(57)【要約】  本発明は、一般構造Ｉによって表される新たなマクロライド化合物（式中、Ｍは、マクロライドであり、Ｐは、ビオチンを含む光親和性基保持サブユニットであり、Ｌは、連結分子である）、ならびにそれらの医薬として許容できる塩および溶媒和物、それらを調製するためのプロセスおよび中間体、ならびにマクロライド標的同定用のこれらの化合物の使用に関する。
2008526952.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2008526952.tif 000045
Ｉ
［式中：
Ｌは連結分子であり；および
Ｍは下位構造式ＩＩ：
【化２】
2008526952.tif 000046
ＩＩ
（式中：
（ｉ）ＺおよびＷは、独立して、
【化３】
2008526952.tif 000047
または結合であり；
ここで、
ＲｔおよびＲｓは、独立して、Ｈまたはアルキルであり；
ＲＭはＯＨ、ＯＲＰ、アルコキシまたは置換アルコキシであり；
ＲＮはＨ、ＲＰ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルコキシアルキルまたは−Ｃ（＝Ｘ）−ＮＲｔＲｓであり；および
ＸはＯまたはＳである；
ただし、
ＺおよびＷの両方が、同時に、
【化４】
2008526952.tif 000048
または結合であることはなく；
（ｉｉ）ＵおよびＹは、独立して、Ｈ、ハロゲン、アルキルまたはヒドロキシアルキルであり；
（ｉｉｉ）Ｒ１はヒドロキシ、ＯＲＰ、−Ｏ−Ｓ２または＝Ｏであり；
（ｉｖ）Ｓ１は、Ｃ／５位にある、Ｈまたは式：
【化５】
2008526952.tif 000049
（式中：
Ｒ８およびＲ９は共に水素であるか、一緒になって結合を形成するか、あるいはＲ９は水素であり、Ｒ８は−Ｎ（ＣＨ３）ＲＹであり、
ＲＹはＲＰ、ＲＺまたは−Ｃ（Ｏ）ＲＺであり、ここでＲＺは水素、シクロアルキル、アルキル、アルケニル、アルキニルまたはヘテロアリールであるか、あるいはＣ２−Ｃ７アルキル、Ｃ２−Ｃ７アルケニル、Ｃ２−Ｃ７アルキニル、アリールまたはヘテロアリールで置換されているアルキルであり；
Ｒ１０は水素またはＲＰである）
で示される糖部分であり；
（ｖ）Ｓ２は式：
【化６】
2008526952.tif 000050
（式中：
Ｒ３’はＨまたはメチルであり、Ｒ１１は水素、ＲＰ、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｑＮＲ４Ｒ６であるか、あるいはＯ−Ｒ１１はＲ１２およびＣ／４”炭素原子と一緒になって＞Ｃ＝Ｏまたはエポキシ基を形成する基であり；Ｒ１２は水素またはＯ−Ｒ１１およびＣ／４”炭素原子と一緒になって＞Ｃ＝Ｏまたはエポキシ基を形成する基であり；
ｑは１ないし６の整数である）
で示される糖部分であり；
（ｖｉ）Ｒ２はＨ、ヒドロキシ、ＯＲＰ基、アルコキシまたは置換アルコキシであり；
（ｖｉｉ）ＡはＨまたはメチルであり；
（ｖｉｉｉ）Ｂはメチルまたはエポキシであり；
（ｉｘ）ＥはＨまたはハロゲンであり；
（ｘ）Ｒ３はヒドロキシ、ＯＲＰ基またはアルコキシ、置換アルコキシであるか、あるいはＲ３はＲ５と一緒になって「架橋」を形成することのできる基であるか、あるいはＷまたはＺが
【化７】
2008526952.tif 000051
である場合、Ｒ３はＷまたはＺと一緒になって「架橋」を形成しうる基であり；
（ｘｉ）Ｒ４はＣ１−Ｃ４アルキルであり；
（ｘｉｉ）Ｒ５がＨ、ヒドロキシ、ＯＲＰ基、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、置換アルコキシまたはＲ３と一緒になって架橋を形成しうる基であり；
（ｘｉｉｉ）Ｒ６はＨまたはＣ１−Ｃ４アルキルである）
で示されるマクロライドサブユニットを表し；
ここで、サブユニットＭは連結部位を有し、その部位を通り、連結基Ｌを介してサブユニットＰに連結され、その連結部位は１個または複数の以下の基：
ａ．Ｓ１、Ｓ２上に位置する任意の反応性ヒドロキシ、Ｎまたはエポキシ基、あるいはＳ１またはＳ２が開裂するならば、アグリコン酸素；
ｂ．ＺまたはＷ上に位置する反応性＞Ｎ−ＲＮまたは−ＮＲｔＲｓまたは＝Ｏ基；
ｃ．Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３またはＲ５のいずれか一つに位置する反応性ヒドロキシ基；および
ｄ．まずヒドロキシまたは−ＮＲｔＲｓ基に誘導化され、ついでＫに連結され得る任意の他の基であり、ここでＫは連結分子Ｌの一部である；
にあり；
Ｐは光親和性基を担持するサブユニットである］
で示される化合物。
【請求項２】
Ｌが式ＩＩＩＡまたはＩＩＩＢ：
ＩＩＩＡ    Ｘ１−（ＣＨ２）ｍ−Ｘ２
ＩＩＩＢ    Ｘ１−（ＣＨ２）ｍ−Ｑ−（ＣＨ２）ｎ−Ｘ２
［式中：
Ｘ１は−ＣＨ２、−ＣＨ２−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、＝Ｎ−Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−または−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−から選択され；
Ｘ２は−ＮＨ−、−ＣＨ２−、−ＮＨＣ（Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−または−ＯＣ（Ｏ）−から選択され；
Ｑは−ＮＨ−、−ＣＨ２−または−Ｓ−Ｓ−であり；
−ＣＨ２−または−ＮＨ−基の各々は、Ｃ１−Ｃ７アルキル、Ｃ２−Ｃ７アルケニル、Ｃ２−Ｃ７アルキニル、Ｃ（Ｏ）ＲＸ、Ｃ（Ｏ）ＯＲＸ、Ｃ（Ｏ）ＮＨＲＸで置換されていてもよく、ここでＲＸはＣ１−Ｃ７アルキル、アリールまたはヘテロアリールであってもよく；
記号のｍおよびｎは、独立して、０ないし８の整数である；
ただし、ＱがＮＨである場合、ｎは０以外の整数である］
で示される、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｐが、下位構造式ＩＶ：
【化８】
2008526952.tif 000052
ＩＶ
［式中：
ＲＣは鎖ＬのＸ２との共有結合リンカーであり；
ＲはＯまたはＮＨである］
で示されるビオチンまたはイミノビオチンサブユニットである、請求項２記載の化合物。
【請求項４】
Ｐがビオチンと光親和性基あるいはイミノビオチンと光親和性基を含有するサブユニットを表す、請求項１記載の化合物。
【請求項５】
光親和性基がアリールアジドである、請求項１記載の化合物。
【請求項６】
Ｐが下位構造式Ｖ：
【化９】
2008526952.tif 000053
［式中、ＲＣは鎖ＬのＸ２との共有結合リンカーである］
で示される、請求項１記載の化合物。
【請求項７】
マクロライドサブユニットＭがＦＫ５０６、ラパマイシンまたはゲルダナマイシンあるいはその誘導体以外の物質である、請求項１記載の化合物。
【請求項８】
以下の特徴（ｉ）ないし（ｘｉｉｉ）：
（ｉ）ＺおよびＷは、独立して、
【化１０】
2008526952.tif 000054
（ここで、ＲｔおよびＲｓは、独立して、Ｈまたはメチルである）、
【化１１】
2008526952.tif 000055
（ここで、ＲＭはＯＨ、ＯＲＰ、アルキルである）、
【化１２】
2008526952.tif 000056
または結合であり；
（ｉｉ）ＵおよびＹは、独立して、Ｈ、メチルまたはヒドロキシメチルであり；
（ｉｉｉ）Ｒ９は水素で、Ｒ８は−Ｎ（ＣＨ３）ＲＹであり、ここでＲＹはＲＰ、ＲＺまたは−Ｃ（Ｏ）ＲＺであり、ＲＺは水素またはシクロヘキシル、Ｃ１−Ｃ７アルキル、Ｃ２−Ｃ７アルケニル、Ｃ２−Ｃ７アルキニル、アリールまたはヘテロアリール、あるいはＣ２−Ｃ７アルキル、Ｃ２−Ｃ７アルケニル、Ｃ２−Ｃ７アルキニル、アリールまたはヘテロアリールで置換されているアルキルであり；
（ｉｖ）Ｒ９は水素で、Ｒ８は−Ｎ（ＣＨ３）ＲＹであり、ここでＲＹは水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−ＣＨ２−フェニルまたはシクロヘキシルであり；
（ｖ）Ｒ２はＣ１−Ｃ４アルコキシであり；
（ｖｉ）ＥはＨまたはフッ素であり；
（ｖｉｉ）Ｒ３はヒドロキシ、ＯＲＰ基、Ｃ１−Ｃ４アルコキシであり；
（ｖｉｉｉ）Ｒ４はメチルであり；
（ｉｘ）Ｒ６はメチルまたはエチルであり；
（ｘ）ＲＰが少なくとも１つ存在し、ＲＰがメチル、アセチル、メトキシカルボニルまたはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、ベンゾイル、ベンジル、トリメチルシリルまたはトリメチルシリルエトキシメチルから選択される保護基を表し；
（ｘｉ）Ｒ１はヒドロキシであり、Ｓ１は式：
【化１３】
2008526952.tif 000057
［式中、ＲＹは上記の記載と同意義である］
で示される糖部分であり；
（ｘｉｉ）Ｓ１はＨで、Ｒ１はＯ−Ｓ２であり、ここでＳ２が式：
【化１４】
2008526952.tif 000058
［式中、Ｒ１１は上記の記載と同意義である］
で示される糖部分であり；
（ｘｉｉｉ）Ｓ１が水素で、Ｒ１がヒドロキシルである
のうち少なくとも１つの特徴を有する、請求項１記載の化合物。
【請求項９】
マクロライド結合蛋白、ペプチドまたはポリペプチドを同定するための、請求項１記載の化合物あるいはその医薬上許容される塩または溶媒和物の使用。
【請求項１０】
マクロライドについて結合親和性を有する蛋白、ペプチドまたはポリペプチドの群より選択される物質を同定する方法であって、
該物質を含有する可能性のある試料を、請求項１に記載の化合物と、該化合物の該物質への結合を可能とする条件下で接触させ；
