(57)【要約】  記載されているのは、ケモカイン受容体とそれらのリガンドの相互作用により仲介される障害または疾患の予防または処置のための、遊離形または塩形の式(Ｉ)式Ｉ【化１】2008545725.tif 000030〔式中、Ｒ１およびＲ２の各々が独立してＨ；所望によりＲ１０および／またはＲ１１置換されていてよいフェニルまたはフェニル−Ｃ１−４アルキル；所望によりＲ１０および／またはＲ１１置換されていてよいヘテロアリールまたは−ヘテロアリール−Ｃ１−４アルキル；所望によりＲ１０および／またはＲ１１置換されていてよいヘテロアリールＮ−オキシド；所望によりＲ１０置換されていてよいＣ１−Ｃ８アルキル；所望によりＲ１０置換されていてよいＣ２−Ｃ８アルケニル、所望によりＲ１０置換されていてよいＣ２−Ｃ８アルキニル；所望によりＲ１０置換されていてよいＣ３−Ｃ８シクロアルキル、または所望によりＲ１０置換されていてよいＣ４−Ｃ８シクロアルケニルであるか；またはＲ１およびＲ２が、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望によりＲ１０置換されていてよい該窒素原子に加えて、Ｎ、ＯおよびＳから独立して選択される２個までのヘテロ原子を含む３−８員環を形成し；Ｒ３はＨ；ＯＲ１；ＣＨ２Ｒ１Ｒ２；(ＣＨ２)１−２ＮＲ１Ｒ２；ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＲ１；ＣＨ２−ＣＯ−ＮＲ１Ｒ２；またはＣＯ−ＣＨ２Ｒ１Ｒ２であり；Ｒ４はＦ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；ＯＲ１；ＮＲ１Ｒ２であるか、またはＲ１について定義の意味の１個を有し；そしてＲ５はＲ１について定義の意味の１個を有する。〕のエルゴリン誘導体である。
2008545725.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
遊離形または塩形の、式Ｉ
【化１】
2008545725.tif 000027
〔式中、
Ｒ１およびＲ２の各々が独立してＨ；所望によりＲ１０および／またはＲ１１置換されていてよいフェニルまたはフェニル−Ｃ１−４アルキル；所望によりＲ１０および／またはＲ１１置換されていてよいヘテロアリールまたはヘテロアリール−Ｃ１−４アルキル；所望によりＲ１０および／またはＲ１１置換されていてよいヘテロアリールＮ−オキシド；所望によりＲ１０置換されていてよいＣ１−Ｃ８アルキル；所望によりＲ１０置換されていてよいＣ２−Ｃ８アルケニル、所望によりＲ１０置換されていてよいＣ２−Ｃ８アルキニル；所望によりＲ１０置換されていてよいＣ３−Ｃ８シクロアルキル、または所望によりＲ１０置換されていてよいＣ４−Ｃ８シクロアルケニルであるか；
またはＲ１およびＲ２が、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望によりＲ１０置換されていてよい該窒素原子に加えて、Ｎ、ＯおよびＳから独立して選択される２個までのヘテロ原子を含む３−８員環を形成し；
ここで、Ｒ１０はＣ１−Ｃ６アルキル；Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル；Ｃ１−Ｃ６アルコキシアルキル；Ｃ１−Ｃ６ハロゲノアルキル；Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル；Ｃ２−Ｃ６アルケニル；Ｃ３−Ｃ６シクロアルケニル；Ｃ２−Ｃ６アルキニル；フェニル；ヘテロアリール；ヘテロアリールＮ−オキシド；Ｆ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；ＯＨ；ＯＲ９；ＯＣＯＲ９；ＯＣＯＯＲ９；ＯＣＯＮＨＲ９；ＯＣＯＮＲ９Ｒ９；ＯＳＯ２Ｒ９；ＣＯＲ９；ＣＯＯＨ；ＣＯＯＲ９；ＣＯＮＨ２；ＣＯＮＨＲ９；ＣＯＮＲ９Ｒ９；ＣＦ３；ＣＨＦ２；ＣＨ２Ｆ；Ｃ１−４アルキルＮＨ２；Ｃ１−４アルキルＮＨＲ９；Ｃ１−４アルキルＮＲ９Ｒ９；ＣＮ；ＮＯ２；ＮＨ２；ＮＨＲ９；ＮＲ９Ｒ９；ＮＨＣＯＲ９；ＮＲ９ＣＯＲ９；ＮＨＣＯＮＨＲ９；ＮＨＣＯＮＨ２；ＮＲ９ＣＯＮＨＲ９；ＮＲ９ＣＯＮＲ９Ｒ９；ＮＨＣＯＯＲ９；ＮＲ９ＣＯＯＲ９；ＮＨＳＯ２Ｒ９；Ｎ(ＳＯ２Ｒ９)２；ＮＲ９ＳＯ２Ｒ９；ＳＲ９；ＳＯＲ９；ＳＯ２Ｒ９；ＳＯ２ＮＨ２；ＳＯ２ＮＨＲ９；ＳＯ２ＮＲ９Ｒ９から独立して選択される１個から４個の置換基であるか；または
Ｒ１０はフェニルまたはヘテロアリールの炭素原子に結合した＝Ｏであるか、または、もしあるならば、ヘテロアリールの同じＳ原子に結合した１個または２個の＝Ｏであってよく；
Ｒ１１は所望によりＮ、ＯおよびＳから独立して選択される２個までのヘテロ原子を含んでよい縮環した(annulated)４−７員非芳香環を形成する２個の隣接置換基であり；
各Ｒ９は、独立してＣ１−Ｃ６アルキル；ヒドロキシル−Ｃ１−Ｃ６アルキル；Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル；Ｃ２−Ｃ６アルケニル；Ｃ２−Ｃ６アルキニル；フェニル；ベンジル；ヘテロアリール；−ＣＨ２−ヘテロアリール；またはＣＦ３であるか；または２個のＲ９が、それらが結合しているＮ原子と一体となって、所望によりＲ１０置換されていてよい該Ｎ原子に加えて、Ｎ、ＯおよびＳから独立して選択される２個までのヘテロ原子を含む４−８員環を形成し；
Ｒ３はＨ；ＯＲ１；ＣＨ２Ｒ１Ｒ２；(ＣＨ２)１−２ＮＲ１Ｒ２；ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＲ１；ＣＨ２−ＣＯ−ＮＲ１Ｒ２；またはＣＯ−ＣＨ２Ｒ１Ｒ２であり；
Ｒ４はＦ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；ＯＲ１；ＮＲ１Ｒ２であるか、またはＲ１について定義の意味の１個を有し；そして
Ｒ５はＲ１について定義の意味の１個を有する。〕
の化合物。
【請求項２】
請求項１に記載の式Ｉの化合物の製造法であって、
ａ)Ｒ３およびＲ４の各々がＨである式Ｉの化合物の製造のために、
式II
【化２】
2008545725.tif 000028
〔式中、Ｒ１およびＲ２は上記で定義の通りである。〕
の化合物とウレア形成剤を反応させるか；または
ｂ)Ｒ３およびＲ４の各々がＨである式Ｉの化合物の製造のために、式III
【化３】
2008545725.tif 000029
〔式中、Ｒ５は上記で定義の通りである。〕
の化合物またはその官能的誘導体をアミド化するか；または
ｃ)Ｒ３およびＲ４がＨ以外である式Ｉの化合物の製造のために、Ｒ３およびＲ４がＨである式Ｉの化合物を変換し；
そして、必要であれば、その結果遊離形で得られた式Ｉの化合物を所望の塩形に変換するか、またはその逆を行う
ことを含む、方法。
【請求項３】
医薬として使用するための、請求項１記載の式Ｉの化合物、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項４】
請求項１記載の式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩を、１種以上の薬学的に許容される希釈剤または担体と共に含む、医薬組成物。
【請求項５】
ケモカイン受容体とそれらのリガンドの間の相互作用が仲介する障害または疾患の予防または処置用薬剤の製造における、請求項１記載の式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩の使用。
【請求項６】
ａ)請求項１記載の式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩である第一剤、およびｂ)少なくとも１種の併用剤を含む、組み合わせ剤。
【請求項７】
処置を必要とする対象におけるケモカイン受容体とそれらのリガンドの間の相互作用が仲介する障害または疾患の予防または処置方法であって、該対照に有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩を投与することを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はエルゴリン誘導体、それらの製造法、医薬としてのそれらの使用、およびそれらを含む医薬組成物に関する。
【発明の開示】
【０００２】
より具体的に、本発明は、遊離形または塩形の、式Ｉ
