(57)【要約】【課題】非吸収性又は吸収性物品に関連する女性の膣及びその周囲の外来蛋白質生成の阻害に関する技術を提供する。【解決手段】グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害するための非吸収性及び吸収性物品。非吸収性及び吸収性物品は、一般式（Ｉ）を有する有効な量の前駆体化合物を含み、式中、Ｒ1は、式（ＩＩ）及び式（ＩＩＩ）から成る群から選択され、Ｒ7は、−ＯＣＨ2−であり、Ｘは、０又は１であり、Ｒ5は、ヘテロ原子で置換しても置換しなくてもよい置換又は非置換芳香環又は一価の飽和又は不飽和、置換又は非置換、分鎖又は直鎖ヒドロカルビル部分であり、Ｒ6は、アミノ酸、アミノ酸のメチルエステル、及びアミノ酸のエチルエステルから成る群から選択され、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は、Ｈ、ＯＨ、ＣＯＯＨから成る群から独立に選択される。
2008514698.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害するための外来蛋白質抑制具であって、
膣内への挿入に適した非吸収性基体を備え、
前記非吸収性基体には、一般式：
【化１】
2008514698.tif 000036
を有する前駆体化合物の有効量が付着され、
ここで、Ｒ1は、
【化２】
2008514698.tif 000037
及び
【化３】
2008514698.tif 000038
から成る群から選択され、Ｒ7は、−ＯＣＨ2−であり、Ｘは、０又は１であり、Ｒ5は、ヘテロ原子で置換しても置換しなくてもよい置換又は非置換芳香環又は一価の飽和又は不飽和、置換又は非置換、分鎖又は直鎖ヒドロカルビル部分であり、Ｒ6は、アミノ酸、アミノ酸のメチルエステル、及びアミノ酸のエチルエステルから成る群から選択され、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は、Ｈ、ＯＨ、ＣＯＯＨから成る群から独立に選択されるものであり、
加水分解すると、前記前駆体化合物は、グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害するのに有効な活性種を生成することができる、
ことを特徴とする抑制具。
【請求項２】
Ｒ5は、１から１５の炭素原子を有するヘテロ原子で置換しても置換しなくてもよい一価の飽和、置換又は非置換、分鎖又は直鎖ヒドロカルビル部分であることを特徴とする請求項１に記載の外来蛋白質抑制具。
【請求項３】
Ｒ2は、Ｈ及びＯＨから成る群から選択され、Ｒ3及びＲ4は、単独でＨであることを特徴とする請求項１に記載の外来蛋白質抑制具。
【請求項４】
ミレス−３−ミリスチン酸塩、グリセロールモノラウレート、及びラウレス−４から成る群から選択された表面活性剤を更に含むことを特徴とする請求項１に記載の外来蛋白質抑制具。
【請求項５】
前記前駆体化合物は、ベンジル−（−）−乳酸塩、マロン酸ベンジルエチル、ベンジル−ラウリン酸塩、安息香酸ベンジル、ベンジルパラベン、サリチル酸ベンジル、及びフェノキシエチルパラベンから成る群から選択されることを特徴とする請求項１に記載の外来蛋白質抑制具。
【請求項６】
前記前駆体化合物は、約０．１５％（前記非吸収性基体の重量による）から約２．０％（該非吸収性基体の重量による）までの量で存在することを特徴とする請求項１に記載の外来蛋白質抑制具。
【請求項７】
Ｒ6は、アミノ酸であり、
前記アミノ酸は、バリン、ロイシン、及びシステインから成る群から選択される、
ことを特徴とする請求項１に記載の外来蛋白質抑制具。
【請求項８】
前記前駆体化合物は、ｎ−ベンゾイル−ｄｌ−バリン、ｎ−ベンゾイル−ｄｌ−ロイシン、及びｎ−ベンゾイル−ｄｌ−システインから成る群から選択されることを特徴とする請求項１に記載の外来蛋白質抑制具。
【請求項９】
前記非吸収性基体は、非吸収性失禁装置、バリア避妊装置、非吸収性避妊装置、タンポンアプリケータ、及び膣洗浄器具から成る群から選択されることを特徴とする請求項１に記載の外来蛋白質抑制具。
【請求項１０】
膣洗浄製剤を含む膣洗浄器具として構成され、
前記前駆体化合物が、約０．２ミリモル／リットルから約５０ミリモル／リットルまでの量で前記膣洗浄製剤に存在する、
ことを特徴とする請求項９に記載の外来蛋白質抑制具。
【請求項１１】
グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害するための吸収性物品であって、
吸収性構造体と、
一般式：
【化４】
2008514698.tif 000039
を有する前駆体化合物の有効な量と、
を含み、
【化５】
2008514698.tif 000040
及び
【化６】
2008514698.tif 000041
から成る群から選択され、Ｒ7は、−ＯＣＨ2−であり、Ｘは、０又は１であり、Ｒ5は、ヘテロ原子で置換しても置換しなくてもよい置換又は非置換芳香環又は一価の飽和又は不飽和、置換又は非置換、分鎖又は直鎖ヒドロカルビル部分であり、Ｒ6は、アミノ酸、アミノ酸のメチルエステル、及びアミノ酸のエチルエステルから成る群から選択され、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は、Ｈ、ＯＨ、ＣＯＯＨから成る群から独立に選択されるものであり、
加水分解すると、前記前駆体化合物は、グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害するのに有効な活性種を生成することができる、
ことを特徴とする物品。
【請求項１２】
Ｒ5は、１から１５の炭素原子を有するヘテロ原子で置換しても置換しなくてもよい一価の飽和、置換又は非置換、分鎖又は直鎖ヒドロカルビル部分であることを特徴とする請求項１１に記載の吸収性物品。
【請求項１３】
Ｒ2は、Ｈ及びＯＨから成る群から選択され、Ｒ3及びＲ4は、単独でＨであることを特徴とする請求項１１に記載の吸収性物品。
【請求項１４】
ミレス−３−ミリスチン酸塩、グリセロールモノラウレート、及びラウレス−４から成る群から選択された表面活性剤を更に含むことを特徴とする請求項１１に記載の吸収性物品。
【請求項１５】
前記前駆体化合物は、ベンジル−（−）−乳酸塩、マロン酸ベンジルエチル、ベンジル−ラウリン酸塩、安息香酸ベンジル、ベンジルパラベン、サリチル酸ベンジル、及びフェノキシエチルパラベンから成る群から選択されることを特徴とする請求項１１に記載の吸収性物品。
【請求項１６】
前記前駆体化合物は、約０．１５％（前記吸収性構造体の重量による）から約２．０％（該吸収性構造体の重量による）までの量で存在することを特徴とする請求項１１に記載の吸収性物品。
【請求項１７】
Ｒ6は、アミノ酸であり、
前記アミノ酸は、バリン、ロイシン、及びシステインから成る群から選択される、
ことを特徴とする請求項１１に記載の吸収性物品。
【請求項１８】
前記前駆体化合物は、ｎ−ベンゾイル−ｄｌ−バリン、ｎ−ベンゾイル−ｄｌ−ロイシン、及びｎ−ベンゾイル−ｄｌ−システインから成る群から選択されることを特徴とする請求項１１に記載の吸収性物品。
【請求項１９】
膣タンポン、生理用ナプキン、パンティライナ、失禁用下着、避妊用スポンジ、おむつ、創傷包帯、歯科用タンポン、医療用タンポン、外科用タンポン、及び鼻用タンポンから成る群から選択されることを特徴とする請求項１１に記載の吸収性物品。
【請求項２０】
吸収性タンポン材料とカバー材料とを備えた膣タンポンを含み、
前記前駆体化合物は、前記カバー材料上に少なくとも約２．６％（該カバー材料の重量による）から約３５％（該カバー材料の重量による）までの量で存在する、
ことを特徴とする請求項１９に記載の吸収性物品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、非吸収性物品又は吸収性物品との組み合わせで女性の膣及びその周囲における外来蛋白質生成を阻害することに関する。より詳細には、本発明は、使用時に前駆体化合物が膣及びその周囲の酵素活動によって加水分解されて細菌からの外来蛋白質の生成を低減する活性種を生成することができるような前駆体化合物を非吸収性物品又は吸収性物品の中又は上に組み込むことに関する。
【背景技術】
【０００２】
膣浸出物の吸収のために、膣タンポンのような使い捨て吸収性物品が広く使用されている。これらの使い捨て物品は、一般的に、典型的には意図する消費者用途によって決まる望ましい形状に形成された吸収剤の圧縮された塊を有する。膣タンポンの分野では、この装置は、一般的に女性の月経期間中に排出される体液の吸収のために膣内に挿入するように意図されている。
【０００３】
女性の体内では、膣及び生理学的関連区域を健康状態に維持する複雑な過程が存在する。初経から閉経の間の年齢の女性においては、正常な膣は、様々な微生物のための生態系を提供する。細菌は、膣に存在する微生物の主な種類であり、殆どの女性は、膣流体のグラム当たり約１０9の細菌を宿している。膣の細菌叢は、好気性及び嫌気性細菌の両方から成る。より一般的に分離される細菌は、乳酸菌種、コリネバクテリア種、膣ガルドネラ、ブドウ球菌種、レプトコッカス種、好気性及び嫌気性ストレプトコッカス種、及びバクテロイデス種である。時々膣から分離される他の微生物は、酵母（カンジダアルビカンス）、プロトゾア（膣トリコモナス）、マイコプラズマ（マイコプラズマホミニス）、クラミジア（クラミジアトラコマチス）、及びウイルス（単純ヘルペス）を含む。これら後者の生物は、一般的に膣炎又は性病に関連するが、症状を引き起こすことなく少数で存在する場合がある。
【０００４】
生理学的、社会的、及び特異体質因子は、膣に存在する細菌の量及び種に影響を与える。生理学的因子は、年齢、月経周期の日、及び妊娠を含む。例えば、月経周期を通して膣に存在する微生物は、乳酸菌、コリネバクテリア、ウレアプラズマ、及びマイコプラズマを含む可能性がある。微生物の数及び微生物の種類は、個体に独特である。社会的及び特異体質因子は、避妊の方法、性行為、全身性疾患（例えば、糖尿病）、及び投薬を含む。
【０００５】
膣に生成される細菌蛋白質及び代謝産物は、他の微生物及びヒト宿主に影響を与える可能性がある。例えば、月経期間と月経期間の間の膣は、約３．８から約４．５までの範囲のｐＨを有する弱酸性である。このｐＨ範囲は、一般的に正常細菌叢の維持に対して最も好ましい条件と考えられる。そのｐＨにおいて、膣は、通常は、均衡の取れた生態系で微生物の多数の種を宿している。これらの微生物は、感染症に対して防御及び抵抗をもたらす有益な役割を果たし、黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）のような一部の細菌の種に対して膣を住み難いものにする。低いｐＨは、乳酸菌の成長及びそれらの酸性産物の生成の結果である。膣の微生物はまた、他の細菌種に対して過酸化水素及び殺菌剤のような抗菌性化合物を生成することができる。一例は、ラクトシン、すなわち、乳酸菌の他の種に対する乳酸菌のバクテリオシン状生成物である。
【０００６】
膣に生成される一部の微生物生産物は、ヒト宿主に悪影響を与える場合がある。例えば、黄色ブドウ球菌は、エンテロトキシン、「毒素性ショック症候群毒素−１（ＴＳＳＴ−１）」、並びにエステラーゼ及びアミダーゼのような酵素を含む様々な外来蛋白質を生成してその環境内に排泄することができる。宿主の血流中に吸収されると、ＴＳＳＴ−１は、非免疫性のヒトにおいて「毒素性ショック症候群（ＴＳＳ）」の進行をもたらす場合がある。
【０００７】
黄色ブドウ球菌は、月経年齢の健康女性のほぼ１６％の膣に見られる。黄色ブドウ球菌の全ての株が、ＴＳＳＴ−１を生成することができるとは限らない。これらの女性のほぼ２５％が、黄色ブドウ球菌を生成するＴＳＳＴ−１を宿すことになる。ＴＳＳＴ−１とブドウ球菌エンテロトキシンの一部とは、ヒトでＴＳＳを起こすものとして特定されている。
【０００８】
ＴＳＳの症状は、一般的に、発熱、下痢、嘔吐、及び発疹、及びそれに続く急速な血圧の低下を含む。多臓器障害は、この疾患が進行するヒトのほぼ６％に起こる。黄色ブドウ球菌は、この微生物の膣腔内への侵入の結果としてはＴＳＳを開始しない。黄色ブドウ球菌が成長して増殖すると、これは、ＴＳＳＴ−１を生成することができる。ＴＳＳＴ−１は、血液中に入った後にのみ全身に作用し、ＴＳＳに起因する症状を出現させる。
【０００９】
月経液は、約７．３のｐＨを有する。月経中に、膣のｐＨは、中性に近づいて弱アルカリ性になる可能性がある。この変化により、成長が酸性環境によって阻害される微生物を増殖可能にする。例えば、黄色ブドウ球菌は、月経期間と月経期間の間に集めた標本からよりも月経中の膣の標本から分離されることがより多い。
【００１０】
