(57)【要約】  本発明は、ＣＸＣＲ４受容体が介在する増殖状態の治療のための、ケモカインＣＸＣＲ４受容体の拮抗薬である化合物、医薬組成物およびある種の化合物の使用方法を提供する。その化合物は、受容体に対するＳＤＦ１の結合を妨害する。これらの化合物は、転移を阻害することで、過剰増殖疾患の治療または重度軽減において特に有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
宿主に対して下記式Ｉの化合物または該化合物の製薬上許容される塩もしくはエステルを投与する段階を有する、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する増殖障害の治療または予防方法。
【化１】
2008526884.tif 000096
［式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは独立に、Ｈ、Ｒ、アシル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＨ、ＯＲ、ＮＨ２、ＮＯ２、ＮＨＲ、ＮＲ２、ＳＲ、ＳＲ、Ｓ２Ｒ、Ｓ−ＮＨＲ、Ｓ２−ＮＨＲ、Ｓ−ＮＲＲ′、Ｓ２−ＮＲＲ′、ＮＨアシル、Ｎ（アシル）２、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｒから選択され、ＲおよびＲ′は独立に、直鎖、分岐もしくは環状アルキルまたはアラルキル基ならびにアリールおよびヘテロアリール基から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は独立に、Ｈ、直鎖、分岐もしくは環状アルキル、アラルキル、アリールヘテロアリール、アシル（ＲＣ−）およびイミドイル（ＲＣ（ＮＨ）−またはＲＣ（ＮＲ′）−）基から選択される。］
【請求項２】
各環における少なくとも１個のＫが窒素である請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ＹおよびＺがそれぞれ水素である請求項１に記載の方法。
【請求項４】
ＷおよびＸがそれぞれ水素である請求項１に記載の方法。
【請求項５】
Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺがいずれも水素である請求項１に記載の方法。
【請求項６】
Ｒ１およびＲ２が水素である請求項１に記載の方法。
【請求項７】
ＵがアシルまたはＮＨアシルである請求項１に記載の方法。
【請求項８】
Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺのうちの少なくとも一つがＣｌ、Ｆ、ＢｒまたはＩである請求項１に記載の方法。
【請求項９】
Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺのうちの少なくとも一つがＯＨである請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺのうちの少なくとも一つがＣＮである請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺのうちの少なくとも一つがＮＯ２である請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記化合物が、下記式Ｉ−１〜Ｉ−１０の化合物または該化合物の製薬上許容される塩もしくはエステルからなる群から選択される請求項１に記載の方法。
【化２】
2008526884.tif 000097
【請求項１３】
前記化合物が、下記式Ｉ−１１〜Ｉ−２０の化合物または該化合物の製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグからなる群から選択される請求項１に記載の方法。
【化３】
2008526884.tif 000098
【請求項１４】
前記化合物が下記構造ＸＶの化合物であるか、該化合物の製薬上許容される塩もしくはエステルである請求項１に記載の方法。
【化４】
2008526884.tif 000099
【請求項１５】
前記化合物が塩である請求項１０に記載の方法。
【請求項１６】
前記化合物が塩化物塩である請求項１１に記載の方法。
【請求項１７】
前記化合物が下記構造ＸＶＩの化合物であるか、該化合物の製薬上許容される塩もしくはエステルである請求項１に記載の方法。
【化５】
2008526884.tif 000100
【請求項１８】
下記式ＩＩａもしくはＩＩｂの化合物または該化合物の製薬上許容される塩もしくはエステルを投与する段階を有する、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する増殖障害の治療または予防方法。
【化６】
2008526884.tif 000101
［式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは独立に、Ｈ、Ｒ、アシル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＨ、ＯＲ、ＮＨ２、ＮＯ２、ＮＨＲ、ＮＲ２、ＳＲ、ＳＲ、Ｓ２Ｒ、Ｓ−ＮＨＲ、Ｓ２−ＮＨＲ、Ｓ−ＮＲＲ′、Ｓ２−ＮＲＲ′、ＮＨアシル、Ｎ（アシル）２、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｒから選択され、ＲおよびＲ′は独立に、直鎖、分岐もしくは環状アルキルまたはアラルキル基ならびにアリールおよびヘテロアリール基から選択され；
ＡおよびＢは、独立に−ＣＲ＝、−ＣＲ３Ｒ４−、−ＣＲ３＝、−Ｎ＝、−Ｏ−、−ＮＲ３−、−Ｓ−、−ＣＲ３＝ＣＲ４−、−ＣＲ３Ｒ４−ＣＲ５Ｒ６−、−ＣＲ３＝Ｎ−、−ＣＲ３Ｒ４−ＮＲ５−、−Ｎ＝ＣＲ３−および−ＮＲ３−ＣＲ４Ｒ５−から選択される１原子および２原子連結部であり；
−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は独立に、−ＮＲ３−ＣＲ４−または−Ｎ＝Ｃ−のいずれかであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は独立に、Ｈ、直鎖、分岐もしくは環状アルキル、アラルキル、アリールヘテロアリール、アシル（ＲＣ−）およびイミドイル（ＲＣ（ＮＨ）−またはＲＣ（ＮＲ′）−）基から選択される。］
【請求項１９】
ＹおよびＺがそれぞれ水素である請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
ＷおよびＸがそれぞれ水素である請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺがいずれも水素である請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
下記式ＩＩＩの化合物または該化合物の製薬上許容される塩もしくはエステルを投与する段階を有する、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する増殖障害の治療または予防方法。
【化７】
2008526884.tif 000102
［式中、
各Ｋは独立にＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは独立に、Ｈ、Ｒ、アシル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＨ、ＯＲ、ＮＨ２、ＮＯ２、ＮＨＲ、ＮＲ２、ＳＲ、ＳＲ、Ｓ２Ｒ、Ｓ−ＮＨＲ、Ｓ２−ＮＨＲ、Ｓ−ＮＲＲ′、Ｓ２−ＮＲＲ′、ＮＨアシル、Ｎ（アシル）２、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｒから選択され、ＲおよびＲ′は独立に、直鎖、分岐もしくは環状アルキルまたはアラルキル基ならびにアリールおよびヘテロアリール基から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は独立に、Ｈ、直鎖、分岐もしくは環状アルキル、アラルキル、アリールヘテロアリール、アシル（ＲＣ−）およびイミドイル（ＲＣ（ＮＨ）−またはＲＣ（ＮＲ′）−）基から選択される。］
【請求項２３】
前記化合物が、下記式ＩＩＩ−１〜ＩＩＩ−１０の化合物または該化合物の製薬上許容される塩もしくはエステルからなる群から選択される請求項２２に記載の方法。
【化８】
2008526884.tif 000103
【請求項２４】
前記化合物が、下記式ＩＩＩ−１１〜ＩＩＩ−２０の化合物または該化合物の製薬上許容される塩もしくはエステルからなる群から選択される請求項２２に記載の方法。
【化９】
2008526884.tif 000104
【請求項２５】
宿主に対して下記式ＩＸの化合物または該化合物の製薬上許容される塩もしくはエステルを投与する段階を有する、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する増殖障害の治療または予防方法。
【化１０】
2008526884.tif 000105
［式中、
各Ｋは独立にＮまたはＣＨであり；
Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは独立に、Ｈ、Ｒ、アシル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＨ、ＯＲ、ＮＨ２、ＮＯ２、ＮＨＲ、ＮＲ２、ＳＲ、ＳＲ、Ｓ２Ｒ、Ｓ−ＮＨＲ、Ｓ２−ＮＨＲ、Ｓ−ＮＲＲ′、Ｓ２−ＮＲＲ′、ＮＨアシル、Ｎ（アシル）２、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｒから選択され、ＲおよびＲ′は独立に、直鎖、分岐もしくは環状アルキルまたはアラルキル基ならびにアリールおよびヘテロアリール基から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は独立に、Ｈ、直鎖、分岐もしくは環状アルキル、アラルキル、アリールヘテロアリール、アシル（ＲＣ−）およびイミドイル（ＲＣ（ＮＨ）−またはＲＣ（ＮＲ′）−）基から選択され；
Ａ＊は独立に、下記式ａ〜ｇ：
【化１１】
2008526884.tif 000106
からなる群から選択され；
ＭはＯ、ＳまたはＮＲ３である。］
【請求項２６】
宿主に対して下記式ＸＩの化合物または該化合物の製薬上許容される塩もしくはエステルを投与する段階を有する、ＣＸＣＲ４受容体を介して調節される増殖障害の治療または予防方法。
【化１２】
2008526884.tif 000107
［式中、
各Ｋは独立にＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは独立に、Ｈ、Ｒ、アシル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＨ、ＯＲ、ＮＨ２、ＮＯ２、ＮＨＲ、ＮＲ２、ＳＲ、ＳＲ、Ｓ２Ｒ、Ｓ−ＮＨＲ、Ｓ２−ＮＨＲ、Ｓ−ＮＲＲ′、Ｓ２−ＮＲＲ′、ＮＨアシル、Ｎ（アシル）２、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｒから選択され、ＲおよびＲ′は独立に、直鎖、分岐もしくは環状アルキルまたはアラルキル基ならびにアリールおよびヘテロアリール基から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は独立に、Ｈ、直鎖、分岐もしくは環状アルキル、アラルキル、アリールヘテロアリール、アシル（ＲＣ−）およびイミドイル（ＲＣ（ＮＨ）−またはＲＣ（ＮＲ′）−）基から選択される。］
【請求項２７】
ＹおよびＺがそれぞれ水素である請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
ＷおよびＸがそれぞれ水素である請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺがいずれも水素である請求項２６に記載の方法。
【請求項３０】
前記化合物が、下記式ＸＩ−１〜ＸＩ−６の化合物または該化合物の製薬上許容される塩もしくはエステルからなる群から選択される請求項２６に記載の方法。
【化１３】
2008526884.tif 000108
【請求項３１】
宿主に対して下記式ＸＩＩＩの化合物または該化合物の製薬上許容される塩もしくはエステルを投与する段階を有する、ＣＸＣＲ４受容体を介して調節される増殖障害の治療または予防方法。
【化１４】
2008526884.tif 000109
［式中、
各Ｋは独立にＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは独立に、Ｈ、Ｒ、アシル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＨ、ＯＲ、ＮＨ２、ＮＯ２、ＮＨＲ、ＮＲ２、ＳＲ、ＳＲ、Ｓ２Ｒ、Ｓ−ＮＨＲ、Ｓ２−ＮＨＲ、Ｓ−ＮＲＲ′、Ｓ２−ＮＲＲ′、ＮＨアシル、Ｎ（アシル）２、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｒから選択され、ＲおよびＲ′は独立に、直鎖、分岐もしくは環状アルキルまたはアラルキル基ならびにアリールおよびヘテロアリール基から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は独立に、Ｈ、直鎖、分岐もしくは環状アルキル、アラルキル、アリールヘテロアリール、アシル（ＲＣ−）およびイミドイル（ＲＣ（ＮＨ）−またはＲＣ（ＮＲ′）−）基から選択され；
「スペーサー」は独立に、結合、直鎖もしくは分岐Ｃ１〜Ｃ５アルキル、Ｃ２〜Ｃ５アルケニル、Ｃ２〜Ｃ５アルキニル、Ｃ１〜Ｃ５アルコキシ、Ｃ２〜Ｃ５アルケノキシおよびＣ２〜Ｃ５アルキノキシであり、前記アルキル基はヘテロ原子（例えばＮ、ＯまたはＳ）によって置換されていても良く、それには−ＣＨ２−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−ＯＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＯＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−ＯＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−（ＣＨ２）ｎ−ＯＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）ｎ−、ＣＨ２−ＯＨ（ＣＨ３）−Ｏ−ＣＨ２、−（ＣＨ２）ｎ−、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−、−（ＣＨ２）ｎ−Ｎ−、−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−、−（ＣＨ２）ｎ−Ｓ−、−（ＣＨ２Ｏ）−、−（ＯＣＨ２）−、−（ＳＣＨ２）−、−（ＣＨ２Ｓ−）、−（アリール−Ｏ）−、−（Ｏ−アリール）−、−（アルキル−Ｏ）−、−（Ｏ−アルキル）−が含まれるがそれらに限定されるものではなく、ｎは独立に０、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０である。］
【請求項３２】
前記障害が癌転移である請求項１、１８、２２、２５、２６または３１のうちのいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
前記疾患が、乳癌、脳腫瘍、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、腎臓癌または非小細胞肺癌から選択される請求項１、１８、２２、２５、２６または３１のうちのいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
前記投与が内皮細胞移動または増殖を低減させる請求項１、１８、２２、２５、２６または３１のうちのいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５】
前記投与が血管新生を低減させる請求項１、１８、２２、２５、２６または３１のうちのいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
前記化合物を、増殖性疾患を患う高リスクの宿主に投与する請求項１、１８、２２、２５、２６または３１のうちのいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
前記化合物を、第２の薬剤と併用投与または交互投与する請求項１、１８、２２、２５、２６または３１のうちのいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
前記第２の薬剤が化学療法薬である請求項１、１８、２２、２５、２６または３１のうちのいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
前記化合物を、別の薬剤の投与停止後に投与する請求項１、１８、２２、２５、２６または３１のうちのいずれか１項に記載の方法。
【請求項４０】
宿主におけるＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する増殖障害の治療または予防のための医薬製造における下記式Ｉの化合物または該化合物の製薬上許容される塩もしくはエステルの使用。
【化１５】
2008526884.tif 000110
［式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは独立に、Ｈ、Ｒ、アシル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＨ、ＯＲ、ＮＨ２、ＮＯ２、ＮＨＲ、ＮＲ２、ＳＲ、ＳＲ、Ｓ２Ｒ、Ｓ−ＮＨＲ、Ｓ２−ＮＨＲ、Ｓ−ＮＲＲ′、Ｓ２−ＮＲＲ′、ＮＨアシル、Ｎ（アシル）２、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｒから選択され、ＲおよびＲ′は独立に、直鎖、分岐もしくは環状アルキルまたはアラルキル基ならびにアリールおよびヘテロアリール基から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は独立に、Ｈ、直鎖、分岐もしくは環状アルキル、アラルキル、アリールヘテロアリール、アシル（ＲＣ−）およびイミドイル（ＲＣ（ＮＨ）−またはＲＣ（ＮＲ′）−）基から選択される。］
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願に関する相互参照）
本出願は、２００５年１月７日出願の米国暫定特許出願第６０／６４２３７５号および２００５年１月７日出願の米国暫定特許出願第６０／６４２３７４号の優先権を主張するものである。
【０００２】
本発明は、化合物、医薬組成物およびケモカインＣＸＣＲ４受容体の拮抗薬であるある種の化合物の使用方法を提供する。その化合物は、ＣＸＣＲ４受容体シグナル伝達によって調節される医学的状態を調節する上で有用であり、特には転移を阻害することで過剰増殖性疾患を治療または重度低減する上で有用である。
【背景技術】
【０００３】
癌は現在、先進国における第２の主要な死亡原因である。２００４年に、米国癌学会が、米国のみで約１３７万人の新たな症例が診断され、約５５万人が癌のために死亡したものと推計している（American Cancer Society, Cancer Facts & Figures 2004；URL: http://www.cancer.org/ docroot/STT/stt_0.aspを参照。）。
【０００４】
転移は、遠位臓器への腫瘍細胞の広がりおよび成長であり、癌の最も破壊的な属性である。乳癌などのある種の癌に関連するほとんどの罹患率および死亡率は、原発腫瘍によるよりはむしろ転移細胞によって生じる疾患に関連するものである。現在、転移の治療は、原発癌の早期診断および積極的治療の組み合わせによるものである。
【０００５】
遠位部位での転移の確立および成長は、腫瘍細胞と宿主環境との間の相互作用によって決まるものと考えられている。転移はいくつかの順次段階の結果であり、高度に系統化された非ランダムの臓器選択的プロセスを代表するものである。乳癌の転移においては、多くの介在物質が示唆されているが、具体的な臓器への腫瘍細胞の有向性移動および侵襲を決定する正確な機序はまだ確立されていない。転移の基礎となる分子機序および細胞機序についての理解が不完全であることが、この状態を排除または改善すると考えられる有効な治療法の開発の障害となってきた。
【０００６】
内皮細胞の抗体もしくは接着分子との接着を調節することで悪性細胞の転移侵襲を低減するために、いくつかの戦略が開発されてきた（例えば、ＰＣＴ公開第ＷＯ９７／００９５６号、米国特許第５９９３８１７号；６４３３１４９号；６４７５４８８号および６３５８９１５号参照）。しかしながら、商業的戦略で、転移を予防するための有効な治療を提供したものはない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
ケモカインは、Ｇタンパク質結合受容体との相互作用を介して、細胞骨格再構成および数種類の細胞の方向性のある移動を誘発する小型サイトカインのスーパーファミリーである（Butcher, et al. (1999) Adv Immunol 72: 209-253；Campbell and Butcher (2000) Curr Opin Immunol 12: 336-341；Zlotnik and Yoshie (2000) Immunity 12: 121-127）。これらの分泌タンパク質は、細胞表面タンパク質と協調的に作用して、各種の下位細胞群のホーミングを特定の解剖学的部位に向ける（Morales, et al. (1999) Proc Natl Acad Sd USA96: 14470-14475；Homey, B., et al. (2000) J Immunol 164: 3465-3470；Peled, et al. (1999) Science 283: 845-848；Forster, et al. (1999) Cell 99: 23-33）。
