(57)【要約】  創傷治癒促進に使用されるフェノチアジニウム化合物、組成物及び医薬、並びに、フェノチアジニウム化合物を創傷部位又は皮膚に適用又は投与し、任意に、創傷部位又は皮膚を光に曝すことによって、創傷の治癒を促進し、或いは美容用用途に使用する方法である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
創傷治癒を促進するために使用されるフェノチアジニウム化合物であって、該フェノチアジニウム化合物が式（１）で表され、
【化１】
2008513424.tif 000008
ここで、
Ｒ1−Ｒ6の各々は独立に、Ｈ、置換されていてもよいＣ1-6アルキル基、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、及びＩから選ばれたものであり、
Ａ及びＢの各々は独立に、次のものから選ばれ、
【化２】
2008513424.tif 000009
ここで、
Ｑは、Ｈ及び置換されていてもよいＣ1-4アルキル基から選ばれ、
Ｚは、Ｃ（Ｒa）2、Ｏ、Ｓ、Ｓ０2、ＮＲaから選ばれ、Ｒaの各々は、Ｈ及び置換されていてもよいＣ1-4アルキル基から選ばれ、
Ｒ7及びＲ8の各々は独立に、Ｈ及び置換されていてもよいＣ1―6アルキル基から選ばれ、
Ｙは、カウンターアニオンであり、
ｐは、１、２又は３である、フェノチアジニウム化合物。
【請求項２】
創傷治癒薬剤として使用するための請求項１に記載された式（１）の化合物。
【請求項３】
請求項１に記載された式（１）の化合物と、薬剤として許容できる希釈剤又は賦形剤とを含む創傷治癒薬剤。
【請求項４】
創傷治癒促進のための医薬の製造における請求項１に記載された式（１）による化合物の使用。
【請求項５】
式（１）の化合物と、薬剤として許容できる希釈剤又は賦形剤とからなる創傷治癒薬剤。
【請求項６】
希釈剤又は賦形剤とともに式（１）のフェノチアジニウム化合物を含む、創傷治癒促進に使用するための組成物。
【請求項７】
請求項１に記載された式（１）のフェノチアジニウム化合物を、創傷部位に適用又は投与し、任意に、創傷部位を光に曝すことにより創傷治癒を促進する方法。
【請求項８】
請求項７に記載した方法であって、
ａ）式（１）の化合物を含む混合物又は医薬を準備し、
ｂ）該混合物又は医薬の有効量を、治療すべき創傷部位に適用又は投与し、
ｃ）任意に、創傷領域を光に曝す、
ことからなる方法。
【請求項９】
皮膚の若返り及び肥厚化、瘢痕の減少及びアザ除去のための美容目的の方法であって、
ａ）請求項１に記載された式（１）の化合物を含む組成物を準備し、
ｂ）該組成物の有効量を治療すべき領域に適用又は投与し、
ｃ）任意に、創傷領域を光に曝す、
ことからなる方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、創傷治療、ある種の複素環式化合物及び組成物並びにそれを含む薬剤を、創傷治癒の方法及び美容用途に使用することに関する。
【背景技術】
【０００２】
常習的な創傷及び鋭利な創傷が治癒する速度は、多くの要因（外因的、内因的）及び種々の医療条件によって遅らされるか、又は損なわれることがある。例として、感染、潰瘍、特に糖尿病による潰瘍、血管疾患に伴う循環器系の問題、栄養不良、ストレス、癌の放射線療法及び／又は化学療法、或いは免疫系の弱体化又は正常な老化過程による弱体化がある。 現在のところ、創傷治癒を促進する、治療上及び美容上の手法に対する明らかな必要性がある。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
ここで、これらの問題に対処し、創傷の治癒を促進する基礎を提供する化合物、方法、及び組成物／医薬が特定された。
【０００４】
本発明によれば、創傷治療の促進のために使用される式（１）のフェノチアジニウム化合物が提供され、ここで、該フェノチアジニウム化合物は式（１）で表され、
【０００５】
【化１】
