(57)【要約】本発明は、式Ｉの化合物、および５−ＨＴ６レセプターに関連したまたはそれにより影響される中枢神経系障害を治療するためのそれらの使用を提供する。式Ｉの化合物において、Ｑは、ＣＯ２Ｒ５またはＣＨ２ＮＲ６ＣＯＲ７である；Ｒ１は、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルである；Ｒ２は、アリールまたはヘテロアリール基であり、各々は、必要に応じて、置換されているか、あるいは、必要に応じて置換した８員〜１３員二環式または三環式環系であり、該環系は、必要に応じて置換した８員〜１３員二環式または三環式環系であり、該環系は、橋頭において、Ｎ原子を有し、そして必要に応じて、１個、２個または３個の追加ヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、Ｎ、ＯまたはＳから選択される。2008504267.tif 000022
2008504267.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物、あるいはそれらの立体異性体または薬学的に受容可能な塩：
【化１】
2008504267.tif 000019
ここで、
Ｑは、ＣＯ２Ｒ５またはＣＨ２ＮＲ６ＣＯＲ７である；
Ｒ１は、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルである；
Ｒ２は、アリールまたはヘテロアリール基であり、各々は、必要に応じて、置換されているか、あるいは、必要に応じて置換した８員〜１３員二環式または三環式環系であり、該環系は、必要に応じて置換した８員〜１３員二環式または三環式環系であり、該環系は、橋頭において、Ｎ原子を有し、そして必要に応じて、１個、２個または３個の追加ヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、Ｎ、ＯまたはＳから選択される；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ別個に、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＯＣＯ２Ｒ８、ＣＯ２Ｒ９、ＣＯＮＲ１０Ｒ１１、ＣＮＲ１２ＮＲ１３Ｒ１４、ＳＯｍＲ１５、ＮＲ１６Ｒ１７、ＯＲ１８、ＣＯＲ１９、あるいはＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、シクロヘテロアルキル、アリールまたはヘテロアリール基であり、各々は、必要に応じて、置換されている；
Ｒ５およびＲ６は、それぞれ別個に、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルである；
Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたは
【化２】
2008504267.tif 000020
である；
ｍは、０、あるいは１または２の整数である；
Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１５およびＲ１９は、それぞれ別個に、Ｈ、あるいはＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、シクロヘテロアルキル、アリールまたはヘテロアリール基であり、各々は、必要に応じて、置換されている；
Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１８は、それぞれ別個に、Ｈ、あるいはＣ１〜Ｃ６アルキル、アリールまたはヘテロアリール基であり、各々は、必要に応じて、置換されているか、あるいはＲ１０およびＲ１１は、それらが結合する原子と一緒になって、５員〜７員環を形成し得、該環は、必要に応じて、別のヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、Ｏ、ＮまたはＳから選択される；そして
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１６およびＲ１７は、それぞれ別個に、Ｈ、あるいはＣ１〜Ｃ４アルキル、アリールまたはヘテロアリール基であり、各々は、必要に応じて、置換されている；あるいはＲ１３およびＲ１４またはＲ１６およびＲ１７は、それらが結合する原子と一緒になって、５員〜７員環を形成し得、該環は、必要に応じて、別のヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、Ｏ、ＮまたはＳから選択される、
化合物、あるいはそれらの立体異性体または薬学的に受容可能な塩。
【請求項２】
Ｒ１、Ｒ３およびＲ４が、Ｈである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ２が、イミダゾリルまたはイミダゾチアゾリル基であり、各々が、必要に応じて、置換されている、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｑが、ＣＯ２Ｈ、ＣＨ２ＮＨＣＯＣＨ３または
【化３】
2008504267.tif 000021
である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項５】
以下からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物：
Ｎ−（２−｛１−［（６−クロロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−５−イル）スルホニル］−１Ｈ−インドール−３−イル｝エチル）アセトアミド；
１−Ｏ−｛［（２−｛１−［（６−クロロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−５−イル）スルホニル］−１Ｈ−インドール−３−イル｝エチル）アミノ］カルボニル｝−β−Ｄ−グルコピラヌロン酸；
｛１−［（６−クロロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−５−イル）スルホニル］−１Ｈ−インドール−３−イル｝酢酸；
Ｎ−［（１−｛［４−クロロ−２−（メチルチオ）−１Ｈ−イミダゾール−５−イル］スルホニル｝−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル］アセトアミド；
それらの立体異性体；および
それらの薬学的に受容可能な塩。
【請求項６】
Ｎ−（２−｛１−［（６−クロロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−５−イル）スルホニル］−１Ｈ−インドール−３−イル｝エチル）アセトアミドである、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
