(57)【要約】高い熱力学的安定性と溶解性を有する。タクロリムス、置換シクロデキストリン誘導体、及び有機酸を含む、非晶性のタクロリムス固体分散体は高い放出性と生適合性を提供できる。
2008529999.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
タクロリムス、下記式（ＩＩ）の置換されたα−、β−またはγ−シクロデキストリン誘導体、及び有機酸を含む非晶質タクロリムス固体分散体：
【化１】
2008529999.tif 000025
（式中、
ｎは６〜８の整数であり、
Ｒはヒドロキシ、カルボキシまたはカルボキシＣ１−４アルコキシで置換または非置換されたＣ１−６アルキル、またはスルホＣ１−４アルコキシである。）
【請求項２】
前記タクロリムス、置換されたシクロデキストリン誘導体、及び有機酸が１：０.１〜２０：０.１〜１０の重量比で含まれることを特徴とする、請求項１に記載の非晶質タクロリムス固体分散体。
【請求項３】
界面活性剤、水溶性高分子または薬剤学的に許容される添加剤をさらに含むことを特徴とする、請求項１に記載の非晶質タクロリムス固体分散体。
【請求項４】
前記置換されたシクロデキストリン誘導体が、２−ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、２，６−ジメチル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−７−β−シクロデキストリン、（２−カルボキシメトキシ）プロピル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシエチル−γ−シクロデキストリン、及び２−ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリンからなる群から選ばれることを特徴とする、請求項１に記載の非晶質タクロリムス固体分散体。
【請求項５】
前記置換されたシクロデキストリン誘導体が、２−ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、２，６−ジメチル−β−シクロデキストリン、及びスルホブチルエーテル−７−β−シクロデキストリンからなる群から選ばれることを特徴とする、請求項４に記載の非晶質タクロリムス固体分散体。
【請求項６】
前記有機酸が、エリソルビン酸、クエン酸、酒石酸、アスコルビン酸、乳酸、リンゴ酸、コハク酸、酢酸、トリクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸、ジメチルトリアミンペンタ酢酸、ピルビン酸、マロン酸、ミリスチン酸、ピクリン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、p−アミノ安息香酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、エデト酸、ソルビン酸、アジピン酸、グルコン酸、アミノカプロン酸、グリシルリジン酸、イソステアリン酸 、ドデシルベンゼンスルホン酸、フマル酸、マレイン酸、シュウ酸、酪酸、パルミチン酸、スルホン酸、スルフィン酸、ギ酸、プロピオン酸、タンニン酸、パントテン酸、アスパラギン酸、アミノ酢酸、ＤＬ−ａ−アミノプロピオン酸及びこれらの混合物からなる群から選ばれることを特徴とする、請求項１に記載の非晶質タクロリムス固体分散体。
【請求項７】
前記有機酸が、エリソルビン酸またはクエン酸であることを特徴とする、請求項６に記載の非晶質タクロリムス固体分散体。
【請求項８】
前記界面活性剤が、ポリオキシエチレン−ソルビタン−脂肪酸エステル類；ソルビタン脂肪酸エステル類；ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロック共重合体；天然または水素化植物油とエチレングリコールとの反応生成物；ポリオキシエチレン脂肪酸エステル類；ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム；ラウリル硫酸ナトリウム；グリセロールのモノエステル、ジエステル及びトリエステルの混合物；ポリエチレングリコールのモノエステル及びジエステル；及びポリエチレングリコールからなる群から選ばれることを特徴とする、請求項３に記載の非晶質タクロリムス固体分散体。
【請求項９】
前記水溶性高分子が、アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、ヒドロキシアルキルアルキルセルロース、カルボキシアルキルセルロース及びそのアルカリ金属塩、カルボキシアルキルアルキルセルロース、カルボキシアルキルセルロースエステル、でんぷん、ペクチン、キチン誘導体、多糖類、ポリアクリル酸及びその塩、ポリメタクリル酸及びその塩、メタクリレート共重合体、アミノアルキルメタクリレート共重合体、ポリビニルアセタール、ジエチルアミノアセテート、糖質系界面活性剤、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリビニルピロリドンと酢酸ビニルとの共重合体、ポリアルキレンオキシド、及びエチレンオキシドとプロピレンオキシドとの共重合体からなる群から選ばれることを特徴とする、請求項３に記載の非晶質タクロリムス固体分散体。
【請求項１０】
請求項１記載の非晶質タクロリムス固体分散体、界面活性剤、水溶性高分子及び薬剤学
的に許容される添加剤を含む、医薬組成物。
【請求項１１】
（１）置換されたシクロデキストリン誘導体及び有機酸を有機溶媒に溶解または分散させる段階；