【化１】
2008545725.tif 000003
〔式中、
Ｒ１およびＲ２の各々が独立してＨ；所望によりＲ１０および／またはＲ１１置換されていてよいフェニルまたはフェニル−Ｃ１−４アルキル；所望によりＲ１０および／またはＲ１１置換されていてよいヘテロアリールまたはヘテロアリール−Ｃ１−４アルキル；所望によりＲ１０および／またはＲ１１置換されていてよいヘテロアリールＮ−オキシド；所望によりＲ１０置換されていてよいＣ１−Ｃ８アルキル；所望によりＲ１０置換されていてよいＣ２−Ｃ８アルケニル、所望によりＲ１０置換されていてよいＣ２−Ｃ８アルキニル；所望によりＲ１０置換されていてよいＣ３−Ｃ８シクロアルキル、または所望によりＲ１０置換されていてよいＣ４−Ｃ８シクロアルケニルであるか；
またはＲ１およびＲ２が、それらが結合している窒素原子と一体となって、所望によりＲ１０置換されていてよい該窒素原子に加えて、Ｎ、ＯおよびＳから独立して選択される２個までのヘテロ原子を含む３−８員環を形成し；
ここで、Ｒ１０はＣ１−Ｃ６アルキル；Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル；Ｃ１−Ｃ６アルコキシアルキル；Ｃ１−Ｃ６ハロゲノアルキル；Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル；Ｃ２−Ｃ６アルケニル；Ｃ３−Ｃ６シクロアルケニル；Ｃ２−Ｃ６アルキニル；フェニル；ヘテロアリール；ヘテロアリールＮ−オキシド；Ｆ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；ＯＨ；ＯＲ９；ＯＣＯＲ９；ＯＣＯＯＲ９；ＯＣＯＮＨＲ９；ＯＣＯＮＲ９Ｒ９；ＯＳＯ２Ｒ９；ＣＯＲ９；ＣＯＯＨ；ＣＯＯＲ９；ＣＯＮＨ２；ＣＯＮＨＲ９；ＣＯＮＲ９Ｒ９；ＣＦ３；ＣＨＦ２；ＣＨ２Ｆ；Ｃ１−４アルキルＮＨ２；Ｃ１−４アルキルＮＨＲ９；Ｃ１−４アルキルＮＲ９Ｒ９；ＣＮ；ＮＯ２；ＮＨ２；ＮＨＲ９；ＮＲ９Ｒ９；ＮＨＣＯＲ９；ＮＲ９ＣＯＲ９；ＮＨＣＯＮＨＲ９；ＮＨＣＯＮＨ２；ＮＲ９ＣＯＮＨＲ９；ＮＲ９ＣＯＮＲ９Ｒ９；ＮＨＣＯＯＲ９；ＮＲ９ＣＯＯＲ９；ＮＨＳＯ２Ｒ９；Ｎ(ＳＯ２Ｒ９)２；ＮＲ９ＳＯ２Ｒ９；ＳＲ９；ＳＯＲ９；ＳＯ２Ｒ９；ＳＯ２ＮＨ２；ＳＯ２ＮＨＲ９；ＳＯ２ＮＲ９Ｒ９から独立して選択される１個から４個の置換基であるか；または
Ｒ１０はフェニルまたはヘテロアリールの炭素原子に結合した＝Ｏであるか、または、もしあるならば、ヘテロアリールの同じＳ原子に結合した１個または２個の＝Ｏであってよく；
Ｒ１１は所望によりＮ、ＯおよびＳから独立して選択される２個までのヘテロ原子を含んでよい縮環した(annulated)４−７員非芳香環を形成する２個の隣接置換基であり；
各Ｒ９は、独立してＣ１−Ｃ６アルキル；ヒドロキシル−Ｃ１−Ｃ６アルキル；Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル；Ｃ２−Ｃ６アルケニル；Ｃ２−Ｃ６アルキニル；フェニル；ベンジル；ヘテロアリール；−ＣＨ２−ヘテロアリール；またはＣＦ３であるか；または２個のＲ９が、それらが結合しているＮ原子と一体となって、所望によりＲ１０置換されていてよい該Ｎ原子に加えて、Ｎ、ＯおよびＳから独立して選択される２個までのヘテロ原子を含む４−８員環を形成し；
Ｒ３はＨ；ＯＲ１；ＣＨ２Ｒ１Ｒ２；(ＣＨ２)１−２ＮＲ１Ｒ２；ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＲ１；ＣＨ２−ＣＯ−ＮＲ１Ｒ２；またはＣＯ−ＣＨ２Ｒ１Ｒ２であり；
Ｒ４はＦ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；ＯＲ１；ＮＲ１Ｒ２であるか、またはＲ１について定義の意味の１個を有し；そして
Ｒ５はＲ１について定義の意味の１個を有する。〕
の化合物を提供する。
【０００３】
全てのアルキル、アルケニルまたはアルキニルは直鎖または分枝鎖であり得る。
ヘテロアリールは、例えばフリル、チエニル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、テトラジニル、インドリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾフラニル、ベンゾイミダゾリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、キノリニル、イソキノリニル、フタラジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、シンノリニルまたはナフチリジニルのような、Ｎ、ＯおよびＳから独立して選択される４個までのヘテロ原子を含む単−、二−または三環系を含む芳香環系を意味する。
【０００４】
Ｒ１１により示される好ましい縮環した４−７員非芳香環は、所望により１個または２個の酸素を含んでよい縮環した５または６員非芳香環であり、例えば２個の隣接炭素原子に結合した−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−または−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−を含む。
【０００５】
式Ｉの化合物は遊離形または塩形で、例えばＲ１、Ｒ２、および／またはＲ３が所望により置換されていてよいアミノ基または付加塩を形成できるヘテロ環残基を含むとき、例えば有機または無機酸、例えば、塩酸、酢酸との付加塩で存在できる。式Ｉの化合物が分子内に１つ以上の不斉中心を有するとき、例えばピペリジン環が置換されているとき、本発明は種々の光学異性体、ならびにラセミ体、ジアステレオ異性体およびそれらの混合物を包含すると理解すべきである。
【０００６】
式Ｉの化合物において、下記の意味が、個々にまたは任意の下位の組み合わせで好ましい：
１. Ｒ１およびＲ２の各々がＨ；所望によりＲ１０置換されていてよいフェニル；所望によりＲ１０置換されていてよいヘテロアリール；所望によりＲ１０置換されていてよいヘテロアリールＮ−オキシド；所望によりＲ１０置換されていてよいＣ１−Ｃ６アルキル；所望によりＲ１０置換されていてよいＣ２−Ｃ６アルケニル、所望によりＲ１０置換されていてよいＣ２−Ｃ６アルキニル；所望によりＲ１０置換されていてよいＣ３−Ｃ８シクロアルキル、または所望によりＲ１０置換されていてよいＣ４−Ｃ８シクロアルケニルである；
２. Ｒ１およびＲ２が、それらが結合しているＮ−原子と一体となって、所望によりＲ１０置換されていてよい該Ｎ原子に加えて、Ｎ、ＯおよびＳから独立して選択される１個までのヘテロ原子を含む３−６員環を形成する。好ましくは、このような所望によりＲ１０置換されていてよい３−６員環は１個のＮ原子または２個のＮ原子または１個のＮ原子と１個のＯ原子しか含まない；より好ましくはそれは非芳香族性である。例は、例えば所望によりＲ１０置換されていてよいアゼチジン、ピロリン、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、ケト−ピペラジン、チアジン、チアジン−ジオキシド、テトラヒドロ−ピリジン、ピペリドン、モルホリノまたはアゼピン由来の環である。好ましくはこのような環は１個または２個のＯＨ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ＣＯ−Ｃ１−４アルキルまたはカルバモイルで置換されている；
３. Ｒ１０がＣ１−Ｃ３アルキル；Ｃ１−Ｃ３ヒドロキシアルキル；Ｃ１−Ｃ６アルコキシアルキル；Ｃ１−Ｃ３ハロゲノアルキル；フェニル；ヘテロアリール；Ｆ；Ｃｌ；ＯＨから独立して選択される１〜３個の置換基である；
４. Ｒ３がＨ；ＯＲ１；−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＲ１Ｒ２；−ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＲ１；−ＣＨ２−Ｃ(Ｏ)−ＮＲ１Ｒ２である；
５. Ｒ４がＦ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；−ＯＲ１；−ＮＲ１Ｒ２であるか、またはＲ１について定義の意味の１個を有する；
６. Ｒ５がＲ１について定義の意味の１個を有する。
【０００７】
本発明はまた式Ｉの化合物の製造法であって、
