(57)【要約】  本発明は、Ｑ1、Ｑ2、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ2a、Ｒ3、Ｒ3aおよびＸが本明細書中で定義されている構造（Ｉ）を有する式Ｉのエストロゲン受容体モジュレーターまたはこれらの薬学的に許容可能な塩を提供する。2008510827.tif 000049
2008510827.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造
【化１】
2008510827.tif 000048
（式中、
Ｑ1およびＱ2は独立してＨ、糖残基またはＳ（Ｏ）t−ＯＨ（ｔは０、１または２である）であり、但しＱ1およびＱ2の両方ともがＨではないものとし；Ｒ1は水素、ヒドロキシル、ハロゲン、１−６個の炭素原子のアルキル、１−６個の炭素原子のトリフルオロアルキル、３−８個の炭素原子のシクロアルキル、１−６個の炭素原子のアルコキシ、１−６個の炭素原子のトリフルオロアルコキシ、１−６個の炭素原子のチオアルキル、１−６個の炭素原子のスルホキソアルキル、１−６個の炭素原子のスルホノアルキル、６−１０個の炭素原子のアリール、Ｏ、ＮまたはＳから選択される１−４個のヘテロ原子を有する５または６員のヘテロ環、−ＮＯ2、−ＮＲ5Ｒ6、−Ｎ（Ｒ5）ＣＯＲ6、−ＣＮ、−ＣＨＦＣＮ、−ＣＦ2ＣＮ、２−７個の炭素原子のアルキニルまたは２−７個の炭素原子のアルケニルであって；アルキルまたはアルケニル部分がヒドロキシル、−ＣＮ、ハロゲン、トリフルオロアルキル、トリフルオロアルコキシ、−ＣＯＲ5、−ＣＯ2Ｒ5、−ＮＯ2、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6またはＮ（Ｒ5）ＣＯＲ6により任意で置換されるものであり；
Ｒ2およびＲ2aは各々、独立して、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、１−６個の炭素原子のアルキル、１−４個の炭素原子のアルコキシ、２−７個の炭素原子のアルケニル、２−７個の炭素原子のアルキニル、１−６個の炭素原子のトリフルオロアルキルまたは１−６個の炭素原子のトリフルオロアルコキシであって；アルキル、アルケニルまたはアルキニル部分がヒドロキシル、−ＣＮ、ハロゲン、トリフルオロアルキル、トリフルオロアルコキシ、−ＣＯＲ5、−ＣＯ2Ｒ5、−ＮＯ2、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6またはＮ（Ｒ5）ＣＯＲ6により任意で置換されるものであり；
Ｒ3およびＲ3aは各々、独立して、水素、１−６個の炭素原子のアルキル、２−７個の炭素原子のアルケニル、２−７個の炭素原子のアルキニル、ハロゲン、１−４個の炭素原子のアルコキシ、１−６個の炭素原子のトリフルオロアルキルまたは１−６個の炭素原子のトリフルオロアルコキシであって；アルキル、アルケニルまたはアルキニル部分がヒドロキシル、−ＣＮ、ハロゲン、トリフルオロアルキル、トリフルオロアルコキシ、−ＣＯＲ5、−ＣＯ2Ｒ5、−ＮＯ2、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6またはＮ（Ｒ5）ＣＯＲ6により任意で置換されるものであり；
Ｒ5、Ｒ6は各々、独立して水素、１−６個の炭素原子のアルキル、６−１０個の炭素原子のアリールであり；
ＸはＯ、ＳまたはＮＲ7であり；
Ｒ7は水素、１−６個の炭素原子のアルキル、６−１０個の炭素原子のアリール、−ＣＯＲ5、−ＣＯ2Ｒ5または−ＳＯ2Ｒ5である）
を有する式Ｉの化合物またはこれらの薬学的に許容し得る塩。
【請求項２】
Ｒ1が２−７個の炭素原子のアルケニルであって；アルケニル部分がヒドロキシル、−ＣＮ、ハロゲン、トリフルオロアルキル、トリフルオロアルコキシ、−ＣＯＲ5、−ＣＯ2Ｒ5、−ＮＯ2、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6またはＮ（Ｒ5）ＣＯＲ6により任意で置換されるものである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ＸがＯである、請求項１または請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ1が２−３個の炭素原子のアルケニルであって；アルケニルがヒドロキシル、−ＣＮ、ハロゲン、トリフルオロアルキル、トリフルオロアルコキシ、−ＣＯＲ5、−ＣＯ2Ｒ5、−ＮＯ2、−ＣＯＮＲ5Ｒ6、−ＮＲ5Ｒ6または−Ｎ（Ｒ5）ＣＯＲ6により任意で置換されるものである、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ1がビニル、１−ブロモビニル、１−フルオロビニルまたはアリルである、請求項３に記載の化合物。
【請求項６】
ｔが２である、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
前記糖残基が修飾または非修飾のヘキソース残基である、請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
前記修飾ヘキソース残基がグルクロニド残基である、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｑ1およびＱ2が、−Ｓ（Ｏ）2−ＯＨおよびＨから独立して選択される、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｑ1およびＱ2が、−Ｓ（Ｏ）2−ＯＨおよび修飾または非修飾のヘキソース残基から独立して選択される、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｑ1およびＱ2が、Ｈおよび修飾または非修飾のヘキソース残基から独立して選択される、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
前記修飾ヘキソース残基がグルクロニド残基である、請求項１０または１１に記載の化合物。
【請求項１３】
２−（３’−フルオロ−４’−グルクロリド（glucuroride）フェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１６】
２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１７】
２−（２’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１８】
２−（２’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１９】
２−（２’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２０】
２−（２’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２１】
２−（２’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２２】
２−（２’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２３】
２−（２’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２４】
２−（２’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２５】
２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２６】
２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２７】
２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２８】
２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２９】
２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３０】
２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３１】
２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３２】
２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３３】
４−ブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３４】
４−ブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３５】
４−ブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３６】
４−ブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３７】
４−ブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３８】
４−ブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３９】
４−ブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４０】
４−ブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４１】
４，６−ジブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４２】
４，６−ジブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４３】
４，６−ジブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４４】
４，６−ジブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４５】
４，６−ジブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４６】
４，６−ジブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４７】
４，６−ジブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４８】
４，６−ジブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４９】
７−（１−ブロモビニル）−２−（２’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５０】
７−（１−ブロモビニル）−２−（２’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５１】
７−（１−ブロモビニル）−２−（２’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５２】
７−（１−ブロモビニル）−２−（２’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５３】
７−（１−ブロモビニル）−２−（２’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５４】
７−（１−ブロモビニル）−２−（２’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５５】
７−（１−ブロモビニル）−２−（２’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５６】
７−（１−ブロモビニル）−２−（２’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５７】
７−（１−ブロモビニル）−２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５８】
７−（１−ブロモビニル）−２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−サルフェートフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５９】
７−（１−ブロモビニル）−２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６０】
７−（１−ブロモビニル）−２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６１】
７−（１−ブロモビニル）−２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６２】
７−（１−ブロモビニル）−２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６３】
７−（１−ブロモビニル）−２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−サルフェートフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６４】
７−（１−ブロモビニル）−２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−サルフェートフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６５】
７−アリル−２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６６】
７−アリル−２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６７】
７−アリル−２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６８】
７−アリル−２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６９】
７−アリル−２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７０】
７−アリル−２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７１】
７−アリル−２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７２】
７−アリル−２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７３】
２−（３’，５’−ジフルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７４】
２−（３’，５’−ジフルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７５】
２−（３’，５’−ジフルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７６】
２−（３’，５’−ジフルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７７】
２−（３’，５’−ジフルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７８】
２−（３’，５’−ジフルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７９】
２−（３’，５’−ジフルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８０】
２−（３’，５’−ジフルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８１】
２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−（１−フルオロビニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８２】
２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−（１−フルオロビニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８３】
２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−（１−フルオロビニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８４】
２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−（１−フルオロビニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８５】
２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−（１−フルオロビニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８６】
２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−（１−フルオロビニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８７】
２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−（１−フルオロビニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８８】
２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−（１−フルオロビニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８９】
２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９０】
２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９１】
２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニドまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９２】
２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートまたはこれらの薬学的に許容し得る塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９３】
ａ）２−（５−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，４−ジオール；
ｂ）３−（５−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，２−ジオール；
ｃ）２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｄ）２−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｅ）２−（２−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｆ）２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−６−オル；
ｇ）２−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−６−オル；
ｈ）２−（６−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，４−ジオール；
ｉ）３−（６−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，２−ジオール；
ｊ）４−（６−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，２−ジオール；
ｋ）２−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−６−オル；
ｌ）４−（５−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，３−ジオール；
ｍ）４−（６−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，３−ジオール；
ｎ）６−クロロ−２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｏ）６−ブロモ−２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｐ）６−クロロ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｑ）５−クロロ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−６−オル；
ｒ）７−ブロモ−２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｓ）７−ブロモ−２−（２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｔ）７−ブロモ−２−（２，３−ジフルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｕ）２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｖ）７−（１，２−ジブロモエチル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｗ）７−（１−ブロモビニル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｘ）７−エチニル−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｙ）２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−プロピル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｚ）７−ブチル−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ａａ）７−シクロペンチル−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｂｂ）エチル５−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−カルボキシレート；
ｃｃ）２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−フェニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｄｄ）２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−メトキシ−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｅｅ）７−エチル−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｆｆ）７−エチル−２−（２−エチル−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｇｇ）５−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−カルボアルデヒド；
ｈｈ）７−（ヒドロキシメチル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｉｉ）７−（ブロモメチル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｊｊ）［５−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−イル］アセトニトリル；
ｋｋ）７−（１−ヒドロキシ−１−メチルエチル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル］；
ｌｌ）２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−イソプロペニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｍｍ）２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−イソプロピル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル］；
ｎｎ）７−ブロモ−２−（４−ヒドロキシ−３−（トリフルオロメチル）フェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｏｏ）７−（２−フリル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｐｐ）２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−７−（２−フリル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｑｑ）２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−チエン−２−イル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｒｒ）２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−（１，３−チアゾール−２−イル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｓｓ）２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−５−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−７−カルボニトリル；
ｔｔ）４−ブロモ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−メトキシ−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
ｕｕ）４，６−ジブロモ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−メトキシ−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；または
ｖｖ）７−ブロモ−２−（３，５−ジフルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；
のグルクロニド誘導体、サルフェート誘導体またはグルクロニド・サルフェート誘導体である化合物またはこれらの薬学的に許容し得る塩。
【請求項９４】
哺乳動物に有効な量の請求項１から９３のいずれか一項に記載の化合物を与えることを含む、これらを必要とする前記哺乳動物の前立腺炎または間質性膀胱炎を治療または阻害する方法。
【請求項９５】
哺乳動物に有効な量の請求項１から９３のいずれか一項に記載の化合物を与えることを含む、これらを必要とする前記哺乳動物の炎症性腸疾患、クローン疾患、潰瘍性直腸炎または大腸炎を治療または阻害する方法。
【請求項９６】
哺乳動物に有効な量の請求項１から９３のいずれか一項に記載の化合物を与えることを含む、これらを必要とする前記哺乳動物の前立腺肥大、子宮平滑筋腫、乳がん、子宮内膜がん、多嚢胞性卵巣症候群、子宮内膜ポリープ、良性乳腺疾患、腺筋症、卵巣がん、メラノーマ、前立腺がん（prostrate cancer）、大腸がん、神経膠腫またはastioblastomiaを治療または阻害する方法。
【請求項９７】
哺乳動物に有効な量の請求項１から９３のいずれか一項に記載の化合物を与えることを含む、これらを必要とする前記哺乳動物のコレステロール、トリグリセリド、Ｌｐ（ａ）またはＬＤＬレベルを低下させるか；高コレステロール血症、高脂血症、心臓血管疾患、アテローム性動脈硬化症、高血圧症、末梢血管疾患、再狭窄または血管痙攣を治療または阻害するか；あるいは免疫仲介の血管損傷に至る細胞イベントから血管壁損傷を阻害する方法。
【請求項９８】
哺乳動物に有効な量の請求項１から９３のいずれか一項に記載の化合物を与えることを含む、これらを必要とする前記哺乳動物の認知増進または神経保護を提供するか；あるいは老人性痴呆症、アルツハイマー疾患、認知衰弱、脳卒中、不安または神経変性障害を治療または阻害する方法。
【請求項９９】
哺乳動物に有効な量の請求項１から９３のいずれか一項に記載の化合物を与えることを含む、これらを必要とする前記哺乳動物のフリーラジカルで誘発される疾患状態を治療または阻害する方法。
【請求項１００】
哺乳動物に有効な量の請求項１から９３のいずれか一項に記載の化合物を与えることを含む、これらを必要とする前記哺乳動物の膣または外陰の萎縮、萎縮性膣炎、膣の乾燥、掻痒、性交疼痛症、排尿困難、頻尿、尿失禁、尿路感染症を治療または阻害する方法。
【請求項１０１】
哺乳動物に有効な量の請求項１から９３のいずれか一項に記載の化合物を与えることを含む、これらを必要とする前記哺乳動物の血管運動症状を治療または阻害する方法。
【請求項１０２】
哺乳動物に有効な量の請求項１から９３のいずれか一項に記載の化合物を与えることを含む、これらを必要とする前記哺乳動物の受胎を阻害する方法。
【請求項１０３】
哺乳動物に有効な量の請求項１から９３のいずれか一項に記載の化合物を与えることを含む、これらを必要とする前記哺乳動物の関節炎を治療または阻害する方法。
【請求項１０４】
関節炎が関節リウマチ、変形性関節症または脊椎関節症である、請求項１０３に記載の方法。
【請求項１０５】
哺乳動物に有効な量の請求項１から９３のいずれか一項に記載の化合物を与えることを含む、これらを必要とする前記哺乳動物の関節腫張またはびらんを治療または阻害するか；あるいは関節鏡下または外科的処置に続発する関節損傷を治療または阻害する方法。
【請求項１０６】
哺乳動物に有効な量の請求項１から９３のいずれか一項に記載の化合物を与えることを含む、これらを必要とする前記哺乳動物の乾癬または皮膚炎を治療または阻害する方法。
【請求項１０７】
哺乳動物に有効な量の請求項１から９３のいずれか一項に記載の化合物を与えることを含む、これらを必要とする前記哺乳動物の虚血、再灌流損傷、喘息、胸膜炎、多発性硬化症、全身性紅斑性狼瘡、ブドウ膜炎、敗血症、出血性ショックまたはＩＩ型糖尿病を治療または阻害する方法。
【請求項１０８】
哺乳動物に有効な量の請求項１から９３のいずれか一項に記載の化合物を与えることを含む、これらを必要とする前記哺乳動物の子宮内膜症を治療または阻害する方法。
【請求項１０９】
請求項１から９３のいずれか一項に記載の化合物および薬学的なキャリアを含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エストロゲン剤として有用な置換ベンゾキサゾールのプロドラッグ誘導体に関する。
【背景技術】
【０００２】
哺乳動物組織中でのエストロゲンの多面的な影響は充分に文献に記載され、現在、エストロゲンが多数の器官系に影響を及ぼすということが認められている[Mendelsohn and Karas, New England Journal of Medicine 340: 1801-1811(1999), Epperson, et al., Psychosomatic Medicine 61: 676-697(1999), Crandall, Journal of Womens Health & Gender Based Medicine 8: 1155-1166(1999), Monk and Brodaty, Dementia & Geriatric Cognitive Disorders 11: 1-10(2000), Hurn and Macrae, Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism 20: 631-652(2000), Calvin, Maturitas 34: 195-210(2000), Finking, et al., Zeitschrift fur Kardiologie 89: 442-453(2000), Brincat, Maturitas 35: 107-117(2000), Al-Azzawi, Postgraduate Medical Journal 77: 292-304(2001)]。エストロゲンは、組織に数種の方法で影響を及ぼすことができ、最もよく特性化された作用機構は、遺伝子転写の変更を生じるエストロゲン受容体との相互作用である。エストロゲン受容体はリガンドで活性化される転写因子であり、核ホルモン受容体スーパーファミリーに属する。このファミリーの他の構成員はプロゲステロン、アンドロゲン、グルココルチコイドおよび鉱質コルチコイド受容体を含む。リガンドを結合する際、これらの受容体は二量体化し、ＤＮＡ上の特異的な配列（応答エレメントとして知られている）に直接に結合するか、あるいは、特異的なＤＮＡ配列に同様に直接に結合する他の転写因子（ＡＰ１などの）と相互作用することにより遺伝子転写を活性化することができる[Moggs and Orphanides, EMBO Reports 2: 775-781(2001), Hall, et al., Journal of Biological Chemistry 276: 36869-36872(2001), McDonnell, Principles of Molecular Regulation 351-361(2000)]。「同時制御」タンパク質の類は、また、リガンドを結合した受容体と相互作用し、この転写活性を更に調節することもできる[McKenna, et al., Endocrine Reviews 20: 321-344(1999)]。エストロゲン受容体は、ＮＦKＢで仲介された転写をリガンド依存的および非依存的な形で抑制することができることも示された[Quaedackers, et al., Endocrinology 142: 1156-1166(2001), Bhat, et al., Journal of Steroid Biochemistry & Molecular Biology 67: 233-240(1998), Pelzer, et al., Biochemical & Biophysical Research Communications 286: 1153-7(2001)]。
