(57)【要約】  Ｒ1a〜Ｒ1e、Ｒ2a、Ｒ2b、Ｒ3およびＸが請求項１に記載の意味を有する式（Ｉ）の化合物は、チロシンキナーゼ、特にＴＩＥ−２およびＲａｆキナーゼの阻害剤であり、特に腫瘍を治療するために使用することができる。
2008515935.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物ならびにあらゆる比率でのそれらの混合物を含む、それらの薬学的に利用可能な誘導体、溶媒和物、塩、互変異性体および立体異性体：
【化１】
2008515935.tif 000008
［式中、
Ｒ1a、Ｒ1b、Ｒ1c、Ｒ1d、Ｒ1e、Ｒ2a、Ｒ2bは、それぞれ相互に独立に、Ｒ、Ｈａｌ、ＣＮ、ＮＯ2、ＮＲＲ’、ＮＨＣＯＲ、ＮＨＳＯ2Ｒ、ＯＲ、ＣＯ−Ｒ、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＨＲ、ＯＡ、ＳＡ、ＳＯ3Ｒ、ＳＯ2Ｒおよび／またはＳＯ2ＮＨＲを示し、
Ｒ1a、Ｒ1b、Ｒ1c、Ｒ1d、Ｒ1eから選択される２個の隣接する基は一緒になって、−Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−、−Ｏ−ＣＨ2−Ｏ−または−Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｏ−を示し、
Ｒ3は、ＨａｌまたはＯＲを示し、
Ｘは、Ｏ、ＮＨまたはＣＨ2を示し、
Ｒ、Ｒ’はそれぞれ相互に独立に、Ｈ、Ａ、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−Ａｒ、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−Ｈｅｔ、−［Ｃ（Ｒ4）2］p−Ｏ−Ｃ（Ｒ4）2］q−Ａｒ、−［Ｃ（Ｒ4）2］p−Ｏ−Ｃ（Ｒ4）2］q−Ｈｅｔを示し、
Ｒ4は、ＨまたはＡを示し、
Ａｒは、フェニル、ナフチルまたはビフェニルを示し、これらはそれぞれ、非置換であるか、Ｈａｌ、Ａ、ＯＲ4、Ｎ（Ｒ4）2、ＮＯ2、ＣＮ、ＣＯＯＲ4、ＣＯＮ（Ｒ4）2、ＮＲ4ＣＯＡ、ＮＲ4ＳＯ2Ａ、ＣＯＲ4、ＳＯ2Ｎ（Ｒ4）2、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−ＣＯＯＲ4、−Ｏ−［Ｃ（Ｒ4）2］o−ＣＯＯＲ4、ＳＯ3Ｈおよび／またはＳ（Ｏ）nＡでモノ、ジまたはトリ置換されており、
Ｈｅｔは、１から４個のＮ、Ｏおよび／またはＳ原子を有する単環式または二環式の飽和、不飽和または芳香族複素環を示し、これは非置換であるか、カルボニル酸素、（＝Ｏ）、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ4）2、Ｈａｌ、Ａ、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−Ａｒ、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−シクロアルキル、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−ＯＲ4、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−Ｎ（Ｒ4）2、ＮＯ2、ＣＮ、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−ＣＯＯＲ4、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−ＣＯＮ（Ｒ4）2、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−ＮＲ4ＣＯＡ、ＮＲ4ＣＯＮ（Ｒ4）2、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−ＮＲ4ＳＯ2Ａ、ＣＯＲ4、ＳＯ2Ｎ（Ｒ4）2および／またはＳ（Ｏ）nＡでモノ、ジまたはトリ置換されていてもよく、
Ａは、１個または２個のＣＨ2基が、ＯまたはＳ原子により、および／または−ＣＨ＝ＣＨ−基により置換されていてもよく、および／または、加えて、１〜７個のＨ原子が、Ｆに置換されていてもよい１〜１０個のＣ原子を有する非分枝鎖もしくは分枝鎖アルキルまたは３〜７個のＣ原子を有する環式アルキルを示し、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを示し、
ｎは、０、１、２、３または４を示し、
ｐは、１、２、３または４を示し、
ｑは、０、１、２、３または４を示す］。
【請求項２】
Ｒ1a、Ｒ1b、Ｒ1c、Ｒ1dおよびＲ1eが、それぞれ相互に独立に、Ｈ、Ａ、ＯＡおよび／またはＨａｌを示す、請求項１に記載の化合物ならびにあらゆる比率でのそれらの混合物を含む、それらの薬学的に利用可能な誘導体、溶媒和物、塩、互変異性体および立体異性体。
【請求項３】
Ｒ2aおよびＲ2bがＨを示す、請求項１または２に記載の化合物ならびにあらゆる比率でのそれらの混合物を含む、それらの薬学的に利用可能な誘導体、溶媒和物、塩、互変異性体および立体異性体。
【請求項４】
Ｒ3が、ＨａｌまたはＯＨを示す、請求項１から３の一項または複数項に記載の化合物ならびにあらゆる比率でのそれらの混合物を含む、それらの薬学的に利用可能な誘導体、溶媒和物、塩、互変異性体および立体異性体。
【請求項５】
Ａが、１〜７個のＨ原子がＦにより置換されていてもよい１〜１０個のＣ原子を有する非分枝鎖または分枝鎖アルキルを表す、請求項１から４の一項または複数項に記載の化合物ならびにあらゆる比率でのそれらの混合物を含む、それらの薬学的に利用可能な誘導体、溶媒和物、塩、互変異性体および立体異性体。
【請求項６】
Ｒ1a、Ｒ1b、Ｒ1c、Ｒ1dおよびＲ1eが、それぞれ相互に独立に、Ｈ、Ａ、ＯＡおよび／またはＨａｌを示し、
Ｒ2aおよびＲ2bが、Ｈを示し、
Ｒ3が、ＨａｌまたはＯＨを示し、
Ｘが、Ｏ、ＮＨまたはＣＨ2を示し、
Ａが、１〜７個のＨ原子がＦにより置換されていてもよい１〜１０個のＣ原子を有する非分枝鎖または分枝鎖アルキルを示し、
Ｈａｌが、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを示す、請求項１から５の一項または複数項に記載の化合物ならびにあらゆる比率でのそれらの混合物を含む、それらの薬学的に利用可能な誘導体、溶媒和物、塩、互変異性体および立体異性体。
【請求項７】
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルオキシ）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチルフェニル）尿素、
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルオキシ）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−６−メトキシフェニル）尿素、
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルオキシ）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−６−フルオロフェニル）尿素、
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルオキシ）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−４−クロロフェニル）尿素、
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルメチル）フェニル］−３−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチルフェニル）尿素，
１−［４−（４−ヒドロキシ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルメチル）フェニル］−３−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチルフェニル）尿素、
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルメチル）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチルフェニル）尿素、
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルメチル）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−４−クロロフェニル）尿素
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルメチル）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−６−メトキシフェニル）尿素、
１−［４−（４−ヒドロキシ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルメチル）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチルフェニル）尿素、
１−［４−（４−ヒドロキシ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルメチル）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−４−クロロフェニル）尿素、
１−［４−（４−ヒドロキシ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルメチル）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−６−メトキシフェニル）尿素、
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルアミノ）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−６−フルオロフェニル）尿素、
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルアミノ）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチルフェニル）尿素、
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルアミノ）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−４−クロロフェニル）尿素、
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルアミノ）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−６−メトキシフェニル）尿素、
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物ならびにあらゆる比率でのそれらの混合物を含む、それらの薬学的に利用可能な誘導体、溶媒和物、塩、互変異性体および立体異性体。
【請求項８】
請求項１から７に記載の式Ｉの化合物ならびにその薬学的に利用可能な誘導体、塩、溶媒和物、互変異性体および立体異性体を調製する方法であって、
ａ）式ＩＩの化合物：
【化２】
2008515935.tif 000009
［式中、
Ｒ2a、Ｒ2b、Ｒ3およびＸは、請求項１に記載の意味を有する］
を、式ＩＩＩの化合物：
【化３】
2008515935.tif 000010
［式中、
Ｒ1a〜Ｒ1eは、請求項１に記載の意味を有する］
と反応させるか、
ｂ）ハロゲン原子を置換することにより、基Ｒ3を別の基Ｒ3に変え、および／または
式Ｉの塩基または酸をその塩の１種に変えることを特徴とする、方法。
【請求項９】
請求項１に記載の少なくとも１種の式Ｉの化合物および／またはあらゆる比率でのそれらの混合物を含むその薬学的に利用可能な誘導体、塩、溶媒和物、互変異性体および立体異性体ならびに場合によって賦形剤および／または補助剤を含む医薬品。
【請求項１０】
キナーゼシグナル伝達の阻害、調節および／または調整が役割を果たす疾患を治療するための医薬品を調製するための、請求項１に記載の化合物ならびにあらゆる比率でのその混合物を含む、その薬学的に利用可能な誘導体、塩、溶媒和物、互変異性体および立体異性体の使用。
【請求項１１】
前記キナーゼが、チロシンキナーゼおよびＲａｆキナーゼの群から選択される、請求項１０に記載の使用。
【請求項１２】
前記チロシンキナーゼが、ＴＩＥ−２、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＦＧＦＲおよび／またはＦＬＴ／ＫＤＲである、請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
請求項１に記載の化合物によるチロシンキナーゼの阻害により影響を受ける疾患を治療するための医薬品を調製するための、請求項１に記載の化合物ならびにあらゆる比率でのその混合物を含む、その薬学的に利用可能な誘導体、溶媒和物および立体異性体の請求項１１に記載の使用。
【請求項１４】
請求項１に記載の化合物よるＴＩＥ−２、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＦＧＦＲおよび／またはＦＬＴ／ＫＤＲの阻害により影響を受ける疾患を治療するための医薬品を調製するための、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
治療される疾患が固形腫瘍である、請求項１３または１４に記載の使用。
【請求項１６】
前記固形腫瘍が、扁平上皮、膀胱、胃、腎臓、頭部および頚部、食道、子宮頚部、甲状腺、小腸、肝臓、脳、前立腺、尿生殖路、リンパ系、胃、咽頭および／または肺の腫瘍の群に由来する、請求項１５に記載の使用。
【請求項１７】
前記固形腫瘍が、単球性白血病、肺腺癌、小細胞肺癌腫、膵臓癌、膠芽細胞腫および乳癌腫の群に由来する、請求項１５に記載の使用。
【請求項１８】
前記固形腫瘍が、肺腺癌、小細胞肺癌腫、膵臓癌、膠芽細胞腫、大腸癌腫および乳癌腫の群に由来する、請求項１５に記載の使用。
【請求項１９】
治療される疾患が、血液および免疫系の腫瘍である、請求項１３または１４に記載の使用。
【請求項２０】
前記腫瘍が、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病および／または慢性リンパ性白血病の群に由来する、請求項１９に記載の使用。
【請求項２１】
血管形成が関与している疾患を治療するための、請求項１３または１４に記載の使用。
【請求項２２】
前記疾患が眼疾患である、請求項２１に記載の使用。
【請求項２３】
網膜血管新生、糖尿病性網膜症、加齢性黄斑変性および／または炎症性疾患を治療するための、請求項１３または１４に記載の使用。
【請求項２４】
前記炎症性疾患が、関節リウマチ、乾癬、接触皮膚炎および遅延型過敏反応の群に由来する、請求項２３に記載の使用。
【請求項２５】
骨肉腫、変形性関節症およびくる病の群に由来する骨異常を治療するための、請求項１３または１４に記載の使用。
【請求項２６】
治療的有効量の式Ｉの化合物を、１）エストロゲン受容体調整剤、２）アンドロゲン受容体調整剤、３）レチノイド受容体調整剤、４）細胞毒性剤、５）抗増殖剤、６）プレニルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤、７）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、８）ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、９）逆転写酵素阻害剤および１０）他の血管新生阻害剤の群からの化合物と組み合わせて投与する、固形腫瘍を治療するための医薬品を調製するための請求項１に記載の式Ｉの化合物および／またはその生理学的に許容できる塩および溶媒和物の使用。
【請求項２７】
治療的有効量の式Ｉの化合物を、放射線療法ならびに１）エストロゲン受容体調整剤、２）アンドロゲン受容体調整剤、３）レチノイド受容体調整剤、４）細胞毒性剤、５）抗増殖剤、６）プレニルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤、７）ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、８）ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、９）逆転写酵素阻害剤および１０）他の血管新生阻害剤の群からの化合物と組み合わせて投与する、固形腫瘍を治療するための医薬品を調製するための請求項１に記載の式Ｉの化合物および／またはその生理学的に許容できる塩および溶媒和物の使用。
【請求項２８】
治療的有効量の請求項１に記載の化合物を成長因子受容体阻害剤と組み合わせて投与する、ＴＩＥ−２活性の障害に基づく疾患を治療するための医薬品を調製するための請求項１３または１４に記載の使用。
【請求項２９】
Ｒａｆキナーゼにより誘発、仲介および／または伝播される疾患を治療するための医薬品を調製するための、式Ｉの化合物の請求項１０または１１に記載の使用。
【請求項３０】
前記Ｒａｆキナーゼが、Ａ−Ｒａｆ、Ｂ−ＲａｆおよびＲａｆ−１からなる群から選択される、請求項２９に記載の使用。
【請求項３１】
前記疾患が、高増殖性および非増殖性疾患の群から選択される、請求項２９に記載の使用。
【請求項３２】
前記疾患が癌である、請求項２９または３１に記載の使用。
【請求項３３】
前記疾患が、非癌性疾患である、請求項２９または３１に記載の使用。
【請求項３４】
前記非癌性疾患が、乾癬、関節炎、炎症、子宮内膜症、瘢痕、良性前立腺肥大、免疫疾患、自己免疫疾患および免疫不全疾患からなる群から選択される、請求項２９、３１または３３に記載の使用。
【請求項３５】
前記疾患が、脳癌、肺癌、扁平上皮癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、肝臓癌、腎臓癌、結腸直腸癌、乳癌、頭部癌、頚部癌、食道癌、婦人科癌、甲状腺癌、リンパ腫、慢性白血病および急性白血病からなる群から選択される、請求項２９、３１または３２のいずれか一項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の背景
本発明の目的は、価値のある特性を有する新規化合物、特に、医薬品を調製するために使用することができる新規化合物を発見することである。
【０００２】
本発明は、化合物に、キナーゼシグナル伝達、特にチロシンキナーゼおよび／またはセリン／トレオニンキナーゼシグナル伝達の阻害、調節および／または調整が役割を果たす化合物の使用に、さらに、これらの化合物を含む医薬組成物に、およびキナーゼ誘発性疾患を治療するための化合物の使用に関する。
【０００３】
詳細には、本発明は、チロシンキナーゼシグナル伝達を阻害、調節および／または調整する式Ｉの化合物に、これらの化合物を含む組成物に、哺乳動物における血管形成、癌、腫瘍の形成、増殖および伝播、動脈硬化、加齢性黄斑変性、脈絡膜血管新生および糖尿病性網膜症などの眼疾患、炎症性疾患、関節炎、血栓症、線維症、糸球体腎炎、神経変性、乾癬、再狭窄、創傷治癒、移植拒絶、代謝、免疫系の疾患、さらに自己免疫疾患、硬変、糖尿病ならびに不安定性および透過性を含む血管の疾患などのチロシンキナーゼ誘発性疾患および状態を治療するためのその使用法に関する。
