(57)【要約】チゲサイクリンの結晶性固体、フォームＩ、フォームＩＩ、フォームＩＩＩ、フォームＩＶ、およびフォームＶ、これらの結晶性固体を含む組成物、ならびにこれらの結晶性固体を調製する方法が本明細書に記載される。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
約５．２°（２θ）および約１１．１°（２θ）のＸ線粉末回折ピークを有するフォームＩチゲサイクリン。
【請求項２】
約８．３°（２θ）のＸ線粉末回折ピークをさらに有する請求項１記載のフォームＩチゲサイクリン。
【請求項３】
約２４．８°（２θ）のＸ線粉末回折ピークをさらに有する請求項１記載のフォームＩチゲサイクリン。
【請求項４】
実質上図１のようなＸ線粉末回折パターンを有するフォームＩチゲサイクリン。
【請求項５】
約１７０℃〜約１７２℃の高温融点開始温度を有する請求項１記載のフォームＩチゲサイクリン。
【請求項６】
約１７０℃〜約１７２℃の高温融点開始温度を有する請求項３記載のフォームＩチゲサイクリン。
【請求項７】
溶液からチゲサイクリンを晶出させることにより調製されるフォームＩ。
【請求項８】
溶液が塩化メチレンを含む請求項７記載のフォームＩ。
【請求項９】
約９．２°（２θ）、約９．７°（２θ）、および約２０．４°（２θ）のＸ線粉末回折ピークを有するフォームＩＩチゲサイクリン。
【請求項１０】
約１８．４°（２θ）のＸ線粉末回折ピークをさらに有する請求項９記載のフォームＩＩチゲサイクリン。
【請求項１１】
約１７．７°（２θ）のＸ線粉末回折ピークをさらに有する請求項９記載のフォームＩＩチゲサイクリン。
【請求項１２】
実質上図２のようなＸ線粉末回折パターンを有するフォームＩＩチゲサイクリン。
【請求項１３】
約１６９℃の高温融点開始温度を有する請求項９記載のフォームＩＩチゲサイクリン。
【請求項１４】
約１６９℃の高温融点開始温度を有する請求項１２記載のフォームＩＩチゲサイクリン。
【請求項１５】
１種または複数の適当な溶媒中でフォームＩチゲサイクリンをスラリー化することにより調製されるフォームＩＩチゲサイクリン。
【請求項１６】
１種の適当な溶媒がメタノールである請求項１５記載のフォームＩＩチゲサイクリン。
【請求項１７】
スラリーが１種以上の適当な溶媒を含む請求項１５記載のフォームＩＩ。
【請求項１８】
適当な溶媒がメタノール／塩化メチレンである請求項１５記載のフォームＩＩ。
【請求項１９】
溶液からチゲサイクリンを晶出させることにより調製されるフォームＩＩ。
【請求項２０】
溶液がメタノールを含む請求項１９記載のフォームＩＩ。
【請求項２１】
溶液がメタノール／塩化メチレンを含む請求項１９記載のフォームＩＩ。
【請求項２２】
約６．０°（２θ）のＸ線粉末回折ピークを有するフォームＩＩＩチゲサイクリン。
【請求項２３】
約５．２°（２θ）のＸ線粉末回折ピークをさらに有する請求項２２記載のフォームＩＩＩチゲサイクリン。
【請求項２４】
約９．３°（２θ）のＸ線粉末回折ピークをさらに有する請求項２２記載のフォームＩＩＩチゲサイクリン。
【請求項２５】
実質上図３のようなＸ線粉末回折パターンを有するフォームＩＩＩチゲサイクリン。
【請求項２６】
約１６７℃の高温融点開始温度を有するフォームＩＩＩチゲサイクリン。
【請求項２７】
約１６７℃の高温融点開始温度を有する請求項２５記載のフォームＩＩＩチゲサイクリン。
【請求項２８】
１種または複数の適当な溶媒中でフォームＩチゲサイクリンをスラリー化することにより調製されるフォームＩＩＩチゲサイクリン。
【請求項２９】
１種の適当な溶媒がジクロロメタンである請求項２５記載のフォームＩＩＩチゲサイクリン。
【請求項３０】
適当な溶媒が塩化メチレン／テトラヒドロフランである請求項２８記載のフォームＩＩＩ。
【請求項３１】
約４．６°（２θ）および約９．２°（２θ）のＸ線粉末回折ピークを有するフォームＩＶチゲサイクリン。
【請求項３２】
約８．８°（２θ）のＸ線粉末回折ピークをさらに有する請求項３１記載のフォームＩＶチゲサイクリン。
【請求項３３】
約１６．８°（２θ）のＸ線粉末回折ピークをさらに有する請求項３１記載のフォームＩＶチゲサイクリン。
【請求項３４】
約１８．０°（２θ）のＸ線粉末回折ピークをさらに有する請求項３３記載のフォームＩＶチゲサイクリン。
【請求項３５】
実質上図４のようなＸ線粉末回折パターンを有するフォームＩＶチゲサイクリン。
【請求項３６】
約１７０℃の高温融点開始温度を有する請求項３１記載のフォームＩＶチゲサイクリン。
【請求項３７】
約１７０℃の高温融点開始温度を有する請求項３５記載のフォームＩＶチゲサイクリン。
【請求項３８】
１種または複数の適当な溶媒中でフォームＩをスラリー化することにより調製されるフォームＩＶ。
【請求項３９】
溶媒がアセトニトリルである請求項３８記載のフォームＩＶ。
【請求項４０】
適当な溶媒がアセトニトリル／ｎ−ヘプタンである請求項３８記載のフォームＩＶ。
【請求項４１】
溶液からチゲサイクリンを晶出させることにより調製されるフォームＩＶ。
【請求項４２】
溶液がアセトニトリルを含む請求項３６記載のフォームＩＶ。
【請求項４３】
約４．３°（２θ）および約１１．４°（２θ）のＸ線粉末回折ピークを有するフォームＶチゲサイクリン。
【請求項４４】
約８．６°（２θ）のＸ線粉末回折ピークをさらに有する請求項４３記載のフォームＶチゲサイクリン。
【請求項４５】
約１７．３°（２θ）のＸ線粉末回折ピークをさらに有する請求項４３記載のフォームＶチゲサイクリン。
【請求項４６】
約２５．９°（２θ）のＸ線粉末回折ピークをさらに有する請求項４５記載のフォームＶチゲサイクリン。
【請求項４７】
実質上図５のようなＸ線粉末回折パターンを有するフォームＶチゲサイクリン。
【請求項４８】
約１７４℃の高温融点開始温度を有する請求項４３記載のフォームＶチゲサイクリン。
【請求項４９】
約１７４℃の高温融点開始温度を有する請求項４７記載のフォームＶチゲサイクリン。
【請求項５０】
１種または複数の適当な溶媒中でフォームＩをスラリー化することにより調製されるフォームＶチゲサイクリン。
【請求項５１】
適当な溶媒がテトラヒドロフランである請求項５０記載のフォームＶ。
【請求項５２】
溶液からチゲサイクリンを晶出させることにより調製されるフォームＶ。
【請求項５３】
溶液がテトラヒドロフランを含む請求項５２記載のフォームＶ。
【請求項５４】
適当な溶媒がテトラヒドロフラン／ｎ−ヘプタンである請求項５０記載のフォームＶ。
