(57)【要約】IBS、IBD、クローン病、抗生物質によって誘発される下痢、および他の腸障害を処置するための、プロバイオティック成分およびプレバイオティック成分の混合物を含む新規な製品が、本明細書に記載される。安定化された米糠、RiSolubles、RiceMucil、およびCea100を含む、安定化された米糠誘導体が、プレバイオティクスの供給源として使用される。このプレバイオティック供給源はフラクトオリゴ糖が豊富なだけではなく、腸管の健康および腸におけるビフィドバクテリアの増殖のための、強力な抗酸化物およびファイトニュートリエントも有する。使用されるプロバイオティクスは、標的とする特定の胃腸病によって、乳酸桿菌種の組合せおよび濃度が異なる。冷蔵した場合、本製品は少なくとも一年間貯蔵安定性である（95〜99%）。2008515809.tif 000007
2008515809.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下を含む、シンバイオティック（synbiotic）組成物：
（i）乳酸桿菌属（Lactobacillus）種を含むプロバイオティック（probiotic）組成物;ならびに
（ii）少なくとも一つの安定化された米糠誘導体を含むプレバイオティック（prebiotic）混合物であって、該安定化された米糠誘導体が、トコール、フィトステロール、γ-オリザノール、およびイノシトール六リン酸（IP6）からなる群より選択される少なくとも一つの天然の抗酸化物を含む、プレバイオティック混合物。
【請求項２】
前記の少なくとも一つの安定化された米糠誘導体が以下からなる群より選択される、請求項1記載の組成物：
安定化された米糠の水溶性画分;安定化された米糠の水不溶性画分;ならびに、安定化された米糠の水溶性画分および水不溶性画分の組合せ。
【請求項３】
前記プレバイオティック混合物が、オリゴ糖、多糖、およびフラクトオリゴ糖からなる群より選択される少なくとも一つの構成成分を含む、請求項2記載の組成物。
【請求項４】
ファイトニュートリエント（phytonutrient）をさらに含む、請求項3記載の組成物。
【請求項５】
前記プレバイオティック組成物が低アレルギー性である、請求項2記載の組成物。
【請求項６】
前記シンバイオティック組成物中のプレバイオティックの量が5%〜60% w/wである、請求項2記載の組成物。
【請求項７】
プロバイオティック組成物がビフィドバクテリア（Bifidobacteria）種をさらに含む、請求項1記載の組成物。
【請求項８】
前記乳酸桿菌属種がL.カゼイ（L. caesi）、L.アシドフィルス（L. acidophilus）、L.プランタルム（L. plantarum）、およびL.ラムノース（L. rhamnosus）からなる種の群より選択される少なくとも一つの種を含む、請求項7記載の組成物。
【請求項９】
酵母菌種をさらに含む、請求項7記載の組成物。
【請求項１０】
前記シンバイオティック組成物が投薬形態であり、前記投薬形態が一用量当たり106〜1010の生存可能なコロニー形成単位を含有する、請求項7記載の組成物。
【請求項１１】
前記シンバイオティック組成物が重量パーセントベースで20%未満のプレバイオティクス（prebiotics）を含む、請求項9記載の組成物。
【請求項１２】
前記シンバイオティック組成物の少なくとも40% w/wが前記酵母菌からなる、請求項11記載の組成物。
【請求項１３】
前記組成物が重量パーセントベースで少なくとも20%のプレバイオティクスを含む、請求項7記載の組成物。
【請求項１４】
前記組成物が重量パーセントベースで少なくとも40%のプレバイオティクスを含む、請求項7記載の組成物。
【請求項１５】
請求項1記載の組成物を含む植物性カプセル。
【請求項１６】
腸溶コーティングされる、請求項15記載の植物性カプセル。
【請求項１７】
室温で液体である、請求項1記載の組成物。
【請求項１８】
錠剤形態である、請求項1記載の組成物。
【請求項１９】
粉末形態である、請求項1記載の組成物。
【請求項２０】
約0〜10℃の温度で保管した場合に少なくとも一年間安定である、請求項1記載の組成物。
【請求項２１】
過敏性腸症候群（IBS）および関連する腸障害を処置または予防する方法であって、請求項1記載の組成物の治療的有効量を、このような処置を必要とする患者に投与する段階を含む方法。
【請求項２２】
前記患者が以下からなる群より選択される疾病を有すると診断された患者である、請求項21記載の方法：
炎症性腸症候群、クローン病、潰瘍性大腸炎、未確定の結腸炎、顕微鏡的結腸炎、膠原性結腸炎、小腸の特発性炎症、クロストリジウム デフィシレ（Clostridium difficile）による下痢、旅行者下痢症、および抗生物質により誘発される下痢。
【請求項２３】
対象の免疫機能を強化する、請求項21記載の方法。
【請求項２４】
対象の腸管の健康を向上させる、請求項21記載の方法。
【請求項２５】
対象において上皮の酵素産生を誘導する、請求項21記載の方法。
【請求項２６】
対象の腸においてビタミン合成を誘導する、請求項21記載の方法。
【請求項２７】
対象の胃腸管における毒素レベルの実質的な低下をもたらす、請求項21記載の方法。
【請求項２８】
対象において癌細胞および前癌細胞のアポトーシスを誘導する、請求項21記載の方法。
【請求項２９】
対象の胃腸および結腸全体の健康を向上させる、請求項21記載の方法。
【請求項３０】
対象において、鼓脹、腹部の膨張、またはガス産生を低下させる、請求項21記載の方法。
【請求項３１】
対象において腸の規則性を向上させる、請求項21記載の方法。
【請求項３２】
対象において健康的な体重減少を促進する、請求項21記載の方法。
【請求項３３】
対象において、有害な微生物およびウイルスの感染症を処置または予防する、請求項21記載の方法。
【請求項３４】
以下の段階を含む、シンバイオティック組成物の有効性を決定するための在宅調査を実施する方法：
志望する患者にオンライン調査票を提供する段階;
前記の志望する患者から記入済調査票を電子的に受信する段階;
志望する患者が前記在宅調査に適格であるかどうか、前記記入済調査票から決定する段階;
被験シンバイオティック製剤、該被験シンバイオティック製剤を所定の期間にわたって投与するための指示書、および、適格である志望者が前記シンバイオティック投与の効果を自己記録するための第二の調査票を、適格である志望者に提供する段階;
