(57)【要約】  皮膚を、ポリアミン誘導体および／またはこのアナログ；ジフルオリルメチルオルニチン（ＤＦＭＯ）；Ｎ−アセチルシステイン；非ヒドロキシＣ２−Ｃ４０ジカルボン酸の中和塩（好ましくは、マロン酸塩）；およびこの混合物から選択される毛成長阻害剤と接触させることによる、皮脂産生および／または毛穴サイズを低下させる美容的組成物および美容的方法。皮脂および／または毛穴サイズを減少させるさらなる薬剤、例えば、分枝状アルコールのカルボキシアルキラートおよび／またはこのエトキシラート、セルレニン、トリクロサン、α−メチレン−γ−ブチロラクトンおよびＥＧＣＧ、ならびに、この混合物およびこのアナログなどを本発明の組成物および方法において含めることができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
脂腺細胞および／または皮膚を、ポリアミン誘導体；ジフルオリルメチルオルニチン（ＤＦＭＯ）；Ｎ−アセチルシステイン；非ヒドロキシＣ２−４０ジカルボン酸の中和塩；この美容上許容され得る塩；この溶媒和物；およびこの混合物から選択される薬剤の皮脂産生阻害量および／または毛穴サイズ阻害量を含む組成物と接触させることを含む、この必要性のある個体の脂腺細胞における皮脂産生および／または皮膚における毛穴サイズを低下させる美容的方法。
【請求項２】
前記皮膚を剃ることをさらに含む、請求項１に記載の美容的方法。
【請求項３】
前記ポリアミン誘導体が、下記の一般式Ｉの化合物：
Ｒ−Ｘ−ポリアミン    （Ｉ）
（式中、Ｒは、Ｈから、または、直鎖または分枝状のＣ１−５０の飽和または不飽和の脂肪族、カルボキシアルキル、ヒドロキシカルボキシアルキルまたはアルコキシ；Ｃ３−８脂環族；単環アリール置換または多環アリール置換の脂肪族；脂肪族置換の単環芳香族または多環芳香族；単環または多環の複素環族；単環複素環置換または多環複素環置換の脂肪族；Ｃ１−１０アルキル；アリールスルホニル；またはシアノからなる群より選択され；
「Ｘ」は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−または−ＣＨ２−であり；および
「ポリアミン」は、天然に存在するポリアミン、または、合成的に製造されたポリアミンである）
である、請求項１に記載の美容的方法。
【請求項４】
前記薬剤が、下記の一般式ＩＩのポリアミン誘導体：
Ｒ−Ｘ−Ｌ−ポリアミン    （ＩＩ）
（式中、Ｒは、直鎖または分枝状のＣ１０−５０の飽和または不飽和の脂肪族、カルボキシアルキル、ヒドロカルボキシアルキルまたはアルコキシ；Ｃ３−８脂環族；単環アリール置換または多環アリール置換または非置換の脂肪族；脂肪族置換または非置換の単環芳香族または多環芳香族；単環または多環の複素環族；単環複素環置換または多環複素環置換の脂肪族；アリールスルホニルであり；
Ｘは、−ＣＯ−、−ＳＯ２−または−ＣＨ２−であり；
Ｌは共有結合であるか、または、天然に存在するアミノ酸、オルニチン、２，４−ジアミノ酪酸、または、この誘導体であり；および
「ポリアミン」は、天然に存在するポリアミン、または、合成的に製造されたポリアミンである）
である、請求項１または請求項２に記載の美容的方法。
【請求項５】
前記薬剤がＤＦＭＯである、請求項１から４のいずれか一項に記載の美容的方法。
【請求項６】
組成物がさらに、分枝状アルコールのカルボキシアルキラートおよび／またはこのエトキシラート、トリクロサン、セルレニン、エピガロカテキンガラート（ＥＧＣＧ）、α−メチレン−γ−ブチロラクトン、この混合物、および、このアナログからなる群より選択される皮脂産生阻害剤を含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の美容的方法。
【請求項７】
前記方法が、スクアレン、トリグリセリド、遊離脂肪酸、ワックスエステル、コレステロール、ステロールエステルおよび／またはこの組合せの合成を減少させる、請求項１から６のいずれか一項に記載の美容的方法。
【請求項８】
ポリアミン誘導体；ＤＦＭＯ；Ｎ−アセチルシステイン；非ヒドロキシＣ２−４０ジカルボン酸の中和塩；この美容上許容され得る塩；この溶媒和物；およびこの混合物から選択される１つ以上の薬剤の皮脂産生阻害有効量および／または毛穴サイズ阻害有効量；および
美容上許容され得るキャリア
を含む、皮脂産生および／または毛穴サイズを減少させるための美容的組成物。
【請求項９】
前記薬剤が、下記の一般式Ｉのポリアミン誘導体：
Ｒ−Ｘ−ポリアミン    （Ｉ）
（式中、Ｒは、Ｈから、または、直鎖または分枝状のＣ１−５０の飽和または不飽和の脂肪族、カルボキシアルキル、ヒドロカルボキシアルキルまたはアルコキシ；Ｃ３−８脂環族；単環アリール置換または多環アリール置換の脂肪族；脂肪族置換の単環芳香族または多環芳香族；単環または多環の複素環族；単環複素環置換または多環複素環置換の脂肪族；Ｃ１−１０アルキル；アリールスルホニル；またはシアノからなる群より選択され；
「Ｘ」は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−または−ＣＨ２−であり；および
「ポリアミン」は、天然に存在するポリアミン、または、合成的に製造されたポリアミンである）
である、請求項８に記載の美容的組成物。
【請求項１０】
前記薬剤が、下記の一般式ＩＩのポリアミン誘導体：
Ｒ−Ｘ−Ｌ−ポリアミン    （ＩＩ）
（式中、Ｒは、直鎖または分枝状のＣ１０−５０の飽和または不飽和の脂肪族、カルボキシアルキル、ヒドロカルボキシアルキルまたはアルコキシ；Ｃ３−８脂環族；単環アリール置換または多環アリール置換または非置換の脂肪族；脂肪族置換または非置換の単環芳香族または多環芳香族；単環または多環の複素環族；単環複素環置換または多環複素環置換の脂肪族；アリールスルホニルであり；
Ｘは、−ＣＯ−、−ＳＯ２−または−ＣＨ２−であり；
Ｌは共有結合であるか、または、天然に存在するアミノ酸、オルニチン、２，４−ジアミノ酪酸、または、この誘導体であり；および
「ポリアミン」は、天然に存在するポリアミン、または、合成的に製造されたポリアミンである）
である、請求項８に記載の美容的組成物。
【請求項１１】
前記薬剤がジフルオリルメチルオルニチン（ＤＦＭＯ）である、請求項８から１０のいずれか一項に記載の美容的組成物。
【請求項１２】
分枝状アルコールのカルボキシアルキラートおよび／またはこのエトキシラート、トリクロサン、セルリニン、エピガロカテキンガラート（ＥＧＣＧ）、α−メチレン−γ−ブチロラクトン、この混合物、および、このアナログからなる群より選択される皮脂産生阻害剤をさらに含む、請求項８から１１のいずれか一項に記載の美容的組成物。
【請求項１３】
前記毛成長阻害剤が組成物の０．０００１重量１％から５０重量％を構成する、請求項８から１２のいずれか一項に記載の美容的組成物。
【請求項１４】
皮膚有益薬剤をさらに含む、請求項８から１３のいずれか一項に記載の美容的組成物。
【請求項１５】
皮脂産生阻害有効量の毛成長阻害剤を美容上許容され得るキャリアと組み合わせることを含む、請求項８から１４のいずれか一項に記載される、脂腺細胞における皮脂産生および／または毛穴サイズを減少させるための美容的組成物を作製する方法。
【請求項１６】
請求項８から１５のいずれか一項に記載される前記美容的組成物と、前記組成物のための容器と、前記組成物を前記皮膚に適用するための説明書とを含む、皮膚における皮脂産生を減少させるための美容的システム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、脂腺細胞における皮脂産生を低下させ、および／または、皮膚における毛穴サイズを減少させる方法に関連する。より具体的には、本発明は、皮膚を、毛成長抑制活性を有する物質と接触させることによって、皮脂産生および／または毛穴サイズを低下させる方法に関連する。
【背景技術】
【０００２】
皮脂は、脂腺細胞（皮膚における脂腺の細胞）によって産生され、この後、皮膚表面に分泌される皮膚オイルである。皮脂は数多くの成分から構成され、約５７％がトリグリセリドまたは脂肪酸である。皮脂の約１２％がスクアレンであり、皮脂の約３％がステロールエステルであり、約２５％がワックスエステルであり、約１％から約２％がコレステロールである。頻繁および望ましくない皮膚状態の１つが「脂性肌」（皮膚上の過剰な量の皮脂から生じる状態）である。脂性肌には、テカテカ光る望ましくない外観および不快な触感が伴い、また、様々な年齢群が冒される。過度な皮脂産生は美容上望ましくなく、ざ瘡の皮膚状態に関連している。従って、皮脂の抑制をもたらす美容的な生成物および方法は非常に望ましい。
【０００３】
同様に、皮膚の毛穴のサイズを小さくする生成物および方法が非常に望ましい。毛穴は、皮膚表面を潤滑および保護するためのオイルまたは皮脂に通り道を提供する皮膚における微視的開口部である。腺は思春期の間は広がっており、また、産生されるオイルの量が同時に増大している。消費者は、この毛穴が、増大した産生量に対処するために、より大きくなることを報告しており、だが、毛穴を制御する真の機構は現在のところ依然として不明である。Ｖａｎ  Ｓｃｏｔｔらによれば、毛の成長は、毛球によって包まれているこの毛乳頭に密接に依存しているので、毛球の細胞間質のサイズおよび有糸分裂活性が一般には、毛乳頭における細胞のサイズおよび数と相関し得ることが見出された。Ｔｈｅ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．の第１９回年会（１９５８年６月２１日）で発表された「正常な頭皮および脱毛症の頭皮における毛球の細胞間質とこの真皮乳頭との間での幾何学的関係性」を参照のこと。
【０００４】
本発明は、毛成長の阻害が皮脂産生および／または毛穴サイズの阻害、減少または抑制をもたらすという予想外の発見に基づいている。
【０００５】
毛成長の阻害は、米国特許第６６４６１４９号（Ｖｅｒｍｅｕｌｉｎら）、米国特許第６１７２２６１号（Ｂｕｒｎｓら）、米国特許出願公開第２００３／０１８７２７６号（Ｏｒｉｄｉｇｍ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）などを含む数多くの刊行物で議論されている題目である。ジフルオリルメチルオルニチン（ＤＦＭＯ）は、Ｖｅｎｉｑａ（商標）の商品名でＢｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ（Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ）から販売されている毛阻害剤である。しかしながら、本発明よりも前には、毛成長阻害剤として知られているいくつかの薬剤を、皮膚における皮脂産生および毛穴サイズを減少させるために使用することは特定または提案されていなかった。
【発明の開示】
【０００６】
驚くべきことに、毛成長を阻害するいくつかの薬剤が、皮脂産生を阻害し、および／または、毛穴サイズを減少させるために有用であることが発見された。これらの発見は、皮膚における皮脂産生を低下させ、および／または、毛穴サイズを減少させるための美容的方法を含む本発明を提供するために利用されている。
【０００７】
１つの態様において、本発明は、この必要性のある個体の脂腺細胞または皮膚における皮脂合成を低下させる方法を提供する。この方法は、皮膚を毛穴サイズ減少量および／または皮質産生阻害量の毛成長阻害剤と接触させることを含む。
【０００８】
別の態様において、本発明は、毛成長を阻害することが知られているある薬剤を他の皮膚有益活性剤との組合せで使用して、このような薬剤を皮膚と接触させることによって皮脂産生を阻害し、および、毛穴サイズを減少させる方法を提供する。本発明に係る有用である薬剤には、ポリアミンのアナログおよび／または誘導体；ＤＦＭＯ；Ｎ−アセチルシステイン；非ヒドロキシＣ２−４０ジカルボン酸の中和塩（好ましくは、マロン酸塩）；およびこれらの混合物が含まれるが、これらに限定されない。
【０００９】
詳細には、本発明は、ポリアミン部分に共有結合的に結合した疎水性部分を含むポリアミン誘導体およびポリアミンアナログ（ＰＡアナログ）を使用して皮脂産生を阻害し、および／または、毛穴サイズを低下させる美容的方法に関する。このようなＰＡアナログは、両親媒的特性（疎水性部分ならびに荷電部分）を有すると見なすことができる。ＰＡアナログおよびＰＡ誘導体には、疎水性のアシル基によりアシル化されたポリアミンとして見ることができるものが含まれ、この場合、アシル化はアミド連結またはスルホンアミド連結のいずれかの形成によるものである。疎水性アシル基とポリアミン部分との間での連結はポリアミン内の任意のアミノ基において生じ得る。具体的には、本発明によるＰＡアナログは、下記の一般式Ｉ：
Ｒ−Ｘ−ポリアミン    （Ｉ）
および／または、下記の一般式（ＩＩ）：
Ｒ−Ｘ−Ｌ−ポリアミン    （ＩＩ）
（式中、Ｒは、Ｈから、または、直鎖または分枝状のＣ１−５０の飽和または不飽和の脂肪族、カルボキシアルキル、カルバルコキシアルキルまたはアルコキシ；Ｃ１−８脂環族；単環アリール置換または多環アリール置換の脂肪族；脂肪族置換の単環芳香族または多環芳香族；単環または多環の複素環族；単環複素環置換または多環複素環置換の脂肪族；Ｃ１−１０アルキル；アリールスルホニル；またはシアノから選択される；
「Ｘ」は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−または−ＣＨ２−である；
「ポリアミン」は、天然に存在するポリアミン、または、合成的に製造されたポリアミンである；
および、適用可能である場合、Ｌは共有結合であるか、または、天然に存在するアミノ酸、オルニチン、２，４−ジアミノ酪酸、または、この誘導体である）
によって表される。
【００１０】
本発明はまた、別の態様において、皮脂産生阻害剤と美容上許容され得るキャリアとの組合せでの毛成長阻害剤を含む、皮脂産生、および／または、毛穴サイズを低下させるための組成物を提供する。毛成長阻害剤は組成物の約０．０００１％から約５０％を構成する。本発明の組成物は別の皮膚有益薬剤をさらに含むことができる。
【００１１】
別の態様において、本発明は、前記美容的組成物と、前記組成物のための容器と、前記組成物を前記皮膚に適用するための説明書とを含む、皮膚における皮脂産生を減少させ、および／または、毛穴サイズを減少させるための美容的システムを提供する。
【００１２】
別の態様において、本発明は、皮脂産生減少有効量および／または毛穴サイズ減少有効量の毛成長阻害剤を美容上許容され得るキャリアと組み合わせることを含む、皮脂産生を減少させ、および／または、毛穴サイズを減少させるための美容的組成物を作製する方法を提供する。
【００１３】
場合により使用されるさらなる皮脂産生阻害剤には、分枝状アルコールおよびこのエトキシラートのカルボキシアルキラート、トリクロサン、セルレニン、エピガロカテキンガラート（ＥＧＣＧ）、α−メチレン−γ−ブチロラクトン、この混合物、および、このアナログ、ならびに、この美容上許容され得る塩またはこの溶媒和物が含まれるが、これらに限定されない。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
