(57)【要約】  最低１種の抗ＩＬ−１２抗体をコードする単離された核酸、ベクター、宿主細胞、トランスジェニック動物若しくは植物、ならびにそれらの作成および使用方法を包含する、ＩＬ−１２のｐ４０サブユニットのアミノ酸配列の残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合する抗ＩＬ−１２抗体は、診断および／若しくは治療の組成物、方法および装置で応用を有する。
2008523842.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
最低２個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含んでなる、単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体であって、前記抗体が、配列番号９のアミノ酸配列の残基１−８８から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合する、上記抗体。
【請求項２】
前記抗体が、配列番号９のアミノ酸配列の残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合する、請求項１に記載の抗ＩＬ−１２抗体。
【請求項３】
前記抗体が、配列番号９のアミノ酸配列の残基２３、４０、４３、４５、５９および６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合する、請求項１に記載の抗ＩＬ−１２抗体。
【請求項４】
前記抗体が、配列番号９のアミノ酸配列の残基４５、５９および６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合する、請求項１に記載の抗ＩＬ−１２抗体。
【請求項５】
前記抗体が、最低１０−９Ｍ、最低１０−１０Ｍ、最低１０−１１Ｍ若しくは最低１０−１２Ｍから選択される最低１種の親和性でＩＬ−１２を結合する、請求項１に記載の抗ＩＬ−１２抗体。
【請求項６】
前記抗体が、最低１種のＩＬ−１２タンパク質の最低１種の活性を実質的に中和する、請求項１に記載の抗ＩＬ−１２抗体。
【請求項７】
請求項１〜４に記載の単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体のいずれかをコードする、単離された核酸分子。
【請求項８】
請求項７に記載の単離された核酸分子を含んでなる、単離された核酸ベクター。
【請求項９】
請求項８に記載の単離された核酸分子を含んでなる、単離された原核生物若しくは真核生物宿主細胞。
【請求項１０】
前記宿主細胞が、ＣＯＳ−１、ＣＯＳ−７、ＨＥＫ２９３、ＢＨＫ２１、ＣＨＯ、ＢＳＣ−１、Ｈｅｐ  Ｇ２、６５３、ＳＰ２／０、２９３、ＨｅＬａ、骨髄腫、若しくはリンパ腫細胞、またはそのいずれかの派生物、不死化若しくは形質転換細胞から選択される最低１種である、請求項９に記載の宿主細胞。
【請求項１１】
ＩＬ−１２抗体が検出可能な若しくは回収可能な量で発現されるようなｉｎ  ｖｉｔｒｏの条件下で、請求項７に記載の核酸分子を翻訳することを含んでなる、抗ＩＬ−１２抗体の製造方法。
【請求項１２】
請求項１〜４のいずれかに記載の単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体、および最低１種の製薬学的に許容できる担体若しくは希釈剤を含んでなる組成物。
【請求項１３】
検出可能な標識若しくはレポーター、ＴＮＦアンタゴニスト、抗リウマチ薬、筋弛緩薬、麻薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、鎮痛薬、麻酔薬、鎮静薬、局所麻酔薬、神経筋遮断薬、抗菌薬、抗乾癬薬、コルチコステロイド、蛋白同化ステロイド、エリスロポエチン、免疫化、免疫グロブリン、免疫抑制薬、成長ホルモン、ホルモン補充薬、放射性医薬品、抗うつ薬、抗精神病薬、刺激薬、喘息医薬品、β遮断薬、吸入ステロイド、エピネフリン若しくはアナログ、サイトカイン、およびサイトカインアンタゴニストの最低１種から選択される最低１種の化合物若しくはタンパク質の有効量を含んでなる最低１種の組成物をさらに含んでなる、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
請求項１〜４のいずれかに記載の単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体を特異的に結合する、抗イディオタイプ抗体若しくはフラグメント。
【請求項１５】
請求項１〜４のいずれかに記載の単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体の有効量を含んでなる組成物を、細胞、組織、器官若しくは動物と接触若しくはそれらに投与すること
を含んでなる、前記細胞、組織、器官若しくは動物におけるＩＬ−１２に関係する状態の診断若しくは処置方法。
【請求項１６】
前記有効量が、前記細胞、組織、器官若しくは動物１キログラムあたり０．００１〜５０ｍｇである、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記接触させること若しくは前記投与することが、非経口、皮下、筋肉内、静脈内、動脈内、気管支内、腹腔内（ｉｎｔｒａａｂｄｏｍｉｎａｌ）、嚢内、軟骨内、腔内、腹腔内（ｉｎｔｒａｃｅｌｉａｌ）、小脳内、脳室内、結腸内、頚部内、胃内、肝内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内（ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）、胸腔内、前立腺内、肺内、直腸内、腎内、網膜内、髄腔内、滑液包内、胸郭内、子宮内、膀胱内、ボーラス、膣、直腸、頬側、舌下、鼻内および経皮から選択される最低１様式による、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記接触させること若しくは投与することの前、同時に、若しくは後に、検出可能な標識若しくはレポーター、ＴＮＦアンタゴニスト、抗リウマチ薬、筋弛緩薬、麻薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、鎮痛薬、麻酔薬、鎮静薬、局所麻酔薬、神経筋遮断薬、抗菌薬、抗乾癬薬、コルチコステロイド、蛋白同化ステロイド、エリスロポエチン、免疫化、免疫グロブリン、免疫抑制薬、成長ホルモン、ホルモン補充薬、放射性医薬品、抗うつ薬、抗精神病薬、刺激薬、喘息医薬品、β遮断薬、吸入ステロイド、エピネフリン若しくはアナログ、サイトカイン、およびサイトカインアンタゴニストの最低１種から選択される最低１種の化合物若しくはタンパク質の有効量を含んでなる最低１種の組成物を投与することをさらに含んでなる、請求項１５に記載の方法。
【請求項１９】
前記ＩＬ−１２に関係する状態が乾癬である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２０】
前記ＩＬ−１２に関係する状態が多発性硬化症である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２１】
前記ＩＬ−１２に関係する状態がクローン病である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２２】
請求項１〜４のいずれかに記載の単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体を含んでなる医療器具であって、前記装置が、非経口、皮下、筋肉内、静脈内、動脈内、気管支内、腹腔内（ｉｎｔｒａａｂｄｏｍｉｎａｌ）、嚢内、軟骨内、腔内、腹腔内（ｉｎｔｒａｃｅｌｉａｌ）、小脳内、脳室内、結腸内、頚部内、胃内、肝内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内（ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）、胸腔内、前立腺内、肺内、直腸内、腎内、網膜内、髄腔内、滑液包内、胸郭内、子宮内、膀胱内、ボーラス、膣、直腸、頬側、舌下、鼻内および経皮から選択される最低１様式により前記抗ＩＬ−１２抗体を接触若しくは投与することに適する、上記装置。
【請求項２３】
単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体を回収可能な量で発現することが可能な宿主細胞
若しくはトランスジェニックのヒト以外の動物若しくはトランスジェニック植物若しくは植物細胞を提供することを含んでなる、最低２個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を有する単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体の製造方法であって、前記抗体が、配列番号９のアミノ酸配列の残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合する、上記方法。
【請求項２４】
請求項２３に記載の方法により製造された抗ＩＬ−１２抗体。
【請求項２５】
（ｉ）配列番号１、２および３のＨ鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）のアミノ酸配列の全部；ならびに（ｉｉ）配列番号４、５および６のＬ鎖ＣＤＲアミノ酸配列の全部の少なくとも一方を含んでなる、単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体であって、前記抗体が、配列番号９のアミノ酸配列の残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合する、上記抗体。
【請求項２６】
前記抗体が、最低１０−９Ｍ、最低１０−１０Ｍ、最低１０−１１Ｍ若しくは最低１０−１２Ｍから選択される最低１種の親和性でＩＬ−１２を結合する、請求項２５に記載の抗ＩＬ−１２抗体。
【請求項２７】
前記抗体が、最低１種のＩＬ−１２タンパク質の最低１種の活性を実質的に中和する、請求項２６に記載の抗ＩＬ−１２抗体。
【請求項２８】
（ｉ）配列番号１、２および３のＨ鎖ＣＤＲアミノ酸配列の全部；ならびに（ｉｉ）配列番号４、５および６のＬ鎖ＣＤＲアミノ酸配列の全部、の少なくとも一方の単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体をコードする単離された核酸分子であって、前記抗体が、配列番号９のアミノ酸配列の残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合する、上記核酸分子。
【請求項２９】
請求項２８に記載の単離された核酸分子を含んでなる単離された核酸ベクター。
【請求項３０】
請求項２８に記載の単離された核酸分子を含んでなる単離された原核生物若しくは真核生物宿主細胞。
【請求項３１】
前記宿主細胞が、ＣＯＳ−１、ＣＯＳ−７、ＨＥＫ２９３、ＢＨＫ２１、ＣＨＯ、ＢＳＣ−１、Ｈｅｐ  Ｇ２、６５３、ＳＰ２／０、２９３、ＨｅＬａ、骨髄腫、およびリンパ腫細胞、またはそのいずれかの派生物、不死化若しくは形質転換細胞から選択される最低１種である、請求項３０に記載の単離された宿主細胞。
【請求項３２】
抗ＩＬ−１２抗体が検出可能な若しくは回収可能な量で発現されるようなｉｎ  ｖｉｔｒｏの条件下で、請求項２８に記載の核酸分子を翻訳することを含んでなる、抗ＩＬ−１２抗体の製造方法。
【請求項３３】
（ｉ）配列番号１、２および３のＨ鎖ＣＤＲアミノ酸配列の全部；ならびに（ｉｉ）配列番号４、５および６のＬ鎖ＣＤＲアミノ酸配列の全部の少なくとも一方を有する、単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体（前記抗体は、配列番号９のアミノ酸配列の残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合する）、ならびに最低１種の製薬学的に許容できる担体若しくは希釈剤を含んでなる組成物。
【請求項３４】
検出可能な標識若しくはレポーター、ＴＮＦアンタゴニスト、抗リウマチ薬、筋弛緩薬、麻薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、鎮痛薬、麻酔薬、鎮静薬、局所麻酔薬、神経筋遮断薬、抗菌薬、抗乾癬薬、コルチコステロイド、蛋白同化ステロイド、エリスロポエチン、免疫化、免疫グロブリン、免疫抑制薬、成長ホルモン、ホルモン補充薬、放射性医薬品、抗うつ薬、抗精神病薬、刺激薬、喘息医薬品、β遮断薬、吸入ステロイド、エピネフリン若しくはアナログ、サイトカイン、およびサイトカインアンタゴニストの最低１種から選択される最低１種の化合物若しくはタンパク質の有効量を含んでなる最低１種の組成物をさらに含んでなる、請求項３３に記載の組成物。
【請求項３５】
（ｉ）配列番号１、２および３のＨ鎖ＣＤＲアミノ酸配列の全部；ならびに（ｉｉ）配列番号４、５および６のＬ鎖ＣＤＲアミノ酸配列の全部、の少なくとも一方を有する単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体を特異的に結合する抗イディオタイプ抗体若しくはフラグメントであって、前記抗体が、配列番号９のアミノ酸配列の残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合する、上記抗体若しくはフラグメント。
【請求項３６】
（ｉ）配列番号１、２および３のＨ鎖ＣＤＲアミノ酸配列の全部；ならびに（ｉｉ）配列番号４、５および６のＬ鎖ＣＤＲアミノ酸配列の全部の少なくとも一方を有する単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体の有効量を含んでなる組成物を、細胞、組織、器官若しくは動物と接触若しくはそれに投与することであって、前記抗体が、配列番号９のアミノ酸配列の残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合する、
を含んでなる、前記細胞、組織、器官若しくは動物でのＩＬ−１２に関係する状態の診断若しくは処置方法。
【請求項３７】
前記有効量が、前記細胞、組織、器官若しくは動物１キログラムあたり０．００１〜５０ｍｇである、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記接触させること若しくは前記投与することが、非経口、皮下、筋肉内、静脈内、動脈内、気管支内、腹腔内（ｉｎｔｒａａｂｄｏｍｉｎａｌ）、嚢内、軟骨内、腔内、腹腔内（ｉｎｔｒａｃｅｌｉａｌ）、小脳内、脳室内、結腸内、頚部内、胃内、肝内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内（ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）、胸腔内、前立腺内、肺内、直腸内、腎内、網膜内、髄腔内、滑液包内、胸郭内、子宮内、膀胱内、ボーラス、膣、直腸、頬側、舌下、鼻内および経皮から選択される最低１様式による、請求項３６に記載の方法。
【請求項３９】
前記接触させること若しくは投与することの前、同時に、若しくは後に、検出可能な標識若しくはレポーター、ＴＮＦアンタゴニスト、抗リウマチ薬、筋弛緩薬、麻薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、鎮痛薬、麻酔薬、鎮静薬、局所麻酔薬、神経筋遮断薬、抗菌薬、抗乾癬薬、コルチコステロイド、蛋白同化ステロイド、エリスロポエチン、免疫化、免疫グロブリン、免疫抑制薬、成長ホルモン、ホルモン補充薬、放射性医薬品、抗うつ薬、抗精神病薬、刺激薬、喘息医薬品、β遮断薬、吸入ステロイド、エピネフリン若しくはアナログ、サイトカイン、およびサイトカインアンタゴニストの最低１種から選択される最低１種の化合物若しくはタンパク質の有効量を含んでなる最低１種の組成物を投与することをさらに含んでなる、請求項３６に記載の方法。
【請求項４０】
前記ＩＬ−１２に関係する状態が乾癬である、請求項３６に記載の方法。
【請求項４１】
前記ＩＬ−１２に関係する状態が多発性硬化症である、請求項３６に記載の方法。
【請求項４２】
前記ＩＬ−１２に関係する状態がクローン病である、請求項３６に記載の方法。
【請求項４３】
（ｉ）配列番号１、２および３のＨ鎖ＣＤＲアミノ酸配列の全部；ならびに（ｉｉ）配列番号４、５および６のＬ鎖ＣＤＲアミノ酸配列の全部、の少なくとも一方を有する単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体を含んでなる、医療器具であって、前記抗体は、配列番号９のアミノ酸配列の残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合し、前記装置が、非経口、皮下、筋肉内、静脈内、動脈内、気管支内、腹腔内（ｉｎｔｒａａｂｄｏｍｉｎａｌ）、嚢内、軟骨内、腔内、腹腔内（ｉｎｔｒａｃｅｌｉａｌ）、小脳内、脳室内、結腸内、頚部内、胃内、肝内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内（ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）、胸腔内、前立腺内、肺内、直腸内、腎内、網膜内、髄腔内、滑液包内、胸郭内、子宮内、膀胱内、ボーラス、膣、直腸、頬側、舌下、鼻内および経皮から選択される最低１様式により前記抗ＩＬ−１２抗体を接触若しくは投与することに適する、上記装置。
【請求項４４】
（ｉ）配列番号１、２および３のＨ鎖ＣＤＲアミノ酸配列の全部；ならびに（ｉｉ）配列番号４、５および６のＬ鎖ＣＤＲアミノ酸配列の全部、の少なくとも一方を有する単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体を回収可能な量で発現することが可能な、宿主細胞若しくはトランスジェニックのヒト以外の動物若しくはトランスジェニック植物若しくは植物細胞を提供することを含んでなる、前記抗体の製造方法であって、前記抗体は、配列番号９のアミノ酸配列の残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合する、上記方法。
【請求項４５】
請求項４４に記載の方法により製造された抗ＩＬ−１２抗体。
【請求項４６】
配列番号１、２、３、４、５若しくは６の最低１種のアミノ酸配列を有する最低１個のＨ鎖若しくはＬ鎖ＣＤＲを含んでなる、単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体であって、前記抗体が、配列番号９のアミノ酸配列の残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合する、上記抗体。
【請求項４７】
前記抗体が、最低１０−９Ｍ、最低１０−１０Ｍ、最低１０−１１Ｍ若しくは最低１０−１２Ｍから選択される最低１種の親和性でＩＬ−１２を結合する、請求項４６に記載の抗ＩＬ−１２抗体。
【請求項４８】
前記抗体が、最低１種のＩＬ−１２タンパク質の最低１種の活性を実質的に中和する、請求項４６に記載の抗ＩＬ−１２抗体。
【請求項４９】
配列番号１、２、３、４、５若しくは６の最低１種のアミノ酸配列を有する最低２個のＨ鎖若しくはＬ鎖ＣＤＲを有する最低１種の単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体をコードする単離された核酸分子であって、前記抗体が、配列番号９のアミノ酸配列の残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合する、上記核酸分子。
【請求項５０】
請求項４９に記載の単離された核酸分子を含んでなる単離された核酸ベクター。
【請求項５１】
請求項４９に記載の単離された核酸分子を含んでなる、単離された原核生物若しくは真核生物宿主細胞。
【請求項５２】
前記宿主細胞が、ＣＯＳ−１、ＣＯＳ−７、ＨＥＫ２９３、ＢＨＫ２１、ＣＨＯ、ＢＳＣ−１、Ｈｅｐ  Ｇ２、６５３、ＳＰ２／０、２９３、ＨｅＬａ、骨髄腫、若しくはリンパ腫細胞、またはそのいずれかの派生物、不死化若しくは形質転換細胞から選択される最低１種である、請求項５０に記載の宿主細胞。
【請求項５３】
抗ＩＬ−１２抗体が検出可能な若しくは回収可能な量で発現されるようなｉｎ  ｖｉｔｒｏの条件下で、請求項４９に記載の核酸分子を翻訳することを含んでなる、抗ＩＬ−１２抗体の製造方法。
【請求項５４】
配列番号１、２、３、４、５若しくは６の最低１種のアミノ酸配列を有する最低１個のＨ鎖若しくはＬ鎖ＣＤＲを有する単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体（前記抗体は、配列番号９のアミノ酸配列の残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合する）、ならびに最低１種の製薬学的に許容できる担体若しくは希釈剤を含んでなる組成物。
【請求項５５】
検出可能な標識若しくはレポーター、ＴＮＦアンタゴニスト、抗リウマチ薬、筋弛緩薬、麻薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、鎮痛薬、麻酔薬、鎮静薬、局所麻酔薬、神経筋遮断薬、抗菌薬、抗乾癬薬、コルチコステロイド、蛋白同化ステロイド、エリスロポエチン、免疫化、免疫グロブリン、免疫抑制薬、成長ホルモン、ホルモン補充薬、放射性医薬品、抗うつ薬、抗精神病薬、刺激薬、喘息医薬品、β遮断薬、吸入ステロイド、エピネフリン若しくはアナログ、サイトカイン、およびサイトカインアンタゴニストの最低１種から選択される最低１種の化合物若しくはタンパク質の有効量を含んでなる最低１種の組成物をさらに含んでなる、請求項５４に記載の組成物。
【請求項５６】
配列番号１、２、３、４、５若しくは６の最低１種のアミノ酸配列を有する最低１個のＨ鎖若しくはＬ鎖ＣＤＲを有する単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体を特異的に結合する抗イディオタイプ抗体若しくはフラグメントであって、前記抗体抗ＩＬ−１２抗体が、配列番号９のアミノ酸配列の残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合する、上記抗体若しくはフラグメント。
【請求項５７】
配列番号１、２、３、４、５若しくは６の最低１種のアミノ酸配列を有する最低１個のＨ鎖若しくはＬ鎖ＣＤＲを有する単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体の有効量を含んでなる組成物を、細胞、組織、器官若しくは動物と接触若しくはそれに投与することであって、前記抗体が、配列番号９のアミノ酸配列の残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合する、
を含んでなる、前記細胞、組織、器官若しくは動物でのＩＬ−１２に関係する状態の診断若しくは処置方法。
【請求項５８】
前記有効量が、前記細胞、組織、器官若しくは動物１キログラムあたり０．００１〜５０ｍｇである、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記接触させること若しくは前記投与することが、非経口、皮下、筋肉内、静脈内、動脈内、気管支内、腹腔内（ｉｎｔｒａａｂｄｏｍｉｎａｌ）、嚢内、軟骨内、腔内、腹腔
内（ｉｎｔｒａｃｅｌｉａｌ）、小脳内、脳室内、結腸内、頚部内、胃内、肝内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内（ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）、胸腔内、前立腺内、肺内、直腸内、腎内、網膜内、髄腔内、滑液包内、胸郭内、子宮内、膀胱内、ボーラス、膣、直腸、頬側、舌下、鼻内および経皮から選択される最低１様式による、請求項５７に記載の方法。
【請求項６０】
前記接触させること若しくは投与することの前、同時に、若しくは後に、検出可能な標識若しくはレポーター、ＴＮＦアンタゴニスト、抗リウマチ薬、筋弛緩薬、麻薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、鎮痛薬、麻酔薬、鎮静薬、局所麻酔薬、神経筋遮断薬、抗菌薬、抗乾癬薬、コルチコステロイド、蛋白同化ステロイド、エリスロポエチン、免疫化、免疫グロブリン、免疫抑制薬、成長ホルモン、ホルモン補充薬、放射性医薬品、抗うつ薬、抗精神病薬、刺激薬、喘息医薬品、β遮断薬、吸入ステロイド、エピネフリン若しくはアナログ、サイトカイン、およびサイトカインアンタゴニストの最低１種から選択される最低１種の化合物若しくはタンパク質の有効量を含んでなる最低１種の組成物を投与することをさらに含んでなる、請求項５７に記載の方法。
【請求項６１】
前記ＩＬ−１２に関係する状態が乾癬である、請求項５７に記載の方法。
【請求項６２】
前記ＩＬ−１２に関係する状態が多発性硬化症である、請求項５７に記載の方法。
【請求項６３】
前記ＩＬ−１２に関係する状態がクローン病である、請求項５７に記載の方法。
【請求項６４】
配列番号１、２、３、４、５若しくは６の最低１種のアミノ酸配列を有する最低１個のＨ鎖若しくはＬ鎖ＣＤＲを有する単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体を含んでなる医療器具であって、前記抗体が、配列番号９のアミノ酸配列の残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合し、前記装置が、非経口、皮下、筋肉内、静脈内、動脈内、気管支内、腹腔内（ｉｎｔｒａａｂｄｏｍｉｎａｌ）、嚢内、軟骨内、腔内、腹腔内（ｉｎｔｒａｃｅｌｉａｌ）、小脳内、脳室内、結腸内、頚部内、胃内、肝内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内（ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）、胸腔内、前立腺内、肺内、直腸内、腎内、網膜内、髄腔内、滑液包内、胸郭内、子宮内、膀胱内、ボーラス、膣、直腸、頬側、舌下、鼻内および経皮から選択される最低１様式により前記最低１種の抗ＩＬ−１２抗体を接触若しくは投与することに適する、上記装置。
【請求項６５】
配列番号１、２、３、４、５若しくは６の最低１種のアミノ酸配列を有する最低１個のＨ鎖若しくはＬ鎖ＣＤＲを有する単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体を、回収可能な量で発現することが可能な、宿主細胞若しくはトランスジェニックのヒト以外の動物若しくはトランスジェニック植物若しくは植物細胞を提供することを含んでなる、前記抗体の製造方法であって、前記抗体が、配列番号９のアミノ酸配列の残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するＩＬ−１２タンパク質の一部分に結合する、上記方法。
【請求項６６】
請求項６５に記載の方法により製造された抗ＩＬ−１２抗体。
【請求項６７】
最低２個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含んでなる、単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体であって、前記抗体が、位置４５のアミノ酸残基グルタミン酸、位置５９のアミノ酸残基グルタミン酸、位置６２のアミノ酸残基アスパラギン酸、位置２３のアミノ酸残基メチオニン、位置４０のアミノ酸残基ロイシンおよび位置４３のアミノ酸残基セリンを含んでなるＩＬ−１２のｐ４０サブユニット上の１エピトープに結合する、上記抗体。
【請求項６８】
最低２個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含んでなる、単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体であって、前記抗体が、配列番号７のＨ鎖可変領域アミノ酸配列、および配列番号８のＬ鎖可変領域アミノ酸配列を含んでなり、配列番号７のアミノ酸残基２８、３１、３２、３３、５７、５９、９８、９９、１００、１０１、１０２および１０３、ならびに配列番号８のアミノ酸残基１、３０、３２、４９、５６、９２、９３および９４以外の可変領域残基のいずれか１個が異なるアミノ酸で置換されうる、上記抗体。
【請求項６９】
最低２個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含んでなる、単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体であって、配列番号９のアミノ酸配列の残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２の最低１種を含んでなるＩＬ−１２タンパク質の一部分と相互作用する前記抗体の残基が、配列番号７のアミノ酸残基２８、３１、３２、３３、５７、５９、９８、９９、１００、１０１、１０２および１０３、ならびに配列番号８のアミノ酸残基１、３０、３２、４９、５６、９２、９３および９４の最低１個、または、配列番号７および８の前記アミノ酸残基の１個若しくはそれ以上の保存的置換を含んでなる、上記抗体。
【請求項７０】
最低２個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含んでなる、単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体であって、前記抗体が、配列番号７のＨ鎖可変領域アミノ酸配列、および配列番号８のＬ鎖可変領域アミノ酸配列を含んでなり、配列番号７のアミノ酸残基２８、３１、３２、３３、５７、５９、９８、９９、１００、１０１、１０２および１０３、ならびに配列番号８のアミノ酸残基１、３０、３２、４９、５６、９２、９３および９４の可変領域残基の１個若しくはそれ以上が保存的置換を受ける、上記抗体。
【請求項７１】
保存的置換が、配列番号７のＲ５９Ｋ、配列番号７のＲ９８Ｋ、配列番号７のＲ９９Ｋおよび配列番号８のＤ１Ｅの１個若しくはそれ以上を含んでなる、請求項７０に記載の抗ＩＬ−１２抗体。
【請求項７２】
最低２個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含んでなる、単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体であって、前記抗体が、配列番号９のアミノ酸配列の残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２よりなる群から選択される最低１アミノ酸残基に対応するｐ４０タンパク質単量体またはヘテロ若しくはホモ二量体タンパク質中のｐ４０サブユニットの一部分に結合する、上記抗体。
【請求項７３】
配列番号７のアミノ酸残基２８、３１、３２、３３、５７、５９、９８、９９、１００、１０１、１０２および１０３、ならびに配列番号８のアミノ酸残基１、３０、３２、４９、５６、９２、９３および９４の可変領域残基の１個若しくはそれ以上を、異なるアミノ酸残基で置換することを含んでなる、配列番号７のＨ鎖可変領域アミノ酸配列および配列番号８のＬ鎖可変領域アミノ酸配列を含んでなる単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体の活性を変える方法。
【請求項７４】
生じるＨ鎖およびＬ鎖可変領域配列を有する抗体の活性を試験する段階をさらに含んでなる、請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
請求項７３に記載の方法により製造された抗体。
【請求項７６】
最低２個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含んでなる単離された抗体であって、前記抗体が請求項１〜４に記載の抗体のいずれかと結合について競合する、上記抗体。
【請求項７７】
本明細書に記述される発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、最低１種のＩＬ−１２タンパク質若しくはそのフラグメントに特異的な、指定される部分若しくはバリアントを包含する抗体、ならびに、抗イディオタイプ抗体、該抗体、部分、バリアントおよびフラグメントのエピトープ領域、ならびにこうした抗ＩＬ−１２抗体をコードする核酸、相補核酸、ベクター、宿主細胞、ならびに治療的製剤、投与および装置を包含するそれらの作成および使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）は、ジスルフィド結合されている３５および４０ｋＤのグリコシル化されたポリペプチド鎖よりなるヘテロ二量体のサイトカインである。該サイトカインは、樹状細胞、単球、マクロファージ、Ｂ細胞、ランゲルハンス細胞およびケラチノサイト、ならびにナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を包含する抗原提示細胞により合成かつ分泌される。ＩＬ−１２は多様な生物学的過程を媒介し、そして、ＮＫ細胞刺激因子（ＮＫＳＦ）、Ｔ細胞刺激因子、細胞傷害性Ｔリンパ球成熟因子、およびＥＢＶ形質転換Ｂ細胞株因子（ＥＢＶ−ｔｒａｎｓｆｏｒｍｅｄ  Ｂ−ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅ  ｆａｃｔｏｒ）ともまた称されている（非特許文献１）。
【０００３】
インターロイキン−１２は、細胞（例えばＴ細胞、ＮＫ細胞）の原形質膜上で発現されるＩＬ−１２受容体に結合し得、それにより生物学的過程を変える（例えば開始する、予防する）。例えば、ＩＬ−１２受容体へのＩＬ−１２の結合は、前活性化Ｔ細胞およびＮＫ細胞の増殖を刺激し得、細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）、ＮＫ細胞およびＬＡＫ（リンホカイン活性化型キラー）細胞の細胞溶解活性を高め得、Ｔ細胞およびＮＫ細胞によるγインターフェロン（ＩＦＮ  γ）の産生を誘導し得、かつ、ナイーブなＴｈ０細胞の、ＩＦＮ  γおよびＩＬ−２を産生するＴｈ１細胞への分化を誘導し得る（非特許文献２）。とりわけ、ＩＬ−１２は、細胞溶解細胞（例えばＮＫ、ＣＴＬ）の生成および細胞性免疫応答（例えばＴｈ１細胞媒介性免疫応答）の開始に不可欠である。従って、ＩＬ−１２は、防御免疫（例えば感染の根絶）および病理学的免疫応答（例えば自己免疫）双方の生成および調節において決定的に重要である（非特許文献３）。従って、免疫応答（例えば防御若しくは病原性）は、例えば抗体によってのｉｎ  ｖｉｖｏのＩＬ−１２の生物学的活性の操作により、高め、抑制し、若しくは予防し得る。
【０００４】
ヒト以外の哺乳動物、キメラ、ポリクローナル（例えば抗血清）および／若しくはモノクローナル抗体（Ｍａｂ）、ならびにフラグメント（例えばそれらのタンパク質分解性消化若しくは融合タンパク質生成物）は、ある種の疾患を処置することを試みるためにいくつかの場合で検討されている潜在的治療薬である。しかしながら、こうした抗体若しくはフラグメントは、ヒトに投与される場合に免疫応答を導き出し得る。こうした免疫応答は、循環からの抗体若しくはフラグメントの免疫複合体媒介性の消失をもたらし得、そして反復投与を治療に不適にし得、それにより患者に対する治療上の利益を低下させかつ該抗体若しくはフラグメントの再投与を制限する。例えば、ヒト以外の部分を含んでなる抗体若しくはフラグメントの反復投与は、血清の疾病および／若しくはアナフィラキシーに至り得る。これらおよび他の問題を回避するために、当該技術分野で公知のところのキメラ化およびヒト化を包含する、こうした抗体およびそれらの部分の免疫原性を低下させるための多数のアプローチがとられた。これらおよび他のアプローチは、しかしながら、若干の免疫原性、低親和性（ａｆｆｉｎｉｔｙ）、低親和性（ａｖｉｄｉｔｙ）を有する、または細胞培養、スケールアップ、生産および／若しくは低収量の問題を伴う抗体若しくはフラグメントをなおもたらし得る。従って、こうした抗体若しくはフラグメントは、治療的タンパク質としての製造若しくは使用に、理想的適するとは言い得ない。
【０００５】
従って、これらの問題のもう１つを克服する抗ＩＬ−１２抗体若しくはフラグメント、ならびに既知の抗体若しくはそれらのフラグメントを上回る改善を提供する必要性が存在する。
【非特許文献１】Ｃｕｒｆｓ，Ｊ．Ｈ．Ａ．Ｊ．ら、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ、１０：７４２−７８０（１９９７）
【非特許文献２】Ｔｒｉｎｃｈｉｅｒｉ，Ｇ．、Ａｎｕａｌ  Ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、１３：２５１−２７６（１９９５）
【非特許文献３】Ｈｅｎｄｒｚａｋ，Ｊ．Ａ．とＢｒｕｎｄａ，Ｍ．Ｊ．、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ、７２：６１９−６３７（１９９５）
【発明の開示】
【０００６】
［発明の要約］
本発明は、当該技術分野で既知であるものと組合せの、本明細書で記述されかつ可能にされるところの、単離されたヒト抗ＩＬ−１２抗体、免疫グロブリン、そのフラグメント、切断生成物ならびに他の指定された部分およびバリアント、ならびに、抗ＩＬ−１２抗体組成物、ＩＬ−１２抗イディオタイプ抗体、該抗体、部分、バリアントおよびフラグメントのエピトープ領域、コーディング若しくは相補核酸、ベクター、宿主細胞、組成物、製剤、装置、トランスジェニック動物、トランスジェニック植物、ならびにそれらの作成および使用方法を提供する。
【０００７】
本発明は、抗体可変領域の１若しくはそれ以上のアミノ酸残基を変えること、および生じる抗体組成物の特性を試験することによる、抗体の効力／活性（例えば結合）を変える方法もまた提供する。
【０００８】
本発明は、一局面において、特異的抗ＩＬ−１２抗体若しくは抗イディオタイプ抗体の最低１種の指定される配列、ドメイン、部分若しくはバリアントを含んでなる、特異的抗ＩＬ−１２抗体若しくは抗イディオタイプ抗体をコードするポリヌクレオチドを含んでなる、それらに相補的な若しくはハイブリダイズする単離された核酸分子を提供する。本発明は、前記抗ＩＬ−１２抗体核酸分子を含んでなる組換えベクター、こうした核酸および／若しくは組換えベクターを含有する宿主細胞、ならびにこうした抗体の核酸、ベクターおよび／若しくは宿主細胞の作成および／若しくは使用方法をさらに提供する。
【０００９】
本発明は、本明細書に記述されるところの宿主細胞を、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体が検出可能かつ／若しくは回収可能な量で発現される条件下で培養することを含んでなる、宿主細胞中での最低１種の抗ＩＬ−１２抗体若しくはＩＬ−１２抗イディオタイプ抗体の最低１種の発現方法もまた提供する。
【００１０】
本発明は、（ａ）本明細書に記述されるところの単離された抗ＩＬ−１２抗体をコードする核酸および／若しくは抗体；ならびに（ｂ）適するかつ／若しくは製薬学的に許容できる担体若しくは希釈剤を含んでなる、最低１種の組成物もまた提供する。
【００１１】
本発明は、当該技術分野で既知かつ／若しくは本明細書に記述されるところの、細胞、組織、器官、動物若しくは患者における、および／または関係する状態の前、後若しくは間に、最低１種のＩＬ−１２に関係する状態を調節若しくは処置するのに治療上有効な量を投与するための、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体の方法若しくは組成物をさらに提供する。
【００１２】
本発明は、本発明の最低１種の抗ＩＬ−１２抗体の治療上若しくは予防上有効な量の最低１種の組成物、装置および／若しくは送達方法もまた提供する。
【００１３】
本発明は、当該技術分野で既知かつ／若しくは本明細書に記述されるところの、細胞、組織、器官、動物若しくは患者における、および／または関係する状態の前、後若しくは間に、最低１種のＩＬ−１２に関係する状態を診断するための、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体の方法若しくは組成物をさらに提供する。
【００１４】
本発明は、本発明の最低１種の抗ＩＬ−１２抗体の最低１種の組成物、装置および／若しくは診断のための送達方法もまた提供する。
【００１５】
本発明の最低１種の単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体を含んでなる医療器具もまた提供され、該装置は、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体、ＩＬ−１２抗イディオタイプ抗体、核酸分子、化合物、タンパク質および／若しくは組成物を接触若しくは投与するのに適する。
【００１６】
包装資材、および溶液若しくは凍結乾燥された形態の本発明の最低１種の単離された哺乳動物抗ＩＬ−１２抗体を含んでなる容器を含んでなる、ヒトの製薬学的若しくは診断的使用のための製品もまた提供される。該製品は、場合によっては、送達装置若しくは系の一成分として該容器を有し得る。
【００１７】
本発明は本明細書に記述されるいかなる発明もさらに提供する。
【００１８】
［発明の詳細な記述］
本発明は、単離された、組換えの、および／若しくは合成抗ＩＬ−１２ヒト抗体、ならびにそれらに対するＩＬ−１２抗イディオタイプ抗体、ならびに、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体若しくは抗イディオタイプ抗体をコードする最低１種のポリヌクレオチドを含んでなる組成物およびコーディング核酸分子を提供する。本発明は、限定されるものでないが、診断および治療的組成物、方法および装置を包含する、こうした核酸ならびに抗体および抗イディオタイプ抗体の作成および使用方法をさらに包含する。
【００１９】
本明細書で使用されるところの「抗ＩＬ−１２抗体」、「ＩＬ−１２抗体」、「抗ＩＬ−１２抗体部分」若しくは「抗ＩＬ−１２抗体フラグメント」および／または「抗ＩＬ−１２抗体バリアント」などは、限定されるものでないが、Ｈ若しくはＬ鎖の最低１個の相補性決定領域（ＣＤＲ）またはそれらのリガンド結合部分、Ｈ鎖若しくはＬ鎖可変領域、Ｈ鎖若しくはＬ鎖定常領域、枠組み領域、あるいはそれらのいずれかの部分、あるいは、本発明の抗体に組込み得るＩＬ−１２受容体若しくは結合タンパク質の最低１部分を挙げることができる、免疫グロブリン分子の最低１部分を含んでなる、いかなるタンパク質若しくはペプチド含有分子も包含する。こうした抗体は、場合によっては、限定されるものでないが、こうした抗体がｉｎ  ｖｉｔｒｏ、ｉｎ  ｓｉｔｕおよび／若しくはｉｎ  ｖｉｖｏでの最低１種のＩＬ−１２の活性若しくは結合、またはＩＬ−１２受容体の活性若しくは結合を調節、低下、増大、拮抗、刺激（ａｇｏｎｉｚｅ）、緩和、軽減、遮断、阻害、排除および／若しくは妨害するような特異的リガンドにさらに影響を及ぼす。制限しない一例として、本発明の適する抗ＩＬ−１２抗体、指定される部分若しくはバリアントは、最低１種のＩＬ−１２分子、またはその指定される部分、バリアント若しくはドメインを結合し得る。適する抗ＩＬ−１２抗体、指定される部分若しくはバリアントは、場合によっては、限定されるものでないが、ＲＮＡ、ＤＮＡ若しくはタンパク質合成、ＩＬ−１２放出、ＩＬ−１２受容体シグナル伝達、膜ＩＬ−１２切断、ＩＬ−１２活性、ＩＬ−１２産生および／若しくは合成を挙げることができるＩＬ−１２の活性若しくは機能の最低１種にもまた影響を及ぼし得る。
