(57)【要約】  本発明は、置換ピラゾール、このような化合物を含有する組成物及び治療方法に関する。本化合物は、グルカゴン受容体拮抗剤であり、したがって、２型糖尿病の治療、予防又は発症の遅延に有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉによって表される化合物又は医薬的に許容されるそれらの塩もしくは溶媒和物：
【化１】
2008507528.tif 000058
（式中、
Ａは、１から４個のヘテロ原子を含有し、その０から４個がＮであり、０から１個がＯ又はＳである、９−１０員二環式ヘテロアリール基を表し、該二環式ヘテロアリール基は、
ｅ）１から５個のハロ基；
ｆ）１個のＣＯ２Ｒａ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２；Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ及びＮＲｂＲｃ；
ｃ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はＯＣ１−１０アルキル（該基は、場合によっては、
（１）１から５個のハロ基（ペルハロアルキル基まで）；
（２）１個のオキソ基；
（３）１個から２個のＯＨ基；
（４）１個から２個のＣ１−１０アルコキシ基（それぞれ、５個以下のハロもしくはペルハロアルコキシ、１個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。）；
（５）１個のＣＯ２Ｒａ又はＳ（Ｏ）ｐＲｄ；
（６）１個から２個のアリール、Ｈｅｔｃｙ又はＨＡＲ基（それぞれ、以下のように場合によっては置換されている：
（ａ）１から５個のハロ基
（ｂ）１個のＯＨ、ＣＯ２Ｒａ、ＣＮ、Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ、ＮＯ２又はＣ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ及び
（ｃ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はアルコキシ基（それぞれ、１から５個のハロ（ペルハロアルキルまで）及び１個から２個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。））により場合によっては置換されている。）
ｄ）アリール、ＨＡＲ、Ｈｅｔｃｙ（それぞれ、
（１）１個から３個のＣ１−１０アルキル又はアルコキシ基（それぞれ、次のように場合によっては置換されている：１から５個のハロ基；１個から２個のＯＨ基；ＣＯ２Ｒａ；ＣＮ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；フェニル（場合によっては以下のように置換される：（ｉ）１から５個のハロ基、（ｉｉ）１個のＣＯ２Ｒａ、ＣＮ、Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ、ＮＯ２又はＣ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ基、（ｉｉｉ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はアルコキシ基（それぞれ、１から５個のハロ（ペルハロアルキルまで）及び１個から２個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基により場合によっては置換されている。）のように場合によっては置換されており；
及び、該アリール、ＨＡＲ、Ｈｅｔｃｙ基ｄ）は、
（２）１から５個のハロ基；
（３）１個から２個のＯＨ基；
（４）１個のＳ（Ｏ）ｐＲｄ、ＮＯ２又はＣＮ基；
（５）１個から２個のＣＯ２Ｒａ；及び
（６）−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲｃからなる群から選択される基により炭素においてさらに場合によっては置換されている。）のように場合によっては置換されており；
Ｒａは、Ｈ又はＣ１−１０アルキル（このアルキル基は、場合によっては、フェニル、ＯＨ、ＯＣ１−６アルキル、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｃ１−６アルキル及び１個から３個のハロ基により置換されている。）であり；
Ｒｂは、Ｈ又はＣ１−１０アルキルであり；
Ｒｃは、Ｈ又は、以下から独立に選択され：
（ａ）Ｃ１−１０アルキル（ＯＨ、ＯＣ１−６アルキル、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｃ１−６アルキル及び１個から３個のハロ基により場合によっては置換されている。）；
（ｂ）アリール又はＡｒ−Ｃ１−６アルキル（それぞれ、１から５個のハロ及び、ＣＮ、ＯＨ、Ｃ１−１０アルキル及びＯＣ１−１０アルキル（該アルキル及びアルコキシは、１から５個のハロ基（ペルハロアルキルまで）でさらに場合によっては置換されている。）からなる群から選択される１から３員により場合によっては置換されている。）；
（ｃ）Ｈｅｔｃｙ又はＨｅｔｃｙ−Ｃ１−６アルキル（１から５個のハロ基、及びオキソ、Ｃ１−１０アルキル及びＯＣ１−１０アルキル（該アルキル及びアルコキシは、１から５個のハロ基（ペルハロアルキルまで）でさらに場合によっては置換されている。）から選択される１個から３個の基により、場合によっては置換されている。）；
（ｄ）ＨＡＲ又はＨＡＲ−Ｃ１−６アルキル（１から５個のハロ基及び、Ｃ１−１０アルキル及びＯＣ１−１０アルキル（該アルキル及びアルコキシは、１から５個のハロ基（ペルハロアルキルまで）でさらに場合によっては置換されている。）から選択される１個から３個の基により場合によっては置換されている。）；
Ｒｄは、Ｃ１−１０アルキル、アリール又はＡｒ−Ｃ１−１０アルキルであり；
ｐは、０、１及び２から選択される整数であり；
各Ｒ１は、Ｈを表すか、又は以下からなる群から選択され：
ａ）ハロ；ＣＯ２Ｒａ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２；Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ及びＮＲｂＲｃ；
ｂ）Ｃ１−１０アルキル又はＯＣ１−１０アルキル（これらの基は、場合によっては、
（１）１から５個のハロ基（ペルハロアルキル基まで）；
（２）１個のオキソ基；
（３）１個から２個のＯＨ基；
（４）１個から２個のＣ１−１０アルコキシ基（それぞれ、５個以下のハロもしくはペルハロアルコキシ、１個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。）；
（５）１個のＣＯ２Ｒａ又はＳ（Ｏ）ｐＲｄ；
（６）１個から２個のアリール、Ｈｅｔｃｙ又はＨＡＲ基（それぞれ、次のように場合によっては置換されている：
（ａ）１から５個のハロ基
（ｂ）１個のＯＨ、ＣＯ２Ｒａ、ＣＮ、Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ、ＮＯ２又はＣ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ及び
（ｃ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はアルコキシ基（それぞれ、１から５個のハロ（ペルハロアルキルまで）及び１個から２個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。））で置換されている。）；
ｃ）アリール、ＨＡＲ、Ｈｅｔｃｙ（それぞれ、
（１）１個から３個のＣ１−１０アルキル又はアルコキシ基（それぞれ、次のように場合によっては置換されている：１から５個のハロ基；１個から２個のＯＨ基；ＣＯ２Ｒａ；ＣＮ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；フェニル（場合によっては以下のように置換される：（ｉ）１から５個のハロ基、（ｉｉ）１個のＣＯ２Ｒａ、ＣＮ、Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ、ＮＯ２又はＣ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ基、（ｉｉｉ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はアルコキシ基（それぞれ、１から５個のハロ（ペルハロアルキルまで）及び１個から２個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基により場合によっては置換されている。）のように場合によっては置換されており；
及び、該アリール、ＨＡＲ、Ｈｅｔｃｙ基ｃ）は、
（２）１から５個のハロ基；
（３）１個から２個のＯＨ基；
（４）１個のＳ（Ｏ）ｐＲｄ、ＮＯ２又はＣＮ基；
（５）１個から２個のＣＯ２Ｒａ；及び
（６）−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ（ここで、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ及びｐは、既に定義したとおりである。）からなる群から選択される基により炭素においてさらに場合によっては置換されている。）；
Ｒ２は、水素及びＣ１−６アルキルから選択される。）。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物：
（式中、
Ａは、１個から３個のヘテロ原子を含有し、その０から３個がＮであり、０から１個がＯ又はＳである、９−１０員二環式ヘテロアリール基を表し、該二環式ヘテロアリール基は、
ａ）１から５個のハロ基；
ｂ）１個のＣＯ２Ｒａ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；ＯＨ、ＣＮ；
ｃ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はＯＣ１−１０アルキル（このアルキル基は、場合によっては以下のもので置換されている：
（１）１から５個のハロ基（ペルハロアルキル基まで）；
（２）１個から２個のＣ１−１０アルコキシ基（それぞれ、５個以下のハロ、ペルハロアルコキシ、１個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。））のように場合によっては置換されている。）。
【請求項３】
請求項１に記載の化合物：
（式中、
各Ｒ１は、Ｈを表すか、又は以下からなる群から選択される：
ａ）ハロ；ＣＯ２Ｒａ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；ＯＨ、ＣＮ；
ｂ）Ｃ１−１０アルキル又はＯＣ１−１０アルキル（これらの基は、場合によっては以下のもので置換されている：
（１）１から５個のハロ基（ペルハロアルキル基まで）；
（２）１個のオキソ基；
（３）１個から２個のＯＨ基；
（４）１個から２個のＣ１−１０アルコキシ基（それぞれ、５個以下のハロもしくはペルハロアルコキシ、１個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。）；
（５）１個のＣＯ２Ｒａ又はＳ（Ｏ）ｐＲｄ））。
【請求項４】
請求項１に記載の化合物：
（式中、
Ａは、１個から３個のヘテロ原子を含有し、その０から３個がＮであり、０から１個がＯ又はＳである、９−１０員二環式ヘテロアリール基を表し、該二環式ヘテロアリール基は、
ａ）１から５個のハロ基；
ｂ）１個のＣＯ２Ｒａ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；ＯＨ、ＣＮ；
ｃ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はＯＣ１−１０アルキル（このアルキル基は、場合によっては以下のもので置換されている：
（１）１から５個のハロ基（ペルハロアルキル基まで）；
（２）１個から２個のＣ１−１０アルコキシ基（それぞれ、５個以下のハロもしくはペルハロアルコキシ、１個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。））のように場合によっては置換されており；
各Ｒ１は、Ｈを表すか、又は以下からなる群から選択される：
ａ）ハロ；ＣＯ２Ｒａ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；ＯＨ、ＣＮ；
ｂ）Ｃ１−１０アルキル又はＯＣ１−１０アルキル（これらの基は、場合によっては以下のもので置換されている：
（１）１から５個のハロ基（ペルハロアルキル基まで）；
（２）１個のオキソ基；
（３）１個から２個のＯＨ基；
（４）１個から２個のＣ１−１０アルコキシ基（それぞれ、５個以下のハロもしくはペルハロアルコキシ、１個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。）；
（５）１個のＣＯ２Ｒａ又はＳ（Ｏ）ｐＲｄ））。
【請求項５】
請求項１に記載の化合物：
（式中、
Ａは、インドール、ベンゾイミダゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾオキサゾール、ベンゾフラン、キノリン、イソキノリン及びキナキソリンからなる群から選択される９−１０員二環式ヘテロアリール基を表し、該基は、次のように場合によっては置換されており：
ａ）１から５個のハロ基；
ｂ）１個のＯＨ基；
ｃ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はＯＣ１−１０アルキル（このアルキル基は、場合によっては１から５個のハロ基、ペルハロアルキルまでにより置換されている。）；
各Ｒ１は、Ｈを表すか、又は
ａ）ハロ；
ｂ）Ｃ１−１０アルキル又はＯＣ１−１０アルキル（このアルキル基は、場合によっては１から５個のハロ基、ペルハロアルキルまでにより置換されている。）からなる群から選択され；
Ｒ２は、Ｈ又はメチルである。）。
【請求項６】
次の化合物からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物又は医薬的に許容されるそれらの塩もしくは溶媒和物：
【表１】
2008507528.tif 000059
2008507528.tif 000060
2008507528.tif 000061
2008507528.tif 000062
【表２】
2008507528.tif 000063
2008507528.tif 000064
2008507528.tif 000065
【請求項７】
医薬的に許容可能な担体と組み合わせて請求項１に記載の化合物を含有する医薬組成物。
【請求項８】
２型糖尿病の治療を必要とする哺乳動物患者において２型糖尿病を治療する方法（２型糖尿病を治療するのに有効である量で請求項１に記載の化合物を前記患者に投与することを含む。）。
【請求項９】
アテローム性動脈硬化症の治療を必要とする哺乳動物患者においてアテローム性動脈硬化症を治療する方法。（アテローム性動脈硬化症を治療するのに有効である量で請求項１に記載の化合物を前記患者に投与することを含む。）。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、二環式ヘテロアリール基により置換されている置換ピラゾール誘導体、このような化合物を含有する組成物及び２型糖尿病の治療方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
糖尿病は、複数の原因要素から生じる疾患過程であり、空腹時の、又は経口グルコース負荷試験でのグルコース投与後の血漿グルコース濃度が高い（高血糖）ことが特徴である。真性糖尿病（例えば、空腹時の血中グルコース濃度≧１２６ｍｇ／ｄＬ）である場合、心臓血管病の早期発病率及び死亡率が高くなり、脂質、リポタンパク質及びアポリポタンパク質代謝の変化を含めた様々な代謝状態に直接的及び間接的に関連する。
【０００３】
糖尿病患者の約９５％を占めるインスリン非依存性糖尿病（２型糖尿病）の患者は、血清脂質、例えば、コレステロール及びトリグリセリドの濃度が高く、血中脂質特性が悪く、ＬＤ１−コレステロール濃度が高く、ＨＤ１−コレステロール濃度が低いことが多い。したがって、２型糖尿病に罹患した患者は、冠動脈心疾患、脳卒中、末梢血管疾患、高血圧（例えば、安静時の血圧≧１３０／８０ｍｍＨｇ）、腎障害、神経障害及び網膜症を含めた大血管性及び微小血管性合併症を発症する危険性が高い。
【０００４】
２型糖尿病患者は、糖尿病ではない患者と比較して高い血漿インスリン濃度を示すことが特徴で、２型糖尿病の患者は、主要なインスリン感受性組織（筋肉、肝臓及び脂肪組織）において、グルコース及び脂質の代謝のインスリン刺激に抵抗性を有するようになっている。したがって、２型糖尿病は、自然な疾患進行の少なくとも初期では、インスリン産生が減少するよりもインスリン抵抗性を示すことが第１の特徴であり、その結果筋肉においてはグルコースの取り込み、酸化及び貯蔵が不十分となり、脂肪組織においては脂肪分解の抑制が不適切となり、肝臓においてはグルコース産生及び分泌が過剰となる。インスリンに対する感受性減少により、最終的には、血漿グルコースを適切に減少させることなく（高血糖）血液中を高濃度のインスリンが循環することとなる。高インスリン血症は、高血圧発症の危険因子であり、血管疾患にも関与する。
【０００５】
グルカゴンは、インスリンの肝臓における糖新生阻害効果を緩和する主要な調節ホルモンとして働き、通常血中グルコース濃度の低下に反応してランゲルハンス島のα−細胞によって分泌される。このホルモンは、ｃＡＭＰが介在する現象を通じてグリコーゲン分解及び糖新生増大を引き起こす肝細胞の特異的受容体に結合する。これらの応答は、グルコースを産生して（例えば、肝臓によるグルコース産生）、血中グルコース濃度の著しい降下を防ぐことによって正常血糖を維持するのを助ける。
【０００６】
循環インスリン濃度の増加に加えて、ＩＩ型糖尿病では血漿グルカゴンの濃度が高く、肝臓によるグルコース産生速度が速い。グルカゴンアンタゴニストは、肝臓におけるインスリンの応答性を改善し、糖新生の速度を低下させ、肝臓のグルコース産出速度を低下させて、それにより血漿グルコース濃度を低下させるのに有用である。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、式Ｉによって表される化合物又は医薬的に許容されるそれらの塩もしくは溶媒和物を対象とする。
【０００８】
【化２】
2008507528.tif 000002
（式中、
Ａは、１から４個のヘテロ原子を含有し、その０から４個がＮであり、０から１個がＯ又はＳである、９−１０員二環式ヘテロアリール基を表し、該二環式ヘテロアリール基は、
ａ）１から５個のハロ基；
ｂ）１個のＣＯ２Ｒａ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２；Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ及びＮＲｂＲｃ；
ｃ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はＯＣ１−１０アルキル（該基は、場合によっては、
（１）１から５個のハロ基（ペルハロアルキル基まで）；
（２）１個のオキソ基；
（３）１個から２個のＯＨ基；
（４）１個から２個のＣ１−１０アルコキシ基（それぞれ、５個以下のハロもしくはペルハロアルコキシ、１個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。）；
（５）１個のＣＯ２Ｒａ又はＳ（Ｏ）ｐＲｄ；
（６）１個から２個のアリール、Ｈｅｔｃｙ又はＨＡＲ基（それぞれ、以下のように場合によっては置換されている：
（ａ）１から５個のハロ基
（ｂ）１個のＯＨ、ＣＯ２Ｒａ、ＣＮ、Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ、ＮＯ２又はＣ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ及び
（ｃ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はアルコキシ基（それぞれ、１から５個のハロ（ペルハロアルキルまで）及び１個から２個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。））により場合によっては置換されている。）
ｄ）アリール、ＨＡＲ、Ｈｅｔｃｙ（それぞれ、
（１）１個から３個のＣ１−１０アルキル又はアルコキシ基（それぞれ、次のように場合によっては置換されている：１から５個のハロ基；１個から２個のＯＨ基；ＣＯ２Ｒａ；ＣＮ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；フェニル（場合によっては以下のように置換される：（ｉ）１から５個のハロ基、（ｉｉ）１個のＣＯ２Ｒａ、ＣＮ、Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ、ＮＯ２又はＣ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ基、（ｉｉｉ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はアルコキシ基（それぞれ、１から５個のハロ（ペルハロアルキルまで）及び１個から２個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基により場合によっては置換されている。）のように場合によっては置換されており；
及び、該アリール、ＨＡＲ、Ｈｅｔｃｙ基ｄ）は、
（２）１から５個のハロ基；
（３）１個から２個のＯＨ基；
（４）１個のＳ（Ｏ）ｐＲｄ、ＮＯ２又はＣＮ基；
（５）１個から２個のＣＯ２Ｒａ；及び
（６）−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲｃからなる群から選択される基により炭素においてさらに場合によっては置換されている。）で場合によっては置換されており；；
Ｒａは、Ｈ又はＣ１−１０アルキル（このアルキル基は、場合によっては、フェニル、ＯＨ、ＯＣ１−６アルキル、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｃ１−６アルキル及び１個から３個のハロ基により置換されている。）であり；
Ｒｂは、Ｈ又はＣ１−１０アルキルであり；
Ｒｃは、Ｈ又は、以下から独立に選択され：
（ａ）Ｃ１−１０アルキル（ＯＨ、ＯＣ１−６アルキル、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｃ１−６アルキル及び１個から３個のハロ基により場合によっては置換されている。）；
（ｂ）アリール又はＡｒ−Ｃ１−６アルキル（それぞれ、１から５個のハロ及び、ＣＮ、ＯＨ、Ｃ１−１０アルキル及びＯＣ１−１０アルキル（該アルキル及びアルコキシは、１から５個のハロ基（ペルハロアルキルまで）でさらに場合によっては置換されている。）からなる群から選択される１から３員により場合によっては置換されている。）；
（ｃ）Ｈｅｔｃｙ又はＨｅｔｃｙ−Ｃ１−６アルキル（１から５個のハロ基、及びオキソ、Ｃ１−１０アルキル及びＯＣ１−１０アルキル（該アルキル及びアルコキシは、１から５個のハロ基（ペルハロアルキルまで）でさらに場合によっては置換されている。）から選択される１個から３個の基により、場合によっては置換されている。）；
（ｄ）ＨＡＲ又はＨＡＲ−Ｃ１−６アルキル（１から５個のハロ基及び、Ｃ１−１０アルキル及びＯＣ１−１０アルキル（該アルキル及びアルコキシは、１から５個のハロ基（ペルハロアルキルまで）でさらに場合によっては置換されている。）から選択される１個から３個の基により場合によっては置換されている。）；
Ｒｄは、Ｃ１−１０アルキル、アリール又はＡｒ−Ｃ１−１０アルキルであり；
ｐは、０、１及び２から選択される整数であり；
各Ｒ１は、Ｈを表すか、又は以下からなる群から選択され：
ａ）ハロ；ＣＯ２Ｒａ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２；Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ及びＮＲｂＲｃ；
ｂ）Ｃ１−１０アルキル又はＯＣ１−１０アルキル（これらの基は、場合によっては、
（１）１から５個のハロ基（ペルハロアルキル基まで）；
（２）１個のオキソ基；
（３）１個から２個のＯＨ基；
（４）１個から２個のＣ１−１０アルコキシ基（それぞれ、５個以下のハロもしくはペルハロアルコキシ、１個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。）；
（５）１個のＣＯ２Ｒａ又はＳ（Ｏ）ｐＲｄ；
（６）１個から２個のアリール、Ｈｅｔｃｙ又はＨＡＲ基（それぞれ、次のように場合によっては置換されている：
（ａ）１から５個のハロ基
（ｂ）１個のＯＨ、ＣＯ２Ｒａ、ＣＮ、Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ、ＮＯ２又はＣ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ及び
（ｃ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はアルコキシ基（それぞれ、１から５個のハロ（ペルハロアルキルまで）及び１個から２個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。））で置換されている。）；
ｃ）アリール、ＨＡＲ、Ｈｅｔｃｙ（それぞれ、
（１）１個から３個のＣ１−１０アルキル又はアルコキシ基（それぞれ場合によっては次のように置換されている）：１から５個のハロ基；１個から２個のＯＨ基；ＣＯ２Ｒａ；ＣＮ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；フェニル（場合によっては以下のように置換される：（ｉ）１から５個のハロ基、（ｉｉ）１個のＣＯ２Ｒａ、ＣＮ、Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ、ＮＯ２又はＣ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ基、（ｉｉｉ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はアルコキシ基（それぞれ、１から５個のハロ（ペルハロアルキルまで）及び１個から２個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。）のように場合によっては置換されており；
該アリール、ＨＡＲ、Ｈｅｔｃｙ基ｃ）は、
（２）１から５個のハロ基；
（３）１個から２個のＯＨ基；
（４）１個のＳ（Ｏ）ｐＲｄ、ＮＯ２又はＣＮ基；
（５）１個から２個のＣＯ２Ｒａ；及び
（６）−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ（ここで、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ及びｐは、既に定義したとおりである。）からなる群から選択される基により炭素においてさらに場合によっては置換されている。）；
Ｒ２は、水素及びＣ１−６アルキルから選択される。）。
【０００９】
本発明の詳細な説明
本発明は、特に明記しない限り、以下で定義した用語を使用して本明細書中で説明する。
「アルキル」並びにアルコキシ、アルカノイルなどの「ａｌｋ」という接頭語を有するその他の基は、指示した数の炭素原子を含有する直鎖、分枝鎖もしくは環状又はそれらを組み合わせであり得る炭素鎖を意味する。数の指定がない場合、直鎖アルキル基の場合は１個から１０個の炭素原子、分枝アルキル鎖の場合は３個から１０個の炭素原子を企図する。アルキル基の例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−及びｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニルなどが含まれる。シクロアルキルは、アルキルのサブセットであり、原子数の指定がない場合、３個から１０個の炭素原子が企図され、１個から３個の縮合炭素環を形成する。「シクロアルキル」にはまた、結合点が非芳香族部分にあるアリール基に融合した単環が含まれる。シクロアルキルの例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、テトラヒドロナフチル、デカヒドロナフチル、インダニルなどが含まれる。
【００１０】
「アルケニル」とは、少なくとも１個の炭素−炭素２重結合を含有し、直鎖もしくは分枝鎖又はそれらの組み合わせであり得る炭素鎖を意味する。アルケニルの例には、ビニル、アリル、イソプロペニル、ペンテニル、ヘキセニル、ヘプテニル、１−プロペニル、２−ブテニル、２−メチル−２−ブテニルなどが含まれる。
【００１１】
「アルキニル」とは、少なくとも１個の炭素−炭素３重結合を含有し、直鎖もしくは分枝鎖又はそれらの組み合わせであり得る炭素鎖を意味する。アルキニルの例には、エチニル、プロパルギル、３−メチル−１−ペンチニル、２−ヘプチニルなどが含まれる。
【００１２】
「アリール」（Ａｒ）は、６個から１２個の炭素原子を含有する単環及び二環芳香族環を意味する。アリールの例には、フェニル、ナフチル、インデニルなどが含まれる。
【００１３】
「ヘテロアリール」（ＨＡＲ）は、他に指定しない限り、Ｏ、Ｓ及びＮから選択された少なくとも１個のヘテロ原子を含有し、各環が５個から６個の原子を有する単環又は二環式芳香族環又は環系を意味する。例としては、ピロリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、ピラゾリル、ピリジル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、テトラゾリル、フラニル、トリアジニル、チエニル、ピリミジル、ピリダジニル、ピラジニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、フロ（２，３−ｂ）ピリジル、キノリル、インドリル、イソキノリル、キノキサリニルなどが含まれる。ヘテロアリールにはまた、非芳香族又は部分的に芳香族である複素環に縮合した芳香族複素環基及びシクロアルキル環に縮合した芳香族複素環基が含まれる。ヘテロアリールにはまた、荷電状態のこのような基、例えばピリジニウムが含まれる。
【００１４】
「ヘテロシクリル」（Ｈｅｔｃｙ）とは、他に指定しない限り、Ｎ、Ｓ及びＯから選択された少なくとも１個のヘテロ原子を含有し、環のそれぞれが３個から１０個の原子を有し、結合点が炭素又は窒素であり得る単環及び二環式飽和環ならびに環系を意味する。「ヘテロシクリル」の例には、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、イミダゾリジニル、２，３−ジヒドロフロ（２，３−ｂ）ピリジル、ベンゾオキサジニル、テトラヒドロヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、ジヒドロインドリルなどが含まれる。この用語にはまた、芳香族ではない、部分的に不飽和である単環、例えば、窒素を介して結合した２−もしくは４−ピリドン又はＮ−置換−（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジン−２，４−ジオン（Ｎ−置換ウラシル）が含まれる。ヘテロシクリルにはさらに、荷電状態のこのような部分、例えばピペリジニウムが含まれる。
【００１５】
「ハロゲン」（ハロ）には、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素が含まれる。
【００１６】
本発明は、最も広範な態様において、式Ｉによって表される化合物又は医薬的に許容されるそれらの塩もしくは溶媒和物を対象とする。
【００１７】
【化３】
2008507528.tif 000003