【請求項５５】
チゲサイクリンの少なくとも１種の結晶性固体形態を含む組成物。
【請求項５６】
フォームＩチゲサイクリンおよびフォームＩＩチゲサイクリンを含む請求項５５記載の組成物。
【請求項５７】
フォームＩチゲサイクリンおよびフォームＩＩＩチゲサイクリンを含む請求項５５記載の組成物。
【請求項５８】
フォームＩチゲサイクリン、フォームＩＩチゲサイクリン、およびフォームＩＩＩチゲサイクリンを含む請求項５５記載の組成物。
【請求項５９】
チゲサイクリンの少なくとも１種の結晶性固体形態を含む医薬組成物。
【請求項６０】
少なくとも１種の固体形態がフォームＩである請求項５９記載の医薬組成物。
【請求項６１】
少なくとも１種の固体形態がフォームＩＩである請求項５９記載の医薬組成物。
【請求項６２】
少なくとも１種の固体形態がフォームＩＩＩである請求項５９記載の医薬組成物。
【請求項６３】
少なくとも１種の固体形態がフォームＩＶである請求項５９記載の医薬組成物。
【請求項６４】
少なくとも１種の固体形態がフォームＶである請求項５９記載の医薬組成物。
【請求項６５】
医薬上有効量のフォームＩチゲサイクリンを含む組成物。
【請求項６６】
医薬上有効量のフォームＩＩチゲサイクリンを含む組成物。
【請求項６７】
医薬上有効量のフォームＩＩＩチゲサイクリンを含む組成物。
【請求項６８】
医薬上有効量のフォームＩＶチゲサイクリンを含む組成物。
【請求項６９】
医薬上有効量のフォームＶチゲサイクリンを含む組成物。
【請求項７０】
１種または複数の適当な溶媒中でフォームＩチゲサイクリンをスラリー化することを含むフォームＩＩチゲサイクリンの調製方法。
【請求項７１】
１種の適当な溶媒がメタノールである請求項７０記載の方法。
【請求項７２】
適当な溶媒がメタノール／塩化メチレンである請求項７０記載の方法。
【請求項７３】
１種または複数の適当な溶媒中でフォームＩチゲサイクリンをスラリー化することを含むフォームＩＩＩチゲサイクリンの調製方法。
【請求項７４】
１種の適当な溶媒がジクロロメタンである請求項７３記載の方法。
【請求項７５】
適当な溶媒が塩化メチレン／テトラヒドロフランである請求項７３記載の方法。
【請求項７６】
１種または複数の適当な溶媒中でフォームＩをスラリー化することを含むフォームＩＶチゲサイクリンの調製方法。
【請求項７７】
１種の適当な溶媒がアセトニトリルである請求項７６記載の方法。
【請求項７８】
適当な溶媒がアセトニトリル／ｎ−ヘプタンである請求項７６記載の方法。
【請求項７９】
１種または複数の適当な溶媒中でフォームＩをスラリー化することを含むフォームＶチゲサイクリンの調製方法。
【請求項８０】
１種の適当な溶媒がテトラヒドロフランである請求項７９記載の方法。
【請求項８１】
フォームＩＩを生産するために、溶液からチゲサイクリンを晶出させることを含むフォームＩＩの調製方法。
【請求項８２】
溶液がメタノールを含む請求項８１記載の方法。
【請求項８３】
フォームＩＶを生産するために、溶液からチゲサイクリンを晶出させることを含むフォームＩＶの調製方法。
【請求項８４】
溶液がアセトニトリルを含む請求項８３記載の方法。
【請求項８５】
フォームＶを生産するために、溶液からチゲサイクリンを晶出させることを含むフォームＶの調製方法。
【請求項８６】
溶液がテトラヒドロフランを含む請求項８５記載の方法。
【請求項８７】
フォームＩを生産するために、溶液からチゲサイクリンを晶出させることを含むフォームＩの調製方法。
【請求項８８】
溶液が塩化メチレンを含む請求項８７記載の方法。
【請求項８９】
フォームＩＩを生産するために、チゲサイクリンの水中溶液にメタノールを添加することを含むフォームＩＩチゲサイクリンの調製方法。
【請求項９０】
フォームＩＩチゲサイクリンが＞２０μｍの平均粒径を有する請求項８９記載の方法。
【請求項９１】
フォームＩＩを生産するために、メタノールにチゲサイクリンの水中溶液を添加することを含むフォームＩＩチゲサイクリンの調製方法。
【請求項９２】
フォームＩＩチゲサイクリンが＜２０μｍの平均粒径を有する請求項９１記載の方法。
【請求項９３】
非経口用医薬組成物を調製するための請求項１〜５４のいずれか一項に記載のチゲサイクリンの一形態の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００５年５月２７日付出願の米国仮出願番号第６０／６８４，９５５号の優先権を主張し、その内容を出典明示により本明細書の一部とする。
【０００２】
本発明は、チゲサイクリンの結晶性固体形態、その組成物、およびそれらの調製方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
チゲサイクリンは、テトラサイクリン系抗生物質およびミノサイクリンの化学類似体である。薬物耐性大腸菌に対する治療として用いられており、他の抗生物質が作用しない場合に作用することが示されている。例えば、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌、ペニシリン耐性肺炎連鎖球菌、バンコマイシン耐性腸球菌（Ｄ．Ｊ．Ｂｅｉｄｅｎｂａｃｈら，Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ  ４０：１７３−１７７（２００１）；Ｈ．Ｗ．Ｂｏｕｃｈｅｒら，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ＆  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ４４：２２２５−２２２９（２０００）；Ｐ．Ａ．Ｂｒａｄｆｏｒｄ  Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｎｅｗｓｌｅｔｔ．２６：１６３−１６８（２００４）；Ｄ．Ｍｉｌａｔｏｖｉｃら，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４７：４００−４０４（２００３）；Ｒ．Ｐａｔｅｌら，Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ  ３８：１７７−１７９（２０００）；Ｐ．Ｊ．Ｐｅｔｅｒｓｅｎら，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４６：２５９５−２６０１（２００２）；およびＰ．Ｊ．Ｐｅｔｅｒｓｅｎら，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４３：７３８−７４４（１９９９））、およびテトラサイクリン耐性の２つの主要形態：汲み出しおよびリボソームの保護のいずれかで輸送する生物（Ｃ．Ｂｅｔｒｉｕら，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４８：３２３−３２５（２００４）；Ｔ．Ｈｉｒａｔａら．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４８：２１７９−２１８４（２００４）；およびＰ．Ｊ．Ｐｅｔｅｒｓｅｎら，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４３：７３８−７４４（１９９９））に対して活性である。