【０００４】
チロシンキナーゼは、少なくとも４００種のメンバーを伴う酵素の一群であり、これらは、アデノシン三リン酸（γ−リン酸）の末端リン酸基の、タンパク質中のチロシン残基への移動を触媒する。チロシンキナーゼは、基質リン酸化を介して、様々な細胞機能におけるシグナル伝達において決定的な役割を果たしていると考えられている。シグナル伝達の正確なメカニズムは、未だ不明であるが、チロシンキナーゼが、細胞増殖、発癌現象および細胞分化において重要な因子であることは判明している。
【背景技術】
【０００５】
チロシンキナーゼは、受容体型チロシンキナーゼと非受容体型チロシンキナーゼに分類することができる。受容体型チロシンキナーゼが、細胞外部分、膜内外部分および細胞内部分を有する一方で、非受容体型チロシンキナーゼは、もっぱら細胞内である（ＳｃｈｌｅｓｓｉｎｇｅｒおよびＵｌｌｒｉｃｈによる総説、Ｎｅｕｒｏｎ  ９、３８３−３９１（１９９２）および１および２０（１９９２）参照）。
【０００６】
受容体型チロシンキナーゼは、様々な生物学的活性を有する多数の膜内外受容体からなる。例えば、受容体型チロシンキナーゼの約２０種の異なるサブファミリーが同定されている。ＨＥＲサブファミリーとして知られている１つのチロシンキナーゼサブファミリーは、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３およびＨＥＲ４からなる。この受容体サブファミリーのリガンドには、上皮増殖因子、ＴＧＦ−α、アンフィレグリン、ＨＢ−ＥＧＦ、ベータセルリンおよびヘレグリンが含まれる。これらの受容体型チロシンキナーゼの別のサブファミリーは、インスリンサブファミリーであり、これには、ＩＮＳ−Ｒ、ＩＧＦ−ＩＲおよびＩＲ−Ｒが含まれる。ＰＤＧＦサブファミリーには、ＰＤＧＦ−αおよび−β受容体、ＣＳＦＩＲ、ｃ−ｋｉｔならびにＦＬＫ−ＩＩが含まれる。加えて、キナーゼ挿入ドメイン受容体（ＫＤＲ）、胎児肝臓キナーゼ−１（ＦＬＫ−１）、胎児肝臓キナーゼ−４（ＦＬＫ−４）およびｆｍｓチロシンキナーゼ−１（ｆｌｔ−１）からなるＦＬＫファミリーがある。ＰＤＧＦおよびＦＬＫファミリーは、これら２つの群の類似性により通常は、一緒に論じられる。受容体型チロシンキナーゼに関する詳細な検討に関しては、参照により本明細書に援用されるＰｌｏｗｍａｎらによる論文、ＤＮ＆Ｐ７（６）：３３４〜３３９、１９９４を参照されたい。
【０００７】
さらにＲＴＫ（受容体型チロシンキナーゼ）は、ＴＩＥ２およびそのリガンドアンギオポイエチン１および２も含む。現在では、これらのリガンドのますます多くの同族体が発見されているが、これらの作用は未だ、詳細明確には証明されていない。ＴＩＥ１は、ＴＩＥ２の同族体として知られている。ＴＩＥ  ＲＴＫは、内皮細胞で選択的に発現され、血管新生および血管熟成のプロセスに関与している。したがってこれらは、特に血管系の疾患および血管が利用されるか、改質される病理において価値ある目的となり得る。血管形成および熟成の予防に加えて、血管形成の刺激も、活性成分のための価値のある目的になり得る。Ｇ．Ｂｒｅｉｅｒ  Ｐｌａｃｅｎｔａ（２０００）２１、Ｓｕｐｐｌ  Ａ、Ｔｒｏｐｈｏｂｌａｓｒ  Ｒｅｓ  １４、Ｓ１１〜Ｓ１５、Ｆ．Ｂｕｓｓｏｌｉｎｏら、ＴＩＢＳ  ２２、２５１〜２５６（１９９７）、Ｇ．Ｂｅｒｇｅｒｓ  ＆  Ｌ．Ｅ．Ｂｅｎｊａｍｉｎ  Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ  ３、４０１〜４１０（２００３）、Ｐ．Ｂｌｕｍｅ−Ｊｅｎｓｅｎ  ＆  Ｈｕｎｔｅｒ  Ｎａｔｕｒｅ  ４１１、３５５〜３６５（２００１）、Ｍ．Ｒａｍｓａｕｅｒ  ＆  Ｐ．Ｄ’Ａｍｏｒｅ  Ｊ．Ｃｌｉｎ．ＩＮｖｅｓｔ．１１０、１６１５〜１６１７（２００２）、Ｓ．Ｔｓｉｇｋｏｓら、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ  １２、９３３〜９４１（２００３）による血管新生、腫瘍発生およびキナーゼシグナル伝達に関する総説論文を参照することができる。
【０００８】
癌治療において既に試験されているキナーゼ阻害剤の例が、Ｌ．Ｋ．Ｓｈａｗｙｅｒら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  １、１１７〜１２３（２００２）およびＤ．Ｆａｂｂｒｏ  ＆  Ｃ．Ｇａｒｃｉａ−Ｅｃｈｅｖｅｒｒｉａ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ＆  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ５、７０１〜７１２（２００２）に示されている。
【０００９】
非受容体型チロシンキナーゼも同様に、多数のサブファミリーからなり、Ｓｒｃ、Ｆｒｋ、Ｂｔｋ、Ｃｓｋ、Ａｂｌ、Ｚａｐ７０、Ｆｅｓ／Ｆｐｓ、Ｆａｋ、Ｊａｋ、ＡｃｋおよびＬＩＭＫが含まれる。これらのサブファミリーはそれぞれ、種々の受容体にさらに再分類される。例えば、Ｓｒｃサブファミリーは、最も大きなサブファミリーの１つである。これには、Ｓｒｃ、Ｙｅｓ、Ｆｙｎ、Ｌｙｎ、Ｌｃｋ、Ｂｌｋ、Ｈｃｋ、ＦｇｒおよびＹｒｋが含まれる。酵素のＳｒｃサブファミリーは、腫瘍形成と関連づけられている。非受容体型チロシンキナーゼのより詳細な議論に関しては、参照により本明細書に援用されるＢｏｌｅｎによる論文、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、８：２０２５〜２０３１（１９９３）を参照。
【００１０】
受容体型チロシンキナーゼおよび非受容体型チロシンキナーゼは共に、癌、乾癬および過剰免疫応答が含まれる様々な病原的状態をもたらす細胞シグナル伝達経路に関与している。
【００１１】
様々な受容体型チロシンキナーゼおよびそれに関連している増殖因子は、血管新生において役割を果たすが、いくつかは、血管新生を間接的に促進すると、提唱されている（ＭｕｓｔｏｎｅｎおよびＡｌｉｔａｌｏ、Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１２９：８９５〜８９８、１９９５）。これらの受容体型チロシンキナーゼのうちの１種は、ＦＬＫ−１とも称される、胎児肝臓キナーゼ１である。ＦＬＫ−１のヒト類似体は、キナーゼ挿入ドメイン含有受容体ＫＤＲであり、これは高い親和性でＶＥＧＦに結合することから、血管内皮細胞増殖因子受容体２またはＶＥＧＦＲ−２としても知られている。最後に、マウス型のこの受容体もＮＹＫと称されている（Ｏｅｌｒｉｃｈｓら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ８（１）：１１〜１５、１９９３）。ＶＥＧＦおよびＫＤＲは、血管内皮細胞の増殖ならびにそれぞれ血管形成および血管新生と称される血管の形成および発芽において重要な役割を果たすリガンド−受容体対である。
【００１２】
血管新生は、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）の過剰な活性を特徴とする。ＶＥＧＦは、実際に、リガンドのファミリーからなる（Ｋｌａｇｓｂｕｒｎ  ａｎｄ  Ｄ’Ａｍｏｒｅ、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ＆  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ７：２５９〜２７０、１９９６）。ＶＥＧＦは、高親和性膜貫通チロシンキナーゼ受容体ＫＤＲ、およびＦｌｔ−１または血管内皮細胞増殖因子受容体１（ＶＥＧＦＲ−１）としても知られている関連ｆｍｓチロシンキナーゼ−１に結合する。細胞培養および遺伝子ノックアウト実験により、それぞれの受容体が血管新生の種々の局面に寄与することが示されている。ＫＤＲは、ＶＥＧＦのマイトジェン機能を媒介し、Ｆｌｔ−１は、細胞接着に関連する機能などの非マイトジェン機能を調整すると考えられる。したがって、ＫＤＲを阻害することによって、マイトジェンＶＥＧＦ活性レベルが調整される。実際、腫瘍増殖は、ＶＥＧＦ受容体アンタゴニストの抗血管新生作用に影響を受けることが判明している（Ｋｉｍら、Ｎａｔｕｒｅ  ３６２、ｐｐ．８４１〜８４４、１９９３）。
【００１３】
ＶＥＧＦＲに関して３種のＰＴＫ（タンパク質チロシンキナーゼ）受容体が同定されている：ＶＥＧＦＲ−１（Ｆｌｔ−１）；ＶＥＧＲＦ−２（Ｆｌｋ−１またはＫＤＲ）およびＶＥＧＦＲ−３（Ｆｌｔ−４）。ＶＥＧＦＲ−２が特に重要である。
【００１４】
固形腫瘍は、増殖の支持に必要な血管の形成に関して血管新生に依存しているため、これらの腫瘍は、チロシンキナーゼ阻害剤で治療することができる。これらの固形腫瘍には、単球性白血病、脳、尿生殖路、リンパ系、胃、咽頭の癌ならびに肺腺癌および小細胞肺癌を含む肺の癌が含まれる。さらなる例には、Ｒａｆ活性化癌遺伝子（例えば、Ｋ−ｒａｓ、ｅｒｂ−Ｂ）の過剰発現または活性化が観察される癌腫が含まれる。これらの癌腫には、膵臓癌および乳癌が含まれる。したがって、これらのチロシンキナーゼの阻害剤は、これらの酵素に起因する増殖性疾患の予防および治療に適している。
【００１５】
ＶＥＧＦの血管新生活性は、腫瘍に限定されない。ＶＥＧＦは、糖尿病性網膜症において網膜または網膜近傍に生じる血管新生活性の原因となる。この網膜での血管増殖は、視力低下をもたらし、最後には失明に至る。眼ＶＥＧＦｍＲＮＡおよびタンパク質レベルは、霊長類での網膜静脈閉塞およびマウスでのｐＯ2レベルの低下などの状態によってさらに上昇し、このことが、新生血管形成をもたらす。抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体またはＶＥＧＦ受容体免疫融合体（ＶＥＧＦreceptor immunofusions)の眼内注射は、霊長類モデルおよび齧歯類モデルの両方で、眼の新生血管形成を阻害する。ヒト糖尿病性網膜症におけるＶＥＧＦの誘発の原因にかかわらず、眼ＶＥＧＦの阻害はこの疾患の治療に適している。
【００１６】
さらにＶＥＧＦの発現は、壊死部に隣接する動物およびヒト腫瘍の低酸素領域で著しく増加する。加えて、ＶＥＧＦは、癌遺伝子ｒａｓ、ｒａｆ、ｓｒｃおよびｐ５３変異型（いずれも癌の撲滅に重要である）の発現によってアップレギュレーションされる。抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体は、ヌードマウスにおいて、ヒト腫瘍の増殖を阻害する。同じ腫瘍細胞は培養においてＶＥＧＦを発現し続けるが、この抗体はその分裂速度を低減しない。そのため、腫瘍由来のＶＥＧＦは、自己分泌マイトジェン因子として機能しない。したがって、ＶＥＧＦは、そのパラクリン血管内皮細胞走化性およびマイトジェン活性を介して血管新生を促進することによって、ｉｎ  ｖｉｖｏで腫瘍増殖に寄与する。さらに、これらのモノクローナル抗体は、無胸腺マウスで典型的に血管化が十分でないヒト結腸癌の増殖を阻害し、接種細胞から生じる腫瘍数を低減する。
【００１７】
細胞質チロシンキナーゼドメインを除去するが、膜アンカーを保持するように切断されたマウスＫＤＲ受容体相同体、Ｆｌｔ−１、Ｆｌｋ−１のＶＥＧＦ結合構築体のウイルスでの発現は、おそらくは膜貫通内皮細胞ＶＥＧＦ受容体とのヘテロダイマー形成の優性阻害機序によって、マウスにおいて移植性膠芽細胞腫の増殖を実質的に停止する。ヌードマウスにおいて通常は固形腫瘍として増殖する胚幹細胞は、両方のＶＥＧＦ対立遺伝子がノックアウトされている場合、検出可能な腫瘍を形成しない。総合すると、これらのデータは、固形腫瘍の増殖におけるＶＥＧＦの役割を示している。ＫＤＲまたはＦｌｔ−１の阻害は、病的血管新生に関与し、腫瘍増殖は血管新生に依存することが知られているため、これらの受容体は、血管新生が病理全体の一部である疾患、例えば炎症、糖尿病性網膜血管形成、ならびに種々の形態の癌の治療に適している（Ｗｅｉｄｎｅｒら、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．、３２４、ｐｐ．１〜８、１９９１）。
【００１８】
内皮特異的受容体型チロシンキナーゼＴＩＥ−２のリガンドであるアンギオポイエチン１（Ａｎｇ−１）は、新規の血管新生因子である（Ｄａｖｉｓら、Ｃｅｌｌ、１９９６、８７：１１６１〜１１６９；Ｐａｒｔａｎｅｎら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．、１２：１６９８〜１７０７（１９９２）；米国特許第５５２１０７３号；第５８７９６７２号；第５８７７０２０号；および第６０３０８３１号）。頭字語ＴＩＥは、「ＩｇおよびＥＧＦ相同ドメインを有するチロシンキナーゼ」の略語である。ＴＩＥは、血管内皮細胞および初期造血細胞においてのみ発現する受容体型チロシンキナーゼの一群を識別するために用いられる。ＴＩＥ受容体キナーゼは典型的に、ＥＧＦ様ドメインおよび鎖間のジスルフィド橋結合によって安定化した細胞外フォールドユニットからなる免疫グロブリン（ＩＧ）様ドメインの存在を特徴とする（Ｐａｒｔａｎｅｎら、Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐｉｃｓ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１９９９、２３７：１５９〜１７２）。血管発生の初期段階にその機能を発揮するＶＥＧＦとは対照的に、Ａｎｇ１およびその受容体ＴＩＥ−２は、血管発生の後期段階、すなわち血管転換（血管内腔の形成に関連する転換）および成熟中に作用する（Ｙａｎｃｏｐｏｕｌｏｓら、Ｃｅｌｌ、１９９８、９３：６６１〜６６４；Ｐｅｔｅｒｓ，Ｋ．Ｇ．、Ｃｉｒｃ．Ｒｅｓ．、１９９８、８３（３）：３４２〜３；Ｓｕｒｉら、Ｃｅｌｌ  ８７、１１７１〜１１８０（１９９６））。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１９】
したがって、ＴＩＥ−２の阻害は、血管新生によって開始される新しい血管系の転換および成熟を中断するはずであり、それにより血管新生のプロセスを中断するはずであることが予期される。さらに、ＶＥＧＦＲ−２のキナーゼドメイン結合部位における阻害は、チロシン残基のリン酸化を遮断し、血管新生の開始を阻止するために役立つであろう。したがって、ＴＩＥ−２および／またはＶＥＧＦＲ−２の阻害は腫瘍血管新生を妨げ、腫瘍増殖を遅延する、または完全に排除するために役立つはずであると仮定されなければならない。したがって、不適切な血管新生に関連する癌および他の疾患の治療を提供することができるであろう。
【課題を解決するための手段】
【００２０】
本発明は、ＴＩＥ−２活性の乱れまたは障害に関連する疾患を予防および／または治療するためにＴＩＥ−２を調節、調整または阻害する方法を対象とする。特に式Ｉの化合物は、一定の形態の癌の治療で用いることもできる。さらに、式Ｉの化合物は、一定の既存の癌化学療法において相加的または相乗的作用をもたらすために使用することもでき、かつ／または一定の既存の癌化学療法および放射線療法の効力を回復させるために用いることもできる。
【００２１】
さらに、式Ｉの化合物は、ＴＩＥ−２の活性または発現の単離および研究のために用いることができる。加えて、これらは特に、ＴＩＥ−２活性の乱れまたは障害に関連する疾患の診断方法で用いるのに適している。
【００２２】
さらに本発明は、ＶＥＧＦＲ−２活性の乱れまたは障害に関連する疾患を予防および／または治療するためにＶＥＧＦＲ−２を調節、調整または阻害する方法を対象とする。
【００２３】
さらに本発明は、Ｒａｆキナーゼの阻害剤としての式Ｉの化合物に関する。
【００２４】
タンパク質リン酸化は、細胞機能を調節するための基礎的なプロセスである。タンパク質キナーゼおよびホスファターゼの協調作用は、リン酸化の程度を制御し、したがって、特定の標的タンパク質の活性を制御する。タンパク質リン酸化の主たる役割の１つはシグナル伝達にあり、ここで細胞外シグナルは、例えばｐ２１ras／ｒａｆ経路において、タンパク質リン酸化および脱リン酸化事象のカスケードによって増幅および伝播される。
【００２５】
ｐ２１ras遺伝子は、ハーベイ（Ｈａｒｖｅｙ）（Ｈ−Ｒａｓ）およびカーステン（Ｋｉｒｓｔｅｎ）（Ｋ−Ｒａｓ）ラット肉腫ウイルスの癌遺伝子として発見された。ヒトでは、細胞Ｒａｓ遺伝子（ｃ−Ｒａｓ）の特徴的な突然変異は、多くの様々な型の癌と関連づけられている。Ｒａｓを構成的に活性化するこれらの突然変異対立遺伝子は、培養において、例えばマウス細胞系ＮＩＨ３Ｔ３などの細胞を形質転換することが示されている。
【００２６】
ｐ２１ras癌遺伝子は、ヒト固形癌腫の発生および進行の重要な要因であり、すべてのヒト癌腫の３０％で突然変異している（Ｂｏｌｔｏｎら、（１９９４）Ａｎｎ．Ｒｅｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２９、１６５〜７４；Ｂｏｓ．（１９８９）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、４９、４６８２〜９）。その正常な非変異型では、Ｒａｓタンパク質は、ほぼすべての組織において、増殖因子受容体が対象とするシグナル伝達カスケードの主要な要素である（Ａｖｒｕｃｈら、（１９９４）Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｃｉ．、１９、２７９〜８３）。
【００２７】
生化学的には、Ｒａｓは、グアニンヌクレオチド結合タンパク質であり、ＧＴＰ結合活性化型とＧＤＰ結合静止型とのサイクリングは、Ｒａｓ内因性ＧＴＰアーゼ活性および他の調節タンパク質によって厳密に制御される。Ｒａｓ遺伝子産物は、グアニン三リン酸（ＧＴＰ）およびグアニン二リン酸（ＧＤＰ）に結合し、ＧＴＰをＧＤＰに加水分解する。Ｒａｓは、ＧＴＰ結合状態で活性である。癌細胞のＲａｓ突然変異体において、内因性ＧＴＰアーゼ活性は低下し、その結果として、タンパク質は、例えば酵素Ｒａｆキナーゼなどの下流エフェクターに構成的増殖シグナルを伝達する。このことが、これらの突然変異体を有する細胞の癌増殖をもたらす（Ｍａｇｎｕｓｏｎら、（１９９４）Ｓｅｍｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ．、５、２４７〜５３）。Ｒａｓ癌原遺伝子は、高等真核生物において受容体型および非受容体型チロシンキナーゼによって開始される増殖および分化シグナルを伝達するために、機能的に無傷のＣ−Ｒａｆ−１癌原遺伝子を必要とする。
【００２８】
活性化Ｒａｓは、Ｃ−Ｒａｆ−１癌原遺伝子の活性化に必要であるが、それによりＲａｓがＲａｆ−１タンパク質（Ｓｅｒ／Ｔｈｒ）キナーゼを活性化する生化学的段階は、今では十分に特徴が明らかにされている。Ｒａｆキナーゼに対する非活性化抗体を投与してＲａｆキナーゼシグナル経路を阻害することによって、あるいは優性阻害ＲａｆキナーゼまたはＲａｆキナーゼの基質である優性阻害ＭＥＫ（ＭＡＰＫＫ）の共発現によって活性Ｒａｓの作用を阻害することにより、形質転換細胞の正常な増殖表現型への返転がもたらされることが示されている（Ｄａｕｍら、（１９９４）Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｃｉ．１９、４７４〜８０；Ｆｒｉｄｍａｎら．（１９９４）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９、３０１０５〜８；Ｋｏｌｃｈら、（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ、３４９、４２６〜２８および総説でＷｅｉｎｓｔｅｉｎ−Ｏｐｐｅｎｈｅｉｍｅｒら、Ｐｈａｒｍ．＆  Ｔｈｅｒａｐ．（２０００）８８、２２９〜２７９参照）。