【０００８】
ケモカイン類は、炎症の開始および維持における主要な介在物質であると見なされている。それは、怪我の後の血管新生および再内皮化時の蔵増殖、移動および分化などの内皮細胞機能の調節において重要な役割を果たすことも認められている（Gupta et al. (1998) J Biol Chem, 7:4282-4287）。２つの特異的ケモカインが、ヒト免疫不全ウィルス（ＨＩＶ）による感染の病因においても示唆されている。
【０００９】
ケモカイン受容体であるＣＸＣＲ４は、Ｔ細胞系向性ＨＩＶの侵入の主要な補助受容体としてウィルス研究において知られている（Feng, et al. (1996) Science 272: 872-877；Davis, et al. (1997) J Exp Med 186: 1793-1798；Zaitseva, et al. (1997) Nat Med 3: 1369-1375；Sanchez, et al. (1997) J Biol Chem.212: 27529-27531）。Ｔ間質細胞由来因子１（ＳＤＦ−１）は、ＣＸＣＲ４と特異的に相互作用するケモカインである。ＳＤＦ−１がＣＸＣＲ４に結合すると、ＣＸＣＲ４は、リンパ球、巨核球および造血幹細胞におけるＲａｓ／ＭＡＰキナーゼ類およびホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）／Ａｋｔなどの下流キナーゼ経路を含むＧαｉタンパク質介在シグナル伝達（百日咳毒素感受性）（Chen, et al. (1998) Mol Pharmacol 53: 177-181）を活性化する（Bleul, et al. (1996) Nature 382: 829-833；Deng, et al. (1997) Nature 388: 296-300；Kijowski, et al. (2001) Stem Cells 19: 453-466；Majka, et al. (2001) Folia. Histochem. Cytobiol. 39: 235-244；Sotsios, et al. (1999) J. Immunol. 163: 5954-5963；Vlahakis, et al. (2002) J. Immunol. 169: 5546-5554）。ヒトリンパ節を移植したマウスでは、ＳＤＦ−１がＣＸＣＲ４陽性細胞の移植リンパ節への移動を誘発する（Blades, et al. (2002) J. Immunol. 168: 4308-4317）。これらの結果は、ＳＤＦ−１とＣＸＣＲ４の間の相互作用によって、高レベルのＳＤＦ−１を有する臓器部位に細胞が向かうことを示唆している。
【００１０】
最近、研究により、ＣＸＣＲ４相互作用が転移細胞の移動を調節し得ることが明らかになっている。酸素分圧が低下した状態である低酸素状態は、ほとんどの固形腫瘍で起こる微小環境変化であり、腫瘍血管新生および治療耐性の主要な誘発因子である。低酸素状態は、ＣＸＣＲ４レベルを上昇させる（Staller, et al. (2003) Nature 425: 307-311）。転移活性が高い骨転移モデルからの細胞の下位群に関するマイクロアレイ解析で、転移表現型で増える遺伝子の一つがＣＸＣＲ４であることが明らかになった。さらに、単離細胞中での過剰発現ＣＸＣＲ４が、転移活性を大きく上昇させた（Kang, et al. (2003) Cancer Cell 3: 537-549）。各種乳癌患者から集めたサンプルにおいて、ムラーら（Muller, et al. (2001) Nature 410: 50-56）は、ＣＸＣＲ４発現レベルが正常な乳腺または上皮細胞と比較して原発腫瘍の方が高いことを認めている。これらの結果は、癌細胞表面でのＣＸＣＲ４の発現が、その癌細胞を高レベルのＳＤＦ−１を発現する部位に向けさせる可能性があることを示唆している。 この仮説に一致して、ＳＤＦ−１は、リンパ節、肺、肝臓および骨髄などの乳癌転移の最も一般的な到達先で高度に発現される。さらに、ＣＸＣＲ４抗体治療が、全てがリンパ節および肺に転移した対照アイソタイプと比較した場合に、局所リンパ節への転移を阻害することが明らかになっている（Muller, et al., (2001)）。
【００１１】
癌細胞の移動調節に加えて、ＣＸＣＲ４−ＳＤＦ−１相互作用は、転移に必要な脈管化を調節し得る。ＣＸＣＲ４／ＳＤＦ−１相互作用またはＣＸＣＲ４／ＳＤＦ−１シグナル伝達経路の主要なＧ−タンパク質（Ｇαｉ）のいずれかの遮断によって、ＶＥＧＦ依存性新血管形成が阻害される。これらの結果は、内皮細胞の形態形成および血管新生の調節因子であるＶＥＧＦシグナル伝達系をＳＤＦ−１／ＣＸＣＲ４が制御することを示している。ＶＥＧＦおよびＭＭＰ類が癌の進行および転移に活発に寄与することを、多くの研究が明らかにしている。
【００１２】
いくつかのグループが、転移癌治療のための標的としてのＣＸＣＲ４を含むケモカイン類を確認している。例えばシェリング社（Schering Corporation）に対するＰＣＴ公開第ＷＯ０１／３８３５２号、プロテイン・デザイン・ラブス社（Protein Design Labs, Inc.）に対するＷＯ０４／０５９２８５およびブルガー（Burger）に対するＷＯ０４／０２４１７８に、ケモカイン受容体シグナル伝達を遮断することによる疾患の治療方法および転移の特異的阻害方法が記載されている。
【００１３】
ＣＸＣＲ４がＴ−指向性ＨＩＶ感染の主要な補助受容体であることから、ＣＸＣＲ４を標的とする化合物が、主としてＨＩＶの治療用に開発されてきた。例えば、久光製薬（Hisamitsu Pharmaceutical Co., Inc.）に対する米国特許第６４２９３０８号には、抗ＨＩＶ薬として用いられるＣＸＣＲ４タンパク質の発現を阻害するアンチセンスオリゴヌクレオチドが開示されている。トーマス・ジェファーソン大学に対するＰＣＴ公開第ＷＯ０１／５６５９１号には、ＣＸＣＲ４シグナル伝達を選択的に防止すると記載されているウィルスマクロファージ炎症タンパク質ＩＩのペプチド断片ならびにＨＩＶ−１の侵入に介在する上での補助受容体が記載されている。
【００１４】
ＣＸＣＲ４受容体のペプチド拮抗薬が開示されている。タマムラ（Tamamura）ら（Tamamura, et al. (2000) Bioorg. Med. Chem. Lett. 10: 2633-2637；Tamamura, et al. (2001) Bioorg. Med. Chem. Lett. 11: 1897-1902）は、特異的ペプチド系ＣＸＣＲ４阻害薬であるＴ１４０の同定を報告している。Ｔ１４０は、全てのＣＸＣＲ４の拮抗薬の中で抗ＨＩＶ活性およびＴ細胞系向性ＨＩＶ−１侵入の拮抗作用を有する１４残基ペプチドである（Tamamura, et al. (1998) Biochem. Biophys. Res. Commun. 253: 877-882）。その化合物は、例えばＴ−１４０のＣ末端をアミド化し、非塩基性極性アミノ酸で塩基性残基を置換することで、 Ｔ１４０と比較して細胞傷害性が低く、血清中での安定性が高いＴＮ１４００３を形成することによって総正電荷を減らすことによって、それの効力および生物学的利用能が高まるように変えられた。ＭＴ−４細胞でのＨＩＶ誘発細胞病原性の５０％保護に必要なＴＮ１４００３の濃度は、０．６ｎＭであり、対照的に４１０μＭでは５０％毒性が生じる。エモリー大学（Emory University）に対するＰＣＴ公開第ＷＯ０４／０８７０６８号には、ＣＸＣＲ４ペプチド拮抗薬、特にはＴＮ１４００３ならびに転移を治療するためのそれらの使用方法について記載されている。
【００１５】
他のペプチド系拮抗薬も開示されている。例えば、ブリティッシュ・コロンビア大学に対する欧州特許公開第１２８６６８４号および第１０６１９４４号には、天然ＳＤＦ−１リガンドから誘導される変性ペプチドＣＸＣＲ４拮抗薬を用いた、転移を含む疾患の治療方法が含まれている。武田薬品工業に対するＰＣＴ公開第ＷＯ０４／０２０４６２号では、乳癌および慢性関節リウマチの治療および予防のためのペプチドＣＸＣＲ４拮抗薬が提供される。一部において米国保健社会福祉省に対する米国特許出願第２００４／０１３２６４２号は、ポリペプチドＣＸＣＲ４阻害薬による腫瘍細胞の転移または成長を阻害する方法を含むものである。
【００１６】
進歩があったが、ペプチド阻害薬の吸収、分布、代謝、排泄または毒性特性が不十分であるために、それの臨床使用には制限があった。小型の非ペプチド薬が、この分野での医化学プログラムの主要な目標として残っている。
【００１７】
現時点で、金属キレート性サイクラム類およびビサイクラム類が、効果的にＣＸＣＲ４を遮断するいくつかの報告されている非ペプチド分子の一つを代表するものである（Onuffer and Horuk (2002) Trends Pharmacol Sd 23: 459-467.36）。これらの非ペプチド分子のうちの一つがＡＭＤ３１００であり、それはＣＸＣＲ４介在ウィルス侵入を遮断する抗ＨＩＶ薬として臨床試験に入っている（Donzella, et al. (1998) Nat Med 4: 72-77；Hatse, et al. (2002) FEBS Lett 527: 255-262；Fujii, et al. (2003) Expert Opin Investig Drugs 12: 185-195；Schols, et al. (1997) Antiviral Res 35: 147-156）。
【００１８】
【化１６】
2008526884.tif 000002
【００１９】
ＡＭＤ３１００がＣＸＣＲ４を介して調節される乳癌転移を効率的に遮断し得るか否かについては報告がない。より重要な点として、臨床試験によって、ＡＭＤ３１００の心臓関連の副作用が明らかになった（Scozzafava, et al. (2002) J Enzyme Inhib Med Chem 17: 69-7641）。実際に、ＡＭＤ３１００は最近、一部に心臓関連の副作用のために臨床試験が中止となった（Hendrix, et al. (2004) Journal of Acquired Immune Deficiency Syndromes 37(2)）。後者は、ＣＸＣＲ４機能を遮断する能力の結果ではなく、それの推定されている構造的金属封入能力によるものである。
【００２０】
他の含窒素二環式分子も、ＣＸＣＲ４拮抗薬として開発されてきた。呉羽化学工業に対する欧州特許公開第１４３１２９０号およびＰＣＴ公開ＷＯ０２／０９４２６１は、癌転移疾患などの各種疾患を治療する上で有用となり得るＣＸＣＲ４阻害薬に関するものである。
【００２１】
ヤマザキ（Yamamazi）らに対する米国特許公開２００４／０２５４２２１も、ＣＸＣＲ４拮抗薬である癌転移などの各種疾患を治療する化合物およびそれの使用を提供している。その化合物は、下記一般式のものである。
【００２２】
【化１７】
2008526884.tif 000003
式中、Ａは、Ａ１−Ｇ１−Ｎ（Ｒ１）−であり；Ａ１は、水素または置換されていても良い単環式もしくは多環式ヘテロ芳香環もしくは芳香環であり；Ｇ１は、単結合または−Ｃ（Ｒ２）（Ｒ３）−であり；Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、置換されていても良い炭化水素であることができ；Ｗは、置換されていても良い炭化水素または複素環であり；ｘは−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−であり；ｙは−Ｃ（＝Ｏ）−であり ；Ｄ１は、水素原子、多環式芳香環を有するアルキルまたはアミンである。
【００２３】
アノルメド（AnorMED）に対するＰＣＴ公開ＷＯ００／５６７２９および米国特許第６７５０３４８号には、ある種の複素環小分子ＣＸＣＲ４結合化合物について記載されており、これらがＨＩＶ感染、腫瘍発生、乾癬またはアレルギーの治療に有用であることが述べられている。その化合物は下記一般式のものである。
【００２４】
【化１８】
2008526884.tif 000004
式中、Ｗは、窒素または炭素原子であることができ；Ｙは非存在であるか水素であり；Ｒ１〜Ｒ７は水素または直鎖、分岐もしくは環状のＣ１−６アルキルであることができ；Ｒ８は、 置換複素環もしくは芳香族基であり；Ａｒは、芳香環またはヘテロ芳香環であり；Ｘは指定の環構造である。
【００２５】
アノルメドに対するＰＣＴ公開ＷＯ２００４／０９１５１８にも、ＣＸＣＲ４受容体に結合するある種の置換含窒素化合物が記載されている。その化合物は、前駆細胞および／または幹細胞を増加させ、白血球の生成を促進し、抗ウィルス特性を示す効果を有すると記載されている。アノルメドに対するＰＣＴ公開ＷＯ２００４／０９３８１７でも、置換複素環ＣＸＣＲ４拮抗薬が開示されており、それらが炎症状態を改善し、前駆細胞を増加させ、そして白血球数を高める上で有用であると記載されている。同様に、アノルメドに対するＰＣＴ公開ＷＯ２００４／１０６４９３には、３つの懸垂基によって囲まれた核窒素原子からなるＣＸＣＲ４およびＣＣＲ５受容体に結合する複素環化合物が記載されており、その場合に３個の懸垂基のうちの２個は好ましくはベンズイミダゾリルメチルおよびテトラヒドロキノリルであり、第３の懸垂基は窒素を有し、別の環を有していても良い。その化合物は、ヒト免疫不全ウィルス（ＨＩＶ）による標的細胞に対する保護効果を示す。
【００２６】
ＣＸＣＲ４受容体が転移シグナル伝達ならびに多くの他の病的状態において示唆されることを考慮すると、新たな効果的受容体拮抗薬を確認することが重要である。
【００２７】
従って、本発明の一つの目的は、ＣＸＣＲ４受容体シグナル伝達を阻害する新たな化合物、方法および組成物を提供することにある。
【００２８】
本発明の別の目的は、ＣＸＣＲ４受容体に結合し、それの天然リガンドへの結合を妨害する化合物、方法および組成物を提供することにある。
【００２９】
本発明のより具体的な目的は、増殖障害の治療、特には癌転移の阻害のための化合物、方法および組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００３０】
病原的もしくは望ましくないＣＸＣＲ４受容体活性および／またはシグナル伝達に関連する疾患の治療もしくは予防のための化合物、方法および医薬組成物が提供される。特に、本明細書で提供される化合物が、ＣＸＣＲ４受容体に対する天然ＳＤＦ−１リガンドの結合を妨害し、受容体の活性化およびその後の下流シグナル伝達経路を阻害するものと考えられている。この経路に基づいて本発明は、過剰増殖性疾患などの病原性の状態の治療、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移に関連する細胞移動および分化の低減のための化合物、方法および医薬組成物を提供する。その化合物、方法および組成物は、有効治療量の式（Ｉ）〜（ＸＶＩＩ）の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグを含む。
【００３１】
第１の主たる実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のための方法、化合物および医薬組成物が提供され、それには下記式Ｉの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが含まれる。
【００３２】
【化１９】
2008526884.tif 000005
式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは独立に、Ｈ、Ｒ、アシル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＲ、ＮＨ２、ＮＨＲ、ＮＲ２、ＳＲ、ＳＲ、Ｓ２Ｒ、Ｓ−ＮＨＲ、Ｓ２−ＮＨＲ、Ｓ−ＮＲＲ′、Ｓ２−ＮＲＲ′、ＮＨアシル、Ｎ（アシル）２、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｒから選択され、ＲおよびＲ′は独立に、直鎖、分岐もしくは環状アルキルまたはアラルキル基ならびにアリールおよびヘテロアリール基から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は独立に、Ｈ、直鎖、分岐もしくは環状アルキル、アラルキル、アリールヘテロアリール、アシル（ＲＣ−）およびイミドイル（ＲＣ（ＮＨ）−またはＲＣ（ＮＲ′）−）基から選択される。
【００３３】
別の実施形態では、前記化合物は下記式を有する。
【００３４】
【化２０】
2008526884.tif 000006
式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、ＵおよびＶは独立に、Ｈ、Ｒ、アシル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＲ、ＮＨ２、ＮＨＲ、ＮＲ２、ＳＲ、ＳＲ、Ｓ２Ｒ、Ｓ−ＮＨＲ、Ｓ２−ＮＨＲ、Ｓ−ＮＲＲ′、Ｓ２−ＮＲＲ′、ＮＨアシル、Ｎ（アシル）２、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｒから選択され、各ＲおよびＲ′は独立に、直鎖、分岐もしくは環状アルキルまたはアラルキル基ならびにアリールおよびヘテロアリール基から選択され；
Ｒａは独立に、Ｒ、アシル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＲ、ＮＨ２、ＮＨＲ、ＮＯ２、ＮＲ２、ＳＯ２、ＳＲ、Ｓ２Ｒ、Ｓ−ＮＨＲ、Ｓ２−ＮＨＲ、Ｓ−ＮＲＲ′、Ｓ２−ＮＲＲ′、ＮＨアシル、Ｎ（アシル）２、Ｃ（Ｏ）Ｒ、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｒから選択され；
ｎ、ｎ′およびｎ″は独立に、０、１、２、３、４または５であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は独立に、Ｈ、直鎖、分岐もしくは環状アルキル、アラルキル、アリールヘテロアリール、アシル（ＲＣ−）およびイミドイル（ＲＣ（ＮＨ）−またはＲＣ（ＮＲ′）−）基から選択される。
【００３５】
別の実施形態では、前記化合物は下記式を有する。
【００３６】
【化２１】
2008526884.tif 000007
式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、ＵおよびＶは独立に、Ｈ、Ｒ、アシル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＲ、ＮＨ２、ＮＨＲ、ＮＲ２、ＳＲ、ＳＲ、Ｓ２Ｒ、Ｓ−ＮＨＲ、Ｓ２−ＮＨＲ、Ｓ−ＮＲＲ′、Ｓ′−ＮＲＲ′、ＮＨアシル、Ｎ（アシル）２、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｒから選択され、各ＲおよびＲ′は独立に、直鎖、分岐もしくは環状アルキルまたはアラルキル基ならびにアリールおよびヘテロアリール基から選択され；
Ｒａ、ｎ、ｎ′およびｎ″ならびにＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りである。
【００３７】
第２の主たる実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のための方法、化合物および医薬組成物が提供され、それには下記式ＩＩａもしくはＩＩｂの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが含まれる。
【００３８】
【化２２】
2008526884.tif 000008
式中、
各Ｋは独立にＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
ＡおよびＢは、独立に−ＣＲ＝、−ＣＲ３Ｒ４−、−ＣＲ３＝、−Ｎ＝、−Ｏ−、−ＮＲ３−、−Ｓ−、−ＣＲ３＝ＣＲ４−、−ＣＲ３Ｒ４−ＣＲ５Ｒ６−、−ＣＲ３＝Ｎ−、−ＣＲ０Ｒ４−ＮＲ５−、−Ｎ＝ＣＲ３−および−ＮＲ３−ＣＲ４Ｒ５−から選択される１原子および２原子連結部であり；
ＲおよびＲ′は上記で定義の通りであり；
−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は独立に、−ＮＲ３−ＣＲ４−または−Ｎ＝Ｃ−のいずれかであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は独立に、Ｈ、直鎖、分岐もしくは環状アルキル、アラルキル、アリールヘテロアリール、アシル（ＲＣ−）およびイミドイル（ＲＣ（ＮＨ）−またはＲＣ（ＮＲ′）−）基から選択される。
【００３９】
第３の主たる実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のための方法、化合物および医薬組成物が提供され、それには下記式ＩＩＩの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが含まれる。
【００４０】
【化２３】
2008526884.tif 000009
式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ、Ｒ′、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りである。
