(57)【要約】ヒト乳脂（ＨＭＦ）代用物、その調製方法、その使用、ならびにＨＭＦを含む脂肪混合物および調製粉乳が開示される。本発明の脂肪ベース組成物は、ｓｎ−２位に結合した脂肪酸残基の５０％未満が飽和しており；および／またはグリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基の量が飽和脂肪酸残基の総量の約４３．５％未満である、植物由来トリグリセリドの混合物を含んでいる。通常、グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸の実質的に全てがパルミチン酸残基である。また、少なくとも２５％または少なくとも３０％の本発明の前記脂肪ベース組成物とそれぞれ最大７５％または最大７０％の少なくとも１種の植物油との混合物を含む代用ＨＭＦ組成物が開示される。脂肪ベース組成物および混合物を調製する方法も開示される。さらに、脂肪ベース組成物または代用ヒト乳脂組成物を含む調製粉乳が開示される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｓｎ−２位に結合した脂肪酸残基の５０％未満が飽和しており；および／または
グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基の量が飽和脂肪酸残基の総量の約４３．５％未満である
ことを特徴とする酵素的に調製した植物由来トリグリセリド混合物を含む脂肪ベース組成物。
【請求項２】
前記グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸の実質的に全てがパルミチン酸残基であることを特徴とする請求項１に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項３】
前記グリセロール骨格のｓｎ−２位にある飽和脂肪酸の少なくとも６０％、好ましくは少なくとも７５％、より好ましくは少なくとも８５％がパルミチン酸残基であることを特徴とする請求項２に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項４】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも４０％、好ましくは４５〜６５％がオレイン酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項３のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項５】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも４５％、好ましくは５４〜６５％がオレイン酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項３のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項６】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも３５％、好ましくは４０〜５２％がオレイン酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項３のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項７】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも５％、好ましくは７〜１５％がリノール酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項８】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも９％、好ましくは１０〜２０％がリノール酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項９】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも４％、好ましくは５〜１０％がリノール酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項１０】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある全脂肪酸部分の約０．２〜１５％、好ましくは約７〜１４％、より好ましくは約１１〜１２．５％がラウリン酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項１１】
少なくとも２５％または少なくとも３０％の請求項１から請求項９のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物とそれぞれ最大７５％または最大７０％の少なくとも１種の植物油との混合物を含む代用ヒト乳脂組成物であって、前記植物油は任意選択でランダム化されていることを特徴とする組成物。
【請求項１２】
前記植物油は、ダイズ油、パーム油、カノーラ油、ヤシ油、パームナッツ油、ヒマワリ油、トウモロコシ油およびナタネ油からなる群より選ばれることを特徴とする請求項１１に記載の代用ヒト乳脂組成物。
【請求項１３】
全パルミチン酸残基の約３３〜４５％、好ましくは約３６〜４３％、より好ましくは約４０％が、グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合していることを特徴とする請求項１１または請求項１２に記載の代用ヒト乳脂組成物。
【請求項１４】
請求項１１から請求項１３のいずれか１項に記載の代用ヒト乳脂組成物または請求項１から請求項１０のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物を含む調製粉乳。
【請求項１５】
少なくとも１種のタンパク質成分および少なくとも１種の脂肪成分を含む調製粉乳であって、
前記脂肪成分は請求項１１から請求項１３のいずれか１項に記載の代用ヒト乳脂組成物または請求項１から請求項１０のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物であり、
調製粉乳はビタミン、ミネラル、ヌクレオチド、アミノ酸および炭水化物を任意選択でさらに含む
ことを特徴とする調製粉乳。
【請求項１６】
請求項１から請求項５のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物を調製する方法であって、
（ａ）全脂肪酸のうち好ましくは６０％未満、より好ましくは５３％未満の低い飽和脂肪酸含有量、好ましくはパルミチン酸含有量を有するトリグリセリド混合物であって、化学的または酵素的に任意選択でランダム化してもよいトリグリセリド混合物と、オレイン酸に富んだ遊離不飽和脂肪酸源とを、不溶性触媒の存在下、前記遊離脂肪酸と前記グリセリド混合物との比を約１．５：１〜約１：１で反応させるステップ；
（ｂ）触媒を除去するステップ；
（ｃ）過剰な遊離脂肪酸を蒸留除去するステップ；
（ｄ）前記油脂を脱色する任意選択のステップ；および
（ｅ）ステップ（ｄ）の生成物を脱臭する任意選択のステップ
を含む方法。
【請求項１７】
前記脱臭するステップ（ｅ）の前に、分留するステップを更に含む請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記トリグリセリド混合物は、飽和脂肪酸、好ましくはパルミチン酸を全脂肪酸のうち最大８０％、好ましくは６０％未満、より好ましくは４８〜５７％の量で含むことを特徴とする請求項１６または請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記遊離脂肪酸源は、約２〜５％のＣ１６：０脂肪酸、６０〜８０％のＣ１８：１脂肪酸および１〜４％のＣ１８：０脂肪酸を含むことを特徴とする請求項１６から請求項１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
請求項１から請求項１０のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物と少なくとも１種の植物油とを混合するステップを含む、請求項１１から請求項１３のいずれか１項に記載の代用ヒト乳脂組成物を調製する方法であって、
前記脂肪ベース組成物と混合する前に、前記植物油を任意選択で化学的または酵素的にランダム化することを特徴とする方法。
【請求項２１】
前記脂肪ベース組成物を、前記植物油と約０．４：１〜約４：１の比で混合して、
グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基の量が、飽和脂肪酸残基の総量の約３３％〜約４３．５、好ましくは約４３％、より好ましくは約４０％である混合物を得ること
を特徴とする請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記 脂肪ベース組成物を、前記植物油と約２．３：１〜約１：１の比で混合して、
グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基の量が、飽和脂肪酸残基の総量の約３３％〜約４０％である混合物を得ること
を特徴とする請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
請求項１から請求項１０のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物を調製する方法であって、
（ａ）全脂肪酸のうち好ましくは少なくとも７０％未満、より好ましくは少なくとも８０％の高いパルミチン酸含有量を有するトリグリセリド混合物であって、化学的または酵素的に任意選択でランダム化してもよいトリグリセリド混合物と、等重量またはより低い重量の、オレイン酸および炭素数１４以下の飽和脂肪酸、好ましくはラウリン酸に富んだ遊離不飽和脂肪酸源とを、不溶性触媒の存在下、前記遊離脂肪酸と前記グリセリド混合物との比を約１：１〜約２：１で反応させるステップ；
（ｂ）触媒を除去するステップ；
（ｃ）過剰な遊離脂肪酸を蒸留除去するステップ；
（ｄ）前記油脂を脱色する任意選択のステップ；および
（ｅ）ステップ（ｄ）の生成物を脱臭する任意選択のステップ
を含む方法。
【請求項２４】
前記遊離不飽和脂肪酸源は、炭素数１４以下の飽和脂肪酸、好ましくはラウリン酸を、全脂肪酸のうち約１０％〜約２５％の割合で含むことを特徴とする請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記脱臭するステップ（ｅ）の前に、分留するステップを更に含む請求項２３または請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記トリグリセリドは、全脂肪酸のうち少なくとも７５％がパルミチン酸であることを特徴とする請求項２４または請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記遊離脂肪酸源は、約５〜２５％のＣ１２：０脂肪酸、０．０５〜２％のＣ１４：０脂肪酸、１〜５％のＣ１６：０脂肪酸、５５〜７５％のＣ１８：１脂肪酸および１〜５％のＣ１８：０脂肪酸を含むことを特徴とする請求項２３から請求項２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
ヒト乳脂の組成と実質的に類似した組成を有する脂質組成物を調製する方法であって、
（ａ）全脂肪酸のうち少なくとも３０％、好ましくは少なくとも４０％、より好ましくは５０％以上、より好ましくは７０％以上のパルミチン酸含有量を有するトリグリセリド混合物であって、化学的または酵素的に任意選択でランダム化してもよいトリグリセリド混合物と、全遊離脂肪酸のうち１０％未満、好ましくは５％未満のパルミチン酸を含む遊離不飽和脂肪酸源とを、不溶性触媒の存在下、前記遊離脂肪酸と前記グリセリド混合物との比を約５：１〜約１：１で反応させるステップ； 
