(57)【要約】本発明は、ａ）少なくとも１種の、ジアシルグリセロール等の中性ジアシル脂質と、ｂ）少なくとも１種の、ホスファチジルコリン等のリン脂質と、ｃ）少なくとも１種の、酸素含有溶媒等の生物学的に許容できる溶媒と、ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体との低粘度混合物を形成する組成物であって、前記前製剤が、水性流体と接触すると、少なくとも１種の液晶相構造を形成するか、または形成することができる組成物に関する。本発明は更に、そのような組成物を、とりわけ、糖尿病治療において投与することを含む治療方法、ならびに前記製剤を含む充填済み投与デバイスおよびキットに関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）少なくとも１種の中性ジアシル脂質および／またはトコフェロールと、
ｂ）少なくとも１種のリン脂質と、
ｃ）少なくとも１種の生体適合性の有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と、
の低粘度混合物を含む前製剤であって、
水性流体と接触すると、少なくとも１種の液晶相構造を形成するか、または形成することができる前製剤。
【請求項２】
ａ）少なくとも１種のジアシルグリセロールと、
ｂ）少なくとも１種のホスファチジルコリンと、
ｃ）少なくとも１種の酸素含有有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と、
の低粘度混合物を含む請求項１に記載の前製剤であって、
水性流体と接触すると、少なくとも１種の液晶相構造を形成するか、または形成することができる前製剤。
【請求項３】
成分ａ）がＧＤＯを含む請求項１または２に記載の前製剤。
【請求項４】
成分ｂ）が大豆ＰＣを含む請求項１から３の何れかに記載の前製剤。
【請求項５】
成分ｃ）がエタノールを含む請求項１から４の何れかに記載の前製剤。
【請求項６】
当該前製剤が、未変性ＧＬＰ−１、リラグルチド（Ｌｉｒａｇｌｕｔｉｄｅ）、ＴＨ−０３８、エクセナチド（Ｅｘｅｎａｔｉｄｅ）および／またはＡＶＥ−０１０から選択される少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体を含む請求項１から５の何れかに記載の前製剤。
【請求項７】
当該前製剤が、付加的に、少なくとも１種のポリエチレンオキシド断片化剤を含む請求項１から６の何れかに記載の前製剤。
【請求項８】
ＧＬＰ−１類似体を用いて、治療を必要とするヒトまたは非ヒト哺乳類である対象に治療を行うための方法であって、当該方法は、当該対象に
ａ）少なくとも１種の中性ジアシル脂質および／またはトコフェロールと、
ｂ）少なくとも１種のリン脂質と、
ｃ）少なくとも１種の生体適合性の有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と、
の低粘度混合物を含む前製剤を投与することを含む方法。
【請求項９】
前記治療方法が、タイプＩ糖尿病、タイプＩＩ糖尿病、過剰体重および肥満から選択される少なくとも１つの症状を治療するための方法である請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
請求項１から７の何れかに記載の少なくとも１種の製剤を投与することを含む請求項８または９の何れかに記載の方法。
【請求項１１】
筋肉内注射、皮下注射、または好ましくは深部皮下注射によって投与することを含む請求項８から１０の何れかに記載の方法。
【請求項１２】
充填済み投与デバイスを用いて投与することを含む請求項８から１１の何れかに記載の方法。
【請求項１３】
２０ゲージ未満の針を通して投与することを含む請求項８から１２の何れかに記載の方法。
【請求項１４】
７から１８０日ごと、好ましくは３０日前後ごとに1回投与することを含む請求項８から１３の何れかに記載の方法。
【請求項１５】
投与用量が送達時点において選択される請求項８から１４の何れかに記載の方法。
【請求項１６】
前記選択された用量が、前記対象の体重を基準として選択される請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記投与用量が、注射容量によって選択される請求項１５または１６に記載の方法。
【請求項１８】
ａ）少なくとも１種の中性ジアシル脂質および／またはトコフェロールと、
ｂ）少なくとも１種のリン脂質と、
ｃ）少なくとも１種の生体適合性の有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と、
のタイプＩ糖尿病、タイプＩＩ糖尿病、過剰体重および肥満から選択される少なくとも１つの症状を治療するためのデポーのインビボでの形成において使用される低粘度前製剤医薬品の製造における使用。
【請求項１９】
請求項１から７の何れかに記載の少なくとも1種の製剤の使用を含む請求項１８に記載の使用。
【請求項２０】
請求項９から１７の何れかに定義した方法における、請求項１８または１９の何れかに記載の使用。
【請求項２１】
ａ）少なくとも１種の中性ジアシル脂質および／またはトコフェロールと、
ｂ）少なくとも１種のリン脂質と、
ｃ）少なくとも１種の生体適合性の有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と、
の低粘度混合物を含む測定用量の前製剤が予め装填された使い捨て投与デバイス。
【請求項２２】
請求項1〜７に記載の製剤を含む請求項２１に記載のデバイス。
【請求項２３】
１回分の用量である０．０５から２５０ｍｇのＧＬＰ−１類似体を含む請求項２１または２２に記載のデバイス。
【請求項２４】
請求項１から７の何れかに定義されている成分ａ）からｃ）の低粘度混合物を含む請求項２１に記載のデバイス。
【請求項２５】
総投与容量が５ｍｌ以下である請求項２１から２４の何れかに記載のデバイス。
【請求項２６】
少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体の投与のためのキットであって、
ａ）少なくとも１種のジアシルグリセロールと、
ｂ）少なくとも１種のホスファチジルコリンと、
ｃ）少なくとも１種の酸素含有有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と、
の低粘度混合物を含む測定用量の製剤を含むキット。
【請求項２７】
請求項１９から２５の何れかに記載の投与デバイスを含む請求項２６に記載のキット。
【請求項２８】
２０ゲージ未満の針を含む請求項２６または２７の何れかに記載のキット。
【請求項２９】
１回分の用量である０．０５から２５０ｍｇのＧＬＰ−１類似体を含む請求項２６から２８の何れかに記載のキット。
【請求項３０】
未変性ＧＬＰ−１、リラグルチド、ＴＨ−０３１８、エクセナチドおよび／またはＡＶＥ−０１０を、０．０５から２５０ｍｇ前後含む請求項２６から２９の何れかに記載のキット。
【請求項３１】
筋肉内注射、皮下注射、または好ましくは深部皮下注射によって投与するための説明書を含む請求項２６から３０の何れかに記載のキット。
【請求項３２】
請求項６から１５の何れかに記載の治療方法において使用する投与に関する説明書を含む請求項２６から３１の何れかに記載のキット。
【請求項３３】
本明細書中に記載の成分ａ）からｃ）の低粘度混合物を含む第１容器と、
少なくとも1種のＧＬＰ−１類似体を含む第２容器と、
を含む２成分キットである、請求項１から７の何れかに記載の組成物の形成のためのキット。
【請求項３４】
請求項１から７の何れかに記載の組成物を投与することを含む美容上の治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ−１）および／またはその類似体等の活性物質を制御放出するためのｉｎ  ｓｉｔｕ生成組成物のための製剤前駆体（前製剤（ｐｒｅ−ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ））、およびそのような製剤を用いた治療法に関する。特に、本発明は、腸管外的に適用される両親媒性成分および少なくとも１種のＧＬＰ−１または類似体活性物質の前製剤であって、体液等の水性流体に曝露されると相転移を起こし、これにより制御放出マトリクスを形成する前製剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
調合薬、栄養素、ビタミン等を含む多くの生物活性物質が、「機能発現枠（ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｗｉｎｄｏｗ）」を有している。すなわち、これらの作用物質が何らかの生物学的効果をもたらすことが観察できる濃度範囲が存在する。適切な身体部分における（例えば、局所的な、または血清濃度によって表される）濃度がある一定のレベルを下回ると、その作用物質からは何ら有益な効果が得られなくなる。同様に、上限濃度レベルが通常存在し、そのレベルよりも濃度を高くしたとしても更なるメリットは得られない。場合によっては、特定レベルを超えて濃度を高めると、望ましくない影響、または危険な影響すら及ぼすことがある。
【０００３】
生物活性物質の中には、生物学的半減期が長く、および／または機能発現枠が広いため、随時投与されて、機能的な生物学的濃度をかなりの期間（例えば、６時間から数日間）にわたって維持し得るものがある。また、その他の場合においては、クリアランス速度が速く、および／または機能発現枠が狭いため、生物学的濃度をこの枠の範囲内に維持するためには、少量ずつの定期的（または、更には継続的）な投薬が要求される。これは、非経口経路での投与（例えば、腸管外投与）が望ましい、または必要な場合には、特に困難となり得る。なぜなら、自己投与が困難で、これにより、不都合および／または不十分な服薬遵守が生じる場合があるためである。このような場合には、単回投与で、活性が必要とされる全期間にわたって治療レベルとなるように活性物質を提供することが有利であろう。
【０００４】
グルカゴン様ペプチド（ＧＬＰ）−１は、栄養素の摂取、ならびに神経および内分泌物の刺激に応答して、腸Ｌ細胞から放出され循環する効力の強いブドウ糖制御（ｇｌｕｃｏｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ）ホルモンである。構造的には、ＧＬＰ−１は、異なる種の間で高度に保存された配列を有する、４．２ＫＤａのＭＷを有する３７アミノ酸ペプチドである。ＧＬＰ−１は、グルコース刺激インスリンの分泌および生合成の増強、グルカゴン分泌の抑制、胃の内容物排出、ならびに食物摂取を含む作用を通したグルコース恒常性の改変に関与する。インスリン分泌を刺激し、グルカゴン放出を阻害するＧＬＰ−１の能力は、グルコースに依存するため、ＧＬＰ−１投与による低血糖のリスクは低い。ＧＬＰ−１はまた、ベータ細胞増殖および再生の刺激、ならびにベータ細胞アポトーシスの阻害を含むメカニズムを通した糖尿病の前臨床モデルにおけるベータ細胞質量を増加させる。動物およびヒトの両方における研究により、ＧＬＰ−１が心臓血管系における保護的な役割も果たし得ることが分かる。
【０００５】
ＧＬＰ−１の組み合わせ作用により、タイプ２糖尿病を治療するための治療薬としてこのペプチドを用いることにかなりの関心がもたらされた。しかし、未変性（ｎａｔｉｖｅ）のＧＬＰ−１の治療能力は、その非常に短い血漿中半減期（２分未満）によって制限される。これは、タンパク質分解酵素ジペプチジルペプチダーゼ（ＤＰＰ）−ＩＶの迅速な不活性化および腎クリアランスの両方によるものである。この結果、エクセナチド（バイエッタ（Ｂｙｅｔｔａ）、アミリン−リリー（Ａｍｙｌｉｎ−Ｌｉｌｌｙ））、リラグルチド（ｌｉｒａｇｌｕｔｉｄｅ）（ノボ  ノルディスク（Ｎｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ））、ＣＪＣ−１１３１（コンジュケム（ＣｏｎｊｕＣｈｅｍ））、ＡＶＥ０１０（ジーランド  ファーマ−サノフィ−アベンティス（Ｚｅａｌａｎｄ  Ｐｈａｒｍａ−Ｓａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓ））、ＬＹ５４８８０６（リリー（Ｌｉｌｌｙ））、およびＴＨ−０３１８（セラテクノロジー（ＴｈｅｒａＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ））を含む、長時間作用性のＤＰＰ−ＩＶ耐性ＧＬＰ−１類似体が、臨床使用のために開発された。これらは全て、１日１回または２回投与される製品であり、放出が制御された（１週間）エクセナチド製品（エクセナチド（Ｅｘｅｎａｔｉｄｅ）  ＬＡＲ  アルケルムス−アミリン−リリー（Ａｌｋｅｒｍｅｓ−Ａｍｙｌｉｎ−Ｌｉｌｌｙ））は、現在臨床検査中である。これらのＧＬＰ−１擬似物は、同様の親和性を有するＧＬＰ−１受容体に結合し、未変性のＧＬＰ−１と同一の生物作用を生じるが、ＤＰＰ−ＩＶ媒介不活性化および腎クリアランスに耐性を有する。これらの化合物は、インビボで、より長期間、より持続的なＧＬＰ−１様活性を発揮することが可能である。未変性のＧＬＰ−１の作用を延ばすための代替的な治療アプローチとしては、ＤＰＰ−ＩＶ活性を阻害することによって、ＧＬＰ−１劣化を防止することが挙げられる。ＤＰＰ−ＩＶ活性を阻害する数種の経口活性物質も、タイプ２糖尿病の治療について評価されている。