【０００４】
チゲサイクリンは、経口投与されると、一般に低いバイオアベイラビリティを示すため、歴史的に静脈内投与されている。静脈内液剤は、滅菌水、０．９％塩化ナトリウム注射（米国薬局方（ＵＳＰ））、または５％ブドウ糖注射（米国薬局方）を用いて非晶質粉末を復元することにより調製されてもよい。チゲサイクリンは、典型的には、滅菌用賦形剤なしに凍結乾燥を介して非晶質粉末の状態にされる。しかしながら、チゲサイクリンは分解する傾向にあるため、該粉末を低酸素および低温の条件下で調製かつ処理する。特殊な装置および操作を必要とするのでかかる処理は費用がかかる。加えて、非晶質は一般に、同一化合物の結晶形より安定性が低い。（Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｏｌｉｄｓ，Ｈ．Ｇ．Ｂｒｉｔｔａｉｎ（ｅｄ．），１９９９，ｐ．２０８）。したがって、特殊な操作システムを必要とせずに結晶性固体形態のチゲサイクリンを使用および製造することができるなら好都合であろう。
【０００５】
結晶化合物は、分子の規則配列を有する固体であるのに対し、非晶質化合物は不規則な分子からなる。かかる配列はまた結晶格子と称され、単位格子と呼ばれる繰り返し構造部分からなる。有機分子などの同一分子が、一つ以上の方法にて固体中でそれ自体を順序づけうる場合、該分子は、いわゆる多形を示す。例えば、元素炭素は、（同素体と称される元素における）多形を示す。固体炭素は、３種の既知の結晶性固体形態：グラファイト、ダイヤモンド、およびフラーレンで存在する。各結晶性固体形態は炭素であるが、各形態の固体構造は異なっているので、各々異なる性質を有する。例えば、ダイヤモンドは既知の最も硬い物質の一つであるのに対し、グラファイトは非常に柔らかいものである。多数の有機化合物もまた、該化合物がどのように詰まって結晶性固体を形成するのかでその構造が異なる点で多形であることが知られている（例えば、Ｓｔｅｐｈｅｎｓｏｎ，Ｇ．Ａ；Ｓｔｏｗｅｌｌ，Ｊ．Ｇ；Ｔｏｍａ，Ｐ．Ｈ；Ｄｏｒｍａｎ，Ｄ．Ｅ．；Ｇｒｅｅｎｅ，Ｊ．Ｒ．；Ｂｙｒｎｅ，Ｓ．Ｒ．；「Ｓｏｌｉｄ  ｓｔａｔｅ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ，ｉｓｏｍｏｒｐｈｉｃ  ａｎｄ  ｓｏｌｖａｔｅｄ  ｆｏｒｍｓ  ｏｆ  Ｄｉｒｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ」，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９９４，１１６，５７６６を参照）。
【０００６】
原子が化学結合して分子を形成する化学構造に基づいて、一の化合物が結晶を形成するか、どのような条件下でもそれが晶出するか、どのくらい多くの固体化合物が存在しうるか、またはこれらのいずれかが固体構造を形成するか、どうかについて、人々はある程度の確信を持って予測することはできない。本明細書に用いられる「固体構造」なる語は、固体を形成するために分子が詰まっている場合に得られる構造を意味する。
【０００７】
時々、溶媒または水分子は、結晶性固体の結晶格子の一部となっている。かかる結晶性固体は各々、溶媒和物または水和物として称される。溶媒和物、水和物、および多形体は、結晶性固体形態と呼ばれることが多い。ここで、ほとんどの固体化学分野において、弱い結合の溶媒和物および水和物はまた、溶媒または水分子がチャネル中に存在する結晶性固体形態として含まれるかあるいは結晶格子の一部とはならない。非晶形は、固体形態として称されることが多いが、結晶性固体形態ではない。
【０００８】
同一化合物の異なる結晶性固体形態は、融点、溶解度、操作および安定度などの異なる固体特性を有することが多い。したがって、同一化合物の異なる結晶性固体形態を同定するとすぐに、与えられた一連の処理および製造条件下の最適な結晶性固体形態ならびに各結晶性固体形態の異なる固体特性を測定してもよい。
【０００９】
固体化学における当業者が固体を分析するために用いうる分析手法は多数存在する。本明細書に用いられる「分析する」なる語は、固体形態の固体構造についての情報を得ることを意味する。例えば、Ｘ線粉末回折は、非晶質固体形態を結晶性固体形態と識別する適当な手法ならびに化合物の結晶性固体形態を特徴付けおよび同定する適当な手法である。Ｘ線粉末回折はまた、混合物中の結晶性固体形態（複数でも可）の量を定量化するのに適当である。Ｘ線粉末回折において、Ｘ線は結晶上に向けられ、回折Ｘ線の強度は、Ｘ線源と試料に回折されたビーム間の２倍角の関数として測定される。かかる回折Ｘ線の強度は、Ｘ線源と回折Ｘ線間の２倍角（これは「２θ」角として知られている）であるｘ軸および回折Ｘ線のピーク強度であるｙ軸とのピークとしてグラフ上にプロットされうる。かかるグラフは、Ｘ線粉末回折パターンまたは粉末パターンと呼ばれる。ｘ軸上のピークの位置は結晶の固体構造の特性であるので、異なる結晶性固体形態は異なる粉末パターンを示す。
【００１０】
かかる粉末パターン、またはその位置は、結晶性固体形態についての同定フィンガープリントとして用いられうる。したがって、未知の試料の粉末パターンを得ることができ、かかる粉末パターンと基準粉末パターンを比較することができる。正の適合は、未知の試料が参照試料と同一の結晶性固体形態であることを意味するであろう。既知の化合物の粉末パターンを加減することにより固体形態の混合物を含有する未知の試料を分析することもできる。
【００１１】