（式中、
Ａは、１から４個のヘテロ原子を含有し、その０から４個がＮであり、０から１個がＯ又はＳである、９−１０員二環式ヘテロアリール基を表し、該二環式ヘテロアリール基は、
ａ）１から５個のハロ基；
ｂ）１個のＣＯ２Ｒａ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２；Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ及びＮＲｂＲｃ；
ｃ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はＯＣ１−１０アルキル（該基は、場合によっては、
（１）１から５個のハロ基（ペルハロアルキル基まで）；
（２）１個のオキソ基；
（３）１個から２個のＯＨ基；
（４）１個から２個のＣ１−１０アルコキシ基（それぞれ、５個以下のハロもしくはペルハロアルコキシ、１個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。）；
（５）１個のＣＯ２Ｒａ又はＳ（Ｏ）ｐＲｄ；
（６）１個から２個のアリール、Ｈｅｔｃｙ又はＨＡＲ基（それぞれ、以下のように場合によっては置換されている：
（ａ）１から５個のハロ基
（ｂ）１個のＯＨ、ＣＯ２Ｒａ、ＣＮ、Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ、ＮＯ２又はＣ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ及び
（ｃ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はアルコキシ基（それぞれ、１から５個のハロ（ペルハロアルキルまで）及び１個から２個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。））により場合によっては置換されている。）
ｄ）アリール、ＨＡＲ、Ｈｅｔｃｙ（それぞれ、
（１）１個から３個のＣ１−１０アルキル又はアルコキシ基（それぞれ、次のように場合によっては置換されている：１から５個のハロ基；１個から２個のＯＨ基；ＣＯ２Ｒａ；ＣＮ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；フェニル（場合によっては以下のように置換される：（ｉ）１から５個のハロ基、（ｉｉ）１個のＣＯ２Ｒａ、ＣＮ、Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ、ＮＯ２又はＣ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ基、（ｉｉｉ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はアルコキシ基（それぞれ、１から５個のハロ（ペルハロアルキルまで）及び１個から２個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基により場合によっては置換されている。）のように場合によっては置換されており；
及び、該アリール、ＨＡＲ、Ｈｅｔｃｙ基ｄ）は、
（２）１から５個のハロ基；
（３）１個から２個のＯＨ基；
（４）１個のＳ（Ｏ）ｐＲｄ、ＮＯ２又はＣＮ基；
（５）１個から２個のＣＯ２Ｒａ；及び
（６）−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲｃからなる群から選択される基により炭素においてさらに場合によっては置換されている。）のように場合によっては置換されており；
Ｒａは、Ｈ又はＣ１−１０アルキル（このアルキル基は、場合によっては、フェニル、ＯＨ、ＯＣ１−６アルキル、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｃ１−６アルキル及び１個から３個のハロ基により置換されている。）であり；
Ｒｂは、Ｈ又はＣ１−１０アルキルであり；
Ｒｃは、Ｈ又は、以下から独立に選択され：
（ａ）Ｃ１−１０アルキル（ＯＨ、ＯＣ１−６アルキル、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｃ１−６アルキル及び１個から３個のハロ基により場合によっては置換されている。）；
（ｂ）アリール又はＡｒ−Ｃ１−６アルキル（それぞれ、１から５個のハロ及び、ＣＮ、ＯＨ、Ｃ１−１０アルキル及びＯＣ１−１０アルキル（該アルキル及びアルコキシは、１から５個のハロ基（ペルハロアルキルまで）でさらに場合によっては置換されている。）からなる群から選択される１から３員により場合によっては置換されている。）；
（ｃ）Ｈｅｔｃｙ又はＨｅｔｃｙ−Ｃ１−６アルキル（１から５個のハロ基、及び、オキソ、Ｃ１−１０アルキル及びＯＣ１−１０アルキル（該アルキル及びアルコキシは、１から５個のハロ基（ペルハロアルキルまで）でさらに場合によっては置換されている。）から選択される１個から３個の基により、場合によっては置換されている。）；
（ｄ）ＨＡＲ又はＨＡＲ−Ｃ１−６アルキル（１から５個のハロ基及び、Ｃ１−１０アルキル及びＯＣ１−１０アルキル（該アルキル及びアルコキシは、１から５個のハロ基（ペルハロアルキルまで）でさらに場合によっては置換されている。）から選択される１個から３個の基により場合によっては置換されている。）；
Ｒｄは、Ｃ１−１０アルキル、アリール又はＡｒ−Ｃ１−１０アルキルであり；
ｐは、０、１及び２から選択される整数であり；
各Ｒ１は、Ｈを表すか、又は以下からなる群から選択され：
ａ）ハロ；ＣＯ２Ｒａ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２；Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ及びＮＲｂＲｃ；
ｂ）Ｃ１−１０アルキル又はＯＣ１−１０アルキル（これらの基は、場合によっては、
（１）１から５個のハロ基（ペルハロアルキル基まで）；
（２）１個のオキソ基；
（３）１個から２個のＯＨ基；
（４）１個から２個のＣ１−１０アルコキシ基（それぞれ、５個以下のハロもしくはペルハロアルコキシ、１個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。）；
（５）１個のＣＯ２Ｒａ又はＳ（Ｏ）ｐＲｄ；
（６）１個から２個のアリール、Ｈｅｔｃｙ又はＨＡＲ基（それぞれ、次のように場合によっては置換されている：
（ａ）１から５個のハロ基
（ｂ）１個のＯＨ、ＣＯ２Ｒａ、ＣＮ、Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ、ＮＯ２又はＣ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ及び
（ｃ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はアルコキシ基（それぞれ、１から５個のハロ（ペルハロアルキルまで）及び１個から２個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。））で置換されている。）；
ｃ）アリール、ＨＡＲ、Ｈｅｔｃｙ（それぞれ、
（１）場合によっては次のように置換されている１個から３個のＣ１−１０アルキル又はアルコキシ基：１から５個のハロ基；１個から２個のＯＨ基；ＣＯ２Ｒａ；ＣＮ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；フェニル（場合によっては以下のように置換される：（ｉ）１から５個のハロ基、（ｉｉ）１個のＣＯ２Ｒａ、ＣＮ、Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ、ＮＯ２又はＣ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ基、（ｉｉｉ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はアルコキシ基（それぞれ、１から５個のハロ（ペルハロアルキルまで）及び１個から２個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。）のように場合によっては置換されており；
該アリール、ＨＡＲ、Ｈｅｔｃｙ基ｃ）は、
（２）１から５個のハロ基；
（３）１個から２個のＯＨ基；
（４）１個のＳ（Ｏ）ｐＲｄ、ＮＯ２又はＣＮ基；
（５）１個から２個のＣＯ２Ｒａ；及び
（６）−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ（ここで、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ及びｐは、既に定義したとおりである。）からなる群から選択される基により炭素においてさらに場合によっては置換されている。）；
Ｒ２は、水素及びＣ１−６アルキルから選択される。）。
【００１８】
興味深い本発明のある態様は、式Ｉの化合物に関する（式中、
Ａは、１個から３個のヘテロ原子を含有し、その０から３個がＮであり、０から１個がＯ又はＳである、９−１０員二環式ヘテロアリール基を表し、該二環式ヘテロアリール基は、
ａ）１から５個のハロ基；
ｂ）１個のＣＯ２Ｒａ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；ＯＨ、ＣＮ；
ｃ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はＯＣ１−１０アルキル（このアルキル基は、場合によっては以下のもので置換されている：
（１）１から５個のハロ基（ペルハロアルキル基まで）；
（２）１個から２個のＣ１−１０アルコキシ基（それぞれ、５個以下のハロもしくはペルハロアルコキシ、１個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。））のように場合によっては置換されている。）。
【００１９】
本発明のこの態様内で、他の全ての可変要素は元々定義されるとおりである。
【００２０】
興味深い本発明の別の態様は、式Ｉの化合物に関する（式中、
各Ｒ１は、Ｈを表すか、又は以下からなる群から選択される：
ａ）ハロ；ＣＯ２Ｒａ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；ＯＨ、ＣＮ；
ｂ）Ｃ１−１０アルキル又はＯＣ１−１０アルキル（これらの基は、場合によっては以下のもので置換されている：
（１）１から５個のハロ基（ペルハロアルキル基まで）；
（２）１個のオキソ基；
（３）１個から２個のＯＨ基；
（４）１個から２個のＣ１−１０アルコキシ基（それぞれ、５個以下のハロもしくはペルハロアルコキシ、１個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。）；
（５）１個のＣＯ２Ｒａ又はＳ（Ｏ）ｐＲｄ））。
【００２１】
本発明のこの態様内で、他の全ての可変要素は元々定義されるとおりである。
【００２２】
より具体的な興味深い化合物は、式Ｉの化合物である（式中、
Ａは、１個から３個のヘテロ原子を含有し、その０から３個がＮであり、０から１個がＯ又はＳである、９−１０員二環式ヘテロアリール基を表し、該二環式ヘテロアリール基は、
ａ）１から５個のハロ基；
ｂ）１個のＣＯ２Ｒａ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；ＯＨ、ＣＮ；
ｃ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はＯＣ１−１０アルキル（このアルキル基は、場合によっては以下のもので置換されている；
（１）１から５個のハロ基（ペルハロアルキル基まで）；
（２）１個から２個のＣ１−１０アルコキシ基（それぞれ、５個以下のハロもしくはペルハロアルコキシ、１個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。）。）のように場合によっては置換されており；
各Ｒ１は、Ｈを表すか、又は
ａ）ハロ；ＣＯ２Ｒａ；Ｓ（Ｏ）ｐＲｄ；ＯＨ、ＣＮ；
ｂ）Ｃ１−１０アルキル又はＯＣ１−１０アルキル（これらの基は、場合によっては以下のもので置換されている：
（１）１から５個のハロ基（ペルハロアルキル基まで）；
（２）１個のオキソ基；
（３）１個から２個のＯＨ基；
（４）１個から２個のＣ１−１０アルコキシ基（それぞれ、５個以下のハロもしくはペルハロアルコキシ、１個のＯＨ又はＣＯ２Ｒａ基で場合によっては置換されている。）；
（５）１個のＣＯ２Ｒａ又はＳ（Ｏ）ｐＲｄ）からなる群から選択される。）。
【００２３】
本発明のこの態様内で、他の全ての可変要素は元々定義されるとおりである。
【００２４】
より具体的な興味深い化合物は、式Ｉの化合物である（式中、
（式中、
Ａは、インドール、ベンゾイミダゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾオキサゾール、ベンゾフラン、キノリン、イソキノリン及びキナキソリンからなる群から選択される９−１０員二環式ヘテロアリール基を表し、該基は、次のように場合によっては置換されており：
ａ）１から５個のハロ基；
ｂ）１個のＯＨ基；
ｃ）１個から２個のＣ１−１０アルキル又はＯＣ１−１０アルキル（このアルキル基は、場合によっては１から５個のハロ基、ペルハロアルキルまでにより置換されている。）；
各Ｒ１は、Ｈを表すか、又は
ａ）ハロ；
ｂ）Ｃ１−１０アルキル又はＯＣ１−１０アルキル（このアルキル基は、場合によっては１から５個のハロ基、ペルハロアルキルまでにより置換されている。）からなる群から選択され；
Ｒ２は、Ｈ又はメチルである。）。
【００２５】
特に関心のある本発明の範囲に含まれる種は、本明細書中で与えられる例に含まれる。
【００２６】
本発明はさらに、医薬的に許容可能な担体と組み合わせた、式Ｉの化合物から構成される医薬組成物を含む。
【００２７】
２型糖尿病の治療に有効な量の式１の化合物を哺乳動物患者に投与することを含む、２型糖尿病の治療が必要な哺乳動物患者において２型糖尿病を治療する方法も含まれる。
【００２８】
２型糖尿病を予防し、又は発症を遅延させるのに有効な量の式Ｉの化合物を哺乳動物患者に投与することを含む、２型糖尿病を予防し、又は発症を遅延させることが必要な哺乳動物患者において、２型糖尿病を予防し、又は発症を遅延させる方法も含まれる。
【００２９】
本発明には、哺乳動物患者に治療的有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む、高血糖、糖尿病又はインスリン抵抗性の治療が必要な哺乳動物患者において高血糖、糖尿病又はインスリン抵抗性を治療する方法が含まれる。
【００３０】
２型糖尿病に関連する疾患又は状態を治療し、予防し、又は発症を遅延させる方法も含まれる。例としては、異脂肪血症（例えば高脂血症）、例えば、コレステロール濃度の上昇（高コレステロール血症）、トリグリセリド濃度の上昇（高トリグリセリド血症）又は低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）濃度（高ＬＤＬ濃度）の上昇、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）濃度の低下、微小血管又は大血管の変化及びこのような状態の続発症、例えば冠状動脈性心疾患、脳卒中、末梢血管疾患、高血圧、腎性高血圧、腎障害、神経障害及び網膜症からなる群から選択された疾患及び状態が挙げられる。この方法は、２型糖尿病患者、例えば、ヒト患者に、このような疾患又は状態の治療、予防又は発症を遅延させるために有効な式Ｉの化合物の量を投与することを伴う。
【００３１】
アテローム性動脈硬化を治療するために有効な量の式Ｉの化合物を哺乳動物患者に投与することを含む、アテローム性動脈硬化の治療が必要な哺乳動物患者においてアテローム性動脈硬化を治療する方法も本発明に含まれる。
【００３２】
本発明にはまた、以下の状態を治療するために有効な量の式Ｉによる化合物を哺乳動物患者に投与することを含む、以下の状態の治療を必要とする哺乳動物患者において、（１）高血糖、（２）耐糖能低下、（３）インスリン抵抗性、（４）肥満、（５）脂質障害、（６）異脂肪血症、（７）高脂血症、（８）高トリグリセリド血症、（９）高コレステロール血症、（１０）低ＨＤＬ濃度、（１１）高ＬＤＬ濃度、（１２）アテローム性動脈硬化及びその続発症、（１３）血管再狭窄、（１４）膵炎、（１５）腹部肥満、（１６）神経変性疾患、（１７）網膜症、（１８）腎障害、（１９）神経障害、（２０）シンドロームＸ並びに、インスリン抵抗性が要素であるその他の状態及び障害からなる群から選択される状態を治療する方法が含まれる。
【００３３】
本発明には、以下の状態の発症を遅延させるのに有効な量の式Ｉの化合物を哺乳動物患者に投与することを含む、以下の状態の治療が必要な哺乳動物患者において、（１）高血糖、（２）耐糖能低下、（３）インスリン抵抗性、（４）肥満、（５）脂質障害、（６）異脂肪血症、（７）高脂血症、（８）高トリグリセリド血症、（９）高コレステロール血症、（１０）低ＨＤＬ濃度、（１１）高ＬＤＬ濃度、（１２）アテローム性動脈硬化及びその続発症、（１３）血管再狭窄、（１４）膵炎、（１５）腹部肥満、（１６）神経変性疾患、（１７）網膜症、（１８）腎障害、（１９）神経障害、（２０）シンドロームＸ並びに、インスリン抵抗性が要素であるその他の状態及び障害からなる群から選択される状態の発症を遅延させる方法が含まれる。
【００３４】
本発明には、以下の状態を発症する危険性を低下させるのに有効な量の式Ｉの化合物を哺乳動物患者に投与することを含む、以下の状態の治療が必要な哺乳動物患者において、（１）高血糖、（２）耐糖能低下、（３）インスリン抵抗性、（４）肥満、（５）脂質異常、（６）異脂肪血症、（７）高脂血症、（８）高トリグリセリド血症、（９）高コレステロール血症、（１０）低ＨＤＬ濃度、（１１）高ＬＤＬ濃度、（１２）アテローム性動脈硬化及びその続発症、（１３）血管再狭窄、（１４）膵炎、（１５）腹部肥満、（１６）神経変性疾患、（１７）網膜症、（１８）腎障害、（１９）神経障害、（２０）シンドロームＸ並びに、インスリン抵抗性が要素であるその他の状態及び障害からなる群から選択される状態を発症する危険性を低下させる方法が含まれる。
【００３５】
より具体的には、本発明には、肥満を治療し、予防し、又は発症を遅延させるのに有効な式Ｉの化合物の量を哺乳動物患者に投与することを含む、肥満の治療が必要な哺乳動物患者において、肥満を治療するか、肥満が発症する危険性を低下させるか、又は肥満の発症を遅延させる方法が含まれる。
【００３６】
より具体的には、本発明には、シンドロームＸを治療し、予防し、又は発症を遅延させるのに有効な式Ｉの化合物の量を哺乳動物患者に投与することを含む、シンドロームＸの治療が必要な哺乳動物患者において、シンドロームＸを治療するか、シンドロームＸの発症の危険性を低下させるか、又はシンドロームＸの発症を遅延させる方法が含まれる。
【００３７】
光学異性体−ジアステレオマー−幾何異性体−互変異性体
式Ｉの化合物の多くは、１以上の不斉中心を含有し、したがってラセミ化合物、ラセミ混合物、単一の鏡像異性体、ジアステレオマー混合物及び個々のジアステレオマーを生じる。本発明には、前記化合物のこのような異性体型全てが純粋な状態で、並びに混合物で含まれる。
【００３８】
本明細書で説明した化合物のいくつかは、オレフィン性二重結合を含有し、特に記載がなければ、Ｅ及びＺ両方の幾何異性体を含むものとする。
【００３９】
本明細書に記載の化合物のいくつかは、水素の結合点が異なって存在し得、これを互変異性体と称する。このような例は、ケトエノール互変異性体として公知のケトン及びそのエノール型であることが可能である。個々の互変異性体並びにそれらの混合物は、式Ｉの化合物に包含される。
【００４０】
塩及び溶媒和物
「医薬的に許容される塩」という用語は、無機塩基もしくは有機塩基及び無機酸もしくは有機酸を含む医薬的に許容される実質的に無毒性の塩基又は酸から調製された塩並びに医薬的に許容される塩に変換することができる塩を指す。無機塩基から得られた塩としては、アルミニウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、銅塩、第二鉄塩、第一鉄塩、リチウム塩、マグネシウム塩、第二マンガン塩、第一マンガン塩、カリウム塩、ナトリウム塩、亜鉛塩などが挙げられる。特に好ましいのは、アンモニウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩及びナトリウム塩である。医薬的に許容される無毒性有機塩基由来の塩には、１級、２級及び３級アミン、天然に生じる置換アミンを含む置換アミン、環状アミン、及び塩基性イオン交換樹脂、例えば、エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソピロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなどの塩が含まれる。
【００４１】
本発明の化合物が塩基性である場合、無機酸及び有機酸を含む医薬的に許容される非毒性酸から塩を調製することができる。このような酸としては、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸などが挙げられる。特に好ましいのは、クエン酸、臭化水素酸、塩酸、マレイン酸、リン酸、硫酸及び酒石酸である。
【００４２】
本明細書中で使用する場合、溶媒和物とは、水などの溶媒と会合した式Ｉの化合物又はその塩の化合物を指す。代表的な例としては、水和物、半水和物、三水和物などが挙げられる。
【００４３】
式Ｉの化合物の参考例としては、医薬的に許容される塩及び溶媒和物が挙げられる。
【００４４】
本発明は、グルカゴンの産生又は活性と拮抗するか、又はこれらを阻害し、それによって糖新生及びグリコーゲン分解の速度を低下させ、血漿中のグルコース濃度を低下させる方法に関する。
【００４５】
医薬品を提供するために式Ｉの化合物を担体物質と混合することからなる、グルコース濃度の上昇によって起こる哺乳動物の疾患状態を予防又は治療処置するための医薬品の製造において、式Ｉの化合物を使用することができる。
【００４６】
用量範囲
式Ｉの化合物の予防的又は治療的用量は、言うまでもなく、処置する状態の性質、選択した特定の化合物及びその投与経路によって変化する。個々の患者の年齢、体重及び応答によってもまた変化する。一般的に、１日用量の範囲は、単回又は分割投与で、体重１ｋｇ当たり約０．００１ｍｇから約１００ｍｇ、好ましくは１ｋｇ当たり約０．０１ｍｇから約５０ｍｇ、より好ましくは１ｋｇ当たり０．１ｍｇから１０ｍｇの範囲内である。場合によっては、これらの限界を逸脱した用量を使用することが必要になる可能性がある。「有効量」「糖尿病に対して有効な量」及び使用する化合物の量に関わる適用を通じて示されるその他の用語は、これらの範囲を逸脱した不可避な変動を考慮して、当業者が決定するように定められた用量範囲のことである。同様に、化合物を患者に「投与する」場合、これは、該化合物が従来の医薬品として送達されるか、又は、例えばプロドラッグの投与によって全身的に患者に送達されることを意味する。
【００４７】
したがって、大人用の代表的用量は、単回又は分割投与で、１日当たり約０．１ｍｇから約１．０ｇ、好ましくは約１ｍｇから２００ｍｇの範囲内で投与する。
【００４８】
静脈内投与又は経口投与を利用する場合、代表的な用量範囲は、１日に体重１ｋｇ当たり式Ｉの化合物約０．００１ｍｇから約１００ｍｇ（好ましくは０．０１ｍｇから約１０ｍｇ）、より好ましくは、１日に体重１ｋｇ当たり式Ｉの化合物約０．１ｍｇから約１０ｍｇである。
【００４９】
医薬組成物
前述のように、医薬品組成物には、式Ｉの化合物又はそれらの医薬的に許容される塩もしくは溶媒和物及び医薬的に許容される担体が含まれる。「組成物」という用語は、活性成分及び、担体を構成する不活性成分（医薬的に許容される賦形剤）を含む生成物、並びに、直接又は間接的に、２種類以上の成分の組み合わせ、錯体化又は凝集によって、あるいは１以上の成分の解離によって、又は成分間のその他の種類の反応又は相互作用によって生じるあらゆる生成物を包含する。好ましくは、本組成物は、医薬的に許容される担体と組み合わせた、２型糖尿病の治療、予防又は発症の遅延に有効な量の式Ｉの化合物から構成される。
【００５０】
哺乳動物、特にヒトに、本発明の化合物の有効用量を提供するために、あらゆる適切な投与経路を使用することができる。例えば、経口、直腸内、局所、非経口、眼、肺、鼻内などを使用し得る。剤形の例としては、錠剤、トローチ剤、分散剤、懸濁剤、液剤、カプセル剤、クリーム、軟膏、エアゾールなどが含まれ、経口用錠剤が好ましい。したがって、関心のある本発明のある態様は、式Ｉの化合物及び担体の組み合わせから構成される医薬組成物を調製するための式Ｉの化合物の使用である。
【００５１】
経口用組成物を調製するには、経口用液剤、例えば、懸濁剤、エリキシール剤及び液剤の場合には、通常の製薬用媒体のいずれか、例えば、水、グリセロール、油、アルコール、香味料、保存剤、着色剤などを使用し得；又は、経口用固形物、例えば、散剤、カプセル剤及び錠剤の場合には、例えば、デンプン、糖、微結晶性セルロース、希釈剤、顆粒化剤、潤沢剤、結合剤、崩壊剤などの担体を使用し得、固形の経口用調製物が好ましい。錠剤及びカプセル剤は、投与が容易であるため、最も有利な経口用投与単位剤形である。必要に応じて、標準的水性又は非水性技術によって錠剤をコーティングすることができる。
【００５２】
前述の通常の剤形に加えて、式Ｉの化合物はまた、制御放出手段及び／又は米国特許第３８４５７７０号、第３９１６８９９号、第３５３６８０９号、第３５９８１２３号、第３６３０２００号及び第４００８７１９号に記載されたものなどの送達装置によって投与することができる。
【００５３】
経口投与に適した本発明の医薬品組成物は、それぞれが活性成分の所定量を（散剤又は顆粒剤として、あるいは水性液体、非水性液体、油中水エマルジョン又は水中油エマルジョン水性液体に溶解させた液剤又は懸濁剤として）含有するカプセル剤、カシェ剤又は錠剤などの分離された単位として与え得る。このような組成物は、調剤法のいずれかによって調製することができるが、いずれの方法にも該活性成分と１種又は複数の必要な成分を構成する担体とを混合する段階が含まれる。一般に、組成物は、活性成分を液体担体又は超微粒子固体担体又はその両方と均一かつ十分に混合し、次に、必要であれば、所望する状態に生成物を成型することによって製造する。例えば、錠剤は、場合によっては１以上の補助成分とともに圧縮又は成型することによって製造することができる。圧縮錠剤は、場合によっては結合剤、潤沢剤、不活性希釈剤、界面活性剤又は分散剤と混合して、適切な機械で、粉末又は顆粒などの易流動型活性成分を圧縮して製造することができる。成型錠剤は、適切な機械で、不活性液体希釈剤で湿潤させた粉末化合物の混合物を成型することによって製造することができる。望ましくは、各錠剤は活性成分約１ｍｇから約１ｇを含有し、各カシェ及びカプセル剤は、活性成分約１ｍｇから約５００ｍｇを含有する。
【００５４】
以下は、式Ｉの化合物の医薬剤形の例である。
【００５５】
【表３】
2008507528.tif 000004
【００５６】
併用療法
式Ｉの化合物は、２型糖尿病並びに式Ｉの化合物が有用である２型糖尿病に関連した疾患及び状態の治療／予防／発症の遅延に使用するその他の薬剤と組み合わせて使用することができる。その他の薬剤は、式Ｉの化合物と同時に、又は逐次的に、それらの薬剤について通常使用される経路及び量で投与することができる。式Ｉの化合物を１以上のその他の薬剤と同時に使用する場合、式Ｉの化合物に加えてこのようなその他の薬剤を含有する医薬品組成物が好ましい。したがって、本発明の医薬品組成物には、式Ｉの化合物に加えて、１以上のその他の活性成分もまた含有するものが含まれる。別々に、又は同一の医薬品組成物で投与される、式Ｉの化合物と組合せ得るその他の活性成分の例には、以下に限定されないが、（ａ）ビグアニド（例えば、ブホルミン、メトホルミン、フェンホルミン）、（ｂ）ＰＰＡＲアゴニスト（例えば、トログリタゾン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン）、（ｃ）インスリン、（ｄ）ソマトスタチン、（ｅ）α−グルコシダーゼ阻害剤（例えば、ボグリボース、ミグリトール、アカルボース）、（ｆ）ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤、（ｇ）ＬＸＲ調節剤及び（ｈ）インスリン分泌促進剤（例えば、アセトヘキサミド、カルブタミド、クロルプロパミド、グリボヌリド、グリクラジド、グリメピリド、グリピジド、グリキジン、グリソキセピド、グリブリド、グリヘキサミド、グリピナミド、フェンブタミド、トラザミド、トルブタミド、トルシクラミド、ナテグリニド及びレパグリニド）が含まれる。
【００５７】
式Ｉの化合物の第２の活性成分に対する重量比は、広範な範囲内で変化し得、各成分の有効量によって決まる。一般に、それぞれの有効量を使用する。したがって、例えば、式Ｉの化合物をＰＰＡＲアゴニストと組み合わせる場合、ＰＰＡＲアゴニストに対する式Ｉの化合物の重量比は一般に約１０００：１から約１：１０００の範囲、好ましくは約２００：１から約１：２００の範囲である。式Ｉの化合物とその他の活性成分との組み合わせはまた、一般に前述の範囲内であるが、それぞれの場合において、各活性成分の有効量を使用すべきである。
【００５８】
組み合わせ製品の場合、式Ｉの化合物を何らかのその他の活性成分と混合してから担体成分に添加し得、あるいは混合の順番を変化させ得る。
【００５９】
薬剤組み合わせ組成物の例には、
（１）式Ｉによる化合物、
（２）（ａ）ＤＰ−ＩＶ阻害剤、（ｂ）（ｉ）ＰＰＡＲアゴニスト及び（ｉｉ）ビグアナイドからなる群から選択されたインスリン増感剤、（ｃ）インスリン及びインスリン様物質、（ｄ）スルホニル尿素及びその他のインスリン分泌促進剤、（ｅ）α−グルコシダーゼ阻害剤、（ｆ）グルカゴン受容体アンタゴニスト、（ｇ）ＧＬＰ−１、ＧＬＰ−１様物質及びＧＬＰ−１受容体アゴニスト、（ｈ）ＧＩＰ、ＧＩＰ様物質及びＧＩＰ受容体アゴニスト、（ｉ）ＰＡＣＡＰ、ＰＡＣＡＰ様物質、及びＰＡＣＡＰ受容体３アゴニスト、（ｊ）（ｉ）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、（ｉｉ）金属イオン封鎖剤、（ｉｉｉ）ニコチニルアルコール、ニコチン酸及び又はその塩、（ｉｖ）ＰＰＡＲαアゴニスト、（ｖ）ＰＰＡＲα／γ２重アゴニスト、（ｖｉ）コレステロール吸収の阻害剤、（ｖｉｉ）アシルＣｏＡ：コレステロールアシルトランスフェラーゼ阻害剤、（ｖｉｉｉ）抗酸化剤及び（ｉｘ）ＬＸＲ調節剤からなる群から選択されたコレステロール低下剤、（ｋ）ＰＰＡＲδアゴニスト、（ｌ）抗肥満化合物、（ｍ）回腸胆汁酸運搬阻害剤、（ｎ）グルココルチコイド以外の抗炎症薬及び（ｏ）タンパク質チロシンホスファターゼ−１Ｂ（ＰＴＰ−１Ｂ）阻害剤からなる群から選択された化合物
及び（３）医薬的に許容される担体が含まれる。
【００６０】
本明細書中に記載の方法によると、関心のある１方法は、以下の状態の治療が必要な哺乳動物患者において（１）高血糖、（２）耐糖能低下、（３）インスリン抵抗性、（４）肥満、（５）脂質障害、（６）異脂肪血症、（７）高脂血症、（８）高トリグリセリド血症、（９）高コレステロール血症、（１０）低ＨＤＬ濃度、（１１）高ＬＤＬ濃度、（１２）アテローム性動脈硬化及びその続発症、（１３）血管再狭窄、（１４）膵炎、（１５）腹部肥満、（１６）神経変性疾患、（１７）網膜症、（１８）腎障害、（１９）神経障害、（２０）シンドロームＸ及びインスリン抵抗性が要素であるその他の状態及び障害からなる群から選択される状態を治療する方法に関し、この方法は、前記患者に、式Ｉの化合物及び（ａ）ＤＰＰ−ＩＶ阻害剤、（ｂ）（ｉ）ＰＰＡＲアゴニスト及び（ｉｉ）ビグアナイドからなる群から選択されるインスリン増感剤、（ｃ）インスリン及びインスリン様物質、（ｄ）スルホニル尿素及びその他のインスリン分泌促進剤、（ｅ）α−グルコシダーゼ阻害剤、（ｆ）グルカゴン受容体アンタゴニスト、（ｇ）ＧＬＰ−１、ＧＬＰ−１様物質及びＧＬＰ−１受容体アゴニスト、（ｈ）ＧＩＰ、ＧＩＰ様物質及びＧＩＰ受容体アゴニスト、（ｉ）ＰＡＣＡＰ、ＰＡＣＡＰ様物質及びＰＡＣＡＰ受容体３アゴニスト、（ｊ）（ｉ）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、（ｉｉ）金属イオン封鎖剤、（ｉｉｉ）ニコチニルアルコール、ニコチン酸及び又はその塩、（ｉｖ）ＰＰＡＲαアゴニスト、（ｖ）ＰＰＡＲα／γ２重アゴニスト、（ｖｉ）コレステロール吸収の阻害剤、（ｖｉｉ）アシルＣｏＡ：コレステロールアシルトランスフェラーゼ阻害剤、（ｖｉｉｉ）抗酸化剤及び（ｉｘ）ＬＸＲ調節剤からなる群から選択されるコレステロール低下剤、（ｋ）ＰＰＡＲδアゴニスト、（ｌ）抗肥満化合物、（ｍ）回腸胆汁酸運搬阻害剤、（ｎ）グルココルチコイド以外の抗炎症薬、及び（ｏ）タンパク質チロシンホスファターゼ−１Ｂ（ＰＴＰ−１Ｂ）阻害剤からなる群から選択される化合物の有効量を投与することを含み、前記状態を治療するのに有効な量で患者に前記化合物を投与する。