（ｂ）触媒を除去するステップ；
（ｃ）過剰な遊離脂肪酸を蒸留除去するステップ；
（ｄ）前記油脂を脱色する任意選択のステップ；および
（ｅ）ステップ（ｄ）の生成物を脱臭する任意選択のステップ
を含む方法。
【請求項２９】
Ｃ１２：０脂肪酸を全脂肪酸のうち０〜２０％、好ましくは１０〜１５％；Ｃ１４：０脂肪酸を全脂肪酸のうち０〜１５％、好ましくは５〜１０％；Ｃ１６：０脂肪酸を全脂肪酸のうち８〜３０％、好ましくは２０〜２５％；Ｃ１８：０脂肪酸を全脂肪酸のうち１〜６％、好ましくは３〜５％；Ｃ１８：１脂肪酸を全脂肪酸のうち２０〜５０％、好ましくは３０〜４０％；Ｃ１８：２脂肪酸を全脂肪酸のうち５〜３０％、好ましくは１０〜２０％；Ｃ１８：３脂肪酸を全脂肪酸のうち０．２〜４％、好ましくは１．５〜３％で含み；他の脂肪酸を、全脂肪酸のうち１０％未満、好ましくは５％未満の量で含むことを特徴とする脂質組成物。
【請求項３０】
調製粉乳用の代用ヒト乳脂組成物の調製における、請求項１から請求項１０のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物の使用。
【請求項３１】
調製粉乳の調製における、請求項１１から請求項１３のいずれか１項に記載の脂肪組成物または請求項２８に記載の方法により調製した脂肪組成物の使用。
【請求項３２】
好適な脂肪ベース組成物と少なくとも１種の植物油とを混合するステップを含む代用ヒト乳脂組成物を調製する方法であって、
前記脂肪ベース組成物と混合する前に、前記植物油を化学的または酵素的にランダム化することを特徴とする方法。
【請求項３３】
前記脂肪ベースは、Ｃ１２：０脂肪酸を全脂肪酸のうち０〜２０％、好ましくは１０〜１５％；Ｃ１４：０脂肪酸を全脂肪酸のうち０〜１５％、好ましくは５〜１０％；Ｃ１６：０脂肪酸を全脂肪酸のうち２０〜５５％含み、このうち３８％を超える量がｓｎ−２位でエステル化されている前記量；Ｃ１８：０脂肪酸を全脂肪酸のうち１〜７％、好ましくは３〜５％；Ｃ１８：１脂肪酸を全脂肪酸のうち２５〜６５％、好ましくは３０〜４０％；Ｃ１８：２脂肪酸を全脂肪酸のうち２〜４０％、好ましくは１０〜２０％；Ｃ１８：３脂肪酸を全脂肪酸のうち０〜８％、好ましくは１．５〜３％で含み；他の脂肪酸を、全脂肪酸のうち８％未満、好ましくは５％未満の量で含む、構造脂質の混合物であることを特徴とする請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記植物油は、ダイズ油、パーム油、カノーラ油、ヤシ油、パームナッツ油、ヒマワリ油、トウモロコシ油およびナタネ油からなる群より選ばれることを特徴とする請求項３２または請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記脂肪ベース組成物と前記油とが好適な比、好ましくは約０．１３：１〜約４：１の比で混合されることを特徴とする請求項３２から請求項３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
調製粉乳の成分として用いる脂肪ベース組成物を調製する方法であって、
（ａ）好適な脂肪酸プロファイル、好ましくは全脂肪酸のうち約３５％を超えるパルミチン酸含有量を有する、化学的または酵素的に任意選択でランダム化したトリグリセリド混合物と、全遊離脂肪酸の１０％未満の量でパルミチン酸を含む好適な遊離不飽和脂肪酸源とを、不溶性触媒の存在下、前記遊離脂肪酸と前記グリセリド混合物との比を約７：１〜約１：１で反応させるステップ；
（ｂ）触媒を除去するステップ；
（ｃ）過剰な遊離脂肪酸を蒸留除去するステップ； 
（ｄ）前記油脂を脱色する任意選択のステップ；および
（ｅ）ステップ（ｄ）の生成物を脱臭する任意選択のステップ
を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒト乳脂代用物、その調製方法、その使用、ならびにヒト乳脂代用物を含む脂肪混合物および調製粉乳に関する。
【背景技術】
【０００２】
本出願において言及する全ての出版物および引用する全ての参考文献は、ここに参照することで全文を本明細書に含むものとする。
【０００３】
一般に脂質は、生物の構成要素である。脂質は、膜、細胞、組織の構成要素として、直接のまたは貯蔵されるエネルギー源として、他の様々な生体分子の前駆体として、また生化学的信号として用いられる。すべての生化学的過程において、脂質は、重要な役割を担っている。
【０００４】
多くの脂質、特にトリグリセリドは、ヒトの栄養分として日々摂取されている。ほとんどの場合これらの脂質は、代謝されて、エネルギー貯蔵に用いられるか他の脂質または生体分子の生合成用前駆体に用いられる。代謝経路における脂質の最終産物がどのようなものであれ、摂取される間または摂取の後、脂質は、他の栄養分またはそれらの代謝産物と相互に作用する。
【０００５】
人乳およびほとんどの調製粉乳において、食物性カロリーの約５０％は、脂肪として新生児に与えられる。乳脂の９８％以上は、トリグリセリドの形状であり、グリセロールにエステル結合した飽和および不飽和脂肪酸を含んでいる。
【０００６】
ヒト乳脂に含まれる脂肪酸のグリセロール骨格における位置分布は、非常に特異的である。この特異な配置が、栄養吸収の効率に大きな影響を及ぼすことが知られている。
【０００７】
パルミチン酸（Ｃ１６：０）は、成熟人乳において脂肪酸の２０〜２５％を構成する、主要な飽和脂肪酸（ＳＡＦＡ）である。この脂肪酸の７０〜７５％は、トリグリセリドのｓｎ−２位にエステル結合している。これに対して、調製粉乳の製造に最もよく用いられている植物油中に存在するパルミチン酸は、ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にエステル結合しており、ｓｎ−２位は、主に不飽和脂肪酸によって占められている。
【０００８】
リノール酸（１８：２）およびリノレン酸（Ｃ１８：３）は、動物組織内で合成することができず、食物から、すなわち結局のところ植物から得なければならない。これらのいわゆる「必須脂肪酸」は、成長、生殖、健康に絶対に必要である。ヒト母乳中のトリグリセリドでは、全Ｃ１８：３の５〜２０％と全Ｃ１８：２の２０〜２３％とが、グリセロール骨格のｓｎ−２位にエステル結合している［Lopez-Lopez A. (2002) European Journal of Clinical Nutrition；56：1242-54、Innis S.M. (1994) Lipids；29：541-5］。
【０００９】
乳児によるトリグリセリド消化
新生児におけるトリグリセリド消化過程は、複雑である。消化過程は、胃液リパーゼまたは舌リパーゼにより触媒作用を受ける胃相から始まる［Hamosh M. (1990) Nutrition；6：421-8］。この初期の脂肪分解があることで、消化過程の腸相において、膵臓補リパーゼ依存性リパーゼが、最大の活性を発揮できる。膵臓リパーゼ系は、高い位置特異性でトリグリセリドに作用する。脂肪分解は、主にｓｎ−１位およびｓｎ−３位で起こり、２個の遊離脂肪酸と１個の２−モノグリセリドを生じる［Mattson F.H.およびBeck L.H. (1956) J. Biol. Chem.；219：735-740］。モノグリセリドは、含んでいる脂肪酸成分の種類に関わらず、よく吸収される。これに対して遊離脂肪酸の吸収は、その化学的構造に応じて様々に異なる。モノおよびポリ不飽和脂肪酸は、よく吸収され、鎖長が１２炭素以下の飽和脂肪酸も、同様によく吸収される。遊離する長鎖飽和脂肪酸すなわちパルミチン酸の吸収係数は、比較的低い［Jensen C.他 (1988) Am. J. Clin. Nutr.；43：745-51］。これは一つには、その融点が体温より高く（〜６３℃）、これらの脂肪酸が腸管のｐＨでカルシウムやマグネシウムなどのミネラルと水和脂肪酸石鹸を形成しやすい、ということが理由である［Small D.M. (1991) Annu. Rev. Nutr.；11：413-434］。
【００１０】
幾つかの研究は、パルミチン酸がトリグリセリドのｓｎ−２位にある場合に吸収されやすいことを示している［Lien E.L.他 (1997) J. Ped. Gastr. Nutr.；52(2)：167-174；Carnielli V.P.他 (1995) Am. J. Clin. Nutr.；61：1037-1042；Innis S.M.他 (1993) Am. J. Clin. Nutr.；57：382-390；Filer L.J.他 (1969) J. Nutr.；99：293-8］。パルミチン酸吸収について人乳と調合乳とを比較した研究は、人乳においてパルミチン酸の吸収がより高いことを示している［Chappel J.E.他 (1986) J. Pediatr.；108：439-447；Hanna F.M.他 (1970) Pediatr.；45：216-224；Tommarelli R.M.他 (1968) J. Nutr.；95：583-90］。調合乳を与えられた乳児と比較して、母乳栄養児において脂肪とカルシウムがより多く吸収されるということには、脂肪分解酵素（胆汁刺激性リパーゼ）が母乳に存在することと、トリグリセリドのｓｎ−２位に比較的高い割合でパルミチン酸が存在することの、２つの要因が寄与していると考えられている［Hernell O.他 (1988) Perinatal Nutrition.ニューヨーク州：Academic Press.；259-272；Wang CS.他 (1983) J. Biol. Chem.；258：9197-9202］。トリグリセリドのｓｎ−２位にエステル結合したパルミチン酸を多く含む調合乳は、主にｓｎ−１、３位にエステル結合したパルミチン酸を含む調合乳と比較して、吸収されるパルミチン酸量が多い［Lopez-Lopez A.他 (2001) Early Hum. Dev.；65：S83-S94］。
【００１１】
脂肪とカルシウムの吸収について、パーム油とダイズ油との混合物（ｓｎ−１、３位にパルミチン酸が多い）を含む調合乳を与えられた乳児と、ダイズ油とヤシ油との混合物（パルミチン酸が少ない）を含む調合乳を与えられた乳児とを比較した研究では、ヒト乳脂のものに近いパルミチン酸対オレイン酸比を有しているにもかかわらず、パーム油とダイズ油との混合物の吸収が低いことが示されている［Nelson SE. 他 (1996) Am. J. Clin. Nutr.；64：291-296］。別の研究では、ラードを含む調合乳を与えた乳児における脂肪吸収は、ラード中に高い割合で存在するｓｎ−２パルミチン酸を化学的にランダム化して３３％に低減した場合に、低下することが示されている［Filer (1969) 前述文献同箇所］。
【００１２】
腸細胞でトリグリセリドを形成する再エステル化の間、ｓｎ−２モノグリセリドとして吸収された脂肪酸の約７０％は元の位置に保持されているので、腸管腔から吸収されるモノグリセリドの組成は、循環脂質の脂肪酸分布にとって重要である。［Small (1991) 前述文献同箇所］。
【００１３】
子豚を用いた研究の結果、パルミチン酸は、再構成トリグリセリドを含む乳または調合乳からｓｎ−２モノグリセリドとして吸収された場合、腸細胞におけるトリグリセリド再構築過程と血漿リポ蛋白質トリグリセリド中の分泌過程を通じて、保持される証拠が示された［Innis S.M.他 (1995) J. Nutr.；125：73-81］。人乳および調製粉乳における飽和脂肪酸の分布が、乳児血漿トリグリセリドおよびリン脂質の脂肪酸分布の決定因子であることも示されている［Innis S.M.他 (1994) Lipids.；29：541-545］。