前記の所定の期間が経過した後に、前記の第二の調査票から自己記録されたデータを収集する段階;ならびに
前記の自己記録されたデータを評価する段階。
【請求項３５】
前記被験シンバイオティック製剤が請求項1記載のシンバイオティック組成物である、請求項34記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
関連出願
本出願は、2004年10月4日に出願され、その全体が全ての目的について参照により本明細書に組み入れられる、「SynBiotics」と題される米国特許出願第60/615,908号の恩典を主張するものである。
【０００２】
背景
胃腸管は、その生理学的、生化学的、ならびに分子構造および機能において多様である。従って、病態が、関係する器官により、潰瘍性大腸炎、炎症性腸疾患（IBD）、および過敏性腸症候群（IBS）などの非常に様々な病因を有することは驚くことではない。これらの疾患の直接的効果または栄養失調状態は、粘膜免疫および完全性の損失、微生物相崩壊、または胃腸（GI）管の潰瘍性病変さえももたらす可能性がある。
【０００３】
したがって、任意の医薬的または免疫療法的介入の役割は、最適な腸管機能の損失と釣り合うものでなければならない。現在の医薬的アプローチの多くは、胃腸の健康の向上に関して不完全である。消化不良から潰瘍性大腸炎までの腸管の状態は、医用薬物全般を用いて処置される。病院の胃腸科病棟におけるほとんどの症例は、胃食道逆流、消化性潰瘍性病変、非潰瘍性消化不良、便秘、IBD、IBS、およびクローン病に関係する。グルテン過敏症によって引き起こされる小児脂肪便症は、米国人口の0.5〜1%に影響を及ぼしている。腸管障害を有する大多数の患者は潜在的な癌を有さないが、本状態を排除することが重要である。
【０００４】
IBDの処置は、胃腸病専門医にとって主要な課題である。繊維が腸の能率を補助し、IBSの症状を軽減する可能性があることが公知である。Metamucil（商標）およびCitrucel（商標）は、胃腸病専門医にとっての最上の選択肢である。これらの増加しつつある製剤は、しかしながら、過敏症、ガス発生、膨満、および腹部の膨張を含む多くの副作用をこうむる。最近、Lotronex（商標）という名の医用製品がIBS用に市販されたが、しかし、この薬物を与えられた患者は、深刻な副作用をこうむった。
【０００５】
多くの胃腸の状態には、現在提供されている治療法は不十分である。従って、これらの状態を処置するための新規な医薬および「天然の」アプローチに対する強い需要が存在する。
【発明の開示】
【０００６】
発明の簡単な概要
本発明は、プロバイオティクス（probiotics）およびプレバイオティクス（prebiotics）の新規な混合物、ならびに、いくつかのGI障害の、望ましくない副作用を伴わない効果的な処置に有用な、該混合物の投与方法を提供する。「SynBiotics」とは、プレバイオティクスに加えて、天然の抗酸化物と共にプロバイオティクスを含む組成物に対して使用される用語である。
【０００７】
1つの態様において、本発明はシンバイオティック組成物を提供し、本組成物は（i）乳酸桿菌属種を含むプロバイオティック（probiotic）組成物;ならびに（ii）少なくとも一つの安定化された米糠誘導体を含むプレバイオティック（prebiotic）混合物であって、該安定化された米糠誘導体がトコール、フィトステロール、γ-オリザノール、およびイノシトール六リン酸（IP6）からなる群より選択される少なくとも一つの天然の抗酸化物を含む、プレバイオティック混合物を含む。関連した態様において、前記の安定化された米糠誘導体は、安定化された米糠の水溶性画分、安定化された米糠の水不溶性画分、ならびに安定化された米糠の水溶性画分および水不溶性画分の組合せからなる群より選択される。
【０００８】
関連した態様において、前記シンバイオティック組成物のプレバイオティック混合物は、オリゴ糖、多糖、およびフラクトオリゴ糖からなる群より選択される少なくとも一つの構成成分を含む。他の関連した態様において、前記プレバイオティック混合物はファイトニュートリエント（phytonutrient）をさらに含む。更に他の関連した態様において、前記プレバイオティック組成物は低アレルギー性である。さらにもう一つの関連した態様において、前記プレバイオティックの量は、前記シンバイオティック組成物の5%〜60% w/wである。
【０００９】
本発明のシンバイオティック組成物のもう一つの態様において、本組成物のプロバイオティック成分はさらにビフィドバクテリア（Bifidobacteria）種を含む。さらに別の態様において、前記プロバイオティック成分の乳酸桿菌属種は、L.カゼイ（L. caesi）、L.アシドフィルス（L. acidophilus）、L.プランタルム（L. plantarum）、およびL.ラムノース（L. rhamnosus）からなる種の群より選択される少なくとも一つの種を含む。さらにもう一つの態様において、前記プロバイオティック組成物は、酵母種、例えばサッカロミセス ブラウディ（Saccharomyces boulardii）などのサッカロミセス属（Saccharomyces）種をさらに含む。
【００１０】
さらにもう一つの態様において、本発明は、一用量当たり106〜1010の生存可能なコロニー形成単位を含有する投薬形態でシンバイオティック組成物を提供する。さらにもう一つの態様において、前記シンバイオティック組成物は、重量パーセントベースで20%未満のプレバイオティクスを含む。関連した態様において、少なくとも40% w/wの本発明のシンバイオティック組成物は、サッカロミセス ブラウディなどの酵母種からなる。さらにもう一つの態様において、前記シンバイオティック組成物は、重量パーセントベースで少なくとも20%または少なくとも40%のプレバイオティクスを含む。
【００１１】
本発明はさらに、新規なシンバイオティック組成物が植物性カプセルに封入される態様を提供する。関連した態様において、植物性カプセルは腸溶コーティングされる。他の態様において、本発明のシンバイオティック組成物は室温で液体である。他の態様において、前記シンバイオティック組成物は、錠剤または粉末形態である。さらに別の態様において、前記シンバイオティック組成物は約0〜10℃の温度で保管した場合に少なくとも一年間安定である。
【００１２】
