(57)【要約】  市販製品において知られている不純物を実質的に含まない、新しい純粋なバンコマイシン塩酸塩が記載される。「不純物を実質的に含まない」という用語は、米国薬局方（U.S.P.）, ＮＦ 第27改訂版, 22 (2004)に指示されるようにＨＰＬＣ分析法により測定するとき、約９７％と約９９％の間、特に約９８％と約９９％の間、好ましくは約９９％の純度のバンコマイシン塩酸塩を指定する。この新しい純粋なバンコマイシン塩酸塩（バンコマイシンＢ塩酸塩）は、０．７％未満の総不純物を含む、即ち、不純物１種だけが０．３％を超える。３．９と４．２の間の移動相の低い選択ｐＨ値を利用すると、高純度のバンコマイシン塩酸塩が得られるという知見に基づく、本発明の目的の純粋な抗生物質が製造される、置換クロマトグラフィーによる粗バンコマイシンの新しい精製方法が記載される。バンコマイシン塩酸塩は、重篤なブドウ球菌感染症、特にメチシリン耐性ブドウ球菌株に起因する感染症の治療のために使用される、既知の抗生物質である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
不純物を実質的に含まない純粋なバンコマイシン塩酸塩。
【請求項２】
純度が、約９７％と約９９％の間である、請求項１記載の純粋なバンコマイシン塩酸塩。
【請求項３】
純度が、約９８％と約９９％の間である、請求項１記載の純粋なバンコマイシン塩酸塩。
【請求項４】
純度が、約９９％である、請求項１記載の純粋なバンコマイシン塩酸塩。
【請求項５】
ＨＰＬＣ分析法により測定するとき、０．７％未満の総不純物を含む、請求項１記載の純粋なバンコマイシン塩酸塩。
【請求項６】
含量が０．３％を上まわる唯一の不純物を含む、請求項１記載の純粋なバンコマイシン塩酸塩。
【請求項７】
バンコマイシンの精製方法であって、以下の工程：
ａ）移動相のｐＨを３．９と４．２の間にして、固定相を有するカラムをコンディショニングすること；
ｂ）移動相に溶解した粗バンコマイシンをカラムに適用すること；
ｃ）バンコマイシンを置換してカラムから出すための置換剤を適用し、そして溶出液の画分を回収すること；
ｄ）９７％を超える純度の溶出液の画分を合わせて濃縮すること；
ｅ）アンモニア又はアルカリ性塩基の水溶液で８．５〜９．０の間のｐＨにバンコマイシン溶液のｐＨを調整すること；
ｆ）工程ｅ）から分離したバンコマイシン塩を水に懸濁し、そして塩酸で約３．０〜約３．５のｐＨにこの媒体を調整すること；
ｇ）有機溶媒による、溶液からのバンコマイシン塩酸塩の沈殿；
ｈ）純粋なバンコマイシン塩酸塩の単離
を含むことを特徴とする方法。
【請求項８】
固定相が、５μmの粒度のオクタデシル・シリカゲルである、請求項７ａ）記載の方法。
【請求項９】
移動相が、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、塩酸、ホウ酸、リン酸、硫酸よりなる群から選択される有機又は無機酸、あるいは酢酸ナトリウム、酢酸アンモニウム、リン酸アンモニウム又はその混合物よりなる群から選択される、アルカリ金属カチオン、アンモニア又はアミン類との緩衝剤であり、また低級Ｃ1−Ｃ4アルコール又はアセトニトリルをも含む、請求項７ａ）記載の方法。
【請求項１０】
低級Ｃ1−Ｃ4アルコールが、メタノール又はエタノールである、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
移動相が、酢酸アンモニウム、メタノール及び酢酸の水溶液よりなる、請求項７ａ）記載の方法。
【請求項１２】
バンコマイシン溶液のｐＨが、アンモニア、又は水酸化ナトリウム、水酸化カリウム若しくはアルカリ土類水酸化物よりなる群から選択されるアルカリ性塩基の水溶液により調整される、請求項７ｅ）記載の方法。
【請求項１３】
置換剤が、以下：
・Ｃ4−Ｃ10炭素原子を持つ高級ｎ−アルコール
