(57)【要約】L-ドーパまたはドーパミンアゴニストにより誘発されたジスキネジーの予防または治療は、ニューロンの一酸化窒素合成酵素の選択的阻害剤の使用により行なうことができる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
L-ドーパまたはドーパミンアゴニストにより誘発されるジスキネジーの予防または治療用医薬の製造において、ニューロンのNO合成酵素の医薬的に許容される選択的阻害剤の使用。
【請求項２】
前記L-ドーパまたはドーパミンアゴニストにより誘発されるジスキネジーを減少すると同時に、パーキンソン病の治療に、併用で、別々にまたは連続的に使用される医薬の製造において、（ｉ）ニューロンのNO合成酵素の医薬的に許容される選択的阻害剤および（ｉｉ）L-ドーパまたはドーパミンアゴニストの使用。
【請求項３】
医薬が、L-ドーパまたはドーパミンアゴニストの反復投与の結果としてその患者に生じるジスキネジーの治療用である、請求項１または請求項２に記載の使用。
【請求項４】
ニューロンのNO合成酵素の医薬的に許容される選択的阻害剤の有効量をその患者に投与することを含む、L-ドーパまたはドーパミンアゴニストの治療的投与を受けている患者に誘発されるジスキネジーの治療方法。
【請求項５】
ジスキネジーが、L-ドーパまたはドーパミンアゴニストの反復投与の結果としてその患者に生じるものである、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
パーキンソン病を患っている患者へのL-ドーパまたはドーパミンアゴニストの投与によりパーキンソン病を治療する方法において、前記L-ドーパまたはドーパミンアゴニストにより誘発される前記患者のジスキネジーを減少するために、ニューロンのNO合成酵素の医薬的に許容される選択的阻害剤の有効量をその患者に投与することを含む改良。
【請求項７】
ジスキネジーが、L-ドーパまたはドーパミンアゴニストの反復投与の結果としてその患者に生じるものである、請求項６に記載の改良。
【請求項８】
（ｉ）ニューロンのNO合成酵素の医薬的に許容される選択的阻害剤、（ｉｉ）L-ドーパまたはドーパミンアゴニストならびに（ｉｉｉ）一以上の医薬的に許容される（ｉ）および／または（ｉｉ）のための希釈剤または担体を含み、パーキンソン病の治療に対して同時に、併用で、別々にまたは連続での使用のための単位投与形態にある医薬組成物、医薬品またはパッケージ。
【請求項９】
末梢の脱炭酸酵素阻害剤をさらに含む、請求項８に記載の医薬組成物、医薬品またはパッケージ。
【請求項１０】
末梢の脱炭酸酵素阻害剤がカルビドパまたはベンセラジドである、請求項９に記載の医薬組成物、医薬品またはパッケージ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、哺乳類における、L-ドーパ（レボドパ；L-3,4-ジヒドロキシフェニルアラニン）またはドーパミンアゴニストの治療により誘発されるジスキネジーの治療に関する。本発明は、パーキンソン病治療の組み合わせ治療にも関する。
【背景技術】
【０００２】
パーキンソン病は、中枢神経系の慢性で進行性の疾患である。パーキンソン病は、脳の黒質部分におけるドーパミン産生細胞の損失の直接的な結果であると考えられる。
【０００３】
60,000以上のパーキンソン病の新たな患者が毎年アメリカで診断されている。その主な治療は、症状の除去だけを与える。これらの治療は、ドーパミンアゴニストの使用を含み、そしてそれは効果的ではあるが、悪心、嘔吐および精神科の合併症を引き起こし得る。ジスキネジーがさらなる可能性のある副作用である。例えばアマンタジンのようなムスカリン拮抗剤が代替の治療であるが、これらは長期では効果がないことが判っている。
【０００４】
パーキンソン病治療の最も一般的に用いられる方針は、L-ドーパ（レボドパ）の投与である。これは、血流中でL-ドーパのドーパミンへの変換を遅くすることによってL-ドーパの効果を長引かせる、カルビドパのような末梢の脱炭酸酵素阻害剤と組み合わせて投与され得る。しかしながら、L-ドーパの長期間の使用は、顕著な副作用として不随意運動（ジスキネジー）を引き起こす。事実、L-ドーパと末梢の脱炭酸酵素阻害剤で治療を受けているパーキンソン病患者の少なくとも40％が、5年以内にジスキネジーを患う。
【０００５】
L-ドーパ誘発ジスキネジーの原因はいまのところ不明である。ジスキネジーに関連した異常な運動を引き起こす呼び水(priming)現象が起こることが考えられる。それゆえ、治療のための戦略は、この呼び水工程が起こることを防ぐこと、ならびに呼び水が起こった患者においてジスキネジーの発現を避けることの両方を含む。用いられている可能性のある治療は、オピオイド拮抗剤（例えばナロキソン）およびアゴニスト（例えばモルヒネ）、α-2アドレナリン受容体拮抗剤（イドゾキサン、フィパメゾール）、5-HT 1a受容体アゴニスト、5-HT 2a/c受容体拮抗剤、カンナビノイド受容体アゴニスト（例えばナビロン）、硫酸マグネシウム、3,4-メチレンジオキシメタアンフェタミン（エクスタシ）およびレビチラセタムを含む。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ジスキネジーのための一般的な治療は、L-ドーパ（またはドーパミンアゴニスト）投与の減少または離脱を含む。例えば、患者は、その代わりにアマンタジン（グルタミン酸拮抗剤）で治療され得る。抗パーキンソン病の治療としてL-ドーパをアマンタジンで置き換えることは、ジスキネジーの症状を除去するが、その恩恵は短期間である。なぜなら、そのような治療法はパーキンソン病からの長期間の開放を提供できないからである。したがって、抗パーキンソン病の治療に影響を及ぼさないで行なうことができる、ジスキネジーを阻害または治療するための有効な方法の必要性がある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明によれば、L-ドーパまたはドーパミンアゴニストにより誘発されるジスキネジーの予防または治療用医薬の製造において、ニューロンの一酸化窒素合成酵素（nNOS）の医薬的に許容される選択的阻害剤の使用が提供される。ニューロンのNO合成酵素の医薬的に許容される選択的阻害剤の有効量を患者に投与することを含む、L-ドーパまたはドーパミンアゴニストにより誘発されるジスキネジーを予防または治療する方法も提供する。
【０００８】
本発明は、L-ドーパまたはドーパミンアゴニストの反復投与による患者におけるパーキンソン病治療の改良も含み、その改良は、該L-ドーパまたはドーパミンアゴニストにより誘発される該患者のジスキネジーを減少するために、ニューロンのNO合成酵素の医薬的に許容される選択的阻害剤の有効量をその患者に投与することも含む。
【０００９】
三つの形態の一酸化窒素（NO）合成酵素、すなわちニューロンのNO合成酵素（nNOS）、誘導性NO合成酵素（iNOS）および内皮細胞NO合成酵素（eNOS）が知られている。三つの形態の酵素全て、生物学的試薬として商業的に入手可能である。選択的nNOS阻害剤は、eNOSおよびiNOSの両方に対するよりもnNOSに対してより低いIC50を有するものである。三つの形態の酵素に対する、任意のNOS阻害剤のIC50を測定するために適した評価法は、Bredtら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 86巻, 9030-9033頁, 11月 1989年 (nNOSに対して); Pollockら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88巻, 10480-10484頁, 12月 1991年 (eNOSに対して); およびMahmoudら、J. Biol. Chem. 204巻, 33号, 11月25日 1989年, 19654-19658頁 (iNOSに対して) に記載されている。これらの評価に用いられるNOS酵素の供給源は重要ではなく、一般的に、マウス、ラット、ウシまたはヒトの酵素が用いられる。好ましくは、nNOS選択性を明らかにする目的のためのIC50の測定は、同じ種、好ましくはヒトからの酵素を用いてなされる。
【００１０】
好ましくは、本発明の使用のための選択的nNOS阻害剤は、eNOSおよびiNOSの両方に対してよりもnNOSに対して、少なくとも10倍、好ましくは少なくとも100倍低いIC50を有する。
【００１１】
選択的nNOS阻害剤は、それ自身、L-ドーパまたはドーパミンアゴニストの共投与(co-administration)なしで、ドーパミン欠乏病、特にパーキンソン病の運動欠乏症状に対して効果的な治療を示さないものであり得る。選択的nNOS阻害剤は、それ自身、L-ドーパまたはドーパミンアゴニストの共投与なしで、以下の実施例に記載の動物モデルにおいて、自発運動を変えるかまたは運動欠乏を改善しないものであり得る。
【００１２】
図１は、以下の参考例に記載のマーモセット動物モデルでのNOS阻害剤L-Nameの試験結果を表わしたものである。
図１（ａ）は、実施例１〜５の時間（分）に対する自発運動量を示す。
図１（ｂ）は、同じ五つの実施例の時間（分）に対する運動障害を示す。