【００２０】
「抗体」という用語は、抗体模倣物を包含するか、あるいは一本鎖抗体およびそれらの
フラグメントを包含する抗体またはその指定されるフラグメント若しくは部分の構造および／若しくは機能を模倣する抗体の一部分を含んでなる、抗体、それらの消化フラグメント、指定される部分およびバリアントを包含することをさらに意図している。機能的フラグメントは、哺乳動物ＩＬ−１２に結合する抗原結合フラグメントを包含する。例えば、限定されるものでないがＦａｂ（例えばパパイン消化による）、Ｆａｂ’（例えばペプシン消化および部分還元による）、ならびにＦ（ａｂ’）２（例えばペプシン消化による）、ｆａｃｂ（例えばプラスミン消化による）、ｐＦｃ’（例えばペプシン若しくはプラスミン消化による）、Ｆｄ（例えばペプシン消化、部分還元および再凝集による）、ＦｖまたはｓｃＦｖ（例えば分子生物学技術による）フラグメントを挙げることができる、ＩＬ−１２若しくはその部分に結合することが可能な抗体フラグメントが、本発明により包含される（例えば、Ｃｏｌｌｉｇａｎ、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、上記を参照されたい）。
【００２１】
こうしたフラグメントは、当該技術分野で既知かつ／若しくは本明細書に記述されるところの酵素的切断、合成若しくは組換え技術により製造し得る。抗体は、１個若しくはそれ以上の終止コドンが天然の終止コドンの上流に導入されている抗体遺伝子を使用して、多様な切断型でもまた製造し得る。例えば、Ｆ（ａｂ’）２Ｈ鎖部分をコードする複合遺伝子を、Ｈ鎖のＣＨ１ドメインおよび／若しくはヒンジ領域をコードするＤＮＡ配列を包含するように設計し得る。抗体の多様な部分を慣習的技術により化学的に一緒に結合し得るか、若しくは遺伝子工学技術を使用して連続した１タンパク質として製造し得る。
【００２２】
本明細書で使用されるところの「ヒト抗体」という用語は、該タンパク質の実質的にすべての部分（例えばＣＤＲ、枠組み、ＣＬ、ＣＨドメイン（例えばＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３）、ヒンジ、（ＶＬ、ＶＨ））が、小さな配列変化若しくは変動のみを伴い、ヒトで実質的に非免疫原性である抗体を指す。「ヒト抗体」は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列由来であるか、若しくはそれに緊密に一致する抗体でもまたありうる。ヒト抗体は、生殖系列免疫グロブリン配列によりコードされないアミノ酸残基（例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで無作為若しくは部位特異的突然変異誘発、またはｉｎ  ｖｉｖｏで体細胞突然変異により導入される突然変異）を包含しうる。しばしば、これは、ヒト抗体がヒトにおいて実質的に非免疫原性であることを意味している。ヒト抗体は、それらのアミノ酸配列の類似性に基づくグループに分類されている。従って、配列類似性検索を使用して、類似の直鎖状配列をもつ抗体を、ヒト抗体を創製するための鋳型として選ぶことができる。同様に、霊長類（サル、ヒヒ、チンパンジーなど）、げっ歯類（マウス、ラット、ウサギ、モルモット、ハムスターなど）、および他の哺乳動物と呼称される抗体は、こうした種、亜属、属、亜科、および科特異的抗体を明示する。さらに、キメラ抗体は上のいかなる組合せも包含し得る。こうした変化若しくは変動は、場合によっては、かつ、好ましくは、改変されない抗体に関して、ヒト若しくは他の種における免疫原性を保持若しくは低下する。従って、ヒト抗体はキメラ若しくはヒト化抗体と異なる。
【００２３】
ヒト抗体は、機能的に再配列されたヒト免疫グロブリン（例えばＨ鎖および／若しくはＬ鎖）遺伝子を発現することが可能であるヒト以外の動物または原核生物若しくは真核生物細胞により産生され得ることが指摘される。さらに、ヒト抗体が一本鎖抗体である場合、それは天然のヒト抗体に見出されないリンカーペプチドを含み得る。例えば、Ｆｖは、Ｈ鎖の可変領域およびＬ鎖の可変領域を結合する、２ないし約８個のグリシン若しくは他のアミノ酸残基のようなリンカーペプチドを含み得る。こうしたリンカーペプチドはヒト起源のものであると考えられている。
【００２４】
最低２種の異なる抗原に対する結合特異性を有するモノクローナル、好ましくはヒト若しくはヒト化抗体である、二特異性、異種特異性、ヘテロ複合物（ｈｅｔｅｒｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ）若しくは類似の抗体もまた使用し得る。本場合に、結合特異性の一方は最低１種のＩＬ−１２タンパク質に対してであり、他方のものはいずれかの他の抗原に対して
である。二特異性抗体の作成方法は当該技術分野で既知である。伝統的に、二特異性抗体の組換え製造は、２本のＨ鎖が異なる特異性を有する２本の免疫グロブリンＨ鎖−Ｌ鎖対の共発現に基づく（ＭｉｌｓｔｅｉｎとＣｕｅｌｌｏ、Ｎａｔｕｒｅ  ３０５：５３７（１９８３））。免疫グロブリンＨおよびＬ鎖の無作為の取り合わせにより、これらのハイブリドーマ（クアドローマ）は、１０種の異なる抗体分子の潜在的混合物を生じ、それらの１種のみが正しい二特異性構造を有する。アフィニティークロマトグラフィー段階により通常行われる正しい分子の精製は、むしろ面倒であり、そして生成物の収量は低い。類似の手順は、例えば、第ＷＯ  ９３／０８８２９号、米国特許第６，２１０，６６８号、同第６，１９３，９６７号、同第６，１３２，９９２号、同第６，１０６，８３３号、同第６，０６０，２８５号、同第６，０３７，４５３号、同第６，０１０，９０２号、同第５，９８９，５３０号、同第５，９５９，０８４号、同第５，９５９，０８３号、同第５，９３２，４４８号、同第５，８３３，９８５号、同第５，８２１，３３３号、同第５，８０７，７０６号、同第５，６４３，７５９号、同第５，６０１，８１９号、同第５，５８２，９９６号、同第５，４９６，５４９号、同第４，６７６，９８０号、第ＷＯ  ９１／００３６０号、第ＷＯ  ９２／００３７３号、欧州特許第ＥＰ  ０３０８９号、Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒら、ＥＭＢＯ  Ｊ．１０：３６５５（１９９１）、Ｓｕｒｅｓｈら、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  １２１：２１０（１９８６）（それぞれそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）に開示されている。
【００２５】
本発明の方法および組成物で有用な抗ＩＬ−１２抗体（ＩＬ−１２抗体ともまた命名される）は、場合によっては、ＩＬ−１２への高親和性結合、および、場合によっては、かつ、好ましくは低毒性を有することを特徴とし得る。とりわけ、可変領域、定常領域および枠組みのような個々の成分が、個々にかつ／若しくは集合的に、場合によっては、かつ、好ましくは低免疫原性を有する、本発明の抗体、指定されるフラグメント若しくはバリアントが、本発明で有用である。本発明で使用し得る抗体は、場合によっては、症状の測定可能な軽減および低くかつ／若しくは許容できる毒性を伴い、延長された期間、患者を処置するそれらの能力を特徴とする。低い若しくは許容できる免疫原性および／または高親和性、ならびに他の適する特性が、達成される治療結果に寄与し得る。「低免疫原性」は、処置される患者の約７５％未満、若しくは好ましくは約５０％未満で有意のＨＡＨＡ、ＨＡＣＡ若しくはＨＡＭＡ応答を生じること、および／または処置される患者で低力価を生じる（二重抗原エンザイムイムノアッセイで測定される約３００未満、好ましくは約１００未満）ことと本明細書で定義する（Ｅｌｌｉｏｔｔら、Ｌａｎｃｅｔ  ３４４：１１２５−１１２７（１９９４）（そっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる））。「低免疫原性」は、処置期間中、推奨される治療経過の間推奨される用量で処置される患者の２５％未満、好ましくは処置される患者の１０％未満で発生することのような、抗ＩＬ−１２抗体で処置される患者で抗ＩＬ−１２抗体に対する滴定可能なレベルの抗体を発生することともまた定義し得る。
【００２６】
利用性
本発明の単離された核酸は、限定されるものでないが、免疫障害若しくは疾患、心血管系障害若しくは疾患、感染性、悪性および／若しくは神経学的障害若しくは疾患、または他の既知の若しくは明記されるＩＬ−１２に関係する状態の最低１種から選択される、最低１種のＩＬ−１２の状態を診断、モニター、調節、処置、軽減、その発生を予防するのを助ける、若しくはその症状を低下させるために、細胞、組織、器官若しくは動物（哺乳動物およびヒトを包含する）で測定する若しくは遂げるのに使用し得る、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体若しくはその指定されるバリアントの製造に使用し得る。
【００２７】
こうした方法は、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体を含んでなる組成物若しくは製薬学的組成物の有効量を、症状、影響若しくは機構のこうした調節、処置、軽減、予防若しくは低減の必要な細胞、組織、器官、動物若しくは患者に投与することを含み得る。有効量は、
本明細書に記述されるか若しくは関連技術で既知のところの既知の方法を使用して行われかつ測定されるとおり、単一（例えばボーラス）、複数若しくは連続投与あたり約０．００１ないし５００ｍｇ／ｋｇの、あるいは単一、複数若しくは連続投与あたり０．０１〜５０００μｇ／ｍｌ血清濃度またはその中のいずれかの有効な範囲若しくは値の血清濃度を達成するための量を含み得る。
【００２８】
引用
本明細書に引用される全部の刊行物若しくは特許は、とりわけ指定されようとされなかろうと、それらが本発明の時点での従来技術を示すために、かつ／若しくは本発明の記述および実施可能性を提供するために、そっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる。刊行物は、いかなる学術若しくは特許刊行物、または全部の記録、電子若しくは印刷形式を包含するいずれかの媒体形成で入手可能ないかなる他の情報も指す。以下の参考文献は、そっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる。すなわち、Ａｕｓｕｂｅｌら編、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、ニューヨーク州ニューヨーク（１９８７−２００１）；Ｓａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、第２版、ニューヨーク州コールドスプリングハーバー（１９８９）；ＨａｒｌｏｗとＬａｎｅ、ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、ニューヨーク州コールドスプリングハーバー（１９８９）；Ｃｏｌｌｉｇａｎら編、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、ニューヨーク（１９９４−２００１）；Ｃｏｌｌｉｇａｎら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、ニューヨーク州ニューヨーク（１９９７−２００１）。
【００２９】
本発明の抗体−製造および生成
本発明の最低１種の抗ＩＬ−１２抗体は、場合によっては、当該技術分野で公知のところの、細胞株、混合細胞株、不死化細胞若しくは不死化細胞のクローン集団により産生され得る。例えば、Ａｕｓｕｂｅｌら編、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、ニューヨーク州ニューヨーク（１９８７−２００１）；Ｓａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、第２版、ニューヨーク州コールドスプリングハーバー（１９８９）；ＨａｒｌｏｗとＬａｎｅ、ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、ニューヨーク州コールドスプリングハーバー（１９８９）；Ｃｏｌｌｉｇａｎら編、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、ニューヨーク（１９９４−２００１）；Ｃｏｌｌｉｇａｎら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、ニューヨーク州ニューヨーク（１９９７−２００１）（それぞれそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）を参照されたい。
【００３０】
ヒトＩＬ−１２タンパク質若しくはそのフラグメントに特異的であるヒト抗体は、単離されたＩＬ−１２タンパク質および／若しくはその一部分（合成ペプチドのような合成分子を包含する）のような適切な免疫原性抗原に対し生じられ得る。他の特異的若しくは一般的な哺乳動物抗体は同様に生じさせ得る。免疫原性抗原の製造、およびモノクローナル抗体の製造は、いずれかの適する技術を使用して実施し得る。
【００３１】
１アプローチにおいて、ハイブリドーマは、限定されるものでないが、単離された若しくはクローン化した脾、末梢血、リンパ、扁桃、または他の免疫若しくはＢ細胞含有細胞、あるいは、組換え若しくは内因性、ウイルス、細菌、藻類、原核生物、両生類、昆虫、は虫類、魚類、哺乳動物、げっ歯類、ウマ、ヒツジ（ｏｖｉｎｅ）、ヤギ、ヒツジ（ｓｈｅｅｐ）、霊長類、真核生物、ゲノムのＤＮＡ、ｃＤＮＡ、ｒＤＮＡ、ミトコンドリアＤＮＡ若しくはＲＮＡ、葉緑体ＤＮＡ若しくはＲＮＡ、ｈｎＲＮＡ、ｍＲＮＡ、ｔＲＮＡ、一本鎖、二本鎖若しくは三本鎖、ハイブリダイズ、など、またはそれらのいずれかの組合せのような、内因性若しくは異種いずれかの核酸として、Ｈ若しくはＬ鎖定常若しくは可変若しくは枠組み若しくはＣＤＲ配列を発現するいずれかの他の細胞を挙げることができる抗体産生細胞と、適する不死化細胞株（例えば、限定されるものでないが、Ｓｐ２／０、Ｓｐ２／０−ＡＧ１４、ＮＳＯ、ＮＳ１、ＮＳ２、ＡＥ−１、Ｌ．５、Ｌ２４３、Ｐ３Ｘ６３Ａｇ８．６５３、Ｓｐ２  ＳＡ３、Ｓｐ２  ＭＡＩ、Ｓｐ２  ＳＳ１、Ｓｐ２  ＳＡ５を挙げることができる骨髄腫細胞株、Ｕ９３７、ＭＬＡ  １４４、ＡＣＴ  ＩＶ、ＭＯＬＴ４、ＤＡ−１、ＪＵＲＫＡＴ、ＷＥＨＩ、Ｋ−５６２、ＣＯＳ、ＲＡＪＩ、ＮＩＨ  ３Ｔ３、ＨＬ−６０、ＭＬＡ  １４４、ＮＡＭＡＬＷＡ、ＮＥＵＲＯ  ２Ａなど、若しくはヘテロミエローマ、それらの融合生成物、またはそれら由来のいずれかの細胞若しくは融合細胞、あるいは当該技術分野で既知のところのいずれかの他の適する細胞株）（例えば、ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ、ｗｗｗ．ｌｉｆｅｔｃｈ．ｃｏｍ．などを参照されたい）を融合することにより製造する。例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ、上記、およびＣｏｌｌｉｇａｎ、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、上記、第２章（そっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）を参照されたい。
【００３２】
抗体産生細胞は、目的の抗原で免疫したヒト若しくは他の適する動物の末梢血、または好ましくは脾若しくはリンパ節からもまた得ることができる。いずれかの他の適する宿主細胞もまた、本発明の抗体、その指定されるフラグメント若しくはバリアントをコードする異種若しくは内因性核酸を発現させるのに使用し得る。融合細胞（ハイブリドーマ）若しくは組換え細胞は、選択的培養条件若しくは他の適する既知の方法を使用して単離し得、かつ、限界希釈若しくは細胞分取、または他の既知の方法によりクローン化し得る。所望の特異性をもつ抗体を産生する細胞を、適するアッセイ（例えばＥＬＩＳＡ）により選択し得る。
【００３３】
限定されるものでないが、当該技術分野で既知かつ／若しくは本明細書に記述されるところの、ペプチド若しくはタンパク質ライブラリー（例えば、限定されるものでないが、バクテリオファージ、リボソーム、オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ、ｃＤＮＡなどのディスプレイライブラリー；例えば、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、英国ケンブリッジシャー；ＭｏｒｐｈｏＳｙｓ、独国マルティンシュライト／プラネク；Ｂｉｏｖａｔｉｏｎ、英国スコットランド・アバディーン；ＢｉｏＩｎｖｅｎｔ、スウェーデン・ルント；Ｄｙａｘ  Ｃｏｒｐ．、Ｅｎｚｏｎ、Ａｆｆｙｍａｘ／Ｂｉｏｓｉｔｅ；Ｘｏｍａ、カリフォルニア州バークレー；Ｉｘｓｙｓから入手可能なところの。例えば、第ＥＰ  ３６８，６８４号、第ＰＣＴ／ＧＢ９１／０１１３４号；第ＰＣＴ／ＧＢ９２／０１７５５号；第ＰＣＴ／ＧＢ９２／００２２４０号；第ＰＣＴ／ＧＢ９２／００８８３号；第ＰＣＴ／ＧＢ９３／００６０５号；第ＵＳ  ０８／３５０２６０号（５／１２／９４）；第ＰＣＴ／ＧＢ９４／０１４２２号；第ＰＣＴ／ＧＢ９４／０２６６２号；第ＰＣＴ／ＧＢ９７／０１８３５号；（ＣＡＴ／ＭＲＣ）；第ＷＯ９０／１４４４３号；第ＷＯ９０／１４４２４号；第ＷＯ９０／１４４３０号；第ＰＣＴ／ＵＳ９４／１２３４号；第ＷＯ９２／１８６１９号；第ＷＯ９６／０７７５４号；（Ｓｃｒｉｐｐｓ）；第ＷＯ９６／１３５８３号、第ＷＯ９７／０８３２０号（ＭｏｒｐｈｏＳｙｓ）；第ＷＯ９５／１６０２７号（ＢｉｏＩｎｖｅｎｔ）；第ＷＯ８８／０６６３０号；第ＷＯ９０／３８０９号（Ｄｙａｘ）；第ＵＳ  ４，７０４，６９２号（Ｅｎｚｏｎ）；第ＰＣＴ／ＵＳ９１／０２９８９号（Ａｆｆｙｍａｘ）；第ＷＯ８９／０６２８３号；第ＥＰ  ３７１  ９９８号；第ＥＰ  ５５０  ４００号；（Ｘｏｍａ）；第ＥＰ  ２２９  ０４６号；第ＰＣＴ／ＵＳ９１／０７１４９号明細書（Ｉｘｓｙｓ）を参照されたい）；若しくは、確率論的に生成されるペプチド若しくはタンパク質−第ＵＳ  ５，７２３，３２３号、同第５，７６３，１９２号、同第５，８１４，４７６号、同第５，８１７，４８３号、同第５，８２４，５１４号、同第５，９７６，８６２号、第ＷＯ  ８６／０５８０３号、第ＥＰ  ５９０  ６８９号（Ｉｘｓｙｓ、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ（ＡＭＥ）の前身、それぞれそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる））から組換え抗体を選択する、または、ヒト抗体のレパートリーを製造することが可能であるトランスジェニック動物（例えばＳＣＩＤマウス、Ｎｇｕｙｅｎら、Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４１：９０１−９０７（１９９７）；Ｓａｎｄｈｕら、Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１６：９５−１１８（１９９６）；Ｅｒｅｎら、Ｉｍｍｕｎｏｌ．９３：１５４−１６１（１９９８）（それぞれそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）ならびに関連特許および出願）の免疫化に頼る方法を挙げることができる、必須の特異性の抗体の他の適する製造若しくは単離方法を使用し得る。こうした技術は、限定されるものでないが、リボソームディスプレイ（Ｈａｎｅｓら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、９４：４９３７−４９４２（Ｍａｙ  １９９７）；Ｈａｎｅｓら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、９５：１４１３０−１４１３５（Ｎｏｖ．１９９８））；単細胞抗体産生技術（例えば選択リンパ球抗体法（“ＳＬＡＭ”）（米国特許第５，６２７，０５２号、Ｗｅｎら．、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７：８８７−８９２（１９８７）；Ｂａｂｃｏｏｋら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９３：７８４３−７８４８（１９９６））；ゲル微小液滴およびフローサイトメトリー（Ｐｏｗｅｌｌら、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．８：３３３−３３７（１９９０）；Ｏｎｅ  Ｃｅｌｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、マサチューセッツ州ケンブリッジ；Ｇｒａｙら、Ｊ．Ｉｍｍ．Ｍｅｔｈ．１８２：１５５−１６３（１９９５）；Ｋｅｎｎｙら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌ．１３：７８７−７９０（１９９５））；Ｂ細胞選択（Ｓｔｅｅｎｂａｋｋｅｒｓら、Ｍｏｌｅｃ．Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｏｒｔｓ  １９：１２５−１３４（１９９４）；Ｊｏｎａｋら、Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｖｏｌ．５、Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｂｏｒｒｅｂａｅｃｋ編、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ  Ｂ．Ｖ．、オランダ・アムステルダム（１９８８））を挙げることができる。
【００３４】
ヒト以外若しくはヒト抗体の工作若しくはヒト化方法もまた使用し得、かつ、当該技術分野で公知である。一般に、ヒト化若しくは工作した抗体は、限定されるものでないがマウス、ラット、ウサギ、ヒト以外の霊長類若しくは他の哺乳動物を挙げることができるヒト以外である供給源からの１若しくはそれ以上のアミノ酸残基を有する。これらのヒト以外のアミノ酸残基は、既知のヒト配列の「輸入」可変、定常若しくは他のドメインから典型的に採用される、「輸入」残基としばしば称される残基により置換される。
【００３５】
既知のヒトＩｇ配列は開示されている。例えば、ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｅｎｔｒｅｚ／ｑｕｅｒｙ．ｆｃｇｉ；ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｉｇｂｌａｓｔ；ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ／ｐｈａｇｅ／ｈｄｂ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｍｒｃ−ｃｐｅ．ｃａｍ．ａｃ．ｕｋ／ＡＬＩＧＮＭＥＮＴＳ．ｐｈｐ；ｗｗｗ．ｋａｂａｔｄａｔａｂａｓｅ．ｃｏｍ／ｔｏｐ．ｈｔｍｌ；ｆｔｐ．ｎｃｂｉ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｒｅｐｏｓｉｔｏｒｙ／ｋａｂａｔ；ｗｗｗ．ｓｃｉｑｕｅｓｔ．ｃｏｍ；ｗｗｗ．ａｂｃａｍ．ｃｏｍ；ｗｗｗ．ａｎｔｉｂｏｄｙｒｅｓｏｕｒｃｅ．ｃｏｍ／ｏｎｌｉｎｅｃｏｍｐ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｐｕｂｌｉｃ．ｉａｓｔａｔｅ．ｅｄｕ／〜ｐｅｄｒｏ／ｒｅｓｅａｒｃｈ＿ｔｏｏｌｓ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｗｈｆｒｅｅｍａｎ．ｃｏｍ／ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ／ＣＨ０５／ｋｕｂｙ０５．ｈｔｍ；ｗｗｗ．ｈｈｍｉ．ｏｒｇ／ｇｒａｎｔｓ／ｌｅｃｔｕｒｅｓ／１９９６／ｖｌａｂ；ｗｗｗ．ｐａｔｈ．ｃａｍ．ａｃ．ｕｋ／〜ｍｒｃ７／ｍｉｋｅｉｍａｇｅｓ．ｈｔｍｌ；ｍｃｂ．ｈａｒｖａｒｄ．ｅｄｕ／ＢｉｏＬｉｎｋｓ／Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙｌｉｎｋ．ｃｏｍ；ｐａｔｈｂｏｘ．ｗｕｓｔｌ．ｅｄｕ／〜ｈｃｅｎｔｅｒ／ｉｎｄｅｘ
．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ａｐｐｌｉｅｄｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ．ｃｏｍ；ｗｗｗ．ｎａｌ．ｕｓｄａ．ｇｏｖ／ａｗｉｃ／ｐｕｂｓ／ａｎｔｉｂｏｄｙ；ｗｗｗ．ｍ．ｅｈｉｍｅ−ｕ．ａｃ．ｊｐ／〜ｙａｓｕｈｉｔｏ／Ｅｌｉｓａ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｂｉｏｄｅｓｉｇｎ．ｃｏｍ；ｗｗｗ．ｃａｎｃｅｒｒｅｓｅａｒｃｈｕｋ．ｏｒｇ；ｗｗｗ．ｂｉｏｔｅｃｈ．ｕｆｌ．ｅｄｕ；ｗｗｗ．ｉｓａｃ−ｎｅｔ．ｏｒｇ；ｂａｓｅｒｖ．ｕｃｉ．ｋｕｎ．ｎｌ／〜ｊｒａａｔｓ／ｌｉｎｋｓ１．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｒｅｃａｂ．ｕｎｉ−ｈｄ．ｄｅ／ｉｍｍｕｎｏ．ｂｍｅ．ｎｗｕ．ｅｄｕ；ｗｗｗ．ｍｒｃ−ｃｐｅ．ｃａｍ．ａｃ．ｕｋ；ｗｗｗ．ｉｂｔ．ｕｎａｍ．ｍｘ／ｖｉｒ／Ｖ＿ｍｉｃｅ．ｈｔｍｌ；ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｂｉｏｉｎｆ．ｏｒｇ．ｕｋ／ａｂｓ；ａｎｔｉｂｏｄｙ．ｂａｔｈ．ａｃ．ｕｋ；ｗｗｗ．ｕｎｉｚｈ．ｃｈ；ｗｗｗ．ｃｒｙｓｔ．ｂｂｋ．ａｃ．ｕｋ／〜ｕｂｃｇ０７ｓ；ｗｗｗ．ｎｉｍｒ．ｍｒｃ．ａｃ．ｕｋ／ＣＣ／ｃｃａｅｗｇ／ｃｃａｅｗｇ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｐａｔｈ．ｃａｍ．ａｃ．ｕｋ／〜ｍｒｃ７／ｈｕｍａｎｉｓａｔｉｏｎ／ＴＡＨＨＰ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｉｂｔ．ｕｎａｍ．ｍｘ／ｖｉｒ／ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ／ｓｔａｔ＿ａｉｍ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｂｉｏｓｃｉ．ｍｉｓｓｏｕｒｉ．ｅｄｕ／ｓｍｉｔｈｇｐ／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｊｅｒｉｎｉ．ｄｅ；Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、米国保健省（Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．Ｈｅａｌｔｈ）（１９８３）（それぞれそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）。
【００３６】
こうした輸入された配列は、当該技術分野で既知のとおり、免疫原性を低下させるか、または、結合、親和性（ａｆｆｉｎｉｔｙ）、オン速度（ｏｎ−ｒａｔｅ）、オフ速度（ｏｆｆ−ｒａｔｅ）、親和性（ａｖｉｄｉｔｙ）、特異性、半減期、若しくはいずれかの他の適する特徴を低減、増強若しくは改変するのに使用しうる。一般に、ＣＤＲ残基は直接、および最も実質的に、抗原結合への影響に関与する。従って、ヒト以外若しくはヒトのＣＤＲ配列の一部若しくは全部が維持される一方、可変および定常領域のヒト以外の配列をヒト若しくは他のアミノ酸で置換しうる。
【００３７】
抗体は、また、場合によっては、抗原に対する高親和性および他の好都合な生物学的特性の保持を伴い工作されたヒト化若しくはヒト抗体でもあり得る。この目標を達成するため、ヒト化（若しくはヒト）抗体は、場合によっては、親およびヒト化配列の三次元モデルを使用して、親配列および多様な概念的ヒト化生成物の分析の方法により製造し得る。三次元免疫グロブリンモデルは一般に入手可能であり、かつ、当業者になじみがある。選択された候補免疫グロブリン配列の可能な三次元コンホメーション構造を具体的に説明しかつ表示するコンピュータプログラムが利用可能である。これらの表示の検査は、候補免疫グロブリン配列の機能における残基のありそうな役割の解析、すなわち、その抗原を結合する該候補免疫グロブリンの能力に影響する残基の解析を可能にする。こうして、枠組み（ＦＲ）残基は、標的抗原（１種若しくは複数）に対する増大された親和性のような所望の抗体の特徴が達成されるように、コンセンサスおよび輸入配列から選択かつ組合せ得る。
【００３８】
加えて、本発明のヒトＩＬ−１２抗体は、ヒト生殖系列Ｌ鎖枠組みを含みうる。特定の態様において、Ｌ鎖生殖系列配列は、限定されるものでないが、Ａ１、Ａ１０、Ａ１１、Ａ１４、Ａ１７、Ａ１８、Ａ１９、Ａ２、Ａ２０、Ａ２３、Ａ２６、Ａ２７、Ａ３、Ａ３０、Ａ５、Ａ７、Ｂ２、Ｂ３、Ｌ１、Ｌ１０、Ｌ１１、Ｌ１２、Ｌ１４、Ｌ１５、Ｌ１６、Ｌ１８、Ｌ１９、Ｌ２、Ｌ２０、Ｌ２２、Ｌ２３、Ｌ２４、Ｌ２５、Ｌ４／１８ａ、Ｌ５、Ｌ６、Ｌ８、Ｌ９、Ｏ１、Ｏ１１、Ｏ１２、Ｏ１４、Ｏ１８、Ｏ２、Ｏ４、およびＯ８を挙げることができるヒトＶＫ配列から選択される。ある態様において、このＬ鎖ヒト生殖系列枠組みは、Ｖ１−１１、Ｖ１−１３、Ｖ１−１６、Ｖ１−１７、Ｖ１−１８、Ｖ１−１９、Ｖ１−２、Ｖ１−２０、Ｖ１−２２、Ｖ１−３、Ｖ１−４、Ｖ１−５、Ｖ１−７、Ｖ１−９、Ｖ２−１、Ｖ２−１１、Ｖ２−１３、Ｖ２−１４、Ｖ２−１５、Ｖ２−１７、Ｖ２−１９、Ｖ２−６、Ｖ２−７、Ｖ２−８、Ｖ３−２、Ｖ３−３、Ｖ３−４、Ｖ４−１、Ｖ４−２、Ｖ４−３、Ｖ４−４、Ｖ４−６、Ｖ５−１、Ｖ５−２、Ｖ５−４、およびＶ５−６から選択される。
【００３９】
他の態様において、本発明のヒトＩＬ−１２抗体は、ヒト生殖系列Ｈ鎖枠組みを含みうる。特定の態様において、このＨ鎖ヒト生殖系列枠組みは、ＶＨ１−１８、ＶＨ１−２、ＶＨ１−２４、ＶＨ１−３、ＶＨ１−４５、ＶＨ１−４６、ＶＨ１−５８、ＶＨ１−６９、ＶＨ１−８、ＶＨ２−２６、ＶＨ２−５、ＶＨ２−７０、ＶＨ３−１１、ＶＨ３−１３、ＶＨ３−１５、ＶＨ３−１６、ＶＨ３−２０、ＶＨ３−２１、ＶＨ３−２３、ＶＨ３−３０、ＶＨ３−３３、ＶＨ３−３５、ＶＨ３−３８、ＶＨ３−４３、ＶＨ３−４８、ＶＨ３−４９、ＶＨ３−５３、ＶＨ３−６４、ＶＨ３−６６、ＶＨ３−７、ＶＨ３−７２、ＶＨ３−７３、ＶＨ３−７４、ＶＨ３−９、ＶＨ４−２８、ＶＨ４−３１、ＶＨ４−３４、ＶＨ４−３９、ＶＨ４−４、ＶＨ４−５９、ＶＨ４−６１、ＶＨ５−５１、ＶＨ６−１およびＶＨ７−８１から選択される。
【００４０】
特定の態様において、Ｌ鎖可変領域および／若しくはＨ鎖可変領域は、枠組み領域若しくは枠組み領域の少なくとも一部分を含んでなる（例えばＦＲ２およびＦＲ３のような２若しくは３個の下位領域を含有する）。ある態様において、少なくともＦＲＬ１、ＦＲＬ２、ＦＲＬ３若しくはＦＲＬ４は完全にヒトである。他の態様において、少なくともＦＲＨ１、ＦＲＨ２、ＦＲＨ３若しくはＦＲＨ４は完全にヒトである。いくつかの態様において、少なくともＦＲＬ１、ＦＲＬ２、ＦＲＬ３若しくはＦＲＬ４は、生殖系列配列（例えばヒト生殖系列）であるか、または、特定の枠組みのヒトコンセンサス配列（上述された既知のヒトＩｇ配列の供給源で容易に入手可能）を含んでなる。他の態様において、少なくともＦＲＨ１、ＦＲＨ２、ＦＲＨ３若しくはＦＲＨ４は、生殖系列配列（例えばヒト生殖系列）であるか、または、特定の枠組みのヒトコンセンサス配列を含んでなる。好ましい態様において、枠組み領域は完全にヒトの枠組み領域である。
【００４１】
本発明の抗体のヒト化若しくは工作は、限定されるものでないがＷｉｎｔｅｒ（Ｊｏｎｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３（１９８８）；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４（１９８８））、Ｓｉｍｓら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２９６（１９９３）；ＣｈｏｔｈｉａとＬｅｓｋ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１（１９８７）、Ｃａｒｔｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８９：４２８５（１９９２）；Ｐｒｅｓｔａら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２６２３（１９９３）、米国特許第５，７２３，３２３号、同第５，９７６，８６２号、同第５，８２４，５１４号、同第５，８１７，４８３号、同第５，８１４，４７６号、同第５，７６３，１９２号、同第５，７２３，３２３号、同第５，７６６，８８６号、同第５，７１４，３５２号、同第６，２０４，０２３号、同第６，１８０，３７０号、同第５，６９３，７６２号、同第５，５３０，１０１号、同第５，５８５，０８９号、同第５，２２５，５３９号；同第４，８１６，５６７号、ＰＣＴ／：第ＵＳ９８／１６２８０号、同第ＵＳ９６／１８９７８号、同第ＵＳ９１／０９６３０号、同第ＵＳ９１／０５９３９号、同第ＵＳ９４／０１２３４号、同第ＧＢ８９／０１３３４号、同第ＧＢ９１／０１１３４号、同第ＧＢ９２／０１７５５号；第ＷＯ９０／１４４４３号、第ＷＯ９０／１４４２４号、第ＷＯ９０／１４４３０号、第ＥＰ  ２２９２４６号明細書（それぞれそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）、その中で引用される包含される参考文献に記述されるものを挙げることができる、いずれかの既知の方法を使用して実施し得る。
【００４２】
ある態様において、該抗体は変えられた（例えば突然変異された）Ｆｃ領域を含んでなる。例えば、いくつかの態様において、Ｆｃ領域は抗体のエフェクター機能を低下するか若しくは高めるように変えられている。いくつかの態様において、Ｆｃ領域はＩｇＭ、Ｉ
ｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＥ若しくは他のアイソタイプから選択されるアイソタイプである。あるいは、若しくは加えて、アミノ酸改変を、ＩＬ−１２結合分子のＦｃ領域のＣ１ｑ結合および／若しくは補体依存性の細胞傷害機能を変える１個若しくはそれ以上のさらなるアミノ酸改変と組合せることが有用でありうる。特定の目的の出発ポリペプチドは、Ｃ１ｑに結合しかつ補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を表すものでありうる。場合によってはＣＤＣを媒介する能力をさらに有する、既存のＣ１ｑ結合活性をもつポリペプチドを、これらの活性の一方若しくは双方が高められるように改変しうる。Ｃ１ｑを変えかつ／若しくはその補体依存性細胞傷害機能を改変するアミノ酸改変は、例えば、第ＷＯ００４２０７２号明細書（これにより引用することにより組み込まれる）に記述されている。
【００４３】
上で開示されるとおり、例えばＣ１ｑ結合および／若しくはＦｃγＲ結合を改変しかつそれにより補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）活性および／若しくは抗体依存性の細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）活性を変化させることにより、変えられたエフェクター機能をもつ本発明のヒトＩＬ−１２抗体のＦｃ領域を設計し得る。「エフェクター機能」は、（例えば被験体における）生物学的活性を活性化若しくは低下させる原因である。エフェクター機能の例は、限定されるものでないが：Ｃ１ｑ結合；ＣＤＣ；Ｆｃ受容体結合；ＡＤＣＣ；食作用；細胞表面受容体（例えばＢ細胞受容体；ＢＣＲ）の下方制御などを挙げることができる。こうしたエフェクター機能は、Ｆｃ領域が結合ドメイン（例えば抗体可変ドメイン）と結合されることを必要とすることがあり、そして多様なアッセイ（例えばＦｃ結合アッセイ、ＡＤＣＣアッセイ、ＣＤＣアッセイなど）を使用して評価し得る。
【００４４】
例えば、改良されたＣ１ｑ結合および改良されたＦｃγＲＩＩＩ結合を伴う（例えば、改良されたＡＤＣＣ活性および改良されたＣＤＣ活性双方を有する）ヒトＩＬ−１２抗体のバリアントＦｃ領域を生成し得る。あるいは、エフェクター機能が低下若しくは排除されることが望ましい場合は、低下されたＣＤＣ活性および／若しくは低下されたＡＤＣＣ活性を伴うバリアントＦｃ領域を工作し得る。他の態様において、これらの活性の１種のみを増大させることができ、そして、場合によってはまた他の活性も低下させうる（例えば、改良されたＡＤＣＣ活性、しかし低下されたＣＤＣ活性をもつ、およびその逆を伴うＦｃ領域バリアントを生成させるため）。
【００４５】
Ｆｃ突然変異は、新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）とのそれらの相互作用を変えかつそれらの薬物動態特性を改良するための工作においてもまた導入し得る。ＦｃＲｎへの改良された結合を伴うヒトＦｃバリアントの集合物が記述されている（Ｓｈｉｅｌｄｓら、（２００１）．Ｈｉｇｈ  ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｍａｐｐｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｓｉｔｅ  ｏｎ  ｈｕｍａｎ  ＩｇＧ１  ｆｏｒ  ＦｃγＲＩ，ＦｃγＲＩＩ，ＦｃγＲＩＩＩ，ａｎｄ  ＦｃＲｎ  ａｎｄ  ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  ＩｇＧ１  ｖａｒｉａｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｔｏ  ｔｈｅ  ＦｃγＲ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：６５９１−６６０４）。
【００４６】
別の型のアミノ酸置換は、ヒトＩＬ−１２抗体のＦｃ領域のグリコシル化パターンを変えるようにはたらく。Ｆｃ領域のグリコシル化は、典型的にはＮ結合若しくはＯ結合のいずれかである。Ｎ結合は、アスパラギン残基の側鎖への炭水化物部分の結合を指す。Ｏ結合グリコシル化は、ヒドロキシアミノ酸、最も一般的にはセリン若しくはトレオニンへの糖、Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース若しくはキシロースの１種の結合を指すとは言え、５−ヒドロキシプロリン若しくは５−ヒドロキシリシンもまた使用しうる。アスパラギン側鎖ペプチド配列への炭水化物部分の酵素的結合のための認識配列は、アスパラギン−Ｘ−セリンおよびアスパラギン−Ｘ−トレオニンであり、式中Ｘはプロリンを除くいずれかのアミノ酸である。従って、ポリペプチド中のこれらのペプチド配列のいずれの存在も、潜在的グリコシル化部位を創製する。
【００４７】
グリコシル化パターンは、例えば、ポリペプチド中で見出される１個若しくはそれ以上のグリコシル化部位を欠失すること、および／または該ポリペプチド中に存在しない１個若しくはそれ以上のグリコシル化部位を付加することにより変えることができる。ヒトＩＬ−１２抗体のＦｃ領域へのグリコシル化部位の付加は、それが上述されたトリペプチド配列（Ｎ結合グリコシル化部位について）の１個若しくはそれ以上を含有するようなアミノ酸配列を変えることにより便宜的に達成される。例示的一グリコシル化バリアントは、Ｈ鎖の残基Ａｓｎ  ２９７のアミノ酸置換を有する。該変化は、元のポリペプチドの配列への１個若しくはそれ以上のセリン若しくはトレオニン残基の付加、またはそれらによる置換によってもまた作成しうる（Ｏ結合グリコシル化部位について）。加えて、Ａｓｎ  ２９７のＡｌａへの変化はグリコシル化部位の１個を除去し得る。
【００４８】
ある態様において、本発明のヒトＩＬ−１２抗体は、β（１，４）−Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ（ＧｎＴ  ＩＩＩ）がヒトＩＬ−１２抗体にＧｌｃＮＡｃを付加するような、ＧｎＴ  ＩＩＩを発現する細胞で発現される。こうした様式での抗体の製造方法は、第ＷＯ／９９５４３４２号、第ＷＯ／０３０１１８７８号、特許公開第２００３０００３０９７Ａ１号明細書、およびＵｍａｎａら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１７：１７６−１８０、Ｆｅｂ．１９９９（それらの全部はそっくりそのまま引用することにより本明細書にとりわけ組み込まれる）に提供される。
【００４９】
抗ＩＬ−１２抗体は、本明細書に記述されかつ／若しくは当該技術分野で既知のところの、ヒト抗体のレパートリーを産生することが可能なトランスジェニック動物（例えばマウス、ラット、ハムスター、ヒト以外の霊長類など）の免疫化によってもまた、場合によっては生成し得る。ヒト抗ＩＬ−１２抗体を産生する細胞は、本明細書に記述される方法のような適する方法を使用して、こうした動物から単離しかつ不死化し得る。
【００５０】
