(57)【要約】本発明は、エストラジオール代謝産物の徐放性処方物であって、それによりインビボ薬物動態が、化学改変、結晶充填構造、粒子サイズまたはそれらの組み合わせからなる群より選択される方法によって操作される、徐放性処方物を提供する。このような組成物は、広範な種類の疾患の長期間の処置に有用である。本発明の目的は、簡単な注射により投与することができる徐放性処方物を調製するために、結晶性エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログ、またはエストラジオール代謝産物プロドラッグの溶解性およびインビボ薬物動態特性を操作することである。
2008513375.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
エストラジオール代謝産物を含み、それにより、該エストラジオール代謝産物のインビボ薬物動態が、化学改変、結晶充填構造および粒子サイズからなる群より選択される手順により操作される、組成物。
【請求項２】
前記エストラジオール代謝産物が、懸濁液体をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記エストラジオール代謝産物が前記懸濁液体とは異なる容器に供給され、個体への投与の前にともに混合される、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記エストラジオール代謝産物が、２−メトキシエストラジオール、２−ヒドロキシエストラジオール、４−メトキシエストラジオール、および４−ヒドロキシエストラジオールからなる群より選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記エストラジオール代謝産物がプロドラッグである、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記プロドラッグがエステルである、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
請求項６に記載の組成物であって、前記エステルが、以下からなる群より選択される：３−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；１７−アセチル−２−メトキシエストラジオール；３−アセチル−２−メトキシエストラジオール；３，１７−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−２−メトキシエストラジオール；３−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；１７−アセチル−４−メトキシエストラジオール；３−アセチル−４−メトキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−４−メトキシエストラジオール；３−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；１７−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３，１７−トリベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３，１７−トリアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；１７−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；４，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；４，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４，１７−トリベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；および３，４，１７−トリアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール、
組成物。
【請求項８】
前記化学改変が、前記エストラジオール代謝産物の誘導体化を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
前記誘導体が、ジカルボン酸化合物、二酸、極性化合物およびイオン性化合物からなる群より選択される、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記ジカルボン酸化合物が、シュウ酸、マロン酸、マレイン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸およびパモ酸からなる群より選択される、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記エストラジオール代謝産物がアナログである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】
前記エストラジオール代謝産物がプロドラッグである、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物プロドラッグまたはエストラジオール代謝産物アナログが、投与後に、個体内で、所望の定常状態の組織濃度に達するのに十分な溶解性を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項１４】
前記エストラジオール代謝産物が結晶形態である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１５】
前記結晶構造が、個体への投与後に前記エストラジオール代謝産物の持続性のインビボ溶解を可能にするのに適する、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
前記粒子サイズが、個体への投与後に、前記薬物の持続性のインビボ溶解を可能にするのに適する、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
前記薬物が、化学改変、結晶構造もしくは粒子サイズ、またはそれらの任意の組み合わせにより操作され、個体への投与後に、適切な溶解速度および定常状態の濃度を達成する、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
前記希釈剤または懸濁剤が界面活性剤を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１９】
請求項１８に記載の組成物であって、前記懸濁剤が、以下からなる群より選択され得る：ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドンチロキサポール、ポロキサマー、ポリオキサミンデキストランレシチン、スルホコハク酸ナトリウムのジアルキルエステル、ラウリル硫酸ナトリウム、スルホン酸アルキルアリールポリエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール、ステアリン酸スクロースとジステアリン酸スクロースとの混合物、Ｃ１８Ｈ３７ＣＨ２（ＣＯＮ（ＣＨ３）ＣＨ２（ＣＨＯＨ）４（ＣＨ２ＯＨ）２、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、非晶質セルロース、およびイソノニルフェノキシポリ（グリシドール）、