【００６１】
より具体的には、関心のある方法は、以下の状態の治療が必要な哺乳動物患者において、高コレステロール血症、アテローム性動脈硬化、低ＨＤＬ濃度、高ＬＤＬ濃度、高脂血症、高トリグリセリド血症及び異脂肪血症からなる群から選択される状態を治療する方法に関し、この方法は、式Ｉの化合物及びＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の治療的有効量を患者に投与することを含む。
【００６２】
さらにより具体的には、関心のある方法は、患者に式Ｉの化合物及びＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の治療的有効量を投与することを含み、このＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤はスタチンであり、さらにより具体的には、このスタチンは、ロバスタチン、シンバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、イタバスタチン、ＺＤ−４５２２及びリバスタチンからなる群から選択される。
【００６３】
本発明の別の態様は、高コレステロール血症、アテローム性動脈硬化、低ＨＤＬ濃度、高ＬＤＬ濃度、高脂血症、高トリグリセリド血症及び異脂肪血症からなる群から選択される状態及びこのような状態の続発症が発症する危険性を低下させる方法に関し、この方法は、このような治療を必要とする哺乳動物患者に式Ｉの化合物及びＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の治療的有効量を投与することを含む。
【００６４】
より具体的には、本発明の他の態様は、アテローム性動脈硬化の発症を遅延させるか、危険性を低下させる治療を必要とするヒト患者においてアテローム性動脈硬化の発症を遅延させるか、危険性を低下させる方法に関し、この方法は、前記患者に式Ｉの化合物及びＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の有効量を投与することを含む。さらにより具体的には、この方法は、式Ｉの化合物及びＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤の有効量を投与することを含み、このＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤はスタチンである。さらにより具体的には、この方法には式Ｉの化合物及びロバスタチン、シンバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、イタバスタチン、ＺＤ−４５２２及びリバスタチンからなる群から選択されるスタチンを投与することが含まれる。さらにより具体的には、この方法は、式Ｉの化合物及びシンバスタチンとして知られるスタチンを投与することを含む。
【００６５】
本発明の別の態様は、高コレステロール血症、アテローム性動脈硬化、低ＨＤＬ濃度、高ＬＤＬ濃度、高脂血症、高トリグリセリド血症及び異脂肪血症からなる群から選択される状態及びこのような状態の続発症が発症する危険性を低下させる方法に関し、この方法は、このような治療を必要とする哺乳動物患者に式Ｉの化合物及びコレステロール吸収阻害剤の治療的有効量を患者に投与することを含む。特に、この方法には、式Ｉの化合物及びエゼチミブとして知られるコレステロール吸収阻害剤の有効量を投与することが含まれる。
【００６６】
より具体的には、アテローム性動脈硬化の発症を遅延させるか、又は危険性を低下させる治療を必要とするヒト患者においてアテローム性動脈硬化の発症を遅延させるか、又は危険性を低下させる方法は、前記患者に式Ｉの化合物及びコレステロール吸収阻害剤の有効量を投与することを含むことを述べる。より具体的には、この方法には、式Ｉの化合物及びエゼチミブとして知られるコレステロール吸収阻害剤を投与することが含まれる。
【００６７】
本願を通じて、別段の指示がない限り、以下の意味で以下の略語を使用する：
【００６８】
【表４】
2008507528.tif 000005
【００６９】
以下の一般的合成スキームで概説する方法により、本発明の化合物を調製し得る。
【００７０】
本発明のある実施形態において、中間体ＩＩ（以下参照）から式Ｉの化合物を調製し得る（式中、Ｒ１及びＲ２は、上記で定義したとおりであり、Ｒは、Ｃ１−６アルキル基を表す。）。
【００７１】
【化４】
2008507528.tif 000006
【００７２】
同様に、化合物ＩＩは、β−ケトエステルＩ及びベンジルヒドラジン２の縮合により調製できる。１などの化合物は市販されているか、文献で知られているか、又は、当業者にとって公知の様々な方法により都合よく調製され得る。ある経路をスキーム１で説明するが、これは、Ｃｌａｙら、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，１９９３，２９０に記載されている。酢酸エチルなどの非プロトン性溶媒中で１時間から１６時間、トリエチルアミンなどの塩基存在下で、酸塩化物３（市販されているか、又は高温にて塩化チオニルにより処理するか、又は室温にてジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）の触媒量の存在下で塩化メチレンなどの溶媒中で塩化オキサリルを用いて処理することにより、対応するカルボン酸から容易に調製され得る。）をマロン酸エチルカリウム及び塩化マグネシウムで処理して、ケトエステル１を得る。
【００７３】
【化５】
2008507528.tif 000007
【００７４】
高温にて、トルエンなどの非極性溶媒中、酢酸存在下でｔｅｒｔ−ブチルカルバゼートを用いて１６時間から２４時間縮合させることにより、対応するカルボニル類似体からベンジルヒドラジン２を調製し得る、スキーム２。次に、水素化シアノホウ素ナトリウムなどのヒドリド還元剤及びｐ−トルエンスルホン酸１当量（滴下添加すべきである。）で中間体４を還元する。周囲温度にて１６時間から４８時間、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）などの極性の非プロトン性溶媒中で反応を行う。あるいは、酢酸を溶媒として使用する場合は、ｐ−トルエンスルホン酸非存在下で反応を行うことができる。水での処理後、水酸化ナトリウム又はその他の強塩基の水溶液をゆっくりと添加することにより、ボラン錯体を分解して、カルバメート５を得ることができる（Ｃａｌａｂｒｅｔｔａら、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、１９９１、５３６を参照のこと。）。周囲温度、０．２５時間から２時間の塩化メチレン中のトリフルオロ酢酸などの酸での処理により、ＢＯＣ基の脱保護を行った。トリイソプロピルシランの添加有り又は無しでこの反応を行うことができる。そのトリフルオロ酢酸塩として直接脱保護からヒドラジン２を使用することができるか、又は遊離塩基を調製することができ、塩酸水溶液を添加し、溶媒を蒸発させることにより、塩酸塩として物質を単離することができる。中間体５が不斉中心を含有する場合（Ｒ２はＨではない。）、ホモキラル固定相を用いたクロマトグラフィーにより、鏡像異性体をこの時点で分割することができる。あるいは、Ｂｕｒｋら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、１９９４、５０、４３９９に記載のように、水素及びロジウムＤｕＰＨＯＳ錯体などのキラル触媒を用いてヒドラゾン４を直接還元することができる。この反応に用いられる溶媒は、通常、２−プロパノールなどのアルコールであり、高い水素圧を使用した。この反応により、鏡像異性体選択性に富む物質が得られ、上述のようなキラルクロマトグラフィーによりこれをさらに精製し得る。
【００７５】
【化６】
2008507528.tif 000008
【００７６】
１時間から８時間、酢酸又はアセトニトリルなどの溶媒中でβ−ケトエステル１及びベンジルヒドラジン２の２つの成分を加熱することにより、スキーム３に記載のβ−ケトエステル１及びベンジルヒドラジン２の縮合を行い、ピラゾロン６を得る。テトラヒドロフラン、ジオキサン、メタノール、エタノール又は同様の溶媒の混合物などの極性溶媒中での、水酸化リチウム水溶液又は水酸化ナトリウム水溶液などの塩基を用いたエステル６のけん化により、この時点でβ−アラニンエステル７へ変化させることができる。次に、周囲温度で３時間から４８時間、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）又は塩化メチレンなどの溶媒中で１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド（ＥＤＣ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）又はベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリスピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）及び塩基（通常、ジイソプロピルエチルアミン）を用いてβ−アラニンエステル８のカップリングを行い、化合物７を得る。次に、−７８℃から室温にて、トリエチルアミンなどの塩基存在下で、ＴＨＦなどの極性の非プロトン性溶媒中でトリフルオロメタンスルホン酸無水物を用いてピラゾロン７を処理し、中間体ＩＩを得る。再結晶化、摩砕、分取薄層クロマトグラフィー、Ｗ．Ｃ．Ｓｔｉｌｌら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，４３．２９２３（１９７８）に記載のシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー又はＨＰＬＣにより、不必要な副産物から生成物を精製する。同様にして中間体の精製を行う。中間体ＩＩがラセミ体（つまりＲ２が水素ではない。）である場合、順相又は超臨界流体状態のいずれかを用いたキラルＨＰＬＣを介してこの化合物を分割することができる。
【００７７】
【化７】
2008507528.tif 000009
【００７８】
次に、中間体ＩＩを適切なヘテロアリールボロン酸９とカップリングさせることにより、最終生成物を調製することができる、スキーム４。場合により、これらの化合物は市販されており、その他のものは、ビス（ピナコラート）ジボロン、酢酸カリウム及び、塩化パラジウムＩＩなどのパラジウム触媒及び、ジフェニルジホスフィノフェロセン（ｄｐｐｆ）などの配位子で処理することにより、臭化物１０から調製することができる。１時間から５時間、ＤＭＳＯなどの極性非プロトン性溶媒中でこの反応物を加熱し、次いで、アセトンなどの溶媒中の塩酸などの希酸で長時間処理することにより、ボロン酸エステルを開裂させる。ボロン酸を得る代替経路は、低温にて、ＴＨＦなどの極性非プロトン性溶媒中で、ヘテロアリールハロゲン化物１０をブチルリチウムなどの強塩基で処理し、次いでホウ酸トリメチルなどのホウ酸トリアルキルを添加することを含む。周囲温度に温めながら、さらに１時間から５時間この反応物を撹拌し、次いで、中間体９を単離する前に、希塩酸などの希酸を用いて反応を停止させる。ヘテロアリール基が２置換インドールである場合、低温にてＴＨＦなどの極性非プロトン性溶媒中でリチウムジイソプロピルアミドなどのアミド塩基を用いて芳香環において直接、インドール窒素を保護し、その後、ホウ酸トリメチル又はホウ酸トリイソプロピルなどのホウ酸トリアルキルの添加を行った後、リチオ化を行うことができる。周囲温度に温めながら、さらに１時間から５時間この反応物を撹拌し、次いで、中間体９ａを単離する前に、希塩酸などの希酸で反応を停止させる。
【００７９】
【化８】
2008507528.tif 000010
【００８０】
パラジウム２−（ジ−ｔブチルホスフィノ）ビフェニル又はトリフェニルホスフィンなどのパラジウム触媒を用いて、ボロン酸９又は９ａとアリールトリフレートＩＩをカップリングさせることができる。溶媒は通常、ジメトキシエタン、エタノール又はトルエンの何れかであり、トリエチルアミン、炭酸セシウム又は炭酸ナトリウムもしくはフッ化カリウムもこの反応に添加することができ、また、この反応は、水を含有し得、高温で行われ、マイクロ波反応器中で行われ得る（関連するクロスカップリング反応に対して、Ｗａｎｇら、Ｔｅｔ．Ｌｅｔｔ．，２０００、４１、４７１３を参照のこと。）。テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール又は同様の溶媒の混合液などの極性溶媒中で、水酸化リチウム又は水酸化ナトリウム水溶液などの塩基を用いてけん化を行うことにより、Ｒ＝Ｍｅ又はＥｔである場合のエステルの除去を行う。Ｒがｔｅｒｔ−ブチルエステルである場合、０．５時間から３時間、周囲温度にて、塩化メチレン中でトリフルオロ酢酸を用いて処理することにより、最も都合よく除去される。再結晶化、摩砕、分取薄層クロマトグラフィー、Ｗ．Ｃ．Ｓｔｉｌｌら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，４３．２９２３（１９７８）に記載のシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー又はＨＰＬＣにより、不必要な副産物から生成物を精製する。同様にして中間体の精製を行う。場合により、スキーム４に記載の反応からの生成物をさらに修飾する。これらの操作には、以下に限定されないが、置換、還元、酸化、アルキル化、アシル化及び加水分解反応が含まれ得、これらは当業者にとって周知である。
【００８１】
あるいは、様々な順序でピラゾロン６の修飾を行うことができる、スキーム５。−７８℃から室温にて、トリエチルアミンなどの塩基存在下で、ＴＨＦなどの極性非プロトン性溶媒中でピラゾロン６をトリフルオロメタンスルホン酸無水物で処理し、中間体１１を得る。上述の方法と類似の方法を用いて、この時点で、適切なヘテロアリールボロン酸９との、パラジウム触媒を用いたカップリングを行うことができる。テトラヒドロフラン、ジオキサン、メタノール、エタノール又は同様の溶媒の混合液などの極性溶媒中で、水酸化リチウム又は水酸化ナトリウムなどの塩基を用いてエステル１２をけん化することにより、最終的な変換を行うことができる。次に、周囲温度にて３時間から４８時間、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）又は塩化メチレンなどの溶媒中で、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド（ＥＤＣ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）又はベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリスピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）及び塩基（通常、ジイソプロピルエチルアミン）を用いてβアラニン８のカップリングを遂行し、最終生成物Ｉのエステルを得る。Ｒ＝Ｍｅ又はＥｔである場合のエステルの除去は、テトラヒドロフラン、ジオキサン、メタノール、エタノール又は同様の溶媒の混合液などの極性溶媒中で水酸化リチウム又は水酸化ナトリウム水溶液などの塩基を用いてけん化を行うことにより遂行する。Ｒがｔｅｒｔ−ブチルエステルである場合、周囲温度にて０．５時間から３時間、塩化メチレン中でトリフルオロ酢酸を用いて処理することにより、最も都合よく除去される。再結晶化、摩砕、分取薄層クロマトグラフィー、Ｗ．Ｃ．Ｓｔｉｌｌら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，４３，２９２３（１９７８）に記載のシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー又はＨＰＬＣにより、不必要な副産物から生成物を精製する。同様にして中間体の精製を行う。化合物Ｉがラセミ体（つまりＲ２が水素ではない。）である場合、順相又は超臨界流体状態のいずれかのキラルＨＰＬＣを介してこの化合物を分割することができる。
【００８２】
【化９】
2008507528.tif 000011
【００８３】
場合により、生成物Ｉ又は上記スキームに記載の反応からの最後から２番目のエステルをさらに修飾する。これらの操作には、以下に限定されないが、置換、還元、酸化、アルキル化、アシル化及び加水分解反応が含まれ得、これらは、当業者にとって周知である。１３においてのようにＲ１が保護されたフェノール（Ｒは水素ではない。）である場合の本明細書中で例示した、このようなある修飾には、アルコールの放出、続くエーテル化が含まれる、スキーム６。シリルエーテルとしてヒドロキシル基を保護し得、この場合、フッ化物源は、通常、フッ化水素酸であり、又はフッ化テトラブチルアンモニウムをこの反応に使用する。メトキシエーテルの脱保護は、通常、周囲温度にて１時間から１６時間、塩化メチレンなどの溶媒中で三臭化ホウ素で化合物を処理することにより行われる。最後に、アルコールがアリルエーテルとして保護される場合、１５分から２時間、塩化メチレンなどの非プロトン性溶媒中で、ジメチルバルビツール酸及びパラジウム触媒（通常、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０））を用い、１，４−ビス−（ジフェニルホスピノ）ブタンなどの配位子を用いて処理することによりこれを除去する。「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｇｒｅｅｎｅ、Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓより出版、を参照のこと。
【００８４】
【化１０】
2008507528.tif 000012
【００８５】
次に、遊離ヒドロキシル基をさらに修飾して、１時間から１６時間、０℃から４０℃の温度にて、塩化メチレンなどの非極性溶媒中で、アルコール及び、ジイソプロピルアゾジカルボキシレートなどのカップリング剤及びトリフェニルホスフィンを用いてエーテルを調製し得る、スキーム６。次に、既に述べたように、中間体１４を所望の生成物に変換することができる（上記参照。）。
【００８６】
式Ｉの化合物を合成するための代替アプローチは、ピラゾールＩＩＩのアルキル化を含む（下記参照）：
【００８７】
【化１１】
2008507528.tif 000013
（式中、Ｒ１及びＡは上記で定義したとおりである。）。
【００８８】
化合物ＩＩＩは、文献において知られているか、又は、Ｋａｔｒｉｔｓｋｙら、Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．６、３４７−４２９ページに記載のように、当業者にとって公知の様々な方法により都合よく調製し得る。ある経路をスキーム７で例示する。エステル１５（市販されているか、又は例えば、硫酸などの酸を含有する、メタノールもしくはエタノールを用いて、エステル化により対応するカルボン酸から容易に調製し得る。）を、メチルケトン１６の陰イオンと縮合させ、ジケトン１７を得る。０℃から２５℃において、１６時間から２４時間、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）などの極性非プロトン性溶媒中で水酸化ナトリウムなどの塩基を用いて反応を行う（Ｍａｒｃｈ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第３版、４３９ページ及びその中に記載の参考文献を参照のこと。）。１６などの化合物は、市販されているか、又は当業者にとって周知の様々な方法により調製できる。次に、０℃から２５℃の温度にて１６時間から２４時間、メタノールなどの極性溶媒（これは、酢酸又は塩酸などの酸を含有し得る。）中でジケトン１７をヒドラジンと縮合させる。
【００８９】
当業者にとって公知の様々な方法によるエステル１５へのその他の経路を想定できる。ヘテロアリール基が３−置換キノリンである場合のこのような方法の１つをスキーム８で述べる。トルエンなどの溶媒中で、高温にて、適切に置換されたアニリンをマロン酸エトキシメチレンのジエステルで処理する（Ｒｅｉｇｅｌ，Ｂ．；Ｌａｐｐｉｎ，Ｂ．Ｈ．；Ａｄｅｌｓｏｎ，，Ｂ．Ｈ．；Ｊａｃｋｓｏｎ，Ｒ．Ｉ．，Ａｌｂｉｓｅｔｔｉ，Ｃ．Ｊ．；Ｄｏｄｓｏｎ，Ｒ．Ｍ．；Ｂａｋｅｒ，Ｒ．Ｈ．ＪＡＣＳ  ｖｏｌ．６８  ｐ１２６４、１９４６）。さらなる加熱（＞２００℃）により、４−ヒドロキシキノリン１８が形成される。高温でオキシ塩化リンなどの塩素化剤を用いてこの化合物を処理することにより、クロロ類似体が得られ、次いで、エタノール又はエタノール／酢酸エチル混合液などのアルコール性溶媒中で、これを水素ガス及び、炭素担持パラジウムなどのパラジウム触媒により還元することができる。必要に応じてけん化により酸を得る。ヘテロアリール基が２−置換キノリンである場合、メタノールなどの溶媒中で、高温にて、適切に置換されたアニリンをアセチレンジカルボン酸のジエステルにより処理し（Ｅｄｍｏｎｔ  Ｄ．，Ｒｏｃｈｅｒ，Ｒ．；Ｐｌｉｓｓｏｎ，Ｃ；及びＣｈｅｎａｕｌｔ，Ｊ．Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ｖｏｌ．１０  ｐ１８３１−１８３４、２０００）、次いで＞２００℃でさらに加熱し、ヒドロキシ中間体１９を得る。次に、３−置換化合物に対して述べたようにして、これをエステル１５ｂに変換する、スキーム８。
【００９０】
【化１２】
2008507528.tif 000014
【００９１】
【化１３】
2008507528.tif 000015
【００９２】
中間体ＩＩＩへの代替経路は、スキーム９で示すような、アルキニルケトン２０とヒドラジンとの縮合を含み、Ｃａｂａｒｒｏｃａｓら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ，Ｖｏｌ．１１、２４８３−２４９３頁、２０００及びその参考文献に記載されている。これは通常、０℃から２５℃の温度にて１６時間から２４時間、ＤＭＦなどの極性溶媒中で行われる。中間体２０の調製には、−７８℃、ＴＨＦなどの極性非プロトン性溶媒中での、ジイソプロピルアミドリチウム又はブチルリチウムなどのヒンダード塩基を用いた、適切に官能化されたカルボン酸のＷｅｉｎｒｅｂアミドとのアルキン２１のカップリングが含まれる。この反応の詳細は、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．，Ｖｏｌ．２２、３８１５ページ、１９８１に記載されている。アルキン２１は、市販されているか、又は対応するハロゲン化物及びヨウ化アルキニルマグネシウムから調製されるかの何れかである（Ｎｅｇｉｓｈｉら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．６２、８９５７−８９６０頁、１９９７及びＯｒｇ．Ｌｅｔｔ．Ｖｏｌ．３、３１１１−３１１３頁、２００１を参照のこと。）。
【００９３】
【化１４】
2008507528.tif 000016
【００９４】
次に、１２を介して中間体ＩＩＩをスキーム１０で示すような式Ｉの化合物に変換することができる。０℃から２５℃にて３時間から２４時間、極性溶媒（通常、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ））中で、水素化ナトリウム又は炭酸セシウムなどの塩基を用いてピラゾールの脱プロトン化を行った後、４−カルボアルコキシベンジルブロミドを用いてピラゾールＩＩＩのアルキル化を達成することができる。場合により、異性体の混合物が形成される。これらは通常、再結晶化、摩砕、分取薄層クロマトグラフィー、Ｗ．Ｃ．Ｓｔｉｌｌら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，４３．２９２３（１９７８）に記載のシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー又はＨＰＬＣにより分離することができる。ＨＰＬＣにより精製された化合物は対応する塩として単離され得る。次に、エステル１２に対して既に述べたようにして、最終化合物への変換を行う。場合により、スキーム１０に記載の反応からの生成物をさらに修飾する。これらの操作には、以下に限定されないが、置換、還元、酸化、アルキル化、アシル化及び加水分解反応が含まれ得、これらは、当業者にとって周知である。
【００９５】
【化１５】
2008507528.tif 000017
【００９６】
本発明のさらなる実施形態において、中間体ＩＶ（下記参照）
【００９７】
【化１６】
2008507528.tif 000018
（式中、Ｒ１は、上記で定義したとおりであり、Ｒはアルキル基を表す。）から化合物を調製し得る。化合物ＩＶは、文献で知られているか、又は、Ｋａｔｒｉｔｓｋｙら、Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．６、３４７−４２９頁に記載のものなど、当業者にとって公知の様々な方法により都合よく調製され得る。ある経路をスキーム１１で例示する。シュウ酸２２のジエステル（市販されているか、又は、例えばメタノールもしくはエタノール（硫酸などの酸を含有する。）を用いてエステル化することにより、対応するカルボン酸から容易に調製され得る。）をメチルケトン２３の陰イオンと縮合させ、ジケトエステル２４を得る（Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍ，２６，１３８９（１９８９））。−７８℃から０℃にて２時間から２４時間、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）などの極性非プロトン性溶媒中でヘキサメチルジシラジドリチウムなどの塩基を用いて、この反応を行う（Ｍａｒｃｈ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，第３版、４３９ページ及びその中の参考文献を参照のこと。）。２３などの化合物は、市販されているか、又は、当業者にとって周知の様々な方法により調製できる。次に、０℃から２５℃の温度にて１６時間から２４時間、酢酸もしくは塩酸などの酸を含有し得るエタノールなどの極性溶媒中でジケトン２４をヒドラジンと縮合させる。
【００９８】
【化１７】
2008507528.tif 000019
【００９９】
中間体ＩＶへの代替経路には、スキーム１２で示されるように、ヒドラジンとアルキニルケトン２５の縮合が含まれ、これは、Ｃａｂａｒｒｏｃａｓら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ，Ｖｏｌ．１１、２４８３−２４９３頁及びその参考文献に記載されている。これは通常、０℃から２５℃の温度にて１６時間から２４時間、ＤＭＦなどの極性溶媒中で行われる。中間体２５の調製には、−７８℃、ＴＨＦなどの極性非プロトン性溶媒中での、ジイソプロピルアミドリチウム又はブチルリチウムなどのヒンダード塩基を用いた、適切に官能化されたカルボン酸のＷｅｉｎｒｅｂアミドとの市販のアルキン２６のカップリングが含まれる。この反応の詳細は、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．，Ｖｏｌ．２２、３８１５ページ、１９８１に記載されている。
【０１００】
【化１８】
2008507528.tif 000020
【０１０１】
次に、下記スキーム１３で示されるように、中間体ＩＶを式Ｉｃの化合物に変換することができる。約０℃から２５℃にて３時間から２４時間、極性溶媒中（通常、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ））で、水素化ナトリウム又は炭酸セシウムなどの塩基を用いてピラゾールの脱プロトン化を行った後、例えば４−カルボメトキシベンジルブロミドを用いてピラゾールＩＶのアルキル化を行うことができる。あるいは、カルボニル誘導体の還元から調製されるベンジル型アルコール２７を使用し、Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ条件を用いて、ピラゾールＩＶをアルキル化することができる。殆どの場合、アルキル化により、主に化合物２８が得られるが、場合により、異性体の混合物が形成される。これらは通常、再結晶化、摩砕、分取薄層クロマトグラフィー又はＷ．Ｃ．Ｓｔｉｌｌら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，４３．２９２３（１９７８）に記載のシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー又はＨＰＬＣにより分離される。ＨＰＬＣにより精製された化合物は対応する塩として単離され得る。
【０１０２】
ベンジルエステルの存在下で、ピラゾールカルボン酸３０の放出を選択的に行うことができる（前者がオルトゴナルに保護されている、つまりＲ＝ｔＢｕである場合。）。周囲温度にて０．５時間から３時間、塩化メチレン中でトリフルオロ酢酸を用いて処理を行うことにより、最も都合よくこれを達成する。標準的なペプチドカップリング条件を用いて、例えば、周囲温度にて３時間から４８時間、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）又は塩化メチレンなどの溶媒中で、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド（ＥＤＣ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）及び塩基（通常、ジイソプロピルエチルアミン）を用いて、酸と芳香族オルト置換アミン２９とのカップリングを行い、アミド３１を得る。アミン２９がジアミンであった場合、３０分から６時間、酢酸などの極性プロトン性溶媒中で還流を行うことにより、中間体３１をベンゾイミダゾールに環化することができる。場合により、異性体の混合物が形成された。ベンゾチアゾールを調製するために、２−アミノチオフェノールを使用し、アミドカップリング後に、ジチオスレイトールを含有し得る酢酸に反応混合物を滴下することにより、チアゾール環を形成させた。さらに３０分間から６時間、加熱を続けた。同様に、２−アミノフェノールを使用した場合、環化によりベンゾオキサゾールが形成された。次に、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール又は同様の溶媒の混合液などの極性溶媒中で、水酸化リチウム又は水酸化ナトリウム水溶液などの塩基を用いて、３１のメチルエステルのけん化を行う。次に、周囲温度で３時間から４８時間、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）又は塩化メチレンなどの溶媒中で、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド（ＥＤＣ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）及び塩基（通常、ジイソプロピルエチルアミン）を用いて、βアラニン８との酸のカップリングを行い、脱保護後、化合物Ｉｃを得る。再結晶化、摩砕、分取薄層クロマトグラフィー、Ｗ．Ｃ．Ｓｔｉｌｌら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ／．４３．２９２３（１９７８）に記載のシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー又はＨＰＬＣにより、不必要な副産物から生成物を精製する。同様にして中間体の精製を行う。当業者にとって当然のことながら、鏡像異性体の面で純粋な化合物の調製の場合、鏡像異性体の面で純粋な出発物質を使用すべきである。
