(57)【要約】  本発明は、銀イオン化植物抽出液およびその用途を開示する。具体的に、本発明は、電解液としての植物抽出液で電気分解によって銀をイオン化させて得られる銀イオン化植物抽出液、および前記銀イオン化植物抽出液を含む抗微生物性組成物を開示する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
電解液としての植物抽出液で電気分解によって銀をイオン化させて得られることを特徴とする、銀イオン化植物抽出液。
【請求項２】
前記銀イオン化植物抽出液は抗微生物性を持つことを特徴とする、請求項１に記載の銀イオン化植物抽出液。
【請求項３】
前記抗微生物性は、植物抽出液または銀イオン水が抗微生物性を示す微生物に対する抗体微生物性であることを特徴とする、請求項２に記載の銀イオン化植物抽出液。
【請求項４】
前記抗微生物性は、細菌、真菌、酵母および藻類よりなる群から選択される微生物に対する抗微生物性であることを特徴とする、請求項２に記載の銀イオン化植物抽出液。
【請求項５】
前記抗微生物性は、エシェリキア(Escherichia sp.)、サルモネラ(Salmonella sp.)、バシラス(Bacillus sp.)、スタフィロコッカス(Staphylococuus sp.)、ビブリオ(Vibrio sp.)、アエロモナス(Aeromonas sp.)、クロモバクテリウム(Chromobacterium sp.)、ストレプトコッカス(Streptococcus sp.)、ラクトバシラス(Lactobacillus sp.)、アスベルギルス(Aspergillus sp.)、フサリウム(Fusarium sp.)、トリコデルマ(Trichoderma sp.)、トリコフィトン(Trichophyton sp.)、マイクロスポルム(Microsporum sp.)、およびカンジダ(Candida sp.)よりなる群から選択される微生物に対する抗微生物性であることを特徴とする、請求項２に記載の銀イオン化植物抽出液。
【請求項６】
前記植物は、竹、オーク、松、コノテガシワおよび海藻類よりなる群から選択されることを特徴とする、請求項１に記載の銀イオン化植物抽出液。
【請求項７】
電解液としての植物抽出液で電気分解によって銀をイオン化させる段階を含む、銀イオン化植物抽出液の製造方法。
【請求項８】
電解液としての植物抽出液で電気分解によって銀をイオン化させる段階を含むことを特徴とする、抗微生物性を有する植物抽出液の抗微生物性を高める方法。
【請求項９】
電解液としての植物抽出液で電気分解によって銀をイオン化させる段階を含むことを特徴とする、抗微生物性のない植物抽出液に抗微生物性を付加する方法。
【請求項１０】
請求項１に記載の銀イオン化植物抽出液を含むことを特徴とする、抗微生物性組成物。
【請求項１１】
前記抗微生物性は、植物抽出液または銀イオン水が抗微生物性を示す微生物に対する抗微生物性であることを特徴とする、請求項１０に記載の抗微生物性組成物。
【請求項１２】
前記抗微生物性は、細菌、真菌、酵母および藻類よりなる群から選択される微生物に対する抗微生物性であることを特徴とする、請求項１０に記載の抗微生物性組成物。
【請求項１３】
前記抗微生物性は、エシェリキア(Escherichia sp.)、サルモネラ(Salmonella sp.)、バシラス(Bacillus sp.)、スタフィロコッカス(Staphylococuus sp.)、ビブリオ(Vibrio sp.)、アエロモナス(Aeromonas sp.)、クロモバクテリウム(Chromobacterium sp.)、ストレプトコッカス(Streptococcus sp.)、ラクトバシラス(Lactobacillus sp.)、アスベルギルス(Aspergillus sp.)、フサリウム(Fusarium sp.)、トリコデルマ(Trichoderma sp.)、トリコフィトン(Trichophyton sp.)、マイクロスポルム(Microsporum sp.)、およびカンジダ(Candida sp.)よりなる群から選択される微生物に対する抗微生物性であることを特徴とする、請求項１０に記載の抗微生物性組成物。
【請求項１４】
前記組成物は薬学的組成物であることを特徴とする、請求項１０に記載の抗微生物性組成物。
【請求項１５】
前記薬学的組成物は、細菌、真菌、酵母および藻類よりなる群から選択される微生物が引き起こす疾病に対する改善または予防効果を持つことを特徴とする、請求項１４に記載の抗微生物性組成物。
【請求項１６】
前記薬学的組成物は、エシェリキア(Escherichia sp.)、サルモネラ(Salmonella sp.)、バシラス(Bacillus sp.)、スタフィロコッカス(Staphylococuus sp.)、ビブリオ(Vibrio sp.)、アエロモナス(Aeromonas sp.)、クロモバクテリウム(Chromobacterium sp.)、ストレプトコッカス(Streptococcus sp.)、ラクトバシラス(Lactobacillus sp.)、アスベルギルス(Aspergillus sp.)、フサリウム(Fusarium sp.)、トリコデルマ(Trichoderma sp.)、トリコフィトン(Trichophyton sp.)、マイクロスポルム(Microsporum sp.)、およびカンジダ(Candida sp.)よりなる群から選択される微生物が引き起こす疾病に対する改善または予防効果を持つことを特徴とする、請求項１４に記載の抗微生物性組成物。
【請求項１７】
前記薬学的組成物は、腎臓組織損傷、チフス性疾患、食中毒、コレラ、腸炎、
フルンケル、蜂窩織炎、リンパ管炎、ひょう疽(felon)、中耳炎、肺炎、敗血症、炭疽病、淋疾、結核、梅毒、ジフテリア、腸チフス、はしか、口内と陰部の粘膜の炎症、口内と陰部の粘膜の掻痒症、口内と陰部の粘膜の痛症、膣炎、皮膚外傷、虫歯、歯周炎、および白癬よりなる群から選択される疾病に対する改善または予防効果を持つことを特徴とする、請求項１４に記載の抗微生物性組成物。
【請求項１８】
請求項１０〜１３に記載の抗微生物性組成物を含むことを特徴とする、微生物が原因となって発生する有害な現象の改善または予防用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、銀イオン化植物抽出液およびその用途に係り、より詳しくは、電解液としての植物抽出液で電気分解によって銀をイオン化させて得られる銀イオン化植物抽出液およびこれを含む抗微生物性組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
銀は、様々な古典文献に言及されているとおり、広範囲な抗微生物効果を持つものと古来から知られてきた金属である。よって、銀は、実生活において、例えばさじなどの食器の製作にも用いられてきた。
【０００３】
銀が抗微生物効果を持つとすれば、実際、抗微生物作用をするものは銀から発せられる銀イオン（Ａｇ+）であるから、銀イオン水をより容易且つ大量に製造するための多くの方法が提案されてきた。例えば、韓国公開特許第１０−２００３−００９０４６６号（発明の名称：銀イオン水製造機）や韓国公開特許第１０−２００５−０００１２４０号（発明の名称：銀イオン水製造装置）などが、銀イオン水の製造に関連した技術である。
【０００４】