本発明はさらに、本明細書に記載される新規なシンバイオティック組成物を投与することによって様々な胃腸の病気の症状を処置または緩和する方法を提供する。具体的には、一つの態様において、本発明はシンバイオティック組成物の治療的有効量をこのような処置を必要とする患者に投与する段階を含む、過敏性腸症候群（IBS）および関連する腸障害を処置または予防する方法を提供する。関連した態様において、前記患者は以下からなる群より選択される疾病を有すると診断された患者である：炎症性腸症候群、クローン病、潰瘍性大腸炎、未確定の結腸炎、顕微鏡的結腸炎、膠原性結腸炎、小腸の特発性炎症、クロストリジウム ディフィシレ（Clostridium difficile）による下痢、旅行者下痢症、および抗生物質により誘発される下痢。関連した態様において、前記処置方法は、対象の免疫機能を強化するか、対象の腸管の健康を向上させるか、上皮の酵素産生を誘導するか、対象の腸においてビタミン合成を誘導するか、対象の消化管における毒素レベルの実質的な低下をもたらすか、対象において癌細胞および前癌細胞のアポトーシスを誘導するか、対象の胃腸および結腸全体の健康を向上させるか、鼓脹、腹部の膨張、もしくはガス産生を低下させるか、腸の規則性を向上させるか、有害な微生物もしくはウイルスの感染症を予防もしくはその症状を緩和するか、または対象において健康的な体重減少を促進する。関連した態様において、前記処置方法は複数の、上述した有益な健康上の効果を達成する。
【００１３】
さらに別の態様において、本発明は、以下の段階を含む、シンバイオティック組成物の有効性を決定するための在宅調査を実施する方法を提供する：志望する患者にオンライン調査票を提供する段階;前記の志望する患者から記入済調査票を電子的に受信する段階;志望する患者が前記在宅調査に適格であるかどうか、前記記入済調査票から決定する段階;被験シンバイオティック製剤、該被験シンバイオティック製剤を所定の期間にわたって投与するための指示書、および前記適格な志望者が前記シンバイオティック投与の効果を自己記録するための第二の調査票を、適格である志望者に提供する段階;前記の所定の期間が経過した後に、前記の第二の調査票から自己記録されたデータを収集する段階;ならびに前記の自己記録されたデータを評価する段階。関連した態様において、前記被験シンバイオティック製剤は（i）乳酸桿菌属種を含むプロバイオティック組成物;ならびに（ii）少なくとも一つの安定化された米糠誘導体を含むプレバイオティック混合物であって、該安定化された米糠誘導体がトコール、フィトステロール、γ-オリザノール、およびイノシトール六リン酸（IP6）からなる群より選択される少なくとも一つの天然の抗酸化物を含む、プレバイオティック混合物を含む。
【００１４】
詳細な説明
本発明は、様々な胃腸の病気を処置するための、所定の割合のプレバイオティクスおよびプロバイオティクスの製剤ならびにこれらの製剤を含むカプセルを提供する。特定の局面において、本発明の製剤は、一緒に作用して有益な効果を提供する、選択されたプロバイオティクスおよびプレバイオティクスの新規な組合せを含む混合物である。
【００１５】
特定の態様において、製剤に使用される本発明の化合物および方法は、米糠油、酵素処理された安定化された米糠、酵素処理された安定化された米糠の可溶化画分、またはこれらの混合物を含むがこれらに限定されない、安定化された米糠誘導体を含む。好ましくは、利用された安定化された米糠誘導体は可溶化画分である。製剤で使用される本発明の他の化合物および方法は、グルコサミン誘導体、メチルスルホニルメタン、イトラン濃縮物、ブドウ種抽出物、クルクミン、ショウガ粉末、ボスウェリン（boswellin）、およびアシュワガンダ（ashwagandha）を含むことができるがこれらに限定されない栄養強化薬剤を含む。本発明の化合物は、トコールなどの、米糠誘導体の活性成分抽出物も含むこともできる。
【００１６】
「トコール」という用語は、抗酸化特性を有するトコフェロールおよびトコトリエノールとして公知である複合体ビタミンEを意味する。これらのビタミンの、少なくとも10種の異なる異性体の形態が存在する。「トコール組成物」という用語は、トコールを含む任意の組成物を意味する。
【００１７】
「ファイトニュートリエント」および「植物化学物質」という用語は、人の健康に対して有益な特性を有する植物由来テルペン、カロチノイド、リモノイド、およびフィトステロールを説明するように、交換可能に使用される。
【００１８】
本明細書で使用する場合、「酵素処理した安定化された米糠誘導体」という用語は、安定化された米糠と水溶液とを15%〜35% w/wの水分を含むスラリーで混合すること;デンプンをデキストリンに変換するために水分を含む米糠スラリーに酵素を加え、その後デキストリン溶液を直接乾燥させて、酵素処理した安定化された米糠誘導体を形成することにより作られた、酵素処理した安定化された米糠を意味する。前記の酵素処理した安定化された米糠は、合計で約20%〜約30%の食物繊維を含む。
【００１９】
前記米糠の加工および米糠の栄養性組成物ならびに本発明の製剤で使用される安定化された米糠誘導体の他の局面は、「Method for Treating Hypercholesterolemia, Hyperlipidemia, and Atherosclerosis」と題される発行された米国特許第6,126,943号および第6,350,473号においてさらに説明され、これらは共に参照により本明細書に組み入れられる。
【００２０】
本明細書で使用する場合、「安定化された米糠誘導体可溶化画分」という用語は、分配プロセスの間に得られた画分を意味する。特に、安定化された米糠の水分を含むスラリーを酵素によって処理した後、これを不溶性画分が水溶液から分かれて沈殿する遠心分離機にポンプで送りこむことができる。前記の水性材料はその後乾燥機にポンプで送りこまれ、乾燥される。この乾燥された水性部分は、可溶性分画を生じる。このような可溶性分画の構成物（例えばNutraCea社の製品であるRiSolubles（商標））は下記の表1に記載されており、安定化された米糠誘導体の可溶化画分の調製法は、本明細書の実施例1において詳述される。
【００２１】
（表１）RiSolubles（商標）
2008515809.tif 000003
【００２２】
米糠誘導体は、ビタミンEおよび集合的にトコールと呼ばれるその異性体（トコフェロール（T）およびトコトリエノール（T3））を含む、百（100）を超える強力な抗酸化物を有することが示されている。トコールの豊富な物質は、トコフェロール（T）、トコトリエノール、およびトコトリエノール様（T3様）化合物から選択される一つまたは複数の化合物を含有する混合物である。安定化された米糠は、ビタミンEの最も高い天然の供給源である。