【０００６】
ＧＬＰ−１および幾つかの公知の類似体の構造および配列を、２つの効力の等しい天然に産出する形態から始めて下記に示す。簡単明瞭な方式を用いてＧＬＰ−１の断片および類似体を示している。例えば、Ａｒｇ34−ＧＬＰ−１（７−３７）は、正式には、アミノ酸残基Ｎｏ．１からＮｏ．６を削除し、位置３４（Ｌｙｓ）にある天然に産出するアミノ酸残基をＡｒｇで置換することによってＧＬＰ−１から得られるＧＬＰ−１の類似体を示している。
【０００７】
未変性（ヒト）ＧＬＰ−１（７−３７）：
Ｈｉｓ7−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ10−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ15−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ20−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ25−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ30−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ37
未変性（ヒト）：
ＧＬＰ−１（７−３６）アミド
ノボノルディスク（ＮｏｖｏＮｏｒｄｉｓｋ）（リラグルチド）
Ａｒｇ34Ｌｙｓ26−（Ｎ−ε−γ−Ｇｌｕ（Ｎ−α−ヘキサデカノイル）））−ＧＬＰ−１（７−３７）
コンジュケム（Ｃｏｎｊｕｃｈｅｍ）（ＣＪＣ−１１３１）
Ｄ−Ａｌａ8Ｌｙｓ37−（２−（２−（２−マレイミドプロピオンアミド（エトキシ）エトキシ）アセトアミド））−ＧＬＰ−１（７−３７）
サノフィ−アベンティス／ジーランド（Ｓａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓ／Ｚｅａｌａｎｄ）（ＡＶＥ−０１０（ＺＰ１０）
Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ
イーライ  リリー（Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ）（エクセナチド）
Ｈｉｓ7−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ10−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ15−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ20−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ25−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ30−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ37−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ
本明細書中で使用される「未変性ＧＬＰ−１」とは、ヒトＧＬＰ−１（７−３７）および／またはヒトＧＬＰ−１（７−３６）アミドを示し、「リラグルチド」、「ＣＪＣ−１１３１」、「ＡＶＥ−０１０」、および「エクセナチド」という用語は上記のそれぞれの活性体を示すのに使用されており、これら活性体は、文脈から読み取れる場合、それらの生理学的に許容できる塩、エステルおよび誘導体を含む。
【０００８】
投与に関し、タイプ２糖尿病が進行中であるというような症状、およびあらゆる治療体制は、典型的には、何ヶ月または何年という長期の継続的な治療を必要とするであろう。現在利用可能なＧＬＰ−１治療は、典型的には、治療期間中、１日２回程度の投与を必要とする注射可能医薬品である。これは、一般に、患者の自己投与によって行われるであろう。長期にわたる頻繁な注射は、最適な投与戦略ではないため、ＧＬＰ―１の使用者が、ずっと少ない頻度で投与され得る、長時間作用性の持続性製剤からメリットを得る余地があることは明らかである。
【０００９】
開発中であることが知られている唯一の長時間作用性のＧＬＰ−１製品は、アルケルムス、アミリンおよびリリーによって共同開発されているエクセナチド  ＬＡＲである。これには、生物分解性ポリマーの微小球からなるアルケルムス・メディソルブ（Ａｌｋｅｒｍｅｓ  Ｍｅｄｉｓｏｒｂ）（登録商標）送達系が用いられる。放出系は、ＧＬＰ−１類似体エクセナチドを捕捉する、水に懸濁したポリ（ＤＬ−ラクチド）（ＰＤＬＬ）ポリマー微小球製剤を含む。
【００１０】
ポリマー微小球製剤は、一般に、典型的には２０ゲージまたはそれ以上である相当な太さの針を用いて投与しなければならない。このことが必要とされる原因は、典型的にはポリマー懸濁液である、用いられるポリマー投薬系の性質にある。細い針を通して容易に投与することができ、それによって処置中の患者の不快感を軽減する、均質な溶液、微粒子の分散液、またはＬ2相といった低粘度の系を提供することが有利であろうことは明白である。タイプ２糖尿病の場合、ほとんどの患者が現在、自己投与体制をとるであろうことから、このように投与が容易であることは特に重要である。２、３日という持続期間を有するが、医療従事者による処置を必要とするほど投与が充分に複雑である持続性製剤を提供することは、１日2回自己投与を行うことに関して全ての患者に有利となるものではないであろうし、より費用がかかると見込まれる。投与のために保健専門家を訪れることを妥当とするほど充分に長い持続期間をもたらす製剤および／または自己投与可能な薬剤を提供し、実際の投与前の、医療従事者または患者の調製時間を削減することは全て重要な問題である。
【００１１】
典型的には徐放製剤の分解に使用され、唯一知られたＧＬＰ−１持続放出製品に用いられているポリ乳酸、ポリグリコール酸、およびポリ乳酸―グリコール酸共重合体は、少なくとも一部の患者において何らかの過敏反応の原因ともなる。詳細には、これらのポリマーは、典型的には、酢酸不純物をある一定の割合で含有しており、この不純物が投与時に注射部位を刺激する。その後ポリマーが分解される時、乳酸およびグリコール酸が分解物となり、更なる過敏反応が引き起こされる。太い針による投与と刺激性の内容物との複合効果により、投与部位における不快感および結合性瘢痕組織の形成が所望のレベルを超えてしまう。
【００１２】
薬物送達の観点から、ポリマーデポー組成物には、一般に、比較的低い薬物負荷だけを許容し、かつ「突発（ｂｕｒｓｔ）／遅延」放出プロファイルを有するという欠点がある。ポリマーマトリクスの性質は、とりわけ、溶液またはプレポリマーとして適用される場合、組成物が最初に投与される際に薬物を初期に突発放出させる。この後、低放出期間が続くとともに、マトリクスの分解が始まり、その後、最終的に放出速度が所望の持続プロファイルにまで増加する。この突発／遅延放出プロファイルにより、活性物質のインビボ濃度が投与直後に機能発現枠を超えて突発し、次いで、ある期間、持続機能濃度に達する前の遅延期間において機能発現枠の下限を経て再び低下し得る。機能的および毒物学的観点から、この突発／遅延放出プロファイルは好ましくなく、危険であり得ることは明かである。また、それは、「ピーク」点における有害効果の危険のために、与えられ得る平衡濃度を制限することもある。デポーから得られる活性体の濃度は副次機能的なものであるが、遅延相の存在により、治療用量を維持するために、デポー治療の始動期間中に反復注射による補足的投薬が更に必要になることがある。
【００１３】
ＧＬＰ−１類似体の場合、投与直後の「突発」期間が、対象に低血糖を引き起こすほど顕著でないことが重要であることは明らかである。ＧＬＰ−１は、この点においてインスリンよりもずっと安全であるが、幾つかのＧＬＰ−１類似体に関する臨床試験は、非持続放出製剤について低血糖効果を示しており、製剤が数週間持続するよう設計されている場合、注射される用量は、それに応じて高くなるであろう。従って、ＧＬＰ−１類似体組成物を投与するとすぐに見られる「突発」効果を最小限にすることは、大いに有利であろう。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
更に、既存のある特定のデポー系では、ＰＬＧＡマイクロビーズおよび懸濁液の製造は、大きな困難を伴う。詳細には、ビーズが微粒子状であり、ポリマーが膜を詰まらせることから、これらは、一般に濾過滅菌できず、更に、ＰＬＧＡ共重合体が４０℃前後で溶融するため、これらを滅菌のため熱処理することは不可能である。その結果、複雑な製造工程を全て無菌性の高い条件下で行わなければならない。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
生物分解性ポリマー微小球の更なる問題点として、送達系および／または活性体の凝集および分解の両方を原因として、注射前の再構成が複雑であること、および保存安定性が限られていることが挙げられる。
【００１６】
本発明者らは、ある特定の両親媒性成分と、少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と、分子性溶液のような低粘度相の生物学的に許容できる溶媒とを含む前製剤を提供することによって、公知のデポー製剤の欠陥の多くに対処し、ＧＬＰ−１類似体デポーを提供するのに適用され得る前製剤が生成され得ることを、今回証明した。詳細には、前記前製剤は、製造し易く、濾過滅菌されてもよく、低粘度であり（典型的には、細い針を通して、簡単でより痛みの少ない投与を行うことができ）、高レベルの生物活性物質を取り込むことができ（それにより、潜在的には、使用する組成物の量をより少なくすることができ）、より浅い注射でよく、および／または制御可能な「突発」または「非突発」放出プロファイルを有する所望の非ラメラデポー組成物をインビボで形成する。これら組成物は、また、非毒性で、生物学的に許容可能かつ生物分解性であり、筋肉内注射または皮下注射により投与可能で、自己投与に適した材料から形成される。
【００１７】
従って、第１の態様において、本発明は、
ａ）少なくとも１種の中性ジアシル脂質および／またはトコフェロールと、
ｂ）少なくとも１種のリン脂質と、
ｃ）少なくとも１種の生体適合性の（好ましくは、酸素含有の）有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と
の低粘度混合物を含む前製剤であって、
水性流体と接触すると、少なくとも１種の液晶相構造を形成するか、または形成することができる前製剤を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
好ましい一実施形態において、この前製剤は、
ａ）少なくとも１種のジアシルグリセロールと、
ｂ）少なくとも１種のホスファチジルコリンと、
ｃ）少なくとも１種の酸素含有有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と、
の低粘度混合物を含むであろう前製剤であって、
水性流体と接触すると、少なくとも１種の液晶相構造を形成するか、または形成することができる。
【００１９】
一般に、前記水性流体は、特に、血管外液、細胞外液／間質液または血漿である体液であり、前記前製剤は、そのような流体に（例えば、インビボで）接触した場合、液晶相構造を形成するであろう。本発明の前製剤は、一般に、投与前には著しい量の水分を含まないであろう。
【００２０】
本発明の第２の態様において、ＧＬＰ−１類似体のヒトまたは非ヒト動物（好ましくは、哺乳類）体へに送達方法も提供され、この方法は、
ａ）少なくとも１種の中性ジアシル脂質および／またはトコフェロールと、
ｂ）少なくとも１種のリン脂質と、
ｃ）少なくとも１種の生体適合性の（好ましくは、酸素含有の）有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と、
の低粘度混合物を含む前製剤を、腸管外的に（例えば、筋肉内注射または、好ましくは、皮下注射で）投与することを含み、
この方法によって、投与後に、水性流体にインビボで接触すると少なくとも１種の液晶相構造が形成される。好ましくは、そのような方法で投与される前記前製剤は、本明細書中に記載の本発明の前製剤である。
【００２１】
更なる態様において、本発明は、
ａ）少なくとも１種の中性ジアシル脂質および／またはトコフェロールと、
ｂ）少なくとも１種のリン脂質と、
ｃ）少なくとも１種の生体適合性の（好ましくは、酸素含有の）有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と、
の低粘度混合物を含む前製剤を、水性流体にインビボで曝露することを含む液晶デポー組成物を調製するための方法も提供する。
【００２２】
好ましくは、投与された前記前製剤は、本明細書中に記載の本発明の前製剤である。