（２）タクロリムスを有機溶媒に溶解させる段階；及び
（３）前記段階で得られた分散液及び溶液を混合した後、これを噴霧乾燥して溶媒を除去する段階を含む、請求項１記載の非晶質タクロリムス固体分散体の製造方法。
【請求項１２】
前記段階（２）の有機溶媒がエタノール、イソプロピルアルコール、アセトン、アセトニトリル、ジクロロメタン、クロロホルム及びこれらの混合溶媒からなる群から選ばれることを特徴とする、請求項１１記載の非晶質タクロリムス固体分散体の製造方法。
【請求項１３】
前記段階（１）の溶液に界面活性剤、水溶性高分子または薬剤学的に許容される添加剤をさらに添加することを特徴とする、請求項１１記載の非晶質タクロリムス固体分散体の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、タクロリムス、置換されたシクロデキストリン誘導体、及び有機酸を含み、タクロリムスの優れた生体利用率を示す、非晶質タクロリムス固体分散体及びこれを含む医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
下記式（Ｉ）のタクロリムス（またはＦＫ−５０６；（−）−（１Ｒ，９Ｓ，１３Ｒ，１４Ｓ，１７Ｒ，１８Ｅ，２１Ｓ，２３Ｓ，２４Ｒ，２５Ｓ，２７Ｒ）−１７-アリル−１，１４−ジヒドロキシ−１２−［（Ｅ）−２−［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘキシル］−１−メチルビニル］−２３，２５−ジメトキシ−１３，１９，２１，２７−テトラメチル１−１１，２８−ジオキサ−４−アザトリシクロ［２２．３．１．０４．９］オクタコス−１８−エン−２，３，１０，１６−テトロン水和物［１０４９８７−１１−３］）は田中及び黒田らによって発見されたマイクロライド系免疫抑制剤である（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１０９：５０３１（１９８７）及び米国特許第４，８９４，３６６号参照）：
【化１】
2008529999.tif 000003
【０００３】
現在、タクロリムスは、臓器移植拒絶反応の抑制を目的として米国食品医薬品局（U.S. Food and Drug Administration）からプログラフカプセル（Prograf（登録商標） capsule, 藤沢薬品工業（株）製, 日本国）として承認され、その他にもアトピー性皮膚炎の治療のための軟膏剤としてプロトピック（Ｐｒｏｔｏｐｉｃ（登録商標））としても承認された。また、タクロリムスと関連する化合物は、アレルギー性脳脊髄炎、膠原性関節炎、喘息のような閉塞性気管支炎、男性型脱毛症、糖尿疾患、後部ブドウ膜炎のような眼疾患、肝臓の損傷による局所的貧血、糸球体腎炎、全身性エリテマトーデス、多剤耐性、粘膜及び血管の炎症、サイトメガロウイルス感染、特発性血小板減少性紫斑病、及び甲状腺機能亢進症などの治療にも有用であると知られている。
【０００４】
タクロリムスは、白色結晶または結晶性粉末であり、無水エタノールのような有機溶媒に溶けやすいが、水に対しては不溶性である。従って、水不溶性のタクロリムスは、経口投与の際、生体利用率が低いという問題がある。
【０００５】
このような問題を解決するために、韓国特許公開第１９８７−１００７３号は、有機溶媒に溶解させた水不溶性のタクロリムスに水溶性高分子を加えた後、必要に応じて賦形剤及び崩壊剤などのような添加剤を懸濁させて均質な懸濁液を得、通常の方法により有機溶媒を除去してタクロリムス及び水溶性高分子を含む固体分散組成物を製造する段階を含む、市販のプログラフカプセルの製造方法を開示した。
【０００６】
そこで、本発明者らは置換されたシクロデキストリン誘導体及び有機酸と共にタクロリムスを噴霧乾燥して製造されたタクロリムスの固体分散体がヒドロキシプロピルメチルセルロースを含む既存のタクロリムス製剤より活性成分の安定性及び溶解度に優れていることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００７】
【特許文献１】米国特許第４，８９４，３６６号
【特許文献２】韓国特許公開第１９８７−１００７３号
【非特許文献１】Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１０９：５０３１（１９８７）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
従って、本発明の目的は、既存のタクロリムス製剤より高い水溶性及び生体利用率が有するタクロリムス固体分散体及びその製造方法を提供することである。
本発明の他の目的は、前記タクロリムス固体分散体を含む経口投与用の医薬組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
前記目的を達成するために、本発明は、タクロリムス、式（ＩＩ）の置換されたα−、β−またはγ−シクロデキストリン誘導体、及び有機酸を含む非晶質タクロリムス固体分散体を提供する。
【化２】
2008529999.tif 000004
（式中、
ｎは６〜８の整数であり、
Ｒはヒドロキシ、カルボキシまたはカルボキシＣ１−４アルコキシで置換または非置換されたＣ１−６アルキル、またはスルホＣ１−４アルコキシである。）
前記他の目的を達成するために、本発明は、界面活性剤、水溶性重合体または薬剤学的に許容される添加剤をさらに含む前記固体分散体を提供する。
【００１０】
次に、本発明によるタクロリムスを含む固体分散体の各構成成分を説明する。
