(57)【要約】本発明は、特に、様々な疾患（例えば、ＨＣＶ）の処置のためのポリペプチドならびに処置の方法およびこれらのポリペプチドを調製する方法を提供する。一実施形態において、上記インターフェロンは、配列番号１２、１３および１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一実施形態において、上記ＩｇＧ４は、配列番号１において示されているアミノ酸配列を含む。一実施形態において、上記インターフェロンは、ペプチドリンカーにより上記ＩｇＧ４に融合されている（例えば、ここで、上記リンカーは、約２から約１８まで（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８）の個数のアミノ酸を含み；例えば、配列番号７、８、９、１０、１１、１７、１８、１９または２０のアミノ酸配列を含む）。【特許請求の範囲】
【請求項１】
１つ以上のＩｇＧ４  Ｆｃポリペプチドに融合した１つ以上のインターフェロンポリペプチドを含む、単離されたポリペプチド。
【請求項２】
請求項１に記載のポリペプチドであって、ここで、前記インターフェロンは、インターフェロンα−１ａ、インターフェロンα−１ｂ、インターフェロンα−２ａ、インターフェロンα−２ｂ、インターフェロンα−２ｃ、インターフェロンα−４ａ、インターフェロンα−４ｂ、インターフェロンα−５、インターフェロンα−６、インターフェロンα−７ａ、インターフェロンα−７ｂ、インターフェロンα−８ａ、インターフェロンα−８ｂ、インターフェロンα−８ｃ、インターフェロンα−１０ａ、インターフェロンα−１０ｂ、インターフェロンα−１３、インターフェロンα−１４ａ、インターフェロンα−１４ｂ、インターフェロンα−１４ｃ、インターフェロンα−１６、インターフェロンα−１７ａ、インターフェロンα−１７ｂ、インターフェロンα−１７ｃ、インターフェロンα−１７ｄ、インターフェロンα−２１ａ、インターフェロンα−２１ｂ、インターフェロンα−２４、インターフェロンβ、インターフェロンω、インターフェロンτ、インターフェロンα−Ｎ３、インターフェロンβ−１ａ、インターフェロンβ−１ｂ、インターフェロンγ−１ｂ、インターフェロンγ、インターフェロンα  Ｆおよびインターフェロンα  ｃｏｎ−１からなる群から選択されるメンバーである、ポリペプチド。
【請求項３】
配列番号２、３および１５からなる群から選択されるメンバーにおいて示されているアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４】
請求項１に記載のポリペプチドであって、ここで、前記インターフェロンは、配列番号１２〜１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、ポリペプチド。
【請求項５】
請求項１に記載のポリペプチドであって、ここで、前記ＩｇＧ４は、配列番号１において示されているアミノ酸配列を含む、ポリペプチド。
【請求項６】
請求項１に記載のポリペプチドであって、ここで、前記インターフェロンは、ペプチドリンカーにより前記ＩｇＧ４に融合されている、ポリペプチド。
【請求項７】
請求項６に記載のポリペプチドであって、ここで、前記リンカーは、約２〜約１８個のアミノ酸を含む、ポリペプチド。
【請求項８】
請求項６に記載のポリペプチドであって、ここで、前記リンカーは、
【化１】
2008545409.tif 000052
【化２】
2008545409.tif 000053
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、ポリペプチド。
【請求項９】
必要に応じて二価の陽イオンと配位結合した、請求項１に記載の２つ以上のポリペプチドを含む、多量体。
【請求項１０】
請求項９に記載の多量体であって、ここで、前記陽イオンは、Ｚｎ２＋である、多量体。
【請求項１１】
結晶性である、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項１２】
請求項１に記載の前記ポリペプチドおよび薬学的に受容可能なキャリアを含む、薬学的組成物。
【請求項１３】
１つ以上のさらなる薬剤と合わせた請求項１に記載のポリペプチドを含む、組成物またはその薬学的組成物。
【請求項１４】
フラビウイルス科のウイルス感染、多発性硬化症、慢性肉芽腫症に関連する重症の感染、悪性大理石骨病、難治性もしくは再発性である外部の尖圭コンジローム、ヘアリーセル白血病、慢性期であるフィラデルフィア染色体（Ｐｈ）陽性の慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、悪性黒色腫、濾胞性リンパ腫、尖圭コンジローム、ＡＩＤＳ関連カポジ肉腫、Ｂ型肝炎感染およびＣ型肝炎感染からなる群から選択される医学的状態を処置するために適切な１つ以上のさらなる薬剤と合わせて、請求項１に記載のポリペプチドを含む、組成物またはその薬学的組成物。
【請求項１５】
請求項１４に記載の組成物であって、ここで、前記さらなる薬剤は、リバビリン、イサトリビン、ＶＸ−４９７、ビラミジン、ＢＩＬＮ  ２０６１、ＶＸ−９５０およびＩＤＮ−６５５６からなる群から選択されるメンバーである、組成物。
【請求項１６】
請求項１に記載のポリペプチドをコードする、単離されたポリヌクレオチド。
【請求項１７】
配列番号４、５および１６からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む、請求項１６に記載のポリヌクレオチド。
【請求項１８】
請求項１６に記載のポリヌクレオチドを含む、単離されたベクター。
【請求項１９】
請求項１８に記載のベクターを含む、単離された宿主細胞。
【請求項２０】
インターフェロンのインビボでの半減期を延長させるための方法であって、該インターフェロンをＩｇＧ４に融合させる工程を包含する、方法。
【請求項２１】
請求項２０に記載の方法であって、ここで、前記ＩｇＧ４に融合した前記インターフェロンは、配列番号２、３および１５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、方法。
【請求項２２】
請求項２０に記載の方法であって、ここで、前記インターフェロンは、インターフェロンα−１ａ、インターフェロンα−１ｂ、インターフェロンα−２ａ、インターフェロンα−２ｂ、インターフェロンα−２ｃ、インターフェロンα−４ａ、インターフェロンα−４ｂ、インターフェロンα−５、インターフェロンα−６、インターフェロンα−７ａ、インターフェロンα−７ｂ、インターフェロンα−８ａ、インターフェロンα−８ｂ、インターフェロンα−８ｃ、インターフェロンα−１０ａ、インターフェロンα−１０ｂ、インターフェロンα−１３、インターフェロンα−１４ａ、インターフェロンα−１４ｂ、インターフェロンα−１４ｃ、インターフェロンα−１６、インターフェロンα−１７ａ、インターフェロンα−１７ｂ、インターフェロンα−１７ｃ、インターフェロンα−１７ｄ、インターフェロンα−２１ａ、インターフェロンα−２１ｂ、インターフェロンα−２４、インターフェロンβ、インターフェロンω、インターフェロンτ、インターフェロンα−Ｎ３、インターフェロンβ−１ａ、インターフェロンβ−１ｂ、インターフェロンγ−１ｂ、インターフェロンγ、インターフェロンα  Ｆおよびインターフェロンα  ｃｏｎ１からなる群から選択されるメンバーである、方法。
【請求項２３】
請求項２２に記載の方法であって、ここで、前記インターフェロンは、配列番号１２〜１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、方法。
【請求項２４】
請求項２０に記載の方法であって、ここで、前記ＩｇＧ４は、配列番号１において示されているアミノ酸配列を含む、方法。
【請求項２５】
フラビウイルス科のウイルス感染、多発性硬化症、慢性肉芽腫症に関連する重症の感染、悪性大理石骨病、難治性もしくは再発性である外部の尖圭コンジローム、ヘアリーセル白血病、慢性期であるフィラデルフィア染色体（Ｐｈ）陽性の慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、悪性黒色腫、濾胞性リンパ腫、尖圭コンジローム、ＡＩＤＳ関連カポジ肉腫、Ｂ型肝炎感染、Ｃ型肝炎感染からなる群から選択される医学的状態ならびに任意の処置可能な医学的状態を、被験体において、インターフェロン治療により処置または予防するための方法であって、該被験体に、ＩｇＧ４に融合したインターフェロンを含む単離されたポリペプチドまたはその薬学組成物の治療的に有効な量を投与する工程を包含する、方法。
【請求項２６】
請求項２５に記載の方法であって、ここで、ＩｇＧ４に融合した前記インターフェロンは、配列番号２、３および１５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、方法。
【請求項２７】
請求項２５に記載の方法であって、ここで、前記被験体は、妊婦または授乳婦である、方法。
【請求項２８】
請求項２５に記載の方法であって、ここで、前記インターフェロンは、インターフェロンα−１ａ、インターフェロンα−１ｂ、インターフェロンα−２ａ、インターフェロンα−２ｂ、インターフェロンα−２ｃ、インターフェロンα−４ａ、インターフェロンα−４ｂ、インターフェロンα−５、インターフェロンα−６、インターフェロンα−７ａ、インターフェロンα−７ｂ、インターフェロンα−８ａ、インターフェロンα−８ｂ、インターフェロンα−８ｃ、インターフェロンα−１０ａ、インターフェロンα−１０ｂ、インターフェロンα−１３、インターフェロンα−１４ａ、インターフェロンα−１４ｂ、インターフェロンα−１４ｃ、インターフェロンα−１６、インターフェロンα−１７ａ、インターフェロンα−１７ｂ、インターフェロンα−１７ｃ、インターフェロンα−１７ｄ、インターフェロンα−２１ａ、インターフェロンα−２１ｂ、インターフェロンα−２４、インターフェロンβ、インターフェロンω、インターフェロンτ、インターフェロンα−Ｎ３、インターフェロンβ−１ａ、インターフェロンβ−１ｂ、インターフェロンγ−１ｂ、インターフェロンγ、インターフェロンα  Ｆおよびインターフェロンα  ｃｏｎ１からなる群から選択されるメンバーである、方法。
【請求項２９】
請求項２５に記載の方法であって、ここで、前記ポリペプチドは、１種以上のさらなる薬剤またはその薬学的組成物と合わせて投与される、方法。
【請求項３０】
請求項２９に記載の方法であって、ここで、前記ポリペプチドは、フラビウイルス科のウイルス感染、多発性硬化症、慢性肉芽腫症に関連する重症の感染、悪性大理石骨病、難治性もしくは再発性である外部の尖圭コンジローム、ヘアリーセル白血病、慢性期であるフィラデルフィア染色体（Ｐｈ）陽性の慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、悪性黒色腫、濾胞性リンパ腫、尖圭コンジローム、ＡＩＤＳ関連カポジ肉腫、Ｂ型肝炎感染およびＣ型肝炎感染からなる群から選択される医学的状態を処置するために適切な１種以上のさらなる薬剤またはその薬学的組成物と合わせて投与される、方法。
【請求項３１】
請求項３０に記載の方法であって、ここで、前記さらなる薬剤は、リバビリン、イサトリビン、ＶＸ−４９７、ビラミジン、ＢＩＬＮ  ２０６１、ＶＸ−９５０およびＩＤＮ−６５５６からなる群から選択される、方法。
【請求項３２】
請求項２５に記載の方法であって、ここで、前記インターフェロンは、配列番号１２〜１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、方法。
【請求項３３】
請求項２５に記載の方法であって、ここで、前記ＩｇＧ４は、配列番号１において示されているアミノ酸配列を含む、方法。
【請求項３４】
請求項２５に記載の方法であって、ここで、前記宿主は、ヒトである、方法。
【請求項３５】
請求項２５に記載の方法であって、ここで、前記医学的状態は、Ｃ型肝炎ウイルス感染であり、ここで、必要に応じて抗ウイルス治療薬と合わせた、ＩｇＧ４に融合したインターフェロンを含む単離されたポリペプチドまたはその薬学的組成物の治療的に有効な量は、検出可能なＣ型肝炎ウイルスのＲＮＡを根絶するためそして処置期間の終了後少なくとも１２週間にわたってＣ型肝炎ウイルスのＲＮＡを検出不可能に維持するために十分な処置期間にわたって投与される、方法。
【請求項３６】
ＩｇＧ４に融合したインターフェロンを含むポリペプチドを調製するための方法であって、請求項１６に記載のポリヌクレオチドを、該ポリヌクレオチドが発現される条件下で、宿主細胞に導入する工程を包含する、方法。
【請求項３７】
請求項３６に記載の方法であって、さらに前記ポリペプチドを単離する工程を包含する、方法。
【請求項３８】
請求項３６に記載の方法により生成される、ポリペプチド。
【請求項３９】
請求項３６に記載の方法であって、ここで、前記ＩｇＧ４に融合したインターフェロンは、配列番号２、３および１５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、米国仮特許出願第６０／６８５，０１８号の利益を請求する；米国仮特許出願第６０／６８５，０１８号は、２００５年５月２６日に出願されており、本明細書中に参考として全体が援用されている。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、インターフェロン（ＩＦＮ）とＩｇＧ４との間の融合ポリペプチドならびに使用の方法およびその調製の方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
（発明の背景）
様々な型のインターフェロンが、ウイルス感染、癌および他の疾患（多発性硬化症が挙げられる）の処置のために承認されてきた。例えば、インターフェロンα−２ｂは、ヘアリーセル白血病、悪性黒色腫、濾胞性リンパ腫、尖圭コンジローム、ＡＩＤＳ関連カポジ肉腫、慢性Ｃ型肝炎感染および慢性Ｂ型肝炎感染について承認されてきた。ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）にインターフェロンを融合させることの利点は、そのインビボでの半減期を延長させ、それによって、期間にわたり必要とされる投薬の回数を減少させることである。例えば、２つの以下のようなペグ化されたＩＦＮ製品が、１週に１回の投薬頻度で承認されてきた：ＩＦＮタンパク質に共有結合した１２ｋＤａ  ＰＥＧまたは４０ｋＤａ  ＰＥＧを各々有する、ＰＥＧ−ｌｎｔｒｏｎ（登録商標）およびＰｅｇａｓｙｓ（登録商標）。ＩＦＮの長期持続型全身循環レベルが拍動性のプロフィールよりも優れた効力をもたらすので、半減期における薬物動態学的な延長は、患者のコンプライアンスの改善に加えて、都合よく、治療の薬理学的性質および関係する効力を変える。非特許文献１は、インターフェロン−α−２ｂおよびその変異体とＩｇＧ１との間の融合を説明する。Ｊｏｎｅｓらは、上記融合がＨＣＶ感染の処置に適切であり得ること、およびこの融合が有利な薬物動態学の性質を有することを主張する。例えば、ＩｇＧ１は比較的高レベルの抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を示すことが明らかにされてきた（非特許文献２を参照のこと）ので、延長された半減期、低い毒性および高い活性を示し、そして製造することが簡単かつ安価である分子に融合したインターフェロンを含む組成物に対する当該分野における必要性が、存在する。
【非特許文献１】Ｊｏｎｅｓら，Ｊ．Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ａｎｄ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｒｅｓ．２００４年，２４，ｐ．５６０−５７２
【非特許文献２】Ｓｔｅｐｌｅｗｓｋｉら，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ．１９８８年，第８５巻，第１３号，ｐ．４８５２−４８５６
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
（発明の要旨）
本発明は、特に、当該分野におけるこの必要性に取り組む。本発明は、１つ以上のＩｇＧ４ポリペプチド（例えば、例えば、ＣＨ２＋ＣＨ３＋ヒンジ領域を含むＦｃ領域ポリペプチド）に融合した１つ以上のインターフェロンポリペプチドを含む、単離されたポリペプチドを提供する。一実施形態において、上記インターフェロンは、インターフェロンα−１ａ、インターフェロンα−１ｂ、インターフェロンα−２ａ、インターフェロンα−２ｂ、インターフェロンα−２ｃ、インターフェロンα−４ａ、インターフェロンα−４ｂ、インターフェロンα−５、インターフェロンα−６、インターフェロンα−７ａ、インターフェロンα−７ｂ、インターフェロンα−８ａ、インターフェロンα−８ｂ、インターフェロンα−８ｃ、インターフェロンα−１０ａ、インターフェロンα−１０ｂ、インターフェロンα−１３、インターフェロンα−１４ａ、インターフェロンα−１４ｂ、インターフェロンα−１４ｃ、インターフェロンα−１６、インターフェロンα−１７ａ、インターフェロンα−１７ｂ、インターフェロンα−１７ｃ、インターフェロンα−１７ｄ、インターフェロンα−２１ａ、インターフェロンα−２１ｂ、インターフェロンα−２４、インターフェロンβ、インターフェロンω、インターフェロンτ、インターフェロンα−Ｎ３、インターフェロンβ−１ａ、インターフェロンβ−１ｂ、インターフェロンγ−１ｂ、インターフェロンγ、インターフェロンα  Ｆおよびインターフェロンα  ｃｏｎ１からなる群から選択されるメンバー（例えば、配列番号２、３または１５）である。一実施形態において、上記インターフェロンは、配列番号１２、１３および１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一実施形態において、上記ＩｇＧ４は、配列番号１において示されているアミノ酸配列を含む。一実施形態において、上記インターフェロンは、ペプチドリンカーにより上記ＩｇＧ４に融合されている（例えば、ここで、上記リンカーは、約２から約１８まで（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８）の個数のアミノ酸を含み；例えば、配列番号７、８、９、１０、１１、１７、１８、１９または２０のアミノ酸配列を含む）。本発明はまた、薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物中の、本明細書中の任意のＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体を含む。
【０００５】
本発明はまた、非共有結合性複合体において共に結合した、本発明の２つ以上（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９または１０）のＩＦＮ−Ｉｇポリペプチドを含む多量体を提供する。本発明の一実施形態において、上記多量体のポリペプチドは、二価の陽イオン（例えば、Ｚｎ２＋）と配位結合している。
【０００６】
本発明はまた、結晶形態である本明細書中の任意のＩＦＮ−Ｉｇポリペプチドを提供する。
【０００７】
本発明の範囲内に含まれているのは、１種以上のさらなる薬剤と合わせて、本明細書中の任意のＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体を含む組成物である；例えば、これらの薬剤は、フラビウイルス科のウイルス感染、多発性硬化症、慢性肉芽腫症に関連する重症の感染、悪性大理石骨病、難治性もしくは再発性である外部の尖圭コンジローム、ヘアリーセル白血病、慢性期であるフィラデルフィア染色体（Ｐｈ）陽性の慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、悪性黒色腫、濾胞性リンパ腫、尖圭コンジローム、ＡＩＤＳ関連カポジ肉腫、Ｂ型肝炎感染およびＣ型肝炎感染から群から選択される医学的状態を処置するために適切である。一実施形態において、上記さらなる薬剤は、リバビリン、イサトリビン、ＶＸ−４９７、ビラミジン、ＢＩＬＮ  ２０６１、ＶＸ−９５０、ＩＤＮ−６５５６および本明細書中に示されている任意の他の薬剤（例えば、下の「薬学的組成物」の節の中またはその薬学的組成物）からなる群から選択されるメンバーである。
【０００８】
本発明はまた、本明細書中に示されている任意のＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体をコードする単離されたポリヌクレオチドを含む。本発明の一実施形態において、上記ポリヌクレオチドは、配列番号４、５および１６からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む。本発明の一実施形態は、本発明のポリヌクレオチドを含む組換えベクターを含む。また本発明の範囲内に含まれているのは、上記ベクターを含む単離された宿主細胞である。
【０００９】
本方法は、インターフェロンをＩｇＧ４に融合させる（例えば、配列番号２、３および１５から選択されるアミノ酸配列を含む融合体を調製する）工程を包含する、インビボでのインターフェロンの半減期を延長させるための方法を提供する。例えば、一実施形態において、上記方法は、この融合ポリペプチドを、例えば、宿主細胞（例えば、細菌細胞（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ））内で組換えにより発現させる工程（例えば、ここで、上記融合体は、例えば、調節性エレメント（例えば、プロモーター）に作動可能に連結している組換えベクター内で、上記融合体が発現される条件下で、上記融合体をコードするポリヌクレオチドを導入することにより発現される）、必要に応じて上記融合体を単離する工程、および上記融合体またはその薬学的組成物を被験体（例えば、ヒト）の体内に導入する工程を包含する。一実施形態において、上記インターフェロンは、インターフェロンα−１ａ、インターフェロンα−１ｂ、インターフェロンα−２ａ、インターフェロンα−２ｂ、インターフェロンα−２ｃ、インターフェロンα−４ａ、インターフェロンα−４ｂ、インターフェロンα−５、インターフェロンα−６、インターフェロンα−７ａ、インターフェロンα−７ｂ、インターフェロンα−８ａ、インターフェロンα−８ｂ、インターフェロンα−８ｃ、インターフェロンα−１０ａ、インターフェロンα−１０ｂ、インターフェロンα−１３、インターフェロンα−１４ａ、インターフェロンα−１４ｂ、インターフェロンα−１４ｃ、インターフェロンα−１６、インターフェロンα−１７ａ、インターフェロンα−１７ｂ、インターフェロンα−１７ｃ、インターフェロンα−１７ｄ、インターフェロンα−２１ａ、インターフェロンα−２１ｂ、インターフェロンα−２４、インターフェロンβ、インターフェロンω、インターフェロンτ、インターフェロンα−Ｎ３、インターフェロンβ−１ａ、インターフェロンβ−１ｂ、インターフェロンγ−１ｂ、インターフェロンγ、インターフェロンα  Ｆおよびインターフェロンα  ｃｏｎ１からなる群から選択されるメンバーである。一実施形態において、上記インターフェロンは、配列番号１２、１３および１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一実施形態において、上記ＩｇＧ４は、配列番号１において示されているアミノ酸配列を含む。
