(57)【要約】  本発明は、本明細書で定義される式Ｉの化合物に関する。この式Ｉの化合物は、例えば、1,3-セクレターゼの阻害によって処置され得る障害又は状態を処置するために使用され得る。【化１】2008530079.tif 000027
2008530079.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：。
【化１】
2008530079.tif 000019
の化合物。
上記式中、
Ｗは、（ｉ）Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＮＯ2、ＯＨ、Ｏ−Ｃ1−Ｃ8アルキル、ＮＨ2、ＮＨ−Ｃ1−Ｃ8アルキル、Ｎ（Ｃ1−Ｃ8アルキル）2、ＮＨＣＯ−Ｃ1−Ｃ8アルキル及びＣＯＮＨ−Ｃ1−Ｃ8アルキルから各々独立して選択される１〜３の置換基で場合により置換されるＣ6−Ｃ10アリール、並びに（ii）Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＮＯ2、ＯＨ、Ｏ−Ｃ1−Ｃ8アルキル、ＮＨ2、ＮＨ−Ｃ1−Ｃ8アルキル、Ｎ（Ｃ1−Ｃ8アルキル）2、ＮＨＣＯ−Ｃ1−Ｃ8アルキル及びＣＯＮＨ−Ｃ1−Ｃ8アルキルから各々独立して選択される１〜３の置換基で場合により置換されるＣ5−Ｃ10ヘテロアリールからなる群より選択され；
Ｒ1は、３つまでのフルオロ原子で場合により置換されるＣ1−Ｃ6アルキルであり；
Ｒ5及びＲ6は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ8アルキル、Ｃ2−Ｃ8アルケニル、Ｃ3−Ｃ8アルキニル、Ｃ3−Ｃ8シクロアルキル、５〜１０員のヘテロアリール及びＣ6−Ｃ14アリールからなる群より各々独立して選択され；
ｐは、０〜１であり；
【化２】
2008530079.tif 000020
は、単結合又は二重結合を表すものであり、但し、
【化３】
2008530079.tif 000021
が二重結合であるならば、Ｘは、Ｎ、Ｃ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）又はＯであるが、但しＸがＯであり、そしてｐが１ならば、Ｒ10は存在しないものとし；そして但し
【化４】
2008530079.tif 000022
が単結合であるならば、Ｘは、Ｃ0−Ｃ6アルキレン、Ｃ（＝Ｃ1−Ｃ6アルキリデン）、Ｃ（＝Ｎ−Ｏ−Ｃ1−Ｃ6アルキル）、Ｃ（＝Ｎ−Ｃ1−Ｃ6アルキル）、Ｃ＝Ｏ、ＮＨ、ＮＣ1−Ｃ6アルキル又はＯであるものとし；そして
Ｒ10は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＯＨ、−Ｏ−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＣＯ−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＣＯＯ−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＮＨ−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）−Ｃ1−Ｃ6アルキル、５〜１０員のヘテロアリール、５〜１０員のヘテロシクロアルキル、Ｃ6−Ｃ14アリール、Ｓ（Ｏ）qＣ1−Ｃ6アルキル及びＳ（Ｏ）qＣ6−Ｃ10アリールからなる群より選択される。
【請求項２】
Ｒ1がＣＨ3である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ5が、ネオペンチル又はｔ−ブチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
【化５】
2008530079.tif 000023
が単結合を表し、そしてＸが、Ｃ（＝Ｃ1−Ｃ6アルキリデン）、Ｃ（＝Ｎ−Ｏ−Ｃ1−Ｃ6アルキル）、Ｃ（＝Ｎ−Ｃ1−Ｃ6アルキル）、Ｃ＝Ｏ、ＮＨ、ＮＣ1−Ｃ6アルキル及びＯからなる群より選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
【化６】
2008530079.tif 000024
が二重結合を表し、そしてＸが、Ｎ及びＣ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）からなる群より選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ10が、Ｈ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＯＨ、−Ｏ−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＣＯ−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＣＯＯ−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＮＨ−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）−Ｃ1−Ｃ6アルキル、５〜１０員のヘテロアリール、５〜１０員のヘテロシクロアルキル及びＣ6−Ｃ14アリールからなる群より選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
化合物が、式Ｉａ：
【化７】
2008530079.tif 000025
（式中、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4は、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＮＯ2、ＯＨ、Ｏ−Ｃ1−Ｃ8アルキル、ＮＨ2、ＮＨ−Ｃ1−Ｃ8アルキル、Ｎ（Ｃ1−Ｃ8アルキル）2、ＮＨＣＯ−Ｃ1−Ｃ8アルキル及びＣＯＮＨ−Ｃ1−Ｃ8からなる群より各々独立して選択される）
の化合物である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ2がフルオロである、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ4がフルオロである、請求項７に記載の化合物。
【請求項１０】
化合物が、式Ｉａａ：
【化８】
2008530079.tif 000026
の化合物、又は式Ｉａａの化合物の鏡像異性体である、請求項７に記載の化合物。
【請求項１１】
化合物が、光学異性体であるＩａａである、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
化合物が、
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−ピペリジン−１−イル−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−フェニル−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−モルホリン−４−イル−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−メチルアミノ−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−メトキシ−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
１−［３−アセチルアミノ−４−（３,５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−７−（２,２−ジメチル−プロピル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−カルボン酸メチルエステル；
１−［３−アセチルアミノ−４−（３,５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−７−（２,２−ジメチル−プロピル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−カルボン酸ジメチルアミド；
Ｎ−［３−［２−アセチル−７−（２,２−ジメチル−プロピル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
ジメチル−カルバミン酸１−［３−アセチルアミノ−４−（３,５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−７−（２,２−ジメチル−プロピル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−イルエステル；
炭酸１−［３−アセチルアミノ−４−（３,５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−７−（２,２−ジメチル−プロピル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−イルエステルメチルエステル；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−（１,３,３−トリメチル−ウレイド）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
［１−［３−アセチルアミノ−４−（３,５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−７−（２,２−ジメチル−プロピル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−イル］−メチル−カルバミン酸メチルエステル；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−（１−メトキシイミノ−エチル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−（１−メトキシ−エチル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−［３−［２−アセチルアミノ−７−（２,２−ジメチル−プロピル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−メタンスルホニルアミノ−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−（３−メチル−３Ｈ−イミダゾール−４−イルメチレン）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−スルファモイル−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−［３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−モルホリン−４−イル−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−１−（４−フルオロ−ピリジン−２−イルメチル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；及び
１−［３−アセチルアミノ−４−（２,６−ジフルオロ−ピリミジン−４−イル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−７−（２,２−ジメチル−プロピル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−カルボン酸ジメチルアミド
からなる群より選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
請求項１に記載の化合物及び薬学的に受容可能な担体を含む薬学的組成物。
【請求項１４】
アルツハイマー病の発症を予防若しくは遅延させるか、もしそうでなければ軽い認知障害からアルツハイマー病へと進行することが予想される患者のアルツハイマー病の発症を予防若しくは遅延させるか、又は脳のアミロイド血管症の潜在的な重要性、例えば単独及び再発性の葉性出血を予防する方法であって、このような治療を必要とする患者に、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に受容可能な塩を投与することを含む、上記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、本明細書に記載の式Ｉの化合物、このような化合物を含む薬学的組成物、及びこのような化合物を用いて、アルツハイマー病を含む本明細書に記載の障害又は状態を治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
アルツハイマー病（ＡＤ）は、主に老化に関連した脳の進行性変性疾患である。ＡＤは、記憶、認知、推理、判断及び見当識の欠損によって特徴付けられている。疾患が進行するにつれて、多数の認知機能が広範に損なわれるまでに、運動、感覚及び言語の能力がまた影響を受ける。これらの認知欠損は、徐々にではあるが典型的には重篤な障害を導き、そして４〜１２年の範囲で最終的には死を招く。
【０００３】
アルツハイマー病は、脳内の２つの主要な病理学的知見、すなわち：Ａβペプチド又はＡβとして公知であり、そして本明細書ではＡβというペプチドフラグメントの凝集体で主に構成される神経原線維変化及びβアミロイド（又は神経炎性）斑によって特徴付けられている。ＡＤを有する個体は、脳内及び大脳血管内に特徴的なＡβ沈着（それぞれβアミロイド斑及びβアミロイド血管障害）、並びに神経原線維変化を示す。神経原線維変化は、アルツハイマー病だけではなく他の痴呆誘導障害においてもまた生じる。剖検の際に、多数のこれらの病変が、記憶及び認知に重要なヒト脳領域に広く見出されている。より限定された解剖学的分布においては、より少数のこれらの病変が、臨床ＡＤを有さない大多数の老齢のヒト脳に見出されている。アミロイド形成斑及び血管のアミロイド血管障害はまた、トリソミー（ダウン症侯群）、オランダ型アミロイドーシスによる遺伝性の大脳出血及び他の神経変性障害を有する個体の脳を特徴付けている。βアミロイドは、ＡＤの発達の原因となる前駆体、すなわち要因であると考えられている。認知活動を担う脳領域のβアミロイド沈着は、ＡＤの発達に重要な要因であると考えられている。βアミロイド斑は、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）のタンパク質分解によって誘導され、そして３９〜４２アミノ酸を含むＡβ（また時折βＡともいわれる）から主に構成されている。セクレターゼと呼ばれるいくつかのプロテアーゼは、ＡＰＰのプロセシングに関与している。
【０００４】
βセクレターゼによりＡβのＮ末端でＡＰＰを切断すること、及び１つ又はそれ以上のγセクレターゼによりＣ末端でＡＰＰを切断することは、βアミロイド形成経路、すなわちＡβが形成される経路を構成する。αセクレターゼによるＡＰＰの切断は、α−ｓＡＰＰというβアミロイド斑形成を生じないＡＰＰ  Ｉの分泌形態を生産する。この別の経路は、Ａβの形成を妨げる。ＡＰＰフラグメントをタンパク質分解によりプロセシングするという記述は、例えば米国特許第５,４４１,８７０号；同第２５５,７２１,１３０号；及び同第５,９４２,４００号に見出される。
【０００５】
アスパルチルプロテアーゼは、βセクレターゼ切断部位でＡＰＰのプロセシングを担う酵素として同定されている。このβセクレターゼ酵素は、ＢＡＣＥ、Ａｓｐ及びメマプシン（Ｍｅｍａｐｓｉｎ）を含む種々の用語を用いて開示されている。例えば、Ｓｉｎｈａら、１９９９、Ｎａｔｕｒｅ  ４０２：５３７−５５４（ｐ５０１）及び公開されたＰＣＴ出願番号ＷＯ００／１７３６９を参照のこと。
【０００６】
いくつかの証拠筋は、Ａβの進行性大脳沈着が、ＡＤの病因に重要な役割を果たしており、そして認知症状よりも数年又は数１０年先行し得ることを示している。例えば、Ｓｅｌｋｏｅ、１９９１、Ｎｅｕｒｏｎ  ６：４８７を参照のこと。培養物中で成長する神経細胞からＡβが放出されること、並びに正常な個体及びＡＤ患者の両方の脳脊髄液（ＣＳＦ）中にＡβが存在することが示されている。例えば、Ｓｅｕｂｅｒｔら、１９９２、Ｎａｔｕｒｅ  ３５９：３２５−３２７を参照のこと。Ａβは、βセクレターゼによるＡＰＰプロセシングの結果として蓄積しており、従ってこの酵素活性を阻害することが、ＡＤの処置に望ましいと提案されている。
【０００７】