その光親和性基を活性化させ；および
該化合物が該物質と結合したかどうかを、バックグラウンドと、あるいは予め確立された基準と比較して、該サインの強度を評価することで決定する、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、参照により本明細書に組み込まれている、２００５年１月１４日に出願した米国仮出願第６０／６４４，３３３号の優先権を主張するものである。
【０００２】
本発明は、一般構造Ｉによって表される新たなマクロライド化合物、それらの医薬として許容できる塩および溶媒和物、それらを調製するためのプロセスおよび中間体、ならびにマクロライド標的同定用のこれらの化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
マクロライド抗生物質は、対象の様々な細胞内、特に単核末梢血液細胞、ならびに腹腔および肺胞マクロファージなどの食細胞内に優先的に蓄積する（Ｇｌａｄｕｅ，Ｒ．Ｐ．他、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．１９８９、３３、２７７〜２８２；Ｏｌｓｅｎ，Ｋ．Ｍ．他、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．１９９６、４０、２５８２〜２５８５）。いくつかのマクロライドの炎症効果が文献に記載されている。例えば、エリスロマイシン誘導体（Ｊ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．１９９８、４１、３７〜４６；ＷＯ特許出願第００／４２０５５号）およびアジスロマイシン誘導体の抗炎症効果が記載されている（ＥＰ  Ｐａｔ．Ｂｒ．０２８３０５５）。いくつかのマクロライドの抗炎症効果は、マウスにおけるザイモサン誘発性腹膜炎（Ｊ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．１９９２、３０、３３９〜３４８）およびラット気管におけるエンドトキシン誘発性好中球蓄積（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９７、１５９、３３９５〜４００５）におけるなどの実験動物モデルにおけるｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏ研究からも知られている。インターロイキン８（ＩＬ−８）（Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ．Ｍｅｄ．１９９７、１５６、２６６〜２７１）およびインターロイキン５（ＩＬ−５）（ＥＰ  Ｐａｔ．Ｂｒ．０７７５４８９およびＥＰ  Ｐａｔ．Ｂｒ．７７１５６４）などのサイトカインに対するマクロライドの調節効果も同様に知られている。
【０００４】
マクロライドは、炎症部位に動員された免疫系細胞、特に食細胞内に蓄積する特性を有する：Ｐａｓｃｕａｌ  Ａ．他  Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｉｎｆｅｃｔ．２００１、７、６５〜６９）。（Ｕｐｔａｋｅ  ａｎｄ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｋｅｔｏｌｉｄｅ  ＨＭＲ３６４７  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｐｈａｇｏｃｙｔｉｃ  ａｎｄ  ｎｏｎ−ｐｈａｇｏｃｙｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ）；Ｈａｎｄ  Ｗ．Ｌ．他、Ｉｎｔ．Ｊ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ、２００１、１８、４１９〜４２５。（Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ  ａｎｄ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  ａｚｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ  ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｅｆｆｌｕｘ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｏｎｕｃｌｅａｒ  ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ）；Ａｍｓｄｅｎ  Ｇ．Ｗ．Ｉｎｔ．Ｊ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ、２００１、１８、１１〜１５。（Ａｄｖａｎｃｅｄ−ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｍａｃｒｏｌｉｄｅｓ：ｔｉｓｓｕｅ−ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ）；Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｊ．Ｄ．他、Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．１９８０、９５、４２９〜４３９。（Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  ｕｐｔａｋｅ  ｂｙ  ａｌｖｅｏｌａｒ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ）；Ｗｉｌｄｆｅｕｅｒ  Ａ．他、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．１９９６、４０、７５〜７９。（Ｕｐｔａｋｅ  ｏｆ  ａｚｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ  ｂｙ  ｖａｒｉｏｕｓ  ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｕｎｄｅｒ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ）；Ｓｃｏｒｎｅａｕｘ  Ｂ．他、Ｐｏｕｌｔ．Ｓｃｉ．１９９８、７７、１５１０〜１５２１。（Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ，ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ  ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ、ａｎｄ  ｅｆｆｌｕｘ  ｏｆ  ｔｉｌｍｉｃｏｓｉｎ  ｉｎ  ｃｈｉｃｋｅｎ  ｐｈａｇｏｃｙｔｅｓ）；Ｍｔａｉｒａｇ  Ｅ．Ｍ．他、Ｊ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．１９９４、３３、５２３〜５３６。（Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｉｒｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ  ａｎｄ  ｅｒｙｔｈｒｏｍｙｃｙｌａｍｉｎｅ  ｕｐｔａｋｅ  ｂｙ  ｈｕｍａｎ  ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｓ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）；Ａｎｄｅｒｓｏｎ  Ｒ．他、Ｊ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．１９８８、２２、９２３〜９３３。（Ａｎ  ｉｎ−ｖｉｔｒｏ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｕｐｔａｋｅ  ａｎｄ  ｉｎｔｒａｐｈａｇｏｃｙｔｉｃ  ｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｃｌａｒｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ（Ａ−５６２６８，ＴＥ−０３１，ａ  ｎｅｗ  ｍａｃｒｏｌｉｄｅ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ａｇｅｎｔ）；Ｔａｓａｋａ  Ｙ．他、Ｊｐｎ．Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．１９８８、４１、８３６〜８４０。（Ｒｏｋｉｔａｍｙｃｉｎ  ｕｐｔａｋｅ  ｂｙ  ａｌｖｅｏｌａｒ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ）；Ｈａｒｆ  Ｒ．他、Ｊ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．１９８８、２２、１３５〜１４０。（Ｓｐｉｒａｍｙｃｉｎ  ｕｐｔａｋｅ  ｂｙ  ａｌｖｅｏｌａｒ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ）。
【０００５】