（１）置換されたシクロデキストリン誘導体
本発明で用いられる式（ＩＩ）の置換されたシクロデキストリン誘導体は、高い水溶性及び生体利用率を有する非晶質固体分散体の形成に用いられる必須成分である。前記置換されたシクロデキストリン誘導体の代表的な例としては２−ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン 、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、２，６−ジメチル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−７−β−シクロデキストリン、（２−カルボキシメトキシ）プロピル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシエチル−γ−シクロデキストリン及び２−ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリンなどが挙げられ、特に２−ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、２，６−ジメチル−β−シクロデキストリン及びスルホブチルエーテル−７−β−シクロデキストリンがより好ましい。前記置換されたシクロデキストリン誘導体は単独でまたはこれらの混合物の形態で用いられ得る。
【化３】
2008529999.tif 000005
（式中、
ｎは６〜８の整数であり、
Ｒはヒドロキシ、カルボキシまたはカルボキシＣ１−４アルコキシで置換または非置換されたＣ１−６アルキル、またはスルホＣ１−４アルコキシである。）
【００１１】
（２）有機酸
本発明で用いられる有機酸は、本発明の固体分散体の製剤に、タクロリムスを安定化するために用いられる通常の薬剤学的に許容される有機酸のいずれかであってよい。前記有機酸の代表的な例としては、エリソルビン酸 、クエン酸、酒石酸、アスコルビン酸、乳酸、リンゴ酸、コハク酸、酢酸、トリクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸、ジメチルトリアミンペンタ酢酸、ピルビン酸、マロン酸、ミリスチン酸、ピクリン酸、メタンスルホン酸 、エタンスルホン酸、p−アミノ安息香酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、エデト酸 、ソルビン酸、アジピン酸、グルコン酸、アミノカプロン酸、グリシルリジン酸、イソステアリン酸 、ドデシルベンゼンスルホン酸、フマル酸、マレイン酸、シュウ酸、酪酸、パルミチン酸、スルホン酸、スルフィン酸、ギ酸、プロピオン酸、タンニン酸、パントテン酸、アスパラギン酸、アミノ酢酸、ＤＬ−ａ−アミノプロピオン酸及びこれらの混合物などが挙げられ、特にエリソルビン酸及びクエン酸が好ましい。
【００１２】
（３）添加剤
本発明では、固体分散体の流動性及び物性を向上させるために、薬剤学的に許容される界面活性剤、水溶性高分子、賦形剤、滑沢剤などのような添加剤が用いられ得、これらの例は次の通りである。
【００１３】
i）界面活性剤
（イ）  ポリオキシエチレン−ソルビタン−脂肪酸エステル類：
モノラウリン酸またはトリラウリン酸エステル、パルミチン酸エステル、ステアリン酸またはオレイン酸エステル（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）、Ｕｎｉｑｕｅｍａ社製）、
（ロ）  ソルビタン脂肪酸エステル類：
ソルビタンモノラウリル酸エステル、ソルビタンモノパルミチン酸エステル、またはソルビタンモノステアリン酸エステル（Ｓｐａｎ（登録商標）、Ｕｎｉｑｕｅｍａ社製）、
（ハ）  ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロック共重合体（ポロキサマー類）、
（ニ）  天然または水素化植物油とエチレングリコールとの反応生成物：
ポリオキシエチレングリコール化された天然または水素化されたヒマシ油（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）、ＢＡＳＦ社製）、
（ホ）  ポリオキシエチレン脂肪酸エステル類：
ポリオキシエチレンステアリン酸エステル（Ｍｙｒｊ（登録商標）、Ｕｎｉｑｕｅｍａ社製）
（ヘ）  ジオクチルスルホコハク酸ナトリウムまたはラウリル硫酸ナトリウム、及び
（ト）  グリセロールモノエステル、ジエステル及びトリエステルの混合物、ポリエチレングリコールのモノエステル及びジエステルまたはポリエチレングリコール（Ｇｅｌｕｃｉｒｅ（登録商標）、Ｇａｔｔｅｆｏｓｓｅ）
上述した界面活性剤のうち、特にポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロック共重合体、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル類、グリセロールのモノエステル、ジエステル及びトリエステルの混合物、ポリエチレングリコールのモノエステル及びジエステル、ポリエチレングリコール、ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム及びラウリル硫酸ナトリウムが好ましく、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロック共重合体がより好ましい。
【００１４】
ii）水溶性高分子