一方、植物抽出物は、その植物の種類および抽出方法を問わず、一般に強弱の程度差異はあるが、ある程度の抗微生物性を持つと知られている[Hori Y, Sato S, Hatai A. Antibacterial activity of plant extracts from azuki beans (Vigna angularis) in vitro. Phytother Res. 2006 Jan 27;20(2):162-164;  Ravikumar S, Nazar S, Nuralshiefa A, Abideen S. Antibacterial activity of traditional therapeutic coastal medicinal plants against some pathogens. J Environ Biol. 2005 Jun;26(2 Suppl):383-6;  Bandyopadhyay D, Chatterjee TK, Dasgupta A, Lourduraja J, Dastidar SG. In vitro and in vivo antimicrobial action of tea: the commonest beverage of Asia. Biol Pharm Bull. 2005 Nov;28(11):2125-7]。
【０００５】
本発明者らは、銀の抗微生物効果と植物抽出物の一般的な抗微生物効果に着眼し、銀を液状の植物抽出物（植物抽出液）で電気分解によってイオン化させたところ、その結果物である銀イオン化植物抽出液が非常に高い抗微生物効果を持つという事実を確認することにより、本発明を完成するに至った。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
そこで、本発明の目的は、銀を植物抽出液で電気分解させて得られる銀イオン化植物抽出液を提供することにある。
本発明の他の目的は、前記銀イオン化植物抽出液を含む抗微生物性組成物を提供することにある。
本発明のその他の目的および具体的な様態などは、以下に提示される。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明のある観点によれば、銀イオン化植物抽出液を提供する。本発明の銀イオン化植物抽出液とは、電解液（電気分解するとき、電解槽に入れてイオン伝導の媒体の役割をする溶液）である植物抽出液で銀を電気分解によってイオン化させて得られたものをいう。
【０００８】
本発明者らは、下記実施例および実験例から確認されるように、電解槽に電解液としての植物抽出液（具体的には竹抽出液、木草液（オーク抽出液）、松抽出液、コノテガシワ抽出液、海藻類抽出液）を入れて２本の銀電極棒に電源を連結して銀イオン化を誘導し、その得られた結果物に対する抗微生物効果を実験したところ、その結果物が電解液として用いられた植物抽出液または銀イオン水（植物抽出液の代わりに３次蒸留水を用いて銀を電気分解させて得られた結果物）に比べて相乗的な抗微生物効果を示すことを確認することができた。
したがって、本発明の銀イオン化植物抽出液は、より具体的には、電解液としての植物抽出液で銀を電気分解によってイオン化させて得られたものであって、抗微生物性を持つものと説明できる。
【０００９】
ここで、前記「抗微生物性」の意味、「微生物」の意味およびその「微生物の範囲」については、下記本発明の抗微生物性組成物に関連して後述する内容がそのまま適用できる。
【００１０】
一方、本発明の銀イオン化植物抽出液は、２本の銀電極棒に電源を連結して電気分解によって電解液としての植物抽出液で銀をイオン化させて得られたものであって、電気分解は、植物抽出液を電解液として銀がイオン化できるように行われるだけでよい。
よって、銀イオン化が発生する（＋）電極は、銀を含有する導体でなければならないが、（−）電極は、必ずしも銀を含有する導体である必要はなく、金属や黒鉛などの導体であるだけでよい。
【００１１】
また、（＋）電極が銀含有導体であれば、それが銀を含有する程度、すなわち銀の純度は特に問題とならない。それは、銀の純度が低くても、電気分解の際に高電圧をかけると、容易に銀イオン化を誘導することができるというのが当業界に公知になっているためである。但し、得られる銀イオン化植物抽出液が持つ抗微生物活性の側面からみては、銀の純度が高いほど好ましいであろう。
【００１２】
また、電気分解時の電圧または電気分解時間は、銀イオン化が誘導される程度であれば、いずれの電圧でもいずれの時間でも構わないが、下記実験例は、電圧が高いほど且つ電気分解時間が長いほど、全般的に抗微生物効果が高くなる結果を示すという点において、前記電気分解時の電圧が高いほど且つ電気分解時間が長いほど好ましい（下記実験例１−４、実験例２−４、表５および表８参照）。
【００１３】
一方、本発明の銀イオン化植物抽出液において、電解液としての植物抽出液は液体状の植物抽出物であればよい。植物抽出物の最初得られた形態が液体状であれば、その状態そのままを電解液として使用できるが、固体状であれば、蒸留水、水、アルコールなど電解液として使用できる任意の適切な溶媒で希釈して使用することができる。液体状の植物抽出物も植物抽出液の種類に応じて適切な溶媒で希釈して使用することが好ましい。
【００１４】
一方、本発明者らによって選定された全ての植物抽出液が銀イオン化されたときに高い抗微生物性を持つという点において、前記植物抽出液は、それが得られる植物の種類を問わないものと理解できる。よって、分類学上「植物」に分類されるものであれば、それから得られる全ての抽出液が前記本発明の銀イオン化植物抽出液の製造において電解液として使用できる。
【００１５】
分類学上「植物」に分類されるものとは、細胞膜の外側に細胞壁があり、光合成能力があって独立栄養生活能力を備えるものをいうが、例えば、藻類（藍藻類(Cyanophyta)、クリプト藻類(Cryptophyta)、黄金色藻類(Chrysophyta)、珪藻類(Bacillariophyta)、褐藻類(Phaeophyta)、紅藻類(Rholophyta)、緑藻類(Chlorophyta)、車軸藻類(Charophyta)、蘚苔植物(Bryophyta)、羊歯(Pteridophyta)、種子植物(Spermatophyta)（被子植物(Angiospermae)と裸子植物(Gymnospermae)）などが含まれる。
【００１６】
一方、松抽出液の場合、本発明者らによって選定されたいずれの微生物に対しても抗微生物性を示していないが、それを電解液として用いて得られた銀イオン化松抽出液の場合は、本発明者らによって選定された全ての微生物に対して非常に高い抗微生物性を示した（下記実験例３および表９参照）。そして、コノテガシワまたは海藻類抽出液の場合も、本発明者らによって選定された微生物のうち特定の幾つかの微生物に対してのみ弱い抗微生物性を示したが、前記抽出液を電解液として用いて銀イオン化させたときは、その結果物が、本発明者らによって選定された全ての微生物に対して非常に高い抗微生物性を示した（下記実験例４、実験例５、表１０および表１１参照）。
したがって、本発明の銀イオン化植物抽出液の製造において、電解液として用いる植物抽出液はそれがもともと抗微生物効果を持つかを問わないものと理解されるべきである。
【００１７】
一方、植物抽出液は、植物を抽出対象とする限りはその抽出方法を問わないものと理解されるべきである。
一般に、植物抽出液を得る方法は４つに分類できるが、一つ目は植物に直・間接的に熱を加え、エキスタイプの植物抽出液を得る第１方法であり、二つ目は生きている植物の上部を切り、流れてくるエキスを得る第２方法であり、三つ目は植物を抽出溶媒（例えば、メタノール、蒸留水、エタノール、アセトン、酢酸エチル、飽和ｎ−ブタノール、クロロホルム、塩化メチレン、水、またはこれらの混合溶媒）で抽出して得る第３方法であり、四つ目は植物を乾燥させた後、乾燥した植物を燃焼させ、燃焼の際に発生する気体を冷却させて得る第４方法である。
通常、前記第１方法、第２方法および第４方法は木質部(Xylem)を持つ植物への適用に適する方法であり、第３方法は全ての植物に対して適用できる方法である。
【００１８】
本発明の下記参考例から得られた植物抽出液は、前記第１方法、第２方法（海藻類抽出液）および第４方法によって得られたものであるが、前記第３方法も本発明の銀イオン化植物抽出液の製造に電解液として使用でき、下記実験例では開示されていないが、実際、本発明者らが鋸屑状の竹を７０％エタノールで抽出した後、凍結乾燥した粉末状の抽出物を３次蒸留水に溶解させ、それを電解液として用いて銀イオン化させたところ、その結果物が高い抗微生物性効果を持つことを確認することができた。