ヒト抗原に結合するヒト抗体のレパートリーを産生し得るトランスジェニックマウスは、既知の方法（限定されるものでないが、Ｌｏｎｂｅｒｇらに交付された米国特許第５，７７０，４２８号、同第５，５６９，８２５号、同第５，５４５，８０６号、同第５，６２５，１２６号、同第５，６２５，８２５号、同第５，６３３，４２５号、同第５，６６１，０１６号および同第５，７８９，６５０号；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓら  第ＷＯ  ９８／５０４３３号、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓら  第ＷＯ  ９８／２４８９３号、Ｌｏｎｂｅｒｇら  第ＷＯ  ９８／２４８８４号、Ｌｏｎｂｅｒｇら  第ＷＯ  ９７／１３８５２号、Ｌｏｎｂｅｒｇら  第ＷＯ  ９４／２５５８５号、Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｅら  第ＷＯ  ９６／３４０９６号、Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｅら  第ＥＰ  ０４６３  １５１  Ｂ１号、Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｅら  第ＥＰ  ０７１０  ７１９  Ａ１号、Ｓｕｒａｎｉら  米国特許第５，５４５，８０７号、Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎら  第ＷＯ  ９０／０４０３６号、Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎら  第ＥＰ  ０４３８  ４７４  Ｂ１号、Ｌｏｎｂｅｒｇら  第ＥＰ  ０８１４  ２５９  Ａ２号、Ｌｏｎｂｅｒｇら  第ＧＢ  ２  ２７２  ４４０  Ａ号明細書、Ｌｏｎｂｅｒｇら  Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：８５６−８５９（１９９４）、Ｔａｙｌｏｒら、Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６（４）５７９−５９１（１９９４）、Ｇｒｅｅｎら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ７：１３−２１（１９９４）、Ｍｅｎｄｅｚら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  １５：１４６−１５６（１９９７）、Ｔａｙｌｏｒら、Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２０（２３）：６２８７−６２９５（１９９２）、Ｔｕａｉｌｌｏｎら、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ９０（８）３７２０−３７２４（１９９３）、Ｌｏｎｂｅｒｇら、Ｉｎｔ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １３（１）：６５−９３（１９９５）ならびにＦｉｓｈｗａｌｄら、Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  １４（７）：８４５−８５１（１９９６）（それぞれそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）を挙げることができる）により製造し得る。一般に、これらのマウスは、機能的に再配列されるか若しくは機能的再配列を受け得る、最低１個のヒト免疫グロブリン遺伝子座からのＤＮＡを含んでなる最低１個の導入遺伝子を含んでなる。こうしたマウス中の内因性免疫グロブリン遺伝子座は、内因性遺伝子によりコードされる抗体を産生する該動物の能力を排除するように破壊若しくは欠失し得る。
【００５１】
類似のタンパク質若しくはフラグメントへの特異的結合についての抗体のスクリーニングは、ペプチドディスプレイライブラリーを使用して便宜的に達成し得る。本方法は、所望の機能若しくは構造を有する個々のメンバーについての、ペプチドの大型の集合物のスクリーニングを必要とする。ペプチドディスプレイライブラリーの抗体スクリーニングは当該技術分野で公知である。表示されるペプチド配列は、長さ３から５０００若しくはそれ以上までのアミノ酸、頻繁に５〜１００アミノ酸長から、およびしばしば約８から２５アミノ酸長までであり得る。ペプチドライブラリーを生成するための直接化学合成法に加え、数種の組換えＤＮＡ法が記述されている。１つの型は、バクテリオファージ若しくは細胞の表面上でのペプチド配列の表示を必要とする。各バクテリオファージ若しくは細胞は、特定の表示されるペプチド配列をコードするヌクレオチド配列を含有する。こうした方法は、ＰＣＴ特許公開第９１／１７２７１号、同第９１／１８９８０号、同第９１／１９８１８号および同第９３／０８２７８号明細書に記述されている。
【００５２】
ペプチドのライブラリーを生成するための他の系は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ化学合成および組換え法の双方の局面を有する。ＰＣＴ特許公開第９２／０５２５８号、同第９２／１４８４３号および同第９６／１９２５６号明細書を参照されたい。米国特許第５，６５８，７５４号；および同第５，６４３，７６８号明細書もまた参照されたい。ペプチドディスプレイライブラリー、ベクター、およびスクリーニングキットは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（カリフォルニア州カールズバッド）およびＣａｍｂｒｉｄｇｅ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（英国ケンブリッジシャー）のような供給元から商業的に入手可能である。例えば、Ｅｎｚｏｎに譲渡された米国特許第４，７０４，６９２号、同第４，９３９，６６６号、同第４，９４６，７７８号、同第５，２６０，２０３号、同第５，４５５，０３０号、同第５，５１８，８８９号、同第５，５３４，６２１号、同第５，６５６，７３０号、同第５，７６３，７３３号、同第５，７６７，２６０号、同第５，８５６，４５６号明細書；Ｄｙａｘに譲渡された同第５，２２３，４０９号、同第５，４０３，４８４号、同第５，５７１，６９８号、同第５，８３７，５００号明細書、Ａｆｆｙｍａｘに譲渡された同第５，４２７，９０８号、同第５，５８０，７１７号明細書；Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓに譲渡された同第５，８８５，７９３号；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈに譲渡された同第５，７５０，３７３号明細書、Ｘｏｍａに譲渡された同第５，６１８，９２０号、同第５，５９５，８９８号、同第５，５７６，１９５号、同第５，６９８，４３５号、同第５，６９３，４９３号、同第５，６９８，４１７号、Ｃｏｌｌｉｇａｎ、上記；Ａｕｓｕｂｅｌ、上記；若しくはＳａｍｂｒｏｏｋ、上記（上の特許および刊行物のそれぞれはそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）を参照されたい。
【００５３】
本発明の抗体は、それらの乳中にこうした抗体を産生する、ヤギ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ウサギなどのようなトランスジェニック動物若しくは哺乳動物を提供するための最低１種の抗ＩＬ−１２抗体をコードする核酸を使用してもまた製造し得る。こうした動物は既知の方法を使用して提供し得る。例えば、限定されるものでないが、米国特許第５，８２７，６９０号；同第５，８４９，９９２号；同第４，８７３，３１６号；同第５，８４９，９９２号；同第５，９９４，６１６号；同第５，５６５，３６２号；同第５，３０４，４８９号明細書など（それらのそれぞれはそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）を参照されたい。
【００５４】
本発明の抗体は、付加的には、植物部分若しくはそれらから培養された細胞中でこうした抗体、指定される部分若しくはバリアントを産生する、トランスジェニック植物および
培養植物細胞（限定されるものでないがタバコおよびトウモロコシを挙げることができる）を提供するための最低１種の抗ＩＬ−１２抗体をコードする核酸を使用して製造し得る。制限しない一例として、組換えタンパク質を発現するトランスジェニックタバコ葉が、例えば誘導可能なプロモーターを使用して大量の組換えタンパク質を提供するのに成功裏に使用されている。例えば、Ｃｒａｍｅｒら、Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｉｃｒｏｂｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４０：９５−１１８（１９９９）およびその中で引用される参考文献を参照されたい。また、トランスジェニックトウモロコシが、他の組換え系で産生若しくは天然の供給源から精製されたものに同等の生物学的活性をもつ哺乳動物タンパク質を商業生産レベルで発現するのに使用されている。例えば、Ｈｏｏｄら、Ａｄｖ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．４６４：１２７−１４７（１９９９）およびその中で引用される参考文献を参照されたい。抗体は、タバコ種子およびバレイショ塊茎を包含する、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）のような抗体フラグメントを包含するトランスジェニック植物種子からもまた大量で産生されている。例えばＣｏｎｒａｄら、Ｐｌａｎｔ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３８：１０１−１０９（１９９８）およびその中で引用される参考文献を参照されたい。従って、本発明の抗体は、既知の方法により、トランスジェニック植物を使用してもまた製造し得る。例えば、Ｆｉｓｃｈｅｒら、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．３０：９９−１０８（Ｏｃｔ．，１９９９）、Ｍａら、Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１３：５２２−７（１９９５）；Ｍａら、Ｐｌａｎｔ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．１０９：３４１−６（１９９５）；Ｗｈｉｔｅｌａｍら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓ．２２：９４０−９４４（１９９４）；およびその中で引用される参考文献もまた参照されたい。上の参考文献のそれぞれは、そっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる。
【００５５】
本発明の抗体は、広範な親和性（ＫＤ）でヒトＩＬ−１２を結合し得る。好ましい一態様において、本発明の最低１種のヒトｍＡｂは、場合によってはヒトＩＬ−１２を高親和性で結合し得る。例えば、ヒトｍＡｂは、限定されるものでないが０．１〜９．９（またはその中のいずれかの範囲若しくは値）×１０−７、１０−８、１０−９、１０−１０、１０−１１、１０−１２、１０−１３またはその中のいずれかの範囲若しくは値を挙げることができる、約１０−７Ｍに等しいか若しくはそれ未満のＫＤでヒトＩＬ−１２を結合し得る。
【００５６】
抗原に対する抗体の親和性（ａｆｆｉｎｉｔｙ）若しくは親和性（ａｖｉｄｉｔｙ）は、いずれかの適する方法を使用して実験的に決定し得る。（例えば、Ｂｅｒｚｏｆｓｋｙら、“Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ａｎｔｉｇｅｎ  Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ、”Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ“、Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．編、Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ：ニューヨーク州ニューヨーク（１９８４）中；Ｋｕｂｙ，Ｊａｎｉｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ：ニューヨーク州ニューヨーク（１９９２）；および本明細書に記述される方法を参照されたい）。特定の抗体−抗原相互作用の測定される親和性は、異なる条件（例えば塩濃度、ｐＨ）下で測定される場合に変動し得る。従って、親和性および他の抗原結合パラメータ（例えばＫＤ、Ｋａ、Ｋｄ）の測定は、好ましくは、抗体および抗原の標準化された溶液、ならびに本明細書に記述される緩衝液のような標準化された緩衝液を用いて行う。
【００５７】
核酸分子
本明細書に提供される情報を使用して、例えば、本明細書に開示される配列のなかでも配列番号１、２、３、４、５、６、７、８のＬ若しくはＨ鎖可変若しくはＣＤＲ領域の最低１種の連続するアミノ酸の最低７０〜１００％をコードするヌクレオチド配列、それらの指定されるフラグメント、バリアント若しくはコンセンサス配列、またはこれらの配列の最低１種を含んでなる寄託されたベクター、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体をコードする本発明の核酸分子を、本明細書に記述されるか若しくは当該技術分野で既知のところの方
法を使用して得ることができる。
【００５８】
本発明の核酸分子は、ｍＲＮＡ、ｈｎＲＮＡ、ｔＲＮＡ若しくはいずれかの他の形態のようなＲＮＡの形態、または、限定されるものでないが、クローニングにより得られるか若しくは合成で製造されるｃＤＮＡおよびゲノムＤＮＡを挙げることができるＤＮＡの形態、あるいはそれらのいずれかの組合せであり得る。ＤＮＡは三本鎖、二本鎖若しくは一本鎖、またはそれらのいずれかの組合せであり得る。ＤＮＡ若しくはＲＮＡの最低１本の鎖のいずれかの部分が、センス鎖としてもまた知られるコーディング鎖であることができるか、若しくは、それは、アンチセンス鎖ともまた称される非コーディング鎖であり得る。
【００５９】
本発明の単離された核酸分子は、場合によっては、１個若しくはそれ以上のイントロン、例えば、限定されるものでないが最低１本のＨ鎖（例えば配列番号１〜３）若しくはＬ鎖（例えば配列番号４〜６）のＣＤＲ１、ＣＤＲ２および／若しくはＣＤＲ３のような最低１個のＣＤＲの最低１個の指定された部分を含む１個のオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）を含んでなる核酸分子；抗ＩＬ−１２抗体若しくは可変領域（例えば配列番号７および８のＬおよびＨ鎖可変領域）のコーディング配列を含んでなる核酸分子；ならびに、上述されたものと実質的に異なるヌクレオチド配列を含んでなるが、しかし遺伝暗号の縮重により本明細書に記述されかつ／若しくは当該技術分野で既知のところの最低１種の抗ＩＬ−１２抗体をなおコードする核酸分子を包含し得る。もちろん、遺伝暗号は当該技術分野で公知である。従って、本発明の特定の抗ＩＬ−１２抗体をコードするこうした縮重核酸バリアントを生成することは、当業者に慣例であるとみられる。例えばＡｕｓｕｂｅｌら、上記を参照されたい。そして、こうした核酸バリアントは本発明に包含される。本発明の単離された核酸分子の制限しない例は、それぞれ、ＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２、ＨＣ  ＣＤＲ３、ＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２およびＬＣ  ＣＤＲ３をコードする核酸を包含する。
【００６０】
本明細書で指定されるところの、抗ＩＬ−１２抗体をコードする核酸を含んでなる本発明の核酸分子は、限定されるものでないが、独力で抗体フラグメントのアミノ酸配列をコードするもの；抗体全体若しくはその一部分のコーディング配列；抗体、フラグメント若しくは部分のコーディング配列、ならびに、限定されるものでないが、転写、スプライシングを包含するｍＲＮＡプロセシングにおいてある役割を演じる（例えばｍＲＮＡのリボソーム結合および安定性）転写され翻訳されない配列、ならびにポリアデニル化シグナルのような非コーディング５’および３’配列を挙げることができる付加的な非コーディング配列と一緒になった最低１個のイントロンのような前述の付加的なコーディング配列を伴う若しくは伴わない、最低１個のシグナルリーダー若しくは融合ペプチドのコーディング配列のような付加的な配列；付加的な機能性を提供するもののような付加的なアミノ酸をコードする付加的なコーディング配列を挙げることができる。従って、抗体をコードする配列を、抗体フラグメント若しくは部分を含んでなる融合された抗体の精製を容易にするペプチドをコードする配列のようなマーカー配列に融合し得る。
【００６１】
本明細書に記述されるところのポリヌクレオチドに選択的にハイブリダイズするポリヌクレオチド
本発明は、選択的ハイブリダイゼーション条件下で、本明細書に開示されるポリヌクレオチドにハイブリダイズする単離された核酸を提供する。従って、本態様のポリヌクレオチドは、こうしたポリヌクレオチドを含んでなる核酸を単離、検出かつ／若しくは定量するのに使用し得る。例えば、本発明のポリヌクレオチドは、寄託されたライブラリー中の部分的若しくは完全長クローンを同定、単離若しくは増幅するのに使用し得る。いくつかの態様において、ポリヌクレオチドは、ヒト若しくは哺乳動物核酸ライブラリーから単離されたか若しくはそれらからのｃＤＮＡに別の方法で相補的なゲノム若しくはｃＤＮＡ配
列である。
【００６２】
好ましくは、ｃＤＮＡライブラリーは、最低８０％の完全長の配列、好ましくは最低８５％若しくは９０％の完全長配列、およびより好ましくは最低９５％の完全長配列を含んでなる。ｃＤＮＡライブラリーは、まれな配列の表示を増大させるように正規化し得る。低若しくは中程度の緊縮性のハイブリダイゼーション条件が、典型的に（しかし独占的でなく）、相補配列に関して低下された配列同一性を有する配列とともに使用される。中程度および高緊縮性条件は、場合によっては、より大きな同一性の配列に使用し得る。低緊縮性条件は、約７０％の配列同一性を有する配列の選択的ハイブリダイゼーションを可能にし、また、オルソロガス若しくはパラロガス配列を同定するのに使用し得る。
【００６３】
場合によっては、本発明のポリヌクレオチドは、本明細書に記述されるポリヌクレオチドによりコードされる抗体の少なくとも一部分をコードすることができる。本発明のポリヌクレオチドは、本発明の抗体をコードするポリヌクレオチドへの選択的ハイブリダイゼーションに使用し得る核酸配列を包含する。例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ、上記；Ｃｏｌｌｉｇａｎ、上記（それぞれそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）を参照されたい。
【００６４】
核酸の構築
本発明の単離された核酸は、当該技術分野で公知のところの（ａ）組換え法、（ｂ）合成技術、（ｃ）精製技術、および／若しくは（ｄ）それらの組合せを使用して作成し得る。
【００６５】
該核酸は、便宜的に、本発明のポリヌクレオチドに加えて配列を含み得る。例えば、１個若しくはそれ以上のエンドヌクレアーゼ制限部位を含んでなるマルチクローニング部位を、ポリヌクレオチドの単離で補助するために該核酸に挿入し得る。また、翻訳可能な配列を、本発明の翻訳されたポリヌクレオチドの単離で補助するために挿入し得る。例えば、ヘキサヒスチジンマーカー配列は、本発明のタンパク質を精製するための便宜的手段を提供する。コーディング配列を除外する本発明の核酸は、場合によっては、本発明のポリヌクレオチドのクローニングおよび／若しくは発現のためのベクター、アダプター若しくはリンカーである。
【００６６】
付加的な配列を、クローニングおよび／若しくは発現でのそれらの機能を至適化するか、該ポリヌクレオチドの単離で補助するか、または該ポリヌクレオチドの細胞中への導入を改善するために、こうしたクローニングおよび／若しくは発現配列に付加し得る。クローニングベクター、発現ベクター、アダプターおよびリンカーの使用は当該技術分野で公知である（例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ、上記；若しくはＳａｍｂｒｏｏｋ、上記を参照されたい）。
【００６７】
核酸の組換え構築方法
ＲＮＡ、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ若しくはそれらのいずれかの組合せのような、本発明の単離された核酸の組成物は、当業者に既知のいずれかの数のクローニングの方法論を使用して、生物学的供給源から得ることができる。いくつかの態様において、緊縮性条件下で本発明のポリヌクレオチドに選択的にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドプローブを、ｃＤＮＡ若しくはゲノムＤＮＡライブラリー中の所望の配列を同定するのに使用する。ＲＮＡの単離、ならびにｃＤＮＡおよびゲノムライブラリーの構築は当業者に公知である（例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ、上記；若しくはＳａｍｂｒｏｏｋ、上記を参照されたい）。
【００６８】
核酸のスクリーニングおよび単離方法
ｃＤＮＡ若しくはゲノムライブラリーを、本明細書に開示されるもののような、本発明のポリヌクレオチドの配列に基づくプローブを使用してスクリーニングし得る。ゲノムＤＮＡ若しくはｃＤＮＡ配列とハイブリダイズさせて同一若しくは異なる生物体中の相同な遺伝子を単離するためにプローブを使用し得る。当業者は、ハイブリダイゼーションの多様な程度の緊縮性をアッセイで使用し得ることを認識するであろう。そして、ハイブリダイゼーション若しくは洗浄媒体のいずれも緊縮性であり得る。ハイブリダイゼーションの条件がより緊縮性になる際に、二重鎖形成が起こるために、プローブと標的の間のより大きな程度の相補性が存在しなければならない。緊縮性の程度は、温度、イオン強度、ｐＨ、およびホルムアミドのような部分的に変性する溶媒の存在の１種若しくはそれ以上により制御し得る。例えば、ハイブリダイゼーションの緊縮性は、例えば０％ないし５０％の範囲内のホルムアミドの濃度の操作により反応体溶液の極性を変えることにより便宜的に変動させる。検出可能な結合に必要とされる相補性（配列同一性）の程度は、ハイブリダイゼーション媒体および／若しくは洗浄媒体の緊縮性に従って変動することができる。相補性の程度は、至適には１００％、若しくは７０〜１００％、またはその中のいずれかの範囲若しくは値であることができる。しかしながら、プローブおよびプライマー中の小さな配列の変動は、ハイブリダイゼーションおよび／若しくは洗浄媒体の緊縮性を低下させることにより補償し得ることが理解されるべきである。
【００６９】
ＲＮＡ若しくはＤＮＡの増幅方法は当該技術分野で公知であり、そして、本明細書に提示される教示および手引きに基づき、過度の実験を伴わずに、本発明により使用し得る。
【００７０】
ＤＮＡ若しくはＲＮＡの既知の増幅方法は、限定されるものでないが、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）および関連増幅過程（例えば、Ｍｕｌｌｉｓらへの米国特許第４，６８３，１９５号、同第４，６８３，２０２号、同第４，８００，１５９号、同第４，９６５，１８８号；Ｔａｂｏｒらへの同第４，７９５，６９９号および同第４，９２１，７９４号；Ｉｎｎｉｓへの同第５，１４２，０３３号；Ｗｉｌｓｏｎらへの同第５，１２２，４６４号；Ｉｎｎｉｓへの同第５，０９１，３１０号；Ｇｙｌｌｅｎｓｔｅｎらへの同第５，０６６，５８４号；Ｇｅｌｆａｎｄらへの同第４，８８９，８１８号；Ｓｉｌｖｅｒらへの同第４，９９４，３７０号；Ｂｉｓｗａｓへの同第４，７６６，０６７号；Ｒｉｎｇｏｌｄへの同第４，６５６，１３４号明細書を参照されたい）、ならびに二本鎖ＤＮＡ合成の鋳型として標的配列に対するアンチセンスＲＮＡを使用するＲＮＡ媒介性増幅（Ｍａｌｅｋらへの米国特許第５，１３０，２３８号明細書、商標ＮＡＳＢＡをもつ）（これらの参考文献の内容全体は引用することにより本明細書に組み込まれる）を挙げることができる。（Ａｕｓｕｂｅｌ、上記；若しくはＳａｍｂｒｏｏｋ、上記を参照されたい）。
【００７１】
例えば、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）技術を使用して、本発明のポリヌクレオチドおよび関連する遺伝子の配列をゲノムＤＮＡ若しくはｃＤＮＡライブラリーから直接増幅し得る。ＰＣＲおよび他のｉｎ  ｖｉｔｒｏ増幅方法は、例えば、発現されるべきタンパク質をコードする核酸配列をクローン化するため、サンプル中の所望のｍＲＮＡの存在を検出するためのプローブとして使用するための核酸を作成するため、核酸配列決定のため、若しくは他の目的上もまた有用であり得る。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ増幅方法により当業者を指図するのに十分な技術の例は、Ｂｅｒｇｅｒ、上記、Ｓａｍｂｒｏｏｋ、上記およびＡｕｓｕｂｅｌ、上記、ならびにＭｕｌｌｉｓら、米国特許第４，６８３，２０２号（１９８７）；およびＩｎｎｉｓら、ＰＣＲ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  Ａ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ、編、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ  Ｉｎｃ．、カリフォルニア州サンディエゴ（１９９０）に見出される。ゲノムＰＣＲ増幅のための商業的に入手可能なキットが当該技術分野で既知である。例えば、Ａｄｖａｎｔａｇｅ−ＧＣゲノムＰＣＲキット（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）を参照されたい。加えて、例えばＴ４遺伝子３２タンパク質（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｍａｎｎｈｅｉｍ）を、長いＰＣＲ産物の収量を向上させるために使用し得る。
【００７２】
核酸の合成構築方法
本発明の単離された核酸は、既知の方法（例えば、Ａｕｓｕｂｅｌら、上記を参照されたい）による直接化学合成によってもまた製造し得る。化学合成は、一般に一本鎖オリゴヌクレオチドを生じ、それは、相補配列とのハイブリダイゼーション、若しくは鋳型として該一本鎖を使用するＤＮＡポリメラーゼでの重合により、二本鎖ＤＮＡに転化し得る。当業者は、ＤＮＡの化学合成は約１００若しくはそれ以上の塩基の配列に制限され得る一方、より長い配列がより短い配列の連結により得ることができることを認識するであろう。
【００７３】
組換え発現カセット
本発明は、さらに、本発明の核酸を含んでなる組換え発現カセットを提供する。本発明の核酸配列、例えば本発明の抗体をコードするｃＤＮＡ若しくはゲノム配列を、最低１種の所望の宿主細胞中に導入し得る組換え発現カセットを構築するのに使用し得る。組換え発現カセットは、典型的に、意図している宿主細胞中での該ポリヌクレオチドの転写を指図することができる転写開始制御配列に作動可能に連結された本発明のポリヌクレオチドを含むことができる。異種および非異種（すなわち内因性）双方のプロモーターを、本発明の核酸の発現を指図するのに使用し得る。
【００７４】
いくつかの態様において、プロモーター、エンハンサー若しくは他の要素としてはたらく単離された核酸を、本発明のポリヌクレオチドの発現を上方若しくは下方制御するように、非異種の形態の本発明のポリヌクレオチドの適切な位置（上流、下流、若しくはイントロン中）に導入し得る。例えば、内因性プロモーターを、突然変異、欠失および／若しくは置換によりｉｎ  ｖｉｖｏ若しくはｉｎ  ｖｉｔｒｏで変えることができる。
【００７５】
ベクターおよび宿主細胞
本発明は、本発明の単離された核酸分子を包含するベクター、組換えベクターで遺伝子的に工作されている宿主細胞、および当該技術分野で公知であるところの組換え技術による最低１種の抗ＩＬ−１２抗体の製造法にもまた関する。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら、上記；Ａｕｓｕｂｅｌら、上記（それぞれそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）を参照されたい。
【００７６】
ポリヌクレオチドは、場合によっては、宿主中での増殖についての選択可能なマーカーを含有するベクターに結合し得る。一般に、プラスミドベクターは、リン酸カルシウム沈殿物のような沈殿物で、若しくは荷電した脂質との複合体で導入する。ベクターがウイルスである場合、それは、適切なパッケージング細胞株を使用してｉｎ  ｖｉｔｒｏでパッケージングし得、そしてその後宿主細胞に形質導入し得る。
【００７７】
ＤＮＡ挿入物は、適切なプロモーターに効果的に連結すべきである。発現構築物は、転写開始、終止のための部位、および転写された領域中に翻訳のためのリボソーム結合部位をさらに含有することができる。該構築物により発現された成熟転写物のコーディング部分は、好ましくは、翻訳されるべきｍＲＮＡの始めの翻訳開始、および終わりに適切に配置された終止コドン（例えばＵＡＡ、ＵＧＡ若しくはＵＡＧ）を包含することができ、ＵＡＡおよびＵＡＧが哺乳動物若しくは真核生物細胞発現に好ましい。
【００７８】
発現ベクターは、好ましくは、しかし、場合によっては、最低１個の選択可能なマーカーを包含することができる。こうしたマーカーは、例えば、限定されるものでないが、真核生物細胞培養物について、メトトレキサート（ＭＴＸ）、ジヒドロ葉酸還元酵素（ＤＨＦＲ、米国特許第４，３９９，２１６号；同第４，６３４，６６５号；同第４，６５６，１３４号；同第４，９５６，２８８号；同第５，１４９，６３６号；同第５，１７９，０１７号明細書、アンピシリン、ネオマイシン（Ｇ４１８）、ミコフェノール酸若しくはグルタミン合成酵素（ＧＳ、米国特許第５，１２２，４６４号；同第５，７７０，３５９号；同第５，８２７，７３９号明細書）耐性、ならびに大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）および他の細菌若しくは原核生物で培養するためのテトラサイクリン若しくはアンピシリン耐性遺伝子を挙げることができる（上の特許は、そっくりそのまま引用することによりここに組み込まれる）。上述された宿主細胞についての適切な培地および培養条件は当該技術分野で既知である。適するベクターは当業者に容易に明らかであろう。ベクター構築物の宿主細胞への導入は、リン酸カルシウムトランスフェクション、ＤＥＡＥ−デキストラン媒介性トランスフェクション、陽イオン性脂質媒介性トランスフェクション、電気穿孔法、形質導入、感染若しくは他の既知の方法により遂げることができる。こうした方法は、Ｓａｍｂｒｏｏｋ、上記、第１〜４および１６〜１８章；Ａｕｓｕｂｅｌ、上記、第１、９、１３、１５、１６章のような、当該技術分野で記述されている。
【００７９】
本発明の最低１種の抗体は、融合タンパク質のような改変された形態で発現され得、そして、分泌シグナルのみならずしかしまた付加的な異種機能領域もまた包含し得る。例えば、付加的なアミノ酸、とりわけ荷電したアミノ酸の１領域を、精製の間、若しくはその後の取扱および保存の間の宿主細胞中での安定性および持続性を改善するために、抗体のＮ末端に付加し得る。また、ペプチド部分を、精製を容易にするために本発明の抗体に付加し得る。こうした領域は、抗体若しくはその最低１フラグメントの最終精製の前に除去し得る。こうした方法は、Ｓａｍｂｒｏｏｋ、上記、第１７．２９〜１７．４２および１８．１〜１８．７４章；Ａｕｓｕｂｅｌ、上記、第１６、１７および１８章のような、多くの標準的実験室手引書に記述されている。
【００８０】
当業者は、本発明のタンパク質をコードする核酸の発現に利用可能な多数の発現系をよく知っている。あるいは、本発明の核酸は、本発明の抗体をコードする内因性ＤＮＡを含有する宿主細胞中で（操作により）スイッチを入れることにより宿主細胞中で発現させ得る。こうした方法は、例えば米国特許第５，５８０，７３４号、同第５，６４１，６７０号、同第５，７３３，７４６号および同第５，７３３，７６１号明細書（そっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）に記述されるとおり、当該技術分野で公知である。
【００８１】
哺乳動物細胞が、該抗体、それらの指定される部分若しくはバリアントの製造に有用な細胞培養物を具体的に説明する。哺乳動物細胞系は、しばしば、細胞の単層の形態にあることができるとは言え、哺乳動物細胞懸濁液若しくはバイオリアクターもまた使用し得る。無傷のグリコシル化タンパク質を発現することが可能な多数の適する宿主細胞株が当該技術分野で開発されており、そして、ＣＯＳ−１（例えばＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １６５０）、ＣＯＳ−７（例えばＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１６５１）、ＨＥＫ２９３、ＢＨＫ２１（例えばＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１０）、ＣＨＯ（例えばＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １６１０）およびＢＳＣ−１（例えばＡＴＣＣ  ＣＲＬ−２６）細胞株、Ｃｏｓ−７細胞、ＣＨＯ細胞、ｈｅｐ  Ｇ２細胞、Ｐ３Ｘ６３Ａｇ８．６５３、ＳＰ２／０−Ａｇ１４、２９３細胞、ＨｅＬａ細胞などを包含し、それらは例えばＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、バージニア州マナサス（ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ）から容易に入手可能である。好ましい宿主細胞は、骨髄腫およびリンパ腫細胞のようなリンパ系起源の細胞を包含する。とりわけ好ましい宿主細胞は、Ｐ３Ｘ６３Ａｇ８．６５３細胞（ＡＴＣＣ受託番号ＣＲＬ−１５８０）およびＳＰ２／０−Ａｇ１４細胞（ＡＴＣＣ受託番号ＣＲＬ−１５８１）である。とりわけ好ましい一態様において、組換え細胞はＰ３Ｘ６３Ａｂ８．６５３若しくはＳＰ２／０−Ａｇ１４細胞である。
【００８２】
これらの細胞のための発現ベクターは、限定されるものでないが、複製起点；プロモーター（例えば後期若しくは初期ＳＶ４０プロモーター、ＣＭＶプロモーター（米国特許第
５，１６８，０６２号；同第５，３８５，８３９号明細書）、ＨＳＶ  ｔｋプロモーター、ｐｇｋ（ホスホグリセリン酸キナーゼ）プロモーター、ＥＦ−１αプロモーター（米国特許第５，２６６，４９１号明細書）、最低１種のヒト免疫グロブリンプロモーター；エンハンサー、ならびに／または、リボソーム結合部位、ＲＮＡスプライス部位、ポリアデニル化部位（例えばＳＶ４０  ラージＴ  ＡｇポリＡ付加部位）のようなプロセシング情報部位、ならびに転写終止配列を挙げることができる、発現制御配列の１個若しくはそれ以上を包含し得る。例えば、Ａｕｓｕｂｅｌら、上記；Ｓａｍｂｒｏｏｋら、上記を参照されたい。本発明の核酸若しくはタンパク質の製造に有用な他の細胞は既知であり、かつ／若しくは、例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎの細胞株およびハイブリドーマのカタログ（Ｃａｔａｌｏｇｕｅ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  Ｌｉｎｅｓ  ａｎｄ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ）（ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ）または他の既知の若しくは商業的供給源から入手可能である。
【００８３】
真核生物宿主細胞を使用する場合、ポリアデニル化若しくは転写終止配列が典型的にベクターに組み込まれる。終止配列の一例は、ウシ成長ホルモン遺伝子からのポリアデニル化配列である。転写物の正確なスプライシングのための配列もまた包含し得る。スプライシング配列の一例は、ＳＶ４０からのＶＰ１イントロンである（Ｓｐｒａｇｕｅら、Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．４５：７７３−７８１（１９８３））。加えて、当該技術分野で既知のとおり、宿主細胞中での複製を制御するための遺伝子配列をベクターに組込み得る。
【００８４】
抗体の精製
抗ＩＬ−１２抗体は、限定されるものでないが、プロテインＡ精製、硫酸アンモニウム若しくはエタノール沈殿、酸抽出、陰イオン若しくは陽イオン交換クロマトグラフィー、ホスホセルロースクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィーおよびレクチンクロマトグラフィーを挙げることができる公知の方法により、組換え細胞培養物から回収かつ精製し得る。高速液体クロマトグラフィー（「ＨＰＬＣ」）もまた精製に使用し得る。例えば、Ｃｏｌｌｉｇａｎ、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、若しくはＣｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、ニューヨーク州ニューヨーク（１９９７−２００１）、例えば第１、４、６、８、９、１０章（それぞれそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）を参照されたい。
【００８５】
本発明の抗体は、天然に精製される生成物、化学合成手順の生成物、ならびに例えば酵母、高等植物、昆虫および哺乳動物細胞を包含する真核生物宿主から組換え技術により製造された生成物を包含する。組換え製造手順で使用される宿主に依存して、本発明の抗体はグリコシル化され得るか若しくはグリコシル化されないことができ、グリコシル化が好ましい。こうした方法は、Ｓａｍｂｒｏｏｋ、上記、第１７．３７〜１７．４２節；Ａｕｓｕｂｅｌ、上記、第１０、１２、１３、１６、１８および２０章、Ｃｏｌｌｉｇａｎ、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、上記、第１２〜１４章（全部はそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）のような、多くの標準的実験室手引書に記述されている。
【００８６】
抗ＩＬ−１２抗体。
本発明の抗ＩＬ−１２抗体は、限定されるものでないが、本発明の抗体に組込み得る、限定されるものでないがＨ若しくはＬ鎖の相補性決定領域（ＣＤＲ）またはそれらのリガンド結合部分を挙げることができる最低１種のリガンド結合部分（ＬＢＰ）、Ｈ鎖若しくはＬ鎖可変領域、枠組み領域（例えば、最低１個の置換、挿入若しくは欠失をさらに場合によっては含んでなる、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、ＦＲ４若しくはそれらのフラグメント）、Ｈ鎖若しくはＬ鎖定常領域（例えば、最低１個の置換、挿入若しくは欠失をさらに場合によっては含んでなる、最低１個のＣＨ１、ヒンジ１、ヒンジ２、ヒンジ３、ヒンジ４、ＣＨ２若しくはＣＨ３またはそれらのフラグメントを含んでなる）、あるいはそれらのいずれかの部分を挙げることができる、免疫グロブリン分子の少なくとも一部分を含んでなる、いかなるタンパク質若しくはペプチド含有分子も包含する。本発明の抗体は、限定されるものでないが、ヒト、マウス、ウサギ、ラット、げっ歯類、霊長類若しくはそれらのいずれかの組合せなどを挙げることができる、いかなる哺乳動物も包含し得るか、若しくはそれら由来であり得る。
【００８７】
本発明の単離された抗体は、いずれかの適するポリヌクレオチドによりコードされる、本明細書に開示される抗体アミノ酸配列、またはいずれかの単離若しくは製造された抗体を含んでなる。好ましくは、ヒト抗体若しくは抗原結合フラグメントはヒトＩＬ−１２を結合し、そして、それにより、該タンパク質の最低１種の生物学的活性を部分的に若しくは実質的に中和する。最低１種のＩＬ−１２タンパク質若しくはフラグメントの最低１種の生物学的活性を部分的に若しくは好ましくは実質的に中和する抗体またはその指定される部分若しくはバリアントは、該タンパク質若しくはフラグメントを結合し得、かつ、それにより、ＩＬ−１２のＩＬ−１２受容体への結合または他のＩＬ−１２依存性若しくは媒介性の機構により媒介される活性を阻害する。本明細書で使用されるところの「抗体を中和すること」という用語は、ＩＬ−１２依存性の活性を、アッセイに依存して約２０〜１２０％、好ましくは最低約１０、２０、３０、４０、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００％若しくはそれ以上阻害し得る抗体を指す。ＩＬ−１２依存性の活性を阻害する抗ＩＬ−１２抗体の能力は、好ましくは、本明細書に記述されかつ／若しくは当該技術分野で既知のところの最低１種の適するＩＬ−１２タンパク質若しくは受容体アッセイにより評価される。本発明のヒト抗体は、いずれのクラス（ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＤなど）若しくはアイソタイプのものでもあり得、そしてκ若しくはλ  Ｌ鎖を含み得る。一態様において、ヒト抗体は、ＩｇＧ  Ｈ鎖若しくは定義されるフラグメント、例えばアイソタイプＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３若しくはＩｇＧ４（例えばγ１、γ２、γ３、γ４）の最低１種を含んでなる。このタイプの抗体は、本明細書に記述されかつ／若しくは当該技術分野で既知のところの、最低１種のヒトＬ鎖（例えばＩｇＧ、ＩｇＡおよびＩｇＭ）導入遺伝子を含んでなるトランスジェニックマウス若しくは他のトランスジェニックのヒト以外の哺乳動物を使用することにより製造し得る。別の態様において、抗ヒトＩＬ−１２ヒト抗体は、ＩｇＧ１  Ｈ鎖およびＩｇＧ１  Ｌ鎖を含んでなる。
【００８８】
本発明の最低１種の抗体は、最低１種のＩＬ−１２タンパク質、サブユニット、フラグメント、部分若しくはそれらのいずれかの組合せに特異的な最低１個の指定されるエピトープを結合する。該最低１個のエピトープは、該タンパク質の少なくとも一部分を含んでなる最低１個の抗体結合領域を含み得、このエピトープは、好ましくは該タンパク質の最低１種の細胞外、可溶性、親水性、外的若しくは細胞質部分より構成される。該最低１個の指定されるエピトープは、配列番号９の連続するアミノ酸の最低１〜３アミノ酸ないし指定された部分全体の最低１種のアミノ酸配列、例えばアミノ酸残基１５、１７−２１、２３、４０−４３、４５−４７、５４−５６および５８−６２のいかなる組合せも含み得る。
【００８９】
一般に、本発明のヒト抗体若しくは抗原結合フラグメントは、最低１種のＨ鎖可変領域の最低１個のヒト相補性決定領域（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３）若しくはバリアント、ならびに、最低１種のＬ鎖可変領域の最低１個のヒト相補性決定領域（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３）若しくはバリアントを含んでなる、抗原結合領域を含むことができる。ＣＤＲ配列は、ヒト生殖系列配列由来でありうるか、若しくは、生殖系列配列に緊密に一致しうる。例えば、元のヒト以外のＣＤＲ由来の合成ライブラリーからのＣＤＲを使用し得る。これらのＣＤＲは、元のヒト以外配列からの保存的置換の組込みにより形