2008513424.tif 000002
【０００６】
ここで、
Ｒ1−Ｒ6の各々は独立に、Ｈ、置換されていてもよいＣ1-8アルキル基、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、及びＩから選ばれたものであり、Ａ及びＢの各々は独立に、次のものから選ばれ、
【０００７】
【化２】
2008513424.tif 000003
【０００８】
ここで、
Ｑは、Ｈ及び置換されていてもよいＣ1-8アルキル基から選ばれ、
Ｚは、Ｃ（Ｒａ）2、Ｏ、Ｓ、Ｓ０2、ＮＲaから選ばれ，Ｒaの各々は、Ｈと任意で置換したＣ1-8アルキル基から選ばれ、
Ｒ7及びＲ8の各々は独立に、Ｈ及び置換されていてもよいＣ1-8アルキル基から選ばれ、
Ｙはカウンターアニオンであり、
ｐは１、２、又は３である。
Ｒ1−Ｒ8、Ｒａ又はＱのいずれか１つが置換されていてもよいアルキル基である場合には、この任意の置換基は、特にＰｈであることが好ましいアリール、 Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、特にＯＣＨ3、ＯＣ2Ｈ5、ＯＣ3Ｈ7であることが好ましいＯＣ1-4アルキル基、ＣＮ、特にＯＣＯＣＨ3であることが好ましいＯＣＯＣ1-4アルキル基、特にシクロヘキシル、メチルで置換されたシクロヘキシル、シクロペンチル、及びメチルで置換されたシクロペンチルであることが好ましい置換されていてもよいＣ3-6シクロアルキル、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＣ1-4アルキル基、Ｓ０3Ｈから選ばれることが好ましい。
Ｒ1−Ｒ8、Ｒa又はＱによって表されるアルキル基は、直鎖又は分鎖であり、任意にＣ−Ｃ二重結合又は三重結合を含むものとすることができる。
Ｒ1−Ｒ6の各々は独立に、Ｈ、ＣＨ3、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、及びＩから選ぶことが好ましい。
Ａ及びＢの両方がＮＲ7Ｒ8である場合には、Ｒ7及びＲ8の各々は独立に、Ｈと、任意にＰｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ3、ＯＣ2Ｈ5、ＯＣ3Ｈ7、ＣＮ、ＯＣＯＣＨ3、シクロヘキシル、メチルで置換されたシクロヘキシル、シクロペンチル、及びメチルで置換されたシクロペンチルにより置換されたＣ1-6アルキル基から選ばれることが好ましい。
ＱはＨ又はＣＨ3であることが好ましい。
Ｚは、ＣＨ2、Ｏ、Ｓ、Ｓ０2、ＮＨ、ＮＣＨ3、ＮＣ2Ｈ5、ＮＣＨ2ＣＨ2０Ｈ、及びＮＣＯＣＨ3から選ぶことが好ましい。
Ｒaは、Ｈ、ＣＨ3、Ｃ2Ｈ5、ＣＨ2ＣＨ2０Ｈ、及びＣＯＣＨ3から選ぶことが好ましい。
Ｙは、有機又は無機のカウンターアニオンとすることができ、Ｆ-、Ｂｒ-、Ｃｌ-、Ｉ-、Ｎ０3-、ＳＣＮ-、Ｃｌ０3-、Ｃｌ０4-、Ｉ０3-、ＢＦ4-、ＨＳ０4-、Ｈ2Ｐ０4-、ＣＨ3Ｓ０4-、Ｎ3-、Ｓ０42-、ＨＰ０42-、Ｐ０4-、酢酸塩、乳酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、グリコール酸塩、グリセラート、グルタミン酸塩、Ｐ−ヒドロキシグルタミン酸塩、グルクロン酸塩、グルコン酸塩、リンゴ酸塩、及びアスパラギン酸塩から選ぶことが好ましい。
【０００９】
式（１）の化合物において、Ａ及びＢの一方又は両方が
【００１０】
【化３】
2008513424.tif 000004
【００１１】
である場合には、Ｒ7及びＲ8の一方又は両方は、これに結合される窒素原子とともに、置換されていてもよい５、６、又は７員環を形成することができる。
式（１）の化合物において、Ｒ1とＲ2の群、及び／又は、Ｒ４とＲ５の群は、これらに結合している炭素分子とともに、置換されていてもよい５、６、又は７員環を形成することができる。