【００２９】
同様に、Ｒａｆキナーゼの阻害（アンチセンスオリゴデオキシヌクレオチドによる）は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏで様々なヒト腫瘍型の増殖の阻害と関連している（Ｍｏｎｉａら、Ｎａｔ．Ｍｅｄ．１９９６、２、６６８〜７５）。
【００３０】
Ｒａｆ−セリンおよびトレオニン特異的タンパク質キナーゼは、種々の細胞系において細胞増殖を刺激するサイトソル酵素である（Ｒａｐｐ  Ｕ．Ｒ．ら、（１９８８）、Ｔｈｅ  Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ；Ｔ．Ｃｕｒｒａｎ、Ｅ．Ｐ．Ｒｅｄｄｙ  ａｎｄ  Ａ．Ｓｋａｌｋａ（ｅｄｓ．）、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ；Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ、ｐｐ２１３〜２５３；Ｒａｐｐ，Ｕ．Ｒ．ら、（１９８８）Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｓｙｍ．Ｑｕａｎｔ．Ｂｉｏｌ．５３：１７３〜１８４；Ｒａｐｐ、Ｕ．Ｒ．ら、（１９９０）Ｉｎｖ  Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．ＰｏｔｔｅｒおよびＭｅｌｃｈｅｒｓ（ｅｄｓ．）、Ｂｅｒｌｉｎ、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ  １６６：１２９〜１３９）。
【００３１】
３種のアイソザイムが同定されている。
【００３２】
Ｃ−Ｒａｆ（Ｒａｆ−１）（Ｂｏｎｎｅｒ  Ｔ．Ｉ．ら、（１９８６）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．１４：１００９〜１０１５）。Ａ−Ｒａｆ（Ｂｅｃｋ  Ｔ．Ｗ．ら、（１９８７）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．１５：５９５〜６０９）およびＢ−Ｒａｆ（Ｑｋａｗａ，Ｓ．ら、（１９９８）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．８：２６５１〜２６５４；Ｓｉｔｈａｎａｎｄａｍ  Ｇ．ら、（１９９０）Ｏｎｃｏｇｅｎｅ：１７７５）。これらの酵素は、様々な組織での発現に差がある。Ｒａｆ−１は、研究されたすべての器官およびすべての細胞系で発現し、Ａ−ＲａｆおよびＢ−Ｒａｆは、それぞれ尿生殖組織および脳組織で発現する（Ｓｔｏｒｍ  Ｓ．Ｍ．（１９９０）Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ５：３４５〜３５１）。
【００３３】
Ｒａｆ遺伝子は、癌原遺伝子である。これらは、特に改変形態で発現されると、細胞の悪性形質転換を開始し得る。発癌活性化をもたらす遺伝子変化は、タンパク質のＮ末端阻害調節ドメインを除去または妨げることによって、構成的活性タンパク質キナーゼを生じる（Ｈｅｉｄｅｃｋｅｒ  Ｇ．ら、（１９９０）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１０：２５０３〜２５１２；Ｒａｐｐ  Ｕ．Ｒ．ら、（１９８７）、Ｏｎｃｏｇｅｎｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ；Ｓ．Ａ．Ａａｒｏｎｓｏｎｍ、Ｊ．Ｂｉｓｈｏｐ、Ｔ．Ｓｕｇｉｍｕｒａ、Ｍ．Ｔｅｒａｄａ、Ｋ．Ｔｏｙｏｓｈｉｍａ、およびＰ．Ｋ．Ｖｏｇｔ（ｅｄｓ．）、Ｊａｐａｎ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｋｙｏ）。発癌的に活性化されているが、野生型ではない、大腸菌発現ベクターを用いて調製されたＲａｆタンパク質型のＮＩＨ３Ｔ３細胞へのマイクロインジェクションは、形態変換をもたらし、ＤＮＡ合成を促進する（Ｒａｐｐ  Ｕ．Ｒ．ら、（１９８７）、Ｏｎｃｏｇｅｎｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ；Ｓ．Ａ．Ａａｒｏｎｓｏｎ、Ｊ．Ｂｉｓｈｏｐ、Ｔ．Ｓｕｇｉｍｕｒａ、Ｍ．Ｔｅｒａｄａ、Ｋ．ＴｏｙｏｓｈｉｍａおよびＰ．Ｋ．Ｖｏｇｔ（ｅｄｓ．）、Ｊａｐａｎ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｋｙｏ；Ｓｍｉｔｈ  Ｍ．Ｒ．ら、（１９９０）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１０：３８２８〜３８３３）。
【００３４】
したがって、活性化Ｒａｆ−１は、細胞増殖の細胞内活性化因子である。Ｒａｆ癌遺伝子は、細胞突然変異（Ｒａｓ復帰突然変異細胞）または抗Ｒａｓ抗体のマイクロインジェクションによる細胞Ｒａｓ活性の遮断に起因する増殖停止に打ち勝つため、Ｒａｆ−１タンパク質セリンキナーゼは、マイトジェンシグナル伝達の下流エフェクターの候補である（Ｒａｐｐ、Ｕ．Ｒ．ら、（１９８８）Ｔｈｅ  Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ；Ｔ．Ｃｕｒｒａｎ、Ｅ．Ｐ．ＲｅｄｄｙおよびＡ．Ｓｋａｌｋａ（ｅｄｓ．）、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ；Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ、ｐｐ．２１３〜２５３；Ｓｍｉｔｈ，Ｍ．Ｒ．ら、（１９８６）Ｎａｔｕｒｅ（Ｌｏｎｄｏｎ）３２０：５４０〜５４３）。
【００３５】
Ｃ−Ｒａｆ機能は、様々な膜結合型癌遺伝子による形質転換および血清に含有されるマイトジェンによる増殖刺激に必要とされる（Ｓｍｉｔｈ，Ｍ．Ｒ．ら、（１９８６）Ｎａｔｕｒｅ（Ｌｏｎｄｏｎ）３２０：５４０〜５４３）。Ｒａｆ−１タンパク質セリンキナーゼ活性は、リン酸化を介してマイトジェンによって調節され（Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  Ｄ．Ｋ．ら、（１９８９）Ｃｅｌｌ  ５８：６４８〜６５７）、これはさらに細胞内分布をもたらす（Ｏｌａｈ  Ｚ．ら、（１９９１）Ｅｘｐ．Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．８４：４０３；Ｒａｐｐ  Ｕ．Ｒ．ら、（１９８８）Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｓｙｍ．Ｑｕａｎｔ．Ｂｉｏｌ．５３：１７３〜１８４）。Ｒａｆ−１活性化増殖因子には、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）（Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  Ｄ．Ｋ．ら、（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：８８５５〜８８５９）、コロニー刺激因子（Ｂａｃｃａｒｉｎｉ  Ｍ．ら、（１９９０）ＥＭＢＯ  Ｊ．９：３６４９〜３６５７）、インスリン（Ｂｌａｃｋｓｈｅａｒ  Ｐ．Ｊ．ら、（１９９０）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６５：１２１１５〜１２１１８）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）（Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  Ｒ．Ｋ．ら、（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：８８５５〜８８５９）、インターロイキン−２（Ｔｕｒｎｅｒ  Ｂ．Ｃ．ら、（１９９１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８８：１２２７）、およびインターロイキン−３ならびに顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（Ｃａｒｒｏｌｌ  Ｍ．Ｐ．ら、（１９９０）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６５：１９８１２〜１９８１７）が含まれる。
【００３６】
細胞のマイトジェン処理後、一過性に活性化されたＲａｆ−１タンパク質セリンキナーゼは、核周囲領域および核に転移する（Ｏｌａｈ，Ｚら、（１９９１）Ｅｘｐ．Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．８４：４０３；Ｒａｐｐ  Ｕ．Ｒ．ら、（１９８８）Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｂｏｒ  Ｓｙｍ．Ｑｕａｎｔ．Ｂｉｏｌ．５３：１７３〜１８４）。活性化Ｒａｆを含有する細胞は、遺伝子発現パターンが変わり（Ｈｅｉｄｅｃｋｅｒ  Ｇ．ら、（１９８９）Ｇｅｎｅｓ  ａｎｄ  ｓｉｇｎａｌ  ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｍｕｌｔｉｓｔａｇｅ  ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ、Ｎ．Ｃｏｌｂｕｒｎ（ｅｄｓ．）、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ｐｐ．３３９〜３７４）、Ｒａｆ癌遺伝子は、一過性トランスフェクションアッセイにおいて、Ａｐ−１／ＰＥＡ３依存性プロモーターからの転写を活性化する（Ｊａｍａｌ  Ｓ．ら、（１９９０）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３４４：４６３〜４６６；Ｋａｉｂｕｃｈｉ  Ｋ．ら、（１９８９）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６４：２０８５５〜２０８５８；Ｗａｓｙｌｙｋ  Ｃ．ら、（１９８９）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．９：２２４７〜２２５０）。
【００３７】
細胞外マイトジェンによるＲａｆ−１活性化には少なくとも２つの独立した経路がある。第１は、タンパク質キナーゼＣ（ＫＣ）を伴い、第２は、タンパク質チロシンキナーゼによって開始される（Ｂｌａｃｋｓｈｅａｒ  Ｐ．Ｊ．ら、（１９９０）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６５：１２１３１〜１２１３４；Ｋｏｖａｃｉｎａ  Ｋ．Ｓ．ら、（１９９０）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６５：１２１１５〜１２１１８；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  Ｄ．Ｋ．ら、（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：８８５５〜８８５９；Ｓｉｅｇｅｌ  Ｊ．Ｎ．ら、（１９９０）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６５：１８４７２〜１８４８０；Ｔｕｒｎｅｒ，Ｂ．Ｃ．ら、（１９９１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８８：１２２７）。いずれの場合にも、活性化は、Ｒａｆ−１タンパク質リン酸化を伴う。Ｒａｆ−１リン酸化は、自己リン酸化によって増幅されたキナーゼカスケードの結果であるか、またはジアシルグリセロールによるＰＫＣ活性化に類似した、潜在的活性化リガンドとＲａｆ−１調節ドメインとの結合によって開始された自己リン酸化がもっぱらの原因である可能性がある（Ｎｉｓｈｉｚｕｋａ  Ｙ．（１９８６）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３３：３０５〜３１２）。
【００３８】
細胞調節が達成される主要な機序の１つは、膜を通過する細胞外シグナルの伝達、それに続く細胞内の生化学的経路の調整によるものである。タンパク質リン酸化は、細胞内シグナルが分子から分子に伝播され、最終的に細胞応答を引き起こす一過程である。これらのシグナル伝達カスケードは、高度に調節されており、多くのタンパク質キナーゼおよびタンパク質ホスファターゼの存在からわかるように、多くの場合重複している。タンパク質のリン酸化は、主としてセリン、トレオニン、またはチロシン残基で起こり、したがって、タンパク質キナーゼは、それらのリン酸化部位の特異性によって、すなわちセリン／トレオニンキナーゼ、およびチロシンキナーゼに分類されている。リン酸化は細胞内の非常に偏在的なプロセスであり、細胞表現型はこれらの経路の活性に大いに影響を受けるため、多数の疾病状態および／または疾患は、キナーゼカスケードの分子成分における異常活性化または機能的突然変異に起因すると現在考えられている。したがって、これらのタンパク質、およびそれらの活性を調整することのできる化合物を同定することに、かなりの注目が向けられている（総説に関してはＷｅｉｎｓｔｅｉｎ−Ｏｐｐｅｎｈｅｉｍｅｒら、Ｐｈａｒｍａ．＆  Ｔｈｅｒａｐ．２０００、８８、２２９〜２７９参照）。
【００３９】
したがって、チロシンキナーゼおよび／またはＲａｆキナーゼのシグナル伝達を特異的に阻害、調節および／または調整する小化合物の合成が望ましく、本発明の目的である。
【００４０】
本発明による化合物およびそれらの塩は、十分に耐性でありながら、非常に有用な薬理学的特性を有することが見出された。
【００４１】
特にこれらは、チロシンキナーゼ阻害特性を示す。
【００４２】
さらに、本発明による化合物は、酵素Ｒａｆキナーゼの阻害剤であることが見出された。この酵素は、ｐ２１rasの下流エフェクターであるため、この阻害剤は、例えばＲａｆキナーゼに媒介される腫瘍および／または癌細胞増殖の治療において、Ｒａｆキナーゼ経路の阻害が指示されているヒトまたは動物薬で用いるための薬剤組成物に適していることがわかる。特に、ヒトおよび動物固形癌、例えばマウス癌の進行は、これらの癌の進行がＲａｓタンパク質シグナル伝達カスケードに依存しており、したがってカスケードの中断、すなわちＲａｆキナーゼの阻害による治療に感受性であるため、これらの化合物は、これらの癌の治療に適している。したがって、本発明による化合物または薬学的に許容できるその塩は、Ｒａｆキナーゼ経路に媒介される疾患、特に固形癌を含む癌、例えば癌腫（例えば、肺、膵臓、甲状腺、膀胱または結腸）、骨髄疾患（例えば、骨髄性白血病）または腺腫（例えば、絨毛状結腸腺腫）、病的血管新生および転移性細胞遊走を治療するために投与される。これらの化合物はさらに、補体活性化依存性慢性炎症（Ｎｉｃｕｌｅｓｃｕら、（２００２）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｓ．２４：１９１〜１９９）およびＨＩＶ−１（ヒト免疫不全ウイルス１型）誘発性免疫不全（Ｐｏｐｉｋら、（１９９８）Ｊ  Ｖｉｒｏｌ  ７２：６４０６〜６４１３）の治療に適している。
【００４３】
本発明による化合物は、シグナル経路、特に本願明細書に記載のシグナル経路、好ましくはＲａｆキナーゼシグナル経路と相互作用し得ることが意外にも判明した。本発明による化合物は好ましくは、酵素に基づくアッセイ、例えば本願明細書に記載の酵素アッセイにおいて容易に証明され得る有利な生物活性を示す。そのような酵素に基づくアッセイにおいて、本発明による化合物は好ましくは、通常は適切な範囲、好ましくはマイクロモル範囲、さらに好ましくはナノモル範囲のＩＣ50値によって示される阻害作用を示し、そのような作用をもたらす。
【００４４】
本願明細書で検討されているように、これらのシグナル経路は、様々な疾患に関与している。したがって、本発明による化合物は、前記のシグナル経路のうちの１つまたは複数と相互作用することにより、前記のシグナル経路に依存している疾患を予防および／または治療するために適している。
【００４５】
したがって本発明は、本明細書に記載のシグナル経路の促進剤または阻害剤、好ましくは阻害剤としての本発明による化合物に関する。したがって本発明は好ましくは、Ｒａｆキナーゼ経路の促進剤または阻害剤、好ましくは阻害剤としての本発明による化合物に関する。したがって本発明は好ましくは、Ｒａｆキナーゼの促進剤または阻害剤、好ましくは阻害剤としての本発明による化合物に関する。本発明はさらに一層好ましくは、Ａ−Ｒａｆ、Ｂ−ＲａｆおよびＣ−Ｒａｆ−１からなる群から選択される１種または複数のＲａｆキナーゼの促進剤または阻害剤としての、好ましくは阻害剤としての本発明による化合物に関する。本発明は特に好ましくは、Ｃ−Ｒａｆ−１の促進剤または阻害剤としての、好ましくは阻害剤としての本発明による化合物に関する。
【００４６】
本発明はさらに、Ｒａｆキナーゼにより誘発、媒介および／または伝播される疾患、好ましくは本願明細書に記載の疾患、特にＡ−Ｒａｆ、Ｂ−ＲａｆおよびＣ−Ｒａｆ−１からなる群から選択されるＲａｆキナーゼにより誘発、媒介および／または伝播される疾患の治療および／または予防における本発明による１種または複数の化合物の使用に関する。本願明細書で検討される疾患は通常、２つの群、過剰増殖性疾患および非過剰増殖性疾患に分類される。これに関して、乾癬、関節炎、炎症、子宮内膜症、瘢痕、良性前立腺肥大、免疫疾患、自己免疫疾患および免疫不全疾患は、非癌性疾患とみなされ、そのうち、関節炎、炎症、免疫疾患、自己免疫疾患および免疫不全疾患は、通常、非過剰増殖性疾患とみなされる。これに関して、脳腫瘍、肺癌、扁平上皮癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、肝臓癌、腎臓癌、結腸直腸癌、乳癌、頭部癌、頚部癌、食道癌、婦人科癌、甲状腺癌、リンパ腫、慢性白血病および急性白血病は、癌性疾患とみなされ、そのすべてが通常、過剰増殖性疾患とみなされる。特に癌細胞増殖、特にＲａｆキナーゼに媒介される癌細胞増殖は、本発明の標的となる疾患である。したがって本発明は、前記疾患を治療および／または予防する医薬品および／または医薬品活性成分としての本発明による化合物に、前記の疾患を治療および／または予防するための薬剤を調製するための本発明による化合物の使用に、さらに、そのような投与を必要としている患者に本発明による１種または複数の化合物を投与することを含む、前記疾患を治療するための方法に関する。
【００４７】
本発明による化合物は、異種移植腫瘍モデルにおいて、ｉｎ  ｖｉｖｏで抗増殖作用を有することを示すことができる。本発明による化合物は、例えば腫瘍増殖を阻害する、リンパ増殖性疾患に伴う炎症を緩和する、移植拒絶または組織修復による神経障害を阻害するなどのために、過剰増殖性疾患を有する患者に投与される。本発明の化合物は、予防または治療目的に適している。本明細書では、「治療」という用語は、疾患の予防および既存状態の治療の両方を指すために用いられる。増殖の予防は、例えば腫瘍の増殖を防ぐ、転移増殖を防ぐ、心臓血管手術に伴う再狭窄を減じるなどのために、顕性疾患の発症に先立って本発明による化合物を投与することによって達成される。あるいは、化合物は、患者の臨床症状を安定または改善することによって、進行中の疾患を治療するために用いられる。