黄色ブドウ球菌が、膣のような通常の微生物個体群を宿している人体の区域に存在する時には、健康な生態系に必要な正常微生物叢のメンバを阻害することなく黄色ブドウ球菌を撲滅するのは困難な場合がある。一般的に、黄色ブドウ球菌を殺す抗生物質は、それらの正常な膣の微生物叢に対する影響により、膣に挿入される製品に用いるための任意選択肢ではない。毒素を生成する細菌の機能を阻止するか又は実質的に低減するために、完全な撲滅に対する代替案が技術的に設計される。
【００１１】
１つ又はそれよりも多くの生物静力学的、殺菌的、及び／又は解毒化合物を膣製品内に組み込むことにより、病原微生物及び月経で起こるＴＳＳを低減又は除去する多くの試みが為されてきた。例えば、Ｌ−アスコルビン酸は、膣に見られる毒素を解毒するために月経タンポンに付加されている。他のものは、殺菌化合物としてグリセロールモノラウレートのような多価脂肪族アルコールのモノエステル及びジエステルを組み込んでいる（例えば、米国特許第５，６７９，３６９号を参照）。更に他のものは、解毒化合物としてアルキルエーテル、アルキルアミン、及びアルキルアミドのような他の非イオン性界面活性剤を導入している（例えば、米国特許第５，６８５，８７２号、第５，６１８，５５４号、及び第５，６１２，０４５号を参照）。
【００１２】
上述の従来の試みの一部に関連する１つの大きな問題は、用いる化合物が、非吸収性又は吸収性物品内への組み込み中及び更に別の製造工程中に高度に揮発性である場合があることである。より詳細には、一部の芳香族化合物、テルペン、及びイソプレノイドのような化合物は、高温製造段階中に非吸収性又は吸収性製品から完全に揮発することが見出されている。また、一部の化合物は、消費者による使用前の保管中の揮発性問題を有することがある。
【００１３】
従って、膣区域に見られる自然な細菌叢に対して実質的に害を及ぼすことなくグラム陽性細菌からのＴＳＳＴ−１のような外来蛋白質の生成を実質的に阻害することになる阻害化合物を含む非吸収性又は吸収性製品のようなパーソナルケア製品に対する必要性が依然として存在する。更に、これらの阻害化合物は、有効性に対して逆効果を有する可能性があって膣に存在する場合もあるリパーゼ、エステラーゼ、及びアミダーゼのような酵素の存在下でさえも活性を維持する必要がある。これらの化合物は、有効な阻害剤を消費者に届けるために製造、保管、及び輸送を通して低揮発性を有し、かつ製品に残存することが望ましい。
【００１４】
【特許文献１】米国特許第５，６７９，３６９号
【特許文献２】米国特許第５，６８５，８７２号
【特許文献３】米国特許第５，６１８，５５４号
【特許文献４】米国特許第５，６１２，０４５号
【特許文献５】米国特許第６，６７９，８３１号
【特許文献６】米国特許第４，７１１，２３５号
【発明の開示】
【００１５】
本発明は、グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害する非吸収性製品及び吸収性物品に関する。より詳細には、本発明は、１つ又はそれよりも多くの芳香族化合物をエステル又はアミド結合を通じて１つ又はそれよりも多くの２次化合物に結合することによって形成される１つ又はそれよりも多くの前駆体化合物を組み込んだタンポンアプリケータのような膣タンポン又は非吸収性基体に関する。膣内に導入された状態で、これらの前駆体化合物は、自然膣細菌叢によって生成される酵素によって加水分解され、膣に存在する細菌叢に実質的に影響を与えることなくグラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害することができる活性種をもたらすことができる。一部の実施形態では、前駆体化合物自体もグラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害することができる。
【００１６】
従って、本発明は、グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害するための外来蛋白質抑制具に関する。外来蛋白質抑制具は、膣内への挿入に適切で以下の一般式を有する前駆体化合物の有効な量を堆積させた非吸収性基体を含む。
【化１】
2008514698.tif 000003
式中Ｒ1は、
【化２】
2008514698.tif 000004
及び
【化３】
2008514698.tif 000005
から成る群から選択され、Ｒ7は、−ＯＣＨ2−であり、Ｘは、０又は１であり、Ｒ5は、ヘテロ原子で置換しても置換しなくてもよい置換又は非置換芳香環又は一価の飽和又は不飽和、置換又は非置換、分鎖又は直鎖ヒドロカルビル部分であり、Ｒ6は、アミノ酸、アミノ酸のメチルエステル、及びアミノ酸のエチルエステルから成る群から選択され、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は、Ｈ、ＯＨ、ＣＯＯＨから成る群から独立に選択され、前駆体化合物は、加水分解すると、グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害するのに有効な活性種を生成することができる。
【００１７】
本発明は、更に、グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害するためのタンポンアプリケータに関する。タンポンアプリケータは、膣内への挿入に適切な非吸収性材料を含み、以下の一般式を有する前駆体化合物の有効な量をそこに堆積させている。
【化４】
2008514698.tif 000006
式中Ｒ1は、
【化５】
2008514698.tif 000007
及び
【化６】
2008514698.tif 000008
から成る群から選択され、Ｒ7は、−ＯＣＨ2−であり、Ｘは、０又は１であり、Ｒ5は、ヘテロ原子で置換しても置換しなくてもよい置換又は非置換芳香環又は一価の飽和又は不飽和、置換又は非置換、分鎖又は直鎖ヒドロカルビル部分であり、Ｒ6は、アミノ酸、アミノ酸のメチルエステル、及びアミノ酸のエチルエステルから成る群から選択され、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は、Ｈ、ＯＨ、ＣＯＯＨから成る群から独立に選択され、前駆体化合物は、加水分解すると、グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害するのに有効な活性種を生成することができる。
【００１８】
本発明は、更に、女性の膣及びその周囲に位置するグラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害するための潅水製剤に関する。潅水製剤は、薬学的に満足できる担体及び以下の一般式を有する前駆体化合物の有効な量を備えた膣洗浄製剤を含む。
【化７】
2008514698.tif 000009
【化８】
2008514698.tif 000010
及び
【化９】
2008514698.tif 000011
から成る群から選択され、Ｒ7は、−ＯＣＨ2−であり、Ｘは、０又は１であり、Ｒ5は、ヘテロ原子で置換しても置換しなくてもよい置換又は非置換芳香環又は一価の飽和又は不飽和、置換又は非置換、分鎖又は直鎖ヒドロカルビル部分であり、Ｒ6は、アミノ酸、アミノ酸のメチルエステル、及びアミノ酸のエチルエステルから成る群から選択され、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は、Ｈ、ＯＨ、ＣＯＯＨから成る群から独立に選択され、前駆体化合物は、加水分解するとグラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害するのに有効な活性種を生成することができ、膣洗浄製剤は、女性の膣に使用するのに適するものである。
【００１９】
本発明はまた、グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害するための吸収性物品に関する。吸収性物品は、膣内への挿入に適切であり、吸収性構造体及び以下の一般式を有する前駆体化合物の有効な量を含む。
【化１０】
2008514698.tif 000012
式中Ｒ1は、
【化１１】
2008514698.tif 000013
及び
【化１２】
2008514698.tif 000014
から成る群から選択され、Ｒ7は、−ＯＣＨ2−であり、Ｘは、０又は１であり、Ｒ5は、ヘテロ原子で置換しても置換しなくてもよい置換又は非置換芳香環又は一価の飽和又は不飽和、置換又は非置換、分鎖又は直鎖ヒドロカルビル部分であり、Ｒ6は、アミノ酸、アミノ酸のメチルエステル、及びアミノ酸のエチルエステルから成る群から選択され、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は、Ｈ、ＯＨ、ＣＯＯＨから成る群から独立に選択され、前駆体化合物は、加水分解するとグラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害するのに有効な活性種を生成することができる。
【００２０】
本発明は、更に、グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害するための膣タンポンに関する。膣タンポンは、吸収性タンポン材料及び以下の一般式を有する前駆体化合物の有効な量を含む。
【化１３】
2008514698.tif 000015
式中Ｒ1は、
【化１４】
2008514698.tif 000016
及び
【化１５】
2008514698.tif 000017
から成る群から選択され、Ｒ7は、−ＯＣＨ2−であり、Ｘは、０又は１であり、Ｒ5は、ヘテロ原子で置換しても置換しなくてもよい置換又は非置換芳香環又は一価の飽和又は不飽和、置換又は非置換、分鎖又は直鎖ヒドロカルビル部分であり、Ｒ6は、アミノ酸、アミノ酸のメチルエステル、及びアミノ酸のエチルエステルから成る群から選択され、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は、Ｈ、ＯＨ、ＣＯＯＨから成る群から独立に選択され、前駆体化合物は、加水分解するとグラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害するのに有効な活性種を生成することができる。
【００２１】
本発明の他の特徴及び利点は、一部は明白であり、一部は以下で指摘するものとする。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
本発明は、一般的には、加水分解するとグラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害することができる活性種を生成する前駆体化合物を含む非吸収性又は吸収性物品に関する。詳細には、本発明は、エステル又はアミド結合によって芳香族化合物を２次化合物に結合することによって形成され、かつ膣の内側にある状態で酵素作用によって容易に加水分解されて活性種及び２次化合物を生成することができる前駆体化合物を含む非吸収性製品又は吸収性物品に関する。活性種は、グラム陽性細菌からのＴＳＳＴ−１のような外来蛋白質の生成を実質的に阻害することが見出されている。一般的に、前駆体化合物自体もグラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害することができる。更に、前駆体化合物は、グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を実質的に阻害するために、例えば、ミリスチン酸ミレス−３、グリセロールモノラウレート、及び／又はラウレス−４のような表面活性剤と組み合わせて用いることができる。
【００２３】
本発明は、タンポンアプリケータに関連して本明細書で以下に詳細に説明するが、非吸収性失禁装置、バリア避妊装置、非吸収性避妊装置、及び膣洗浄器具のような他の非吸収性物品、装置、及び／又は製品に適用可能であることが当業者によって認識されるであろう。
【００２４】
本明細書で用いられる場合、語句「非吸収性物品」は、一般的に、月経及び血液産物などのような流体を反発する実質的に疎水性の材料から形成された外側層を含む基体又は装置を意味する。本発明の非吸収性物品を構成するのに適切な材料は、例えば、ゴム、プラスチック、及び厚紙を含む。
【００２５】
一般的に、タンポンアプリケータは、好ましくは中空チューブの形態の外側チューブを含む。チューブは、紙、板紙、厚紙、プラスチック、熱可塑性フィルム、水性コーティング、又はこれらの組合せから形成される。紙、板紙、又は厚紙が用いられる場合、それに耐水性を与えるために、それは、ワックス又は水不溶性ポリマーで被覆することができる。適切なプラスチック材料は、低密度ポリエチレン及び低密度ポリプロピレンのようなポリオレフィンを含む。外側チューブは、通常の膣圧下での崩壊を防止するために十分な強度及び剛性を有するべきである。外側チューブはまた、縦方向のシームを有する円筒形状に形成することができ、又は螺旋状又は回旋状に巻くことができる。外側チューブは、約１０ｍｍから約２０ｍｍまでの比較的小さな直径を有する。