【０１０３】
場合により、スキーム１３に記載の反応からの生成物をさらに修飾する。これらの操作には、以下に限定されないが、置換、還元、酸化、アルキル化、アシル化及び加水分解反応が含まれ得、これらは、当業者にとって周知である。このようなある修飾は、示されるように、メチルのけん化又はｔｅｒｔ−ブチルエステルの除去であり、これは、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール又は同様の溶媒の混合液などの極性溶媒中で水酸化リチウム又は水酸化ナトリウム水溶液などの塩基を用いて、又は周囲温度にて０．５時間から３時間、塩化メチレン中でトリフルオロ酢酸を用いて処理することにより達成される。
【０１０４】
【化１９】
2008507528.tif 000021
【０１０５】
次の非限定例を用いて、本発明をさらに例示する。
【０１０６】
中間体Ａ
【０１０７】
【化２０】
2008507528.tif 000022
【０１０８】
段階Ａ：ｔｅｒｔ−ブチル２−｛１−［４−（エトキシカルボニル）フェニル］エチリデン｝ヒドラジンカルボキシレート
トルエン（１２０ｍＬ）中の、ｔｅｒｔ−ブチルカルバゼート（１３．９０ｇ、１０５ｍｍｏｌ）及びエチル４−アセチルベンゾエート（２０．００ｇ、０．１０４ｍｏｌ）の溶液を８０℃にて一晩（１５時間）撹拌した。ｔｅｒｔ−ブチル−２−｛１−［４−（エトキシカルボニル）フェニル］エチリデン｝ヒドラジンカルボキシレートを結晶性固体として分離し、混合液のろ過により回収した。ＨＰＬＣ／ＭＳ：ｍ／ｚ＝３０７．３（Ｍ＋１）＋、Ｒ１＝３．４７分。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ８．０５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．８８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．７９（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），４．４１（２Ｈ，ｑ、Ｊ＝７．０Ｈｚ），２．２４（３Ｈ，ｓ），１．５８（９Ｈ，ｓ），１．４３（３Ｈ，ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）。
【０１０９】
段階Ｂ：ｔｅｒｔ−ブチル２−｛１−［４−（エトキシカルボニル）フェニル］エチル｝ヒドラジンカルボキシレート
シーラムキャップ及び磁気式撹拌装置を備えた、Ｎ２を満たした丸底フラスコにおいて、ＮａＢＨ３ＣＮ（６．０ｇ、０．０９５ｍｏｌ）及びｔｅｒｔ−ブチル−２−｛１−［４−（エトキシカルボニル）フェニル］エチリデン｝ヒドラジンカルボキシレート（２５．６ｇ、０．０８４ｍｏｌ）をＴＨＦ（２００ｍＬ）中で溶解させた。シリンジポンプを用いてＴＨＦ（５０ｍＬ）中のｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１７．３ｇ、０．０９１ｍｏｌ）の溶液をゆっくりと添加した。添加完了に約１０分を要した。混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈し、懸濁液を塩水（１５０ｍＬ）で抽出した。有機相を分離し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ロータリーエバポレーターで濃縮し、白色の固体を得た。この白色の固体をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）に吸収させ、１Ｎ  ＮａＯＨ（１００ｍＬ）を添加した。懸濁液をｒ．ｔ．で１時間激しく撹拌し、次いでＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）で希釈した。有機相を分離し、１Ｎ  ＨＣｌ（２ｘ１５０ｍＬ）、塩水（２ｘ１５０ｍＬ）で抽出し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、およそ５０ｍＬまで濃縮した。白色固体として生成物を沈殿させ、ろ過により回収し、ヘキサンで洗浄し、ｔｅｒｔ−ブチル２−｛１−［４−（エトキシカルボニル）フェニル］エチル｝ヒドラジンカルボキシレートを得た。ＨＰＬＣ／ＭＳ：ｍ／ｚ＝３３１．３（Ｍ＋Ｎａ）＋、Ｒｔ＝３．２４分。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ８．０３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．４４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），５．９９（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），４．４０（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），４．２９（１Ｈ，ｍ），１．４５（９Ｈ，ｓ），１．４１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），１．３５（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ）。
【０１１０】
段階Ｃ｛１−［４−（エトキシカルボニル）フェニル］エチル｝ヒドラジニウムクロリド
室温にて１時間、ｔｅｒｔ−ブチル２−｛１−［４−（エトキシカルボニル）フェニル］エチル｝ヒドラジンカルボキシレート（２９ｇ、９４ｍｍｏｌ）をＴＦＡ−ＤＣＭ−トリイソプロピルシラン（２０：２０：１）１００ｍＬで処理した。減圧下で混合物を濃縮し、残渣を水（１００ｍＬ）中で溶解させ、ＤＣＭ２ｘで洗浄した。水３ｘでＤＣＭを逆抽出した。合わせた水溶液にＨＣｌ（５Ｎ、２０ｍＬ）を添加し、〜５０ｍＬに濃縮した。ＣＨ３ＣＮ（５０ｍＬ）を添加し、これを凍結乾燥させて、｛１−［４−（エトキシカルボニル）フェニル］エチル｝−ヒドラジニウムクロリドを得た。ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ：１．３４（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）；１．６７（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；４．３３（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），４．９７（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），７．７６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．９７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）。ＭＳ  Ｃ１１Ｈ１６Ｎ２Ｏ２  計算値：２０８．１２；実測値（Ｍ＋１）：２０９．１９。
【０１１１】
【化２１】
2008507528.tif 000023
【０１１２】
段階Ｄ｛（１Ｓ）−１−［４−（エトキシカルボニル）フェニル］エチル｝ヒドラジニウムトリフルオロアセテート及び｛（１Ｒ）−１−［４−（エトキシカルボニル）フェニル］エチル｝ヒドラジニウムトリフルオロアセテート
２種類の条件を用いてキラルＨＰＬＣにより、ｔｅｒｔ−ブチル２−｛１−［４−（エトキシカルボニル）フェニル］エチル｝ヒドラジンカルボキシレートを分析した。１）ＤａｉｃｅｌカラムＣｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＪ、４０℃、０．７５ｍＬ／分、１０％ＥｔＯＨ／９０％ｎ−ヘプタン：ｔ１  ６．６６分；ｔ２  １２．２５分。このカラムを用いて、分取スケールで鏡像異性体を分割した（３０％ＥｔＯＨ／７０％ｎ−ヘプタン）。２ＤａｉｃｅｌカラムＣｈｉｒａｌＰａｋ  ＡＤ、０．７５ｍＬ／分、１０％ＥｔＯＨ／９０％ｎ−ヘプタン：ｔ１  １２．１７分；ｔ２  １５．４９分。このカラムを用いて、分取スケールで鏡像異性体を分割した（２０％ＥｔＯＨ／８０％ｎ−ヘプタン）。速く移動する鏡像異性体は各場合で同一であり、続いて、（Ｓ）鏡像異性体（［α］Ｄ２０＝−１２０°（ｃ１．１、ＭｅＯＨ）（下記参照）として確立した。ゆっくりと移動する（Ｒ）−鏡像異性体も単離した（［α］Ｄ２０＝＋１２２°（ｃ１．１、ＭｅＯＨ）。
【０１１３】
４５：４５：１０のＴＦＡ：ＤＣＭ：ＴＩＰＳで何れかの鏡像異性体を脱保護することができた（４０℃、１．５時間）。過剰な試薬及び溶媒を蒸発させ、水中で残渣を溶解させた。水溶液をＤＣＭ２ｘで洗浄した。さらなる水でＤＣＭ層を逆抽出した。合わせた水溶液を真空下で蒸発させ（温度＜４５℃）、次いでトルエンを用いて共沸乾燥させ、（Ｓ）−異性体−｛（１Ｓ）−１−［４−（エトキシカルボニル）フェニル］−エチル｝ヒドラジニウムトリフルオロアセテートを粘性のある油状物質として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ１．３８（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）；１．４９（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）；４．２６（ｂｒ  ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）；４．３７（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）；７．５４（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）；８．０７（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）。ＭＳ  Ｃ１１Ｈ１６Ｎ２Ｏ２  計算値：２０８．１２；実測値（Ｍ＋１）：２０９．１９。同一の様式で｛（１Ｒ）−１−［４−（エトキシカルボニル）フェニル］エチル｝ヒドラジニウムトリフルオロアセテートを調製することができた。
【０１１４】
鏡像異性体ヒドラジンの絶対配置の決定
エチル４−［１−（２−ベンゾイルヒドラジノ）エチル］ベンゾエートに変換することにより、ｔｅｒｔ−ブチル２−｛１−［４−（エトキシカルボニル）フェニル］エチル｝ヒドラジンカルボキシレートの鏡像異性体の絶対配置を確立し、次いで報告されているデータと旋光度の標示を比較した［Ｂｕｒｋら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、１９９４、５０、４３９９−（Ｓ）−１−ｐ−カルボエトキシフェニル−１−（２−ベンゾイルヒドラジノ）エタン（９５％ｅｅ；［α］Ｄ２０＝−２００．０°（ｃ１、ＣＨＣｌ３）、ＨＰＬＣ  Ｄａｉｃｅｌ  Ｃｈｉｒａｃｅｌ  ＯＪ、４０℃、０．５ｍＬ／分、１０％２−プロパノール／９０％ヘキサン：Ｒｔ＝３３．１分）。（Ｒ）−異性体Ｒ１＝３７．４分。］。
【０１１５】
したがって、上述のようなキラル分離からの、ゆっくり移動する鏡像異性体ｔｅｒｔ−ブチル２−｛１−［４−（エトキシカルボニル）フェニル］エチル｝ヒドラジンカルボキシレート（０．７４ｇ、２．４２ｍｍｏｌ）を室温で１時間、ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２（１：１、１０ｍＬ）で処理した。反応物をロータリーエバポレーターで濃縮し、トルエンからの共蒸発により、残留ＴＦＡを除去した。次に、生じたエチル４−（１−ヒドラジノエチル）ベンゾエートをＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）中で溶解させ、−７８℃に冷却した。ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中の、塩化ベンゾイル（３６５μＬ、３．１５ｍｍｏｌ）及び２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチルピリジン（７４５ｍｇ、３．６３ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくりと−７８℃で添加した。−７８℃で３時間後、反応混合物をすぐにＳｉＯ２カラムに載せ、３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出した。生成物を含有する分画を濃縮し、Ｋｒｏｍａｓｉｌ  Ｃ８カラム（１０％から７０％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ／０．１％ＴＦＡ、１２分）を用いたＨＰＬＣでさらに精製し、再びシリカゲルカラム（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製し、（Ｒ）−（＋）−エチル４−［１−（２−ベンゾイルヒドラジノ）エチル］ベンゾエートを得た。ＨＰＬＣ／ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１３．３（Ｍ＋１）＋。Ｒ１＝３．０８分。ＤａｉｃｅｌカラムＣｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＪ、４０℃、０．５ｍＬ／分、１０％イソプロパノール／９０％ｎ−ヘプタン：ｔ＝３５．７９分；［α］Ｄ２０＝＋１９２．４°（ｃ１、ＣＨＣｌ３））；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ８．０３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．９４（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．６６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），７．５１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），７．５４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．４０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），４．３９（２Ｈ，ｑ、Ｊ＝７．０Ｈｚ），４．３６（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），１．４６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），１．４１（３Ｈ，ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１６７．７６、１６６．６９、１４８．１６、１３２．７０、１３２．２７、１３０．２１、１３０．１８、１２８．９４、１２７．４７、１２７．１５、６１．２２、６０．２１、２１．２１、１４．５８。ｔｅｒｔ−ブチル２−｛１−［４−（エトキシカルボニル）フェニル］エチル｝ヒドラジンカルボキシレートのより速く移動する異性体から、（Ｓ）−（−）−エチル４−［１−（２−ベンゾイルヒドラジノ）エチル］−ベンゾエートを同様に調製した。ＨＰＬＣ／ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１３．４（Ｍ＋１）＋、Ｒｔ＝３．０９分。ＤａｉｃｅｌカラムＣｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＪ、４０℃、０．５ｍＬ／分、１０％イソプロパノール／９０％ｎ−ヘプタン：ｔ＝３４．９９分；［α］Ｄ２０＝−１９４．４°（ｃ１、ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ８．０２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．７３（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．６５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．４９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．４８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．３９（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），４．３８（２Ｈ，ｑ、Ｊ＝７．０Ｈｚ），���．３４（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），１．４４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），１．４１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１６７．８１、１６６．７４、１４８．７３、１３２．９２、１３２．１５、１３０．１３、１３０．０２、１２８．９０、１２７．４３、１２７．１２、６１．２０、６０．０９、２１．５２、１４．５８。
【０１１６】
中間体Ｂ
【０１１７】
【化２２】
2008507528.tif 000024
【０１１８】
段階Ａ．ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｅ）−２−［４−（メトキシカルボニル）ベンジリデン］ヒドラジンカルボキシレート
上記の中間体Ａ、段階Ａで述べた化学反応を用いて表題化合物を調製した。ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．５５（ｓ，９Ｈ）；３．９２（ｓ，３Ｈ）；７．７４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８８（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）；７．９６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）；８．０４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）。
【０１１９】
段階Ｂ．ｔｅｒｔ−ブチル２−［４−（メトキシカルボニル）ベンジル］ヒドラジンカルボキシレート
上記の中間体Ａ、段階Ｂで述べた化学反応を用いて表題化合物を調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．４６（ｓ，９Ｈ）;３．９１（ｓ，３Ｈ）；４．０６（ｓ，２Ｈ）；６．０３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）；７．４２（ｑ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）；８．００（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）。
【０１２０】
段階Ｃ．［４−（メトキシカルボニル）ベンジル］ヒドラジニウムクロリド
上記の中間体Ａ、段階Ｃで述べた化学反応を用いて表題化合物を調製した。ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：３．９１（ｓ，３Ｈ）；４．１９（ｓ，２Ｈ）；７．５４（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）；８．０５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）。ＭＳ  Ｃ９Ｈ１２Ｎ２Ｏ２  計算値：１８０．０９；実測値（Ｍ＋１）：１８１．１２。
【０１２１】
中間体Ｃ
３−（３，５−ジクロロフェニル）−１−［４−（メトキシカルボニル）ベンジル］−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸
【０１２２】
【化２３】
2008507528.tif 000025
【０１２３】
段階Ａ．３，５−ジクロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルベンズアミド
０℃のジクロロメタン５０ｍＬ中の３，５−ジクロロベンゾイルクロリド（５ｇ、２３．９ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（２．５６ｇ、２６．３ｍｍｏｌ）及びピリジン（４．３ｍＬ、５２．６ｍｍｏｌ）を添加した。冷却槽を取り除き、周囲温度で１６時間混合物を撹拌し、水で希釈し、ジクロロメタン２部で抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し（ＳｉＯ２、２０％酢酸エチル／ヘキサン）、無色油状物質として表題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．６１（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，２Ｈ）；７．５０（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）；３．６０（ｓ，３Ｈ）；３．４０（ｓ，３Ｈ）。
【０１２４】
段階Ｂ．１−（３，５−ジクロロフェニル）エタノン
テトラヒドロフラン１００ｍＬ中の段階Ａからの生成物（５．４２ｇ、２３．２ｍｍｏｌ）に、臭化メチルマグネシウム（１１．６ｍＬ、３４．８ｍｍｏｌ）を滴下添加した。周囲温度で２５分間撹拌した後、１Ｎ塩酸を添加し、混合物を酢酸エチル２部で抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮し、表題化合物を得て、さらに精製せずに使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．８４（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，２Ｈ）；７．５８（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ）；２．６３（ｓ，３Ｈ）。
【０１２５】
段階Ｃ．ｔｅｒｔ−ブチル４−（３，５−ジクロロフェニル）−２，４−ジオキソブタノエート
−７８℃のジエチルエーテル１００ｍＬ中の段階Ｂからの生成物（４．１ｇ、２１．７ｍｍｏｌ）の溶液に、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド（２３．９ｍＬ、２３．９ｍｍｏｌ）を添加した。−７８℃にて５０分後、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルオキサレート（４．１８ｇ、２０．６６ｍｍｏｌ）を固体として添加した。冷却槽を取り除き、２時間後、ジｔｅｒｔ−ブチルオキサレート（５３０ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）をさらに添加し、周囲温度で１６時間撹拌し続けた。１Ｎ塩酸１５０ｍＬを添加することにより、反応を停止させ、１時間撹拌した。混合物を酢酸エチルで抽出し、有機層を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮し、油状物質として表題化合物を得て、さらに精製せずに使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．８４（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，２Ｈ）；７．５９（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）；６．９３（ｓ，１Ｈ）；１．５６（ｓ，９Ｈ）。
【０１２６】
段階Ｄ．ｔｅｒｔ−ブチル３−（３，５−ジクロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート
エタノール１２５ｍＬ中の段階Ｃからの生成物（６．８ｇ、２１．７ｍｍｏｌ）の溶液に、ヒドラジン（０．７５ｍＬ、２３．９ｍｍｏｌ）及び氷酢酸１０ｍＬを添加した。反応混合物を周囲温度で１６時間撹拌し、次いで、真空下で濃縮し、残渣を酢酸エチル中で懸濁した。重炭酸ナトリウム飽和水溶液２部、塩水１部で有機層を連続して洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮し、黄白色の固体として表題化合物を得て、さらに精製せずに使用した。
【０１２７】
段階Ｅ．ｔｅｒｔ−ブチル３−［３，５−ジクロロフェニル）−１−［４−（メトキシカルボニル）ベンジル］−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド５０ｍＬ中の段階Ｄからの生成物（６．８ｇ、２１．７ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸セシウム（１０．６ｇ、３２．６ｍｍｏｌ）を添加し、次に、生じた混合物を周囲温度で１５分間撹拌した。メチル４−（ブロモ−メチル）ベンゾエート（５．４６ｇ、２３．９ｍｍｏｌ）を添加し、３時間撹拌し続けた。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水６部及び塩水１部で有機層を連続して洗浄し、次に硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し（ＳｉＯ２、５％酢酸エチル／ヘキサン）、淡褐色の固体として表題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：８．０３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）；７．７５（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ）；７．３５（ｍ，３Ｈ）；７．１２（ｓ，１Ｈ）；５．８８（ｓ，２Ｈ）；３．９４（ｓ，３Ｈ）；１．５７（ｓ，９Ｈ）。
【０１２８】
段階Ｆ．３−（３，５−ジクロロフェニル）−１−［４−（メトキシカルボニル）ベンジル］−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸
ジクロロメタン３０ｍＬ中の段階Ｅからの生成物（５．５４ｇ、１２ｍｍｏｌ）の溶液に、トリフルオロ酢酸１３ｍＬを添加した。反応混合物を周囲温度で１６時間撹拌し、次に真空下で濃縮し、ジクロロメタンを用いた共沸蒸留により過剰なトリフルオロ酢酸を除去し、白色の固体として表題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：８．００（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）；７．８３（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ）；７．４１（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）；７．３６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）；７．３２（ｓ，１Ｈ）；５．９４（ｓ，２Ｈ）；４．８７（ｓ，３Ｈ）。
【０１２９】
中間体Ｄ
【０１３０】
【化２４】
2008507528.tif 000026
【０１３１】
段階Ａ．ｔｅｒｔ−ブチル５−クロロ−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート
室温にて４時間、ＤＭＦ（３０ｍＬ）中で２−クロロインドール（１．０ｇ、６．６ｍｍｏｌ）及びジ−ｔ−ブチルジカルボネート（２．２ｇ、１０ｍｍｏｌ）及びＣｓ２ＣＯ３（３．２ｇ、９．９ｍｍｏｌ）を撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ（２ｘ）、５％Ｋ２ＣＯ３（２ｘ）及び塩水で洗浄した。粗製生成物をフラッシュクロマトグラフィーにかけ（ＳｉＯ２ゲル、ヘキサン中の０％から１０％ＤＣＭの勾配）、無色油状物質としてｔｅｒｔ−ブチル５−クロロ−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレートを得た。ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．６７（ｓ，９Ｈ）；６．５１（ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，１Ｈ）；７．２６（ｄｄ，Ｊ＝２．３，９Ｈｚ，１Ｈ）；７．５３（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．６１（ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，１Ｈ）；８．０７（ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，１Ｈ）。
【０１３２】
段階Ｂ．［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−クロロ−１Ｈ−インドール−２−イル］ボロン酸
０℃にて、ＴＨＦ（５ｍＬ）中でｔｅｒｔ−ブチル５−クロロ−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート（０．５ｇ、２ｍｍｏｌ）、トリイソプロピルボレート（０．７ｍＬ、３ｍｍｏｌ）の混合物に、ＬＤＡ（３．４ｍＬ、７ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくりと添加した。混合物を０℃にて３０分間撹拌し、２Ｎ  ＨＣｌで反応停止させた。逆相ＨＰＬＣで粗製生成物を精製し、凍結乾燥後、白色粉末として［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−クロロ−１Ｈ−インドール−２−イル］ボロン酸を得た。ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．５１（ｓ，９Ｈ）；６．７（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）；７．０１（ｓ，１Ｈ）；７．２５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．４５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）；８．１２（ｓ，１Ｈ）。
【０１３３】
中間体Ｅ
【０１３４】
【化２５】
2008507528.tif 000027
【０１３５】
［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−６−クロロ−１Ｈ−インドール−２−イル］ボロン酸
この化合物を中間体Ｄとして同様に調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．７５（ｓ，９Ｈ）；６．９（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）；７．２４（ｄｄ，Ｊ＝２．０，８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．４４（ｓ，１Ｈ）；７．５１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；８．０４（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）。