組成物。
【請求項２０】
前記作用の持続時間が、３日間から１年間の範囲に及ぶように選択され得る、請求項１５に記載の組成物。
【請求項２１】
前記薬物が、前記懸濁剤と組み合わせて、皮下経路、歯肉下経路、筋肉内経路、腹腔内経路または眼内経路により個体へ注射される、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
前記エストラジオール代謝産物が、２０ｍｇ／ｍｌ〜２００ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度で、２−メトキシエストラジオールを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項２３】
請求項２２に記載のエストラジオール代謝産物を含む組成物であって、該エストラジオール代謝産物が、０．５％ｗ／ｖ  カルボキシメチルセルロースナトリウム、０．０５％ｗ／ｖ  ラウリル硫酸塩、および５％マンニトールを含む希釈剤に懸濁される、組成物。
【請求項２４】
２−メトキシエストラジオールを含む組成物であって、
ここで、該２−メトキシエストラジオールが、０．５％ｗ／ｖ  カルボキシメチルセルロースナトリウム、０．０５％ｗ／ｖ  ラウリル硫酸塩、および５％マンニトールを含む希釈剤に懸濁され、そして該２−メトキシエストラジオールのインビボ薬物動態が、化学改変、結晶充填構造および粒子サイズからなる群より選択される手順により操作される、組成物。
【請求項２５】
代謝疾患を処置するための方法であって、該方法は、該処置を必要とする被験体にエストラジオール代謝産物を含む組成物を投与する工程を包含し、ここで、インビボ溶解速度は、該代謝症候群の症状を軽減するのに有効な量において、化学改変、結晶充填構造または粒子サイズにより決定される、方法。
【請求項２６】
前記代謝疾患が、肥満、真性糖尿病、インシュリン抵抗性、高血圧、異脂肪血症およびそれらの組み合わせからなる群より選択される症状を含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記疾患が、内皮機能不全、肺高血圧、糖尿病性腎症および腎毒性からなる群より選択される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
請求項２５に記載の方法であって、前記エストラジオール代謝産物が、２−メトキシエストラジオールを含み、該２−メトキシエストラジオールが、以下の工程により調製される：
９．２％  テトラヒドロフラン、６１％  メタノールおよび２８％  ６Ｍ  塩酸水溶液からなる溶媒中の２−メトキシエストラジオールの４％ｗ／ｖ溶液を等量の水に添加する工程、続いて、吸引濾過により固体組成物を単離する工程、水による洗浄工程、減圧下での乾燥工程、
該固体を粉砕して、篩にかけ、９０μｍ〜１８０μｍの範囲の粒子の集団を生成する工程、ならびに、
５％ｗ／ｖ  マンニトールおよび０．０５％ｗ／ｖ  ＳＤＳを含む、０．５％ｗ／ｖ  カルボキシメチルセルロースナトリウム中に懸濁する工程、
方法。
【請求項２９】
エンドセリン−１レベルを低下させる方法であって、該方法は、エンドセリン−１レベルの低下を必要とする被験体にエストラジオール代謝産物を含む組成物を投与する工程を包含し、ここで、該組成物のインビボ溶解速度は、該疾患の症状を軽減するのに有効な量において、化学改変、結晶充填構造または粒子サイズにより決定される、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、一般的に結晶形態でのエストラジオール代謝産物の徐放性処方物であって、それにより、その薬物動態が結晶構造および粒子サイズにより制御される、徐放性処方物に関する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
エストラジオールは、インビボでの代謝プロセスを介して異なる誘導体に変換される。２つの特定の型の代謝産物は、カテコールエストロゲンおよびメトキシエストラジオールである。カテコールエストロゲンである２−ヒドロキシエストラジオールおよび４−ヒドロキシエストラジオールは、シトクロムＰ４５０酵素によるエストロゲンのヒドロキシル化によって生成される。これらのカテコールエストロゲンは、カテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼによってメチル化され得、メトキシエストラジオールである２−メトキシエストラジオールおよび４−メトキシエストラジオールを生成し得る。
【０００３】
エストラジオール代謝産物は、多くの細胞プロセスに影響を与えることが報告されている。エストラジオール代謝産物は、活発に増殖する細胞において血管形成およびチューブリンの重合と組織化とを阻害し（Ｂｒｕｅｇｇｅｍｅｉｅｒ，Ｒ．Ｗ．ら、２００１：Ｐｒｉｂｌｕｄａ，Ｖ．Ｓ．ら、２０００；特許文献１；特許文献２）、数種の細胞においてアポトーシスを誘導するようである（Ｓｃｈｕｍａｃｈｅｒ，Ｇ．ら、２００１；特許文献３；Ｗａｎｇ，Ｓ．Ｈ．ら、２０００）。さらに、２−ヒドロキシエストラジオールおよび２−メトキシエストラジオールは、卵巣を摘出した（ｏｖａｒｅｃｔｏｍｉｚｅｄ）ラットにおいてコレステロールレベルに影響を与え、培養物中の脂肪細胞の増殖を阻害する（Ｌｉｕ，Ｄ．ら、１９９８；Ｐｉｃｏ，Ｃ．ら、１９９８）一方で、２−ヒドロキシエストラジオールは、肥満ラットにおいて肥満、代謝症候群ならびに血管および腎臓の機能不全の影響を減じるようである（Ｄｕｂｅｙ，Ｒ．Ｋ．ら、２００１）。また、エストラジオール代謝産物は、末期の腎臓疾患および喘息の処置に有益であることが報告されている（Ｄｕｂｅｙ，Ｒ．Ｋ．ら、２００１；特許文献４）。さらに、エストラジオール代謝産物は、有効な抗真菌剤であるようである（特許文献５）。
【０００４】
癌の処置に関して、エストラジオール代謝産物の有益な効果が報告されている（特許文献６）。２−メトキシエストラジオールは、野生型ｐ５３とともに投与した場合に、培養物中の肺癌細胞の増殖を減少させ（Ｈｕｏｂｅｒ，Ｊ．Ｂ．ら、２０００；Ｋａｔａｏｋａ，Ｍ．ら、１９９８）、ヒト膵臓癌細胞（Ｓｃｈｕｍａｃｈｅｒ，Ｇ．ら、１９９９）およびヒト前立腺癌細胞（Ｋｕｍａｒ，Ａ．Ｐ．ら、２００１；Ｑａｄａｎ，Ｌ．Ｒ．ら、２００１）の増殖を阻害し、骨肉腫細胞に有毒であるようである（Ｍａｒａｎ，Ａ．ら、２００２）。また、２−メトキシエストラジオールは、神経芽腫細胞および脳下垂体の腫瘍の増殖速度を低下させることが報告されている（Ｂａｎｅｒｊｅｅｉ，Ｓ．Ｋ．ら、２０００；Ｗａｓｓｂｅｒｇ，Ｅ．、１９９９）。エストラジオール代謝産物は、迅速に分裂する細胞において、スーパーオキシドアニオンの細胞内蓄積を増大させ（特許文献７）、既存の癌処置（例えば、放射免疫療法）の効果を増強するようである（Ａｍｏｒｉｎｏ，Ｇ．Ｐ．ら、２００１；Ｋｉｎｕｙａ，Ｓ．ら、２００１）。
【０００５】