【００２６】
外側チューブは、第１及び第２の離間した端部を有する。外側チューブは、等しいか又は異なる板重量で構成することができる少なくとも２つの個別の層から形成される。層は、例えば板紙及びフィルムのような異なる材料から作ることができ、又は例えば異なる板重量の異なる特性を有する類似の材料から作ることができる。一実施形態では、外部層は、約０．０６ｍｍの薄い被覆板紙又は約０．０１ｍｍの厚みを有するフィルム材料から形成することができるが、１つ又はそれよりも多くの内側層は、より重い板重量を有する非被覆材料から形成することができる。外部層は、水分解性又は水分散性である高光沢の被覆紙から構成することができる。代替的に、外部層は、半光沢又はサテン仕上げのような異なる仕上げを有することができるであろう。外側チューブ上のコーティングは、広範な材料から選択することができる。適切なコーティングは、ポリエチレン、ポリプロピレン、塩化ポリビニリデン、及びポリ塩化アルコールを含むことができる。外部層はまた、潤滑させることができ、又は添加剤を含有することができる。適切な潤滑剤及び添加剤は、従来的にタンポンアプリケータに用いられた薬学的に満足できる潤滑剤又は添加剤のいずれかを含む。このような潤滑剤及び添加剤は、脂肪酸の誘導体、例えばステアルアミド及びオレアミドのような有機化合物、長鎖脂肪族基を含む。
【００２７】
タンポンアプリケータの構成に用いる紙は、リーム当たり約２０ポンドから約２００ポンドまで、適切にはリーム当たり約２５ポンドから約１００ポンドまで、及びより適切にはリーム当たり約３０ポンドから約５０ポンドまでの層当たりの板重量を有するべきである。「リーム」は、２４インチ（６０９．６ｍｍ）×３６インチ（９１４．４ｍｍ）×５００シートの寸法を有する材料と定義される。各板紙層は、約０．４ｍｍ未満、適切には約０．０４ｍｍから約０．２ｍｍ、及びより適切には約０．０５ｍｍから約０．１６ｍｍの厚みを有するべきである。一般的に、外部層は、内部板紙層よりも薄くなることになる。
【００２８】
層の１つが熱可塑性フィルムから作られる場合、それは、ポリエチレンとすることができる。適切なポリエチレンフィルムは、高い滑り特性及び低密度を有する。熱可塑性フィルムは、約０．１ｍｍ未満、適切には約０．０１０ｍｍから約０．０５０ｍｍ、及びより適切には約０．０１２ｍｍから約０．０４０ｍｍの薄さであるべきである。他の種類のフィルムも用いることができる。このようなフィルムは、脂肪族及び芳香族エーテルの群から選択されたセルロースエーテルと、基本的基礎成分としてエチルセルロースを有するフィルム又はメチルセルロースのフィルムと、可撓性高可塑化セルロース酢酸塩、ギ酸塩、及び同様の他のアルキルエステルと、例えば「Ｐｌｉｏｆｉｌｍ（登録商標）」又はビニライト樹脂のようなビニル塩化ビニリデン又は塩酸ゴムとを含む。
【００２９】
熱可塑性フィルムは、透明又は不透明とすることができる。フィルムは、外側チューブの全長に及ぶ場合があり、又は単にその一部分に沿って延びることもできる。フィルムは、外側チューブの外面上とすることができ、又は内側層の１つとすることができる。
【００３０】
外側チューブの層は、膠のような接着剤により、又は熱、圧力、超音波などにより互いに保持することができる。接着剤は、水溶性又は水不溶性のいずれかとすることができる。水溶性接着剤は、外側チューブが水に浸漬されると急速に壊れることになるという点で環境的理由に対しては好ましい。このような浸漬は、仮に外側チューブがそれをトイレに流すことによって廃棄されるとすれば発生することになる。
【００３１】
外側チューブは、吸収性生理用タンポンを収納する大きさであり、かつそのように構成される。外側チューブの内径は、典型的な大きさのタンポンを収容する大きさである。通常は、外側チューブの内径は、約０．７５インチ（約１９ｍｍ）よりも小さく、より適切には約０．６２５インチ（約１６ｍｍ）よりも小さい。タンポンの外径は変化するが、女性によって利用される殆どのタンポンは、約０．７５インチ（約１９ｍｍ）よりも小さな外径を有する。
【００３２】
外側チューブは、タンポンアプリケータの女性の膣内への挿入を容易にすることになる実質的に滑らかな外面を有するべきである。外部層の表面が滑らかであり及び／又は滑りやすいと、外側チューブは、女性の膣の内部組織が擦り傷を受けることなく、女性の膣に容易に滑り込むことになる。外側チューブは、その外側チューブに高い滑り特性を与えるように被覆することができる。ワックス、ポリエチレン、ワックス及びポリエチレンの組合せ、セロファン、及び粘土は、快適な挿入を容易にするように外部層に付加することができる代表的なコーティングである。外側チューブは、縦中心軸上に形成された真っ直ぐな細長い円筒形チューブとすることができる。外側チューブを弓形形状に形成することも可能である。弓形又は湾曲形状は、外側チューブを女性の膣に挿入する時に快適性をもたらすのを助けることができる。湾曲タンポンアプリケータでは、タンポンの形状が女性の膣の曲率により良く適合すると考えられるので、ここでもまた一部の女性が使用するのにより快適であると考えられる湾曲タンポンを用いることが可能である。
【００３３】
外側チューブの第１の端部上に一体的に形成され、そこから外向きの延びているのは、挿入先端部である。挿入先端部は、快適な方法で女性の膣への外側チューブの挿入を容易にするように設計される。挿入先端部は、女性の膣へのタンポンアプリケータの挿入期間中の膣液の急速な吸収に耐える薄い可撓性材料又は膜で作る必要がある。挿入先端部は、紙、板紙、又はフィルム材料で構成することができる。外側チューブが２層だけである時には、挿入先端部は、より低い板重量を有する層から形成すべきである。低い板重量の層は、通常はより薄い層である。フィルム材料は、それが薄く、柔らかく、かつ可撓性があるので好ましい。挿入先端部に適切な材料は、低密度ポリエチレン、可塑化塩化ポリビニル、又はポリウレタンで被覆した薄い結合不織布層を含む。挿入先端部はまた、膣液のあらゆる実質的な吸収を阻害するコーティング又は含浸剤を含むことができる。コーティング剤は、油、ワックス、又は満足できる有機化合物とすることができる。代替的に、挿入先端部は、自己潤滑性とすることができる。このような材料は、本質的に外面に低摩擦係数を備えたポリマーで作ることができる。この種の典型的なポリマーは、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、フッ素化エチレン−プロピレン（ＦＥＰ）、及び酸化ポリエチレン（ＰＥＯ）のようにフッ素化される。
【００３４】
挿入先端部は、外側チューブの外径にほぼ等しいか又はそれよりも小さな外径を有するべきである。直径が外側チューブの直径よりも小さい時には、その差は、外部層の端部が挿入中に女性によって感じることができないほど小さい必要があることに注意すべきである。一般的に、挿入先端部は、外側チューブの直径よりも小さな直径を有する。挿入先端部は、丸い半球形又は円錐台になるように構成することができる。他のノーズ又はドーム状形状も用いることができる。挿入先端部の丸い構成は、タンポンの前方端部が、それが覆われていなかった場合にそうであるように膣の壁に対して磨耗作用を及ぼすことを防止するように機能する。
【００３５】
挿入先端部は、外側チューブを形成する層の少なくとも１つから形成され、挿入先端部がより小さな厚みを有する限り、必要に応じて１つよりも多い層から形成することができる。挿入先端部は、外側チューブが構成されている層の数よりも少なくとも１つ少ない層から形成することができる。挿入先端部が、柔らかくかつ可撓性があることを保証するために、挿入先端部は、外側チューブの厚みよりも小さな厚みを有する。挿入先端部の厚みは、外側チューブの厚みの約５０％よりも小さく、適切には外側チューブの厚みの約７５％よりも小さく、より適切には外側チューブの厚みの約８０％よりも小さい必要がある。
【００３６】
挿入先端部は、ドーム形ノーズ部を形成するように配置された複数の柔らかい可撓性花弁部を有することができる。花弁部は、幅の狭い溝によって分離されている。花弁部は、タンポンが内側チューブによって前方に押されるとタンポンが出ていくことができる拡大開口部をもたらすために半径方向外向きに屈曲又は曲げることができる。偶数又は奇数のいずれかの花弁部を用いることができるが、奇数の花弁部は、タンポンが排出された後に外側チューブが崩壊又は潰れないようにすることになるので、３、５、７などのような奇数の花弁部があることが好ましい。外側チューブが崩壊しないようにすることにより、タンポンアプリケータが使用者の膣から除去された時に膣組織が締め付けられないことを保証することができる。例えば、挿入先端部は、５つの花弁部を含むことになり、各々は、丸い端部を有する細長いほぼ切頭形状を有し、かつ各々は、長さが約７／１６インチ（約１１．１ｍｍ）である。
【００３７】
上述のように、タンポンアプリケータは、内側チューブを含む。外側チューブと同様に、内側チューブは、螺旋状に巻かれるか、回旋状に巻かれるか、又は縦方向に縫い合わされた紙、板紙、厚紙、プラスチック、フィルム、水性コーティング、又はこれらの組合せから構成された中空チューブとすることができる。内側チューブはまた、材料を内側チューブ自体の上に重ね合わせることによって中空チューブ内に形成することができる。内側チューブは、外側チューブと同じ材料で構成することができ、又は内側チューブは、異なる材料で作ることができる。更に、内側チューブは、後で螺旋状に巻かれるか、回旋状に巻かれるか、又は縦方向に縫い合わされて円筒形チューブになる２つ又はそれよりも多くの層を有する積層体として構成することができる。巻きチューブ又は縦方向の縫い合わせチューブは、仕上げチューブが一定の厚みを備える壁を有することになるので好ましい。しかし、一部の製造業者は、中実棒として内側チューブを構成し、何らかの他の独特な形状を使用することを好む場合がある。内側チューブはまた、内側チューブの外側チューブ内への移動を容易にするために使用者の人差し指を置くことができる遠位又は自由端を有する。遠位端は、それによって人差し指の台座として機能する。より大きな接触面を備えた内側チューブの遠位端上に細長いリング又はフランジを形成することも可能である。
【００３８】
内側チューブは、伸縮自在に外側チューブ内に移動することによって機能する。内側チューブが外側チューブ内に押し込まれると、タンポンは、挿入先端部に対して前方に強く押される。タンポンによる接触により、タンポンの外側チューブから排出を可能にするのに十分な直径まで半径方向に花弁部を開かせる。女性の膣でタンポンが適正に位置決めされた状態で、タンポンアプリケータを引き出して廃棄する。
【００３９】
タンポンアプリケータの重量は、タンポンの大きさ及び吸収性に依存することになる。例えば、より長くてより吸収性のタンポンは、短くてより吸収性が低いタンポンよりも重いものになる。一般的に、通常の吸収性タンポンと共に本発明で使用するのに適切なアプリケータは、約３．６２グラムの重量があることになり、超吸収性又は超プラス吸収性タンポンの使用に適切なアプリケータは、約４．１２グラムの重量があることになる。
【００４０】
本発明の他の適切な非吸収性物品は、例えば、非吸収性失禁装置、バリア避妊装置のような非吸収性避妊装置、及び膣洗浄器具を含む。本明細書で用いられる場合、「非吸収性失禁装置」は、女性の膣に挿入するように設計され、膀胱から尿道を通る尿の無意識の通過を軽減又は取除くように拡張された装置を意味する。非吸収性尿失禁装置の拡張は、尿道膣筋膜区域近くに位置する筋肉組織及び体組織に安定なバックドロップをもたらし、腹圧の増加の出現中に尿道にそれ自体に対して圧迫させるものである。更に、膣内の失禁装置の拡張は、尿道括約筋が円形断面構成を維持するのを助けることになる。適切な非吸収性失禁装置の一例は、Ｚｕｎｋｅｒ他に付与された（２００４年１月２０日）米国特許第６，６７９，８３１号に開示されている。
【００４１】
本発明のためのバリア避妊装置のような適切な非吸収性避妊装置は、当業技術で公知である。例えば、ウィリスに付与された（１９８７年１２月８日）米国特許第４，７１１，２３５号は、気泡ゴムの２つの層の間に挟まれた弾性不透過性材料の中央シートを有するリングを含む装置を開示している。気泡ゴムは、膣分泌物の通常の酸ｐＨによって破壊されるのに十分な時間にわたって膣の奥まった場所に精子及び細菌を捕捉する。リングは、シート材料を４つの側面を有するコップ形状に形成し、一方の対の対抗する側面は、内向きに曲げたワイヤコアを含み、別の対の側面は、一方が外向きに丸くしたワイヤコアを有し、他方がフォーク構成を有する。弾性不透過性材料は、一般的にネオプレン非吸収性ゴム材料である。