したがって、本発明の銀イオン化植物抽出液の製造において、電解液として用いられる植物抽出液は、それが得られる抽出方法を問わないものと理解されるべきである。
【００１９】
一方、前述したように、植物抽出液は、それが得られる植物の種類と抽出方法を問わないが、好ましくは下記参考例に使用された植物、すなわち竹、オーク、松、コノテガシワ、海藻類を有し、前述した４つの抽出方法のうち任意の抽出方法を用いて得られる抽出液を意味し、さらに好ましくは前述した４つの抽出方法のうち第１、第２または第４の方法を用いて得られた抽出液を意味する。
ここで、海藻類とは、海で棲息する藻類（褐藻類、緑藻類、紅藻類などを含む）を意味し、竹、オーク、松、コノテガシワとは、その具体的な種類を問わず、分類学上それぞれ竹、オーク、松、コノテガシワに分類される植物を意味する。
【００２０】
本発明の他の観点によれば、銀イオン化植物抽出液の製造方法を提供する。前記本発明の銀イオン化植物抽出液の製造方法は、電解液としての植物抽出液で電気分解によって銀をイオン化させる段階を含むことを特徴とする。
【００２１】
本発明の別の観点によれば、抗微生物性を持つ植物抽出液の抗微生物性を高める方法を提供する。前記本発明の抗微生物性を持つ植物抽出液の抗微生物性を高める方法は、電解液としての植物抽出液で電気分解によって銀をイオン化させる段階を含むことを特徴とする。
【００２２】
本発明の別の観点によれば、抗微生物性のない植物抽出液に抗微生物性を付加する方法を提供する。前記本発明の抗微生物性のない植物抽出液に抗微生物性を付加する方法は、電解液としての植物抽出液で電気分解によって銀をイオン化させる段階を含むことを特徴とする。
【００２３】
前記本発明の銀イオン化植物抽出液の製造方法、抗微生物性を持つ植物抽出液の抗微生物性を高める方法、および抗微生物性のない植物抽出液に抗微生物性を付加する方法において、銀イオン化植物抽出液、抗微生物性の意味、微生物の意味、微生物の範囲、植物抽出液の意味、好適な観点における電気分解時の電圧または電気分解の時間、並びに銀の純度などに対しては、前述および後述したとおりの説明がそのまま有効である。
【００２４】
本発明の別の観点によれば、有効成分として、前述したところの銀イオン化植物抽出液を含む抗微生物性組成物を提供する。
請求の範囲を含む本明細書において、前記「抗微生物性」とは、微生物の生長または増殖を抑制し、或いは微生物を死滅させる性質を意味する。
【００２５】
また、請求の範囲を含む本明細書において、前記「微生物」とは、本発明の抗微生物性組成物に有効成分として含まれる銀イオン化植物抽出液が抗微生物効果を示す全ての細菌、真菌、酵母、藻類を含む概念である。
【００２６】
下記実験例から確認できるように、本発明の抗微生物性組成物に有効成分として含まれる銀イオン化植物抽出液は、その植物抽出液が得られた植物の種類を問わず、本発明者らによって選定された全ての微生物に対して抗微生物活性を示した。
【００２７】
当業者であれば、その通常の能力範囲内で下記実験例に基づく限りは、下記実験例から確認された微生物以外にも、本発明の抗微生物性組成物に有効成分として含まれる銀イオン化植物抽出液が抗微生物効果を示すその他の微生物を確認、選別し得ると期待される。
したがって、前記「微生物」の意味には、下記実施例で直接確認された微生物以外にも、当業者の通常の能力範囲内で、本明細書が開示するところに基づき、本発明の銀イオン化植物抽出液がその抗微生物活性を示すものと予想されるその他の全ての微生物が含まれると理解されるべきである。
【００２８】
少なくとも、前記「微生物」の意味には、植物抽出液が抗微生物活性を示す微生物、および銀イオン水が抗微生物活性を示す微生物が含まれると理解されるべきである。それは、本発明の抗微生物性組成物に有効成分として含まれる銀イオン化植物抽出液が、下記実験例に示すように、植物抽出液自体が抗微生物活性を示す（場合によっては、活性を示さない）全ての微生物、および銀イオン水自体が抗微生物活性を示す（場合によっては、活性を示さない）全ての微生物に対して相乗的な抗微生物活性を示すという点において、本発明の抗微生物性組成物に有効成分として含まられる銀イオン化植物抽出液は、少なくとも植物抽出液または銀イオン水が抗微生物活性を示す微生物に対しては抗微生物活性を示すことが明白だからである。ここで、銀イオン水は、水や蒸留水、アルコールなどその他の電解液として利用できる溶媒で電気分解によって銀がイオン化されたものであると理解される。
【００２９】
それにも拘わらず、前記「微生物」は、下記実験例で直接抗微生物性が確認された細菌、真菌または酵母を意味するものと理解されることが好ましく、特に細菌の中ではエシェリキア(Escherichia sp.)、サルモネラ(Salmonella sp.)、バシラス(Bacillus sp.)、スタフィロコッカス(Staphylococuus sp.)、ビブリオ(Vibrio sp.)、アエロモナス(Aeromonas sp.)、クロモバクテリウム(Chromobacterium sp.)、ストレプトコッカス(Streptococcus sp.)、ラクトバシラス(Lactobacillus sp.) を意味すると理解されることが好ましく、真菌の中ではアスベルギルス(Aspergillus sp.)、フサリウム(Fusarium sp.)、トリコデルマ(Trichoderma sp.)、トリコフィトン(Trichophyton sp.)、マイクロスポルム(Microsporum sp.) を意味すると理解されることが好ましく、酵母の中ではカンジダ(Candida sp.)を意味すると理解されることが好ましい。最も好ましくは、下記実験例で抗微生物活性が直接確認されたそれぞれの微生物を意味する。
【００３０】
前記本発明の抗微生物性組成物は、好適な様態を含んで前記定義された微生物が直・間接的に原因となって発生する有害な現象の改善または予防に単独でまたは他の抗微生物剤などと一緒に使用できる。
【００３１】
前記「有害な現象」とは、それが改善または予防されるならばヒトに有益な現象と定義できるが、例えばヒト、動物または植物に発生する疾病、食品の腐敗、水質または土壌の汚染、繊維の腐敗などを挙げることができる。
【００３２】
また、前記「微生物が直接的に原因となって発生する有害な現象」とは、当該微生物の生長または増殖を抑制し、或いは当該微生物を死滅させると、それにより改善または予防効果がある現象と定義できるが、例えば、サルモネラが引き起こすチフス性疾患または食中毒［下記参照文献３０］、スタフィロコッカスが引き起こす蜂窩織炎、リンパ管炎、中耳炎［下記参照文献２０〜２５参照］、バシラスが引き起こす動物または植物の炭疽病［下記参照文献３４〜３５参照］、フサリウムが引き起こす作物伝染病［下記参照文献３７〜４０参照］、カンジダまたはラクトバシラスが引き起こす膣炎、アエロモナスやクロモバクテリウムなどが関与する皮膚外傷、ストレプトコッカスが引き起こす虫歯、トリコフィトンまたはマイクロスポルムが引き起こす白癬などを挙げることができる。この場合においては、本発明の抗微生物性組成物を単独で使用しても、意図するところの改善または予防効果を挙げることができる。
【００３３】
また、前記において「微生物が間接的に原因となって発生する有害な現象」とは、そのような現象を改善または予防するために、当該微生物の生長または増殖を抑制し、或いは当該微生物を死滅させることが好ましい（すなわち、共に要求される）現象と定義できる。微生物が間接的に原因となって発生する有害な現象の例としては、ビブリオが引き起こす敗血症［下記参照文献３２および３３参照］、大腸菌０１５７が引き起こす腎臓組織損傷［下記参照文献２６〜２９参照］などを挙げることができる。
【００３４】