ａ)Ｒ３およびＲ４の各々がＨである式Ｉの化合物の製造のために、
式II
【化２】
2008545725.tif 000004
〔式中、Ｒ１およびＲ２は上記で定義の通りである。〕
の化合物とウレア形成剤を反応させるか；または
【０００８】
ｂ)Ｒ３およびＲ４の各々がＨである式Ｉの化合物の製造のために、式III
【化３】
2008545725.tif 000005
〔式中、Ｒ５は上記で定義の通りである。〕
の化合物またはその官能的誘導体をアミド化するか；または
【０００９】
ｃ)Ｒ３およびＲ４がＨ以外である式Ｉの化合物の製造のために、Ｒ３およびＲ４がＨである式Ｉの化合物を変換し；
そして、必要であれば、その結果遊離形で得られた式Ｉの化合物を所望の塩形に変換するか、またはその逆を行う
ことを含む、方法も含む。
【００１０】
方法ａ)で使用するウレア形成剤は、例えばホスゲン、トリホスゲンまたはトリクロロメチルホルメートであってよく、アミンの添加が続く。ウレア形成は、また式IIの化合物をイソシアネートと反応させたときのも得ることができる。
【００１１】
方法ｂ)のアミド化は、簡便には、活性化カルボキシ官能的誘導体、例えば酸クロライド、混合無水物または対称無水物を形成させ、続いてアミンと反応させるか、または例えばメチルエステルとアミンの加熱下のまたはマイクロ波照射しながらの直接の反応により行い得る。
【００１２】
出発物質として使用する式IIの化合物は、下記の通り製造できる：
【化４】
2008545725.tif 000006
Ｒ１およびＲ２は上記で定義の通りである。
【００１３】
出発物質として使用する式IIIの化合物は、下記の通り製造できる：
【化５】
2008545725.tif 000007
(式中、Ｒ５は上記で定義の通りであり、そしてＰは保護基、例えばメチル、エチル、ｔ−ブチル、トリチル、ベンジル、フルオレニル、トリメチルシリルエチルまたはアリルエステルである。)
【００１４】
上記の反応は当分野で既知の方法に従って、または以下に記載の通りに行うことができる。保護基Ｐの除去は、酸または塩基性加水分解、フルオライド・イオンでの処理または水素化により行い得る。
【００１５】
出発物質の製造が特に記載されていない限り、その化合物は既知であるか、または当分野で既知の方法に準じてまたは以下に記載の通り製造できる。
下記実施例は、本発明の説明であるが、限定はしない。
【実施例】
【００１６】
実施例１
(６ａＲ,９Ｒ)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７,９−ジカルボン酸９−ジエチルアミド７−フェニルアミド
(６ａＲ,９Ｒ)−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−カルボン酸ジエチルアミドのメシレート(１２２mg、０.３０mmol)およびイソシアナート−ベンゼン(３６mg、０.３０mmol)のアセトン(５ml)中の混合物を３時間、２５℃で撹拌する。溶媒を除去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー(ＳｉＯ２、シクロヘキサン／ｔ−ブチルメチルエーテル１：０→２：３)に付し、表題化合物を得る。ＭＳ／ＥＳ：４２９[Ｍ＋Ｈ]＋
【００１７】
式
【化６】
2008545725.tif 000008
〔式中、Ｒ５は表１に記載の意味を有する。〕
の化合物を、類似の方法に従い製造する。
【表１】
2008545725.tif 000009
【００１８】
実施例１３
(６ａＲ,９Ｒ)−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミド
工程１：(６ａＲ,９Ｒ)−７−シアノ−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−カルボン酸メチルエステル
リセルグ酸メチルエステル(１.０ｇ、３.５４mmol)の無水ジクロロメタン(５０ml)溶液を含む５０ml丸底フラスコに、臭化シアン(２.０２ｇ、１９.１１mmol)をゆっくり添加し、得られる黒色反応混合物を室温で４時間撹拌し、その時までに、１０％メタノール／ジクロロメタン中のＴＬＣは、出発物質の部分的変換を示し、２個のより速く流れる生成物が得られる。反応混合物を週末中撹拌し続け、ｍＴＬＣによるモニターは変化がないことを示す。反応混合物を、次いで、５０℃で４時間撹拌し、次いで、酒石酸およびジクロロメタンの間で抽出する。水性相をジクロロメタン(１００ml)で再抽出し、合わせた有機相を塩水(２００ml)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮して、暗褐色(タール色)油状物を得る。精製を、４０％酢酸エチル／ヘキサンを使用して順相フラッシュカラムクロマトグラフィー(Biotage Flash 40、９０ｇカートリッジ)により行い、速く流れる生成物の分離を行い、それを薄黄色固体として単離する。生成物をｔｅｒｔ.ブチルメチルエーテルから結晶化し、ゆっくり蒸発させる。得られる結晶化物質をポンプで濾過し、薄黄色結晶を得る。
【００１９】
工程２：(６ａＲ,９Ｒ)−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−カルボン酸メチルエステル
(６ａＲ,９Ｒ)−７−シアノ−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−カルボン酸メチルエステル(１.５７ｇ、５.３５mmol)の酢酸(２０ml)溶液を含む１００ml丸底フラスコに、水(４ml)および亜鉛(１.５ｇ)を添加する。反応混合物を１００℃で３時間還流し、その時間までに２０％メタノール／ＤＣＭ中のＴＬＣは出発物質の変換を示し、生成物をジアステレオマー混合物として得る。反応混合物を濾過して亜鉛を除去し、濾紙を水(２００ml)および酢酸エチル(２００ml)で徹底的に洗浄する。水性相を固体炭酸水素ナトリウムの添加により塩基性にする。相を次いで抽出し、分離させる。水性相を酢酸エチル(２×１００ml)で再抽出し、合わせた有機相を塩水(２００ml)で洗浄し、乾燥させ(ＭｇＳＯ４)、ポンプで濾過し、真空で濃縮して、ベージュ色泡状物を得る。精製を、１０％メタノール／ジクロロメタンを使用する順相フラッシュカラムクロマトグラフィー(Biotage Flash 40、４０ｇカートリッジ)で行い、分離を達成する。生成物をベージュ色泡状物として単離する。
【００２０】
工程３：(６ａＲ,９Ｒ)−７−フェニルカルバモイル−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−カルボン酸メチルエステル
(６ａＲ,９Ｒ)−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−カルボン酸メチルエステル(０.８ｇ、２.９８mmol)のジクロロメタン(２０ml)溶液を含む１００ml丸底フラスコに、フェニルイソシアネート(０.４５ml、４.５mmol、１.５当量)を添加する。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、その時間までに１０％メタノール／ＤＣＭ中のＴＬＣは、出発物質の変換を示し、生成物をジアステレオマー混合物として得る。揮発物を真空で濃縮し、３０％酢酸エチル／ヘキサンを使用する順相フラッシュカラムクロマトグラフィー(Biotage Flash 40、９０ｇカートリッジ)を使用して直接精製し、生成物を１：１ジアステレオマー混合物として単離する。
【００２１】
工程４：(６ａＲ,９Ｒ)−７−フェニルカルバモイル−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−カルボン酸
(６ａＲ,９Ｒ)−７−フェニルカルバモイル−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−カルボン酸メチルエステル(０.８ｇ、２.０６mmol)を含む１００ml丸底フラスコにメタノール(１２ml)、ＴＨＦ(２４ml)および水酸化リチウム(２４７mg)の水(１２ml)溶液を添加する。反応混合物を室温で２０分撹拌し、その時間までに２０％メタノール／ジクロロメタン中のＴＬＣは出発物質の完全な変換を示す。粗反応混合物の色は、明黄色から赤紫色に変化する。揮発物を真空で除去し(水のみ残す)、水性溶液を１Ｍ  ＨＣｌの添加により酸性にする。得られるベージュ色沈殿をポンプで濾過し、フィルター・ケーキを蒸留水(５０ml)で洗浄する。フィルター・ケーキを、次いで、高真空オーブンで５０℃で１６時間乾燥させ、生成物を得る。
