(57)【要約】  ポリマーコーティングは、血液と接触したときに血栓形成が実質的になくなるようになされている。ポリマーコーティングは、第１のポリマー層および第２のポリマー層を含む。第１および第２のポリマー層の間には、酸化窒素供与体および酸化窒素発生剤の少なくとも一方がドープされたポリマー母材層が介在されている。酸化窒素供与体および／または酸化窒素発生剤は、ＮＯを放出しまたは発生することが可能である。生物活性剤は、第２のポリマー層の表面に固定化され、またはポリマー母材層に組み込まれる。
2008510569.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
血管内装置のためのポリマーコーティングであって、
第１のポリマー層と、
第２のポリマー層と、
前記第１および第２のポリマー層の間に介在されたポリマー母材層であって、酸化窒素供与体および酸化窒素発生剤の少なくとも１種でドープされ、前記酸化窒素供与体および前記酸化窒素発生剤の少なくとも一方がＮＯの放出および発生の少なくとも一方を行うことが可能であるポリマー母材層と、
前記第２のポリマー層の表面への固定化、および前記ポリマー母材層への組込みの、少なくとも一方が行われた生物活性剤と
を含み、血液と接触したときに血栓形成が実質的になくなるようになされたことを特徴とするポリマーコーティング。
【請求項２】
前記生物活性剤が、抗凝固剤、抗血小板剤、抗増殖剤、抗菌剤、およびこれらの混合物の少なくとも１種であることを特徴とする請求項１に記載のポリマーコーティング。
【請求項３】
前記生物活性剤が、ヘパリン、ヘパラン、プロスタサイクリン、トロンボモジュリン、およびこれらの混合物の少なくとも１種を含むことを特徴とする請求項１に記載のポリマーコーティング。
【請求項４】
前記第１のポリマー層および第２のポリマー層の少なくとも一方が、ポリ（塩化ビニル）、シリコーンゴム、ポリウレタン、ポリメタクリレート、ポリアクリレート、ポリカプロラクトン、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）、ポリアクリルアミド、これらの共重合体、およびこれらの混合物の少なくとも１種を含むことを特徴とする請求項１に記載のポリマーコーティング。
【請求項５】
前記酸化窒素発生剤が、金属−／金属イオン−含有ポリマー母材であることを特徴とする請求項１に記載のポリマーコーティング。
【請求項６】
前記金属−／金属イオン−含有ポリマー母材が、銅、カルシウム、マグネシウム、コバルト、マンガン、鉄、モリブデン、バナジウム、アルミニウム、クロム、亜鉛、ニッケル、これらのイオン、およびこれらの混合物の少なくとも１種を含むことを特徴とする請求項５に記載のポリマーコーティング。
【請求項７】
前記金属−／金属イオン−含有ポリマー母材が、銅（ＩＩ）ジベンゾ［ｅ，ｋ］−２，３，８，９−テトラフェニル−１，４，７，１０−テトラアザ−シクロドデカ−１，３，７，９−テトラエン、銅（ＩＩ）−シクレンおよびこのポリマー誘導体、リン酸銅、金属銅、およびこれらの混合物を含むことを特徴とする請求項５に記載のポリマーコーティング。
【請求項８】
前記酸化窒素供与体が、離散型酸化窒素付加物およびポリマー状酸化窒素付加物の少なくとも一方であることを特徴とする請求項１に記載のポリマーコーティング。
【請求項９】
前記離散型酸化窒素付加物が、離散型Ｎ−ジアゼニウムジオレート、ニトロソチオール、有機硝酸化合物、金属−ニトロシル、Ｃベースのジアゼニウムジオレート、およびこれらの混合物の少なくとも１種を含むことを特徴とする請求項８に記載のポリマーコーティング。
【請求項１０】
前記離散型Ｎ−ジアゼニウムジオレートが、金属陽イオンによって安定化された陰イオンジアゼニウムジオレート、両性イオンジアゼニウムジオレート、およびこれらの混合物の少なくとも１種を含むことを特徴とする請求項９に記載のポリマーコーティング。
【請求項１１】
前記ポリマー状酸化窒素付加物が、ポリマーベースのＮ−ジアゼニウムジオレートを含むことを特徴とする請求項８に記載のポリマーコーティング。
【請求項１２】
固定化が、共有結合およびイオン結合の少なくとも一方によって実現されることを特徴とする請求項１に記載のポリマーコーティング。
【請求項１３】
血管内装置のためのポリマーコーティングであって、
稠密なポリマー層と、
前記稠密なポリマー層上に配置されたポリマー母材層であって、酸化窒素供与体および酸化窒素発生剤の少なくとも１種でドープされ、前記酸化窒素供与体および前記酸化窒素発生剤の少なくとも一方がＮＯの放出および発生の少なくとも一方を行うことが可能であるポリマー母材層と、
前記ポリマー母材層上に配置されたアミノ化ポリマー層と、
イオン結合および共有結合の少なくとも一方を介して前記アミノ化ポリマー層の表面に固定化された生物活性剤と
を含むことを特徴とするポリマーコーティング。
【請求項１４】
前記生物活性剤が、抗凝固剤、抗血小板剤、抗増殖剤、抗菌剤、およびこれらの混合物の少なくとも１種であることを特徴とする請求項１３に記載のポリマーコーティング。
【請求項１５】
前記生物活性剤が、ヘパリン、ヘパラン、プロスタサイクリン、トロンボモジュリン、およびこれらの混合物の少なくとも１種を含むことを特徴とする請求項１３に記載のポリマーコーティング。
【請求項１６】
前記稠密およびアミノ化ポリマー層の少なくとも一方が、ポリ（塩化ビニル）、シリコーンゴム、ポリウレタン、ポリメタクリレート、ポリアクリレート、ポリカプロラクトン、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）、ポリアクリルアミド、これらの共重合体、およびこれらの混合物の少なくとも１種を含むことを特徴とする請求項１３に記載のポリマーコーティング。
【請求項１７】
前記酸化窒素発生剤が、金属−／金属イオン−含有ポリマー母材であることを特徴とする請求項１３に記載のポリマーコーティング。
【請求項１８】
前記金属−／金属イオン−含有ポリマー母材が、銅、カルシウム、マグネシウム、コバルト、マンガン、鉄、モリブデン、バナジウム、アルミニウム、クロム、亜鉛、ニッケル、これらのイオン、およびこれらの混合物の少なくとも１種を含むことを特徴とする請求項１７に記載のポリマーコーティング。
【請求項１９】
前記金属−／金属イオン−含有ポリマー母材が、銅（ＩＩ）ジベンゾ［ｅ，ｋ］−２，３，８，９−テトラフェニル−１，４，７，１０−テトラアザ−シクロドデカ−１，３，７，９−テトラエン、銅（ＩＩ）−シクレンおよびこのポリマー誘導体、リン酸銅、金属銅、およびこれらの混合物を含むことを特徴とする請求項１７に記載のポリマーコーティング。
【請求項２０】
前記酸化窒素供与体が、離散型酸化窒素付加物およびポリマー状酸化窒素付加物の少なくとも一方であることを特徴とする請求項１３に記載のポリマーコーティング。
【請求項２１】
前記離散型酸化窒素付加物が、離散型Ｎ−ジアゼニウムジオレート、ニトロソチオール、有機硝酸化合物、金属ニトロシル、Ｃベースのジアゼニウムジオレート、およびこれらの混合物の少なくとも１種を含むことを特徴とする請求項２０に記載のポリマーコーティング。
【請求項２２】
前記離散型Ｎ−ジアゼニウムジオレートが、金属陽イオンによって安定化された陰イオンジアゼニウムジオレート、両性イオンジアゼニウムジオレート、およびこれらの混合物の少なくとも１種を含むことを特徴とする請求項２１に記載のポリマーコーティング。