マクロライド抗生物質は、それらの殺菌活性から明らかに分離した慢性気道炎症の疾患の管理における有望な役割を有しているように見える。過去１５年にわたり、ヒト臨床試験における、特にびまん性汎細気管支炎および嚢胞性線維症などの疾患におけるそれらの成功により、抗生物質のこのファミリーが免疫応答を調節する機序を決定するためのｉｎ  ｖｉｔｒｏ検討とｉｎ  ｖｉｖｏ検討の両方が促されてきた。大部分の証拠は、マクロライドが、殺菌／静菌効果と無関係に起きる炎症カスケードの複数の成分を直接標的とすることを示唆している（Ｗ．Ｃ．Ｔｓａｉ、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｅｓｉｇｎ、２００４、１０、３０８１〜３０９３）。
【０００６】
肺の中で炎症を制御する機序を理解することが大いに必要である。この要請は、肺生物学者が、肺炎症の状態においてマクロライドが免疫調節効果を発揮する１つまたは複数の機序を解明し、解明された１つまたは複数の機序に基づいて可能性のある治療戦略を確立するのに必要なツールを提供するはずの細胞生物学および分子生物学における革命と一致する。例えば、アジスロマイシンは、ＨＰＬＣ法を組み合わせた透析法を用い、血清由来のα１−酸性糖蛋白と特異的に結合することが分かった（Ｃａｓｔｅａｒｅｎａ他、Ｊ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．１９９５、７  Ｓｕｐｐｌ  ４：２６〜８）。
【０００７】
光親和性標識は、生体分子と特異的に関係している光化学的に反応性の分子を、通常は中間体を介し、標識を生体分子に共有結合させるために光励起する技法である（ＩＵＰＡＣ  Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ、第２版、１９９７）。光親和性標識は、標的の生物学的巨大分子系の特定の機能に関係している構造的特徴を解析するために広く使用される生物科学における重要な方法論である。この方法では、極めて反応性に富む中間体、通常は光親和性プローブの鍵構造としてのナイトレンおよびカルベンを生成する光反応性基が必要となる（Ｈａｔａｎａｋａ  Ｙ．他、Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ、１９９３、３５、９９７〜１００４）。
【０００８】
マクロライド光親和性類縁体の使用により、分子レベルにおける蛋白−マクロライド相互作用の研究が可能になる。光親和性標識技法を用い、どの特異的マクロライド結合蛋白が薬物の標的であるかを決定することができる。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
当技術分野の既知の状況および確立された状況によれば、本発明の対象である式Ｉによって表される化合物、それらの薬理学的に許容できる塩および蛋白同定のためのそれらの使用方法はこれまで記載されたことがない。
【００１０】
本発明は、単一試薬の使用により、他の分子と光親和性架橋され、受容体であり、共有結合複合体中にビオチンハンドルを同時に導入する能力のあるマクロライドコンジュゲートを提供する。これにより、適当なアビジン誘導体を用いるインタクトな、または後で断片化される複合体の単離および／または同定が可能になる。
【００１１】
本発明の対象であるどの化合物も、分子レベルでの蛋白−マクロライド相互作用の研究における使用について記載されたことはない。
【００１２】
本発明の一態様において、式Ｉのコンジュゲート、ならびに医薬として許容できるそれらの塩、プロドラッグ、および溶媒和物は、以下に示すように表され、
【００１３】
【化１】
2008526952.tif 000003
Ｉ
式中、
Ｍは、炎症細胞において蓄積性を有するマクロライドサブユニットを表し、Ｐは、ビオチンサブユニットまたはビオチンおよび光親和性基を含むサブユニットを表し、Ｌは、ＭとＰを共有結合的に連結するリンカーを表す。
【００１４】
本発明のハイブリッド化合物に適しているマクロライドサブユニットは、多員（ｍｕｌｔｉ−ｍｅｍｂｅｒ）ラクトン環分子から選択することができるが、それらに限定されるものではなく、「員（ｍｅｍｂｅｒ）」は、環内の炭素原子またはヘテロ原子を指し、「多（ｍｕｌｔｉ）」は、約１０を超える、好ましくは１０〜約５０の数であり、１２−、１４−、１５−、１６−、１７−および１８−員ラクトン環マクロライドであることがより好ましい。１４−および１５−員環マクロライドサブユニットが特に好ましく、アジスロマイシンおよびその誘導体ならびにエリスロマイシンおよびその誘導体が最も好ましい。
【００１５】
マクロライドサブユニットを選択することができる分子のより具体的な非限定的例は、以下である。
（ｉ）アザライドを含むマクロライド抗生物質、例えば、エリスロマイシン、ジリスロマイシン、アジスロマイシン、９−ジヒドロ−９−デオキソ−９ａ−アザ−９ａ−ホモエリスロマイシン、ＨＭＲ３００４、ＨＭＲ３６４７、ＨＭＲ３７８７、ジョサマイシン、エリスロマイシルアミン、ＡＢＴ７７３フルリスロマイシン、クラリスロマイシン、タイロシン、チルミコシン、オレアンドマイシン、デスミコシン（ｄｅｓｍｙｃｏｓｉｎ）、ＣＰ−１６３５０５、ロキシスロマイシン、ミオカマイシンおよびロキタマイシンならびにケトライド（例えば、３−ケトン）、ラクタム（例えば、８ａ−または９ａ−ラクタム）および１つまたは複数の糖部分を欠く誘導体などのそれらの誘導体。
（ｉｉ）ＦＫ５０６、シクロスポリン、アンホテリシンおよびラパマイシンなどのマクロライド免疫抑制剤。
（ｉｉｉ）バフィロマイシン、コンカナマイシン、ナイスタチン、ナタマイシン、カンジシジン、フィリピン、エトルスコマイシン（ｅｔｒｕｓｃｏｍｙｃｉｎ）、トリコマイシンなどの宿主細胞阻害特性のあるマクロライド抗真菌剤。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
市販されていない上記マクロライドを合成するための方法および一般的なマクロライドの合成操作は、当業者に知られているか、あるいは、Ｄｅｎｉｓ  Ａ．他、Ｂｉｏｏｒｇ．＆  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ  １９９９、９、３０７５〜３０８０；Ａｇｏｕｒｉｄａｓ  Ｃ．他、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９８、４１、４０８０〜４１００；およびＥＰ−００６８０９６７（１９９８）；Ｓｕｎ  Ｏｒ  Ｙ．他、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０００、４３、１０４５〜１０４９；ＵＳ−０５７４７４６７（１９９８）；ＭｃＦａｒｌａｎｄ  Ｊ．Ｗ．他、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９７、４０、１０４１〜１０４５；Ｄｅｎｉｓ  Ａ．他、Ｂｉｏｏｒｇ．＆  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１９９８、８、２４２７〜２４３２；ＷＯ−０９９５１６１６（１９９９）；Ｌａｒｔｅｙ他、Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．１９９５、３８、１７９３〜１７９８；ＥＰ０９８４０１９；ＷＯ９８／５６８０１中に見出すことができ、それらの各々は、全体として参照により本明細書に組み込まれるものとする。
【００１７】
追加の適当なマクロライドが知られており、いくつかは、全体として参照により組み込まれているＢｒｙｓｋｉｅｒ，Ａ．Ｊ．他、Ｍａｃｒｏｌｉｄｅｓ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｕｓｅ；Ａｒｎｅｔｔｅ  Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ：Ｐａｒｉｓ、１９９３、ｐｐ４８５〜４９１、１４（Ｒ）−ヒドロキシクラリスロマイシン、エリスロマイシン−１１，１２−カーボネート、トリ−Ｏ−アセチルオレアンドマイシン、スピラマイシン、ロイコマイシン、ミデカマイシン、ラサラマイシン（ｒａｓａｒａｍｙｃｉｎ）；Ｍａ，Ｚ．他、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ−Ａｎｔｉ−Ｉｎｆｅｃｔｉｖｅ  Ａｇｅｎｔｓ、２００２、１、１５〜３４；全体として参照により組み込まれているピクロマイシン（ｐｉｋｒｏｍｙｃｉｎ）、ナルボマイシン、ＨＭＲ−３５６２、ＣＰ−６５４７４３、ＣＰ−６０５００６、ＴＥ−８０２、ＴＥ−９３５、ＴＥ−９４３、ＴＥ−８０６、６，１１−架橋ケトライド、ＣＰ−５４４３７２、ＦＭＡ−１９９、Ａ−１７９４６１；および全体として参照により組み込まれているＲｏｍｏ，Ｄ．他、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９８、１２０；１２２３７〜１２２５４に開示されている。特に、Ｂｒｙｓｋｉｅｒ，他のｐｐ４８７〜４９１における１４−および１６−員環マクロライドについての構造および誘導体、ならびにＭａ他における、特にすべての構造表およびすべての反応スキームにおける様々なケトライドの誘導体および合成を参照されたい。サブユニットＰにコンジュゲートさせた後のこれらすべてのマクロライドは、本発明の範囲内にある。上記の具体的に命名または言及したマクロライド化合物は、市販されているか、あるいはそれらの合成方法は、知られている。
【００１８】
好ましい実施形態において、本発明は、式Ｉによって表される化合物、ならびにそれらの塩、プロドラッグおよび溶媒和物の使用に関し、式中、Ｍは、式ＩＩによって表されることが最も好ましい１４−または１５−員ラクトン環マクロライドサブユニットを具体的に表し、
【００１９】
【化２】
