｋ２はＳ期への移行を制御し、サイクリンＢ／Ｃｄｋ１はＧ2チェックポイントを制御し、Ｍ（有糸分裂）期へ入るのを制御する。
【０００６】
細胞周期進行は、細胞が細胞質分裂することになる初期Ｇ1を超えてＣｄｋ１（ｃｄｃ２）およびＣｄｋ２により制御されている。したがって、これらのＣｄｋの薬剤阻害は、細胞増殖を止めるだけでなく、アポトーシス細胞死も引き起こすようである。細胞がＧ1Ｒ点を通過し、Ｓ期に入ると、それらは、成長因子刺激に依存せずに細胞周期進行を継続するようになる。
【０００７】
ＤＮＡ複製終了のあと、細胞は、Ｍ期と細胞質分裂に備えて細胞周期のＧ2期に入る。Ｃｄｋ１は、サイクリンＡおよびＢの両方と共同で、これらの細胞周期のより後期への細胞の通過を制御することが示されてきた。Ｃｄｋ１の完全な活性化には、サイクリン結合性かつ特異的であるリン酸化が必要である（Ｍｏｒｇａｎ，Ｄ．Ｏ．，Ｄｅ  Ｂｏｎｄｔ，Ｈ．Ｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１９９４，６，２３９−２４６）。活性化されると、Ｃｄｋ１／サイクリン複合体は、細胞にＭ期の間の分裂の準備をさせる。
【０００８】
上述のＧ1期からＳ期への移行は、Ｃｄｋ４とサイクリンＤならびにＣｄｋ２とサイクリンＥの複合体により制御されている。これらの複合体は、腫瘍抑制タンパク質網膜芽細胞腫（ｐＲｂ）をリン酸化し、転写因子Ｅ２Ｆを放出し、Ｓ期に必要な遺伝子の発現を可能にする（Ｎｅｖｉｎｓ，Ｊ．Ｒ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９９２，２５８，４２４−４２９；Ｌａｖｉａ，Ｐ．ＢｉｏＥｓｓａｙｓ  １９９９，２１，２２１−２３０）。Ｃｄｋ４／サイクリンＤおよびＣｄｋ２／サイクリンＥ複合体の活性を阻害すると、細胞周期がＧ1期にとどまる。例えば、Ｃｄｋ４／サイクリンＤ複合体のキナーゼ活性を阻害する、ｐ１６INK4aを含むＩＮＫ４ファミリーのタンパク質は、Ｇ1での停止を起こす（Ｓｈｅｒｒ，Ｃ．Ｊ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９９６，２７４，１６７２−１６７７）。特異的阻害が総説されている（Ｖｉｄａｌ，Ａ．Ｇｅｎｅ  ２０００，２４７，１−１５）。
【０００９】
Ｃｄｋ４とサイクリンＤ３の複合体が、Ｇ2期を通る細胞周期進行に役割を果たすことが最近の実験から示されている。ｐ１６により、または優性阻害Ｃｄｋ４の利用により、この複合体を阻害すると、細胞のＧ2期の停止をもたらしｐＲｂを発現しない（Ｇａｂｒｉｅｌｌｉ  Ｂ．Ｇ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９９，２７４，１３９６１−１３９６９）。
【００１０】
ｐＲｂ経路における多くの欠陥が種々の癌に関連していることが示されている。例えば、Ｃｄｋ４の過剰発現が、遺伝性メラノーマの場合に観察されてきた（Ｗｅｂｓｔｅｒ，Ｋ．Ｒ．Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｒｕｇｓ  １９９８，７，８６５−８８７）。サイクリンＤは、多くのヒトの癌で過剰発現されている（Ｓｈｅｒｒ，Ｃ．Ｊ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９９６，２７４，１６７２−１６７７）。ｐ１６は、多くの腫瘍で突然変異または欠失されている（Ｗｅｂｓｔｅｒ，Ｋ．Ｒ．Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｒｕｇｓ  １９９８，７，８６５−８８７）。ｐＲｂ機能は、多くのヒトの癌において突然変異または欠失により失われている（Ｗｅｉｎｂｅｒｇ，Ｒ．Ａ．Ｃｅｌｌ  １９９５，８１，３２３−３３０）。この経路における欠陥は、予後にも影響を与えることが示されている。例えば、ｐ１６の損失は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）および悪性メラノーマにおける良好でない予後と関連がある（Ｔｓｉｈｌｉａｓ，Ｊら、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．１９９９，５０，４０１−４２３）。遺伝子および／または発現レベルでのサイクリンＤ１および／またはｐＲｂの異常は、一連の非小細胞肺癌検体の９０％を超えるものに存在し、サイクリンＤ１および／またはｐＲｂが肺の腫瘍形成において重要なステップであることを示している（Ｍａｒｃｈｅｔｔｉ，Ａ．ら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  １９９８，７５，５７３−５８２）。膵臓癌５０例のうち４９において（９８％）、ｐＲｂ／ｐ１６経路が、ｐ１６遺伝子および結合されたサイクリンＤの不活性化により、排他的に排除されていた（Ｓｃｈｕｔｔｅ，Ｍ．ら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１９９８，５７，３１２６−３１３４）。多くの組織におけるｐＲｂの発現とサイクリン／サイクリン依存性キナーゼの間の関係についての総説は、Ｔｅｉｃｈｅｒ，Ｂ．Ａ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０００．４６，２９３−３０４を参照されたい。
【００１１】
Ｇ1からＳ期へ細胞周期の進行制御における役割によるＣｄｋ４／サイクリンＤ／ｐＲｂ経路のヒトの癌への関与およびこの経路の調整により得られる潜在的な治療上の利益のため、この経路の要素を阻害または促進する薬剤に多くの興味が存在した。例えば、抗体、アンチセンスオリゴヌクレオチドおよびこの経路に関与するタンパク質の過剰発現または追加を利用して癌細胞への効果が示されている。例えば、Ｌｕｋａｓ，Ｊ．ら、Ｎａｔｕｒｅ  １９９５，７９，５７３−５８２；Ｎｅｖｉｎｓ，Ｊ．Ｒ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９９２，２５８，４２４−４２９；Ｌｉｍ，Ｉ．Ｋ．ら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ  １９９８，２３，２５−３５；Ｔａｍ，Ｓ．Ｗ．ら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  １９９４，９，２６６３−２６７４；Ｄｒｉｓｃｏｌｌ，Ｂ．ら、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．１９９７，２７３（Ｌｕｎｇ  Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．）Ｌ９４１−Ｌ９４９；およびＳａｎｇ，Ｊ．ら、Ｃｈｉｎ．Ｓｃｉ．Ｂｕｌｌ．１９９９，４４，５４１−５４４）を参照されたい。
【００１２】
細胞増殖の制御におけるＣｄｋの役割は、このように確立している。例えば、上に示したとおり、増殖抑制治療薬としてＣｄｋ４、Ｃｄｋ２およびＣｄｋ１経路におけるターゲットを阻害する化合物の使用を検証する多くの文献がある。細胞増殖の阻害剤は、癌および他の細胞増殖障害、例えば、炎症（例えば、良性前立腺過形成、家族性アデノーマ、ポリープ症、神経繊維腫症、アテローム性動脈硬化症、肺繊維症、関節炎、乾癬、炎症性腸疾患、移植拒絶感染）、ウィルス感染（限定はされないが、ヘルペス（ｈｅｒｐｅｒ）ウィルス、ポックスウィルス、ＥＢウィルスなど）、自己免疫疾患（狼瘡、関節リウマチ、乾癬、炎症性腸疾患）、神経変性障害（限定はされないがアルツハイマー病）および神経変性疾患（例えば、パーキンソン病、筋萎縮側索硬化症、色素性網膜炎、脊髄性筋萎縮症および大脳変性）などの異常細胞増殖を特徴とする疾患プロセスの治療に有用な可逆性細胞増殖抑制薬として機能する。
【００１３】
異なる数種類の小分子が、Ｃｄｋの阻害剤として特定されてきた：オロモウシンおよび他のプリンアナログ、フラボピリドール、スタウロスポリン、ＵＣＮ−１０および他のインドロカルバゾール、９−ヒドロキシエリプチシン、インジルビン、パウロン（ｐａｕｌｌｏｎｅ）、ジアリールウレア、キナゾリン、インドピラゾール（ｉｎｄｏｐｉｒａｚｏｌｅ）、［２，３−ｄ］ピリドピリミジン、ファスカプリシン（ｆａｓｃａｐｌｙｓｉｎ）、アミノチアゾール、ジアミノチアゾール、プテリジノンおよびピラゾールまたは例（Ｃａｒｌｓｏｎら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，１９９６，５６，２９７３−２９７８；Ｄｅ  Ａｚｅｖｅｄｏら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９９７，２４３，５１８−５２６；Ｂｒｉｄｇｅｓ，Ａ．Ｊ．Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ．１９９５，５，１２４５１２５７；Ｒｅｉｎｈｏｌｄら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９８，２７８，３８０３−３８０７；Ｋａｋｅｙａ，Ｈ．ら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，１９９８，５８，７０４−７１０；Ｈａｒｐｅｒ，Ｊ．Ｗ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｕｒｖｅｙｓ  １９９７、２９，９１−１０７；Ｈａｒｒｉｎｇｔｏｎ，Ｅ．Ａ．，ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １９９８，９５，１１９４５−１１９５０；Ｍｅｉｊｅｒ，Ｌ．ら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２０００，２６７，１−１３；Ｇａｒｒｅｔｔ，Ｍ．Ｄ．ら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎ．Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｄｅｖｅｌｏｐ．１９９９，９，１０４−１１１；Ｍｇｂｏｎｙｅｂｉ，Ｏ．Ｐ．ら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，１９９９，５９，１９０３−１９１０；Ｈｏｅｓｓｅｌら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，１９９９，１，６０−６７；Ｚａｈｅｒｅｖｉｔｚら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，１９９９，５９，２５６６−２５６９；Ｈｏｎｍａ，Ｔ．ら、２２１st  Ｎａｔｉｏｎａｌ  ＡＣＳ  Ｍｅｅｔｉｎｇ．，２００１：Ｍｅｄｉ  １３６；Ｓｉｅｌｅｃｋｉ，Ｔ．Ｍ．ら、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２００１，１１，１１５７−１１６０；Ｎｕｇｉｅｌ，Ｄ．Ａ．ら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００１，４４，１３３４−１３３６；Ｆｒｙ，Ｄ．Ｗ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００１，２７６，１６６１７−１５５２３；Ｓｏｎｉ，Ｒ．ら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２０００，２７５，８７７；Ｒｙｕ，Ｃ−Ｋ．ら、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２０００，１０，４６１；Ｊｅｏｎｇ，Ｈ−Ｗ．ら、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，２０００，１０，１８１９；Ｔｏｏｇｏｏｄら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２０００，４３，４６０６−４６１６；Ｃｈｏｎｇ，Ｗ．，Ｆｉｓｃｈｅｒ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐ．，２００１，６，６２３−６３４；ＷＯ０００９９２１８４５，Ｔｏｏｇｏｏｄ．Ｐ．，ＷＯ０１１９８２５，Ｔｏｏｇｏｏｄ．Ｐ．，ＷＯ０１３８３１５，Ｒｅｉｃｈ  Ｓ．Ｈ．，ＷＯ０１７９１９８，Ｗｅｂｓｔｅｒ，Ｋ．ＵＳ  ６，２６２，０９６。
【００１４】
Ｃｄｋ４およびＦＡＫ３を阻害すると述べられている種類のジアミノピリジミンは、以下の式の化合物により表される。ＷＯ００１２４８５（Ａｓｔｒａ  Ｚｅｎｅｃａ）を参照のこと。
【化２】
2008501744.tif 000004
【００１５】
ＷＯ９１１８８８７（Ｓｍｉｔｈ  Ｋｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ）は、胃液分泌を抑制すると述べられている、以下の式のジアミノピリミジンに関する。
【化３】
2008501744.tif 000005
【００１６】
ＷＯ００３９１０１（Ａｓｔｒａ  Ｚｅｎｅｃａ）は、抗癌剤として作用すると述べられている、以下の式のピリミジン化合物に関する。
【化４】
2008501744.tif 000006
【００１７】
ＷＯ０１６４６５３（Ａｓｔｒａ  Ｚｅｎｅｃａ）は、Ｃｄｋ阻害剤およびＦＡＫ阻害剤として作用すると記載されている、以下の式のピリミジン化合物に関する。
【化５】
2008501744.tif 000007
【００１８】