【０１３６】
中間体Ｆ
【０１３７】
【化２６】
2008507528.tif 000028
【０１３８】
［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−６−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］ボロン酸
この化合物を中間体Ｄとして同様に調製した。ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．４９（ｓ，９Ｈ）；７．０１（ｓ，２Ｈ）；７．０４（ｄｄ，Ｊ＝２．３，９．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．１５（ｓ，１Ｈ）；７．３１（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ）；７．６７（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）。
【０１３９】
（実施例１）
Ｎ−（４−｛（１Ｓ）−１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−キノリン−３−イル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
【０１４０】
【化２７】
2008507528.tif 000029
【０１４１】
段階Ａ．Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルキノリン−３−カルボキサミド
ジクロロメタン（１０ｍｌ）中のキノリン−３−カルボン酸（４８０ｍｇ、２．７７ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（４０５ｍｇ、４．１５ｍｍｏｌ）の懸濁液に、トリエチルアミン（１．９３ｍｌ、１３．８ｍｍｏｌ）を添加し、次いでブロモ（トリピロリジン−１イル）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（１．５５ｇ、３．３２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌した後、水（１０ｍＬ）の添加により反応を停止させた。生じた混合物をＤＣＭで抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。７５％酢酸エチル−ヘキサンを使用してフラッシュクロマトグラフィーにより残渣を精製した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：８．２５（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），８．６７（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），７．９６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．８４（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６５（ｔ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），３．６１（ｓ，３Ｈ），３．４８（ｓ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：１．２４分；（Ｍ＋Ｈ）＝２１７．１。
【０１４２】
段階Ｂ．１，３−ジクロロ−５−エチニルベンゼン
室温で窒素雰囲気下にある無水ＴＨＦ（１００ｍｌ）中の臭化亜鉛（５．０ｇ、２２．２ｍｍｏｌ）の溶液に、臭化エチニルマグネシウムの溶液（ＴＨＦ中０．５Ｍ、４４．４ｍＬ、４４．４ｍｍｏｌ）を添加した。５分後、３，５−ジクロロ−ヨードベンゼン（４．０３ｇ、１４．８ｍｍｏｌ）を添加した後、テトラキス−トリフェニルホスフィンパラジウム（０）（８５５ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で１８時間撹拌した。反応混合物を塩水に注ぎ、エーテルで抽出した（４ｘ１００ｍｌ）。エーテル層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。１００％ヘキサンを使用するフラッシュクロマトグラフィーにより残渣を精製し、表題化合物を黄色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：７．４（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，２Ｈ），７．３（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），３．１９（ｓ，１Ｈ）。
【０１４３】
段階Ｃ．３−（３，５−ジクロロフェニル）−１−キノリン−３−イルプロプ−２−イン−１−オン
Ｎ２雰囲気下で−７８℃に冷却した無水ＴＨＦ中の１，３−ジクロロ−５−エチニルベンゼン（２００ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）の溶液に、ｎＢｕｔＬｉ（８００μＬ、１．２８ｍｍｏｌ）を添加した。５分後、ＴＨＦ（３ｍｌ）中の段階Ａからの中間体（３８０ｍｇ、１．７５ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応物を３０分にわたり室温へと徐々に温め、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液を用いて反応停止させた。生じた二相性混合物を酢酸エチルで抽出し、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。１５％酢酸エチル−ヘキサンを使用するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製し、生成物を淡黄色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：９．６３（ｓ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），８．９６（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），８．２４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．０７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．９４（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７３（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），７．５５（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：３．９９分；（Ｍ＋Ｈ）＝３２６．０。
【０１４４】
段階Ｄ．エチル４−｛（１Ｓ）−１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−キノリン−３−イル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾエート
ＤＭＦ（５ｍｌ）中の段階Ｃからの中間体（１５２ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）の溶液に、エチル４−［（１Ｓ）−１−ヒドラジノエチル］ベンゾエート塩酸塩（１２６ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（８６μＬ、０．６１ｍｍｏｌ）を添加した。室温で２時間撹拌した後、反応混合物を真空下で濃縮した。残渣を水及び酢酸エチルで希釈した。有機層を塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。１０％酢酸エチル−ヘキサンを使用するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製した。次に、この物質を７５％ヘキサン−ジクロロメタンで再精製し、所望の化合物を主要生成物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：８．８４（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．０３（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），７．７８（ｍ，１Ｈ），７．６２（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３４（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），６．７７（ｓ，１Ｈ），５．５８（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），４．４１（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），２．０２（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），１．４（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：４．６４分；（Ｍ＋Ｈ）＝５１６．３。
【０１４５】
段階Ｅ．４−｛（１Ｓ）−１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−キノリン−３−イル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝安息香酸
ＴＨＦの５ｍｌ中の段階Ｄからの中間体（１２５ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｅＯＨ（１ｍＬ）を添加した後、水酸化ナトリウム（５Ｎ、０．５ｍＬ）を添加した。反応物を室温で１８時間撹拌した後、この反応物を真空下で濃縮し、ＴＨＦ／ＭｅＯＨを除去した。生じた水性混合物を１Ｎ  ＨＣｌで、ｐＨがわずかに酸性（ｐＨ＝５）になるまで酸性化した。生じた溶液をＥｔＯＡｃで抽出し（３ｘ）、次に、合わせた有機層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。生じた白色固体をさらに精製せずに使用した。ＬＣ−ＭＳ：４．０３分；（Ｍ＋Ｈ）＝４８８．３。
【０１４６】
段階Ｆ．ｔｅｒｔ−ブチルＮ−（４−｛（１Ｓ）−１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−キノリン−３−イル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニナート
無水ＤＭＦ２ｍＬ中の段階Ｅからの中間体（１２０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）の溶液に、ｔｅｒｔ−ブチルβ−アラニナート塩酸塩（６６ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾ−トリアゾール（５０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１２７μＬ、０．７２ｍｍｏｌ）及び１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（７０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で４時間撹拌し続け、次いでＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ（２ｘ）、重炭酸ナトリウム飽和溶液（２ｘ）及び塩水（１ｘ）で洗浄した。次に、有機層を無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。生じた固体をフラッシュクロマトグラフィー（４５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：８．８６（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），８．２（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．０（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），７．７８（ｍ，１Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．６６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），７．３５（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），６．９１（ｂｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），６．６７（ｓ，１Ｈ），５．５７（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ），３．７２（ｑ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），２．５８（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．０１（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：４．３分；（Ｍ＋Ｈ）＝６１５．０。
【０１４７】
段階Ｇ．Ｎ−（４−｛（１Ｓ）−１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−キノリン−３−イル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍｌ）中の段階Ｆからの中間体（１２８ｍｇ）の溶液に、ＴＦＡ（２ｍｌ）を添加した。反応物を室温で３０分間撹拌した後、真空下で濃縮し、トルエンとともに共沸させた（３ｘ）。生じた淡黄色の固体を１，４−ジオキサン中で溶解させ、一晩凍結乾燥させて、白色固体として表題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，  ５００ＭＨｚ）８．８２（ｄ，Ｊ１．８Ｈｚ，１Ｈ），８．４２（ｓ，１Ｈ），８．１２（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．９３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，２Ｈ），７．７７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７１（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．４（ｓ，１Ｈ），７．２４（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．０６（ｓ，１Ｈ），５．７１（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），３．６６（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），２．６３（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），２．０１（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：３．６８分；（Ｍ＋Ｈ）＝５５９．１。
【０１４８】
（実施例２）
Ｎ−（４−｛（１Ｓ）−１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−（７−メトキシキノリン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
【０１４９】
【化２８】
2008507528.tif 000030
【０１５０】
段階Ａ．エチル４−ヒドロキシ−７−メトキシキノリン−３−カルボキシレート
トルエン（５ｍｌ）中のｍ−アニシジン（１．１１ｇ、８．９４ｍｍｏｌ）の溶液に、マロン酸ジエチルエトキシメチレン（１．９３ｇ、８．９４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を４５分間還流した後、真空下で濃縮した。残渣をフェニルエーテル（５ｍｌ）中で溶解させ、還流しているフェニルエーテルの溶液（１０ｍＬ）に添加した。１時間後、反応物を室温に冷却した。沈殿物を粉砕した。反応物をヘキサンで希釈し、ろ過し、黄色の固体を得た。ＬＣ−ＭＳ：２．０８分；（Ｍ＋Ｈ）＝２４８．２。
【０１５１】
段階Ｂ．エチル４−クロロ−７−メトキシキノリン−３−カルボキシレート
段階Ａからの中間体（８９０ｍｇ、ｍｍｏｌ）をＰＯＣｌ３（５ｍｌ）中で懸濁し、１時間還流した。反応物を室温に冷却し、氷及び５ＮのＮａＯＨ（３０ｍｌ）を含有するエーレンマイヤーフラスコに注いだ。生じた混合物を酢酸エチルで抽出した（３ｘ）。有機層をＮａＨＣＯ３飽和溶液、ＮａＣｌ飽和溶液で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。３０％酢酸エチル−ヘキサンを使用するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製し、生成物を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：９．１９（ｓ，１Ｈ），８．３３（ｓ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３６（ｄｄ，Ｊ＝２．５，９．１Ｈｚ，１Ｈ），４．５３（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），４．０１（ｓ，３Ｈ），１．５（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：３．２２分；（Ｍ＋Ｈ）＝２６６．１。
【０１５２】
段階Ｃ．エチル７−メトキシキノリン−３−カルボキシレート
１：１のエタノール−酢酸エチル中の段階Ｂからの中間体（４００ｍｇ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（２０ｍｇ）を添加し、生じた反応物を水素バルーン下で３時間撹拌した。反応物を酢酸エチルで希釈し、セライトに通してろ過した。ろ液を真空下で濃縮し、所望の生成物を得た。この物質をさらに精製せずに次の段階で使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：９．３７（ｓ，１Ｈ），９．２６（ｓ，１Ｈ），８．１（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｄ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５１（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ），４．４９（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），４．０６（ｓ，３Ｈ），１．４２（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：２．３１分；（Ｍ＋Ｈ）＝２３２．１。
【０１５３】
段階Ｄ．７−メトキシキノリン−３−カルボン酸
ＴＨＦ（６ｍｌ）中の段階Ｃからの中間体（３９９ｍｇ、ｍｍｏｌ）の溶液に、メタノール（１ｍｌ）を添加し、次いでＮａＯＨ（５Ｎ、１．５ｍｌ）を添加した。室温で１８時間撹拌した後、反応物を真空下で濃縮した。残渣を１ＮのＨＣｌ（１０ｍｌ）で酸性化した。溶液を真空下で濃縮し、トルエンとともに共沸させた（４ｘ）。この物質をさらに精製せずに次の段階で使用した。
【０１５４】
段階Ｅ．Ｎ，７−ジメトキシ−Ｎ−メチルキノリン−３−カルボキサミド
ジクロロメタン（２０ｍｌ）中の、段階Ｄからの中間体（１．５ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（２１９ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）の懸濁液に、トリエチルアミン（１．０４ｍｌ、７．５ｍｍｏｌ）を添加し、次いでブロモ（トリスピロリジン−１イル）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（８４０ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で３時間撹拌した後、１ＮのＨＣｌ（１０ｍｌ）の添加により反応を停止させた。生じた混合物をＤＣＭで抽出した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。７０％酢酸エチル−ヘキサンを使用するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：９．１５（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），８．５（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），８．０（ｓ，１Ｈ），７．７（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２４（ｄｄ，Ｊ＝２．５，９．０Ｈｚ，１Ｈ），３．９６（ｓ，３Ｈ），３．５７（ｓ，３Ｈ），３．４３（ｓ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：１．６分；（Ｍ＋Ｈ）＝２４７．１。
【０１５５】
段階Ｆ．３−（３，５−ジクロロフェニル）−１−（７−メトキシキノリン−３−イル）プロプ−２−イン−１−オン
Ｎ２雰囲気下で−７８℃へ冷却した無水ＴＨＦ中の１，３−ジクロロ−５−エチニルベンゼン（１８５ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）の溶液に、ｎＢｕｔＬｉ（７５０μｌ、１．１８ｍｍｏｌ）を添加した。５分後、ＴＨＦ（５ｍｌ）中の段階Ｅからの中間体（３２０ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応物を３０分にわたり室温へと徐々に温め、ＮＨ４Ｃｌ飽和溶液で反応停止させた。生じた二相性混合物を酢酸エチルで抽出し、ＮａＣｌ飽和溶液で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。２０％酢酸エチル−ヘキサンを使用するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製し、生成物を淡黄色の固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：９．５４（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），８．８５（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．９２（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），７．６２（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ），７．５（ｍ，２Ｈ），７．３４（ｄｄ，Ｊ＝２．５，８．９Ｈｚ，１Ｈ），４．０４（ｓ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：３．９２分；（Ｍ＋Ｈ）＝３５６．０。
【０１５６】
段階Ｇ．エチル４−｛（１Ｓ）−１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−（７−メトキシキノリン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾエート
ＤＭＦ中の段階Ｆからの中間体（１１８ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）の溶液に、エチル４−［（１Ｓ）−１−ヒドラジノエチル］ベンゾエート塩酸塩（８９ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（５５μｌ、０．３９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１８時間撹拌した後、真空下で濃縮した。残渣を水及び酢酸エチルで希釈した。有機層を塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。２５％酢酸エチル−ヘキサンを使用するフラッシュクロマトグラフィーによって残渣を精製した。次に、この物質を３％アセトニトリル−ジクロロメタンで再精製し、望ましい化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：８．７６（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．０４（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．９２（１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．８５（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），７．６８（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），７．５（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．３６（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３１（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），６．７６（ｓ，１Ｈ），４．４２（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ），４．０３（ｓ，３Ｈ），２．０４（ｓ，３Ｈ），２．０１（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），１．４３（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：４．２８分；（Ｍ＋Ｈ）＝５４６．０。
【０１５７】
段階Ｈ．４−｛（１Ｓ）−１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−（７−メトキシキノリン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝安息香酸
１：１のＴＨＦ／ＭｅＯＨの４ｍｌ中の段階Ｇからの中間体（６７ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の溶液に、水酸化ナトリウム（５Ｎ、１ｍｌ）を添加した。反応物を室温で１時間撹拌した後、真空下で濃縮し、ＴＨＦ／ＭｅＯＨを除去した。生じた水性混合物を１Ｎ  ＨＣｌで、ｐＨがわずかに酸性（ｐＨ＝５）になるまで酸性化した。生じた溶液をＥｔＯＡｃで抽出し（３ｘ）、次に、合わせた有機層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。生じた白色固体をさらなる精製なしで使用した。
【０１５８】
段階Ｉ．ｔｅｒｔ−ブチルＮ−（４−｛（１Ｓ）−１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−（７−メトキシキノリン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニナート
無水ＤＭＦの２ｍＬ中の段階Ｈからの中間体（５９ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の溶液に、ｔｅｒｔ−ブチルβ−アラニナート塩酸塩（３３ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾ−トリアゾール（２５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（６４μＬ、０．３６ｍｍｏｌ）及び１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（３５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で１２時間撹拌し続け、次いでＥｔＯＡｃで希釈し、１ＮのＨＣｌ（２ｘ）、重炭酸ナトリウム飽和溶液（２ｘ）及び塩水（１ｘ）で洗浄した。次に、有機層を無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。生じた固体をフラッシュクロマトグラフィー（５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、白色固体を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：８．７５（ｂｓ，１Ｈ），７．９（ｓ，１Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．６７（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４８（ｓ，１Ｈ），７．３４（ｔ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ），７．３（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），６．９２（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ），６．７３（ｓ，１Ｈ），５．５６（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），４．０１（ｓ，３Ｈ），３．７１（ｑ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．５８（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ），２．０（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：４．０７分；（Ｍ＋Ｈ）＝６４５．０。
【０１５９】