・（ジ）オキシアルコール（アルコール−エーテル）［エーテル結合とヒドロキシル末端を持つＲ−Ｏ−Ｙ−ＯＨ又はＲ−Ｏ−Ｙ−Ｏ−Ｙ−ＯＨ型の化合物（ここで、Ｒは、Ｃ1-12アルキルラジカルであり、そしてＹは、アルキレン基である）］、
・一般式：Ｒ1Ｒ2Ｒ3Ｒ4ＮＸを持つ第４級アンモニウム塩（ここで、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3又はＲ4は、同一であるか又は異なって、フェニル、ベンジル又はＣ1-12アルキルラジカルを表し、Ｘは、塩化物、臭化物又はヨウ化物である）、
・ドデシル硫酸ナトリウム又はそのヒドロキシル誘導体
よりなる群から選択される、請求項７ｃ）記載の方法。
【請求項１４】
置換剤が、移動相中のｎ−ペンタノールの溶液である、請求項７ｃ）記載の方法。
【請求項１５】
有機溶媒が、イソプロパノールである、請求項７ｇ）記載の方法。
【請求項１６】
細菌感染症の治療用医薬品の製造のための、請求項１〜６のいずれか１項記載の純粋なバンコマイシン塩酸塩の使用。
【請求項１７】
注射用に適しているバイアルに入れた滅菌型の請求項１〜６のいずれか１項記載の凍結乾燥した純粋なバンコマイシン塩酸塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
（国際特許分類：Ｃ０７Ｋ５／１２、Ａ６１Ｋ３８／１２）
本発明は、糖ペプチド抗生物質の群からの医薬活性物質の分野に属し、そして市販製品において知られている不純物を実質的に含まない、そしてバンコマイシン塩酸塩の純度が約９７％〜約９９％の範囲である、純粋なバンコマイシン塩酸塩、並びに分取ＨＰＬＣ、即ち、置換クロマトグラフィーの方法の使用によるバンコマイシンの新しい精製方法に関する。
【０００２】
バンコマイシン塩酸塩は、重篤なブドウ球菌感染症、特にメチシリン耐性ブドウ球菌株に起因する感染症の治療のために使用される。
【０００３】
技術上の問題
それぞれ抗生物質及びバンコマイシン塩酸塩には、共存不純物のため、及びその結果見込まれる副作用のため、患者へのある種の使用には高純度の抗生物質が望まれる。したがって、それぞれ共存不純物を実質的に含まない純粋なバンコマイシン塩酸塩、及びこのような製品が製造されるプロセスに対して絶え間ないニーズが存在している。
【０００４】
先行技術
バンコマイシンは、その塩酸塩の形で治療に使用される三環系両性糖ペプチド抗生物質であり、またメルク・インデックス（The Merck Index）、化学物質、薬物及び生物学的作用物質の百科事典（An Encyclopedia of Chemicals, Drugs and Biologicals）、第13版 (2001)に、モノグラフ番号9995の下に引用されている。これは米国特許第3,067,099号に最初に開示されている。バンコマイシン塩酸塩は、ブドウ球菌感染症、特にメチシリン耐性ブドウ球菌株に起因する感染症の治療に使用される。バンコマイシンは、関連する共発酵因子の混合物を産生する、ノカルジア・オリエンタリス（Nocardia orientalis）（以前は、例えば、ストレプトミセス・オリエンタリス（Streptomyces orientalis）ＮＲＲＬ２４５２のような、ストレプトミセス・オリエンタリス）の発酵ブロスから単離される発酵産物である。「Ｂ因子」（バンコマイシンＢ）は、この混合物において最も重要な抗生物質として同定されており、市販製品として利用できる。バンコマイシン発酵ブロスを濾過して、濾液は、バンコマイシンを脱色及び脱塩する吸着樹脂を含むカラムに加える。この樹脂を洗浄して、低ｐＨの溶媒で溶出し、次に溶出液を活性炭で脱色する。このバンコマイシン溶出液は、続いて低ｐＨの媒体での結晶化工程を用いて精製する。結晶化バンコマイシンは、塩酸と合わせ、アセトンのような有機溶媒中で沈殿させることにより、バンコマイシン塩酸塩が生成する。
【０００５】