【００１４】
誕生から１年すると、乳児の体重は、誕生時と比べて３倍となり、身長は、５０％増加する。骨格質量が急速に増す必要に合わせて、成長過程にある乳児は、生物学的に利用可能なカルシウム源を必要とする。人工栄養児にとって、カルシウムを利用できるか否かは、調合乳の組成に依存している［Ostrom KM.他 (2002) J. Am. Coll. Nutr.；21(6)：564-569］。
【００１５】
上記したように、トリグリセリドの消化では、脂肪がｓｎ−１位および３位において分解され、遊離脂肪酸と２−モノグリセリドとが形成される。ほとんどの調製粉乳の場合に当てはまるが、パルミチン酸がｓｎ−１、３位にある場合、遊離脂肪酸として切り離され、不溶性カルシウム石鹸を形成しやすい。これに対して人乳のように、ｓｎ−２位にエステル結合したパルミチン酸は、カルシウム石鹸を形成しない［Small (1991) 前述文献同箇所］。
【００１６】
幾つかの研究では、トリグリセリドのｓｎ−１、３位に位置するパルミチン酸が多い調合乳と、低いカルシウム吸収との間に、相関関係があることが示されている［Nelson S. E.他 (1998) J. Amer. Coll. Nutr.；17：327-332；Lucas A.他 (1997) Arch. Dis. Child.；77：F178-F187；Carnielli V.P.他 (1996) J. Pediatr. Gastroenterol. Nutr.23：553-560；Ostrom (2002) 前述文献同箇所；Hanna (1970) 前述文献同箇所］。さらに人乳のように、ｎ−２位を主にパルミチン酸が占める食物性トリグリセリドは、正期産児と早期産児との両方において、脂肪およびカルシウムの腸内吸収に有益な影響を顕著にもたらすことが示されている［Carnielli (1996) 前述文献同箇所；Carnielli (1995) 前述文献同箇所；Lucas (1997) 前述文献同箇所］。ｓｎ−１、３位のパルミチン酸が多い調合乳を与えられた乳児では、カルシウムの糞便中排泄量が多く、パルミチン酸の少ない調合乳を与えられた乳児と比較して、カルシウムの吸収率が低い［Nelson (1996) 前述文献同箇所］。カルシウムの糞便中排泄量は、脂肪の糞便中排泄量と密接な関係があった。この研究ではまた、ｓｎ−１、３位のパルミチン酸が多い調合乳を乳児に与えた場合、リンの尿中排泄量が増加し、リンの保持量が低下したことも示された。これらの知見はおそらく、骨に沈着するカルシウム量の低さを反映している。
【００１７】
石鹸形成は、カルシウム吸収に深刻な影響を与える可能性がある。多くの調製粉乳は、そこに含まれるカルシウムの実質的に全てと石鹸を形成しうる量の飽和脂肪酸を含んでいる。
【００１８】
調合乳投与に関連するその他の重要な問題として、正期産児と早期産児両方における便秘があり、後者では生死に関わる合併症に至る可能性もある。これに対して母乳栄養児の便秘は、稀である。便の硬さと母乳または調合乳の組成について母乳栄養児と人工栄養児とを比較する研究では、カルシウム脂肪酸石鹸が便の硬さに明らかに関与していることが示されている。人工栄養児の便は、母乳栄養児のものより顕著に硬く、これは飽和脂肪酸の処理が異なっていることを示唆している［Quinlan PT.他 (1995) J. Pediatr. Gastr. and Nutr.；20：81-90］。
【００１９】
カルシウム吸収の低下と硬い便の問題を解消するために、調製粉乳製造者は、パルミチン酸をラウリン酸に置き換えることで、あるいはポリ不飽和脂肪酸含有量を増加させることで、脂肪酸の特性を変えるようにしている。研究の結果、食用脂肪酸の組成が、成長している乳児組織の脂肪酸の組成に影響を与えること［Widdowson E.M. (1975) Br. Med. J.；1：633-5；Carlson S.E.他 (1986) Am. J. Clin. Nutr.；44：798-804；Innis S.M.他 (1990) Am. J. Clin. Nutr.；5：994-1000；Koletzko B.他 (1989) Eur. J. Pediatr.；148：669-75］、従ってリポ蛋白質および脂質代謝は、母乳栄養児と人工栄養児との間で異なっていること［Putnam J.C. 他 (1982) Am. J. Clin. Nutr.；36：106-114；Innis S.M.他 (1992) Am. Coll. Nutr.;11:63S-8S；Van Biervliet J.P.他 (1981) Acta. Paediatr. Scand.；70：851-6］が示されている。
【００２０】
Innis他［Innis (1993) 前述文献同箇所］では、パーム油由来のＣ８〜Ｃ１４、Ｃ１６飽和脂肪酸（主にｓｎ−１、３位に位置する）、および合成トリグリセリド由来のＣ１６飽和脂肪酸（主にｓｎ−２位に位置する）をほぼ等量で含む３種類の調製粉乳を比較した場合、調製粉乳に含まれる飽和脂肪酸の鎖長が、食物性のオレイン酸、リノール酸およびα−リノレン酸の代謝に影響することが示された。この研究ではさらに、人乳トリグリセリドにおけるＣ１６飽和脂肪酸のｓｎ−２配置が、吸収以外にも独特な特性を示すことも示された。そうした特性には、ＨＤＬおよびコレステロ−ルの濃度や、コレステロ−ルエステル脂肪酸組成に与える影響などがある。
【００２１】
欧州特許出願公開第０２０９３２７号には、調製粉乳中の脂肪代替品として好適な代用乳脂組成物が開示されている。請求の範囲に記載される脂肪組成物において、全飽和脂肪酸残基の少なくとも４３．５％が、トリグリセリドのｓｎ−２位に結合している。さらに、ｓｎ−２位を占める脂肪酸の少なくとも５０％が、飽和している。この発明の脂肪組成物は、飽和脂肪酸（具体的にはパルミチン酸）含有量の多い油脂または脂肪から得られる。
【００２２】
欧州特許出願公開第０４９５４５６号にも、代用ヒト乳脂組成物が開示されている。請求の範囲に記載される組成物では、全飽和脂肪酸の少なくとも４０％が、組成物に含まれるトリグリセリドのｓｎ−２位に位置している。さらにこれらの脂肪組成物は、０．２〜７％のリノレン酸部分（Ｃ１８：３、ω−３）を含み、そのうち７０％がグリセロール部分のｓｎ−１および３位に結合していることを特徴とする。欧州特許出願公開第０４９５４５６号の脂肪組成物は、飽和脂肪酸（具体的にはパルミチン酸）に富んだトリグリセリド源のエステル交換反応によっても得られる。このトリグリセリド源、例えばパーム油の最上画分は、パルミチン酸を８０％より高い濃度で、あるいは９０％より高い濃度で、含むことが可能である。
【００２３】
米国特許第５，６５８，７６８号には、４０％を超える飽和脂肪酸部分がｓｎ−２位に位置するトリグリセリド組成物を調製する多段階方法が開示されている。ステップの多くは、酵素修飾を必要とする。
【００２４】
出願人による国際特許出願公開番号ＷＯ２００４／０３６９８７は、ヒト乳脂と高レベルの類似性を有するヒト乳脂代用物の製造に用いることのできる、および／または比較的低い濃度で用いてそのようなヒト乳脂代用物を得ることのできる、脂肪組成物を開示している。この組成物は、パルミチン酸に富んだトリグリセリド源から出発しても得られる。
【００２５】
上述した脂肪組成物は、ヒト乳脂（ＨＭＦ）と高レベルの類似性を有するＨＭＦ代用物の調製に用いることができ、調製されたＨＭＦ代用物を、最終的な調製粉乳の製造に用いることができるが、得られるＨＭＦ代用物は、非常に高価であり、商業用の調製粉乳の調製としては実用的でない。
【００２６】
本発明の発明者らは、上述の国際特許出願公開番号ＷＯ２００４／０３６９８７において、独自の脂肪組成物を製造することで費用の問題に取り組んでおり、調製粉乳に用いる全脂肪混合物に当該発明の比較的少量の合成脂肪ベース組成物を用いることで、ＨＭＦと高レベルの類似性を有するＨＭＦ代用物を提供している。
【００２７】
費用の障害を克服する別の方法では、全飽和脂肪酸のうち比較的高い割合がｓｎ−２位に位置するＨＭＦ代用物が提供されている。全飽和脂肪酸のうち４０％を超える（かつ５０％未満である）飽和脂肪酸がｓｎ−２位に位置する脂肪組成物が得られる。このようなＨＭＦ代用物は、欧州特許出願公開第０２０９３２７号または第０４９５４５６号に記載されるように、脂肪ベース組成物を単純で安価な植物油で高度希釈することで得られる。しかしこれらの混合物は、全パルミチン酸に対するｓｎ−２パルミチン酸の比（〜４０から４３％）が、ＨＭＦにおける比（〜７０％）より低い。にもかかわらず臨床研究の結果［Lien 他 Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition 1997、167-74］、これらの混合物は、複数の植物油を単に混ぜたものをベースとする調製粉乳と比べて、摂取されるカルシウムおよび脂肪酸の量がより多いことが示されている。ヒト乳脂に非常に近い代用物は、出願人による上述の国際特許出願公開番号ＷＯ２００４／０３６９８７に記載されている［InFat １、表１］。いずれの場合においても、少なくとも４０％の飽和脂肪酸がｓｎ−２位に位置することを特徴とするこれらのＨＭＦ代用物は、ｓｎ−２パルミチン酸含有量が多くｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸比の高い脂肪ベースを、様々な植物トリグリセリドで希釈することで混合物として得られる。この比は通常、４０〜４５％である。これらのＨＭＦ代用物の調製に用いられる脂肪ベースは、オレイン酸に富んだ遊離脂肪酸の混合物を過剰量用いて、パルミチン酸に富んだトリグリセリドをエステル交換することによって生成される。
【特許文献１】欧州特許出願公開第０２０９３２７号
【特許文献２】欧州特許出願公開第０４９５４５６号
【特許文献３】米国特許第５，６５８，７６８号
【特許文献４】国際特許出願公開番号ＷＯ２００４／０３６９８７
【非特許文献１】［Lopez-Lopez A. (2002) European Journal of Clinical Nutrition；56：1242-54、Innis S.M. (1994) Lipids；29：541-5］
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【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２８】
本発明の目的は、良好なＨＭＦ類似物としての利点を有しつつ安価に製造することのできる、新規で脂肪を主成分とした（fat-base）組成物を提供することにある。
【００２９】
本発明のさらなる目的は、様々な調製粉乳に用いるのに好適なＨＭＦ類似脂肪ベース（fat base）および脂肪混合物を安価に製造する、新規な方法を提供することにある。
【００３０】
本発明の上記およびその他の目的は、以下の説明により明らかになるであろう。
【課題を解決するための手段】
【００３１】
発明の概要
第１の態様において本発明は、ｓｎ−２位に結合した脂肪酸残基の５０％未満が飽和しており；および／またはグリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基の量が飽和脂肪酸残基の総量の約４３．５％未満であることを特徴とする酵素的に調製した植物由来トリグリセリド混合物を含む脂肪ベース組成物に関する。前記脂肪酸残基はＣ１２、Ｃ１２、Ｃ１６またはＣ１６脂肪酸、任意選択で他の脂肪酸、およびそのうち少なくとも２種の脂肪酸を含む混合物である。
【００３２】
本発明の脂肪ベース組成物の好ましい実施形態において、グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸の実質的に全てがパルミチン酸残基である。特に、グリセロール骨格のｓｎ−２位にある飽和脂肪酸の少なくとも６０％、好ましくは少なくとも７５％、より好ましくは少なくとも８５％がパルミチン酸残基である。