本発明は、毛成長を阻害する薬剤を使用して皮脂産生および毛穴サイズを減少させるための方法および美容的組成物を提供する。本発明は、このためのある種の薬剤を使用する毛成長の阻害が、脂腺細胞における皮脂産生の低下、および／または、皮膚における毛包サイズおよび／または毛穴サイズの減少をもたらすという発見を利用している。
【００１５】
従って、１つの態様において、本発明は、個体の皮膚における毛成長の阻害によって脂腺細胞における皮脂産生を低下させ、および／または、毛穴サイズを減少させる方法を提供する。本発明の方法は、皮膚を皮脂産生阻害量および／または毛穴サイズ減少量の毛成長阻害剤と接触させ、これにより、脂腺細胞における皮脂合成および／または皮膚における毛穴サイズを減少させることを含む。
【００１６】
本明細書中で使用される用語「含む」は、包含する、から構成される、から形成される、からなる、および／または、から本質的になるを意味する。さらに、「含む」の通常の意味において、この用語は、この用語が示す工程、構成要素、成分または特徴について包括的でないとして定義される。
【００１７】
操作例および比較例での場合を除いて、または、別途明示的に示される場合を除いて、材料または反応条件の量または比率、材料の物理的性質、および／または使用を示す本記載におけるすべての数字は、「約」の語によって修飾されるとして理解されなければならない。用語「約」は、およそ、辺りで、大雑把には、または、前後を意味するように本明細書中では使用される。用語「約」が数値範囲と併せて使用されるとき、用語「約」は、示された数値の上限および下限を広げることによってこの範囲を変更する。
【００１８】
皮脂抑制および／または毛穴サイズ減少のための薬剤としての毛成長阻害剤
いくつかの実施態様において、これらに限定されないが、ある種の毛阻害剤が、ポリアミン誘導体および／またはポリアミンアナログ（この医薬的に許容される塩および溶媒和物を含む）；ＤＦＭＯ；Ｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）；非ヒドロキシＣ２−Ｃ４０ジカルボン酸の中和塩、好ましくは、マロン酸塩；およびこの混合物からなる群より、皮脂抑制および／または毛穴サイズ減少のために選択される。
【００１９】
ポリアミン誘導体および／またはポリアミンアナログ
詳細には、本発明は、ポリアミン部分に共有結合的に結合した疎水性部分を含むポリアミン誘導体および／またはポリアミンアナログ（ＰＡアナログ）である毛成長阻害剤を使用して、皮脂産生を阻害し、および／または、毛穴サイズを減少させる美容的方法に関する。このようなＰＡアナログは両親媒的特性（疎水成分ならびに荷電部分）を有すると見なすことができる。ＰＡアナログおよびＰＡ誘導体には、疎水性アシル基によりアシル化されたポリアミンとして見ることができるＰＡアナログおよびＰＡ誘導体が含まれ、この場合、アシル化はアミド連結またはスルホンアミド連結によるものである。疎水性アシル基とポリアミン部分との間での連結はポリアミン内の任意のアミン基において生じ得る。
【００２０】
本明細書中で使用される用語「ポリアミン」には、プトレッシン、スペルミンまたはスペルミジン、ならびに、２個から約１０個の窒素を有し得るより長い直鎖ポリアミン、分枝状ポリアミンなどが含まれる。この定義にはまた、多数の官能基のいずれかがＣ原子または末端または内部のＮ原子に結合している基本ポリアミン鎖を含むポリアミン誘導体またはポリアミンアナログが含まれる。第一級アミノ基における修飾のためには、ポリアミンは、当然のことではあるが、このような基を含有しなければならない。
【００２１】
ポリアミンの「アナログ」および／または「誘導体」は一般には、本明細書中に開示または記載される任意の修飾されたポリアミン分子を示す。このような分子は一般には、天然に存在するか、または、合成的に製造されているかのいずれかであっても、既存のポリアミンの修飾体であり、本発明の「ポリアミン剤」、「ＰＡ」または「薬剤」として示される場合がある。好ましいＰＡは細胞のポリアミン輸送に結合し、および／または、を阻害し、このため、「輸送結合分子」または「ポリアミン輸送阻害剤」として示される場合がある。この定義の範囲には、ＰＡを既存のポリアミンから製造するための任意の修飾、または、構造的に同一のＰＡを天然に存在する供給源から単離することが含まれる。好ましくは、修飾はポリアミンへの１つ以上の化学的部分の付加である。
【００２２】
本発明によるポリアミンアナログおよびポリアミン誘導体には、下記の一般式Ｉのものが含まれる：
Ｒ−Ｘ−ポリアミン    （Ｉ）
（式中、Ｒは、Ｈから、または、直鎖または分枝状のＣ１−５０の飽和または不飽和の脂肪族、カルボキシアルキル、カルバルコキシアルキルまたはアルコキシ；Ｃ１−８脂環族；単環アリール置換または多環アリール置換の脂肪族；脂肪族置換の単環芳香族または多環芳香族；単環または多環の複素環族；単環複素環置換または多環複素環置換の脂肪族；Ｃ１−１０アルキル；アリールスルホニル；またはシアノからなる群より選択される；
「Ｘ」は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−または−ＣＨ２−であり得る；および
「ポリアミン」は、天然に存在するポリアミン（例えば、プトレッシン、スペルミンまたはスペルミジンなど）、または、合成的に製造されたポリアミンであり得る）。
【００２３】
好ましくは、Ｒは、少なくとも約Ｃ５、少なくとも約Ｃ１０、少なくとも約Ｃ１１、少なくとも約Ｃ１２、少なくとも約Ｃ１３、少なくとも約Ｃ１４、少なくとも約Ｃ１５、少なくとも約Ｃ１６、少なくとも約Ｃ１７、少なくとも約Ｃ１８、少なくとも約Ｃ１９、少なくとも約Ｃ２０または少なくとも約Ｃ２２である。
【００２４】
Ｘとポリアミンとの間での連結は直接的であってもよく、この場合、Ｘとポリアミンのアミン基の窒素との間には原子が存在せず、または、間接的であってもよく、この場合、１個以上の原子がＸとポリアミンのアミン基の窒素との間には存在し得る。Ｘとポリアミンとの間での連結をポリアミン内の任意のアミノ基を介して生じさせることができ、だが、第一級アミノ基が本発明の好ましい実施態様では使用される。
【００２５】
Ｘとポリアミンとの間での連結が間接的である本発明の好ましい実施態様において、間に存在する１個以上の原子は、好ましくは、アミノ酸またはこの誘導体の原子である。このタイプの特に好ましい実施態様において、間に存在する１個以上の原子は、リジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、オルニチンまたは２，４−ジアミノ酪酸の原子である。このタイプの好ましい化合物を下記の一般式ＩＩによって表すことができる：
Ｒ−Ｘ−Ｌ−ポリアミン    （ＩＩ）
（式中、Ｒは、直鎖または分枝状のＣ１０−５０の飽和または不飽和の脂肪族、カルボキシアルキル、カルバルコキシアルキルまたはアルコキシ；Ｃ１−８脂環族；単環アリール置換または多環アリール置換または非置換の脂肪族；脂肪族置換または非置換の単環芳香族または多環芳香族；単環または多環の複素環族；単環複素環置換または多環複素環置換の脂肪族；アリールスルホニルである；
Ｘは、−ＣＯ−、−ＳＯ２−または−ＣＨ２−である；および
Ｌは共有結合であるか、または、天然に存在するアミノ酸、オルニチン、２，４−ジアミノ酪酸、または、この誘導体である）
【００２６】
本発明のアナログおよび誘導体はポリアミンの１つ以上の他の位置において場合によりさらに置換され得る。これらには、内部の窒素原子および／または内部の炭素原子が含まれるが、これらに限定されない。本発明の１つの態様において、好ましい置換基は、ポリアミン輸送阻害、結合親和性を増大させるか、または、そうでない場合には、ポリアミン結合分子（例えば、ポリアミン輸送体、酵素またはＤＮＡなど）に対する化合物の結合の不可逆性を高める構造体である。このようなさらなる置換基には、アジリジン基および様々な他の脂肪族構造、芳香族構造、混合型の脂肪族−芳香族構造、または、複素環状多環構造が含まれる。アジリジンのように、ポリアミン輸送体または他のポリアミン結合分子に共有結合的に結合する反応性部分もまた、本発明の範囲に含まれる。求核剤と反応して、共有結合による結合を形成する反応基の例には、様々なクロロアセトアミド、ブロモアセトアミド、ヨードアセトアミド、スルホニルフルオリド、エステル、ナイトロジェンマスタードなどが含まれる。このような反応性成分は、診断または研究に関連して親和性標識化のために使用され、また、ポリアミン輸送またはポリアミン合成を阻害することにおける薬理学的活性に寄与し得る。反応基は反応性の光親和性基（例えば、アジド基またはベンゾフェノン基など）が可能である。光親和性標識化のための様々な化学的薬剤が当分野では周知である（米国特許出願公開第２００３／０１８７２７８号）。
【００２７】
オルニチンデカルボキシラーゼ（ＯＤＣ）の阻害剤
オルニチンデカルボキシラーゼ（ＯＤＣ）は、オルニチンの脱カルボキシル化（これにより、プトレッシンが合成される）を行うことによって、ポリアミンを合成する際において役割を果たす酵素である。これは、ポリアミンの産生（すなわち、プトレッシンからスペルミジン、さらにはスペルミンの産生）における律速段階である。ＯＤＣの阻害はポリアミンの産生または生合成を阻害し、これにより、細胞成長および細胞増殖を阻害する。本発明の１つの態様が、ＯＤＣの阻害により、皮脂腺のサイズが減少し、皮脂合成の減少および／または皮膚における毛穴サイズの外観の減少がもたらされるという発見に基づいている。
【００２８】
ＯＤＣの阻害剤には、ジフルオリルメチルオルニチン（ＤＦＭＯ）（これはＶａｎｉｑａ（商標）の商品名で入手することができる）、メチルグリオキサルビスグアニルヒドラゾン（ＭＧＢＧ）、ヒドラジノオルニチン（ＨＡＶＡ）およびこの混合物が含まれる。これらの中で好ましいものが、この商業的入手性のために、ＤＦＭＯである。
【００２９】
本明細書中で使用される表現「阻害する」は、この表現が示す活性における約１０％から約１００％の低下を示す。より好ましくは、用語「阻害する」は、この用語が示す活性における約２５％から約１００％の低下を示し、最も好ましくは、この用語が示す活性における約５０％から約１００％の低下を示す。活性における低下または変化は、当業者に公知の任意の方法によって、または、当業者により開発された任意の方法によって測定することができる。
【００３０】
用語「脂性もしくは脂ぎった皮膚および／または毛穴サイズの外見を減少させる」は、個体の皮膚を、毛成長および／または皮脂産生の阻害剤を含む処置様式と接触させた後で生じる、皮膚の皮脂および／または毛穴サイズにおける任意の検出可能な減少（例えば、肉眼に見える減少）を示すことが本明細書中では意味される。
【００３１】
用語「皮脂産生を減少させる」は、毛成長および／または皮脂産生を阻害する化合物にさらされた脂腺細胞によって合成された皮脂の量が、このような阻害性化合物の非存在下で合成された皮脂の量と比較して検出可能なほど低下することを意味するように本明細書中では使用される。用語「減少」は、皮脂および／または汗および／または毛穴サイズに関連して本明細書中で使用される場合、皮脂および／または汗および／または毛穴サイズの完全な防止、分泌の抑制、または、形成の減少度をそれぞれ意味する。用語「低下する」は、好ましくは、観測または測定された皮脂の量における約１０％の低下から約１００％の低下を示す。より好ましくは、用語「低下する」は、観測または測定された皮脂および／または毛穴サイズの量における約２５％の低下から約１００％の低下を示す。最も好ましくは、用語「低下する」は、観測または測定された皮脂および／または毛穴サイズの量における約５０％の低下から約１００％の低下を示す。低下する、減少させる、低下させる、抑制する、および、阻害するのこれらの用語は、これらが皮脂産生に関連して使用されるとき、交換可能に使用されることが意図される。
【００３２】
本明細書中で使用される用語「この必要性のある人」は、正常ではあるが、顕著および望ましくない、脂性および／または毛穴の多い皮膚状態を有する個体、または、顕著および望ましくない、脂性および／または毛穴の多い皮膚状態が存在しない状態において皮脂の量および／または毛穴サイズを低下させようとする人を示す。
【００３３】
本明細書中で使用される場合、皮膚の毛穴は、皮膚表面における開口部または溝として定義される。より好ましくは、毛穴は皮脂油腺のための開口部である。毛穴は、皮膚表面を潤滑および保護するためのオイルまたは皮脂に通り道を提供する、皮膚における微視的開口部である。腺は思春期の間は広がっており、また、産生されるオイルの量が同時に増大している。毛穴の全体的な外観は、溝の深さおよび直径、ならびに、取り囲んでいる皮膚の色、肌のきめ、および毛穴の周期性に依存する。
【００３４】
本明細書中で使用される場合、化合物の「皮脂および／または毛穴サイズの減少有効量」は、美容上効果的な期間の後において皮膚における皮脂産生および／または毛穴サイズを検出可能に減少させる、化合物の量を意味する。当業者は、皮膚オイルおよび／または毛穴サイズを減少させる所望の特定の効果に基づいて、「美容上効果的な期間」を決定することができる。
【００３５】
本明細書中で使用される用語「皮膚」には、顔、口内、頸、胸、背中、腕、手、脚および頭皮における皮膚が含まれる。
【００３６】
好ましくは、本発明の方法および組成物は、脊椎動物細胞または脊椎動物個体（より具体的には、哺乳動物細胞または哺乳動物個体、最も好ましくは、ヒト細胞またはヒト個体）に適用するためのものである。用語「個体」は、脊椎動物、哺乳動物またはヒトを示すために本明細書中では使用される。
【００３７】
皮脂産生および／または毛穴サイズを減少させる、場合により使用される薬剤
いくつかの実施態様では、さらに、しかし、場合により、さらなる皮脂産生阻害剤および／または毛穴サイズ減少剤が、分枝状アルコールおよび／またはこのアルコキシラートのカルボキシアルキラート（例えば、トリデシルカルボキシアルキラート）、セルレニンおよびセルレニンアナログ（この医薬的に許容される塩および溶媒和物を含む）からなる群より選択される。他の実施態様では、脂肪酸シンターゼ（ＦＡＳ）阻害剤はトリクロサンおよびこのアナログである。本明細書中で使用される用語「アナログ」は、セルレニンに構造的に関連し、および、少なくとも測定可能な量の皮脂産生阻害活性を保持する化学的化合物を示す。トリクロサンは、Ｉ型脂肪酸シンターゼのエノイルレダクターゼを阻害することが知られている。さらなる実施態様では、皮脂産生阻害剤および／または毛穴サイズ減少剤はＥＧＣＧ（Ｓｉｇｍａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、Ｍｉｓｓｏｕｒｉ）から得ることができる、緑茶抽出物であるポリフェノール性化合物）またはα−メチレン−γ−ブチロラクトンである。
【００３８】