結晶性固体形態を特徴付けるために粉末パターンにおけるピークを選定する場合または形態を同定するために基準粉末パターンを用いる場合、他の固体形態に含まれない一形態におけるピークまたは一群のピークを同定する。
【００１２】
本明細書に用いられる「特徴付ける」なる語は、一の固体形態と別のものを識別することができる適当な一連のデータを選定することを意味する。Ｘ線粉末回折におけるかかる一連のデータは、１つまたは複数のピークの位置である。チゲサイクリンＸ線粉末回折ピークが特定の形態を定義する選定は、その形態を特徴付けるといわれている。
【００１３】
本明細書に用いられる「同定する」なる語は、固体形態の特性データを選定し、その形態が試料中に含まれるかどうかを決定するためにかかるデータを用いることを意味する。Ｘ線粉末回折において、かかるデータは、上記のように問題となっている形態を特徴付けている１つまたは複数のピークのｘ軸の位置である。例えば、選択された多数のＸ線回折ピークが、チゲサイクリンの特定の固体形態を特徴付けることを決定するとすぐに、かかる形態がチゲサイクリンを含有する試料中に含まれるかどうかを決定するためにそれらのピークを用いうる。
【００１４】
同一化学物質の結晶性固体形態をＸ線粉末回折で特徴付けおよび／または同定する場合、全粉末パターンを用いる必要のない場合が多い。全粉末パターンのより小さな部分を用いて特徴付けおよび／または同定を行いうることが多い。化合物の結晶性固体形態を他の結晶性固体形態と区別する一群のピークを選択することにより、人々はこれらのピークを信頼して、例えば、未知の混合物にてその形態を特徴付けること、およびその形態を同定することができる。その形態を特徴付けおよび／または同定する、もう一つ別の分析手法からなどの付加的なデータ、あるいは粉末パターンからの付加的なピークを加えることで、例えば、後になって、付加的な多形が同定されるであろう。
【００１５】
機器、試料、および試料調製間の差異により、ピーク値は、ピーク値の前の「約」なる修飾語句で記録される。ピーク値の固有変化のため、これは固体化学分野においてありふれたものである。粉末パターンにおけるピークのｘ軸値２θの典型的精密度は、約±０．２°（２θ）である。したがって、「約９．２°（２θ）」に出現する粉末回折ピークは、ほとんどの条件下にてほとんどのＸ線回折計で測定するとピークが９．０°（２θ）と９．４°（２θ）の間にありうることを意味する。ピーク強度における変動は、個々の結晶が（「好ましい配向」として知られる）外部Ｘ線源に関する試料容器でどの程度配向であるかという結果である。かかる配向効果は、結晶に対する構造情報を提供しない。
【００１６】
Ｘ線粉末回折は、複数の分析手法のまさに一つであり、結晶性固体を特徴付けおよび／または同定するために用いてもよい。ラマン（Ｒａｍａｎ）（顕微ラマンを含む）、赤外線、および固体ＮＭＲ分光法などの分光法は、結晶性固体を特徴付けおよび／または同定するために用いられてもよい。該手法をまた、混合物中の１種または複数の結晶性固体形態の量を定量化するために用いてもよい。
【００１７】
同一化合物の異なる結晶性固体形態は、識別できない融点を有する可能性があるため、融点などの熱的手法は、それ自体が化合物の異なる結晶性固体形態を特徴付けおよび／または同定する必要はない。しかしながら、かかる状況において、融点は、結晶性固体を特徴付けおよび／または同定するためにＸ線粉末回折などの別の分析手法と共に用いられうる。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明は、フォームＩ、フォームＩＩ、フォームＩＩＩ、フォームＩＶ、およびフォームＶとして同定されるチゲサイクリンの結晶性固体形態に関する。本発明はまた、チゲサイクリンの１種または複数の結晶性固体形態を含有する、医薬組成物を含む、組成物に関する。さらに、本発明は、チゲサイクリンの結晶性固体形態を調製する方法に関する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１９】
２種のＸ線回折計は、本発明に通じる研究に用いられた。図１および図２のデータは、リガク製ミニフレックス回折システム（Ｒｉｇａｋｕ  Ｍｉｎｉｆｌｅｘ  Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ）（Ｒｉｇａｋｕ  ＭＳＣ  Ｉｎｃ．，東京、日本）を用いて収集された。粉末試料は、ゼロバックグラウンド（ｚｅｒｏ−ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ）研磨シリコン試料保持器で貯蔵された。標準フォーカス銅Ｘ線管は、３０ｋＶおよび１５ｍＡで操作され、機器はＮｉ  Ｋフィルターを備えている。試料スキャニングは、３．００〜４０．００°（２θ）にて０．０２°／段階である。Ｊａｄｅ６．０ソフトウェア（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄａｔａ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．，Ｌｉｖｅｒｍｏｒｅ、ＣＡ）を用いてデータ処理を行う。図３および図４および図５のデータは、石英試料保持器と共にＳｃｉｎｔａｇ新型回折システムモデルＸ２（Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｍｏｄｅｌ  Ｘ２）（Ｓｃｉｎｔａｇ，Ｉｎｃ．Ｃｕｐｅｒｔｉｎｏ、ＣＡ）を用いて収集された。銅Ｘ線発生装置は、４５ｋＶおよび４０ｍＡで操作され、スキャニングは、０．０２°／段階で３〜４０°（２θ）にて行われる。Ｊａｄｅ６．０ソフトウェア（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄａｔａ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）を用いてデータ処理を行う。図１−５各々、２つの部分：ピーク選定Ｘ線粉末回折図およびピーク一覧を含む。ピーク一覧を、標準パラメータおよび商用ソフトウェアを用いて作成する。
【００２０】
固体化学分野における当業者が、一見異なるパターンが、実際に異なる結晶性固体を表すかどうか識別するために粉末パターンを分析する場合、例えば、ライトボックス上またはコンピュータ画面上に粉末パターンを載せることが多い。まさにそのオーバーレイの例は、特徴付けおよび同定されたチゲサイクリンの５種の結晶性固体を表しているオーバーレイである図６で見出されうる。オーバーレイの拡大版は図７である。