１−Ｏ−｛［（２−｛１−［（６−クロロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−５−イル）スルホニル］−１Ｈ−インドール−３−イル｝エチル）アミノ］カルボニル｝−β−Ｄ−グルコピラヌロン酸である、請求項５に記載の化合物。
【請求項８】
それを必要とする患者における５−ＨＴ６レセプターに関連したまたはそれにより影響される中枢神経系障害を治療する方法であって、該患者に、請求項１〜７のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物の治療有効量を供給する工程を包含する、方法。
【請求項９】
前記障害が、神経変性疾患；不安障害；および認知障害からなる群から選択される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記不安または認知障害が、多動症候群；強迫性障害；および全般性不安障害からなる群から選択される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
薬学的に受容可能な担体と、請求項１〜７のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物の有効量とを含有する、医薬組成物。
【請求項１２】
（１−アリールスルホニル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチルアミン誘導体の代謝を定量する方法であって、請求項１〜７のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物の存在について、試験試料を評価する工程を包含する、方法。
【請求項１３】
神経変性疾患、不安障害または認知障害を治療する医薬を製造するための、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、５−ヒドロキシトリプタミン−６配位子としてのインドリルアルキルアミン代謝物、それらを含有する医薬組成物、それらを使用する治療方法、およびそれらを使用して（１−アリールスルホニル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチルアミン誘導体の代謝を定量する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
種々の中枢神経系障害（例えば、不安、鬱病、運動障害など）は、神経伝達物質５−ヒドロキシトリプタミン（５−ＨＴ）またはセロトニンの障害に関与すると考えられている。セロトニンは、中枢神経系および末梢神経系に局在化し、とりわけ、精神障害、運動活動、摂食行動、性的活動、および神経内分泌調節を含む多くの型の状態に影響を及ぼすことが公知である。セロトニンの影響は、種々の５−ＨＴレセプターサブタイプによって調節される。既知の５−ＨＴレセプターとしては、５−ＨＴ１ファミリー（例えば、５−ＨＴ１Ａ）、５−ＨＴ２ファミリー（例えば、５−ＨＴ２Ａ）、５−ＨＴ３、５−ＨＴ４、５−ＨＴ５、５−ＨＴ６および５−ＨＴ７のサブタイプが挙げられる。
【０００３】
ヒト５−ヒドロキシトリプタミン−６（５−ＨＴ６）レセプターサブタイプは、クローニングされ、そのｍＲＮＡの広範な分布が報告されている。５−ＨＴ６レセプターｍＲＮＡの最も高いレベルは、嗅結節、線条、側坐核、歯状回ならびに海馬のＣＡ１領域、ＣＡ２領域およびＣＡ３領域において観察されている。５−ＨＴ６レセプターｍＲＮＡの最も低いレベルは、小脳の顆粒層、数個の間脳核、扁桃および皮質において見られる。ノーザンブロットによって、５−ＨＴ６レセプターｍＲＮＡが、もっぱら脳に存在するようであることが明らかにされ、末梢組織におけるその存在についての証拠はほとんどない。線条、嗅結節および側坐核におけるそのｍＲＮＡの局在化に加えて、５−ＨＴ６レセプターについての多くの抗精神病薬の高親和性は、これらの化合物の臨床作用のうちのいくつかが、このレセプターを介して媒介され得ることを示唆する。従って、５−ＨＴ６レセプターリガンドは、特定のＣＮＳ障害（例えば、不安、鬱病、癲癇、強迫性障害、注意欠陥障害、片頭痛、認知記憶増強（ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  ｍｅｍｏｒｙ  ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ）（例えば、アルツハイマー病の処置のため）、睡眠障害、摂食障害（例えば、食欲不振または過食症）、神経変性障害（例えば、脳卒中または頭部外傷）、パニック発作、薬物乱用（例えば、コカイン、エタノール、ニコチンまたはベンゾジアゼピン）からの離脱症状、精神分裂病など）の処置；または特定の胃腸障害（例えば、過敏性腸症候群）の処置において潜在的に有用であると考えられている。
【０００４】
特許文献１に記載されるものようなインドリルアルキルアミン誘導体は、有力かつ選択的な５−ＨＴ６リガンドである。これまで、上記インドリルアルキルアミン誘導体の代謝物は、同定、単離、精製または合成されていなかった。
【特許文献１】米国特許出願公開第２００３−０１７１３５３Ａ−１号明細書
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
従って、本発明の目的は、インドリルアルキルアミン５−ＨＴ６リガンドの代謝物であり、そして５−ＨＴ６レセプターに関連するか、または５−ＨＴ６レセプターに影響される種々の中枢神経系障害の処置における治療因子として有用である、化合物を提供することである。
【０００６】
本発明の別の目的は、５−ＨＴ６リガンドによって軽減される中枢神経系障害の処置のために有用な治療方法および医薬組成物を提供することである。
【０００７】
本発明のさらなる目的は、インドリルアルキルアミン誘導体の代謝物を決定するための方法を提供することである。
【０００８】
本発明のこれらおよび他の目的ならびにこれらおよび他の特徴は、本明細書中の以下の詳細な説明によって、より明らかになる。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
（発明の要旨）
本発明は、式Ｉの化合物、あるいはそれらの立体異性体または薬学的に受容可能な塩を提供する：
【００１０】
【化４】
2008504267.tif 000003
ここで、
Ｑは、ＣＯ２Ｒ５またはＣＨ２ＮＲ６ＣＯＲ７である；
Ｒ１は、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルである；
