(57)【要約】  新規Ｎ−ホルミルヒドロキシルアミン化合物およびそれらの誘導体が開示されている。これらのＮ−ホルミルヒドロキシルアミン化合物は、原核生物に存在する酵素、ペプチジルデホルミラーゼ（ＰＤＦ）を阻害する。化合物は、抗菌剤および抗生物質として有用である。本発明化合物は、他のメタロプロテイナーゼ、例えばＭＭＰに対してペプチジルデホルミラーゼの選択的阻害作用を示す。化合物の製造および使用方法も開示されている。【化１】2008545692.tif 000098［式中、  Ｒ１は、水素、アルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり、  Ｒ３は、水素、ハロゲンまたはアルコキシであり、  Ｒ４は、アリールまたはヘテロアリールであるか、または  ｎは０〜３である。  ただし、Ｒ１がシクロアルキルであり、および／またはＲ４が、環に２、３または４個の窒素へテロ原子を有する所望により置換されていてもよい６員単環式ヘテロアリール環である場合、１個またはそれ以上の環窒素へテロ原子は所望により酸化されていてもよい］。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2008545692.tif 000091
［式中、
Ｒ１は、水素、アルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり、
Ｒ３は、水素、ハロゲンまたはアルコキシであり、
Ｒ４は、アリールまたはヘテロアリールであるか、または
ｎは０〜３である。
ただし、Ｒ１がシクロアルキルであり、および／またはＲ４が、環に２、３または４個の窒素へテロ原子を有する所望により置換されていてもよい６員単環式ヘテロアリール環である場合、１個またはそれ以上の環窒素へテロ原子は所望により酸化されていてもよい］
で示される化合物またはその塩またはそのプロドラッグ。
【請求項２】
Ｒ３がフッ素、塩素またはヨウ素から選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１がシクロアルキルである、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ４が、式（II）
【化２】
2008545692.tif 000092
［式中、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９は、各々独立して水素、アルキル、置換アルキル、フェニル、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシである］
で示されるヘテロアリールである、請求項１記載の化合物またはその塩またはそのプロドラッグ。
【請求項５】
Ｒ４が、式（II．１）
【化３】
2008545692.tif 000093
で示されるヘテロアリールであり、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８が、水素であり、Ｒ８がフルオロである、請求項１記載の化合物またはその塩またはそのプロドラッグ。
【請求項６】
Ｒ４が、式（II．２）
【化４】
2008545692.tif 000094
で示されるヘテロアリールであり、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８が水素である、請求項１記載の化合物、その塩またはそのプロドラッグ。
【請求項７】
Ｒ４が、式（II．３）
【化５】
2008545692.tif 000095
で示されるヘテロアリールであり、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８が水素である、請求項１記載の化合物、その塩またはそのプロドラッグ。
【請求項８】
Ｒ４が、式（II．４）
【化６】
2008545692.tif 000096
で示されるヘテロアリールであり、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８が水素である、請求項１記載の化合物、その塩またはそのプロドラッグ。
（請求項８）
Ｒ４が、式（II．５）
【化７】
2008545692.tif 000097
で示されるヘテロアリールであり、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８が水素である、請求項１記載の化合物、その塩またはそのプロドラッグ。
【請求項９】
Ｒ１が、シクロヘキシル、シクロペンチル、シクロブチルまたはシクロプロピルから選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ１がｎ−ブチルである、請求項１記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ４が、２−アミノ、５−フルオロピリジンＮ−オキシド、２−ピラジン、３−ピリダジン、３−ピリミジン、４−ピリミジンまたは３−ピリダジンＮ−オキシドから選択される、請求項９記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ４が、２−アミノ、５−フルオロピリジンＮ−オキシド、２−ピラジン、３−ピリダジン、３−ピリミジン、４−ピリミジンまたは３−ピリダジンＮ−オキシドから選択される、請求項１０記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ３がフッ素である、請求項９記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ３がフッ素である、請求項１０記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規Ｎ−ホルミルヒドロキシルアミン化合物、ペプチジルデホルミラーゼ阻害剤による処置が奏効し得る疾患の処置、例えば細菌感染症の処置を含む様々な医学適用におけるこれらの化合物の使用、およびこれらの化合物を含む医薬組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
宿主生物体における微生物感染症の処置は、可能な限り宿主に害を及ぼさずに微生物を殺せる有効な手段を必要とする。したがって、病原性微生物に特有な特徴を標的とする薬剤が処置には望ましい。
【０００３】
ペプチドデホルミラーゼは、原核生物体、例えば細菌から見出されるメタロペプチダーゼである。原核生物体におけるタンパク質合成は、Ｎ−ホルミルメチオニン（ｆＭｅｔ）により開始される。タンパク質合成の開始後、ホルミル基を酵素ペプチドデホルミラーゼ（ＰＤＦ）により除去する。この活性は、タンパク質の成熟には不可欠である。
【０００４】
メタロプロテイナーゼは、正常な代謝の多くの局面に対し重大な役割を果たす。メタロプロテイナーゼが関わる障害は、幾つかの病気、例えば癌、関節炎および自己免疫疾患に関与している。正常な生理学的プロセスにおけるＭＭＰの重要性ゆえに、ＭＭＰの著しい阻害を回避しながらＰＤＦを阻害する薬剤を開発することが好ましい。別法として、ＰＤＦ阻害による治療上の利益がＭＭＰ阻害により生じる副作用の危険より価値がある場合、ＭＭＰを阻害するＰＤＦ阻害剤でも有用であり得る。
【０００５】
ＰＤＦ阻害剤に関する研究は、ＭＭＰの阻害剤の場合と比べてかなり不十分なものである。Ｎ−ホルミルヒドロキシルアミン誘導体は、国際特許出願ＷＯ９９／３９７０４およびＷＯ０２／１０２７９０に記載されている。既存の抗生物質に耐性を示す細菌を処置するための新たな抗生物質を同定することが重要であるため、抗菌剤および抗微生物剤として評価され、使用される新規ＰＤＦ阻害剤を開発することが望ましい。本発明はこの要望を満たすものである。
【発明の開示】
【０００６】
特に、本発明は、Ｎ−ホルミルヒドロキシルアミン誘導体（本明細書では一まとめにして「本発明化合物」と称す）、その塩またはそのプロドラッグ、例えば式（Ｉ）：
【化１】
2008545692.tif 000002
［式中、
Ｒ１は、水素、アルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり、
Ｒ３は、水素、ハロゲンまたはアルコキシであり、
Ｒ４は、アリールまたはヘテロアリールであるか、または
ｎは０〜３である］
で示される化合物、その塩またはそのプロドラッグを提供する。
【０００７】
一態様として、Ｒ４は、式（II）
【化２】
2008545692.tif 000003
［式中、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９は、各々独立して水素、アルキル、置換アルキル、フェニル、ハロゲン、ヒドロキシまたはアルコキシである、
例えば、
ａ.）Ｒ６およびＲ８は水素であり、Ｒ９は水素またはアルキルであり、Ｒ７は、アルキル、置換アルキルまたはフェニルである；
ｂ.）Ｒ６、Ｒ７およびＲ９は水素であり、Ｒ８は、ハロゲン、アルキルまたは置換アルキルである；
ｃ.）Ｒ７、Ｒ８およびＲ９は水素であり、Ｒ６はヒドロキシルである］
で示されるヘテロアリールである。
【０００８】
特に有用な態様として、ヘテロアリールは、式（II．１）
【化３】
2008545692.tif 000004
［式中、Ｒ６、Ｒ７およびＲ９は、上記式（II）について記載した意味であり、Ｒ８はハロゲン、例えばフルオロである］
で示される。
【０００９】
さらに別の態様において、Ｒ４は、式（II．２）
【化４】
2008545692.tif 000005
［式中、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、上記式（II）について記載した意味である］
である。
【００１０】
さらに別の態様において、Ｒ４は、式（II．３）
【化５】
2008545692.tif 000006
［式中、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、上記式（II）について記載した意味である］
である。
【００１１】
さらに別の態様において、Ｒ４は、式（II．４）
【化６】
2008545692.tif 000007
［式中、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、上記式（II）について記載した意味である］
である。
【００１２】
さらに別の態様において、Ｒ４は、式（II．５）
【化７】
2008545692.tif 000008
［式中、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、上記式（II）について記載した意味である］
である。
【００１３】
特に断らなければ、本明細書で使用されている以下の語は、以下の意味を有するものとする。
【００１４】
「シクロアルカン」または「シクロアルキル」の語は、３〜７個の環炭素原子を含み、好ましくはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルである。
【００１５】
「脂肪族基」の語は、飽和または不飽和脂肪族基、例えば１〜１０個の炭素原子を有する直鎖、分枝鎖および環状基を含むアルキル、アルケニルまたはアルキニル、シクロアルキルまたは置換アルキルをいう。「アルキル」または「アルク（ａｌｋ）」の語については、この表現が出てきたときは常に、炭素原子１〜１０個の飽和直鎖または分枝脂肪族基または炭素原子３〜１０個のシクロアルキルであり、さらに好ましくは、アルキル基は、Ｃ１−Ｃ７アルキル、特にＣ１−Ｃ４アルキルである。「アルキル」または「ａｌｋ」の例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシルまたはｎ−ヘプチル、シクロプロピルおよび特にｎ−ブチルがあるが、これらに限定されるわけではない。
【００１６】
「置換アルキル」の語は、限定するわけではないが、例えばハロゲン、低級アルコキシ、ヒドロキシ、メルカプト、カルボキシ、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールなどの置換基を含む、１個またはそれ以上の置換基、好ましくは１〜３個の置換基により置換されたアルキル基をいう。置換アルキル基の例には、−ＣＦ３、−ＣＦ２−ＣＦ３、ヒドロキシメチル、１−または２−ヒドロキシエチル、メトキシメチル、１−または２−エトキシエチル、カルボキシメチル、１−または２−カルボキシエチルなどがあるが、これらに限定されるわけではない。
【００１７】
「アリール」または「Ａｒ」の語は、単環（例えばフェニルなどの基を含むが、これに限定されるわけではない）または多縮合環（例えばナフチルまたはアントリルといった基を含むが、これらに限定されるわけではない）を有する炭素原子６〜１４個の芳香族炭素環状基をいい、特にフェニルである。
【００１８】
「ヘテロアリール」または「ＨｅｔＡｒ」の語は、４〜７員単環状芳香族複素環または４〜７員単環状芳香族複素環およびそれに縮合したベンゼン環から成る二環をいう。ヘテロアリールは、限定するわけではないが、例えばＮ、ＯおよびＳといったヘテロ原子を含む、少なくとも１個のヘテロ原子、好ましくは少なくとも２個のヘテロ原子を環内に有する。好ましいヘテロアリール部分は、環に２、３または４個の窒素へテロ原子を有する６員単環状複素環である。ヘテロアリール基の例は、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリダジニルＮ−オキシドまたはベンゾジオキソラニル、トリアジンまたはテトラジンである。
【００１９】
アリールまたはヘテロアリールは、非置換であるか、または限定するわけではないが、Ｃ１−７アルキル、特にＣ１−４アルキル、例えばメチル、ヒドロキシ、アルコキシ、アシル、アシルオキシ、ＳＣＮ、シアノ、ニトロ、チオアルコキシ、フェニル、ヘテロアルキルアリール、アルキルスルホニル、ハロゲンおよびホルミルを含む１個またはそれ以上の置換基により置換され得る。
【００２０】
「ヘテロアルキル」の語は、上記の飽和または不飽和Ｃ１−８アルキル、および特に基における主鎖、分枝または環状鎖の一部として１個またはそれ以上のヘテロ原子を含むＣ１−４へテロアルキルをいう。ヘテロ原子は、独立して−ＮＲ−（式中、Ｒは水素またはアルキルである）、−Ｓ−、−Ｏ−および−Ｐ−、好ましくは−ＮＲ−（式中、Ｒは水素またはアルキルである）、および／または−Ｏ−から成る群から選択され得る。ヘテロアルキル基は、ヘテロ原子（原子価が利用可能な場合）または炭素原子のところで分子の残りに結合され得る。ヘテロアルキル基の例には、例えば−Ｏ−ＣＨ３、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｓ−ＣＨ３、および−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−などの基があるが、これらに限定されるわけではない。