ＷＯ０１６４６５４（Ａｓｔｒａ  Ｚｅｎｅｃａ）は、Ｃｄｋ阻害剤およびＦＡＫ阻害剤として作用すると記載されている、以下の式のピリミジン化合物に関する。
【化６】
2008501744.tif 000008
【００１９】
さらに、ＷＯ０１６４６５６は、やはりＣｄｋ阻害剤およびＦＡＫ阻害剤として記載されている、以下の式のピリミジン化合物に関する。
【化７】
2008501744.tif 000009
【００２０】
Ｃｄｋ４／サイクリンＤ経路を阻害する化合物の総説には、以下を参照されたい：Ｈａｒｒｉｓ，Ｗ．ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓｏｎ，Ｓ．，Ｅｍｅｒｇｉｎｇ  Ｄｒｕｇ．，２００５，５，２８７−２９７；Ｄｕｍａｓ，Ｊ．，Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ．２００１，１１，４０５−４２９；Ｓｉｅｌｅｃｋｉ  Ｔ．，ら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２０００，４３，１−１８。
【発明の開示】
【００２１】
本発明は、以下の式（Ｉ）を有する新規ピラゾロピリミジン：
【化８】
2008501744.tif 000010
あるいは、その医薬として許容される塩またはエステルを提供する
｛式中、
Ｒ1は以下からなる群から選択され：
（ａ）以下からなる群から独立に選択される最大で４の置換基により置換されていてよい複素環：
（ｉ）ＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよい低級アルキル；および
（ｉｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7またはＳ（Ｏ）nＲ8；
（ｂ）以下からなる群から独立に選択される最大で４の置換基に置換されていてよいアリール：
（ｉ）Ｓ（Ｏ）nＲ8、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキル、ＯＲ7、ハロゲンあるいはＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6またはＯＲ7により置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉ）ＣＯＯＨ；および
低級アルキル、ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されているカルボニル；
（ｃ）ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよいシクロアルキル；
（ｄ）以下により置換されていてよい低級アルキル：
（ｉ）ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、Ｓ（Ｏ）nＲ8、ＨＮＳ（Ｏ）nＲ8またはＣＯ2Ｒ3；
（ｉｉ）低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよい複素環；
（ｉｉｉ）低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよいヘテロアリール；および
（ｉｖ）低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3、ハロゲン、ＣＯＲ4またはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよいアリール；
Ｒ2は以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；
（ｉｉ）低級アルキルまたはＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7により置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉｉ）ハロゲン、ＮＯ2、ＣＮ、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキル、低級アルコキシおよびハロゲンまたはＯＲ7により置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
（ｉｖ）低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲンおよびＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7により置換されていてよい低級アルキルにより置換されていてよいヘテロアリール；
Ｒ3は以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；
（ｉｉ）ＯＲ7、ＣＯＲ4、ＮＲ5Ｒ6またはＣＯＮＲ5Ｒ6により置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉｉ）低級アルキル、ハロゲンおよびＮＲ5Ｒ6からなる群から独立に選択される最大で３の置換基により置換されていてよいアリール；および
（ｉｖ）ＯＨまたはＮＨ2により置換されていてよいシクロアルキル；
Ｒ4は以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；および
（ｉｉ）ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよい低級アルキル；
Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立に、以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；
（ｉｉ）ＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ10Ｒ11、複素環またはヘテロアリールにより置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＳＯ2Ｒ4、ＯＲ7またはＮＲ10Ｒ11により置換されていてよいシクロアルキル；
（ｉｖ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ10Ｒ11、ハロゲン、低級アルキルおよびハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＯＲ7、ＮＲ10Ｒ11またはＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
（ｖ）ＳＯ2Ｒ3；
（ｖｉ）ＣＯ2Ｒ3、および
（ｖｉｉ）ＣＯＲ3、または
或いは、ＮＲ5Ｒ6が合計で３−７の環原子を有する環を形成してよく、前記環原子が、Ｒ5およびＲ6が結合している窒素に加え炭素環原子を含んでなり、前記炭素環原子が任意に１つまたは複数の追加のＮまたはＯ環原子またはＳＯ2基により置換されており、前記環原子が任意に、ＯＨ、オキソ、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキルおよびＯＲ7により置換されている低級アルキルにより置換されており；
Ｒ7は、Ｈおよび任意にＮＲ5Ｒ6またはＯＲ9により置換されている低級アルキルからなる群から選択され；
Ｒ8は、以下からなる群から選択され：
（ｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲン、低級アルキルまたは、ハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6およびＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
（ｉｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲン、低級アルキルまたは、ハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいヘテロアリール；
（ｉｉｉ）ＮＲ5Ｒ6；
（ｉｖ）ハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＯＨにより置換されていてよい低級アルキル；
（ｖ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ3、ＳＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよい複素環；
Ｒ9は、Ｈ、低級アルキルおよびＯＨまたはハロゲンにより置換されている低級アルキルからなる群から選択され；
Ｒ10およびＲ11は、それぞれ独立に、以下からなる群から選択され：
（ｉ）Ｈ；
（ｉｉ）ＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、複素環またはヘテロアリールにより置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよいシクロアルキル；
（ｉｖ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲン、低級アルキルあるいはハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
（ｖ）ＳＯ2Ｒ3；
（ｖｉ）ＣＯ2Ｒ3；および
（ｖｉｉ）ＣＯＲ3；または
或いは、ＮＲ10Ｒ11が合計で３−７の環原子を有する環を形成してよく、前記環原子が、Ｒ10およびＲ11が結合している窒素に加え炭素環原子を含んでなり、前記炭素環原子が任意に１つまたは複数の追加のＮまたはＯ環原子またはＳＯ2基により置換されており、前記環原子が任意に、ＯＨ、オキソ、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキルおよびＯＲ7により置換されている低級アルキルにより置換されており；
ｎが１または２である｝。
【００２２】
これらの化合物は、サイクリン依存性キナーゼ、最も詳細には、サイクリン依存性キナーゼ１（Ｃｄｋ１）、サイクリン依存性キナーゼ２（Ｃｄｋ２）およびサイクリン依存性キナーゼ４（Ｃｄｋ４）を阻害する。これらの化合物ならびにその医薬として許容される塩およびエステルは増殖抑制活性を有し、癌、特に固形腫瘍の治療および制御に有用である。
【００２３】
本発明は、本発明の化合物の１種または複数あるいは、その医薬として許容される塩またはエステルおよび医薬として許容される担体または賦形剤を含んでなる医薬組成物にも関する。
【００２４】
本発明は、癌を治療または抑制する方法、より詳細には、固形腫瘍の治療または抑制、最も詳細には、乳房、肺ならびに結腸および前立腺の腫瘍の治療または抑制の方法であって、そのような治療を必要とする患者に、治療有効量の式Ｉの化合物あるいはその薬学的な塩またはエステルを投与することによる治療または抑制の方法にさらに関する。
【００２５】
最後に、本発明は、式Ｉの化合物の調製に有用な新規中間体化合物にも関する。
【００２６】
本願で使用されるとおり、以下の用語は以下の定義を有するものとする。
【００２７】
「アリール」は、一価で単環または二環の芳香族炭素環式炭化水素基であり、好ましくは六−十員芳香環系である。好ましいアリール基には、フェニル、ナフチル、トリルまたはキシリルがあるが、これらに限定されない。
【００２８】
「カルボニル」はＣ＝Ｏ基を意味する。
【００２９】
「シクロアルキル」は、非芳香族で部分的または完全に飽和している、３−８の原子を含む一価の環状炭化水素基を意味する。シクロアルキル基の例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルがある。
【００３０】
「有効量」は、疾病の症状の予防、緩和または改善あるいは治療される患者の生存を延長するに有効な量を意味する。
【００３１】
「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素、好ましくは、フッ素または塩素、より好ましくは、フッ素を意味する。
【００３２】
「ヘテロ原子」は、Ｎ、ＯおよびＳから選択される原子を意味する。
【００３３】
「ヘテロアリール」は、２までの環を含む芳香族複素環系を意味する。好ましいヘテロアリール基には、チエニル、フリル、インドリル、ピロリル、ピリジニル、ピリジン、ピラジニル、オキサゾリル、チアキソリル（ｔｈｉａｘｏｌｙｌ）、キノリニル、ピリミジニル、イミダゾール、ベンゾフランおよびテトラゾリルがあるが、これらに限定されない。
【００３４】
「複素環」または「複素環式」は、飽和または部分的に不飽和の、３−８の環原子の非芳香族環状基であり、１から３の環原子が、窒素、酸素、Ｓ（Ｏ）ｎ（ｎは０から２の整数）またはそれらの組み合わせから選択されるヘテロ原子であり、残りの環原子がＣである環状基を意味する。好ましい複素環の例は、ピペリジン、ピペラジン、ピロリジン、モルホリン、インドリン、テトラヒドロピラニル、チオモルホリノ、ペンタメチレンスルフィドおよびペンタメチレンスルホンである。
【００３５】
「ＩＣ50」は、測定される特定の活性の５０％を阻害するのに要求される、本発明による特定の化合物の濃度を意味する。ＩＣ50は、とりわけ、以下の実施例に記載のとおり測定可能である。
【００３６】
「Ｋi」は、ターゲットとするタンパク質に対するリガンド／阻害剤（すなわち、本発明による化合物）の熱力学的結合の尺度である。Ｋiは、とりわけ、以下の実施例に記載のとおり測定可能である。
【００３７】