【００２３】
本発明のより更なる態様において、生物活性物質を（好ましくは、哺乳類である）対象に投与するのに適した前製剤を形成するためのプロセスであって、当該プロセスが、
ａ）少なくとも１種の中性ジアシル脂質および／またはトコフェロールと、
ｂ）少なくとも１種のリン脂質と、
ｃ）少なくとも１種の生体適合性の（好ましくは、酸素含有の）有機溶媒と、
の低粘度混合物を形成することと、
少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体を、前記低粘度混合物、または前記低粘度混合物を形成する前に成分ａ、ｂまたはｃのうちの少なくとも１つに溶解または分散させることとを含むプロセスを提供する。好ましくは、そのように形成された前記前製剤は、本明細書中に記載の本発明の製剤である。
【００２４】
更により更なる態様において、本発明は、
ａ）少なくとも１種の中性ジアシル脂質および／またはトコフェロールと、
ｂ）少なくとも１種のリン脂質と、
ｃ）少なくとも１種の生体適合性の（好ましくは、酸素含有の）有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と、
の低粘度混合物の、当該ＧＬＰ−１類似体の持続的な投与に使用される前製剤の製造における使用であって、当該前製剤が、水性流体と接触すると、少なくとも１種の液晶相構造を形成することができる低粘度混合物の使用を提供する。
【００２５】
本発明は、本明細書中に記載のＧＬＰ−１類似体組成物の、糖尿病、とりわけ、タイプＩＩ糖尿病の治療、または過剰体重および／もしくは肥満の医療上もしくは美容上の治療のための医薬品の製造における使用も提供する。医療上の治療の場合、前記組成物は、典型的には、それを医療上必要とする（例えば、糖尿病、過剰体重または肥満である）対象に投与される。美容上の治療の場合、対象は、それを医療上識別可能に必要としないかもしれないが、例えば、やや体重超過あるいは標準より高い範囲、または標準範囲の肥満度指数を有し、減量によって得られるメリットが、医療上ではなく、主にまたはもっぱら美容上のものである場合がある。
【００２６】
より更なる態様において、本発明は、ＧＬＰ−１類似体を用いて、治療を必要とするヒトまたは非ヒト哺乳類である対象に治療を行うための方法であって、当該方法は、当該対象に
ａ）少なくとも１種の中性ジアシル脂質および／またはトコフェロールと、
ｂ）少なくとも１種のリン脂質と、
ｃ）少なくとも１種の生体適合性の（好ましくは、酸素含有の）有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と、
の低粘度混合物を含む前製剤を投与することを含む方法を提供する。
【００２７】
好ましくは、前記治療方法は、糖尿病、タイプＩ糖尿病、タイプＩＩ糖尿病、過剰体重および肥満から選択される少なくとも１つの症状を治療するための方法である。
【００２８】
本発明は、本明細書中に記載のＧＬＰ−１類似体組成物の、とりわけ治療を必要とする対象における投与を含む治療方法を更に提供する。前記治療方法は、特に、糖尿病、とりわけタイプＩＩ糖尿病の治療に関するものである。
【００２９】
より更なる態様において、本発明は、
ａ）少なくとも１種の中性ジアシル脂質および／またはトコフェロールと、
ｂ）少なくとも１種のリン脂質と、
ｃ）少なくとも１種の生体適合性の（好ましくは、酸素含有の）有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と、
のタイプＩ糖尿病、タイプＩＩ糖尿病、過剰体重および／または肥満を治療するためのデポーのインビボでの形成において使用される低粘度前製剤医薬品の製造における使用を提供する。
【００３０】
本発明の全ての態様において、成分ａ）〜ｃ）は、好ましくは、
ａ）少なくとも１種のジアシルグリセロールおよび／または少なくとも１種のトコフェロール、
ｂ）少なくとも１種のホスファチジルコリン、
ｃ）少なくとも１種の酸素含有有機溶媒、
である。
【００３１】
本発明の前製剤は、その最終的な「投与準備完了」形態において、長期保存に対して安定しているという点で極めて有利である。その結果、これらの前製剤は、医療従事者か、または十分に訓練された医療従事者である必要はなく、複雑な薬剤を作るだけの経験またはスキルを有していなくてもよい患者あるいはその介護人の何れかによる投与用に容易に供給され得る。このことは、糖尿病のような、持続期間が長く、効果が遅い疾病に関して特に重要である。
【００３２】
より更なる態様において、本発明は、測定用量の本発明の前製剤を予め装填した（デバイス部品も含むべきである）使い捨て投与デバイスを提供する。このようなデバイスは、典型的には、投与のための準備が完了している１回分の用量を含有し、一般に、この組成物が投与時までデバイス内に保存されるように無菌包装されるであろう。好適なデバイスとしては、カートリッジ、アンプル、および、特に、一体型の針または好適な使い捨て針を収容するように適合させた標準的な（例えば、ルアー）取り付け具の何れかを備えた注射器および注射筒が挙げられる。
【００３３】
本発明の充填済みデバイスは、投与キットに適切に組み込まれていてもよく、このキットもまた、本発明の更なる態様をなす。よって、より更なる態様において、本発明は、少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体を投与するためのキットであって、測定用量の本発明の製剤と、任意的に、投与デバイスまたはその部品とを含むキットを提供する。前記用量は、筋肉内投与または好ましくは皮下投与に適するであろうデバイスまたは部品内に保持されることが好ましい。これらキットは、針、スワブ等のような付加的な投与用部品を備えていてもよく、任意的に、かつ好ましくは、投与に関する説明書を備える。このような説明書は、典型的には、本明細書中に記載の経路での、および／または本明細書中で先に示した疾患の治療のための投与に関するものであろう。
【００３４】
本発明は、本明細書中に示す充填済み投与デバイスおよび、本明細書中に記載のＧＬＰ−１類似体組成物を含む、本明細書中に示すキットを提供する。
【００３５】
本発明の代替的な態様において、前記「キット」は、第１容器が本明細書中に記載の成分ａ）からｃ）の低粘度混合物を含み、第２容器が測定用量の本明細書中に記載の少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体を含む、少なくとも２つの容器を備えてもよい。このような「２成分キット」は、ＧＬＰ−１粉末を１つのバイアルまたは充填済み注射器に、そして成分ａ）からｃ）の脂質製剤を２つ目のバイアルまたは充填済み注射器に含んでもよい。２つの注射器を備える場合、注射前に、これら充填済み注射器を結合し、注射筒を前後に動かすことによって、ＧＬＰ−１粉末を脂質製剤と混合して、注射されるＧＬＰ−１懸濁液を形成する。代替的に、液体脂質製剤（ａ）からｃ））は、１つのバイアルから取り出すか、注射器に予め充填して、ＧＬＰ−１粉末を含むバイアル内に注入する。この製剤を、その後、手で振ることによって、または他の好適な再構成法（例えば、ボルテックス（渦）混合等）によって混合してもよい。
【００３６】
従って、この態様において、本発明は、
ｉ）本明細書中に記載の成分ａ）からｃ）の低粘度混合物を含む第１容器と、
ｉｉ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体を含む第２容器と、
ｉｉｉ）任意的に、かつ好ましくは、
１）（当該第１および第２容器の１つまたは両方であってもよい）少なくとも１つの注射器と、
２）本明細書中に記載のもののような投与用針と、
３）前記第１および第２容器の内容物から本発明の組成物を生成することに関する説明書と、
４）本明細書中に記載のデポーを形成するための、投与に関する説明書
のうちの少なくとも１つとを
含む２成分キットを提供する。
【００３７】
本発明の製剤は、投与後に非ラメラ液晶相を作り出す。生物活性物質の送達における（液晶相のような）非ラメラ相構造の使用が、現在では比較的よく確立されている。そのような構造は、両親媒性物質が、集まって極性および無極性領域を形成する極性および無極性基の両方を有することから、両親媒性化合物が溶媒に曝露される時に形成される。これらの領域は、極性および無極性化合物の両方を効果的に可溶化することができる。更に、極性および／または無極性溶媒において両親媒性物質によって形成される構造の多くは、その他の両親媒性化合物が吸収され、安定化され得る非常に広大な極性／無極性境界領域を有する。両親媒性物質は、酵素を含む侵攻性の生物学的環境から、活性物質を少なくともある程度保護し、それによって、活性物質の安定性および放出に対して有利な制御をもたらすように調合することもできる。
【００３８】
両親媒性物質／水、両親媒性物質／油、および両親媒性物質／油／水の相図における非ラメラ領域の形成はよく知られた現象である。このような相としては、分子レベルでは流体であるが顕著な長距離秩序を示すキュービックＰ相、キュービックＤ相、キュービックＧ相およびヘキサゴナル相のような液晶相、ならびに非ラメラであるが液晶相の長距離秩序が無い二分子層シートの多重相互結合両連続ネットワークを含むＬ３相が挙げられる。これらの相は、前記両親媒性シートの曲率に応じて、正（非極性領域に向かう平均曲率）または逆（極性領域に向かう平均曲率）と説明されてもよい。
【００３９】
前記非ラメラ液晶相およびＬ３相は、熱力学的に安定な系である。すなわち、これらは単に、層、ラメラ相等に分離および／または改質されるであろうメタ安定状態なのではなく、脂質／溶媒混合物の安定な熱力学的形態なのである。
【００４０】
バルク液晶相は一般に高粘度であるため、本発明の前製剤は、投与前に液晶でないことが重要である。よって、前記前製剤は、投与されると相変化を起こして液晶塊（ｌｉｑｕｉｄ  ｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ  ｍａｓｓ）を形成する低粘度非液晶製剤である。低粘度混合物の特に好ましい例は、分子性溶液ならびに／または、Ｌ２相および／もしくはＬ３相のような等方相である。上記の通り、Ｌ３は、何らかの相構造を有してはいるものの、液晶相の長距離秩序を欠く相互結合シートの非ラメラ相である。一般に高粘度である液晶相とは異なり、Ｌ３相は、より低い粘度を有している。Ｌ３相および分子性溶液、および／または１つ以上の成分からなるバルク分子性溶液に懸濁したＬ３相の粒子の混合物もまた好適であることは明らかである。Ｌ２相は、いわゆる「逆ミセル」相またはマイクロエマルジョンである。最も好ましい低粘度混合物は、分子性溶液、Ｌ３相、およびそれらの混合物である。Ｌ２相は、以下に記載する膨潤Ｌ2相の場合を除き、好適性が劣る。
【００４１】
本明細書中で使用される「低粘度混合物」という用語は、対象に容易に投与され得る混合物、および詳細には、標準的な注射器および針からなる装置によって容易に投与される混合物を示すのに使用されている。これは、例えば、１ｍｌの使い捨て注射器からゲージの小さい針を通して供給される能力で表してもよい。低粘度混合物は、１９ａｗｇの針、好ましくは１９ゲージよりも細い針、より好ましくは２３ａｗｇ（または、最も好ましくは更に２７ゲージ）の針を通して、指圧によって供給可能であることが好ましい。特に好ましい実施形態において、低粘度混合物は、０．２２μｍのシリンジフィルター等の標準的な滅菌濾過膜を通過できる混合物とすべきである。好適な粘度の典型的な範囲は、例えば、２０℃で０．１から５０００ｍＰａｓ、好ましくは１から１０００ｍＰａｓである。
【００４２】
本明細書中に示す低粘度溶媒を少量添加することにより、極めて顕著な粘度の変化をもたらすことができることが観察されている。例えば、わずか５％の溶媒を脂質混合物に添加するだけで、粘度を１００分の１に低下させることができ、１０％の溶媒の添加で、粘度が１０，０００分の１にまで低下する場合がある。この非線形の相乗効果を達成するために、粘度を低下させるにあたり、適度に低粘度で、かつ好適な極性を有する溶媒を採用することが重要である。このような溶媒には、本明細書中で以下に挙げるものが含まれる。
【００４３】
本発明は、本明細書中に示す成分ａ、ｂ、ｃ、および少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体を含む前製剤を提供する。これらの成分の量は、典型的には、ａ）を３０〜７０％、ｂ）を３０〜６０％、およびｃ）を０．１〜２０％の範囲とし、ＧＬＰ−１類似体を０．０１％から１０％存在させる（例えば、ａ）を４０〜７０％、ｂ）を３０〜６０％、およびｃ）を０．１〜１０％とし、ＧＬＰ−１類似体を０．１％から１０％存在させる）。本明細書全体を通して、％は、特に指定のない限り、何れも重量％である。これら製剤は、実質的にこれらの成分のみで構成されていてもよく、一態様においては、完全にこのような成分のみで構成されている。成分ａ）の好ましい範囲は３３〜６０％（例えば、４３〜６０％）、特に３５〜５５％（例えば、４５〜５５％）であり、成分ｂ）の好ましい範囲は３３〜５５％（例えば、３５〜５５％）、特に３５〜５０％（例えば、４０から５０％）である。
【００４４】