βセクレターゼ切断部位でのＡＰＰのインビボプロセシングは、Ａβ生産の律速段階と考えられており、従ってこれは、ＡＤの処置に対する治療標的である。例えば、Ｓａｂｂａｇｈ，Ｍ.ら、１９９７、Ａｌｚ．Ｄｉｓ．Ｒｅｖ．３、１  １９を参照のこと。ＢＡＣＥ１ノックアウトマウスは、Ａβを生産することができず、そして正常な表現型を示している。ＡＰＰを過剰発現するトランスジェニックマウスと交配すると、この子孫は、コントロール動物と比較して、脳抽出物中のＡβ量が減少していることを示している（Ｌｕｏら、２００１  Ｎａｔｕｒｅ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  ４：２３１−２３２）。この証拠は、βセクレターゼ活性の阻害及び脳内Ａβの減少が、ＡＤ及び他のβアミロイド障害を処置するための治療方法を提供するという提案ををさらに支持している。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
現在、アルツハイマー病の進行を停止、予防又は逆転させるための有効な治療は存在しない。従って、アルツハイマー病の進行を遅らせ得るかそして／又はまず第一にアルツハイマー病を予防し得る薬剤に対する差し迫った必要性が存在する。例えば、βセクレターゼの有効な阻害剤であり、ＡＰＰのβセクレターゼ媒介切断を阻害し、Ａβ生産の有効な阻害剤であり、そして／又はアミロイドβ沈着若しくは斑を減少させるに有効な化合物が、アミロイドβ沈着若しくは斑によって特徴付けられる疾患、例えばＡＤの処置及び予防に必要である。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、次の式Ｉの化合物又はその薬学的に受容可能な塩に関する。
【化１】
2008530079.tif 000003
【００１０】
式中、
Ｗは、（ｉ）Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＮＯ2、ＯＨ、Ｏ−Ｃ1−Ｃ8アルキル、ＮＨ2、ＮＨ−Ｃ1−Ｃ8アルキル、Ｎ（Ｃ1−Ｃ8アルキル）2、ＮＨＣＯ−Ｃ1−Ｃ8アルキル及びＣＯＮＨ−Ｃ1−Ｃ8アルキルから各々独立して選択される１〜３の置換基で場合により置換されるＣ6−Ｃ10アリール、並びに（ii）Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＮＯ2、ＯＨ、Ｏ−Ｃ1−Ｃ8アルキル、ＮＨ2、ＮＨ−Ｃ1−Ｃ8アルキル、Ｎ（Ｃ1−Ｃ8アルキル）2、ＮＨＣＯ−Ｃ1−Ｃ8アルキル及びＣＯＮＨ−Ｃ1−Ｃ8アルキルから各々独立して選択される１〜３の置換基で場合により置換されるＣ5−Ｃ10ヘテロアリールからなる群より選択され、
【００１１】
Ｒ1は、３つまでのフルオロ原子で場合により置換されるＣ1−Ｃ6アルキル、例えば−ＣＨ2Ｆ2、ＣＨＦ2又は−ＣＦ3であり；
Ｒ5及びＲ6は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ8アルキル、Ｃ2−Ｃ8アルケニル、Ｃ3−Ｃ8アルキニル、Ｃ3−Ｃ8シクロアルキル、５〜１０員のヘテロアリール及びＣ6−Ｃ14アリールからなる群より各々独立して選択され；
ｐは、０〜１であり、
【００１２】
【化２】
2008530079.tif 000004
は、単結合又は二重結合を表すものであり、但し
【化３】
2008530079.tif 000005
が二重結合であるならば、Ｘは、Ｎ、Ｃ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）又はＯであるものとし、但しＸがＯであり、そしてｐが１ならば、Ｒ10は存在しないものとし；そして但し
【化４】
2008530079.tif 000006
が単結合であるならば、Ｘは、Ｃ0−Ｃ6アルキレン、Ｃ（＝Ｃ1−Ｃ6アルキリデン）、Ｃ（＝Ｎ−Ｏ−Ｃ1−Ｃ6アルキル）、Ｃ（＝Ｎ−Ｃ1−Ｃ6アルキル）、Ｃ＝Ｏ、ＮＨ、ＮＣ1−Ｃ6アルキル又はＯであるものとし；そして
【００１３】
Ｒ10は、Ｈ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＯＨ、−Ｏ−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＣＯ−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＣＯＯ−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＮＨ−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｎ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）−Ｃ1−Ｃ6アルキル、５〜１０員のヘテロアリール、５〜１０員のヘテロシクロアルキル、Ｃ6−Ｃ14アリール、Ｓ（Ｏ）qＣ1−Ｃ6アルキル及びＳ（Ｏ）qＣ6−Ｃ10アリールからなる群より選択される。
【００１４】
本発明はまた、次に挙げるものに関する：
例えば、βセクレターゼを阻害することによって治療され得る障害又は状態を治療するための薬学的組成物であって、この組成物は、式Ｉの化合物又はその薬学的に受容可能な塩及び薬学的に受容可能な担体を含むものであること；
βセクレターゼを阻害することによって治療され得る障害又は状態を治療する方法であって、この方法は、このような治療を必要とする哺乳動物に、式Ｉの化合物又はその薬学的に受容可能な塩を投与することを含むものであること；
【００１５】
例えば、アルツハイマー病（ＡＤ）、軽い認知障害、ダウン症侯群、オランダ型アミロイドーシスによる遺伝性の大脳出血、脳のアミロイド血管症、血管及び変性が原因の混合性痴呆、パーキンソン病関連性痴呆、進行性核上麻痺関連性痴呆、皮質基底変性関連性痴呆、多発梗塞性痴呆、アルコール性痴呆若しくは他の薬物関連痴呆、頭蓋内腫瘍若しくは大脳外傷関連性痴呆、ハンチントン病関連性痴呆又はＡＩＤＳ関連性痴呆、びまん性レヴィー小体型アルツハイマー病、振せん麻痺を伴う前頭側頭痴呆（ＦＴＤＰ）、封入体筋細胞増加症（ｍｙｏｃｙｔｉｓ）、核上白内障、加齢性黄斑変性（ＡＭＤ）、ハンチントン病、パーキンソン病、不穏下肢症候群、脳卒中、頭部外傷、脊髄損傷、神経系の脱髄疾患、末梢ニューロパチー、前立腺上皮内腫瘍（ｐｉｎ）、脳のアミロイドアンギオパチー、筋萎縮性側索硬化症、多発性硬化症、ドーパミンアゴニスト治療関連性ジスキネジー、精神遅滞、学習障害（読解障害、数学障害又は筆記表現障害を含む）、加齢性の認知低下、健忘障害、神経弛緩薬誘導性振せん麻痺、遅発性ジスキネジー、ツレット症候群、多発性硬化症並びに急性及び慢性の神経変性障害からなる群より選択される障害又は状態を治療するための薬学的組成物であって、この組成物は、式Ｉの化合物又はその薬学的に受容可能な塩及び薬学的に受容可能な担体を含むものであること；
【００１６】
本明細書に列挙される障害又は状態からなる群より選択される障害又は状態を治療する方法であって、この方法は、このような治療を必要とする哺乳動物に、式Ｉの化合物又はその薬学的に受容可能な塩を投与することを含むものであること；
【００１７】
ＡＤの発症を予防若しくは遅延させるか、もしそうでなければ軽い認知障害（ＭＣＩ）からＡＤへと進行することが予想される患者のＡＤの発症を予防若しくは遅延させるか、又は脳のアミロイド血管症の潜在的な重要性、例えば単独及び再発性の葉性出血を予防するための薬学的組成物であって、この組成物は、式Ｉの化合物又はその薬学的に受容可能な塩及び薬学的に受容可能な担体を投与することを含むものであること；並びに
【００１８】
ＡＤの発症を予防若しくは遅延させるか、もしそうでなければＭＣＩからＡＤへと進行することが予想される患者のＡＤの発症を予防若しくは遅延させるか、又は脳のアミロイド血管症の潜在的な重要性、例えば単独及び再発性の葉性出血を予防する方法であって、この方法は、このような治療を必要とする患者に、式Ｉの化合物又はその薬学的に受容可能な塩を投与することを含むものであること。
【００１９】
本発明はまた、薬剤の製造のための式Ｉの化合物又は塩の使用を提供する。
本発明はまた、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）のβセクレターゼ媒介切断を阻害する化合物、薬学的組成物、キット及び方法を提供し、この方法は、このような治療を必要とする患者に、式Ｉの化合物又はその薬学的に受容可能な塩を投与することを含むものである。とりわけ、本発明の化合物、組成物及び方法は、Ａβ生産の阻害、及びＡβの病理学的形態に関連したすべてのヒト又は家畜の疾患又は状態を治療又は予防するに有効である。
【００２０】
本発明の化合物は、βセクレターゼ阻害活性を有する。本発明の化合物のこの阻害活性は、例えば本明細書に記載されるか又は当該分野で公知の１つ又はそれ以上のアッセイを用いて容易に示される。
本発明はまた、本発明の化合物の製造方法、及びこの方法に使用される中間体を提供する。
本発明はまた、１つ又はそれ以上の容器を含む容器キットを含み、各容器は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に受容可能な塩の１つ又はそれ以上の単位用量を含むものである。
【００２１】
本発明の薬学的組成物及び方法はまた、本明細書に記載されている障害又は状態のいずれかの再発予防に使用され得る。このような再発予防は、このような予防を必要とする哺乳動物に、式Ｉの化合物又はその薬学的に受容可能な塩を投与することによって果たされ、そしてこれは、治療方法として考えられる。
【００２２】
本発明の化合物は、光学的中心を有することもあり、従って異なる鏡像異性体配置で存在し得る。上記の式Ｉは、構造的な式Ｉで示された化合物のすべての鏡像異性体、ジアステレオマー及び他の立体異性体、並びにそのラセミ混合物及び他の混合物を含む。個々の異性体は、公知の方法、例えば最終生成物又はその中間体の製造物を光学分割、光学選択反応又はクロマトグラフ分離することによって得られ得る。
【００２３】
ＰＥＴ又はＳＰＥＣＴによって検出され得るように同位体標識された式Ｉの化合物を含む式Ｉの同位体標識化合物又はその薬学的に受容可能な塩はまた、本発明の範囲内である。
式Ｉの化合物のシス及びトランス異性体又はその薬学的に受容可能な塩はまた、本発明の範囲内である。
式Ｉの化合物又はその薬学的に受容可能な塩の互変異性体はまた、本発明の範囲内である。
【００２４】
第一の基又は置換基が、２つ又はそれ以上の基又は置換基で置換されるとき、本発明は、このような基又は置換基の組み合わせが存在する実施態様を限定せずに含むものとする。
第一の基又は置換基が、２つ又はそれ以上の基又は置換基で置換されるとき、このような置換基の数は、置換に利用される第一の基又は置換基の位置数を超えないはずであることは勿論である。
【００２５】
用語「アルキル」は、直鎖又は分枝した飽和炭化水素ラジカルをいう。代表的なアルキル基としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシルなどが挙げられる。用語「アルケニル」は、１つ又はそれ以上の炭素−炭素二重結合を有する直鎖又は分枝した炭化水素ラジカル、例えばビニル、アリル、ブテニルなどを表すために使用される。用語「アルキニル」は、１つ又はそれ以上の炭素−炭素三重結合を有する直鎖又は分枝した炭化水素ラジカル、例えばエチニル、プロパルギル、１−ブチニル、２−ブチニルなどを表すために使用される。
【００２６】
「アリール」は、芳香環上の炭素から水素を除去することによって、芳香族炭化水素から誘導される有機ラジカルを意味する。「芳香族炭化水素」は、少なくとも１つが芳香族である１つ又はそれ以上の環を有する炭化水素（例えば、フェニル、１,２,３,４−テトラヒドロナフチル、ナフチル）を意味する。本発明の好ましいアリール基は、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、インダニル、インデニル、ジヒドロナフチル、フルオレニル、テトラリニル又は６,７,８,９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［ａ］シクロヘプテニルである。本明細書のアリール基は、置換されないかもしれないし、１、２、３又は４の置換可能な位置において種々の置換基で置換されるかもしれない。このような置換基としては、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、モノ（Ｃ1−Ｃ6）アルキルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ6）アルキルアミノ、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ1−Ｃ6ハロアルキル、Ｃ1−Ｃ6ハロアルコキシ、アミノ（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、モノ（Ｃ1−Ｃ6）アルキルアミノ（Ｃ1−Ｃ6）アルキル又はジ（Ｃ1−Ｃ6）アルキルアミノ（Ｃ1−Ｃ6）アルキルが挙げられる。
【００２７】
用語「アルコキシ」及び「アリールオキシ」は、それぞれ「Ｏ−アルキル」及び「Ｏ−アリール」を表す。
用語「シクロアルキル」は、環炭素から水素を除去することによって、飽和炭素環化合物から形成されるラジカルを表す。シクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルなどが挙げられる。本明細書で使用される用語「シクロアルキル」はまた、少なくとも２つの縮合環を含む飽和炭素環から形成されるラジカル、例えばアダマンタニル、デカヒドロナフタリニル、ノルボルナニルなどを表すことを意図する。
【００２８】
用語「ハロ」は、クロロ、フルオロ、ブロモ及びヨードを表す。
用語「ヘテロアリール」は、芳香環上の炭素から水素を除去することによって、ヘテロ芳香族炭化水素から誘導される有機ラジカルを表し、ここで「ヘテロ芳香族炭化水素」は、窒素、酸素及び硫黄からなる群より選択される１つ又はそれ以上の環へテロ原子を含む芳香族炭化水素である。このヘテロアリール基が、１を超えるヘテロ原子を含む場合、このヘテロ原子は、同一かもしれないし異なるかもしれない。好ましいヘテロアリール基としては、酸素、窒素及び硫黄から独立して選択される１〜４のヘテロ原子を含む５員及び６員環が挙げられる。好ましい５員及び６員のヘテロアリール基の例としては、ベンゾ［ｂ］チエニル、クロメニル、フリル、イミダゾリル、インダゾリル、インドリジニル、インドリル、イソベンゾフラニル、イソインドリル、イソキノリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、オキサジニル、オキサゾリル、フタラジニル、プテリジニル、プリニル、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジル、ピロリル、キノリジニル、キノリル、キノキサリニル、チアゾリル、チエニル、トリアジニル、トリアゾリル、テトラゾリル及びキサンテニルが挙げられる。本発明の好ましいヘテロアリール基としてはまた、インドリニル、キナゾリニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、フラニル、チエニル、チアジアゾリル、オキサゾロピリジニル、イミダゾピリジニル、ナフチリジニル、シンノリニル、カルバゾリル、β−カルボリニル、イソクロマニル、クロマニル、テトラヒドロイソキノリニル、イソベンゾテトラヒドロフラニル、イソベンゾテトラヒドロチエニル、イソベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル、ピリドピリジニル、ベンゾテトラヒドロフラニル、ベンゾテトラヒドロチエニル、ベンゾジオキソリル、フェノキサジニル、フェノチアジニル、ベンゾチアゾリル、イミダゾピリジニル、イミダゾチアゾリル、ジヒドロベンゾイソオキサジニル、ベンゾイソオキサジニル、ベンゾオキサジニル、ジヒドロベンゾイソチアジニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、クマリニル、イソクマリニル、クロモニル、クロマノニル、ピリジニル−Ｎ−オキシド、テトラヒドロキノリニル、ジヒドロキノリニル、ジヒドロキノリノニル、ジヒドロイソキノリノニル、ジヒドロクマリニル、ジヒドロイソクマリニル、イソインドリノニル、ベンゾジオキサニル、ベンゾオキサゾリノニル、ピロリルＮ−オキシド、ピリミジニルＮ−オキシド、ピリダジニルＮ−オキシド、ピラジニルＮ−オキシド、キノリニルＮ−オキシド、インドリルＮ−オキシド、インドリニルＮ−オキシド、イソキノリルＮ−オキシド、キナゾリニルＮ−オキシド、キノキサリニルＮ−オキシド、フタラジニルＮ−オキシド、イミダゾリルＮ−オキシド、イソオキサゾリルＮ−オキシド、オキサゾリルＮ−オキシド、チアゾリルＮ−オキシド、インドリジニルＮ−オキシド、インダゾリルＮ−オキシド、ベンゾチアゾリルＮ−オキシド、ベンゾイミダゾリルＮ−オキシド、ピロリルＮ−オキシド、オキサジアゾリルＮ−オキシド、チアジアゾリルＮ−オキシド、トリアゾリルＮ−オキシド、テトラゾリルＮ−オキシド、ベンゾチオピラニ���Ｓ−オキシド、ベンゾチオピラニルＳ,Ｓ−ジオキシド、テトラヒドロカルバゾール、テトラヒドロβカルボリンが挙げられる。本明細書のヘテロアリール基は、置換されていないか、又は明記されているように、１つ又はそれ以上の置換可能位置において種々の基で置換されている。例えばこのようなヘテロアリール基は、例えばＣ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、モノ（Ｃ1−Ｃ6）アルキルアミノ、ジ（Ｃ1−Ｃ6）アルキルアミノ、Ｃ2−Ｃ6アルケニル、Ｃ2−Ｃ6アルキニル、Ｃ1−Ｃ6ハロアルキル、Ｃ1−Ｃ6ハロアルコキシ、アミノ（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、モノ（Ｃ1−Ｃ6）アルキルアミノ（Ｃ1−Ｃ6）アルキル又はジ（Ｃ1−Ｃ6）アルキルアミノ（Ｃ1−Ｃ6）アルキルで場合により置換され得る。
