(57)【要約】式（Ｉ）の化合物および式（Ｉ）の化合物を投与することによって障害を治療する方法が、本明細書に記載される。障害の例として、腫瘍性障害、脂肪細胞関連障害、神経変性障害および代謝異常が挙げられる。本発明は、置換ヘテロシクリル化合物、該化合物を含む組成物、ならびに該化合物および組成物を使用する方法に関する。該化合物およびそれを含む組成物は、たとえばＳＩＲＴ１のようなサーチュイン、媒介脱アセチル化によって媒介される疾患または疾患症状を治療するのに有用である。2008513370.tif 000030
2008513370.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
障害を治療または予防する方法であって、該方法は、有効量の式（Ｉ）
【化１】
2008513370.tif 000026
で表される化合物を被験体に投与する工程を包含し、ここで、
Ｒ１およびＲ２は、それらが結合する炭素と一緒になって、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロシクリル、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニル、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロシクロアルケニル、Ｃ６−Ｃ１０アリールまたはＣ６−Ｃ１０ヘテロアリールを形成し、これらはそれぞれ、場合によっては１〜５個のＲ５で置換されてもよく、またはＲ１はＨ、Ｓ−アルキルまたはＳ−アリールであり、Ｒ２は、窒素がアルキル、アリールまたはアリールアルキルで置換されているアミドアルキルであり、これらはそれぞれ、場合によってはさらにアルキル、ハロ、ヒドロキシまたはアルコキシで置換されてもよく；
Ｒ３およびＲ４は、それらが結合する炭素と一緒になって、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロシクリル、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニル、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロシクロアルケニル、Ｃ６−Ｃ１０アリールまたはＣ６−Ｃ１０ヘテロアリールを形成し、これらはそれぞれ、場合によっては１〜５個のＲ６で置換されてもよく；
Ｒ５およびＲ６のそれぞれは、独立して、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、Ｃ７−Ｃ１２アラルキル、Ｃ７−Ｃ１２ヘテロアラルキル、Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニル、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロシクロアルケニル、カルボキシ、カルボキシレート、シアノ、ニトロ、アミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノ、メルカプト、ＳＯ３Ｈ、サルフェート、Ｓ（Ｏ）ＮＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、フォスフェイト、Ｃ１−Ｃ４アルキレンジオキシ、オキソ、アシル、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ１０チオアルコキシカルボニル、ヒドラジノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルヒドラジノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルヒドラジノカルボニル、ヒドロキシアミノカルボニル、アルコキシアミノカルボニル、またはＲ５またはＲ６の１つとＲ７とが、４〜６個の炭素、１〜３個の窒素、０〜２個の酸素および０〜２個の硫黄を含む環状部分を形成し、これらは場合によってはオキソまたはＣ１−Ｃ６アルキルで置換されてもよく；
Ｘは、ＮＲ７、ＯまたはＳであり；ＹはＮＲ７’、ＯまたはＳであり；
−  −  −  −は任意の二重結合を示し；
Ｒ７およびＲ７’のそれぞれは、独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ７−Ｃ１２アリールアルキル、Ｃ７−Ｃ１２ヘテロアリールアルキルであり；またはＲ７とＲ５またはＲ６の１個とは４〜６個の炭素、１〜３個の窒素、０〜２個の酸素および０〜２個の硫黄を含む環状部分を形成し、これらは場合によってはオキソまたはＣ１−Ｃ６アルキルで置換されてもよく；および
ｎは０または１である、
方法。
【請求項２】
Ｒ１およびＲ２が、それらが結合する炭素と一緒になって、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロシクリル、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニル、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロシクロアルケニル、Ｃ６−Ｃ１０アリールまたはＣ６−Ｃ１０ヘテロアリールを形成し、これらはそれぞれ、場合によっては、１〜５個のＲ５で置換されてもよい、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
Ｒ１およびＲ２が、それらが結合する炭素と一緒になって、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニルを形成する、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
Ｒ１およびＲ２が、Ｒ５で置換されている、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
Ｒ５が、置換基または置換基で置換されたアミノカルボニルで置換されたＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記置換基がアミノ置換基またはアミノカルボニルである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
Ｒ３およびＲ４が、それらが結合する炭素と一緒になって、Ｃ６−Ｃ１０アリールを形成する、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
Ｒ３およびＲ４が、Ｒ６で置換されている、請求項５に記載の方法。
【請求項９】
Ｒ６が、ハロまたはＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
ｎが０である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
ＸがＮＲ７である、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
ｎが０であり、かつＸがＮＲ７である、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
式（Ｘ）
【化２】
2008513370.tif 000027
を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
Ｒ６が、ハロまたはＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
Ｒ５が、アミノカルボニルである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
式（ＸＩ）
【化３】
2008513370.tif 000028
を有する、請求項１３に記載の方法。
【請求項１７】
Ｒ６が、ハロまたはアルキルである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
Ｒ５が、アミノカルボニルである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
Ｒ６がハロまたはアルキルであり、かつＲ５がアミノカルボニルである、請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
前記化合物が、６−クロロ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−カルボン酸アミドである、請求項１３に記載の方法。
【請求項２１】
前記化合物が、旋光性が−１４．１（ｃ＝０．３３ＤＣＭ）のエナンチオマーを、６０％を超える鏡像体過剰率で含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記化合物が、旋光性が−１４．１（ｃ＝０．３３ＤＣＭ）のエナンチオマーを、９０％を超える鏡像体過剰率で含む請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記化合物が、非ＳｉｒＴ１サーチュインよりもＳｉｒＴ１を優先的に阻害する、請求項１に記載の化合物。
【請求項２４】
前記化合物が、ＳｉｒＴ１に関し少なくとも５倍の優先傾向を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項２５】
前記化合物のＳｉｒＴ１に対するＫｉが、約１μＭ未満である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２６】
前記障害が腫瘍性障害である、請求項１に記載の方法。
【請求項２７】
前記腫瘍性障害が癌である、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記障害が神経変性障害である、請求項１に記載の方法。
【請求項２９】
前記神経変性障害が、アルツハイマー病またはパーキンソン病である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記障害が、脂肪細胞関連障害である、請求項１に記載の方法。
【請求項３１】
前記化合物の投与によって、前記被験体中の脂肪生成を亢進する、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記障害が糖尿病である、請求項１に記載の方法。
【請求項３３】
前記被験体がＩ型糖尿病を有する、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記被験体がＩＩ型糖尿病を有する、請求項３２に記載の方法。
【請求項３５】
前記被験体が、糖尿病のリスクがあると同定されている、請求項１に記載の方法。
【請求項３６】
前記患者が、ブドウ糖耐性の障害を有することによって、糖尿病のリスクがあると同定されている、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記患者が、空腹時高血糖症を有することによって、糖尿病のリスクがあると同定されている、請求項３５に記載の方法。
【請求項３８】
前記障害がメタボリック症候群である、請求項１に記載の方法。
【請求項３９】
前記被験体がアテローム発生異常脂肪血症である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記被験体が肥満である請求項３８に記載の方法。
【請求項４１】
前記被験体がインシュリン抵抗性またはブドウ糖不耐性の障害を有する、請求項３８に記載の方法。
【請求項４２】
前記被験体が高血圧である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４３】
式（ＸＩ）：
【化４】
2008513370.tif 000029
を有する化合物であって、ここで、
Ｒ６は、ハロまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり、および
ｐは０、１または２であり、
該化合物は、旋光性が−１４．１（ｃ＝０．３３ＤＣＭ）の６−クロロ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−カルボン酸アミドの立体異性体と同じ相対立体化学を有する、
化合物。
【請求項４４】
Ｒ６がクロロまたはメチルである、請求項４３に記載の化合物。
【請求項４５】
ｐが１である、請求項４３に記載の化合物。
【請求項４６】
−１４．１（ｃ＝０．３３ＤＣＭ）の旋光性を有する、６−クロロ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−カルボン酸アミドの立体異性体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（優先権の主張）
この出願は、２００４年９月１３日に出願された米国特許出願第１０／９４０，２６９号および２００５年３月１１日に出願された米国特許出願第１１／０７７，６６４号明細書の優先権を主張し、それらの全体は参照によって本明細書に援用される。
【背景技術】
【０００２】
（背景）
Ｓｉｒ２タンパク質は、ＮＡＤを補助因子として使用する脱アセチル化酵素である（Ｉｍａｉら，２０００；Ｍｏａｚｅｄ，２００１；Ｓｍｉｔｈら，２０００；Ｔａｎｎｅｒら，２０００；ＴａｎｎｙおよびＭｏａｚｅｄ，２００１）。多くが遺伝子の抑制に関与する他の脱アセチル化酵素とは相違し、Ｓｉｒ２は、トリコスタチンＡ（ＴＳＡ）のようなヒストン脱アセチル化酵素インヒビターに非感応的である（Ｉｍａｉら，２０００；Ｌａｎｄｒｙら，２０００ａ；Ｓｍｉｔｈら，２０００）。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
（要旨）
本発明は、置換ヘテロシクリル化合物、該化合物を含む組成物、ならびに該化合物および組成物を使用する方法に関する。該化合物およびそれを含む組成物は、たとえばＳＩＲＴ１のようなサーチュイン（ｓｉｒｔｕｉｎ）、媒介脱アセチル化によって媒介される疾患または疾患症状を治療するのに有用である。
【０００４】
一態様では、本発明は、被験体における障害、たとえば本明細書で記載された障害を治療または予防する方法に関する。該方法は、有効量の式（Ｉ）で表される化合物を被験体に投与することを含む。
【０００５】
【化５】
2008513370.tif 000003
（式中、
Ｒ１およびＲ２は、それらが結合する炭素と一緒になって、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロシクリル、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニル、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロシクロアルケニル、Ｃ６−Ｃ１０アリールまたはＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールを形成し、これらはそれぞれ、場合によっては１〜５個のＲ５で置換されてもよく、またはＲ１はＨ、Ｓ−アルキルまたはＳ−アリールであり、Ｒ２はアミドアルキル（ここで窒素は、アルキル、アリールまたはアリールアルキルで置換されている）であり、これらはそれぞれ、場合によってはさらにアルキル、ハロ、ヒドロキシまたはアルコキシで置換されてもよく；
Ｒ３およびＲ４は、それらが結合する炭素と一緒になって、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロシクリル、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニル、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロシクロアルケニル、Ｃ６−Ｃ１０アリールまたはＣ５−Ｃ１０ヘテロアリールを形成し、これらはそれぞれ、場合によっては１〜５個のＲ６で置換されてもよく；
Ｒ５およびＲ６のそれぞれは、独立して、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール、Ｃ７−Ｃ１２アラルキル、Ｃ７−Ｃ１２ヘテロアラルキル、Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニル、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロシクロアルケニル、カルボキシ、カルボキシレート、シアノ、ニトロ、アミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノ、メルカプト、ＳＯ３Ｈ、サルフェート、Ｓ（Ｏ）ＮＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、フォスフェイト、Ｃ１−Ｃ４アルキレンジオキシ、オキソ、アシル、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ１０チオアルコキシカルボニル、ヒドラジノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルヒドラジノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルヒドラジノカルボニル、ヒドロキシアミノカルボニル、アルコキシアミノカルボニル、またはＲ５またはＲ６の１つとＲ７とが、４〜６個の炭素、１〜３個の窒素、０〜２個の酸素および０〜２個の硫黄を含む環状部分を形成し、これらは場合によってはオキソまたはＣ１−Ｃ６アルキルで置換されてもよく；
Ｘは、ＮＲ７、ＯまたはＳであり；ＹはＮＲ７’、ＯまたはＳであり；
−  −  −  −は場合によっては二重結合であることを示し；
Ｒ７およびＲ７’のそれぞれは、独立して、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ７−Ｃ１２アリールアルキル、Ｃ７−Ｃ１２ヘテロアリールアルキルであり；またはＲ７とＲ５またはＲ６の１個とは４〜６個の炭素、１〜３個の窒素、０〜２個の酸素および０〜２個の硫黄を含む環状部分を形成し、これらは場合によってはオキソまたはＣ１−Ｃ６アルキルで置換されてもよく；およびｎは０または１である）
実施形態として、以下のものの１以上のものを含むことができる。
【０００６】
ある実施形態では、ｎは１でありうる。
【０００７】
ＸはＮＲ７であり、ＹはＮＲ７’でありうる。Ｒ７およびＲ７’は、それぞれ、たとえば、水素またはＣＨ３でありうる。Ｒ７およびＲ７’の１つは水素であり、他方はＣＨ３でありうる。
【０００８】
Ｒ１およびＲ２はＣ５−Ｃ１０シクロアルケニルを形成しうる。
【０００９】
Ｒ１およびＲ２はＣ６−Ｃ１０アリールを形成しうる。
【００１０】
Ｒ１およびＲ２は、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニルを形成することができ、これはＲ５で置換されてもよく、Ｒ３およびＲ４は、Ｃ６−Ｃ１０アリールを形成することができ、これはＲ６で置換されてもよい。
【００１１】
ある実施形態では、シクロアルケニル二重結合は、Ｒ１に結合する炭素とＲ２に結合する炭素との間にありうる。Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニル、たとえばＣ６またはＣ７シクロアルケニルは、Ｒ５で置換され、Ｃ６−Ｃ１０アリールはＲ６で置換されうる。
【００１２】
Ｒ６は、ハロ（たとえばクロロまたはブロモ）、Ｃ１−Ｃ６アルキル（たとえばＣＨ３）、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル（たとえばＣＦ３）またはＣ１−Ｃ６ハロアルコキシ（たとえばＯＣＦ３）であってもよい。Ｒ５は、たとえば、アミノ置換基のような置換基で置換されたＣ１−Ｃ６アルキルまたはアミノカルボニル（たとえば、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アルコキシカルボニルまたはほかの置換基のような置換基で置換された、置換されたアミノカルボニルがある。各事例で、該置換基はさらに置換基で置換されうる）でありうる。
【００１３】
ｎは０でありうる。
【００１４】
Ｒ１およびＲ２はＣ５−Ｃ１０シクロアルケニルを形成しうる。
【００１５】
Ｒ１およびＲ２はＣ６−Ｃ１０アリール形成しうる。
【００１６】
ＸはＮＲ７でもよく、Ｒ７は、たとえば、水素またはＣＨ３でありうる。
【００１７】
Ｒ１およびＲ２はＣ５−Ｃ１０シクロアルケニルを形成し、これは、Ｒ５で置換されていてもよく、Ｒ３およびＲ４はＣ６−Ｃ１０アリールを形成し、これはＲ６で置換されてもよい。
【００１８】
ある実施形態では、シクロアルケニル二重結合は、Ｒ１に結合する炭素とＲ２に結合する炭素との間にありうる。Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニル、たとえば、Ｃ６またはＣ７シクロアルケニルは、Ｒ５で置換され、Ｃ６−Ｃ１０アリールはＲ６で置換されうる。
【００１９】
Ｒ６は、ハロ（たとえばクロロ）、Ｃ１−Ｃ６アルキル（たとえばＣＨ３）、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル（たとえばＣＦ３）またはＣ１−Ｃ６ハロアルコキシ（たとえばＯＣＦ３）でありうる。Ｒ５はアミノカルボニルでありえる。
【００２０】
ｎは０でありうる。
【００２１】
Ｒ１およびＲ２はＣ５−Ｃ１０シクロアルケニルを形成しうる。
【００２２】
Ｒ１およびＲ２はＣ６−Ｃ１０アリールを形成しうる。
【００２３】
ＸはＮＲ７で、Ｒ７は、たとえば、水素またはＣＨ３でありうる。
【００２４】
Ｒ１およびＲ２は、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニルを形成することができ、これは、Ｒ５で置換されてもよく、Ｒ３およびＲ４は、Ｃ６−Ｃ１０アリールを形成することができ、これはＲ６で置換されてもよい。
【００２５】
ある実施形態では、シクロアルケニル二重結合は、Ｒ１に結合する炭素とＲ２に結合する炭素との間にあることができる。Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニル、たとえば、Ｃ６またはＣ７シクロアルケニルは、Ｒ５で置換され、Ｃ６−Ｃ１０アリールはＲ６で置換されうる。これらの化合物は、式（ＩＩ）または式（ＩＩＩ）：
【００２６】
【化６】
2008513370.tif 000004
で表される。
【００２７】
Ｒ６は、ハロ（たとえばクロロまたはブロモ）、Ｃ１−Ｃ６アルキル（たとえばＣＨ３）、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル（たとえばＣＦ３）またはＣ１−Ｃ６ハロアルコキシ（たとえばＯＣＦ３）でありうる。Ｒ５はアミノカルボニルでありうる。該化合物は、図１または化合物（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）または（ＶＩＩ）から選択される化合物であってもよい。
【００２８】
【化７】
2008513370.tif 000005
一例では、化合物は、単一異性体の高い鏡像体過剰率を有する式（ＶＩ）で表される化合物であって、優勢な異性体の旋光性が負、たとえば−１４．１（ｃ＝０．３３，ＤＣＭ）、またはたとえば［α］Ｄ２５−４１．２°（ｃ０．９６，ＣＨ３ＯＨ）である化合物でありえる。第二の例では、化合物は、単一異性体の高い鏡像体過剰率を有する式（ＩＶ）で表される化合物であって、優勢な異性体の旋光性が負である化合物でありえる。ある例では、優勢な異性体が、前記アスターリスク炭素に対応するように、式（ＶＩ）の化合物の負の異性体と同じ絶対配置を有する場合、式（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩＩ）の化合物を単一異性体の高い鏡像体過剰率を有して投与する。
【００２９】
化合物は、非ＳＩＲＴ１サーチュインより、たとえば、少なくとも１．５、２、５または１０倍優先的にＳＩＲＴ１を抑制するのが好ましい。ＳＩＲＴ１に関する化合物のＫｉは５００、１００、５０または４０ｎＭ未満でありえる。
【００３０】
ある例では、化合物は、ＦｏｘＯ１またはＦｏｘＯ３のようなＦＯＸＯ転写因子の活性を低下させる。
【００３１】
その量は、障害の少なくとも１つの症状を軽減するのに有効な量である。疾患または障害としては、たとえば、加齢性障害、老人性障害、加齢性感受性要因を持つ障害、腫瘍性障害、非腫瘍性障害、神経障害、心臓血管障害、代謝異常、皮膚障害または皮膚組織の状態を挙げることができる。一実施形態では、疾患または障害としては、神経変性障害または神経変性障害が少なくとも部分的にポリグルタミン凝集によって媒介されうる障害、たとえば、ハンチントン病、球脊髄性筋萎縮症（ＳＢＭＡまたはケネディ病）歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症（ＤＲＰＬＡ）、脊髄小脳失調症１（ＳＣＡ１）、脊髄小脳失調症２（ＳＣＡ２）、マチャド−ジョゼフ病（ＭＪＤ；ＳＣＡ３）、脊髄小脳失調症６（ＳＣＡ６）、脊髄小脳失調症７（ＳＣＡ７）および脊髄小脳失調症１２（ＳＣＡ１２）を挙げることができる。神経変性障害として、パーキンソン型またはアルツハイマー型を挙げることができる。
【００３２】
疾患または障害は、少なくとも部分的にサーチュインに関連またはサーチュインによって媒介され、たとえば、疾患または障害は、少なくとも部分的にサーチュインに媒介される脱アセチル化、たとえば、過剰なサーチュイン活性、または過剰濃度の脱アセチル化されたｐ５３、ＦｏｘＯ１またはＦｏｘＯ３に関連または該脱アセチル化によって媒介されうる。サーチュインとしては、ＳＩＲＴ１、たとえばヒトＳＩＲＴ１を挙げうる。
【００３３】
疾患または障害としては癌を挙げうる。その量は、癌または腫瘍細胞集団、転移のリスク、または腫瘍細胞増殖の速度を減少させるのに効果的な量である。その量は、アポトーシスを調整する（たとえば増やす）のに効果的な量である。
【００３４】