【００１０】
本発明はまた、インターフェロン治療により処置可能である任意の医学的状態、例えば、フラビウイルス科のウイルス感染、多発性硬化症、慢性肉芽腫症に関連する重症の感染、悪性大理石骨病、難治性もしくは再発性である外部の尖圭コンジローム、ヘアリーセル白血病、慢性期であるフィラデルフィア染色体（Ｐｈ）陽性の慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、悪性黒色腫、濾胞性リンパ腫、尖圭コンジローム、ＡＩＤＳ関連カポジ肉腫、Ｂ型肝炎感染およびＣ型肝炎感染からなる群から選択される任意の医学的状態を、被験体において、処置または予防するための方法を提供する。上記方法は、被験体に、ＩｇＧ４に融合したインターフェロンを含む単離されたポリペプチドまたはその薬学的に受容可能な組成物（例えば、配列番号２、３および１５から選択されるアミノ酸配列を含む）の治療的に有効な量を投与する工程を包含する。一実施形態において、被験体は、妊婦または授乳婦である。一実施形態において、上記インターフェロンは、インターフェロンα−１ａ、インターフェロンα−１ｂ、インターフェロンα−２ａ、インターフェロンα−２ｂ、インターフェロンα−２ｃ、インターフェロンα−４ａ、インターフェロンα−４ｂ、インターフェロンα−５、インターフェロンα−６、インターフェロンα−７ａ、インターフェロンα−７ｂ、インターフェロンα−８ａ、インターフェロンα−８ｂ、インターフェロンα−８ｃ、インターフェロンα−１０ａ、インターフェロンα−１０ｂ、インターフェロンα−１３、インターフェロンα−１４ａ、インターフェロンα−１４ｂ、インターフェロンα−１４ｃ、インターフェロンα−１６、インターフェロンα−１７ａ、インターフェロンα−１７ｂ、インターフェロンα−１７ｃ、インターフェロンα−１７ｄ、インターフェロンα−２１ａ、インターフェロンα−２１ｂ、インターフェロンα−２４、インターフェロンβ、インターフェロンω、インターフェロンτ、インターフェロンα−Ｎ３、インターフェロンβ−１ａ、インターフェロンβ−１ｂ、インターフェロンγ−１ｂ、インターフェロンγ、インターフェロンα  Ｆおよびインターフェロンα  ｃｏｎ１からなる群から選択されるメンバーである。一実施形態において、上記ポリペプチドは、１種以上のさらなる薬剤；例えば、フラビウイルス科のウイルス感染、多発性硬化症、慢性肉芽腫症に関連する重症の感染、悪性大理石骨病、難治性もしくは再発性である外部の尖圭コンジローム、ヘアリーセル白血病、慢性期であるフィラデルフィア染色体（Ｐｈ）陽性の慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、悪性黒色腫、濾胞性リンパ腫、尖圭コンジローム、ＡＩＤＳ関連カポジ肉腫、Ｂ型肝炎感染およびＣ型肝炎感染からなる群から選択される医学的状態を処置するために適切である、またはその薬学的組成物と合わせて投与される。一実施形態において、上記さらなる薬剤は、リバビリン、イサトリビン、ＶＸ−４９７、ビラミジン、ＢＩＬＮ  ２０６１、ＶＸ−９５０、ＩＤＮ−６５５６および本明細書中に示されている任意の他の薬剤（例えば、下の「薬学的組成物」の節の中）からなる群から選択される。一実施形態において、上記インターフェロンは、配列番号１２、１３および１４からなる群から選択されるアミノ酸配列��含む。一実施形態において、上記ＩｇＧ４は、配列番号１に示されているアミノ酸配列を含む。一実施形態において、上記宿主はヒトである（例えば、妊娠しているヒトまたは授乳婦）。一実施形態において、必要に応じて抗ウイルス治療薬と合わせた、ＩｇＧ４に融合したインターフェロンを含む単離されたポリペプチドまたはその薬学的に受容可能な組成物の治療的に有効な量は、検出可能なＣ型肝炎ウイルスのＲＮＡを根絶するためそして処置期間の終了後少なくとも１２週間（例えば、２４週間）にわたってＣ型肝炎ウイルスのＲＮＡを検出不可能に維持するために十分な処置期間にわたって、投与される。
【００１１】
本発明はまた、ポリヌクレオチドが発現される条件下で、宿主細胞内に、ＩｇＧ４に融合したインターフェロンを含むポリペプチドをコードするこのポリヌクレオチドを導入する工程を包含する、ＩｇＧ４に融合したインターフェロンを含むポリペプチドを調製するための方法を提供する。一実施形態において、上記方法はさらに、上記ポリペプチドを単離する工程を包含する。また本発明の範囲内に含まれているのは、上記ポリペプチドを調製するための方法により調製される任意のポリペプチドである。
【００１２】
本発明のさらなる実施形態は、必要に応じてリンカーペプチドにより、短い半減期のサイトカイン（例えば、任意の種由来のＩＬ−１０）に融合したＩｇＧ４を含む任意の単離された融合体；このような融合体をコードする任意のポリヌクレオチドに加えて、このようなポリヌクレオチドを含む任意の単離されたベクター、およびこのようなベクターを含む任意の宿主細胞を含む。本発明はまた、ＩｇＧ４−ＩＬ−１０融合ポリペプチドの治療的に有効な量を投与することにより、任意の炎症性障害（例えば、多発性硬化症、炎症性腸症候群、乾癬、クローン病、慢性関節リウマチ、または潰瘍性大腸炎）を被験体において処置または予防するための任意の方法を含む。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
（発明の詳細な説明）
本発明は、特に、有益なインビボのＰＫ／ＰＤプロフィールを示し、そして単一工程の製造プロセスにより簡便に調製され得るＩＦＮ−ＩｇＧ４産物を提供する。実際、上記単一工程の製造プロセスは、従来のＩＦＮの組換え発現の複雑さと同様の複雑さである。さらに、ＩＦＮ−ＩｇＧ４の上記ＰＫ／ＰＤプロフィールは、低い投薬頻度のみを必要とする。ＩｇＧ４は、低い毒性（例えば、ＡＤＣＣ（抗体依存性細胞媒介性細胞傷害）および／またはＣＤＣ（補体依存性細胞傷害））を示すので、他のＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１）と比べて有益である。単一の理論または作用機構による拘束を受けることはないが、ＩｇＧ４は、Ｆｃ補体および／またはＦｃγレセプターに、比較的不十分にしか結合しないので、本発明のＩｇＧ４融合体は、他の免疫グロブリンのサブタイプより低いＡＤＣＣおよび／またはＣＤＣを示す（例えば、Ｓｔｅｐｌｅｗｓｋｉら，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ．８５（１３）：４８５２−４８５６（１９８８）を参照のこと）。単一の理論または作用機構による拘束を受けることはないが、本発明の融合体は、効果的には胎盤関門を通過しないので、上記融合体は、妊婦の処置のために適切である。インターフェロンａ２ｂは、Ｍａｃａｃａ  ｍｕｌａｔｔａ（アカゲザル）において１５×１０６および３０×１０６ＩＵ／ｋｇで流産の影響を有することが、示されている。胎盤関門を通過することが不可能であり、例えば、ウイルス感染（例えば、Ｃ型肝炎ウイルス）を有する妊婦に禁忌でないインターフェロンａ２ｂが、有益である。
【００１４】
（分子生物学）
本発明に従って、当該分野の技術の範囲内で、従来の分子生物学、微生物学および組換えＤＮＡ技術が、用いられ得る。このような技術は、文献において十分に説明されている。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｆｒｉｔｓｃｈ  ＆  Ｍａｎｉａｔｉｓ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ．第２版（１９８９）  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（本明細書中で「Ｓａｍｂｒｏｏｋら，１９８９」）；ＤＮＡ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，第Ｉ巻および第ＩＩ巻（Ｄ．Ｎ．Ｇｌｏｖｅｒ編集，１９８５）；Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（ＭＪ．Ｇａｉｔ編集，１９８４）；Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ（Ｂ．Ｄ．Ｈａｍｅｓ  ＆  Ｓ．Ｊ．Ｈｉｇｇｉｎｓ編集（１９８５））；Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  Ａｎｄ  Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ  （Ｂ．Ｄ．Ｈａｍｅｓ  ＆  Ｓ．Ｊ．Ｈｉｇｇｉｎｓ編集（１９８４））；Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ編集（１９８６））；Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ  Ｃｅｌｌｓ  Ａｎｄ  Ｅｎｚｙｍｅｓ（ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ，（１９８６））；Ｂ．Ｐｅｒｂａｌ，Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｇｕｉｄｅ  Ｔｏ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ  （１９８４）；Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌら（編集），Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ．Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  Ｉｎｃ．（１９９４）を参照のこと。
【００１５】
「ポリヌクレオチド」、「核酸」または「核酸分子」は、１本鎖形態、２本鎖形態またはその他で、リボヌクレオシド（アデノシン、グアノシン、ウリジンもしくはシチジン；「ＲＮＡ分子」）またはデオキシリボヌクレオシド（デオキシアデノシン、デオキシグアノシン、デオキシチミジン、もしくはデオキシシチジン；「ＤＮＡ分子」）のホスファートエステル高分子形態、あるいはその任意のホスホエステルアナログ（例えば、ホスホロチオアートおよびチオエステル）を含む。
【００１６】
「ポリヌクレオチド配列」、「核酸配列」または「ヌクレオチド配列」は、核酸（例えば、ＤＮＡまたはＲＮＡ）における一連のヌクレオチド塩基（「ヌクレオチド」とも呼ばれる）であり、２つ以上のヌクレオチドの任意の鎖を意味する。
【００１７】
「コード配列」または発現産物（例えば、ＲＮＡ、ポリペプチド、タンパク質、または酵素）を「コードする」配列は、発現される場合に、この産物の生成をもたらすヌクレオチド配列である。
【００１８】
用語「遺伝子」は、１つ以上のＲＮＡ分子、タンパク質もしくは酵素の全体または一部分を含むリボヌクレオチドあるいはアミノ酸の特定の配列をコードするか、あるいはこれらに対応するＤＮＡ配列を意味し、そして、例えば、遺伝子が発現される条件を決定する調節性ＤＮＡ配列（例えば、プロモーター配列）を含んでも含まなくてもよい。遺伝子は、ＤＮＡからＲＮＡに転写され得、このＲＮＡは、アミノ酸に翻訳されることもあるし、されないこともある。
【００１９】
「タンパク質配列」、「ペプチド配列」もしくは「ポリペプチド配列」または「アミノ酸配列」は、タンパク質、ペプチドまたはポリペプチドにおいて、一連の２つ以上のアミノ酸を含む。
【００２０】
用語「単離されたポリヌクレオチド」または「単離されたポリペプチド」は、細胞または組換えＤＮＡ発現系において標準的に見出される他の構成成分から、部分的または完全に分離されたポリヌクレオチド（例えば、ＲＮＡ分子もしくはＤＮＡ分子、または混合高分子）あるいはポリペプチドを各々含む。これらの構成成分としては、細胞膜、細胞壁、リボソーム、ポリメラーゼ、血清成分および外来性のゲノム配列が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２１】
単離されたポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、好ましくは、本質的に均質の分子の組成物であるが、いくらかの異質性を含み得る。
【００２２】
本明細書中に用いられているＤＮＡの「複製」は、ＤＮＡ配列の混合物中の特定のＤＮＡ配列の濃度を増加させるためのポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）の使用を含む。ＰＣＲの説明については、Ｓａｉｋｉら，Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９８８）２３９：４８７を参照のこと。
【００２３】
用語「宿主細胞」は、細胞による物質の生成（例えば、この細胞による、遺伝子、ＤＮＡ配列もしくはＲＮＡ配列またはタンパク質の発現あるいは複製）のために、任意の方法で、選択、改変、トランスフェクション、形質転換、増殖されるか、または使用もしくは操作される任意の生物体の任意の細胞を含む。宿主細胞としては、細菌細胞（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ）、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、マウスマクロファージＪ７７４細胞または任意の他のマクロファージ細胞株およびヒト腸上皮Ｃａｃｏ２細胞が挙げられる。
【００２４】
ポリヌクレオチドのヌクレオチド配列は、当該分野において公知の任意の方法により決定され得る（例えば、化学的配列決定または酵素的配列決定）。ＤＮＡの「化学的配列決定」は、個々の塩基に特異的な反応を用いて、ＤＮＡが無作為に切断される方法（例えば、ＭａｘａｍおよびＧｉｌｂｅｒｔ（１９７７）（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７４：５６０の方法）を含む。ＤＮＡの「酵素的配列決定」は、Ｓａｎｇｅｒ方法（Ｓａｎｇｅｒら，（１９７７）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７４：５４６３）のような方法を含む。
【００２５】
本明細書中のポリヌクレオチドは、天然の調節性（発現調節）配列に隣接し得るか、または異種配列（プロモーター、ｉｎｔｅｒｎａｌ  ｒｉｂｏｓｏｍｅ  ｅｎｔｒｙ  ｓｉｔｅｓ（ＩＲＥＳ）および他のリボソーム結合部位配列、エンハンサー、応答配列、サプレッサー、シグナル配列、ポリアデニル化配列、イントロン、５’−および３’−の非コード領域などを含む）に連結され得る。
【００２６】
一般的に、「プロモーター」または「プロモーター配列」は、（例えば、直接的に、またはプロモーターに結合しているタンパク質または物質を介して）細胞内のＲＮＡポリメラーゼを結合させ、そしてコード配列の転写を開始するＤＮＡ調節性領域である。プロモーター配列は、一般的に、転写開始部位の３’末端に隣接し、そして、任意のレベルで転写を開始するために必要な最小の数の塩基または要素を含むように上流（５’方向）に伸長する。上記プロモーター配列内には、（例えば、ヌクレアーゼＳ１を用いたマッピングにより、便利よく定義されている）転写開始部位およびＲＮＡポリメラーゼの結合をもたらすタンパク質結合ドメイン（コンセンサス配列）が、見出され得る。上記プロモーターは、他の発現調節配列（エンハンサー配列およびリプレッサー配列を含む）または本発明のポリヌクレオチドに作動可能に連結され得る。遺伝子発現を調節するために用いられ得るプロモーターとしては、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター（米国特許第５，３８５，８３９号および同第５，１６８，０６２号）、ＳＶ４０の初期プロモーター領域（Ｂｅｎｏｉｓｔら，（１９８１）Ｎａｔｕｒｅ  ２９０：３０４−３１０）、ラウス肉腫ウイルスの３’末端の長いリピート内に含まれているプロモーター（Ｙａｍａｍｏｔｏら，（１９８０）Ｃｅｌｌ  ２２：７８７−７９７）、ヘルペスチミジンキナーゼプロモーター（Ｗａｇｎｅｒら，（１９８１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７８：１４４１−１４４５）、メラトニン遺伝子の調節性配列（Ｂｒｉｎｓｔｅｒら，（１９８２）Ｎａｔｕｒｅ  ２９６：３９−４２）；原核生物の発現ベクター（例えば、β−ラクタマーゼプロモーター（Ｖｉｌｌａ−Ｋｏｍａｒｏｆｆら，（１９７８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７５：３７２７−３７３１）、またはｔａｃプロモーター（ＤｅＢｏｅｒら，（１９８３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８０：２１−２５）；また、Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ａｍｅｒｉｃａｎ（１９８０）  ２４２：７４−９４における「Ｕｓｅｆｕｌ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｆｒｏｍ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ｂａｃｔｅｒｉａ」も参照のこと；および酵母または他の真菌に由来するプロモーターエレメント（例えば、Ｇａｌ  ４プロモーター、ＡＤＣ（アルコールデヒドロゲナーゼ）プロモーター、ＰＧＫ（ホスホグリセロールキナーゼ）プロモーターまたはアルカリホスファターゼプロモーターが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２７】
コード配列は、この配列がこのコード配列のＲＮＡ（好ましくはｍＲＮＡ）へのＲＮＡポリメラーゼ媒介性転写を指向し、次いで、ＲＮＡが（ＲＮＡがイントロンを含む場合に）ＲＮＡスプライシングされ得、必要に応じて、このコード配列によりコードされるタンパク質に翻訳され得る場合に、細胞において、転写調節配列および翻訳調節配列「の制御下にある」か、これらの配列に「機能的に連結している」かまたは「作動可能に連結している」。
【００２８】
用語「発現する」および「発現」は、遺伝子、ＲＮＡ配列またはＤＮＡ配列における情報が明らかになることを可能にすることまたはこれを引き起こすこと；例えば、対応する遺伝子の転写および翻訳に関係する細胞機能を活性化することにより、タンパク質を生成することを意味する。ＤＮＡ配列は、細胞においてまたは細胞により発現されて、「発現産物」（例えば、ＲＮＡ（例えば、ｍＲＮＡ）またはタンパク質）を形成する。上記発現産物自体はまた、細胞により「発現される」と言われる。
【００２９】
用語「形質転換」は、ポリヌクレオチドの細胞への導入を意味する。この導入された遺伝子または配列は、「クローン」と呼ばれ得る。この導入されたＤＮＡまたはＲＮＡを受容する宿主細胞は、「形質転換」され、かつ、「形質転換体」または「クローン」である。宿主細胞に導入されたＤＮＡまたはＲＮＡは、任意の起源（宿主細胞と同じ属もしくは種の細胞、または異なる属もしくは種の細胞に由来する細胞を含む）に由来し得る。
【００３０】
用語「ベクター」は、宿主を形質転換し、必要に応じて、その導入された配列の発現および／または複製を促進するように、ＤＮＡ配列またはＲＮＡ配列が宿主細胞に導入される手段であるビヒクル（例えば、プラスミド）を含む。
【００３１】
本発明において用いられ得るベクターは、プラスミド、ウイルス、バクテリオファージ、組込み可能なＤＮＡフラグメント、および宿主へのポリヌクレオチドの導入を容易にし得る他のビヒクルを含む。プラスミドは、最も一般的に用いられているベクターの形態であるが、類似の機能を供給し、そして当該分野において公知であるか公知になる全ての他のベクターの形態は、本明細書中の使用に適する。例えば、Ｐｏｕｗｅｌｓら，Ｃｌｏｎｉｎｇ  Ｖｅｃｔｏｒｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，１９８５および補遺，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，およびＲｏｄｒｉｇｕｅｚら（編集），Ｖｅｃｔｏｒｓ：Ａ  Ｓｕｒｖｅｙ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ  Ｖｅｃｔｏｒｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｉｒ  Ｕｓｅｓ，１９８８，Ｂｕｔｔｅｒｓｗｏｒｔｈ，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ．を参照のこと。
【００３２】
用語「発現系」は、適切な条件下で、ベクターにより輸送され、そして宿主細胞内に導入されるタンパク質または核酸を発現し得る、宿主細胞および適合可能なベクターを意味する。一般的な発現系としては、Ｅ．ｃｏｌｉ宿主細胞およびプラスミドベクター、昆虫宿主細胞およびバキュロウイルスベクター、ならびに哺乳動物宿主細胞およびベクターが挙げられる。
【００３３】
本発明のＩＦＮ−ＩｇＧ４融合ポリペプチドをコードする核酸の発現は、原核生物の細胞または真核生物の細胞のいずれかにおいて、従来の方法により実施され得る。Ｅ．ｃｏｌｉ宿主細胞が原核生物システムにおいて最も頻繁に用いられるが、多くの他の細菌（例えば、シュードモナス属およびバチルス属の様々な株）もまた、当該分野において公知であり、用いられ得る。上記ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合ポリペプチドをコードする核酸を発現するための適切な宿主細胞は、原核生物および高等真核生物を含む。原核生物は、グラム陰性生物とグラム陽性生物との両者（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉおよびＢ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ）を含む。高等真核生物は、非哺乳動物起源（例えば、昆虫細胞および鳥類）と哺乳動物起源（例えば、ヒト、霊長類および齧歯類）との両者の動物細胞由来の確立された組織培養細胞株を含む。
【００３４】