【００２９】
用語「ヘテロシクロアルキル」は、シクロアルキル系を表し、ここで「シクロアルキル」は上記で定義されるものであり、これにおいて１つ又はそれ以上の環炭素原子は、窒素、酸素及び硫黄からなる群より選択されるヘテロ原子で置換される。このヘテロシクロアルキル基が、１を超えるヘテロ原子を含む場合、このヘテロ原子は、同一かもしれないし異なるかもしれない。このようなヘテロシクロアルキル基の例としては、アザビシクロヘプタニル、アゼチジニル、ベンゾアゼピニル、１,３−ジヒドロイソインドリル、インドリニル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、モルホリニル、ピペラジニル、ピペリジル、ピロリジニル及びテトラヒドロ−２Ｈ−１,４−チアジニルが挙げられる。
【００３０】
用語「アルキレン」は、メチレン又は１を超える炭素を有する直鎖若しくは分枝した飽和炭化水素ジラジカルをいい、これにおいて２つの異なる炭素の各々は、自由原子価を有する。代表的なアルキレン基としては、メチレン、−ＣＨ2ＣＨ2−、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）−、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2−、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ2−、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−などが挙げられる。
【００３１】
用語「アルキリデン」は、直鎖又は分枝した飽和炭化水素ジラジカルをいい、これにおいて炭素は、２つの自由原子価を有する。代表的なアルキリデン基としては、メチレン、ＣＨ（ＣＨ3）、Ｃ（ＣＨ3）2、Ｃ（ＣＨ3）Ｃ2Ｈ5などが挙げられる。
【００３２】
環式基は、１を超える仕方で別の基に結合され得る。特定の結合配置が指定されない場合、すべての可能な配置が意図される。例えば、用語「ピリジル」は、２−、３−又は４−ピリジルを含み、そして用語「チエニル」は、２−又は３−チエニルを含む。
【００３３】
本明細書で使用される「哺乳動物」は、哺乳綱のすべてのメンバーである。例として、治療又は予防が必要な哺乳動物は、ヒトであり得る。別の例として、治療又は予防が必要な哺乳動物は、ヒト以外の哺乳動物であり得る。
【００３４】
ＡＰＰ、アミロイド前駆体タンパク質は、例えば、米国特許第５,７６６,８４６号に開示されているＡＰＰ変異体、突然変異体及びアイソフォームを含むすべてのＡＰＰポリペプチドとして定義される。
【００３５】
Ａβ、アミロイドβペプチドは、ＡＰＰのβセクレターゼ媒介切断から生じ、３９、４０、４１、４２及び４３アミノ酸のペプチドを含む、すなわちβセクレターゼ切断部位からアミノ酸３９、４０、４１、４２又は４３に伸長するすべてのペプチドとして定義される。
【００３６】
βセクレターゼ（ＢＡＣＥ１、Ａｓｐ２、メマプシン２）は、Ａβのアミノ末端でＡＰＰの切断を媒介するアスパルチルプロテアーゼである。ヒトβセクレターゼは、例えばＷＯ００／１７３６９に記載されている。
【００３７】
好ましくは、本発明の組成物及び方法は、治療有効量の式Ｉの化合物を使用する。
性質上塩基性である式Ｉの化合物は、種々の無機酸及び有機酸と広範な異なる塩を形成し得る。酸付加塩は、水性溶媒又は好適な有機溶媒媒体、例えばメタノール若しくはエタノール中で、塩基化合物を実質的に等量の選択された鉱酸又は有機酸と処理することによって容易に製造される。この溶媒を慎重に蒸発させると、所望の固体塩が得られる。
【００３８】
性質上塩基性である本発明の薬学的組成物の処方に使用される活性化合物の薬学的に受容可能な酸塩の製造に使用される酸は、非毒性の酸付加塩、すなわち薬理学的に受容可能なアニオンを含む塩を形成する酸である。この塩の非限定例としては、酢酸塩、安息香酸塩、βヒドロキシ酪酸塩、重硫酸塩、重亜硫酸塩、ブロミド、ブチン−１,４−ジオエート、カルポエート、クロリド、クロロ安息香酸塩、クエン酸塩、リン酸二水素塩、ジニトロ安息香酸塩、フマル酸塩、グリコール酸塩、ヘプタノエート、ヘキシン−１,６−ジオエート、ヒドロキシ安息香酸塩、ヨージド、乳酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メタリン酸塩、メタンスルホン酸塩、メトキシ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、リン酸一水素塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、シュウ酸塩、フェニル酪酸塩、フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、フタル酸塩、フェニル酢酸塩、プロパンスルホン酸塩、プロピオレート、プロピオン酸塩、ピロリン酸塩、ピロ硫酸塩、セバケート、スベレート、コハク酸塩、硫酸塩、亜硫酸塩、スルホン酸塩、酒石酸塩、キシレンスルホン酸塩、酸性リン酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸水素塩、コハク酸塩、グルコン酸塩、サッカリン酸塩、硝酸塩、メタンスルホン酸塩、パモエート［すなわち、１,１’−メチレン−ビス−（２−ヒドロキシ−３−ナフトエート）］塩、並びに次の酸の塩、すなわちＣＨ3−（ＣＨ2）n−ＣＯＯＨ（式中、ｎは０〜４である）及びＨＯＯＣ−（ＣＨ2）n−ＣＯＯＨ（式中、ｎは、上記で定義される通りである）が挙げられる。
【００３９】
代表的な実施態様において、式Ｉの化合物は、次の式Ｉａ：
【化５】
2008530079.tif 000007
（式中、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4は、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＮＯ2、ＯＨ、Ｏ−Ｃ1−Ｃ8アルキル、ＮＨ2、ＮＨ−Ｃ1−Ｃ8アルキル、Ｎ（Ｃ1−Ｃ8アルキル）2、ＮＨＣＯ−Ｃ1−Ｃ8アルキル及びＣＯＮＨ−Ｃ1−Ｃ8からなる群より各々独立して選択される）
の化合物である。
【００４０】
本発明の代表的な実施態様は、次の場合：
（Ａ）Ｒ2がフルオロであり；
（Ｂ）Ｒ4がフルオロであり；
（Ｃ）Ｒ3がＨである；
の式Ｉａの化合物を含む。
【００４１】
本発明の代表的な実施態様は、次の場合：
（Ｄ）Ｒ1がＣＨ3であり；
（Ｅ）Ｒ5がネオペンチル又はｔ−ブチルであり；
（Ｆ）Ｒ6がＨであり；
（Ｇ）
【化６】
2008530079.tif 000008
が単結合を表し、そしてＸが、Ｃ（＝Ｃ1−Ｃ6アルキリデン）、Ｃ（＝Ｎ−Ｏ−Ｃ1−Ｃ6アルキル）、Ｃ（＝Ｎ−Ｃ1−Ｃ6アルキル）、Ｃ＝Ｏ、ＮＨ、ＮＣ1−Ｃ6アルキル又はＯであり；
（Ｈ）
【化７】
2008530079.tif 000009
が二重結合を表し、そしてＸが、Ｎ又はＣ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）であり；そして
（Ｉ）Ｒ10が、Ｈ、Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＯＨ、−Ｏ−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＣＯ−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＣＯＯ−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＮＨ−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1−Ｃ6アルキル）−Ｃ1−Ｃ6アルキル、５〜１０員のヘテロアリール、５〜１０員のヘテロシクロアルキル及びＣ6−Ｃ14アリールからなる群より選択される、
の式Ｉ又は式Ｉａの化合物を含む。
【００４２】
本発明の代表的な実施態様はまた、上述の実施態様（Ａ）〜（Ｉ）のすべての組み合わせを含む。
【００４３】
本発明の代表的な実施態様はまた、次の式Ｉａの化合物の光学異性体：
【化８】
2008530079.tif 000010
及びその鏡像異性体を含む。
【００４４】
式Ｉの化合物は、
（ｉ）次の式Ｖの化合物
【化９】
2008530079.tif 000011
（式中、Ｐ1は、Ｒ1又はＲ1−Ｏである）を、次の式IVの化合物
【化１０】
2008530079.tif 000012
と反応させること；
（ii）（ｉ）で形成された生成物からＰ1ＣＯ基を除去すること；及び
（iii）（ii）で形成された生成物を、Ｒ1ＣＯ基を転移し得る化合物と反応させてＩを形成すること、
を含むものであるが、但しＰ1＝Ｒ1である場合、工程（ii）及び（iii）はないものとする方法によって製造され得る。
【００４５】
本明細書で使用される「（ｉ）で形成された生成物からＰ1ＣＯ基を除去すること」は、当業者に公知のすべての方法で脱保護工程を行うことをいう。このような工程は、Ｐ1ＣＯ−Ｎ結合の加水分解、又は（ｉ）で形成された生成物を、Ｐ1ＣＯ−ＮＨのアシル炭素で求核置換を行い得る求核試薬と反応させることであり得るが、これらに限定されない。例えば、酸又は塩基加水分解を用いて、Ｐ1ＣＯ−Ｎ結合を加水分解し、それによってＰ1ＣＯ基を除去し得る。
【００４６】
本明細書で使用される「Ｒ1ＣＯ基を転移し得る化合物」は、式Ｒ1ＣＯＸ2のすべての化合物をいい、式中Ｘ2は脱離基である。例えばＸ2は、ハロゲン、例えばクロリド、又はシアノ基、又はＣ1−Ｃ6アルコキシ基、又はＣ1−Ｃ6アルキルチオ基であり得るがこれらに限定されない。
【００４７】
あるいは、式Ｉの化合物は、例えば、
（ｉ）次の式IIの化合物
【化１１】
2008530079.tif 000013
（式中、Ｅ1は、Ｃ1−Ｃ6アルキル、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ又はハロで場合により置換される（Ｃ1−Ｃ12アルキル）又は（Ｃ6−Ｃ10アリール）である）を、次の式IIIの化合物
【化１２】
2008530079.tif 000014
と反応させること；及び
（ii）（ｉ）で形成された生成物を、ホウ素−水素結合を含む還元剤で処理すること、を含む方法によって製造され得る。この還元剤は、例えばボロヒドリドであり得る。
【００４８】
この方法はさらに、
（iii）（ii）で形成された生成物を、水中の酸、Ｃ1−Ｃ4アルキルアルコール、又は水及びＣ1−Ｃ4アルキルアルコールの混合物で処理すること、
を含み得る。
【００４９】
式IIの化合物は、例えば次の式IIａ：
【化１３】
2008530079.tif 000015
を有する化合物であり得る。
【００５０】
例として、スキーム１に示されるように、置換アミノテトラリン４を、好適な不活性溶媒、例えばＴＨＦ、ジオキサン又はアルコール中のエポキシド５と反応させることができ、ここでイソプロパノールは、５０〜１５０℃の範囲の温度が好ましく、ここで８０〜１２０℃が、ＢＯＣ保護中間体３を得るのに好ましい。３の脱保護を、酸、例えばトリフルオロ酢酸、水性硫酸又は好ましくは水性塩酸での処理によって行い、２を得ることができる。化合物１は、塩化アセチル及び第三級アミン塩基、アセチルイミダゾールを用いるか、又は好ましくは酢酸及びアミドカップリング試薬、例えばＥＤＣ．ＨＣｌとの２のアセチル化によって製造され得る。
【００５１】
【化１４】
2008530079.tif 000016
【００５２】
別の例として、スキーム２に示されるように、置換テトラロン６ａ−ｉを、酢酸中のＮａＢＣＮＨ3又は好ましくは１,２−ジクロロエタン中のＮａＢ（ＯＡｃ）3Ｈを用いて、保護アミン７との還元的アミノ化条件に供し、次いでメタノール中の水性酸で処理して、式Ｉの化合物を得ることができる。
【００５３】
【化１５】
2008530079.tif 000017
【００５４】
反応物の構造に対する種々の置換及び他の修飾が、各工程又はスキーム全体の首尾良い結果に影響を及ぼすことなく、スキーム１又はスキーム２のいずれかの各工程で行われ得ることを、当業者なら容易に認識している。
【００５５】
中間体テトラロン６ａ−ｈの実施例及び中間体アミノ−テトラリン４の実施例の製造を、スキーム３に示す。ハロゲン化α−テトラロン６ｉは、不活性溶媒、例えばジエチルエーテル又は好ましくはＴＨＦ中のパラジウム触媒、好ましくはＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ2の存在下、アルキル亜鉛試薬を用いたＮｅｇｉｓｈｉ型カップリングを介して、６ｈ型のアルキル化テトラロンに転換され得る。６ｈは、他のテトラロン中間体に転換され得る。従って、Ｎｏｌａｎら（Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．、２００２、４、４０５３）に記載されている方法に従って、ハロゲン化アリールで６ｈを処理することにより、アリール又はヘテロアリール置換テトラロン６ｃを得ることができる。未反応性溶媒、例えば酢酸又はジエチルエーテル中で酢酸エチル又は臭素を還流しながらＣｕＢｒ2で６ｈをαハロゲン化することにより６ｇを得て、次いでこれを、種々の求核試薬、例えば限定されないが、アミン、アルコキシド、スルフィドで処理して、式６ａの化合物を得ることができる。式６ｃの化合物はまた、Ｈｕｓｓｅｙ及びＨｅｒｒ（ＪＯＣ、１９５９、２４、８４３）に記載されている方法に従って、アリールグリニャール試薬で６ｇを処理することにより得ることができる。Ｗａｃｈｔｅｒら（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、１９９６、３９、８３４）によって記載されているような方法に従って、種々のアリールアルデヒド、ヘテロアリールアルデヒド及びアルキルアルデヒドで６ｈを縮合することによりオレフィン６ｆを得ることができ、次いでこれを、金属触媒、例えば炭素上のパラジウムを用いて、還元剤、例えば水素で処理することによって、化合物６ｅに転換し得る。オキシム６ｂは、Ｏｋａら（Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．、１９７７、２５、６３２）の縮合方法に従って６ｈから製造され得る。式６ｄのケトエステル化合物は、塩基、例えば水素化ナトリウム又はナトリウムエトキシドで６ｈを処理し、その後Ｃｈａｋｒａｂａｒｔｙら（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、２００３、１５、２２９４）によって記載された一般方法に従って、炭酸ジアルキルと反応させることによって製造され得る。６ａ−ｉ型のすべての化合物は、当業者に明らかな方法を用いて、他の種にさらに転換され得る。
【００５６】
式４のαアミンテトラリンは、式６ａ−ｉのテトラロンから製造され得る。塩基、例えばナトリウムエトキシド又はピリジンの存在下で、塩酸ヒドロキシルアミンで６ａ−ｉを処理することによりオキシムを得て、次いでこれを、金属水素化物、例えば水素化アルミニウムリチウム若しくはボランを用いて還元するか、又はラネーニッケル若しくは炭素上のパラジウムの存在下で水素化して、アミノ−テトラリン４を形成し得る。同様に、例えば酢酸アンモニウム及び水素化ホウ素、例えば水素化ホウ素ナトリウム、ナトリウムシアノボロヒドリド又はナトリウムトリアセトキシボロヒドリドとの６ａ−ｉの還元的アミノ化により、化合物４もまた得ることができる。
【００５７】
【化１６】
2008530079.tif 000018
【００５８】
本発明の代表的な化合物としては、以下に示されるものが挙げられる：
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−ピペリジン−１−イル−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−フェニル−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−モルホリン−４−イル−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−メチルアミノ−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−メトキシ−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