段階Ｊ．Ｎ−（４−｛（１Ｓ）−１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−（７−メトキシキノリン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍｌ）中の段階Ｉからの中間体（６４ｍｇ）の溶液に、ＴＦＡ（２ｍｌ）を添加した。反応物を室温で３０分間撹拌した後、真空下で濃縮し、トルエンとともに共沸させた（３ｘ）。生じた淡黄色の固体を１，４−ジオキサン中で溶解し、一晩凍結乾燥させ、生成物を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ，５００ＭＨｚ）８．８（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），８．４５（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），８．３８（ｓ，１Ｈ），７．９４（ｓ，２Ｈ），７．９２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．７２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．５８（ｓ，１Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．３７（ｄｄ，Ｊ＝２．３，８．７Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｓ，１Ｈ），７．２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），５．８（ｑ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），３．９５（ｓ，３Ｈ），３．４１（ｑ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），２．４５（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），１．９３（ｄ，Ｊ＝６，９Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：３．５３分；（Ｍ＋Ｈ）＝５８８．９。
【０１６０】
（実施例３）
Ｎ−（４−｛１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−キノキサリン−６−イル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニン−異性体１
【０１６１】
【化２９】
2008507528.tif 000031
【０１６２】
段階Ａ．キノキサリン−６−カルボン酸
ＴＨＦ  １０ｍｌ中のメチルキノキサリン−６−カルボキシレート（５００ｍｇ、２．６６ｍｍｏｌ）の溶液に、水酸化ナトリウム（５Ｎ、２．５ｍｌ、１２．５ｍｍｏｌ）を添加し、次いでメタノール（２．５ｍｌ）を添加した。反応物を室温で一晩撹拌し、次いで真空下で濃縮してＴＨＦ／ＭｅＯＨを除去した。生じた水性混合物を１Ｎ  ＨＣｌで、ｐＨがわずかに酸性（ｐＨ＝５）になるまで酸性化した。生じた溶液をＥｔＯＡｃで抽出し（３ｘ）、次いで合わせた有機層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。生じた白色固体をさらに精製せずに使用した。ＬＣ−ＭＳ：３．５０分；（Ｍ＋Ｈ）＝１７５．１６。
【０１６３】
段階Ｂ．キノキサリン−６−カルボニルクロリド
ベンゼン（１６ｍｌ）中のキノキサリン−６−カルボン酸（４３８ｍｇ、２．５１ｍｍｏｌ）の溶液に、塩化オキサリル（０．２６ｍｌ、３．０２ｍｍｏｌ）及び無水ＤＭＦ（０．１ｍｌ）を添加した。反応物を室温で３０分間撹拌した後、混合物を真空下で濃縮した。生じた黄色の固体をトルエンとともに３回共沸させ、生成物をさらに精製せずに直ちに使用した。
【０１６４】
段階Ｃ．Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルキノキサリン−６−カルボキサミド
０℃に冷却した１７ｍＬの無水塩化メチレン中の段階Ｂからの中間体（４８４ｍｇ、２．５１ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（３６８ｍｇ、３．７７ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、ピリジン（０．６１ｍｌ、７．５４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温に温め、一晩撹拌した後、水により反応停止させた。水層を塩化メチレンで抽出し（２ｘ）、合わせた有機層を無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーにより、生じた油状物質を精製し、無色の油状物質として生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：３．４５（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，３Ｈ），３．５９（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，３Ｈ），８．０５（ｍ，１Ｈ），８．１５（ｄｄ，Ｊ＝８．７，３．２Ｈｚ，１Ｈ），８．４６（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），８．９１（ｄ，Ｊ＝２．５，２Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：１．１１分。（Ｍ＋Ｈ）＝１１１。
【０１６５】
段階Ｄ．３−（３，５−ジクロロフェニル）−１−キノキサリン−６−イルプロプ−２−イン−１−オン
実施例１の段階Ｃに記載の手段を使用して、この化合物を合成した。
【０１６６】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：７．５５（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．６６（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，２Ｈ），８．２７（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），８．５１（ｄｄ，Ｊ＝８．９５，１．８Ｈｚ，１Ｈ），９．０３（ｄｄ，Ｊ＝７．３５，１．８Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１６７】
段階Ｅ．６−［５−（３，５−ジクロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］キノキサリン
無水ＤＭＦ７ｍｌ中の段階Ｄからの中間体（３１６ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）の溶液に、ヒドラジン（０．０３ｍｌ、１．０６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で一晩撹拌し、次いで真空下で濃縮した。生じた残渣をトルエンとともに２ｘ共沸させ、次いでＥｔＯＡｃ中で溶解させ、水（１ｘ）、塩水（１ｘ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。生じた固体をさらなる精製なしで使用した。ＬＣ−ＭＳ：３．６２分。（Ｍ＋Ｈ）＝３４２．１９。
【０１６８】
段階Ｆ．ｔｅｒｔ−ブチル４−｛１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−キノキサリン−６−イル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾエート
無水ＤＭＦの８ｍｌ中の段階Ｅからの中間体（３３０ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｃｓ２ＣＯ３（４７３ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）を添加し、次いでｔｅｒｔ−ブチル４−（１−ブロモエチル）ベンゾエート（３３１ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で一晩撹拌し、次いで水で希釈した。次に、水層をＥｔＯＡｃで抽出し（３ｘ）、次いで合わせた有機層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。生じた油状物質をフラッシュカラムクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製し、黄色の油状物質として生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：１．６０（ｓ，９Ｈ），２．０２（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），５．６７（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），６．７８（ｓ，１Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．３４（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．６８（ｄｄ，Ｊ＝８．７，１．９Ｈｚ，１Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝１．８，２Ｈ），７．９５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），８．１０（ｄ，Ｊ＝１．９，１Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ＝８．７，１Ｈ），８．９４（ｓ，２Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：４．７４，４．８９分。（Ｍ＋Ｈ）＝５４６．４６。
【０１６９】
段階Ｇ．４−｛１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−キノキサリン−６−イル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝安息香酸
段階Ｆからの中間体（４０ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）を１：１のＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（４ｍｌ）中で溶解させ、室温で３０分間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、トルエンとともに共沸させた（３ｘ）。生じた淡黄色の固体をさらに精製せずに使用した。ＬＣ−ＭＳ：４．１８分。（Ｍ＋Ｈ）＝４９０．３５。
【０１７０】
段階Ｈ．エチルＮ−（４−｛１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−キノキサリン−６−イル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニナート
無水ＤＭＦの３ｍＬ中の段階Ｇからの中間体（３９．７ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）の溶液に、エチルβ−アラニナート塩酸塩（１９ｍｇ、０．１２）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾ−トリアゾール（１７ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０４ｍｌ、０．２４ｍｍｏｌ）及び１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（２４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で１２時間撹拌し続け、次いでＥｔＯＡｃで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ（２ｘ）、重炭酸ナトリウム飽和溶液（２ｘ）及び塩水（１ｘ）で洗浄した。次に、有機層を無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。生じた固体をフラッシュクロマトグラフィー（３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、淡黄色の固体を得た。次に、以下の条件でのＳＦＣ−ＨＰＬＣセミプレップ法を用いて、鏡像異性体を分離した：カラム＝ＣｈｉｒａｌＣｅｌ  ＯＪ  １０ｘ２５０ｍｍ  １０ミクロン、流速＝１０．０ｍＬ／分、移動相＝４０％ＭｅＯＨ（０．１％ＴＦＡ）／ＣＯ２、カラム温度＝４０℃、ＵＶ波長＝２４８ｎｍ、アウトレット圧＝１００バール、濃度＝５０ｍｇ／ｍＬメタノール。保持時間：異性体Ａ＝４．０３分、異性体Ｂ＝５．０１分。ＬＣ−ＭＳ：４．２０分。（Ｍ＋Ｈ）＝５８９．４８。
【０１７１】
段階Ｉ．Ｎ−（４−｛（１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−キノキサリン−６−イル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニン−異性体１
ＴＨＦの２ｍｌ中の段階Ｈからの異性体Ａ（１７．１ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）の溶液に、水酸化ナトリウム（５Ｎ、１．５ｍｌ、７．５ｍｍｏｌ）を添加し、次いでメタノール（２．５ｍｌ）を添加した。反応物を室温で一晩撹拌し、次いで真空下で濃縮してＴＨＦ／ＭｅＯＨを除去した。生じた水性混合物を１ＮのＨＣｌで、ｐＨがわずかに酸性（ｐＨ＝５）になるまで酸性化した。生じた溶液をＥｔＯＡｃで抽出し（３ｘ）、次に、合わせた有機層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。生じた淡黄色の固体を１，４−ジオキサン中で溶解させ、一晩凍結乾燥させ、白色固体として生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ，５００ＭＨｚ）：１．９３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ），２．２（ｍ，２Ｈ），３．１５（ｍ，２Ｈ），５．８４（ｑ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，１Ｈ），７．２２（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．３４（ｓ，１Ｈ），７．５９（ｔ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８８（ｄｄ，Ｊ＝８．６，２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．９６（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），８．０７（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），８．２１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．４６（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），９．０１（ｔ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：３．８４分。（Ｍ＋Ｈ）＝５５９．９。
【０１７２】
（実施例４）
Ｎ−（４−｛１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−キノキサリン−６−イル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニン−異性体２
【０１７３】
【化３０】
2008507528.tif 000032
【０１７４】
ＴＨＦの２ｍｌ中の実施例３の段階Ｈからの異性体Ｂ（１４．７ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）の溶液に、水酸化ナトリウム（５Ｎ、１．５ｍｌ、７．５ｍｍｏｌ）を添加し、次いでメタノール（２．５ｍｌ）を添加した。反応物を室温で一晩撹拌し、次いで真空下で濃縮してＴＨＦ／ＭｅＯＨを除去した。生じた水性混合物を１ＮのＨＣｌで、ｐＨがわずかに酸性（ｐＨ＝５）になるまで酸性化した。生じた溶液をＥｔＯＡｃで抽出し（３ｘ）、次に、合わせた有機層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。生じた淡黄色の固体を１，４−ジオキサン中で溶解させ、一晩凍結乾燥させ、白色固体として生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ，５００ＭＨｚ）：１．９２（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ），２．２（ｍ，２Ｈ），３．１５（ｍ，２Ｈ），５．８４（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．３４（ｓ，１Ｈ），７．５９（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．８８（ｄｄ，Ｊ＝８．７，１．９Ｈｚ，１Ｈ），７．９６（ｄ，１．８，１Ｈ），８．０７（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ），８．２１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．４６（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），９．０１（ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：３．８４分。（Ｍ＋Ｈ）＝５５９．９。
【０１７５】
（実施例５）
Ｎ−（４−｛（１Ｓ）−１−［３−［２−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］−５−（７−メトキシキノリン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
【０１７６】
【化３１】
2008507528.tif 000033
【０１７７】
段階Ａ．｛［２−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］エチニル｝（トリメチル）シラン
無水ＴＨＦ３０ｍＬ中の１−ブロモ−２−クロロ−４−（トリフルオロメチル）ベンゼン（１．５ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）２Ｃｌ２（３５１ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（６５ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、エチニル（トリメチル）シラン（２．１２ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（２．１ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で２０分間撹拌した後、ＣｕＩ（２３ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を溶液に添加し、反応物を室温で１６時間撹拌した。次に、反応物を真空下で濃縮し、生じた残渣をヘキサン中で溶解させ、セライトに通してろ過し、再度真空下で濃縮した。１００％ヘキサンを使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーにより残渣を精製し、所望の生成物を暗褐色の油状物質として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ：７．８（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），７．５（ｍ，２Ｈ），０．２３（ｓ，９Ｈ）。
【０１７８】
段階Ｂ．１−クロロ−２−エチニル−４−（トリフルオロメチル）ベンゼン
１０：１のＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ（６０ｍｌ）中の段階Ａからの中間体（２．７ｇ、１０ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸カリウム（２．７６ｇ、２０ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で１５分間撹拌した後、混合物をｐＨ７のリン酸緩衝液に注ぎ、塩化メチレンで抽出した（３ｘ）。次に、合わせた有機層を無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。生じた油状物質をさらに精製せずに使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：７．８（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ），７．５（ｍ，２Ｈ），３．４８（ｓ，１Ｈ）。
【０１７９】
段階Ｃ．３−［２−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］−１−（７−メトキシキノリン−３−イル）プロプ−２−イン−１−オン
段階Ｂからのアルキン及び、実施例２の段階Ｆに記載の手段に従い、実施例２の段階Ｅからの中間体であるＮ，７−ジメトキシ−Ｎ−メチルキノリン−３−カルボキサミドを使用して、表題化合物を調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：９．６２（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），８．９７（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），８．０３（ｓ，１Ｈ），７．８７（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），７．６９（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，２Ｈ），７．５１（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），７．３１（ｄｄ，Ｊ＝２．３，８．９Ｈｚ，１Ｈ），４．０３（ｓ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：３．８５分；（Ｍ＋Ｈ）＝３８９．９。
【０１８０】
段階Ｄ．Ｎ−（４−｛（１Ｓ）−１−［３−［２−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］−５−（７−メトキシキノリン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
実施例２の段階ＧからＪに記載の手段に従って表題化合物を調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，５００ＭＨｚ）：８．７６（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），８．４８（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），８．２１（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），７．９６（ｍ，５Ｈ），７．４４（ｍ，２Ｈ），７．２１（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．１６（ｓ，１Ｈ），５．７６（ｑ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），４．０２（ｓ，３Ｈ），３．５５（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），２．６（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），１．９８（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：３．３５分。（Ｍ＋Ｈ）＝６２３．０。
【０１８１】
（実施例６）
Ｎ−［４−（｛３−（３，４−ジクロロフェニル）−５−［７−（トリフルオロメチル）キノリン−３−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）ベンゾイル］−β−アラニン
【０１８２】
【化３２】
2008507528.tif 000034
【０１８３】
段階Ａ．１，２−ジクロロ−４−エチニルベンゼン
実施例１の段階Ａに記載の手段に従うことによって、３，４−ジクロロ−ヨードベンゼンからこの中間体を調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：７．６（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．３４（ｄｄ，Ｊ＝１．９，８．４Ｈｚ，１Ｈ），３．２（ｓ，１Ｈ）。
【０１８４】
段階Ｂ．Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−６−（トリフルオロメチル）−２−ナフタミド
実施例２の段階ＢからＥに記載の手段を使用して、エチル４−ヒドロキシ−７−（トリフルオロメチル）キノリン−３−カルボキシレートからこの中間体を調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：３．４９（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｓ，３Ｈ），７．８０（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．０５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），８．６４（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），９．３２（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：１．１１分。（Ｍ＋Ｈ）＝１１１。
【０１８５】
段階Ｃ．３−（３，４−ジクロロフェニル）−１−［７−（トリフルオロメチル）キノリン−３−イル］プロップ−２−イン−１−オン
実施例２の段階Ｆに記載の手段に従うことによって、段階Ａからのアルキン及び段階Ｂからのアミドを使用してこの中間体を調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：７．６０（ｓ，２Ｈ），７．８７（ｓ，１Ｈ），７．８９（ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，１Ｈ），８．２０（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．５５（ｓ，１Ｈ），９．０２（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），９．７３（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ）。
【０１８６】
段階Ｄ．エチル４−（｛３−（３，４−ジクロロフェニル）−５−［７−（トリフルオロメチル）キノリン−３−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）ベンゾエート
無水ＤＭＦ３ｍｌ中の段階Ｃからの中間体（４０ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）の溶液に、メチル４−（ヒドラジノメチル）ベンゾエート塩酸塩（２６ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を添加し、次いでトリエチルアミン（０．０２ｍＬ、０．１２ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で一晩撹拌した後、水によりこの反応を停止させ、ＥｔＯＡｃで抽出した（３ｘ）。合わせた有機層を塩水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、真空下で濃縮した。生じた固体をフラッシュクロマトグラフィー（１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、淡黄色の固体を得た。この物質をフラッシュクロマトグラフィー（１００％ＣＨ２Ｃｌ２）によって再精製し、ＮＯＥ差分光法により指定される２種類のピラゾール異性体を得た。異性体Ａ：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：３．９２（ｓ，３Ｈ），５．５２（ｓ，３Ｈ），６．８７（ｓ，１Ｈ），７．２０（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．７４（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１．７Ｈｚ，１Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），８．０１（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，３Ｈ），８．０９（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），８．４７（ｓ，１Ｈ），９．０１（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：４．７１分。（Ｍ＋Ｈ）＝５５５．９９。異性体Ｂ：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：３．９４（ｓ，３Ｈ），５．５０（ｓ，３Ｈ），６．９１（ｓ，１Ｈ），７．１８（ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．４８（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．７６（ｄｄ，Ｊ＝８．７，１．１Ｈｚ，１Ｈ），８．０３（ｍ，３Ｈ），８．４６（ｓ，１Ｈ），８．６４（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），９．５４（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：４．６１分。（Ｍ＋Ｈ）＝５５５．９９。
【０１８７】
段階Ｅ．Ｎ−［４−（｛３−（３，４−ジクロロフェニル）−５−［７−（トリフルオロメチル）キノリン−３−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）ベンゾイル］−β−アラニン
実施例２の段階ＨからＪに対して記載の手段に従って段階Ｄからの異性体Ａを使用して、表題化合物を調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ，５００ＭＨｚ）：２．４６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．４０（ｑ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），５．６８（ｓ，２Ｈ），７．１３（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．４４（ｓ，１Ｈ），７．７２（ｍ，２Ｈ），７．８９（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１．９Ｈｚ，１Ｈ），７．９６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），８．１２（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ），８．２５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），８．４２（ｓ，１Ｈ），８．４４（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），８．６８（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），９．１４（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：３．９５分。（Ｍ＋Ｈ）＝６１３．２７。