【請求項２３】
前記ポリマー状酸化窒素付加物が、ポリマーベースのＮ−ジアゼニウムジオレートを含むことを特徴とする請求項２０に記載のポリマーコーティング。
【請求項２４】
基材と、
前記基材の表面に付着されたコーティングと
を含み、前記コーティングが、
第１のポリマー層と、
前記第１のポリマー層上に配置されたポリマー母材層であって、離散型酸化窒素付加物およびポリマー状酸化窒素付加物の少なくとも一方がドープされ、前記離散型酸化窒素付加物およびポリマー状酸化窒素付加物の少なくとも一方がＮＯを放出することが可能であるポリマー母材層と、
前記ポリマー母材層上に配置された第２のポリマー層と、
前記第２のポリマー層の表面への固定化、前記第２のポリマー層への組込み、および前記ポリマー母材層への組込みの少なくとも１つが行われた生物活性剤と
を含み、前記ポリマーコーティングが、血液と接触したときに血栓形成が実質的になくなるようになされたことを特徴とする血管内装置。
【請求項２５】
前記生物活性剤が、抗凝固剤、抗血小板剤、抗増殖剤、抗菌剤、およびこれらの混合物の少なくとも１種であることを特徴とする請求項２４に記載の血管内装置。
【請求項２６】
前記生物活性剤が、ヘパリン、プロスタサイクリン、トロンボモジュリン、およびこれらの混合物の少なくとも１種を含むことを特徴とする請求項２４に記載の血管内装置。
【請求項２７】
前記第１および第２のポリマー層の少なくとも一方が、ポリ（塩化ビニル）、シリコーンゴム、ポリウレタン、ポリメタクリレート、ポリアクリレート、ポリカプロラクトン、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）、ポリアクリルアミド、これらの共重合体、およびこれらの混合物を含むことを特徴とする請求項２４に記載の血管内装置。
【請求項２８】
前記離散型酸化窒素付加物が、離散型Ｎ−ジアゼニウムジオレート、ニトロソチオール、有機硝酸化合物、金属ニトロシル、Ｃベースのジアゼニウムジオレート、およびこれらの混合物の少なくとも１種を含む、請求項２４に記載の血管内装置。
【請求項２９】
前記離散型Ｎ−ジアゼニウムジオレートが、金属陽イオンによって安定化された陰イオンジアゼニウムジオレート、両性イオンジアゼニウムジオレート、およびこれらの混合物の少なくとも１種を含むことを特徴とする請求項２８に記載の血管内装置。
【請求項３０】
前記ポリマー状酸化窒素付加物が、ポリマーベースのＮ−ジアゼニウムジオレートを含むことを特徴とする請求項２４に記載の血管内装置。
【請求項３１】
前記生物活性剤が前記ポリマー母材層に組み込まれ、前記第２のポリマー層がプラズマ重合によって形成されないことを特徴とする請求項２４に記載の血管内装置。
【請求項３２】
固定化が、共有結合およびイオン結合の少なくとも一方によって実現されることを特徴とする請求項２４に記載の血管内装置。
【請求項３３】
血管内装置のためのポリマーコーティングであって、
ポリマー層と、
前記ポリマー層上に配置されたポリマー母材層であって、酸化窒素供与体および酸化窒素発生剤の少なくとも一方がドープされ、前記酸化窒素供与体および酸化窒素発生剤の少なくとも一方がＮＯの放出および発生の少なくとも一方を行うことが可能であるポリマー母材層と、
前記ポリマー母材層内に分散された生物活性剤と
を含むことを特徴とするポリマーコーティング。
【請求項３４】
前記生物活性剤が、プロスタサイクリン、ヘパリン、ヘパラン、トロンボモジュリン、およびこれらの混合物の１種であることを特徴とする請求項３３に記載のポリマーコーティング。
【請求項３５】
前記ポリマー母材層上に配置された最上ポリマー層をさらに含むことを特徴とする請求項３３に記載のポリマーコーティング。
【請求項３６】
前記酸化窒素発生剤が、金属−／金属イオン−含有ポリマー母材を含むことを特徴とする請求項３３に記載のポリマーコーティング。
【請求項３７】
前記金属−／金属イオン−含有ポリマー母材が、銅、カルシウム、マグネシウム、コバルト、マンガン、鉄、モリブデン、バナジウム、アルミニウム、クロム、亜鉛、ニッケル、これらのイオン、およびこれらの混合物の少なくとも１種を含むことを特徴とする請求項３６に記載のポリマーコーティング。
【請求項３８】
前記酸化窒素供与体が、離散型酸化窒素付加物およびポリマー状酸化窒素付加物の少なくとも一方を含むことを特徴とする請求項３３に記載のポリマーコーティング。
【請求項３９】
ポリマーコーティングを有する血管内装置を患者に挿入するステップを含む、血栓形成を実質的になくすための方法であって、
前記ポリマーコーティングが、
第１のポリマー層と、
第２のポリマー層と、
前記第１および第２のポリマー層の間に介在されたポリマー母材層であって、酸化窒素供与体および酸化窒素発生剤の少なくとも一方がドープされ、前記化窒素供与体および酸化窒素発生剤の少なくとも一方がＮＯの放出および発生の少なくとも一方を行うことが可能であるポリマー母材層と、
前記第２のポリマー層の表面への固定化、および前記ポリマー母材層への組込みの少なくとも一方がなされた生物活性剤と
を含み、
前記ポリマーコーティングが、血液と接触したときに血栓形成および再狭窄の少なくとも一方が実質的になくなるようになされたことを特徴とする方法。
【請求項４０】
前記酸化窒素発生剤が、金属−／金属イオン−含有ポリマー母材を含むことを特徴とする請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記金属−／金属イオン−含有ポリマー母材が、銅、カルシウム、マグネシウム、コバルト、マンガン、鉄、モリブデン、バナジウム、アルミニウム、クロム、亜鉛、ニッケル、これらのイオン、およびこれらの混合物の少なくとも１種を含むことを特徴とする請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記酸化窒素供与体が、離散型酸化窒素付加物およびポリマー状酸化窒素付加物の少なくとも一方を含むことを特徴とする請求項４０に記載の方法。
【請求項４３】
固定化が、共有結合およびイオン結合の少なくとも一方によって実現されることを特徴とする請求項３９に記載の方法。
【請求項４４】
血管内装置表面にポリマーコーティングを形成するための方法であって、
前記装置表面に第１のポリマー層を確立するステップと、
酸化窒素供与体および酸化窒素発生剤の少なくとも一方をポリマー母材層にドープするステップであって、前記酸化窒素供与体および酸化窒素発生剤の少なくとも一方がＮＯの放出および発生の少なくとも一方を行うことが可能なステップと、
前記第１のポリマー層上に前記ポリマー母材層を確立するステップと、
前記ポリマー母材層上に第２のポリマー層を確立するステップと、
前記第２のポリマー層の表面への固定化、および前記ポリマー母材層への組込みの少なくとも一方を介して、生物活性剤を確立するステップと
を含み、前記ポリマーコーティングは、血液と接触したときに血栓形成が実質的になくなるようになされたことを特徴とする方法。
【請求項４５】
前記ポリマー母材層をドープするステップおよび前記ポリマー母材層を確立するステップが、同時に実施されることを特徴とする請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記ポリマー母材層をドープするステップおよび前記ポリマー母材層を確立するステップが、順次実施されることを特徴とする請求項４４に記載の方法。