【００４８】
宿主および患者は、任意の哺乳動物種、例えば霊長類種、特にヒト；マウス、ラット、およびハムスターを含む齧歯動物；ウサギ；ウマ、ウシ、イヌ、ネコなどに属することができる。動物モデルは、実験的研究に重要であり、ヒトの疾患治療のモデルを提供する。
【００４９】
本発明による化合物での治療に対する特定の細胞の感受性は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験によって判定することができる。典型的に、細胞の培養を、活性剤が細胞死を誘発するか、遊走を阻害するのに十分な期間、通常は約１時間から１週間、様々な濃度の本発明による化合物と組み合わせる。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験は、生検試料由来の培養細胞を用いて行うことができる。その後、処置後に残存する生存細胞をカウントする。
【００５０】
用量は、用いられる特定の化合物、特定の疾患、患者の状態などに応じて異なる。治療用量は典型的には、患者の生存性を維持しながら、標的組織において望ましくない細胞集団を大幅に減少するのに十分な量である。治療は一般的に、大幅な低減が生じるまで、例えば細胞負荷において少なくとも約５０％の低減まで継続され、望ましくない細胞が体内で本質的に検出されなくなるまで継続することができる。
【００５１】
シグナル伝達経路を同定し、様々なシグナル伝達経路の相互作用を検出するために、様々な科学者が、適切なモデルまたはモデル系、例えば細胞培養モデル（例えば、Ｋｈｗａｊａら、ＥＭＢＯ、１９９７、１６、２７８３〜９３）および形質転換動物モデル（例えばＷｈｉｔｅら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、２００１、２０、７０６４〜７０７２）を開発している。シグナル伝達カスケードでの一定の段階の決定に関して、シグナルを調節するために、相互作用化合物を利用することができる（例えばＳｔｅｐｈｅｎｓら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｊ．、２０００、３５１、９５〜１０５）。さらに本発明による化合物を、動物および／または細胞培養モデルまたは本願明細書で挙げられている臨床疾患におけるキナーゼ依存性シグナル伝達経路を試験するための試薬として使用することができる。
【００５２】
キナーゼ活性の測定は、当業者にはよく知られている技術である。基質、例えば、ヒストン（例えばＡｌｅｓｓｉら、ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．１９９６、３９９、３、ｐ．３３３〜３３８）または塩基性ミエリンタンパク質を使用してキナーゼ活性を決定するための一般的な試験系は、文献に記載されている（例えばＣａｍｐｏｓ−Ｇｏｎｚａｌｅｚ，Ｒ．ａｎｄ  Ｇｌｅｎｎｅｙ，Ｊｒ．，Ｊ．Ｒ．１９９２、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６７、ｐ．１４５３５）。
【００５３】
キナーゼ阻害剤を同定するために、種々のアッセイ系が利用可能である。シンチレーション近接アッセイ（Ｓｏｒｇら、Ｊ．ｏｆ．Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ、２００２、７、１１〜１９）およびフラッシュプレートアッセイでは、γＡＴＰを用いて基質としてのタンパク質またはペプチドの放射性リン酸化を測定する。阻害化合物の存在下では、検出される放射性シグナルが低減するか、まったく検出されない。さらに、ホモジニアス時間分解蛍光共鳴エネルギー転移（ＨＴＲ−ＦＲＥＴ）、および蛍光偏光（ＦＰ）技法は、アッセイ法として適している（Ｓｉｌｌｓら、Ｊ．ｏｆ  Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ、２００２、１９１〜２１４）。
【００５４】
他の非放射性ＥＬＩＳＡアッセイ法は、特定のホスホ−抗体（ホスホ−ＡＢ）を用いる。このホスホ−ＡＢは、リン酸化基質にのみ結合する。この結合は、二次ペルオキシダーゼ複合抗ヒツジ抗体を用いて、化学発光によって検出することができる（Ｒｏｓｓら、２００２、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．、まもなく発行、原稿ＢＪ２００２０７８６）。
【００５５】
細胞増殖の脱制御および細胞死（アポトーシス）に関連する多くの疾患がある。しかしながら、該当する状態には、これに限定されるものではないが、以下の状態が含まれる。本発明による化合物は、平滑筋細胞および／または炎症細胞の脈管の内膜層への増殖および／または遊走があり、例えば新生内膜閉塞病変の場合など、脈管の血流が制限される様々な状態の治療に適している。該当する閉塞性移植血管疾患には、アテローム性動脈硬化症、移植後の冠血管疾患、静脈移植血管狭窄、吻合周囲プロテーゼ再狭窄、血管形成またはステント留置術後の再狭窄などが含まれる。
【００５６】
本発明による化合物はさらに、ｐ３８キナーゼ阻害剤として適している。
【００５７】
ｐ３８キナーゼを阻害する複素アリール尿素は、国際公開第０２／８５８５９号パンフレットに記載されている。
【００５８】
先行技術
ピリドピリミジンは、国際公開第９８／０８８４６号パンフレットに記載されている。
【００５９】
発明の概要
本発明は、式Ｉの化合物：
【００６０】
【化１】
2008515935.tif 000003
【００６１】
［式中、
Ｒ1a、Ｒ1b、Ｒ1c、Ｒ1d、Ｒ1e、Ｒ2a、Ｒ2bは、それぞれ相互に独立に、Ｒ、Ｈａｌ、ＣＮ、ＮＯ2、ＮＲＲ’、ＮＨＣＯＲ、ＮＨＳＯ2Ｒ、ＯＲ、ＣＯ−Ｒ、ＣＯＯＲ、ＣＯ−ＮＨＲ、ＯＡ、ＳＡ、ＳＯ3Ｒ、ＳＯ2Ｒおよび／またはＳＯ2ＮＨＲを示し、
Ｒ1a、Ｒ1b、Ｒ1c、Ｒ1d、Ｒ1eから選択される２個の隣接する基は一緒になって、−Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−、−Ｏ−ＣＨ2−Ｏ−または−Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｏ−を示し、
Ｒ3は、ＨａｌまたはＯＲを示し、
Ｘは、Ｏ、ＮＨまたはＣＨ2を示し、
Ｒ、Ｒ’はそれぞれ相互に独立に、Ｈ、Ａ、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−Ａｒ、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−Ｈｅｔ、−［Ｃ（Ｒ4）2］p−Ｏ−Ｃ（Ｒ4）2］q−Ａｒ、−［Ｃ（Ｒ4）2］p−Ｏ−Ｃ（Ｒ4）2］q−Ｈｅｔを示し、
Ｒ4は、ＨまたはＡを示し、
Ａｒは、フェニル、ナフチルまたはビフェニルを示し、これらはそれぞれ、非置換であるか、Ｈａｌ、Ａ、ＯＲ4、Ｎ（Ｒ4）2、ＮＯ2、ＣＮ、ＣＯＯＲ4、ＣＯＮ（Ｒ4）2、ＮＲ4ＣＯＡ、ＮＲ4ＳＯ2Ａ、ＣＯＲ4、ＳＯ2Ｎ（Ｒ4）2、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−ＣＯＯＲ4、−Ｏ−［Ｃ（Ｒ4）2］o−ＣＯＯＲ4、ＳＯ3Ｈおよび／またはＳ（Ｏ）nＡでモノ、ジまたはトリ置換されており、
Ｈｅｔは、１から４個のＮ、Ｏおよび／またはＳ原子を有する単環式または二環式の飽和、不飽和または芳香族複素環を示し、これは非置換であるか、カルボニル酸素、（＝Ｏ）、＝Ｓ、＝Ｎ（Ｒ4）2、Ｈａｌ、Ａ、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−Ａｒ、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−シクロアルキル、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−ＯＲ4、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−Ｎ（Ｒ4）2、ＮＯ2、ＣＮ、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−ＣＯＯＲ4、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−ＣＯＮ（Ｒ4）2、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−ＮＲ4ＣＯＡ、ＮＲ4ＣＯＮ（Ｒ4）2、−［Ｃ（Ｒ4）2］n−ＮＲ4ＳＯ2Ａ、ＣＯＲ4、ＳＯ2Ｎ（Ｒ4）2および／またはＳ（Ｏ）nＡでモノ、ジまたはトリ置換されていてもよく、
Ａは、１個または２個のＣＨ2基が、ＯまたはＳ原子により、および／または−ＣＨ＝ＣＨ−基により置換されていてもよく、および／または、加えて、１〜７個のＨ原子が、Ｆに置換されていてもよい１〜１０個のＣ原子を有する非分枝鎖もしくは分枝鎖アルキルまたは３〜７個のＣ原子を有する環式アルキルを示し、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを示し、
ｎは、０、１、２、３または４を示し、
ｐは、１、２、３または４を示し、
ｑは、０、１、２、３または４を示す］ならびにあらゆる比率でのそれらの混合物を含む、それらの薬学的に利用可能な誘導体、溶媒和物、塩、互変異性体および立体異性体に関する。
【００６２】
さらに本発明は、これらの化合物の光学活性形態（立体異性体）、エナンチオマー、ラセミ体、ジアステレオマーならびに水和物および溶媒和物に関する。化合物の溶媒和物との用語は、相互引力により形成される、本化合物への不活性溶媒分子の付加を意味する。溶媒和物は例えば、一水和物もしくは二水和物またはアルコキシドである。
【００６３】
さらに式Ｉには、式Ｉの互変異性化合物も包含される。
【００６４】
Ｒ3が例えば、ＯＨを示す場合には、式Ｉａの互変異性化合物：
【００６５】
【化２】
2008515935.tif 000004
【００６６】
も包含される。
【００６７】
薬学的に利用可能な誘導体との用語は例えば、本発明による化合物の塩およびいわゆるプロドラッグ化合物を意味する。
【００６８】
プロドラッグ誘導体との用語は、例えばアルキル基またはアシル基、糖またはオリゴペプチドで修飾されており、生物において迅速に分解されて、本発明による有効な化合物を形成する式Ｉの化合物を意味する。
【００６９】
これらには、例えばＩｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．１１５、６１−６７（１９９５）に記載されているように、本発明による化合物の生分解性ポリマー誘導体も含まれる。
【００７０】
「有効量」という表現は、組織、系、動物、またはヒトにおいて、例えば研究者または医師から求められるまたは望まれる生物学的または医学的応答を引き起こす医薬品または薬剤活性成分の量を意味する。
【００７１】
加えて、「治療的有効量」という表現は、この量を与えられていない対応する対象と比較して、以下の結果を有する量を示す：
疾患、症候群、状態、愁訴、障害または副作用の治療、治癒、予防または除去の改善、あるいは疾患、愁訴または障害の進行の低減。
【００７２】
「治療的有効量」という表現はさらに、正常な生理機能を増大するために有効な量も包含する。
【００７３】
さらに本発明は、式Ｉの化合物の混合物、例えば１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：１０、１：１００または１：１０００の比率での例えば２種のジアステレオマーの混合物の使用に関する。
【００７４】
これらは特に好ましくは、立体異性化合物の混合物である。
【００７５】
本発明は、式Ｉの化合物およびその塩に、請求項１から１０に記載の式Ｉの化合物ならびにその薬学的に利用可能な誘導体、塩、溶媒和物および立体異性体の調製法に関し、これは、
ａ）式ＩＩの化合物：
【００７６】
【化３】
2008515935.tif 000005
【００７７】
（式中、
Ｒ2a、Ｒ2b、Ｒ3およびＸは、請求項１に記載の意味を有する）
を、式ＩＩＩの化合物：
【００７８】
【化４】
2008515935.tif 000006
【００７９】
（式中、
Ｒ1a〜Ｒ1eは、請求項１に記載の意味を有する）
と反応させるか、
ｂ）ハロゲン原子を置換することにより、基Ｒ3を別の基Ｒ3に変え、および／または
式Ｉの塩基または酸をその塩の１種に変えることを特徴とする。
【００８０】
前記および後記では、基Ｒ1a、Ｒ1b、Ｒ1c、Ｒ1d、Ｒ1e、Ｒ2a、Ｒ2b、Ｒ3およびＸは、他に特に記載されていない限り、式Ｉに記載の意味を有する。
【００８１】
Ａは、アルキルを示し、非分枝鎖（直鎖）または分枝鎖であり、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個のＣ原子を有する。Ａは好ましくは、メチル、さらにはエチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓ−ブチルまたはｔ−ブチル、さらにはペンチル、１−、２−、または３−メチルブチル、１，１−、１，２−または２，２−ジメチルプロピル、１−エチルプロピル、ヘキシル、１−、２−、３−または４−メチルペンチル、１，１−、１，２−、１，３−、２，２−、２，３−または３，３−ジメチルブチル、１−または２−エチルブチル、１−エチル−１−メチルプロピル、１−エチル−２−メチルプロピル、１，１，２−または１，２，２−トリメチルプロピル、さらに好ましくは例えばトリフルオロメチルを示す。
【００８２】
Ａは非常に特に好ましくは、１、２、３、４、５または６個のＣ原子を有するアルキルを示し、好ましくはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルまたは１，１，１−トリフルオロエチルを示す。Ａはさらに、シクロアルキルを示す。
【００８３】
シクロアルキルは好ましくは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルまたはシクロヘプチルを示す。
【００８４】
好ましい実施形態では、Ａはさらに、１〜１０個のＣ原子を有する非分枝鎖または分枝鎖アルキルを示し、ここで、１〜７個のＨ原子は、Ｆで置換されていてもよい。
【００８５】
Ｒ1a、Ｒ1b、Ｒ1c、Ｒ1dおよびＲ1eは好ましくは、それぞれ相互に独立に、Ｈ、Ａ、ＯＡまたはＨａｌを示す。
【００８６】
Ｒ2aおよびＲ2bは好ましくは、Ｈを示す。
【００８７】
Ｒ3は好ましくは、ＨａｌまたはＯＨを示す。
【００８８】
Ｒ、Ｒ’は好ましくは、それぞれ相互に独立に、例えばＨ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、トリフルオロメチル、フェニル、ベンジル、ピリジル、ピリミジニル、イミダゾリル、ピペリジニル、ピロリジニル、チエニル、インドリルまたはベンジルオキシメチルを示す。
【００８９】
さらなる置換にかかわらず、Ｈｅｔは例えば、２−または３−フリル、２−または３−チエニル、１−、２−または３−ピロリル、１−、２、４−または５−イミダゾリル、１−、３−、４−または５−ピラゾリル、２−、４−または５−オキサゾリル、３−、４−または５−イソオキサゾリル、２−、４−または５−チアゾリル、３−、４−または５−イソチアゾリル、２−、３−または４−ピリジル、２−、４−、５−または６−ピリミジニル、さらに好ましくは１，２，３−トリアゾール−１−、−４−または−５−イル、１，２，４−トリアゾール−１−、−３−または５−イル、１−または５−テトラゾリル、１，２，３−オキサジアゾール−４−または−５−イル、１，２，４−オキサジアゾール−３−または−５−イル、１，３，４−チアジアゾール−２−または−５−イル、１，２，４−チアジアゾール−３−または−５−イル、１，２，３−チアジアゾール−４−または−５−イル、３−または４−ピリダジニル、ピラジニル、１−、２−、３−、４−、５−、６−または７−インドリル、４−または５−イソインドリル、１−、２−、４−または５−ベンズイミダゾリル、１−、３−、４−、５−、６−または７−ベンゾピラゾリル、２−、４−、５−、６−または７−ベンゾオキサゾリル、３−、４−、５−、６−または７−ベンズイソオキサゾリル、２−、４−、５−、６−または７−ベンゾチアゾリル、２−、４−、５−、６−または７−ベンズイソチアゾリル、４−、５−、６−または７−ベンズ−２，１，３−オキサジアゾリル、２−、３−、４−、５−、６−、７−または８−キノリル、１−、３−、４−、５−、６−、７−または８−イソキノリル、３−、４−、５−、６−、７−または８−シンノリニル、２−、４−、５−、６−、７−または８−キナゾリニル、５−または６−キノキサリニル、２−、３−、５−、６−、７−または８−２Ｈ−ベンゾ−１，４−オキサジニル、さらに好ましくは１，３−ベンゾジオキソール−５−イル、１，４−ベンゾジオキサン−６−イル、２，１，３−ベンゾチアジアゾール−４−または−５−イルまたは２，１，３−ベンゾオキサジアゾール−５−イルを示す。
【００９０】
複素環式基はさらに、部分的にまたは完全に水素化されていてもよい。したがってＨｅｔはさらに、例えば２，３−ジヒドロ−２−、−３−、−４−または−５−フリル、２，５−ジヒドロ−２−、−３−、−４−または５−フリル、テトラヒドロ−２−または−３−フリル、１，３−ジオキソラン−４−イル、テトラヒドロ−２−または−３−チエニル、２，３−ジヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−または−５−ピロリル、２，５−ジヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−または−５−ピロリル、１−、２−または３−ピロリジニル、テトラヒドロ−１−、−２−または−４−イミダゾリル、２，３−ジヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−または−５−ピラゾリル、テトラヒドロ−１−、−３−または−４−ピラゾリル、１，４−ジヒドロ−１−、−２−、−３−または−４−ピリジル、１，２，３，４−テトラヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−、−５−または−６−ピリジル、１−、２−、３−または４−ピペリジニル、２−、３−または４−モルホリニル、テトラヒドロ−２−、−３−または−４−ピラニル、１，４−ジオキサニル、１，３−ジオキサン−２−、−４−または−５−イル、ヘキサヒドロ−１−、−３−または−４−ピリダジニル、ヘキサヒドロ−１−、−２−、−４−または−５−ピリミジニル、１−、２−または３−ピペラジニル、１，２，３，４−テトラヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−、−５−、−６−、−７−または−８−キノリル、１，２，３，４−テトラヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−、−５−、−６−、−７−または−８−イソキノリル、２−、３−、５−、６−、７−または８−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ−１，４−オキサジニル、さらに好ましくは２，３−メチレンジオキシフェニル、３，４−メチレンジオキシフェニル、２，３−エチレンジオキシフェニル、３，４−エチレンジオキシフェニル、３，４−（ジフルオロメチレンジオキシ）フェニル、２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−または６−イル、２，３−（２−オキソメチレンジオキシ）−フェニルまたは３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，５−ベンゾジオキセピン−６−または−７−イルであっても、さらに好ましくは２，３−ジヒドロベンゾフラニルまたは２，３−ジヒドロ−２−オキソフラニルを示すことができる。