図１（ｃ）は、実施例２〜５の時間（分）に対する舞踏病(chorea)を表わす。
図１（ｄ）は、実施例２〜５の時間（分）に対する失調症(dystonia)を表わす。
【００１３】
図２は、以下の参考例に記載のマーモセット動物モデルでのNOS阻害剤LPAの試験結果を表わしたものである。
図２（ａ）は、実施例２、６および７の時間（分）に対する自発運動量を示す。
図２（ｂ）は、同じ実施例の時間（分）に対する運動障害を示す。
図２（ｃ）は、同じ実施例の時間（分）に対する舞踏病を表わす。
図２（ｄ）は、実施例６および７の時間（分）に対する失調症を表わす。
【００１４】
図３は、以下の参考例に記載のマーモセット動物モデルでのNOS阻害剤7-NIの試験結果を表わしたものである。
図３（ａ）は、実施例２および８の時間（分）に対する自発運動量を示す。
同じ実施例について、図３（ｂ）は、時間（分）に対する運動障害を示し、
図３（ｃ）は、時間（分）に対する舞踏病を表わし、そして
図３（ｄ）は、時間（分）に対する失調症を表わす。
【００１５】
図４は、L-NAMEおよびLPAを用いた運動機能試験の結果をまとめたものである。
図５は、L-NAMEおよびLPAを用いた全ジスキネジー試験の結果をまとめたものである。
【００１６】
図６は、以下の参考例に記載のマーモセット動物モデルでのドーパミンアゴニスト ロピニロールおよびNOS阻害剤L-NAMEの試験結果を示す。
図６（ａ）は、実施例９および１０の時間（分）に対する自発運動量の点からの自発運動を示す。
同じ実施例について、図６（ｂ）は運動障害試験の結果を示し、
図６（ｃ）は舞踏病試験の結果を示し、そして
図６（ｄ）は失調症試験の結果を示す。
【００１７】
図７は、以下の参考例に記載のマーモセット動物モデルでのeNOS阻害剤L-NIOの試験結果を示す。
図７（ａ）は、L-NIOを用いた試験に対する自発運動の結果を示し、
図７（ｂ）は、L-NIOを用いた試験に対する運動障害の結果を示し、
図７（ｃ）は、L-NIOを用いた試験に対する舞踏病の結果を示し、そして
図７（ｄ）は、L-NIOを用いた試験に対する失調症の結果を示す。
【００１８】
図８は、以下の参考例に記載のマーモセット動物モデルでのiNOS阻害剤1,3-PB-ITUの試験結果を示す。
図８（ａ）は、1,3-PB-ITUを用いた試験に対する自発運動の結果を示し、
図８（ｂ）は、1,3-PB-ITUを用いた試験に対する運動障害の結果を示し、
図８（ｃ）は、1,3-PB-ITUを用いた試験に対する舞踏病の結果を示し、そして
図８（ｄ）は、1,3-PB-ITUを用いた試験に対する失調症の結果を示す。
【００１９】
図９は、以下の参考例に記載のマーモセット動物モデルでのiNOS阻害剤S-(2-アミノエチル)-ITUの試験結果を示す。
図９（ａ）は、S-(2-アミノエチル)-ITUを用いた試験に対する自発運動の結果を示し、
図９（ｂ）は、S-(2-アミノエチル)-ITUを用いた試験に対する運動障害の結果を示し、
図９（ｃ）は、S-(2-アミノエチル)-ITUを用いた試験に対する舞踏病の結果を示し、そして
図９（ｄ）は、S-(2-アミノエチル)-ITUを用いた試験に対する失調症の結果を示す。
【００２０】
図１０は、以下の参考例に記載のマーモセット動物モデルでのnNOS阻害剤ビニルL-NIOの試験結果を示す。
図１０（ａ）は、ビニルL-NIOを用いた試験に対する自発運動の結果を示し、
図１０（ｂ）は、ビニルL-NIOを用いた試験に対する運動障害の結果を示し、
図１０（ｃ）は、ビニルL-NIOを用いた試験に対する舞踏病の結果を示し、そして
図１０（ｄ）は、ビニルL-NIOを用いた試験に対する失調症の結果を示す。
図１１は、本発明に従って使用できるnNOS阻害剤を表わす。
【００２１】
本発明は、L-ドーパまたはドーパミンアゴニストの反復投与により誘発されるジスキネジーを予防するかまたは治療する、特に予防することに関する。本発明に照らして、そのようなジスキネジーを予防することは、そのようなジスキネジーを部分的に予防することまたはそのようなジスキネジーの発生を減少することを含む。特に、そのようなジスキネジーを予防することは、哺乳類において、ジスキネジーが起こる寸前のそのようなジスキネジーの発現を予防するかまたは減少することを含む。
【００２２】
本発明は、特にL-ドーパによって誘発されるジスキネジーに対して有用である。本発明に照らして、L-ドーパによって誘発されるジスキネジーは、L-ドーパの投与の間にまたは投与に続いて起こるジスキネジーである。ドーパミンアゴニストにより誘発されるジスキネジーは、ドーパミンアゴニストの投与の間にまたは投与に続いて起こるジスキネジーである。
【００２３】
本発明は、哺乳類、特にヒトの治療に有用である。
作用の様式がニューロンのNO合成酵素の選択的阻害である作用物質のクラスは、そのクラスの研究開発が続いているので、着実にその数が増えている既知のクラスである。そのような様式を有する医薬的に許容されるあらゆる作用物質が本発明に用いられ得る。競合、非競合、可逆および不可逆的な阻害剤が適している。
【００２４】
nNOSの選択的阻害剤は、L-アルギニン類縁物質、チオシトルリン、インダゾール誘導体、アミノグアニジン誘導体およびチオウレア、例えば7-ニトロインダゾール（7-NI）中に見出される。
【００２５】
本発明の一つの態様において、nNOS阻害剤は式：
【化１】
2008545616.tif 000002
【００２６】
（式中、
XはCH、N、OおよびSから選択され；
mおよびnは独立して0および1から選択される整数であり、mおよびnの少なくとも一つは1であり；
YはCHおよびNから選択され；
pおよびqは独立して1および2から選択される整数であり、pおよびqの少なくとも一つは1であり、pおよびqは同時に2とはならず；
ZはNHおよびOから選択され；
R1はH、アルキル、アミノ、ヒドロキシ、および置換されたアルキル部分から選択され；そして
R2はアルキル、置換されたアルキル、ヒドロキシアルキル、置換されたヒドロキシアルキル、アミノアルキル、および置換されたアミノアルキル部分から選択される）
の化合物、またはその塩である。
【００２７】
R1がアルキル基または置換されたアルキル基であるとき、そのアルキル基は一般的に直鎖状または分枝鎖状のC1-C6、好ましくはC1-C4アルキル基である。一般的に、R1が置換されたアルキルであるとき、それはアミノアルキルまたはヒドロキシアルキルである。好ましくは、R1はHまたはアミノアルキルである。
【００２８】
一般的に、R2がアルキル基または置換されたアルキル基であるとき、そのアルキル基は直鎖状または分枝鎖状のC1-C6、好ましくはC1-C4アルキル基である。アルキル基はそのアルキル鎖中に5-または6-員のシクロアルキル基も含み得る。
【００２９】
一般的に、R2が置換されたアルキルであるとき、その置換基はアミノ(NH2)、ヒドロキシ、C1-C4アルコキシ、C1-C4アルキルアミノ、-CONH2、-CONH(C1-C4アルキル)、-COO(C1-C4アルキル)、フェニル、ピリジルまたはC1-C4アルキルで置換されたフェニルから選択される。好ましくは、R2は少なくともヒドロキシおよび／またはアミノ置換基を有するアルキルである。さらに好ましくは、R2は一級、二級もしくは三級の、直鎖または環状のアミノアルキル基である。
【００３０】
この態様の一つの観点において、XはCHであり、mおよびnは1である。この態様のこの観点または他の観点において、YはNであり、pは1または2であり、ZはNHである。あるいは、YはCHであり、そしてpおよびqの少なくとも一つが1であるとの条件で、pおよびqは1または2であり、好ましくはpおよびqの両方が1である。あるいは、YがNであり、pおよびqが1である。
【００３１】
この態様のもう一つの観点において、XはSであり、mおよびnの一つは0である。Y、p、qおよびZは上記で定義されたとおりであり得る。
【００３２】
この態様のもう一つの観点において、nNOS阻害剤は式：
【化２】
2008545616.tif 000003
【００３３】
（式中、
R1はH、アルキル、置換されたアルキル、アミノアルキル、置換されたアミノアルキル、ヒドロキシアルキル、および置換されたヒドロキシアルキル部分から選択され；
R2はアルキル、置換されたアルキル、ヒドロキシアルキル、置換されたヒドロキシアルキル、アミノアルキル、および置換されたアミノアルキル部分から選択される）
の化合物、またはその塩である。一般的に、R1およびR2は前記で定義されたとおりである。好ましくは、R1はH、アルキル、アミノアルキルまたはヒドロキシアルキル、より好ましくはHまたはアミノアルキルである。好ましくは、R2はアミノアルキルである。
【００３４】
この態様に従ったnNOS阻害剤の例は図７に表わされる。この態様に従った化合物は、WO 2005/026111に詳述された方法に従って製造することができる。
【００３５】
本発明のさらなる態様において、nNOS阻害剤は式：
【化３】
2008545616.tif 000004
【００３６】
［式中、
R2はH、C1-C6アルキルまたはプロリニルであり；