「低級アルキル」は、単独で、または、例えば低級アルキル複素環のように、他の用語と組み合わさって、１から６の、好ましくは１から４の炭素原子を有する直鎖または分岐状飽和脂肪族炭化水素を意味する。典型的な低級アルキル基には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、２−ブチル、ペンチル、ヘキシルなどがある。
【００３８】
「低級アルコキシ」は、単独で、または、例えば低級アルコキシ複素環のように、他の用語と組み合わさって、１から６の、好ましくは１から４の炭素原子を有する直鎖または分岐状飽和脂肪族アルカノールを意味する。典型的な低級アルコキシ基には、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、ｔ−ブトキシ、２−ブトキシ、ペントキシ、へキソキシなどがある。
【００３９】
「オキソ」は＝Ｏを意味する。
【００４０】
「医薬として許容されるエステル」は、カルボキシル基を有する式Ｉの従来どおりエステル化された化合物であって、式Ｉの化合物の生物的な有効性および性質を保持しており、ｉｎ  ｖｉｖｏで（生物体中で）分裂して対応する活性カルボン酸になる化合物のことである。医薬化合物の送達のためのエステルの例およびその使用に関するさらなる情報は、Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ  Ｈ編（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８５）にある。Ｈ．Ａｎｓｅｌら、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（第６版、１９９５）、１０８−１０９ページ；Ｋｒｏｇｓｇａａｒｄ−Ｌａｒｓｅｎら、Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ（第２版、１９９６）、１５２−１９１ページも参照されたい。
【００４１】
「医薬として許容される塩」とは、式Ｉの化合物の生物的な有効性および性質を保持し、好適な非毒性有機酸または無機酸あるいは有機塩基または無機塩基から形成される、従来の酸付加塩または塩基付加塩のことである。酸付加塩の例としては、塩化水素酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸および硝酸などの無機酸から誘導されるものならびにｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、コハク酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸などの有機酸から誘導されるものがある。塩基付加塩の例としては、例えば、テトラメチルアンモニウムヒドロキシドなど、水酸化アンモニウム、カリウム、ナトリウムおよび４級アンモニウムから誘導されるものがある。医薬化合物（すなわち、薬）の塩への化学修飾は、化合物の物理的および化学的安定性、吸湿性、流動性および溶解性を改善するための製薬化学者に公知の技術である。例えば、Ｈ．ＡｎｓｅｌらのＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（第６版、１９９５）の１９６ページおよび１４５６−１４５７ページを参照されたい。
【００４２】
医薬として許容される担体、賦形剤などの「医薬として許容される」とは、特定の化合物が投与される患者にとって薬理学的に許容でき実質的に非毒性であることを意味する。
【００４３】
置換アルキルなどにおける「置換」とは、置換が１つまたは複数の部位で起こりうることおよび、特に記載のない限り、各置換部位の置換基が、特定の選択肢から独立に選択されることを意味する。
【００４４】
「治療有効量」とは、ヒト腫瘍細胞系を含むヒト腫瘍細胞の増殖を実質的に阻害し、かつ／またはその分化を防ぐ、少なくとも１種の式Ｉの化合物あるいは、その医薬として許容される塩またはエステルの量を意味する。
【００４５】
本発明によると、式（Ｉ）の化合物：
【化９】
2008501744.tif 000011
あるいは、その医薬として許容される塩またはエステルが提供される
｛式中、
Ｒ1は以下からなる群から選択される：
（ａ）以下からなる群から独立に選択される最大で４の置換基により置換されていてよい複素環：
（ｉ）ＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよい低級アルキル；および
（ｉｉ）ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7またはＳ（Ｏ）nＲ8；
（ｂ）以下からなる群から独立に選択される最大で４の置換基に置換されていてよいアリール：
（ｉ）Ｓ（Ｏ）nＲ8、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキル、ＯＲ7、ハロゲンまたはＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7により置換されていてよい低級アルキル；
（ｉｉ）ＣＯＯＨ；および
（ｉｉｉ）低級アルキル、ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されているカルボニル；
（ｃ）ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよいシクロアルキル；および
（ｄ）以下により置換されていてよい低級アルキル：
（ｉ）ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、Ｓ（Ｏ）nＲ8、ＨＮＳ（Ｏ）nＲ8またはＣＯ2Ｒ3；
（ｉｉ）低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよい複素環；
（ｉｉｉ）低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3またはＳ（Ｏ）nＲ8により置換されていてよいヘテロアリール；および
（ｉｖ）低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ハロゲンまたはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよいアリール｝。
【００４６】
好ましくは、Ｒ1は、ピペリジン、ピペラジンまたはピロリジンからなる群から選択される複素環；フェニル、トリルおよびキシリルからなる群から選択されるアリール；またはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルからなる群から選択されるシクロアルキル；メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、２−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択される低級アルキルである。より好ましくは、Ｒ1は、置換または非置換のピペリジン、フェニルおよびＣ2−Ｃ5アルキル基からなる群から選択される。より好ましくは、Ｒ1は、ＳＯ2ＣＨ3、ＣＨ3、ＣＯＯＣＨ2ＣＨ3、ＳＯ2ＮＨ2、Ｆ、ＯＣＨ3、ＯＨ、ＮＨ2またはＮ（ＣＨ3）2により置換される。
【００４７】
Ｒ2は以下からなる群から選択される：
Ｈ；
低級アルキルまたはＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6により置換されていてよい低級アルキル；
ハロゲン、ＮＯ2、ＣＮ、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキル、低級アルコキシおよびハロゲンまたはＯＲ7により置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
低級アルキル、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲンおよびＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ4、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7により置換されていてよい低級アルキルにより置換されていてよいヘテロアリール。
【００４８】
好ましくは、Ｒ2は、Ｈ；あるいはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、２−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択される低級アルキル；またはフェニル、トリルおよびキシリルからなる群から選択されるアリールである。より好ましくは、Ｒ2は、Ｈ、メチルおよびフッ素またはメトキシにより置換されていてよいフェニルからなる群から選択される。
【００４９】
Ｒ3は以下からなる群から選択される：
Ｈ；
ＯＲ7、ＣＯＲ4、ＮＲ5Ｒ6またはＣＯＮＲ5Ｒ6により置換されていてよい低級アルキル；
低級アルキル、ハロゲンおよびＮＲ5Ｒ6からなる群から独立に選択される最大で３の置換基により置換されていてよいアリール；および
ＯＨまたはＮＨ2により置換されていてよいシクロアルキル。
【００５０】
好ましくは、Ｒ3は、Ｈあるいはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、２−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択される低級アルキルである。より好ましくは、Ｒ3は、メチル、エチル、プロピルまたはイソプロピルである。
【００５１】
Ｒ4は以下からなる群から選択される：
Ｈ；および
ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよい低級アルキル。
【００５２】
好ましくは、Ｒ4は、Ｈあるいはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、２−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択される低級アルキルである。より好ましくは、Ｒ4は、Ｈ、メチル、エチル、プロピルまたはイソプロピルである。
【００５３】
Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立に、以下からなる群から選択される：
Ｈ；
ＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ10Ｒ11、複素環またはヘテロアリールにより置換されていてよい低級アルキル；
ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＳＯ2Ｒ4、ＯＲ7またはＮＲ10Ｒ11により置換されていてよいシクロアルキル；
ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ10Ｒ11、ハロゲン、低級アルキルおよびハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ10Ｒ11、ＯＲ7、ＮＲ10Ｒ11またはＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
ＳＯ2Ｒ3；
ＣＯ2Ｒ3、および
ＣＯＲ3。
【００５４】
或いは、ＮＲ5Ｒ6が合計で３−７の環原子を有する環を形成してよく、前記環原子が、Ｒ5およびＲ6が結合している窒素に加え炭素環原子を含んでなり、前記炭素環原子が任意に１つまたは複数の追加のＮまたはＯ環原子またはＳＯ2基により置換されており、前記環原子が任意に、ＯＨ、オキソ、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキルおよびＯＲ7により置換されている低級アルキルにより置換されている。
【００５５】
好ましくは、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立に、Ｈあるいはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、２−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択される低級アルキルからなる群から選択される。より好ましくは、Ｒ5およびＲ6は、Ｈ、メチル、エチル、プロピルまたはイソプロピルである。
【００５６】
Ｒ7は、Ｈおよび任意にＮＲ5Ｒ6またはＯＲ9により置換されている低級アルキルからなる群から選択される。
【００５７】
好ましくは、Ｒ7は、Ｈあるいはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、２−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択される低級アルキルである。より好ましくは、Ｒ7は、Ｈ、メチル、エチル、プロピルまたはイソプロピルである。
【００５８】
Ｒ8は、以下からなる群から選択される：
ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲン、低級アルキルまたはハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6およびＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲン、低級アルキルまたは、ハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいヘテロアリール；