【００４１】
第４の主たる実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のための方法、化合物および医薬組成物が提供され、それには下記式ＩＶａもしくはＩＶｂの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが含まれる。
【００４２】
【化２４】
2008526884.tif 000010
式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ、Ｒ′、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
ＡおよびＢおよび−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は上記で定義の通りである。
【００４３】
第５の主たる実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のための方法、化合物および医薬組成物が提供され、それには下記式Ｖａ、ＶｂもしくはＶｃの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが含まれる。
【００４４】
【化２５】
2008526884.tif 000011
式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ、Ｒ′、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りである。
【００４５】
第６の主たる実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のための方法、化合物および医薬組成物が提供され、それには下記式ＶＩａもしくはＶＩｂの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが含まれる。
【００４６】
【化２６】
2008526884.tif 000012
式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ、Ｒ′、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
ＡおよびＢおよび−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は上記で定義の通りである。
【００４７】
第７の主たる実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のための方法、化合物および医薬組成物が提供され、それには下記式ＶＩＩの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが含まれる。
【００４８】
【化２７】
2008526884.tif 000013
式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りであり；
ＭはＯ、ＳまたはＮＲ３である。
【００４９】
第８の主たる実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のための方法、化合物および医薬組成物が提供され、それには下記式ＶＩＩＩａもしくはＶＩＩＩｂの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが含まれる。
【００５０】
【化２８】
2008526884.tif 000014
式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
ＡおよびＢおよび−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は上記で定義の通りであり；
Ｍは、Ｏ、ＳまたはＮＲ３である。
【００５１】
第９の主たる実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のための方法、化合物および医薬組成物が提供され、それには下記式ＩＸの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが含まれる。
【００５２】
【化２９】
2008526884.tif 000015
式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りであり；
Ａ＊は独立に、下記式ａ〜ｇ：
【００５３】
【化３０】
2008526884.tif 000016
からなる群から選択され；
ＭはＯ、ＳまたはＮＲ３である。
【００５４】
第１０の主たる実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のための方法、化合物および医薬組成物が提供され、それには下記式Ｘの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが含まれる。
【００５５】
【化３１】
2008526884.tif 000017
式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
ＡおよびＢおよび−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は上記で定義の通りであり；
Ａ＊は上記で定義の通りであり；
Ｍは上記で定義の通りである。
【００５６】
第１１の主たる実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のための方法、化合物および医薬組成物が提供され、それには下記式ＸＩの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが含まれる。
【００５７】
【化３２】
2008526884.tif 000018
式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りである。
【００５８】
第１２の主たる実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のための方法、化合物および医薬組成物が提供され、それには下記式ＸＩＩの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが含まれる。
【００５９】
【化３３】
2008526884.tif 000019
式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
ＡおよびＢおよび−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は上記で定義の通りである。
【００６０】
第１３の主たる実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のための方法、化合物および医薬組成物が提供され、それには下記式ＸＩＩＩの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが含まれる。
【００６１】
【化３４】
2008526884.tif 000020
式中、
Ｋ、Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りであり；
「スペーサー」は独立に、結合、直鎖もしくは分岐Ｃ１〜Ｃ５アルキル、Ｃ２〜Ｃ５アルケニル、Ｃ２〜Ｃ５アルキニル、Ｃ１〜Ｃ５アルコキシ、Ｃ２〜Ｃ５アルケノキシおよびＣ２〜Ｃ５アルキノキシであり、前記アルキル基はヘテロ原子（Ｎ、ＯまたはＳなど）によって置換されていても良く、それには−ＣＨ２−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−ＯＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＯＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−ＯＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−（ＣＨ２）ｎ−ＯＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）ｎ−、ＣＨ２−ＯＨ（ＣＨ３）−Ｏ−ＣＨ２、−（ＣＨ２）ｎ−、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−、−（ＣＨ２）ｎ−Ｎ−、−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−、−（ＣＨ２）ｎ−Ｓ−、−（ＣＨ２Ｏ）−、−（ＯＣＨ２）−、−（ＳＣＨ２）−、−（ＣＨ２Ｓ−）、−（アリール−Ｏ）−、−（Ｏ−アリール）−、−（アルキル−Ｏ）−、−（Ｏ−アルキル）−などがあるがそれらに限定されるものではなく、ｎは独立に０、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０である。
【００６２】
第１４の主たる実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のための方法、化合物および医薬組成物が提供され、それには下記式ＸＩＶａもしくはＸＩＶｂの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが含まれる。
【００６３】
【化３５】
2008526884.tif 000021
式中、
Ｋ、Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りであり；
「スペーサー」は上記で定義の通りであり；
「複素環」および「ヘテロ芳香族」は本明細書で定義の通りである。
【００６４】
本発明の化合物は、天然リガンドとのＣＸＣＲ４受容体相互作用を阻害する上で特に有用である。１実施形態では、細胞を式（Ｉ）〜（ＸＶＩＩ）の化合物と接触させることでＣＸＣＲ４介在障害を阻害する方法が提供される。上記の化合物は、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防において特に有用である。
【００６５】
１実施形態では、悪性細胞の転移の予防方法であって、宿主に対して式（Ｉ）〜（ＸＶＩＩ）の化合物を投与する段階を有する方法が提供される。その悪性細胞は腫瘍細胞であることができる。ある種の実施形態では、前記化合物を宿主に提供してから、第２の活性化合物で腫瘍を治療することができる。別の実施形態では、癌に関して治療を行ったことがある患者に対して前記化合物を提供して、再発の可能性を低下させるか、特定の腫瘍に関連する死亡率を下げる。式（Ｉ）〜（ＸＶＩＩ）の化合物は、別の活性化合物と併用して提供することもできる。
【００６６】
ある特定の実施形態では、悪性細胞の転移を予防する方法が提供され、それには細胞を式ＸＶの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグと接触させる段階が含まれる。
【００６７】
【化３６】
2008526884.tif 000022
【００６８】
ある特定の下位実施形態では、前記化合物は式ＸＶの化合物の塩、特には塩化物塩である。
【００６９】
別の特定の実施形態では、悪性細胞の転移を予防する方法が提供され、それには細胞を式ＸＶＩの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグと接触させる段階が含まれる。
【００７０】
【化３７】
2008526884.tif 000023
【００７１】
別の特定の実施形態では、悪性細胞の転移を予防する方法が提供され、それには細胞を式ＸＶＩＩの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグと接触させる段階が含まれる。
【００７２】
【化３８】
2008526884.tif 000024
【００７３】
別の実施形態では、処置を必要とする宿主に対して式（Ｉ）〜（ＸＶＩＩ）の化合物を投与することで、転移などのＣＸＣＲ４が介在する障害を治療する方法が提供される。ある種の実施形態では、前記増殖性障害は癌であり、特定の下位実施形態では、その障害は転移癌である。本発明の化合物を、処置を必要とする宿主に投与することで、転移の発生率を低下させることができる。特定の実施形態では、前記疾患は乳癌、脳腫瘍、膵臓癌、卵巣癌、特には卵巣上皮癌、前立腺癌、腎臓癌または非小細胞肺癌である。ある下位実施形態では、前記化合物は、別の活性化合物と併用投与または交互投与される。
【００７４】
別の実施形態では、本発明は、細胞を本明細書に記載の化合物と接触させることで新血管形成、特にはＶＥＧＦ依存性新血管形成を低下させる方法を提供する。その細胞は、ヒトなどの宿主動物でのものであることができる。
【００７５】
別の実施形態では、式（Ｉ）〜（ＸＶＩＩ）の化合物のうちの少なくとも一つを含む医薬組成物が提供される。ある種の実施形態では、少なくとも第２の活性化合物が組成物中に含まれる。第２の活性化合物は、特には原発腫瘍に対して活性な化学療法薬であることができる。
【００７６】
１実施形態では、式（Ｉ）〜（ＸＶＩＩ）の化合物を用いて、ＣＸＣＲ４受容体を有する幹細胞および前駆細胞の産生、増殖および単離を刺激する。そのような細胞には、骨髄前駆細胞および／または幹細胞または心臓組織のための前駆細胞などがあるが、これらに限定されるものではない。
【００７７】
別の実施形態では、式（Ｉ）〜（ＸＶＩＩ）の化合物を宿主に投与する段階を有する、血管系疾患、炎症疾患および変性疾患の治療方法が提供される。
【００７８】
別の実施形態では、可能性がある候補薬剤のスクリーニング方法が提供される。その方法は、ＣＸＣＲ４受容体に結合した時に検出可能な信号を有する標識ペプチドに基づくＣＸＣＲ４拮抗薬を提供する段階；ＣＸＣＲ４受容体を、既知濃度の少なくとも１種類の被験分子と接触させて、試験サンプルを形成する段階；前記試験サンプルをペプチド系拮抗薬と接触させる段階；別個に、前記ペプチド系拮抗薬を被験分子を含まないサンプルに接触させて対照サンプルを形成する段階；前記試験サンプルからのシグナルを前記対照サンプルからのシグナルと比較する段階を有する。ある特定の下位実施形態では、前記ペプチド系拮抗薬は、ＴＮ１４００３から誘導されるものである（エモリー大学に対するＰＣＴ公開第ＷＯ０４／０８７０６８号に記載されている）。別の下位実施形態では、前記拮抗薬をビオチン分子で標識し、そのビオチン標識拮抗薬がストレプトアビジン結合シグナル分子と接触した時にシグナルが誘発される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００７９】
図面の簡単な説明
図１には、ＴＮ１４００３の特異性を示す染色細胞およびブロットの画像を示してある。Ａ：ＴＮ１４００３のＣＸＣＲ４への結合が、４００ｎｇ／ｍＬのＳＤＦ−１の前インキュベーションによって遮断された。細胞を、ビオチン標識対照ペプチド（ａ）またはビオチン標識ＴＮ１４００３（ｂおよびｃ）およびストレプトアビジン結合ローダミン（赤）を用いることで免疫染色した。細胞をＳＤＦ−１とともに１０分間前インキュベートし、次に氷冷アセトン中で固定した（ｃ）。Ｂ：ノーザンブロット分析およびウェスタンブロット分析結果は、乳癌細胞系ＭＤＡ−ＭＢ−２３１およびＭＤＡ−ＭＢ−４３５からのＣＸＣＲ４の異なる発現レベルを示している。両方に対する負荷対照として、β−アクチンを用いた。Ｃ：ビオチン化ＴＮ１４００３およびストレプトアビジン結合Ｒ−ＰＥ（赤色）を用いることによるＭＤＡ−ＭＢ−２３１およびＭＤＡ−ＭＢ−４３５細胞系からの細胞表面上のＣＸＣＲ４タンパク質の共焦点顕微鏡写真。核を、サイトックス・ブルー（cytoxblue）によって対比染色した。Ｄ：乳癌患者および正常乳房組織のパラフィン包埋組織切片に関するビオチン化ＴＮ１４００３によるＣＸＣＲ４の代表的免疫蛍光染色。
【００８０】
図２は、Ａｋｔのリン酸化を示すウェスタンブロットの画像である。１００ｎｇ／ｍＬのＳＤＦ−１とともにＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を３０分間インキュベートすることで、Ａｋｔのリン酸化を刺激した。この活性化は、用量依存的にＴＮ１４００３またはＡＭＤ３１００で遮断された。
【００８１】
図３は、染色細胞およびＣＸＣＲ４ｓｉＲＮＡでトランスフェクションされたＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の侵襲を示すブロットの画像を示す図である。Ａ：マトリゲル侵襲アッセイで対照ｓｉＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ１単独またはｓｉＲＮＡ２単独によってトランスフェクションされたＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の侵襲のＨ＆Ｅ染色。対照と比較したｓｉＲＮＡ１＋２、ｓｉＲＮＡ１およびｓｉＲＮＡ２でトランスフェクションされたＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の侵襲性は、それぞれ１６％（Ｐ＜０．０００３）、３９％（Ｐ＜０．００１４）および５１％（Ｐ＜０．００２６）である。Ｂ：ＶＥＧＦ、ＨＩＦ−１およびＣＤ４４ｍＲＮＡレベル。負荷対照としてアクチンを用いた。
【００８２】
図４は、細胞および肺の画像、ならびにイン・ビボでの乳癌転移の阻害に対するＣＸＣＲ４ｓｉＲＮＡの効果のグラフを示す図である。Ａ：各群からの一つの代表的なものの肺およびそれのＨ＆Ｅ染色の写真である。Ｂ：対照群と比較した、ｓｉＲＮＡ処理群からのヒト細胞のみを認識するプライマーを用いたｈＨＰＲＴの平均リアルタイムＰＣＲ（ＲＴ−ＰＣＲ）。１：群２；２：群２；３：群３；４：群４。Ｃ：各処理群のヒトＣＸＣＲ４平均発現のパーセントは、対照群のものとの比較である。
【００８３】
図５は、群１（対照ｓｉＲＮＡ）および群２（ｓｉＲＮＡ１＋２）における動物のＦＤＧ−ＰＥＴの代表的画像を示す図であり、イン・ビボでの乳癌転移の阻害に対するＣＸＣＲ４ｓｉＲＮＡの効果を示している。Ａ：群１（左３匹のマウス）および群２（右３匹のマウス）からの６匹の代表的なマウスの最大強度投射。Ｂ：Ａにおける同じ動物からの肺領域からの冠状断面画像。Ｃ：Ａにおける同じ動物からの肺領域からの体軸横断断面画像。
【００８４】
図６はＨＲＥ活性のグラフである。そのグラフは、ＨＲＥ−ＬｕｃＭＢ−２３１細胞がＣＸＣＲ４ｓｉＲＮＡまたはＨＩＦ−１ｓｉＲＮＡのいずれかによって抑制することができる通常酸素状態での中等度に高いＨＲＥ活性を有することを示している。ＨＲＥ活性は、ＣＸＣＲ４ｓｉＲＮＡまたはＨＩＦ−１ｓｉＲＮＡのいずれかによって抑制することもできる低酸素状態で２．５倍上昇する。
【００８５】
図７は、レポーターとしてビオチン標識ＴＮ１４００３を用いる薬剤スクリーニング方法を示す細胞の蛍光顕微鏡写真画像である。
【００８６】
図８は、染色細胞の蛍光顕微鏡写真画像である。ビオチン標識ＴＮ１４００３を用いて、各種濃度のＷＺＺＬ８１１Ｓとともに前インキュベートした細胞からのＣＸＣＲ４タンパク質を検出した。結果は、ＷＺＺＬ８１１ＳのＩＣ５０が１ｎＭ未満であることを示している。
【００８７】
図９は、ＷＺＺＬ８１１Ｓの化学構造の表示である。
【００８８】
図１０は、細胞におけるマトリゲル侵襲およびＡｋｔリン酸化のグラフおよび代表的ブロットである。Ａ：ＷＺＺＬ８１１Ｓによるイン・ビトロでのＭＤＡ−ＭＢ−２３１のＣＸＣＲ４／ＳＤＦ−１介在侵襲の阻害。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１のＣＸＣＲ４／ＳＤＦ−１介在侵襲は、２ｎＭのＴＮ１４００３またはＷＺＺＬ８１１Ｓのいずれかによって遮断された。Ｂ：３０分間にわたって１００ｎｇ／ｍＬのＳＤＦ−１とともにＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞をインキュベーションすることでＡｋｔのリン酸化が刺激され、それはＷＺＺＬ８１１Ｓによって用量依存的に遮断された。
【００８９】
図１１は、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の骨転移を示すマウスのＸ線画像である。Ａ：ＦＤＧ−ＰＥＴ（左、体軸横断；右、冠状）。Ｂ：Ｘ線マンモグラフィー。脛骨内に腫瘍細胞を注入することで、動物異種移植片を発生させた。
【００９０】
図１２は、実施例７に記載のマウス動物のＦＤＧ−ＰＥＴ画像である。
【００９１】
図１３は、実施例８に記載の方法に従って行われるＨＰＬＣ分析のグラフである。
【００９２】
図１４は、内皮毛細管形成アッセイの画像およびグラフである。Ａ）は、内皮細胞管形成の顕微鏡写真である。Ｂ）は、各処置群における管数のグラフである。
【００９３】
図１５は、指定量のＷＺＺＬ８１１Ｓ、ＷＺ４０またはＷＺ４１Ｓとともにインキュベーションした後に測定されたｐ２７レベルのグラフである。
【００９４】
図１６は、指定量のＷＺ４０とともにインキュベートし、ＳＨＩＶで２、４または５日間感染させた後に測定したｐ２７レベルのグラフである。
【００９５】
図１７は、全身投与後の指定時点で測定したＷＺＺＬ８１１Ｓ量のグラフであり、ＷＺＺＬ８１１ＳおよびＷＺ４０のイン・ビボでの安定性を示す図である。Ａ）は、強制経口投与によって４００ｍｇ／ｋｇの化合物を投与した後の指定時点でのＷＺＺＬ８１１Ｓのレベルのグラフである。Ｂ）は、４００ｍｇ／ｋｇの腹腔内注射から１５、３０、６０および９０分後のＷＺ４０のレベルのグラフである。
【００９６】