R1は基X-R3（ここで、Xは-C(O)-、-C(O)-NR4-または-CH-NR4-であり；R3はH、-NH2、-CONH2および-COOR5から選択される一以上の置換基で任意に置換されていてもよいC1-C6アルキル、-NH2、-CONH2および-NHCOCF3から選択される一以上の置換基で任意に置換されていてもよいピロリジニルもしくはシクロペンチル基、またはそれぞれが、-NH2、-CONH2および-(CH2)p-NH2から選択される一以上の置換基で任意に置換されていてもよい基-(CH2)n-ピリジルもしくは(CH2)m-フェニルであり；R4はHまたは-NH2および-CONH2から選択される一以上の置換基で任意に置換されていてもよいC1-C6アルキルであり；R5はHまたはC1-C4アルキルであり；nおよびmは独立して0、1または2であり；そしてpは1または2である）である］
のニトロアルギニン類縁物質である。
【００３７】
R2がC1-C6アルキルまたはプロリニルであるとき、それは置換されていないか、または一般的に、1、2もしくは3個の置換基で置換されている。好ましい置換基は-NH2および-CONH2である。プロリニル基は2-カルボキシ-ピロリジニルである。好ましい基R2はHまたは4-アミノプロリニルである。
Xは、好ましくは-C(O)-、-C(O)-NH-または-CHNH-で、最も好ましくは-CHNH-である。
【００３８】
R3は、好ましくはアルキル、ピロリジニル、シクロペンチル、-(CH2)n-ピリジルまたは-(CH2)m-フェニルである。好ましくは、アルキル、ピロリジニルもしくはシクロペンチル基は、-NH2および-CONH2から選択される、0、1または2個の置換基を有する。Xが-C(O)-であるとき、一般的に、ピロリジニル基はN原子を介してXと結合する。Xが-C(O)-NR4-または-CH-NR4-であるとき、一般的に、ピロリジニル基はC原子を介してXと結合する。
【００３９】
R3が(CH2)n-ピリジルであるとき、nは好ましくは1または2であり、ピリジル基は好ましくは無置換である。R3が(CH2)m-フェニルであるとき、フェニル基は好ましくは無置換であるか、または-NH2および-(CH2)pNH2から選択される、1または2個の置換基で置換される。
【００４０】
この態様のNOS阻害剤の例は：
N-(4S)-[[4-アミノ-5-(3-アミノ)フェニルアミノ]-ペンチル]-N'-ニトログアニジン、
N-(4S)-[[4-アミノ-5-(4-アミノ)フェニルアミノ]-ペンチル]-N'-ニトログアニジン、
N-(4S)-[[4-アミノ-5-(2-アミノ)フェニルアミノ]-ペンチル]-N'-ニトログアニジン、
N-(4S)-[4-アミノ-5-(2-アミノベンジルアミノ)ペンチル]-N'-ニトログアニジン、
N-(4S)-[4-アミノ-5-(3-アミノベンジルアミノ)ペンチル]-N'-ニトログアニジン、
【００４１】
N-(4S)-[4-アミノ-5-(4-アミノベンジルアミノ)ペンチル]-N'-ニトログアニジン、
N-(4S)-[[4-アミノ-5-(2-アミノフェニル)エチルアミノ]ペンチル]-N'-ニトログアニジン、
N-(4S)-[[4-アミノ-5-(3-アミノフェニル)エチルアミノ]ペンチル]-N'-ニトログアニジン、
N-(4S)-[[4-アミノ-5-(4-アミノフェニル)エチルアミノ]ペンチル]-N'-ニトログアニジン、
【００４２】
N-(4S)-[4-アミノ-5-[(2-アミノメチル)フェニルアミノ]ペンチル]-N'-ニトログアニジン、
N-(4S)-[4-アミノ-5-[(3-アミノメチル)フェニルアミノ]ペンチル]-N'-ニトログアニジン、
N-(4S)-[4-アミノ-5-[(4-アミノメチル)フェニルアミノ]ペンチル]-N'-ニトログアニジン、
N-(4S)-[4-アミノ-5-[2-(2-アミノエチル)フェニルアミノ]-ペンチル]-N'-ニトログアニジン、
N-(4S)-[4-アミノ-5-[3-(2-アミノエチル)フェニルアミノ]ペンチル]-N'-ニトログアニジン、
【００４３】
N-(4S)-[4-アミノ-5-[4-(2-アミノエチル)フェニルアミノ]ペンチル]-N'-ニトログアニジン、
N-(4S)-[4-アミノ-5-[(ピリジン-2-イル)メチル]アミノペンチル]-N'-ニトログアニジン、
N-(4S)-[4-アミノ-5-[(ピリジン-3-イル)メチル]アミノ]ペンチル-N'-ニトログアニジン、
N-(4S)-[4-アミノ-5-[(ピリジン-4-イル)メチル]アミノペンチル]-N'-ニトログアニジン、
N-(4S)-[4-アミノ-5-[(2-ピリジン-2-イル)エチル]アミノペンチル]-N'-ニトログアニジン、
【００４４】
N-(4S)-[4-アミノ-5-[(2-ピリジン-3-イル)エチル]アミノペンチル]-N'-ニトログアニジン、
N-(4S)-[4-アミノ-5-[(2-ピリジン-4-イル)エチルアミノ]ペンチル]-N'-ニトログアニジン、
L-ニトロArg-NH-(CH2)2-NH2、L-ニトロArg-NH-(CH2)3-NH2、L-ニトロArg-NH-(CH2)4-NH2、L-ニトロArg-NH-CH(CONH2)-(CH2)2-NH2、L-ニトロArg-NH-CH(CONH2)-(CH2)3-NH2およびL-ニトロArg-NH-CH(CONH2)-(CH2)4-NH2
を含む。
この態様のNOS阻害剤は、US 6,803,486に記載の方法に従って製造できる。
【００４５】
本発明のさらなる態様において、NOS阻害剤は、少なくとも一つ、好ましくは一つのNW-ニトロArgまたはその他の非天然のアミノ酸残基を含むジペプチドである。非天然のアミノ酸残基は、ジペプチドのN-またはC-末端のどちらかに位置することができ、D-またはL-立体配置のどちらかの状態をとり得る。この態様の好ましい観点において、N-末端基はNw-L-ニトロArgである。この態様のもう一つの好ましい観点において、C-末端基はNw-D-ニトロArgである。どちらの場合も、二番目のアミノ酸は、好ましくはその側鎖に-NH2基を有する。非天然のアミノ酸残基が一つだけ存在する場合、その他の残基はあらゆる天然のアミノ酸残基である得る。その他の残基もD-またはL-立体配置のどちらかの状態をとり得る。ジペプチドはエステル、アミドまたは他のペプチド模倣基(peptidomimetic group)の形態であり得る。
【００４６】
非天然のアミノ酸残基の例は、ニトロLys、オルニチン(Orn)、2,4-ジアミノブタン酸(Dbu)、2,3-ジアミノプロパン酸(Dpr)および置換されたアルギニンである。Argの置換基は、好ましくはC1-C6アルキルまたはC2-C6アルケニルである。その置換基は直鎖状、分枝鎖状または環状であり得る。Argの好ましい置換基はC1-C6アルキルである。
【００４７】
この態様の一つの好ましい観点において、ジペプチドはNw-ニトロArgの残基とPheを含む。N-末端にL-ニトロArgを有するジペプチドおよびDアミノ酸を含むメチルエステルジペプチドは、選択的nNOS阻害剤であるので好ましい。ニトロArgおよびPheを含む特に好ましいジペプチドは、D-Phe-L-ニトロArg、L-ニトロArg-L-Phe、L-ニトロArg-L-Phe-OMe、L-ニトロArg-L-Phe-OMe、D-ニトロArg-D-Phe-OMe、D-Phe-L-ニトロArg-OMe、L-Phe-D-ニトロArg-OMe、またはD-Phe-D-ニトロArg-OMeである。ニトロArgおよびPheを含むジペプチドのさらなる例は、L-Phe-L-ニトロArg、L-Phe-L-ニトロArg-OMe、L-ニトロArg-L-Phe-OBn、L-Phe-L-ニトロArg-OBn、L-ニトロArg-D-Phe-OMe、D-ニトロArg-L-Phe-OMeおよびD-Phe-D-ニトロArgである。
【００４８】
この態様のもう一つの観点において、そのジペプチドは一つのNw-ニトロArgおよびNw-ニトロArgまたはPhe以外の第二の残基を含むジペプチドアミドである。特に好ましいそのようなペプチドは、Nw-L-ニトロArg-L-Lys、N-L-ニトロArg-Nw-L-ニトロArg、L-Lys-Nw-D-ニトロArg、D-Lys-Nw-D-ニトロArg、L-His-N-D-ニトロArg、Nw-L-ニトロArg-D-Glu、Nw-D-ニトロArg-L-Ser、ならびにNw-L-ニトロArg-D-Asn、Nw-L-ニトロArg-L-Dpr、Nw-ニトロArg-L-Orn、Nw-L-ニトロArg-D-Orn、L-Dbu-Nw-D-ニトロArg、L-Orn-Nw-D-ニトロArgおよびD-Orn-Nw-D-ニトロArgである。好ましくは、Nw-ニトロアルギニンはL-Nw-ニトロアルギニンである。
【００４９】
この態様のもう一つの観点において、そのジペプチドはN-ニトロArgおよび2,4-ジアミノ酪酸(Dbu)を含む。これらのジペプチドの例は、L-ニトロArg-L-Dbu、L-ニトロArg-D-Dbu、D-ニトロArg-D-Dbu、D-Dbu-L-ニトロArg、D-Dbu-D-ニトロArgおよびD-ニトロArg-L-Dbuを含む。
【００５０】