１−［３−アセチルアミノ−４−（３,５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−７−（２,２−ジメチル−プロピル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−カルボン酸メチルエステル；
１−［３−アセチルアミノ−４−（３,５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−７−（２,２−ジメチル−プロピル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−カルボン酸ジメチルアミド；
Ｎ−［３−［２−アセチル−７−（２,２−ジメチル−プロピル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
ジメチル−カルバミン酸１−［３−アセチルアミノ−４−（３,５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−７−（２,２−ジメチル−プロピル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−イルエステル；
炭酸１−［３−アセチルアミノ−４−（３,５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−７−（２,２−ジメチル−プロピル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−イルエステルメチルエステル；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−（１,３,３−トリメチル−ウレイド）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
［１−［３−アセチルアミノ−４−（３,５−ジフルオロ−フェニル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−７−（２,２−ジメチル−プロピル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−イル］−メチル−カルバミン酸メチルエステル；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−（１−メトキシイミノ−エチル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−（１−メトキシ−エチル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−［３−［２−アセチルアミノ−７−（２,２−ジメチル−プロピル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−メタンスルホニルアミノ−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−（３−メチル−３Ｈ−イミダゾール−４−イルメチレン）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−スルファモイル−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミド；
Ｎ−［３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−モルホリン−４−イル−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−１−（４−フルオロ−ピリジン−２−イルメチル）−２−ヒドロキシ−プロピル］−アセトアミド；及び
１−［３−アセチルアミノ−４−（２,６−ジフルオロ−ピリミジン−４−イル）−２−ヒドロキシ−ブチルアミノ］−７−（２,２−ジメチル−プロピル）−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−２−カルボン酸ジメチルアミド。
【００５９】
本発明の薬学的組成物は、式Ｉの化合物及び薬学的に受容可能な担体を含む組成物であり得る。この薬学的組成物は、１つ又はそれ以上の薬学的に受容可能な担体を用いて従来方法で処方され得る。この組成物は、経口、頬、鼻腔内、非経口（例えば、静脈内、筋肉内、腹腔内又は皮下若しくは移植片を通じて）、鼻、膣、舌下、直腸若しくは局所投与のために処方され得るか、又は吸入若しくは吹送による投与に好適な形態に処方され得る。本発明の組成物において、式Ｉの化合物は、好ましくは、本明細書に記載されている状態を治療するに有効な量で存在する。同様に、本明細書に記載されている状態の治療方法において、投与される式Ｉの化合物量は、好ましくは、この状態を治療するに有効な量である。
【００６０】
本発明は、本明細書に記載されている疾患若しくは状態を有する患者を治療するか、又は患者がこれらに罹患するのを予防する方法を含む。
【００６１】
一実施態様において、本発明の治療方法は、アルツハイマー病の治療に使用される。
一実施態様において、この治療方法は、アルツハイマー病の発症の予防又は遅延を助け得る。
一実施態様において、この治療方法は、疾患が軽い認知障害である場合に使用され得る。
一実施態様において、この治療方法は、疾患がダウン症侯群である場合に使用され得る。
一実施態様において、この治療方法は、疾患がオランダ型アミロイドーシスによる遺伝性の大脳出血である場合に使用され得る。
【００６２】
一実施態様において、この治療方法は、疾患が脳のアミロイド血管症である場合に使用され得る。
一実施態様において、この治療方法は、疾患が変性痴呆又は痴呆である場合に使用され得る。
一実施態様において、この治療方法は、疾患がびまん性レヴィー小体型アルツハイマー病の場合に使用され得る。
一実施態様において、この治療方法は、現存する疾患を治療し得る。
一実施態様において、この治療方法は、疾患の発達を予防し得る。
【００６３】
一実施態様において、この治療方法は、次の治療有効量、すなわち：経口投与については、およそ０.１ｍｇ／日〜およそ１,０００ｍｇ／日；非経口、舌下、鼻腔内、鞘内投与については、およそ０.５〜およそ１００ｍｇ／日；デポー（ｄｅｐｏ）投与及び移植片については、およそ０.５ｍｇ／日〜およそ５０ｍｇ／日；局所投与については、およそ０.５ｍｇ／日〜およそ２００ｍｇ／日；直腸投与については、およそ０.５ｍｇ〜およそ５００ｍｇを使用し得るものである。
【００６４】
一実施態様において、この治療方法は、次の治療有効量、すなわち：経口投与については、およそ１ｍｇ／日〜およそ１００ｍｇ／日；及び非経口投与については、およそ５〜およそ５０ｍｇ／日を使用し得るものである。
一実施態様において、この治療方法は、経口投与については、およそ５ｍｇ／日〜およそ５０ｍｇ／日の治療有効量を使用し得るものである。
【００６５】
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に受容可能な塩を含む薬学的組成物を含む。
本発明は、本明細書に記載されている疾患若しくは状態を有する患者を治療するか、又は患者がこれらに罹患することを予防するときに使用する薬剤の製造に関して、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に受容可能な塩を使用することを含む。
【００６６】
一実施態様において、この式（Ｉ）の化合物の使用は、疾患がアルツハイマー病である場合に採用され得る。
一実施態様において、この式（Ｉ）の化合物の使用は、アルツハイマー病の発症の予防又は遅延を助け得る。
一実施態様において、この式（Ｉ）の化合物の使用は、疾患が軽い認知障害である場合に採用され得る。
一実施態様において、この式（Ｉ）の化合物の使用は、疾患がダウン症侯群である場合に採用され得る。
【００６７】
一実施態様において、この式（Ｉ）の化合物の使用は、疾患がオランダ型アミロイドーシスによる遺伝性の大脳出血である場合に採用され得る。
一実施態様において、この式（Ｉ）の化合物の使用は、疾患が脳のアミロイド血管症である場合に採用され得る。
一実施態様において、この式（Ｉ）の化合物の使用は、疾患が変性痴呆又は痴呆である場合に採用され得る。
一実施態様において、この式（Ｉ）の化合物の使用は、疾患がびまん性レヴィー小体型アルツハイマー病である場合に採用され得る。
【００６８】
一実施態様において、この化合物の使用は、以下の酸、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ＣＨ3−（ＣＨ2）n−ＣＯＯＨ（式中、ｎは０〜４である）、ＨＯＯＣ−（ＣＨ2）n−ＣＯＯＨ（式中、ｎは上記で定義される通りである）、ＨＯＯＣ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯＯＨ及びフェニル−ＣＯＯＨ、酢酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、重炭酸、重硫酸、重酒石酸（ｂｉｔａｒｔａｒｉｃ）、酪酸、エデト酸カルシウム、カンシル酸（ｃａｍｓｙｌｉｃ）、炭酸、クロロ安息香酸、クエン酸、エデト酸、エジシル酸（ｅｄｉｓｙｌｉｃ）、エストル酸（ｅｓｔｏｌｉｃ）、エシル（ｅｓｙｌ）、エシル酸（ｅｓｙｌｉｃ）、ギ酸、フマル酸、グルセプト酸（ｇｌｕｃｅｐｔｉｃ）、グルコン酸、グルタミン酸、グリコリルアルサニル酸、ヘキサミック酸（ｈｅｘａｍｉｃ）、ヘキシルレゾルシン酸、ヒドラバミック酸（ｈｙｄｒａｂａｍｉｃ）、臭化水素酸、塩酸、ヨウ化水素酸、ヒドロキシナフトエ酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、メチル硝酸、メチル硫酸、粘液酸、ムコン酸、ナプシル酸（ｎａｐｓｙｌｉｃ）、硝酸、シュウ酸、ｐ−ニトロメタンスルホン酸、パモ酸（ｐａｍｏｉｃ）、パントテン酸、リン酸、一水素リン酸、ニ水素リン酸、フタル酸、ポリガラクツロン酸（ｐｏｌｙｇａｌａｃｔｏｕｒｏｎｉｃ）、プロピオン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファミン酸、スルファニル酸、スルホン酸、硫酸、タンニン酸、酒石酸、テオクリック酸（ｔｅｏｃｌｉｃ）及びトルエンスルホン酸の塩からなる群より選択される薬学的に受容可能な塩を使用する。他の受容可能な塩については、Ｉｎｔ.Ｊ．Ｐｈａｒｍ．、３３、２０１−２１７（１９８６）及びＪ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、６６（１）、１、（１９７７）を参照のこと。
【００６９】
これらの方法は、治療有効量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に受容可能な塩の投与を各々含むものである。
【００７０】
本発明はまた、βセクレターゼ活性の阻害方法を含み、これは、このβセクレターゼを有効な阻害量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に受容可能な塩に曝露することを含むものである。
【００７１】
一実施態様において、この方法は、５０ミクロモル未満の濃度で酵素活性の５０％を阻害する化合物を使用するものである。
一実施態様において、この方法は、１０ミクロモル又はそれ以下の濃度で酵素活性の５０％を阻害する化合物を使用するものである。
一実施態様において、この方法は、１ミクロモル又はそれ以下の濃度で酵素活性の５０％を阻害する化合物を使用するものである。
【００７２】
一実施態様において、この方法は、１００ナノモル未満の濃度で酵素活性の５０％を阻害する化合物を使用するものである。
一実施態様において、この方法は、１０ナノモル又はそれ以下の濃度で酵素活性の５０％を阻害する化合物を使用するものである。
【００７３】
一実施態様において、この方法は、このβセクレターゼをインビトロでこの化合物に曝露することを含むものである。
一実施態様において、この方法は、このβセクレターゼを細胞内でこの化合物に曝露することを含むものである。
一実施態様において、この方法は、このβセクレターゼを動物の細胞内でこの化合物に曝露することを含むものである。
一実施態様において、この方法は、このβセクレターゼをヒト内でこの化合物に曝露することを含むものである。
【００７４】
本発明はまた、βセクレターゼ活性を阻害するために、反応混合物中で、ＡＰＰ−６９５アミノ酸アイソタイプに対して番号付けされたＭｅｔ５９６とＡｓｐ５９７との間の部位、又はそのアイソタイプ若しくは突然変異体の対応する部位でアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の切断を阻害する方法；細胞内でアミロイドβペプチド（Ａβ）の生産を阻害する方法；動物内でβアミロイド斑の生産を阻害する方法；及び脳のβアミロイド沈着によって特徴付けられる疾患を治療又は予防する方法を含み、これは、この反応混合物を、有効な阻害量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に受容可能な塩に曝露することを含むものである。
【００７５】
一実施態様において、この方法は、次の切断部位、すなわち：ＡＰＰ−７５１アイソタイプに対して番号付けされたＭｅｔ６５２とＡｓｐ６５３との間；ＡＰＰ−７７０アイソタイプに対して番号付けされたＭｅｔ６７１とＡｓｐ６７２との間；ＡＰＰ−６９５スウェーデン型突然変異のＬｅｕ５９６とＡｓｐ５９７との間；ＡＰＰ−７５１スウェーデン型突然変異のＬｅｕ６５２とＡｓｐ６５３との間；又はＡＰＰ−７７０スウェーデン型突然変異のＬｅｕ６７１とＡｓｐ６７２との間を使用するものである。
【００７６】
一実施態様において、この方法は、この反応混合物をインビトロで曝露するものである。
一実施態様において、この方法は、この反応混合物を細胞内で曝露するものである。
一実施態様において、この方法は、この反応混合物を動物細胞内で曝露するものである。
一実施態様において、この方法は、この反応混合物をヒト細胞内で曝露するものである。
【００７７】
本発明はまた、細胞内でアミロイドβペプチド（Ａβ）の生産を阻害する方法を含み、これは、この細胞に、有効な阻害量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に受容可能な塩を投与することを含むものである。
一実施態様において、この方法は、動物に投与することを含む。
一実施態様において、この方法は、ヒトに投与することを含む。
【００７８】
本発明はまた、動物内でβアミロイド斑の生産を阻害する方法を含み、これは、この動物に有効な阻害量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に受容可能な塩を投与することを含むものである。
一実施態様において、この方法は、ヒトに投与することを含む。
【００７９】
本発明はまた、脳のβアミロイド沈着によって特徴付けられる疾患を治療又は予防する方法を含み、これは、患者に有効な治療量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に受容可能な塩を投与することを含むものである。
一実施態様において、この方法は、５０ミクロモル未満の濃度で酵素活性の５０％を阻害する化合物を使用するものである。
一実施態様において、この方法は、１０ミクロモル又はそれ以下の濃度で酵素活性の５０％を阻害する化合物を使用するものである。
一実施態様において、この方法は、１ミクロモル又はそれ以下の濃度で酵素活性の５０％を阻害する化合物を使用するものである。
一実施態様において、この方法は、１０ナノモル又はそれ以下の濃度で酵素活性の５０％を阻害する化合物を使用するものである。
一実施態様において、この方法は、およそ０.１〜およそ１０００ｍｇ／日の範囲の治療量で化合物を使用するものである。
一実施態様において、この方法は、およそ１５〜およそ１５００ｍｇ／日の範囲の治療量で化合物を使用するものである。
一実施態様において、この方法は、およそ１〜およそ１００ｍｇ／日の範囲の治療量で化合物を使用するものである。
一実施態様において、この方法は、およそ５〜およそ５０ｍｇ／日の範囲の治療量で化合物を使用するものである。
【００８０】
本発明はまた、βセクレターゼ複合体を生産する方法を含み、これは、この複合体の生産に好適な条件下で、反応混合物中でβセクレターゼを式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に受容可能な塩に曝露することを含むものである。
一実施態様において、この方法は、インビトロで曝露することを使用するものである。
一実施態様において、この方法は、細胞である反応混合物を使用するものである。
【００８１】
本発明はまた、アッセンブルされ得るコンポーネント部分を含むコンポーネントキットを含み、これにおいて、少なくとも１つのコンポーネント部分は、容器に包含される式Ｉの化合物を含むものとする。