Ｒ２は、アリールまたはヘテロアリール基であり、各々は、必要に応じて、置換されているか、あるいは、必要に応じて置換した８員〜１３員二環式または三環式環系であり、該環系は、必要に応じて置換した８員〜１３員二環式または三環式環系であり、該環系は、橋頭において、Ｎ原子を有し、そして必要に応じて、１個、２個または３個の追加ヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、Ｎ、ＯまたはＳから選択される；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ別個に、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＯＣＯ２Ｒ８、ＣＯ２Ｒ９、ＣＯＮＲ１０Ｒ１１、ＣＮＲ１２ＮＲ１３Ｒ１４、ＳＯｍＲ１５、ＮＲ１６Ｒ１７、ＯＲ１８、ＣＯＲ１９、あるいはＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、シクロヘテロアルキル、アリールまたはヘテロアリール基であり、各々は、必要に応じて、置換されている；
Ｒ５およびＲ６は、それぞれ別個に、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルである；
Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたは
【００１１】
【化５】
2008504267.tif 000004
である；
ｍは、０、あるいは１または２の整数である；
Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１５およびＲ１９は、それぞれ別個に、Ｈ、あるいはＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、シクロヘテロアルキル、アリールまたはヘテロアリール基であり、各々は、必要に応じて、置換されている；
Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１８は、それぞれ別個に、Ｈ、あるいはＣ１〜Ｃ６アルキル、アリールまたはヘテロアリール基であり、各々は、必要に応じて、置換されているか、あるいはＲ１０およびＲ１１は、それらが結合する原子と一緒になって、５員〜７員環を形成し得、該環は、必要に応じて、別のヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、Ｏ、ＮまたはＳから選択される；そして
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１６およびＲ１７は、それぞれ別個に、Ｈ、あるいはＣ１〜Ｃ４アルキル、アリールまたはヘテロアリール基であり、各々は、必要に応じて、置換されている；あるいはＲ１３およびＲ１４またはＲ１６およびＲ１７は、それらが結合する原子と一緒になって、５員〜７員環を形成し得、該環は、必要に応じて、別のヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、Ｏ、ＮまたはＳから選択される。
【００１２】
本発明はまた、５−ＨＴ６レセプターに関連したまたはそれにより影響される中枢神経系障害を治療する方法およびインドリルアルキルアミン誘導体の代謝物を定量する方法を提供する。
【００１３】
（発明の詳細な説明）
５−ヒドロキシトリプタミン−６（５−ＨＴ６）レセプターが精神医学で使用される広範囲の治療化合物に結合する性能は、脳内でのその興味深い分布と相まって、該レセプターと相互作用または影響できる新しい化合物の点で、大きな興味を促している。精神病、認知障害、運動機能および制御、記憶、気分などにおいて５−ＨＴ６レセプターが果たす可能性がある役割を理解するべく、多大な努力がなされている。その目的のために、５−ＨＴ６レセプターに対する結合アフィニティーを示す化合物は、中枢神経系障害の治療における潜在的な治療薬として、熱心に探求されている。例えば、Ｃ．Ｒｅａｖｉｌｌ  ａｎｄ  Ｄ．Ｃ．Ｒｏｇｅｒｓ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌ  Ｄｒｕｇｓ，２００１，２（１）：１０４−１０９，Ｐｈａｒｍａ  Ｐｒｅｓｓ  Ｌｔｄ．を参照のこと。
【００１４】
５−ＨＴ６レセプターに対する強力かつ選択的な結合アフィニティーを有する
インドリルアルキルアミン誘導体およびそれらの調製は、特許出願公報ＵＳ２００３−０１７１３５３Ａ−１で記載されており、その内容は、本明細書中で参考として援用されている。今まで、該インドリルアルキルアミン誘導体の代謝物は、同定、単離、精製または合成されていない。
【００１５】
驚くべきことに、今ここで、式Ｉの化合物がインドリルアルキルアミン５−ＨＴ６誘導体の代謝物であることが発見された。有利なことに、該式Ｉ化合物は、５−ＨＴ６レセプターに関連したまたはそれにより影響される中枢神経系（ＣＮＳ）障害を治療する有効な治療薬として、使用され得る。
【００１６】
従って、本発明は、式Ｉの化合物、あるいはそれらの立体異性体または薬学的に受容可能な塩を提供する：
【００１７】
【化６】
2008504267.tif 000005
ここで、
Ｑは、ＣＯ２Ｒ５またはＣＨ２ＮＲ６ＣＯＲ７である；
Ｒ１は、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルである；
Ｒ２は、アリールまたはヘテロアリール基であり、各々は、必要に応じて、置換されているか、あるいは、必要に応じて置換した８員〜１３員二環式または三環式環系であり、該環系は、必要に応じて置換した８員〜１３員二環式または三環式環系であり、該環系は、橋頭において、Ｎ原子を有し、そして必要に応じて、１個、２個または３個の追加ヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、Ｎ、ＯまたはＳから選択される；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ別個に、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＯＣＯ２Ｒ８、ＣＯ２Ｒ９、ＣＯＮＲ１０Ｒ１１、ＣＮＲ１２ＮＲ１３Ｒ１４、ＳＯｍＲ１５、ＮＲ１６Ｒ１７、ＯＲ１８、ＣＯＲ１９、あるいはＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、シクロヘテロアルキル、アリールまたはヘテロアリール基であり、各々は、必要に応じて、置換されている；
Ｒ５およびＲ６は、それぞれ別個に、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルである；
Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたは
【００１８】
【化７】
2008504267.tif 000006
である；
ｍは、０、あるいは１または２の整数である；
Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１５およびＲ１９は、それぞれ別個に、Ｈ、あるいはＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、シクロヘテロアルキル、アリールまたはヘテロアリール基であり、各々は、必要に応じて、置換されている；
Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１８は、それぞれ別個に、Ｈ、あるいはＣ１〜Ｃ６アルキル、アリールまたはヘテロアリール基であり、各々は、必要に応じて、置換されているか、あるいはＲ１０およびＲ１１は、それらが結合する原子と一緒になって、５員〜７員環を形成し得、該環は、必要に応じて、別のヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、Ｏ、ＮまたはＳから選択される；そして
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１６およびＲ１７は、それぞれ別個に、Ｈ、あるいはＣ１〜Ｃ４アルキル、アリールまたはヘテロアリール基であり、各々は、必要に応じて、置換されている；あるいはＲ１３およびＲ１４またはＲ１６およびＲ１７は、それらが結合する原子と一緒になって、５員〜７員環を形成し得、該環は、必要に応じて、別のヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、Ｏ、ＮまたはＳから選択される。
【００１９】
本明細書および請求の範囲で使用するハロゲンとの用語は、Ｂｒ、Ｃｌ、ＩまたはＦを示し、そしてシクロヘテロアルキルとの用語は、１個または２個のヘテロ原子および必要に応じて１個の二重結合を含有する５員〜７員シクロアルキル環系を示し、このヘテロ原子は、同一または異なり得、Ｎ、ＯまたはＳから選択される。本明細書中で指定された用語に含まれるシクロヘテロアルキル環系の代表例は、以下の環であり、ここで、Ｘは、ＮＲ、ＯまたはＳである；そしてＲは、Ｈまたは以下で記述する任意の置換基である：
【００２０】
【化８】
2008504267.tif 000007
同様に、本明細書および請求の範囲で使用するヘテロアリールとの用語は、１個、２個または３個のヘテロ原子を含有する５員〜１０員芳香環系を示し、このヘテロ原子は、同一または異なり得、Ｎ、ＯまたはＳから選択される。このようなヘテロアリール環系には、ピロリル、アゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、フリル、チエニル、キノリニル、イソキノリニル、インドリル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、ベンゾイソキサゾリルなどが挙げられる。アリールとの用語は、例えば、６個〜１４個の炭素原子を有する炭素環式芳香環系（例えば、フェニル、ナフチル、アントラセニルなど）を示す。本明細書中で使用するハロアルキルとの用語は、１個〜２ｎ＋１個のハロゲン原子（これらは、同一または異なり得る）を有するＣｎＨ２ｎ＋１基を示し、そして本明細書中で使用するハロアルコキシとの用語は、１個〜２ｎ＋１個のハロゲン原子（これらは、同一または異なり得る）を有するＯＣｎＨ２ｎ＋１基を示す。
【００２１】
この８員〜１３員二環式または三環式環系（これは、橋頭において、Ｎ原子を有し、そして必要に応じて、１個、２個または３個の追加ヘテロ原子を含有し、該ヘテロ原子は、Ｎ、ＯまたはＳから選択され、そして本明細書中で指定された用語に含まれる）の代表例には、以下の環系があり、ここで、Ｗは、ＮＲ、ＯまたはＳである；そしてＲは、Ｈまたは以下で記述する任意の置換基である：
【００２２】
【化９】
2008504267.tif 000008
本明細書および請求の範囲において、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、シクロヘテロアルキル、アリール、ヘテロアリールあるいは８員〜１３員二環式または三環式環系（これは、橋頭において、Ｎ原子を有する）との用語が必要に応じて置換したと示されるとき、必要に応じて存在している置換基は、それらの構造／活性、持続性、吸収性、安定性または他の有益な特性に影響を与えるために、医薬化合物の開発またはこのような化合物の改良において通例使用されるものの１つまたはそれ以上（例えば、２つまたは３つ；これらは、同一または異なる）であり得る。このような置換基の具体例には、ハロゲン原子、ニトロ、シアノ、チオシアナト、シアナト、ヒドロキシル、アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、ホルミル、アルコキシカルボニル、カルボキシル、アルカノイル、アルキルチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、カルバモイル、アルキルアミド、フェニル、フェノキシ、ベンジル、ベンジルオキシ、ヘテロアリール、シクロヘテロアルキルまたはシクロアルキル基、好ましくは、ハロゲン原子あるいはＣ１〜Ｃ６アルキル基が挙げられる。典型的には、０個〜３個の置換基（これらは、同一または異なる）が存在し得る。前述の置換基のいずれかがアルキル置換基（例えば、アルコキシ、アルカノイル）を表わすかそれを含むとき、これは、直鎖または分枝であり得、そして、１２個まで、好ましくは、６個まで、さらに好ましくは、４個までの炭素原子を含有し得る。
【００２３】
薬学的に受容可能な塩は、式Ｉの化合物と薬学的に受容可能な酸（例えば、リン酸、硫酸、塩酸、臭化水素酸、クエン酸、マレイン酸、マロン酸、マンデル酸、コハク酸、フマル酸、酢酸、乳酸、硝酸、スルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸など）とにより形成される任意の酸付加塩であり得る。
【００２４】
本発明の化合物には、エステル、カーバメートまたは他の通常のプロドラッグ形態が挙げられ、これらは、一般に、本発明の化合物の機能性誘導体であり、そしてインビボで、本発明の活性部分に容易に変換される。それに対応して、本発明の方法は、この上で記述した種々の病態を、式Ｉの化合物、または具体的には開示されていないが投与するとインビボで式Ｉの化合物に変換する化合物で治療することを包含する。また、本発明の化合物の代謝物も含まれ、それらは、これらの化合物を生体系に導入するとすぐに産生される活性種として、定義される。
【００２５】
式Ｉの化合物が１個またはそれ以上のキラル中心または不斉炭素を含有するとき、該式Ｉの化合物は、１個またはそれ以上の立体異性体として、存在し得る。種々の立体異性体には、鏡像異性体、ジアステレオマー、アトロプ異性体および幾何異性体が挙げられる。当業者は、１つの立体異性体が、他の立体異性体に対して富んでいるとき、または他の立体異性体から分離されるとき、より活性であり得るか、または有益な効果を示し得ることを理解する。さらに、当業者は、該立体異性体をいかにして分離、富化または選択的に調製するかを知っている。従って、本発明は、式Ｉの化合物、それらの立体異性体およびそれらの薬学的に受容可能な塩を包含する。本発明の化合物は、立体異性体の混合物として、個々の立体異性体として、または光学活性形状として、存在し得る。