原核生物の宿主ベクター系は、多くの異なる種についての広範なベクターを含む。ＤＮＡを増幅するための代表的なベクターは、ｐＢＲ３２２または任意の多くのその誘導体（例えば、ｐＵＣ１８または１９）である。上記ＩＦＮ−ＩｇＧ４ポリペプチドを発現するために用いられ得るベクターとしては、ｌａｃプロモーター（ｐＵＣ系列）；ｔｒｐプロモーター（ｐＢＲ３２２−ｔｒｐ）；ｌｐプロモーター（ｐＩＮ系列）；λ−ｐＰプロモーターもしくはｐＲプロモーター（ｐＯＴＳ）；またはハイブリッドプロモーター（例えば、ｐｔａｃ（ｐＤＲ５４０））を含むベクターが挙げられるが、これらに限定されない。Ｂｒｏｓｉｕｓらの「Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｖｅｃｔｏｒｓ  Ｅｍｐｌｏｙｉｎｇ  Ｌａｍｂｄａ−，ｔｒｐ−，ｌａｃ−，ａｎｄ  Ｉｐｐ−ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｐｒｏｍｏｔｅｒｓ」，Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ  および  Ｄｅｎｈａｒｄｔ（編集）Ｖｅｃｔｏｒｓ：Ａ  Ｓｕｒｖｅｙ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ  Ｖｅｃｔｏｒｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｉｒ  Ｕｓｅｓ，１９８８，Ｂｕｔｔｅｒｓｗｏｒｔｈ，Ｂｏｓｔｏｎ，ｐｐ．２０５−２３６を参照のこと。米国特許第４，９５２，４９６号、同第５，６９３，４８９号および同第５，８６９，３２０号において、ならびにＤａｖａｎｌｏｏ，Ｐ．ら，（１９８４）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８１：２０３５−２０３９；Ｓｔｕｄｉｅｒ，Ｆ．Ｗ．ら，（１９８６）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１８９：１１３−１３０；Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，Ａ．Ｈ．ら，（１９８７）Ｇｅｎｅ  ５６：１２５−１３５；およびＤｕｎｎ，Ｊ．Ｊ．ら，（１９８８）Ｇｅｎｅ  ６８：２５９において開示されているように、多くのポリペプチドは、Ｅ．ｃｏｌｉ／Ｔ７発現系において、高レベルで発現され得る。
【００３５】
高度真核生物の組織培養細胞はまた、本発明のＩＦＮ−ＩｇＧ４融合ポリペプチドの組換え調製のために用いられ得る。高度真核生物の組織培養細胞株（昆虫バキュロウイルス発現系および哺乳動物細胞を含む）が、用いられ得る。このような細胞の形質転換またはトランスフェクションおよび増殖は、慣習的な手順になった。有用な細胞株の例としては、ＨｅＬａ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞株、Ｊ７７４細胞、Ｃａｃｏ２細胞、仔ラット腎臓（ＢＲＫ）細胞株、昆虫細胞株、鳥細胞株、およびサル（ＣＯＳ）細胞株が挙げられる。典型的に、このような細胞株のための発現ベクターは、複製起点、プロモーター、翻訳開始部位、（ゲノムＤＮＡが用いられる場合には）ＲＮＡスプライス部位、ポリアデニル化部位、および転写終結部位を含む。これらのベクターはまた、通常、選択遺伝子または増幅遺伝子を含む。適切な発現ベクターは、例えば、アデノウイルス、ＳＶ４０、パルボウイルス、ワクシニアウイルス、またはサイトメガロウイルスのような供給源に由来するプロモーターを保有するプラスミド、ウイルス、またはレトロウイルスであり得る。発現ベクターの例としては、ｐＣＲ（登録商標）３．１、ｐＣＤＮＡ１、ｐＣＤ（Ｏｋａｙａｍａら，（１９８５）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．５：１１３６）、ｐＭＣ１ｎｅｏ  Ｐｏｌｙ−Ａ（Ｔｈｏｍａｓら，（１９８７）Ｃｅｌｌ  ５７：５０３）、ｐＲＥＰ８、ｐＳＶＳＰＯＲＴおよびその誘導体、ならびにバキュロウイルスベクター（例えば、ｐＡＣ３７３またはｐＡＣ６１０）が挙げられる。
【００３６】
ポリペプチドにおいて起こる修飾（例えば、翻訳後修飾）はしばしば、そのポリペプチドがどのように生成されるかについての機能である。宿主においてクローニングされた遺伝子を発現することにより生成されるポリペプチドについて、例えば、その修飾の性質および程度は、大部分が、宿主細胞の翻訳後修飾の能力およびポリペプチドのアミノ酸配列内に存在する修飾シグナルにより決定される。例えば、周知のように、グリコシル化はしばしば、細菌宿主（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ）において起こらない。従って、ＩＦＮ−ＩｇＧ４のグリコシル化が所望される場合、このポリペプチドは、グリコシル化する宿主、一般的には真核生物の細胞において発現され得る。昆虫細胞はしばしば、哺乳動物細胞のグリコシル化と類似する翻訳後のグリコシル化を実行する。この理由のために、昆虫細胞発現系は、グリコシル化の天然のパターンを有する哺乳動物タンパク質を効率的に発現するように、開発されてきた。本発明において用いられ得る昆虫細胞は、昆虫綱の生物に由来する任意の細胞である；例えば、ここで、この昆虫は、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｉｇｉｐｅｒｄａ（Ｓｆ９もしくはＳｆ２１）またはＴｒｉｃｈｏｐｌｕｓｉａ  ｎｉ（Ｈｉｇｈ  ５）である。（例えば、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合ポリペプチドを調製するために）本発明で用いられ得る昆虫発現系の例としては、Ｂａｃ−Ｔｏ−Ｂａｃ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）またはＧａｔｅｗａｙ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）が挙げられる。所望される場合、脱グリコシル化酵素は、真核生物の発現系における産生の間に付着した炭水化物を除去するために用いられ得る。
【００３７】
本発明は、本発明のＩＦＮ−ＩｇＧ４ポリペプチドに対応するアミノ酸配列もしくはヌクレオチド配列に対する任意の表面的な改変またはわずかな改変を企図する。特に、本発明は、本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの配列保存的な改変体を企図する。ポリヌクレオチド配列の「配列保存的な改変体」は、所定のコドンにおける１つ以上のヌクレオチドの変化がその位置にコードされているアミノ酸に何の変化ももたらさない改変体である。本発明のポリペプチドの機能保存的な改変体もまた、本発明により企図される。「機能保存的な改変体」は、ポリペプチドの全体のコンフォメーションおよび機能を変えることなく、タンパク質または酵素における１つ以上のアミノ酸残基が変化した（類似の性質を有するアミノ酸へのアミノ酸の置換が挙げられるが、決してこれに限定されない）改変体である。類似の性質を有するアミノ酸は、当該分野において周知である。例えば、交換可能であり得る極性／親水性アミノ酸としては、アスパラギン、グルタミン、セリン、システイン、スレオニン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、アスパラギン酸およびグルタミン酸が挙げられ；交換可能であり得る非極性／疎水性アミノ酸としては、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファンおよびメチオニンが挙げられ；交換可能であり得る酸性アミノ酸は、アスパラギン酸およびグルタミン酸が挙げられ、そして交換可能であり得る塩基性アミノ酸としては、ヒスチジン、リジンおよびアルギニンが挙げられる。
【００３８】
本発明は、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド（例えば、配列番号４、５または１６）およびこのポリヌクレオチドにハイブリダイズする核酸を含む。好ましくは、上記核酸は、低いストリンジェンシー条件下で、より好ましくは中程度のストリンジェンシー条件下で、および最も好ましくは高いストリンジェンシー条件下でハイブリダイズする。核酸分子の１本鎖形態が、温度および溶液のイオン強度の適切な条件下で、別の核酸分子にアニーリングし得る場合、この核酸分子は、別の核酸分子（例えば、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、またはＲＮＡ）に対して「ハイブリダイゼーション可能である」（前出の、Ｓａｍｂｒｏｏｋらを参照のこと）。温度およびイオン強度の条件が、上記ハイブリダイゼーションの上記「ストリンジェンシー」を決定する。典型的な低いストリンジェンシーハイブリダイゼーション条件は、５５℃、５×ＳＳＣ、０．１％  ＳＤＳ、０．２５％  ミルク、および４２℃でホルムアミドなし；または４２℃で、３０％  ホルムアミド、５×ＳＳＣ、０．５％  ＳＤＳである。典型的な中程度のストリンジェンシーハイブリダイゼーション条件は、このハイブリダイゼーションが、５×または６×ＳＳＣを含む４０％  ホルムアミドにおいて、４２℃で実行されることを除いて、低いストリンジェンシー条件と同様である。高いストリンジェンシーハイブリダイゼーション条件は、このハイブリダイゼーション条件が、５０％  ホルムアミド、５×または６×ＳＳＣにおいて、必要に応じてより高い温度（例えば、４２℃より高い：５７℃、５９℃、６０℃、６２℃、６３℃、６５℃または６８℃）で実行されることを除いて、低いストリンジェンシー条件と同様である。一般的に、ＳＳＣは、０．１５Ｍ  ＮａＣｌおよび０．０１５Ｍ  Ｎａ−クエン酸である。ハイブリダイゼーションは、２つの核酸が相補的な配列を含むことを必要とするが、そのハイブリダイゼーションのストリンジェンシーに依存して、塩基間のミスマッチが可能である。核酸をハイブリダイズするための適切なストリンジェンシーは、当該分野において周知の変数である、核酸の長さおよび相補の程度に依存する。２つのヌクレオチド配列間の類似性または相同性が高いほど、核酸がハイブリダイズし得るストリンジェンシーは、高い。１００個のヌクレオチドにより長いハイブリッドについて、その融解温度を算出するための方程式が誘導された（前出のＳａｍｂｒｏｏｋら，９．５０−９．５１を参照のこと）。より短い核酸（すなわち、オリゴヌクレオチド）とのハイブリダイゼーションについて、ミスマッチの位置は、より重要になり、そしてオリゴヌクレオチドの長さは、その特異性を決定する（前出のＳａｍｂｒｏｏｋらを参照のこと）。
【００３９】
また本発明において含まれているのは、比較がＢＬＡＳＴアルゴニズムにより行われる（ここで、このアルゴニズムのパラメータは、各参照配列の全体の長さにわたり、各配列間で最大のマッチを与えるように選択される）場合、配列番号４、５もしくは１６のいずれかのＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の参照ポリヌクレオチド配列、および配列番号２、３、もしくは１５のいずれかのＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の参照アミノ酸配列に対して、少なくとも約７０％同一であり、好ましくは少なくとも約８０％同一であり、より好ましくは少なくとも約９０％同一であり、そして最も好ましくは少なくとも約９５％同一である（例えば、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、１００％）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドおよびアミノ酸配列を含むポリペプチドである。比較がＢＬＡＳＴアルゴリズムを用いて行われる（ここで、このアルゴニズムのパラメータは、各参照配列の全体の長さにわたり、各配列間で最大のマッチを与えるように選択される）場合、配列番号２、３または１５のいずれかのＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の参照アミノ酸配列に対して、少なくとも約７０％類似し、好ましくは少なくとも約８０％類似し、より好ましくは少なくとも約９０％類似し、そして最も好ましくは少なくとも約９５％類似する（例えば、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、１００％）アミノ酸配列を含むポリペプチドもまた、本発明に含まれている。
【００４０】
配列同一性は、比較されている２つの配列のヌクレオチドまたはアミノ酸の間の厳密なマッチを指す。配列類似性は、同一でない生物化学的に関係するアミノ酸の間のマッチに加えて、比較されている２つのポリペプチドのアミノ酸の間の厳密なマッチとの両方を指す。類似の性質を共有し、交換可能であり得る生物化学的に関係するアミノ酸は、上で議論されている。
【００４１】
上記ＢＬＡＳＴアルゴリズムに関する以下の参考文献が、本明細書中に参考として援用されている：ＢＬＡＳＴ  ＡＬＧＯＲＩＴＨＭＳ：Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．ら，（１９９０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−４１０；Ｇｉｓｈ，Ｗ．ら，（１９９３）Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔ．３：２６６−２７２；Ｍａｄｄｅｎ，Ｔ．Ｌら，（１９９６）Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．２６６：１３１−１４１；Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．ら，（１９９７）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２５：３３８９−３４０２；Ｚｈａｎｇ，Ｊ．ら，（１９９７）Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．７：６４９−６５６；Ｗｏｏｔｔｏｎ，Ｊ．Ｃ．ら，（１９９３）Ｃｏｍｐｕｔ．Ｃｈｅｍ．１７：１４９−１６３；Ｈａｎｃｏｃｋ，Ｊ．Ｍ．ら，（１９９４）Ｃｏｍｐｕｔ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．１０：６７−７０；ＡＬＩＧＮＭＥＮＴ  ＳＣＯＲＩＮＧ  ＳＹＳＴＥＭＳ：Ｄａｙｈｏｆｆ，Ｍ．Ｏ．ら，「Ａ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ  ｃｈａｎｇｅ  ｉｎ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ．」，Ａｔｌａｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，（１９７８）第５巻，補遺３．Ｍ．Ｏ．Ｄａｙｈｏｆｆ（編集），ｐｐ．３４５−３５２，Ｎａｔｌ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｆｏｕｎｄ．，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，ＤＣ；Ｓｃｈｗａｒｔｚ，Ｒ．Ｍ．ら，「Ｍａｔｒｉｃｅｓ  ｆｏｒ  ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ  ｄｉｓｔａｎｔ  ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ．」，Ａｔｌａｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ．（１９７８）第５巻，補遺３．Ｍ．Ｏ．Ｄａｙｈｏｆｆ（編集），ｐｐ．３５３−３５８，Ｎａｔｌ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｆｏｕｎｄ．，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，ＤＣ；Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．，（１９９１）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１９：５５５−５６５；Ｓｔａｔｅｓ，Ｄ．Ｊ．ら，（１９９１）Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３：６６−７０；Ｈｅｎｉｋｏｆｆ，Ｓ．ら，（１９９２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８９：１０９１５−１０９１９；Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．ら，（１９９３）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｅｖｏｌ．３６：２９０−３００；ＡＬＩＧＮＭＥＮＴ  ＳＴＡＴＩＳＴＩＣＳ：Ｋａｒｌｉｎ，Ｓ．ら，（１９９０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８７：２２６４−２２６８；Ｋａｒｌｉｎ，Ｓ．ら，（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：５８７３−５８７７；Ｄｅｍｂｏ，Ａ．ら，（１９９４）Ａｎｎ．Ｐｒｏｂ．２２：２０２２−２０３９；およびＡｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．「Ｅｖａｌｕａｔｉｎｇ  ｔｈｅ  ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｌｏｃａｌ  ａｌｉｇｎｍｅｎｔｓ．」，Ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ（Ｓ．Ｓｕｈａｉ編集），（１９９７）ｐｐ．１−１４，Ｐｌｅｎｕｍ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ。
【００４２】
（融合体）
本発明は、必要に応じてリンカーペプチドにより１つ以上のＩｇＧ４  Ｆｃポリペプチドに融合した１つ以上の任意のインターフェロンポリペプチド（「ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体」）を含む、任意の融合ポリペプチドを含む。一実施形態において、上記インターフェロンは、インターフェロンα−１ａ、インターフェロンα−１ｂ、インターフェロンα−２ａ、インターフェロンα−２ｂ、インターフェロンα−２ｃ、インターフェロンα−４ａ、インターフェロンα−４ｂ、インターフェロンα−５、インターフェロンα−６、インターフェロンα−７ａ、インターフェロンα−７ｂ、インターフェロンα−８ａ、インターフェロンα−８ｂ、インターフェロンα−８ｃ、インターフェロンα−１０ａ、インターフェロンα−１０ｂ、インターフェロンα−１３、インターフェロンα−１４ａ、インターフェロンα−１４ｂ、インターフェロンα−１４ｃ、インターフェロンα−１６、インターフェロンα−１７ａ、インターフェロンα−１７ｂ、インターフェロンα−１７ｃ、インターフェロンα−１７ｄ、インターフェロンα−２１ａ、インターフェロンα−２１ｂ、インターフェロンα−２４、インターフェロンβ、インターフェロンω、インターフェロンτ、インターフェロンα−Ｎ３、インターフェロンβ−１ａ、インターフェロンβ−１ｂ、インターフェロンγ−１ｂ、インターフェロンα−Ｆもしくはインターフェロンα  ｃｏｎ１、またはＢｌａｔｔら，Ｊ．Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ａｎｄ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｒｅｓ．１６：４８９−４９９（１９９６）、もしくはＰｅｓｔｋａにおけるＩｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｆｒｏｍ  １９８１  ｔｏ  １９８６，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．１１９：３−１４（１９８６）；（これらは本明細書中に参考として全体が援用されている）に開示されている任意のインターフェロン種である。これらのインターフェロン種各々についてのポリペプチドおよびコードするポリヌクレオチドは、当該分野において公知である（例えば、Ａｌｌｅｎら，Ｊ．Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ａｎｄ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｒｅｓ．１６：１８１−１８４（１９９６）；または公開された米国特許出願第ＵＳ２００４／０２１９１３１  Ａ１号を参照のこと；これらの各々は、本明細書中に参考として援用されている）。
【００４３】
本発明の一実施形態において、ヒトインターフェロンα−２ｂのアミノ酸配列は：
【００４４】
【化３】
2008545409.tif 000002
（配列番号１２；Ｇｅｎｂａｎｋ  登録番号  ＣＡＡ２５７７０も参照のこと）であり；ここで、最初のＭは、随意選択である。
【００４５】
本発明の一実施形態において、ヒトインターフェロンα−２ａのアミノ酸配列は：
【００４６】
【化４】
2008545409.tif 000003
（配列番号１３；  ｓｅｅ  ａｌｓｏ  Ｇｅｎｂａｎｋ  登録番号  １ＩＴＦも参照のこと）であり；ここで、最初のＭは、随意選択である。
【００４７】
本発明の一実施形態において、ヒトのコンセンサスインターフェロンα（α  ｃｏｎ−１）のアミノ酸配列は：
【００４８】
【化５】
2008545409.tif 000004
2008545409.tif 000005
（配列番号１４；Ｂｌａｔｔら，Ｊ．Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｒｅｓ．１６：４８９−４９９（１９９６）；Ｋｌｅｉｎら，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  ４５４：２０５−２１５（１９８８）を参照のこと）であり；ここで、最初のＭは、随意選択である。
【００４９】
本発明の融合体は、１つ以上のインターフェロンおよび／または１つ以上のＩｇＧ４を含む。上記融合体が多数のインターフェロンを含む場合、これらのインターフェロンは、同じであっても異なってもよい。例えば、本発明の融合体は、一実施形態において、ヒトインターフェロンα−２ａ−ヒトインターフェロンα−２ａ−ＩｇＧ４を含む。別の実施形態において、上記融合体は、ヒトインターフェロンα−２ａ−ヒトインターフェロンα−２ｂ−ＩｇＧ４またはインターフェロンα−２ａ−ＩｇＧ４−インターフェロンα−２ａを含む。多数のＩｇＧ４ポリペプチドもまた、本発明の融合体において含まれてい得る。例えば、一実施形態において、上記融合体は、ヒトインターフェロンα−２ａ−ヒトインターフェロンα−２ａ−ＩｇＧ４−ＩｇＧ４またはヒトインターフェロンα−２ａ−ヒトインターフェロンα−２ｂ−ＩｇＧ４−ＩｇＧ４を含む。任意のこれらの実施形態は、用語「ＩＦＮ−ＩｇＧ４」の下に含まれている。
【００５０】