成されうる。制限しない一例として、抗体若しくは抗原結合部分またはバリアントは、配列番号１〜３よりなる群から選択される一アミノ酸配列を有するＨ鎖ＣＤＲ３、および／若しくは配列番号４〜６よりなる群から選択される一アミノ酸配列を有するＬ鎖ＣＤＲ３の最低１種を含み得る。特定の一態様において、抗体若しくは抗原結合フラグメントは、対応するＣＤＲ１、２および／若しくは３（例えば配列番号１、２および／若しくは３）のアミノ酸配列を有する最低１個のＨ鎖ＣＤＲ（すなわちＣＤＲ１、ＣＤＲ２および／若しくはＣＤＲ３）の少なくとも一部分を含んでなる抗原結合領域を有し得る。別の特定の態様において、抗体若しくは抗原結合部分またはバリアントは、対応するＣＤＲ１、２および／若しくは３のアミノ酸配列を有する最低１個のＬ鎖ＣＤＲ（すなわちＣＤＲ１、ＣＤＲ２および／若しくはＣＤＲ３）の少なくとも一部分を含んでなる抗原結合領域を有し得る。
【００９０】
こうした抗体は、慣習的技術を使用して抗体の多様な部分（例えばＣＤＲ、枠組み）を化学的に一緒に結合することにより、組換えＤＮＡ技術の慣習的技術を使用して、抗体をコードするある（すなわち１種若しくはそれ以上の）核酸分子を製造かつ発現することにより、またはいずれかの他の適する方法により、製造し得る。
【００９１】
抗ＩＬ−１２抗体は、定義されるアミノ酸配列を有するＨ若しくはＬ鎖可変領域の最低１種を含み得る。例えば、好ましい一態様において、抗ＩＬ−１２抗体は、配列番号７のアミノ酸配列を場合によっては有する最低１種のＨ鎖可変領域、および／若しくは配列番号８のアミノ酸配列を場合によっては有する最低１種のＬ鎖可変領域の少なくとも一方を含んでなる。ヒトＩＬ−１２に結合しかつ定義されるＨ若しくはＬ鎖可変領域を含んでなる抗体は、当該技術分野で既知かつ／若しくは本明細書に記述されるところの、ファージディスプレイ（Ｋａｔｓｕｂｅ，Ｙ．ら、Ｉｎｔ  Ｊ  Ｍｏｌ．Ｍｅｄ、１（５）：８６３−８６８（１９９８））、若しくはトランスジェニック動物を使用する方法のような適する方法を使用して製造し得る。例えば、機能的に再配列されたヒト免疫グロブリンＨ鎖導入遺伝子、および機能的再配列を受け得るヒト免疫グロブリンＬ鎖遺伝子座からのＤＮＡを含んでなる導入遺伝子を含んでなるトランスジェニックマウスを、抗体の産生を導き出すため、ヒトＩＬ−１２若しくはそのフラグメントで免疫し得る。所望の場合は、抗体産生細胞を単離し得、そして、ハイブリドーマ若しくは他の不死化抗体産生細胞を、本明細書に記述されかつ／若しくは当該技術分野で既知のとおり製造し得る。あるいは、抗体、指定される部分若しくはバリアントは、適する宿主細胞中でコードする核酸若しくはその部分を使用して発現させ得る。
【００９２】
本発明は、本明細書に記述されるアミノ酸配列と実質的に同一である配列のアミノ酸を含んでなる抗体、抗原結合フラグメント、免疫グロブリン鎖およびＣＤＲにもまた関する。好ましくは、こうした抗体若しくは抗原結合フラグメント、およびこうした鎖若しくはＣＤＲを含んでなる抗体は、高親和性（例えば約１０−９Ｍ未満若しくはそれに等しいＫＤ）でヒトＩＬ−１２を結合し得る。本明細書に記述される配列と実質的に同一であるアミノ酸配列は、保存的アミノ酸置換、ならびにアミノ酸欠失および／若しくは挿入を含んでなる配列を包含する。保存的アミノ酸置換は、第一のアミノ酸のものに類似である化学および／若しくは物理特性（例えば電荷、構造、極性、疎水性／親水性）を有する第二のアミノ酸による第一のアミノ酸の置換を指す。保存的置換は、以下の群、すなわちリシン（Ｋ）、アルギニン（Ｒ）およびヒスチジン（Ｈ）；アスパラギン酸（Ｄ）およびグルタミン酸（Ｅ）；アスパラギン（Ｎ）、グルタミン（Ｑ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、チロシン（Ｙ）、Ｋ、Ｒ、Ｈ、ＤおよびＥ；アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）、イソロイシン（Ｉ）、プロリン（Ｐ）、フェニルアラニン（Ｆ）、トリプトファン（Ｗ）、メチオニン（Ｍ）、システイン（Ｃ）およびグリシン（Ｇ）；Ｆ、ＷおよびＹ；Ｃ、ＳおよびＴ内の１アミノ酸の別のものによる置換を制限なしに包含する。
【００９３】
アミノ酸記号
本発明の抗ＩＬ−１２抗体を構成するアミノ酸はしばしば略記される。アミノ酸の呼称は、当該技術分野で十分に理解されるところの、その一文字記号、その三文字記号、名称若しくは３ヌクレオチドコドン（１種若しくは複数）により該アミノ酸を指示することにより示し得る（Ａｌｂｅｒｔｓ，Ｂ．ら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｔｈｅ  Ｃｅｌｌ、第３版、Ｇａｒｌａｎｄ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｉｎｃ．、ニューヨーク、１９９４を参照されたい）。
【００９４】
【表１】
2008523842.tif 000003
【００９５】
本発明の抗ＩＬ−１２抗体は、天然の突然変異若しくは本明細書に明記されるところの人的操作いずれかからの１個若しくはそれ以上のアミノ酸置換、欠失若しくは付加を包含し得る。
【００９６】
当業者が行いうるアミノ酸置換の数は、上述されたものを包含する多くの因子に依存する。一般的に言って、いずれかの所定の抗ＩＬ−１２抗体、フラグメント若しくはバリアントのアミノ酸置換、挿入若しくは欠失の数は、本明細書に明記されるところの、１〜３０またはその中のいずれかの範囲若しくは値のような、４０、３０、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、１を越えないことができる。
【００９７】
機能上不可欠である、本発明の抗ＩＬ−１２抗体中のアミノ酸は、部位特異的突然変異誘発若しくはアラニン走査突然変異誘発のような、当該技術分野で既知の方法により同定し得る（例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ、上記、第８、１５章；ＣｕｎｎｉｎｇｈａｍとＷｅｌｌｓ、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４４：１０８１−１０８５（１９８９））。後者の手順は、分子中のすべての残基に単一アラニン突然変異を導入する。生じる変異体分子をその後、限
定されるものでないが最低１種のＩＬ−１２中和活性を挙げることができる生物学的活性について試験する。抗体結合に決定的に重要である部位は、結晶化、核磁気共鳴若しくは光親和性標識のような構造解析によってもまた同定し得る（Ｓｍｉｔｈら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２４：８９９−９０４（１９９２）およびｄｅ  Ｖｏｓら、Ｓｃｉｅｎｃｅ
２５５：３０６−３１２（１９９２））。ＩＬ−１２結合に関与するＩＬ−１２ｐ４０抗体上の残基は、ＩＬ−１２抗体およびＩＬ−１２  ｐ４０抗原の共結晶構造に基づき同定された。これらを下の表５に示す。
【００９８】
本発明の抗ＩＬ−１２抗体は、限定されるものでないが、配列番号１、２、３、４、５、６の最低１種の連続するアミノ酸の５ないし全部から選択される最低１種の部分、配列若しくは組合せを挙げることができる。
【００９９】
本発明のＩＬ−１２抗体または指定される部分若しくはバリアントは、限定されるものでないが、配列番号１の最低３〜５の連続するアミノ酸、配列番号２の５〜７の連続するアミノ酸、配列番号３の５〜１０の連続するアミノ酸、配列番号４の５〜１１の連続するアミノ酸、配列番号５の５〜７の連続するアミノ酸；配列番号６の５〜９の連続するアミノ酸；配列番号７のＬｅｕ２１、Ｌｙｓ７６、Ｍｅｔ８３、Ｓｅｒ８５から選択される最低１種の部分、配列若しくは組合せを挙げることができる。
【０１００】
抗ＩＬ−１２抗体は、配列番号１、２、３、４、５、６、７若しくは８の最低１種の５、１７、１０、１１、７、１９、１１９若しくは１０８の連続するアミノ酸の７０〜１００％の最低１種のポリペプチドをさらに場合によっては含み得る。一態様において、免疫グロブリン鎖若しくはその部分（例えば可変領域、ＣＤＲ）のアミノ酸配列は、配列番号１、２、３、４、５、６、７若しくは８の最低１種の対応する鎖のアミノ酸配列に対する約７０〜１００％の同一性（例えば、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、またはその中のいずれかの範囲若しくは値）を有する。例えば、Ｌ鎖可変領域のアミノ酸配列を、配列番号４、５、６若しくは８の配列と比較し得るか、または、Ｈ鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列を配列番号１、２、３若しくは７と比較し得る。好ましくは、７０〜１００％のアミノ酸同一性（すなわち９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００またはその中のいずれかの範囲若しくは値）を、当該技術分野で既知のところの適するコンピュータアルゴリズムを使用して決定する。
【０１０１】
当該技術分野で既知のところの「同一性」は、配列を比較することにより決定されるところの、２種若しくはそれ以上のポリペプチド配列または２種若しくはそれ以上のポリヌクレオチド配列間の関係である。当該技術分野で、「同一性」は、一連のこうした配列の間の一致により決定されるところの、ポリペプチド若しくはポリヌクレオチド配列間の配列の関連性の程度もまた意味している。「同一性」および「類似性」は、限定されるものでないが、Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｌｅｓｋ、Ａ．Ｍ．編、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ、ニューヨーク、１９８８；Ｂｉｏｃｏｍｐｕｔｉｎｇ：Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｐｒｏｊｅｃｔｓ、Ｓｍｉｔｈ，Ｄ．Ｗ．編．、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、ニューヨーク、１９９３；Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｄａｔａ、Ｐａｒｔ  Ｉ、Ｇｒｉｆｆｉｎ，Ａ．Ｍ．とＧｒｉｆｆｉｎ，Ｈ．Ｇ．編、Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ、ニュージャージー、１９９４；Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、ｖｏｎ  Ｈｅｉｎｊｅ，Ｇ．、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、１９８７；およびＳｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｐｒｉｍｅｒ、Ｇｒｉｂｓｋｏｖ，Ｍ．とＤｅｖｅｒｅｕｘ，Ｊ．編、Ｍ  Ｓｔｏｃｋｔｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、ニューヨーク、１９９１；ならびにＣａｒｉｌｌｏ，Ｈ．とＬｉｐｍａｎ，Ｄ．、Ｓｉａｍ  Ｊ．Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｍａｔｈ．、４８：１０７３（１９８８）に記述されているものを挙げることができる既知の方法により、容易に計算し得る。加えて、同一性パーセントの値は、Ｖｅｃｔｏｒ  ＮＴＩ  Ｓｕｉｔｅ  ８．０（Ｉｎｆｏｒｍａｘ、メリーランド州フレデリック）のＡｌｉｇｎＸコンポーネントについてのデフォルト設定を使用して生成されるアミノ酸およびヌクレオチド配列アライメントから得ることができる。
【０１０２】
同一性の好ましい決定方法は、試験される配列間の最大の一致を与えるよう設計される。同一性および類似性の決定方法は、公的に入手可能なコンピュータプログラムに体系化されている。２配列間の同一性および類似性の好ましいコンピュータプログラム決定方法は、限定されるものでないが、ＧＣＧプログラムパッケージ（Ｄｅｖｅｒｅｕｘ，Ｊ．ら、Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １２（１）：３８７（１９８４））、ＢＬＡＳＴＰ、ＢＬＡＳＴＮおよびＦＡＳＴＡ（Ａｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．Ｆ．ら、Ｊ．Ｍｏｌｅｃ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−４１０（１９９０））を挙げることができる。ＢＬＡＳＴ  Ｘプログラムは、ＮＣＢＩおよび他の供給源から公的に入手可能である（ＢＬＡＳＴ  Ｍａｎｕａｌ、Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．ら、ＮＣＢＩＮＬＭ  ＮＩＨ  Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．２０８９４：Ａｌｔｓｃｈｕｌ，Ｓ．ら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−４１０（１９９０）。公知のＳｍｉｔｈ  Ｗａｔｅｒｍａｎのアルゴリズムもまた、同一性を決定するのに使用しうる。
【０１０３】
ポリペプチド配列比較のための好ましいパラメータは以下を包含する。すなわち、
（１）アルゴリズム：ＮｅｅｄｌｅｍａｎとＷｕｎｓｃｈ、Ｊ．Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．４８：４４３−４５３（１９７０）  比較マトリックス（Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｍａｔｒｉｘ）：ＨｅｎｔｉｋｏｆｆとＨｅｎｔｉｋｏｆｆ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ，ＵＳＡ．８９：１０９１５−１０９１９（１９９２）からのＢＬＯＳＳＵＭ６２
ギャップペナルティ（Ｇａｐ  Ｐｅｎａｌｔｙ）：１２
ギャップ長ペナルティ（Ｇａｐ  Ｌｅｎｇｔｈ  Ｐｅｎａｌｔｙ）：４
これらのパラメータを用いて有用なプログラムは、Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ
Ｇｒｏｕｐ、ウィスコンシン州マディソンから「ｇａｐ」プログラムとして公的に入手可能である。前述のパラメータは、ペプチド配列比較のためのデフォルトのパラメータである（末端ギャップについてペナルティなしと一緒に）。
【０１０４】
ポリヌクレオチド比較のための好ましいパラメータは以下を包含する。すなわち
（１）アルゴリズム：ＮｅｅｄｌｅｍａｎとＷｕｎｓｃｈ、Ｊ．Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．４８：４４３−４５３（１９７０）
比較マトリックス（Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｍａｔｒｉｘ）：一致（ｍａｔｃｈｅｓ）＝＋１０、不一致（ｍｉｓｍａｔｃｈ）＝０
ギャップペナルティ（Ｇａｐ  Ｐｅｎａｌｔｙ）：５０
ギャップ長ペナルティ（Ｇａｐ  Ｌｅｎｇｔｈ  Ｐｅｎａｌｔｙ）：３
Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ、ウィスコンシン州マディソンから「ｇａｐ」プログラムとして入手可能。これらは、核酸配列比較のためのデフォルトのパラメータである。
【０１０５】
例として、ポリヌクレオチド配列は、あるポリヌクレオチドに同一でありうる、すなわち１００％同一であるか、若しくは、それは、参照配列に比較して、ある整数までのヌクレオチド変化を包含しうる。こうした変化は、最低１個のヌクレオチド欠失、転移および塩基転換を包含する置換、若しくは挿入よりなる群から選択され、かつ、該変化は、参照ヌクレオチド配列の５’若しくは３’末端位置、あるいは、参照配列中のヌクレオチド間で個別にまたは参照配列内の１個若しくはそれ以上の群のいずれかに散在される、それらの末端位置の間のどこかで発生しうる。ヌクレオチド変化の数は、比較されるべき配列中
のヌクレオチドの総数を、それぞれの同一性パーセントの数値パーセント（１００により除算される）により乗算すること、およびその積を配列番号Ａ中のヌクレオチドの総数から差し引くことにより決定する。すなわち、
ｎ．ｓｕｂ．ｎ．１ｔｏｒｓｉｍ．ｘ．ｓｕｂ．ｎ−（ｘ．ｓｕｂ．ｎ．ｙ）、
式中、ｎ．ｓｕｂ．ｎはヌクレオチド変化の数であり、ｘ．ｓｕｂ．ｎは配列番号Ａ中のヌクレオチドの総数であり、そして、ｙは、例えば７０％について０．７０、８０％について０．８０、８５％について０．８５、９０％について０．９０、９５％について０．９５などであり、また、式中、ｘ．ｓｕｂ．ｎおよびｙのいかなる整数でない積も、ｘ．ｓｕｂ．ｎから差し引く前に、最も近い整数に切り捨てる。
【０１０６】
配列番号７のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列の変化は、本コーディング配列中でナンセンス、ミスセンス若しくはフレームシフト突然変異を創製することができ、そしてそれによりこうした変化後に該ポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチドを変えうる。同様に、あるポリペプチド配列は、配列番号７の参照配列に同一でありうる、すなわち１００％同一でありうるか、若しくは、それは、同一性パーセントが１００％未満であるような、参照配列に比較して、ある整数までのアミノ酸変化を包含しうる。こうした変化は、最低１個のアミノ酸欠失、保存的および非保存的置換を包含する置換、若しくは挿入よりなる群から選択され、また、該変化は、参照ポリペプチド配列のアミノ若しくはカルボキシ末端位置、あるいは、参照配列中のアミノ酸間で個別にまたは参照配列内の１個若しくはそれ以上の連続する群のいずれかに散在される、それらの末端位置間のどこかで発生しうる。所定の同一性％についてのアミノ酸変化の数は、配列番号７のアミノ酸の総数を、それぞれの同一性パーセントの数値パーセント（１００により除算される）により乗算すること、およびその後、配列番号７のアミノ酸の総数からその積を差し引くことにより決定する。すなわち
ｎ．ｓｕｂ．ａ．１ｔｏｒｓｉｍ．ｘ．ｓｕｂ．ａ−（ｘ．ｓｕｂ．ａ．ｙ）、
式中、ｎ．ｓｕｂ．ａはアミノ酸変化の数であり、ｘ．ｓｕｂ．ａは配列番号７のアミノ酸の総数であり、そして、ｙは、例えば７０％について０．７０、８０％について０．８０、８５％について０．８５などであり、また、式中、ｘ．ｓｕｂ．ａおよびｙのいかなる整数でない積も、それをｘ．ｓｕｂ．ａから差し引く前に、最も近い整数に切り捨てる。
【０１０７】
例示的Ｈ鎖およびＬ鎖可変領域配列ならびにそれらの部分を配列番号１〜８に提供する。本発明の抗体、若しくはそれらの指定されるバリアントは、本発明の抗体からのいずれかの数の連続するアミノ酸残基を含み得、その数は、抗ＩＬ−１２抗体中の連続する残基の数の１０〜１００％からよりなる整数の群から選択される。場合によっては、連続するアミノ酸のこの下位配列は、長さが最低約１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０若しくはそれ以上またはその中のいずれかの範囲若しくは値のアミノ酸である。さらに、こうした下位配列の数は、最低２、３、４若しくは５のような、１から２０までよりなる群から選択されるいかなる整数でもあり得る。
【０１０８】
当業者が認識するであろうとおり、本発明は、本発明の最低１種の生物学的に活性の抗体を包含する。生物学的に活性の抗体は、天然の（合成でない）、内因性の若しくは関係する、かつ既知の抗体の比活性の最低２０％、３０％若しくは４０％、および好ましくは最低５０％、６０％若しくは７０％、ならびに最も好ましくは最低８０％、９０％若しくは９５％〜１００％またはそれ以上（該比活性の１０倍までを制限なしに包含する）の比活性を有する。酵素活性および基質特異性のアッセイおよびそれらの尺度の定量方法は当業者に公知である。
【０１０９】
どのタンパク質、抗体および他のアンタゴニストが、本発明の抗体とＩＬ−１２ｐ４０への結合について競合しかつ／若しくはエピトープ領域を共有するかを決定するために、本発明の抗体を用いて競合アッセイを実施し得る。当業者に容易に既知のところのこれらのアッセイは、あるタンパク質、例えばｐ４０上の制限された数の結合部位についてのアンタゴニスト若しくはリガンド間の競合を評価する。タンパク質および／若しくは抗体を、競合の前若しくは後に固定若しくは不溶化し、そして、ｐ４０サブユニットに結合したサンプルを、例えばデカンテーションすること（タンパク質／抗体を前不溶化した場合）若しくは遠心分離すること（タンパク質／抗体を競合反応後に沈殿させた場合）により、未結合のサンプルから分離する。また、競合結合は、タンパク質への抗体の結合若しくは結合の欠如により機能が変えられるかどうか、例えば、抗体分子が例えば標識の酵素活性を阻害するか若しくは増強するかどうかにより、決定しうる。当該技術分野で公知のところの、ＥＬＩＳＡおよび他の機能アッセイを使用しうる。
【０１１０】
別の局面において、本発明は、有機部分の共有結合により改変される、本明細書に記述されるところのヒト抗体および抗原結合フラグメントに関する。こうした改変は、改良された薬物動態特性（例えば増大されたｉｎ  ｖｉｖｏ血清半減期）をもつ抗体若しくは抗原結合フラグメントを生じ得る。有機部分は、直鎖若しくは分枝状の親水性ポリマー基、脂肪酸基若しくは脂肪酸エステル基であり得る。特定の態様において、親水性ポリマー基は約８００ないし約１２０，０００ダルトンの分子量を有し得、そして、ポリアルキレングリコール（例えばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ））、炭水化物ポリマー、アミノ酸ポリマー若しくはポリビニルピロリドンであり得、そして、脂肪酸若しくは脂肪酸エステル基は約８から約４０個までの炭素原子を含み得る。
【０１１１】
本発明の改変された抗体および抗原結合フラグメントは、抗体に直接若しくは間接的に共有結合されている１個若しくはそれ以上の有機部分を含み得る。本発明の抗体若しくは抗原結合フラグメントに結合されている各有機部分は、独立に、親水性ポリマー基、脂肪酸基若しくは脂肪酸エステル基であり得る。本明細書で使用されるところの「脂肪酸」という用語はモノカルボン酸およびジカルボン酸を包含する。該用語が本明細書で使用されるところの「親水性ポリマー基」は、オクタン中より水中でより溶解性である有機ポリマーを指す。例えば、ポリリシンはオクタン中より水中でより溶解性である。従って、ポリリシンの共有結合により改変された抗体は、本発明により包含される。本発明の抗体を改変するのに適する親水性ポリマーは、直鎖若しくは分枝状であり得、そして、例えば、ポリアルキレングリコール（例えばＰＥＧ、モノメトキシ−ポリエチレングリコール（ｍＰＥＧ）、ＰＰＧなど）、炭水化物（例えばデキストラン、セルロース、オリゴ糖、多糖など）、親水性アミノ酸のポリマー（例えばポリリシン、ポリアルギニン、ポリアスパラギン酸など）、ポリアルキレンオキシド（例えばポリエチレンオキシド、ポリプロピレンオキシドなど）、およびポリビニルピロリドンを包含し得る。好ましくは、本発明の抗体を改変する親水性ポリマーは、別個の分子実体として約８００ないし約１５０，０００ダルトンの分子量を有する。例えば、ＰＥＧ５０００およびＰＥＧ２０，０００（ここで下付き文字はダルトンでのポリマーの平均分子量である）を使用し得る。親水性ポリマー基は、１ないし約６個のアルキル、脂肪酸若しくは脂肪酸エステル基で置換し得る。脂肪酸若しくは脂肪酸エステル基で置換されている親水性ポリマーは、適する方法を使用することにより製造し得る。例えば、アミン基を含んでなるポリマーを、脂肪酸若しくは脂肪酸エステルのカルボキシレートに結合し得、そして、脂肪酸若しくは脂肪酸エステル上の活性化されたカルボキシレート（例えば、Ｎ，Ｎ−カルボニルジイミダゾールで活性化された）を、ポリマー上のヒドロキシル基に結合し得る。
【０１１２】
本発明の抗体を改変するのに適する脂肪酸および脂肪酸エステルは飽和であり得るか、または１個若しくはそれ以上の不飽和単位を含有し得る。本発明の抗体を改変するのに適
する脂肪酸は、例えば、ｎ−ドデカノエート（Ｃ１２、ラウレート）、ｎ−テトラデカノエート（Ｃ１４、ミリステート）、ｎ−オクタデカノエート（Ｃ１８、ステアレート）、ｎ−エイコサノエート（Ｃ２０、アラキデート）、ｎ−ドコサノエート（Ｃ２２、ベヘネート）、ｎ−トリアコンタノエート（Ｃ３０）、ｎ−テトラコンタノエート（Ｃ４０）、ｃｉｓ−Δ９−オクタデカノエート（Ｃ１８、オレエート）、全ｃｉｓ−Δ５，８，１１，１４−エイコサテトラエノエート（Ｃ２０、アラキドネート）、オクタン二酸、テトラデカン二酸、オクタデカン二酸、ドコサン二酸などを包含する。適する脂肪酸エステルは、直鎖若しくは分枝状低級アルキル基を含んでなるジカルボン酸のモノエステルを包含する。低級アルキル基は、１から約１２個まで、好ましくは１ないし約６個の炭素原子を含み得る。
【０１１３】
改変されたヒト抗体および抗原結合フラグメントは、１種若しくはそれ以上の修飾剤との反応によるような適する方法を使用して製造し得る。該用語が本明細書で使用されるところの「修飾剤」は、活性化基を含んでなる適する有機基（例えば親水性ポリマー、脂肪酸、脂肪酸エステル）を指す。「活性化基」は、適切な条件下で第二の化学基と反応してそれにより修飾剤と第二の化学基の間に共有結合を形成し得る化学部分若しくは官能基である。例えば、アミン反応性活性化基は、トシレート、メシレート、ハロ（クロロ、ブロモ、フルオロ、ヨード）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル（ＮＨＳ）などのような親電子基を包含する。チオールと反応し得る活性化基は、例えば、マレイミド、ヨードアセチル、アクリロリル、ピリジルジスルフィド、５−チオール−２−ニトロ安息香酸チオール（ＴＮＢ−チオール）などを包含する。アルデヒド官能基は、アミン若しくはヒドラジド含有分子に結合し得、また、アジド基は、三価のリン基と反応してホスホルアミデート若しくはホスホルイミド結合を形成し得る。分子への活性化基の適する導入方法は当該技術分野で既知である（例えば、Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ，Ｇ．Ｔ．、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ：カリフォルニア州サンディエゴ（１９９６）を参照されたい）。活性化基は、有機基（例えば親水性ポリマー、脂肪酸、脂肪酸エステル）に直接、またはリンカー部分、例えば１個若しくはそれ以上の炭素原子が酸素、窒素若しくはイオウのようなヘテロ原子により置換され得る二価のＣ１−Ｃ１２基により結合し得る。適するリンカー部分は、例えば、テトラエチレングリコール、−（ＣＨ２）３−、−ＮＨ−（ＣＨ２）６−ＮＨ−、−（ＣＨ２）２−ＮＨ−および−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ−ＮＨ−を包含する。リンカー部分を含んでなる修飾剤は、例えば、モノ−Ｂｏｃ−アルキルジアミン（例えばモノ−Ｂｏｃ−エチレンジアミン、モノ−Ｂｏｃ−ジアミノヘキサン）を、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）の存在下に脂肪酸と反応させて、遊離アミンと脂肪酸のカルボキシレートの間でアミド結合を形成することにより製造し得る。Ｂｏｃ保護基は、一級アミンを露出させるためのトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）での処理により生成物から除去し得、該一級アミンは、記述されるとおり別のカルボキシレートに結合し得るか、若しくは無水マレイン酸と反応させ得、そして生じる生成物を環化させて脂肪酸の活性化マレイミド誘導体を生じさせ得る。（例えば、Ｔｈｏｍｐｓｏｎら、第ＷＯ  ９２／１６２２１号明細書（その教示全体は引用することにより本明細書に組み込まれる）を参照されたい。）
【０１１４】
本発明の改変された抗体は、ヒト抗体若しくは抗原結合フラグメントを修飾剤と反応させることにより製造し得る。例えば、有機部分を、アミン反応性の修飾剤、例えばＰＥＧのＮＨＳエステルを使用することにより、部位非特異的様式で抗体に結合し得る。改変されたヒト抗体若しくは抗原結合フラグメントは、抗体若しくは抗原結合フラグメントのジスルフィド結合（例えば鎖内ジスルフィド結合）を還元することによってもまた製造し得る。還元された抗体若しくは抗原結合フラグメントをその後、チオール反応性の修飾剤と反応させて、本発明の改変された抗体を生じ得る。本発明の抗体の特定の部位に結合されている有機部分を含んでなる改変されたヒト抗体および抗原結合フラグメントは、逆タン
パク質分解（Ｆｉｓｃｈら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．、３：１４７−１５３（１９９２）；Ｗｅｒｌｅｎら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．、５：４１１−４１７（１９９４）；Ｋｕｍａｒａｎら、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉ．６（１０）：２２３３−２２４１（１９９７）；Ｉｔｏｈら、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、２４（１）：５９−６８（１９９６）；Ｃａｐｅｌｌａｓら、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．、５６（４）：４５６−４６３（１９９７））のような適する方法、およびＨｅｒｍａｎｓｏｎ，Ｇ．Ｔ．、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ：カリフォルニア州サンディエゴ（１９９６）に記述される方法を使用して製造し得る。
【０１１５】
抗ＩＬ−１２抗体組成物に対する抗イディオタイプ抗体
モノクローナル抗ＩＬ−１２抗体に加え、本発明は、本発明のこうした抗体に特異的な抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体にもまた向けられる。抗Ｉｄ抗体は、別の抗体の抗原結合領域と一般に会合する独特の抗原決定基を認識する抗体である。抗Ｉｄは、Ｉｄ抗体の供給源と同一の種および遺伝子型（例えばマウス系統）の動物を、該抗体若しくはそのＣＤＲ含有領域で免疫することにより製造し得る。免疫した動物は、免疫抗体のイディオタイプ決定基を認識しかつそれに応答し、そして抗Ｉｄ抗体を産生することができる。抗Ｉｄ抗体は、なお別の動物で免疫応答を誘導していわゆる抗抗Ｉｄ抗体を生じさせるための「免疫原」としてもまた使用しうる。
【０１１６】
本発明は、天然に存在しない組成物、混合物若しくは形態で提供される、本明細書に記述されかつ／若しくは当該技術分野で既知のところの、最低１、最低２、最低３、最低４、最低５、最低６種若しくはそれ以上の抗ＩＬ−１２抗体を含んでなる、最低１種のその抗ＩＬ−１２抗体組成物もまた提供する。こうした組成物は、配列番号７若しくは８の連続するアミノ酸の７０〜１００％よりなる群から選択される抗ＩＬ−１２抗体アミノ酸配列の最低１若しくは２種の完全長、Ｃおよび／若しくはＮ末端欠失バリアント、ドメイン、フラグメント、または指定されるバリアント、あるいはそれらの指定されるフラグメント、ドメイン若しくはバリアントを含んでなる、天然に存在しない組成物を含んでなる。好ましい抗ＩＬ−１２抗体組成物は、本明細書に記述される抗ＩＬ−１２抗体配列、例えば、配列番号１〜６、７若しくは８の７０〜１００％、またはそれらの指定されるフラグメント、ドメイン若しくはバリアントの部分を含有する最低１個のＣＤＲ若しくはＬＢＰのような、最低１若しくは２種の完全長、フラグメント、ドメイン若しくはバリアントを包含する。さらなる好ましい組成物は、例えば、配列番号１〜６、７若しくは８など、またはそれらの指定されるフラグメント、ドメイン若しくはバリアントの７０〜１００％の最低１種の４０〜９９％を含んでなる。こうした組成物のパーセントは、当該技術分野で既知若しくは本明細書に記述されるところの液体、若しくは乾燥溶液、混合物、懸濁液、乳液、粒子、粉末若しくはコロイドとして、重量、容量、濃度、モル濃度、若しくは重量モル濃度でである。
【０１１７】
さらなる治療的有効成分を含んでなる抗体組成物
本発明の抗体組成物は、抗感染症薬、心血管（ＣＶ）系薬、中枢神経系（ＣＮＳ）薬、自律神経系（ＡＮＳ）薬、気道薬、胃腸（ＧＩ）管薬、ホルモン薬、液体若しくは電解質バランスのための薬物、血液学的薬物、抗腫瘍薬、免疫調節薬、眼、耳若しくは鼻の薬物、局所薬、栄養薬などの最低１種から選択される最低１種の化合物若しくはタンパク質の有効量を、場合によってはさらに含み得る。本明細書に提示されるそれぞれの、製剤、適応症、投薬および投与を包含するこうした薬物は、当該技術分野で公知である（例えば、Ｎｕｒｓｉｎｇ  ２００１  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｄｒｕｇｓ、第２１版、Ｓｐｒｉｎｇｈｏｕｓｅ  Ｃｏｒｐ．、ペンシルバニア州スプリングハウス、２００１；Ｈｅａｌｔｈ  Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ’ｓ  Ｄｒｕｇ  Ｇｕｉｄｅ  ２００１、Ｓｈａｎｎｏｎ、Ｗｉｌｓｏｎ、Ｓｔａｎｇ編、Ｐｒｅｎｔｉｃｅ−Ｈａｌｌ，Ｉｎｃ．、ニュージャージー州アッパーサドルリバー；Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ、Ｗｅｌｌｓら編、Ａｐｐｌｅｔｏｎ  ＆  Ｌａｎｇｅ、コネチカット州スタンフォード（それぞれそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）を参照されたい）。
【０１１８】
抗感染症薬は、殺アメーバ薬、または最低１種の抗原虫薬、駆虫薬、抗真菌薬、抗マラリア薬、抗結核薬、若しくは最低１種の抗らい薬、アミノグリコシド、ペニシリン、セファロスポリン、テトラサイクリン、スルホンアミド、フルオロキノロン、抗ウイルス薬、マクロライド抗感染症薬および雑多な抗感染症薬から選択される最低１種であり得る。ＣＶ薬は、変力薬、抗不整脈薬、抗狭心症薬、降圧薬、高脂血症治療薬および雑多な心血管薬から選択される最低１種であり得る。ＣＮＳ薬は、非麻薬性鎮痛薬から選択される最低１種、または、解熱薬、非ステロイド性抗炎症薬、麻薬、若しくは最低１種のオピオイド鎮痛薬、鎮静催眠薬、抗痙攣薬、抗うつ薬、抗不安薬、抗精神病薬、中枢神経系刺激薬、抗パーキンソン病薬および雑多な中枢神経系薬物から選択される最低１種であり得る。ＡＮＳ薬は、コリン作動薬（副交感神経刺激薬）、抗コリン作動薬、アドレナリン作動薬（交感神経刺激薬）、アドレナリン遮断薬（交感神経遮断薬）、骨格筋弛緩薬、および神経筋遮断薬から選択される最低１種であり得る。気道薬は、抗ヒスタミン薬、気管支拡張薬、去痰薬、若しくは最低１種の鎮咳薬、および雑多な気道薬から選択される最低１種であり得る。ＧＩ管薬は、制酸剤、あるいは、最低１種の吸収剤または最低１種の抗鼓腸薬、消化酵素、若しくは最低１種の胆石溶解剤、止瀉薬、緩下剤、制吐剤および抗潰瘍薬から選択される最低１種であり得る。ホルモン薬は、コルチコステロイド、アンドロゲン若しくは最低１種の蛋白同化ステロイド、エストロゲン若しくは最低１種のプロゲスチン、ゴナドトロピン、抗糖尿病薬若しくは最低１種のグルカゴン、甲状腺ホルモン、甲状腺ホルモンアンタゴニスト、下垂体ホルモン、および副甲状腺様薬物から選択される最低１種であり得る。液体および電解質バランスのための薬物は、利尿薬、電解質若しくは最低１種の補充溶液（ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）、酸化剤若しくは最低１種のアルカリ化剤から選択される最低１種であり得る。血液学的薬物は、造血剤、抗凝固薬、血液製剤および血栓溶解酵素から選択される最低１種であり得る。抗腫瘍薬は、アルキル化薬、代謝拮抗薬、抗生物質性抗腫瘍薬、ホルモンバランスを変える抗腫瘍薬、および雑多な抗腫瘍薬から選択される最低１種であり得る。免疫調節薬は、免疫抑制剤、ワクチン若しくは最低１種の類毒素、抗毒素若しくは最低１種の抗蛇毒素、免疫血清、および生物学的応答調節物質から選択される最低１種であり得る。眼、耳および鼻の薬物は、眼科用抗感染症薬、眼科用抗炎症薬、縮瞳薬、散瞳薬、眼科用血管収縮薬、雑多な眼、耳および鼻の薬物から選択される最低１種であり得る。局所薬は、局所抗感染症薬、抗疥癬薬若しくは最低１種の殺シラミ薬、または局所コルチコステロイドから選択される最低１種であり得る。栄養薬は、ビタミン、ミネラル若しくはカロリーから選択される最低１種であり得る。例えば、Ｎｕｒｓｉｎｇ  ２００１  Ｄｒｕｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ、上記の内容を参照されたい。
【０１１９】
最低１種の殺アメーバ薬若しくは抗原虫薬は、アトバクオン、塩酸クロロキン、リン酸クロロキン、メトロニダゾール、塩酸メトロニダゾールおよびイセチオン酸ペンタミジンから選択される最低１種であり得る。最低１種の駆虫薬は、メベンダゾール、パモ酸ピランテルおよびチアベンダゾールから選択される最低１種であり得る。最低１種の抗真菌薬は、アムホテリシンＢ、アムホテリシンＢコレステリル硫酸複合体、アムホテリシンＢ脂質複合体、アムホテリシンＢリポソーム製剤（ｌｉｐｏｓｏｍａｌ）、フルコナゾール、フルシトシン、グリセオフルビン微粒子（ｍｉｃｒｏｓｉｚｅ）、グリセオフルビン超微粒子（ｕｌｔｒａｍｉｃｒｏｓｉｚｅ）、イトラコナゾール、ケトコナゾール、ナイスタチンおよび塩酸テルビナフィンから選択される最低１種であり得る。最低１種の抗マラリア薬は、塩酸クロロキン、リン酸クロロキン、ドキシサイクリン、硫酸ヒドロキシクロロキン、塩酸メフロキン、リン酸プリマキン、ピリメタミン、およびスルファドキシンを伴
うピリメタミンから選択される最低１種であり得る。最低１種の抗結核薬若しくは抗らい薬は、クロファジミン、シクロセリン、ダプソン、塩酸エタンブトール、イソニアジド、ピラジナミド、リファブチン、リファンピン、リファペンチンおよび硫酸ストレプトマイシンから選択される最低１種であり得る。最低１種のアミノグリコシドは、硫酸アミカシン、硫酸ゲンタマイシン、硫酸ネオマイシン、硫酸ストレプトマイシン、および硫酸トブラマイシンから選択される最低１種であり得る。最低１種のペニシリンは、アモキシシリン／クラブラン酸カリウム、アモキシシリン三水和物、アンピシリン、アンピシリンナトリウム、アンピシリン三水和物、アンピシリンナトリウム／スルバクタムナトリウム、クロキサシリンナトリウム、ジクロキサシリンナトリウム、メズロシリンナトリウム、ナフシリンナトリウム、オキサシリンナトリウム、ペニシリンＧベンザチン、ペニシリンＧカリウム、ペニシリンＧプロカイン、ペニシリンＧナトリウム、ペニシリンＶカリウム、ピペラシリンナトリウム、ピペラシリンナトリウム／タゾバクタムナトリウム、チカルシリン二ナトリウム、およびチカルシリン二ナトリウム／クラブラン酸カリウムから選択される最低１種であり得る。最低１種のセファロスポリンは、セファクロル、セファドロキシル、セファゾリンナトリウム、セフジニル、塩酸セフェピム、セフィキシム、セフメタゾールナトリウム、セフォニシドナトリウム、セフォペラゾンナトリム、セフォタキシムナトリウム、セフォテタン二ナトリウム、セフォキシチンナトリウム、セフポドキシムプロキセチル、セフプロジル、セフタジジム、セフチブテン、セフチゾキシムナトリウム、セフトリアキソンナトリウム、セフロキシムアキセチル、セフロキシムナトリウム、塩酸セファレキシン、セファレキシン一水和物、セフラジン、およびロラカルベフから選択される最低１種であり得る。最低１種のテトラサイクリンは、塩酸デメクロサイクリン、ドキシサイクリンカルシウム、ドキシサイクリンヒクラート、塩酸ドキシサイクリン、ドキシサイクリン一水和物、塩酸ミノサイクリン、および塩酸テトラサイクリンから選択される最低１種であり得る。最低１種のスルホンアミドは、コトリモキサゾール、スルファジアジン、スルファメトキサゾール、スルフイソキサゾール、およびスルフイソキサゾールアセチルから選択される最低１種であり得る。最低１種のフルオロキノロンは、メシル酸アラトロフロキサシン、シプロフロキサシン、エノキサシン、レボフロキサシン、塩酸ロメフロキサシン、ナリジクス酸、ノルフロキサシン、オフロキサシン、スパルフロキサシン、およびメシル酸トロバフロキサシンから選択される最低１種であり得る。最低１種のフルオロキノロンは、メシル酸アラトロフロキサシン、シプロフロキサシン、エノキサシン、レボフロキサシン、塩酸ロメフロキサシン、ナリジクス酸、ノルフロキサシン、オフロキサシン、スパルフロキサシン、およびメシル酸トロバフロキサシンから選択される最低１種であり得る。最低１種の抗ウイルス薬は、硫酸アバカビル、アシクロビルナトリウム、塩酸アマンタジン、アンプレナビル、シデフォビル、メシル酸デラビルジン、ジダノシン、エファビレンズ、ファムシクロビル、ホミビルセンナトリウム、ホスカルネットナトリウム、ガンシクロビル、硫酸インジナビル、ラミブジン、ラミブジン／ジドブジン、メシル酸ネルフィナビル、ネビラピン、リン酸オセルタミビル、リバビリン、塩酸リマンタジン、リトナビル、サキナビル、メシル酸サキナビル、スタブジン、塩酸バラシクロビル、ザルシタビン、ザナミビルおよびリドブジンから選択される最低１種であり得る。最低１種のマクロライン抗感染症薬は、アジトロマイシン、クラリスロマイシン、ジリトロマイシン、エリスロマイシン塩基、エストル酸エリスロマイシン、エチルコハク酸エリスロマイシン、ラクトビオン酸エリスロマイシン、およびステアリン酸エリスロマイシンから選択される最低１種であり得る。最低１種の雑多な抗感染症薬は、アズトレオナム、バシトラシン、コハク酸クロラムフェニコールナトリウム、塩酸クリンダマイシン、塩酸パルミチン酸クリンダマイシン、リン酸クリンダマイシン、イミペネムおよびシラスタチンナトリウム、メロペネム、ニトロフラントイン大結晶（ｍａｃｒｏｃｒｙｓｔａｌ）、ニトロフラントイン微結晶（ｍｉｃｒｏｃｒｙｓｔａｌ）、キヌプリスチン／ダルホプリスチン、塩酸スペクチノマイシン、トリメトプリム、ならびに塩酸バンコマイシンから選択される最低１種であり得る。（例えば、Ｎｕｒｓｉｎｇ  ２００１  Ｄｒｕｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋのｐｐ．２４−２１４を参照されたい）。
【０１２０】