【００２１】
ヘテロアルキル基は、非置換であるか、または限定されるわけではないが、アルキル、ハロゲン、アルコキシ、ヒドロキシル、メルカプト、カルボキシおよび特にフェニルを含む、１個またはそれ以上の置換基、好ましくは１〜３個の置換基により置換され得る。基のヘテロ原子（複数も可）および炭素原子は置換され得る。ヘテロ原子（複数も可）はまた酸化形態でもあり得る。
【００２２】
本明細書で使用されている「アルコキシ」の語は、酸素原子に結合されたＣ１−１０アルキル、または好ましくはＣ１−７アルコキシ、さらに好ましくはＣ１−４アルコキシをいう。アルコキシ基の例には、例えばメトキシ、エトキシ、ｎ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシおよびアリルオキシといった基があるが、これらに限定されるわけではない。
【００２３】
本明細書で使用されている「ハロゲン」または「ハロ」の語は、塩素、臭素、フッ素、ヨウ素をいい、特にフッ素である。
【００２４】
「保護基」は、以下の特徴を呈する化学基をいう：１）所望の官能基と十分な収率で選択的に反応することにより、計画された保護が望まれる反応に対して安定している保護基質を与え；２）保護基質から選択的に除去され得ることにより、所望の官能基をもたらし；そして３）計画された上記反応において存在するかまたは生成される他の官能基（複数も可）と互いに影響を及ぼすことのない試薬により十分な収率で除去され得る。適切な保護基の例は、Greene et al., “Protective Groups in Organic Synthesis”、第２版、John Wiley & Sons, Inc., ニューヨーク（１９９１）に記載されている。好ましいアミノ保護基には、ベンジルオキシカルボニル（ＣＢｚ）、ｔ−ブチル−オキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）、９−フルオレニルメチル−オキシ−カルボニル（Ｆｍｏｃ）、または適切な光分解性保護基、例えば６−ニトロベラトリルオキシカルボニル（Ｎｖｏｃ）、ニトロピペロニル、ピレニルメトキシカルボニル、ニトロベンジル、ジメチルジメトキシ−ベンジル、５−ブロモ−７−ニトロインドリニルなどがあるが、これらに限定されるわけではない。好ましいヒドロキシ保護基には、Ｆｍｏｃ、ＴＢＤＭＳ、光分解性保護基（例えばニトロベラトリルオキシメチルエーテル（Ｎｖｏｍ））、Ｍｏｍ（メトキシメチルエーテル）、およびＭｅｍ（メトキシエトキシメチルエーテル）がある。特に好ましい保護基には、ＮＰＥＯＣ（４−ニトロフェネチルオキシカルボニル）およびＮＰＥＯＭ（４−ニトロフェネチルオキシ−メチルオキシカルボニル）がある。
【００２５】
式（Ｉ）の化合物は、光学異性体、ラセミ体またはジアステレオマーの形態で存在し得るものとする。例えば、式（Ｉ）において、Ｒ３がＲ−またはＳ−立体配置であり得る化合物がある。本発明は、鏡像体およびそれらの混合物を全て包含するものとする。上記の通り不斉炭素原子を呈する出発物質に関しても同様の考察が当てはまる。
【００２６】
本発明化合物は、固体結晶塩形態で存在し得る。化合物によっては、１価対イオン、例えばＮａを用いることにより結晶性固体を形成することも可能であるが、好ましくは、結晶塩は、好ましくは２価金属の金属塩である。対イオンは、好ましくはＭｇ、ＣａまたはＺｎである。
【００２７】
本発明化合物は、典型的には水和物または混合溶媒和物／水和物の形態であり得る。典型的には、本発明の結晶塩は、約２〜８の水和水、より一般的には約２〜６の水和水、さらに一般的には約２〜４の水和水を含む。すなわち、本発明の結晶塩は、典型的には２％を越える割合で、より一般的には約４〜約１２％、およびさらに一般的には約８〜約９％の割合で水を含有する。溶媒和物は、１種またはそれ以上の有機溶媒、例えば低級アルキルアルコール、例えばメタノール、エタノール、イソプロパノール、ブタノールまたはそれらの混合物により構成され得る。
【００２８】
本発明化合物、例えば式（Ｉ）の化合物は、遊離形態または塩形態、例えば医薬上許容される塩形態で存在し得る。化合物の「医薬上許容される塩」とは、親化合物の望ましい薬理学的活性を有し、かつ望ましくない毒物学的影響を及ぼすことのない生理学上および医薬上許容される塩を意味する。かかる塩には以下のものが含まれる：
（１）無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などにより形成されるか、または有機酸、例えば酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、３−（４−ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１,２−エタンジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−クロロベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、４−トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸、３−フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、第３級ブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、ムコン酸などにより形成される、酸付加塩；または
（２）親化合物に存在する酸性プロトンが、金属イオン、例えばアルカリ金属イオン、アルカリ土類イオン、またはアルミニウムイオンにより置換されているか、または有機塩基、例えばエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、Ｎ−メチルグルカミンなどと配位結合しているときに形成される塩。
【００２９】
本発明化合物、例えば式（Ｉ）の化合物は、プロドラッグとして作用し得る。「プロドラッグ」とは、それが哺乳類対象に投与されたとき、式（Ｉ）による活性親薬剤をインビボで放出する化合物を意味する。式（Ｉ）で示される化合物のプロドラッグは、修飾をインビボで開裂することにより親化合物を放出させ得るように、式（Ｉ）の化合物に存在する官能基を修飾することにより製造される。プロドラッグは、式（Ｉ）において、ヒドロキシ、アミノまたはスルフヒドリル基が、インビボで開裂されることにより遊離ヒドロキシル、アミノまたはスルフヒドリル基をそれぞれ再生させ得る基に結合されている場合の化合物を含む。プロドラッグの例には、エステル類（例、酢酸、蟻酸および安息香酸誘導体）、式（Ｉ）の化合物におけるヒドロキシ官能基のカルバメート（例、Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノ−カルボニル）などがあるが、これらに限定されるわけではない。
【００３０】
式（Ｉ）の化合物では、以下の意味を個々に、または部分的に組み合わせたものが好ましい：
１．Ｒ４は、式（II.１）（式中、Ｒ６、Ｒ７およびＲ９は水素であり、Ｒ８はフルオロである、Ｒ６、Ｒ７およびＲ９は水素であり、Ｒ８はメチルまたはトリフルオロメチルである；またはＲ６、Ｒ７およびＲ８は水素であり、Ｒ９はフルオロである；またはＲ６、Ｒ８およびＲ９は水素であり、Ｒ７はエチルまたはメトキシである；またはＲ７、Ｒ８およびＲ９は水素であり、Ｒ６はヒドロキシである；またはＲ７およびＲ８は水素、Ｒ６はメトキシ、そしてＲ９はメチルである）で示されるヘテロアリールであるか、またはＲ４は、式（II.２）（式中、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は水素である）で示されるヘテロアリールであるか、またはＲ４は、式（II.３）（式中、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は水素である）で示されるヘテロアリールであるか、またはＲ４は、式（II.４）（式中、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は水素である）で示されるヘテロアリールであるか、またはＲ４は式（II.５）（式中、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は水素である）で示されるヘテロアリールである。
２．Ｒ１は、アルキル、好ましくはｎ−ブチルまたはシクロアルキル、好ましくはＣ３−７シクロアルキル、例えばシクロヘキシル、シクロプロピルまたはシクロペンチルである；
３．Ｒ３は、ハロゲン、好ましくはフルオロである。
【００３１】
用途
本発明化合物は、様々な細菌または原核生物により誘発される感染疾患の処置または予防に使用され得る。例としては、グラム陽性およびグラム陰性の好気性および嫌気性菌、例えばスタフィロコッカス（Staphylococci、ブドウ球菌）、例、スタフィロコッカス・アウレウス（S. aureus） およびスタフィロコッカス・エピデルミディス（S. epidermidis）;エンテロコッカス（Enterococci、腸球菌）、例、エンテロコッカス・フェカリス（E. faecalis）およびエンテロコッカス・フェシウム（E. faecium）;ストレプトコッカス（Streptococci、連鎖球菌）、例、ストレプトコッカス・ニューモニエ（S.pneumoniae）;ヘモフィルス（Haemophilus）、例、ヘモフィルス・インフルエンザ（H.influenza）;モラクセラ（Moraxella）、例、モラクセラ・カタラーリス（M. catarrhalis）; およびエシェリキア（Escherichia）、例、エシェリキア・コリ（E. coli）があるが、これらに限定されるわけではない。他の例としては、マイコバクテリア（Mycobacteria）、例、マイコバクテリウム・ツベルクローシス（M.tuberculosis）、細胞間微生物、例、クラミジア（Chlamydia）およびリケッチア（Rickettsiae）およびマイコプラズマ（Mycoplasma）、例、マイコプラズマ・ニューモニエ（M.pneumoniae）およびシュードモナス（Pseudomonas）、例、シュードモナス・アエルギノーザ（P.aeruginosa、緑膿菌）；ヘリコバクター・ピロリ（H.pylori）；および寄生体、例、プラスモディウム・ファルシパルム（Plasmodium falciparum）がある。
【００３２】
本発明化合物では、好ましくはグラム陽性または陰性菌に対する微生物学的効力に実質的な改良がみられる。具体的には、本発明化合物の場合、グラム陰性および／またはグラム陽性菌、例えばヘモフィルス・インフルエンザ（H. influenza）およびストレプトコッカス・ニューモニエ（S. pneumoniae）の阻害に改良が加えられていることにより、それらの微生物学的活性スペクトルが著しく改善されている。例えば、一例において、平均比較指数（ＡＣＩ）は、ヘモフィルス・インフルエンザ（H. influenza）の阻害改善については３希釈段階より大きく、さらにストレプトコッカス・ニューモニエ（S. pneumoniae）の阻害改善については０.４希釈段階のＡＣＩを示す。もう一つの例において、ＡＣＩは、ストレプトコッカス・ニューモニエ（S. pneumoniae）の阻害改善については３希釈段階であり、さらにヘモフィルス・インフルエンザ（H. influenza）の阻害改善については１.２希釈段階のＡＣＩを示す。
【００３３】
本発明化合物はまた、好ましくは先行技術による化合物と比べてヒトにおける安全性、毒性および薬物動態特性に改良が加えられており、例えば潜在的に有害な事象の減少または排除がみられる。
【００３４】
一態様では、医薬上許容される担体と組み合わせた形で本明細書に開示されている、本発明化合物、その医薬上許容される塩またはそのプロドラッグを含む、感染疾患を処置または予防するための組成物が提供される。別の実施態様では、上記組成物はさらに別の治療剤を含む。
【００３５】
別の態様では、疾患、例えば感染疾患の処置、予防または緩和に有効な量で本明細書において開示されている、本発明化合物、その医薬上許容される塩またはそのプロドラッグの投与量が提供される。これらの化合物またはその誘導体は、種々の微生物病原体に対する活性についてスクリーニングされ得、当業界で利用可能な方法を用いて適切な用量が決定され得る。
【００３６】
本発明化合物を用いて対象を処置することにより、感染を処置、予防またはその重症度を低減化させ得る。対象には、動物、植物、血液製品、培養物および表面例えば医療または研究設備の表面、例えばガラス器具、針、手術設備および管系の表面、および生物体への一時的または永久的移植が意図された物体がある。好ましい動物には、哺乳類、例えばマウス、ラット、ネコ、イヌ、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウマ、イノシシ、霊長類、例えばアカゲザル、チンパンジー、ゴリラ、および最も好ましくはヒトがある。対象の処置には、微生物による対象の感染により誘発される臨床症状の予防、低減化または排除、微生物による対象の感染の予防、低減化または排除；または微生物による対象の汚染の予防、低減化または排除があるが、これらに限定されるわけではない。関与する微生物は、好ましくは原核生物、さらに好ましくは細菌である。
【００３７】
一態様では、本発明化合物、その医薬上許容される塩またはそのプロドラッグの有効ペプチジルデホルミラーゼ阻害量を対象に投与することによる、ペプチジルデホルミラーゼの阻害に応答する、対象、例えばヒトまたは他の動物対象における感染疾患の処置または予防方法が提供される。一実施態様において、化合物またはその誘導体は、所望により医薬上許容される担体中における医薬上許容される形態で投与される。本発明化合物、その医薬上許容される塩またはそのプロドラッグは、単独または別の治療剤と組み合わせて投与され得る。上記治療剤の例には、β−ラクタム、キノロン、マクロリド、グリコペプチドおよびオキサゾリジノンがあるが、これらに限定されるわけではない。本明細書で使用されている「感染疾患」は、微生物感染の存在、例えば細菌の存在を特徴とする疾患である。かかる感染疾患には、例えば、中枢神経系感染、外耳感染、中耳の感染、例えば急性中耳炎、硬膜静脈洞の感染、目の感染、口腔内感染、例えば歯、歯肉および粘膜の感染、上気道感染、下気道感染、尿生殖器感染、胃腸感染、婦人科感染、敗血症、骨および関節感染、皮膚および皮膚構造の感染、細菌性心内膜炎、火傷を含み、また手術の抗菌的予防、免疫抑制患者、例えば癌化学療法を受けている患者、または臓器移植患者における抗菌的予防にかかわるものであり、また感染性生物により誘発される慢性病、例えば動脈硬化症も含む。化合物および化合物を含む組成物は、例えば局所的、局部的または全身的経路により投与され得る。全身適用には、例えば、硬膜下腔内、硬膜外、筋肉内、経皮、静脈内、腹腔内、皮下、舌下、鼻、膣、直腸および経口投与といった、身体組織への化合物の導入方法が含まれる。投与される抗菌剤の具体的な用量および処置の持続時間は、必要に応じて調節され得る。