【００２３】
安定化された米糠誘導体中のさらなる抗酸化物は、γ-オリザノール、β-カロチン、いくつかの公知のフラバノイド、フィトステロール、リポ酸、フェルラ酸、およびイノシトール六リン酸（すなわち、「IP6」）を含むが、これらに限定されるものではない。これらの化合物のいくつかは、本化合物の任意の公知の天然の供給源中よりも非常に高い濃度で、安定化された米糠誘導体中に存在する。例えばフェルラ酸は、玄米、全粒コムギ、およびカラスムギ、ならびにコーヒー、リンゴ、アーティチョーク、ピーナッツ、オレンジ、およびパイナップルなどの植物種子中で見つかった植物化学物質である。フェルラ酸は、我々の細胞を紫外線から保護しかつ肉体中の活性酸素種を中和し、これにより活性酸素種が我々のDNAに損傷にもたらすことを予防する。抗酸化物であるため、これは、肉体中のコレステロールおよびトリグリセライドのレベルを低下させ、したがって、心疾患のリスクを低下させる。IP6は、一般に繊維の豊富な植物性食物で見つかるイノシトールの、リン酸エステル化された形態である。IP6は、イノシトールを得るため、消化管においてフィターゼ酵素により加水分解される。IP6は、反応性の鉄を用いてキレート化することにより、損害を与えるヒドロキシルフリーラジカルに対する細胞の天然の防御を支援する。プロバイオティクスと組み合わせて、抗酸化物は、胃腸障害に関連する侵襲性の病原に抵抗するための特別なさらなる防御および免疫系の能力の増加を提供する。
【００２４】
本明細書において使用される場合、「プロバイオティクス」という用語は天然に生じる「友好的な」細菌、例えば、乳酸桿菌および／またはビフィドバクテリア種を意味する。これらの細菌は、あらゆる人の消化系の不可欠な部分である。ビフィドバクテリアは、グラム陽性嫌気性菌である。これらは、非運動性、非芽胞形成性、およびカタラーゼ陰性である。これらは、短い、湾曲したロッド、棍棒形のロッド、および二叉に分けられたY形のロッドを含む、様々な形状を有する。これらの名前は、これらが多くの場合Y形または二叉形態で存在するという観察に由来する。これらのDNAのグアニンおよびシトシン含量は54 mol%〜67 mol%である。これらは、グルコナート分解の間を除きCO2の生成なしに酢酸および乳酸を産生する糖分解性生物である。ビフィドバクテリア種の例は、ビフィドバクテリウム アドレセンティス（Bifidobacterium adolescentis）、ビフィドバクテリウム ビフィドゥム（Bifidobacterium bifidum）、ビフィドバクテリウム アニマリス（Bifidobacterium animalis）、ビフィドバクテリウム テルモフィルム（Bifidobacterium thermophilum）、ビフィドバクテリウム ブレブ（Bifidobacterium breve）、ビフィドバクテリウム ロンガム（Bifidobacterium longum）、ビフィドバクテリウム インファンティス（Bifidobacterium infantis）、およびビフィドバクテリウム ラクチス（Bifidobacterium lactis）を含む。プロバイオティクスとして有用な、ビフィドバクテリアの特定の株は、ビフィドバクテリウム ブレブ株ヤクルト、ビフィドバクテリウム ブレブRO7O、ビフィドバクテリウム ラクチスBb 12、ビフィドバクテリウム ロンガムRO23、ビフィドバクテリウム ビフィドゥム（Bifidobacterium bifidum）RO71、ビフィドバクテリウム インファンティスRO33、ビフィドバクテリウム ロンガムBB536、およびビフィドバクテリウム ロンガムSBT-2928を含む。本発明のSynBioticsにおける使用に好ましいビフィドバクテリウム種は、ビフィドバクテリウム ロンガムである。
【００２５】
乳酸桿菌は、通常ヒトの腸および膣に存在するグラム陽性通性嫌気性菌である。これらは、非芽胞形成性および非有鞭毛のロッドまたは球桿菌である。それらは、耐気性または嫌気性、および厳密に発酵性である。ホモ型発酵性の場合において、グルコースは主に乳酸に発酵する。乳酸桿菌はまた、乳酸菌（LAB）として分類される。現在までに、56種の乳酸桿菌属が同定されている。プロバイオティクスとして使用される乳酸桿菌は、アシドフィルス菌（Lactobacillus acidophilus）、乳酸短桿菌（Lactobacillus brevis）、ブルガリア乳酸かん菌（Lactobacillus bulgaricus）、ラクトバシラス カゼイ（Lactobacillus casei）、ラクトバシラス セロビオスス（Lactobacillus cellobiosus）、ラクトバシラス クリスパトゥス（Lactobacillus crispatus）、ラクトバシラス クルバトゥス（Lactobacillus curvatus）、発酵乳酸桿菌（Lactobacillus fermentum）、乳酸桿菌属GG（ラクトバシラス ラムノスス（Lactobacillus rhamnosus）またはラクトバシラス カゼイ亜種ラムノスス）、ラクトバシラス ガセリ（Lactobacillus gasseri）、ラクトバシラス ジョンソニイ（Lactobacillus johnsonii）、ラクトバシラス プランタルム（Lactobacillus plantarum）、およびラクトバシラス サリヴァリゥス（Lactobacillus salivarus）を含む。ラクトバシラス プランタルム299v株はサワー種に起因する。ラクトバシラス プランタルム自体はヒト起源である。乳酸桿菌属の他のプロバイオティック株は、アシドフィルス菌BG2FO4、アシドフィルス菌INT-9、ラクトバシラス プランタルムST31、ラクトバシラス レウテリ（Lactobacillus reuteri）、ラクトバシラス ジョンソニイLA1、アシドフィルス菌NCFB 1748、ラクトバシラス カゼイ シロタ、アシドフィルス菌NCFM、アシドフィルス菌DDS-1、デルブリュック菌（Lactobacillus delbrueckii）亜種デルブリュック（delbrueckii）、デルブリュック菌亜種ブルガリクス（bulgaricus）型2038、アシドフィルス菌SBT-2062、乳酸短桿菌、ラクトバシラス サリバリウス（Lactobacillus salivarius）UCC 118、およびラクトバシラス パラカゼイ（Lactobacillus paracasei）亜種パラカゼイ（paracasei）F19である。ラクトバシラスの好ましい種は、L.カゼイ、L.アシドフィルス、L.プランタルム、およびL.ラムノススを含む。