最低１種の変力薬は、乳酸アムリノン、ジゴキシン、および乳酸ミルリノンから選択される最低１種であり得る。最低１種の抗不整脈薬は、アデノシン、塩酸アミオダロン、硫酸アトロピン、トシル酸ブレチリウム、塩酸ジルチアゼム、ジソピラミド、リン酸ジソピラミド、塩酸エスモロール、酢酸フレカイニド、フマル酸イブチリド、塩酸リドカイン、塩酸メキシレチン、塩酸モリシジン、フェニトイン、フェニトインナトリウム、塩酸プロカインアミド、塩酸プロパフェノン、塩酸プロプラノロール、硫酸水素キニジン、グルコン酸キニジン、ポリガラクツロン酸キニジン、硫酸キニジン、ソタロール、塩酸トカイニド、および塩酸ベラパミルから選択される最低１種であり得る。最低１種の抗狭心症薬は、ベシル酸アムロジピン、亜硝酸アミル、塩酸ベプリジル、塩酸ジルチアゼム、硝酸イソソルビド、一硝酸イソソルビド、ナドロール、塩酸ニカルジピン、ニフェジピン、ニトログリセリン、塩酸プロプラノロール、ベラパミル、および塩酸ベラパミルから選択される最低１種であり得る。最低１種の降圧薬は、塩酸アセブトロール、ベシル酸アムロジピン、アテノロール、塩酸ベナゼプリル、塩酸ベタキソロール、フマル酸ビソプロロール、カンデサルタンシレキセチル、カプトプリル、塩酸カルテオロール、カルベジオール、クロニジン、塩酸クロニジン、ジアゾキシド、塩酸ジルチアゼム、メシル酸ドキサゾシン、エナラプリラート、マレイン酸エナラプリル、メシル酸エプロサルタン、フェロジピン、メシル酸フェノルドパム、ホシノプリルナトリウム、酢酸グアナベンズ、硫酸グアナドレル、塩酸グアンファシン、塩酸ヒドララジン、イルベサルタン、イスラジピン、塩酸ラベタロール、リシノプリル、ロサルタンカリウム、メチルドパ、塩酸メチルドペート、コハク酸メトプロロール、酒石酸メトプロロール、ミノキシジル、塩酸モエキシプリル、ナドロール、塩酸ニカルジピン、ニフェジピン、ニソルジピン、ニトロプルシドナトリウム、硫酸ペンブトロール、ペリンドプリルエルブミン、メシル酸フェントラミン、ピンドロール、塩酸プラゾシン、塩酸プロプラノロール、塩酸キナプリル、ラミプリル、テルミサルタン、塩酸テラゾシン、マレイン酸チモロール、トランドラプリル、バルサルタン、および塩酸ベラパミルから選択される最低１種であり得る。最低１種の高脂血症治療薬は、アトルバスタチンカルシウム、セリバスタチンナトリウム、コレスチラミン、塩酸コレスチポール、フェノフィブラート（微粉）、フルバスタチンナトリウム、ゲムフィブロジル、ロバスタチン、ナイアシン、プラバスタチンナトリウム、およびシンバスタチンから選択される最低１種であり得る。最低１種の雑多なＣＶ薬は、アブシキシマブ、アルプロスタジル、塩酸アルブタミン、シロスタゾール、硫酸水素クロピドグレル、ジピリダモール、エプチフィバチド、塩酸ミドドリン、ペントキシフィリン、塩酸チクロピジン、および塩酸チロフィバンから選択される最低１種であり得る。（例えば、Ｎｕｒｓｉｎｇ  ２００１  Ｄｒｕｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋのｐｐ．２１５−３３６を参照されたい。）
【０１２１】
最低１種の非麻薬性鎮痛薬若しくは解熱薬は、アセトアミノフェン、アスピリン、トリサリチル酸コリンマグネシウム、ジフルニサールおよびサリチル酸マグネシウムから選択される最低１種であり得る。最低１種の非ステロイド性抗炎症薬は、セレコキシブ、ジクロフェナクカリウム、ジクロフェナクナトリウム、エトドラク、フェノプロフェンカルシウム、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、インドメタシンナトリウム三水和物、ケトプロフェン、ケトロラクトロメタミン、ナブメトン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、オキサプロジン、ピロキシカム、ロフェコキシブ、およびスリンダクから選択される最低１種であり得る。最低１種の麻薬性若しくはオピオイド鎮痛薬は、塩酸アルフェンタニル、塩酸ブプレノルフィン、酒石酸ブトルファノール、リン酸コデイン、硫酸コデイン、クエン酸フェンタニル、フェンタニル経皮系、経粘膜フェンタニル、塩酸ヒドロモルホン、塩酸メペリジン、塩酸メサドン、塩酸モルヒネ、硫酸モルヒネ、酒石酸モルヒネ、塩酸ナルブフィン、塩酸オキシコドン、ペクチン酸オキシコドン、塩酸オキシモルホン、塩酸ペンタゾシン、塩酸ペンタゾシンおよび塩酸ナロキソン、乳酸ペンタゾシン、塩酸プロポキシフェン、ナプシル酸プロポキシフェン、塩酸レミフェンタニル、クエン酸スフェンタニルならびに塩酸トラマドールから選択される最低１種であり得る。最低１種の鎮静催眠薬は、抱水クロラール、エスタゾラム、塩酸フルラゼパム、ペントバルビタール、ペントバルビタールナトリウム、フェノバルビタールナトリウム、セコバルビタールナトリウム、テマゼパム、トリアゾラム、ザレプロン、および酒石酸ゾルピデムから選択される最低１種であり得る。最低１種の抗痙攣薬は、アセタゾラミドナトリウム、カルバマゼピン、クロナゼパム、クロラゼプ酸カリウム、ジアゼパム、ジバルプロエックスナトリウム、エトスクシミド、ホスフェニトインナトリウム、ギャバペンチン、ラモトリジン、硫酸マグネシウム、フェノバルビタール、フェノバルビタールナトリウム、フェニトイン、フェニトインナトリウム、フェニトインナトリウム（長時間型）、プリミドン、塩酸タイアガビン、トピラメート、バルプロ酸ナトリウム、およびバルプロ酸から選択される最低１種であり得る。最低１種の抗うつ薬は、塩酸アミトリプチリン、パモ酸アミトリプチリン、アモキサピン、塩酸ブプロピオン、臭化水素酸シタロプラム、塩酸クロミプラミン、塩酸デシプラミン、塩酸ドキセピン、塩酸フルオキセチン、塩酸イミプラミン、パモ酸イミプラミン、ミルタザピン、塩酸ネファゾドン、塩酸ノルトリプチリン、塩酸パロキセチン、硫酸フェネルジン、塩酸セルトラリン、硫酸トラニルシプロミン、マレイン酸トリミプラミン、および塩酸ベンラファキシンから選択される最低１種であり得る。最低１種の抗不安薬は、アルプラゾラム、塩酸ブスピロン、クロルジアゼポキシド、塩酸クロルジアゼポキシド、クロラゼプ酸カリウム、ジアゼパム、塩酸ドキセピン、ヒドロキシジンエンボナート、塩酸ヒドロキシジン、パモ酸ヒドロキシジン、ロラゼパム、メフロバメート、塩酸ミダゾラム、およびオキサゼパムから選択される最低１種であり得る。最低１種の抗精神病薬は、塩酸クロルプロマジン、クロザピン、デカン酸フルフェナジン、エナント酸フルエフェナジン、塩酸フルフェナジン、ハロペリドール、デカン酸ハロペリドール、乳酸ハロペリドール、塩酸ロキサピン、コハク酸ロキサピン、ベシル酸メソリダジン、塩酸モリンドン、オランザピン、ペルフェナジン、ピモジド、プロクロルペラジン、フマル酸クエチアピン、リスペリドン、塩酸チオリダジン、チオチキセン、塩酸チオチキセン、および塩酸トリフルオペラジンから選択される最低１種であり得る。最低１種の中枢神経系刺激薬は、硫酸アンフェタミン、カフェイン、硫酸デキストロアンフェタミン、塩酸ドキサプラム、塩酸メタンフェタミン、塩酸メチルフェニデート、モダフィニル、ペモリン、および塩酸フェンテルミンから選択される最低１種であり得る。最低１種の抗パーキンソン病薬は、塩酸アマンタジン、メシル酸ベンズトロピン、塩酸ビペリデン、乳酸ビペリデン、メシル酸ブロモクリプチン、カルビドパ−レボドパ、エンタカポン、レボドパ、メシル酸ペルゴリド、塩酸プラミペキソール、塩酸ロピニロール、塩酸セレギリン、トルカポン、および塩酸トリヘキシフェニジルから選択される最低１種であり得る。最低１種の雑多な中枢神経系薬物は、塩酸ブプロピオン、塩酸ドネペジル、ドロペリドール、マレイン酸フルボキサミン、炭酸リチウム、クエン酸リチウム、塩酸ナラトリプタン、ニコチン・ポラクリレックス、ニコチン経皮系、プロポフォール、安息香酸リザトリプタン、塩酸シブトラミン一水和物、コハク酸スマトリプタン、塩酸タクリン、およびゾルミトリプタンから選択される最低１種であり得る。（例えば、Ｎｕｒｓｉｎｇ  ２００１  Ｄｒｕｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋのｐｐ．３３７−５３０を参照されたい。）
【０１２２】
最低１種のコリン作動薬（例えば副交感神経刺激薬）は、塩化ベタネコール、塩化エドロホニウム、臭化ネオスチグミン、メチル硫酸ネオスチグミン、サリチル酸フィゾスチグミン、および臭化ピリドスチグミンから選択される最低１種であり得る。最低１種の抗コリン作動薬は、硫酸アトロピン、塩酸ジシクロミン、グリコピロール酸、ヒヨスチアミン、硫酸ヒヨスチアミン、臭化プロパンテリン、スコポラミン、ブチル臭化スコポラミン、および臭化水素酸スコポラミンから選択される最低１種であり得る。最低１種のアドレナリン作動薬（交感神経刺激薬）は、塩酸ドブタミン、塩酸ドパミン、酒石酸水素メタラミノール、酒石酸水素ノルエピネフリン、塩酸フェニレフリン、塩酸プソイドエフェドリン、および硫酸プソイドエフェドリンから選択される最低１種であり得る。最低１種のアドレナリン遮断薬（交感神経遮断薬）は、メシル酸ジヒドロエルゴタミン、酒石酸エルゴタミン、マレイン酸メチセルギド、および塩酸プロプラノロールから選択される最低１種であり得る。最低１種の骨格筋弛緩薬は、バクロフェン、カリソプロドール、クロルゾキサゾン、塩酸シクロベンザプリン、ダントロレンナトリウム、メトカルバモール、および塩酸チザニジンから選択される最低１種であり得る。最低１種の神経筋遮断薬は、ベシル酸アトラクリウム、ベシル酸シサトラクリウム、塩化ドキサクリウム、塩化ミバクリウム、臭化パンクロニウム、臭化ピペクロニウム、臭化ラパクロニウム、臭化ロクロニウム、塩化スクシニルコリン、塩化ツボクラリン、および臭化ベクロニウムから選択される最低１種であり得る。（例えば、Ｎｕｒｓｉｎｇ  ２００１  Ｄｒｕｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋのｐｐ．５３１−８４を参照されたい）。
【０１２３】
最低１種の抗ヒスタミン薬は、マレイン酸ブロムフェニラミン、塩酸セチリジン、マレイン酸クロルフェニラミン、フマル酸クレマスチン、塩酸シプロヘプタジン、塩酸ジフェンヒドラミン、塩酸フェキソフェナジン、ロラタジン、塩酸プロメタジン、テオクル酸プロメタジン、および塩酸トリプロリジンから選択される最低１種であり得る。最低１種の気管支拡張薬は、アルブテロール、硫酸アルブテロール、アミノフィリン、硫酸アトロピン、硫酸エフェドリン、エピネフリン、酒石酸水素エピネフリン、塩酸エピネフリン、臭化イプラトロピウム、イソプロテレノール、塩酸イソプロテレノール、硫酸イソプロテレノール、塩酸レバルブテロール、硫酸メタプロテレノール、オキシトリフィリン、酢酸ピルブテロール、キシナホ酸サルメテロール、硫酸テルブタリン、およびテオフィリンから選択される最低１種であり得る。最低１種の去痰薬若しくは鎮咳薬は、ベンゾナテート、リン酸コデイン、硫酸コデイン、臭化水素酸デキストラメトルファン、塩酸ジフェンヒドラミン、グアイフェネシン、および塩酸ヒドロモルホンから選択される最低１種であり得る。最低１種の雑多な気道薬は、アセチルシステイン、プロピオン酸ベクロメタゾン、ベラクタント（ｂｅｒａｃｔａｎｔ）、ブデソニド、カルファクタント（ｃａｌｆａｃｔａｎｔ）、クロモリンナトリウム、ドルナーゼアルファ、エポプロステノールナトリウム、フルニソリド、プロピオン酸フルチカゾン、モンテルカストナトリウム、ネドクロミルナトリウム、パリビズマブ、トリアムシノロンアセトニド、ザフィルルカスト、およびジレウトンから選択される最低１種であり得る。（例えばＮｕｒｓｉｎｇ  ２００１  Ｄｒｕｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋのｐｐ．５８５−６４２を参照されたい。）
【０１２４】
最低１種の制酸剤、吸着剤若しくは抗鼓腸薬は、炭酸アルミニウム、水酸化アルミニウム、炭酸カルシウム、マガルドラート、水酸化マグネシウム、酸化マグネシウム、シメチコン、および重炭酸ナトリウムから選択される最低１種であり得る。最低１種の消化酵素若しくは胆石溶解剤は、パンクレアチン、パンクレリパーゼおよびウルソジオールから選択される最低１種であり得る。最低１種の止瀉薬は、アタパルジャイト、次サリチル酸ビスマス、ポリカルボフィルカルシウム、塩酸ジフェノキシレートおよび硫酸アトロピン、ロペラミド、酢酸オクトレオチド、あへんチンキ、ならびにあへんチンキ（カンファー入り（ｃａｍｐｈｏｒａｔｅｄ））から選択される最低１種であり得る。最低１種の緩下剤は、ビソコジル、ポリカルボフィルカルシウム、カスカラサグラダ、カスカラサグラダ芳香流エキス剤、カスカラサグラダ流エキス剤、ヒマシ油、ドクセートカルシウム、ドクセートナトリウム、グリセリン、ラクツロース、クエン酸マグネシウム、水酸化マグネシウム、硫酸マグネシウム、メチルセルロース、鉱物油、ポリエチレングリコール若しくは電解質溶液、オオバコ、センナ、およびリン酸ナトリウムから選択される最低１種であり得る。最低１種の制吐薬は、塩酸クロルプロマジン、ジメンヒドリナート、メシル酸ドラセトロン、ドロナビノール、塩酸グラニセトロン、塩酸メクリジン、塩酸メトクロプロアミド、塩酸オンダンセトロン、ペルフェナジン、プロクロルペラジン、エジシル酸プロクロルペラジン、マレイン酸プロクロルペラジン、塩酸プロメタジン、スコポラミン、マレイン酸チエチルペラジン、および塩酸トリメトベンズアミドから選択される最低１種であり得る。最低１種の抗潰瘍薬は、シメチジン、塩酸シメチジン、ファモチジン、ランソプラゾール、ミソプロストール、ニザチジン、オメプラゾール、ラベプロゾールナトリウム、ランチジン・クエン酸ビスマス、塩酸ラニチジン、およびスクラルファートから選択される最低１種であり得る。（例えばＮｕｒｓｉｎｇ  ２００１  Ｄｒｕｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋのｐｐ．６４３−９５を参照されたい。）
【０１２５】
最低１種のコルチコステロイドは、ベタメタゾン、酢酸ベタメタゾン若しくはリン酸ベタメタゾンナトリウム、リン酸ベタメタゾンナトリウム、酢酸コルチゾン、デキサメタゾン、酢酸デキサメタゾン、リン酸デキサメタゾンナトリウム、酢酸フルドロコルチゾン、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、シピオン酸ヒドロコルチゾン、リン酸ヒドロコルチゾンナトリウム、コハク酸ヒドロコルチゾンナトリウム、メチルプレドニゾロン、酢酸メチルプレドニゾロン、コハク酸メチルプレドニゾロンナトリウム、プレドニゾロン、酢酸プレドニゾロン、リン酸プレドニゾロンナトリウム、テブト酸プレドニゾロン、プレドニゾン、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、および酢酸トリアムシノロンから選択される最低１種であり得る。最低１種のアンドロゲン若しくは蛋白同化ステロイドは、ダナゾール、フルオキシメステロン、メチルテストステロン、デカン酸ナンドロロン、フェンプロピオン酸ナンドロロン、テストステロン、シピオン酸テストステロン、エナント酸テストステロン、プロピオン酸テストステロン、およびテストステロン経皮系から選択される最低１種であり得る。最低１種のエストロゲン若しくはプロゲスチンは、エステル化エストロゲン、エストラジオール、シピオン酸エストラジオール、エストラジオール／酢酸ノルエチンドロン経皮系、吉草酸エストラジオール、エストロゲン（複合）、エストロピペート、エチニルエストラジオール、エチニルエストラジオールおよびデソゲストレル、エチニルエストラジオールおよび酢酸エチノジオール、エチニルエストラジオールおよびデソゲストレル、エチニルエストラジオールおよび酢酸エチノジオール、エチニルエストラジオールおよびレボノルゲストレル、エチニルエストラジオールおよびノルエチンドロン、エチニルエストラジオールおよび酢酸ノルエチンドロン、エチニルエストラジオールおよびノルゲスチメート、エチニルエストラジオールおよびノルゲストレル、エチニルエストラジオールおよびノルエチンドロンおよび酢酸塩およびフマル酸鉄、レボノルゲストレル、酢酸メドロキシプロゲステロン、メストラノールおよびノルエチンドロン、ノルエチンドロン、酢酸ノルエチンドロン、ノルゲストレル、ならびにプロゲステロンから選択される最低１種であり得る。最低１種のゴナドトロピンは、酢酸ガニレリックス、酢酸ゴナドレリン、酢酸ヒストレリンおよびメノトロピンから選択される最低１種であり得る。最低１種の抗糖尿病薬若しくはグルカゴンは、アカルボース、クロルプロパミド、グリメピリド、グリピジド、グルカゴン、グリブリド、インスリン、塩酸メトホルミン、ミグリトール、塩酸ピグリタゾン、レパグリニド、マレイン酸ロシグリタゾン、およびトログリタゾンから選択される最低１種であり得る。最低１種の甲状腺ホルモンは、レボチロキシンナトリウム、リオチロニンナトリウム、リオトリックス、および甲状腺から選択される最低１種であり得る。最低１種の甲状腺ホルモンアンタゴニストは、メチマゾール、ヨウ化カリウム、ヨウ化カリウム（飽和溶液）、プロピルチオウラシル、放射活性ヨウ素（ヨウ化ナトリウム１３１Ｉ）、および濃ヨウ素溶液から選択される最低１種であり得る。最低１種の下垂体ホルモンは、コルチコトロピン、コシントロピン、酢酸デスモフレシン、酢酸リュープロリド、貯蔵（ｒｅｐｏｓｉｔｏｒｙ）コルチコトロピン、ソマトレム、ソマトロピン、およびバソプレシンから選択される最低１種であり得る。最低１種の副甲状腺様薬物は、カルシフェジオール、カルシトニン（ヒト）、カルシトニン（サケ）、カルシトリオール、ジヒドロタキステロール、およびエチドロン酸二ナトリウムから選択される最低１種であり得る。（例えばＮｕｒｓｉｎｇ  ２００１  Ｄｒｕｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋのｐｐ．６９６−７９６を参照されたい。）
【０１２６】
最低１種の利尿薬は、アセタゾラミド、アセタゾラミドナトリウム、塩酸アミロリド、ブメタニド、クロルチアリドン、エタクリン酸ナトリウム、エタクリン酸、フロセミド、ヒドロクロロチアジド、インダパミド、マンニトール、メトラゾン、スピロノラクトン、トルセミド、トリアムテレン、および尿素から選択される最低１種であり得る。最低１種の電解質若しくは補充溶液は、酢酸カルシウム、炭酸カルシウム、塩化カルシウム、クエ
ン酸カルシウム、グルビオナートカルシウム（ｃａｌｃｉｕｍ  ｇｌｕｂｉｏｎａｔｅ）、グルセプト酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、乳酸カルシウム、リン酸カルシウム（二塩基性）、リン酸カルシウム（三塩基性）、デキストラン（高分子量）、デキストラン（低分子量）、ヘタスターチ、塩化マグネシウム、硫酸マグネシウム、酢酸カリウム、重炭酸カリウム、塩化カリウム、グルコン酸カリウム、リンゲル液、リンゲル液（乳糖加）、および塩化ナトリウムから選択される最低１種であり得る。最低１種の酸性化剤若しくはアルカリ性化剤は、重炭酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、およびトロメタミンから選択される最低１種であり得る。（例えばＮｕｒｓｉｎｇ  ２００１  Ｄｒｕｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋのｐｐ．７９７−８３３を参照されたい。）
【０１２７】
最低１種の造血剤は、フマル酸鉄、グルコン酸鉄、硫酸鉄、硫酸鉄（乾燥）、鉄デキストラン、鉄ソルビトール、多糖−鉄複合体、およびグルコン酸鉄ナトリウム複合体から選択される最低１種であり得る。最低１種の抗凝固薬は、アルデパリンナトリウム、ダルテパリンナトリウム、ダナパロイドナトリウム、エノキサパリンナトリウム、ヘパリンカルシウム、ヘパリンナトリウム、およびワルファリンナトリウムから選択される最低１種であり得る。最低１種の血液製剤は、５％アルブミン、２５％アルブミン、抗血友病因子、活性化プロトロンビン複合体濃縮製剤（ａｎｔｉ−ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｃｏａｇｕｌａｎｔ  ｃｏｍｐｌｅｘ）、アンチトロンビンＩＩＩ（ヒト）、第ＩＸ因子（ヒト）、第ＩＸ因子複合体、および血漿タンパク質画分から選択される最低１種であり得る。最低１種の血栓溶解酵素は、アルテプラーゼ、アニストレプラーゼ、レテプラーゼ（組換え）、ストレプトキナーゼ、およびウロキナーゼから選択される最低１種であり得る。（例えばＮｕｒｓｉｎｇ  ２００１  Ｄｒｕｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋのｐｐ．８３４−６６を参照されたい。）
【０１２８】
最低１種のアルキル化薬は、ブスルファン、カルボプラチン、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、シクロホスファミド、イホスファミド、ロムスチン、塩酸メクロレタミン、メルファラン、塩酸メルファラン、ストレプトゾシン、テモゾロミド、およびチオテパから選択される最低１種であり得る。最低１種の代謝拮抗薬は、カペシタビン、クラドリビン、シタラビン、フロクスウリジン、リン酸フルダラビン、フルオロウラシル、ヒドロキシ尿素、メルカプトプリン、メトトレキサート、メトトレキサートナトリウム、およびチオグアニンから選択される最低１種であり得る。最低１種の抗生物質性抗腫瘍薬は、硫酸ブレオマイシン、ダクチノマイシン、クエン酸ダウノルビシンリポソーム製剤、塩酸ダウノルビシン、塩酸ドキソルビシン、塩酸ドキソルビシンリポソーム製剤、塩酸エピルビシン、塩酸イダルビシン、マイトマイシン、ペントスタチン、プリカマイシンおよびバルルビシンから選択される最低１種であり得る。ホルモンバランスを変える最低１種の抗腫瘍薬は、アナストロゾール、ビカルタミド、リン酸エストラムスチンナトリウム、エキセメスタン、フルタミド、酢酸ゴセレリン、レトロゾール、酢酸リュープロリド、酢酸メゲストロール、ニルタミド、クエン酸タモキシフェン、テストラクトン、およびクエン酸トレミフェンから選択される最低１種であり得る。最低１種の雑多な抗腫瘍薬は、アスパラギナーゼ、カルメット−ゲラン桿菌（ＢＣＧ）（生、膀胱内）、ダカルバジン、ドセタキセル、エトポシド、リン酸エトポシド、塩酸ゲムシタビン、塩酸イリノテカン、ミトタン、塩酸ミトキサントロン、パクリタキセル、ペグアスパルガーゼ、ポルフィマーナトリウム、塩酸プロカルバジン、リツキシマブ、テニポシド、塩酸トポテカン、トラスツズマブ、トレチノイン、硫酸ビンブラスチン、硫酸ビンクリスチン、および酒石酸ビノレルビンから選択される最低１種であり得る。（例えばＮｕｒｓｉｎｇ  ２００１  Ｄｒｕｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋのｐｐ．８６７−９６３を参照されたい。）
【０１２９】
最低１種の免疫抑制薬は、アザチオプリン、バシリキシマブ、シクロスポリン、ダクリズマブ、リンパ球免疫グロブリン、ムロモナブ−ＣＤ３、ミコフェノール酸モフェチル、塩酸ミコフェノール酸モフェチル、シロリムスおよびタクロリムスから選択される最低１
種であり得る。最低１種のワクチン若しくは類毒素は、ＢＣＧワクチン、コレラワクチン、ジフテリアおよび破傷風類毒素（吸着）、ジフテリアおよび破傷風類毒素ならびに無細胞性百日咳ワクチン（吸着）、ジフテリアおよび破傷風類毒素ならびに全細胞百日咳ワクチン、ヘモフィルス属（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｉｕｓ）ｂ複合ワクチン、Ａ型肝炎ワクチン（不活化）、Ｂ型肝炎ワクチン（組換え）、インフルエンザウイルスワクチン、１９９９−２０００年、三価、ＡおよびＢ型（精製表面抗原）、インフルエンザウイルスワクチン、１９９９−２０００年、三価、ＡおよびＢ型（サブビリオン若しくは精製サブビリオン）、インフルエンザウイルスワクチン、１９９９−２０００年、三価、ＡおよびＢ型（全ビリオン）、日本脳炎ウイルスワクチン（不活化）、ライム病ワクチン（組換えＯｓｐＡ）、麻疹および流行性耳下腺炎および風疹ウイルスワクチン（生）、麻疹および流行性耳下腺炎および風疹ウイルスワクチン（生、弱毒化）、麻疹ウイルスワクチン（生、弱毒化）、髄膜炎菌多糖ワクチン、流行性耳下腺炎ウイルスワクチン（生）、ペストワクチン、肺炎球菌ワクチン（多価）、ポリオウイルスワクチン（不活化）、ポリオウイルスワクチン（生、経口、三価）、狂犬病ワクチン（吸着）、狂犬病ワクチン（ヒト二倍体細胞）、風疹および流行性耳下腺炎ウイルスワクチン（生）、風疹ウイルスワクチン（生、弱毒化）、破傷風類毒素（吸着）、破傷風類毒素（液体）、腸チフスワクチン（経口）、腸チフスワクチン（非経口）、腸チフスＶｉ多糖ワクチン、水痘ウイルスワクチン、ならびに黄熱病ワクチンから選択される最低１種であり得る。最低１種の抗毒素若しくは抗蛇毒素は、クロゴケグモ抗蛇毒素、ガラガラヘビ科抗毒素（多価）、ジフテリア抗毒素（ウマ）、およびアメリカサンゴヘビ（Ｍｉｃｒｕｒｕｓ  ｆｕｌｖｉｕｓ）抗蛇毒素から選択される最低１種であり得る。最低１種の免疫血清は、サイトメガロウイルス免疫グロブリン（静脈内）、Ｂ型肝炎免疫グロブリン（ヒト）、免疫グロブリン筋肉内、免疫グロブリン静脈内、狂犬病免疫グロブリン（ヒト）、ＲＳウイルス免疫グロブリン静脈内（ヒト）、Ｒｈ０（Ｄ）免疫グロブリン（ヒト）、Ｒｈ０（Ｄ）免疫グロブリン静脈内（ヒト）、破傷風免疫グロブリン（ヒト）、および水疱性口内炎免疫グロブリンから選択される最低１種であり得る。最低１種の生物学的応答調節物質は、アルデスロイキン、エポエチンα、フィルグラスチム、注射用酢酸グラチラマー、インターフェロンアルファコン−１、インターフェロンα−２ａ（組換え）、インターフェロンα−２ｂ（組換え）、インターフェロンβ−１ａ、インターフェロンβ−１ｂ（組換え）、インターフェロンγ−１ｂ、塩酸レバミソール、オプレルベキン、およびサルグラモスチムから選択される最低１種であり得る。（例えばＮｕｒｓｉｎｇ  ２００１  Ｄｒｕｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋのｐｐ．９６４−１０４０を参照されたい。）
【０１３０】
最低１種の眼科用抗感染症薬は、バシトラシン、クロラムフェニコール、塩酸シプロフロキサシン、エリスロマイシン、硫酸ゲンタマイシン、オフロキサシン０．３％、硫酸ポリミキシンＢ、スルファセタミドナトリウム１０％、スルファセタミドナトリウム１５％、スルファセタミドナトリウム３０％、トブラマイシン、およびビダラビンから選択される最低１種であり得る。最低１種の眼科用抗炎症薬は、デキサメタゾン、リン酸デキサメタゾンナトリウム、ジクロフェナクナトリウム０．１％、フルオロメトロン、フルルビプロフェンナトリウム、ケトロラクトロメタミン、酢酸プレドニゾロン（懸濁液）およびリン酸プレドニゾロンナトリウム（溶液）から選択される最低１種であり得る。最低１種の縮瞳薬は、塩酸アセチルコリン、カルバコール（眼内）、カルバコール（局所）、ヨウ化エコチオフェート、ピロカルピン、塩酸ピロカルピン、および硝酸ピロカルピンから選択される最低１種であり得る。最低１種の散瞳薬は、硫酸アトロピン、塩酸シクロペントレート、塩酸エピネフリン、ホウ酸エピネフリル、臭化水素酸ホマトロピン、塩酸フェニレフリン、臭化水素酸スコポラミン、およびトロピカミドから選択される最低１種であり得る。最低１種の眼科用血管収縮薬は、塩酸ナファゾリン、塩酸オキシメタゾリン、および塩酸テトラヒドロゾリンから選択される最低１種であり得る。最低１種の雑多な眼科用薬は、塩酸アプラクロニジン、塩酸ベタキソロール、酒石酸ブリモニジン、塩酸カルテオロール、塩酸ジピベフリン、塩酸ドルゾラミド、フマル酸エメダスチン、フルオレセインナトリウム、フマル酸ケトチフェン、ラタノプロスト、塩酸レボブノロール、塩酸メチプラノロール、塩化ナトリウム（高張）、およびマレイン酸チモロールから選択される最低１種であり得る。最低１種の耳用薬は、ホウ酸、過酸化カルバミド、クロラムフェニコール、およびオレイン酸トリエタノールアミンポリペプチド縮合物（ｔｒｉｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ  ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ  ｏｌｅａｔｅ−ｃｏｎｄｅｎｓａｔｅ）から選択される最低１種であり得る。最低１種の鼻用薬物は、プロピオン酸ベクロメタゾン、ブデソニド、硫酸エフェドリン、塩酸エピネフリン、フルニソリド、プロピオン酸フルチカゾン、塩酸ナファゾリン、塩酸オキシメタゾリン、塩酸フェニレフリン、塩酸テトラヒドロゾリン、トリアムシノロンアセトニド、および塩酸キシロメタゾリンから選択される最低１種であり得る。（例えばＮｕｒｓｉｎｇ  ２００１  Ｄｒｕｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋのｐｐ．１０４１−９７を参照されたい。）
【０１３１】
最低１種の局所抗感染症薬は、アシクロビル、アムホテリシンＢ、アゼライン酸クリーム、バシトラシン、硝酸ブトコナゾール、リン酸クリンダマイシン、クロトリマゾール、硝酸エコナゾール、エリスロマイシン、硫酸ゲンタマイシン、ケトコナゾール、酢酸マフェニド、メトロニダゾール（局所）、硝酸ミコナゾール、ムピロシン、塩酸ナフチフィン、硫酸ネオマイシン、ニトロフラゾン、ナイスタチン、スルファジアジン銀、塩酸テルビナフィン、テルコナゾール、塩酸テトラサイクリン、チオコナゾールおよびトルナフテートから選択される最低１種であり得る。最低１種の抗疥癬薬若しくは殺シラミ薬は、クロタミトン、リンダン、ペルメトリン、およびピレトリンから選択される最低１種であり得る。最低１種の局所コルチコステロイドは、プロピオン酸ベタメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、プロピオン酸クロベタゾール、デソニド、デソキシメタゾン、デキサメタゾン、リン酸デキサメタゾンナトリウム、酢酸ジフロラゾン、フルオシノロンアセトニド、フルオシノニド、フランドレノリド、プロピオン酸フルチカゾン、ハルシオニド、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、酪酸ヒドロコルチゾン、吉草酸ヒドロコルチゾン、フロ酸モメタゾン、およびトリアムシノロンアセトニドから選択される最低１種であり得る。（例えばＮｕｒｓｉｎｇ  ２００１  Ｄｒｕｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋのｐｐ．１０９８−１１３６を参照されたい。）
【０１３２】
最低１種のビタミン若しくはミネラルは、ビタミンＡ、ビタミンＢ群、シアノコバラミン、葉酸、ヒドロキソコバラミン、ロイコボリンカルシウム、ナイアシン、ナイアシンアミド、塩酸ピリドキシン、リボフラビン、塩酸チアミン、ビタミンＣ、ビタミンＤ、コレカルシフェロール、エルゴカルシフェロール、ビタミンＤ類似物、ドキセルカルシフェロール、パリカルシトール、ビタミンＥ、ビタミンＫ類似物、フィトナジオン、フッ化ナトリウム、フッ化ナトリウム（局所）、微量元素、クロム、銅、ヨウ素、マンガン、セレン、および亜鉛から選択される最低１種であり得る。最低１種のカロリーは、アミノ酸輸液（結晶）、Ｄ−ブドウ糖中アミノ酸輸液、電解質を含むアミノ酸輸液、Ｄ−ブドウ糖中電解質を含むアミノ酸輸液、肝不全のためのアミノ酸輸液、高代謝ストレスのためのアミノ酸輸液、腎不全のためのアミノ酸輸液、Ｄ−ブドウ糖、脂肪乳剤、および中鎖トリグリセリドから選択される最低１種であり得る。（例えばＮｕｒｓｉｎｇ  ２００１  Ｄｒｕｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋのｐｐ．１１３７−６３を参照されたい。）
【０１３３】
本発明の抗ＩＬ−１２抗体組成物は、最低１種のＴＮＦアンタゴニスト（限定されるものでないがＴＮＦの化学物質若しくはタンパク質アンタゴニスト、ＴＮＦのモノクローナル若しくはポリクローナル抗体若しくはフラグメント、可溶性ＴＮＦ受容体（例えばｐ５５、ｐ７０若しくはｐ８５）またはフラグメント、それらの融合ポリペプチド、あるいは小分子ＴＮＦアンタゴニスト、例えばＴＮＦ結合タンパク質Ｉ若しくはＩＩ（ＴＢＰ−Ｉ若しくはＴＢＰ−ＩＩ）、ネレリモンマブ、インフリキシマブ、エテルナセプト、ＣＤＰ−５７１、ＣＤＰ−８７０、アフェリモマブ、レネルセプトなどを挙げることができる）、抗リウマチ薬（例えばメトトレキサート、オーラノフィン、金チオグルコース、アザチオプリン、エタネルセプト、金チオリンゴ酸ナトリウム、硫酸ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、サルファサルジン）、筋弛緩薬、麻薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、鎮痛薬、麻酔薬、鎮静薬、局所麻酔薬、神経筋遮断薬、抗菌薬（例えば、アミノグリコシド、抗真菌薬、駆虫薬、抗ウイルス薬、カルバペネム、セファロスポリン、フルロルキノロン、マクロライド、ペニシリン、スルホンアミド、テトラサイクリン、別の抗菌薬）、抗乾癬薬、コルチコステロイド、蛋白同化ステロイド、糖尿病関連薬、ミネラル、栄養薬、甲状腺薬、ビタミン、カルシウム関連ホルモン、止瀉薬、鎮咳薬、制吐薬、抗潰瘍薬、緩下剤、抗凝固薬、エリスロポエチン（例えばエポエチンα）、フィルグラスチム（例えばＧ−ＣＳＦ、ニューポジェン（Ｎｅｕｐｏｇｅｎ））、サルグラモスチム（ＧＭ−ＣＳＦ、リューカイン（Ｌｅｕｋｉｎｅ））、免疫化、免疫グロブリン、免疫抑制薬（例えばバシリキシマブ、シクロスポリン、ダクリズマブ）、成長ホルモン、ホルモン補充薬、エストロゲン受容体調節物質、散瞳薬、毛様体筋麻痺薬、アルキル化薬、代謝拮抗薬、分裂阻害剤、放射性医薬品、抗うつ薬、抗躁薬、抗精神病薬、抗不安薬、催眠薬、交感神経刺激薬、刺激薬、ドネペジル、タクリン、喘息医薬品、βアゴニスト、吸入ステロイド、ロイコトリエン阻害剤、メチルキサンチン、クロモリン、エピネフリン若しくはアナログ、ドルナーゼアルファ（プルモザイム（Ｐｕｌｍｏｚｙｍｅ））、サイトカイン若しくはサイトカインアンタゴニストから選択される最低１種を場合によってはさらに含んでなる、こうした調節、処置若しくは治療の必要な細胞、組織、器官、動物若しくは患者に接触若しくは投与される、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体を含んでなる組成物若しくは製薬学的組成物のいずれかの適しかつ有効な量の最低１種をさらに含み得る。こうしたサイトカインの制限しない例は、限定されるものでないが、ＩＬ−１ないしＩＬ−２３のいずれか（例えばＩＬ−１、ＩＬ−２など）を挙げることができる。適する投薬量は当該技術分野で公知である。例えば、Ｗｅｌｌｓら編、Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ、第２版、Ａｐｐｌｅｔｏｎ  ａｎｄ  Ｌａｎｇｅ、コネチカット州スタンフォード（２０００）；ＰＤＲ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ、Ｔａｒａｓｃｏｎ  Ｐｏｃｋｅｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ  ２０００、豪華版、Ｔａｒａｓｃｏｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、カリフォル���ア州ロマリンダ（２０００）（これらの参考文献のそれぞれは、そっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）を参照されたい。
【０１３４】
こうした抗癌若しくは抗感染症薬は、本発明の最低１種の抗体と会合、結合、共処方若しくは共投与される毒素分子もまた包含し得る。該毒素は、場合によっては、病的な細胞若しくは組織を選択的に死滅させるよう作用し得る。病的な細胞は癌若しくは他の細胞であり得る。こうした毒素は、限定されるものでないが、例えばリシン、ジフテリア毒素、蛇毒素若しくは細菌毒素の最低１種から選択される毒素の最低１個の機能的細胞傷害ドメインを含んでなる、精製若しくは組換えの毒素若しくは毒素フラグメントを挙げることができる。毒素という用語は、死亡をもたらし得る毒素ショックを包含する、ヒトおよび他の哺乳動物における病的状態を引き起こしうる、いずれかの天然に存在する、変異体の若しくは組換えの細菌若しくはウイルスにより産生される内毒素および外毒素双方もまた包含する。こうした毒素は、限定されるものでないが、腸毒素産生性大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）熱不安定性腸毒素（ＬＴ）、熱安定性腸毒素（ＳＴ）、赤痢菌属（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）細胞毒、アエロモナス属（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ）腸毒素、毒性ショック症候群毒素−１（ＴＳＳＴ−１）、ブドウ球菌腸毒素Ａ（ＳＥＡ）、Ｂ（ＳＥＢ）若しくはＣ（ＳＥＣ）、連鎖球菌腸毒素などを挙げることができる。こうした細菌は、限定されるものでないが、腸毒素産生性大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）（ＥＴＥＣ）スピーシーズの株、腸出血性大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）（例えば血清型０１５７：Ｈ７の株）、ブドウ球菌属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）スピーシーズ（例えば黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）、化膿性連鎖球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ））、赤痢菌属（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）スピーシーズ（例えば志賀赤痢菌（Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｄｙｓｅｎｔｅｒｉａｅ）、フレクスナー赤痢菌（Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｆｌｅｘｎｅｒｉ）、ボイド赤痢菌（Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｂｏｙｄｉｉ）、およびゾンネ赤痢菌（Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｓｏｎｎｅｉ））、サルモネラ属（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）スピーシーズ（例えばチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉ）、豚コレラ菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｃｈｏｌｅｒａ−ｓｕｉｓ）、腸炎菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ））、クロストリジウム属（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）スピーシーズ（例えばウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、クロストリジウム  ディフィシレ（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｉｃｉｌｅ）、ボツリヌス菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ））、カンフロバクター属（Ｃａｍｐｈｌｏｂａｃｔｅｒ）スピーシーズ（例えば、カンフロバクター  ジェジュニ（Ｃａｍｐｈｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ）、カンフロバクター  フェツス（Ｃａｍｐｈｌｏｂａｃｔｅｒ  ｆｅｔｕｓ））、ヘリコバクター属（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ）スピーシーズ（例えばヘリコバクター  ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ））、アエロモナス属（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ）スピーシーズ（例えば、アエロモナス  ソブリア（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ  ｓｏｂｒｉａ）、アエロモナス  ヒドロフィラ（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ  ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）、アエロモナ��  カビエ（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ  ｃａｖｉａｅ））、プレシオモナス  シゲロイデス（Ｐｌｅｓｉｏｍｏｎａｓ  ｓｈｉｇｅｌｌｏｉｄｅｓ）、エルジナ  エンテロコリティカ（Ｙｅｒｓｉｎａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ）、ビブリオ属（Ｖｉｂｒｉｏｓ）スピーシーズ（例えばコレラ菌（Ｖｉｂｒｉｏｓ  ｃｈｏｌｅｒａｅ）、ビブリオ  パラヘモリティクス（Ｖｉｂｒｉｏｓ  ｐａｒａｈｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）、クレブシエラ属（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）スピーシーズ、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、および連鎖球菌を挙げることができる。例えば、Ｓｔｅｉｎ編、ＩＮＴＥＲＮＡＬ  ＭＥＤＩＣＩＮＥ、第３版、ｐｐ  １−１３、Ｌｉｔｔｌｅ，Ｂｒｏｗｎ  ａｎｄ  Ｃｏ．、ボストン（１９９０）；Ｅｖａｎｓら編、Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎｓ：Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔｒｏｌ、第２版、ｐｐ  ２３９−２５４、Ｐｌｅｎｕｍ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｂｏｏｋ  Ｃｏ．、ニューヨーク（１９９１）；Ｍａｎｄｅｌｌら、Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ、第３版、Ｃｈｕｒｃｈｉｌｌ  Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎｅ、ニューヨーク（１９９０）；Ｂｅｒｋｏｗら編、Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ、第１６版、Ｍｅｒｃｋ  ａｎｄ  Ｃｏ．、ニュージャージー州ローウェイ、１９９２；Ｗｏｏｄら、ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、７６：１２１−１３４（１９９１）；Ｍａｒｒａｃｋら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４８：７０５−７１１（１９９０）（これらの参考文献の内容はそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）を参照されたい。