アミノ末端にインターフェロンを含む融合体は、カルボキシル末端にインターフェロンを含む融合体と共に、本発明の範囲内にある；用語ＩＦＮ−ＩｇＧ４は、これらの型の両方の融合体を指す。例えば、本発明は、本発明の任意の融合体をコードするポリヌクレオチドと共に、任意の以下のＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体を含む：ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−１ａ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−１ｂ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−２ａ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−２ｂ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−２ｃ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−４ａ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−４ｂ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−５、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−６、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−７ａ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−７ｂ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−８ａ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−８ｂ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−８ｃ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−１０ａ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−１０ｂ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−１３、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−１４ａ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−１４ｂ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−１４ｃ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−１６、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−１７ａ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−１７ｂ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−１７ｃ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−１７ｄ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−２１ａ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−２１ｂ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−２４、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンβ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンω、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンτ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−Ｎ３、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα−Ｎ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンβ−１ａ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンβ−１ｂ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンγ−１ｂ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンγ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα  Ｆ、ＩｇＧ４  Ｆｃ−インターフェロンα  ｃｏｎ１、インターフェロンα−１ａ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−１ｂ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−２ａ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−２ｂ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−２ｃ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−４ａ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−４ｂ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−５−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−６−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−７ａ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−７ｂ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−８ａ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−８ｂ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−８ｃ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−１０ａ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−１０ｂ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−１３−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−１４ａ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−１４ｂ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−１４ｃ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−１６−ＩｇＧ４  Ｆｃ��インターフェロンα−１７ａ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−１７ｂ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−１７ｃ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−１７ｄ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−２１ａ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−２１ｂ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−２４−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンβ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンω−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンτ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−Ｎ３−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα−Ｎ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンβ−１ａ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンβ−１ｂ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンγ−１ｂ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンγ−ＩｇＧ４  Ｆｃ、インターフェロンα  Ｆ−ＩｇＧ４  Ｆｃまたはインターフェロンα  ｃｏｎ１−ＩｇＧ４  Ｆｃ；ここで、上記インターフェロン部分および上記ＩｇＧ４  Ｆｃ部分は、必要に応じて、ペプチドリンカーにより融合されている。
【００５１】
一実施形態において、上記ＩｇＧ４  Ｆｃは、以下のアミノ酸配列：
【００５２】
【化６】
2008545409.tif 000006
（配列番号１）を含み；必要に応じて、最初のメチオニン（Ｍ）を含む。
【００５３】
一実施形態において、上記ヒトインターフェロン−α−２ｂ−ヒトＩｇＧ４  Ｆｃ融合タンパク質は、以下のアミノ酸配列：
【００５４】
【化７】
2008545409.tif 000007
（配列番号２）を含み；ここで、そのシグナル配列
【００５５】
【化８】
2008545409.tif 000008
（配列番号６）は、随意選択であり、その結果、不在であり得；しかしながら、本発明の一実施形態において、この融合体のＮ末端は、必要に応じて、メチオニン（Ｍ）を含み；ここで、そのリンカーは、下線が引かれており、また随意選択であり；ここで、このリンカーに対してＮ末端にある配列は、ヒトＩＦＮ−α−２ｂであり、このリンカーに対してＣ末端にある配列は、ヒトＩｇＧ４  Ｆｃである。一実施形態において、上記リンカーは、配列番号７〜１１および１７〜２０から選択される。例えば、一実施形態において、上記インターフェロンα−２ｂのアミノ酸配列は、Ｉｎｔｒｏｎ  Ａ（登録商標）（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  Ｃｏｒｐ．；Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪ）のアミノ酸と同一である。
【００５６】
一実施形態において、上記ヒトインターフェロン−α−２ａ−ヒトＩｇＧ４  Ｆｃ融合タンパク質は、以下のアミノ酸配列：
【００５７】
【化９】
2008545409.tif 000009
（配列番号３）を含み；ここで、本発明の一実施形態において、この融合体のＮ末端は、必要に応じて、メチオニン（Ｍ）を含み；ここで、そのリンカーは、下線が引かれており、また随意選択であり；必要に応じて、シグナル配列を含み；ここで、このリンカーに対してＮ末端にある配列は、ヒトＩＦＮ−α−２ａであり、このリンカーに対してＣ末端にある配列は、ヒトＩｇＧ４  Ｆｃである。一実施形態において、上記リンカーは、配列番号７〜１１および１７〜２０から選択される。例えば、一実施形態において、上記インターフェロンα−２ａのアミノ酸配列は、Ｒｏｆｅｒｏｎ  Ａ（登録商標）（Ｒｏｃｈｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ；Ｎｕｔｌｅｙ，ＮＪ）のアミノ酸と同一である。
【００５８】
一実施形態において、上記ヒトインターフェロン−α  ｃｏｎ−１−ヒトＩｇＧ４  Ｆｃ融合タンパク質は、以下のアミノ酸配列：
【００５９】
【化１０】
2008545409.tif 000010
（配列番号１５）を含み；ここで、本発明の一実施形態において、この融合体のＮ末端は、必要に応じて、メチオニン（Ｍ）を含み；ここで、そのリンカーは、下線が引かれており、また随意選択であり；必要に応じて、シグナル配列を含み；ここで、このリンカーに対してＮ末端にある配列は、ヒトＩＦＮ−α  ｃｏｎ−１であり、このリンカーに対してＣ末端にある配列は、ヒトＩｇＧ４  Ｆｃである。一実施形態において、上記リンカーは、配列番号７〜１１および１７〜２０から選択される。
【００６０】
本発明は、本明細書中の任意のＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体をコードする任意のポリヌクレオチドを含む。一実施形態において、上記ポリヌクレオチドは、以下のヌクレオチド配列：
【００６１】
【化１１】
2008545409.tif 000011
（配列番号４）を含むヒトインターフェロン−α−２ｂ−ヒトＩｇＧ４をコードする。
【００６２】
一実施形態において、上記ポリヌクレオチドは、以下のポリヌクレオチド配列：
【００６３】
【化１２】
2008545409.tif 000012
【００６４】
【化１３】
2008545409.tif 000013
（配列番号５）を含むヒトインターフェロン−α−２ａ−ヒトＩｇＧ４  Ｆｃをコードする。
【００６５】
一実施形態において、上記ポリヌクレオチドは、以下のヌクレオチド配列：
【００６６】
【化１４】
2008545409.tif 000014
（配列番号１６）を含むヒトインターフェロン−α  ｃｏｎ−１−ヒトＩｇＧ４  Ｆｃをコードする。
【００６７】
本発明はさらに、短い半減期のサイトカイン（例えば、ＩＬ−１０）に融合したＩｇＧ４を含む任意の融合ポリペプチド（ＩＬ−１０−ＩｇＧ４融合体）を含む。本発明の一実施形態において、ヒトＩＬ−１０は、以下のアミノ酸配列：
【００６８】
【化１５】
2008545409.tif 000015
（配列番号２４；Ｇｅｎｂａｎｋ  登録番号：ＣＡＨ７１８１３；ＡＡＶ３８４５０；ＡＡＸ３６８３１；ＣＡＧ４６８２５またはＸＰ＿５２５０４０も参照のこと）を含む。
【００６９】
本発明の一実施形態において、上記ヒトＩＬ−１０−ＩｇＧ４融合体は、以下のアミノ酸配列：
【００７０】
【化１６】
2008545409.tif 000016
（配列番号２５）を含み、ここで、本発明の一実施形態において、この融合体のＮ末端は、必要に応じて、メチオニン（Ｍ）を含み；ここで、そのリンカーは、下線が引かれており、また随意選択であり；必要に応じて、シグナル配列を含み；ここで、このリンカーに対してＮ末端にある配列は、ヒトＩＬ−１０であり、このリンカーに対してＣ末端にある配列は、ヒトＩｇＧ４  Ｆｃである。一実施形態において、上記リンカーのアミノ酸配列は、配列番号７〜１１および１７〜２０から選択される。
【００７１】
（治療方法）
本発明は、インターフェロンの投与によって緩和される任意の状態を処置または予防するための組成物および方法を提供する。例えば、本発明は、宿主、被験体または患者において宿主中のフラビウイルス科のメンバーであるウイルスによる感染を、本発明のＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体またはその薬学的組成物の治療的に有効な投薬量（必要に応じて、以下の「薬学的組成物」の節に示される任意のさらなる治療剤（例えば、リバビリン）を合わせた）をその宿主、被験体または患者に投与することによって処置または予防するための方法を包含する。例えば、本発明は、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）を含むヘパシウイルス属のメンバーによって引き起こされる感染を処置または予防するための方法を包含するが、これに限定されない。ＨＣＶは、以下の数種の型、亜型および分離株を含む：
Ｃ型肝炎ウイルス（１分離株）
Ｃ型肝炎ウイルス（ＢＫ分離株）
Ｃ型肝炎ウイルス（ＥＣ１分離株）
Ｃ型肝炎ウイルス（ＥＣ１０分離株）
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣ−Ｊ２分離株）
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣ−Ｊ５分離株）
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣ−Ｊ６分離株）
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣ−Ｊ７分離株）
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣ−Ｊ８分離株）
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣ−ＪＴ分離株）
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＴ１８分離株）
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＴ２７分離株）
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ−４７６分離株）
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ−ＫＦ分離株）
Ｃ型肝炎ウイルス（ヒト分離株）
Ｃ型肝炎ウイルス（日本分離株）
Ｃ型肝炎ウイルス（台湾分離株）
Ｃ型肝炎ウイルス（ＴＨ分離株）
Ｃ型肝炎ウイルスＨ分離株
Ｃ型肝炎ウイルス１型
Ｃ型肝炎ウイルス１ａ型
Ｃ型肝炎ウイルスＨ７７株
Ｃ型肝炎ウイルス１ｂ型
Ｃ型肝炎ウイルス１ｃ型
Ｃ型肝炎ウイルス１ｄ型
Ｃ型肝炎ウイルス１ｅ型
Ｃ型肝炎ウイルス１ｆ型
Ｃ型肝炎ウイルス１０型
Ｃ型肝炎ウイルス２型
Ｃ型肝炎ウイルス２ａ型
Ｃ型肝炎ウイルス２ｂ型
Ｃ型肝炎ウイルス２ｃ型
Ｃ型肝炎ウイルス２ｄ型
Ｃ型肝炎ウイルス２ｆ型
Ｃ型肝炎ウイルス３型
Ｃ型肝炎ウイルス３ａ型
Ｃ型肝炎ウイルス３ｂ型
Ｃ型肝炎ウイルス３ｇ型
Ｃ型肝炎ウイルス４型
Ｃ型肝炎ウイルス４ａ型
Ｃ型肝炎ウイルス４ｃ型
Ｃ型肝炎ウイルス４ｄ型
Ｃ型肝炎ウイルス４ｆ型
Ｃ型肝炎ウイルス４ｈ型
Ｃ型肝炎ウイルス４ｋ型
Ｃ型肝炎ウイルス５型
Ｃ型肝炎ウイルス５ａ型
Ｃ型肝炎ウイルス６型
Ｃ型肝炎ウイルス６ａ型
Ｃ型肝炎ウイルス７型
Ｃ型肝炎ウイルス７ａ型
Ｃ型肝炎ウイルス７ｂ型
Ｃ型肝炎ウイルス８型
Ｃ型肝炎ウイルス８ａ型
本発明はまた、フラビウイルス属のメンバーによって引き起こされる感染を処置または予防するための方法および組成物を包含する。フラビウイルス属は、黄熱病ウイルス；ダニ媒介ウイルス（例えば、ガジェッツガリーウイルス（Ｇａｄｇｅｔｓ  Ｇｕｌｌｙ  ｖｉｒｕｓ）、カダムウイルス（Ｋａｄａｍ  ｖｉｒｕｓ）、キャサヌール森林病ウイルス、ランガットウイルス、オムスク出血熱ウイルス、ポーワッサンウイルス、ロイヤルファームウイルス（Ｒｏｙａｌ  Ｆａｒｍ  ｖｉｒｕｓ）、カルシーウイルス（Ｋａｒｓｈｉ  ｖｉｒｕｓ）、ダニ媒介脳炎ウイルス、ニュードルフウイルス（Ｎｅｕｄｏｅｒｆｌ  ｖｉｒｕｓ）、ソフジンウイルス（Ｓｏｆｊｉｎ  ｖｉｒｕｓ）、跳躍病ウイルスおよびネギシウイルス）；海鳥ダニ媒介ウイルス（例えば、メアバンウイルス（Ｍｅａｂａｎ  ｖｉｒｕｓ）、ソーマレズリーフウイルス（Ｓａｕｍａｒｅｚ  Ｒｅｅｆ  ｖｉｒｕｓ）、およびチュレニーウイルス（Ｔｙｕｌｅｎｉｙ  ｖｉｒｕｓ））；蚊媒介ウイルス（例えば、アロアウイルス（Ａｒｏａ  ｖｉｒｕｓ）、バスカラウイルス（Ｂｕｓｓｕｑｕａｒａ  ｖｉｒｕｓ）、イグェイプウイルス（ｌｇｕａｐｅ  ｖｉｒｕｓ）およびナランハルウイルス（Ｎａｒａｎｊａｌ  ｖｉｒｕｓ））；デング熱ウイルス（例えば、デング熱ウイルスおよびケドゥグウイルス（Ｋｅｄｏｕｇｏｕ  ｖｉｒｕｓ））；日本脳炎ウイルス（例えば、カシパコールウイルス（Ｃａｃｉｐａｃｏｒｅ  ｖｉｒｕｓ）、コウタンゴウイルス（Ｋｏｕｔａｎｇｏ  ｖｉｒｕｓ）、日本脳炎ウイルス、マリーバレー脳炎ウイルス、アルフィウイルス（Ａｌｆｕｙ  ｖｉｒｕｓ）、セントルイス脳炎ウイルス、ウスツウイルス（Ｕｓｕｔｕ  ｖｉｒｕｓ）、西ナイルウイルス、クンジンウイルスおよびヤウデンウイルス（Ｙａｏｕｎｄｅ  ｖｉｒｕｓ））；ココベラウイルス（Ｋｏｋｏｂｅｒａ  ｖｉｒｕｓ）（例えば、ココベラウイルスおよびストラトフォードウイルス（Ｓｔｒａｔｆｏｒｄ  ｖｉｒｕｓ））；タヤウイスル（Ｎｔａｙａ  ｖｉｒｕｓ）（例えば、バガザウイルス（Ｂａｇａｚａ  ｖｉｒｕｓ）、イレウスウイルス（Ｉｌｈｅｕｓ  ｖｉｒｕｓ）、ロシオウイルス（Ｒｏｃｉｏ  ｖｉｒｕｓ）、イスラエルトルコ髄膜脳脊髄炎ウイルス（Ｉｓｒａｅｌ  ｔｕｒｋｅｙ  ｍｅｎｉｎｇｏｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ  ｖｉｒｕｓ）、タヤウイルス（Ｎｔａｙａ  ｖｉｒｕｓ）およびテムブスウイルス（Ｔｅｍｂｕｓｕ  ｖｉｒｕｓ））；スポンドウェニウイルス（例えば、ジカウイルスおよびスポンドウェニウイルス）；黄熱病ウイルス（例えば、バンジウイルス（Ｂａｎｚｉ  ｖｉｒｕｓ）、ボウボウィウイルス（Ｂｏｕｂｏｕｉ  ｖｉｒｕｓ）、エッジヒルウイルス（Ｅｄｇｅ  Ｈｉｌｌ  ｖｉｒｕｓ）、ジュグラウイルス（Ｊｕｇｒａ  ｖｉｒｕｓ）、サボヤウイルス（Ｓａｂｏｙａ  ｖｉｒｕｓ）、ポチスカムウイルス（Ｐｏｔｉｓｋｕｍ  ｖｉｒｕｓ）、セピクウイルス（Ｓｅｐｉｋ  ｖｉｒｕｓ）、ウガンダＳウイルス（Ｕｇａｎｄａ  Ｓ  ｖｉｒｕｓ）、ウェッセルスブロンウイルス（Ｗｅｓｓｅｌｓｂｒｏｎ  ｖｉｒｕｓ）および黄熱病ウイルス）；エンテベウイルス（Ｅｎｔｅｂｂｅ  ｖｉｒｕｓ）（例えば、エンテベコウモリウイルス（Ｅｎｔｅｂｂｅ  ｂａｔ  ｖｉｒｕｓ）、ソコルクウイルス（Ｓｏｋｏｌｕｋ  ｖｉｒｕｓ）、およびヨコセウイルス（Ｙｏｋｏｓｅ  ｖｉｒｕｓ））；モドックウイルス（Ｍｏｄｏｃ  ｖｉｒｕｓ）（例えば、アポイウイルス（Ａｐｏｉ  ｖｉｒｕｓ）、牛骨髄ウイルス（Ｃｏｗｂｏｎｅ  Ｒｉｄｇｅ  ｖｉｒｕｓ）、ジュチアパウイルス（Ｊｕｔｉａｐａ  ｖｉｒｕｓ）、モドックウイルス、サルビエハウイルス（Ｓａｌ  Ｖｉｅｊａ  ｖｉｒｕｓ）およびサンペーリタウイルス（Ｓａｎ  Ｐｅｒｌｉｔａ  ｖｉｒｕｓ））；リオブラボーウイルス（Ｒｉｏ  Ｂｒａｖｏ  ｖｉｒｕｓ）（例えば、ブカラサコウモリウイルス（Ｂｕｋａｌａｓａ  ｂａｔ  ｖｉｒｕｓ）、カーレー島ウイルス（Ｃａｒｅｙ  Ｉｓｌａｎｄ  ｖｉｒｕｓ）、ダカーコウモリウイルス（Ｄａｋａｒ  ｂａｔ  ｖｉｒｕｓ）、モンタナミオチス白質脳炎ウイルス（Ｍｏｎｔａｎａ  ｍｙｏｔｉｓ  ｌｅｕｋｏｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ  ｖｉｒｕｓ）、プノンペンコウモリウイルス（Ｐｈｎｏｍ  Ｐｅｎｈ  ｂａｔ  ｖｉｒｕｓ）、バトゥー洞窟ウイルス（Ｂａｔｕ  Ｃａｖｅ  ｖｉｒｕｓ）、リオブラボーウイルス、タマナコウモリウイルス（Ｔａｍａｎａ  ｂａｔ  ｖｉｒｕｓ）、および細胞融合因子ウイルス（Ｃｅｌｌ  ｆｕｓｉｎｇ  ａｇｅｎｔ  ｖｉｒｕｓ））。