本発明では、固体分散体の流動性及びその他の物性を向上させるために、少なくとも一つの水溶性高分子を任意に添加でき、その代表的な例としては、メチルセルロースのようなアルキルセルロース；ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース及びヒドロキシブチルセルロースのようなヒドロキシアルキルセルロース；ヒドロキシエチルメチルセルロース及びヒドロキシプロピルメチルセルロースのようなヒドロキシアルキルアルキルセルロース；カルボキシメチルセルロースのようなカルボキシアルキルセルロース；カルボキシメチルセルロースナトリウムのようなカルボキシアルキルセルロースのアルカリ金属塩；カルボキシメチルエチルセルロースのようなカルボキシアルキルアルキルセルロース；カルボキシアルキルセルロースエステル；でんぷん；カルボキシメチルアミロペクチンナトリウムのようなペクチン；キトサンのようなキチン誘導体；アルギン酸、そのアルカリ金属及びアンモニウム塩、カラギーナン、ガラクトマンナン、トラガカント、寒天、アラビアゴム、グアーガム及びキサンタンガムのような多糖類；ポリアクリル酸及びその塩；ポリメタクリル酸及びその塩、メタクリレート共重合体、アミノアルキルメタクリレート共重合体；ポリビニルアセタール、及びジエチルアミノアセテート；ジステアリン酸スクロース、モノ／ジステアリン酸スクロース及びモノペルミチン酸スクロースのような糖質系界面活性剤；ポリビニルアルコール；ポリビニルピロリドン、及びポリビニルピロリドンと酢酸ビニルとの共重合体；ポリエチレンオキシド及びポリプロピレンオキシドのようなポリアルキレンオキシド；及びエチレンオキシドとプロピレンオキシドとの共重合体からなる群から選ばれることができる。
上述した水溶性高分子のうち、特にアルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、ヒドロキシアルキルアルキルセルロース及びポリビニルピロリドンなどが好ましく、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース及びポリビニルピロリドンなどがより好ましい。
【００１５】
iii）賦形剤及び滑沢剤
本発明では、固体分散体を含む経口投与用組成物の製造の際に、固体分散体の流動性及びその他の物性を向上させるために、少なくとも一つの薬剤学的に許容可能な賦形剤を任意に添加することができる。前記薬剤学的に許容可能な賦形剤としては、乳糖、でんぷん、デンプングリコール酸ナトリウム、クロスポビドン、クロスカルメロースナトリウム、マルトデキストリン、微結晶性セルロース、リン酸カルシウム、重炭酸カルシウム及び結晶セルロースからなる群から選ばれることができ、また、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム及びタルクのような滑沢剤も用いられ得る。
【００１６】
本発明の非晶質タクロリムス固体分散体の製造の際に、薬理学的活性成分であるタクロリムス、置換されたシクロデキストリン誘導体及び有機酸は１：０.１〜２０：０.１〜１０の重量比、もしくは、１：０.１〜１０：０.１〜５の重量比で用いられる。界面活性剤、賦形剤、滑沢剤などの添加剤は、タクロリムス１重量部に対して２０重量部以下の量で用いることができる。また、下記実施例で記述する本発明の組成物をその好ましい例として挙げることができる。
【００１７】
本発明の非晶質タクロリムス固体分散体は、ＤＳＣ（differential scanning calorim
eter）上で吸熱ピークを殆ど示さないだけでなく、粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて結晶性回折ピークを示さないため、本発明の固体分散体に含まれたタクロリムスは安定した非晶質であることが分かる。
【００１８】
本発明の固体分散体は（１）置換されたシクロデキストリン誘導体及び有機酸を有機溶媒に溶解または分散させる段階、（２）タクロリムスを有機溶媒に溶解させる段階、及び（３）前記段階で得られた分散液及び溶液を混合した後、これから溶媒を除去する段階を含む方法によって製造され得る。
前記製法において、必要に応じて前記段階（１）の溶液に一つ以上の薬剤学的に許容される界面活性剤などの添加剤をさらに溶解または分散させることができる。また、前記段階（２）の有機溶媒としては、エタノール、イソプロピルアルコール、アセトン、アセトニトリル、ジクロロメタン、クロロホルムまたは適切な有機溶媒のいずれかを用いることができる。前記段階（３）では、噴霧乾燥法、ローラー乾燥法、溶媒沈殿法または凍結乾燥法などを用いて溶媒を除去することにより、非晶質タクロリムス固体分散体を得る。
また、本発明では、薬剤学的に許容される担体、賦形剤及び添加剤などと共に前記固体分散体を含むタクロリムスの経口投与用医薬組成物を提供する。この組成物は、通常の方法によって粉末、顆粒、錠剤、軟カプセル剤または硬カプセル剤、丸薬、及びコーティング製剤などに剤形化することができる。例えば、固体分散体に滑沢剤または他の医薬品添加物などを加え、粉末または顆粒の形態で軟カプセルに充填するか、打錠に必要な医薬品添加物を加えて錠剤に打錠し、必要に応じて通常的なコーティング方法によってコーティング製剤を製造することもできる。
本発明の製剤は通常の投与量で１日１回または数回経口投与することができる。
【発明の効果】
【００１９】
タクロリムス、置換されたシクロデキストリン誘導体、及び有機酸を含む本発明の非晶質タクロリムス固体分散体は熱や水分などの影響を殆ど受けないため、高い熱力学的安定性、及び溶解度を有することにより溶出率及び生体利用率に優れているという長所がある。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