ＣＸＣＲ４受容体の効果を調節する化合物、方法および組成物が提供される。これらの化合物を用いて、ＣＸＣＲ４が関与する腫瘍転移またはいずれか他の疾患、特には過剰増殖性疾患を治療することができる。
【００９７】
本発明の例示的化合物は、公知のＣＸＣＲ４拮抗薬であるＡＭＤ３１００（金属キレート形成性ビシクラム（bicyclam））およびＴ１４０（ペプチド拮抗薬）の構造的比較を用いて同定した。ＣＸＣＲ４のロドプシンに基づく相同モデルは、ＡＭＤ３１００は、２つのアスパラギン酸によるＣＸＣＲ４／ＳＤＦ−１結合と相互作用することから弱い部分作動薬であるが、ペプチド系ＣＸＣＲ４拮抗薬であるＴ１４０（ＴＮ１４００３と同様）は細胞表面に対して近位である疎水性核の細胞外ドメインおよび領域でＣＸＣＲ４のＳＤＦ−１結合部位に強力に結合することを示している。この構造データを用いて、分子フレームワークを通じて複数窒素を有する化合物のライブラリを形成したが、構造的にはＡＭＤ３１００と異なっていた。これら化合物を、ＣＸＣＲ４へのＳＤＦ−１結合に関して、ペプチドリガンドＴ１４０と競合する能力についてスクリーニングした。
【００９８】
本明細書に記載の化合物は、ＣＸＣＲ４受容体と相互作用し、それの活性化を阻害する能力を有する。例示的化合物は、公知のＣＸＣＲ４拮抗薬と比較して、ＣＸＣＲ４受容体およびＳＤＦ−１依存性シグナル伝達の阻害における生物学的利用能および効力が高い。理論に拘束されるものではないが、これら化合物は、ＳＤＦ−１−ＣＸＣＲ４相互作用を阻害する能力を有することで転移を阻害し得るものであり、それは細胞標的化を低下させ得るものであり、ＶＥＧＦ依存性の内皮細胞形態形成および血管新生をも低下させ得る。この内皮細胞成長は、腫瘍の転移における重要な事象である。
【００９９】
活性化合物ならびにそれの生理的に許容される塩およびプロドラッグ
第１の主たる実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のために、下記式Ｉの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが提供される。
【０１００】
【化３９】
2008526884.tif 000025
式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは独立に、Ｈ、Ｒ、アシル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＲ、ＮＨ２、ＮＨＲ、ＮＲ２、ＳＲ、ＳＲ、Ｓ２Ｒ、Ｓ−ＮＨＲ、Ｓ２−ＮＨＲ、Ｓ−ＮＲＲ′、Ｓ２−ＮＲＲ′、ＮＨアシル、Ｎ（アシル）２、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｒから選択され、ＲおよびＲ′は独立に、直鎖、分岐もしくは環状アルキルまたはアラルキル基ならびにアリールおよびヘテロアリール基から選択され；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は独立に、Ｈ、直鎖、分岐もしくは環状アルキル、アラルキル、アリールヘテロアリール、アシル（ＲＣ−）およびイミドイル（ＲＣ（ＮＨ）−またはＲＣ（ＮＲ′）−）基から選択される。
【０１０１】
式Ｉの１下位実施形態では、ＹおよびＺはそれぞれ水素である。あるいは、ＷおよびＸはそれぞれ水素である。さらに別の下位実施形態では、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺはいずれも水素である。
【０１０２】
ゾウら（Zou, et al. (2003) Acta Cryst. E59: online 1312-o1313）は、四座配位子となり得る１，４−ビス−（ピリジン−２−アミノメチル）ベンゼンの合成について記載している。ゾウは、この化合物が金属イオンに対する配位子となり得ると記載している。この文献では、当該化合物を疾患治療、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移の治療に用いることが可能であるという示唆はない。
【０１０３】
１下位実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のために、下記式Ｉ−１〜Ｉ−１０の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが提供される。
【０１０４】
【化４０】
2008526884.tif 000026
式中、
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りである。
【０１０５】
別の下位実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特には癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のために、下記式Ｉ−１１〜Ｉ−２０の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが提供される。
【０１０６】
【化４１】
2008526884.tif 000027
式中、
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りである。
【０１０７】
第２の主たる実施形態では、本発明は、下記式ＩＩａもしくはＩＩｂの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグを提供する。
【０１０８】
【化４２】
2008526884.tif 000028
式中、
各Ｋは独立にＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
ＡおよびＢは、独立に−ＣＲ＝、−ＣＲ３Ｒ４−、−ＣＲ３＝、−Ｎ＝、−Ｏ−、−ＮＲ３−、−Ｓ−、−ＣＲ３＝ＣＲ４−、−ＣＲ３Ｒ４−ＣＲ５Ｒ６−、−ＣＲ３＝Ｎ−、−ＣＲ０Ｒ４−ＮＲ５−、−Ｎ＝ＣＲ３−および−ＮＲ３−ＣＲ４Ｒ５−から選択される１原子および２原子連結部であり；
−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は独立に、−ＮＲ３−ＣＲ４−または−Ｎ＝Ｃ−のいずれかであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は独立に、Ｈ、直鎖、分岐もしくは環状アルキル、アラルキル、アリールヘテロアリール、アシル（ＲＣ−）およびイミドイル（ＲＣ（ＮＨ）−またはＲＣ（ＮＲ′）−）基から選択される。
【０１０９】
式ＩＩの１下位実施形態では、ＹおよびＺはそれぞれ水素である。あるいは、ＷおよびＸはそれぞれ水素である。さらに別の下位実施形態では、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺはいずれも水素である。
【０１１０】
１下位実施形態では、本発明は下記式ＩＩ−１〜ＩＩ−１８の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグを提供する。
【０１１１】
【化４３】
2008526884.tif 000029
2008526884.tif 000030
式中、
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ａおよび−Ｄ−Ｅ−は上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りである。
【０１１２】
別の下位実施形態では、本発明は下記式ＩＩ−１９〜ＩＩ−３０の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグを提供する。
【０１１３】
【化４４】
2008526884.tif 000031
式中、
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ａ、Ｂ、−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りである。
【０１１４】
第３の主たる実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特には癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のために、下記式ＩＩＩの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが提供される。
【０１１５】
【化４５】
2008526884.tif 000032
式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りである。
【０１１６】
式ＩＩＩの１下位実施形態では、ＹおよびＺはそれぞれ水素である。あるいは、ＷおよびＸはそれぞれ水素である。さらに別の下位実施形態では、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺはいずれも水素である。
【０１１７】
レイエスら（Reyes, et al. (2002) Tetrahedron 58:8573-8579）は、原料のピリジニウムＮ−アミニド類からのある種のポリアミン類の合成について記載している。これらの化合物に帰する具体的な機能については何ら記載されていない。
【０１１８】
１下位実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特には癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のために、下記式ＩＩＩ−１〜ＩＩＩ−１０の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグが提供される。
【０１１９】
【化４６】
2008526884.tif 000033
式中、
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りである。
【０１２０】
別の下位実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特には癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のために、下記式ＩＩＩ−１１〜ＩＩＩ−２０の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグが提供される。
【０１２１】
【化４７】
2008526884.tif 000034
式中、
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りである。
【０１２２】
第４の主たる実施形態では、本発明は、下記式ＩＶａもしくはＩＶｂの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグを提供する。
【０１２３】
【化４８】
2008526884.tif 000035
式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
ＡおよびＢおよび−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は上記で定義の通りである。
【０１２４】
式ＩＶａもしくはＩＶｂの１下位実施形態では、ＹおよびＺはそれぞれ水素である。あるいは、ＷおよびＸはそれぞれ水素である。さらに別の下位実施形態では、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺはいずれも水素である。
【０１２５】
１下位実施形態では、本発明は下記式ＩＶ−１〜ＩＶ−１２の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグを提供する。
【０１２６】
【化４９】
2008526884.tif 000036
式中、
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
Ａおよび−Ｄ−Ｅ−は上記で定義の通りである。
【０１２７】
別の下位実施形態では、本発明は下記式ＩＶ−１３〜ＩＶ−２０の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグを提供する。
【０１２８】
【化５０】
2008526884.tif 000037
式中、
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
Ａ、Ｂ、−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は上記で定義の通りである。
【０１２９】
第５の主たる実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特には癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のために、下記式Ｖａ、ＶｂもしくはＶｃの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグが提供される。
【０１３０】
【化５１】
2008526884.tif 000038
2008526884.tif 000039
式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りである。
【０１３１】
式Ｖａ〜ｃの１下位実施形態では、ＹおよびＺはそれぞれ水素である。あるいは、ＷおよびＸはそれぞれ水素である。さらに別の下位実施形態では、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺはいずれも水素である。
【０１３２】
１下位実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特には癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のために、下記式Ｖ−１〜Ｖ−３の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグが提供される。
【０１３３】
【化５２】
2008526884.tif 000040
式中、
各Ｋは独立にＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りである。
【０１３４】
別の下位実施形態では、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特には癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のために、下記式Ｖ−４〜Ｖ−９の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグが提供される。
【０１３５】
【化５３】
2008526884.tif 000041
式中、
各Ｋは独立にＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りである。
【０１３６】
第６の主たる実施形態では、本発明は、下記式ＶＩａもしくはＶＩｂの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグを提供する。
【０１３７】
【化５４】
2008526884.tif 000042
式中、
各Ｋは独立にＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
ＡおよびＢおよび−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は上記で定義の通りである。
【０１３８】
式ＶＩａもしくはｂの１下位実施形態では、ＹおよびＺはそれぞれ水素である。あるいは、ＷおよびＸはそれぞれ水素である。さらに別の下位実施形態では、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺはいずれも水素である。
【０１３９】
１下位実施形態では、式ＶＩ−１〜ＶＩ−６の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが提供される。
【０１４０】
【化５５】
2008526884.tif 000043
式中、
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
Ａおよび−Ｄ−Ｅ−は上記で定義の通りである。
【０１４１】
別の下位実施形態では、式ＶＩ−７〜ＶＩ−１０の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが提供される。
【０１４２】
【化５６】
2008526884.tif 000044
式中、
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
ＡおよびＢならびに−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は上記で定義の通りである。
【０１４３】
第７の主たる実施形態では、本発明は、下記式ＶＩＩの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグを提供する。
【０１４４】
【化５７】
2008526884.tif 000045
式中、
各Ｋは独立にＮまたはＣＨであり；
Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りであり；
ＭはＯ、ＳまたはＮＲ３である。
【０１４５】
式ＶＩＩの１下位実施形態では、ＹおよびＺはそれぞれ水素である。あるいは、ＷおよびＸはそれぞれ水素である。さらに別の下位実施形態では、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺはいずれも水素である。
【０１４６】
１下位実施形態では、式ＶＩＩ−１〜ＶＩＩ−１０の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが提供される。
【０１４７】
【化５８】
2008526884.tif 000046
式中、
Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りであり；
ＭはＯ、ＳもしくはＮＲ３である。
【０１４８】
別の下位実施形態では、式ＶＩＩ−１１〜ＶＩＩ−２０の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが提供される。
【０１４９】
【化５９】
2008526884.tif 000047
式中、
Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りであり；
Ｍは、Ｏ、ＳまたはＮＲ３である。
【０１５０】
第８の主たる実施形態では、本発明は、下記式ＶＩＩＩａもしくはＶＩＩＩｂの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグを提供する。
【０１５１】
【化６０】
2008526884.tif 000048
式中、
各Ｋは独立にＮまたはＣＨであり；
Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
ＡおよびＢならびに−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は上記で定義の通りであり；
ＭはＯ、ＳまたはＮＲ３である。
【０１５２】
式ＶＩＩＩａもしくはＶＩＩＩｂの１下位実施形態では、ＹおよびＺはそれぞれ水素である。あるいは、ＷおよびＸはそれぞれ水素である。さらに別の下位実施形態では、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺはいずれも水素である。
【０１５３】
１下位実施形態では、式ＶＩＩＩ−１〜ＶＩＩＩ−１２の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが提供される。
【０１５４】
【化６１】
2008526884.tif 000049
式中、
Ｍ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
Ａおよび−Ｄ−Ｅ−は上記で定義の通りである。
【０１５５】
別の下位実施形態では、式ＶＩＩＩ−１３〜ＶＩＩＩ−２０の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが提供される。
【０１５６】
【化６２】
2008526884.tif 000050
式中、
Ｍ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
Ａ、Ｂ、−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は上記で定義の通りである。
【０１５７】
第９の主たる実施形態では、本発明は、下記式ＩＸの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグを提供する。
【０１５８】
【化６３】
2008526884.tif 000051
式中、
各Ｋは独立にＮまたはＣＨであり；
Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りであり；
Ａ＊は独立に、下記式ａ〜ｇ：
【０１５９】
【化６４】
2008526884.tif 000052
からなる群から選択され：
Ｍは、Ｏ、ＳまたはＮＲ３である。
【０１６０】