疾患または障害は、メタボリック症候群または糖尿病（たとえば、Ｉ型糖尿病またはＩＩ型糖尿病）のような代謝病を上げうる。量は、たとえば、インシュリン感受性を増加させる、インシュリン分泌などを増加させるまたはブドウ糖濃度を低下させるのに効果的な量である。ある例では、疾患または障害は、心障害関連糖尿病のような代謝病に関連する。
【００３５】
疾患または障害として、肥満、異常脂質血症または高脂血症のような脂肪関連障害を挙げうる。その量は、たとえば、被験体の重さを減少させるまたは被験体の重さの増加を妨げるのに効果的な量である。
【００３６】
疾患または障害は、アルツハイマー病またはパーキンソン病のような神経障害を挙げうる。その量は、たとえば、該神経障害の１以上の症状を減少するのに効果的な量である。
【００３７】
方法は、該化合物を複数回投与する、たとえば該化合物を反復投与することを含みうる。化合物は、１回以上ボーラスで、あるいは連続的に投与しうる。化合物は外から（たとえば、注射、経口摂取、吸入など）、または体内で、たとえば移植デバイスによって投与しうる。
【００３８】
方法は、化合物を局部に投与しうる。
【００３９】
その量は、被験体の少なくともいくつかの細胞中のサーチュイン基質（たとえば、核タンパク質、たとえばヒストンまたは転写因子、たとえばｐ５３、ＦｏｘＯ１またはＦｏｘＯ３）のアセチル化を増加させるのに効果的な量である。
【００４０】
被験体は、哺乳類、たとえば、ヒトを挙げることができる。
【００４１】
被験体は、そのような治療または予防を必要とするものと言ってもよい。
【００４２】
方法は、さらに、被験体の細胞におけるサーチュイン活性を評価することによって、サーチュインをエンコードする被験体の核酸におけるヌクレオチド相同性を評価することによって、新生細胞または新生細胞の増殖（たとえば腫瘍）に関し被験体を評価することによって、被験体の細胞内の遺伝的組成物または遺伝子の発現を評価する（たとえば腫瘍生検）ことによって、そのような治療を必要とする被験体を同定することを含みうる。
【００４３】
さらに、方法は、たとえば、被験体を撮像することによって、被験体における腫瘍サイズを評価することによって、被験体の細胞内のサーチュイン活性を評価することによって、副作用、たとえば腎機能に関し被験体を評価することによって、被験体を監視することを含みうる。
【００４４】
別の態様では、本発明は、ＦｏｘＯ転写因子のような、基質のサーチュインに媒介される脱アセチル化を抑制する方法に関する。該方法は、サーチュインと式（Ｉ）の化合物を接触させることを含む。抑制は、インビトロで、無細胞培地、細胞培養、または哺乳類、好ましくはヒトのような生物体内で起こりうる。
【００４５】
更なる態様では、本発明は、複数の化合物を評価する方法であって、ａ）各化合物が式（Ｉ）で表される複数の化合物を含む化合物のライブラリーを用意することと、ｂ）該ライブラリーの複数の化合物のそれぞれに関し、ｉ）化合物をサーチュインの脱アセチル化酵素機能ドメインを含むサーチュイン試験タンパク質に接触させ；ｉｉ）化合物の存在下、化合物とサーチュイン試験タンパク質との間の相互反応を評価することとを含む方法に関する。
【００４６】
実施形態は、以下の１以上を含みうる。
【００４７】
一実施形態では、化合物とサーチュイン試験タンパク質との間の相互反応の評価に、サーチュイン試験タンパク質の酵素活性を評価することが含まれる。
【００４８】
一実施形態では、化合物とサーチュイン試験タンパク質との間の相互反応の評価に、化合物とサーチュイン試験タンパク質との間の結合相互反応を評価することが含まれる。
【００４９】
さらに、方法は、評価の結果に基づいて、基質に関する脱アセチル化酵素活性を調整する化合物を選択することも含みうる。基質として、アセチル化リジンアミノ酸、アセチル化転写因子（たとえば、ｐ５３、ＦｏｘＯ１またはＦｏｘＯ３）またはそのアセチル化ペプチド、アセチル化ヒストンまたはそのアセチル化ペプチドが挙げられる。
【００５０】
また、方法は、評価の結果に基づいて、基質のサーチュイン脱アセチル化酵素活性を調整する化合物を選択することをさらに含んでもよい。
【００５１】
方法は、評価の結果に基づいて、サーチュインを調整する化合物を選択することをさらに含んでもよい。
【００５２】
一態様では、本発明は、標的化剤と化合物とを含む複合体であって、該標的化剤および化合物は共役結合で結合し、該化合物は式（Ｉ）で表される複合体に関する。
【００５３】
実施形態は、以下の１以上を含みうる。
【００５４】
標的化剤として、たとえば癌特異抗原のような細胞表面タンパク質に対して特異的な抗体を挙げうる。
【００５５】
標的化剤として、合成ペプチドを挙げうる。
【００５６】
標的化剤として、自然に発生するタンパク質のドメインを挙げうる。
【００５７】
別の態様において、本発明は、本明細書で記載する化合物と、本明細書で記載する疾患を治療するために使用する指示書とを含むキットに関する。該キットは、化合物の名前の構造のレンダリングを含む印刷物をさらに含んでもよい。
【００５８】
別の態様では、本発明は、構造を分析あるいは設計する方法であって、本明細書に記載の化合物、たとえば式（Ｉ）の化合物に関するコンピュータ作成画像または構造体（好ましくは三次元画像または構造体）を用意することと、第二化合物、たとえば本明細書記載の別の化合物（たとえば式（Ｉ）の化合物、ＮＡＤ）、標的、たとえばサーチュイン（たとえばヒトサーチュイン、たとえば、ＳＩＲＴ１、ＳＩＲＴ２、ＳＩＲＴ３、ＳＩＲＴ４、ＳＩＲＴ５、ＳＩＲＴ６またはＳＩＲＴ７）、またはオフターゲット分子、たとえば、ＳＩＲＴ１以外のサーチュイン、たとえばＳＩＲＴ２またはＳＩＲＴ３、または非サーチュインヒストン脱アセチル化酵素に関するコンピュータ作成画像または構造（好ましくは三次元画像または構造体）を用意することと、第一および第二化合物の構造、たとえば、結合角、分子間または分子内距離、原子または部分（たとえば第一または第二世代化合物）の位置に関するパラメーターのような構造、または標的あるいはオフターゲット分子と相互反応するまたはこれを抑制する化合物の予測される能力を比較することとを含む方法に関する。
【００５９】
好ましい実施形態では、構造体は、インビトロで、インビボで、または標的またはオフターゲット分子を持つシリコ中でさらに評価される。
【００６０】
さらなる態様では、本発明は、構造体に関するまたは構造体を同定する情報、たとえばインビトロ、インビボまたはシリコ中での構造体の活性に関する情報、たとえば少なくとも５、１０、５０または１００個の記録を含むデータベースに関する。
【００６１】
一態様では、本発明は、複数個の記録を含み、該記録のそれぞれが、ａ）本明細書で記載される構造、たとえば式（Ｉ）の構造を有する化合物に関する情報、または該化合物を同定する情報と、ｂ）  たとえば患者パラメーターのような、腫瘍性障害または神経変性障害に関する患者のパラメーターに関する情報とを有するデータベースに関する。
【００６２】
一態様では、本発明は、化合物を評価する方法であって、式（Ｉ）の構造を有する第一化合物、または該構造に関する情報を持つデータレコードを用意することと；式（Ｉ）の構造を有するまたは有しない第二化合物、または該構造に関する情報を持つデータレコードを用意することと；第一化合物と第二化合物とを、たとえば、インビボ、インビトロまたはシリコ中で評価することと；第二化合物の相互作用する能力、たとえば、ＳＩＲＴ１のようなサーチュインを抑制する能力を、第一化合物と比較し、第二化合物のＳＩＲＴ１と相互作用する能力を評価することとを含む方法に関する。
【００６３】
他の態様では、本発明は、本明細書に記載された任意の化合物と、医薬的に許容しうる担体とを含む組成物に関する。該組成物は、追加の治療剤、たとえば抗腫瘍剤または抗神経変性剤を含んでもよい。また、このような組成物を、今記載した用途のための医薬の製造に使用することも本発明の範囲内である。
【００６４】
別の態様では、本発明は、被験体において、望ましくない細胞増殖、たとえばｐ５３依存性癌、またはｐ５３非依存性癌のような癌によって特徴付けられる疾患を治療するまたは予防する方法に関する。該方法は、ＳＩＲＴ１拮抗薬を投与することを含む。たとえば、ＳＩＲＴ１拮抗薬としては、ＳＩＲＴ１のアンチセンス、ＲＮＡｉ、抗体、細胞内発現体、および本明細書に記載する方法で同定された他の化合物、たとえば、細胞を発現するＳＩＲＴ１内のアポトーシスを誘発する化合物の１種以上のものでありうる。
【００６５】
好ましい実施形態では、該方法は、ＳＩＲＴ１拮抗薬を、１種以上の治療剤、たとえば、望ましくない細胞増殖を治療するための治療剤と組み合わせて投与することを含む。該治療剤として、たとえば、１種以上の化学治療剤、放射性同位元素、および細胞毒が挙げられる。化学治療剤の例として、タキソール、サイトカラシンＢ、グラミシジンＤ、マイトマイシン、エトポシド、テノポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ブスルファン、シスプラチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラシンジオン、ミトキサントロン、ミトラマイシン、クロラムブシル、ゲムシタビン、アクチノマイシン、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、ピューロマイシン、メイタンシノイドおよびこれらの類縁体または同族体が挙げられる。追加の治療剤として、抗代謝剤（たとえば、メトトレキサート、６−メルカプトプリン、６−チオグアニン、シタラビン、５−フルオロウラシルデカルバジン）、アルキル化剤（たとえば、メクロレタミン、チオエパクロラムブシル、ＣＣ−１０６５、メルファラン、カルムスチン（ＢＳＮＵ）およびロムスチン（ＣＣＮＵ）、シクロフォスファミド、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンＣおよびシス−ジクロロジアミン白金（ＩＩ）（ＤＤＰ）シスプラチン）、アントラサイクリン（たとえば、ダウノルビシン（旧ダウノマイシン）およびドキソルビシン）、抗生物質（たとえば、ダクチノマイシン（旧アクチノマイシン）、ブレオマイシン、ミトラマイシンおよびアントラマイシン（ＡＭＣ））、および抗有糸分裂剤（たとえば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、タキソールおよびメイタンシノイド）などが挙げられるが、これらに限定されない。放射性同位元素としては、α、βおよび／またはγ放射核を含むことができる。放射性同位元素の例としては、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、１３１Ｉ、２１１Ａｔ、１８６Ｒｅ、９０Ｙおよび１１７Ｌｕを挙げることができる。
【００６６】
ＳＩＲＴ１拮抗薬および治療剤は、同時にまたは別々に投与することができる。
【００６７】
また、包装された製品も本発明の範囲内である。包装された製品は、容器、該容器中にある前記化合物の１種、および容器に備えられた説明文（たとえば標識または装入物）であって、本明細書に記載された障害（たとえば、癌または神経変性障害）、本明細書で述べたいかなるのものも含む疾患または疾患症状を治療するための化合物の投与を指示する説明文を含む。
【００６８】
被験体は、哺乳類、好ましくはヒトである。該被験体は、非ヒト被験体たとえば、動物モデルであってもよい。ある実施形態では、方法は被験体を同定することをさらに含む。そのような治療を必要とする被験体の同定は、被験体または健康管理専門家の判断において行うことができ、主観的（たとえば意見）または客観的（たとえば、試験または診断方法による測定可能値）であってもよい。
【００６９】
用語「哺乳類」は、マウス、ラット、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウサギ、ヤギおよびウマ、サル、イヌ、ネコを始めとする生物体を含み、好ましくはヒトである。
【００７０】
用語「治療する」または「治療した」は、疾患、たとえば、感染、疾患の症状、または疾患に対する素因を治癒、癒す、軽減する、除去する、改変する、矯正する、軽減する、改善するまたは影響を及ぼす目的で被験体に本明細書に記載の化合物を投与することを言う。
【００７１】
前記化合物の有効量は、約０．１ｍｇ／Ｋｇ〜約５００ｍｇ／Ｋｇの範囲、あるいは約１〜約５０ｍｇ／Ｋｇの範囲でもよい。また、効果的な投与量は、投与の経路、および他の薬剤との併用の可能性に依って変化するであろう。
【００７２】
用語「ハロ」または「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素の任意のラジカルを言う。
【００７３】
用語「アルキル」は、炭化水素鎖を言い、直鎖または分岐状鎖でもよく、示された数の炭素原子を含む。たとえば、Ｃ１−Ｃ１２アルキルは、１〜１２個（両端を含む）の炭素原子をその中に含む基を示す。用語「ハロアルキル」は、１個以上の水素原子がハロで置き換えられたアルキル基を言い、水素がハロによって置き換えられたアルキル部分も含む（たとえば、パーフルオロアルキル）。用語「アリールアルキル」または「アラルキル」は、アルキル水素原子がアリール基によって置き換えられたアルキル部分を言う。アラルキルは、１個を超える水素原子がアリール基によって置き換えられた基を含む。「アリールアルキル」または「アラルキル」は、ベンジル、２−フェニルエチル、３−フェニルプロピル、９−フルオレニル、ベンズヒドリルおよびトリチル基を含む。
【００７４】
用語「アルキレン」は、二価のアルキル、たとえば、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−および−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−を言う。
【００７５】
用語「アルケニル」は、２〜１２個の炭素原子を含み、１個以上の二重結合を有する直鎖または分岐状炭化水素鎖を言う。アルケニル基の例として、アリル、プロペニル、２−ブテニル、３−ヘキセニルおよび３−オクテニル基が挙げられるが、これらに限定されない。二重結合炭素の１つは、場合によっては、アルケニル置換基の結合点であってもよい。用語「アルキニル」は、２〜１２個の炭素原子を含み、１個以上の三重結合を有することで特徴付けられる直鎖または分岐状炭化水素鎖を言う。アルキニル基の例として、エチニル、プロパルギルおよび３−ヘキシニルが挙げられるが、これらに限定されない。三重結合炭素の１つは、場合によっては、アルキニル置換基の結合点であってもよい。
【００７６】
用語「アルキルアミノ」および「ジアルキルアミノ」は、それぞれ、−ＮＨ（アルキル）および−ＮＨ（アルキル）２ラジカルを言う。用語「アラルキルアミノ」は、−ＮＨ（アラルキル）ラジカルを言う。用語アルキルアミノアルキルは、（アルキル）ＮＨ−アルキル−ラジカルを言い、用語ジアルキルアミノアルキルは、（アルキル）２Ｎ−アルキル−ラジカルを言い、用語「アルコキシ」は、−Ｏ−アルキルラジカルを言う。用語「メルカプト」は、ＳＨラジカルを言う。用語「チオアルコキシ」は、−Ｓ−アルキルラジカルを言う。用語チオアリールオキシは、−Ｓ−アリールラジカルを言う。
【００７７】
用語「アリール」は、置換しうる任意の環原子が（たとえば、１個以上の置換基によって）置換されうる芳香族単環式、二環式または三環式炭化水素環構造体を言う。アリール部分の例として、フェニル、ナフチルおよびアントラセニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７８】
本明細書で使用される用語「シクロアルキル」は、３〜１２個の炭素を有する、飽和単環式、二環式、三環式または多環式炭化水素基を言う。環原子のいずれも、（たとえば、１個以上の置換基によって）置換されうる。シクロアルキル基は、縮合環を含みうる。縮合環は、共通の炭素原子を共有する環である。シクロアルキル部分の例として、シクロプロピル、シクロヘキシル、メチルシクロヘキシル、アダマンチル、およびノルボルニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７９】
用語「ヘテロシクリル」は、非芳香族の３〜１０員環単環式、８〜１２員環二環式または１１〜１４員環三環式環構造を言い、該環構造は、単環式の場合は１〜３個のヘテロ原子、二環式の場合は１〜６個のヘテロ原子、三環式の場合は、１〜９個のヘテロ原子を有し、該ヘテロ原子は、Ｏ、ＮまたはＳである環構造（たとえば、炭素原子と、単環式の場合１〜３個、二環式の場合１〜６個、三環式の場合１〜９個のＮ、ＯまたはＳのヘテロ）である。該ヘテロ原子は、場合によっては、ヘテロシクリル置換基の結合点であってもよい。環原子のいかなるものも、置換されうる（たとえば、１個以上の置換基によって）。ヘテロシクリル基は、縮合環を含みうる。縮合環は、共通の炭素原子を共有する環である。ヘテロシクリルの例として、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、ピペリジニル、モルホリノ、ピロリニル、ピリミジニル、キノリニル、およびピロリジニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８０】
用語「シクロアルケニル」は、５〜１２個の炭素、好ましくは５〜８個の炭素を有する、部分的に不飽和の、非芳香族の単環式、二環式、三環式または多環式炭化水素基を言う。不飽和炭素は、場合によっては、シクロアルケニル置換基の結合点であってもよい。任意の環原子は（たとえば１個以上の置換基によって）置換されうる。シクロアルケニル基は縮合環を含みうる。縮合環は、共通の炭素原子を共有する環である。シクロアルケニル部分の例として、シクロヘキセニル、シクロヘキサジエニルまたはノルボルネニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８１】
用語「ヘテロシクロアルケニル」は、部分的に飽和の、非芳香族５〜１０員環単環式、８〜１２員環二環式、または１１〜１４員環三環式環構造を言い、単環式の場合１〜３個のヘテロ原子、二環式の場合１〜６個のヘテロ原子、三環式の場合１〜９個のヘテロ原子を有し、該ヘテロ原子は、Ｏ、ＮまたはＳから選択される（たとえば、炭素原子と、単環式の場合１−３個の、二環式の場合１−６個の、三環式の場合１〜９個のＮ、Ｏ、またはＳのヘテロ原子）。不飽和炭素またはヘテロ原子は、場合によっては、ヘテロシクロアルケニル置換基の結合点であってもよい。任意の環原子は（たとえば、１個以上の置換基によって）置換されうる。ヘテロシクロアルケニル基は、縮合環を含みうる。縮合環は共通の炭素原子を共有する環である。ヘテロシクロアルケニルの例として、テトラヒドロピリジルおよびジヒドロピラニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８２】
用語「ヘテロアリール」は、芳香族５〜８員環単環式、８〜１２員環二環式または１１〜１４員環三環式環構造を言い、単環式の場合１〜３個のヘテロ原子、二環式の場合１〜６個のヘテロ原子、三環式の場合１〜９個のヘテロ原子を有し、該ヘテロ原子は、Ｏ、ＮまたはＳから選択される（たとえば、炭素原子と、単環式の場合１〜３個の、二環式の場合１〜６個の、三環式の場合１〜９個のＮ、ＯまたはＳのヘテロ原子）。任意の環原子は（たとえば、１個以上の置換基によって）置換されうる。
【００８３】
用語「オキソ」は、酸素原子を言い、これは、炭素に結合する場合はカルボニルを、窒素と結合する場合はＮ−オキサイドを、硫黄と結合する場合はスルフォキシドを形成する。
【００８４】
用語「アシル」は、アルキルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、アリールカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、またはヘテロアリールカルボニル置換基を言い、どれも（たとえば１個以上の置換基によって）さらに置換されてもよい。
【００８５】
用語「アミノカルボニル」、「アルコキシカルボニル」、「ヒドラジノカルボニル」およびヒドロキシアミノカルボニルは、それぞれ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（アルキル）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２ＮＨ２および−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２ＮＨ２ラジカルを言う。
【００８６】
用語「アミド」は、Ｎが結合点である-ＮＨＣ（Ｏ）−ラジカルを言う。
【００８７】
用語「置換基」は、アルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロシクリル、ヘテロシクロアルケニル、シクロアルケニル、アリールまたはヘテロアリール基上にある任意の原子に「置換された」基を言う。いかなる原子も置換されうる。適切な置換基として、アルキル（たとえば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２直鎖または分岐状鎖アルキル）、シクロアルキル、ハロアルキル（たとえば、ＣＦ３のようなパーフルオロアルキル）、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、ヘテロシクリル、アルケニル、アルキニル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルケニル、アルコキシ、ハロアルコキシ（たとえば、ＯＣＦ３のようなフルオロアルコキシ）、ハロ、ヒドロキシ、カルボキシ、カルボキシレート、シアノ、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、ＳＯ３Ｈ、サルフェート、フォスフェイト、メチレンジオキシ（−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−（式中、酸素は隣接する原子に結合する）、エチレンジオキシ、オキソ、チオキソ（たとえば、Ｃ＝Ｓ）、イミノ（アルキル、アリール、アラルキル）、Ｓ（Ｏ）ｎアルキル（式中、ｎは０〜２）、Ｓ（Ｏ）ｎアリール（式中、ｎは０〜２）、Ｓ（Ｏ）ｎヘテロアリール（式中、ｎは０〜２）、Ｓ（Ｏ）ｎヘテロシクリル（式中、ｎは０〜２）、アミン（モノ−、ジ−、アルキル、シクロアルキル、アラルキル、ヘテロアラルキル、アリール、ヘテロアリールおよびこれらの組み合わせ）、エステル（アルキル、アラルキル，、ヘテロアラルキル、アリール、ヘテロアリール）、アミド（モノ−、ジ−、アルキル、アラルキル、ヘテロアラルキル、アリール、ヘテロアリールおよびこれらの組み合わせ）、スルホンアミド（モノ−、ジ−、アルキル、アラルキル、ヘテロアラルキルおよびこれらの組み合わせ）が挙げられるが、これらに限定されない。一態様では、基上の置換基は、独立して、前記置換基の単一のもの、あるいはサブセットの任意のものである。別の態様では、置換基それ自身が前記置換基の任意のもので置換されてもよい。
【００８８】
本発明の１以上の実施形態の詳細を、以下に図面とともに説明する。本発明の他の特徴、目的および利点は、明細書の記載、図面および請求の範囲から明らかになるであろう。
【００８９】
本明細書に挙げた全ての参考資料は、印刷物、電子的、コンピュータで読める保存媒体、または他の形のもののいかなるものであろうと、要約、記事、雑誌、刊行物、テキスト、学術論文、インターネットのウェブサイト、データベース、特許、特許出願、および特許公開を含むその全体が参考によって本明細書に組み入れられる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００９０】
（詳細な説明）
（例示的な化合物の構造）
本発明を実施する際使用しうる例示的な化合物は、一般式（Ｉ）で表され、環の構成原子、たとえば、以下の式（Ｉ）のＸおよびＹとして、それぞれ１個または２個の酸素、窒素または硫黄原子を含む、置換された５または６員環の核を含む。
【００９１】
【化８】
2008513370.tif 000006
いかなる環炭素原子も置換されうる。たとえば、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、置換されたまたは置換されていないアルキル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロシクリル、ヘテロシクロアルケニル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリールなど（これらに限定されない）を含んでもよい。５または６員環の核は、飽和すなわち、二重結合を含んでいなくてもよく、また部分的または完全に飽和、すなわちそれぞれ１個のまたは２個の二重結合を含んでもよい。ｎ＝０の場合、「Ｘ」は、酸素、硫黄または窒素、たとえば、ＮＲ７であってもよい。置換基Ｒ７は、水素、アルキル、たとえばＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４アルキル、ＳＯ２（アリール）、アシルまたは環窒素はカルバメートまたはウレア基の一部を形成してもよいが、これらに限定されない。ｎ＝１の場合、Ｘは、ＮＲ７、ＯまたはＳであり、Ｙは、ＮＲ７’、ＯまたはＳである。ＸおよびＹは、ヘテロ原子の任意の組み合わせ、たとえば、Ｎ、Ｎ、Ｎ、Ｏ、Ｎ、Ｓなどである。
【００９２】
式（Ｉ）の化合物の好ましいサブセットとして、１個のまたは好ましくは縮合した２個の環が５または６員環を形成するものが挙げられ、たとえば、Ｒ１とＲ２とがそれらが結合する炭素と一緒になっておよび／またはＲ３とＲ４，とがそれらが結合する炭素と一緒になって、たとえば、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルキル（たとえば、Ｃ５、Ｃ６またはＣ７）、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロシクリル（たとえば、Ｃ５、Ｃ６またはＣ７）、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニル（たとえば、Ｃ５、Ｃ６またはＣ７）、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロシクロアルケニル（たとえば、Ｃ５、Ｃ６またはＣ７）、Ｃ６−Ｃ１０アリール（たとえば、Ｃ６、Ｃ８またはＣ１０）、またはＣ６−Ｃ１０ヘテロアリール（たとえば、Ｃ５またはＣ６）を形成することができる。縮合環の組み合わせとしては、以下に記載の１以上のものを含んでもよいが、これらに限定されない。