【００７２】
本発明は、ペスチウイルス属のメンバーによって引き起こされる感染を処置または予防するための方法および組成物を包含する。ペスチウイルス属としては、ボーダー病ウイルス（ヒツジ）、ウシウイルス性下痢症ウイルス１、ウシウイルス性下痢症ウイルス２、ブタコレラウイルス（Ｃｌａｓｓｉｃａｌ  ｓｗｉｎｅ  ｆｅｖｅｒ  ｖｉｒｕｓ）、および豚コレラウイルス（Ｈｏｇ  ｃｈｏｌｅｒａ  ｖｉｒｕｓ）が挙げられる。
【００７３】
さらに、本発明は、Ｇ型肝炎ウイルスまたはＧＢ型肝炎ウイルス−Ａ、ＧＢ型肝炎ウイルス−ＢもしくはＧＢ型肝炎ウイルス−Ｃによって引き起こされる感染を処置または予防するための方法および組成物を包含する。
【００７４】
１つの実施形態において、上記被験体は、本発明のＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体を、必要に応じてさらなる治療剤（例えば、治療的に有効な量の別の抗ウイルス治療）と合わせて、検出可能なＣ型肝炎ウイルスＲＮＡを根絶するためそして処置期間の終了後少なくとも１２週間（例えば、２４週間）にわたってＣ型肝炎ウイルスＲＮＡを検出不可能に維持するために十分な処置期間にわたって投与される。
【００７５】
以下でも考察されるように、用語「合わせた（ｉｎ  ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）」は、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体およびさらなる治療剤（例えば、抗ウイルス治療）が同時送達のための単一の組成物へと処方され得るかまたは２つ以上の組成物（例えば、キット）へと別個に処方され得ることを示す。さらに、各成分は、他の成分が投与されるときとは異なる時間に被験体に投与され得る；例えば、各投与は、与えられる期間にわたっていくつかの間隔で同時にではなく（例えば、別個かまたは連続して）与えられ得る。さらに、別々の成分は、被験体に同じかまたは異なる経路（例えば、経口、静脈内、皮下）で投与され得る。
【００７６】
「宿主」、「被験体」または「患者」は、哺乳動物（例えば、霊長類、チンパンジー、イヌ（例えば、ビーグル犬）、ネコ、ウシ、ウマ、ブタ、ヤギ、ウサギ、ラット（例えば、Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラット）、マウス、トリ）などの任意の生物体（例えば、ヒト）であり得る。したがって、本発明の方法は、本発明の融合体が、例えば、臨床設定におけるヒトの処置、または例えば、獣医または研究者による動物の処置（例えば、毒物学研究、薬物動態研究または安全性評価研究を行うこと）に使用される実施形態を包含する。１つの実施形態において、「宿主」、「被験体」または「患者」は、妊婦または授乳婦である。慢性Ｃ型肝炎感染を罹患する者は、以下の徴候または症状の１つ以上を示し得る：
（ａ）上昇したＡＬＴ、
（ｂ）抗ＨＣＶ抗体に対する陽性試験、
（ｃ）ＨＣＶ−ＲＮＡに対する陽性試験によって示されるようなＨＣＶの存在、
（ｄ）慢性肝疾患の臨床徴候
（ｅ）肝細胞の損傷。
【００７７】
このような判定基準は、Ｃ型肝炎ウイルス感染を診断するためだけはでなく、薬物処置に対する患者の応答を追跡および評価するためににも使用され得る。このようなパラメータは、処置の用量および持続期間を調節するために、臨床医によって使用され得る。このような判定基準の評価および宿主、患者または被験体の処置レジメンの調整は、当業者によって容易に行われ得る。
【００７８】
本発明の方法および組成物は、レシピエントにおけるフラビウイルス科感染を処置または予防するために肝臓移植手順において使用され得る。ドナーの肝臓は、生きているドナーに由来し得（すなわち、生体肝移植（ＬＤＬＴ））、ここでドナーの肝臓の部分が、取り出され、そしてレシピエントに導入される。あるいは、移植片は、死亡したドナー由来であり得、ここで肝臓全体が、取り出され、そして移植される。例えば、本発明の実施形態は、宿主への肝臓の移植または宿主への輸血後におけるフラビウイルス科のウイルスのメンバーであるウイルスによる被験体の感染を予防するための方法を包含し、この方法は、ＩＦＮ−ＩｇＧ４またはその薬学的に受容可能な組成物の治療的に有効な量を宿主に投与することを包含する。
【００７９】
本発明はまた、被験体において多発性硬化症または多発性硬化症の再発を処置または予防するための方法を包含し、この方法は、その被験体にＩＦＮ−ＩｇＧ４またはその薬学的に受容可能な組成物の治療的に有効な量を投与することを包含する。例えば、１つの実施形態において、上記被験体は、ＩＦＮβ−１ａ−ＩｇＧ４またはＩＦＮβ−１ｂ−ＩｇＧ４を投与される。必要に応じて、ＩＦＮ−ＩｇＧ４は、トルテロジン；オキシブチニン；オキシブチニン；オキシブチニン；臭化プロパンテリン；塩化トロスピウム；イミプラミン；コハク酸ソリフェナシン；鉱油；ドクセート；ビサコジル；ドクセート便軟化剤緩下薬；リン酸ナトリウム；車前子親水性粘漿薬（Ｐｓｙｌｌｉｕｍ  ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃ  ｍｕｃｉｌｌｏｉｄ）；水酸化マグネシウム；グリセリン；酢酸グラチラマー；ミトキサントロン；塩酸デュロキセチン；ベランファキシン；パロキセチン；フルオキセチン；ブプロピオン；セルトラリン；メクリジン；パパベリン；タダラフィル；バルデナフィル；アルプロスタジル；アルプロスタジル；シルデナフィル；デキサメタゾン；プレドニゾン；メチルプレドニゾロン；アマンタジン；モダフィニル；フルオキセチン；ペモリン；ヒドロキシジン；メクリジン；塩酸デュロキセチン；フェニトイン；アミトリプチリン；ガバペンチン；ノルトリプチリン；クロナゼパム；カルバマゼピン；イミプラミン；バクロフェン；ダントロレン；バクロフェン（鞘内）；クロナゼパム；ジアゼパム；チザニジン；イソニアジド；クロナゼパム；デスモプレシン；デスモプレシン；スルファメトキサゾール；シプロフロキサシン；メテナミン；ニトロフラントイン；またはフェナゾピリジンのうちの１種以上またはそれらの薬学的組成物と合わせて投与される。
【００８０】
本発明はまた、被験体において慢性肉芽腫症に関連する深刻な感染を処置（例えば、重篤度を減少させるかまたは根絶する）または予防ための方法を包含し、この方法は、その被験体にＩＦＮ−ＩｇＧ４またはその薬学的に受容可能な組成物の治療的に有効な量を投与することを包含する。例えば、１つの実施形態において、上記被験体は、ＩＦＮγ−１ｂ−ＩｇＧ４を投与される。必要に応じて、ＩＦＮ−ＩｇＧ４は、トリメトプリムとスルファメトキサゾール（ｓｕｌｆａｍｅｔｈａｚｏｌｅ）との組み合わせまたはトリメトプリムまたはイトラコニゾール（ｉｔｒａｃｏｎｉｚｏｌｅ）のうちの１種以上あるいはそれらの薬学的組成物と合わせて投与される。
【００８１】
本発明はまた、重篤な悪性の大理石骨病を有する患者において、疾患を処置または予防するかあるいは疾患が進行するまでの時間を遅らせるための方法を包含し、この方法は、その患者にＩＦＮ−ＩｇＧ４またはその薬学的に受容可能な組成物の治療的に有効な量を投与することを包含する。例えば、１つの実施形態において、上記被験体は、ＩＦＮγ−１ｂ−ＩｇＧ４を投与される。必要に応じて、ＩＦＮ−ＩｇＧ４は、カルシトリオールまたはプレドニゾンのうちの１種以上あるいはそれらの薬学的組成物と合わせて投与される。
【００８２】
本発明はまた、難治性または再発性である外部の尖圭コンジロームを処置または予防するための方法を包含し、この方法は、その患者にＩＦＮ−ＩｇＧ４またはその薬学的に受容可能な組成物の治療的に有効な量を投与（例えば、病変内注射）することを包含する。例えば、１つの実施形態において、上記被験体は、インターフェロンα−ｎ３−ＩｇＧ４を投与される。必要に応じて、ＩＦＮ−ＩｇＧ４は、トリクロロ酢酸、ポドフィルム、局所液体窒素処置、ポドフィロトキシン塗布剤、イミキモッドクリーム、ポドフィロックス溶液、５−フルオロウラシルクリームまたはトリクロロ酢酸（ＴＣＡ）のうちの１種以上あるいはそれらの薬学的組成物と合わせて投与される。
【００８３】
本発明または、被験体において、ヘアリーセル白血病、慢性期であるフィラデルフィア染色体（Ｐｈ）陽性の慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、悪性黒色腫、濾胞性リンパ腫、尖圭コンジローム、ＡＩＤＳ関連カポジ肉腫、慢性Ｂ型肝炎を処置または予防するための方法を包含し、この方法は、その被験体にＩＦＮ−ＩｇＧ４またはその薬学的に受容可能な組成物の治療的に有効な量を投与することを包含する。例えば、１つの実施形態において、上記被験体は、インターフェロンα−２ａ−ＩｇＧ４またはインターフェロンα−２ｂ−ＩｇＧ４を投与される。必要に応じて、ＩＦＮ−ＩｇＧ４は、クラドリビン（２−クロロデオキシアデノシン、２−ＣｄＡ）、ペントスタチン、イマチニブ、ポドフィルム、局所液体窒素処置、ポドフィロトキシン塗布剤、イミキモッドクリーム、ポドフィロックス溶液、５−フルオロウラシルクリーム、トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）、リタキシマブ、トシツモマブおよびヨウ素Ｉ１３１、イブリツモマブチウキセタン、ダカルバジン、アルデスロイキンまたは塩酸ドキソルビシンのうちの１種以上あるいはそれらの薬学的組成物と合わせて投与される。
【００８４】
本発明は、被験体において任意の炎症性障害（例えば、多発性硬化症、炎症性腸症候群（ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｂｏｗｅｌ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、乾癬、クローン病、慢性関節リウマチ、または潰瘍性大腸炎）を、その被験体にＩＬ−１０−ＩｇＧ４融合体の治療的に有効な量を投与することによって処置または予防するための方法を包含する。
【００８５】
本発明の１つの実施形態において、本発明のＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体は、他のＩＦＮ融合体と比較した場合のその母親がＩＦＮ−ＩｇＧ４を投与される胎児に対する毒性および乳児に対する毒性の減少に起因して、妊婦または授乳婦である患者、被験体または宿主に、任意の上述の方法で投与される。単一の理論または作用機序に拘束されることなく、本発明のＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体は、限定的な胎盤移行を示すＩｇＧ４部分の存在に起因して、より低い胎児に対する毒性および乳児に対する毒性を示し得る。
【００８６】
（薬学的組成物）
本発明は、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体（必要に応じて、さらなる治療剤と合わせた）および薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物を使用するための方法を包含し、その薬学的に受容可能なキャリアは、上記薬学的組成物自体とともにフラビウイルス科感染を処置するためのものである。上記薬学的組成物は、薬学の分野において周知である任意の方法によって調製され得る；例えば、Ｇｉｌｍａｎら（編）、（１９９０）、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｅｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ．第８版、Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ；Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ（編）、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ．第１８版、（１９９０）、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ．；Ａｖｉｓら（編）、（１９９３）、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；  Ｌｉｅｂｅｒｍａｎら（編）、（１９９０）、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：Ｔａｂｌｅｔｓ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；およびＬｉｅｂｅｒｍａｎら（編）、（１９９０）、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：Ｄｉｓｐｅｒｓｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋを参照のこと。
【００８７】
ＩＦＮ−ｌｇＧ４融合体を含む薬学的組成物は、従来の薬学的に受容可能な賦形剤および添加剤ならびに従来の技術を使用して調製され得る。このような薬学的に受容可能な賦形剤および添加剤としては、非毒性の適合可能なフィラー（ｆｉｌｌｅｒ）、結合剤、崩壊剤、緩衝剤、保存剤、酸化防止剤、滑沢剤、香料、増粘剤、着色剤、乳化剤などが挙げられる。全ての投与経路が企図され、それらとしては、非経口経路（例えば、皮下経路、静脈内経路、腹腔内経路、筋肉内経路）および非経口ではない（ｎｏｎ−ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ）経路（例えば、経口経路、経皮経路、鼻腔内経路、眼内経路、舌下経路、吸入経路、直腸経路および局所経路）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８８】
注射剤は、液体の溶液または懸濁液のいずれか、注射前に液体中に溶解または懸濁するのに適した固体形態、あるいはエマルションとして従来の形態に調製され得る。上記注射剤、溶液およびエマルションはまた、１種以上の賦形剤を含み得る。適切な賦形剤は、例えば、水、食塩水、デキストロース、グリセロールまたはエタノールである。さらに、所望される場合、投与される薬学的組成物はまた、湿潤剤または乳化剤、ｐＨ緩衝剤、安定剤、溶解度増強剤（ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ  ｅｎｈａｎｃｅｒ）、および他のこのような薬剤などの少量の非毒性補助物質（例えば、（例えば、酢酸ナトリウム、モノラウリル酸ソルビタン、オレイン酸トリエタノールアミンおよびシクロデキストリンなど）を含み得る。
【００８９】
非経口調製物に使用される薬学的に受容可能なキャリアとしては、水性ビヒクル、非水性ビヒクル、抗微生物剤、等張化剤、緩衝剤、酸化防止剤、局所麻酔剤、懸濁剤および分散剤、乳化剤、封鎖剤またはキレート剤ならびに他の薬学的に受容可能な物質が挙げられる。
【００９０】
水性ビヒクルの例としては、塩化ナトリウム液、リンゲル液、等張性デキストロース液、注射用滅菌水、デキストロースと乳酸とを加えたリンゲル液（Ｄｅｘｔｒｏｓｅ  ａｎｄ  Ｌａｃｔａｔｅｄ  Ｒｉｎｇｅｒｓ  Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）が挙げられる。非水性の非経口ビヒクルとしては、植物起源の不揮発性油、綿実油、トウモロコシ油、ゴマ油および落花生油が挙げられる。静菌濃度または静真菌濃度の抗微生物剤が、一般に、複数用量容器にパッケージ化される非経口調製物に添加され、その抗微生物剤としては、フェノールまたはクレゾール、水銀剤、ベンジルアルコール、クロロブタノール、メチルｐ−ヒドロキシ安息香酸エステルおよびプロピルｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル、チメロサール、塩化ベンザルコニウムおよび塩化ベンゼトニウムが挙げられる。等張化剤としては、塩化ナトリウムおよびデキストロースが挙げられる。緩衝剤としては、リン酸塩およびクエン酸塩が挙げられる。酸化防止剤としては、亜硫酸ナトリウムが挙げられる。局所麻酔剤としては、塩酸プロカインが挙げられる。懸濁剤および分散剤としては、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびポリビニルピロリドンが挙げられる。乳化剤としては、ポリソルベート８０（ＴＷＥＥＮ−８０）が挙げられる。金属イオンの封鎖剤またはキレート剤としては、ＥＤＴＡが挙げられる。薬学的キャリアとしてはまた、水混和性ビヒクルのためのエチルアルコール、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコール；ならびにｐＨ調整のための水酸化ナトリウム、塩酸、クエン酸または乳酸が挙げられる。
【００９１】
非経口投与のための調製物は、注射用の滅菌溶液、使用の直前に溶媒と合わせられる用意ができている滅菌した乾燥可溶性産物（例えば、凍結乾燥粉末）（皮下組織の錠剤（ｈｙｐｏｄｅｒｍｉｃ  ｔａｂｌｅｔ）を含む）、注射用の滅菌懸濁物、使用の直前にビヒクルと合わせられる用意ができている滅菌した乾燥不溶性産物および滅菌したエマルションを含み得る。上記溶液は、水性であっても非水性であってもよい。
【００９２】
一定レベルの投薬量が維持されるような徐放システムまたは持続放出システムの移植もまた、本明細書中で企図される。簡単にいうと、この実施形態において、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体は、固体の内部マトリックス（例えば、ポリメチルメタクリレート、ポリブチルメタクリレート、可撓性または非可撓性の塩化ポリビニル、可撓性のナイロン、可撓性のポリエチレンテレフタレート、天然ゴム、ポリイソプレン、ポリイソブチレン、ポリブタジエン、ポリエチレン、エチレン−ビニルアセテート、シリコーンゴム、ポリジメチルシロキサン、シリコーンカルボネートコポリマー、親水性ポリマー（例えば、アクリル酸とメタクリル酸とのエステルのヒドロゲル）、コラーゲン、外部のポリマー膜によって囲まれている架橋型ポリビニルアルコールおよび架橋型の部分的に加水分解したポリビニルアセテート（例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、エチレン／プロピレンコポリマー、エチレン／酢酸エチルコポリマー、エチレン／酢酸ビニルコポリマー、シリコーンゴム、ポリジメチルシロキサン、ネオプレンゴム、塩素化ポリエチレン、塩化ポリビニル、酢酸ビニルと、塩化ビニリデンと、エチレンとプロピレンとの塩化ビニルコポリマー、イオノマーポリエチレンテレフタレート、ブチルゴムエピクロロヒドリンゴム、エチレン／ビニルアルコールコポリマー、エチレン／酢酸ビニル／ビニルアルコールターポリマー（ｔｅｒｐｏｌｙｍｅｒ）、ならびにエチレン／ビニルオキシエタノールコポリマー（体液中で不溶性である））中に分散される。活性成分は、放出速度を制御する工程において外部のポリマー膜を通過して拡散する。このような非経口組成物に含まれる活性化合物の％は、その特定の性質ならびにＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の活性および被験体の必要性に大きく依存する。
【００９３】
ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の濃度は、注射が所望の薬理学的効果をもたらすのに有効な量を提供するように調整され得る。正確な用量は、とりわけ、当該分野において公知であるように、患者の年齢、体重および状態に依存する。
【００９４】
単位用量の非経口調製物は、アンプル、バイアルまたは針を備える注射器にパッケージ化される。非経口投与のための全ての調製物は、当該分野において公知でありかつ実施されるように、滅菌されなければならない。
【００９５】
ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体は、凍結乾燥粉末へと処方され得、その凍結乾燥粉末は、溶液、エマルジョンおよび他の混合物として投与するために再構成され得る。その粉末はまた、固体またはゲルとして再構成および処方され得る。
【００９６】
上記滅菌した凍結乾燥粉末は、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体またはその薬学的に受容可能な誘導体を適切な溶媒に溶解することによって調製される。上記溶媒は、上記粉末または再構成された溶液（その粉末から調製された）の安定性または別の薬理学的成分を改善する賦形剤を含み得る。使用され得る賦形剤としては、デキストロース、ソルビトール、フルクトース、コーンシロップ、キシリトール、グリセリン、グルコース、スクロースまたは他の適切な薬剤が挙げられるが、これらに限定されない。上記溶媒はまた、緩衝剤（例えば、クエン酸塩、リン酸ナトリウムまたはリン酸カリウムあるいは他のそのような当業者に公知である緩衝剤）を、いくつかの実施形態では、ほぼ中性のｐＨで含み得る。当業者に公知である標準的な条件下におけるその後の濾過滅菌、それに続く凍結乾燥は、所望の処方物を提供する。１つの実施形態において、得られた溶液は、凍結乾燥のためにバイアルに分配される。各バイアルは、ＩＦＮ−ＩｇＧ４の単一投薬量または複数投薬量を含み得る。上記凍結乾燥粉末は、適切な条件下（例えば、約４℃〜室温）で保存され得る。
【００９７】
この凍結乾燥粉末の注射用水による再構成は、非経口投与に使用するための処方物を提供する。再構成のために、上記凍結乾燥粉末は、滅菌水または別の適切なキャリアに添加され得る。その正確な量は、選択された化合物に依存する。このような量は、実験的に決定され得る。
【００９８】
吸入による投与は、例えば、ソルビタントリオレエートまたはオレイン酸を、例えば、トリクロロフルオロメタン、ジクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタンまたは任意の他の生物学的に適合可能な噴霧剤ガスと一緒に含むエアロゾルを使用することによって提供され得る；ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体をそれ含むシステムを自体かまたは賦形剤と合わせて粉末形態で使用することも、可能である。
【００９９】