以下に、本発明を実施例により詳細に説明する。但し、これらの実施例は本発明を例示するだけであり、本発明を制限しない。
【実施例】
【００２１】
実施例：タクロリムス固体分散体の製造
実施例１
２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン （Ａｌｄｒｉｃｈ社製，米国）４００ｍｇ、クエン酸２０ｍｇ及びポロキサマー１８８（Ｌｕｔｒｏｌ  Ｆ６８（登録商標），  ＢＡＳＦ社製）２０ｍｇをジクロロメタンとエタノールとの混合液に加え、溶液が透明になるまで攪拌した後、乳糖４００ｍｇを加えて均質に分散させた。エタノールに溶解されたタクロリムス１００ｍｇを前記分散液と混合した後、これを入口温度及び出口温度をそれぞれ６０℃及び４５〜５０℃に保たれた噴霧乾燥器（Ｍｉｎｉ  Ｓｐｒａｙ  Ｄｒｙｅｒ Ｂ−１９１，  Ｂｕｃｈｉ社製，スイス）を用いて、噴霧乾燥させて下記表１の組成を有するタクロリムス固体分散体を製造した。
【００２２】
実施例２
２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン２００ｍｇを用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表１の組成を有するタクロリムス固体分散体を製造した。
【００２３】
実施例３
２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン８００ｍｇを用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表１の組成を有するタクロリムス固体分散体を製造した。
【表１】
2008529999.tif 000006
【００２４】
実施例４
２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの代わりに２，６−ジメチル−β−シクロデキストリン（ＣＡＶＡＳＯＬ（登録商標）  Ｗ７  Ｍ  Ｐｈａｒｍａ，ＷＡＣＫＥＲ社製）を用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表２の組成を有するタクロリムス固体分散体を製造した。
【００２５】
実施例５
２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンの代わりにスルホブチルエーテル−７−β−シクロデキストリン（ＣＡＰＴＩＳＯＬ（登録商標），ＷＡＣＫＥＲ社製）を用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表２の組成を有するタクロリムス固体分散体を製造した。
【００２６】
実施例６
有機酸としてクエン酸の代わりにエリソルビン酸を用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表２の組成を有するタクロリムス固体分散体を製造した。
【表２】
2008529999.tif 000007
【００２７】
実施例７
界面活性剤としてポロキサマー１８８の代わりにＭｙｒｊ５２Ｓ（登録商標）（Ｕｎｉｑｅｍａ社製）を用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表３の組成を有するタクロリムス固体分散体を製造した。
【００２８】
実施例８
界面活性剤としてポロキサマー１８８の代わりにラウリル硫酸ナトリウムを用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表３の組成を有するタクロリムス固体分散体を製造した。
【００２９】
実施例９
界面活性剤としてポロキサマー１８８の代わりにソルトールを用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表３の組成を有するタクロリムス固体分散体を製造した。
【表３】
2008529999.tif 000008
【００３０】
実施例１０
医薬品添加物として乳糖の代わりにでんぷんを用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表４の組成を有するタクロリムス固体分散体を製造した。
【００３１】
実施例１１
医薬品添加物として乳糖の代わりにマルトデキストリンを用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表４の組成を有するタクロリムス固体分散体を製造した。
【００３２】
実施例１２
医薬品添加物として乳糖の代わりに微結晶性セルロースを用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表４の組成を有するタクロリムス固体分散体を製造した。
【表４】
2008529999.tif 000009
【００３３】
実施例１３
ポロキサマー１８８を用いないことを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表５の組成を有する固体分散体を製造した。
【００３４】
実施例１４
乳糖を用いないことを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表５の組成を有する固体分散体を製造した。
【００３５】
実施例１５
ポロキサマー１８８及び乳糖を用いないことを除いては、実施例１と同様な方法によって表５の組成を有する固体分散体を製造した。
