(57)【要約】  本発明は、造影基で標識されたヒドロキサメートクラスの特定の種類のマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤（ＭＭＰｉ）を含む造影剤が、哺乳類の体のインビボ画像解析及び診断のための有用な診断用造影剤であることを開示する。【選択図】  図１【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４又はＹ１の位置で造影基で標識された以下の式（Ｉ）のメタロプロテイナーゼ阻害剤を含む造影剤であって、哺乳類生体内への標識マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤の投与後に造影基を検出することができる造影剤。
【化１】
2008514580.tif 000039
式中、
Ｘ１はＨ、Ｃ１〜３アルキル又はＣ１〜３フルオロアルキルであり、
Ｘ２はＨ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル又はＣ１〜６フルオロアルキルであり、
Ｘ３はＸ２基、ＮＨ２、Ｃ１〜１０アミノ又は−ＮＨ（ＣＯ）Ｘａであって、ＸａはＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜１２アリール又はＣ５〜１５アラルキルであり、
Ｘ４はＣ１〜６アルキル、Ａｒ１又は−（Ｃ１〜３アルキル）Ａｒ１であって、Ａｒ１はＣ３〜１２アリールもしくはヘテロアリール基又は−（ＣＨ２）ｗＣＯＮＨＹ２であり、ｗは１又は２の整数であり、
Ｙ１及びＹ２は独立にＹ基であって、ＹはＣ１〜１０アルキル、Ｃ３〜１０シクロアルキル、Ｃ１〜１０フルオロアルキル、Ａｒ１基又は−（Ｃ１〜３アルキル）Ａｒ１であるが、
（ｉｉｉ）Ｘ２とＸ３が共にＨとはならないこと、
（ｉｖ）Ｘ１がＨであり、Ｘ２がＨ又はＣ１〜３アルキルであり、Ｘ３がＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル又はＣ１〜６フルオロアルキルであり、Ｘ４がＣ１〜６アルキル、フェニル又はベンジルであるとき、造影基はキレート剤を含まないこと
を条件とする。
【請求項２】
Ｘ１がＨである、請求項１記載の造影剤。
【請求項３】
Ｘ２又はＸ３がＣ１〜４アルキルである、請求項１又は請求項２記載の造影剤。
【請求項４】
Ｘ３がＸ２基である、請求項３記載の造影剤。
【請求項５】
Ｘ４が−ＣＨ２Ａｒ１である、請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載の造影剤。
【請求項６】
Ｘ４がインドール基を含む、請求項５記載の造影剤。
【請求項７】
当該造影剤が次の式ＩＩのものである、請求項１乃至請求項６のいずれか１項記載の造影剤。
【化２】
2008514580.tif 000040
式中、｛阻害剤｝は請求項１の式（Ｉ）のメタロプロテイナーゼ阻害剤であり、
−（Ａ）ｎ−はリンカー基であって、各Ａは独立に−ＣＲ２−、−ＣＲ＝ＣＲ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＲ２ＣＯ２−、−ＣＯ２ＣＲ２−、−ＮＲＣＯ−、−ＣＯＮＲ−、−ＮＲ（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ−、−ＮＲ（Ｃ＝Ｓ）ＮＲ−、−ＳＯ２ＮＲ−、−ＮＲＳＯ２−、−ＣＲ２ＯＣＲ２−、−ＣＲ２ＳＣＲ２−、−ＣＲ２ＮＲＣＲ２−、Ｃ４〜８シクロヘテロアルキレン基、Ｃ４〜８シクロアルキレン基、Ｃ５〜１２アリーレン基、Ｃ３〜１２ヘテロアリーレン基、アミノ酸、糖又は単分散ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）構成単位であり、
ＲはＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４アルコキシアルキル又はＣ１〜４ヒドロキシアルキルからは独立に選択され、
ｎは０〜１０の整数であり、
Ｘ５はＨ、ＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルコキシアルキル、Ｃ１〜４ヒドロキシアルキル又は請求項１で定義したＡｒ１基である。
【請求項８】
前記造影基がメタロプロテイナーゼ阻害剤のＸ４又はＹ１の位置に結合している、請求項７記載の造影剤。
【請求項９】
前記造影基が、
（ｉ）放射性金属イオン、
（ｉｉ）常磁性金属イオン、
（ｉｉｉ）γ線放出型放射性ハロゲン、
（ｉｖ）陽電子放出型放射性非金属、
（ｖ）過分極ＮＭＲ活性核種、
（ｖｉ）インビボ光学イメージングに適したレポーター、
（ｖｉｉ）血管内検出に適したβ線放射体
から選択される、請求項１乃至請求項８のいずれか１項記載の造影剤。
【請求項１０】
前記マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤がリガンドに結合しており、リガンドが放射性金属イオン又は常磁性金属イオンと金属錯体を形成している、請求項１乃至請求項９のいずれか１項記載の造影剤。
【請求項１１】
前記リガンドがキレート剤である、請求項１０記載の造影剤。
【請求項１２】
前記放射性金属イオンがγ線放射体又は陽電子放射体である、請求項１０又は１１記載の造影剤。
【請求項１３】
前記放射性金属イオンが９９ｍＴｃ、１１１Ｉｎ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、６７Ｇａ又は６８Ｇａである、請求項１２記載の造影剤。
【請求項１４】
前記γ線放出型放射性ハロゲン造影基が１２３Ｉである、請求項９記載の造影剤。
【請求項１５】
前記陽電子放出型放射性非金属が１８Ｆ、１１Ｃ、１３Ｎ又は１２４Ｉから選択される、請求項９記載の造影剤。
【請求項１６】
前記マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤が次の式ＩＶのものである、請求項１乃至請求項１５のいずれか１項記載の造影剤。
【化３】
2008514580.tif 000041
式中、Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は請求項１で定義した通りであり、
Ｙ３は請求項１で定義したＹ基である。
【請求項１７】
前記マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤が次の式Ｖのものである、請求項１乃至請求項１５のいずれか１項記載の造影剤。
【化４】
2008514580.tif 000042
式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｙ２及びｗは請求項１で定義した通りであり、
Ｙ４は請求項１で定義したＹ基である。
【請求項１８】
請求項１乃至請求項１７のいずれか１項記載の造影剤を生体適合性担体と共に哺乳類への投与に適した形態で含む医薬組成物。
【請求項１９】
請求項１乃至請求項１７のいずれか１項記載の造影剤を生体適合性担体と共に哺乳類への投与に適した形態で含み、造影基が放射性である、放射性医薬組成物。
【請求項２０】
前記造影基が放射性金属イオンを含む、請求項１９記載の放射性医薬組成物。
【請求項２１】
前記造影基が陽電子放出型放射性非金属又はγ線放出型放射性ハロゲンを含む、請求項１９記載の放射性医薬組成物。
【請求項２２】
放射性又は常磁性金属イオンと金属錯体を形成することのできるリガンドと請求項１乃至請求項６で定義した式（Ｉ）のマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤とのコンジュゲート。
【請求項２３】
当該コンジュゲートが次の式ＩＩｂのものである、請求項２２記載のコンジュゲート。
【化５】
2008514580.tif 000043
式中、｛阻害剤｝、Ａ、ｎ及びｍは請求項７で定義した通りである。
【請求項２４】
前記マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤が請求項１６又は請求項１７記載の式Ｉａ又はＩｂのものである、請求項２２又は請求項２３記載のコンジュゲート。
【請求項２５】
前記リガンドがキレート剤である、請求項２２乃至請求項２４のいずれか１項記載のコンジュゲート。
【請求項２６】
請求項２１記載の放射性医薬組成物の調製用前駆体であって、当該前駆体が請求項１乃至請求項１７のいずれか１項記載のマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤の非放射性誘導体を含み、非放射性誘導体が陽電子放出型放射性非金属源又はγ線放出型放射性ハロゲン源との反応によって所望の放射性医薬品を与える、前駆体。
【請求項２７】
前記陽電子放出型放射性非金属源又はγ線放出型放射性ハロゲン源が、
（ｉ）ハライドイオン又はＦ＋もしくはＩ＋、或いは
（ｉｉ）アルキルハライド、フルオロアルキルハライド、トシレート、トリフレート又はメシレートから選択されるアルキル化剤