非限定的な例として、セルレニンは、本発明の方法において有用な皮脂産生阻害剤である。構造的には、セルレニンは［２Ｒ，３Ｓ］−２，３−エポキシ−４−オキソ−７，１０−ｔｒａｎｓ，ｔｒａｎｓ−ドデカン酸アミドとして特徴づけられる。セルレニンは最初、Ｃｅｐｈａｌｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｃａｅｒｕｌｅｎｓの培養液から可能性のある抗真菌性抗生物質として単離された。皮脂産生阻害剤が、セルレニンおよびセルレニンアナログ（この医薬的に許容される塩および溶媒和物を含む）からなる群より選択される。セルレニンおよびセルレニンアナログの非限定的な例には、米国特許第５５３９１３２号（Ｒｏｙｅｒら）に記載されるものが含まれる。または、セルレニンは、Ｓｉｇｍａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、Ｍｉｓｓｏｕｒｉ）から商業的に得ることができる。
【００３９】
分枝状アルコールのカルボキシアルキラートおよび／またはこのアルコキシラート
分枝状アルコールのカルボキシアルキラートおよび／またはこのアルコキシラートには、下記の式Ａの化合物、および、このような化合物を含む組成物が含まれる：
Ｒ−Ｏ−Ｍ    （Ａ）
式中、
Ｒは、少なくとも７個の炭素原子と、少なくとも２つの枝分かれとを有する分枝したアルキル鎖またはアルケニル鎖である；
Ｏは酸素原子である；および
Ｍは（−（ＣＨ２）ｐＯ）ｎ−（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｘ）であり、
この場合、ｎは０または１から７の整数である；ｍは１から４の整数である；ｐは２から４の整数である；Ｘは、水素、メチル基、エチル基またはカチオンである。カチオンは、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、銅、マグネシウム、マンガン、ストロンチウム、イオウ、亜鉛およびアミンからなる群より選択される。好ましくは、Ｘは水素またはカチオンである。
【００４０】
このタイプの好ましい化合物はトリデシルカルボキシアルキラートであり、より好ましくは、トリデシルカルボキシメチラートおよび／またはトリデシルカルボキシエチラートである。
【００４１】
皮脂産生阻害剤の同定
毛成長阻害剤が本発明の方法において有用であるかどうかを明らかにするために、皮脂産生および／または毛穴サイズにおける減少を明らかにすることができる、当業者に公知の任意のアッセイを使用することができる。例えば、培養された脂腺細胞を、例えば、本明細書中下記のアッセイを参照して記載されるように、提案される阻害剤試験化合物とインキュベーションし、皮脂含有量について試験することができる。この後、この皮脂含有量を非処理の培養された脂腺細胞の皮脂含有量と比較して、毛成長阻害剤が皮脂産生を阻害しているかどうかが明らかにされる。
【００４２】
非限定的な例において、皮脂産生を下記のプロトコルに従ってヒトの初代脂腺細胞でアッセイすることができる。結果は、ビヒクルとインキュベーションされただけであるコントロールサンプルに対する、皮脂抑制剤との培養で脂腺細胞により産生された総脂質における減少割合を示す。
【００４３】
インビトロ脂腺細胞脂質生成アッセイ
ヒトの脂腺を男性（６０歳）の鼻から単離し、液中組織培養技術（Ｂａｊｏｒら、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．、１０２：１９９４、ｐ．５６４）を使用して培養した。この脂腺細胞は、成人の皮脂に特徴的な細胞内脂質液滴を蓄積する。
【００４４】
脂腺細胞を９６ウエル組織培養プレートの各ウエルに加え、７．５％ＣＯ２の存在下で１０日間、３７℃でインキュベーションする。成長培地を１週間に３回交換する。実験当日に、成長培地を除き、脂腺細胞をリン酸塩緩衝化生理的食塩水（ＰＢＳ）により３回洗浄する。脂質生成を阻害することが推測される活性な薬剤の様々な濃度を含有する０．２ｍｌ量における新鮮なフェノール非含有脂腺細胞成長培地を各ウエルに加える。三連のウエルを各サンプルについて利用する。コントロールは、ＰＢＳ、親脂性化合物を可溶化するために使用されるジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）またはエタノール、およびフェノールレッド（エストロゲン様活性を有する化合物）からなる。培養物を、７．５体積％のＣＯ２の存在下で２４時間、３７℃でインキュベーションする。放射能標識を、１００μｌ（マイクロリットル）の１４−Ｃ標識された酢酸（Ａｍｅｒｓｈａｍ、ナトリウム塩、５６ｍＣｉ／ｍｍｏｌの比活性）を５０ｍＭ酢酸ナトリウム緩衝液の１０ｍｌに加えることによって調製する。この後、５０μｌを、脂腺細胞および活性な薬剤を含有するそれぞれのウエルに加える。培養物を４時間インキュベーターに戻す。この後、処置および標識を除き、脂腺細胞を新鮮なＰＢＳにより３回すすぎ洗いする。１４−Ｃ標識を含有する細胞を抽出し、標識を、Ｂｅｃｋｍａｎシンチレーションカウンターを使用して計数する。
【００４５】
それぞれの９６ウエル組織培養プレートについて、２０個のサンプルを分析することができる。これらのうち、１つのサンプルが培地のために指定され、１つのサンプルがＤＭＳＯまたはエタノールのために指定され、１つのサンプルがフェノールレッドのために指定され、これにより、１７個の残ったサンプルが自由に使える。
【００４６】
皮膚の脂性および／または毛穴サイズの外観を減少させるための美容的方法および美容的組成物
脂腺細胞を、インビトロまたはインビボのいずれかで、皮脂産生を阻害するために効果的である量のある種の毛成長阻害剤と接触させることにより、皮脂および／または毛穴を減少させる所望の効果が生じる。この目的のための好適な化合物には、上記で特定された化合物が含まれる。加えて、場合により使用される皮脂減少薬剤には、上記で記載された皮脂減少薬剤が含まれるが、これらに限定されない。本発明の美容的組成物は、皮脂および毛穴を減少させる薬剤を含み、皮脂の過剰産生を引き起こすタイプの、皮膚において普通に生じる状態を有するヒトまたは動物に投与することができる。
【００４７】
本発明の組成物および方法は美容上の目的のために注目に値する。例えば、皮脂の産生または過剰産生の結果としての脂性の顕著ではあるが、望ましくない印象または外観の、皮膚または毛における発生が、本発明の方法を使用して改善され得る。本発明の方法についての美容的適用には、皮膚または毛の視覚的外観を良くするために、または、そうでない場合には、皮膚または毛の視覚的外観を変化させるために脂腺細胞における皮脂産生を低下させる１つ以上の化合物を含有する組成物の適用が含まれる。または、皮脂産生の防止（例えば、発汗または蒸散の結果としての皮脂産生の防止）もまた、脂性皮膚および／または毛穴サイズの外観を減少させるための本発明の美容的方法の適切な適用として意図される。
【００４８】
脂性皮膚および／または毛穴サイズの外観を減少させるための化合物は組成物の約０．００００１重量％から約５０重量％（好ましくは約０．１重量％から約２０重量％、より好ましくは約１重量％から約１５重量％、最も好ましくは約２重量％から約５重量％）の量で本発明の組成物において使用される。
【００４９】
場合により使用されるさらなる皮膚有益薬剤
様々なタイプのさらなる活性な成分を本発明の美容的組成物に存在させることができる。活性剤は、皮膚軟化剤以外の皮膚有益薬剤、および、組成物の物理的特性を単に改善するだけである成分とは異なる皮膚有益薬剤として定義される。このカテゴリーに限定されないが、一般的な例には、脂性皮膚の外観を良くするさらなる成分（例えば、タルクおよびシリカなど）、ならびに、α−ヒドロキシ酸、β−ヒドロキシ酸、ポリヒドロキシ酸、過酸化ベンゾイル、収斂性の塩（例えば、亜鉛塩など）、レチノイド、日焼け防止剤および保存剤が含まれる。
【００５０】
β−ヒドロキシ酸には、例えば、サリチル酸が含まれる。ピリチオン亜鉛は、本発明の組成物において有用な亜鉛塩の一例である。
【００５１】
場合により使用され、しかし、好ましいことではあるが、収斂性の塩が本発明の組成物に含められる。このような収斂性の塩は、アルミニウム、ジルコニウム、亜鉛の無機塩または有機塩およびこれらの混合物であり得る。好ましくは、収斂性の塩は、この場合、約１００ミクロン未満のサイズ（好ましくは、約３ミクロンから約１０ミクロンのサイズ）の粒子状形態（すなわち、親水性の多孔性粒子）で用いられる。収斂剤として、または、収斂性のアルミニウム複合体の成分として有用な塩には、水酸化アルミニウム、ハロゲン化アルミニウム、アルミニウムヒドロキシハリド、ジルコニルオキシハリド、ジルコニルヒドロキシハリド、および、これらの塩物質の混合物が含まれる。
【００５２】
このタイプのアルミニウム塩には、塩化アルミニウム、および、下記の一般式を有するアルミニウムヒドロキシハリドが含まれる：Ａｌ２（ＯＨ）ｘＱｙ−ＸＨ２Ｏ（式中、Ｑは、塩素、臭素またはヨウ素である；ｘは２から５であり、ｘ＋ｙ＝６であり、ｘおよびｙは整数である必要はない；Ｘは約１から６である）。例えば、［Ａｌ２（ＯＨ）５Ｃｌ］−ＸＨ２Ｏの式を有するアルミニウムクロロヒドラートは、この容易な商業的入手性および比較的低いコストのために好ましい。
【００５３】
上記の収斂性塩を利用する数タイプの複合体が制汗剤分野では公知である。例えば、米国特許第３７９２０６８号（Ｌｕｅｄｄｅｒｓら）は、アルミニウム、ジルコニウムおよびアミノ酸（例えば、グリジンなど）の複合体（ＺＡＧ複合体）を開示する。このＺＡＧ複合体は通常、約１．６７から１２．５のＡｌ：Ｚｒ比、および、約０．７３から１．９３の金属：Ｃｌ比を有する。このようなＺＡＧ複合体を調製するための好ましいアミノ酸は、ＣＨ２（ＮＨ２）ＣＯＯＨの式を有するグリジンである。粒子サイズが１ミクロンから１００ミクロンである球状ＺＡＧが特に好ましい。
【００５４】
より具体的には、本発明のために有用であり得る、米国食品薬品局による承認リスト（官報）に載っている収斂性の塩の一覧が下記に示される。このような収斂性の塩には、塩化アルミニウム、アルミニウムクロロヒドラート、アルミニウムクロロヒドレクス、アルミニウムクロロヒドレクスＰＥＧ、アルミニウムクロロヒドレクスＰＧ、アルミニウムジクロロヒドラート、アルミニウムジクロロヒドレクスＰＥＧ、アルミニウムジクロロヒドレクスＰＧ、アルミニウムセスキクロロヒドラート、アルミニウムセスキクロロヒドレクスＰＥＧ、アルミニウムセスキクロロヒドレクスＰＧ、硫酸アルミニウム、アルミニウムジルコニウムオクタクロロヒドラート、アルミニウムジルコニウムオクタクロロヒドレクスＧＬＹ（グリジンに対する略号）、アルミニウムジルコニウムペンタクロロヒドラート、アルミニウムジルコニウムペンタクロロヒドレクスＧＬＹ、アルミニウムジルコニウムテトラクロロヒドラート、アルミニウムジルコニウムトリクロロヒドラート、アルミニウムジルコニウムテトラクロロヒドラートＧＬＹ、および、アルミニウムジルコニウムトリクロロヒドラートＧＬＹが含まれる。
【００５５】
同様に好適なものが、硫酸アルミニウムカリウム（これはまたミョウバン（ＫＡｌ（ＳＯ４）２１２Ｈ２Ｏ）として知られている）、アルミニウムウンデシレノイルコラーゲンアミノ酸、乳酸アルミニウムナトリウム＋硫酸ナトリウム（Ｎａ２ＨＡｌ（ＯＯＣＣＨＯＨＣＨ３）２−（ＯＨ）６）＋Ａｌ２（ＳＯ４）３）、ナトリウムアルミニウムクロロヒドロキシラクタート、アルミニウムブロモヒドラート（Ａｌ２Ｂｒ（ＯＨ）５ｎＨ２Ｏ）、塩化アルミニウム（ＡｌＣｌ３６Ｈ２Ｏ）、亜鉛塩およびナトリウム塩の複合体、ランタンおよびセリウムの複合体、ならびに、リポアミノ酸（Ｒ−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨＲ’−ＣＯ−ＯＡｌ−（ＯＨ）２、式中、Ｒ＝Ｃ６−１１およびＲ’＝アミノ酸）のアルミニウム塩である。
【００５６】
好ましくは、制汗剤はアルミニウム塩であり、より好ましくは、硫酸アルミニウムカリウム（ミョウバン）およびアルミニウムクロロヒドラートから選ばれる。
【００５７】
活性な収斂性塩の量は組成物の約０．０００００１重量％から約２０重量％（好ましくは約０．１０重量％から約１８重量％、より好ましくは約１重量％から約１５重量％、場合により約２重量％から約３重量％）の範囲であり得る。
【００５８】
アルミニウムクロロヒドラート（ＡＣＨ）は、この広汎な商業的入手性および比較的低いコストのために、本発明の目的のための最も好ましい収斂性の塩である。
【００５９】
場合により使用され、しかし、好ましいことではあるが、本発明の組成物はまた、レチノイドを含むことができる。レチノイドは、皮膚の繊維芽細胞によるコラーゲン合成を増大させる。これにより、しわの多い皮膚の平滑化がもたらされる。レチノイドの添加はまた、脂質生成の改善された阻害をもたらす。本明細書中で使用される用語「レチノイド」には、レチノイン酸、レチノール、レチナールおよびレチニルエステルが含まれる。用語「レチノイン酸」には、１３−ｃｉｓ−レチノイン酸およびａｌｌ−ｔｒａｎｓ−レチノイン酸が含まれる。
【００６０】
本明細書中で使用される用語「レチノール」には、レチノールの下記の異性体が含まれる：ａｌｌ−ｔｒａｎｓ−レチノール、１３−ｃｉｓ−レチノール、１１−ｃｉｓ−レチノール、９−ｃｉｓ−レチノールおよび／または３，４−ジデヒドロレチノール。好ましい異性体は、この広汎な商業的活動のために、ａｌｌ−ｔｒａｎｓ−レチノールである。
【００６１】
レチニルエステルはレチノールのエステルである。用語「レチノール」は上記で定義されている。本発明における使用のために好適なレチニルエステルは、このより一般的な入手性のために、レチノールのＣ１−Ｃ３０エステル（好ましくは、Ｃ２−Ｃ２０エステル、最も好ましくは、Ｃ２、Ｃ３およびＣ１６エステル）である。レチニルエステルの例には、パルミチン酸レチニル、ギ酸レチニル、酢酸レチニル、プロピオン酸レチニル、酪酸レチニル、吉草酸レチニル、イソ吉草酸レチニル、ヘキサン酸レチニル、ヘプタン酸レチニル、オクタン酸レチニル、ノナン酸レチニル、デカン酸レチニル、ウンデカン酸レチニル、ラウリン酸レチニル、トリデカン酸レチニル、ミリスチン酸レチニル、ペンタデカン酸レチニル、ヘプタデカン酸レチニル、ステアリン酸レチニル、イソステアリン酸レチニル、ノナデカン酸レチニル、アラキドン酸レチニル、ベヘン酸レチニル、リノール酸レチニル、オレイン酸レチニル、乳酸レチニル、グリコール酸レチニル、ヒドロキシカプリル酸レチニル、ヒドロキシラウリン酸レチニル、酒石酸レチニルが含まれるが、これらに限定されない。
【００６２】
本発明におけるレチノイドは組成物の０．００１重量％から１０重量％（好ましくは０．０１重量％から１重量％、最も好ましくは０．０１重量％から０．０５重量％）の量で存在する。
【００６３】
日焼け防止剤には、紫外光を阻止するために一般に用いられているこのような物質が含まれる。例示的な化合物には、パラ−アミノ安息香酸（ＰＡＢＡ）の誘導体、シンナマートおよびサリチラートがある。例えば、アゾベンゾフェノン（Ｐａｒｓｏｌ１７８９（登録商標））、メトキシケイ皮酸オクチル（Ｐａｒｓｏｌ（商標）ＭＣＸ）、および、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン（これはオキシベンゾフェノンとしても知られており、Ｂｅｎｚｏｐｈｅｎｏｎｅ（商標）３として入手可能である）を使用することができる。組成物において用いられる日焼け防止剤の正確な量は、日光の紫外線からの所望される保護の程度に依存して変化し得る。