【００３３】
本発明の脂肪ベース組成物の特定の実施形態において、ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも４０％、好ましくは４５〜６５％がオレイン酸部分である。特に、ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも４５％、好ましくは５４〜６５％がオレイン酸部分である。あるいは、ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも３５％、好ましくは４０〜５２％がオレイン酸部分である。
【００３４】
さらに、本発明の脂肪ベース組成物において、ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも５％、好ましくは７〜１５％がリノール酸部分であってもよい。具体的には、ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも９％、好ましくは１０〜２０％がリノール酸部分である。あるいは、ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも４％、好ましくは５〜１０％がリノール酸部分である。
【００３５】
本発明の脂肪ベース組成物の別の特定の実施形態において、ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある全脂肪酸部分の約０．２〜約１５％、好ましくは約７％〜約１４％、より好ましくは約１１％〜約１２．５％がラウリン酸部分である。
【００３６】
さらなる態様において本発明は、少なくとも２５％または少なくとも３０％の本発明の脂肪ベース組成物とそれぞれ最大７５％または最大７０％の少なくとも１種の植物油との混合物を含む代用ヒト乳脂組成物に関する。植物油は、ダイズ油、パーム油、カノーラ油、ヤシ油、パームナッツ油、ヒマワリ油、トウモロコシ油およびナタネ油からなる群より選ばれてもよいが、これらに限定されない。これらの油は、後に詳述するように、脂肪ベース組成物と混合する前にランダム化してもよい。
【００３７】
本発明の代用ヒト乳脂組成物の特定の実施形態において、全パルミチン酸残基の約３３％〜約４５％、好ましくは約３６％〜約４３％、より好ましくは約４０％が、グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合している。
【００３８】
さらなる態様において、本発明は、本発明の脂肪ベース組成物または代用ヒト乳脂組成物を含む調製粉乳に関し、特に少なくとも１種のタンパク質成分および少なくとも１種の脂肪成分を含む調製粉乳であって、前記脂肪成分は、本発明の脂肪ベース組成物または代用ヒト乳脂組成物であり、調製粉乳はビタミン、ミネラル、ヌクレオチド、アミノ酸および炭水化物、および栄養面で利点のあるその他の成分を任意選択でさらに含むことを特徴とする調製粉乳に関する。
【００３９】
さらなる態様において本発明は、上で定義した本発明の脂肪ベース組成物を調製する第１の方法に関する。本方法は以下のステップを含む。
【００４０】
（ａ）全脂肪酸のうち好ましくは６０％未満、より好ましくは５７％未満、さらにより好ましくは５３％未満の実質的に低い飽和脂肪酸含有量、好ましくはパルミチン酸含有量を有するトリグリセリド混合物と、オレイン酸に富んだ遊離不飽和脂肪酸源とを、不溶性触媒の存在下、前記遊離脂肪酸と前記グリセリド混合物との比を約１．５：１〜約１：１で反応させるステップ；
（ｂ）触媒を除去するステップ；
（ｃ）過剰な遊離脂肪酸を蒸留除去するステップ；
（ｄ）前記油脂を脱色する任意選択のステップ；および
（ｅ）ステップ（ｄ）の生成物を脱臭する任意選択のステップ。
【００４１】
あるいは、（ｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸の構成比を増やすことによって）ｓｎ−２位にある飽和脂肪酸を強化する目的で、反応の前にトリグリセリド混合物をランダム化する。ランダム化は、塩基性または酸性触媒を用いて化学的に行ってもよいし、非選択性リパーゼを用いて酵素的に行ってもよい。
【００４２】
本発明の第１の方法は、ステップ（ｅ）の前に、分留するステップを更に含んでいてもよい。
【００４３】
本発明の本方法で用いる前記トリグリセリド混合物は、飽和脂肪酸、好ましくはパルミチン酸を、好ましくは４８〜５７％の量で含んでいてもよい。
【００４４】
本発明の本方法で用いる前記遊離脂肪酸源は、好ましくは約２〜５％のＣ１６：０脂肪酸、６０〜８０％のＣ１８：１脂肪酸および１〜４％のＣ１８：０脂肪酸を含んでいてもよい。
【００４５】
さらなる実施形態において本発明は、上で定義した本発明の代用ヒト乳脂組成物を調製する方法に関する。本方法は、本発明の脂肪ベース組成物と少なくとも１種の植物油とを、好ましくは約０．４：１〜約４：１の比で混合して、グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基の量が、飽和脂肪酸残基の総量の約３３％〜約４３．５、好ましくは約４３％、より好ましくは約４０％である混合物を得るステップを含む。
【００４６】
あるいは本発明の脂肪ベース組成物を、植物油と約２．３：１〜約１：１の比で混合して、グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基の量が、飽和脂肪酸残基の総量の約３３％〜約４０％である混合物を得る。
【００４７】
パルミチン酸残基の３３％がｓｎ−２位においてエステル化されるように、代用ヒト乳脂の調製に用いられる混合植物油を、任意選択でランダム化してもよい。ランダム化することで、飽和脂肪酸残基の総量のうちｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基を所望の比で有する、調製粉乳用の代用乳脂組成物を調製するのに必要な脂肪ベースの量を、大幅に減らすことができる。本実施形態はコストの面で非常に重要である。上記したように、混合植物油のランダム化は、塩基性または酸性触媒を用いて化学的に、または非選択性リパーゼを用いて酵素的に行うことができる。
【００４８】
さらに別の態様において、本発明は上で定義した本発明の脂肪ベース組成物を調製する第２の方法に関する。本方法は以下のステップを含む。
【００４９】
（ａ）全脂肪酸のうち好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％の高いパルミチン酸含有量を有するトリグリセリド混合物と、等重量またはより低い重量の、オレイン酸および炭素数１４以下の飽和脂肪酸、好ましくはラウリン酸に富んだ遊離不飽和脂肪酸源とを、不溶性触媒の存在下、前記遊離脂肪酸と前記グリセリド混合物との比を約１：１〜約２：１で反応させるステップ；
（ｂ）触媒を除去するステップ；
（ｃ）過剰な遊離脂肪酸を蒸留除去するステップ；
（ｄ）前記油脂を脱色する任意選択のステップ；および
（ｅ）ステップ（ｄ）の生成物を脱臭する任意選択のステップ。
【００５０】
本発明の第１の方法のように、グリセロール骨格のｓｎ−２位にある飽和脂肪酸部分を強化する目的で、反応の前にトリグリセリド混合物を任意選択でランダム化する。ランダム化は、標準的なエステル交換法によって、酸性または塩基性触媒（例えばナトリウムメトキシド）を用いて化学的に行ってもよいし、非選択性リパーゼを用いて酵素的に行ってもよい。
【００５１】
本発明の第２の方法において、好ましくは前記遊離不飽和脂肪酸源は、炭素数１４以下の飽和脂肪酸、好ましくはラウリン酸を約１０％〜約２５％の割合で含む。
【００５２】
本発明の第２の方法は、脱臭するステップ（ｅ）の前に、分留するステップを更に含んでいてもよい。
【００５３】
本発明の第２の方法の特定の実施形態において、トリグリセリド混合物は少なくとも７５％がパルミチン酸であってもよい。遊離脂肪酸源は、全脂肪酸のうち約５〜２５％がＣ１２：０脂肪酸、０．０５〜２％がＣ１４：０脂肪酸、１〜５％がＣ１６：０脂肪酸、５５〜７５％がＣ１８：１脂肪酸および１〜５％がＣ１８：０脂肪酸であってもよい。
【００５４】
さらなる態様において本発明は、上で定義した本発明の代用ヒト乳脂組成物を調製する方法に関する。本方法は、本発明の脂肪ベース組成物と少なくとも１種の植物油とを、好ましくは約０．４：１〜約４：１の比で混合して、グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基の量が、飽和脂肪酸残基の総量の約３３％〜約４３．５、好ましくは約４３％、より好ましくは約４０％である混合物を得るステップを含む。
【００５５】
あるいは本発明の脂肪ベース組成物を、植物油と約２．３：１〜約１：１の比で混合して、グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基の量が、飽和脂肪酸残基の総量の約３３％〜約４０％である混合物を得る。
【００５６】
またこれらの実施形態において、全パルミチン酸残基の約３３％がｓｎ−２位においてエステル化されるように、混合植物油を任意選択でランダム化してもよい。ランダム化することで、飽和脂肪酸残基の総量のうちｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基を所望の比で有する、代用ＨＭＦ調製物を得るのに必要な脂肪ベースの量を、大幅に減らすことができる。混合植物油のランダム化は、塩基性または酸性触媒を用いて化学的に、または非選択性リパーゼを用いて酵素的に行うことができる。
【００５７】
別の態様において、本発明はＨＭＦ類似組成物を調製する方法に関する。本方法は以下のステップを含む。
【００５８】
（ａ）全脂肪酸のうち少なくとも３０％、好ましくは少なくとも４０％、より好ましくは５０％以上、さらにより好ましくは７０％以上のパルミチン酸含有量を有するトリグリセリド混合物と、全遊離脂肪酸のうち１０％未満、好ましくは５％未満のパルミチン酸を含む遊離不飽和脂肪酸源とを、不溶性触媒の存在下、前記遊離脂肪酸と前記グリセリド混合物との比を約５：１〜約１：１で反応させるステップ；
（ｂ）触媒を除去するステップ；
（ｃ）過剰な遊離脂肪酸を蒸留除去するステップ；
（ｄ）前記油脂を脱色する任意選択のステップ；および
（ｅ）ステップ（ｄ）の生成物を脱臭する任意選択のステップ。
【００５９】
得られる生成物はＣ１２：０脂肪酸を全脂肪酸のうち０〜２０％、好ましくは１０〜１５％；Ｃ１４：０脂肪酸を全脂肪酸のうち０〜１５％、好ましくは５〜１０％；Ｃ１６：０脂肪酸を全脂肪酸のうち８〜３０％、好ましくは２０〜２５％；Ｃ１８：０脂肪酸を全脂肪酸のうち１〜６％、好ましくは３〜５％；Ｃ１８：１脂肪酸を全脂肪酸のうち２０〜５０％、好ましくは３０〜４０％；Ｃ１８：２脂肪酸を全脂肪酸のうち５〜３０％、好ましくは１０〜２０％；Ｃ１８：３脂肪酸を全脂肪酸のうち０．２〜４％、好ましくは１．５〜３％で含み；他の脂肪酸は、全脂肪酸のうち１０％未満、好ましくは５％未満の量で含む。この生成物の主な利点は、さらに混合することを必要とせずに、調製粉乳の成分として好適に用いることが可能であることにある。
【００６０】
あるいは、ｓｎ−２位にある飽和脂肪酸部分を強化するために、反応前に、源であるトリグリセリド混合物を、化学的または酵素的にランダム化する。
【００６１】
本発明はまた、ＨＭＦに類似し、本発明の方法により作成可能なＨＭＦ代替物として作用する脂肪組成物に関する。このようなＨＭＦ代用物組成物は、乳児栄養に好適な脂肪酸プロファイルによって特徴付けられるのが好ましく、好ましくはＨＭＦの脂肪酸プロファイルを模倣する、最も好ましくは脂肪酸石鹸形成を通じたカルシウム損失を最小化するものであってもよい。この組成物は、全飽和脂肪酸に対するｓｎ−２飽和脂肪酸が少なくとも３３％、好ましくは少なくとも４０％、より好ましくは４５％以上、さらにより好ましくは５０％以上、最も好ましくは５９％以上である。この組成物は、ｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸比が少なくとも４０％、好ましくは４３％以上、より好ましくは４５％以上である。