【００４２】
本発明はまた、吸収性物品に関し、また、膣タンポンに関連して本明細書で以下に詳細に説明するが、生理用ナプキン、パンティライナ、成人用失禁衣、吸収性避妊用スポンジ、おむつ、創傷包帯、医療用包帯、及びグラム陽性細菌からの外来蛋白質の阻害が有益であると考えられる医療用、歯科用、外科用、及び／又は鼻用を意図したものなどの他の吸収性タンポンのような他の使い捨て吸収性物品に適用可能であることを当業者は理解するであろう。
【００４３】
本明細書で用いられる場合、語句「吸収性タンポン」は、一般的に、膣タンポン、医療用タンポン、歯科用タンポン、外科用タンポン、及び鼻用タンポンを意味する。語句「吸収性物品」は、一般的に、体液を吸収して収容する装置を意味し、より詳細には、皮膚に対して又は皮膚の近くに又は体腔の内側に設けられて身体から排出される様々な流体を吸収して収容する装置を意味する。用語「使い捨て」は、一回使用後に吸収性物品として洗濯又は他の方法で修復又は再使用することを意図していない吸収性物品を説明する本明細書で用いられる。このような使い捨て吸収性物品の例は、以下に限定されるものではないが、グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成の阻害が有益であると考えられる医療用、歯科用、外科用、及び／又は鼻用を意図したような包帯及びタンポンを含むヘルスケア関連製品、女性用衛生用品（例えば、生理用ナプキン、パンティライナ、及び膣タンポン）、おむつ、トレーニングパンツ、失禁製品などのようなパーソナルケア吸収性製品を含む。
【００４４】
本発明で用いる適切な膣タンポンは、一般的に、膣腔内に容易に挿入することができる大きさの単体に圧縮された天然及び合成繊維を含む吸収性繊維のような吸収性材料で作られる。適切な繊維は、例えば、綿及びレーヨンのようなセルロース繊維を含む。繊維は、タンポン用途に適切であることが公知である１００％綿、１００％レーヨン、綿、及びレーヨンの混合物とすることができる。
【００４５】
膣タンポンは、一般的に、膣タンポンが必要な吸収機能を備えるのに十分なほど大きな本体の材料を有することができるように細長い円筒形形態で作られるが、様々な形態で作ることができる。タンポンは、圧縮されても圧縮されなくてもよいが、圧縮した種類が一般的に好ましい。タンポンは、吸収性及び非吸収性線維の両方を含む様々な繊維混合物で作ることができ、タンポンは、カバー又は包装で包まれても包まれなくてもよい。一般的に、カバー又は包装は、ポリオレフィン、特にポリプロピレン又はポリエチレンのような不織材料から形成することができる。適切な材料は、スパンボンド材料である。カバー又は包装は、タンポンの繊維が女性の膣の内壁に直接接触しないことを保証するのに有用である。これは、タンポンを除去した後で膣内に繊維が残されないことになることを保証する。カバーは、完全に繊維を取り囲んで封入するようにタンポンの遠位側に離間した端部内に押し込むことができる。カバー又は包装はまた、熱及び圧力等によってそれを繊維に結合するのを助けるヒートシール可能な材料から構成することができる。タンポンを製造するための適切な方法及び材料は、当業者には公知である。
【００４６】
一実施形態では、本発明に用いる適切なタンポンは、カバー又は包装を有する。一般的に、カバー又は包装を有するタンポンの重量は、タンポンの吸収性のレベルに依存することになる。例えば、より吸収性のタンポンは、より吸収性が低いタンポンよりも重いものになる。一般的に、カバー又は包装を有する通常の吸収性タンポンは、約１．７７グラムから約２．６７グラムまで、適切には約２．２２グラムの重量があることになり、カバー又は包装を有する超吸収性タンポンは、約２．６７グラムから約３．５７グラムまで、適切には約３．１２グラムの重量があることになり、カバー又は包装を有する超プラス吸収性タンポンは、約３．６７グラムから約４．９７グラムまで、適切には約４．３２グラムの重量があることになる。
【００４７】
タンポンは、様々な大きさになる。別の実施形態では、本発明で用いるタンポンは、カバー又は包装を持たない。一般的に、本発明に適切なカバー又は包装なしの通常の吸収性タンポンは、約１．６０グラムから約２．５０グラムまで、適切には約２．０５グラムの重量があることになり、カバー又は包装なしの超吸収性タンポンは、約２．４９グラムから約３．３９グラムまで、適切には約２．９４グラムの重量があることになり、カバー又は包装なしの超プラス吸収性タンポンは、約３．４９グラムから約４．７９グラムまで、適切には約４．１４グラムの重量があることになる。
【００４８】
上述のように、本発明の非吸収性及び吸収性物品は、加水分解するとグラム陽性細菌による外来蛋白質の生成、特に黄色ブドウ球菌からのＴＳＳＴ−１の生成を実質的に阻害することができる活性種を生成する前駆体化合物の有効な量を構成する。本明細書で用いられる場合、用語「前駆体化合物」は、グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害することができる活性種を生成するために、膣の内部及び／又は隣接して加水分解を受けることができる非吸収性又は吸収性物品内及び／又は上に導入される化合物を意味する。前駆体化合物は、芳香族化合物をエステル又はアミド結合で２次化合物に結合することによって形成される。前駆体化合物内に含まれるエステル又はアミド結合は、自然膣細菌叢内に見られる細菌によって生成されるリパーゼ、エステラーゼ、及び／又はアミダーゼのような酵素によって加水分解され、グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害することができる活性種をもたらす。生成される活性種と共に、加水分解反応は、活性種の機能にはそれほど重要でない２次化合物を生成する。一部の実施形態では、２次化合物は、ヒトの体内で自然に生じる化合物と同一又は類似であることになる。上述のように、２次化合物は重要なものではないが、前駆体化合物は、加水分解すると形成される２次化合物が膣又は膣にいる細菌に対して実質的に有害でないように設計すべきである。
【００４９】
加水分解処理中に、前駆体化合物は、徐々に分解されて活性種及び２次化合物になり、上述のように前駆体化合物及び活性種の両方が、グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害することができる。この特性は、それがグラム陽性細菌による外来蛋白質生成の長時間持続する連続的阻害を可能にするので有利である。本発明の前駆体化合物は、加水分解前に外来蛋白質の生成を阻害することができ、更に、次に前駆体化合物が加水分解されると活性種が生成され、それが外来蛋白質生成を更に阻害することができる。
【００５０】
本明細書で説明し、かつ非吸収性又は吸収性物品内及び／又は上への導入に適切な前駆体化合物は、製造工程及び棚保管中の両方にわたって非吸収性又は吸収性物品内及び／又は上の両方で実質的に安定である。すなわち、前駆体化合物は、高温製造工程中又は出荷及び保管中に非吸収性又は吸収性物品から出て又はから外には容易に揮発されない。前駆体化合物のこの特性は、それが消費者による最終的な使用に有効な量で非吸収性又は吸収性物品製品内又は上に残る前駆体化合物に対して重要であるので非常に望ましいものである。上述のように、非吸収性又は吸収性物品からの活性化合物の揮発は、過去において問題とされており、結果として活性物質を欠く非吸収性製品又は吸収性物品をもたらす可能性があるものである。
【００５１】
特定の理論に拘泥するものではないが、本発明の前駆体化合物は、これら前駆体化合物の分子量の増大に起因する従来の成分と比較して、増大した量で非吸収性又は吸収性物品内又は上に残る可能性があると考えられている。本発明の前駆体化合物は、過去において利用された一部の活性成分と比較して一般的に高分子量を有するが、これら前駆体化合物は、適切には体内で加水分解され、グラム陽性細菌による外来蛋白質の生成を阻害するのに非常に有効であるベンジルアルコール及び安息香酸のような非常に望ましい活性種を生成する。
【００５２】
製造、出荷、及び保管にわたって非吸収性又は吸収性製品内及び／又は上に低揮発性を有すること及び残存することができることに加えて、体内で生成される加水分解活性種及び２次化合物と共に本明細書に説明する前駆体化合物は、膣に見られる相当量の自然に発生する細菌を殺さない。この特性は重要であり、その理由は、自然な細菌叢が健康な膣を維持するのに必要とされるので、膣又はその周囲の細菌を完全に又は実質的に完全に非特異的に殺すことは、宿主に対して非常に有害である可能性があるからである。膣の全微生物を非特異的に殺す抗菌剤又は抗ウイルス剤のような作用物質と異なり、膣腔内及び周囲で生成される前駆体化合物及び加水分解化合物は、製品内に組み込まれる濃度では細菌に対する実質的な殺菌効果は持たないが、加水分解によって生成される活性種は、グラム陽性細菌からの外毒素の生成を実質的に阻害することができる。
【００５３】
本発明の一実施形態では、前駆体化合物は、以下の一般化学構造式を有する。
【化１６】
2008514698.tif 000018
【化１７】
2008514698.tif 000019
であり、Ｒ7は、−ＯＣＨ2−であり、Ｘは０又は１であり、Ｒ5は、ヘテロ原子で置換しても置換しなくてもよい置換又は非置換芳香環又は一価の飽和又は不飽和、置換又は非置換、分鎖又は直鎖ヒドロカルビル部分であり、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は、Ｈ、ＯＨ、ＣＯＯＨから成る群から独立に選択される。
【００５４】
上述のように、本明細書に説明するヒドロカルビル部分は、例えば、ヒドロキシル基などの様々な置換基と置換しても置換しなくてもよい直鎖及び分鎖ヒドロカルビル部分の両方を含む。更に、ヒドロカルビル部分は、ヘテロ原子で遮断されても遮断されなくてもよい。ヒドロカルビル部分を遮断することができるヘテロ原子は、例えば、酸素、窒素、及びイオウを含む。一実施形態では、Ｒ5は、１から１５の炭素原子、より適切には１から１２の炭素原子を有する一価の飽和、置換又は非置換、分鎖又は直鎖ヒドロカルビル部分である。
【００５５】
エステル結合を有し、本発明の上述の実施形態に適切な一部の特定の前駆体化合物は、以下の表１に見出すことができる。
【００５６】
【表１】
2008514698.tif 000020
【００５７】
上記化合物は、単独又はその組合せで用いることができる。
【００５８】
本明細書で示すように、月経液中に自然に発生する酵素と共に、膣細菌叢内に見られる黄色ブドウ球菌のような細菌によって生成されるエステラーゼのような酵素は、本明細書に説明する前駆体化合物を加水分解して活性種及び２次化合物を生成することができる。例えば、酵素エステラーゼは、上述の前駆体化合物のエステル結合と反応して、活性種ベンジルアルコール及び炭化水素を形成することができる。ベンジルアルコールは、実質的に細菌を除去することなくグラム陽性細菌からの外来蛋白質を実質的に阻害することが見出されている。
【００５９】
別の実施形態では、前駆体化合物は、以下の一般化学構造式を有する。
【化１８】
2008514698.tif 000021
式中、Ｒ1は、
【化１９】
2008514698.tif 000022
であり、Ｒ6は、アミノ酸、アミノ酸のメチルエステル、及びアミノ酸のエチルエステルから成る群から選択され、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4は、Ｈ、ＯＨ、ＣＯＯＨから成る群から独立に選択される。
【００６０】
アミノ酸は、アミノ基及びカルボン酸基を含有する有機化合物である。Ｒ6に用いることができる適切なアミノ酸は、人体中に自然に見られる２０のアミノ酸のいずれかである。より詳細には、本発明で用いるアミノ酸は、適切には、例えば、バリン、ロイシン、システイン、及びこれらの組合せを含む。
【００６１】
この実施形態の適切な化合物は、以下の表２に見出すことができる。
【００６２】
【表２】
2008514698.tif 000023
【００６３】
本明細書に説明する上記化合物は、単独又はその組合せで用いることができる。
【００６４】
上述のように、月経液中に自然に発生する酵素と共に、膣細菌叢内に見られる黄色ブドウ球菌のような細菌によって生成されるアミダーゼのような酵素は、アミノ酸を含む前駆体化合物を加水分解することができる。例えば、酵素アミダーゼは、前駆体化合物と反応し、この実施形態の化合物のアミド結合を分解して安息香酸及びアミノ酸を放出することができる。上述のベンジルアルコールと同様に、安息香酸は、実質的に自然に発生する細菌叢を除去することなくグラム陽性細菌からの外来蛋白質を実質的に阻害することが見出されている。
【００６５】