ＮＲ5Ｒ6；
ハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＯＨにより置換されていてよい低級アルキル；
ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＲ3、ＳＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよい複素環。
【００５９】
好ましくは、Ｒ8は、Ｈあるいはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、２−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択される低級アルキルである。より好ましくは、Ｒ8は、Ｈ、メチル、エチル、プロピルまたはイソプロピルである。
【００６０】
Ｒ9は、Ｈ、低級アルキルおよびＯＨまたはハロゲンにより置換されている低級アルキルからなる群から選択される。
【００６１】
好ましくは、Ｒ9は、Ｈあるいはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、２−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択される低級アルキルである。より好ましくは、Ｒ9は、Ｈ、メチル、エチル、プロピルまたはイソプロピルである。
【００６２】
Ｒ10およびＲ11は、それぞれ独立に、以下からなる群から選択される：
Ｈ；
ＯＨ、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、複素環またはヘテロアリールにより置換されていてよい低級アルキル；
ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7またはＮＲ5Ｒ6により置換されていてよいシクロアルキル；
ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ3、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6、ハロゲン、低級アルキル、あるいはハロゲン、ＣＯ2Ｒ3、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＯＲ7、ＮＲ5Ｒ6またはＯＨにより置換されている低級アルキルにより置換されていてよいアリール；
ＳＯ2Ｒ3；
ＣＯ2Ｒ3；または
ＣＯＲ3。
【００６３】
或いは、ＮＲ10Ｒ11が合計で３−７の環原子を有する環を形成してよく、前記環原子が、Ｒ10およびＲ11が結合している窒素に加え炭素環原子を含んでなり、前記炭素環原子が任意に１つまたは複数の追加のＮまたはＯ環原子またはＳＯ2基により置換されており、前記環原子が任意に、ＯＨ、オキソ、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキルおよびＯＲ7により置換されている低級アルキルにより置換されている。
【００６４】
好ましくは、Ｒ10およびＲ11は、それぞれ独立に、Ｈあるいはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、２−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択される低級アルキルからなる群から選択される。より好ましくは、Ｒ10およびＲ11は、Ｈ、メチル、エチル、プロピルまたはイソプロピルである。
【００６５】
式（Ｉ）の化合物の例には以下のものがある：
［３−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン（実施例１６）
メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）−アミン（実施例１９）
メチル−ピペリジン−４−イル）−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）−アミン（実施例２３）
［３−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン（実施例２５）
［３−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン（実施例２６）
［３−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン（実施例２７）
（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−アミン；トリフルオロ酢酸が付加した化合物（実施例２８）
［３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン（実施例２９）
メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−（３−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）−アミン（実施例３０）
［３−（３−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン（実施例３１）
４−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イルアミノ］−ベンゼンスルホンアミド；トリフルオロ酢酸が付加した化合物（実施例３２）
［３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（４−フルオロ−フェニル）−アミン（実施例３３）
２−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イルアミノ］−エタノール（実施例３４）
［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−ペンタン−１，５−ジアミン；トリフルオロ酢酸が付加した化合物（実施例３５）
Ｎ’−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチル−プロパン−１，３−ジアミン（実施例３６）
Ｎ−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ペンタン−１，５−ジアミン；トリフルオロ酢酸が付加した化合物（実施例３７）
［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−フェニル−アミン（実施例３８）
（４−メトキシ−フェニル）−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−アミン；トリフルオロ酢酸が付加した化合物（実施例３９）
［３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（２−メトキシ−フェニル）−アミン；トリフルオロ酢酸が付加した化合物（実施例４０）
４−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イルアミノ）−ベンゼンスルホンアミド；トリフルオロ酢酸が付加した化合物（実施例４１）
２−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イルアミノ）−エタノール；トリフルオロ酢酸が付加した化合物（実施例４２）
４−［３−（３−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル；トリフルオロ酢酸が付加した化合物（実施例４３）
メチル−ピペリジン−４−イル）−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）−アミン（実施例４４）
【００６６】
式（Ｉ）の化合物の好ましい例には以下のものがある：
［３−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン（実施例１６）
メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）−アミン（実施例１９）
［３−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン（実施例２５）
［３−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン（実施例２７）
（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−アミン；トリフルオロ酢酸が付加した化合物（実施例２８）
［３−（３−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン（実施例３１）
４−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イルアミノ］−ベンゼンスルホンアミド；トリフルオロ酢酸が付加した化合物（実施例３２）  
【００６７】
本願に開示され上記の式Ｉに含まれる化合物は、互変異性または構造異性を示すことがある。本発明が、これらの化合物の互変異性または構造異性形態あるいはそのような形態の混合物を包含し、上記の式に描かれているどのような互変異性または構造異性形態にも限定されないことが意図される。
【００６８】
本発明の化合物は、どのような従来の手段によっても調製できる。これらの化合物を合成する好適な方法は実施例に提供されている。一般的に、式Ｉの化合物は、以下に記載の合成経路の１つにより調製できる。
【化１０】
2008501744.tif 000012
【００６９】
一般的に、これらの化合物は上記に与えた合成スキームにより調製できる。これらの化合物を調製する好適な方法は実施例に与えられている。
【００７０】
式Ｉの異性体構造の任意の分離は、例えば、分離（ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ）またはキラル高圧液体クロマトグラフィ（キラルＨＰＬＣとしても知られる）などの公知の方法により実施できる。分離方法は公知であり、「Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍａｔｅｓ，ａｎｄ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ」（Ｊａｃｑｕｅｓ，Ｊ．ら、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，ＮＹ，１９８１）に要約されている。キラルＨＰＬＣの方法も公知であり、「Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ  ｂｙ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ  Ｍｅｔｈｏｄｓ」（Ｐｉｒｋｌｅ，Ｗ．Ｈ．ａｎｄ  Ｆｉｎｎ，Ｊ．，“Ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｖｏｌ．１，Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｊ．Ｄ．編、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．，ＮＹ，１９８３，８７−１２４ページ）に要約されている。
【００７１】
塩基性窒素を有する式Ｉの化合物の医薬として許容される酸付加塩への任意の転換は、従来の手段により実施できる。例えば、化合物を、例えば、塩化水素酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸で、または酢酸、クエン酸、酒石酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸などの適切な有機酸で処理できる。
【００７２】
カルボン酸基を有する式Ｉの化合物の医薬として許容されるアルカリ金属塩への任意の転換は、従来の手段により実施できる。例えば、化合物を、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどの無機塩基により処理できる。
【００７３】
カルボン酸基を有する式Ｉの化合物の医薬として許容されるエステルへの任意の転換は、従来の手段により実施できる。エステル形成の条件は、分子内の他の官能基の反応条件に対する安定性によるであろう。分子内の他の部分が酸性条件に安定である場合、エステルは、鉱酸（例えば硫酸）のアルコール溶液中で加熱して調製するのが便利である。分子が酸性条件に安定でない場合都合のよい他のエステル調製方法は、カップリング剤の存在下で、反応を促進する追加の試薬が任意に存在する状態で、化合物をアルコールで処理するものである。そのようなカップリング剤の多くは有機化学の当業者に公知である。２つの例は、ジシクロヘキシルカルボジイミドおよびトリフェニルホスフィン／ジエチルアゾジカルボキシレートである。ジシクロヘキシルカルボジイミドがカップリング剤として使用される場合、反応は、ハロゲン化炭化水素（例えばジクロロメタン）などの不活性溶媒中で、約０℃と室温付近の間の温度で、好ましくは室温付近で、酸を、アルコール、ジシクロヘキシルカルボジイミドおよび触媒量（０−１０モル％）のＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンの任意の存在により処理して実施するのが便利である。トリフェニルホスフィン／ジエチルアゾジカルボキシレートがカップリング剤として使用される場合、反応は、エーテル（例えばテトラヒドロフラン）または芳香族炭化水素（例えばベンゼン）などの不活性溶媒中で、約０℃と室温付近の間の温度で、好ましくは約０℃で、酸を、アルコール、トリフェニルホスフィンおよびジエチルアゾジカルボキシレートで処理して実施するのが便利である。