一実施態様において、このコンポーネントキットは、凍結乾燥された化合物を含むものであり、そして少なくとも１つのさらなるコンポーネント部分は、希釈剤を含むものとする。
【００８２】
本発明はまた、１つ又はそれ以上の容器を含む容器キットを含み、各々の容器は、１つ又はそれ以上の単位用量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に受容可能な塩を含むものとする。
一実施態様において、この容器キットは、経口送達に適合した各容器を含むものであり、そして錠剤、ゲル又はカプセルが挙げられる。
一実施態様において、この容器キットは、非経口送達に適合した各容器を含むものであり、そしてデポー製品、シリンジ、アンプル又はバイアルが挙げられる。
一実施態様において、この容器キットは、局所送達に適合した各容器を含み、そしてパッチ、医療パッド（ｍｅｄｉｐａｄ）、軟膏又はクリームが挙げられる。
【００８３】
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に受容可能な塩；及び抗酸化剤、抗炎症剤、γセクレターゼ阻害剤、神経分化誘導物質、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、スタチン、Ａβ及び抗Ａβ抗体からなる群より選択される１つ又はそれ以上の治療剤を含む薬剤キットを含む。
【００８４】
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に受容可能な塩；及び不活性希釈剤又は食用担体を含む組成物を含む。
一実施態様において、この組成物は、油である担体を含む。
【００８５】
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に受容可能な塩；及び結合剤、賦形剤、崩壊剤、潤滑剤又は滑剤（ｇｉｌｄａｎｔ）を含む組成物を含む。
本発明はまた、クリーム、軟膏又はパッチ中に配置された式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に受容可能な塩を含む組成物を含む。
【００８６】
本発明は、アルツハイマー病の治療および予防に有用な式（Ｉ）の化合物及び本明細書に含まれる他の式の化合物を提供する。スキームＩに示される方法に加えて、本発明の化合物の製造に応用され得る当該分野の製造方法の例は、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９８、６３、４８９８−４９０６；Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９７、６２、９３４８−９３５３；Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９６、６１、５５２８−５５３１；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９３、３６、３２０−３３０；Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９９、１２１、１１４５−１１５５；及びそれらの中に引用される参考文献に見出される。また、米国特許第６,１５０,５３０号、同第５,８９２,０５２号、同第５,６９６,２７０号及び同第５,３６２,９１２号、並びにそれらの中に引用される参考文献を参照のこと。
【００８７】
本発明の化合物は、互変異性体として幾何異性体又は光学異性体を含み得る。従って、本発明は、すべての互変異性体並びに純粋な幾何異性体、例えばＥ及びＺ幾何異性体をそれらの混合物として含む。さらに本発明は、純粋な鏡像異性体及びジアステレオマーを、それらの混合物（ラセミ混合物を含む）として含む。個々の幾何異性体、鏡像異性体又はジアステレオマーは、キラルクロマトグラフィーが挙げられるがこれに限定されない当業者に公知の方法によって製造又は単離され、ジアステレオマーを製造し、このジアステレオマーを分離し、次いで当該分野で周知の方法を通じてこのジアステレオマーを鏡像異性体に転換することによって製造又は単離され得る。
【００８８】
指定された立体化学を有する本発明の化合物は、他の鏡像異性体、ジアステレオマー、幾何異性体又は互変異性体との混合物（ラセミ混合物を含む）に包含され得る。好ましい局面において、本発明の化合物は、代表的には、これらの混合物中で、少なくとも５０パーセントのジアステレオマー及び／又は鏡像異性体過剰で存在している。好ましくは、本発明の化合物は、これらの混合物中で、少なくとも８０パーセントのジアステレオマー及び／又は鏡像異性体過剰で存在している。より好ましくは、所望の立体化学を有する本発明の化合物は、少なくとも９０パーセントのジアステレオマー及び／又は鏡像異性体過剰で存在している。なおより好ましくは、所望の立体化学を有する本発明の化合物は、少なくとも９９パーセントのジアステレオマー及び／又は鏡像異性体過剰で存在している。
【００８９】
本発明の化合物は、本明細書に開示されている疾患又は状態の治療又は予防に使用され得る。これらの疾患を治療又は予防するとき、本発明の化合物は、患者にとって最良となるように、個別又は組み合わせてのいずれかで使用され得る。
【００９０】
用語「予防」は、疾患症状の発達を遅らせること、この疾患の発症を遅延させること、又は患者の疾患の発達をともかく防ぐことをいい、この場合、患者は、投与時に疾患を有すると診断されていないが、通常疾患が発達するか、又は疾患の危険性が増大することが予想されるものとする。予防はまた、年齢、家族病歴、遺伝子又は染色体異常及び／又は疾患に対する１つ又はそれ以上の生物学的マーカー、例えばＡＰＰの既知の遺伝子突然変異又は脳組織若しくは体液中のＡＰＰ切断生成物の存在に起因して疾患にかかりやすいと考えられる個体へ本発明の化合物を投与することを含む。
【００９１】
上記の疾患の治療又は予防において、本発明の化合物は、好ましくは治療有効量で投与される。この治療有効量は、当業者に公知のように、使用される特定の化合物及び投与経路如何により変化する。
【００９２】
診断された上記の状態のいずれかを示す患者の治療において、医師は、本発明の化合物を直ちに投与し、そして必要であれば無期限に投与を継続し得る。アルツハイマー病を有すると診断されないが、アルツハイマー病の実質的危険性にあると考えられる患者の治療において、この患者が、早期にアルツハイマー前症状、例えば老化に関連した記憶又は認知問題を最初に経験したときに、医師は好ましくは治療を開始すべきである。さらに、遺伝子マーカー（例えばＡＰＯＥ４）又はアルツハイマー病の予測となる他の生物学的指標の検出を通じて、アルツハイマー病を発達する危険性にあると定められ得るいくらかの患者が存在している。これらの状況において、たとえ患者が疾患症状を有していなくても、本発明の化合物の投与は、症状が現れる前に開始され得、そして治療は、疾患の発症を予防又は遅延させるために無期限に継続され得る。
【００９３】
本発明の化合物は、経口投与、非経口（ＩＶ、ＩＭ、デポー（ｄｅｐｏ）−ＩＭ、ＳＱ及びデポーＳＱ）投与、舌下投与、鼻腔内（吸入）投与、鞘内投与、局所投与又は直腸投与され得る。当業者に公知の投薬形態は、本発明の化合物の送達に好適である。
【００９４】
治療有効量の本発明の化合物を含む組成物が提供される。この化合物は、好ましくは、好適な薬学的製造物、例えば経口投与については錠剤、カプセル又はエリキシル剤、非経口投与については滅菌溶液又は懸濁液に処方される。代表的には、上記の化合物は、当該分野で周知の技術及び方法を用いて薬学的組成物に処方される。
【００９５】
本発明の化合物若しくは本発明の化合物の混合物又は生理学的に受容可能な塩およそ１〜５００ｍｇは、生理学的に受容可能なビヒクル、担体、賦形剤、結合剤、防腐剤、安定剤、香料などとともに、一般に認められた薬務によって要求されるような単位投薬形態に調合される。これらの組成物又は調製物中の活性物質量は、指示される範囲の好適な投薬量が得られるような量である。この組成物は、好ましくは単位投薬形態に処方され、各投薬量は、およそ２〜およそ１００ｍｇ、より好ましくは、およそ１０〜およそ３０ｍｇの活性成分を含むものである。用語「単位投薬形態」は、単位投薬としてヒト被験体及び他の哺乳動物に好適な物理的に別個の単位をいい、各単位は、所望の治療効果を生じさせるように計算された所定量の活性物質を好適な薬学的賦形剤とともに含むものである。
【００９６】
組成物を製造するために、１つ又はそれ以上の本発明の化合物は、好適な薬学的に受容可能な担体と混合される。この化合物を混合又は添加する際、得られる混合物は、溶液、懸濁液、エマルションなどであり得る。リポソーム懸濁液はまた、薬学的に受容可能な担体として好適であり得る。これらは、当業者に公知の方法に従って製造され得る。得られる混合物の形態は、意図される投与様式及び選択された担体又はビヒクル中の化合物の溶解度を含む多くの要因に左右される。有効濃度は、治療される疾患、障害又は状態の少なくとも１つの症状を軽減又は改善するに十分なものであり、そして経験的に決定され得るものである。
【００９７】
本明細書で提供される化合物の投与に好適な薬学的担体又はビヒクルは、投与の特定の様式に好適であるような当業者に公知のすべての担体を含む。さらに、活性物質はまた、所望の作用を損なわない他の活性物質、又は所望の作用を補うか若しくは別の作用を有する物質と混合され得る。この化合物は、唯一の薬学的活性成分として組成物中に処方され得るか、又は他の活性成分と組み合わせられ得る。
【００９８】
化合物が不十分な溶解度を示す場合、可溶化方法が使用され得る。このような方法は公知であり、そしてジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）のような共溶媒の使用、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）のような界面活性剤の使用、及び水性重炭酸ナトリウムへの溶解が挙げられるがこれらに限定されない。この化合物の誘導体、例えば塩又はプロドラッグはまた、有効な薬学的組成物の処方に使用され得る。
【００９９】
化合物濃度は、障害の少なくとも１つの症状を軽減又は改善する投与（そのために化合物が投与される）の際に、化合物量を送達するに有効なものである。代表的には、この組成物は、単一投薬投与として処方される。
【０１００】
本発明の化合物は、本発明の化合物が体からの急速な排出を妨げる担体、例えば持続放出型処方物又はコーティングとともに製造され得る。このような担体としては、徐放性処方物、例えばマイクロカプセル化送達系が挙げられるがこれに限定されない。この活性化合物は、治療される患者に対して望ましくない副作用がない状態で、治療に有用な効果を発揮するに十分な量で、薬学的に受容可能な担体に包含される。この治療に有効な濃度は、治療される障害に対する公知のインビトロ及びインビボモデル系でこの化合物を試験することにより経験的に決定され得る。
【０１０１】
本発明の化合物及び組成物は、複合用量又は単一用量の容器に包含され得る。この包含された化合物及び組成物は、例えば、使用の際にアッセンブルされ得るコンポーネント部分を含むキットで提供され得る。例えば、凍結乾燥形態の化合物阻害剤及び好適な希釈剤が、使用前に組み合わせのために別々のコンポーネントとして提供され得る。キットは、同時投与のために化合物阻害剤及び第二の治療剤を含み得る。この阻害剤及び第二の治療剤は、別々のコンポーネント部分として提供され得る。キットは、複数の容器を含み得るものであり、各容器は、１つ又はそれ以上の単位用量の本発明の化合物を保持している。この容器は、好ましくは、経口投与については、錠剤、ゲルカプセル、持続放出性カプセルなど；非経口投与については、デポー製品、事前充填済みシリンジ、アンプル、バイアルなど；及び局所投与については、パッチ、医療パッド、クリームなどが挙げられるがこれらに限定されない所望の投与様式に適合するものである。
【０１０２】
薬物組成物中での活性化合物濃度は、この活性化合物の吸収速度、不活性化速度及び排出速度、投薬スケジュール、並びに投与量、並びに当業者に公知の他の要因に左右される。
【０１０３】
活性成分は、一度に投与され得るか、又は時間間隔をあけて投与されるように、多くの少ない用量に分割され得る。正確な投薬量及び治療期間は、治療されている疾患との相関関係であり、そして公知の試験プロトコルを用いて、又はインビボ若しくはインビトロの試験データからの推定により、経験的に決定され得ることは勿論である。濃度及び投薬量の値はまた、緩和されるべき状態の重症度により変化し得ることに注意すべきである。すべての個別の被験体に対して、特定の投薬計画が、個人の必要性及び組成物を投与するか又は組成物の投与を監督する専門家の判断に従ってある期間にわたり調整されるべきであり、そして本明細書に示される濃度範囲は単に代表的なものであり、そして請求される組成物の範囲又は実施の限定が意図されないことはさらに理解すべきである。
【０１０４】
経口投与が所望の場合、この化合物は、胃の酸性環境からこの化合物を保護する組成物中に提供されるべきである。例えば、この組成物は、その完全な状態を胃で維持し、そしてこの活性化合物を腸で解放する腸溶性コーティング中に処方され得る。この組成物はまた、制酸剤又は他のこのような成分と組み合わせて処方され得る。
【０１０５】
経口組成物は、一般に、不活性希釈剤又は食用担体を含み、そして錠剤に圧縮され得るか、又はゼラチンカプセルに包含され得る。経口治療投与の目的として、この活性化合物又は化合物群は、賦形剤と混合され得、そして錠剤、カプセル又はトローチの形態で使用され得る。薬学的に適合性の結合剤及び補助物質は、この組成物の一部として包含され得る。
【０１０６】
錠剤、丸剤、カプセル、トローチなどは、類似の性質の次の成分又は化合物、すなわち：結合剤、例えば、トラガカントゴム、アカシア、コーンスターチ又はゼラチンが挙げられるがこれらに限定されない；賦形剤、例えば、微結晶性セルロース、デンプン又はラクトース；崩壊剤、例えば、アルギン酸及びコーンスターチが挙げられるがこれらに限定されない；潤滑剤、例えば、ステアリン酸マグネシウムが挙げられるがこれに限定されない；滑剤、例えば、コロイド状二酸化ケイ素が挙げられるがこれに限定されない；甘味料、例えば、スクロース又はサッカリン；並びに香料、例えば、ペパーミント、サリチル酸メチル又は果実香料のいずれかを含み得る。
【０１０７】
投薬単位形態がカプセルのとき、これは、上記のタイプの物質に加えて、液体担体、例えば脂肪油を含み得る。さらに、投薬単位形態は、この投薬単位の物理的形態を変更する種々の他の物質、例えば砂糖及び他の腸溶剤のコーティングを含み得る。この化合物はまた、エリキシル剤、懸濁液、シロップ剤、ウエファー、チューインガムなどのコンポーネントとして投与され得る。シロップ剤は、活性化合物に加えて、甘味料としてのスクロース、並びに特定の防腐剤、染料及び着色剤、並びに香料を含み得る。
【０１０８】
活性物質はまた、所望の作用を損なわない他の活性物質、又は所望の作用を補う物質と混合され得る。
【０１０９】
非経口、皮内、皮下又は局所適用に使用される溶液又は懸濁液としては、次のコンポーネント、すなわち：滅菌希釈剤、例えば注射用の水、食塩水溶液、不揮発性油、天然に存在する植物油、例えばゴマ油、ヤシ油、ラッカセイ油、綿実油など、若しくは合成脂肪性ビヒクル、例えばオレイン酸エチルなど、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール又は他の合成溶媒；抗菌剤、例えばベンジルアルコール及びメチルパラベン；抗酸化剤、例えばアスコルビン酸及び重亜硫酸ナトリウム；キレート化剤、例えばエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）；緩衝液、例えば酢酸塩、クエン酸塩及びリン酸塩；並びに等張化剤、例えば塩化ナトリウム及びブドウ糖のうちのいずれかが挙げられ得る。非経口製造物は、ガラス、プラスチック又は他の好適な材料でできたアンプル、使い捨てシリンジ又は複合用量バイアルに包含され得る。緩衝液、防腐剤、抗酸化剤などは、必要に応じて包含され得る。
【０１１０】
静脈内投与の場合、好適な担体としては、生理食塩水、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）並びに粘稠化剤及び可溶化剤、例えばグルコース、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、並びにそれらの混合物を含む溶液が挙げられる。組織標的化リポソームを含むリポソーム懸濁液はまた、薬学的に受容可能な担体として好適であり得る。これらは、例えば、米国特許第４,５２２,８１１号に記載されている公知の方法に従って製造され得る。
【０１１１】
活性化合物は、体からの急速な排出に対してこの化合物を保護する担体、例えば持続性処方物又はコーティングとともに製造され得る。このような担体としては、徐放性処方物、例えば、限定されないが移植片及びマイクロカプセル化送達系、並びに生分解性の生体適合性ポリマー、例えばコラーゲン、エチレン酢酸ビニル共重合体、ポリ無水物、ポリグリコール酸、ポリオルトエステル、ポリ乳酸などが挙げられる。このような処方物の製造方法は、当業者に公知である。