迅速に代謝される薬物（特に、ステロイド）への曝露の持続時間を延長するために、２つの主なストラテジーが存在する。その第一のものは、有機酸でステロイドを化学改変し、ステロイドエステルプロドラッグを形成することにより、血漿循環時間を増大させることである。送達後、このステロイドエステル結合は、内因性酵素によって切断されて、その親化合物を形成する。有機酸または他の修飾化合物によりステロイドに付与される物理的特性および化学的特性は、親化合物がそのプロドラッグ形態から放出される速度を支配する。この方法において、その血漿循環時間は、制御された様式で増大され得る。ステロイドエステルは、慣用的に、持続性送達のために油性ビヒクルにより溶解および注射される。しかしながら、大半の場合、油ベースのデポー注射の持続時間は、数日間に制限される。エストラジオール代謝産物の治療法への持続性の曝露を達成する第二のストラテジーは、エストラジオール代謝産物またはエストラジオール代謝産物プロドラッグを徐放性送達装置に組み込むことである。このような装置としては、注射可能または移植可能な浸透圧ポンプ、リポソーム、固体の脂質粒子、あるいは拡散媒介性の不活性または生分解性のマトリクスまたはデポーが挙げられ得る。
【０００６】
送達装置に処方された薬物の製造および投与に関し、数個の不都合が存在する。第一に、装置の投与は外科手順を必要とし得ることである。このことは、長期間の処置が必要とされる場合に特に不都合となり得る。第二に、処方物に追加される装置のかさ高さは、患者への過度な不快感を伴わずに投与され得る薬学的な活性成分の量を制限し得ることである。第三に、装置内に封入されるエストラジオール代謝産物の物理的形態は不安定かつ化学分解に感受性であり得、薬物を処方するために使用することができる装置の型を制限し得ることである。これらの欠点は、特にエストラジオール代謝産物（これは、一般的に低い溶解性を有し、慢性疾患の処置への用途を有する）の場合に当てはまる。
【０００７】
特許文献８（１９９７）において、Ｌｅｏｎａｒｄは、全長約６〜７ｍｍおよび直径２．４ｍｍの熱的に融合させた円柱状のステロイドペレットの生産をもたらす組成物および方法を記載する。融合ノルエチンドロンからなるペレットは、数ヶ月の期間にわたって水中に薬物を放出した。ステロイド化合物の持続性の放出は、処方のこの型により達成され得るが、ペレットの皮下移植は、代表的な液体注射よりも高い技術を必要とし、この手順は、患者の不快感の増大を伴う。
【０００８】
注射用微粒化結晶性懸濁物の第二のクラスは、数週間の期間にわたり薬物を放出するように処方される。例えば、包装挿入物にしたがって、酢酸メチルプレドニゾロン（Ｄｅｐｏ−Ｍｅｄｒｏｌ（登録商標））は、全身作用のために２週間の間隔で投薬され、避妊用酢酸メドロキシプレドニゾロン（ｍｅｄｒｏｘｙｐｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｅ）（Ｄｅｐｏ−Ｐｒｏｖｅｒａ（登録商標））は、１３週毎に注射される。これら２つの製品についての粒子サイズの分布は、ほぼ同一（０．４μｍ〜約２０μｍの範囲で、その最頻値は７μｍと９μｍとの間である）である。両方の製品に関して、酢酸エステルを形成するための化学改変は同一である。これら２つの水不溶性化合物は、同一の化学改変および同程度の粒子サイズの分布を有するのにもかかわらず、広範に変動する作用の持続時間を有する。さらに、特許文献９は、霊長類において、プロゲステロンのステロイドエステルの注射可能な結晶性懸濁物について４週間の測定可能な血中レベルを実証した。この処方物において、ステロイドの粒子サイズの分布は、３μｍと１００μｍとの間に及び、その最頻値は約２４μｍであった。したがって、水に不溶性であると分類されるステロイドは、注射後、生理的な環境において様々な持続時間を示す。インビボ薬物動態をある程度制御することは、粒子サイズおよび／または化学改変を変更することによって達成され得る。しかしながら、所望のインビボ薬物動態を達成するのに有効なステロイドの化学組成および結晶性粒子のサイズの分布のために必要とされる改変は、明らかではなく、各々の化合物について特別に見出されなければならない。
【特許文献１】米国特許第５，５０４，０７４号明細書
【特許文献２】国際公開第００／３５８６５号パンフレット
【特許文献３】米国特許第５，９５８，８９２号明細書
【特許文献４】米国特許第６，２００，９６６号明細書
【特許文献５】米国特許出願公開第２００１／４４４３２号明細書
【特許文献６】国際公開第０１／７００９３号パンフレット
【特許文献７】国際公開第０２／０３９７９号パンフレット
【特許文献８】米国特許第５，６８８，５１９号明細書
【特許文献９】米国特許第４，７９４，１１９号明細書
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
エストラジオール代謝産物は、種々の疾患の処置または予防に有用であり得る。不幸なことに、天然に存在するエストラジオール代謝産物は、乏しい経口バイオアベイラビリティおよび短い半減期を有し、そしてその有益な効果は、長期にわたる処置期間に限られるようである。頻繁な投与（動物患者およびヒト患者の両方において望ましくない）を必要とせずに、代謝産物の作用の持続時間を増大させる、エストラジオール代謝産物の薬学的処方物に対する必要性が存在する。エストラジオール代謝産物の徐放性の注射可能な結晶性懸濁物（化学的な形態および結晶構造ならびにステロイド分子の粒子サイズの分布を調整することによって、制御される所望のインビボ薬物動態を有する処方物が挙げられる）についての組成物および方法に対して特に、必要性が存在する。エストラジオール代謝産物のための持続性の放出システムを開発することは、広範な種類の獣医学的な疾患およびヒト疾患の処置のために、改善された治療上の選択肢を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
（発明の要旨）
本発明は、エストラジオール代謝産物の徐放性処方物ならびにその製造法および使用法に関する。
【００１１】
本発明の目的は、簡単な注射により投与することができる徐放性処方物を調製するために、結晶性エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログ、またはエストラジオール代謝産物プロドラッグの溶解性およびインビボ薬物動態特性を操作することである。このような処方物は、放出制御装置の追加のかさ高さに制限されることなく、ポリマーマトリクスにおいて利用可能な、望ましい長期間の放出特徴を提供し得る。さらに、結晶性化合物からなる処方物は、制御性放出装置に含まれる化合物の非晶質状態または溶液状態と比較して、より安定性が高いようである。さらに、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログおよびエストラジオール代謝産物プロドラッグの結晶性懸濁物の処方物は、ポリマーマトリクス装置よりも製造するのに、簡単かつ安価であるようである。
【００１２】
理想的には、注射可能な徐放性投薬形態は、より安定性が高く、患者の自己投与を可能にするのに十分簡単であり、そして用量あたりに注射される物質の体積を最小限にし、それにより患者の不快感を最小限にする。したがって、本発明の目的は、固体の結晶状態に由来するエストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログ、またはエストラジオール代謝産物プロドラッグの制御されたインビボ薬物動態に基づく注射可能な徐放性処方物を提供することである。本発明の実施形態は、薬物のインビボ薬物動態特性が、薬物の化学的な形態、結晶多形、粒子サイズおよび薬物の重量を個々にか、または組み合わせて操作することにより制御される徐放性処方物を提供する。このような変更は、多くの特性（例えば、溶解速度）に影響を与え得る。
【００１３】