【００２６】
他のプロバイオティック微生物を、本発明のSynBiotic組成物に使用することもできる。例えば、グラム陽性通性嫌気性菌である高温性連鎖球菌（Streptococcus thermophilus）を使用することができる。エンテロコッカス フェシウム（Enterococcus faecium）SF68は、下痢性疾患の処置に使用されるプロバイオティック株である。酵母菌サッカロミセス ボウラルディイ（Saccharomyces boulardii）は、抗生物質の使用に関連する下痢を処置するために使用されている。
【００２７】
食品または栄養補助食品として消費する場合、プロバイオティクスはいくつかのやり方で健康を向上させることができる。これらは、免疫系を刺激し、有害なおよび毒素産生性の細菌およびウイルスを根絶し、食品および栄養の同化作用を助け、ならびに胃腸および結腸の健康を促進することができる。多くの個体では、それらの消化系中のビフィドバクテリアが枯渇しており、従って胃腸の問題を被っている。
【００２８】
プロバイオティクスは概して、その全体が全ての目的について参照により本明細書に組み入れられる、以下の特許出願で考察される：米国特許出願公開第2004-0072794号A1（Nutritional formulations containing synbiotic substances）;米国特許出願公開第2004-0067223号A1（Probiotic compositions for the treatment of inflammatory bowel disease）;米国特許第6,942,857号（Microorganisms for preventing and/or treating obesity or diabetes mellitus）; PCT出願国際公開公報第01/93904号（Method of treating gastrointestinal diseases associated with species of genus Clostridium）;欧州特許出願公開第1 384 483号A1（Probiotics for treatment of irritable bowel disease (IBS) through improvement of gut neuromuscular function）; PCT出願国際公開公報第99/17788号（Composition of treatment of candidiasis）; PCT出願国際公開公報第04/014403号（Microorganisms for inhibiting obesity and diabetes mellitus）;米国特許第6,641,808号（Composition for treatment of obesity）;および米国特許出願公開第2003-0147857号A1（Probiotic/prebiotic composition and delivery method）。
【００２９】
「プレバイオティクス」とは、友好的な細菌のための食物供給源として少なくとも部分的に役立つ組成物である。プレバイオティクスはしたがって、腸におけるプロバイオティック生物の増殖を促進する。フラクトオリゴ糖は、ビフィドバクテリアの好ましい食物である。安定化された米糠およびその水溶性画分（例えばRiSolubles（商標））は、フラクトオリゴ糖が特に豊富である。さらに、安定化された米糠誘導体可溶性画分は典型的に、強力な抗酸化物と共に多糖およびオリゴ糖を含む（表1を参照）。
【００３０】
SynBiotics（商標）は、適切な組合せのプロバイオティクスおよびプレバイオティクスを強力な抗酸化物と共に含有する様々な治療組成物に対して、NutraCea社(El Dorado Hills, California) によって使用される商標名である。好ましい態様において、SynBiotic組成物は、有益な微生物および安定化された米糠誘導体の混合物を、経口摂食に適切な形態で含む。例えば、プロバイオティック培養物およびプレバイオティクスを混合物として製剤化し、カプセル化してもよい。このようなカプセルは、カプセル化した製剤中の一つまたは複数のプロバイオティック生物が酸性条件（例えば胃の酸性条件）下で生育不能である場合、腸溶コーティングを含むことが好ましい。製剤が液体、カプセル、粉末、または錠剤の形態であるかどうかに関わらず、少なくとも1年またはそれ以上の品質保持期間が望ましい。
【００３１】
本発明の典型的なSynBiotic製剤は、一つまたは複数の乳酸桿菌属種をプロバイオティック成分の一部として含む。乳酸桿菌属の好ましい種は、L.カゼイ、L.アシドフィルス、L.プランタルム、およびL.ラムノススを含む。特定のSynBiotic製剤中のプロバイオティック部分の乳酸桿菌属成分は、追加的な乳酸桿菌属種、ビフィドバクテリア種、および／またはサッカロミセス属などの酵母の種を含む一つまたは複数の追加的な微生物種の含有によって増やしてもよい。ビフィドバクテリアの好ましい種は、ビフィドバクテリア ロンガムである。複数の細菌種が存在する場合、これらの種は、重量パーセントベースで互いに対して異なる量または等しい量で存在してもよい。例えばSynBiotic製剤は重量パーセントベースで50%のプロバイオティックを含むことができ、すなわち、用量500mgのSynBiotic製剤は250mgのプロバイオティック組成物を含むことができる。本プロバイオティック組成物は次いで、30%のラクトバシラス プランタルム、20%のラクトバシラス ラムノスス、および50%のビフィドバクテリウム ロンガムから成ることができる。
【００３２】
SynBiotics製剤中の、酵母種の特定の割合の含有物は、特に、クロストリジウム ディフィシレ（Clostridium difficile）によって引き起こされる、抗生物質と関連する結腸炎に対するそれらの有効性をさらに増加させる。クロストリジウム属のメンバーは、グラム陽性の、芽胞形成性嫌気性のロッドである。これらの芽胞胞子は、他の細菌は生存することができない極限条件に耐性がある。それらの活性形態において、これらの細菌は破傷風、ボツリヌス菌中毒、およびガス壊疽のような疾患の原因となる強力な外毒素を分泌する。