【００６４】
多くの美容的組成物（特に、水を含有する組成物）は、潜在的に有害な微生物の成長から保護されなければならない。好適な保存剤には、ｐ−ヒドロキシ安息香酸のアルキルエステル、ヒダントイン誘導体、プロピオン酸塩、および、様々な第四級アンモニウム化合物が含まれる。本発明の特に好ましい保存剤は、メチルパラベン、プロピルパラベン、フェノキシエタノールおよびベンジルアルコールである。保存剤は通常、組成物の約０．１重量％から２重量％の範囲の量で用いられる。
【００６５】
美容上許容され得るビヒクル
本発明による組成物は、本発明の皮膚有益化合物および場合により使用される任意の皮膚有益薬剤の希釈剤、分散剤またはキャリアとして作用して、この結果、組成物が皮膚に適用されたとき、これらの分布を容易にするようにするための美容上許容され得るビヒクルを含む。
【００６６】
ビヒクルは、水性、無水またはエマルションであり得る。好ましくは、組成物は水性またはエマルション（特に、油中水型エマルションまたは水中油型エマルション）である。水は、存在するとき、組成物の５重量％から９９重量％（好ましくは４０重量％から９０重量％、場合により、６０重量％から９０重量％の間）の範囲であり得る量である。
【００６７】
水の他に、比較的揮発性の溶媒もまた、本発明の組成物におけるキャリアとして役立ち得る。最も好ましいものが、一価のＣ１−Ｃ３アルカノールである。これらには、エチルアルコール、メチルアルコールおよびイソプロピルアルコールが含まれる。一価アルカノールの量は組成物の１重量から７０重量％（好ましくは１０重量％から５０重量％、場合により、１５重量％から４０重量％の間）の範囲であり得る。
【００６８】
皮膚軟化性の物質もまた、美容上許容され得るキャリアとして役立ち得る。これらはシリコーンオイルおよび合成エステルの形態であり得る。皮膚軟化剤の量は組成物の０．１重量％から５０重量％（好ましくは１重量％から２０重量％の間）の範囲で任意であり得る。
【００６９】
シリコーンオイルは揮発性のものおよび不揮発性のものに分けることができる。本明細書中で使用される用語「揮発性（の）」は、測定可能な蒸気圧を周囲温度で有するこのような物質を示す。揮発性のシリコーンオイルが、好ましくは、３個から９個（好ましくは４個から５個）のケイ素原子を含有する環状または直鎖状のポリジメチルシロキサンから選ばれる。直鎖状の揮発性シリコーン物質は一般には、約５センチストークス未満の粘度を２５℃で有し、一方、環状の物質は典型的には、約１０センチストークス未満の粘度を有する。皮膚軟化性の物質として有用な不揮発性シリコーンオイルには、ポリアルキルシロキサン、ポリアルキルアリールシロキサンおよびポリエーテルシロキサン共重合体が含まれる。本発明において有用な本質的に不揮発性のポリアルキルシロキサンには、例えば、約５００万センチストークスから約２５００万センチストークスの粘度を２５℃で有するポリジメチルシロキサンが含まれる。本発明の組成物において有用な好ましい不揮発性の皮膚軟化剤には、約１０センチストークスから約４００センチストークスの粘度を２５℃で有するポリジメチルシロキサンが含まれる。
【００７０】
エステル型皮膚軟化剤には、下記の物質が挙げられる：
（１）１０個から２０個の炭素原子を有する脂肪酸のアルケニルエステルまたはアルキルエステル。この例には、ネオペンタン酸イソアラキジル、イソノナン酸イソノニル、ミリスチン酸オレイル、ステアリン酸オレイルおよびオレイン酸オレイルが含まれる。
（２）エーテル−エステル、例えば、エトキシル化アルコールの脂肪酸エステルなど。
（３）多価アルコールエステル、例えば、エチレングリコールのモノおよびジ脂肪酸エステル、ジエチレングリコールのモノおよびジ脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール（２００から６０００）のモノおよびジ脂肪酸エステル、プロピレングリコールのモノおよびジ脂肪酸エステル、ポリプロピレングリコール２０００モノオレアート、ポリプロピレングリコール２０００モノステアラート、エトキシル化プロピレングリコールモノステアラート、グリセリルモノ脂肪酸エステルおよびグリセリルジ脂肪酸エステル、ポリグリセロールポリ脂肪エステル、エトキシル化グリセリルモノステアラート、１，３−ブチレングリコールモノステアラート、１，３−ブチレングリコールジステアラート、ポリオキシエチレンポリオール脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステルおよびポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルなど。
（４）ワックスエステル、例えば、蜂ろう、鯨ろう、ミリスチン酸ミリスチル、ステアリン酸ステアリルおよびベヘン酸アラキジルなど。
（５）ステロールエステル、コレステロール脂肪酸エステルがこの例である。
【００７１】
１０個から３０個の炭素原子を有する脂肪酸もまた、本発明の組成物のための美容上許容され得るキャリアとして含めることができる。このカテゴリーの例示には、ペラルゴン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、ヒドロキシステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リシノール酸、アラキジン酸、ベヘン酸およびエルカ酸がある。
【００７２】
多価アルコールタイプの保湿剤もまた、本発明の組成物における美容上許容され得るキャリアとして用いることができる。保湿剤は、皮膚軟化剤の有効性を増大させることを助け、皮膚の落屑を減少させ、積み重なった鱗屑の除去を刺激し、および、皮膚の感触を改善する。典型的な多価アルコールには、グリセロール、ポリアルキレングリコール、ならびに、より好ましくは、アルキレンポリオールおよびこの誘導体が含まれ、これらに、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコールおよびこの誘導体、ソルビトール、ヒドロキシプロピルソルビトール、ヘキシレングリコール、１，３−ブチレングリコール、１，２，６−ヘキサントリオール、エトキシル化グリセロール、プロポキシル化グリセロール、ならびに、この混合物が含まれる。最良の結果のために、保湿剤は、好ましくは、プロピレングリコールまたはヒアルロン酸ナトリウムである。保湿剤の量は組成物の０．５重量％から３０重量％（好ましくは１重量％から１５重量％の間）の範囲で任意であり得る。
【００７３】
増粘剤もまた、本発明による組成物の美容上許容され得るキャリアの一部として利用することができる。典型的な増粘剤には、架橋アクリラート（例えば、Ｃａｒｂｏｐｏｌ（商標）９８２）、疎水性修飾されたアクリラート（例えば、Ｃａｒｂｏｐｏｌ（商標）１３８２）、セルロース誘導体および天然ゴムが含まれる。有用なセルロース誘導体には、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、エチルセルロースおよびヒドロキシメチルセルロースが含まれる。本発明のために好適な天然ゴムには、グアールガム、キサンタンガム、スクレロチウムガム、カラギーナン、ペクチン、および、これらのガムの組合せが含まれる。増粘剤の量は組成物の０．０００１重量％から５重量％（通常的には、０．００１重量％から１重量％、場合により、０．０１重量％から０．５重量％）の範囲であり得る。
【００７４】
まとめると、水、溶媒、シリコーン、エステル、脂肪酸、保湿剤および／または増粘剤は、組成物の１重量％から９９．９重量％（好ましくは８０重量％から９９重量％）の量で美容上許容され得るキャリアを構成する。
【００７５】
オイルまたは脂性物質を、主として、用いられる乳化剤の平均親水性・疎水性バランス（ＨＬＢ）に依存して、油中水型エマルションまたは水中油型エマルションのいずれかを提供するための乳化剤と一緒に存在させることができる。
【００７６】
新規な組成物の使用
本発明による組成物は主に、ヒトの皮膚に対する局所的適用のための生成物として意図され、特に、過度な皮脂分泌を抑制もしくは防止し、および／または、毛穴サイズを減少させるための薬剤として意図される。皮脂の抑制は、改善された皮膚状態；脂ぎった皮膚の好ましくない外観および感触の軽減；ざ瘡、酒さ、脂漏症、脂性頭皮、脂性／脂ぎった頭髪、および、ふけの軽減および／または防止を含む多数の利益を提供する。
【００７７】
使用において、一定量の組成物（例えば、１ｍｌから１００ｍｌ）が好適な容器またはアプリケーターから皮膚の露出領域に適用され、また、必要ならば、この後、手もしくは指または好適なデバイスを使用して、皮膚全体に広げられ、および／または、皮膚にこすりつけられる。
【００７８】
場合により行われ、しかし、好ましいことではあるが、本発明の方法では、皮膚を剃る工程が含まれる。より好ましくは、皮膚は、本発明の組成物が適用される前に剃られる。
【００７９】
本発明はまた、本発明の組成物を皮膚に適用することによって、特に顔領域において脂性肌状態を抑制または防止する美容的方法を包含する。別の態様では、本発明は、脂性または脂ぎった頭髪を抑制、防止または処置する美容的方法を包含する。
【００８０】
本発明はまた、本発明の組成物を適用することによって脂腺細胞からの皮脂分泌を減少させるか、または防止するか、または抑制する美容的方法を包含する。
【００８１】
本発明はまた、本発明の組成物を皮膚に適用することによって、脂性または脂ぎった皮膚の認知を減少させるか、または抑制する美容的方法を包含する。
【００８２】
本発明の方法および組成物は、脂腺細胞からの皮脂分泌の抑制、改善されたオイル抑制および改善された皮膚感触を提供し、また、てかりおよびベトつきを防止し、この一方で、ざ瘡に関連する細菌に対する抗菌活性をも提供し、また、一般には、皮膚表面における細菌の微生物活動を抑制する。
【００８３】
生成物の形態および包装
本発明の美容的皮膚組成物は任意の形態にすることができ、例えば、収斂性化粧水、ゲル、ローション、流動クリームまたはクリームとして配合することができる。組成物は、この粘度および消費者による意図された使用に適合させるための好適な容器に詰めることができる。例えば、ローションまたは流動クリームを、ボトル、または、ロール・ボールアプリケーター、または、噴射剤駆動によるエアロゾルデバイス、または、指操作のために好適なポンプを備えた容器に詰めることができる。組成物がクリームであるとき、クリームを非変形ボトルまたは絞り出し容器（例えば、チューブまたは蓋付きの広口瓶など）に単に貯蔵することができる。従って、本発明はまた、本明細書中で定義されるような美容上許容され得る組成物を含む閉じられた容器を提供する。組成物はまた、米国特許第５０６３０５７号に記載されるカプセルなどのカプセルに含めることができる。
【００８４】
包装され、および、包装物に関連する１組の説明書と一緒になった組成物は、皮膚の皮脂を抑制／減少させ、および／または、毛穴サイズを減少させるためのシステムを含むことができる。１組の説明書は包装物の表面に印刷され得るか、または、包装物に入れることができる。１組の説明書は典型的には、微生物を殺すか、もしくは微生物のレベルを減少させること、皮脂産生を抑制／減少させること、外観を改善すること、毛穴サイズを減少させること、および／またはこれらの組合せからなる群より選択される問題を伴う様々な問題に対する解決策、および／または、このような問題に関連する利点の提供を提供するために効果的な量で組成物を施すことを本発明品の消費者に知らせる。本発明品の消費者がこれらの利点に注意を払うことは重要である。そうでない場合、消費者は、本発明の組成物により、これらの問題または問題の組合せが解決され、および／または、これらの利点または利点の組合せが提供されることを知らないからである。
【実施例１】
【００８５】
脂腺細胞アッセイ手順
成人男性から得られたヒト脂腺細胞の二次培養物をコンフルエンス後３日間まで９６ウエル組織培養プレート（Ｐａｃｋａｒｄ）において成長させた。脂腺細胞の成長培地は、１４ｕｇ／ｍｌのウシ下垂体抽出物、０．４ｕｇ／ｍｌのヒドロコルチゾン、５ｕｇ／ｍｌのインスリン、１０ｎｇ／ｍｌの上皮増殖因子、１．２×１０−１０Ｍのコレラ毒素、１００ユニット／ｍｌのペニシリンおよび１００ｕｇ／ｍｌのストレプトマイシンが補充されたＣｌｏｎｅｔｉｃｓケラチノサイト基礎培地（ＫＢＭ）からなった。すべての培養物を７．５体積％のＣＯ２の存在下において３７℃でインキュベーションした。培地を１週間に３回交換した。
【００８６】
実験当日、成長培地を除き、脂腺細胞を無菌のダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ；フェノールレッド非含有）により３回洗浄した。新鮮なＤＭＥＭを、水に可溶化された試験剤（ＤＬ−α−ジフルオロメチルオルニチン塩酸塩）の５マイクロリットルとともに各サンプル（５つの複製物）に加えた。コントロールは水だけの添加からなった。各プレートをインキュベーターに２０時間戻し、この後、１４Ｃ−酢酸塩緩衝液（５ｍＭの最終濃度、５６ｍＣｉ／ｍｍｏｌの比活性）を加えた。脂腺細胞をインキュベーターに４時間戻し、この後、それぞれの培養物をリン酸塩緩衝化生理的食塩水により３回すすぎ洗いして、結合していない標識を除いた。脂腺細胞に残留する放射能標識を、Ｐａｃｋａｒｄ  ＴｏｐＣｏｕｎｔシンチレーションカウンターを使用して求めた。統計学的有意性（ｐ値）を、スチューデントのｔ検定を使用して計算した。得られた結果が表１にまとめられる。フェノールレッド（知られている皮脂抑制剤）を陽性コントロールとして用いた。
【００８７】
【表１】
2008502618.tif 000002
【００８８】
これらの結果は２４時間後の限定された皮脂抑制活性を示している。実験を上記に改変を加えて繰り返した。実験当日、成長培地を除き、脂腺細胞を無菌のダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ；フェノールレッド非含有）により３回洗浄した。新鮮なＤＭＥＭを、水に可溶化された試験剤（ＤＬ−α−ジフルオロメチルオルニチン塩酸塩）の５マイクロリットルとともに各サンプル（３つの複製物）に加えた。コントロールは水だけの添加からなった。各プレートをインキュベーターに６８時間戻し、この後、１４Ｃ−酢酸塩緩衝液（５ｍＭの最終濃度、５６ｍＣｉ／ｍｍｏｌの比活性）を加えた。脂腺細胞をインキュベーターに４時間戻し、この後、それぞれの培養物をリン酸塩緩衝化生理的食塩水により３回すすぎ洗いして、結合していない標識を除いた。脂腺細胞に残留する放射能標識を、Ｐａｃｋａｒｄ  ＴｏｐＣｏｕｎｔシンチレーションカウンターを使用して求めた。統計学的有意性（ｐ値）を、スチューデントのｔ検定を使用して計算した。得られた結果が下記の表２にまとめられる。