【請求項４７】
第１のポリマー層と、
前記第１のポリマー層上に配置された活性層であって、離散型酸化窒素付加物およびポリマー状酸化窒素付加物の少なくとも一方がドープされ、前記離散型酸化窒素付加物およびポリマー状酸化窒素付加物の少なくとも一方がＮＯの放出が可能である活性層と、
前記活性層上に配置された第２のポリマー層と、
前記第２のポリマー層の表面への固定化、前記第２のポリマー層への組込み、および前記活性層への組込みの少なくとも１つがなされた生物活性剤と
を含み、血液と接触したときに血栓形成が実質的になくなるようになされたことを特徴とするポリマーコーティング。
【請求項４８】
前記生物活性剤が、ヘパリン、プロスタサイクリン、トロンボモジュリン、およびこれらの混合物の少なくとも１種を含むことを特徴とする請求項４７に記載のポリマーコーティング。
【請求項４９】
前記離散型酸化窒素付加物が、離散型Ｎ−ジアゼニウムジオレート、ニトロソチオール、有機硝酸化合物、金属ニトロシル、Ｃベースのジアゼニウムジオレート、およびこれらの混合物の少なくとも１種を含むことを特徴とする請求項４７に記載のポリマーコーティング。
【請求項５０】
前記ポリマー酸化窒素付加物が、ポリマーベースのＮ−ジアゾニウムジオレートを含むことを特徴とする請求項４７に記載のポリマーコーティング。
【請求項５１】
前記生物活性剤が前記活性層に組み込まれ、前記第２のポリマー層がプラズマ重合によって形成されないことを特徴とする請求項４７に記載のポリマーコーティング。
【請求項５２】
固定化が、共有結合およびイオン結合の少なくとも一方により実現されることを特徴とする請求項４７に記載のポリマーコーティング。
【請求項５３】
基材と、
前記基材の表面に付着されたコーティングと
を含み、前記コーティングが、
第１のポリマー層と、
前記第１のポリマー層上に配置されたポリマー母材層であって、ＮＯを発生することが可能な酸化窒素発生剤がドープされたポリマー母材層と、
前記ポリマー母材層上に配置された第２のポリマー層と、
前記第２のポリマー層の表面への固定化、前記第２のポリマー層への組込み、および前記ポリマー母材層への組込みの少なくとも１つが行われた生物活性剤と
を含み、前記ポリマーコーティングが、血液と接触したときに血栓形成が実質的になくなるようになされたことを特徴とする血管内装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（連邦政府による資金提供を受けた研究開発の記載）
本発明は、米国国立保健研究所からの助成金により一部支援された研究（グラント番号  １  Ｒ４３  ＨＬ０７２６２４−０１）の過程でなされたものである。米国政府は、本発明に一定の権利を有している。
本発明の実施形態は、生体適合性コーティングと、これを形成し使用する方法を対象とする。
【背景技術】
【０００２】
カテーテルや人工血管、体外循環回路、および化学センサーなどの、広く様々な血液接触装置を構成しまたはコーティングするのに使用されるポリマー材料は、良好な血液適合性を示す材料で作製することができる。しかし、これらの装置に関して常につきまとう問題とは、ある場合に、血液に直接接触したときに生体内で血栓形成応答が誘発される可能性があることである。血液凝固カスケードは、材料表面でのタンパク質吸着によって開始され、その後に、血小板粘着および活性化が続く。次いで一連の凝固因子が、可溶性フィブリノゲンを、活性化血小板を閉じ込めた不溶性フィブリンへと変換し、したがって血栓形成が生ずる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
より血液適合性のあるポリマー材料の開発を目標とした、非常に数多くの手法が検討されている。ある戦略は、血液に接触する装置のポリマー表面に、ヘパリンを固定化することを含む。しかし血栓形成は、完全になくなったわけではない。これは一部には、ポリマー表面のヘパリンの量が、凝固を効果的に防ぐほど適切ではない可能性があること、および／または固定化された化学種が、フィブリン形成の抑制に一般に必要とされる抗トロンビンＩＩＩおよびトロンビンと同時に完全には結合できないことに起因する。さらにヘパリンは、血小板活性を阻害せず、実際に血小板活性をある程度にまですることができる。
【０００４】
血栓形成を減少させまたはなくすための別の手法は、ポリマーにプロスタサイクリン（ＰＧＩ２）をドープすること、またはＰＧＩ２をポリマー表面に固定化することを含む。しかし、これらのドープされたポリマーは、ＰＧＩ２の放出量が不十分であるので、または固定化後に生物学的機能が失われるので、生体内で高い血液適合性を示さない。
高い血液適合性を実現させるため、ポリマー表面を改質しようとするその他の手法が検討されている。これらには、トロンボモジュリン含浸、内皮細胞（ＥＣ）播種、ならびにタンパク質接着および細胞接着抑制が含まれる。これらの異なる手法は全て、様々な成功レベルに到達したが、抗血栓性のポリマー材料をもたらすことができるものは何もない。
【０００５】
酸化窒素（ＮＯ）には、独特の血管拡張特性、癌と闘う能力、抗血小板活性、および抗細胞増殖特性を含めたいくつかの重要な生理学的機能があることも示されている。ＮＯは安定な基であるが、ヘモグロビンおよび酸素との反応性が高く、したがって標的部位へのＮＯの送達を困難にする。実際には、水溶性ＮＯ供与体／付加物またはＮＯ発生剤をＮＯ送達剤として使用して、多くの進歩がもたらされている。例えばジアゼニウムジオール化プロリン（ＰＲＯＬＩ／ＮＯ）は、血液に注入されると筋痙攣を緩和することが示されている。さらに、ジメチレントリアミンジアゼニウムジオレート（ＤＥＴＡ／ＮＯ）は、血管損傷後に細胞の過剰増殖を実質的に抑制し、グリコシル化ジアゼニウムジオレートは抗腫瘍活性を有することが報告されている。
【０００６】
しかし、生体適合性コーティングを形成するために、そのような水溶性ジアゼニウムジオレートおよびその他のＮＯ供与体を疎水性母材と共に使用することは、多くの問題をはらんでいる可能性がある。例えば、シリコーンゴムの母材に分散させた（Ｚ）−１−［Ｎ−メチル−Ｎ−［６−（Ｎ−メチルアンモニオヘキシル）アミノ］］−ジアゼン−１−イウム−１，２−ジオレート（ＭＡＨＭＡ／ＮＯ）は、ある場合に、血管内センサーの表面での血栓形成を防止することができる。同じ化合物は、体外循環回路の内壁のポリマーコーティングに用いたときに、血小板活性を大幅に低下させることができる。しかし、ＭＡＨＭＡ／ＮＯおよびこれに対応するジアミン前駆体は、ポリマー母材の表面から浸出し、ＮＯの酸化的中間体と逆反応して、潜在的に毒性のニトロソアミンを形成する傾向がある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の実施形態は、血液に接触させたときに血栓形成が実質的になくなるように適応させた、ポリマーコーティングを提供することによって、上記列挙された欠点を実質的に解決する。ポリマーコーティングは、第１のポリマー層と第２のポリマー層を含む。第１および第２のポリマー層の間には、酸化窒素供与体および酸化窒素発生剤の少なくとも一方がドープされたポリマー層を介在させている。酸化窒素供与体および／または酸化窒素発生剤は、ＮＯを放出しまたは発生させることが可能である。生物活性剤は、第２のポリマー層の表面に固定化され、またはポリマー母材層に組み込まれる。