Ｒ7とＲ8の一方又は両方とこれらに結合した窒素原子とにより形成される環、及び、Ｒ1とＲ2の群、及び／又は、Ｒ4とＲ5の群とこれらに結合した炭素原子とにより形成される環は、飽和又は不飽和のものとすることができる。
Ｒ7及びＲ8とこれらに結合した窒素原子とにより形成された、置換されていてもよい５、６、又は７員環のための任意の置換基、及び、Ｒ1とＲ2の群、及び／又は、Ｒ4とＲ5の群とこれらに結合した窒素原子とにより形成された、置換されていてもよい５、６、又は７員環のための任意の置換基は、Ｒ1について上記した置換基のいずれからでも選ぶことができる。
メチレンブルーとその環置換誘導体、及びトルイジンブルーは、式（１）の化合物から除外することが好ましい。
【００１２】
本発明の一つの特徴によれば、式（１）の化合物が創傷治療薬剤として提供される。
【００１３】
本発明の一つの特徴によれば、式（１）の化合物と薬剤として許容できる希釈剤又は賦形剤とからなる創傷治療薬剤が提供される。
【００１４】
本発明はまた、式（１）のフェノチアジニウム化合物を希釈剤又は賦形剤とともに含む、創傷治療を促進するために使用される配合物、好ましくは薬剤配合物を提供する。
【００１５】
本発明の更に別の特徴によれば、式（１）の化合物を、創傷治療促進のための医薬の製造に使用することが提示される。
【００１６】
医薬は、局所的又は体系的使用のための形態とすることができ、好ましくは局所的な使用のための形態にする。
【００１７】
医薬は局所的に投与することが好ましく、更に好ましくは、クリーム、懸濁物、乳液、ゲル、軟膏、スティック、石けん、ペーストとして、又は式（１）の化合物又は式（１）の化合物を含む組成物又は医薬を含浸させた包帯などの抗菌包帯により投与する。
【００１８】
本発明によって提供される創傷治癒のための薬剤、組成物、及び医薬は、式（１）の２又はそれ以上の異なる化合物の混合物からなるものとすることができ、それらはまた、一又はそれ以上の異なる治療用薬剤又は活性薬剤を更に含むことができる。
本発明の更に別の特徴によれば、常習的な創傷及び鋭利な創傷の両方に対して、式（１）のフェノチアジニウム化合物を創傷部位に適用し、又は投与し、任意に創傷部位を光に曝すことによって、創傷治癒を促進する方法が提供される。
【００１９】
更に特定的には、創傷治癒を促進するための方法は、以下のステップ、すなわち、
ａ）式（１）の化合物を含む組成物又は医薬を準備し、
ｂ）該組成物又は医薬の有効量を、治療すべき創傷部位に適用又は投与し、
ｃ）任意に、創傷部位を光に曝す
ステップを含む。
【００２０】
本発明の化合物、組成物、創傷治療薬剤、及び医薬は、組織の一体性が損傷したものであれば、どのような状態のものでも治療するために使用することができ、したがって、常習的な創傷及び鋭利な創傷、結合組織の創傷及び筋肉の創傷、骨及び神経組織の創傷にも使うことができる。
【００２１】
創傷は、限定的な意味ではないが、以下のもの、すなわち、手術創、噛み傷、火傷、酸及びアルカリによる火傷、低温火傷（凍傷）、日焼け、小さな切り傷、大きな切り傷、擦り傷、裂傷、発砲又はナイフによる創傷、先天性疾患による創傷、 口腔外科手術に起因する創傷、歯周病、外傷性障害による創傷、原発腫瘍と関連する悪性の皮膚潰瘍又は転移に分類することができる腫瘍を伴う創傷、潰瘍、脚部潰瘍、足部潰瘍、床ずれと角膜の創傷を含む。
【００２２】
創傷は、鋭利な病因又は常習性の病因のいずれかの病因によって分類することができる。鋭利な創傷は、無傷の皮膚に対する外部からの損傷が原因となるもので、手術創、噛み傷、火傷、切り傷及び擦り傷、並びに、もっと神経に障る外傷、例えば裂傷、及び、圧潰や銃撃による創傷のようなものを含む。
常習性の創傷は、究極的には真皮又は上皮の組織の一体性を弱めることになる病原的状態に関連する内因的なメカニズムによって、最も頻繁に起こる。 脚部潰瘍、足部潰瘍、及び床ずれなどの常習性創傷を形成する傾向がある病態生理異常としては、動脈血流障害（末梢血管疾患）又は静脈血流障害（静脈の高血圧症）、及び糖尿病などの病気の結果として現われる組織灌流の弱体化がある。 老化、肥満、喫煙、栄養不足、及び病気（例えばエイズ）関連か、又は薬物（例えば、化学療法又は放射線療法）免疫抑制はまた、常習性の潰瘍を助長することになる。