【０１１２】
本発明の化合物は、経口投与、非経口（ＩＶ、ＩＭ、デポー−ＩＭ、ＳＱ及びデポー−ＳＱ）投与、舌下投与、鼻腔内（吸入）投与、鞘内投与、局所投与又は直腸投与され得る。当業者に公知の投薬形態は、本発明の化合物の送達に好適である。
【０１１３】
経口投与の場合、本発明の化合物は、当業者に周知であるような経口投与の通常の投薬形態で投与され得る。これらの投薬形態としては、錠剤及びカプセルといった通常の固体単位投薬形態、並びに液体投薬形態、例えば溶液、懸濁液及びエリキシル剤が挙げられる。固体投薬形態が使用される場合、本発明の化合物が一日に一回又は二回の投与しか必要としないように、持続放出型であることが好ましい。
【０１１４】
経口投薬形態は、一日に１、２、３又は４回患者に投与される。本発明の化合物は、一日に３回又はそれ以下のいずれか、より好ましくは、１回又は２回投与されることが好ましい。従って、本発明の化合物は、経口投薬形態で投与されることが好ましい。いかなる経口投薬形態が使用されようとも、胃の酸性環境から本発明の化合物を保護するように設計されることが好ましい。腸溶性錠剤は、当業者に周知である。さらに、各々が酸性の胃から保護されるようにコーティングされた小球で満たされたカプセルはまた、当業者に周知である。
【０１１５】
経口投与の場合、βセクレターゼ活性の阻害、Ａβ生産の阻害、Ａβ沈着の阻害又はＡＤの治療若しくは予防のための治療に有効な投与量は、およそ０.１ｍｇ／日〜およそ１,０００ｍｇ／日である。この経口投薬量は、およそ１ｍｇ／日〜およそ１００ｍｇ／日であることが好ましい。この経口投薬量は、およそ５ｍｇ／日〜およそ５０ｍｇ／日であることがより好ましい。患者は一用量で開始され得るが、用量は、患者の状態変化に従い徐々に変化し得ることは勿論である。
【０１１６】
本発明の化合物はまた、ナノ結晶分散処方物で有利に送達され得る。このような処方物の製造は、例えば米国特許第５,１４５,６８４号に記載されている。ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤のナノ結晶分散及びその使用方法は、米国特許第６,０４５,８２９号に記載されている。このナノ結晶処方物は、代表的には、薬物化合物のバイオアベイラビリティをより高くする。
【０１１７】
本発明の化合物は、非経口、例えばＩＶ、ＩＭ、デポー−ＩＭ、ＳＣ又はデポー−ＳＣによって投与され得る。非経口投与の場合、一日におよそ０.５〜およそ１００ｍｇ、好ましくは一日におよそ５〜およそ５０ｍｇの治療有効量が送達されるべきである。デポー処方物が、１ヶ月に１回又は２週間に１回注射に使用される場合、この用量は、およそ０.５ｍｇ／日〜およそ５０ｍｇ／日、又はおよそ１５ｍｇ／月〜およそ１,５００ｍｇ／月の用量であるべきである。一つには、アルツハイマー病の患者は忘れっぽいので、この非経口投薬形態は、デポー処方物であることが好ましい。
【０１１８】
本発明の化合物は、舌下投与され得る。舌下に与えられる場合、本発明の化合物は、ＩＭ投与に関する上記の量で、一日に１〜４回与えられるべきである。
【０１１９】
本発明の化合物は、鼻腔内投与され得る。この経路で与えられる場合、適切な投薬形態は、当業者に公知のように鼻内噴霧又は乾燥粉末である。鼻腔内投与に関する本発明の化合物の投薬量は、ＩＭ投与に関する上記の量である。
【０１２０】
本発明の化合物は、鞘内投与され得る。この経路で与えられる場合、適切な投薬形態は、当業者に公知のように非経口投薬形態であり得る。鞘内投与に関する本発明の化合物の投薬量は、ＩＭ投与に関する上記の量である。
【０１２１】
本発明の化合物は、局所投与され得る。この経路で与えられる場合、適切な投薬形態は、クリーム、軟膏又はパッチである。投与されるべき本発明の化合物量が理由で、パッチが好ましい。局所投与の場合、この投薬量は、およそ０.５ｍｇ／日〜およそ２００ｍｇ／日である。１つのパッチによって送達され得る量には限界があるので、２つ又はそれ以上のパッチが使用され得る。パッチの数及びサイズは重要ではなく、重要なことは、当業者に公知のように本発明の化合物の治療有効量が送達されることである。本発明の化合物は、当業者に公知のように坐剤によって直腸投与され得る。坐剤により投与される場合、この治療有効量は、およそ０.５ｍｇ〜およそ５００ｍｇである。
【０１２２】
一般に、一日に体重１ｋｇ当たりおよそ０.０１ｍｇとおよそ１００ｍｇとの間の投薬レベルが、ヒト及び他の哺乳動物に投与される。ヒトへの好ましい投薬範囲は、一日に体重１ｋｇ当たりおよそ０.１〜およそ５０ｍｇであり、これは単一用量として投与され得るか、又は複合用量に分割され得る。ヒト以外の哺乳動物への好ましい投薬範囲は、一日に体重１ｋｇ当たりおよそ０.０１〜およそ１０.０ｍｇであり、これは単一用量として投与され得るか、又は複合用量に分割され得る。ヒト以外の哺乳動物へのより好ましい投薬範囲は、一日に体重１ｋｇ当たりおよそ０.１〜およそ５.０ｍｇであり、これは単一用量として投与され得るか、又は多数回用量に分割され得る。
【０１２３】
本明細書で言及される標準の成人ヒトの状態を治療するためのエーロゾル処方物は、好ましくは、エーロゾルの各定量又は「一吹き量」が、式Ｉの化合物をおよそ２０μｇ〜およそ１０００μｇ含むように準備される。エーロゾルによる一日の総用量は、およそ１００μｇ〜およそ１０ｍｇの範囲内である。投与は、一日に数回、例えば２、３、４又は８回で、例えば各回１、２又は３用量を与え得るものである。
【０１２４】
本発明の化合物は、当業者に公知のように移植片によって投与され得る。移植片によって本発明の化合物を投与する場合、治療有効量は、デポー投与に関する上記の量である。
本発明の特定の化合物及び所望の投薬形態が与えられると、どのように適切な投薬形態を製造し、そして投与するかを当業者なら理解しているはずである。
【０１２５】
本発明の化合物は、本明細書に開示されている疾患又は状態を予防又は治療するために、上記と同じ様式で、同じ投与経路により、同じ薬学的投薬形態を用い、そして同じ投薬スケジュールで使用される。
【０１２６】
本発明の化合物は、互いに、又は上記で列挙された状態を治療又は予防するために使用される他の治療剤又はアプローチと組み合わせて使用され得る。このような薬剤又はアプローチとしては、以下、すなわち：アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、例えばタクリン（ＣＯＧＮＥＸ（登録商標）として市販されるテトラヒドロアミノアクリジン）、塩酸ドネペジル（Ａｒｉｃｅｐｔ（登録商標）として市販）及びリバスティグミン（ｒｉｖａｓｔｉｇｍｉｎｅ）（Ｅｘｅｌｏｎ（登録商標）として市販）；γセクレターゼ阻害剤；抗炎症剤、例えばシクロオキシゲナーゼＩＩ阻害剤；抗酸化剤、例えばビタミンＥ及びギンコリド（ｇｉｎｋｏｌｉｄｅｓ）；免疫学的アプローチ、例えば、Ａβペプチドとの免疫化又は抗Ａβペプチド抗体の投与；スタチン；並びに直接又は間接的な神経分化誘導物質、例えばＣｅｒｅｂｒｏｌｙｓｉｎ（登録商標）、ＡＩＴ−０８２（Ｅｍｉｌｉｅｕ、２０００、Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．５７：４５４）、並びに今後の他の神経分化誘導物質が挙げられる。
【０１２７】
さらに、式（Ｉ）の化合物はまた、Ｐ−糖タンパク質（Ｐ−ｇｐ）の阻害剤とともに使用され得る。Ｐ−ｇｐ阻害剤及びこのような化合物の使用は、当業者に公知である。例えば、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、５３、４５９５−４６０２（１９９３）、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、２、７−１２（１９９６）、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、５６、４１７１−４１７９（１９９６）、国際公開ＷＯ９９／６４００１及びＷＯ０１／１０３８７を参照のこと。重要なことは、Ｐ−ｇｐ阻害剤の血液レベルが、Ｐ−ｇｐが式（Ａ）の化合物の脳血液レベルの減少を阻害する効果を発揮するようなレベルであることである。この目的のために、Ｐ−ｇｐ阻害剤及び式（Ａ）の化合物は、同じか若しくは異なる投与経路によって同時に又は異なる時点で投与され得る。重要なことは、投与時間ではなく、有効な血液レベルのＰ−ｇｐ阻害剤を有することである。
【０１２８】
好適なＰ−ｇｐ阻害剤としては、シクロスポリンＡ、ベラパミル、タモキシフェン、キニジン、ビタミンＥ−ＴＧＰＳ、リトナビル、酢酸メゲストロール（ｍｅｇｅｓｔｒｏｌ  ａｃｅｔａｔｅ）、プロゲステロン、ラパマイシン、１０,１１−メタノジベンゾスベラン（ｍｅｔｈａｎｏｄｉｂｅｎｚｏｓｕｂｅｒａｎｅ）、フェノチアジン、アクリジン誘導体、例えばＧＦ１２０９１８、ＦＫ５０６、ＶＸ−７１０、ＬＹ３３５９７９、ＰＳＣ−８３３、ＧＦ−１０２,９１８及び他のステロイドが挙げられる。さらなる薬剤が、同じ機能を有し、従って同じ結果を達成することが見出され、このような化合物がまた、有用であるとみなされることは勿論である。
【０１２９】
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、経口投与、非経口（ＩＶ、ＩＭ、ＩＭ−デポー、ＳＱ、ＳＱ−デポー）投与、局所投与、舌下投与、直腸投与、鼻腔内投与、鞘内投与及び移植片により投与され得る。
【０１３０】
Ｐ−ｇｐ阻害剤の治療有効量は、一日当たりおよそ０.１〜およそ３００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは一日当たりおよそ０.１〜およそ１５０ｍｇ／ｋｇである。患者は一用量で開始され得るが、用量は、患者の状態変化に従い徐々に変化されるべきであり得ることは勿論である。
【０１３１】
経口投与の場合、Ｐ−ｇｐ阻害剤は、当業者に公知であるような経口投与の通常の投薬形態で投与され得る。これらの投薬形態は、錠剤及びカプセルといった通常の固体単位投薬形態、並びに液体投薬形態、例えば溶液、懸濁液及びエリキシル剤が挙げられる。固体投薬形態が使用される場合、Ｐ−ｇｐ阻害剤が一日に一回又は二回の投与しか必要としないように、持続放出型であることが好ましい。経口投薬形態は、一日に１〜４回患者に投与される。Ｐ−ｇｐ阻害剤は、一日に３回又はそれ以下のいずれか、より好ましくは、一日に１回又は２回投与されることが好ましい。従って、Ｐ−ｇｐ阻害剤は、固体投薬形態で投与されることが好ましく、そしてさらに、この固体投薬形態は、一日に１回又は２回の投薬を可能にする持続放出形態であることが好ましい。いかなる投薬形態が使用されようとも、胃の酸性環境からＰ−ｇｐ阻害剤を保護するように設計されることが好ましい。腸溶性錠剤は、当業者に周知である。さらに、各々が酸性の胃から保護されるようにコーティングされた小球で満たされたカプセルはまた、当業者に周知である。
【０１３２】
さらに、Ｐ−ｇｐ阻害剤は、非経口投与され得る。非経口投与の場合、これは、ＩＶ、ＩＭ、デポー−ＩＭ、ＳＱ又はデポー−ＳＱ投与され得る。
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、舌下で与えられ得る。舌下に与えられる場合、Ｐ−ｇｐ阻害剤は、ＩＭ投与と同じ量で、一日に１〜４回与えられるべきである。
【０１３３】
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、鼻腔内投与され得る。この投与経路で与えられる場合、適切な投薬形態は、当業者に公知のように鼻内噴霧又は乾燥粉末である。鼻腔内投与に関するＰ−ｇｐ阻害剤の投薬量は、ＩＭ投与と同じ量である。
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、鞘内で与えられ得る。この投与経路で与えられる場合、適切な投薬形態は、当業者に公知のように非経口投薬形態であり得る。
【０１３４】
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、局所で与えられ得る。この投与経路で与えられる場合、適切な投薬形態は、クリーム、軟膏又はパッチである。投与に必要なＰ−ｇｐ阻害剤量が理由で、パッチが好ましい。しかし、パッチによって送達され得る量には限界がある。従って、２つ又はそれ以上のパッチが必要とされ得る。パッチの数及びサイズは重要ではなく、重要なことは、当業者に公知のようにＰ−ｇｐ阻害剤の治療有効量が送達されることである。
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、当業者に公知のように坐剤によって直腸投与され得る。
【０１３５】
Ｐ−ｇｐ阻害剤は、当業者に公知のように移植片によって投与され得る。
Ｐ−ｇｐ阻害剤の投与に関して、投与経路も投薬形態も新しいことは何もない。特定のＰ−ｇｐ阻害剤及び所望の投薬形態が与えられると、どのようにＰ−ｇｐ阻害剤に適切な投薬形態を製造するかを当業者なら理解しているはずである。
【０１３６】
正確な投薬量及び投与頻度は、当業者である投与医師に周知のように、投与される特定の本発明の化合物、治療されている特定の状態、治療されている状態の重症度、特定の患者の年齢、体重、一般的な身体的状態、及び個人が摂取し得る他の投薬に左右されることは、当業者に明らかなはずである。
【０１３７】
ＡＰＰ切断の阻害
本発明の化合物は、ＡＰＰ６９５アイソフォーム若しくはその突然変異体に対して番号付けされたＭｅｔ５９６とＡｓｐ５９７との間、又は異なるアイソフォーム、例えばＡＰＰ７５１若しくはＡＰＰ７７０若しくはそれらの突然変異体の対応する部位（時折、「βセクレターゼ部位」と言われる）でのＡＰＰの切断を阻害する。特定の理論に束縛されることを望まないが、βセクレターゼ活性の阻害は、βアミロイドペプチド（Ａβ）の生産を阻害すると考えられている。阻害活性は、種々の阻害アッセイのうちの１つで実証されており、これによって、βセクレターゼ酵素の存在下でのＡＰＰ基質の切断は、βセクレターゼ切断部位での切断をもたらすに通常十分な条件下で、この阻害化合物の存在下で分析される。未治療又は不活性コントロールと比較したβセクレターゼ切断部位でのＡＰＰ切断の減少は、阻害活性に相関している。本発明の化合物阻害剤の効力を実証するために使用され得るアッセイ系は公知である。代表的なアッセイ系は、例えば米国特許第５,９４２,４００号、同第５,７４４,３４６号、及び以下の実施例に記載されている。
【０１３８】
βセクレターゼの酵素活性及びＡβの生産は、天然型、突然変異型、切断型及び／又は合成型ＡＰＰ基質、天然型、突然変異型、切断型及び／又は合成型酵素、並びに試験化合物を用いて、インビトロ又はインビボで分析され得る。この分析は、天然の、突然変異体の及び／若しくは合成のＡＰＰ及び酵素を発現する初代若しくは二次細胞、天然のＡＰＰ及び酵素を発現する動物モデルを含み得るか、又はこの基質及び酵素を発現するトランスジェニック動物モデルを使用し得る。酵素活性の検出は、例えばイムノアッセイ、蛍光定量若しくは色素生産アッセイ、ＨＰＬＣ又は他の検出手段による１つ又はそれ以上の切断生成物の分析によって行われ得る。阻害化合物は、コントロールと比較して生産されたβセクレターゼ切断生成物量を減少させる能力を有するものとして決定され、ここでこの反応系でのβセクレターゼ媒介切断は、阻害化合物の非存在下で観察及び測定される。
【０１３９】
βセクレターゼ
βセクレターゼ酵素の種々の形態が公知かつ入手可能であり、そして酵素活性のアッセイ及び酵素活性の阻害に有用である。これらは、この酵素の天然、組換え及び合成形態を含む。ヒトβセクレターゼは、β部位ＡＰＰ切断酵素（Ｂｅｔａ  Ｓｉｔｅ  ＡＰＰ  Ｃｌｅａｖｉｎｇ  Ｅｎｚｙｍｅ）（ＢＡＣＥ）、Ａｓｐ２及びメマプシン２として公知であり、そして例えば、米国特許第５,７４４,３４６号並びに公開されたＰＣＴ特許出願ＷＯ９８／２２５９７、ＷＯ００／０３８１９、ＷＯ０１／２３５３３及びＷＯ００／１７３６９、並びに文献刊行物（Ｈｕｓｓａｉｎら、１９９９、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１４：４１９−４２７；Ｖａｓｓａｒら、１９９９、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８６：７３５−７４１；Ｙａｎら、１９９９、Ｎａｔｕｒｅ  ４０２：５３３−５３７；Ｓｉｎｈａら、１９９９、Ｎａｔｕｒｅ  ４０：５３７−５４０；及びＬｉｎら、２０００、ＰＮＡＳ  ＵＳＡ  ９７：１４５６−１４６０）に特徴付けられている。この酵素の合成形態がまた記載されている（ＷＯ９８／２２５９７及びＷＯ００／１７３６９）。βセクレターゼは、ヒト脳組織から抽出及び精製され得、そして細胞、例えば組換え酵素を発現する哺乳動物細胞内で生産され得る。
【０１４０】
好ましい化合物は、５０ミクロモル未満の濃度、好ましくは１０ミクロモル以下、より好ましくは１ミクロモル以下、そして最も好ましくは１０ナノモル以下の濃度でβセクレターゼの酵素活性の５０％を阻害するに有効なものである。