【００２６】
本発明の好ましい化合物には、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４がＨである式Ｉの化合物がある。また、Ｒ２がイミダゾリルまたはイミダゾチアゾリル基であり、各々が、必要に応じて、置換されている式Ｉの化合物も、好ましい。好ましい式Ｉの化合物の別の群には、ＱがＣＯ２Ｈ、ＣＨ２ＮＨＣＯＣＨ３または
【００２７】
【化１０】
2008504267.tif 000009
であるものがある。
【００２８】
本発明のさらに好ましい化合物には、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４がＨであり、そしてＲ２がイミダゾリルまたはイミダゾチアゾリル基であり、各々が、必要に応じて、置換されている式Ｉの化合物がある。さらに好ましい化合物の別の群には、Ｒ１、Ｒ３およびＲ４がＨである；Ｒ２がイミダゾリルまたはイミダゾチアゾリル基であり、各々が、必要に応じて、置換されている；そしてＱがＣＨ２ＮＨＣＯＣＨ３または
【００２９】
【化１１】
2008504267.tif 000010
である式Ｉの化合物がある。
【００３０】
本発明の好ましい化合物のうちには、以下がある：
Ｎ−（２−｛１−［（６−クロロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−５−イル）スルホニル］−１Ｈ−インドール−３−イル｝エチル）アセトアミド；
１−Ｏ−｛［（２−｛１−［（６−クロロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−５−イル）スルホニル］−１Ｈ−インドール−３−イル｝エチル）アミノ］カルボニル｝−β−Ｄ−グルコピラヌロン酸；
｛１−［（６−クロロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−５−イル）スルホニル］−１Ｈ−インドール−３−イル｝酢酸；
Ｎ−［（１−｛［４−クロロ−２−（メチルチオ）−１Ｈ−イミダゾール−５−イル］スルホニル｝−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル］アセトアミド；それらの立体異性体；またはそれらの薬学的に受容可能な塩。
【００３１】
本発明の化合物は、好都合には、通常の合成方法、ならびに、もし必要なら、標準的な分離および単離技術を使用して、調製され得る。例えば、ＱがＣＯ２Ｒ５である式Ｉの化合物（Ｉａ）は、式ＩＩのインドール誘導体と、強塩基（例えば、ｎ−ブチルリチウム、ＫＯｔ−ＢｕまたはＮａＨ）およびハロゲン化アリールスルホニルＣｌＳＯ２Ｒ２とを連続的に反応させることにより、調製され得る。この反応は、流れ図Ｉで示す。
【００３２】
（流れ図Ｉ）
【００３３】
【化１２】
2008504267.tif 000011
ＱがＣＨ２ＮＲ６ＣＯＲ７であり、そしてＲ７がＣ１〜Ｃ６アルキルである式Ｉの化合物（Ｉｂ）は、塩基（例えば、Ｎ（Ｃ２Ｈ５）３の存在下にて、必要に応じて、触媒量の４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下にて、式ＩＩＩの化合物と式ＩＶの無水物とを反応させることにより、調製され得る。この反応は、流れ図ＩＩで示す。
【００３４】
（流れ図ＩＩ）
【００３５】
【化１３】
2008504267.tif 000012
ＱがＯ−グルコピラヌロン酸である式Ｉの化合物（Ｉｃ）は、触媒量のＤＭＡＰの存在下にて、式ＩＩＩの化合物と二カルボン酸ジ−ｔ−ブチル［（Ｂｏｃ）２Ｏ］およびＣＨ３ＣＮとを反応させて、その場で、式ＩＶのイソシアネートを形成することにより、そして該イソシアネートを式Ｖのヒドロキシグルクロン酸エステルと反応させて、式ＶＩのカルバモイルエステルを得ることにより、そして該エステルを塩基（例えば、ＬｉＯＨ）で加水分解して、式Ｉｃの所望化合物を得ることにより、調製され得る。この反応順序は、流れ図ＩＩＩで示し、ここで、Ａｃは、ＣＯＣＨ３を表わす。
【００３６】
（流れ図ＩＩＩ）
【００３７】
【化１４】
2008504267.tif 000013
式ＩＩの化合物は、業者から得られるか、または公知の合成方法（例えば、Ｂａｌｄｉ、Ｂ．Ｇ．ら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｌａｂｅｌｌｅｄ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ａｎｄ  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ（１９８５），２２（３），２７９−２８５またはＳａｍｉｚｕ，Ｋ．ａｎｄ  Ｏｇａｓａｗａｒａ，Ｋ．，Ｓｙｎｌｅｔｔ（１９９４），（７），４９９−５００）を使用して、容易に調製され得る。
【００３８】
式ＩＩＩの化合物およびそれらの調製は、ＵＳ  ２００３−０１７１３５３Ａ−１，ＵＳ  ６，１８７，８０５およびＵＳ  ６，４０３，８０８で記載されている。
【００３９】
あるいは、式Ｉの化合物は、哺乳動物試験被験体にインドリルアルキルアミン誘導体（例えば、式ＩＩＩの化合物）を供給することにより、そして該被験体の血漿から式Ｉの化合物を単離することにより、得られる。
【００４０】
有利には、本発明の式Ｉの化合物は、５−ＨＴ６レセプターに関連したまたはそれにより影響される中枢神経系障害（例えば、不安障害、気分、精神、認知または神経変性疾患など（例えば、アルツハイマー病、多動症候群、急性不安障害、全般性不安障害、癲癇、鬱病、強迫性障害、片頭痛、睡眠障害、神経変性疾患（例えば、外傷または卒中）、摂食障害（例えば、拒食症または過食症）、統合失調症、記憶喪失、薬物またはニコチンの乱用による禁断症状に関連した障害など））、あるいはある種の胃腸障害（例えば、過敏性腸症候群）の治療で、有用である。従って、本発明は、それを必要とする患者における５−ＨＴ６レセプターに関連したまたはそれにより影響される中枢神経系（ＣＮＳ）の障害を治療する方法を提供し、該方法は、該患者に、この上で記述した式Ｉの化合物の治療有効量を供給する工程を包含する。この化合物は、経口または非経口投与により、あるいは治療薬の有効な投与であることが公知の任意の一般的な様式で、それを必要とする患者に供給され得る。
【００４１】
特定のＣＮＳ障害の治療で供給される治療有効量は、治療する特定の病態、患者の体格、年齢および応答パターン、その障害の重症度、担当医の判断などに従って、変わり得る。一般に、毎日経口投与に有効な量は、約０．０１〜１，０００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは、約０．５〜５００ｍｇ／ｋｇであり得、そして非経口投与に有効な量は、約０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは、約０．５〜５０ｍｇ／ｋｇであり得る。