2008526952.tif 000004
ＩＩ
式中、
（ｉ）ＺおよびＷは、独立して、
【００２０】
【化３】
2008526952.tif 000005
または結合であり、
ＲｔおよびＲｓは、独立してＨまたはアルキル（好ましくはメチルまたはＨ）であり、
ＲＭは、ＯＨ、ＯＲｐ、アルコキシまたは置換アルコキシ（Ｓｙｎ配置かＡｎｔｉ配置のどちらか、またはそれらの混合物）、
ＲＮは、Ｈ、Ｒｐ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルコキシアルキル、または−Ｃ（＝Ｘ）−ＮＲｔＲｓであり、
Ｘは、ＯまたはＳであるが、
ただし、ＺおよびＷは、両方が同時に
【００２１】
【化４】
2008526952.tif 000006
または結合であることはなく、
（ｉｉ）ＵおよびＹは、独立して、Ｈ、ハロゲン、アルキル、またはヒドロキシアルキル（好ましくはＨ、メチル、またはヒドロキシメチル）であり、
（ｉｉｉ）Ｒ１は、ヒドロキシ、ＯＲｐ、−Ｏ−Ｓ２、または＝Ｏであり、
（ｉｖ）Ｓ１は、Ｈまたは式：
【００２２】
【化５】
2008526952.tif 000007
のＣ／５位における糖部分（例えば、デソサミン基）であり、
式中、
Ｒ８およびＲ９は、両方とも水素であるか、あるいは一緒に結合を形成するか、あるいはＲ９は、水素であり、Ｒ８は、−Ｎ（ＣＨ３）Ｒｙであり、
Ｒｙは、Ｒｐ、Ｒｚまたは−Ｃ（Ｏ）Ｒｚであり、Ｒｚは、水素またはシクロアルキル（好ましくはシクロヘキシル）またはアルキル（好ましくはＣ１〜Ｃ７アルキル）またはアルケニル（好ましくはＣ２〜Ｃ７−アルケニル）またはアルキニル（好ましくはＣ２〜Ｃ７−アルキニル）アリールまたはヘテロアリールまたはＣ２〜Ｃ７アルキル、Ｃ２〜Ｃ７アルケニル、Ｃ２〜Ｃ７アルキニル、アリールもしくはヘテロアリールで置換されているアルキルであり（Ｒｙは、水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−ＣＨ２−フェニル、またはシクロヘキシルであることが好ましい）、
Ｒ１０は、水素またはＲｐであり、
（ｖ）Ｓ２糖部分は、式
【００２３】
【化６】
2008526952.tif 000008
の、Ｒ３’が、Ｈまたはメチルであってよく、Ｒ１１が、水素またはＲｐ、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）ｑＮＲ４Ｒ６であるか、あるいはＯ−Ｒ１１が、Ｒ１２およびＣ／４’’炭素原子と共に＞Ｃ＝Ｏまたはエポキシ基を形成する基であり、Ｒ１２が、水素またはＯ−Ｒ１１およびＣ／４’’炭素原子と共に＞Ｃ＝Ｏまたはエポキシ基を形成する基であり、
ｑが、１〜６の整数の意味を有する（例えば、クラジノシル基であり）、
（ｖｉ）Ｒ２は、Ｈ、ヒドロキシ、ＯＲｐ基、アルコキシ（好ましくはＣ１〜Ｃ４アルコキシ、最も好ましくはメトキシ）または置換アルコキシであり、
（ｖｉｉ）Ａは、Ｈまたはメチルであり、
（ｖｉｉｉ）Ｂは、メチルまたはエポキシであり、
（ｉｘ）Ｅは、Ｈまたはハロゲン（好ましくはフッ素）であり、
（ｘ）Ｒ３は、ヒドロキシ、ＯＲｐ基またはアルコキシ（好ましくはＣ１〜Ｃ４アルコキシ、最も好ましくはメトキシ）、置換アルコキシであるか、あるいはＲ３は、Ｒ５と結合して「架橋」（例えば、環状カーボネートまたはカルバメート）を形成することができる基であるか、あるいはＷまたはＺが
【００２４】
【化７】
2008526952.tif 000009
の場合、Ｒ３は、ＷまたはＺと結合して「架橋」（例えば、環状カルバメート）を形成することができる基であり、
（ｘｉ）Ｒ４は、Ｃ１〜Ｃ４アルキル（好ましくはメチル）であり、
（ｘｉｉ）Ｒ５は、Ｈ、ヒドロキシ、ＯＲｐ基、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、置換アルコキシまたはＲ３と結合して架橋（例えば、環状カーボネートまたはカルバメート）を形成してもよい基であり、
（ｘｉｉｉ）Ｒ６は、ＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキル（好ましくはメチルまたはエチル）であり、
サブユニットＭは、連結基Ｌを介してサブユニットＳに連結する連結部位を有し、連結部位は、以下の
Ｓ１、Ｓ２上にある任意の反応性のヒドロキシ、Ｎ、もしくはエポキシ基、またはＳ１またはＳ２が切断されている場合にはアグリコン酸素、すなわち
ａ．ＺまたはＷ上にある反応性の＞Ｎ−ＲＮまたは−ＮＲｔＲｓまたは＝Ｏ基、
ｂ．Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、およびＲ５のうちのいずれか１つにある反応性のヒドロキシ基、
ｃ．ヒドロキシまたは−ＮＲｔＲｓ基にまず誘導体化し、次いでＫと連結することができ（例えば、
【００２５】
【化８】
2008526952.tif 000010
Ｋは、連結分子Ｌの一部であるその他の基のうちの１つまたは複数にある。
【００２６】
式ＩＩのマクロライドサブユニットには、１つまたは複数のＲｐ基が独立して存在することがあり、Ｒｐは、アルキル（好ましくはメチル）、アルカノイル（好ましくはアセチル）、アルコキシカルボニル（好ましくはメトキシカルボニルまたはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）、アリールメトキシカルボニル（好ましくはベンジルオキシカルボニル）、アロイル（好ましくはベンゾイル）、アリールアルキル（好ましくはベンジル）、アルキルシリル（好ましくはトリメチルシリル）またはアルキルシリルアルコキシアルキル（好ましくはトリメチルシリルエトキシメチル）から選択することができる保護基を表す。
【００２７】
Ｒ１およびＲ１がヒドロキシルであり、Ｓ１が、式（Ｒ１０、Ｒ８、Ｒ９は、前に定義した通りである）
【００２８】
【化９】
2008526952.tif 000011
の糖部分である式ＩＩによるセミグリコン（ｓｅｍｉｇｌｙｃｏｎｅ）化合物も好ましい。
【００２９】
Ｓ１が、Ｈであり、Ｒ１が、Ｏ−Ｓ２であり、Ｓ２が、式（Ｒ３、Ｒ１１Ｒ１２は、前に定義した通りである）
【００３０】
【化１０】
2008526952.tif 000012
の糖部分である式ＩＩによるセミグリコン化合物も好ましい。
【００３１】
Ｓ１が、水素であり、Ｒ１が、ヒドロキシルである式ＩＩによるアグリコン化合物も好ましい。
【００３２】
リンカーＬ
Ｌは、必要な間隔を提供するどんなタイプのスペーサー分子であってもよいスペーサーまたはリンカー分子である。例えば、Ｌは、式ＩＩＩＡまたはＩＩＩＢによって表される連結基であるように選択することができ、
ＩＩＩＡ  Ｘ１−（ＣＨ２）ｍ−Ｘ２  または  
ＩＩＩＢ  Ｘ１−（ＣＨ２）ｍ−Ｑ−（ＣＨ２）ｎ−Ｘ２
式中、
Ｘ１は、−ＣＨ２、−ＣＨ２−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、＝Ｎ−Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−または−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−から選択され、
Ｘ２は、−ＮＨ−、−ＣＨ２−、−ＮＨＣ（Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−または−ＯＣ（Ｏ）−から選択され、
Ｑは、−ＮＨ−、−ＣＨ２−または−Ｓ−Ｓ−であり、
各−ＣＨ２−または−ＮＨ−基は、Ｃ１〜Ｃ７−アルキル、Ｃ２〜Ｃ７−アルケニル、Ｃ２〜Ｃ７−アルキニル、Ｃ（Ｏ）Ｒｘ、Ｃ（Ｏ）ＯＲｘ、Ｃ（Ｏ）ＮＨＲｘによって所望により置換されており、Ｒｘは、Ｃ１〜Ｃ７−アルキル、アリールまたはヘテロアリールであってよく、
記号ｍおよびｎは、独立して、０〜８の整数であるが、
ただし、Ｑ＝ＮＨの場合、ｎは、ゼロであることはない。
【００３３】
連結基の上記定義は、Ｐと式ＩＩのマクロライドとのコンジュゲートにとってばかりでなく、式Ｉ内の任意のコンジュゲートにとっても好ましい。他の連結基も、必要なスペーサーを提供する限りは使用することができる。好ましいリンカー分子は、１〜６０個の炭素原子（鎖内のヘテロ原子を数えずに）の長さを有する分子であり、２〜２０個の炭素原子の長さを有する分子が最も好ましい。マクロライド部分に対するＬの連結は、９ａ位の環窒素原子を介してか、１１位および６位のヒドロキシ基を介してか、デソザミン（ｄｅｓｏｚａｍｉｎｅ）糖部分の２’ヒドロキシまたは３’アミノ基を介してか、クラジノース糖の４’’ヒドロキシ基を介してか、Ｍ部分が、アグリコンであるか、あるいはデソザミンおよびクラジノース糖基のうちの１つを失っている場合には、マクロライド環の５または３位に作られたＯＨ基を介してかのいずれかで行うことができる。リンカーは、当技術分野においてよく知られているように、式Ｉの一方のサブユニットをもう一方のサブユニットと連結する役目を果たすことができる。
【００３４】
サブユニットＰ
Ｐは、電磁放射線によって化学的に架橋することができる基と、ビオチンまたはイミノビオチンとを含む光親和性サブユニットである。光親和性サブユニットに含まれているビオチンまたはイミノビオチンの知られている誘導体も本発明に企図されている。
【００３５】
好ましい実施形態において、Ｐは、下部構造ＩＶによって表すことができるビオチンまたはイミノビオチンサブユニットを含む光親和性基を表し、
【００３６】
【化１１】
2008526952.tif 000013
ＩＶ
式中、
Ｒｃは、例えば、Ｘ２における共有結合連結鎖Ｌであり、
Ｒは、Ｏ（ビオチン）またはＮＨ（イミノビオチン）であるか、あるいは