【０１８８】
（実施例８）
Ｎ−（４−｛（１Ｓ）−１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−（６−メトキシキノリン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
【０１８９】
【化３３】
2008507528.tif 000035
【０１９０】
段階Ａ．エチル４−ヒドロキシ−６−メトキシキノリン−２−カルボキシレート
メタノール（５０ｍｌ）中のｐ−アニシジン（２．７ｇ、２２ｍｍｏｌ）の溶液に、ジエチル−アセチレンジカルボキシレート（３．７４ｇ、２２ｍｍｏｌ）を添加した。生じた溶液を５５℃で１時間加熱した。反応混合物を真空下で濃縮した。残渣をフェニルエーテル（４０ｍｌ）中で溶解させ、２４０℃で１時間還流させた。反応混合物を室温に冷却し、ヘキサンで希釈し、ろ過した。淡褐色の固体を得た。ＬＣ−ＭＳ：１．３９分。（Ｍ＋Ｈ）＝２４８．１。
【０１９１】
段階Ｂ．エチル４−クロロ−６−メトキシキノリン−２−カルボキシレート
実施例２の段階Ｂに記載の手段に従うことによって、段階Ａからのエステルを使用してこの中間体を調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：８．２４（ｓ，１Ｈ），８．２（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），７．４７（ｄｄ，Ｊ＝２．８，９．１Ｈｚ，１Ｈ），７．４４（ｔ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），４．５５（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），４．０（ｓ，３Ｈ），１．５（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：３．４２分。（Ｍ＋Ｈ）＝２６６．３。
【０１９２】
段階Ｃ．Ｎ，６−ジメトキシ−Ｎ−メチルキノリン−２−カルボキサミド
実施例２の段階ＣからＥに記載の手段を使用して、段階Ｂにおける中間体からこの化合物を調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：８．１７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．０７（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），７．７４（ｂｓ，１Ｈ），７．４５（ｄｄ，Ｊ＝２．７，９．１Ｈｚ，１Ｈ），７．１４（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），３．９８（ｓ，３Ｈ），３．８５（ｂｓ，３Ｈ），３．５１（ｂｓ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：２．４４分。
【０１９３】
（Ｍ＋Ｈ）＝２４７．４。
【０１９４】
段階Ｄ．３−（３，５−ジクロロフェニル）−１−（６−メトキシキノリン−２−イル）プロプ−２−イン−１−オン
実施例２の段階Ｆに記載の手段に従うことによって、実施例１の段階Ｂからのアルキン及び段階Ｃからのアミドを使用してこの化合物を調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：８．２６（ｄ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，１Ｈ），８．２１（ｓ，１Ｈ），７．６７（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，２Ｈ），７．５（ｍ，２Ｈ），７．４（ｍ，１Ｈ），７．１７（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），４．０２（ｓ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：４．３５分。（Ｍ＋Ｈ）＝３５６．２。
【０１９５】
段階Ｅ．エチル４−｛（１Ｓ）−１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−（６−メトキシキノリン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾエート
実施例２の段階Ｇに記載の手段に従うことによって、段階Ｄからの中間体を使用してこの化合物を調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：８．１（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），８．０２（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），７．９７（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），７．６３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４６（ｄｄ，Ｊ＝２．７，９．４Ｈｚ，１Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３５（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１６（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），７．１１（ｄ，Ｊ＝２，７Ｈｚ，１Ｈ），７．０２（ｓ，１Ｈ），４．３８（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．９９（ｓ，３Ｈ），２．１（ｓ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），１．３９（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：４．８５分。（Ｍ＋Ｈ）＝４９６．０。
【０１９６】
段階Ｆ．Ｎ−（４−｛（１Ｓ）−１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−（６−メトキシキノリン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
実施例２の段階ＨからＪに記載の手段に従うことによって、段階Ｅからの中間体を使用して表題化合物を調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ，５００ＭＨｚ）：８．４２（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），８．３７（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），８．０３（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），７．９７（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），７．７６（ｓ，１Ｈ），７．６９（ｍ，２Ｈ），７．６０（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４７（ｄｄ，Ｊ＝２．７，９．１Ｈｚ，１Ｈ），７．４（ｍ，３Ｈ），７．３（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），３．９２（ｓ，３Ｈ），３．４（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），２．４６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），１．９８（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：２．８１分。（Ｍ＋Ｈ）＝５８９．２。
【０１９７】
表１における以下の実施例は、実施例１から実施例８に対する前述の手段に従って合成できる。
【０１９８】
【表５】
2008507528.tif 000036
2008507528.tif 000037
2008507528.tif 000038
2008507528.tif 000039
【０１９９】
（実施例４２）
Ｎ−［４−（｛３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−［６−（トリフルオロメトキシ）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］−Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）ベンゾイル］−β−アラニン
【０２００】
【化３４】
2008507528.tif 000040
【０２０１】
段階Ａ．メチル４−（｛３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−［６−（トリフルオロメトキシ）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）ベンゾエート
３−（３，５−ジクロロフェニル）−１−［４−（メトキシカルボニル）ベンジル］−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸（３６．７ｍｇ、９１μｍｏｌ）、４−（トリフルオロメトキシ）ベンゼン−１，２−ジアミン（５２ｍｇ、３当量）、ＤＩＥＡ（２５μＬ、１．５当量）をＤＭＦ（０．７ｍｌ）中で溶解させた。ＤＭＦ（０．２ｍｌ）中のＰｙＢＯＰ（６６ｍｇ、１．４当量）の溶液を添加した。混合物を３０分間撹拌し、ＣＨ３ＣＮ：水（５％ＴＦＡ）を用いて反応を停止させ、逆相ＨＰＬＣで精製した。生成物を回収し、凍結乾燥させて、二種類の異性体の混合物として固体アミドを得た。Ｃ２６Ｈ１９Ｃｌ２Ｆ３Ｎ４Ｏ４に対するＭＳ計算値：５７８．０７；実測値（Ｍ＋１）：５７９．０９。このアミドを酢酸（１０ｍｌ）中で１時間還流させ、凍結乾燥後、メチル４−（｛３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−［６−（トリフルオロメトキシ）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）ベンゾエートを白色固体として得た。Ｃ２６Ｈ１７Ｃｌ２Ｆ３Ｎ４Ｏ３に対するＭＳ計算値：５６０．０６；実測値（Ｍ＋１）：５６１．１４。
【０２０２】
段階Ｂ．４−（｛３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−［６−（トリフルオロメトキシ）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）安息香酸
メチル４−（｛３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−［６−（トリフルオロメトキシ）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）ベンゾエート（４５ｍｇ、８２μｍｏｌ）をジオキサン：メタノール（１：１、１．６ｍｌ）中で溶解させ、ＮａＯＨの溶液（０．４ｍｌ中４０ｍｇ）で処理した。反応物を１時間６５℃に加熱した。混合物をＣＨ３ＣＮ中の５％ＴＦＡで酸性化した。この混合物を蒸発乾固し、残渣をＤＭＦ：水（１０：１）中で溶解させ、逆相ＨＰＬＣで精製して、凍結乾燥後に４−（｛３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−［６−（トリフルオロメトキシ）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）安息香酸を白色粉末として得た。
【０２０３】
段階Ｃ．Ｎ−［４−（｛３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−［６−（トリフルオロメトキシ）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）ベンゾイル］−β−アラニン
ＤＭＦ（０．１ｍｌ）中のＰｙＢＯＰ（３８ｍｇ、７０μｍｏｌ）の溶液を、ＤＭＦ（０．３ｍＬ）中の、４−（｛３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−［６−（トリフルオロメトキシ）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）安息香酸（２０ｍｇ、３６μｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルβ−アラニン塩酸塩（２７ｍｇ、４当量）、ＤＩＥＡ（４０μＬ、６当量）の混合物に添加した。ＣＨ３ＣＮ：水（５％ＴＦＡ）を用いて反応を停止させ、逆相ＨＰＬＣで精製し、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［４−（｛３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−［６−（トリフルオロメトキシ）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）ベンゾイル］−β−アラニナートを油状残渣として得た。これをＴＦＡ／ＤＣＭ（１：２）で処理し、生成物を凍結乾燥して、Ｎ−［４−（｛３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−［６−（トリフルオロメトキシ）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）ベンゾイル］−β−アラニンを白色粉末として得た。ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２．４３（ｔ，２Ｈ）；３．４（ｑ，２Ｈ）；６．１８（ｓ，２Ｈ）；７．２６（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．３８（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；７．５９（ｓ，１Ｈ）；７．６１（ｔ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）；７．６７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）；７．７２（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；７．７４（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．８２（ｄ，Ｊ＝ｂ１．９Ｈｚ，２Ｈ）。Ｃ２８Ｈ２０Ｃｌ２Ｆ３Ｎ５Ｏ４についてのＭＳ計算値：６１７．０８；実測値（Ｍ＋１）：６１８．２１。
【０２０４】
（実施例４３）
Ｎ−［４−（｛３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−［５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）ベンゾイル］−β−アラニン
【０２０５】
【化３５】
2008507528.tif 000041
【０２０６】
この化合物を前述の実施例４２に記載の化合物と同一の方法で調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：７．９８（ｓ，１Ｈ）；７．８７（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ）；７．７９（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．７１（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）；７．５９（ｄｄ，Ｊ＝１．４，８．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．４５（ｍ，１Ｈ）；７．３９（ｍ，３Ｈ）；６．２３（ｓ，２Ｈ）；３．５９（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）；２．６０（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）。ＨＰＬＣ／ＭＳ計算値：６０１．０９。実測値：６０１．９０。
【０２０７】
（実施例４４）
Ｎ−［４−（｛３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−［１−メチル−５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）ベンゾイル］−β−アラニン及びＮ−［４−（｛３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−［１−メチル−６−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）ベンゾイル］−β−アラニン
【０２０８】
【化３６】
2008507528.tif 000042
【０２０９】
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの１ｍＬ中のＮ−［４−（｛３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−［５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）ベンゾイル］−β−アラニン（８ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸セシウム（１６ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）及びヨードメタン（５ｍＬ、０．０６３ｍｍｏｌ）を添加した。生じた混合物を周囲温度にて４時間撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水４部及び塩水１部で連続して洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮し、残渣をテトラヒドロフラン１ｍｌ及び水１ｍｌ中で懸濁した。水酸化リチウム（５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を周囲温度にて４８時間撹拌した。この混合物を酢酸エチル及び水で希釈し、１Ｎ塩酸で酸性化した。有機相を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣を逆相分取ＨＰＬＣにより精製し、表題化合物を位置異性体の混合物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：８．０９（ｓ，１Ｈ）；７．９５（ｍ，４Ｈ）；７．７６−７．６２（ｍ，１０Ｈ）；７．４６（ｍ，１Ｈ）；７．４１（ｓ，２Ｈ）；７．１６（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，４Ｈ）；５．８５（ｓ，４Ｈ）；３．７９（ｓ，３Ｈ）；３．７７（ｓ，３Ｈ）；３．５８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ）；２．６１（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ）。計算値：６１５．１１。実測値：６１５．８８。
【０２１０】
（実施例４５）
Ｎ−［４−（｛３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−［１−メチル−５−（トリフルオロメトキシ）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）ベンゾイル］−β−アラニン及びＮ−［４−（｛３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−［１−メチル−６−（トリフルオロメトキシ）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）ベンゾイル］−β−アラニン
【０２１１】
【化３７】
2008507528.tif 000043
【０２１２】
実施例４４に記載の化合物と同一の方法でこれらの化合物を調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：７．９３（ｍ，６Ｈ）；７．８４（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）；７．６９−７．６２（ｍ，６Ｈ）；７．４５（ｍ，１Ｈ）；７．３８−７．３０（ｍ，４Ｈ）；７．１４（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，４Ｈ）；５．８２（ｓ，２Ｈ）；５．８１（ｓ，２Ｈ）；３．７３（ｓ，３Ｈ）；３．７２（ｓ，３Ｈ）；３．５９（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，４Ｈ）；２．６１（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，４Ｈ）。ＨＰＬＣ／ＭＳ計算値：６３１．１０。実測値：６３１．９３。
【０２１３】
（実施例４６）
Ｎ−（４−｛［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−（５，６−ジフルオロ−１，３−ベンゾオキサゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
【０２１４】
【化３８】
2008507528.tif 000044
【０２１５】
３−（３，５−ジクロロフェニル）−１−［４−（メトキシカルボニル）ベンジル］−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸（１５，５ｍｇ、３８μｍｏｌ）、２−アミノ−４，５−ジフルオロフェノール（１６ｍｇ、３当量）及びＤＩＥＡ（１０μＬ、１．５当量）をＤＭＦ（４５０μＬ）中で溶解させた。ＤＭＦ（１５０μＬ）中のＰｙＢＯＰ（２４ｍｇ、１．２当量）の溶液を滴下添加した。３０分後、反応混合物に対してＣＨ３ＣＮ：Ｈ２Ｏ（５％ＴＦＡ）を用いて反応停止させ、逆相ＨＰＬＣに注入し、凍結乾燥後にメチル４−［（３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−｛［（４，５−ジフルオロ−２−ヒドロキシフェニル）アミノ］カルボニル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］ベンゾエートを白色粉末として得た。
【０２１６】
メチル４−［（３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−｛［（４，５−ジフルオロ−２−ヒドロキシフェニル）アミノ］カルボニル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］ベンゾエート（６．７ｍｇ）をＭｅＯＨ−ジオキサン（１：１、８００μＬ）中で溶解させた。ＮａＯＨの溶液（２０ｍｇ、２００μＬ）を添加した。１時間後、混合物をＣＨ３ＣＮ：Ｈ２Ｏ中の５％ＴＦＡで酸性化し、逆相ＨＰＬＣにより精製して、凍結乾燥後に４−［（３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−｛［（４，５−ジフルオロ−２−ヒドロキシフェニル）−アミノ］カルボニル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］安息香酸を白色粉末として得た。
【０２１７】
ｔ−ブチルβ−アラニン塩酸塩（６．５ｍｇ、４当量）、ＤＩＥＡ（７μＬ、４当量）及びＰｙＢＯＰ（５．７ｍｇ、１．５当量）を含有するＤＭＦ（２００μＬ）中で前述の酸を溶解させた。１時間後、ＣＨ３ＣＮ：Ｈ２Ｏ（５％ＴＦＡ）により反応を停止させ、逆相ＨＰＬＣにより精製して、凍結乾燥後にｔｅｒｔ−ブチルＮ−｛４−［（３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−｛［（４，５−ジフルオロ−２−ヒドロキシフェニル）−アミノ］カルボニル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］ベンゾイル｝−β−アラニナートを白色粉末として得た。
【０２１８】
電子レンジにおいて、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−｛４−［（３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−｛［（４，５−ジフルオロ−２−ヒドロキシフェニル）−アミノ］−カルボニル｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］ベンゾイル｝−β−アラニナート（６ｍｇ）をＨＯＡｃ（０．５ｍｌ）中で３時間２００℃に加熱した。混合物をＣＨ３ＣＮ：Ｈ２Ｏで希釈し、逆相ＨＰＬＣに通して精製し、凍結乾燥後にＮ−（４−｛［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−（５，６−ジフルオロ−１，３−ベンゾオキサゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝ベンゾイル）−β−アラニンを白色粉末として得た。Ｃ２７Ｈ１８Ｃｌ２Ｆ２Ｎ４Ｏ４に対するＭＳ計算値：５７０．０７；実測値：５７１．１５。
【０２１９】
（実施例４７）
Ｎ−（４−｛［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
【０２２０】
【化３９】
2008507528.tif 000045
【０２２１】
段階Ａ．４−｛［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−安息香酸
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１ｍＬ中の３−（３，５−ジクロロフェニル）−１−［４−（メトキシカルボニル）ベンジル］−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸（２０ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ）及びＰｙＢＯＰ（３６ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１５μＬ、０．０８８ｍｍｏｌ）を添加した。周囲温度にて１０分間撹拌した後、２−アミノチオフェノール（７μＬ、０．０５９ｍｍｏｌ）を添加し、１時間撹拌し続けた。ジチオスレイトール（１５ｍｇ、０．０９７ｍｍｏｌ）を含有する氷酢酸１０ｍＬへと生じた混合物を滴下添加し、混合物を１１０℃で１時間加熱した。酢酸を真空下で除去し、残渣を酢酸エチル中で懸濁し、有機層を重炭酸ナトリウム飽和水溶液の２部及び塩水１部で連続して洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮し、残渣をジオキサン２ｍＬ及び水１ｍＬ中で懸濁した。水酸化リチウム一水和物（４２ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５０℃で２時間加熱した。混合物を酢酸エチル及び水で希釈し、１Ｎ塩酸溶液で酸性化した。有機層を塩水一部で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮して、表題化合物を得て、精製せずに使用した。ＨＰＬＣ／ＭＳ：ｍ／ｚ＝４７９．９１（Ｍ＋１）。
【０２２２】
段階Ｂ．Ｎ−（４−｛［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１ｍＬ中の前述からの生成物２３ｍｇ（０．０４９ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（６８μＬ、０．３９ｍｍｏｌ）、β−アラニン−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５３ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）及びｐｙＢＯＰ（５１ｍｇ、０．０９８ｍｍｏｌ）を添加した。生じた溶液を周囲温度にて１６時間撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水４部及び塩水１部で連続して洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣をジクロロメタン１ｍＬ中で懸濁し、周囲温度にて１．５時間、トリフルオロ酢酸１ｍＬで処理した。混合物を真空下で濃縮し、逆相分取ＨＰＬＣによって精製し、白色粉末として表題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：８．４７（ｂｒ  ｔ，１Ｈ）；８．２１（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）；８．１２（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）；８．０１（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．８９（ｓ，１Ｈ）；７．７５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）；７．６１（ｍ，２Ｈ），７．５５（ｍ，１Ｈ）；７．３７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；６．１３（ｓ，２Ｈ）；３．４０（ｍ，２Ｈ）；２．４６（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）。
【０２２３】
（実施例４８）
Ｎ−（４−｛［５−（６−クロロ−１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
【０２２４】
【化４０】
2008507528.tif 000046
【０２２５】
前述の実施例４に記載の化合物と同じようにしてこの化合物を調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：８．４５（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）；８．３９（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ）；８．１２（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）；８．０１（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，２Ｈ）；７．９２（ｓ，１Ｈ）；７．７５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）；７．６３（ｍ，２Ｈ）；７．３７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）；６．１１（ｓ，２Ｈ）；３．４２（ｍ，２Ｈ）；２．４７（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）。ＨＰＬＣ／ＭＳ：計算値：５８４．０２。実測値：５８６．８０。