【００４２】
実際には、本発明の化合物は、この化合物またはそれらの前駆体を、固体または液体形状で、純粋状態で、あるいは１種またはそれ以上の通常の医薬担体または賦形剤と併用して、いずれかで、投与することにより、供給される。従って、本発明は、薬学的に受容可能な担体と、この上で記述した式Ｉの化合物の有効量とを含有する医薬組成物を提供する。
【００４３】
本発明の組成物で使用するのに適当な固体担体には、香味料、潤滑剤、可溶化剤、懸濁剤、充填剤、グライダント（ｇｌｉｄａｎｔｓ）、圧縮助剤、結合剤、錠剤崩壊剤またはカプセル化物質としても作用し得る１種またはそれ以上の物質が挙げられる。粉末では、この担体は、細かく分割された固形物であり、これは、式Ｉの細かく分割された化合物と混合されている。錠剤では、式Ｉの化合物は、適当な割合で、必要な圧縮特性を有する担体と混合され得、そして所望の形状および大きさで緻密化され得る。該粉末および錠剤は、９９重量％までの式Ｉの化合物を含有し得る。本発明の組成物で使用するのに適当な固体担体には、リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖類、ラクトース、デキストリン、デンプン、ゼラチン、セルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニルピロリドン、低融解ワックスおよびイオン交換樹脂が挙げられる。
【００４４】
溶液、懸濁液、乳濁液、シロップおよびエリキシル剤を調製するのに適当な任意の薬学的に受容可能な液体担体は、本発明の組成物中で使用され得る。式Ｉの化合物は、薬学的に受容可能な液体担体（例えば、水、有機溶媒、または薬学的に受容可能な油脂）、またはそれらの混合物に溶解または懸濁され得る。該液状組成物は、他の適当な医薬添加剤（例えば、可溶化剤、乳化剤、緩衝液、防腐剤、甘味料、香味料、懸濁剤、増粘剤、着色剤、粘度調節剤、安定剤、浸透調節剤など）を含有し得る。経口投与および非経口投与に適当な液体担体の例には、水（これは、特に、上記のような添加剤（例えば、セルロース誘導体、好ましくは、カルボキシメチルセルロースナトリウム溶液）を含有する）、アルコール（これには、一価アルコールおよび多価アルコール（例えば、グリコール）が挙げられる）またはそれらの誘導体、あるいはオイル（例えば、分別したやし油および落花生油）が挙げられる。非経口投与には、この担体はまた、油性エステル（例えば、オレイン酸エチルまたはミリスチン酸イソプロピル）であり得る。
【００４５】
無菌溶液または懸濁液である本発明の組成物は、筋肉内注射、腹腔内注射または皮下注射に適当である。無菌溶液はまた、静脈内に投与され得る。経口投与に適当な本発明の組成物は、液体または固体のいずれかの組成物形状であり得る。
【００４６】
有利には、式Ｉの化合物は、インドリルアルキルアミン誘導体の吸収または代謝を同定または定量するのに使用され得る。従って、本発明は、（１−アリールスルホニル−１Ｈ−インドール−３−イル）エチルアミン誘導体の代謝を定量する方法を提供し、該方法は、式Ｉの化合物の存在について、試験試料を評価する工程を包含する。
【００４７】
さらに明白に理解するために、また、本発明をさらに明瞭に説明するために、それらの特定の実施例を以下に示す。以下の実施例は、単に例示であり、いずれの様式でも、本発明の範囲およびその基礎となる原理を限定するものと理解すべきではない。
【００４８】
特に明記しない限り、全ての部は、重量部である。ＮＭＲおよびＨＰＬＣとの用語は、それぞれ、核磁気共鳴および高速液体クロマトグラフィーを示す。ＴＨＦとの用語は、テトラヒドロフランを示す。
【実施例】
【００４９】
（実施例１）
（Ｎ−（２−｛１−［（６−クロロ−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−５−イル）スルホニル］−１Ｈ−インドール−３−イル｝−エチル）アセトアミドの調製）
【００５０】
【化１５】
2008504267.tif 000014
ジクロロメタンおよびトリエチルアミン（０．４０ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）中の２−｛１−［（６−クロロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−５−イル）スルホニル］−１Ｈ−インドール−３−イル｝エチルアミン塩酸塩（４１７ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）の撹拌混合物を、室温で、窒素下にて、触媒４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（約５ｍｇ）で処理する。その不均一混合物を無水酢酸（０．３０ｍＬ、３．２ｍｍｏｌ）で処理すると、この反応物は、均一となる。１６時間後、この反応物を、０．３時間にわたって、ＮａＨＣＯ３飽和水溶液（８ｍＬ）で処理し、次いで、ジクロロメタンで抽出する。抽出物を合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥し、そして真空中で濃縮して、発泡体を得る。この発泡体を２０：８０の酢酸エチル：ヘキサンで処理し、そして真空中で濃縮して、固形物を得る。これをエーテルで倍散し、そして濾過する。その濾過ケーキを乾燥して、白色固形物（３８９ｍｇ、収率９２％、融点１５０〜１５２℃）として、表題生成物を得、これを、ＣＨＮ元素分析および１Ｈ  ＮＭＲにより、特性付ける。
【００５１】
（実施例２）
（｛１−［（６−クロロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−５−イル）スルホニル］−１Ｈ−インドール−３−イル｝酢酸の調製）
【００５２】
【化１６】
2008504267.tif 000015
３−インドリル酢酸（１７５ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）の撹拌ＴＨＦ溶液を、窒素下にて、−７８℃まで冷却し、そして１０分間にわたって、ヘキサン（０．８４ｍＬ、２．１０ｍｍｏｌ）中の２．５Ｍ  ｎ−ブチルリチウムで少しずつ処理する。−７８℃で１時間後、その反応混合物を、ＴＨＦ中にて、（６−クロロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−５−イル）塩化スルホニル（２５７ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）で処理し、周囲温度まで温め、２４時間撹拌し、そして真空中で濃縮する。得られた残渣を１Ｍ  ＨＣｌ水溶液（約２ｍＬ）および水（３ｍＬ）で処理し、そしてジクロロメタンで抽出する。抽出物を合わせ、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、そして真空中で濃縮する。この残渣をクロマトグラフィー（これは、酢酸エチルで溶出する）にかけると、淡黄褐色固形物（３２ｍｇ、融点２２０〜２２２℃、＞２００℃で黒化）として、表題化合物が得られ、これを、質量スペクトル分析およびＮＭＲ分析により、同定する。