Ｐは、ビオチンおよび光親和性基を含み、下部構造Ｖによって表すことができるサブユニットを表し、
【００３７】
【化１２】
2008526952.tif 000014
式中、
Ｒｃは、例えば、Ｘ２における共有結合連結鎖Ｌである。
【００３８】
他の適当な光反応性基は、例えば、参照により組み込まれているＳ．Ａ．Ｆｌｅｍｉｎｇ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、１９９５、５１、１２４７９〜１２５２０（Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｉｎ  Ｐｈｏｔｏａｆｆｉｎｉｔｙ  Ｌａｂｅｌｉｎｇ）に記載されている。それらには、フェニルアジド、フルオロフェニルアジド、ニトロフルオロフェニルアジド、ｐ−アジドアニリン、ｐ−アジドベンゾイル、アリールジアジリン、ジアゾケトン、ベンゾフェノンが含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００３９】
本明細書に含まれる式における肉太の結合は、紙面上に隆起した結合を示し、ダッシュ記号で描かれた結合は、紙面下の結合を示し、一方、破線は、紙面下か紙面上のどちらかであってよい結合を示す。平行な実線および破線は、単結合か二重結合のどちらかを表す。本明細書で明示的に別段の定めをした場合を除き、以下の用語は、以下でそれらに割り当てられた意味を有する。
【００４０】
「アルキル」は、１〜１０個の炭素原子、より好ましくは１〜６個の炭素原子の直鎖または分岐鎖の飽和一価炭化水素基を意味する。好ましい直鎖または分岐鎖アルキルには、メチル、エチル、プロピル、ｉｓｏ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルが含まれる。メチルが最も好ましい。アルキル基は、ハロゲン（好ましくはフッ素または塩素）、ヒドロキシ、アルコキシ（好ましくはメトキシまたはエトキシ）、アシル、アシルアミノ、シアノ、アミノ、Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルアミノ（好ましくはＮ−メチルアミノまたはＮ−エチルアミノ）、Ｎ，Ｎ−ジ（Ｃ１〜Ｃ４−アルキル）アミノ（好ましくはジメチルアミノまたはジエチルアミノ）、アリール（好ましくはフェニル）またはヘテロアリール、チオカルボニルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミジノ、アルキルアミジノ、チオアミジノ、アミノアシル、アミノカルボニルアミノ、アミノチオカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、アリール、ヘテロアリール、アリールオキシ、アリールオキシアリール、ニトロ、カルボキシル、カルボキシルアルキル、カルボキシル−置換アルキル、カルボキシル−シクロアルキル、カルボキシル−置換シクロアルキル、カルボキシルアリール、カルボキシル−置換アリール、カルボキシルヘテロアリール、カルボキシル−置換ヘテロアリール、カルボキシル複素環式、カルボキシル−置換複素環式、シクロアルキル、シクロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、およびオキシカルボニルアミノを含む１から５個までの置換基で置換されていてもよい。そのような置換アルキル基は、「アルキル」の本定義の範囲内にある。アルキルの本定義は、アルコキシなどのアルキル部分を有する他の基に引き継がれる。
【００４１】
「アルケニル」は、少なくとも１個の二重炭素−炭素結合を有する２〜１０個、好ましくは２〜６個の炭素原子の直鎖または分岐鎖の一価炭化水素基を意味する。アルケニル基は、アルキルと同じ基で置換されていてもよく、そのような所望により置換されたアルケニル基は、用語「アルケニル」に包含される。エテニル、プロペニル、ブテニルおよびシクロヘキセニルが好ましい。
【００４２】
「アルキニル」は、少なくとも１個、好ましくは３個程度の三重炭素−炭素結合を含む２〜１０個、好ましくは２〜６個の炭素原子の直鎖または分岐鎖を有する直鎖または分岐鎖の一価炭化水素基を意味する。アルキニル基は、アルキルと同じ基で置換されていてもよく、置換された基は、アルキニルの本定義の範囲内にある。エチニル、プロピニルおよびブチニル基が好ましい。
【００４３】
「シクロアルキル」は、アリールまたはヘテロアリール基と所望により縮合している単一の環を有する３〜８個の炭素原子を有する環状基を意味する。シクロアルキルは、飽和環と所望により縮合していてもよい。シクロアルキル基は、以下で「アリール」について規定されているように置換されていてもよく、置換シクロアルキル基は、「シクロアルキル」の本定義の範囲内にある。好ましいシクロアルキルは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチルである。シクロアルキルが１〜６個の炭素を有するアルキル鎖を介して結合しているアルキルシクロアルキルも含まれる。
【００４４】
「アリール」は、フェニルなどの単一の環またはナフチルなどの複数の縮合環を有する６〜１４個の炭素原子を有する不飽和芳香族炭素環式基を意味する。アリールは、脂肪族またはアリール基と所望によりさらに縮合していてもよいか、あるいは、ハロゲン（フッ素、塩素および／または臭素）、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ７アルキル、Ｃ１〜Ｃ７アルコキシもしくはアリールオキシ、Ｃ１〜Ｃ７アルキルチオ、アリールチオ、アルキルスルホニル、シアノ、一級もしくは非一級アミノ、ハロアルキル、またはアルキルアミノなどの１個または複数の置換基で置換されていてもよい。
【００４５】
「ヘテロアリール」は、２〜１０個の炭素原子およびＯ、ＳまたはＮなどの１〜４個のヘテロ原子を有する単環式または二環式芳香族炭化水素環を意味する。ヘテロアリール環は、別のヘテロアリール、アリールまたは脂肪族環式基と所望により縮合していてもよい。このタイプの例は、フラン、チオフェン、ピロール、イミダゾール、インドール、ピリジン、オキサゾール、チアゾール、ピロール、ピラゾール、テトラゾール、ピリミジン、ピラジンおよびトリアジンであり、フラン、ピロール、ピリジンおよびインドールが好ましい。この用語には、上記でアリールについて規定されているのと同じ置換基で置換されている基が含まれる。
【００４６】
「複素環式」は、単一または複数の環および１〜１０個の炭素原子および窒素、イオウまたは酸素から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する飽和または不飽和基を意味し、縮合環系において、他の１つまたは複数の環は、アリールまたはヘテロアリールであってよい。複素環式基は、アルキル基について規定されているように置換されていてもよく、そのように置換された複素環式基は、本定義の範囲内にある。
【００４７】
本明細書で使用する「電磁放射線」は、Ｘ線、紫外、可視、赤外、遠赤外、マイクロ波、無線周波、音波および超音波を含むがこれらに限定されない電磁スペクトルのエネルギー波を指す。電磁放射線は、可視（すなわち、少なくとも約４．０×１０−５ｃｍから約７．０×１０−５ｃｍの波長を有する）または紫外（すなわち、少なくとも約１．０×１０−６ｃｍだが約４．０×１０−５ｃｍ未満の波長を有する）光を含むことが好ましい。本発明は、本化合物の医薬として許容できる塩も包含する。本発明の化合物の医薬として適当な塩には、無機酸（例えば塩酸、臭化水素酸、リン酸、メタリン酸、硝酸または硫酸）または有機酸（例えば酒石酸、酢酸、メタンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸、マレイン酸、乳酸、フマル酸、安息香酸、コハク酸、メタンスルホン酸、シュウ酸およびｐ−トルエンスルホン酸）との塩が含まれる。
【００４８】
本発明は、式Ｉ化合物のプロドラッグ、すなわち、哺乳類の対象に投与された場合、ｉｎ  ｖｉｖｏで式（Ｉ）による活性な親薬物を放出する化合物も包含する。式Ｉの化合物のプロドラッグは、修飾がｉｎ  ｖｉｖｏで切断されて親化合物を放出するような方法で、式Ｉの化合物中に存在する官能基を修飾することによって調製される。プロドラッグには、式Ｉ化合物のヒドロキシ、アミノ、またはカルボキシ基が、ｉｎ  ｖｉｖｏで切断されてそれぞれ遊離のヒドロキシル、アミノまたはカルボキシ基を再生することができる任意の基と結合している式Ｉの化合物が含まれる。プロドラッグの例には、式Ｉの化合物のエステル（例えば、酢酸エステル、ギ酸エステル、および安息香酸エステル誘導体）、あるいは生理的ｐＨにすると、または酵素作用を介して活性な親薬物に変換される他の任意の誘導体が含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００４９】
本発明は、式Ｉの化合物の溶媒和物（好ましくは水和物）またはそれらの塩も包含する。
【００５０】
式Ｉの化合物は、１個または複数のキラリティー中心を有し、個々の置換基の性質に応じて、それらは、幾何異性体を有することもある。空間におけるそれらの原子の配置が異なる異性体は、「立体異性体」と呼ばれる。お互いに鏡像ではない立体異性体は、「ジアステレオマー」と呼ばれ、お互いに重ね合わせることができない鏡像である立体異性体は、「鏡像異性体」と呼ばれる。ある化合物がキラル中心を有する場合、一対の鏡像異性体が可能である。鏡像異性体は、その不斉中心の絶対立体配置によって特徴付けることができ、ＣａｈｎおよびＰｒｅｌｏｇのＲ−およびＳ−配列ルールによって記載されるか、あるいは、分子が偏光面を回転させる様式により、右旋性または左旋性（すなわち、それぞれ（＋）または（−）−異性体と）として表される。キラル化合物は、個々の鏡像異性体か鏡像異性体の混合物のどちらかとして存在することがある。均等な割合の鏡像異性体を含有する混合物は、「ラセミ混合物」と呼ばれる。本発明は、式Ｉの化合物のすべての個別異性体を包含する。明細書および特許請求の範囲における特定の化合物の記述または命名には、個々の鏡像異性体とそれらのラセミまたはその他の混合物の双方が含まれることを意図している。立体化学の決定および立体異性体の分割のための方法は、当技術分野においてよく知られている。