【００２１】
全体的Ｘ線粉末回折を、チゲサイクリンの各結晶性固体形態を特徴付けるために用いてもよいが、人々はチゲサイクリンの各結晶性固体形態を特徴付けるために各パターンにおけるピークのより小さな部分を選択してもよい。次いで、かかる選択されたピークは、未知の試料におけるチゲサイクリンのまたはチゲサイクリンを含有する特定の結晶性固体形態の存在を同定するために用いられてもよい。
【００２２】
例えば、表１は、フォームＩおよびフォームＩＩの回折図における最初の６つのピークを記載する。
【表１】
2008545717.tif 000003
【００２３】
これらのデータの比較に基づき、かつ、チゲサイクリンのかかる２種の形態のみを考慮すれば、一群６つのピークがフォームＩＩの＋０．２°（２θ）に存在しないのでフォームＩを特徴付ける６つの記載されたフォームＩピークを信頼できることが分かる。しかしながら、フォームＩがフォームＩＩと異なると結論づけるために６つ全てのピークを信頼する必要はない。実際には、約５．２°（２θ）に最も近いフォームＩＩピークは、４°（２θ）離れた、約９．２°（２θ）で見出されるので、フォームＩの約５．２°（２θ）の単一ピークは、独自にフォームＩを特徴付ける。該４°（２θ）の差異は、任意の２つのピークの変動（０．２°（２θ））を合わせることにより得られる０．４°（２θ）より著しく大きい。他の用語では、１種の試料におけるピークが、別の試料の任意のピークから０．４°（２θ）以上離れている限り、これらは異なる結晶を表す。結晶性固体形態の任意に与えられたピークが試料間および／または機器間で０．４°（２θ）以上異なる可能性は非常に小さい。そのため、フォームＩおよびフォームＩＩのみを含むシステムにおいて、約５．２°（２θ）のピークを含有するチゲサイクリン粉末パターンは、フォームＩチゲサイクリンを特徴付け、そのピークの存在がフォームＩを同定するために用いられうる。同様に、フォームＩＩを特徴付ける場合、そのピークの０．４°（２θ）間にフォームＩのピークが存在しないため、約９．２°（２θ）のピークをまさに用いうる。
【００２４】
表１における全てのピークがフォームＩを特徴付けるために用いられうるとは限らない。例えば、フォームＩＩは０．１°（２θ）だけ離れる約１３．３°（２θ）のピークを有するので、フォームＩにおける約１３．２°（２θ）のピークは、それ自体はフォームＩを特徴付けるために用いることはできない。
【００２５】
本発明によれば、Ｘ線粉末回折データは、５種の結晶性チゲサイクリン型、フォームＩ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、およびＶで収集され、約２６°（２θ）以下のピークは表２に現れる。より高い強度のピークは、好ましい配向効果の影響をより受けやすいと決定される。さらに、表２に記載のピークは、図１−５のピークの一覧を考慮して選択された。したがって、表２のデータは、本発明の対象であるチゲサイクリンの結晶性固体形態を特徴付けおよび／または同定するピークの一部を見出すために用いられうる。
【表２】
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【００２６】
本発明によれば、フォームＩに記載のピークは、１ピークおきの各フォームＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、およびＶから０．４°（２θ）より大きくなることはないので、単一ピークは、各フォームＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、およびＶからフォークＩを特徴付けない。例えば、フォームＩの約５．２°（２θ）のピークを、フォームＩとフォームＩＩの間を識別するために用いることができる一方、フォームＩＩＩも５．２°（２θ）のピークを有するので、それを単独でフォームＩとフォームＩＩＩの間を識別するために用いることはできない。しかしながら、約１１．１°（２θ）のピークは、フォームＩＩＩの任意のピークから０．４°（２θ）以上であるので、５．２°（２θ）および１１．１°（２θ）のフォームＩピークの一部は、フォームＩとフォームＩＩおよびフォームＩＩＩ両方を識別するために用いられうる。同様の理由により、５．２°（２θ）のピークはまた、フォームＩをフォームＩＶおよびフォームＶと識別するために用いられうる。したがって、約５．２°（２θ）および約１１．１°（２θ）のＸ線回折ピークは、フォームＩの特性を示しており、試料のフォームＩを同定するために用いられてもよい。フォームＩの特徴付けおよび同定において、人々はまた、図１のフォームＩ粉末パターンピーク一覧からのいくつかまたは全ての他のピークも信頼してもよい。
【００２７】
同様の分析は、本発明のチゲサイクリンの異なる結晶性固体形態を特徴付けおよび同定するために用いられうる一組の特性Ｘ線粉末回折ピークを構成するためにフォームＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、およびＶについて実施される。
【００２８】
本発明によれば、フォームＩＩに関して、約９．２°（２θ）のピークは、フォームＩＩとフォームＩおよびフォームＶを識別する。しかしながら、それ自体はフォームＩＩとフォームＩＩＩまたはフォームＩＶを識別しない。約９．７°（２θ）のピークは、フォームＩＶより識別しやすいが、フォームＩＩＩにおけるピークから０．４°（２θ）である。フォームＩＩにおける約２０．４°（２θ）のピークは、フォームＩＩとフォームＩＩＩを識別する。そのため、約９．２°（２θ）、約９．７°（２θ）、および約２０．４°（２θ）のフォームＩＩのピークは、フォームＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、およびＶよりフォームＩＩを識別するので、試料中のフォームＩＩを特徴付ける。さらに、該ピークを、フォームＩＩを同定するために用いてもよい。フォームＩＩの特徴付けおよび同定において、人々はまた、図２のフォームＩＩ粉末パターンピーク一覧からのいくつかまたは全ての他のピークも信頼してもよい。
【００２９】