【００３３】
抗生物質は、細菌感染症（例えば旅行者下痢症）に対して小児および成人の間に広く普及しており、時にそれらは、HIVを含むウィルス感染に対して処方される。抗生物質によって媒介される正常細菌叢の破壊は、例えば侵襲性のカンジダ症、またはクロストリジウム ディフィシレによって引き起こされる抗生物質と関連する結腸炎などの真菌感染をまねく可能性がある。
【００３４】
例えば、抗生物質治療と関連する結腸炎および他の疾患、例えば旅行者下痢症を処置するには、一用量当たり、重量パーセントベースでプレバイオティック成分（例えばRiSolubles）と同じだけまたはより多くの酵母種を含むSynBiotic製剤が好ましい。例えば、10%の酵母および10%のプレバイオティックを含むSynBiotic製剤が好ましい。さらにより好ましいものは、プレバイオティックよりも大きい割合の酵母を含むSynBiotic製剤である。例えば、10%のプレバイオティクスを含む製剤は、重量パーセントベースで10%、20%、30%、40%、または50%の酵母を含んでもよい。10%のプレバイオティクスおよび50%の酵母を含む製剤が特に好ましい。好ましい酵母種はサッカロミセス ボウラルディイである。
【００３５】
「炎症性腸疾患」（IBD）は、深刻な結果をもたらす、潰瘍性大腸炎、クローン病、および関連する腸障害などの胃腸管の慢性的な炎症障害を含む集合的な用語である。これらの症状は、腹痛、痙攣、下痢、直腸の/腸管の出血、体重減少、および発熱まで様々である。これらの症状は、繰り返される重篤な再発を伴う進行性のものである場合がある。IBDは治療法を有さない。処置の選択肢は、抗炎症薬および免疫抑制剤、ならびに最後の手段としての外科手術からなる。
【００３６】
本発明のSynBiotic製剤は、胃腸管に対してより特定の細菌平衡状態を提供する。これは胃腸管における細菌のバランスを変化させ、IBDを実質的に回復または治癒させもする。
【００３７】
「過敏性腸症候群」（IBS）は世界人口の約10〜20%に影響を及ぼしている容態であり、慢性的な腹痛および変化した腸習慣により特徴づけられる。本状態は女性に最も多く生じ、通常20〜30歳の女性に発生する。これは、任意の胃腸の診療において遭遇する最も一般的な障害の一つである。これは、腹部の膨張、痛みを伴う痙攣、不完全な排便感、ならびに全体的な不快感に関連する。
【００３８】
IBSは、主に大腸筋運動（運動性）における撹乱に起因して起こり;腸管構造に異常は存在しない。素因は、低残渣食、情動ストレス、腸意識、および緩下薬の誤用である可能性がある。
【００３９】
食事における変化は一部の患者において症状緩和に役立つ可能性があるが、全ての患者に対して適用できる食事はない。食物繊維の増加およびカフェイン含有飲料などの胃腸刺激物の除去は、有益である可能性がある。他の可能な処置には以下が含まれる可能性がある：規則正しい運動;食前の、抗コリン薬物の投与;および重篤な不安またはうつ病の場合のカウンセリングなどの、不安緩和手段。
【００４０】
SynBiotics-1（商標）、SynBiotics-2（商標）、およびSynBiotics-3（商標）は、特定の組合せおよび割合のプロバイオティック微生物を指定の量のプレバイオティックであるRiSolublesと共に含む、SynBiotic栄養補助食品の好ましい態様の例である。RiSolublesはフラクトオリゴ糖が豊富であり、これにより友好的なバクテリアが良好に育つ。SynBiotics-1、SynBiotics-2、およびSynBiotics-3における製剤はカプセル化されている。各製剤は、下記において詳述する。
【００４１】
Synbiotics-1（商標）は、安定化された米糠誘導体である、プレバイオティックとしてのRiSolublesと共に特別に選択された、新規なプロバイオティックである（表2を参照）。これは、過敏性腸症候群（IBS）の症状の軽減に適切な、ビフィドバクテリウム ロンガム、ラクトバシラス ラムノスス、およびラクトバシラス プランタルムの特別に選択された細菌の組合せと配合されたRiSolublesを含有する、腸溶コーティングされた植物性カプセルとして送達される。一つの態様において、前記配合はカプセル当たり約27億5000万個のコロニー形成単位（cfu）からなる。典型的な治療計画は1カプセルを1日2回服用するが、用量および投薬計画は患者の必要性によって変更することができる。
【００４２】
（表２）SynBiotics-1製剤カプセル
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【００４３】
Synbiotics-2（商標）は、安定化された米糠誘導体である、プレバイオティックとしてのRiSolublesと共に特別に選択された、新規なプロバイオティックである（表2を参照）。これは、過敏性腸症候群（IBS）の症状の軽減に適切な、ビフィドバクテリウム ロンガム、ラクトバシラス ラムノスス、およびラクトバシラス プランタルムの混合物と配合されたRiSolublesを含有する、腸溶コーティングされた植物性カプセルとして送達される。一つの態様において、前記配合はカプセル当たり約30億個のコロニー形成単位（cfu）からなる。典型的な治療計画は1カプセルを1日2回または3回、好ましくは食事の30分後に服用するが、用量および投薬計画は患者の必要性によって変更することができる。SynBiotics-2は、カプセル当たり、SynBiotics-1と比較してより強力な用量のコロニー形成細菌を、わずかに増加した割合のビフィドバクテリウムと共に提供する。
【００４４】
（表３）SynBiotics-2製剤カプセル
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【００４５】
SynBiotics-3（商標）は、特別に選択された細菌の組合せ（ビフィドバクテリウム ロンガム、ラクトバシラス ラムノスス、ラクトバシラス プランタルム）と配合されたRiSolublesを含有し、かつ酵母（サッカロミセス ボラルディイ（Saccharomyces bolardii））をさらに含む、腸溶コーティングされた植物性カプセルであり、本カプセルにおいて、プロバイオティックとプレバイオティックとの組合せは、クロストリジウム ディフィシレ（Clostridium difficile）の増殖を抑制して、抗生物質誘発性の下痢に付随する結腸炎を緩和するために操作される。典型的な治療計画は1カプセルを1日2回または3回、好ましくは食事の30分後に服用するが、用量および投薬計画は患者の必要性によって変更してもよい。