圧力又は床ずれによる潰瘍は、最も一般的に臀部、仙骨、及びかかとにおいて持続的に加わる外皮への圧力によるという点で、ほかの創傷による潰瘍とは異なる病因を持つ。すべての常習性の創傷はゆっくりと、予測不可能な過程で治癒する（ボウラー、その他、臨床の微生物学レビュー１４（２）２４４）。例えば、糖尿病による足部潰瘍の研究において、２０週間にわたる良好な傷治療を行った場合の潰瘍の治癒は、僅か３１％である（マーゴリスら。糖尿病ケア、２２（５）、６９２）。
ここに提示する化合物、組成物、創傷治療薬剤及び医薬、並びに創傷治癒を促進するための方法は、外科的に処置される傷に対して、創傷の識別から常習性及び鋭利な創傷を治療するまでの間の何時でも使用することができ、この使用の時期は、外科的手術中又は手術後、並びに、外科的修復前及び外科的修復後における創傷治療の補助として、式（１）の化合物を適用又は投与した後の、好ましくは０日〜７日の間、一層好ましくは、２日〜６日の間を含む。この化合物、組成物、創傷治療薬剤、又は医薬を治療すべき部位に適用又は投与した後に、この処置すべき部位を任意に光に曝し、光に曝す場合には、化合物の適用又は投与と光の照射の間の時間は、以下に定義されるとおりである。それらはまた、外科処置の前、処置中、又は処置後のいずれにおいて使用することもでき、例えば、組織溶着、皮膚移植及び移植手術の際に使われる移植を含む組織移植におけるいずれの時点でも使用することができる。それらは、そう痒、痂皮形成、鱗屑性病変又は水膨れをもたらす皮膚の炎症疾患、例えば湿疹、乾癬及びにきびを治療するために使用することができる。本発明による方法はまた、アトピー性皮膚炎などの免疫反応（アレルギー）が弱められた湿疹の形態を治療するためにも使用することができる。
【００２３】
化合物、組成物、創傷治療薬剤、及び医薬の適用又は投与は繰り返す必要があり、創傷治療を促進するためには、典型的には、１回から２０回の処置が行われ、一層好ましくは１回から５回の処置が行われる。
ここに説明された化合物、組成物、創傷治療薬剤、医薬、及び方法は、上皮の傷口を手当てするため、更に好ましくは、皮傷口を手当てするために使用することが好ましい。
【００２４】
例えば、本発明の更に別の特徴によれば、例えば皮膚の若返りと肥厚のために、或いは火傷跡の軽減やあざの除去に使用される化粧品剤が提供される。
本発明の更に別の特徴によれば、美容の目的のために使用することができる方法が提供され、この目的は、皮膚の若返りと肥厚、及び、火傷跡の軽減やあざの除去含むが、しかしそれに制限されるものではない。美容の方法は、以下のステップを含む：
ａ）式（１）の化合物を含む組成物を準備する、
ｂ）組成物の有効量を、処置する部位に適用又は投与する、
ｃ）任意に創傷部位を光に曝す。
【００２５】
創傷が胃潰瘍などの内部創傷である場合には、該化合物、組成物、創傷治癒薬剤又は医薬は、内視鏡を使用して投与されることになるが、創傷部位を光に曝すことが望まれる場合には、これは、内視鏡の光源を使用して達成することができる。
【００２６】
式（１）の化合物は、直接創傷部位に適用することができ、或いは、薬学的に容認できる組成物、創傷治癒薬剤、又は医薬内に含めて創傷部位に投与することができる。化合物、組成物、薬剤又は医薬は、局部的に又は局所に投与され、種々の手段で、例えば、スプレー、局部注射、局所輸液、クリーム、ローション、懸濁物、乳液、ゲル、軟膏、スティック、石けん、エアロゾル、粉体エアロゾル、液滴、ペースト、内視鏡的に又は包帯のような抗菌性外傷用材料によって供与される。好ましくは、投与は局所的とし、更に好ましくは、クリーム、懸濁物、乳液、ゲル、軟膏、塗剤、スティック、石けん、ペースト、又は抗菌性外傷用材料により、特に、クリーム、懸濁物、乳液、ゲル、又は軟膏の形態で行う。