１下位実施形態では、式ＩＸ−１〜ＩＸ−１２の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが提供される。
【０１６１】
【化６５】
2008526884.tif 000053
式中、
Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りである。
【０１６２】
別の下位実施形態では、式ＩＸ−１３〜ＩＸ−２４の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが提供される。
【０１６３】
【化６６】
2008526884.tif 000054
式中、
Ｍ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りである。
【０１６４】
さらに別の下位実施形態では、式ＩＸ−２５〜ＩＸ−３６の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが提供される。
【０１６５】
【化６７】
2008526884.tif 000055
式中、
Ｍ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りである。
【０１６６】
第１０の主たる実施形態では、本発明は、下記式Ｘの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグを提供する。
【０１６７】
【化６８】
2008526884.tif 000056
式中、
各Ｋは独立に、ＮまたはＣＨであり；
Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
ＡおよびＢならびに−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は上記で定義の通りであり；
Ａ＊は上記で定義の通りであり；
Ｍは上記で定義の通りである。
【０１６８】
１下位実施形態では、式Ｘ−１〜Ｘ−１４の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが提供される。
【０１６９】
【化６９】
2008526884.tif 000057
式中、
Ｍ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
ＡおよびＢならびに−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は上記で定義の通りである。
【０１７０】
別の下位実施形態では、式Ｘ−１５〜Ｘ−２８の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが提供される。
【０１７１】
【化７０】
2008526884.tif 000058
式中、
Ｍ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
ＡおよびＢならびに−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は上記で定義の通りである。
【０１７２】
さらに別の下位実施形態では、式Ｘ−２９〜Ｘ−３８の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが提供される。
【０１７３】
【化７１】
2008526884.tif 000059
式中、
Ｍ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
ＡおよびＢならびに−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は上記で定義の通りである。
【０１７４】
第１１の主たる実施形態では、本発明は、下記式ＸＩの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグを提供する。
【０１７５】
【化７２】
2008526884.tif 000060
式中、
各Ｋは独立にＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りである。
【０１７６】
式ＸＩの１下位実施形態では、ＹおよびＺはそれぞれ水素である。あるいは、ＷおよびＸはそれぞれ水素である。さらに別の下位実施形態では、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺはいずれも水素である。
【０１７７】
１下位実施形態では、式ＸＩ−１〜ＸＩ−６の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが提供される。
【０１７８】
【化７３】
2008526884.tif 000061
式中、
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りである。
【０１７９】
第１２の主たる実施形態では、本発明は、下記式ＸＩＩの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグを提供する。
【０１８０】
【化７４】
2008526884.tif 000062
式中、
各Ｋは独立にＮまたはＣＨであり；
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
ＡおよびＢおよび−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は上記で定義の通りである。
【０１８１】
式ＸＩＩの１下位実施形態では、ＹおよびＺはそれぞれ水素である。あるいは、ＷおよびＸはそれぞれ水素である。さらに別の下位実施形態では、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺはいずれも水素である。
【０１８２】
１下位実施形態では、式ＸＩＩ−１〜ＸＩＩ−５の化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグが提供される。
【０１８３】
【化７５】
2008526884.tif 000063
式中、
Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義の通りであり；
ＡおよびＢならびに−Ｄ−Ｅ−および−Ｇ−Ｊ−は上記で定義の通りである。
【０１８４】
第１３の主たる実施形態では、下記式ＸＩＩＩの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグを含む、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のための方法、化合物および医薬組成物が提供される。
【０１８５】
【化７６】
2008526884.tif 000064
式中、
Ｋ、Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りであり；
「スペーサー」は独立に、結合、直鎖もしくは分岐Ｃ１〜Ｃ５アルキル、Ｃ２〜Ｃ５アルケニル、Ｃ２〜Ｃ５アルキニル、Ｃ１〜Ｃ５アルコキシ、Ｃ２〜Ｃ５アルケノキシおよびＣ２〜Ｃ５アルキノキシであり、前記アルキル基はヘテロ原子（例えばＮ、ＯまたはＳ）によって置換されていても良く、例としては−ＣＨ２−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−ＯＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＯＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−ＯＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−（ＣＨ２）ｎ−ＯＨ（ＣＨ３）−（ＣＨ２）ｎ−、ＣＨ２−ＯＨ（ＣＨ３）−Ｏ−ＣＨ２、−（ＣＨ２）ｎ−、−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯ−、−（ＣＨ２）ｎ−Ｎ−、−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−、−（ＣＨ２）ｎ−Ｓ−、−（ＣＨ２Ｏ）−、−（ＯＣＨ２）−、−（ＳＣＨ２）−、−（ＣＨ２Ｓ−）、−（アリール−Ｏ）−、−（Ｏ−アリール）−、−（アルキル−Ｏ）−、−（Ｏ−アルキル）−であり、ｎは独立に０、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０である。
【０１８６】
第１４の主たる実施形態では、下記式ＸＩＶａもしくはＸＩＶｂの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグを含む、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特にはＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防のための方法、化合物および医薬組成物が提供される。
【０１８７】
【化７７】
2008526884.tif 000065
式中、
Ｋ、Ｑ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは上記で定義の通りであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は上記で定義の通りであり；
「スペーサー」は上記で定義の通りであり；
「複素環」および「ヘテロ芳香族」は本明細書で定義の通りである。
【０１８８】
ある特定の実施形態では、悪性細胞の転移を予防する方法が提供され、それには細胞を下記式ＸＶの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグと接触させる段階が含まれる。
【０１８９】
【化７８】
2008526884.tif 000066
【０１９０】
ある特定の下位実施形態では、前記化合物は式ＸＶの化合物の塩、特には塩化物塩である。
【０１９１】
別の特定の実施形態では、悪性細胞の転移を予防する方法が提供され、それには細胞を下記式ＸＶＩの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグと接触させる段階が含まれる。
【０１９２】
【化７９】
2008526884.tif 000067
【０１９３】
別の特定の実施形態では、悪性細胞の転移を予防する方法が提供され、それには細胞を下記式ＸＶＩＩの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグと接触させる段階が含まれる。
【０１９４】
【化８０】
2008526884.tif 000068
【０１９５】
定義
本明細書で使用される「アルキル」という用語は、別段の断りがない限り、代表的にはＣ１〜Ｃ１０の飽和の直鎖、分岐もしくは環状１級、２級もしくは３級炭化水素を指し、具体的にはメチル、トリフルオロメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、シクロペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、シクロヘキシル、シクロヘキシルメチル、３−メチルペンチル、２，２−ジメチルブチルおよび２，３−ジメチルブチルなどがある。その用語は、置換アルキル基を含んでいても良い。アルキル基が置換されていても良い部分は、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アルコキシ、アリールオキシ、ニトロ、シアノ、スルホン酸、サルフェート、ホスホン酸、ホスフェートまたはホスホネートからなる群から選択され、それらは未保護であっても例えばグリーンらの著作（Greene, et al., Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, Second Edition, 1991；参照によって本明細書に組み込まれる）に記載のような当業者には公知のように、必要に応じて保護されていても良い。
【０１９６】
「Ｃ１〜Ｃ５アルキル」、「Ｃ２〜Ｃ５アルケニル」、「Ｃ１〜Ｃ５アルコキシ」、「Ｃ２〜Ｃ５アルケノキシ」、「Ｃ２〜Ｃ５アルキニル」および「Ｃ２〜Ｃ５アルキノキシ」という用語を用いる場合は必ず、これらが独立にその基の各構成員を含むものと見なされ、例えばＣ１〜Ｃ５アルキルは直鎖、分岐および適宜に環状のＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４およびＣ５アルキル官能基を含み；Ｃ２〜Ｃ５アルケニルは直鎖、分岐および適宜に環状のＣ２、Ｃ３、Ｃ４およびＣ５アルケニル官能基を含み；Ｃ１〜Ｃ５アルコキシは直鎖、分岐および適宜に環状のＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４およびＣ５アルコキシ官能基を含み；Ｃ２〜Ｃ５アルケノキシは直鎖、分岐および適宜に環状のＣ２、Ｃ３、Ｃ４およびＣ５アルケノキシ官能基を含み；Ｃ２〜Ｃ５アルキニルは直鎖、分岐および適宜に環状のＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４およびＣ５アルキニル官能基を含み；Ｃ２〜Ｃ５アルキノキシは直鎖、分岐および適宜に環状のＣ２、Ｃ３、Ｃ４およびＣ５アルキノキシ官能基を含むことになる。
【０１９７】
本明細書で使用される低級アルキルという用語は、別段の断りがない限り、Ｃ１〜Ｃ４飽和の直鎖、分岐または適切であれば環状（例えば、シクロプロピル）アルキル基を指し、置換型を含んでいても良い。本願において別段で具体的に記載されていない限り、アルキルが好適な部分である場合、低級アルキルが好ましい。同様に、アルキルまたは低級アルキルが好適な部分である場合、未置換アルキルまたは低級アルキルが好ましい。
【０１９８】
アルキルアミノまたはアリールアミノという用語は、それぞれ１個もしくは２個のアルキルまたはアリール置換基を有するアミノ基を指す。
【０１９９】
本明細書で使用される「保護（された）」という用語は、別段の定義がない限り、酸素、窒素またはリン原子に付加されて、それのそれ以上の反応を防止したり、他の目的を行う基を指す。非常に多様な酸素および窒素保護基が、有機合成の当業者には公知である。
【０２００】
本明細書で使用されるアリールという用語は、別段の断りがない限り、フェニル、ビフェニルまたはナフチル、好ましくはフェニルを指す。その用語は、置換部分および未置換部分の両方を含む。そのアリール基は、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アルコキシ、アリールオキシ、ニトロ、シアノ、スルホン酸、サルフェート、ホスホン酸、ホスフェートまたはホスホネートからなる群から選択される１以上の部分で置換されていても良く、それらは未保護であるか、例えばグリーンらの著作（Greene, et al., Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, Second Edition, 1991）に記載のような当業者には公知のように、必要に応じて保護されている。
【０２０１】
アルカリールまたはアルキルアリールという用語は、アリール置換基を有するアルキル基を指す。アラルキルまたはアリールアルキルという用語は、アルキル置換基を有するアリール基を指す。
【０２０２】
本明細書で使用されるハロという用語は、クロロ、ブロモ、ヨードおよびフルオロを含む。
【０２０３】
アシルという用語は、エステル基の非カルボニル部分が直鎖、分岐もしくは環状アルキルまたは低級アルキル、メトキシメチルなどのアルコキシアルキル、ベンジルなどのアラルキル、フェノキシメチルなどのアリールオキシアルキル、ハロゲンで置換されていても良いフェニルなどのアリール、Ｃ１〜Ｃ４アルキルもしくはＣ１〜Ｃ４アルコキシ、メタンスルホニル等のアルキルまたはアラルキルスルホニルなどのスルホン酸エステル、モノ、ジもしくはトリリン酸エステル、トリチルもしくはモノメトキシトリチル、置換ベンジル、トリアルキルシリル（例：ジメチル−ｔ−ブチルシリル）またはジフェニルメチルシリルから選択されるカルボン酸エステルを指す。エステルにおけるアリール基は、至適にはフェニル基を含む。「低級アシル」という用語は、非カルボニル部分が低級アルキルであるアシル基を指す。
【０２０４】
「製薬上許容される塩、エステルまたはプロドラッグ」という用語は、本明細書全体を通じて、患者に投与した時に明細書に記載の化合物を与える製薬上許容される形態（エステル、リン酸エステル、エステルの塩または関連する基など）の化合物を説明するのに用いられる。製薬上許容される塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、リンゴ酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸などの製薬上許容される無機もしくは有機塩基および酸から誘導されるものなどがある。好適な塩には、当業界で公知の多くの他の酸の中で、カリウムおよびナトリウムなどのアルカリ金属、カルシウムおよびマグネシウムなどのアルカリ土類金属から誘導されるものなどがある。
【０２０５】
製薬上許容される「プロドラッグ」は、宿主において、代謝、例えば加水分解または酸化されて本発明の化合物を形成する化合物を指す。プロドラッグの代表的例には、活性化合物の官能性部分に生体で不安定な保護基を有する化合物などがある。プロドラッグには、酸化、還元、アミノ化、脱アミノ化、ヒドロキシル化、脱ヒドロキシル化、加水分解、脱水、アルキル化、脱アルキル化、アシル化、脱アシル化、ホスホリル化、脱ホスホリル化して、活性化合物を形成することができる化合物などがある。
【０２０６】
「複素環」という用語は、部分飽和（少なくとも１個の二重結合を有する）もしくは完全飽和していても良く、環中に酸素、硫黄、窒素もしくはリンなどの少なくとも１個のヘテロ原子がある非芳香族環状基を指す。本明細書で使用されるヘテロアリールまたはヘテロ芳香族という用語は、芳香族環中に少なくとも１個の硫黄、酸素、窒素またはリンを含む芳香族を指す。複素環およびヘテロ芳香族の例には、ピロリジニル、テトラヒドロフリル、ピペラジニル、ピペリジニル、モルホリノ、チオモルホリノ、テトラヒドロピラニル、イミダゾリル、ピロリニル、ピラゾリニル、インドリニル、ジオキソラニルもしくは１，４−ジオキサニル．アジリジニル、フリル、フラニル、ピリジル、ピリミジニル、ベンゾオキサゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，３，４−オキサジアゾリル、１，３，４−チアジアゾール、インダゾリル、１，３，５−トリアジニル、チエニル、テトラゾリル、ベンゾフラニル、キノリル、イソキノリル、ベンゾチエニル、イソベンゾフリル、インドリル、イソインドリル、ベンズイミダゾリル、プリン、カルバゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、ベンゾチアゾリル、イソチアゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、イソオキサゾリル、ピロリル、キナゾリニル、シンノリニル、フタラジニル、キサンチニル、ハイポキサンチニル、ピラゾール、１，２，３−トリアゾール、１，２，４−トリアゾール、１，２，３−オキサジアゾール、チアジン、ピリダジン、ベンゾチオフェニル、イソピロール、チオフェン、ピラジンまたはプテリジニルがあり（それらに限定されるものではない）、その場合に前記ヘテロアリールまたは複素環基は、ハロゲン、ハロアルキル、アルキル、アルコキシ、ヒドロキシ、カルボキシル誘導体、アミド、ヒドロキシル、アシル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、アルコキシ、アリールオキシ、ニトロ、シアノ、スルホン酸、サルフェート、ホスホン酸、ホスフェートまたはホスホネートからなる群から選択される１以上の置換基で置換されていても良く、それらは未保護であっても例えばグリーンらの著作（Greene, et al., ″Protective Groups in Organic Synthesis″, John Wiley and Sons, Second Edition, 1991；参照によって本明細書に組み込まれる）に記載のような当業者には公知のように、必要に応じて保護されている。
【０２０７】
ヘテロアリール基上の官能性酸素および窒素基は、必要または所望に応じて保護することができる。好適な保護基は当業者には公知であり、トリメチルシリル、ジメチルヘキシルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリルおよびｔ−ブチルジフェニルシリル、トリチルもしくは置換トリチル、アルキル基、アセチルおよびプロピオニルなどのアシル基、メタンスルホニルおよびｐ−トルエンスルホニルなどがある。
【０２０８】