【００９３】
【化９】
2008513370.tif 000007
好ましい組み合わせとしては、Ｂ，たとえば、Ｃ６アリールおよびＣ６シクロアルケニルを有するもの（Ｂ１）、およびＣ、たとえばＣ６アリールおよびＣ７シクロアルケニルを有するもの（Ｃ１）が挙げられる。
【００９４】
【化１０】
2008513370.tif 000008
これらの縮合環構造は、それぞれ、場合によっては、置換基で置換されてもよく、置換基として、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０）、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６）、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０）、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６）、Ｃ６−Ｃ１０アリール（Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０）、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロアリール（Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０）、Ｃ７−Ｃ１２アラルキル（Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２）、Ｃ７−Ｃ１２ヘテロアラルキル（Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２）、Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル（Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８）、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル（Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２）、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル（Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０、Ｃ１１、Ｃ１２）、Ｃ５−Ｃ１０シクロアルケニル（Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０）、Ｃ５−Ｃ１０ヘテロシクロアルケニル（Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０）、カルボキシ、カルボキシレート、シアノ、ニトロ、アミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６）、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６）、メルカプト、ＳＯ３Ｈ、スルフェート、Ｓ（Ｏ）ＮＨ２、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、フォスフェイト、Ｃ１−Ｃ４アルキレンジオキシ（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４）、オキソ、アシル、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノカルボニル（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６）、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルアミノカルボニル（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６）、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシカルボニル（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０）、Ｃ１−Ｃ１０チオアルコキシカルボニル（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０）、ヒドラジノカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルヒドラジノカルボニル（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６）、Ｃ１−Ｃ６ジアルキルヒドラジノカルボニル（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６）、ヒドロキシアミノカルボニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。好ましい置換基として、ハロ（たとえば、フルオロ、クロロ、ブロモ）、Ｃ１−Ｃ１０アルキル（たとえば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、Ｃ７、Ｃ８、Ｃ９、Ｃ１０）、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル（たとえば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６など、ＣＦ３）、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシル（たとえば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６など、ＯＣＦ３）、またはアミノカルボニルが挙げられる。２個の縮合環上の置換パターンは要求どおりに選択され、たとえば、１個の環は置換され、もう１個は置換されていなくてもよく、または２個の環とも１〜５個の置換基（１、２、３、４、５個の置換基）で置換されてもよい。各環上の置換基の数は、同じでも異なっていてもよい。好ましい置換パターンを以下に示す。
【００９５】
【化１１】
2008513370.tif 000009
ある実施形態では、ｎが０でＸがＮＲ７の場合、窒素の置換基Ｒ７は、たとえば、４〜６個の炭素、１〜３個の窒素、０〜２個の酸素および０〜２個の硫黄を含む縮合環の１個との環状構造を形成することができる。この環状構造は、場合によっては、オキソまたはＣ１−Ｃ６アルキルで置換されてもよい。
【００９６】
本発明で考える置換基および変化しうる因子の組み合わせは、安定な化合物の形成となるものだけである。本明細書で使用する用語「安定な」は、製造を可能にするのに充分な安定性を有する化合物を言い、以下に詳述する目的（たとえば、被験体への治療的または予防的投与）のために有用であるのに充分な時間、化合物の完全な状態を保つものである。
【００９７】
例示的な化合物として、以下＊に記載の表１に示すものが挙げられる。
【００９８】
（表１：例示的な化合物）
【００９９】
【化１２】
2008513370.tif 000010
【０１００】
【化１３】
2008513370.tif 000011
【０１０１】
【化１４】
2008513370.tif 000012
【０１０２】
【化１５】
2008513370.tif 000013
【０１０３】
【化１６】
2008513370.tif 000014
＊Ａで示される活性を持つ化合物は、ＩＣ５０が１．０μＭ未満である。Ｂで示される活性を持つ化合物は、ＩＣ５０が１．０μＭと１０．０μＭとの間である。Ｃで示される活性を持つ化合物は、ＩＣ５０が１０．０μＭを超える。Ｄで示される活性を持つ化合物は、このアッセイでは試験しなかった。
【０１０４】
本発明の実施に有益でありえる化合物は、インビトロ（細胞および非細胞ベース）およびインビボ方法によって同定することができる。これらの方法の説明は、実施例で記載する。
【０１０５】
（例示的な化合物の合成）
本明細書に記載の化合物は、商業的供給元（たとえば、Ａｓｉｎｅｘ，モスクワ，ロシア；Ｂｉｏｎｅｔ，カメルホード，英国；ＣｈｅｍＤｉｖ，サンディエゴ，カリフォルニア；Ｃｏｍｇｅｎｅｘ，ブダペスト，ハンガリー；Ｅｎａｍｉｎｅ，キエフ，ウクライナ；ＩＦ  Ｌａｂ，ウクライナ；Ｉｎｔｅｒｂｉｏｓｃｒｅｅｎ，モスクワ，ロシア；Ｍａｙｂｒｉｄｇｅ，ティンタージェル，ＵＫ；Ｓｐｅｃｓ，オランダ；Ｔｉｍｔｅｃ，ニューアーク，ＤＥ；Ｖｉｔａｓ−Ｍ  Ｌａｂ，モスクワ，ロシア）から、または市販の出発物質および試薬を使用して以下に示す従来の方法で合成することによって得ることができる。たとえば、例示的な化合物４は、以下のスキーム１で示すように合成することができる。
【０１０６】
（スキーム１）
【０１０７】
【化１７】
2008513370.tif 000015
臭素化β−ケトエステル１を４−クロロアニリンと縮合し、次いで環化してインドール２を得ることができる。エステルケン化によって酸３を得ることができる。最後に、ＰｙＡＯＰとのアミノ化によってアミド４を得ることができる。他の方法も業界では公知であり、たとえば、米国特許第３，８５９，３０４号明細書、米国特許第３，７６９，２９８号明細書、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９７４，７４，５４９５を参照のこと。上記の合成は、たとえば、３，５−ジクロロアニリン、３−クロロアニリンおよび４−ブロモアニリンのような他のアニリンにも広げることができる。位置異性体、たとえば５、は、たとえば４−クロロ−Ｎ−メチルアニリンのようなＮ−置換アニリンを使用して得てもよい。
【０１０８】
本明細書に記載の化合物は、反応混合物から分離することができ、さらに、カラムクロマトグラフィー、高圧液体クロマトグラフィー、または再結晶のような方法によって精製することができる。当業者には認識されるように、本明細書中の式で表される化合物を合成するさらなる方法が、当業者には明らかになるであろう。さらに、所望の化合物を得るために、種々の合成ステップを変更した順序でまたは順番どおりに実施してもよい。本明細書に記載された化合物の合成において有用な合成化学変換反応および保護基手順（保護および脱保護）は、業界で公知であり、たとえば、Ｒ．Ｌａｒｏｃｋ，Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ（１９８９）；Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，２ｄ．Ｅｄ．，Ｊｏｈｎ  ＷｉｌｅｙおよびＳｏｎｓ（１９９１）；Ｌ．ＦｉｅｓｅｒおよびＭ．Ｆｉｅｓｅｒ，Ｆｉｅｓｅｒ  ａｎｄ  Ｆｉｅｓｅｒ’ｓ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  ＷｉｌｅｙおよびＳｏｎｓ（１９９４）；およびＬ．Ｐａｑｕｅｔｔｅ，ｅｄ．，Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  ＷｉｌｅｙおよびＳｏｎｓ（１９９５）、およびこれらに続く版に記載されたものが挙げられる。
【０１０９】
本発明の化合物は、１個以上の不斉中心を含んでもよく、したがって、ラセミ体およびラセミ混合物、単一エナンチオマー、個々のジアステレオマーおよびジアステレオマー混合物であってもよい。これらの化合物のそのような異性体形体は全て、明確に本発明に含まれる。また、本発明の化合物は、たとえば環または二重結合の存在に起因する制限のような結合の回転を制限しうる結合（たとえば炭素−炭素結合）または置換基を含んでもよい。したがって、全てのシス／トランスおよびＥ／Ｚ異性体も明らかに本発明に含まれる。また、本発明の化合物は、複数の互変異生体の形で表されてもよく、そのような場合、たとえ単一の互変異性体しか表されていなかったとしても、本発明は本明細書に記載の化合物の全ての互変異性体を明らかに含む（たとえば、環構造のアルキル化は、複数の部分でのアルキル化が起こり得、本発明はそのような反応生成物を全て含む）。そのような化合物の異性体は全て明らかに本発明に含まれる。本明細書に記載される化合物の結晶形態は全て明らかに本発明に含まれる。
【０１１０】
異性体、たとえば立体異性体の分離に有用な技術は、当該技術の範囲内であり、Ｅｌｉｅｌ，Ｅ．Ｌ．；Ｗｉｌｅｎ，Ｓ．Ｈ．；Ｍａｎｄｅｒ，Ｌ．Ｎ．Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，ＮＹ，１９９４．に記載されている。たとえば、化合物３または４は、ジアステレオマー塩、たとえばキラル塩基、たとえば（＋）または（−）α−メチルベンジルアミンとの塩の形成を通して、またはキラルカラムを使用する高性能液体クロマトグラフィーを通して、高い鏡像体過剰率（たとえば、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％またはそれ以上）とすることができる。ある実施形態では、粗生成物４を直接キラルカラムで精製し、鏡像異性体に富む化合物を提供する。
【０１１１】
例示の目的のため、化合物４のエナンチオマーを以下に示す。
【０１１２】
【化１８】
2008513370.tif 000016
ある例では、本明細書に記載の化合物は、１種の異性体（たとえば、Ｒ異性体またはＳ異性体）が高い鏡像体過剰率で存在するように投与する。一般に、負の旋光性、たとえば−１４．１（ｃ＝０．３３，ＤＣＭ）または［α］Ｄ２５−４１．１８°（ｃ０．９６０，ＣＨ３ＯＨ）を有する化合物４の異性体は、＋３２．８（ｃ＝０．３８，ＤＣＭ）または［α］Ｄ２５＋２２．７２°（ｃ０．９１０，ＣＨ３ＯＨ）の正の旋光性を持つエナンチオマーより、ＳｉｒＴ１酵素に対する活性が大きい。したがって、ある例では、疾患を治療するために、負の旋光性を有する異性体の鏡像体過剰率が高い化合物４を被験体に投与することが有用である。
【０１１３】
化合物４のエナンチオマーを立体異性体の１例示として挙げたが、たとえば、以下の化合物６および７で示すような他の立体異性体もまた本発明では考慮される。
【０１１４】
【化１９】
2008513370.tif 000017
式４で表される化合物と同様に、ある例では、そのエナンチオマーよりＳｉｒＴ１に対する親和性が大きな、化合物６または７の異性体を被験体に投与するのが有用である。たとえば、ある例では、アミド（または他の置換基）が化合物４の負の異性体と同じ配置を有する（−）光学回転異性体が豊富な化合物７を投与するのが有用である。
【０１１５】
ある例では、アミド（または他の置換基）の立体化学的構造が、負の旋光性を有する化合物４中のアミドに対応する、以下の構造体の１つを持つ化合物を投与するのが有用である。
【０１１６】
【化２０】
2008513370.tif 000018
（式中、ｎは０〜４の整数である。）
本発明の化合物は、化合物そのものと同時に、もし該当するなら、その塩およびプロドラグも含む。たとえば、塩は、アニオンと本明細書で記載した化合物の正に帯電した置換基（たとえば、アミノ）との間に形成されうる。適切なアニオンとして、塩素、臭素、ヨウ素、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩、トリフルオロ酢酸塩、および酢酸塩が挙げられる。同様に、塩は、カチオンと本明細書で記載した化合物の負に帯電した置換基（たとえば、カルボキシレート）との間に形成されうる。適切なカチオンとして、ナトリウムイオン、カリウムイオン、マグネシウムイオン、カルシウムイオン、およびテトラメチルアンモニウムイオンのようなアンモニウムカチオンが挙げられる。プロドラグの例として、エステル類および他の医薬的に許容しうる誘導体であって、被験体に投与した時、活性化合物を提供しうるものが挙げられる。
【０１１７】
本発明の化合物は、選択された生物学的性質、たとえば特定の組織を標的とすること、を増強するように、適正な機能を追加することによって変性してもよい。そのような変性は業界では公知であり、所定の生物学的区分（たとえば、血液、リンパ系、中枢神経系）への生物学的浸透を増加させること、経口での利用可能性を増加させること、注射による投与を可能にするよう溶解性を増加させること、代謝を変更すること、および排出速度を変更することがある。
【０１１８】
別の実施形態では、本明細書に記載の化合物は、該化合物の誘導体および／または化学ライブラリーの製造のためのコンビナトリアルケミストリー技術において利用されるプラットホームまたはスカフォードとして使用してもよい。化合物のそのような誘導体およびライブラリーは、生物学的活性を有し、特定活性を有する化合物を同定し、設計するのに有用である。本明細書に記載の化合物を利用するのに適したコンビナトリアル技術は、Ｏｂｒｅｃｈｔ，Ｄ．およびＶｉｌｌａｌｇｒｏｄｏ，Ｊ．Ｍ．，Ｓｏｌｉｄ−Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ  Ｃｏｎｂｉｎａｔｏｒｉａｌ  ａｎｄ  Ｐａｒａｌｌｅｌ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｓｍａｌｌ−Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ−Ｗｅｉｇｈｔ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄ  Ｌｉｂｒａｒｉｅｓ，Ｐｅｒｇａｍｏｎ−Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｌｉｍｉｔｅｄ（１９９８）によって例示されるように、業界で公知であり、「スプリット・アンド・プール」または「パラレル」合成技術、固相および液相技術、およびエンコーディング技術（たとえば、Ｃｚａｒｎｉｋ，Ａ．Ｗ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏ．，（１９９７）１，６０参照）のような技術も含む。したがって、一実施形態は、本明細書に記載の化合物を、誘導体または化学ライブラリーを生成するために使用する方法であって、１）複数個のウェルを持つ物体を用意することと；２）各ウェルに本明細書に記載の方法で同定した化合物を１種以上入れることと；３）各ウェルに追加の１種以上の化学物質を入れることと；４）各ウェルからの１種以上の生成物を単離することとを含む方法に関する。別の実施形態は、誘導体または化学ライブラリーを生成するために本明細書に記載の化合物を使用する方法であって、１）固体支持体に結合された本明細書に記載の化合物の１種以上を用意することと；２）該固体支持体に結合された本明細書に記載の方法で同定された化合物の１種以上を、追加の化学物質の１種以上で処理することと；３）得られた１種以上の生成物を前記固体支持体から単離することとを含む方法に関する。先に記載した方法において、「タグ」または識別子または標識化部分は、所望の生成物またはそれらの中間体の追随、同定または単離を促進するよう、本明細書に記載の化合物またはそれらの誘導体に結合されおよび／または切り離されてもよい。そのような部分は、業界で公知である。前記方法において使用される化学物質として、たとえば、溶剤、試薬、触媒、保護基および脱保護基試薬などが挙げられる。そのような化学物質の例として、種々の合成および保護基の化学テキストおよび本明細書に参照した処置で明示したものが挙げられる。
【０１１９】
（サーチュイン類）
サーチュイン類は、遺伝子のサイレント・インフォメーション・レギュレーター（ＳＩＲ）ファミリーの一種である。サーチュイン類は、Ｐｆａｍファミリー「ＳＩＲ２」〜ＰＦ０２１４６中のヒットとして描かれるアミノ酸配列として定義されるＳＩＲ２ドメインを含むタンパク質である。このファミリーは、ＩＮＴＥＲＰＲＯデスクリプション（エントリーＩＰＲ００３０００）としてＩＮＴＥＲＰＲＯデータベース中にある。タンパク質配列中の「ＳＩＲ２」ドメインの存在を同定するため、および興味のあるポリペプチドまたはタンパク質が特定のプロフィールを持つことについて決定を下すために、タンパク質のアミノ酸配列を、ＨＭＭのＰｆａｍデータベース（たとえば、Ｐｆａｍデータベース、リリース９）に対してデフォルトパラメーターを使用して検索することができる（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｓａｎｇｅｒ．ａｃ．ｕｋ／Ｓｏｆｔｗａｒｅ／Ｐｆａｍ／ＨＭＭ＿ｓｅａｒｃｈ）。ＳＩＲ２ドメインは、Ｐｆａｍ中にＰＦ０２１４６として、ＩＮＴＥＲＰＲＯ中にＩＮＴＥＲＰＲＯデスクリプション（エントリＩＰＲ００３０００）として、インデックスが作成されている。たとえば、検索プログラムのＨＭＭＥＲパッケージの一部として入手しうるｈｍｍｓｆプログラムは、ＭＩＬＰＡＴ００６３用のファミリー特定デフォルトプログラムであり、スコア１５は、ヒットを決定するデフォルト閾値スコアである。あるいは、ヒットを決定する閾値スコアは、（たとえば８ビットに）下げることができる。Ｐｆａｍデータベースの説明は、「Ｔｈｅ  Ｐｆａｍ  タンパク質ファミリーデータベース」Ｂａｔｅｍａｎ  Ａ，Ｂｉｒｎｅｙ  Ｅ，Ｃｅｒｒｕｔｉ  Ｌ，Ｄｕｒｂｉｎ  Ｒ，Ｅｔｗｉｌｌｅｒ  Ｌ，Ｅｄｄｙ  ＳＲ，Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ−Ｊｏｎｅｓ  Ｓ，Ｈｏｗｅ  ＫＬ，Ｍａｒｓｈａｌｌ  Ｍ，Ｓｏｎｎｈａｍｍｅｒ  ＥＬ（２００２）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ３０（１）：２７６−２８０およびＳｏｎｈａｍｍｅｒら（１９９７）Ｐｒｏｔｅｉｎｓ２８（３）：４０５−４２０中にあり、ＨＭＭの詳細な説明は、たとえば、Ｇｒｉｂｓｋｏｖら（１９９０）Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．１８３：１４６−１５９；Ｇｒｉｂｓｋｏｖら（１９８７）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８４：４３５５−４３５８；Ｋｒｏｇｈら（１９９４）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２３５：１５０１−１５３１；およびＳｔｕｌｔｚら（１９９３）Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉ．２：３０５−３１４中にある。
【０１２０】
ＳＩＲ２遺伝子ファミリーのメンバーによってエンコードされているタンパク質は、２５０個アミノ酸核ドメインにおいて高い配列変換率を示す。このファミリーのよく特徴付けられている遺伝子は、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ  ＳＩＲ２であり、これは、酵母接合型、テロメア位置効果および細胞老化を特定する情報を含むサイレンシングＨＭ座位に関与する（Ｇｕａｒｅｎｔｅ，１９９９；Ｋａｅｂｅｒｌｅｉｎら，１９９９；Ｓｈｏｒｅ，２０００）。酵母ｓｉｒ２タンパク質は、ヒストン脱アセチル化酵素のファミリーに属する（Ｇｕａｒｅｎｔｅ，２０００；Ｓｈｏｒｅ，２０００で精査）。Ｓｉｒ２タンパク質は、補助因子としてＮＡＤを使用することができる脱アセチル化酵素である（Ｉｍａｉら，２０００；Ｍｏａｚｅｄ，２００１；Ｓｍｉｔｈら，２０００；Ｔａｎｎｅｒら，２０００；ＴａｎｎｙおよびＭｏａｚｅｄ，２００１）。多くが遺伝子の抑制に関与する他の脱アセチル化酵素とは異なり、Ｓｉｒ２は、トリコスタチンＡ（ＴＳＡ）のように、ヒストン脱アセチル化酵素インヒビターに対して比較的非感応的である（Ｉｍａｉら，２０００；Ｌａｎｄｒｙら，２０００ａ；Ｓｍｉｔｈら，２０００）。ＳＩＲＴ１のような哺乳類のＳｉｒ２同族体は、ＮＡＤ依存性脱アセチル化酵素活性を持つ（Ｉｍａｉら，２０００；Ｓｍｉｔｈら，２０００）。
【０１２１】
例示的な哺乳類のサーチュインとして、ＳＩＲＴ１、ＳＩＲＴ２およびＳＩＲＴ３が挙げられ、たとえば、ヒトＳＩＲＴ１、ＳＩＲＴ２およびＳＩＲＴ３がある。本明細書に記載の化合物は、たとえば５００、２００、１００、５０または４０ｎＭ未満のＫｉで、哺乳類のサーチュイン、たとえばＳＩＲＴ１、ＳＩＲＴ２またはＳＩＲＴ３の１つ以上の活性を抑制する。たとえば、該化合物は、たとえば、天然または人工の基質、たとえば本明細書に記載の基質に関して、脱アセチル化酵素活性を以下の様に抑制する。
【０１２２】
ＳＩＲＴ１用の天然基質は、ヒストン、ｐ５３およびＦｏｘＯ１およびＦｏｘＯ３のようなＦｏｘＯ転写因子を含む。ＳＩＲＴ１タンパク質は、他の数多くのタンパク質に結合し、これを「ＳＩＲＴ１結合パートナー」と言う。たとえば、ＳＩＲＴ１はｐ５３と結合し、ｐ５３のパスウェイ、たとえば、ｐ５３のＫ３７０、Ｋ３７１、Ｋ３７２、Ｋ３８１および／またはＫ３８２、またはこれらのリジンを１種以上含むペプチドにおいて役割を果たす。たとえば、ペプチドは５個と１５個のアミノ酸の間の長さを持ちうる。また、ＳＩＲＴ１タンパク質は、ヒストンを脱アセチル化しうる。たとえば、ＳＩＲＴ１は、ヒストンＨ３のリジン９または１４、これらのリジンを１個以上含む小さなペプチドを脱アセチル化しうる。ヒストン脱アセチル化は局所クロマチン構造を変更し、結果的にその隣の遺伝子の転写を調整する。ＳＩＲＴ１結合パートナーの多くは、転写因子、たとえばタンパク質特定のＤＮＡ部位を認識するである。たとえば、ＳｉｒＴ１は、フォークヘッドタンパク質（すなわち、ＦｏｘＯタンパク質）を脱アセチル化し、下方制御する。ＳＩＲＴ１とＳＩＲＴ１結合パートナーとの間の相互反応は、ゲノムの特的の領域へＳＩＲＴ１を送達することができ、たとえばヒストンのような基質の局所の局所発現およびと区的の領域に局在する転写因子としうる。