【００２７】
式（１）の化合物は、種々の薬剤組成物、創傷治癒薬剤又は医薬の形態に調剤することができ、これらは、本発明の化合物と、薬剤として許容できる担体、賦形剤、補助薬（各々は、最適な調剤を可能にする特性により選定する）を含むもので、 これらは、リポソーム、ナノ粒子、コロイド懸濁物、ミセル、マイクロエマルジョン、液胞、及びナノ球体を含む。
【００２８】
この組成物、創傷治療薬剤又は医薬は又、更に別の構成要素、例えば通常の投与用賦形剤及び賦形剤を含むことができ、これらは、アルコール（例えばエタノール、プロパノール、及びイソプロパノール）のような有機溶媒、ジメチルスルホキシド、プロピレングリコールとポリエチレン・グリコールなどのグリコール、液状、半固体状及び固体状のパラフィン、水、生理食塩水、ヒマシ油の派生物のような可溶化剤（例えばＣｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬ（商標ＢＡＳＦ ＡＧ）のようなエトキシ化されたヒマシ油）など、又はＴｗｅｅｎ（商標、ｌＣｌ  Ａｍｅｒｉｃａｓ  Ｉｎｃ．）の類、Ｕｎｇｕｅｎｔｕｍ軟膏（商標、Ｍｅｒｋ  ＫＧａＡ）、Ｓｏｌｕｔｏｌ（商標、ＢＡＳＦ  ＡＧ）、尿素のような生理食塩剤、グリセリン、アミノエタノール、プロピレングリコール、ｐＨ調整剤、染料、ゲル化薬剤、濃縮剤、バッファー、炭化水素ワックス及びそれらの組み合わせを含む。
【００２９】
この組成物、創傷治療薬剤又は医薬は更に、弱い還元剤、例えばグルコース又はデキストロースなどの糖、アスコルビン酸、ナトリウムメタ重亜硫酸塩、及びニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）を含むことができる。
典型的には、この組成物、創傷治療薬剤又は医薬は、式（１）の化合物を、一又はそれ以上の薬学的に容認できる担体に対し、適切な温度、典型的には１５℃から４０℃の温度で、適切なｐＨ、典型的にはｐＨ３からの９までのｐＨで、好ましくはｐＨ６．５から７．５のような生理的に容認できるｐＨで、混合することにより準備される。
【００３０】
組成物、創傷治療薬剤又は医薬における式（１）の化合物の濃度は、化合物の感光性付与能力に依存し、典型的には、０．００１から２０％の範囲である。
使用前に再構成することができる乾燥状態の組成物、創傷治癒薬剤又は医薬もまた、本発明において提供される。これらは、固体成分を乾燥混合するか、又は、液状組成物を、真空のもとで、或いは低温オーブン内で、穏やかな条件により蒸発させて乾燥状態にすることにより準備することができ、凍結乾燥が適切な乾燥技術である。
式（１）の化合物はまた、例えば、静脈注射、経口投与、経皮投与、筋肉注射などの、あらゆる便利な手段によって、処置される組織又は器官或いは腹膜組織に直接投与することによって、体系的に投与できる。
【００３１】
上述した手段のいずれによる適用又は投与も、繰り返し行う必要があり、創傷治癒を促進するためには、典型的には、１回から２０回行われ、好ましくは１回から５回行われるようにする。
【００３２】
式（１）の化合物を、局所的、直接的又は体系的に投与する場合の投与量は、好ましくは、０．１から２０００μｍｏｌまでの範囲、なるべくは、１０から１０００μｍｏｌの範囲、更に好ましくは、５０から５００μｍｏｌの範囲とする。注射による場合のような体系的における典型的な注射量は、０．１から１００ｍｌまでの範囲、好ましくは、５から５０ｍｌの範囲とする。
【００３３】
創傷治療が、光を照射することにより促進される場合には、光は、好ましくは６００〜８００ｎｍの波長とし、一層好ましくは６３０ｎｍから７００ｎｍの波長とする。
光源は、発光ダイオード（ＬＥＤ）、レーザー又はレーザーダイオード、広域波長ハロゲンランプ、又はフィルター付きランプなどの、どのような適切な光源であってもよい。
【００３４】