プリンまたはピリミジンという用語は、アデニン、Ｎ６−アルキルプリン類、Ｎ６−アシルプリン類（アシルはＣ（Ｏ）（アルキル、アリール、アルキルアリールまたはアリールアルキル）である）、Ｎ６−ベンジルプリン、Ｎ６−ハロプリン、Ｎ６−ビニルプリン、Ｎ６−アセチレン系プリン、Ｎ６−アシルプリン、Ｎ６−ヒドロキシアルキルプリン、Ｎ６−チオアルキルプリン、Ｎ２−アルキルプリン類、Ｎ２−アルキル−６−チオプリン類、チミン、シトシン、５−フルオロシトシン、５−メチルシトシン、６−アザシトシンなどの６−アザピリミジン、２−および／または４−メルカプトピリミジン、ウラシル、５−フルオロウラシルなどの５−ハロウラシル、Ｃ５−アルキルピリミジン類、Ｃ５−ベンジルピリミジン類、Ｃ５−ハロピリミジン類、Ｃ５−ビニルピリミジン、Ｃ５−アセチレン系ピリミジン、Ｃ５−アシルピリミジン、Ｃ５−ヒドロキシアルキルプリン、Ｃ５−アミドピリミジン、Ｃ５−シアノピリミジン、Ｃ５−ニトロピリミジン、Ｃ５−アミノピリミジン、Ｎ２−アルキルプリン類、Ｎ２−アルキル−６−チオプリン類、５−アザシチジニル、５−アザウラシリル、トリアゾロピリジニル、イミダゾロピリジニル、ピロロピリミジニルおよびピラゾロピリミジニルを含むが、これらに限定されるものではない。プリン塩基には、グアニン、アデニン、ヒポキサンチン、２，６−ジアミノプリンおよび６−クロロプリンなどがあるが、これらに限定されるものではない。
【０２０９】
活性化合物の製造方法
一般的方法
１Ｈ  ＮＭＲまたは１３Ｃ  ＮＭＲスペクトラムは、４００ＭＨｚもしくは１００ＭＨｚ  ＩＮＯＶＡスペクトル装置または６００ＭＨｚもしくは１５０ＭＨｚ  ＩＮＯＶＡスペクトル装置のいずれかで記録した。得られたスペクトラムは、残留溶媒ピークを基準としたものである。それは、重クロロホルム、ジメチルスルホキシド−ｄ６、重水またはアセトン−ｄ６中で記録した。融点は、トーマス・フーバー（Thomas Hoover）キャピラリー融点装置で得たもので、未補正である。低分解能ＥＩ質量スペクトラムは、ＪＥＯＬスペクトル装置で記録した。元素分析は、アトランティック・ミルコラブ（Atlantic Mircolab, Norcross, GA）が行った。フラッシュカラムクロマトグラフィーは、サイエンティフィック・アブソルベント社（Scientific Absorbent Incorporated）シリカゲル６０を用いて行った。分析薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、サイエンティフィック・アブソルベンツ社（Scientific Absorbents Incorporated）からのプレコートガラス裏材プレート（シリカゲル６０Ｆ２５４）で行った。プレートは、紫外線またはヨウ素蒸気またはリンモリブデン酸（ＰＭＡ）を用いて肉眼観察できるようにした。
【０２１０】
６種類の異なる方法を用いて本発明の化合物を製造し、特性決定データを表１に挙げた。
【０２１１】
方法Ａ：アミン類とシアナミド類の間の求核付加
この方法は、文献法（Braun, et al. (1938) J. Am. Chem. Soc. 3: 146-149）の変法に従って行う。１．０当量のジアミン・ジヒドロハライドおよび３．０当量のシアナミドの純粋エタノール溶液を一緒に、還流下に１時間攪拌した。溶媒を減圧下に除去して粗塩を得て、それをメタノールでの再結晶によって精製した。
【０２１２】
【化８１】
2008526884.tif 000069
【０２１３】
方法Ｂ：アミン類とメチルメルカプト誘導体の間の付加−脱離
この方法は、文献法とほぼ同様である（Linton, et al. (2001) J. Org. Chem. 66(22): 7313-7319）。１．０当量のジアミンおよび２．０当量のメチルメルカプト・ヒドロハライド誘導体をメタノールに溶かした。頂部にＮａＯＨトラップを取り付けた冷却管を装着した。１時間還流後、溶液を減圧下に減量して最小量とした。エチルエーテルを加えて白色沈殿を得た。これを熱メタノール中で再結晶して、純粋生成物を得た。
【０２１４】
【化８２】
2008526884.tif 000070
【０２１５】
方法Ｃ：アルデヒド／ケトンとアミノグアニジンの間の縮合によるグアニルヒドロゾン誘導体の取得
この方法は、文献法からの変法である（Murdock, et al. (1982) J. Med. Chem. 25:505-518）。１．０当量のジアルデヒド／ケトンおよび２．０当量のアミノグアニジン・ヒドロハライドのエタノール中混合物を、還流下に１時間加熱した。混合物を冷却して室温とし、濾過して、グアニルヒドロゾン・ヒドロハライドを得た。
【０２１６】
【化８３】
2008526884.tif 000071
【０２１７】
方法Ｄ：アルデヒド／ケトンとアミンの間の還元的アミノ化（Abdel-Magid, et al. (1996) J. Org. Chem. 61:3849-3862）
１．０当量のジアルデヒドまたはケトンおよび２．０当量のアミンを１，２−ジクロロエタン中で混合し、で処理し３．０当量の水素化ホウ素トリアセトキシナトリウム（ケトンの反応では１．０〜２．０ｍｏｌ当量の酢酸を加えることもできる）。ＴＬＣプレートでの反応物の消失まで、混合物をアルゴンまたは窒素下に室温で１時間攪拌した。１Ｎ  ＮａＯＨを加えることで反応混合物を反応停止し、生成物をエチルエーテルによって抽出し、ブラインによって洗浄し、無水ＭｇＳＯ４によって脱水した。溶媒を留去して粗遊離塩基を得て、それはクロマトグラフィーによって精製することができた。得られた遊離塩基をエタノール性塩酸塩または酒石酸に溶かして塩を得て、それは通常、ＭｅＯＨ／Ｅｔ２Ｏから再結晶することができる。
【０２１８】
【化８４】
2008526884.tif 000072
【０２１９】
方法Ｅ：アミドの還元（Micovic and Mihailovic (1953) J. Org. Chem. 18:1190）
アミドは、相当するカルボン酸またはカルボン酸クロライドから製造することができた。カルボン酸および塩化チオニルの混合物を、頂部にＮａＯＨトラップを取り付けた冷却管を装着した無水系で１時間還流した。過剰の塩化チオニルを減圧下に除去して、カルボン酸クロライドを得た。そのカルボン酸クロライドを、２．０当量のアミンおよび３当量のピリジンを加えた後に塩化メチレンに溶かした。ＴＬＣプレートで反応物が消失するまで、混合物を室温で攪拌した。溶媒を減圧下に除去して粗アミドを得て、それをクロマトグラフィーによって精製することができる。
【０２２０】
１当量のアミドおよび１．９当量のＬｉＡｌＨ４のＴＨＦ中混合物を、ＴＬＣプレートからアミドが消失するまで還流させた。次に、文献５に記載の方法に従って水および１５％ＮａＯＨ水溶液を加えることで、溶液を反応停止し、エチルエーテルで抽出し、ＭｇＳＯ４で脱水した。溶媒の除去によって遊離アミン生成物を得て、それはクロマトグラフィーによって精製することができる。遊離塩基をエタノール性塩酸塩または酒石酸に溶かして塩を得て、それは通常ＭｅＯＨ／Ｅｔ２Ｏから再結晶することができる。
【０２２１】
【化８５】
2008526884.tif 000073
【０２２２】
方法Ｆ：アミンによるハライドの求核置換
１．０当量のハライド、２．０当量のアミンおよび３当量のピリジンのエタノール中混合物を、反応物が消失するまで１時間還流させた。溶液を濃縮し、エチルエーテルで抽出し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水した。溶媒除去によって遊離アミン生成物を得て、それはクロマトグラフィーによって精製することができる。遊離塩基をエタノール性塩酸塩または酒石酸に溶かして塩を得て、それは通常ＭｅＯＨ／Ｅｔ２Ｏから再結晶することができる。
【０２２３】
【化８６】
2008526884.tif 000074
【０２２４】
【表１】
2008526884.tif 000075
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【０２２５】
製造し、細胞アッセイで調べてウィルス阻害を求めた別の化合物
【０２２６】
【表２】
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【０２２７】
製剤
化合物が無毒性の酸塩もしくは塩基塩を形成する上で十分に塩基性または酸性である場合、製薬上許容される塩としての化合物の投与が適切である場合がある。製薬上許容される塩の例としては、生理的に許容されるアニオンを形成する酸と形成された有機酸付加塩があり、例えばトシル酸塩、メタンスルホン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、マロン酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、安息香酸塩、アスコルビン酸塩、α−ケトグルタル酸塩およびα−グリセロリン酸塩がある。好適な無機塩も形成可能であり、それには硫酸塩、硝酸塩、重炭酸塩および炭酸塩などがある。
【０２２８】
製薬上許容される塩は、当業界で公知の標準的な手順を用いて、例えば生理的に許容されるアニオンを与える好適な酸とアミンなどの十分に塩基性の化合物を反応させることで得ることができる。カルボン酸のアルカリ金属（例えば、ナトリウム、カリウムまたはリチウム）塩またはアルカリ土類金属（例えばカルシウム）塩も製造することができる。
【０２２９】
活性化合物は、イン・ビボで生理活性に変換されるプロドラッグとして提供することもできる。プロドラッグは、酵素プロセスおよび代謝的加水分解などの各種機序によって親薬剤に変換することができる（Harper, NJ. (1962) in Jucker, ed. Progress in Drug Research, 4:221-294；Morozowich et al. (1977) in E. B. Roche ed. Design of Biopharmaceutical Properties through Prodrugs and Analogs, APhA (Acad. Pharm. Sci.)；E. B. Roche, ed. (1977) Bioreversible Carriers in Drug in Drug Design, Theory and Application, APhA；H. Bundgaard, ed. (1985) Design of Prodrugs, Elsevier；Wang et al. (1999) Curr. Pharm. Design. 5(4):265-287；Pauletti et al. (1997) Adv. Drug. Delivery Rev. 27:235-256；Mizen et al. (1998) Pharm. Biotech. 11:345-365；Gaignault et al. (1996) Pract. Med. Chem. 671-696；M. Asghamejad (2000) in G. L. Amidon, P. I. Lee and E. M. Topp, Eds., Transport Proc. Pharm. Sys., Marcell Dekker, p. 185-218；Balant et al. (1990) Eur. J. Drug Metab. Pharniacokinct., 15(2): 143-53；Balimane and Sinko (1999) Adv. Drug Deliv.Rev., 39(1-3): 183-209；Browne (1997). Clin. Neuropharm. 20(1): 1-12；Bundgaard (1979) Arch. Pharm. Chemi. 86(1): 1-39；H. Bundgaard, ed. (1985) Design of Prodrugs, New York: Elsevier；Fleisher et al. (1996) Adv. Drug Delivery Rev, 19(2): 115-130；Fleisher et al. (1985) Methods Enzymol. 112: 360-81; Farquhar D, et al. (1983) J. Pharm. Set, 72(3): 324- 325；Han, H.K. et al. (2000) AAPS Pharm Sci, 2(1): E6；Sadzuka Y. (2000) Curr. Drug Metab., 1:31-48；D.M. Lambert (2000) Eur. J. Pharm. Set, 11 Suppl 2:S1 5-27；Wang, W. et al. (1999) Curr. Pharm. Des., 5(4):265）。
【０２３０】
活性化合物は、脂質プロドラッグとして提供することもできる。化合物に共有結合的に組み込むことができるか、親油性製剤で組み込むことができる好適な親油性置換基を開示している米国特許の例としては、米国特許第５１４９７９４号（ヤトビン（Yatvin）ら、１９９２年９月２２日）；５１９４６５４号（ホステトラー（Hostetler）ら、１９９３年３月１６日）、５２２３２６３号（ホステトラーら、１９９３年６月１９日）；５２５６６４１号（ヤトビンら、１９９３年１０月２６日）；５４１１９４７号（ホステトラーら、１９９５年５月２日）；５４６３０９２号（ホステトラーら、１９９５年１０月３１日）；５５４３３８９号（ヤトビンら、１９９６年８月６日）；５５４３３９０号（ヤトビンら、１９９６年８月６日）；５５４３３９１号（ヤトビンら、１９９６年８月６日）；および５５５４７２８号（バサバ（Basava）ら、１９９６年９月１０日）などがあるが、これらに限定されるものではない。
【０２３１】
治療方法
本明細書に記載の化合物は、ＣＸＣＲ４受容体の結合または活性化に関連する障害特にＣＸＣＲ４を介して調節される癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防に特に有用である。
【０２３２】
１実施形態では、悪性細胞の転移を予防する方法が提供され、それには宿主に対して式（Ｉ）〜（ＸＶＩＩ）のうちの少なくとも一つを投与する段階がある。悪性細胞は腫瘍細胞であることができる。ある種の実施形態では、当該化合物を宿主に与えてから、腫瘍の治療を行う。別の実施形態では、当該化合物を、癌治療を受けたことがある患者に与えて、再発の可能性を低くしたり、特定の腫瘍に関連する死亡率を低下させる。別の実施形態では、当該化合物を、増殖性疾患を患うリスクの高い宿主に投与する。そのような高リスクは、例えば家族歴または既知もしくは推定発癌物質に対する曝露歴に基づいたものであることができる。
【０２３３】
増殖性障害を患っているかそれのリスクがあるヒトなどの宿主は、製薬上許容される担体または希釈剤の存在下に有効量の活性化合物またはそれの製薬上許容されるプロドラッグもしくは塩を投与することで治療することができる。投与は、ＣＸＣＲ４受容体活性化に関連する障害、特には癌転移を含む増殖性傷害の予防のために予防的であることができる。活性材料は、液体もしくは固体形で、いずれか適切な経路によって、例えば経口投与、非経口投与、静脈投与、皮内投与、皮下投与または局所投与することができる。しかしながら、当該化合物は、経口投与に特に適している。
【０２３４】
化合物の好ましい用量は、約１〜５０ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは１〜２０ｍｇ／ｋｇ／日、より一般的には０．１〜約１００ｍｇ／ｋｇ（被投与者体重）／日の範囲である。製薬上許容される塩およびプロドラッグの有効用量範囲は、送達される親化合物の重量に基づいて計算することができる。塩、エステルまたはプロドラッグ自体が活性を示す場合、有効用量は、その塩、エステルまたはプロドラッグの重量を用いて、または当業者に公知の他の手段によって推算することができる。
【０２３５】
ある特定の実施形態では、悪性細胞の転移の予防方法が提供され、それには細胞を下記式ＸＶの化合物またはそれの製薬上許容される塩、エステルもしくはプロドラッグと接触させる段階がある。
【０２３６】
【化８７】
2008526884.tif 000087
【０２３７】
ある特定の下位実施形態では、その化合物は式ＸＶの化合物の塩、特には塩化物塩である。
【０２３８】
別の実施形態では、処置を必要とする宿主に対して式（Ｉ）〜（ＸＶＩＩ）の化合物を投与することで増殖性障害を治療する方法が提供される。ある種の実施形態では、前記増殖性障害は転移癌である。本発明の化合物を処置を必要とする宿主に投与することで、癌などの増殖性障害の転移の発生率を低下させることができる。特定の実施形態では、前記の癌は乳癌、脳腫瘍、膵臓癌、卵巣腫瘍、特には卵巣上皮腫瘍、前立腺癌、腎臓癌または非小細胞肺癌である。
【０２３９】
別の実施形態では、本発明は、細胞を式（Ｉ）〜（ＸＶＩＩ）の化合物と接触させることで、新血管形成、特にはＶＥＧＦ依存性新血管形成を低減される方法を提供する。その細胞は宿主動物でのものであることができる。
【０２４０】
別の実施形態では、式（Ｉ）〜（ＸＶＩＩ）の化合物を投与する段階を含む血管系疾患、炎症疾患および変性疾患の治療方法が提供される。１実施形態では、式（Ｉ）〜（ＸＶＩＩ）の化合物を用いて、幹細胞および前駆細胞の産生および増殖を刺激する。
【０２４１】
当該化合物は、ＣＸＣＲ４活性に関連する疾患、特には宿主における増殖性疾患を予防または重度低下させることができる。しかしながら代表的には、宿主は哺乳動物であり、より代表的にはヒトである。ある種の実施形態では、宿主は過剰増殖性障害と診断されており、それから化合物を投与するが、他の実施形態では、宿主は単にそのような障害を患うリスクがあると見なされるものである。
【０２４２】
医薬組成物
ある実施形態では、式（Ｉ）〜（ＸＶＩＩ）の化合物のうちの少なくとも一つを含む医薬組成物が提供される。ある種の実施形態では、少なくとも第２の活性化合物が組成物に含まれる。その第２の活性化合物は、化学療法薬、特には原発腫瘍に対して活性な薬剤であることができる。
【０２４３】
有効量の活性化合物の医薬組成物を投与することで、増殖性障害を患っているかそれのリスクがある宿主を治療することができる。
【０２４４】
その化合物は簡便には、単位製剤当たり７〜３０００ｍｇ、好ましくは７０〜１４００ｍｇの有効成分を含むものなど（それに限定されるものではない）のいずれか好適な単位製剤で投与される。５０〜１０００ｍｇの経口用量が通常は簡便である。理想的には、有効成分を投与して、活性化合物のピーク血漿濃度を約１μＭ〜１００ｍＭまたは０．２〜７００μＭまたは約１．０〜１０μＭとするべきである。
【０２４５】
薬剤組成物中の活性化合物の濃度は、その薬剤の吸収速度、失活速度および排泄速度ならびに当業者には公知の他の要素によって決まる。留意すべき点として、用量値は改善すべき状態の重度によって変動する。さらに理解すべき点として、特定の被験者において、具体的な投与法は個々のニーズおよび組成物を投与または投与管理する者の専門的判断に応じて時間経過に伴って調節すべきであり、本明細書に記載の濃度範囲は例示のみであり、特許請求の組成物の範囲や実務を限定するものではない。有効成分は、１回で投与することができるか、時間間隔を変動させて相対的に少ない用量を多数回に分けて投与することができる。
【０２４６】
活性化合物の好ましい投与形態は経口投与である。経口組成物は通常、不活性希釈剤または食用担体を含む。それらは、ゼラチンカプセルに封入することができるか、打錠して錠剤とすることができる。経口治療投与に関して、活性化合物は賦形剤と組み合わせることができるか、錠剤、トローチもしくはカプセルの形態で用いることができる。製薬上適合性の結合剤および／または補助材料を、組成物の一部として含めることができる。
【０２４７】
錠剤、丸薬、カプセル、トローチなどは、下記の成分または同様の性質の化合物のいずれかを含むことができる。すなわち、微結晶セルロース、トラガカントガムまたはゼラチンなどの結合剤；デンプンまたは乳糖などの賦形剤、アルギン酸、プリモゲル（Primogel）またはコーンスターチなどの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムまたはステロテスなどの潤滑剤；コロイド状二酸化ケイ素などの流動促進剤；ショ糖またはサッカリンなどの甘味剤；またはペパーミント、サリチル酸メチルまたはオレンジフレーバーなどの香味剤である。単位製剤がカプセルである場合、それは上記の種類の材料に加えて、脂肪油などの液体担体を含むことができる。さらに単位製剤は、その単位製剤の物理的形状を変える各種他の材料、例えば糖、シェラックその他の腸溶剤のコーティングを含むことができる。
【０２４８】
当該化合物は、エリキシル剤、懸濁液、シロップ、ウェハ、チューインガムなどの成分として投与することができる。シロップは、活性化合物に加えて、甘味剤としてのショ糖ならびにある種の保存剤、色素および着色料および香味剤を含むことができる。
【０２４９】
当該化合物またはそれの製薬上許容されるプロドラッグまたは塩は、所望の作用を妨害しない他の活性材料または抗生物質、抗真菌剤、抗炎症剤または抗ウィルス化合物などの所望の作用を補う材料もしくは別の化学療法剤と混合することができる。非経口投与、皮内投与、皮下投与または局所投与に用いられる液剤または懸濁液は、注射用水、生理食塩水、固定油、ポリエチレングリコール類、グリセリン、プロピレングリコールその他の合成溶媒などの無菌希釈剤；ベンジルアルコールまたはメチルパラベン類などの抗細菌剤；アスコルビン酸または重亜硫酸ナトリウムなどの抗酸化剤；エチレンジアミン四酢酸などのキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩もしくはリン酸塩などの緩衝剤ならびに塩化ナトリウムもしくはブドウ糖などの等張性の調節のための薬剤などの成分を含むことができる。非経口製剤は、ガラスもしくはプラスチック製のアンプル、使い捨て注射器または多用量バイアル中に封入することができる。
【０２５０】
好ましい実施形態では、活性化合物は、インプラントおよびマイクロカプセル化投与系のような徐放製剤などの身体からの急速の排出に対して化合物を保護する担体とともに製剤される。エチレンビニルアセテート、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル類およびポリ乳酸などの生体分解性で生体適合性のポリマーを用いることができる。そのような製剤の製造方法は、当業者には明らかであろう。それらの材料は、アルザ社（Alza Corporation）から市販もされている。静脈投与する場合、好ましい担体は生理食塩水またはリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）である。