から選択される、請求項２６記載の前駆体。
【請求項２８】
前記非放射性誘導体が、
（ｉ）トリアルキルスタンナン又はトリアルキルシランのような有機金属誘導体、
（ｉｉ）求核置換のためのアルキルハライド、アルキルトシレート又はアルキルメシレートを含む誘導体、
（ｉｉｉ）求核又は求電子置換のため活性化された芳香環を有する誘導体、
（ｉｖ）容易にアルキル化を起こす官能基を有する誘導体、
（ｖ）チオール含有化合物とのアルキル化によってチオエーテル含有生成物を与える誘導体
から選択される、請求項２６又は請求項２７記載の前駆体。
【請求項２９】
請求項２２乃至請求項２５のいずれか１項記載のコンジュゲートを含む、請求項２０記載の放射性医薬組成物の調製用キット。
【請求項３０】
前記放射性金属イオンが９９ｍＴｃであり、さらに生体適合性還元剤を含む、請求項２９記載のキット。
【請求項３１】
請求項２６乃至請求項２８のいずれか１項記載の前駆体を含む、請求項２１記載の放射性医薬組成物の調製用キット。
【請求項３２】
前記前駆体が固相に結合している、請求項３１記載のキット。
【請求項３３】
アテローム性動脈硬化症の画像診断のための請求項１乃至請求項１７のいずれか１項記載の造影剤の使用。
【請求項３４】
不安定プラークの画像診断のための請求項１乃至請求項１７のいずれか１項記載の造影剤の使用。
【請求項３５】
アテローム性動脈硬化症の血管内検出のための請求項１乃至請求項１７のいずれか１項記載の造影剤の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はインビボイメージング用の画像診断造影剤に関する。本造影剤は、インビボ画像診断に適した造影基で標識されたメタロプロテイナーゼ阻害剤を含む。
【背景技術】
【０００２】
マトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）は、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の分解又はリモデリングを媒介する２０種以上の亜鉛依存性エンドペプチダーゼ酵素のファミリーである［Ｍａｓｓｏｖａ  ｅｔ  ａｌ，  ＦＡＳＥＢ  Ｊ  １２  １０７５（１９９８）］。ＭＭＰファミリーに属するものはいずれも血管壁のすべての成分を分解することができるため、ＥＣＭ成分の分解を伴う生理現象及び病理現象のいずれにおいても重要な役割を果たす。ＭＭＰは、細胞の挙動を制御する細胞−マトリックス相互作用に干渉することができるため、その活性は細胞の分化、遊走、増殖及びアポトーシスのような多岐にわたるプロセスに影響を与える。生理的状況下でのＭＭＰ活性を細かく制御する負の調整制御は必ずしもうまく機能するわけではない。ＭＭＰ活性の不適切な発現は、幾つかの病態における病理機序の一部をなすと考えられている。そのため、ＭＭＰは、多くの炎症性、悪性及び変性疾患の治療用メタロプロテイナーゼ阻害剤（ＭＭＰｉ）のターゲットとされている［Ｗｈｉｔｔａｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ，  Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．９９，２７３５（１９９９）］。
【０００３】
従って、合成ＭＭＰ阻害剤は多くの炎症性、悪性及び変性疾患の治療に有用であると考えられる。さらに、ＭＭＰ阻害剤がこれらの疾患の診断に有用であることも示唆されている。米国特許第５１８３９００号には、ＭＭＰに関連した疾患の治療用化合物として次式の化合物が開示されている。
【０００４】
【化１】
2008514580.tif 000002
式中、Ｒ１はＨであり、Ｒ２はアルキル（Ｃ３〜８）であるか、或いはＲ１とＲ２とが一体として−（ＣＨ２）ｎ−を形成するものであり（ｎ＝３−５である。）、Ｒ３はＨ又はアルキル（Ｃ１〜４）であり、Ｒ４は縮合又は結合した非置換又は置換ビシクロアリールメチレンであり、ＸはＯＲ５又はＮＨＲ５であって、Ｒ５はＨ、置換もしくは非置換アルキル（Ｃ１〜１２）、アリール（Ｃ６〜１２）又はアリールアルキル（Ｃ６〜１６）であるか、或いはＸはアミノ酸残基又はそのアミドであるか、或いはＸは環状アミン又は複素環式アミンの残基である。米国特許第５１８３９００号には、これらの化合物を９９Ｔｃや１３１Ｉのようなシンチグラフィー標識で標識すると、生体内における過剰量のＭＭＰの位置を決定できると記載されているが、そうした標識化をどのように達成するかについては教示も示唆もされていない。
【０００５】
国際公開第０１／６０４１６号には、広範な種々異なるマトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）阻害剤並びに診断用金属との金属錯体の調製におけるその使用が開示されている。記載されたＭＭＰ阻害剤には、ある種のスクシニルヒドロキサメートを始めとするヒドロキサメート類が含まれている（第８６頁３０行〜第８９頁９行）。これらの化合物は、アテローム性動脈硬化症、心不全及び再狭窄のような細胞外マトリックス分解に関連した循環器病の診断に有用であると提案されている。好ましいＭＭＰ阻害剤、キレーター及びリンカーが記載されている。Ｚｈｅｎｇらの報文［Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．２９  ７６１〜７７０（２００２）］には、陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）トレーサー１１Ｃ及び１８Ｆで標識したヒドロキサメート系ＭＭＰ阻害剤の合成が記載されている。同報文に記載された化合物は、乳癌の非侵襲イメージングに有用であると記載されている。
【特許文献１】米国特許第５１８３９００号明細書
【特許文献２】国際公開第０１／６０４１６号パンフレット
【非特許文献１】Ｍａｓｓｏｖａ  ｅｔ  ａｌ，  ＦＡＳＥＢ  Ｊ  １２  １０７５（１９９８）
【非特許文献２】Ｗｈｉｔｔａｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ，  Ｃｈｅｍ．  Ｒｅｖ．９９，２７３５（１９９９）
【非特許文献３】Ｚｈｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ，  Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．２９  ７６１−７７０（２００２）
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
今回、造影基で標識した特定の種類のスクシニルヒドロキサメートマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤（ＭＭＰｉ）が、哺乳類のインビボイメージング及び哺乳類の診断に有用な診断用造影剤であることが判明した。これらの化合物は、ゼラチナーゼ（ＭＭＰ−２及びＭＭＰ−９）及びコラゲナーゼ（ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−８及びＭＭＰ−１３）に対してナノモル未満の範囲のＫｉで、優れたＭＭＰ阻害活性を示す。本発明のＭＭＰｉの尿中排泄特性は、適切なリンカー基、特にポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アミノ酸又は糖含有リンカー基の使用によって調節できる。
【０００７】
本発明の造影剤は、特定のマトリックスメタロプロテイナーゼが関与することが知られているある範囲の病態（炎症性、悪性及び変性疾患）のインビボ画像診断に有用である。これらの病態としては、以下のものが挙げられる。
【０００８】
（ａ）各種ＭＭＰが過剰発現するアテローム性動脈硬化症。ヒトのアテローム性動脈硬化症巣でＭＭＰ−１、３、７、９、１１、１２、１３及びＭＴ１−ＭＭＰレベルの上昇が検出されている［Ｓ．Ｊ．Ｇｅｏｒｇｅ、Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｒｕｇｓ、９（５）、９９３−１００７（２０００）及び同報文中の参照文献］。ヒトアテロームでのＭＭＰ−２の発現［Ｚ．Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ，  Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．、１４８、１２１−１２８（１９９６）］及びＭＭＰ−８の発現［Ｍ．Ｐ．Ｈｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ，  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ、１０４、１８９９−１９０４（２００１）］も報告されている。コラゲナーゼはＶＰに特に重要であると考えられている［Ｓｕｋｈｏｖａ  ｅｔ．ａｌ．，  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，  １９９９，  ９９，  ２５０３；上掲のＨｅｒｍａｎ  ｅｔ．ａｌ．，  Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，  ２００１，  １０４，  １８９９；  Ａｘｉｓａ  ｅｔ．ａｌ．，  Ｓｔｒｏｋｅ，  ２００２，  ３３，  ２８５８；  Ｆｒｉｃｋｅｒ，  Ｃ．，  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ，  ２００２，  ７，  ８６］。