【０１４１】
ＡＰＰ基質
ＡＰＰのβセクレターゼ媒介切断の阻害を実証するアッセイは、Ｋａｎｇら、１９８７、Ｎａｔｕｒｅ  ３２５：７３３−６に記載されている６９５アミノ酸の「標準の」アイソタイプ、Ｋｉｔａｇｕｃｈｉら、１９８１、Ｎａｔｕｒｅ  ３３１：５３０−５３２に記載されている７７０アミノ酸のアイソタイプ、及び変異体、例えばスウェーデン型突然変異（ＫＭ６７０−１ＮＬ）（ＡＰＰ−ＳＷ）、ロンドン型突然変異（Ｖ７１７６Ｆ）並びに他のものを含む公知の形態のＡＰＰのうちのいずれかを使用し得る。例えば、米国特許第５,７６６,８４６号及びまた公知の変異体の突然変異の概説に関するＨａｒｄｙ、１９９２、Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔ．１：２３３−２３４を参照のこと。さらなる有用な基質としては、二塩基性アミノ酸修飾、例えばＷＯ  ００／１７３６９に開示されているＡＰＰ−ＫＫ、ＡＰＰのフラグメント及びβセクレターゼ切断部位を含む合成ペプチド、野生型（ＷＴ）又は突然変異形態、例えば米国特許第５,９４２,４００号及びＷＯ００／０３８１９に記載されているＳＷが挙げられる。
【０１４２】
ＡＰＰ基質は、ＡＰＰのβセクレターゼ切断部位（ＫＭ−ＤＡ又はＮＬ−ＤＡ）を含むものであり、例えば完全なＡＰＰペプチド又は変異体、ＡＰＰフラグメント、組換え若しくは合成ＡＰＰ、又は融合ペプチドである。好ましくは、この融合ペプチドは、酵素アッセイに有用な部分、例えば単離及び／又は検出性質を有するペプチドに融合されるβセクレターゼ切断部位を含むものである。有用な部分は、抗体結合のための抗原エピトープ、標識又は他の検出部分、結合基質などであり得る。
【０１４３】
抗体
ＡＰＰ切断に特徴的な生成物は、例えば、Ｐｉｒｔｔｉｌａら、１９９９、Ｎｅｕｒｏ．Ｌｅｔｔ．２４９：２１−４及び米国特許第５,６１２,４８６号に記載されている種々の抗体を用いたイムノアッセイによって測定され得る。Ａβの検出に有用な抗体としては、例えばＡβペプチドのアミノ酸１〜１６上のエピトープを特異的に認識するモノクローナル抗体６Ｅ１０（Ｓｅｎｅｔｅｋ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）；それぞれヒトＡβ１〜４０及び１〜４２に特異的な抗体１６２及び１６４（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  Ｓｔａｔｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｆｏｒ  Ｂａｓｉｃ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、Ｓｔａｔｅｎ  Ｉｓｌａｎｄ、ＮＹ）；並びに米国特許第５,５９３,８４６号に記載されているβアミロイドペプチドの結合領域である残基１６と１７との間の部位を認識する抗体が挙げられる。ＡＰＰの残基５９１〜５９６の合成ペプチドに対して生成された抗体、及びスウェーデン型突然変異の５９０〜５９６に対して生成されたＳＷ１９２抗体はまた、米国特許第５,６０４,１０２号及び同第５,７２１,１３０号に記載されている通り、ＡＰＰ及びその切断生成物のイムノアッセイに有用である。
【０１４４】
アッセイ系
βセクレターゼ切断部位でのＡＰＰ切断を測定するアッセイは、当該分野で周知である。代表的なアッセイは、例えば米国特許第５,７４４,３４６号及び同第５,９４２,４００号に記載されており、そして以下の実施例に記載される。
【０１４５】
無細胞アッセイ
本発明の化合物の阻害活性を実証するために使用され得る代表的なアッセイは、例えば、ＷＯ００／１７３６９、ＷＯ００／０３８１９並びに米国特許第５,９４２,４００号及び同第５,７４４,３４６号に記載されている。このようなアッセイは、βセクレターゼを発現する細胞、及びβセクレターゼ切断部位を有するＡＰＰ基質を用いて、無細胞インキュベーション又は細胞インキュベーション中で行われ得る。
【０１４６】
ＡＰＰのβセクレターゼ切断部位を含むＡＰＰ基質、例えば、次のアミノ酸配列、すなわち：ＫＭ−ＤＡ又はＮＬ−ＤＡを含む完全なＡＰＰ若しくは変異体、ＡＰＰフラグメント、又は組換え若しくは合成ＡＰＰ基質は、この酵素の切断活性に好適なインキュベーション条件下で、βセクレターゼ活性を有し、そしてＡＰＰのβセクレターゼ切断部位を切断するに有効なβセクレターゼ酵素、そのフラグメント又は合成若しくは組換えのポリペプチド変異体の存在下でインキュベートされる。好適な基質は、場合により、基質ペプチド、及びペプチド又はそのβセクレターゼ切断生成物の精製又は検出を容易にするのに有用な修飾を含む融合タンパク質又はペプチドであり得る誘導体を含む。有用な修飾としては、抗体結合のための公知の抗原エピトープの挿入；標識又は検出可能な部分の連結、結合基質の連結などが挙げられる。
【０１４７】
無細胞のインビトロアッセイに好適なインキュベーション条件としては、例えば次の条件：基質およそ１５０ナノモル〜１０ミクロモル、酵素およそ１０〜２００ピコモル及び阻害化合物およそ０.１ナノモル〜１０ミクロモル、水溶液中、ｐＨおよそ４〜７、およそ３７℃、およそ１０分〜３時間の期間が挙げられる。これらのインキュベーション条件はただ単に代表であり、そして特定のアッセイコンポーネント及び／又は所望の測定系が、必要に応じて変化され得る。特定のアッセイコンポーネントに対するインキュベーション条件の最適化は、使用される特定のβセクレターゼ酵素及びその至適ｐＨ、アッセイに使用され得る任意のさらなる酵素及び／又はマーカーなどを明らかにするべきである。このような最適化は常用の手順であり、そして過度の実験を必要としない。
【０１４８】
細胞アッセイ
非常に多くの細胞ベースのアッセイは、Ａβを解放するβセクレターゼ活性及び／又はＡＰＰのプロセシングを分析するために使用され得る。細胞内及び本発明の化合物阻害剤の存在又は非存在下で、βセクレターゼ酵素とＡＰＰ基質とを接触させることは、この化合物のβセクレターゼ阻害活性を実証するために使用され得る。好ましくは、有用な阻害化合物の存在下でのアッセイは、阻害されないコントロールと比較して、酵素活性を少なくともおよそ３０％、最も好ましくは少なくともおよそ５０％阻害する。
【０１４９】
一実施態様において、βセクレターゼを天然に発現する細胞が使用される。あるいは細胞は、上記で議論されるように、組換えβセクレターゼ又は合成変異体酵素を発現するように修飾される。このＡＰＰ基質は、培養基に添加され得るか、又は好ましくは細胞内で発現される。ＡＰＰ、ＡＰＰの変異体若しくは突然変異体形態を天然に発現する細胞、又はβセクレターゼのＡＰＰ切断部位を含むＡＰＰ、突然変異体若しくは変異体ＡＰＰのアイソフォーム、組換え若しくは合成ＡＰＰ、ＡＰＰフラグメント若しくは合成ＡＰＰペプチド、又は融合タンパク質を発現するように形質転換された細胞が使用され得、但し、発現されるＡＰＰは酵素と接触可能であり、そして酵素的切断活性が分析され得る。
【０１５０】
通常ＡβをＡＰＰからプロセシングするヒト細胞系統は、本発明の化合物の阻害剤活性をアッセイする有用な手段を提供する。培養基へのＡβ及び／又は他の切断生成物の生産及び解放は、例えばイムノアッセイ、例えば、ウエスタンブロット又は酵素結合イムノアッセイ（ＥＩＡ）、例えば、ＥＬＩＳＡによって測定され得る。
【０１５１】
ＡＰＰ基質及び活性なβセクレターゼを発現する細胞は、コントロールと比較して酵素活性の阻害を実証するために、化合物阻害剤の存在下でインキュベートされ得る。βセクレターゼの活性は、ＡＰＰ基質の１つ又はそれ以上の切断生成物の分析によって測定され得る。例えば、基質ＡＰＰに対するβセクレターゼ活性の阻害は、特定のβセクレターゼ誘導性のＡＰＰ切断生成物、例えばＡβの解放を減少することが期待される。
【０１５２】
神経細胞及び非神経細胞の両方が、Ａβをプロセシング及び解放するが、内因性のβセクレターゼ活性レベルは低く、ＥＩＡによる検出はしばしば困難である。従って、βセクレターゼ活性が増強し、ＡＰＰのＡβへのプロセシングが増強し、そして／又はＡβの生産が増強したことが知られる細胞型の使用が好ましい。例えば、ＡＰＰのスウェーデン型突然変異体形態（ＡＰＰ−ＳＷ）；ＡＰＰ−ＫＫ；又はＡＰＰ−ＳＷ−ＫＫとの細胞のトランスフェクションは、βセクレターゼ活性が増強し、そして容易に測定され得るＡβ量を生産する細胞を提供する。
【０１５３】
このようなアッセイにおいて、例えば、ＡＰＰ及びβセクレターゼを発現する細胞は、ＡＰＰ基質上の切断部位でのβセクレターゼ酵素活性に好適な条件下で、培養基中でインキュベートされる。細胞を化合物阻害剤に曝露すると、培地に解放されるＡβ量及び／又は細胞溶菌液中のＡＰＰのＣＴＦ９９フラグメント量が、コントロールと比較して減少する。ＡＰＰの切断生成物は、例えば、上記で議論される特異的抗体を用いたイムノアッセイによって分析され得る。
【０１５４】
βセクレターゼ活性の分析に好ましい細胞としては、初代ヒト神経細胞、初代モルモット神経細胞、導入遺伝子がＡＰＰである初代トランスジェニック動物神経細胞、及び他の細胞、例えばＡＰＰを発現する安定なＨ４神経芽細胞腫細胞系統（例えばＡＰＰ−ＳＷ）が挙げられる。
【０１５５】
インビボアッセイ：動物モデル
種々の動物モデルは、上記のように、Ａβを解放するβセクレターゼ活性及び／又はＡＰＰのプロセシングの分析に使用され得る。例えば、ＡＰＰ基質及び／又はβセクレターゼ酵素を発現するトランスジェニック動物は、本発明の化合物の阻害活性を実証するために使用され得る。特定のトランスジェニック動物モデルは、例えば、次の米国特許：５,８７７,３９９；５,６１２,４８６；５,３８７,７４２；５,７２０,９３６；５,８５０,００３；５,８７７,０１５及び５,８１１,６３３、並びにＧａｎｅｓら、１９９５、Ｎａｔｕｒｅ  ３７３：５２３に記載されている。ＡＤの病態生理学に関連した特徴を示す動物が好ましい。本明細書に記載されているトランスジェニックマウスへの本発明の化合物阻害剤の投与は、この化合物の阻害活性を実証する別法を提供する。薬学的に有効な担体中で、そして適切な治療量で標的組織に達する投与経路を介した化合物の投与がまた好ましい。
【０１５６】
βセクレターゼ切断部位でのＡＰＰのβセクレターゼ媒介切断及びＡβ解放の阻害は、動物の体液、例えば大脳脊髄液、血漿又は組織中の切断フラグメントを測定することにより、これらの動物内で分析され得る。Ａβ沈着又は斑に対する脳組織の分析はまた、βセクレターゼ活性の阻害を示唆する。
【０１５７】
本発明の阻害化合物の存在下、並びにＡＰＰの酵素媒介切断及び／又は基質からのＡβの解放を可能にするに十分な条件下で、ＡＰＰ基質をβセクレターゼ酵素と接触させると、本発明の化合物は、βセクレターゼ切断部位でのＡＰＰのβセクレターゼ媒介切断の減少及び／又は解放されるＡβ量の減少に有効である。このような接触が、例えば上記の動物モデルへの本発明の阻害化合物の投与である場合、この化合物は、動物の脳組織中のＡβ沈着の減少並びにβアミロイド斑の数及び／又はサイズの減少に有効である。このような投与が、ヒト被験体への投与である場合、この化合物は、Ａβ量の減少によって特徴付けられる疾患進行の阻害若しくは遅延、ＡＤ進行の遅延、及び／又はこの疾患の危険性にある患者のＡＤの発症若しくは発達の予防に有効である。
【０１５８】
他に定義されない限り、本明細書で使用されるすべての科学用語及び技術用語は、本発明が属する分野の当業者に一般的に理解される意味と同じものを有する。本明細書で言及されるすべての特許及び刊行物は、すべての目的のために参照によって本明細書に組み込まれる。
【実施例】
【０１５９】
本発明は、以下の実施例を参照することによってより一層理解され得る。これらの実施例は、本発明の特定の実施態様の代表であることが意図され、本発明の範囲を限定すると意図されない。
【０１６０】
製造例
Ａ．７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−ピペリジン−１−イル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ナフタレン−１−オンの製造
臭化銅（ＩＩ）（１.０５ｇ、４.７０ｍｍｏｌ）を、酢酸エチル／クロロホルム１：１中の７−（２,２−ジメチル−プロピル）−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ナフタレン−１−オン（１.０ｇ、４.６２ｍｍｏｌ）の還流溶液に添加した。およそ１時間の還流後、この混合物を冷却し、濾過して（セライト）銅塩を除去し、水及び食塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、そして濃縮して、２−ブロモ−７−（２,２−ジメチル−プロピル）−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ナフタレン−１−オンを得た。この物質を、ＴＨＦ（５０ｍＬ）に直ちに溶解し、トリエチルアミン（１.３ｍＬ、９.３２ｍｍｏｌ）を添加し、その後ピペリジン（０.５１ｍＬ、５.１５ｍｍｏｌ）を添加し、そして得られる混合物を、周囲温度で一晩撹拌した。この反応混合物を濃縮し、ＣＨ2Ｃｌ2に溶解し、そして水及び食塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、そして濃縮して、７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−ピペリジン−１−イル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ナフタレン−１−オンを得た。
【０１６１】
Ｂ．７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−ピペリジン−１−イル−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミンの製造
エタノール（２５ｍＬ）中の７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−ピペリジン−１−イル−３,４−ジヒドロ−２Ｈ−ナフタレン−１−オン（０.４５ｇ、１.５０ｍｍｏｌ）、ヒドロキシルアミン塩酸塩（０.１１ｇ、１.５８ｍｍｏｌ）及びピリジン（１.２８ｍＬ、１５.８ｍｍｏｌ）を、およそ１.５時間還流し、冷却し、そして濃縮して乾燥させた。残留物を、酢酸エチルと水との間で分配し、有機物を食塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、そして濃縮して、オキシム異性体の混合物を得た。これらを、エタノールに溶解し、そしてラネーニッケル（０.３ｇ、ｗ／ｗ）の存在下、４５ｐｓｉで水素化した。およそ１６時間後、この反応物を濾過し、そして濃縮して、７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−ピペリジン−１−イル−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミンを得た。
【０１６２】
実施例１．Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−ピペリジン−１−イル−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミドの製造
イソプロパノール中のｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−２−（３,５−ジフルオロフェニル）−１−（（Ｓ）−オキシラン−２−イル）エチルカルバメート（０.３６ｇ、１.２０ｍｍｏｌ）及び７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−ピペリジン−１−イル−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミン（０.３０ｇ、１.００ｍｍｏｌ）を、およそ１６時間還流し、冷却し、そしてシリカゲル上で濃縮した。５〜１５％メタノール／酢酸エチルを用いたクロマトグラフィーにより、未反応のエポキシドを除去し、そして｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−ピペリジン−１−イル−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを得た。これを、ジオキサン（３ｍＬ）に溶解し、そして４Ｎ  ＨＣｌ／ジオキサンで処理した。この混合物を、周囲温度でおよそ１８時間撹拌し、そして濃縮して、３−アミノ−４−（３,５−ジフルオロ−フェニル）−１−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−ピペリジン−１−イル−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−ブタン−２−オールの塩酸塩を得た。この粗製アミンを、ＣＨ2Ｃｌ2（１０ｍＬ）に溶解し、そして氷中で冷却した。Ｎ−メチルモルホリン（０.６６ｍｍｏｌ、６.００ｍｍｏｌ）、酢酸（０.０５７ｍＬ、１.００ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ（０.１５ｇ、１.１１ｍｍｏｌ）及びＥＤＣ（０.２１ｇ、１.１０ｍｍｏｌ）を順次添加し、そしてこの反応混合物を、室温でおよそ１６時間にわたり温めた。この反応物を濃縮し、酢酸エチルと水との間で分配し、この有機物を食塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、そして濃縮した。この粗生成物を、５〜２０％メタノール／酢酸エチルを用いたカラムクロマトグラフィーにより精製して、Ｎ−｛１−（３,５−ジフルオロ−ベンジル）−３−［７−（２,２−ジメチル−プロピル）−２−ピペリジン−１−イル−１,２,３,４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イルアミノ］−２−ヒドロキシ−プロピル｝−アセトアミドを得た。