前記微生物が間接的に原因となって発生する、ヒトに有害な現象は、他の抗微生物剤または前記現象の改善または予防剤と共に本発明の抗微生物性組成物を使用すると、より容易に改善または予防することができる。例えば、敗血症の場合、敗血症に治療または予防効果のある薬物（例えば、Ｌｉｌｌｙ Ｃｏ．社のＸｉｇｒｉｓなどと共に本発明の抗微生物性組成物が使用される場合を挙げることができる。
【００３５】
一方、本発明の抗微生物性組成物において、銀イオン化植物抽出液は、抗微生物効果を示すことができる限りは、その適用様態または抗微生物性が要求される程度（すなわち、有害な現象の有害な程度）などに応じて適切な任意の量で本発明の抗微生物性組成物に含まれ得る。十分な抗微生物効果を得るためには、その適用様態または抗微生物性が要求される程度を問わず、通常、銀イオン化植物抽出液は、本発明の抗微生物性組成物にその組成物の全体重量を基準としたとき、０．１重量％以上、好ましくは３重量％以上含まれればよい。
【００３６】
一方、本発明の抗微生物性組成物は、有効成分である銀イオン化植物抽出液の抗微生物効果を阻害しない限りは、銀イオン化植物抽出液以外にも、分散剤、担体、およびその他の抗微生物剤などを含んで製造できる。
【００３７】
そのような分散剤として、水、アルコール（例えば、メチルアルコール、エチルアルコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、ジエチレングリコール、グリセリンなど）、ケトン（例えば、アセトン、メチルエチルケトンなど）、エーテル（例えば、ジオクサン、テトラヒドロフラン、セロソルブ、ジエチレングリコールジメチルエーテルなど）、脂肪族炭化水素（例えば、ヘキサン、ケロセンなど）、芳香族炭化水素（例えば、ベンゼン、トルエン、キシレン、ナフタレン、メチルナフタレンなど）、ハロゲン化炭化水素（例えば、クロロホルム、四塩化炭素など）、酸アミド（例えば、ジメチルホルムアミドなど）、エステル（例えば、酢酸メチルエステル、酢酸エチルエステル、酢酸ブチルエステル、脂肪酸グリセリンエステルなど）、ニトリル（例えば、アセトニトリルなど）、界面活性剤（高級硫酸アルコールエステル、アルキルスルホン酸、アルキルアリールスルホン酸、４級アンモニウム塩、オキシアルキルアミン、脂肪酸エステル、ポリアルキレンオキシド化合物、アンヒドロソルビトール化合物）などが例示できる。前記分散剤は、単独でまたは２種以上の混合物として本発明の抗微生物性組成物に含まれ得る。
【００３８】
担体として、粘土（例えば、カオリン、ベントナイト、酸粘土など）、滑石（例えば、滑石粉末、蝋石粉末など）、シリカ（例えば、珪藻土、珪酸無水物、雲母粉末など）、アルミナ、硫黄粉末、活性炭などが例示できる。これらの担体も、単独でまたは２種以上の混合物として本発明の抗微生物性組成物に含まれ得る。
【００３９】
抗微生物剤として、カルバクロール(carvacrol)、チモール(thymol)、シトラール(citral)（韓国特許第４３８２０９号）、イソユージノール、メチルユージノール（韓国特許第４２７５８４号）、竹エキス（ＷＯ２００３／１０５８７８）、ガノダーマシネンス(Ganoderma sinense)抽出液（韓国特許第４４５４０５号）、イソチアノゾロン(isothiazolone)化合物、アミノカルボン酸（ＷＯ２０００／１３５１０）などが例示できる。これらの抗微生物剤も、単独でまたは２種以上の混合物として本発明の抗微生物性組成物に含まれ得る。
【００４０】
一方、本発明の抗微生物性組成物は、液体状、固体状および気体状のいずれの形に製造されてもよい。また、本発明の抗微生物性組成物は、経口、非経口など任意の方式で投与できるが、局所投与方式が好ましい。経口投与方式の剤形は、錠剤、丸薬、粉剤、液剤、食品の形などを例示することができ、非経口投与方式の剤形は、注射剤、局所投与剤（クリーム、軟膏など）、座薬、撒布剤（植物に適用する場合）などを例示することができる。特に、局所投与方式の剤形は、本発明の抗微生物性組成物を、天然繊維または合成繊維からなる担体に含浸させたもの、化粧品や石鹸などに含有させたものなどを含む。
【００４１】
本発明の抗微生物性組成物は、前述したとおりのヒトに有害な現象を改善または予防することができれば、ヒトだけでなく、愛玩動物や家畜、養殖魚類などを含んだ動物または植物にも投与／撒布でき、防腐剤用として食品に添加されることも可能であり、ひいてはヒトが使用する繊維製品などにもその製品の保存性を延長させるために繊維製品の製造の際に添加される、または製造の後に塗布されることが可能である。
【００４２】
前記において、本発明の抗微生物性組成物がヒトに投与されるための様態、すなわち薬学的組成物に対しては、本発明の抗微生物性組成物が主に薬学的組成物として利用されるだろうと期待されるという点において、以下で特に詳述する。
本発明の抗微生物性組成物が薬学的組成物として利用される場合、その薬理効果は、本発明の抗微生物性組成物に有効成分として含まれる銀イオン化植物抽出液が抗微生物効果を示す微生物が引き起こす疾病に対する改善または予防効果と把握できるであろう。
【００４３】
前記薬理効果は、好ましくは下記実験例で銀イオン化植物抽出液が直接的に抗微生物効果を示すものと確認された細菌、真菌、酵母が引き起こす疾病に対する改善または予防効果と把握でき、さらに好ましくは前記細菌、真菌または酵母の中でもエシェリキア(Escherichia sp.)、サルモネラ(Salmonella sp.)、バシラス(Bacillus sp.)、スタフィロコッカス(Staphylococuus sp.)、ビブリオ(Vibrio sp.)、アスベルギルス(Aspergillus sp.)、フサリウム(Fusarium sp.)、トリコデルマ(Trichoderma sp.)、カンジダ(Candida sp.)、ラクトバシラス(Lactobacillus sp.)、アエロモナス(Aeromonas sp.)、クロモバクテリウム(Chromobacterium sp.)、ストレプトコッカス(Streptococcus sp.)、トリコフィトン(Trichophyton sp.)、マイクロスポルム(Microsporum sp.)などが引き起こす疾病に対する改善または予防効果と把握できるであろう。
【００４４】
具体的に、本発明の抗微生物性薬学的組成物は、大腸菌、特に大腸菌０１５７が引き起こす腎臓組織損傷［下記参照文献２６〜２９］、サルモネラが引き起こすチフス性疾患、食中毒［下記参照文献３０］、ビブリオが引き起こすコレラ、敗血症、腸炎［下記参照文献３１〜３２］、スタフィロコッカスが引き起こすフルンケル、蜂窩織炎、リンパ管炎、ひょう疽(felon)、中耳炎、肺炎、食中毒、敗血症［下記参照文献２０〜２５参照］、カンジダが引き起こす淋疾、結核、梅毒、ジフテリア、腸チフス、はしか、口内と陰部の粘膜の炎症（膣炎を含む）、掻痒症または痛症［下記参照文献１〜１８］、アスペルギルスが引き起こす敗血症［下記参照文献３６および３７参照］、ラクトバシラスが引き起こす膣炎、アエロモナスやクロモバクテリウムなどが引き起こす皮膚外傷、ストレプトコッカスが引き起こす虫歯や歯周炎、トリコフィトンまたはマイクロスポルムが引き起こす白癬などに対する改善または予防効果を持つ。
【００４５】
前記において本発明の抗微生物性薬学的組成物に有効成分として含まれる銀イオン化植物抽出液が前記微生物に対して抗微生物効果を持つという点において、本発明の抗微生物性薬学的組成物は、前記微生物が引き起こす疾病に対して薬理効果を持つことは自明なので、本発明の薬学的組成物が薬理効果を持つと予想される前記疾病はあくまでも例示に過ぎないと理解されるべきである。よって、本発明の薬学的組成物の薬理効果が前記例示された疾病に対する薬理効果に限定されると理解されてはならない。
【００４６】
少なくとも、本発明の抗微生物性薬学的組成物は、前述した微生物が引き起こす、下記に引用された参照文献上に開示された疾病に対しては改善または予防の薬理効果を持つと理解されるべきである。
【００４７】