１つの実施形態において、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体は、経口投与のための固体投薬形態へと処方され、１つの実施形態において、そのＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体は、カプセル剤または錠剤へと処方される。錠剤、丸剤、カプセル剤、トローチ剤などは、以下の成分または同様の性質の化合物の１種以上を含み得る：結合剤；滑沢剤；希釈剤；流動促進剤（ｇｌｉｄａｎｔ）；崩壊剤；着色剤；甘味剤；香料；湿潤剤；催吐コーティング；およびフィルムコーティング。結合剤の例としては、微結晶性セルロース、トラガカントガム、グルコース溶液、アラビアゴム粘液、ゼラチン溶液、糖蜜、ポリビニルピロリドン、ポビドン、クロスポビドン、スクロースおよびデンプンのりが挙げられる。滑沢剤としては、タルク、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、セキショウシおよびステアリン酸が挙げられる。希釈剤としては、例えば、ラクトース、スクロース、デンプン、カオリン、塩、マンニトールおよび第二リン酸カルシウムが挙げられる。流動促進剤としては、コロイド状二酸化ケイ素が挙げられるが、これらに限定されない。崩壊剤としては、カルメロースナトリウム架橋重合物（ｃｒｏｓｓｃａｒｍｅｌｌｏｓｅ  ｓｏｄｉｕｍ）、デンプングリコール酸ナトリウム、アルギン酸、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、ベントナイト、メチルセルロース、寒天およびカルボキシメチルセルロースが挙げられる。着色剤としては、例えば、任意の承認された水溶性のＦＤ色素およびＣ色素、その混合物；ならびに水酸化アルミナに懸濁された不水溶性のＦＤ色素およびＣ色素が挙げられる。甘味剤としては、スクロース、ラクトース、マンニトールおよび人工甘味剤（例えば、サッカリン）ならびに多くの噴霧乾燥した香料が挙げられる。香料としては、植物（例えば、果実）から抽出された天然の香料および清涼感をもたらす化合物（例えば、ペパーミントおよびサリチル酸メチルであるが、これらに限定されない）の合成ブレンドが挙げられる。湿潤剤としては、プロピレングリコールモノステアレート、ソルビタンモノステアレート、ジエチレングリコールモノラウレートおよびポリオキシエチレンラウリルエーテル（ｌａｕｒａｌ  ｅｔｈｅｒ）が挙げられる。催吐コーティングとしては、脂肪酸、脂肪、蝋、シェラック、アンモニア処理したシェラックおよび酢酸フタル酸セルロースが挙げられる。フィルムコーティングとしては、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリエチレングリコール４０００および酢酸フタル酸セルロースが挙げられる。
【０１００】
本発明の方法は、例えば、１種以上の他の治療剤と合わせてたＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の投与を包含する。１つの実施形態において、他の治療剤は、被験体に投与される場合にその被験体におけるウイルス感染を処置または予防する抗ウイルス剤である。このような薬剤の投与および投薬量は、代表的に、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  ２００３（Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ、第５７版）；Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ；ＩＳＢＮ：１５６３６３４４５７；第５７版（２００２年１１月）、および当該分野において周知である治療プロトコルにおける、承認された薬剤の製品情報シートに記載されるスケジュールに従うものである。
【０１０１】
「治療剤」は、被験体に投与された場合に所望されるかまたは有益な治療効果（所与の医学的状態に関連する症状の進行または重篤度の予防、排除または減少）をもたらす薬剤である。治療剤は、例えば、抗ウイルス剤または抗癌剤であり得る。
【０１０２】
ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体と合わせて、投与され得るかまたは組み合され得る化合物としては、１種以上のリボヌクレオチドアナログ、ＩＭＰＤＨインヒビター、Ｎ−グリコシル化インヒビター、Ｎ３プロテアーゼインヒビター、ＮＳ５Ｂインヒビター、免疫調節性化合物およびＣＴＰシンターゼインヒビター、チアゾリジン誘導体、ベンズアニリド、フェナントレキノン、ヘリカーゼインヒビター、ポリメラーゼインヒビター、アンチセンスホスホチオエートオリゴデオキシヌクレオチド、ＩＲＥＳ依存性翻訳インヒビター、ヌクレアーゼ抵抗性リボザイム、１−アミノ−アルキルシクロヘキサン（ａｌｋｙｌｏｙｃｌｏｈｅｘａｎｅ）、アルキル脂質、抗酸化剤、スクアレン、アマンタジン、胆汁酸、Ｎ−（ホスホノアセチル）−Ｌ−アスパラギン酸、ベンゼンジカルボキサミド、ポリアデニル酸誘導体、２’，３’ジデオキシイノシンおよびベンズイミダゾールが挙げられる。
【０１０３】
上述の通り、本発明の１つの実施形態において、リバビリン
【０１０４】
【化１７】
2008545409.tif 000017
は、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体と合わせて、投与されるかまたは組み合わされる。リバビリンは、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ、ＮＪによってＲＥＢＥＴＯＬ（登録商標）として販売されている。その製造および処方は、例えば、米国特許第４，２１１，７７１号に記載される。
【０１０５】
上述の通り、本発明の１つの実施形態において、ラミブジン（ｌａｍｕｖｉｄｉｎｅ）
【０１０６】
【化１８】
2008545409.tif 000018
；またはジドブジン
【０１０７】
【化１９】
2008545409.tif 000019
は、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体と合わせて、投与されるかまたは組み合わされる。
【０１０８】
本発明の別の実施形態において、ゲムシタビン
【０１０９】
【化２０】
2008545409.tif 000020
は、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体と合わせて、投与されるかまたは組み合わされる。ゲムシタビンは、Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ  ａｎｄ  Ｃｏ．（Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、ＩＮ）によってＧＥＭＺＡＲ（登録商標）として販売される。
【０１１０】
本発明のさらなる実施形態は、ＶＸ４９７
【０１１１】
【化２１】
2008545409.tif 000021
と合わせたＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の投与または組み合わせを含む。
【０１１２】
本発明の１つの実施形態は、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体と合わせた、ミコフェノール酸モフェチル（ＭＭＦ；２−モルホリノエチル（Ｅ）−６−（１，３−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−６−メトキシ−７−メチル−３−オキソ−５−イソベンゾフラニル）−４−メチル−４−ヘキセノエート）の投与または組み合わせを含む。ＭＭＦは、Ｒｏｃｈｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｎｕｔｌｅｙ、ＮＪ）によってＣｅｌｌＣｅｐｔ（登録商標）として販売されている。
【０１１３】
別の実施形態は、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体と合わせた、ＥＩＣＡＲ
【０１１４】
【化２２】
2008545409.tif 000022
または
【０１１５】
【化２３】
2008545409.tif 000023
の投与または組み合わせを含む。
【０１１６】
本発明の１つの実施形態は、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体と合わせたチアゾフリン
【０１１７】
【化２４】
2008545409.tif 000024
の投与または組み合わせを含む。
【０１１８】
本発明の別の実施形態は、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体と合わせた、デオキシノジリマイシン（ｄｅｏｘｙｎｏｊｉｒｉｍｙｃｉｎ）および／もしくはその誘導体（例えば、Ｎ−ノニル−デオキシノジリマイシン（Ｄｅ  Ｃｌｅｒｃｑら、Ｍｉｎｉ  Ｒｅｖ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．２（２）：１６３−７５（２００２））またはｎ−ブチルデオキシノジリマイシン（ｎＢ−ＤＮＪ；Ｏｕｚｏｕｎｏｖら、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｒｅｓ．５５（３）：４２５−３５（２００２））の投与または組み合わせを含む。
【０１１９】
別の実施形態において、ＢＩＬＮ−２０６１
【０１２０】
【化２５】
2008545409.tif 000025
は、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体と合わせて、投与されるかまたは組み合わされる。
【０１２１】
別の実施形態において、チマルファシン（ｔｈｙｍａｌｆａｓｉｎ）（例えば、ＺＡＤＡＸＩＮＴＭ）は、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体と合わせて投与されるか、または組み合わされる。ＺＡＤＡＸＩＮＴＭは、ＳｃｉＣｌｏｎｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｌｔｄ．（Ｓａｎ  Ｍａｔｅｏ、ＣＡ）から入手可能である。
【０１２２】
なお別の実施形態において、イサトルビン（ｉｓａｔｏｒｉｂｉｎｅ）
【０１２３】
【化２６】
2008545409.tif 000026
は、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体と合わせて、投与されるかまたは組み合わされる。
【０１２４】
別の実施形態において、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体は、テルビブジン（ｔｅｌｂｉｖｕｄｉｎｅ）
【０１２５】
【化２７】
2008545409.tif 000027
、バルトルシチビン（ｖａｌｔｏｒｃｉｔｉｂｉｎｅ）
【０１２６】
【化２８】
2008545409.tif 000028
、ＭＮ２８３
【０１２７】
【化２９】
2008545409.tif 000029
またはＮＭ１０７（Ｉｄｅｎｉｘ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ；Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、ＭＡ）などの任意のＮＳ５Ｂインヒビターと合わせて、投与されるかまたは組み合わされる。
【０１２８】
別の実施形態において、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体は、
【０１２９】
【化３０】
2008545409.tif 000030
または
【０１３０】
【化３１】
2008545409.tif 000031
と合わせて、投与されるかまたは組み合わされる。
【０１３１】
さらなる実施形態において、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体は、Ｑａｓｉｍら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３６：１５９８−１６０７（１９９７）に開示されるＥｌｇｉｎ  ｃの任意のＰ１改変体と合わせて、投与されるかまたは組み合わされる。
【０１３２】
なお別の実施形態において、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体は、グリオトキシン
【０１３３】
【化３２】
2008545409.tif 000032
と合わせて、投与されるかまたは組み合わされる。
【０１３４】
本発明の他の実施形態は、ＲＤ３−４０８２
【０１３５】
【化３３】
2008545409.tif 000033
またはＲＤ３−４０７８
【０１３６】
【化３４】
2008545409.tif 000034
またははＳｕｄｏらにおいて開示される任意の他のプロテアーゼインヒビターと合わせたＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の、投与または組み合わせを含む。
【０１３７】
本発明のさらなる実施形態は、
【０１３８】
【化３５】
2008545409.tif 000035
またはＫａｋｉｕｃｈｉらにおいて開示される任意の他のプロテアーゼインヒビターと合わせたＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の、投与または組み合わせを含む。
【０１３９】
本発明の別の実施形態は、ＲＤ４−６２０５
【０１４０】
【化３６】
2008545409.tif 000036
またはＳｕｄｏらにおいて開示される任意の他のプロテアーゼインヒビターと合わせた、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の投与または組み合わせを含む。
【０１４１】
本発明の１つの実施形態は、セルレニン
【０１４２】
【化３７】
2008545409.tif 000037
またはＬｏｈｍａｎｎらにおいて開示される任意の他のＨＣＶ  ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ（ＲｄＲｐ）インヒビターと合わせたＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の、投与または組み合わせを含む。
【０１４３】
本発明の１つの実施形態は、セプレン（ｃｅｐｌｅｎｅ）
【０１４４】
【化３８】
2008545409.tif 000038
と合わせたＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の、投与または組み合わせを含む。
【０１４５】
本発明のなお別の実施形態は、アマンタジン
【０１４６】
【化３９】
2008545409.tif 000039
と合わせたＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の、投与または組み合わせを含む。
【０１４７】
本発明のさらなる実施形態は、ＩＤＮ−６５５６
【０１４８】
【化４０】
2008545409.tif 000040
と合わせたＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の、投与または組み合わせを含む。
【０１４９】
本発明のなお別の実施形態は、ナフトキノン、２−メチルナフトキノン、２−ヒドロキシナフトキノン、５−ヒドロキシナフトキノン、５，８−ジヒドロキシナフトキノン、アルカンニンまたはシコニン（Ｔａｋｅｓｈｉｔａら、Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．２４７：２４２−２４６（１９９７））と合わせたＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の、投与または組み合わせを含む。
【０１５０】
本発明のさらなる実施形態は、以下と合わせたＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の、投与または組み合わせを含む：１−アミノ−１，３，５−トリメチルシクロヘキサン、１−アミノ−１（トランス），３（トランス），５−トリメチルシクロヘキサン、１−アミノ−１（シス），３（シス），５−トリメチルシクロヘキサン、１−アミノ−１，３，３，５−テトラメチルシクロヘキサン、１−アミノ−１，３，３，５，５−ペンタメチルシクロヘキサン、１−アミノ−１，３，５，５−テトラメチル−３−エチルシクロヘキサン、１−アミノ−１，５，５−トリメチル−３，３−ジエチルシクロヘキサン、１−アミノ−１，５，５−トリメチル−シス−３−エチルシクロヘキサン、１−アミノ−（１Ｓ，５Ｓ）シス−３−エチル−１，５，５−トリメチルシクロヘキサン、１−アミノ−１，５，５−トリメチル−トランス−３−エチルシクロヘキサン、１−アミノ−（１Ｒ，５Ｓ）トランス−３−エチル−１，５，５−トリメチルシクロヘキサン、１−アミノ−１−エチル−３，３，５，５−テトラメチルシクロヘキサン、１−アミノ−１−プロピル−３，３，５，５−テトラメチルシクロヘキサン、Ｎ−メチル−１−アミノ−１，３，３，５，５−ペンタメチルシクロヘキサン、Ｎ−エチル−１−アミノ−１，３，３，５，５−ペンタメチルシクロヘキサン、またはＮ−（１，３，３，５，５−ペンタメチルシクロヘキシル）ピロリジンあるいは米国特許第６，０３４，１３４号に開示される任意の他の１−アミノアルキルシクロヘキサン  Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）インヒビター。
【０１５１】
本発明のさらなる実施形態は、ｄ−α−トコフェロールまたは米国特許第５，９２２，７５７号に開示される任意の他の抗ＨＣＶ化合物と合わせたＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の、投与または組み合わせを含む。
【０１５２】
本発明の別の実施形態は、タウロウルソデオキシコール酸、ケノデオキシコール酸、ウルソデオキシコール酸または遊離胆汁酸あるいは米国特許第５，８４６，９６４号に開示される任意の他の胆汁酸ＨＣＶインヒビターと合わせたＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の、投与または組み合わせを含む。
【０１５３】
本発明の別の実施形態は、１，１’−［１，４−フェニレンビス（メチレン）］ビス（４，４’−トランス−（４，５，６，７，８，９−ヘキサヒドロ）ベンズイミダゾイル）ピペリジン、１，１’−［１，４−フェニレンビス（メチレン）］ビス（４，４’−ベンズイミダゾイル）ピペリジンまたは米国特許第５，８３０，９０５号に開示される任意の他の抗ＨＣＶ化合物と合わせたＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の、投与または組み合わせを含む。
【０１５４】
本発明の別の実施形態は、Ｎ，Ｎ’−４−［（２−ベンズイミダゾール）フェニル］−１，４−ブタンジカルボキサミド、Ｎ，Ｎ’−４−［（２−ベンズイミダゾール）フェニル］−１，６−ヘキサンジカルボキサミド、Ｎ，Ｎ’−４−［（２−ベンズイミダゾール）フェニル］−１，８−オクタンジカルボキサミド、Ｎ，Ｎ’−４−［（２−ベンズイミダゾール）フェニル］−１，９−ノナンジカルボキサミド、Ｎ，Ｎ’−４−［（２−ベンズイミダゾール）フェニル］−１，１０−デカンジカルボキサミドまたはＮ，Ｎ’−４−［（２−ベンズイミダゾール）フェニル］−１，４−ブテンジカルボキサミドあるいは米国特許第５，６３３，３８８号に開示される任意の他のカルボキサミドＨＣＶインヒビターと合わせたＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の、投与または組み合わせを含む。
【０１５５】
本発明の別の実施形態は、米国特許第５，４９６，５４６号に開示される任意のポリアデニル酸（５’）誘導体と合わせたＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の、投与または組み合わせを含む。
【０１５６】
本発明のさらなる実施形態は、２’，３’−ジデオキシイノシン（米国特許第５，０２６，６８７号）と合わせたＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の、投与または組み合わせを含む。
【０１５７】
本発明の１つの実施形態は、
【０１５８】
【化４１】
2008545409.tif 000041
または米国特許第５，８９１，８７４号に開示される任意の他のベンズイミダゾールと合わせたＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の、投与または組み合わせを含む。
【０１５９】
本発明のさらなる実施形態は、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体と合わせたＶＸ−９５０
【０１６０】
【化４２】
2008545409.tif 000042
の、投与または組み合わせを含む。
【０１６１】
本発明の別の実施形態は、ビラミジン（ｖｉｒａｍｉｄｉｎｅ）
【０１６２】
【化４３】
2008545409.tif 000043
またはレボビリン（ｌｅｖｏｖｉｒｉｎ）
【０１６３】
【化４４】
2008545409.tif 000044
と合わせたＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体の、投与または組み合わせを含む。
【０１６４】
１つの実施形態において、本発明は、トルテロジン；オキシブチニン；オキシブチニン；オキシブチニン；臭化プロパンテリン；塩化トロスピウム；イミプラミン；コハク酸ソリフェナシン；鉱油；ドクセート；ビサコジル；ドクセート便軟化剤緩下薬；リン酸ナトリウム；車前子親水性粘漿薬；水酸化マグネシウム；グリセリン；酢酸グラチラマー；ミトキサントロン；塩酸デュロキセチン；ベランファキシン；パロキセチン；フルオキセチン；ブプロピオン；セルトラリン；メクリジン；パパベリン；タダラフィル；バルデナフィル；アルプロスタジル；アルプロスタジル；シルデナフィル；デキサメタゾン；プレドニゾン；メチルプレドニゾロン；アマンタジン；モダフィニル；フルオキセチン；ペモリン；ヒドロキシジン；メクリジン；塩酸デュロキセチン；フェニトイン；アミトリプチリン；ガバペンチン；ノルトリプチリン；クロナゼパム；カルバマゼピン；イミプラミン；バクロフェン；ダントロレン；バクロフェン；クロナゼパム；ジアゼパム；チザニジン；イソニアジド；クロナゼパム；デスモプレシン；デスモプレシン；スルファメトキサゾール；シプロフロキサシン；メテナミン；ニトロフラントイン；フェナゾピリジン、トリメトプリムおよびスルファメトキサゾールの組み合わせあるいはトリメトプリム、イトラコナゾール、カルシトリオール、プレドニゾン、トリクロロ酢酸、ポドフィルム、局所液体窒素処置、ポドフィロトキシン塗布剤、イミキモッドクリーム、ポドフィロックス溶液、５−フルオロウラシルクリーム、トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）、クラドリビン（２−クロロデオキシアデノシン、２−ＣｄＡ）、ペントスタチン、イマチニブから選択されるものの１種以上；トリクロロ酢酸、ポドフィルム、局所液体窒素処置、ポドフィロトキシン塗布剤、イミキモッドクリーム、ポドフィロックス溶液、５−フルオロウラシルクリーム、トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）、リタキシマブ、トシツモマブおよびヨウ素Ｉ１３１、イブリツモマブチウキセタン、ダカルバジン、アルデスロイキンまたは塩酸ドキソルビシンのうちの１種以上と合わせたＩＦＮ−ＩｇＧ４の、投与または組み合わせを含む。