この態様のさらなる観点において、そのジペプチドは、一つのN-ニトロArg残基とそのNまたはC、好ましくはN-ニトロArg残基のN末端に結合したアミノ-置換プロリンを含む。好ましいそのようなジペプチドは、L-ニトロArg-4-アミノ-Pro、特に4N-(L-ニトロArg)-L-トランス-4-ニトロProおよび4N-(L-ニトロArg)-D-トランス-4-ニトロProを含む。
この態様で記載されたジペプチドは、当業者に周知の方法により、例えばUS 6,274,557またはUS 6,803,486に記載されているようにして製造できる。
【００５１】
本発明のさらなる態様において、そのNOS阻害剤はアミジンである。好適なアミジンの例は、N-(1-イミノエチル)-L-オルニチン、N-(イミノ-3-ブテニル)-L-オルニチン、N-(1-イミノエチル)-L-リジン、2-アミノ-6-(1-イミノ-2-フルオロエチルアミノ)-4,4-ジオキソ-4-チオへキサン酸、N-(3-(アミノメチル)フェニル)アセトアミジン、N-(3-(アミノエチル)フェニル)アセトアミジン、N-(3-(アミノメチル)ベンジル)アセトアミジンおよびN,N'-(1,3-ベンジル)ビスアミジンを含む。これらの中で、N-(3-(アミノメチル)フェニル)アセトアミジンおよびN-(イミノ-3-ブテニル)-L-オルニチンがnNOSに対して選択的であり、したがって好ましい。
【００５２】
この態様のさらなる観点において、そのNOS阻害剤は、式：
【化４】
2008545616.tif 000005
【００５３】
［式中、
R1はNH2、NHCH3またはCH3、好ましくはNH2であり、そして
Aは-CH2CH=CH-、フェニルまたはフェニル-CH2-である（ここで、基Aの左手末端は、記載のように上記式のNHに結合する）］
の化合物である。
【００５４】
この態様のさらなる観点において、そのNOS阻害剤は、式：
【化５】
2008545616.tif 000006
（式中、R1はフラニルまたはチオフェニルであり、Aはフェニルである）
の化合物である。
【００５５】
この態様のアミジンは、当該技術分野で知られている方法に従って製造でき、いくつかのものは天然物である。この態様のアミジンのさらなる製造方法は、Leeら(Bioorg & Med. Chem, 1999, 7, 1097-1104)により検討されている。
【００５６】
本発明のさらなる態様において、そのNOS阻害剤は、式：
【化６】
2008545616.tif 000007
【００５７】
（式中、
R1はH、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルまたはフェニルであり、R1は置換されていないか、またはNH2およびR1がフェニルの場合は(CH2)nNH2（ここで、nは1または2である）から選択される一つまたは二つの置換基で置換されており、
R2およびR3は独立して水素またはメチル、好ましくは水素である）
のピラゾール誘導体である。
【００５８】
本発明のこの態様における好ましい阻害剤は、R2およびR3がHであり、R1がH、NH2で任意に置換されていてもよいC1-C4アルキルまたは一つのNH2もしくは(CH2)pNH2置換基で置換されたフェニルであるものである。特に好ましい阻害剤は、R2およびR3がHであり、R1がH、プロピル、-(CH2)4-NH2または2-アミノメチルフェニルであるものである。
【００５９】
本発明のさらなる態様において、その阻害剤は、式：
【化７】
2008545616.tif 000008
（式中、R1はHまたはフェニルであり、nは0、1、2、3または4である）
のイミダゾール含有アミノ酸である。
【００６０】
もう一つの態様において、そのnNOS阻害剤は、WO 97/36871；WO 2004/073712；US仮特許出願60/057739；WO 98/34919、およびWO 98/24766中で言及されているものの中の一つである。この態様のNOS阻害剤のその他の例は、WO 03/030993、US特許6,235,747、US特許6,465,491およびUS 6,803,470中に記載されている。前記の特許出願および特許はそれぞれ、そっくりそのまま、ここに参照として組み込まれる。
【００６１】
この態様の好ましいnNOS阻害剤は、次の式VIII：
【化８】
2008545616.tif 000009
【００６２】
［式中、
R1およびR2は独立して、水素、ハロ、ヒドロキシ、(C1-C6)アルコキシ、(C1-C7)アルキル、(C2-C6)アルケニル、および(C2-C10)アルコキシアルキルから選択され；
Gは水素、(C1-C6)アルキル、(C1-C6)アルコキシ-(C1-C3)アルキル、アミノカルボニル-(C1-C3)アルキル-、(C1-C3)アルキルアミノカルボニル-(C1,-C3)アルキル-、ジ-[(C1-C3)アルキル]アミノカルボニル-(C1-C3)アルキル-、およびN(R3)(R4)(C0-C4)アルキル-（ここで、R3およびR4は独立して、水素、(C1-C7)アルキル、テトラヒドロナフタレンおよびアラルキルから選択され、該アラルキルのアリール部分はフェニルまたはナフチルであり、アルキル部分は直鎖または分枝鎖状で、1〜6の炭素原子を含み、そして該(Cl-C7)アルキルおよび該テトラヒドロナフタレンならびに該アラルキルのアリール部分は、独立して、ハロ、ニトロ、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、(C1-C4)アルコキシ、および(Cl-C4)アルキルアミノから選択される1〜3の置換基で任意に、好ましくは0〜2の置換基で置換されていてもよいか；
【００６３】
またはR3およびR4はそれらが結合している窒素と一緒になって、ピペラジン、ピペリジン、アゼチジンまたはピロリジン環を形成するか、または1〜3の窒素、0〜2の酸素および残りは炭素を含む、6〜14員環を含む置換または無置換のアザビシクロ環系を形成し；
【００６４】
該ピペラジン、ピペリジン、アゼチジンおよびピロリジン環ならびに該アザビシクロ環系は独立して、(C1-C6)アルキル、アミノ、(C1-C6)アルキルアミノ、[ジ-(C1-C6)アルキル]アミノ、フェニルで置換された1〜4の環窒素原子を含む5〜6員のへテロ環、ベンゾイル、ベンゾイルメチル、ベンゾイルカルボニル、フェニルアミノカルボニル、フェニルエチルおよびフェノキシカルボニルから選択される1以上の置換基で任意に、好ましくは0〜2の置換基で置換されていてもよく、前記のいずれの置換基のフェニル部分は独立して、ハロ、(C1-C3)アルキル、(C1-C3)アルコキシ、ニトロ、アミノ、シアノ、CF3およびOCF3から選択される1以上の置換基で任意に、好ましくは0〜2の置換基で置換されていてもよく;
【００６５】
該ピペラジン、ピペリジン、アゼチジンおよびピロリジン環ならびに該アザビシクロ環系は、NR3R4環の窒素原子または可能な結合部位を有するそのような環の他のあらゆる原子で-(C0-C4)アルキル-O-に結合し得る）から選択されるか；
【００６６】
またはGは式Aの基であり：
【化９】
2008545616.tif 000010
（式中、Zは窒素またはCHであり、nは0または1であり、qは0、1、2または3であり、そしてpは0、1または2である）；
【００６７】
そして、前記構造Iで示した2-アミノピペリジン環は、
【化１０】
2008545616.tif 000011
で任意に置き換えられてもよい］
のものおよびそのような化合物の医薬的に許容される塩を含む。
【００６８】
この態様に有用なその他の好ましいnNOS阻害剤は、式(VI)：
【化１１】
2008545616.tif 000012
【００６９】
（式中、
R1はメチル、エチル、プロピル、ブチル、イソプロピル、2-メチルプロピル、t-ブチル、メトキシ、エトキシ、およびプロポキシから選択され；
R2は水素、メチル、エチル、プロピル、ブチル、イソプロピル、1-メチルプロピル、2-メチルプロピル、t-ブチル、メトキシ、エトキシ、およびプロポキシから選択され；
mは1、2または3であり；
【００７０】
R3およびR4は独立して、R7；フェニル；O、N、およびSから独立して選択される1〜4のヘテロ原子を含む5または6員のヘテロアリール；およびR6、-CF3、ハロ（すなわち、臭素、塩素、ヨウ素、フッ素）、-NR7R8、(C3-C6)シクロアルキル、O、N、およびSから独立して選択される1または2のヘテロ原子を含む3〜9員のヘテロシクロアルキル、フェニル、ならびにO、N、およびSから独立して選択される1〜4のヘテロ原子を含む5または6員のヘテロアリールから独立して選択される1〜3の置換基で置換された直鎖状または分枝鎖状の(C1-C6)アルキルから選択され；
【００７１】
R3およびR4の該フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキル基は、R6および1または2の二重結合もしくは三重結合を任意に含んでいてもよい直鎖状または分枝鎖状のC1-C6アルキルから独立して選択される1〜3の置換基で任意に独立して置換されていてもよいか；
【００７２】
またはR3およびR4は、それらが結合している窒素原子と一緒に、3〜9員のヘテロ環を形成し、そのヘテロ環は、該窒素原子に加えて1〜3のヘテロ原子を任意に含んでいてもよく、それら任意のヘテロ原子はO、S、およびNから独立して選択され;