【表５】
2008529999.tif 000010
【００３６】
実施例１６
クエン酸１０ｍｇを用いることを除いては、実施例８と同様な方法によって下記表６の組成を有する固体分散体を製造した。
【００３７】
実施例１７
クエン酸５０ｍｇを用いることを除いては、実施例８と同様な方法によって下記表６の組成を有する固体分散体を製造した。
【００３８】
実施例１８
クエン酸１００ｍｇを用いることを除いては、実施例８と同様な方法によって下記表６の組成を有する固体分散体を製造した。
【表６】
2008529999.tif 000011
【００３９】
実施例１９
乳糖８００ｍｇを用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表７の組成を有する固体分散体を製造した。
【００４０】
実施例２０
乳糖１,５００ｍｇを用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表７の組成を有する固体分散体を製造した。
【００４１】
実施例２１
乳糖２,０００ｍｇを用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表７の組成を有する固体分散体を製造した。
【表７】
2008529999.tif 000012
【００４２】
実施例２２
有機酸としてクエン酸及びエリソルビン酸をそれぞれ１０ｍｇずつ用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表８の組成を有する固体分散体を製造した。
【００４３】
実施例２３
医薬品添加物として乳糖及び微結晶性セルロースをそれぞれ２００ｍｇずつ用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表８の組成を有する固体分散体を製造した。
【００４４】
実施例２４
界面活性剤としてポロキサマー１８８及びラウリル硫酸ナトリウムをそれぞれ１０ｍｇずつ用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表８の組成を有する固体分散体を製造した。
【表８】
2008529999.tif 000013
【００４５】
実施例２５
２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン及びスルホブチルエーテル−７−β−シクロデキストリンをそれぞれ２００ｍｇずつ用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表９の組成を有する固体分散体を製造した。
【００４６】
実施例２６
乳糖及び水溶性高分子としてのヒドロキシプロピルメチルセルロース２９１０をそれぞれ２００ｍｇずつ用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表９の組成を有する固体分散体を製造した。
【００４７】
実施例２７
乳糖及び水溶性高分子としてのポリビニルピロリドンをそれぞれ２００ｍｇずつ用いることを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表９の組成を有する固体分散体を製造した。
【表９】
2008529999.tif 000014
【００４８】
比較例１
前記実施例１と同一な組成（表１０）を噴霧乾燥せず、単純に混合して混合物を製造した。
【００４９】
比較例２
２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを用いないことを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表１０の組成を有するタクロリムス固体分散体を製造した。
【００５０】
比較例３
クエン酸を用いないことを除いては、実施例１と同様な方法によって下記表１０の組成を有するタクロリムス固体分散体を製造した。
【表１０】
2008529999.tif 000015
【００５１】
製剤例
カプセル剤の製造
製剤例１
実施例１の固体分散体９４０ｍｇ（タクロリムス含量：１００ｍｇ）、乳糖５,４９５ｍｇ及びステアリン酸マグネシウム６５ｍｇを均質に混合した後、タクロリムス１ｍｇに当たる量を５号サイズのゼラチンカプセルに充填して下記表１１の組成を有するカプセル剤を製造した。
【００５２】
製剤例２
実施例３の固体分散体１,３４０ｍｇ（タクロリムス含量：１００ｍｇ）及び乳糖５,０９５ｍｇを用いることを除いては、製剤例１と同様な方法によって下記表１１の組成を有するカプセル剤を製造した。
【００５３】
製剤例３
実施例５の固体分散体９４０ｍｇ（タクロリムス含量：１００ｍｇ）を用いることを除いては、製剤例１と同様な方法によって下記表１１の組成を有するカプセル剤を製造した。
【表１１】
2008529999.tif 000016
【００５４】
製剤例４
実施例６の固体分散体９４０ｍｇ（タクロリムス含量：１００ｍｇ）を用いることを除いては、製剤例１と同様な方法によって下記表１２の組成を有するカプセル剤を製造した。
【００５５】
製剤例５
実施例８の固体分散体９４０ｍｇ（タクロリムス含量：１００ｍｇ）を用いることを除いては、製剤例１と同様な方法によって下記表１２の組成を有するカプセル剤を製造した。
【００５６】
製剤例６
実施例１１の固体分散体９４０ｍｇ（タクロリムス含量：１００ｍｇ）を用いることを除いては、製剤例１と同様な方法によって下記表１２の組成を有するカプセル剤を製造した。