【００３８】
本発明の別の態様は、ペプチジルデホルミラーゼの阻害方法に関するものである。一実施態様は、式（Ｉ）の化合物、その医薬上許容される塩またはそのプロドラッグの有効ペプチジルデホルミラーゼ阻害量を、それを必要とする対象に投与することを含む。「対象」および「有効ペプチジルデホルミラーゼ阻害量」の語は、上記と同じである。
【００３９】
本発明のさらに別の態様は、ペプチジルデホルミラーゼが介在する病気の処置で使用される医薬の製造における上記式（Ｉ）の化合物、その医薬上許容される塩またはそのプロドラッグの使用に関するものである。
【００４０】
投与および医薬組成物
本発明はまた、生物活性Ｎ−ホルミルヒドロキシルアミン化合物、その医薬上許容される塩またはそのプロドラッグおよび医薬上許容される担体を含む医薬組成物を提供する。本発明組成物は、経口、局所または非経口用に適合させた形態のものを含み、対象、例えば動物、好ましくは哺乳類、さらに好ましくはヒトにおける細菌感染症の処置に使用され得る。医薬組成物は、さらに下記に示した別の治療剤を含み得る。
【００４１】
本明細書で抗菌化合物とも称される、本発明抗生化合物は、他の抗生物質と同様に、人体または獣医学で使用される慣用的方法での投与用に製剤化され得る。上記方法は当業界では公知であり（例、Remington's Pharmaceutical Sciences、イーストン、ペンシルベニア：Mack Publishing Co.参照）、本明細書では詳述しない。
【００４２】
組成物は、当業界では公知の経路、例えば皮下、吸入、経口、局所または非経口経路による投与用に製剤化され得る。組成物は、限定されるわけではないが、錠剤、カプセル剤、カシェ剤、即溶性製剤(fast melts)（オブラート無し）、散剤、顆粒、口内錠、クリームまたは液体調製物、例えば経口または滅菌非経口溶液または懸濁液を含む、当業界で公知の形態をとり得る。化合物は、リポソーム、ミセルまたはマイクロエマルション製剤で投与され得る。また、化合物はプロドラッグとしても投与され得、投与されたプロドラッグは、処置されている哺乳類において生物活性形態への生体内変化を被る。
【００４３】
本発明の局所製剤は、例えば、軟膏、クリームまたはローション、溶液、膏薬、エマルション、硬膏、眼用軟膏および点眼および点鼻液、含浸包帯剤、経皮パッチ、スプレーおよびエーロゾルの形を取り得、適切な慣用的添加物、例えば保存剤、薬剤浸透を助ける溶媒および軟膏およびクリームにおける皮膚軟化薬を含み得る。
【００４４】
製剤はまた、適合性のある慣用的担体、例えばクリームまたは軟膏基剤およびローション用のエタノールまたはオレイルアルコールを含み得る。上記担体は、例えば製剤の約１％〜約９９％の割合で存在し得る。例えば、それらは製剤の約８０％までを構成し得る。
【００４５】
経口投与用の錠剤およびカプセル剤は、単位用量形態であり得、慣用的賦形剤、例えば結合剤、例えば糖蜜、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、またはポリビニルピロリドン、増量剤、例えば乳糖、糖、とうもろこし澱粉、リン酸カルシウム、ソルビトールまたはグリシン、錠剤滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコールまたはシリカ、崩壊剤、例えばジャガイモ澱粉、または許容し得る湿潤剤、例えばラウリル硫酸ナトリウムを含み得る。錠剤は、実際の標準的製薬業務における公知方法に従ってコーティングされ得る。
【００４６】
経口液体調製物は、例えば水性または油性懸濁液、溶液、エマルション、シロップまたはエリキシル形態であり得るか、または使用前に水または別の適切な賦形剤で再構成するための乾燥製品として提供され得る。上記の液体調製物は、慣用的添加物、例えば懸濁剤、例えばソルビトール、メチルセルロース、グルコースシロップ、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲルまたは硬化食用脂；乳化剤、例えばレシチン、ソルビタンモノオレエート、またはアカシア；非水性賦形剤（食用油を含み得る）、例えば、扁桃油、油性エステル、例えばグリセリン、プロピレングリコール、またはエチルアルコール；保存剤、例えば、メチルまたはプロピルｐ−ヒドロキシベンゾエートまたはソルビン酸、および所望ならば慣用的調味料または着色剤を含み得る。
【００４７】
非経口投与の場合、液体単位用量形態は、上記化合物および滅菌賦形剤、好ましくは水を用いて製造される。化合物は、使用される賦形剤および濃度によって、賦形剤または他の適切な溶媒に懸濁または溶解され得る。溶液の製造では、化合物を注射用水に溶かし、滅菌濾過した後、適切な瓶またはアンプルに充填し、密封し得る。好都合には、例えば局部麻酔、保存および緩衝剤といった薬剤を賦形剤に溶解し得る。安定性を高めるため、組成物を瓶に充填後、冷凍し、水を真空下で除去し得る。次いで、凍結乾燥粉末を瓶に入れて密閉し、添付された瓶の注射用水を注ぐことにより、使用前に液体が再構成され得る。非経口懸濁液は、化合物を賦形剤に溶解させるのではなく懸濁し、また滅菌が濾過を伴い得ないこと以外、実質的に同じ方法で製造される。化合物を酸化エチレンへの暴露により滅菌した後、滅菌賦形剤に懸濁させ得る。
【００４８】
好都合には、界面活性剤または湿潤剤を、組成物中に含ませることにより、化合物の均一分布を促進する。
【００４９】
組成物は、投与方法しだいで、例えば約０.１重量％〜約９９重量％、例えば約１０〜６０重量％の範囲で有効成分を含有し得る。組成物が用量単位を構成する場合、各単位は、例えば約１〜１０００ｍｇの有効成分を含有する。成人の処置に使用される用量は、投与経路および頻度しだいで例えば１日当たり約１〜３０００ｍｇの範囲、例えば１日当たり約１５００ｍｇである。上記用量は、１日当たり約０.０１５〜５０ｍｇ／ｋｇに相当する。好適には、用量は、例えば１日当たり約５〜２０ｍｇ／ｋｇである。
【００５０】
式（Ｉ）の化合物を含む代表的な医薬製剤を以下に記載する。
【００５１】
本発明はまた、本発明化合物、例えば式（Ｉ）で示される化合物の製造方法であって、式（Ｖ）
【化８】
2008545692.tif 000009
［式中、Ｒ１およびＲ２は前記の意味であり、Ｙはヒドロキシ保護基である］
で示される化合物またはその官能性誘導体を、式（ＶＩ）
【化９】
2008545692.tif 000010
［式中、Ｒ３およびＲ４は前記の意味であり、ｎは１である］
で示される化合物と反応させ、必要な場合、遊離形態で得られた上記化合物を塩形態に変換、またはその逆の形で変換することを含む方法を提供する。
【００５２】
式（Ｖ）で示される化合物の官能性誘導体には、例えば酸塩化物、酸無水物または活性化エステルがある。
【００５３】
上記反応は、当業界では周知の方法に従って、または下記実施例に開示された要領で実施され得る。この反応は、好都合には塩基の存在下で実施され、次いで好ましくは水素化触媒の存在下において水素化され得る。適切な塩基には、例えばヒューニッヒ塩基（すなわち、ジイソプロピルエチルアミン）および無機塩基、例えば重炭酸ナトリウムがある。次いで、水素化触媒、好ましくはパラジウム触媒、例えばパラジウム・炭素またはパラジウムブラックを、例えば濃縮後の上記生成物に添加し、例えば約１６〜約２４時間水素雰囲気下で攪拌し得る。パラジウム触媒は、好ましくは濃縮生成物の約５モル％〜約１０モル％の割合で添加され得る。
【００５４】
出発物質として使用する式（Ｖ）の化合物は、例えば式（ＶＩＩ）
【化１０】
2008545692.tif 000011
［式中、Ｒ１、Ｒ２およびＹは、前記の意味である］
で示される化合物を、例えば当業界では公知である、例えば弱い塩基性条件下で反応させることにより製造され得る。典型的には、この反応は、不活性溶媒、例えばＴＨＦ、ＤＭＦ、トルエン、ジオキサンまたはＣＨ２Ｃｌ２および水の混合物に、式（ＶＩＩ）の化合物を溶かし、過酸化水素、次いで塩基の水溶液を冷却した混合物に加えることにより実施され得る。塩基の例には、例えば重炭酸ナトリウム、水酸化リチウム、水酸化ナトリウムなどがある。塩基は、好ましくは式（ＶＩＩ）の化合物に対し約１.１〜約１.５当量で使用され得る。
【００５５】
式（ＶＩＩ）の化合物は、当業界で知られている通り、例えば式（ＶIII）（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＹは、前記の意味である）で示される化合物を、蟻酸と反応させることにより製造され得る。この反応は、典型的には例えば０℃で、蟻酸中の無水酢酸溶液を蟻酸中の式（ＶIII）で示される化合物の溶液に加えることにより実施され得る。
【化１１】
2008545692.tif 000012
【００５６】
式（ＶIII）で示される化合物は、当業界で認められているように、例えば式（ＩＸ）（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＹは、前記の意味である）の化合物を、不活性有機溶媒中のｐ−トルエンスルホン酸溶液およびＮａ２ＣＯ３の溶液（例、１Ｍ）と反応させることにより製造され得る。
【００５７】
式（ＩＸ）の化合物は、当業界で知られているように、例えば、式（Ｘ）（式中、Ｒ１は前記の意味である）の化合物を、式（ＸＩ）（式中、Ｙはアリール、アルキル、アラルキルまたはシリルである）で示されるヒドロキシ保護化合物と反応させることにより製造され得る。
【００５８】
式（Ｘ）で示される化合物は、当業界で知られている通り、例えば式（ＸＩＩ）（式中、Ｒ４は前記の意味である）の化合物をピバロイルクロリドと反応させることにより製造され得る。
【００５９】
出発物質の製造について特に断らない限り、化合物は既知のものであるか、または当業界で知られているかまたは後記実施例で開示されている方法と同様にして製造され得る。
【００６０】
本願で引用されている全ての特許、特許出願および出版物については、個々の特許、特許出願または出版物が各々個別に示されている場合と同じ度合いであらゆる目的についてそのまま完全に出典明示により援用されているものとする。
【００６１】
以下の略語を使用する：
ＡｃＯＨ、ＨＯＡｃ＝酢酸
Ａｃ２Ｏ＝無水酢酸
ＢＯＣ、Ｂｏｃ＝ｔ−ブチルオキシカルボニル
ＤＣＭ＝ジクロロメタン
ＤＩＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド
Ｅｔ＝エチル
ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル
Ｆｍｏｃ、ＦＭＯＣ＝９−フルオレニルメチルオキシカルボニル
ＨＡＴＵ＝Ｏ−（７−アザ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＭＣＰＢＡ＝メタ−クロロペルオキシ−安息香酸
Ｍｅ＝メチル
ＭｅＯＨ＝メタノール
ＭＭＰ＝マトリックスメタロプロテイナーゼ
ＮＶＯＭ＝ニトロベラトリルオキシメチルエーテル
ｐ−ＴＳＡ＝ｐ−トルエンスルホン酸
ＲＴ＝室温
ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸
ｔＢｕ＝ｔ−ブチル
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン
ＴＨＰ＝２−テトラヒドロピラニル
ＴｓＯＨまたはｐ−ＴＳＡ＝トルエンスルホン酸
【００６２】
一般的合成スキーム
本発明化合物は、下記の反応スキームに示した方法により製造され得る。
【００６３】
これらの化合物の製造で使用される出発物質および試薬は、販売供給業者、例えばAldrich Chemical Co.（ミルウォーキー、ウィスコンシン、米国）、Bachem（トランス、カリフォルニア、米国）、Emka-Chemie、またはSigma（セントルイス、ミズーリ、米国）から入手可能であるか、または参考文献、例えばFieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis、１〜１５巻（John Wiley and Sons、１９９１）、Rodd's Chemistry of Carbon Compounds、１〜５巻および補遺（Elsevier Science Publishers、１９８９）、Organic Reactions、１〜４０巻（John Wiley and Sons、１９９１）、March's Advanced Organic Chemistry （John Wiley and Sons、第４版）、およびLarock's Comprehensive Organic Transformations（VCH Publishers Inc.、１９８９）に示された手順に従って当業者に熟知された方法により製造される。これらのスキームは、本発明化合物が合成され得る若干の方法の単なる実例に過ぎず、様々な修正がこれらのスキームに加えられ得、この開示を参照すれば、当業者には容易に想到できるものである。
【００６４】
反応の出発物質および中間体は、所望ならば慣用的技術、限定するわけではないが、例えば、濾過、蒸留、結晶化、クロマトグラフィーなどを用いて分離および精製され得る。上記物質は、物理定数およびスペクトルデータを含む、慣用的手段を用いて特性検定され得る。
【００６５】
式（Ｉ）で示される化合物の製造
式（Ｉ）の化合物は、有機化学業界において公知の方法により製造され得る。本発明化合物を製造するための代表的合成手順を以下に説明および詳述する。例えば、式（Ｉ）の化合物は、下記スキームＡ−Ｂに記載した要領で製造され得る。
一般的手順Ａ：１−｛２（Ｒ）−［(ホルミルヒドロキシアミノ)−メチル］−アルカノイル｝−ピロリジン−２（Ｓ）−カルボン酸アミドの合成
【化１２】
2008545692.tif 000013
【００６６】
工程１：２−ｎ−ブチルアクリル酸（Ａ−２）
