(57)【要約】  本発明は、抗炎症活性を有するマクロライド化合物に関し、より詳細には、抗炎症活性を有するマクロライド誘導体の新規な安定結晶体に関する。また本発明は、該結晶体の調製プロセス、該結晶体を有効成分とする医薬組成物、及び該結晶体の炎症性疾患の治療のための使用に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
2008544970.tif 000005
で表される化合物のＩ型結晶体であって、２θ値約４．９、約８．５、約９．１、約９．６、約１０．３、約１１．１、約１４．５、約１７．０、約１８．２及び約１９．３を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする結晶体。
【請求項２】
図１に示す粉末Ｘ線回折パターンに実質的に従う粉末Ｘ線回折パターンを示す、請求項１に記載の結晶体。
【請求項３】
示差走査熱量測定曲線において融解開始点が１６３〜１７４℃の範囲にあることを特徴とする、先の請求項の一項に記載の結晶体。
【請求項４】
示差走査熱量測定曲線において融解開始点が１６３〜１６８℃の範囲にあることを特徴とする、請求項３に記載の結晶体。
【請求項５】
式Ｉで表される化合物のＩＩ型結晶体であって、２θ値約１１．９、約１３．４、約１３．９、約１４．６、約１５．３、約１６．４、約１７．４、約１８．８、約１９．０、約１９．５、約２１．１及び約２２．７を有する粉末Ｘ線回折パターンを特徴とする結晶体。
【請求項６】
図２に示す粉末Ｘ線回折パターンに実質的に従う粉末Ｘ線回折パターンを示す、請求項５に記載の結晶体。
【請求項７】
示差走査熱量測定曲線において融解開始点が２１８〜２２６℃の範囲にあることを特徴とする、請求項５又は６に記載の結晶体。
【請求項８】
示差走査熱量測定曲線において融解開始点が２１８〜２２３℃の範囲にあることを特徴とする、請求項７に記載の結晶体。
【請求項９】
Ｉ型結晶体の調製プロセスであって、式Ｉで表される化合物の酢酸エチル溶液にメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを添加することと、得られた反応混合物を冷却することと、結晶化した生成物を濾過し乾燥させることと、を含むプロセス。
【請求項１０】
前記Ｉ型結晶体の水懸濁液を加熱することによりＩ型結晶体からＩＩ型結晶体に変換することを含む、ＩＩ型結晶体の調製プロセス。
【請求項１１】
前記懸濁液を３０〜３５℃の範囲の温度まで加熱する、請求項１０に記載のプロセス。
【請求項１２】
式Ｉで表される化合物をメチルエチルケトンから結晶化させることを含む、ＩＩ型結晶体の調製プロセス。
【請求項１３】
溶液にＩＩ型結晶体をシード添加することを更に含む、請求項１２に記載のプロセス。
【請求項１４】
薬物として使用するためのＩ型結晶体。
【請求項１５】
薬物として使用するためのＩＩ型結晶体。
【請求項１６】
医薬として許容される担体と共にＩ型結晶体を有効成分として治療有効量含む医薬組成物。
【請求項１７】
医薬として許容される担体と共にＩＩ型結晶体を有効成分として治療有効量含む医薬組成物。
【請求項１８】
炎症性疾患の治療に有用な請求項１６又は１７に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
呼吸器疾患の治療に有用な請求項１８に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
胃腸疾患の治療に有用な請求項１８に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗炎症活性を有するマクロライド化合物に関し、より詳細には、抗炎症活性を有するマクロライド誘導体の新規な安定結晶体に関する。また本発明は、該結晶体の調製プロセス、該結晶体を有効成分とする医薬組成物、及び該結晶体の炎症性疾患の治療のための使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