【０００８】
本発明の実施形態の目的、特徴、および利点は、以下の詳細な説明および図面を参照することによって明らかにされよう。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
ポリマーコーティングの実施形態は、例えばグラフトやステント、カテーテル、体外循環回路、および化学センサーなどの血管内装置で好都合に使用してもよい。上記にて論じたように、これまでの試みは、血管内装置に関連した血栓形成をなくすようになされてきたが（すなわちＮＯ供与体の組込み）、これらの様々な技法に関連した問題は、依然として克服されていない。
ＮＯ放出またはＮＯ発生コーティングの有効性は、追加の内皮細胞（ＥＣ）剤をこれらのコーティング表面に添加することによって、さらに高めることができる。例えば、血栓症の低減が示されるように、所与のポリマーフィルムに必要とされるＮＯ流束レベルは、適切な相乗剤が表面に結合し（例えばトロンボモジュリン）または表面から放出されるときに（例えばプロスタサイクリン）、低下させることができる。いかなる理論にも拘泥するものではないが、より低い流束を有するエンジニアリングフィルムは、ＮＯの長期放出を有利に可能にし、したがってＮＯの利点を、ＮＯ放出コーティングだけを使用して実現できる場合よりはるかに広げることができると考えられる（この非限定的な例には、親油性ジアゼニウムジオレートによるコーティングが含まれる）。
【００１０】
ポリマーコーティングの実施形態は、全ての健康な血管の内壁を裏打ちする非血栓形成ＥＣを有利に模倣する可能性があり、血管材料の相互作用を抑制する化学表面部分（例えば、低下したタンパク質および細胞接着を示すポリマー表面）を有利に使用する可能性がある。いかなる理論にも拘泥するものではないが、内皮細胞を模倣しかつ相乗的に作用する様々な化学種を有することは、血栓症および狭窄を予防することができると考えられる。ＥＣの非血栓形成および抗細胞増殖特性に寄与する分子には、酸化窒素（ＮＯ）、プロスタサイクリン（ＰＧＩ２）、トロンボモジュリン（ＴＭ）、およびヘパラン硫酸が含まれる。これらの物質を、ポリマー母材中にまたはポリマー母材上に組み込んで、これらの物質がポリマーから放出されるようにまたはポリマー表面に生物学的に活性な形で存在するようにすることによって、実質的に真にバイオミメティックでありかつ機能性に関する結果がＥＣを模倣するものである多機能性コーティングの実施形態が形成される。多機能性ポリマーコーティングの一実施形態には、これら天然に生ずるＥＣ由来の抗血小板、抗凝固子、および／または抗細胞増殖物質の２種以上が含まれる。
【００１１】
したがって、本明細書に記載されるコーティングの実施形態は、血管内装置の留置に関連した長引く血栓症および再狭窄の問題を、実質的に解決する。本明細書で述べるように、ポリマーコーティングの実施形態は、人体の血管を裏打ちする内皮細胞を有利にモデル化するが、この細胞は、例外的な血栓抵抗力を有するものである。いかなる理論にも拘泥するものではないが、酸化窒素供与体からのＮＯ放出（この非限定的な例には、離散型およびポリマー状のジアゼニウムジオレートが含まれる）または発生剤（この非限定的な例には、銅（ＩＩ／Ｉ）イオン−／銅金属−含有ポリマー母材が含まれる）と、ポリマーコーティング中／上の天然に生ずる内皮細胞物質との組合せによって、装置が血液と接触したときの血栓形成を実質的に完全になくすと考えられる。これは、少なくとも一部には、血液の生体適合性が実質的に高められたこと、およびコーティングに使用される材料が原因と考えられる。さらに、コーティングの実施形態は、ＮＯ放出または発生と、再狭窄、血栓症、炎症、および／または同様の症状の予防を支援することができるその他の天然に生じない化学種の薬物送達との組合せを含んでもよい。
【００１２】
本明細書で使用される「ＮＯ供与体」という用語は、一般に、適切な状況に曝されたときに１つまたは複数の化学官能基がＮＯを放出するように、ＮＯ放出部分が共有結合している物質を指す。「ＮＯ発生剤」という用語は、一般に、そこに共有結合しているＮＯ放出部分が存在しない状態で、ＮＯを試薬から直接生成させる物質を指す。
次に図１Ａを参照すると、ポリマーコーティング１０を表面に有する血管内装置１２の実施形態が示されている。グラフト、ステント、カテーテル、体外循環回路、化学センサーなどを含むがこれらに限定することのない、任意の適切な血管内装置１２を使用することができることを理解されたい。
【００１３】
ポリマーコーティング１０は、互いに結合されかつそこに密接に接触している２つ以上の層を含むことができる。様々な疎水性ポリマー材料を、本明細書に開示されるようにコーティング１０の層１４、１６、１８に用いることができる。これらには、ポリ（塩化ビニル）（ＰＶＣ）やシリコーンゴム（ＳＲ）、ポリウレタン（ＰＵ）、ポリメタクリレート、ポリアクリレート、ポリカプロラクトン、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）、ポリアクリルアミド、これらの共重合体、および／またはこれらの混合物などの材料が含まれるが、これらに限定するものではない。層１４、１６、１８のそれぞれは、ポリマー母材でよいことを理解されたい。ポリマー母材は、望み通りに可塑化しても可塑化しなくてもよいことをさらに理解されたい。さらに、外層１６、１８に最適なポリマーは、一般に、例えば共有結合しかつ／または分散したジアゼニウムジオレートタイプＮＯ−付加物からＮＯを放出することが可能なものになる。
【００１４】
実施形態では、層１４（すなわち第１の層）が、装置１２上に確立される。この層１４は、後で形成される層１６、１８内に存在し得る任意の化合物が装置１２に実質的に移動しないように、かつ／またはコーティング１０の層１４、１６、１８同士の接着が実質的に促進するように適応させたポリマー材料を含む。層１４に使用されるポリマー材料の、適切な非限定的な例には、ポリ（塩化ビニル）、ポリ−ｐ−キシキシレン、シリコーンゴム、ポリウレタン、ポリメタクリレート、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）、ポリアクリルアミド、プライマー化合物、およびこれらの混合物が含まれる。層１４は、ポリマー材料の稠密層でよいことを理解されたい。実施形態では、層１４の密度は、約１０オングストロームから約１００マイクロメートルに及ぶ。
【００１５】
ポリマーコーティング１０の実施形態は、さらに、層１４上に配置された活性層１６（すなわちポリマー母材層）を含む。活性層１６は、ポリマー母材材料を含むことができる。ポリマー母材材料は、可塑化できることを理解されたい。ポリマー母材材料の非限定的な例には、可塑化ポリ（ビニル）アルコール、ポリ（塩化ビニル）（ＰＶＣ）、シリコーンゴム（ＳＲ）、ポリウレタン（ＰＵ）、ポリメタクリレート、ポリアクリレート、ポリカプロラクトン、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）、ポリアクリルアミド、これらの共重合体、および／またはこれらの混合物が含まれる。
【００１６】
活性層１６は、ＮＯ供与体／付加物または発生剤２０を含む。ＮＯ供与体またはＮＯ発生剤２０の活性層１６への添加は、装置１２上での活性層１６の確立と同時に、または確立の後に行うことができることを理解されたい。