エタノール（２００ｍＬ）中のアルキルマロン酸Ａ−１（Ｒ＝ｎ−ブチル、１０７.４ｍｍｏｌ）の溶液に、ピペリジン（１２.７ｍＬ、１２８.８ｍｍｏｌ、１.２当量）および３７％ホルムアルデヒド水溶液（４０.０ｍＬ、５３６.９ｍｍｏｌ、５当量）を加える。溶液を８０℃に加熱すると、その間に沈殿が形成され、次いでこれを徐々に１時間かけて再溶解させる。反応混合物を一晩８０℃で撹拌し、次いで室温（ｒｔ）に冷却する。溶媒を減圧下で除去し、残渣を酢酸エチルに溶かし、１ＭのＨＣｌおよびブラインで連続的に洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過する。濾液を濃縮することにより、澄明油状物として標記化合物Ａ−２を得る。
【００６７】
工程２：４−ベンジル−３−（２−ブチル−アクリロイル）−オキサゾリジン−２−オン（Ａ−３）
２−ｎ−ブチルアクリル酸（９.９０ｇ、７７.２ｍｍｏｌ、および１当量）を、乾燥ＴＨＦ（２６０ｍＬ）に溶かし、窒素ブランケット下で−７８℃に冷却する。ヒューニッヒ塩基（１７.５ｍＬ、１００.４ｍｍｏｌ、１.３当量）およびピバロイルクロリド（９.５ｍＬ、７７.２ｍｍｏｌ、１当量）を、温度を−６０℃未満に維持する速度で加える。混合物を−７８℃で３０分間撹拌し、２時間室温に温め、最後に再び−７８℃に冷却する。
【００６８】
セパレートフラスコ中で、（Ｓ）−（−）−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン（１３.４９ｇ、７７.２４ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（１５０ｍＬ）に溶かし、窒素ブランケット下で−７８℃に冷却する。ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２.５Ｍ溶液、３０.９ｍＬ、７７.２ｍｍｏｌ、１当量）を−７８℃でゆっくりと加え、混合物を室温で３０分間撹拌する。生じたアニオンを、カニューレによりゆっくりともとの反応容器中に移す。混合物をそのまま室温まで温め、室温で一晩撹拌する。反応を１ＭのＫＨＣＯ３でクエンチングし、溶媒を減圧下で除去する。残渣を酢酸エチルおよび水間に分配する。有機層をブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮することにより、黄色油状物を得、これをフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）により精製し、白色固体（１５.０ｇ、５２.２ｍｍｏｌ、６８％）として標記化合物Ａ−３を得る。
【００６９】
工程３：４−ベンジル−３−［２−（ベンジルオキシアミノ−メチル）ヘキサノイル］−オキサゾリジン−２−オン（ｐ−トルエンスルホン酸塩）
化合物Ａ−３（８.２５ｇ、２８.７ｍｍｏｌ）を、Ｏ−ベンジルヒドロキシルアミン（７.０７ｇ、５７.４ｍｍｏｌ、２当量）と混合し、窒素下室温で４０時間撹拌する。混合物を酢酸エチルに溶かし、ｐ−トルエンスルホン酸（２１.８４ｇ、１１４.８ｍｍｏｌおよび４当量）を加えると、過剰のＯ−ベンジルヒドロキシルアミンが白色固体として沈殿する。白色固体を濾過し、濾液を濃縮することにより、粗黄色油状物を得る（ＨＰＬＣ分析は、出発物質の小さな痕跡を示した）。粗黄色油状物に過剰のジエチルエーテルを加え、０℃で３０分間冷却することにより、固体を得、これを濾過により集め、真空乾燥することにより、白色結晶固体として標記化合物を得る（単ジアステレオマー）。
【００７０】
工程４：４−ベンジル−３−［２−（ベンジルオキシアミノ−メチル）−ヘキサノイル］−オキサゾリジン−２−オン（Ａ−５）
酢酸エチル（４００ｍＬ）に溶かしたｐ−ＴＳＡ塩（２２.９ｇ、３９.３ｍｍｏｌ）の溶液に、１ＭのＮａ２ＣＯ３（２００ｍＬ、５当量）を加え、室温で３０分間撹拌する。層を分離し、水層を酢酸エチルで抽出する。有機層を合わせ、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮することにより、淡い不透明油状物（１５.８ｇ、３８.６ｍｍｏｌ、９８％）として標記化合物を得る。
【００７１】
工程５：Ｎ−［２−（４−ベンジル−２−オキソ−オキサゾリジン−３−カルボニル）−ヘキシル］−Ｎ−ベンジルオキシ−ホルムアミド（Ａ−６）
蟻酸（７.４ｍＬ、１９６.６ｍｍｏｌ、１５当量）中の化合物Ａ−５（５.３８ｇ、１３.１ｍｍｏｌ、１当量）の溶液を、窒素ブランケット下で０℃に冷却する。セパレートフラスコ中で、蟻酸（７.４ｍＬ、１９６.６ｍｍｏｌ、１５当量）を窒素ブランケット下で０℃に冷却し、無水酢酸（２.４７ｍＬ、２６.２ｍｍｏｌ、２当量）を滴下する。溶液を０℃で１５分間撹拌する。生じた混合無水物を注射器によりもとの反応容器中にゆっくりと移す。混合物を０℃で１時間、次いで室温で３時間撹拌する。混合物を濃縮し、ジクロロメタン中に取り、飽和ＮａＨＣＯ３およびブラインで連続的に洗浄する。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮することにより不透明油状物を得、これをフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１、次いでジクロロメタン：アセトン＝９：１）で精製することにより、無色油状物として標記化合物を得る。
【００７２】
工程６：２−［（ベンジルオキシ−ホルミル−アミノ）−メチル］−ヘキサン酸（Ａ−７）
化合物Ａ−６（０.１６３ｇ、０.３７２ｍｍｏｌ、１当量）を、ＴＨＦ（４.５ｍＬ）および水（１.５ｍＬ）に溶かし、０℃に冷却する。過酸化水素（水中３０％、２２８μＬ、２.２３ｍｍｏｌ、６当量）を滴下し、次いで水（３５０μＬ）中の水酸化リチウム（０.０１９ｇ、０.４４６ｍｍｏｌ、１.２当量）の溶液をゆっくりと加える。生成した混合物を０℃で１.５時間撹拌する。塩基性反応混合物を、０℃でアンバーライトＩＲ−１２０樹脂（Ｈ＋）によりｐＨ４〜５にクエンチングする。樹脂を濾過し、酢酸エチルですすぐ。混合物を濃縮してＴＨＦを除去し、次いで酢酸エチル中に取る。水層を分離し、有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮することにより不透明油状物を得、これをフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン：アセトン＝４：１、次いでアセトン：メタノール＝９９：１）で精製し、無色油状物として標記化合物Ａ−７を得る。
【００７３】
工程７
１−｛２−［（ベンジルオキシ−ホルミル−アミノ）−メチル］−ヘキサノイル｝−ピロリジン−２−カルボン酸アミド
窒素下、室温で乾燥ジオキサン（４ｍＬ）中の化合物Ａ−７（０.１９０ｇ、０.６８０ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ヒューニッヒ塩基（３９１μＬ、２.２４ｍｍｏｌ、３.３当量）、アミンＡ−８（０.７４８ｍｍｏｌ、１.１当量）およびＨＡＴＵ（０.２８４ｇ、０.７４８ｍｍｏｌ、１.１当量）を連続して加える。生成した混合物を室温で２２時間撹拌する。混合物を酢酸エチルおよび１０％クエン酸間に分配する。有機層をブラインおよび飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮する。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン：アセトン＝３：１）で精製することにより、無色油状物として標記化合物を得る。
【００７４】
工程２：１−｛２−［（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−メチル］−ヘキサノイル｝−ピロリジン−２−カルボン酸アミド（Ａ−９）
Ｐｄ−Ｃ（０.０５９ｇ、０.１当量）を、窒素ブランケット下、１：１酢酸エチル／エタノール溶液（１２ｍＬ）中の上記化合物（０.５５０ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に加える。混合物を３６時間水素雰囲気下で撹拌する。セライトのパッドでの濾過により触媒を除去する。濾液を濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（ジクロロメタン：アセトン＝２：１）により精製して、非結晶固体（０.１２１ｇ、０.３３４ｍｍｏｌ、６１％）として標記化合物を得た。
【００７５】
一般的手順Ｂ：１−｛２（Ｒ）−［（ホルミルヒドロキシアミノ）−メチル］−アルカノイル｝−ピロリジン−２（Ｓ）−カルボン酸エステルの合成
【化１３】
2008545692.tif 000014
Ｘ＝ＣＨ２、−Ｓ−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ（ＯＲ）−、−ＣＦ２−または−ＣＨ（Ｆ）−；ｎ＝０〜３
【００７６】
工程１：１−｛２−［（ベンジルオキシ−ホルミル−アミノ）−メチル］−ヘキサノイル｝−ピロリジン−２−カルボン酸エステル
窒素下、室温で乾燥ジオキサン（４ｍＬ）中の化合物Ａ−７（０.６８０ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ヒューニッヒ塩基（３９１μＬ、２.２４ｍｍｏｌ、３.３当量）、アミンＡ−１０（０.７４８ｍｍｏｌ、１.１当量）およびＨＡＴＵ（０.２８４ｇ、０.７４８ｍｍｏｌ、１.１当量）を連続して加える。通常の後処理を行い、精製することにより、標記化合物を得る。
【００７７】
工程２：１｛２−［（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−メチル］−ヘキサノイル｝−ピロリジン−２−カルボン酸エステル（Ａ−１１）
Ｐｄ−Ｃ（０.０５９ｇ、０.１当量）を、窒素ブランケット下、１：１酢酸エチル／エタノール溶液（１２ｍＬ）中の上記化合物（０.５５０ｍｍｏｌ）の溶液に加える。混合物を３６時間水素雰囲気下で撹拌する。セライトのパッドでの濾過により触媒を除去する。濾液を濃縮し、残渣を分取ＴＬＣ（ジクロロメタン：アセトン＝２：１）により精製して、標記化合物を得る。
【００７８】
一般的手順Ｃ：ピロリジン−２−Ｓ−カルボン酸ピリジン−２−イルアミド（Ａ−８）（Ｘ＝ＣＨ２、ｎ＝１、Ｒ１＝２−ピリジル）の製造
工程１：２−Ｓ−（ピリジン−２−イルカルバモイル）−ピロリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
【化１４】
2008545692.tif 000015
ピリジン（４０ｍＬ）中のＺ−プロクロリド（５.０ｇ、１８.７ｍｍｏｌ、１当量）の溶液を、窒素ブランケット下、０℃に冷却する。ピリジン（１０ｍＬ）中の２−アミノピリジン（５.２７ｇ、５６.０ｍｍｏｌ、３当量）を滴下する。生成した混合物を室温で４時間撹拌し、次いで濃縮する。残留油状物を、酢酸エチルに溶かし、水、１０％クエン酸、飽和ＮａＨＣＯ３およびブラインで連続的に洗浄する。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮することにより、不透明固体として標記化合物（４.２１ｇ、１３.０ｍｍｏｌ、６９％）を得る。
【００７９】
工程２：ピロリジン−２−Ｓ−カルボン酸（ピリジン−２−イル）アミド臭化水素酸塩
【化１５】
2008545692.tif 000016
室温で酢酸（６５ｍＬ）中の上記化合物（４.２１ｇ、１３.０ｍｍｏｌ、１当量）の溶液を、ＨＢｒ（５.７Ｍ、酢酸中３３％、１１０ｍＬ、６４９ｍｍｏｌ、５０当量）で処理し、混合物を室温で２時間撹拌する。反応混合物に過剰のジエチルエーテルを加え、３０分間０℃に冷却することにより、固体を得、これを濾過により集め、真空乾燥することにより、帯褐色粉末として標記化合物を得る。
【００８０】
一般的手順Ｄ：４−Ｒ−ヒドロキシ−ピロリジン−２−Ｓ−カルボン酸（５−メチル−ピリジン−２−イル）−アミド
【化１６】
2008545692.tif 000017
ＨＡＴＵ（１.３ｍｍｏｌ）およびＮ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（５ｍｍｏｌ）条件下、ＤＭＦ（５ｍＬ）中で５−ピコリン（１.５ｍｍｏｌ）とＯ−ｔｅｒｔ−ブチル保護プロリン（１ｍｍｏｌ）をカップリングさせ、次いでＯ−ｔｅｒｔ-ブチルをＴＦＡ−ジクロロエタン（１：１）で除去することにより、標記化合物を収率８５％で得る。
【００８１】
一般的手順Ｅ：４−Ｓ−フルオロ−ピロリジン−２−Ｓ−カルボン酸（５−メチル−ピリジン−２−イル）−アミド
【化１７】
2008545692.tif 000018
メチレンクロリド（２０ｍＬ）中の上記ヒドロキシ化合物（２ｍｍｏｌ）を、−７０℃で三フッ化Ｎ'Ｎ−ジエチルアミノ硫黄（ＤＡＳＴ；４ｍｍｏｌ）により処理する。次いで、反応混合物をそのまま室温で１６時間撹拌し、冷重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮する。それをシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することにより、Ｎ−保護誘導体を得、ＨＢｒ−ＡｃＯＨで処理後、アミノ化合物を得る。
【００８２】
一般的手順Ｆ：４−Ｓ−ヒドロキシ−ピロリジン−１,２−ジカルボン酸１−ｔｅｒｔ-ブチルエステル−２−メチルエステル
【化１８】
2008545692.tif 000019
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のトランス−４−ヒドロキシ化合物（１ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（１.５ｍｍｏｌ）および安息香酸（１.５ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でＴＨＦ（５ｍＬ）中のＮ,Ｎ−ジイソプロピル−アゾジカルボキシレート（１.５ｍｍｏｌ）を滴下する。それをそのまま室温で１６時間撹拌する。溶媒を減圧下で除去し、残渣をエーテルに溶かす。それを氷冷すると、ホスフィンオキシドが沈殿し、これを濾過により除去し、濾液を減圧下で濃縮する。粗物質を０℃で２時間、メタノール性ナトリウムメトキシドで処理することにより、標記シス−ヒドロキシ化合物を得る。
【００８３】
一般的手順Ｇ：４−Ｒ−フルオロ−ピロリジン−２−Ｓ−カルボン酸（５−メチル−ピリジン−２−イル）−アミド
【化１９】
2008545692.tif 000020
上記シス−ヒドロキシのフッ素化により、トランス−４−フルオロ誘導体を得、これをけん化後、対応する酸を得る。ＨＡＴＵ条件下、４−Ｒ−フルオロ−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ-ブチルエステルおよび５−メチル−ピリジン−２−イルアミンからアミンを製造することにより、プロリンアミド誘導体を得、これをジオキサン中の４ＭのＨＣｌで処理後、所望のアミンを得る。