【００５１】
本発明は、オキシムまたは類似の基が存在する場合に認められるシン−アンチ型の立体異性体、およびそれらの混合物も包含する。オキシムの末端二重結合原子のうちの１つに結合している最も高いＣａｈｎ−Ｉｎｇｏｌｄ−Ｐｒｅｌｏｇ順位の基がオキシムのヒドロキシル基と比較される。立体異性体は、オキシムヒドロキシルが、最高順位の基とＣ＝Ｎ二重結合を通過する基準面の同じ側にある場合にＺ（ｚｕｓａｍｍｅｎ＝一緒に）またはシンで表され、もう一方の立体異性体は、Ｅ（ｅｎｔｇｅｇｅｎ＝反対の）またはアンチで表される。
【００５２】
式ＩのＺまたはＷが、＞Ｃ＝ＮＲｍであり、Ｒｍが、ＯＨ、ＯＲ９、または置換アルコキシである一実施形態において、化合物は、主にシン異性体である。別の実施形態において、化合物は、主にアンチ異性体である。さらに別の実施形態において、化合物は、２つの異性体の５０／５０混合物であるか、あるいはシン対アンチ、あるいはアンチ対シンの６０／４０、７０／３０、８０／２０、または９０／１０などの混合物である。
【００５３】
本発明に従って使用することができる式Ｉの具体的コンジュゲートは、
化合物１、
【００５４】
【化１３】
2008526952.tif 000015
化合物２、
【００５５】
【化１４】
2008526952.tif 000016
化合物３、
【００５６】
【化１５】
2008526952.tif 000017
化合物４、
【００５７】
【化１６】
2008526952.tif 000018
化合物５、
【００５８】
【化１７】
2008526952.tif 000019
化合物６、
【００５９】
【化１８】
2008526952.tif 000020
化合物７、
【００６０】
【化１９】
2008526952.tif 000021
化合物８、
【００６１】
【化２０】
2008526952.tif 000022
化合物９、
【００６２】
【化２１】
2008526952.tif 000023
化合物１０、
【００６３】
【化２２】
2008526952.tif 000024
化合物１１、
【００６４】
【化２３】
2008526952.tif 000025
化合物１２、
【００６５】
【化２４】
2008526952.tif 000026
化合物１３、
【００６６】
【化２５】
2008526952.tif 000027
化合物１４である。
【００６７】
【化２６】
2008526952.tif 000028
【００６８】
連結部位は、Ｃ／３位において；またはＳ１糖のＣ／３’位におけるアミノ基を介して、あるいはＣ／１１位において、あるいはＷもしくはＺにおいて、あるいはＳ２糖のＣ／４’’位を介することが好ましい。
【００６９】
本発明の他の態様は、式Ｉによって表される化合物を調製するためのプロセスに関する。一般に、式Ｉの化合物は、以下の方法で得ることができる。鎖の一方の端を、マクロライドとまず連結させ、次いで、鎖のもう一方の端を、Ｐと連結させるか、あるいは、鎖の一方の端を、Ｐとまず連結させ、次いで、鎖のもう一方の端を、マクロライドと連結させるか、または最後に、鎖の一方の部分を、マクロライドと連結させ、一方、鎖のもう一方の部分をＰと連結させ、次いで、鎖部分の遊離末端を、化学的に連結させて鎖Ｌを形成する。
【００７０】
当業者には当然のことながら、式Ｉの化合物の調製において使用される中間体の保護された誘導体を使用することが望ましいことがある。官能基の保護および脱保護は、当技術分野において知られている方法によって行うことができる。例えば、Ｇｒｅｅｎ，Ｔ．Ｗ．；Ｗｕｔｓ，Ｐ．Ｇ．Ｍ．、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９９に記載されているように、ヒドロキシルまたはアミノ基を、任意のヒドロキシルまたはアミノ保護基で保護することができる。上記の式Ｉに関連する保護基の考察も参照されたい。アミノ保護基は、従来技法によって除去することができる。例えば、アルカノイル、アルコキシカルボニルおよびアロイル基などのアシル基は、加溶媒分解により、例えば、酸性または塩基性条件下の加水分解により除去することができる。アリールメトキシカルボニル基（例えば、ベンジルオキシカルボニル）は、パラジウム炭素などの触媒の存在下での水素化分解により切断することができる。
【００７１】
より具体的には、式Ｉに含まれる化合物は、以下のプロセスによって調製することができる。
ａ）Ｘ２が−ＮＨＣ（Ｏ）−である式Ｉの化合物は、式ＶＩの化合物（Ｌ１は、脱離基（ヒドロキシまたはスルホン化Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド：スルホ−ＮＨＳなど）を表す）と、
【００７２】
【化２７】
2008526952.tif 000029
ＶＩ
式ＶＩＩａによって表されるマクロライド（Ｋは、マクロライドサブユニットと結合している連結分子Ｌの一部である）を反応させることによって形成させることができる。
【００７３】
【化２８】
2008526952.tif 000030
ＶＩＩａ
【００７４】
この反応は一般に、ハロゲン化物、混合酸無水物などのカルボン酸基の活性化能を有する酸誘導体、ならびに、特に（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチル−カルボジイミド（ＥＤＣ）などのカルボジイミドおよびベンゾトリアゾールで行われる。この反応は、アルゴンまたは窒素などの不活性雰囲気下で室温にて、有機塩基（例えば、トリエチルアミン）などの塩基の存在下で進行する。この反応を完結させるには、数時間〜数日間を必要とすることがある。
【００７５】
例えば、Ｌが、−Ｋ−ＮＨ２である場合、式Ｉの化合物は、マクロライド環上の＞ＮＨ基を＞Ｎ−Ｋ−ＮＨ２基に誘導体化し、誘導体化したマクロライドを、以下に示すような式ＶＩの化合物と反応させることによって形成させることができる。
【００７６】
【化２９】
2008526952.tif 000031
【００７７】
例えば、このプロセスは、式ＩＩのマクロライドサブユニット中の＞ＮＨ基が、Ｃ／３’位またはＮ／９ａ位で結合している場合に行うことができる。
【００７８】
式ＶＩによって表される化合物は市販されているか、あるいは、それらを、付加反応として当技術分野において知られている反応により、サブユニットＰから誘導することができる。
【００７９】
式ＶＩＩａの出発マクロライドの調製は、全体として参照により組み込まれているＰＣＴ  ＨＲ０２／０００１に記載されている。各々が全体として参照により組み込まれている米国特許第４，４７４，７６８号およびＢｒｉｇｈｔ，Ｇ．Ｍ．他、Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．１９８８、４１、１０２９〜１０４７も参照されたい。
【００８０】
ｂ）Ｘ１が、−ＯＣ（Ｏ）−であり、Ｑが、−ＣＨ２−またはＮＨであり、Ｘ２が、−ＮＨ−である式Ｉによって表される化合物は、アセトニトリルなどの溶媒中で、式
【００８１】
【化３０】
2008526952.tif 000032
によって表されるマクロライドサブユニット（４’’は、クラジノース糖などの糖Ｓ２上の４位である）と、
式
【００８２】
【化３１】
2008526952.tif 000033
によって表される遊離アミノ基を有するサブユニットＰを反応させることによって調製し、  
【００８３】
【化３２】
2008526952.tif 000034
を得ることができる。
【００８４】
誘導体化されたサブユニットＰ（すなわち、Ｐ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｋ−ＮＨ２）は、適切なアミン（連結基−Ｋ−ＮＨ２を有する）を、サブユニットＰのカルボン酸基と反応させることによって形成させることができる。
【００８５】
ｃ）Ｘ１が、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−であり、Ｘ２が、−ＮＨ−である式Ｉによって表される化合物は、以下に示すようにマクロライドサブユニットと遊離アミノ基を有する誘導体化されたサブユニットＰを反応させることによって調製することができる。
【００８６】
【化３３】
2008526952.tif 000035
【００８７】
ｄ）Ｘ１が、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−であり、Ｘ２が、−ＮＨ−である式Ｉによって表される化合物は、以下に示すようにマクロライドサブユニットと遊離アミノ基を有する誘導体化されたサブユニットＰを反応させることによって調製することができる。
【００８８】
【化３４】
2008526952.tif 000036
【００８９】
式Ｉによって表される化合物（Ｍ−ビオチン−光親和性基）は、以下に示すようにマクロライドサブユニットＶＩＩａとＦｍｏｃビオサイチンを反応させることによっても調製することができる。
【００９０】
【化３５】
2008526952.tif 000037
【００９１】