ａ：ｂの比率は、典型的には４０：６０から７０：３０、好ましくは４５：５５から６０：４０、およびより好ましくは４８：５２から５５：４５である。５０：５０程度の比率が極めて効果的である。
【００４５】
前製剤における溶媒成分ｃ）の量は、いくつかの特徴に多大な影響を与えるであろう。詳細には、粘度および放出の速度（および持続時間）が、溶媒レベルに伴い著しく変化するであろう。よって、溶媒の量は、少なくとも低粘度混合物を供給するのに充分な量とするが、これに加えて、所望の放出速度が得られるように決定されるであろう。これは、以下に挙げる実施例に鑑みた日常的に使用される方法で決定してもよい。典型的には、０．１から２０％のレベル、特に０．１から１０％の溶媒とすれば、好適な放出および粘度特性が得られるであろう。これは好ましくは２から１５％（例えば、２から８％）であり、５％前後の量が極めて効果的である。
【００４６】
前記製剤中の溶媒の割合を用いて、ある特定の活性物質の放出の最初の２、３日間における放出プロファイルを「調整」することができるということは、本発明者らによる目覚しい発見である。詳細には、適切な活性体を用いた場合、本発明の製剤は全て驚くほど低い「突発／遅延」効果を有し（実際、遅延期間が全くないこともある）、注射から２、３日（例えば、５日、好ましくは３日、より好ましくは１日）以内にプラトー放出レベルに達するが、最初の１〜２日間に活性物質の制御「突発」／初期放出が必要とされる場合には、先に挙げた範囲の上部にまで溶媒の割合を高めることによって、これを達成することができる。これに対し、前記範囲の中間から下部では、実質的に突発がなく、迅速にプラトー放出レベルにまで低下するデポーをもたらす製剤が提供される。当業者は、この「調整」が適している活性体を難なく識別するであろう。特に、前記前製剤に溶解して均質な溶液を形成することができる活性体が、分散する活性体が一般に効果が劣るのに対して、典型的には非常に好適である。
【００４７】
従って、一実施形態において、本発明は、成分ｃ）を０．１から６ｗｔ％前後含有し、投与後初期の活性化合物の放出が少ない（「非突発プロファイル」）製剤およびデポーを提供する。代替的な実施形態において、本発明は、成分ｃ）を６．５から１０ｗｔ％前後含有し、投与後初期の活性化合物の初期放出が多い（「突発プロファイル」）製剤およびデポーを提供する。
【００４８】
本発明のある特定の実施形態において、より高い割合の水分が許容され得る。この場合、水分は、付加的な水混和性成分ｃ（単一溶媒または混合物）と組み合わせた溶媒成分の一部として存在する。この実施形態においては、少なくとも３ｗｔ％、好ましくは少なくとも５％、およびより好ましくは少なくとも７ｗｔ％の成分ｃも存在し、成分ｃが水混和性であり、かつ得られる前製剤が非粘性であるため、液晶相を構成しない場合、２０％まで、好ましくは１０ｗｔ％までの水分が存在していてもよい。一般に、有機溶媒成分ｃ）と水分との重量比は、２０：８０から８０：２０の間、好ましくは３０：７０から７０：３０の間、およびより好ましくは３５：６５から６５：３５の間であろう。一実施形態において、この割合として少なくとも溶媒が５０％である。本発明のこの態様において、水分と共に用いられる最も好適な溶媒としては、エタノール、イソプロピルアルコール、ＮＭＰ、アセトンおよび酢酸エチルが挙げられる。
【００４９】
活性物質の初期放出が少ない（「非突発プロファイル」）とは、最初の２４時間における時間に対する血漿中濃度の曲線下面積が、曲線全体における曲線下面積（時間０から無限大または時間０から最終のサンプリング時点までを測定または推定）の１５％未満、より好ましくは１０％未満、および最も好ましくは７％未満であることと定義される。更に、４８時間以内、より好ましくは２４時間以内、および最も好ましくは１２時間以内にプラトーに達するように、初期ピーク後のプラトー血漿中濃度レベルまでの低下は迅速に起こるべきである。逆に、初期放出が多い（「突発プロファイル」）とは、１５％を超える活性物質が２４時間以内に放出されること、およびより好ましくは２０％を超える活性物質が最初の２４時間で放出されることである。プラトーへの低下は、３６時間後まで、より好ましくは４８時間後まで、および最も好ましくは７２時間後まで起こらないであろう。これらのプロファイルのそれぞれが、活性物質の血漿中濃度の「プラトー」レベルへの迅速な安定を伴っていることが好ましい。例えば、１０日後の血漿中濃度は、５日目から２０日目の平均濃度より５０％を超えて上回るかまたは下回るべきではない。これは、３０％以下、およびより好ましくは２０％以下であることが好ましいであろう。
【００５０】
先に示したように、本発明の前製剤における成分ｃの量は、少なくとも、成分ａ、ｂおよびｃから成る低粘度混合物（例えば、分子性溶液、上記参照）を提供する上で充分な量とされ、如何なる特定の成分の組み合わせに関しても、標準的な方法で容易に決定されるであろう。偏光顕微鏡法、核磁気共鳴、および低温透過型電子顕微鏡法（ｃｒｙｏ−ＴＥＭ）と組み合わせた目視観察で溶液、Ｌ２相もしくはＬ３相、または液晶相、または低温透過型電子顕微鏡法におけるように、そのような相の分散した断片を調べる等の技術により、相挙動そのものを分析してもよい。標準的な手段により、粘度を直接測定してもよい。上記の通り、実用上適切な粘度は、効果的に注射可能な、特に濾過滅菌可能な粘度である。これは、本明細書中で示されているように、容易に評価されるであろう。
【００５１】
本明細書中で示されている成分「ａ」は、少なくとも１種のジアシルグリセロール（ＤＡＧ）であり、よって、２つの非極性「尾部」基を有する。これら２つの非極性基は、同一または異なる数の炭素原子を有していてもよく、それぞれ独立して飽和または不飽和であってもよい。非極性基の例としては、Ｃ6〜Ｃ32アルキルおよびアルケニル基が挙げられるが、これらは典型的には、長鎖カルボン酸のエステルとして存在する。これらはしばしば、炭素鎖における炭素原子数および不飽和数に言及して説明される。従って、ＣＸ：Ｚは、炭素原子数がＸであり不飽和数がＺである炭化水素鎖を示す。例としては、特に、カプロイル（Ｃ６：０）基、カプリロイル（Ｃ８：０）基、カプリル（Ｃ１０：０）基、ラウロイル（Ｃ１２：０）基、ミリストイル（Ｃ１４：０）基、パルミトイル（Ｃ１６：０）基、フィタノイル（Ｃ１６：０）基、パルミトレオイル（Ｃ１６：１）基、ステアロイル（Ｃ１８：０）基、オレオイル（Ｃ１８：１）基、エライドイル（Ｃ１８：１）基、リノレオイル（Ｃ１８：２）基、リノレノイル（Ｃ１８：３）基、アラキドノイル（Ｃ２０：４）基、ベヘノイル（Ｃ２２：０）基、およびリグノセロイル（Ｃ２４：９）基が挙げられる。従って、典型的な非極性鎖は、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、フィタン酸、パルミトレイン酸（ｐａｌｍｉｔｏｌｉｃ）、ステアリン酸、オレイン酸、エライジン酸、リノール酸、リノレン酸、アラキドン酸、ベヘン酸、もしくはリグノセリン酸、またはこれらに対応するアルコールを含む、天然エステル脂質の脂肪酸をベースとするものである。好ましい非極性鎖は、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、およびリノール酸であり、特にオレイン酸である。
【００５２】
任意の数のジアシル脂質の混合物を、成分ａとして使用してもよい。好ましくは、この成分が、グリセロールジオレアート（ＧＤＯ）の少なくとも一部を含むであろう。極めて好ましい例は、ＧＤＯを少なくとも５０％、好ましくは少なくとも８０％、および更には実質的に１００％含むＤＡＧである。
【００５３】
ＧＤＯおよびその他のジアシルグリセロールは天然源由来の生成物であるため、その他の鎖長等を有する「混入物質」としての脂質がある一定の割合で一般に存在する。よって、一態様において、本明細書中で使用されるＧＤＯは、付随する不純物を含む商業用等級のＧＤＯ（すなわち、商業純度のＧＤＯ）を示すのに使用されている。これらの不純物を精製により分離除去してもよいが、この等級に該当すれば、このような処理はほとんど必要ない。しかしながら、必要であれば、「ＧＤＯ」は、少なくとも８０％が純粋なＧＤＯ、好ましくは少なくとも８５％が純粋なＧＤＯ、およびより好ましくは少なくとも９０％が純粋なＧＤＯ等、実質的に化学的に純粋なＧＤＯであってもよい。
【００５４】
本発明における成分「ｂ」は、少なくとも１種のホスファチジルコリン（ＰＣ）である。成分ａと同様に、この成分は、極性の頭部基と、少なくとも１つの非極性の尾部基とを含む。成分ａと成分ｂとの違いは、主に極性基にある。よって、成分ａに関して上記に考察した脂肪酸または対応するアルコールから、非極性部を適切に生じさせてもよい。成分ａ）と同様に、ＰＣは２つの非極性基を含むであろう。
【００５５】
ホスファチジルコリン部は、如何なるジアシルグリセロール部よりも好適に、天然源から派生し得る。好適なリン脂質源としては、卵、心臓（例えば、ウシの）、脳、肝臓（例えば、ウシの）、および大豆を含む植物源が挙げられる。このような材料源は、成分ｂの構成成分を１つ以上提供してもよいが、この構成成分は、リン脂質の如何なる混合物を含んでいてもよい。これらまたはその他の材料源から生じた如何なる単一のＰＣまたは複数のＰＣの混合物を使用してもよいが、大豆ＰＣまたは卵ＰＣを含む混合物が極めて好適である。このＰＣ成分は、少なくとも５０％の大豆ＰＣまたは卵ＰＣ、より好ましくは少なくとも７５％の大豆ＰＣまたは卵ＰＣ、および最も好ましくは実質的に純粋な大豆ＰＣまたは卵ＰＣを含むことが好ましい。
【００５６】
本発明の前製剤は、ＧＬＰ−１類似体活性物質の制御放出を目的として対象に投与されるものであるため、前記成分が生体適合性であることが重要である。この点において、本発明の前製剤は、ＰＣおよびＤＡＧの何れもが良好に許容され、インビボにて哺乳類の身体に元来存在する成分へと分解されるため、極めて有利である。
【００５７】
成分ａおよびｂの特に好ましい組み合わせは、ＧＤＯとＰＣ、特にＧＤＯと大豆ＰＣの組み合わせである。
【００５８】
本発明の前製剤の成分「ｃ」は、酸素を含有する有機溶媒である。前記前製剤は、（例えば、インビボでの）投与後、水性流体との接触によりデポー組成物を生成するものであるため、この溶媒は、対象にとって許容可能なものであり、前記水性流体と混合可能であり、および／または前記前製剤から前記水性流体中に拡散もしくは溶解可能であることが望ましい。よって、少なくとも中程度の水溶性を有する溶媒が好ましい。
【００５９】
好ましいバージョンでは、前記溶媒は、ａおよびｂを含む前記組成物に比較的少量、すなわち、好ましくは１０％未満を添加した場合に、一桁以上の大幅な粘度低下をもたらす。本明細書中に記載のように、１０％の溶媒の添加により、溶媒を含まない組成物に対し、その組成物が、溶媒を含まないか、もしくは水等の不適切な溶媒を含むか、もしくはグリセロールを含む溶液またはＬ2相であったとしても、２桁、３桁、または４桁も粘度を低下させることができる。
【００６０】
成分ｃとしての使用に適した典型的な溶媒としては、アルコール類、ケトン類、エステル類（ラクトン類を含む）、エーテル類、アミド類、およびスルホキシド類から選択される少なくとも１種の溶媒が挙げられる。アルコール類が特に好適であり、好適な溶媒群を形成する。好適なアルコール類の例としては、エタノール、イソプロパノール、ベンジルアルコールおよびグリセロールホルマールが挙げられる。エタノールが最も好ましい。ジオールおよびポリオールよりも、モノオールのほうが好ましい。ジオールまたはポリオールを使用する場合、少なくとも等量のモノオールまたは他の好ましい溶媒と併用することが好ましい。ケトン類の例としては、アセトンおよび炭酸プロピレンが挙げられる。好適なエーテル類としては、ジエチルエーテル、グリコフロール、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ジメチルイソバーバイド（ｄｉｍｅｔｈｙｌｉｓｏｂａｒｂｉｄｅ）、およびポリエチレングリコールが挙げられる。好適なエステル類としては、酢酸エチル、安息香酸ベンジルおよび酢酸イソプロピルが挙げられ、硫化ジメチルは、好適な硫化物溶媒である。好適なアミド類としては、ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、２−ピロリドンおよびジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）が挙げられる。スルホキシド類としては、メチルスルホキシドおよびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）が挙げられる。
【００６１】
極めて好ましい組み合わせは、大豆ＰＣと、ＧＤＯと、エタノールの組み合わせである。
【００６２】
ほとんどまたは全ての成分ｃが、ハロゲン置換された炭化水素を含有しないことが好ましい。なぜなら、このような成分ｃは、生体適合性が低くなる傾向があるからである。ジクロロメタンまたはクロロホルム等のハロゲン化溶媒が一部必要である場合、この割合は、通常、最小限とされるであろう。
【００６３】