特定の実施形態において、本発明は、組成物または方法を提供し、ここで、水性媒体中の改変化合物の溶解性を、親化合物の溶解性と比較して増大または低下させるために、エストラジオール代謝産物化合物が、化学的に誘導体化または改変される。これらの化学改変は、元のエストラジオール代謝産物を再生するように、生理的な環境における溶解について可逆的であり得る。あるいは、この化学改変は、生理的な環境において不可逆的であり得る。このような場合において、改変エストラジオール代謝産物の薬理学的な活性の基本的な性質は、定性的にインタクトなままである。このようなプロドラッグは、エストラジオール代謝産物のエステル誘導体であり得る。誘導体としては、ジカルボン酸化合物、二酸、極性化合物およびイオン性化合物が挙げられるが、これらに限定されない。
【００１４】
一実施形態において、エストラジオール代謝産物は、カテコールエストロゲンまたはメトキシエストラジオールである。本発明において使用されるエストラジオール代謝産物は、２−メトキシエストラジオール、２−ヒドロキシエストラジオール、４−メトキシエストラジオール、および４−ヒドロキシエストラジオールからなる群より選択され得る。特定の実施形態において、エストラジオール代謝産物のエステル誘導体は、以下からなる群より選択される：３−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；１７−アセチル−２−メトキシエストラジオール；３−アセチル−２−メトキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−２−メトキシエストラジオール；３−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；１７−アセチル−４−メトキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−４−メトキシエストラジオール；２−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；１７−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３，１７−トリベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３，１７−トリアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；１７−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；４，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；４，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４，１７−トリベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４，１７−トリアセチル−４−ヒドロキシエストラジオールなど。
【００１５】
本発明のエストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物プロドラッグ、またはエストラジオール代謝産物アナログは、所望の時間枠（数日から数ヶ月の範囲に及ぶ）において生理学的媒体に溶解するように、当該分野において公知の任意の方法によって所望の結晶構造に製造され得る。この目的を達成するために使用される例示的な方法としては、熱処理、噴霧乾燥または貧溶媒（ａｎｔｉｓｏｌｖｅｎｔ）沈殿が挙げられるが、これらに限定されない。
【００１６】
本発明の他の実施形態において、所望の結晶充填構造を有するエストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログ、またはエストラジオール代謝産物プロドラッグは、インビボ薬物動態（例えば、組成物の溶解速度）を制御するために、アニール（ａｎｎｅａｌ）、粉砕（ｇｒｉｎｄ）、製粉（ｍｉｌｌ）することによって、または規定のサイズの分布を有する粒子を達成する他のこのような方法によって処理され得る。さらなる実施形態において、異なるサイズの分布を有する粒子調製物がともに混合され得、所望のインビボ薬物動態を達成し得る。
【００１７】
本発明の実施形態は、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログ、またはエストラジオール代謝産物プロドラッグのインビボ薬物動態特性をさらに制御し得る、化学改変、結晶構造、粒子サイズを含む。
【００１８】
本発明は、薬物の結晶を懸濁するために使用される水性希釈剤を提供し、これは薬物の筋肉内注射、腹腔内注射、眼内注射、歯肉下注射または皮下注射を可能にする。この希釈剤は、あらゆる塩、緩衝剤、浸透圧調節物質（ｏｓｍｏｌｙｔｅ）、または等張性を達成するために当該分野において公知であり、かつ実施される他の化合物を含み得る。さらなる実施形態において、懸濁剤は、結晶の湿潤および懸濁を補助するために使用される界面活性剤を含む。
【００１９】
最終的な処方物は、希釈剤中に懸濁されたエストラジオール代謝産物またはエストラジオール代謝産物誘導体の結晶から構成され得る。あるいは、エストラジオール代謝産物またはエストラジオール代謝産物誘導体の結晶は、同一の容器または個別の容器に包装された希釈剤とともに供給され得る。
【００２０】
本発明のさらなる利点は、続く説明で部分的に示され、その説明から部分的に明らかになるか、または本発明の実施により理解され得る。本発明の利点は、添付の特許請求の範囲で特に指摘される要素および組み合わせにより、実現および達成される。上記の一般的な説明および以下の一般的な説明および以下の詳細な説明の両方は単に例示的および説明的であり、これらは特許請求される本発明を制限しないことが理解されるべきである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２１】
（発明の詳細な説明）
本発明は、続く本発明の特定の実施形態の詳細な説明およびそれに含まれる実施例を参照することにより、より容易に理解され得る。
【００２２】
本発明の化合物、組成物および／または方法を開示および記載する前に、本発明は、特定の合成法にも、特定の試薬にも，実験室の技術にも、製造技術にも限定されず、それゆえ、本発明は、当然のことながら、別途示されない限りは変動し得ることが理解されなければならない。また、本明細書で使用される用語法は、特定の実施形態を説明する目的のみのためであり、限定的ではないことも理解されなければならない。
【００２３】
（定義）
本発明の目的のために、以下の用語は、以下の意味を有するべきである。
【００２４】
用語「アナログ」およびその同族語は、エストラジオール代謝産物の活性を示すあらゆる分子をいう。このような分子は、合成アナログ、エストラジオール代謝産物のフラグメント、またはエストラジオール代謝産物様活性の能力を有する、エストラジオール代謝産物以外の内因性の生物学的分子であり得る。つまり、エストラジオール代謝産物アナログは、エストラジオール代謝産物自体と同様か、またはそれよりも高い生物活性を示すあらゆる分子をいう。
【００２５】
本発明の目的のために、用語「プロドラッグ」は、エストラジオール代謝産物のあらゆる改変（血漿循環時間の増大または組織液における溶解性の変更をもたらす物理的変更または化学的変更が挙げられる）をいう。薬物への化学改変は、個体への投与に関して可逆的であり得る。最終産物は、エストラジオール代謝産物、別のエストラジオールプロドラッグまたはエストラジオールアナログを含み得る。
【００２６】
