(57)【要約】  本発明は、免疫調節性６−置換型プリニル化合物のいくつかの新しい生物学的活性を記述する。これらの活性により、当該化合物は、癌の治療にとくに有用なものとなる。これらの新しい生物学的活性が共同的に作用することにより、当該プリニル化合物は、癌の化学療法および／または放射線療法に伴う骨髄抑制を治療するのに有用な化学防護剤となる。この化学防護活性は、当該化合物が呈する免疫調節活性と、それに続く抗癌活性である。当該化合物の化学防護的有用性は、中鎖脂肪酸あるいはその塩またはトリグリセリドもしくはモノグリセリドもしくはジグリセリドを本発明に係る６−置換型プリニル化合物と組み合わせて使用することにより、さらに向上する。【選択図】  図１
2008511553.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
化学療法および／または放射線療法の結果として治療を必要とする癌患者において造血を刺激する方法であって、以下の一般式：
【化１】
2008511553.tif 000012
〔式中、
Ｒ１＝Ｈ、ＣＨ３
Ｒ２＝Ｈ、ＣＨ３、ＮＨ２
Ｒ１は、Ｒ２に等しくても等しくなくてもよい
Ｘ＝（ＣＨ２）ｎ  ｎ＝２〜４
＝ＣＨ２ＺＣＨ２  Ｚ＝ＮＨ、Ｏ、Ｓ
Ｙ＝Ｈ、ＣＨ３
＝
【化２】
2008511553.tif 000013
ｍ＝２〜４〕
で示される１種以上の化合物を含む薬理学的有効量の組成物の投与を含む、上記方法。
【請求項２】
前記組成物が、Ｙ＝ＨまたはＣＨ３である前記一般式で示される１種以上の化合物を含み、かつ経口投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記組成物が、Ｒ１＝Ｒ２＝ＣＨ３、Ｘ＝（ＣＨ２）ｎ（ｎ＝２〜４）、かつ
Ｙ＝Ｈまたは
＝
【化３】
2008511553.tif 000014
ｍ＝２〜４
＊＝Ｄ配置もしくはＬ配置またはラセミ混合物
である前記一般式で示される１種以上の化合物を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記組成物が、Ｒ１＝Ｒ２＝ＣＨ３、Ｘ＝（ＣＨ２）ｎ（ｎ＝２〜４）、かつＹ＝ＨまたはＤ−アルギニンである前記一般式で示される１種以上の化合物を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記組成物が、中鎖長脂肪酸Ｈ３Ｃ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ（ｎ＝４〜１０）またはその金属塩もしくはトリグリセリドをさらに含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記組成物が、ナトリウムカプリレートまたはナトリウムカプレートまたはカプリル酸またはカプリン酸またはトリカプリリンまたはトリカプリンをさらに含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
結果として生じる白血球減少または癌の治療に用いられる化学療法および／もしくは放射線療法から生じる好中球減少および／もしくは貧血を含めて、癌を治療するための化学療法および／または放射線療法をさらに含む、請求項５または６に記載の方法。
【請求項８】
前記癌患者において造血を刺激することにより、化学療法および／または放射線療法から生じる骨髄抑制を少なくとも予防、抑制、または低減する、請求項５または６に記載の方法。
【請求項９】
前記癌患者において造血を刺激することにより、化学療法および／または放射線療法から生じる白血球減少および／または好中球減少および／または貧血を少なくとも予防、抑制、または低減する、請求項４または５に記載の方法。
【請求項１０】
前記組成物がヒスタミンをさらに含む、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
化学療法および／または放射線療法の結果として治療を必要とする癌患者において造血を刺激するための医薬を製造するための１種以上の化合物の使用であって、該化合物が以下の一般式：
【化４】
2008511553.tif 000015
〔式中、
Ｒ１＝Ｈ、ＣＨ３
Ｒ２＝Ｈ、ＣＨ３、ＮＨ２
Ｒ１は、Ｒ２に等しくても等しくなくてもよい
Ｘ＝（ＣＨ２）ｎ  ｎ＝２〜４
＝ＣＨ２ＺＣＨ２  Ｚ＝ＮＨ、Ｏ、Ｓ
Ｙ＝Ｈ、ＣＨ３
＝
【化５】
2008511553.tif 000016
ｍ＝２〜４〕
で示され、かつ該医薬が、ナトリウムカプリレートまたはカリウムカプリレートまたはナトリウムカプレートまたはカリウムカプレートまたはカプリル酸またはカプリン酸またはトリカプリリンまたはトリカプリンをさらに含む、上記使用。
【請求項１２】
前記医薬が、Ｒ１＝Ｒ２＝ＣＨ３、Ｘ＝（ＣＨ２）ｎ（ｎ＝２〜４）、かつＹ＝ＨまたはＤ−アルギニンである前記一般式で示される１種以上の化合物を含む、請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
前記医薬がヒスタミンをさらに含む、請求項１１または１２に記載の使用。
【請求項１４】
化学療法および／または放射線療法の結果として治療を必要とする癌患者において造血を刺激するための組成物であって、以下の一般式：
【化６】
2008511553.tif 000017
〔式中、
Ｒ１＝Ｈ、ＣＨ３
Ｒ２＝Ｈ、ＣＨ３、ＮＨ２
Ｒ１は、Ｒ２に等しくても等しくなくてもよい
Ｘ＝（ＣＨ２）ｎ  ｎ＝２〜４
＝ＣＨ２ＺＣＨ２  Ｚ＝ＮＨ、Ｏ、Ｓ