【０００９】
（ｂ）慢性心不全［Ｐｅｔｅｒｓｏｎ，Ｊ．Ｔ．ｅｔ  ａｌ，  Ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｈｅａｒｔ  ｆａｉｌｕｒｅ、Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．Ｒｅｓ．（２００２）、５５（１）、２９−４４には、心不全においてＭＭＰ−１、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−８、ＭＭＰ−９、ＭＭＰ−１３及びＭＭＰ−１４が上方制御されると報告されている］。
【００１０】
（ｃ）癌［Ｖｉｈｉｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ，  Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ９９、ｐ１５７−１６６（２００２）では、ＭＭＰの癌への関与が概説されており、特にＭＭＰ−２、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−７及びＭＭＰ−９が強調されている］。
【００１１】
（ｄ）関節炎［Ｊａｃｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，  Ｉｎｆｌａｍｍ．Ｒｅｓ．５０（４）、ｐ１８３−１８６（２００１）“Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｍａｔｒｉｘ  ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｉｎ  ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ−ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｇｅｌａｔｉｎａｓｅ  Ａ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ”では、特にＭＭＰ−２について論じられている］。
【００１２】
（ｅ）筋萎縮性側索硬化症［Ｌｉｍ  ｅｔ  ａｌ，  Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ、６７、２５１−２５９（１９９６）には、ＭＭＰ−２及びＭＭＰ−９の関与が記載されている］。
【００１３】
（ｆ）ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−９及びＭＭＰ−１３が関係すると報告されている脳腫瘍転移［Ｓｐｉｎａｌｅ、Ｃｉｒｃｕｌ．Ｒｅｓ．、９０、５２０−５３０（２００２）］。
【００１４】
（ｇ）ＭＭＰ−２及びＭＭＰ−９が関与すると報告されている脳血管疾患［Ｌｕｋｅｓ  ｅｔ  ａｌ，  Ｍｏｌ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．、１９、２６７−２８４（１９９９）］。
【００１５】
（ｈ）ＭＭＰ−２及びＭＭＰ−９が患部組織中で同定されているアルツハイマー病［Ｂａｃｋｓｔｒｏｍ  ｅｔ  ａｌ，  Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．、５８、９８３−９９２（１９９２）］。
【００１６】
（ｉ）ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−３及びＭＭＰ−９が関与する神経炎症性疾患［Ｍｕｎ−Ｂｒｙｃｅ  ｅｔ  ａｌ，  Ｂｒａｉｎ．Ｒｅｓ．、９３３、４２−４９（２００２）］。
【００１７】
（ｊ）ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−８及びＭＭＰ−９が上方制御されると報告されているＣＯＰＤ（即ち、慢性閉塞性肺疾患）［Ｓｅｇｕｒａ−Ｖａｌｄｅｚ  ｅｔ  ａｌ，  Ｃｈｅｓｔ、１１７、６８４−６９４（２０００）］。
【００１８】
（ｋ）眼病［Ｋｕｒｐａｋｕｓ−Ｗｈｅａｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ，  Ｐｒｏｇ．Ｈｉｓｔｏ．Ｃｙｔｏｃｈｅｍ．、３６（３）、１７９−２５９（２００１）］。
【００１９】
（ｌ）皮膚疾患［Ｈｅｒｏｕｙ，Ｙ．、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．、７（１）、３−１２（２００１）］。
【００２０】
本発明のスクシニルヒドロキサメートＭＭＰｉは、他の同程度の効力のＭＭＰｉよりも親水性が高い。これらは、生体内でのバックグラウンド組織からのクリアランスに優れ、柔軟性に富んだ合成経路で入手でき、広範な造影基を容易に組み込むことができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２１】
第一の態様では、本発明は、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４又はＹ１の位置で造影基で標識された以下の式（Ｉ）のメタロプロテイナーゼ阻害剤を含む造影剤であって、哺乳類生体内への標識マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤の投与後に造影基を検出することができる造影剤を提供する。
【００２２】
【化２】
2008514580.tif 000003
式中、
Ｘ１はＨ、Ｃ１〜３アルキル又はＣ１〜３フルオロアルキルであり、
Ｘ２はＨ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル又はＣ１〜６フルオロアルキルであり、
Ｘ３はＸ２基、ＮＨ２、Ｃ１〜１０アミノ又は−ＮＨ（ＣＯ）Ｘａであって、ＸａはＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜１２アリール又はＣ５〜１５アラルキルであり、
Ｘ４はＣ１〜６アルキル、Ａｒ１又は−（Ｃ１〜３アルキル）Ａｒ１であって、Ａｒ１はＣ３〜１２アリールもしくはヘテロアリール基又は−（ＣＨ２）ｗＣＯＮＨＹ２であり、ｗは１又は２の整数であり、
Ｙ１及びＹ２は独立にＹ基であって、ＹはＣ１〜１０アルキル、Ｃ３〜１０シクロアルキル、Ｃ１〜１０フルオロアルキル、Ａｒ１基又は−（Ｃ１〜３アルキル）Ａｒ１であるが、
（ｉｉｉ）Ｘ２とＸ３が共にＨとはならないこと、
（ｉｖ）Ｘ１がＨであり、Ｘ２がＨ又はＣ１〜３アルキルであり、Ｘ３がＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜６シクロアルキル又はＣ１〜６フルオロアルキルであり、Ｘ４がＣ１〜６アルキル、フェニル又はベンジルであるとき、造影基はキレート剤を含まないこと
を条件とする。
【００２３】
式（Ｉ）において、Ｘ１は最も好ましくはＨである。
【００２４】
Ｘ２は好ましくはＨ、Ｃ１〜４アルキル又はＣ１〜４フルオロアルキルであり、最も好ましくはＨ、Ｃ２〜４アルキル又はＣ２〜４フルオロアルキルであり、Ｘ２が−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２であるのが特に好ましい。
【００２５】
Ｘ３がＸ２基であるとき、Ｘ３は好ましくはＨ、Ｃ１〜４アルキル又はＣ１〜４フルオロアルキルであり、最も好ましくはＨ、Ｃ２〜４アルキル又はＣ２〜４フルオロアルキルである。Ｘ３がアミン基を含むとき、Ｘ３は、（例えば、還元的アミド化又はＮ−アルキル化によって）その位置で造影基を容易に結合できるように、好ましくは−ＮＨ２又は−（ＣＨ２）ｑＮＨ２（ｑは１〜４の整数である。）のような第一級アミン基を含むものである。さらに好ましいアミン含有Ｘ３基は、−ＮＨ（Ｃ１〜４アルキル）、特に−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２基のＮ含有類似体である−ＮＨＣＨ（ＣＨ３）２である。式（Ｉ）の最も好ましい化合物はＸ３がＸ２基であるものである。
【００２６】