本発明によれば、非吸収性又は吸収性物品は、前駆体化合物の加水分解時に、非吸収性又は吸収性物品が黄色ブドウ球菌に露出される時のＴＳＳＴ−１のような外来蛋白質の形成を実質的に阻害するのに十分な量の活性剤が生成されるように、前駆体化合物の有効な量を含む。黄色ブドウ球菌の存在下でのＴＳＳＴ−１の生成の阻害に関するベンジルアルコール又は安息香酸のような可能な阻害剤の有効性を試験するためのいくつかの方法が当業技術で公知である。１つのこのような好ましい方法は、実施例１に示されている。本明細書に説明する方法に従って試験すると、好ましくは前駆体化合物の加水分解から生成される活性種は、黄色ブドウ球菌によるＴＳＳＴ−１の形成を少なくとも約４０％だけ、より好ましくは少なくとも約５０％だけ、更により好ましくは少なくとも約６０％だけ、更により好ましくは少なくとも約７０％だけ、更により好ましくは少なくとも約８０％だけ、更により好ましくは少なくとも約９０％だけ、更により好ましくは少なくとも約９５％だけ低減する。更に、上述のように、前駆体化合物もまた、一部の実施形態においてはグラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を阻害することができる。実施例１に示す試験手順はまた、前駆体化合物による阻害量を測定するのに用いることができる。一部の実施形態では、前駆体化合物は、ＴＳＳＴ−１の形成を少なくとも約５０％だけ、好ましくは少なくとも約８０％だけ低減することができる。
【００６６】
本発明によれば、非吸収性又は吸収性製品は、使用時に本明細書で説明するような膣又はその周囲の前駆体化合物及び／又はそこから生成される活性種が、グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を実質的に阻害することができるように、適切な量の前駆体化合物を含む。一般的に、非吸収性製品は、約０．１５％（非吸収性基体の重量による）から約２．０％（非吸収性基体の重量による）までの前駆体化合物を含むことになり、吸収性物品は、約０．１５％（吸収性構造体の重量による）から約２．０％（吸収性構造体の重量による）までの前駆体化合物を含むことになる。これらの百分率は、一般的に「添加重量百分率」と呼ばれる。望ましい実施形態では、非吸収性製品は、約０．１７％（非吸収性基体の重量による）から約１．７％（非吸収性基体の重量による）までの前駆体化合物を含むことになり、吸収性製品は、約０．１７％（吸収性構造体の重量による）から約１．７％（吸収性構造体の重量による）までの前駆体化合物を含むことになる。
【００６７】
１つの特定的な実施形態では、本明細書に説明するようなタンポンアプリケータは、使用時に本明細書に説明するような膣又はその周囲の前駆体化合物及び／又はそこから生成される活性種が、グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を実質的に阻害することができるように、適切な量の前駆体化合物を含む。一般的に、タンポンアプリケータは、約０．１５％（非吸収性基体の重量による）から約２．０％（非吸収性基体の重量による）までの前駆体化合物を含むことになる。望ましい実施形態では、タンポンアプリケータは、約０．１７％（非吸収性基体の重量による）から約１．７％（非吸収性基体の重量による）までの前駆体化合物を含むことになる。
【００６８】
別の特定的な実施形態では、カバー又は包装材料なしの本明細書に説明するような膣タンポンは、使用時に本明細書に説明するような膣又はその周囲の前駆体化合物及び／又はそこから生成される活性種が、グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を実質的に阻害することができるように、適切な量の前駆体化合物を含む。一般的に、カバー又は包装なしの膣タンポンは、約０．１５％（吸収性タンポン材料の重量による）から約２．０％（吸収性タンポン材料の重量による）までの前駆体化合物を含むことになる。望ましい実施形態では、膣タンポンは、約０．１７％（吸収性タンポン材料の重量による）から約１．７％（吸収性タンポン材料の重量による）までの前駆体化合物を含むことになる。
【００６９】
別の特定的な実施形態では、使用時に本明細書に説明するような膣又はその周囲の前駆体化合物及び／又はそこから生成される活性種が、グラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を実質的に阻害することができるように適切な量の前駆体化合物を含むカバー又は包装材料を有する本明細書に説明するような膣タンポンが提供される。前駆体化合物は、膣タンポンの吸収性基体内又は上に導入されているのとは対照的に、カバー又は包装材料内又は上に直接導入される。望ましい実施形態では、膣タンポンのカバー又は包装材料は、約２．６％（カバー又は包装材料の重量による）から約３５．０％（カバー又は包装材料の重量による）までの前駆体化合物を含むことになる。より望ましくは、膣タンポンのカバー又は包装材料は、約２．９５％（カバー又は包装材料の重量による）から約２９．５％（カバー又は包装材料の重量による）までの前駆体化合物を含むことになる。
【００７０】
本発明の好ましい実施形態では、本明細書に説明する前駆体化合物は、有益な細菌叢を著しく除去することなくＴＳＳＴ−１のような外来蛋白質の生成を更に低減する１つ又はそれよりも多くの表面活性剤と組み合わせて非吸収性物品又は吸収性製品内及び／又は上に導入することができる。前駆体化合物と組み合わせて用いる表面活性剤はまた、更に製品性能を改善するように潤滑剤及び／又は皮膚軟化剤として作用することができる。膣タンポンと組み合わせて用いると、表面活性剤は、更に「乾燥タンポン」の除去を助けることができる。タンポンアプリケータ又は膣タンポンを含む一実施形態では、適切な表面活性剤は、クラフト・ケミカル・コーポレーション（米国イリノイ州メルローズパーク）によって「ＣＥＴＩＯＬ  １４１４」として市販されているミレス−３−ミリスチン酸塩である。本発明の他の適切な表面活性剤は、例えば、グリセロールモノラウレート及びラウレス−４を含む。
【００７１】
本発明によれば、非吸収性又は吸収性製品は、使用時に表面活性剤がグラム陽性細菌からの外来蛋白質の生成を更に阻害することができるように、適切な量の表面活性剤を含むことができる。一般的に、非吸収性製品は、約０．４％（非吸収性基体の重量による）から約１．１％（非吸収性基体の重量による）までの表面活性剤を含むことになる。１つの特定的な実施形態では、非吸収性製品は、約０．７５％（非吸収性基体の重量による）の表面活性剤を含むタンポンアプリケータである。一般的に、吸収性製品は、約０．４％（吸収性構造体の重量による）から約１．１％（吸収性構造体の重量による）までの表面活性剤を含むことになる。１つの特定的な実施形態では、吸収性製品は、カバーを有する膣タンポンであり、約０．７５％（カバーを含む全タンポンの重量による）の表面活性剤を含むことになる。
【００７２】
別の実施形態では、表面活性成分は、膣タンポンの吸収性基体内又は上に導入されているものとは対照的に、カバー又は包装材料内又は上に直接導入することができる。一般的に、膣タンポンのカバー又は包装材料は、約１３％（カバー材料の重量による）の表面活性剤を含むことになる。
【００７３】
更に、本明細書に説明する前駆体化合物は、有益な細菌叢を著しく除去することなくＴＳＳＴ−１のような外来蛋白質の生成を更に低減する１つ又はそれよりも多くの２次作用物質と組み合わせて非吸収性又は吸収性製品内及び／又は上に導入することができる。本発明で有用な２次作用物質の適切な例は、Ｃ8−Ｃ18脂肪酸を芳香族アルコールに結合するエーテル、エステル、アミド、グルコシド、又はアミン結合との化合物から成る群から選択された作用物質を含む。
【００７４】
一実施形態では、本明細書に説明する前駆体化合物は、以下の一般式を有するエステル化合物と組み合わせて用いることができる。
【化２０】
2008514698.tif 000024
式中、Ｒ27は、８から約１８までの炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキル又は直鎖又は分岐アルケニルであり、Ｒ28は、アルコール、多価アルコール、及びエトキシル化アルコールから成る群から選択される。本明細書で用いられる場合、用語「多価」は、少なくとも２つの水酸（ＯＨ）基の化合物の存在を意味する。適切な化合物は、グリセリルモノラウレート、グリセリルジラウレート、ミレス−３−ミリスチン酸塩、及びこれらの混合物を含む。
【００７５】
別の実施形態では、本明細書に説明する前駆体化合物は、以下の一般式を有するエーテル化合物と組み合わせて用いることができる。
【化２１】
2008514698.tif 000025
式中、Ｒ10は、８から約１８までの炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキル又は直鎖又は分岐アルケニルであり、Ｒ11は、アルコール、エトキシル化アルコール、ポリアルコキシル化硫酸塩、及びポリアルコキシル化スルホコハク酸塩から成る群から選択される。適切な化合物は、ラウレス−３、ラウレス−４、ラウレス−５、ＰＰＧ−５ラウリルエーテル、１−０−ドデシル−ラク−グリセロール、ラウレス硫酸ナトリウム、ラウレス硫酸カリウム、ラウレス（３）スルホコハク酸二ナトリウム塩、ラウレス（３）スルホコハク酸二カリウム塩、及び酸化ポリエチレン（２）ソルビトールエーテルを含む。
【００７６】
別の実施形態では、本明細書に説明する前駆体化合物は、アルキルポリグリコシド化合物と組み合わせて用いることができる。前駆体化合物と組み合わせて用いるのに適切なアルキルポリグリゴシドは、以下の一般式を有するアルキルポリグリゴシドを含む。
【化２２】
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式中、Ｚは、５又は６の炭素原子を有するサッカリドであり、ｎは、１から６までの整数であり、Ｒ14は、約８から約１８までの炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキル基である。「Ｇｌｕｃｏｐｏｎ  ２２０、２２５、４２５、６００、及び６２５」（全て、米国ペンシルベニア州アンブラー所在のヘンケル・コーポレーションから市販）並びに「ＴＬ  ２１４１」（米国デラウエア州ウィルミントン所在のＩＣＩ・サーファクタンツから市販）は、本発明の前駆体化合物と組み合わせて用いるのに適切なアルキルポリグルコシドである。
【００７７】
別の実施形態では、本明細書に説明する前駆体化合物は、以下の一般式を有するアミド含有化合物と組み合わせて用いることができる。
【化２３】
2008514698.tif 000027
式中、Ｒ17は、カルボニル炭素を含めて、８から１８までの炭素原子を有するアルキル基であり、Ｒ18及びＲ19は、エステル基、エーテル基、アミン基、水酸基、カルボキシル基、カルボキシル塩、スルホン酸基、スルホン酸塩、及びこれらの混合物から選択された群と置換されても置換されなくてもよい１から約１２までの炭素原子を有する水素又はアルキル基から独立に選択される。本明細書に説明する前駆体化合物と組み合わせて用いるのに好ましいアミド化合物は、ラウリル・サルコシン酸ナトリウム、ラウリルアミド・モノエタノールアミド、ラウリルアミド・ジエタノールアミド、ラウラミドプロピル・ジメチルアミン、ラウラミド・モノエタノールアミド・スルホコハク酸塩二ナトリウム、及びラウロアンホジ酢酸二ナトリウムを含む。
【００７８】
別の実施形態では、本明細書に説明する前駆体化合物は、以下の一般式を有するアミン化合物と組み合わせて用いることができる。
【化２４】
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式中、Ｒ20は、約８から約１８までの炭素原子を有するアルキル基であり、Ｒ21及びＲ22は、１から約１８までの炭素原子を有する水素及びアルキル基から成る群から独立に選択され、ヒドロキシル、カルボキシル、カルボキシル塩、及びイミダゾリンから成る群から選択された１つ又はそれよりも多くの置換部分を有することができる。本明細書に説明する前駆体化合物と共に用いるのに好ましいアミン化合物は、ラウレス硫酸トリエタノールアミド、ラウラミン、ラウラミノプロピオン酸、ラウリミノジプロピオン酸ナトリウム、ラウリルヒドロキシエチルイミダゾリン、及びこれらの混合物を含む。
【００７９】
別の実施形態では、アミン化合物は、以下の一般式を有するアミン塩とすることができる。
【化２５】