【０００３】
エストロゲン受容体はリン酸化によっても活性化できる。このリン酸化はＥＧＦなどの生長因子により仲介され、リガンドの不在下で遺伝子転写の変化を引き起こす[Moggs and Orphanides, EMBO Reports 2: 775-781(2001), Hall, et al, Journal of Biological Chemistry 276: 36869-36872(2001)]。
【０００４】
エストロゲンが細胞に影響を及ぼすことができる、あまり特性化されていない手段はいわゆる膜受容体によるものである。このような受容体の存在は議論のあるところであるが、エストロゲンが細胞からの極めて迅速な非ゲノム的応答を発現させることができるということは充分に文献に記載されてきた。これらの影響を変換する役割の分子実体は決定的に単離されていないが、これがエストロゲン受容体の核形に少なくとも関連することを示唆する証拠は存在する[Levin, Journal of Applied Physiology 91: 1860-1867(2001), Levin, Trends in Endocrinology & Metabolism 10: 374-377(1999)]。
【０００５】
２つのエストロゲン受容体がこれまでに発見されている。第１のエストロゲン受容体は約１５年前にクローニングされ、今はＥＲαと呼ばれている[Green, et al., Nature 320: 134-9(1986)]。エストロゲン受容体の第２の形は比較的最近に見出され、ＥＲβと呼ばれている[Kuiper, et al., Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 93: 5925-5930(1996)]。種々のリガンドに対する親和性とＥＲαとの若干の差異についての明確化に焦点を当てたＥＲβに関する初期の研究が見られた。ＥＲβの組織分布はげっ歯類において充分にマッピングされ、それはＥＲαと一致しない。組織、例えばマウスおよびラット子宮は圧倒的にＥＲαを発現し、マウスおよびラット肺は圧倒的にＥＲβを発現する[Couse, et al., Endocrinology 138: 4613-4621(1997), Kuiper, et al., Endocrinology 138: 863-870(1997)]。同一の器官内でも、ＥＲαおよびＥＲβの分布は区分化可能である。例えば、マウスの子宮においては、ＥＲβは顆粒膜細胞中で高度に発現され、ＥＲαは包膜および間質細胞に限定される[Sar and Welsch, Endocrinology 140: 963-971(1999), Fitzpatrick, et al., Endocrinology 140: 2581-2591(1999)]。しかしながら、受容体が共発現される例が存在し、ＥＲαおよびＥＲβがヘテロダイマーを形成することができるという証拠がインビトロ研究において存在する[Cowley, et al., Journal of Biological Chemistry 272: 19858-19862(1997)]。
【０００６】
１７β−エストラジオールの活性を模倣または妨害する多数の化合物が記述されてきた。おおまかに言って最も強力な内在性エストロゲンである１７β−エストラジオールと同一の生物学的影響を有する化合物は「エストロゲン受容体作用薬」と呼ばれる。１７β−エストラジオールとの組み合わせで与えられる場合、その影響を妨害するものは、「エストロゲン受容体拮抗薬」と呼ばれる。実際、エストロゲン受容体作用薬活性とエストロゲン受容体拮抗薬活性の間には連続性が存在し、ある化合物はある組織においてはエストロゲン受容体作用薬として、他の組織においてはエストロゲン受容体拮抗薬として挙動する。混合活性を持つこれらの化合物は選択性エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭＳ）と呼ばれ、治療的に有用な薬剤（例えば、ＥＶＩＳＴＡ（登録商標））である[McDonnell, Journal of the Society for Gynecologic Investigation 7: S10-S15(2000), Goldstein, et al., Human Reproduction Update 6: 212-224(2000)]。同一の化合物が細胞特異的な影響を有することができる正確な理由は明らかにされていないが、受容体立体配置および／または同時制御タンパク質の環境の差が示唆されてきた。
【０００７】
リガンドを結合する場合、エストロゲン受容体が異なる立体配置をとるということが以前から知られていた。しかしながら、これらの変化の結果および巧妙さは最近明らかにされたばかりである。ＥＲαおよびＥＲβの三次元構造は、種々のリガンドとの共結晶化により解明され、受容体−同時制御タンパク質相互作用に要求されるタンパク質配列を立体的に妨害するヘリックス１２がエストロゲン受容体拮抗薬の存在下で再配置することを明らかに示す[Pike, et al., Embo 18: 4608-4618(1999), Shiau, et al., Cell 95: 927-937(1998)]。加えて、異なるリガンドの存在下でエストロゲン受容体と相互作用するペプチドの同定にファージディスプレイの手法が使用されてきた[Paige, et al., Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 96: 3999-4004(1999)]。例えば、完全エストロゲン受容体作用薬に結合したＥＲα、１７β−エストラジオールおよびジエチルスチルベステロールの間を識別するペプチドが同定された。異なるペプチドがＥＲαおよびＥＲβに結合するクロミフェンの間を識別することが示された。これらのデータは、各リガンドが、明確に区別される生物学的活性を有するような特異で予測不能な立体配置にこの受容体を潜在的に入れるということを示す。
【０００８】
上記のように、エストロゲンは生物学的過程の全体の形に影響を及ぼす。加えて、性差を記述する場合（例えば、疾患頻度、アレルギーの誘発に対する応答など）には、この説明は雄と雌の間のエストロゲンレベルの差を含むということが可能である。
【０００９】
エストロゲン活性を有する化合物は、参照により全てが本明細書に組み込まれている、２００２年１２月４日に出願された米国特許出願シリアル番号第１０／３０９，６９９号、現在、米国特許第６７９４４０３号およびＷＯ０３／０５００９５号で開示されている。
【発明の開示】
【００１０】
本発明は、エストロゲン剤として有用である、構造
【化２】
2008510827.tif 000003
を有する式Ｉのエストロゲン化合物またはこれらの薬学的に許容し得る塩を提供する。式中、
Ｑ1およびＱ2は独立してＨ、糖残基またはＳ（Ｏ）t−ＯＨ（ｔは０、１または２である）であり、但しＱ1およびＱ2の両方ともがＨではないものとし；
Ｒ1は水素、ヒドロキシル、ハロゲン、１−６個の炭素原子のアルキル、１−６個の炭素原子のトリフルオロアルキル、３−８個の炭素原子のシクロアルキル、１−６個の炭素原子のアルコキシ、１−６個の炭素原子のトリフルオロアルコキシ、１−６個の炭素原子のチオアルキル、１−６個の炭素原子のスルホキソアルキル、１−６個の炭素原子のスルホノアルキル、６−１０個の炭素原子のアリール、Ｏ、ＮまたはＳから選択される１−４個のヘテロ原子を有する５または６員のヘテロ環、−ＮＯ2、−ＮＲ5Ｒ6、−Ｎ（Ｒ5）ＣＯＲ6、−ＣＮ、−ＣＨＦＣＮ、−ＣＦ2ＣＮ、２−７個の炭素原子のアルキニルまたは２−７個の炭素原子のアルケニルであって；アルキルまたはアルケニル部分がヒドロキシル、−ＣＮ、ハロゲン、トリフルオロアルキル、トリフルオロアルコキシ、−ＣＯＲ5、−ＣＯ2Ｒ5、−ＮＯ2、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6またはＮ（Ｒ5）ＣＯＲ6により任意で置換されるものであり；
Ｒ2およびＲ2aは各々、独立して、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、１−６個の炭素原子のアルキル、１−４個の炭素原子のアルコキシ、２−７個の炭素原子のアルケニル、２−７個の炭素原子のアルキニル、１−６個の炭素原子のトリフルオロアルキルまたは１−６個の炭素原子のトリフルオロアルコキシであって；アルキル、アルケニルまたはアルキニル部分がヒドロキシル、−ＣＮ、ハロゲン、トリフルオロアルキル、トリフルオロアルコキシ、−ＣＯＲ5、−ＣＯ2Ｒ5、−ＮＯ2、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6またはＮ（Ｒ5）ＣＯＲ6により任意で置換されるものであり；
Ｒ3およびＲ3aは各々、独立して、水素、１−６個の炭素原子のアルキル、２−７個の炭素原子のアルケニル、２−７個の炭素原子のアルキニル、ハロゲン、１−４個の炭素原子のアルコキシ、１−６個の炭素原子のトリフルオロアルキルまたは１−６個の炭素原子のトリフルオロアルコキシであって；アルキル、アルケニルまたはアルキニル部分がヒドロキシル、−ＣＮ、ハロゲン、トリフルオロアルキル、トリフルオロアルコキシ、−ＣＯＲ5、−ＣＯ2Ｒ5、−ＮＯ2、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6またはＮ（Ｒ5）ＣＯＲ6により任意で置換されるものであり；
Ｒ5、Ｒ6は各々、独立して水素、１−６個の炭素原子のアルキル、６−１０個の炭素原子のアリールであり；
ＸはＯ、ＳまたはＮＲ7であり；
Ｒ7は水素、１−６個の炭素原子のアルキル、６−１０個の炭素原子のアリール、−ＣＯＲ5、−ＣＯ2Ｒ5または−ＳＯ2Ｒ5である。
【００１１】
本発明の化合物が塩基性部分を含有する場合には、薬学的に許容し得る塩は、有機および無機酸、例えば酢酸、プロピオン酸、乳酸、クエン酸、酒石酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、マロン酸、マンデル酸、リンゴ酸、フタル酸、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硝酸、硫酸、メタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸および同様の既知の許容し得る酸から形成され得る。本発明の化合物が酸性部分を含有する場合には、塩は、有機および無機塩基、例えばアルカリ金属塩（例えば、ナトリウム、リチウムまたはカリウム）、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、１−６個の炭素原子を含有するアルキルアンモニウム塩または各アルキル基中に１−６個の炭素原子を含有するジアルキルアンモニウム塩および各アルキル基中に１−６個の炭素原子を含有するトリアルキルアンモニウム塩からも形成され得る。
【００１２】
用語「アルキル」、「アルケニル」および「アルキニル」は、分岐鎖および直鎖部分の両方を含む。例は、メチル、エチル、プロピル、ブチル、イソプロピル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ビニル、アリル、アセチレン、１−メチルビニルなどを含む。アルキルまたはアルケニル部分が置換されている場合には、これらは通常モノ−、ジ−、トリ−またはペル置換であり得る。ハロゲン置換基に対する例は、１−ブロモビニル、１−フルオロビニル、１，２−ジフルオロビニル、２，２−ジフルオロビニル、１，２，２−トリフルオロビニル、１，２−ジブロモエタン、１，２ジフルオロエタン、１−フルオロ−２−ブロモエタン、ＣＦ2ＣＦ3、ＣＦ2ＣＦ2ＣＦ3などを含む。用語「ハロゲン」は臭素、塩素、フッ素およびヨウ素を含む。用語「アリール」は６−１０個の炭素原子の芳香族、例えばフェニル、１−ナフチルまたは２−ナフチルを含む。好ましい５−６員のヘテロ環は、フラン、チオフェン、ピロール、イソピロール、ピラゾール、イミダゾール、トリアゾール、ジチオール、オキサチオール、イソキサゾール、オキサゾール、チアゾール、イソチアゾール（isothiazolem）、オキサジアゾール、フラザン、オキサトリアゾール、ジオキサゾール、オキサチアゾール、テトラゾール、ピラン、ピリジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、トリアジン、オキサジン、オキサチアジンまたはオキサジアジンを含む。更に好ましいヘテロ環はフラン、チオフェンまたはチアゾールである。
【００１３】
式Ｉの化合物のある実施形態においては、Ｒ1は２−７個の炭素原子のアルケニルであって、アルケニル部分がヒドロキシル、−ＣＮ、ハロゲン、トリフルオロアルキル、トリフルオロアルコキシ、−ＣＯＲ5、−ＣＯ2Ｒ5、−ＮＯ2、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6またはＮ（Ｒ5）ＣＯＲ6により任意で置換されているものである。
【００１４】
本発明の化合物のうち、式Ｉの化合物は構造
【化３】
2008510827.tif 000004
を有するもの、またはこれらの薬学的に許容し得る塩であるということが好ましい。式中、
Ｑ1およびＱ2は独立してＨ、修飾または非修飾のヘキソース残基またはＳ（Ｏ）t−ＯＨ（ｔは２である）であり、但しＱ1およびＱ2の両方ともがＨではないものとし；
Ｒ1は２−７個の炭素原子のアルケニルであって；アルケニル部分がヒドロキシル、−ＣＮ、ハロゲン、トリフルオロアルキル、トリフルオロアルコキシ、−ＣＯＲ5、−ＣＯ2Ｒ5、−ＮＯ2、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6またはＮ（Ｒ5）ＣＯＲ6により任意で置換されるものであり；
Ｒ2およびＲ2aは各々、独立して、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、１−６個の炭素原子のアルキル、１−４個の炭素原子のアルコキシ、２−７個の炭素原子のアルケニル、２−７個の炭素原子のアルキニル、１−６個の炭素原子のトリフルオロアルキルまたは１−６個の炭素原子のトリフルオロアルコキシであって；アルキル、アルケニルまたはアルキニル部分がヒドロキシル、−ＣＮ、ハロゲン、トリフルオロアルキル、トリフルオロアルコキシ、−ＣＯＲ5、−ＣＯ2Ｒ5、−ＮＯ2、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6またはＮ（Ｒ5）ＣＯＲ6により任意で置換されるものであり；
Ｒ3およびＲ3aは各々、独立して、水素、１−６個の炭素原子のアルキル、２−７個の炭素原子のアルケニル、２−７個の炭素原子のアルキニル、ハロゲン、１−４個の炭素原子のアルコキシ、１−６個の炭素原子のトリフルオロアルキルまたは１−６個の炭素原子のトリフルオロアルコキシであって；アルキル、アルケニルまたはアルキニル部分がヒドロキシル、−ＣＮ、ハロゲン、トリフルオロアルキル、トリフルオロアルコキシ、−ＣＯＲ5、−ＣＯ2Ｒ5、−ＮＯ2、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6またはＮ（Ｒ5）ＣＯＲ6により任意で置換されるものであり；
Ｒ5、Ｒ6は各々、独立して水素、１−６個の炭素原子のアルキル、６−１０個の炭素原子のアリールであり；
ＸはＯ、ＳまたはＮＲ7であり；
Ｒ7は水素、１−６個の炭素原子のアルキル、６−１０個の炭素原子のアリール、−ＣＯＲ5、−ＣＯ2Ｒ5または−ＳＯ2Ｒ5である。
【００１５】
ＸはＯであるということが更に好ましく、ＸはＯであり、Ｒ1は２−３個の炭素原子のアルケニルであって、アルケニルがヒドロキシル、−ＣＮ、ハロゲン、トリフルオロアルキル、トリフルオロアルコキシ、−ＣＯＲ5、−ＣＯ2Ｒ5、−ＮＯ2、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＮＲ5Ｒ6またはＮ（Ｒ5）ＣＯＲ6により任意で置換されているということがなおいっそう好ましい。
【００１６】
Ｑ1およびＱ2は−ＳＯ3Ｈおよびグルクロニド残基から選択されるということが更に好ましい。
【００１７】
ある特に好ましい実施形態においては、本化合物は、２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルのモノ−またはジ−サルフェート誘導体、モノ−またはジ−グルクロニド誘導体またはグルクロニド・サルフェート誘導体またはこれらの薬学的に許容し得る塩である。ある実施形態においては、本化合物は、２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；２−（２’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（２’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（２’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；２−（２’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；２−（２’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；２−（２’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；２−（２’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；２−（２’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；４−ブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；４−ブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；４−ブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；４−ブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；４−ブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；４−ブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；４−ブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；４−ブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；４，６−ジブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；４，６−ジブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；４，６−ジブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；４，６−ジブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；４，６−ジブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；４，６−ジブロモ−２−（３’フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；４，６−ジブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；４，６−ジブロモ−２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；７−（１−ブロモビニル）−２−（２’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；７−（１−ブロモビニル）−２−（２’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；７−（１−ブロモビニル）−２−（２’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；７−（１−ブロモビニル）−２−（２’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；７−（１−ブロモビニル）−２−（２’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；７−（１−ブロモビニル）−２−（２’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；７−（１−ブロモビニル）−２−（２’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；７−（１−ブロモビニル）−２−（２’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；７−（１−ブロモビニル）−２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；７−（１−ブロモビニル）−２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−サルフェートフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；７−（１−ブロモビニル）−２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；７−（１−ブロモビニル）−２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；７−（１−ブロモビニル）−２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；７−（１−ブロモビニル）−２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；７−（１−ブロモビニル）−２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−サルフェートフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；７−（１−ブロモビニル）−２−（２’，３’−ジフルオロ−４’−サルフェートフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；７−アリル−２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；７−アリル−２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；７−アリル−２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；７−アリル−２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；７−アリル−２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；７−アリル−２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；７−アリル−２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；７−アリル−２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；２−（３’，５’−ジフルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（３’，５’−ジフルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（３’，５’−ジフルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；２−（３’，５’−ジフルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；２−（３’，５’−ジフルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；２−（３’，５’−ジフルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；２−（３’，５’−ジフルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；２−（３’，５’−ジフルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−（１−フルオロビニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−（１−フルオロビニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−（１−フルオロビニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−（１−フルオロビニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−（１−フルオロビニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；２−（３’−フルオロ−４’−グルクロニドフェニル）−７−（１−フルオロビニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェート；２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−（１−フルオロビニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−グルクロニド；または２−（３’−フルオロ−４’−サルフェートフェニル）−７−（１−フルオロビニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−サルフェートである。更なる実施形態においては、本化合物は、２−（５−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，４−ジオール；３−（５−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，２−ジオール；２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（２−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−６−オル；２−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−６−オル；２−（６−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２
−イル）ベンゼン−１，４−ジオール；３−（６−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，２−ジオール；４−（６−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，２−ジオール；２−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−６−オル；４−（５−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，３−ジオール；４−（６−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，３−ジオール；６−クロロ−２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；６−ブロモ−２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；６−クロロ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；５−クロロ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−６−オル；７−ブロモ−２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；７−ブロモ−２−（２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；７−ブロモ−２−（２，３−ジフルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル．；７−（１，２−ジブロモエチル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；７−（１−ブロモビニル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；７−エチニル−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−プロピル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；７−ブチル−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；７−シクロペンチル−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；エチル５−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−カルボキシレート；２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−フェニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−メトキシ−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；７−エチル−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；７−エチル−２−（２−エチル−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；５−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−カルボアルデヒド；７−（ヒドロキシメチル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；７−（ブロモメチル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；［５−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−イル］アセトニトリル；７−（１−ヒドロキシ−１−メチルエチル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル］；２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−イソプロペニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−イソプロピル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル］；７−ブロモ−２−（４−ヒドロキシ−３−（トリフルオロメチル）フェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；７−（２−フリル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−７−（２−フリル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−チエン−２−イル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−（１，３−チアゾール−２−イル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−５−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−７−カルボニトリル；４−ブロモ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−メトキシ−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；４，６−ジブロモ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−メトキシ−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル；または７−ブロモ−２−（３，５−ジフルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルのグルクロニド誘導体、サルフェート誘導体またはグルクロニド・サルフェート誘導体である。
【００１８】
本発明は、エストロゲン剤として有用な置換ベンゾキサゾールのプロドラッグ誘導体を提供する。ある実施形態においては、本発明の化合物は、１またはそれ以上の付加サルフェート（すなわち、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）2−Ｏ−Ｈ）、非修飾または修飾のヘキソース（例えば、グルクロニド）またはこれらを両方とも有する誘導体である。本発明の化合物を形成するように誘導体化可能な好適な化合物は、参照により全てが本明細書に組み込まれている、２００２年１２月４日出願の米国特許出願シリアル番号第１０／３０９，６９９号に見られる。