本明細書中で使用される成分ｃは、単一の溶媒であってもよいし、または複数の好適な溶媒の混合物であってもよいが、一般に、低粘度とされるであろう。本発明の主たる態様の一つは低粘度の前製剤を提供することであり、好適な溶媒の主な役割はこの粘度を低下させることであるため、このことは重要である。この低下は、溶媒のより低い粘度による効果と、溶媒と脂質組成物間の分子間相互作用による効果の組み合わせの結果であろう。本発明者らによる観察結果の一つは、本明細書中に記載の低粘度の酸素含有溶媒は、組成物の脂質部分との間に極めて有利かつ予期しなかった分子間相互作用を引き起こし、これにより、少容量の溶媒の添加によって非線形の粘度低下をもたらすというものである。
【００６４】
「低粘度」溶媒成分ｃ（単一の溶媒または混合物）の粘度は、典型的には、２０℃で１８ｍＰａｓ以下とすべきである。この粘度は、好ましくは２０℃で１５ｍＰａｓ以下であり、より好ましくは１０ｍＰａｓ以下、および最も好ましくは７ｍＰａｓ以下である。
【００６５】
本発明の前製剤の更なる利点は、生物活性物質がより高レベルで系に取り込まれ得るということである。詳細には、成分ａ〜ｃ（とりわけｃ）を適切に選択することにより、高レベルの活性物質が前製剤に溶解または懸濁し得る。これにより、投与容量を低減し、それによって対象の不快感を緩和することができる。
【００６６】
本発明の前製剤は、典型的には、著しい量の水分を含有しない。脂質組成物から微量の水分を全て除去することは実質的に不可能であるため、これは、容易に除去できない最低限の微量の水分のみが存在することを意味すると解釈されるべきある。このような量は、一般に、前製剤の１重量％未満、好ましくは０．５重量％未満であろう。好ましい一態様において、本発明の前製剤は、グリセロール、エチレングリコール、またはプロピレングリコールを含有せず、直前に述べたように、水分は微量しか含有しない。
【００６７】
本発明の前製剤は、１種以上のＧＬＰ−１類似体または他の活性体（以下参照）（本明細書中では、全ての「活性物質」という記載がこれを指すものである）を含有する。ＧＬＰ−１はペプチドホルモンであるため、典型的なＧＬＰ−１類似体は、とりわけ３０個前後、例えば２０から４５個、とりわけ２５から３８個のアミノ酸で構成されるペプチドであろう。好ましくは、このようなペプチドは、ＧＬＰ−１および／または本明細書中で挙げるものを含む１種以上の公知の類似体に構造上、関連するであろう。ペプチドは、遺伝コードに示された２０個のα−アミノ酸から選択されるアミノ酸のみを含有してもよいし、あるいは、より好ましくは、これらのアミノ酸の異性体およびその他の天然および非天然アミノ酸（一般に、α、β、またはγ−アミノ酸）、ならびにその類似体および誘導体を含有してもよい。好ましいアミノ酸には、公知のＧＬＰ−１類似体の構成成分として上記に挙げたものが含まれる。
【００６８】
アミノ酸誘導体は、ペプチドの末端にとりわけ有用であり、ペプチドの末端において、末端のアミノ基またはカルボキシレート基は、ヒドロキシ基、アルコキシ基、カルボキシ基、エステル基、アミド基、チオ基、アミド基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジまたはトリアルキルアミノ基、アルキル基（本明細書全体を通して、Ｃ1〜Ｃ12アルキル基、好ましくはＣ1〜Ｃ6アルキル基、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソ、ｓｅｃ−、またはｔ−ブチル基等を意味する）、アリール基（例えば、フェニル基、ベンジル基、ナフチル（ｎａｐｔｈｙｌ）基等）、またはヘテロ原子を少なくとも１つ有していることが好ましく、かつ原子の合計が１０以下、より好ましくは６以下であることが好ましいその他の官能基のような、他のあらゆる官能基によって、またはそれで置換されていてもよい。
【００６９】
本明細書中で使用される「ＧＬＰ−１類似体」は、ヒトまたはその他のあらゆる生物種由来の何れかの、ＧＬＰ−１の天然に産出する形態を含む、あらゆるＧＬＰ−１受容体アゴニスト（またはより好ましさに欠ける、アンタゴニスト）を示す。これらの類似体は、好ましくは、ペプチド、ペプチド誘導体または模倣体である。先に示したもののようなペプチド由来のＧＬＰ−１アゴニストが最も好ましく、とりわけ、ＧＬＰ−１（７−３７）、ＧＬＰ−１（７−３６）アミド、リラグルチド、ＡＶＥ−０１０（ＺＰ１０）、ＴＨ０３１８およびエクセナチドが最も好ましい。
【００７０】
典型的な一実施形態において、ＧＬＰ−１類似体は、一般に、製剤全体の０．０２から１２重量％になるように調合されるであろう。典型的な値としては、０．１から１０％、好ましくは０．２から８％、およびより好ましくは０．５〜６％であろう。１〜５％前後のＧＬＰ−１類似体の含有量が最も好ましい。
【００７１】
関連する実施形態において、ＧＬＰ−１類似体は、一般に、製剤全体の０．０１から１２重量％となるように調合されるであろう。典型的な値としては、０．０５から１０％、好ましくは０．１から８％、およびより好ましくは０．２から６％であろう。０．３〜５％前後のＧＬＰ−１類似体の含有量が最も好ましい。
【００７２】
前記製剤に含有させるのに適したＧＬＰ−１類似体の用量および、かくして使用される製剤の容量は、所望の治療レベル、特異的な作用物質の活性、および選択された特定の活性体のクリアランス速度にはもちろん、（例えば、溶媒のタイプおよび使用量によって制御される）放出速度および放出持続期間に左右されるであろう。典型的には、１から２４週間、好ましくは２から１６（例えば１２）週間の持続期間に対し、デポー持続期間１週間当たり０．０５から１０ｍｇ前後、好ましくは１週間の持続期間当たり０．１から８ｍｇの量である。７から１６８日までの間の治療レベルをもたらすには、１用量当たり０．０５から２５０ｍｇの合計用量が適切であろう。これは、好ましくは、０．１から１９２ｍｇ、例えば、０．２から１６０ｍｇ、０．１から１．６ｍｇ、２０から１６０ｍｇ等である。活性体の安定性および放出速度の線形性により、装填と持続期間とが線形関係にない場合がもたらされるであろうことは明らかである。３０日ごとに投与されるデポーは、例えば０．２から２０ｍｇ、または９０日ごとのデポーは６０から１２０ｍｇの、本明細書中で示すＧＬＰ−１類似体の１種のような活性体を有する場合がある。特異的な活性体の生物学的半減期が特に重要であろうことも明らかである。１種の好ましい活性体である未変性ヒトＧＬＰ−１（ＧＬＰ−１（７−３７）およびＧＬＰ−１（７−３６）アミド）の半減期は５分未満であり、そのため、持続的な放出のためには、比較的大きな（例えば、前記範囲の高端に向かう）量が必要となるであろう。半減期がずっと長いエクセナチドのような類似体に関しては、必要な量はより少ないことが明らかであろう。
【００７３】
未変性ヒトＧＬＰ−１（ＧＬＰ−１（７−３７）およびＧＬＰ−１（７−３６）アミド）が本発明のデポー前駆体において調製され、投与されることができ、この活性物質の生物学的半減期が驚くほど短いにもかかわらず、数日間または更に何週間という制御放出をもたらすであろうことは、本製剤の注目に値する成果である。半減期が短い活性体のこのような高い送達性能は他では知られておらず、未変性ヒトＧＬＰ−１の持続放出を可能にする脂質デポー系は他に報告されていない。従って、一実施形態において、活性物質は１時間未満、例えば、（ＧＬＰ−１（７−３７）のように）１５分未満の半減期を有し、前製剤は、少なくとも７日間、好ましくは少なくとも１４日間、より好ましくは少なくとも２８日間の持続放出をもたらすデポーを形成する。
【００７４】
本発明の特定の好ましい一実施形態において、組成物（前製剤および得られるデポー）は、ＰＥＧグラフト脂質および／または界面活性剤のような、少なくとも１種の生体適合性のポリエチレンオキシドまたはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）断片化剤を含んでもよい。これらの剤は、全ての組成物において有用であり、低濃度であってもＧＬＰ−１類似体の安定性を高めると考えられている。特に有利な実施形態においては、しかし、これらはより短い持続期間（例えば、５から３０日間、とりわけ７から２１日間）を有するデポーを提供するのに極めて有用であり得る。これは、そのような成分が、デポーをｉｎ  ｓｉｔｕでより小さな断片にする傾向があり、それによって、そのデポーが生物分解のみならず「物理的な」侵食によって分解し、そのため、より速い（しかし、それでも著しい突発放出は起こらない）放出を可能にするであろうことによる。
【００７５】
製剤に含有される場合、そのような断片化剤成分の含有量は、０．１〜２０％、より好ましくは０．５〜１８％、および最も好ましくは１〜１５％であろう。特に、０．１から１％（好ましくは０．２から０．７％）であれば、ＧＬＰ−１類似体を安定化させるのに特に有用であり、１から１５％、好ましくは５から１０％であれば、デポー放出期間を制御するの有益である。断片化剤を含有する別の利点は、そのことが長期的使用の観点から有益であり得るということである。ＧＬＰ−１類似体デポー製品の使用者は、典型的には、長期間にわたって使用者になると見込まれ、そのようなデポーは、侵食がより速く、そのため、注射部位からより速く消散し、その部位の再生を早めることができ、注射部位周辺の結合組織形成を弱める。また、そのような剤を含有することは、既に良好な生物許容性／生体適合性を更に向上させ得る。
【００７６】
最も好ましい断片化剤は、ポリソルベート（Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ）８０（Ｐ８０）である。その他の有用な剤には、その他のポリソルベート類（例えば、ポリソルベート２０）、ＰＥＧ化リン脂質類（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ（２０００）、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ（５０００）、ＤＯＰＥ−ＰＥＧ（２０００）およびＤＯＰＥ―ＰＥＧ（５０００）のようなＰＥＧ脂質類）、ソルトール（Ｓｏｌｕｔｏｌ）ＨＳ  １５、ＰＥＧ化脂肪酸類（例えば、ＰＥＧオレアート）、プルロニック（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ）（登録商標）Ｆ１２７およびプルロニック（登録商標）Ｆ６８のようなブロック共重合体類、エトキシ化ヒマシ油誘導体類（例えば、クレモフォール（Ｃｈｒｅｍｏｐｈｏｒｅｓ））、ＰＥＧ化グリセリル脂肪酸エステル類（例えば、日光ケミカルズ株式会社製ＴＭＧＯ−１５）およびＰＥＧ化トコフェロール類（例えば、イーストマン（Ｅａｓｔｍａｎ）製ビタミン（Ｖｉｔａｍｉｎ）Ｅ  ＴＰＧＳとして知られるｄ−アルファトコフェリルポリ（エチレングリコール）１０００スクシナート）が含まれる。
【００７７】
脂質製剤に溶解したＧＬＰ−１はもちろん、（例えば、本発明のキットにおける）粉末としてのＧＬＰ−１は、ある特定の安定化添加剤によって安定性（保存およびインビボ安定性の両方）を得てもよい。そのような添加剤としては、糖類（例えば、スクロース、トレハロース、ラクトース等）、ポリマー類（例えば、カルボキシメチルセルロースのようなポリオール類）、少量の表面活性剤類（例えば、Ｐ８０、上記参照）、酸化防止剤類（例えば、アスコルビン酸、ＥＤＴＡおよびクエン酸）、アミノ酸類（例えば、メチオニン、グルタメート、リジン等）およびアニオン脂質類と表面活性剤類（例えば、ジオレオイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルグリセロール（ＰＯＰＧ）およびオレイン酸（ＯＡ））が挙げられる。
【００７８】
本発明の前製剤は、腸管外投与用に調合される。この投与は、一般に、血管内へ投与する方法ではなく、好ましくは皮下、腔内、または筋肉内投与であろう。典型的には、投与は注射によって行われるであろうが、この用語は、本明細書中では、針、カテーテル、または無針（針のない）注入器等による、製剤が皮膚を通過するようにするあらゆる方法を示すのに使用されている。
【００７９】
好ましい腸管外投与は、筋肉内注射または皮下注射によって行われ、深部皮下注射によって行われることが最も好ましい。本発明の組成物の重要な特徴は、それが、筋肉内投与および皮下投与、ならびにその他の毒性または著しい局所効果がない経路の両方によって投与可能であることである。このことは、腔内投与に関しても好適である。深部皮下注射は、現在のデポーの幾つかに用いられている（深部）筋肉内注射よりも、深さが浅く、対象にとって痛みが少ないという利点を有し、注射が容易になると共に、局所的副作用の危険性が少ないことから、技術的には、本件において最も好適である。これらの製剤が、皮下注射および筋肉内注射の両方によって予測可能な期間にわたって活性物質の持続的放出をもたらすということは、本発明者らによる驚くべき観察結果である。従って、これにより、注射部位を広範に多様化することができ、注射部位における組織深さを詳細に考慮せずして用量投与を行うことができる。
【００８０】