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式中、Ｒ23は、アミンに関連するアニオン部分であり、８から約１８までの炭素原子を有するアルキル基に由来し、Ｒ24、Ｒ25、及びＲ26は、１から約１８までの炭素原子を有する水素及びアルキル基から成る群から独立に選択され、ヒドロキシル、カルボキシル、カルボキシル塩、及びイミダゾリンから成る群から選択された１つ又はそれよりも多くの置換部分を有することができる。Ｒ24、Ｒ25、及びＲ26は、飽和又は不飽和とすることができる。アミン塩の好ましい例示的化合物は、ラウレス硫酸ＴＥＡである。
【００８０】
ＴＳＳＴ−１の生成を更に低減するように非吸収性製品に加えられる本明細書に説明する２次化合物の量は、約０．１５％（非吸収性基体の重量による）から約２．０％（非吸収性基体の重量による）までの２次化合物であることが見出されている。より適切には、非吸収性製品は、約０．１７％（非吸収性基体の重量による）から約１．７％（非吸収性基体の重量による）までの２次化合物を含む。
【００８１】
ＴＳＳＴ−１の生成を更に低減するように吸収性物品に加えられる本明細書に説明する２次化合物の量は、約０．１５％（吸収性構造体の重量による）から約２．０％（吸収性構造体の重量による）までの２次化合物であることが見出されている。より適切には、吸収性製品は、約０．１７％（吸収性構造体の重量による）から約１．７％（吸収性構造体の重量による）までの２次化合物を含む。
【００８２】
前駆体化合物は、化学作用物質を望ましい非吸収性基体に付加するための従来の方法を用いて非吸収性基体に付加することができる。例えば、非吸収性物品は、前駆体化合物を含有する流体浴に直接浸漬することができ、次に、必要に応じてあらゆる揮発性溶剤を除去するために空気乾燥することができる。代替的に、本発明の非吸収性物品は、本発明の阻害化合物を用いて溶射又は他の方法で被覆することができる。
【００８３】
前駆体化合物は、吸収性製品内への吸収を容易にするためのような望ましい用途に有用な１つ又はそれよりも多くの従来の薬学的に満足できかつ適合する担体材料を更に用いることができる。担体は、非吸収性又は吸収性物品に用いる前駆体化合物を相互溶解又は懸濁することができる。本発明に用いるのに適切な担体材料は、オイトメント、ローション、クリーム、軟膏、エーロゾル、坐薬、及びゲルなどのベースとして化粧品及び医療技術で使用するための公知のものを含む。例えば、１つの適切な担体は、「Ｃｅｔｉｏｌ」である。更に、上述のように、「Ｃｅｔｉｏｌ」はまた、潤滑剤及び皮膚軟化剤の両方として作用することができる。他の適切な担体材料は、水、様々なアルコール、及び他の有機溶剤を含む。
【００８４】
別の実施形態では、本発明の前駆体化合物は、現在市販されている潅水製剤又はより高粘性潅水剤のような様々な製剤に処方することができる。例えば、本発明の前駆体化合物は、膣を洗浄して清潔にし、かつ膣感染症を防止するのに用いる製剤に組み込むことができる。更に、前駆体化合物は、「Ｃｒｅｍｏｐｈｏｓ  ＲＨ６０」又は「Ｔｗｅｅｎ  ２０」などのような界面活性剤、望ましくは非イオン性界面活性剤と共に処方することができる。本発明の製剤はまた、防腐剤を含有することができる。プロピレングリコールのようなより大きな粘性を付与することができる化合物は、本発明の製剤に加えることができる。一般的に、より高粘性製剤は、投薬後に比較的長い期間にわたって膣に留まる傾向があることになる製剤を作り出すために好ましい。
【００８５】
前駆体化合物が、薬学的に満足できる担体を含む製剤に組み込まれる時、製剤は、一般的に、少なくとも約０．０１％（重量／容積）、望ましくは少なくとも約０．０４％（重量／容積）の前駆体化合物（製剤の総重量に基づく）を含む。一般的に、製剤は、約０．３％（重量／容積）よりも多くない前駆体化合物を含有する。膣洗浄用途に用いる特に適切な製剤は、前駆体化合物の少なくとも約０．２ミリモル／リットルから約５０ミリモル／リットルまで、適切には約０．３ミリモル／リットルから約３０ミリモル／リットルまで、より適切には約１．０ミリモル／リットルから約１５ミリモル／リットルまでを含有することができる。
【００８６】
本発明の前駆体化合物は、あらゆる適切な形態で調製して吸収性物品に付加することができるが、好ましくは、以下に限定されるものではないが、水溶液、ローション、香油、ゲル、軟膏、オイントメント、ボーラス、及び坐薬などを含む形態に調製される。
【００８７】
前駆体化合物は、化学作用物質を望ましい吸収性物品に付加するための従来の方法を用いて吸収性物品に付加することができる。例えば、別々の包装なしの単体タンポンは、望ましい濃度の前駆体化合物を含有する溶液で溶射することができ、次に、必要に応じてあらゆる揮発性溶剤を除去するために空気乾燥することができる。圧縮タンポンに関しては、圧縮前にいずれかの化合物でタンポンを含浸することが一般的に好ましい。前駆体化合物は、タンポン材料上及び／又は内に組み込まれると、移動性、緩く接着、結合、又はこのいずれかの組合せとすることができる。本明細書で用いられる場合、用語「移動性」は、組成物がタンポン材料を通って移動することができることを意味する。
【００８８】
一般的に、必ずしも前駆体化合物でタンポンの吸収性本体全体を含浸する必要はない。最適な結果は、経済的にも機能的にも、使用中に最も有効と考えられるタンポン又は他の吸収性製品の外面上又はその近くに前駆体化合物を集中させることによって得ることができる。
【００８９】
一部の実施形態では、本発明の前駆体化合物は、当業技術で定着した方式で、かつ通常の膣細菌叢を変えないと考えられる濃度で薬剤組成物に従来見られる補助成分と組合せて用いることができる。例えば、組成物は、補足的選択性抗菌剤、抗酸化剤、駆虫剤、抗掻痒剤、収斂剤、局所麻酔剤、又は抗炎症剤のような併用治療のための付加的な適合薬学活性物質を含有することができる。
【００９０】
一実施形態では、前駆体化合物は、月経又は他の膣分泌物と接触すると溶解、分解、破裂、又は他の方法で分解して成分を放出することになるシェル型材料にマイクロ封入することができる。この実施形態により、マイクロ封入材料は、前駆体化合物の放出をもたらす分泌液で湿るまで前駆体化合物の揮発を遅らせる。このようなマイクロ封入により、製造及び保管後の製品内に存在する前駆体化合物の量を著しく増加させることができる。適切なマイクロ封入シェル材料は、当業技術で公知であり、セルロースベースポリマー材料（例えば、エチルセルロース）、炭水化物ベース材料（例えば、カチオン澱粉及び糖）、及びこれらに由来する材料（例えば、デキストリン及びシクロデキストリン）、並びにヒト組織に適合する他の材料を含む。
【００９１】
マイクロ封入シェル厚みは、変更することができ、一般的に、単層又はより厚い積層体層、又は複合層とすることができる封入材料の薄層によって封入前駆体化合物を覆うことを可能にするように製造される。マイクロ封入層は、製品の取扱い又は出荷中のシェルの亀裂又は分解に抵抗するほど十分に厚くすべきである。マイクロ封入層は、保管、出荷、又は着用中の大気条件による湿度がマイクロ封入層の分解を起こし、結果として前駆体化合物の放出を引き起こすことにならないように構成すべきである。
【００９２】
非吸収性又は吸収性物品に直接付加されるマイクロ封入製剤又は成分は、使用者が使用中に皮膚又は粘膜で封入シェルを感じることができないような大きさのものとすべきである。一般的に、カプセルは、約２５マイクロメートルよりも大きくなく、望ましくは約１０マイクロメートルよりも大きくない直径を有する。これらの大きさでは、製剤が皮膚に接触する時の「ざらざら」又は「ちくちく」感がない。
【００９３】
本発明は、単に例示のためであって本発明の範囲又は本発明を実施することができる方法を限定するように考えないものとする以下の実施例によって示される。
【実施例１】
【００９４】
この実施例では、黄色ブドウ球菌の成長及びＴＳＳＴ−１の生成に対する様々な試験化合物の効果が判断された。望ましい濃度（重量％（ｗ／ｖ）で表される）の試験化合物は、無菌の５０ｍＬ円錐ポリプロピレンチューブ（米国ノースカロライナ州ニュートン所在のサーステット・インコーポレーテッド）の１０ｍＬの成長培地内に置かれた。
【００９５】
成長培地は、製造業者の使用説明書に従って３７グラムの脳心臓注入培養液（ＢＨＩ）（米国メリーランド州コッキーズビル所在のディフコ・ラボラトリーズ）を８８０ｍＬの蒸留水に溶解し、培養液を殺菌することによって調製された。ＢＨＩには、１００ｍＬウシ胎仔血清（ＦＢＳ）（米国ミズーリ州セントルイス所在のシグマ・ケミカル・カンパニー社）が追加された。塩化マグネシウムの６水和物の１０ｍＬ０．０２１Ｍ無菌溶液（米国ミズーリ州セントルイス所在のシグマ・ケミカル・カンパニー）が、ＢＨＩ−ＦＢＳ混合物に加えられた。Ｌ−グルタミンの１０ｍＬ０．０２７Ｍ無菌溶液（米国ミズーリ州セントルイス所在のシグマ・ケミカル・カンパニー）もＢＨＩ−ＦＢＳ混合物に加えられた。
【００９６】
試験される化合物には、Ｎ−ベンゾイル−ＤＬ−ロイシン（Ｓｉｇｍａ  Ｂ−１５０４）及びＮ−ベンゾイル−ＤＬ−バリン（Ｓｉｇｍａ  Ｂ−６５００）を含めた。試験化合物は、固体として入手された。固体は、上述のように調製されたＢＨＩに溶解された。試験化合物は、望ましい最終濃度を得るのに必要な量で成長培地に加えられた。「Ｃｅｔｉｏｌ  １４１４Ｅ」（ミレス−３−ミリスチン酸塩）（米国イリノイ州メルローズパーク所在のクラフト・ケミカル・コーポレーション）を１０ｍＭ濃度で一部の分析の成長培地内に含めた。
【００９７】
試験化合物を含有する成長培地のチューブの植菌のための調製において、植菌培養液は、以下の方法で調製された。すなわち、黄色ブドウ球菌ＭＮ８をトリプシン大豆寒天プレート（ＴＳＡ、米国メリーランド州コッキーズビル所在のディフコ・ラボラトリーズ）上に付着させ、３５℃で培養した。この実施例の供試生物は、米国ミネソタ州ミネアポリス所在のミネソタ大学医学部微生物学科のＰａｔ  Ｓｃｈｌｉｅｖｅｒｔ博士から入手したものである。２４時間培養後、３回から５回まで個々のコロニーを無菌植菌ループで採取し、１０ｍＬの成長培地に用いた。植菌成長培地のチューブは、大気中３５℃で培養された。２４時間培養後、培養液は培養器から除去され、Ｓ／Ｐ銘柄渦混合器上で十分に混合された。１０ｍＬの成長培地を含有する第２のチューブは、上述の２４時間経った培養液０．５ｍＬを植菌され、大気中で３５℃で培養された。２４時間培養後、培養液は培養器から除去され、Ｓ／Ｐ銘柄渦混合器上で十分に混合された。培養液の最適密度は、マイクロプレート読取器（米国バーモント州ウィヌースキ所在のバイオテック・インストルメンツ製「Ｍｏｄｅｌ  ＥＬ３０９」）で判断された。１０ｍＬの成長培地内に５×１０6ＣＦＵ／ｍＬを得るのに必要な接種量は、予め準備した標準曲線を用いて判断された。
【００９８】
この実施例には、様々な濃度の試験化合物、様々な濃度の試験化合物及び「Ｃｅｔｉｏｌ  １４１４Ｅ」、並びに試験化合物なしの成長培地のチューブ（対照）を含めた。各チューブは、上述のように判断された接種量が植菌された。チューブは、発泡栓（米国ニュージャージー州サウスプレーンフィールド所在のＶＷＲ・サイエンティフィック・プロダクツから獲得したジェース・インダストリーズ製の「ＩＤＥＮＴＩ−ＰＬＵＧ」プラスチック発泡栓）で蓋をした。チューブは、ＣＯ2を容積で５％含む大気中３５℃で培養された。２４時間培養後、チューブは培養器から除去され、培養液に対して黄色ブドウ球菌のコロニー形成単位の数が分析され、培養液は、上述のようにＴＳＳＴ−１の分析のために調製された。
【００９９】
培養後のｍＬ当たりのコロニー形成単位の数は、標準プレート計数手順を用いて判断された。ＴＳＳＴ−１の分析の準備において、培養液培養液は、１５分間２−１０℃２５００ｒｐｍで遠心分離され、上澄みは、０．２μＭ細孔径の「ＦＩＳＨＥＲＢＲＡＮＤ」０．４５μｍＭＣＥフィルタを通してその後濾過滅菌された。得られた流体は、「ＦＩＳＨＥＲＢＲＡＮＤ」１２×７５ｍｍポリスチレン培養チューブ（米国ペンシルベニア州ピッツバーグ所在のフィッシャー・サイエンティフィック）において−７０℃で冷凍された。
【０１００】
ｍＬ当たりのＴＳＳＴ−１の量は、非競争サンドイッチ酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）によって判断された。用いた方法は、以下の通りであった。すなわち、ＴＳＳＴ−１（＃ＴＴ−６０６）、ウサギポリクローナル「抗ＴＳＳＴ−１」ＩｇＧ（ＬＴＩ−１０１）、西洋ワサビペルオキシダーゼ共役ウサギポリクローナル「抗ＴＳＳＴ−１」ＩｇＧ（＃ＬＴＣ−１０１）、及び正常ウサギ血清（ＮＲＳ）認証「抗ＴＳＳＴ−１」なし（＃ＮＲＳ−１０）の４つの試薬が、トキシン・テクノロジー・インコーポレーテッド（米国フロリダ州サラソータ）から購入された。ポリクローナルウサギ「抗ＴＳＳＴ−１」ＩｇＧの１０μｇ／ｍＬ溶液が、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）（ｐＨ７．４）中で調製された。ＰＢＳは、全てシグマ・ケミカル・カンパニー（米国ミズーリ州セントルイス）から入手可能な０．０１６ＭのＮａＨ2ＰＯ4、０．００４ＭのＮａＨ2ＰＯ4−Ｈ2Ｏ、０．００３ＭのＫＣｌ、及び０．１３７ＭのＮａＣｌから調製された。百マイクロリットルのポリクローナルウサギ「抗ＴＳＳＴ−１」ＩｇＧ溶液が、ポリスチレンマイクロプレート（Ｎｕｎｃ−Ｄｅｎｍａｒｋ、カタログ番号＃４３９４５４）の内側ウェルにピペットで取られた。プレートは、覆われて一夜室温で培養された。非結合抗毒素は、乾燥するまで排液することによって除去された。