バンコマイシン塩酸塩は、経口的に、又は非経口的に使用され、そして滅菌バイアル又は小瓶中の乾燥したオフホワイト色の粉末のような乾燥物質の形態である。この乾燥固体状のバンコマイシンは、その塩酸塩の水溶液の凍結乾燥により得られるが、これは、水により２．５と４．５の間のｐＨを有する清澄な溶液を形成する。
【０００６】
文献には、上記米国特許第3,067,099号及び他の文献（米国特許第5,037,652号又は米国特許第5,235,037号に記載されている水酸化ナトリウムのようなアルカリ水酸化物での沈殿方法を記述している）に開示されている発酵媒体からの、幾つかのそれぞれバンコマイシン及びその塩酸塩の製造方法が；米国特許第4,868,285号に記載されているイミダゾール・バンコマイシン複合体での精製方法；特許EP 145,484に記載されているリン酸塩の形成を介しての、米国特許第4,667,024号に開示されているペプチドとの複合体の形成を介しての、又は米国特許第4,440,753号若しくは米国特許第4,874,843号に開示されている様々なポリマー樹脂への吸着による精製方法が記載されている。
【０００７】
米国特許第5,574,135号は、バンコマイシン発酵ブロスを２つの吸着剤に連続して通し、精製バンコマイシンを生成することからなる、結晶性バンコマイシンの改良製造方法を開示している。次にこの媒体を９．０と９．５の間のｐＨにするためにアルカリ塩基溶液を加えることにより、精製バンコマイシンを溶液から結晶化させる。得られるバンコマイシンは、他の先行技術のプロセスにより生成したバンコマイシンよりも純度が高いことが開示されている。バンコマイシン純度は、２回の結晶化工程後に約９０％である。
【０００８】
米国特許第5,854,390号は、高圧液体クロマトグラフィー（High Pressure Liquid Chromatography）による、即ち、バンコマイシン塩酸塩のクロマトグラフィー純度９５．５％領域が本質的に改善される、置換クロマトグラフィーの方法による、バンコマイシンの新しい精製方法を開示している。このクロマトグラフィーは、有機若しくは無機酸又は適切な緩衝剤よりなる移動相により、及び様々な置換剤により、明確なｐＨと温度で、及びバンコマイシンの量と濃度で、逆固定相で実行される。この開示されたプロセスによると、バンコマイシン塩酸塩が含む不純物の割合は、これまで知られている市販製品中よりも３分の１低い。
【０００９】
置換クロマトグラフィーの方法は、既知であり、文献に（例えば、G. Subramanianら,「生体分子の置換クロマトグラフィー（Displacement Chromatography of Biomolecules）」, J. of Chromatography, Vol. 439, (1988), pp. 341-351の論文に）記載されており、そして試料中では固定相と移動相の間の均衡が固定相の方向にシフトするという原理に基づく。試料の単一成分が相互に置換し、そして固定相に対する親和性がより高い置換剤が、混合物の成分をカラムの外に押し出す。
【００１０】
米国特許第4,885,275号は、ゲルを伴わないバンコマイシン塩酸塩の新しい安定な濃縮水溶液、並びに該濃縮溶液から乾燥し、溶けやすく、かつ流動性の粉末の形で得られるバンコマイシン塩酸塩の新しい凍結乾燥方法を開示している。
【００１１】
実施例を含む本発明の説明
本発明の目的は、先行技術において知られている問題を解決すること、即ち、極めて高純度のバンコマイシン塩酸塩が得られる、バンコマイシンの新しいクロマトグラフィー精製方法により、市販製品において知られている不純物を実質的に含まない新しい純粋なバンコマイシン塩酸塩を製造することである。本明細書において使用されるとき「不純物を実質的に含まない」純粋なバンコマイシン塩酸塩という用語は、米国薬局方（U.S. Pharmacopoeia）、国民医薬品集（The National Formulary）ＮＦ, 第27改訂版, 22 (2004), モノグラフ：「バンコマイシン塩酸塩」に指示されるようにＨＰＬＣ分析法により測定するとき、約９７％〜約９９％、好ましくは約９８％〜約９９％、最も好ましくは約９９％の純度を意味する。本明細書において使用される純粋なバンコマイシン塩酸塩という用語は、市販製品中のバンコマイシン塩酸塩の主要因子として同定されるバンコマイシンＢ塩酸塩を意味する。