本発明の目的のために、用語「エストラジオール代謝産物」は、エストラジオールからもたらされるあらゆる分子、およびエストラジオール代謝産物、エストラジオールプロドラッグまたはエストラジオールアナログに由来するあらゆる分子を包含する。
【００２７】
本発明の目的のために、用語「薬物」は、任意のエストラジオール代謝産物、任意のエストラジオール代謝産物アナログ、またはエストラジオール代謝産物プロドラッグを言及し得る。
【００２８】
本発明の目的のために、用語「持続性の放出」は、数日間から一ヶ月以上にわたる、エストラジオール代謝産物の放出を言及し得る。
【００２９】
さらに、本発明の目的のために、用語「ａ」または「ａｎ」の実体は、１つ以上のその実体をいい、例えば、「プロドラッグ」または「エストラジオール代謝産物」は、１つ以上のその化合物または少なくとも１つの化合物をいう。それゆえ、用語「ａ」または「ａｎ」、「１つ以上」および「少なくとも１つ」は、本明細書において交換可能に使用され得る。また、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」および「有する」は交換可能に使用され得ることにも留意されるべきである。さらに、「からなる群より選択される」化合物は、続くリスト中の１つ以上の化合物（２つ以上の化合物の混合物（すなわち、組み合わせ）を含む）をいう。本発明にしたがって、単離された化合物または生物学的に純粋な化合物は、その天然の環境から取り出された化合物である。それゆえ、「単離された」および「生物学的に純粋な」は、必ずしも化合物が精製された程度を反映する必要はない。本発明の単離された化合物は、その天然の供給源から取得されても、分子生物学的技術を使用して生成されても、化学合成により生成されてもよい。
【００３０】
最後に、本発明の目的のために、用語「個体」とは、いずれかの性別の動物またはヒトを意味する。
【００３１】
ここで、本発明の特定の実施形態への言及が詳細になされる。
【００３２】
天然に存在するエストラジオール代謝産物の血漿半減期は短い。迅速な肝代謝に部分的に起因して、経口バイオアベイラビリティは低い。さらに、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログ、またはエストラジオール代謝産物プロドラッグを使用して処置され得る数種の適応症（ｉｎｄｉｃａｔｉｏｎ）（例えば、糖尿病性腎症、癌、肥満、または肺高血圧）は、薬物の長期にわたる投与を必要とする。延長された期間にわたる送達のために、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログ、またはエストラジオール代謝産物プロドラッグの投薬形態を開発することは、有用な様式で、これらの特定の治療法を行う新規の方法である。国際特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ０３／１２７２７は、持続性の放出を提供する物質と組み合わせたエストラジオール代謝産物の組成物を記載する。薬物の制御性の放出を引き起こす第二の物質ではなく、結晶状態由来のエストラジオール代謝産物のインビボ薬物動態特性が、放出の持続時間を調節する点において、本発明は、上記とは区別される。エストラジオール代謝産物の放出の制御は、その結晶の化学的特性および物理的特性を変更することにより、発揮され得る。
【００３３】
生理的な環境に配置された結晶性デポーから、所与の時間における薬物の全身濃度は、生理学的な環境における薬物の全体的な溶解性、結晶由来の薬物のインビボ薬物動態、および薬物の排出速度に依存する。エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログ、またはエストラジオール代謝産物プロドラッグの持続性の放出を達成するためのストラテジーの１つは、組織液中での、結晶状態からのこのような化合物の制限された水溶解性および限定された溶解速度を操作することである。ステロイド（エストラジオールおよびエストラジオール代謝産物を含む）は、代表的に、水性媒体中で低い溶解性を示す。これらの化合物の治療上の有用性は、組織液中で達成可能な飽和濃度によって制限され得る。しかしながら、これらの化合物は、所望の放出プロフィールを達成するように、化学改変され得、溶解性とインビボ薬物動態との両方が制御され得る。
【００３４】
（エストラジオール代謝産物の化学改変）
本発明において、特定のエストラジオール代謝産物が選択され得、特定の状態を処置するのに必要とされる、所望の薬物レベルおよび作用の持続時間が達成され得る。１つより多いエストラジオール代謝産物は、特定の細胞型に対して抗増殖活性を有し得る。しかしながら、エストラジオール代謝産物の化学的特性および物理的特性（特に、これらの化合物の水溶性）は、広範に変動し得る。例えば、２−ヒドロキシエストラジオールの水溶性は、２−メトキシエストラジオールのそれよりも約１００倍高い。したがって、生理的な環境におけるエストラジオール代謝産物の溶解性は、注射後の薬物の溶解速度と定常状態の濃度との両方に影響を与え得る。結晶性懸濁物の注射後、２−ヒドロキシエストラジオールは、等用量の２−メトキシエストラジオールに比べて、はるかに高い定常状態の濃度を有することが期待され得る。それゆえ、特定のエストラジオール代謝産物の選択は、所望の生物活性、用量レベル、および作用の持続時間を最適化するための制御の最初の手段としてなされ得る。それに続く投薬形態の最適化は、親のエストラジオール代謝産物化合物を化学改変すること、および／または、所望の構造の結晶を調製すること、および／または、所望の粒子サイズの分布を有する結晶を調製することによって実行され得る。
【００３５】
特定の実施形態において、エストラジオール代謝産物のエステルを利用して、プロドラッグを製造する。このエステル結合は、薬物の調製および貯蔵の間、インタクトなままであり、患者への投与後にのみ加水分解に対して脆弱になる。したがって、エステルは最適なプロドラッグである。なぜなら、組織液は、この結合の加水分解を触媒する内因性エステラーゼを豊富に含むからである。一旦、加水分解が生じると、活性なエストラジオール代謝産物および（例えば、酢酸またはプロピオン酸のような）非毒性の生物学的化合物のみが残る。
【００３６】
また、エステルを使用して、エストラジオール代謝産物の溶解性を制御し得る。増大した水溶性は、例えば、コハク酸でエステル化することにより付与され得る。他のエステルは、種々の他の溶媒中での溶解性を改善し得、そしてまた、これは結晶充填幾何学（ｃｒｙｓｔａｌ  ｐａｃｋｉｎｇ  ｇｅｏｍｅｔｒｙ）の変更（結晶性マトリクスから周囲の組織液へのエステルプロドラッグの放出を制御し得る）を可能にし得る。
【００３７】
本発明の２−メトキシエストラジオールのエステルとしては、３−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール、１７−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール、１７−アセチル−２−メトキシエストラジオール、３−アセチル−２−メトキシエストラジオール、３，１７−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール、および３，１７−ジアセチル−２−メトキシエストラジオールが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３８】