【００８９】
【表２】
2008502618.tif 000003
【００９０】
これらの結果は、ＤＦＭＯとの長期間のインキュベーションの後における増強された皮脂抑制活性を示している。
【００９１】
本発明が、本明細書中において、ある程度具体的に、また、このいくつかの好ましい実施態様を参照して記載されているが、行うことができ、および、本発明の範囲および精神に含まれる記載されているこの数多くの変化、改変および置き換えを当業者は認識することができよう。これらの改変および変化のすべてが、本明細書中に記載され、また、特許請求されるような本発明の範囲に含まれること、および、本発明は下記の請求項の範囲によってのみ限定されること、および、このような請求項は妥当である限り広く解釈されることが意図される。本出願明細書全体を通して、様々な刊行物が引用されている。これらの刊行物のそれぞれの全体が本明細書による参照により本明細書中に組み込まれる。
【手続補正書】
【提出日】平成18年4月4日(2006.4.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
脂腺細胞および／または皮膚を、ポリアミン誘導体；ジフルオリルメチルオルニチン（ＤＦＭＯ）；Ｎ−アセチルシステイン；非ヒドロキシＣ２−４０ジカルボン酸の中和塩；この美容上許容され得る塩；この溶媒和物；およびこの混合物から選択される薬剤の皮脂産生阻害量および／または毛穴サイズ阻害量を含む組成物と接触させることを含む、この必要性のある個体の脂腺細胞における皮脂産生および／または皮膚における毛穴サイズを低下させる美容的方法。
【請求項２】
前記皮膚を剃ることをさらに含む、請求項１に記載の美容的方法。
【請求項３】
前記ポリアミン誘導体が、下記の一般式Ｉの化合物：
Ｒ−Ｘ−ポリアミン    （Ｉ）
（式中、Ｒは、Ｈから、または、直鎖または分枝状のＣ１−５０の飽和または不飽和の脂肪族、カルボキシアルキル、ヒドロキシカルボキシアルキルまたはアルコキシ；Ｃ３−８脂環族；単環アリール置換または多環アリール置換の脂肪族；脂肪族置換の単環芳香族または多環芳香族；単環または多環の複素環族；単環複素環置換または多環複素環置換の脂肪族；Ｃ１−１０アルキル；アリールスルホニル；またはシアノからなる群より選択され；
「Ｘ」は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−または−ＣＨ２−であり；および
「ポリアミン」は、天然に存在するポリアミン、または、合成的に製造されたポリアミンである）
である、請求項１に記載の美容的方法。
【請求項４】
前記薬剤が、下記の一般式ＩＩのポリアミン誘導体：
Ｒ−Ｘ−Ｌ−ポリアミン    （ＩＩ）
（式中、Ｒは、直鎖または分枝状のＣ１０−５０の飽和または不飽和の脂肪族、カルボキシアルキル、ヒドロカルボキシアルキルまたはアルコキシ；Ｃ３−８脂環族；単環アリール置換または多環アリール置換または非置換の脂肪族；脂肪族置換または非置換の単環芳香族または多環芳香族；単環または多環の複素環族；単環複素環置換または多環複素環置換の脂肪族；アリールスルホニルであり；
Ｘは、−ＣＯ−、−ＳＯ２−または−ＣＨ２−であり；
Ｌは共有結合であるか、または、天然に存在するアミノ酸、オルニチン、２，４−ジアミノ酪酸、または、この誘導体であり；および
「ポリアミン」は、天然に存在するポリアミン、または、合成的に製造されたポリアミンである）
である、請求項１または請求項２に記載の美容的方法。
【請求項５】
前記薬剤がＤＦＭＯである、請求項１から４のいずれか一項に記載の美容的方法。
【請求項６】
組成物がさらに、分枝状アルコールのカルボキシアルキラートおよび／またはこのエトキシラート、トリクロサン、セルレニン、エピガロカテキンガラート（ＥＧＣＧ）、α−メチレン−γ−ブチロラクトン、この混合物、および、このアナログからなる群より選択される皮脂産生阻害剤を含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の美容的方法。
【請求項７】
前記方法が、スクアレン、トリグリセリド、遊離脂肪酸、ワックスエステル、コレステロール、ステロールエステルおよび／またはこの組合せの合成を減少させる、請求項１から６のいずれか一項に記載の美容的方法。
【請求項８】
ポリアミン誘導体；ＤＦＭＯ；Ｎ−アセチルシステイン；非ヒドロキシＣ２−４０ジカルボン酸の中和塩；この美容上許容され得る塩；この溶媒和物；およびこの混合物から選択される１つ以上の薬剤の皮脂産生阻害有効量および／または毛穴サイズ阻害有効量；
美容上許容され得るキャリア；および
分枝状アルコールのカルボキシアルキラートおよび／またはこのエトキシラート、トリクロサン、セルリニン、エピガロカテキンガラート（ＥＧＣＧ）、α−メチレン−γ−ブチロラクトン、この混合物、および、このアナログ（からなる群より選択される皮脂産生阻害剤を含む、
皮脂産生および／または毛穴サイズを減少させるための美容的組成物。
【請求項９】
前記薬剤が、下記の一般式Ｉのポリアミン誘導体：
Ｒ−Ｘ−ポリアミン    （Ｉ）
（式中、Ｒは、Ｈから、または、直鎖または分枝状のＣ１−５０の飽和または不飽和の脂肪族、カルボキシアルキル、ヒドロカルボキシアルキルまたはアルコキシ；Ｃ３−８脂環族；単環アリール置換または多環アリール置換の脂肪族；脂肪族置換の単環芳香族または多環芳香族；単環または多環の複素環族；単環複素環置換または多環複素環置換の脂肪族；Ｃ１−１０アルキル；アリールスルホニル；またはシアノからなる群より選択され；
「Ｘ」は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−または−ＣＨ２−であり；および
「ポリアミン」は、天然に存在するポリアミン、または、合成的に製造されたポリアミンである）
である、請求項８に記載の美容的組成物。
【請求項１０】
前記薬剤が、下記の一般式ＩＩのポリアミン誘導体：
Ｒ−Ｘ−Ｌ−ポリアミン    （ＩＩ）
（式中、Ｒは、直鎖または分枝状のＣ１０−５０の飽和または不飽和の脂肪族、カルボキシアルキル、ヒドロカルボキシアルキルまたはアルコキシ；Ｃ３−８脂環族；単環アリール置換または多環アリール置換または非置換の脂肪族；脂肪族置換または非置換の単環芳香族または多環芳香族；単環または多環の複素環族；単環複素環置換または多環複素環置換の脂肪族；アリールスルホニルであり；
Ｘは、−ＣＯ−、−ＳＯ２−または−ＣＨ２−であり；
Ｌは共有結合であるか、または、天然に存在するアミノ酸、オルニチン、２，４−ジアミノ酪酸、または、この誘導体であり；および
「ポリアミン」は、天然に存在するポリアミン、または、合成的に製造されたポリアミンである）
である、請求項８に記載の美容的組成物。
【請求項１１】
前記薬剤がジフルオリルメチルオルニチン（ＤＦＭＯ）である、請求項８から１０のいずれか一項に記載の美容的組成物。
【請求項１２】
前記毛成長阻害剤が前記組成物の０．０００１重量１％から５０重量％を構成する、請求項８から１１のいずれか一項に記載の美容的組成物。
【請求項１３】
皮膚有益薬剤をさらに含む、請求項８から１２のいずれか一項に記載の美容的組成物。
【請求項１４】
請求項８から１３のいずれか一項に記載される前記美容的組成物と、前記組成物のための容器と、前記組成物を前記皮膚に適用するための説明書とを含む、皮膚における皮脂産生を減少させるための美容的システム。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、脂腺細胞における皮脂産生を低下させ、および／または、皮膚における毛穴サイズを減少させる方法に関連する。より具体的には、本発明は、皮膚を、毛成長抑制活性を有する物質と接触させることによって、皮脂産生および／または毛穴サイズを低下させる方法に関連する。
【背景技術】
【０００２】
皮脂は、脂腺細胞（皮膚における脂腺の細胞）によって産生され、この後、皮膚表面に分泌される皮膚オイルである。皮脂は数多くの成分から構成され、約５７％がトリグリセリドまたは脂肪酸である。皮脂の約１２％がスクアレンであり、皮脂の約３％がステロールエステルであり、約２５％がワックスエステルであり、約１％から約２％がコレステロールである。頻繁および望ましくない皮膚状態の１つが「脂性肌」（皮膚上の過剰な量の皮脂から生じる状態）である。脂性肌には、テカテカ光る望ましくない外観および不快な触感が伴い、また、様々な年齢群が冒される。過度な皮脂産生は美容上望ましくなく、?瘡の皮膚状態に関連している。従って、皮脂の抑制をもたらす美容的な生成物および方法は非常に望ましい。
【０００３】
同様に、皮膚の毛穴のサイズを小さくする生成物および方法が非常に望ましい。毛穴は、皮膚表面を潤滑および保護するためのオイルまたは皮脂に通り道を提供する皮膚における微視的開口部である。腺は思春期の間は広がっており、また、産生されるオイルの量が同時に増大している。消費者は、この毛穴が、増大した産生量に対処するために、より大きくなることを報告しており、だが、毛穴を制御する真の機構は現在のところ依然として不明である。Ｖａｎ  Ｓｃｏｔｔらによれば、毛の成長は、毛球によって包まれているこの毛乳頭に密接に依存しているので、毛球の細胞間質のサイズおよび有糸分裂活性が一般には、毛乳頭における細胞のサイズおよび数と相関し得ることが見出された。Ｔｈｅ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．の第１９回年会（１９５８年６月２１日）で発表された「正常な頭皮および脱毛症の頭皮における毛球の細胞間質とこの真皮乳頭との間での幾何学的関係性」を参照のこと。
【０００４】
本発明は、毛成長の阻害が皮脂産生および／または毛穴サイズの阻害、減少または抑制をもたらすという予想外の発見に基づいている。
【０００５】
毛成長の阻害は、米国特許第６６４６１４９号（Ｖｅｒｍｅｕｌｉｎら）、米国特許第６１７２２６１号（Ｂｕｒｎｓら）、米国特許出願公開第２００３／０１８７２７６号（Ｏｒｉｄｉｇｍ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）などを含む数多くの刊行物で議論されている題目である。ジフルオリルメチルオルニチン（ＤＦＭＯ）は、Ｖｅｎｉｑａ（商標）の商品名でＢｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ（Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ）から販売されている毛阻害剤である。しかしながら、本発明よりも前には、毛成長阻害剤として知られているいくつかの薬剤を、皮膚における皮脂産生および毛穴サイズを減少させるために使用することは特定または提案されていなかった。
【発明の開示】
【０００６】
驚くべきことに、毛成長を阻害するいくつかの薬剤が、皮脂産生を阻害し、および／または、毛穴サイズを減少させるために有用であることが発見された。これらの発見は、皮膚における皮脂産生を低下させ、および／または、毛穴サイズを減少させるための美容的方法を含む本発明を提供するために利用されている。
【０００７】
１つの態様において、本発明は、この必要性のある個体の脂腺細胞または皮膚における皮脂合成を低下させる方法を提供する。この方法は、皮膚を毛穴サイズ減少量および／または皮質産生阻害量の毛成長阻害剤と接触させることを含む。
【０００８】
別の態様において、本発明は、毛成長を阻害することが知られているある薬剤を他の皮膚有益活性剤との組合せで使用して、このような薬剤を皮膚と接触させることによって皮脂産生を阻害し、および、毛穴サイズを減少させる方法を提供する。本発明に係る有用である薬剤には、ポリアミンのアナログおよび／または誘導体；ＤＦＭＯ；Ｎ−アセチルシステイン；非ヒドロキシＣ２−４０ジカルボン酸の中和塩（好ましくは、マロン酸塩）；およびこれらの混合物が含まれるが、これらに限定されない。
【０００９】
詳細には、本発明は、ポリアミン部分に共有結合的に結合した疎水性部分を含むポリアミン誘導体およびポリアミンアナログ（ＰＡアナログ）を使用して皮脂産生を阻害し、および／または、毛穴サイズを低下させる美容的方法に関する。このようなＰＡアナログは、両親媒的特性（疎水性部分ならびに荷電部分）を有すると見なすことができる。ＰＡアナログおよびＰＡ誘導体には、疎水性のアシル基によりアシル化されたポリアミンとして見ることができるものが含まれ、この場合、アシル化はアミド連結またはスルホンアミド連結のいずれかの形成によるものである。疎水性アシル基とポリアミン部分との間での連結はポリアミン内の任意のアミノ基において生じ得る。具体的には、本発明によるＰＡアナログは、下記の一般式Ｉ：
Ｒ−Ｘ−ポリアミン    （Ｉ）
および／または、下記の一般式（ＩＩ）：
Ｒ−Ｘ−Ｌ−ポリアミン    （ＩＩ）
（式中、Ｒは、Ｈから、または、直鎖または分枝状のＣ１−５０の飽和または不飽和の脂肪族、カルボキシアルキル、カルバルコキシアルキルまたはアルコキシ；Ｃ１−８脂環族；単環アリール置換または多環アリール置換の脂肪族；脂肪族置換の単環芳香族または多環芳香族；単環または多環の複素環族；単環複素環置換または多環複素環置換の脂肪族；Ｃ１−１０アルキル；アリールスルホニル；またはシアノから選択される；
「Ｘ」は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−または−ＣＨ２−である；
「ポリアミン」は、天然に存在するポリアミン、または、合成的に製造されたポリアミンである；
および、適用可能である場合、Ｌは共有結合であるか、または、天然に存在するアミノ酸、オルニチン、２，４−ジアミノ酪酸、または、この誘導体である）
によって表される。
【００１０】
本発明はまた、別の態様において、分枝状アルコールのカルボキシアルキラートおよびこのエトキシラート、トリクロサン、セルレニン、エピガロカテキンガラート（ＥＧＣＧ）、α−メチレン−γ−ブチロラクトン、この混合物、および、このアナログ、ならびに、美容上許容され得る塩またはこの溶媒和物からなる群より選択される皮脂産生阻害剤と美容上許容され得るキャリアとの組合せでの毛成長阻害剤を含む、皮脂産生、および／または、毛穴サイズを低下させるための組成物を提供する。毛成長阻害剤は組成物の約０．０００１％から約５０％を構成する。本発明の組成物は別の皮膚有益薬剤をさらに含むことができる。
【００１１】
別の態様において、本発明は、前記美容的組成物と、前記組成物のための容器と、前記組成物を前記皮膚に適用するための説明書とを含む、皮膚における皮脂産生を減少させ、および／または、毛穴サイズを減少させるための美容的システムを提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
本発明は、毛成長を阻害する薬剤を使用して皮脂産生および毛穴サイズを減少させるための方法および美容的組成物を提供する。本発明は、このためのある種の薬剤を使用する毛成長の阻害が、脂腺細胞における皮脂産生の低下、および／または、皮膚における毛包サイズおよび／または毛穴サイズの減少をもたらすという発見を利用している。
【００１３】