ある非限定的な実施形態では、ＮＯ発生剤２０が、銅（ＩＩ／Ｉ）イオン／銅金属またはその他の遷移金属イオン−および／または金属を含有するポリマー母材である。適切な金属イオン含有ポリマー母材を形成することができる、その他の金属および／または金属イオンの適切な非限定的な例には、カルシウム、マグネシウム、コバルト、マンガン、鉄、モリブデン、バナジウム、アルミニウム、クロム、亜鉛、ニッケル、その他の遷移金属、これらのイオン、および／またはこれらの混合物が含まれる。銅（ＩＩ／Ｉ）イオン／金属含有ポリマー母材の特定の例には、銅（ＩＩ）ジベンゾ［ｅ，ｋ］−２，３，８，９−テトラフェニル−１，４，７，１０−テトラアザ−シクロドデカ−１，３，７，９−テトラエン（銅（ＩＩ）−ＤＴＴＣＴ）、銅（ＩＩ）−シクレンおよびそのポリマー誘導体、リン酸銅、金属銅など、およびこれらの混合物が含まれるが、これらに限定するものではない。
【００１７】
別の実施形態では、ＮＯ供与体２０が、離散型ＮＯ付加物およびポリマー状ＮＯ付加物から選択される。最適なＮＯ付加物２０は、生理学的条件下で溶液および／または血液にポリマーを曝したときに、ＮＯを自発的に放出することが可能なものであることも理解されたい。ＮＯ付加物２０のいくつかの非限定的な例には、保護されかつ離散したＮ−ジアゼニウムジオレート、ポリマーベースのＮ−ジアゼニウムジオレート、ニトロソチオール、有機硝酸化合物、金属ニトロシル、Ｃベースのジアゼニウムジオレート、および／またはこれらの混合物が含まれる。
【００１８】
ポリマーからのＮＯの自発的な放出は、ＮＯ付加物２０と水性環境との間で生ずる少なくとも１つのプロセスによって支配することができる。これらには、有機ポリマーへの／有機ポリマー内での水またはその他の血液成分の拡散およびイオン化；緩衝イオンとポリマー内のイオンとの間のイオン交換；ＮＯをもたらすためのアミン−窒素含有化合物のプロトン化；有機水酸化アンモニウムをもたらすための第２級アミン部位による、または金属水酸化物をもたらすためのナトリウムまたはその他の金属イオンによる水の脱プロトン化の少なくとも１つが含まれるが、これらに限定するものではない。
【００１９】
本明細書で言及される「離散型ＮＯ付加物」は、小分子にまたはポリマー充填剤（例えば官能化シリカ粒子またはチタン粒子）に共有結合したＮＯ放出部分を有する化合物である。離散型ＮＯ付加物は、一般にポリマーではないことを理解されたい。ポリマー主鎖に共有結合しているＮＯ放出部分を有するこれらの化合物を、一般に「ポリマーＮＯ付加物」と呼ぶ。適切なポリマーＮＯ付加物の非限定的な例には、ジアゼニウムジオール化シリコーンゴム（ＤＡＣＡ／Ｎ２Ｏ２）、ジアゼニウムジオール化メタクリレート、ジアゼニウムジオール化ポリウレタン、ジアゼニウムジオール化ポリ（塩化ビニル）、および／またはこれらの混合物が含まれるが、これらに限定するものではない。一般に、離散型ＮＯ付加物もポリマー状ＮＯ付加物も、そこに結合する保護基がないことを理解されたい。しかし、離散型ＮＯ付加物および／またはポリマー状ＮＯ付加物が良性の保護基を有する実施形態では、保護基が放出されるときに良性の化学種が得られることを理解されたい。さらに、ＮＯ付加物またはポリマー状付加物の良性保護基は、ＮＯ放出の前および／またはＮＯ放出中に除去することができる。さらに、良性ではない保護基を利用する場合、この保護基は、装置装着（例えばＮＯ放出）前に除去されることを理解されたい。
【００２０】
離散型酸化窒素付加物は、ポリマー母材に共有結合することができ、またはポリマー母材中に分散できることをさらに理解されたい。離散型ジアゼニウムジオレートのいくつかの例には、金属陽イオンで安定化させた陰イオンジアゼニウムジオレート、両性イオンジアゼニウムジオレート、および被保護離散型ジアゼニウムジオレート（例えば、Ｏ２で保護された離散型ジアゼニウムジオレート）が含まれるが、これらに限定するものではない。酸化窒素付加物２０（被保護Ｎ−ジアゼニウムジオレートなど）または酸化窒素発生剤２０を組み込んだ実施形態では、被保護酸化窒素付加物２０を、実質的にポリマー母材全体に分散させることができることを理解されたい。
【００２１】
本発明の方法の実施形態は、制御されたＮＯ流束を維持しながら、ＮＯ放出前駆体材料の毒性を実質的に回避する。これは、離散型ジアゼニウムジオレート分子の親油性を増加させることによって、かつ／またはそのような部分をポリマー（例えばシリコーンゴム、メタクリレートベースのポリマーなど）に直接共有結合することによって、実現することができる。そのようなポリマーの耐血栓性は、生体内で試験をしたときに、そのような材料表面での血小板粘着および活性化を著しく低下させた状態で、改善することができる。
【００２２】
ポリマーコーティングの実施形態を調製するのに使用される、ＮＯ供与体２０の非限定的な例は、下式の一般的直鎖構造を有するジアルキルヘキサメチレンジアミン化合物から誘導されたジアゼニウムジオレートであり、
【００２３】
【化１】
2008510569.tif 000003
【００２４】
これによって、下記の一般式を有する対応したＮ−ジアゼニウムジオレート誘導体を形成するものである
【００２５】
【化２】
2008510569.tif 000004
【００２６】
（式中、Ｒは、１個から１２個の炭素原子を有するアルキル基または分枝状側鎖である）。Ｒ基は、その性質が異なってよいことを理解されたい。例えば、１つのＲ基はプロピル基でよく、これに対して別のＲ基はブチル基でよい。実施形態では、Ｒ基が水素でよい。さらに、誘導体のアミン同士の間に存在するメチレンスペーサーは、ｘ＝１からｘ＝６に及んでよい。
ジアゼニウムジオレートを形成するのに使用される親構造の、その他の非限定的な例は、下式の化合物を含有するがこれらに限定することのない、任意の第１級または第２級アミンでよい
【００２７】
【化３】
2008510569.tif 000005
【００２８】
（式中、ＲおよびＲ’は、水素；ｎ−アルキル；分枝状アルキル；脂肪族；環状および／または芳香族アミン側鎖；ケトン；アルデヒド；アミド；エーテル；エステル；アルケン；アルキン；および／またはこれらの混合物；および／または同様のものでよい）。親構造Ａから形成することができるジアゼニウムジオレートの例には、下式の化合物が含まれる。
【００２９】
【化４】
2008510569.tif 000006
【００３０】
親構造Ｂから形成することができるジアゼニウムジオレートの例には、下記の化合物が含まれる。
【００３１】
【化５】
2008510569.tif 000007
【００３２】
非限定的な例として、それぞれのジアゼニウムジオレートを安定化するために、ナトリウムイオンを、構造ａ、ａ’、ｂ、およびｂ’では対イオンとして示す。リチウムやカリウム、銅、および／または同様のもの、および／またはこれらの混合物などその他の金属イオンは、これら化学種を安定させるのに妥当な金属イオンになり得ることを理解されたい。
図示のように、前述のジアミン主鎖を有するジアゼニウムジオレート、または１つのアミン部位を含有する化合物、または３つ以上のアミン部位を含有する化合物は、ポリマーコーティング１０の活性層１６の実施形態で使用することができる。実施形態では、水または比較的高い温度に曝されたとき、ジアゼニウムジオレート種１モルが、ＮＯ（ｇ）２モルと供与体アミン１モルとに容易に解離する。