【００２２】
工程５：(６ａＲ,９Ｒ)−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミド
(６ａＲ,９Ｒ)−７−フェニルカルバモイル−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−カルボン酸(０.２ｇ、０.５４mmol)の懸濁液を含む５０ml丸底フラスコに、ＰＹＢＯＰ(０.３０７ｇ)、ジクロロメタン(１０ml)、ピロリジン(０.０５４ml、０.６４mmol、１.２当量)およびヒューニッヒの塩基(０.１８７ml、１.０７mmol、２当量)を添加する。反応混合物を３時間、室温で撹拌する。精製を５０％酢酸エチル／ヘキサンを溶媒として使用する順相フラッシュカラムクロマトグラフィー(Biotage Flash 40、４０ｇカートリッジ)で行う。(６ａＲ,９Ｒ)−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミドをベージュ色固体として単離する。ＭＳ／ＥＳ：４２７(Ｍ＋Ｈ)＋
【００２３】
式
【化７】
2008545725.tif 000010
〔式中、Ｒ１およびＲ２は表２に示す意味を有する。〕
の化合物を類似の方法および適当なアミンを使用して製造する。
【表２】
2008545725.tif 000011
【表３】
2008545725.tif 000012
【表４】
2008545725.tif 000013
【００２４】
実施例４５
(６ａＲ,９Ｒ)−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸(２−メトキシ−フェニル)−アミド
工程１：(６ａＲ,９Ｒ)−７−メチル−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−イル)−ピロリジン−１−イル−メタノン
３０ｇ(１１１.８０mmol)リセルグ酸を４００ml  ジクロロメタンに溶解し、０°−５℃に冷却し、３１.１６ml(２２３.６１、２当量)トリエチルアミンおよび１８.６６ml(２２３.６１mmol、２当量)ピロリジンを、そして１５分以内に１.５当量  プロパンホスホン酸無水物(酢酸エチル中５０％)を添加する。反応混合物を１時間、室温で撹拌し、次いでそれを氷に注ぎ、ジクロロメタンで抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させ、残渣(２８.６ｇ)を、ジクロロメタン：メタノール９：１で溶出するシリカクロマトグラフィーで精製し、((６ａＲ,９Ｒ)−７−メチル−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−イル)−ピロリジン−１−イル−メタノンを得る。
【００２５】
工程２：(６ａＲ,９Ｒ)−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−イル−ピロリジン−１−イル−メタノン
６ｇ(１８.６７mmol)の工程１の生成物を１８０ml  ジクロロメタンに０℃で溶解し、５.５２２ｇ(２２.４０mmol、１.２当量)の７０％メタ−クロロ過安息香酸を添加する。１０分後、中間体Ｎ−オキシドが形成しており、２.５９４ｇ(９.３３mmol、０.５当量)ＦｅＳＯ４.７Ｈ２Ｏの１２ml  メタノール溶液を添加し、冷却をやめ、混合物を室温で撹拌する。１時間２５分後、反応混合物を０.１Ｍ  ＥＤＴＡ溶液(使用前にｐＨ９に調整)で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させ、ジクロロメタン：メタノール：アンモニア  ９３：６：１で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、(６ａＲ,９Ｒ)−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−イル−ピロリジン−１−イル−メタノンを得る。
【００２６】
工程３：(６ａＲ,９Ｒ)−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸(２−メトキシ−フェニル)−アミド
５.０８７ｇ(１６.５４mmol)の工程２の生成物を８０ml  テトラヒドロフランに溶解し、１.７９ml(１６.５mmol)１−イソシアナート−２−メトキシ−ベンゼンを添加し、室温で撹拌する。過剰のイソシアネートをトラップするために、０.３当量３−アミノ−１,２−プロパンジオールを添加し、２.５時間撹拌する。次いで反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液および塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、部分的に蒸発させる。結晶化により、(６ａＲ,９Ｒ)−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸(２−メトキシ−フェニル)−アミドを得る。ＭＳ／ＥＳ：４５７(Ｍ＋Ｈ)＋
【００２７】
式
【化８】
2008545725.tif 000014
〔式中、Ｒ５は表３に示す意味を有する。〕
の化合物は、類似の方法に従い製造する。
【表５】
2008545725.tif 000015
【００２８】
実施例５６
５−メチル−９−(ピペリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミド
５−メチル−９−(ピペリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミドを、実施例４５の記載と類似の方法に従い、工程１で２−メチル−リセルグ酸(リセルグ酸の代わり)およびピペリジン(ピロリジンの代わり)をおよび工程３でフェニルイソシアネートを使用して製造する。ＭＳ：４５５(Ｍ＋Ｈ)＋
【００２９】
実施例５７
９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸(３−フルオロ−フェニル)−アミド
６２mg(０.２０mmol)の実施例４５の工程２の生成物を３mlのジクロロメタンに溶解し、０.１４ml(１０当量)のトリエチルアミン、０.０４２ml  トリクロロメチルクロロホルメートの２mlのジクロロメタン溶液を添加する。３０分、室温の後、０.１４mlのトリエチルアミン(１０当量)および０.０４０ml(２当量)の２−フルオロアニリンを添加する。２２時間、室温で撹拌後、反応混合物を１００ml  ジクロロメタンおよび飽和炭酸水素ナトリウム溶液に分配する。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させる。粗生成物を、酢酸エチル／シクロヘキサン３：１で溶出するシリカクロマトグラフィーゲルで精製し、(６ａＲ,９Ｒ)−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸(３−フルオロ−フェニル)−アミドを得る。ＭＳ／ＥＳ：４４５(Ｍ＋Ｈ)＋
【００３０】
式
【化９】
2008545725.tif 000016
〔式中、Ｒ５は表４に記載の意味を有する。〕
の化合物は、適当なアミン試薬を使用して、類似の方法に従い製造する。
【表６】
2008545725.tif 000017
【表７】
2008545725.tif 000018
【００３１】
実施例７２
(６ａＲ,９Ｒ)−５−クロロ−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミド
６４mgの実施例１３の化合物(０.１５mmol)を１ml  ＤＭＦに溶解し、３６mg(０.２７mmol、１.８当量)Ｎ−クロロスクシンイミドを添加し、室温で撹拌する。５５分後、反応混合物を、酢酸エチルで溶出するシリカクロマトグラフィーで精製し、(６ａＲ,９Ｒ)−５−クロロ−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミドを得る。ＭＳ：４６１(Ｍ＋Ｈ)＋
【００３２】
実施例７３