一方、本発明の薬学的組成物は、有効成分として、銀イオン化植物抽出液以外に、薬学的に許容される担体を含むことができるが、このような薬学的に許容される担体は、薬品製剤の際に通常利用されるものであって、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、澱粉、アカシアゴム、リン酸カルシウム、アルギン酸塩、ゼラチン、珪酸カルシウム、微細結晶性セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水、シロップ、メチルセルロース、メチルヒドロキシベンゾエート、プロピルヒドロキシベンゾエート、滑石、ステアリン酸マグネシウム、ミネラルオイルなどを含む。
【００４８】
本発明の薬学的組成物は、また、添加剤として、当業界に知られている潤滑剤、湿潤剤、甘味剤、香味剤、乳化剤、懸濁剤、保存剤などをさらに含むことができる。
【００４９】
前記担体は、本発明の薬学的組成物に、それの全体重量に対して約０．１重量％〜約９９．９重量％、好ましくは約０．１重量〜約９７重量％で含まれることができ、前記添加剤は、約０．１重量％〜約２０重量％で含まれることができる。
【００５０】
一方、本発明の薬学的組成物は、経口または非経口で投与でき、好ましくは局所投与方式で当該部位に直接投与できる。
本発明の薬学的組成物は、薬学的に許容される担体を用いて製剤化することにより、単位用量の形で、或いは多用量の容器内に入れて製造できる。この際、剤形は溶液、懸濁液、乳化液、エリキシル剤、エキス剤、粉末剤、顆粒剤、錠剤、軟膏などを含むことができる。
【００５１】
本発明の薬学的組成物は、その１日投与量が通常０．００１〜１５０ｍＬ／ｋｇ体重の範囲であり、１回または数回に分けて投与することができる。ところが、本発明の薬学的組成物の投与量は投与経路、患者の年齢、性別、体重、患者の重症度、使用期間などのいろんな関連因子に鑑みて定められるものなので、前記投与量はどんな側面からも本発明の範囲を制限するものと理解されてはならない。
【発明の効果】
【００５２】
前述したように、本発明は、銀イオン化植物抽出液とその銀イオン化植物抽出液の抗微生物剤としての用途を開示する。
本発明の銀イオン化植物抽出液は、様々な微生物に対して抗微生物効果を示すことにより、その微生物が原因となって発生する有害な現象の改善または予防に有用に使用できる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００５３】
以下、本発明を参考例、実施例および実験例を参照して説明する。ところが、本発明の範囲はこのような参考例、実施例および実験例によって制限されるものではない。
【００５４】
<参考例>植物抽出液の製造または購入
【００５５】
<参考例１>竹抽出液の製造
【００５６】
竹を約３０ｃｍ程度に細切し、細切された竹の中央部分に約４００℃程度の熱を加え、細切された竹の両端から出るエキスを採取して竹抽出液を製造した。製造された竹抽出液の酸度を測定したところ、酸度がｐＨ２６７であった。
【００５７】
<参考例２>木草液（オーク抽出液）の購入
【００５８】
木草液は韓国ソウル市中浪区所在の（株）Ｌｉｆｅ−Ｃｈａｍｓｏｏｔ社から購入して使用した。
【００５９】
<参考例３>松抽出液の製造
【００６０】
松を約３０ｃｍ程度に細切し、細切された松の中央部分に約３００℃の熱を加え、細切された松の両端から出るエキスを採取して松抽出液を製造した。
【００６１】
<参考例４>コノテガシワ抽出液の製造
【００６２】
コノテガシワを約３０ｃｍ程度に細切し、細切されたコノテガシワの中央部分に約４００℃の熱を加え、細切されたコノテガシワの両端から出るエキスを採取してコノテガシワ抽出液を製造した。
【００６３】
<参考例５>海藻類抽出液の購入
【００６４】
海藻類抽出液（海藻類を圧搾して得られるエキスタイプの抽出液である）は、Ｈａｒｖｅｓｏｎ社（Ｆｒｅｅｇｒｏｗ、Ｈａｒｖｅｓｏｎ Ｉｎｃ．Ｐｈｉｌｉｐｐｉｎｅ）（液体状であり、ｐＨは１４である）から購入した。
【００６５】
<実施例>銀イオン化植物抽出液の製造
【００６６】
<実施例１〜１０>電気分解を利用した銀イオン化竹抽出液の製造
【００６７】
非導電性の電解槽に、前記<参考例１>で得られた竹抽出液を入れた後、高純度（９９．９％以上）の２本の銀棒に（＋）電極と（−）電極を連結し、下記<表１>の電圧と時間で銀イオン化を誘導して、銀イオンと前記竹抽出液とが反応するようにした。その結果、濃い褐色の沈殿物が形成されたが、前記電気分解した溶液を遠心分離した後、膜濾過（Ｐａｌｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ａｃｒｏｄｉｓｃ Ｓｙｒｉｎｇｅ Ｆｉｌｔｅｒ、０．２μｍ）させて沈殿物を完全に除去し、最終的に銀イオン化竹抽出液を製造した。
【００６８】
【表１】
2008526958.tif 000003
【００６９】
<実施例１１〜２０>電気分解を利用した銀イオン化木草液の製造
【００７０】
非導電性の電解槽に前記<参考例２>の木草液を入れた後、高純度（９９．９％以上）の２本の銀棒に（＋）電極と（−）電極を連結し、下記<表２>の電圧と時間で銀イオン化を誘導して、銀イオンと前記木草液とが反応するようにした。その結果、濃い褐色の沈殿物が形成されたが、前記電気分解した溶液を遠心分離した後、膜濾過（Ｐａｌｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ａｃｒｏｄｉｓｃ Ｓｙｒｉｎｇｅ Ｆｉｌｔｅｒ、０．２μｍ）させて沈殿物を完全に除去し、最終的に銀イオン化木草液を製造した。
【００７１】
【表２】
2008526958.tif 000004
【００７２】
<実施例２１>電気分解を利用した銀イオン化松抽出液の製造
【００７３】
非導電性の電解槽に、前記<参考例３>で得られた松抽出液を入れた後、高純度（９９．９％以上）の２本の銀棒に（＋）電極と（−）電極を連結し、９Ｖの電圧をかけて約４分間銀イオン化を誘導して、銀イオンと前記松抽出液とが反応するようにした。その結果、薄い褐色の沈殿物が形成されたが、前記電気分解した溶液を遠心分離した後、膜濾過（Ｐａｌｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ａｃｒｏｄｉｓｃ Ｓｙｒｉｎｇｅ Ｆｉｌｔｅｒ、０．２μｍ）させて沈殿物を完全に除去し、最終的に銀イオン化松抽出液を製造した。
【００７４】
<実施例２２>電気分解を利用した銀イオン化コノテガシワ抽出液の製造
【００７５】
非導電性の電解槽に、前記<参考例４>で得られたコノテガシワ抽出液を入れた後、高純度（９９．９％以上）の２本の銀棒に（＋）電極と（−）電極を連結し、９Ｖの電圧をかけて約４分間銀イオン化を誘導して、銀イオンと前記コノテガシワ抽出液とが反応するようにした。その結果、薄い褐色の沈殿物が形成されたが、前記電気分解した溶液を遠心分離した後、膜濾過（Ｐａｌｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ａｃｒｏｄｉｓｃ Ｓｙｒｉｎｇｅ Ｆｉｌｔｅｒ、０．２μｍ）させて沈殿物を完全に除去し、最終的に銀イオン化コノテガシワ抽出液を製造した。
【００７６】
<実施例２３>電気分解を利用した銀イオン化海藻類抽出液の製造
【００７７】
まず、電解液としては、前記<参考例５>の海藻類抽出液に３次蒸留水を添加して２倍に希釈させた後、得られる上澄み原液を使用した。
非導電性の電解槽に前記上澄み原液を入れた後、高純度（９９．９％以上）の２本の銀棒に（＋）電極と（−）電極を連結し、９Ｖの電圧をかけて約４分間銀イオン化を誘導して、銀イオンと前記２倍希釈された海藻類抽出液の上澄み原液とが反応するようにした。その結果、濃い褐色の沈殿物が形成されたが、前記電気分解した溶液を遠心分離した後、膜濾過（Ｐａｌｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ａｃｒｏｄｉｓｃ Ｓｙｒｉｎｇｅ Ｆｉｌｔｅｒ、０．２μｍ）させて沈殿物を完全に除去し、最終的に銀イオン化海藻類抽出液を製造した。