本発明によれば、フォームＩＩＩにおいて、約６．０°（２θ）のピークは、フォームＩ、ＩＩ、ＩＶ、およびＶよりフォームＩＩＩを識別し、さらにフォームＩＩＩを特徴付ける。さらに、該ピークを、試料のフォームＩＩＩを同定するために用いてもよい。フォームＩＩＩの特徴付けおよび同定において、人々はまた、図３のフォームＩＩＩ粉末パターンピーク一覧からのいくつかまたは全ての他のピークも信頼してもよい。
【００３０】
本発明によれば、フォームＩＶにおいて、約４．６°（２θ）のピークは、フォームＩ、ＩＩ、およびＩＩＩよりフォームＩＶを識別し、約９．２°（２θ）のピークは、フォームＶにおけるピークから０．４°（２θ）以上である。したがって、約４．６°（２θ）および約９．２°（２θ）のピークは、フォームＩＶとフォームＩ、ＩＩ、ＩＩＩ、およびＶを識別するため、フォームＩＶを特徴付ける。さらに、該ピークを、試料のフォームＩＶを同定するために用いてもよい。フォームＩＶの特徴付けおよび同定において、人々はまた、図４のフォームＩＶ粉末パターンピーク一覧からのいくつかまたは全ての他のピークも信頼してもよい。
【００３１】
本発明によれば、フォームＶについて、約４．３°（２θ）のピークは、フォームＶとフォームＩ、ＩＩ、およびＩＩＩを識別する。１１．４°（２θ）のフォームＶのピークは、フォームＶとフォームＩＶをさらに識別する。したがって、約４．３°（２θ）および約１１．４°（２θ）のピークは、フォームＩ、ＩＩ、ＩＩＩ、およびＩＶよりフォームＶを識別するため、フォームＶを特徴付ける。さらに、該ピークを、試料のフォームＶを同定するために用いてもよい。フォームＶの特徴付けおよび同定において、人々はまた、図５のフォームＶ粉末パターンピーク一覧からのいくつかまたは全ての他のピークも信頼してもよい。
【００３２】
他の分析手法はまた、チゲサイクリンの結晶性固体形態を分析するのに有用であってもよい。（顕微ラマンを含む）ラマン、赤外線、および固体ＮＭＲ分光法などの分光技術は、結晶性固体形態を特徴付けおよび／または同定するために用いられてもよい。該手法はまた、混合物中の１種または複数の結晶性固体形態の量を定量化するために用いられてもよい。
【００３３】
表３は、本発明のフォームＩ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶおよびＶの数種の試料の高温顕微鏡法による融点開始を示すデータを説明する。高温顕微鏡法による融点開始などの熱的手法は、それ自体が表３に示されるデータに基づきチゲサイクリンの異なる結晶性固体形態を特徴付けるかまたは同定する必要はない。例えば、フォームＩおよびフォームＩＶには、各々、約１７０℃の高温顕微鏡法により測定された融点開始が含まれるため、かかる手法により相互に識別することができない。対照的に、フォームＶは約１７４℃の高温により融点開始を有し、フォームＩＩＩは約１６７℃であるため、フォームＩＩＩは、該手法を用いてフォームＶと識別される。高温顕微鏡法による融点開始は、チゲサイクリンの結晶性固体を特徴付けおよび／または同定するためにＸ線粉末回折などの別の分析手法と共に用いてもよい。
【表３】
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【００３４】
高温顕微鏡測定において、高温顕微鏡のステージ温度は、Ｃｒｅａｔｉｖｅ  Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｉｎｃ社製（Ｎｅｓｈａｎｉｃ  Ｓｔａｔｉｏｎ，ＮＪ）Ｍｏｄｅｌ  ５０−６００  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｒにより制御される。試料の加熱速度は、１０℃／分である。使用される顕微鏡は、Ｎｉｋｏｎ社製（Ｔｏｋｙｏ，Ｊａｐａｎ）ＤＩＡＰＨＯＴ  ３００  ｓｙｓｔｅｍである。画像をＩｍａｇｅ−Ｐｒｏ  Ｐｌｕｓ  ｓｏｆｔｗａｒｅで加工した。融点開始値は、固体化学分野における標準用語であり、水、溶媒、または化学不純物の存在による融点変化、ならびに用いられる分析機器および手法により融点測定にもたらされる変動を説明すると意図している「約」なる修飾語句で報告される。
【００３５】
ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社製（Ｎｅｗ  Ｃａｓｔｌｅ、ＤＥ）熱重量分析装置（「ＴＧＡ」）による熱測定は、フォームＩＩが水和物であることを示す。図７において、フォームＩＩ試料を約２５℃〜約１００℃の間から開始して１０℃／分で加熱すると、フォームＩＩは、約５．３％の重量減少を示した。図８における加熱−冷却サイクルＴＧＡ実験により水さらに示されることによって、その大部分の重量減少が起こりうる。かかるサイクルでは、試料を最初に約５５℃に加熱し、次いで、約３７℃に冷却し、再度加熱し、冷却し、再度加熱する。約４．４％の重量減少が最初の加熱−冷却サイクルで観察され、後のサイクルでは重量減少はほとんど観察されない。実質上最初のサイクル後にこれ以上重量減少が観察されない、加熱−冷却サイクルにおける該重量減少反応は、水和物である試料と一致している。したがって、フォームＩＩは、約４．４％の水和レベルを有する水和物であると考えられる。
【００３６】
チゲサイクリンが５種の異なる結晶性固体形態に晶出させることは、チゲサイクリン化学式から予測することはできなかった。結晶性固体形態のいずれかの構造または特性を予測することも不可能であろう。本発明のチゲサイクリンの５種の結晶性固体形態を、かかる形態が結晶化できるようにする適当な一連の条件を決定することにより調製した。
【００３７】
本発明はまた、チゲサイクリンの結晶性固体形態を生産する方法を提供する。変動条件下にて有機溶媒でフォームＩをスラリー化することにより、フォームＩＩ−Ｖを調製しうる。スラリーにおいて、フォームＩを、固体フォームＩが完全に溶解しないかかる量の１種または複数の有機溶媒で処理し、スラリーとして一定期間溶媒または溶媒の混合物に合する。時として、スラリーを加熱し、またある時は、スラリーを別の溶媒で処理した。分析前にスラリーを、固体を単離するために濾過し、次いで、真空下で乾燥した。次いで、得られた固体を、多数の分析手法により分析しうる。
【００３８】