式（Ｉ）において、Ｘ２とＸ３が共にＨとなることはなく、Ｘ２とＸ３の両方の位置に置換基が存在することも本発明の技術的範囲に属する。好ましい組合せはＸ２とＸ３の一方がＨで、他方がＨ以外のものである。この組合せではＸ２とＸ３の一方がＨで、他方が−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２であるのが特に好ましい。本発明者らは、Ｘ２の位置での置換が強いＭＭＰ阻害剤を与えるという予想外の知見を得た。そこで、最も好ましい組合せは、Ｘ３がＨで、Ｘ２が上述の好ましいＸ２基であり、Ｘ１がＨである。Ｘ１とＸ３が共にＨで、Ｘ２が−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２であるのが最も特に好ましい。
【００２７】
Ｘ４は好ましくは−ＣＨ２Ａｒ１又は（ＣＨ２）ＣＯＮＨＹ２である。Ｘ４が−ＣＨ２Ａｒ１のとき、Ａｒ１は最も好ましくはインドリル基であり、特に次式の−ＣＨ２（３−インドリル）である。
【００２８】
【化３】
2008514580.tif 000004
Ｙ１は好ましくはＣ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０フルオロアルキル又は−（ＣＨ２）ｗＣＯＮＨＹ２であり、最も好ましくはＣ１〜４アルキル、Ｃ１〜４フルオロアルキル又は−（ＣＨ２）ＣＯＮＨＹ２であり、Ｙ１が−ＣＨ３又は−（ＣＨ２）ＣＯＮＨＡｒ１であるのが特に好ましい。
【００２９】
本発明のヒドロキサメートマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤は、好適には１００〜３０００ダルトン、好ましくは１５０〜６００ダルトン、最も好ましくは２００〜５００ダルトンの分子量を有する。阻害剤は、好ましくは合成品である。
【００３０】
「標識」という用語は、ＭＭＰｉ自体が造影基を含んでいるか、或いは造影基が以下の式ＩＩに示すように追加の化学種として適宜リンカー基を介して結合していることを意味する。ＭＭＰｉ自体が造影基を含む場合、「造影基」がＭＭＰｉの化学構造の一部を形成し、その天然の存在量よりも格段に高レベルで存在する放射性又は非放射性同位体であることを意味する。こうした同位体の高レベル又は濃縮レベルは、その同位体の天然存在量の好適には５倍以上、好ましくは１０倍以上、最も好ましくは２０倍以上、理想的には５０倍以上、或いはその同位体の濃縮度が９０％〜１００％となるレベルで存在する。「造影基」を含むＭＭＰｉの例を以下に記載するが、造影基がＭＭＰｉの化学構造中の同位体標識１３Ｃ、１１Ｃ又は１８Ｆであるように、１３Ｃ又は１１Ｃレベルを高めたＣＨ３基及び１８Ｆレベルを高めたフルオロアルキル基も含まれる。「造影基」は哺乳類の体外から検出できるもの又はインビボ用に設計された検出器を用いて検出され、例えば血管内照射又は光学的検出器、例えば内視鏡検査又は術中使用のために設計された放射能検出器で検出し得る。好ましい造影基は生体内投与後に非侵襲的方法で外部から検出できるものである。最も好ましい造影基は、放射性、特に放射性金属イオン、γ線放出型放射性ハロゲン及び陽電子放出型放射性非金属、特にＳＰＥＣＴ又はＰＥＴを用いた造影に適したものである。
【００３１】
「造影基」は、好ましくは以下の（ｉ）〜（ｖｉｉ）から選択される。
（ｉ）放射性金属イオン、
（ｉｉ）常磁性金属イオン、
（ｉｉｉ）γ線放出型放射性ハロゲン、
（ｉｖ）陽電子放出型放射性非金属、
（ｖ）過分極ＮＭＲ活性核種、
（ｖｉ）インビボ光学イメージングに適したレポーター、
（ｖｉｉ）血管内検出に適したβ線放射体。
【００３２】
造影基が放射性金属イオン、即ち放射性金属である場合、好適な放射性金属は、６４Ｃｕ、４８Ｖ、５２Ｆｅ、５５Ｃｏ、９４ｍＴｃ又は６８Ｇａのような陽電子放射体、９９ｍＴｃ、１１１Ｉｎ、１１３ｍＩｎ又は６７Ｇａのようなγ線放射体である。好ましい放射性金属は９９ｍＴｃ、６４Ｃｕ、６８Ｇａ及び１１１Ｉｎである。最も好ましい放射性金属はγ放射体、特に９９ｍＴｃである。
【００３３】
造影基が常磁性金属イオンである場合、かかる金属イオンの好適なものとして、Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩ）、Ｃｕ（ＩＩ）、Ｃｒ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、Ｃｏ（ＩＩ）、Ｅｒ（ＩＩ）、Ｎｉ（ＩＩ）、Ｅｕ（ＩＩＩ）又はＤｙ（ＩＩＩ）が挙げられる。好ましい常磁性金属イオンはＧｄ（ＩＩＩ）、Ｍｎ（ＩＩ）及びＦｅ（ＩＩＩ）であり、Ｇｄ（ＩＩＩ）が特に好ましい。
【００３４】
造影基がγ線放出型放射性ハロゲンである場合、放射性ハロゲンは好適には１２３Ｉ、１３１Ｉ又は７７Ｂｒから選択される。好ましいγ線放出型放射性ハロゲンは１２３Ｉである。
【００３５】
造影基が陽電子放出型放射性非金属である場合、かかる陽電子放射体の好適なものとして、１１Ｃ、１３Ｎ、１５Ｏ、１７Ｆ、１８Ｆ、７５Ｂｒ、７６Ｂｒ又は１２４Ｉが挙げられる。好ましい陽電子放出型放射性非金属は１１Ｃ、１３Ｎ、１８Ｆ及び１２４Ｉであり、特に好ましくは１１Ｃ及び１８Ｆであり、最も好ましくは１８Ｆである。
【００３６】
造影基が過分極ＮＭＲ活性核種である場合、かかるＮＭＲ活性核種はゼロ以外の核スピンを有し、１３Ｃ、１５Ｎ、１９Ｆ、２９Ｓｉ及び３１Ｐが挙げられる。これらのうち、１３Ｃが好ましい、「過分極」という用語は、ＮＭＲ活性核種の分極の程度がその平衡分極を超えていることを意味する。１３Ｃの天然存在量（１２Ｃに対して）は約１％であり、適当な１３Ｃ標識化合物は過分極する前に好適には５％以上、好ましくは５０％以上、最も好ましくは９０％以上の存在量となるように濃縮される。本発明のメタロプロテイナーゼ阻害剤の１以上の炭素原子は好適には１３Ｃで濃縮され、これを次いで過分極させる。
【００３７】
造影基がインビボ光学イメージングに適したレポーターである場合、レポーターは光学イメージング法で直接又は間接的に検出できる部分であればよい。レポーターは光散乱体（例えば着色又は未着色粒子）でも、光吸収体でも、光放射体でもよい。さらに好ましくは、レポーターは発色団又は蛍光化合物のような色素である。色素は紫外乃至近赤外域の波長を有する電磁スペクトルの光と相互作用する色素であればよい。最も好ましくはレポーターは蛍光特性を有する。
【００３８】
好ましい有機発色団及び蛍光団レポーターとしては、広範な非局在化電子系を有する基、シアニン、メロシアニン、インドシアニン、フタロシアニン、ナフタロシアニン、トリフェニルメチン、ポルフィリン、ピリリウム色素、チアピリリウム色素、スクアリリウム色素、クロコニウム色素、アズレニウム色素、インドアニリン、ベンゾフェノキサジニウム色素、ベンゾチアフェノチアジニウム色素、アントラキノン、ナフトキノン、インダスレン、フタロイルアクリドン、トリスフェノキノン、アゾ色素、分子内及び分子間電荷移動色素及び色素鎖体、トロポン、テトラジン、ビス（ジチオレン）鎖体、ビス（ベンゼン−ジチオレート）鎖体、ヨードアニリン色素、ビス（Ｓ，Ｏ−ジチオレン）鎖体が挙げられる。蛍光タンパク質、例えば緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）及び吸収／発光特性の異なるＧＦＰの修飾体も有用である。ある種の希土類金属（例えばユーロピウム、サマリウム、テルビウム又はジスプロシウム）の鎖体も、蛍光ナノ結晶（量子ドット）のような特定の状況で用いられる。
【００３９】
使用し得る発色団の具体例としては、フルオレセイン、スルホローダミン１０１（テキサスレッド）、ローダミンＢ、ローダミン６Ｇ、ローダミン１９、インドシアニングリーン、Ｃｙ２、Ｃｙ３、Ｃｙ３．５、Ｃｙ５、Ｃｙ５．５、Ｃｙ７、マリーナブルー、パシフィックブルー、オレゴングリーン８８、オレゴングリーン５１４、テトラメチルローダミン及びＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ３５０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ４３０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５３２、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５４６、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５５５、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５６８、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５９４、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６３３、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６６０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６８０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ７００及びＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ７５０が挙げられる。