【００１９】
本明細書で使用されるように、「糖」は、５−６個の炭素原子を有する少なくともモノサッカライド、例えばペントース、例えばリボースおよびヘキソース、例えばグルコース、ガラクトースまたはフルクトースを指す。糖は、ジサッカライド、すなわち２個のモノサッカライドを含む糖、例えばスクロース、ラクトースおよびマルトースも含む。糖残基は、例えばホスフェート、酸およびラクトンを含む天然的または合成的に修飾された形のものであることができる。
【００２０】
本明細書で使用されるように、用語「ヘキソース」は、６個の炭素原子を含有する糖を意味する。好適なヘキソースは、限定はされないが、グルコース、マンノース、ガラクトースおよびフルクトースを直鎖およびピラノース形の両方で含む。修飾ヘキソースは、ヘキソースの天然起源の誘導体、例えばホスフェート、対応する酸およびラクトン形を含む。例えば、用語「修飾ヘキソース」は、Ｎ−アセチル誘導体、ホスフェート誘導体などを含む、グルコン酸、グルコノラクトン、グルクロン酸、アミノ誘導体を含む。
【００２１】
本明細書で使用されるように、用語「グルクロニド誘導体」は、特異的な化合物に適用されるように、化合物の１またはそれ以上のヒドロキシル基を式ＸＸ
【化４】
2008510827.tif 000005
の一部分により置き換えた化合物の誘導体を指す。
【００２２】
本明細書で使用されるように、用語「サルフェート誘導体」は、特異的な化合物に適用されるように、化合物の１またはそれ以上のヒドロキシル基を式−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）2−Ｏ−Ｈの一部分により置き換えた化合物の誘導体を指す。
【００２３】
用語「グルクロニド・サルフェート誘導体」は、特異的な化合物に適用されるように、化合物の少なくとも１つのヒドロキシル基を式ＸＸの一部分により置き換えた化合物、および化合物の少なくとも１つのヒドロキシル基を式Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）2−Ｏ−Ｈの部分により置き換えた化合物の誘導体を指す。
【００２４】
本発明の化合物は１またはそれ以上の付加部分を有するように誘導体化した置換ベンゾキサゾールエストロゲン剤である。誘導体化された化合物を投与した後、付加部分は内在性酵素により除去されて、非誘導体化された化合物を提供する。このような化合物は、本明細書では、本発明の化合物の代謝物と呼ばれる。
【００２５】
本発明において使用されるように、用語「提供する」は、本発明によりカバーされる化合物または物質を提供することに関して、このような化合物または物質を直接に投与するか、または有効な量のこの化合物または物質を体内で形成するプロドラッグ、誘導体または類縁体を投与することのいずれかを意味する。
【００２６】
本発明において使用されるように、用語「ＥＲβ選択性リガンド」は、ＥＲαとＥＲβに対する結合親和性を測定する標準の薬理学的試験手順で、ＥＲβに対するリガンドの結合親和性（ＩＣ50により測定、この場合には１７β−エストラジオールのＩＣ50がＥＲαとＥＲβの間で３倍またはそれ以上異ならない）がＥＲαに対する結合親和性よりも少なくとも約１０倍大きいということを意味する。ＥＲβ選択性リガンドはＥＲαに対する結合親和性よりも少なくとも約２０倍大きいＥＲβに対する結合親和性を有するということが好ましい。ＥＲβ選択性リガンドはＥＲαに対する結合親和性よりも少なくとも約５０倍大きいＥＲβに対する結合親和性を有するということが更に好ましい。ＥＲβ選択性リガンドは子宮非刺激性で、乳腺非刺激性であるということが更に好ましい。
【００２７】
本発明において使用されるように、用語「子宮非刺激性」は、標準の薬理学的試験手順で１７β−エストラジオールまたは１７α−エチニル−１７β−エストラジオールの最大有効用量に対して同一の手順で観察される子宮重量増加の約５０％未満の湿時の子宮重量増加を生じることを意味する。湿時の子宮重量増加は、エストラジオールに対して観察されるものの約２５％未満であるということが好ましく、湿時の子宮重量増加は、エストラジオールに対して観察されるものの約１０％未満であるということが更に好ましい。子宮非刺激性ＥＲβ選択性リガンドは、子宮刺激性活性を欠如するコントロール（例えば媒体）と比較して湿時の子宮重量を著しく増加させない（ｐ＞０．０５）ということが最も好ましい。
【００２８】
本発明において使用されるように、用語「乳腺非刺激性」は、組織学的試験により評価して小葉−肺胞尾芽の発育の促進の点で１７β−エストラジオールより＜１０％効果的である活性を有することを意味する。組織学的試験によるこのような判定の例は当分野でよく知られている。例えば、各々参照により全てが本明細書に組み込まれている、Harris, H.A., et al., Endocrinology 144(10)4241-4249(2003);Mulac-Jericevic, B., et al., Proc.Natl.Acad.Sci.100(17)9744-9749(2003);Bocchinfuso, W.P., et al., Endocrinology 141(8)2982-2994(2002);and Lewis, B.C., et al., Toxicological Sciences 62, 46-53(2001)を参照のこと。
【００２９】
本発明は、また、関節炎、炎症性腸疾患および子宮内膜症の治療または阻害における開示された誘導体化されたＥＲβ選択性リガンドの使用も提供する。特に、この誘導体化されたＥＲβ選択性リガンドは、関節リウマチ、変形性関節症また脊椎関節症；およびクローン疾患、潰瘍性大腸炎、不定大腸炎、感染性大腸炎または潰瘍性直腸炎の治療または阻害において有用である。本発明は、関節腫張またはびらんの治療または阻害；あるいは関節鏡下または外科的処置に続発する関節損傷の治療または阻害における誘導体化されたＥＲβ選択性リガンドの使用を更に提供する。ＥＲβ選択性リガンドは子宮非刺激性および乳腺非刺激性であるということが好ましい。
【００３０】
本発明は、また、これらを必要とする哺乳動物のコレステロール、トリグリセリド、Ｌｐ（ａ）またはＬＤＬレベルを低下させるか；高コレステロール血症、高脂血症、心臓血管疾患、アテローム性動脈硬化症、高血圧症、末梢血管疾患、再狭窄または血管痙攣を治療または阻害するか；あるいは免疫仲介された血管損傷に至る細胞イベントから血管壁損傷を阻害するのに使用するための開示された誘導体化されたＥＲβ選択性リガンドも提供する。
【００３１】
更には、この開示された誘導体化されたＥＲベータ選択性リガンドは、これらを必要とする哺乳動物における認知増進または神経保護の提供；あるいは老人性痴呆症、アルツハイマー病、認知衰弱、脳卒中、不安または神経変性障害の治療または阻害において有用である。
【００３２】
本発明は、これらを必要とする哺乳動物におけるフリーラジカル誘発疾患状態、膣または外陰の萎縮、萎縮性膣炎、膣の乾燥、掻痒、性交疼痛症、排尿困難、頻尿、尿失禁、尿路感染症、血管運動症状、乾癬または皮膚炎、虚血、再灌流損傷、喘息、胸膜炎、多発性硬化症、全身性紅斑性狼瘡、ブドウ膜炎、敗血症、出血性ショックまたはＩＩ型糖尿病を治療および阻害するための開示されたＥＲβリガンドの使用を更に提供する。
【００３３】
式Ｉの本発明のＥＲβ選択性リガンドは、また、これらを必要とする哺乳動物における受胎の阻害にも有用である。
【００３４】
ある実施形態においては、哺乳動物はヒト、例えば女性である。
【００３５】
本発明は、本明細書中で前述した式Ｉの化合物および薬学的なキャリアを含む医薬組成物を更に提供する。
【００３６】
本発明の化合物の製造で使用される反応試剤は、商業的に入手可能であるか、あるいは文献で述べられている標準の手順により製造可能である。
【００３７】
サルフェート、および修飾および非修飾のヘキソースから選択される１またはそれ以上の部分の付加により誘導体化可能な式Ｉの化合物の一般的な製造を次の合成スキーム（Ｉ−ＶＩＩＩ）に従って提供することができる。
【化５】
2008510827.tif 000006
【００３８】
スキームＩにおいては、市販のジメトキシアニリン（１）をトリエチルアミンの存在下で市販のベンゾイルクロリド（２）により処理して、アミド（３）を製造した。必要とされるベンゾイルクロリド（２）もチオニルクロリドと共に還流して市販の安息香酸（４）から製造した。ピリジンヒドロクロリドにより高温（２００℃）で処理することにより、アミド（３）をフェノール性ベンゾキサゾール（５）に変換した。
【化６】
2008510827.tif 000007
【００３９】
スキームＩＩにおいては、市販のニトロ−フェノール（６）を酢酸中でＢｒ2／ＮａＯＡｃにより臭素化して、ブロモ−フェノール（７）を製造した。ＥｔＯＡｃ中でのＲａ−Ｎｉによる（７）の接触水素化によりアニリン（８）を得た。ピリジンの存在下での（８）のベンゾイルクロリド（９）（市販の、あるいは対応する安息香酸とチオニルクロリドから製造された）とのカップリングにより、アミド−エステル（１０）を製造した。（１０）のベンゾキサゾール（１１）への変換を酸性条件（ｐ−トルエンスルホン酸）下、高温（１５０℃）で行った。ジクロロメタン中での三臭化ホウ素による（１１）の脱メチル化によりフェノール性ベンゾキサゾール（１２）を得た。
【化７】
2008510827.tif 000008
【００４０】
スキームＩＩＩにおいては、ｐ−キシレン中、高温（１５０℃）での安息香酸（１３）とホウ酸による処理により、アニリン（８）をベンゾキサゾール（１４）に転換した。ジクロロメタン中での（１４）の三臭化ホウ素による脱メチル化によりフェノール性ベンゾキサゾール（１５）を製造した。
【化８】
2008510827.tif 000009
【００４１】
スキームＩＶにおいては、酢酸中での（１６）の硝酸によるニトロ化により（１７）を製造し、これをＲａ−Ｎｉの存在下で水素により還元して、アニリン（１８）を得た。脱メチル化段階をピリジンヒドロクロリドにより高温（２００℃）で行ったということを除いて、アニリン（１８）をスキームＩＩに述べたのと類似の方法でベンゾキサゾール（１９）に変換した。
【化９】
2008510827.tif 000010
【００４２】
スキームＶにおいては、ベンゾキサゾール（２０）のヒドロキシル基をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド／イミダゾール／４−ジメチルアミノピリジンによりシリルエーテル（２１）（Ｒ3＝Ｍｅ3Ｃ（ＣＨ3）2Ｓｉ）として、あるいはジクロロメタン中酢酸無水物／４−ジメチルアミノピリジンによりエステル（２１）（Ｒ3＝ＣＨ3ＣＯ）として保護した。ｐ−キシレン、トルエン、テトラヒドロフラン、ジメトキシメタンまたは１，２−ジメトキシエタン中でパラジウム触媒［すなわち、ジクロロビス（トリ−ｏ−トリルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）またはテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）］の存在下、ボロン酸カップリング反応のための塩基（すなわち、Ｎａ2ＣＯ3）の存在と共にベンゾキサゾール（２０）と（２１）を種々のスズ反応試剤（すなわち、トリブチル（ビニル）スズ、トリブチル（アリル）スズ、トリブチル（２−フリル）スズ、ボロン酸または塩化亜鉛と２０℃−１５０℃の範囲の温度でカップリングして、ベンゾキサゾール（２２）および（２３）を製造した。
【００４３】
フッ化水素酸（水中４８重量％）またはテトラブチルアンモニウムフルオリドによる（２２）（Ｒ3＝Ｍｅ3Ｃ（ＣＨ3）2Ｓｉ）のシリルエーテルの脱保護によりベンゾキサゾール（２４）を製造した。ジオキサン中の（２２）（Ｒ3＝ＣＨ3ＣＯ）の炭酸カリウムによる鹸化により、ベンゾキサゾール（２４）を製造した。ジクロロメタンまたはピリジンヒドロクロリド中、高温（２００℃）でベンゾキサゾール２３（Ｒ＝ＣＨ3）を三臭化ホウ素により脱メチル化して、ベンゾキサゾール（２４）を得た。
【化１０】
2008510827.tif 000011
【００４４】
スキームＶＩにおいては、ベンゾキサゾール（２４）をｎ−ブチルリチウムにより低温（−７８℃）で処理し、続いて求電子性試薬（すなわち、ＣＮＣＯ2Ｅｔ、Ｐｈ（ＣＨ3）ＮＣＨＯ、ＥｔＩなど）を添加して、化合物（２５）を製造した。三臭化ホウ素（Ｒ＝ＣＨ3）またはテトラブチルアンモニウムフルオリド（Ｒ＝Ｍｅ3Ｃ（ＣＨ3）2Ｓｉ）による（２５）の脱保護によりベンゾキサゾール（２６）［Ｒ＝ＣＨＯ、ＣＯ2Ｅｔ、ＣＨ2ＣＨ3、Ｃ（ＣＨ3）2ＯＨ］を得た。
【００４５】
三級アルコール（２５）（Ｒ＝Ｃ（ＣＨ3）ＯＨ）をピリジンヒドロクロリドにより高温（２００℃）で処理して、１−メチル−ビニルベンゾキサゾール（２７）を製造した。Ｈ2／Ｐｄ−Ｃによる（２７）の還元によりイソプロピル類縁体（２８）を得た。
【化１１】
2008510827.tif 000012
【００４６】
スキームＶＩＩにおいては、メタノール中でのナトリウムボロヒドリドによるベンゾキサゾール（２９）の還元によりアルコール（３０）を製造した。ＣＨ2Ｃｌ2中での（３０）の三臭化ホウ素による１時間の処理によりベンゾキサゾール（３１）を得、長時間（１８時間）の処理によりブロミド（３２）を得た。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中でのシアン化カリウムと１８−クラウン−６−エーテルによる処理によって、ブロミド（３２）をアセトニトリル（３３）に変換した。
【化１２】
2008510827.tif 000013
【００４７】
スキームＶＩＩＩにおいては、第１にブロモ−ベンゾキサゾール（３５）（Ｒ＝ＣＨ3）をＤＭＦ中でシアン化銅（Ｉ）により処理して、対応するアリールナイトライトを製造し、これを三臭化ホウ素による処理によってベンゾキサゾール（３６）を得た。ブロモ−ベンゾキサゾール（３５）をパラジウム触媒［すなわち、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（Ｏ）］の存在下シアン化亜鉛により処理して、対応するアリールナイトライトを得、これの三臭化ホウ素による脱メチル化によりベンゾキサゾール（３６）を製造する第２の合成経路からベンゾキサゾール（３６）も製造した。臭化銅（Ｉ）と新しく調製したナトリウムメトキシドによりＤＭＦ中でベンゾキサゾール（３５）（Ｒ＝Ｈ）を処理して、メトキシ−ベンゾキサゾール（３７）を製造した。アセトニトリル中でのＮ−ブロモスクシンイミドによる（３７）の臭素化により、モノブロモベンゾキサゾール（３８）（主生成物）とジブロモベンゾキサゾール（３９）（微量生成物）を得た。
【００４８】
スキームＩ−ＶＩＩＩの手順により製造される化合物のグルクロニド、サルフェートおよびグルクロニド・サルフェート誘導体がスキームＩＸおよびＸにしたがって製造可能である。
【化１３】
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【化１４】
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【００４９】
加えて、本発明のグルクロニド、サルフェートおよびグルクロニド・サルフェート誘導体が標準の有機化学合成法にしたがって製造可能である。例えば、スキームＩ−ＶＩＩＩにしたがって製造される化合物の官能基（例えば、１またはそれ以上のヒドロキシル基）を標準的な方法により保護し、次に遊離のヒドロキシルを非修飾または修飾のヘキソース（例えばグルクロニド）またはスルホン酸基にカップリングして、本発明の化合物を生成させることができる。このような合成での使用に好適な保護基は、例えば、Greene, T.W., and Wuts, P.G.M., 「Protective Groups in Organic Synthesis」, 2nd ed., New York: John Wiley & Sons, N.Y.1991に見ることができる。
【００５０】
薬理学的試験手順
標準の薬理学的試験手順を使用して、与えられた試験化合物の活性プロフィールを容易に求めることができる。以下にいくつかの代表的な試験手順を簡潔に要約し、本発明の代表的な化合物に対するデータを含み得る。放射性リガンド結合アッセイを除いて、すべてのアッセイは、化合物のエストロゲン受容体作用薬または拮抗薬活性を検出するのに使用可能である。一般に、エストロゲン受容体作用薬活性は、化合物の活性を参照エストロゲン（例えば、１７β−エストラジオール、１７α−エチニル、１７β−エストラジオール、エストロン、ジエチルスチルベステロールなど）に対して比較することにより測定される。エストロゲン受容体拮抗薬活性は、試験化合物を参照エストロゲンにより共処理し、この結果を参照エストロゲン単独により得られる結果と比較することにより一般に測定される。ＳＥＲＭに対する標準の薬理学的試験手順は、引用により本明細書に組み込まれている、米国特許第４，４１８，０６８号および５，９９８，４０２号にも述べられている。
【００５１】
ＥＲαおよびＥＲβに対する結合親和性の評価
慣用の放射性リガンド結合アッセイにおけるＥＲαおよびＥＲβの両方に対する１７β−エストラジオールと競合する能力について、本発明の化合物の代謝物の代表的な例を評価した。この試験手順は、ＥＲαまたはＥＲβ受容体に対する相対的な結合親和性を求める方法論を提供する。下記に使用される手順を簡潔に述べる。
【００５２】
結合選択性のキャラクタリゼーションのための受容体抽出物の調製：本明細書中ではＤＮＡ結合ドメインの下流のすべての配列として便宜的には定義されるリガンド結合ドメインが、テンプレートとして完全長ｃＤＮＡ、およびサブクローニングに適切な制限部位を含む一方で発現のための適切な読み枠を維持するプライマーを用いたＰＣＲにより得られた。これらのテンプレートは、ヒトＥＲαのアミノ酸Ｍ250−Ｖ595［Green, et al., Nature 320: 134-9(1986)］およびヒトＥＲβのＭ214−Ｑ530［Ogawa, et al., Biochemical & Biophysical Research Communications 243: 122-6(1998)］を含むものであった。Ｃ−末端Ｆｌａｇ  ｔａｇを保持するＮｃｏ１−ＢａｍＨ１フラグメントとしてヒトＥＲβをｐＥＴ１５ｂ（Novagen, Madison, WI）の中にクローニングした。Ｎ−末端のＨｉｓ  ｔａｇを添加したことを除いて、ヒトＥＲαをヒトＥＲβとしてクローニングした。両方の鎖を完全に配列決定することにより、使用されるすべての構造のコンストラクトを検証した。
【００５３】
ＢＬ２１（ＤＥ３）細胞を使用して、ヒトタンパク質を発現させた。通常、１０ｍＬのオーバーナイト培養物を使用して、１００μｇ／ｍＬのアンピシリンを含有するＬｕｒｉａ−Ｂｅｒｔａｎｉ（ＬＢ）培地の１Ｌの培地に接種した。３７℃でオーバーナイトインキュベーションした後、イソプロピル−β−Ｄ−チオグラクトシド（ＩＰＴＧ）を１ｍＭの最終濃度まで添加し、インキュベーションを２５℃で２時間進行させた。細胞を遠心分離（１５００×ｇ）により収集し、沈殿物を１００ｍＬの５０ｍＭのＴｒｉｓ−Ｃｌ（ｐＨ７．４）および１５０ｍＭ  ＮａＣｌで洗浄し、再懸濁させた。１２０００ｐｓｉでフレンチプレスに２回通すことにより、細胞を溶解させた。この溶解物を１２，０００×ｇ、４℃で３０分間の遠心分離により清澄化させ、−７０℃で貯蔵した。
【００５４】
特異的な［3Ｈ］−エストラジオール結合に対する抽出物の評価：１ｍＭのエチレンジアミン−四酢酸（ＥＤＴＡ）により添加したダルベッコのリン酸緩衝生理食塩水（１×最終濃度Ｇｉｂｃｏ（登録商標）；ｎｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）をアッセイ緩衝液として使用した。アッセイにおいて使用する受容体の量を最適化するために、［3Ｈ］−１７β−エストラジオール（最終濃度＝２ｎＭ；Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｎｕｃｌｅａｒ（ＮＥＮ）；Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，Ｓｈｅｌｔｏｎ，ＣＴ）±０．６μＭのジエチルスチルベストロールおよび１００μＬの種々の大腸菌ライゼートの希釈物を高結合のマスクされたミクロタイタープレート（ＥＧ＆Ｇ  Ｗａｌｌａｃ）の各ウエルに添加した。この最終のアッセイ容積は１２０μＬであり、ＤＭＳＯ濃度は≦１％であった。室温で５−１８時間インキュベーションした後、非結合材料を吸引し、ほぼ３００μＬのアッセイ緩衝液によりこのプレートを３回洗浄した。洗浄後、１３５μＬのシンチレーションカクテル（Ｏｐｔｉｐｈａｓｅ  Ｓｕｐｅｒｍｉｘ，ＥＧ＆Ｇ  Ｗａｌｌａｃ）をウエルに添加し、プレートを封止し、少なくとも５分間振盪して、シンチレーション剤を残存洗浄緩衝液と混合した。結合した放射活性を液体シンチレーション計数（Ｐｌｕｓ  ＥＧ  ＆Ｇ  Ｗａｌｌａｃ，Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ）により評価した。
【００５５】
最大の特異的な結合をもたらす各受容体標品の希釈を求めた後、種々の希釈の受容体製剤標品を用いて、非ラベル１７β−エストラジオールのＩＣ50を評価することにより、このアッセイを更に最適化した。非ラベル１７β−エストラジオールのＩＣ50が２−４ｎＭである各受容体標品に対する最終の使用希釈を選択した。
【００５６】
リガンド結合競合試験手順：最初、試験化合物をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に可溶化した。結合アッセイ中のＤＭＳＯの最終濃度は≦１％であった。各試験化合物の８つの希釈を［3Ｈ］−１７β−エストラジオールに対する非ラベル競合物として使用した。通常、一組の化合物の希釈物をヒトＥＲαおよびＥＲβに同時に試験した。結果を測定された１分当たりの崩壊（ＤＰＭ）対試験化合物濃度としてプロットした。用量−反応曲線フィッティングに対して、変形され、重み付けされたデータ上の４パラメーターのロジスチックモデルをフィットさせ、最大［3Ｈ］−エストラジオール結合を５０％減少させる化合物の濃度としてＩＣ50を定義した。
【００５７】
本発明の化合物の代表的な代謝物に対するＥＲαおよびＥＲβに対する結合親和性（ＩＣ50により測定して）を表１に示す。
【表１】
2008510827.tif 000016
2008510827.tif 000017
【００５８】
上述の標準の薬理学的試験手順において得られる結果は、試験化合物がエストロゲン受容体の両方のサブタイプを結合するということを実証する。ＩＣ50はＥＲβに対して一般的に低く、これらの化合物が優先的にＥＲβ選択性のリガンドであるが、ＥＲαにおいて活性であるとなお考えられるということを示す。化合物は、受容体親和性の選択性プロフィールに少なくとも部分的に基づく活性範囲を呈する。本発明の化合物の代謝物はＥＲαよりも高い親和性でＥＲβを結合するので、本発明の化合物は、ＥＲβ経由で調節可能な疾患を治療または阻害することにおいて有用である。加えて、各受容体リガンドコンプレックスは特異的であり、したがって種々の同時制御タンパク質との相互作用は特異的であるので、本発明の化合物は細胞環境に依って異なり、かつ予測不能な活性を表す。例えば、ある細胞タイプにおいては、化合物がエストロゲン受容体作用薬として挙動し、他の組織においてはエストロゲン受容体拮抗薬として挙動することが可能である。このような活性を持つ化合物は、往々にしてＳＥＲＭ（選択性エストロゲン受容体モジュレーター）と呼ばれてきた。しかしながら、多数のエストロゲンと異なり、ＳＥＲＭの多くは子宮の湿時重量の増加を生じさせない。これらの化合物は子宮中で抗エストロゲン性であり、子宮組織中でのエストロゲン受容体作用薬の刺激性の影響と完全に拮抗することができる。しかしながら、これらの化合物は、骨、心臓血管および中枢神経系中でエストロゲン受容体作用薬として作用する。これらの化合物のこの組織選択性の性質により、これらは、哺乳動物におけるエストロゲン不足（骨または心臓血管などのしかるべき組織中の）またはエストロゲン過剰（子宮または乳腺中で）により引き起こされるか、あるいはそれと関連する疾患状態または症候群の治療または阻害において有用である。加えて、本発明の化合物の代謝物は、一つの受容体タイプに対するエストロゲン受容体作用薬として挙動し、他方で他の受容体タイプに対するエストロゲン受容体拮抗薬として挙動する潜在力を有する。例えば、化合物はＥＲαとのエストロゲン受容体作用薬活性を呈する一方で、Ｅβ経由の１７β−エストラジオールの作用に拮抗可能であるということが実証された[Sun, et al., Endocrinology 140: 800-804(1999)]。このようなＥＲＳＡＡ（エストロゲン受容体選択性作用薬拮抗薬）活性は、一連の化合物内で薬理学的に識別できるエストロゲン性活性を提供する。
【００５９】
メタロチオネインＩＩｍＲＮＡの調節
ＥＲβにより作用するが、ＥＲαによっては作用しないエストロゲンは、Harris et al.[Endocrinology 142(2): 645-652(2001)]により述べられているように、Ｓａｏｓ−２細胞中でメタロチオネインＩＩｍＲＮＡ濃度を上方制御することができる。この試験手順からの結果は、下記に述べる試験手順（ＥＲＥレポーター試験手順）からの結果と合体されて、本発明の化合物の代謝物に対する選択性プロフィールを生成することができる（ＷＯ００／３７６８１号も参照のこと）。本発明の化合物の代表的な代謝物に対するデータを表２に示す。
【表２】
2008510827.tif 000018
【００６０】
ＥＲＥ−レポーター試験手順を用いるＭＣＦ−７乳がん細胞における試験化合物の評価
試験化合物のストック溶液（通常０．１Ｍ）をＤＭＳＯ中で調製し、次にＤＭＳＯにより１０−１００倍に希釈して、１または１０ｍＭの使用溶液を作製する。このＤＭＳＯストックを４℃（０．１Ｍ）または−２０℃（＜０．１Ｍ）のいずれかで貯蔵する。ＭＣＦ−７細胞を成長培地［１０％（ｖ／ｖ）加熱非働化したウシ胎児血清、１％（ｖ／ｖ）ペニシリン−ストレプトマイシンおよび２ｍＭ  ｇｌｕｔａＭａｘ−１を含有するＤ−ＭＥＭ／Ｆ−１２培地］により１週間に２回継代させる。この細胞を５％ＣＯ2／９５％加湿空気インキュベーター内で通気したフラスコ中３７℃で維持する。処理の１日前、この細胞を２５，０００細胞／ウエルで９６ウエルのプレートの中に成長培地と共に撒き、３７℃で一夜インキュベーションした。
【００６１】
実験培地［１０％（ｖ／ｖ）加熱非働化したチャコールで精製されたウシ胎児血清、１％（ｖ／ｖ）ペニシリン−ストレプトマイシン、２ｍＭ  ｇｌｕｔａＭａｘ−１および１ｍＭナトリウムピルベートを含有するフェノールレッドフリーＤ−ＭＥＭ／Ｆ−１２培地］中で、１：１０希釈比の５０μＬ／ウエルのアデノウイルス５−ＥＲＥ−ｔｋ−ルシフェラーゼにより、この細胞を３７℃で２時間感染させる。次に、このウエルを１５０μｌの実験培地により１回洗浄する。最後に、この細胞を８ウエル／処理の複製中で１５０μｌ／ウエルの媒体（≦０．１％  ｖ／ｖ  ＤＭＳＯ）または実験培地の中に≧１０００倍希釈された試験化合物により３７℃で２４時間処理する。
【００６２】
単独（エストロゲン受容体作用薬モード）または０．１ｎＭの１７β−エストラジオールとの組み合わせ（ＥＣ80；エストロゲン受容体拮抗薬モード）で試験される１μＭの単独用量において試験化合物の一次スクリーニングを行う。各９６ウエルのプレートは、また、媒体コントロール群（０．１％  ｖ／ｖ  ＤＭＳＯ）とエストロゲン受容体作用薬コントロール群（０．１または１ｎＭのいずれかの１７β−エストラジオール）も含む。活性化合物に対するエストロゲン受容体作用薬および／またはエストロゲン受容体拮抗薬モードのいずれかで１０-14から１０-5Ｍまで対数増加させて用量−応答実験を行う。これらの用量−反応曲線から、ＥＣ50およびＩＣ50値をそれぞれ生成させる。各処理群における最終のウエルは、エストロゲン受容体拮抗薬コントロールとして５μｌの３×１０-5ＭのＩＣＩ−１８２，７８０（１０-6Ｍ最終濃度）を含有する。
【００６３】
処理後、この細胞を振盪器上で２５μｌ／ウエルの１Ｘ細胞培養リーシス反応試剤（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）により１５分間溶解させる。この細胞ライゼート（２０μｌ）を９６ウエルのルミノメータープレートに移し、１００μｌ／ウエルのルシフェラーゼ基質（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を用いてルシフェラーゼ活性をＭｉｃｒｏＬｕｍａｔ  ＬＢ９６Ｐ  ルミノメーター（ＥＧ＆Ｇ  Ｂｅｒｔｈｏｌｄ；Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，Ｓｈｅｌｔｏｎ，ＣＴ）中で測定する。基質の注射の前に、１秒のバックグラウンド測定を各ウエルに対して行う。基質の注射の後に、１秒の遅延後ルシフェラーゼ活性を１０秒間測定する。このデータをルミノメーターからマキントッシュパーソナルコンピューターへ移し、ＪＭＰソフトウエア（ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｃａｒｙ，ＮＣ）を用いて、分析する；このプログラムは、各ウエルに対してルシフェラーゼ測定からバックグラウンド読みを差し引き、次に各処理の平均および標準偏差を求める。
【００６４】
このルシフェラーゼのデータを対数により変形させ、ＨｕｂｅｒＭ評価装置を使用して、中心から離れた変形観察値の重み付けを軽くする。ＪＭＰソフトウエアを使用して、一元配置ＡＮＯＶＡ（ダネットテスト）に対して変形し、重み付けされたデータを分析する。化合物処理をエストロゲン受容体作用薬モードでの媒体コントロール結果と、あるいはエストロゲン受容体拮抗薬モードでのポジチブエストロゲン受容体作用薬コントロール結果（０．１ｎＭの１７β−エストラジオール）と比較する。初期の単一の用量実験に対しては、化合物処理結果が適切なコントロールと著しく異なる（ｐ＜０．０５）場合には、結果を１７β−エストラジオールコントロールに対するパーセント［すなわち、（（化合物−媒体コントロール）／（１７β−エストラジオールコントロール−媒体コントロール））×１００）］として示す。ＪＭＰソフトウエアを使用して、非線形の用量−反応曲線からＥＣ50および／またはＩＣ50値も求める。
【００６５】
子宮刺激性活性の評価
試験化合物の子宮刺激性活性を次の標準の薬理学的試験手順にしたがって測定することができる。
【００６６】
手順１：性的に未熟な（１８日令）スプラーグ・ドーリーラットをＴａｃｏｎｉｃ（Ｇｅｒｍａｎｔｏｗｎ，ＮＹ）から入手し、カゼインベースの食餌（Ｐｕｒｉｎａ  Ｍｉｌｌｓ（登録商標）５Ｋ９６Ｃ，Ｐｕｒｉｎａ  Ｍｉｌｌｓ，ＬＬＣ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）と水を制約なしで得ることができるようにする。１９日、２０日および２１日目に、このラットに１７α−エチニル−１７β−エストラジオール（０．０６μｇ／ラット／日）、試験化合物または媒体（５０％ＤＭＳＯ／５０％ダルベッコのＰＢＳ）を皮下投与する。エストロゲン受容体拮抗薬活性を評価するために、化合物を１７α−エチニル−１７β−エストラジオール（０．０６μｇ／ラット／日）と共に共投与する。６匹のラット／群を最後の注射後ほぼ２４時間にＣＯ2窒息および気胸により安楽死させる。子宮を取り出し、結合した脂肪をトリミングし、内液をすべて絞り出した後に秤量する。遺伝子発現（例えば、相補因子３ｍＲＮＡ）を分析するために、組織試料をスナップ凍結することもできる。本発明の化合物の代表的な代謝物から得られる結果を表３に示す。
【表３】
2008510827.tif 000019
【００６７】
手順２：性的に未熟の（１８日令）１２９ＳｖＥマウスをＴａｃｏｎｉｃから入手し、カゼインベースの食餌（Ｐｕｒｉｎａ  Ｍｉｌｌｓ（登録商標）５Ｋ９６Ｃ）と水を制約なしで得られるようにする。２２日、２３日、２４日および２５日目に、このマウスに化合物または媒体（コーンオイル）を皮下投与する。６匹のマウス／群を最後の注射後ほぼ６時間にＣＯ2窒息および気胸により安楽死させる。子宮を取り出し、結合した脂肪をトリミングし、内液をすべて絞り出した後に秤量する。本発明の化合物の代表的な代謝物に対して次の結果（表４）が得られた。
【表４】
2008510827.tif 000020
【００６８】
骨粗しょう症および脂質モジュレーション（心筋保護）の評価：
子宮切除または擬似手術された雌のスプラーグ・ドーリーラットを手術後１日でＴａｃｏｎｉｃから入手する（重量範囲２４０−２７５ｇ）。これらを３または４匹ラット／かごで１２／１２時間（明／暗）のスケジュールにより室中で飼育し、食物（Ｐｕｒｉｎａ  Ｍｉｌｌｓ（登録商標）の５Ｋ９６Ｃ）と水を自由に与える。すべての試験のための処理は到着後１日で開始し、ラットに指示されたように１週間当たり７日６週間投与する。いずれの処理も受けていない、年齢にマッチングした擬似手術されたラットの群が各試験に対して無処置のエストロゲン充満コントロール群としての役割を行う。
【００６９】
処理容積が０．１ｍＬ／１００ｇ体重となるように、すべての試験化合物を５０％ＤＭＳＯ（ＪＴ  Ｂａｋｅｒ，Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ，ＮＪ）／１×ダルベッコのリン酸緩衝生理食塩水（Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ，Ｇｒａｎｄ  Ｉｓｌａｎｄ，ＮＹ）の媒体中で規定の濃度で調製する。１７β−エストラジオールをコーンオイルに溶解（２０μｇ／ｍＬ）し、０．１ｍＬ／ラットで皮下送達させる。すべての用量を群平均体重測定にしたがって３週間隔で調整し、皮下投与する。
【００７０】
処理の開始後５週およびこの試験の停止１週前に、各ラットを骨塩密度（ＢＭＤ）について評価する。ＸＣＴ−９６０Ｍ末梢骨用定量的コンピュータートモグラフィ（ｐＱＣＴ）（Ｓｔｒａｔｅｃ  Ｍｅｄｉｚｉｎｔｅｃｈｎｉｋ，Ｐｆｏｒｚｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて、近位脛骨の全密度および海綿骨密度を麻酔させたラット中で評価する。この測定を次のように行う：走査前１５分間に、４５ｍｇ／ｋｇケタミン、８．５ｍｇ／ｋｇキシラジンおよび１．５ｍｇ／ｋｇアセプロマジンを腹腔内注射することにより、各ラットを麻酔させる。
【００７１】
