(57)【要約】  本発明は、薬用植物種、Narcissus（Amaryllidaceae；ヒガンバナ科）からの単離により入手される化合物、ナルシクラシン（２ａ）及び７−デオキシ−ナルシクラシン（２ｃ）の、新規合成法における前駆体としての使用に関連する。この方法では、これら化合物のそれぞれを選択的に水素化して、ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ａ）及び７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ｃ）を生成する。本明細書にまた記載するのは、ナルシスタチンナトリウム（１１）をナルシクラシン（２ａ）より生成する新規合成法である。本明細書にさらに記載するのは、７−デオキシナルシスタチンナトリウム（８）、７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシスタチンナトリウム（９）、及びｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシスタチンナトリウム（１０）が含まれる、ある種の新規３，４−サイクリックリン酸塩プロドラッグである。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ナルシスタチンナトリウム（sodium narcistatin）を合成する方法であって、以下の工程：
ａ）ピリジン中のナルシクラシン（narciclasine）をリン酸二水素テトラブチルアンモニウム及びジシクロヘキシルカルボジイミドと反応させて、反応混合物とする工程；
ｂ）工程ａ）の反応混合物へ追加のリン酸二水素テトラブチルアンモニウムを加える工程；
ｃ）工程ｂ）の反応混合物を冷却する工程；
ｄ）工程ｃ）の冷却した反応混合物を濾過して、沈殿と第一の濾液を入手する工程；
ｅ）前記濾液へ水を加えて、母液とする工程；
ｆ）工程ｅ）の母液をナトリウム型イオン交換カラムに通して溶出させて、第二の濾液を入手する工程；
ｇ）工程ｆ）の第二の濾液のＵＶ活性分画を凍結乾燥させて、ナルシスタチンナトリウムを得る工程を含んでなる、前記方法。
【請求項２】
工程ａ）を約８０℃で約２４時間撹拌することにより行って、工程ｂ）を約９６時間撹拌することにより行う、請求項１の方法。
【請求項３】
工程ｅ）が工程ｄ）において生成した濾液を再濾過することをさらに含む、請求項２の方法。
【請求項４】
ナルシスタチンカリウム又はナルシスタチンリチウムを合成する方法であって、以下の工程：
ａ）ピリジン中のナルシクラシンをリン酸二水素テトラブチルアンモニウム及びジシクロヘキシルカルボジイミドと反応させて、反応混合物とする工程；
ｂ）工程ａ）の反応混合物へ追加のリン酸二水素テトラブチルアンモニウムを加える工程；
ｃ）工程ｂ）の反応混合物を冷却する工程；
ｄ）工程ｃ）の冷却した反応混合物を濾過して、沈殿と第一の濾液を入手する工程；
ｅ）上記濾液へ水を加えて、母液とする工程；
ｆ）工程ｅ）の母液をカリウム型又はリチウム型のイオン交換カラムに通して溶出させて、第二の濾液を入手する工程；
ｇ）工程ｆ）の第二の濾液のＵＶ活性分画を凍結乾燥させて、ナルシスタチンカリウム又はナルシスタチンリチウムを得る工程を含んでなる、前記方法。
【請求項５】
以下の構造：
【化１】
2008527010.tif 000004
を有する化合物。
【請求項６】
以下の構造：
【化２】
2008527010.tif 000005
を有する化合物。
【請求項７】
以下の構造：
【化３】
2008527010.tif 000006
を有する化合物。
【請求項８】
ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシンを合成する方法であって、以下の工程：
ａ）無水酢酸中のナルシクラシンとピリジンを反応させて、２，３，４，７−Ｏ−テトラアセトキシ−ナルシクラシンを生成する工程；
ｂ）２，３，４，７−Ｏ−テトラアセトキシ−ナルシクラシンを氷酢酸及びパラジウム触媒と反応させる工程；
ｃ）工程ｂ）の生成物を濾過して、２，３，４，７−Ｏ−テトラアセトキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン及び２，３，４，７−Ｏ−テトラアセトキシ−ｃｉｓ−ジヒドロナルシクラシンを含んでなる濾液を生成する工程；
ｄ）上記濾液を乾燥させる工程；
ｅ）上記濾液をカラムクロマトグラフィーにより精製する工程；
ｆ）工程ｅ）より入手した２，３，４，７−Ｏ−テトラアセトキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシンをメタノール及び水に溶かし、炭酸カリウムを加えて、反応混合物を生成する工程；
ｇ）工程ｆ）の反応混合物を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して、それによりｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシンを入手する工程を含んでなる、前記方法。
【請求項９】
ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシンを合成する方法であって、以下の工程：
ａ）無水酢酸中のナルシクラシンとピリジンを反応させて、２，３，４，７−Ｏ−テトラアセトキシ−ナルシクラシンを生成する工程；
ｂ）エタノール／ジクロロメタンの混合物中の２，３，４，７−Ｏ−テトラアセトキシ−ナルシクラシンとパラジウム触媒を反応させる工程；
ｃ）工程ｂ）の生成物を濾過して、２，３，４，７−Ｏ−テトラアセトキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン及び２，３，４，７−Ｏ−テトラアセトキシ−ｃｉｓ−ジヒドロナルシクラシンを含んでなる濾液を生成する工程；
ｄ）上記濾液を乾燥させる工程；
ｅ）上記濾液をカラムクロマトグラフィーにより精製する工程；
ｆ）工程ｅ）より入手した２，３，４，７−Ｏ−テトラアセトキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシンをメタノール及び水に溶かし、炭酸カリウムを加えて、反応混合物を生成する工程；
ｇ）工程ｆ）の反応混合物を濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して、それによりｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシンを入手する工程を含んでなる、前記方法。