Ｙ＝Ｈ、ＣＨ３
＝
【化７】
2008511553.tif 000018
ｍ＝２〜４〕
で示される薬理学的有効量の１種以上の化合物が含まれる、上記組成物。
【請求項１５】
前記組成物が、Ｒ１＝Ｒ２＝ＣＨ３、Ｘ＝（ＣＨ２）ｎ（ｎ＝２〜４）、かつＹ＝ＨまたはＤ−アルギニンである前記一般式で示される１種以上の化合物を含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
前記組成物がヒスタミンをさらに含む、請求項１４または１５に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、免疫調節性６−置換型プリニル化合物のいくつかの新しい生物学的活性を記述する。これらの活性により、当該化合物は、癌の治療にとくに有用なものとなる。これらの新しい生物学的活性が共同的に作用することにより、当該プリニル化合物は、癌の化学療法および／または放射線療法に伴う骨髄抑制を治療するのに有用な化学防護剤となる。この化学防護活性は、当該化合物が呈する免疫調節活性と、それに続く抗癌活性である。当該化合物の化学防護的有用性は、中鎖脂肪酸あるいはその塩またはトリグリセリドもしくはモノグリセリドもしくはジグリセリドを本発明に係る６−置換型プリニル化合物と組み合わせて使用することにより、さらに向上する。
【背景技術】
【０００２】
化学療法とは、癌細胞および腫瘍を根絶するための細胞傷害剤の使用を意味し、細胞傷害剤としては、たとえば、シクロホスファミド、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ブレオマイシン、エトポシド、トポテカン、イリノテカン、タキソテール、タキソール、５−フルオロウラシル、メトトレキセート、ゲムシタビン、シスプラチン、カルボプラチン、またはクロラムブシルが挙げられるが、これらに限定されるものではない。しかしながら、これらの薬剤は、非特異的であり、とくに高用量では、正常な急速分裂細胞に対して毒性を有する。電離放射線もまた、正常な急速分裂細胞に対して毒性を有する。これは、多くの場合、化学療法および／または放射線療法を受けている患者において種々の副作用を引き起こす。骨髄抑制（骨髄における血球産生の重度の減少）は、そのような副作用の１つである。それは、貧血、白血球減少、好中球減少、顆粒球減少、および血小板減少により特徴付けられる。重度の慢性的好中球減少はまた、循環好中球数の選択的減少および細菌感染に対する感受性の増大により特徴付けられる。
【０００３】
化学療法剤による癌治療の本質は、細胞傷害性の機序と、宿主細胞よりも高増殖性腫瘍細胞を優先する選択性の機序と、を兼備することである。しかしながら、化学療法剤がそのような選択性を有することは稀である。化学療法剤の細胞傷害性は、投与可能用量を制限し、治療サイクルに影響を及ぼし、癌患者の生活の質を著しく損なう。放射線療法による癌の治療にも、同様の欠点が影響を及ぼす。
【０００４】
貧血は、種々の疾患および障害の症状である。それは、赤色血液細胞すなわち赤血球の数、ヘモグロビンの量、またはヘマトクリット値の測定により特徴付けられる血液中の濃縮赤血球の体積が正常値未満に減少したときに存在する病状を意味する。ヘモグロビンは、血液中の酸素に結合して酸素を輸送するテトラペプチドである。本発明の枠内では、癌の治療における化学療法または放射線療法の使用に伴う貧血に対処することがとくに対象となる。ＢｉｏＷｏｒｌｄ Ｔｏｄａｙ（４頁；２００２年７月２３日刊）に発表された報告によれば、米国では化学療法を受けている癌患者の約６７％は、貧血になる。
【０００５】
癌治療はまた、多くの場合、白色血液細胞すなわち白血球の減少を引き起こす。生じる病状は、白血球減少が原因であるとみなされる。より特定的には、癌治療は、主要な白血球サブセットである多形核好中球の減少を引き起こす可能性がある。正常血球数を呈する個人では、好中球は、全白血球の約６０％を構成する。しかしながら、化学療法を受けている癌患者の約３人に１人は、好中球減少の問題を抱えている。
【０００６】
造血増殖因子は、組換えタンパク質として市販されている。これらのタンパク質としては、好中球減少を治療するための顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）および顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）ならびに貧血を治療するためのエリトロポエチン（ＥＰＯ）が挙げられる。しかしながら、これらの組換えタンパク質は高価であり、その結果、それらの使用は制限され、必要のあるすべての患者に容易に使用できるわけではない。患者が免疫抑制から「化学防護」されるのであれば、そのような療法後の改善治療は不必要である。国際出願ＰＣＴ／ＣＡ０２／００５３５およびＰＣＴ／ＧＢ０４／００４５７には、造血を刺激したり好中球減少や貧血を治療したりするのにも有用である化学防護剤としての中鎖長の脂肪酸、グリセリド、およびそれらの類似体の使用について記載されている。しかしながら、上記の増殖因子や化合物はいずれも、患者を「化学防護」すると同時に、最も効率的に抗腫瘍活性を示す患者の免疫細胞サブセットすなわち細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）を刺激することはできない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