本発明の前製剤は、とりわけインビボで水性流体に曝露されると、非ラメラ液晶デポー組成物を提供する。本明細書中で使用される「非ラメラ」という用語は、正もしくは逆の液晶相（キュービック相もしくはヘキサゴナル相等）またはＬ３相、あるいはこれらのあらゆる組み合わせを示すのに使用されている。液晶という用語は、全てのヘキサゴナル液晶相、全てのキュービック液晶相および／またはこれらの全ての混合物を示す。本明細書中で使用されるヘキサゴナルは、「正」または「逆」のヘキサゴナル（好ましくは逆）を示し、「キュービック」は、特に指定のない限り、あらゆるキュービック液晶相を示す。
【００８１】
多くの脂質の組み合わせに関しては、ある特定の非ラメラ相のみが存在するか、またはあらゆる安定した状態で存在する。本明細書中に記載の組成物が、その他の成分の組み合わせの多くにおいては存在しない非ラメラ相を高い頻度で示すということは、本発明の驚くべき特徴である。従って、特に有利な一実施形態では、本発明は、水性溶媒で希釈された場合にＩ2相および／またはＬ2相領域を存在させる成分の組み合わせを有する組成物に関する。このような領域の有無は、如何なる特定の組み合わせに関しても、組成物を単に水性溶媒で希釈し、この結果生じた相構造を本明細書中に記載の方法で観察することにより、簡単に試験できる。
【００８２】
極めて有利な実施形態において、本発明の組成物は、水分との接触によりＩ2相、また
はＩ2相を含む混合相を形成してもよい。Ｉ2相は、不連続な水性領域を有する逆キュービック液晶相である。この相は、活性物質の制御放出に特に有利であり、とりわけ水溶性活性体等の極性活性物質と組み合わせた場合に特に有利である。これは、不連続な極性ドメインが、前記活性体の迅速な拡散を防止するからである。Ｌ2におけるデポー前駆体は、Ｉ2相デポー構成物との併用が極めて効果的である。これは、Ｌ2相が、分離した極性コアを取り囲む連続的な疎水性領域を有するいわゆる「逆ミセル」相であるからである。よって、Ｌ2は、親水性の活性体と同様の利点を有する。
【００８３】
体液と接触後の過渡段階において、組成物は複数の相を含むことができるが、これは、とりわけかなりの規模で内部デポーを投与した場合、初期表面相の形成により、デポーのコアへの溶媒の透過が遅延されるであろうからである。理論にとらわれることなく、この表面相、とりわけ液晶表面相の過渡形成は、組成物とその周囲との間の交換速度を即座に制限することにより、本発明の組成物の「突発／遅延」プロファイルを劇的に低減するように働くものと考えられる。過渡相は、（一般に、外側からデポーの中心に向かって順に）ＨIIまたはＬα、Ｉ2、Ｌ2、および流体（溶液）を含んでいてもよい。本発明の組成物は、生理的温度の水分との接触後に、これらの相のうち少なくとも２つ、およびより好ましくは少なくとも３つ、過渡段階で同時に形成可能であることが極めて好ましい。特に、少なくとも過渡的に形成されるこれらの相の１つがＩ2相であることが極めて好ましい。更に重要な組み合わせは、相ＨII、相Ｌ2および流体（溶液または分散液）の組み合わせであり、これは（本発明のある特定の有利な組成物）を体液に（最も外側とするＨIIから最も内側とする流体へ）暴露後に共存するであろう非常に有利な組み合わせである。当業者である読み手は、本明細書中の記載および実施例を参照して、この要件に適合する組成物を難なく識別するであろうが、この挙動に関して最も有利な組成領域では、成分比率（ｒａｔｉｏｎ）ａ：ｂが均等領域（例えば、３５：６５から６５：３５程度、好ましくは４２：５８から５８：４２、最も好ましくは４６：５４から５４：４６）にある。
【００８４】
本発明の前製剤が低粘度であることを理解することは重要である。その結果、これらの前製剤は、バルク液晶相であってはならない。なぜなら、液晶相は全て、注射器またはスプレーディスペンサーで投与可能な粘度よりもはるかに高い粘度を有するからである。よって、本発明の前製剤は、溶液、Ｌ2相またはＬ3相、特に、溶液またはＬ2のような非液晶状態にあるであろう。本明細書全体を通して使用されるＬ2相は、好ましくは、１０ｗｔ％を超える粘度低下効果を有する溶媒（成分ｃ）を含有する「膨潤」Ｌ2相である。これは、溶媒を含有しないか、より少量の溶媒を含有するか、または本明細書中に明記する酸素含有低粘度溶媒に付随する粘度低下をもたらさない溶媒（または混合物）を含有する、「濃縮」または「非膨潤」Ｌ2相とは対照的である。
【００８５】
本発明の前製剤は、投与されると、低粘度混合物から高粘度（一般に、組織付着性）デポー組成物へと相構造転移する。一般に、これは、分子混合物、膨潤Ｌ2および／またはＬ３相から、正もしくは逆ヘキサゴナルもしくはキュービック液晶相またはこれらの混合物等の１種以上の（高粘度）液晶相への転移であろう。先に示したように、投与後に、更なる相転移が起こってもよい。本発明が機能する上で、完全な相転移を必要としないことは明らかであるが、投与された混合物の少なくとも表面層が液晶構造を形成するであろう。この転移は一般に、投与された製剤の少なくとも表面領域（空気、体表面および／または体液と直接接触している部分）に関しては迅速であろう。これは、２、３秒または２、３分（例えば、最高３０分、好ましくは最高１０分、より好ましくは５分以下）で生じることが最も好ましいであろう。前記組成物の残部は、拡散によって、および／または表面領域が分散するにつれて、よりゆっくりと液晶相に相変化してもよい。
【００８６】
よって、好ましい一実施形態において、本発明は、水性流体との接触により、少なくともその一部がヘキサゴナル液晶相を形成する、本明細書中に記載の前製剤を提供する。このように形成されたヘキサゴナル相は、徐々に分散および／または分解して活性物質を放出してもよいし、または引き続きキュービック液晶相へと変化し、次いでこのキュービック液晶相が徐々に分散してもよい。
【００８７】
理論にとらわれることなく、本発明の前製剤は、（例えば、体液への）曝露により、含有する有機溶媒の一部または全部を（例えば、拡散によって）喪失すると共に、身体的環境（例えば、インビボ環境）から水性流体を取り込み、これにより、前記製剤の少なくとも一部分が非ラメラ、特に液晶相構造を生成すると考えられる。ほとんどの場合、これらの非ラメラ構造は高粘性であり、インビボ環境に容易に溶解または分散されない。この結果、限られた領域のみが体液に曝露され、モノリシック「デポー」がインビボで生成される。また、非ラメラ構造は大きな極性、非極性、および境界領域を有しているため、ペプチド等の活性物質を可溶化および安定化し、これらを劣化メカニズムから保護する上で極めて効果的である。前製剤から形成されたデポー組成物が何日間、何週間、または何ヶ月間にわたって徐々に分解されるに従い、前記組成物から活性物質が徐々に放出および／または拡散される。デポー組成物内の環境は比較的保護されているため、本発明の前製剤は、比較的短い生物学的半減期を有する活性物質（上記参照）に極めて好適である。
【００８８】
本発明の製剤により形成されるデポー系は、活性物質を劣化から保護する上で極めて効果的であり、よって放出期間の延長を可能にする。公知のＰＬＧＡ徐放製品と、ＧＤＯ、大豆ＰＣ、エタノール、および活性物質を含有する本発明の製剤との間で、比較試験を行った。これらの試験により、本発明の製剤は、シミュレートされたインビボ条件下で、公知の組成物に比べ、分解の程度が低いことが分かった。よって、本発明の製剤は、７から３６０日（例えば、２０から３６０日）、好ましくは３０〜２４０日（例えば、３０から１６８日）、より好ましくは６０〜１８０日（例えば、９０日前後）に１回だけ投与すればよいＧＬＰ−１類似体のインビボデポーを提供し得る。代替的には、更に好ましい実施形態において、これらの持続期間はやや短く、好ましくは１０から２４０日（例えば、２０から１６８日）、より好ましくは１４から１８０日（例えば、６０日前後）である。前記組成物が自己投与用でない場合、医療従事者が要する時間を短縮するのみならず、患者の快適さおよび服薬遵守の上でも、より長く安定な放出期間が望ましいことは明らかである。前記製剤が自己投与用である場合、投与の必要性を忘れることがないよう、週ごと（例えば、７日ごと）または月ごと（例えば、２８から３０日ごと）の投与とすることによって患者の服薬遵守を促進してもよい。
【００８９】
本発明のデポー前駆体の顕著な利点は、これらが安定で均質な相であるということである。すなわち、これらは、相分離を起こすことなく、かなり長期間（好ましくは、少なくとも６ヶ月間）室温または冷蔵庫内温度で保存され得る。これにより、有利な保存および容易な投与が実現するのみならず、個々の対象の種、年齢、性別、体重、および／または身体状態を参照してＧＬＰ−１類似体の用量を選択することが、選択された容量を注射することによって可能となる。また、本発明者らは、驚くべきことに、総薬物曝露量（ＡＵＣまたは平均プラトー血漿中濃度として観察される）は注射容量に比例するにもかかわらず、活性物質の初期放出（Ｃmaxとして観察される）は、試料として用いた容量の注射では少なくとも１０倍の範囲において、投薬容量に比例しないことを発見した。それどころか、Ｃmaxは、注射された投薬容量の表面積に相関し得ることが分かった。すなわち、Ｃmaxは、注射された投薬容量の３分の２乗に比例する。投薬容量を１０倍に増やしても、Ｃmaxは１０倍にはならず、よって、Ｃmaxと総薬物曝露量（ＡＵＣまたは平均プラトー血漿中濃度レベル）の関係は、投薬容量の増加に伴い減少するであろう。このことは極めて有利である。なぜなら、この特性により、総用量を著しく増加させたとしても、潜在的に有毒な血漿中薬剤濃度に達するリスクが低減されるからである。上記に考察したように、このことは、低血糖を引き起こさずに１日２回の投与型から持続性のある製剤にする上で、重要な問題であるかもしれない。しかしながら、投薬が注射容量に直接比例しない状況においても、デポー前駆体の均質性により、事前測定用量の部分的な投与が可能となり、この投与は、対象における関連可変要素の何れかまたは全てを考慮し得る投薬表、カルテ、ソフトウェアによる計算等を参照して行ってもよい。
【００９０】
よって、本発明は、特に対象の体重に基づき、個々の対象に特異な投薬量を選択することを含む方法を提供する。この用量選択の手段は、投与容量を選択することである。
【００９１】
前記前製剤により、活性物質の放出プロファイルにおいて「突発」効果がほとんど見られないデポー組成物が得られるということは、本発明者らによって成された予期しなかった発見である。このことが予期されなかったのは、前記前駆組成物の低粘度混合物（とりわけ、これが溶液である場合）は、水分に曝露されると、ある特定のその他の持続放出製剤に関して観察される様式で、迅速に活性物質を喪失することが予期され得たからである。実際には、本発明の前製剤は、表面結合活性物質または溶解した活性物質が初期に「洗い流される（ｗａｓｈ  ｏｆｆ）」または「洗い落とされる（ｗａｓｈ  ｏｕｔ）」傾向を示す、マイクロビーズ組成物を含む従来公知のポリマーベースのデポー組成物と比べて、初期「突発」の程度が著しく低かった。よって、一実施形態において、本発明は、投与後における活性体の最高血漿中濃度が、投与後２４時間から５日目までにおける平均濃度の４０倍以下となる注射可能な前製剤およびこの前製剤から生じるデポー組成物を提供する。この比率は、前記平均濃度の２５倍以下であることが好ましく、２０倍以下（例えば、１０倍まで、または５倍まで）であることが最も好ましい。
【００９２】
本発明の組成物は、投与後に「遅延」効果がほとんどないデポー組成物の生成も可能にする。よって、更なる実施形態において、本発明は、１回の投与後７日目の活性体の血漿中濃度が、投与後２１日目の活性体の血漿中濃度以上となる注射可能な前製剤およびこの前製剤から生じるデポー組成物を提供する。同様に、最初の２１日間における活性体の濃度を、投与後３０日目以降における何れの時点の濃度よりも常に高くする必要がある。この徐々に低下する放出プロファイルは、脂質デポー徐放ＧＬＰ−１類似体製剤に関しては、これまでに実証されていなかった。
【００９３】
本明細書中に示す特徴と好ましい特徴との組み合わせにより、本発明の前製剤は、以下に挙げる好ましい特徴を１つ以上、単独または組み合わせで有していてもよい：
成分ａ）は、ＧＤＯを含むか、実質的にＧＤＯで構成されるか、または好ましくはＧＤＯで構成される；
成分ｂ）は、大豆ＰＣを含むか、実質的に大豆ＰＣで構成されるか、または好ましくは大豆ＰＣで構成される；
成分ｃ）は、１、２、３もしくは４炭素アルコール、好ましくはイソプロパノール、またはより好ましくはエタノールを含むか、実質的にこのような成分で構成されるか、または好ましくはこのような成分で構成される；
前記前製剤は、本明細書中に示すものから選択される少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体、好ましくはＧＬＰ−１（７−３７）、ＧＬＰ−１（７−３６）アミド、リラグルチド、ＡＶＥ−０１０、ＴＨ−０３１８またはエクセナチドを含有する；
前記前製剤は、本明細書中に示す低粘度を有する。
【００９４】
前記前製剤は、インビボ投与されると、本明細書中に示す液晶相を形成する。
【００９５】
前記前製剤は、インビボ投与後にデポーを生成し、このデポーは、少なくとも７日間、好ましくは少なくとも２１日間、より好ましくは少なくとも３０日間にわたり、少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体を治療レベルで放出する。