【００６２】
さらにまた本発明は、調製粉乳用の代用ヒト乳脂組成物の調製における、本発明の脂肪ベース組成物の使用、または本発明の方法のいずれかによって調製した脂肪ベース組成物の使用に関する。
【００６３】
さらなる態様において、本発明は、代用ＨＭＦ組成物を調製する方法に関する。この方法は、好適な脂肪ベース組成物と少なくとも１種の植物油とを混合するステップを含み、前記脂肪ベース組成物と混合する前に植物油をランダム化することを特徴とする。好適な脂肪ベースは、グリセリドと遊離脂肪酸とを立体特異的選択性リパーゼの存在下に反応して得られる構造脂質の混合物である。この脂肪ベースは、Ｃ１２：０脂肪酸を全脂肪酸のうち０〜２０％、好ましくは１０〜１５％；Ｃ１４：０脂肪酸を全脂肪酸のうち０〜１５％、好ましくは５〜１０％；Ｃ１６：０脂肪酸を全脂肪酸のうち２０〜５５％（そのうち３８％以上がｓｎ−２位でエステル化されている）；Ｃ１８：０脂肪酸を全脂肪酸のうち１〜７％、好ましくは３〜５％；Ｃ１８：１脂肪酸を全脂肪酸のうち２５〜６５％、好ましくは３０〜４０％；Ｃ１８：２脂肪酸を全脂肪酸のうち２〜４０％、好ましくは１０〜２０％；Ｃ１８：３脂肪酸を全脂肪酸のうち０〜８％、好ましくは１．５〜３％で含み；他の脂肪酸を、全脂肪酸のうち８％未満、好ましくは５％未満の量で含む。
【００６４】
植物油は、ダイズ油、パーム油、カノーラ油、ヤシ油、パームナッツ油、ヒマワリ油、トウモロコシ油およびナタネ油からなる群より選ばれてもよいが、これらに限定されない。
【００６５】
本態様において、代用ヒト乳脂の調製に用いる混合植物油はランダム化されたものである。ランダム化により、パルミチン酸残基の３３％がグリセロール骨格のｓｎ−２位においてエステル化された油脂が得られる。ランダム化することで、飽和脂肪酸残基の総量のうちｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基を所望の比で有する、調製粉乳用の代用乳脂組成物を調製するのに必要な脂肪ベースの量を、大幅に減らすことができる。本実施形態はコストの面で非常に重要である。上記した他の実施形態におけるように、混合植物油のランダム化は、塩基性または酸性触媒を用いて化学的に、または非選択性リパーゼを用いて酵素的に行うことができる。
【００６６】
混合油のランダム化は、費用効果のほかに、とりわけ重要な側面を有する。天然油と比較して、ランダム化混合油では、γ−リノレン酸（Ｃ１８：３）およびリノール酸（Ｃ１８：２）の分布が、ＨＭＦと非常によく似たものとなる。
【００６７】
脂肪ベース組成物と油とは好適な比で混合するが、この比は、得られる混合物における所望のプロファイルによって決めらることができる。例えば脂肪ベース組成物と混合油とを約０．１３：１〜約４：１の比で混合することで、グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基の量が飽和脂肪酸残基の総量の約３３％〜約４３．５、好ましくは約４３％、より好ましくは約４０％である混合物を提供する。あるいは、グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基の量が４３．５％以上である混合物を得る。成分比はこのように、所望のまたは所与の脂肪酸プロファイルを有する混合物を得るように、調整することができる。
【００６８】
さらなる態様において本発明は、調製粉乳の成分として使用するのに好適な脂肪ベース組成物を調製する、以下のステップを含む方法に関する。（ａ）好適な脂肪酸プロファイル、全脂肪酸のうち約３５％を超えるパルミチン酸含有量を有する、ランダム化したトリグリセリド混合物と、全遊離脂肪酸の１０％未満の量でパルミチン酸を含む好適な遊離不飽和脂肪酸源とを、不溶性触媒の存在下、前記遊離脂肪酸と前記グリセリド混合物との比を約７：１〜約１：１で反応させるステップ；（ｂ）触媒を除去するステップ；（ｃ）過剰な遊離脂肪酸を蒸留除去するステップ；（ｄ）前記油脂を脱色する任意選択のステップ；および（ｅ）ステップ（ｄ）の生成物を脱臭する任意選択のステップ。トリグリセリド混合物のランダム化は、塩基性または酸性触媒を用いて化学的に、または非選択性リパーゼを用いて酵素的に行うことができる。
【００６９】
特に好ましい実施形態によって本発明を詳細に説明する。
【発明を実施するための最良の態様】
【００７０】
栄養面で利点を有しつつ製造の安価なＨＭＦ代用物を研究した結果、本発明者らは、ｓｎ−２脂肪酸の５０％未満が飽和脂肪酸であることを特徴とする新規な脂肪ベース組成物を作成した。これらの新規なＨＭＦ代用物は、パルミチン酸含有量が比較的に少ないトリグリセリドをエステル交換することで得られる。脂肪ベース組成物は、ＨＭＦに類似した全飽和脂肪酸（特にパルミチン酸）含有量であり、かつｓｎ−２飽和脂肪酸（実質的にはパルミチン酸）対全飽和脂肪酸（パルミチン酸）比が３３％より高く、好ましくは４３．５％未満、より好ましくは４０％未満であることを特徴とする、脂肪混合物（最終的には、調製粉乳成分として直ちに使用可能である）の調製に用いることができる。この脂肪ベース組成物、その調製方法、およびそのさまざまな使用が、本発明の第１の態様を構成する。
【００７１】
従って第１の実施形態において本発明は、先行技術に記載したものほどには出発原料のパルミチン酸が多くなく、トリグリセリド原材料として、パルミチン酸含有量が約５０％で全飽和脂肪酸含有量が６０％未満である植物油の組み合わせを用いる、エステル交換法による濃縮脂肪の製造に関する。２種のトリグリセリド出発原料例の組成を、表１に示す。
【表１】
2008538915.tif 000002
【００７２】
これらの原材料を、エステル交換法における出発原料として用いて、好適な特異的１，３−リパーゼを使用して脂肪ベース組成物を生成し、次にこれを用いて上記したようなＨＭＦ代用物（代替物）を生成することができる。これらの代用物は、３３％より高いｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸比を有するという限られた部分でＨＭＦと類似しており、その結果、乳児におけるカルシウムの吸収とエネルギー源として用いられる脂肪酸の吸収とが向上する。これら本発明のＨＭＦ代用物は、調製粉乳に用いられる植物油の単純な混合物に比べてカルシウム吸収が向上しており、好ましくは最大比が１：３（３３％）のｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸比を有しており、そして従来技術の脂肪ベース（ｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸比が５０％を超えるものなど）から得られるＨＭＦ代用物と比較して安価に製造される。
【００７３】
上で説明したパルミチン酸量の少ない原材料トリグリセリドは、エステル交換（後述）の前にランダム化してもよいし、さらに、比較的多い量のオレイン酸を含む遊離脂肪酸混合物と、実施例１のように１．５：１（ＦＦＡ：トリグリセリド）の比で反応させるか、実施例２のように１：１の低い比で反応させてもよい。なお先行技術の組成物では、概して５：１〜３：１（ＦＦＡ：脂肪）の比である。実施例１および２でトリグリセリドから生成した脂肪ベースの脂肪酸組成物（ＦＡＣ）を、表２に示す。
【表２】
2008538915.tif 000003
【００７４】
略号：ＦＡＣ−脂肪酸組成物；  ＳＡＦＡ−飽和脂肪酸；  ＦＦＡ−遊離脂肪酸
両方の実施例において、得られる脂肪ベースは、ｓｎ−２飽和脂肪酸（ＳＡＦＡ）含有量が５０％未満であり、ｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸比が５０％未満である。
【００７５】
これらの脂肪ベースを、さらに植物油と混合して、ｓｎ−２飽和ＦＡ対全飽和ＦＡ比が３３％より高く（実施例２の脂肪ベースを用いた場合３９．３％）、ｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸の比が約４４％（実施例２の脂肪ベースを用いた場合４４．２％）である最終ＨＭＦ代用物／代替物を生成することができる。
【００７６】
表３および４は、実施例２の脂肪ベースに混合する植物油の詳細と、混合物の組成とを示す。ＨＭＦでの含有量に匹敵する全パルミチン酸量は、２２％である。
【表３】
2008538915.tif 000004
【表４】
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【００７７】
従ってこの態様において本発明は、トリグリセリドが、パーム油とエステル交換したパームステアリン、ナタネ油とエステル交換したパームステアリンなどの混合物である方法と、それに使用されるトリグリセリド組成物とを提供する。得られるトリグリセリド出発原料の典型的な脂肪酸組成は、全脂肪酸のうち６０％未満、好ましくは約４８〜約５７％が飽和脂肪酸である。この段階で、ｓｎ−２位にあるＳＡＦＡと全ＳＡＦＡとの最大比は約１：３（３３％）である。用いられる遊離脂肪酸（ＦＦＡ）は、オレイン酸に富み飽和脂肪酸の量が少ない脂肪酸源である。典型的な数値は、Ｃ１６：０が２〜５％、Ｃ１８：１が６０〜８０％、Ｃ１８：０が１〜４％である。可能な脂肪酸源は、ナタネ脂肪酸、パームナッツ油Ｃ１８画分の脂肪酸、オレイン酸に富むヒマワリ油ＦＦＡなどである。少なくとも２種の異なる脂肪酸源の組合せも、可能である。トリグリセリド（ＴＡＧ）とＦＦＡとの比は、通常、約４０：６０（ＴＡＧ：ＦＦＡ）〜約５０：５０である。
【００７８】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位の不飽和脂肪酸を強化するのに用いられる脂肪酸は、ここで例示するように、遊離脂肪酸由来のものであってもよいが、脂肪酸のアルキルエステル、好ましくはメチルまたはエチルエステル、およびグリセリドエステルに由来するものであってもよい。
【００７９】
更なる態様において本発明は、トリグリセリド源と比較的少量の遊離脂肪酸とのエステル交換反応により生成した脂肪組成物に関する。加えてこの遊離脂肪酸源は、オレイン酸とラウリン酸との両方に富んでいる。エステル交換反応において大幅に過剰な不飽和脂肪酸を用いることで脂肪ベースが生成されることが、先行技術から知られている。脂肪に対して５倍量までの過剰なＦＦＡが、用いられている。ほとんどの場合、脂肪に対して３：１または２：１で過剰となるＦＦＡが、用いられている。すべての場合において、これらの脂肪酸混合物は、オレイン酸とその他のＣ１８不飽和脂肪酸に富んでいた。これらの脂肪酸の混合物は、飽和脂肪酸、特にラウリン酸を含んでいなかった。本発明ではＦＦＡと脂肪との比として１．５：１〜１：１を、連続床バッチシステムにおいて用いる。その上さらに、ラウリン酸を含む脂肪酸混合物を使用すると、不溶性カルシウム飽和脂肪複合体が形成される可能性を増やすことなく、ｓｎ−２飽和脂肪酸対全飽和脂肪酸比を、比較的低く保つことができる。これは、ラウリン酸は飽和しているがＣ１６以上の長い飽和脂肪酸に起こるような不溶性カルシウム複合体を形成しないためであると考えられている［TantibhedhyangkulおよびHashim (1978) Pediatrics. 61(4)：537-45；FinleyおよびDavidson (1980) Pediatrics. 65(1)：132-8；Lien (1994) J. Pediatr. 125(5)：S62-8；Lien他 (1997) J Pediatr Gastroenterol Nutr. 25(2)：167-74］.