【００３３】
一実施形態では（図１Ａおよび１Ｂに示されるように）、活性層１６は、ＮＯ供与体または発生剤２０の他に、この層に組み込まれる１種または複数の生物活性剤２２を有することができる。生物活性剤２２は、抗凝固剤、抗血小板剤、抗細胞増殖剤、抗菌剤、抗ウイルス剤、および／またはこれらの混合物でよい。特定の生物活性剤２２には、ヘパリン、ヘパラン、ヘパラン硫酸、プロスタサイクリン、トロンボモジュリン、および／またはこれらの混合物が含まれるが、これらに限定するものではない。この実施形態では、生物活性剤２２を、活性層１６全体に実質的に均一に分散させることができることを理解されたい。実施形態では、生物活性剤２２を活性層１６内に分散させ、活性層１６内から放出させる。
【００３４】
ポリマーコーティング１０の実施形態は、任意選択で、最上層１８（例えば第２のポリマー層）を含む。最上層１８は、活性層１６内に位置付けられた酸化窒素および／またはその他の生物活性剤２２の放出の制御を支援する、障壁層として働くことができる。さらに、最上層１８は、活性層１６が血液に直接曝されないようにすることもできる。最上層１８がないと、ポリマー母材中にドープされた物質（ＮＯ供与体または発生剤２０、および／または生物活性剤２２）が、場合によっては血液と相互に作用する可能性がある（すなわち、ポリマー表面に電荷を形成し、または表面に凝集するなど）。しかし、活性層１６内に分散された生物活性剤２２を有する実施形態では、ＮＯおよび／または生物活性剤２２の放出をこれらが組み込まれるポリマー母材によって制御することができるので、最上層１８を使用しても（図１Ａ）使用しなくてもよい（図１Ｂ）ことを理解されたい。
【００３５】
図示されるように、図１Ｂは、最上層１８のないポリマーコーティング１０の実施形態を示す。非限定的な例では、活性層１６が、ＮＯ供与体２０（例えば離散型またはポリマー状ジアゼニウムジオレート）または発生剤２０と、ポリスタサイクリン（生物活性剤２２として）を含む。放出は、ＮＯ供与体または発生剤２０とプロスタサイクリンが埋め込まれるポリマー母材の組成によって制御することができるので、最上層１８は、この実施例では任意選択で除去することができる。
【００３６】
さらに、ポリマーコーティング１０の代替実施形態は、最上ポリマー層１８全体に任意選択で分散された（図示せず）、生物活性剤２２を含む。この実施形態は、活性層１６全体に分散された、ＮＯ供与体２０（この非限定的な例には、離散型Ｎ−ジアゼニウムジオレートが含まれる）またはＮＯ発生剤２０を含むことができることを理解されたい。
次に図２Ａを参照すると、ポリマーコーティング１０の代替実施形態が開示されている。図示されるように、ポリマーコーティング１０は、最上層１８を含む。生物活性剤２２は、最上層１８の表面に固定化される。最上層１８を介してポリマーコーティング１０の表面に固定化することができる適切な生物活性剤２２には、ヘパリン、ヘパラン、プロスタサイクリン、トロンボモジュリン、およびこれらの混合物が含まれるが、これらに限定するものではない。
【００３７】
生物活性剤２２をポリマーコーティング１０の表面に固定するために、様々な方法を用いることができる。図２Ｂは、生物活性剤２２（例えばヘパリン）の固定化を実施する、２つの代替方法の非限定的な例を示す。代替方法のそれぞれは、まず、選択された生物活性剤２２と共有結合および／またはイオン結合するようになされた表面官能基（例えば、ヘパリンを結合するためのＮＨ２基、またはトロンボモジュリンを結合するためのＣＯＯＨ基）を最上層１８に形成することを含む。実施形態では、生物活性剤２２を、リンカー（この非限定的な例は、トロンボモジュリンとアミノ化表面を結合することができるジイソシアン酸ヘキサメチレン（ＨＭＤＩ）である）を介して表面に結合することができる。図２Ｂに示される実施例では、生物活性剤２２がヘパリンであり、最上層１８は、アミノ化されてＮＨ２基を形成する。一般に、通常の固定化は、生物活性剤２２をアミド結合を介して固定化することにより形成され、固定化の終点は、生物活性剤２２をアミン結合を介して固定化することにより形成される。図２Ｂに示す第１の非限定的な実施例では、ＥＤＣ／ＮＨＳ活性化ヘパリンを、アミド結合を介してアミノ化ＰＶＣ表面に固定化し、それによって固定化を形成し；図２Ｂに示す第２の非限定的な実施例では、ジアゾ化ヘパリンの末端アルデヒド基と、第１級アミンを含む表面とを反応させ、その後、シアノ水素化ホウ素ナトリウムを使用して還元して、アミン結合を介して終点固定化ヘパリンを形成する。生物活性剤２２は、最上層１８の表面にランダムにまたは均一に固定化できることを理解されたい。しかし、これまで述べてきた固定化の実施例のいずれにおいても、生物活性剤２２は一般に、最上層１８上に連続なまたは均一な層を形成しない。
【００３８】
図３Ａは、装置１２の内面に確立されたポリマーコーティング１０の実施形態の上面図である。図示されるように、ポリマーコーティング１０は、装置１２の内面に直接確立された層１４と、隣接して確立されたポリマー母材層１６と、コーティング１０に外面をもたらすように確立された最上層１８を含む。
図３Ｂは、装置１２の外面に確立された、ポリマーコーティング１０の代替実施形態の上面図である。図示されるように、ポリマーコーティング１０は、装置１２の外面に直接確立された層１４と、隣接して確立されたポリマー母材層１６と、コーティング１０に外面がもたらされるように確立された最上層１８とを含む。
【００３９】
本明細書に記載されるポリマーコーティング１０の実施形態は、他の１種の抗凝固剤または抗血小板剤と組み合わせたＮＯ供与体／発生剤に限定されないことを理解されたい。ＮＯ供与体／発生剤は、２種以上のその他の抗凝固剤および／または抗血小板剤と組み合わせて使用することができる（この非限定的な例には、ＮＯ＋ヘパリン＋プロスタサイクリン；ＮＯ＋ヘパラン＋トロンボモジュリン；ＮＯ＋プロスタサイクリン＋トロンボモジュリン、ＮＯ＋ヘパリン＋プロスタサイクリン＋トロンボモジリンなどが含まれる）。
【００４０】
さらに、層１４、１６、１８のそれぞれは、堆積用にポリマー／溶媒混合物を使用する任意の適切な技法によって確立することができる。そのような技法の、いくつかの非限定的な例には、スピンコーティング、ディップコーティング、スプレイコーティング、フローコーティング、エレクトロコーティングなどが含まれる。使用することができるその他の技法には、化学気相成長法（ＣＶＤ）、およびプラズマ重合法が含まれる。しかし、ＣＶＤおよびプラズマ重合技法は、一般に、活性層１６を堆積するのに望ましくないことを理解されたい。さらに、プラズマ重合は、堆積の結果として反応性副産物が形成される可能性があるので、一般に最上層１８を堆積するのに望ましくない。
（実験）
ＮＯ供与体をドープしたヘパリン固定化ポリマーフィルム。ヘパリンは、１つの理由として、抗トロンビンＩＩＩとのこの２成分複合体が、最終的にはフィブリノゲンをフィブリンに変換するのに望ましい２種のプロテアーゼである第Ｘａ因子およびトロンビンの両方に結合し、かつ阻害するという理由により、広く使用される阻害剤である。
【００４１】