【００７８】
<実験例>銀イオン化植物抽出液の抗微生物効果実験
【００７９】
<実験例１>銀イオン化竹抽出液の抗微生物効果実験
<実験例１−１>カンジダ(Candida sp.)に対する抗微生物効果実験
【００８０】
本実験で使用されたカンジダ(Candida sp.)は、カンジダクルセイ(Candida krusei)ＡＴＣＣ６２５８、カンジダパラプシロシス(Candida parapsilosis)ＡＴＣＣ２２０１９、カンジダグラブラータ(Candida glabrata)ＡＴＣＣ９００３０である。
【００８１】
まず、滅菌した培養液（Ｓａｂｏｕｒａｕｄ Ｄｅｘｔｒｏｓｅ Ｂｒｏｔｈ、１０ｍＬ）に<参考例１>の竹抽出液を無処理または４００μＬ、８００μＬ、１６００μＬ、３２００μＬの量でそれぞれ処理し、また８００μＬの<実施例１０>の銀イオン化竹抽出液を処理した後、十分に成長した１００μＬのカンジダクルセイＡＴＣＣ６２５８、カンジダパラプシロシスＡＴＣＣ２２０１９、カンジダグラブラータＡＴＣＣ９００３０をそれぞれ接種して３０℃で培養した。
【００８２】
培養中に２時間間隔でＯ．Ｄ（６００ｎｍ）値を測定し、その結果を図１〜図３に示した。図１〜図３はそれぞれカンジダクルセイＡＴＣＣ６２５８、カンジダパラプシロシスＡＴＣＣ２２０１９、カンジダグラブラータＡＴＣＣ９００３０に対する菌株の増殖程度を調べた結果である。
【００８３】
カンジダクルセイの場合は、<参考例１>の竹抽出液を４００μＬ添加したときに特別な抗微生物効果を示しておらず、８００μＬ以上を添加したときには抗微生物効果を示し始め、１６００μＬを添加したときにはカンジダクルセイの増殖が完全に抑制されたが、これに対し、銀イオン化竹抽出液を８００μＬ添加したときにはカンジダクルセイの増殖が完全に抑制された。このような結果より、<参考例１>の竹抽出液の場合は最小発育阻止濃度(Minimum Inhibitory concentration;以下「ＭＩＣ」という)が少なくとも８０μＬ／ｍＬ以上であるが、銀イオン化竹抽出液の場合はＭＩＣが８０μＬ／ｍＬ以下であることが分かる。
【００８４】
カンジダパラプシロシスの場合は、<参考例１>の竹抽出液と銀イオン化竹抽出液の両方とも８００μＬを添加したときに菌の増殖が完全に抑制されたが、カンジダグラブラータの場合は、前記カンジダクルセイに対する抗微生物効果と同様に、<参考例１>の竹抽出液は１６００μＬを添加したときに菌の増殖が抑制され、銀イオン化竹抽出液は８００μＬを添加したときに菌の増殖が抑制された。
【００８５】
<実験例１−２>細菌および酵母に対する抗微生物効果実験
【００８６】
バクテリアのうち、大腸菌０１５７（ＫＣＣＭ４０４０６）、Bacillus therengenesis（ＫＣＴＣ１０３４）、Staphylococcus warneri（ＫＡＣＣ １０７８５）、Staphylococcus aureus（ＫＡＣＣ １０７７８）、Staphylococus aureus（ＫＡＣＣ １０７７８）およびVibrio sp.（全南大病院）は、ＬＢ Ｂｒｏｔｈで初期培養（３７℃、１２時間）し、Aeromonas hydrophila subsp. Hydrophila（ＫＣＣＭ３２５８６）とChromobacterium violaceum（ＫＣＣＭ１１７４８）はＮｕｔｒｉｅｎｔ Ｂｒｏｔｈ培地で初期培養し（２６℃、１８時間）、Streptococcus pyogenes（ＫＣＣＭ１１８５６）およびStreptococcus mutants（ＫＣＣＭ ４０１０５）はＢＨＩ(Brain Heart Infusion) Ｂｒｏｔｈ培地で初期培養し（３７℃、１８時間）、Lactobacillus crispatus（ＫＣＣＭ４１６２０）はＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｉ ＭＲＳ Ｂｒｏｔｈ培地で初期培養した（３７℃、１８時間）。そして、カンジダ(Candida sp.)はＳＤ(Sabouraud Dextrose)Ｂｒｏｔｈで初期培養（３０℃、１２時間）した。
【００８７】
初期培養の後、微生物培地（ＬＢ寒天）入りのそれぞれのペトリ皿に前記初期培養された１００μＬのそれぞれの菌株を十分塗抹した後、<参考例１>の竹抽出液、銀イオン水、<実施例１０>の銀イオン化竹抽出液１２μＬを前記微生物の塗抹された微生物培地上に添加した。そして、恒温器で１２時間培養した後、バクテリアの生育をクリアゾーン(clear zone)で判断して下記<表２>に示した。
ここで、前記銀イオン水は、前記<実施例１０>と同様の方法および条件で、<参考例１>の竹抽出液の代わりに３次蒸留水を用いて製造されたものである。
【００８８】
【表３】
2008526958.tif 000005
【００８９】
前記<表３>は、<実施例１０>の銀イオン化竹抽出液のバクテリアと酵母に対する抗微生物効果が<参考例１>の竹抽出液または銀イオン水の抗微生物効果よりも相乗的な効果であることを示す。前記において一般に抗微生物効果を持つと知られている銀イオン水が抗微生物効果を示していないのは、電気分解の電圧が低く、時間が短くて十分な量の銀イオンが発生していないためであると推測される。
【００９０】
<実験例１−３>真菌に対する抗微生物効果実験
【００９１】
Aspergillus ocnraceus（ＫＡＣＣ４００７）、Trichoderma harzianum（ＫＣＴＣ６４２６）、Fusarium solani（ＫＣＴＣ６３２８）、およびFusarium oxysporum（ＫＡＣＣ４００３７）はＰＤＡ（ポテトデキストロース寒天培地、Ｄｕｃｈｅｆａ）培地、Aspergillus ochraceus（ＫＡＣＣ４００７７）、Fusarium solani（ＫＡＣＣ４０３８４）およびFusarium graminearum（ＫＡＣＣ４０５３２）はＭＥＡ(Malt Extraction liquid Agar)培地、Trichophyton rubrum（ＫＣＴＣ６３４５）、Microsporum audouinii（ＫＣＴＣ６３４６）およびTrichophyton ferrugineum（ＫＣＴＣ６３５１）はＳＤＡ(Sabouraud Dextrose Agar)培地の中心部に菌を移植し、菌が栄養繁殖を始めて円形に確定されるとき（約７日間培養する）、一定の距離をおいてペーパーディスク(paper disk)に適量（約３０μＬ）の試料、すなわち<参考例１>の竹抽出液、銀イオン水、<実施例１０>の銀イオン化竹抽出液を吸収させた後、１２時間後に菌が前記試料処理地域へ増殖されるか否かを観察し、その結果を下記<表３>に示した。
ここで、前記銀イオン水は、前記<実施例１０>と同様の方法と条件で、<参考例１>の竹抽出液の代わりに３次蒸留水を用いて製造されたものである。
【００９２】
【表４】
2008526958.tif 000006
【００９３】
前記<表４>より、前記<実験例１−２>の<表３>と同様に、<実施例１０>の銀イオン化竹抽出液の真菌に対する抗微生物効果が<参考例１>の竹抽出液または銀イオン水の抗微生物効果よりも相乗的な効果であることが分かる。銀イオン水が真菌に対する抗微生物効果を示していないのは、前記<表３>で説明したような理由であると推測される。
【００９４】
<実験例１−４>電気分解の電圧と時間による抗微生物効果実験
【００９５】
前記<実施例１〜１０>の銀イオン化竹抽出液を用いて、銀イオン化竹抽出液の製造の際に電気分解の電圧と時間が抗微生物活性に対してどんな影響を及ぼすかを調べた。
実験方法は前記<実験例１−２>と同様であり、その結果は下記<表５>に示した。
【００９６】
【表５】
2008526958.tif 000007
【００９７】