【表１２】
2008529999.tif 000017
【００５７】
製剤例７
実施例１３の固体分散体９２０ｍｇ（タクロリムス含量：１００ｍｇ）及び乳糖５,５１５ｍｇを用いることを除いては、製剤例１と同様な方法によって下記表１３の組成を有するカプセル剤を製造した。
【００５８】
製剤例８
実施例１４の固体分散体５４０ｍｇ（タクロリムス含量：１００ｍｇ）及び乳糖５,８９５ｍｇを用いることを除いては、製剤例１と同様な方法によって下記表１３の組成を有するカプセル剤を製造した。
【００５９】
製剤例９
実施例１５の固体分散体５２０ｍｇ（タクロリムス含量：１００ｍｇ）及び乳糖５,９１５ｍｇを用いることを除いては、製剤例１と同様な方法によって下記表１３の組成を有するカプセル剤を製造した。
【表１３】
2008529999.tif 000018
【００６０】
製剤例１０
実施例１５の固体分散体３２０ｍｇ（タクロリムス含量：１００ｍｇ）及び乳糖６,１１５ｍｇを用いることを除いては、製剤例１と同様な方法によって下記表１４の組成を有するカプセル剤を製造した。
【００６１】
製剤例１１
医薬品添加物として乳糖の代りに微結晶性セルロースを用いることを除いては、製剤例１と同様な方法によって下記表１４の組成を有するカプセル剤を製造した。
【００６２】
製剤例１２
医薬品添加物として乳糖５,１９５ｍｇ及びクロスカルメロースナトリウム３００ｍｇを用いることを除いては、製剤例１と同様な方法によって下記表１４の組成を有するカプセル剤を製造した。
【表１４】
2008529999.tif 000019
【００６３】
製剤例１３
乳糖４,８４５ｍｇ及び水溶性高分子としてのヒドロキシプロピルメチルセルロース６５０ｍｇを用いることを除いては、製剤例１と同様な方法によって下記表１５の組成を有するカプセル剤を製造した。
【００６４】
製剤例１４
医薬品添加物として乳糖４,８４５ｍｇ及びクロスポビドン６５０ｍｇを用いることを除いては、製剤例１と同様な方法によって下記表１５の組成を有するカプセル剤を製造した。
【００６５】
製剤例１５
乳糖の代わりにリン酸カルシウム４,８４５ｍｇ及びクロスポビドン６５０ｍｇを用いることを除いては、製剤例１と同様な方法によって下記表１５の組成を有するカプセル剤を製造した。
【表１５】
2008529999.tif 000020
【００６６】
比較製剤例
比較製剤例１
比較例１の混合物９４０ｍｇ（タクロリムス含量：１００ｍｇ）を用いることを除いては、製剤例１と同様な方法によって下記表１６の組成を有するカプセル剤を製造した。
【００６７】
比較製剤例２
比較例２の固体分散体５４０ｍｇ（タクロリムス含量：１００ｍｇ）及び乳糖５,８９５ｍｇを用いることを除いては、製剤例１と同様な方法によって下記表１６の組成を有するカプセル剤を製造した。
【００６８】
比較製剤例３
比較例３の固体分散体９２０ｍｇ（タクロリムス含量：１００ｍｇ）及び乳糖５,５１５ｍｇを用いることを除いては、製剤例１と同様な方法によって下記表１６の組成を有するカプセル剤を製造した。
【表１６】
2008529999.tif 000021
【００６９】
試験例
試験例１
熱力学的安定性試験
製剤の熱力学的安定性を測定するために、比較例１の混合物、実施例１の固体分散体、及び結晶性タクロリムスを用いて、ＤＳＣ上で吸熱ピークの変化を観察した。吸熱ピークを示す温度を下記表１７に、ＤＳＣの結果は図１に示す。
【表１７】
2008529999.tif 000022
前記表１７及び図１に示すように、本発明のタクロリムス固体分散体はＤＳＣ上で吸熱ピークを示さないので、観察した温度範囲において安定した非晶質形態であることが分かる。
【００７０】
試験例２
粉末Ｘ線回折分析
結晶性タクロリムス、比較例１の混合物及び実施例１の固体分散体の粉末Ｘ線回折パターンをＭ１８ＸＨＦ−ＳＲＡ（Ｍａｃｓｃｉｅｎｃｅ社製, 日本国）を用いて、Ｃｕ Ｘ線、４０ｋＶ、３００ｍＡの条件下で測定し、その結果を図２に示す。
図２に示すように、本発明の固体分散体のタクロリムスは噴霧乾燥過程を通じて非晶質及び熱力学的に安定した形態であることが分かる。
【００７１】
試験例３
溶解度試験
対照製剤としてのプログラフカプセル、製剤例１、９及び１１の製剤、及び比較製剤１及び２の製剤を用いて溶解度試験を行ったが、ここでタクロリムス量が約５ｍｇに相当する量の製剤を採取して蒸留水１０ｍｌに溶かした後、２５℃水槽に放置した。それぞれ１、３、６、１５及び２４時間後に検液を採取し、各検液におけるタクロリムスの量を下記条件によって測定した。
［分析法：液体クロマトグラフィー］
カラム−ＴＳＫ ｇｅｌ ＯＤＳ ８０ ＴＭ カラム（１５０mm×４.６mm、５μｍ）、
移動相−水：イソプロパノール：テトラヒドロフラン＝５：２：２（ｖ／ｖ／ｖ）、
注入量−２０μｌ、
流速−タクロリムスの保持時間が約１０分になるように調節、
カラム温度：５０℃、及び
検出器−２２０ｎｍ。
【００７２】
その結果を図３に示す。図３に示すように、本発明のタクロリムス固体分散体は、比較製剤例１の単純混合物より顕著に優れた溶解度を示した。また、シクロデキストリン誘導体を用いた固体分散体を含む製剤が２５℃水槽に２４時間放置された場合、比較製剤例２または対照製剤に比べて１５時間に亘って高い溶解度を維持した。従って、置換されたシクロデキストリン誘導体の使用が水溶液中で薬物の結晶化を抑制し、非晶質及び生体利用可能な形態が長期間維持されることが分かる。
【００７３】
試験例４
生体外（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）溶出試験