多くの抗生物質、特に１４員環構造を有するエリスロマイシン系マクロライド類は、抗菌活性に加え抗炎症活性を有することが知られている（非特許文献１）。
【０００３】
エリスロマイシンは、天然に産生されるマクロライド（非特許文献２）であり、グラム陽性菌や種々のグラム陰性菌、マイコプラズマによる感染症の治療に広く利用されてきた。
【０００４】
最近、科学界においてエリスロマイシンとその誘導体の抗炎症活性及び免疫調節能が注目されている（非特許文献３）。
【０００５】
この活性については、臨床研究並びにｉｎ ｖｉｖｏ及びｉｎ ｖｉｔｒｏ実験に関連して多くの文献報告がなされている。
【０００６】
しかしながら、従来のマクロライド化合物はその強い抗菌活性により、該化合物を使用するとその耐性菌株が急速に発達する可能性があるため、病原微生物に起因しない炎症プロセスの長期的治療へと用途を広げることはできない。
【０００７】
上述の技術的問題点は、同一出願人による特許文献１（ＷＯ’１５３）において成功裏に解決された。同出願明細書には、抗炎症活性を有し且つ抗生物質活性を有さないマクロライド誘導体が開示されている。
【０００８】
特に、式：
【０００９】
【化１】
2008544970.tif 000002
【００１０】
で表される化合物（９Ｓ）−３−デスクラジノシル−３’−デスメチル−３’−アセチル−９−デオキソ−９−デヒドロ−エリスロマイシンＡ（以下、「本化合物」と称する）はアモルファスな固体として得られる。
【００１１】
物質が２種類以上の結晶構造を伴い結晶化することを多形現象といい、特定の結晶体を多形体という。
【００１２】
ＷＯ’１５３においては、本化合物に結晶多形体が存在しうるかどうかは開示も示唆もされていない。
【００１３】
当業界においては、同一の活性化合物でも固体形態が異なると、溶解性、溶解速度及び／又は棚持ち性等の物性が異なる場合があり、これが効能の相違の原因となり得ることが知られている。
【００１４】
更に、ある化合物の固体形態が結晶状態かアモルファス状態かによってその物性が異なることは、化学的医薬的に見て、その化合物の生産性に大きく影響することがあり、特に工業規模で調製又は使用際には影響が大きい。
【００１５】
例えば薬剤物質は、できる限り高純度で提供できることが重要である。
【００１６】
通常、アモルファス物質は結晶体に比べて取扱いや配合が困難であり、安定性や不純物に関する問題を伴うことが多い。
【００１７】
従って、容易に単離できると共に薬物としての使用に特に適している実質的に安定な結晶体として本化合物を得ることは、当業者とって望ましい。
【００１８】
ＷＯ’１５３は、エリスロマイシンから本化合物のアモルファス体を効率的に製造する方法を提供している。
【特許文献１】ＷＯ２００４／０１３１５３号パンフレット
【非特許文献１】Clin.Immunother., (1996), 6, 454−464
【非特許文献２】メルクインデックス、第１３版、No.3714、654ページ
【非特許文献３】Journal of Antimicrobial Chemotherapy, (1998), 41, Suppl.B, 37−46
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題及び課題を解決するための手段】
【００１９】
本発明者らは、適切な反応条件と溶媒を用いることにより、本化合物を良好な収率且つ純度で安定な固体結晶体として反応混合物から単離することができることを見出した。
【００２０】
多形体の結晶性は粉末試料のＸ線回折を測定することにより確認した。
【００２１】
従って本発明の目的は、本化合物の安定結晶体（以下、Ｉ型結晶体と称する）を提供することにある。
【００２２】
Ｉ型結晶体は、図１に示す粉末Ｘ線回折パターンに実質的に従うパターンを示すことができる。
【００２３】
回折ピークの２θ値とその相対強度を次の表１に示す。
【００２４】
【表１】
2008544970.tif 000003