前記<表５>によれば、銀イオン化竹抽出液は、全般的に電気分解時の電圧が高いほど、且つ電気分解時間が長いほどさらに高い抗微生物効果を持つ。
【００９８】
<実験例２>銀イオン化木草液の抗微生物効果実験
【００９９】
<実験例２−１>カンジダ(Candida sp.)に対する抗微生物効果実験
【０１００】
前記<実験例１−１>と同様の方法によってカンジダ(Candida sp.)に対する抗微生物効果を調べた。
本実験に使用されたカンジダ(Candida sp.)は、カンジダクルセイ(Candida krusei)ＡＴＣＣ６２５８、カンジダパラプシロシス(Candida parapsilosis)ＡＴＣＣ２２０１９、カンジダグラブラータ(Candida glabrata)ＡＴＣＣ９００３０、カンジダアルビカンス(Candida albicans)ＡＴＣＣ６４５５０およびカンジダアルビカンス(Candida albicans)ＡＴＣＣ９００２８である。
【０１０１】
まず、滅菌した培養液(Sabouraud Dextrose Broth)１０ｍＬに<参考例２>の木草液を無処理（ＣＯＮ）または１００μＬ、２００μＬ、４００μＬ、８００μＬ、１６００μＬの量でそれぞれ処理し、また２００μＬ、４００μＬの<実施例２０>の銀イオン化木草液を処理した後、十分成長した１００μＬのカンジダクルセイＡＴＣＣ６２５８、カンジダパラプシロシスＡＴＣＣ２２０１９、カンジダグラブラータＡＴＣＣ９００３０、カンジダアルビカンスＡＴＣＣ６４５５０(C. albicans 1)およびカンジダアルビカンスＡＴＣＣ９００２８(C. albicans 2)をそれぞれ接種して３０℃で培養した。
【０１０２】
培養中２に時間間隔でＯ．Ｄ（６００ｎｍ）値を測定し、その結果を図４〜図８に示した。図４〜図８はそれぞれカンジダクルセイＡＴＣＣ６２５８、カンジダパラプシロシスＡＴＣＣ２２０１９、カンジダクラブラータＡＴＣＣ９００３０、カンジダアルビカンスＡＴＣＣ６４５５０、およびカンジダアルビカンスＡＴＣＣ９００２８に対する菌株の増殖程度を調べた結果である。
【０１０３】
カンジダクルセイと２種のカンジダアルビカンスの場合は、木草液を１００μＬ添加したときには特別な抗微生物効果を示しておらず、木草液を２００μＬ以上添加したときに抗微生物効果が現われ始め、木草液を４００μＬ添加したときには完全にその増殖が抑制された。これに対し、銀イオン化木草液の場合は、木草液を２００μＬを添加したときにその増殖が完全に抑制された。このような結果より、カンジダクルセイと２種のカンジダアルビカンスにおいて、木草液の場合は最小発育阻止濃度（Minimum Inhibitiry Concentration；以下「ＭＩＣ」という）が少なくとも２０μＬ／ｍＬ以上であるが、銀イオン化木草液の場合はＭＩＣが２０μＬ／ｍＬ以下であることが分かる。
【０１０４】
カンジダパラプシロシスの場合は、木草液と銀イオン化木草液の両方とも２００μＬを添加したときに菌の増殖が完全に抑制されたが、カンジダグラブラータの場合は、前記カンジダクルセイに対する抗微生物効果と同様に、木草液は８００μＬを添加したときに菌の増殖が完全に抑制され、銀イオン化木草液は４００μＬを添加したときに菌の増殖が完全に抑制された。
【０１０５】
<実験例２−２>細菌および酵母に対する抗微生物効果実験
【０１０６】
前記<実験例１−２>と同様の方法で、細菌と酵母に対する抗微生物効果を調べた。
バクテリアは、ＬＢ Ｂｒｏｔｈで初期培養（３７℃、１２時間）し、カンジダ(Candida sp.)は、ＳＤ(Sabouraud Dextrose) Ｂｒｏｔｈで初期培養（３０℃、１２時間）した後、微生物培地（ＬＢ寒天）入りのペトリ皿に、初期培養された１００μＬの菌株を十分塗抹した後、<参考例２>の木草液、銀イオン水、<実施例２０>の銀イオン化木草液１２μＬを、前記バクテリアが塗抹された微生物培地上に添加した。そして、恒温器で１２時間培養した後、バクテリアの生育有無をクリアゾーンで判断して下記<表６>に示した。
ここで、前記銀イオン水は、前記<実施例２０>と同様の方法および条件で、<参考例２>の木草液の代わりに３次蒸留水を用いて製造されたものである。
【０１０７】
【表６】
2008526958.tif 000008
【０１０８】
前記<表６>は、<実施例２０>の銀イオン化木草液のバクテリアと酵母に対する抗微生物効果が<参考例２>の木草液または銀イオン水の抗微生物効果よりも相乗的な効果であることを示す。前記において一般に抗微生物効果を持つと知られている銀イオン水が抗微生物効果を示していないのは前記<表３>での説明と同じ理由であろう、と推測される。
【０１０９】
<実験例２−３>真菌に対する抗微生物効果実験
【０１１０】
前記<実験例１−３>と同様の方法で、真菌（カビ菌）に対する抗微生物効果を調べた。
培地（ポテトデキストロース寒天培地、Ｄｕｃｈｅｆａ）の中心部に菌を移植し、菌が栄養繁殖を始めて円形に確定されるとき、一定の距離をおいてペーパーディスクに２５μＬの試料、すなわち<参考例２>の木草液、銀イオン水、<実施例１０>の銀イオン化木草液を吸収させた後、１２時間後に菌が前記試料処理地域へ増殖するか否かを観察し、その結果を下記<表７>に示した。
ここで、前記銀イオン水は、前記<実施例２０>と同様の方法と条件で、<参考例２>の木草液の代わりに３次蒸留水を用いて製造されたものである。
【０１１１】
【表７】
2008526958.tif 000009
【０１１２】
前記<表７>からも分かるように、前記実験例と同様に、<実施例２０>の銀イオン化木草液の真菌に対する抗微生物効果が<参考例２>の木草液または銀イオン水の抗微生物効果よりも相乗的な効果である。銀イオン水が真菌に対する抗微生物効果を示していないのは前記<表３>での説明と同じ理由であろう、と推測される。
【０１１３】
<実験例２−４>電気分解の電圧と時間による抗微生物効果実験
【０１１４】
前記<実施例１１〜２０>の銀イオン化木草液を用いて、銀イオン化木草液の製造時の電気分解の電圧と時間が抗微生物活性に対してどんな影響を及ぼすかを調べた。
実験方法は前記<実験例２−２>と同様であり、その結果は下記<表８>に示した。
【０１１５】
【表８】
2008526958.tif 000010
【０１１６】
前記<表８>は、銀イオン化木草液が全般的に電気分解時の電圧が高いほど、且つ電気分解時間が長いほど、さらに高い抗微生物効果を持つことを示している。
【０１１７】
<実験例３>銀イオン化松抽出液の抗微生物効果実験
【０１１８】
前記<実験例１−２>と同様の方法で、細菌と酵母に対する抗微生物効果を調べた。
バクテリアは、ＭＨ(Mueller Hinton) Ｂｒｏｔｈで初期培養（３７℃、１２時間）し、カンジダ(Candida sp.)はＳＤ(Sabouraud Dextrose) Ｂｒｏｔｈで初期培養（３０℃、１２時間）した後、微生物培地（ＭＨ寒天）入りのペトリ皿に、初期培養された１００μＬの菌株を十分塗抹した後、<参考例３>の松抽出液、銀イオン水、<実施例２１>の銀イオン松抽出液１５μＬを、前記バクテリアの塗抹された微生物培地上に添加した。そして、恒温器で１２時間培養した後、バクテリアの生育有無を形成されたクリアゾーンで判断して下記<表９>に示した。
ここで、前記銀イオン水は、前記<実施例２１>と同様の方法と条件で、<参考例３>の松抽出液の代わりに３次蒸留水を用いて製造された。
【０１１９】
【表９】
2008526958.tif 000011
【０１２０】
前記<表９>より分かるように、<参考例３>の松抽出液または銀イオン水は抗微生物効果を示していないが、<実施例２１>の銀イオン化松抽出液はバクテリアおよび酵母に対して抗微生物効果がある。前記で銀イオン水が抗微生物効果を示していないのは前記<表３>での説明と同じ理由であろう、と推測される。
【０１２１】
<実験例４>銀イオン化コノテガシワ抽出液の抗微生物効果実験
【０１２２】
前記<実験例１−２>と同様の方法で、細菌と酵母に対する抗微生物効果を調べた。