【００９１】
Ａｒは例えば、フェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−トリル、ｏ−、ｍ−またはｐ−エチルフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−プロピルフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−イソプロピルフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−ｔ−ブチルフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−ヒドロキシフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−ニトロフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−アミノフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−（Ｎ−メチルアミノ）フェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−（Ｎ−メチルアミノカルボニル）フェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−アセトアミドフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−メトキシフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−エトキシフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−エトキシカルボニルフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノカルボニル）フェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−（Ｎ−エチルアミノ）フェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ）フェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−フルオロフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−ブロモフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−クロロフェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−（メチルスルホンアミド）フェニル、ｏ−、ｍ−またはｐ−（メチルスルホニル）フェニル、さらに好ましくは２，３−、２，４−、２，５−、２，６−、３，４−または３，５−ジフルオロフェニル、２，３−、２，４−、２，５−、２，６−、３，４−または３，５−ジクロロフェニル、２，３−、２，４−、２，５−、２，６−、３，４−または３，５−ジブロモフェニル、２，４−または２，５−ジニトロフェニル、２，５−または３，４−ジメトキシフェニル、３−ニトロ−４−クロロフェニル、３−アミノ−４−クロロ−、２−アミノ−３−クロロ−、２−アミノ−４−クロロ−、２−アミノ−５−クロロ−または２−アミノ−６−クロロフェニル、２−ニトロ−４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ−または３−ニトロ−４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノフェニル、２，３−ジアミノフェニル、２，３，４−、２，３，５−、２，３，６−、２，４，６−または３，４，５−トリクロロフェニル、２，４，６−トリメトキシフェニル、２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロフェニル、ｐ−ヨードフェニル、３，６−ジクロロ−４−アミノフェニル、４−フルオロ−３−クロロフェニル、２−フルオロ−４−ブロモフェニル、２，５−ジフルオロ−４−ブロモフェニル、３−ブロモ−６−メトキシフェニル、３−クロロ−６−メトキシフェニル、３−クロロ−４−アセトアミドフェニル、３−フルオロ−４−メトキシフェニル、３−アミノ−６−メチルフェニル、３−クロロ−４−アセトアミドフェニルまたは２，５−ジメチル−４−クロロフェニルを示す。
【００９２】
Ｈａｌは好ましくは、Ｆ、ＣｌまたはＢｒ、さらにはＩ、特に好ましくはＦまたはＣｌを示す。
【００９３】
本発明を通して、１回よりも多く出現する基はすべて、同じでも異なってもよい。すなわち、相互に独立している。
【００９４】
式Ｉの化合物は、１個または複数のキラル中心を有することがあるので、様々な立体異性形態で生じ得る。式Ｉには、これらの形態すべてが包含される。
【００９５】
したがって本発明は特に、前記の基の少なくとも１個が前記の好ましい意味の１つを有する式Ｉの化合物に関する。化合物のいくつかの好ましい群を、次の亜式ＩａからＩｅならびにあらゆる比率でのその混合物を含むその薬学的に利用可能な誘導体、塩、溶媒和物、互変異性体および立体異性体で表すことができるが、これらは、式Ｉに従い、その際、詳細に記載されていない基は、式Ｉに記載の意味を有するが、
Ｉａでは、
Ｒ1a、Ｒ1b、Ｒ1c、Ｒ1dおよびＲ1eは、それぞれ相互に独立に、Ｈ、Ａ、ＯＡおよび／またはＨａｌを示し；
Ｉｂでは、
Ｒ2aおよびＲ2bは、Ｈを示し；
Ｉｃでは、
Ｒ3は、ＨａｌまたはＯＨを示し；
Ｉｄでは、
Ａは、１〜７個のＨ原子がＦにより置換されていてもよい１〜１０個のＣ原子を有する非分枝鎖または分枝鎖アルキルを表し；
Ｉｅでは、
Ｒ1a、Ｒ1b、Ｒ1c、Ｒ1dおよびＲ1eは、それぞれ相互に独立に、Ｈ、Ａ、ＯＡおよび／またはＨａｌを示し、
Ｒ2aおよびＲ2bは、Ｈを示し、
Ｒ3は、ＨａｌまたはＯＨを示し、
Ｘは、Ｏ、ＮＨまたはＣＨ2を示し、
Ａは、１〜７個のＨ原子がＦにより置換されていてもよい１〜１０個のＣ原子を有する非分枝鎖または分枝鎖アルキル表し、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを示す。
【００９６】
式Ｉの化合物およびそれらを調製するための出発原料は加えて、前記反応に適している既知の反応条件下で、文献（例えば、Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ、Ｍｅｔｈｏｄｅｎ  ｄｅｒ  ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ  Ｃｈｅｍｉｅ（有機化学の方法）、Ｇｅｏｒｇ−Ｔｈｉｅｍｅ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｓｔｕｔｔｇａｒｔなどの標準的な著作物）に記載されているような、それ自体知られている方法で調製される。それ自体知られているが、本明細書にはより詳細に述べられていない態様を使用することもできる。
【００９７】
望ましい場合には、出発原料をその場で形成させて、反応混合物から単離せずに、代わりに、速やかに式Ｉの化合物に変換することもできる。
【００９８】
好ましくは、式ＩＩの化合物と式ＩＩＩの化合物とを反応させることにより、式Ｉの化合物を得ることができる。
【００９９】
式ＩＩの化合物は新規であり、式ＩＩＩの化合物は一般に知られている。
【０１００】
反応を通常は、不活性溶剤中、トリエチルアミン、ジメチルアニリン、ピリジンまたはキノリンなどの有機塩基の存在下に実施する。使用される条件に応じて、反応時間は、数分から１４日であり、反応温度は約０℃から１５０℃、通常は１５℃から９０℃、特に好ましくは１５から３０℃である。
【０１０１】
適切な不活性溶剤は例えば、ヘキサン、石油エーテル、ベンゼン、トルエンまたはキシレンなどの炭化水素；トリクロロエチレン、１，２−ジクロロエタン、四塩化炭素、クロロホルムまたはジクロロメタンなどの塩素化炭化水素；メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｎ−プロパノール、ｎ−ブタノールまたはｔ−ブタノールなどのアルコール；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）またはジオキサンなどのエーテル；エチレングリコールモノメチルまたはモノエチルエーテル、エチレングリコールジメチルエーテル（ジグリム）などのグリコールエーテル；アセトンまたはブタノンなどのケトン；アセトアミド、ジメチルアセトアミドまたはジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）などのアミド；アセトニトリルなどのニトリル；ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などのスルホキシド；二硫化炭素；ギ酸または酢酸などのカルボン酸；ニトロメタンまたはニトロベンゼンなどのニトロ化合物；酢酸エチルなどのエステルあるいは前記の溶剤の混合物である。
【０１０２】
薬学的塩および他の形態
本発明による前記化合物は、その最終的な非塩形態で使用することができる。他方で、本発明は、当技術分野で知られている手順により様々な有機および無機酸ならびに塩基に由来し得るその薬学的に許容できる塩の形態でのこれらの化合物の使用も包含する。式Ｉの化合物の薬学的に許容できる塩形態は大部分、慣用の方法により調製される。式Ｉの化合物がカルボキシル基を含む場合、適切な塩基とその化合物とを反応させて、対応する塩基付加塩を得ることにより、その適切な塩の１種を形成させることができる。このような塩基は例えば、水酸化カリウム、水酸化ナトリウムおよび水酸化リチウムを含むアルカリ金属水酸化物；水酸化バリウムおよび水酸化カルシウムなどのアルカリ土類金属水酸化物；アルカリ金属アルコキシド、例えばカリウムエトキシドおよびナトリウムプロポキシド；およびピペリジン、ジエタノールアミンおよびＮ−メチル−グルタミンなどの様々な有機塩基である。式Ｉの化合物のアルミニウム塩も同様に含まれる。一定の式Ｉの化合物では、これらの化合部を薬学的に許容できる有機および無機酸、例えば塩化水素、臭化水素またはヨウ化水素などの水素ハロゲン化物、他の鉱酸および硫酸塩、硝酸塩またはリン酸塩などの対応するその塩ならびにエタンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩およびベンゼンスルホン酸塩などのアルキル−およびモノアリールスルホン酸塩ならびに他の有機酸および酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、アスコルビン酸塩などの対応するその塩で処理することにより、酸付加塩を形成することができる。したがって、式Ｉの化合物の薬学的に許容できる酸付加塩には、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アルギニン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩（ベシル酸塩）、硫酸水素塩、亜硫酸水素塩、臭化物、酪酸、ショウノウ酸塩、ショウノウスルホン酸塩、カプリル酸塩、塩化物、クロロ安息香酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、二水素リン酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、ガラクタン酸塩（粘液酸から）、ガラクツロン酸塩、グルコヘプタン酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリセロリン酸塩、半コハク酸塩、半硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヒプル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ヨウ化物、イセチオン酸塩、イソ酪酸、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メタリン酸塩、メタンスルホン酸塩、メチル安息香酸塩、一水素リン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、オレイン酸塩、パルモチン酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、フェニル酢酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ホスホン酸塩、フタル酸塩が含まれるが、これは、制限ではない。
【０１０３】
さらに、本発明による化合物の塩基塩には、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、鉄（ＩＩＩ）、鉄（ＩＩ）、リチウム、マグネシウム、マンガン（ＩＩＩ）、マンガン（ＩＩ）、カリウム、ナトリウムおよび亜鉛の塩が含まれるが、これは、制限を示すことを意図したものではない。前記の塩のうち、アンモニウム；ナトリウムおよびカリウムのアルカリ金属塩ならびにカルシウムおよびマグネシウムのアルカリ土類金属塩が好ましい。薬学的に許容できる有機非毒性塩基に由来する式Ｉの化合物の塩には、天然に生じる置換アミン、環式アミンおよび塩基性イオン交換樹脂も含む第一級、第二級および第三級アミン、置換アミンの塩、例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、クロロプロカイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン（ベンザチン）、ジシクロヘキシルアミン、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リドカイン、リシン、メグルミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエタノールアミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミンおよびトリス−（ヒドロキシメチル）メチルアミン（トロメタミン）の塩が含まれるが、これは、制限を示すことを意図したものではない。
【０１０４】
（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルハロゲン化物、例えば、塩化、臭化およびヨウ化メチル、エチル、イソプロピルおよびｔ−ブチル；ジ（Ｃ1〜Ｃ4）アルキル硫酸塩、例えば硫酸ジメチル、ジエチルおよびジアミル；（Ｃ10〜Ｃ18）アルキルハロゲン化物、例えば、塩化、臭化およびヨウ化デシル、ドデシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリル；ならびにアリール（Ｃ1〜Ｃ4）アルキルハロゲン化物、例えば、塩化ベンジルおよび臭化フェネチルなどの薬剤を使用して、塩基性窒素含有基を含む本発明の化合物を第四級化することができる。このような塩を使用して、本発明による水溶性および油溶性化合物の両方を調製することができる。
【０１０５】
好ましい前記の薬学的塩には、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、ベシル酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、半コハク酸塩、ヒプル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、イセチオン酸塩、マンデル酸塩、メグルミン、硝酸塩、オレイン酸塩、リン酸塩、ピバル酸塩、リン酸ナトリウム、ステアリン酸塩、硫酸塩、スルホサリチル酸塩、酒石酸塩、チオリンゴ酸塩、トシル酸塩およびトロメタミンが含まれるが、これは、制限を示すことを意図したものではない。
【０１０６】
慣用の方法で遊離塩基形態を十分な量の所望の酸と接触させて、塩を形成させることにより、式Ｉの塩基性化合物の酸付加塩を調製する。慣用の方法で、塩形態を塩基と接触させ、遊離塩基を単離することにより、遊離塩基を回復することもできる。遊離塩基形態は、一定の点では、極性溶剤への可溶性などの一定の物理的特性に関して、その対応する塩形態とは異なるが、本発明の目的では、塩は、その個々の遊離塩基形態に対応する。
【０１０７】
前記のように、式Ｉの化合物の薬学的に許容できる塩基付加塩を、アルカリ金属およびアルカリ土類金属または有機アミンなどの金属またはアミンで形成させる。好ましい金属は、ナトリウム、カリウム、マグネシウムおよびカルシウムである。好ましい有機アミンは、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンおよびプロカインである。
【０１０８】
慣用の方法で、遊離酸形態と十分な量の所望の塩基とを接触させて、塩を形成させることにより、本発明による酸性化合物の塩基付加塩を調製する。慣用の方法で、塩形態を酸と接触させ、遊離の酸を単離することにより、遊離酸を回復させることができる。遊離酸形態は、一定の点では、極性溶剤への可溶性などの一定の物理的特性に関して、その対応する塩形態とは異なるが、本発明の目的では、塩は、その個々の遊離酸形態に対応する。
【０１０９】
本発明による化合物が、このタイプの薬学的に許容できる塩を形成し得る基を１個よりも多く含む場合、本発明は、多重塩（multiple salts)も包含する。典型的な多重塩形態には例えば、酒石酸水素塩、二酢酸塩、二フマル酸塩、ジメグルミン、二リン酸塩、二ナトリウムおよび三水素塩化物が含まれるが、これは、制限を示すことを意図したものではない。
【０１１０】
前記に関して、特に、その塩形態が、活性成分の遊離形態または初めに使用された活性成分の他の塩形態に対して薬物動態特性の改善を活性成分にもたらす場合に、「薬学的に許容できる塩」との表現は、式Ｉの化合物をその塩のいずれかの形態で含む活性成分を意味していることがわかる。活性成分の薬学的に許容できる塩形態はさらに、当初は持ってなかった所望の薬物動態特性を有する活性成分を初めて提供することができ、体への治療効力に関して積極的な影響を活性な成分の薬物動態に与えることすらできる。
【０１１１】
さらに本発明は、少なくとも１種の式Ｉの化合物および／またはすべての比でのそれらの混合物を含むその薬学的に利用可能な誘導体、溶媒和物および立体異性体ならびに場合によって賦形剤および／または補助剤を含む医薬品に関する。
【０１１２】
医薬処方物を、投与単位当たり所定量の活性成分を含む投与単位の形態で投与することができる。そのような単位は、治療される状態、投与方法、患者の年齢、体重および状態に応じて、例えば０．５ｍｇから１ｇ、好ましくは１ｍｇから７００ｍｇ、特に好ましくは５ｍｇから１００ｍｇの本発明による化合物を含むことができるか、薬剤処方物を、投与単位当たり予め決定された量の活性成分を含む投与単位の形態で投与することができる。好ましい投与単位処方物は、前記のように、活性成分の一日用量または部分用量、あるいはその相当する画分を含むものである。さらに、この種の医薬処方物は、薬剤分野で一般に知られている方法を用いて調製することができる。