したがって、化学療法および／または放射線療法により引き起こされる骨髄抑制的状態の望ましくない副作用を低減すると同時に、ＣＴＬを刺激することにより免疫系の抗腫瘍応答を最大限に刺激する新規な組成物および方法が必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
一連の６−置換型プリニルアルコキシカルボニルアミノ酸が、ＣＴＬを刺激するそれらの能力に関して文献に記載されている；B. Zacharie et al., Journal of Medicinal Chemistry, 40, 2883-2894 (1997)およびS. Kadhim et al., International Journal of Immunopharmacology, 22, 659-671 (2000)。これらの化合物のうちのいくつか、特定的には［［５−［６−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）プリン−９−イル］ペントキシ］−カルボニル］ｄ−アルギニン（これ以降では化合物Ｉと記す）は、免疫性増殖因子またはサイトカインインターロイキン２に匹敵するｉｎ ｖｉｔｒｏ ＣＴＬ刺激を示した。さらに、この強力なＣＴＬ刺激は、有意なｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍活性を引き起こすことが明らかにされた。これらの論文から２つの一般的論点が導かれる。
【０００９】
（１）  Ｔ細胞（特定的にはＣＴＬ）は、抗腫瘍応答を開始するのに重要な免疫細胞サブセットである。
【００１０】
（２）  いくつかの化合物は、主にＴ細胞系列（Ｔヘルパー細胞、ＣＴＬ）に作用する特異的免疫応答を刺激することが可能であり、それらは抗腫瘍活性を有する。そのような「胸腺模倣」化合物としては、レバミゾール、メチルイノシンモノホスフェート、イソプリノシン、チモペンチン、およびツカレソールが挙げられる。
【００１１】
しかしながら、該論文にもそこに引用されている参考文献にも、Ｔ細胞刺激剤または胸腺模倣剤（胸腺を模倣しうるもの）として機能すると同時に化学防護剤としても機能しうる先行技術の化合物は、教示されていない。実際には、先行技術では、これらは、特異的化合物、とくに化合物Ｉ（したがって改良化合物）であることが教示されており、この物質により、複数の免疫細胞サブセットを直接刺激する、非特異的でかつ後に有毒となる免疫刺激剤と比較して、この群の化合物が相対的に毒性を持たないことが説明されている。後者の例としては、リポポリサッカリドおよびムラミルジペプチドが挙げられる。
【００１２】
驚くべきことに、化合物Ｉのような６−置換型プリニル化合物は赤血球および白血球の増殖を刺激する能力によってもたらされるものとして化学防護活性を有することを見いだした。さらに、本発明に係る化合物を中鎖脂肪酸あるいはその金属塩またはトリグリセリドもしくはモノグリセリドもしくはジグリセリドと組み合わせたときに増強された化学防護活性を取得しうることを見いだした。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明は、患者が癌治療のために細胞傷害剤による化学療法および／または電離放射線による放射線療法を受けている間、患者の造血系を維持すると同時に、より効果的な抗腫瘍応答が行われるように患者のＣＴＬを刺激する方法に関する。本発明は、以下の一般式：
【化１】
2008511553.tif 000003
【００１４】
〔式中、
Ｒ１＝Ｈ、ＣＨ３
Ｒ２＝Ｈ、ＣＨ３、ＮＨ２
Ｒ１は、Ｒ２に等しくても等しくなくてもよい
Ｘ＝（ＣＨ２）ｎ  ｎ＝２〜４
＝ＣＨ２ＺＣＨ２  Ｚ＝ＮＨ、Ｏ、Ｓ
Ｙ＝Ｈ、ＣＨ３
＝
【化２】
2008511553.tif 000004
【００１５】
ｍ＝２〜４〕
で示される化合物または製薬上許容されるその誘導体を包含する。
【００１６】
本発明の一態様では、
Ｒ１＝Ｒ２＝ＣＨ３、Ｘ＝（ＣＨ２）ｎ（ｎ＝２〜４）、かつ
Ｙ＝Ｈまたは
【化３】
2008511553.tif 000005
【００１７】
ｍ＝２〜４
＊＝Ｄ配置もしくはＬ配置またはラセミ混合物（race）
である。
【００１８】
本発明の好ましい態様では、
Ｒ１＝Ｒ２＝ＣＨ３、Ｘ＝（ＣＨ２）ｎ（ｎ＝２〜４）、かつ
Ｙ＝Ｈまたは
【化４】
2008511553.tif 000006
【００１９】
である。
【００２０】
とくに好ましいのは、以下の構造：
【化５】
2008511553.tif 000007
【００２１】
を有する化合物ＩおよびＩＩである。
【００２２】
本発明の他の実施形態では、上記の式で示される化合物は、カプリン酸やカプリル酸のような中鎖脂肪酸あるいはその金属塩またはトリグリセリドもしくはモノグリセリドもしくはジグリセリドと組み合わせて使用可能である。とくに好ましいのは、カプリン酸もしくはカプリル酸のナトリウム塩もしくはカリウム塩またはカプリン酸のトリグリセリド（トリカプリン）もしくはカプリル酸のトリグリセリド（トリカプリリン）の使用である。
【００２３】
中鎖脂肪酸とは、６（ヘキサン酸）〜１２（ドデカン酸）の炭素鎖長を有する脂肪族カルボン酸を意味する。飽和中鎖脂肪酸は本発明の好ましい実施形態を構成するが、これは、不飽和中鎖脂肪酸の使用を除外するものではない。たとえば、９−デセン酸は、本発明で利用しうる適切な不飽和中鎖脂肪酸の代表例である。飽和脂肪酸の中で、カプリル酸（オクタン酸）およびカプリン酸（デカン酸）は、好ましい中鎖長脂肪酸である。中鎖トリグリセリドとは、３分子の中鎖脂肪酸が１分子のグリセロールでエステル化されたときに得られる生成物を意味する。