【０１２３】
ＳＩＲＴ２用の天然基質として、チューブリン、たとえば、α−チューブリンが挙げられる。たとえば、Ｎｏｒｔｈら、Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ．２００３Ｆｅｂ；１１（２）：４３７−４４を参照のこと。例示的な基質として、α−チューブリンのリジン４０を含むペプチドが挙げられる。
【０１２４】
さらに他の例示的なサーチュイン基質として、サイトクロームｃおよびそのアセチル化ペプチドが挙げられる。
【０１２５】
用語「ＳＩＲＴ１タンパク質」および「ＳＩＲＴ１ポリペプチド」は、本明細書では、交換可能に使用され、２５０個のアミノ酸で保存されたＳＩＲＴ１触媒ドメインに少なくとも２５％の同一性のあるポリペプチド、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１の２５８〜４５１個のアミノ酸残基を言う。ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１はヒトＳＩＲＴ１のアミノ酸配列を示す。好ましい実施形態では、ＳＩＲＴ１ポリペプチドは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１のアミノ酸残基２５８個と４５１個との間のアミノ酸配列に少なくとも３０、４０、５０、６０、７０、８０、８５、９０、９５、９９％の相同性でありえる。他の実施形態では、ＳＩＲＴ１ポリペプチドは、フラグメント、たとえば、ＮＡＤおよび／またはＮＡＤ類縁体存在下に基質を脱アセチル化することができ、および／または標的タンパク質、たとえば転写因子に結合することができる、ＳＩＲＴ１のフラグメントの可能性がある。このような機能は、たとえば本明細書に記載の方法によって評価することができる。他の実施形態では、ＳＩＲＴ１ポリペプチドは、「完全長」ＳＩＲＴ１ポリペプチドである。本明細書で使用する用語「完全長」は、少なくとも自然に発生したＳＩＲＴ１ポリペプチド（または本明細書に記載の他のタンパク質）の長さを持つポリペプチドを言う。「完全長」ＳＩＲＴ１ポリペプチドまたはそのフラグメントは、また、他の配列、たとえば、精製タグ、または他の結合化合物、たとえば結合蛍光団、または補助因子を含むことができる。また、用語「ＳＩＲＴ１ポリペプチド」は、配列、または１個以上のサブスティテューション、たとえば、自然に発生するＳｉｒ２ファミリー・メンバーに関し、１個のサブスティテューションおよび１０個のサブスティテューションの間を含む変異体も含む。「ＳＩＲＴ１活性」は、ＳＩＲＴ１の１種以上の活性を言い、たとえば基質（たとえば、アミノ酸、ペプチドまたはタンパク質）の脱アセチル化、たとえば転写因子（たとえばｐ５３）またはヒストンタンパク質（たとえば、ＮＡＤおよび／またはＮＡＤ類縁体のような補助因子の存在下）および標的、たとえば転写因子のような標的タンパク質への結合がある。
【０１２６】
本明細書で使用するように、タンパク質の「生物学的に活性な一部」または「機能的ドメイン」は、分子内または分子間相互反応、たとえば結合または触媒相互反応、のような相互反応に関与する、関心のあるタンパク質のフラグメントを含む。分子間相互反応は、特定の結合相互反応または酵素相互反応でもよい（たとえば、該相互反応は一過性であり、共有結合が形成あるいは破壊される）。分子間相互反応は、タンパク質と別のタンパク質との間、タンパク質と別の化合物との間、タンパク質の第一分子と第二分子との間（たとえば、二量体化相互反応）で起こりうる。タンパク質の生物学的に活性な一部／機能的ドメインとして、完全長の天然タンパク質より少ない数のアミノ酸を含み、天然タンパク質の少なくとも１種の活性を発揮するタンパク質のアミノ酸配列に充分に相同性のあるまたは該配列由来のアミノ酸配列を含むペプチドが挙げられる。生物学的に活性な一部／機能的ドメインは、トランケーション分析、部位特異的突然変異形成およびタンパク質分解のような種々の技術によって同定することができる。変異体またはタンパク質分解性フラグメントは、適正な生化学的または生物学的（たとえば遺伝的）アッセイによってその活性を分析することができる。ある実施形態では、機能的ドメインは、独立して折畳まれる。一般的に、生物学的に活性な一部は、タンパク質、たとえばＳＩＲＴ１、の活性を少なくとも１つ有するドメインまたはモチーフを含む。例示的なドメインとして、ＳＩＲＴ１核触媒ドメインが挙げられる。タンパク質の生物学的に活性な一部／機能的ドメインは、たとえば、長さが１０個、２５個、５０個、１００個、２００個またはそれ以上のアミノ酸であるポリペプチドである。タンパク質の生物学的に活性な一部／機能的ドメインは、ＳＩＲＴ１を調整する展開剤用の標的として使用することができる。
【０１２７】
以下は、例示的なＳＩＲ配列である。
【０１２８】
【化２１】
2008513370.tif 000019
【０１２９】
【化２２】
2008513370.tif 000020
本明細書に記載の例示的な化合物は、本明細書に記載の天然または人工基質に関し、ＳＩＲＴ１またはその機能的ドメインの活性を少なくとも１０、２０、２５、３０、５０、８０または９０％まで抑制できる。たとえば、該化合物のＫｉは、５００、２００、１００または５０ｎＭ未満である。
【０１３０】
また、本明細書に記載の化合物は、サーチュインと転写因子との間の複合をたとえば、複合体形成、変形および／または安定性を増加または減少などの調整ができる。例示的なサーチュイン−ＴＦ複合体として、Ｓｉｒ２−ＰＣＡＦ、ＳＩＲ２−ＭｙｏＤ、Ｓｉｒ２−ＰＣＡＦ−ＭｙｏＤ、Ｓｉｒ２−ｐ５３、Ｓｉｒ２−ＦｏｘＯ１およびＳｉｒ２−ＦｏｘＯ３が挙げられる。本明細書に記載の化合物は、また、Ｓｉｒ２調節遺伝子、たとえば、Ｆｕｌｃｏら（２００３）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ１２：５１−６２の表１に記載の遺伝子の発現を調整できる。
【０１３１】
（インビトロアッセイ）
ある実施形態では、ＳＩＲＴ１とのたとえば結合による相互反応を、インビトロでアッセイすることができる。反応混合物は、ＮＡＤおよび／またはＮＡＤ類縁体のようなＳＩＲＴ１補助因子を含みうる。
【０１３２】
他の実施形態では、反応混合物は、ＳＩＲＴ１結合パートナー、たとえば転写因子、たとえば、ｐ５３またはＦｏｘＯ１またはＦｏｘＯ３のようなｐ５３以外の転写因子を含みうる。化合物は、たとえばインビトロアッセイでスクリーニングすることができ、ＳＩＲＴ１とＳＩＲＴ１結合パートナーとの間の相互反応を調整する、たとえば転写因子のような、試験化合物の能力を評価することができる。このタイプのアッセイは、たとえば、他の成分に対する標識化成分の結合を複合体中の標識化化合物を検出することによって測定できるように、該化合物の１種と放射性同位元素または酵素標識とをカップリングさせることによって行われる。成分は、１２５Ｉ、３５Ｓ、１４Ｃまたは３Ｈを直接または間接的に標識化し、該放射性同位元素を、放射能放出の直接カウントによって、またはシンチレーションカウントによって検出する。あるいは、成分を、ホースラディッシュパーオキシダーゼ、アルカリ性リン酸塩またはルシフェラーゼで、酵素的に標識化することができ、酵素標識は、適正な基質の生成物への変換の測定によって検出することができる。試験化合物と標的との間の物理的相互反応を評価するために、競合アッセイを使用することもできる。
【０１３３】
無細胞アッセイは、該２成分を相互作用させ、結合させ、したがって、分離および／または検出できる複合体を形成させるのに充分な条件および時間で、標的タンパク質（たとえばＳＩＲＴ１）と試験化合物との反応混合物を製造することを含む。
【０１３４】
２個の分子の間の相互反応も、たとえば、少なくとも１個の分子を傾向的に標識化する蛍光アッセイを使用することによって検出することができる。そのようなアッセイの１つの例として、蛍光エネルギー移動（蛍光共鳴エネルギー移動用のＦＥＴまたはＦＲＥＴ）（たとえば、Ｌａｋｏｗｉｃｚら，米国特許第５，６３１，１６９号明細書；Ｓｔａｖｒｉａｎｏｐｏｕｌｏｓら，米国特許第４，８６８，１０３号明細書）が挙げられる。第一「ドナー」分子上の蛍光団標識は、発光蛍光エネルギーが第二「アクセプター」分子上の蛍光標識によって吸収される、言い換えれば、吸収エネルギーにより蛍光を発することができるように選択される。あるいは、「ドナー」タンパク質分子は単に、トリプトファン残基の自然蛍光エネルギーを利用するだけであってもよい。光の異なる波長を発する標識は、「アクセプター」分子標識が「ドナー」の標識とは差別化されるように選択される。標識間のエネルギー移動の効率は、分子を分離する距離に関連するので、分子間の空間関係を判定することができる。結合が分子間に起こる条件においては、アッセイにおける「アクセプター」分子標識の蛍光発光は、最大であるべきである。ＦＥＴ結合事象は、業界でよく知られた標準蛍光測定検出手段（たとえば、蛍光測定器を用いて）によって簡単に測定することができる。
【０１３５】
蛍光アッセイの別の例は、蛍光偏光法（ＦＰ）である。ＦＰでは、標識化するために、ただ１個の成分を必要とするだけである。結合相互反応は、標識化された成分の分子サイズの変化によって検出される。該サイズの変化は、成分のタンブリング速度を変え、ＦＰにおける変化として検出する。たとえば、Ｎａｓｉｒら，（１９９９）Ｃｏｍｂ  Ｃｈｅｍ  ＨＴＳ  ２：１７７−１９０；Ｊａｍｅｓｏｎら，（１９９５）Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ２４６：２８３；Ｓｅｅｔｈａｌａら（１９９８）Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ，２５５：２５７参照。蛍光偏光は、たとえば、テカンポラリオンン（登録商標）リーダーを使用して、マルチウェルプレート中でモニターすることができる。たとえば、Ｐａｒｋｅｒら（２０００）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇｉｎｇ５：７７-８８；およびＳｈｏｅｍａｎら（１９９９）３８，１６８０２−１６８０９参照。
【０１３６】
別の実施形態では、ＳＩＲＴ１タンパク質の標的分子への結合能力の測定を、リアルタイムの生体分子相互反応分析（ＢＩＡ）を使用することによって達成することができる（たとえば、Ｓｊｏｌａｎｄｅｒ，Ｓ．およびＵｒｂａｎｉｃｚｋｙ，Ｃ．（１９９１）Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．６３：２３３８−２３４５およびＳｚａｂｏら（１９９５）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．５：６９９−７０５参照）。「表面プラズモン共鳴」または「ＢＩＡ」はリアルタイムの生物特異的相互反応を、いかなる反応体も標識することなく、検出する（たとえば、ＢＩＡｃｏｒｅ）。結合表面での量の変化（結合が起こったことの表示）は、表面近傍の光の屈折率の変化（表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）の光学現象）となり、生物学的分子間のリアルタイム反応の指標として使用することができる検出可能信号となる。
【０１３７】
一実施形態では、ＳＩＲＴ１を固相上に固定する。固相上に固定された該ＳＩＲＴ１／試験化合物複合体はたとえば結合反応のような反応の終点で検出することができる。たとえば、ＳＩＲＴ１は、固体表面に固定することができ、試験化合物（これは固定されていない）は、本明細書で記載する検出可能な標識で直接または間接的に標識化することができる。
【０１３８】
タンパク質の１つまたは両方の非複合型から複合型の分離を促進するため、およびアッセイの自動化を適応化するために、ＳＩＲＴ１または抗ＳＩＲＴ１抗体のいずれかを固定化することが望ましいこともある。候補化合物の存在下または非存在下での試験化合物のＳＩＲＴ１タンパク質への結合、またはＳＩＲＴ１タンパク質と第二成分との相互反応は、反応試薬を含有するのに適切ないかなる容器内においても達成することができる。そのような容器の例として、マイクロタイタープレート、試験管、および微量遠心管が挙げられる。一実施形態では、融合タンパク質を、タンパク質の１つまたは両方をマトリックスに結合させることのできるドメインを加えて提供することができる。たとえば、グルタチオン−Ｓ−トランスファーゼ／ＳＩＲＴ１融合タンパク質またはグルタチオン−Ｓ−トランスファーゼ／標的融合タンパク質は、グルタチオン・セファローズ・ビーズ（シグマ化学薬品、セントルイス、ミズリー州）またはグルタチオン誘導マイクロタイタープレートに吸着させることができ、次いで、これを試験化合物、または試験化合物および非吸着標的タンパク質またはＳＩＲＴ１タンパク質と組み合わせ、得られた混合物を複合物形成ができる条件（たとえば、塩およびｐＨに関し生理学的条件）下で培養する。培養の後、前記ビーズまたはマイクロタイタープレートを洗浄して結合していない成分を除去し、ビーズの場合マトリックスに固定化された複合物を、たとえば先に記載したように、直接または間接的に測定する。あるいは、複合体をマトリックスから解離し、ＳＩＲＴ１結合のレベルまたは活性を、標準的な技術を使用して測定する。
【０１３９】
マトリックス上にＳＩＲＴ１タンパク質または標的分子のどちらかを固定化する他の技術として、ビオチンおよびストレプトアビジンの接合を使用することが挙げられる。ビオチニル化ＳＩＲＴ１タンパク質または標的分子は、業界で公知の技術を使用して、ビオチン−ＮＨＳ（Ｎ−ヒドロキシ−スクシンイミド）から製造し（たとえば、ビオチニル化キット、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、ロックフォード、イリノイ）、ストレプトアビジンが塗布された９６穴プレート（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）のウェル内に固定化することができる。
【０１４０】
アッセイを行うために、非固定化成分を、表面が塗布された固定された成分に加える。反応が完了した後、形成されたいかなる複合体も固体表面に固定化されて残っている条件下で、未反応成分を除去（たとえば、洗浄によって）する。固体表面に固定された複合体の検出は、多数の方法で達成することができる。前もって非固定化成分を予備標識化する場合は、表面に固定化された標識の検出は、複合体が形成されたことを示唆する。前もって非固定化された成分を予備標識化しない場合は、間接標識を使用して、たとえば、固定化された成分に特異的な標識抗体（すなわち、該抗体は、たとえば標識化抗−Ｉｇ抗体で直接または間接的に標識化できる）を使用して、表面に固定された複合体を検出することができる。
【０１４１】
一実施形態では、このアッセイは、ＳＩＲＴ１タンパク質または標的分子と反応するが、ＳＩＲＴ１タンパク質のその標的分子への結合は妨げない抗体を利用して実施する。そのような抗体を、プレートのウェルに誘導し、抗体結合によってウェル中に捕捉された標的ＳＩＲＴ１タンパク質を未結合とすることができる。ＧＳＴ−固定化複合体に関して先に記載した事項に加えて、そのような複合体を検出する方法として、ＳＩＲＴ１タンパク質または標的分子に反応する抗体を使用する複合体の免疫検出法、およびＳＩＲＴ１タンパク質または標的分子に関連する酵素活性に基づく酵素リンクアッセイが挙げられる。
【０１４２】
あるいは、無細胞アッセイは、液体相で行うことができる。そのようなアッセイでは、反応生成物は、多数の標準的な技術の任意のものによって反応しなかった成分と分離される。これらの技術として、遠心分画（たとえば、Ｒｉｖａｓ，Ｇ．およびＭｉｎｔｏｎ，Ａ．Ｐ．，（１９９３）Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｓｃｉ１８：２８４−７）；クトマトグラフィー（ゲルろ過クトマトグラフィー、イオン交換クトマトグラフィー）；電気泳動（たとえば、Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．ら，ｅｄｓ．Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ１９９９，Ｊ．Ｗｉｌｅｙ：ニューヨーク）；および免疫沈降反応（たとえば、Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．ら，ｅｄｓ．（１９９９）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊ．Ｗｉｌｅｙ：ニューヨーク）が挙げられるが、これらに限定されない。前記の樹脂およびクロマトグラフィー技術は、当業者に公知である（たとえば、Ｈｅｅｇａａｒｄ，Ｎ．Ｈ．，（１９９８）Ｊ  Ｍｏｌ  Ｒｅｃｏｇｎｉｔ１１：１４１−８；Ｈａｇｅ，Ｄ．Ｓ．，ａｎｄ  Ｔｗｅｅｄ，Ｓ．Ａ．（１９９７）Ｊ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ  Ｂ  Ｂｉｏｍｅｄ  Ｓｃｉ  Ａｐｐｌ．６９９：４９９−５２５参照）。さらに、溶液から複合体を精製することなく結合を検出するために、本明細書に記載するように、蛍光エネルギー移動を便宜上利用してもよい。
【０１４３】
好ましい実施形態では、アッセイは、ＳＩＲＴ１タンパク質またはその生物学的に活性な一部を、ＳＩＲＴ１と結合してアッセイ混合物を形成する公知の化合物と接触させることと、該アッセイ混合物を試験化合物と接触させることと、ＳＩＲＴ１タンパク質と相互反応する試験化合物の能力を測定することとを含み、ＳＩＲＴ１タンパク質と相互反応する試験化合物の能力を測定することが、試験化合物の持つＳＩＲＴ１またはその生物学的に活性な一部に優先的に結合する能力、あるいは標的分子の活性を調整する能力を、公知の化合物と比較して、測定することを含む。
【０１４４】
例示的なアッセイ法として、入手可能なバイオモルによる「Ｆｌｕｏｒ−ｄｅ−Ｌｙｓ」アッセイ原理に基づく、ＳｉｒＴ１酵素アッセイの１５３６ウェルフォーマット、すなわち蛍光発生がある（ｗｗｗ．ｂｉｏｍｏｌ．ｃｏｍ／ｓｔｏｒｅ／Ｐｒｏｄｕｃｔ＿Ｄａｔａ＿ＰＤＦｓ／ａｋ５００．ｐｄｆ）。このアッセイでは、リシル残基のｅ−アミノ機能脱アセチル化を、ブロックされていないｅ−アミノ機能に依存性があり、蛍光アミノメチルクマリンを生成する、蛍光「発生工程と結びつける。蛍光は、市販の可視読み取り器上でよむことができる。
【０１４５】
（さらなるアッセイ）
本明細書で記載する化合物または化合物のライブラリーは、疾患または障害用のモデルシステム、または本明細書に記載の疾患または障害用の他の公知モデルを使用して、評価することもできる。
【０１４６】
筋萎縮に関する試験化合物の効果を評価するモデルは、たとえば、１）たとえば、大腿中央部での右坐骨神経を切断することによる除神経に起因するラット内側ひ腹筋筋肉量損失、２）固定化、たとえば屈曲９０°に固定された右足関節に起因するラット内側ひ腹筋筋肉量損失、３）下肢固定に起因するラット内側ひ腹筋筋肉量損失（たとえば、米国特許出願第２００３−０１２９６８６号明細書参照）、４）悪液質サイトカイン、インターロイキン−１（ＩＬ−１）による治療に起因する骨格筋萎縮（Ｒ．Ｎ．Ｃｏｏｎｅｙ，Ｓ．Ｒ．Ｋｉｍｂａｌｌ，Ｔ．Ｃ．Ｖａｒｙ，Ｓｈｏｃｋ７，１−１６（１９９７））；および５）グルココルチコイド、デキサメタソンによる治療に起因する骨格筋萎縮（Ａ．Ｌ．Ｇｏｌｄｂｅｒｇ，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ２４４，３２２３−９（１９６９））が挙げられる。モデル１、２および３は、筋肉が経験する神経性活性および／または外部負荷を様々な程度に変更することによって筋萎縮を誘発する。モデル４および５は、たとえば、Ｇｏｖｅｒｍａｎら，Ｃｅｌｌ．７２：５５１−６０（１９９３）に記載されるように、それらのパラメーターＭＳに直接影響することなく萎縮を誘発し（実験的自己免疫脳脊髄炎（ＥＡＥ））、およびＢｒｏｋら，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．，１８３：１７３−８５（２００１）によって精査されたような霊長類モデルである。
【０１４７】
ＡＭＤ（老化関連黄斑変性）用の例示的な動物モデルとして、滲出性（湿潤）黄斑退化をシミュレートするレーザー誘起マウスモデル、Ｂｏｒａら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．，１００：２６７９−８４  （２００３）；ＡＭＤの「地図状の萎縮」形態と関連する特徴となる、カテプシンＤの突然変異形態を発現するトランスジェニックマウス（Ｒａｋｏｃｚｙら，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．，１６１：１５１５−２４（２００２））；およびＣＮＶとなる網膜色素上皮においてＶＥＧＦを過剰発現するトランスジェニックマウス、Ｓｃｈｗｅｓｉｎｇｅｒら，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１５８：１１６１−７２（２００１）が挙げられる。
【０１４８】
パーキンソン病の例示的な動物モデルとして、ドーパミン作動性細胞毒１−メチル−４−フェニル−１，２，３，６−テトラヒドロピリジン（ＭＰＴＰ）で治療することによって、パーキンソン症を示す霊長類（たとえば、米国特許出願第２００３００５５２３１号明細書およびＷｉｃｈｍａｎｎら，Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，９９１：１９９−２１３（２００３）を参照）；６−ヒドロキシドーパミン病変ラット（たとえば、Ｌａｂ．Ａｎｉｍ．Ｓｃｉ．，４９：３６３−７１（１９９９））；およびトランスジェニック無脊椎動物モデル（たとえば、Ｌａｋｓｏら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，８６：１６５−７２（２００３）およびＬｉｎｋ，Ｍｅｃｈ．Ａｇｅｉｎｇ  Ｄｅｖ．，１２２：１６３９−４９（２００１））。
【０１４９】
ＩＩ型糖尿病の例示的な分子モデルは、欠陥Ｎｋｘ−２．２またはＮｋｘ−６．１を有するトランスジェニックマウス（米国特許第６，１２７，５９８号明細書）；ツッカー糖尿病性脂肪ｆａ／ｆａ（ＺＤＦ）ラット（米国特許第６５６９８３２号明細書）；自然に肥満が進行し、次いで度々顕著な２型糖尿病が進行するアカゲザル（Ｈｏｔｔａら，Ｄｉａｂｅｔｓ，５０：１１２６−３３（２００１）；および２型糖尿病様インシュリン抵抗性のある優性ネガティブＩＧＦ−Ｉ受容体（ＫＲ−ＩＧＦ−ＩＲ）を持つトランスジェニックマウスが挙げられる。
【０１５０】
神経障害に関する例示的な動物および細胞モデルとして、ビンクリスチン誘起感覚運動神経障害のあるマウス（米国特許出願第５４２０１１２号明細書）またはウサギ（Ｏｇａｗａら，Ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，２１：５０１−１１（２０００））；自律神経障害の研究のためのストレプトゾトシン（ＳＴＺ）−糖尿病ラット（Ｓｃｈｍｉｄｔら，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．，１６３：２１−８（２００３））；および進行性運動神経障害（ｐｍｎ）マウス（Ｍａｒｔｉｎら，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ，７５：９−１６（２００１））が挙げられる。
【０１５１】
（構造活性相関関係および構造ベースの設計）
たとえばサーチュインを拮抗するまたは作動する、サーチュインと相互反応する化合物を製造するために、構造活性相関関係（ＳＡＲ）および構造ベースの設計原理を使用することもできる。ＳＡＲは、少なくとも１つの関連アッセイにおいて、関連化合物の活性に関する情報を提供する。相関化は、関心のある化合物の構造的特徴と活性との間でなされる。たとえば、本明細書に記載の化合物に関連する化合物のファミリーに関し、ＳＡＲを評価することによって、アゴニストの活性を必要とする１以上の構造的特徴を同定することが可能であるかもしれない。次いで、これらの特徴を変更した化合物のライブラリーを化学的に製造することができる。別の例では、相互作用すると予測される単一化合物を、インビトロまたはインビボで製造し、評価する。
【０１５２】
構造ベースの設計は、サーチュインおよび化合物の機能的ドメインの物理的相互反応の構造モデルを決定することも含みうる。構造モデルは、相互反応を改善するようにまたは望ましくない相互反応を減らすようになど、化合物をどのように設計しうるかを示すことができる。化合物のサーチュインとの相互反応は、たとえば、結晶構造の溶液化、ＮＭＲまたはコンピューター・ベース・モデル化、たとえばドッキング法によって同定することができる。たとえば、Ｅｗｉｎｇら，Ｊ  Ｃｏｍｐｕｔ  Ａｉｄｅｄ  Ｍｏｌ  Ｄｅｓ．２００１Ｍａｙ；１５（５）：４１１−２８を参照のこと。
【０１５３】
ＳＡＲおよび構造ベースの設計アプローチも、加えて他の方法も、ファーマコフォアを同定するために使用することができる。ファーマコフォアは、化学基の異なる三次元（３Ｄ）構成配置として同定される。そのような基の選択は、生物学的活性に適している可能性がある。医薬的に活性な分子は、効果を発揮するために、被験体の体内で１つ以上の分子構造と相互反応するに違いなく、また所望の分子の機能特性はこれらの相互反応から誘導されるものであるので、各活性化合物は、この相互反応が起こるのを可能にする、化学基の異なる構成配置を含むに違いない。一般的に記述子センターと呼ばれる化学基は、（ａ）１個の原子または複数の原子の基；（ｂ）擬似原子、たとえば、環の中央、または分子の塊の中央；（ｃ）ベクトル、たとえば、原子ペア、電子孤立対方向、または平面に対する法線などによって表すことができる。一度、式にすれば、たとえば、ファーマコフォアと適合する構造を持つもののような、化学化合物のデータベースを検索するために、ファーマコフォアを使用することができる。たとえば、米国特許第６，３４３，２５７号明細書；Ｙ．Ｃ．Ｍａｒｔｉｎ，３Ｄ  Ｄｅｔａｂａｓｅ  Ｓｅａｒｃｈｉｎｇ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３５，２１４５（１９９２）；およびＡ．Ｃ．ＧｏｏｄおよびＪ．Ｓ．Ｍａｓｏｎ，Ｔｈｒｅｅ  Ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  Ｄｅｔａｂａｓｅ  Ｓｅａｒｃｈｅｓ，Ｒｅｖｉｅｗｓ  ｉｎ  Ｃｏｍｐ．Ｃｈｅｍ．７，６７（１９９６）参照のこと。データベース検索質問は、化学特性情報ばかりでなく、正確な幾何学情報にも基づく。