本発明の４−メトキシエストラジオールのエステルとしては、３−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール、１７−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール、１７−アセチル−４−メトキシエストラジオール、３−アセチル−４−メトキシエストラジオール、３，１７−ジベンゾイル−４−メトキシエストラジオール、および３，１７−ジアセチル−４−メトキシエストラジオールが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３９】
２−ヒドロキシエストラジオールのエステルとしては、３−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール、１７−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール、１７−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール、３−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール、３，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール、３，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール、２，３−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール、２，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール、２，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール、２，３−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール、２，３，１７−トリベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール、および２，３，１７−トリアセチル−２−ヒドロキシエストラジオールが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４０】
４−ヒドロキシエストラジオールのエステルとしては、３−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール、１７−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール、１７−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール、３−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール、３，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール、３，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール、３，４−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール、４，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール、４，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール、３，４−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール、３，４，１７−トリベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール、および３，４，１７−トリアセチル−４−ヒドロキシエストラジオールが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４１】
特定の実施形態において、４つ全てのエストラジオール代謝産物のエステルは、元のエストラジオール代謝産物の有機酸誘導体であり得る。特定の実施形態において、これらとしては、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、ヘキサン酸、安息香酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、ステアリン酸および他の脂肪酸のエステルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４２】
本発明で使用されるエストラジオール代謝産物は、２−メトキシエストラジオール、２−ヒドロキシエストラジオール、４−メトキシエストラジオール、および４−ヒドロキシエストラジオールからなる群より選択される。別の好ましい実施形態において、エストラジオール代謝産物のエステル誘導体は、以下からなる群より選択される：３−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；１７−アセチル−２−メトキシエストラジオール；３−アセチル−２−メトキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；３，ｌ７−ジアセチル−２−メトキシエストラジオール；３−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；１７−アセチル−４−メトキシエストラジオール；３−アセチル−４−メトキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−４−メトキシエストラジオール；３−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；１７−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３，１７−トリベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３，１７−トリアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；１７−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；４，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；４，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４，１７−トリベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４，１７−トリアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール。
【００４３】
数種類のエストラジオール代謝産物のエステルを合成する方法が公知である（例えば、特許第５７，０４１，４７９号および同第４９，１００，０７０号を参照のこと）。
【００４４】
当業者は、先に列挙される化合物が単なる例示であり、特定のエストラジオール代謝産物から生成される特定のエステル誘導体に依存して、多くのバリエーションが使用され得ることを認識する。このようなバリエーションは当該分野において公知である。
【００４５】