【００１２】
米国特許第5,854,390号は、約２〜約１０（好ましくは約２〜約６）の間の移動相のｐＨでの逆固定相での置換クロマトグラフィーによるバンコマイシンの精製方法を開示しているが、一方実施例は、３．０の移動相ｐＨを提示し、移動相に溶解したバンコマイシンをカラムに適用後、これを置換剤により置換してカラムから出し、画分を回収して、合わせた画分をその特性にしたがい凍結乾燥する。固定（逆）相の粒度は、数μm〜数１００μmの範囲内にあり、そして実施例では、１２μmの固定相の粒度を与える。
【００１３】
予想外にかつ驚くべきことに、我々は、先行技術において知られている問題が、数μm〜数１００μmの範囲内の固定相の粒度（好ましくは５μmの固定相の選択粒度）を用いる、３．９と４．２の間の移動相の狭い選択ｐＨの、固定相（逆相）での置換クロマトグラフィーによる、粗バンコマイシンの新しい精製方法を用いることにより解決されることを見い出した。固定相は、オクタデシル・シリカゲルである。
【００１４】
本発明による逆相での置換クロマトグラフィーによる粗バンコマイシン（ｐＨ３．２の水溶液）の精製方法は、以下の工程：
ａ）移動相のｐＨを３．９と４．２の間にして、固定相を有するカラムをコンディショニングすること；
ｂ）移動相に溶解した粗バンコマイシンをカラムに適用すること；
ｃ）バンコマイシンを置換してカラムから出すための置換剤を適用し、そして溶出液の画分を回収すること；
ｄ）９７％を超える純度の溶出液の画分を合わせて濃縮すること；
ｅ）アンモニア又はアルカリ性塩基の水溶液で８．５〜９．０の間のｐＨにバンコマイシン溶液のｐＨを調整すること；
ｆ）工程ｅ）から分離したバンコマイシン塩を水に懸濁し、そして塩酸で約３．０〜約３．５のｐＨにこの媒体を調整すること；
ｇ）有機溶媒による、溶液からのバンコマイシン塩酸塩の沈殿；
ｈ）純粋なバンコマイシン塩酸塩の単離
を含むことを特徴とする。
【００１５】
カラムは、適切な移動相でコンディショニングする。移動相のｐＨは、アルカリ性媒体中でのバンコマイシンの低い安定性のため、適度な酸性でなければならず、そして適切な酸又は適切な緩衝剤で３．９〜４．２のｐＨに調整する。移動相は、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、塩酸、ホウ酸、リン酸、硫酸のような、有機又は無機酸の、あるいは、酢酸ナトリウム、酢酸アンモニウム又はリン酸アンモニウムのような、アルカリ金属カチオン、アンモニア又はアミンと生成する緩衝剤の水希釈溶液であってよい。固定相のより良い湿潤を達成するために、ある量の数パーセント（約３％）の低級Ｃ1−Ｃ4アルコール（メタノール、エタノールなど）、アセトニトリル又はこれらの組合せを移動相に加えることができる。移動相に溶解した粗バンコマイシンは、カラムに装填し、次にバンコマイシンを置換するために置換剤を５〜１５０mg/ml移動相の間の濃度で装填し、そして約９７％を超える純度のバンコマイシン溶出液の画分を回収する。バンコマイシン溶出液の合わせた濃縮画分を、その純度特性にしたがい５０〜１５０mg/mlの間のバンコマイシンの濃度に濃縮し、次にメタノールのような適切な溶媒をこの濃縮液に加え、この媒体を、アルカリ性塩基又は水酸化アンモニウムの水溶液で８．５〜９．０の間のｐＨに調整し、生じたバンコマイシン溶液を−２０℃と５℃の間の温度に冷やす。この分離バンコマイシン塩を濾別し、水に再懸濁して、この媒体を、塩酸で３．０〜３．５の間のｐＨに調整し、そしてイソプロパノールのような有機溶媒中で水溶液からバンコマイシン塩酸塩を沈殿させる。得られる純粋なバンコマイシン塩酸塩を濾別して、真空下で３０℃までの温度で乾燥する。