バクテリアはＭＨ(Mueller Hinton) Ｂｒｏｔｈで初期培養（３７℃、１２時間）し、カンジダ(Candida sp.)はＳＤ(Sabouraud Dextrose) Ｂｒｏｔｈで初期培養（３０℃、１２時間）した後、微生物培地（ＭＨ寒天）入りのペトリ皿に、初期培養された１００μＬの菌株を十分塗抹した後、<参考例４>のコノテガシワ抽出液、銀イオン水、<実施例２２>の銀イオンコノテガシワ抽出液１５μＬを、前記バクテリアの塗抹された微生物培地上に添加した。そして、恒温器で１２時間培養した後、バクテリアの生育有無を形成されたクリアゾーンで判断して下記<表１０>に示した。
ここで、前記銀イオン水は、前記<実施例２２>と同様の方法と条件で、<参考例４>の松抽出液の代わりに３次蒸留水を用いて製造された。
【０１２３】
【表１０】
2008526958.tif 000012
【０１２４】
前記<表１０>は、<実施例２２>の銀イオン化コノテガシワ抽出液のバクテリアおよび酵母に対する抗微生物効果が<参考例４>のコノテガシワ抽出液または銀イオン水の抗微生物効果よりも相乗的な効果であることを示す。前記において銀イオン水が抗微生物効果を示していないのは前記<表３>での説明と同じ理由であろう、と推測される。
【０１２５】
<実験例５>銀イオン化海藻類抽出液の抗微生物効果実験
前記<実験例１−２>と同様の方法で、細菌と酵母に対する抗微生物効果を調べた。
バクテリアはＭＨ(Mueller Hinton) Ｂｒｏｔｈで初期培養（３７℃、１２時間）し、カンジダ(Candida sp.)はＳＤ(Sabouraud Dextrose) Ｂｒｏｔｈで初期培養（３０℃、１２時間）した後、微生物培地（ＭＨ寒天）入りのペトリ皿に、初期培養された１００μＬの菌株を十分塗抹した後、蒸留水で２倍希釈された<参考例５>の海藻類抽出液の上澄み原液（<実施例２３>参照）、銀イオン水、<実施例２３>の銀イオン化海藻類抽出液１５μＬを、前記バクテリアの塗抹された微生物培地上に添加した。そして、恒温器で１２時間培養した後、バクテリアの生育有無を形成されたクリアゾーンで判断して下記<表１１>に示した。
ここで、前記銀イオン水は、前記<実施例２３>と同様の方法と条件で、蒸留水で２倍希釈された<参考例５>の海藻類抽出液の上澄み原液の代わりに３次蒸留水を用いて製造された。
【０１２６】
【表１１】
2008526958.tif 000013
【０１２７】
前記<表１１>は、<実施例２３>の銀イオン化海藻類抽出液のバクテリアおよび酵母に対する抗微生物効果が<参考例５>の海藻類抽出液または銀イオン水の抗微生物効果よりも相乗的な効果であることを示す。前記において銀イオン水が抗微生物効果を示していないのは前記<表３>での説明と同じ理由であろう、と推測される。
【０１２８】
本発明者らは、電気分解によって生成された銀イオンが竹抽出液または木草液などの植物抽出液に存在する未知の物質と反応して新規物質を生成することにより、その物質が抗微生物効果を高める、と推測している。
【０１２９】
一方、前記実験例には示されていないが、本発明者らが前記<実験例１−２>と同様の方法で実験した結果によれば、銀イオン化竹抽出液または木草液はバシラスアントラシス(Bacillus anthracis)、大腸菌ＤＨ５α、スタフィロコッカススクレイフェリ(Staphylococcus schleiferi)に対しても抗微生物効果があった。
【０１３０】
［参照文献］
下記参照文献は、本明細書の一部を成す。
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【図面の簡単な説明】
【０１３１】
【図１】図１は竹抽出液と銀イオン化竹抽出液をそれぞれカンジダクルセイＡＴＣＣ６２５８培養液に処理した場合における前記微生物の増殖程度をグラフで示す。図１において、ＣＯＮは竹抽出液を無処理した場合であり、４００、８００、１６００および３２００は竹抽出液をそれぞれ４００μＬ、８００μＬ、１６００μＬおよび３２００μＬで処理した場合であり、８００（＋）は銀イオン化竹抽出液を８００μＬで処理した場合である。
【図２】図２は竹抽出液と銀イオン化竹抽出液をそれぞれカンジダパラプシロシスＡＴＣＣ２２０１９培養液に処理した場合における前記微生物の増殖程度をグラフで示す。図２において、ＣＯＮは竹抽出液を無処理した場合であり、４００、８００、１６００および３２００は竹抽出液をそれぞれ４００μＬ、８００μＬ、１６００μＬおよび３２００μＬで処理した場合であり、８００（＋）は銀イオン化竹抽出液を８００μＬで処理した場合である。
【図３】図３は竹抽出液と銀イオン化竹抽出液をそれぞれカンジダグラブラータＡＴＣＣ９００３０培養液に処理した場合における前記微生物の増殖程度をフラグで示す。図３において、ＣＯＮは竹抽出液を無処理した場合であり、４００、８００、１６００および３２００は竹抽出液をそれぞれ４００μＬ、８００μＬ、１６００μＬおよび３２００μＬで処理した場合であり、８００（＋）は銀イオン化竹抽出液を８００μで処理した場合である。
【図４】図４は木草液と銀イオン化木草液をそれぞれカンジダクルセイＡＴＣＣ６２５８培養液に処理した場合における前記微生物の増殖程度をグラフで示す。図４において、ＣＯＮは木草液を無処理した場合であり、１００、２００、４００、８００および１６００は木草液をそれぞれ１００μＬ、２００μＬ、４００μＬ、８００μＬおよび１６００μＬで処理した場合であり、２００（＋）および４００（＋）は銀イオン化木草液をそれぞれ２００μＬおよび４００μＬで処理した場合である。
【図５】図５は木草液と銀イオン化木草液をそれぞれカンジダパラプシロシスＡＴＣＣ２２０１９培養液に処理した場合における前記微生物の増殖程度をグラフで示す。図５において、ＣＯＮは木草液を無処理した場合であり、１００、２００、４００、８００および１６００は、木草液をそれぞれ１００μＬ、２００μＬ、４００μＬ、８００μＬおよび１６００μＬで処理した場合であり、２００（＋）および４００（＋）は銀イオン化木草液をそれぞれ２００μＬおよび４００μＬで処理した場合である。
【図６】図６は木草液と銀イオン化木草液をそれぞれカンジダグラブラータＡＴＣＣ９００３０培養液に処理した場合における前記微生物の増殖程度をグラフで示す。図６において、ＣＯＮは木草液を無処理した場合であり、１００、２００、４００、８００および１６００は木草液をそれぞれ１００μＬ、２００μＬ、４００μＬ、８００μＬおよび１６００μＬで処理した場合であり、２００（＋）および４００（＋）は銀イオン化木草液をそれぞれ２００μＬおよび４００μＬで処理した場合である。
【図７】図７は木草液と銀イオン化木草液をそれぞれカンジダアルビカンスＡＴＣＣ６４５５０(C. albians 1)培養液に処理した場合における前記微生物の増殖程度をグラフで示す。図７において、ＣＯＮは木草液を無処理した場合であり、１００、２００、４００、８００および１６００は木草液をそれぞれ１００μＬ、２００μＬ、４００μＬ、８００μＬおよび１６００μＬで処理した場合であり、２００（＋）および４００（＋）は銀イオン化木草液をそれぞれ２００μＬおよび４００μＬで処理した場合である。
【図８】図８は木草液と銀イオン化木草液をそれぞれカンジダアルビカンスＡＴＣＣ９００２８(C. albicans 2)培養液に処理した場合における前記微生物の増殖程度をグラフで示す。図８において、ＣＯＮは木草液を無処理した場合であり、１００、２００、４００、８００および１６００は木草液をそれぞれ１００μＬ、２００μＬ、４００μＬ、８００μＬおよび１６００μＬで処理した場合であり、２００（＋）および４００（＋）は銀イオン化木草液をそれぞれ２００μＬおよび４００μＬで処理した場合である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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