【請求項１０】
７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシンを合成する方法であって、以下の工程：
ａ）ＤＭＦ中の７−デオキシナルシクラシン及びＴｓＯＨと２’，２’−ジメトキシプロパンを反応させて、第一の反応混合物とする工程；
ｂ）第一の反応混合物を撹拌する工程；
ｃ）第一の反応溶液を水及び酢酸エチルへ注いで、有機相と水相を生成する工程；
ｄ）上記有機相を乾燥させ、濾過してから濃縮して、３，４−イソプロピリデン−７−デオキシ−ナルシクラシンを生成する工程；
ｅ）３，４−イソプロピリデン−７−デオキシ−ナルシクラシンをイミダゾールと反応させて、ＤＭＦを除去し、それにより２−［ｔｅｒｔ−ブチル−１，１−ジメチルシリル］オキシ−３，４−イソプロピリデン−７−デオキシ−ナルシクラシンを生成する工程；
ｆ）エタノール及びジクロロメタン中の２−［ｔｅｒｔ−ブチル−１，１−ジメチルシリル］オキシ−３，４−イソプロピリデン−７−デオキシ−ナルシクラシンをパラジウム触媒と反応させて、第二の反応混合物とする工程；
ｇ）第二の反応混合物を撹拌してから、第二の反応混合物をシリカゲルカラムに通過させ、酢酸エチルで溶出して、濾液とする工程；
ｈ）上記濾液より溶媒を除去して、第一の固形物とする工程；
ｉ）ヘキサン／酢酸エチルをカラムクロマトグラフィーにおいて使用して、第一の固形物をその成分へ分離して、（１）２−［ｔｅｒｔ−ブチル−１，１−ジメチルシリル］オキシ−３，４−イソプロピリデン−７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン、（２）２−［ｔｅｒｔ−ブチル−１，１−ジメチルシリル］オキシ−３，４−イソプロピリデン−７−デオキシ−ｃｉｓ−ジヒドロナルシクラシン、及び（３）２−［ｔｅｒｔ−ブチル−１，１−ジメチルシリル］オキシ−３，４−イソプロピリデン−７−デオキシ−イソジヒドロナルシクラシンを得る工程；
ｊ）テトラヒドロフラン中の２−［ｔｅｒｔ−ブチル−１，１−ジメチルシリル］オキシ−３，４−イソプロピリデン−７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシンとギ酸を加熱しながら反応させて、７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシンを生成する工程を含んでなる、前記方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
関連出願への相互参照
本出願は、その開示がそのまま本明細書に組み込まれる、米国仮特許出願番号６０／６４４，３９７（２００５年１月１４日出願）に基づき、それへの優先権を主張する。
【０００２】
連邦支援研究の陳述
本発明への資金援助が米国政府、癌治療及び診断部門、国立癌研究所、医療及び福祉部、優秀研究奨励番号ＣＡ−４４３４４−０１Ａ１−０１−１２；ＣＡ４４３４４−０１−１２及びＣＡ９０４４１−０１−０３；アリゾナ州疾病制御研究委員会；及び私的寄付により提供された。従って、米国政府は、本発明に一定の権利を有する。
【０００３】
技術分野
本発明は、ある化合物とある化合物の合成の方法に関し、ここで該化合物は、癌細胞系に対する抗新生物活性を示したので、動物及びヒトにおける様々な形態の癌の治療に有用であることが期待される。
【０００４】
発明の要約
本発明は、薬用植物種、Narcissus（Amaryllidaceae；ヒガンバナ科）からの単離により入手される化合物、ナルシクラシン（２ａ）及び７−デオキシ−ナルシクラシン（２ｃ）の、新規合成法における前駆体としての使用に関連する。この方法では、これら化合物のそれぞれを選択的に水素化して、ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ａ）及び７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ｃ）を生成する。本明細書にまた記載するのは、ナルシスタチンナトリウム（１１）をナルシクラシン（２ａ）より生成する新規合成法である。本明細書にさらに記載するのは、７−デオキシナルシスタチンナトリウム（８）、７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシスタチンナトリウム（９）、及びｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシスタチンナトリウム（１０）が含まれる、ある種の新規３，４−サイクリックリン酸塩プロドラッグである。
【０００５】
本発明は、ある種の Narcissus（ヒガンバナ科）からの単離により入手される化合物、ナルシクラシン（２ａ）及び７−デオキシ−ナルシクラシン（２ｃ）の、これら化合物のそれぞれを選択的に水素化して、ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ａ）及び７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ｃ）を生成し得る、新規で複雑な（unobvious）方法における前駆体としての使用に関連する。
【０００６】
発明の詳細な説明
材料と方法
植物のような、天然に見出される物質からの新しい化合物の単離と、これらの化合物の誘導体の創製は、医薬有用性を有する化合物への活発な研究分野である。本明細書に記載するのは、そのような「天然」化合物の合成の方法と、その多くが抗新生物薬として有望である他の化合物の合成における該化合物の使用の方法である。
【０００７】