【００７４】
別な実施形態において、本発明は、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物あるいは、その医薬として許容される塩またはエステルおよび医薬として許容される賦形剤および／または担体を含んでなる医薬組成物を含む。
【００７５】
これらの医薬組成物は、例えば、錠剤、コーティング錠、糖衣錠、ハードまたはソフトゼラチンカプセル、溶液、エマルションまたは懸濁液の形態で経口投与できる。医薬組成物は、例えば、坐薬の形態で経直腸投与でき、または注射液の形態で腸管外投与できる。式Ｉの化合物および／またはその塩またはエステルを含んでなる本発明の医薬組成物は、当業界に公知の方法、例えば、従来の混合、カプセル化、溶解、顆粒化、乳化、封入（ｅｎｔｒａｐｐｉｎｇ）、糖衣錠製造または凍結乾燥プロセスにより製造できる。これらの製剤は、治療上不活性な無機または有機担体とともに処方できる。ラクトース、コーンスターチまたはその誘導体、タルク、ステリック酸（ｓｔｅｒｉｃ  ａｃｉｄ）またはその塩は、錠剤、コーティング錠、糖衣錠およびハードゼラチンカプセル用のそのような担体として使用できる。ソフトゼラチンカプセル用の好適な担体には、植物油、ワックスおよび脂肪がある。活性物質の性質により、ソフトゼラチンカプセルの場合には一般的に担体は必要とされない。溶液およびシロップの製造のための好適な担体は、水、ポリオール、サッカロース、転化糖およびグルコースである。注射液のための好適な担体は、水、アルコール、ポリオール、グリセリン、植物油、リン脂質および界面活性剤である。坐薬のための好適な担体は、天然油または硬化油、ワックス、脂肪および半液体ポリオールである。
【００７６】
製剤は、保存剤、可溶化剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、甘味剤、着色剤、着香剤、浸透圧を変えるための塩、緩衝剤、コーティング剤または酸化防止剤も含んでよい。製剤は、式（Ｉ）のもの以外の追加の有効成分を含む、他の治療上価値のある物質も含んでよい。
【００７７】
上述のとおり、式（Ｉ）の化合物を含む本発明の化合物は、癌の化学防御を含む、細胞の増殖異常の治療または抑制に有用である。化学防御は、突然変異誘発性事象の開始の妨害または腫瘍再発を阻害する障害をすでに受けた前癌状態細胞の進行の妨害により、浸潤性癌の成長を阻害するものと定義される。これらの化合物および前記化合物を含む配合物は、固形腫瘍、例えば、乳房、結腸、肺および前立腺の腫瘍の治療または抑制に特に有用である。
【００７８】
本発明による化合物の治療有効量は、疾病の症状の予防、緩和または改善あるいは治療される患者の生存を延長するに有効な化合物の量を意味する。治療有効量の決定は当分野の技術範囲内である。
【００７９】
本発明による化合物の治療有効量または投薬量は広い範囲で変わることがあり、当分野に公知の方法で決定できる。そのような投薬量は、投与される特定の化合物（複数可）、投与経路、治療される病気ならびに治療される患者を含む、それぞれの場合の個別な要件に調整されるであろう。一般的に、およそ体重７０ｋｇのヒト成人に対する経口投与または腸管外投与の場合、指示のある場合上限を超えることもあるが、約１０ｍｇから約１０，０００ｍｇ、好ましくは約２００ｍｇから約１，０００ｍｇの一日投薬量が適当である。一日投薬量は、一回量としても、分割投与でも投与でき、腸管外投与の場合、連続点滴として与えてもよい。
【００８０】
本発明の化合物は、放射線治療などの公知の抗癌治療と組み合わせて、あるいは細胞増殖抑止剤または細胞毒性剤、例えば、限定はされないが、シスプラチンまたはドキソルビシンなどのＤＮＡ作用薬；エトポシドなどのトポイソメラーゼＩＩ阻害剤；ＣＰＴ−１１またはトポテカンなどのトポイソメラーゼＩ阻害剤；パクリタキセル、デセタキセルまたはエポチロンなどのチューブリン作用剤；タモキシフェンなどのホルモン剤；５−フルオロウラシルなどのチミジレートシンセターゼ阻害剤；およびメトトレキセートなどの代謝拮抗物質と組み合わせて（組み合わせてまたは連続的に投与）使用してよい。式Ｉの化合物は、ｐ５３トランス活性化のモジュレーターと組み合わせても有用なことがある。
【００８１】
固定された投薬量として処方される場合、上述の組み合わせ製品は、上述の投薬量範囲内の本発明の化合物および認可されている投薬量範囲内の他の薬学的に活性な薬剤または治療を含む。例えば、初期のＣｄｋ１阻害剤オロモウシンは、公知の細胞毒性剤と相乗的に作用し、アポトーシスを引き起こすことが見いだされている（Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｓｃｉ．，１９９５，１０８，２８９７−２９０４）。式Ｉの化合物は、同時投与または組み合わせが不適当な場合、公知の抗癌剤または細胞毒性剤と連続して投与してもよい。本発明は、投与の順序に限定されない。式Ｉの化合物は、公知の抗癌剤または細胞毒性剤の前にでも、後にでも投与してよい。例えば、Ｃｄｋ阻害剤フラボピリドールの細胞毒活性は、抗癌剤との投与の順番により影響される（Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９９７，５７，３３７５）。
【実施例】
【００８２】
以下の実施例は、本発明の化合物および配合物の好ましい合成方法および使用方法を説明している。これらの実施例および調合物は実例であり、限定的なものではない。本願に添付される特許請求の範囲に定義される本発明の精神および範囲内に含まれる他の実施形態もあることを理解されたい。
【００８３】
実施例１
（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−フェニル）−メタノール
【化１１】
2008501744.tif 000013
−３０℃で２０ｍＬのＴＨＦ中の５−ブロモ−２，４−ジクロロピリミジン（Ａｌｄｒｉｃｈ、３．０２ｇ、１３．２５ミリモル）の攪拌している溶液に、イソプロピルマグネシウム塩化物（Ａｌｄｒｉｃｈ、ＴＨＦ中２Ｍ溶液、７．１２ｍＬ、１３．２５ミリモル）を滴下して加え、混合物を２０分間攪拌した。次いで、２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−ベンズアルデヒド（Ｍａｔｒｉｘ、２．２８ｇ、１３．２５ミリモル）を加え、混合物を０℃に温め、４０分間攪拌した。飽和塩化アンモニウム溶液で反応を停止し、得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥した。ロータリーエバポレーターで溶媒を除き、固体をヘキサン（８ｍＬ）で処理した。固体を濾過し、乾燥し、オフホワイトの固体を得た。３．４２ｇ；収率、８０．５％。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、３２２。
【００８４】
実施例２
（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−フェニル）−メタノン
【化１２】
2008501744.tif 000014
アルコール（２．００ｇ、６．２３ミリモル）を塩化メチレン（２０ｍＬ）に溶解させた。攪拌している溶液に、水（２ｍＬ）を加え、その後、ＮａＨＣＯ3（２３５ｍｇ、２．８ミリモル）、テトラブチルアンモニウム塩化物（Ａｌｄｒｉｃｈ、６０ｍｇ、０．１８ミリモル）およびＴＥＭＰＯ（Ａｌｄｒｉｃｈ、１０ｍｇ、０．０６２ミリモル）を加えた。次いで、混合物を０℃に冷却し、次亜塩素酸ナトリウム（Ａｌｄｒｉｃｈ、活性Ｃｌ2、５．８％、８．７８ｍＬ）をゆっくりと加え、得られた新しい混合物を３０分間攪拌した。混合物を水に注ぎ、塩化メチレンで抽出した。抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を除き、薄い黄色の固体として適切な生成物を得た。１．８４ｇ、９２％。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、３１９。
【００８５】
実施例３
６−クロロ−３−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン
【化１３】
2008501744.tif 000015
ＴＨＦ中のケトン（６３８ｍｇ、２ミリモル）の攪拌している溶液に、ヒドラジン（Ａｌｄｒｉｃｈ、８０ｍｇ、２．５ミリモル）を加え、混合物を室温で３０分間、次いで５０℃で１時間攪拌した。溶媒を除き、固体を水で洗浄し、乾燥し、黄色の固体を得た。５８０ｍｇ、９７％。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、２９７。
【００８６】
実施例４
（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−（２−メトキシ−フェニル）−メタノール
【化１４】
2008501744.tif 000016
実施例１に記載のものと類似の方法で、５−ブロモ−２，４−ジクロロピリミジン（Ａｌｄｒｉｃｈ）および２−メトキシベンズアルデヒド（Ａｌｄｒｉｃｈ）から収率７７％で化合物を調製した。1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ８．７５（ｓ、１Ｈ）、７．３４（ｄ．ｔ．１Ｈ、Ｊ＝２Ｈｚ、８Ｈｚ）、７．１６（ｄ．ｄ．１Ｈ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、７．３Ｈｚ）、６．９６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）、６．９５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８Ｈｚ）、６．２１（ｓ、１Ｈ）、３．８５（ｓ、３Ｈ）、３．１４８（ｂｒ、ｓ、１Ｈ）。
【００８７】
実施例５
（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−（２−メトキシ−フェニル）−メタノン
【化１５】
2008501744.tif 000017
実施例２に記載のものと類似の方法で、（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−（２−メトキシ−フェニル）−メタノール（実施例４）から収率９６％で化合物を調製した。1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ８．６０（ｓ、１Ｈ）、７．８４（ｄ．ｄ．１Ｈ、Ｊ＝２Ｈｚ、８Ｈｚ）、７．６０（ｄｄ、１Ｈ  Ｊ＝２Ｈｚ、７．３Ｈｚ）、７．１２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）、６．９５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８Ｈｚ）、３．６７（ｓ、３Ｈ）
【００８８】
実施例６
６−クロロ−３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン
【化１６】
2008501744.tif 000018
実施例３に記載のものと類似の方法で（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−（２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例５）から収率３５％で化合物を調製した。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、２６１．１１。
【００８９】
実施例７
（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−（３−フルオロ−フェニル）−メタノール
【化１７】
2008501744.tif 000019
実施例１に記載のものと類似の方法で、５−ブロモ−２，４−ジクロロピリミジン（Ａｌｄｒｉｃｈ）および３−フルオロベンズアルデヒド（Ａｌｄｒｉｃｈ）から収率７９％で化合物を調製した。1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ８．８５（ｓ、１Ｈ）、７．３５（ｍ、１Ｈ）、７．１４（ｍ、３Ｈ）、７．１４（ｍ、３Ｈ）、６．０７７（ｓ、１Ｈ）。
【００９０】
実施例８
（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−（３−フルオロ−フェニル）−メタノン
【化１８】
2008501744.tif 000020
実施例２に記載のものと類似の方法で、（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−（３−フルオロ−フェニル）−メタノール（実施例７）から収率９９％で化合物を調製した。1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ８．６３２（ｓ、１Ｈ）、７．５２（ｍ、４Ｈ）、７．４３（ｍ、１Ｈ）、５．３０３（ｓ、１Ｈ）。
【００９１】
実施例９
６−クロロ−３−（３−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン
【化１９】
2008501744.tif 000021
実施例３に記載のものと類似の方法で、（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−（３−フルオロ−フェニル）−メタノン（実施例８）から収率７５％で化合物を調製した。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、２４９。
【００９２】
実施例１０
（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−メタノール
【化２０】
2008501744.tif 000022
実施例１に記載のものと類似の方法で、５−ブロモ−２，４−ジクロロピリミジン（Ａｌｄｒｉｃｈ）および２，６−ジフルオロベンズアルデヒド（Ａｌｄｒｉｃｈ）から収率８８％で化合物を調製した。1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ９．０９（ｓ、１Ｈ）、７．３５（ｍ、１Ｈ）、７．９２（ｍ、２Ｈ）、６．３５（ｓ、１Ｈ）、２．６７（ｂｒ．ｓ、１Ｈ）。
【００９３】
実施例１１
（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−メタノン
【化２１】
2008501744.tif 000023
実施例２に記載のものと類似の方法で、（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−メタノール（実施例１０）から収率９８％で化合物を調製した。1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ８．７９（ｓ、１Ｈ）、７．５６（ｍ、１Ｈ）、７．０４（ｍ、２Ｈ）。
【００９４】
実施例１２
６−クロロ−３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン
【化２２】
2008501744.tif 000024
実施例３に記載のものと類似の方法で、（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−メタノン（実施例１１）から収率７１％で化合物を調製した。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、２６７．０８。
【００９５】
実施例１３
（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−フェニル−メタノール
【化２３】
2008501744.tif 000025
実施例１に記載のものと類似の方法で、５−ブロモ−２，４−ジクロロピリミジン（Ａｌｄｒｉｃｈ）およびベンズアルデヒド（Ａｌｄｒｉｃｈ）から収率７９％で化合物を調製した。1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ８．９１（ｓ、１Ｈ）、７．３６（ｍ、５Ｈ）、６．０６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝３．０Ｈｚ）、２．４８（ｂｒ  ｍ、１Ｈ）。
【００９６】
実施例１４
（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−フェニル−メタノン
【化２４】
2008501744.tif 000026
実施例２に記載のものと類似の方法で、（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−フェニル−メタノール（実施例１３）から収率９８％で化合物を調製した。1Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ3）δ８．６２（ｓ、１Ｈ）、７．７９（ｍ、２Ｈ）、７．７０（ｍ、１Ｈ）、７．５４（ｍ、２Ｈ）。
【００９７】
実施例１５
６−クロロ−３−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン
【化２５】
2008501744.tif 000027
実施例３に記載のものと類似の方法で、（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−フェニル−メタノン（実施例１４）から収率９９％で化合物を調製した。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、２３１．０８。
【００９８】
実施例１６
［３−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン
【化２６】
2008501744.tif 000028
ＤＭＦ（２．５ｍＬ）中の６−クロロ−３−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例３、１４８ｍｇ、０．５０ミリモル）の攪拌している溶液に、重炭酸ナトリウム（１００ｍｇ）および１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミン（１２５ｍｇ、０．７０ミリモル）を加え、混合物を１００℃で４時間攪拌した。溶媒を減圧下で除き、残渣を水で処理した。固体を濾過し乾燥した。２％ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2からの再結晶により９２ｍｇのオフホワイトの固体を得た。４２％。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、４３９。
【００９９】
実施例１７
２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−カルボアルデヒド
【化２７】
2008501744.tif 000029
−７８℃のＴＨＦ中の５−ブロモ−２，４−ジクロロピリミジン（Ａｌｄｒｉｃｈ、４５４ｍｇ、２ミリモル）の攪拌している溶液に、ジイソプロピルマグネシウム塩化物（２ＭのＴＨＦ溶液、２．１ミリモル、１．０５ｍＬ）を加え、混合物を−３５℃で３０分間攪拌した。次に、溶液を−７８℃に冷却し、１ｍＬの乾燥ＤＭＦを加えた。混合物を−７８℃で１２０分間攪拌し、反応を１Ｎ  ＨＣｌで停止した。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を除き、残渣をクロマトグラフにかけて、茶色の固体を得た。１０２ｍｇ、２８％。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）δ（ｐｐｍ）９．０（ｓ、１Ｈ）、１０．４（ｓ、１Ｈ）。
【０１００】
実施例１８
６−クロロ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン
【化２８】
2008501744.tif 000030
ＴＨＦ（５ｍＬ）中のヒドラジン（Ａｌｄｒｉｃｈ、６４ｍｇ、２ミリモル）の攪拌している溶液に、２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−カルボアルデヒド（実施例１７、１７６ｍｇ、１ミリモル）を加え、混合物を室温で３０分間攪拌した。混合物を水に注ぎ、ＥｔＯＡｃで抽出した。抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を除き、橙色の固体を得た。１２８ｍｇ、８２％。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、１５５。
【０１０１】
実施例１９
メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）−アミン
【化２９】
2008501744.tif 000031
ＤＭＦ（２．５ｍＬ）中の（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−（１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）−アミン（実施例１８、６１ｍｇ、０．４０ミリモル）の攪拌している溶液に、重炭酸ナトリウム（６０ｍｇ）および１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミン（８５ｍｇ、０．４８ミリモル）を加え、混合物を１００℃で５時間攪拌した。溶媒を減圧下で除き、残渣を水で処理し、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥し濃縮し、固体を得たが、これを逆相ＨＰＬＣで精製してオフホワイトの固体を得た。２９ｍｇ、２９％。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、２９７。
【０１０２】
実施例２０
１−（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−エタノール
【化３０】
2008501744.tif 000032
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−カルボアルデヒド（実施例１７、１．０１ｇ、５．７ミリモル）の攪拌している溶液に、メチルマグネシウムブロマイド（Ａｌｄｒｉｃｈ、３Ｍエーテル溶液、６．２７ミリモル、２．１ｍＬ）を−７８℃でゆっくりと加えた。混合物をさらに２時間−７８℃で攪拌し、反応を１Ｎ  ＨＣｌ（１０ｍＬ）で停止させた。得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を除き、茶色の固体を得た。１．０７ｇ、９７％。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、１９３。
【０１０３】
実施例２１
１−（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−エタノン
【化３１】
2008501744.tif 000033
塩化メチレン（３０ｍＬ）、ＴＨＦ（８ｍＬ）および水（２ｍＬ）の混合物中の１−（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−エタノール（実施例２０、１．００ｇ、５．２ミリモル）の攪拌している懸濁液に、テトラブチルアンモニウム塩化物（Ａｌｄｒｉｃｈ、５０ｍｇ、０．１５ミリモル）、ＴＥＭＰＯ（Ａｌｄｒｉｃｈ、９ｍｇ、０．０５ミリモル）および重炭酸ナトリウム（２０８ｍｇ、２．４８ミリモル）を加え、混合物を０℃に冷却した。攪拌している混合物に、ｃｏｌｏｒｅｘ（Ａｌｄｒｉｃｈ、活性Ｃｌ2、１０−１３％、３．７５ｍＬ）を加え、混合物を０℃で２時間攪拌した。水（１０ｍＬ）を加え、有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を除去し油を得たが、これをシリカゲルクロマトグラフィー（１％  ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2）で精製して、無色の油を得た。２３２ｍｇ、２３％。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、１９１。
【０１０４】
実施例２２
６−クロロ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン
【化３２】
2008501744.tif 000034
ＴＨＦ（５ｍＬ）中のヒドラジン（Ａｌｄｒｉｃｈ、１０２．４ｍｇ、３．２ミリモル）の攪拌している溶液に、１−（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−エタノン（実施例２１、１９１ｍｇ、１ミリモル）を加え、混合物を室温で１時間攪拌した。反応を水（５ｍＬ）で停止し、混合物をＥｔＯＡｃ／ＴＨＦ（３×５ｍＬ、ＥｔＯＡｃ：ＴＨＦの１：１混合物）で抽出した。抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮すると、固体を得た。１２６ｍｇ、７５％。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、１６９。
【０１０５】
実施例２３
メチル−ピペリジン−４−イル）−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）−アミン
【化３３】
2008501744.tif 000035
ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中の６−クロロ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例２２、５６ｍｇ、０．３ミリモル）の攪拌している溶液に、１−メチル−ピリミジン−４−イルアミン（Ａｌｄｒｉｃｈ、４６ｍｇ、０．４０ミリモル）を加え、混合物を１００℃で２時間攪拌した。溶媒を除き、残渣をクロマトグラフにかけ（ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2中の５％７Ｎアンモニア）、白色固体を得た。４５ｍｇ、６１％。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、２４７。
【０１０６】
実施例２４
６−クロロ−３−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン
【化３４】
2008501744.tif 000036