【実施例】
【００８４】
実施例１：１−［２−シクロペンチルメチル−３−（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−プロピオニル］−ピロリジン−２−カルボン酸（５−フルオロ−１−オキシ−ピリジン−２−イル）−アミド
【化２０】
2008545692.tif 000021
一般的手順Ａに従って、３−ベンジルオキシ−ホルミル−アミノ）−２−シクロペンチルメチル−プロピオン酸Ａ−７（Ｒ＝シクロペンチルメチル）およびピロリジン−２−カルボン酸ピリジン−２−イルアミドＡ−８（Ｘ＝ＣＨ２、ｎ＝１、Ｒ１＝５−フルオロ２−ピリジル）から標記化合物を製造する。
【００８５】
２−シクロペンチルメチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオン酸を、下記要領でシクロペンチルメチルマロン酸から製造する。
【００８６】
ブロモメチル−シクロペンタン
【化２１】
2008545692.tif 000022
シクロペンタンメタノール（４８.５ｇ、４８４ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（８８.０ｍＬ、６３１ｍｍｏｌ）および無水ＴＨＦ（１Ｌ）の溶液を、４℃に冷却し、窒素下で撹拌する。１０℃を維持しながら、メタンスルホニルクロリド（４５.０ｍＬ、５８１ｍｍｏｌ）を撹拌溶液にゆっくりと加える。混合物をさらに１時間１０℃で撹拌し、ＬｉＢｒ（３００.０ｇ、３４５４ｍｍｏｌ）をゆっくりと加える（発熱性）。反応混合物をさらに１６時間室温で撹拌する。水を加えて塩を溶かし、混合物をＥｔ２Ｏで抽出する。Ｅｔ２Ｏ層を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、注意深く濃縮する（１００ｔｏｒｒで２５℃）。粗生成物を真空蒸留により精製する（１ｔｏｒｒで３５℃、目的化合物は最初に集められるフラクションである）。これにより、無色油状物としてブロモメチル−シクロペンタン（３１.４ｇ、４０％収率）を得る。
【００８７】
２−シクロペンチルメチル−マロン酸
【化２２】
2008545692.tif 000023
ジエチルマロネート（３６.９１ｇ、２３０.４ｍｍｏｌ）、無水メタノール（４００ｍＬ）およびＮａＯＭｅ（メタノール中２５％、４９.７９ｇ、２３０.４ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素下で１時間、還流温度で撹拌する。ブロモメチル−シクロペンタン（３１.３１ｇ、１９２.０ｍｍｏｌ）を混合物に加え、さらに３時間撹拌する。水（４００ｍＬ）中のＮａＯＨ（２３.０４ｇ、５７６.０ｍｍｏｌ）の溶液を加え、混合物をさらに１時間還流温度で撹拌する。混合物を冷却し、水で希釈し、エーテルで抽出する。エーテル層を捨て、水層を１ＮのＨＣｌでｐＨ＝１に酸性化する。水層をＥｔＯＡｃで抽出する。ＥｔＯＡｃ層を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮する。これにより、白色固体として２−シクロペンチルメチル−マロン酸（２１.０ｇ、５９％収率）を得る。
【００８８】
２−シクロペンチルメチル−アクリル酸
【化２３】
2008545692.tif 000024
２−シクロペンチルメチル−マロン酸（２４.９０ｇ、１３３.７ｍｍｏｌ）、ピペリジン（１５.９ｍＬ、１６０.８ｍｍｏｌ）、３７％ホルムアルデヒド水溶液（５１.０ｍＬ、６４７.２ｍｍｏｌ）およびＥｔＯＨ（２５０ｍＬ）から成る混合物を、１６時間還流温度で撹拌する。反応を１ＮのＨＣｌでクエンチングしてｐＨ＝２にし、混合物をＥｔＯＡｃで抽出する。ＥｔＯＡｃ層を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮する。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＤＣＭ中１０％アセトン）で精製することにより、油状物として２−シクロペンチルメチル−アクリル酸（１７.６５ｇ、８６％収率）を得る。
【００８９】
４−ベンジル−３−（２−シクロペンチルメチル−アクリロイル）−オキサゾリジン−２−オン
【化２４】
2008545692.tif 000025
２−シクロペンチルメチル−アクリル酸（１７.６５ｇ、１１４.５ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（２００ｍＬ）に溶かし、窒素下で−７８℃に冷却する。温度を−６０℃未満に維持し、気体の発生を制御する速度でＮ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２５.９ｍＬ、１４８.７ｍｍｏｌ）およびトリメチルアセチルクロリド（１４.１ｍＬ、１１４.５ｍｍｏｌ）を連続して加える。混合物を−７８℃で３０分間撹拌し、室温で２時間撹拌し、再び−７８℃に冷却する。
【００９０】
セパレートフラスコで、（Ｓ）−（−）−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン（２０.３０ｇ、１１４.６ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（４００ｍＬ）に溶かし、窒素下で−７８℃に冷却する。ＢｕＬｉ（２.５Ｍ、４５.８ｍＬ、１１４.５ｍｍｏｌ）を、−７８℃でゆっくりと加え、混合物を室温で３０分間撹拌する。生成したアニオンをカニューレによりもとの反応容器へゆっくりと移す。混合物をそのまま室温に温め、室温で一晩（１６時間）撹拌する。反応混合物を１ＭのＫＨＣＯ３でクエンチングし、ＥｔＯＡｃで抽出する。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮することにより、黄色油状物を得る。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ヘキサン中２０％ＥｔＯＡｃ）で精製することにより、油状物として４−ベンジル−３−（２−シクロペンチルメチル−アクリロイル）−オキサゾリジン−２−オン（２２.９ｇ、６４％）を得る。
【００９１】
４−ベンジル−３−［２−シクロペンチルメチル−３−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシアミノ）−プロピオニル］−オキサゾリジン−２−オン
【化２５】
2008545692.tif 000026
４−ベンジル−３−（２−シクロペンチルメチル−アクリロイル）−オキサゾリジン−２−オン（２２.９０ｇ、７３.１ｍｍｏｌ）およびＯ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−ヒドロキシルアミン（３４.２４ｇ、２９２.３ｍｍｏｌ）を合わせ、４５℃で窒素下４８時間撹拌する。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、０→３０％ＥｔＯＡｃ、ヘキサン中）で精製することにより、油状物として４−ベンジル−３−［２−シクロペンチルメチル−３−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシアミノ）−プロピオニル］−オキサゾリジン−２−オン（２１.６５ｇ、６９％収率）を得る。
【００９２】
Ｎ−［３−（４−ベンジル−２−オキソ−オキサゾリジン−３−イル）−２−シクロペンチルメチル−３−オキソ−プロピル］−Ｎ−（テトラヒドロピラン−２−イルオキシ）−ホルムアミド
【化２６】
2008545692.tif 000027
蟻酸（４５.０ｍＬ、１１９３ｍｍｏｌ）および無水酢酸（９０.０ｍＬ、９５２ｍｍｏｌ）の混合物を、窒素下で１時間、５０℃で撹拌する。第２のフラスコに４−ベンジル−３−［２−シクロペンチルメチル−３−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシアミノ）−プロピオニル］−オキサゾリジン−２−オン（２１.６２ｇ、５０.２ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（１７０.０ｍＬ、１２２０ｍｍｏｌ）および無水ＤＣＭ（４５０ｍＬ）を加える。この第２の混合物を窒素下で４℃に冷却し、１０℃を維持しながら混合酸溶液を第２フラスコにゆっくりと加える。混合物を合わせ、１０℃で３０分間撹拌し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液でクエンチングし、同溶液で洗浄し、ＤＣＭで抽出する。ＤＣＭ層を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮する。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ヘキサン中５０％ＥｔＯＡｃ）で精製することにより、油状物としてＮ−［３−（４−ベンジル−２−オキソ−オキサゾリジン−３−イル）−２−シクロペンチルメチル−３−オキソ−プロピル］−Ｎ−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−ホルムアミド（２０.１０ｇ、８７％収率）を得る。
【００９３】
２−シクロペンチルメチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオン酸
【化２７】
2008545692.tif 000028
Ｎ−［３−（４−ベンジル−２−オキソ−オキサゾリジン−３−イル）−２−シクロペンチルメチル−３−オキソ−プロピル］−Ｎ−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−ホルムアミド（３.６５ｇ、７.９６ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（１２５ｍＬ）および水（４０ｍＬ）を、４℃に冷却する。この混合物に、３０％Ｈ２Ｏ２（５.２ｍＬ、５０.９０ｍｍｏｌ）およびＬｉＯＨ一水和物（０.４０ｇ、９.５３ｍｍｏｌ）をそれぞれ加える。反応混合物を１.５時間撹拌する。温度を氷浴により１５℃未満に維持しながら、混合物を０.５ＭのＮａ２ＳＯ３でゆっくりとクエンチングする。クエンチングされた混合物をさらに３０分間撹拌し、真空中で濃縮してＴＨＦ溶媒を除去し、ＥｔＯＡｃで洗浄する。塩基性反応混合物をアンバーライトＩＲ−１２０樹脂（Ｈ＋）によりｐＨ＝４.５に酸性化する。ブラインを酸性溶液に加え、混合物を合わせてＥｔＯＡｃで抽出する。酸性溶液洗浄からの有機層を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、真空中で濃縮する。これにより、油状物として２−シクロペンチルメチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオン酸（１.２０ｇ、５０％収率）を得る。
【００９４】
３−（ベンジルオキシ−ホルミル−アミノ）−２−シクロペンチルメチル−プロピオン酸
これは、対応するＯ−ＴＨｐ保護ビルディングブロックの合成についての記載と同様にして、２−シクロペンチルメチル−アクリル酸およびＯ−ベンジルヒドロキサミンから製造される。
【００９５】
４−ベンジル−３−（３−ベンジルオキシアミノ−２−シクロペンチルメチル−プロピオニル）−オキサゾリジン−２−オン
【化２８】
2008545692.tif 000029
【００９６】
Ｎ−［３−（４−ベンジル−２−オキソ−オキサゾリジン−３−イル）−２−シクロペンチルメチル−３−オキソ−プロピル］−Ｎ−ベンジルオキシ−ホルムアミド（化合物Ａ−Ｇ、式中、Ｒ１＝シクロペンチルメチル、ＰＧ１＝ベンジル）
【化２９】
2008545692.tif 000030
【００９７】
３−（ベンジルオキシ−ホルミル−アミノ）−２−シクロペンチルメチル−プロピオン酸
【化３０】
2008545692.tif 000031
【００９８】
１−［３−ベンジルオキシ−ホルミル−アミノ）−２−シクロペンチルメチル−プロピオニル］−ピロリジン−２−カルボン酸（５−フルオロ−１−オキシ−ピリジン−２−イル）−アミド
【化３１】
2008545692.tif 000032
【００９９】
実施例２：４−フルオロ−１−｛２−［（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−メチル］−ヘキサノイル｝−ピロリジン−２−カルボン酸（５−フルオロ−１−オキシ−ピリジン−２−イル）−アミド
【化３２】
2008545692.tif 000033
一般的手順Ａにしたがって、２−［（ベンジルオキシ−ホルミル−アミノ）−メチル］−ヘキサン酸Ａ−７（Ｒ＝ｎ−ブチル）およびピロリジン−２−カルボン酸ピリジン−２−イルアミドＡ−８（Ｘ＝ＣＨＦ、ｎ＝１、Ｒ１＝５−フルオロ２−ピリジル）から標記化合物を製造する。
【０１００】
４−トランス−フルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸−［２−アミノ−５−フルオロ−ピリジン−２−イル］アミド
【化３３】
2008545692.tif 000034
Ｂｏｃ−Ｌ−Ｐｒｏ−４−Ｆ−ＯＨ（２.５ｇ、１０.７３ｍｍｏｌ、１当量）のＤＭＦ溶液（１５ｍＬ）に、ヒューニッヒ塩基（ジイソプロピルエチルアミン、略してＤＩＥＡ）（６.７３ｍＬ、３８.６１ｍｍｏｌ、３.６当量）を加え、混合物を０℃に冷却する。この後、０℃で２−アミノ−５−フルオロピリジン（１.４４ｇ、１２.８７ｍｍｏｌ、１.２当量）およびＨＡＴＵ（４.８９ｇ、１２.８７ｍｍｏｌ、１.２当量）を加える。生成した混合物を室温で１６時間撹拌する。混合物を過剰の酢酸エチルおよび１０％クエン酸間に分配する。有機層をブラインおよび飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮する。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：０〜７：３）で精製することにより、無色シロップとして標記化合物（２.５ｇ、７１％）を得る。
【０１０１】
４−トランス−フルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸−［２−アミノ−５−フルオロ−ピリジン−２−イル］アミド（塩酸塩）
【化３４】
2008545692.tif 000035
Ｂｏｃ−プロリン−４−フルオロ−ピリジンアミド（１ｇ、３.０６ｍｍｏｌ、１当量）を、室温で４ＮのＨＣｌ／ジオキサン（３０ｍＬ、１２０ｍｍｏｌ、４０当量）により処理し、そのまま１６時間撹拌する。混合物を濃縮し、残渣をトルエン２Ｘと共蒸発させ、濃縮することにより、紫がかったピンク色固体（１ｇ）を得る。