【０１３５】
本発明の抗ＩＬ−１２抗体化合物、組成物若しくは組合せは、限定されるものでないが、希釈剤、結合剤、安定剤、緩衝剤、塩、親油性溶媒、保存剤、補助物質などを挙げることができる、いずれかの適する補助物質の最低１種をさらに含み得る。製薬学的に許容できる補助物質が好ましい。こうした無菌溶液の制限しない例およびそれらの製造方法は、限定されるものでないが、Ｇｅｎｎａｒｏ編、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１８版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．（ペンシルバニア州イーストン）１９９０を挙げることができる当該技術分野で公知である。当該技術分野で公知若しくは本明細書に記述されるところの、抗ＩＬ−１２抗体、フラグメント若しくはバリアントの組成物の投与様式、溶解性および／若しくは安定性に適する製薬学的に許容できる担体は、慣例に選択し得る。
【０１３６】
本組成物で有用な製薬学的賦形剤および添加物は、限定されるものでないが、タンパク質、ペプチド、アミノ酸、脂質ならびに炭水化物（例えば、単糖、二、三、四およびオリゴ糖を包含する糖；アルジトール、アルドン酸、エステル化糖などのような誘導体化糖；ならびに多糖若しくは糖ポリマー）を挙げることができ、それらは単独で若しくは組合せで存在し得、単独で若しくは組合せで１〜９９．９９重量若しくは容量％を含んでなる。
例示的タンパク質賦形剤は、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）のような血清アルブミン、組換えヒトアルブミン（ｒＨＡ）、ゼラチン、カゼインなどを包含する。緩衝能力においてもまた機能し得る代表的アミノ酸／抗体成分は、アラニン、グリシン、アルギニン、ベタイン、ヒスチジン、グルタミン酸、アスパラギン酸、システイン、リシン、ロイシン、イソロイシン、バリン、メチオニン、フェニルアラニン、アスパルテームなどを包含する。好ましい一アミノ酸はグリシンである。
【０１３７】
本発明での使用に適する炭水化物賦形剤は、例えば、果糖、麦芽糖、ガラクトース、ブドウ糖、Ｄ−マンノース、ソルボースなどのような単糖；乳糖、ショ糖、トレハロース、セロビオースなどのような二糖；ラフィノース、メレジトース、マルトデキストリン、デキストラン、デンプンなどのような多糖；およびマンニトール、キシリトール、マルチトール、ラクチトール、キシリトールソルビトール（グルチトール）、ミオイノシトールなどのようなアルジトールを包含する。本発明での使用のための好ましい炭水化物賦形剤は、マンニトール、トレハロースおよびラフィノースである。
【０１３８】
抗ＩＬ−１２抗体組成物は、緩衝剤すなわちｐＨ調節剤もまた包含し得；典型的には、緩衝剤は有機酸若しくは塩基から調製される塩である。代表的緩衝剤は、クエン酸、アスコルビン酸、グルコン酸、炭酸、酒石酸、コハク酸、酢酸若しくはフタル酸の塩のような有機酸の塩；トリス、トロメタミン塩酸塩若しくはリン酸塩緩衝剤を包含する。本組成物での使用のための好ましい緩衝剤は、クエン酸塩のような有機酸の塩である。
【０１３９】
加えて、本発明の抗ＩＬ−１２抗体組成物は、ポリビニルピロリドン、フィコール（ポリマー糖）、デキストレート（ｄｅｘｔｒａｔｅ）（例えば、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンのようなシクロデキストリン）、ポリエチレングリコール、着香料、抗菌剤、甘味料、抗酸化剤、帯電防止剤、界面活性剤（例えば、「ＴＷＥＥＮ  ２０」および「ＴＷＥＥＮ  ８０」のようなポリソルベート）、脂質（例えばリン脂質、脂肪酸）、ステロイド（例えばコレステロール）、ならびにキレート剤（例えばＥＤＴＡ）のような、ポリマー性賦形剤／添加物を包含し得る。
【０１４０】
本発明の抗ＩＬ−１２抗体、部分若しくはバリアントの組成物での使用に適するこれらおよび付加的な既知の製薬学的賦形剤および／若しくは添加物は、例えば、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ＆  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ”、第１９版、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｌｉａｍｓ、（１９９５）、および“Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ”、第５２版、Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ、ニュージャージー州モントベール（１９９８）（それらの開示はそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）に列挙されるとおり、当該技術分野で既知である。好ましい担体若しくは賦形剤物質は、炭水化物（例えば糖およびアルジトール）ならびに緩衝剤（例えばクエン酸塩）若しくはポリマー剤である。例示的一担体分子は、関節内送達に有用でありうるムコ多糖、ヒアルロン酸である。
【０１４１】
製剤
上に示されたとおり、本発明は、製薬学的に許容できる製剤中に最低１種の抗ＩＬ−１２抗体を含んでなる、製薬学的若しくは家畜の使用に適する、生理的食塩水若しくは選ばれた塩を含むリン酸緩衝液、ならびに、保存剤を含有する保存される溶液および製剤、ならびに複数使用の保存される製剤を好ましくは含んでなる、安定な製剤を提供する。保存される製剤は、最低１種の既知の、または最低１種のフェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、ｏ−クレゾール、クロロクレゾール、ベンジルアルコール、亜硝酸フェニル水銀、フェノキシエタノール、ホルムアルデヒド、クロロブタノール、塩化マグネシウム（例えば六水和物）、アルキルパラベン（メチル、エチル、プロピル、ブチルなど）、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、デヒドロ酢酸ナトリウム、およびチメロサール、若しくはそれらの混合物よりなる群から場合によっては選択される保存剤を水性希釈剤中に含有する。限定されるものでないが、０．００１、０．００３、０．００５、０．００９、０．０１、０．０２、０．０３、０．０５、０．０９、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．３、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、またはその中のいずれかの範囲若しくは値を挙げることができる、０．００１〜５％、またはその中のいずれかの範囲若しくは値のような、いかなる適する濃度若しくは混合物も、当該技術分野で既知のとおり使用し得る。制限しない例は、保存剤なし、０．１〜２％  ｍ−クレゾール（例えば、０．２、０．３．０．４、０．５、０．９、１．０％）、０．１〜３％ベンジルアルコール（例えば、０．５、０．９、１．１、１．５、１．９、２．０、２．５％）、０．００１〜０．５％チメロサール（例えば、０．００５、０．０１）、０．００１〜２．０％フェノール（例えば、０．０５、０．２５、０．２８、０．５、０．９、１．０％）、０．０００５〜１．０％アルキルパラベン（１種若しくは複数）（例えば、０．０００７５、０．０００９、０．００１、０．００２、０．００５、０．００７５、０．００９、０．０１、０．０２、０．０５、０．０７５、０．０９、０．１、０．２、０．３、０．５、０．７５、０．９、１．０％）などを包含する。
【０１４２】
上に示されたとおり、本発明は、包装資材、ならびに場合によっては水性希釈剤中の、処方される緩衝剤および／若しくは保存剤を伴う最低１種の抗ＩＬ−１２抗体の溶液を含んでなる最低１個のバイアルを含んでなる製品を提供し、前記包装資材は、こうした溶液を、１、２、３、４、５、６、９、１２、１８、２０、２４、３０、３６、４０、４８、５４、６０、６６、７２時間若しくはそれ以上の期間にわたり保持し得ることを示すラベルを含んでなる。本発明は、包装資材、凍結乾燥した最低１種の抗ＩＬ−１２抗体を含んでなる第一のバイアル、および処方される緩衝剤若しくは保存剤の水性希釈剤を含んでなる第二のバイアルを含んでなる製品をさらに含んでなり、前記包装資材は、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体を該水性希釈在中で再構成して、２４時間若しくはそれ以上の期間にわたり保持し得る溶液を形成することを患者に指示するラベルを含んでなる。
【０１４３】
本発明により使用される最低１種の抗ＩＬ−１２抗体は、哺乳動物細胞若しくはトランスジェニック調製物からを包含する組換え手段により製造し得るか、または、本明細書に記述されるか若しくは当該技術分野で既知のとおり、他の生物学的供給源から精製し得る。
【０１４４】
本発明の製品中の最低１種の抗ＩＬ−１２抗体の範囲は、再構成に際して、ウェット／ドライ系での場合に約１．０μｇ／ｍｌから約１０００ｍｇ／ｍｌまでの濃度を生じる量を包含するとは言え、より低いおよびより高い濃度が操作可能であり、そして、意図している送達ベヒクルに依存し、例えば、溶液製剤は、経皮貼付剤、肺、経粘膜、または浸透圧若しくは微小ポンプ法と異なることができる。
【０１４５】
好ましくは、水性希釈剤は、製薬学的に許容できる保存剤を場合によってはさらに含んでなる。好ましい保存剤は、フェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、ｏ−クレゾール、クロロクレゾール、ベンジルアルコール、アルキルパラベン（メチル、エチル、プロピル、ブチルなど）、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、デヒドロ酢酸ナトリウム、およびチメロサール、若しくはそれらの混合物よりなる群から選択されるものを包含する。製剤中で使用される保存剤の濃度は、抗菌効果を生じるのに十分な濃度である。こうした濃度は、選択される保存剤に依存し、かつ、当業者により容易に決定される。
【０１４６】
他の賦形剤、例えば等張剤、緩衝剤、抗酸化剤、および保存増強剤を、場合によっては、かつ、好ましくは希釈剤に添加し得る。グリセリンのような等張剤を一般に既知濃度で使用する。生理学的に耐えられる緩衝剤を、改良されたｐＨ制御を提供するために好ましく添加する。製剤は、約ｐＨ４から約ｐＨ１０までのような広範なｐＨ、および約ｐＨ５から約ｐＨ９までの好ましい範囲、ならびに約６．０ないし約８．０の最も好ましい範囲を包括し得る。好ましくは、本発明の製剤は、約６．８と約７．８の間のｐＨを有する。好ましい緩衝剤は、リン酸緩衝液、最も好ましくはリン酸ナトリウム、とりわけ、リン酸緩衝生理的食塩水（ＰＢＳ）を包含する。
【０１４７】
Ｔｗｅｅｎ  ２０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート）、Ｔｗｅｅｎ  ４０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノパルミテート）、Ｔｗｅｅｎ  ８０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート）、プルロニック（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ）Ｆ６８（ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロックコポリマー）、およびＰＥＧ（ポリエチレングリコールのような製薬学的に許容できる可溶化剤、あるいは、ポリソルベート２０若しくは８０またはポロキサマー１８４若しくは１８８、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（Ｒ）ポリル、他のブロックコポリマーのような非イオン性界面活性剤、ならびにＥＤＴＡおよびＥＧＴＡのようなキレート剤のような他の添加物を、場合によっては、凝集を低下させるために製剤若しくは組成物に添加し得る。これらの添加物は、ポンプ若しくはプラスチック製容器を使用して製剤を投与する場合にとりわけ有用である。製薬学的に許容できる界面活性剤の存在は、タンパク質が凝集する傾向を緩和する。
【０１４８】
本発明の製剤は、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体、ならびにフェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、ｏ−クレゾール、クロロクレゾール、ベンジルアルコール、アルキルパラベン（メチル、エチル、プロピル、ブチルなど）、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、デヒドロ酢酸ナトリウムおよびチメロサールよりなる群から選択される保存剤若しくはそれらの混合物を、水性希釈在中で混合することを含んでなる方法により製造し得る。水性希釈在中で最低１種の抗ＩＬ−１２抗体および保存剤を混合することは、慣習的溶解および混合手順を使用して実施する。適する製剤を製造するため、例えば、緩衝溶液中の測定された量の最低１種の抗ＩＬ−１２抗体を、タンパク質および保存剤を所望の濃度で提供するのに十分な量で、緩衝溶液中の所望の保存剤と組み合わせる。この方法の変形物が当業者により認識されるであろう。例えば、成分を添加する順序、付加的な添加物を使用するかどうか、製剤を製造する温度およびｐＨは、全部、濃度および使用される投与手段について至適化し得る因子である。
【０１４９】
特許請求される製剤は、澄明な溶液として、あるいは、水、保存剤および／または賦形剤、好ましくは水性希釈剤中のリン酸緩衝液および／若しくは生理的食塩水ならびに選ばれた塩を含有する第二のバイアルで再構成される、凍結乾燥した最低１種の抗ＩＬ−１２抗体のバイアルを含んでなる二本のバイアルとして、患者に提供し得る。単一溶液バイアル若しくは再構成を必要とする二本のバイアルのいずれも、複数回再使用し得、また、単一若しくは複数サイクルの患者処置に十分であり得、そして、従って現在利用可能より便宜的な処置レジメンを提供し得る。
【０１５０】
本特許請求される製品は、即座から２４時間若しくはそれ以上までの範囲にわたる期間にわたる投与に有用である。従って、本特許請求される製品は、患者に大きな利点を提供する。本発明の製剤は、場合によっては、約２℃から約４０℃までの温度で安全に保存し得、かつ、タンパク質の生物学的活性を長期間保持し得、従って、該溶液を６、１２、１８、２４、３６、４８、７２若しくは９６時間またはそれ以上の期間にわたり保持かつ／若しくは使用し得ることを示す包装ラベルを可能にする。保存される希釈剤を使用する場合、こうしたラベルは１〜１２ヶ月、半年、１年半、および／若しくは２年までの使用を包含し得る。
【０１５１】
本発明の最低１種の抗ＩＬ−１２抗体の溶液は、水性希釈剤に最低１種の抗体を混合することを含んでなる方法により製造し得る。混合は、慣習的溶解および混合手順を使用して実施する。適する希釈剤を製造するため、例えば、水若しくは緩衝液中の測定された量の最低１種の抗体を、該タンパク質および場合によっては保存剤若しくは緩衝剤を所望の濃度で提供するのに十分な量で組合せる。この方法の変形物が当業者により認識されるであろう。例えば、成分を添加する順序、付加的な添加物を使用するかどうか、製剤を製造する温度およびｐＨは、全部、濃度および使用する投与様式について至適化し得る因子である。
【０１５２】
特許請求される製品は、澄明な溶液、若しくは、水性希釈剤を含有する第二のバイアルで再構成される凍結乾燥した最低１種の抗ＩＬ−１２抗体のバイアルを含んでなる二本のバイアルとして患者に提供し得る。単一溶液バイアル若しくは再構成を必要とする二本のバイアルのいずれも、複数回再使用し得、また、単一若しくは複数サイクルの患者処置に十分であり得、そして、従って、現在利用可能より便宜的な処置レジメンを提供する。
【０１５３】
特許請求される製品は、澄明な溶液、若しくは水性希釈剤を含有する第二のバイアルで再構成される凍結乾燥した最低１種の抗ＩＬ−１２抗体のバイアルを含んでなる二本のバイアルを、薬局、診療所若しくは他のこうした施設（ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ）および施設（ｆａｃｉｌｉｔｙ）に提供することにより、患者に間接的に提供し得る。この場合の澄明な溶液は、それから最低１種の抗体の溶液のより小さい部分をより小さいバイアルへの移動のために１若しくは複数回取得し得る大きなリザーバを提供する、大きさが１リットルまでもしくはなおより大きいことができ、そして薬局若しくは診療所によりそれらの顧客および／若しくは患者に提供され得る。
【０１５４】
単一バイアル系を含んでなる認識される装置は、例えばＢｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｅｎｓｅｎ（ニュージャージー州フランクリンレイクス、ｗｗｗ．ｂｅｃｔｏｎｄｉｃｋｅｎｓｏｎ．ｃｏｍ）、Ｄｉｓｅｔｒｏｎｉｃ（スイス・ブルクドルフ、ｗｗｗ．ｄｉｓｅｔｒｏｎｉｃ．ｃｏｍ；Ｂｉｏｊｅｃｔ、オレゴン州ポートランド（ｗｗｗ．ｂｉｏｊｅｃｔ．ｃｏｍ）；Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、Ｗｅｓｔｏｎ  Ｍｅｄｉｃａｌ（英国ピータースボロ、ｗｗｗ．ｗｅｓｔｏｎ−ｍｅｄｉｃａｌ．ｃｏｍ）、Ｍｅｄｉ−Ｊｅｃｔ  Ｃｏｒｐ（ミネソタ州ミネアポリス、ｗｗｗ．ｍｅｄｉｊｅｃｔ．ｃｏｍ）により作成若しくは開発されたところの、ＢＤ  Ｐｅｎ、ＢＤ  Ａｕｔｏｊｅｃｔｏｒ（Ｒ）、Ｈｕｍａｊｅｃｔ（Ｒ）、ＮｏｖｏＰｅｎ（Ｒ）、Ｂ−Ｄ（Ｒ）Ｐｅｎ、ＡｕｔｏＰｅｎ（Ｒ）、およびＯｐｔｉＰｅｎ（Ｒ）、ＧｅｎｏｔｒｏｐｉｎＰｅｎ（Ｒ）、Ｇｅｎｏｔｒｏｎｏｒｍ  Ｐｅｎ（Ｒ）、Ｈｕｍａｔｒｏ  Ｐｅｎ（Ｒ）、Ｒｅｃｏ−Ｐｅｎ（Ｒ）、Ｒｏｆｅｒｏｎ  Ｐｅｎ（Ｒ）、Ｂｉｏｊｅｃｔｏｒ（Ｒ）、Ｉｊｅｃｔ（Ｒ）、Ｊ−ｔｉｐ  Ｎｅｅｄｌｅ−Ｆｒｅｅ  Ｉｎｊｅｃｔｏｒ（Ｒ）、Ｉｎｔｒａｊｅｃｔ（Ｒ）、Ｍｅｄｉ−Ｊｅｃｔ（Ｒ）のような溶液の送達のためのペン型注入器装置、および類似の適する装置を包含する。二本のバイアルの系を含んでなる認識される装置は、ＨｕｍａｔｒｏＰｅｎ（Ｒ）のような、再構成した溶液の送達のために、凍結乾燥した薬物をカートリッジ中で再構成するためのペン型注入器装置を包含する。適する他の装置の例は、充填済みシリンジ、自動注入装置、無針注入器、および無針ＩＶ注入セットを包含する。
【０１５５】
本特許請求される製品は包装資材を包含する。包装資材は、規制当局により要求される情報に加え、該製品を使用し得る条件を提供する。本発明の包装資材は、２本のバイアルすなわち水分を含む（ｗｅｔ）／水分を含まない（ｄｒｙ）製品について、水性希釈在中で最低１種の抗ＩＬ−１２抗体を再構成して溶液を形成しかつ該溶液を２〜２４時間若しくはそれ以上の期間にわたり使用するための説明書を患者に提供する。単一バイアルの溶
液製品については、ラベルは、こうした溶液を２〜２４時間若しくはそれ以上の期間にわたり使用し得ることを示す。本特許請求される製品は、ヒトの製薬学的製品の使用に有用である。
【０１５６】
本発明の製剤は、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体および選択された緩衝液、好ましくは生理的食塩水若しくは選ばれた塩を含有するリン酸緩衝液を混合することを含んでなる方法により製造し得る。最低１種の抗ＩＬ−１２抗体および緩衝剤を水性希釈剤中で混合することは、慣習的溶解および混合手順を使用して実施する。適する製剤を製造するため、例えば、水若しくは緩衝液中の測定された量の最低１種の抗体を、該タンパク質および緩衝剤を所望の濃度で提供するのに十分な量で、水中で所望の緩衝剤と組合せる。本方法の変形物が当業者により認識されるであろう。例えば、成分を添加する順序、付加的な添加物を使用するかどうか、製剤を製造する温度およびｐＨは、全部、濃度および使用する投与手段について至適化し得る因子である。
【０１５７】
特許請求される安定なすなわち保存される製剤は、澄明な溶液として、または、保存剤若しくは緩衝剤および賦形剤を水性希釈剤中に含有する第二のバイアルで再構成される、凍結乾燥した最低１種の抗ＩＬ−１２抗体のバイアルを含んでなる二本のバイアルとして、患者に提供し得る。単一溶液バイアル若しくは再構成を必要とする二本のバイアルのいずれも、複数回再使用し得、また、単一若しくは複数サイクルの患者処置に十分であり得、そして、従って現在利用可能より便宜的な処置レジメンを提供する。
【０１５８】
抗ＩＬ−１２抗体を安定化する他の製剤若しくは方法は、抗体を含んでなる凍結乾燥した粉末の澄明な溶液以外をもたらしうる。微粒子懸濁液を含んでなる製剤は澄明でない溶液のひとつであり、前記微粒子は、変動する寸法の、およびミクロスフェア、微粒子、ナノ粒子、ナノスフェア若しくはリポソームとして多様に既知の構造に抗ＩＬ−１２抗体を含有する組成物である。有効成分を含有するこうした比較的均質な、本質的に球状の微粒子製剤は、米国特許第４，５８９，３３０号明細書に教示されるとおり、有効成分およびポリマーを含有する水相ならびに非水相を接触させること、次いで非水相を蒸発させて水相からの粒子の合着を引き起こすことにより形成し得る。多孔性微粒子は、米国特許第４，８１８，５４２号明細書に教示されるとおり、連続溶媒中に分散された有効成分およびポリマーを含有する第一相を使用し、かつ、凍結乾燥若しくは希釈−抽出−沈殿により該懸濁液から前記溶媒を除去して製造し得る。こうした製剤に好ましいポリマーは、ゼラチン寒天、デンプン、アラビノガラクタン、アルブミン、コラーゲン、ポリグリコール酸、ポリ乳酸、グリコリド−Ｌ（−）ラクチドポリ（ε−カプロラクトン、ポリ（ε−カプロラクトン−ＣＯ−乳酸）、ポリ（ε−カプロラクトン−ＣＯ−グリコール酸）、ポリ（β−ヒドロキシ酪酸）、ポリエチレンオキシド、ポリエチレン、ポリ（アルキル−２−シアノアクリレート）、ポリ（ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリアミド、ポリ（アミノ酸）、ポリ（２−ヒドロキシエチルＤＬ−アスパルトアミド）、ポリ（エステル尿素）、ポリ（Ｌ−フェニルアラニン／エチレングリコール／１，６−ジイソシアナトヘキサン）およびポリ（メチルメタクリレート）よりなる群から選択される、天然若しくは合成のコポリマー若しくはポリマーである。とりわけ好ましいポリマーは、ポリグリコール酸、ポリ乳酸、グリコリド−Ｌ（−）ラクチドポリ（ε−カプロラクトン、ポリ（ε−カプロラクトン−ＣＯ−乳酸）、およびポリ（ε−カプロラクトン−ＣＯ−グリコール酸のようなポリエステルである。ポリマーおよび／若しくは有効成分を溶解するのに有用な溶媒は：水、ヘキサフルオロイソプロパノール、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、ヘキサン、ベンゼン、若しくはヘキサフルオロアセトンセスキ水和物を包含する。有効成分含有相の第二相での分散方法は、前記第一の相にノズルのオリフィスを通過させて液滴形成に影響を及ぼす圧を包含しうる。
【０１５９】
乾燥粉末製剤は、噴霧乾燥若しくは溶媒抽出、蒸発、または結晶組成物の沈殿、次いで
水性若しくは非水性溶媒を除去するための１若しくはそれ以上の段階によるような、凍結乾燥以外の方法から生じうる。噴霧乾燥抗体製剤の製造法は米国特許第６，０１９，９６８号明細書に教示される。抗体に基づく乾燥粉末組成物は、溶媒中の抗体および場合によっては賦形剤の溶液若しくはスラリーを、吸い込み可能な乾燥粉末を提供するための条件下で噴霧乾燥することにより製造し得る。溶媒は、容易に乾燥されうる水およびエタノールのような極性化合物を包含しうる。抗体の安定性は、窒素ブランケット下、若しくは乾燥ガスとして窒素を使用することによるような、酸素の非存在下で噴霧乾燥手順を実施することにより高めうる。別の比較的乾燥した製剤は、第ＷＯ  ９９１６４１９号明細書に教示されるところの、典型的にはヒドロフルオロアルカン噴射剤を含んでなる懸濁媒体中に分散された複数の穿孔した微小構造の分散体である。安定化された分散系は、定量式吸入器を使用して患者の肺に投与しうる。噴霧乾燥医薬品の商業生産で有用な設備は、Ｂｕｃｈｉ  Ｌｔｄ．若しくはＮｉｒｏ  Ｃｏｒｐ．により製造されている。
【０１６０】
本明細書に記述される安定なすなわち保存される製剤若しくは溶液いずれ中の最低１種の抗ＩＬ−１２抗体も、ＳＣ若しくはＩＭ注入；経皮、肺、経粘膜、植込物、浸透圧ポンプ、カートリッジ、微小ポンプ、若しくは当該技術分野で公知のところの当業者により認識される他の手段を包含する、多様な送達方法を介して、本発明により患者に投与し得る。
【０１６１】
治療的応用
本発明は、本発明の最低１種のＩＬ−１２抗体を使用する、例えば細胞、組織、器官、動物若しくは患者に治療的有効量のＩＬ−１２抗体を投与若しくはそれらと接触させる、当該技術分野で既知若しくは本明細書に記述されるところの、細胞、組織、器官、動物若しくは患者での最低１種のＩＬ−１２関連疾患の調節若しくは処置方法もまた提供する。本発明は、限定されるものでないが、肥満、免疫関連疾患、心血管系疾患、感染性疾患、悪性疾患若しくは神経学的疾患の最低１種を挙げることができる、細胞、組織、器官、動物若しくは患者における最低１種のＩＬ−１２関連疾患の調節若しくは処置方法もまた提供する。
【０１６２】
本発明は、限定されるものでないが、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、全身発症型若年性関節リウマチ、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、胃潰瘍、血清陰性の関節症、変形性関節炎、骨溶解、整形外科植込物の無菌的弛緩、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、全身性エリテマトーデス、抗リン脂質症候群、虹彩毛様体炎／ブドウ膜炎／視神経炎、特発性肺線維症、全身性血管炎／ヴェゲナー肉芽腫症、サルコイドーシス、精巣炎／精管切除復帰処置、アレルギー性／アトピー性疾患、喘息、アレルギー性鼻炎、湿疹、アレルギー性接触皮膚炎、アレルギー性結膜炎、過敏性肺炎、移植、臓器移植拒絶、移植片対宿主病、全身性炎症応答症候群、敗血症症候群、グラム陽性敗血症、グラム陰性敗血症、培養陰性敗血症、真菌性敗血症、好中球減少熱、尿路性敗血症、髄膜炎菌血症、外傷／出血、火傷、イオン化放射被曝、急性膵炎、成人呼吸窮迫症候群、関節リウマチ、アルコール誘発性肝炎、慢性炎症の病状、サルコイドーシス、クローンの病状、鎌状赤血球貧血、糖尿病、ネフローゼ、アトピー疾患、過敏反応、アレルギー性鼻炎、花粉症、通年性鼻炎、結膜炎、子宮内膜症、喘息、蕁麻疹、全身性アナフィラキシー、皮膚炎、悪性貧血、溶血性疾患、血小板減少症、いずれかの臓器若しくは組織の移植拒絶、腎移植拒絶、心移植拒絶、肝移植拒絶、膵移植拒絶、肺移植拒絶、骨髄移植（ＢＭＴ）拒絶、皮膚同種移植拒絶、軟骨移植拒絶、骨移植拒絶、小腸移植拒絶、胎児胸腺移植拒絶、副甲状腺移植拒絶、いずれかの臓器若しくは組織の異種移植拒絶、同種移植拒絶、抗受容体過敏反応、グレーヴズ病、レイノー病、Ｂ型インスリン抵抗型糖尿病、喘息、重症筋無力症、抗体媒介性細胞傷害、ＩＩＩ型過敏反応、ＰＯＥＭＳ症候群（多発性神経炎、臓器巨大症、内分泌異常症、単一クローン性高γグロブリン血症、および皮膚病変の症候群）、多発性神経炎、臓器巨大症、内分泌異常症、単一クローン性高γグロブリン血症、皮膚病変症候群、抗リン脂質症候群、天疱瘡、強皮症、混合型結合組織疾患、特発性アジソン病、糖尿病、慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、白斑、血管炎、心筋梗塞後心切開症候群、ＩＶ型過敏症、接触皮膚炎、過敏性肺炎、同種移植拒絶、細胞内生物体による肉芽腫、薬物過敏症（代謝性／特発性）、ウィルソン病、ヘモクロマトーシス、α−１−アンチトリプシン欠乏症、糖尿病性網膜症、橋本甲状腺炎、骨粗鬆症、視床下部−下垂体−副腎系の評価、原発性胆汁性肝硬変、甲状腺炎、脳脊髄炎、悪液質、嚢胞性線維症、新生児の慢性肺疾患、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、家族性血球貪食性リンパ組織球症、皮膚科的状態、乾癬、脱毛症、ネフローゼ症候群、腎炎、糸球体腎炎、急性腎不全、血液透析、尿毒症、毒性、子癇前症、ｏｋｔ３療法、抗ｃｄ３療法、サイトカイン療法、化学療法、放射線治療（限定されるものでないが無力症、貧血、悪液質などを挙げることができる）、慢性サリチル酸中毒などの最低１種を挙げることができる、細胞、組織、器官、動物若しくは患者における最低１種のＩＬ−１２に関係する免疫関連疾患の調節若しくは処置方法もまた提供する。例えば、Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ、第１２〜１７版、Ｍｅｒｃｋ  ＆  Ｃｏｍｐａｎｙ、ニュージャージー州ローウェイ（１９７２、１９７７、１９８２、１９８７、１９９２、１９９９）、Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ、Ｗｅｌｌｓら編、第２版、Ａｐｐｌｅｔｏｎ  ａｎｄ  Ｌａｎｇｅ、コネチカット州スタンフォード（１９９８、２０００）（それぞれそっくりそのまま引用することにより組み込まれる）を参照されたい。
【０１６３】
本発明は、限定されるものでないが、心突然死（ｃａｒｄｉａｃ  ｓｔｕｎ）症候群、心筋梗塞、うっ血性心不全、卒中、虚血性発作、出血、動脈硬化、アテローム硬化症、再狭窄、糖尿病性動脈硬化性疾患、高血圧、動脈性高血圧、腎血管性高血圧、失神、ショック、心血管系の梅毒、心不全、肺性心、原発性肺高血圧症、心不整脈、心房性異所性拍動、心房粗動、心房細動（持続性若しくは発作性）、灌流後症候群、心肺バイパス炎症応答、多源性すなわち多病巣性心房性頻拍、規則的な幅の狭いＱＲＳ頻拍、特定の（ｓｐｅｃｉｆｉｃ）不整脈、心室細動、Ｈｉｓ束不整脈、房室ブロック、脚ブロック、心筋虚血性障害、冠動脈疾患、狭心症、心筋梗塞、心筋症、拡張型うっ血性心筋症、拘束型心筋症、心臓弁疾患、心内膜炎、心膜疾患、心腫瘍、大動脈および末梢動脈瘤、大動脈解離、大動脈の炎症、腹部大動脈およびその分枝の閉塞、末梢血管障害、閉塞性動脈障害、末梢アテローム硬化性疾患、閉塞性血栓性血管炎、機能的末梢動脈障害、レイノー現象およびレイノー病、先端チアノーゼ、先端紅痛症、静脈疾患、静脈血栓、静脈瘤、動静脈瘻、リンパ浮腫、脂肪浮腫、不安定型狭心症、再灌流傷害、ポンプ後症候群、虚血−再灌流傷害などの最低１を挙げることができる、細胞、組織、器官、動物若しくは患者における最低１種の心血管系疾患の調節若しくは処置方法もまた提供する。こうした方法は、場合によっては、こうした調節、処置若しくは治療の必要な細胞、組織、器官、動物若しくは患者に、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体を含んでなる組成物若しくは製薬学的組成物の有効量を投与することを含み得る。
【０１６４】
本発明は、限定されるものでないが、急性若しくは慢性細菌感染症、細菌、ウイルスおよび真菌感染を包含する急性および慢性の寄生虫若しくは感染の過程、ＨＩＶ感染／ＨＩＶニューロパシー、髄膜炎、肝炎（例えばＡ、Ｂ若しくはＣなど）、化膿性関節炎、腹膜炎、肺炎、咽頭蓋炎、大腸菌（ｅ．ｃｏｌｉ）０１５７：ｈ７、溶血性尿毒症症候群／血栓溶解性血小板減少性紫斑病、マラリア、デング出血熱、リーシュマニア症、らい、毒性ショック症候群、ブドウ球菌性筋炎、ガス壊疽、ヒト結核菌（ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、トリ結核菌群（ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｅ）、ニューモシスチス・カリニ（ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｃａｒｉｎｉｉ）肺炎、骨盤炎症性疾患、精巣炎／精巣上体炎、レジオネラ、ライム病、インフルエンザａ型、エプスタイン−バーウイルス、ウイルス関連血液貪食性症候群、ウイルス性脳炎／無菌性髄膜炎などの最低１種を挙げることができる、細胞、組織、器官、動物若しくは患者での最低１種のＩＬ−１２に関係する感染性疾患の調節若しくは処置方法もまた提供する。
【０１６５】
本発明は、限定されるものでないが、白血病、急性白血病、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性リンパ球性白血病、Ｂ細胞、Ｔ細胞若しくはＦＡＢ  ＡＬＬ、急性骨髄性（ｍｙｅｌｏｉｄ）白血病（ＡＭＬ）、急性骨髄性（ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ）白血病、慢性骨髄性（ｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃ）白血病（ＣＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、ヘアリーセル白血病、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、リンパ腫、ホジキン病、悪性リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、多発性骨髄腫、カポシ肉腫、結腸直腸癌、膵癌、上咽頭癌、悪性組織球増殖症、新生物随伴症候群／悪性病変の高カルシウム血症、充実性腫瘍、膀胱癌、乳癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌、頭部癌、頚部癌、遺伝性非ポリポーシス癌、ホジキンリンパ腫、肝癌、肺癌、非小細胞肺癌、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、腎細胞癌、睾丸癌、腺癌、肉腫、悪性黒色腫、血管腫、転移性疾患、癌関連の骨吸収、癌関連の骨痛などの最低１種を挙げることができる、細胞、組織、器官、動物若しくは患者での最低１種のＩＬ−１２に関係する悪性疾患の調節若しくは処置方法もまた提供する。
【０１６６】
本発明は、限定されるものでないが、神経変性疾患、多発性硬化症、偏頭痛、ＡＩＤＳ痴呆症候群、多発性硬化症および急性横断脊髄炎のような脱髄性疾患；皮質脊髄系の病変のような錐体外路および小脳の障害；基底核の障害；ハンチントン舞踏病および老人性舞踏病のような運動亢進性運動障害；ＣＮＳのドパミン受容体を遮断する薬物により誘発されるもののような薬物誘発性の運動障害：パーキンソン病のような運動低下性運動障害；進行性核上性麻痺；小脳の構造的病変；脊髄性運動失調、フリートライヒ運動失調、小脳皮質変性、多系統変性（メンセル、デジェリーヌ−トーマス、シャイ−ドレーガーおよびマシャド−ヨーゼフ）のような脊髄小脳変性；全身障害（レフサム病、無β−リポ蛋白血症、運動失調、末梢血管拡張症およびミトコンドリアの多系統障害）；多発性硬化症、急性横断脊髄炎のような脱髄核（ｄｅｍｙｅｌｉｎａｔｉｎｇ  ｃｏｒｅ）障害；ならびに、神経原性筋萎縮症（筋萎縮性側索硬化症、乳児の脊髄性筋萎縮症および若年性脊髄性筋萎縮症のような前角細胞変性）のような運動単位の障害；アルツハイマー病；中年のダウン症候群；びまん性レヴィー小体病；レヴィー小体型の老人性痴呆；ウェルニッケ−コルサコフ症候群；慢性アルコール症；クロイツフェルト−ヤコブ病；亜急性硬化性汎脳炎、ハレルフォルデン−シュパッツ症候群；ボクサー痴呆；神経外傷性傷害（例えば脊髄傷害、脳傷害、脳震盪、反復性脳震盪）；疼痛；炎症性疼痛；自閉症；うつ；卒中；認知障害；癲癇などの最低１種を挙げることができる、細胞、組織、器官、動物若しくは患者での最低１種のＩＬ−１２関連の神経学的疾患の調節若しくは処置方法もまた提供する。こうした方法は、場合によっては、こうした調節、処置若しくは治療の必要な細胞、組織、器官、動物若しくは患者に、最低１種のＴＮＦ抗体または指定される部分若しくはバリアントを含んでなる組成物若しくは製薬学的組成物の有効量を投与することを含み得る。例えば、Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ、第１６版、Ｍｅｒｃｋ  ＆  Ｃｏｍｐａｎｙ、ニュージャージー州ローウェイ（１９９２）を参照されたい。
【０１６７】
本発明は、限定されるものでないが、歯周外科手術、抜歯（１本若しくは複数）、歯内処置、歯インプラントの挿入、義歯の適用および使用を包含する口腔外科手術に関連する身体の傷害若しくは外傷；または、創傷が、無菌的創傷、挫傷、切創、裂傷、非貫通創、開放創、貫通創、穿孔創、刺創、化膿性創傷、梗塞性および皮下創よりなる群から選択される場合；あるいは、創傷が、虚血性潰瘍、褥瘡、瘻、重篤な咬創、熱傷およびドナー部位創傷（ｄｏｎｏｒ  ｓｉｔｅ  ｗｏｕｎｄ）よりなる群から選択される場合；あるいは、創傷が、アフタ性創傷、外傷性創傷若しくはヘルペス関連創傷である場合の最低１種を挙げることができる、細胞、組織、器官、動物若しくは患者での最低１種のＩＬ−１２に関係する創傷、外傷若しくは組織傷害、または関係する慢性状態の調節若しくは処置方法もまた提供する。
【０１６８】
創傷および／若しくは潰瘍は、通常、皮膚から突出して、若しくは粘膜表面に、またはある器官中の梗塞（「卒中」）の結果として見出される。創傷は、軟組織の欠陥若しくは病変または根底にある状態の結果でありうる。本情況において、「皮膚」という用語は、ヒトを包含する動物の身体の最外表面を指し、そして無傷若しくはほぼ無傷の皮膚ならびに損傷した皮膚表面を包含する。「粘膜」という用語は、ヒトのような動物の損傷を受けていない若しくは損傷を受けた粘膜に関し、そして、口腔、頬側、耳、鼻、肺、眼、胃腸、膣若しくは直腸粘膜でありうる。
【０１６９】
本情況において、「創傷」という用語は、組織構造の正常な完全性の破壊を伴う身体の傷害を示す。該用語は「びらん」、「病変」、「壊死」および「潰瘍」という用語を包含することもまた意図している。通常、「びらん」という用語は皮膚若しくは粘膜のほぼいかなる病変についても一般的な用語であり、また、「潰瘍」という用語は、壊死組織の脱落により生じられる器官若しくは組織の表面の局所の欠陥すなわち窩である。病変は一般にいかなる組織の欠陥にも関する。壊死は、感染、傷害、炎症若しくは梗塞から生じる死組織に関する。
【０１７０】
本情況で使用されるところの「創傷」という用語は、いずれの創傷（創傷の分類については下を参照されたい）、および、いずれかの治癒が開始する前、若しくはなお外科切創のような特定の損傷が作成される前（予防的処置）の段階を包含する、治癒過程のいずれの特定の段階でも示す。本発明により予防かつ／若しくは処置し得る創傷の例は、例えば、無菌的創傷、挫傷、切創、裂創、非貫通創（すなわち皮膚の破壊が存在しないがしかし下の構造に対する傷害が存在する創傷）、開放創、貫通創、穿孔創、刺創、化膿性創傷、皮下創などである。びらんの例は、褥瘡（ｂｅｄ  ｓｏｒｅ）、アフタ、クロムびらん（ｃｈｒｏｍｅ  ｓｏｒｅ）、単純疱疹、褥瘡（ｐｒｅｓｓｕｒｅ  ｓｏｒｅ）などである。潰瘍の例は、例えば、消化性潰瘍、十二指腸潰瘍、胃潰瘍、痛風潰瘍、糖尿病性潰瘍、高血圧性虚血性潰瘍、うっ血性潰瘍、下腿潰瘍（静脈性潰瘍）、舌下潰瘍、粘膜下潰瘍、症候性潰瘍、栄養性潰瘍、熱帯潰瘍、ならびに例えば淋病により引き起こされる性病性潰瘍（尿道炎、子宮頚内膜炎および直腸炎を包含する）である。本発明により成功裏に処置しうる創傷若しくはびらんに関する状態は、火傷、炭疽、破傷風、ガス壊疽、猩紅熱（ｓｃａｌａｔｉｎａ）、丹毒、尋常性毛瘡、毛包炎、伝染性膿痂疹、若しくは水疱性膿痂疹などである。「創傷」および「潰瘍」ならびに「創傷」および「びらん」という用語の使用の間にある種の重なりがしばしば存在し、また、さらに、該用語はしばしば無作為に使用される。従って、上で挙げられたとおり、本情況において、「創傷」という用語は「潰瘍」、「病変」、「びらん」および「梗塞」という用語を包含し、そして、該用語は、別の方法で示されない限り、無差別に使用される。
【０１７１】
本発明により処置されるべき創傷の種類は、（ｉ）例えば外科的、外傷性、感染性、虚血性、熱性、化学的および水疱性創傷のような一般的創傷；（ｉｉ）例えば抜歯後創傷、とりわけ嚢胞および膿瘍の処置と関連する歯内創傷、細菌、ウイルス若しくは自己免疫学的起源の潰瘍および病変、機械的、化学的、熱性、感染性および苔癬様創傷のような口腔に特異的な創傷；ヘルペス潰瘍、アフタ性口内炎、急性壊死性潰瘍性歯肉炎および口内焼灼感症候群は特殊な例である；ならびに（ｉｉｉ）例えば新生物、火傷（例えば化学的、熱性）、病変（細菌性、ウイルス性、自己免疫学的）、咬傷および外科的切創のような皮膚の創傷もまた包含する。創傷の別の分類方法は、（ｉ）外科的切開、小剥離および小咬傷による小組織喪失として、若しくは（ｉｉ）重大な組織喪失としてである。後者の群は、虚血性潰瘍、褥創、瘻、裂傷、重篤な咬傷、熱傷およびドナー部位創傷（軟および硬組織における）ならびに梗塞を包含する。
【０１７２】
本発明に関して重要である他の創傷は、虚血性潰瘍、褥創、瘻、重篤な咬傷、熱傷およびドナー部位創傷のような創傷である。虚血性潰瘍および褥創は、通常非常にゆっくりと
しか治癒しない創傷であり、そしてとりわけこうした場合には、向上されかつより迅速な治癒過程が、もちろん、患者に非常に重要である。さらに、こうした創傷に苦しめられる患者の処置に関与する費用は、治癒が改善されかつより迅速に起こる場合に顕著に低減される。
【０１７３】
ドナー部位創傷は、例えば、例えば移植に関連しての身体の一部から身体の別の部分への硬組織の取り出しと関連して発生する創傷である。こうした操作から生じる創傷は非常に痛みを伴い、そして、向上された治癒が従って最も有益である。「皮膚」という用語は、皮膚の表皮層、および、皮膚表面がいくぶん損傷されている場合には皮膚の真皮層もまた包含する非常に広範な意味で使用される。角質層は別にして、皮膚の表皮層は最外（上皮）層であり、そして、皮膚のより深部の結合組織層は真皮と呼ばれる。
【０１７４】
本発明は、限定されるものでないが、免疫関連疾患、心血管系疾患、感染性、悪性および／若しくは神経学的疾患の最低１種を挙げることができる、細胞、組織、器官、動物若しくは患者において、ＩＬ−１２関連として上で列挙された他の疾患のなかで、クローン病、乾癬および多発性硬化症の調節若しくは処置方法もまた提供する。こうした方法は、こうした調節、処置若しくは治療の必要な細胞、組織、器官、動物若しくは患者に、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体を含んでなる最低１種の組成物若しくは製薬学的組成物の有効量を投与することを場合によっては含み得る。
【０１７５】