【００２４】
以上で引用した特許出願に記載されるように、中鎖脂肪酸およびそのトリグリセリドは、食品業界および医薬品業界で使用される非毒性材料である。たとえば、Ｔｈｅ Ｍｅｒｃｋ Ｉｎｄｅｘ， １１ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ， ２６６ （１９８９）には、カプリル酸は、本質的に非毒性であるＬＤ５０（経口、ラット）＝１０．０８ｇ／ｋｇを有すると報告されている。実際には、Ｃｏｄｅ ｏｆ Ｆｅｄｅｒａｌ Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｓ（ＣＦＲ）の第１８４部に準拠して、Ｕ．Ｓ． Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎは、カプリル酸にＧＲＡＳ（一般に安全であると認められる）認定を与えている。同様に、第１７２部（ＣＦＲ）に準拠して、遊離脂肪酸（たとえば、カプリル酸、カプリン酸）およびその金属塩は、食品に使用するための安全な添加剤として認められている。
【００２５】
中鎖脂肪酸またはその金属塩もしくはトリグリセリドと６−置換型プリニル化合物との組合せは、本発明の好ましい実施形態であるが、これは、造血を刺激しうる他の化合物（先行技術に記載の化合物またはこれまで開示されていない化合物のいずれか）と６−置換型プリニル化合物との組合せの使用を除外するものではない。たとえば、C. Lyman et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 43, 2165-2169 (1999)に記載されているように、ノナペプチドＳＫＦ １０７６４７は、好中球および単球の増加を引き起こすと報告される。したがって、ＳＫＦ １０７６４７または関連ペプチドを６−置換型プリニル化合物と併用することは、本発明の範囲内にある。同様に、ヒスタミンは、造血を弱くしか刺激できないことが観測された。しかしながら、低用量の化合物Ｉとヒスタミンとの組合せは、白血球数および赤血球数の有意な増加を引き起こす。
【００２６】
単独であるいは中鎖脂肪酸またはその金属塩もしくはそのトリグリセリドと組み合わせて使用される上記の一般式により記述される本発明に係る化合物は、哺乳動物においてＣＴＬの活性を刺激しその数を増加させることが可能である。以上で引用した文献にはネズミＣＴＬを刺激する能力が記載されているが、ヒト血液を用いた後続実験から、本発明に係る化合物はまた、ヒトＣＴＬを刺激しうることが明らかにされた。さらに、これらの化合物を用いて達成されるこのきわめて特異的なＣＴＬ刺激は、治療される哺乳動物に対して比較的非毒性である。これは、ＣＴＬを刺激する他の分子、たとえば、サイトカインインターロイキン２とは対照的である。インターロイキン２は、ＣＴＬを効率的に刺激する１５ｋＤの内因性増殖因子タンパク質である。したがって、それは、腎細胞癌および黒色腫を治療することに関してＵ．Ｓ． Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎにより承認されている。しかしながら、インターロイキン２は、その使用に伴いうる重度の毒性が原因で広く使用されていない。さらに、以上に述べたように、多くの免疫細胞サブセット（マクロファージ、Ｂ細胞、およびＮＫ細胞、さらにはＴ細胞）を非特異的に刺激する他の分子もまた、とくに長期間使用した場合、毒性を呈する。しかしながら、特定の免疫細胞サブセットを特異的に刺激する化合物は、比較的非毒性の傾向がある。たとえば、Ｔ細胞（Ｔヘルパー細胞およびＣＴＬ）を特異的に刺激する能力を有して胸腺を模倣する、上記に記載した胸腺模倣化合物は、比較的非毒性である。したがって、先行技術の引用では、ＣＴＬを選択的かつ特異的に刺激する６−置換型プリニル化合物の能力は、その毒性の異例な消失を説明するものと推測された。たとえば、ＬＤ５０（静脈内、ラット）は、胸腺模倣化合物レバミゾールでは１６ｍｇ／ｋｇであるが、化合物Ｉでは５００ｍｇ／ｋｇ超である。
【００２７】
驚くべきことに、６−置換型プリニル化合物の毒性の消失はＣＴＬを特異的に刺激する能力によっては完全には説明されないことを見いだした。実際には、当該化合物は、赤血球および白血球の産生を刺激する能力によってもたらされるものとして化学防護活性を有する。これについては、実施例１に示される。実施例１では、細胞傷害剤シクロホスファミドで処理された動物（ただし、化合物Ｉで前処理されている）において脾臓赤血球数および脾臓白血球数の有意な増加が観測される。同実施例では、化合物Ｉで処理された同一の動物において末梢白血球数の有意な増加も観測される。しかしながら、実施例２に示されるように、化合物Ｉとナトリウムカプレートとの組合せで前処理すると、末梢赤血球の有意な増加が起こる。化合物Ｉの化学防護活性はまた、特定用量（たとえば４０ｍｇ／ｋｇ）の５−フルオロウラシル単独で処理されたマウスと比較して、ＭＣ−３８結腸癌を有するマウスを化合物Ｉと細胞傷害剤５−フルオロウラシルの傷害性療法とで処理した実験において、動物の生存率の改善によっても例証された。
【００２８】