Ｆｍｏｃビオサイチン（Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎε−ビオチニル−Ｌ−リジン）および５−アジド−２−ニトロ安息香酸−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルは、市販されている（Ｆｌｕｋａ）。
【００９２】
１６員環マクロライドは伝統的に、それらのアグリコンの置換パターンに基づいてサブファミリーに分類される。このファミリーの主要な基本型は、ロイコマイシン、スピラマイシンおよびタイロシンによって表すことができる。
【００９３】
タイロシンは、１６員マクロライドの代表であり、２個の二重結合のある高度に置換されたアグリコン（タイロノリド（ｔｙｌｏｎｏｌｉｄｅ））および５−ヒドロキシル基に結合している二糖の他に第三のサッカリド置換基（β−Ｄ−マイシノース（ｍｙｃｉｎｏｓｅ））β−Ｄ−マイコシン（ｍｙｃｏｓｉｎｅ）を有する。二糖からマイカロースを加水分解すると、デスマイカロシル（ｄｅｓｍｙｃａｒｏｓｙｌ）−タイロシン（デスマイコシン（ｄｅｓｍｙｃｏｓｉｎ））が得られた。
【００９４】
デスマイコシンにおける修飾の可能な部位：
【００９５】
【化３６】
2008526952.tif 000038
【００９６】
例えば、１６員環マクロライドハイブリッドは、Ｃ−２０アルデヒド基の還元的アミノ化によって調製することができよう。
【００９７】
【化３７】
2008526952.tif 000039
【００９８】
この反応は、８ａ−アザ−ホモデスマイコシンおよびその誘導体（ジヒドロおよびテトラヒドロ誘導体など）のような１７員アザライドについても使用できよう。
【００９９】
【化３８】
2008526952.tif 000040
【０１００】
１６員環マクロライド誘導体化における他の可能性には、エポキシ化による二重結合の変換、およびエポキシ基を適切な反応剤（ジアミンなど）で切断して反応剤マクロライドサブユニット（Ｍ−ＣＨ２−ＮＨ−Ｋ−ＮＨ２）を得ることが含まれる。
【０１０１】
さらに、９位のケトンをヒドロキシルアミン塩酸塩によって修飾してオキシムを取得し、次いで、アミンに還元することができる。
【０１０２】
ターゲティング
本発明からの化合物は、標的蛋白、すなわちこの化合物と相互作用する蛋白、ペプチドまたはポリペプチドの同定のために使用される。標的同定は、以下の手法を用いて行うことができることが知られている。
【０１０３】
手法の１つは、ファージディスプレーである。この手法では、それらの表面上にランダムなポリペプチド、ｃＤＮＡまたは遺伝子フラグメントライブラリーを発現するファージ粒子を、固定化された化合物または可溶性の化合物と一緒にインキュベートする。個々のファージは、蛋白またはポリペプチドの化合物との相互作用を介して取り出され、それらをコードするＤＮＡ配列によって同定される。この手法では、ビオチンまたはイミノビオチンタグは、固体支持体上、例えば、ストレプトアビジンをコーティングした９６ウエルプレートまたは磁気ビーズ上に化合物を固定化するため、あるいはストレプトアビジンをコーティングした固体支持体上に形成されるファージ−化合物複合体を溶液中で捕捉するために使用される。
【０１０４】
もう１つの手法は、親和性に基づく方法を用いる。ビオチンまたはイミノビオチンタグ付き化合物を、様々な起源、例えば、細胞ライセート、血漿、尿などからの標的蛋白と結合させる。これは、溶液中で、（すなわち、ビオチンまたはイミノビオチンタグ付き化合物を、ライセート、血漿、尿などと混合することにより）または表面上に固定化されたビオチンまたはイミノビオチンタグ付き化合物を有するストレプトアビジン含有固体マトリックスを、ライセート、血漿、尿などと混合することによって行うことができる。
【０１０５】
標的結合の特異性は、光反応性基、例えば、アリール−アジドによる化合物の誘導体化によって改善される。この手法では、親和結合に加え、化合物は、電磁放射線で光活性化基を刺激することにより標的蛋白と共有結合する。溶液中で形成される複合体の場合には、ストレプトアビジン含有マトリックスを、共有結合した複合体にその後加える。
【０１０６】
次いで、化合物−蛋白複合体を、ストレプトアビジン含有固体マトリックスに結合しているビオチンまたはイミノビオチンタグを用いて単離する。単離された蛋白は、例えば、質量分析法によって同定される。
【０１０７】
本発明が特に有用なのは、この結合蛋白が、マクロライド−蛋白相互作用が比較的弱い場合でさえ、洗浄工程中にマクロライド部分から解離しないからである。この利点は、洗浄工程中の標的（蛋白）の解離を防ぐ、光親和性基とマクロライド分子（プローブ）間の共有結合に起因する。この手法は、それらの結合親和性に関係なく（一定）、すべての標的を同定するための基礎を提供する。
【０１０８】
本発明の化合物、プロセスおよび方法は、例示としてのみであって本発明の範囲を限定することを意図していない以下の実施例との関連でより良く理解されるであろう。開示されている実施形態に対する様々な変更および改変は、当業者には明らかであろうし、本発明の化学構造、置換基、誘導体処方および／または方法に関連するものを含むが、それらに限定されないそのような変更および改変は、本発明の精神および添付の特許請求の範囲を逸脱することなく行うことができる。
実験
【０１０９】
【表１−１】
2008526952.tif 000041
【表１−２】
2008526952.tif 000042
【表１−３】
2008526952.tif 000043
【０１１０】
アジスロマイシンアミンＭ１およびＭ２は、国際特許出願ＷＯ０２／０５５５３１Ａ１に記載されているような手順によって調製することができる。アミンＭ３は、国際特許出願ＷＯ２００４／０９４４９Ａ１に記載されているような手順によって調製することができる。アミンＭ４およびＭ６は、国際特許出願ＷＯ２００４／００５３１０Ａ２に記載されているような手順によって調製することができる。
【０１１１】
アミンＭ５、Ｍ７およびＭ１０は、全体として参照により本明細書に組み込まれている米国仮出願６０／６４３，８４１においてそれらが調製されたのと同じ手順によって調製することができる。より詳細には、Ｍ５は、アクリロニトリル中の２’−Ｏ−アセチル−１１−Ｏ−メチル−アジスロマイシンの溶液を、窒素下で０℃にて１時間、ｔ−ＢｕＯＨおよびＮａＨと一緒に撹拌することによって調製することができる。アクリロニトリルを蒸発させ、残渣をＤＣＭに溶かし、水で抽出する。有機層を濾過し、乾燥し、ＰｔＯ２と一緒に氷酢酸に溶かす。反応混合物を、Ｐａｒｒ装置中で水素化し、溶媒および触媒を除去し、化合物を抽出し、乾燥し、ＭｅＯＨに溶かす。混合物を５０℃にて１８時間撹拌し、ＭｅＯＨを蒸発させた後に生成物が得られる。
【０１１２】
Ｍ７を得るには、１１，１２−カーボネート−１１，１２−ジデオキシ−２’−Ｏ−アセチル−６−Ｏ−メチルエリスロマイシンＡ９−Ｏ−（１−イソプロポキシヘキシル）オキシムを含有する溶液を、（ａ）残渣を、ＤＣＭの代わりに酢酸エチルに溶かし、（ｂ）得られる生成物をＣＨＯＯＨおよびＮａ２Ｓ２Ｏ５と混合し、ＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏに溶かすことを除いて、Ｍ５について記載したのと類似の条件下で反応させる。反応混合物を８０℃まで温めて撹拌する。溶媒の蒸発、希釈、ｐＨ調製、有機層の抽出、乾燥、および精製後に、化合物Ｍ７が得られる。
【０１１３】
マクロラドＭ１０を得るには、乾燥メタノール中の化合物２’−Ｏ−アセチル−４″−Ｏ−プロペノイル−６−Ｏ−メチル−９ａ−アザ−９ａ−ホモエリスロマイシンＡ（参照により組み込まれているＷＯ０３／０４２２２８に従って調製）の溶液にジエチルアミンを加える。反応混合物を、４０℃にて一夜撹拌する。生成物をアクリロニトリル中で混合し、一夜還流する。２’−Ｏ−アセチル基の脱保護後、中間体をＰｔＯ２の存在下で氷酢酸に溶かし、水素雰囲気下で一夜撹拌する。濾過、蒸発、および精製により、Ｍ１０生成物が得られる。
【０１１４】
化合物Ｍ９は、国際特許出願ＷＯ０３／０４２２２８Ａ１に記載されているような手順に従って調製することができる。
【実施例１】
【０１１５】
化合物１：
アルゴン下で乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中のビオチン（７０ｍｇ；０．２９ｍｍｏｌ）の懸濁液に、トリエチルアミン（０．３８０ｍＬ、２．７３ｍｍｏｌ）；１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（８０ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）；アミンＭ１（２３０ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチル−カルボジイミド塩酸塩（２３５ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、アルゴンの流れの中で室温にて２４時間撹拌し、次いで、少量まで蒸発させ、シリカゲルカラム（溶出液：ＣＨＣｌ３：ＣＨ３ＯＨ：ＮＨ４ＯＨ＝６：１：０．１）で精製すると、化合物１（１６６ｍｇ）が得られた。
ＭＳ（ｍ／ｚ）：１０１８．４０［ＭＨ］＋。
【実施例２】
【０１１６】
化合物２：
化合物２は、実施例１に記載されている手順に従い、アミンＭ１および２−イミノビオチンから出発して調製する。
【実施例３】
【０１１７】
化合物３：