【０１０１】
ＴＳＳＴ−１は、０．０５％（容積／容積）「Ｔｗｅｅｎ−２０」（ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ）（米国ミズーリ州セントルイス所在のシグマ・ケミカル・カンパニー）及び１％（容積／容積）ＮＲＳを含むリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）（ｐＨ７．４）で１０ｎｇ／ｍＬに希釈され、一夜４℃で培養された。試験標本は、１％ＮＲＳ（容積／容積）と組み合わされ、一夜４℃で培養された。培養液の標本及びＴＳＳＴ−１規準標準液は、３通りに分析された。
【０１０２】
ＰＢＳ中のカゼイン（米国ミズーリ州セントルイス所在のシグマ・ケミカル・カンパニー）のナトリウム塩の１％（重量／容積）溶液百マイクロリットルが、ポリエチレンマイクロプレートの内側ウェルにピペットで取られた。プレートは、覆われて１時間３５℃で培養された。非結合ＢＳＡは、「ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ」で３回洗浄により除去された。ＮＲＳで処理されたＴＳＳＴ−１規準標準液（１０ｎｇ／ｍＬ）及び試薬対照が、プレートの第１及び第７コラム上のそれらのそれぞれのウェルに２００μＬ容積だけピペットで取られた。百マイクロリットルの「ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ」を残りのウェルに加えた。ＴＳＳＴ−１規準標準液及び試験標本は、次に、ウェルからウェルへ１００マイクロリットル移すことにより、「ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ」内で連続的に５回希釈された。標本は、吸引及び圧搾の反復によって移す前に混合された。試験標本及びＴＳＳＴ−１規準標準液の標本は、３通りに分析された。これに３５℃で１．５時間の培養、並びに非結合毒素を除去するために「ＰＢＳ−Ｔ」で５回の洗浄及び蒸留水で３回の洗浄が続いた。西洋ワサビペルオキシダーゼ共役ウサギポリクローナル「抗ＴＳＳＴ−１」ＩｇＧは、製造業者の使用説明書に従って希釈され、５０マイクロリットルが共役制御ウェルであるウェル「Ａ−１」を除く各マイクロリットルウェルに加えられた。プレートは、覆われて１時間にわたって３５℃で培養された。
【０１０３】
培養に続いて、プレートは、「ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ」で５回及び蒸留水で３回洗浄された。洗浄に続いて、ウェルは、１１ｍＬのクエン酸塩緩衝剤（ｐＨ５．５）中５ｍｇのｏ−フェニレンジアミン及び５μＬの３０％過酸化水素（両方とも米国ミズーリ州セントルイス所在のシグマ・ケミカル・カンパニーから入手可能）から成る１００マイクロリットルの西洋ワサビペルオキシダーゼ基質緩衝剤で処理された。クエン酸塩緩衝剤は、両方ともシグマ・ケミカル・カンパニー（米国ミズーリ州セントルイス）から入手可能な０．０１２Ｍ無水クエン酸及び０．０２６Ｍ二塩基リン酸ナトリウムから調製された。プレートは、３５℃で１５分間培養された。反応は、５０マイクロリットルの５％硫酸溶液の添加によって停止された。各ウェルの呈色反応の強度は、バイオテック製「Ｍｏｄｅｌ  ＥＬ３０９」マイクロプレート読取器（外径４９０ｎｍ）を用いて値が求められた。試験標本中のＴＳＳＴ−１濃度は、各分析手順中に導き出された規準毒素回帰方程式から判断された。ＴＳＳＴ−１の生成を阻害する時の化合物の有効性は、以下の表３に示されている。
【０１０４】
（表３）
2008514698.tif 000030
【０１０５】
本発明によれば、表３のデータは、試験化合物を含有するアミノ酸の存在化下で、黄色ブドウ球菌ＭＮ８が、対照と比較してより少ないＴＳＳＴ−１を生成したことを示している。試験した濃度で、これらの化合物は、７９％から９３％だけ毒素生成の量を低減した。また、データは、「Ｃｅｔｉｏｌ  １４１４Ｅ」と組み合わせると、試験化合物を含有するアミノ酸の存在化下で、黄色ブドウ球菌ＭＮ８が、対照と比較してより少ないＴＳＳＴ−１を生成したことを示している。試験した濃度で、これらの化合物は、「Ｃｅｔｉｏｌ  １４１４Ｅ」と組み合わせると、９３％から９５％だけ毒素生成の量を低減した。しかし、毒素生成の量は著しく減少したが、黄色ブドウ球菌の成長に対する効果は、たとえあったとしても最小限であった。
【実施例２】
【０１０６】
この実施例では、黄色ブドウ球菌の成長及びＴＳＳＴ−１の生成に対するベンジルアルコール（「Ａｌｄｒｉｃｈ  ４０」、２８３−４）及びマロン酸ベンジルエチル（「Ａｌｄｒｉｃｈ  ３０」、０６９−１）（米国ミズーリ州セントルイス所在のシグマ・ケミカル・コーポレーション）の効果が判断された。実施例２で試験した試験化合物の効果は、実施例１で説明したように１０ｍＬの成長培地内に％（ｖ／ｖ）で表される望ましい濃度を配置することによって判断された。次に、試験化合物は、各試験が４通りに実施された以外は実施例１のように試験されて評価された。示す結果は、４つの数値の平均を表している。黄色ブドウ球菌ＭＮ８の成長及びＴＳＳＴ−１の生成に対する試験化合物の効果は、以下の表４に示されている。
【０１０７】
（表４）
2008514698.tif 000031
【０１０８】
試験した濃度で、化合物マロン酸ベンジルエチル及び活性種ベンジルアルコールの両方とも８５％から９４％だけ毒素生成の量を低減した。また、データは、「Ｃｅｔｉｏｌ  １４１４Ｅ」（ミレス−３−ミリスチン酸塩）と組み合わせると、ベンジルアルコール又はマロン酸ベンジルエチルの存在化下で、黄色ブドウ球菌ＭＮ８が、対照と比較してより少ないＴＳＳＴ−１を生成したことを示している。試験した濃度で、これらの化合物は、「Ｃｅｔｉｏｌ  １４１４Ｅ」と組み合わせると９８％から９９％だけ毒素生成の量を低減した。
【０１０９】
この処理の統計的分析は、「分散分析」的に「最小二乗平均」での２つ１組の比較を用いて実施された。２つ１組の比較は、標準的な「Ｔ−検定」と同等である。比較の結果は、「Ｃｅｔｉｏｌ」なしの成長、又は「Ｃｅｔｉｏｌ」の有無に関わらずベンジルアルコール単独又はマロン酸ベンジルエチルの存在下での成長よりも、「Ｃｅｔｉｏｌ」単独の存在下の成長が、黄色ブドウ球菌の成長の著しく大きな阻害をもたらすことを示した。マロン酸ベンジルエチル、及び「Ｃｅｔｉｏｌ」とベンジルアルコール又はマロン酸ベンジルエチルとの組合せの存在下の成長は、「Ｃｅｔｉｏｌ」単独の存在下又は添加剤なしでの成長に比較すると、著しい毒素生成の減少をもたらした。しかし、毒素生成の量は、これらの条件下で著しく減少したが、黄色ブドウ球菌の成長に対する効果は、たとえあったとしても最小限であった。
【実施例３】
【０１１０】
この実施例では、黄色ブドウ球菌の成長及びＴＳＳＴ−１の生成に対するベンジル−（−）−乳酸塩（「Ａｌｄｒｉｃｈ  ４２」、４８４−６）（米国ミズーリ州セントルイス所在のシグマ・ケミカル・コーポレーション）の効果が判断された。試験化合物の効果は、実施例１のように１０ｍＬの成長培地内に％（ｖ／ｖ）で表される望ましい濃度を配置することによって判断された。次に、化合物は、各試験が４通りに実施された以外は実施例１のように試験されて評価された。示す結果は、４つの数値の平均を表している。黄色ブドウ球菌ＭＮ８の成長及びＴＳＳＴ−１の生成に対する試験化合物の効果は、以下の表５に示されている。
【０１１１】
（表５）
2008514698.tif 000032
【０１１２】
試験した濃度で、ベンジル−（−）−乳酸塩は、９７％だけ毒素生成の量を低減した。また、データは、「Ｃｅｔｉｏｌ  １４１４Ｅ」（ミレス−３−ミリスチン酸塩）と組み合わせると、ベンジル−（−）−乳酸塩の存在化下で、黄色ブドウ球菌ＭＮ８が、対照と比較してより少ないＴＳＳＴ−１を生成したことを示している。試験した濃度で、ベンジル−（−）−乳酸塩は、「Ｃｅｔｉｏｌ  １４１４Ｅ」と組み合わせると９９％だけ毒素生成の量を低減した。
【０１１３】
この処理の統計的な比較は、実施例２で考察した方法によって実施された。比較の結果は、「Ｃｅｔｉｏｌ」単独、又は「Ｃｅｔｉｏｌ」及びベンジル−（−）−乳酸塩の存在下での成長が、「Ｃｅｔｉｏｌ」なしの成長又はベンジル−（−）−乳酸塩存在下での成長よりも黄色ブドウ球菌の成長の著しく大きな阻害をもたらすことを示した。ベンジル−（−）−乳酸塩、及び「Ｃｅｔｉｏｌ」とベンジル−（−）−乳酸塩との組合せの存在下の成長は、「Ｃｅｔｉｏｌ」単独の存在下又は添加剤なしの成長に比較すると、著しい毒素生成の減少をもたらした。
【実施例４】
【０１１４】
この実施例では、表面活性剤「Ｃｅｔｉｏｌ  １４１４Ｅ」（ミレス−３−ミリスチン酸塩）と組み合わせたベンジル−（−）−乳酸塩の効果が、５×４格子状実験設計を用いて試験された。それによって黄色ブドウ球菌の成長及びＴＳＳＴ−１の生成に対する２つの試験化合物の相互作用の評価が可能であった。
【０１１５】
ベンジル−（−）−乳酸塩の５つの濃度（０．００、０．０５％、０．１３％、０．２５％、及び０．５０％）は、「Ｃｅｔｉｏｌ  １４１４Ｅ」の４つの濃度（１０ｍＭ、５ｍＭ、２．５ｍＭ、及び０．０ｍＭ）と２０チューブのアレイに組み合わされた。例えば、チューブ＃１には、１０ｍＬの成長培地（実施例１で調製されたような）中に０．０ｍＭ「Ｃｅｔｉｏｌ  １４１４Ｅ」及び０．０％ベンジル−（−）−乳酸塩（ｗ／ｖ）を含有させた。チューブ＃１−＃２０の各々には、ベンジル−（−）−乳酸塩及び「Ｃｅｔｉｏｌ」の固有の組合せを含有させた。溶液は、実験１のように試験されて評価された。黄色ブドウ球菌ＭＮ８の成長及びＴＳＳＴ−１の生成に対する試験化合物の効果は、以下の表６に示されている。
【０１１６】
（表６）
2008514698.tif 000033
【０１１７】
「Ｃｅｔｉｏｌ  １４１４Ｅ」の全ての濃度で、ベンジル−（−）−乳酸塩は、ＴＳＳＴ−１生成の阻害を増大する。この効果は、加法的であるように見える。
【実施例５】
【０１１８】
この実施例では、黄色ブドウ球菌ＭＮ８の成長及びＴＳＳＴ−１の生成に対するベンジルラウリン酸塩（米国ニュージャージー州フェアフィールド所在のペンタ・マニファクチャリング）の効果が判断された。試験化合物の効果は、実施例１のように１０ｍＬの成長培地内に％（ｖ／ｖ）で表される望ましい濃度を配置することによって判断された。次に、化合物は、実施例１のように試験されて評価された。黄色ブドウ球菌ＭＮ８の成長及びＴＳＳＴ−１の生成に対するベンジルラウリン酸塩の効果は、以下の表７に示されている。
【０１１９】
（表７）
2008514698.tif 000034
【０１２０】
試験した濃度で、ベンジルラウリン酸塩は、６２％から９１％だけ毒素生成の量を低減した。試験した濃度で、ベンジルラウリン酸塩は、「Ｃｅｔｉｏｌ  １４１４Ｅ」（ミレス−３−ミリスチン酸塩）と組み合わせると８６％から９０％だけ毒素生成の量を低減した。
【実施例６】
【０１２１】
この実施例では、市販のタンポン（米国ウイスコンシン州ニーナー所在のキンバリークラーク・ワールドワイド・インコーポレーテッドの「ＫＯＴＥＸ  ｓｕｐｅｒ  ａｂｓｏｒｂｅｎｃｙ」）が、黄色ブドウ球菌ＭＮ８の成長及びＴＳＳＴ−１の生成に対する処理済みタンポンの効果を判断するためにベンジルアルコールで処理された。上述のように、市販のタンポンは、約０．７５％（カバーを有する全タンポンの重量による）の「Ｃｅｔｉｏｌ  １４１４Ｅ」（ミレス−３−ミリスチン酸塩）を含有することになる。実験の準備において、タンポンのヒモは切り取られ、綿撒糸は、ヒモ側の端部を下にして無菌の蓋をした５０ｍＬポリスチレン試験チューブ内に置かれた。
【０１２２】
綿撒糸は、「脳心臓注入培養液（ＢＨＩ）」に溶解した５ｍＬのベンジルアルコールの５つの濃度（０．０、０．３％、０．１５％、０．０７５％、及び０．０３％）で培養された。タンポン綿撒糸は、１時間にわたって室温で放置した。
【０１２３】