【００２５】
本化合物のＩ型結晶体は、２θ値約４．９、約８．５、約９．１、約９．６、約１０．３、約１１．１、約１４．５、約１７．０、約１８．２及び約１９．３を有する粉末Ｘ線回折パターンを示すことを特徴とする。Ｉ型結晶体は更に、示差走査熱量測定曲線において融解開始点が１６３〜１７４℃の範囲（開始：１６８．２℃、ピーク：１７４．８℃）にあることを特徴とする。
【００２６】
Ｉ型結晶体は、示差走査熱量測定曲線において融解開始点が１６３〜１６８℃の範囲にあることが好ましい。
【００２７】
Ｉ型結晶体は、ＷＯ’１５３で得られた公知のアモルファスな固体に比べて、上述の加工性や安定性に関する必要条件をより十分に満足する。更に驚くべきことには、本化合物をより安定な結晶体として得ることができることを見出した。
【００２８】
従って本発明の更なる目的は、本化合物の安定結晶体（以下、ＩＩ型結晶体と称する）を提供することにある。
【００２９】
ＩＩ型結晶体は、図２に示す粉末Ｘ線回折パターンに実質的に従うパターンを示すことができる。
【００３０】
回折ピークの２θ値とその相対強度を次の表２に示す。
【００３１】
【表２】
2008544970.tif 000004
【００３２】
本化合物のＩＩ型結晶体は、２θ値約１１．９、約１３．４、約１３．９、約１４．６、約１５．３、約１６．４、約１７．４、約１８．８、約１９．０、約１９．５、約２１．１及び約２２．７を有する粉末Ｘ線回折パターンを示すことを特徴とする。
【００３３】
ＩＩ型は更に、示差走査熱量測定曲線において融解開始点が２１８〜２２６℃の範囲（開始：２２２．７℃、ピーク：２２５．０℃）にあることを特徴とする。
【００３４】
ＩＩ型結晶体は、示差走査熱量測定曲線において融解開始点が２１８〜２２３℃の範囲にあることが好ましい。
【００３５】
ＩＩ型結晶体は熱力学的活性が低いことを特徴とし、従って、例えばＩ型結晶体よりも熱力学的に安定（特に生物学的流体において）であるという有利な性質を有する。
【００３６】
ＩＩ型結晶体は、工業規模で好便に適用可能なプロセスにより良好な収率且つ高純度で反応混合物から単離され、その熱力学的安定性から薬物としての使用に特に適している。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３７】
本発明は更に、反溶剤析出プロセスにより生成物を単離するＩ型結晶体の調製プロセスを提供する。
【００３８】
ＷＯ’１５３の第２合成経路において本化合物は、エリスロマイシンＡから出発して９位ケト基の還元、３’位窒素原子のモノ脱メチル化、クラジノースの加水分解及び得られたアミンのアセチル化を行い調製した。
【００３９】
アセチル化段階終了時、本化合物の乾燥残渣を酢酸エチルに溶解し、不純物は希クエン酸溶液で洗浄した。
【００４０】
得られた有機相を濾過し溶媒を蒸発させた。
【００４１】
目的とするＩ型結晶体を単離するためには、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを反溶剤として本化合物の酢酸エチル溶液に添加する。
【００４２】
従って本発明の更なる目的は、Ｉ型結晶体の調製プロセスであって、本化合物の酢酸エチル溶液にメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを添加することと、得られた反応混合物を冷却することと、結晶化した生成物を濾過し乾燥させることと、を含むプロセスを提供することにある。
【００４３】
例えばＩ型結晶体の調製は、ＷＯ’１５３に記載の手続に従って得られる本化合物の乾燥残渣を酢酸エチルに溶解させ、得られた溶液にメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを反溶剤として添加することにより行う。
【００４４】