漢方薬植物、Zephyranthes candida（ヒガンバナ科）の１９８２コレクション（球根）より、強い（ＥＤ５０：０．００３２μｇ／ｍｌ）Ｐ３８８リンパ球性白血病細胞の増殖阻害剤、ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ａ）を単離した（Pettit G. R., et al., Antineoplasmic 162. Zephyranthes candida. J. Nat. Prod. 53: 176-178; 1990）。その過酢酸誘導体（１ｂ）の詳細なスペクトル分析により構造を確定して、ナルシクラシン（２ａ）の接触水素化からの生成物との比較により確認した（Mondon, A., et al., Zur Kenntnis des Narciclasins. Chem. Ber. 108: 445-463; 1975）。水素化により、主要生成物として、予測されたｃｉｓ−ジヒドロナルシクラシン（３ａ）が得られ、ｔｒａｎｓ異性体（１ａ）とイソナルシクラシン（４ａ）を伴った。より最近になって、ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ａ）は、米国立癌研究所（ＮＣＩ）の癌細胞系パネルに対して強い癌細胞増殖阻害（平均パネルＧＩ５０：１２．６ｎＭ）を明示することが見出されたが、一方、そのｃｉｓ異性体（３ａ）には、ごく弱い活性しかなかった（平均パネルＧＩ５０：３８００ｎＭ）（Pettit G. R., et al., Antineoplasmic agent 256. Cell growth inhibitory isocarbostyrils from Hymenocallis.「抗新生物薬２５６。Hymenocallis 由来の細胞増殖阻害性イソカルボスチリル」J. Nat. Prod. 56: 1682-1687; 1993）。重要にも、このｔｒａｎｓ異性体（１ａ）は、（＋）−パンクラチスタチン（５）に関して、１．００に匹敵する、０．９２の有効な比較相関係数を示した（Pettit G. R., et al., Antineoplasmic agent 256. Cell growth inhibitory isocarbostyrils from Hymenocallis.「抗新生物薬２５６。Hymenocallis 由来の細胞増殖阻害性イソカルボスチリル」J. Nat. Prod. 56: 1682-1687; 1993）。このｔｒａｎｓ異性体（１ａ）はまた、一連のＲＮＡウイルスに対して強い活性を示したが、合成のｃｉｓ異性体（３ａ）は、完全に不活性であった（Gabrielsen, B., et al., Antiviral (RNA) activity of selected Amaryllidaceae isoquinoline constituents and synthesis of related substances.「選択されたヒガンバナ科イソキノリン構成成分の抗ウイルス（ＲＮＡ）活性と関連物質の合成」J. Nat. Prod. 55: 1569-1581; 1992）。
【０００８】
ナルシクラシン（２ａ）は、Narcissus imcomparabillus の球根より単離し、７−デオキシナルシクラシン（２ｃ）と７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ｃ）は、Hymenocallis littoralis の球根より単離した（これらは、現在はアリゾナ州バイオデザイン研究所の一部である、アリゾナ州テンペのＡＳＵ−ＣＲＩ研究グループにより栽培された）（Piozzi, F., et al., Narciclasine and Narciprimine「ナルシクラシンとナルシプリミン」Tetrahedron. 24: 1119-1131; 1968）（Pettit G. R., et al., Antineoplasmic agent 256. Cell growth inhibitory isocarbostyrils from Hymenocallis.「抗新生物薬２５６。Hymenocallis 由来の細胞増殖阻害性イソカルボスチリル」J. Nat. Prod. 56: 1682-1687; 1993）。溶媒はいずれも再蒸留して、試薬は、ランカスター、シグマ−アルドリッチ社、及びＡｅｒｏｓ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ社より購入した。反応の進行は、ＡｎａｌｔｅｃｈシリカゲルＧＨＬＦ  Ｕｎｉｐｌａｔｅを使用し、長波長及び短波長ＵＶ照射下に可視化して、リンモリブデン酸試薬（シグマ−アルドリッチ社）のエタノール溶液中で発色させる薄層クロマトグラフィーにより確認した。カラムクロマトグラフィーは、Ｅ．メルク製のシリカゲル６０（２３０〜４００メッシュ、Ｄｏｗｅｘ  ５０ＷＸ８−４００カチオン交換樹脂（Ｈ＋）型）を用いて実施して、はじめにメタノール、１Ｎ塩酸、及び脱イオン水で溶出させた。この樹脂のカチオン型は、適切な塩基の１Ｎ溶液に続いて脱イオン水で溶出させることによって調製した。反応生成物は、他に述べなければ、いずれも無色の固形物であった。融点はいずれも電熱デジタル融点測定装置モデル、ＩＡ９２００で決定して、補正しない。
【０００９】
ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ａ）の合成法
２，３，４，７−Ｏ−テトラアセトキシ−ナルシクラシン（２ｂ）−化合物（２ｂ）を以下のように生成する。ナルシクラシン（１．００ｇ，３．２５ミリモル）のピリジン（３ｍｌ，窒素下）撹拌溶液へ無水酢酸（６ｍｌ）を加える。室温で１６時間撹拌し、この混合物へ氷（５０ｍｌ）を加えて、ジクロロメタン（３ｘ２０ｍｌ）で抽出する。合わせた抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で蒸発させて、２，３，４，７−Ｏ−テトラアセトキシ−ナルシクラシン（２ｂ）（１．４ｇ，収率９０％）を淡褐色の粉末として得る。
【００１０】
２，３，４，７−Ｏ−テトラアセトキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ｂ）。
（１ｂ）を生成する方法１。四酢酸ナルシクラシン（２ｂ）（０．９７ｇ，２０．４２ミリモル）の氷酢酸（１２０ｍｌ）溶液へ５％  Ｐｄ／Ｃ触媒（０．５６ｇ，２６モル％）を加える。この混合物を水素の雰囲気下に室温で３時間撹拌してから、この溶液を、溝付き濾紙に通すように、濾過する。濾液をＭｇＳＯ４で乾燥させ、再び濾過して、真空で蒸発させる。ジクロロメタン中０．５％メタノールで溶出させるシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより残渣を精製して、生成物（１ｂ）（０．２９０ｇ，３０％）を粉末として、同時にｃｉｓ−ジヒドロ過酢酸エステル（peracetate）（３ｂ）（０．６９ｇ，６２％）を固形物として得る。ＮＭＲデータの比較による（１ｂ）の分析により、それが標準試料と同一であることを見出した（Pettit G. R., et al., Antineoplasmic 162. Zephyranthes candida. J. Nat. Prod. 53: 176-178; 1990）。
【００１１】