【００５３】
（実施例３）
（３，４，５−トリアセトキシ−６−（２−｛１−［（６−クロロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−５−イル）スルホニル］−１Ｈ−インドール−３−イル｝エチルカルバモイルオキシ）テトラヒドロピラン−２−カルボン酸メチルエステルの調製）
【００５４】
【化１７】
2008504267.tif 000016
（Ｂｏｃ）２Ｏ（１．８ｇ、８．３ｍｍｏｌ、１．２当量）のＣＨ３ＣＮ溶液を０℃（氷水浴）まで冷却し、ＣＨ３ＣＮ中のＤＭＡＰ（２０３ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ、０．２当量）で滴下処理し、５分間撹拌し、ＣＨ３ＣＮ中の２−｛１−［（６−クロロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−５−イル）スルホニル］−１Ｈ−インドール−３−イル｝エチルアミン（２．６ｇ、６．９ｍｍｏｌ）で滴下処理し、０℃で、３０分間撹拌し（その場で、イソシアネートが発生する）、ロータベーパーを使用して濃縮して、このＣＨ３ＣＮを除去し、そしてトルエンで追い払う。得られた残渣をトルエンに溶解し、ヒドロキシグルクロン酸エステル（２．６ｇ、７．７ｍｍｏｌ、１．１当量）のトルエン溶液に続いてトリエチルアミン（１．２ｍＬ）で滴下処理し、０℃で、２時間撹拌し、室温まで温め、１６時間撹拌し、そして乾燥状態まで濃縮する。この残渣をカラムクロマトグラフィー（溶離液として、ヘプタン中の２０〜５０％ＴＨＦ）で精製して、表題生成物の純粋なβ−アノマー２ｇ（収率３９％）と、α−およびβ−アノマーの混合物（１：１．６）２．５ｇ（収率４９％）とを得る。これらのアノマーをＮＭＲ分析で同定する。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：β−アノマー４：８．０１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．５Ｈｚ），７．９５−７．９１（ｍ，１Ｈ），７．５３−７．５０（ｍ，１Ｈ），７．４５（ｓ，１Ｈ），７．３５−７．２６（２Ｈ，ｍ），７．１７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．５Ｈｚ），５．７４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），５．３６−５．０９（ｍ，３Ｈ），４．９９（１Ｈ，ｍ），４．１９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．９Ｈｚ），３．７５（ｓ，３Ｈ），３．５７−３．４１（２Ｈ，ｍ），２．９２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），２．０４，２．０３，２，０２（３ｓ，９Ｈ）．ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋＝７４１．α−アノマー（２００ｍｇ，２％のβ−アノマーを含有する）１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：８．０３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．２Ｈｚ），７．９４−７．９１（ｍ，１Ｈ），７．５６−７．５３（ｍ，１Ｈ），７．４５（ｓ，１Ｈ），７．３５−７．２６（２Ｈ，ｍ），７．１４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），６．３３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ），５．５２−５．４６（ｍ，１Ｈ），５．２６−５．１０（３Ｈ，ｍ），４．３８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ），３．７４（ｓ，３Ｈ），３．５７−３．４６（２Ｈ，ｍ），２．９２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），２．０３（３ｓ，９Ｈ）。
【００５５】
（実施例４）
（１−Ｏ−｛［（２−｛１−［（６−クロロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−５−イル）スルホニル］−１Ｈ−インドール−３−イル｝エチル）アミノ］カルボニル｝−β−Ｄ−グルコピラヌロン酸の調製）
【００５６】
【化１８】
2008504267.tif 000017
３，４，５−トリアセトキシ−６−（２−｛１−［（６−クロロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−５−イル）スルホニル］−１Ｈ−インドール−３−イル｝エチルカルバモイルオキシ）テトラヒドロピラン−２−カルボン酸メチルエステル（１．０ｇ、１．３５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液をＣＨ３ＯＨ（３８．８ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で処理し、０℃（氷水浴）まで冷却し、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（３４０ｍｇ、８．１ｍｍｏｌ、６当量）のＨ２Ｏ（５．５ｍＬ）［０．１Ｎ  ＬｉＯＨ／ＭｅＯＨ／ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ］溶液で処理し、そしてＮ２雰囲気下にて、０℃で、２時間撹拌する。この脱保護の進行は、逆相ＴＬＣ（ＳｉＯ２−Ｃ１８  ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、３／７）でモニターする。その反応混合物をＨ２Ｏ（１５０ｍＬ）で希釈し、アンバーライト−１２０（プラス）カチオン交換材料（Ｈ＋型）１０ｇを加えることにより中和し、そして濾過する。濾液を減圧下にて濃縮して、水性懸濁液を得る。この懸濁液を凍結乾燥して、表題生成物７００ｍｇ（収率８６％）を得る。シリカゲルカラムクロマトグラフィー［溶離液として、ＣＨＣｌ３／ＣＨ３ＯＨ／Ｈ２Ｏ（７：３：０．５）］でさらに精製すると、表題生成物（３１０ｍｇ、純度９８％）が得られ、これを、質量スペクトル分析およびＮＭＲ分析で同定する。