【００４０】
特に好ましいのは、４００ｎｍ〜３μｍ、特に６００〜１３００ｎｍの可視又は近赤外域に吸収極大を有する色素である。光学イメージングモダリティ及び測定法としては、例えば、発光イメージング、内視鏡検査、蛍光内視鏡検査、光干渉断層撮影、透過イメージング、時間分解透過イメージング、共焦点イメージング、非線形顕微鏡、光音響イメージング、音響光学イメージング、分光法、反射分光法、干渉分光法、コヒーレンス干渉法、拡散光トモグラフィー及び蛍光媒介拡散光トモグラフィー（連続波、時間領域及び周波数領域システム）、並びに光散乱、吸収、偏光、発光、蛍光寿命、量子収率及び消光の測定が挙げられる。
【００４１】
造影基が血管内検出に適したβ線放射体である場合、かかるβ線放射体の好適なものとして、放射性金属の６７Ｃｕ、８９Ｓｒ、９０Ｙ、１５３Ｓｍ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ又は１９２Ｉｒ並びに非金属の３２Ｐ、３３Ｐ、３８Ｓ、３８Ｃｌ、３９Ｃｌ、８２Ｂｒ及び８３Ｂｒが挙げられる。
【００４２】
本発明のＭＭＰｉはＸ４を有する炭素原子とＸ２及び／又はＸ３置換基を有する炭素原子の位置、さらにおそらくは他の位置にキラル中心を有する。本発明は、ラセミ混合物並びに実質的に純粋な光学異性体（つまり鏡像異性体）又はジアステレオマーを始めとする、あらゆる純度の立体異性体を包含する。式Ｉの好ましい立体異性体を以下の式Ｉａ及びＩｂに示す。
【００４３】
【化４】
2008514580.tif 000005
本発明の造影剤は、好ましくは次の式（ＩＩ）のものである。
【００４４】
【化５】
2008514580.tif 000006
式中、
｛阻害剤｝は式（Ｉ）のメタロプロテイナーゼ阻害剤であり、
−（Ａ）ｎ−はリンカー基であって、各Ａは独立に−ＣＲ２−、−ＣＲ＝ＣＲ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＲ２ＣＯ２−、−ＣＯ２ＣＲ２−、−ＮＲＣＯ−、−ＣＯＮＲ−、−ＮＲ（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ−、−ＮＲ（Ｃ＝Ｓ）ＮＲ−、−ＳＯ２ＮＲ−、−ＮＲＳＯ２−、−ＣＲ２ＯＣＲ２−、−ＣＲ２ＳＣＲ２−、−ＣＲ２ＮＲＣＲ２−、Ｃ４〜８シクロへテロアルキレン基、Ｃ４〜８シクロアルキレン基、Ｃ５〜１２アリーレン基もしくはＣ３〜１２へテロアリーレン基、アミノ酸、糖又は単分散ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）構成単位であり、
ＲはＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４アルコキシアルキル又はＣ１〜４ヒドロキシアルキルからは独立に選択され、
ｎは０〜１０の整数であり、
Ｘ５はＨ、ＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ１〜４アルコキシ、Ｃ１〜４アルコキシアルキル、Ｃ１〜４ヒドロキシアルキル又は式（Ｉ）で定義したＡｒ１基であり、
「造影基」は上記の式（Ｉ）で定義した通りであって、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４又はＹ１の位置に結合している。
【００４５】
「アミノ酸」という用語は、Ｌアミノ酸又はＤアミノ酸、アミノ酸類似体（例えば、ナフチルアラニン）又はアミノ酸模倣体を意味し、天然のものでも純粋な合成品であってもよく、光学的に純粋つまり単一の光学異性体（従ってキラルなもの）であってもよいし、光学異性体の混合物であってもよい。好ましくは、本発明のアミノ酸は光学的に純粋である。
【００４６】
「糖」という用語は、単糖類、二糖類又は三糖類を意味する。好適な糖としては、グルコース、ガラクトース、マルトース、マンノース及びラクトースが挙げられる。糖は、アミノ酸との結合を容易にするため適宜官能化してもよい。例えば、アミノ酸のグルコサミン誘導体は、ペプチド結合を介して他のアミノ酸に結合させることができる。アスパラギンのグルコサミン誘導体（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社から市販）はその一例である。
【００４７】
【化６】
2008514580.tif 000007
造影基は、好ましくは式（Ｉ）のＭＭＰｉのＸ１３、Ｘ４又はＹ１の位置に結合し、最も好ましくはＸ４又はＹ１の位置に結合し、Ｘ１はＨである。造影基が−（ＣＨ２）ｗ（ＣＯ）ＮＨＹ２基のＹ２基に結合又はＹ２基を含んでいるのが特に好ましい。
【００４８】
式（ＩＩ）のリンカー基−（Ａ）ｎ−の役割としてメタロプロテイナーゼ阻害剤の活性部位から造影基を遠ざけることも想定される。これは、造影基が比較的嵩高い（例えば金属鎖体）場合にＭＭＰ酵素への阻害剤の結合が損なわれないようにするため特に重要である。これは、嵩高い基が活性部位から遠ざかる自由度をもつようにするための柔軟性（例えば単純なアルキル鎖）及び／又は金属錯体を活性部位から遠ざけるシクロアルキル又はアリールのスペーサーのような剛直性の組合せによって達成することができる。
【００４９】
リンカー基の性状は造影剤の生体分布を変化させるのにも利用できる。例えば、リンカーにエーテル基を導入すると、血漿タンパク質の結合を最小限にするのに役立つ。−（Ａ）ｎ−が単分散ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）構成単位又はアミノ酸残基１〜１０個のペプチド鎖を含むと、リンカー基は生体内での造影剤の薬物動態及び血中クリアランスを変化させる機能をもつことがある。かかる「バイオモディファイアー」のリンカー基は筋肉や肝臓のようなバックグランド組織及び／又は血液からの造影剤のクリアランスを加速し、バックグラウンドの干渉の低減による良好な診断画像を得ることができる。バイオモディファイアーリンカー基は、肝臓を経る場合とは異なり、例えば腎臓を経る排出の特定の経路を優先するためにも使用し得る。
【００５０】
−（Ａ）ｎ−がアミノ酸残基１〜１０個のペプチド鎖を含む場合、アミノ酸残基は好ましくはグリシン、リジン、アスパラギン酸又はセリンから選択される。−（Ａ）ｎ−がＰＥＧ部分を含む場合、好ましくは、以下の式ＩＩＩＡ又は式ＩＩＩＢの単分散ＰＥＧ様構造のオリゴマー化で得られる単位、即ち式ＩＩＩＡの１７−アミノ−５−オキソ−６−アザ−３，９，１２，１５−テトラオキサヘプタデカン酸を含む。
【００５１】
【化７】
2008514580.tif 000008
式中、ｐは１〜１０の整数であり、Ｃ末端単位（＊）は造影基に連結している。別法では、次の式ＩＩＩＢのプロピオン酸誘導体に基づくＰＥＧ様構造も使用できる。
【００５２】
【化８】
2008514580.tif 000009
式中、ｐは式ＩＩＩＡで定義した通りであり、ｑは３〜１５の整数である。式ＩＩＩＢにおいて、ｐは好ましくは１又は２であり、ｑは好ましくは５〜１２である。
【００５３】
リンカー基がＰＥＧ又はペプチド鎖を含まない場合、好ましい−（Ａ）ｎ−基は原子が連結した主鎖を有し、２〜１０原子、最も好ましくは２〜５原子、特に好ましくは２又は３原子の−（Ａ）ｎ−部分をなす。２原子の最小のリンカー基主鎖は造影基がメタロプロテイナーゼ阻害剤から十分離隔され、いかなる相互作用も最小限となるという利点を与える。
【００５４】
アルキレン基又はアリーレン基のような非ペプチドリンカー基は、それが結合したＭＭＰ阻害剤と顕著な水素結合相互作用をもたず、ＭＭＰ阻害剤にリンカーが巻きつかないという利点を有する。好ましいアルキレンスペーサー基は−（ＣＨ２）ｄ−であり、ｄは２〜５である。好ましいアリーレンスペーサーは次式のものである。
【００５５】
【化９】
2008514580.tif 000010
式中、ａ及びｂは独立に０、１又は２である。
【００５６】
リンカー基−（Ａ）ｎ−は好ましくはジグリコール酸基、マレイミド基、グルタル酸、コハク酸、ポリエチレングリコール系単位又は式ＩＩＩＡ又はＩＩＩＢのＰＥＧ様単位を含む。
【００５７】
造影基が金属イオンを含む場合、金属イオンは金属鎖体として存在する。かかるメタロプロテイナーゼ阻害剤と金属イオンとのコンジュゲートは好適には次の式ＩＩａのものである。
【００５８】
【化１０】
2008514580.tif 000011
式中、Ａ及びｎは上記の式ＩＩで定義した通りである。
【００５９】
「金属鎖体」という用語は、金属イオンと１以上のリガンドとの配位鎖体を意味する。金属鎖体は「トランスキレート化に耐性」、つまり金属の配位部位に対する他の潜在的な競合リガンドとのリガンド交換を容易に起こさないことが極めて好ましい。潜在的な競合リガンドには、ヒドロキサム酸ＭＭＰｉ部分自体及びインビトロ標品中の他の賦形剤（製剤に使用される例えば放射能保護物質又は抗菌保存剤）又は生体の内在性化合物（例えばグルタチオン、トランスフェリン又は血漿タンパク質）がある。