【０２５１】
リポソーム懸濁液（ウィルス抗原に対するモノクローナル抗体を含む感染細胞を標的としたリポソームなど）も、製薬上許容される担体として好ましい。これらは、例えば米国特許第４５２２８１１号（参照によってその全体が本明細書に組み込まれる）に記載されているような、当業者には公知の方法に従って製造することができる。例えば、リポソーム製剤は、適切な脂質（ステアロイルホスファチジルエタノールアミン、ステアロイルホスファチジルコリン、アラカドイルホスファチジルコリンおよびコレステロールなど）を無機溶媒に溶かし、次にそれを溶媒留去して、容器表面に乾燥脂質の薄層を残すことで製造することができる。次に、活性化合物またはそれのモノリン酸、ジリン酸および／またはトリリン酸誘導体の水溶液を容器に導入する。次に容器を手で渦回転させて、容器側面から脂質材料を遊離させ、脂質凝集物を分散させることで、リポソーム懸濁液を形成する。
【０２５２】
併用療法および交互療法
１実施形態では、本明細書に記載の化合物は、別の活性化合物と併用投与または交互投与される。
【０２５３】
１実施形態では、活性化合物は化学療法薬として用いられる化合物である。併用投与または交互投与される化合物は、例えば下記のリストから選択することができる。
【０２５４】
【表３】
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【０２５５】
１実施形態では、本発明の化合物は別の活性薬剤と併用投与される。その化合物は、他の活性薬剤と同時に投与することもできる。この場合、その化合物は、同じ製剤または別個の製剤で投与することができる。それら化合物を同じように投与する必要はない。例えば、第２の活性薬剤は静脈注射によって投与することができ、本発明の経口投与することができる。別の実施形態では本発明の化合物は、少なくとも１種類の他の活性化合物と交互に投与される。別の実施形態では、本発明の化合物は、例えば上記の薬剤などの化学療法薬による治療中に投与され、他の活性化合物の投与終了後も本発明の化合物の投与は続ける。その化合物は、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも４、６、７、８、９、１０、１１、１２ヶ月またはそれ以上投与して、転移の発生率を低下させることができる。
【０２５６】
本発明の化合物は別の活性化合物投与が終わる前または終わった後に投与することができる。ある種の例では、当該化合物は、例えば原発腫瘍の一連の治療開始前に投与することができる。別の実施形態では、当該化合物は、一連の化学療法後に投与して、転移腫瘍の再発を低減することができる。
【０２５７】
疾患
本明細書に記載の化合物は、ＣＸＣＲ４受容体の結合もしくは活性化に関連する障害、特には癌転移などの増殖性障害の治療もしくは予防に特に有用である。しかしながら、多くの他の疾患が、ＣＸＣＲ４受容体シグナル伝達に関連していた。さらに、その化合物を用いて、異常細胞増殖の障害を治療することができ、その例としては、下記で挙げる各種の癌および増殖性障害などがあるが、これらに限定されるものではない。
【０２５８】
異常細胞増殖、特には過剰増殖は、遺伝子突然変異、感染、毒物への曝露、自己免疫障害および良性もしくは悪性腫瘍誘発などの非常に多様な因子の結果として起こり得る。
【０２５９】
細胞過剰増殖に関連する皮膚障害が多くある。例えば乾癬は、肥厚鱗屑によって覆われたプラークを特徴とするヒト皮膚の良性疾患である。その疾患は、原因が未知の表皮細胞の増殖亢進によって引き起こされる。正常な皮膚では、細胞が基底層から上層の顆粒層に移動するのに要する時間は約５週間である。乾癬では、この時間はわずか６〜９日であり、それは一部には、増殖細胞数の増加および分裂する細胞の割合の増加によるものである（G. Grove, Int. J. Dermatol. 18:111, 1979）。慢性湿疹も、表皮の大幅な過剰増殖に関連している。皮膚細胞の過剰増殖が原因である他の疾患には、アトピー性皮膚炎、扁平苔癬、疣、尋常性天疱瘡、光線性角化症、基底細胞癌および扁平細胞癌などがある。
【０２６０】
他の増殖細胞障害には、血管増殖障害、線維障害、自己免疫障害、移植片対宿主拒絶、腫瘍および癌などがある。
【０２６１】
血管増殖性障害には、血管新生障害および血管性障害などがある。血管組織におけるプラーク発達の途中における平滑筋細胞の増殖によって、例えば再狭窄、網膜症およびアテローム性動脈硬化が生じる。アテローム性動脈硬化の進行病変は、動脈壁の内皮および平滑筋に対する損傷への過剰の炎症−増殖応答から生じるものである（Ross, R. Nature, 1993, 362:801-809）。細胞移動および細胞増殖の両方が、アテローム性動脈硬化病変の形成において役割を果たす。
【０２６２】
線維障害は多くの場合、細胞外基質の異常形成によるものである。線維障害の例には、肝硬変およびメサンギウム増殖細胞障害などがある。肝硬変は、細胞外基質構成成分の増加による肝臓瘢痕形成を特徴とする。肝硬変は、肝臓の硬変などの疾患の原因となり得る。肝臓瘢痕を生じる細胞外基質増加は、肝炎などのウィルス感染によっても生じ得る。脂肪細胞は、肝硬変において主要な役割を果たすように思われる。
【０２６３】
メサンギウム障害は、メサンギウム細胞の異常増殖によって生じる。メサンギウム過剰増殖細胞障害には、糸球体腎炎、糖尿病性腎症、悪性腎硬化症、血栓性微小血管症症候群、移植片拒絶反応および糸球体症等の各種のヒト腎臓疾患などがある。
【０２６４】
増殖性要素を有する別の疾患は関節リウマチである。関節リウマチは一般に、自己反応性Ｔ細胞の活性に関連し（例えば、Harris, E. D., Jr.(1990) The New England Journal of Medicine, 322:1277-1289）、コラーゲンおよびＩｇＥに対して産生される自己抗体によって引き起こされると思われる自己免疫疾患と考えられている。
【０２６５】
異常細胞増殖要素を含み得る他の障害には、ベーチェット症候群、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、虚血性心疾患、透析後症候群、白血病、後天性免疫不全症候群、脈管炎、脂質性組織球増殖症、敗血症ショックおよび炎症全般などがある。
【０２６６】
治療される原発腫瘍であることができるか、転移が阻害もしくは低減される部位であることができる増殖障害の例には、結腸、腹部、骨、乳房、消化系、肝臓、膵臓、腹膜、内分泌腺（副腎、副甲状腺、下垂体、睾丸、卵巣、胸腺、甲状腺）、眼球、頭部および頸部、神経（中枢および末梢）、リンパ系、骨盤、皮膚、軟組織、脾臓、胸郭および尿生殖路にある新生物などがあるが、これらに限定されるものではない。
【０２６７】
具体的な種類の疾患には、小児急性リンパ芽球性白血病；急性リンパ芽球性白血病、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、成人（原発）肝細胞癌、成人（原発）肝臓癌、成人急性リンパ性白血病、成人急性骨髄性白血病、成人ホジキン病、成人ホジキンリンパ腫、成人リンパ性白血病、成人非ホジキンリンパ腫、成人原発肝臓癌、成人軟組織肉腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、ＡＩＤＳ関連悪性腫瘍、肛門癌、星状細胞腫、胆管癌、膀胱癌、骨肉腫、脳幹グリオーマ、脳腫瘍、乳癌、腎盂および尿管の癌、中枢神経系（原発）リンパ腫、中枢神経系リンパ腫、小脳星状細胞腫、大脳星細胞腫、子宮頸癌、小児（原発）肝細胞癌、小児（原発）肝臓癌、小児急性リンパ芽球性白血病、小児急性骨髄性白血病、小児脳幹グリオーマ、小児小脳星状細胞腫、小児大脳星細胞腫、小児頭蓋外胚細胞腫瘍、小児ホジキン病、小児ホジキンリンパ腫、小児視床下部および視覚伝導路グリオーマ、小児リンパ芽球性白血病、小児髄芽細胞腫、小児非ホジキンリンパ腫、小児松果体部およびテント上原始神経外胚葉腫瘍、小児原発性肝癌、小児横紋筋肉腫、小児軟組織肉腫、小児視覚伝導路および視床下部膠腫、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、大腸癌、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫、膵臓内分泌腺島細胞癌、子宮体癌、上衣腫、上皮癌、食道癌、ユーイング肉腫および関連する腫瘍、外分泌膵臓癌、頭蓋外胚細胞腫瘍、性腺外胚細胞腫瘍、肝臓外胆管癌、眼癌、女性乳癌、ゴーシェ病、胆嚢癌、胃癌、消化管カルチノイド腫瘍、消化管腫瘍、胚細胞腫瘍、懐胎絨毛性腫瘍、有毛状細胞性白血病、頭部および頸部癌、肝細胞癌、ホジキン病、ホジキンリンパ腫、高ガンマグロブリン血症、下咽頭癌、腸癌、眼内メラノーマ、島細胞癌、島細胞膵臓癌、カポジ肉腫、腎臓癌、喉頭癌、口唇癌および口腔癌、肝臓癌、肺癌、リンパ増殖症候群、マクログロブリン血症、男性乳癌、悪性中皮腫、悪性胸腺腫、髄芽細胞腫、メラノーマ、中皮腫、転移潜伏原発性頸部扁平上皮癌、転移原発性頸部扁平上皮癌、転移頸部扁平上皮癌、多発性硬化症、多発性骨髄腫／形質細胞腫、脊髄形成異常症候群、骨髄性白血病、骨髄球性白血病、骨髄増殖症候群、鼻腔癌および副鼻腔癌、鼻咽頭癌、神経芽細胞腫、妊娠時非ホジキンリンパ腫、非メラノーマ皮膚癌、非小細胞肺癌、潜伏原発性転移性頸部扁平上皮癌、口腔咽頭癌、骨肉腫／悪性線維性肉腫、骨肉腫／悪性線維性組織球腫、骨肉腫／骨の悪性線維性組織球腫、上皮性卵巣癌、卵巣胚細胞腫瘍、卵巣低悪性度腫瘍、膵臓癌、類タンパク血症、紫斑、副甲状腺癌、陰茎癌、褐色細胞腫、下垂体部腫瘍、形質細胞腫／多発性骨髄腫、原発性中枢神経系リンパ腫、原発性肝臓癌、前立腺癌、直腸癌、腎細胞癌、腎盂および尿管癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、唾液腺癌、サルコイドーシス肉腫、セザリー症候群、皮膚癌、小細胞肺癌、小腸癌、軟組織肉腫、頸部扁平上皮癌、胃癌、テント上原始神経外胚葉腫瘍および松果体部腫瘍、Ｔ細胞リンパ腫、睾丸癌、胸腺腫、甲状腺癌、腎盂および尿管の移行上皮癌、移行性腎盂および尿管癌、絨毛性腫瘍、尿管および腎盂細胞癌、尿道癌、子宮癌、子宮肉腫、膣癌、視覚伝導路および視床下部膠腫、外陰癌、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、ウィルムス腫瘍ならびに上記で挙げた臓器系にある他の過剰増殖性疾患などがある。
【０２６８】
過形成障害には、縦隔リンパ節過形成、好酸球増多随伴性血管類リンパ組織増殖症、異型メラニン細胞過形成、基底細胞過形成、良性巨大リンパ節過形成、セメント質過形成、先天性副腎過形成、先天性脂肪過形成,嚢胞性過形成、乳房の嚢胞性過形成、義歯過形成、腺管過形成、子宮内膜過形成、線維筋過形成、限局性上皮過形成、歯肉過形成、炎症性線維性過形成、炎症性乳頭状過形成、血管内乳頭状内皮過形成、前立腺の結節性過形成、結節性再生性過形成、偽上皮腫性過形成、老人性脂腺過形成および疣贅性肥厚；白血病（急性白血病（例：急性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病（骨髄芽球性白血病、前骨髄球性白血病、骨髄単球性白血病、単球性白血病および赤白血病など））および慢性白血病（例：慢性骨髄性（顆粒球性）白血病および慢性リンパ球性白血病）など）、真性赤血球増加症、リンパ腫（例：ホジキン病および非ホジキン病）、多発性骨髄腫、ヴァルデンストレームマクログロブリン血症、重鎖病ならびに線維肉腫、粘液肉腫、フィポ肉腫（fiposarcoma）、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑液腫瘍、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支癌、腎臓細胞癌、肝癌、胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胎生期癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、睾丸腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽細胞腫、頭蓋咽頭腫、上衣細胞腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起細胞腫、髄膜腫、メラノーマ、神経芽細胞腫および網膜芽細胞腫などの肉腫および癌など（これらに限定されるものではない）の固形腫瘍などがあるが、これらに限定されるものではない。
【０２６９】
別の実施形態では、本明細書に記載の少なくとも１種類の化合物を投与する段階を有する加齢性黄斑変性（ＡＲＭＤ）および黄斑網膜色素上皮（ＲＰＥ）細胞が関与する他の病的状態の治療、予防または重度低減方法が提供される。
【０２７０】
ＣＸＣＲ４は、加齢性黄斑変性（ＡＲＭＤ）などの網膜が関与する眼球疾患において非常に重要な役割を果たす。網膜色素上皮は、光受容体層に必須の栄養素に関する輸送および貯蔵系の提供における光受容体外節の生理的再生で主要な役割を有する。網膜色素上皮（ＲＰＥ）細胞は、ＣＸＣＲ４受容体を主に発現する（Crane, et al. (2000) J. Immunol.165: 4372-4278）。血液−網膜関門からのヒト網膜色素上皮細胞でのＣＸＣＲ４受容体発現により、間質細胞由来因子Ｉａに対する応答でケモカインの分泌および移動が生じる（J. Immunol.. 200; 165: 4372-4278）。ＣＸＣＲ４  ｍＲＮＡ発現のレベルは、ＩＬ−１βまたはＴＮＦαによる刺激で上昇する（Dwinell, et al. (1999) Gastroenterology. 117: 359-367）。ＲＰＥ細胞もＳＤＦ−１αに応答して移動し、それはＳＤＦ−１α／ＣＸＣＲ４相互作用が血液−網膜障壁のＲＰＥ部位での慢性炎症および網膜下新血管形成の影響を調節し得ることを示している（Crane IJ, Wallace CA, McKillop-Smith S, Forrester JV. CXCR4 receptor expression on human retinal pigment epithelial cells from the blood-retina barrier leads to chemokine secretion and migration in response to stromal cell-derived factor Ia: J. Immunol. 200; 165: 4372-4278）。
【０２７１】
加齢性黄斑変性は、黄斑ＲＰＥ細胞の一次および二次の両方の損傷を特徴とする。ＡＲＭＤの早期の段階は、黄斑ドルーゼならびにＲＰＥの不規則な増殖および萎縮を特徴とする。ＡＲＭＤの後期段階は、地図状ＲＰＥ萎縮、ＲＰＥ剥離および破裂、脈絡膜血管新生および線維血管性円板状瘢痕化を生じる。共通する第１の症状には、読書不能および顔検出困難を生じる変視症および／または中心視力低下などがある。ＡＲＭＤの後期段階によって中心視力低下が生じ、それが両眼に起こると極端に見えなくなる（Bressler and Bressler (1995) Ophthalmology. 1995; 102: 1206-1211）。
【０２７２】
別の実施形態では、本明細書に記載の少なくとも一つの化合物を投与する段階を有する、炎症疾患状態、新血管形成および創傷治癒の治療、予防または重度低減方法が提供される。
【０２７３】
血管内皮細胞は多数のケモカイン受容体を発現し、ＣＸＣＲ４が特に顕著である（Gupta, et al. (1998) J Biol Chem. 273: 4282；Volin, et al. (1998) Biochem Biophys Res Commnun. 242: 46）。
【０２７４】
ＣＸＣＲ４特異的プライマーを用いたＲＴ−ＰＣＲに基づく戦略によって、ケモカイン受容体ＣＸＣＲ４に関するｍＲＮＡが初代培養および形質転換ＩＩ型肺胞上皮細胞（肺細胞）だけでなく、各種の他組織由来の多くの上皮細胞系でも発現されることが明らかになった（Murdoch, et al. (1998) Immunology. 98(1): 36- 41）。内皮細胞とは異なり、ＣＸＣＲ４は上皮細胞上で発現される唯一のケモカイン受容体である。その受容体は、上皮の病理において機能的な役割を有し得る。ＣＸＣＲ４が炎症応答に関与するか否かについては、現在でも不明である。上皮上で発現されるＣＸＣＲ４は、上皮細胞に対する直接効果により、食細胞の炎症部位への召集を促進し得る。ＣＸＣＲ４は、免疫応答内の他の機能的役割を果たし、創傷治癒もしくは新血管形成に関与もし得る。ＣＸＣＲ４は、上皮に関連するいくつかの急性もしくは慢性炎症疾患状態の病態生理に関与している可能性もある（Murdoch, etal. (1999) Immunology. 98(1): 36-41）。
【０２７５】
さらに本発明は、前駆細胞および／または幹細胞の強化または増加を行うために、動物被験者、特には動物およびヒト被験者を治療する方法に関するものでもある。前駆細胞および／または幹細胞は、回収し、細胞移植で用いることができる。１実施形態では、骨髄前駆細胞および／または幹細胞を動員して心筋修復を行う。さらに本発明は、本明細書に開示の化合物を用いて、白血球（ＷＢＣ）数が少ないか、ＷＢＣレベル上昇が有益であると考えられる動物被験者、特には動物およびヒト被験者を治療する方法に関するものでもある。さらに本発明は、開示の化合物を用いて、再生を必要とする被験者で心臓組織の再生を行う方法に関するものでもある。
【０２７６】
本発明の化合物は、免疫抑制；受容体機能における先天的欠損その他の原因による免疫抑制；および線虫などの蠕虫感染（それに限定されるものではない）等の寄生虫疾患のような感染疾患を引き起こす、化学療法、放射線療法、創傷治癒促進および熱傷処置、自己免疫疾患療法その他の薬物療法（例：コルチコステロイド治療療法）または自己免疫疾患および移植片／移植拒絶の治療で用いられる従来の薬剤の組み合わせを受けている個体などの免疫抑制に関連する疾患の治療に用いることができる。そこで本発明は、被験者における前駆細胞および／または幹細胞の増加が有用であるか、後の幹細胞移植のための前駆細胞および／または幹細胞の回収が有益であると考えられる広範囲の状態を標的とするものである。さらに本発明の方法は、白血球数の低下を特徴とするか、前記ＷＢＣ数の上昇が有益であると考えられる広範囲の状態を標的とする。
【０２７７】
「前駆細胞」という用語は、ある種の刺激に応答して、分化した造血細胞または骨髄性細胞を形成し得る細胞を指す。前駆細胞の存在は、サンプル中の細胞が、例えばＣＦＵ−ＧＭ（コロニー形成単位、顆粒球マクロファージ）；ＣＦＵ− ＧＥＭＭ（コロニー形成単位、多分化能）；ＢＦＵ−Ｅ（バースト形成単位、赤血球）；ＨＰＰ−ＣＦＣ（高増殖能コロニー形成細胞）；または公知のプロトコールを用いて培養で得ることができる他の種類の分化コロニーなどの各種のコロニー形成単位を形成する能力によって評価することができる。「幹」細胞は、分化程度の相対的に低い形態の前駆細胞である。代表的には、そのような細胞はＣＤ３４に関して陽性である場合が多い。しかしながら、一部の幹細胞はこのマーカーを含まない。一般に、ＣＤ３４＋細胞は血液中には低レベルでしか存在しないが、骨髄では多数存在する。
【０２７８】
本発明の化合物は、単独の有効成分として、式（Ｉ）〜（ＸＶＩＩ）の各種化合物の混合物として、ないしは抗生物質、ビタミン、ハーブ抽出物、抗炎症薬、グルコース、解熱剤、鎮痛薬、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、インターロイキン−１（ＩＬ−１）、インターロイキン−３（ＩＬ−３）、インターロイキン−８（ＩＬ−８）、ＰＩＸＹ−３２１（ＧＭ−ＣＳＦ／ＩＬ−３融合タンパク質）、マクロファージ炎症性タンパク質、幹細胞因子、トロンボポイエチン、増殖関連腫瘍遺伝子または化学療法などの治療上または栄養上有用な別の有効成分との混合物で投与することができる。さらに、本発明の化合物は、抗生物質、ビタミン、ハーブ抽出物、抗炎症薬、グルコース、解熱剤、鎮痛薬など、治療上もしくは栄養上有用な別の有効成分との混合物で投与することができる。
【０２７９】
ＳＤＦ−１のＣＸＣＲ４への結合は、アテローム性動脈硬化（Abi-Younes et al. Circ. Res. 86, 131-138 (2000)）、腎臓同種移植拒絶（Eitner et al. Transplantation 66, 1551-1557 (1998)）、喘息およびアレルギー性気道炎症（Yssel et al. Clinical and Experimental AllerD; 28, 104-109 (1998)； J 1777771unol. 164, 59355943 (2000); Gonzalo et al. J Immunol. 165, 499-508 (2000)）、アルツハイマー病（Xia et al. J. Neurovirology 5, 32-41 (1999)）および関節炎（Nanlci et al. J Immunol. 164, 5010-5014 (2000)）の発症においても示唆されている。
【０２８０】
ＣＸＣＲ４拮抗薬の確認方法