右後肢を２５ｍｍの直径のポリカーボネート管に通し、くるぶし関節を９０゜の角度で、膝関節を１８０゜でアクリル枠とテープで貼る。このポリカーボネート管をｐＱＣＴの開口に垂直にこのポリカーボネート管を保持するスライド式プラットホームに固定する。大腿骨の遠位端と脛骨の近位端が走査場中にあるように、このプラットホームを調整する。二次元のスカウト像を０．２ｍｍの線分解能および１０ｍｍの長さの間を走らせる。スカウト像をモニター上に表示した後、脛骨の近位端を位置決めする。ｐＱＣＴ走査をこの地点の３．４ｍｍ遠位で開始する。ｐＱＣＴ走査は１ｍｍ厚であり、０．１４０ｍｍのボクセル（三次元的ピクセル）サイズを有し、このスライスからの１４５個の投影からなる。
【００７２】
ｐＱＣＴの走査が完結した後、像をモニター上に表示する。脛骨を含むが、腓骨を除く対象の領域を輪郭描写する。反復アルゴリズムを用いて、軟組織を数学的に除去する。残存する骨密度（全密度）をｍｇ／ｃｍ3で示す。この骨の外側の５５％を同心らせんで数学的に剥離する。残存する骨密度（海綿骨密度）をｍｇ／ｃｍ3で示す。
【００７３】
ＢＭＤ評価後１週後、このラットをＣＯ2窒息および気胸により安楽死させ、血液をコレステロール定量のために集める。子宮も取り出し、結合した脂肪をトリミングし、いかなる管腔流液も絞り出した後に秤量する。コレステロール／ＨＰキットを用いるＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒ−Ｍａｎｎｈｅｉｍ  Ｈｉｔａｃｈｉ  ９１１臨床分析装置（Ｒｏｃｈｅ，Ａｌａｍｅｄａ，ＣＡ）を使用して、全コレステロールを求める。一元配置分散分析を用いて統計をダネットテストと比較する。
【００７４】
本発明の化合物の代表的な代謝物について次の結果を得た（表５）。
【表５】
2008510827.tif 000021
【００７５】
抗酸化薬活性の評価
ブタの大動脈を食肉処理場から入手し、洗浄し、冷ＰＢＳ中で輸送し、大動脈の内皮細胞を収集する。この細胞を収集するために、大動脈の肋間血管を縛り、この大動脈の一端をクランプで止める。新鮮で滅菌濾過された０．２％コラゲナーゼ（Ｓｉｇｍａ  Ｔｙｐｅ  Ｉ）を血管に入れ、次に他端をクランプで止めて、閉じた系を形成する。この大動脈を３７℃で１５−２０分間インキュベーションし、その後コラゲナーゼ溶液を集め、２０００×ｇで５分間遠心分離する。各沈殿物をチャコールで精製されたＦＢＳ（５％）、ＮｕＳｅｒｕｍ（５％）、Ｌ−グルタミン（４ｍＭ）、ペニシリン−ストレプトマイシン（１０００Ｕ／ｍｌ、１００μｇ／ｍｌ）およびゲンタマイシン（７５μｇ／ｍ１）を添加したフェノールレッドフリーＤＭＥＭ／ＨａｍのＦ−１２培地からなる７ｍＬの内皮細胞培養培地中に懸濁させ、１００ｍｍのペトリ皿中で播種し、５％ＣＯ2中３７℃でインキュベーションする。２０分後、この細胞をＰＢＳによりすすぎ、新鮮な培地を添加し、これを２４時間で再び繰り返す。ほぼ１週間後この細胞はコンフルエントである。この内皮細胞に１週間に２回定期的に栄養を与え、コンフルエントの場合には１：７比でトリプシン化し、播種する。１２．５μｇ／ｍＬ  ＬＤＬの細胞で仲介された酸化は、評価対象の化合物の存在下（５μＭ）で３７℃で４時間進行するようにされる。遊離アルデヒドを分析するために、結果をＴＢＡＲＳ（チオバルビツール酸反応性物質）法により測定してこの酸化過程のパーセント阻害として表す［Yagi K., Biochemical Medicine 15: 212-6(1976)］。
【００７６】
プロゲステロン受容体ｍＲＮＡ調節の標準の薬理学的試験手順
この試験手順を使用して、本発明からの化合物のエストロゲン性または抗エストロゲン性の活性を評価することができる［Shughrue, et al.,Endocrinology 138: 5476-5484(1997)］。本発明の化合物の代表的な代謝物についてのデータを表６に示す。
【表６】
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【００７７】
ラット顔面潮紅試験手順
モルヒネ中毒になったラットをナロキソンを用いてこの薬剤から急速に退薬させるときに起こる尻尾皮膚温度の増加を鈍らせる試験化合物の能力を測定する標準の薬理学的試験手順で顔面潮紅に及ぼす試験化合物の影響を評価することができる［Merchenthaler, et.al., Maturitas 30: 307-16(1998)］。これは、また、参照エストロゲンと共に試験化合物を共投与することにより、エストロゲン受容体拮抗薬活性の検出にも使用可能である。本発明の化合物の代表的な代謝物から次のデータを得た（表７）。
【表７】
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【００７８】
単離されたラット大動脈リングにおける血管運動機能の評価
スプラーグ・ドーリーラット（２４０−２６０グラム）を次の４群に区分する。
１．通常子宮非切除（無処理）
２．子宮切除（ovex）、媒体処理
３．子宮切除、１７β−エストラジオール処理（１ｍｇ／ｋｇ／日）
４．試験化合物（種々の用量）により処理された子宮切除された動物
【００７９】
動物を処理のほぼ３週前に子宮切除する。各動物に１％ ｔｗｅｅｎ−８０と蒸留脱イオン水中に懸濁させた１７−βエストラジオールサルフェート（１ｍｇ／ｋｇ／日）または試験化合物のいずれかを胃管栄養法により与える。媒体で処理された動物に薬剤で治療された群で使用される適切な容積の媒体を与える。
【００８０】
動物をＣＯ2吸入および全採血により安楽死させる。胸部大動脈を迅速に除去し、ＮａＣｌ（５４．７）、ＫＣｌ（５．０）、ＮａＨＣＯ3（２５．０）、ＭｇＣｌ2２Ｈ2Ｏ（２．５）、Ｄ−グルコース（１１．８）および９５％／５％のＣＯ2／Ｏ2によりガス添加されたＣａＣｌ2（０．２）の組成（ｍＭ）の３７℃の生理溶液中に７．４の最終ｐＨで入れる。外膜を外表面から除去し、血管を２−３ｍｍ幅のリングに切断する。このリングを１０ｍＬの組織浴中に吊るし、一方の端を浴の底に取り付け、他端を張力変換器に取り付ける。１グラムの静止張力をリング上にかける。このリングを１時間平衡化させ、信号を取り出し、分析する。
【００８１】
平衡化の後、このリングを増大する濃度のフェニレフリン（１０-8−１０-4Ｍ）に暴露し、張力を記録する。次に、この浴を新しい緩衝液により３回すすぐ。洗い出した後、２００ｍＭのニトロ−Ｌ−アルギニン−メチルエステル（Ｌ−ＮＡＭＥ）をこの組織浴に添加し、３０分間平衡化する。次に、このフェニレフリン濃度応答曲線を繰り返す。
【００８２】
心筋保護活性の評価
アポリポタンパク質Ｅ−欠乏Ｃ５７／Ｂ１Ｊ（ａｐｏ  Ｅ  ＫＯ）マウスをＴａｃｏｎｉｃから入手した。Institutional Animal Care and Use Committee（ＩＡＣＵＣ）のガイドラインの厳密な準拠の下ですべての動物手順を行った。４−７週令の子宮切除された雌のａｐｏ  Ｅ  ＫＯマウスを靴箱ケージで飼育し、食物と水を自由に摂取できるようにした。この動物を体量により群（群当たりｎ＝１２−１５匹のマウス）にランダム配置した。消費される食餌量を週で測定し、用量を動物の体量に基づいて調整する、正確な投与（Ｐｒｅｃｉｓｅ−ｄｏｓｉｎｇ）プロトコルを用いて、この動物に食餌中の試験化合物またはエストロゲン（１ｍｇ／ｋｇ／日の１７β−エストラジオールサルフェート）を投与した。使用される食餌はＰｕｒｉｎａ（登録商標）により調製された西洋式食餌（５７Ｕ５）であり、０．５０％のコレステロール、２０％のラードおよび２５ＩＵ／ＫＧのビタミンＥを含有する。このパラダイムを用いて、この動物に１２週間投与／給餌した。コントロール動物には西洋式食餌を給餌し、化合物を与えない。試験期間の終わりに、この動物を安楽死させ、血漿試料を得た。心臓を最初に生理食塩水により、次に中性の緩衝１０％ホルマリン溶液によりｉｎ  ｓｉｔｕで灌流した。
【００８３】
血漿脂質とリポタンパク質の測定には、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｍａｎｎｈｅｉｍ（Ｒｏｃｈｅ、Ａｌａｍｅｄａ、ＣＡ）およびＷａｋｏ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ｏｓａｋａ，Ｊａｐａｎ）からの市販のキットによる酵素法を用いて総コレステロールとトリグリセリドをそれぞれ求め、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｍａｎｎｈｅｉｍ  Ｈｉｔａｃｈｉｉ  ９１１アナライザーを用いて分析する。ＦＰＬＣサイズ分画を用いて、血漿リポタンパク質の分離および定量を行った。手短にいうと、５０−１００ｍＬの血清を濾過し、直列に連結されたＳｕｐｅｒｏｓｅ（登録商標）１２およびＳｕｐｅｒｏｓｅ（登録商標）６カラムの中に注入し、一定流速で１ｍＭナトリウムＥＤＴＡと０．１５ＭＮａＣｌにより溶離した。Ｗａｔｅｒｓ  Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ（商標）ソフトウエアを用いて、極低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）、（ＬＤＬ）および高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）を表す各曲線の面積を積分し、各リポタンパク質画分を総コレステロール値にそれぞれのクロマトグラムピークの相対的なパーセント面積を掛けることにより定量した。
【００８４】
大動脈のアテローム性動脈硬化症の定量には、この大動脈を注意深く単離し、取り扱い前にホルマリン固定液中に４８−７２時間入れた。Ｏｉｌ  Ｒｅｄ  Ｏ染色を用いて、アテローム硬化性病変を同定した。この血管を手短に脱染色し、次に像キャプチュア用のソフトウエアとしてＩＭＡＱ  Ｃｏｎｆｉｇｕｒａｔｉｏｎ  Ｕｔｉｌｉｔｙ（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ，Ａｕｓｔｉｎ，ＴＸ）と連携したソニー３ＣＣＤビデオカメラシステムを備えたＮｉｋｏｎ  ＳＭＵ８００顕微鏡を用いて、画像形成した。カスタムしきい値ユーティリティソフトウエアパッケージ（Ｃｏｌｅｍａｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｓｕｒｒｅｙ，ＢＣ，Ｃａｎａｄａ）を用いて、この病変を大動脈弓に沿って正面で定量した。このプログラムのしきい値機能を用いて、この血管について、特に腕頭動脈の近位縁から左鎖骨下動脈の遠位縁までの大動脈弓内に含まれる領域について、自動化された病変評価を行った。厳密に規定された管腔領域内のパーセント病変障害として大動脈のアテローム性動脈硬化症データを表した。
【００８５】
認知増進の評価
子宮切除されたラット（ｎ＝５０）を５連続日の各々で８本のアームのラジアルアーム迷路に１０分間慣らさせる。慣らし、試験する前には動物に水を与えない。各アームの端に置かれた１００μＬアリコートの水が強化剤として役を果たす。ラジアルアーム迷路中のウイン−シフト課題の取得は、動物が１つの餌を付けたアームにアクセスすることを可能にさせることにより行われる。水を飲んだ後、動物はこのアームを出て、中央の小室に再び入り、ここで前に訪れたアームまたは新しいアームにアクセスすることが可能となる。動物が新しいアームに入ることを選ぶときには、正しい応答を記録する。各動物に１日当たり５回の試みを３日間与える。最後の取得の試みの後、この動物を次の４群の１つに帰属させる。
１．負のコントロール：１０％ＤＭＳＯ／ゴマ油媒体を１日１回６日間注射（１ｍＬ／ｋｇ、ＳＣ）。
２．正のコントロール：１７β−エストラジオールベンゾエートを２日間注射し、第２の注射（ラット当たり１０μｇ／０．１ｍＬの１７β−エストラジオールベンゾエート）の４日後試験した。
３．エストラジオール：１７β−エストラジオールを６日間毎日注射（２０μｇ／ｋｇ、ＳＣ）。
４．試験化合物：６日間毎日注射（用量は変わる）。
取得の最終日の試験後にすべての注射を始める。試験２時間前に群１、３および４に対する最終の注射をワーキングメモリーのために行う。
【００８６】
ワーキングメモリーのための試験は、１５、３０または６０秒の遅延を用いる遅延非見本あわせ（delayed non-matching-to-sample）課題（ＤＮＭＳ）である。この課題はラットを中央アリーナに置き、前のように１つのアームに入らせる取得課題の変形である。ラットが第１のアームを半分横断したならば、第２のアームを開き、ラットはこのアームを再び選ぶのを必要とされる。ラットが第２のアームを半分横断した場合には、両方の扉を閉じ、遅延を始める。遅延が終了ならば、元の２つの扉と第３の新しい扉を同時に開く。この動物が第３の新しいアームを半分進んだ場合には、正しい応答を記録する。この動物が第１または第２のアームのいずれかを半分進んだ場合には、不正の応答を記録する。各動物には、被験動物当たり合計１５回の試みに対して３つの遅延間隔の各々で５回の試みを与える。
【００８７】
胸膜炎に及ぼす影響の評価
ラットにおいて実験的に誘導された胸膜炎の症状を低減させる能力は、Cuzzocrea S. et., al [Endocrinology 141(4): 1455-63(2000)]の手順にしたがって評価可能である。
【００８８】
グルタメートで誘起された細胞毒性に対する保護（神経保護）の評価
グルタメート誘発を用いるインビトロの標準の薬理学的試験手順で本発明の化合物またはこれらの代謝物の神経保護的な活性を評価することができる［Zaulyanov, et al., Cellular & Molecular Neurobiology 19: 705-18(1999); Prokai, et al., Journal of Medicinal Chemistry 44: 110-4(2001)］。
【００８９】
組織学的試験による乳腺終端芽試験手順での評価
乳管の充分な管状伸長および分岐と、それに続くプロゲステロンの影響下での小葉−肺胞終端芽の発育には、エストロゲンが必要とされる。小葉−肺胞終端芽の発育の促進能の組織学的評価により、化合物の乳腺非刺激性活性を求めることができる。組織学的試験によるこのような判定の例は当分野でよく知られている。例えば、参照により全てが本明細書に組み込まれている、Harris, H.A., et al., Endocrinology 144(10): 4241-4249(2003); Mulac-Jericevic, B., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 100(17): 9744-9749(2003); Bocchinfuso, W.P., et al., Endocrinology 141(8): 2982-2994(2002); and Lewis, B.C., et al., Toxicological Sciences 62:46-53(2001)を参照のこと。本発明の文脈においては、化合物は、組織学的試験により評価して小葉−肺胞終端芽の発育の促進において１７β−エストラジオールの有効性の＜１０％である活性を有する場合には「乳腺非刺激性」と考えられる。
【００９０】
炎症性腸疾患に対するＨＬＡラット標準の薬理学的試験手順での評価
本発明の化合物の代表的な代謝物をヒトにおける炎症性腸疾患を模倣するＨＬＡラット標準の薬理学的試験手順で評価した。以下で使用される手順と得られる結果を簡潔に述べる。雄のＨＬＡ−Ｂ２７ラットをＴａｃｏｎｉｃから入手し、食物（ＰＭＩ（登録商標）Ｌａｂ  Ｄｉｅｔ（登録商標）５００１，Ｐｕｒｉｎａ  Ｍｉｌｌｓ，Ｉｎｃ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ）と水を自由に与える。大便の質を日々観察し、下痢＝３；軟便＝２；正常便＝１という尺度にしたがって等級付けした。試験の終わりに、血清を集め、−７０℃で貯蔵した。大腸の切片を組織学的分析用に調製し、追加の区域をミエロペルオキシダーゼ活性について分析した。
【００９１】
試験Ａにおいては、下記の治療法の一つによりラット（２２−２６週令）に１日当たり１回７日間皮下投与した。各群の５匹のラットには、安楽死の２時間前に最後の用量を投与した。
・媒体（５０％ＤＭＳＯ／５０％ダルベッコのＰＢＳ）
・実施例２４（５０ｍｇ／ｋｇ）
試験Ａからの結果を表８に示す。媒体を投与したラットは試験の過程を通じて下痢を起こし続けた。実施例２４により治療されたラットでは大便の質が改善された。
【表８】
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【００９２】
試験Ｂにおいては、ラット（８−１０週令）に２６日間次のように経口投与した。
・媒体（２％Ｔｗｅｅｎ−８０／０．５％メチルセルロース）
・実施例２５（１−１４日は１０ｍｇ／ｋｇ；次に１５日目に２０ｍｇ／ｋｇまで増加）
・実施例３４（１０ｍｇ／ｋｇ）
【００９３】
次の結果を得た（表９）。この表は本発明の化合物の代表的な代謝物により治療されたすべてのラットにおいて大便の質が改善されたということを示す。
【表９】
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【００９４】
試験Ｃにおいては、ラット（８−１０週令）に下記の製剤の１つを１日当たり１回４６日間次のように経口投与した。各群の４匹のラットには、安楽死の２時間前に最後の用量を投与した。
・媒体（２％Ｔｗｅｅｎ−８０／０．５％メチルセルロース）
・実施例２１（１−１８日は１０ｍｇ／ｋｇ；次に１９日目に２０ｍｇ／ｋｇまで増加）
・実施例２４（１−２４日は１０ｍｇ／ｋｇ；次に２５日目に２０ｍｇ／ｋｇまで増加）
【００９５】
次の結果を得た（表１０）。この表はすべてのＥＲβ選択性化合物の投与により大便の質が改善されたということを示す。
【表１０】
2008510827.tif 000026
【００９６】
組織学的分析
大腸組織を１０％中性の緩衝液化されたホルマリン中に漬けた。評価のために大腸の各試料を４つの試料に分離した。パラフィン埋め込みのためにホルマリン固定された組織をＴｉｓｓｕｅ−Ｔｅｋ（登録商標）真空浸潤処理装置（Ｍｉｌｅｓ，ｌｎｃ；Ｗｅｓｔ  Ｈａｖｅｎ，Ｃｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔ）中で処理した。Ｂｏｕｇｈｔｏｎ−Ｓｍｉｔｈにならって改良された尺度を用いた盲検化された組織学的評価のためにこの試料を５μｍの切片とし、次にヘマトキシリンおよびエオシン（Ｈ＆Ｅ）により染色した。スコアを完結した後、試料を非盲検化し、データを表とし、多重平均比較によるＡＮＯＶＡ線形モデル化により分析した。大腸組織の切片をいくつかの疾患指標のために評価し、相対的なスコアを与えた。表（１１）（試験Ａを含む２つの皮下投与試験の複合）に示すように、実施例２４は組織損傷のいくつかの測定の低減において有効である。
【表１１】
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【００９７】
試験Ｂ（上記を参照のこと）からの腸組織も組織学的に試験した。下記（表１２）に示すように、両方の化合物は全疾患スコアを著しく低下させた。
【表１２】
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【００９８】
試験Ｃ（上記を参照のこと）からの腸組織も組織学的に試験した。下記（表１３）に示すように、実施例２４は全疾患スコアを著しく低下させた。すべての疾患パラメーター上の実施例２１のスコアは、統計的には有意ではないが、媒体で処置されたラットからの対応するスコアよりも低かった。
【表１３】
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【００９９】
関節炎の２つのモデルにおける評価
アジュバント誘起の関節炎のルイスラットアッセイ：６０匹の１２週令の雌のルイスラットを標準の施設運用手順にしたがって飼育する。これらのラットには標準の治療法の食物と水を自由に与える。各動物はプロジェクトグループと動物の番号を示すケージカードにより同定される。各ラットの番号は消えないインクマーカーにより尻尾にマークされる。試験の少なくとも１０−２１日前に、このラットは麻酔され、標準の無菌の外科手法により子宮切除される。
【０１００】
フロイント完全アジュバント（Ｓｉｇｍａ  Ｉｍｍｕｎｏ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）を使用して、関節炎を誘発する。各ｍＬは加熱殺菌し、乾燥した１ｍｇのＭycobacterium tuberculosis、０．８５ｍＬの鉱油および０．１５ｍＬのマンニドモノオレエート（Ｌｏｔ  Ｎｏ．０８４Ｈ８８００）を含有する。
【０１０１】
以下は２つの試験手順の例である。
【０１０２】
阻害試験手順：３０匹のラットに０．１ｍＬのフロイント完全アジュバントを尻尾の基部において皮内注射する。この動物を４つの群にランダム配置する。各群は６匹のラットを含む。毎日、この群に媒体（５０％ＤＭＳＯ（ＪＴ  Ｂａｋｅｒ，Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ，ＮＪ）／１×ダルベッコのリン酸緩衝生理食塩水（Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ，Ｇｒａｎｄ  Ｉｓｌａｎｄ，ＮＹ））または試験化合物（皮下投与）を与える。１日目にすべてのラットは処置を始めた。本発明の化合物の代表的な代謝物に対するデータを表１４に示す。
【０１０３】
処置試験手順：３０匹のラットに０．１ｍＬのフロイント完全アジュバントを尻尾の基部において皮内注射する。この動物を４つの群にランダム配置する。各群は６匹のラットを含む。毎日、この群に媒体（５０％ＤＭＳＯ（ＪＴ  Ｂａｋｅｒ，Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ，ＮＪ）／１×ダルベッコのリン酸緩衝生理食塩水（Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ，Ｇｒａｎｄ  Ｉｓｌａｎｄ，ＮＹ））または試験化合物（皮下投与）を与える。アジュバント注射後８日目にすべてのラットは処置を始めた。本発明の化合物の代表的な代謝物に対するデータを後述の表１５、１６および１７に示す。
【０１０４】
Ａｂａｃｕｓ  Ｃｏｎｃｅｐｔｓ  Ｓｕｐｅｒ  ＡＮＯＶＡ（Ａｂａｃｕｓ  Ｃｏｎｃｅｐｔｓ，Ｉｎｃ．，Ｂｅｒｋｅｌｅｙ，ＣＡ）を用いて、統計的分析を行った。対象のパラメーターをすべて群の間のダンカンの新しい多重範囲事後試験による分散分析にかけた。データを平均±標準偏差（ＳＤ）で表し、ｐ＜０．０５ならば差異を有意と判断する。
【０１０５】
関節炎重症度の程度を後足の紅斑、後足の腫張、関節の圧痛および動きと姿勢の疾患指標により毎日モニターする。０−３の整数尺度を使用して、紅斑（０＝正常な足、１＝軽度の紅斑、２＝中程度の紅斑、３＝重度の紅斑）および腫張（０＝正常な足、１＝軽度の腫張、２＝中程度の腫張、３＝後足の重度の腫張）の濃度を定量化する。１日当たりの最大のスコアは１２である。
【０１０６】
試験の終わりで、このラットをＣＯ2により安楽死させ、剖検で後肢を取り除き、１０％緩衝ホルマリン中で固定し、足根関節を脱灰し、パラフィン中に埋め込む。組織学的切片をヘマトキシリンおよびエオシンまたはＳａｆｆｒａｎｉｎ  Ｏ−Ｆａｓｔ  Ｇｒｅｅｎ染色剤により染色する。
【０１０７】
処置群に対して試験者を盲検化するように、スライドをコード化する。下記に概述するように、滑膜肥厚、炎症性細胞浸潤およびパンヌス形成［Poole and Coombs, International Archives of Allergy & Applied Immunology 54: 97-113(1977)］に基づいて足根関節からの滑膜組織を評価する。
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【０１０８】
加えて、下記に示すように、マンキンの組織学的等級付けシステム［Mankin, et al., Journal of Bone & Joint Surgery-American 53: 523-37(1971)］を用いて関節軟骨および骨を評価する。
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【表１４】
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【表１５】
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【表１６】
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【表１７】
2008510827.tif 000035
【０１０９】
ＨＬＡ−Ｂ２７ラットモデルにおける関節炎の評価：本発明の化合物の代表的な代謝物をヒトにおける関節炎を模倣するＨＬＡ−Ｂ２７ラット標準の薬理学的試験手順で評価した。以下で使用される手順と得られる結果を簡潔に述べる。雄のＨＬＡ−Ｂ２７ラットをＴａｃｏｎｉｃから入手し、食物（ＰＭＩ（登録商標）ＬａｂＤｉｅｔ５００１）と水を自由に与えた。アジュバントで誘発された関節炎のルイスラットモデルに対して関節スコアおよび組織像を上述のように評価した。
【０１１０】
試験１：ラット（８−１０週令）に下記の製剤の１つを１日当たり１回４６日間次のように経口投与した。各群には４匹のラットがおり、安楽死の２時間前に最後の用量を投与した。
・媒体（２％Ｔｗｅｅｎ−８０／０．５％メチルセルロース）
・実施例２１（１−１８日は１０ｍｇ／ｋｇ；次に１９日目に２０ｍｇ／ｋｇまで増加）
・実施例２４（１−２４日は１０ｍｇ／ｋｇ；次に２５日目に２０ｍｇ／ｋｇまで増加）
【０１１１】
本発明の化合物の代表的な代謝物に対して次の結果を得た（表１８および１９）。
【表１８】
2008510827.tif 000036
【表１９】
2008510827.tif 000037
【０１１２】
試験２：ラット（８−１０週令）に下記の製剤の１つを２６日間次のように経口投与した。各群には４匹のラットがおり、安楽死の２時間前に最後の用量を投与した。
・媒体（２％Ｔｗｅｅｎ−８０／０．５％メチルセルロース）
・実施例２５（１−１４日は１０ｍｇ／ｋｇ；次に１５日目に２０ｍｇ／ｋｇまで増加）
・実施例３４（１０ｍｇ／ｋｇ）
【０１１３】
本発明の化合物の代表的な代謝物に対して次の結果を得た（表２０）。
【表２０】
2008510827.tif 000038
【０１１４】
発がんのインビボモデルにおける評価
本発明の化合物およびこれらの代謝物が種々の悪性腫瘍または過剰増殖性障害を治療し、阻害する能力は、文献で容易に入手し得る標準の薬理学的試験手順で評価可能であり、次の２つの手順を含む。
【０１１５】
乳がん：子宮切除された胸腺欠損ｎｕ／ｎｕ（ヌード）マウスをＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）から、入手する。腫瘍細胞注射の１日前に、動物に０．３６−１．７ｍｇの１７β−エストラジオールまたはプラセボを含有する時間放出性埋め込み錠（６０または９０日放出、Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａ，Ｓａｒａｓｏｔａ，ＦＬ）を埋め込む。１０ゲージの精密トロカール（trochar）を用いて、この埋め込み錠を肩甲領域の中に皮下導入するのに引き続いて、マウスの乳房組織の中に１×１０7ＭＣＦ−７細胞または１×１０7ＢＧ−１細胞のいずれかを皮下注射する。この細胞を等容積のマトリゲル基底膜マトリックス製剤と混合して、腫瘍の形成を増進させる。腫瘍細胞埋め込み後１日（阻害治療法）、または腫瘍がしかるべきサイズに達した後１日（治療治療法）のいずれかで投与することにより、試験化合物を評価することができる。化合物を生理食塩水中の１％Ｔｗｅｅｎ−８０の媒体中で腹腔内または経口のいずれかで各日投与する。腫瘍サイズを３日ごと、または７日ごとに評価する。
【０１１６】
大腸がん：大腸がんを治療または阻害する能力はＳｍｉｒｎｏｆｆ  Ｐ．らの試験手順で評価可能である［Oncology Research 11: 255-64(1999)］。
【０１１７】
２つのインビトロ試験手順での神経保護の評価
モンゴルスナネズミにおける一過性の全虚血：次の試験手順を用いて、酸素遮断／再灌流に応答しての脳損傷の予防または治療に及ぼす試験化合物の影響を測定した。
【０１１８】
雌のモンゴルスナネズミ（６０−８０ｇ；Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｋｉｎｇｓｔｏｎ，ＮＹ）を１２時間の明、１２時間の暗の照明期間により保証され、水道水と低エストロゲンカゼイン食餌（Ｐｕｒｉｎａ（登録商標）；Ｒｉｃｈｍｏｎｄ、ＩＮ）を自由にとることができる、Wyeth-Ayerst animal care facility Association for Assessment and Acreditation of Laboratory Animal Care（ＡＡＡＬＡＣ）中で飼育した。順応させた後（３−５日）、スナネズミをイソフルラン（Ｏ2との２−３％の混合物）により麻酔させ、子宮除去した（０日目）。翌朝（１日目）に始まって、スナネズミに媒体（１０％ＥＴＯＨ／コーンオイル）、１７β−エストラジオール（１ｍｇ／ｋｇ，ｓｃ）または実験化合物を日ごと皮下投与した。６日目、スナネズミ（ｎ＝４−５匹／群）をイソフルランにより麻酔し、総頚動脈を正中線頚部切開により可視化し、両動脈を非外傷性ミクロ動脈瘤クリップにより５分間同時に閉塞した。閉塞後、このクリップを取り外して、脳の再灌流を可能とさせ、頚部切開を創傷クリップにより閉じた。一貫した虚血性損傷を促進する段階である全虚血手術の前に、すべての動物を一夜断食させた。１２日目、スナネズミを致死量のＣＯ2に暴露し、脳をドライアイス上で凍結させ、−８０℃で貯蔵した。これらの試験に使用される動物プロトコルはWyeth-Ayerst ResearchのRadnor/Collegeville Animal Care and Use Committee（ＲＡＣＵＣ／ＣＡＣＵＣ）により精査され、承認された。
【０１１９】
ニューログラニンｍＲＮＡのｉｎ  ｓｉｔｕハイブリダイゼーション分析により神経保護の程度を評価した。手短にいうと、２０μｍのコロナルクライオスタット切片をゼラチン被覆したスライド上に集め、乾燥し、−８０℃で貯蔵した。処理の時点においては、乾燥したスライドボックスを室温まで温め、このスライドを４％パラホルムアルデヒド中で後固定し、酢酸無水物により処理し、次にクロロホルムとエタノールにより脱脂質および脱水した。次に、処理された切片を載せたスライドをニューログラニン（35Ｓ−ＵＴＰで標識したＮＧ−２４１；塩基９９−３４０）用の２００μｌ（６×１０6ＤＰＭ／スライド）のアンチセンスまたはセンス（コントロール）リボプローブにより５０％ホルムアミドハイブリッド形成混合物中でハイブリッド化し、加湿スライドチャンバー中でカバースリップさせずに５５℃で一夜インキュベーションした。翌朝、このスライドをラック中に集め、２×ＳＳＣ（０．３ＭＮａＣｌ、０．０３Ｍクエン酸ナトリウム；ｐＨ７．０）／１０ｍＭＤＴＴ中に浸漬し、ＲＮａｓｅ  Ａ（２０μｇ／ｍｌ）により処理し、０．１×ＳＳＣ中６７℃で洗浄（２×３０分）して、非特異的ラベルを除去した。脱水後、このスライドをＢｉｏＭａｘ（登録商標）（ＢＭＲ−１；Ｋｏｄａｋ，Ｒｏｃｈｅｓｔｅｒ，ＮＹ）Ｘ線フィルムと一夜対向させた。
【０１２０】
ニューログラニンハイブリッド形成シグナルのレベルを使用して、損傷後のＣＡ１領域中のニューロン欠損の程度を定量的に評価し、１７β−エストラジオールおよび実験化合物の効力を評価した。ニューログラニンｍＲＮＡはＣＡ１を含む海馬ニューロン中で高度に発現されるが、グリアおよびこの脳領域中に存在する他の細胞タイプ中に存在しないために、ニューログラニンｍＲＮＡをこれらの試験に選択した。それゆえ、存在するニューログラニンｍＲＮＡ量の測定は生き残っているニューロンを表す。ニューログラニンハイブリッド形成シグナルの相対的な光学的密度測定をコンピューターベースの画像分析システム（Ｃ−Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｉｎｃ．，Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，ＰＡ）によるフィルムオートラジオグラムから得た。動物当たり６個の切片（４０μｍ離れた）からの結果を平均し、統計的に評価した。数値を平均±ＳＥＭとして示す。一元配置分散分析を使用して、ニューログラニンｍＲＮＡのレベルの差について試験した。結果の項で差異がないというすべての記述はｐ＞０．０５であることを示唆する。
【０１２１】
本発明の化合物の代表的な代謝物について次の結果を得た（表２１）。
【表２１】
2008510827.tif 000039
【０１２２】
マウスの中大脳動脈の閉塞：Ｄｕｂａｌにより述べられている試験手順[Dubal, et al., Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 98: 1952-1957(2001) and Dubal, et al., Journal of Neuroscience 19: 6385-6393(1999)を参照]にしたがって神経保護を評価することができる。
【０１２３】
排卵阻害標準薬理学的試験手順
この試験手順を使用して、試験化合物が排卵のタイミングを阻害または変更可能であるかどうかを決める。これは、また、排卵される卵母細胞数を求めるのにも使用可能である[Lundeen, et al., J.Steroid Biochem Mol Biol 78: 137-143(2001)]。本発明の化合物の代表的な代謝物から次のデータを得た（表２２）。
【表２２】
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【０１２４】
子宮内膜症標準薬理学的試験手順での評価
この手順は、刊行された方法[Bruner-Tran.et al., Journal of Clinical Investigation 99: 2851-2857(1997)]から若干改変されている。手短にいうと、正常なヒト子宮内膜組織（サイクル日数〜１２）を１０ｎＭの１７β−エストラジオールにより一夜インビトロで処理し、次に子宮切除された胸腺欠損ヌードマウスの中に埋め込む。これらの試験の目的には、このマウスには論文で述べられているように、エストロゲン／プラセボのインプラントを与えない。病変を少なくとも１０日間定着させ、次に毎日の経口投与を始め、少なくとも１５日間続ける。すべてのマウスは投与のスタート時には目視可能な病変を有するということを特記すべきである。剖検時に病変のあるマウスの数、ならびにマウス当たりの病変を求める。