対照製剤であるプログラフカプセル（１ｍｇ、フジサワアイルランド（Fujisawa island）社製）と、製剤例１及び比較製剤例１の製剤を用いて大韓薬典の溶出試験法（パドル式）によって溶出試験を行い、下記の条件下で溶解度パターンを分析した。
【００７４】
［溶出試験法］
溶出試験装置：Ｅｒｗｅｋａ ＤＴ ８０、
溶出液：減圧下で１０分間脱気した蒸留水、９００ｍｌ、
溶出液の温度：３７±０.５℃、
回転速度：１００ｒｐｍ、及び
試料量：各シンカー当り１カプセル。
【００７５】
［分析法：液体クロマトグラフィー］
カラム−Ｉｎｅｒｔｓｉｌ ＣＮ−３（１５０mm×４.６mm、５μｍ）、
移動相−水：アセトニトリル：イソプロパノール＝７：２：１（ｖ／ｖ／ｖ）
注入量−３００μｌ、
流速−０.５ｍｌ／分、
カラム温度−５０℃、及び、
検出器−２１０nm。
【００７６】
その結果を図４に示す。その結果、図４に示すように、本発明の非晶質タクロリムス固体分散体を含む製剤（製剤例１）は、対照製剤と同等な溶出率を示したが、タクロリムスをその他の組成と単純に混合した製剤（比較製剤例１）より顕著に高い溶出率を示した。
【００７７】
試験例５
安定性試験
対照製剤としてプログラフカプセル（フジサワアイルランド社製（Fujisawa island））１ｍｇと製剤例１及び比較製剤例３で製造された製剤を６０℃で促進老化試験条件下で保存した後、生成された不純物及び互変異性体の経時的な量を下記条件を用いるＨＰＬＣによって分析した。
【００７８】
カラム−Ｓｕｐｅｌｃｏｓｉｌ ＬＣ−Ｄｉｏｌ（２５０mm×４mm、５μｍ）、
２つを縦方向に連結、
移動相−ｎ−ヘキサン：ｎ−塩化ブチル：アセトニトリル＝
７：２：１（ｖ／ｖ／ｖ）、
注入量−２０μｌ、
流速−タクロリムスの保持時間が約１５分になるように調節、
カラム温度−２５℃、及び
検出器−２２５ｎｍ。
【００７９】
その結果を下記表１８に示す。
【表１８】
2008529999.tif 000023
【００８０】
前記表１８に示すように、置換されたシクロデキストリン誘導体及び有機酸を含む本発明の製剤（製剤例１）のタクロリムスは対照製剤または比較製剤例３の製剤に比べて過酷な促進老化条件下で非常に安定しており、互変異性体または不純物の生成に対する抵抗性を有することが分かる。
【００８１】
試験例６
生体内（ｉｎ ｖｉｖｏ）吸収試験
経口投与された本発明の化合物の生体利用率を調べるために、製剤例１及び比較製剤例１の製剤と、対照製剤とを用いて生体内吸収試験を行った。
雄性Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（体重２５０ｇ、１４〜１５週齢）を検体当りにそれぞれ５匹ずつ用い、ラットに飲食を自由に摂取させながら、４日以上飼育した。その後、ラットに水を自由に摂取させながら、４８時間絶食させた。
ラットにラット体重１ｋｇ当り１０ｍｇタクロリムスに該当する量の試験製剤または対照製剤を水と共に経口投与した。投与前、投与後、０.５、１、１.５、２、３、４、５、７及び２４時間が経過した時に、それぞれ採血した。
【００８２】
各血液２００μｌに０.２Ｍ ＺｎＳＯ４とＭｅＯＨとの混合液（２：８（ｖ／ｖ））４００μｌを加えて混合した後、振盪した。この混合液を１２,０００ｒｐｍで３０秒間遠心分離し、上澄液を取って０.２２μｍフィルタでろ過した後、次の条件下でＬＣ−ＭＳを用いて分析した。
【００８３】
カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＭＳ  Ｃ１８（１５０mm×２.１mm、ガードカラム付き）、
移動相：濃度勾配（６５％ＭｅＯＨ→９５％ＭｅＯＨ）、
注入容量：３０μｌ、
流速：０.３ｍｌ／分、及び
検出：ＳＩＲ ｍｏｄｅ ｍ／ｚ：８２６.７（Ｎａ ａｄｄｕｃｔ）。
【００８４】
その結果を下記表１９及び図５に示す。
【表１９】
2008529999.tif 000024
【００８５】
前記表１９及び図５に示したように、本発明によって製造された製剤が対照製剤であるプログラフカプセルに比べて高い生体利用率を示した。従って、本発明では置換されたシクロデキストリン誘導体及び有機酸の混合使用によって従来の技術では達成できなかった優れた効果が得られた。
【図面の簡単な説明】
【００８６】
【図１】結晶性タクロリムス（１）、実施例１の固体分散体（２）及び比較例２の混合物（３）のＤＳＣ（differential scanning calorimeter）のサーモグラム（thermogram）である。
【図２】実施例１の固体分散体（１）、結晶性タクロリムス（２）及び比較例２の混合物（３）の粉末Ｘ線回折分析結果を示す図である。
【図３】プログラフカプセル（対照製剤）、及び製剤例１、９及び１１、並びに比較製剤例１及び２で製造されたカプセル剤の飽和溶解度の試験結果を示す図である。
【図４】プログラフカプセル（対照製剤）、製剤例１、及び比較製剤例１で製造されたカプセル剤の試験管内の溶出試験結果を示す図である。
【図５】プログラフカプセル（対照製剤）、製剤例１及び比較製剤例１で製造されたカプセルの経口投与時における生体内利用率を示す図である。
【図１】
2008529999.tif 000026
【図２】
2008529999.tif 000027
【図３】
2008529999.tif 000028
【図４】
2008529999.tif 000029
【図５】
2008529999.tif 000030
【国際調査報告】
2008529999.tif 000031
2008529999.tif 000032