溶媒が、出発形態を別の形態に変換するのを補助しうると分かっている場合、かかる溶媒は、本明細書にてかかる変換に対する「適当な溶媒」といわれる。例えば、ジクロロメタンでフォームＩをスラリー化することにより、フォームＩはフォームＩＩＩに変換されることが分かる。したがって、ジクロロメタンは、かかる変換に適当な溶媒である。また、フォームＩは、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）から晶出され、ジクロロメタンでスラリー化することによりフォームＩＩＩに変換されうる。フォームＩＩは、メタノール中でフォームＩをスラリー化することにより生じうる。したがって、メタノールは、かかる変換に適当な溶媒である。所望により、フォームＩＩは、メタノール／ジクロロメタン中でスラリーにすることにより生じうる、ここで、メタノール含有量は１０％以上である。同様に、アセトニトリル中でフォームＩをスラリー化することによりフォームＩは、フォームＩＶに変換される。したがって、アセトニトリルは、その変換について適当な溶媒である。さらに、アセトニトリル／ｎ−ヘプタン中でフォームＩをスラリー化することは、フォームＩＶを生じさせる。さらに、テトラヒドロフラン中でフォームＩをスラリー化することは、フォームＩのフォームＶへの変換をもたらす。結果として、テトラヒドロフランは、その変換について適当な溶媒である。アセトン／メタノール（１．１ｖ／ｖ）におけるフォームＩのスラリー化は、アセトン／メタノールから晶出させるようにフォームＩをもたらす。
【００３９】
スラリー化することに加えて、適当な溶媒との他の処理は、一形態から別の形態への変換をもたらしうる。例えば、チゲサイクリンのフォームＩＩは、メタノールからチゲサイクリンを晶出させることにより調製されうる。さらに、チゲサイクリンのフォームＩＩは、チゲサイクリンの水中溶液へのメタノールの低速添加により調製され得、フォームＩＩ粒子＞２０μｍを得る。さらに、メタノールへのチゲサイクリンの水中溶液の添加により＜２０μｍであるフォームＩＩ粒子を得る。したがって、メタノール、メタノール／水または水／メタノールは、チゲサイクリンを晶出させることによりフォームＩＩの形成に適当である。
【００４０】
粒子長データをチゲサイクリン粒子の光学像から収集する。光学顕微鏡分析は、デジタルカメラ（Ｎｉｋｏｎ  ＤＸＭ  １２００）および修正画像収集システム（Ｎｉｋｏｎ  ＡＣＴ−１  ｖ２．１２）内蔵の５倍〜１００倍拡大能のＮｉｋｏｎ製Ｅｃｌｉｐｓｅ  Ｅ６００顕微鏡を用いて実施される。画像は、ＩｍａｇｅＰｒｏ  ｐｌｕｓ画像処理ソフトウェア（Ｍｅｄｉａ  Ｃｙｂｅｒｎｅｔｉｃｓ、Ｓｉｌｖｅｒ  Ｓｐｒｉｎｇ、ＭＤ）を用いて処理される。ソフトウェアは、均一なバックグラウンドからチゲサイクリン粒子を単離するために対比微分アルゴリズムを用いた。データ分析の結果を、以下の表４に示す。
【表４】
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【００４１】
フォームＩＩＩは、ジクロロメタンからチゲサイクリンを晶出させることにより得られうる。フォームＩＶは、アセトニトリルからチゲサイクリンを晶出させることにより得られ、フォームＶは、テトラヒドロフランからチゲサイクリンを晶出させることにより得られうる。
【００４２】
本発明によれば、動物またはヒトに用いるためのチゲサイクリンの製剤は、本発明のフォームＩ−Ｖから生産されうる。チゲサイクリンの５種の結晶性固体の溶解度は、全て水中２５ｍｇ／ｍｌより大きいため、それらが全て相互に生物学的に同等であると期待されている。
【００４３】
非経口用医薬組成物はまた、凍結乾燥工程の有無に関わらずフォームＩ−Ｖのいずれかで調製されうる。１種または複数のフォームＩ−Ｖを用いる結晶性チゲサイクリンの医薬組成物はまた、本発明にしたがって調製されうる。かかる組成物は、チゲサイクリンの１種または複数のフォームＩ−Ｖの医薬上有効な量を送達するために用いられうる。組成物は、医薬上適当な担体と組み合わせてまたは付随してチゲサイクリンの結晶形を含んでいてもよい。
【００４４】
以下に限定されないが、実施例は、チゲサイクリンのフォームＩ−Ｖを生産する複数の方法を説明する。
【実施例】
【００４５】
実施例１−フォームＩの調製
スターラーおよび温度計内蔵の５リットルの三首丸底フラスコ中で２０００ｍＬのｔ−ブチルアミンを効率的に攪拌しながら、３００ｇの粗９−クロロアセトアミドミノサイクリンを室温（２５−２８℃）でゆっくりと添加する。４８ｇのヨウ化ナトリウムを添加し、反応混合物を３５−４０℃で６時間攪拌する。反応物をＨＰＬＣで測定し、出発物質が＜２％残存する場合、５００ｍＬのメタノールで処理し、溶媒を４０℃で回転式蒸発装置上にて除去する。残渣に、１１００ｍＬのメタノールおよび１７００ｍＬの水を添加する。溶液を０−２℃に冷却し、濃ＨＣｌ（約２５０ｍＬ）でｐＨ７．２に調整する。この段階での反応混合物の総量は３５００ｍＬである。それを水で８．５リットルに希釈し、ｐＨを濃ＨＣｌ（１２ｍＬ）で４．０−４．２に調整する。１．６ｋｇの洗浄アンバークロム（Ａｍｂｅｒｃｈｒｏｍ）（登録商標）（ＣＧ−１６１  ｃｄ）（ＮＶＭ  ２７％）樹脂を溶液に添加し、ｐＨを４．０−４．２に調整しながら３０分間攪拌する。樹脂を濾去し、使用済み水性溶液について生成物の測定を行い、４−８℃に保存する。樹脂を２．０リットルの水中２０％メタノール（容量／容量）でスラリー化する。懸濁液を、ｐＨを４．０−４．２に調整しながら１５分間攪拌する。樹脂を再度濾去し、濾液について生成物の測定を行う。樹脂の抽出を２．０リットルの水中２０％メタノールで２回以上繰り返す。全ての樹脂抽出物および上記からの使用済み水性溶液を保存し、ｐＨを３０％水酸化アンモニウムで７−７．２に調整した。抽出物間でｐＨを７．０−７．２に調整しながら、水性溶液を６ｘ３．０リットルの塩化メチレンで抽出する。保存された塩化メチレン抽出物を、２５０ｇの無水硫酸ナトリウムに通して濾過し、５００ｍＬに濃縮し、０−３℃に冷却する。生成物は晶出した。スラリーを０−３℃で１時間攪拌し、固体を濾過し、２ｘ５０ｍＬの冷却塩化メチレンで洗浄し、真空中にて４０℃で乾燥した（２９インチのＨｇ）。得られた固体の重量は、１１０ｇである。得られた固体は、フォームＩのチゲサイクリンとしてＸ線粉末回折により同定されうる（ＨＰＬＣ面積９７．９％、エピマー０．３％）。
【００４６】
実施例１Ａ−実施例１から樹脂の調製