【００６０】
式ＩＩａの金属鎖体は次の式ＩＩｂのコンジュゲート（つまり金属−配位リガンドコンジュゲート）から誘導される。
【００６１】
【化１１】
2008514580.tif 000012
式中、Ａ及びｎは上記の式ＩＩで定義した通りである。
【００６２】
トランスキレート化に耐性である金属鎖体を形成する本発明の使用に適したリガンドとしては、（金属ドナー原子同士が炭素原子又は非配位ヘテロ原子の非配位骨格で連結されていることによって）五又は六員キレート環が形成されるように２〜６個、好ましくは２〜４個の金属ドナー原子が配列したキレート剤、又はイソニトリル、ホスフィン又はジアゼニドなどの金属イオンに強く結合するドナー原子を含む単座リガンドが挙げられる。
キレート剤の部分として金属に良好に結合するドナー原子の例は、アミン、チオール、アミド、オキシム及びホスフィンである。ホスフィン類は強い金属鎖体を形成し、単座又は二座ホスフィンであっても適当な金属鎖体を形成する。イソニトリル及びジアゼニドの線状構造は、それらがキレート剤に容易に取り込まれないようにするためであり、従って、典型的には単座リガンドとして使用される。適当なイソニトリルの例としては、ｔ−ブチルイソニトリルのような単純なアルキルイソニトリル及びｍｉｂｉ（即ち、１−イソシアノ−２−メトキシ−２−メチルプロパン）のようなエーテル置換イソニトリルが挙げられる。適当なホスフィンの例としては、テトロホスミン及び単座ホスフィン類、例えばとリス（３−メトキシプロピル）ホスフィンが挙げられる。適当なジアゼニドの例としては、リガンドのＨＹＮＩＣ系列、即ちヒドラジン置換ピリジン又はニコチンアミドが挙げられる。
【００６３】
トランスキレート化に耐性の金属鎖体を形成するテクネチウムの適当なキレート剤の例としては、特に限定されないが、以下の（ｉ）〜（ｖ）が挙げられる。
【００６４】
（ｉ）次式のジアミンジオキシム。
【００６５】
【化１２】
2008514580.tif 000013
式中、Ｅ１〜Ｅ６は各々独立にＲ′基であり、
各Ｒ′はＨ又はＣ１〜１０アルキル、Ｃ３〜１０アルキルアリール、Ｃ２〜１０アルコキシアルキル、Ｃ１〜１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜１０フルオロアルキル、Ｃ２〜１０カルボキシアルキル又はＣ１〜１０アミノアルキルであるか、或いは２個以上のＲ′がそれらと結合した原子と共に炭素環、複素環、飽和環又は不飽和環を形成するもので、Ｒ′基の１以上がＭＭＰ阻害剤に結合しており、
Ｑは式−（Ｊ）ｆ−の架橋基であり、
ｆは３、４又は５であり、各Ｊは独立に−Ｏ−、−ＮＲ′−又は−Ｃ（Ｒ′）２−であるが、ただし、−（Ｊ）ｆ−が、−Ｏ−又は−ＮＲ′−であるＪ基を最大１個しか含まないことを条件とする。
【００６６】
好ましいＱ基は以下のものである。
Ｑ＝−（ＣＨ２）（ＣＨＲ′）（ＣＨ２）−、即ちプロピレンアミンオキシムつまりＰｎＡＯ誘導体、
Ｑ＝−（ＣＨ２）２（ＣＨＲ′）（ＣＨ２）２−、即ちペンチレンアミンオキシムつまりＰｅｎｔＡＯ誘導体、
Ｑ＝−（ＣＨ２）２ＮＲ′（ＣＨ２）２−。
【００６７】
Ｅ１〜Ｅ６は、好ましくはＣ１〜３アルキル、アルキルアリールアルコキシアルキル、ヒドロキシアルキル、フルオロアルキル、カルボキシアルキル又はアミノアルキルから選択される。最も好ましくは、各Ｅ１〜Ｅ６基はＣＨ３である。
【００６８】
ＭＭＰ阻害剤は好ましくはＥ１又はＥ６のＲ′基或いはＱ部分のＲ′基のいずれかで結合する。最も好ましくは、ＭＭＰ阻害剤はＱ部分のＲ′基に結合する。ＭＭＰ阻害剤がＱ部分のＲ′基に結合する場合、Ｒ′基は好ましくは橋頭位にある。かかる場合、Ｑは好ましくは−（ＣＨ２）（ＣＨＲ′）（ＣＨ２）−、−（ＣＨ２）２（ＣＨＲ′）（ＣＨ２）２−又は−（ＣＨ２）２ＮＲ′（ＣＨ２）２−、最も好ましくは−（ＣＨ２）２（ＣＨＲ′）（ＣＨ２）２−である。特に好ましい二官能性ジアミンジオキシムキレーターは次式のものであり、ＭＭＰ阻害剤は橋頭の−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２基を介して結合している。
【００６９】
【化１３】
2008514580.tif 000014
（ｉｉ）チオールトリアミドドナーセットを有するＮ３Ｓリガンド、例えばＭＡＧ３（メルカプトアセチルトリグリシン）及び関連リガンド、又はジアミドピリジンチオールドナーセットを有するもの、例えばＰｉｃａ。
【００７０】
（ｉｉｉ）ジアミンジチオールドナーセットを有するＮ２Ｓ２リガンド、例えばＢＡＴ又はＥＣＤ（即ちエチルシステイネート二量体）又はアミドアミンジチオールドナーセットを有するもの、例えばＭＡＭＡ。
【００７１】
（ｉｖ）テトラミン、アミドトリアミン又はジアミンジアミンドナーセットを有する開環又はマクロ環状リガンドであるＮ４リガンド、例えばサイクラム、モノオキシサイクラム又はジオキシサイクラム。
【００７２】
（ｖ）ジアミンジフェノールドナーセットを有するＮ２Ｏ２リガンド。
【００７３】
上述のリガンドは特にテクネチウム、例えば９４ｍＴｃ又は９９ｍＴｃとの錯形成に適しており、Ｊｕｒｉｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ［Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．，９９，２２０５−２２１８（１９９９）］にさらに詳細に記載されている。これらのリガンドは、他の金属、例えば銅（６４Ｃｕ又は６７Ｃｕ）、バナジウム（例えば４８Ｖ）、鉄（例えば５２Ｆｅ）又はコバルト（例えば５５Ｃｏ）にも有用である。他の適当なリガンドとしては、Ｓａｎｄｏｚの国際公開第９１／０１１４４号に記載されたものがあり、インジウム、イットリウム及びガドリニウムに特に適したリガンド、特にマクロ環アミノカルボキシレート及びアミノホスホン酸リガンドが挙げられる。ガドリニウムの非イオン系（即ち中性）金属鎖体を形成するリガンドは公知であり、米国特許第４８８５３６３号に記載されている。放射性金属イオンがテクネチウムである場合、リガンドは好ましくは四座キレート剤である。テクネチウムに対する好ましいキレート剤はジアミンジオキシム又は上記Ｎ２Ｓ２又はＮ３Ｓのドナーセットを有するものである。
【００７４】
多座ヒドロキサム酸はキレート剤であり、９９ｍＴｃを始めとする放射性金属と金属錯体を形成することが知られている［Ｓａｆａｖｙ  ｅｔ  ａｌ，  Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．，４，１９４〜１９８（１９９３）］。しかし、本発明者らは、単座ヒドロキサム酸では［例えば、式（Ｉ）のＸ１がＨのとき］、ヒドロキサム酸ＭＭＰｉが放射性金属の結合リガンドと効果的に競争し得ることを見出した。従って、Ｘ１がＨである場合、リガンドの選択には特別な注意が必要である。即ち、望ましくない［ヒドロキサム酸］−［放射性金属］の金属錯体の形成を避けるため、放射性金属のヒドロキサム酸ＭＭＰｉと効果的に競争するリガンドを選択することが必要である。かかるリガンドの適当なものとしては、ホスフィン；イソニトリル；テトラミン、アミドトリアミン又はジアミドジアミンドナーセットを有するＮ４キレート剤；チオールトリアミンドナー又はジアミドピリジンチオールドナーセットを有するＮ３Ｓキレート剤；或いはＢＡＴなどのジアミンジチオールドナーセット又はＭＡＭＡなどのアミドアミンジチオールドナーセットを有するＮ２Ｓ２キレート剤が挙げられる。かかるリガンドの好ましいものとしては、上述のＮ４、Ｎ３Ｓ及びＮ２Ｓ２キレート剤、最も好ましくはＮ４テトラミン及びＮ２Ｓ２ジアミンジチオール又はジアミドジチオールキレート剤、特にＢＡＴとして知られるＮ２Ｓ２ジアミンジチオールキレーターが挙げられる。
【００７５】
【化１４】
2008514580.tif 000015
マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤は、結合が血中で容易に代謝されない態様で金属鎖体に結合するのが極めて好ましい。かかる代謝が起これば標識メタロプロテイナーゼ阻害剤が所望の生体内標的部位に到達する前に金属鎖体が切断されるからである。従ってマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤は好ましくは容易に代謝されない結合を介して本発明の金属鎖体に共有結合する。造影基がヨウ素のような放射性ハロゲンである場合、ＭＭＰ阻害剤は好適には、ヨウ化又は臭化アリールのような非放射性ハロゲン原子（放射性ヨウ素交換を可能とするため）、活性化アリール環（例えばフェノール基）、有機金属前駆体化合物（例えばトリアルキルスズ又はトリアルキルシリル）、トリアゼンのような有機前駆体、或いはヨードニウム塩のような求核置換反応のための良好な脱離基を含むように選択される。放射性ハロゲン（例えば１２３Ｉ及び１８Ｆ）の導入法は、Ｂｏｌｔｏｎ［Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，４５，４８５−５２８（２００２）］に記載されている。放射性ハロゲン、特にヨウ素を結合させることのできる適当なアリール基の例を以下に示す。