【０１２５】
実施例２４の化合物を１０ｍｇ／ｋｇの投与量でこの手順で３回評価した。各試験手順においては、実施例２４の化合物を投与したマウスは、媒体を投与したマウスよりも少ない病変を剖検時に有していた。例えば、試験１においては、媒体群中の４匹のマウスの各々は少なくとも１つの病変を有し、この群には合計１０個の病変があった。対照的に、実施例２４により処置された６匹のマウスの２匹のみがなんらかの病変を有し、動物当たり１つのみの病変が見出された。したがって、すべてのマウスは処理のスタート時に病変を有するために、実施例２４の化合物は６匹のマウスのうち４匹中で病変縮退を引き起こした。
【０１２６】
標準の薬理学的試験手順で得られる結果に基づいて、本発明のプロドラッグ化合物は、エストロゲン不足または過剰により少なくとも部分的に仲介されるか、あるいはエストロゲン剤の使用により治療または阻害され得る、状態、障害または疾患状態の治療または阻害において有用なエストロゲン受容体モジュレーターである化合物を生じると予期される。このような化合物は、生成する内在性エストロゲンのレベルが大きく低下する、閉経期前後、閉経期のまたは閉経後の患者の治療において特に有用である。閉経期は、最後の自然の月経期間として一般に定義され、子宮機能の停止により特徴付けられ、血流中の循環エストロゲンの実質的な減少を生じる。本明細書で使用されるように、閉経期は、また、外科的に、化学的に、または子宮機能の早期減少または停止につながる疾患状態により引き起こし得るエストロゲン生成の減少の症状も含む。
【０１２７】
本発明のプロドラッグ化合物は、また、顔面潮紅、膣または外陰の萎縮、萎縮性膣炎、膣の乾燥、掻痒、性交疼痛症、排尿困難、頻尿、尿失禁、尿路感染症を含む、エストロゲン遮断の他の影響の阻害または治療においても有用である。他の生殖器官の使用は機能不全の子宮の出血の治療または阻害を含む。この化合物は、また、子宮内膜症の治療または阻害においても有用である。
【０１２８】
本発明のプロドラッグ化合物は脳においても活性であり、それゆえアルツハイマー疾患、認知衰弱、性欲減退、老人性痴呆症、神経変性障害、うつ病、不安、不眠症、精神分裂病および不妊症の阻害または治療に有用である。本発明の化合物は、また、糸球体硬化症、前立腺肥大、子宮平滑筋腫、乳がん、強皮症、線維腫症、子宮内膜がん、多嚢胞性卵巣症候群、子宮内膜ポリープ、良性乳腺疾患、腺筋症、卵巣がん、メラノーマ、前立腺がん（prostrate cancer）、大腸がん、ＣＮＳがん、例えば神経膠腫またはastioblastomiaを含む、良性または悪性の異常組織の生長の治療または阻害においても有用である。
【０１２９】
本発明のプロドラッグ化合物は心臓保護性であって、抗酸化薬であり、コレステロール、トリグリセリド、Ｌｐ（ａ）およびＬＤＬレベルの低下；高コレステロール血症、高脂血症、心臓血管疾患、アテローム性動脈硬化症、末梢血管疾患、再狭窄および血管痙攣の阻害または治療、および免疫仲介された血管の損傷に向かう細胞イベントからの血管壁の損傷の阻害において有用である。
【０１３０】
本発明のプロドラッグ化合物は、また、炎症性腸疾患（クローン疾患、潰瘍性大腸炎、不定大腸炎）、関節炎（関節リウマチ、脊椎関節症、変形性関節症）、胸膜炎、虚血／再灌流損傷（例えば、脳卒中、移植拒否反応、心筋梗塞など）、喘息、巨細胞性動脈炎、前立腺炎、ブドウ膜炎、乾癬、多発性硬化症、全身性紅斑性狼瘡および敗血症を含む、炎症または自己免疫性疾患に関連する障害の治療にも有用である。
【０１３１】
本発明のプロドラッグ化合物は、また、白内障、ブドウ膜炎および黄斑変性症を含む眼球障害の治療または阻害においても、および、皮膚症状、例えば老化、脱毛症およびざ瘡の治療においても有用である。
【０１３２】
本発明のプロドラッグ化合物は、また、脂質代謝の代謝障害、例えばＩＩ型糖尿病、食欲（例えば、神経性食欲不振症および過食症）の治療または阻害においても有用である。
【０１３３】
本発明のプロドラッグ化合物は、また、出血障害、例えば遺伝性出血性毛細血管拡張症、機能不全子宮出血の治療または阻害においても、および出血性ショックの除去においても有用である。
【０１３４】
本発明のプロドラッグ化合物は、無月経が有利である疾患状態、例えば白血病、子宮内膜アブレーション、慢性腎臓または肝臓疾患、または凝固疾患または障害において有用である。
【０１３５】
本発明のプロドラッグ化合物は、特にプロゲスチンと組み合わせる場合、避妊薬として使用可能である。
【０１３６】
特定の疾患状態または障害の治療または阻害のために投与される場合、使用される特定の化合物、投与方式、条件、および治療対象の症状の重症度、ならびに治療対象の個人に関連する種々の物理的因子に依って、有効な用量は変わり得るということは理解される。本発明の化合物の有効な投与は、約０．１ｍｇ／日−約１，０００ｍｇ／日の経口用量で与えられ得る。好ましくは、投与は、単一の投与で、あるいは２つまたはそれ以上の分割された投与で約１０ｍｇ／日−約６００ｍｇ／日、更に好ましくは約５０ｍｇ／日−約６００ｍｇ／日である。計画された１日当たりの用量は投与経路と共に変わると予期される。
【０１３７】
このような用量は、経口的、インプラント経由、非経口的（静脈内、腹腔内、関節内および皮下注射を含む）、直腸的、鼻腔内、局所的、眼球内（点眼薬経由）、膣内および経皮的を含む、本明細書での活性化合物をレシピエントの血流に送るのに有用ないかなる方法によっても投与され得る。
【０１３８】
本発明の化合物を含有する経口製剤は、錠剤、カプセル、口腔形、トローチ、ロゼンジ（lozenge）および経口液体、懸濁液または溶液を含む、任意の慣用的に使用される経口剤形を含み得る。カプセルは、活性化合物と、不活性充填剤および／または希釈剤、例えば薬学的に許容し得るでんぷん（例えば、とうもろこし、じゃがいもまたはタピオカでんぷん）、糖、人工甘味剤、粉末化セルロース、例えば結晶性および微結晶性セルロース、粉（flour）、ゼラチン、ガムなどとの混合物を含有し得る。有用な錠剤製剤は、慣用の圧縮および湿式顆粒化または乾式顆粒化法により製造され得、限定はされないが、マグネシウムステアレート、ステアリン酸、タルク、ナトリウムラウリルサルフェート、微結晶性セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、アルギン酸、アカシアガム、キサンタンガム、クエン酸ナトリウム、複合シリケート、炭酸カルシウム、グリシン、デキストリン、スクロース、ソルビトール、ジカルシウムホスフェート、カルシウムサルフェート、ラクトース、カオリン、マンニトール、塩化ナトリウム、タルク、乾燥でんぷんおよび粉末化された糖を含む、薬学的に許容し得る希釈剤、結合剤、潤滑剤、崩壊剤、表面変性剤（界面活性剤を含む）、懸濁または安定化剤を使用する。好ましい表面変性剤は非イオン性およびアニオン性表面変性剤を含む。表面変性剤の代表的な例は、限定はされないが、ポロキサマー１８８、ベンザルコニウムクロリド、カルシウムステアレート、セトステアリルアルコール、セトマクロゴール乳化ワックス、ソルビタンエステル、コロイド状二酸化ケイ素、ホスフェート、ナトリウムドデシルサルフェート、マグネシウムアルミニウムシリケートおよびトリエタノールアミンを含む。本明細書での経口製剤は、活性化合物の吸収を変えるのに標準の遅延または時間放出製剤を使用し得る。経口製剤は、適切な可溶化剤または乳化剤を必要に応じて含有する水またはフルーツジュース中に活性成分を投与することからもなり得る。
【０１３９】
ある場合には、化合物をエアロゾルの形で直接気道に投与することが望ましい。
【０１４０】
本発明のプロドラッグ化合物は非経口でまたは腹腔内にも投与され得る。遊離塩基または薬理学的に許容され得る塩としてのこれらの活性化合物の溶液または懸濁液は、界面活性剤、例えばヒドロキシ−プロピルセルロースと好適に混合された水中に製造可能である。分散液は、また、オイル中のグリセロール、液体ポリエチレングリコールおよびこれらの混合物中でも製造可能である。通常の貯蔵および使用条件下で、これらの製剤は微生物の生長を阻害するのに保存剤を含有する。
【０１４１】
無菌の注射可能な溶液または分散液を即時調製するために注射可能な使用に好適な薬学的な剤形は、無菌の水溶液または分散液および無菌の粉末を含む。すべての場合、この剤形は無菌でなければならず、容易に注射可能である範囲で流体でなければならない。これは、製造および貯蔵の条件下で安定でなければならず、微生物、例えばバクテリアおよび菌類の汚染作用に対して保護されなければならない。このキャリアは、例えば水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコール）、好適なこれらの混合物および植物油を含有する、溶媒または分散液培地であることができる。
【０１４２】
この開示の目的には、経皮投与は、身体の表面および上皮および粘膜組織を含む身体通路の内部裏打ち物質を通るすべての投与を含むと理解される。このような投与は、本発明の化合物またはこれらの薬学的に許容し得る塩を使用して、ローション、クリーム、フォーム、パッチ、懸濁液、溶液および座薬（直腸用および膣用）で行われ得る。
【０１４３】
経皮投与は、活性化合物と、活性化合物に対して不活性であり、皮膚に対して非毒性であり、皮膚経由で血流の中に全身的に吸収するために薬剤の送達を可能とさせるキャリアを含有する経皮的パッチを使用することにより行われ得る。このキャリアは、クリームと軟膏、ペースト、ゲルおよび閉塞具などのいかなる数の形もとり得る。このクリームと軟膏は、水中油型または油中水型のいずれかのタイプの粘稠な液体または半固体エマルジョンであり得る。活性成分を含有する石油または親水性石油中に分散されている吸収性粉末を含むペーストも好適である。活性成分を血流の中に放出するのに種々の閉塞具、例えばキャリアまたは活性成分を含有するマトリックス有りまたは無しで活性成分を入れたリザバーを覆う半透過性膜が使用され得る。他の閉塞具が文献中で既知である。
【０１４４】
座薬製剤は、座薬の融点を変えるのにワックスの添加有りまたは無しで、ココアバターおよびグリセリンを含む在来の材料から製造され得る。水溶性座薬ベース、例えば種々の分子量のポリエチレングリコールも使用され得る。
【実施例】
【０１４５】
誘導体化して本発明の化合物の形成可能な化合物の代表的な調製例を下記に述べる。
【０１４６】
実施例１
２−（５−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，４−ジオール
段階ａ）ｎ−（２，５−ジメトキシフェニル）−２，５−ジメトキシベンズアミド
２，５−ジメトキシ安息香酸（５．０ｇ，２７．５ミリモル）とチオニルクロリド（１５ｍｌ）の混合物を１時間還流させた。次に、揮発物を真空下で除去した。この残渣をＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解し、２，５−ジメトキシアニリン（４．６ｇ，３０．２ミリモル）、トリエチルアミン（５ｍＬ，３５．９ミリモル）およびＴＨＦ（４０ｍＬ）の冷（０℃）溶液の中に添加した。この反応混合物を３０分間撹拌し、水の中に注ぎ、ＨＣｌ（２Ｎ）により酸性とし、ＥｔＯＡｃにより抽出した。この有機抽出物をＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ２／１）による精製によって、白色固体（８．１ｇ，９３％収率、ｍ．ｐ．１２１−１２３℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ３１８（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ17Ｈ19ＮＯ5に対する分析
計算値：Ｃ，６４．３４；Ｈ，６．０３；Ｎ，４．４１
実測値：Ｃ，６４．２９；Ｈ，５．９５；Ｎ，４．４４
【０１４７】
段階ｂ）２−（５−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，４−ジオール
Ｎ−（２，５−ジメトキシフェニル）−２，５−ジメトキシベンズアミド（１．０ｇ，３．１ミリモル）とピリジンヒドロクロリド（２．０ｇ，１７．３ミリモル）の混合物を２００℃で１時間撹拌した。この反応混合物を室温まで冷却し、ＨＣｌ（１０ｍＬ，２Ｎ）を添加した。次に、この反応混合物をＥｔＯＡｃにより抽出し、この有機抽出物をＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ２／１）による精製によって、白色固体（０．８ｇ，７６％収率、ｍ．ｐ．３０９−３１１℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ２４２（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ9ＮＯ4に対する分析
計算値：Ｃ，６４．２０；Ｈ，３．７３；Ｎ，５．７６
実測値：Ｃ，６３．９８；Ｈ，３．７１；Ｎ，５．６２
【０１４８】
実施例２
３−（５−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，２−ジオール
実施例１に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を２，５−ジメトキシアニリンと２，３−ジメトキシ安息香酸から調製した。この生成物を黄褐色固体、ｍ．ｐ．２３９−２４１℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２４４（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ9ＮＯ4に対する分析
計算値：Ｃ，６４．２０；Ｈ，３．７３；Ｎ，５．７６
実測値：Ｃ，６３．８６；Ｈ，３．９０；Ｎ，５．７４
【０１４９】
実施例３
２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例１に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を２，５−ジメトキシアニリンと３−フルオロ−４−メトキシ安息香酸から調製し、白色固体、ｍ．ｐ．２６２−２６８℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２４４（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ8ＦＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，６３．６８；Ｈ，３．２９；Ｎ，５．７１
実測値：Ｃ，６４．０１；Ｈ，３．２５；Ｎ，５．６３
【０１５０】
実施例４
２−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例１に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を２，５−ジメトキシアニリンと３−クロロ−４−メトキシ安息香酸から調製し、白色固体、ｍ．ｐ．２５４−２５６℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２６０（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ8ＣｌＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，５９．６７；Ｈ，３．０８；Ｎ，５．３５
実測値：Ｃ，５９．５９；Ｈ，３．０２；Ｎ，５．２５
【０１５１】
実施例５
２−（２−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例１に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を２，５−ジメトキシアニリンと２−クロロ−４−メトキシ安息香酸から調製し、白色固体、ｍ．ｐ．２５３−２５５℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２６２（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ8ＣｌＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，５９．６７；Ｈ，３．０８；Ｎ，５．３５
実測値：Ｃ，５９．７９；Ｈ，２．８７；Ｎ，５．３６
【０１５２】
実施例６
２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−６−オル
実施例１に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を２，４−ジメトキシアニリンと３−フルオロ−４−メトキシ安息香酸から調製し、白色固体、ｍ．ｐ．２６９−２７１℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２４４（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ17Ｈ17ＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，６３．６８；Ｈ，３．２９；Ｎ，５．７１
実測値：Ｃ，６３．５３；Ｈ，３．７１；Ｎ，５．３８
【０１５３】
実施例７
２−（３−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−６−オル
実施例１に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を２，４−ジメトキシアニリンと３−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メトキシ安息香酸から調製し、白色固体、ｍ．ｐ．２２０−２２２℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２８４（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ17Ｈ17ＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，７２．０７；Ｈ，６．０５；Ｎ，４．９４
実測値：Ｃ，７２．０３；Ｈ，６．４３；Ｎ，４．７２
【０１５４】
実施例８
２−（６−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，４−ジオール
実施例１に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を２，４−ジメトキシアニリンと２，５−ジメトキシ安息香酸から調製し、黄褐色固体、ｍ．ｐ．２７８−２８０℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２４４（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ9ＮＯ4に対する分析
計算値：Ｃ，６４．２０；Ｈ，３．７３；Ｎ，５．７６
実測値：Ｃ，６４．０９；Ｈ，３．１４；Ｎ，５．６５
【０１５５】
実施例９
３−（６−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，２−ジオール
実施例１に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を２，４−ジメトキシアニリンと２，３−ジメトキシ安息香酸から調製し、黄褐色固体、ｍ．ｐ．２５６−２５８℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２４４（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ9ＮＯ4に対する分析
計算値：Ｃ，６４．２０；Ｈ，３．７３；Ｎ，５．７６
実測値：Ｃ，６３．９１；Ｈ，３．９８；Ｎ，５．７２
【０１５６】
実施例１０
４−（６−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，２−ジオール
実施例１に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を２，４−ジメトキシアニリンと３，４−ジメトキシ安息香酸から調製し、白色固体、ｍ．ｐ．２８２−２８４℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２４２（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ9ＮＯ4に対する分析
計算値：Ｃ，６４．２０；Ｈ，３．７３；Ｎ，５．７６
実測値：Ｃ，６３．５７；Ｈ，３．６８；Ｎ，５．６３
【０１５７】
実施例１１
２−（３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−６−オル
実施例１に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を２，４−ジメトキシアニリンと３−クロロ−４−メトキシ安息香酸から調製し、オフホワイトの固体、ｍ．ｐ．２５４−２５６℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２６２（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ9ＮＯ4に対する分析
計算値：Ｃ，６４．２０；Ｈ，３．７３；Ｎ，５．７６
実測値：Ｃ，６３．５７；Ｈ，３．６８；Ｎ，５．６３
【０１５８】
実施例１２
２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例１に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を２，５−ジメトキシアニリンと４−メトキシベンゾイルクロリドから調製し、淡黄色固体、ｍ．ｐ．２６４−２６７℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２２８（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ9ＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，６８．７２；Ｈ，３．９９；Ｎ，６．１６
実測値：Ｃ，６７．８７；Ｈ，４．０５；Ｎ，６．２３
【０１５９】
実施例１３
４−（５−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，３−ジオール
実施例１に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を２，５−ジメトキシアニリンと２，４−ジメトキシ安息香酸から調製し、白色固体，３００℃を超えるｍ．ｐ．として得た；ＭＳｍ／ｅ２４２（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ9ＮＯ4に対する分析
計算値：Ｃ，６４．２０；Ｈ，３．７３；Ｎ，５．７６
実測値：Ｃ，６３．９２；Ｈ，３．７４；Ｎ，５．５６
【０１６０】
実施例１４
２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−６−オル
実施例１に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を２，４−ジメトキシアニリンと４−メトキシベンゾイルクロリドから調製し、白色固体，３００℃を超えるｍ．ｐ．として得た；ＭＳｍ／ｅ２２６（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ9ＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，６８．７２；Ｈ，３．９９；Ｎ，６．１６
実測値：Ｃ，６８．０９；Ｈ，４．０１；Ｎ，６．０５
【０１６１】
実施例１５
４−（６−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル）ベンゼン−１，３−ジオール
実施例１に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を２，４−ジメトキシアニリンと２，４−ジメトキシ安息香酸から調製し、白色固体、ｍ．ｐ．２９３−２９６℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２４２（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ9ＮＯ4に対する分析
計算値：Ｃ，６４．２０；Ｈ，３．７３；Ｎ，５．７６
実測値：Ｃ，６４．４３；Ｈ，３．７７；Ｎ，５．７４
【０１６２】
実施例１６
６−クロロ−２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
段階ａ）Ｎ−（４−クロロ−２，５−ジメトキシフェニル）−３−フルオロ−４−メトキシベンズアミド
実施例１、段階（ａ）に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を４−クロロ−２，５−ジメトキシアニリンと３−フルオロ−４−メトキシ安息香酸から調製し、白色固体、ｍ．ｐ．１９７−１９９℃として得た；ＭＳｍ／ｅ３４０（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ16Ｈ15ＣｌＦＮＯ4に対する分析
計算値：Ｃ，５６．５６；Ｈ，４．４５；Ｎ，４．１２
実測値：Ｃ，５６．３３；Ｈ，４．３５；Ｎ，４．０５
【０１６３】
段階ｂ）Ｎ−（４−クロロ−２，５−ジヒドロキシフェニル）−３−フルオロ−４−ヒドロキシベンズアミド
三フッ化ホウ素ジメチルスルフィド錯体（７０ｍＬ）をＮ−（４−クロロ−２，５−ジメトキシフェニル）−３−フルオロ−４−メトキシベンズアミド（１．７５ｇ，５．１５ミリモル）とＣＨ2Ｃｌ2（３５ｍＬ）の混合物の中に添加した。２０時間撹拌した後、溶媒と過剰の反応試剤をフード中窒素流下で蒸発させた。残基を氷とＨＣｌ（１Ｎ）の混合物の中に取り込み、ＥｔＯＡｃにより抽出した。この有機層をＨＣｌ（１Ｎ）により洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（ＣＨ2Ｃｌ2／ヘキサン／ＥｔＯＡｃ  ５／３／２、および溶出溶媒の１リットル当たりＡｃＯＨ１０ｍＬ）による精製によって、白色固体（１．４ｇ，９１％収率、ｍ．ｐ．２５４−２５６℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ２９６（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ9ＣｌＦＮＯ4に対する分析
計算値：Ｃ，５２．４６；Ｈ，３．０５；Ｎ，４．７１
実測値：Ｃ，５１．９８；Ｈ，２．９８；Ｎ，４．５６
【０１６４】
段階ｃ）６−クロロ−２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例１、段階（ｂ）に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物をＮ−（４−クロロ−２，５−ジヒドロキシフェニル）−３−フルオロ−４−ヒドロキシベンズアミドとピリジンヒドロクロリドから調製し、白色固体、ｍ．ｐ．２５８−２６０℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２７８（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ17ＣｌＦＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，５５．８３；Ｈ，２．５２；Ｎ，５．０１
実測値：Ｃ，５５．３５；Ｈ，２．５９；Ｎ，４．９１
【０１６５】
実施例１７
６−ブロモ−２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例１６に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を４−ブロモ−２，５−ジメトキシアニリンと３−フルオロ−４−メトキシ安息香酸から調製し、白色固体、ｍ．ｐ．２２４−２２６℃として得た；ＭＳｍ／ｅ３２２（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ17ＢｒＦＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，４８．１８；Ｈ，２．１８；Ｎ，４．３２
実測値：Ｃ，４８．６９；Ｈ，２．３６；Ｎ，４．５９
【０１６６】
実施例１８
６−クロロ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例１６に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を４−クロロ−２，５−ジメトキシアニリンおよび４−メトキシベンゾイルクロリドから調製し、オフホワイトの固体、ｍ．ｐ．２６０−２６２℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２６０（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ8ＣｌＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，５９．６７；Ｈ，３．０８；Ｎ，５．３５
実測値：Ｃ，５９．０９；Ｈ，３．０６；Ｎ，５．１１
【０１６７】
実施例１９
５−クロロ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−６−オル
実施例１６に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を５−クロロ−２，４−ジメトキシアニリンおよび４−メトキシベンゾイルクロリドから調製し、オフホワイトの固体、ｍ．ｐ．２５４−２５６℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２６２（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ8ＣｌＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，５９．６７；Ｈ，３．０８；Ｎ，５．３５
実測値：Ｃ，５９．４０；Ｈ，２．９７；Ｎ，５．２２
【０１６８】
実施例２０
７−ブロモ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
段階ａ）２−ブロモ−４−メトキシ−６−ニトロフェノール
酢酸（２０ｍＬ）中の臭素（１６．０ｇ，１００ミリモル）を４−メトキシ−２−ニトロフェノール（１６．９ｇ，１００ミリモル）、酢酸ナトリウム（１６．４ｇ，２００ミリモル）および酢酸（１００ｍＬ）の混合物の中に添加した。この反応混合物を室温で３０分間、次に７０℃で２時間撹拌し、濃硫酸（１０ｍＬ）を含有する水（１．５Ｌ）の中に注いだ。この沈澱した固体を濾過し、クロロホルム／ヘキサンから結晶化させて、褐色がかった固体、ｍ．ｐ．１１６−１１８℃を得た；ＭＳｍ／ｅ２４６（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ7Ｈ6ＢｒＮＯ4に対する分析
計算値：Ｃ，３３．９０；Ｈ，２．４４；Ｎ，５．６５
実測値：Ｃ，３４．６４；Ｈ，２．１６；Ｎ，５．４３
【０１６９】
段階ｂ）２−アミノ−６−ブロモ．４−メトキシフェノール
ラネー／ニッケル（２．５ｇ）をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）中の２−ブロモ−４−メトキシ−６−ニトロフェノール（８．８ｇ，３５．５ミリモル）の溶液の中に添加した。この混合物を水素下２５ｐｓｉでパール装置中で２．５時間振盪した。この反応混合物をセライト（登録商標）により濾過し、真空下で濃縮して、灰色固体（７．４ｇ，９６％収率；９５−９７℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ２１８（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ7Ｈ8ＢｒＮＯ2に対する分析
計算値：Ｃ，３８．５６；Ｈ，３．７０；Ｎ，６．４２
実測値：Ｃ，３８．３２；Ｈ，３．７７；Ｎ，６．２４
【０１７０】
段階ｃ）２−ブロモ−４−メトキシ−６−［（４−メトキシベンゾイル）アミノ］フェニル−４−メトキシベンゾエート
無水ピリジン（３７．０ｍＬ，４６８．５ミリモル）を２−アミノ−６−ブロモ−４−メトキシフェノール（２０．０ｇ，９１．７ミリモル）、４−メトキシベンゾイルクロリド（３８．９ｇ，２２９．０ミリモル）およびＣＨ2Ｃｌ2（２５０ｍＬ）の冷（０℃）混合物（機械的に攪拌された）の中に滴加した。ピリジン添加時、沈澱物が生成した。この反応混合物を３０分間撹拌し、次にエチルエーテル（２５０ｍＬ）を添加した。この沈澱した固体を濾別し、エチルエーテルで洗浄した。この固体を水の中に取り込んで、２０分間撹拌した。次に、この固体を濾別し、乾燥して、オフホワイトの固体（４２．５ｇ，９５％収率、ｍ．ｐ．７３−７５℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ４８４（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ23Ｈ20ＢｒＮＯ6に対する分析
計算値：Ｃ，５６．８０；Ｈ，４．１５；Ｎ，２．８８
実測値：Ｃ，５６．５０；Ｈ，３．７８；Ｎ，２．８３
【０１７１】
段階ｄ）７−ブロモ−５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール
経路ａ）
２−ブロモ−４−メトキシ−６−［（４−メトキシベンゾイル）アミノ］フェニル４−メトキシベンゾエート（４２．０ｇ，８６．４ミリモル）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（３２．８ｇ，１７２．８ミリモル）および無水ｐ−キシレン（８００ｍＬ）の懸濁液を連続的に水除去（ディーン−スタルクトラップ）しながら１時間還流させた。この初期の懸濁液は還流温度で褐色溶液に変わった。この反応混合物を室温まで冷却し、ＮａＯＨ（２Ｎ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびアセトン／エチルエーテルからの結晶化によって、オフホワイトの固体（２３．５ｇ，８２％収率、ｍ．ｐ．１３９−１４１℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ３３４（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ15Ｈ12ＢｒＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，５３．９１；Ｈ，３．６２；Ｎ，４．１９