（１ｂ）を生成する方法２。エタノール／ジクロロメタンの１：１混合物中の四酢酸ナルシクラシン（２ｂ）（０．２００ｇ，０．４２ミリモル）の溶液へ１０％  Ｐｄ／Ｃ触媒（０．００４ｇ，０．０４２ミリモル）を加えた。この混合物を１気圧の水素下に室温で４時間撹拌した。次いで、この反応混合物をシリカのパッドに通して濾過して、溶媒を真空で除去した。次いで、残渣をカラムクロマトグラフィー（フラッシュシリカ；溶出液、４５：５５  ｎ−ヘキサン−ＥｔＯＡｃ）により精製して、ｔｒａｎｓ−ジヒドロ過酢酸エステル（１ｂ）（０．１３１ｇ，６５％）を固形物として、同時にｃｉｓ−ジヒドロ過酢酸エステル（３ｂ）（０．０５０ｇ，２５％）を固形物として得た。
【００１２】
ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ａ）。２，３，４，７−Ｏ−テトラアセトキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ｂ）（０．５１２ｇ，１．０７ミリモル）をメタノール：水（９：１）（２０ｍｌ）に溶かして、溶解性を助けるために、ジクロロメタン（１２ｍｌ）を加える。炭酸カリウム（０．００９ｇ，０．０６ミリモル）を加えて、この反応物を室温で３日間撹拌する。ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２：ＣＨ３ＯＨ  ４％）は、生成物への完全な変換を示す。
【００１３】
この反応混合物を濃縮して、残渣をシリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２：ＣＨ３ＯＨ  ４％）により精製して、（１ａ）（０．１３４ｇ，４０％）を非結晶性の固形物として得る；融点２６０℃（分解），２８５℃（融解）。
【００１４】
３，４−イソプロピリデン−７−デオキシナルシクラシン（２ｅ）−はじめに、７−デオキシナルシクラシン（２ｃ）（０．２０５ｇ，０．７０４ミリモル）とＴｓＯＨ（０．１３３ｇ，０．７０４ミリモル）をＤＭＦ（１０ｍｌ）に溶かして、２’，２’−ジメトキシプロパン（０．８６４ｍｌ，７．０４ミリモル）を加える。生じる溶液を１６時間撹拌してから水（５０ｍｌ）へ注ぎ、酢酸エチル（４ｘ３０ｍｌ）で抽出する。合わせた有機相を乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、真空で濃縮して薄黄色の固形物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（フラッシュシリカ；溶出液、３：７  ｎ−ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）により分離して、生成物（２ｅ）（０．２１５ｇ，９２％）を固形物として得る；メタノールより針状物として再結晶させた。
【００１５】
２−［ｔｅｒｔ−ブチル−１，１−ジメチルシリル］オキシ−３，４−イソプロピリデン−７−デオキシ−ナルシクラシン（２ｆ）：ＤＭＦ（３ｍｌ）中の３，４−イソプロピリデン−７−デオキシ−ナルシクラシン（２ｅ，０．０２４ｇ，０．０７２５ミリモル）へＴＢＤＭＳＣＩ（０．０１６ｇ，０．１０９ミリモル）とイミダゾール（０．００７ｇ，０．１０９ミリモル）を加える。生じる溶液を５時間撹拌して、ＤＭＦを真空で除去して、薄黄色のオイルを得る。残渣をカラムクロマトグラフィー（フラッシュシリカ；溶出液、３：２  ｎ−ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）により分離して、シリルエーテル（０．０２８ｇ，８７％）を固形物として得る：融点２６９℃。
【００１６】
２−［ｔｅｒｔ−ブチル−１，１−ジメチルシリル］オキシ−３，４−イソプロピリデン−７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ｄ）：エタノール及びジクロロメタンの１：１混合物（８ｍｌ）中の２−（ｔｅｒｔ−ブチル−１，１−ジメチルシリル］オキシ−３，４−イソプロピリデン−７−デオキシ−ナルシクラシン（２ｆ，０．０５０ｇ，０．１１２ミリモル）の溶液へ１０％  Ｐｄ／Ｃ（１．２ｍｇ，０．０１１２ミリモル）を加える。生じる混合物を１気圧の水素下に４時間撹拌してから、シリカゲルのショートカラムに通過させて、酢酸エチルで溶出させる。溶媒を真空で除去して、固形物を得る。残渣をカラムクロマトグラフィー（重力、シリカゲル；溶出液、７：３  ｎ−ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）により分離して、固形物（０．０２８ｇ，５６％）を得る：融点１８１．５〜１８２．５℃。
【００１７】
また、２−［ｔｅｒｔ−ブチル−１，１−ジメチルシリル］オキシ−３，４−イソプロピリデン−７−デオキシ−ｃｉｓ−ジヒドロ−ナルシクラシン（３ｃ）（０．０１３ｇ，２６％）を固形物として単離した：融点２３７．５〜２３８．５℃。
【００１８】
第三のマイナー成分、２−［ｔｅｒｔ−ブチル−１，１−ジメチルシリル］オキシ−３，４−イソプロピリデン−７−デオキシ−イソジヒドロ−ナルシクラシン（４ｃ）（０．００５ｇ，１０％）を固形物として単離した：融点２４６．５〜２４８．０℃。
【００１９】
７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ｃ）。２−［ｔｅｒｔ−ブチル−１，１−ジメチルシリル］オキシ−３，４−イソプロピリデン−７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（０．０２ｇ，０．０４５ミリモル）をテトラヒドロフラン（２ｍｌ）に溶かして、ギ酸（６０％）（２ｍｌ）を室温で加える。この反応混合物を６０℃まで３時間加熱する。ＴＬＣ（酢酸エチル  １５％：ヘキサン）は、より遅く移動する生成物への完全な変換を示す。この反応物を濃縮して白い残渣とし、これをシリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２：ＣＨ３ＯＨ  １０％）により精製して、白い固形物（１３．１ｍｇ，７４％）を得る。融点２３０℃。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）は、シリルエーテルが依然として存在していることを示した。これをＨＲＭＳにより確認した。ＡＰＣＩ＋  Ｃ２０Ｈ３０ＮＯ６Ｓｉ（Ｍ＋Ｈ）＋の計算値＝４０８．１８４２，実測値  ｍ／ｚ＝４０８．１８４５。この材料を、さらに精製せずに、シリルエーテル脱保護工程へ導く。
【００２０】