従って第２の態様において本発明は、ラウリン酸も比較的多く（３％以上）含む、オレイン酸に富む複数の脂肪酸を低重量または等重量で混合したものを用いることを特徴とする濃縮脂肪ベースを調製する方法に関する。トリグリセリドは、多量の（好ましくは７０％を超える）パルミチン酸と、極少量のリノレン酸とを含んでいる。
【００８０】
本実施形態においてさらに、パルミチン酸に富んだトリグリセリドを、後述する標準的な化学的または酵素的エステル交換法によってランダム化してもよい。
【００８１】
本発明のこの態様において、パルミチン酸に富んだトリグリセリドを、ラウリン酸含有量が比較的多い脂肪酸混合物と反応させ、これによってｓｎ−２ＳＡＦＡ対全ＳＡＦＡ比を低下させる。一方、高いｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸比を有する脂肪ベースから得た類似の混合物と比較して、高いｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸比が維持され、かつ乳児によるカルシウムと脂肪酸の摂取に悪影響が及ばない（上記参照）。
【００８２】
エステル交換法における脂肪酸とトリグリセリドの比は、１．５：１（実施例３、表５）〜２：１（実施例４、表６）である。
【表５】
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【表６】
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【００８３】
実施例３および４からわかるように、得られる脂肪ベースはｓｎ−２ＳＡＦＡ対全ＳＡＦＡ比が４３．５未満であり、ｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸比が約５０％である。
【００８４】
トリグリセリドは、概して、最大８０％のパルミチン酸を有する、低いヨウ素価（ＩＶ）のパームステアリンである。トリグリセリドは、パーム油とエステル交換したパームステアリンと、ナタネ油、パーム油等とエステル交換したパームステアリンとの混合物であってもよい。トリグリセリドのｓｎ−２ＳＡＦＡ対全ＳＡＦＡの比は、最大３３％である。
【００８５】
遊離脂肪酸は、オレイン酸に富み、Ｃ１４以上の飽和長鎖脂肪酸の量が少なく、ラウリン酸で強化された脂肪酸源である。典型的な数値は、全脂肪酸のうちＣ１６：０が２〜５％、Ｃ１８：１が６０〜８０％、Ｃ１８：０が１〜４％、Ｃ１２が５〜３０％である。可能な脂肪酸源は、ナタネ脂肪酸、パームナッツ油Ｃ１８画分の脂肪酸、ラウリン油（例えばパームナッツ油およびヤシ油）、オレイン酸に富むヒマワリ油遊離脂肪酸などである。２種以上の異なる脂肪酸源の組合せも可能である。 
下記の表７は、実施例４の脂肪ベースに、表に詳述する植物油を添加した、混合物の調製を例示する。実施例で調製した混合植物油は、脂肪ベースと混合する前に、ランダム化した（後述）。
【００８６】
得られる混合物の脂肪酸組成を、表８に示す。混合物のｓｎ−２ＳＡＦＡ対全ＳＡＦＡ比は、３７％であり、ｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸比は、４４％である。従ってこの混合物は、ｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸比、全パルミチン酸含有量および結果として生ずるカルシウム摂取への寄与について、ｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸比が顕著に高い脂肪ベースから得られる類似の混合物に匹敵する。
【表７】
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【表８】
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【００８７】
さらなる実施形態において本発明は、植物油または他の油と事前に混合することなく調製粉乳の脂肪画分として用いることができ、またＨＭＦに類似した全飽和脂肪酸（特にパルミチン酸）含有量であり、かつｓｎ−２飽和脂肪酸（パルミチン酸）対全飽和脂肪酸（パルミチン酸）比が３３％より高く、乳児栄養に必要とされる必須脂肪酸を全て含むことを特徴とするエステル交換脂肪生成物に関する。
【００８８】
さらなる態様において本発明は、好適な脂肪ベースを得て次いで他の成分と混合するということを必要としない、上述した混合物に類似した脂肪酸組成とｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸比およびｓｎ−２ＳＡＦＡ対全ＳＡＦＡ比とを有する、ＨＭＦ代用物の直接生産に関する。本発明のこの態様によると、エステル交換の生成物は、脂肪酸組成および比が植物油の単純混合物と比較して改善され、その結果カルシウムおよび脂肪酸摂取が向上した調製粉乳用の最終ＨＭＦ代替物として用いることができる。
【００８９】
これは、好適なトリグリセリド混合物（本明細書に記載するように反応前にランダム化してもよい）を、多いオレイン酸含有量とＨＭＦのｓｎ−１、３脂肪酸プロファイルを実質的に模倣するように設計された全脂肪酸プロファイルとによって特徴付けられる脂肪酸混合物と反応することによって得られる。トリグリセリドは、所望のＨＭＦ代用物の標的とする等級やＨＭＦ類似レベルに応じて、多いパルミチン酸含有量にも、（上記したように）少ないパルミチン酸含有量にもなりうる。
【００９０】
エステル交換に用いられる脂肪酸混合物としては、ラウリン酸、ミリスチン酸、ステアリン酸などの飽和脂肪酸、オレイン酸、パルミトオレイン酸およびリノール酸などのモノ−／ジ−不飽和脂肪酸、ならびにリノレン酸、アラキドン酸、ドコサヘキサエン酸などのポリ不飽和脂肪酸などのＣ８〜Ｃ２４脂肪酸が挙げられる。
【００９１】
所望の脂肪酸混合物は、表９に示すように植物油および脂肪を混合して得られる。これは、粗トリグリセリド源の一例である。このトリグリセリドは、標準的な方法でグリセロールおよび遊離脂肪酸に分離される。派生する遊離脂肪酸の組成は、粗トリグリセリドの組成と同一である。
【００９２】
エステル交換反応における脂肪酸混合物とトリグリセリドとの比は、５：１〜１：２、好ましくは３：１〜１：１とすることができ、エステル交換反応は、好ましくは固定化されて１，３リパーゼ活性を有する生体触媒を用いて、連続床法または固定床法によって行うことができる。
【００９３】
この方法を用いて、出願人による前述の国際特許出願公開番号ＷＯ２００４／０３６９８７および欧州特許出願公開第２０９３２７号に記載される生成物（異なる種類の混合物）を得ることができる。
【００９４】
得られるＨＭＦ代用物は、ｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸比が３３％以上、好ましくは４０％以上、最大８０％のものであってもよい。
【００９５】
下記の表１０は、実施例５（表９）の遊離脂肪酸混合物とランダム化パーム油とを１．２：１の比で用いて生成したＨＭＦ代用物を例示する。ＨＭＦ代用物のｓｎ−２ＳＡＦＡ対全ＳＡＦＡ比は、３４．５％であり、ｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸比は、４５．３％である。従ってこの組成物は、ｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸、全パルミチン酸含有量および結果として生ずるカルシウム摂取への寄与について、脂肪ベースから得られる類似の混合物に匹敵する。
【表９】
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【表１０】
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【００９６】
さらなる態様において本発明は、上で得られた脂肪ベーストリグリセリド出発原料のランダム化、および脂肪ベースと混合する前の混合油のランダム化に関する。本発明のこれら両方の態様は、以下に詳細に例示説明する大きな利点がある。なおランダム化自体は公知の方法であるが、（特に乳児、幼児、小児、子供用の）栄養食品製造を目的としたトリグリセリド出発原料のランダム化や、調製粉乳の調製に用いられる混合油のランダム化については、これまでに報告がない。これは、本願において示される独自の成果である。
【００９７】
脂肪ベース組成物調製の出発原料として用いられる、上で得られたトリグリセリドは、好ましくは標準的なエステル交換法で、酸性または塩基性触媒（例えばナトリウムメトキシド）を用いて化学的に、または非選択性リパーゼを用いて酵素的にランダム化する。上記したように、ランダム化することによって、ｓｎ−２位にある飽和脂肪酸が、脂肪混合物中の飽和脂肪酸パーセントに達する。ｓｎ−２飽和脂肪酸を増加させることで、ｓｎ−２飽和脂肪酸に富んだ脂肪ベースが得られ、従ってＨＭＦ代用物混合物中で量の少ない脂肪ベースを利用することができるので、費用が大幅に節約できる。
【００９８】
例えば標準的パーム油は、全脂肪酸のうち約４０％がＣ１６で、全Ｃ１６のうち５〜２０％のＣ１６のみがｓｎ−２位においてエステル化されている。パーム油のランダムエステル交換反応を行うと、全Ｃ１６のうち３３％のＣ１６が、ｓｎ−２位に結合する。
【００９９】
別の例としてパームステアリンＩＶ１５が挙げられ、全脂肪酸のうち７９％がＣ１６であり、そのうち２７．４％のみがｓｎ−２位においてエステル化されている。ナトリウムメトキシドを用いた化学的ランダム化の結果得られる生成物は、全脂肪酸のうち７９％がＣ１６であり、全Ｃ１６のうちｓｎ−２位においてエステル化されたＣ１６が、３３％である。
【０１００】
下記の表１１は、ランダム化パームステアリンを用いて得た脂肪ベースと、非ランダム化パームステアリンを用いて得た脂肪ベースを比較している。ランダム化および非ランダム化パームステアリンＩＶ１５はそれぞれ、パームステアリン：遊離脂肪酸＝１：４として、市販のオレイン遊離脂肪酸と反応させた。反応終了後、触媒を分離し、蒸気蒸留を用いて遊離脂肪酸を除去し、トリグリセリド画分を分析した。表１１は、非ランダム化パームステアリンを用いると、全脂肪酸のうち２９．８％がＣ１６であり、そのうち６３．１％のみがｓｎ−２位においてエステル化されている脂肪ベースが得られることを実証している。一方、ランダム化パームステアリンを用いると、全脂肪酸のうちのＣ１６の割合と、全Ｃ１６のうちｓｎ−２位においてエステル化されたＣ１６の割合が、それぞれ３２．２％と６８．１％に増加する。
【表１１】
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【０１０１】
トリグリセリド出発原料をランダム化すると、本発明に記載する脂肪ベースのほかにも、より良質な脂肪ベースを生成できるという利点がある。従って別の実施形態において本発明は、粗トリグリセリド源を化学的にまたは酵素的にランダム化する、脂肪ベース組成物を調製する方法に関する。
【０１０２】
混合に用いられる混合植物油は、脂肪ベース組成物と混合する前に化学的または酵素的にランダム化されているのが好ましい。ランダム化処理により、油または脂肪の脂肪酸が、グリセロール骨格上の３個のｓｎ位の間でランダムに分配される。従って植物油の低いｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸比が、３３％まで増加する。ランダム化処理は、特定の用途に合わせて物理的特性を変える（例えば脂肪の融点を変える）ことを主な目的として、様々な油や脂肪に対して当分野で日常的に行われている。しかし下記に述べるように本発明のこの態様においては、混合油のｓｎ−２飽和脂肪酸対全飽和脂肪酸比を改善して、混合油が混合物のｓｎ−２飽和脂肪酸対全飽和脂肪酸比に与えるマイナスの影響を最小化する目的で、ランダム化を行う。