従って、１つの態様において、本発明は、個体の皮膚における毛成長の阻害によって脂腺細胞における皮脂産生を低下させ、および／または、毛穴サイズを減少させる方法を提供する。本発明の方法は、皮膚を皮脂産生阻害量および／または毛穴サイズ減少量の毛成長阻害剤と接触させ、これにより、脂腺細胞における皮脂合成および／または皮膚における毛穴サイズを減少させることを含む。
【００１４】
本明細書中で使用される用語「含む」は、包含する、から構成される、から形成される、からなる、および／または、から本質的になるを意味する。さらに、「含む」の通常の意味において、この用語は、この用語が示す工程、構成要素、成分または特徴について包括的でないとして定義される。
【００１５】
操作例および比較例での場合を除いて、または、別途明示的に示される場合を除いて、材料または反応条件の量または比率、材料の物理的性質、および／または使用を示す本記載におけるすべての数字は、「約」の語によって修飾されるとして理解されなければならない。用語「約」は、およそ、辺りで、大雑把には、または、前後を意味するように本明細書中では使用される。用語「約」が数値範囲と併せて使用されるとき、用語「約」は、示された数値の上限および下限を広げることによってこの範囲を変更する。
【００１６】
皮脂抑制および／または毛穴サイズ減少のための薬剤としての毛成長阻害剤
いくつかの実施態様において、これらに限定されないが、ある種の毛阻害剤が、ポリアミン誘導体および／またはポリアミンアナログ（この医薬的に許容される塩および溶媒和物を含む）；ＤＦＭＯ；Ｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）；非ヒドロキシＣ２−Ｃ４０ジカルボン酸の中和塩、好ましくは、マロン酸塩；およびこの混合物からなる群より、皮脂抑制および／または毛穴サイズ減少のために選択される。
【００１７】
ポリアミン誘導体および／またはポリアミンアナログ
詳細には、本発明は、ポリアミン部分に共有結合的に結合した疎水性部分を含むポリアミン誘導体および／またはポリアミンアナログ（ＰＡアナログ）である毛成長阻害剤を使用して、皮脂産生を阻害し、および／または、毛穴サイズを減少させる美容的方法に関する。このようなＰＡアナログは両親媒的特性（疎水成分ならびに荷電部分）を有すると見なすことができる。ＰＡアナログおよびＰＡ誘導体には、疎水性アシル基によりアシル化されたポリアミンとして見ることができるＰＡアナログおよびＰＡ誘導体が含まれ、この場合、アシル化はアミド連結またはスルホンアミド連結によるものである。疎水性アシル基とポリアミン部分との間での連結はポリアミン内の任意のアミン基において生じ得る。
【００１８】
本明細書中で使用される用語「ポリアミン」には、プトレッシン、スペルミンまたはスペルミジン、ならびに、２個から約１０個の窒素を有し得るより長い直鎖ポリアミン、分枝状ポリアミンなどが含まれる。この定義にはまた、多数の官能基のいずれかがＣ原子または末端または内部のＮ原子に結合している基本ポリアミン鎖を含むポリアミン誘導体またはポリアミンアナログが含まれる。第一級アミノ基における修飾のためには、ポリアミンは、当然のことではあるが、このような基を含有しなければならない。
【００１９】
ポリアミンの「アナログ」および／または「誘導体」は一般には、本明細書中に開示または記載される任意の修飾されたポリアミン分子を示す。このような分子は一般には、天然に存在するか、または、合成的に製造されているかのいずれかであっても、既存のポリアミンの修飾体であり、本発明の「ポリアミン剤」、「ＰＡ」または「薬剤」として示される場合がある。好ましいＰＡは細胞のポリアミン輸送に結合し、および／または、を阻害し、このため、「輸送結合分子」または「ポリアミン輸送阻害剤」として示される場合がある。この定義の範囲には、ＰＡを既存のポリアミンから製造するための任意の修飾、または、構造的に同一のＰＡを天然に存在する供給源から単離することが含まれる。好ましくは、修飾はポリアミンへの１つ以上の化学的部分の付加である。
【００２０】
本発明によるポリアミンアナログおよびポリアミン誘導体には、下記の一般式Ｉのものが含まれる：
Ｒ−Ｘ−ポリアミン    （Ｉ）
（式中、Ｒは、Ｈから、または、直鎖または分枝状のＣ１−５０の飽和または不飽和の脂肪族、カルボキシアルキル、カルバルコキシアルキルまたはアルコキシ；Ｃ１−８脂環族；単環アリール置換または多環アリール置換の脂肪族；脂肪族置換の単環芳香族または多環芳香族；単環または多環の複素環族；単環複素環置換または多環複素環置換の脂肪族；Ｃ１−１０アルキル；アリールスルホニル；またはシアノからなる群より選択される；
「Ｘ」は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−または−ＣＨ２−であり得る；および
「ポリアミン」は、天然に存在するポリアミン（例えば、プトレッシン、スペルミンまたはスペルミジンなど）、または、合成的に製造されたポリアミンであり得る）。
【００２１】
好ましくは、Ｒは、少なくとも約Ｃ５、少なくとも約Ｃ１０、少なくとも約Ｃ１１、少なくとも約Ｃ１２、少なくとも約Ｃ１３、少なくとも約Ｃ１４、少なくとも約Ｃ１５、少なくとも約Ｃ１６、少なくとも約Ｃ１７、少なくとも約Ｃ１８、少なくとも約Ｃ１９、少なくとも約Ｃ２０または少なくとも約Ｃ２２である。
【００２２】
Ｘとポリアミンとの間での連結は直接的であってもよく、この場合、Ｘとポリアミンのアミン基の窒素との間には原子が存在せず、または、間接的であってもよく、この場合、１個以上の原子がＸとポリアミンのアミン基の窒素との間には存在し得る。Ｘとポリアミンとの間での連結をポリアミン内の任意のアミノ基を介して生じさせることができ、だが、第一級アミノ基が本発明の好ましい実施態様では使用される。
【００２３】
Ｘとポリアミンとの間での連結が間接的である本発明の好ましい実施態様において、間に存在する１個以上の原子は、好ましくは、アミノ酸またはこの誘導体の原子である。このタイプの特に好ましい実施態様において、間に存在する１個以上の原子は、リジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、オルニチンまたは２，４−ジアミノ酪酸の原子である。このタイプの好ましい化合物を下記の一般式ＩＩによって表すことができる：
Ｒ−Ｘ−Ｌ−ポリアミン    （ＩＩ）
（式中、Ｒは、直鎖または分枝状のＣ１０−５０の飽和または不飽和の脂肪族、カルボキシアルキル、カルバルコキシアルキルまたはアルコキシ；Ｃ１−８脂環族；単環アリール置換または多環アリール置換または非置換の脂肪族；脂肪族置換または非置換の単環芳香族または多環芳香族；単環または多環の複素環族；単環複素環置換または多環複素環置換の脂肪族；アリールスルホニルである；
Ｘは、−ＣＯ−、−ＳＯ２−または−ＣＨ２−である；および
Ｌは共有結合であるか、または、天然に存在するアミノ酸、オルニチン、２，４−ジアミノ酪酸、または、この誘導体である）
【００２４】
本発明のアナログおよび誘導体はポリアミンの１つ以上の他の位置において場合によりさらに置換され得る。これらには、内部の窒素原子および／または内部の炭素原子が含まれるが、これらに限定されない。本発明の１つの態様において、好ましい置換基は、ポリアミン輸送阻害、結合親和性を増大させるか、または、そうでない場合には、ポリアミン結合分子（例えば、ポリアミン輸送体、酵素またはＤＮＡなど）に対する化合物の結合の不可逆性を高める構造体である。このようなさらなる置換基には、アジリジン基および様々な他の脂肪族構造、芳香族構造、混合型の脂肪族−芳香族構造、または、複素環状多環構造が含まれる。アジリジンのように、ポリアミン輸送体または他のポリアミン結合分子に共有結合的に結合する反応性部分もまた、本発明の範囲に含まれる。求核剤と反応して、共有結合による結合を形成する反応基の例には、様々なクロロアセトアミド、ブロモアセトアミド、ヨードアセトアミド、スルホニルフルオリド、エステル、ナイトロジェンマスタードなどが含まれる。このような反応性成分は、診断または研究に関連して親和性標識化のために使用され、また、ポリアミン輸送またはポリアミン合成を阻害することにおける薬理学的活性に寄与し得る。反応基は反応性の光親和性基（例えば、アジド基またはベンゾフェノン基など）が可能である。光親和性標識化のための様々な化学的薬剤が当分野では周知である（米国特許出願公開第２００３／０１８７２７８号）。
【００２５】
オルニチンデカルボキシラーゼ（ＯＤＣ）の阻害剤
オルニチンデカルボキシラーゼ（ＯＤＣ）は、オルニチンの脱カルボキシル化（これにより、プトレッシンが合成される）を行うことによって、ポリアミンを合成する際において役割を果たす酵素である。これは、ポリアミンの産生（すなわち、プトレッシンからスペルミジン、さらにはスペルミンの産生）における律速段階である。ＯＤＣの阻害はポリアミンの産生または生合成を阻害し、これにより、細胞成長および細胞増殖を阻害する。本発明の１つの態様が、ＯＤＣの阻害により、皮脂腺のサイズが減少し、皮脂合成の減少および／または皮膚における毛穴サイズの外観の減少がもたらされるという発見に基づいている。
【００２６】
ＯＤＣの阻害剤には、ジフルオリルメチルオルニチン（ＤＦＭＯ）（これはＶａｎｉｑａ（商標）の商品名で入手することができる）、メチルグリオキサルビスグアニルヒドラゾン（ＭＧＢＧ）、ヒドラジノオルニチン（ＨＡＶＡ）およびこの混合物が含まれる。これらの中で好ましいものが、この商業的入手性のために、ＤＦＭＯである。
【００２７】
本明細書中で使用される表現「阻害する」は、この表現が示す活性における約１０％から約１００％の低下を示す。より好ましくは、用語「阻害する」は、この用語が示す活性における約２５％から約１００％の低下を示し、最も好ましくは、この用語が示す活性における約５０％から約１００％の低下を示す。活性における低下または変化は、当業者に公知の任意の方法によって、または、当業者により開発された任意の方法によって測定することができる。
【００２８】
用語「脂性もしくは脂ぎった皮膚および／または毛穴サイズの外見を減少させる」は、個体の皮膚を、毛成長および／または皮脂産生の阻害剤を含む処置様式と接触させた後で生じる、皮膚の皮脂および／または毛穴サイズにおける任意の検出可能な減少（例えば、肉眼に見える減少）を示すことが本明細書中では意味される。
【００２９】
用語「皮脂産生を減少させる」は、毛成長および／または皮脂産生を阻害する化合物にさらされた脂腺細胞によって合成された皮脂の量が、このような阻害性化合物の非存在下で合成された皮脂の量と比較して検出可能なほど低下することを意味するように本明細書中では使用される。用語「減少」は、皮脂および／または汗および／または毛穴サイズに関連して本明細書中で使用される場合、皮脂および／または汗および／または毛穴サイズの完全な防止、分泌の抑制、または、形成の減少度をそれぞれ意味する。用語「低下する」は、好ましくは、観測または測定された皮脂の量における約１０％の低下から約１００％の低下を示す。より好ましくは、用語「低下する」は、観測または測定された皮脂および／または毛穴サイズの量における約２５％の低下から約１００％の低下を示す。最も好ましくは、用語「低下する」は、観測または測定された皮脂および／または毛穴サイズの量における約５０％の低下から約１００％の低下を示す。低下する、減少させる、低下させる、抑制する、および、阻害するのこれらの用語は、これらが皮脂産生に関連して使用されるとき、交換可能に使用されることが意図される。
【００３０】
本明細書中で使用される用語「この必要性のある人」は、正常ではあるが、顕著および望ましくない、脂性および／または毛穴の多い皮膚状態を有する個体、または、顕著および望ましくない、脂性および／または毛穴の多い皮膚状態が存在しない状態において皮脂の量および／または毛穴サイズを低下させようとする人を示す。
【００３１】
本明細書中で使用される場合、皮膚の毛穴は、皮膚表面における開口部または溝として定義される。より好ましくは、毛穴は皮脂油腺のための開口部である。毛穴は、皮膚表面を潤滑および保護するためのオイルまたは皮脂に通り道を提供する、皮膚における微視的開口部である。腺は思春期の間は広がっており、また、産生されるオイルの量が同時に増大している。毛穴の全体的な外観は、溝の深さおよび直径、ならびに、取り囲んでいる皮膚の色、肌のきめ、および毛穴の周期性に依存する。
【００３２】
本明細書中で使用される場合、化合物の「皮脂および／または毛穴サイズの減少有効量」は、美容上効果的な期間の後において皮膚における皮脂産生および／または毛穴サイズを検出可能に減少させる、化合物の量を意味する。当業者は、皮膚オイルおよび／または毛穴サイズを減少させる所望の特定の効果に基づいて、「美容上効果的な期間」を決定することができる。
【００３３】
本明細書中で使用される用語「皮膚」には、顔、口内、頸、胸、背中、腕、手、脚および頭皮における皮膚が含まれる。
【００３４】
好ましくは、本発明の方法および組成物は、脊椎動物細胞または脊椎動物個体（より具体的には、哺乳動物細胞または哺乳動物個体、最も好ましくは、ヒト細胞またはヒト個体）に適用するためのものである。用語「個体」は、脊椎動物、哺乳動物またはヒトを示すために本明細書中では使用される。
【００３５】
皮脂産生および／または毛穴サイズを減少させる、場合により使用される薬剤
いくつかの実施態様では、さらに、しかし、場合により、さらなる皮脂産生阻害剤および／または毛穴サイズ減少剤が、分枝状アルコールおよび／またはこのアルコキシラートのカルボキシアルキラート（例えば、トリデシルカルボキシアルキラート）、セルレニンおよびセルレニンアナログ（この医薬的に許容される塩および溶媒和物を含む）からなる群より選択される。他の実施態様では、脂肪酸シンターゼ（ＦＡＳ）阻害剤はトリクロサンおよびこのアナログである。本明細書中で使用される用語「アナログ」は、セルレニンに構造的に関連し、および、少なくとも測定可能な量の皮脂産生阻害活性を保持する化学的化合物を示す。トリクロサンは、Ｉ型脂肪酸シンターゼのエノイルレダクターゼを阻害することが知られている。さらなる実施態様では、皮脂産生阻害剤および／または毛穴サイズ減少剤はＥＧＣＧ（Ｓｉｇｍａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、Ｍｉｓｓｏｕｒｉ）から得ることができる、緑茶抽出物であるポリフェノール性化合物）またはα−メチレン−γ−ブチロラクトンである。
【００３６】
非限定的な例として、セルレニンは、本発明の方法において有用な皮脂産生阻害剤である。構造的には、セルレニンは［２Ｒ，３Ｓ］−２，３−エポキシ−４−オキソ−７，１０−ｔｒａｎｓ，ｔｒａｎｓ−ドデカン酸アミドとして特徴づけられる。セルレニンは最初、Ｃｅｐｈａｌｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｃａｅｒｕｌｅｎｓの培養液から可能性のある抗真菌性抗生物質として単離された。皮脂産生阻害剤が、セルレニンおよびセルレニンアナログ（この医薬的に許容される塩および溶媒和物を含む）からなる群より選択される。セルレニンおよびセルレニンアナログの非限定的な例には、米国特許第５５３９１３２号（Ｒｏｙｅｒら）に記載されるものが含まれる。または、セルレニンは、Ｓｉｇｍａ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、Ｍｉｓｓｏｕｒｉ）から商業的に得ることができる。