２−［ｔｅｒｔ−ブチル−１，１−ジメチルシリル］オキシ−７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（０．０３７ｇ，０．０９ミリモル）をテトラヒドロフラン（５ｍｌ）に溶かし、フッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ）（０．０１ｍｌ，０．０１ミリモル）を加えて、この反応物をアルゴン下に室温で撹拌する。６時間後のＴＬＣ（ＣＨ３ＯＨ  １０％；ＣＨ２Ｃｌ２）が出発材料の生成物への不完全な変換を示すので、ＴＢＡＦ（０．１ｍｌ，０．１ミリモル）を加えて、この反応物を２４時間撹拌し続ける。２４時間後に、追加のＴＢＡＦ（０．１ｍｌ，０．１ミリモル）を加えた。この反応物を５日間撹拌する。酢酸エチル（３５ｍｌ）を加えて有機相を塩水（２５ｍｌ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、真空で濃縮して、黄色いオイルとする。このオイルをテトラヒドロフランに取り、ＣＨ２Ｃｌ２：ＣＨ３ＯＨ  １０％〜ＣＨ２Ｃｌ２：ＣＨ３ＯＨ  ３０％を使用する勾配溶出で、シリカゲルのカラムで溶出させる。生成物（１３．４ｍｇ，５０％）を白い固形物として単離し、これは、１Ｈ  ＮＭＲによれば、７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシンの天然試料と同一であった（Gabrielsen, B., et al., Antiviral (RNA) activity of selected Amaryllidaceae isoquinoline constituents and synthesis of related substances.「選択されたヒガンバナ科イソキノリン構成成分の抗ウイルス（ＲＮＡ）活性と関連物質の合成」J. Nat. Prod. 55: 1569-1581; 1992）。
【００２１】
ヒドロキシル、エステル、及びアミドのような官能基は、しばしば、水素化の立体化学を方向づける。アリルアルコールの均一系水素化は、通常、高い立体選択性を伴って起こる。そのようなヒドロキシ指向性水素化に使用する触媒には、しばしば、ウィルキンソン触媒（６）［ＲｈＣＩ（ＰＰｈ３）３］とＣｒａｂｔｒｅｅ触媒（７）［Ｉｒ（ＣＯＤ）（Ｐｃｙ３）（ｐｙ）］ＰＦ６（８）が含まれる。結果的に、そのアセトニドとして保護したナルシクラシン（２ｄ）をジクロロメタン中のＣｒａｂｔｒｅｅ触媒（７）で処理したが、水素化生成物を得ることはできなかった（（Mondon, A., et al., Zur Kenntnis des Narciclasins. Chem. Ber. 108: 445-463; 1975）。この反応をトルエン中のウィルキンソン触媒（６）でも試みたが、ナルシクラシンアセトニト（２ｄ）は、再び水素化に抵抗した。ウィルキンソン触媒（６）での水素化に対して強制的な条件の下でも非反応性であることが判明した、関連のトリ置換スチレンは、はじめにそのアルコキシドへ変換すると、成功裡に水素化された。これは、専らｃｉｓ異性体をもたらした（Thompson, H. W. et al., Stereochemical control of reductions. IV. Control of hydrogenation stereochemistry by intramolecular anionic coordination to homogeneous catalysts「還元の立体化学制御。ＩＶ．均一系触媒への分子内アニオン配位による水素化立体化学の制御」J. Amer. Chem. Soc. 96: 6232-6233; 1974）。このアプローチは、ナルシクラシンアセトニド（２ｄ）を使用するとき、不成功であった。この理論により束縛されることを企図しないが、この反応は、触媒金属の空の表面軌道に対して非共有電子対を供与するオレフィンの能力と関連していると考えられるので、ナルシクラシン中の二重結合は、おそらくは、この種のヒドロキシ指向性の水素化を可能にするにはあまりに妨害を受けているのであろう（Thompson, H. W., Stereochemical control of reductions. The directive effect of carbomethoxy vs. hydroxymethyl groups in catalytic hydrogenation「還元の立体化学制御。接触水素化におけるカルボキシメトキシ対ヒドロキシメチル基の指向効果」J. Org. Chem. 36: 2577-2581; 1971）。そこで、次に、イオン水素化へ関心を向けた。興味深いことに、我々の実験において、ナルシクラシン（２ａ）と誘導体（２ｂ）及び（２ｄ）は、−７５℃と２５℃で、ジクロロメタン中のトリエチルシラン／トリフルオロ酢酸での水素化に抵抗した。
【００２２】
アダム触媒をエタノール中で使用するナルシクラシン（２ａ）の水素化は、以下をもたらす：通常、２８％のｔｒａｎｓ異性体（１ａ）と、同時に５８％のｃｉｓ異性体（３ａ）と１３％のイソナルシクラシン（４ａ）が得られた（Mondon, A., et al., Zur Kenntnis des Narciclasins. Chem. Ber. 108: 445-463; 1975）。１気圧で５％  Ｐｄ／Ｃ（２０モル％）の存在下に、多様な溶媒：酢酸エチル、エタノール、酢酸、ヘキサン、テトラヒドロフラン、ピリジン、及びジメチルホルムアミドにおいて、過酢酸ナルシクラシン（２ｂ）の水素化を行った（Thompson, H. W. et al., Stereochemical control of reductions. ５. Effects of electron density and solvents on group haptophilicity「還元の立体化学制御。５．基の接触親和性に対する電子密度及び溶媒の効果」J. Org. Chem. 41: 2903-2906; 1976）、（Okamoto T. et al., Lycoricidinol and lycoricidine. New plant growth regulators in the bulbs of Lycoris radiata「リコリシジノールとリコリシジン。Lycoris radiate の球根にある新しい植物成長調節剤」Herb. Chem. Pharm. Bull. 16: 1860-1864; 1968）、（Immirzi, A., et al., The crystal and molecular structure of narciclasine tetra-acetate「四酢酸ナルシクラシンの結晶及び分子構造」J. Amer. Chem. Soc. 240-240; 1972）。これらの結果を表１に示す。