或いは、本化合物を含有する溶剤／反溶剤混合物（即ち、酢酸エチル／メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを含む混合物）を、アセチル化段階から直接得られる本化合物溶液にメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを添加することにより得る。
【００４５】
即ち、本化合物溶液は反溶剤析出における出発物質として好ましく、これはアセチル化段階の後処理から直接得られる反応混合物である。
【００４６】
酢酸エチルとメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルの重量比は約１：１（ｗ／ｗ）であることが好ましい。
【００４７】
反溶剤の添加は約５０℃の温度で行うことが好ましい。
【００４８】
酢酸エチル溶液中の生成物濃度は約３０〜４０重量％であることが好ましい。
【００４９】
得られた混合物は、約１０℃まで０．０８℃／分の降温プロセスで３時間かけて冷却することが好ましい。
【００５０】
本発明に係るプロセスの実際の実施形態は、酢酸エチル溶液を生成物濃度が３０〜４０重量％に達するまで蒸発させることと、室温にて低速攪拌下に維持することと、を含む。生成物の析出が始まり、得られた懸濁液を約５０℃まで加熱し、次いでメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを添加し、約３時間後に反応混合物を約１０℃まで冷却する。生じた固体を濾過し、酢酸エチル／メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１／１）で洗浄し、真空乾燥させる。これにより生成物がＩ型結晶体として単離される。
【００５１】
本発明は更に、Ｉ型結晶体からより安定なＩＩ型結晶体への変換プロセスを提供する。
【００５２】
従って本発明の更なる目的は、ＩＩ型結晶体の調製プロセスであって、前記Ｉ型結晶体の水懸濁液を加熱することによりＩ型結晶体からＩＩ型結晶体に変換することを含むプロセスを提供することにある。
【００５３】
懸濁液の流動性を向上させ、攪拌や濾過時に起こり得る問題点を回避するために、水／基質の重量比は約１５：１（ｗ／ｗ）であることが好ましい。
【００５４】
懸濁液は３０〜３５℃の範囲の温度まで加熱することが好ましい。
【００５５】
本発明に係るプロセスの実際の実施形態は、Ｉ型結晶体の水懸濁液を約３０〜３５℃の温度まで加熱することと、同温にて約１日間攪拌下に維持することと、室温まで冷却することと、反応混合物を濾過することと、水洗し真空乾燥させることと、を含む。これにより生成物がＩＩ型結晶体として単離される。
【００５６】
本発明は更に、動的な（kinetic）Ｉ型結晶体の単離とその後の該結晶体の変換を行わない熱力学的に安定なＩＩ型結晶体の調製プロセスを提供する。
【００５７】
本発明者らは、熱力学的に安定なＩＩ型結晶体をメチルエチルケトンから結晶化させることにより、該結晶体を直接析出させることができることを見出した。
【００５８】
従って本発明の更なる目的は、メチルエチルケトンから本化合物を結晶化させることを含むＩＩ型結晶体の調製プロセスを提供することにある。
【００５９】
例えばＩＩ型結晶体の調製は、ＷＯ’１５３に記載の手続に従って得られる本化合物の乾燥残渣をメチルエチルケトンに溶解させ、得られた溶液を結晶化に付すことにより行う。
【００６０】
或いは、本発明の結晶化における出発物質として好ましい本化合物のメチルエチルケトン溶液は、従来法により酢酸エチルからメチルエチルケトンに変更するアセチル化段階の後処理から直接得られる反応混合物である。
【００６１】
本化合物のメチルエチルケトン溶液は、酢酸エチルの残量が１５重量％未満であることが好ましい。
【００６２】
本化合物のメチルエチルケトン溶液は、生成物濃度が２５〜５０重量％に達するまで濃縮することが好ましい。
【００６３】
前記溶液は、生成物濃度が約３６重量％に達するまで濃縮することがより好ましい。
【００６４】
生成物の析出を促進するためには、ＩＩ型結晶体のシード添加が有用な場合もある。
【００６５】