【０１０３】
混合油の全Ｃ１６のうちｓｎ−２位にあるＣ１６の割合を増加させることで、より少量の脂肪ベースで、特定のＣ１６パーセントと特定のｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸比とを得ることができる。大量の脂肪ベースを使用する必要があるということが、脂肪混合物を調製する際の費用面での主な問題の一つであるので、混合油のランダム化によって、単純かつ効率よく費用が節減される。表１２は、Ｃ１６を約２１％含みそのうち４２％がｓｎ−２位にエステル結合した典型的な調合乳を得るには、混合油をランダム化していない場合、実施例２の脂肪ベースの６５％が必要であることを示している。表１３は、Ｃ１６を２１％含みそのうち４２％がｓｎ−２位にエステル結合した調合乳を得るためには、混合油をランダム化した場合、同じ脂肪ベースを４７％しか必要としないことを示している。脂肪ベース必要量のこの顕著な差は、ランダム化混合油の使用が費用削減に重要であることを明示している。
【表１２】
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【表１３】
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【０１０４】
重要なことに、表１２の混合物は表３のものと比較してＣ１６の割合が低く、ｓｎ−２パルミチン酸対全パルミチン酸比が低いので、表１２の混合物の製造に必要な実施例２の脂肪ベースは、表３の混合物の製造に必要な脂肪ベースより少ない。
【０１０５】
混合油のランダム化は、本発明に記載する脂肪ベース以外の脂肪ベースからなる混合物にも利点がある。欧州特許出願公開第０２０９３２７号または第０４９５４５６号あるいは出願人による上述の国際特許出願公開番ＷＯ２００４／０３６９８７に記載の脂肪ベースを、天然植物油ではなくランダム化植物油と混合してもよい。本発明のこの態様を用いることで、上記した用途と同一のＣ１６パーセント、同一のｓｎ−２パルミチン酸残基対全パルミチン酸残基比を、より少ない量の脂肪ベースで得ることができ、従って混合物の製造費を節約することができる。
【０１０６】
表１４は、欧州特許出願公開第０２０９３２７号の混合物２の組成物（Ｃ１６を２６％含みそのうち５２．６％がｓｎ−２位にエステル結合しているもの）を得るためには、欧州特許出願公開第０２０９３２７号で用いられている非ランダム化混合油を用いた場合、同特許の試料１の脂肪ベースの５０％を必要とすることを示している。表１５から明らかなように、Ｃ１６を２６％含みそのうち５２．６％がｓｎ−２位にエステル結合しているものを得るためには、本発明のランダム化混合油を用いた場合、欧州特許出願公開第０２０９３２７号の試料１の脂肪ベースを４３％しか必要としない。脂肪ベース必要量のこの顕著な差（１４％節約）は、本発明で記載した脂肪ベースおよび本発明の主題とする脂肪ベース以外の脂肪ベースから得た混合物についても、ランダム化混合油の使用が費用削減に重要かつ有利であることを実証している。
【０１０７】
表１６は、欧州特許出願公開第０２０９３２７号（EP0209327）に記載の混合物（混合物１〜４）において、ランダム化混合油を用いた場合、全パルミチン酸残基のうちのｓｎ−２パルミチン酸残基の割合を向上させることが可能であることを示している。
【表１４】
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【表１５】
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【表１６】
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【０１０８】
混合油のランダム化は、費用効果のほかに、とりわけ重要な側面を有する。天然油と比較して、ランダム化混合油では、γ−リノレン酸（Ｃ１８：３）およびリノール酸（Ｃ１８：２）の分布が、ＨＭＦに非常によく似たものとなる。
【０１０９】
ナタネ油およびダイズ油は、植物性リノレン酸の主要源であり、調製粉乳の製造に一般に的に用いられている。表１７は、リノール酸およびリノレン酸のｓｎ−２分布について、ＨＭＦ、天然およびランダム化ナタネ油、天然およびランダム化ダイズ油における違いを示す。ナタネ油では、４５〜６１％のリノレン酸残基と、３２〜４７％のリノール酸残基がｓｎ−２位でエステル化している。ナタネ油におけるリノレン酸とリノール酸の分布は、ＨＭＦにおけるものとは大きく異なっている。ＨＭＦでは、５〜２０％のリノレン酸と、２０〜２３％のリノール酸のみが、ｓｎ−２位でエステル化されている。ナタネ油をランダム化すると、３３％のγ−リノレン酸と３３％のリノール酸がｓｎ−２位に結合し、従って脂肪代用物のＨＭＦに対する類似性が向上している。
【０１１０】
ダイズ油において、リノレン酸の分布（２７〜２９％のγ−リノレン酸がｓｎ−２位に結合）は、ランダム化ダイズ油の分布（３３％）に類似している。
【０１１１】
しかし天然ダイズ油では、４０〜４３％のリノール酸が、ｓｎ−２位でエステル化しており、一方ランダム化ダイズ油では、わずかに３３％のリノール酸が、ｓｎ−２位でエステル化している。ＨＭＦでは、わずかに２０〜２３％のリノール酸残基が、ｓｎ−２位に結合している。従って天然ダイズ油の代わりにランダム化ダイズ油を用いると、類似のγ−リノレン酸分布が維持されつつ、リノール酸分布が、ＨＭＦにおける分布とさらに似たものとなる。
【表１７】
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【０１１２】
混合植物油のランダム化は、塩基性または酸性触媒（例えばナトリウムメトキシド）を用いて化学的に、または非選択性リパーゼを用いて酵素的に、標準的なエステル交換法によって行うことができる。
【０１１３】
本発明の様々な態様のＨＭＦ代用物はいずれも、調製粉乳の脂肪画分として、また離乳食、幼児用食、小児用食、若年用食、および大人用栄養分の脂肪画分として、用いることが可能である。
【０１１４】
本明細書において「脂肪」および「脂質」の語は、交換可能に用いられる。
【０１１５】
本発明の範囲において、脂質は、トリグリセリドとその派生物（モノ−およびジ−グリセリドなど）を含む。
【０１１６】
本明細書において「脂肪酸」、「脂肪酸アシル」および「脂肪酸残基」（および特定の脂肪酸を言及する全ての同等表現）の語は、交換可能に用いられる。
【０１１７】
本明細書において「調製粉乳」の語は、調製粉乳（新生児から６ヶ月の乳児用）、フォローアップ調合乳（６〜１２ヶ月の乳児用）および成長用調合乳（１〜３歳の幼児用）を含む。
【０１１８】
本発明を開示および説明してきたが、本明細書に記載する本発明は、特定の実施例、方法ステップおよび材料に限定されるものではなく、そのような方法ステップおよび材料の改変は、ある程度可能であることは理解されよう。また本明細書で用いる用語は、特定の実施形態を説明する目的のみに用いられているのであって、限定することを企図しないことは理解されよう。本発明の範囲は、付属の請求の範囲およびその均等物によってのみ限定される。
【０１１９】
なお、本明細書および請求の範囲で用いられる単数形「一つの（a）」、「一つの（an）」および「その（the）」は、文脈から明らかとされる場合を除いては、複数形を含むものとする。
【０１２０】
本明細書および請求の範囲を通じて、文脈から明らかとされる場合を除いては、「含む（comprise）」の語と、その活用形「含む（comprises）」「含んでいる（comprising）」などは、言及したその完全なるもの（integer）またはステップ、あるいはその完全なるものからなる群またはステップ群を包括することを意味するが、その他全ての完全なるものまたはステップあるいは完全なるものからなる群またはステップ群を除外するわけではないことは理解されよう。
【０１２１】
本明細書における実施例は、本発明の態様を実施するにあたり、本発明者らが用いた技術の代表例である。これらの技術は、本発明を実施する上で好ましい実施形態の典型例であり、本発明の開示に照らし合わせて、本発明の精神および本発明の意図する範囲内で、様々な改変が可能であるということが、当業者には理解されよう。
【手続補正書】
【提出日】平成19年7月6日(2007.7.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｓｎ−２位に結合した脂肪酸残基の５０％未満が飽和しており；および／または
グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基の量が飽和脂肪酸残基の総量の約４３．５％未満である
ことを特徴とする酵素的に調製した植物由来トリグリセリド混合物を含む脂肪ベース組成物。
【請求項２】
ｓｎ−２位に結合した脂肪酸残基の５０％未満が飽和しており；および
グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基の量が飽和脂肪酸残基の総量の約４３．５％未満である
ことを特徴とする酵素的に調製した植物由来トリグリセリド混合物を含む脂肪ベース組成物。
【請求項３】
前記グリセロール骨格のｓｎ−２位にある飽和脂肪酸の少なくとも６０％、好ましくは少なくとも７５％、より好ましくは少なくとも８５％がパルミチン酸残基であることを特徴とする請求項１または請求項２に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項４】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも４０％、好ましくは４５〜６５％がオレイン酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項３のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項５】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも４５％、好ましくは５４〜６５％がオレイン酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項３のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項６】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも３５％、好ましくは４０〜５２％がオレイン酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項３のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項７】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも５％、好ましくは７〜１５％がリノール酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項８】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも９％、好ましくは１０〜２０％がリノール酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項９】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある不飽和脂肪酸部分の少なくとも４％、好ましくは５〜１０％がリノール酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項１０】