各綿撒糸は、次に、１０．５ｍＬの最終容積を達成するために５×１０6±１×１０6ＣＦＵ／ｍＬの黄色ブドウ球菌ＭＮ８を含有する５．５ｍＬの植菌培養液で植菌された。チューブは、発泡栓（米国ニュージャージー州サウスプレーンフィールド所在のＶＷＲ・サイエンティフィック・プロダクツから獲得したジェース・インダストリーズ製の「ＩＤＥＮＴＩ−ＰＬＵＧ」プラスチック発泡栓）で蓋をし、２４時間３７℃で培養した。綿撒糸は、培養器から除去し、５０ｍＬの無菌ＢＨＩを含有させた無菌「ＳＴＯＭＡＣＨＥＲ」バッグ（英国ノーフォーク所在のセワード・インコーポレーテッド）に個々に入れられた。次に、綿撒糸及び流体は、バッグ内で消化又は配合された。一定分量の流体が「ＳＴＯＭＡＣＨＥＲ」バッグから除去され、試験のために無菌チューブに入れられた。
【０１２４】
プレート計数標本が、標本をボルテックスすることによって準備され、５ｍＬの標本を回収し、５ｍＬを新しい無菌５０ｍＬ遠心分離チューブに入れた。標本は、次に、「Ｖｉｒｓｏｎｉｃ６００超音波セル分裂装置」（米国ニューヨーク州ガーディナー所在のバーチス・カンパニー）を用いて８％の出力電力で１５秒間にわたって超音波分解された。全ての標本が超音波分解されると、ｍＬ当たりのコロニー形成単位（ＣＦＵ）の数が、標準プレート計数手順を用いて判断された。
【０１２５】
ＴＳＳＴ−１の分析の準備において、培養液は、５分間４℃９０００ｒｐｍで遠心分離され、上澄みは、続いて０．２μＭ細孔径の０．４５μｍＭＣＥフィルタを通して濾過滅菌された。得られた流体は、１．５ｍＬポリプロピレンネジ蓋冷凍水薬瓶中で２つの１ｍＬ分割量で−７０℃で冷凍された。
【０１２６】
ｍＬ当たりのＴＳＳＴ−１の量は、非競争サンドイッチ酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）によって判断された。用いた方法は、以下の通りであった。すなわち、ＴＳＳＴ−１（＃６０６）、ウサギポリクローナル「抗ＴＳＳＴ−１」ＩｇＧ（ＬＴＩ−１０１）、西洋ワサビペルオキシダーゼ共役ウサギポリクローナル「抗ＴＳＳＴ−１」ＩｇＧ（＃ＬＴＣ−１０１）、及び正常ウサギ血清（ＮＲＳ）認証「抗ＴＳＳＴ−１なし」（＃ＮＲＳ−１０）の４つの試薬が、トキシン・テクノロジー・インコーポレーテッド（米国フロリダ州サラソタ）から購入された。６２マイクロリットルの＃ＬＴＣ−１０１は、１：１００の希釈が２０５ｎｍで０．４の吸収度をもたらすように希釈され、続いて６．５ｍＬのＮａ2Ｏ3緩衝剤、ｐＨ７．２、０．５Ｍ炭酸塩緩衝剤、ｐＨ９．６に加えられ、１００μＬの溶液が、ポリスチレンマイクロプレート（ヌンク−デンマークから入手可能、カタログ番号＃４３９４５４）の内側ウェルの各々にピペットで取られた。プレートは、覆われて一夜３７℃で培養された。
【０１２７】
非結合抗毒素は、リン酸緩衝生理食塩水（米国ミズーリ州セントルイス所在のシグマ・ケミカル・カンパニーから入手可能な０．０１６ＭのＮａ2ＨＰＯ4）、ｐＨ７．２及び０．５％（ｖ／ｖ）「Ｔｗｅｅｎ  ２０」（米国ミズーリ州セントルイス所在のシグマ・ケミカル・カンパニー）を含有する０．９％（ｗ／ｖ）ＮａＣｌ（米国ニュージャージー州サウスプレーンフィールド所在のＶＷＲ・サイエンティフィック・プロダクツ）を用いて、自動プレート洗浄機内で４回洗浄により除去された。プレートは、上述のＮａ2ＣＯ3プラスＮａＨＣＯ3緩衝剤中でウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）分画Ｖ（米国ミズーリ州セントルイス所在のシグマ・ケミカル・カンパニー）の１％（ｗ／ｖ）溶液の１００μＬで処理された。プレートは、再度覆って１時間にわたって３７℃で培養された。非結合ＢＳＡは、２５０μＬの「ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ」の６回洗浄によって除去された。
【０１２８】
試験標本は、次に、室温で１５分間正常ウサギ血清（１０％（ｖ／ｖ）濃度）で処理された。ＴＳＳＴ−１規準標準液（連続的に「ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ」で２−２０ｎｇ／ｍＬに希釈された）及びＮＲＳ処理試験標本（得られるＴＳＳＴ−１濃度が２−２０ｎｇであるように、「ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ」で連続的に希釈された）が、これらのそれぞれのウェルに対して１００μＬ容積だけピペットで取られた。次に、標本は、３７℃で２時間培養され、次に、非結合毒素は、２５０ｍＬ「ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ」の４回洗浄で除去された。西洋ワサビペルオキシダーゼ共役ウサギポリクローナル「抗ＴＳＳＴ−１」ＩｇＧは、製造業者の使用説明書に従って希釈された。共役物の最終使用希釈液は、非希釈、１：２、及び１：４の希釈の共役物を有するＴＳＳＴ−１規準標準液の移動標準曲線によって判断された。従来のロットの共役物に最も匹敵する結果を示す希釈液が選択された。１００μＬ容積のこの希釈液は、各マイクロタイターウェルに加えられた。プレートは、覆われて１時間にわたって３７℃で培養された。
【０１２９】
培養に続いて、プレートは、２５０μＬの「ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ」で６回洗浄された。洗浄に続いて、ウェルは、０．０１５Ｍのクエン酸ナトリウム、ｐＨ４．０、０．６ｍＭの２、２’−アジノ−ビス−（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）ジアンモニウム塩、及び０．００９％（ｖ／ｖ）過酸化水素（全て米国ミズーリ州セントルイス所在のシグマ・ケミカル・カンパニーから入手可能）から成る１００μＬの西洋ワサビペルオキシダーゼ基質溶液で処理された。各ウェルの呈色反応の強度は、「ＶｅｒｓａＭａｘ分子素子マイクロプレート」読取器（外径４０５ｎｍ）及び「ＳｏｆｔＭａｘ  Ｐｒｏ」ソフトウエア（両方ともモレキュラー・デバイシズ・インコーポレーテッドから入手可能）を用いて経時的に値が求められた。試験標本中のＴＳＳＴ−１濃度は、各分析手順に対する規準毒素回帰方程式から導き出された。
【０１３０】
黄色ブドウ球菌によるＴＳＳＴ−１の生成を阻害するベンジルアルコールの有効性は、以下の表８に示されている。
【０１３１】
（表８）
2008514698.tif 000035
【０１３２】
本発明によれば、データは、「Ｃｅｔｉｏｌ  １４１４Ｅ」だけを含有する対照タンポンと比較すると、黄色ブドウ球菌ＭＮ８が、ベンジルアルコール及び「Ｃｅｔｉｏｌ  １４１４Ｅ」（ミレス−３−ミリスチン酸塩）の両方を含有するタンポンの存在化下で、より少ないＴＳＳＴ−１を生成したことを示している。試験した濃度で、ベンジルアルコールは、８％から５０％だけ毒素生成の量を低減した。
【実施例７】
【０１３３】
この実施例では、様々な試験化合物の一体性に対する黄色ブドウ球菌ＭＮ８の成長の効果が、黄色ブドウ球菌ＭＮ８によって生成された酵素によって引き起こされた試験化合物の分解の量を測定することによって判断された。試験化合物は、望ましい濃度で無菌の５００ｍＬの「Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｆｌｅａｋｅｒ」（米国ペンシルベニア州ピッツベリー所在のフィッシャー・サイエンティフィック）中の１００ｍＬの成長培地に入れられた。成長培地及び接種材料は、実施例１のように調製された。
【０１３４】
試験される化合物には、０．２％（ｖ／ｖ）ベンジルアルコール（「Ａｌｄｒｉｃｈ  ４０」、２８３−４）、０．５％（ｗｔ／ｖ）安息香酸ナトリウム、０．３％（ｖ／ｖ）ベンジル−（−）−乳酸塩（「Ａｌｄｒｉｃｈ  ４２」、４８４−６）、０．８％（ｖ／ｖ）マロン酸ベンジルエチル（「Ａｌｄｒｉｃｈ  ３０」、０６９−１）、及び０．３％（ｗｔ／ｖ）Ｎ−ベンジル−ＤＬ−ロイシン（Ｓｉｇｍａ  Ｂ−１５０４）を含めた。試験化合物は、望ましい最終濃度を得るために必要な量で成長培地に加えられた。
【０１３５】
各「ｆｌｅａｋｅｒ」は、上述のように求めた接種材料の量を植菌された。「ｆｌｅａｋｅｒ」は、無菌アルミニウム箔で蓋をし、１８０ｒｐｍで「Ｌａｂ−Ｌｉｎｅ」環状水槽（米国イリノイ州マクゴーパークの所在のＶＷＲ・サイエンティフィック・プロダクツから入手可能）において大気中の空気の３５℃で培養された。１５ミリリットル標本は、３、６、９、及び２４時間で除去された。培養液の最適密度（５９５ｎｍ）が判断され、２４時間で収集された培養液は、標準プレート計数手順を用いて黄色ブドウ球菌ＭＮ８のコロニー形成単位の数が分析された。試験化合物は、試験された濃度で黄色ブドウ球菌の成長を阻害しなかった。
【０１３６】
試験化合物の一体性の分析の準備において、培養液は、１５分間２−１０℃３０００ｒｐｍで遠心分離された。上澄みは、０．４５μＭ細孔径の「ＡＵＴＯＶＩＡＬ  ５」シリンジレスフィルタ（米国ニュージャージー州クリフトン所在のワットマン・インコーポレーテッドから入手可能）を通して濾過滅菌された。得られた流体は、化学分析を実施することができるまで「ＦＩＳＨＥＲＢＲＡＮＤ」（１２ｍｍ×７５ｍｍ）ポリスチレン培養チューブ（米国ペンシルベニア州ピッツバーグ所在のフィッシャー・サイエンティフィック）において−７０℃で冷凍された。
【０１３７】
「Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ５９７３Ｎ  ＧＣ／ＭＳ」を用いて、分析は、試験化合物を分解する黄色ブドウ球菌ＭＮ８の機能を評価するために３、６、９及び２４時間で非希釈溶液に関して実施された。分析に基づくと、試験化合物を加えていなかった対照標本は、全ての時間間隔で殆ど酢酸を含んでいた。安息香酸及びベンジルアルコールを含有する標本は、主な化合物としてそれぞれ安息香酸及びベンジルアルコールを有することが見られたが、安息香酸及びベンジルアルコール濃度は、時間と共に減少した。試験化合物としてＮ−ベンゾイル−ＤＬ−ロイシンを含む標本は、主な化合物として安息香酸を含有するのが見られ、濃度は、時間と共に低減した。
【０１３８】
試験化合物としてベンジル−（−）−乳酸塩を含む標本は、主な化合物としてベンジルアルコールを含有するのが見られた。更に、ベンジルアルコールの濃度は、時間と共に減少するのが見られた。最後に、試験化合物としてマロン酸ベンジルエチルを含む標本は、主な化合物としてベンジルアルコールを含有するのが見られた。更に、ベンジルアルコールの濃度は、時間と共に増加することが見られた。
【０１３９】
本発明によれば、上述のＧＣ／ＭＳ分析は、前駆体化合物が、黄色ブドウ球菌ＭＮ８によって生成される酵素によって分解されて活性種を生成することを示している。更に、前駆体化合物は、活性種による外来蛋白質生成の長時間持続する連続的な阻害を可能にするために時間と共に徐々に分解されることを見ることができる。
【０１４０】
６時間及び２４時間標本の追加分析が、液体クロマトグラフィーによって行われた。クロマトグラフィーの準備において、標本は、水で１０倍希釈された。次に、希釈液は、分離を達成するためにイオン排除コラムを用いて分析された。化合物の検出は、２３０ｎｍにおけるＵＶ吸収を通して達成された。
【０１４１】
本発明によれば、試験化合物の液体クロマトグラフィー分析は、化合物が、２４時間の期間にわたって分解されて活性種、安息香酸、及びベンジルアルコールになることを示している。より詳細には、０．３％Ｎ−ベンゾイル−ＤＬ−ロイシンを含有する６時間及び２４時間標本は、化合物が安息香酸に分解する証拠を示している。更に、ベンジル−（−）−乳酸塩及びマロン酸ベンジルエチルを含有する６時間及び２４時間標本は、化合物がベンジルアルコールに分解する証拠を示している。更に見ることができるように、ベンジル−（−）−乳酸塩及びマロン酸ベンジルエチルを含有する２４時間標本は、６時間標本に比較してベンジルアルコールのレベルの上昇の証拠を示している。
【０１４２】
以上に鑑みて、本発明のいくつかの目的が達成され、他の有利な結果が得られたことが分るであろう。
【０１４３】
本発明又はその好ましい実施形態の要素を導入する場合、冠詞「ａ」、［ａｎ」、「ｔｈｅ」、及び「ｓａｉｄ」は、１つ又はそれよりも多くの要素があることを意味するものとする。用語「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」、「ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ」、及び「ｈａｖｉｎｇ」は、包含的であり、列挙する要素以外の付加的な要素があり得ることを意味するものとする。
【０１４４】
本発明の範囲を逸脱することなく上記において様々な変更を行うことができると考えられるので、上述の説明に含み添付図面に示した全ての内容は、制限的な意味はなく例示的に解釈されるべきであることを意図している。
【国際調査報告】
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