【００１６】
我々は、９７％を超える純度の合わせたバンコマイシン溶出液のｐＨを、アンモニア又はアルカリ性塩基の水溶液で、バンコマイシン溶液の８．５〜９．０の間のｐＨに調整するならば、最良の結果が得られることを見い出した。アルカリ塩基として、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウムのようなアルカリ土類水酸化物などを使用することができる。
【００１７】
市販の形状のバイアルの調製のために、この純粋なバンコマイシン塩酸塩は、先行技術において既知の方法により凍結乾燥する。
【００１８】
バンコマイシン塩酸塩の純度は、米国薬局方、国民医薬品集, 第27改訂版, 22 (2004), モノグラフ：「バンコマイシン塩酸塩」に指示されるように高圧液体クロマトグラフィー分析法によって測定する。
【００１９】
本発明のプロセスにより、市販製品において知られている不純物を実質的に含まない、純粋なバンコマイシン塩酸塩が、高い全収率で製造される。上述のＨＰＬＣ分析法により、不純物の数とパーセント量を、市販のバンコマイシン塩酸塩（「バンコマイシン塩酸塩、米国薬局方、製造者：アメリカン・ファーマシューティカル・パートナーズ（American Pharmaceutical Partners）、ロット：130373、有効期限：04/05」）、米国特許第5,854,390号に開示されたプロセスにより調製されたバンコマイシン塩酸塩の試料において、及び本発明により調製されたバンコマイシン塩酸塩の試料において測定した。バンコマイシン塩酸塩の市販の試料では、０．１％を超える含量の１２種の不純物が測定され、そのうち５種の不純物は、図１のクロマトグラムに図解されるように、それぞれ０．３％を上まわる個々の不純物の含量であった。図２は、米国特許第5,854,390号に開示されたように調製したバンコマイシン塩酸塩の試料のクロマトグラムを図解している。それぞれ先行技術及び市販製品とは対照的に、本発明により調製された純粋なバンコマイシンでは、０．１％を上まわる含量のわずか２種の不純物が測定され、そのうち０．３％を上まわる含量の不純物は１種のみが測定された。このことは、本発明の新しいバンコマイシン塩酸塩が、０．７％未満の総不純物を含むこと、即ち、０．３％を超えるのはただ１種の不純物であることを意味する。図３は、本発明により調製されたバンコマイシン塩酸塩の試料のクロマトグラムを図解する。
【００２０】
この置換剤は、以下：
・Ｃ4−Ｃ10炭素原子を持つ高級ｎ−アルコール、
・（ジ）オキシアルコール（アルコール−エーテル）［エーテル結合とヒドロキシル末端を持つＲ−Ｏ−Ｙ−ＯＨ又はＲ−Ｏ−Ｙ−Ｏ−Ｙ−ＯＨ型の化合物（ここで、Ｒは、Ｃ1-12アルキルラジカルであり、そしてＹは、アルキレン基である）］、
・一般式：Ｒ1Ｒ2Ｒ3Ｒ4ＮＸを持つ第４級アンモニウム塩（ここで、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、同一であるか又は異なって、フェニル、ベンジル又はＣ1-12アルキルラジカルを表し、Ｘは、塩化物、臭化物又はヨウ化物である）、
・ドデシル硫酸ナトリウム又はそのヒドロキシル誘導体
よりなる群から選択される。
【００２１】
好ましくは、移動相中の溶液の形のｎ−ペンタノールが使用される。
【００２２】
出発物質の粗及び部分精製バンコマイシンは、先行技術において既知の手順により調製することができる。バンコマイシンは、例えば、ストレプトミセス・オリエンタリスＮＲＲＬ２４２５の発酵ブロスから、バンコマイシン発酵ブロスの濾過により単離することができる、発酵産物であり、そして濾液は、バンコマイシンを脱色及び脱塩する吸着樹脂を含むカラムに添加される。この樹脂を洗浄し、媒体の低ｐＨの適切な溶媒でバンコマイシンを溶出し、続いて活性炭で溶出液を脱色する。次にバンコマイシン溶出液は、媒体の低ｐＨでの結晶化を利用して更に精製する。結晶化バンコマイシンは、塩酸と合わせて、アセトンのような有機溶液中で沈殿させることにより、バンコマイシン塩酸塩を生成する。