ＰＶＣチュービングの内壁（またはＳＲカテーテルスリーブの外面）を、ＰＶＣ層（４４ｍｇ／ｍＬ、ＴＨＦ中）でコーティングし、その後、ＮＯ供与体（Ｎ，Ｎ−ジブチルヘキサメチレンジアミンジアゼニウムジオレートまたはポリマーベースのＮＯ供与体）をドープした可塑化ＰＶＣ層（１３３ｍｇのポリ（塩化ビニル）、６６ｍｇのセバシン酸ジオクチル（ＤＯＳ）、および１５．７ｍｇのＫＴｐＣｌＰＢを、ＴＨＦ  ３〜４ｍＬ中に溶かしたもの）でコーティングし、最後にアミノ化ＰＶＣトップコーティング（４４ｍｇ／ｍＬ、ＴＨＦ中）でコーティングした。ＮＯ供与体の量ならびにＰＶＣ／ＤＯＳ比は、所望の適用例に応じて変えてよい。アミノ化ＰＶＣは、（Ａ）ＰＶＣと、アミノ基でキャップされた１，６−ジアミノヘキサンや１，１２−ジアミノドデカン、またはポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）などの様々なジアミンとを反応させることによって、あるいは（Ｂ）ＥＤＣ／ＮＨＳ（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩）およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド）で予備活性化したカルボキシル化ＰＶＣと、上記にて示した様々なジアミンとを反応させることによって、合成することができる。ヘパリンは、（Ａ）ＥＤＣ／ＮＨＳ活性化による固定化または（Ｂ）ＮａＢＨ３ＣＮ還元を使用した終点固定化を介して、装置表面に共有結合により固定化した（図２Ｂも参照）。
【００４２】
（Ａ）アミノ化ＰＶＣでコーティングされたＰＶＣチュービング（またはＳＲカテーテルスリーブ）を、ＭＥＳ−緩衝液（０．０５Ｍ、ｐＨ５．６）で約３０分間平衡にした。ヘパリン（Ｈｅｐ−ＣＯＯＨ）のカルボン酸基を、ＥＤＣ（カルボジイミド）およびＮＨＳ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド）をＭＥＳ−緩衝液中に溶かしたものを使用して活性化した。約１０分間予備活性化した後、コーティングされたＰＶＣチュービングをＥＤＣ／ＮＨＳ活性化ヘパリン溶液に添加した。約２時間の反応後、ヘパリン化したチュービングの内壁（またはＳＲカテーテルスリーブの外面）を、０．１Ｍ  Ｎａ２ＨＰＯ４、４Ｍ  ＮａＣｌ、および蒸留水で洗浄した。ヘパリン化した表面を、そこに窒素フラッシュすることによって素早く乾燥した。
【００４３】
（Ｂ）アミノ化ＰＶＣでコーティングされたＰＶＣチュービング（またはＳＲカテーテルスリーブ）と、ジアゾ化ヘパリン（１０ｍｇ／ｍＬ）とを、５０℃で約２時間、ＮａＢＨ３ＣＮ（１ｍｇ／ｍＬ）の存在下で反応させた。溶液のｐＨを、ＮａＯＨ／ＨＣｌを使用して３．５に調節した。反応後、ヘパリン化チュービングの内壁（またはＳＲカテーテルスリーブの外面）を、０．１Ｍ  Ｎａ２ＨＰＯ４、４Ｍ  ＮａＣｌ、蒸留水で洗浄した。ヘパリン化した表面を、そこに窒素をフラッシュすることによって素早く乾燥した。
【００４４】
ＮＯの放出を、各固定化中および各固定化後に測定した。コーティングの表面ＮＯ放出は、表面に結合したヘパリンによって妨げられず、表面ＮＯ流束は、少なくとも２４時間、１０×１０−１０モル・ｃｍ−２・分−１よりも高く維持できることがわかった（図４および５）。図５は、ヘパリン固定化から２時間後のＮＯ流束を示す、インサートブローアップグラフを示す。表面に結合したヘパリンを、抗第Ｘａ因子アッセイで評価し、抗凝固活性が示された（０．１〜１００ｍＩＵ／ｃｍ−２ポリマー表面）。
【００４５】
いくつかの実施形態について詳細に述べてきたが、開示された実施形態を修正できることが、当業者に明らかにされよう。したがって前述の記載事項は、限定ではなく例示と見なすべきである。
【図面の簡単な説明】
【００４６】
【図１Ａ】基材上のポリマーコーティングの実施形態を示す、やや概略的な図である。
【図１Ｂ】基材上のポリマーコーティングの代替実施形態を示す、やや概略的な図である。
【図２Ａ】基材上のポリマーコーティングの代替実施形態を示す、やや概略的な図である。
【図２Ｂ】固定化された生物活性剤の、代替実施形態を示す図である。
【図３Ａ】基材内面のポリマーコーティングの実施形態を示す、やや概略的な上面図である。
【図３Ｂ】基材外面のポリマーコーティングの代替実施形態を示す、やや概略的な上面図である。
【図４】ヘパリン固定化中およびヘパリン固定化後に、ＫＴｐＣｌＰＢおよび４％ＤＢＨＤ／ＮＯに組み込まれた可塑化ＰＶＣでコーティングされ、かつＰＶＣ−ＮＨ２でトップコーティングされたＳＲカテーテルスリーブ（ｄ＝０．１ｃｍ、ｈ＝２．５ｃｍ）から発生したＮＯ表面流束を示すチャートである（Ａ−ＰＶＣ：ＤＯＳ＝１：２のトップコーティング、Ｂ−ＰＶＣ：ＤＯＳ＝１：１のトップコーティング、Ｃ−ＰＶＣ：ＤＯＳ＝２：１のトップコーティング；ａ−２５℃でＭＥＳと平衡、ｂ−２５℃でＭＥＳ中のＨｅｐ／ＥＤＣ／ＮＨＳと反応、ｃ−２５℃でＮａ２ＨＰＯ４で洗浄、ｄ−２５℃で４Ｍ  ＮａＣｌで洗浄、ｅ−２５℃で水で洗浄、ｆ−３７℃でＰＢＳ中に浸漬；Ａ（ａ＋ｂ＋ｃ＋ｄ＋ｅ）＝全ＮＯの約５％、Ｂ（ａ＋ｂ＋ｃ＋ｄ＋ｅ）＝全ＮＯの約２％、およびＣ（ａ＋ｂ＋ｃ＋ｄ＋ｅ）＝全ＮＯの１％未満）。
【図５】ヘパリン固定化中およびヘパリン固定化後に、ＫＴｐＣｌＰＢおよび４％ＤＢＨＤ／Ｎ２Ｏ２に組み込まれた可塑化ＰＶＣでコーティングされ、かつＰＶＣ−ＮＨ２でトップコーティングされた、ＳＲカテーテルスリーブ（ｄ＝０．１ｃｍ、ｈ＝２．５ｃｍ）から発生したＮＯ表面流束を示すチャートである（Ａ−−−ＰＶＣ：ＤＯＳ＝１：１のトップコーティング、Ｂ−−−ＰＶＣ：ＤＯＳ＝２：１のトップコーティング；ａ−５０℃でＨｅｐ−ＣＨＯ（ｐＨ＝３．５）を固定化、ｂ−３７℃でＰＢＳに浸漬；Ａ（ａ）＝全ＮＯの約２７％、およびＢ（ａ）＝全ＮＯの約１２％）。
【図１Ａ】
2008510569.tif 000008
【図３Ｂ】
2008510569.tif 000009
【図４】
2008510569.tif 000010
【図５】
2008510569.tif 000011
【図１Ｂ】
2008510569.tif 000012
【図２Ａ】
2008510569.tif 000013
【図２Ｂ】
2008510569.tif 000014
【図３Ａ】
2008510569.tif 000015
【手続補正書】
【提出日】平成19年7月13日(2007.7.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリマーコーティングであって、
第１のポリマー層と、
第２のポリマー層と、
前記第１および第２のポリマー層の間に介在されたポリマー母材層であって、酸化窒素供与体または酸化窒素発生剤を含むポリマー母材層と、
を含み、血液と接触したときに血栓形成が実質的になくなるようになされたことを特徴とするポリマーコーティング。
【請求項２】
生物活性剤をさらに含むことを特徴とする請求項１に記載のポリマーコーティング。
【請求項３】
前記生物活性剤が、抗凝固剤、抗血小板剤、抗増殖剤、抗菌剤、およびこれらの混合物から選択されたことを特徴とする請求項２に記載のポリマーコーティング。
【請求項４】
前記生物活性剤が、ヘパリン、ヘパラン、プロスタサイクリン、トロンボモジュリン、およびこれらの混合物から選択されたことを特徴とする請求項２に記載のポリマーコーティング。
【請求項５】