ＰＤＴ（光線力学的療法）の間に投与される光量は、種々の値とすることができるが、好ましくは１〜２００Ｊ／ｃｍ２、一層好ましくは５〜１００Ｊ／ｃｍ、特に５〜７５、理想的には ５から２５Ｊ／ｃｍ２である。
創傷治癒の促進は、薬を適用又は投与することのみによって、或いは、薬を適用又は投与し、光に曝すことによって達成することができる。
【００３５】
一般に、露光が与えられる場合には、この露光は、薬剤投与のとき、或いは、薬剤投与から１２時間までの間であり、この時間は、処置されている傷、薬剤投与の方法、及び使われる式（１）の特定の化合物に応じて調整される。露光は、好ましくは、薬剤投与の時点から３時間までの間、一層好ましくは、薬剤投与の時点から１時間までの間に与える。フェノチアジニウム化合物が局所的に投与される場合には、創傷は、光に曝す前に、１時間までの間、一層好ましくは、１〜２０分の間、特に８〜１２分の間、暗所内に閉じ込めておくことが好ましい。
【００３６】
光投与の強度（フルエンス率）を増大させると、一般に露光時間が減少する。
光への露出は、処置されるべき領域／範囲に局所化することが好ましく、傷が処置されている場合には、その傷自体に局所化することが一層好ましい。
【００３７】
式（１）の化合物、並びに、式（１）の化合物を含む組成物、創傷治癒薬剤及び医薬は、創傷治療を促進するために暗所において使用することができ、或いは、光に露出した状態で使用することができる。暗所においては、創傷治療を促進するのは式（１）の化合物それ自体である。
【００３８】
式（１）のフェノチアジニウム塩は以下のようにして合成される。
１）Ａ＝Ｂである対称フェノチアジニウム化合物
ａ）フェノチアジンを、まず氷酢酸内で臭素により臭素化して、３，７−ジブロモフェノチアジン−５−イウムブロミドを生成し、形成された懸濁物を濾過して集積する。
ｂ）この３，７−ジブロモフェノチアジン−５−イウムブロミドを、Ｒ7Ｒ8ＮＨ（Ｒ7とＲ8は先に定義したもの）によって表されるアミン又はクロロホルム内のＮ複素環に付加する。 形成された固体は濾過して集められ、適当な手段のいずれかによって、例えば、クロロホルム、クロロホルム／メタノール（９８／２）、次いでクロロホルム／メタノール（９０／１０）を使用し、シリカゲル６０上でフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製する。製品は、石油エーテルによるクロロホルムからの沈殿（ｂ．ｐ．６０−８０℃）により更に精製できる。
２）Ａ≠Ｂである非対称フェノチアジニウム化合物
ａ）クロロホルム内のフェノチアジンを５℃以下に冷やし、ヨウ素のクロロホルム溶液に加える。形成された固体を濾過により集めて、ヨウ素がなくなるまでクロロホルムで洗い、次いで真空下の室温で一晩保持してフェノチアジン−５−イウム 四ヨウ化水和物を生成させた。
ｂ）メタノールをフェノチアジン−５−イウム四ヨウ化水和物に入れて、アミンＲ7Ｒ8ＮＨ（Ｒ7とＲ8は先に定義したもの）の溶液に加える。反応混合物を一晩かき混ぜ、蒸発により減らし、放置冷却する。形成した固体を濾過により集めて、ジエチルエーテルにより洗い、乾燥させる。
ｃ）ジクロロメタン中の異なる２番目のアミンＲ7Ｒ8ＮＨ（Ｒ7とＲ8は、先に定義したもの）の溶液によるジクロロメタン中のトリエチルアミンを、上記ｂ）により得られる固形物のジクロロメタン溶液に加える。反応組成物を一晩かき混ぜ、有機質層を希塩酸と水によって洗って分離し、乾燥する（ＭｇＳ０4）。溶媒の大部分は蒸発させ、ジエチルエーテルを加えて生成物を沈殿させ、これを、濾過や、ジエチルエーテルによる洗い、乾燥により集める。必要に応じて、上記１ｂ）において説明したフラッシュカラムクロマトグラフィーによって、生成物を更に精製することができる。
【実施例１】
【００３９】
３、７−ビス（Ｎ、Ｎ−ジブチルアミノ）フェノチアジン−５−イウムブロミドＰＤＴの突発性糖尿病マウス（デンマークのタコニック社から入手可能な、系統ｃ５７ＢＬＫｓ/Ｂｏｍ ｄｂ/ｄｂ）に対する創傷治癒効果を観察する研究