実測値：Ｃ，５３．８３；Ｈ，３．３７；Ｎ，４．０１
【０１７２】
経路ｂ）
ディーン−スタルク水分離器を用いて、ｐ−キシレン（９ｍＬ）中の−２−アミノ−６−ブロモ−メトキシフェノール（１００ｍｇ，０．４６ミリモル）、４−メトキシ−安息香酸（７７ｍｇ，０．５ミリモル）およびホウ酸（３１ｍｇ，０．５ミリモル）の混合物を２４時間還流させた。この反応混合物を室温まで冷却し、真空下で濃縮した。この残存生成物をフラッシュクロマトグラフィ（３０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）により精製して、淡いピンク色固体（９９ｍｇ，６５％収率、ｍ．ｐ．１３６−１３８℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ３３４（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ15Ｈ12ＢｒＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，５３．９１；Ｈ，３．６２；Ｎ，４．１９
実測値：Ｃ，５３．７８；Ｈ，３．５５；Ｎ，４．０１．
【０１７３】
段階ｃ）７−ブロモ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
経路ａ）
三臭化ホウ素（１Ｍ，８９．９ｍＬ，８９．８ミリモル）を７−ブロモ−５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール（１０．０ｇ，２９．９４ミリモル）とＣＨ2Ｃｌ2（５０ｍＬ）の冷（−７０℃）懸濁液の中に滴加した。この反応混合物を室温まで温めた。加温時に、この懸濁液は暗い溶液に変わった。この反応混合物を室温で２日間撹拌し、次に冷（０℃）エチルエーテル（１０００ｍＬ）の中に注いだ。メチルアルコール（２００ｍＬ）をこの新しい反応混合物の中に２０分間にわたってゆっくりと添加した。次に、この反応混合物を水（１．５Ｌ）の中に注いだ。この有機層を水で３回洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびアセトン／エチルエーテル／ヘキサンからの結晶化によって、オフホワイトの固体（８．４ｇ，９２％収率、ｍ．ｐ．２９８−２９９℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ３０６（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ8ＢｒＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，５１．０１；Ｈ，２．６３；Ｎ，４．５８
実測値：Ｃ，５０．９６；Ｈ，２．３０；Ｎ，４．４２
【０１７４】
経路ｂ）
三臭化ホウ素（０．２５ｍＬ，２．７ミリモル）を７−ブロモ−５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール（１３０ｍｇ，０．３９ミリモル）とジクロロメタン（１．５ｍＬ）の冷（−７８℃）混合物の中に滴加した。この反応混合物を室温まで徐々に上げ、１時間撹拌した。この反応混合物を氷の中に注ぎ、ＥｔＯＡｃにより抽出した。この有機抽出物をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（３０％−４０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）により、この生成物（１０２ｍｇ，８６％収率）を淡ピンク色固体、ｍ．ｐ．２９５−２９８℃として得た；ＭＳｍ／ｅ３０４（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ8ＢｒＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，５１．０１；Ｈ，２．６３；Ｎ，４．５８
実測値：Ｃ，５１．０６；Ｈ，２．７７；Ｎ，４．３６．
【０１７５】
実施例２１
７−ブロモ−２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
段階ａ）２−ブロモ−６−［（３−フルオロ−４−メトキシベンゾイル）アミノ］−４−メトキシフェニル３−フルオロ−４−メトキシベンゾエート
３−フルオロ−４−メトキシ安息香酸（３９．０ｇ，２２９ミリモル）、チオニルクロリド（１００ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）の混合物を１時間還流した。この揮発物を真空下で除去した。この固体をベンゼン中に取り込み（２回）、揮発物を真空下で除去した。残渣をＣＨ2Ｃｌ2（１００ｍＬ）中に溶解し、２−アミノ−６−ブロモ−４−メトキシフェノール（２０．０ｇ，９１．７ミリモル）とＣＨ2Ｃｌ2（１５０ｍＬ）の冷（０℃）混合物（機械的に撹拌された）の中に添加した。無水ピリジン（３７．０ｍＬ，４６８．５ミリモル）をこの新しい反応混合物の中に滴加した。ピリジン添加時、沈澱物を形成した。この反応混合物を３０分間撹拌し、次にエチルエーテル（２５０ｍＬ）を添加した。この沈澱した固体を濾別し、エチルエーテルで洗浄した。この固体を水の中に取り込み、２０分間撹拌した。次に、この固体を濾別し、乾燥して、オフホワイトの固体（４６．５ｇ，９７％収率、ｍ．ｐ．１８４−１８６℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ５２０（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ23Ｈ18ＢｒＦ2ＮＯ6に対する分析
計算値：Ｃ，５２．８９；Ｈ，３．４７；Ｎ，２．６８
実測値：Ｃ，５２．７９；Ｈ，３．２３；Ｎ，２．６３
【０１７６】
段階ｂ）７−ブロモ−２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−５−メトキシ−１，３−ベンゾキサゾール
２−ブロモ−６−[（３−フルオロ−４−メトキシベンゾイル）アミノ]−４−メトキシフェニル３−フルオロ−４−メトキシベンゾエート（４６．０ｇ，８８．１ミリモル）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（３３．５ｇ，１７７．２ミリモル）および無水ｐ−キシレン（１Ｌ）の懸濁液を連続的に水を除去しながら（ディーンスタルクトラップ）３時間還流させた。この初期の懸濁液は還流温度で褐色溶液に変わった。この固体を濾別し、エチルエーテルで洗浄した。この固体をエチルエーテル（２００ｍＬ）中に懸濁させ、１０分間撹拌し、濾別し、乾燥して、黄褐色固体（２５．１ｇ、ｍ．ｐ．１７５−１７７℃）を得た。このエチルエーテル層を２０ｍＬまで濃縮し、２．５ｇの更なる生成物（９０％全収率）を得た；ＭＳｍ／ｅ３５２（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ15Ｈ11ＢｒＦＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，５１．１６；Ｈ，３．１５；Ｎ，３．９８
実測値：Ｃ，５１．１０；Ｈ，２．９２；Ｎ，３．８９
【０１７７】
段階ｃ）７−ブロモ−２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例２０、段階（ｅ）に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を調製し、白色固体、ｍ．ｐ．２６５−２６７℃として得た；ＭＳｍ／ｅ３３２（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ7ＢｒＦＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，４８．１８；Ｈ，２．１８；Ｎ，４．３２
実測値：Ｃ，４８．１９；Ｈ，２．２９；Ｎ，４．１９
【０１７８】
実施例２２
７−ブロモ−２−（２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
段階ａ）２−フルオロ−４−メトキシ安息香酸
Ａｇ2Ｏ（１３．５ｇ，５８．４ミリモル）、ＮａＯＨ（１９．５ｇ，４８７ミリモル）および水（２００ｍＬ）の温かい（５５℃）混合物の中に２−フルオロ−４−メトキシベンズアルデヒド（１５ｇ，９７．４ミリモル）を添加した。この反応混合物を１時間撹拌し、濾別し、沈澱した固体を熱水（１０ｍＬ）により洗浄した。この濾液を激しい撹拌と共に冷（０℃）ＨＣｌ（５Ｎ）の中にゆっくりと添加した。この沈澱した固体を濾過し、水で洗浄し、乾燥して、白色固体（１３．６ｇ，８２％収率、ｍ．ｐ．１９４−１９６℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ１６９（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ8Ｈ7ＦＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，５６．４８；Ｈ，４．１５
実測値：Ｃ，５６．１２；Ｈ，４．１２
【０１７９】
段階ｂ）７−ブロモ−２−（２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例２１に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を２−フルオロ−４−メトキシ安息香酸から調製し、白色固体、ｍ．ｐ．２４８−２５０℃として得た；ＭＳｍ／ｅ３２４（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ7ＢｒＦＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，４８．１８；Ｈ，２．１８；Ｎ，４．３２
実測値：Ｃ，４７．８９；Ｈ，１．９５；Ｎ，４．１８
【０１８０】
実施例２３
７−ブロモ−２−（２，３−ジフルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
段階ａ）メチル２，３−ジフルオロ−４−メトキシベンゾエート
ヨードメタン（１０．７ｍＬ，１７２．５ミリモル）を２，３−ジフルオロ−４−ヒドロキシ安息香酸（１０．０ｇ，５７．５ミリモル）、炭酸リチウム（１２．７ｇ，１７２．５ミリモル）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）の混合物の中に添加した。この反応混合物を４０℃で１２時間撹拌し、次に水の中に注ぎ、ＥｔＯＡｃにより抽出した。この有機抽出物をＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ５／１）により精製することによって、白色固体（１０．２ｇ，８８％収率、ｍ．ｐ．６６−６８℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ２０３（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ9Ｈ8Ｆ2Ｏ3に対する分析
計算値：Ｃ，５３．４７；Ｈ，３．９９
実測値：Ｃ，５３．１５；Ｈ，３．８３
【０１８１】
段階ｂ）２，３−ジフルオロ−４−メトキシ安息香酸
水酸化ナトリウム（２Ｎ，５０ｍＬ）をメチル２，３−ジフルオロ−４−メトキシベンゾエート（１０．０ｇ，４９．５ミリモル）、ＴＨＦ（１００ｍＬ）およびＭｅＯＨ（１００ｍＬ）の混合物の中に添加した。この反応混合物を室温で６時間撹拌し、ＨＣｌ（２Ｎ）により酸性とした。この沈澱した固体を濾別し、水で洗浄し、乾燥して、白色固体（８．９ｇ，９６％収率、ｍ．ｐ．１９４−１９６℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ１８７（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ8Ｈ6Ｆ2Ｏ3に対する分析
計算値：Ｃ，５１．０８；Ｈ，３．２１
実測値：Ｃ，５０．８３；Ｈ，２．９２
【０１８２】
段階ｃ）７−ブロモ−２−（２，３−ジフルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例２１に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を２，３−ジフルオロ−４−メトキシ安息香酸から調製し、白色固体、ｍ．ｐ．２５８−２６０℃として得た；ＭＳｍ／ｅ３４２（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ6ＢｒＦ2ＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，４５．６４；Ｈ，１．７７；Ｎ，４．０９
実測値：Ｃ，４５．３３；Ｈ，１．６２；Ｎ，４．０２
【０１８３】
実施例２４
２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
経路ａ）
段階ａ）７−ブロモ−５−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−（４−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−３−フルオロフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール
ｔｅｒｔ−ブチル（クロロ）ジメチルシラン（２３．２ｇ，１５４ミリモル）を７−ブロモ−２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル（１６．６ｇ，５１．４ミリモル）、イミダゾール（１７．５ｇ，２５７ミリモル）、Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン（１．０ｇ，８．１ミリモル）およびＤＭＦ（３００ｍＬ）の混合物の中に小分けにして添加した。この反応混合物を３時間撹拌し、水の中に注ぎ、エチルエーテルにより抽出した。この有機抽出物をＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ  ５０／１）により精製することによって、白色固体（２７．５ｇ，９７％収率、ｍ．ｐ．９８−９９℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ５５２（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ25Ｈ35ＢｒＦＮＯ3Ｓｉ2に対する分析
計算値：Ｃ，５４．３４；Ｈ，６．３８；Ｎ，２．５３
実測値：Ｃ，５４．０６；Ｈ，６．５２；Ｎ，２．２４
【０１８４】
段階ｂ）５−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−（４−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−３−フルオロフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール
ジクロロビス（トリ−ｏ−トリルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（０．６３ｇ，０．７９ミリモル）を７−ブロモ−５−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−（４−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−３−フルオロフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール（１４．７ｇ，２６．６ミリモル）、トリブチル（ビニル）スズ（１０．５ｇ，３３．２５ミリモル）およびｐ−キシレン（８５ｍＬ）の混合物の中に添加した。この反応混合物を９０℃で２４時間撹拌し、室温まで冷却し、エチルエーテル（１００ｍＬ）で希釈し、活性炭により処理した。この反応混合物をＭｇＳＯ4により濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ５０／１）による精製によって、白色固体（１１．８ｇ，８９％収率、ｍ．ｐ．９３−９５℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ５００（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ27Ｈ38ＦＮＯ3Ｓｉ2に対する分析
計算値：Ｃ，６４．８９；Ｈ，７．６６；Ｎ，２．８０
実測値：Ｃ，６４．５９；Ｈ，７．７０；Ｎ，２．７３
【０１８５】
段階ｃ）２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
フッ化水素酸（水中４８重量％，１ｍＬ）を５−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−（４−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−３−フルオロフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール（１．５ｇ，３．０ミリモル）、ＴＨＦ（６ｍＬ）およびアセトニトリル（３ｍＬ）の溶液の中に添加した。この反応混合物を６５℃で８時間撹拌し、次に水の中に注いだ。この沈澱した固体を濾別し、乾燥した。アセトン／エチルエーテルからの生成物の結晶化によって、白色固体（０．７２ｇ，８１％収率、ｍ．ｐ．２４９−２５１℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ２７２（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ15Ｈ10ＦＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，６６．４２；Ｈ，３．７２；Ｎ，５．１６
実測値：Ｃ，６６．３１；Ｈ，３．８５；Ｎ，４．９６
【０１８６】
経路ｂ）
２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
ジクロロビス（トリ−ｏ−トリルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（０．８７ｇ，１．１ミリモル）を７−ブロモ−２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル（７．１６ｇ，２２．１ミリモル）、トリブチル（ビニル）スズ（１０．５ｇ，３３．２５ミリモル）およびエチレングリコールジエチルエーテル（６５ｍＬ）の混合物の中に添加した。この反応混合物を１１５℃で４８時間撹拌し、室温まで冷却し、活性炭により処理した。この反応混合物をＭｇＳＯ4により濾過し、濃縮した。酸性シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2１／１／１）による精製によって、白色固体（４．３５ｇ，７２％収率、ｍ．ｐ．２５０−２５２℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ２７２（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ15Ｈ10ＦＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，６６．４２；Ｈ，３．７２；Ｎ，５．１６
実測値：Ｃ，６６．０３；Ｈ，３．６８；Ｎ，５．０９
【０１８７】
経路ｃ）
段階ａ）４−［５−（アセチルオキシ）−７−ブロモ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル］−２−フルオロフェニルアセテート
酢酸無水物（１．０ｍＬ，９．９５ミリモル）を７−ブロモ−２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル（１．２４ｇ，３．８ミリモル）、Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン（１．１ｇ，９．１８ミリモル）および１，４−ジオキサン（１３ｍＬ）の冷（０℃）溶液の中に添加した。この反応混合物を室温まで温め、２０時間撹拌した。水（５０ｍＬ）をこの反応混合物に添加し、ＥｔＯＡｃで抽出し、ＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびＥｔＯＡｃ／ヘキサンからの結晶化によって、オフホワイトの固体（０．８７ｇ，５６％収率）を得た；ＭＳｍ／ｅ４０８（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ17Ｈ11ＢｒＦＮＯ5に対する分析
計算値：Ｃ，５０．０２；Ｈ，２．７２；Ｎ，３．４３
実測値：Ｃ，４９．５８；Ｈ，２．５９；Ｎ，３．３７
【０１８８】
段階ｂ）２−［４−（アセチルオキシ）−３−フルオロフェニル］−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−イルアセテート
ジクロロビス（トリ−ｏ−トリルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（４６ｍｇ，０．０６ミリモル）を４−［５−（アセチルオキシ）−７−ブロモ−１，３−ベンゾキサゾール−２−イル］−２−フルオロフェニルアセテート（０．８ｇ，１．９８ミリモル）、トリブチル（ビニル）スズ（０．９ｇ，２．８ミリモル）およびｐ−キシレン（９ｍＬ）の混合物の中に添加した。この反応混合物を１３０℃で５時間撹拌し、室温まで冷却し、エチルエーテル（１０ｍＬ）で希釈し、活性炭により処理した。この反応混合物をＭｇＳＯ4により濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ５／１）による精製によって、白色固体（０．４ｇ，５６％収率、ｍ．ｐ．１５４−１５６℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ３５６（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ19Ｈ14ＦＮＯ5に対する分析
計算値：Ｃ，６４．２３；Ｈ，３．９７；Ｎ，３．９４
実測値：Ｃ，６３．９４；Ｈ，３．７８；Ｎ，３．７６
【０１８９】
段階ｃ）２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
炭酸カリウム（５５ｍｇ）を２−［４−（アセチルオキシ）−３−フルオロフェニル］−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−イルアセテート（０．１４ｇ，０．３９ミリモル）と１，４−ジオキサン（３ｍＬ）の溶液の中に添加した。この反応混合物を９０℃で１時間撹拌し、水の中に注ぎ、ＨＣｌ（２Ｎ）で酸性とし、ＥｔＯＡｃにより抽出した。この有機抽出物をＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびＥｔＯＡｃ／ヘキサンからの結晶化によって、白色固体（０．０６ｇ，４６％収率、ｍ．ｐ．２５０−２５２℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ２７２（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ15Ｈ10ＦＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，６６．４２；Ｈ，３．７２；Ｎ，５．１６
実測値：Ｃ，６６．３２；Ｈ，３．４７；Ｎ，５．１８
【０１９０】
実施例２５
２−（２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾオキサゾール−５−オル
実施例２４、経路（ａ）に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を７−ブロモ−２−（２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルから調製し、白色固体、ｍ．ｐ．２７４−２７５℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２７２（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ15Ｈ10ＦＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，６６．４２；Ｈ，３．７２；Ｎ，５．１６
実測値：Ｃ，６６．１８；Ｈ，３．４７；Ｎ，４．９７
【０１９１】
実施例２６
２−（２，３−ジフルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例２４、経路（ｂ）に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を７−ブロモ−２−（２，３−ジフルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルから調製し、オフホワイトの固体、ｍ．ｐ．２７６−２７８℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２９０（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ15Ｈ9Ｆ2ＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，６２．２９；Ｈ，３．１４；Ｎ，４．８４
実測値：Ｃ，６１．９０；Ｈ，３．０５；Ｎ，４．５２
【０１９２】
実施例２７
２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例２４、経路（ｂ）に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を７−ブロモ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルから調製し、白色固体、ｍ．ｐ．２４９−２５０℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２５４（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ15Ｈ11ＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，７０．９９；Ｈ，４．３９；Ｎ，５．５２
実測値：Ｃ，７０．７５；Ｈ，４．３４；Ｎ，５．４６
【０１９３】
実施例２８および２９
４−ブロモ−２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル（実施例２８）および４，６−ジブロモ−２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル（実施例２９）
Ｎ−ブロモスクシンイミド（０．４９ｇ，２．７７ミリモル）を２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル（０．７５ｇ，２．７７ミリモル）とアセトニトリル（３０ｍＬ）の混合物の中に添加した。この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、水の中に注ぎ、ＥｔＯＡｃにより抽出した。この有機抽出物をＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2  ２／１／１）により精製することによって、実施例２８を白色固体（０．４５ｇ、ｍ．ｐ．２２６−２２８℃）として得た；ＭＳｍ／ｅ３４９（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ15Ｈ9ＢｒＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，５１．４５；Ｈ，２．５９；Ｎ，４．００
実測値：Ｃ，５１．０８；Ｈ，２．４０；Ｎ，３．９０；
そして実施例２９を白色固体（０．１８ｇ、ｍ．ｐ．２７２−２７４℃）として得た；ＭＳｍ／ｅ４２８（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ15Ｈ8Ｂｒ2ＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，４１．９９；Ｈ，１．８８；Ｎ，３．２６
実測値：Ｃ，４２．２５；Ｈ，１．９０；Ｎ，３．１４
【０１９４】
実施例３０
７−（１，２−ジブロモエチル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
段階ａ）５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−７−ビニル−１，３ベンゾキサゾール
実施例２４、経路（ｃ）、段階（ｂ）に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を７−ブロモ−５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾールから調製し、白色固体として得た；ＭＳｍ／ｅ２８２（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ17Ｈ15ＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，７２．５８；Ｈ，５．３７；Ｎ，４．９８
実測値：Ｃ，７２．３３；Ｈ，５．２６；Ｎ，４．７２
【０１９５】
段階ｂ）７−（１，２−ジブロモエチル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
三臭化ホウ素（０．８５ｍＬ，８．９５ミリモル）を５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール（０．３１ｇ，１．１２ミリモル）とＣＨ2Ｃｌ2（４ｍＬ）の冷（−７８℃）混合物の中に滴加した。この反応混合物を室温まで温めた。室温で１８時間撹拌した後、この反応混合物を冷（０℃）エチルエーテル（２０ｍＬ）の中にゆっくりと注いだ。次に、メチルアルコール（１０ｍＬ）をこの反応混合物の中にゆっくりと添加した。この新しい反応混合物を水で洗浄（３回）し、ＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ３／１）により精製することによって、淡黄色固体（０．２７ｇ，５９％収率、ｍ．ｐ．１７５−１７７℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ４１２（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ15Ｈ11Ｂｒ2ＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，４３．６２；Ｈ，２．６８；Ｎ，３．３９
実測値：Ｃ，４３．８５；Ｈ，２．４４；Ｎ，３．３３
【０１９６】
実施例３１
７−（１−ブロモビニル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデセ−７−エン（０．２５ｇ，１．６５ミリモル）を７−（１，２−ジブロモエチル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル（０．４ｇ，０．９６ミリモル）とアセトニトリル（４ｍＬ）の溶液の中に添加した。この反応混合物を２４時間撹拌し、冷（０℃）ＨＣｌ（１Ｎ，１０ｍＬ）の中に注ぎ、ＥｔＯＡｃにより抽出した。この有機抽出物をＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（ＣＨ2Ｃｌ2／ヘキサン／イソプロピルアルコール１５／５／１）により精製することによって、白色固体（１８５ｍｇ，５８％収率、ｍ．ｐ．２２８−２３０℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ３３２（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ15Ｈ10ＢｒＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，５４．２４；Ｈ，３．０３；Ｎ，４．２２
実測値：Ｃ，５４．２７；Ｈ，２．９４；Ｎ，４．２０
【０１９７】
実施例３２
７−（１−ブロモビニル）−２−（２−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例２９−３０に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を７−ブロモ−２−（２−フルオロ−４−メトキシフェニル）−５−メトキシ−１，３−ベンゾキサゾールから調製し、オフホワイトの固体、ｍ．ｐ．２３５−２３７℃として得た；ＭＳｍ／ｅ３５０（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ15Ｈ9ＢｒＦＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，５１．４５；Ｈ，２．５９；Ｎ，４．００
実測値：Ｃ，５１．６３；Ｈ，２．３８；Ｎ，３．９８
【０１９８】
実施例３３
７−（１−ブロモビニル）−２−（２，３−ジフルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例２９−３０に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を７−ブロモ−２−（２，３−ジフルオロ−４−メトキシフェニル）−５−メトキシ−１，３−ベンゾキサゾールから調製し、オフホワイトの固体、ｍ．ｐ．２４０−２４２℃として得た；ＭＳｍ／ｅ３６６（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ15Ｈ8ＢｒＦ2ＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，４８．９４；Ｈ，２．１９；Ｎ，３．８０