前記第１のポリマー層および第２のポリマー層の少なくとも一方が、ポリ（塩化ビニル）、シリコーンゴム、ポリウレタン、ポリメタクリレート、ポリアクリレート、ポリカプロラクトン、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）、ポリアクリルアミド、これらの共重合体、およびこれらの混合物から独立して選択されたことを特徴とする請求項１乃至４のうちいずれか１項に記載のポリマーコーティング。
【請求項６】
前記酸化窒素発生剤が、金属−／金属イオン−含有ポリマー母材であることを特徴とする請求項１乃至５のうちいずれか１項に記載のポリマーコーティング。
【請求項７】
前記酸化窒素発生剤が、銅、カルシウム、マグネシウム、コバルト、マンガン、鉄、モリブデン、バナジウム、アルミニウム、クロム、亜鉛、ニッケル、これらのイオン、およびこれらの混合物の少なくとも１種を含むことを特徴とする請求項１乃至５のうちいずれか１項に記載のポリマーコーティング。
【請求項８】
前記酸化窒素発生剤が、銅（ＩＩ）ジベンゾ［ｅ，ｋ］−２，３，８，９−テトラフェニル−１，４，７，１０−テトラアザ−シクロドデカ−１，３，７，９−テトラエン、銅（ＩＩ）−シクレンおよびこのポリマー誘導体、リン酸銅、金属銅、およびこれらの混合物を含むことを特徴とする請求項１乃至５のうちいずれか１項に記載のポリマーコーティング。
【請求項９】
前記酸化窒素供与体が、離散型酸化窒素付加物およびポリマー状酸化窒素付加物の少なくとも一方であることを特徴とする請求項１または２に記載のポリマーコーティング。
【請求項１０】
前記離散型酸化窒素付加物が、Ｎ−ジアゼニウムジオレート、ニトロソチオール、有機硝酸化合物、金属−ニトロシル、Ｃベースのジアゼニウムジオレート、およびこれらの混合物から選択されたことを特徴とする請求項９に記載のポリマーコーティング。
【請求項１１】
前記Ｎ−ジアゼニウムジオレートが、金属陽イオンによって安定化された陰イオンジアゼニウムジオレート、両性イオンジアゼニウムジオレート、およびこれらの混合物から選択されたことを特徴とする請求項１０に記載のポリマーコーティング。
【請求項１２】
前記ポリマー状酸化窒素付加物が、ポリマーベースのＮ−ジアゼニウムジオレートを含むことを特徴とする請求項９に記載のポリマーコーティング。
【請求項１３】
前記生物活性剤が、前記第２のポリマー層の表面に固定化されていることを特徴とする請求項２に記載のポリマーコーティング。
【請求項１４】
前記生物活性剤が、ポリマー母材層に組み込まれていることを特徴とする請求項２に記載のポリマーコーティング。
【請求項１５】
固定化が、共有結合およびイオン結合の少なくとも一方によって実現されることを特徴とする請求項１３に記載のポリマーコーティング。
【請求項１６】
前記第２のポリマー層が、生物活性剤を含んでいることを特徴とする請求項１、２乃至１２及び１５のうちいずれか１項に記載のポリマーコーティング。
【請求項１７】
ポリマーコーティングであって、
第１のポリマー層と、
前記第１のポリマー層上に配置されたポリマー母材層であって、酸化窒素供与体および酸化窒素発生剤の少なくとも１種を含むポリマー母材層と、
前記ポリマー母材層上に配置されたアミノ化ポリマー層と、
生物活性剤と
を含むことを特徴とするポリマーコーティング。
【請求項１８】
前記生物活性剤が、抗凝固剤、抗血小板剤、抗増殖剤、抗菌剤、およびこれらの混合物の少なくとも１種であることを特徴とする請求項１７に記載のポリマーコーティング。
【請求項１９】
前記生物活性剤が、ヘパリン、ヘパラン、プロスタサイクリン、トロンボモジュリン、およびこれらの混合物から選択されたことを特徴とする請求項１７又は１８に記載のポリマーコーティング。
【請求項２０】
前記第１およびアミノ化ポリマー層の少なくとも一方が、ポリ（塩化ビニル）、シリコーンゴム、ポリウレタン、ポリメタクリレート、ポリアクリレート、ポリカプロラクトン、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）、ポリアクリルアミド、これらの共重合体、およびこれらの混合物から独立して選択されたことを特徴とする請求項１７乃至１９のうちいずれか１項に記載のポリマーコーティング。
【請求項２１】
前記酸化窒素発生剤が、金属−／金属イオン−含有ポリマー母材であることを特徴とする請求項１７乃至２０のうちいずれか１項に記載のポリマーコーティング。
【請求項２２】
前記酸化窒素発生剤が、銅、カルシウム、マグネシウム、コバルト、マンガン、鉄、モリブデン、バナジウム、アルミニウム、クロム、亜鉛、ニッケル、これらのイオン、およびこれらの混合物の少なくとも１種を含むことを特徴とする請求項１７乃至２０のうちいずれか１項に記載のポリマーコーティング。
【請求項２３】
前記酸化窒素発生剤が、銅（ＩＩ）ジベンゾ［ｅ，ｋ］−２，３，８，９−テトラフェニル−１，４，７，１０−テトラアザ−シクロドデカ−１，３，７，９−テトラエン、銅（ＩＩ）−シクレンおよびこのポリマー誘導体、リン酸銅、金属銅、およびこれらの混合物を含むことを特徴とする請求項１７乃至２０のうちいずれか１項に記載のポリマーコーティング。
【請求項２４】
前記酸化窒素供与体が、離散型酸化窒素付加物およびポリマー状酸化窒素付加物の少なくとも一方であることを特徴とする請求項１７に記載のポリマーコーティング。
【請求項２５】
前記離散型酸化窒素付加物が、離散型Ｎ−ジアゼニウムジオレート、ニトロソチオール、有機硝酸化合物、金属ニトロシル、Ｃベースのジアゼニウムジオレート、およびこれらの混合物から選択されたことを特徴とする請求項２４に記載のポリマーコーティング。
【請求項２６】
前記離散型Ｎ−ジアゼニウムジオレートが、金属陽イオンによって安定化された陰イオンジアゼニウムジオレート、両性イオンジアゼニウムジオレート、およびこれらの混合物から選択されたことを特徴とする請求項２５に記載のポリマーコーティング。
【請求項２７】
前記ポリマー状酸化窒素付加物が、ポリマーベースのＮ−ジアゼニウムジオレートを含むことを特徴とする請求項２４に記載のポリマーコーティング。
【請求項２８】
請求項１乃至２７のうちいずれか１項に記載のポリマーコーティングを含むことを特徴とする装置。
【請求項２９】
ポリマーコーティングを有する血管内装置を患者に挿入するステップを含む、血栓形成を実質的になくすための方法であって、
前記ポリマーコーティングが、
第１のポリマー層と、
第２のポリマー層と、
前記第１および第２のポリマー層の間に介在されたポリマー母材層であって、酸化窒素供与体または酸化窒素発生剤を含むポリマー母材層と、
を含み、前記ポリマーコーティングが、血液と接触したときに血栓形成および再狭窄の少なくとも一方が実質的になくなるようになされたことを特徴とする方法。
【請求項３０】
血管内装置表面にポリマーコーティングを形成するための方法であって、
前記装置表面に第１のポリマー層を確立するステップと、
酸化窒素供与体および酸化窒素発生剤の少なくとも一方をポリマー母材層にドープするステップと、
前記第１のポリマー層上に前記ポリマー母材層を確立するステップと、
前記ポリマー母材層上に第２のポリマー層を確立するステップと、
前記第２のポリマー層の表面への固定化、および前記ポリマー母材層への組込みの少なくとも一方を介して、生物活性剤を確立するステップと
を含み、前記ポリマーコーティングは、血液と接触したときに血栓形成が実質的になくなるようになされたことを特徴とする方法。
【国際調査報告】
2008510569.tif 000016