本発明のいかなる方法も、こうした調節、処置若しくは治療の必要な細胞、組織、器官、動物若しくは患者に、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体を含んでなる組成物若しくは製薬学的組成物の有効量を投与することを含み得る。こうした方法は、場合によっては、前記最低１種の抗ＩＬ−１２抗体、その指定される部分若しくはバリアントの投与が、最低１種のＴＮＦアンタゴニスト（限定されるものでないがＴＮＦの化学物質若しくはタンパク質アンタゴニスト、ＴＮＦのモノクローナル若しくはポリクローナル抗体またはフラグメント、可溶性ＴＮＦ受容体（例えばｐ５５、ｐ７０若しくはｐ８５）またはフラグメント、それらの融合ポリペプチド、あるいは小分子ＴＮＦアンタゴニスト、例えばＴＮＦ結合タンパク質Ｉ若しくはＩＩ（ＴＢＰ−Ｉ若しくはＴＢＰ−ＩＩ）、ネレリモンマブ、インフリキシマブ、エテルナセプト（ＥｎｂｒｅｌＴＭ）、アダリムラブ（ＨｕｍｉｒａＴＭ）、ＣＤＰ−５７１、ＣＤＰ−８７０、アフェリモマブ、レネルセプトなどを挙げることができる）、抗リウマチ薬（例えばメトトレキサート、オーラノフィン、金チオグルコース、アザチオプリン、金チオリンゴ酸ナトリウム、硫酸ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、サルファサルジン）、筋弛緩薬、麻薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、鎮痛薬、麻酔薬、鎮静薬、局所麻酔薬、神経筋遮断薬、抗菌薬（例えば、アミノグリコシド、抗真菌薬、駆虫薬、抗ウイルス薬、カルバペネム、セファロスポリン、フルロルキノロン、マクロライド、ペニシリン、スルホンアミド、テトラサイクリン、別の抗菌薬）、抗乾癬薬、コルチコステロイド、蛋白同化ステロイド、糖尿病関連薬、ミネラル、栄養薬、甲状腺薬、ビタミン、カルシウム関連ホルモン、止瀉薬、鎮咳薬、制吐薬、抗潰瘍薬、緩下剤、抗凝固薬、エリスロポエチン（例えばエポエチンα）、フィルグラスチム（例えばＧ−ＣＳＦ、ニューポジェン（Ｎｅｕｐｏｇｅｎ））、サルグラモスチム（ＧＭ−ＣＳＦ、リューカイン（Ｌｅｕｋｉｎｅ））、免疫化、免疫グロブリン、免疫抑制薬（例えばバシリキシマブ、シクロスポリン、ダクリズマブ）、成長ホルモン、ホルモン補充薬、エストロゲン受容体調節物質、散瞳薬、毛様体筋麻痺薬、アルキル化薬、代謝拮抗薬、分裂阻害剤、放射性医薬品、抗うつ薬、抗躁薬、抗精神病薬、抗不安薬、催眠薬、交感神経刺激薬、刺激薬、ドネペジル、タクリン、喘息医薬品、βアゴニスト、吸入ステロイド、ロイコトリエン阻害剤、メチルキサンチン、クロモリン、エピネフリン若しくはアナログ、ドルナーゼアルファ（プルモザイム（Ｐｕｌｍｏｚｙｍｅ））、サイトカイン若しくはサイトカインアンタゴニストから選択される最低１種を前、同時におよび／若しくは後に投与することをさらに含んでなる、こうした疾患若しくは障害を処置するための共投与若しくは併用療法をさらに含み得る。適する投薬量は当該技術分野で公知である。例えば、Ｗｅｌｌｓら編、Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ、第２版、Ａｐｐｌｅｔｏｎ  ａｎｄ  Ｌａｎｇｅ、コネチカット州スタンフォード（２０００）；ＰＤＲ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ、Ｔａｒａｓｃｏｎ  Ｐｏｃｋｅｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ  ２０００、豪華版、Ｔａｒａｓｃｏｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、カリフォルニア州ロマリンダ（２０００）；Ｎｕｒｓｉｎｇ  ２００１  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｄｒｕｇｓ、第２１版、Ｓｐｒｉｎｇｈｏｕｓｅ  Ｃｏｒｐ．、カリフォルニア州スプリングハウス、２００１；Ｈｅａｌｔｈ  Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ’ｓ  Ｄｒｕｇ  Ｇｕｉｄｅ  ２００１、Ｓｈａｎｎｏｎ、Ｗｉｌｓｏｎ、Ｓｔａｎｇ編、Ｐｒｅｎｔｉｃｅ−Ｈａｌｌ，Ｉｎｃ、ニュージャージー州アッパーサドルリバー（それらの参考文献のそれぞれはそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）を参照されたい。
【０１７６】
本発明の組成物、併用療法、共投与、装置および／若しくは方法（本発明の最低１種の抗体、その指定される部分およびバリアントをさらに含んでなる）に適するＴＮＦアンタゴニストは、限定されるものでないが、抗ＴＮＦ抗体（例えば、上で定義されたところの最低１種のＴＮＦアンタゴニスト）、その抗原結合フラグメント、およびＴＮＦに特異的に結合する受容体分子；サリドマイド、テニダップ、ホスホジエステラーゼ阻害剤（例えばペントキシフィリンおよびロリプラム）、Ａ２ｂアデノシン受容体アゴニストならびにＡ２ｂアデノシン受容体増強物質のような、ＴＮＦ合成、ＴＮＦ放出若しくは標的細胞に対するその作用を予防かつ／若しくは阻害する化合物；マイトジェン活性化タンパク質（ＭＡＰ）キナーゼ阻害剤のような、ＴＮＦ受容体のシグナル伝達を予防かつ／若しくは阻害する化合物；メタロプロテイナーゼ阻害剤のような、膜ＴＮＦ切断を遮断かつ／若しくは阻害する化合物；アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤（例えばカプトプリル）のような、ＴＮＦ活性を遮断かつ／若しくは阻害する化合物；ならびに、ＭＡＰキナーゼ阻害剤のような、ＴＮＦ産生および／若しくは合成を遮断かつ／若しくは阻害する化合物を挙げることができる。
【０１７７】
本明細書で使用されるところの「腫瘍壊死因子抗体」、「ＴＮＦ抗体」、「ＴＮＦα抗体」若しくはフラグメントなどは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ、ｉｎ  ｓｉｔｕおよび／若しくは好ましくはｉｎ  ｖｉｖｏで、ＴＮＦαの活性を低下、遮断、阻害、除外若しくは妨害する。例えば、本発明の適するＴＮＦヒト抗体は、ＴＮＦαを結合し得、そして、抗ＴＮＦ抗体、その抗原結合フラグメント、およびＴＮＦαに特異的に結合するその指定される変異体若しくはドメインを包含する。適するＴＮＦ抗体若しくはフラグメントは、ＴＮＦのＲＮＡ、ＤＮＡ若しくはタンパク質合成、ＴＮＦ放出、ＴＮＦ受容体シグナル伝達、膜ＴＮＦ切断、ＴＮＦ活性、ＴＮＦ産生および／若しくは合成もまた低下遮断、除外、妨害、予防かつ／若しくは阻害し得る。
【０１７８】
ＴＮＦ抗体若しくはアンタゴニストの一例はキメラ抗体ｃＡ２である。本発明で使用し得るモノクローナル抗ＴＮＦ抗体の付加的な例は、当該技術分野で記述されている（例えば、米国特許第５，２３１，０２４号明細書；Ｍｏｅｌｌｅｒ，Ａ．ら、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ２（３）：１６２−１６９（１９９０）；米国特許出願第０７／９４３，８５２号明細書（１９９２年９月１１日出願）；Ｒａｔｈｊｅｎら、国際特許公開第ＷＯ  ９１／０２０７８号明細書（１９９１年２月２１日公開）；Ｒｕｂｉｎら、ＥＰＯ特許公開第０  ２１８  ８６８号明細書（１９８７年４月２２日公開）；Ｙｏｎｅら、ＥＰＯ特許公開第０  ２８８  ０８８号明細書（１９８８年１０月２６日）；Ｌｉａｎｇら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．１３７：８４７−８５４（１９８６）；Ｍｅａｇｅｒら、Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ  ６：３０５−３１１（１９８７）；Ｆｅｎｄｌｙら、Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ  ６：３５９−３６９（１９８７）；Ｂｒｉｎｇｍａｎら、Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ  ６：４８９−５０７（１９８７）；およびＨｉｒａｉら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．９６：５７−６２（１９８７）（これらの参考文献はそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）を参照されたい）。
【０１７９】
ＴＮＦ受容体分子
本発明で有用な好ましいＴＮＦ受容体分子は、高親和性でＴＮＦαを結合し（例えば、Ｆｅｌｄｍａｎｎら、国際特許公開第ＷＯ  ９２／０７０７６号明細書（１９９２年４月３０日公開）；Ｓｃｈａｌｌら、Ｃｅｌｌ  ６１：３６１−３７０（１９９０）；およびＬｏｅｔｓｃｈｅｒら、Ｃｅｌｌ  ６１：３５１−３５９（１９９０）（これらの参考文献はそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）を参照されたい）かつ場合によっては低免疫原性を有するものである。とりわけ、５５ｋＤａ（ｐ５５  ＴＮＦ−Ｒ）および７５ｋＤａ（ｐ７５  ＴＮＦ−Ｒ）のＴＮＦ細胞表面受容体が本発明で有用である。該受容体の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）若しくはそれらの機能的部分を含んでなるこれらの受容体の切断型の形態（例えば、Ｃｏｒｃｏｒａｎら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２２３：８３１−８４０（１９９４）を参照されたい）もまた本発明で有用である。ＥＣＤを含んでなる、切断型の形態のＴＮＦ受容体は、３０ｋＤａおよび４０ｋＤａのＴＮＦα阻害性結合タンパク質として、尿および血清中で検出されている（Ｅｎｇｅｌｍａｎｎ，Ｊ．ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６５：１５３１−１５３６（１９９０））。ＴＮＦ受容体多量体分子およびＴＮＦ免疫受容体融合分子、ならびにそれらの誘導体およびフラグメント若しくは部分は、本発明の方法および組成物で有用であるＴＮＦ受容体分子の付加的な例である。
【０１８０】
本発明で有用なＴＮＦ受容体の多量体分子は、１種若しくはそれ以上のポリペプチドリンカー、若しくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）のような他の非ペプチドリンカーを介して連結された２個若しくはそれ以上のＴＮＦ受容体のＥＣＤの全部若しくは機能的一部分を含んでなる。こうしたＴＮＦ免疫受容体融合分子の一例はＴＮＦ受容体／ＩｇＧ融合タンパク質である。ＴＮＦ免疫受容体融合分子、およびそれらの製造方法は当該技術分野で記述されている（Ｌｅｓｓｌａｕｅｒら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２１：２８８３−２８８６（１９９１）；Ａｓｈｋｅｎａｚｉら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８８：１０５３５−１０５３９（１９９１）；Ｐｅｐｐｅｌら、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７４：１４８３−１４８９（１９９１）；Ｋｏｌｌｓら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９１：２１５−２１９（１９９４）；Ｂｕｔｌｅｒら、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ６（６）：６１６−６２３（１９９４）；Ｂａｋｅｒら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２０４０−２０４８（１９９４）；Ｂｅｕｔｌｅｒら、米国特許第５，４４７，８５１号明細書；および米国特許出願第０８／４４２，１３３号明細書（１９９５年５月１６日出願）（これらの参考文献のそれぞれはそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる））。免疫受容体融合分子の製造方法は、Ｃａｐｏｎら、米国特許第５，１１６，９６４号明細書；Ｃａｐｏｎら、米国特許第５，２２５，５３８号明細書；およびＣａｐｏｎら、Ｎａｔｕｒｅ  ３３７：５２５−５３１（１９８９）（これらの参考文献はそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）にもまた見出し得る。
【０１８１】
サイトカインはいかなる既知のサイトカインも包含する。例えばＣｏｐｅｗｉｔｈＣｙｔｏｋｉｎｅｓ．ｃｏｍを参照されたい。サイトカインアンタゴニストは、限定されるものでないが、いかなる抗体、フラグメント若しくは模倣物、いかなる可溶性受容体、フラグメント若しくは模倣物、いかなる小分子アンタゴニストまたはそれらのいかなる組合せも挙げることができる。
【０１８２】
治療的処置
本発明のいかなる方法も、こうした調節、処置若しくは治療の必要な細胞、組織、器官、動物若しくは患者に、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体を含んでなる組成物若しくは製薬学的組成物の有効量を投与することを含んでなる、ＩＬ−１２媒介性の障害の処置方法を含み得る。こうした方法は、前記最低１種の抗ＩＬ−１２抗体、その指定される部分若しくはバリアントの投与が、抗感染症薬、心血管（ＣＶ）系薬、中枢神経系（ＣＮＳ）薬、自律神経系（ＡＮＳ）薬、気道薬、胃腸（ＧＩ）管薬、ホルモン薬、液体若しくは電解質バランスのための薬物、血液学的薬物、抗腫瘍薬、免疫調節薬、目、耳若しくは鼻の薬物、局所薬、栄養薬など、最低１種のＴＮＦアンタゴニスト（限定されるものでないが、ＴＮＦ抗体若しくはフラグメント、可溶性ＴＮＦ受容体若しくはフラグメント、それらの融合タンパク質、または小分子ＴＮＦアンタゴニストを挙げることができる）、抗リウマチ薬（例えばメトトレキサート、オーラノフィン、金チオグルコース、アザチオプリン、エタネルセプト、金チオリンゴ酸ナトリウム、硫酸ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、サルファサルジン）、筋弛緩薬、麻薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、鎮痛薬、麻酔薬、鎮静薬、局所麻酔薬、神経筋遮断薬、抗菌薬（例えば、アミノグリコシド、抗真菌薬、駆虫薬、抗ウイルス薬、カルバペネム、セファロスポリン、フルロルキノロン、マクロライド、ペニシリン、スルホンアミド、テトラサイクリン、別の抗菌薬）、抗乾癬薬、コルチコステロイド、蛋白同化ステロイド、糖尿病関連薬、ミネラル、栄養薬、甲状腺薬、ビタミン、カルシウム関連ホルモン、止瀉薬、鎮咳薬、制吐薬、抗潰瘍薬、緩下剤、抗凝固薬、エリスロポエチン（例えばエポエチンα）、フィルグラスチム（例えばＧ−ＣＳＦ、ニューポジェン（Ｎｅｕｐｏｇｅｎ））、サルグラモスチム（ＧＭ−ＣＳＦ、リューカイン（Ｌｅｕｋｉｎｅ））、免疫化、免疫グロブリン、免疫抑制薬（例えばバシリキシマブ、シクロスポリン、ダクリズマブ）、成長ホルモン、ホルモン補充薬、エストロゲン受容体調節物質、散瞳薬、毛様体筋麻痺薬、アルキル化薬、代謝拮抗薬、分裂阻害剤、放射性医薬品、抗うつ薬、抗躁薬、抗精神病薬、抗不安薬、催眠薬、交感神経刺激薬、刺激薬、ドネペジル、タクリン、喘息医薬品、βアゴニスト、吸入ステロイド、ロイコトリエン阻害剤、メチルキサンチン、クロモリン、エピネフリン若しくはアナログ、ドルナーゼアルファ（プルモザイム（Ｐｕｌｍｏｚｙｍｅ））、サイトカイン若しくはサイトカインアンタゴニストから選択される最低１種を前、同時にかつ／若しくは後に投与することをさらに含んでなる、こうした疾患若しくは障害を処置するための共投与若しくは併用療法を場合によってはさらに含み得る。本明細書に提示されるそれぞれについて、製剤、適応症、投薬および投与を包含するこうした薬物は当該技術分野で公知である（例えば、Ｎｕｒｓｉｎｇ  ２００１  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｄｒｕｇｓ、第２１版、Ｓｐｒｉｎｇｈｏｕｓｅ  Ｃｏｒｐ．、ペンシルバニア州スプリングハウス、２００１；Ｈｅａｌｔｈ  Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ’ｓ  Ｄｒｕｇ  Ｇｕｉｄｅ  ２００１、Ｓｈａｎｎｏｎ、Ｗｉｌｓｏｎ、Ｓ��ａｎｇ編、Ｐｒｅｎｔｉｃｅ−Ｈａｌｌ，Ｉｎｃ、ニュージャージー州アッパーサドルリバー；Ｐｈａｒｍｃｏｔｈｅｒａｐｙ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ、Ｗｅｌｌｓら編、Ａｐｐｌｅｔｏｎ  ＆  Ｌａｎｇｅ、コネチカット州スタンフォード（それぞれそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）を参照されたい）。
【０１８３】
典型的には、病理学的状態の処置は、組成物中に含有される有効成分の比活性に依存して、平均して合計で用量あたり患者１キログラムあたり最低約０．０１から５００ミリグラムまでの最低１種の抗ＩＬ−１２抗体、および好ましくは単一若しくは複数投与あたり最低約０．１から１００ミリグラム抗体／患者１キログラムまでの範囲になる、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体組成物の有効量若しくは投薬量を投与することにより遂げられる。あるいは、有効血清濃度は、単一若しくは複数投与あたり０．１〜５０００μｇ／ｍｌの血清濃度を含み得る。適する投薬量は医学実務者に既知であり、そして、もちろん、特定の疾患状態、投与されている組成物の比活性、および処置を受けている特定の患者に依存することができる。いくつかの場合には、所望の治療量を達成するために、反復投与、すなわち、所望の１日用量若しくは効果が達成されるまで個々の投与を反復する、特定のモニター若しくは計量される用量の反復個別投与を提供することが必要であり得る。
【０１８４】
好ましい用量は、場合によっては、投与あたり０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９および／若しくは１００〜５００ｍｇ／ｋｇ、またはそのいずれかの範囲、値若しくは画分、あるいは、単一若しくは複数投与あたり０．１、０．５、０．９、１．０、１．１、１．２、１．５、１．９、２．０、２．５、２．９、３．０、３．５、３．９、４．０、４．５、４．９、５．０、５．５、５．９、６．０、６．５、６．９、７．０、７．５、７．９、８．０、８．５、８．９、９．０、９．５、９．９、１０、１０．５、１０．９、１１、１１．５、１１．９、２０、１２．５、１２．９、１３．０、１３．５、１３．９、１４．０、１４．５、４．９、５．０、５．５．、５．９、６．０、６．５、６．９、７．０、７．５、７．９、８．０、８．５、８．９、９．０、９．５、９．９、１０、１０．５、１０．９、１１、１１．５、１１．９、１２、１２．５、１２．９、１３．０、１３．５、１３．９、１４、１４．５、１５、１５．５、１５．９、１６、１６．５、１６．９、１７、１７．５、１７．９、１８、１８．５、１８．９、１９、１９．５、１９．９、２０、２０．５、２０．９、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９６、１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、１５００、２０００、２５００、３０００、３５００、４０００、４５００、および／若しくは５０００μｇ／ｍｌの血清濃度、またはそのいずれかの範囲、値若しくは画分の血清濃度を達成するためを包含し得る。
【０１８５】
あるいは、投与される投薬量は、特定の剤の薬力学的特徴、ならびにその投与様式および経路；受領者の齢、健康状態および重量；症状の性質および程度、付随する処置の種類、処置の頻度、ならびに所望の効果のような既知の因子に依存して変動し得る。通常、有効成分の投薬量は、体重１キログラムあたり約０．１ないし１００ミリグラムであり得る。通常、投与あたり若しくは徐放形態物で、０．１ないし５０、および好ましくは０．１ないし１０ミリグラムが、所望の結果を得るのに有効である。
【０１８６】
制限しない一例として、ヒト若しくは動物の処置は、単一、注入若しくは反復用量を使用して、第１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９若しくは４０日の最低１、または、あるいは、若しくは付加的に、第１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１若しくは５２週の最低１、または、あるいは、若しくは付加的に、１、２、３、４、５、６，、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９若しくは２０年の最低１、あるいはそれらの組合せに、１日あたり０．５、０．９、１．０、１．１、１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０若しくは１００ｍｇ／ｋｇのような、０．１ないし１００ｍｇ／ｋｇの本発明の最低１種の抗体の一時若しくは定期的投薬量として提供し得る。
【０１８７】
内的投与に適する投薬形態物（組成物）は、一般に、単位若しくは容器あたり約０．０
０１ミリグラムから約５００ミリグラムまでの有効成分を含有する。これらの製薬学的組成物中で、有効成分は、通常、該組成物の総重量に基づき、約０．５〜９９．９９９重量％の量で存在することができる。
【０１８８】
非経口投与のためには、該抗体は、製薬学的に許容できる非経口ベヒクルとともに、溶液、懸濁剤、乳剤、粒子、散剤若しくは凍結乾燥粉末として処方し得るか、または別個に提供し得る。こうしたベヒクルの例は、水、生理的食塩水、リンゲル液、Ｄ−ブドウ糖溶液、および１〜１０％ヒト血清アルブミンである。リポソーム、および不揮発性油のような非水性ベヒクルもまた使用し得る。ベヒクル若しくは凍結乾燥粉末は、等張性（例えば塩化ナトリウム、マンニトール）ならびに化学的安定性（例えば緩衝剤および保存剤）を維持する添加物を含有し得る。該製剤は既知の若しくは適する技術により滅菌する。
【０１８９】
適する製薬学的担体は、本分野の標準的参照教科書、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ａ．Ｏｓｏｌの最新版に記述されている。
【０１９０】
代替投与
多くの既知のかつ開発された様式を、本発明の最低１種の抗ＩＬ−１２抗体の製薬学的有効量を投与するために、本発明により使用し得る。肺投与を以下の記述で使用する一方、他の投与様式を、適する結果を伴い、本発明により使用し得る。本発明のＩＬ−１２抗体は、担体中で、溶液、乳液、コロイド若しくは懸濁液として、または乾燥粉末として、吸入による投与に適する多様な装置および方法、または本明細書に記述されるか若しくは当該技術分野で既知の他の様式のいずれかを使用して、送達し得る。
【０１９１】
非経口製剤および投与
非経口投与のための製剤は、共通の賦形剤として、滅菌水若しくは生理的食塩水、ポリエチレングリコールのようなポリアルキレングリコール、植物起源の油、水素化ナフタレンなどを含有し得る。注入のための水性若しくは油性懸濁剤は、適切な乳化剤若しくは湿潤剤および懸濁化剤を既知の方法に従って使用することにより製造し得る。注入のための剤は、水性溶液、溶媒中の無菌の注入可能な溶液若しくは懸濁液のような、非毒性の非経口で投与可能な希釈剤であり得る。使用可能なベヒクル若しくは溶媒として、水、リンゲル液、等張生理的食塩水などが許容され；通例の溶媒若しくは懸濁化溶媒として、無菌の不揮発性油を使用し得る。これらの目的上、天然若しくは合成若しくは半合成の脂肪油若しくは脂肪酸；天然若しくは合成若しくは半合成のモノ若しくはジ若しくはトリグリセリドを包含する、いかなる種類の不揮発性油および脂肪酸も使用し得る。非経口投与は当該技術分野で既知であり、そして、限定されるものでないが、慣習的注入手段、米国特許第５，８５１，１９８号明細書に記述されるところのガス加圧式無針注入装置、および米国特許第５，８３９，４４６号明細書（そっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）に記述されるところのレーザー穿孔機装置を挙げることができる。
【０１９２】
代替送達
本発明は、非経口、皮下、筋肉内、静脈内、動脈内、気管支内、腹腔内（ｉｎｔｒａａｂｄｏｍｉｎａｌ）、嚢内、軟骨内、腔内、腹腔内（ｉｎｔｒａｃｅｌｉａｌ）、小脳内、脳室内、結腸内、頚部内、胃内、肝内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内（ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）、胸腔内、前立腺内、肺内、直腸内、腎内、網膜内、髄腔内、滑液包内、胸郭内、子宮内、膀胱内、病変内、ボーラス、膣、直腸、頬側、舌下、鼻内若しくは経皮手段による最低１種の抗ＩＬ−１２抗体の投与にさらに関する。最低１種の抗ＩＬ−１２抗体組成物は、とりわけ液体の溶液若しくは懸濁液の形態物で非経口（皮下、筋肉内若しくは静脈内）またはいずれかの他の投与のための使用のため；とりわけ、限定されるものでないがクリーム剤および坐剤を挙げることができる半固形の形態物での膣若しくは直腸投与での使用のため；限定されるものでないが錠剤若しくはカプセル剤の形態物でを挙げることができる頬側若しくは舌下投与のため；あるいは、限定されるものでないが散剤、点鼻薬若しくはエアゾルまたはある種の剤の形態物を挙げることができる鼻内で；あるいは、皮膚構造を改変するか若しくは経皮貼付剤中の薬物濃度を増大させるかのいずれかのためのジメチルスルホキシドのような化学的増強剤（Ｊｕｎｇｉｎｇｅｒら  “Ｄｒｕｇ  Ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ  Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ；”Ｈｓｉｅｈ，Ｄ．Ｓ．編中、ｐｐ．５９−９０（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．ニューヨーク  １９９４（そっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる））、あるいはタンパク質およびペプチドを含有する製剤の皮膚上への塗布を可能にする酸化剤（第ＷＯ  ９８／５３８４７号明細書）、または電気穿孔法のような一過性の輸送経路を創製するため、若しくはイオントフォレーシスのような皮膚を通る荷電した薬物の移動性を増大させるための電場の適用、またはソノフォレーシスのような超音波の適用（米国特許第４，３０９，９８９号および同第４，７６７，４０２号明細書）（上の刊行物および特許は、そっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）を伴う、限定されるものでないがゲル剤、軟膏剤、ローション剤、懸濁剤若しくは貼付剤送達系を挙げることができる経皮で、製造し得る。
【０１９３】
肺／鼻投与
肺投与のためには、好ましくは、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体組成物は、肺の下部気道若しくは副鼻腔に達するのに有効な粒子径で送達される。本発明により、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体は、吸入による治療薬の投与のための当該技術分野で既知の多様な吸入若しくは鼻装置のいずれによっても送達し得る。患者の副鼻腔洞若しくは肺胞中にエアゾル化した製剤を沈着させることが可能なこれらの装置は、定量式吸入器、ネブライザー、乾燥粉末生成装置、噴霧器などを包含する。抗体の肺若しくは鼻投与を指図するのに適する他の装置もまた当該技術分野で既知である。全部のこうした装置は、エアゾル中に抗体を分散させるための投与に適する処方を使用し得る。こうしたエアゾルは溶液（水性および非水性双方）若しくは固体粒子いずれからも構成され得る。
【０１９４】
Ｖｅｎｔｏｌｉｎ（Ｒ）定量式吸入器のような定量式吸入器は、典型的に噴射剤ガスを使用し、そして、吸入の間に起動を必要とする（例えば、第ＷＯ  ９４／１６９７０号、同第ＷＯ  ９８／３５８８８号明細書を参照されたい）。ＴｕｒｂｕｈａｌｅｒＴＭ（Ａｓｔｒａ）、Ｒｏｔａｈａｌｅｒ（Ｒ）（Ｇｌａｘｏ）、Ｄｉｓｋｕｓ（Ｒ）（Ｇｌａｘｏ）、ＳｐｉｒｏｓＴＭ吸入器（Ｄｕｒａ）、Ｉｎｈａｌｅ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓにより市販されている装置、およびＳｐｉｎｈａｌｅｒ（Ｒ）粉末吸入器（Ｆｉｓｏｎｓ）のような乾燥粉末吸入器は、混合粉末の呼吸起動を使用する（米国特許第４，６６８，２１８号  Ａｓｔｒａ、欧州特許第ＥＰ  ２３７５０７号  Ａｓｔｒａ、第ＷＯ  ９７／２５０８６号  Ｇｌａｘｏ、第ＷＯ  ９４／０８５５２号  Ｄｕｒａ、米国特許第５，４５８，１３５号  Ｉｎｈａｌｅ、第ＷＯ  ９４／０６４９８号明細書  Ｆｉｓｏｎｓ（そっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる））。ＡＥＲｘＴＭ  Ａｒａｄｉｇｍ、Ｕｌｔｒａｖｅｎｔ（Ｒ）ネブライザー（Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ）およびＡｃｏｒｎ  ＩＩ（Ｒ）ネブライザー（Ｍａｒｑｕｅｓｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）（米国特許第５，４０４，８７１号  Ａｒａｄｉｇｍ、第ＷＯ  ９７／２２３７６号明細書）（上の参考文献はそっくりそのまま引用することにより本明細書に組み込まれる）のようなネブライザーは、溶液からエアゾルを生じる一方、定量式吸入器、乾燥粉末吸入器などは小粒子エアゾルを生成する。商業的に入手可能な吸入装置のこれらの特定の例は、本発明の実務に適する特定の装置の代表であることを意図しており、そして本発明の範囲を制限するとして意図していない。
【０１９５】
好ましくは、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体を含んでなる組成物は、乾燥粉末吸入器若しくは噴霧器により送達する。本発明の最低１種の抗体を投与するための吸入装置のいくつかの望ましい特徴が存在する。例えば、吸入装置による送達は、有利に信頼でき、再現可
能、かつ正確である。吸入装置は、場合によっては、良好な吸入可能性のため、小乾燥粒子、例えば約１０μｍ未満、好ましくは約１〜５μｍを送達し得る。
【０１９６】
ＩＬ−１２抗体組成物のスプレーとしての投与
ＩＬ−１２抗体組成物を包含するスプレーは、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体の懸濁液若しくは溶液に、加圧下にノズルを通させることにより生じさせ得る。ノズルの大きさおよび構造、適用される圧、ならびに液体供給速度は、所望の出力および粒子径を達成するように選ぶことができる。例えば毛細管若しくはノズル供給とともにの電場により、エレクトロスプレーを生じさせ得る。有利には、噴霧器により送達される最低１種の抗ＩＬ−１２抗体組成物の粒子は、約１０μｍ未満、好ましくは約１μｍないし約５μｍの範囲、および最も好ましくは約２μｍないし約３μｍの粒子径を有する。
【０１９７】
噴霧器での使用に適する最低１種の抗ＩＬ−１２抗体組成物の製剤は、典型的に、溶液１ｍｌあたり約０．１ｍｇないし約１００ｍｇの最低１種の抗ＩＬ−１２抗体組成物若しくはｍｇ／ｇｍ、またはその中のいずれかの範囲若しくは値、例えば、限定されるものでないが０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０若しくは１００ｍｇ／ｍｌ若しくはｍｇ／ｇｍを挙げることができる濃度で、水性溶液中に抗体組成物を包含する。製剤は、賦形剤、緩衝剤、等張剤、保存剤、界面活性剤、および好ましくは亜鉛のような剤を包含し得る。製剤は、緩衝剤、還元剤、バルクタンパク質若しくは炭水化物のような、抗体組成物の安定化のための賦形剤若しくは剤もまた包含し得る。抗体組成物の処方において有用なバルクタンパク質は、アルブミン、プロタミンなどを包含する。抗体組成物の処方において有用な典型的な炭水化物は、ショ糖、マンニトール、乳糖、トレハロース、ブドウ糖などを包含する。抗体組成物製剤は、エアゾルの形成における溶液の霧状化により引き起こされる抗体組成物の表面誘導性の凝集を低下若しくは予防し得る界面活性剤もまた包含し得る。ポリオキシエチレン脂肪酸エステルおよびアルコール、ならびにポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステルのような、多様な慣習的界面活性剤を使用し得る。量は、一般に、製剤の０．００１と１４重量％の間の範囲にわたることができる。本発明の目的上とりわけ好ましい界面活性剤は、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０などである。ＩＬ−１２抗体または指定される部分若しくはバリアントのようなタンパク質の製剤のための当該技術分野で既知の付加的な剤もまた、製剤に包含し得る。
【０１９８】
ネブライザーによるＩＬ−１２抗体組成物の投与
本発明の抗体組成物は、ジェットネブライザー若しくは超音波ネブライザーのようなネブライザーにより投与し得る。典型的に、ジェットネブライザーにおいては、加圧空気供給源を使用して、オリフィスを通して高速空気ジェットを創製する。ガスがノズルを越えて膨張する際に、低圧領域が創製され、これが、液体リザーバに接続された毛細管を通して抗体組成物の溶液を引く。毛細管からの液体流は、それが管を出る際に、不安定な細糸および液滴に剪断されてエアゾルを創製する。ある範囲の構造、流速およびバッフル型を使用して、所定のジェットネブライザーから所望の性能の特徴を達成し得る。超音波ネブライザーでは、高周波電気エネルギーを使用して、典型的には圧電変換器を使用して振動的機械エネルギーを創製する。このエネルギーが、直接に若しくはカップリング液を通してのいずれかで、抗体組成物の製剤に伝播され、抗体組成物を包含するエアゾルを創製する。有利には、ネブライザーにより送達される抗体組成物の粒子は、約１０μｍ未満、好ましくは約１μｍないし約５μｍの範囲、および最も好ましくは約２μｍないし約３μｍの粒子径を有する。
【０１９９】
ジェット若しくは超音波いずれかのネブライザーでの使用に適する最低１種の抗ＩＬ−１２抗体の製剤は、典型的に、溶液１ｍｌあたり約０．１ｍｇないし約１００ｍｇの最低１種の抗ＩＬ−１２抗体タンパク質の濃度を包含する。該製剤は、賦形剤、緩衝剤、等張剤、保存剤、界面活性剤、および好ましくは亜鉛のような剤を包含し得る。製剤は、緩衝剤、還元剤、バルクタンパク質若しくは炭水化物のような、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体組成物の安定化のための賦形剤若しくは剤もまた包含し得る。最低１種の抗ＩＬ−１２抗体組成物の処方において有用なバルクタンパク質は、アルブミン、プロタミンなどを包含する。最低１種の抗ＩＬ−１２抗体の処方において有用な、典型的な炭水化物は、ショ糖、マンニトール、乳糖、トレハロース、ブドウ糖などを包含する。最低１種の抗ＩＬ−１２抗体製剤は、エアゾルの形成における溶液の霧状化により引き起こされる、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体の表面誘導性の凝集を低下若しくは予防し得る界面活性剤もまた包含し得る。ポリオキシエチレン脂肪酸エステルおよびアルコール、ならびにポリオキシエチレンソルビタル脂肪酸エステルのような、多様な慣習的界面活性剤を使用し得る。量は、一般に、製剤の０．００１と４重量％の間の範囲にわたることができる。本発明の目的上とりわけ好ましい界面活性剤は、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０などである。抗体タンパク質のようなタンパク質の製剤について当該技術分野で既知の付加的な剤もまた、該製剤中に包含し得る。
【０２００】
定量式吸入器によるＩＬ−１２抗体組成物の投与
定量式吸入器（ＭＤＩ）には、噴射剤、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体、およびいずれかの賦形剤若しくは他の添加物が、液化圧縮ガスを包含する混合物としてキャニスター中に含有される。計量バルブの起動が、好ましくは約１０μｍ未満、好ましくは約１μｍないし約５μｍ、および最も好ましくは約２μｍないし約３μｍの大きさ範囲の粒子を含有するエアゾルとして、該混合物を放出する。所望のエアゾル粒子径は、ジェットミル粉砕、噴霧乾燥、臨界点凝縮などを包含する、当業者に既知の多様な方法により製造される抗体組成物の製剤を使用することにより、得ることができる。好ましい定量式吸入器は、３Ｍ若しくはＧｌａｘｏにより製造されかつヒドロフルオロカーボン噴射剤を使用するものを包含する。定量式吸入器装置での使用のための最低１種の抗ＩＬ−１２抗体の製剤は、一般に、例えば界面活性剤の助けを借りて噴射剤中に懸濁された、非水性媒体中の懸濁液として、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体を含有する微粉にされた粉末を包含することができる。噴射剤は、トリクロロフルオロメタン、ジクロロジフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタノールおよび１，１，１，２−テトラフルオロエタン、ＨＦＡ−１３４ａ（ヒドロフルロアルカン−１３４ａ）、ＨＦＡ−２２７（ヒドロフルロアルカン−２２７）などを包含する、クロロフルオロカーボン、ヒドロクロロフルオロカーボン、ヒドロフルオロカーボン若しくは炭化水素のような、この目的上使用されるいかなる慣習的物質でもあり得る。好ましくは、噴射剤はヒドロフルオロカーボンである。界面活性剤は、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体を噴射剤中の懸濁液として安定化する、化学的分解に対し有効成分を保護する、などのために選ぶことができる。適する界面活性剤は、トリオレイン酸ソルビタン、ダイズレシチン、オレイン酸などを包含する。いくつかの場合には、エタノールのような溶媒を使用する溶液エアゾルが好ましい。タンパク質の製剤について当該技術分野で既知の付加的な剤もまた、該製剤に包含し得る。当業者は、本発明の方法が、本明細書に記述されない装置を介しての最低１種の抗ＩＬ−１２抗体組成物の肺投与により達成され得ることを認識するであろう。
【０２０１】
経口製剤および投与
経口投与のための製剤は、腸壁の浸透性を人工的に増大させるための補助物質（例えば、レゾルシノール、ならびにポリオキシエチレンオレイルエーテルおよびｎ−ヘキサデシルポリエチレンエーテルのような非イオン性界面活性剤）の共投与、ならびに、酵素的分解を阻害するための酵素阻害剤（例えば、膵トリプシンインヒビター、ジイソプロピルフルオロリン酸（ＤＦＦ）およびトラシロール）の共投与に頼る。タンパク質および抗体を包含する親水性の剤および経口、頬側、粘膜、鼻、肺、膣経粘膜若しくは直腸投与に意図している最低２種の界面活性剤の組合せの送達のための製剤は、米国特許第６，３０９，６６３号明細書に教示されている。経口投与のための固体型投薬形態物の有効構成成分を、ショ糖、乳糖、セルロース、マンニトール、トレハロース、ラフィノース、マルチトール、デキストラン、デンプン、寒天、アルギン酸塩、キチン、キトサン、ペクチン、トラガカントガム、アラビアゴム、ゼラチン、コラーゲン、カゼイン、アルブミン、合成若しくは半合成ポリマー、およびグリセリドを包含する最低１種の添加物と混合し得る。これらの投薬形態物は、他の型（１種若しくは複数）の添加物、例えば、不活性希釈剤、ステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤、パラベン、ソルビン酸、アスコルビン酸、α−トコフェロールのような保存剤、システインのような抗酸化剤、崩壊剤、結合剤、増粘剤、緩衝剤、甘味料、着香料、香料などもまた含有し得る。
【０２０２】
錠剤および丸剤は腸溶コーティング製剤にさらに加工し得る。経口投与のための液体製剤は、医学的使用に許容できる、乳剤、シロップ剤、エリキシル剤、懸濁剤および溶液製剤を包含する。これらの製剤は、前記分野で通例に使用される不活性希釈剤、例えば水を含有し得る。リポソームはインスリンおよびヘパリンの薬物送達系としてもまた記述されている（米国特許第４，２３９，７５４号明細書）。より最近、混合アミノ酸の人工的ポリマーのミクロスフェア（プロテイノイド（ｐｒｏｔｅｉｎｏｉｄ））が、医薬品を送達するために使用されている（米国特許第４，９２５，６７３号明細書）。さらに、米国特許第５，８７９，６８１号および同第５，５，８７１，７５３号明細書に記述されかつ生物学的有効成分を経口で送達するのに使用される担体化合物が、当該技術分野で既知である。
【０２０３】
粘膜製剤および投与
１種若しくはそれ以上の生物適合性ポリマー若しくはコポリマー賦形剤、好ましくは生物分解性ポリマー若しくはコポリマーに被包化され、生じるマイクロカプセルの適正な大きさにより剤の到達をもたらすマイクロカプセルを提供し、かつ、胃腸管を通過した剤による有効性の喪失を伴わずに、別名、動物の「パイエル板」若しくは「ＧＡＬＴ」として知られる集合リンパ小節により取り込まれる、生物活性の剤を経口で投与するための製剤。類似の集合リンパ小節は気管支（ｂｒｏｎｃｈｅｉ  ｔｕｂｅ）（ＢＡＬＴ）および大腸に見出し得る。上述された組織は、一般に粘膜関連リンパ組織（ＭＡＬＴ）と称される。粘膜表面を通る吸収のため、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体の組成物および投与方法は、複数の、ミクロン以下の粒子、粘膜付着性巨大分子、生物活性ペプチド、および乳剤粒子の粘膜付着を達成することにより粘膜表面を通る吸収を促進する水性連続層を含んでなる乳剤を包含する（米国特許第５，５１４，６７０号明細書）。本発明の乳剤の適用に適する粘膜表面は、角膜、結膜、頬側、舌下、鼻、膣、肺、胃、腸および直腸の投与経路を包含し得る。膣若しくは直腸投与のための製剤、例えば坐剤は、賦形剤として、例えばポリアルキレングリコール、ワセリン、カカオバターなどを含有し得る。鼻内投与のための製剤は固体であり得、かつ、賦形剤として例えば乳糖を含有し得るか、または点鼻薬の水性若しくは油性溶液であり得る。頬側投与のためには、賦形剤は、糖、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、糊化済デンプンなどを包含する（米国特許第５，８４９，６９５号明細書）。
【０２０４】
経皮製剤および投与
経皮投与のためには、最低１種の抗ＩＬ−１２抗体を、リポソーム若しくはポリマーナノ粒子、微小粒子、マイクロカプセル若しくはミクロスフェア（別の方法で述べられない限り、微小粒子と集合的に称する）のような送達装置中に被包化する。ポリ乳酸、ポリグリコール酸のようなポリヒドロキシ酸およびそれらのコポリマー、ポリオルトエステル、ポリ無水物ならびにポリホスファゼンのような合成ポリマー、ならびに、コラーゲン、ポリアミノ酸、アルブミンおよび他のタンパク質、アルギン酸塩および他の多糖のような天