ＴＨＦ（８ｍ）中の（２，４−ジクロロ−ピリミジン−５−イル）−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン（６０２ｍｇ、２ミリモル）の攪拌している溶液に、ヒドラジン（Ａｌｄｒｉｃｈ、９８％、６４ｍｇ、２ミリモル）を加え、混合物を２０分間攪拌し、第２部のヒドラジン（０．１ｍＬ）を加えた。反応は５分で終わった。溶媒を除き、固体を水／アセトニトリル（３：１）で洗浄し、黄色の固体を得た。４５６ｍｇ、８２％。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、２７８。
【０１０７】
実施例２５
［３−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン
【化３５】
2008501744.tif 000037
ＤＭＦ（４ｍＬ）中の６−クロロ−３−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例２４、９７ｍｇ、０．３５ミリモル）の攪拌している溶液に、重炭酸ナトリウム（６０ｍｇ）および１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミン（９３ｍｇ、０．５２ミリモル）を加え、混合物を１００℃で４時間攪拌した。反応を冷却し、混合物を水（６０ｍＬ）に注いだ。固体を濾過し、乾燥し、黄色固体を得たが、これを逆相ＨＰＬＣにより精製し、５２ｍｇの薄黄色固体を得た。収率３５％。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、４２１。
【０１０８】
実施例２６
［３−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン
【化３６】
2008501744.tif 000038
実施例２４の６−クロロ−３−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（９７ｍｇ、０．３５ミリモル）およびＮ−（４−アミノ−シクロヘキシル）−メタンスルホンアミド（１０１ｍｇ、０．５２ミリモル）から出発して、実施例２５に記載の手順と同じ手順を利用し、黄色固体を得た。７０ｍｇ、４６％。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、４３５。
【０１０９】
実施例２７
［３−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン
【化３７】
2008501744.tif 000039
実施例２４の６−クロロ−３−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（１０３ｍｇ、０．３７ミリモル）および（３Ｓ，４Ｓ）−（４−アミノ−１−メタンスルホニル−ピペリジン−３−オール（１１５ｍｇ、０．５９ミリモル）から出発して、実施例２５に記載の手順と同じ手順を利用し、黄色固体を得た。７０ｍｇ、４６％。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、４３７。
【０１１０】
実施例２８
メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−アミン；トリフルオロ酢酸が付加した化合物
【化３８】
2008501744.tif 000040
６−クロロ−３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例６）および１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミンから化合物、トリフルオロ酢酸が付加した化合物を実施例４に記載のものと類似の方法で調製し、ＨＰＬＣにより精製して、ＴＦＡ塩（収率３６％）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、４０３．２４。
【０１１１】
実施例２９
［３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン
【化３９】
2008501744.tif 000041
６−クロロ−３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例８）および１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミンから化合物、トリフルオロ酢酸が付加した化合物を実施例４に記載のものと類似の方法で調製し、ＨＰＬＣ（Ｇｉｌｓｏｎ）により精製して、遊離塩基（収率３４．５％）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、４０９．２２。
【０１１２】
実施例３０
メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−（３−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）−アミン
【化４０】
2008501744.tif 000042
６−クロロ−３−フェニル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例１４）および１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミンから化合物、トリフルオロ酢酸が付加した化合物を実施例４に記載のものと類似の方法で調製し、ＨＰＬＣ（Ｇｉｌｓｏｎ）により精製して、遊離塩基（収率２１％）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、３７３．２４。
【０１１３】
実施例３１
［３−（３−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミン
【化４１】
2008501744.tif 000043
６−クロロ−３−（３−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例９）および１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミンから化合物、トリフルオロ酢酸が付加した化合物を実施例４に記載のものと類似の方法で調製し、ＨＰＬＣ（Ｇｉｌｓｏｎ）により精製して、遊離塩基（収率６％）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、３９１．２５。
【０１１４】
実施例３２
４−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イルアミノ］−ベンゼンスルホンアミド；トリフルオロ酢酸が付加した化合物
【化４２】
2008501744.tif 000044
６−クロロ−３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例６、５０ｍｇ、０．１９２ミリモル）およびスルファニルアミド（Ａｌｄｒｉｃｈ、４７．６ｍｇ、０．２７６ミリモル、Ａｌｄｒｉｃｈ）を２−プロパノール（１ｍｌ）とマイクロ波管中で合わせ、マイクロ波加熱器（ＳｍｉｔｈＳｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒ、Ｐｅｒｓｏｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）中で１７０℃で１０分間加熱し、冷却して、懸濁液を濾過し、固体を回収し、冷２−プロパノールで洗浄した。ＨＰＬＣ精製により、ＴＦＡ塩として４０．１ｍｇ（４１％）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、３９７．１。
【０１１５】
実施例３３
「３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル」−（４−フルオロ−フェニル）−アミン
【化４３】
2008501744.tif 000045
６−クロロ−３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例１２）および４−フルオロアニリン（Ａｌｄｒｉｃｈ）から、実施例３２に記載のものと類似の方法（１６０℃）で化合物を調製した。反応後の濾過および２−プロパノールによる洗浄により、標題生成物（５９％）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、３４２．１。
【０１１６】
実施例３４
２−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イルアミノ］−エタノール
【化４４】
2008501744.tif 000046
６−クロロ−３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例６）およびエタノールアミン（ＡｎａＬａＲ）から、実施例３２に記載のものと類似の方法で化合物を調製した。ＨＰＬＣ精製により、標題化合物（２４ｍｇ、収率３７％）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、２８６．２。
【０１１７】
実施例３５
［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−ペンタン−１，５−ジアミン；トリフルオロ酢酸が付加した化合物
【化４５】
2008501744.tif 000047
６−クロロ−３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例６）および１，５−ジアミノペンタン（ＡＣＲＯＳ）から、実施例３２に記載のものと類似の方法（マイクロ波で１２０℃）で化合物を調製した。ＨＰＬＣ精製により、ＴＦＡ塩（収率６８％）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、３２７．３。
【０１１８】
実施例３６
Ｎ’−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチル−プロパン−１，３−ジアミン
【化４６】
2008501744.tif 000048
６−クロロ−３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例６）および３−ジメチルアミノプロピルアミン（Ａｌｄｒｉｃｈ）から、実施例３２に記載のものと類似の方法（１２０℃）で化合物を調製し、９．２ｍｇ（収率１２％）の遊離塩基を得た。ＨＰＬＣによる母液の精製により、ＴＦＡ塩（５０ｍｇ、収率４９％）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、３２７．２。
【０１１９】
実施例３７
Ｎ−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ペンタン−１，５−ジアミン；トリフルオロ酢酸が付加した化合物
【化４７】
2008501744.tif 000049
６−クロロ−３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例６）および５−（ジメチルアミノ）アミルアミン（Ｍａｔｒｉｘ）から、実施例３２に記載のものと類似の方法（１２０℃）で化合物を調製した。ＨＰＬＣによる精製によりＴＦＡ塩（収率５９％）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、３５５．２５。
【０１２０】
実施例３８
［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−フェニル−アミン
【化４８】
2008501744.tif 000050
６−クロロ−３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例６）およびアニリン（Ａｌｄｒｉｃｈ）から、実施例３２に記載のものと類似の方法（１７５℃）で化合物を調製し、標題化合物を収率６９％で得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、３１８．２。
【０１２１】
実施例３９
（４−メトキシ−フェニル）−［３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−アミン；トリフルオロ酢酸が付加した化合物
【化４９】
2008501744.tif 000051
６−クロロ−３−（２−メトキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例６）およびｐ−アニシジン（Ａｌｄｒｉｃｈ）から、実施例３２に記載のものと類似の方法（１７５℃）で化合物を調製した。ＨＰＬＣによる精製により、標題化合物をＴＦＡ塩として（収率４８％）で得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、３４８．２。
【０１２２】
実施例４０
［３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル］−（２−メトキシ−フェニル）−アミン；トリフルオロ酢酸が付加した化合物
【化５０】
2008501744.tif 000052