前記溶液へのシード添加を室温にて行った後に、ＩＩ型結晶体の析出に好適な溶液濃度が得られるまで蒸発させることが好ましい。
【００６６】
前記の好適な濃度に達し生成物が析出し始めたら、得られた懸濁液を約７５℃の温度で数時間維持することが好ましい。
【００６７】
得られた混合物を約０℃まで５時間かけて冷却し、これを同温にて約１時間維持することが好ましい。
【００６８】
本発明に係るプロセスの実際の実施形態は、ＷＯ’１５３に記載のアモルファスな固体として得られる本化合物をメチルエチルケトンに溶解させることを含む。
【００６９】
得られた溶液は、生成物濃度が約３６重量％になるまで蒸発させる。約７５℃まで冷却した後、反応混合物を数時間攪拌下に維持する。次に、この混合物を０℃まで５時間かけて冷却し同温にて約１時間維持する。得られた混合物を濾過しメチルエチルケトンで洗浄する。生成物がＩＩ型結晶体として単離される。
【００７０】
本発明に係るプロセスの他の実際の実施形態は、アセチル化段階の後処理から得られる反応混合物の溶媒を酢酸エチルからメチルエチルケトンに変更すること含む。濾過とメチルエチルケトンによる洗浄とを行った後、溶液にＩＩ型結晶体をシード添加し得られた混合物を生成物濃度が約３６重量％になるまで蒸発させる。約７５℃まで冷却した後、反応混合物を数時間攪拌下に維持する。次に、この混合物を０℃まで５時間かけて冷却し同温にて約１時間維持する。得られた混合物を濾過しメチルエチルケトンで洗浄する。生成物がＩＩ型結晶体として単離される。
【００７１】
当業者であれば、本発明のメチルエチルケトンからの結晶化プロセスは、Ｉ型結晶体からＩＩ型結晶体を調製する場合にも有用であることが理解されよう。
【００７２】
本発明に係る化合物は抗生物質活性を欠く抗炎症性マクロライドであるので、各種炎症性疾患の治療及び予防に有用である。
【００７３】
従って本発明の更なる目的は、前記本化合物のＩ型結晶体の薬物としての使用にある。
【００７４】
また、本発明の更なる目的は、前記本化合物のＩＩ型結晶体の薬物としての使用にある。
【００７５】
上述した疾患の治療又は予防に使用するための本発明化合物は、経口、直腸、舌下腺、非経口、局所的、経皮的及び吸入投与に適した医薬組成物として使用することが好ましい。
【００７６】
従って本発明の他の目的は、医薬として許容される担体と共に本化合物のＩ型結晶体を有効成分として治療有効量含む医薬組成物を提供することにある。
【００７７】
また、本発明の他の目的は、医薬として許容される担体と共に本化合物のＩＩ型結晶体を有効成分として治療有効量含む医薬組成物を提供することにある。
【００７８】
本発明に係る医薬組成物は、液滴、シロップ、溶液、注射液（即使用可能な形態或いは凍結乾燥調製物を希釈して使用する形態）等、経口投与及び／又は非経口投与に好適な液体；錠剤、カプセル剤、顆粒剤、粉剤、ペレット剤、膣座剤、座薬、クリーム、軟膏、ジェル、膏薬（unguents）等の固体又は半固体；更には、吸入や経皮投与用の溶液、懸濁液、乳液その他の形態とすることができる。
【００７９】
本発明医薬組成物には、その種類に応じて本発明化合物の治療有効量のほかに、医薬用途で用いられる固体又は液体の賦形剤や希釈剤を含有させることができ、また、医薬組成物の調製に通常用いられるその他の添加剤（例えば増粘剤、結合剤、潤滑剤、崩壊剤、矯味矯臭剤、着色剤等）も任意に含有させることができる。
【００８０】
本発明に係る医薬組成物は、通常用いられる技法により調製することができる。
図１はＩ型結晶体の粉末Ｘ線回折チャートである。
図２はＩＩ型結晶体の粉末Ｘ線回折チャートである。
図３はＩ型結晶体のＤＳＣサーモグラムである。
図４はＩＩ型結晶体のＤＳＣサーモグラムである。
【００８１】
ＤＳＣサーモグラムはＴＡＱ１００（１０℃／分、アルミパン）を用いて得た。融解開始点はベースラインからの変化が顕著となる点と定義し、これを測定した。
【００８２】
当業者であれば、融解点の精確な値は化合物の純度や試料重量、加熱速度、粒径に影響されることを理解されよう。
【００８３】