【００７３】
R3およびR4により形成される該へテロ環は、ベンゼン環およびヘテロ芳香族環から独立して選択される1または2の芳香族環と任意に縮合して縮合環系を形成してもよく、それらの芳香族環は二つの炭素原子を該へテロ環と共有するか；またはR3およびR4により形成されるヘテロ環は、3〜8員の炭素環と任意に縮合して、1または2の炭素原子を該へテロ環と共有する縮合環またはスピロ環系（ここで、縮合環またはスピロ環系は15員環までを含む）を形成してもよく；
【００７４】
そして、該へテロ環、該任意の芳香環、および該任意の炭素環はそれぞれ、任意に独立して、R6、-O-(C1-C6アルキル)-R6、-S-(C1-C6アルキル)-R6、R6で任意に置換されていてもよい直鎖または分枝鎖状の(C1-C6)アルキル、-C(=O)O-((C1-C6)アルキル)、3〜6員のシクロアルキル、フェニル、ベンジル、および5または6員のヘテロアリールから独立して選択される1〜3の置換基で置換されていてもよく、ここで該シクロアルキル、フェニル、ベンジル、およびヘテロアリールは、R5から独立して選択される1〜3の置換基で独立して任意に置換されていてもよく；
【００７５】
R5はR6、直鎖または分枝鎖状の(C1-C6アルキル)、-(C1-C6アルキル)-R6、ならびにR6、-NR7R8、直鎖もしくは分枝鎖状の(C1-C6)アルキル、および(C1-C6)アルキル-R6から独立して選択される1または2の置換基で任意に置換されていてもよい5または6員のヘテロアリールから選択され；
【００７６】
R6は-O-R7および-S-R7から選択され；
R7はHおよび1または2の二重結合もしくは三重結合を任意に含んでいてもよい直鎖もしくは分枝鎖状の(C1-C6)アルキル（例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、イソプロピル、1-メチルプロピル、2-メチルプロピル、t-ブチル、ペンチル、3-メチルブチル、1,2-ジメチルプロピル、または1,1-ジメチルブチル）から選択され；そしてR8はHおよび直鎖または分枝鎖状の(C1-C6)アルキルから選択される）
の化合物および医薬的に許容されるそれらの塩である。
【００７７】
この態様に有用なその他の好ましいnNOS阻害剤は、次の化合物：
(a) 次の構造を有する、6-[4-(N-メチル-3-アゼチジンオキシ)-5-エチル-2-メトキシ-フェニル]-ピリジン-2-イルアミン、
【化１２】
2008545616.tif 000013
【００７８】
(b) 次の構造を有する、6-[4-(N,N-ジメチルアミノメチル)-5-エチル-2-メトキシ-フェニル]-ピリジン-2-イルアミン、
【化１３】
2008545616.tif 000014
【００７９】
(c) 次の構造を有する、6-[4-(N-メチルアミノメチル)-5-エチル-2-メトキシ-フェニル]-ピリジン-2-イルアミン、
【化１４】
2008545616.tif 000015
【００８０】
(d) 次の構造を有する、6-[4-(3-アゼチジンオキシ)-5-エチル-2-メトキシ-フェニル]-ピリジン-2-イルアミン、
【化１５】
2008545616.tif 000016
【００８１】
(e) 次の構造を有する、6-[4-(2-ジメチルアミノ-エトキシ)-5-エチル-2-メトキシ-フェニル]-ピリジン-2-イルアミン、
【化１６】
2008545616.tif 000017
およびそれらの医薬的に許容される塩である。
【００８２】
この態様に用いることができるNOS阻害剤のその他の例は、式：
【化１７】
2008545616.tif 000018
【００８３】
[式中、
R1およびR2は独立して、(C1-C6)アルキル、テトラヒドロナフタレンおよびアラルキルから選択され、ここで、該アラルキルのアリール部分はフェニルまたはナフチルであり、アルキル部分は直鎖または分枝鎖状で、1〜6の炭素原子を含み、ここで、該(C1-C6)アルキルおよび該テトラヒドロナフタレンならびに該アラルキルのアリール部分は、ハロ（例えばクロロ、フルオロ、ブロモ、ヨード）、ニトロ、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、(C1-C4)アルコキシ、および(C1-C4)アルキルアミノから選択される1〜3の置換基で任意に、好ましくは0〜2の置換基で置換されるか；
【００８４】
または、R1およびR2はそれらが結合している窒素と一緒になって、ピペラジン、ピペリジンもしくはピロリジン環または1〜3の窒素および残りは炭素である6〜14員環を含むアザビシクロ環を形成し、ここで、該アザビシクロ環の例は次の：
【００８５】
【化１８】
2008545616.tif 000019
【００８６】
（式中、R3およびR4は水素、(C1-C6)アルキル、フェニル、ナフチル、(C1-C6)アルキル-C(=O)-、HC(=O)-、(C1-C6)アルコキシ-(C=O)-、フェニル-C(=O)-、ナフチル-C(=O)-、および-(R7)2NC(=O)（ここで、R7はそれぞれ独立して、水素および(C1-C6)アルキルから選択される）から選択され；R5は水素、(C1-C6)アルキル、フェニル、ナフチル、フェニル-(C1-C6)アルキル-およびナフチル(C1-C6)アルキル-から選択される）
であり；そして
【００８７】
ここで、該ピペラジン、ピペリジンおよびピロリジン環は、(C1-C6)アルキルアミノ、[ジ(C1-C6)アルキル]アミノ、フェニルが置換した1〜4の環窒素原子を含む5〜6員へテロ環、ベンゾイル、ベンゾイルメチル、ベンジルカルボニル、フェニルアミノカルボニル、フェニルエチルおよびフェノキシカルボニルから独立して選択された1以上の置換基で任意に、好ましくは0〜2の置換基で置換され、ここで、前記のいずれの置換基のフェニル部分は、ハロ、(C1-C3)アルキル、(C1-C3)アルコキシ、ニトロ、アミノ、シアノ、CF3およびOCF3から独立して選択される1以上の置換基で任意に、好ましくは0〜2の置換基で置換され；
nは0、1または2であり；そして該(CH2)nのそれぞれの炭素は、置換基R8で任意に置換されていてもよく；
【００８８】
mは0、1、または2であり；そして該(CH2)mのそれぞれの炭素は、置換基R9；(C1-C4)アルキル、アリール-(C1-C4)アルキル（ここで、該アリールはフェニルおよびナフチルから選択される）；アリルおよびフェンアリルで任意に置換されていてもよく；
XおよびYは独立して、メチル、メトキシ、ヒドロキシおよび水素から選択され；そして
R10はH、(C1-C6)アルキルである；
但し、nが0のときR8は存在せず、mが0のときR9は存在しない]
の化合物である。
【００８９】
式VIIの化合物は、US特許6,235,747、およびUS特許6,465,491に開示され、それらの合成が記載されており、両方、前述され、ここに参照として組み込まれる。
【００９０】
この態様において有用なその他のnNOS阻害剤は、式：
【化１９】
2008545616.tif 000020
［式中、
R1およびR2は独立して、水素、ハロ、ヒドロキシ、(C1-C6)アルコキシ、(C1-C7)アルキル、(C2-C6)アルケニル、および(C2-C10)アルコキシアルキルから選択され；
Gは水素、(C1-C6)アルキル、(C1-C6)アルコキシ-(C1-C3)アルキル、アミノカルボニル-(C1-C3)アルキル-、(C1-C3)アルキルアミノカルボニル-(C1-C3)アルキル-、ジ-[(C1-C3)アルキル]アミノカルボニル-(C1-C3)アルキル-、およびN(R3)(R4)(C0-C4)アルキル（ここで、R3およびR4は独立して、水素、(C1-C7)アルキル、テトラヒドロナフタレンおよびアラルキル（ここで、該アラルキルのアリール部分はフェニルまたはナフチルであり、アルキル部分は直鎖状または分枝鎖状で、1〜6の炭素原子を含み、該(C1-C7)アルキルおよび該テトラヒドロナフタレンならびに該アラルキルのアリール部分は、ハロ、ニトロ、ヒドロキシ、シアノ、アミノ、(C1-C4)アルコキシ、および(C1-C4)アルキルアミノから独立して選択される1〜3の置換基で任意に、好ましくは0〜2の置換基で置換される）から選択されるか；
【００９１】
または、R3およびR4はそれらが結合している窒素と一緒になって、ピペラジン、ピペリジン、アゼチジンもしくはピロリジン環または1〜3の窒素、0〜2の酸素および残りは炭素である6〜14員環を含む飽和もしくは不飽和のアザビシクロ環系を形成し、
【００９２】
ここで、該ピペラジン、ピペリジン、アゼチジンおよびピロリジン環ならびに該アザビシクロ環系は、(Cl-C6)アルキル、アミノ、(C1-C6)アルキルアミノ、[ジ-(C1-C6)アルキル]アミノ、フェニルで置換された1〜4の環窒素原子を含む5〜6員ヘテロ環、ベンゾイル、ベンゾイルメチル、ベンジルカルボニル、フェニルアミノカルボニル、フェニルエチルおよびフェノキシカルボニルから独立して選択される1以上の置換基で任意に、好ましくは0〜2の置換基で置換され、ここで、前記のいずれの置換基のフェニル部分は、ハロ、(C1-C3)アルキル、(C1-C3)アルコキシ、ニトロ、アミノ、シアノ、CF3およびOCF3から独立して選択される1以上の置換基で任意に、好ましくは0〜2の置換基で置換され；