【０１０２】
１−｛２−［（ベンジルオキシ−ホルミル−アミノ）−メチル］−ヘキサノイル｝−４−トランス−フルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸−（２−アミノ−５−フルオロ−ピリジン−２−イル）−アミド
【化３５】
2008545692.tif 000036
トランス−フルオロ−プロリン−５−フルオロ−アミノピリジンアミドＨＣｌ塩（６４４ｍｇ、２.１５ｍｍｏｌ、１.２当量）のＤＭＦ溶液（１０ｍＬ）に、０℃でヒューニッヒ塩基（２ｍＬ、１０.８ｍｍｏｌ、５当量）、Versiacid  ＶＲＩ１７２（５００ｍｇ、１.７９ｍｍｏｌ、１当量）およびＨＡＴＵ（８１８ｍｇ、２.１５ｍｍｏｌ、１.２当量）を連続して加える。生成した混合物を室温で１６時間撹拌する。混合物を過剰の酢酸エチルおよび１０％クエン酸間に分配する。有機層をブラインおよび飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮する。化合物を、ＤＣＭ：アセトン（１：０〜８６：１４）中でのシリカゲルクロマトグラフィーで精製することにより、白色粉末（６３０ｍｇ、７２％）として標記化合物を得る。ＥＳ−ＭＳ：Ｃ25Ｈ30Ｆ2Ｎ4Ｏ5 についての計算値(５０４.５３); 実測値: ５０５.４ ［Ｍ＋Ｈ]。
【０１０３】
１−｛２−［（ベンジルオキシ−ホルミル−アミノ）−メチル］−ヘキサノイル｝−４−トランス−フルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸−（２−アミノ−５−フルオロ−ピリジン−Ｎ−オキシド−２−イル）−アミド
【化３６】
2008545692.tif 000037
化合物（１.２５ｇ、２.５６ｍｍｏｌ、１当量）のＤＣＭ溶液に、ＭＣＰＢＡ（１.３２ｇ、７.６８ｍｍｏｌ、３当量）を好都合には０℃で加え、反応物を１６時間撹拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ３およびＤＣＭ層間に分配する。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮する。残渣を、ＤＣＭ：アセトン（１：０〜９：１）を用いるシリカゲルクロマトグラフィーで精製することにより、標記化合物（１.２ｇ）を得る。
【０１０４】
実施例３：１−｛２−［（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−メチル］−ヘキサノイル｝−ピロリジン−２−カルボン酸ピラジン−２−イルアミド
【化３７】
2008545692.tif 000038
一般的手順Ａにしたがって、２−［（ベンジルオキシ−ホルミル−アミノ）−メチル］−ヘキサン酸Ａ−７（Ｒ＝ｎ−ブチル）およびピロリジン−２−カルボン酸ピラジン−２−アミドＡ−８（Ｘ＝ＣＨ２、ｎ＝１、Ｒ１＝２−ピラジニル）から標記化合物を製造する。
【０１０５】
実施例４：１−｛２−［（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−メチル］−ヘキサノイル｝−ピロリジン−２−カルボン酸ピリダジン−３−イルアミド
【化３８】
2008545692.tif 000039
一般的手順Ａにしたがって、２−｛［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−メチル｝−ヘキサン酸Ａ−７（Ｒ＝ｎ−ブチル）およびピロリジン−２−カルボン酸ピリダジン−３−アミドＡ−８（Ｘ＝ＣＨ２、ｎ＝１、Ｒ１＝３−ピリダジニル）から標記化合物を製造する。
【０１０６】
工程１：ピリダジン−３−イルアミン
【化３９】
2008545692.tif 000040
エタノール（１５０ｍｌ）中の６−クロロ−２−アミノ−ピリジアジン（４ｇ）およびＮａＯＨ（粉末化、１.４ｇ）の溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ（０.６ｇ）を加える。反応混合物を水素雰囲気下で１６時間撹拌する。それをセライトで濾過し、溶媒を濃縮する。生じた残渣をエーテルと磨砕することにより、既知アミノ化合物を得る。
【０１０７】
工程２：２−（ピリダジン−３−イルカルバモイル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化４０】
2008545692.tif 000041
０℃でＤＣＭ中のＢｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ（１当量）の溶液に、ゴーセズ(Ghosez)試薬（１.１当量）を加え、反応混合物を０℃で１時間撹拌した。これに、ピリジン中のアミン（１.１当量）を加え、反応混合物を室温で１６時間撹拌する。次いで、それを濃縮することにより、揮発性物質を全て除去し、過剰のＤＣＭに再溶解する。有機層を１０％クエン酸、ブラインおよびＮａＨＣＯ３で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮する。生じた残渣を、ヘキサン中の１０〜４０％酢酸エチルを用いるフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標記化合物を得る。ＨＰＬＣ：ＹＭＣ−Ｐａｋ  Ｐｒｏ  Ｃ１８、Ｓ−３□ｍ、１２０Ａ、５０×４.６ｍｍ内径カラム；勾配溶離液８.５分にわたって０％〜９０％ＭｅＣＮ、１.５ｍＬ／分；保持時間＝４.１４分。
ＥＳ−ＭＳ：Ｃ14Ｈ20Ｎ4Ｏ3 についての計算値(２９２)；実測値２９３［Ｍ＋Ｈ］。
【０１０８】
工程２：ピロリジン−２−カルボン酸ピリダジン−３−イルアミド
【化４１】
2008545692.tif 000042
ＨＰＬＣ：ＹＭＣ−Ｐａｋ  Ｐｒｏ  Ｃ１８、Ｓ−３□ｍ、１２０Ａ、５０×４.６ｍｍ内径カラム；勾配溶離液８.５分にわたって０％〜９０％ＭｅＣＮ、１.５ｍＬ／分；保持時間＝２.３９８分。
ＥＳ−ＭＳ：Ｃ９Ｈ１２Ｎ4Ｏについての計算値(１９２.１)；実測値１９３.２［Ｍ＋Ｈ］
【０１０９】
工程３：１−（２−｛[ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ]−メチル｝−ヘキサノイル）−ピロリジン−２−カルボン酸ピリダジン−３−イルアミド
【化４２】
2008545692.tif 000043
一般的手順Ａに記載された要領で、ＨＡＴＵ条件下で標記化合物を製造する。
ＨＰＬＣ：ＹＭＣ−Ｐａｋ  Ｐｒｏ  Ｃ１８、Ｓ−３□ｍ、１２０Ａ、５０×４.６ｍｍ内径カラム；勾配溶離液８.５分にわたって２０％〜９０％ＭｅＣＮ、１.５ｍＬ／分；保持時間＝３.６５５分。
ＥＳ−ＭＳ：Ｃ２２Ｈ３３Ｎ５Ｏ５についての計算値(４４７)；実測値４４８［Ｍ＋Ｈ］。
【０１１０】
実施例５：１−［２−シクロペンチルメチル−３−（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−プロピオニル］−４−フルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸（５−フルオロ−１−オキシ−ピリジン−２−イル）−アミド
【化４３】
2008545692.tif 000044
一般的手順Ａにしたがって、２−シクロペンチルメチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオン酸およびピロリジン−２−カルボン酸ピリジン−２−イルアミドＡ−８（Ｘ＝ＣＨＦ、ｎ＝１、Ｒ１＝５−フルオロ ２−ピリジル）から標記化合物を製造する。
【０１１１】
１−｛２−シクロペンチルメチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオニル｝−４−フルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸（５−フルオロ−１−オキシ−ピリジン−２−イル）−アミド
【化４４】
2008545692.tif 000045
【０１１２】
実施例６：１−［２−シクロブチルメチル−３−（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−プロピオニル］−ピロリジン−２−カルボン酸ピリダジン−３−イルアミド
【化４５】
2008545692.tif 000046
一般的手順Ａにしたがって、２−シクロブチルメチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオン酸Ａ−７（Ｒ＝シクロブチルメチル）およびピロリジン−２−カルボン酸ピリダジン−２−アミドＡ−８（Ｘ＝ＣＨ２、ｎ＝１、Ｒ１＝３−ピリダジニル）から標記化合物を製造する。
【０１１３】
実施例７：１−［２−シクロブチルメチル−３−（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−プロピオニル］−ピロリジン−２−カルボン酸ピラジン−２−イルアミド
【化４６】
2008545692.tif 000047
一般的手順Ａにしたがって、２−シクロブチルメチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオン酸Ａ−７（Ｒ＝シクロブチルメチル）およびピロリジン−２−カルボン酸ピラジン−２−アミドＡ−８（Ｘ＝ＣＨ２、ｎ＝１、Ｒ１＝２−ピラジニル）から標記化合物を製造する。
【０１１４】
実施例８：１−［２−シクロペンチルメチル−３−（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−プロピオニル］−ピロリジン−２−カルボン酸ピラジン−２−イルアミド
【化４７】
2008545692.tif 000048
一般的手順Ａにしたがって、２−シクロペンチルメチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオン酸Ａ−７（Ｒ＝シクロペンチルメチル）およびピロリジン−２−カルボン酸ピラジン−２−アミドＡ−８（Ｘ＝ＣＨ２、ｎ＝１、Ｒ１＝２−ピラジニル）から標記化合物を製造する。
【０１１５】
実施例９：４−フルオロ−１−｛２−［（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−メチル］−ヘキサノイル｝−ピロリジン−２−カルボン酸ピラジン−２−イルアミド
【化４８】
2008545692.tif 000049
一般的手順Ａにしたがって、２−［（ベンジルオキシ−ホルミル−アミノ）−メチル］−ヘキサン酸Ａ−７（Ｒ＝ｎ−ブチル）およびピロリジン−２−カルボン酸ピラジン−２−アミドＡ−８（Ｘ＝ＣＨＦ、ｎ＝１、Ｒ１＝２−ピラジニル）から標記化合物を製造する。
【０１１６】
実施例１０：１−［２−シクロペンチルメチル−３−（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−プロピオニル］−４−フルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸ピラジン−２−イルアミド
【化４９】
2008545692.tif 000050
一般的手順Ａにしたがって、２−シクロペンチルメチル−３−（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−プロピオン酸Ａ−７（Ｒ＝シクロペンチルメチル）およびピロリジン−２−カルボン酸ピラジン−２−アミドＡ−８（Ｘ＝ＣＨＦ、ｎ＝１、Ｒ１＝２−ピラジニル）から標記化合物を製造する。
【０１１７】
実施例１１：１−［２−シクロブチルメチル−３−（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−プロピオニル］−４−フルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸ピラジン−２−イルアミド
【化５０】
2008545692.tif 000051
一般的手順Ａにしたがって、２−シクロブチルメチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオン酸Ａ−７（Ｒ＝シクロブチルメチル）およびピロリジン−２−カルボン酸ピラジン−２−アミドＡ−８（Ｘ＝ＣＨＦ、ｎ＝１、Ｒ１＝２−ピラジニル）から標記化合物を製造する。
【０１１８】
実施例１での対応するシクロペンチルメチル誘導体の合成について記載した要領で、２−シクロブチルメチルマロン酸から２−シクロブチルメチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオン酸を製造する。
【０１１９】
２−シクロブチルメチル−マロン酸
【化５１】
2008545692.tif 000052
（ブロモメチル）シクロブタンから標記化合物を製造する。
【０１２０】
２−シクロブチルメチル−アクリル酸
【化５２】
2008545692.tif 000053
【０１２１】
４−ベンジル−３−（２−シクロブチルメチル−アクリロイル）−オキサゾリジン−２−オン
【化５３】
2008545692.tif 000054
【０１２２】
４−ベンジル−３−［２−シクロブチルメチル−３−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシアミノ）−プロピオニル］−オキサゾリジン−２−オン
【化５４】
2008545692.tif 000055
【０１２３】
Ｎ−［３−（４−ベンジル−２−オキソ−オキサゾリジン−３−イル）−２−シクロブチルメチル−３−オキソ−プロピル］−Ｎ−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−ホルムアミド
【化５５】
2008545692.tif 000056
【０１２４】
２−シクロブチルメチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオン酸
【化５６】
2008545692.tif 000057
【０１２５】
１−｛２−シクロブチルメチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオニル｝−４−フルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸ピラジン−２−イルアミド
【化５７】
2008545692.tif 000058
【０１２６】