本発明に係る６−置換型プリニル化合物は、当技術分野で周知の合成方法を用いて調製可能である。その際、たとえば、上記の引用文献Journal of Medicinal Chemistry, 40, 2883-2894, 1997に記載の合成手順に準拠しうる。類似の詳細手順はまた、１９９９年１１月３０日に発行された米国特許第５，９９４，３６１号でも提供されている。同様に、中鎖脂肪酸の金属塩は、国際出願ＰＣＴ／ＧＢ０４／０３１８２に記載の合成手順により調製可能である。ヒトに使用するのに好適な中鎖脂肪酸およびそのトリグリセリドは、いくつかの供給業者のいずれかより入手可能な市販品である。
【００２９】
癌の化学療法および／または放射線療法で使用した場合、６−置換型プリニル化合物は、単独あるいは中鎖脂肪酸またはその金属塩もしくはトリグリセリドとの組合せのいずれかで、化学療法および／または放射線療法の施行前、施行中、および／または施行後（たとえば１４日以内）に、投与可能である。抗腫瘍免疫応答を刺激するとともに造血細胞の増殖および後続の修復をも刺激するそのような化合物を用いて、化学療法および／または放射線療法に伴う毒性（白血球減少、好中球減少、貧血）を低減することが、本発明の意図するところである。そのように毒性が低減されれば、臨床医により必要であるとみなされた場合、細胞傷害剤および／または電離放射線の量を増大できる可能性が開かれる。６−置換型プリニル化合物と中鎖脂肪酸またはその金属塩もしくはトリグリセリドとの組合せの使用に関して、組合せの両成分を別々にまたは一緒に混合して投与することが可能である。前者の場合、組合せの個々の成分は、治療サイクルの同一時点または異なる時点でならびに化学療法および／または放射線療法に対して同一時点または異なる時点で投与可能である。組合せの個々の成分は、同一経路または異なる経路により投与可能である。別々に与えるか一緒に与えるかに関係なく、組合せの成分は、経口経路、舌下経路、吸入経路（点鼻スプレー）、静脈内経路、筋肉内経路、または皮下経路により与えることが可能である。
【００３０】
当業者であればわかるであろうが、本発明に係る６−置換型プリニル化合物には、単独あるいは中鎖脂肪酸またはその金属塩もしくはトリグリセリドとの組合せのいずれにおいても、製薬上許容されるすべてのその誘導体（プロドラッグが包含される）および類似体さらにはすべての異性体およびエナンチオマーが包含される。さらに、当該化合物は、単独あるいは中鎖脂肪酸またはその金属塩もしくはトリグリセリドとの組合せのいずれにおいても、医薬の製造に使用される。
【００３１】
本発明の他の態様は、免疫不全および／または白血球減少および／または好中球減少および／または貧血および／または腫瘍増殖を治療するために、上記の一般式で示される６−置換型プリニル化合物を単独あるいは中鎖脂肪酸またはその金属塩もしくはトリグリセリドとの組合せのいずれかで投与するかあるいはその医薬組成物を投与する工程を含む、哺乳動物、好ましくはヒトの治療方法である。当業者であればわかるであろうが、治療とは、化学療法および／もしくは放射線療法と併用される樹立腫瘍の治療または癌の症状の治療だけでなく、原発性腫瘍からの転移の予防をはじめとする予防まで拡張解釈されるものである。さらに、治療に使用される化合物の量は、選択される特定の化合物だけでなく、投与経路、治療される癌の性質および重症度、ならびに患者の年齢および健康状態によっても異なり、最終的には担当の臨床医の自由裁量にゆだねられることもわかるであろう。しかしながら、一般的には、好適な用量は、１日あたり約０．１〜約２００ｍｇ／ｋｇ（体重）の範囲内で単独であるいは約１．０〜約５００ｍｇ／ｋｇの中鎖脂肪酸またはその金属塩もしくはトリグリセリドと組み合わせて与えられる。好ましくは、用量は、１日あたり約１．０ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの化合物の範囲内であろう。より好ましくは、１日あたり約１０．０ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇの化合物であろう。
【実施例】
【００３２】
以下で本発明の実施についてさらに説明するが、それらに限定されるものではない。
【００３３】
実施例１．化学防護試験：化合物Ｉによる造血細胞のｉｎ ｖｉｖｏ防護
０日目に２００ｍｇ／ｋｇのシクロホスファミド（ＣＹ）を静脈内投与して処理することにより、６〜８週齢の雌Ｃ５７ＢＬ／６マウスを免疫抑制した。化合物Ｉの化学防護作用を調べるために、−３、−２、−１日目に５０ｍｇ／ｋｇの化合物でマウスを腹腔内前処理した。＋５日目に心臓穿刺および頸椎脱臼によりマウスを屠殺した。次に、以下のように、胸腺、脾臓、および骨髄から細胞懸濁液を調製した。
【００３４】
組織をＰＢＳ緩衝液中で粉砕し、不純赤血球を５分間かけてＡＣＫ緩衝液（１５５ｍＭ ＮＨ４Ｃｌ、１２ｍＭ ＮａＨＣＯ３、０．１ｍＭ ＥＤＴＡ、ｐＨ７．３）中に溶解させた。次に、細胞を遠心分離により捕集し、ＰＢＳ中で３回洗浄し、そして組織培養培地中に再懸濁させた。細胞をコールターカウンターでカウントした。
【００３５】
ＣＹ処理マウスにおいて、化合物Ｉで前処理した後、脾臓赤血球数および脾臓白血球数の有意な増加が観測された（表１）。さらに、何匹かの処理動物は、非免疫抑制動物（対照）と比較して、脾臓赤血球数が「ベースラインレベル」に戻った。さらに、化合物Ｉの存在で末梢白血球数の有意な増加が観測された。
【表１】
2008511553.tif 000008
【００３６】
実施例２．化学防護試験：ナトリウムカプレートと化合物Ｉとの組合せによる免疫細胞増殖または防護のｉｎ ｖｉｖｏ誘導