【００４０】
背景
非糖尿病マウス（ｄｂ／＋）に創傷を与えた場合には、それらは迅速に治癒する。糖尿病のマウス（ｄｂ／ｄｂ）に創傷を与えた場合には、非糖尿病患者マウスに比べて治癒が遅くなる。この治癒の遅れは、脈管構造の不足と傷を埋めるための細胞の量が限られていることに起因するものであろう。遅延治癒モデルは、常習性の創傷に表われるものであり、薬の創傷治癒効果は、より厳密に監視し、より容易に測定することができる。
【００４１】
材料及び方法
この研究には１８匹の動物が含まれていた。６匹の比較例非糖尿病マウス（ｄｂ／＋）、６匹の比較例糖尿病（ｄｂ／ｄｂ）マウス、及び６匹の（ｄｂ／ｄｂ）ＰＤＴ処置糖尿病マウスである。
０．２６６ｍｇ／ｍＬの濃度で下の例２において説明されるように、３、７ビス（Ｎ、Ｎ−ジブチルアミノ）フェノチアジン−５−イウムブロミドをエタノールと軟膏Ｍの中に調合した。
【００４２】
手順
０日目に動物を麻酔し、１つの全体の厚さを規格化した（７．５ｍｍ×７．５ｍｍ）創傷を各実験動物の側面の皮膚中に作成した。次いで、傷を一定量の無菌生理食塩水で湿らせたカプセル化したガーゼの１．５×１．５ｃｍのパッドにより覆った。創傷は、必要とされる時に、生理食塩水で湿らせたガーゼとフィルム包帯を取り替える以外は、４日間介入なしで治癒した。
【００４３】
４日目に包帯を外した。ＰＤＴ処置したグループについて、１００ｍｇの０．２６６ｍｇ／ｍＬ  ３、７ビス（Ｎ、Ｎ・ジブチルアミノ）フェノチアジン−５−イウムブロミドクリームを傷に塗布した。次に傷を覆い、６分４０秒の間放置した。これに続いて、傷を１２５ｍＷ／ｃｍ2のフルエンス率で６８８ｎｍの光により照射して２５Ｊ／ｃｍ2線量の光を与えた。
処置のすぐ後に包帯を再び当て、続いて創傷後７日目と１０日目に再び処置を行った。
【００４４】
傷つけた（０日）直後、及びその後の４日目と７日目に、すべての創傷をデジタル写真撮影し、キャリブレーション／識別版を付けた。Ｉｍａｇｅ  Ｐｒｏ画像解析ソフトウェア（Ｍｅｄｉａ Ｃｙｂｅｒｎｅｔｉｃｓ、ＵＳＡ、ｖｅｒｓｉｏｎ  ４．１．０．０）を使用して、各々の実験グループについての創傷イメージから、時間経過に対する傷口閉鎖を計算した。各時点での各創傷について、開いた傷口面積を測定し、４日目（処置日数）に対する傷口面積を％で表わした。
【００４５】
結果
2008513424.tif 000005
６匹の動物が各グループに含まれていた
従って、比較例糖尿病マウスと処置した糖尿病マウスを比較すると、光との組み合わせにおいて、３、７ビス（Ｎ、Ｎ−ジブチルアミノ）フェノチアジン−５−イウムブロミドは、創傷治癒率に関し、それぞれ６７％の残留創傷面積に対して４６％残留創傷面積という有意な増加をもたらす。更に、処置した糖尿病のマウスは、比較例非糖尿病患者マウスに比べて、創傷治癒は、それぞれ４６％残留創傷面積に対して４８%残留創傷面積というように、小さな増加を見せた。
【実施例２】
【００４６】
ウィスターラットにおける創傷治癒に対する３、７ビスＮ，Ｎ−ジブチルアミノフェノチアジン−５−イウムブロミドＰＤＴの効果を観察する研究
３、７ビス（Ｎ，Ｎ−ジブチルアミノ）フェノチアジン−５−イウムブロミドを、１０ｍｇ／ｍｌの濃度となるようにエタノールに溶解した。これを軟膏Ｍと８０％の水により希釈して、３、７ビス（Ｎ、Ｎ−ジブチルアミノ）フェノチアジン−５−イウムブロミドの終濃度が１００μＭ又は５００μＭになるクリームを形成した。
【００４７】
処置の方法
上記のクリームをウィスターラットについて切除創傷厚さ全体の閉鎖に使用し、光への露出も行った。３、７ビス（Ｎ、Ｎ−ジブチルアミノ）フェノチアジン−５−イウムブロミド（濃度１００μＭ及び５００μＭ）５０ｍｇを局所的に適用し、続いて６８８ｎｍのレーザー光線による光活性化を行ったときの効果を観察し、薬剤投与担体（軟膏Ｍ）の投与に続いて６８８ｎｍの光活性化を行ったときの効果と比較した。使用した光線量は５０Ｊ／ｃｍ２であった。傷の修復は、成長ウィスターラットの脇腹皮膚に作成した標準の切り傷厚さ全体の閉鎖を基準として測定した。