【００９６】
本明細書中に示す特徴と好ましい特徴との組み合わせにより、本発明の治療方法は、以下に挙げる好ましい特徴を１つ以上、単独または組み合わせで有していてもよい：
前記方法は、先に示した好ましい特徴を１つ以上有する少なくとも１種の製剤を投与することを含む；
前記方法は、本明細書中に示す少なくとも１種の製剤を、筋肉内注射、皮下注射、または好ましくは深部皮下注射によって投与することを含む；
前記方法は、本明細書中に示す充填済み投与デバイスを用いて投与することを含む；
前記方法は、２０ゲージ以下、好ましくは２０ゲージ未満、および最も好ましくは２３ゲージ以下の針を通して投与することを含む；
前記方法は、７から３６０日ごと、好ましくは７から１２０日ごと、より好ましくは１４から６０日ごとに１回投与することを含む。
【００９７】
前記方法は、１４から１８０日ごと、好ましくは６０日前後ごとに１回投与することを含む。
【００９８】
本明細書中に示す特徴と好ましい特徴との組み合わせにより、本明細書中に示す前製剤の医薬品の製造における使用は、以下に挙げる好ましい特徴を１つ以上、単独または組み合わせで有していてもよい：
前記使用は、先に示した好ましい特徴を１つ以上有する少なくとも１種の製剤の使用を含む；
前記使用は、本明細書中に示す少なくとも１種の製剤を、筋肉内注射、皮下注射、または好ましくは深部皮下注射によって投与するための医薬品の製造を含む；
前記使用は、本明細書中に示す充填済み投与デバイスを用いて投与するための医薬品の製造を含む；
前記使用は、２０ゲージ以下、好ましくは２０ゲージ未満、および最も好ましくは２３ゲージ以下の針を通して投与するための医薬品の製造を含む；
前記使用は、７から３６０日ごと、好ましくは７から１２０日ごと、より好ましくは１４から６０日ごとに１回投与するための医薬品の製造を含む。
【００９９】
本明細書中に示す特徴と好ましい特徴との組み合わせにより、本発明の充填済みデバイスは、以下に挙げる好ましい特徴を１つ以上、単独または組み合わせで有していてもよい；
前記充填済みデバイスは、本明細書中に示す好ましい製剤を含有する；
前記充填済みデバイスは、２０ゲージ未満、好ましくは２３ゲージ以下の針を含む；
前記充填済みデバイスは、１回分の用量である０．０５から２５０ｍｇ、好ましくは０．１から１００ｍｇおよびより好ましくは１〜５０ｍｇのＧＬＰ−１類似体を含む；
前記充填済みデバイスは、ＧＬＰ−１（７−３７）、ＧＬＰ−１（７−３６）アミド、ＴＨ−０３１８、リラグルチドまたはＡＶＥ−０１０を、０．０５から２５０ｍｇ前後含む；
前記充填済みデバイスは、本発明の組成物の均質な混合物を注射準備完了形態で含む。
【０１００】
前記充填済みデバイスは、ＧＬＰ−１類似体と組み合わせて、本発明の前製剤を形成するための成分ａ）からｃ）の製剤を含む。
【０１０１】
前記充填済みデバイスは、成分ａ）からｃ）の製剤と組み合わせて、本発明の前製剤を形成するためのＧＬＰ−１類似体を含む。
【０１０２】
前記充填済みデバイスは、総投与容量が、５ｍｌ以下、好ましくは３ｍｌ以下、より好ましくは２ｍｌ以下である。
【０１０３】
本明細書中に示す特徴と好ましい特徴との組み合わせにより、本発明のキットは、以下に挙げる好ましい特徴を１つ以上、単独または組み合わせで有していてもよい：
前記キットは、本明細書中に示す好ましい製剤を含む；
前記キットは、本明細書中に示す充填済みデバイスを含む；
前記キットは、２０ゲージ未満、好ましくは２３ゲージ以下の針を含む；
前記キットは、１回分の用量である０．０５から２５０ｍｇ、好ましくは０．１から１００ｍｇおよびより好ましくは１〜５０ｍｇのＧＬＰ−１類似体を含む；
前記キットは、ＧＬＰ−１（７−３７）、ＧＬＰ−１（７−３６）アミド、ＴＨ−０３１８、リラグルチドまたはＡＶＥ−０１０を、０．０５から２５０ｍｇ前後含む；
前記キットは、本発明の脂質製剤とＧＬＰ−１類似体粉末をそれぞれ含む少なくとも２つの容器を含む「二区画キット」を含む。
【０１０４】
前記キットは、総投与容量が、５ｍｌ以下、好ましくは３ｍｌ以下、より好ましくは２ｍｌ以下である。
【０１０５】
前記キットは、本明細書中に示す経路および／または頻度での投与に関する説明書を含む；
前記キットは、本明細書中に記載の治療方法において使用する投与に関する説明書を含む。
【０１０６】
下記の非限定的な実施例および添付図面を参照しながら、本発明について以下に更に説明する。
実施例
使用される略語
ＧＬＰ−１＝ＧＬＰ−１（７−３６）アミド（酢酸塩）＝グルカゴン様ペプチド１（ポリペプチド  ラボラトリーズ（ＰｏｌｙＰｅｐｔｉｄｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、ドイツ）
ＳＰＣ＝大豆ホスファチジルコリン（リポイド（Ｌｉｐｏｉｄ）、ドイツ）
ＥＰＣ=卵ホスファチジルコリン（リポイド、ドイツ）
ＧＤＯ＝グリセロールジオレアート（ダニスコ（Ｄａｎｉｓｃｏ）、デンマーク）
Ｐ８０＝ポリソルベート（Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ）８０（アポテケット（Ａｐｏｔｅｋｅｔ）、スウェーデン）
Ｆ６８＝プルロニック（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ）Ｆ６８（シグマ−アルドリッチ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）、スウェーデン）
ＥｔＯＨ＝エタノール（ケメチル（Ｋｅｍｅｔｙｌ）、スウェーデン）
ＨＡｃ＝酢酸（メルク（Ｍｅｒｃｋ）、ドイツ）
ＢｚＯＨ＝ベンジルアルコール（アポテケット、スウェーデン）
ＰＧ＝プロピレングリコール（アポテケット、スウェーデン）
ＢｚＢ＝安息香酸ベンジル（アポテケット、スウェーデン）
ＮＭＰ＝Ｎ−メチルピロリドン（ＩＳＰ、米国）
アスコルビン酸＝Ａｓｃ（シグマ−アルドリッチ、スウェーデン）
ＥＤＴＡ＝エチレンジアミン四酢酸（シグマ−アルドリッチ、スウェーデン）
ＤＰＰ−ＩＶ＝ジペプチジルペプチダーゼＩＶ
ＤＯＰＧ＝ジオレオイルホスファチジルグリセロール（アバンティポーラーリピッズ（Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ）、米国）
【実施例１】
【０１０７】
組成物の選択によるデポー中の各種液晶相の利用可能性
ホスファチジルコリン（「ＰＣ」−リポイド（Ｌｉｐｏｉｄ）Ｓ１００）とグリセロールジオレアート（ＧＤＯ）を異なる割合で含有し、更にＥｔＯＨを溶媒として含有する注射可能製剤を調製し、デポー前駆体製剤を過剰量の水で平衡化した後、各種液晶相が得られることを例証した。
【０１０８】
適量のＰＣ、ＧＤＯおよびＥｔＯＨをガラスバイアルで計量し、その混合物を、ＰＣが完全に溶解し、透明な液体溶液となるまで振盪器にかけた。次に、ＧＤＯを添加し、注射可能な均質溶液を形成させた。
【０１０９】
各製剤をバイアルに注入し、過剰量の水で平衡化した。相挙動を、目視ならびに交差偏光子間（ｂｅｔｗｅｅｎ  ｃｒｏｓｓｅｄ  ｐｏｌａｒｉｚｅｓ）で、２５℃で評価した。結果を表１に示す。
【０１１０】
【表１】
2008542437.tif 000002
【実施例２】
【０１１１】
共溶媒添加によるＰＣ／ＧＤＯ混合物の粘度
ＰＣ／ＧＤＯと共溶媒の混合物を、実施例１の方法で調製した。まずロータリーエバポレーターを用いて前記ＰＣ／ＧＤＯ混合物からＥｔＯＨを蒸発させることによって、ＥｔＯＨ含有量を調整し、実質的にＰＣおよびＧＤＯからなる粘性液体混合物を得た。その後、共溶媒を、下記表２に示す割合で添加した。
【０１１２】
これら試料を数日間平衡化させた後、フィジカ（Ｐｈｙｓｉｃａ）ＵＤＳ  ２００レオメータを用い、２５℃で粘度を測定した。
【０１１３】
【表２】
2008542437.tif 000003
【０１１４】
この実施例は、注射可能製剤を得るためには、粘度低下特性を有する溶媒が必要である事を例証するものである。グリセロールを含有する混合物（試料１９）または水（試料２０および２１）は、ＥｔＯＨを含有する試料（試料１３、１４および１７と比較）と同等の溶媒濃度で注射可能とするには粘度が高過ぎる。
【実施例３】
【０１１５】
ラットにおけるデポー製剤の分解
各種容量（１、２、６ｍｌ／ｋｇ）のデポー前駆体（ＰＣが３６％ｗｔ、ＧＤＯが５４％ｗｔ、およびＥｔＯＨが１０％ｗｔ）をラットに注射し、１４日間後に再び除去した。この後、相当量の製剤が依然としてラットの皮下に存在したことが分かった。表３参照。
【０１１６】
【表３】
2008542437.tif 000004
【実施例４】
【０１１７】
グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ−１）のデポー組成物の調製
ＧＬＰ−１のデポー前駆体を以下の２つの異なる方法で調製した。
１）ＧＬＰ−１を、まずＰＣ、ＧＤＯおよびＥｔＯＨと、混合が容易になるようにＥｔＯＨを過剰添加して混合した。典型的に、この段階でのＥｔＯＨ含有量は、約５０〜８０ｗｔ％であった。次いで、過剰量のＥｔＯＨを、ロータリーエバポレーターまたは凍結乾燥により除去し、ＥｔＯＨの最終含有量を、その後、必要に応じて調整した。
２）ＧＬＰ−１を、まず少量の無菌水に溶解させた。その後、予め作製しておいたＰＣ，ＧＤＯおよびＥｔＯＨの、ＥｔＯＨ含有量を約５〜１０重量％とした液体混合物をＧＬＰ−１／水の溶液に添加した。得られた混合物をボルテックス混合で１分間混合した。
【０１１８】
各試料の最終組成物を下記表４に示す。ＧＤＯならびに、大豆および卵の両ホスファチジルコリン（ＰＣ）について、数通りの純度レベルを用いた。
【０１１９】
【表４】
2008542437.tif 000005
【０１２０】
【表５】
2008542437.tif 000006
【実施例５】
【０１２１】
５．１  脂質保存溶液の調製
ＳＰＣ（１．４４ｇ）、ＧＤＯ（１．４４ｇ）、Ｐ８０（０．７２ｇ）およびＥｔＯＨ（０．４０ｇ）をガラスバイアルに順に加え、その後、２４時間転倒型回転を行って、液体保存溶液を調製した。透明で均質な液体脂質保存溶液を得た。
５．２  脂質／ＧＬＰ−１製剤の調製
２０ｍｇのＧＬＰ−１（酢酸塩）をバイアルで計量し、ＨＡｃを２ｗｔ％含有する水溶液０．３５２ｇを添加して溶解させ、その後、ボルテックス混合を行った。ＧＬＰ−１の保存水溶液に、５．１で調製した脂質保存溶液１．６２８ｇを添加した。得られた製剤を、短時間のボルテックス混合後、１時間の転倒型回転を行って混合し、透明で均質な低粘度脂質／ＧＬＰ−１製剤を得た。
【０１２２】
【表６】
2008542437.tif 000007
【実施例６】
【０１２３】
脂質保存溶液を、実施例５．１に従い、以下の組成、すなわちＳＰＣ／ＧＤＯ／ＥｔＯＨ＝４２．５／４２．５／１５ｗｔ％で調製した。この脂質保存溶液２．５２ｇを、３０ｍｇのＧＬＰ−１（酢酸塩）が０．４５０ｇの２ｗｔ％ＨＡｃに溶解した水溶液に添加した。得られた製剤を短時間のボルテックス混合後、１時間の転倒型回転を行って混合し、透明で均質な低粘度脂質／ＧＬＰ−１製剤を得た。
【０１２４】
【表７】
2008542437.tif 000008
【実施例７】
【０１２５】
脂質保存溶液を、実施例５．１に従い、以下の組成、すなわちＳＰＣ／ＧＤＯ／Ｐ８０／ＥｔＯＨ＝３５／３５／２０／１０ｗｔ％で調製した。この脂質保存溶液０．８３ｇを、１０ｍｇのＧＬＰ−１（酢酸塩）が、２ｗｔ％ＨＡｃおよび０．１ｗｔ％Ａｓｃ、または２ｗｔ％ＨＡｃ、０．１ｗｔ％Ａｓｃおよび０．１ｗｔ％グリシン、または２ｗｔ％ＨＡｃ、０．１ｗｔ％Ａｓｃおよび０．０２ｗｔ％ＥＤＴＡ（二ナトリウム塩）をそれぞれ含有する水溶液０．１６０ｇに溶解したものを含む３つの異なるバイアルに加えた。得られた各製剤を短時間のボルテックス混合後、１時間の転倒型回転を行って混合し、透明で均質な低粘度脂質／ＧＬＰ−１製剤を得た。
【０１２６】
【表８】
2008542437.tif 000009
【実施例８】
【０１２７】
脂質保存溶液を、実施例５．１に従い、下記の表に挙げた各組成で調製した。各脂質保存溶液を、下記表に示した各組成に従って、ガラスバイアル内のＧＬＰ−１粉末に添加した。得られた各製剤を、バイアルを手で振って混合することによって、ＧＬＰ−１粉末を液体脂質製剤に懸濁させた。各製剤を、過剰量の塩水（０．９％  ｗｔ／ｖ  ＮａＣｌ）に注入して（注射器２３Ｇ）、懸濁ＧＬＰ−１を封入するほぼ球形のデポーを形成した。
【０１２８】
【表９】
2008542437.tif 000010
【実施例９】
【０１２９】
脂質保存溶液を、実施例５．１に従い、以下の組成、すなわちＳＰＣ／ＧＤＯ／Ｐ８０／ＥｔＯＨ＝３７．５／３７．５／１５／１０ｗｔ％で調製した。この脂質保存溶液０．８３ｇを、１０ｍｇのＧＬＰ−１（酢酸塩）が、ＨＡｃを２ｗｔ％含有する水溶液０．１６０ｇに溶解したものを含むバイアルに加えた。得られた製剤を短時間のボルテックス混合後、１時間の転倒型回転を行って混合し、透明で均質な低粘度脂質／ＧＬＰ−１製剤を得た。
【０１３０】
【表１０】
2008542437.tif 000011
【実施例１０】
【０１３１】