【０１６３】
生物学的実施例
実施例Ａ
合成ＡＰＰ基質を用いた無細胞ＢＡＣＥ１阻害アッセイ
βセクレターゼによって切断され得、そしてＮ−末端ビオチンを有し、そしてＣｙｓ残基へのオレゴングリーン（Ｏｒｅｇｏｎ  ｇｒｅｅｎ）の共有結合により蛍光を生じる合成ＡＰＰ基質を、阻害化合物の存在下又は非存在下でβセクレターゼ活性をアッセイするために使用した。この基質は、ビオチン−ＧＬＴＮＩＫＴＥＥＩＳＥＩＳＹ−ＥＶＥＦＲＣ［オレゴングリーン］ＫＫ（配列番号１）であった。この酵素（０.１ナノモル）及び試験化合物（０.００００２〜２００ミクロモル）を、事前にブロッキングされた低親和性の暗所のプレート（３８４ウェル）中、ＲＴで３０分間インキュベートした。この反応を、１ウェル当たり基質１５０ナノモルを３０マイクロリットルの最終容量まで添加することによって開始させた。この最終アッセイ条件は、次の通りである。すなわち：化合物阻害剤０.００００２〜２００ミクロモル；酢酸ナトリウム（ｐＨ４.５）  ０.１モル；基質１５０ナノモル；可溶性βセクレターゼ０.１ナノモル；０.００１％  Ｔｗｅｅｎ２０、及び２％  ＤＭＳＯ。このアッセイ混合物を、３７℃で３時間インキュベートし、そしてこの反応を、飽和濃度のイムノピュアな（ｉｍｍｕｎｏｐｕｒｅ）ストレプトアビジン（０.７５ミクロモル）の添加によって終結させた。室温で１５分間のストレプトアビジンとのインキュベーション後、蛍光偏光を、例えばＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｅｎｖｉｓｉｏｎ（Ｅｘ４８５ｎｍ／Ｅｍ５３０ｎｍ）を用いて測定した。βセクレターゼ酵素活性を、基質が酵素によって切断されるときに生じる蛍光偏光変化によって検出した。化合物阻害剤の存在下でのインキュベーションは、合成ＡＰＰ基質のβセクレターゼ酵素切断の特異的阻害を実証した。このアッセイにおいて、好ましい本発明の化合物は、５０ミクロモル未満のＩＣ50を示した。より好ましい本発明の化合物は、１０ミクロモル未満のＩＣ50を示した。なおより好ましい本発明の化合物は、５ミクロモル未満のＩＣ50を示した。なおより好ましい本発明の化合物は、１００ナノモル未満のＩＣ50を示した。なおより好ましい本発明の化合物は、１０ナノモル未満のＩＣ50を示した。
【０１６４】
実施例Ｂ
βセクレターゼ活性の阻害−細胞アッセイ
βセクレターゼ活性の阻害分析に関する代表的なアッセイは、米国特許第５,６０４,１０２号に記載されているように、一般的にスウェーデン型突然変異と呼ばれ、そしてＡβを過剰生産することが示されている（Ｃｉｔｒｏｎら、１９９２、Ｎａｔｕｒｅ  ３６０：６７２−６７４）天然に存在する二重突然変異、Ｌｙｓ６５１Ｍｅｔ５２〜Ａｓｎ６５１Ｌｅｕ６５２（ＡＰＰ７５１に対する番号付け）を含むＨ４ヒト神経芽細胞腫細胞系統（ＡＴＣＣ受託番号ＣＲＬ−１５７３）を使用した。
【０１６５】
この細胞を、５％未満のＤＭＳＯの最終濃度で、所望の濃度（一般に３０μＭまで）の阻害化合物（ＤＭＳＯストックから充当）の存在／非存在下でインキュベートした。処理期間の終わりに、ならし培地を、例えば切断フラグメントの分析によってβセクレターゼ活性について分析した。Ａβを、特異的な検出抗体を用いてイムノアッセイにより分析し得た。この酵素活性を、化合物阻害剤の存在及び非存在下で測定して、ＡＰＰ基質のβセクレターゼ媒介切断の特異的阻害を実証した。
【０１６６】
例えば、このアッセイを、１日目の朝に細胞をプレーティングし（３０,０００細胞／ウェルのプレーティング密度、Ｈ４ｓｗｅ）、そして３７℃でおよそ６時間インキュベートすることによって２日間行い得た。１日目の午後に、この細胞を培地又はＰＢＳで１回洗浄して、蓄積したＡＢを除去した。新鮮な培地を添加し、次いで本発明の化合物を、各ウェルに添加した（培地９５μｌ＋１０％  ＤＭＳＯ中の２０×化合物ストック５μｌ）。この細胞を、５％  ＣＯ2中３７℃で一晩インキュベートした。
【０１６７】
一連の９６ウェルＮｕｎｃ  ｉｍｍｕｎｏ−ｓｏｒｐプレートを、捕獲（ｃａｐｔｕｒｅ）抗体（６Ｅ１０）Ａβでコーティングし；各ウェルを、炭酸塩／重炭酸塩コーティング緩衝液中で製造された１ｍｇ／ｍｌ  ６Ｅ１０  ５０μｌでコーティングした。この炭酸塩／重炭酸塩コーティング緩衝液は、ｐＨ９.５の精製水５００ｍｌ、Ｎａ2ＣＯ3 ０.８ｇ及びＮａＨＣＯ3  １.５ｇを含んだ。プレートを密封し、そして４℃で一晩インキュベートした。
【０１６８】
２日目、６Ｅ１０でコーティングしたプレートを、室温に１５〜３０分間置き、そしてプレート洗浄機を用いて０.０５％  ＰＢＳＴで３〜４回洗浄した。ＰＢＳＴ中の１％ミルクを１ウェル当たり２００μｌ添加して、続いて添加したならし培地又はＡβ標準の非特異的結合をブロッキングした。
このプレートを覆い、そして室温で少なくとも１時間インキュベートした。このプレートを、ＰＢＳＴで３〜４回洗浄して、ブロッキングを除去した。Ｈ４細胞に基づく細胞ならし培地（上記の化合物で一晩予め処理済）又はＡβ標準を、ウェルに添加した（５０μｌ／ウェル、２時間、暗所、室温）。ＭＴＴアッセイを、場合によりこの細胞に行った（２時間のインキュベーション、３７℃）。
【０１６９】
ＥＬＩＳＡプレートを、ＰＢＳＴで３〜４回洗浄した。ビオチン化レポーターＡβ抗体を添加し（５０μｌ／ウェル（ＰＢＳＴ中４Ｇ８−ビオチン化  １：５０００）、１〜２時間、室温）、暗所）、その後ＰＢＳＴで３〜４回洗浄した。ストレプトアビジン−ＨＲＰ（ＰＢＳＴ中１：１０,０００）を添加し（５０μｌ／ウェル）、そしてプレートをインキュベートした（３０分〜１時間、室温、暗所）。このプレートを、ＰＢＳＴで３〜４回洗浄した。ＴＭＢ−ペルオキシダーゼ基質５０μｌ／ウェルを室温で添加し、そして所望の青色を示すまで、インキュベーションを室温で行った。この反応を、０.０９Ｍ  Ｈ2ＳＯ4を１ウェル当たり５０μｌ添加することによって停止させた。色は黄色になった。Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘで４５０ｎｍでの読取りを行った。
【０１７０】
実施例Ｃ
モルモット神経細胞培養アッセイ
混合した皮質及び海馬ニューロンを、モルモット胚から単離し、そしてインビトロで培養した。代表的な方法において、およそ２５日胚で、モルモットをイソフルランチャンバー内で麻酔し、そして断頭した。胚を含む子宮を取り出し、そして濡れた氷上の５０ｍＬチューブ内の冷Ｈｉｂｅｒｎａｔｅ  Ｅ  ２５ｍＬ中に置いた。解剖顕微鏡下でＨｉｂｅｒｎａｔｅ  Ｅをちょうど十分に含むコールドプレート（４℃）上のペトリ皿中で頭蓋を剥ぎ取り、そして脳及び小脳を取り出した。半球を分離し、その後中脳を取り出した。髄膜を、皮質から取り去った。この皮質組織を、濡れた氷上の１５ｍｌチューブ内のＨｉｂｅｒｎａｔｅ  Ｅ／Ｂ２７中に置き、すべての胚由来の組織をプールした（Ｈｉｂ  Ｅ／Ｂ２７  １０ｍＬ中３〜６胚）。Ｂ２７（５０×溶液  Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ*１７５０４−０４４）を、１：５０比でＨｉｂｅｒｎａｔｅ  Ｅ培地に添加した。
【０１７１】
Ｈｉｂｅｒｎａｔｅ  Ｅ／Ｂ２７のすべてをチューブから取り出し、そして粉砕するために新しい１５ｍＬチューブに移した。２ｍｇ／ｍｌパパイン溶液５ｍｌを、３７℃で２５分間、チューブ内の組織に添加した。プールされた組織から６を超える胚を使用する場合、パパイン溶液１０ｍＬを使用した。１０ｍｇ／ｍｌパパイン（Ｒｏｃｈｅ  ０１０８０１４）１ｍｌ＋Ｂ２７を含まないＨｉｂｅｒｎａｔｅ  Ｅ  ４ｍｌを、３７℃で５分間温め、そして０.２μｍシリンジフィルターに通して濾過した。
【０１７２】
第一の粉砕を、Ｈｉｂｅｒｎａｔｅ  Ｅ／Ｂ２７  ２ｍｌ及び１ｍｇ／ｍｌ  ＤＮＡｓｅ（Ｓｉｇｍａ  Ｄ４２６３）２０μＬを用いて行った。パパイン溶液を除去した後、組織を、１０〜１５回火炎処理した（ｆｌａｍｅ−ｐｏｌｉｓｈｅｄ）パスツールピペットに通して粉砕した。さらに１〜２回粉砕工程を行い、毎回Ｈｉｂｅｒｎａｔｅ  Ｅ／Ｂ２７  ２ｍＬで１０〜１５回粉砕し、毎回火炎でピペット開口部のサイズを小さくした。上清を、１００μｍストレーナ（Ｆａｌｃｏｎ  ３５２３５０）に通して濾過し、そして２５０×ｇで５分間回転沈降させた。ペレットを、１：５０比のＢ２７（５０×溶液、Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ  １７５０４−０４４）、１：４００比の０.５ｍＭグルタミン（２００ｍＭ  Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ  ２５０３０−０８１）、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  １５２４００６２  抗生剤−抗真菌剤（１００×）、及び５０％  ０.１Ｍ  ＨＣｌ／５０％  Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ中の２５ｍＭストックから１：１０００比の２５μＭグルタメート（このグルタメートは、最初のプレーティング培地にしか使用しなかった）を含むプレーティング培地１０ｍｌで再懸濁した。細胞を、１.５×１０5細胞／ｃｍ2＝６×１０5細胞／ｍＬの濃度で、１ウェル当たり５００μＬ添加して、ポリ−Ｄ−リジン２４ウェルプレート（Ｂｉｏｃｏａｔ  ３５６４１４）上にプレーティングした。
【０１７３】
ニューロンに、培養基での培養後４〜５日に１回、グルタメートを含まないＮｅｕｒｏｂａｓａｌ／Ｂ２７＋グルタミン＋Ｐ／Ｓ／ＦＺを１ウェル当たり５００μｌ再供給した。ベースラインサンプル（３００μｌ）を、ＤＩＶ  １５（最後の再供給の３〜４日後）に各ウェルから取り出し、９６ウェルプレートに移し、そしてアッセイまで−２０℃で凍結させた。
【０１７４】
本発明の化合物の希釈サンプルを、１２ウェルからなる列に各薬物を含む９６ウェルプレート中で１００％  ＤＭＳＯ中の１０ｍＭストックから製造し、ウェル中の得られる濃度は、ＤＭＳＯ中１０ｍＭ、３ｍＭ、１ｍＭ、０.３ｍＭ、０.１ｍＭ、０.０３ｍＭ、０.０１ｍＭ、０.００３ｍＭ、０.００１ｍＭ、０.０００３ｍＭ、０.０００１ｍＭ及び０.００００３ｍＭであった。各ウェルを、再供給培地で１：１０に希釈した。残りの培地を、すべての細胞から吸引し、そして新鮮な培地５００μＬで置換した。この化合物を、１：１００希釈で二重反復のウェルに添加した（１ウェル当たり５μＬ添加）。最終的な化合物濃度は、１０μＭ〜１００ｐＭであった。３〜４日後*、サンプルを各ウェルから取り出し（３００μｌ）、そして９６ウェルプレートに移した。このサンプルを、アッセイするまで−２０℃で凍結処理した。
【０１７５】
ＭＴＳアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｇ３５８１）を用いた細胞毒性アッセイを、ＭＴＳ一溶液試薬／ウェル（１０μｌ）を用いて各ウェル（バックグラウンドの色差し引きのため、培地しか含まないプレートのウェルを含む）に対して３７℃で２時間行った。各ウェルから１００μｌを新しい９６ウェルプレートに移し、そして２つの培地のみ／ＭＴＳ試薬のウェルを、バックグラウンド差し引き用に含めた。読取りを、４９０ｎｍで行った。サンプルのアッセイのために、サンプルを室温で融解し、そしてＥＬＩＳＡサンプル／ブロッキング緩衝液ＰＢＳＴ＋１％  ＢＳＡを用いて１：２に希釈した。
* 総Ａβ測定に関して、培養３日で非常に強力なシグナルが生じるが、２４時間でもＡβの測定には十分であった。
Ｃ末端特異的アッセイに関して（すなわち、Ａβ１〜３８／１〜４０／１〜４２）、シグナル（特にＡβ１〜４２）が極めて低いので、培地の収集までに完全に４日間を要した。
【０１７６】
実施例Ｄ
ＡＤの動物モデルでのβセクレターゼの阻害
種々の動物モデルを、βセクレターゼ活性の阻害をスクリーニングするために使用し得た。本発明に有用な動物モデルの例としては、マウス、モルモット、イヌなどが挙げられるがこれらに限定されない。使用される動物は、野生型、トランスジェニック又はノックアウトモデルであり得た。さらに、哺乳動物モデルは、ＡＰＰで突然変異を発現し得、これは例えば、本明細書に記載されているＡＰＰ６９５−ＳＷなどであった。トランスジェニック非ヒト哺乳動物モデルの例は、米国特許第５,６０４,１０２号、同第５,９１２,４１０号及び同第５,８１１,６３３号に記載されている。
【０１７７】
Ｈｓｉａｏら、１９９６に記載されている通りに製造されたＴｇ２５７６マウスは、推定上の阻害化合物の存在下でのＡβ解放のインビボ抑制の分析に有用であった。Ｔｇ２５７６マウスに、ビヒクル、例えば２０％  ＤＭＳＯ：２０％エタノール：６０％ポリエチレングリコール中で処方された化合物を投与した。このマウスに、化合物（１００〜３００ｍｇ／ｋｇ；好ましくは１〜１００ｍｇ／ｋｇ）を投薬した。その後、例えば３〜１０時間後、このマウスを屠殺し、そして分析のために脳を取り出した。
【０１７８】
トランスジェニック動物に、選択された投与様式に好適な担体中で処方された化合物阻害剤量を投与した。コントロール動物を、処置しないか、ビヒクルで処置するか又は不活性化合物で処置した。投与は、急性、すなわち一日の間に単一用量若しくは複合用量を投与するものであり得るか、又は慢性、すなわち一日、一週間又は一ヶ月の期間、投薬を毎日反復するものであり得た。０時間で開始し、脳組織又は大脳脊髄液若しくは血漿を選択した動物から得て、そして例えば、Ａβを検出するための特異的抗体を用いたイムノアッセイによって、Ａβを含むＡＰＰ切断ペプチドの存在を分析した。試験期間の終わりに、動物を屠殺し、そして脳組織又は大脳脊髄液若しくは血漿を、Ａβ、ｓＡＰＰβ及び／又はβアミロイド斑の存在について分析した。この組織をまた、変性の徴候についても分析した。
【０１７９】
本発明の化合物阻害剤を投与された動物は、未処置コントロールと比較して、脳組織若しくは大脳脊髄液若しくは血漿中のＡβの減少、及び／又は脳組織中のβアミロイド斑の減少を示すことが期待された。
【０１８０】
実施例Ｅ
ヒト患者でのＡβ生産の阻害
アルツハイマー病（ＡＤ）を患う患者は、脳内のＡβ量の増加を示した。ＡＤ患者に、選択された投与様式に好適な担体中で処方された化合物阻害剤量を投与した。投与を、試験の継続期間中毎日反復した。０日目で開始し、認知及び記憶試験を、例えば１ヶ月に１回行った。
化合物阻害剤を投与された患者は、コントロールの未処置患者と比較して、１つ又はそれ以上の次の疾患パラメータ、すなわち：ＣＳＦ又は血漿中のＡβ存在；脳又は海馬の体積；脳内のＡβ沈着；脳内のアミロイド斑；並びに認知及び記憶機能のスコアの変化によって分析されるように、疾患進行の遅延又は安定化を示すことが期待された。
【０１８１】
実施例Ｆ
ＡＤの危険性にある患者のＡβ生産の予防
ＡＤに罹患しやすいか又はＡＤを患う危険性にある患者を、家族性の遺伝パターン、例えば、スウェーデン型突然変異の存在を認識すること、及び／又は診断パラメータをモニターすることのいずれかによって同定した。ＡＤに罹患しやすいか又はＡＤを患う危険性にあると同定された患者に、選択された投与様式に好適な担体中で処方された化合物阻害剤量を投与した。投与を、試験の継続期間中毎日反復した。０日目で開始し、認知及び記憶試験を、例えば１ヶ月に１回行った。
化合物阻害剤を投与された患者は、コントロールの未処置患者と比較して、１つ又はそれ以上の次の疾患パラメータ、すなわち：ＣＳＦ又は血漿中のＡβ存在；脳又は海馬の体積；脳内のアミロイド斑；並びに認知及び記憶機能のスコアの変化によって分析されるように、疾患進行の遅延又は安定化を示すことが期待された。
【０１８２】
本発明は、種々の特定及び好ましい実施態様及び技術に関して記載されている。しかし、多くの変化及び修飾が、本発明の趣旨及び範囲内にありながら行われ得ることが理解されるべきである。
【国際調査報告】
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