実施例１に記載のプロトコルに準拠して、造血細胞増殖または防護のｉｎ ｖｉｖｏ誘導に及ぼすナトリウムカプレート、化合物Ｉ、および両化合物の組合せの影響を調べた。−３、−２、および−１日目に、ナトリウムカプレート（６０．５ｍＭ）の経口投与および／または化合物Ｉ（５０ｍｇ／ｋｇ）の腹膜注射を行った。処理動物をそのそれぞれの対照群と比較した。すなわち、ＣＹ＋ナトリウムカプレートをＣＹ−ＰＯ（ＣＹ＋経口投与ＰＢＳ）と比較し；ＣＹ＋化合物ＩをＣＹ−ＩＰ（ＣＹ＋腹腔内注射ＰＢＳ）と比較し；そしてＣＹ＋ナトリウムカプレート＋化合物ＩをＣＹ−ＰＯＩＰ（ＣＹ＋経口投与ＰＢＳおよび腹腔内注射ＰＢＳ）と比較した。
【００３７】
図１は、末梢赤血球数に及ぼすナトリウムカプレート、化合物Ｉ、および両化合物の組合せの影響を示している。ＣＹ処理マウスにおいて、ナトリウムカプレートの前処理により末梢赤血球の有意な増加が得られた（ＣＹ−経口投与対照と比較して）。ＣＹ免疫抑制マウスを化合物Ｉで処理したときも、末梢赤血球の有意な増加が観測された（ＣＹ−腹腔内注射対照と比較して）。さらに、ナトリウムカプレートと化合物Ｉとの組合せ療法では、末梢赤血球数の増加に関して相加効果を生じた。そのうえ、組合せ処理された何匹かの処理動物は、非免疫抑制動物（対照）と比較して末梢赤血球数が「ベースラインレベル」に戻る。同一用量の化合物Ｉおよびより低用量（６．０５ｍＭ）のナトリウムカプレートを用いてこの実験を反復したとき、類似の結果が得られた。
【００３８】
以上に記載したプロトコルに準拠して、低用量のナトリウムカプレート、化合物Ｉ、および両化合物の組合せの影響を調べた。ただし、ナトリウムカプレートのときは１．２１ｍＭで、化合物Ｉのときは５ｍｇ／ｋｇで、化合物を静脈内投与した。図２および３は、骨髄赤血球数および骨髄白血球数に及ぼすナトリウムカプレート、化合物Ｉ、および両化合物の組合せの影響を示している。ナトリウムカプレートまたは化合物Ｉを単独使用したときは、影響は観測されなかった。しかしながら、ナトリウムカプレートと化合物Ｉとを併用したときは、骨髄赤血球（ｐ＜０．０４）および骨髄白血球（ｐ＜０．０４）の有意な増加が得られた。さらに、ナトリウムカプレートと化合物Ｉとの組合せ療法では、骨髄赤血球数および骨髄白血球数の増加に関して相乗効果を生じた。
【００３９】
実施例３．化学防護試験：トリカプリンと化合物Ｉとの組合せによる免疫細胞増殖または防護のｉｎ ｖｉｖｏ誘導
実施例１に記載のプロトコルに準拠して、造血細胞増殖または防護のｉｎ ｖｉｖｏ誘導に及ぼすトリカプリン、化合物Ｉ、および両化合物の組合せの影響を調べた。−３、−２、および−１日目に、トリカプリン（６０．５ｍＭ）の経口投与および／または化合物Ｉの腹膜注射を行った。
【００４０】
表２は、骨髄赤血球数に及ぼすトリカプリン、化合物Ｉ、および両化合物の組合せの影響を示している。ＣＹ処理マウスにおいて、トリカプリンと化合物Ｉとの組合せで前処理することにより、骨髄赤血球の有意な増加が得られた。これは、ＣＹ単独と比較して相乗効果であった。さらに、トリカプリンと化合物Ｉとの組合せで処理されたマウスは、骨髄においてＣＦＵ−ＧＥＭＭ細胞集団の増加（３倍）を示した（表３）。
【表２】
2008511553.tif 000009
【表３】
2008511553.tif 000010
【００４１】
実施例４．化学防護試験：化合物ＩＩによる造血細胞のｉｎ ｖｉｖｏ防護
実施例１に記載のプロトコルに準拠して、造血細胞増殖または防護のｉｎ ｖｉｖｏ誘導に及ぼす化合物ＩＩの影響を調べた。−３、−２、および−１日目に、化合物ＩＩ（５０ｍｇ／ｋｇまたは１００ｍｇ／ｋｇ）の経口投与を行った。
【００４２】
ＣＹ処理マウスにおいて、化合物ＩＩで前処理することにより、骨髄赤血球数および骨髄白血球数の有意な増加が観測された（表４）。さらに、何匹かの処理動物は、非免疫抑制動物（対照）と比較して、骨髄赤血球数および骨髄白血球数が「ベースラインレベル」に戻る。
【表４】
2008511553.tif 000011
【００４３】
実施例５．化学防護試験：ナトリウムカプレートと化合物ＩＩとの組合せによる免疫細胞増殖または防護のｉｎ ｖｉｖｏ誘導
実施例１に記載のプロトコルに準拠して、造血細胞増殖または防護のｉｎ ｖｉｖｏ誘導に及ぼすナトリウムカプレート、化合物ＩＩ、および両化合物の組合せの影響を調べた。−３、−２、および−１日目に、ナトリウムカプレート（６０．５ｍＭ）および／または化合物ＩＩ（５０ｍｇ／ｋｇもしくは１００ｍｇ／ｋｇ）の経口投与を行った。
【００４４】
図４は、末梢赤血球数に及ぼすナトリウムカプレート、化合物ＩＩ、および両化合物の組合せの影響を示している。ＣＹ処理マウスにおいて、ナトリウムカプレートの前処理により末梢赤血球のわずかな増加が得られた（ＣＹ−経口投与対照と比較して）。しかしながら、ナトリウムカプレートと化合物ＩＩとの組合せ療法では、末梢赤血球の増加において相乗効果を生じた。そのうえ、組合せ処理された何匹かの処理動物は、非免疫抑制動物（対照）と比較して末梢赤血球数が「ベースラインレベル」に戻る。
【００４５】
実施例６．化学防護試験：ヒスタミンジヒドロクロリドと化合物Ｉとの組合せによる免疫細胞増殖または防護のｉｎ ｖｉｖｏ誘導
実施例１に記載のプロトコルに準拠して、造血細胞増殖または防護のｉｎ ｖｉｖｏ誘導に及ぼす低用量のヒスタミン、化合物Ｉ、および両化合物の組合せの影響を調べた。−３、−２、および−１日目に、ヒスタミンジヒドロクロリド（２５ｍｇ／ｋｇ）および化合物Ｉ（５ｍｇ／ｋｇ）の静脈内投与を行った。
【００４６】