乾燥ＤＭＦ（５００μＬ）中のスルホ−ＳＢＥＤ（スルホスクシンイミジル−２−［６−（ビオチンアミド）−２−（ｐ−アジドベンズアミド）ヘキサノアミド］エチル−１，３’−ジチオプロピオネート（１０ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）；ＰＩＥＲＣＥ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、ＩＬ、ＵＳＡから入手）の溶液に、アミンＭ１（９ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）を加え、室温にて２時間、暗所で撹拌した。次いで、混合物を減圧下で濃縮した。残渣を、カラムクロマトグラフィー（溶出液：ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ＝６／１／０．１）により精製すると、化合物３（１２ｍｇ）が得られた。ＭＳ（ｍ／ｚ）：１４５４．６０［ＭＨ］＋。
【実施例４】
【０１１８】
化合物４：
化合物４（１２．８４ｍｇ）は、実施例３に記載されている手順に従い、アミンＭ５（９．７ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）から出発して調製した。
ＭＳ（ｍ／ｚ）：１４６８．３４［ＭＨ］＋。
【実施例５】
【０１１９】
化合物５：
化合物５は、マクロライドＭ９から出発して調製する。マクロライドを、メタノール中で５−（ビオチンアミド）ペンチルアミンと混合し、５５℃にて一夜反応させる。次いで、混合物を減圧下で濃縮する。残渣を、カラムクロマトグラフィー（溶出液：ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ：ＮＨ４ＯＨ＝６／１／０．１）により精製すると、化合物５が得られる。
【実施例６】
【０１２０】
化合物６：
化合物６は、実施例３に記載されている手順に従い、アミンＭ１０から出発して調製する。
【実施例７】
【０１２１】
化合物７：
化合物７は、実施例３に記載されている手順に従い、アミンＭ２から出発して調製する。
【実施例８】
【０１２２】
化合物８：
化合物８は、実施例３に記載されている手順に従い、アミンＭ３から出発して調製する。
【実施例９】
【０１２３】
化合物９：
化合物９（９．５５ｍｇ）は、実施例３に記載されている手順に従い、アミンＭ４（９ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）から出発して調製した。
ＭＳ（ｍ／ｚ）：１４５５．３２［ＭＨ］＋。
【実施例１０】
【０１２４】
化合物１０：
化合物１０（７．１９ｍｇ）は、実施例３に記載されている手順に従い、アミンＭ６（９ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）から出発して調製した。
ＭＳ（ｍ／ｚ）：１４５５．３７［ＭＨ］＋。
【実施例１１】
【０１２５】
化合物１１：
アミンＭ１１
アルゴン下で乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中の１２−（ＦＭＯＣ−アミノ）ドデカン酸（２５４ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）の懸濁液に、トリエチルアミン（０．７６０ｍＬ）；１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１６０ｍｇ）；Ｍ１（４６０ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチル−カルボジイミド塩酸塩（４７０ｍｇ）を加えた。反応混合物を、室温にて２４時間撹拌し、次いで、少量まで蒸発させ、シリカゲルカラム（溶出液：ＣＨＣｌ３：ＣＨ３ＯＨ：ＮＨ４ＯＨ＝６：１：０．１）で精製した。ＦＭＯＣで保護された化合物（１３７ｍｇ）を酢酸エチル（５ｍＬ）に溶かし、ピペリジン（２ｍＬ）を加え、得られた反応混合物を室温にて３時間撹拌し、次いで、減圧下で濃縮すると、アミンＭ１１（１４０ｍｇ）が得られた。
【０１２６】
化合物１１
化合物１１（２３ｍｇ）は、実施例１に記載されている手順に従い、アミンＭ１１（１００ｍｇ）から出発して調製した。
ＭＳ（ｍ／ｚ）：１２１５．４２［ＭＨ］＋。
【実施例１２】
【０１２７】
化合物１２：
アミンＭ１２
アミンＭ１２（２９９ｍｇ）は、実施例１１のアミンＭ１１についての手順に従い、アミンＭ４から出発して調製した。
【０１２８】
化合物１２
化合物１２（３６ｍｇ）は、実施例１に記載されている手順に従い、アミンＭ１２（１５０ｍｇ）から出発して調製した。
ＭＳ（ｍ／ｚ）：１２１５．８７［ＭＨ］＋。
【実施例１３】
【０１２９】
化合物１３：
アミンＭ８
【０１３０】
【化３９】
2008526952.tif 000044
【０１３１】
工程１：１１−シアノエトキシクラリスロマイシン
２’，４’’−Ｏ−ジ−アセチルクラリスロマイシン（１．２４ｇ、１．４９ｍｍｏｌ）をアクリロニトリル（２９．５ｍｌ）に溶かし、室温にて撹拌した。ｔｅｒｔ−ブタノール（０．１４ｍｌ）を加え、溶液を０℃まで冷却し、次いでＮａＨ（０．０６ｇ、２．５０ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温にて２４時間撹拌した。反応が完結した後、アクリロニトリルを減圧下で蒸発させた。水（２０ｍｌ）およびジクロロメタン（２０ｍｌ）を加え、層を分離した。有機層を飽和水溶液ＮａＨＣＯ３、水および食塩水で抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させると、ジ−アセチルで保護されたシアノクラリスロマイシン（１．８５ｇ）が得られ、メタノール中でＬｉＯＨによる脱保護後に、１１−シアノエトキシクラリスロマイシン（１．０４ｇ）が得られた。
ＭＳ：ｍ／ｚ＝８０１．４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３２】
工程２：アミンＭ８
工程１で得られた化合物（０．２６ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を、室温にて氷酢酸（１５ｍｌ）に溶かし、酸化白金（ＩＶ）（０．１ｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、４．５バール（４５０ｋＰａ）の圧力下で５時間水素化し、触媒を濾過により除去し、濾液を真空中で濃縮すると、粗生成物が得られた。次いで、ジクロロメタンおよび水を粗生成物に加えた。７．６および９．５におけるグラジエント抽出を行い、ｐＨ９．５にて得られた有機層を蒸発させた後に、アミンＭ８（０．６２ｇ）が得られた。
ＭＳ：ｍ／ｚ＝８０５．７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３３】
化合物１３
化合物１３（８．１６ｍｇ）は、実施例３に記載されている手順に従い、アミンＭ８（９ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）から出発して調製した。
ＭＳ（ｍ／ｚ）：１４６７．８０［ＭＨ］＋。
【実施例１４】
【０１３４】
化合物１４
化合物１４（５．６５ｍｇ）は、実施例３に記載されている手順に従い、アミンＭ７（９ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）から出発して調製した。
ＭＳ（ｍ／ｚ）：１４６７．６０［ＭＨ］＋。
【実施例１５】
【０１３５】
実施例９からの化合物（１ｍＭ）をジメチルスルホキシド（２０μＬ）（Ｋｅｍｉｋａ、Ｃｒｏａｔｉａ）に溶かし、暗所で室温にて６０分間、ヒト血清（健常志願者の静脈血から得た）と一緒にインキュベートした。その後、混合物に、Ｓｐｅｃｔｒｏｌｉｎｅ  ＣＸ−２０  Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｃａｂｉｎｅｔ（Ｓｐｅｃｔｒｏｎｉｃｓ、ＵＳＡ）中で１５分間、紫外光（３６５ｎｍ）を照射し、次いで、４℃にてＳｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅマトリックス（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓｗｅｄｅｎ）と一緒に一夜インキュベートした。マトリックスを、ＮａＣｌ（１５０ｍＭ）を含有するｐＨ７．５のリン酸緩衝液（２０ｍＭ）で洗浄し、短時間遠心分離して結合してない蛋白分画を除去した。この手順を３回繰り返した。蛋白と共有結合している化合物９を、グアニジン塩酸塩、ｐＨ１．５（８Ｍ）でマトリックスから溶出した。その後、蛋白を、ＰｒｏｔｅｏＥｘｔｒａｃｔ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ、ＵＳＡ）を用いて沈殿させ、ポリアクリルアミドゲル上のＳＤＳ電気泳動により分離した。α１−酸性糖蛋白は、モノクローナル抗体（Ｓｉｇｍａ、ＵＳＡ）を用いるウエスタンブロットのより検出した（図１を参照）。
【０１３６】
これは、ヒト血清からのα１−酸性糖蛋白が、化合物９と結合する蛋白の１つであることを裏付けた。同様に、この手法を用い、本発明の化合物と相互作用する他の蛋白を同定することができる。
【図面の簡単な説明】
【０１３７】
【図１】α１−酸性糖蛋白の検出を示す図である。図１Ａは銀染色を提供する図である。図１Ｂはウエスタンブロットを提供する図である。
【図１】
2008526952.tif 000059
【国際調査報告】
2008526952.tif 000060
2008526952.tif 000061
2008526952.tif 000062