【０２２６】
（実施例４９）
Ｎ−（４−｛［５−（５−クロロ−１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
【０２２７】
【化４１】
2008507528.tif 000047
【０２２８】
前述の実施例４に記載の化合物と同じようにしてこの化合物を調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：８．２４（ｍ，２Ｈ）；８．０１（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ）；７．９２（ｓ，１Ｈ）；７．７５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）；７．６３（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ）；７．５８（ｄｄ，Ｊ＝２．０，８．７Ｈｚ，１Ｈ）；７．３９（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）；６．１１（ｓ，２Ｈ）；３．４０（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）；２．４４（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）。ＨＰＬＣ／ＭＳ計算値：５８４．０２。実測値５８６．７８。
【０２２９】
（実施例５０）
Ｎ−［４−（｛３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−［５−（トリフルオロメチル）−１，３−ベンゾチアゾール−２−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）ベンゾイル］−β−アラニン
【０２３０】
【化４２】
2008507528.tif 000048
【０２３１】
前述の実施例４に記載の化合物と同じようにしてこの化合物を調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：８．４８（ｍ，２Ｈ）；８．０１（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ）；７．９６（ｓ，１Ｈ）；７．８５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）；７．７６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）；７．６２（ｍ，１Ｈ）；７．４２（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）；６．１４（ｓ，２Ｈ）；３．４２（ｍ，２Ｈ）；２．４６（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）。ＨＰＬＣ／ＭＳ計算値：６１８．０５。実測値６１８．８４。
【０２３２】
（実施例５１）
Ｎ−（４−｛［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−［６−メトキシ−１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
【０２３３】
【化４３】
2008507528.tif 000049
【０２３４】
前述の実施例４に記載の化合物と同じようにしてこの化合物を調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：８．４５（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）；８．００（ｍ，２Ｈ）；７．８０（ｍ，３Ｈ）；７．７５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）；７．６１（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）；７．３６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）；７．１９（ｄｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，８．９Ｈｚ，１Ｈ）；６．１０（ｓ，２Ｈ）；３．８７（ｓ，３Ｈ）；３．４１（ｍ，２Ｈ）；２．４７（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）。ＨＰＬＣ／ＭＳ計算値：５８０．０７。実測値５８０．８７。
【０２３５】
（実施例５２）
Ｎ−（４−｛（１Ｓ）−１−［５−（５−クロロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
【０２３６】
【化４４】
2008507528.tif 000050
【０２３７】
段階Ａ．エチル４−｛１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾエート
エチル（３，５−ジクロロベンゾイル）アセテート（３．０ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）及び｛１−［４−（エトキシカルボニル）フェニル］エチル｝ヒドラジニウムクロリド（２．５５ｇ、１０．４ｍｍｏｌ）の溶液をＨＯＡｃ（８０ｍＬ）中で４時間還流した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を酢酸エチルで溶解させ、飽和ＮａＨＣＯ３（２ｘ）、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＤＣＭ中の０から５％の酢酸エチルの勾配）により、エチル４−｛１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾエートを白色固体として得た。ＴＬＣ（５％酢酸エチル−ＤＣＭ）Ｒｆ０．４３。ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．３８（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）；１．７８（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）；３．５５（ｄ，Ｊ＝２２．６Ｈｚ，１Ｈ）；３．６０（ｄ，Ｊ＝２２．６Ｈｚ，１Ｈ）；４．３６（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）；５．５７（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．３９（ｔ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）；７．５０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）。７．５２（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，２Ｈ）；８．０２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ１８Ｃｌ２Ｎ２Ｏ３計算値：４０４．０７；実測値（Ｍ＋１）：４０５．２０。
【０２３８】
段階Ｂ．ｔｅｒｔ−ブチルＮ−（４−｛１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニナート
エチル４−｛１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾエート（２．２３ｇ、５．５０ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ−ジオキサン（１：１、５０ｍＬ）中で溶解させた。ＮａＯＨの溶液（０．７ｇ／１５ｍＬ）を添加した。混合物を６０℃に１時間加熱した。これを２ＮのＨＣｌ（１０ｍＬ）で酸性化し、溶媒を除去し、残渣を真空乾燥させ、黄白色の固体（生成物の酸及びＮａＣｌの混合物）を得た。この固体をＤＭＦ（１５ｍＬ）中で懸濁し、次いでＤＩＥＡ（４．８ｍｌ）、β−アラニンｔ−ブチルエステル塩酸塩（３ｇ）とともに懸濁した。次に、ＤＭＦ（５ｍｌ）中のＰｙＢＯＰ（３．４３ｇ）の溶液を添加した。室温で３時間撹拌した後、より多くのＰｙＢＯＰ（１ｇ）を添加し、反応混合物を一晩撹拌した。水（５ｍＬ）の添加後、混合物を３０分間６０℃に加熱した。酢酸エチル（１５０ｍＬ）を添加し、有機層を０．５ＮのＨＣｌで２ｘ、５％Ｋ２ＣＯ３で２ｘ、塩水で２ｘ洗浄した。溶媒を蒸発させ、油状の残渣を得て、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＤＣＭ中の０−３０％の酢酸エチル）の後、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−（４−｛１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニナートを白色固体として得た。ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．３７（ｓ，９Ｈ）；１．７８（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）；２．４５（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）；３．４２（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）；５．５６（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）；５．９９（ｓ，１Ｈ）；７．３０（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）；７．４７（ｔ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，１Ｈ）。７．７３（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）；７．７６（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，２Ｈ）；８．４３（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ）；１１．３４（ｓ，１Ｈ）。ＭＳ  Ｃ２５Ｈ２７Ｃｌ２Ｎ３Ｏ４計算値：５０３．１４；実測値（Ｍ＋Ｎａ）：５２６．０５。
【０２３９】
段階Ｃ．ｔｅｒｔ−ブチルＮ−｛４−［１−（３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−｛［（トリフルオロメチル）スルホニル］オキシ｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エチル］ベンゾイル｝−β−アラニナート
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−（４−｛１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニナート（２．０５ｇ、４．０６ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（１．７ｍＬ、１２ｍｍｏｌ）を−７８℃のＴＨＦ（３５ｍＬ）中で溶解させた。トリフルオロメタンスルホン酸無水物（１．１ｍＬ、６．２ｍｍｏｌ）を添加した。冷却槽を除去し、反応混合物を１時間撹拌した。酢酸エチル、水を添加することによって反応を停止させた。有機層を０．５ＮのＨＣｌ（２ｘ）、塩水（２ｘ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒の蒸発及びフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＤＣＭ中の０から１０％酢酸エチルの勾配）により、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−｛４−［１−（３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−｛［（トリフルオロメチル）スルホニル］オキシ｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エチル］ベンゾイル｝−β−アラニナートを無色の乾燥フィルム状物質として得た。ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．４５（ｓ，９Ｈ）；１．９７（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）；２．５３（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ）；３．６７（ｑ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ）；５．５４（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）；６．４３（ｓ，１Ｈ）；６．８６（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ）；７．３３（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．３６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）。７．６７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．７４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）。ＭＳ  Ｃ２６Ｈ２６Ｃｌ２Ｆ３Ｎ３Ｏ６Ｓ  計算値：６３５．０９；実測値（Ｍ＋Ｎａ）：６５７．８９。
【０２４０】
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−｛４−［１−（３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−｛［（トリフルオロメチル）スルホニル］オキシ｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エチル］ベンゾイル｝−β−アラニナートは、キラルＨＰＬＣ（ＣｈｉｒａｌＰａｋ  ＡＤカラム、分析条件：６％イソプロパノール／ヘプタン、（Ｓ）−異性体Ｒｔ＝１６．１及び（Ｒ）−異性体１８．１分、又はＳＦＣクロマトグラフィーを使用、１５％ＭｅＯＨ：ＣＯ２、１．５ｍＬ／分、（Ｒ）−異性体Ｒｔ＝５．５及び（Ｓ）−異性体６．１分、ＳＦＣクロマトグラフィーを使用する分取条件  １５％ＭｅＯＨ：ＣＯ２、５０ｍｌ／分）により分析できる。（Ｓ）異性体を段階Ｄにおいて使用した。
【０２４１】
あるいは、段階ＡからＣは、｛（１Ｓ）−１−［４−（エトキシカルボニル）フェニル］−エチル｝ヒドラジニウムトリフルオロアセテートを直接使用して実施できる。
【０２４２】
段階Ｄ．Ｎ−（４−｛（１Ｓ）−１−［５−（５−クロロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
ｔｅｒｔ−ブチルＮ−｛４−［（１Ｓ）−１−（３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−｛［（トリフルオロメチル）スルホニル］オキシ｝−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エチル］ベンゾイル｝−β−アラニナート（１５ｍｍｏｌ、０．０２４ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１４μＬ、０．１ｍｍｏｌ）、［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−クロロ−１Ｈ−インドール−２−イル］ボロン酸（１４ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）をＤＭＥ（０．６ｍＬ）中で溶解した。混合物を真空−Ｎ２充填サイクルによって脱酸素化した。触媒Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（３ｍｇ、１０％）を素早く添加し、混合物を再度脱酸素化した。電子レンジで１０分間１００℃に加熱した後、混合物をＣＨ３ＣＮ：水（５％ＴＦＡ含有）で希釈し、逆相ＨＰＬＣで精製した。回収した生成物をＴＦＡ／ＤＣＭ（１：１、１ｍＬ）で処理し、凍結乾燥後、Ｎ−（４−｛（１Ｓ）−１−［５−（５−クロロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニンを白色粉末として得た。Ｈ１−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，５００ＭＨｚ）δ：８．４２（１Ｈ，ｔ）；７．９０（２Ｈ，ｓ）；７．７５（２Ｈ，ｄ）；７．６０（２Ｈ，ｄ）；７．４０（１Ｈ，ｄ）；７．２８（１Ｈ，ｓ）；７．２２（２Ｈ，ｄ）；７．１８（１Ｈ，ｄ）；６．５８（１Ｈ，ｓ），６．５０（１Ｈ，ｓ）；６．０２（１Ｈ，ｄｄ）；３．４０（２Ｈ，ｄｄ）；１．９５（３Ｈ，ｄ）。Ｃ２９Ｈ２３Ｃｌ３Ｎ４Ｏ３に対するＭＳ計算値：５８０．０８。実測値：５８１．１３。
【０２４３】
（実施例５３）
Ｎ−（４−｛（１Ｓ）−１−［５−（６−クロロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
【０２４４】
【化４５】
2008507528.tif 000051
【０２４５】
この化合物を実施例５２と同様の方法で調製した。Ｈ１−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，５００ＭＨｚ）：δ：８．４２（１Ｈ，ｔ）；７．９０（２Ｈ，ｓ）；７．７５（２Ｈ，ｄ）；７．５８（２Ｈ，ｍ）；７．４１（１Ｈ，ｓ）；７．３０（１Ｈ，ｓ）；７．２２（２Ｈ，ｄ）；７．０５（１Ｈ，ｄ）；６．６０（１Ｈ，ｓ）；６．０５（１Ｈ，ｄｄ）；３．４０（１Ｈ，ｄｄ）；１．８５（３Ｈ，ｄ）。
【０２４６】
Ｃ２９Ｈ２３Ｃｌ３Ｎ４Ｏ３についてのＭＳ計算値：５８０．０８。実測値：５８１．０９。
【０２４７】
（実施例５４）
Ｎ−［４−（（１Ｓ）−１−｛３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−［６−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝エチル）ベンゾイル］−β−アラニン
【０２４８】
【化４６】
2008507528.tif 000052
【０２４９】
実施例５２と同様の方法でこの化合物を調製した。Ｈ１−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，５００ＭＨｚ）δ：８．４２（１Ｈ，ｔ）；７．９０（２Ｈ，ｓ）；７．７８（１Ｈ，ｄ）；７．７５（３Ｈ，ｍ）；７．３５（２Ｈ，ｓ）；７．２２（２Ｈ，ｄ）；６．７６（１Ｈ，ｓ）；６．０５（１Ｈ，ｄｄ）；３．４０（２Ｈ，ｄｄ）；１．９５（３Ｈ，ｄ）。Ｃ３０Ｈ２３Ｃｌ２Ｆ３Ｎ４Ｏ３に対するＭＳ計算値：６１４．１１；実測値：６３７．０９。
【０２５０】
（実施例５５）
Ｎ−（４−｛（１Ｓ）−１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−（５−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
【０２５１】
【化４７】
2008507528.tif 000053
【０２５２】
実施例５２と同様の方法でこの化合物を調製した。Ｈ１−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，５００ＭＨｚ）：δ：８．４２（１Ｈ，ｔ）；７．９０（２Ｈ，ｓ）；７．７５（２Ｈ，ｄ）；７．５９（１Ｈ，ｓ）；７．３０（１Ｈ，ｄ）；７．２２（３Ｈ，ｍ）；７．０２（１Ｈ，ｓ）；６．８０（１Ｈ，ｄ）；６．４５（１Ｈ，ｓ）；６．０５（１Ｈ，ｄｄ）；３．７２（３Ｈ，ｓ）；３．４０（２Ｈ，ｄｄ）；１．９５（３Ｈ，ｄ）；Ｃ３０Ｈ２６Ｃｌ２Ｎ４Ｏ４についてのＭＳ計算値：５７６．１３；実測値：５７７．２３。
【０２５３】
（実施例５６）
Ｎ−（４−｛（１Ｓ）−１−［３−（３，５−ジクロロフェニル）−５−（１Ｈ−インドール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
【０２５４】
【化４８】
2008507528.tif 000054
【０２５５】
実施例５２と同様の方法でこの化合物を調製した。Ｈ１−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，５００ＭＨｚ）：δ８．４２（１Ｈ，ｔ）；７．９０（２Ｈ，ｓ）；７．７７（２Ｈ，ｄ）；７．５９（１Ｈ，ｓ）；７．５８（１Ｈ，ｄ）；７．４０（１Ｈ，ｄ）；７．２３（１Ｈ，ｓ）；７．２２（２Ｈ，ｄ）；７．１８（１Ｈ，ｔ）；７．０１（１Ｈ，ｔ）；６．５９（１Ｈ，ｓ）；６．０５（１Ｈ，ｄｄ）；３．４（２Ｈ，ｄｄ）；２．４８（２Ｈ，ｄｄ）；１．９５（３Ｈ，ｄ）。Ｃ２９Ｈ２４Ｃｌ２Ｎ４Ｏ３についてのＭＳ計算値：５４６．１２；実測値：５４７．１７。
【０２５６】
（実施例５７）
Ｎ−（４−｛（１Ｓ）−１−［３−［２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］−５−（１Ｈ−インドール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］エチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
【０２５７】
【化４９】
2008507528.tif 000055
【０２５８】
実施例５２と同様の方法でこの化合物を調製した。Ｈ１−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，５００ＭＨｚ）δ：８．４２（１Ｈ，ｔ）；８．３５（１Ｈ，ｄ）；７．８０（１Ｈ，ｍ）；７．７５（２Ｈ，ｄ）；７．６０（１Ｈ，ｔ）；７．５５（１Ｈ，ｄ）；７．４０（１Ｈ，ｄ）；７．２５（２Ｈ，ｄ）；７．２２（１Ｈ，ｄ）；７．１５（１Ｈ，ｔ）；７．００（１Ｈ，ｔ）；６．６０（１Ｈ，ｓ）；６．１８（１Ｈ，ｄｄ）；１．９８（３Ｈ，ｄ）。Ｃ３０Ｈ２４Ｆ４Ｎ４Ｏ３についてのＭＳ計算値：５６４．１８；実測値：５６５．２６。
【０２５９】
（実施例５８）
Ｎ−（４−｛［５−（１−ベンゾフラン−２−イル）−３−（３，５−ジクロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝ベンゾイル）−β−アラニン
【０２６０】
【化５０】
2008507528.tif 000056
【０２６１】
市販の２−ベンゾフランボロン酸から出発し、実施例５２と同様の方法でこの化合物を調製した。ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２．４４（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）；３．３９（ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ）；５．８３（ｓ，２Ｈ）；７．２３（ｓ，１Ｈ）；７．２６（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）；７．２９（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．３７（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．５９（ｔ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ）；７．６０（ｓ，１Ｈ）；７．６３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）；７．６８（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．７５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）；７．９４（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，２Ｈ）；８．４６（ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，１Ｈ）。Ｃ３０Ｈ２４Ｆ４Ｎ４Ｏ３に対するＭＳ計算値：５３３．０９；実測値：５３４．２８。
【０２６２】
（実施例５９）
Ｎ−［４−（｛５−（１−ベンゾフラン−２−イル）−３−［２−プロポキシ−４−（トリフルオロメチル）フェニル］−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝メチル）ベンゾイル］−β−アラニン
【０２６３】
【化５１】
2008507528.tif 000057
【０２６４】
実施例５２と同様の方法でこの化合物を調製した。ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．０７（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ）；１．８８（ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）；２．４３（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）；３．３９（ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ，２Ｈ）；４．１９（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）；５．８４（ｓ，２Ｈ）；７．２−７．３（ｍ，４Ｈ）；７．３４−７．４１（ｍ，４Ｈ）；７．６４（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．６７（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．７５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）；８．１７（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ）；８．４７（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ）。Ｃ３２Ｈ２８Ｆ３Ｎ３Ｏ５についてのＭＳ計算値：５９１．２０；実測値：５９２．３６。
【０２６５】
生物学的アッセイ
本発明の化合物のグルカゴン結合阻害能、並びに２型糖尿病及び関連状態の治療又は予防におけるそれらの有用性を以下のインビトロアッセイによって示すことができる。
【０２６６】
グルカゴン受容体結合アッセイ
クローニングしたヒトグルカゴン受容体を発現する安定したＣＨＯ（チャイニーズハムスター卵巣）細胞株を記載のように維持した（Ｃｈｉｃｃｈｉら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ２７２，７７６５−９（１９９７）；Ｃａｓｃｉｅｒｉら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ２７４，８６９４−７（１９９９））。化合物の拮抗的な結合親和性を測定するため、これらの細胞由来の細胞膜０．００２ｍｇを、５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、２ｍＭ  ＥＤＴＡ、１２％グリセロール及び０．２００ｍｇのＷＧＡでコーティングしたＰＶＴ  ＳＰＡビーズ（Ａｍｅｒｓｈａｍ）（±化合物）を含有する緩衝液中の１２５Ｉ−グルカゴン（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｎｕｃｌｅａｒ，ＭＡ）又は０．００１ｍＭ非標識グルカゴンとインキュベートした。室温で４時間から１２時間インキュベートした後、細胞膜に結合した放射能を放射能放出検出カウンタ（Ｗａｌｌａｃ−Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ）で測定した。ＧｒａｐｈＰａｄ社製のソフトウェアプログラムＰｒｉｓｍ（Ｒ）を使用してデータを分析した。一部位競合を仮定した非線形回帰分析を使用してＩＣ５０を算出した。
【０２６７】
グルカゴンにより刺激される細胞内ｃＡＭＰ形成の阻害
酵素不含の解離用培地（Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ  Ｍｅｄｉａ）を用いて、ヒトグルカゴン受容体を発現する指数関数的に増殖するＣＨＯ細胞を回収し、低速でペレット化して、細胞懸濁緩衝液［７５ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  ｐＨ７．５、２５０ｍＭスクロース、２５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１．５ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．１ｍＭ  Ｒｏ−２０−１７２４（Ｂｉｏｍｏｌ社）、０．２％ウシ血清アルブミン及びｃｏｍｐｌｅｔｅ（ＴＭ）（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ）１錠、緩衝液の各５０ｍＬに対してプロテアーゼ阻害剤のカクテルを含有する。］中で再懸濁した。Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｎｕｃｌｅａｒ（ＮＥＮ）製のＡｄｅｎｙｌａｔｅ  Ｃｙｃｌａｓｅ  Ａｓｓａｙキット（ＳＭＰ−００４Ｂ）を製造者の使用説明書のとおり使用して、アデニル酸シクラーゼアッセイを設定した。簡単に述べると、キットで供給される細胞刺激緩衝液中の保存液から化合物を希釈した。前述のとおり調製した細胞を、抗ｃＡＭＰ抗体（ＮＥＮ）でコーティングしたフラッシュプレート中で化合物又はＤＭＳＯ対照物の存在下で４０分間プレインキュベートし、次いでグルカゴン（２５０ｐＭ）でさらに４０分間刺激した。溶解緩衝液ならびに１２５Ｉ標識したｃＡＭＰトレーサー（ＮＥＮ）を含有する検出緩衝液の等量を添加して細胞刺激を停止させた。室温で３時間から６時間インキュベートした後、結合した放射能を液体シンチレーションカウンタ（ＴｏｐＣｏｕｎｔ−Ｐａｃｋａｒｄ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）で測定した。対照試料の総シンチレーションシグナル（ＣＰＭ）に対して、化合物なし及び０．００１ｍＭの非標識グルカゴンと比較することによって、試験化合物の活性を算出した。
【０２６８】
本発明のいくつかの実施形態を詳細に説明したが、その他数多くの実施形態が本発明の範囲内にあるものとする。したがって、請求の範囲は本明細書で説明した特定の実施形態に限定するものではない。本明細書で引用した特許、特許出願及び発行物は全て、全体を参照により本明細書に組み込む。
【国際調査報告】
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