【００４８】
低い線量（１００μＭ）において、光処置を受けた傷口は、３、７ビス（Ｎ、Ｎ−ジブチルアミノ）フェノチアジン−５−イウムブロミドだけを受けた同様の傷より急速にふさがった。３、７ビス（Ｎ、Ｎ−ジブチルアミノ）フェノチアジン−５−イウムブロミド（すなわち５００μＭ）の投与を増やすことで、傷口は、一層低い量の光量を受けた場合でも同様の創傷より急速にふさがった。創傷及び創傷周辺組織の全体的検査から、この研究において採用した処置計画の結果として、何も悪い組織反応は見られなかった。
【実施例３】
【００４９】
常習性潰瘍の創傷治療に対する３、７ビスＮ Ｎ−ジブチルアミノ フェノチアジン−５−イウムブロミドのＰＤＴの効果を観察する臨床研究
【００５０】
材料及び方法
倫理論評の承認が審議され、文書で見識者の承諾が得られた後、患者を募集し、彼らの納得する倫理的に承認された包括基準を提供した。ＭＨＲＡ承認が得られた。
【００５１】
常習性で治癒していない足部潰瘍又は糖尿病の足部潰瘍を持つ患者を募集した。これらの患者は、治療前には、数週間にもわたって創傷治癒がほとんど又は全く現われていなかった。
【００５２】
手順
処置のために、３、７ビス（Ｎ、Ｎ−ジブチルアミノ）フェノチアジン−５−イウムブロミドをエタノール及び軟膏Ｍ内において上記の例２の５００μＭに関して説明されたように調剤し、クリーム深さが５ｍｍまでとなるように、潰瘍表面とその周りの潰瘍辺縁（５ｍｍ）に局所的に適用した。次に、潰瘍を、１５分の間、覆うことなく、照明を最小にして放置した。この初期放置時間の後に、クリームを潰瘍の中に擦り込み、下側にある皮膚／組織がクリームを通して見える状態とした。下側の皮膚／組織が見えない場合には、余分なクリームを取り除いた。次に潰瘍を、広帯域幅のＣｕｒｅＬｉｇｈｔ（ＰｈｏｔｏＣｕｒｅから入手可能）ランプを使って２０−５０ｍＷ／ｃｍ2のフルエンス率で照射し、全体の光線量として５０Ｊ／ｃｍ2が与えられるようにした。
潰瘍領域は、処置前と、処置後１週間及び１か月の時点で測定した 。
【００５３】
結果
光力学的処置を受けて処置された潰瘍の面積には縮小があった。これを表１に示す。
表１−前処置により１週間後及び１か月後の潰瘍領域の縮小率（％）。
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【実施例４】
【００５４】
ウィスターラットにおける創傷治癒に対する１００Ｍ及び５００ Ｍの３、７−ビス（Ｎ、 Ｎ− ジブチルアミノ）フェノチアジン−５−イウムブロミドの効果を観察する研究
【００５５】
材料及び方法
０日に動物を麻酔して、単一の規格化した全厚さ創傷（７．５ｍｍ×７．５ｍｍ）を各実験動物の脇腹皮膚に作成した。傷は１．５×１．５ｃｍの一定容量の無菌生理食塩水で湿らせたカプセル化したガーゼパッドによって覆った。創傷は、必要とされるときに生理食塩水で湿らせたガーゼとフィルムの包帯を取り替えること以外は、４日の期間中、介入なしで治癒させた。
４日目に、標準の２つ目の包帯を外した。１００ｍｇの１００μＭ又は５００μＭ  ３、７ビス（Ｎ、Ｎ−ジブチルアミノ）フェノチアジン−５−イウムブロミドのクリームを創傷に適用した。創傷は光照射しなかった。創傷面積を、処置前（４日目）と、６日目、８日目、及び１０日目に測定した。
【００５６】
結果
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比較例試験では、創傷治癒に効果のない賦形剤クリームだけを使った。一般的に言うと、創傷の治癒は、濃度１００μＭによるよりも濃度５００μＭによる方が速くなる。
【国際調査報告】
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