図５は、骨髄白血球数に及ぼすヒスタミン、化合物Ｉ、およびヒスタミンと化合物Ｉとの組合せの影響を示している。ＣＹ処理マウスにおいて、低用量のヒスタミンおよび／または化合物Ｉでは有意な影響は観測されなかった（ＣＹと比較して）。しかしながら、ヒスタミンと化合物Ｉとの組合せ療法では、骨髄白血球数の増加に関して相乗効果を生じた（図５）。そのうえ、組合せ処理された何匹かの処理動物は、非免疫抑制動物（対照）と比較して骨髄白血球数が「ベースラインレベル」に戻る。さらに、ＣＹ処理マウスにおいて、ヒスタミンと化合物Ｉとの組合せにより、骨髄赤血球のわずかな増加が得られた（図６）。
【００４７】
実施例７．化学防護試験：ヒスタミンジヒドロクロリドと化合物ＩＩとの組合せによる免疫細胞増殖または防護のｉｎ ｖｉｖｏ誘導
実施例１に記載のプロトコルに準拠して、造血細胞増殖または防護のｉｎ ｖｉｖｏ誘導に及ぼす低用量のヒスタミン、化合物ＩＩ、および両化合物の組合せの影響を調べた。−３、−２、および−１日目に、ヒスタミンジヒドロクロリド（２５ｍｇ／ｋｇ）および化合物ＩＩ（１００ｍｇ／ｋｇ）の経口投与を行った。
【００４８】
図７は、脾臓白血球数に及ぼすヒスタミン、化合物ＩＩ、および、ヒスタミンと化合物ＩＩとの組合せの影響を示している。ＣＹ処理マウスにおいて、低用量のヒスタミンおよび／または化合物ＩＩでは有意な影響は観測されなかった（ＣＹと比較して）。しかしながら、ヒスタミンと化合物ＩＩとの組合せ療法では、脾臓白血球数の増加に関して相乗効果を生じた。
【００４９】
本明細書に引用されている特許、特許出願、および他の出版物は、それらの全体が参照により組み入れられるものとする。
【００５０】
請求項の意味範囲内およびその法的均等物の範囲内にある変更および置換はすべて、それらの範囲内に包含されるものとする。「〜を含む」という移行語を用いた請求項は、他の要素が請求項の範囲内に包含されることを許容するものであり；「〜を含む」という用語の代わりに、「〜より本質的になる」という移行句（すなわち、発明の有効性に実質的に影響を及ぼさないのであれば他の要素が請求項の範囲内に包含されることを許容する）および「〜よりなる」という移行語（すなわち、通常、発明に関連する不純物または取るに足らない活性は別として、請求項に列挙された要素だけを許容する）を用いた請求項によっても、本発明は記述される。３つの移行部のいずれかを用いて、本発明の特許請求を行うことが可能である。
【００５１】
当然のことながら、本明細書に記載の要素は、請求項に明記されていないかぎり、特許請求された本発明を限定するものと解釈すべきものではない。したがって、請求項は、明細書に基づく限定ではなく、請求項に包含されると解釈される許容される法的保護の範囲を決定するための基準である。それとは対照的に、先行技術は、特許請求された発明が予想されるかまたは新規性が損なわれる特定の実施形態の程度まで、本発明から明確に除外される。
【００５２】
さらに、請求項による２つもしくはそれ以上の限定間の特定の関係は、そのような関係が請求項に明記されていないかぎり、意図されない（たとえば、生産物クレームにおける成分の配置または方法クレームにおける工程の順序は、そのように明記されていないかぎり、請求項により限定されるものではない）。本明細書に開示される個々の構成要素の可能な組合せおよび順列はすべて、本発明の態様であるとみなされ；同様に、本発明の説明の一般概念も、本発明の一部であるとみなされる。
【００５３】
以上の内容から、当業者であれば、本発明をその精神または本質的特徴から逸脱することなく他の特定の形態で具体化しうることは明らかであろう。本発明に与えられる法的保護の範囲は、本明細書によってではなく添付の特許請求の範囲によって規定されるので、記載の実施形態は、限定的なものではなく例示的ものにすぎないとみなされるべきものである。
【図面の簡単な説明】
【００５４】
【図１】図１は、末梢血赤血球数に及ぼすナトリウムカプレート、化合物Ｉ、および化合物Ｉとナトリウムカプレートとの組合せの影響を示している。
【図２】図２は、骨髄赤血球数に及ぼすナトリウムカプレート、化合物Ｉ、および化合物Ｉとナトリウムカプレートとの組合せの影響を示している。
【図３】図３は、骨髄白血球数に及ぼすナトリウムカプレート、化合物Ｉ、および化合物Ｉとナトリウムカプレートとの組合せの影響を示している。
【図４】図４は、末梢血赤血球数に及ぼすナトリウムカプレート、化合物ＩＩ、および化合物ＩＩとナトリウムカプレートとの組合せの影響を示している。
【図５】図５は、骨髄白血球数に及ぼすヒスタミンジヒドロクロリド、化合物Ｉ、および化合物Ｉとヒスタミンジヒドロクロリドとの組合せの影響を示している。
【図６】図６は、骨髄赤血球数に及ぼすヒスタミンジヒドロクロリド、化合物Ｉ、および化合物Ｉとヒスタミンジヒドロクロリドとの組合せの影響を示している。
【図７】図７は、脾臓白血球数に及ぼすヒスタミンジヒドロクロリド、化合物ＩＩ、および化合物ＩＩとヒスタミンジヒドロクロリドとの組合せの影響を示している。
【図１】
2008511553.tif 000019
【図２】
2008511553.tif 000020
【図３】
2008511553.tif 000021
【図４】
2008511553.tif 000022
【図５】
2008511553.tif 000023
【図６】
2008511553.tif 000024
【図７】
2008511553.tif 000025
【手続補正書】
【提出日】平成19年5月9日(2007.5.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