【００９３】
そして、ここで該ピペラジン、ピペラジン、ピペリジン、アゼチジンおよびピロリジン環ならびに該アザビシクロ環系は、NR3R4環の窒素原子または可能な結合部位を有するそのような環の他のあらゆる原子で-(C0-C4)アルキル-O-と結合し得るか；
【００９４】
または、式Aの基であり：
【化２０】
2008545616.tif 000021
（式中、Zは窒素またはCHであり、nは0または1であり、qは0、1、2または3であり、そしてpは0、1または2である）；
【００９５】
そして、前記構造Iで示した2-アミノピペリジン環は、
【化２１】
2008545616.tif 000022
で任意に置き換えられてもよい］
の化合物およびそのような化合物の医薬的に許容される塩である。
【００９６】
式IXの化合物は、USシリアル番号09/127,158に開示され、それらの合成が記載されており、上記の参照としてここに組み込まれる。
別に示されていない限り、上記のNOS阻害剤は、商業的に入手可能であるか、または既知の方法から類推して製造され得る。
【００９７】
本阻害剤は、前記化合物の医薬的に許容される塩であってもよい。好適な塩は、医薬的に許容される酸、例えば塩酸、硫酸、リン酸、二リン酸、臭化水素酸または硝酸のような無機酸およびクエン酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、コハク酸、酒石酸、安息香酸、酢酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸またはp-トルエンスルホン酸のような有機酸の両方の酸との塩を含む。塩は、アルカリ金属（例えばナトリウムまたはカリウム）およびアルカリ土類金属（例えばカルシウムまたはマグネシウム）の水酸化物およびアルキルアミン、アラルキルアミンまたはヘテロ環アミンのような有機塩基のような医薬的に許容される塩基と形成してもよい。
【００９８】
nNO合成酵素の選択的阻害剤は、種々の投与形態で投与され得る。したがって、それらは、例えば錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性または油性の懸濁液、分散粉末または顆粒として、経口的に投与可能である。本阻害剤は、皮下、静脈内、筋肉内、胸骨内(intrasternally)、経皮または点滴法のどちらかにより非経口的に投与もされ得る。本阻害剤は、鼻腔内または吸入により投与され得る。本阻害剤は坐剤として投与もされ得る。
【００９９】
選択的nNO合成酵素阻害剤は、一般的に、医薬的に許容される担体または希釈剤と一緒に、本発明の投与用として製剤化される。例えば、固形の経口剤型は、活性化合物と一緒に、例えば乳糖、デキストロース、ショ糖、セルロース、トウモロコシ澱粉または馬鈴薯澱粉のような希釈剤；例えばシリカ、タルク、ステアリン酸、マグネシウムもしくはカルシウムのステアリン酸塩、および／またはポリエチレングリコールのような滑沢剤；澱粉、アラビアゴム、ゼラチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースまたはポリビニルピロリドンのような結合剤；例えば澱粉、アルギン酸、アルギネートまたはナトリウム澱粉グリコレートのような解離剤(disaggregating agents)；飽和剤；染料；甘味料；レシチン、ポリソルベート、ラウリルサルフェートのような湿潤剤；および一般的に、医薬製剤において用いられる無毒性でかつ薬理学的に不活性な物質を含み得る。そのような製剤は、例えば混合、造粒化、錠剤化、糖コーティング、またはフィルムコーティング法による既知の方法で製造され得る。
【０１００】
経口投与用分散液は、シロップ、乳液および懸濁液であり得る。シロップは担体として、例えばショ糖またはグリセリンおよび／もしくはマンニトールおよび／もしくはソルビトールと一緒のショ糖を含み得る。
【０１０１】
懸濁液および乳液は担体として、例えば天然ゴム、寒天、アルギン酸ナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、またはポリビリルアルコールを含み得る。筋肉内注射用懸濁液または溶液は、活性物質と一緒に、例えば滅菌水、オリーブ油、オレイン酸エチル、グリコール（例えばポリエチレングリコール）のような医薬的に許容される担体、および必要なら、適当な量のリドカイン塩酸塩を含み得る。
【０１０２】
静脈内投与または点滴用溶液は担体として、例えば滅菌水を含んでもよく、好ましくは、それらは無菌の、水性の、等張食塩溶液の形態であり得る。
【０１０３】
選択的nNO合成酵素阻害剤の治療的に有効な量が患者に投与される。典型的な一日用量は、具体的な阻害剤の活性、治療される患者の年齢、体重および健康状態、ジスキネジーのタイプおよび重篤度、いかなる抗パーキンソン病の同時治療ならびに投与回数および投与経路により、体重1kg当たり約0.1〜50 mgである。好ましくは、一日の用量は、例えば2〜30 mg（例えば5〜20 mgまたは8〜20 mg）のような1 mg〜50 mgである。本選択的nNOS阻害剤は、その阻害剤がL-ドーパまたはドーパミンアゴニストの共投与なしに単独で投与されるとき、それ自身で、ドーパミン欠乏病、特にパーキンソン病の運動不全症状に対して有効な治療を示さない用量で投与され得る。本選択的nNOS阻害剤は、その阻害剤がL-ドーパまたはドーパミンアゴニストの共投与なしに単独で投与されるときに、以下の実施例に記載された動物モデルで自発運動を変化させないか、または運動不全を改善しない用量で投与され得る。
【０１０４】
本発明の一つの態様において、(a)L-ドーパまたは(b)ドーパミンアゴニストまたは(c)L-ドーパおよびドーパミンアゴニストの両方が、選択的nNO合成酵素阻害剤と組み合わせて投与される。この態様において、パーキンソン病の治療は、L-ドーパおよび／またはドーパミンアゴニストの投与により成され、一方、ジスキネジーの潜在的副作用はnNO合成酵素阻害剤の投与により阻害される。それゆえ、本発明は、医薬的に許容される担体または希釈剤と一緒に、(i)L-ドーパおよび／またはドーパミンアゴニストおよび(ii)nNO合成酵素の医薬的に許容される選択的阻害剤を含む医薬製剤を提供する。好ましい製剤は、ドーパミンアゴニストと一緒にまたは無しのどちらかでL-ドーパを含む。適当な医薬的に許容される担体および希釈剤は、前記のものである。
【０１０５】
L-ドーパは医薬的に許容される塩の形態で投与され得る。適当な塩は、前記の酸および塩基とで形成されるものである。あるいは、L-ドーパは、医薬的に許容される誘導体、例えば医薬的に許容されるエステルの形態で投与され得る。
【０１０６】
ドーパミンアゴニストは、一般的に、体内でドーパミンと似た効果を示し、ドーパミン受容体と結合する医薬的に許容されるあらゆる化合物である。好ましくは、ドーパミンアゴニストはD2受容体と結合する。ドーパミンアゴニストの例は、ブロモクリプチン、ペルゴリド、ロピニロール、プラミペキソールおよびカベルゴリンを含む。これらの化合物は、パーキンソン病の治療用として市場で入手可能である。代わりのドーパミンアゴニストも用いられ得る。それらのドーパミンアゴニストは塩の形態で用いられ得る。適当な塩は、NO合成酵素阻害剤に関して前に記載の酸および塩基とで形成されるものである。
【０１０７】
ドーパミンアゴニストは、スクリーニング、例えば動物の全部または部分を用いた評価により確認できる。したがって、例えば候補化合物は、選択された動物群、例えばドーパミンのレベルが抑えられた動物に投与され、その生じる効果が観察され得る。コントロール実験は、(a)ロピニロールのような既知のドーパミンアゴニスト（ポジティブコントロール：100％アゴニスト活性）および(b)プラセボ（ネガティブコントロール：0のアゴニスト活性）を用いて行われ得る。
【０１０８】
ここで用いられるように一般的に、ドーパミンアゴニストは、上記の評価において少なくとも50％、例えば少なくとも80％またはロピニロールが用いられたときに観察される実質的に100％のアゴニスト活性を与える。
【０１０９】
その製剤がL-ドーパを含む場合、それは、(iii)末梢の脱炭酸酵素阻害剤も含み得る。末梢の脱炭酸酵素阻害剤は、末梢のドーパ-脱炭酸酵素(DDC)をブロックすることによりL-ドーパのドーパミンへの末梢の変換を妨げるかまたは減じる。次に、これはより高量のL-ドーパが脳に達することを保証する。この発明の文脈において、末梢は大脳の外を意味する。
【０１１０】
末梢の脱炭酸酵素阻害剤の例は、L-ドーパと組み合わせてパーキンソン病の治療用として市場で両方とも入手可能なカルビドパおよびベンセラジドを含む。代わりの末梢の脱炭酸酵素阻害剤も用いられ得る。
【０１１１】
末梢の脱炭酸酵素阻害剤は、動物の全部または部分を用いた評価によるスクリーニングによって確認できる。例えば、選択された動物群に、L-ドーパと一緒に候補化合物を投与し、その生じる効果を観察することを含むマウス全体による評価が用いられ得る。コントロール実験は、(a)L-ドーパと一緒にカルビドパのような既知の末梢の脱炭酸酵素阻害剤および(b)L-ドーパのみを用いて行われ得る。次いで、候補化合物の試験ならびにコントロール(a)（ポジティブコントロール：DDCの阻害）および(b)（ネガティブコントロール：0阻害）の結果の比較が行われ得る。例えば、L-ドーパが動物の脳に影響を及ぼす時間が各ケースについて測定され得る。