【０１１３】
医薬処方物は、任意の所望の適切な方法、例えば経口（口腔または舌下を含む）、直腸、経鼻、局所（口腔、舌下または経皮を含む）、膣内あるいは非経口（皮下、筋内、静脈内または皮内を含む）法によって投与するために適応させることができる。そのような医薬処方物は、薬剤分野で知られているあらゆる方法を用いて、例えば活性成分を賦形剤または補助剤と組み合わせることによって調製することができる。
【０１１４】
経口投与用に適応された医薬処方物は、別個の単位として投与することができ、例えばカプセル剤または錠剤；粉剤または顆粒剤；水性または非水性溶液の液剤または懸濁剤；食用泡剤または泡状食品；あるいは水中油型液体エマルションまたは油中水型液体エマルションなどである。
【０１１５】
したがって、例えば、錠剤またはカプセル剤形態での経口投与の場合、活性成分は、経口、非毒性かつ薬剤として許容される不活性賦形剤、例えばエタノール、グリセロール、水などと組み合わせることができる。粉剤は、化合物を適切な微細粒度に粉砕し、それを同様に粉砕した薬剤賦形剤、例えば食用炭水化物、例えばデンプンまたはマンニトールなどと混合することによって調製される。同様に、香味剤、保存剤、分散剤および色素も存在してよい。
【０１１６】
カプセル剤は、前記のように粉末混合物を調製し、成形したゼラチン外皮にそれを充填することによって製造される。流動促進剤および滑沢剤、例えば高度分散ケイ酸、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたは固体形態のポリエチレングリコールなどを、充填操作前に、粉末混合物に添加することができる。崩壊剤または可溶化剤、例えば寒天、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウムなども、カプセル摂取後の薬剤の有用性を向上させるために、同様に添加することができる。
【０１１７】
さらに、所望であるか必要であれば、適切な結合剤、滑沢剤および崩壊剤ならびに色素を、同様に混合物に組み入れることができる。適切な結合剤には、デンプン、ゼラチン、天然糖、例えばグルコースまたはβ−ラクトースなど、トウモロコシから作られた甘味剤、天然および合成ゴム、例えばアカシア、トラガカントまたはアルギン酸ナトリウムなど、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ロウなどが含まれる。これらの投与形態に用いられる滑沢剤には、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが含まれる。崩壊剤には、これらに限定されることなく、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどが含まれる。錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、混合物を粒状にするか、または乾燥圧縮し、滑沢剤および崩壊剤を添加し、全混合物を圧縮して錠剤を得ることによって製剤化される。粉末混合物は、上述のとおり、適切な様式で粉砕した化合物を、前記の希釈剤またはベースと、場合によって結合剤、例えばカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、またはポリビニルピロリドンなど、分解遅延剤、例えばパラフィンなど、吸収促進剤、例えば第四級塩など、および／または吸収剤、例えばベントナイト、カオリン、または第二リン酸カルシウムなどと混合することによって調製される。粉末混合物は、結合剤、例えば糖ミツ、デンプン糊、アカディア（ａｃａｄｉａ）粘液あるいはセルロースまたはポリマー材料の溶液などを用いて湿潤させ、ふるいを通してそれを圧縮することによって粒状にすることができる。粒状化の別法として、粉末混合物を打錠機に通して、分解されて小粒を形成する不均一な形状の塊を得ることができる。小粒は、錠剤鋳型に粘着するのを防ぐために、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルクまたは鉱油を添加することによって、潤滑にすることができる。その後、潤滑混合物を圧縮して、錠剤を得る。本発明による化合物は、流動性不活性賦形剤と組み合わせ、その後粒状化または乾燥圧縮段階を行わずに、直接圧縮して錠剤を得ることもできる。シェラック密封層、糖またはポリマー材料層およびロウの光沢層からなる透明または不透明保護層が存在してもよい。異なる投与単位を識別できるように、これらの被覆物に色素を添加することができる。
【０１１８】
経口液体、例えば液剤、シロップ剤、およびエリキシル剤などは、所与の量が予め指定された量の化合物を含むような投与単位の形態で調製することができる。シロップ剤は、化合物を適切な香味剤と共に水溶液に溶解することによって調製することができ、エリキシル剤は、非毒性アルコールビヒクルを用いて調製される。懸濁剤は、化合物を非毒性ビヒクルに分散することによって製剤化することができる。可溶化剤および乳化剤、例えばエトキシル化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテルなど、保存剤、香味添加剤、例えばハッカ油あるいは天然甘味剤またはサッカリンあるいは他の人工甘味剤なども同様に添加することができる。
【０１１９】
経口投与用の投与単位製剤は、所望であれば、マイクロカプセルに封入することができる。この製剤は、例えば粒状材料をポリマー、ロウなどで被覆または包埋することによって、放出が延長または遅延するように調製することもできる。
【０１２０】
式Ｉの化合物ならびにその塩、溶媒和物および生理的機能性誘導体は、例えば小さい単層ベシクル、大きい単層ベシクルおよび多層ベシクルなどのリポソーム輸送系の形態で投与することもできる。リポソームは、種々のリン脂質、例えばコレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリンなどから形成することができる。
【０１２１】
式Ｉの化合物ならびにその塩、溶媒和物および生理的機能性誘導体は、化合物分子が結合する個別の担体としてモノクローナル抗体を用いて輸送することもできる。これらの化合物は、標的薬剤担体として、可溶性ポリマーに結合させることもできる。そのようなポリマーは、パルミトイル基で置換されたポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノールまたはポリエチレンオキシドポリリシンを含むことができる。これらの化合物は、さらに薬剤の制御放出を達成するのに適したある種の生分解性ポリマー、例えばポリ酢酸、ポリ−ε−カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロキシピラン、ポリシアノアクリレートおよびヒドロゲルの架橋または両親媒性ブロックコポリマーの群に結合させることもできる。
【０１２２】
経皮投与用に適応された薬剤は、受容者の表皮と密接に長期接触させるための個別の硬膏剤として投与することができる。したがって例えば、活性成分は、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、３（６）、３１８（１９８６）の一般項に記載されているように、イオン導入法によって硬膏剤から輸送することができる。
【０１２３】
局所投与用に適応された薬剤は、軟膏剤、クリーム、懸濁剤、ローション剤、粉剤、液剤、パスタ剤、ゲル、スプレー、エアロゾルまたは油として処方することができる。
【０１２４】
眼または他の外部組織、例えば口および皮膚の治療の場合、処方物は、好ましくは局所軟膏剤またはクリームとして適用される。軟膏を提供する製剤の場合、活性成分は、パラフィン系または水混和性クリームベースと共に用いることができる。あるいは、水中油型クリームベースまたは油中水型ベースを用いてクリームを提供するように製剤化することができる。
【０１２５】
眼への局所適用に適応された処方物には、点眼液が含まれ、この場合、活性成分は、適切な担体、特に水性溶媒に溶解または懸濁される。
【０１２６】
口への局所適用に適応された処方物は、ロゼンジ、トローチ剤およびマウスウォッシュを含む。
【０１２７】
直腸投与用に適応された処方物は、坐剤または浣腸の形態で投与することができる。
【０１２８】
担体物質が固体である経鼻投与用に適応された処方物は、例えば２０〜５００ミクロンの範囲の粒径を有する粗い粉末を含み、この薬剤は、鼻からの吸入が行われる様式、すなわち鼻に近接して保持された粉末を含有する容器から鼻道を経由して急速に吸入されることによって投与される。担体物質として液体を含む鼻用スプレーまたは点鼻薬として投与される適切な処方物には、活性成分の水溶液または油溶液が含まれる。
【０１２９】
吸引による投与に適応された処方物には、微細粒状ダストまたはミストが含まれ、これはエアロゾル、ネブライザーまたは注入器を備えた様々な型の加圧式ディスペンサによって発生させることができる。
【０１３０】
膣内投与用に適応された処方物は、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、パスタ、泡またはスプレー処方物として投与することができる。
【０１３１】
非経口投与用に適応された処方物には、それによって製剤が治療される受容者の血液と等張となる、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤および溶質を含む水性または非水性滅菌注射液ならびに懸濁媒質および増粘剤を含むことのできる水性または非水性滅菌懸濁液が含まれる。これらの処方物は、単回用量または多回用量容器、例えば密封アンプルおよびバイアルで投与することができ、使用直前に注射のために、滅菌担体液体、例えば水の添加のみが必要であるように、冷凍乾燥（凍結乾燥）状態で保存される。この製法に従って調製される注射液および懸濁液は、滅菌粉末、顆粒および錠剤から調製することができる。
【０１３２】
特に上に述べた成分に加えて、本発明による処方物は、その特定の種類の処方物に関して当分野で通例である他の薬剤も含むことができるのは言うまでもなく、したがって、例えば経口投与に適している処方物は、香味剤を含むことができる。
【０１３３】
式Ｉの化合物の治療的有効量は、例えば動物の年齢および体重、治療を要する正確な疾患状態およびその重篤度、処方物の性質ならびに投与方法を含むいくつかの要因によって決まり、最終的には治療を行う医師または獣医師によって決定される。しかしながら、腫瘍性増殖、例えば結腸癌または乳癌を治療するための、式Ｉの化合物の有効量は、一般に１日当たり、受容者（哺乳動物）の体重１ｋｇ当たり、０．１から１００ｍｇの範囲、特に典型的には１日当たり、体重１ｋｇ当たり、１から１０ｍｇの範囲である。したがって、体重７０ｋｇである成体哺乳動物の１日当たりの実際量は、通常７０から７００ｍｇであり、この量を、総日用量が同一となるように、１日当たりの単回用量として、または通常１日当たり一連（例えば、２、３、４、５または６回など）の部分用量で投与することができる。その塩もしくは溶媒和物または生理的機能性誘導体の有効量は、それ自体が式Ｉの化合物の有効量の画分として決定することができる。類似の用量が上に挙げた他の状態の治療にも適していることが推測され得る。
【０１３４】
さらに本発明は、少なくとも１種の式Ｉの化合物および／またはあらゆる比率でのそれらの混合物を含む、それらの薬学的に利用可能な誘導体、溶媒和物および立体異性体ならびに少なくとも１種の他の医薬品活性成分を含む医薬品に関する。
【０１３５】
さらに本発明は、
（ａ）有効量の式Ｉの化合物ならびに／またはあらゆる比率のそれらの混合物を含む、薬学的に利用可能な誘導体、溶媒和物および立体異性体、ならびに
（ｂ）有効量の他の医薬品活性成分
の別個のパックからなるセット（キット）に関する。
【０１３６】
このセットは、適切な容器、例えば箱、個別ボトル、袋またはアンプルなどを含む。このセットは例えば、それぞれ溶解または凍結乾燥形態で、有効量の式Ｉの化合物ならびに／またはあらゆる比率のそれらの混合物を含む、薬学的に利用可能なその誘導体、溶媒和物および立体異性体ならびに有効量の他の医薬品活性成分を含有する別個のアンプルを含むことができる。
【０１３７】
使用
さらに本発明の化合物は、チロシンキナーゼ誘発性疾患の治療において、哺乳動物、特にヒトに対する薬剤活性成分として適している。これらの疾患には、腫瘍細胞の増殖、固形腫瘍の増殖を促進する病的新生血管形成（血管新生）、眼新生血管形成（糖尿病性網膜症、加齢性黄斑変性など）および炎症（乾癬、関節リウマチなど）が含まれる。
【０１３８】
本発明は、癌を治療または予防するための医薬品を調製するための、式Ｉの化合物および／またはその生理学的に許容できる塩および溶媒和物の使用を包含する。治療に好ましい癌腫は、脳腫瘍、尿生殖路癌腫、リンパ系の癌腫、胃癌腫、咽頭癌腫、肺癌腫の群に由来する。癌の好ましい形態のさらなる群は、単球性白血病、肺腺癌、小細胞肺癌、膵臓癌、膠芽細胞腫および乳癌である。
【０１３９】
さらに、血管新生が関与する疾患を治療または予防するための医薬品を調製するための、請求項１に記載の化合物および／またはその生理学的に許容できる塩および溶媒和物の使用を包含する。
【０１４０】
このような血管新生が関与する疾患は、網膜血管形成、糖尿病性網膜症、加齢性黄斑変性などの眼疾患である。
【０１４１】
炎症性疾患を治療または予防するための医薬品を調製するための、式Ｉの化合物および／またはその生理学的に許容できる塩および溶媒和物の使用も、本発明の範囲内である。このような炎症性疾患の例には、関節リウマチ、乾癬、接触皮膚炎、遅延型過敏反応などが含まれる。
【０１４２】
哺乳動物におけるチロシンキナーゼ誘発性疾患またはチロシンキナーゼ誘発性状態を治療または予防するための医薬品を調製するための、式Ｉの化合物および／またはその生理学的に許容できる塩および溶媒和物の使用も包含され、この方法では、治療的有効量の式Ｉの化合物を、そのような治療を必要とする病気の哺乳動物に投与する。治療量は、具体的な疾患によって変動し、当業者であれば特に努力することなく決定することができる。
【０１４３】
本発明はさらに、網膜血管形成を治療または予防するための医薬品を調製するための、式Ｉの化合物および／またはその生理学的に許容できる塩および溶媒和物の使用も包含する。
【０１４４】
糖尿病性網膜症および加齢性黄斑変性などの眼疾患を治療または予防するための方法も同様に、本発明の一部である。慢性関節リウマチ、乾癬、接触皮膚炎および遅延型過敏症反応などの炎症疾患を治療または予防するための使用、さらに、骨肉腫、変形性関節症およびくる病の群からの骨病理を治療または予防するための使用も、本発明の範囲内である。
【０１４５】
「チロシンキナーゼ誘発性疾患または状態」という表現は、１種または複数のチロシンキナーゼの活性に依存する病的状態を指す。チロシンキナーゼは、増殖、接着、遊走および分化を含む種々の細胞活動のシグナル伝達経路に、直接または間接的に関与する。チロシンキナーゼ活性に関連する疾患には、腫瘍細胞の増殖、固形腫瘍の増殖を促進する病的新生血管形成、眼新生血管形成（糖尿病性網膜症、加齢性黄斑変性など）および炎症（乾癬、関節リウマチなど）が含まれる。
【０１４６】
式Ｉの化合物は、癌を治療するために患者に投与することができる。本発明の化合物は、腫瘍血管新生を阻害し、それによって腫瘍の増殖に影響を及ぼす（Ｊ．Ｒａｋら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｈ、５５：４５７５〜４５８０、１９９５）。式Ｉの本発明の化合物の血管新生阻害特性は、網膜新生血管形成に関連するある種の形態の失明の治療にも適している。
【０１４７】
式Ｉの化合物はさらに、骨肉腫、変形性関節症および腫瘍性骨軟化症とも称されるくる病などのある種の骨の異常の治療にも適している（Ｈａｓｅｇａｗａら、Ｓｋｅｌｅｔａｌ、Ｒａｄｉｏｌ．２８、ｐｐ．４１〜４５、１９９９；Ｇｅｒｂｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、Ｖｏｌ．５、Ｎｏ．６、ｐｐ．６２３〜６２８、１９９９年６月）。ＶＥＧＦは、成熟破骨細胞に発現するＫＤＲ／Ｆｌｋ−１によって破骨細胞骨吸収を直接促進するので（ＦＥＢＳ  Ｌｅｔ．４７３：１６１〜１６４（２０００）；Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ、１４１：１６６７（２０００））、本発明の化合物は、骨粗鬆症およびパジェット病など、骨吸収に関連する状態の治療および予防にも適している。
【０１４８】
さらに本化合物は、脳水腫、組織損傷および虚血後再潅流障害を低減することによって、発作などの脳虚血事象後に起こる組織損傷を低減または予防するために用いることもできる（Ｄｒｕｇ  Ｎｅｗｓ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔ  １１：２６５〜２７０（１９９８）；Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１０４：１６１３〜１６２０（１９９９））。
【０１４９】
したがって本発明は、キナーゼシグナル伝達の阻害、調節および／または調整が役割を果たす疾患を治療するための医薬品を調製するための、式Ｉの化合物ならびにあらゆる比率でのその混合物を含む、その薬学的に利用できる誘導体、溶媒和物および立体異性体の使用に関する。
【０１５０】
この場合、チロシンキナーゼおよびＲａｆキナーゼの群から選択されるキナーゼが、好ましい。
【０１５１】
チロシンキナーゼは好ましくは、ＴＩＥ−２、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＦＧＦＲおよび／またはＦＬＴ／ＫＤＲである。
【０１５２】
請求項１に記載の化合物によるチロシンキナーゼの阻害により影響を受ける疾患を治療するための医薬品を調製するための、式Ｉの化合物ならびにあらゆる比率でのその混合物を含む、その薬学的に利用できる誘導体、溶媒和物および立体異性体の使用に関する。
【０１５３】
請求項１に記載の化合物よるＴＩＥ−２、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＦＧＦＲおよび／またはＦＬＴ／ＫＤＲにより影響を受ける疾患を治療するための医薬品を調製するための使用が特に好ましい。
【０１５４】
疾患が固形腫瘍である疾患を治療するための使用が、殊に好ましい。
【０１５５】
固形腫瘍は好ましくは、扁平上皮、膀胱、胃、腎臓、頭部および頚部、食道、子宮頚部、甲状腺、小腸、肝臓、脳、前立腺、尿生殖路、リンパ系、胃、咽頭および／または肺の腫瘍の群から選択される。
【０１５６】
固形腫瘍はさらに好ましくは、肺腺癌、小細胞肺癌腫、膵臓癌、膠芽細胞腫、大腸癌腫および乳癌腫の群から選択される。
【０１５７】
さらに、血液および免疫系の腫瘍を治療するための、好ましくは、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病および／または慢性リンパ性白血病の群から選択される腫瘍を治療するための使用が好ましい。
【０１５８】
さらに本発明は、血管形成が関与している疾患を治療するための式Ｉの化合物の使用に関している。
【０１５９】
疾患は好ましくは、眼疾患である。
【０１６０】
さらに本発明は、網膜血管新生、糖尿病性網膜症、加齢性黄斑変性および／または炎症疾患を治療するための使用に関する。