【００７６】
【化１５】
2008514580.tif 000016
これらはいずれも芳香環で容易に放射性ヨウ素置換できる置換基を含んでいる。放射性ヨウ素を含む別の置換基は、放射性ハロゲン交換、例えば次式を経る直接ヨウ素化によって合成することができる。
【００７７】
【化１６】
2008514580.tif 000017
造影基がヨウ素の放射性同位体である場合、放射性ヨウ素原子は好ましくはベンゼン環のような芳香族環又はビニル基に共有結合で直接結合する。飽和脂肪族系に結合したヨウ素原子は生体内代謝を受けやすく、放射性ヨウ素が消失しやすいことが知られているからである。
【００７８】
造影基がフッ素の放射性同位体（例えば１８Ｆ）を含む場合、放射性ヨウ素原子は、アルキルブロマイド、アルキルメシレート又はアルキルトシレートのような良好な脱離基を有する適当な前駆体と１８Ｆ−フルオライドとの反応を用いた直接標識によって実施し得る。１８Ｆは、Ｎ−（ＣＨ２）３１８Ｆを得るための１８Ｆ（ＣＨ２）３ＯＭｓ（Ｍｓはメシレート）のようなアルキル化剤を用いたアミン前駆体のＮ−アルキル化、或いは１８Ｆ（ＣＨ２）３ＯＭｓ又は１８Ｆ（ＣＨ２）３Ｂｒを用いたヒドロキシル基のＯ−アルキル化によって導入することもできる。１８Ｆは、１８Ｆ（ＣＨ２）３ＯＨ反応物を用いたＮ−ハロアセチル基のアルキル化によって導入することもでき、−ＮＨ（ＣＯ）ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２）３１８Ｆ誘導体を生じる。アリール系に関しては、アリールジアゾニウム塩からの窒素の１８Ｆ−フルオライド求核置換、アリールニトロ化合物又はアリール第四級アンモニウム塩がアリール−１８Ｆ誘導体への可能な経路である。
【００７９】
第一級アミンを含む式（Ｉ）のＭＭＰｉは、Ｋａｈｎ他［Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．４５，１０４５−１０５３（２００２）］及びＢｏｒｃｈ他［Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．９３，２８９７（１９７１）］に教示されているように、還元的アミド化によって、例えば以下の通り１８Ｆ標識することができる。
【００８０】
【化１７】
2008514580.tif 000018
この方法は、フェニル−ＮＨ２又はフェニル−ＣＨ２ＮＨ２基を含む化合物のようなアリール第一級アミンにも有効に応用することができる。
【００８１】
式（Ｉ）のアミン含有ＭＭＰ阻害剤は、次式のような１８Ｆ標識活性エステルとの反応で１８Ｆで標識することもでき、アミド結合で結合した生成物を生じる。
【００８２】
【化１８】
2008514580.tif 000019
上記Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル及びペプチド標識におけるその使用は、Ｖａｉｄｙａｎａｔｈａｎ他［Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．，１９（３），２７５〜２８１（１９９２）］及びＪｏｈｎｓｔｒｏｍ他［Ｃｌｉｎ．Ｓｃｉ．，１０３（Ｓｕｐｐｌ．４８），４５〜８５（２００２）］に教示されている。１８Ｆ標識誘導体の合成経路の詳細は、Ｂｏｌｔｏｎ，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，４５，４８５〜５２８（２００２）に記載されている。
【００８３】
Ｘ１位置でのＰＥＴ放射性同位体標識の導入は、例えばＦｅｉ他［Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，４６，３４３〜３５１（２００３）］又はＺｈｅｎｇ他［Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．，３０，７５３〜７６０（２００３）］に教示されているような１１ＣＨ３ＯＳＯ２ＣＦ３のようなトリフレート誘導体又は上述の１８ＦＯ−アルキル化剤を用いた対応ヒドロキサム酸誘導体（Ｘ１＝Ｈ）のＯ−アルキル化によって達成し得る。１１ＣＰＥＴ放射性標識は、Ｚｈｅｎｇ他［Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．，３１，７７〜８５（２００４）］に教示されているように、上記トリフレート誘導体を用いたフェノール性水酸基のアルキル化によっても導入できる。１１Ｃでのその他の標識法は、Ａｎｔｏｎｉ他［「Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ」、Ｍ．Ｊ．Ｗｅｌｃｈ及びＣ．Ｓ．Ｒｅｄｖａｎｌｙ（編者）、Ｗｉｌｅｙ（２００３）、第５章、１４１〜１９４］に教示されている。
【００８４】
本発明のマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤の好ましいクラスは次の式ＩＶのものである。
【００８５】
【化１９】
2008514580.tif 000020
式中、
Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は上記の式（Ｉ）で定義した通りであり、
Ｙ３は上記の式（Ｉ）で定義したＹ基である。
【００８６】
式（ＩＶ）において、Ｙ３は好ましくはＣ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０フルオロアルキル又は−（ＣＨ２）ｗＣＯＮＨＹ２であり、最も好ましくはＣ１〜４アルキル、Ｃ１〜４フルオロアルキル又は（ＣＨ２）ＣＯＮＨＹ２であり、Ｙ３が−ＣＨ３又は−（ＣＨ２）ＣＯＮＨＡｒ１であるのが特に好ましい。
【００８７】
式ＩＶの化合物は、好ましくは式Ｉａ及びＩｂ（上記）に相当する立体化学を有する。式（ＩＶ）の好ましいＸ１、Ｘ２及びＸ３置換基は、式（Ｉ）で好ましいものとして挙げたものである。式ＩＶのＸ１は最も好ましくはＨである。
【００８８】
造影剤が式ＩＶのＭＭＰ阻害剤を含み、造影基がγ線放出型放射性ハロゲンである場合、造影基は好ましくはＹ３又はＸ３のいずれかの置換基、最も好ましくはＹ３置換基に結合する。造影基が陽電子放出型放射性非金属である場合、造影基は好ましくはＸ１、Ｘ３又はＹ３、最も好ましくはＹ３又はＸ３、特にＹ３の位置に結合する。Ｘ１がＨであるとき、陽電子放出型放射性非金属は好ましくはＹ３又はＸ３、最も好ましくはＹ３の位置に結合する。
【００８９】
造影基が放射性又は常磁性金属イオンである場合、Ｙ３又はＸ３の一方の置換基は好ましくは造影基に結合又は造影基を含む。最も好ましくは、式ＩＶのＹ３置換基が放射性又は常磁性金属イオン造影基に好ましくは結合しているか、或いは造影基を含む。
【００９０】
本発明の好ましいマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤の別の群は、次の式Ｖのものである。
【００９１】
【化２０】
2008514580.tif 000021
式中、
Ｘ１、Ｘ２及びＸ３は上記の式（Ｉ）で定義した通りであり、
Ｙ４は上記の式（Ｉ）で定義したＹ基である。
【００９２】
式（Ｖ）において、Ｙ４は好ましくはＣ１〜１０アルキル又はＣ１〜１０フルオロアルキルであり、最も好ましくはＣ１〜４アルキル又はＣ１〜４フルオロアルキルであり、Ｙ４が−ＣＨ３であるのが特に好ましい。
【００９３】
式Ｖの化合物は好ましくは式Ｉａ及びＩｂ（上記）に相当する立体化学を有する。式（Ｖ）の好ましいＸ１、Ｘ２及びＸ３置換基は、式（Ｉ）で好ましいものとして挙げたものである。式ＶのＸ１は最も好ましくはＨである。
【００９４】
造影剤が式ＶのＭＭＰ阻害剤を含み、造影基がγ線放出型放射性ハロゲンである場合、造影基は好ましくはＹ２、Ｙ４又はＸ３のいずれかの置換基、最も好ましくはＹ２又はＹ４置換基、特にＹ２に結合する。造影基が陽電子放出型放射性非金属である場合、造影基は好ましくはＸ１、Ｘ３、Ｙ２又はＹ４の位置、最も好ましくはＹ２又はＹ４置換基、特にＹ２に結合する。Ｘ１がＨである場合、陽電子放出型放射性非金属は好ましくはＹ２又はＸ３、最も好ましくはＹ２の位置に結合する。
【００９５】
造影基が放射性又は常磁性金属イオンである場合、Ｙ２又はＹ４の一方の置換基は好ましくは造影基に結合又は造影基を含む。最も好ましくは、式ＶのＹ２置換基が放射性又は常磁性金属イオン造影基に好ましくは結合しているか、或いは造影基を含む。
【００９６】