【０１１２】
ここで用いられるように、一般的に、末梢の脱炭酸酵素阻害剤は、上記の評価で少なくとも50％、例えば少なくとも80％またはカルビドパで観測される実質的に100％の阻害を示す化合物である。
【０１１３】
末梢の脱炭酸酵素阻害剤は、医薬的に許容される塩の形態で投与され得る。適当な塩は、前記の酸および塩基を用いて形成されるものである。
【０１１４】
本発明は、パーキンソン病の治療用医薬の製造において、(i)L-ドーパおよび／またはドーパミンアゴニストならびに(ii)nNO合成酵素の医薬的に許容される選択的阻害剤を、そして任意に(iii)末梢の脱炭酸酵素阻害剤と一緒の使用も提供する。
【０１１５】
患者に(i)L-ドーパの有効量および／またはドーパミンアゴニストの有効量ならびに(ii)nNO合成酵素の医薬的に許容される選択的阻害剤の有効量を、そして任意に(iii)末梢の脱炭酸酵素阻害剤の有効量を投与することを含む、該患者へのパーキンソン病の治療方法も提供する。通常、各化合物の安全でかつ有効な量が投与される。
【０１１６】
(i)L-ドーパおよび／またはドーパミンアゴニスト、(ii)nNO合成酵素の医薬的に許容される選択的阻害剤、ならびに任意に(iii)末梢の脱炭酸酵素阻害剤を含むパーキンソン病の治療剤も提供する。
【０１１７】
本発明の製剤は、通常、前記のようにNO合成酵素阻害剤の一日用量を与える形式で提供される。投与がL-ドーパと組み合わされる場合、L-ドーパの治療的に有効な量が投与される。典型的な一日用量は、治療される患者の年齢、体重および健康状態、パーキンソン病のタイプおよび重篤度ならびに投与の回数および経路により、体重1kg当たり約0.1〜50 mgである。好ましくは、一日用量のレベルは、1 mg〜50 mg、例えば2〜20 mgである。
【０１１８】
投与がドーパミンアゴニストと組み合わされる場合、ドーパミンアゴニストの治療的に有効な量が投与される。典型的な一日用量は、具体的なアゴニストの活性、治療される患者の年齢、体重および健康状態、パーキンソン病のタイプおよび重篤度ならびに投与の回数および経路により、体重1kg当たり約0.01〜10 mgである。好ましくは、一日用量のレベルは、0.02 mg〜5 mg、例えば0.05〜1 mgである。例えば1kg当たり、0.02 mg〜1 mgまたは0.05 mg〜0.5 mg。
【０１１９】
投与が末梢の脱炭酸酵素阻害剤と組み合わされる場合、末梢の脱炭酸酵素阻害剤の治療的に有効な量が投与される。典型的な一日用量は、具体的な阻害剤の活性、治療される患者の年齢、体重および健康状態、パーキンソン病のタイプおよび重篤度、投与されるL-ドーパの量ならびに投与の回数および経路により、体重1kg当たり約0.1〜50 mgである。好ましくは、一日用量のレベルは、1 mg〜50 mg、例えば2〜20 mgである。例えば1kg当たり、1 mg〜50 mg、2〜20 mg（例えば5〜20 mg）または8 mg〜20 mg。
【０１２０】
L-ドーパとドーパミンアゴニストが組み合わされて投与される場合、一方または両方の化合物の用量は減少し得る。特に、L-ドーパは、例えば1kg当たり0.05〜30 mg（例えば0.1〜20 mg）、0.5〜10 mgまたは0.5〜5 mgの減少した量で投与され得る。この態様において、いかなる末梢の脱炭酸酵素阻害剤は、例えば1kg当たり0.05〜30 mg（例えば0.1〜20 mg）、0.5〜10 mgまたは0.5〜5 mgの減少した量で投与もされ得る。
【０１２１】
選択的nNO合成酵素阻害剤は、L-ドーパと同時に、連続的にまたは別々に投与され得る。したがって、本発明は、パーキンソン病の治療において同時に、別々にまたは連続して使用するための、L-ドーパおよびNO合成酵素の医薬的に許容される選択的阻害剤を含む製品を提供する。ドーパミンアゴニストおよび／または末梢の脱炭酸酵素阻害剤は、これらの化合物と組み合わせて、同時に、別々にまたは連続的のいずれでも投与され得る。
【０１２２】
選択的nNO合成酵素阻害剤は、ドーパミンアゴニストと同時に、連続的にまたは別々にも投与され得る。したがって、本発明は、パーキンソン病の治療において同時に、別々にまたは連続して使用するための、ドーパミンアゴニストおよびNO合成酵素の医薬的に許容される阻害剤を含む製品を提供する。L-ドーパおよび任意に末梢の脱炭酸酵素阻害剤は、これらの化合物と組み合わせて、同時に、別々にまたは連続的のいずれでも投与され得る。
【０１２３】
本発明は、パーキンソン病の治療で、L-ドーパおよび／またはドーパミンアゴニストと共投与用の医薬の製造において、NO合成酵素の医薬的に許容される選択的阻害剤の使用も提供する。さらに、本発明は、パーキンソン病の治療で、nNO合成酵素の医薬的に許容される選択的阻害剤と共投与用の医薬の製造において、L-ドーパおよび／またはドーパミンアゴニストの使用を提供する。L-ドーパが投与される場合、末梢の脱炭酸酵素阻害剤と共投与され得る。
【０１２４】
医薬が別々に投与される場合、各化合物は、通常、前記の投与形態の一つに別々に製剤化される。各化合物に対して、同じかまたは異なる投与形態が用いられ得る。各化合物の適当な用量は、医薬製剤に関して前に記載したものである。任意に、二以上の医薬が、単一製剤で同時に投与され得るが、少なくとも一つの医薬は別々に投与される。
【０１２５】
各化合物の投与は任意の順序で行われ得る。例えば、L-ドーパは末梢の脱炭酸酵素阻害剤と実質的に同時に投与され得るが、選択的nNO合成酵素阻害剤は、実質的に同時またはその後のどちらかで投与され得る。同様に、ドーパミンアゴニストは、選択的nNO合成酵素阻害剤と実質的に同時にまたはその前に投与され得る。この発明の文脈において、実質的に同時とは2時間以内、好ましくは1時間以内または30分以内を意味する。したがって、例えば末梢の脱炭酸酵素阻害剤は、L-ドーパより前の2時間まで、例えば1時間までに投与される。
【０１２６】
一般的に、各医薬は24時間まで、好ましくは12時間までまたは6時間までの期間内に投与される。例えば、L-ドーパはNO合成酵素阻害剤の前の24時間まで、例えば12時間までまたは6時間までに投与され得るか、またはNO合成酵素阻害剤は、L-ドーパの前の24時間まで、たとえば12時間までまたは6時間までに投与され得る。同様に、末梢の脱炭酸酵素阻害剤は、L-ドーパの前または後の24時間まで、例えば12時間までまたは6時間までに投与され得る。
【実施例】
【０１２７】
以下の実施例は本発明を説明する。
参考例
以下の操作において、全てのNOS阻害剤（nNOSi）は皮下投与された。7-ニトロインダゾールを除いて他のすべての薬物は脱イオン水に溶解されるか、または経口投与に対しては10％ショ糖を含む脱イオン水に溶解され、経口で投与された。7-ニトロインダゾールは、水とDMSOの30：70 v/vに溶解された。ロピニロールを用いた実験において、動物は、30分前に、制吐剤としてドンペリドンの単回経口量（5 mg.kg-1）で前処理がされた。カルビドパおよびドンペリドンは、脱イオン水および10％ショ糖中に懸濁させた。
【０１２８】
運動不全の誘発およびジスキネジー誘発の呼び水(priming)
この研究において、体重310〜380 gのどちらかの性の大人の普通のマーモセット(Callithrix Jacchus；n=6)を用いた。マーモセットは、12時間の明暗サイクルで50％の相対湿度、25±1℃の温度で対または個別のどちらかで収容した。動物は一日一回、新鮮な果物、ナッツ、Mazuriフードペレット、およびビタミンD3の栄養補助食品の食餌で飼育され、水の摂取は自由にした。実験日に、動物は行動試験の終了に続いて食餌が与えられた。
【０１２９】
MPTP処理
マーモセットは、5日間連続で毎日、1-メチル-4-フェニル-1,2,3,6-テトラヒドロピリジン塩酸塩(皮下に2.0 mg.kg-1；MPTP-HCl；Research Biochemicals International；0.9％無菌生理食塩水に溶解)で処理された。この処理法は、運動不能、運動緩慢、硬直、姿勢異常、協調運動不能および姿勢振戦の持続的で安定な症候群を誘発する(JennerおよびMarsden, 1986; Pearceら、1995)。動物は、体重が前処理レベルに戻るまで、Mazuriマーモセットゼリー、粉ミルクおよびバナナピューレのカクテルを手で食べさせた。
【０１３０】
MPTPの最後の投与に続いて、全ての動物は著しい運動不全を示し、異常な猫背の姿勢、運動不能、硬直、失声、および姿勢振戦を示した。MPTP処理後5週間で、動物はいくつかの運動機能を回復し、独力で身づくろい、摂餌および飲むことができるようになった。実験は、「Animals (Scientific Procedures) Act 1986」およびHome Office規則(ライセンス番号PPL 3563)に従って行なわれた。
【０１３１】
ジスキネジー誘発の呼び水