【０１５４】
コンピューター・ベース・アプローチは、マッチングするテンプレートを見つけるために、データベース検索を使用することができる。Ｙ．Ｃ．Ｍａｒｔｉｎ，  Ｄａｔａｂａｓｅ  ｓｅａｒｃｈｉｎｇ  ｉｎ  ｄｒｕｇ  ｄｅｓｉｇｎ，Ｊ．  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｖｏｌ．３５，ｐｐ２１４５−５４（１９９２）、これらは参照によって本明細書に組み入れられる。化合物の２−Ｄおよび３−Ｄデータベースの検索のための既存の方法を適用しうる。Ｌｅｄｅｒｌｅ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｙａｎａｍｉｄ社（Ｐｅａｒｌ  Ｒｉｖｅｒ，Ｎ．Ｙ．）は、分子形検索、３Ｄ検索およびデータベースのトレンド・ベクターを開発した。商業的ベンダーおよび他の研究グループも検索機能を提供している（ＭＡＣＳＳ−３Ｄ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｓｉｇｎ社（Ｓａｎ  Ｌｅａｎｄｒｏ，Ｃａｌｉｆ．）；ＣＡＶＥＡＴ，Ｌａｕｒｉ，Ｇ．ら，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ（Ｂｅｒｋｅｌｅｙ，Ｃａｌｉｆ．）；ＣＨＥＭ−Ｘ，Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｄｅｓｉｇｎ社（Ｍａｈｗａｈ，Ｎ．Ｊ．））。これらの検索用のソフトを、これらの重要な化学および幾何構造によってインデックが付けられた可能性のある薬品化合物のデータベースを分析するために使用することができる（たとえば、標準薬品ファイル（Ｄｅｒｗｅｎｔ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ社，Ｌｏｎｄｏｎ，Ｅｎｇｌａｎｄ），Ｂｉｅｌｓｔｅｉｎデータベース（Ｂｉｅｌｓｔｅｉｎ情報，Ｆｒａｎｋｆｕｒｔ，ＧｅｒｍａｎｙまたはＣｈｉｃａｇｏ）および化学薬品登録データベース（ＣＡＳ，Ｃｏｌｕｍｂｕｓ，Ｏｈｉｏ））。
【０１５５】
一度化合物がファーマコフォアと一致すると同定されれば、インビトロ、インビボまたはシリコ中での活性、たとえば、サーチュインへまたはそのドメインへの結合を試験することができる。
【０１５６】
一実施形態では、アゴニストまたは候補アゴニスト、たとえば、Ｎａｔｕｒｅ  ２００３  Ｓｅｐ１１；４２５（６９５４）：１９１−１９６に記載された化合物は修飾され、たとえば本明細書に記載した方法で、拮抗薬を同定することができる。たとえば、関連化合物のライブラリーを製造し、該ライブラリーを本明細書で記載したアッセイでスクリーニングすることができる。
【０１５７】
本発明の化合物の医薬的に許容しうる塩として、医薬的に許容しうる無機および／または有機酸および塩基から誘導されたものを含む。適切な酸塩の例として、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギニン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、硫酸水素塩、酪酸塩、クエン酸塩、ショウノウ酸塩、ショウノウスルホン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グルコール酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭素酸塩、ヨウ素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、サクシン酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩、およびウンデカン酸塩が挙げられる。それ自身は、医薬的に許容しうるものではないが、本発明の化合物およびそれらの医薬的に許容しうる酸付加塩を得るための中間体として有用な塩の製造において、シュウ酸のような他の酸を使用してもよい。適正な塩基から誘導される塩として、アルカリ金属（たとえばナトリウム）、アルカリ土類金属（たとえばマグネシウム）、アンモニウムおよびＮ−（アルキル）４＋塩類が挙げられる。また、本発明は、本明細書に記載された化合物の任意の塩基性窒素含有基の四級化生成物も想定する。水溶性、油溶生または分散性生成物を、このような四級化生成物によって得てもよい。本明細書中の式の任意の化合物の塩の形は、カルボキシ基のアミノ酸塩（たとえばＬ−アルギニン、Ｌ−リジン、Ｌ−ヒスチジン塩）である可能性がある。
【０１５８】
本明細書に記載の式で表される化合物は、たとえば、注射で、静注的に、動脈内に、経皮的に、腹腔内に、筋肉内にあるいは皮下的に、または経口で、経口内的に、経鼻的に、経粘膜的に、または局所的に点眼用の眼用製剤として、または吸入によって、体重の約０．５〜約１００ｍｇ／ｋｇの用量で、あるいは１ｍｇと１０００ｍｇ／用量との間の投与用で、４〜１２０時間ごとに、または個々の薬品の要求に従って、投与することができる。本明細書の方法は、望ましいまたは記載された効果を得るために、有効量の化合物または化合物組成物を投与することを意図する。一般的に、本発明の医薬組成物は、１日につき約１〜約６回、または継続的な輸液注入として投与されるかもしれない。そのような投与は、慢性または急性治療として使用することができる。単一の投与形態物を製造するために担体材料と組み合わせてもよい、活性成分の量は、治療されるホストおよび投与の個々のモードによって変化しうる。代表的な調剤は、約５％〜約９５％の活性化合物（ｗ／ｗ）を含む。あるいは、そのような調剤は、約２０％〜約８０％の活性化合物を含む。
【０１５９】
前記した範囲より低いまたは高い用量が要求されてもよい。任意の特定の患者に関する具体的な用量および治療レジメンは、使用される具体的化合物の活性、年齢、体重、一般健康状態、性別、食事、投与の回数、排泄の速度、薬の組み合わせ、疾患の重症度および経過、状態または症状、疾患に対する患者の素質、条件または症状、および治療をする医者の判断を始めとする、種々の要因に依存する。
【０１６０】
患者の状態が改善した際、必要であれば、本発明の化合物、組成物または組み合わせの維持用量を投与してもよい。次いで、投与量または投与頻度、またはその両方は、症状が所望のレベルに軽減した時、症状の機能として、改善された状態を保持するレベルに減らしてもよい。しかし、患者は、疾患症状の再発に際し、長期的に、間欠的な治療を求めてもよい。
【０１６１】
本明細書に記載の組成物は、ここに記載の式で表される化合物と、もしあれば追加の治療剤とを、ここでの記載を含む疾患または疾患症状の調整を達成するのに効果的な量で含む。
【０１６２】
用語「医薬的に許容しうる担体またはアジュバント」は、本発明の化合物とともに患者に投与してもよい担体またはアジュバントを言い、これはその薬学的活性を壊せず、治療的量の化合物を送達するのに充分な投与量で投与した時、無毒である。
【０１６３】
本発明の医薬組成物中で使用してもよい医薬的に許容しうる担体、アジュバントおよび賦形剤として、イオン交換剤、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネートのような自己乳化型薬剤送達システム（ＳＥＤＤＳ）、ツィーンのような医薬的に許容しうる投与形態において使用される界面活性剤、または他の類似の重合体送達マトリックス、ヒト血清アルブミンのような血清タンパク質、フォスフェイト、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物性脂肪酸の部分的グリセリド混合物、水、塩のような緩衝剤物質、またはプロタミン硫酸、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイダルシリカ、三珪酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース・ベース物質、ポリエチレングリコール、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂のような電解質が挙げられるが、これらに限定されない。α−、β−およびγ−シクロデキストリンのようなシクロデキストリン、または２−および３−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを含むヒドロキシアルキルシクロデキストリンのような化学的に修飾された誘導体、または他の可溶化誘導体も、本明細書に記載の式で表される化合物の送達を増強するために好ましく使用されることもある。
【０１６４】
本発明の医薬組成物は、経口的に、非経口的に、吸入スプレーによって、局所的に、直腸に、経鼻的に、経口内的に、経膣的に、または移植リザーバーを介して、好ましくは、経口投与によって、または注射による投与によって投与されてもよい。本発明の医薬組成物は、従来の無毒性の医薬的に許容しうる担体、アジュバントまたは賦形剤の任意のものを含んでもよい。ある例では、製剤のｐＨは、医薬的に許容しうる酸、塩基または緩衝液で調整し、製剤化化合物または送達形態の安定度を高めてもよい。本明細書で使用される用語「非経口形態」は、経皮的、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、動脈内、滑液内、胸骨内、クモ膜下、病巣内および脳内注射、または組み合わせ技術がある。
【０１６５】
医薬組成物は、無菌注射可能な調剤の形態、たとえば、無菌注射可能な水性または油性懸濁液の形であってもよい。この懸濁液は、業界で公知の技術に従って、適切な分散化剤または湿潤剤（たとえばツィーン８０のような）および懸濁化剤を使用して、製剤化してもよい。また、無菌で注射可能な調剤は、無毒性非経口的に許容しうる希釈剤または溶剤、たとえば１，３−ブタンジオール溶液中の、無菌で注射可能な溶液または懸濁液であってもよい。使用してもよい、許容しうる賦形剤および溶剤として、マンニトール、水、リンゲル溶液および等張塩化ナトリウム溶液がある。さらに、無菌の不揮発油は、従来から溶剤または懸濁媒体として使用されている。この目的で、合成モノまたはジグリセリドを含む、いかなる無刺激性不揮発油を使用してもよい。オレイン酸およびそのグリセリド誘導体のような脂肪酸は、オリーブ油またはひまし油のような天然の、医薬的に許容しうる油のように、注射可能な調剤において有用であり、特にそのポリオキシエチレン化体が有用である。また、これらの油溶液または懸濁液は、医薬的に許容しうる投与形態、たとえば、乳液および／または懸濁液の製剤において一般的に使用される、長鎖アルコール希釈剤または分散剤、またはカルボキシメチルセルロースあるいは類似の分散化剤を含んでもよい。ツィーンあるいはスパンのような他に一般的に使用される界面活性剤および／または他の類似の乳化剤、または医薬的に許容しうる固体、液体、または他の投与形態の製造において一般的に使用される、生体内利用率の増進剤も製剤の目的のために使用してよい。
【０１６６】
本発明の医薬組成物は、経口的に許容しうる任意の投与形態で経口的に投与してもよく、たとえば、カプセル、錠剤、乳液および水性懸濁液が挙げられるが、これらに限定されない。経口用途としての錠剤の場合、一般的に使用される担体は、ラクトースおよびコーンスターチが挙げられる。ステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤も、一般的に加えられる。カプセル形態の経口投与のために有用な希釈剤として、ラクトースおよび乾燥コーンスターチが挙げられる。水性懸濁液および／または乳液を経口的に投与する場合、活性成分は、乳化剤および／または懸濁化剤が組合わされた油状相に懸濁または溶解してもよい。所望の場合は、ある甘味剤および／または風味剤および／または着色剤を加えてもよい。
【０１６７】
また、本発明の医薬組成物は、直腸投与用座薬の形態で投与してもよい。これらの組成物は、本発明の化合物を、室温では固体であるが直腸温度で液体となり、したがって直腸内では溶けて活性成分を放出する、適切な非刺激性賦形剤と混合することによって製造することができる。そのような材料として、ココアバター、蜜蝋、およびポリエチレングリコールが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１６８】
本発明の医薬組成物の局所投与は、所望の治療が局所塗布によって簡単に到達可能である範囲または組織に含まれる時、有用である。皮膚に局所的に塗布するために、医薬組成物は、担体中に懸濁または溶解した活性成分を含む適切な軟膏剤で製剤化すべきである。本発明の化合物の局所投与用の担体として、鉱物油、液化石油、白色石油、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレン化合物、乳化ワックスおよび水が挙げられるが、これらに限定されない。あるいは、医薬組成物は、適切な乳化剤で担体中に懸濁または溶解された活性化合物を含む、適切なローションまたはクリームで製剤化することができる。適切な担体として、鉱物油、ソルビタンモノステアレート、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリールアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコールおよび水が挙げられるが、これらに限定されない、本発明の医薬組成物は、また、下部消化管に直腸座薬製剤または適切な浣腸製剤によって、局所的に適用してもよい。局所経皮パッチもまた本発明に含まれる。
【０１６９】
本発明の医薬組成物は、鼻腔エアロゾルまたは吸入によって投与してもよい。そのような組成物は、医薬製剤の業界でよく知られた技術に従って製造され、生理食塩水中の溶液として、ベンジルアルコールまたは他の適切な防腐剤、生体内利用率を高める吸収プロモーター、フルオロ炭素および／または他の業界で公知の可溶化剤または分散化剤を使用して製造してもよい。
【０１７０】
本明細書の式で表される化合物および追加の薬剤（たとえば、治療剤）を含む組成物は、埋め込み可能な装置を使用して投与することができる。埋め込み可能な装置および関連技術は業界で公知であり、本明細書で記載された化合物または組成物の連続的または徐放性送達が望まれる送達システムとして有用である。さらに、埋め込み装置送達システムは、化合物または組成物送達の特定ポイント（たとえば、局在化部位、器官）を標的とするのに有用である。Ｎｅｇｒｉｎら，Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ，２２（６）：５６３（２００１）。交互送達方法を含む徐放性技術も本発明において使用することができる。たとえば、ポリマー技術、持続放出技術、およびカプセル形成技術  （たとえば、高分子、リポソーム）に基づく徐放性製剤も、本明細書で記載の化合物および組成物の送達のために使用することができる。
【０１７１】
また、本明細書内の活性化学療法混合物を送達するパッチも本発明の範囲内である。パッチは、材料層（たとえば、ポリマー、生地、ガーゼ、包帯）と本明細書に記載の式で表される化合物とを含む。材料層の片側には、化合物または組成物の通過を拒むために、そこに付着する保護層を含むことができる。該パッチは、さらに、被験体上に適切にパッチを保っておくため接着剤を含む。該接着剤は、被験体の皮膚に接触したときに、一時的に皮膚に付着するように、天然または合成起源の接着剤を含む組成物である。それは耐水性でもよい。接着剤は、長時間、被験体の皮膚に接触するために、パッチ上に置くことができる。接着剤は、偶発的に接触ではデバイスは被験体の所定の場所に保たれているが、積極的な行為（たとえば、裂く、はがす、または他の意図的な除去）の時は、接着剤は、デバイスまたは接着剤それ自身にかかる外部圧力によって、接着接触を破壊させるような粘着力または接着力で造られうる。接着剤は、感圧接着剤であってもよく、すなわち、接着剤またはデバイス上に圧力がかかる（たとえば、押す、こする）ことによって皮膚に対して接着剤（および皮膚に付着すべきデバイス）の位置決めを可能にできる。
【０１７２】
本発明の組成物が、本明細書に記載の式で表される化合物と、１種以上の治療または予防剤との組み合わせを含む場合、該化合物および追加の薬剤とも、単独治療レジメンにおいて正常に投与される投与量の約１〜１００％、更に好ましくは約５〜９５％の投与量濃度で存在すべきである。追加の薬剤は、本発明の化合物とは別に、複数回投レジメンの一部として投与してもよい。あるいは、それらの薬剤は、単一投与形態の一部であって、単一の組成物中で本発明の化合物と一緒に混合してもよい。
【０１７３】
（腫瘍性障害）
本発明の化合物は、癌の治療に使用することができる。本明細書で使用される用語「癌」、「高増殖性」、「悪性」および「新形成」は、互換的に使用され、急速な増殖または新生物を特徴とする異常な状態または状況の細胞をいう。該用語は、侵入の組織病理学的タイプまたは段階とは無関係に、癌性成長または発癌過程、転移性組織または悪性癌化細胞、組織または器官の全てのタイプを含む。「病的高増殖性」細胞は、悪性腫瘍成長を特徴とする疾患常態において起こる。
【０１７４】
用語「新形成」の一般的な医学的意味は、正常な成長制御に対する応答性を失う、たとえば、腫瘍細胞成長が起こる「新しい細胞の成長」を言う。「過形成」は、生長が異常に高速な成長を受けている細胞を言う。しかし、本明細書で使用する用語、新形成および過形成は、その文脈から明らかとなるとおり、互換的に使用することができ、異常な細胞成長速度を示す細胞を一般的に言う。新形成および過形成は、良性、前悪性または悪性である「腫瘍」を含む。
【０１７５】
癌性障害の例として、固形腫瘍、軟組織腫瘍および転移性病巣が挙げられるが、これらに限定されない。固形腫瘍の例として、悪性腫瘍、たとえば種々の器官系の肉腫、アデノカルチノーマおよびカルチノーマ、たとえば、肺、乳房、リンパ系、消化管（たとえば大腸）および尿生殖器官（たとえば、腎臓、尿路上皮細胞）、咽頭、前立腺、卵巣を侵すもの、およびほとんどの結腸癌、直腸癌、腎細胞腫、肝臓癌、肺の非小細胞癌、小腸の癌などの悪性腫瘍を含むアデノカルチノーマが挙げられる。前記癌の転移病巣も本明細書に記載の化合物を使用して、治療または予防することができる。
【０１７６】
本発明の方法は、種々の器官系の悪性腫瘍、たとえば、肺、乳房、リンパ系、消化管（たとえば大腸）および尿生殖器官、前立腺、卵巣、咽頭を侵すもの、およびほとんどの結腸癌、腎細胞腫、前立腺癌および／または精巣腫瘍、肺の非小細胞癌、小腸の癌および食道の癌のような悪性腫瘍を含むアデノカルチノーマの治療において有用でありえる。治療することができる例示的な固形腫瘍として、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉種、大腸カルチノーマ、すい臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平細胞カルチノーマ、基底細胞カルチノーマ、アデノカルチノーマ、汗腺カルチノーマ、皮脂腺カルチノーマ、乳頭カルチノーマ、乳頭アデノカルチノーマ、嚢胞腺癌、髄質カルチノーマ、気管支原性カルチノーマ、腎細胞腫、ヘパトーマ、胆管カルチノーマ、絨毛膜癌腫、精上皮腫、胚芽カルチノーマ、ウィルムス腫瘍、子宮頚部癌、精巣腫瘍、肺カルチノーマ、小細胞肺カルチノーマ、非小細胞肺カルチノーマ、膀胱カルチノーマ、上皮カルチノーマ、グリオーマ、アストロチトーム、神経髄芽細胞腫、頭蓋咽頭管腫瘍、上衣細胞腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫瘍、乏突起神経膠腫、髄膜腫、メラノーマ、神経芽細胞腫および網膜芽細胞腫が挙げられる。
【０１７７】
用語「カルチノーマ」は、当業者に認識され、上皮または内分泌組織の悪性腫瘍をいい、呼吸器系カルチノーマ、消化管系カルチノーマ、尿生殖器系カルチノーマ、精巣カルチノーマ、乳房カルチノーマ、前立腺カルチノーマ、内分泌腺系カルチノーマおよびメラノーマが挙げられる。例示的なカルチノーマとして、子宮頚部、肺、前立腺、乳房、頭部および首部、大腸および卵巣の組織から形成されるものが挙げられる。該用語は、たとえば、癌性および肉腫組織から構成される悪性腫瘍を始めとする癌肉腫も含む。「アデノカルチノーマ」は、腺組織から由来する、または腫瘍細胞が認識可能な腺性構造を形成しているカルチノーマを言う。
【０１７８】
用語「肉腫」は、当業者に認識されており、間葉細胞起源の悪性腫瘍を言う。
【０１７９】
また、本発明の方法は、たとえば、骨髄性、リンパ系または赤血球系統、またはその前駆体細胞から出現する、造血起点の過形成／腫瘍細胞の増殖を抑制するためにも使用することができる。たとえば、本発明は、急性前骨髄球性白血病（ＡＰＭＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）および慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）（これらに限定されない）（Ｖａｉｃｋｕｓ，Ｌ．（１９９１）Ｃｒｉｔ  Ｒｅｖ．ｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．／Ｈｅｍｏｔｏｌ．１１：２６７−９７で精査されている）を含む種々の骨髄障害の治療を想定する。本発明の方法で治療してもよいリンパ系悪性腫瘍として、Ｂ−系統ＡＬＬおよびＴ−系統ＡＬＬを含む急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ芽球性白血病（ＣＬＬ）、前リンパ球性白血病（ＰＬＬ）、毛様細胞性白血病（ＨＬＬ）およびワルデンストローム・マクログロブリン血症（ＷＭ）が挙げられるが、これらに限定されない。悪性リンパ腫の追加の形として、非ホジキンリンパ腫およびその変異体、末梢Ｔ細胞リンパ腫、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫（ＡＴＬ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫（ＣＴＣＬ）、大型顆粒リンパ球性白血病（ＬＧＦ）およびホジキン病が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１８０】
（アルツハイマー病）
アルツハイマー病（ＡＤ）は、ニューロンの不可逆的損失を招く複合神経変性疾患であり、少なくとも部分的にタンパク質凝集によって起こる症状を持つ神経変性疾患の１例である。本明細書に記載の化合物は、ＡＤを患う被験体の少なくとも１個の症状を軽減するために使用することができる。
【０１８１】
アルツハイマー病の臨床上の特徴として、記憶、判断、物理的な外界への位置確認および言葉における進行性障害が挙げられる。ＡＤの神経病理学的特徴として、領域特定神経細胞の喪失、アミロイド斑および神経細線維もつれが挙げられる。アミロイド斑は、βアミロイドペプチド（Ａβ、またはＡβ４２としても知られる）を含む細胞外斑であり、これは、β−アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰとしても知られる）の分解産物である。神経細線維もつれは、異常に高リン酸化した微小管関連タンパク質であるタウ（ｔａｕ）のフィラメントから構成される、不溶性細胞内凝集物である。アミロイド斑および神経細線維もつれは、第二の事象に影響し、アポトーシスによる神経細胞の喪失となる可能性がある（ＣｌａｒｋおよびＫａｒｌａｗｉｓｈ，Ａｎｎ．Ｉｎｔｅｒｎ．Ｍｅｄ．１３８（５）：４００−４１０（２００３））。たとえば、β−アミロイドは、培養ニューロン中でカスパーゼ−２依存性アポトーシスを誘発する（Ｔｒｏｙら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２０（４）：１３８６−１３９２）。インビボでの斑の堆積が、同じような方法で、プロキシマルニューロンのアポトーシスを引き起こす可能性がある。
【０１８２】
ＡＰＰ、プレセリニン−１およびプレセリニン−２をエンコードする遺伝子中の突然変異が、早期発症ＡＤにおいて関与していた（Ｌｅｎｄｏｎら，ＪＡＭＡ２２７：８２５（１９９７））。これらのタンパク質における突然変異は、Ａβを生成する細胞内経路を介してＡＰＰのタンパク質分解プロセッシングを促進することを示していた。Ａβプロセッシングの異常制御は、アミロイド斑形成、および結果として斑に関与するニューロンの損傷の中心をなす可能性がある。
【０１８３】
遺伝的、生化学的、生理学的および認知性の基準を含む種々の評価基準を、被験体におけるＡＤを評価するために使用することができる。ＡＤの症状および診断は、医療担当者に公知である。ＡＤの症状およびマーカーの例のいくつかを以下に挙げる。これらの指標およびＡＤと関連があると知られている他の指標に関する情報は、「ＡＤ関連パラメーター」として使用することができる。ＡＤ関連パラメーターは、定性的および定量的情報を含みうる。定量的情報の例として、１次元またはそれ以上の次元の数値、たとえば、タンパク質の濃度または断層撮影マップがある。定性的情報として、アセスメント、たとえば、医者のコメントまたは二者択一（「はい」／「いいえ」）などがある。ＡＤ関連パラメーターは、被験体がＡＤと診断されない、またはＡＤ特有の指標を持たない、たとえば、ＡＤの特色を示していないまたはＡＤと関連しない遺伝的ＡＰＯＥポリモルフィズムであるという認知性試験の結果を示す情報も含む。
【０１８４】