脂質保存溶液を、実施例５．１に従い、ＳＰＣ／ＧＤＯ／ＥｔＯＨ＝４６／４６／８ｗｔ％という組成で調製した。ＧＬＰ−１（２０ｍｇ／ｍＬ）を、下記の表に挙げた各組成を有する水溶液に溶解させた（ｐＨは、ＧＬＰ−１を溶解させるために、必要に応じて、ＨＣｌ（水性）またはＮａＯＨ（水性）を用いて調整した）。小容量（１００μＬ）の各ＧＬＰ−１水溶液をガラスバイアルに加え、その後、−８５℃で急速に凍結させた。次いで、バイアルを凍結乾燥機に移して凍結乾燥した。得られた各粉末に、１００〜２００ｍｇの脂質保存溶液を添加し、その後、ボルテックス混合を行った。そのようにして、ＧＬＰ−１含有粉末を液体脂質製剤に懸濁させた（ｇ当たり１０〜２０ｍｇのＧＬＰ−１を含有する製剤）。各製剤を、過剰量の塩水（０．９％  ｗｔ／ｖ  ＮａＣｌ）に注入して（注射器２３Ｇ）、懸濁ＧＬＰ−１粉末を封入するほぼ球形のデポーを形成した。
【０１３２】
【表１１】
2008542437.tif 000012
【実施例１１】
【０１３３】
脂質保存溶液を、実施例５．１に従い、ＳＰＣ／ＧＤＯ／ＥｔＯＨ＝４６／４６／８ｗｔ％という組成で調製した。ＧＬＰ−１（１ｍｇ／ｍＬ）を、スクロース（２ｍｇ／ｍＬ）と、グリシン（１ｍｇ／ｍＬ）と、クエン酸塩（１ｍｇ／ｍＬ）とＦ６８（０．０５ｍｇ／ｍＬ）とを含有する水溶液３０ｍＬに溶解させた（ｐＨは、ＧＬＰ−１を溶解させるために、必要に応じて、ＨＣｌ（水性）を用いて調整した）。このＧＬＰ−１水溶液を噴霧乾燥して（ビュッヒ（ＢＵｅＣＨＩ）ミニスプレードライヤー）ＧＬＰ−１含有粉末を形成した。得られた粉末（５０ｍｇ）に、４５０ｍｇの脂質保存溶液を添加し、その後、ボルテックス混合を行った。そのようにして、ＧＬＰ−１含有粉末を液体脂質製剤に懸濁させた。この製剤を、過剰量の塩水（０．９％  ｗｔ／ｖ  ＮａＣｌ）に注入して（注射器２３Ｇ）、懸濁ＧＬＰ−１粉末を封入するほぼ球形のデポーを形成した。
【実施例１２】
【０１３４】
脂質保存溶液を、実施例５．１に従い、以下の組成、すなわちＳＰＣ／ＧＤＯ／Ｐ８０／ＥｔＯＨ＝４４．２／４４．２／１．６／１０ｗｔ％で調製した。この脂質保存溶液０．９９ｇを、１０ｍｇのＧＬＰ−１粉末を含むバイアルに加えた。得られた製剤を、バイアルを手で振って混合することによって、ＧＬＰ−１粉末を液体脂質製剤に懸濁させた。この製剤を、過剰量の塩水（０．９％  ｗｔ／ｖ  ＮａＣｌ）に注入して（注射器２３Ｇ）、懸濁ＧＬＰ−１を封入するほぼ球形のデポーを形成した。
【実施例１３】
【０１３５】
１３．１  動物での研究  −  一般的手順
研究の第１日目に、ラット（スプレーグ−ドーリー（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ）の雄ラット）を計量し、標準的な手順に従って静脈カテーテルを挿入することによる実験用に準備した。簡潔に言えば、これらのラットを、エンフルランおよびブプレノルフィン（Ｂｕｐｒｉｎｏｒｐｈｉｎ）を用いて麻酔した。シリコンカテーテルを、頸静脈内に挿入し、固定し、皮膚の下を通して、血液のサンプリングのために外在化させた頸部背側部まで貫通させた。これらラットは、投薬前に４８時間の回復期間が与えられた。
【０１３６】
このカテーテルは、１日に１度、０．９％ＮａＣｌと５０ＩＵ／ｍＬヘパリンですすいだ。これら動物は、回復後、計量し、軽い麻酔下で、製剤Ｂ（実施例６）および製剤Ｆ（実施例８）を１０ｍｇＧＬＰ−１／ｋｇの用量および１ｍＬ／ｋｇの投薬容量で皮下注射した（１製剤当たりｎ＝６）。ＳＰＣ／ＧＤＯ／ＥｔＯＨ＝４５／４５／１０ｗｔ％を含むプラセボ製剤を、参考として、１ｍＬ／ｋｇの投薬容量で注射した（ｎ＝６）。これら動物には、投薬後、水および食物を自由に摂取させた。
１３．２  サンプリング
投薬前、投薬後１時間、３時間、６時間、1日、２日、7日、１４日、２１日および２８日後に、血液試料を採取した。血液０．４ｍＬの血液試料を、氷で冷やしたＥＤＴＡ処理済試験管に採取した。これら試験管に、市販のＤＰＰ−ＩＶ阻害剤を加えた。各サンプリング後、注射用無菌０．９％ＮａＣｌ（１０ｍＭ  ＥＤＴＡを含む）を、カテーテルを通してラットに与えて喪失した血液量を補った。
１３．３  生物分析
分析前に、これら試料を−８０℃未満で保存した。ＥＤＴＡ血漿試料におけるＧＬＰ−１濃度を、市販のエリザ（ＥＬＩＳＡ）（グルカゴン様ペプチド１（活性）エリザキット（ＥＬＩＳＡ  Ｋｉｔ）、Ｃａｔ．＃ＥＧＬＰ−３５Ｋ、リンコリサーチ（Ｌｉｎｃｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）により測定した。
１３．４結果
図１は、ＰＫプロファイルを示す。２８日間で、ＧＬＰ−１血漿中レベルが、プラセボと比較して著しく上昇したことが分かる。両製剤に関して、放出の遅延相が存在せず、注射後２日以内に、安定したプラトー血漿中ＧＬＰ−１レベルが達成されたことは重要なことである。ＧＬＰ−１デポー製剤の持続期間は、非常に短期間であるペプチドの血漿中半減期（５分未満）を考慮すると、際立ってすばらしい。
【実施例１４】
【０１３７】
脂質保存溶液を、実施例５．１に従い、以下の組成、すなわちＳＰＣ／ＧＤＯ／ＤＯＰＧ／ＥｔＯＨ＝４４／４６／２／８ｗｔ％で調製した。この脂質保存溶液（０．４９ｇ）を、ガラスバイアル中のＧＬＰ−１粉末（１０ｍｇ）に添加した。得られた製剤を、バイアルを手で振って混合することによって、ＧＬＰ−１粉末を液体脂質製剤に懸濁させた。この製剤を、過剰量の塩水（０．９％  ｗｔ／ｖ  ＮａＣｌ）に注入して（注射器２３Ｇ）、懸濁ＧＬＰ−１を封入するほぼ球形のデポーを形成した。
【図面の簡単な説明】
【０１３８】
【図１】図１は、ＧＬＰ−１（７−３６）アミドを含む２つの製剤と１つのプラセボ製剤を、スプレーグ−ドーリーの雄ラット（ｎ＝６）に皮下投与した後のＧＬＰ−１（７−３６）アミドの血漿中プロファイルを示す。
【図１】
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【手続補正書】
【提出日】平成20年4月10日(2008.4.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）少なくとも１種の中性ジアシル脂質および／またはトコフェロールと、
ｂ）少なくとも１種のリン脂質と、
ｃ）少なくとも１種の生体適合性の有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と、
の低粘度混合物を含む前製剤であって、
水性流体と接触すると、少なくとも１種の液晶相構造を形成するか、または形成することができる前製剤。
【請求項２】
ａ）少なくとも１種のジアシルグリセロールと、
ｂ）少なくとも１種のホスファチジルコリンと、
ｃ）少なくとも１種の酸素含有有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と、
の低粘度混合物を含む請求項１に記載の前製剤であって、
水性流体と接触すると、少なくとも１種の液晶相構造を形成するか、または形成することができる前製剤。
【請求項３】
成分ａ）がＧＤＯを含む請求項１または２に記載の前製剤。
【請求項４】
成分ｂ）が大豆ＰＣを含む請求項１から３の何れかに記載の前製剤。
【請求項５】
成分ｃ）がエタノールを含む請求項１から４の何れかに記載の前製剤。
【請求項６】
当該少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体が、未変性ＧＬＰ−１、リラグルチド（Ｌｉｒａｇｌｕｔｉｄｅ）、ＴＨ−０３８、エクセナチド（Ｅｘｅｎａｔｉｄｅ）および／またはＡＶＥ−０１０から選択される請求項１から５の何れかに記載の前製剤。
【請求項７】
当該前製剤が、付加的に、少なくとも１種のポリエチレンオキシド断片化剤を含む請求項１から６の何れかに記載の前製剤。
【請求項８】
タイプＩ糖尿病、タイプＩＩ糖尿病、過剰体重および肥満から選択される少なくとも１つの症状を治療するための請求項１から７の何れかに記載の前製剤。
【請求項９】
ＧＬＰ−１類似体を用いて、治療を必要とする非ヒト哺乳類である対象に治療を行うための方法であって、当該方法は、当該対象に
ａ）少なくとも１種の中性ジアシル脂質および／またはトコフェロールと、
ｂ）少なくとも１種のリン脂質と、
ｃ）少なくとも１種の生体適合性の有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と、
の低粘度混合物を含む前製剤を投与することを含む方法。
【請求項１０】
前記治療方法が、タイプＩ糖尿病、タイプＩＩ糖尿病、過剰体重および肥満から選択される少なくとも１つの症状を治療するための方法である請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
請求項１から８の何れかに記載の少なくとも１種の前製剤を投与することを含む請求項９または１０の何れかに記載の方法。
【請求項１２】
筋肉内注射または皮下注射によって投与することを含む請求項９から１１の何れかに記載の方法。
【請求項１３】
充填済み投与デバイスを用いて投与することを含む請求項９から１２の何れかに記載の方法。
【請求項１４】
２０ゲージ未満の針を通して投与することを含む請求項９から１３の何れかに記載の方法。
【請求項１５】
７から１８０日ごとに1回投与することを含む請求項９から１４の何れかに記載の方法。
【請求項１６】
投与用量が送達時点において選択される請求項９から１５の何れかに記載の方法。
【請求項１７】
前記選択された用量が、前記対象の体重を基準として選択される請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記投与用量が、注射容量によって選択される請求項１６または１７に記載の方法。
【請求項１９】
ａ）少なくとも１種の中性ジアシル脂質および／またはトコフェロールと、
ｂ）少なくとも１種のリン脂質と、
ｃ）少なくとも１種の生体適合性の有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と、
の低粘度混合物を含む測定用量の前製剤が予め装填された使い捨て投与デバイス。
【請求項２０】
ａ）少なくとも１種のジアシルグリセロールと、
ｂ）少なくとも１種のホスファチジルコリンと、
ｃ）少なくとも１種の酸素含有有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と、
の低粘度混合物を含む測定用量の前製剤が予め装填された使い捨て投与デバイス。
【請求項２１】
１回分の用量である０．０５から２５０ｍｇのＧＬＰ−１類似体を含む請求項１９または２０に記載のデバイス。
【請求項２２】
成分ａ）がＧＤＯを含む請求項１９から２１のいずれかに記載のデバイス。
【請求項２３】
成分ｂ）が大豆ＰＣを含む請求項１９から２２のいずれかに記載のデバイス。
【請求項２４】
少なくとも１種類のＧＬＰ−１類似体を投与するためのキットであり、
ａ）少なくとも１種の中性ジアシル脂質および／またはトコフェロールと、
ｂ）少なくとも１種のリン脂質と、
ｃ）少なくとも１種の生体適合性の有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と
の低粘度混合物を含む測定用量の製剤を含むキット。
【請求項２５】
少なくとも１種類のＧＬＰ−１類似体を投与するためのキットであり、
ａ）少なくとも１種のジアシルグリセロールと、
ｂ）少なくとも１種のホスファチジルコリンと、
ｃ）少なくとも１種の酸素含有有機溶媒と、
ｄ）少なくとも１種のＧＬＰ−１類似体と、
の低粘度混合物を含む測定用量の製剤を含むキット。
【請求項２６】
２０ゲージ未満の針を更に含む請求項２４または２５の何れかに記載のキット。
【請求項２７】
１回分の用量である０．０５から２５０ｍｇのＧＬＰ−１類似体を含む請求項２４から２６の何れかに記載のキット。
【請求項２８】
前記少なくとも１種類のＧＬＰ−１類似体として、未変性ＧＬＰ−１、リラグルチド、ＴＨ−０３１８、エクセナチドおよび／またはＡＶＥ−０１０を、０．０５から２５０ｍｇ前後含む請求項２４から２７の何れかに記載のキット。
【請求項２９】
請求項１に記載の前製剤の形成のためのキットであり、
前記キットは、
ｉ）  ａ）少なくとも１種の中性ジアシル脂質および／またはトコフェロールと、
ｂ）少なくとも１種のリン脂質と、
ｃ）少なくとも１種の生体適合性の有機溶媒と
の低粘度混合物を含む第１容器と、
ｉｉ）  少なくとも1種のＧＬＰ−１類似体を含む第２容器と
を含む２成分キットであるキット。
【請求項３０】
請求項２に記載の前製剤の形成のためのキットであり、
前記キットは、
ｉ）    ａ）少なくとも１種のジアシルグリセロールと、
ｂ）少なくとも１種のホスファチジルコリンと、
ｃ）少なくとも１種の酸素含有有機溶媒と、
の低粘度混合物を含む第１容器と、
ｉｉ）  少なくとも1種のＧＬＰ−１類似体を含む第２容器と
を含む２成分キットであるキット。
【請求項３１】
請求項１から８の何れかに記載の前製剤を投与することを含む美容上の治療方法。
【国際調査報告】
2008542437.tif 000014
2008542437.tif 000015
2008542437.tif 000016
2008542437.tif 000017