MPTP処理後8週間、全ての動物(n=6)は、12.5 mg.kg-1のL-ドーパメチルエステル(Sigma)と12.5 mg.kg-1のカルビドパ(Merck Sharp & Dohme)で、毎日、経口強制栄養法で30〜40日間処理された。カルビドパはL-ドーパ処理の30〜45分前に投与された(Pearceら、1995)。動物がジスキネジーになったとき、L-ドーパ／カルビドパの組合せの毎日の服用を一週間に一回の処理に変えた。この時点において、一週間に一回のL-ドーパ／カルビドパ処理は、毎日の呼び水期間の最後に生じたと同じようなレベルのジスキネジーを生じた。
【０１３２】
実施例１〜８
L-ドーパ誘発の自発運動量、運動障害およびジスキネジー（舞踏病および失調症）への変化対する一酸化窒素阻害剤(NOSi)、L-ニトロアルギニン(L-NAME；Sigma)、Lw-プロピルアルギニン(LPA；Tocris-Cookson)または7-ニトロインダゾール(7-NI；Sigma)の効果が研究された。L-NameおよびLPAはnNOSの選択的阻害剤ではないが、7-NIはnNOSの選択的阻害剤である。参考例のL-ドーパで呼び水されたMPTP処理動物(n=6)は、12.5 mg.kg-1のカルビドパ投与に続いて30〜45分後に、12.5 mg.kg-1のL-ドーパと10％ショ糖(実施例１)またはL-ドーパとnNOSi(L-NAME：実施例３〜５；LPA：実施例６および７；ならびに7-NI 実施例８)のいずれかが共投与された。各実施例においてなされた処理を次の表１に要約する。
【０１３３】
【表１】
2008545616.tif 000023
【０１３４】
行動評価
自発運動量：自発運動量は、一連の8つの赤外フォトセンサー(photo sensors)を備えた試験ケージ（前面がパースペクスのアルミケージ、50×60×70 cm）中で測定された。運動により光線が遮られた数が計測され、IntelベースのPCに取り付けられたアナログからデジタルへのコンバータを用いて10分間隔で貯蔵所に集積された。自発運動量は6時間かけて測定され、10分の時間区分で起こった光線の遮断の数を測定して時間的経過としてまたは試験期間中での光線遮断の全数としての両方で表わした。
【０１３５】
運動障害：それぞれの日の運動障害を評価するために、次の観察者評定尺度：敏捷（0〜2）；動作チェッキング(checking)（0〜2）；姿勢（0〜4）；平衡性（0〜3）；運動性（0〜2）；刺激への反応（0〜3）および発声（0〜2）を用いた。
障害点数は、観察される各パラメータの個々の点数の加算によって得られた。点数0が正常な点数を示し、点数18が最大の運動障害を示す。実験日に、運動障害は240分までの期間10〜20分毎に記録された。運動障害点数は、時間的経過のグラフとして図示されるか、あるいは各実験日の全運動障害の平均として表わされた。
【０１３６】
ジスキネジー：慢性的L-ドーパ処理に続く、舞踏病（速いランダムな細かく震える動き）および失調症（異常な持続的姿勢）の形態における異常な動作が、観察者評価によって記録された。各パラメータは、前に報告されている（Pearceら、1995）ように0（ジスキネジー不存在）〜4（正常な行動に置き換わった著しい連続的なジスキネジー活性）の尺度で記録された。舞踏病と失調症の組合せからなるジスキネジーの測定も記録された。この場合も0〜4の尺度で評価された。失調症、舞踏病およびジスキネジーの記録は、動物が自発運動量を観察されているときに、運動障害と同時に行なわれた。
【０１３７】
結果
結果は平均±SEMで表わされる。自発運動量からのデータは、各時点で、ビークル(vehicle)処理コントロールと異なる用量のNOSiの効果の比較のために、反復測定一方向(repeated measures one way)ANOVAを用いて解析された。有意なF値を得るときに、Newman-Keuls多重比較試験が行なわれた。非母数の運動障害、舞踏病および失調症の点数が、Freidman試験、次いでDunn多重比較試験を用いて比較された。
【０１３８】
図１は、ビークル（実施例１）、L-ドーパ単独（実施例２）および2、6または20 mg/kgのL-NAMEを含む実施例３〜５の行動試験の結果を示す。本結果は、L-ドーパ単独で処理されたものと比較して、L-NAME処理動物の自発運動量における顕著な減少ならびに舞踏病、失調症および運動障害における減少も示す。同様の結果が、LPAを用いた実施例６および７に対する図２、および7-NIを用いた実施例８に対する図３で示される。
【０１３９】
図４および５は、図１および２の結果の要約を与え、実施例１〜７（全ジスキネジーに対して実施例２〜７）の各々に対する全自発運動量、全運動障害および全ジスキネジーを示している。
【０１４０】
実施例９および１０
さらなる実験において、DA D3/D2アゴニスト、ロピニロール(GSK) 100 μg.kg-1、p.oと制吐剤として用いられる1 mg.kg-1のドンペリドンにより引き起こされる運動効果へのNOSiの効果を測定した。用いられた処理は、次の表２に提示されたものであった。
【０１４１】
【表２】
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【０１４２】
処理された動物は、前記の行動評価に付され、その結果を図６に示す。図６はドーパミンアゴニスト誘発ジスキネジーの減少におけるL-NAMEの有効性を示す。図６と図１の比較は、ドーパミンアゴニスト誘発ジスキネジーに比較して、L-ドーパ誘発ジスキネジーへのL-NAMEのより高い活性を示す。
【０１４３】
実施例１１
選択的eNOS阻害剤 N5-(1-イミノメチル)-L-オルニチン2HCl、("L-NIO")が、参考例および実施例１〜８と同じ試験プロトコルを用いて試験された。その結果を図７（ここで、自発運動の結果は図７ａ、運動障害の結果は図７ｂ、舞踏病の結果は図７ｃおよび失調症の結果は図７ｄである）に図示する。これらの結果は、試験された選択的eNOS阻害剤はL-ドーパ誘発ジスキネジーを減少しなかったことを示す。
【０１４４】
実施例１２
選択的iNOS阻害剤 S-(2-アミノエチル)-イソチオウレア("S-(2-アミノエチル)-ITU")、およびS,S'-1,3-フェニレン-ビス(1,2-エタンジル)-ビス-イソチオウレア("1,3 PB-ITU")が、参考例および実施例１〜８の試験プロトコルで、6 mg/kg s.cで試験された。その結果を図８(1,3 PB-ITU)および９(S-(2-アミノエチル)-ITU)に図示する（ここで、自発運動の結果は図８ａおよび９ａ、運動障害の結果は図８ｂおよび９ｂ、舞踏病の結果は図８ｃおよび９ｃ、ならびに失調症の結果は図８ｄおよび９ｄである）。これらの結果は、試験された選択的iNOS阻害剤はL-ドーパ誘発ジスキネジーを減少しなかったことを示す。
【０１４５】
実施例１３
選択的nNOS阻害剤 L-N5-(1-イミノ-3-ブテニル)-オルニチン("ビニル L-NIO")が、参考例および実施例１〜８と同じ試験プロトコルを用いて6 mg/kgで試験された。その結果を図１０に図示する（ここで、自発運動の結果は図１０ａ、運動障害の結果は図１０ｂ、舞踏病の結果は図１０ｃ、および失調症の結果は図１０ｄである）。これらの結果は、実施例８における7-NIのように、試験された選択的nNOS阻害剤はL-ドーパ誘発ジスキネジーを減少しなかったことを示す。
【図面の簡単な説明】
【０１４６】
【図１】マーモセット動物モデルでのNOS阻害剤L-NAMEの自発運動量、運動障害、舞踏病および失調症に対する効果を示したものである。
【図２】マーモセット動物モデルでのNOS阻害剤LPAの自発運動、運動障害、舞踏病および失調症に対する効果を示したものである。
【図３】マーモセット動物モデルでのNOS阻害剤7-NIの自発運動量、運動障害、舞踏病および失調症に対する効果を示したものである。
【０１４７】
【図４】L-NAMEおよびLPAを用いた運動機能試験の結果をまとめたものである。
【図５】L-NAMEおよびLPAを用いた全ジスキネジー、全失調症および全舞踏病試験の結果をまとめたものである。
【図６】マーモセット動物モデルでのドーパミンアゴニス ロピニロールおよびNOS阻害剤L-NAMEの自発運動量、運動障害、舞踏病および失調症に対する効果を示したものである。
【０１４８】
【図７】マーモセット動物モデルでのeNOS阻害剤L-NIOの自発運動、運動障害、舞踏病および失調症に対する効果を示したものである。
【図８】マーモセット動物モデルでのiNOS阻害剤1,3-PB-ITUの自発運動、運動障害、舞踏病および失調症に対する効果を示したものである。
【図９】マーモセット動物モデルでのiNOS阻害剤S-(2-アミノエチル)-ITUの自発運動、運動障害、舞踏病および失調症に対する効果を示したものである。
【０１４９】
【図１０】マーモセット動物モデルでのnNOS阻害剤ビニルL-NIOの自発運動、運動障害、舞踏病および失調症に対する効果を示したものである。
【図１１】本発明に従って使用できるnNOS阻害剤を表わしたものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【国際調査報告】
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