然のポリマー、ならびにそれらの組合せから作成される微小粒子を包含する、多数の適する装置が既知である（米国特許第５，８１４，５９９号明細書）。
【０２０５】
長時間投与および製剤
本発明の化合物を、単一投与から長時間にわたり、例えば１週ないし１年の期間、被験体に送達することがときに望ましいことができる。多様な遅延放出、デポー若しくは植込投薬形態物を利用し得る。例えば、投薬形態物は、体液中での低い程度の溶解性を有する化合物の製薬学的に許容できる非毒性の塩、例えば（ａ）リン酸、硫酸、クエン酸、酒石酸、タンニン酸、パモ酸、アルギン酸、ポリグルタミン酸、ナフタレンモノ若しくはジスルホン酸、ポリガラクツロン酸などのような多塩基酸との酸付加塩；（ｂ）亜鉛、カルシウム、ビスマス、バリウム、マグネシウム、アルミニウム、銅、コバルト、ニッケル、カドミウムなどのような多価金属陽イオン、または例えばＮ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン若しくはエチレンジアミンから形成される有機陽イオンとの塩；あるいは（ｃ）（ａ）および（ｂ）の組合せ、例えばタンニン酸亜鉛の塩を含有し得る。加えて、本発明の化合物、若しくは、好ましくは、たった今記述されたもののような比較的不溶性の塩を、ゲル、例えば、注入に適する例えばゴマ油を含むモノステアリン酸アルミニウムゲル中で処方し得る。とりわけ好ましい塩は、亜鉛塩、タンニン酸亜鉛塩、パモ酸塩などである。注入のための別の型の遅延放出デポー製剤は、被包化のために、例えば米国特許第３，７７３，９１９号明細書に記述されるところのポリ乳酸／ポリグリコール酸ポリマーのようなゆっくりと分解する非毒性の非抗原性ポリマーに分散された化合物若しくは塩を含有することができる。化合物、若しくは、好ましくは、上述されたもののような比較的不溶性の塩は、とりわけ動物での使用のためにコレステロールマトリックスのシラスティックペレット中でもまた処方し得る。付加的な遅延放出、デポー若しくは植込製剤、例えば気体若しくは液体リポソームが文献で既知である（米国特許第５，７７０，２２２号明細書、および“Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ”、Ｊ．Ｒ．Ｒｏｂｉｎｓｏｎ編、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．、ニューヨーク、１９７８）。
【０２０６】
実施例
本発明を全般的に記述したので、それは、具体的説明として提供されかつ制限するとして意図していない、以下の実施例を参照してより容易に理解されるであろう。
【実施例１】
【０２０７】
ＩＬ−１２抗体のクローニングおよび哺乳動物細胞中での発現。
【０２０８】
典型的な哺乳動物発現ベクターは、ｍＲＮＡの転写の開始を媒介する最低１個のプロモーター要素、抗体コーディング配列、ならびに転写の終止および転写物のポリアデニル化に必要とされるシグナルを含有する。付加的な要素は、エンハンサー、コザック配列、ならびにＲＮＡスプライシングのためのドナーおよびアクセプター部位により隣接される介在配列を包含する。高度に効率的な転写は、ＳＶ４０からの初期および後期プロモーター、レトロウイルス、例えばＲＳＶ、ＨＴＬＶＩ、ＨＩＶＩからの末端反復配列（ＬＴＲ）、ならびにサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）の初期プロモーターを用いて達成し得る。しかしながら、細胞性要素もまた使用し得る（例えばヒトアクチンプロモーター）。本発明の実施における使用のための適する発現ベクターは、例えば、ｐＩＲＥＳ１ｎｅｏ、ｐＲｅｔｒｏ−Ｏｆｆ、ｐＲｅｔｒｏ−Ｏｎ、ＰＬＸＳＮ、若しくはｐＬＮＣＸ（Ｃｌｏｎｅｔｅｃｈ  Ｌａｂｓ、カリフォルニア州パロアルト）、ｐｃＤＮＡ３．１（＋／−）、ｐｃＤＮＡ／Ｚｅｏ（＋／−）若しくはｐｃＤＮＡ３．１／Ｈｙｇｒｏ（＋／−）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、ＰＳＶＬおよびＰＭＳＧ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ、スウェーデン・ウプサラ）、ｐＲＳＶｃａｔ（ＡＴＣＣ  ３７１５２）、ｐＳＶ２ｄｈｆｒ（ＡＴＣＣ  ３７１４６）ならびにｐＢＣ１２ＭＩ（ＡＴＣＣ  ６７１０９）のようなベクターを包含する。使用し得る哺乳動物宿主細胞は、ヒトＨｅｌａ  ２９３、Ｈ９およびＪｕｒｋａｔ細胞、マウスＮＩＨ３Ｔ３およびＣ１２７細胞、Ｃｏｓ  １、Ｃｏｓ  ７およびＣＶ  １、ウズラＱＣ１−３細胞、マウスＬ細胞、ならびにチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞を包含する。あるいは、遺伝子は、染色体に組込まれた遺伝子を含有する安定細胞株中で発現され得る。ｄｈｆｒ、ｇｐｔ、ネオマイシン若しくはハイグロマイシンのような選択可能なマーカーとのコトランスフェクションは、トランスフェクトした細胞の同定および単離を可能にする。
【０２０９】
トランスフェクトした遺伝子は、大量のコードされる抗体を発現するようにまた増幅もし得る。ＤＨＦＲ（ジヒドロ葉酸還元酵素）マーカーは、数百若しくはなお数千コピーの目的の遺伝子を保有する細胞株を開発するのに有用である。別の有用な選択マーカーは酵素グルタミン合成酵素（ＧＳ）である（Ｍｕｒｐｈｙら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．２２７：２７７−２７９（１９９１）；Ｂｅｂｂｉｎｇｔｏｎら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
１０：１６９−１７５（１９９２））。これらのマーカーを使用して、哺乳動物細胞を選択培地で増殖させ、そして最高の耐性を伴う細胞を選択する。これらの細胞株は、染色体中に組込まれた増幅された遺伝子（１種若しくは複数）を含有する。チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）およびＮＳＯ細胞は、しばしば、抗体の産生に使用される。
【０２１０】
発現ベクターｐＣ１およびｐＣ４は、ラウス肉腫ウイルスの強力なプロモーター（ＬＴＲ）（Ｃｕｌｌｅｎら、Ｍｏｌｅｃ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．５：４３８−４４７（１９８５））、およびＣＭＶエンハンサーのフラグメント（Ｂｏｓｈａｒｔら、Ｃｅｌｌ  ４１：５２１−５３０（１９８５））を含有する。例えば制限酵素切断部位ＢａｍＨＩ、ＸｂａＩおよびＡｓｐ７１８をもつマルチクローニング部位は、目的の遺伝子のクローニングを容易にする。該ベクターは、３’イントロンに加え、ラットプレプロインスリン遺伝子のポリアデニル化および終止シグナルを含有する。
【０２１１】
クローニングおよびＣＨＯ細胞中での発現。
ベクターｐＣ４をＩＬ−１２抗体の発現に使用する。プラスミドｐＣ４はプラスミドｐＳＶ２−ｄｈｆｒ（ＡＴＣＣ受託番号３７１４６）の誘導体である。該プラスミドは、ＳＶ４０初期プロモーターの制御下にマウスＤＨＦＲ遺伝子を含有する。これらのプラスミドでトランスフェクトされている、ジヒドロ葉酸活性を欠くチャイニーズハムスター卵巣若しくは他の細胞を、化学療法剤メトトレキサートを補充した選択培地（例えばα−ＭＥＭ、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、メリーランド州ゲイタースバーグ）中で細胞を増殖させることにより選択し得る。メトトレキサート（ＭＴＸ）に耐性の細胞中でのＤＨＦＲ遺伝子の増幅は十分に報告されている（例えば、Ｆ．Ｗ．Ａｌｔら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５３：１３５７−１３７０（１９７８）；Ｊ．Ｌ．ＨａｍｌｉｎとＣ．Ｍａ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．ｅｔ  Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ  １０９７：１０７−１４３（１９９０）；およびＭ．Ｊ．ＰａｇｅとＭ．Ａ．Ｓｙｄｅｎｈａｍ、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ９：６４−６８（１９９１）を参照されたい）。増大する濃度のＭＴＸ中で増殖させた細胞は、ＤＨＦＲ遺伝子の増幅の結果として標的酵素ＤＨＦＲを過剰産生することにより、該薬物に対する耐性を発生させる。第二の遺伝子がＤＨＦＲ遺伝子に連結されている場合、それは通常共増幅かつ過剰発現される。このアプローチを使用して、１，０００コピー以上の増幅された遺伝子（１種若しくは複数）を保有する細胞株を開発し得ることが、当該技術分野で既知である。その後、メトトレキサートを除去する場合に、宿主細胞の１種若しくはそれ以上の染色体に組込まれた増幅された遺伝子を含有する細胞株が得られる。
【０２１２】
ラウス肉腫ウイルスの末端反復配列（ＬＴＲ）の強力なプロモーター以外の高効率プロモーター、例えばヒトｂ−アクチンプロモーター、ＳＶ４０初期若しくは後期プロモーター、または他のレトロウイルス、例えばＨＩＶおよびＨＴＬＶＩからの末端反復配列もまた、発現に使用し得る。ＣｌｏｎｔｅｃｈのＴｅｔ−ＯｆｆおよびＴｅｔ−Ｏｎ遺伝子発現系ならびに類似の系を使用して、哺乳動物細胞中でＩＬ−１２を調節された方法で発現し得る（Ｍ．ＧｏｓｓｅｎとＨ．Ｂｕｊａｒｄ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８９：５５４７−５５５１（１９９２））。ｍＲＮＡのポリアデニル化のためには、例えばヒト成長ホルモン若しくはグロビン遺伝子からの他のシグナルを同様に使用し得る。染色体中に組込まれた目的の遺伝子を運搬する安定細胞株は、ｇｐｔ、Ｇ４１８若しくはハイグロマイシンのような選択可能なマーカーとのコトランスフェクションに際してもまた選択し得る。始めに１種以上の選択可能なマーカー、例えばＧ４１８およびメトトレキサートを使用することが有利である。プラスミドｐＣ４を制限酵素で消化し、そしてその後、当該技術分野で既知の手順により仔ウシ腸ホスファターゼを使用して脱リン酸化する。該ベクターをその後、１％アガロースゲルから単離する。
【０２１３】
本発明のＩＬ−１２抗体のＨＣおよびＬＣ  ＣＤＲ領域に対応する、完全なＩＬ−１２抗体をコードするＤＮＡ配列を、それぞれ、既知の方法の段階に従って使用する。適するヒト定常領域（すなわちＨＣおよびＬＣ領域）をコードする単離された核酸もまた、本構築物で使用する。
【０２１４】
単離された可変および定常領域をコードするＤＮＡならびに脱リン酸化したベクターを、その後、Ｔ４  ＤＮＡリガーゼを用いて連結する。大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ＨＢ１０１若しくはＸＬ−１  Ｂｌｕｅ細胞をその後形質転換し、そして、例えば制限酵素分析を使用して、プラスミドｐＣ４に挿入されたフラグメントを含有する細菌を同定する。
【０２１５】
活性のＤＨＦＲ遺伝子を欠くチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞をトランスフェクションに使用する。５マイクログラムの発現プラスミドｐＣ４を、０．５マイクログラムのプラスミドｐＳＶ２−ｎｅｏとともに、リポフェクチンを使用してコトランスフェクトする。プラスミドｐＳＶ２ｎｅｏは、優勢な選択可能なマーカー、すなわちＧ４１８を包含する抗生物質の一群に対する耐性を賦与する酵素をコードするＴｎ５からのｎｅｏ遺伝子を含有する。細胞を、１マイクログラム／ｍｌのＧ４１８を補充したα−ＭＥＭに播種する。２日後に、細胞をトリプシン処理し、そして、１０、２５若しくは５０ｎｇ／ｍｌのメトトレキサート、および１マイクログラム／ｍｌのＧ４１８を補充したα−ＭＥＭ中で、ハイブリドーマクローニングプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ、ドイツ）に播種する。約１０〜１４日後に、単一クローンをトリプシン処理し、そしてその後、多様な濃度のメトトレキサート（５０ｎＭ、１００ｎＭ、２００ｎＭ、４００ｎＭ、８００ｎＭ）を使用し、６ウェルペトリ皿若しくは１０ｍｌフラスコに播種する。最高濃度のメトトレキサートで増殖するクローンをその後、なおより高濃度のメトトレキサート（１ｍＭ、２ｍＭ、５ｍＭ、１０ｍＭ、２０ｍＭ）を含有する新たな６ウェルプレートに移す。１００〜２００ｍＭの濃度で増殖するクローンが得られるまで、同一の手順を反復する。所望の遺伝子産物の発現を、例えば、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウエスタンブロット、若しくは逆相ＨＰＬＣ分析により分析する。
【実施例２】
【０２１６】
マウスの実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）における抗ＩＬ−１２ｐ３５および抗ＩＬ−１２／２３ｐ４０の治療的有効性の比較
【０２１７】
要約
この一組の研究は、多発性硬化症のマウスモデル、実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）におけるＩＬ−１２若しくはＩＬ−１２／ＩＬ−２３特異的中和の治療的有効性を検討するために実施した。ＩＬ−１２のｐ３５サブユニット若しくはＩＬ−１２とＩＬ−２３の間で共有されるｐ４０サブユニットに特異的な、中和ラット抗マウスモノクローナル抗体（ｍＡｂ）を、疾患誘導の前、疾患発症前、若しくは疾患が進行中であった後のいずれかに投与した。全部の場合で、抗ｐ４０のみが治療的効力を示した。これらのデータは、ＩＬ−２３が、この自己免疫モデルにおける疾患の病因への支配的な寄与因子であることを示唆する。
【０２１８】
略語：
ＩＬ          インターロイキン
ｍＡｂ        モノクローナル抗体
ＥＡＥ        実験的自己免疫性脳脊髄炎
Ｔｈ          Ｔヘルパー細胞
ＩＦＮγ      インターフェロンγ
ｃｓ          臨床スコア
ＭＢＰ        ミエリン塩基性タンパク質
ＰＫ          薬物動態
【０２１９】
緒言
生物学的に活性のＩＬ−１２は、３５（ｐ３５）および４０（ｐ４０）キロダルトンの２個の共有結合されたサブユニットから構成されるヘテロ二量体として存在する。いくつかの連続する証拠が、ＩＬ−１２が、ＣＤ４＋  Ｔ細胞からのＩＦＮγおよびＩＬ−２の産生を特徴とする強いＴｈ１免疫応答を誘導し得ることを示した。不適切なＴｈ１応答、および従ってＩＬ−１２発現は、多発性硬化症、関節リウマチ、炎症性腸疾患、インスリン依存型糖尿病およびブドウ膜炎のような、多くの免疫媒介性疾患と相関すると考えられている。動物モデルで、ＩＬ−１２中和が免疫媒介性疾患を軽減することが示された。しかしながら、これらの研究はそのｐ４０サブユニットによりＩＬ−１２を中和した。ｐ４０サブユニットを共有するヘテロ二量体サイトカイン、ＩＬ−２３の最近の記述（１）は、以前の知見がＩＬ−１２活性によったのか若しくはＩＬ−２３活性によったのかを決定することを重要にした。従って、ｐ３５およびｐ４０特異的中和を、自己免疫のマウスモデル、実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）で比較した。ＩＬ−１２ｐ３５に特異的な中和抗体はＥＡＥの進行に対する影響を有しなかった。対照的に、抗ｐ４０  ｍＡｂでのＩＬ−１２およびＩＬ−２３双方の中和は、抗体がＴｈ１分化の前に投与されようと後に投与されようと、ＥＡＥの臨床徴候を抑制した。このデータは、ＥＡＥにおける抗ｐ４０処置の活性が単にＩＬ−２３の中和にのみ基づくことを示唆する。
【０２２０】
方法および材料
マウス
雌性Ｃ３Ｈ／ＨＥＢ／ＦＥＪマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、メーン州バーハーバー）を薬物動態分析で使用した。ＥＡＥ研究のため、雌性Ｂ１０．ＰＬ（Ｈ−２ｕ）マウスをＪａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入し、そして６〜８週齢の間に使用した。全動物は、承認されたプロトコルのもとでＩＡＣＵＣガイドラインに従って管理した。
【０２２１】
抗体
Ｇｉｏｒｇｉｏ  Ｔｒｉｎｃｈｉｅｒｉ博士およびＷｉｓｔａｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ペンシルバニア州フィラデルフィア）により提供されるＣ１７．８（ラット抗マウスＩＬ−１２／ＩＬ−２３ｐ４０、ＩｇＧ２ａ）およびＣ１８．２（ラット抗マウスＩＬ−１２ｐ３５、ＩｇＧ２ａ）ハイブリドーマ。腹水はＨａｒｌａｎ  Ｂｉｏｐｒｏｄｕｃｔｓ（インジアナ州インジアナポリス）で生成させ、そしてプロテインＧアフィニティーにより精製した。
【０２２２】
ラット抗マウス抗体の血清ＰＫ
重量およそ２０〜２５グラムの雌性Ｃ３Ｈ／ＨＥＢ／ＦＥＪマウスの重量を個別に測定
し、そして、１０ｍＬ／ｋｇの一定用量の容量／マウスで、１２５Ｉ標識抗体（Ｃ１７．８、Ｃ１８．２）の単一５ｍｇ／ｋｇ腹腔内用量で処置した。後眼窩血を、麻酔したマウスから３０分、６および２４時間、４、７、１１および１８日に採取した。血液サンプルを室温で最低３０分間、しかし１時間を超えない間静置させ、そしてその後、およそ２，５００〜３，５００ｒｐｍで１０〜１５分間遠心分離した。各血清サンプルのおよそ５０μＬのアリコートを、ＬＫＢ  Ｃｏｍｐｕｇａｍｍａ  １２８２カウンター（Ｗａｌｌａｃ、メリーランド州ゲイタースバーグ）を使用して、１２５Ｉについてカウントした。注入液（ｉｎｊｅｃｔａｔｅ）の１０ｍＬのアリコートもまたカウントした。各時間点での注入されたカウントの画分の平均を計算し、そして、注入された抗体の総ｍｇにより乗算して、各時間点で血清中に残存する総ｍｇを決定した。データは、各群に５〜１０動物を含む血清中のｍＡｂの平均ｍｇ±ｓ．ｄ．として示す。
【０２２３】
ＥＡＥ誘導および評価
ＥＡＥ誘導のため、雌性Ｂ１０．ＰＬマウスに、２００μｇのモルモットＭＢＰ（Ｓｉｇｍａ）と組合せたＣＦＡ（２００μｇのヒト結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）Ｊａｍａｉｃａ株を含有する）合計１００μｌを、背部の４部位にわたり皮下注入した。マウスは、免疫化の時点および４８時間後に、０．２ｍｌ  ＰＢＳ中の２００ｎｇの百日咳毒素（Ｌｉｓｔ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ、カリフォルニア州キャンベル）ｉ．ｐ．もまた受領した。マウスは、指定された日に、ＰＢＳで１００ｍｇ／ｋｇ（Ｃ１８．２）若しくは２０ｍｇ／ｋｇ（Ｃ１７．８）に希釈したＣ１７．８（抗ＩＬ−１２ｐ４０）若しくはＣ１８．２（抗ＩＬ−１２ｐ３５）モノクローナル抗体のｉ．ｐ．注入を受領した。対照マウスは、ＰＢＳ若しくはＰＢＳ中の２０ｍｇ／ｋｇのラットＩｇＧ（Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ）を受領した。
【０２２４】
臨床徴候（ｃｓ）を示した動物を、後に続くとおり評価した。すなわち、尾の引きずり（ｌｉｍｐ  ｔａｉｌ）、若しくは尾の緊張を伴うあひる歩行  １、尾の引きずりを伴うあひる歩行（運動失調）  ２、部分的四肢麻痺を伴う運動失調  ２．５、一肢の完全麻痺
３、第二肢の部分麻痺を伴う一肢の完全麻痺  ３．５、二肢の完全麻痺  ４、瀕死状態
４．５、死亡５。５の点数であった動物は、実験の残りの１日ｃｓ分析の平均に包含しなかった。１日ｃｓは群について平均し、また、平均発生率、発生日、最高の急性ｃｓ、累積ｃｓ、ｃｓ／日、再発の数および再発の重症度±ｓｅｍを記述する。群あたりの平均累積ｃｓは、個々の動物の１日臨床スコアの総和を平均することにより計算した。ｃｓ／日は、動物が試験に留まった日数により累積ｃｓを除算することにより計算した。発生日の平均を決定するためには、ＥＡＥを発症していない動物は分析に包含しなかった。最高ｃｓの平均を決定するためには、ＥＡＥを発症していないマウスは「０」の値を割り当て、そして分析に包含した。再発は、最低２観察日間持続した臨床スコアの満点の下落、次いで最低２観察日間持続した臨床スコアの満点の増大により定義した。
【０２２５】
結果および考察
抗ｐ３５および抗ｐ４０抗体は同一の薬物動態を有する
抗ｐ４０および抗ｐ３５抗体の消失速度を確立するために、正常マウスに、単一５ｍｇ／ｋｇ用量の１２５Ｉ標識抗体を注入し、そして循環濃度を抗体投与後１１日間測定した。抗ｐ３５および抗ｐ４０は重なる薬物動態を有し、消失速度が正常マウスで同一であることを示した（２）。各ｍＡｂの期待される消失速度はおよそ７〜１０日である。これは単一用量ＰＫ試験であるとは言え、これらのデータはｉｎ  ｖｉｖｏ試験のための週１回投薬を支持する。
【０２２６】
ＥＡＥ誘導前の抗ｐ４０処置のみが保護的である
免疫媒介性疾患におけるＩＬ−１２およびＩＬ−２３の相対的役割を決定するため、われわれは、多発性硬化症のマウスモデル、すなわち再発性実験的自己免疫性脳脊髄炎（Ｅ
ＡＥ）を利用した。アジュバント中ミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）でのＥＡＥ誘導に際して、Ｂ１０．ＰＬマウスは、典型的には麻痺の初期エピソードを表し（急性疾患）、その後、部分的に若しくは完全にのいずれかで回復し、そして、複数の再発および／若しくは慢性ＥＡＥにまで進行する。ＩＬ−１２はＴｈ０のＴｈ１分化への主要媒介物質であると考えられているため、ＥＡＥがＩＬ−１２発現に依存することは長く想定されていた。しかしながら、ＥＡＥ誘導におけるＩＬ−２３の潜在的役割を識別するため、中和濃度の抗ｐ４０（ＩＬ−１２およびＩＬ−２３）若しくは抗ｐ３５（ＩＬ−１２のみ）抗体を、ＥＡＥの免疫化の１日前（第−１日）に確立した。疾患の発生は動物間で変動し得；従って、処置を７および１４日後に反復して、抗ｐ３５およびＩＬ−ｐ４０抗体がＴｈ１分化の間に存在したことを確実にした。いくつかのｉｎ  ｖｉｔｒｏ中和試験は、抗４０  ｍＡｂが抗ｐ３５  ｍＡｂよりも、ＩＬ−１２の中和において５倍より有効であることを示した（データは示されない）。従って、抗ｐ３５  ｍＡｂの用量を、全部のＥＡＥ実験で抗ｐ４０より５倍多くなるように調節した。２回の別個の実験で、ラットＩｇＧアイソタイプ対照抗体（２０ｍｇ／ｋｇ）若しくは抗ｐ３５（１００ｍｇ／ｋｇ）で処置したマウスは、疾患からの保護を示さなかった。非特異的対照抗体（ラットＩｇＧ）の末梢投与は、ＥＡＥを伴う未処置マウスと比較した場合に疾患の臨床経過を変えなかったことに注目することが重要である。双方の試験で、抗ｐ４０  ｍＡｂ（２０ｍｇ／ｋｇ）で処置したマウスは、ＥＡＥの臨床徴候のほぼ完全な阻害を表した。注目すべきことに、疾患の抑制は、ＥＡＥ誘導７０日後までの抗体消失の期待された速度を超えて延長した。各実験において、抗ｐ４０で処置した１動物のみが２連続日のＥＡＥの臨床徴候を表し、また、それぞれ、晩発性および有意により低い急性臨床スコア、累積臨床スコアを示し、かつ、疾患の再発を示さなかった（表１）。これらの結果は、共有されるｐ４０サブユニットによるＩＬ−１２およびＩＬ−２３の中和が、ＥＡＥからのほぼ完全な保護を提供したことを示す。対照的に、抗ｐ３５のみを介するＩＬ−１２の特異的中和は無効であった。これらのデータは、ＥＡＥがＩＬ−１２により媒介されないことを強く示唆する。
【０２２７】
疾患発症直前の抗ｐ４０処置のみが保護的である
予防的処置はマウスをＥＡＥから完全に保護したとは言え、Ｔｈ１集団がｉｎ  ｖｉｖｏで一旦確立されればＩＬ−１２特異的中和が保護的であるかどうかが決定されるべきままである。従って、別個の一組の実験で、マウスを、対照抗体（ラットＩｇＧ）、抗ｐ３５若しくは抗ｐ４０モノクローナル抗体のいずれかで、ＥＡＥ誘導１０日後、しかし疾患発生前に処置した。典型的免疫応答は７日以内に発生するため、この時間点は、分化したＴｈ１細胞に対する抗ＩＬ−１２若しくは抗ＩＬ−２３  ｍＡｂの効果を反映するはずである。ＥＡＥの発生は動物間で異なり得、従って、処置を７および１４日後に反復して、抗ｐ３５および抗ｐ４０抗体が疾患の発生中に存在したことを確実にした。２回の別個の実験で、アイソタイプ対照抗体（２０ｍｇ／ｋｇ）若しくは抗ｐ３５（１００ｍｇ／ｋｇ）で処置したマウスは、未処置のＥＡＥマウスに比較した場合、疾患から保護されなかった。しかしながら、抗ｐ４０  ｍＡｂ（２０ｍｇ／ｋｇ）で処置したマウスはＥＡＥから有意に保護された。以前に記述された研究で示されたとおり、疾患の抑制は、ＥＡＥ誘導後７０日までの、末梢投与した抗体の消失に必要とされる時間を十分に越えて観察された。抗体がＴｈ１分化（第１０日）後まで投与されなかったことを考えれば、疾患の発生率、発生日、および急性ＥＡＥ中の最高の臨床スコアがいずれの群でも異ならなかったことは驚くべきことではなかった（表２）。しかしながら、双方の実験において、抗ｐ４０を受領するマウスは、有意により低い累積臨床スコア、１日あたり臨床スコアおよび再発の重症度を表した。
【０２２８】
確立したＥＡＥ中の抗ｐ４０処置のみが保護的である
いずれの治療についても最も困難しかし臨床上関連する障害は、確立した疾患を抑制することである。従って、マウスをＥＡＥについて免疫し、その後、疾患が一旦進行中となれば処置群に分割した、別の一組の実験を実施した。ＥＡＥ誘導のおよそ３０日後、マウ
スは疾患の急性期まで進行していた。この時点で、動物を、比較可能な累積および１日臨床スコアを伴う群に分割した。処置を７および１４日後に反復して、抗体が急性から慢性への移行の間（緩和−再発疾患）、中和濃度で利用可能であったことを確実にした。アイソタイプ対照抗体（２０ｍｇ／ｋｇ）若しくは抗ｐ３５（１００ｍｇ／ｋｇ）いずれの処置動物と比較した場合にも、抗ｐ４０処置（２０ｍｇ／ｋｇ）のみが疾患を軽減した。疾患の抑制はＥＡＥ誘導後８０日まで観察された。双方の実験で、処置の第１日から第８０日までの分析は、抗ｐ４０を受領するマウスが、より低い累積臨床スコア、１日あたり臨床スコアおよび最少の最高処置後臨床スコアを表したことを示した。これらのデータは、ＩＬ−２３がＴｈ１分化（表１）およびＥＡＥ誘導（表２）を媒介することがありそうであるのみならず、しかし、ＩＬ−２３もまた慢性の免疫媒介性（すなわち自己免疫）応答のエフェクター期に寄与する（表３）ことを示唆する。従って、抗ｐ４０処置は、免疫媒介性疾患の進行のいずれの時点でも治療を提供し得る。
【０２２９】
結論
免疫機能におけるＩＬ−１２の役割の理解は、ＩＬ−１２のｐ４０サブユニットの研究に基づいていた。従って、ＩＬ−１２とＩＬ−２３の間で共有されるｐ４０サブユニットに対するＩＬ−１２特異的ｐ３５サブユニットの中和の並列比較を、自己免疫疾患の動物モデルで実施した。抗ｐ４０を介する中和は、ｍＡｂをいかなる時点で投与した場合でもＥＡＥを有意に阻害した。しかしながら、ＩＬ−１２特異的中和は完全に無効であった。従って、われわれのデータは、ＩＬ−１２がこの自己免疫モデルに寄与しないこと、および、ＩＬ−２３が自己免疫性Ｔ細胞応答のより顕著な媒介物質であると期待されることを示す。
【実施例３】
【０２３０】
ｐ４０中和エピトープ
要約
ＩＬ−１２およびＩＬ−２３のヒトｐ４０サブユニットに対する中和抗体（ｐ４０  ｍＡｂ）のエピトープを、Ｆａｂ／ＩＬ−１２複合体の結晶構造に基づき決定した。該エピトープは、ヒトＩＬ−１２のｐ４０サブユニットのＤ１ドメイン（残基１−８８）に位置する。この領域はｐ４０／ｐ３５界面から離れており、そしてまたＩＬ−２３のｐ４０サブユニット上でも利用可能であると期待される。抗原−抗体結合に関与する残基は不連続的であり（表４）、そして、１個の独特なコンホメーションエピトープを含んでなる。このエピトープ若しくはそれの部分および隣接領域に対する抗体は、ｐ４０サブユニットのこの部分により媒介されるＩＬ−１２およびＩＬ−２３の機能の阻害に至ることができる。
【０２３１】
緒言
ヒトＩＬ−１２に向けられた完全にヒトのモノクローナル抗体（ｐ４０  ｍＡｂ）は、ＩＬ−１２およびＩＬ−２３の機能の強力な中和物質であることが示された。ｐ４０  ｍＡｂがｐ４０サブユニットに結合しかつ双方のサイトカインのそれらの受容体への結合を阻害することが示されている。ｐ４０サブユニットはＩＬ−１２とＩＬ−２３の間で共有されているため、ＩＬ−１２とｐ４０  ｍＡｂの間の詳細な相互作用が、重要な共通の中和エピトープを規定し、それが順にサイトカイン−受容体相互作用をいくぶん解明しうる。
【０２３２】
ｐ４０  Ｆａｂ／ＩＬ−１２の結晶構造に基づくエピトープ決定
ｐ４０  ｍＡｂは、培養物中の哺乳動物細胞株から製造し、そしてプロテインＡカラムにより精製した。ｐ４０  ｍＡｂ（７０ｍｇ）を、活性化緩衝液（０．０３Ｍリン酸ナトリウム、０．１５Ｍ  ＮａＣｌ、０．０１Ｍ  ＥＤＴＡ、０．００７２Ｍ  Ｌ−システイン、ｐＨ７．０）中パパイン（１ミリグラムのＩｇＧあたり０．２５単位のパパイン）で
３７℃で２時間消化した。消化を、表面増強レーザー脱離イオン化（ＳＥＬＤＩ）質量分析によりモニターした。ヨードアセトアミド（０．５Ｍ）を使用して消化を停止した。固定したプロテインＧによりＦｃを除去した。ｐ４０  Ｆａｂを、Ｓｕｐｅｒｄｅｘ  ２００  １６／６０カラムでのゲル濾過によりさらに精製した。合計４４ｍｇの精製したｐ４０  ｍＡｂを得、そしてその純度をＳＤＳ−ＰＡＧＥにより分析した。
【０２３３】
組換えヒトＩＬ−１２は、ｐ４０およびｐ３５サブユニットを過剰発現する、安定にトランスフェクトした細胞株から培養物中で製造し、そしてｐ４０  ｍＡｂアフィニティーカラムで精製した。タンパク質画分を収集し、そして、１０ｍＭトリス、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．４に透析しかつ２．５ｍｇ／ｍｌに濃縮した。ＩＬ−１２は、脱グリコシル化酵素（ＰＮＧアーゼＦ、シアラダーゼ、エンド−Ｏ−グリコシダーゼ、α−、β−ガラクトシダーゼ、α−マンノシダーゼ、フコシダーゼ［約５ｍＵ〜１０Ｕ／１００μｇタンパク質］）の数種の組合せとともにアルゴン下３７℃で３日間インキュベートすることにより、脱グリコシル化した。
【０２３４】
脱グリコシル化ＩＬ−１２を、過剰のｐ４０  Ｆａｂと混合した。ＩＬ−１２／ｐ４０
Ｆａｂ複合体を、１０ｍＭトリス、５０ｍＭ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．４でのサイズ排除クロマトグラフィーにより精製した。単離した複合体をおよそ４ｍｇ／ｍｌに濃縮した。ＩＬ−１２／ｐ４０  Ｆａｂ複合体を、上のタンパク質複合体溶液を５０ｍＭトリス、ｐＨ７．０、１６％  ＰＥＧ  ３３５０のリザーバ溶液と１：１の容量比で組合せることにより、シッティングドロップ（ｓｉｔｔｉｎｇ  ｄｒｏｐ）蒸気拡散法を使用して結晶化した。典型的に大きさ５０〜１５０μｍの立方体、錐体若しくは棒形状の結晶が、１６℃で２週間以内に出現する。
【０２３５】
結晶を収集し、そして、母液および３０％エチレングリコール中に浸積し、そして、Ｘ線データ収集のため液体窒素中で急速凍結した。最良のデータ組を、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｐｈｏｔｏｎ  Ｓｏｕｒｃｅ（ＡＰＳ）、Ａｒｇｏｎｎｅ  Ｎａｔｉｏａｎｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（Ａｘａｓ−ＣｏｍＣａｔ）で、２．８Åの回折限界まで収集した（３６０°、０．５°／フレーム、フレームあたり１０秒曝露）。回折データを、ＤｅｎｚｏおよびＳｃａｌｅＰａｃｋ（ＯｔｗｉｎｏｗｓｋｉとＭｉｎｏｒ、Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．２７６：３０７−３２６）で処理した。この結晶形の空間群は、ａ＝１１６．８Å、ｂ＝５５．７７Å、ｃ＝１８２．９６Å、およびα＝β＝γ＝９０°のセル寸法をもつＰ２１２１２１である。２７，１４１の独立の反射が存在し、そして該データは３．０Åで約９０％完全であった（Ｉ／σ＝５．２、Ｒｓｙｍ＝９％）。
【０２３６】
該結晶構造を、ＣＮＸ（カリフォルニア州アクセルリス）で実施されたところの分子置換により解明した。検索モデルは、ＩＬ−１２について公表されたＩＬ−１２構造（ＰＤＢコード１Ｆ４５）、および、Ｆａｂの結晶構造（ＰＤＢコード１ＶＧＥ）に基づくｐ４０  Ｆａｂについての相同性モデルであった。ＩＬ−１２およびｐ４０  Ｆａｂの分子モデルを目視検査し、そしてＸｔａｌＶｉｅｗを使用して人的に補正した。構造の改良はＣＮＸで実施した。分子モデルをＩｎｓｉｇｈｔＩＩ（カリフォルニア州アクセルリス）で検証した。ＩＬ−１２／ｐ４０  Ｆａｂの結合複合体の分子構造を、図１にリボン表示で示す。
【０２３７】
表面およびリボン表示での分子表面上のｐ４０  ｍＡｂ結合部位（ｐ４０エピトープ）を図２に示す。結合エピトープ残基は、一般に受け入れられる規約に従い、抗体のいずれかの原子の４Å以内にいずれかの原子を伴ういかなる表面露出されたｐ４０残基（０．１若しくはそれ以上の相対的溶媒接近可能性）と定義する。表面接近可能性は、デフォルトのパラメータを使用して、ＩＣＭ（カリフォルニア州モルソフト）により計算した。ＩＬ−１２  ｐ４０上のｐ４０  ｍＡｂ結合エピトープを含んでなる残基を、それらの表面露
出面積（ｓｆ）および相対的接近可能性（ｓｆ比）とともに表４に列挙する。（タンパク質の情況内のアミノ酸残基の露出表面積の定義は、当該分野で十分受け入れられている。とりわけ、１．４Ａの半径をもつ水分子がタンパク質の表面に沿って巻かれ、そして、特定の１残基についてこの計算により得られる面積の量が、その残基の露出表面積に割り当てられる。完全に伸長されたコンホメーションでのアミノ酸の総表面積もまた利用可能である。表面接近可能性（ｓｆ比）は、その場合、標準的表面積に対する露出された表面積の比である。これら２種の値は、一緒に、ある残基がタンパク質表面上に露出しているかどうかの考えをわれわれに与える。明らかに、表面露出された残基のみが、抗体のような他の分子の結合に関与し得る。しかしながら、われわれは本文中でこの全部を説明する必要はない。ＪＬ．）
【０２３８】
ｐ４０上の結合部位は不連続であり、そして、不規則な表面に分布される多数の表面露出残基を構成することが、表４および図２（右図）から明らかである。抗体−抗原相互作用は、合計１７５８Å２のＩＬ−１２およびｐ４０  ｍＡｂ上の接近可能表面を埋める。該相互作用は、３個の塩橋、すなわちＲ５９（Ｈ）−Ｅ５９（ｐ４０）、Ｒ９８（Ｈ）−Ｅ４５（ｐ４０）およびＲ９９（Ｈ）−Ｄ６２（ｐ４０）により支配されるようである。また、疎水性若しくはファンデルワールス力による抗体−抗原相互作用への寄与が存在する。
【０２３９】
本明細書の共結晶構造に基づき同定される、ＩＬ−１２結合に関与するＩＬ−１２ｐ４０抗体上の残基を、下の表５に示す。ｐ４０サブユニットの４Ａ以内にいずれかの原子を伴う抗ｐ４０抗体の全部の表面露出残基が、これらの結合残基の一部とみなされる。これらの残基のいずれか１個若しくはそれ以上に対する保存的変化は、類似の効力のものである変異体抗体を生じうる。こうした保存的置換の例は、ＶＨ（例えば配列番号７）中のＲ５９Ｋ、Ｒ９８ＫおよびＲ９９Ｋ、ならびにＶＬ（例えば配列番号８）中のＤ１Ｅを制限なしに包含する。
【０２４０】
また、表５に示される各位置の飽和突然変異誘発を実施して（例えば、野性型（ＷＴ）アミノ酸配列を、おそらくシステインを除くいずれかの他のアミノ酸に変えること）、生じる抗体に、増大された、減少された若しくは実質的に類似の活性（例えば結合）を有させる突然変異を同定し得る。生じる抗体のｐ４０サブユニットへの結合は、いずれかの適する結合アッセイに従って試験し得る。飽和突然変異誘発を使用して、例えば、より多く若しくはより少なく強力な抗体、または異なる特性、すなわち、可変領域配列中の変化（例えば、可変領域に対する大きさ若しくは他の構造変化）から生じる効力以外の特性を有する等しく強力な抗体を創製し得る。
【０２４１】
飽和突然変異誘発は、各実験について１個以上の置換、例えば２、３若しくはそれ以上の位置を使用してもまた実施し得る。これは、個別のクローン若しくはライブラリーとして行うことができ、次いでファージディスプレイのような適切な形式で選択若しくはスクリーニングし得る。さらに、活性を調節するために望ましい、表５中の位置での個々の若しくは組合せの突然変異を組合せて、類似若しくはより良好な効力の付加的な組合せ変異体を創製し得る。
【０２４２】
利点
ｐ４０  ｍＡｂ結合部位はｐ４０／ｐ３５会合部位から離れている（図１）。ＩＬ−２３のｐ１９サブユニットは、有意の配列相同性を伴い、ＩＬ−１２のｐ３５に進化的に関連する。ｐ１９がｐ３５に類似の様式でｐ４０と会合することがありそうである。従って、ｐ４０  ｍＡｂ結合領域はＩＬ−２３でのｐ４０／ｐ１９相互作用からもまた離れている。本発明で同定されるエピトープはＩＬ−１２およびＩｌ−２３双方で等しく利用可能であり；従って、ｐ４０  ｍＡｂが双方のサイトカインの機能を能動的に阻害し得ることは驚くべきことではない。
【０２４３】
ＩＬ−１２（ｐ４０／ｐ３５）およびＩＬ−２３（ｐ４０／ｐ１９）は、それらのそれぞれの受容体（ＩＬ−１２Ｒβ１／β２およびＩＬ−１２Ｒβ１／ＩＬ−２３Ｒ）と類似の様式で相互作用する。それらは類似のシグナル伝達カスケードを誘導する。サイトカイン−受容体相互作用の詳細は、しかしながら、分子レベルで明瞭に定義されていない。新たに定義されたｐ４０  ｍＡｂエピトープは、サイトカインのＩＬ−１２ファミリーとそれらの共有される受容体ＩＬ−１２Ｒβ１との間の相互作用について生物学的に重要な部位を表し得る。従って、エピトープは、モノクローナル抗体、ペプチド、組換えタンパク質、小分子および他の天然若しくは合成の剤を使用する治療的介入の重要な標的である。
【実施例４】
【０２４４】
突然変異分析を使用するＩＬ−１２ｐ４０でのｐ４０  ｍＡｂのエピトープマッピング
要約
ＩＬ−１２ｐ４０変異体のｐ４０  ｍＡｂとのＥＬＩＳＡ結合を実施して結合エピトープを確認した。ｐ４０  Ｆａｂ／ＩＬ−１２複合体の結晶構造に基づき、７種の単一変異体および２種の二重変異体を生成した。変異した残基は、ｐ４０サブユニットのドメインＩ（Ｄ１）中のｐ４０  Ｆａｂ接触領域に位置する。相対的結合親和性は、３種の負に荷電した残基、Ｅ４５、Ｅ５９およびＤ６２が、ｐ４０  ｍＡｂとの結合相互作用に有意に寄与することを示した。他の残基、Ｍ２３、Ｌ４０およびＳ４３は、より小さいがしかし認識可能な寄与を有する。この突然変異分析は、ｐ４０  ｍＡｂが、ｐ４０サブユニットのドメインＩを認識し、かつ、残基Ｅ４５、Ｅ５９、Ｄ６２、Ｍ２３、Ｌ４０およびＳ４３が結合エピトープの一部であることを確認する。
【０２４５】
材料および方法
７種のヒトｐ４０単一変異体すなわちＭ２３Ｔ、Ｌ４０Ｔ、Ｓ４３Ｒ、Ｅ４５Ａ、Ｅ４５Ｒ、Ｅ５９ＲおよびＤ６２Ｒ、ならびに２種の二重変異体Ｓ４３Ｒ／Ｅ４５ＡおよびＳ４３Ｒ／Ｅ４５Ｒを本研究で使用する。野性型ヒトｐ４０（ＷＴ  ｈｕ−ｐ４０）を対照として使用した。ｐ４０変異体をＨＥＫ２９３Ｅ細胞中で一過性に発現させた。該上清を結合アッセイに使用した。
【０２４６】
簡潔には、ＭＳＤ高結合プレート（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、メリーランド州）を、５μｌの捕捉モノクローナル抗体（５μｇ／ｍｌ）で室温で１時間被覆した。該捕捉モノクローナル抗体はｐ４０サブユニットを認識するが、しかしｐ４０  ｍＡｂと競合しない。１５０μｌの５％ＭＳＤ  Ｂｌｏｃｋｅｒ  Ａ緩衝液を各ウェルに添加し、そして室温で１時間インキュベートした。プレートを０．１Ｍ  ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．４）で３回洗浄した。これらのタンパク質を負荷したＥＬＩＳＡプレートを、２５μｌの多様な一過性に発現させたｐ４０変異体上清（０．１Ｍ  ＨＥＰＥＳ緩衝液、ｐＨ７．４で１０倍希釈）とともに室温で１時間インキュベートした。プレートを０．１Ｍ  ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．４）で３回洗浄した。２５μｌの、０から２０μｇ／ｍｌまでの範囲にわたる多様な濃度のＭＳＤ  スルホ−ＴＡＧ標識ｐ４０  ｍＡｂを、マイクロウェルに分注した。室温で振とうする２時間のインキュベーション後に、プレートを０．１Ｍ  ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．４）で３回洗浄した。１５０μｌの希釈したＭＳＤ読み取り緩衝液（Ｒｅａｄ  Ｂｕｆｆｅｒ）Ｔを各ウェルに分注し、そしてプレートをＳＥＣＴＯＲ画像化装置（ＭＳＤ）で分析した。
【０２４７】
結果
図３に示されるとおり、Ｅ４５Ｒ、Ｅ５９ＲおよびＤ６２Ｒはそれぞれ、変異タンパク質ｐ４０のｐ４０  ｍＡｂへの結合親和性を、野性型ｐ４０に比較して有意に低下させた。Ｅ４５Ａは、Ｅ４５Ｒに比較して、結合に対する有意のしかしより少なく劇的な影響を有した。Ｍ２３Ｔ、Ｌ４０ＴおよびＳ４３Ｒはそれぞれ結合に対する穏やかな影響を有した。
【０２４８】
ｐ４０  ｍＡｂの多様な変異体タンパク質に対する相対結合親和性を、捕捉アッセイによりさらに分析した。図４に示されるとおり、Ｅ４５Ｒ、Ｅ５９ＲおよびＤ６２Ｒは、それぞれ、抗原結合をほぼ完全に無効にした。界面の他の突然変異すなわちＭ２３Ｔ、Ｌ４０ＴおよびＳ４３Ｒは、それぞれ結合をおよそ４０％低下させた。Ｅ４５Ａは結合を約７０％低下させた。
【０２４９】
本発明は、前述の記述および実施例にとりわけ記述されたところと別の方法で実施し得ることが明らかであろう。本発明の多数の改変および変形物が、上の教示に照らして可能であり、そして、従って付随する請求の範囲の範囲内にある。
【０２５０】
【表２】
2008523842.tif 000004
【０２５１】
【表３】
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【０２５２】
【表４】
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【０２５３】
【表５】
2008523842.tif 000007
【０２５４】
【表６】
2008523842.tif 000008
【図面の簡単な説明】
【０２５５】
【図１】ＩＬ−１２／ｐ４０  Ｆａｂの結合した複合体の分子構造をリボン表示で示す。
【図２】分子表面上で表示されるｐ４０  ｍＡｂ結合部位（エピトープ）を表面およびリボン表示で示す。Ｄ１ドメインおよびＦｖが明瞭さのため複合体構造から分離されている。ｐ４０のＤ１ドメインについて、分子表面を示す。該ＦａｂのＦｖ部分はリボンで示される。左図：抗体結合部位、すなわちエピトープを下に見る。中図：左図から約９０°で見る。右図：該エピトープの残基のリボン表示。
【図３】多様なｐ４０単一変異体に結合したＩＬ−１２  ｐ４０抗体のＥＬＩＳＡ評価の結果を示す。
【図４】多様なｐ４０変異タンパク質に対するｐ４０  ｍＡｂの相対結合親和性を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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