進行性認知障害は、ＡＤの特徴である。この障害は、記憶、判断、決定、物理的な外界への位置確認および言葉における減退として存在しうる（ＮｕｓｓｂａｕｍおよびＥｌｌｉｓ，Ｎｅｗ  Ｅｎｇ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４８（１４）：１３５６−１３６４（２００３））。痴呆の他の形態を含めることもＡＤの診断を行う際の助けとなりうる。
【０１８５】
ニューロンの死は、ＡＤ患者を進行性大脳萎縮へと導く。脳および／または脳萎縮におけるＡＤ関連病変を検出するために、映像技術（たとえば、核磁気共鳴映像法またはコンピュータ断層撮影法）を使用することができる。
【０１８６】
ＡＤ患者は、疾患の病理から起こる生化学的異常性を示す可能性がある。たとえば、髄液中のタウタンパク質の濃度は、ＡＤ患者では上昇する（Ａｎｄｒｅａｓｅｎ，Ｎ．ら，ＡｒｃｈＮｅｕｒｏｌ．５８：３４９−３５０（２００１））。アミロイドβ４２（Ａβ２）ペプチドの濃度は、ＡＤ患者のＣＳＦ中で減少させることができる（Ｇａｌａｓｋｏ，Ｄ．，ら，Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．５５：９３７−９４５  （１９９８））。Ａβ４２の濃度は、ＡＤ患者の血漿中で増やすことができる（Ｅｒｔｅｋｅｉｎ−Ｔａｎｅｒ，Ｎ．，ら，Ｓｃｉｅｎｃｅ２９０：２３０３−２３０４（２０００））。被験体からの試料中の生化学的異常性を検出する技術として、細胞性、免疫学的および他の生物学的方法が業界で知られている。一般的な指針として、たとえば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ＆  Ｒｕｓｓｅｌｌ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎ．Ｙ．（２００１）、Ａｕｓｕｂｅｌら，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎ．Ｙ．（１９８９）、（Ｈａｒｌｏｗ，Ｅ．およびＬａｎｅ，Ｄ．（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ）、およびこれらの更新された版に記載される技術を参照のこと。
【０１８７】
たとえば、抗体、他のイムノグロブリンおよび他の特定の結合リガンドは、生体分子、たとえば、ＡＤに関連するタンパク質または他の抗原を検出するために使用することができる。たとえば、１種以上の特異抗体は、試料をプローブするために使用することができる。種々のフォーマット、たとえば、ＥＬＩＳＡ、蛍光ベースのアッセイ、ウェスタンブロットおよびタンパク集積が可能である。ポリペプチド集積の製造方法は、業界で、たとえば、Ｄｅ  Ｗｉｌｄｔら（２０００），Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．１８，９８９−９９４；Ｌｕｅｋｉｎｇら（１９９９）Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２７０，１０３−１１１；Ｇｅ，Ｈ．（２０００）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２８，ｅ３，Ｉ−ＶＩＩ；ＭａｃＢｅａｔｈ，Ｇ．，およびＳｃｈｒｅｉｂｅｒ，Ｓ．Ｌ．（２０００）Ｓｃｉｅｎｃｅ２８９，１７６０−１７６３；および国際公開第９９／５１７７３Ａ１号パンフレットに記載されている。また、質量分光測定、クロマトグラフィー、電気泳動、酵素相互反応を使用して、または転写後修飾（たとえば、ホスホリル化、ユビキチン化、グリコシル化、メチル化またはアセチル化）を検出するプローブを使用して、タンパク質を分析することもできる。
【０１８８】
核酸の発現は、たとえば、手術、抽出、剖検または他のサンプリング（たとえば、血液、ＣＳＦ）によって取り除かれた被験体からの細胞で検出する。１種以上の遺伝子の発現は、たとえば、ハイブリッド化に基づく技術、たとえばノーザン分析、ＲＴ−ＰＣＲ、ＳＡＧＥおよび核酸集積によって、評価することができる。核酸集積は、試料中の複数のｍＲＮＡ種をプロファイルするのに有用である。核酸集積は、種々の方法、たとえば、フォトリソグラフィー法（たとえば、米国特許第５，１４３，８５４号明細書；第５，５１０，２７０号明細書；および第５，５２７，６８１号明細書参照）、機械的方法（たとえば、米国特許５，３８４，２６１号明細書に記載されるような定方向流法）、ピン・ベース法（たとえば、米国特許第５，２８８，５１４号明細書に記載されるような）、およびビーズ・ベース技術（たとえば、国際特許出願第ＰＣＴ  ＵＳ／９３／０４１４５号明細書に記載されるような）によって製造することができる。
【０１８９】
ＡＤに関連する代謝産物は、標識化前駆体を使用する酵素結合アッセイおよび核磁気共鳴（ＮＭＲ）を始めとする種々の手段によって検出することができる。たとえば、ＮＭＲは、試料中のフォスフェイト・ベース化合物の相対濃度、たとえばクレアチン濃度を測定するために使用することができる。レドックス状態、イオン濃度（たとえばＣａ２＋）（たとえば、イオン感応性染料を使用して）、および膜電位のような他の代謝パラメーターは、（たとえばパッチ・クランプ技術を使用して）検出することもできる。
【０１９０】
ＡＤ関連マーカーに関する情報は、コンピュータ読出可能なフォーマットに記録および／または保存することができる。通常、該情報は、被験体に関するリファレンスにリンクし、また、被験体中にサーチュインをエンコードする遺伝子における、１以上のヌクレオチドの同一性に関する情報と（直接または間接的に）関連する。
【０１９１】
一実施形態では、たとえば、化合物またはたとえば本明細書に記載の化合物の治療レジメンを評価するために、ＡＤの非ヒト動物モデル（たとえば、マウスモデル）を使用する。たとえば、米国特許第６，５０９，５１５号明細書には、学習および記憶試験に当然用いることができるそのようなモデル動物の１つが記載されている。一般的に、誕生から１年以内、好ましくは誕生から２〜６ヶ月以内のような誕生から短い期間内に、該動物が進行性神経性障害を発症させるようなレベルで、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）配列を脳組織内で発現する。ＡＰＰタンパク質配列は、動物または該動物の原種に、胚形成期、好ましくは１細胞期または受精した卵母細胞から一般的に約８細胞期までに導入する。次いで、受精卵または胎児は成長し、偽妊娠フォスターメスと名づけられる。該アミロイド前駆体タンパク質遺伝子は、アミロイド前駆体タンパク質の超内因性発現および脳のコルチコ−辺縁範囲、すなわち、ＡＤのような進行性神経性疾患状態に顕著に影響を及ぼす脳の範囲において進行性神経性疾患の進行の結果となる状態で、染色体的に組み込まれるように、動物胎児に導入する。影響を受けた遺伝形質動物におけるグリオーシスおよび臨床所見は、神経性疾患を擬似する。神経性疾患の進行性態様は、診査および／または自発運動行動の減退と、脳のコルチコ−辺縁領域における、２−デオキシグルコースの取り込み／活用および肥大性グリオーシスの減退とに特徴付けられる。さらに、見られる変化は、ある老化した動物において見られる変化と類似している。また、他の動物モデルは、米国特許第５，３８７，７４２号明細書；第５，８７７，３９９号明細書；第６，３５８，７５２号明細書；および第６，１８７，９９２号明細書に記載されている。
【０１９２】
（パーキンソン病）
パーキンソン病は、運動機能を調整する黒質線状体のドーパミン系の退行変性となる、黒質中のドーパミン・ニューロンの神経変性を含む。言い換えると、この病変は、運動機能障害を引き起こす（たとえば、およびＬｏｔｈａｒｉｕｓら，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，３：９３２−４２（２００２）参照）。例示的な運動症状として、アキネジー、停止姿勢、歩行困難、姿勢動揺、カタレプシー、筋硬直およびふるえが挙げられる。例示定な非運動症状として、抑鬱症、無気力、消極性、痴呆および胃腸障害が挙げられる（たとえば、Ｆａｈｎ，Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，９９１：１−１４（２００３）およびＰｆｅｉｆｆｅｒ，Ｌａｎｃｅｔ  Ｎｅｕｒｏｌ．，２：１０７−１６（２００３）を参照）。パーキンソン型は、６５〜６９歳のヒトの０．５〜１％、８０歳以上のヒトの１〜３％に観察された（たとえば、Ｎｕｓｓｂａｕｍら，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３４８：１３５６−６４（２００３））。
【０１９３】
本明細書に記載の化合物は、パーキンソン病を患う被験体の少なくとも１つの症状を軽減するために使用することができる。
【０１９４】
パーキンソン病の分子マーカーは、芳香族Ｌ−アミノ酸デカルボキシラーゼ（ＡＡＤＣ）における還元（たとえば、米国特許出願第２００２０１７２６６４号明細書）；および黒質線状ニューロン（たとえば、Ｆａｈｎ，Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，９９１：１−１４（２００３）およびＬｏｔｈａｒｉｕｓら，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，３：９３２−４２（２００２）参照）中のドーパミン濃度の損失が挙げられる。いくつかの家族性の症例においては、α−シヌクレインおよびパーキン（Ｅ３  ユビキチンリガーゼ）タンパク質をエンコードする単一遺伝子中で、ＰＤが突然変異する。（たとえばＲｉｅｓｓら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｌ．２５０Ｓｕｐｐｌ１：Ｉ３−１０（２００３）およびＮｕｓｓｂａｕｍら，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３４８：１３５６−６４（２００３））。ニューロン特異Ｃ末端ユビキチンヒドロラーゼ遺伝子におけるミスセンス突然変異もまたパーキンソン型と関連する。（たとえば、Ｎｕｓｓｂａｕｍら，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３４８：１３５６−６４（２００３））
本明細書に記載の化合物または化合物のライブラリーを、パーキンソン病の非ヒト動物モデルで評価することができる。パーキンソン病の例示的な動物モデルとして、ドーパミン細胞毒性１−メチル−４−フェニル−１，２，３，６−テトラヒドロピリジン（ＭＰＴＰ）（たとえば、米国特許出願第２００３００５５２３１号およびＷｉｃｈｍａｎｎら，Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，９９１：１９９−２１３（２００３参照）で処置された、パーキンソン病とされた霊長類；６−ヒドロキシドーパミン病変ラット（たとえば、Ｌａｂ．Ａｎｉｍ．Ｓｃｉ．，４９：３６３−７１（１９９９））による；および遺伝子組換え無脊椎動物モデル（たとえば、Ｌａｋｓｏら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，８６：１６５−７２（２００３）およびＬｉｎｋ，Ｍｅｃｈ．Ａｇｅｉｎｇ  Ｄｅｖ．，１２２：１６３９−４９（２００１））が挙げられる。
【０１９５】
（ポリグルタミン凝集の評価）
種々の無細胞アッセイ、細胞ベースアッセイおよび生物事象アッセイが、ポリグルタミン凝集、たとえばハンチンチンポリグルタミン凝集を評価するために利用できる。いくつかの例示が、たとえば、米国特許出願第２００３−０１０９４７６号に記載されている。
【０１９６】
アッセイ（たとえば、無細胞、細胞ベース、または生物事象）は、少なくとも３５個のポリグルタミンを持つ、ポリグルタミン反復領域を含むレポータータンパク質を含むことができる。レポータータンパク質は、たとえば蛍光によって、容易に検出することができる。たとえば、タンパク質は、蛍光団、たとえば、フルオレセイン・イソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、アロフィコシアニン（ＡＰＣ）、Ｒ−フィコエリトリン（ＰＥ）、ペリジニンクロロフィルタンパク質（ＰｅｒＣＰ）、テキサスレッド、Ｃｙ３、Ｃｙ５、Ｃｙ７またはＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５、ＰＥ−Ｃｙ５、ＰＥ−Ｃｙ５．５、ＰＥ−Ｃｙ７、ＰＥ−テキサスレッドおよびＡＰＣ−Ｃｙ７のような蛍光共鳴エネルギータンデム蛍光団と結合する。別の例では、タンパク質は、そのアミノ酸配列によって完全にエンコードされ、補助因子または基質を必要とせずに蛍光を発光しうるクロモフォアを持つという点で、「内因的蛍光」である。たとえば、タンパク質は、緑色の蛍光タンパク質（ＧＦＰ）様クロモフォアを含みうる。本明細書で使用される「ＧＦＰ様クロモフォア」は、中央α螺旋構造を持つ１１鎖β−バレルを含む内因的に蛍光タンパク質部分を意味し、中央α螺旋構造は、２個の芳香族環系とその間に架橋を含む複合π−共鳴系を持つ。
【０１９７】
ＧＦＰ様クロモフォアは、Ａ．ｖｉｃｔｏｒｉａ  ＧＦＰ（ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＡＡＡ２７７２１）、Ｒｅｎｉｌｌａ  ｒｅｎｉｆｏｒｍｉｓ  ＧＦＰ、ＦＰ５８３（ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＡＦ１６８４１９）（ＤｓＲｅｄ）、ＦＰ５９３（ＡＦ２７２７１１）、ＦＰ４８３（ＡＦ１６８４２０）、ＦＰ４８４（ＡＦ１６８４２４）、ＦＰ５９５（ＡＦ２４６７０９）、ＦＰ４８６（ＡＦ１６８４２１）、ＦＰ５３８（ＡＦ１６８４２３）およびＦＰ５０６（ＡＦ１６８４２２）などの自然発生のタンパク質で見られるＧＦＰ様クロモフォアから選択することができ、クロモフォアの内因性蛍光を保持することが必要なように、多くの天然タンパク質を含む必要がある。蛍光に必要な最小ドメインを測定する方法は、業界で知られている。Ｌｉら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：２８５４５−２８５４９（１９９７）。
【０１９８】
あるいは、ＧＦＰ様クロモフォアは、自然で見出されるものから修飾されるＧＦＰ様クロモフォアから選択することができる。普通、そのような修飾は、非相同発現系（タンパク質配列における変化があるまたはない）における組換え生産を改善するために、天然タンパク質の励起および／または発光スペクトルを変更するために、精製を促進するために、クローニングを促進するために、またはクローニングの因果関係として起こり、または研究調査の偶発的因果関係である。そのような修飾ＧＦＰ様クロモフォアを設計する方法およびそれらの蛍光活性を試験する方法、両方単独およびタンパク質融合の一部として、業界で公知である。そのような修飾クロモフォアの種々のものが今では市販されており、本発明の融合タンパク質において容易に使用することができる。たとえば、ＥＧＦＰ（「強化ＧＦＰ」）、Ｃｏｒｍａｃｋら，Ｇｅｎｅ１７３：３３−３８（１９９６）；米国特許第６，０９０，９１９号明細書および第５，８０４，３８７号明細書は、哺乳類の細胞中での格段に明るい蛍光、より高い発現、またはフローサイトメーターにおける使用を最適にされた励起スペクトルを設計してきた、赤にシフトする、ＧＦＰのヒトコドン最適変異体である。ＥＧＦＰは、ＧＦＰ様クロモフォアを、さらにポリグルタミン領域を含む融合タンパク質に効果的に処理できる。種々のＥＧＦＰベクター、プラスミドもウィルスも市販されている（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ  Ｌａｂｓ，Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，Ｃａｌｉｆ．，ＵＳＡ）。その他に設計されたＧＦＰタンパク質も公知である。たとえば、Ｈｅｉｍら，Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．６：１７８−１８２（１９９６）；Ｃｏｒｍａｃｋら，Ｇｅｎｅ１７３：３３−３８（１９９６），ＢＦＰ２，ＥＹＦＰ（「増強黄色蛍光タンパク質」）、ＥＢＦＰ、Ｏｒｍｏら，Ｓｃｉｅｎｃｅ２７３：１３９２−１３９５（１９９６），Ｈｅｉｋａｌら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９７：１１９９６−１２００１（２０００）、ＥＣＦＰ（「増強シアン蛍光タンパク質」）（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ  Ｌａｂｓ，Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，Ｃａｌｉｆ．，ＵＳＡ）参照のこと。該ＧＦＰ様クロモフォアは、米国特許第６，１２４，１２８号明細書；第６，０９６，８６５号明細書；第６，０９０，９１９号明細書；第６，０６６，４７６号明細書；第６，０５４，３２１号明細書；第６，０２７，８８１号明細書；第５，９６８，７５０号明細書；第５，８７４，３０４号明細書；第５，８０４，３８７号明細書；第５，７７７，０７９号明細書；第５，７４１，６６８号明細書；および第５，６２５，０４８号明細書に記載のものを始めとする、他の修飾されたＧＦＰからも導くことができる。
【０１９９】
一実施形態では、ポリグルタミン反復領域を含み、少なくとも３５個のポリグルタミンを有するレポータータンパク質を、細胞ベースアッセイで使用する。
【０２００】
一例では、増強ＧＦＰ（緑色蛍光タンパク質）遺伝子に融合された交互反復コドンを含むＨＤ遺伝子エキソン１によってエンコードされたタンパク質を発現するように設計された構造体を持つＰＣ１２ニューロン細胞株を使用することができる。たとえば、Ｂｏａｄｏら，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．ａｎｄ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ２９５（１）：２３９−２４３（２０００）およびＫａｚａｎｔｓｅｖら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９６：１１４０４−０９（１９９９）を参照のこと。この遺伝子の発現は、タンパク質凝集物の部位への共局在された緑色蛍光の外観の一因となる。ＨＤ遺伝子エキソン１−ＧＦＰ融合遺伝子は、ムリステロンによって調整された誘導性プロモーターの支配下にある。特定の構造体は、約４６個のグルタミン反復（ＣＡＡまたはＣＡＧでエンコードされた）を有する。他の構造体は、たとえば、１０３個のグルタミン反復を持つ。ＰＣ１２細胞は、ＤＭＥＭ、５％ウマ血清（熱失活）、２．５％ＦＢＳおよび１％Ｐｅｎ−Ｓｔｒｅｐ中で成長し、ゼオシンおよびＧ４１８上で少量保持される。細胞は、ポリ−Ｌ−リジンカバーガラスが塗布された２４穴プレートに、密度５・１０５細胞／ｍｌで選択なしの培地に培養する。一晩培養した後、ムリステロンを加え、ＨＤ遺伝子エキソン１−ＧＦＰの発現を誘導する。該細胞を、試験化合物と、たとえば、培養の前後および誘導の前後に接触させることができる。データは、ツァイス５１０ＬＳＭ共焦点顕微鏡を備えるツァイス逆１００Ｍアキシオスコープおよび干渉性クリプトンアルゴンレーザーおよびヘリウムネオンレーザーで得ることができる。試料は、撮像改善のため、Ｌａｂ−ＴｅｋＩＩ袋状カバーガラスシステムにロードすることができる。目的物の観察のフィールド内のハンチンチン−ＧＦＰ凝集物の数を、独立した実験でカウントする（たとえば、独立した実験で、少なくとも３または７個）。
【０２０１】
試料を評価する他の例示的な手段として、静的および動的に検出および定量すべき蛍光タグを付けた部分の細胞内部位置および濃度測定を可能にする、アマシャム・バイオサイエンスＩＮ細胞分析システムおよびＣｅｌｌｏｍｉｃｓ（登録商標）集積スキャンＨＣＳシステムのような高スループット装置もある。米国特許第５，９８９，８３５号明細書も参照のこと。
【０２０２】
他の例示的な哺乳類細胞株として、ＣＨＯ細胞株および２９３細胞株がある。たとえば、ＨＤ遺伝子エキソン１Ｑ１０３−ＧＦＰをエンコードする融合構造体として、ＧＦＰに融合された約１０３Ｑ反復を持つ、ＨＤ遺伝子エキソン１の集積コピーを持つＣＨＯ細胞は、核膜で目に見え、顕微鏡で検出可能なＧＦＰ凝集を生成し、一方ＣＨＯ細胞中でＨＤ遺伝子エキソン１Ｑ２４−ＧＦＰをエンコードする、融合構造物の集積コピーを持つＣＨＯ細胞は、核膜で目に見えるＧＦＰ凝集を生成しない。別の例では、８４個のＣＡＧ反復を含むＨＤ遺伝子エキソン１の集積コピーを持つ２９３個の細胞を使用する。
【０２０３】
数多くのハンチントン病用動物モデルシステムが入手可能である。たとえば、Ｂｒｏｕｉｌｌｅｔ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ１５（４）：２３９−２５１（２０００）；Ｏｎａら，Ｎａｔｕｒｅ３９９：２６３−２６７（１９９９），Ｂａｔｅｓら，Ｈｕｍ  Ｍｏｌ  Ｇｅｎｅｔ．６（１０）：１６３３−７（１９９７）；Ｈａｎｓｓｏｎら，Ｊ．ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ７８：６９４−７０３；およびＲｕｂｉｎｓｚｔｅｉｎ，Ｄ．  Ｃ．，Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，Ｖｏｌ．１８，Ｎｏ．４，ｐｐ．２０２−２０９（種々のＨＤの動物と非ヒトモデルのレビュー）を参照のこと。
【０２０４】
一実施形態では、動物は、（少なくとも１つの細胞で）ヒトハンチンチンタンパク質、その一部、またはヒトハンチンチンタンパク質を含む融合タンパク質またはその一部を、たとえば、少なくとも３６個のグルタミン（たとえば、ポリグルタミントラクトをエンコードするエキソン１のＣＡＧ反復セグメントにおいて、ＣＡＧ反復（あるいは任意の数のＣＡＧ反復はＣＡＡであってもよい）によってエンコードされた）で、発現することができる遺伝子組換えマウスである。
【０２０５】
そのような遺伝子組換えマウスの系統の例は、Ｒ６／２ライン（Ｍａｎｇｉａｒｉｎｉら，Ｃｅｌｌ８７：４９３−５０６（１９９６））である。Ｒ６／２マウスは、ヒトＨＤ遺伝子のエキソン１を（内在性プロモーターの制御下で）過剰発現する、遺伝子組換えハンチントン病マウスである。Ｒ６／２ヒトＨＤ遺伝子のエキソン１は、延長されたＣＡＧ／ポリグルタミン反復長さ（平均１５０ＣＡＧ反復）を有する。これらのマウスは、ヒトハンチントン病の多くの特徴を持つ、進行性の最終的に死に至る神経性疾患を進行させる。Ｒ６／２マウスには、細胞質および細胞核の両方で（ＨＤエキソン１によってエンコードされた）ハンチンチンのＮ−末端部分によって一部構成された異常な凝集物が観察される（Ｄａｖｉｅｓら，Ｃｅｌｌ９０：５３７−５４８（１９９７））。たとえば、遺伝子組換え動物中のヒトハンチンチンタンパク質は、少なくとも５５ＣＡＧ反復、さらに好ましくは約１５０ＣＡＧ反復を含む遺伝子によって、エンコードされる。
【０２０６】
これらの遺伝子組換え動物は、ハンチントン病様表現型を進行させることができる。これらの遺伝子組換えマウスは、体重が減少すること、寿命が減少すること、異常歩行、安静時ふるえ、後肢抱擁および誕生後８〜１０週の活動過多に特徴付けられる運動障害によって特徴付けられる（たとえば、Ｒ６／２系統；Ｍａｎｇｉａｒｉｎｉら，Ｃｅｌｌ８７：４９３−５０６（１９９６）参照）。該表現型は、運動低下に向かって次第に悪くなる。これらの遺伝子組換えマウスの脳は、また、神経伝達物質受容体（グルタメート、ドーパミン）における変化、Ｎ−アセチルアスパラギン酸塩（ニューロン集積のマーカー）の濃度が減少すること、および線条体および脳のサイズが減少することなど、神経化学的および組織学的な異常性を示す。したがって、評価することには、神経伝達物質濃度に関するパラメーターの評価、神経伝達物質受容体濃度、脳のサイズ、および線条体サイズが含まれうる。さらに、遺伝子組換えの部分または完全長ヒトハンチンチンタンパク質を含む異常な凝集物は、これらの動物の脳組織（たとえば、Ｒ６／２遺伝子組換えマウス系統）中に存在する。たとえば、Ｍａｎｇｉａｒｉｎｉら，Ｃｅｌｌ８７：４９３−５０６（１９９６），Ｄａｖｉｅｓら，Ｃｅｌｌ９０：５３７−５４８（１９９７）、Ｂｒｏｕｉｌｌｅｔ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ１５（４）：２３９−２５１（２０００）およびＣｈａら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９５：６４８０−６４８５（１９９８）参照のこと。
【０２０７】
動物モデルにおける試験化合物、たとえば、本明細書に記載の化合物または本明細書に記載のライブラリーにある化合物の効果を試験するために、異なる濃度の試験化合物を、遺伝子組換え動物に、たとえば、試験化合物を動物の血液循環に注射によって投与する。一実施形態では、ハンチントン病様症状を動物において評価する。たとえば、ハンチントン病様症状の進行は、たとえば、マウスモデルに関し先に記載したように、次にモニターされ、試験化合物による治療が症状の軽減または遅延をもたらすかどうかを測定する。別の実施形態では、これらの動物におけるハンチンチンタンパク質凝集物の解離をモニターする。次に、該動物を致死させ、脳スライスを得る。該脳スライスを、次いで、遺伝子組換えヒトハンチンチンタンパク質、その一部を含む凝集物、またはヒトハンチンチンタンパク質を含む融合タンパク質またはその一部の存在について分析する。この分析は、たとえば、脳組織のスライスを抗ハンチンチン抗体で染色すること、抗ハンチンチンの抗体を認識する、ＦＩＴＣと複合した第二抗体（たとえば、抗ハンチンチン抗体はマウス抗ヒト抗体であり、第二抗体はヒト抗体に特異的である）を加え、蛍光顕微鏡でタンパク質凝集物を可視化することを含んでもよい。あるいは、抗ハンチンチン抗体を、直接ＦＩＴＣと複合化することもできる。次いで、ハンチンチンのタンパク質凝集物の濃度を蛍光顕微鏡で可視化する。
【０２０８】