【００２３】
【表１】
2008527010.tif 000002
【００２４】
ｔｒａｎｓ：ｃｉｓ：イソ（ｉｓｏ）の比は、１Ｈ−ＮＭＲにより決定して、出発材料の生成物への１００％変換に基づいた。観測された最良の比は、酢酸を溶媒として、それぞれ５１：４７：２であり、この反応は、小スケール（ほぼ０．０２０ｇの過酢酸ナルシクラシン）で行った。この反応のスケールアップは、結果において大きな変動を示した。５ｇのナルシクラシンを５％  Ｐｄ／Ｃ（８モル％）の存在下に酢酸中で２０時間水素化した場合、出発材料しか回収されなかった。１０％  Ｐｄ／Ｃ（２５．８モル％）を使用して、１ｇの過酢酸ナルシクラシンで水素化を行った場合、シリカゲルでのクロマトグラフィーに続いて、ｔｒａｎｓ及びｃｉｓの生成物がそれぞれ３０％及び６２％の収率で単離された。四酢酸ナルシクラシン（２ｂ）（２００ｍｇ）を１０％  Ｐｄ／Ｃ（１０モル％）の存在下に水素化した場合、ジクロロメタン：エタノール（１：１）の溶媒系が良好な結果を与えた。ｔｒａｎｓの収率は、クロマトグラフィーに続いて６５％であった。過アセチル化異性体、（１ｂ）、（３ｂ）、及び（４ｂ）をシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーにより分離した。合成ｔｒａｎｓ異性体（１ｂ）の構造は、標準試料との詳細なスペクトルデータ比較により確定した（Pettit G. R., et al., Antineoplasmic 162. Zephyranthes candida. J. Nat. Prod. 53: 176-178; 1990）。
【００２５】
７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ｃ）の合成法
（２ｂ）の（１ｂ）への水素化の方法を開発した後で、７−デオキシナルシクラシン（２ｃ）の７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ｃ）への相互変換について、同様の方法を探求した。このことは、そのｃｉｓジオール単位をそのアセトニド（２ｄ）としてはじめに保護することによって、良好な収率（９２％）で達成された。残るヒドロキシル基をそのシリルエーテル（２ｆ）として保護して、ナルシクラシンアセトニド（２ｄ）の水素化を試みたときにすでに遭遇した潜在的な問題を回避した。このシリルエーテルを手中にして、過酢酸エステル（２ｂ）のｔｒａｎｓ−ジヒドロ過酢酸エステル（１ｂ）への還元が最も成功した条件を使用して、オレフィンの水素化を試みた。エタノール／ジクロロメタン（１：１）中、１気圧において１０％  Ｐｄ／Ｃ（１０モル％）で（２ｆ）（０．０５ｇ）を水素化すると、ｔｒａｎｓ：ｃｉｓ：ｉｓｏの分離可能な混合物がそれぞれ５６％：２６％：１０％の収率で得られた。しかしながら、この反応はスケールアップ時にうまくいかず、この反応を２ｇスケールで行うとき、ｔｒａｎｓの収率は２７％へ低下した。ギ酸（６０％）を使用するアセトニドの脱保護により合成ｔｒａｎｓ−異性体（１ｄ）を入手した後で、このシリルエーテルをＴＢＡＦで脱保護して（１ｃ）を得たが、これは７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ｄ）の標準試料と同一であることがわかった（Gabrielsen, B., et al., Antiviral (RNA) activity of selected Amaryllidaceae isoquinoline constituents and synthesis of related substances.「選択されたヒガンバナ科イソキノリン構成成分の抗ウイルス（ＲＮＡ）活性と関連物質の合成」J. Nat. Prod. 55: 1569-1581; 1992）。
【００２６】
下記に記載するように、ナルシスタチンナトリウム（１１）の合成を改善し（８８％の全体収率）、この改良した反応順序を利用して、７−デオキシ−ナルシスタチンナトリウム（８）、７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシスタチンナトリウム（９）、及びｔｒａｎｓ−ジヒドロ−ナルシスタチンナトリウム（１０）を合成した。ヒト癌細胞系の阻害性のイソカルボスチリル前駆体を、園芸生産により入手した Hymenocallis littoralis の球根より、又は同じ供給源からのナルシクラシン（２ａ）の還元により単離した。溶媒は使用前に蒸留して、ピリジンは水酸化カリウムで乾燥させて蒸留した。その合成について以下にさらに詳しく考察する、３種の新しい３，４−サイクリックリン酸塩プロドラッグ（８，９，及び１０）について、抗癌薬としてのさらなる開発を評価中である。
【００２７】
ナルシスタチンナトリウム（１１）の合成法。３，４−サイクリックリン酸塩（１１）のナルシクラシン（２ａ）（０．１１３ｇ，０．３６８ミリモル）からの合成を、リン酸二水素テトラブチルアンモニウム（０．０７５ｇ，０．２２ミリモル）とジシクロヘキシルカルボジイミド（０．４ｇ，１．９４ミリモル）を使用してピリジン（４ｍｌ）中で行って、追加量のリン酸二水素テトラブチルアンモニウム（０．１８５ｇ）及びジシクロヘキシルカルボジイミド（０．４ｇ）を約８０℃で最初の約２４時間の撹拌の後で加えた。この反応物を約９６時間撹拌し、冷やし、濾過して、沈殿したジシクロヘキシル尿素（ＤＣＵ）を除去する。水（１００ｍｌ）を加えて、この混合物を再濾過して、残留するＤＣＵを除去する。母液を最少量まで濃縮する。イオン交換カラム（ナトリウム型）に通して水性分画を溶出させる。ＵＶ活性分画を合わせ、凍結乾燥させて、リン酸塩（１１）（収率８８％）をクリーム色の固形物として得る。水性分画をイオン交換カラムのナトリウム型より溶出させるのではなく、別の好適な塩型（カリウム又はリチウムのような）を使用すれば、ナルシスタチンカリウム又はナルシスタチンリチウムのような化合物を生成することができる。
【００２８】
３，４−サイクリックリン酸塩の７−デオキシナルシスタチンナトリウム（８）、７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシスタチンナトリウム（９）、及びｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシスタチンナトリウム（１０）の合成法