実測値：Ｃ，４９．６３；Ｈ，２．３３；Ｎ，３．６１
【０１９９】
実施例３４
７−アリル−２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例２４、経路（ｃ）、段階（ｂ）に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を７−ブロモ−２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−５−メトキシ−１，３−ベンゾキサゾール、アリルトリブチルスズおよびジクロロビス（トリ−ｏ−トリルホスフィン）パラジウムから調製し、続いて実施例２０、段階（ｅ）にしたがって脱メチル化した。所望の生成物を淡ピンク色固体、ｍ．ｐ．１６９−１７１℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２８４（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ16Ｈ12ＦＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，６７．３７；Ｈ，４．２４；Ｎ，４．９１
実測値：Ｃ，６７．３７；Ｈ，４．１６；Ｎ，４．６６
【０２００】
実施例３５
７−エチニル−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（５２ｍｇ，０．０４５ミリモル）を７−ブロモ−５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール（０．３ｇ，０．９ミリモル）、ヨウ化銅（Ｉ）（１７．１ｍｇ，０．０９ミリモル）、エチニル（トリメチル）シラン（０．２ｇ  ｍｇ，２ミリモル）およびトリエチルアミン（１２ｍＬ）の混合物の中に添加した。この反応混合物を１１０℃で４時間撹拌し、塩化アンモニウム水溶液の中に注ぎ、ＥｔＯＡｃ／ＴＨＦ（１／１）により抽出した。この有機抽出物をＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ６／１）により精製することによって、オフホワイトの固体（０．２７ｇ，８５％収率）を得た。この生成物をＣＨ2Ｃｌ2（２ｍＬ）に溶解し、−７８℃まで冷却し、三臭化ホウ素（０．６ｍＬ）を滴加した。この反応混合物を室温まで温めた。室温で１８時間撹拌した後、この混合物を冷（０℃）エチルエーテル（１０ｍＬ）の中にゆっくりと注いだ。次に、メチルアルコール（３ｍＬ）をこの反応混合物の中にゆっくりと添加した。この新しい反応混合物を水で洗浄（３回）し、ＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ３／１）による精製によって、黄色固体（８６ｍｇ，３８％収率、ｍ．ｐ．２２９−２３１℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ２５２（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ15Ｈ9ＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，７１．７１；Ｈ，３．６１；Ｎ，５．５８
実測値：Ｃ，７１．３９；Ｈ，３．４９；Ｎ，５．３２
【０２０１】
実施例３６
２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−プロピル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（７０ｍｇ，０．０６ミリモル）を７−ブロモ−５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール（０．４ｇ，１．２ミリモル）、ブロモ（プロピル）亜鉛（ＴＨＦ中０．５Ｍ，３．６ｍＬ，１．８ミリモル）およびＴＨＦ（４ｍＬ）の混合物の中に添加した。この反応混合物を室温で４８時間撹拌し、ＨＣｌ（１Ｎ）の中に注ぎ、ＥｔＯＡｃにより抽出した。この有機抽出物をＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ６／１）により精製することによって、オフホワイトの固体（０．１４ｇ）を得た。この生成物をＣＨ2Ｃｌ2（２ｍＬ）に溶解し、−７８℃まで冷却し、三臭化ホウ素（０．３５ｍＬ）を滴加した。この反応混合物を室温まで温めた。室温で１８時間撹拌した後、この反応混合物を冷（０℃）エチルエーテル（１０ｍＬ）の中にゆっくりと注いだ。次に、メチルアルコール（３ｍＬ）をこの反応混合物の中にゆっくりと添加した。この新しい反応混合物を水で洗浄（３回）し、ＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ４／１）により精製することによって、白色固体（９０ｍｇ，２７％収率、ｍ．ｐ．１１０−１１２℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ２７０（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ16Ｈ15ＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，７１．３６；Ｈ，５．６１；Ｎ，５．２０
実測値：Ｃ，７１．０２；Ｈ，５．５８；Ｎ，４．９４
【０２０２】
実施例３７
７−ブチル−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
【０２０３】
実施例３８
７−シクロペンチル−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例３５に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を７−ブロモ−５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾールとブロモ（シクロペンチル）亜鉛から調製した。所望の生成物を白色固体、ｍ．ｐ．２２０−２２２℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２９６（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ18Ｈ17ＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，７３．２０；Ｈ，５．８０；Ｎ，４．７４
実測値：Ｃ，７３．０５；Ｈ，５．７４；Ｎ，４．５９
【０２０４】
実施例３９
エチル５−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−カルボキシレート
段階ａ）７−ブロモ−５−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−（４−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝フェニル）−１，３−ベンゾキサゾール
実施例２４、経路（ａ）、段階（ａ）に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を７−ブロモ−５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾールとｔｅｒｔ−ブチル（クロロ）ジメチルシランから調製した。所望の生成物を白色固体、ｍ．ｐ．９０−９１℃として得た；ＭＳｍ／ｅ５３４（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ25Ｈ36ＢｒＮＯ3Ｓｉ2に対する分析
計算値：Ｃ，５６．１６；Ｈ，６．７９；Ｎ，２．６２
実測値：Ｃ，５５．６６；Ｈ，６．８６；Ｎ，２．６８
【０２０５】
段階ｂ）エチル５−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−カルボキシレート
ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍ，０．３ｍＬ，０．７５ミリモル）を７−ブロモ−５−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝−２−（４−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝フェニル）−１，３−ベンゾキサゾール（０．４ｇ，０．７５ミリモル）とＴＨＦ（４ｍＬ）の冷（０℃）溶液の中に滴加した。この反応混合物を４０℃まで温め、次に２時間撹拌した。ＴＨＦ（１ＭＬ）中の［（シアノカルボニル）オキシ］エタン（８４ｍｇ）をこの反応混合物の中に添加し、この反応混合物を０℃まで温め、１時間撹拌した。この反応を塩化アンモニウム水溶液によりクエンチし、ＥｔＯＡｃにより抽出し、そしてＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン／ＣＨ2Ｃｌ2／イソプロピルアルコール１８／２／１）により精製することによって、無色のオイル（３４０ｍｇ）を得た。この生成物をＴＨＦ（３．５ｍＬ）に溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオリド（ＴＨＦ中１Ｍ，１．４ｍＬ）により処理した。この反応混合物を３０分間撹拌し、ＨＣｌ（１Ｎ）の中に注ぎ、ＥｔＯＡｃにより抽出した。この有機抽出物をＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン／ＣＨ2Ｃｌ2／イソプロピルアルコール５／２／１）による精製によって、白色固体（１１９ｍｇ，５３％収率、ｍ．ｐ．３０５−３０７℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ３００（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ16Ｈ13ＮＯ5に対する分析
計算値：Ｃ，６４．２１；Ｈ，４．３８；Ｎ，４．６８
実測値：Ｃ，６４．０４；Ｈ，４．４３；Ｎ，４．４０
【０２０６】
実施例４０
２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−フェニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
段階ａ）５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−７−フェニル−１，３−ベンゾキサゾール
７−ブロモ−５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール（２００ｍｇ，０．６０ミリモル）とテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（６３ｍｇ，０．０３ミリモル）をトルエン（５ｍＬ）に溶解し、窒素雰囲気下室温で１０分間撹拌した。ベンゼンボロン酸（１１０ｍｇ，０．９０ミリモル）を添加し、続いて炭酸ナトリウム（２Ｍ，１．５ｍＬ）水溶液とエタノール（２ｍＬ）を添加した。この反応混合物を１２時間還流させ、水で希釈し、ＥｔＯＡｃにより抽出した。この有機抽出物をＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（２０％−４０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）により精製することによって、標記化合物を淡ピンク色固体，ｍｐ９２℃として得た；ＭＳｍ／ｅ３３２（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ21Ｈ17ＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，７６．１２；Ｈ，５．１７；Ｎ，４．２３
実測値：Ｃ，７５．８６；Ｈ，５．０８；Ｎ，４．０７
【０２０７】
段階ｂ）２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−フェニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
この標記化合物を実施例２０、段階（ｅ）（経路（ｂ））の手順にしたがって調製し、紫色固体、ｍ．ｐ．２５５−２５８℃として得た；ＭＳｍ／ｅ３０２（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ19Ｈ13ＮＯ3×０．２５Ｈ2Ｏに対する分析
計算値：Ｃ，７４．１４；Ｈ，４．４２；Ｎ，４．５５
実測値：Ｃ，７３．８１；Ｈ，４．４０；Ｎ，４．３５
【０２０８】
実施例４１
５−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−カルボニトリル
段階ａ）５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−カルボニトリル
無水Ｎ，Ｎジメチルホルムアミド（１．５ｍＬ）中の７−ブロモ−５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール（２００ｍｇ，０．６０ミリモル）の溶液を撹拌し、シアン化銅（Ｉ）（８０ｍｇ，０．９０ミリモル）と４時間乾燥窒素下で還流まで加熱した。反応混合物を冷却し、過剰のエチレンジアミン四酢酸水溶液の中に注いだ。この粗生成物の単離によって、３０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテルからニトリル（１６４ｍｇ，９８％収率）を黄褐色針状物として得た；ｍ．ｐ．１８０−１８３℃；ＭＳｍ／ｅ２８１（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ16Ｈ12Ｎ2Ｏ3×０．２Ｈ2Ｏに対する分析
計算値：Ｃ，６６．８４；Ｈ，４．４８；Ｎ，９．７４
実測値：Ｃ，６６．６３；Ｈ，４．３３；Ｎ，９．６０
【０２０９】
段階ｂ）５−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−カルボニトリル
この標記化合物を実施例２０、段階（ｅ）（経路（ｂ））の手順にしたがって調製し、淡ピンク色固体，ｍｐ２９７−３０３℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２５３（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ14Ｈ8Ｎ2Ｏ3×０．５Ｈ2Ｏに対する分析
計算値：Ｃ，６４．３７；Ｈ，３．４７；Ｎ，１０．７２
実測値：Ｃ，６４．４４；Ｈ，３．４９；Ｎ，９．９２
【０２１０】
実施例４２
５−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−カルボキサアミド
この標記化合物を実施例４０、段階（ｂ）の反応からの微量生成物として単離し、淡黄褐色固体，ｍ．ｐ．３２５℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２７１（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ14Ｈ10Ｎ2Ｏ4×０．５Ｈ2Ｏに対する分析
計算値：Ｃ，６０．２２；Ｈ，３．９７；Ｎ，１０．０３
実測値：Ｃ，５９．７１；Ｈ，３．９１；Ｎ，９．８４
【０２１１】
実施例４３
２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−メトキシ−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
無水Ｎ，Ｎジメチルホルムアミド（１．５ｍＬ）中の７−ブロモ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル（１００ｍｇ，０．３３ミリモル）と臭化銅（Ｉ）（５６ｍｇ，０．３９ミリモル）の混合物を新鮮に調製されたナトリウムメトキシド（メタノール中１５重量％，１ｍｌ）と共に撹拌し、１２０℃で４時間加熱した。この反応混合物を冷却し、ＨＣｌ（１Ｎ，５ｍｌ）により希釈した。エチルアセテートによる粗生成物の単離と、それに続くフラッシュクロマトグラフィ（４０％−５０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）によって、標記化合物をオフホワイトの固体（５０ｍｇ，６０％収率，ｍｐ２２５−２２８℃）として得た；ＭＳｍ／ｅ２５８（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ14Ｈ11ＮＯ4×０．７５Ｈ2Ｏに対する分析
計算値：Ｃ，６２．１１；Ｈ，４．６５；Ｎ，５．１７
実測値：Ｃ，６２．５３；Ｈ，４．７３；Ｎ，５．０２
【０２１２】
実施例４４
７−エチル−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
段階ａ）７−エチル−５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール
ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｎ，０．４３ｍＬ，１．０８ミリモル）を７−ブロモ−５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール（３００ｍｇ，０．９０ミリモル）とＴＨＦ（２ｍＬ）の冷（−７８℃）混合物の中に滴加した。この反応混合物を０．５時間撹拌した。ヨードエタン（０．１４ｍＬ，１．８ミリモル）をこの反応混合物の中に滴加した。この反応混合物を室温まで温め、２時間撹拌した。この反応物を塩化アンモニウム水溶液によりクエンチし、水の中に注ぎ、そしてＥｔＯＡｃにより抽出した。この有機抽出物をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（２０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）により、生成物（２３１ｍｇ，９１％収率）を淡褐色固体として得た：ｍ．ｐ．８５℃；ＭＳｍ／ｅ２８４（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ17Ｈ17ＮＯ3×０．２Ｈ2Ｏに対する分析
計算値：Ｃ，７０．２８；Ｈ，６．１７；Ｎ，４．９４．
実測値：Ｃ，７０．１２；Ｈ，５．７４；Ｎ，４．８２．
【０２１３】
段階ｂ）７−エチル−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
この標記化合物を実施例２０、段階（ｅ）（経路（ｂ））の手順にしたがって調製し、淡褐色固体（９８％収率）、ｍ．ｐ．１１０−１１５℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２５６（Ｍ＋Ｈ）+。
【０２１４】
実施例４５
７−エチル−２−（２−エチル−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
段階ａ）７−エチル−５−メトキシ−２−（２−エチル−４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール
２等量のｎ−ブチルリチウムを用いて、この標記化合物を実施例４３、段階（ａ）の手順にしたがって調製し、この粗生成物を次の段階で直接使用した。
【０２１５】
段階ｂ）７−エチル−２−（２−エチル−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
この標記化合物を実施例２０、段階（ｅ）（経路（ｂ））の手順にしたがって７−エチル−５−メトキシ−２−（２−エチル−４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾールから調製し、灰色固体（８７％収率）として得た；ＭＳｍ／ｅ２８４（Ｍ＋Ｈ）+。
【０２１６】
実施例４６
５−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−カルボアルデヒド
段階ａ）５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−カルボアルデヒド
Ｎ−メチルホルムアミドを求電子性試薬として使用して、この標記化合物を実施例４３、段階（ａ）の手順にしたがって調製して、淡橙色固体（９４％、ｍ．ｐ．１５３−１５５℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ２８４（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ16Ｈ13ＮＯ4に対する分析
計算値：Ｃ，６７．８４；Ｈ，４．６３；Ｎ，４．９４
実測値：Ｃ，６７．５８；Ｈ，４．５３；Ｎ，４．７５
【０２１７】
段階ｂ）５−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−カルボアルデヒド
この標記化合物を実施例２０、段階（ｅ）（経路（ｂ））の手順にしたがって５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−カルボアルデヒドから調製し、暗黄色固体（９９％収率、ｍ．ｐ．２７３−２７５℃）として得た；ＭＳｍ／ｅ２５６（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ14Ｈ9ＮＯ4×０．２５Ｈ2Ｏに対する分析
計算値．：Ｃ，６４．７４；Ｈ，３．６９；Ｎ，５．３９
実測値：Ｃ，６４．３２；Ｈ，３．５９；Ｎ，５．１８。
【０２１８】
実施例４７
７−（ヒドロキシメチル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
段階ａ）５−メトキシ−７−（ヒドロキシメチル）−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール
ナトリウムボロヒドリド（６６．８ｍｇ，１．７６ミリモル）を無水ＭｅＯＨ（８ｍＬ）中の５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−カルボアルデヒド（２５０ｍｇ，０．８８ミリモル）の溶液の中に０℃で添加した。この反応混合物を３０分間撹拌し、次に真空中で蒸発させた。この残渣をジエチルエーテルに溶解し、水とブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥し、濾過した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（５０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）によって、次の反応で直接に使用される生成物（２１０ｍｇ，８３％）を得た。
【０２１９】
段階ｂ）７−（ヒドロキシメチル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
この標記化合物を実施例２０、段階（ｅ）（経路（ｂ））の手順にしたがって５−メトキシ−７−（ヒドロキシメチル）−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾールから調製し、淡褐色固体、ｍ．ｐ．２８２℃（dec）として得た；ＭＳｍ／ｅ２５８（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ14Ｈ11ＮＯ4×０．５Ｈ2Ｏに対する分析
計算値：Ｃ，６３．１６；Ｈ，４．５４；Ｎ，５．２６
実測値：Ｃ，６３．３３；Ｈ，４．３６；Ｎ，５．０４
【０２２０】
実施例４８
７−（ブロモメチル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
この標記化合物を実施例２０、段階（ｅ）（経路（ｂ））の手順にしたがって三臭化ホウ素の存在下で長時間撹拌しながら５−メトキシ−７−（ヒドロキシメチル）−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾールから調製し、淡褐色固体、ｍ．ｐ．２５０−２６０℃として得た；ＭＳｍ／ｅ３２１（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ14Ｈ10ＢｒＮＯ3に対する分析
計算値．Ｃ，５２．５２，Ｈ，３．１５；Ｎ，４．３８
実測値：Ｃ，５２．２６；Ｈ，３．１７；Ｎ，４．０７
【０２２１】
実施例４９
［５−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−イル］アセトニトリル
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．５ｍＬ）中の７−（ブロモメチル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾオキサゾール−５−オル（１２２ｍｇ，０．４０ミリモル）の溶液に、１８−クラウン−６−エーテル（２０２ｍｇ，０．８０ミリモル）とシアン化カリウム（１３１ｍｇ，２ミリモル）を添加した。この反応混合物を２時間撹拌し、次に水の中に注ぎ、ＥｔＯＡｃにより抽出した。この有機抽出物をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（５０％−６０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）によって、生成物（８０ｍｇ，７５％収率）を灰色固体、ｍ．ｐ．１７０−１８０℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２６５（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ15Ｈ10Ｎ2Ｏ3×１．５Ｈ2Ｏに対する分析
計算値：Ｃ，６１．４３；Ｈ，４．４７；Ｎ，９．５５
実測値：Ｃ，６１．４１；Ｈ，４．２１；Ｎ，９．１９
【０２２２】
実施例５０
７−（１−ヒドロキシ−１−メチルエチル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル］
段階ａ）２−［５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−イル］プロパン−２−オル
アセトンを求電子性試薬として使用して、この標記化合物を実施例４３、段階（ａ）の手順にしたがって７−ブロモ−５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾールから調製して、白色固体（７８％収率、ｍ．ｐ．１４９℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ３１４（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ18Ｈ19ＮＯ4に対する分析
計算値：Ｃ，６８．９９；Ｈ，６．１１；Ｎ，４．４７。
実測値：Ｃ，６８．７８；Ｈ，６．１３；Ｎ，４．３５。
【０２２３】
段階ｂ）７−（１−ヒドロキシ−１−メチルエチル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル］
この標記化合物を実施例２０、段階（ｅ）（経路（ｂ））の手順にしたがって２−［５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−イル］プロパン−２−オルから調製し、暗褐色固体（９０％収率、ｍ．ｐ．１８０−１８５℃）として得た；ＭＳｍ／ｅ２８６（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ16Ｈ15ＮＯ4×０．５Ｈ2Ｏに対する分析
計算値：Ｃ，６５．３０；Ｈ，５．４８；Ｎ，４．７６
実測値：Ｃ，６５．０３；Ｈ，５．２０；Ｎ，４．７２
【０２２４】
実施例５１
２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−イソプロペニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
ピリジンヒドロクロリド（４００ｍｇ）を１９０℃まで加熱した。この融液に２−［５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−７−イル］プロパン−２−オル（１１４ｍｇ，０．３６ミリモル）を添加し、この反応物を２時間撹拌した。この反応混合物を室温まで冷却し、水に溶解し、ＥｔＯＡｃにより抽出した。この有機層を合体し、ＨＣｌ（１Ｎ）、水、次にブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（５０％−６０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）による精製によって、生成物（４０ｍｇ，４１％収率）を淡赤褐色固体、ｍ．ｐ．２２５−２２８℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２６８（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ16Ｈ13ＮＯ3×０．５Ｈ2Ｏに対する分析
計算値．：Ｃ，６９．５６；Ｈ，５．１１；Ｎ，５．０６
実測値：Ｃ，６９．４６；Ｈ，５．２２；Ｎ，４．５６
【０２２５】
実施例５２
２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−イソプロピル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル］
２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−イソプロペニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル（６４ｍｇ，０．２４ミリモル）をＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）と無水エタノール（５ｍＬ）の混合物に溶解し、不活性雰囲気下にアルゴンと共に置いた。この溶液に１０％Ｐｄ−Ｃ（２５ｍｇ）を添加した。この溶液をパール装置により２５ｐｓｉで３時間水素化した。この溶液をセライト（登録商標）により濾過し、エタノールによりすすいだ。この濾液を濃縮し、残渣をフラッシュクロマトグラフィ（５０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）により精製して、この生成物（５８ｍｇ，９０％収率）を黄褐色固体、ｍ．ｐ．２００℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２７０（Ｍ＋Ｈ）+。
【０２２６】
実施例５３
７−ブロモ−２−（４−ヒドロキシ−３−（トリフルオロメチル）フェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
段階ａ）２−ブロモ−４−メトキシ−６−｛［４−メトキシ−３−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］アミノ｝フェニル４−メトキシ−３−（トリフルオロメチル）ベンゾエート
実施例２０、段階（ｃ）に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を２−アミノ−６−ブロモ−４−メトキシフェノールと４−メトキシ−３−トリフルオロメチルベンゾイルクロリドから調製した。この生成物をオフホワイトの固体、ｍ．ｐ．２０５−２０８℃として得た；ＭＳｍ／ｅ６２２（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ25Ｈ18ＢｒＦ6ＮＯ6に対する分析
計算値：Ｃ，４８．２５；Ｈ，２．９２；Ｎ，２．２５
実測値：Ｃ，４８．４７；Ｈ，２．７６；Ｎ，２．１６
【０２２７】
段階ｂ）７−ブロモ−５−メトキシ−２−（４−メトキシ−３−（トリフルオロメチル）フェニル]−１，３−ベンゾキサゾール
実施例２０、段階（ｄ）（経路（ａ））に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を２−ブロモ−４−メトキシ−６−｛［４−メトキシ−３−（トリフルオロメチル）ベンゾイル］アミノ｝フェニル４−メトキシ−３−（トリフルオロメチル）ベンゾエートとｐ−トルエンスルホン酸一水和物から調製した。この生成物をオフホワイトの固体、ｍ．ｐ．１８３−１８５℃として得た；ＭＳｍ／ｅ４０２（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ16Ｈ11ＢｒＦ3ＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，４７．７９；Ｈ，２．７６；Ｎ，３．４８
実測値：Ｃ，４７．６０；Ｈ，２．５０；Ｎ，３．３７
【０２２８】
段階ｃ）７−ブロモ−２−（４−ヒドロキシ−３−（トリフルオロメチル）フェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例２０、段階（ｅ）（経路（ｂ））の手順にしたがってこの標記化合物を７−ブロモ−５−メトキシ−２−（４−メトキシ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−１，３−ベンゾキサゾールから調製し、淡黄色固体（５０％収率、ｍ．ｐ．２００−２１０℃）として得た；ＭＳｍ／ｅ３７２（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ14Ｈ7ＢｒＦ3ＮＯ3×０．５Ｈ2Ｏに対する分析
計算値：Ｃ，４３．８９；Ｈ，２．１０；Ｎ，３．６５
実測値：Ｃ，４３．５９；Ｈ，２．０４；Ｎ，３．６
【０２２９】
実施例５４
７−（２−フリル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
段階ａ）７−（２−フリル）−５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール
７−ブロモ−５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール（３００ｍｇ，０．９０ミリモル）とジクロロビス（トリ−ｏ−トリルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（７１ｍｇ，０．０９ミリモル）をｐ−キシレン（３ｍＬ）に溶解し、窒素雰囲気下室温で１０分間撹拌した。２−（トリブチルスタンニル）フラン（４４９ｍｇ，１．２６ミリモル）を添加し、この反応混合物を４時間還流させた。この反応混合物を室温まで冷却し、塩化アンモニウムの飽和溶液により希釈し、ＥｔＯＡｃにより抽出した。この有機抽出物を水、次にブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィ（２０％−３０％ＥｔＯＡｃ／石油エーテル）による精製によって、標記化合物を白色固体（９９％収率、ｍ．ｐ．１２０−１２１℃）として得た；ＭＳｍ／ｅ３２２（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ19Ｈ15ＮＯ4に対する分析
計算値：Ｃ，７１．０２；Ｈ，４．７１；Ｎ，４．３６
実測値：Ｃ，７０．２３；Ｈ，４．７；Ｎ，４．１９
【０２３０】
段階ｂ）７−（２−フリル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例５０の手順にしたがってこの標記化合物を調製し、淡ピンク色固体（６４％収率、ｍ．ｐ．２８３−２８７℃）として得た；ＭＳｍ／ｅ２９４（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ17Ｈ11ＮＯ4に対する分析
計算値：Ｃ，６９．６２；Ｈ，３．７８；Ｎ，４．７８
実測値：Ｃ，６９．１１；Ｈ，３．６；Ｎ，４．６４
【０２３１】
実施例５５
２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−７−（２−フリル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
段階ａ）２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−７（２−フリル）−５−メトキシ−１，３−ベンゾキサゾール
実施例５３、段階（ａ）の手順にしたがってこの標記化合物を７−ブロモ−５−メトキシ−２−（４−メトキシ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−１，３−ベンゾキサゾールから調製し、琥珀色結晶（７３％収率、ｍ．ｐ．１５５℃）として得た；ＭＳｍ／ｅ３４０（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ19Ｈ14ＦＮＯ4に対する分析
計算値：Ｃ，６７．２５；Ｈ，４．１６；Ｎ，４．１３
実測値：Ｃ，６６．８８；Ｈ，３．９７；Ｎ，４．０４
【０２３２】
段階ｂ）２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−７−（２−フリル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例５０の手順にしたがってこの標記化合物を２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−７−（２−フリル）−５−メトキシ−１，３−ベンゾキサゾールから調製し、灰色固体（８１％収率、ｍ．ｐ．２４５−２５０℃）として得た；ＭＳｍ／ｅ３１２（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ17Ｈ10ＦＮＯ4×０．７Ｃ3Ｈ6Ｏに対する分析
計算値：Ｃ，６５．０４；Ｈ，４．３７；Ｎ，３．７９
実測値：Ｃ，６４．８４；Ｈ，４．２９；Ｎ，３．７０
【０２３３】
実施例５６
２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−チエン−２−イル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
段階ａ）５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−７−チエン−２−イル）−１，３−ベンゾキサゾール
実施例５３、段階（ａ）の手順にしたがってこの標記化合物を７−ブロモ−５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾールと２−（トリブチルスタンニル）チオフェンから調製した。この生成物を白色固体（９５％収率）、ｍ．ｐ．９５−１００℃）として得た；ＭＳｍ／ｅ３３８（Ｍ＋Ｈ）。
【０２３４】
段階ｂ）２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−チエン−２−イル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例５０の手順にしたがってこの標記化合物を５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−７−チエン−２−イル）−１，３−ベンゾキサゾールから調製し、灰色固体（８０％収率、ｍ．ｐ．２７８−２８０℃）として得た；ＭＳｍ／ｅ３１０（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ17Ｈ11ＮＯ3Ｓ×０．２５Ｈ2Ｏに対する分析
計算値：Ｃ，６５．０６；Ｈ，３．６９；Ｎ，４．４６
実測値：Ｃ，６４．９３；Ｈ，３．８４；Ｎ，４．２１
【０２３５】
実施例５７
２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−（１，３−チアゾール−２−イル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
段階ａ）５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−７−（１，３−チアゾール−２−イル）−１，３−ベンゾキサゾール
実施例５３、段階（ａ）の手順にしたがってこの標記化合物を７−ブロモ−５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾールと２−（トリブチルスタンニル）チアゾールから調製した。この生成物をオフホワイトの固体（９３％収率、ｍ．ｐ．１３２−１３６℃）として得た；ＭＳｍ／ｅ３３９（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ18Ｈ14Ｎ2Ｏ3Ｓに対する分析
計算値：Ｃ，６３．８９；Ｈ，４．１７；Ｎ，８．２８
実測値：Ｃ，６３．５３；Ｈ，３．９４；Ｎ，８．１５
【０２３６】
段階ｂ）２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−（１，３−チアゾール−２−イル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例５０の手順にしたがってこの標記化合物を５−メトキシ−２−（４−メトキシフェニル）−７−（１，３−チアゾール−２−イル）−１，３−ベンゾキサゾールから調製し、黄色固体（５５％収率、ｍ．ｐ．２４５−２５５℃）として得た；ＭＳｍ／ｅ３１１（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ16Ｈ10Ｎ2Ｏ3Ｓ×１．５Ｈ2Ｏに対する分析
計算値：Ｃ，５６．９７；Ｈ，３．８８；Ｎ，８．３０
実測値：Ｃ，５７．２４；Ｈ，３．９５；Ｎ，７．５０
【０２３７】
実施例５８
２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−５−ヒドロキシ−１，３−ベンゾキサゾール−７−カルボニトリル
実施例３５の手順にしたがってこの標記化合物を７−ブロモ−２−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−５−メトキシ−１，３−ベンゾキサゾールとシアン化亜鉛から調製した。この生成物を白色固体、ｍ．ｐ．３０８−３１０℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２６９（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ14Ｈ7ＦＮ2Ｏ３×１．５Ｈ2Ｏに対する分析
計算値：Ｃ，６１．０１；Ｈ，２．７７；Ｎ，１０．１６
実測値：Ｃ，６０．６８；Ｈ，２．４６；Ｎ，９．７７
【０２３８】
実施例５９および６０
４−ブロモ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−メトキシ−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル（実施例５９）
４，６−ジブロモ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−メトキシ−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル（実施例６０）
実施例２８の手順にしたがってこの標記化合物を２−（４−ヒドロキシフェニル）−７−メトキシ−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルとＮ−ブロモスクシンイミドから調製した。生成物（実施例５９）を白色固体、ｍ．ｐ．２４６−２４８℃として得た；ＭＳｍ／ｅ３３６（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ14Ｈ10ＢｒＮＯ4×．１Ｈ2Ｏに対する分析
計算値：Ｃ，４９．４９；Ｈ，３．０８；Ｎ，４．１２
実測値：Ｃ，４９．２８；Ｈ，２．８９；Ｎ，３．８７。
生成物（実施例６０）を白色固体、ｍ．ｐ．２６０−２６２’Ｃとして得た；ＭＳｍ／ｅ４１４（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ14Ｈ9Ｂｒ2ＮＯ4に対する分析
計算値：Ｃ，４０．５２；Ｈ，２．１９；Ｎ，３．３７
実測値：Ｃ，４０．２１；Ｈ，２．００；Ｎ，３．３
【０２３９】
実施例６１
７−ブロモ−２−（３，５−ジフルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例２１に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を３，５−ジフルオロ−４−メトキシ安息香酸と２−アミノ−６−ブロモ−４−メトキシフェノールから調製し、白色固体、ｍ．ｐ．２７０−２７２℃として得た；ＭＳｍ／ｅ３４０（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ13Ｈ6ＢｒＦ2ＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，４５．６４；Ｈ，１．７７；Ｎ，４．０９
実測値：Ｃ，４５．８１；Ｈ，１．７３；Ｎ，３．８９
【０２４０】
実施例６２
２−（３，５−ジフルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例２４、経路（ｂ）に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を７−ブロモ−２−（３，５−ジフルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルから調製し、白色固体、ｍ．ｐ．１６０−２６２℃として得た；ＭＳｍ／ｅ２８８（Ｍ−Ｈ）+。
Ｃ15Ｈ9Ｆ2ＮＯ3×０．１Ｈ2Ｏに対する分析
計算値：Ｃ，６１．５２；Ｈ，３．２３；Ｎ，４．７８
実測値：Ｃ，６１．５３；Ｈ，３．１０；Ｎ，４．７２
【０２４１】
実施例６３
７−ブロモ−２−（４−ヒドロキシ−２−メチルフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
実施例２１に述べたのと実質的に同一の方法でこの標記化合物を４−メトキシ−２−メチル安息香酸と２−アミノ−６−ブロモ−４−メトキシフェノールから調製し、淡紫色固体、ｍ．ｐ．１２０−１３５℃として得た；ＭＳｍ／ｅ３２０（Ｍ+Ｈ）+。
Ｃ14Ｈ10ＢｒＮＯ3に対する分析
計算値：Ｃ，５２．５２；Ｈ，３．１５；Ｎ，４．３８
実測値：Ｃ，５２．２４；Ｈ，２．９７；Ｎ，４．１５
【０２４２】
実施例６４
２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−７−（１−フルオロビニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オル
ピリジンフッ化水素（１．１４ｍＬ）をスルホラン（３ｍＬ）中の２−［４−（アセチルオキシ）−３−フルオロフェニル］−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−イルアセテート（０．２５ｇ，０．７ミリモル）の冷（０℃）溶液に滴加した。この反応混合物を５分間撹拌し、次に１，３−ジブロモ−５，５−ジメチルイミダゾリジン−２，４−ジオン（１２０ｍｇ）を一度に添加した。この反応混合物を室温で２４時間撹拌し、ＨＣｌ（１Ｎ）により希釈し、ＥｔＯＡｃにより抽出した。この有機層をＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（ＣＨ2Ｃｌ2／イソプロピルアルコール０．３％）による精製によって、７−（２−ブロモ−１−フルオロエチル）−２−（３−フルオロ−４−ヒドロキシフェニル）−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルを白色固体（０．２５ｇ、ｍ．ｐ．１８５−１８６℃）として得た。この生成物をアセトニトリル（２ｍＬ）の中に取り込み、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデセ−７−エン（１５０ｍｇ）を添加した。この反応混合物を２４時間撹拌し、冷（０℃）ＨＣｌ（１Ｎ，１０ｍｌ）の中に注ぎ、ＥｔＯＡｃにより抽出した。この有機抽出物をＭｇＳＯ4上で乾燥した。蒸発およびフラッシュクロマトグラフィ（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）による精製によって、白色固体（１６０ｍｇ、ｍ．ｐ．２１３−２１４℃）を得た；ＭＳｍ／ｅ２９０（Ｍ＋Ｈ）+。
Ｃ15Ｈ9ＢｒＦ2ＮＯ３×０．３Ｈ2Ｏに対する分析
計算値：Ｃ，６１．１５；Ｈ，３．２８；Ｎ，４．７５
実測値：Ｃ，６０．８４；Ｈ，３．４１；Ｎ，４．５７
【０２４３】
実施例６５
２−（３’−フルオロ−４’−ヒドロキシフェニル）−７−ビニル−１，３−ベンゾキサゾール−５−オルの代謝物（ＥＲＢ−０４１）の調製および分析
ラット肝臓ミクロソームおよび細胞質ゾル中のＥＲＢ−０４１の大規模インキュベーションを行って、グルクロニド体（本明細書ではＭ５およびＭ６と表記）とサルフェート体（本明細書ではＭ９およびとＭ９Ａと表記）をＮＭＲ分析のために単離した。1Ｈ−および19Ｆ−ＮＭＲ分析からの結果に基づいて、Ｍ５およびＭ６の構造をＥＲＢ−０４１−４’−グルクロニド（Ｍ５）およびＥＲＢ−０４１−５−グルクロニド（Ｍ６）と一義的に帰属した。Ｍ９およびＭ９Ａの構造をそれぞれ、ＥＲＢ−０４１−４’−サルフェートおよびＥＲＢ−０４１−５−サルフェートと決定した。
【０２４４】
Ｍ５、Ｍ６、Ｍ９およびＭ９Ａの構造を下記に示す。
【化１５】
2008510827.tif 000041
【０２４５】
ＳＤラットからの肝臓ミクロソーム（雄、ロットＶＪＦ，２０ｍｇ／ｍＬ）と細胞質ゾル（雄、ロット１００００７，２０ｍｇ／ｍＬ）をＩｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＭＤから入手した。ＢＤ  Ｇｅｎｔｅｓｔ，Ｗｏｂｕｒｎ，ＭＡから入手した細胞質ゾルを用いて、追加のラット肝臓インキュベーションを行った。補助因子のウリジン５’−ジホスホグルクロン酸（ＵＤＰＧＡ）および３’−ホスホアデノシン−５’−ホスホサルフェート（ＰＡＰＳ）をＳｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ，ＳｔＬｏｕｉｓ，ＭＯから購入した。すべての他の反応試剤は分析用グレードのものであった。
【０２４６】
ＵＤＰＧＡの存在下でのＥＲＢ−０４１のミクロソームインキュベーション
ＵＤＰＧＡの存在下での雄ＳＤラット肝臓ミクロソームと共のＥＲＢ−０４１の分析的規模のインキュベーションを１ｍｇ／ｍＬのラット肝臓ミクロソームタンパク質を５ｍＭ塩化マグネシウムと４ｍＭ  ＵＤＰＧＡの最終濃度で含有するリン酸塩緩衝液（０．１Ｍ，ｐＨ７．４）中で行った。１００μＭの基質濃度を用いて、このパイロットインキュベーション（１．０ｍＬインキュベーション容積）を３７℃で６０分間行った。等容積の冷アセトニトリルを添加することにより、インキュベーションを停止した。
【０２４７】
続いて、構造解明に充分な量のグルクロニド代謝物を生成させるのに、大規模インキュベーション（合計３７回のインキュベーション＠５．０ｍＬのインキュベーション容積）を上述のように３７℃で６０分間行った。ＵＤＰＧＡの添加無しでの適切な基質コントロールおよびインキュベーションも行った。
【０２４８】
ＰＡＰＳの存在下でのＥＲＢ−０４１の細胞質ゾルインキュベーション
ＰＡＰＳの存在下での雄ＳＤラットおよびヒト肝臓細胞質ゾル画分と共のＥＲＢ−０４１の分析的規模のインキュベーションを１ｍｇ／ｍＬ肝臓細胞質ゾル，０．１１４ｍｇ／ｍＬ  ＰＡＰＳ，０．１ｍｇ／ｍＬ  ＢＳＡ，５ｍＭ  ジチオトレイトールおよび５ｍＭ  ＭｇＣｌ2を含有するトリスバッファー（５０ｍＭ，ｐＨ７．４）中で行った。１００μＭ  ＥＲＢ−０４１の基質濃度を用いて、これらのパイロットインキュベーション（１．０ｍＬインキュベーション容積）を３７℃で６０分間行った。等容積の冷アセトニトリルを添加することにより、インキュベーションを停止した。
【０２４９】
続いて、構造解明に充分な量のサルフェート代謝物を生成させるのに、大規模インキュベーション（合計６０回のインキュベーション＠１．０ｍＬのインキュベーション容積）を上述のように３７℃で６０分間行った。ＰＡＰＳの添加無しでの適切な基質コントロールおよびインキュベーションを行った。充分な量のＥＲＢ−０４１−サルフェートを単離して完全な構造同定を可能とするのに、更なるインキュベーション（合計１２０回＠２．０ｍＬインキュベーション容積，５０μＭ  ＥＲＢ−０４１）も類似の方法で行った。
【０２５０】
試料調製
インキュベーションの終了後、反応混合物を遠心分離（３０００ｒｐｍ，１０−１５分）し、次に上澄みを以降の調製ＨＰＬＣ単離で使用した。
【０２５１】
高速液体クロマトグラフィ
逆相ＨＰＬＣをすべての代謝物分析に使用した。パイロット規模インキュベーションでのＥＲＢ−０４１のグルクロニドおよびサルフェート共役体の形成を確認するために、ダイオードアレー検出器（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＤＥ）を備えたＡｇｉｌｅｎｔ  １１００ＬＣ系を用いて、ＨＰＬＣ分析を行った。このダイオードアレー検出器を２５４ｎｍの波長で設定した。Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｐｒｏｄｉｇｙ，５ＯＤＳ［４．６×２５０ｍｍ］カラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ，Ｉｎｃ．Ｔｏｒｒａｎｃｅ，ＣＡ）および勾配系Ａを用いる１．０ｍＬ／分流速を用いて、分離を行った。
2008510827.tif 000042
【０２５２】
インキュベーション抽出物の大規模分析時の分析的検出を次の条件下で行った：
ＵＶ検出（２５４および２８０ｎｍ）付きのＷａｔｅｒｓ  ２６９０  Ａｌｌｉａｎｃｅ  ＬＣ系（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐ．，Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ）を使用し、勾配系Ｂ（グルクロニド）および勾配系Ｃ（サルフェート）を用いるＰｈｅｎｏｍｅｎｏｘ  ＬＵＮＡ（登録商標）−フェニル／ヘキシルカラム［４．６×２５０ｍｍ，５μ］を用いて、分離を行った。
2008510827.tif 000043
2008510827.tif 000044
【０２５３】
この共役化代謝物の調製ＨＰＬＣ単離を次の条件下で行った。
ＵＶ検出（２５４および２８０ｎｍ）付きのＷａｔｅｒｓ  Ｄｅｌｔａ  Ｐｒｅｐ  ４０００系を使用し、勾配系Ｄ（グルクロニド）および勾配系Ｅ（サルフェート）を用いるＺｏｒｂａｘ（登録商標）  ＲＸ−Ｃ１８カラム［２１．１×２５０ｍｍ，１０μ］（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＤＥ）カラムを用いて、分離を行った。
2008510827.tif 000045
2008510827.tif 000046
【０２５４】
共役化代謝物の単離および精製
グルクロニドに対しては、ＵＤＰＧＡの存在下でのラット肝臓ミクロソームインキュベーションからの合体された抽出物を逆相フラッシュクロマトグラフィにかけ、水とメタノールによる順次的な溶離を行った。ＥＲＢ−０４１異性体グルクロニド（Ｍ５およびＭ６）を含有する画分を合体し、調製ＨＰＬＣによる更なる単離の前に濃縮した。勾配Ｄを用いるＺｏｒｂａｘ（登録商標）ＲＸ−Ｃ１８カラム［２１．１×２５０ｍｍ，１０μ］のＷａｔｅｒｓ  Ｄｅｌｔａ  Ｐｒｅｐ４０００系を用いて、この共役化代謝物の調製ＨＰＬＣ単離を行った。この分離を２５４および２８０ｎｍでのＵＶ検出によりモニターし、対象の代謝物（Ｒｔ＝２６．８−２７．３分、Ｍ５およびＲｔ＝２８．０−２８．５分，Ｍ６）を含有するピークを集めた。有機溶媒を真空下で蒸発させた後、残渣を凍結乾燥して、以降の1Ｈ−および１９Ｆ−ＮＭＲ分析のために純粋なグルクロニド（Ｍ５およびＭ６）を得た。
【０２５５】
サルフェートには、Ｚｏｒｂａｘ（登録商標）ＲＸ  Ｃ−１８カラムでの調製ＨＰＬＣによりこの合体された粗インキュベーション生成物を単離した。勾配溶媒Ｅを用い、２８０ｎｍおよび２５０ｎｍでＵＶモニターリングしながら、調製ＨＰＬＣ単離を行った。対象のピークのＭ９Ａ（Ｒｔ＝２８．５−２９分）およびＭ９（Ｒｔ＝２９．３−２９．８分）を集めた。有機溶媒を真空下で蒸発させた後、残渣を凍結乾燥して、以降の１９Ｆ−ＮＭＲ分析のために純粋なサルフェート共役体（Ｍ９ＡおよびＭ９）を得た。
【０２５６】
グルクロニドとサルフェートにそれぞれ勾配ＢおよびＣを用いて、精製したグルクロニドおよびサルフェートの調製ＨＰＬＣおよび分析時の分析的検出を上述のように行った。
【０２５７】
ＬＣ−ＭＳ分析
ＨＰ１１００ＭＳＤ質量分析計と結合されたＡｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣ系を用いて、単離された代謝物のＬＣ−ＭＳキャラクタリゼーションを行った。フルスキャンエレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）質量スペクトルを単位分解能で得た。ＥＳＩ正イオン化モードをグルクロニドのマススペクトル記録のために使用し、ＥＳＩ負モードをサルフェートのマススペクトル記録のために選択した。ＸＴｅｒｒａ（登録商標）Ｃ１８カラム（２．１×２５０ｍｍ，５μ；Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐ．）を溶媒系として勾配Ｆ（下記）と共に使用した。
2008510827.tif 000047
グルクロニド共役体の形成を確認するのにＬＣ−ＭＳ分析に使用されたＨＰＬＣ条件は前述したものであった。２×２５０ｍｍカラムおよび０．３５ｍＬ／分の流速を使用したことを除いて、前述（勾配Ａ）と同一のＬＣ−ＭＳ条件を用いて、サルフェート代謝物の大規模生成を確認した。使用したＨＰＬＣ系はＷａｔｅｒｓ  Ａｌｌｉａｎｃｅ  ２６９０  ＨＰＬＣポンピング系であった。使用した質量分析計は、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）源を備え、負イオン化モードで動作されるＦｉｎｎｉｇａｎ  ＴＳＱ  Ｑｕａｎｔｕｍ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｎｎｉｇａｎ，Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）であった。単位質量分解能をすべての分析に使用した。
【０２５８】
ＮＭＲ分析
グルクロニドの1Ｈ−ＮＭＲスペクトルをＥＲＢ−０４１のスペクトルと比較するために、ＥＲＢ−０４１のケミカルシフトを1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲ、ＨＭＢＣおよびＨＭＱＣ実験に基づいて、一義的に帰属した。Ｂｒｕｋｅｒ  ４００  ＡＭＸスペクトロメーター（Ｂｒｕｋｅｒ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）を用いて、すべてのＮＭＲ分析を行った。
【０２５９】
グルクロニドには、ＣＤ3ＣＮ／ＤＭＳＯ−ｄ６混合物を1Ｈ−ＮＭＲ用の溶媒として使用し、ＣＤ3ＯＤを19Ｆ−ＮＭＲ分析に使用した。サルフェート共役体には、０．００５％ＴＦＡを含有するＣＤ３ＯＤを19Ｆ−ＮＭＲ分析に使用し、フルオロベンゼン標準（δＦ−１１３．１２ｐｐｍ）を使用して、サルフェート共役体のデータを取得する前に、装置設定を調整した。
【０２６０】
データ分析
Ａｇｉｌｅｎｔクロマトグラフィソフトウエア，ＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ＬＣ３Ｄ，バージョンＲｅｖ．Ａ．０９．０１（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．，Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＤＥ）を代謝物ピークの検出に使用した。ＬＣ−ＭＳ装置の制御およびＬＣ−ＭＳ分析からのデータの記録にＸｃａｌｉｂｕｒバージョン１．３ソフトウエアを使用した。
【０２６１】
ラット肝臓ミクロソーム中のグルクロン化
ラット肝臓ミクロソームからのミクロソームタンパク質と共のＥＲＢ−０４１のインキュベーションをＵＤＰＧＡの存在下で行う場合、２つの主要な代謝物のＭ５およびＭ６を検出した。Ｍ５およびＭ６のＬＣ−ＭＳ分析（ＥＳＩ、正イオン化）は、これらのピークが４’−ＯＨ（フェニル）および５−ＯＨ（ベンゾキサゾール）位におけるＥＲＢ−０４１のフェノール系グルクロニドであるということを示した。大規模インキュベーションにおけるＭ５およびＭ６の形成の更なる確認をＬＣ−ＭＳ分析（ＥＳＩ、正イオン化）により示した。勾配溶媒系Ｂを上述のように用いて、この２つの代謝物の分離を行った。
【０２６２】
ラット肝臓細胞質ゾル中の硫酸化
ラットおよびヒト肝臓画分からの細胞質ゾルと共のＥＲＢ−０４１のインキュベーションをＰＡＰＳの存在下で行う場合、２つの代謝物（Ｍ９ＡおよびＭ９）をＨＰＬＣおよびＬＣ−ＭＳ分析により検出した。ラット肝臓およびヒト肝臓細胞質ゾルインキュベーションは類似のプロフィールを生じた。代謝物Ｍ９ＡおよびＭ９の両方は、ヒトおよびラット両方の細胞質ゾルのインキュベーションにおいて［Ｍ−Ｈ］−をＥＲＢ−０４１−サルフェートと一致するｍ／ｚ３５０で生じた。ＬＣ−ＭＳ分析（ＥＳＩ、負イオン化）を用いて、大規模インキュベーションからの単離された代謝物のＭ９ＡおよびＭ９の同一性の更なる確認を得た。大規模インキュベーションにおいては、ほぼ２３％のＥＲＢ−０４１がこの２つのサルフェート共役体に変換された。上述の勾配溶媒系Ｃを用いて、この２つのサルフェート代謝物の分離を行った。
【０２６３】
ＥＲＢ−０４１共役化代謝物の構造解明
ＥＲＢ−０４１グルクロニド（代謝物Ｍ５およびＭ６）およびサルフェート（代謝物Ｍ９およびＭ９Ａ）に対して質量スペクトルを得、大規模インキュベーション抽出物中のこれらの存在を確認した。ＬＣ−ＭＳデータは、フェノール性のグルクロン化および／または両方の環（フェニルおよびベンゾキサゾール）の硫酸化を示した。19Ｆ−および1Ｈ−ＮＭＲ分析を基に共役の部位を決めた。個別の代謝物の詳細な質量スペクトルおよびＮＭＲデータを下記に述べる。
【０２６４】
代謝物Ｍ５（ＥＲＢ−０４１−４’−グルクロニド）
代謝物Ｍ５はｍ／ｚ４４８において［Ｍ+Ｈ］+を示した；それゆえ、代謝物Ｍ５は前に報告したようにフェニル（Ｃ−４’）またはベンゾキサゾール（Ｃ−５）環のフェノール系基のいずれかにおけるＥＲＢ−０４１−グルクロニドであることが確認された。このことは、ｍ／ｚ４７０（＋２２マスユニット，Ｎａ付加物）およびｍ／ｚ２７２（グルクロニド部分の喪失）における［Ｍ＋Ｎａ］+の存在により更に支持された。しかしながら、いかなる識別用質量スペクトルフラグメントの欠如も、ＬＣ−ＭＳデータに基づくグルクロン化の個別の部位の識別を可能とさせるものでなかった。
【０２６５】
構造の更なる解明を19Ｆ−および1Ｈ−ＮＭＲデータから得た。ＥＲＢ−０４１の19Ｆ−ＮＭＲ分析は、δＦ−１３８ｐｐｍのケミカルシフトのシグナル（３’−Ｆ）を示した。代謝物Ｍ５およびＭ６の19Ｆ−ＮＭＲ分析からの結果は、Ｍ５の３’−ＦシグナルがδＦ−１３４ｐｐｍにシフトし、Ｍ６のシグナルがδＦ−１３８ｐｐｍにおいて影響を受けないままであるということを示した。これらの結果は、グルクロン化の部位がＭ５に対してはＣ４’−位（フェニル環）であるということと明らかに一致する。Ｃ４’−ＯＨ位におけるグルクロン化を1Ｈ−ＮＭＲ分析により更に確認した。この代謝物のプロトンＮＭＲスペクトルは、Ｈ−５’の顕著なダウンフィールドシフト（ＥＲＢ−０４１におけるδ７．１９ｐｐｍからＭ５におけるδ７．４５ｐｐｍまで）を除いて、ＥＲＢ−０４１のスペクトルと類似していた。加えて、アノマープロトンに一致するδ５．２ｐｐｍのシグナルは代謝物スペクトルにおいても明白であり、グルクロニド構造を更に示すものであった。すべての他のプロトンのケミカルシフトは変わらないままであった。このＨ−５’シグナルはベンゾキサゾール環のすべてのプロトンが影響を受けないままで、ダウンフィールドシフトを受ける唯一のシグナルであるということは、グルクロン化の部位がこのフェニル環の４’−フェノール系基であるということを更に確かなものとする。シグナルの二重のセットがＭ５の1Ｈ−ＮＭＲスペクトルにおいて明白であり、グルクロン酸のβおよびαエピマーと一致するということが特記される。Ｍ５のＲＯＳＥＹスペクトルにおいてＨ−５’を持つグルクロン酸部分のアノマープロトンの間の観察されるＮＯＥは、４’−Ｏ−グルクロニドとして帰属された構造と一致し、これを更に支持するものであった。
【０２６６】
代謝物Ｍ６（ＥＲＢ−０４１−５−グルクロニド）
代謝物のＭ５と類似して、Ｍ６の質量スペクトル分析は、ｍ／ｚ４４８で［Ｍ＋Ｈ］-を示し、ＥＲＢ−０４１モノグルクロニドとしての同一性を確かなものとした。この同一性の更なる支持は、上述のようにｍ／ｚ４７０（［Ｍ＋Ｎａ］+）およびｍ／ｚ２７２（グルクロニド部分の喪失）の存在によるものであった。再び、いかなる識別用質量スペクトルフラグメントも欠如しているために、グルクロン化の個別部位はＬＣ−ＭＳデータのみに基づいて識別不能であった。上述のように、Ｍ６の19Ｆ−ＮＭＲ分析は、Ｍ６の３’−Ｆシグナルがグルクロン化により影響を受けないままであり、δＦ−１３８ｐｐｍのケミカルシフトを呈し、親のＥＲＢ−０４１のケミカルシフト（δＦ−１３８ｐｐｍ）と同一であるということを示した。これらの結果は、グルクロン化の部位がＭ６に対してはＣ５−ＯＨ位（ベンゾキサゾール環）であるということと明らかに一致する。Ｃ−５におけるグルクロン化は1Ｈ−ＮＭＲ分析により更に確認され、Ｈ−４およびＨ−６に対応するプロトンシグナルは親のＥＲＢ−０４１と比較して顕著なダウンフィールドシフトを明らかに起こした。この1Ｈ−ＮＭＲの結果は一致し、グルクロン化の部位がベンゾキサゾール環のＣ５−フェノール性基であるということを更に確認した。
【０２６７】
代謝物Ｍ９（ＥＲＢ−０４１−４’−サルフェート）
代謝物Ｍ９はサルフェート部分の喪失によるｍ／ｚ２７０におけるフラグメントと共にｍ／ｚ３５０において分子イオン［Ｍ−Ｈ］-を示した；それゆえ、Ｍ９はＥＲＢ−０４１−サルフェートであることが確認された。硫酸化はフェノール性基のいずれか（Ｃ−４’、フェニルまたはＣ−５、ベンゾキサゾール環）で起こり得るものであった。しかしながら、いかなる識別用質量スペクトルフラグメントの欠如も、ＬＣ−ＭＳデータに基づく硫酸化の個別の部位の識別を可能とさせるものでなかった。このサルフェート代謝物の一義的な構造的な帰属を更なる19Ｆ−ＮＭＲ分析に基づいて行った。このように、Ｍ９の19Ｆ−ＮＭＲ分析は、ＥＲＢ−０４１のそれに対するδＦ−１３８ｐｐｍと比較してδＦ−１３０ｐｐｍのケミカルシフトのシグナル（３’−Ｆ）を示した。グルクロニドＭ５およびＭ６について上述したように、ここで観察される顕著なダウンフィールドシフトはＣ−４’位におけるサルフェート共役を明らかに示すものである。Ｍ９Ａの３’−Ｆに対して観察されるケミカルシフトがδＦ−１３８ｐｐｍで影響を受けないままである場合に、この帰属を更に確認した。
【０２６８】
代謝物Ｍ９Ａ（ＥＲＢ−０４１−５−サルフェート）
代謝物Ｍ９ＡはＭ９について見られたようにサルフェートの喪失に対応するｍ／ｚ２７０におけるフラグメントと共にｍ／ｚ３５０において分子イオン［Ｍ−Ｈ］-を示した；それゆえ、Ｍ９Ａは直接のＥＲＢ−０４１−サルフェート共役体であることも結論付けられた。Ｍ９のように、Ｃ４’（フェニル）またはＣ５（ベンゾキサゾール）のいずれかが硫酸化に利用可能な部位である。また、いかなる識別用質量スペクトルフラグメントの欠如も、ＬＣ−ＭＳデータに基づく硫酸化の個別の部位の識別を可能とさせるものでなかった。Ｍ９Ａの一義的な構造的な帰属を19Ｆ−ＮＭＲ分析に基づいて行った。ＥＲＢ−０４１と比較して、Ｍ９ＡのδＦに対してはケミカルシフトの変化を観察しなかった。両方の場合、観察されるδＦは−１３８ｐｐｍであり、この結果は遠位のＣ５−ベンゾキサゾールＯＨ基における硫酸化と一致した。
【０２６９】
この特許明細書で挙げた、特許、特許出願および書籍を含む印刷刊行物の各々は、引用により本明細書に全体で組み込まれるということが意図されている。この出願は、２００４年８月２６日に出願され、引用により全体が本明細書に組み込まれている、米国仮出願シリアル番号第６０／６０４，８３５号の優先権の利益を主張する。
【０２７０】
当業者が認識するように、本発明の精神から逸脱せずに、本発明の好ましい実施形態に対して多数の変更および改変を加え得る。このような変形はすべて本発明の範囲内にあるように意図されている。
【国際調査報告】
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