さらなる実施形態において、エストラジオール代謝産物の活性を示す化合物は、ステロイドに対する構造的な類似性をほとんど有さないか、または全く有さず、これらは、注射可能な結晶性デポー処方物に取り込まれ得る。このようなエストラジオールアナログは、所望の持続時間の持続性の活性を可能にする溶解性およびインビボ薬物動態特性をそれ自体で有し得る。代替的な実施形態において、エストラジオールアナログは化学改変され得、エストラジオールアナログのプロドラッグを形成し得る。エストラジオールアナログの親化合物への化学改変の作用は、エストラジオールアナログの溶解性およびインビボ薬物動態特性を改変する目的を達成するためのものであり、その結果、適切な濃度の薬物の持続性送達が実現され得る。化学改変は、生理的な環境で可逆的であり得る。
【００４６】
（エストラジオール代謝産物の結晶多形）
複合有機分子（例えば、ステロイド）は、結晶を形成することができ、この結晶内で、構成要素の分子は、有限の種類の幾何学的配置に共に充填する。種々の幾何学に充填することのできる化合物は、多形であると呼ばれる。充填幾何学は、一般的にＸ線結晶学的技術を使用して測定される。所定の化合物に対して、隣接する分子間の相互作用の個数と強度とは、結晶の単位格子内の相対的な分子の配置と同様に異なる。結果として、結晶格子から１分子の化合物を放出するのに必要とされるエネルギーは、充填幾何学に依存して増大するか、または減少する。この特性は、溶剤への化合物の溶解速度を部分的に制御する。
【００４７】
結晶状態における化合物の充填幾何学は、当該分野で周知の種々のプロセスを使用して制御され得る。これらとしては、非晶性物質または結晶性物質のアニーリング、噴霧乾燥、あるいは化合物の溶液からの貧溶媒沈殿法が挙げられ得る。エストラジオール代謝産物の物理的特性および化学的特性を変化させる条件は、新規に形成される結晶の充填の配置および粒子サイズを支配し得る。例えば、エストラジオール代謝産物（例えば、２−メトキシエストラジオール）を含む有機溶液が非溶媒レザバに注入される場合、再結晶の反応速度論は、この代謝産物に対する液体の非溶媒（例えば、水）の体積により支配され得る。また、他の条件（例えば、温度、非溶媒中での溶媒の溶解性など）は、再結晶化されるエストラジオール代謝産物の結晶構造および粒子サイズに影響を与え得る。本発明の特定の実施形態は、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログ、またはエストラジオール代謝産物プロドラッグの組成物を提供し、所望のインビボ薬物動態を達成することを補助するために、薬物の充填幾何学が、任意の技術により操作されている。
【００４８】
（エストラジオール代謝産物の結晶の粒子サイズ）
任意の所定の充填幾何学のために、粒子がマイクロメーターのサイズの範囲である場合、結晶状態からの化合物のインビボ薬物動態は、その比表面積にさらに依存する（Ｍａｒｔｉｎ，Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  第４版（１９９３）Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＵＳＡ）。したがって、より小さなサイズを有する結晶性粒子の所定の質量に対して、より多くの分子が固体の表面に存在し、長時間の溶媒和の可能性が高まる。当該分野の熟練者に公知の標準的なアニール法、粉砕法、または製粉法を使用して、粒子サイズを制御することができる。粉砕プロセス、製粉プロセス、またはアニールプロセスは、任意の所望の粒子サイズの分布を生成する意図で、薬物の調製に適用され得る。粒子サイズの分布は、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログ、またはエストラジオール代謝産物プロドラッグの全体的な溶解速度を改変するか、調整するために操作され得る。製粉プロセスそれ自体が、特定の分布を生成するように設計され得るか、または、異なる粒子サイズの分布を有する薬物の個々の調製を異なる製粉手順により処理し得、ともに混合して、所望の薬物動態プロフィールを達成し得る。
【００４９】
特定の実施形態において、エストラジオール代謝産物の結晶の特定の比率が直径５μｍ未満である場合、粉砕プロセスまたは製粉プロセスは、広範な粒子サイズの分布をもたらす。より小さな粒子からのエストラジオール代謝産物のより迅速な溶解は、をもたらす。特定の状態の処置に有益であり得る、薬物の初期「バースト（ｂｕｒｓｔ）」放出をもたらす。
【００５０】
（懸濁液体）
本発明は、薬物の結晶を懸濁し、薬物の筋肉内注射、腹腔内注射、眼内注射、歯肉下注射、または皮下注射を可能にするために使用される、水性希釈剤を提供する。この希釈剤は、等張性を達成するために当該分野で公知であり、かつ実施される、任意の塩、緩衝剤、浸透圧調節物質、または他の化合物を含み得る。さらなる実施形態において、懸濁剤は、結晶の湿潤および懸濁を補助するために使用される界面活性剤を含む。上記の界面活性剤は、以下からなる群より選択され得る：ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドンチロキサポール、ポロキサマー（ｐｏｌｏｘａｍｅｒ）、ポリオキサミンデキストランレシチン、スルホコハク酸ナトリウムのジアルキルエステル、ラウリル硫酸ナトリウム、スルホン酸アルキルアリールポリエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール、ステアリン酸スクロースとジステアリン酸スクロースとの混合物、Ｃ１８Ｈ３７ＣＨ２（ＣＯＮ（ＣＨ３）ＣＨ２（ＣＨＯＨ）４（ＣＨ２ＯＨ）２、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、非晶質セルロース、およびイソノニルフェノキシポリ（グリシドール（ｇｌｙｃｉｄｏｌ））。
【００５１】
以下の実施例は、結晶の形状およびサイズの分布が変動する２ＭＥ結晶の調製、ならびに、結晶性２ＭＥの注射後の、２ＭＥの持続性血漿レベルの例を示す。
【００５２】
（疾患の処置）
本発明の組成物を使用して、エストラジオール代謝産物の投与に応答し得る任意の疾患を処置することができる。
【００５３】
本発明の組成物により処置され得る、１つのこのような疾患としては、代謝症候群が挙げられる。代謝疾患の処置としては、単独の肥満、真性糖尿病、インシュリン抵抗性、高血圧および異脂肪血症（ｄｙｓｌｉｐｉｄｅｍｉａ）、またはそれらの組み合わせ（しばしば、代謝症候群またはシンドロームＸと記載される）が挙げられる。
【００５４】
また、本発明の組成物は、細胞の増殖、血管の再構築、血管作用性サイトカインの発現の増大、細胞外マトリクスタンパク質の沈着の増大、および炎症の増大などにより特徴付けられる、内皮の機能不全に関連する任意の疾患に使用され得る。これらのような症状は、高血圧、肺高血圧、強皮症および他のコラーゲン血管疾患のような疾患に見出される。
【００５５】
また、本発明の組成物は、肺高血圧、エンドセリン−１レベルの増大に関連する任意の疾患、糖尿病性腎症、および腎毒性などからなる群より選択される疾患の処置に有用であり得る。
【実施例】
【００５６】
以下の実施例は、本発明の好ましい実施形態を実証するために含まれる。続く実施例に開示される技術が、本発明者らにより発見され、本発明の実施において良好に機能する技術を代表し、それゆえ、その実施のための好ましい形態を構成するとみなされ得ることが、当業者により認識されなければならない。しかしながら、本開示を鑑みて、当業者は、多くの変更が、開示される特定の実施形態になされ得、本発明の意図および範囲を逸脱することなく同様または類似の結果を依然として取得し得ることを認識する。