化学療法および／または放射線療法の結果として治療を必要とする癌患者において貧血および／または好中球減少を治療する方法であって、以下の一般式：
【化１】
2008511553.tif 000026
〔式中、
Ｒ１＝Ｈ、ＣＨ３
Ｒ２＝Ｈ、ＣＨ３、ＮＨ２
Ｒ１は、Ｒ２に等しくても等しくなくてもよい
Ｘ＝（ＣＨ２）ｎ  ｎ＝２〜４
＝ＣＨ２ＺＣＨ２  Ｚ＝ＮＨ、Ｏ、Ｓ
Ｙ＝Ｈ、ＣＨ３
＝
【化２】
2008511553.tif 000027
ｍ＝２〜４〕
で示される１種以上の化合物を含む薬理学的有効量の組成物の投与を含む、上記方法。
【請求項２】
前記組成物が、Ｙ＝ＨまたはＣＨ３である前記一般式で示される１種以上の化合物を含み、かつ経口投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記組成物が、Ｒ１＝Ｒ２＝ＣＨ３、Ｘ＝（ＣＨ２）ｎ（ｎ＝２〜４）、かつ
Ｙ＝Ｈまたは
＝
【化３】
2008511553.tif 000028
ｍ＝２〜４
＊＝Ｄ配置もしくはＬ配置またはラセミ混合物
である前記一般式で示される１種以上の化合物を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記組成物が、Ｒ１＝Ｒ２＝ＣＨ３、Ｘ＝（ＣＨ２）ｎ（ｎ＝２〜４）、かつＹ＝ＨまたはＤ−アルギニンである前記一般式で示される１種以上の化合物を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記組成物が、中鎖長脂肪酸Ｈ３Ｃ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ（ｎ＝４〜１０）またはその金属塩もしくはトリグリセリドをさらに含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記組成物が、ナトリウムカプリレートまたはナトリウムカプレートまたはカプリル酸またはカプリン酸またはトリカプリリンまたはトリカプリンをさらに含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
化学療法から生じる貧血が少なくとも予防、抑制、または低減される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
放射線療法から生じる貧血が少なくとも予防、抑制、または低減される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
化学療法から生じる好中球減少が少なくとも予防、抑制、または低減される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
放射線療法から生じる好中球減少が少なくとも予防、抑制、または低減される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記組成物がヒスタミンをさらに含む、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
化学療法および／または放射線療法の結果として治療を必要とする癌患者において貧血および／または好中球減少を治療するための医薬を製造するための１種以上の化合物の使用であって、該化合物が以下の一般式：
【化４】
2008511553.tif 000029
〔式中、
Ｒ１＝Ｈ、ＣＨ３
Ｒ２＝Ｈ、ＣＨ３、ＮＨ２
Ｒ１は、Ｒ２に等しくても等しくなくてもよい
Ｘ＝（ＣＨ２）ｎ  ｎ＝２〜４
＝ＣＨ２ＺＣＨ２  Ｚ＝ＮＨ、Ｏ、Ｓ
Ｙ＝Ｈ、ＣＨ３
＝
【化５】
2008511553.tif 000030
ｍ＝２〜４〕
で示され、かつ該医薬が、ナトリウムカプリレートまたはカリウムカプリレートまたはナトリウムカプレートまたはカリウムカプレートまたはカプリル酸またはカプリン酸またはトリカプリリンまたはトリカプリンをさらに含む、上記使用。
【請求項１３】
前記医薬が、Ｒ１＝Ｒ２＝ＣＨ３、Ｘ＝（ＣＨ２）ｎ（ｎ＝２〜４）、かつＹ＝ＨまたはＤ−アルギニンである前記一般式で示される１種以上の化合物を含む、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
前記医薬がヒスタミンをさらに含む、請求項１２または１３に記載の使用。
【請求項１５】
化学療法および／または放射線療法の結果として治療を必要とする癌患者において貧血および／または好中球減少を治療するための組成物であって、以下の一般式：
【化６】
2008511553.tif 000031
〔式中、
Ｒ１＝Ｈ、ＣＨ３
Ｒ２＝Ｈ、ＣＨ３、ＮＨ２
Ｒ１は、Ｒ２に等しくても等しくなくてもよい
Ｘ＝（ＣＨ２）ｎ  ｎ＝２〜４
＝ＣＨ２ＺＣＨ２  Ｚ＝ＮＨ、Ｏ、Ｓ
Ｙ＝Ｈ、ＣＨ３
＝
【化７】
2008511553.tif 000032
ｍ＝２〜４〕
で示される薬理学的有効量の１種以上の化合物が含まれる、上記組成物。
【請求項１６】
前記組成物が、Ｒ１＝Ｒ２＝ＣＨ３、Ｘ＝（ＣＨ２）ｎ（ｎ＝２〜４）、かつＹ＝ＨまたはＤ−アルギニンである前記一般式で示される１種以上の化合物を含む、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
前記組成物がヒスタミンをさらに含む、請求項１５または１６に記載の組成物。
【国際調査報告】
2008511553.tif 000033
2008511553.tif 000034
2008511553.tif 000035
2008511553.tif 000036