【００２３】
好ましくは、ストレプトミセス・オリエンタリスの発酵ブロスからのバンコマイシンは、米国特許第5,853,720号に開示されたように単離及び部分精製する；次に、菌糸及び他の固形物質は、精密濾過分離によりストレプトミセス・オリエンタリスの発酵ブロスから分離する。得られた透過液は、アンバーライト（Amberlite）ＸＡＤ１６アクリル樹脂カラムで部分精製し、酸性メタノール（酸性酸の添加）のような適切な溶媒での溶出後、合わせた溶出液を逆浸透により濃縮する。次に濃縮液は、活性炭で精製することにより、（粗）バンコマイシンの脱色濃縮液が得られるが、これを本発明のカラムに装填する。
【００２４】
本発明は更に、細菌感染症の治療用医薬品の製造のための新しい純粋なバンコマイシン塩酸塩の使用、及び注射用に適しているバイアルに入れた滅菌型の凍結乾燥した純粋なバンコマイシン塩酸塩に関する。
【００２５】
本発明は、以下の実施例により例示されるが、これらにより何ら限定されない。
【００２６】
実施例
置換クロマトグラフィーによる粗バンコマイシンの精製方法
固定相は、５μmの粒度のＹＭＣ−パックＯＤＳ−ＡＱオクタデシル・シリカゲルカラム（逆相）２０×２５０mm（ＹＭＣ社（YMC Co. Ltd.）、京都、日本）とした。移動相は、３％部のメタノール（v/v）を加えた酢酸アンモニウムの５mM水溶液よりなり、そしてこの媒体のｐＨは、酢酸で４．０に調整した。置換剤は、移動相中のｎ−ペンタノールの２％溶液とした。カラムに装填するための試料は、粗バンコマイシンの２５mlの水溶液（ｐＨは塩酸で３．２に調整、バンコマイシン１００mg/mlの濃度を有する）とし、ここに酢酸アンモニウム９．６mg及びメタノール０．７５mlを加え、アンモニア又は酢酸の水溶液の添加によりｐＨを４．０に調整した。移動相、置換剤及び試料装填の流量は、８ml/分とした。
【００２７】
移動相２５０mlで洗浄したカラムに、試料を装填し、次に最初は移動相で１分間洗浄し、続いて置換剤を適用した。バンコマイシンが溶出液中に出現したら、画分を２分毎に回収した。溶出液中のバンコマイシンの濃度が最高濃度の半分まで低下したら、画分の回収を停止して、カラムをメタノール２５０mlで洗浄した。次にカラムを移動相で更に洗浄した。
【００２８】
９７．５％を超えるクロマトグラフィー純度（ＵＳＰ27−ＮＦ22、2004からの既に前述された指示によるＨＰＬＣ分析法によって測定）の溶出液の画分を合わせて、１４０mg/mlのバンコマイシンの濃度まで真空下で濃縮した。得られた濃縮液１２．５mlに、最初にメタノール１００mlを加え、次にアンモニアの１Ｍ水溶液で媒体のｐＨをｐＨ８．５〜９．０に調整し、そして得られた溶液を０℃に冷やした。分離した沈殿物を濾別し、０℃に冷やしたメタノール２０mlで洗浄し、次に撹拌しながら水１０mlに懸濁し、２Ｍ塩酸で媒体のｐＨを３．２に調整することによって、沈殿物の溶解を達成した。得られた溶液にイソプロパノール５０mlを加え、０℃に冷やして、濾別し、得られたバンコマイシン塩酸塩を３０℃の温度で真空下で乾燥した。純粋なバンコマイシンＢ塩酸塩１．５ｇ（収率６０％）を純度９９．３％（ＵＳＰ27−ＮＦ22、2004によるＨＰＬＣ分析法によって測定）の白色の粉末として得て、そしてこれを窒素雰囲気下ポリエチレンの「両面アルミ（Alu-Alu）バッグ」に貯蔵した。
【手続補正書】
【提出日】平成20年1月23日(2008.1.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
不純物を実質的に含まない純粋なバンコマイシン塩酸塩。
【請求項２】
純度が、９７％と９９％の間である、請求項１記載の純粋なバンコマイシン塩酸塩。