【０１６５】
上記においても考察されるように、本発明の組成物および方法は、必要に応じて１種以上のさらなる抗ウイルス剤（例えば、リバビリン、インターフェロンα−２ａまたはインターフェロンα−２ｂ、あるいはペグ化インターフェロンα−２ａまたはペグ化インターフェロンα−２ｂ）と「合わせた」ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体を含む。用語「合わせた」は、本発明の組み合わせの成分が同時送達のための単一の組成物へと処方され得るかまたは２つ以上の組成物（例えば、キット）へと別個に処方され得ることを示す。さらに、本発明の組み合わせの成分は、他の成分が投与されるときとは異なる時間に被験体に投与され得る；例えば、各投与は、与えられる期間にわたっていくつかの間隔で同時にではなく（例えば、別個かまたは連続して）与えられ得る。さらに、別々の成分は、被験体に同じかまたは異なる経路（例えば、経口、静脈内、皮下）で投与され得る。
【０１６６】
本発明は、上で考察される１種以上の抗ウイルス剤（例えば、リバビリン）と薬学的に受容可能なキャリアを含むその薬学的組成物とを合わせてＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体を含む組成物を含む。
【０１６７】
（投薬量および投与）
このような物質の治療的投与のための代表的なプロトコルは、当該分野において周知である。本発明の薬学的組成物は、例えば、任意の（例えば、皮下注射、筋肉内注射、静脈内注射）または非経口ではない経路（例えば、経口、経鼻）によって投与され得る。
【０１６８】
本発明の丸剤は、経口的に投与され得る。注射可能な組成物は、当該分野において公知である医学的デバイスによって投与され得る；例えば、上で考察されるＲＥＤＩＰＥＮ（登録商標）またはＮＯＶＯＬＥＴ（登録商標）Ｎｏｖｏ  Ｐｅｎを含む皮下針による注射によって。
【０１６９】
本発明の注射可能な薬学的組成物はまた、針を有さない皮下注射デバイスによって投与され得る；例えば、米国特許第５，３９９，１６３号；同第５，３８３，８５１号；同第５，３１２，３３５号；同第５，０６４，４１３号；同第４，９４１，８８０号；同第４，７９０，８２４号または同第４，５９６，５５６号に開示されるデバイス。
【０１７０】
本発明の組成物は、例えば、１日に３回、１日に２回、１日に１回、１週間に３回、１週間に２回または１週間に１回、２週間毎に１回、３週間毎に１回、４週間毎に１回、５週間毎に１回、６週間毎に１回、７週間毎に１回または８週間毎に１回投与され得る。
【０１７１】
投与において、本発明の化合物または本発明の化合物と合わせて投与される任意の他の抗ウイルス剤の１日量は、可能な場合、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  ２００３（Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ、第５７版）；Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ；ＩＳＢＮ：１５６３６３４４５７；第５７版（２００２年１１月）に従って投与される。しかし、適切な投薬量は、治療を受ける被験体の特定の特徴を補うために、例えば、投与される化合物の効力、副作用、年齢、体重、医学的状態、健康全般および応答に依存して臨床家によって変更され得る。
【０１７２】
用語「治療的に有効な量」は、投与者（例えば、研究者、医師または獣医）によって求められる組織、系、被験体または宿主の生物学的応答または医学的応答を誘発する治療剤または物質（例えば、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体）の量を意味し、その応答としては、例えば、フラビウイルス科ウイルス（例えば、ＨＣＶ）感染の症状の緩和、およびフラビウイルス科ウイルス（例えば、ＨＣＶ）感染およびその症状の進行を任意の程度まで予防、遅延または停止すること（宿主への肝臓の移植後のフラビウイルス科ウイルス（例えば、ＨＣＶ）による宿主の感染の予防を含む）が挙げられる；あるいは、１つの実施形態において、その応答としては、多発性硬化症、Ｂ型肝炎ウイルス感染、尖圭コンジローム、癌（例えば、白血病、リンパ腫、黒色腫、カポジ肉腫）または本明細書中で考察される任意の医学的障害の緩和、およびこのような医学的障害およびその症状の進行を任意の程度まで予防、遅延または停止することが挙げられる。例えば、１つの実施形態において、ＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体または別の抗ウイルス剤（例えば、リバビリンおよび／またはペグ化されているかもしくはペグ化されていないインターフェロンα−２ａもしくはインターフェロンα−２ｂ）を含む組み合わせの「治療的に有効な投薬量」は、検出可能なフラビウイルス科ウイルスＲＮＡ（例えば、ＨＣＶ  ＲＮＡ）の任意の期間（例えば、１２週間以上（例えば、２４週間））にわたる根絶を生じる。宿主におけるウイルスＲＮＡの検出は、従来の当該分野において周知である方法を使用して容易に行われ得る。
【０１７３】
１つの実施形態において、本発明の任意のＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体またはＩＬ−１０−ＩｇＧ４融合体の治療的に有効な投薬量または治療的に有効な量は、１ヶ月〜２ヶ月に約１回の投薬頻度で体重６０ｋｇあたり約２ｍｇ〜約３ｍｇ（例えば、体重６０ｋｇあたり約２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８または２．９ｍｇ）である。
【０１７４】
１つの実施形態において、リバビリン（例えば、ＲＥＢＥＴＲＯＬ（登録商標））の治療的に有効な用量は、患者の体重に依存する。１つの実施形態において、ＲＥＢＥＴＯＬ（登録商標）の推奨用量は、下の表１に提供される。
【０１７５】
【化４５】
2008545409.tif 000045
１つの実施形態において、先にインターフェロンによって処置されていない患者に対するリバビリン（例えば、ＲＥＢＥＴＯＬ（登録商標））による処置の持続期間は、２４週間〜４８週間である。処置の持続期間は、ベースラインの疾患特性、治療に対する応答、およびレジメンの耐用性に依存してその患者に対して個別化されるべきである。処置の２４週間後、ウイルス学的応答が、評価されるべきである。処置の中止は、２４週間でアッセイの検出限界を下回るＨＣＶ  ＲＮＡを達成しなかったあらゆる患者において検討され得る。
【０１７６】
１つの実施形態において、インターフェロン治療後に再発する患者では、リバビリン（例えば、ＲＥＢＥＴＯＬ（登録商標））による処置の持続期間は、２４週間である。
【０１７７】
ＲＥＢＥＴＯＬ（登録商標）は、食物に関係なく投与され得るが、食物摂取に関して一貫した様式で投与されるべきである。
【０１７８】
臨床家または医師は、治療を受ける患者において観察される進行に従って、本発明のＩＦＮ−Ｉｇ融合体の投薬量を調整し得る。例えば、肝炎ウイルス（例えば、ＨＣＶ）感染を罹患する患者のウイルス量は、当該分野において周知である多くの方法のいずれかを使用してモニタリングされ得る。本発明の１つの実施形態において、ウイルス量は、以下でより詳細に考察されるようなｒｔＰＣＲまたはＥＬＩＳＡ（例えば、Ｆａｂｒｉｚｉら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．４３（１）：４１４−２０（２００５）またはＣｏｏｋら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．４２（９）：４１３０−６（２００４）を参照のこと）によってモニタリングされる。
【０１７９】
理想的には、必ずではないが、本発明の組成物を投与される感染している宿主は、最終的に、その宿主の身体においてある期間（例えば、１２週間以上）にわたってＨＣＶ  ＲＮＡが検出不可能であることを示す。
【０１８０】
本発明の文脈において用語「ＨＣＶ−ＲＮＡが検出不可能（ｎｏ  ｂｄｅｔｅｃｔａｂｌｅ  ＨＣＶ−ＲＮＡ）」は、定量的な複数サイクルの逆転写ＰＣＲ（ｒｔＰＣＴ）方法論によって測定されたところ患者の血清１ｍｌあたり約１００コピー未満のＨＣＶ−ＲＮＡが存在することを意味する。このようなＰＣＲベースのアッセイは、慣習的であり、そして非常に当該分野において周知である。一般に、ｒｔＰＣＲは、検体からＲＮＡを単離し、そのＲＮＡを逆転写してｃＤＮＡを産生し、ａｍｐｌｉｆｙｉｎｇ  特定の核酸配列をＰＣＲによって増幅し、次いで種々の方法を使用してその増幅された配列を検出することによって行われる（Ｕｒｄｅａら、Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．４３：１５０７−１５１１（１９９７））。
【０１８１】
１つの実施形態において、本発明の組成物は、フラビウイルス科ウイルスに感染した宿主に投与される場合、持続性のウイルス学的応答を示す。用語「持続性のウイルス学的応答」は、本発明の文脈において使用される場合、本発明によって処置された患者の血清において併用療法処置の終了後に少なくとも２４週間にわたってＨＣＶ−ＲＮＡが検出不可能なままであることを意味する。好ましくは、持続性のウイルス学的応答の期間は、処置の終了後少なくとも１年間以上である。
【０１８２】
同様に、本明細書中で考察される癌性適応症の処置における投薬量は、当該分野において周知である方法を使用してモニタリングされ得、そして処置する臨床家または医師は、投与されるべきＩＦＮ−Ｉｇの投薬量を、観察された進行のレベルおよび観察される他の臨床的な危急（例えば、選択された処置レジメンに対する有害反応）に従って調整し得る。本発明の１つの実施形態において、本明細書中で考察されるような白血病適応症（例えば、ヘアリーセル白血病または慢性骨髄性白血病）の本発明のＩＦＮ−Ｉｇする処置の進行は、白血球酵素アルカリホスファターゼについてのような血液化学試験（ＬＡＰスコア）を使用してモニタリングされる（Ｒａｍｂａｌｄｉら、Ｂｌｏｏｄ  ７３（５）：１１１３−５（１９８９））。より低いＬＡＰスコアは、ＣＭＬに関連している。本発明の１つの実施形態において、ヘアリーセル白血病の本発明のＩＦＮ−Ｉｇによる処置の進行は、、例えば、低い白血球数、低い赤血球数または低い血小板を検出する全血球算定；肥大した脾臓または肝臓を検出する身体検査；ヘアリーセルを検出する骨髄生検；ヘアリーセルを検出する末梢血スミア；へアリーセルの存在を確認し得る、血球または骨髄細胞において行われる酒石酢酸抵抗性酸ホスファターゼについての試験；あるいは肥大した脾臓または肝臓を検出する腹部コンピューター連動断層（ＣＴ）スキャンによってモニタリングされる。本発明の１つの実施形態において、黒色腫の本発明のＩＦＮ−Ｉｇを使用する処置の進行は、全身写真撮影およびほくろの位置確認（ｍｏｌｅ  ｍａｐｐｉｎｇ）を含む皮膚の視診によってモニタリングされる。本発明の１つの実施形態において、悪性の大理石骨病（ｏｓｔｅｏｐｅｒｔｏｓｉｓ）の処置の進行は、骨格Ｘ線（大理石骨病患者のＸ線は、しばしば、チョークホワイト（ｃｈａｌｋｙ  ｗｈｉｔｅ）の外見を伴う異常な密度を有する）、骨密度試験、骨生検、ＣＡＴスキャンまたはＭＲＩを使用してモニタリングされ得る。本発明の１つの実施形態において、難治性または再発性の尖圭コンジローム（性器いぼ）の処置の進行は、感染した皮膚表面の視診によってモニタリングされ得る。本発明の１つの実施形態において、濾胞性リンパ腫の処置の進行は、全血球算定（ＣＢＣ）、末梢血スミアの検査、腰部Ｘ線およびＣＴスキャンならびに血液化学試験（例えば、ＬＤＨ、尿酸、肝機能試験、およびクレアチニンを含む）によってモニタリングされ得る。ＬＤＨは、しばしば、腫瘍量の指標であり、ここで高いＬＤＨは、ネガティブな予後因子である。本発明の１つの実施形態において、カポジ肉腫（例えば、ＡＩＤＳ関連カポジ肉腫）の処置の進行は、皮膚病変の視診、腰部Ｘ線（肺の病変を可視化するため）、気管支鏡検査（上気道の病変を可視化するため）および内視鏡検査（胃および小腸の病変を可視化するため）によってモニタリングされる。本発明の１つの実施形態において、慢性肉芽腫症（ＣＧＤ）に関連する感染の処置の進行は、患者の面接および体温のモニタリング、腰部Ｘ線、過剰に高いレベルの免疫グロブリンを検出する血球算定、または高い赤血球沈降速度またはＥＳＲ（慢性感染または炎症の徴候）を検出する試験によってモニタリングされる。本発明の１つの実施形態において、多発性硬化症（ＭＳ）の処置の進行は、脳におけるプラークまたは瘢痕の存在を検出する磁気共鳴画像化法ＭＳ症状の発作、再燃、紅斑、または再発の頻度をモニタリングするための患者の面接によってモニタリングされる。
【０１８３】
（キットおよび製品）
本発明のキットは、例えば、丸剤、散剤、注射可能な液体、錠剤、分散可能な顆粒剤、カプセル剤、カシェ剤または坐剤などの薬学的投薬においてＩＦＮ−ＩｇＧ４融合体またはその薬学的組成物を備える。例えば、Ｇｉｌｍａｎら（編）（１９９０）、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｅｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第８版、Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ；およびＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、前出、Ｅａｓｔｏｎ、Ｐｅｎｎ．；Ａｖｉｓら（編）（１９９３）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎら（編）（１９９０）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：Ｔａｂｌｅｔｓ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；ａｎｄ  Ｌｉｅｂｅｒｍａｎら（編）（１９９０）、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：Ｄｉｓｐｅｒｓｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋを参照のこと。
【０１８４】
本発明のキットはまた、例えば、そのキット中の薬学的組成物および投薬形態に関する情報を含む添付文書の形態において情報を備え得る。一般に、このような情報は、患者および医師が同封されｔ薬学的組成物および投薬形態を有効かつ安全に使用するのに役立つ。例えば、ＩＦＮ−ＩｇＧ４に関する以下の情報は、挿入物として供給され得る：薬物動態、薬力学、臨床試験、効能のパラメータ、適応および用法、禁忌、警告、注意、有害反応、過量投与、適切な投薬量および投与、供給方法、適切な保存条件、参考文献ならびに特許情報。
【０１８５】
本発明のキットはまた、例えば、薬学的処方物（より好ましくは、薬学的投薬形態（例えば、丸剤、散剤、注射可能な液体、錠剤、分散可能な顆粒剤、カプセル剤、カシェ剤または坐剤））で、薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせたリバビリン（例えば、Ｒｅｂｅｔｏｌ（登録商標））などの別の治療用組成物を備え得る。
【０１８６】
ＩＦＮ−ＩｇＧ４および他の治療用組成物（例えば、リバビリン）は、キットにおいてか、別個の組成物としてか、または単一の組成物中に組み合わされて供給され得る。
【実施例】
【０１８７】
以下の実施例は、本発明をより明確に記載するために提供され、そして本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。
【０１８８】
（実施例１：ヒトインターフェロン−α−２ｂ／Ａｌａ−Ｓｅｒ／ヒトＩｇＧ４  Ｆｃ融合タンパク質のクローニング、発現および精製）
ｐＥ３−３２７−ＩＦＮａ２ｂから得られたクローニングされたヒトインターフェロン−α−２ｂ（ＩＦＮａ２ｂ）（ＩＦＮａ２ｂシグナルペプチド配列を含む）を、ＰＣＲ反応を介してヒトＩｇＧ４  Ｆｃに融合した。成熟タンパク質は、ヒトＩＦＮａ２ｂ−（Ａｌａ−Ｓｅｒリンカー）−ヒトＩｇＧ４  Ｆｃを含んだ：
（ヒトインターフェロン−α−２ｂ／Ａｌａ−Ｓｅｒ／ヒトＩｇＧ４  Ｆｃ融合タンパク質（配列番号２））
【０１８９】
【化４６】
2008545409.tif 000046
【０１９０】
【化４７】
2008545409.tif 000047
【０１９１】
【化４８】
2008545409.tif 000048
ＩｇＧ４領域において実線で下線を付けられた残基は、野生型ＩｇＧ４においてセリンである残基が変異したものである。上記変異は、ＩｇＧ４分子の間における分子間ジスルフィド結合の形成を容易し（したがって、上記融合体のダイマー形態の形成に都合がよい）、そして分子内結合の形成を妨げる。
【０１９２】
ベクターは、アンピシリン耐性マーカーおよびサイトメガロウイルスプロモーター領域を含んだ。
【０１９３】
プラスミドをＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＸＬ１−Ｂｌｕｅ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）中に形質転換し、５００ｍｌ  Ｌｕｒｉａ  Ｂｒｏｔｈ−５０ｕｇ／ｍＬアンピシリン中で１０時間増殖させ、そしてＱｉａｇｅｎ  Ｐｌａｓｍｉｄ  Ｍａｘｉ  Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ、カタログ番号１２１６３）を使用してｄｓＤＮＡを調製することによって、ＤＮＡを調製した。精製したｄｓＤＮＡを、リン酸カルシウム法（Ｇｏｒｍａｎら、ＤＮＡ  Ｐｒｏｔ．Ｅｎｇｉｎｅｅｒ．Ｔｅｃｈ．２：３（１９９０））を使用してヒト胚腎臓２９３（ＨＥＫ２９３）細胞にトランスフェクトした。細胞を、最初に、１０％ウシ胎仔血清（Ｃｅｌｌｇｒｏ）を含む５０％  Ｈａｍｍ’ｓ  Ｆ１２／５０％  ＤＭＥＭ  Ｆ−１２中で増殖させた。トランスフェクションの２４時間後、その培地を、１ｕｇ／ｍＬアポ−トランスフェリン（Ｓｉｇｍａ）および５ｕｇ／ｍＬインスリン（Ｓｉｇｍａ）を添加したＣＨＯ−ＰＦ無血清培地（Ｓｉｇｍａ）に変えた。分泌されたタンパク質を、トランスフェクションの９６時間後に回収した。上清を、プロテインＡ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  ＣＬ−４Ｂカラム（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）に適用し、リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）で緩衝液を交換し、そしてＣｅｎｔｒｉｐｒｅｐ−１０（Ａｍｉｃｏｎ）を使用して０．５  ｍｌまで濃縮した。精製したタンパク質を、Ａ２８０によって定量した。
【０１９４】
さらなる融合タンパク質を、Ａｌａ−Ｓｅｒジペプチド配列とヒトＩｇＧ４  Ｆｃとの間に種々のサイズのリンカーを挿入することによって産生した。これらのリンカーは、以下である：Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ（配列番号９）、Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ（配列番号１０）、および（Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ）３−Ｇｌｙ（配列番号１１）。
【０１９５】
（実施例２：ＩＦＮα−２ｂ−ＩｇＧ４の薬物動態）
ヒトＩＦＮα−２ｂ−ＩｇＧ４融合体構築物を、従来の分子クローニング技術を使用して調製した。簡単にいうと、３種の構築物を、調製した：１つは、ＩＦＮα−２ｂのＣ末端と、Ａｌａ−Ｓｅｒリンカーと、ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域（ＣＨ２＋ＣＨ３＋ヒンジ領域）との間に直接的な融合を含み、残りの２つは、ＡＳＧＳＧ（配列番号７）またはＡＳＧＳＧＳＧ（配列番号８）を含むリンカーを含む。ＨＥＫ２９３細胞のトランスフェクション後、発現された組換えタンパク質を、プロテイン−Ａ上で精製し、そしてＰＢＳ（リン酸緩衝化生理食塩水）緩衝液に、０．７９ｍｇ／ｍＬと２．３１ｍｇ／ｍＬとの間の範囲の濃度で可溶化した。これらの融合タンパク質の生物活性（ＩＦＮ  α２ｂに関する）を、有効な生物検定を使用して評価した。参照のネイティブなＩＦＮα−２ｂ標準タンパク質を、上記融合タンパク質の生物活性を比較するために使用した。これらのタンパク質の薬物動態を、Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットにおいて１ｍｇ／ｋｇの用量における静脈内投与後に評価した。投与前、投与の１時間後、４時間後、８時間後、２４時間後、ならびに投与の２日後、３日後、４日後、７日後、１０日後、１４日後、２２日後、および２８日後に得た血漿サンプルを、有効な生物検定を使用して分析した。上記アッセイの結果を、以下の表２に示す。
【０１９６】
【化４９】
2008545409.tif 000049
タンパク質１ｍｇあたり２．１×１０６ＩＵと３．３×１０６ＩＵとの間の範囲の３種の融合構築物の生物活性（ＩＦＮ基準の標準的な生物活性は、タンパク質１ｍｇあたり２．６×１０８ＩＵ；インビトロアッセイにおいて決定される場合）。
【０１９７】
インターフェロン生物活性を測定した細胞変性効果（ＣＰＥ）アッセイは、細胞をウイルス誘導性の細胞死または細胞変性効果から保護するインターフェロン（ＩＦＮ）（またはＩＦＮ活性を有する分子）の能力に基づく。上記アッセイは、９６ウェル形式においてヒト線維芽細胞（ＦＳ−７１、正常なヒト二倍体包皮細胞）およびＥＭＣウイルス（脳心筋炎ウイルス）を使用した：一定数の細胞を、約４時間にわたってＩＦＮ（参照ＩＦＮ基準）で処理し、次いで一定数のウイルス粒子を感染させたサンプルの存在下で算出した。ウイルスに感染したコントロール細胞がＣＰＥの所定の段階に到達した後、その培地を回収し、そしてその細胞を、クリスタルバイオレットを使用して比色分析でアッセイした。次いで、上記サンプルを、生物活性の算出のためにＩＦＮ参照基準についての活性曲線と比較した。
【０１９８】
ラットにおけるこれらの融合タンパク質の薬物動態は、ＩＦＮタンパク質に対して、ＩＦＮに由来する生物活性の最終的な半減期（ｔ１／２）における実質的な改善を示した。そのｔ１／２は、ラットにおいてＩＦＮタンパク質を用いた１時間のｔ１／２（ｔ１／２は、ヒトにおいて約２時間である）と比較して、５．６日間と９．７日間との間の範囲であった。
【０１９９】
（実施例３：ＩＦＮａ２ｂ−ＩｇＧ４の発現、精製および性質決定）