(６ａＲ,９Ｒ)−５−ヨード−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミド
(６ａＲ,９Ｒ)−５−ヨード−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミドを、Ｎ−クロロスクシンイミドの代わりにＮ−ヨードスクシンイミドを使用して、実施例７２の記載に類似の方法に従い、製造する。ＭＳ：５５３(Ｍ＋Ｈ)＋
【００３３】
実施例７４
(６ａＲ,９Ｒ)−５−ブロモ−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミド
工程１：(６ａＲ,９Ｒ)−５−ブロモ−７−メチル−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−カルボン酸
リセルグ酸(８.０５ｇ、３０mmol)をジオキサンに懸濁させ、ＴＦＡの滴下により処理する(発熱)。臭素(１.５４ml、３０mmol、１.０当量)のクロロホルムを滴下する。反応物を５℃に冷却し、生成物が結晶化する。(６ａＲ,９Ｒ)−５−ブロモ−７−メチル−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−カルボン酸を濾過により単離し、ジエチルエーテルから再結晶する。Ｒｆ＝０.５、１０％ＭｅＯＨ：ＤＣＭ、Ｍ＋Ｈ＋＝３４６,３４８、ｍ.ｐ.＞２４５(分解)。
【００３４】
工程２：(６ａＲ,９Ｒ)−５−ブロモ−７−メチル−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−イル)−ピロリジン−１−イル−メタノン
(６ａＲ,９Ｒ)−５−ブロモ−７−メチル−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−カルボン酸(５.０ｇ、１３.３８mmol)のＤＭＦ(２０ml)溶液を含む５０ml丸底フラスコに、ＨＡＴＵ(６.１０ｇ、１６.０６mmol、１.２当量)を添加し、反応混合物を１時間、室温で撹拌する。ピロリジン(２.２４ml、２６.７８mmol、２.０当量)を添加し、反応混合物をさらに２時間、室温で撹拌する。１０％メタノール／ＤＣＭ中のＴＬＣは出発物質の完全な変換を示す(塩素／ＴＢＤＭ試薬およびＵＶにより可視化)。４Ｍ  ＨＣｌ(１５０ml)および水(１５０ml)を反応混合物に添加し、酢酸エチル(２００ml)を添加する。抽出後、水性相を酢酸エチル(２×２００ml)で再抽出し、合わせた抽出物を飽和ビカーボネート(２×２００ml)、水(２００ml)、飽和塩水(２００ml)で洗浄し、濾過し(ポンプで)、乾燥させ(ＭｇＳＯ４)、真空で濃縮して、暗褐色油状物を得る。精製を、２０％酢酸エチル／ヘキサンから１００％酢酸エチルへの、およびその後５％メタノール／酢酸エチルへの５リットルにわたる傾斜を使用する順相フラッシュカラムクロマトグラフィー(Biotage Flash 40、９０ｇカートリッジ)で行う。関連フラクションを合わせ、真空で濃縮し、高真空オーブンに３時間、５０℃で放置して、(６ａＲ,９Ｒ)−５−ブロモ−７−メチル−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−カルボン酸およびジアステレオマーの混合物を得る。
【００３５】
工程３：((Ｒ)−５−ブロモ−７−メチル−７−オキシ−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−イル)−ピロリジン−１−イル−メタノン
１.１ｇ(２.７５mmol)の工程２からの生成物をＴＨＦ(４０ml)に超音波処理しながら溶解し、次いで溶液をアセトン／ドライアイス浴を使用して−４０℃に冷却する。ｍ−ＣＰＢＡ(０.６４０ｇ、３.７５mmol、１.３５当量)を少しずつ添加し(３０分にわたり)、得られる暗褐色反応混合物を、撹拌しながら０℃に暖める(約１.５時間)。塩化鉄(II)(０.１７４ｇ、１.３７mmol、０.５当量)の水(１０ml)溶液を反応混合物に０℃で滴下する。１時間後、反応混合物(ＲＭ)を室温にゆっくり暖め、次いで撹拌を２時間続ける。２０％メタノール／ＤＣＭ中のＴＬＣはＮ−オキシド中間体の完全な消費を示す。重亜硫酸ナトリウム(１ｇ)の水(５ml)溶液を反応混合物に添加し、次いで揮発物を真空で除去して、黒色泡状物を得る。これをBiotage Flash 40システムで、溶媒１リットルあたり２％メタノール／ＤＣＭから８％メタノール／ＤＣＭの２％の傾斜の増加を使用して、((Ｒ)−５−ブロモ−７−メチル−７−オキシ−４,６,６ａ,７,８,９−ヘキサヒドロ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−９−イル)−ピロリジン−１−イル−メタノンを得る。
【００３６】
工程４：(６ａＲ,９Ｒ)−５−ブロモ−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミド
工程３の生成物(０.５０４ｇ、１.３２mmol)を無水ジクロロメタン(２０ml)に溶解し、溶液を０℃に氷−塩浴で冷却する。ヒューニッヒの塩基(０.９４０ml、０.２１mmol)およびフェニルイソシアネート(０.３８８ml、３.９mmol)を次いで添加し、反応混合物を室温に暖める。撹拌を１６時間続ける。２０％メタノール／ＤＣＭ中のＴＬＣは出発物質の完全な消費を示す。精製を、２０％酢酸エチル／ヘキサン(１リットル)から始まり、３０％酢酸エチル／ヘキサン(１リットル)、次いで５０％酢酸エチル／ヘキサン(１リットル)および最後に６０％酢酸エチル／ヘキサン(１リットル)までの傾斜の勾配系を使用した、順相フラッシュカラムクロマトグラフィー(Biotage Flash 40、４０ｇカートリッジ)で行う。関連フラクションを合わせ、真空で濃縮し、高真空オーブンに３時間、５０℃で放置する。(６ａＲ,９Ｒ)−５−ブロモ−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミドβを無色固体として単離する。ＭＳ／ＥＳ：５０５(Ｍ＋Ｈ)＋
【００３７】
実施例７５
(６ａＲ,９Ｒ)−５−フェニル−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミド
実施例７４の化合物(０.０５ｇ、０.２７mmol)のＤＭＥ(１ml)を含む５mlマイクロ波用反応バイアルに、フェニルボロン酸(４６mg、０.３７mmol、１.４当量)および２Ｍ  炭酸ナトリウム(１.５０ml)を添加する。反応混合物を撹拌しながら窒素で５分パージし、次いで触媒(３０mg)を添加する。バイアル壁を窒素でフラッシュしたエタノール(０.７５ml)で洗浄し、反応混合物を窒素でさらに５分パージし続ける。バイアルをキャップで密封し、反応混合物をマイクロ波上、１００℃で３００秒(固定された保持時間)進行させる。１０％メタノール／ＤＣＭ中のＴＬＣは出発物質の完全な消費を示す(塩素／ＴＢＤＭ試薬およびＵＶにより可視化)。反応混合物を飽和ビカーボネート(２０ml)およびジクロロメタン(２０ml)に分配する。有機物を、直接フラッシュカラムに載せ、３０％酢酸エチル／ヘキサン(１リットル)から４０％酢酸エチル／ヘキサン(１リットル)への傾斜を溶媒として使用した順相フラッシュカラムクロマトグラフィー(Biotage Flash 40、４０ｇカートリッジ)で精製する。関連フラクションを合わせ、真空で濃縮し、高真空オーブンに３時間、５０℃で放置し、生成物を単離する。ＭＳ：５０３(Ｍ＋Ｈ)＋
【００３８】
式
【化１０】
2008545725.tif 000019
〔式中、Ｒ４は表５に記載の意味を有する〕。
の化合物を類似の方法で製造する。
【表８】
2008545725.tif 000020
【００３９】
実施例７８
(６ａＲ,９Ｒ)−５−(３−ヒドロキシ−プロプ−１−イニル)−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸
実施例７４の化合物(５０mg、０.１mmol)の溶液、トリフェニルホスフィン(３mg、０.００１mmol、０.１当量)、ヨウ化銅(１mg、０.００５mmol、０.０５当量)、トリエチルアミン(１ml)、ピリジン(１ml)を含む５mlマイクロ波用反応バイアルにプロパルギルアルコール(０.００７ml、０.１２mmol、１.２当量)を添加し、反応混合物を撹拌しながら窒素で５分パージする。ジクロロビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム触媒(７mg、０.０１mmol、０.１当量)を添加し、反応物を窒素でさらに５分パージし続ける。バイアルをキャップで密封し、反応混合物(ＲＭ)をマイクロ波上、１００℃で３００秒(固定された保持時間)進行させる。ＬＣ−ＭＳは生成物への幾分かの変換を示す。触媒(７mg、０.０１mmol、０.１当量)、プロパルギルアルコール(７μl、０.１２mmol、１.２当量)およびヨウ化銅(Ｉ)(１mg、０.００５mmol、０.０５当量)を反応混合物に添加し、マイクロ波中でさらに３００秒、１００℃で進行させる。ＬＣ−ＭＳは、出発物質：生成物の約１：１の変換を示す。反応混合物を、さらに６００秒、１００℃で進行させ、その後、ＬＣ−ＭＳは出発物質の生成物への事実上の消費を示す。精製を、５０％酢酸エチル／ヘキサン(２リットル)を使用した順相フラッシュカラムクロマトグラフィー(Biotage Flash 40、４０ｇカートリッジ)で行う。関連フラクションを合わせ、真空で濃縮し、高真空下で、３時間、５０℃で乾燥させ、得られる生成物を単離する。ＭＳ／ＥＳ：４８１(Ｍ＋Ｈ)＋
【００４０】
実施例７９
[(６ａＲ,９Ｒ)−７−フェニルカルバモイル−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６ａ,７,８,９−テトラヒドロ−６Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−４−イル]−酢酸イソプロピルエステル
５ｇ(１１.７２mmol)の実施例１３の化合物を１００mlのジクロロメタンに溶解する。室温で、３０ml  ４０％水性水酸化ナトリウム溶液ならびに４００mg  ベンジルトリエチル−アンモニウムクロライドを添加する。反応混合物を０−５℃に冷却し、６.２３ml(４６.８９mmol、４当量)イソプロピルブロモアセテートを添加し、１時間撹拌する。反応混合物を氷に注ぎ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、有機層を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させる。残渣を、ｔｅｒｔ.ブチル−メチルエーテルで溶出するシリカクロマトグラフィーで精製し、[(６ａＲ,９Ｒ)−７−フェニルカルバモイル−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６ａ,７,８,９−テトラヒドロ−６Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−４−イル]−酢酸イソプロピルエステルを得る。ＭＳ／ＥＳ：５２７(Ｍ＋Ｈ)＋
【００４１】
実施例８０
[(６ａＲ,９Ｒ)−７−フェニルカルバモイル−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６ａ,７,８,９−テトラヒドロ−６Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−４−イル]−酢酸
[(６ａＲ,９Ｒ)−７−フェニルカルバモイル−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６ａ,７,８,９−テトラヒドロ−６Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−４−イル]−酢酸を実施例７９の合成副産物として単離する。ＭＳ／ＥＳ：４８５(Ｍ＋Ｈ)＋
【００４２】
式
【化１１】
2008545725.tif 000021
〔式中、Ｒ３は表６に記載の意味を有する。〕
の化合物を、実施例７９に類似の方法に従い製造する。
【表９】
2008545725.tif 000022
【００４３】
式
【化１２】
2008545725.tif 000023
〔式中、Ｒ３は表７に記載の意味を有する。〕
の化合物は、実施例１３の化合物の代わりに実施例１の化合物から開始して、適当なアルキルハライドを使用して実施例７９の方法に従い、製造する。
【表１０】
2008545725.tif 000024
【００４４】
実施例８７
(６ａＲ,９Ｒ)−４−(２−ヒドロキシ−エチル)−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミド
３.９９ｇ(７.５７mmol)の実施例７９の化合物を１００ml  テトラヒドロフランに溶解し、０−５℃で、９８９mg(４５.４３mmol、４当量)リチウムボロハイドライドを添加する。反応混合物を室温で４.５時間撹拌する。次いで反応混合物を氷／酢酸混合物に添加し(激しいＣＯ２発生)、ジクロロメタンで抽出する。有機層を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させる。残渣を、ジクロロメタン：メタノール９５：５で溶出するシリカクロマトグラフィーで精製し、溶出の順番で所望のβ−異性体(６ａＲ,９Ｒ)−４−(２−ヒドロキシ−エチル)−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミドを得る。ＭＳ／ＥＳ：４７１(Ｍ＋Ｈ)＋
【００４５】
実施例８８
(６ａＲ,９Ｒ)−４−(２−モルホリン−４−イル−エチル)−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミド
工程１：トルエン−４−スルホン酸２−[(６ａＲ,９Ｒ)−７−フェニルカルバモイル−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６ａ,７,８,９−テトラヒドロ−６Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−４−イル]−エチルエステル
１.１２ｇ(２.３８mmol)の実施例８７の化合物を４０ml  ジクロロメタンに溶解し、室温で、４３７mg(３.５８mmol、１.５当量)ジメチルアミノピリジンを添加し、混合物を０−５℃に冷却する。６８３mg(３.５８９mmol、１.５当量)４−メチル−ベンゼンスルホニルクロライドを添加し、反応混合物を室温で３.５時間撹拌する。反応混合物を氷および小量の６Ｎ  硫酸に注ぎ、ジクロロメタンで抽出する。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させる。残渣をシリカクロマトグラフィーで精製して、トルエン−４−スルホン酸２−[(６ａＲ,９Ｒ)−７−フェニルカルバモイル−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６ａ,７,８,９−テトラヒドロ−６Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−４−イル]−エチルエステルを得る。
【００４６】
工程２：(６ａＲ,９Ｒ)−４−(２−モルホリン−４−イル−エチル)−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミド
８０mg(０.１２８mmol)の工程１の生成物および１ml  モルホリンを室温で１６時間撹拌する。反応混合物を、アセトン：シクロヘキサン６：４で溶出するシリカクロマトグラフィーゲルにより精製して、(６ａＲ,９Ｒ)−４−(２−モルホリン−４−イル−エチル)−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミドを得る。ＭＳ／ＥＳ：５４０(Ｍ＋Ｈ)＋
【００４７】
式
【化１３】
2008545725.tif 000025
〔式中、Ｒ３は表８に記載の意味を有する。〕
の化合物を、実施例８８の工程２に類似の方法に従い製造する。
【表１１】
2008545725.tif 000026
【００４８】
実施例９７
(６ａＲ,９Ｒ)−４−アセチル−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミド
８０mgの実施例１３の化合物(０.１８mmol)および６９mg(０.５６mmol、３当量)ジメチルアミノピリミジンを３ml  ジクロロエタンに溶解し、０.０３６ml(０.３７mmol、２当量)無水酢酸を添加する。反応混合物を６５℃で４時間撹拌する。反応混合物をジクロロメタンおよび飽和水性ビカーボネート溶液に分配する。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させる。粗生成物を、ジクロロメタン：メタノール９７：３で溶出するシリカクロマトグラフィーで精製して、(６ａＲ,９Ｒ)−４−アセチル−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミドを得る。ＭＳ／ＥＳ：４６９(Ｍ＋Ｈ)＋
【００４９】
実施例９８
(６ａＲ,９Ｒ)−４−ヒドロキシ−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミド
工程１：(５ａＳ,６ａＲ,９Ｒ)−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−５,５ａ,６,６ａ,８,９−ヘキサヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミド
３５１mg(０.８２mmol)の実施例１３の化合物を６ml  トリフルオロ酢酸に溶解し、０.４０７ml(２.４７mmol、３当量)トリエチルシランを添加する。反応混合物を室温で１時間１０分撹拌する。次いで反応混合物を酢酸エチルおよび飽和水性ビカーボネート溶液に分配し、有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させ、ｔｅｒｔ.ブチルメチルエーテルから結晶化させて、(５ａＳ,６ａＲ,９Ｒ)−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−５,５ａ,６,６ａ,８,９−ヘキサヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミドを得る。
【００５０】
工程２：(６ａＲ,９Ｒ)−４−ヒドロキシ−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミド
２１２mg(０.４９mmol)の工程１の生成物を１２ml  メタノールに溶解し、数滴の水中で脱水した４１mg(０.１２mmol、０.２５当量)タングステン酸ナトリウムを添加する。次いで６７０μl  ３０％Ｈ２Ｏ２(１０当量)を０℃で添加し、室温で５０分撹拌する。反応混合物をジクロロメタンおよび飽和水性ビカーボネート溶液で分配し、有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させ、ｔｅｒｔ.ブチルメチルエーテル：シクロヘキサン９：１で溶出するシリカクロマトグラフィーで精製して、(６ａＲ,９Ｒ)−４−ヒドロキシ−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミドを得る。ＭＳ／ＥＳ：４４１(Ｍ＋Ｈ)＋
【００５１】
実施例９９
(６ａＲ,９Ｒ)−４−メトキシ−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミド
１７mg(０.０３８mmol)の実施例９８の化合物を２ml  メタノール：ジクロロメタン１：１に溶解し、新たに調製したジアゾメタン溶液を、反応混合物の黄色が持続するようになるまで１０分間、蒸留により導入する。反応混合物を蒸発させ、ｔｅｒｔ.ブチルメチルエーテル：シクロヘキサン９：１を溶離剤として使用してシリカクロマトグラフィーで精製する。生成物を蒸発により結晶化させて、(６ａＲ,９Ｒ)−４−メトキシ−９−(ピロリジン−１−カルボニル)−６,６ａ,８,９−テトラヒドロ−４Ｈ−インドロ[４,３−ｆｇ]キノリン−７−カルボン酸フェニルアミドを得る。ＭＳ／ＥＳ：４５８(Ｍ＋Ｈ)＋
【００５２】
遊離形または薬学的に許容される塩形の式Ｉの化合物は、例えばインビトロ試験で示されるような、例えばＣＸＣＲ３アンタゴニストとしての、価値ある薬理学的特性を有し、故に治療に適応される。
【００５３】
ａ)ＣＸＣＲ３膜結合アッセイ
リガンド結合アッセイを、ＣＸＣＲ３を発現する膜へのＩ−ＴＡＣの結合の阻害剤の同定のために使用する。細胞膜を、ヒトＣＸＣＲ３でトランスフェクトしたＣＨＯ細胞から調製する。１２５Ｉ標識ＣＸＣＲ３リガン、ド例えばＩ−ＴＡＣ(ＣＸＣＬ１１)のＣＸＣＲ３への結合を、シンチレーション近接アッセイ(ＳＰＡ)技術(Amersham Pharmacia Biotech)を使用して評価する。緩衝液または化合物の連続希釈物を、２時間、室温で標識ＣＸＣＲ３リガンド(例えばＩ−ＴＡＣ)、ＣＸＣＲ３発現膜およびＷＧＡ被覆ＰＶＴビーズとインキュベートする。次いでプレートを遠心分離し、Topcount(Packard)装置で計数する。データは、１２５Ｉリガンド結合の５０％阻害の達成に必要な化合物の濃度として示す。このアッセイで、式Ｉの化合物は１μM−１nMのＩＣ５０値を有する。例えば、実施例１８、２３、４３、５９および７９の化合物は、各々５４、６１、２３、４３および１４５nMのＩＣ５０を有する。
【００５４】
ｂ)ＣＸＣＲ３機能アッセイ  −  Ｃａ２＋動員
ＣＸＣＲ３リガンド誘発Ｃａ２＋動員をＣＸＣＲ３トランスフェクトＬ１.２細胞(マウス前Ｂ細胞株)で評価する。このために、細胞にＣａ２＋感受性蛍光色素Ｆｌｕｏ−４(Molecular Probes)を負荷する。洗浄後、細胞を低分子量阻害剤と２時間、室温でインキュベートする。ＣＸＣＲ３リガンド(例えばＩ−ＴＡＣ)添加後の細胞内Ｃａ２＋の一過性の増加が、蛍光画像プレートリーダー(ＦＬＩＰＲ)装置でモニターされる。ＣＸＣＲ３アンタゴニスト存在下でのＣＸＣＲ３リガンド誘発Ｃａ２＋動員の阻害を、ＩＣ５０値、すなわち最大Ｃａ２＋応答を５０％まで減少させる化合物の濃度として示す。このアッセイで、式Ｉの化合物は１μM−１nMのＩＣ５０値を有する。例えば、実施例１８、２３、４３、５９および７９の化合物は、各々１８、８、１６、２０および５３nMのＩＣ５０を有する。
【００５５】
ｃ)ＣＸＣＲ３機能アッセイ  −  走化性
ＣＸＣＲ３リガンド、例えばＩ−ＴＡＣにより誘発される有向細胞移動を、５μm直径の孔を有するポリカーボネート膜を備えた９６ウェル使い捨て走化性チャンバー(Multiscreen MIC, Costar)を使用して評価する。ケモカイン(例えばＩ−ＴＡＣ)をチャンバーの下部ウェルに入れ、細胞(例えばＣＸＣＲ３トランスフェクトＬ−１.２細胞)を走化性チャンバーの最上部区画に入れる。多孔性膜を介した細胞の移動を、４時間、３７℃で行わせる。最上部区画から下部区画への細胞の移動をフローサイトメトリーにより定量する。ＬＭＷ阻害剤を試験するとき、化合物を同一の濃度で両区画に添加する。化合物の連続希釈を試験して、ＣＸＣＲ３依存性細胞移動に対するそれらの阻害効果を評価する。移動した細胞の５０％の減少をもたらすＬＭＷ  ＣＸＣＲ３阻害剤濃度をＩＣ５０として示す。このアッセイで、式Ｉの化合物は、１μM−１nMのＩＣ５０値を有する。例えば、実施例１８および４３の化合物は、各々７４および７５nMのＩＣ５０を有する。
【００５６】
ｄ)マウス動物モデルで行った実験は、実験的傷害(例えば同種移植により誘発)後の血管液リモデリングが、機能的ＣＸＣＲ３の非存在下で著しく減少されることを示す。
【００５７】
式Ｉの化合物は、故に、ケモカイン受容体、例えばＣＸＣＲ３とそれらのリガンドの相互作用が仲介する疾患または障害の予防および／または処置に、例えば自己免疫性疾患、例えばリウマチ性関節炎、全身性エリテマトーデス、橋本甲状腺炎、多発性硬化症、重症筋無力症、Ｉ型またはII型糖尿病およびその合併症、脈管炎、悪性貧血、シェーグレン症候群、ブドウ膜炎、乾癬、円形脱毛症およびその他、アレルギー性疾患、例えばアレルギー性喘息、アトピー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎／結膜炎、アレルギー性接触性皮膚炎、異常な応答が根底にあってもよい炎症性疾患、例えば炎症性腸疾患、クローン病または潰瘍性大腸炎、内因性喘息、炎症性肺傷害、炎症性肝臓傷害、炎症性糸球体傷害、アテローム性動脈硬化症、骨関節症、刺激性接触性皮膚炎およびさらなる湿疹性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、免疫仲介障害の皮膚発現、炎症性眼  疾患、角結膜炎、心筋炎または肝炎、虚血／再潅流傷害、例えば心筋梗塞、卒中、腸虚血、腎不全または出血性ショック、外傷性ショックおよびその他、癌、例えば固形腫瘍またはリンパの癌、例えばＴ細胞リンパ腫またはＴ細胞白血病、転移または血管形成、感染症、例えば毒素ショック(例えば超抗原誘発)、敗血症性ショック、成人呼吸窮迫症候群、または移植、例えば臓器、組織または細胞同種もしくは異種移植片の急性または慢性拒絶反応または遅延した移植片機能に有用である。移植は、例えば細胞、組織または固形臓器、例えば膵臓島、幹細胞、骨髄、角膜組織、神経組織、心臓、肺、心肺複合、腎臓、肝臓、腸、膵臓、気管または食道の同種または異種移植片を意味する。慢性拒絶反応はまた、移植片血管疾患とも呼ばれる。