H. littoralis より分離した７−デオキシナルシクラシン（２ｃ）及び７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ｃ）の混合物をピリジン（２０ｍＬ）に溶かして無水酢酸（２０ｍＬ，２．４当量）を加えることによってアセチル化した。この混合物は、室温で一晩撹拌するとゆっくりと溶液になり、ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２−ＣＨ３ＯＨ，２％）は、出発材料を示さなかった。この反応混合物へ、激しく撹拌しながら、氷水（２００ｍｌ）を加える。クリーム色の沈殿が発生して、２時間撹拌後に採取して、１３．７ｇを得る。その後で、７：３  トルエン−酢酸エチルを使用するシリカゲルカラムクロマトグラフィーを介した溶出により過酢酸エステル混合物（アセチル化生成物）を分離して、以下のイソカルボスチリル（１２）（回収６０％）及び（１３）（回収１９％）を得る。次いで、２，３，４−トリアセトキシ−７−デオキシナルシクラシン（１２）と２，３，４−トリアセトキシ−７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１３）の両方を水性メタノール中の炭酸カリウムで脱保護して、対応するトリオール（１４）及び（１５）を収率７２％で得た。
【００２９】
３，４−サイクリックリン酸塩（８，９，及び１０）は、リン酸二水素テトラブチルアンモニウムと過剰のジシクロカルボジイミドをアルゴン下の乾燥ピリジンにおいて８０℃で４８時間使用する、ナルシスタチンナトリウム（１１）の合成について我々が開発した手順の改良法を利用して合成した（Mondon, A., et al., Chem. Ber. 1975, 94, 617）、（Pettit, G. R., et al., J. Nat. Prod. 1986, 49, 995-1002）、（Pettit, G. R., et al., J. Nat. Prod. 2003, 66, 92-96）。
【００３０】
いずれの場合でも、粗生成物の１Ｈ−ＮＭＲは、この反応が２４時間の期間の後で５０％しか完了しないことを示した。この段階で追加の試薬を加えて、反応をそのまま完了まで（さらに２４時間）進行させた。リン酸二水素テトラブチルアンモニウムの量を最初の２４時間で０．６５当量から１当量へ増やしても、反応速度は増加しなかった。この反応混合物へ水を加えてジシクロヘキシル尿素（ＤＣＵ）を沈殿させ、ピリジン／水の濾液を濃縮して、ピリジンを除去した。この残渣の水性抽出物をＤｏｗｅｘ  ５０ＷＸ８−４００イオン交換カラム（ナトリウム型）に通過させた。ＵＶ反応性の分画を合わせ、凍結乾燥させて新しい３，４−サイクリックリン酸塩を得て、７−デオキシ−ナルシスタチンナトリウム（８，収率８８％）、７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロ−ナルシスタチンナトリウム（９，収率６５％）、及びｔｒａｎｓ−ジヒドロ−ナルシスタチンナトリウム（１０，収率９４％）と命名した。
【００３１】
より好ましい態様では、ｐ−トルエンスルホン酸成分の削除により、リン酸塩（１１）の収率が、元の５０％に対して８８％へ増加した。これは、新しいリン酸塩（８，９，及び１０）がきわめて良好な収率で得られることを可能にする、主要な改善の１つであった。
【００３２】
このサイクリックリン酸塩のプロドラッグについて、元の化合物ともに、ヒト癌細胞系及びマウスＰ３８８リンパ球性白血病のミニパネルに対して評価した。表２を参照のこと。
【００３３】
【表２】
2008527010.tif 000003
【００３４】
この癌細胞系評価の結果により、７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ｃ）及びｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ａ）の強い癌細胞増殖阻害活性を再確認した。対応する３，５−サイクリックリン酸塩は、利用した実験条件下では、より少ない阻害性であった。しかしながら、リン酸基の切断により in vivo できわめて有効になると予測され、そのような抗癌評価がこれらの新規抗癌薬候補品のさらなる前臨床開発の一部として現在進行中である（Pettit, G. R., et al., J. Nat. Prod. 2003, 66, 92-96）、（Dowlati, A., et al., Cancer Research 2002, 62, 3408-3416）、（Dziba, J. M., et al., Thyroid 2002, 12, 1062-1070）、（Eikesdal, H. P. et al., Cancer Lett. 2002, 178, 209-217）、（Prise, V., et al., Int. J. Oncology 2002, 21, 717-726）、（Hill, S. A., et al., Int. J. Cancer 2002, 102, 70-74）。
【００３５】
７−デオキシ−ナルシクラシン（２ｃ）。７−デオキシ−ナルシクラシン（２ｃ）を入手するために、２，３，４−トリアセトキシ−７−デオキシ−ナルシクラシン（１２，４．３６ｇ）のＣＨ３ＯＨ（９９ｍｌ）−Ｈ２Ｏ（１ｍｌ）−ＣＨ３ＯＨ（３０ｍｌ）溶液へ炭酸カリウム（０．１２４ｇ）を加えて、撹拌を室温で１６時間継続すると、その間に白い沈殿が分離する。この混合物を酢酸（２ｍｌ）で中和し、１５分間撹拌し、最少量まで濃縮する。無色の生成物（２．１８ｇ，７２％）を採取し、酢酸−メタノールからの再結晶により、きめ細かい針状物を得た：融点２０５〜２１０℃（分解）。
【００３６】
７−デオキシ−ナルシスタチンナトリウム（８）。７−デオキシ−ナルシクラシン（２ｃ，０．２ｇ，０．６９ミリモル）のピリジン（８ｍｌ）溶液を８０℃まで加熱して、リン酸二水素テトラブチルアンモニウム（０．１５ｇ，０．４５ミリモル、０．６５当量）に続いてジシクロヘキシルカルボジイミド（０．８ｇ，５．６当量）を加えた。反応をそのまま８０℃で２４時間進行させた。反応混合組成物の１Ｈ  ＮＭＲ分析は、出発材料の生成物に対する５０：５０混合物を示した。リン酸二水素テトラブチルアンモニウム（０．１５ｇ）に続いてＤＣＣＩ（０．８ｇ）を加えて、反応をさらに２４時間継続した。この時点で、反応混合物からの試料の１Ｈ  ＮＭＲ分析は、反応が完了したことを示した。この反応混合物を冷やして、水（１００ｍｌ）を加えた。沈殿したジシクロヘキシル尿素（ＤＣＵ）を採取し、ピリジン−水の母液を最少量まで濃縮した。次いで、水性分画をナトリウム型のイオン交換カラム（ＤＯＷＥＸ  ５０Ｗ８−４００）に通過させた。ＵＶ反応性の分画を合わせ、凍結乾燥させて、リン酸塩（８）を無色の固形物として得た：２２７ｍｇ（８８％）；融点２５５℃（分解）。