ハンチントン病用のキイロショウジョウバエモデルシステムも入手可能である。たとえば、Ｓｔｅｆｆａｎら，Ｎａｔｕｒｅ，４１３：７３９−７４３（２００１）およびＭａｒｓｈら，Ｈｕｍａｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｇｅｎｅｔｉｓ９：１３−２５（２０００）参照のこと。たとえば、遺伝子組換えショウジョウバエを、たとえば、少なくとも３６個のグルタミンを含むポリグルタミン領域（たとえば、ＣＡＧ反復（好ましくは５１反復またはそれ以上でエンコードされた）（あるいは、任意の数のＣＡＧ反復はＣＡＡでもよい））を持つ、ヒトハンチンチンタンパク質、その一部（たとえばエキソン１）、またはヒトハンチンチンタンパク質を含む融合タンパク質、またはその一部を発現するように設計することができる。ポリグルタミン領域は、ポリＱトラクトをエンコードするエキソン１のＣＡＧ反復セグメントによってエンコードされうる。これらの遺伝子組換えバエは、また、ニューロン、たとえばショウジョウバエの目において、ヒトハンチンチンタンパク質、その一部（たとえばエキソン１）、またはヒトハンチンチンタンパク質を含む融合タンパク質またはその一部を発現するように設計することもできる。
【０２０９】
試験化合物（たとえば、異なる濃度の試験化合物）または本明細書に記載の化合物を、遺伝子組換えショウジョウバエに、たとえば、該化合物を含む医薬組成物を動物に施すことによって、または該化合物を食物の一部として与えることによって投与することができる。化合物の投与は、ショウジョウバエのライフサイクルの種々の段階で行うことができる。該動物は、該化合物での処置がハンチントン病様症状の軽減または遅延、ハンチンチンタンパク質凝集物の解離という結果になるかどうか決定するためにモニターすることができ、または致死率の減少および／光受容体ニューロンの退行変性をモニターすることができる。
【０２１０】
ヒトハンチンチンタンパク質、その一部（たとえばエキソン１）、またはヒトハンチンチンタンパク質を含む融合タンパク質またはその一部の発現による神経変性は、各ショウジョウバエの個眼の光受容体ニューロンによって製造される、７個の可視感桿分体規定の台形配置（亜細胞性集光構造体）で構成される、ハエ化合物眼中で容易に観察される。ヒトハンチンチンタンパク質、その一部（たとえばエキソン１）、またはヒトハンチンチンタンパク質を含む融合タンパク質またはその一部の発現は、進行性の感桿分体欠損に導く。したがって、試験化合物を投与された動物のニューロン退行変性を評価する。
【０２１１】
Ｍｏｒｅｌｙら，（２００２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．ＵＳＡ  Ｖｏｌ．９９：１０４１７は、ハンチントン病関連タンパク質凝集を評価するための線虫システムを記載する。
【０２１２】
（ハンチントン病の評価）
本明細書に記載の化合物は、被験体におけるハンチントン病の少なくとも１つの症状を軽減するために使用することができる。
【０２１３】
ハンチントン病を評価および／またはモニターするための種々の方法が入手可能である。疾患に関する種々の臨床症状および標識は公知である。ハンチントン病は、運動障害、精神的困難性および認知性の変化を起こす。その程度、発病の年齢、およびこれらの症状の発現は変化しうる。運動障害には、舞踏病と呼ばれる、素早い、不規則な、ダンス様動作を含みうる。
【０２１４】
ハンチントン病を評価する方法の１つは、統一ハンチントン病評価スケール（ＵＮＤＲＳ）を使用する。ハンチントン病の少なくとも１つの症状を軽減する場合は、評価するために、個々の試験を単独でまたは組み合わせて使用することも可能である。ＵＮＤＲＳは、Ｍｏｖｅｍｅｎｔ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ（ｖｏｌ．１１：１３６−１４２，１９９６）およびＭａｒｄｅｒら，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ（５４：４５２−４５８，２０００）に記載されている。ＵＮＤＲＳは、ハンチントン病の重症度を定量化する。これは、運動性、認知性、行動性、機能性の複数のサブセクションに分けられる。一実施形態では、単一のサブセクションが被験体を評価するために使用される。これらのスコアは、各セクションの種々の質問を合計することによって計算しうる。あるセクション（たとえば、舞踏病およびジストニア）では、四肢、顔、頬−口腔−舌および胴体を別々にした等級付けを含みうる。
【０２１５】
例示的な運動評価として、眼球追跡、断続的運動の開始、断続的運動の速度、構音障害、舌突出し、フィンガータップ能力、回内運動／回外運動、拳−手−手のひらの順番、腕の硬さ、運動緩慢、最高ジストニア（胴体、上および下肢）、最高ヒョレア（たとえば、胴体、顔、上および下肢）、歩行、タンデム状歩行、および後方突進が挙げられる。例示的な治療で、たとえば１年を超える期間で、合計運動スコア４（ＴＭＳ−４）、ＵＨＤＲＳのサブスケールの変化を起こしうる。
【０２１６】
（糖尿病）
本発明は、糖尿病を治療および予防する方法を提供する。糖尿病の例として、インシュリン依存性真性糖尿病およびインシュリン非依存性糖尿病が挙げられる。該方法は、たとえば、糖尿病を患う患者または糖尿病のリスクを負う患者に本明細書に記載の化合物を投与することを含む。ある場合では、グルコース許容値低下（ＩＧＴ）または空腹時高血糖症であることによって、患者は糖尿病を発症するリスクがあると同定することができる。
【０２１７】
たとえば、本明細書に記載の化合物を被験体に治療的に効果のある量投与し、グリコネオゲネシスを減らし、血糖コントロールを改善し（すなわち空腹時血糖値を下げる）、またはインシュリン感受性を正常化する。化合物は、糖尿病または肥満を患う被験体に投与することができる。
【０２１８】
インシュリン依存性真性糖尿病（１型糖尿病）は自己免疫疾患であり、ここではインシュリン炎がすい臓のＪ細胞の破壊へと導く。１型真性糖尿病が臨床発病すると、ｂ細胞を生成するかなりの数のインシュリンが破壊され、１５％〜４０％しか、インシュリン製造ができなくなる（ＭｃＣｕｌｌｏｃｈら，（１９９１）Ｄｉａｂｅｔｅｓ４０：６７３−６７９）。ｂ細胞の破損は、一生、毎日のインシュリン注射に依存することとなり、疾患の急性および後発合併症に曝されることとなる。
【０２１９】
２型真性糖尿病は、高血糖症または高い血糖によって特徴付けられる、ブドウ糖の恒常性維持の傷害の代謝病であり、欠陥のあるインシュリン作用の結果、インシュリン抵抗性、欠陥インシュリン分泌、またはその両方として兆候が現われる。２型真性糖尿病の患者は、インシュリン抵抗性および／または欠陥インシュリン分泌に関連する、異常な炭水化物、脂質およびタンパク質代謝を持つ。該疾患は、すい臓のβ細胞破壊および最終的に絶対的インシュリン欠乏となる。インシュリンなしでは、血液中に高いブドウ糖濃度が維持される。高血糖値の長い期間の効果として、視覚消失、腎不全およびこれらの範囲への乏しい血液循環があり、これによって足および足首の切断へと導かれる可能性もある。早期検出は、患者をこのような重症度に達することから守るのに重要である。糖尿病患者の多くは、糖尿病の非インシュリン依存性型であり、これから２型真性糖尿病と言う。
【０２２０】
また、本発明は、たとえば、末端器官損傷、糖尿病性胃麻痺、糖尿病神経障害、不整脈などの糖尿病に関連するまたはこれに起因する障害を治療する方法も含む。
【０２２１】
ＩＩ型糖尿病の分子のモデルの例として、欠陥Ｎｋｘ−２．２またはＮｋｘ−６．１を有する遺伝子組換えマウス；（米国特許第６，１２７，５９８号）；ツッカー糖尿病肥満ｆａ／ｆａ（ＺＤＦ）ラット（米国特許第６５６９８３２号）；アカゲザル、これは同時に肥満も進行し、次いで多くが顕著な２型糖尿病へ進行する（Ｈｏｔｔａら，Ｄｉａｂｅｔｓ，５０：１１２６−３３（２００１））；および顕著に不活性なＩＧＦ−Ｉ受容体を持つ遺伝子組換えマウス（ＫＲ−ＩＧＦ−ＩＲ）であって、２型糖尿病様インシュリン抵抗性を持つ。
【０２２２】
（メタボリック症候群）
本発明は、メタボリック症候群を治療する方法であって、被験体に有効量の本明細書に記載の化合物を投与する方法を提供する。
【０２２３】
メタボリック症候群（たとえばＸ症候群）は、１人の人間において、１組の代謝リスク要因に特徴付けられる。これらの例として、中心性肥満（腹部の中および周りの脂肪過多組織）、アテローム発生異常脂肪血症（動脈壁に斑形成を助成する血液脂質障害、主として、高トリグリセリドおよび低ＨＤＬコレステロール）；インシュリン抵抗性またはブドウ糖不耐性（体が適正にインシュリンまたは血糖を使用することができない）；血栓症促進状態（たとえば、高フィブリノゲンまたは血中のプラスミノーゲン活性因子インヒビター［−１］）；上昇した血圧（たとえば、高血圧）（１３０／８５ｍｍＨｇまたはこれより高い）；および炎症誘発性状態（たとえば、血中の上昇した高感度Ｃ−反応性タンパク質）が挙げられる。
【０２２４】
この症候群の基本的な原因は、体重過多／肥満、身体的な不活性および遺伝的要因である。メタボリック症候群の人々は、冠状心疾患、動脈壁における斑形成に関連する他の疾患（たとえば、卒中発作および末梢血管疾患）および２型糖尿病のリスクが高い。メタボリック症候群は、体が効果的にインシュリンを使用することができない、インシュリン抵抗性と呼ばれる全身性代謝異常と密接に関連している。
【０２２５】
（脂肪細胞関連障害）
本発明は、脂肪生成を高める方法であって、被験体に本明細書に記載の化合物を投与することを含む方法を提供する。たとえば、被験体は、体重を減少させることができ、脂肪含有量を減らすことができ、あるいは追加でまたは局所的に（たとえば、顔の皮膚のような局所的な位置に）または全身的に脂肪細胞を要求することができる。
【０２２６】
また、化合物は、脂肪細胞の差別化のように、脂肪細胞を調整するために使用してもよい。たとえば、本明細書に記載の化合物は、正常なまたは病的状態において脂肪の集積を阻止するのに効果的な量を投与することができる。脂肪細胞が関連する障害として、肥満が含まれる。「肥満」は、被験体の肥満度指数が３０以上である状態を言う。「太りすぎ」は、被験体の肥満度指数が２５．０以上の状態を言う。肥満度指数および他の定義は、「ＮＩＨ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ，  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｏｖｅｒｗｅｉｇｈｔ  ａｎｄ  Ｏｂｅｓｉｔｙ  ｉｎ  Ａｄｕｌｔｓ」（１９９８）に従う。特に、肥満は、次の段階でＩＩ型糖尿病に導かれうる。臨床的には、これらの段階を、正常なブドウ糖耐性、ブドウ糖耐性の障害、高いインシュリン性糖尿病および低インシュリン性糖尿病として特徴づけることができる。これらのブドウ糖貯蔵の進行性障害は、基本血糖における上昇と相関する。
【０２２７】
他の脂肪細胞関連障害の例として、異常脂肪血症および高脂血症（高トリグリセリド、高ＬＤＬおよび高脂肪酸濃度を含む）が挙げられる。
【０２２８】
肥満治療のための例示的なモデルとして、２つ主要な動物モデルシステムがある。１）げっ歯類に６０％までの脂肪含量のカロリー摂取量を与えることによって起こる食餌誘発性肥満（ＤＩＯ）。このタイプの食事で１２〜１６週間までの間処置された動物は、実質的な体重を増やし（＞５０％増加）、過剰の脂肪分を蓄積し、高血糖性、高インシュリン性およびインシュリン抵抗性となる。このモデルでは、化合物を、食事処置の開始の前、または肥満の進行の間に試験することができる。２）ｄｂ／ｄｂ変異体マウス（レプチン受容体自然変異体）。これらの動物は、種々の測定値に関しより深刻であるだけで、ＤＩＯ動物と類似の表現型を示す。動物は、ＤＩＯモデルと同じように処置することができる。ＳｉｒＴ１インヒビター活性の代替の測定値として、種々の組織、たとえば、肝臓、筋肉および白色脂肪組織における、ＦｏｘＯ１タンパク質の高アセチル化状況に関し、姉妹動物を、処置レジメンに沿って致死させ、生化学的に評価することもできる。
【０２２９】
本明細書に記載の化合物は、ＡＭＤの治療に使用することができる。黄斑性退行変性として、ブルック膜および網膜色素上皮の異常を伴う、中心視覚の進行性喪失を特徴とする種々の疾患が挙げられる。（たとえば、米国特許出願第２００３０１３８７９８号明細書を参照のこと。）ＡＭＤは、５２〜６４歳の人の人口の１．２％に起こり、患者の２０％は、７５歳を超えている。（たとえば、米国特許出願第２００３００８７８８９号明細書参照。）黄斑性退行変性は、「萎縮性」（「非滲出性」または「乾燥」形態）および「滲出性」（「湿潤」形態）の２つの形態で起こる。死んだＲＰＥ細胞に起因する「萎縮性ＡＭＤ」は、ＡＭＤの形態としてはあまり一般的ではない（米国特許出願第２００３００９３０６４号明細書参照）。
【０２３０】
ＡＭＤの症状として、視野の直線が波型に見えること、本、雑誌および新聞のタイプがぼやけて見えること、および暗いまたは空のスペースが視中心をブロックすることが挙げられる。（たとえば、米国特許出願第２００３００６５０２０号明細書参照。）
ＡＭＤ状態を評価するために使用することができる例示的な分子マーカーとして、ＦＢＮＬをエンコードする遺伝子の核酸配列またはＦＢＮＬタンパク質、３４５Ａｒｇ＞Ｔｒｐおよび３６２Ａｒｇ＞Ｇｌｎのアミノ酸配列（たとえば、米国特許出願第２００３０１３８７９８号明細書参照）、最終的にサイトクロームｃの細胞質への放出を引き起こす、色素Ａ２Ｅ、Ｎ−レチニル−Ｎ−レチニリデンエタノールアミンの増加（米国特許出願第２００３００５０２８３号明細書）、フィブリン−３、ビトロネクチン、β−クリスタリンＡ２、β−クリスタリンＡ３、β−クリスタリンＡ４、β−クリスタリンＳ、カルレチクリン、１４−３−３タンパク質ε、血清トランスフェリン、アルブミン、ケラチン、ピルビン酸カルボキシラーゼまたはビリン２を始めとする、種々の黄斑性退行変性を伴う分子に対する自己抗体（たとえば、米国特許出願第２００３００１７５０１号明細書参照）、異常活性またはクラステリン、Ｃ６またはＣ５ｂ−９複合体を含む補体経路分子の異常な濃度（たとえば、米国特許出願第２００２００１５９５７号明細書参照）、およびレチナール色素上皮（ＲＰＥ）細胞のリソソーム中の色素リポフシンの集積（Ｓｕｔｅｒら，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２７５：３９６２５−３０（２０００））が挙げられる。
【０２３１】
（組織の修復）
本明細書に記載の化合物は、組織修復または組織状態を調整するために使用してもよい。組織修復のための例示的な実施として、創傷、やけど、潰瘍（たとえば、糖尿病における潰瘍、たとえば糖尿病性足底潰瘍）、手術創、びらんおよび擦過傷の治癒が挙げられる。該方法は、組織の少なくとも１つの症状を軽減することができる。たとえば、該方法は、本明細書に記載の化合物を有効量投与する（たとえば、局所的にまたは全身的に）ことを含む。
【０２３２】
化合物を、皮膚科疾患または障害用に使用してもよい。
【０２３３】
（骨格筋萎縮）
筋萎縮は、数多くの神経筋、代謝、免疫学的および神経障害および疾患、さらに、飢餓、栄養失調、代謝ストレス、糖尿病、老化、筋ジストロフィーまたはミオパシーを含む。筋萎縮は、年を取る間に起こる。筋萎縮は、筋肉を使うことを減らすまたは使わないことからも起こる。症状は、骨格筋組織量の減退を含む。ヒト男性では、筋肉量は５０歳と８０歳の間に１／３まで減退する。
【０２３４】
筋萎縮のある分子の特徴として、ユビキチンリガーゼの増加調整および筋原線維タンパク質の損失が含まれる（Ｆｕｒｕｎｏら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６５：８５５０−８５５７，１９９０）。これらのタンパク質の破壊の後には、たとえば、アクチンの特異的構造体でありミオシンのある筋肉中にある、３−メチル−ヒスチジン生成が測定されうる（Ｇｏｏｄｍａｎ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ，２４１：１２１−１２，１９８７およびＬｏｗｅｌｌら，Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，３５：１１２１−１１２，１９８６；ＳｔｅｉｎおよびＳｃｈｌｕｔｅｒ，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．２７２：Ｅ６８８−Ｅ６９６，１９９７）。クレアチンキナーゼ（細胞損傷マーカー）（Ｊａｃｋｓｏｎら，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，４１：１０１  １０４，１９９１）の放出も示している。
【０２３５】
（多発硬化症）
多発硬化症（ＭＳ）は、大脳白質の病巣炎症性および自己免疫退行変性を特徴とする神経筋疾患である。白質に炎症が起き、炎症後ミエリンの破壊（「病変」の形成）となり、これは、数多くの免疫細胞、特にＴ−細胞リンパ球およびマクロファージの浸潤によってマークされる。ＭＳは、神経インパルス伝達のゆっくりしたまたは完全なブロックを発生することができ、したがって、肉体的機能を減少させ、失わせる。ＭＳを患う患者は、ＭＳの種々の等級（たとえば、再発寛解型ＭＳ、第一進行性ＭＳ、第二進行性ＭＳおよびマールブルク変異体ＭＳ）の１つに入る。
【０２３６】
症状としては、かすみ目または複視、赤緑色覚異常、または１つの目での失明のような視力の問題、末梢部における筋衰弱、協調性およびバランスの問題、筋痙直、筋肉疲労、感覚異常、しびれ、刺すような痛み、または「ちくちくする」感じのような一瞬の異常な感覚、そして最悪の場合、部分的なあるいは完全な麻痺が挙げられる。ＭＳを患うほぼ半数の人は、たとえば、集中力、注意、記憶および／または判断の低下など認知障害を経験する（たとえば、米国特許出願第２００３−０１３０３５７号明細書および第２００３−００９２０８９号明細書参照）。
【０２３７】
ＭＳの分子マーカーは、多数の遺伝的要因、たとえば、白人ハプロタイプＤＲＢ＊１５０１−ＤＱＡ１＊０１０２−ＤＱＢ１＊０６０２（米国特許出願第２００３０１１３７５２号明細書）、タンパク質チロシンフォスファターゼ受容体−タイプＣ中の点突然変異（米国特許出願第２００３０１１３７５２）、野生型ＳＡＲＧ−１−タンパク質の非存在、変異ＳＡＲＧ−１−タンパク質の存在、または野生型ＳＡＲＧ−１をエンコードする核酸中での非存在または突然変異（たとえば、米国特許出願第２００３０１１３７５２号明細書参照）およびタンパク質指示薬、たとえば、髄液中のミエリン塩基性タンパク質自己抗体（たとえば、米国特許出願第２００３００９２０８９号明細書を参照）が含まれる。
【０２３８】
ＭＳの細胞および動物モデルとして、たとえば、Ｇｏｖｅｒｍａｎら，Ｃｅｌｌ．７２：５５１−６０（１９９３）によって記載されているような、慢性ＭＳ用の遺伝子組換えマウスモデル（実験的自己免疫脳脊髄炎（ＥＡＥ））、およびＢｒｏｋら，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．，１８３：１７３−８５（２００１）によって精査されているような霊長類モデルが挙げられる。
【０２３９】
（筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ；ルーゲーリック病））
本明細書に記載の化合物は、ＡＬＳを調整するために使用することができる。ＡＬＳは、上位および下位運動ニューロンを含む障害の等級を言う。ＡＬＳの発現率は、より年を取った大人に実質的に増える。これらの障害は、運動ニューロンの死を招く、脊髄中の下位運動ニューロンおよび大脳皮質中の上位運動ニューロンの選択性および進行性退行変性を含む主要な病的異常性を特徴とし、これは、その衰弱および消耗する制御下での筋肉に起こり、麻痺となる。ＡＬＳ障害の例として、古典的ＡＬＳ（普通、下位および上位運動ニューロンに影響する）、原発性側索硬化症（ＰＬＳ、普通、上位運動ニューロンにのみ影響する）、進行性延髄麻痺（ＰＢＰまたは延髄発病、普通、えん下、そしゃくおよび発声が困難なことから始まるＡＬＳの１種）、進行性筋萎縮症（ＰＭＡ、普通、下位運動ニューロンにのみ影響する）または家族性ＡＬＳ（ＡＬＳの遺伝的なもの）、またはこれらの状態の組み合わせが挙げられる（たとえば、米国特許出願第２００２０１９８２３６号明細書および米国特許出願第２００３０１３０３５７号明細書参照）。
【０２４０】
個々のＡＬＳの進行状況は、神経性試験または他の手段、たとえば、ＭＲＩ、ＦＶＣ、ＭＵＮＥなどによって評価してもよい（たとえば、米国特許出願第２００３０１３０３５７号明細書参照）。症状としては、手、腕、足の筋肉の衰弱、えん下または呼吸困難、筋肉の攣縮（線維束収縮）およびけいれん、および足を使うことが減ることが挙げられる。本発明は、ＩＧＦ−１／ＧＨ軸を調整する薬剤を、たとえば、個々が持つ１以上のＡＬＳ症状を解消するのに効果的な量で投与することを含む。
【０２４１】
個々のＡＬＳ状態を評価する方法は、「興奮性アミノ酸トランスポーター２型」（ＥＡＡＴ２）タンパク質または遺伝子、Ｃｕ−Ｚｎスーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ１）タンパク質または遺伝子、ミトコンドリア複合Ｉ活性、プトラシン、スペルミンおよびスペルミジンのようなポリアミンの濃度、オルニチンデカルボキシラーゼ活性、および推定上のＧＴＰアーゼ調整剤をエンコードする遺伝子を評価することを含みうる（Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．，２９（２）：１６６−７３（２００１）参照）。
【０２４２】
ＡＬＳ状態に関する化合物の効果を評価するための細胞および動物として、変更ＳＯＤ遺伝子を有するマウス、たとえば、内在性プロモーターによって推進されるヒトＧ９３Ａ  ＳＯＤ突然変異の可変数のコピーを有するＳＯＤ１−Ｇ９３Ａ遺伝子組換えマウス、ＳＯＤ１−Ｇ３７Ｒ遺伝子組換えマウス（Ｗｏｎｇら，Ｎｅｕｒｏｎ，４（６）：１１０５−１６（１９９５））、ＳＯＤ１−Ｇ８５Ｒ遺伝子組換えマウス（Ｂｒｕｉｊｎら，Ｎｅｕｒｏｎ，１８（２）：３２７−３８（１９９７））、変異体ヒトＳＯＤ１を発現する線虫の系統（Ｏｅｄａら，Ｈｕｍ  Ｍｏｌ  Ｇｅｎｅｔ．，１０：２０１３−２３（２００１））、およびＣｕ／Ｚｎスーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）中で突然変異を発現するショウジョウバエ（Ｐｈｉｌｌｉｐｓら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，９２：８５７４−７８（１９９５）およびＭｃＣａｂｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，９２：８５３３−３４（１９９５））が挙げられる。
【０２４３】
（神経障害）
本明細書に記載の化合物は、神経障害を調整するために使用できる。神経障害には、運動、感覚、知覚運動または自立神経に影響する全身疾患、遺伝性疾患または毒性薬剤によって起こる中枢および／または末梢神経機能不全を含むことができる。（たとえば、米国特許出願第２００３００１３７７１号明細書参照）。
【０２４４】
症状は、神経損傷の原因および影響を受けた神経の特定のタイプによって変化しうる。たとえば、運動神経障害の症状として、肉体労働の行為においてぎくしゃくすることまたは筋肉衰弱、軽度の身体運動後の強度の疲労、直立または歩行の困難および神経筋弛緩の減弱または欠如が挙げられる（米国特許出願第２００３００１３７７１号明細書）。自律神経障害の症状として、便秘、心臓の不整脈および位置低血圧反射の減弱（米国特許出願第２００３００１３７７１号明細書）が挙げられ、感覚神経障害の症状には、疼痛およびしびれ感；手、脚部、足の刺痛；および接触に対する極度の過敏症が含まれ、網膜症の症状には、かすみ目、突然の視力喪失、黒斑および光のちらつきが挙げられる。
【０２４５】
ギラン−バレー症候群は、運動神経障害の１タイプで、普通、インフルエンザ様疾患または他の感染の１〜３週間後に起こる。症状は、筋力低下が下肢に始まり上肢へ向かって上に上がる、上行筋力低下を含む。白色細胞の数が増えることなく、脊髄液中のタンパク質濃度の上昇の結果ともなる（米国特許出願第２００３００８３２４２号明細書）。
【０２４６】
（例示的障害）
本明細書に記載の化合物が有用である可能性のある追加の例示的障害およびそれらの定義を以下に挙げる。
【０２４７】
「加齢性障害」または「加齢関連障害」は、本願の出願時、１００，０００人を超える選択された集団において、その事象が、６０歳を超えるヒト個体の間で、３０歳〜４０歳の間のヒト個体に対して少なくとも１．５倍高い割合でおこる疾患または障害を言う。好ましい集団は、合衆国の集団である。集団は、性別および／または  民族性によって制限しうる。
【０２４８】
「老人性障害」は、本願の出願時、１００，０００人を超える選択された集団において、その事象が、７０歳を超えるヒト個体の少なくとも７０％に起こる疾患または障害を言う。一実施形態では、老人性障害は、癌や心肺障害以外の障害である。好ましい集団は、合衆国の集団である。集団は、性別および／または民族性によって制限しうる。
【０２４９】
「加齢性感受性要因」を持つ障害は、本願の出願時、合衆国集団において、その原因は外界によって媒介されるが、しかしその重症度または症状は、３０歳〜４０歳の間のヒト個体より６０歳を超えたヒト個体において実質的に増加する疾患または障害を言う。たとえば、肺炎は病原菌によって起きるが、疾患の重症度は、３０歳〜４０歳の間のヒト個体より６０歳を超えたヒト個体のほうが大きい。
【０２５０】
「腫瘍障害」は、自律増殖または複製に関する能力を持つ細胞で特徴付けられる疾患または障害、たとえば、増殖性細胞成長で特徴付けられる異常な様子や状態である。「加齢性腫瘍障害」は、加齢性障害でもある腫瘍障害である。
【０２５１】
「非腫瘍障害」は、自律増殖または複製に関する能力を持つ細胞で特徴付けられない疾患または障害である。「加齢性非腫瘍障害」は、加齢性障害でもある非腫瘍障害である。
【０２５２】