【００３７】
分枝状アルコールのカルボキシアルキラートおよび／またはこのアルコキシラート
分枝状アルコールのカルボキシアルキラートおよび／またはこのアルコキシラートには、下記の式Ａの化合物、および、このような化合物を含む組成物が含まれる：
Ｒ−Ｏ−Ｍ    （Ａ）
式中、
Ｒは、少なくとも７個の炭素原子と、少なくとも２つの枝分かれとを有する分枝したアルキル鎖またはアルケニル鎖である；
Ｏは酸素原子である；および
Ｍは（−（ＣＨ２）ｐＯ）ｎ−（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｘ）であり、
この場合、ｎは０または１から７の整数である；ｍは１から４の整数である；ｐは２から４の整数である；Ｘは、水素、メチル基、エチル基またはカチオンである。カチオンは、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、銅、マグネシウム、マンガン、ストロンチウム、イオウ、亜鉛およびアミンからなる群より選択される。好ましくは、Ｘは水素またはカチオンである。
【００３８】
このタイプの好ましい化合物はトリデシルカルボキシアルキラートであり、より好ましくは、トリデシルカルボキシメチラートおよび／またはトリデシルカルボキシエチラートである。
【００３９】
皮脂産生阻害剤の同定
毛成長阻害剤が本発明の方法において有用であるかどうかを明らかにするために、皮脂産生および／または毛穴サイズにおける減少を明らかにすることができる、当業者に公知の任意のアッセイを使用することができる。例えば、培養された脂腺細胞を、例えば、本明細書中下記のアッセイを参照して記載されるように、提案される阻害剤試験化合物とインキュベーションし、皮脂含有量について試験することができる。この後、この皮脂含有量を非処理の培養された脂腺細胞の皮脂含有量と比較して、毛成長阻害剤が皮脂産生を阻害しているかどうかが明らかにされる。
【００４０】
非限定的な例において、皮脂産生を下記のプロトコルに従ってヒトの初代脂腺細胞でアッセイすることができる。結果は、ビヒクルとインキュベーションされただけであるコントロールサンプルに対する、皮脂抑制剤との培養で脂腺細胞により産生された総脂質における減少割合を示す。
【００４１】
インビトロ脂腺細胞脂質生成アッセイ
ヒトの脂腺を男性（６０歳）の鼻から単離し、液中組織培養技術（Ｂａｊｏｒら、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．、１０２：１９９４、ｐ．５６４）を使用して培養した。この脂腺細胞は、成人の皮脂に特徴的な細胞内脂質液滴を蓄積する。
【００４２】
脂腺細胞を９６ウエル組織培養プレートの各ウエルに加え、７．５％ＣＯ２の存在下で１０日間、３７℃でインキュベーションする。成長培地を１週間に３回交換する。実験当日に、成長培地を除き、脂腺細胞をリン酸塩緩衝化生理的食塩水（ＰＢＳ）により３回洗浄する。脂質生成を阻害することが推測される活性な薬剤の様々な濃度を含有する０．２ｍｌ量における新鮮なフェノール非含有脂腺細胞成長培地を各ウエルに加える。三連のウエルを各サンプルについて利用する。コントロールは、ＰＢＳ、親脂性化合物を可溶化するために使用されるジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）またはエタノール、およびフェノールレッド（エストロゲン様活性を有する化合物）からなる。培養物を、７．５体積％のＣＯ２の存在下で２４時間、３７℃でインキュベーションする。放射能標識を、１００μｌ（マイクロリットル）の１４−Ｃ標識された酢酸（Ａｍｅｒｓｈａｍ、ナトリウム塩、５６ｍＣｉ／ｍｍｏｌの比活性）を５０ｍＭ酢酸ナトリウム緩衝液の１０ｍｌに加えることによって調製する。この後、５０μｌを、脂腺細胞および活性な薬剤を含有するそれぞれのウエルに加える。培養物を４時間インキュベーターに戻す。この後、処置および標識を除き、脂腺細胞を新鮮なＰＢＳにより３回すすぎ洗いする。１４−Ｃ標識を含有する細胞を抽出し、標識を、Ｂｅｃｋｍａｎシンチレーションカウンターを使用して計数する。
【００４３】
それぞれの９６ウエル組織培養プレートについて、２０個のサンプルを分析することができる。これらのうち、１つのサンプルが培地のために指定され、１つのサンプルがＤＭＳＯまたはエタノールのために指定され、１つのサンプルがフェノールレッドのために指定され、これにより、１７個の残ったサンプルが自由に使える。
【００４４】
皮膚の脂性および／または毛穴サイズの外観を減少させるための美容的方法および美容的組成物
脂腺細胞を、インビトロまたはインビボのいずれかで、皮脂産生を阻害するために効果的である量のある種の毛成長阻害剤と接触させることにより、皮脂および／または毛穴を減少させる所望の効果が生じる。この目的のための好適な化合物には、上記で特定された化合物が含まれる。加えて、場合により使用される皮脂減少薬剤には、上記で記載された皮脂減少薬剤が含まれるが、これらに限定されない。本発明の美容的組成物は、皮脂および毛穴を減少させる薬剤を含み、皮脂の過剰産生を引き起こすタイプの、皮膚において普通に生じる状態を有するヒトまたは動物に投与することができる。
【００４５】
本発明の組成物および方法は美容上の目的のために注目に値する。例えば、皮脂の産生または過剰産生の結果としての脂性の顕著ではあるが、望ましくない印象または外観の、皮膚または毛における発生が、本発明の方法を使用して改善され得る。本発明の方法についての美容的適用には、皮膚または毛の視覚的外観を良くするために、または、そうでない場合には、皮膚または毛の視覚的外観を変化させるために脂腺細胞における皮脂産生を低下させる１つ以上の化合物を含有する組成物の適用が含まれる。または、皮脂産生の防止（例えば、発汗または蒸散の結果としての皮脂産生の防止）もまた、脂性皮膚および／または毛穴サイズの外観を減少させるための本発明の美容的方法の適切な適用として意図される。
【００４６】
脂性皮膚および／または毛穴サイズの外観を減少させるための化合物は組成物の約０．００００１重量％から約５０重量％（好ましくは約０．１重量％から約２０重量％、より好ましくは約１重量％から約１５重量％、最も好ましくは約２重量％から約５重量％）の量で本発明の組成物において使用される。
【００４７】
場合により使用されるさらなる皮膚有益薬剤
様々なタイプのさらなる活性な成分を本発明の美容的組成物に存在させることができる。活性剤は、皮膚軟化剤以外の皮膚有益薬剤、および、組成物の物理的特性を単に改善するだけである成分とは異なる皮膚有益薬剤として定義される。このカテゴリーに限定されないが、一般的な例には、脂性皮膚の外観を良くするさらなる成分（例えば、タルクおよびシリカなど）、ならびに、α−ヒドロキシ酸、β−ヒドロキシ酸、ポリヒドロキシ酸、過酸化ベンゾイル、収斂性の塩（例えば、亜鉛塩など）、レチノイド、日焼け防止剤および保存剤が含まれる。
【００４８】
β−ヒドロキシ酸には、例えば、サリチル酸が含まれる。ピリチオン亜鉛は、本発明の組成物において有用な亜鉛塩の一例である。
【００４９】
場合により使用され、しかし、好ましいことではあるが、収斂性の塩が本発明の組成物に含められる。このような収斂性の塩は、アルミニウム、ジルコニウム、亜鉛の無機塩または有機塩およびこれらの混合物であり得る。好ましくは、収斂性の塩は、この場合、約１００ミクロン未満のサイズ（好ましくは、約３ミクロンから約１０ミクロンのサイズ）の粒子状形態（すなわち、親水性の多孔性粒子）で用いられる。収斂剤として、または、収斂性のアルミニウム複合体の成分として有用な塩には、水酸化アルミニウム、ハロゲン化アルミニウム、アルミニウムヒドロキシハリド、ジルコニルオキシハリド、ジルコニルヒドロキシハリド、および、これらの塩物質の混合物が含まれる。
【００５０】
このタイプのアルミニウム塩には、塩化アルミニウム、および、下記の一般式を有するアルミニウムヒドロキシハリドが含まれる：Ａｌ２（ＯＨ）ｘＱｙ−ＸＨ２Ｏ（式中、Ｑは、塩素、臭素またはヨウ素である；ｘは２から５であり、ｘ＋ｙ＝６であり、ｘおよびｙは整数である必要はない；Ｘは約１から６である）。例えば、［Ａｌ２（ＯＨ）５Ｃｌ］−ＸＨ２Ｏの式を有するアルミニウムクロロヒドラートは、この容易な商業的入手性および比較的低いコストのために好ましい。
【００５１】
上記の収斂性塩を利用する数タイプの複合体が制汗剤分野では公知である。例えば、米国特許第３７９２０６８号（Ｌｕｅｄｄｅｒｓら）は、アルミニウム、ジルコニウムおよびアミノ酸（例えば、グリジンなど）の複合体（ＺＡＧ複合体）を開示する。このＺＡＧ複合体は通常、約１．６７から１２．５のＡｌ：Ｚｒ比、および、約０．７３から１．９３の金属：Ｃｌ比を有する。このようなＺＡＧ複合体を調製するための好ましいアミノ酸は、ＣＨ２（ＮＨ２）ＣＯＯＨの式を有するグリジンである。粒子サイズが１ミクロンから１００ミクロンである球状ＺＡＧが特に好ましい。
【００５２】
より具体的には、本発明のために有用であり得る、米国食品薬品局による承認リスト（官報）に載っている収斂性の塩の一覧が下記に示される。このような収斂性の塩には、塩化アルミニウム、アルミニウムクロロヒドラート、アルミニウムクロロヒドレクス、アルミニウムクロロヒドレクスＰＥＧ、アルミニウムクロロヒドレクスＰＧ、アルミニウムジクロロヒドラート、アルミニウムジクロロヒドレクスＰＥＧ、アルミニウムジクロロヒドレクスＰＧ、アルミニウムセスキクロロヒドラート、アルミニウムセスキクロロヒドレクスＰＥＧ、アルミニウムセスキクロロヒドレクスＰＧ、硫酸アルミニウム、アルミニウムジルコニウムオクタクロロヒドラート、アルミニウムジルコニウムオクタクロロヒドレクスＧＬＹ（グリジンに対する略号）、アルミニウムジルコニウムペンタクロロヒドラート、アルミニウムジルコニウムペンタクロロヒドレクスＧＬＹ、アルミニウムジルコニウムテトラクロロヒドラート、アルミニウムジルコニウムトリクロロヒドラート、アルミニウムジルコニウムテトラクロロヒドラートＧＬＹ、および、アルミニウムジルコニウムトリクロロヒドラートＧＬＹが含まれる。
【００５３】
同様に好適なものが、硫酸アルミニウムカリウム（これはまたミョウバン（ＫＡｌ（ＳＯ４）２１２Ｈ２Ｏ）として知られている）、アルミニウムウンデシレノイルコラーゲンアミノ酸、乳酸アルミニウムナトリウム＋硫酸ナトリウム（Ｎａ２ＨＡｌ（ＯＯＣＣＨＯＨＣＨ３）２−（ＯＨ）６）＋Ａｌ２（ＳＯ４）３）、ナトリウムアルミニウムクロロヒドロキシラクタート、アルミニウムブロモヒドラート（Ａｌ２Ｂｒ（ＯＨ）５ｎＨ２Ｏ）、塩化アルミニウム（ＡｌＣｌ３６Ｈ２Ｏ）、亜鉛塩およびナトリウム塩の複合体、ランタンおよびセリウムの複合体、ならびに、リポアミノ酸（Ｒ−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨＲ’−ＣＯ−ＯＡｌ−（ＯＨ）２、式中、Ｒ＝Ｃ６−１１およびＲ’＝アミノ酸）のアルミニウム塩である。
【００５４】
好ましくは、制汗剤はアルミニウム塩であり、より好ましくは、硫酸アルミニウムカリウム（ミョウバン）およびアルミニウムクロロヒドラートから選ばれる。
【００５５】
活性な収斂性塩の量は組成物の約０．０００００１重量％から約２０重量％（好ましくは約０．１０重量％から約１８重量％、より好ましくは約１重量％から約１５重量％、場合により約２重量％から約３重量％）の範囲であり得る。
【００５６】
アルミニウムクロロヒドラート（ＡＣＨ）は、この広汎な商業的入手性および比較的低いコストのために、本発明の目的のための最も好ましい収斂性の塩である。
【００５７】
場合により使用され、しかし、好ましいことではあるが、本発明の組成物はまた、レチノイドを含むことができる。レチノイドは、皮膚の繊維芽細胞によるコラーゲン合成を増大させる。これにより、しわの多い皮膚の平滑化がもたらされる。レチノイドの添加はまた、脂質生成の改善された阻害をもたらす。本明細書中で使用される用語「レチノイド」には、レチノイン酸、レチノール、レチナールおよびレチニルエステルが含まれる。用語「レチノイン酸」には、１３−ｃｉｓ−レチノイン酸およびａｌｌ−ｔｒａｎｓ−レチノイン酸が含まれる。
【００５８】
本明細書中で使用される用語「レチノール」には、レチノールの下記の異性体が含まれる：ａｌｌ−ｔｒａｎｓ−レチノール、１３−ｃｉｓ−レチノール、１１−ｃｉｓ−レチノール、９−ｃｉｓ−レチノールおよび／または３，４−ジデヒドロレチノール。好ましい異性体は、この広汎な商業的活動のために、ａｌｌ−ｔｒａｎｓ−レチノールである。
【００５９】
レチニルエステルはレチノールのエステルである。用語「レチノール」は上記で定義されている。本発明における使用のために好適なレチニルエステルは、このより一般的な入手性のために、レチノールのＣ１−Ｃ３０エステル（好ましくは、Ｃ２−Ｃ２０エステル、最も好ましくは、Ｃ２、Ｃ３およびＣ１６エステル）である。レチニルエステルの例には、パルミチン酸レチニル、ギ酸レチニル、酢酸レチニル、プロピオン酸レチニル、酪酸レチニル、吉草酸レチニル、イソ吉草酸レチニル、ヘキサン酸レチニル、ヘプタン酸レチニル、オクタン酸レチニル、ノナン酸レチニル、デカン酸レチニル、ウンデカン酸レチニル、ラウリン酸レチニル、トリデカン酸レチニル、ミリスチン酸レチニル、ペンタデカン酸レチニル、ヘプタデカン酸レチニル、ステアリン酸レチニル、イソステアリン酸レチニル、ノナデカン酸レチニル、アラキドン酸レチニル、ベヘン酸レチニル、リノール酸レチニル、オレイン酸レチニル、乳酸レチニル、グリコール酸レチニル、ヒドロキシカプリル酸レチニル、ヒドロキシラウリン酸レチニル、酒石酸レチニルが含まれるが、これらに限定されない。
【００６０】
本発明におけるレチノイドは組成物の０．００１重量％から１０重量％（好ましくは０．０１重量％から１重量％、最も好ましくは０．０１重量％から０．０５重量％）の量で存在する。
【００６１】
日焼け防止剤には、紫外光を阻止するために一般に用いられているこのような物質が含まれる。例示的な化合物には、パラ−アミノ安息香酸（ＰＡＢＡ）の誘導体、シンナマートおよびサリチラートがある。例えば、アゾベンゾフェノン（Ｐａｒｓｏｌ１７８９（登録商標））、メトキシケイ皮酸オクチル（Ｐａｒｓｏｌ（商標）ＭＣＸ）、および、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン（これはオキシベンゾフェノンとしても知られており、Ｂｅｎｚｏｐｈｅｎｏｎｅ（商標）３として入手可能である）を使用することができる。組成物において用いられる日焼け防止剤の正確な量は、日光の紫外線からの所望される保護の程度に依存して変化し得る。
【００６２】