【００４６】
（表４）SynBiotics-3製剤カプセル
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【００４７】
関連した態様において、本発明は、その生存度が部分的に弱毒化されている微生物から実質的になるプロバイオティック混合物か、または生存不可能な微生物単独からなるプロバイオティクスを含む、SynBioticsを提供する。「部分的に弱毒化した」という用語は、10%、20%、30%、50%、またはそれ以上の生存不可能な細胞からなる混合物を含む。本発明はさらに、殺した微生物から分離および精製した微生物膜および／または細胞壁を含むSynBiotic製剤を提供する。
【００４８】
上記の製剤に加えて、本発明は、本明細書において説明する胃腸の病気を処置するための、SynBioticsの使用方法を提供する。投与されたSynBioticの量は、当然ながら、処置される対象、対象の体重、苦痛の大きさ、および投与の様式に依存する。経腸の投与のための典型的な用量は、1日間当たり約1グラムから約5グラムの量である。有効量の決定は、十分に当業者の能力の範囲内である。
【００４９】
本明細書で使用する場合、「有効量」または「治療的有効量」とは、医学的状態の処置、すなわち下痢または膨満または任意の胃腸の痛みの減少をもたらす、本発明の方法に使用する任意の化合物または製剤の量を意味する。あるいは、「有効量」は、クロストリジウム ディフィシレなどの毒性微生物の存在をモニタリングすることによって決定することができる。本発明の文脈において、「予防的に効果的な量」とは、医学的状態の発症または再発を予防する、任意の本化合物の量を意味する。例えば、「予防的に効果的な量」は、下痢の発症から対象を保護する量である。
【００５０】
本発明の方法で使用する任意の化合物または製剤について、治療的に有効な用量は、まず、当業者に周知の動物モデルから推定することができる（上記にて説明）。そのような情報は、ヒトにおける有用な投与量をより正確に決定するために使用することができる。初回投与量は、インビトロまたはインビボのデータから推定することもできる。
【００５１】
初回投与量は、本発明の方法において使用される化合物のモデルアッセイでの有効性を、公知の化合物の有効性と比較することによって処方することもできる。例えば、初回投与量は、モデルアッセイでの化合物の有効性を、本状態の処置における有効性が示されている他の化合物の有効性と比較することによって処方することができる。本方法において、初回投与量は、本発明の方法で使用される化合物および対照化合物についてモデルアッセイで得られた有効濃度の割合に、対照化合物の有効量を乗じることによって得ることができる。例えば、本方法において有用である化合物がモデルアッセイにおいて公知の化合物の二倍効果的である場合（すなわち、化合物のEC50が、同一アッセイにおける公知の化合物のEC50の半分に等しい）、化合物の初回の有効な投与量は、公知の化合物の公知の投与量の半分である。これらの最初の指針を用いて、当業者は、人間または他の哺乳動物における有効量を容易に決定することができる。
【００５２】
投与量および間隔を個々に調整して、治療効果の維持に十分である活性化合物の濃度を提供してもよい。当業者は、治療的に有効な局所投与量を過度の実験なしに最適化することが可能である。
【００５３】
併用療法
本発明のSynBiotic製剤は、胃腸の困難と関連している様々な治療法と併用して投与することができる。このような治療法は、限定されるものではないが、癌に対する放射線および化学療法、ならびに様々な細菌性疾患に対する抗生物質療法を含む。このような治療法は腸の通常のファウナの組成および健康を混乱させる傾向があり、本明細書において説明される、有害な細菌の望ましくない増殖および付随する痛みを伴う症状をもたらす。本明細書において説明されるSynBiotic組成物の投与は、それらの症状の緩和に対して有用である。
【００５４】
実施例
以下の実施例は例示のために提供されるが、特許請求される本発明を限定するものではない。
【００５５】
実施例１ - 可溶性の安定化された米糠誘導体の調製
本発明に用いる米糠誘導体を作製するために、米糠は最初に安定化され、次いで少なくとも2つの画分にさらに分離される。これらは安定化された米糠の可溶性誘導体および安定化された米糠の不溶性誘導体を含むが、これらに限定されない。好ましくは、米糠誘導体への分離は非化学プロセス、すなわち酵素法を含む。このプロセスにおいて、分割または分画は、好ましくは本明細書の以下に概説されるように、および参照により本明細書に組み入れられる米国特許第6,350,473号に説明されるように進行する。
【００５６】
この安定化された米糠は、飲用水を用いて、約15%〜約35%のスラリーに、好ましくは20〜25%のスラリーにされる。デキストラナーゼ、マルターゼ、α-アミラーゼ、および様々な他の炭水化物切断酵素を含み得るがこれらに限定されるものではない酵素がバッチに添加され、デンプンをデキストリンに変換する。本スラリーは、例えば水蒸気噴射調理器具、熱交換器、または他の加熱方法を用いて、約150°F〜約200°Fに加熱される。本スラリーは次に、不溶性画分が分離される水平遠心分離機にポンプで送りこまれる。この不溶性画分を収集し、次いでベルト乾燥機上で乾燥させ、その後粉末に摩砕する。この粉末は、安定化された米糠の不溶性画分である。水性材料はドラム乾燥機にポンプで送りこまれ、乾燥される。この乾燥された水性部分は、安定化された米糠の可溶化分画を生じる。
【００５７】
酵素処理した安定化された米糠は、上記の様に米糠スラリーを使用することにより作り出すことができる。このように、別の局面においては、本発明は以下を含む、酵素処理した安定化された米糠誘導体を作製するプロセスに関する：安定化された米糠を水溶液と混合し、w/wで約15%〜約35%の水分を含む米糠スラリー、好ましくは20%〜約30%の水分を含む米糠スラリーを形成させる段階;水分を含む前記米糠スラリーに、デンプンをデキストリンに変換するための酵素を添加して酵素処理したスラリーを形成し、次いで酵素処理したスラリーを直接乾燥して酵素処理した安定化された米糠誘導体を形成させる段階。
【００５８】