【０１６１】
炎症疾患は好ましくは、関節リウマチ、乾癬、接触皮膚炎、遅延型過敏反応の群から選択される。
【０１６２】
さらに本発明は、骨異常を治療するための式Ｉの化合物の使用に関し、この際、骨異常は、骨肉腫、変形性関節症およびくる病に由来する。
【０１６３】
式Ｉの化合物は、Ｒａｆキナーゼにより誘発、仲介および／または伝播される疾患を治療するための医薬品を調製するために適しており、この際、Ｒａｆキナーゼは、Ａ−Ｒａｆ、Ｂ−ＲａｆおよびＲａｆ−１からなる群から選択される。
【０１６４】
好ましくは高増殖性および非増殖性疾患の群からの疾患を治療するために使用することが好ましい。
【０１６５】
これらは、癌性疾患または非癌性疾患である。
【０１６６】
非癌性疾患は、乾癬、関節炎、炎症、子宮内膜症、瘢痕、良性前立腺肥大、免疫疾患、自己免疫疾患および免疫不全疾患からなる群から選択される。
【０１６７】
癌性疾患は、脳癌、肺癌、扁平上皮癌、膀胱癌、胃癌、膵臓癌、肝臓癌、腎臓癌、結腸直腸癌、乳癌、頭部癌、頚部癌、食道癌、婦人科癌、甲状腺癌、リンパ腫、慢性白血病および急性白血病からなる群から選択される。
【０１６８】
式Ｉの化合物は、治療される状態に対して特に有用であるように選択されるよく知られた他の治療剤と同時に投与することもできる。例えば、骨疾患の場合、好ましい組合せには、抗吸収性ビスホスホネート、例えばアレンドロネートおよびリセドロネートなど、インテグリン遮断薬（以下にさらに定義する）、例えばαｖβ３アンタゴニストなど、ホルモン置換療法に用いられる結合型エストロゲン、例えばＰｒｅｍｐｒｏ（登録商標）、Ｐｒｅｍａｒｉｎ（登録商標）、およびＥｎｄｏｍｅｔｒｉｏｎ（登録商標）など、選択的エストロゲン受容体調整剤（ＳＥＲＭ）、例えばラロキシフェン、ドロロキシフェン、ＣＰ−３３６，１５６（Ｐｆｉｚｅｒ）およびラソフォキシフェンなど、カテプシンＫ阻害剤ならびにＡＴＰプロトンポンプ阻害剤との組合せが含まれる。
【０１６９】
本発明の化合物はまた、知られている抗癌剤との組合せにも適している。これらの知られている抗癌剤には、以下のものが含まれる。エストロゲン受容体調整剤、アンドロゲン受容体調整剤、レチノイド受容体調整剤、細胞毒性剤、抗増殖剤、プレニルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、逆転写酵素阻害剤および血管新生阻害剤である。本発明の化合物は、放射線療法と同時に投与するのに特に適している。放射線療法と組み合わせたＶＥＧＦ阻害の相乗効果は、当分野において記載されている（国際公開第００／６１１８６号パンフレット参照）。
【０１７０】
「エストロゲン受容体調整剤」とは、機序にかかわらず、エストロゲンの受容体への結合を妨害または阻害する化合物を指す。エストロゲン受容体調整剤の例には、これに限定されるものではないが、タモキシフェン、ラロキシフェン、イドキシフェン、ＬＹ３５３３８１、ＬＹ１１７０８１、トレミフェン、フルベストラント、４−［７−（２，２−ジメチル−１−オキソプロポキシ−４−メチル−２−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−２Ｈ−１−ベンゾピラン−３−イル］−フェニル２，２−ジメチルプロパノエート、４，４’−ジヒドロキシベンゾフェノン−２，４−ジニトロフェニルヒドラゾンおよびＳＨ６４６が含まれる。
【０１７１】
「アンドロゲン受容体調整剤」とは、機序にかかわらず、アンドロゲンの受容体への結合を妨害または阻害する化合物を指す。アンドロゲン受容体調整剤の例には、フィナステリドおよび他の５α−レダクターゼ阻害剤、ニルタミド、フルタミド、ビカルタミド、リアロゾールおよび酢酸アビラテロンが含まれる。
【０１７２】
「レチノイド受容体調整剤」とは、機序にかかわらず、レチノイドの受容体への結合を妨害または阻害する化合物を指す。そのようなレチノイド受容体調整剤の例には、ベキサロテン、トレチノイン、１３−シス−レチノイン酸、９−シス−レチノイン酸、α−ジフルオロメチルオルニチン、ＩＬＸ２３−７５５３、トランス−Ｎ−（４’−ヒドロキシフェニル）レチンアミドおよびＮ−４−カルボキシフェニルレチンアミドが含まれる。
【０１７３】
「細胞毒性剤」とは、主として細胞機能に対する直接作用によって細胞死を引き起こすか、あるいは細胞減数分裂を阻害または妨害する化合物を指し、アルキル化剤、腫瘍壊死因子、インターカレータ、ミクロチューブリン阻害剤およびトポイソメラーゼ阻害剤が含まれる。
【０１７４】
細胞毒性剤の例には、これに限定されるものではないが、チラパジミン（ｔｉｒａｐａｚｉｍｉｎｅ）、セルテネフ、カケクチン、イホスファミド、タソネルミン、ロニダミン、カルボプラチン、アルトレタミン、プレドニムスチン、ジブロモダルシトール、ラニムスチン、フォテムスチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、テモゾロミド、ヘプタプラチン、エストラムスチン、トシル酸インプロスルファン、トロフォスファミド、ニムスチン、塩化ジブロスピジウム（ｄｉｂｒｏｓｐｉｄｉｕｍ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、プミテパ（ｐｕｍｉｔｅｐａ）、ロバプラチン、サトラプラチン、プロフィロマイシン（ｐｒｏｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）、シスプラチン、イロフルベン、デキシフォスファミド（ｄｅｘｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、シス−アミンジクロロ（２−メチルピリジン）白金、ベンジルグアニン、グルフォスファミド、ＧＰＸ１００、（トランス，トランス，トランス）−ビス−μ−（ヘキサン−１，６−ジアミン）μ−［ジアミン−白金（ＩＩ）］ビス［ジアミン（クロロ）白金（ＩＩ）］テトラクロリド、ジアリジジニルスペルミン、三酸化ヒ素、１−（１１−ドデシルアミノ−１０−ヒドロキシウンデシル）−３，７−ジメチルキサンチン、ゾルビシン、イダルビシン、ダウノルビシン、ビスアントレン、ミトキサントロン、ピラルビシン、ピナフィド（ｐｉｎａｆｉｄｅ）、バルルビシン、アムルビシン、アンチネオプラストン、３’−デアミノ−３’−モルホリノ−１３−デオキソ−１０−ヒドロキシカルミノマイシン、アナマイシン、ガラルビシン（ｇａｌａｒｕｂｉｃｉｎ）、エリナフィド、ＭＥＮ１０７５５および４−デメトキシ−３−デアミノ−３−アジリジニル−４−メチルスルホニルダウノルビシンが含まれる（国際公開第００／５００３２号パンフレット参照）。
【０１７５】
ミクロチューブリン阻害剤の例には、パクリタキセル、硫酸ビンデシン、３’，４’−ジデヒドロ−４’−デオキシ−８’−ノルビンカロイコブラスチン、ドセタキソール、リゾキシン、ドラスタチン、イセチオン酸ミボブリン、アウリスタチン（ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ）、セマドチン、ＲＰＲ１０９８８１、ＢＭＳ１８４４７６、ビンフルニン、クリプトフィシン（ｃｒｙｐｔｏｐｈｙｃｉｎ）、２，３，４，５，６−ペンタフルオロ−Ｎ−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）ベンゼンスルホンアミド、アンヒドロビンブラスチン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｌ−バリル−Ｌ−バリル−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｌ−プロリル−Ｌ−プロリン−ｔ−ブチルアミド、ＴＤＸ２５８、およびＢＭＳ１８８７９７が含まれる。
【０１７６】
トポイソメラーゼ阻害剤は例えば、トポテカン、ヒカプタミン（ｈｙｃａｐｔａｍｉｎｅ）、イリノテカン、ルビテカン、６−エトキシプロピオニル−３’，４’−Ｏ−エキソベンジリデンシャールトルーシン、９−メトキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−５−ニトロピラゾロ［３，４，５−ｋｌ］アクリジン−２−（６Ｈ）プロパンアミン、１−アミノ−９−エチル−５−フルオロ−２，３−ジヒドロ−９−ヒドロキシ−４−メチル−１Ｈ，１２Ｈ−ベンゾ［ｄｅ］ピラノ［３’，４’：ｂ，７］インドリジノ［１，２ｂ］キノリン−１０，１３（９Ｈ，１５Ｈ）ジオン、ルルトテカン（ｌｕｒｔｏｔｅｃａｎ）、７−［２−（Ｎ−イソプロピルアミノ）エチル］−（２０Ｓ）カンプトテシン、ＢＮＰ１３５０、ＢＮＰＩ１１００、ＢＮ８０９１５、ＢＮ８０９４２、リン酸エトポシド、テニポシド、ソブゾキサン、２’−ジメチルアミノ−２’−デオキシエトポシド、ＧＬ３３１、Ｎ−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−９−ヒドロキシ−５，６−ジメチル−６Ｈ−ピリド［４，３−ｂ］カルバゾール−１−カルボキサミド、アスラクリン（ａｓｕｌａｃｒｉｎｅ）、（５ａ，５ａＢ，８ａａ，９ｂ）−９−［２−［Ｎ−［２−（ジメチルアミノ）エチル］−Ｎ−メチルアミノ］エチル］−５−［４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル］−５，５ａ，６，８，８ａ，９−ヘキソヒドロフロ（３’，４’：６，７）ナフト（２，３−ｄ）−１，３−ジオキソール−６−オン、２，３−（メチレンジオキシ）−５−メチル−７−ヒドロキシ−８−メトキシベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム、６，９−ビス［（２−アミノエチル）アミノ］ベンゾ［ｇ］イソキノリン−５，１０−ジオン、５−（３−アミノプロピルアミノ）−７，１０−ジヒドロキシ−２−（２−ヒドロキシエチルアミノメチル）−６Ｈ−ピラゾロ［４，５，１−ｄｅ］アクリジン−６−オン、Ｎ−［１−［２（ジエチルアミノ）エチルアミノ］−７−メトキシ−９−オキソ−９Ｈ−チオキサンテン−４−イルメチル］ホルムアミド、Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）アクリジン−４−カルボキサミド、６−［［２−（ジメチルアミノ）エチル］アミノ］−３−ヒドロキシ−７Ｈ−インデノ［２，１−ｃ］キノリン−７−オンおよびジメスナである。
【０１７７】
「抗増殖剤」には、アンチセンスＲＮＡおよびＤＮＡオリゴヌクレオチド、例えばＧ３１３９、ＯＤＮ６９８、ＲＶＡＳＫＲＡＳ、ＧＥＭ２３１、およびＩＮＸ３００１など、ならびに代謝拮抗剤、例えばエノシタビン、カルモフール、テガフール、ペントスタチン、ドキシフルリジン、トリメトレキサート、フルダラビン、カペシタビン、ガロシタビン、シタラビンオクホスフェート、フォステアビン（ｆｏｓｔｅａｂｉｎｅ）ナトリウム水和物、ラルチトレキセド、パルチトレキシド（ｐａｌｔｉｔｒｅｘｉｄ）、エミテフール、チアゾフリン、デシタビン、ノラトレキセド、ペメトレキセド、ネルザラビン、２’−デオキシ−２’−メチリデンシチジン、２’−フルオロメチレン−２’−デオキシシチジン、Ｎ−［５−（２，３−ジヒドロベンゾフリル）スルホニル］−Ｎ’−（３，４−ジクロロフェニル）尿素、Ｎ６−［４−デオキシ−４−［Ｎ２−［２（Ｅ），４（Ｅ）−テトラデカジエノイル］グリシルアミノ］−Ｌ−グリセロ−Ｂ−Ｌ−マンノヘプトピラノシル］アデニン、アプリジン、エクテイナシディン、トロキサシタビン（ｔｒｏｘａｃｉｔａｂｉｎｅ）、４−［２−アミノ−４−オキソ−４，６，７，８−テトラヒドロ−３Ｈ−ピリミジノ［５，４−ｂ］−１，４−チアジン−６−イル−（Ｓ）−エチル］−２，５−チエノイル−Ｌ−グルタミン酸、アミノプテリン、５−フルオロウラシル、アラノシン、１１−アセチル−８−（カルバモイルオキシメチル）−４−ホルミル−６−メトキシ−１４−オキサ−１、１１−ジアザテトラシクロ（７．４．１．０．０）テトラデカ−２，４，６−トリエン−９−イル酢酸エステル、スワインソニン、ロメトレキソール、デクスラゾキサン、メチオニナーゼ、２’−シアノ−２’−デオキシ−Ｎ４−パルミトイル−１−Ｂ−Ｄ−アラビノフラノシルシトシンおよび３−アミノピリジン−２−カルボキシアルデヒドチオセミカルバゾンなどが含まれる。「抗増殖剤」にはさらに、トラスツズマブなど「血管新生阻害剤」の項に挙げたもの以外の増殖因子に対するモノクローナル抗体および組換えウイルス媒介遺伝子転移を介して輸送され得るｐ５３などの腫瘍抑制遺伝子が含まれる（例えば、米国特許第６０６９１３４号明細書参照）。
【０１７８】
さらに本発明は、血管新生の障害を特徴とする疾患を治療するための医薬品を調製するための、式Ｉの化合物の使用に関する。疾患は好ましくは、癌性疾患である。
【０１７９】
血管新生の障害は好ましくは、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２および／またはＶＥＧＦＲ−３活性の障害に由来する。
【０１８０】
したがって、ＶＥＧＦＲ−２活性を阻害するための医薬品を調製するための本発明による化合物の使用が、特に好ましい。
【０１８１】
アッセイ
実施例に記載の式Ｉの化合物を、下記のアッセイによって試験し、それが、キナーゼ阻害活性を有することを見出した。他のアッセイは文献から知られており、当業者であれば容易に実施することができる（例えば、Ｄｈａｎａｂａｌら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５９：１８９〜１９７；Ｘｉｎら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４：９１１６〜９１２１；Ｓｈｅｕら、Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１８：４４３５〜４４４１；Ａｕｓｐｒｕｎｋら、Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．３８：２３７〜２４８；Ｇｉｍｂｒｏｎｅら、Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．５２：４１３〜４２７；Ｎｉｃｏｓｉａら、Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  １８：５３８〜５４９参照）。
【０１８２】
ＶＥＧＦ受容体キナーゼアッセイ
４：１のポリグルタミン酸／チロシン基質（ｐＥＹ）に、放射性標識リン酸を組み込むことによって、ＶＥＧＦ受容体キナーゼ活性を測定する。そのリン酸化ｐＥＹ生成物を濾過膜にトラップし、放射性標識リン酸の組み込みを、シンチレーションカウントによって定量する。
【０１８３】
材料
ＶＥＧＦ受容体キナーゼ
ヒトＫＤＲ（Ｔｅｒｍａｎ、Ｂ．Ｉ．ら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ（１９９１）Ｖｏｌ．６、１６７７〜１６８３頁）、およびＦｌｔ−１（Ｓｈｉｂｕｙａ、Ｍ．ら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ（１９９０）Ｖｏｌ．５、５１９〜５２４頁）の細胞内チロシンキナーゼドメインを、グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）遺伝子融合タンパク質としてクローン化した。これは、ＫＤＲキナーゼの細胞質ドメインを、ＧＳＴ遺伝子のカルボキシ末端においてインフレーム融合としてクローニングすることによって行った。可溶性組換えＧＳＴ−キナーゼドメイン融合タンパク質を、バキュロウイルス発現ベクター（ｐＡｃＧ２Ｔ、Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）を用いて、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ（Ｓｆ２１）昆虫細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に発現させた。
【０１８４】
溶解緩衝液
５０ｍＭのトリスｐＨ７．４、０．５ＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＤＴＴ、１ｍＭのＥＤＴＡ、０．５％のトリトンＸ−１００、１０％のグリセロール、それぞれ１０ｍｇ／ｍｌのロイペプチン、ペプスタチンおよびアプロチニンならびに１ｍＭのフェニルメチルスルホニルフルオリド（いずれもＳｉｇｍａ）。
【０１８５】
洗浄緩衝液
５０ｍＭのトリスｐＨ７．４、０．５ＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＤＴＴ、１ｍＭのＥＤＴＡ、０．０５％のトリトンＸ−１００、１０％のグリセロール、それぞれ１０ｍｇ／ｍｌのロイペプチン、ペプスタチンおよびアプロチニンならびに１ｍＭのフェニルメチルスルホニルフルオリド。
【０１８６】
透析緩衝液
５０ｍＭのトリスｐＨ７．４、０．５ＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＤＴＴ、１ｍＭのＥＤＴＡ、０．０５％のトリトンＸ−１００、５０％のグリセロール、それぞれ１０ｍｇ／ｍｌのロイペプチン、ペプスタチンおよびアプロチニンならびに１ｍＭのフェニルメチルスルホニルフルオリド。
【０１８７】
１０×反応緩衝液
２００ｍＭのトリスｐＨ７．４、１．０ＭのＮａＣｌ、５０ｍＭのＭｎＣｌ2、１０ｍＭのＤＴＴおよび５ｍｇ／ｍｌのウシ血清アルブミン［ＢＳＡ］（Ｓｉｇｍａ）。
【０１８８】
酵素希釈緩衝液
５０ｍＭのトリスｐＨ７．４、０．１ＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＤＴＴ、１０％のグリセロール、１００ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ。
【０１８９】
１０×基質
７５０μｇ／ｍｌのポリ（グルタミン酸／チロシン４：１）（Ｓｉｇｍａ）。
【０１９０】
停止溶液
３０％のトリクロロ酢酸、０．２Ｍのピロリン酸ナトリウム（共にＦｉｓｈｅｒ）。
【０１９１】
洗浄溶液
１５％のトリクロロ酢酸、０．２Ｍのピロリン酸ナトリウム。
【０１９２】
フィルタプレート
Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ＃ＭＡＦＣ  ＮＯＢ、ＧＦ／Ｃガラスファイバ９６ウェルプレート。
【０１９３】
方法Ａ−タンパク質精製
１．Ｓｆ２１細胞を、５ウイルス粒子／細胞の感染多重度で組換えウイルスに感染させ、２７℃で４８時間増殖させた。
【０１９４】
２．すべてのステップを４℃で行う。感染細胞を１０００×ｇの遠心分離によって収穫し、１／１０容量の溶解緩衝液を用いて４℃で３０分間溶解し、その後１０００００×ｇで１時間遠心分離した。次いで、上澄みを、溶解緩衝液で平衡させたグルタチオンＳｅｐｈａｒｏｓｅ  ａｃｉｄ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）に通し、５容量の同じ緩衝液で洗浄、続いて５容量の洗浄緩衝液で洗浄した。組換えＧＳＴ−ＫＤＲタンパク質を、洗浄緩衝液／１０ｍＭ還元グルタチオン（Ｓｉｇｍａ）で溶出し、透析緩衝液に対して透析した。
【０１９５】
方法Ｂ−ＶＥＧＦ受容体キナーゼアッセイ
１．５０％ＤＭＳＯ中のアッセイに阻害剤または対照５μｌを添加する。
【０１９６】
２．１０×反応緩衝液５μｌ、２５ｍＭのＡＴＰ／１０μＣｉ［33Ｐ］ＡＴＰ（Ａｍｅｒｓｈａｍ）５μｌおよび１０×基質５μｌを含有する反応混合物３５μｌを添加する。
【０１９７】
３．酵素希釈緩衝液中のＫＤＲ（２５ｎＭ）１０μｌを添加して、反応を開始する。