多くの美容的組成物（特に、水を含有する組成物）は、潜在的に有害な微生物の成長から保護されなければならない。好適な保存剤には、ｐ−ヒドロキシ安息香酸のアルキルエステル、ヒダントイン誘導体、プロピオン酸塩、および、様々な第四級アンモニウム化合物が含まれる。本発明の特に好ましい保存剤は、メチルパラベン、プロピルパラベン、フェノキシエタノールおよびベンジルアルコールである。保存剤は通常、組成物の約０．１重量％から２重量％の範囲の量で用いられる。
【００６３】
美容上許容され得るビヒクル
本発明による組成物は、本発明の皮膚有益化合物および場合により使用される任意の皮膚有益薬剤の希釈剤、分散剤またはキャリアとして作用して、この結果、組成物が皮膚に適用されたとき、これらの分布を容易にするようにするための美容上許容され得るビヒクルを含む。
【００６４】
ビヒクルは、水性、無水またはエマルションであり得る。好ましくは、組成物は水性またはエマルション（特に、油中水型エマルションまたは水中油型エマルション）である。水は、存在するとき、組成物の５重量％から９９重量％（好ましくは４０重量％から９０重量％、場合により、６０重量％から９０重量％の間）の範囲であり得る量である。
【００６５】
水の他に、比較的揮発性の溶媒もまた、本発明の組成物におけるキャリアとして役立ち得る。最も好ましいものが、一価のＣ１−Ｃ３アルカノールである。これらには、エチルアルコール、メチルアルコールおよびイソプロピルアルコールが含まれる。一価アルカノールの量は組成物の１重量から７０重量％（好ましくは１０重量％から５０重量％、場合により、１５重量％から４０重量％の間）の範囲であり得る。
【００６６】
皮膚軟化性の物質もまた、美容上許容され得るキャリアとして役立ち得る。これらはシリコーンオイルおよび合成エステルの形態であり得る。皮膚軟化剤の量は組成物の０．１重量％から５０重量％（好ましくは１重量％から２０重量％の間）の範囲で任意であり得る。
【００６７】
シリコーンオイルは揮発性のものおよび不揮発性のものに分けることができる。本明細書中で使用される用語「揮発性（の）」は、測定可能な蒸気圧を周囲温度で有するこのような物質を示す。揮発性のシリコーンオイルが、好ましくは、３個から９個（好ましくは４個から５個）のケイ素原子を含有する環状または直鎖状のポリジメチルシロキサンから選ばれる。直鎖状の揮発性シリコーン物質は一般には、約５センチストークス未満の粘度を２５℃で有し、一方、環状の物質は典型的には、約１０センチストークス未満の粘度を有する。皮膚軟化性の物質として有用な不揮発性シリコーンオイルには、ポリアルキルシロキサン、ポリアルキルアリールシロキサンおよびポリエーテルシロキサン共重合体が含まれる。本発明において有用な本質的に不揮発性のポリアルキルシロキサンには、例えば、約５００万センチストークスから約２５００万センチストークスの粘度を２５℃で有するポリジメチルシロキサンが含まれる。本発明の組成物において有用な好ましい不揮発性の皮膚軟化剤には、約１０センチストークスから約４００センチストークスの粘度を２５℃で有するポリジメチルシロキサンが含まれる。
【００６８】
エステル型皮膚軟化剤には、下記の物質が挙げられる：
（１）１０個から２０個の炭素原子を有する脂肪酸のアルケニルエステルまたはアルキルエステル。この例には、ネオペンタン酸イソアラキジル、イソノナン酸イソノニル、ミリスチン酸オレイル、ステアリン酸オレイルおよびオレイン酸オレイルが含まれる。
（２）エーテル−エステル、例えば、エトキシル化アルコールの脂肪酸エステルなど。
（３）多価アルコールエステル、例えば、エチレングリコールのモノおよびジ脂肪酸エステル、ジエチレングリコールのモノおよびジ脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール（２００から６０００）のモノおよびジ脂肪酸エステル、プロピレングリコールのモノおよびジ脂肪酸エステル、ポリプロピレングリコール２０００モノオレアート、ポリプロピレングリコール２０００モノステアラート、エトキシル化プロピレングリコールモノステアラート、グリセリルモノ脂肪酸エステルおよびグリセリルジ脂肪酸エステル、ポリグリセロールポリ脂肪エステル、エトキシル化グリセリルモノステアラート、１，３−ブチレングリコールモノステアラート、１，３−ブチレングリコールジステアラート、ポリオキシエチレンポリオール脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステルおよびポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルなど。
（４）ワックスエステル、例えば、蜂ろう、鯨ろう、ミリスチン酸ミリスチル、ステアリン酸ステアリルおよびベヘン酸アラキジルなど。
（５）ステロールエステル、コレステロール脂肪酸エステルがこの例である。
【００６９】
１０個から３０個の炭素原子を有する脂肪酸もまた、本発明の組成物のための美容上許容され得るキャリアとして含めることができる。このカテゴリーの例示には、ペラルゴン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、ヒドロキシステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リシノール酸、アラキジン酸、ベヘン酸およびエルカ酸がある。
【００７０】
多価アルコールタイプの保湿剤もまた、本発明の組成物における美容上許容され得るキャリアとして用いることができる。保湿剤は、皮膚軟化剤の有効性を増大させることを助け、皮膚の落屑を減少させ、積み重なった鱗屑の除去を刺激し、および、皮膚の感触を改善する。典型的な多価アルコールには、グリセロール、ポリアルキレングリコール、ならびに、より好ましくは、アルキレンポリオールおよびこの誘導体が含まれ、これらに、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコールおよびこの誘導体、ソルビトール、ヒドロキシプロピルソルビトール、ヘキシレングリコール、１，３−ブチレングリコール、１，２，６−ヘキサントリオール、エトキシル化グリセロール、プロポキシル化グリセロール、ならびに、この混合物が含まれる。最良の結果のために、保湿剤は、好ましくは、プロピレングリコールまたはヒアルロン酸ナトリウムである。保湿剤の量は組成物の０．５重量％から３０重量％（好ましくは１重量％から１５重量％の間）の範囲で任意であり得る。
【００７１】
増粘剤もまた、本発明による組成物の美容上許容され得るキャリアの一部として利用することができる。典型的な増粘剤には、架橋アクリラート（例えば、Ｃａｒｂｏｐｏｌ（商標）９８２）、疎水性修飾されたアクリラート（例えば、Ｃａｒｂｏｐｏｌ（商標）１３８２）、セルロース誘導体および天然ゴムが含まれる。有用なセルロース誘導体には、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、エチルセルロースおよびヒドロキシメチルセルロースが含まれる。本発明のために好適な天然ゴムには、グアールガム、キサンタンガム、スクレロチウムガム、カラギーナン、ペクチン、および、これらのガムの組合せが含まれる。増粘剤の量は組成物の０．０００１重量％から５重量％（通常的には、０．００１重量％から１重量％、場合により、０．０１重量％から０．５重量％）の範囲であり得る。
【００７２】
まとめると、水、溶媒、シリコーン、エステル、脂肪酸、保湿剤および／または増粘剤は、組成物の１重量％から９９．９重量％（好ましくは８０重量％から９９重量％）の量で美容上許容され得るキャリアを構成する。
【００７３】
オイルまたは脂性物質を、主として、用いられる乳化剤の平均親水性・疎水性バランス（ＨＬＢ）に依存して、油中水型エマルションまたは水中油型エマルションのいずれかを提供するための乳化剤と一緒に存在させることができる。
【００７４】
新規な組成物の使用
本発明による組成物は主に、ヒトの皮膚に対する局所的適用のための生成物として意図され、特に、過度な皮脂分泌を抑制もしくは防止し、および／または、毛穴サイズを減少させるための薬剤として意図される。皮脂の抑制は、改善された皮膚状態；脂ぎった皮膚の好ましくない外観および感触の軽減；ざ瘡、酒さ、脂漏症、脂性頭皮、脂性／脂ぎった頭髪、および、ふけの軽減および／または防止を含む多数の利益を提供する。
【００７５】
使用において、一定量の組成物（例えば、１ｍｌから１００ｍｌ）が好適な容器またはアプリケーターから皮膚の露出領域に適用され、また、必要ならば、この後、手もしくは指または好適なデバイスを使用して、皮膚全体に広げられ、および／または、皮膚にこすりつけられる。
【００７６】
場合により行われ、しかし、好ましいことではあるが、本発明の方法では、皮膚を剃る工程が含まれる。より好ましくは、皮膚は、本発明の組成物が適用される前に剃られる。
【００７７】
本発明はまた、本発明の組成物を皮膚に適用することによって、特に顔領域において脂性肌状態を抑制または防止する美容的方法を包含する。別の態様では、本発明は、脂性または脂ぎった頭髪を抑制、防止または処置する美容的方法を包含する。
【００７８】
本発明はまた、本発明の組成物を適用することによって脂腺細胞からの皮脂分泌を減少させるか、または防止するか、または抑制する美容的方法を包含する。
【００７９】
本発明はまた、本発明の組成物を皮膚に適用することによって、脂性または脂ぎった皮膚の認知を減少させるか、または抑制する美容的方法を包含する。
【００８０】
本発明の方法および組成物は、脂腺細胞からの皮脂分泌の抑制、改善されたオイル抑制および改善された皮膚感触を提供し、また、てかりおよびベトつきを防止し、この一方で、ざ瘡に関連する細菌に対する抗菌活性をも提供し、また、一般には、皮膚表面における細菌の微生物活動を抑制する。
【００８１】
生成物の形態および包装
本発明の美容的皮膚組成物は任意の形態にすることができ、例えば、収斂性化粧水、ゲル、ローション、流動クリームまたはクリームとして配合することができる。組成物は、この粘度および消費者による意図された使用に適合させるための好適な容器に詰めることができる。例えば、ローションまたは流動クリームを、ボトル、または、ロール・ボールアプリケーター、または、噴射剤駆動によるエアロゾルデバイス、または、指操作のために好適なポンプを備えた容器に詰めることができる。組成物がクリームであるとき、クリームを非変形ボトルまたは絞り出し容器（例えば、チューブまたは蓋付きの広口瓶など）に単に貯蔵することができる。従って、本発明はまた、本明細書中で定義されるような美容上許容され得る組成物を含む閉じられた容器を提供する。組成物はまた、米国特許第５０６３０５７号に記載されるカプセルなどのカプセルに含めることができる。
【００８２】
包装され、および、包装物に関連する１組の説明書と一緒になった組成物は、皮膚の皮脂を抑制／減少させ、および／または、毛穴サイズを減少させるためのシステムを含むことができる。１組の説明書は包装物の表面に印刷され得るか、または、包装物に入れることができる。１組の説明書は典型的には、微生物を殺すか、もしくは微生物のレベルを減少させること、皮脂産生を抑制／減少させること、外観を改善すること、毛穴サイズを減少させること、および／またはこれらの組合せからなる群より選択される問題を伴う様々な問題に対する解決策、および／または、このような問題に関連する利点の提供を提供するために効果的な量で組成物を施すことを本発明品の消費者に知らせる。本発明品の消費者がこれらの利点に注意を払うことは重要である。そうでない場合、消費者は、本発明の組成物により、これらの問題または問題の組合せが解決され、および／または、これらの利点または利点の組合せが提供されることを知らないからである。
【実施例１】
【００８３】
脂腺細胞アッセイ手順
成人男性から得られたヒト脂腺細胞の二次培養物をコンフルエンス後３日間まで９６ウエル組織培養プレート（Ｐａｃｋａｒｄ）において成長させた。脂腺細胞の成長培地は、１４ｕｇ／ｍｌのウシ下垂体抽出物、０．４ｕｇ／ｍｌのヒドロコルチゾン、５ｕｇ／ｍｌのインスリン、１０ｎｇ／ｍｌの上皮増殖因子、１．２×１０−１０Ｍのコレラ毒素、１００ユニット／ｍｌのペニシリンおよび１００ｕｇ／ｍｌのストレプトマイシンが補充されたＣｌｏｎｅｔｉｃｓケラチノサイト基礎培地（ＫＢＭ）からなった。すべての培養物を７．５体積％のＣＯ２の存在下において３７℃でインキュベーションした。培地を１週間に３回交換した。
【００８４】
実験当日、成長培地を除き、脂腺細胞を無菌のダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ；フェノールレッド非含有）により３回洗浄した。新鮮なＤＭＥＭを、水に可溶化された試験剤（ＤＬ−α−ジフルオロメチルオルニチン塩酸塩）の５マイクロリットルとともに各サンプル（５つの複製物）に加えた。コントロールは水だけの添加からなった。各プレートをインキュベーターに２０時間戻し、この後、１４Ｃ−酢酸塩緩衝液（５ｍＭの最終濃度、５６ｍＣｉ／ｍｍｏｌの比活性）を加えた。脂腺細胞をインキュベーターに４時間戻し、この後、それぞれの培養物をリン酸塩緩衝化生理的食塩水により３回すすぎ洗いして、結合していない標識を除いた。脂腺細胞に残留する放射能標識を、Ｐａｃｋａｒｄ  ＴｏｐＣｏｕｎｔシンチレーションカウンターを使用して求めた。統計学的有意性（ｐ値）を、スチューデントのｔ検定を使用して計算した。得られた結果が表１にまとめられる。フェノールレッド（知られている皮脂抑制剤）を陽性コントロールとして用いた。
【００８５】
【表１】
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【００８６】
これらの結果は２４時間後の限定された皮脂抑制活性を示している。実験を上記に改変を加えて繰り返した。実験当日、成長培地を除き、脂腺細胞を無菌のダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ；フェノールレッド非含有）により３回洗浄した。新鮮なＤＭＥＭを、水に可溶化された試験剤（ＤＬ−α−ジフルオロメチルオルニチン塩酸塩）の５マイクロリットルとともに各サンプル（３つの複製物）に加えた。コントロールは水だけの添加からなった。各プレートをインキュベーターに６８時間戻し、この後、１４Ｃ−酢酸塩緩衝液（５ｍＭの最終濃度、５６ｍＣｉ／ｍｍｏｌの比活性）を加えた。脂腺細胞をインキュベーターに４時間戻し、この後、それぞれの培養物をリン酸塩緩衝化生理的食塩水により３回すすぎ洗いして、結合していない標識を除いた。脂腺細胞に残留する放射能標識を、Ｐａｃｋａｒｄ  ＴｏｐＣｏｕｎｔシンチレーションカウンターを使用して求めた。統計学的有意性（ｐ値）を、スチューデントのｔ検定を使用して計算した。得られた結果が下記の表２にまとめられる。
【００８７】
【表２】
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【００８８】
これらの結果は、ＤＦＭＯとの長期間のインキュベーションの後における増強された皮脂抑制活性を示している。
【国際調査報告】
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