ｓｎ−１位およびｓｎ−３位にある全脂肪酸部分の約０．２〜１５％、好ましくは約７〜１４％、より好ましくは約１１〜１２．５％がラウリン酸部分であることを特徴とする請求項１から請求項４のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物。
【請求項１１】
少なくとも２５％または少なくとも３０％の請求項１から請求項９のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物とそれぞれ最大７５％または最大７０％の少なくとも１種の植物油との混合物を含む代用ヒト乳脂組成物であって、前記植物油は任意選択でランダム化されていることを特徴とする組成物。
【請求項１２】
前記植物油は、ダイズ油、パーム油、カノーラ油、ヤシ油、パームナッツ油、ヒマワリ油、トウモロコシ油およびナタネ油からなる群より選ばれることを特徴とする請求項１１に記載の代用ヒト乳脂組成物。
【請求項１３】
全パルミチン酸残基の約３３〜４５％、好ましくは約３６〜４３％、より好ましくは約４０％が、グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合していることを特徴とする請求項１１または請求項１２に記載の代用ヒト乳脂組成物。
【請求項１４】
請求項１１から請求項１３のいずれか１項に記載の代用ヒト乳脂組成物または請求項１から請求項１０のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物を含む調製粉乳。
【請求項１５】
少なくとも１種のタンパク質成分および少なくとも１種の脂肪成分を含む調製粉乳であって、
前記脂肪成分は請求項１１から請求項１３のいずれか１項に記載の代用ヒト乳脂組成物または請求項１から請求項１０のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物であり、
調製粉乳はビタミン、ミネラル、ヌクレオチド、アミノ酸および炭水化物を任意選択でさらに含む
ことを特徴とする調製粉乳。
【請求項１６】
請求項１から請求項５のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物を調製する方法であって、
（ａ）全脂肪酸のうち６０％未満、好ましくは５３％未満の飽和脂肪酸含有量、好ましくはパルミチン酸含有量を有するトリグリセリド混合物であって、化学的または酵素的に任意選択でランダム化してもよいトリグリセリド混合物と、６０〜８０％のオレイン酸含有量を有する遊離不飽和脂肪酸源とを、不溶性触媒の存在下、前記遊離脂肪酸と前記グリセリド混合物との比を約１．５：１〜約１：１で反応させるステップ；
（ｂ）触媒を除去するステップ；
（ｃ）過剰な遊離脂肪酸を蒸留除去するステップ；
（ｄ）前記油脂を脱色する任意選択のステップ；および
（ｅ）ステップ（ｄ）の生成物を脱臭する任意選択のステップ
を含む方法。
【請求項１７】
前記脱臭するステップ（ｅ）の前に、分留するステップを更に含む請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記トリグリセリド混合物は、飽和脂肪酸、好ましくはパルミチン酸を全脂肪酸のうち最大８０％、好ましくは６０％未満、より好ましくは４８〜５７％の量で含むことを特徴とする請求項１６または請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記遊離脂肪酸源は、約２〜５％のＣ１６：０脂肪酸、６０〜８０％のＣ１８：１脂肪酸および１〜４％のＣ１８：０脂肪酸を含むことを特徴とする請求項１６から請求項１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
構造脂質の混合物である好適な脂肪ベース組成物と少なくとも１種の植物油とを混合するステップを含む代用ヒト乳脂組成物を調製する方法であって、
前記脂肪ベース組成物と混合する前に、前記植物油を化学的にランダム化することを特徴とする方法。
【請求項２１】
構造脂質の混合物である好適な脂肪ベース組成物と少なくとも１種の植物油とを混合するステップを含む代用ヒト乳脂組成物を調製する方法であって、
前記脂肪ベース組成物と混合する前に、前記植物油を酵素的にランダム化することを特徴とする方法。
【請求項２２】
請求項１１から請求項１３のいずれか１項に記載の代用ヒト乳脂組成物を調製する方法であって、前記脂肪ベース組成物は請求項１から請求項１０のいずれか１項に記載の組成物である
ことを特徴とする請求項２０または請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記脂肪ベース組成物を、前記植物油と約０．４：１〜約４：１の比で混合して、
グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基の量が、飽和脂肪酸残基の総量の約３３％〜約４３．５、好ましくは約４３％、より好ましくは約４０％である混合物を得ること
を特徴とする請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記 脂肪ベース組成物を、前記植物油と約２．３：１〜約１：１の比で混合して、
グリセロール骨格のｓｎ−２位に結合した飽和脂肪酸残基の量が、飽和脂肪酸残基の総量の約３３％〜約４０％である混合物を得ること
を特徴とする請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
請求項１から請求項１０のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物を調製する方法であって、
（ａ）全脂肪酸のうち少なくとも７０％未満、好ましくは少なくとも８０％のパルミチン酸含有量を有するトリグリセリド混合物であって、化学的または酵素的に任意選択でランダム化してもよいトリグリセリド混合物と、等重量またはより低い重量の、オレイン酸含有量６０〜８０％および炭素数１２の飽和脂肪酸含有量５〜３０％である遊離不飽和脂肪酸源とを、不溶性触媒の存在下、前記遊離脂肪酸と前記グリセリド混合物との比を約１：１〜約２：１で反応させるステップ；
（ｂ）触媒を除去するステップ；
（ｃ）過剰な遊離脂肪酸を蒸留除去するステップ；
（ｄ）前記油脂を脱色する任意選択のステップ；および
（ｅ）ステップ（ｄ）の生成物を脱臭する任意選択のステップ
を含む方法。
【請求項２６】
請求項１から請求項１０のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物を調製する方法であって、
（ａ）全脂肪酸のうち少なくとも７０％未満、好ましくは少なくとも８０％のパルミチン酸含有量を有するトリグリセリド混合物であって、化学的または酵素的に任意選択でランダム化してもよいトリグリセリド混合物と、等重量またはより低い重量の、オレイン酸含有量６０〜８０％および炭素数１４以下の飽和脂肪酸含有量１０〜２５％である遊離不飽和脂肪酸源とを、不溶性触媒の存在下、前記遊離脂肪酸と前記グリセリド混合物との比を約１：１〜約２：１で反応させるステップ；
（ｂ）触媒を除去するステップ；
（ｃ）過剰な遊離脂肪酸を蒸留除去するステップ；
（ｄ）前記油脂を脱色する任意選択のステップ；および
（ｅ）ステップ（ｄ）の生成物を脱臭する任意選択のステップ
を含む方法。
【請求項２７】
前記脂肪ベースが、Ｃ１６脂肪酸を全脂肪酸のうち２０〜５５％の量で含み、そのうち３８％を超える量がｓｎ−２位でエステル化されていることを特徴とする請求項２０または２１に記載の方法。
【請求項２８】
前記遊離不飽和脂肪酸源は、炭素数１４以下の飽和脂肪酸、好ましくはラウリン酸を、全脂肪酸のうち約１０％〜約２５％の割合で含むことを特徴とする請求項２５に記載の方法。
【請求項２９】
前記脱臭するステップ（ｅ）の前に、分留するステップを更に含む請求項２５または請求項２６に記載の方法。
【請求項３０】
前記トリグリセリドは、全脂肪酸のうち少なくとも７５％がパルミチン酸であることを特徴とする請求項２８または請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記遊離脂肪酸源は、約５〜２５％のＣ１２：０脂肪酸、０．０５〜２％のＣ１４：０脂肪酸、１〜５％のＣ１６：０脂肪酸、５５〜７５％のＣ１８：１脂肪酸および１〜５％のＣ１８：０脂肪酸を含むことを特徴とする請求項２５から請求項２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
ヒト乳脂の組成と実質的に類似した組成を有する脂質組成物を調製する方法であって、
（ａ）全脂肪酸のうち少なくとも３０％、好ましくは少なくとも４０％、より好ましくは５０％以上、より好ましくは７０％以上のパルミチン酸含有量を有する粗植物性トリグリセリド混合物であって、化学的または酵素的に任意選択でランダム化してもよいトリグリセリド混合物と、全遊離脂肪酸のうち１０％未満、好ましくは５％未満のパルミチン酸を含む遊離不飽和脂肪酸源とを、不溶性触媒の存在下、前記遊離脂肪酸と前記グリセリド混合物との比を約５：１〜約１：１で反応させるステップ； 
（ｂ）触媒を除去するステップ；
（ｃ）過剰な遊離脂肪酸を蒸留除去するステップ；
（ｄ）前記油脂を脱色する任意選択のステップ；および
（ｅ）ステップ（ｄ）の生成物を脱臭する任意選択のステップ
を含む方法。
【請求項３３】
Ｃ１２：０脂肪酸を全脂肪酸のうち１０〜１５％；Ｃ１４：０脂肪酸を全脂肪酸のうち０〜１５％、好ましくは５〜１０％；Ｃ１６：０脂肪酸を全脂肪酸のうち２０〜２５％；Ｃ１８：０脂肪酸を全脂肪酸のうち１〜６％、好ましくは３〜５％；Ｃ１８：１脂肪酸を全脂肪酸のうち２０〜５０％、好ましくは３０〜４０％；Ｃ１８：２脂肪酸を全脂肪酸のうち５〜３０％、好ましくは１０〜２０％；Ｃ１８：３脂肪酸を全脂肪酸のうち０．２〜４％、好ましくは１．５〜３％で含み；他の脂肪酸を、全脂肪酸のうち１０％未満、好ましくは５％未満の量で含むことを特徴とする脂質組成物。
【請求項３４】
調製粉乳用の代用ヒト乳脂組成物の調製における、請求項１から請求項１０のいずれか１項に記載の脂肪ベース組成物の使用。
【請求項３５】
調製粉乳の調製における、請求項１１から請求項１３のいずれか１項に記載の脂肪組成物または請求項３２に記載の方法により調製した脂肪組成物の使用。
【請求項３６】
前記脂肪ベースは、Ｃ１２：０脂肪酸を全脂肪酸のうち０〜２０％、好ましくは１０〜１５％；Ｃ１４：０脂肪酸を全脂肪酸のうち０〜１５％、好ましくは５〜１０％；Ｃ１６：０脂肪酸を全脂肪酸のうち２０〜５５％含み、このうち３８％を超える量がｓｎ−２位でエステル化されている前記量；Ｃ１８：０脂肪酸を全脂肪酸のうち１〜７％、好ましくは３〜５％；Ｃ１８：１脂肪酸を全脂肪酸のうち２５〜６５％、好ましくは３０〜４０％；Ｃ１８：２脂肪酸を全脂肪酸のうち２〜４０％、好ましくは１０〜２０％；Ｃ１８：３脂肪酸を全脂肪酸のうち０〜８％、好ましくは１．５〜３％で含み；他の脂肪酸を、全脂肪酸のうち８％未満、好ましくは５％未満の量で含む、構造脂質の混合物であることを特徴とする請求項２０または請求項２１に記載の方法。
【請求項３７】
前記植物油は、ダイズ油、パーム油、カノーラ油、ヤシ油、パームナッツ油、ヒマワリ油、トウモロコシ油およびナタネ油からなる群より選ばれることを特徴とする請求項２０、請求項２１および請求項２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
前記脂肪ベース組成物と前記油とが好適な比、好ましくは約０．１３：１〜約４：１の比で混合されることを特徴とする請求項２０、請求項２１および請求項２７から請求項３７のいずれか１項に記載の方法。
【国際調査報告】
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