【０１９８】
４．混合し、室温で１５分間インキュベートする。
【０１９９】
５．停止溶液５０μｌを添加して、反応を停止する。
【０２００】
６．４℃で１５分間インキュベートする。
【０２０１】
７．アリコート９０μｌをフィルタプレートに移す。
【０２０２】
８．吸引し、洗浄溶液で３回洗浄する。
【０２０３】
９．シンチレーションカクテル３０μｌを添加し、プレートを密封して、Ｗａｌｌａｃ  Ｍｉｃｒｏｂｅｔａシンチレーションカウンタでカウントする。
【０２０４】
ヒト臍静脈内皮細胞有糸分裂誘発アッセイ
増殖因子に対するマイトジェン応答を媒介するＶＥＧＦ受容体の発現は、血管内皮細胞に主として限定される。培養中のヒト臍静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）は、ＶＥＧＦ処理に応答して増殖し、ＶＥＧＦ刺激に対するＫＤＲキナーゼ阻害剤の効果を定量するためのアッセイ系として用いることができる。記載のアッセイでは、静止状態のＨＵＶＥＣ単層を、ビヒクルまたは試験化合物で処理し、２時間後にＶＥＧＦまたは塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）を添加する。ＶＥＧＦまたはｂＦＧＦに対するマイトジェン応答を、細胞ＤＮＡへの［3Ｈ］チミジンの取り込みを測定することによって求める。
【０２０５】
材料
ＨＵＶＥＣ
１次培養単離物として凍結したＨＵＶＥＣを、Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｒｐ．から入手する。細胞を内皮増殖培地（ＥＧＭ、Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ）で得、継代３〜７でマイトジェンアッセイに用いる。
【０２０６】
培養プレート
ＮＵＮＣＬＯＮ９６ウェルポリスチレン組織培養プレート（ＮＵＮＣ＃１６７００８）
アッセイ培地
１ｇ／ｍｌグルコース（低グルコースＤＭＥＭ、Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ）および１０％（ｖ／ｖ）ウシ胎児血清（Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ）を含有するダルベッコ改変イーグル培地。
【０２０７】
試験化合物
試験化合物の作業ストック溶液を、１００％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）で連続希釈して、所望の最終濃度の４００倍濃度とする。１倍濃度の最終希釈液は、細胞への添加の直前にアッセイ培地で作製する。
【０２０８】
１０×増殖因子
ヒトＶＥＧＦ１６５（５００ｎｇ／ｍｌ、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）およびｂＦＧＦ（１０ｎｇ／ｍｌ、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）溶液をアッセイ培地で調製する。
【０２０９】
１０×［3Ｈ］チミジン
［メチル−3Ｈ］チミジン（２０Ｃｉ／ｍｍｏｌ、Ｄｕｐｏｎｔ−ＮＥＮ）を希釈して、低グルコースＤＭＥＭ培地中８０μＣｉ／ｍｌとする。
【０２１０】
細胞洗浄培地
１ｍｇ／ｍｌウシ血清アルブミン（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ−Ｍａｎｎｈｅｉｍ）を含有するハンクス平衡塩溶液（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ）
細胞溶解溶液
１ＮのＮａＯＨ、２％（ｗ／ｖ）Ｎａ2ＣＯ3
方法１
ＥＧＭに維持したＨＵＶＥＣ単層をトリプシン処理によって収穫し、９６ウェルプレートで、ウェル当たり、アッセイ培地１００μｌ当たり細胞４０００個の密度で平板培養する。５％ＣＯ2を含有する加湿雰囲気中３７℃で２４時間、細胞増殖を停止する。
【０２１１】
方法２
増殖停止培地を、ビヒクル（０．２５％［ｖ／ｖ］ＤＭＳＯ）または所望の最終濃度の試験化合物を含有するアッセイ培地１００μｌと交換する。判定はすべて３重で行う。次いで、細胞を３７℃／５％ＣＯ2で２時間インキュベートして、試験化合物を細胞に取り込ませる。
【０２１２】
方法３
２時間の過ヨウ素酸（ｐｅｒｉｏｄｉｎｅ）前処理後、アッセイ培地、１０×ＶＥＧＦ溶液、または１０×ｂＦＧＦ溶液のいずれかをウェル当たり１０μｌ添加することによって、細胞を刺激する。次いで、細胞を３７℃／５％ＣＯ2でインキュベートする。
【０２１３】
方法４
増殖因子の存在下、２４時間後に、１０×［3Ｈ］チミジン（１０μｌ／ウェル）を添加する。
【０２１４】
方法５
［3Ｈ］チミジンを添加して３日後、培地を吸引によって除去し、細胞を細胞洗浄培地で２回洗浄する（４００μｌ／ウェル、次いで２００μｌ／ウェル）。細胞溶解溶液（１００μｌ／ウェル）を添加し、３０分間３７℃に加温することによって、洗浄した接着細胞を溶解する。細胞溶解産物を、水１５０μｌを含有する７ｍｌガラスシンチレーションバイアルに移す。シンチレーションカクテル（５ｍｌ／バイアル）を添加し、細胞関連放射能を液体シンチレーション分光分析法によって求める。
【０２１５】
これらのアッセイによれば、式Ｉの化合物はＶＥＧＦの阻害剤であり、したがって、例えば糖尿病性網膜症のような眼疾患の治療および例えば固形腫瘍のような癌腫の治療などにおいて、血管新生の阻害に適している。本発明の化合物は、培養中のヒト血管内皮細胞のＶＥＧＦ刺激有糸分裂誘発を阻害し、ＩＣ５０値は０．０１〜５．０μＭである。これらの化合物はさらに、関連するチロシンキナーゼに対して選択性を示す（例えば、ＦＧＦＲ１およびＳｒｃファミリー。ＳｒｃキナーゼおよびＶＥＧＦＲキナーゼの関係に関しては、Ｅｌｉｃｅｉｒｉら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｅｌｌ、Ｖｏｌ．４、９１５〜９２４頁、１９９９年１２月参照）。
【０２１６】
ＴＩＥ−２試験は、例えば国際公開第０２／４４１５６号パンフレットに記載の方法と同様に行うことができる。
【０２１７】
このアッセイは、放射性33Ｐ−ＡＴＰの存在下、ＴＩＥ−２キナーゼによる基質ポリ（Ｇｌｕ、Ｔｙｒ）のリン酸化における試験物質の阻害活性を求めるものである。リン酸化された基質は、インキュベーション時に「フラッシュプレート」マイクロタイタープレートの表面に結合する。反応混合物を除去した後、マイクロタイタープレートを数回洗浄し、続いて表面上の放射性を測定する。測定される物質の阻害効果は、障害を受けていない酵素反応と比べて低い放射性をもたらす。
【０２１８】
上記および下記において、すべての温度は℃で示される。以下の実施例において、「通常の後処理」は、必要であれば水を添加し、最終生成物の構成に応じて、必要であればｐＨを２から１０に調整し、混合物を酢酸エチルまたはジクロロメタンで抽出し、相を分離し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させ、生成物をシリカゲルのクロマトグラフィーおよび／または結晶化によって精製することを意味する。シリカゲル上のＲｆ値；溶離液：酢酸エチル／メタノール９：１。
【０２１９】
質量分析（ＭＳ）：ＥＩ（電子衝撃イオン化）Ｍ+
ＦＡＢ（高速原子衝撃）（Ｍ＋Ｈ）+
ＥＳＩ（エレクトロスプレーイオン化）（Ｍ＋Ｈ）+
ＡＰＣＩ−ＭＳ（大気化学イオン化−質量分析）（Ｍ＋Ｈ）+。
【０２２０】
ＨＰＬＣによる保持時間Ｒfの決定：
カラム：Ｃｈｒｏｍｏｌｉｔｈ  ＳｐｅｅｄＲＰＤ、５０×４．６ｍｍ2（Ｍｅｒｃｋ）
勾配：５分、ｔ＝０分、Ａ：Ｂ＝９５：５、ｔ＝４．４分：Ａ：Ｂ＝２５：７５、ｔ＝４．５分からｔ＝５．０分：Ａ：Ｂ＝０：１００
流速：３．００ｍｌ／分
溶離液Ａ：水＋０．１％ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）
溶離液Ｂ：アセトニトリル＋０．０８％ＴＦＡ
波長：２２０ｎｍ。
【実施例】
【０２２１】
実施例１
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルオキシ）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチルフェニル）尿素（「Ａ１」）の調製
【０２２２】
【化５】
2008515935.tif 000007
【０２２３】
１．１  ３，４−ジアミノ−２−クロロピリジン１７．２３ｇおよび１，１’−カルボニルジイミダゾール１９．４６ｇのＴＨＦ溶液を室温で１６時間攪拌する。生成物を分離し、乾燥させると、４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−オール（「１」）１７．６ｇが得られる。
【０２２４】
１．２  「１」１５．３ｇ、１−フルオロ−４−ニトロベンゼン１２．７３ｇおよび炭酸カリウム１２．４７ｇのＤＭＦ溶液を１３０℃で１６時間攪拌する。生成物を分離し、乾燥させると、４−クロロ−２−（４−ニトロフェノキシ）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン（「２」）１５．８ｇが得られる。
【０２２５】
１．３  「２」１５．８ｇを標準的な条件下に、ＤＭＦ３００ｍｌ中、ラネーニッケル４．７ｇの存在下に水素化する。次いで、触媒を分離し、慣用の後処理に掛けると、４−クロロ−２−（４−アミノフェノキシ）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン（「３」）１１．５ｇが得られる。
【０２２６】
１．４  「３」７８．２ｍｇ、イソシアン酸３−トリフルオロメチルフェニル４１．３μｌおよびＮ−エチルジイソプロピルアミン５１．０μｌのＤＭＦ溶液３ｍｌを室温で１６時間攪拌する。この混合物を慣用の後処理に掛けると、「Ａ１」１３．８ｍｇ、Ｒf３．９２が得られる。
【０２２７】
次の化合物：
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルオキシ）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−６−メトキシフェニル）尿素、Ｒf４．０５；
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルオキシ）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−６−フルオロフェニル）尿素、Ｒf３．９７；
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルオキシ）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−４−クロロフェニル）尿素、Ｒf４．０
が同様に得られる。
【０２２８】
実施例２
２．１  ３，４−ジアミノ−２−クロロピリジン１．４４ｇおよび（４−ニトロフェニル）酢酸９．０６ｇのポリリン酸溶液１０ｍｌを８０℃で１６時間攪拌する。次いで、この混合物を氷水に注ぎ、ＮａＯＨを用いて中和し、堆積した結晶を分離し、慣用の後処理に掛ける。有機層から、４−クロロ−２−（４−ニトロフェニルメチル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン（「４」）２．２ｇが得られる。
【０２２９】
２．２  塩化スズ（ＩＩ）１．１３ｇを、「４」１．２ｇのＤＭＦ／エタノール（４：１）溶液２０ｍｌに加え、この混合物を室温で１６時間攪拌する。この混合物を氷水に注ぎ、アルカリ性にし、酢酸エチルで２回、さらにｎ−ブタノールで３回抽出する。溶剤を分離し、残留物をシリカゲルカラムを介して、酢酸エチル、次いで酢酸エチル／メタノール（１：１）の溶離液で精製すると、４−クロロ−２−（４−アミノフェニルメチル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン（「５」）０．３ｇが得られる。
【０２３０】
２．３  「５」２０ｍｇおよびイソシアン酸２−フルオロ−５−トリフルオロメチルフェニル０．１１ｍｌのジクロロメタン溶液を室温で１６時間攪拌する。この混合物を慣用の後処理に掛けると、１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルメチル）フェニル］−３−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチルフェニル）尿素（「Ａ２」）１６０ｍｇ、Ｒf３．７６が得られる。
【０２３１】
２．４  「Ａ２」５０ｍｇのギ酸（９８〜１００％）１ｍｌ溶液を８時間環流させ、次いで、ＲＰ１８カラムで精製すると、１−［４−（４−ヒドロキシ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルメチル）フェニル］−３−（２−フルオロ−５−トリフルオロメチルフェニル）尿素（「Ａ３」）３ｍｇ、Ｒf２．８８が得られる。
【０２３２】
次の化合物：
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルメチル）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチルフェニル）尿素、Ｒf３．４９；
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルメチル）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−４−クロロフェニル）尿素、Ｒf３．９５；
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルメチル）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−６−メトキシフェニル）尿素、Ｒf３．８４；
が同様に得られ、これらは、次の化合物：
１−［４−（４−ヒドロキシ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルメチル）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチルフェニル）尿素、Ｒf３．０７；
１−［４−（４−ヒドロキシ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルメチル）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−４−クロロフェニル）尿素、Ｒf３．４９；
１−［４−（４−ヒドロキシ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルメチル）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−６−メトキシフェニル）尿素、Ｒf３．３６；
をもたらす。
【０２３３】
実施例３
３．１  ３，４−ジアミノ−２−クロロピリジン０．７２ｇ、イソチオシアン酸４−ニトロフェニル０．９ｇおよびＮ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド０．７８ｍｌのＤＭＦ溶液３０ｍｌを室温で１６時間、次いで５０℃で６時間攪拌する。溶剤を分離し、残留物をメタノールから結晶化させると、４−クロロ−２−（４−ニトロフェニルアミノ）−３Ｈ−イミダゾ−［４，５−ｃ］ピリジン（「６」）１．２ｇが得られる。
【０２３４】
３．２  「６」１．２ｇを２．２と同様に、塩化スズ（ＩＩ）を用いて還元すると、４−クロロ−２−（４−アミノフェニルアミノ）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン（「７」）０．９ｇが得られる。
【０２３５】
３．３  イソシアン酸２−フルオロ−５−トリフルオロメチルフェニル０．１４５ｍｌおよび「７」０．２６ｇのジクロロメタン溶液を室温で１６時間攪拌する。溶剤を除去し、残留物をＲＰ−１８を介して精製すると、１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］−ピリジン−２−イルアミノ）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−６−フルオロフェニル）尿素１２０ｍｇ、Ｒf３．４４が得られる。
【０２３６】
次の化合物：
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルアミノ）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチルフェニル）尿素、Ｒf３．４１；
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルアミノ）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−４−クロロフェニル）尿素、Ｒf３．７６；
１−［４−（４−クロロ−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イルアミノ）フェニル］−３−（３−トリフルオロメチル−６−メトキシフェニル）尿素、Ｒf３．６３
が同様に得られる。
【０２３７】
以下の実施例は、医薬品に関する。
【０２３８】
実施例Ａ：注射バイアル
式Ｉの活性成分１００ｇおよびリン酸水素二ナトリウム５ｇの再蒸留水３ｌ溶液を、２Ｎの塩酸を用いてｐＨ６．５に調整し、無菌濾過し、注射バイアルに移し、無菌条件下で凍結乾燥し、無菌条件下で密封する。各注射バイアルは、５ｍｇの活性成分を含有する。
【０２３９】
実施例Ｂ：坐剤
式Ｉの活性成分２０ｇと大豆レシチン１００ｇおよびカカオ脂１４００ｇとの混合物を溶解し、鋳型に注入し、冷ます。各坐剤は、２０ｍｇの活性成分を含有する。
【０２４０】
実施例Ｃ：液剤
式Ｉの活性成分１ｇ、ＮａＨ2ＰＯ4・２Ｈ2Ｏ９．３８ｇ、Ｎａ2ＨＰＯ4・１２Ｈ2Ｏ２８．４８ｇおよび塩化ベンザルコニウム０．１ｇから再蒸留水９４０ｍｌ中の溶液を調製する。ｐＨを６．８に調整し、溶液を１ｌとし、照射により滅菌する。この液剤は、点眼液の形態で用いることができる。
【０２４１】
実施例Ｄ：軟膏剤
式Ｉの活性成分５００ｍｇを、無菌条件下、ワセリン９９．５ｇと混合する。
【０２４２】
実施例Ｅ：錠剤
式Ｉの活性成分１ｋｇ、ラクトース４ｋｇ、ジャガイモデンプン１．２ｋｇ、タルク０．２ｋｇおよびステアリン酸マグネシウム０．１ｋｇの混合物を圧縮し、各錠剤が１０ｍｇの活性成分を含むように、通常の方法で錠剤を得る。
【０２４３】
実施例Ｆ：被覆錠剤
錠剤を実施例Ｅと同様に圧縮し、続いて、スクロース、ジャガイモデンプン、タルク、トラガカント、および色素の被覆物を用いて通常の方法で被覆する。
【０２４４】
実施例Ｇ：カプセル剤
式Ｉの活性成分２ｋｇを、各カプセル剤が２０ｍｇの活性成分を含有するように、通常の方法で硬質ゼラチンカプセルに導入する。
【０２４５】
実施例Ｈ：アンプル
式Ｉの活性成分１ｋｇの再蒸留水６０ｌ溶液を無菌濾過し、アンプルに移し、無菌条件下で凍結乾燥し、無菌条件下で密封する。各アンプルは、１０ｍｇの活性成分を含有する。
【国際調査報告】
2008515935.tif 000011
2008515935.tif 000012
2008515935.tif 000013
2008515935.tif 000014
2008515935.tif 000015
2008515935.tif 000016