実施例１２：１−［２−シクロブチルメチル−３−（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−プロピオニル］−４−フルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸ピリミジン−４−イルアミド
【化５８】
2008545692.tif 000059
一般的手順Ａにしたがって、２−シクロブチルメチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオン酸Ａ−７（Ｒ＝シクロブチルメチル）およびピロリジン−２−カルボン酸ピリマジン−４−アミドＡ−８（Ｘ＝ＣＨＦ、ｎ＝１、Ｒ１＝２−ピリミジニル）から標記化合物を製造する。
【０１２７】
実施例１３：１−［２−シクロブチルメチル−３−（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−プロピオニル］−４−フルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸ピリダジン−３−イルアミド
【化５９】
2008545692.tif 000060
一般的手順Ａにしたがって、２−シクロブチルメチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオン酸Ａ−７（Ｒ＝シクロブチルメチル）およびピロリジン−２−カルボン酸ピリダジン−３−アミドＡ−８（Ｘ＝ＣＨＦ、ｎ＝１、Ｒ１＝３−ピリダジニル）から標記化合物を製造する。
【０１２８】
（２Ｓ,４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル・４−フルオロ−２−（ピリダジン−３−イルカルバモイル）ピロリジン−１−カルボキシレート
【化６０】
2008545692.tif 000061
０℃でＤＣＭ中のＢｏｃ−Ｐｒｏ（Ｆ）−ＯＨ（５ｇ、２１.４６ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ゴーセズ試薬（３.１ｍｌ、２３.６１ｍｍｏｌ、１.１当量）を加え、反応混合物を０℃で１時間撹拌した。これに、ピリジン中のアミン（２.６５ｇ、２７.９ｍｍｏｌ、１.３当量）を０℃で加え、反応混合物を室温で１６時間撹拌する。次いで、それを濃縮することにより、揮発性物質を全て除去し、過剰のＤＣＭに再溶解する。有機層を１０％クエン酸、ＮａＣｌ（飽和）およびＮａＨＣＯ３（飽和）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮する。生じた残渣を、ジクロロメタン中１０〜１５％アセトンを用いるフラッシュクロマトグラフィーで精製することにより、標記化合物を得る。
【０１２９】
（２Ｓ,４Ｒ）−４−フルオロ−Ｎ−（ピリダジン−３−イル）ピロリジン−２−カルボキサミド
【化６１】
2008545692.tif 000062
Ｂｏｃ−保護アミドを４ＭのＨＣｌ／ジオキサン中に取り、反応物を室温で５時間撹拌する。溶媒を減圧下で除去し、残渣をエーテルで磨砕することにより、標記化合物を得る。
【０１３０】
（２Ｓ,４Ｒ）−１−（（２Ｒ）−３−シクロブチル−２−（（Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）ホルムアミド）メチル）プロパノイル）−４−フルオロ−Ｎ−（ピリダジン−３−イル）ピロリジン−２−カルボキサミド
【化６２】
2008545692.tif 000063
Versiacid（５００ｍｇ、１.７７ｍｍｏｌ、１当量）の冷ＤＭＦ溶液（１５ｍＬ）に、ＤＩＥＡ（１.７ｍｌ、９.７２ｍｍｏｌ、５.５当量）、アミン・ＨＣｌ塩（５５０ｍｇ、１.９４３ｍｍｏｌ、１.１当量）およびＨＡＴＵ（７３９ｍｇ、１.９４３ｍｍｏｌ、１.２当量）を加える。生じた反応混合物を室温で１６時間撹拌する。混合物を過剰の酢酸エチルおよび１０％クエン酸間に分配する。有機層を飽和ＮａＣｌおよび飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮する。残渣を、ＤＣＭ中１０〜２５％アセトンを用いるシリカゲルクロマトグラフィーで精製することにより、標記化合物を得る（５３％）。
【０１３１】
実施例１４：１−［２−シクロブチルメチル−３−（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−プロピオニル］−４−フルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸（２−オキシ−ピリダジン−３−イル）アミド
【化６３】
2008545692.tif 000064
一般的手順Ａにしたがって、２−シクロブチルメチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオン酸Ａ−７（Ｒ＝シクロブチルメチル）およびピロリジン−２−カルボン酸ピリダジン−１−オキソ−３−アミドＡ−８（Ｘ＝ＣＨＦ、ｎ＝１、Ｒ１＝３−ピリダジニルＮ−オキシド）から標記化合物を製造する。
【０１３２】
６−（（２Ｓ,４Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−フルオロピロリジン−２−カルボキサミド）ピリダジン・１−オキシド
【化６４】
2008545692.tif 000065
０℃でＤＣＭ中のＢｏｃ−Ｐｒｏ（Ｆ）−ＯＨ（２.０４７ｇ、８.１５４ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ゴーセズ試薬（１.２ｍｌ、８.９７ｍｍｏｌ、１.１当量）を加え、反応混合物を０℃で１時間撹拌する。これに、ピリジン中のアミン（１.２７ｇ、１１.４２ｍｍｏｌ、１.４当量）を０℃で加え、反応混合物を室温で１６時間撹拌する。次いで、それを濃縮することにより、揮発性物質を全て除去し、残渣を過剰のＤＣＭに溶解する。有機層を１０％クエン酸、ＮａＣｌ（飽和）およびＮａＨＣＯ３（飽和）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮する。生じた残渣を、ジクロロメタン中２〜１５％アセトンを用いるフラッシュクロマトグラフィーで精製することにより、標記化合物を得る（６１％）。
【０１３３】
６−（（２Ｓ,４Ｒ）−４−フルオロピロリジン−２−カルボキサミド）ピリダジン  １−オキシド
【化６５】
2008545692.tif 000066
Ｂｏｃ−保護アミドを４ＭのＨＣｌ／ジオキサン中に取り、反応物を室温で５時間撹拌する。揮発性物質を全て除去し、残渣をエーテルで磨砕することにより、標記化合物を得る。
【０１３４】
６−（（２Ｓ,４Ｒ）−１−（（２Ｒ）−３−シクロブチル−２−（（Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）ホルムアミド）メチル）プロパノイル）−４−フルオロピロリジン−２−カルボキサミド）−ピリダジン・１−オキシド
【化６６】
2008545692.tif 000067
Versiacid（５７１ｍｇ、２ｍｍｏｌ、１当量）の冷ＤＭＦ溶液（２０ｍＬ）に、ＤＩＥＡ（２.５１ｍｌ、１４.４ｍｍｏｌ、６当量）、アミン・ＨＣｌ塩（７１８ｍｇ、２.４ｍｍｏｌ、１.２当量）およびＨＡＴＵ（９１３ｍｇ、２.４ｍｍｏｌ、１.２当量）を加える。生じた反応混合物を室温で１６時間撹拌する。混合物を過剰の酢酸エチルおよび１０％クエン酸間に分配する。有機層を飽和ＮａＣｌおよび飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮する。残渣を、ＤＣＭ中１０〜２０％のアセトン、次いでＤＣＭ中２〜８％のメタノールを用いるシリカゲルクロマトグラフィーで精製することにより、標記化合物を得る（４４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：
【０１３５】
実施例１５：１−［２−シクロペンチルメチル−３−（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−プロピオニル］−４−フルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸ピリダジン−３−イルアミド
【化６７】
2008545692.tif 000068
一般的手順Ａにしたがって、２−シクロペンチルメチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオン酸Ａ−７（Ｒ＝シクロペンチルメチル）およびピロリジン−２−カルボン酸ピリダジン−２−アミドＡ−８（Ｘ＝ＣＨＦ、ｎ＝１、Ｒ１＝３−ピリダジニル）から標記化合物を製造する。
【０１３６】
（２Ｓ,４Ｒ）−１−（（２Ｒ）−３−シクロペンチル−２−（（Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）ホルムアミド）メチル）プロパノイル）−４−フルオロ−Ｎ−（ピリダジン−３−イル）ピロリジン−２−カルボキサミド
【化６８】
2008545692.tif 000069
【０１３７】
実施例１６：１−［２−シクロペンチルメチル−３−（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−プロピオニル］−４−フルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸（２−オキシ−ピリダジン−３−イル）−アミド
【化６９】
2008545692.tif 000070
一般的手順Ａにしたがって、２−シクロペンチルメチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオン酸Ａ−７（Ｒ＝シクロペンチルメチル）およびピロリジン−２−カルボン酸ピリダジン−２−アミドＡ−８（Ｘ＝ＣＨＦ、ｎ＝１、Ｒ１＝３−ピリダジニル・Ｎ−オキシド）から標記化合物を製造する。
【０１３８】
６−アミノピリダジン・１−オキシド
【化７０】
2008545692.tif 000071
アセトン中６−アミノピリダジンの溶液に、アセトン中のＭＣＰＢＡ（１当量）の溶液を一度で加える。反応混合物をそのまま室温で１時間撹拌する。溶媒を除去し、エーテルを残渣に加える。固体を濾過し、乾燥することにより、標記化合物を得る。これを次の工程でそのまま使用する。
【０１３９】
６−（（２Ｓ,４Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−フルオロピロリジン−２−カルボキサミド）ピリダジン・１−オキシド
【化７１】
2008545692.tif 000072
０℃でＤＣＭ中のＢｏｃ−Ｐｒｏ（Ｆ）−ＯＨ（２.０４７ｇ、８.１５４ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ゴーセズ試薬（１.２ｍｌ、８.９７ｍｍｏｌ、１.１当量）を加え、反応混合物を０℃で１時間撹拌する。これに、ピリジン中のアミン（１.２７ｇ、１１.４２ｍｍｏｌ、１.４当量）を０℃で加え、反応混合物を室温で１６時間撹拌する。次いで、それを濃縮することにより、揮発性物質を全て除去し、残渣を過剰のＤＣＭに溶解する。有機層を１０％クエン酸、ＮａＣｌ（飽和）およびＮａＨＣＯ３（飽和）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮する。生じた残渣を、ジクロロメタン中２〜１５％アセトンを用いるフラッシュクロマトグラフィーで精製することにより、標記化合物を得る（６１％）。
【０１４０】
６−（（２Ｓ,４Ｒ）−４−フルオロピロリジン−２−カルボキサミド）ピリダジン・１−オキシド
【化７２】
2008545692.tif 000073
Ｂｏｃ−保護アミドを４ＭのＨＣｌ／ジオキサン中に取り、反応物を室温で５時間撹拌する。揮発性物質を全て除去し、残渣をエーテルで磨砕することにより、標記化合物を得る。
【０１４１】
６−（（２Ｓ,４Ｒ）−１−（（２Ｒ）−３−シクロペンチル−２−（（Ｎ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）ホルムアミド）メチル）プロパノイル）−４−フルオロピロリジン−２−カルボキサミド）−ピリダジン・１−オキシド
【化７３】
2008545692.tif 000074
【０１４２】
実施例１７：１−［２−シクロヘキシルメチル−３−（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−プロピオニル］−４−フルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸ピリダジン−３−イルアミド
【化７４】
2008545692.tif 000075
一般的手順Ａにしたがって、２−シクロヘキシルメチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオン酸Ａ−７（Ｒ＝シクロヘキシルメチル）およびピロリジン−２−カルボン酸ピリダジン−３−アミドＡ−８（Ｘ＝ＣＨＦ、ｎ＝１、Ｒ１＝３−ピリダジニル）から標記化合物を製造する。
【０１４３】
実施例１において対応するシクロヘキシルメチルマロン酸の合成について記載した要領で、２−シクロヘキシルメチルマロン酸から２−シクロヘキシルメチル−３−（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−プロピオン酸ビルディングブロックを製造する。
【０１４４】
２−シクロヘキシルメチル−マロン酸
【化７５】
2008545692.tif 000076
（ブロモメチル）シクロヘキサンから標記化合物を製造する。
【０１４５】
２−シクロヘキシルメチル−アクリル酸
【化７６】
2008545692.tif 000077
【０１４６】
４−ベンジル−３−（２−シクロヘキシルメチル−アクリロイル）−オキサゾリジン−２−オン
【化７７】
2008545692.tif 000078
【０１４７】
４−ベンジル−３−［２−シクロヘキシルメチル−３−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシアミノ）−プロピオニル］−オキサゾリジン−２−オン）。
【化７８】
2008545692.tif 000079
【０１４８】
Ｎ−［３−（４−ベンジル−２−オキソ−オキサゾリジン−３−イル）−２−シクロヘキシルメチル−３−オキソ−プロピル］−Ｎ−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−ホルムアミド
【化７９】
2008545692.tif 000080
【０１４９】