前述のプロセスの好ましい態様において、酵素をスラリーに添加した後、スラリーを、約100°F〜約200°Fに加熱する。好ましくは、スラリーを、約150°F〜約200°Fに加熱する。その後、本スラリーを乾燥し、乾燥は、ベルト乾燥、噴霧乾燥、ドラム乾燥、および空気乾燥などのプロセスによって達成される。ドラム乾燥プロセスが好ましい。
【００５９】
これらの安定化された米糠誘導体は、E1 Dorado Hills, CaliforniaのNutraCea社から商業的に入手することもできる。具体的には、安定化された米糠の不溶性誘導体はRiceMucil（登録商標）繊維複合体として入手でき、および可溶性誘導体はRiSolubles（登録商標）として入手可能である。
【００６０】
この安定化された米糠誘導体は、様々な形態を取ることができる。これらは、粉末、食物、食物サプリメント、医用食品、液体、飲料、エマルション、またはこれらの混合物であることができる。さらに、これらは他の食用材料に取り込ませることができる。哺乳動物の食物に米糠誘導体を取り込むには、単に他の食物物質（すなわちサラダ、パン、シリアルなど）に誘導体を振りかけること、禾穀類が食べやすいマルチグレインの主要な成分であること、焼いた食品（パン、マフィン、ワッフルなど）、パスタ、ヘルシーなデザートおよび軽食（アスレチックバー、健康飲料など）、ならびに繊維が多い食物に取り込ませることを含むがこれらに限定されない様々な選択肢がある。
【００６１】
安定化された米糠は、約18〜23%の脂肪、約23〜35%の食物繊維、約12〜16%のタンパク質、約8〜36%の総炭水化物、および多くの強力なミクロ成分を含有する。米糠可溶分は、約15〜40%の脂肪、好ましくは23〜30%の脂肪;約0%〜25%の食物繊維、好ましくは約0〜20%の食物繊維;約0%〜15%のタンパク質、好ましくは6〜9%のタンパク質;および25%〜約80%の炭水化物、好ましくは約27〜66%の単純な炭水化物を含有し、かつ、水可溶性画分である（表1を参照）。
【００６２】
実施例2 - SynBiotics製剤の品質保持期間
冷蔵（4℃）条件下でのSynBioticsカプセルの品質保持期間は、SynBiotics 1、SynBiotics 2、およびSynBiotics 3をカプセル化した製剤の、カプセル当たりのコロニー形成単位を測定することによって決定した。測定は、ほぼ3ヵ月毎に、1年にわたって行った。データは、図1Aにグラフ化する。
【００６３】
同様の実験をSynBiotics 3カプセルを用いて反復し、1年にわたってカプセル当たりのコロニー形成単位の総数を測定した。結果を図1Bに示す。全体として、データはSynBiotic製剤が少なくとも一年の品質保持期間を有することを示す。
【００６４】
実施例3 - SynBiotics処置のための在宅調査プロトコル
本実施例は、過敏性腸症候群を有すると医師によって診断され、かつ彼らの状態を処置するために、天然の、摂取が容易で、効果的な製品を試みることを希望する人々のための、非盲検調査を説明する。本調査の論理は、図2において模式的な形式で説明する。
【００６５】
本調査は、志望する患者にコンピュータ・ネットワーク、例えばワールド・ワイド・ウェッブを介して示されるオンラインの形態を用いて開始される。本調査への申し込みに関心を持つ人々は、オンライン調査票および同意書に記入する。
【００６６】
申請書はウェブサイトから回収され、症状に基づいて適格患者が志望者のグループから選択される。患者が適格でない場合、SynBiotic製剤または関心対象の他の製剤を購入するための注文書と共に断りの書面が患者に郵送される。志望者が適格必要条件を満たす場合、SynBiotic製剤のサンプルボトルが祝辞書面、フォローアップ調査票、および切手を貼った返信用封筒（SASE）と共に速達で郵送される。参加に対する参加者の同意は、記録目的のために印刷およびファイルされる。
【００６７】
調査票に由来する参加者の情報は、追跡用のスプレッドシートに入力される。参加者の個人情報を管理する人口統計ワークシート、および調査票に対する回答の追跡を維持する調査票ワークシートの、2つのワークシートがある。各参加者には、最初の調査票の回答および2週間のフォローアップ調査票に対する回答が記録される、2列がある。
【００６８】
祝辞書面は、参加者にSynBiotics製剤を冷蔵状態に保つよう指示し、例えば「2週間の間、毎日2回、2つのカプセルを摂取する」といった、使用についての推奨を提供する。参加者は、発送から10日間以内にフォローアップ部分の調査票に記入することを催促される。2週間の期間の終わりに、彼らは、フォローアップ調査票に記入し、SASEを使用してそれを返却することを再度求められる。
【００６９】
フォローアップ調査票の回答が参加者から届いたら、本調査における彼または彼女の参加に対する感謝として、他の製品サンプルが参加者に郵送される。追加的なSynBiotic製剤のための注文書もサンプルと共に含まれる。
【００７０】
フォローアップ調査票に由来する参加者の情報は、追跡用のスプレッドシートに入力される。ハードコピーのフォローアップ調査票はまたスキャナで読み込まれ、歴史的記録のために保存される。ここで説明したシステムは、単独のコンピュータベースの調査票を使用して実施することができる。例えば、調査票に対する回答は、参加者の自宅のパソコンを使用して参加者によって入力してもよく、インターネットを通じた伝達の後、回答は将来の分析のために、例えば在宅試験を担当する臨床医によって自動的に記録されてもよい。
【００７１】
本発明を好ましい態様およびその実施例に関して説明したが、本発明の範囲はこれらの説明した態様のみに限定されない。当業者に明らかであるように、添付の特許請求の範囲によって定義されかつ限界が定められている上記の本発明に対して、本発明の精神および範囲から逸脱することなく変更および調節を行うことができる。
【図面の簡単な説明】
【００７２】
【図１】SynBiotics1、SynBiotics2、およびSynBiotics3をカプセル化した製剤の、360日/一年の期間にわたる安定性を示す（図1A）。図1Bは、SynBiotics3の安定性を分析する、同様の実験のグラフを示す。
【図２】一つまたは複数のSynBiotic製剤の有効性を決定するための在宅試験を実行するシステムを説明するフローチャートを示す。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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