１ｋｇのアンバークロム（登録商標）（トーソー・ハース（Ｔｏｓｏ  Ｈａａｓ）からＣＧ−１６１  ＣＤ）を取得し、６−７リットルの水中１２％２−プロパノール（容量／容量）中でスラリー化し、１２−１６時間攪拌することにより、使用前に実施例１の樹脂を洗浄する。それを濾過し、６−７リットルの５０％アセトニトリル−水（容量／容量）中で３０分間攪拌する。スラリーを濾過し、次いで、７リットルのアセトニトリル中で再度スラリー化し、３０分間攪拌し、濾過する。アセトニトリルのスラリー化を２回繰り返し、濾過する。次いで、樹脂を６リットルのメタノール中でスラリー化し、１時間攪拌し、濾過する。次いで、樹脂を７リットルの脱イオン水中でスラリー化し、１６時間攪拌し、濾過する。次いで、樹脂を、７リットルの水中で再度スラリー化し、１時間攪拌し、濾過する。水のスラリー化を３回以上繰り返す。樹脂を濾過し、できるだけ多量の水を１０−１２時間濾過漏斗上で除去する。瓶に入れ、冷却（５−８℃）保存する。
【００４７】
実施例２−フォームＩの調製
１０．００ｇの９−アミノミノサイクリンを、６０ｍｌの水に０−５℃で滴下する。１０．９８ｇのｔ−ブチルグリシン酸塩化物塩酸塩を、０−５℃の温度を保ちながら滴下する。４０−６０分間攪拌した後、３０％水酸化アンモニウムを、０−５℃の温度を保ちながら反応混合物に滴下し、ｐＨを７．２に調整する。溶液に８３ｍｌのメタノールを、次いで、６０ｍｌの塩化メチレンを添加する。１５分間攪拌した後、相を分離した。各々抽出する前に、水相を、ｐＨを７．２に調整しながら４ｘ４０ｍｌの塩化メチレンで抽出する。合した有機物に１０ｍｌのメタノールを添加し、溶液を硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで、濾過する。溶液を濃縮する。得られた懸濁液を、５−１０℃で１時間攪拌し、次いで、濾過する。固体を、２ｘ１０ｍＬの冷却塩化メチレンで洗浄し、次いで、乾燥し、８．８０ｇの生成物を得る（収率７６．８％）；ＨＰＬＣ面積による純度９８．４％およびＣ−４エピマー０．１％；ＭＳ（ＦＡＢ）：ｍ／ｚ  ５８６  （Ｍ＋Ｈ）；５８５（Ｍ＋）。
【００４８】
実施例３−フォームＩＩの調製
０．５ｇのフォームＩを、２２℃にて８ｍＬのメタノール中でスラリー化する。スラリーを約３５℃に加温し、透明溶液を得、２２℃に冷却し、３０分間保持し、濃赤色スラリーを得る。スラリーを濾過し、２５℃で真空下にて一晩乾燥する。得られた固体を熱重量分析（「ＴＧＡ」）および粉末Ｘ線回折によって分析する。ＴＧＡプロット（図８）は、８７℃で５．３％の重量減少を示し、１０℃／分の標準ランプ速度を実験で用いる。
【００４９】
ＴＧＡ加熱炉内部の窒素雰囲気中の新たな試料で加熱−冷却サイクルを継続する（図９）。最初の加熱サイクルでは、４．４％重量減少が観察され、二番目および三番目のサイクルでは観察されず、重量減少は適当な水であることを示す。三番目のサイクル後、得られた粉末は外観が赤色である。
【００５０】
実施例４−フォームＩＩの調製
３０ｍｇの粗チゲサイクリンを、４０℃にて５００μＬの脱イオン水で溶解し、溶液を２３℃で攪拌する。該溶液に、５００μＬのメタノールを１００μＬずつ１５分かけて添加する。完全に添加した後、濁った溶液を約１０分間攪拌し、次いで、赤色結晶性沈渣を得る。物質を空中で濾過により単離し、次いで、４０℃で８時間真空下にて乾燥し、Ｘ線粉末回折によって測定される２１．４ｇのフォームＩＩを得る。
【００５１】
実施例５−フォームＩＩの調製
３０ｍｇの粗チゲサイクリンを、４０℃にて５００μＬの脱イオン水で溶解し、溶液を２３℃で攪拌する。該溶液を、８００μＬメタノールに添加し、約１５分間１０℃で攪拌する。添加中に、結晶性沈渣を得る。物質を空中で濾過により単離し、次いで、４０℃で８時間真空下にて乾燥し、Ｘ線粉末回折によって測定される２０．２ｍｇのフォームＩＩを得る。
【００５２】
実施例６−フォームＩＩＩの調製
０．２５ｇのフォームＩを２ｍＬのジクロロメタン中でスラリー化し、懸濁液を形成する。０．０１ｇのフォームＶを種として添加する。懸濁液を２２℃で９６時間攪拌する。次いで、スラリーを濾過し、２２℃で真空下にて乾燥する。得られた固体フォームＩＩＩを、高温顕微鏡法、Ｘ線粉末回折、ＨＰＬＣ（純度９９．９８％）、および光学顕微鏡法によって分析する。
【００５３】
実施例７−フォームＩＶの調製
０．１５ｇのフォームＩを、２２℃で２ｍＬのアセトニトリルに添加する。透明溶液を得、３０分間攪拌し、懸濁液を得る。スラリーを濾過し、２２℃で真空下にて乾燥する。得られた灰白色固体フォームＩＶを、高温顕微鏡法、Ｘ線粉末回折、ＨＰＬＣ（純度９３．３９％）、および光学顕微鏡法によって分析する。
【００５４】
実施例８−フォームＩＶの調製
０．１６７ｇのフォームＩを、２２℃でアセトニトリル中にてスラリー化する。スラリーを３０℃に加温し、透明溶液を得る。２ｍＬのｎ−ヘプタンを５分経過後、溶液に添加する。懸濁液を形成し、２２℃に冷却し、３０分間その温度に保持する。スラリーを濾過し、得られた固体を５ｍＬのｎ−ヘプタンで洗浄し、真空下にて２２℃で乾燥する。得られた固体フォームＩＶをＸ線粉末回折、ＨＰＬＣ（純度９６．３９％）、および光学顕微鏡法によって分析する。
【００５５】
実施例９−フォームＶの調製
０．２２ｇのフォームＩを、２２℃で２ｍＬのテトラヒドロフランに添加し、５分間攪拌した。２ｍＬのｎ−ヘプタンを添加し、透明溶液を得る。得られたスラリーを２２℃で３０分間攪拌する。スラリーを濾過し、２２℃で真空下にて乾燥する。得られた固体フォームＶを、高温顕微鏡法、Ｘ線粉末回折、ＨＰＬＣ（純度９３．５７％）、および光学顕微鏡法によって分析する。
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１】フォームＩチゲサイクリンのＸ線粉末回折パターンおよびピーク一覧である。
【図２】フォームＩＩチゲサイクリンのＸ線粉末回折パターンおよびピーク一覧である。
【図３】フォームＩＩＩチゲサイクリンのＸ線粉末回折パターンおよびピーク一覧である。
【図４】フォームＩＶチゲサイクリンのＸ線粉末回折パターンおよびピーク一覧である。
【図５】フォームＶチゲサイクリンのＸ線粉末回折パターンおよびピーク一覧である。
【図６】チゲサイクリンのフォームＩ−ＶのＸ線粉末回折オーバーレイである。
【図７】チゲサイクリンのフォームＩ−ＶのＸ線粉末回折オーバーレイの拡大版である。
【図８】フォームＩＩのチゲサイクリンの熱重量分析（「ＴＧＡ」）である。
【図９】フォームＩＩのチゲサイクリンのＴＧＡ加熱−冷却サイクルである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【国際調査報告】
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