本発明のＩ型及びＩＩ型結晶体のＸ線回折チャートは、照射源をＣｕＫα−１とし、Ｘ’Ｐｅｒｔ Ｐｈｉｌｉｐｓ（ブラッグ−ブレンターノ型（Bragg-Brentano geometry））Ｘ線回折計を用いて得た。
【００８４】
各ピークの位置と強度は、"Ｐｒｏｇｒａｍ Ｘ’Ｐｅｒｔ Ｐｈｉｌｉｐｓ Ａｎａｌｉｔｙｃａｌ"を用いて測定した。
【００８５】
粉末Ｘ線回折ピークの相対強度は、試料の調製技法や試料載置手続、使用する特定の機器に応じて変化することがある。
【００８６】
本発明をその好ましい実施形態を示して説明したが、当業者であれば、本発明の精神から逸脱することなくその他の実施形態も可能であることを認識されることを理解されたい。
【実施例】
【００８７】
次に実施例を示して本発明を更に説明する。
【００８８】
実施例１
（９Ｓ）−３−デスクラジノシル−３’−デスメチル−３’−アセチル−９−デオキソ−９−デヒドロ−エリスロマイシンＡ、Ｉ型結晶体の調製
ＷＯ’１５３の記載に従いアセチル化段階の後処理から得られたアモルファスな固体の本化合物（２６．０ｇ）を酢酸エチル（３９．０ｇ）に溶解した。混合物を室温にて２時間攪拌したところ生成物が析出し始め、得られた懸濁液を約５０℃まで加熱した。次に、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（３９．０ｇ）を３０分かけて添加し、懸濁液を５０℃で２時間攪拌した後、８時間で１０℃まで冷却し同温にて更に２時間攪拌下に維持した。  生じた固体をろ過して単離し、酢酸エチル／メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１：１）混合物（３×５ｍＬ）を用いて洗浄し、次いで真空下４５℃で１６時間乾燥させてＩ型結晶体（１４．４ｇ）を白色固体として得た。
【００８９】
実施例２
Ｉ型結晶体からＩＩ型結晶体への変換
Ｉ型結晶体（５５．４ｇ、０．０９８ｍｏｌ）と脱塩水（demineralized water）８９８．５ｇの懸濁液を３０〜３５℃まで加熱し、少なくとも２４時間同温にて攪拌下に維持した。
ＤＳＣ曲線がシングルピークを示しその開始温度が２１９．０℃以上である場合に、変換が完了したと考えた。次いで、懸濁液を２５℃まで３０分かけて冷却し室温にて１時間維持した。固体をグーチで濾過し壁面を脱塩水（６０．０ｇ）で洗浄した。得られた固体を真空下５０℃で乾燥させることによりＩＩ型結晶体を得た（５２．４ｇ、力価：９６．９％、収率：９２．７％）。
【００９０】
実施例３
（９Ｓ）−３−デスクラジノシル−３’−デスメチル−３’−アセチル−９−デオキソ−９−デヒドロ−エリスロマイシンＡ、ＩＩ型結晶体の調製
ＷＯ’１５３の記載に従って得た本化合物（１２６．７ｇ）をメチルエチルケトン（１５８６．０ｇ）に溶解させた。濃度約１５〜１７％（ｗ／ｗ）になるまで得られた溶液を常圧で蒸発させた後にシード添加し、最終濃度約２５〜２６％（ｗ／ｗ）になるまで更に蒸発させた。得られた懸濁液を７５℃で５時間攪拌し、０℃まで７．５時間かけて冷却し（約１０℃／時）、同温にて更に２時間攪拌下に維持した。生じた固体を、冷メチルエチルケトン（０℃）（２×５６ｇ）を用いて濾過洗浄することにより単離し、次いで真空下５０℃で１６時間乾燥させてＩＩ型結晶体（１１０．２ｇ）を白色固体として得た。
【図面の簡単な説明】
【００９１】
【図１】図１はＩ型結晶体の粉末Ｘ線回折チャートである。
【図２】図２はＩＩ型結晶体の粉末Ｘ線回折チャートである。
【図３】図３はＩ型結晶体のＤＳＣサーモグラムである。
【図４】図４はＩＩ型結晶体のＤＳＣサーモグラムである。
【図１】
2008544970.tif 000006
【図２】
2008544970.tif 000007
【図３】
2008544970.tif 000008
【図４】
2008544970.tif 000009
【国際調査報告】
2008544970.tif 000010
2008544970.tif 000011
2008544970.tif 000012