【００３７】
７−デオキシ−ナルシスタチンのプロドラッグ（８ａ及び８ｂ）の合成法
７−デオキシ−ナルシスタチンナトリウム（８，５２ｍｇ）を水（１ｍｌ）に溶かして、この溶液を、各カチオンを担うＤｏｗｅｘ  ５０ＷＸ８−４００のカラムに通過させる。例えば、リチウム又はカリウムのカチオンを含有するカラムを別々に使用してよい。次いで、ＵＶ活性分画を合わせ、凍結乾燥させて、対応のナルシスタチン塩を以下のような白い固形物として得る：
７−デオキシ−ナルシスタチンリチウム（１０ａ）。３４ｍｇ，融点２５０℃（分解）。
【００３８】
７−デオキシ−ナルシスタチンカリウム（１０ｂ）。４３ｍｇ，融点２３０〜２３５℃（分解）。
７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロ−ナルシクラシン（１ｃ）。この化合物は、以下のように生成する。２，３，４−トリアセトキシ−７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１３，０．１４ｇ）を９：１水性メタノールにおいて、炭酸カリウム（０．００３ｇ）を用いて鹸化して、アルコール（２ｃ）を入手するために上記に記載のように実施して、トリオール（１ｃ）を無色の固形物として得る；８９ｍｇ（収率９１％）；融点＞３００℃（分解）。
【００３９】
７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロ−ナルシスタチンナトリウム（９）。７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロ−ナルシクラシン（１ｃ，０．１５ｇ，０．５１ミリモル）のナルシスタチン（９）への変換を、ピリジン（６ｍｌ）においてリン酸二水素テトラブチルアンモニウム（０．２１ｇ，０．６２ミリモル、１．２当量）とジシクロヘキシルカルボジイミド（０．５４ｇ，２．６２ミリモル、５．１３当量）を用いて実施して、追加のリン酸二水素テトラブチルアンモニウム（０．２１ｇ，１．２当量）及びＤＣＣＩ（０．５４ｇ）が含まれる、ナルシスタチン（８）の合成（上記参照）について要約されるようにリン酸塩を単離する。生成物の水性抽出物をＤＯＷＥＸ  ５０ＷＸ８−４００（ナトリウム型）のイオン交換カラムへ処して、上記（８参照）のように、ＵＶ蛍光分画を合わせて凍結乾燥させる。ナトリウム塩のメタノール（１５ｍｌ，加熱）溶液を調製し、不溶性の材料を採取し、濾液を濃縮して、（０．１２４ｇ，６５％）を得る；融点２９７℃。
【００４０】
７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロ−ナルシスタチンのプロドラッグ（１１ａ及び１１ｂ）の合成法
７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロ−ナルシスタチンナトリウム（９，３０ｍｇ）を水（１ｍｌ）に溶かして、この溶液を、各カチオンを担うＤｏｗｅｘ  ５０ＷＸ８−４００のカラムに通過させた。ＵＶ活性分画を合わせ、凍結乾燥させて、対応のナルシスタチン塩を白い固形物として得た：
７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロ−ナルシスタチンリチウム（９ａ）。２５．４ｍｇ，融点２５３℃（分解）。
【００４１】
７−デオキシ−ｔｒａｎｓ−ジヒドロ−ナルシスタチンカリウム（９ｂ）。２３．２ｍｇ，融点２８７℃（分解）。
ｔｒａｎｓ−ジヒドロ−ナルシスタチンナトリウム（１０）。３，４−サイクリック−リン酸塩（１０）のｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシクラシン（１ａ，５７ｍｇ，０．１８４ミリモル）からの合成を、リン酸塩（９）の製法（上記参照）について記載のように、ピリジン（２ｍｌ）においてリン酸二水素テトラブチルアンモニウム（６０ｍｇ，０．１７６ミリモルと、遅れて追加するための６０ｍｇ）とジシクロヘキシルカルボジイミド（０．１８ｇ，０．８７ミリモルと、第二の添加用の０．１８ｇ）を利用して実施する（ｔｒａｎｓ−ジヒドロ−ナルシクラシンは、Mondon and Krohn. 19 により記載される手順に従って、１９９２年に我々のグループにより、ナルシクラシンより合成された）（Mondon, A., et al., Chem. Ber., 1975, 108, 445-463）。イオン交換カラム（Ｄｏｗｅｘ  ５０ＷＸ８−４００，ナトリウム型）より溶出される水性分画により、ｔｒａｎｓ−ジヒドロナルシスタチンナトリウム（１０）（８６ｍｇ，収率９４％）を無色の固形物として得た。融点＞３００℃。
【００４２】
ｔｒａｎｓ−ジヒドロ−ナルシスタチンのプロドラッグ（１０ａ及び１０ｂ）の合成法
ｔｒａｎｓ−ジヒドロ−ナルシスタチンナトリウム（１０，０．０１０ｇ）を水（１０ｍｌ）に溶かして、この溶液を、各カチオンを担うＤｏｗｅｘ  ５０ＷＸ８−２００のカラムに通過させた。次いで、ＵＶ活性分画を合わせ、凍結乾燥させて、対応のｔｒａｎｓ−ジヒドロ−ナルシスタチン塩を白い固形物として得る：
ｔｒａｎｓ−ジヒドロ−ナルシスタチンリチウム（１０ａ）。８ｍｇ，融点２７５℃（分解）。
【００４３】
ｔｒａｎｓ−ジヒドロ−ナルシスタチンカリウム（１０ｂ）。７．１ｍｇ，融点２３０〜２３５℃（分解）。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１−１】図１は、本明細書に記載する化合物の構造式を示す。
【図１−２】図１は、本明細書に記載する化合物の構造式を示す。
【図２−１】図２は、本発明の化合物のいくつかを合成するための反応スキームを示す。
【図２−２】図２は、本発明の化合物のいくつかを合成するための反応スキームを示す。
【図２−３】図２は、本発明の化合物のいくつかを合成するための反応スキームを示す。
【図１−１】
2008527010.tif 000007
【図１−２】
2008527010.tif 000008
【図２−１】
2008527010.tif 000009
【図２−２】
2008527010.tif 000010
【図２−３】
2008527010.tif 000011
【国際調査報告】
2008527010.tif 000012