【請求項３】
純度が、９８％と９９％の間である、請求項１記載の純粋なバンコマイシン塩酸塩。
【請求項４】
純度が、９９％である、請求項１記載の純粋なバンコマイシン塩酸塩。
【請求項５】
ＨＰＬＣ分析法により測定するとき、０．７％未満の総不純物を含む、請求項１記載の純粋なバンコマイシン塩酸塩。
【請求項６】
含量が０．３％を上まわる唯一の不純物を含む、請求項１記載の純粋なバンコマイシン塩酸塩。
【請求項７】
バンコマイシンの精製方法であって、以下の工程：
ａ）移動相のｐＨを３．９と４．２の間にして、固定相を有するカラムをコンディショニングすること；
ｂ）移動相に溶解した粗バンコマイシンをカラムに適用すること；
ｃ）バンコマイシンを置換してカラムから出すための置換剤を適用し、そして溶出液の画分を回収すること；
ｄ）９７％を超える純度の溶出液の画分を合わせて濃縮すること；
ｅ）アンモニア又はアルカリ性塩基の水溶液で８．５〜９．０の間のｐＨにバンコマイシン溶液のｐＨを調整すること；
ｆ）工程ｅ）から分離したバンコマイシン塩を水に懸濁し、そして塩酸で３．０〜３．５のｐＨにこの媒体を調整すること；
ｇ）有機溶媒による、溶液からのバンコマイシン塩酸塩の沈殿；
ｈ）純粋なバンコマイシン塩酸塩の単離
を含むことを特徴とする方法。
【請求項８】
固定相が、５μmの粒度のオクタデシル・シリカゲルである、請求項７記載の方法。
【請求項９】
移動相が、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、塩酸、ホウ酸、リン酸、硫酸よりなる群から選択される有機又は無機酸、あるいは酢酸ナトリウム、酢酸アンモニウム、リン酸アンモニウム又はその混合物よりなる群から選択される、アルカリ金属カチオン、アンモニア又はアミン類との緩衝剤であり、また移動相が低級Ｃ1−Ｃ4アルコール又はアセトニトリルをも含む、請求項７記載の方法。
【請求項１０】
低級Ｃ1−Ｃ4アルコールが、メタノール又はエタノールである、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
移動相が、酢酸アンモニウム、メタノール及び酢酸の水溶液よりなる、請求項７記載の方法。
【請求項１２】
バンコマイシン溶液のｐＨが、アンモニア、又は水酸化ナトリウム、水酸化カリウム若しくはアルカリ土類水酸化物よりなる群から選択されるアルカリ性塩基の水溶液により調整される、請求項７記載の方法。
【請求項１３】
置換剤が、以下：
・Ｃ4−Ｃ10炭素原子を持つ高級ｎ−アルコール
・エーテル結合とヒドロキシル末端を持つＲ−Ｏ−Ｙ−ＯＨ又はＲ−Ｏ−Ｙ−Ｏ−Ｙ−ＯＨ型の化合物（ここで、Ｒは、Ｃ1-12アルキルラジカルであり、そしてＹは、アルキレン基である）である（ジ）オキシアルコール（アルコール−エーテル）、
・一般式：Ｒ1Ｒ2Ｒ3Ｒ4ＮＸを持つ第４級アンモニウム塩（ここで、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3又はＲ4は、同一であるか又は異なって、フェニル、ベンジル又はＣ1-12アルキルラジカルを表し、Ｘは、塩化物、臭化物又はヨウ化物である）、
・ドデシル硫酸ナトリウム又はそのヒドロキシル誘導体
よりなる群から選択される、請求項７記載の方法。
【請求項１４】
置換剤が、移動相中のｎ−ペンタノールの溶液である、請求項７記載の方法。
【請求項１５】
有機溶媒が、イソプロパノールである、請求項７記載の方法。
【請求項１６】
細菌感染症の治療用医薬品の製造のための、請求項１〜６のいずれか１項記載の純粋なバンコマイシン塩酸塩の使用。
【請求項１７】
注射用に適しているバイアルに入れた滅菌型の請求項１〜６のいずれか１項記載の凍結乾燥した純粋なバンコマイシン塩酸塩。
【国際調査報告】
2008523003.tif 000002
2008523003.tif 000003
2008523003.tif 000004