１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．３１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．５Ｈｚ），７．９４−７．９１（ｍ，１Ｈ），７．８２（ｓ，１Ｈ），７．６９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．２Ｈｚ），７．６４−７．５７（ｍ，２Ｈ），７．３９−７．２７（ｍ，２Ｈ），５．３１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），３．６９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），３．３７−３．１３（ｍ，５Ｈ），２．８２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ）；１３Ｃ（７５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：１７０．６，１５５．４，１５５．３，１５２．３，１３９．２，１３４．９，１３１．６，１２５．７，１２４．５，１２４．４，１２１．１，１２１．１，１２０．７，１１８．８，１１６．６，１１３．８，９５．５，７６．６，７６．５，７２．８，７２．０，２５．２；ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）保持時間＝３５．１２，［Ｍ＋Ｈ］＋＝６００．７。
【００５７】
上記と同じ様式で、a−アノマー（５７ｍｇ）を得、これを、ＨＰＬＣ分析および質量スペクトル分析で同定する。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）保持時間＝２７．１１分間、［Ｍ＋Ｈ］＋＝６００．８。
【００５８】
（実施例５）
（試験化合物の５−ＨＴ６結合親和性の比較評価）
セロトニン５−ＨＴ６レセプターについての試験化合物の親和性を、以下の様式において評価する。ヒトのクローニングされた５−ＨＴ６レセプターを発現する培養されたヒーラ細胞を回収し、１０．０分間、低速（１，０００×ｇ）で遠心分離して、培地を除去する。回収した細胞を、半分の体積の新鮮な生理学的リン酸緩衝化生理食塩水中で懸濁し、同じ速度で再び遠心分離する。この操作を繰り返す。次いで、回収した細胞を、１０容量の５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ．ＨＣｌ（ｐＨ７．４）および０．５ｍＭ  ＥＤＴＡ中でホモジネートする。このホモジネートを、３０分間、４０，０００×ｇで遠心分離し、沈殿物を回収する。得られたペレットを、１０容量のＴｒｉｓ．ＨＣｌ緩衝液中で再懸濁し、同じ速度で再び遠心分離する。最終的なペレットを、少量のＴｒｉｓ．ＨＣｌ緩衝液中で懸濁し、組織タンパク質含量を、１０〜２５μｌ容積のアリコート中で決定する。ウシ血清アルブミンを、Ｌｏｗｒｙら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９３：２６５（１９５１）に記載される方法に従って、タンパク質決定における標準物質として使用する。懸濁した細胞膜の容積を調整して、懸濁液の１．０ｍｇ／ｍｌの組織タンパク質濃度を得る。調製した膜懸濁液（１０倍に濃縮した）を１．０ｍｌ容積に等分し、後の結合実験に使用するまで−７０℃で保存する。
【００５９】
結合実験を、２００μｌの総容量において９６ウェルマイクロタイタープレート形式で実施する。各ウェルに、以下の混合物を添加する：１０．０ｍＭ  ＭｇＣｌ２および０．５ｍＭ  ＥＤＴＡを含む５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ．ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．４）で作製された８０．０μｌのインキュベーション緩衝液ならびに２０μｌの［３Ｈ］−ＬＳＤ（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅから入手可能なＳ．Ａ．、８６．０Ｃｉ／ミリモル）、３．０ｎＭ。ヒトセロトニン５−ＨＴ６レセプターにおける［３Ｈ］ＬＳＤの解離定数ＫＤは、［３Ｈ］ＬＳＤの濃度を増加させて飽和結合することによって決定されるように、２．９ｎＭである。この反応は、１００．０μｌの組織懸濁液の最終的な添加によって開始される。非特異的結合を、１０．０μＭのメチオセピン（ｍｅｔｈｉｏｔｈｅｐｉｎ）の存在下で測定する。試験化合物を、２０．０μｌの容積中に添加する。
【００６０】
この反応は、室温で１２０分間、暗闇で進められ、その時に、結合リガンド−レセプター複合体を、Ｐａｃｋａｒｄ  Ｆｉｌｔｅｒｍａｔｅ（登録商標）１９６  Ｈａｒｖｅｓｔｅｒを有する９６ウェルユニフィルター（ｕｎｉｆｉｌｔｅｒ）上で濾過する。フィルターディスク上に捕らえられた結合複合体を風乾させ、放射能を、各浅いウェルに４０．０μｌのＭｉｃｒｏｓｃｉｎｔ（登録商標）−２０シンチラント（ｓｃｉｎｔｉｌｌａｎｔ）の添加後、６個の光電子増倍管検出器を備えたＰａｃｋａｒｄ  ＴｏｐＣｏｕｎｔ（登録商標）において測定する。ユニフィルタープレートを熱密閉し、３１．０％のトリチウム効率を用いてＰａｃｋａｒｄＴｏｐＣｏｕｎｔ（登録商標）においてカウントする。
【００６１】
５−ＨＴ６レセプターへの特異的結合を、１０．０μＭの未標識のメチオセピンの存在下でのより少ない結合量を、全放射能結合として定義する。種々の濃度の試験化合物の存在下での結合は、試験化合物の存在下での特異的結合のパーセンテージとして表される。結果を、ｌｏｇ％結合対試験化合物のｌｏｇ濃度としてプロットする。コンピューターを使ったプログラムのＰｒｉｓｍ（登録商標）を用いたデータポイントの非線形回帰分析により、９５％の信頼限界で試験化合物のＩＣ５０値とＫＩ値の両方を得る。データポイントの直線回帰線をプロットし、それらからＩＣ５０値を決定し、ＫＩ値を以下の式に基づいて決定する：
Ｋ＝ＩＣ５０／（１＋Ｌ／ＫＤ）
ここで、Ｌは使用される放射活性リガンドの濃度であり、ＫＤはレセプターについてのリガンドの解離定数であり、両方ともｎＭで表される。
【００６２】
このアッセイを使用して、以下のＫｉ値を決定し、５−ＨＴ６レセプターへの結合を示すために、公知の代表的な化合物によって得られるこれらの値と比較する。このデータを以下の表Ｉに示す。
【００６３】
【表１】
2008504267.tif 000018
上記の結果から見られ得るように、本発明の化合物は、５−ＨＴ６レセプターについての顕著な親和性を示す。
【国際調査報告】
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2008504267.tif 000024
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