別の実施形態では、候補薬剤をスクリーニングする方法が提供される。その方法には、ＣＸＣＲ４受容体に結合した時に検出可能な信号を有する標識ペプチド系ＣＸＣＲ４拮抗薬を提供する段階；ＣＸＣＲ４受容体を既知濃度の少なくとも１種類の被験分子と接触させて試験サンプルを形成する段階；試験サンプルをペプチド系拮抗薬と接触させる段階；別個に、ペプチド系拮抗薬を、被験分子を含まないサンプルに接触させることで対照サンプルを形成する段階；ならびに試験サンプルからの信号を対照サンプルからの信号と比較する段階がある。ある具体的な下位実施形態では、ペプチド系拮抗薬はＴＮ１４００３に由来するものである（エモリー大学に対するＰＣＴ公開第ＷＯ０４／０８７０６８号に記載）。別の下位実施形態では、前記拮抗薬はビオチン分子で標識されており、ビオチン標識拮抗薬がストレプトアビジン結合信号分子と接触した時に前記信号が誘発される。
【０２８１】
ＣＸＣＲ４拮抗薬および受容体の結合によって誘発される信号は、蛍光信号であることができる。１実施形態では、例えば標識拮抗薬分子に結合する分子に結合した蛍光分子などの第２の補助分子を加えた時に信号が誘発される。１実施形態では、前記拮抗薬分子はビオチンで標識され、前記補助分子は蛍光的に標識されたストレプトアビジン分子である。
【０２８２】
前記ペプチド系拮抗薬は代表的には、受容体に対して高アフィニティを有する分子である。１実施形態では、前記分子は「Ｔ１４０」ペプチド拮抗薬由来のものである。ある具体的な実施形態では、前記拮抗薬はＴＮ１４００３（エモリー大学に対するＰＣＴ公開第ＷＯ０４／０８７０６８号に記載）である。 その受容体は代表的には、細胞系で発現される。そのプロセスは、用量−応答曲線として行うことができる。この実施形態では、被験化合物を各種濃度の受容体とともにインキュベートし、標識拮抗薬の結合後に誘発された信号を測定し、対照と比較し、そして互いに比較する。
【０２８３】
（実施例）
【実施例１】
【０２８４】
ペプチド系ＣＸＣＲ４拮抗薬であるＴＮ１４００３は、ＣＸＣＲ４に特異的な新規な造影プローブである
最初に、ＴＮ１４００３がＣＸＣＲ４受容体上の予想ＳＤＦ−１結合部位に結合することを実証するための実験を行った。これらの試験では、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を、４００ｍｇ／ｍＬのＳＤＦ−１αの非存在下（図１Ａ、Ｂ）または存在下（図１Ａ、Ｃ）に１０分間インキュベートし、次に氷冷アセトンで固定した。ビオチン標識ＴＮ１４００３の免疫蛍光がＳＤＦ−１αで１０分間前処理した細胞において膜および細胞質ゾルの両方で陰性であった（図１Ａ、Ｃ）。
【０２８５】
ＣＸＣＲ４のプローブとしてのビオチン化ＴＮ１４００３の有用性を、乳癌患者からの培養乳癌細胞およびパラフィン包埋組織の免疫蛍光染色と組み合わせて調べた。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１は、ＭＤＡ−ＭＢ−４３５と比較したノーザンブロットおよびウェスタンブロットによって示されたように、ＣＸＣＲ４に関して高レベルのｍＲＮＡおよびタンパク質を有していた（図１Ｂ）。ビオチン化ＴＮ１４００３を用いてその２種類の細胞型を染色した時、高ＣＸＣＲ４発現ＭＤＡ−ＭＤ−２３１細胞は明るく染色されたが（図１Ｃ左）、低ＣＸＣＲ４発現ＭＤＡ−ＭＢ−４３５はそれより程度が低く（図１Ｃ右）、これら細胞における低表面ＣＸＣＲ４発現と一致していた。
【０２８６】
癌患者のパラフィン包埋組織切片でのビオチン化ＴＮ１４００３を用いた免疫蛍光染色によって、ＴＮ１４００３を用いて、保存されたパラフィン包埋組織切片からの腫瘍細胞上でＣＸＣＲ４受容体を検出することが可能であることが示された（図１Ｄ）。ジョージア州アトランタのグレイディメモリアル病院トランスレイショナルジェノミクス研究所エイボン組織バンクによって提供された合計４１名の患者の組織を染色し、４個の正常乳房組織のうちの０個、１２個の非浸潤性乳管癌（ＤＣＩＳ）のうちの９個および２５個の節陽性の症例のうちの２３個がＣＸＣＲ４陽性であった。ＤＣＩＳの診断を有する多くのサンプルが、すでにＣＸＣＲ４過剰発現を獲得していた（図１Ｄ）。
【実施例２】
【０２８７】
ＴＮ１４００３は、ＡＭＤ３１００より強力なＣＸＣＲ４関連シグナル伝達阻害薬である
ＣＸＣＲ４／ＳＤＦ−１相互作用は、Ｇαｉタンパク質（ＰＴＸ感受性）依存的にＰＩ３Ｋ／ＡｋｔおよびＲａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／Ｅｒｋ経路を活性化する。実験を行って、各種濃度（０、０．０１、０．１、１、１０、１００、１０００ｎＭ）でのＴＮ１４００３またはＡＭＤ３１００のいずれかによるＣＸＣＲ４／ＳＤＦ−１相互作用の遮断がＡｋｔおよびＥｒｋ１／２シグナル伝達のリン酸化に与える効果を求めた。細胞を１００ｎｇ／ｍＬのＳＤＦ−１とともに３０分間インキュベートすることで、Ａｋｔを活性化した。サブナノモル濃度のＴＮ１４００３または数ナノモルのＡＭＤ３１００のいずれかによってＡｋｔ活性化を遮断した（図２）。サブナノモル濃度のＴＮ１４００３または１００ｎＭ  ＡＭＤ３１００の存在下に、Ｅｒｋ１／２リン酸化を弱めた（データは不図示）。しかしながら、ＳＤＦ−１によるＥｒｋ１／２リン酸化の増加は、Ａｋｔリン酸化における増加ほど顕著ではなかった。その結果は、ＣＸＣＲ４介在シグナル伝達の阻害において、ＴＮ１４００３の方がＡＭＤ３１００より強力であることを示している。ＳＤＦ−１、ＴＮ１４００３またはＡＭＤ３１００による細胞の処理は、ＣＸＣＲ４タンパク質レベルに影響しなかった。
【実施例３】
【０２８８】
ｓｉＲＮＡによるＣＸＣＲ４のノックダウンが、肺における転移を遮断する
哺乳動物細胞での標的遺伝子を沈黙させるＲＮＡ干渉技術が、遺伝子機能の研究に対する強力な手段となってきた。ＣＸＣＲ４（ジェンバンク受託番号ＮＭ＿００３４６７）の２つの異なるｓｉＲＮＡ二本鎖、ｓｉＲＮＡ１（センス、５′−ＵＡＡＡＡＵＣＵＵＣＣＵＧＣＣＣＡＣＣｄＴｄＴ−３′）およびｓｉＲＮＡ２（センス、５′−ＧＧＡＡＧＣＵＧＵＵＧＧＣＵＧＡＡＡＡdＴｄＴ−３′）を、ダーマコン（Dharmacon）（Lafayette, CO）が設計し、そこから購入した。ＣＸＣＲ４  ｓｉＲＮＡと同じＧＣ含有率（４２％、Ｄ００１２０６−１０）で、非特異的対照ｓｉＲＮＡ二本鎖をダーマコンから購入した。
【０２８９】
ｓｉＲＮＡによってＣＸＣＲ４  ｓｉＲＮＡレベルを低下させることで、マトリゲル侵襲アッセイによって測定されるＣＸＣＲ４／ＳＤＦ−１介在侵襲を阻害した。ＣＸＣＲ４リガンドであるＳＤＦ−１（４００ｎｇ／ｍＬ）を下側チャンバに加えて、ＣＸＣＲ４陽性乳癌細胞を引きつけることで、マトリゲルを通過して移動させた。ｓｉＲＮＡ１でトランスフェクションしたＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の侵襲は、対照細胞の３９±４％まで低下し、ｓｉＲＮＡ２では５１±８％であり、ｓｉＲＮＡ１＋２の両方では１６±６％に過ぎなかった（図３Ａ）。図３Ｂは、ＣＸＣＲ４の低下がＶＥＧＦおよびＣＤ４４のｍＲＮＡレベルに影響し、ＨＩＦ−１αのｍＲＮＡレベルに影響しなかったことを示している。
【０２９０】
ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞でのＣＸＣＲ４レベル低下が実験動物モデルでの肺転移を遮断するか否かを確認するため、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を各種組み合わせのＣＸＣＲ４ｓｉＲＮＡでトランスフェクションし、雌ＳＣＩＤマウスに、腫瘍細胞注入後にそれのみで（リポソームなし）尾静脈から週２回静脈注射した（群２〜４）。腫瘍細胞注射から４５日後、対照群（群１）における全ての動物で肺転移が発生した。対照的に、群２で転移が発生したのは１匹の動物のみであり、それはほとんど肉眼で見えないものであった。図４Ａにおける肺の代表的な写真は、対照群において顕著に嚢胞性の肺微小転移を示した。他方、３つの処置群からの肺の３つの代表的な写真では、肺転移はほとんど肉眼で認められず、最も顕著には群２および３でそうであることが明らかになった。群２からの肺組織のＨ＆Ｅ染色では正常な肺の形態が示されたが、対照群からのものは侵襲性腫瘍細胞が示された（図４Ａ）。
【０２９１】
これらの結果を、マウスでの対応するものと交差反応しないヒトハウスキーピング遺伝子ｈＨＰＲＴについてのプライマーを用いる半定量的リアルタイムＲＴ−ＰＣＲによってさらに確認した（図４Ｂ）。リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ分析で、対照群でのＳＣＩＤの転移浸潤肺においてｈＨＰＲＴ  ｍＲＮＡの発現が高度であることが明らかになった。群２および３でのマウスの肺におけるヒトＨＲＰＴの発現レベルは、対照群のものより有意に低かった（図４Ｂ）。対照群マウス肺では高いＣＸＣＲ４発現があり、処置群マウスの肺ではかなり低いＣＸＣＲ４発現があった（図４Ｃ）。ＦＤＧを用いたマイクロＰＥＴ撮像を用いて、群１および２のマウスでの肺転移を検出した。図５には代表的なＦＤＧ−ＰＥＴ画像が示してあり、対照群での肺転移および群２での有意に少ない肺転移が確認される。図５Ａは、群１（対照）の３匹の代表的マウスから得られた最大強度投射（３次元）である。胸部領域は、ｓｉＲＮＡ１＋２処置群のいずれのマウス（右）と比較しても、対照群の各マウス（左）の方が有意に明るい。ＦＤＧの分泌のために、膀胱では高ＦＤＧ取り込みも認めることができる。図５Ｂおよび５Ｃは、それぞれ特定の冠状断面画像および体軸横断面画像である。図５中の肺領域の最大標準化取り込み値（ＳＵＶｍａｘ）は、８．６、７．１、９．３、２．２、２．５および ２．１であった。総合して、これらの画像は、ＦＤＧ取り込みが、ｓｉＲＮＡ１＋２処置群（右）より対照群（左）からの肺の方がはるかに高値であることを示しており、それはｓｉＲＮＡ１＋２処置群より対照群での肺転移が多いことと関連している。
【実施例４】
【０２９２】
ＣＸＣＲ４およびＨＩＦ−１αによるＶＥＧＦプロモーター調節
ＣＸＣＲ４レベルの低下がＨＩＦ−１αと比較してＶＥＧＦ転写に影響し得るか否かを確認するため、ファン・メイア（Van Meir）博士の研究室からの低酸素症レポーティングルシフェラーゼ／ＬａｃＺプラスミドをレポーターシステムとして用いて、ＶＥＧＦプロモーター活性の低酸素症応答要素（ＨＲＥ）を検出した（Post, D. E. and Van Meir, E. G. (2001) Gene Ther 8: 1801-1807）。ＨＩＦ−１αｓｉＲＮＡの配列は、５′−ＵＵＣＡＡＧＵＵＧＧＡＡＵＵＧＧＵＡＧｄＴｄＴ−３′であった。このプラスミドで安定にトランスフェクションされたＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を用いて、プール細胞クローンを形成した（ＨＲＥ−ＬｕｃＭＢ−２３１と称する）。予想外に、通常酸素状態でのＨＲＥ活性は、通常酸素状態での高ＣＸＣＲ４レベル（図６左）を有するＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞で中等度に高く、それは低ＣＸＣＲ４およびＨＩＦ−１レベルである他の細胞系（ＬＮ２２９、Ｕ８７、９ＬおよびＭＤＡ−ＭＢ−４３５）では認められなかった。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞でのこの中等度に高いＨＲＥ活性は、ＣＸＣＲ４ｓｉＲＮＡまたはＨＩＦ−１αｓｉＲＮＡによって抑制された。ＨＲＥ活性は、ＣＸＣＲ４ｓｉＲＮＡおよびＨＩＦ−１αｓｉＲＮＡの併用治療を４８時間行うことで大きく低下した。予想通り、ＨＲＥ活性は低酸素処置（窒素中１％酸素および５％ＣＯ２）によって２．５倍上昇した。この高ＨＲＥ活性もやはり、ＣＸＣＲ４またはＨＩＦ−１αのｓｉＲＮＡによって抑制された（図６、右）。
【実施例５】
【０２９３】
ビオチン標識ＴＮ１４００３（ペプチド系）を用いる競争アッセイによる新規な抗ＣＸＣＲ４小分子のスクリーニング
ＣＸＣＲ４のロドプシン系相同モデルの分子力学シミュレーションは、ＡＭＤ３１００は、２つのアスパラギン酸によるＣＸＣＲ４／ＳＤＦ−１結合と相互作用することから弱い部分作動薬であるが、ペプチド系ＣＸＣＲ４拮抗薬であるＴ１４０（ＴＮ１４００３と同様）は細胞表面に対して近位である疎水性核の細胞外ドメインおよび領域でＣＸＣＲ４のＳＤＦ−１結合部位に強力に結合することを示している（Trent, et al. (2003) J Biol Chem 278: 47136-47144）。この構造データを用いて、分子フレームワークを通じて複数窒素を有する化合物のライブラリを形成したが、構造的にはＡＭＤ３１００と異なっていた。
【０２９４】
ストレプトアビジン結合ローダミンとともにビオチン標識ＴＮ１４００３を用いることで、腫瘍細胞上のＣＸＣＲ４のＳＤＦ−１結合部位に対するこれら化学物質の結合有効性の測定が可能となり、ＡＭＤ３１００−ＳＤＦ−１相互作用とそれを比較した（図７）。リガンド結合部位に高いアフィニティを有する化合物とともにインキュベートした細胞は青色の核染色のみを示し、低アフィニティを有する化合物では両方のＣＸＣＲ４で赤（ローダミン）および青核染色を生じた。細胞を、各種濃度のＡＭＤ３１００とともに前インキュベートした。その結果は、ビオチン標識ＴＮ１４００３に対して競争させるには、ＡＭＤ３１００については１０μＭ濃度が必要であることを示していた。他方、一部の候補化合物は、非常に低濃度でＴＮ１４００３と同様に強力であった。従って、これら化合物のうちの一つであるＷＺＺＬ８１１Ｓを選択して、効力および細胞に対する低毒性に基づくそれの治療潜在力を調べた（図９）。図８に、ナノモル濃度での腫瘍細胞上のＣＸＣＲ４のリガンド結合部位（ＴＮ１４００３結合部位とほぼ同じ）に対するＷＺＺＬ８１１Ｓの結合アフィニティを示している。ＷＺＺＬ８１１Ｓは、１００μＭ（調べた中で最も高い濃度）であってもＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の細胞生存率を低下させなかった。
【実施例６】
【０２９５】
ＷＺＺＬ８１１Ｓは、ＣＸＣＲ４／ＳＤＦ−１介在マトリゲル侵襲およびＣＸＣＲ４／ＳＤＦ−１介在Ａｋｔ活性化を阻害する
ＷＺＺＬ８１１Ｓをマトリゲル侵襲アッセイで調べて、ＣＸＣＲ４／ＳＤＦ−１介在侵襲を阻害し得るか否かを確認した。図１０Ａに示したように、ＷＺＺＬ８１１Ｓは、同じ濃度（２ｎＭ）でのＳＤＦ−１誘発侵襲の遮断において、ＴＮ１４００３と同等の効力を有していた。図１０Ｂは、ＷＺＺＬ８１１Ｓが用量依存的にＳＤＦ−１／ＣＸＣＲ４誘発Ａｋｔリン酸化を遮断したことを示している。
【実施例７】
【０２９６】
動物モデル
ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を尾静脈から注射することで、転移に関して実験動物モデルを作った。９０％を超える動物が、４５日以内に肺転移を生じた。腫瘍細胞を脛骨内注射することで、転移に関する別の実験動物モデルを形成した。約５０％の動物が４５日以内に骨転移を生じた。ＦＤＧ−ＰＥＴは、肺転移（図５）および骨転移（図１１）が本発明者らのＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞から生じたことを明瞭に示している。
【０２９７】
転移性６８６ＬＮ細胞を、尾静脈から静脈注射することで、ＣＸＣＲ４を介して調節される頭部および頸部癌転移に関する実験動物モデルを形成した。３０日後、これらの転移性細胞は、対照群（媒体処置）において肺、肝臓および骨髄に転移したが、非侵襲性［１８Ｆ］−フルオロデオキシグルコース陽電子放出型断層撮影（ＦＤＧ−ＰＥＴ）によって測定されたペプチド系ＣＸＣＲ４拮抗薬ＴＮ１４００３（２０ｍｇ／マウス／週２回）ではいずれの臓器にも転移しなかった（図１２）。各パネルは、６匹のマウスのＦＤＧ−ＰＥＴ画像を示しており、緑色の矢印によって大きい肺転移が示されている（膀胱は、排泄のために高ＦＤＧ取り込みを示しており、腫瘍関連ではない）。これらの３Ｄ投射画像は、肺転移を良好に示している（対照群のマウスの骨転移および肝臓転移が、横断面画像で認められたが、データは示していない）。小分子抗ＣＸＣＲ４化合物ＷＺＺＬ８１１Ｓ（２０ｍｇ／マウス／週２回）は、恐らくは化合物の半減期が短いためにＴＮ１４００３の８０％の効力を示した。
【実施例８】
【０２９８】
新規な抗ＨＩＦ１α化合物の薬物動態
新規な抗ＨＩＦ−１α小分子の薬物動態研究を行った。神経膠腫細胞の低酸素レポーティングプラスミド（上記）でトランスフェクションした安定に統合された低酸素レポーター系を利用した。化合物１００００個の天然産物様小分子ライブラリをスクリーニングし、「ベストヒット」を確認した。血漿および他の生体サンプル中のＫＣＮ−１を定量的に検出するために、ＨＰＬＣ方法を開発した。薬物動態試験のため、ＫＣＮ−１（１００ｍｇ／ｋｇ）をＤＭＳＯに溶かし、マウスに静脈投与した。血漿サンプルを所定の時間点で採取し（０．２５、０．５、１、２、４および８時間）、ＫＣＮ−１レベルをＨＰＬＣによって定量した。ＨＰＬＣ系は、バリアンのプロスター（Prostar）勾配ポンプ、プロスターオートサンプラーおよびプロスターフォトダイオードアレイ検出器からなるものであった。カラムは、ルナ（Luna）５μ  Ｃ１８カラム（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ、フェノメネクス（Phenomenex））であった。ＫＣＮ１および内部標準の保持時間は、それぞれ８．７分および１７．７分であった（図１３）。２時間かけて化合物を全身投与した後に、ＷＺＺＬ８１１ＳおよびＷＺ４０のイン・ビボ安定性を測定した（図１７）。
【実施例９】
【０２９９】
内皮毛細管形成アッセイ
内皮細胞の増殖および管形成を分析することで、被験化合物の抗血管新生効果を測定した。ヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）による毛細管形成に対するＳＤＦ−１ （１００ｎｇ／ｍＬ）の血管新生効果を、マトリゲルで前コーティングし、１８時間インキュベートしたマトリゲルコート２４ウェルプレートを用いてイン・ビトロで調べた。ＳＤＦ−１の血管新生効果は、１００ｎＭのＴＮ１４００３（ペプチド系ＣＸＣＲ４拮抗薬）またはＷＺＺＬ８１１Ｓ処理のいずれかによって阻害された（図１４ａ、グラフ図１４ｂ）。図１４Ｂは、対照（ＮＣ）に対して正規化された内皮細胞管数のグラフでの解析を示す図である。
【実施例１０】
【０３００】
ＨＩＶのモデルにおける効力
モデル細胞でのＨＩＶ感染に対する被験化合物の効果を、ＳＨＩＶ感染細胞を用いてｐ２７抗原捕捉によって分析した。細胞を０、０．１、１、１０または１００ｎＭの薬剤とともにインキュベートしてから、ＳＨＩＶで感染させた。ｐ２７抗原のレベルを分析することで、感染後にウィルス力価を測定した。ＷＺ４０、ＷＺＺＬ８１１ＳおよびＷＺ４１とともにインキュベーションした場合の結果を、図１５および１６に示してある。被験化合物は、調べた濃度全てでＳＨＩＶ感染を阻害した。その阻害は、２日目に測定可能であり、５日間のインキュベーションまで続いた。
【実施例１１】
【０３０１】
ＣＸＣＲ４への結合でＳＤＦ−１に対して調べた化合物
ＳＤＦ−１と比較した場合の、ＣＸＣＲ４に結合する被験化合物のｎＭ単位でのＩＣ５０を示すアッセイ結果（競争アッセイ）を下記の表２に示してある。マウスでの化合物の半減期を測定した場合には、それも示してある。
【０３０２】
【表４】
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【図面の簡単な説明】
【０３０３】
【図１】ＴＮ１４００３の特異性を示す染色細胞およびブロットの画像である。
【図２】Ａｋｔのリン酸化を示すウェスタンブロットの画像である。
【図３】染色細胞およびＣＸＣＲ４ｓｉＲＮＡでトランスフェクションされたＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の侵襲を示すブロットの画像を示す図である。
【図４】細胞および肺の画像、ならびにイン・ビボでの乳癌転移の阻害に対するＣＸＣＲ４ｓｉＲＮＡの効果のグラフを示す図である。
【図５】群１（対照ｓｉＲＮＡ）および群２（ｓｉＲＮＡ１＋２）における動物のＦＤＧ−ＰＥＴの代表的画像を示す図であり、イン・ビボでの乳癌転移の阻害に対するＣＸＣＲ４ｓｉＲＮＡの効果を示す図である。
【図６】ＨＲＥ活性のグラフである。
【図７】レポーターとしてビオチン標識ＴＮ１４００３を用いる薬剤スクリーニング方法を示す細胞の蛍光顕微鏡写真画像である。
【図８】染色細胞の蛍光顕微鏡写真画像である。
【図９】ＷＺＺＬ８１１Ｓの化学構造の表示である。
【図１０】細胞におけるマトリゲル侵襲およびＡｋｔリン酸化のグラフおよび代表的ブロットである。
【図１１】ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の骨転移を示すマウスのＸ線画像である。
【図１２】実施例７に記載のマウス動物のＦＤＧ−ＰＥＴ画像である。
【図１３】実施例８に記載の方法に従って行われるＨＰＬＣ分析のグラフである。
【図１４】内皮毛細管形成アッセイの画像およびグラフである。
【図１５】指定量のＷＺＺＬ８１１Ｓ、ＷＺ４０またはＷＺ４１Ｓとともにインキュベーションした後に測定されたｐ２７レベルのグラフである。
【図１６】指定量のＷＺ４０とともにインキュベートし、ＳＨＩＶで２、４または５日間感染させた後に測定したｐ２７レベルのグラフである。
【図１７】全身投与後の指定時点で測定したＷＺＺＬ８１１Ｓ量のグラフであり、ＷＺＺＬ８１１ＳおよびＷＺ４０のイン・ビボでの安定性を示す図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【国際調査報告】
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