「神経障害」は、ニューロン細胞またはニューロン支持体細胞（たとえば神経膠または筋肉）の異常性または機能障害で特徴付けられる疾患または障害である。該疾患または障害は、中枢および／または末梢神経系に影響しうる。例示的な神経障害として、神経系障害、骨格筋萎縮および神経変性疾患、たとえば、少なくとも部分的にポリグルタミン凝集によって起こる神経変性疾患、または少なくとも部分的にポリグルタミン凝集によって起こるもの以外の神経変性疾患が挙げられる。例示的な神経変性疾患として、アルツハイマー型、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）およびパーキンソン病が上げられる。「加齢性神経障害」は、加齢性障害でもある神経障害である。
【０２５３】
「心臓血管障害」は、心織血管系、たとえば、心臓、肺または血管の異常または機能障害で特徴付けられる疾患または障害である。例示的心臓血管障害として、不整脈、慢性うっ血性心不全、虚血性脳卒中、冠動脈疾患、血圧上昇（すなわち高血圧）および心筋症が挙げられる。「加齢性心臓血管障害」は、加齢性障害でもある心臓血管障害である。
【０２５４】
「代謝異常」は、代謝の異常性または代謝不全で特徴付けられる疾患または障害である。代謝異常の１カテゴリーは、ブドウ糖またはインシュリン代謝の障害である。「加齢性代謝異常」は、加齢性障害でもある代謝異常である。
【０２５５】
「皮膚障害」は、皮膚の異常性または機能低下で特徴付けられる疾患または障害である。「皮膚科組織の状態」は、皮膚機能および／または外観に影響を及ぼす、たとえば化粧外観などの、皮膚および任意の下層組織（たとえば支持体組織）を言う。
【０２５６】
ある実現化に関連する例示的な疾患および障害として、癌（たとえば、乳癌、結腸直腸癌、ＣＣＬ、ＣＭＬ、前立腺癌）；骨格筋萎縮；成人発病糖尿病；糖尿病性腎症、神経障害（たとえば、感覚神経障害、自律神経障害、運動神経障害、網膜症）；肥満；骨吸収；加齢関連黄斑性退行変性、ＡＬＳ、アルツハイマー型、ベル麻痺、アテローム硬化症、心臓血管障害（たとえば、不整脈、慢性うっ血性心不全、虚血性脳卒中、冠動脈疾患、高い血圧（たとえば、高血圧）および心筋症）、慢性腎不全、２型糖尿病、潰瘍形成、白内障、老眼、糸球体腎炎、ギラン−バレー症候群、出血性卒中、短期および長期記憶喪失、リウマチ性関節炎、炎症性大腸疾患、多発硬化症、ＳＬＥ、クローン病、変形性関節症、パーキンソン病、肺炎および尿失禁が上げられる。さらに、神経変性障害およびタンパク質凝集（たとえば、ポリグルタミン凝集以外）またはタンパク質ミスホールディングに関連する障害の多くは、加齢関連でもある。疾患の症状および診断は、医療担当者にはよく知られている。該組成物は、そのような疾患の他の方法によって治療を受けている個人、たとえば、化学療法（たとえば、好中球減少、萎縮、全身衰弱状態、ネフロパシー、神経障害を患う）または選択的手術によって治療されている個人、に投与してもよい。
【０２５７】
（キット）
本明細書に記載の化合物は、キットに入れて提供することができる。キットは、（ａ）本明細書に記載の化合物、たとえば、本明細書に記載の化合物を含む組成物と、場合によっては、（ｂ）情報材料とを含む。情報材料は、本明細書に記載の方法および／または本明細書に記載の方法のための本明細書に記載の化合物の用途に関する、説明的、指示的、販売促進的または他の材料である。
【０２５８】
キットの情報材料は、その形に限定されない。一実施形態では、情報材料は、化合物の製造に関する情報、化合物の分子量、濃度、有効期限のデータ、バッチまたは製造部位情報などを含みうる。一実施形態では、情報材料は化合物の投与方法に関する。
【０２５９】
一実施形態では、情報材料は、本明細書に記載の方法を実行するために、本明細書に記載の化合物を適切な手法、たとえば、適切な投与量、投薬形態または投与モード（たとえば、本明細書に記載の用量、投薬形態、または投与モード）で投与する指示を含みうる。別の実施形態では、情報材料は、本明細書に記載の化合物を、適切な被験体、たとえば、ヒト、たとえば本明細書に記載の障害またはそのリスクを持つヒトに投与する指示を含むことができる。
【０２６０】
キットの情報材料は、その形体に限定されない。多くの場合、情報材料、たとえば指示は、印刷物、たとえば、印刷文書、図面および／または写真、たとえば、標識または印刷されたシートで提供される。しかし、情報材料は、他のフォーマット、たとえば点字、コンピュータ読出可能な材料、ビデオ記録または録音によって提供することもできる。別の実施形態では、キットの情報材料は、キットの使用者が、本明細書に記載の化合物および／または本明細書に記載の方法でのその用途に関する実態的な情報を得ることができる接触情報、たとえば、物理アドレス、電子メールアドレス、ウェッブサイト、または電話番号である。もちろん、情報材料もフォーマットの任意の組み合わせで提供することができる。
【０２６１】
キットの組成物は、本明細書に記載の化合物に加えて、他の成分、たとえば、溶媒またはバッファー、安定化剤、保存剤、フレーバー剤（たとえば、苦味拮抗薬または甘味料）、香料、または他の化粧成分および／または本明細書に記載の状態または障害を治療するための第二薬剤を含むことができる。あるいは、他の成分は、キットの中に含めることもできるが、本明細書に記載の化合物とは異なる組成物または容器中に入れることもできる。そのような実施形態では、キットには、本明細書に記載の化合物と他の成分とを混合するための、または本明細書に記載の化合物を他の成分とともに使用するための指示書が含まれえる。
【０２６２】
本明細書に記載の化合物は任意の形、たとえば、液体、乾燥または凍結乾燥された形で提供しうる。本明細書に記載の化合物は、実質的に純粋および／または無菌であることが好ましい。本明細書に記載の化合物を液体溶液で提供する場合、該液体溶液は、水溶液が好ましく、特に無菌水溶液が好ましい。本明細書に記載の化合物を乾燥形態で提供する場合、再調製は、一般的に適切な溶媒を添加して行う。該溶媒、たとえば無菌水やバッファーは、場合によっては、キットの中に入れてもよい。
【０２６３】
キットは、本明細書に記載の化合物を含む組成物用の１つ以上の容器を含みうる。ある実施形態では、キットは、組成物および情報材料用に、別個の容器、デバイダー、またはコンパートメントを含む。たとえば、組成物は、ビン、バイアルまたは注射器中に含まれ、情報材料はプラスチック・スリーブまたはパケット中に含まれる。他の実施形態では、キットの分離した要素は、単一の分けられていない容器の中にある。たとえば、組成物は、ビン、バイアルまたは注射器に含まれ、標識という形で情報材料がこれに付けられている。ある実施形態では、キットは、複数（たとえば、パック）の独立した容器を含み、各容器は、本明細書に記載の化合物の１以上の単位投薬形態（たとえば、本明細書に記載の投薬形態）を含む。たとえば、キットは、複数の注射器、アンプル、フォイルパケットまたはブリスターパックを含み、各容器は、本明細書に記載の化合物の単一用量を含む。キットの容器は、気密、防水（たとえば、水分または蒸発中で変化しない）および／または遮光性であってもよい。
【０２６４】
キットは、場合によっては、組成物の投与に適切な道具、たとえば、注射器、吸入器、ピペット、ピンセット、計量スプーン、滴びん（たとえば、点眼びん）、スワブ（たとえば、綿棒または木製スワブ）またはそのような送達道具の任意のものを含む。好ましい実施形態では、道具は、医療的インプラント装置、たとえば、外科手術用のパッケージである。
【０２６５】
（遺伝情報）
ＳＩＲＴ１遺伝情報は、たとえば、被験体（たとえば以下に記載するもの）からの遺伝材料（たとえばＤＮＡまたはＲＮＡ）を評価することによって得ることができる。遺伝情報は、１以上のヌクレオチドでの核酸配列の内容に関する任意の指標を言う。遺伝情報として、たとえば、特異的ポリモルフィズムの存在または非存在、たとえば、１以上のヌクレオチドバリエーションに関する指標が挙げられる。例示的なポリモルフィズムとして、単一ヌクレオチド・ポリモルフィズム（ＳＮＰ）、限定部位または限定フラグメント長、はめ込み、転移、欠失、反復（たとえば、トリヌクレオチド反復、レトロウィルス反復）などがある。
【０２６６】
例示的なＳＩＲＴ１  ＳＮＰを表２に列挙する。
【０２６７】
（表２：例示的なＳＩＲＴ１  ＳＮＰ）
【０２６８】
【化２３】
2008513370.tif 000021
遺伝情報を、種々の方法で、デジタル的に記録しまたは伝達することができる。代表的な表現法として、１以上のビット、またはテキストストリングが挙げられる。たとえば、２つの対立遺伝子マーカーは、２つのビットを使用して記載することができる。一実施形態では、第一ビットは、第一対立遺伝子（たとえば、小対立遺伝子）が存在するかを示し、第二ビットは、もう一つの対立遺伝子（たとえば、大対立遺伝子）が存在するかを示す。たとえば、２つの対立遺伝子より大きいものが可能なマルチ対立遺伝子であるマーカーについて、エンコーディングの他の形（たとえば、２進法、１６進法テキスト、たとえば、ＡＳＣＩＩまたはＵｎｉｃｏｄｅなど）を使用することと、追加のビットを使用することも可能である。ある実施形態では、遺伝情報は、ハプロタイプ、たとえば、クロモソーム上の複数個のポリモルフィズムを記載する。しかし、多くの実施形態では、遺伝情報はアンフェーズドである。
【０２６９】
本明細書に記載の化合物を投与するかどうかに関する決定は、ＳＩＲＴ１に関する遺伝情報に依存して作りうる。たとえば、本明細書に記載の化合物を投与する方法は、被験体からの核酸を評価し、ＳＩＲＴ１または別のサーチュインに関する遺伝情報を得ること、および本明細書に記載の化合物を投与することを含む。
【０２７０】
（データベース）
また、本発明は、１種以上の本明細書に記載の化合物に関する情報またはこれを同定する情報と、患者、たとえば、本明細書に記載の障害で治療を受けている患者に関するパラメーターとを関連させるデータベースを持つ。パラメーターは、たとえば、血圧、体温などの一般的なパラメーター、または、たとえば本明細書に記載するような特定の疾患または障害に関連するパラメーターであってもよい。
【実施例】
【０２７１】
以下の全ての実施例で、化合物は、表１の指定（すなわち例示化合物）に対応するように記載する。
【０２７２】
（実施例１：ＨｅＬａアポトーシスアッセイ）
以下の例示的な化合物を、ロッシュ・アプライド・サイエンス社からの細胞死検出ＥＬＩＳＡおよびキットを使用して、ＨｅＬａ細胞アポトーシスアッセイに関するそれらの効果を評価した。
【０２７３】
【化２４】
2008513370.tif 000022
（実施例２）
【０２７４】
【化２５】
2008513370.tif 000023
【０２７５】
【化２６】
2008513370.tif 000024
【０２７６】
【化２７】
2008513370.tif 000025
（実施例３）
哺乳類酵素が、化合物８によって抑制されるかどうかを測定するために、２９３Ｔ細胞をグルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼに対してヒトＳＩＲＴ１融合を発現するように設計された構造体を導入し、細胞抽出物からの高速精製を可能にした。以下の細胞溶解細胞抽出物を、グルタチオン−セファロースビーズで培養し、次いで数回、細胞溶解バッファーで洗浄し、最後にＳＩＲＴ１酵素アッセイ・バッファーで洗浄した。ＧＳＴ−ＳＩＲＴ１で結合したビーズを、複数の濃度の化合物８の存在下で、Ｆｌｅｕｒ−ｄｅ−ｌｙｓアッセイ（バイオモル社）に加えた。図２ａからわかるように、哺乳類ＳＩＲＴ１に関する化合物８のＥＣ５０値は、組換え細菌産生ヒト酵素に関して得られたものと比較しうるものである。
【０２７７】
図２Ｂにおいてわかるように、エトポシド治療後、化合物８は細胞に入り込み、ｐ５３アセチル化を（リジン３８２で）増加させる。図２Ｂで示された実験では、ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を、ＳＩＲＴ１インヒビター、化合物８またはニコチンアミドの存在下または非存在下、２０μＭのエトポシド（ＤＮＡ損傷剤）で治療し、アセチル化ｐ５３（リジン３８２で）の量をウェスタンブロットによって視覚化した。化合物８は、ＤＭＳＯ単独と比べて有意にｐ５３アセチル化を増加させ、１μＭおよび１０μＭについても同様に効果を得る。
【０２７８】
（実施例４）
化合物８のエナンチオマーを試験した。ここで、エナンチオマー単独がエナンチオマーの混合物より、より効力があるかどうかを測定するために、各エナンチオマーは、９０％を超える鏡像体過剰率の純度であった。ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を、２０ミクロモルのエトポシドの存在下、化合物８（＋）および８（−）で６時間処置し、次いで、Ａｂ−６（オンコジーン・サイエンス社）を使用して、ｐ５３の細胞溶解および免疫沈澱を行った。ｐ５３のアセチル化リジン３８２を認識する（細胞シグナル伝達）抗体で、抽出物を調べた。図３は、化合物８の活性および不活性エナンチオマーがあることを示す。具体的には、不活性エナンチオマー、化合物８（＋）は、エトポシドの存在下、ｐ５３のアセチル化を増加させない。一方化合物８（−）は、アセチル化を有意に増加させ、ｐ５３タンパク質を安定化に導いた。
【０２７９】
（実施例５）
図４に示す、以下の実験の結果で、化合物のｐ５３アセチル化を増加させる能力は、ＳＩＲＴ１に対するそのインビトロ効力に相関することを示す。構造的に類似の一連の化合物を、１μＭの濃度で細胞に加えた。１μＭ未満のＩＣ５０の化合物だけがＳＩＲＴ１を抑制し、ｐ５３のアセチル化を増やしたが、一方１μＭを超えるＩＣ５０の化合物は増やさなかった。
【０２８０】
（実施例６）
図５に示す実験は、ＳＩＲＴ１活性に関しアッセイ依存性を抑制する酵母において、化合物８の不活性エナンチオマー、化合物８（＋）は、細胞成長に影響を与えないが、活性エナンチオマー、８（−）は、ＳＩＲＴ１を抑制し、５−フルオロウラシルの存在下で、成長をブロックするＵＲＡ３を発現させることを実証する。株ＳＬ８ｃ（テロメアでＵＲＡ）を、酵母ベースのアッセイのために、化合物をスクリーニングするために使用した。細胞は、非不活性細胞を選択するために、−ＵＲＡ培地中で成長させた。次の日、細胞を、２％ブドウ糖を含む新鮮ＹＰＤに１：２０で希釈し、次いで５時間成長させた。次いで、細胞をＳＤおよびＳＤ＋０．１％５ＦＯＡ培地中、ＯＤ＝０．０１希釈した。化合物を、続けて、１０μｌのＳＤまたはＳＤ＋０．１％５ＦＯＡ培地に希釈した。１４０μｌの細胞をピペットで取り、９６ウェルプレートに入れ、３０Ｃ１８〜２４時間成長させた。
【０２８１】
（実施例７）
化合物８は、追加の細胞中でＳＩＲＴ１酵素を抑制する。細胞株Ｕ２ＯＳおよびＭＣＦ７細胞株を、２０マイクロモルのエトポシド（ＴＯＰＯ）の存在下、化合物８で６時間処置し、その後、アガロースビーズに複合したｐ５３Ａｂ−６で細胞溶解および免疫沈澱を行った。試料をＳＤＳ−ＰＡＧＥで分析し、ｐ５３のアセチル化リジン３８２を認識する抗体でイムノブロットした。図６に示した結果は、化合物８がＰ５３アセチル化に関し類似の効果を持つ種々の細胞株において、ＳＩＲＴ１を抑制するのに有用であることを実証する。
【０２８２】
（実施例８）
ｐ５３アセチル化に関する化合物８の影響が、実験上ｐ５３機能の変化をもたらすかどうかを評価するため、ＤＮＡ損傷後の細胞生存を測定して行った。ＳＩＲＴ１インヒビターの存在下または非存在下、ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を、種々の濃度のエトポシドで損傷を付けた。図７に示すように、化合物８それ自身は、このアッセイにおいては、ｐ５３機能を有意に調整しなかった。
【０２８３】
（実施例９）
様々な濃度のエトポシドおよび１マイクロモルの化合物８の存在下、１ウェル当たり８００個の密度で、９６穴シタラビンプレート中に細胞を置いた。チミジン取り込みを２４時間間隔で測定した。図９に示すように、この実験で、エトポシドによる処置と同時に、該処置の前に、および該処置のあとに化合物を加えた条件下では、ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞の成長特徴に関し、エトポシドと化合物８との間に相乗効果はないことを実証している。
【０２８４】
（実施例１０）
ＨＥＫ２９３細胞を、化合物８の存在下または非存在下で２４時間、血清欠乏状態に置き、次いで、ｐ２７タンパク質の細胞溶解およびイムノブロット分析を行った。図９でわかるように、細胞の化合物８による処置によって、細胞周期インヒビターｐ２７の血清飢餓培養−媒介増加調整の抑止が起こる。この結果に対し、ＳＩＲＴ１−媒介脱アセチル化は、ｐ２７のＦＯＸＯ１−媒介転写の不活性化を起こし、化合物８の添加によってこの効果が逆転するという説明が提案される。
【０２８５】
（実施例１１）
ＨｅＬａ細胞にＧＦＰ−ｈＳＩＲＴ２イソ型１（緑色）を形質移入した。形質移入の３６時間後、１μＭのＴＳＡと、ＤＭＳＯまたは５０μＭの化合物８を加えた。次の朝、細胞を固定し、透過し、アセチル化チューブリン（赤色）で染色した。ＤＭＳＯで処置した細胞では、ＳＩＲＴ２を発現する細胞中に、アセチル化チューブリンは殆どなかった。化合物８で処置した細胞では、チューブリンがより高くアセチル化され、これはＳＩＲＴ２の効果がブロックされたことを示唆していた。
【０２８６】
ウエスタン分析を用いて、該化合物の効果を観察することも可能であった。２９３Ｔ細胞にｅＧＦＰ（コントロール）またはマウスＳＩＲＴ２イソ型１（ｍＳＩＲＴ２）を形質移入した。アセチル化チューブリンの量を増やすためにＴＳＡを加え、同時にＤＭＳＯまたは以下に挙げた化合物を加えて、１０μＭとした。
【０２８７】
（手順の説明）
ステップの説明
１    ２×評価すべきウェルの数に必要な基質の量を準備する。１ウェルあたり５μｌが必要である。
２    ５μｌ  ２×基質を試験ウェルに分配する。
３    １μｌの試験化合物を試験ウェルに分配する
１μｌの化合物溶剤／希釈剤をポジティブコントロールウェルに分配する
１μｌの１ｍＭニコチンアミドを５０％抑制ウェルに分配する
１μｌの１０ｍＭニコチンアミドを１００％抑制ウェルに分配する
４    ４μｌのアッセイ緩衝液をネガティブコントロールウェルに分配する。（酵素なしのコントロール）
５    アッセイのためのウェルの数に必要な酵素の量を準備する。１ウェルあたり４μｌの酵素混合物が必要であった。
６    ４μｌの酵素混合物を試験ウェルおよびポジティブコントロールウェルに分配する。
７    覆いをし、３７Ｃで４５分間培養する。
８    使用前３０分以内に、評価されるウェルの数だけの１×展開剤／停止試薬の量を準備する。
９    １０μｌ  １×展開剤／停止試薬を全ウェルに分配する。
１０  室温で少なくとも１５分培養する。
１１  蛍光プレートリーダーを読む。励起＝３５０〜３８０ｎｍ、放出＝４４０〜４６０
１２  基質中のＦｌｕｏｒ  ｄｅ  Ｌｙｓは、データ上、いかなる計算が行われる前に、バックグランドとして差し引く必要のある内部蛍光を持つ。これらの値は、ネガティブコントロールウェル中に見出すことができる。
【０２８８】
（付録１：  Ｆｌｕｏｒ  ｄｅ  Ｌｙｓ  脱アセチル化スタンダードを使用した標準カーブの調製）
１    １μＭのスタンダードの希釈液を作ることによって、上記アッセイと併せて使用するために、脱アセチル化スタンダートの濃度範囲を決定する。１０μｌの１μＭの希釈液と１０μｌの展開剤を混合し、アッセイが読まれたと同じ波長および感度の設定で読む。標準カーブにおいて試験する濃度の範囲を決定するために、ＡＦＵ（任意の蛍光単位）／μＭのこの評価を使用する。
２    アッセイ緩衝液中に、所望の濃度範囲にかかる、Ｆｌｕｏｒ  ｄｅ  Ｌｙｓアセチル化スタンダードの一連の希釈液を調製する。
３    １０μｌのアッセイ緩衝液を「ゼロ」ウェルにピペットで入れる。
４    １０μｌの標準希釈液をウェルにピッペットで入れる。
５    １０μｌの展開剤をウェルにピペットで入れ、１５分間室温で培養する。
６    波長の上でプレートを読む。
７    蛍光信号（ｙ）対Ｆｌｕｏｒ  ｄｅ  Ｌｙｓ  脱アセチル化スタンダードの濃度（ｘ）をプロットし、傾きをＡＦＵ／μＭで測定する。
【０２８９】
（展開剤反応のインヒビターの試験のためのプロトコル）
１    標準カーブから、アッセイ中のポジティブコントロールに等価の蛍光信号を与える（たとえば５μＭ）、脱アセチル化スタンダードの濃度を選択する。
２    ５μｌの２×脱アセチル化スタンダート（たとえば１０μＭ）を分配する。
３    １μｌの化合物、４μｌのアッセイ緩衝液を分配する。
４    １０μｌの展開剤を分配する。
５    室温で１５分間（またはスクリーニング中、同等の時間）培養し、スクリーニングと同じ設定で読み取る。
【０２９０】
（実施例１２：  ２−クロロ−５，６，７，８，９，１０−ヘキサヒドロシクロヘプタ［ｂ］インドール−６−カルボキサミドの合成）
メチル  ３−ブロモ−２−オキソシクロヘプタンカルボキシレートの調製：メチル２−オキソ−１−シクロヘプタンカルボキシレート（５０ｇ，２９４ミリモル）を四塩化炭素（２００ｍＬ）に溶解し、０℃に冷やした。ブロミン（４６．８ｇ，２９４ミリモル）を、添加漏斗を介して３０分を超えて添加した。次いで、冷却浴を取り去り、反応物を室温まで暖めた。反応物を窒素下、室温で４日間撹拌した。４日後、該溶液を水（１Ｌ）を含む分液漏斗に注ぎ入れた。有機物を水洗し、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を真空除去し、（７２．４ｇ，２９１ミリモル，９９％粗生成物）を得た。該材料をさらに精製することなく、用いた。
【０２９１】
メチル２−クロロ−５，６，７，８，９，１０−ヘキサヒドロシクロヘプタ［ｂ］インドール−６−カルボキシレートの調製：メチル３−ブロモ−２−オキソシクロヘプタンカルボキシレート（１６．８ｇ，６７．４ミリモル）および４−クロロアニリン（１８．４ｇ，９８％，２．１３当量，１４３．６ミリモル）を温度計、窒素導入管、および機械的撹拌器を備えるフラスコに加えた。混合物の温度が１４０℃を超えたとき、比較的速い発熱とガスの激しい発生が起こった。反応物をすぐに水で冷却した。反応混合物をＤＣＭ（２００ｍＬ）に溶解した。材料を分液漏斗に移し、水（２×５０ｍＬ）、３ＨＣｌ（３×５０ｍＬ）さらに水（２×５０ｍＬ）、生理食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、溶媒を真空除去した。粗残渣をバイオタージに付し、９／１ヘプタン／酢酸エチルで溶出し、１０ｇの生成物（５３％）をオフホワイト固体として得た。さらに精製することなく次の反応に用いた。
【０２９２】
２−クロロ−５，６，７，８，９，１０−ヘキサヒドロシクロヘプタ［ｂ］インドール−６−カルボキサミドの調製：メチル２−クロロ−５，６，７，８，９，１０−ヘキサヒドロシクロヘプタ［ｂ］インドール−６−カルボキシレート（１０ｇ，３６ミリモル）をメタノール（３５０ｍＬ）中の７Ｎのアンモニアに溶解し、Ｐａｒｒ高圧反応器に移した。反応容器を簡単にパージし、空気を窒素で入れ替えた。次いで、反応物を９０℃で４８時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、溶媒を真空除去し、粗残渣を
バイオタージに付し、徐々に溶出し（１／１ヘプタン／酢酸エチル〜０／１ヘプタン／酢酸エチル）、生成物をオフホワイト発泡体として得た。これを、ＤＣＭで粉砕し、純粋な生成物２ｇ（２１％）をオフホワイト固体として得た。
【０２９３】
多数の本発明の実施形態が記載されている。しかし、本発明の精神および範囲を逸脱しない限り、種々の変更がなされてもよいことは当然である。他の実施形態は請求の範囲にある。
【図面の簡単な説明】
【０２９４】
【図１】代表的な化合物とデータの表。
【図２】ＳＩＲＴの活性部位に結合する化合物８の可能性のあるひとつの配向を示すコンピュータ作成モデル。
【図３Ａ】化合物８による哺乳類ＳｉｒＴ１の抑制を示すグラフ。
【図３Ｂ】エトポシドだけで治療したＮＣＩ−Ｈ４６０細胞またはエトポシドおよび化合物８で治療した該細胞のウェスタンブロット。
【図４】化合物８のエナンチオマー８（−）が、ｐ５３アセチル化の増加を導くことを示す棒グラフ。
【図５】ＳｉｒＴ触媒活性を抑制する化合物は、ｐ５３アセチル化にも効果的であることを示すウェスタンブロット。
【図６】化合物８のエナンチオマー８（−）は、エナンチオマー８（＋）より、酵母ｓｉｒ２を優先的に抑制することを示すグラフ。
【図７】Ｕ２ＯＳ細胞およびＭＣＦ−７細胞におけるＳｉｒＴ１抑制に関し、化合物８の有効性を示すゲルアッセイ。
【図８】ＤＮＡが損傷を受けた後の細胞生存における、化合物８の効果を示すグラフ。
【図９Ａ】ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞の細胞生存における、化合物８の効果を示すグラフ。
【図９Ｂ】ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞の細胞生存における、化合物８の効果を示すグラフ。
【図９Ｃ】ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞の細胞生存における、化合物８の効果を示すグラフ。
【図１０】化合物８が、細胞周期インヒビターｐ２７の血清飢餓培養で媒介された増加調整の抑止に導くことを示す棒グラフ。
【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【図９Ｃ】
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【図１０】
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【配列表】
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【手続補正書】
【提出日】平成19年8月9日(2007.8.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2008513370000001.app
【国際調査報告】
2008513370.tif 000052