実施例１８：１−｛４−シクロプロピル−２−［（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−メチル］−ブチリル｝−４−フルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸ピラジン−２−イルアミド
【化８０】
2008545692.tif 000081
一般的手順Ａにしたがって、２−シクロプロピルエチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオン酸Ａ−７（Ｒ＝シクロプロピルエチル）およびピロリジン−２−カルボン酸ピラジン−２−アミドＡ−８（Ｘ＝ＣＨＦ、ｎ＝１、Ｒ１＝２−ピラジニル）から標記化合物を製造する。
【０１５０】
実施例１において対応するシクロペンチルメチルメチルマロン酸の合成について記載した要領で、２−シクロプロピルエチルマロン酸から２−シクロプロピルエチル−３−（ホルミル−ヒドロキシ−アミノ）−プロピオン酸ビルディングブロックを製造する。
【０１５１】
（ブロモエチル）シクロプロパン
【化８１】
2008545692.tif 000082
２−シクロプロピルエタノールから標記化合物を製造する。
【０１５２】
２−シクロプロピルエチル−マロン酸
【化８２】
2008545692.tif 000083
【０１５３】
２−シクロプロピルエチル−アクリル酸
【化８３】
2008545692.tif 000084
【０１５４】
４−ベンジル−３−（２−シクロプロピルエチル−アクリロイル）−オキサゾリジン−２−オン
【化８４】
2008545692.tif 000085
【０１５５】
４−ベンジル−３−［２−シクロプロピルエチル−３−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシアミノ）−プロピオニル］−オキサゾリジン−２−オン
【化８５】
2008545692.tif 000086
【０１５６】
Ｎ−［３−（４−ベンジル−２−オキソ−オキサゾリジン−３−イル）−２−シクロプロピルエチル−３−オキソ−プロピル］−Ｎ−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−ホルムアミド
【化８６】
2008545692.tif 000087
【０１５７】
２−シクロプロピルエチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオン酸
【化８７】
2008545692.tif 000088
【０１５８】
１−｛２−シクロプロピルエチル−３−［ホルミル−（テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ）−アミノ］−プロピオニル｝−４−フルオロ−ピロリジン−２−カルボン酸ピラジン−２−イルアミド
【化８８】
2008545692.tif 000089
【０１５９】
実施例１９：ペプチドデホルミラーゼ活性の阻害
ＰＤＦ／ＦＤＨ共活性測定法（Lazennec et al.、Anal.Biochem.、第２２４巻、１８０−１８２頁（１９９７））を使用する。この共活性測定法では、ＰＤＦによりその基質ｆＭＡＳから放出されるホルメートを、共役酵素ＦＤＨにより酸化し、１分子のＮＡＤ＋からＮＡＤＨに還元すると、３４０ｎｍでの吸収の増加が誘発される。測定は全て、ハーフエリア９６ウェルのマイクロタイタープレート（Corning）において、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７.２、１０ｍＭのＮａＣｌ、０.２ｍｇ／ｍＬのＢＳＡの緩衝液中、室温で実施される。０.５単位／ｍＬのＦＤＨ、１ｍＭのＮＡＤ＋および所望濃度のｆＭＡＳの混合物を加えることにより、反応を開始させる。ＩＣ５０（酵素活性の５０％を阻害するのに必要とされる濃度）値を測定するため、ＰＤＦを１０分間様々な濃度の阻害剤とプレインキュベーションし、４ｍＭのｆＭＡＳを含む反応混合物を加えることにより、脱ホルミル化反応を開始させる。SpectraMax プレートリーダー（Molecular Devices、サニーベール、カリフォルニア）を用いて、反応初速度ｙを、３４０ｎｍでの吸収増加初速度として測定する。酵素活性の５０％が阻害される阻害剤濃度［Ｉｎ］、ＩＣ５０を、下式を用いて計算する：
【数１】
2008545692.tif 000090
（式中、ｙ０は、阻害剤の非存在下における反応速度である）
ｙ＝ｙ０／２のときの［Ｉｎ］でのＩＣ５０についてこの等式を解くと、ＩＣ５０が得られる。ＩＣ５０は、市販のソフトウェアパッケージ（Deltapoint, Inc.、シカゴ、イリノイ）を用いることにより、非線型最小２乗回帰フィットに基づいて算出される。
【０１６０】
この測定法を用いて、様々な化合物のＩＣ５０を測定する。様々な化合物についてのＩＣ５０を、金属イオンとしてニッケルおよび亜鉛を含むデホルミラーゼ酵素に対して測定する。亜鉛含有デホルミラーゼについて測定された式（Ｉ）で示される好ましい化合物のＩＣ５０値は、約０.００１μＭ〜約０.２μＭの範囲である。ニッケル含有デホルミラーゼについて測定された式（Ｉ）で示される好ましい化合物のＩＣ５０値は、約０.００５μＭ〜約３μＭの範囲である。
【０１６１】
実施例２０：抗菌活性試験法
９６ウェルのフォーマットプレートにおける微量希釈方法を用いて、最小阻害濃度（ＭＩＣ）を測定する。化合物を５または１０ｍｇ／ｍＬでＤＭＳＯに懸濁し、使用時まで４℃で貯蔵する。それらをミュラー-ヒントンブロス（ＭＨＢ）またはトリプチカーゼ大豆ブロス（ＴＳＢ）中で希釈し、ＭＩＣ測定に使用する。試験濃度範囲は、２倍希釈系を用いた６４〜０.０６２５μｇ／ｍＬ最終濃度である。
【０１６２】
イノキュラムを、トリプチカーゼ大豆寒天（ＴＳＡ）において生育させた細胞から調製し、３５℃で一晩インキュベーションし、５〜１０コロニーを用いて、ＭＨＢまたはＴＳＢブロスに接種し、培養物を一晩３５℃でインキュベーションする。一晩培養物を１：１０に希釈し、３５℃で１時間インキュベーションし、適切なイノキュラムサイズに希釈し、ブロスおよび試験化合物を含むウェルに適用する。イノキュラムのサイズは２×１０４ＣＦＵ／ｍＬである。
【０１６３】
プレートを３５℃で４８時間インキュベーションし、細菌について１８時間のインキュベーション後、ＭＩＣを記録する。ＭＩＣは、インキュベーション後に肉眼で見える成長をもたらさなかった化合物の最低濃度と定義される。
【０１６４】
式（Ｉ）の様々な好ましい化合物についての最小阻害濃度は、ヘモフィルス・インフルエンザエ（H.influenza）（４株）に対しては約０.２５μｇ／ｍＬ〜約３２μｇ／ｍＬ、スタフィロコッカス・アウレウス（S.aureus）（４株）に対しては約０.００１μｇ／ｍＬ〜８μｇ／ｍＬより大、ストレプトコッカス・ニューモニエ（S.pneumonia）（４株）に対しては約０.０１６μｇ／ｍＬ〜約１６μｇ／ｍＬ、およびモラクセラ・カタラーリス(M.catarrhalis)に対しては約０.００８μｇ／ｍＬ〜約１６μｇ／ｍＬの範囲である。デホルミラーゼ酵素は、エシェリキア・コリ（E.coli）から得られる。
【０１６５】
以下のものは、式（Ｉ）の化合物を含む代表的な医薬製剤である。
実施例２１：錠剤の処方
以下の成分を完全に混合し、単一割線錠剤に圧縮する：
錠剤の成分 分量（ｍｇ）
本発明化合物                  ４００
コーンスターチ                  ５０
クロスカルメロースナトリウム    ２５
乳糖                          １２０
ステアリン酸マグネシウム          ５
【０１６６】
実施例２２：カプセル剤の処方
以下の成分を完全に混合し、ハードゼラチンカプセルに充填する。
カプセル剤の成分 分量（ｍｇ）
本発明化合物              ２００
乳糖、噴霧乾燥            １４８
ステアリン酸マグネシウム      ２
【０１６７】
実施例２３：懸濁液の処方
以下の成分を混合して、経口投与用懸濁液を形成する。
成分 量
本発明化合物                        １.０ｇ
フマル酸                            ０.５ｇ
塩化ナトリウム                      ２.０ｇ
メチルパラベン                      ０.１５ｇ
プロピルパラベン                    ０.０５ｇ
グラニュー糖                      ２５.０ｇ
ソルビトール（７０％溶液）        １３.００ｇ
Veegum K（ビーガムK、Vanderbilt Co   １.０ｇ
香味料                              ０.０３５ｍＬ
着色料                              ０.５ｍｇ
蒸留水                      適量加えて１００ｍＬにする
【０１６８】
実施例２４：注射可能製剤
以下の成分を混合して、注射可能製剤を形成する：
成分 量
本発明化合物                          ０.２〜２０ｍｇ
酢酸ナトリウム緩衝液、０.４Ｍ          ２０ｍＬ
ＨＣｌ（１Ｎ）またはＮａＯＨ（１Ｎ）    適量加えて適切なｐＨにする
水（蒸留、滅菌）    適量加えて２０ｍＬにする
【０１６９】
実施例２５：坐薬の処方
本発明化合物を、Witepsol（登録商標）Ｈ−５（飽和植物性脂肪酸のトリグリセリド；Riches-Nelson,Inc.、ニューヨーク）と混合することにより、以下の組成を有する総重量２.５ｇの坐薬を製造する。
本発明化合物                      ５００ｍｇ
Witepsol（登録商標）Ｈ−１５
残量
【手続補正書】
【提出日】平成20年1月25日(2008.1.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2008545692.tif 000099
［式中、
Ｒ１は、水素、アルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールであり、
Ｒ３は、水素、ハロゲンまたはアルコキシであり、
Ｒ４は、アリールまたはヘテロアリールであるか、または
ｎは０〜３である。
ただし、Ｒ１がシクロアルキルであり、および／またはＲ４が、環に２、３または４個の窒素へテロ原子を有する所望により置換されていてもよい６員単環式ヘテロアリール環である場合、１個またはそれ以上の環窒素へテロ原子は所望により酸化されていてもよい］
で示される化合物またはその塩またはそのプロドラッグ。
【請求項２】
Ｒ３がフッ素、塩素またはヨウ素から選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１がシクロアルキルである、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ４が、式（II）
【化２】
2008545692.tif 000100
［式中、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８およびＲ９は、各々独立して水素、アルキル、置換アルキル、フェニル、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシである］
で示されるヘテロアリールである、請求項１記載の化合物またはその塩またはそのプロドラッグ。
【請求項５】
Ｒ４が、式（II．１）
【化３】
2008545692.tif 000101
で示されるヘテロアリールであり、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８が、水素であり、Ｒ８がフルオロである、請求項１記載の化合物またはその塩またはそのプロドラッグ。
【請求項６】
Ｒ４が、式（II．２）
【化４】
2008545692.tif 000102
で示されるヘテロアリールであり、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８が水素である、請求項１記載の化合物、その塩またはそのプロドラッグ。
【請求項７】
Ｒ４が、式（II．３）
【化５】
2008545692.tif 000103
で示されるヘテロアリールであり、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８が水素である、請求項１記載の化合物、その塩またはそのプロドラッグ。
【請求項８】
Ｒ４が、式（II．４）
【化６】
2008545692.tif 000104
で示されるヘテロアリールであり、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８が水素である、請求項１記載の化合物、その塩またはそのプロドラッグ。
【請求項９】
Ｒ１が、シクロヘキシル、シクロペンチル、シクロブチルまたはシクロプロピルから選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ１がｎ−ブチルである、請求項１記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ４が、２−アミノ、５−フルオロピリジンＮ−オキシド、２−ピラジン、３−ピリダジン、３−ピリミジン、４−ピリミジンまたは３−ピリダジンＮ−オキシドから選択される、請求項９記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ４が、２−アミノ、５−フルオロピリジンＮ−オキシド、２−ピラジン、３−ピリダジン、３−ピリミジン、４−ピリミジンまたは３−ピリダジンＮ−オキシドから選択される、請求項１０記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ３がフッ素である、請求項９記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ３がフッ素である、請求項１０記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ４が、式（II．５）
【化７】
2008545692.tif 000105
で示されるヘテロアリールであり、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８が水素である、請求項１記載の化合物、その塩またはそのプロドラッグ。
【国際調査報告】
2008545692.tif 000106
2008545692.tif 000107
2008545692.tif 000108
2008545692.tif 000109