産生用細胞株である２９３  ｃ１８を、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＣＲＬ−１０８５２）から入手し、１０％  ＦＢＳを補ったＤＭＥＭ中で維持した。ＩＦＮ融合タンパク質  ＳＣＨ  ＹおよびＩＦＮ融合タンパク質  ＳＣＨ  ＺをコードするｃＤＮＡを、発現ベクターであるｐＣＥＰ４ベクター（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐ．；Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）にクローニングした。ＴｒａｎｓＩＴ−２９３（Ｍｉｒｕｓ  Ｂｉｏ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を用いて、発現ベクターであるｐＣＥＰ４−ＬＰＤ４７５およびｐＣＥＰ４−ＬＰＤ４７６を、２９３  ｃ１８細胞内にトランスフェクションした。次いで、トランスフェクションした細胞培養物を、ジェネティシン（４００μｇ／ｍＬ）およびハイグロマイシンＢ（４００μｇ／ｍＬ）で処理した。
【０２００】
上記融合タンパク質の産生のために、これらのトランスフェクションした細胞を、Ｔ型フラスコ内で、１０％  ＦＢＳを含むＤＭＥＭ中に播種した。播種の約３日後に、培養物を、２００ｍＭ  グルタミン（４０ｍｌ／Ｌ）、Ｔｒａｃｅ  Ａ（１ｍｌ／Ｌ）、Ｔｒａｃｅ  Ｂ（１ｍｌ／Ｌ）、Ｔｒｉｓ  Ｐｈ  ７．４（１５ｍｌ／Ｌ）、ＩＳ（ｉｒｏｎ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）Ｆｅ（１ｍｌ／Ｌ，Ｉｒｖｉｎｅ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ；Ｓａｎｔａ  Ａｎａ，ＣＡ）を補った２９３  ＳＦＭＩＩ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐ．）に交換した。７２時間以内に、インキュベーターの温度を、３７℃から３４℃まで下降させ、そして産生の間中、３４℃で維持した。この温度の変更後の約１０〜１２日目に、上記培養物の上清を回収した。この馴化培養培地を、卓上遠心分離機で遠心分離した。この上清を、０．２μｍ  フィルターを通して濾過した。
【０２０１】
上記融合体を、プロテインＡカラムクロマトグラフィーにより、次の通りに精製した：ＩＦＮα−２ｂ−ＩｇＧ４の２つのクローンを、５ｍＬのＨｉＴｒａｐ−ｒＰｒｏｔｅｉｎ  Ａカラムを用いて精製した。このカラムの寸法は、１．６ｃｍ×２．５ｃｍであった。この精製を、冷蔵室内で、ＡＫＴＡ  １００システム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ；Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）を用いて実施した。ロードする標的は、約１０ｍｇ／ｍＬの樹脂であった。
【０２０２】
上記カラムを、１２５ｍＭ  塩化ナトリウム、ｐＨ  ７．２を含む、カラム３つの容量の１０ｍＭ  リン酸ナトリウムで平衡化した。次いで、フィード（ｆｅｅｄ）を、上記カラムに流速１ｍｌ／分でロードした。上記カラムを、カラム１０個の容量の上記の緩衝液を用いて、同じ流速で洗浄した。洗浄後、結合したタンパク質を、１００ｍＭ  酢酸ナトリウム、ｐＨ  ２．９を用いて、流速１ｍｌ／分で溶出した。
【０２０３】
このプールを、１Ｍ  Ｔｒｉｓ塩基を用いて、ｐＨ  ５．５に調整し、０．２２μｍ  フィルターを通して濾過し、そして予備解析用に用いた。その後、このプールを、１２５ｍＭ  塩化ナトリウム、ｐＨ  ７．２を含む１リットルの１０ｍＭ  リン酸ナトリウムに対して透析し、０．２２μｍで濾過し、そして４℃で保管した。
【０２０４】
（表３．プールの解析結果）
【０２０５】
【化５０】
2008545409.tif 000050
上記ＩＦＮα−２ｂ−ＩｇＧ４融合体を、サイズ排除ＨＰＬＣカラムで解析した。その結果は、下記の表４において示されている。
【０２０６】
（表４．ＩＦＮα−２ｂ−ＩｇＧ４のサイズ排除ＨＰＬＣ解析）
配列  ＭＷ  ＩＦＮα−２ｂ−ＩｇＧ４  （ＳＣＨ  Ｚ）＝４５０７０．１５
配列  ＭＷ  ＩＦＮα−２ｂ−ＩｇＧ４  （ＳＣＨ  Ｙ）＝４５２１４．２８
【０２０７】
【化５１】
2008545409.tif 000051
リゾチーム、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）およびＩｇＧを、ＩＦＮα−２ｂ−ＩｇＧ４  ＳＣＨ−ＹまたはＩＦＮα−２ｂ−ＩｇＧ４  ＳＣＨ−Ｚのサイズを算出する対照となるサイズ標準として、上記カラムに通した。分子量が上記カラムから溶出されたポリペプチドのサイズの約半分であるので、上記カラムから溶出されたＩＦＮα−２ｂ−ＩｇＧ４は二量体であったことが、導き出された。
【０２０８】
この実施例において発現された融合体の生物活性を、インビトロでの細胞変性効果（ＣＰＥ）アッセイにおいて上記に示されているように測定した：
ＩＦＮａ２ｂ−ＩｇＧ４（ＳＣＨ  Ｙ）：７．４８×１０６ＩＵ／ｍｇ
ＩＦＮａ２ｂ−ＩｇＧ４（ＳＣＨ  Ｚ）：１．０２×１０７ＩＵ／ｍｇ
本発明は、本明細書中に記載されている特定の実施形態により、範囲を限定されることを意図しない。実際、本明細書中に記載されている改変に加えて、本発明の様々な改変が、上記の説明から、当業者にとって明らかである。このような改変は、添付されている特許請求の範囲の範囲内におさまることを意図されている。
【０２０９】
特許、特許出願、刊行物、製品の説明、およびプロトコールは、本出願を通じて引用されており、その開示は、本明細書中に参考として全体が全ての目的のために援用されている。
【配列表】
2008545409000001.xml
【手続補正書】
【提出日】平成20年1月18日(2008.1.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１つ以上のＩｇＧ４  Ｆｃポリペプチドに融合した１つ以上のインターフェロンポリペプチドを含む、単離されたポリペプチド。
【請求項２】
請求項１に記載のポリペプチドであって、ここで、前記インターフェロンは、インターフェロンα−１ａ、インターフェロンα−１ｂ、インターフェロンα−２ａ、インターフェロンα−２ｂ、インターフェロンα−２ｃ、インターフェロンα−４ａ、インターフェロンα−４ｂ、インターフェロンα−５、インターフェロンα−６、インターフェロンα−７ａ、インターフェロンα−７ｂ、インターフェロンα−８ａ、インターフェロンα−８ｂ、インターフェロンα−８ｃ、インターフェロンα−１０ａ、インターフェロンα−１０ｂ、インターフェロンα−１３、インターフェロンα−１４ａ、インターフェロンα−１４ｂ、インターフェロンα−１４ｃ、インターフェロンα−１６、インターフェロンα−１７ａ、インターフェロンα−１７ｂ、インターフェロンα−１７ｃ、インターフェロンα−１７ｄ、インターフェロンα−２１ａ、インターフェロンα−２１ｂ、インターフェロンα−２４、インターフェロンβ、インターフェロンω、インターフェロンτ、インターフェロンα−Ｎ３、インターフェロンβ−１ａ、インターフェロンβ−１ｂ、インターフェロンγ−１ｂ、インターフェロンγ、インターフェロンα  Ｆおよびインターフェロンα  ｃｏｎ−１からなる群から選択されるメンバーである、ポリペプチド。
【請求項３】
配列番号２、３および１５からなる群から選択されるメンバーにおいて示されているアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４】
請求項１に記載のポリペプチドであって、ここで、前記インターフェロンは、配列番号１２〜１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、ポリペプチド。
【請求項５】
請求項１に記載のポリペプチドであって、ここで、前記ＩｇＧ４は、配列番号１において示されているアミノ酸配列を含む、ポリペプチド。
【請求項６】
請求項１に記載のポリペプチドであって、ここで、前記インターフェロンは、ペプチドリンカーにより前記ＩｇＧ４に融合されている、ポリペプチド。
【請求項７】
請求項６に記載のポリペプチドであって、ここで、前記リンカーは、約２〜約１８個のアミノ酸を含む、ポリペプチド。
【請求項８】
請求項６に記載のポリペプチドであって、ここで、前記リンカーは、
【化１】
2008545409.tif 000124
【化２】
2008545409.tif 000125
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、ポリペプチド。
【請求項９】
必要に応じて二価の陽イオンと配位結合した、請求項１に記載の２つ以上のポリペプチドを含む、多量体。
【請求項１０】
請求項９に記載の多量体であって、ここで、前記陽イオンは、Ｚｎ２＋である、多量体。
【請求項１１】
結晶性である、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項１２】
請求項１に記載の前記ポリペプチドおよび薬学的に受容可能なキャリアを含む、薬学的組成物。
【請求項１３】
１つ以上のさらなる薬剤と合わせた請求項１に記載のポリペプチドを含む、組成物またはその薬学的組成物。
【請求項１４】
フラビウイルス科のウイルス感染、多発性硬化症、慢性肉芽腫症に関連する重症の感染、悪性大理石骨病、難治性もしくは再発性である外部の尖圭コンジローム、ヘアリーセル白血病、慢性期であるフィラデルフィア染色体（Ｐｈ）陽性の慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、悪性黒色腫、濾胞性リンパ腫、尖圭コンジローム、ＡＩＤＳ関連カポジ肉腫、Ｂ型肝炎感染およびＣ型肝炎感染からなる群から選択される医学的状態を処置するために適切な１つ以上のさらなる薬剤と合わせて、請求項１に記載のポリペプチドを含む、組成物またはその薬学的組成物。
【請求項１５】
請求項１４に記載の組成物であって、ここで、前記さらなる薬剤は、リバビリン、イサトリビン、ＶＸ−４９７、ビラミジン、ＢＩＬＮ  ２０６１、ＶＸ−９５０およびＩＤＮ−６５５６からなる群から選択されるメンバーである、組成物。
【請求項１６】
請求項１に記載のポリペプチドをコードする、単離されたポリヌクレオチド。
【請求項１７】
配列番号４、５および１６からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む、請求項１６に記載のポリヌクレオチド。
【請求項１８】
請求項１６に記載のポリヌクレオチドを含む、単離されたベクター。
【請求項１９】
請求項１８に記載のベクターを含む、単離された宿主細胞。
【請求項２０】
インターフェロンのインビボでの半減期を延長させるための方法であって、該インターフェロンをＩｇＧ４に融合させる工程を包含する、方法。
【請求項２１】
請求項２０に記載の方法であって、ここで、前記ＩｇＧ４に融合した前記インターフェロンは、配列番号２、３および１５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、方法。
【請求項２２】
請求項２０に記載の方法であって、ここで、前記インターフェロンは、インターフェロンα−１ａ、インターフェロンα−１ｂ、インターフェロンα−２ａ、インターフェロンα−２ｂ、インターフェロンα−２ｃ、インターフェロンα−４ａ、インターフェロンα−４ｂ、インターフェロンα−５、インターフェロンα−６、インターフェロンα−７ａ、インターフェロンα−７ｂ、インターフェロンα−８ａ、インターフェロンα−８ｂ、インターフェロンα−８ｃ、インターフェロンα−１０ａ、インターフェロンα−１０ｂ、インターフェロンα−１３、インターフェロンα−１４ａ、インターフェロンα−１４ｂ、インターフェロンα−１４ｃ、インターフェロンα−１６、インターフェロンα−１７ａ、インターフェロンα−１７ｂ、インターフェロンα−１７ｃ、インターフェロンα−１７ｄ、インターフェロンα−２１ａ、インターフェロンα−２１ｂ、インターフェロンα−２４、インターフェロンβ、インターフェロンω、インターフェロンτ、インターフェロンα−Ｎ３、インターフェロンβ−１ａ、インターフェロンβ−１ｂ、インターフェロンγ−１ｂ、インターフェロンγ、インターフェロンα  Ｆおよびインターフェロンα  ｃｏｎ１からなる群から選択されるメンバーである、方法。
【請求項２３】
請求項２２に記載の方法であって、ここで、前記インターフェロンは、配列番号１２〜１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、方法。
【請求項２４】
請求項２０に記載の方法であって、ここで、前記ＩｇＧ４は、配列番号１において示されているアミノ酸配列を含む、方法。
【請求項２５】
フラビウイルス科のウイルス感染、多発性硬化症、慢性肉芽腫症に関連する重症の感染、悪性大理石骨病、難治性もしくは再発性である外部の尖圭コンジローム、ヘアリーセル白血病、慢性期であるフィラデルフィア染色体（Ｐｈ）陽性の慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、悪性黒色腫、濾胞性リンパ腫、尖圭コンジローム、ＡＩＤＳ関連カポジ肉腫、Ｂ型肝炎感染、Ｃ型肝炎感染からなる群から選択される医学的状態ならびに任意の処置可能な医学的状態を、被験体において、インターフェロン治療により処置または予防するための組成物であって、ＩｇＧ４に融合したインターフェロンを含む単離されたポリペプチドまたはその薬学組成物の治療的に有効な量を含む、組成物。
【請求項２６】
請求項２５に記載の組成物であって、ここで、ＩｇＧ４に融合した前記インターフェロンは、配列番号２、３および１５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、組成物。
【請求項２７】
請求項２５に記載の組成物であって、ここで、前記被験体は、妊婦または授乳婦である、組成物。
【請求項２８】
請求項２５に記載の組成物であって、ここで、前記インターフェロンは、インターフェロンα−１ａ、インターフェロンα−１ｂ、インターフェロンα−２ａ、インターフェロンα−２ｂ、インターフェロンα−２ｃ、インターフェロンα−４ａ、インターフェロンα−４ｂ、インターフェロンα−５、インターフェロンα−６、インターフェロンα−７ａ、インターフェロンα−７ｂ、インターフェロンα−８ａ、インターフェロンα−８ｂ、インターフェロンα−８ｃ、インターフェロンα−１０ａ、インターフェロンα−１０ｂ、インターフェロンα−１３、インターフェロンα−１４ａ、インターフェロンα−１４ｂ、インターフェロンα−１４ｃ、インターフェロンα−１６、インターフェロンα−１７ａ、インターフェロンα−１７ｂ、インターフェロンα−１７ｃ、インターフェロンα−１７ｄ、インターフェロンα−２１ａ、インターフェロンα−２１ｂ、インターフェロンα−２４、インターフェロンβ、インターフェロンω、インターフェロンτ、インターフェロンα−Ｎ３、インターフェロンβ−１ａ、インターフェロンβ−１ｂ、インターフェロンγ−１ｂ、インターフェロンγ、インターフェロンα  Ｆおよびインターフェロンα  ｃｏｎ１からなる群から選択されるメンバーである、組成物。
【請求項２９】
請求項２５に記載の組成物であって、ここで、前記ポリペプチドは、１種以上のさらなる薬剤またはその薬学的組成物と合わせて投与されるのに適している、組成物。
【請求項３０】
請求項２９に記載の組成物であって、ここで、前記ポリペプチドは、フラビウイルス科のウイルス感染、多発性硬化症、慢性肉芽腫症に関連する重症の感染、悪性大理石骨病、難治性もしくは再発性である外部の尖圭コンジローム、ヘアリーセル白血病、慢性期であるフィラデルフィア染色体（Ｐｈ）陽性の慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、悪性黒色腫、濾胞性リンパ腫、尖圭コンジローム、ＡＩＤＳ関連カポジ肉腫、Ｂ型肝炎感染およびＣ型肝炎感染からなる群から選択される医学的状態を処置するために適切な１種以上のさらなる薬剤またはその薬学的組成物と合わせて投与されるのに適している、組成物。
【請求項３１】
請求項３０に記載の組成物であって、ここで、前記さらなる薬剤は、リバビリン、イサトリビン、ＶＸ−４９７、ビラミジン、ＢＩＬＮ  ２０６１、ＶＸ−９５０およびＩＤＮ−６５５６からなる群から選択される、組成物。
【請求項３２】
請求項２５に記載の組成物であって、ここで、前記インターフェロンは、配列番号１２〜１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、組成物。
【請求項３３】
請求項２５に記載の組成物であって、ここで、前記ＩｇＧ４は、配列番号１において示されているアミノ酸配列を含む、組成物。
【請求項３４】
請求項２５に記載の組成物であって、ここで、前記宿主は、ヒトである、組成物。
【請求項３５】
請求項２５に記載の組成物であって、ここで、前記医学的状態は、Ｃ型肝炎ウイルス感染であり、ここで、必要に応じて抗ウイルス治療薬と合わせた、ＩｇＧ４に融合したインターフェロンを含む単離されたポリペプチドまたはその薬学的組成物の治療的に有効な量は、検出可能なＣ型肝炎ウイルスのＲＮＡを根絶するためそして処置期間の終了後少なくとも１２週間にわたってＣ型肝炎ウイルスのＲＮＡを検出不可能に維持するために十分な処置期間にわたって投与されるのに適している、組成物。
【請求項３６】
ＩｇＧ４に融合したインターフェロンを含むポリペプチドを調製するための方法であって、請求項１６に記載のポリヌクレオチドを、該ポリヌクレオチドが発現されるインビトロ条件下で、宿主細胞に導入する工程を包含する、方法。
【請求項３７】
請求項３６に記載の方法であって、さらに前記ポリペプチドを単離する工程を包含する、方法。
【請求項３８】
請求項３６に記載の方法により生成される、ポリペプチド。
【請求項３９】
請求項３６に記載の方法であって、ここで、前記ＩｇＧ４に融合したインターフェロンは、配列番号２、３および１５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、方法。
【請求項４０】
フラビウイルス科のウイルス感染、多発性硬化症、慢性肉芽腫症に関連する重症の感染、悪性大理石骨病、難治性もしくは再発性である外部の尖圭コンジローム、ヘアリーセル白血病、慢性期であるフィラデルフィア染色体（Ｐｈ）陽性の慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、悪性黒色腫、濾胞性リンパ腫、尖圭コンジローム、ＡＩＤＳ関連カポジ肉腫、Ｂ型肝炎感染、Ｃ型肝炎感染からなる群から選択される医学的状態ならびに任意の処置可能な医学的状態を、被験体において処置するための医薬の製造における、ＩｇＧ４に融合したインターフェロンを含む単離されたポリペプチドまたはその薬学組成物の治療的に有効な量の、使用。
【請求項４１】
請求項４０に記載の使用であって、ここで、ＩｇＧ４に融合した前記インターフェロンは、配列番号２、３および１５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、使用。
【請求項４２】
請求項４０に記載の使用であって、ここで、前記被験体は、妊婦または授乳婦である、使用。
【請求項４３】
請求項４０に記載の使用であって、ここで、前記インターフェロンは、インターフェロンα−１ａ、インターフェロンα−１ｂ、インターフェロンα−２ａ、インターフェロンα−２ｂ、インターフェロンα−２ｃ、インターフェロンα−４ａ、インターフェロンα−４ｂ、インターフェロンα−５、インターフェロンα−６、インターフェロンα−７ａ、インターフェロンα−７ｂ、インターフェロンα−８ａ、インターフェロンα−８ｂ、インターフェロンα−８ｃ、インターフェロンα−１０ａ、インターフェロンα−１０ｂ、インターフェロンα−１３、インターフェロンα−１４ａ、インターフェロンα−１４ｂ、インターフェロンα−１４ｃ、インターフェロンα−１６、インターフェロンα−１７ａ、インターフェロンα−１７ｂ、インターフェロンα−１７ｃ、インターフェロンα−１７ｄ、インターフェロンα−２１ａ、インターフェロンα−２１ｂ、インターフェロンα−２４、インターフェロンβ、インターフェロンω、インターフェロンτ、インターフェロンα−Ｎ３、インターフェロンβ−１ａ、インターフェロンβ−１ｂ、インターフェロンγ−１ｂ、インターフェロンγ、インターフェロンα  Ｆおよびインターフェロンα  ｃｏｎ１からなる群から選択されるメンバーである、使用。
【請求項４４】
請求項４０に記載の使用であって、ここで、前記ポリペプチドは、１種以上のさらなる薬剤またはその薬学的組成物と合わせて投与されるのに適している、使用。
【請求項４５】
請求項４４に記載の使用であって、ここで、前記ポリペプチドは、フラビウイルス科のウイルス感染、多発性硬化症、慢性肉芽腫症に関連する重症の感染、悪性大理石骨病、難治性もしくは再発性である外部の尖圭コンジローム、ヘアリーセル白血病、慢性期であるフィラデルフィア染色体（Ｐｈ）陽性の慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、悪性黒色腫、濾胞性リンパ腫、尖圭コンジローム、ＡＩＤＳ関連カポジ肉腫、Ｂ型肝炎感染およびＣ型肝炎感染からなる群から選択される医学的状態を処置するために適切な１種以上のさらなる薬剤またはその薬学的組成物と合わせて投与されるのに適している、使用。
【請求項４６】
請求項４５に記載の使用であって、ここで、前記さらなる薬剤は、リバビリン、イサトリビン、ＶＸ−４９７、ビラミジン、ＢＩＬＮ  ２０６１、ＶＸ−９５０およびＩＤＮ−６５５６からなる群から選択される、使用。
【請求項４７】
請求項４０に記載の使用であって、ここで、前記インターフェロンは、配列番号１２〜１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、使用。
【請求項４８】
請求項４０に記載の使用であって、ここで、前記ＩｇＧ４は、配列番号１において示されているアミノ酸配列を含む、使用。
【請求項４９】
請求項４０に記載の使用であって、ここで、前記宿主は、ヒトである、使用。
【請求項５０】
請求項４０に記載の使用であって、ここで、前記医学的状態は、Ｃ型肝炎ウイルス感染であり、ここで、必要に応じて抗ウイルス治療薬と合わせた、ＩｇＧ４に融合したインターフェロンを含む単離されたポリペプチドまたはその薬学的組成物の治療的に有効な量は、検出可能なＣ型肝炎ウイルスのＲＮＡを根絶するためそして処置期間の終了後少なくとも１２週間にわたってＣ型肝炎ウイルスのＲＮＡを検出不可能に維持するために十分な処置期間にわたって投与されるのに適している、使用。
【手続補正書】
【提出日】平成20年2月25日(2008.2.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2008545409000001.app
【国際調査報告】
2008545409.tif 000126
2008545409.tif 000127
2008545409.tif 000128
2008545409.tif 000129