６−クロロ−３−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例１２）およびｏ−アニシジン（Ａｌｄｒｉｃｈ）から、実施例３２に記載のものと類似の方法（１６０℃）で化合物を調製した。ＨＰＬＣによる精製により、ＴＦＡ塩（収率４２％）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、３５４．１。
【０１２３】
実施例４１
４−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イルアミノ）−ベンゼンスルホンアミド；トリフルオロ酢酸が付加した化合物
【化５１】
2008501744.tif 000053
６−クロロ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例２２）およびスルファニルアミド（Ａｌｄｒｉｃｈ）から、実施例３２に記載のものと類似の方法（１７５℃）で化合物を調製した。ＨＰＬＣによる精製により、ＴＦＡ塩として標題化合物（１３％）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、３０５．０。
【０１２４】
実施例４２
２−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イルアミノ）−エタノール；トリフルオロ酢酸が付加した化合物
【化５２】
2008501744.tif 000054
６−クロロ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例２２）およびエタノアミン（ＡｎａＬａＲ）から、実施例３２に記載のものと類似の方法（１２０℃）で化合物を調製した。ＨＰＬＣによる精製により、ＴＦＡ塩を収率５６％で得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、１９３．９。
【０１２５】
実施例４３
４−［３−（３−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル；トリフルオロ酢酸が付加した化合物
【化５３】
2008501744.tif 000055
６−クロロ−３−（３−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例９）およびエチル４−アミノ−１−ピペリジンカルボキシレート（Ａｌｄｒｉｃｈ）から、実施例３２に記載のものと類似の方法（１６０℃）で化合物を調製した。ＨＰＬＣによる精製により、ＴＦＡ塩を収率１８％で得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、３８５．１。
【０１２６】
実施例４４
メチル−ピペリジン−４−イル）−（３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−６−イル）−アミン
【化５４】
2008501744.tif 000056
６−クロロ−３−メチル−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン（実施例２２）および４−アミノ−Ｎ−メチルピペリジン（Ａｌｄｒｉｃｈ）から、実施例３２に記載のものと類似の方法で化合物を調製した。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+、２４７。
【０１２７】
実施例４５
本発明の化合物の薬理学的性質を、いくつかの薬理学的アッセイにより確認できる。以下に例示する薬理学的アッセイを、本発明による化合物およびそれらの塩に実施した。本発明の化合物は、１．０μＭ未満のＩＣ50値およびＫｉ値を持つＣｄｋ４／サイクリンＤ活性を示した。さらに、本発明のいくつかの化合物の増殖抑制能をヒト結腸腫瘍細胞系統ＨＣＴ１１６で試験し、３０μＭ未満、好ましくは５μＭ未満のＭＴＴアッセイから報告されるＩＣ90値を得た。
【０１２８】
キナーゼアッセイ
Ｃｄｋ４、Ｃｄｋ２およびＣｄｋ１活性の阻害を測定するため、キナーゼアッセイをＦｌａｓｈＰｌａｔｅ（商標）アッセイ（ＮＥＮ（商標）−Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）を使用して実施した。ＦｌａｓｈＰｌａｔｅアッセイを、組換型ヒトサイクリンＢ−Ｃｄｋ１、ヒトサイクリンＥ−Ｃｄｋ２またはヒトサイクリンＤ１−Ｃｄｋ４複合体を利用して実施した。バキュロウィルスベクター中のＧＳＴ−サイクリンＥ（ＧＳＴ−ｃｙｃＥ）、Ｃｄｋ２、ＧＳＴ−サイクリンＢ（ＧＳＴ−ｃｙｃＢ）、Ｃｄｋ１、ＧＳＴ−Ｃｄｋ４およびサイクリンＤ１（ｃｙｃＤ１）ｃＤＮＡクローンは、テキサス州、ヒューストン、ベイラー医科大学のＷ．Ｈａｒｐｅｒ博士が提供した。タンパク質は、Ｈｉｇｈ  Ｆｉｖｅ（商標）昆虫細胞中で共発現させ、すでに記載のとおり（Ｈａｒｐｅｒ，Ｊ．Ｗ．ら、Ｃｅｌｌ  １９９３，７５，８０５−８１６）複合体をグルタチオンＳｅｐｈａｒｏｓｅ樹脂（ニュージャージー州、ピスカタウェイ、Ｐｈａｒｍａｃｉａ）で精製した。６×ヒスチジンタグの付いた短縮型（６×−ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ  ｔａｇｇｅｄ  ｔｒｕｎｃａｔｅｄ  ｆｏｒｍ）の網膜芽細胞腫（Ｒｂ）タンパク質（アミノ酸３８６−９２８）を、ｃｙｃＤ１−Ｃｄｋ４、ｃｙｃＢ−Ｃｄｋ１およびｃｙｃＥ−Ｃｄｋ２アッセイの基質として使用した（発現プラスミドは、英国、ウェリンガーデンシティー、Ｒｏｃｈｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｅｎｔｒｅ、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ、Ｖｅｒｏｎｉｃａ  Ｓｕｌｌｉｖａｎ博士が提供した）。Ｒｂタンパク質は、Ｃｄｋ４、Ｃｄｋ２およびＣｄｋ１のリン酸化の天然の基質である（ＨｅｒｗｉｇおよびＳｔｒａｕｓｓ、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｖｏｌ．２４６（１９９７）、５８１−６０１ページおよびそこで引用されている参考文献を参照のこと）。
【０１２９】
６２Ｋｄタンパク質の発現は、大腸菌Ｍ１５株中のＩＰＴＧ誘導性プロモーターの制御下にあった。細胞を超音波により溶解させ、１ｍＭイミダゾールで前処理したＮｉキレート化アガロースカラムにｐＨ８．０で溶解物を結合させて精製を実施した。次いで、ｐＨ緩衝液をｐＨ６．０まで徐々に下げながら樹脂を数回洗浄し、５００ｍＭイミダゾールで溶離した。溶離したタンパク質を２０ｍＭのｐＨ７．５のＨＥＰＥＳ、３０％のグリセロール、２００ｍＭのＮａＣｌおよび１ｍＭのＤＴＴに対して透析した。精製したＲｂ融合タンパク質のストックを、タンパク質濃度について定量化し、等分して、−７０℃で保存した。
【０１３０】
本願で報告する３種のキナーゼアッセイの全てで、９６ウェルＦｌａｓｈＰｌａｔｅに、ウェルあたり１００μｌ使用し、１０μｇ／ｍｌでＲｂタンパク質をコーティングした。プレートを、振盪器上で、４℃で一晩または室温で３時間インキュベーションした。非特異リン酸化を対照群とするため、１列のウェルに１００μｌ／ウェルのコーティング緩衝液（２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、０．２ＭのＮａＣｌ）をコーティングした。次いで、プレートを洗浄緩衝液（リン酸緩衝食塩水中の０．０１％Ｔｗｅｅｎ２０）で２回洗浄した。試験すべき化合物（「試験化合物」）を、５×最終濃度でウェルに加えた。直ちに４０μｌの反応ミックス（２５ｍＭのＨＥＰＥＳ、２０ｍＭのＭｇＣｌ2、０．００２％のＴｗｅｅｎ２０、２ｍＭのＤＴＴ、１μＭのＡＴＰ、４ｎＭの３３Ｐ−ＡＴＰ）およびバックグラウンドの少なくとも１０倍上でカウントを与えるに十分な量の酵素を加えて反応を開始した。振盪器上でプレートを室温で３０分間インキュベーションした。プレートを洗浄緩衝液で４回洗浄し、密封し、ＴｏｐＣｏｕｎｔシンチレーションカウンター（イリノイ州、ダウナーズグローブ、Ｐａｃｋａｒｄ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏ．）でカウントした。Ｃｄｋ活性の阻害の尺度である、Ｒｂリン酸化の阻害パーセントを以下の式により決定した：
【数１】
2008501744.tif 000057
上式において、「試験化合物」は、試験複製物の分あたりの平均カウントであり、「非特異」は、サイクリンＤ／Ｃｄｋ４などが加えられていない場合の１分あたりの平均カウントであり、「全体」は、化合物が加えられていない場合の１分あたりの平均カウントである。ＩＣ50値は、記載した試験条件下で、タンパク質−キナーゼが誘導する放射能標識の取り込みを５０％低減する試験化合物の濃度である。
【０１３１】
上記のｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験の結果を以下の表１に示す。ＩＣ50値を以下の式１に要約する。
【０１３２】
細胞系アッセイ（テトラゾリウム染料増殖アッセイ）
ＤｅｎｉｚｏｔおよびＬａｎｇの手順によるテトラゾリウム染料アッセイにより増殖を評価した（Ｄｅｎｉｚｏｔ、Ｆ．およびＬａｎｇ，Ｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ
【０１３３】
Ｍｅｔｈｏｄｓ  １９８６，８９，２７１−２７７）。使用した細胞系は、アメリカンタイプセルカルチャーコレクション（メリーランド州、ロックヴィル、ＡＴＣＣ）から得た結腸直腸癌細胞系、ＨＣＴ１１６である。細胞を、１０％ＦＣＳおよびＬ−グルタミンを補ったＭｃＣｏｙｓ５Ａ培地で成長させた。
【０１３４】
細胞を、９６ウェル組織培養プレートに、アッセイの時間とともに対数的な成長を与える適切な播種密度で培養した。プレートを、５％ＣＯ2を含む加湿したインキュベータ中で、３７℃で一晩インキュベーションした。翌日、試験化合物を、１．２％ＤＭＳＯを含む適切な培地中で最終濃度の４倍まで連続的に希釈した。各希釈液の４分の１の体積を、細胞を含むプレートに二連で加えた。各ウェルのＤＭＳＯ最終濃度が０．３％になるよう、培地中の同体積の１．２％ＤＭＳＯを、「対照ウェル」の列に加えた。細胞を加えないウェルは「ブランク」とした。阻害剤を加えないウェルは「インヒビターのない対照」とした。プレートをインキュベータに戻し、設定した時間の点で（成長曲線により決定）プレートを以下のとおり分析した。
【０１３５】
３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムブロマイド（チアゾリルブルー；ＭＴＴ；シグマ）を各ウェルに加え、最終濃度を１ｍｇ／ｍｌとした。プレートを３７℃で２．５−３時間インキュベータに戻した。ＭＴＴを含む培地を除き、得られたホルマザン代謝物を、室温で１５分間振盪して１００％エタノールに可溶化させた。吸光度の読みは、参照波長を６５０ｎｍとし５７０ｎｍの波長で、マイクロタイタープレートリーダーで行った（Ｄｙｎａｔｅｃｈ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓプレートリーダーを交換可能に使用した）。阻害パーセント（％ＩＮＨ）を、全てのウェルからブランクウェルの吸光度を引き、１．００から各試験複製物の平均吸光度（ＳＡＶＥ）と対照の平均（ＣＡＶＥ）の比を引いて、計算する。次いで、最終的な数字を１００倍する（％ＩＮＨ＝（１．００−ＳＡＶＥ／ＣＡＶＥ）×１００）。細胞増殖の５０％阻害が得られる濃度（ＩＣ50）を、濃度対阻害パーセントの対数プロットの線形回帰から決定する。ＩＣ50値も以下の表１に示す。
【０１３６】
【表１】
2008501744.tif 000058
【０１３７】
実施例４６
錠剤製剤
【表２】
2008501744.tif 000059
製造手順
品目１、２および３を、好適なミキサー中で１５分間混合する。
工程１のパウダーミックスを２０％ポビドンＫ３０溶液（品目４）とともに粒状にする。
工程２の顆粒を５０℃で乾燥する。
工程３の顆粒を好適な粉砕装置に通す。
粉砕した顆粒工程４に品目５を加え、３分間混合する。
工程５の顆粒を好適な圧縮機で圧縮する。
【０１３８】
実施例４７
カプセル製剤
【表３】
2008501744.tif 000060
製造手順
品目１、２および３を好適なミキサーで１５分間混合する。
品目４および５を加え、３分間混合する。
好適なカプセルに充填する。
【０１３９】
実施例４８
注射溶液／エマルション製剤
【表４】
2008501744.tif 000061
製造手順
品目１を品目２に溶解させる。
品目３、４および５を品目６に加え、分散するまで混合し、均質化する。
工程１の溶液を、工程２の混合物に加え、分散液が半透明になるまで均質化する。
０．２μｍフィルターに通して濾過滅菌し、バイアルに詰める。
【０１４０】
実施例４９
注射溶液／エマルション製剤
【表５】
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製造手順
品目１を品目２に溶解させる。
品目３、４および５を品目６に加え、分散するまで混合し、均質化する。
工程１の溶液を、工程２の混合物に加え、分散液が半透明になるまで均質化する。
０．２μｍフィルターに通して濾過滅菌し、バイアルに詰める。
【０１４１】
本発明を特定の好ましい実施形態に関連して説明してきたが、当業者は、本発明の通常の実験および実施により変形および修正が可能であることを理解するであろう。したがって、本発明は、上記の記載に限定されるものではなく、添付する特許請求の範囲およびそれらの等価物により規定されるものとする。
【国際調査報告】
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