【００５７】
（実施例１．エストラジオール代謝産物の結晶の調製）
２ＭＥの４％ｗ／ｖ溶液を、９．２％テトラヒドロフラン、６１％メタノール、および２８％  ６Ｍ塩酸水溶液からなる溶媒中で調製した。この溶液を、等量の激しく攪拌している水に滴下した。得られた固体を、吸引濾過により単離し、水で洗い、減圧下で乾燥させた。得られた２ＭＥの結晶は、長さ５００μｍ、幅約２００μｍよりも大きい大型の中空の角柱と、一辺約５００ｎｍ〜約５０μｍの範囲の立方体状粒子との混合物であった。粒子サイズの広範な範囲は、注射時に、複雑かつ二相性の薬物動態プロフィールを与えるために意図された。
【００５８】
（実施例２．エストラジオール代謝産物の結晶調製物のインビボ薬物動態）
実施例１で生成した物質を、乳鉢と乳棒とで粉砕し、１８０μｍスクリーンを通して篩にかけ、篩にかけた物質の粒子サイズの分布を、Ｃｏｕｌｔｅｒ  ＬＳ１３３２０  粒子サイズ分析器により測定した。粒子サイズの平均の体積は、４８．９８±３６．９５μｍであることが見出された。
【００５９】
０日目に、全ての処置群の動物に、１ｃｃシリンジおよび１’’，２０−ゲージ針を使用する皮下注射により、０．０１％ｗ／ｖ  Ｔｗｅｅｎ  ８０と０．１％ｗ／ｖ  ＳＤＳとを含む２．０％ｗ／ｖカルボキシメチルセルロースナトリウムからなる注射ビヒクル０．２５ｍｌ中で、ラット１匹あたり５ｍｇの２ＭＥを与えた。−３日目に、全てのラットから、尾静脈を介して血液を収集した。１日目、３日目、７日目、２１日目、２８日目、および３５日目に、全てのラットを外側の尾静脈から採血した。血漿サンプルを抽出し、誘導体化し、そして適切なガスクロマトグラフィ−質量検出法を使用して、２ＭＥの濃度を測定した。２ＭＥの薬物動態プロフィールを図１に示す。広範なサイズの分布を有する結晶から放出された血漿濃度プロフィールは、初期バーストと、それに続く３日目と２８日目との間の約５ｎｇ／ｍｌの持続性血中レベルにより特徴付けられる。３５日目までに、２ＭＥの血中レベルは０まで落ち、結晶の完全な溶解を示した。
【００６０】
（実施例３．水溶性を変化させるためのエストラジオール代謝産物のエステル化）
２−メトキシエストラジオールをエステル化して、３−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオールを形成した。２ＭＥの水溶性は、室温でおよそ０．００２ｍｇ／ｍｌである。エステル化した化合物の水溶性は、同一の条件下でその約３分の１である。２−ヒドロキシエストラジオールをエステル化して、３−ヒドロキシエストラ−ｌ，３，５（１０）−トリエン−２，１７β−ジオールジアセテートを形成した。２−ヒドロキシエストラジオールの水溶性は、室温でおよそ０．１５５ｍｇ／ｍｌである。エステル化した化合物の水溶性は、同一の条件下でその約２５分の１である。
【００６１】
（実施例４．エストラジオール代謝産物のエステルのインビボ溶解）
３−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオールの結晶を含む粒子を、２．５％ｗ／ｖカルボキシメチルセルロースナトリウムに懸濁させ、１６ｍｇをラットに皮下注射した。注射部位を１５日間のインキュベーション後に切開した。切開した物質のクロマトグラフィ分析により、注射した用量のうち、６．２％±１．２の放出が示された。
【００６２】
（実施例５．エストラジオール代謝産物の結晶形態の改変）
２−メトキシエストラジオール（２ＭＥ）（Ｔｅｔｒｉｏｎｉｃｓ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）の溶液を、ｎ−メチルピロリドンにより１０％ｗ／ｖの濃度で作製した。１体積の２ＭＥ溶液を、２３℃で、高速で攪拌させている１０００体積の水に添加した。混合物を攪拌し、その後、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）を添加して、０．１％ｗ／ｖの終濃度にした。２ＭＥを沈殿により収集し、０．１％  ＳＤＳで２回洗浄した。サンプルの顕微鏡検査により、回収した結晶が放射状または十字状であり、約１０μｍの平均直径を有することを示した。電量的なＫａｒｌ  Ｆｉｓｈｅｒ湿度分析および示差走査熱量測定により、形成された結晶調製物が２ＭＥのヘミ水和物であることを示した。
【００６３】
（実施例６．エストラジオール代謝産物の改変した結晶形態のインビボ薬物動態）
０日目に、処置群の各々の動物（ｎ＝６）に、１ｃｃシリンジおよび１インチ，２０−ゲージ針を使用する皮下注射により、５％ｗ／ｖマンニトールと０．０５％ｗ／ｖ  ＳＤＳを含む０．５％ｗ／ｖカルボキシメチルセルロースナトリウムからなる注射ビヒクル０．２５ｍｌ中で、ラット１匹あたり５ｍｇの２ＭＥを与えた。−３日目に、全てのラットから、尾静脈を介して血液を収集した。周期的に、ラットを外側の尾静脈から採血した。血漿サンプルを抽出し、誘導体化し、そして適切なガスクロマトグラフィ−質量分析検出法を使用して、２ＭＥの濃度を測定した。血漿濃度  対  時間を図２にプロットする。２８日目までに、血漿２ＭＥ濃度は０まで落ち、注射した用量の完全な溶解を示した。
【００６４】
（実施例７．エストラジオール代謝産物のインビボ薬物動態）
実施例１で調製した２−メトキシエストラジオールの一部を、乳鉢と乳棒とにより粉砕し、ステンレス鋼スクリーンを通して篩にかけ、９０μｍ〜１８０μｍの範囲に及ぶ粒子の集団を生成した。０日目に、処置群の各々の動物（ｎ＝６）に、１ｃｃシリンジおよび１インチ，２０−ゲージ針を使用する皮下注射により、５％ｗ／ｖマンニトールと０．０５％ｗ／ｖ  ＳＤＳを含む０．５％ｗ／ｖカルボキシメチルセルロースナトリウムからなる注射ビヒクル０．２５ｍｌ中で、ラット１匹あたり５ｍｇの２ＭＥを与えた。−３日目に、全てのラットから、尾静脈を介して血液を収集した。周期的に、ラットを外側の尾静脈から採血した。血漿サンプルを抽出し、誘導体化し、そして適切なガスクロマトグラフィ−質量分析検出法を使用して、２ＭＥの濃度を測定した。血漿濃度  対  時間を図３にプロットする。インビボ溶解は、第一週の低い初期血漿濃度と、それに続く７日目と２８日目との間の約２〜４ｎｇ／ｍｌの定常濃度により特徴付けられた。５１日目においても、血漿中の２ＭＥは依然として測定可能であった。
【００６５】
本明細書中で開示され、特許請求される全ての組成物、方法および装置は、本開示を鑑みて過度の実験をすることなく作製および実行され得る。本発明の組成物および方法は、好ましい実施形態に関して記載されているが、本発明の概念、意図および範囲から逸脱することなく、バリエーションが、組成物、方法および装置ならびに本明細書に記載される方法の工程および工程の順序に適用され得ることが当業者に明らかである。より具体的には、化学的および生理的の両方で関連する特定の因子が、同一または類似の結果を達成しながら、本明細書に記載される因子と置き換えられ得ることが明らかである。当業者に明らかな全てのこのような類似の置き換えおよび改変が、添付の特許請求の範囲により規定される本発明の意図、範囲および概念内であるとみなされる。
【図面の簡単な説明】
【００６６】
【図１】図１である。
【図２】図２である。
【図３】図３である。
【図１】
2008513375.tif 000003
【図２】
2008513375.tif 000004
【図３】
2008513375.tif 000005
【国際調査報告】
2008513375.tif 000006