【００５８】
上記使用のために、必要な投与量はもちろん投与形態、処置すべき特定の状態および望む効果に依存して変化する。一般に、満足いく結果が、約０.０１から１０mg／体重kgの一日投与量で全身的に得られることが示される。大型哺乳類、例えばヒトでの指示される１日量は、約０.５mgから約１０００mgであり、簡便には、例えば、１日４回までの分割量でまたは持続形態で投与する。経口投与用の適当な単位投与形態は、約１から５００mg活性成分を含む。
【００５９】
式Ｉの化合物は任意の慣用の経路で、特に経腸的に、例えば経口で、例えば錠剤またはカプセルの形で、または非経腸的に、例えば注射可能溶液または懸濁液の形で、局所的に、例えばローション、ゲル、軟膏またはクリームの形で、または経鼻または坐薬形態で投与できる。遊離形または薬学的に許容される塩形の式Ｉの化合物を少なくとも１種の医学的に許容される担体または希釈剤と共に含む医薬組成物は、薬学的に許容される担体または希釈剤との混合により慣用の方法で製造できる。式Ｉの化合物は例えば上記の通り遊離形または薬学的に許容される塩で投与できる。このような塩は慣用の方法で製造でき、遊離化合物と同程度の活性を示す。
【００６０】
前記によって、本発明はさらに以下を提供する：
１.１  処置を必要とする対象におけるケモカイン受容体とそれらのリガンドの間の相互作用が仲介する障害または疾患、例えば上記の疾患を予防または処置する方法であって、該対象に有効量の式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩を投与することを含む、方法；
１.２  処置を必要とする対象における炎症性または自己免疫性疾患、例えば上記の疾患を予防または処置する方法であって、該対象に有効量の式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩を投与することを含む、方法；
２.  例えば、上記１.１または１.２の下に示す方法のいずれかにおいて、医薬として使用するための式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩；
３.  式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩を薬学的に許容される希釈剤または担体と共に含む、例えば上記１.１または１.２における方補のいずれかに使用するための医薬組成物；
４.  上記１.１または１.２の方法のいずれかに使用するための医薬組成物の製造に使用するための、式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩。
【００６１】
式Ｉの化合物は、唯一の活性成分として、または他の薬剤の、例えばアジュバントとして、例えば同種または異種移植片急性または慢性拒絶反応または炎症性または自己免疫性障害の処置または予防のために、例えば免疫抑制性または免疫抑制レジメンにおいて、または他の抗炎症剤と、化学療法剤または抗感染剤、例えば例えば抗レトロウイルス剤のような抗ウイルス剤と、または抗生物質と共に、投与できる。例えば、式Ｉの化合物はカルシニューリン阻害剤、例えばシクロスポリンまたはＦＫ５０６；ｍＴＯＲ阻害剤、例えばラパマイシン、４０−Ｏ−(２−ヒドロキシエチル)−ラパマイシン、ＣＣＩ７７９、ＡＢＴ５７８またはラパログ、例えばＡＰ２３５７３、ＡＰ２３４６４、ＡＰ２３６７５、ＡＰ２３８４１、ＴＡＦＡ−９３、バイオリムス７またはバイオリムス９；免疫抑制性特性を有するアスコマイシン、例えばＡＢＴ−２８１、ＡＳＭ９８１など；コルチコステロイド；シクロホスファミド；アザチオプリン；メトトレキサート；レフルノミド；ミゾルビン；ミコフェノール酸；ミコフェノール酸モフェチル；１５−デオキシスペルグアリンまたはその免疫抑制性同族体、類似体または誘導体；Ｓ１Ｐ受容体アゴニストまたはモジュレーター、例えばＦＴＹ７２０またはその類似体；例えばＷＯ０２／３８５６１またはＷＯ０３／８２８５９に記載のＰＫＣ阻害剤、例えば実施例５６または７０に記載の化合物；白血球受容体、例えば、ＭＨＣ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８、ＣＤ２５、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ５２、ＣＤ５８、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３７、ＩＣＯＳ、ＣＤ１５０(ＳＬＡＭ)、ＯＸ４０、４−１ＢＢまたはそれらのリガンド、例えばＣＤ１５４に対するモノクローナル抗体、またはそれらのアンタゴニスト；他の免疫調節性化合物、例えばＣＴＬＡ４の細胞外ドメインの少なくとも一部またはその変異体を有する、例えば非ＣＴＬＡ４タンパク質配列に結合した少なくともＣＴＬＡ４の細胞外部分またはその変異体を有する組み換え結合分子、例えばＣＴＬＡ４Ｉｇ(例えば、ＡＴＣＣ６８６２９と命名)またはその変異体、例えばＬＥＡ２９Ｙ；接着分子阻害剤、例えばＬＦＡ−１アンタゴニスト、ＩＣＡＭ−１または−３アンタゴニスト、ＶＣＡＭ−４アンタゴニストまたはＶＬＡ−４アンタゴニスト；または抗ケモカイン抗体、例えば抗ＭＣＰ−１抗体、または抗ケモカイン受容体抗体または低分子量ケモカイン受容体アンタゴニストと組み合わせて使用できる。
【００６２】
式Ｉの化合物を他の免疫抑制性／免疫調節性、抗炎症性または化学療法性治療と組み合わせて投与するとき、併用投与する免疫抑制剤、免疫調節剤、抗炎症剤または化学療法剤化合物の用量は、もちろん、用いる併用剤のタイプ、例えばそれがステロイドかカルシニューリン阻害剤か、用いる具体的薬剤、処置する状態などに依存して変化する。
【００６３】
前記によって、本発明はさらなる局面において、以下を提供する：
５.  治療的有効量の式Ｉの化合物および少なくとも１種の第二医薬物質、例えば上記の通りの、例えば免疫抑制剤、免疫調節剤、抗炎症剤、抗感染症剤または化学療法剤と、例えば、同時にまたは連続的に共投与することを含む、上記で定義の方法。
【００６４】
６.  ａ)ＣＸＣＲ３アンタゴニスト、例えば、ここに開示の遊離形または薬学的に許容される塩形の、式Ｉの化合物である第一薬剤、およびｂ)少なくとも１種の併用剤、例えば免疫抑制剤、免疫調節剤、抗炎症剤、抗感染症剤または化学療法剤を含む、医薬組み合わせ剤、例えばキット。本キットはその投与のための指示書を含み得る。
【００６５】
ここで使用する用語“併用投与”または“組み合わせ投与”などは、選択した複数の治療剤を単独の患者に投与することを包含することを意味し、複数薬剤を必ずしも同じ投与経路でまたは同時に投与するものではない処置レジメンを含むことを意図する。
【００６６】
ここで使用する用語“医薬組み合わせ剤”
は、１種を超える活性成分の混合または組み合わせに由来する製品を意味し、活性成分の固定されたおよび固定されていない組み合わせの両方を含む。用語“固定された組み合わせ”は、複数活性成分、例えば式Ｉの化合物と併用剤を、両方とも一つの物または投与量の形で患者に同時に投与することを意味する。用語“固定されていない組み合わせ”は、複数活性成分、例えば式Ｉの化合物と併用剤を、両方とも患者に別々の物として、同時にまたは一緒にまたは具体的な時間制限なしに連続的に投与することを意味し、ここで、このような投与が患者体内で２化合物の治療的有効レベルを達成する。後者はまたカクテル療法、例えば、３種以上の活性成分の投与にも適用される。
【国際調査報告】
2008545725.tif 000031
2008545725.tif 000032
2008545725.tif 000033
2008545725.tif 000034