本発明の造影剤が放射性又は常磁性金属イオンを含む場合、金属イオンは好適には金属錯体として存在する。かかる金属錯体は好適には式ＩＩｂのコンジュゲートと適当な金属イオンとの反応で調製される。式ＩＩｂのＭＭＰ阻害剤のリガンドコンジュゲート又はキレーターコンジュゲートは二官能性キレート法で調製できる。例えば、官能基を結合したリガンド又はキレート剤（それぞれ「二官能性リンカー」又は「二官能性キレート」）の調製は周知である。結合させた官能基としては、アミン、チオシアネート、マレイミド及び活性エステル、例えばＮ−ヒドロキシスクシンイミド又はペンタフルオロフェノールが挙げられる。本発明のキレーター１はアミン官能化二官能性キレートの一例である。ＢＡＴキレーターコンジュゲートの調製に使用できるチオラクトン系二官能性キレートについては、Ｂａｉｄｏｏ他［Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．，５，１１４〜１１８（１９９４）］に記載されている。テクネチウム又はレニウムトリカルボニルコアの錯化に適した二官能性キレートは、Ｓｔｉｃｈｅｌｂｅｒｇｅｒ他［Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｏｌ．，３０，４６５〜４７０（２００３）］に記載されている。二官能性ＨＹＮＩＣリガンドは、Ｅｄｗａｒｄｓ他［Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．，８，１４６（１９９７）］に記載されている。かかる二官能性キレートは、所望のコンジュゲートを形成するためのマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤の適当な官能基と反応させることができる。阻害剤上のかかる適当な官能基としては、以下のものが挙げられる。カルボキシル類（アミンで官能化した二官能性キレーターとのアミド結合形成用）、アミン類（カルボキシル又は活性エステルで官能化した二官能性キレーターとのアミド結合形成用）、ハロゲン類、メシレート類及びトシレート類（アミンで官能化した二官能性キレーターのＮ−アルキル化用）、及びチオール類（マレイミドで官能化した二官能性キレーターとの反応用）。
【００９７】
本発明のＭＭＰ阻害剤の放射標識は「前駆体」を用いて好適に実施できる。造影基が金属イオンを含む場合、かかる前駆体は以下の第四の実施形態で説明する通り、好適にはＭＭＰ阻害剤とリガンドとの「コンジュゲート」を含む。造影基が非金属放射性同位体、即ちγ線放出型放射性ハロゲン又は陽電子放出型放射性非金属を含む場合、かかる「前駆体」は好適には非放射性物質を含み、所望の非金属放射性同位体の好適な化学的形態との化学反応を最小限の段階数（理想的には一段階）で実施でき、多大な精製を必要性とせず（理想的にはそれ以上精製せず）に所望の放射能をもつ生成物を得ることができるように設計される。かかる前駆体は好適には良好な化学純度で得ることができ、適宜滅菌形態で供給される。
【００９８】
本発明のＭＭＰ阻害剤の放射標識のための「前駆体」（リガンドコンジュゲートを含む）は以下の通り製造できると考えられる。
【００９９】
−Ｎ（ＣＨ２）２ＯＨ又は−Ｎ（ＣＨ２）３ＯＨ誘導体の末端−ＯＨ基をトシル又はメシル基又はブロモ誘導体に転化し、次にこれを用いてアミノ官能化キレーターを結合すればよい。１８Ｆ標識ＰＥＴ造影剤を得るため、上記前駆体のトシレート、メシレート又はブロモ基を［１８Ｆ］フルオライドで置き換えてもよい。
【０１００】
放射性ヨウ素誘導体は対応するフェノール前駆体から調製することができる。アルキルブロミド誘導体は、アミン官能化キレーターのＮ−アルキル化に使用することができる。ヨウ化フェニル誘導体もまた、放射性ヨウ素化合物の有機金属前駆体、例えばトリアルキルスズ又はトリメチルシリル（ＴＭＳ）前駆体に転化することができる。ヨウ化フェニル誘導体は、また、１８Ｆフルオライドによる放射性フッ素化のためのアリールヨードニウム前駆体に転化することもできる。
【０１０１】
第一級アミン官能化ＭＭＰ阻害剤を酸無水物と反応させると、−Ｎ（ＣＯ）（ＣＨ２）３ＣＯ２ＨのタイプのＮ官能性前駆体を得ることができ、次いでこれを二官能性アミン含有リガンドに結合させることができる。かかる第一級アミンで置換されたＭＭＰｉは、ベンジルアミンを用いてブロモ誘導体をアルキル化した後、パラジウム触媒担持木炭を用いた水素化のような標準的な条件下でベンジル保護基を除去することによって調製することができる。
【０１０２】
アミン官能化ＭＭＰｉは、カルボキシル又は活性エステルで官能化した二官能性キレーターと直接又はリンカーを介して結合させることができる。かかる化合物を、１８Ｆ（ＣＨ２）２ＯＴｓ（Ｔｓはトシレート基である）又は１８Ｆ（ＣＨ２）２ＯＭｓ（Ｍｓはメシレート基である）のような、１８Ｆでの標識化に適するアルキル化剤と反応させて、−Ｎ（ＣＨ２）２１８Ｆ置換基を有する対応するＮ官能性アミン誘導体を得ることもできる。或いは、アミンを最初に塩化クロロアセチルと反応させて、Ｎ誘導化アミド−Ｎ（ＣＯ）ＣＨ２Ｃｌを得た後、ＨＳ（ＣＨ２）３１８Ｆ又はＨＯ（ＣＨ２）３１８Ｆと反応させて、それぞれ−Ｎ（ＣＯ）ＣＨ２Ｓ（ＣＨ２）３１８Ｆ及び−Ｎ（ＣＯ）ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２）３１８Ｆ生成物を得ることができる。
【０１０３】
本発明の放射性金属鎖体は、適当なｐＨで式ＩＩｂのリガンドコンジュゲートに適当な酸化状態の放射性金属の溶液を反応させることによって調製できる。溶液は好ましくは金属と弱く錯形成するリガンド（例えばグルコン酸塩又はクエン酸塩）を含み、即ち放射性金属鎖体はリガンドの交換又はトランスキレート化によって調製される。かかる条件は金属イオンの加水分解のような不都合な副反応を抑制するのに有用である。放射性金属イオンが９９ｍＴｃである場合、通常の出発原料は９９Ｍｏジェネレータから得られる過テクネチウム酸ナトリウムである。テクネチウムは、比較的反応性の低いＴｃ（ＶＩＩ）の酸化状態の９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸塩として存在する。そのため、酸化状態の低いＴｃ（Ｉ）〜Ｔｃ（Ｖ）のテクネチウム錯体の調製には、通常、錯形成を促すため亜ジチオン酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、アスコルビン酸、ホルムアミジンスルフィン酸、第一スズイオン、Ｆｅ（ＩＩ）又はＣｕ（Ｉ）のような薬学的に許容される還元剤の添加が必要とされる。薬学的に許容される還元剤は好ましくは第一スズ塩であり、最も好ましくは塩化第一スズ、フッ化第一スズ又は酒石酸第一スズである。
【０１０４】
造影基が、過分極１３Ｃ原子のような過分極ＮＭＲ活性核種である場合、所望の過分極化合物は適当な１３Ｃ富化ヒドロキサム酸誘導体への過分極ガス（例えば１２９Ｘｅ又は３Ｈｅ）からの分極交換によって調製することができる。
【０１０５】
本発明のメタロプロテイナーゼ阻害剤の幾つか（例えば、化合物１７、Ｇａｌａｒｄｉｎ（商標）Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｍ５９３９）は市販されている。他のものは、Ｌｅｖｙ他［Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４１，１９９−２２３（１９９８）］及びＧａｌａｒｄｙ［Ｄｒｕｇｓ  Ｆｕｔｕｒｅ，１８，１１０９−１１１１（１９９３）］の方法で合成できる。合成に関するそれ以上の詳細は、スキーム１〜４（以下）及び実施例に例示する。Ｘ３がアミノ基を含む場合、−ＮＨＣＨ（Ｘ３）−ＣＯ−残基はアミノ酸に相当するので、Ｐ．Ｌｌｏｙｄ−Ｗｉｌｌｉａｍｓ、Ｆ．Ａｌｂｅｒｉｃｉｏ及びＥ．ＧｉｒａｌｄのＣｈｅｍｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，１９９７に記載されているように、従来の固相ペプチド合成でＮＨ２ＣＨ（Ｘ４）−ＣＯ−アミノ酸残基に結合させることができる。
【０１０６】
固相ペプチド合成はまた、スキーム５に示す有用な合成断片を提供すると思われる。その段階は次のようになるはずである。
（ｉ）Ｒｉｎｋ  ａｍｉｄｅ−Ｒｅｓｉｎ（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社から市販）アミノキシ官能基は、市販の誘導体Ｆｍｏｃ−Ａｍｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ社、ただしＡｍｓはアミノセリン）つまりＦｍｏｃ（ＮＨ）−ＣＨ（ＣＯ２Ｈ）ＣＨ２Ｏ−ＮＨ（Ｂｏｃ）を用いて直接導入することができ、
（ｉｉ）Ｒ１の位置で一群の置換基が可能となるＦｍｏｃ−ＡＡ−ＯＨとして示す保護アミノ酸（ＡＡ）−を結合し（スキーム５参照）、
（ｉｉｉ）標準Ｌ−トリプトファンを結合し、
（ｉｖ）ｔ−ブチル保護ヒドロキサメート成分を結合し、
（ｖ）４−［１８Ｆ］フルオロベンズアルデヒドを結合して最終生成物とする。
【０１０７】
段階（ｉ）の代替法は、適切に保護したリジン誘導体を使用することであり、εアミノ基が修飾されてアミノ酸側鎖−（ＣＨ２）４ＮＨ（ＣＯ）ＣＨ２Ｏ−ＮＨ（Ｂｏｃ）が得られる。
【０１０８】
以下の略語を使用する。
Ｂｏｃ＝ｔ−ブチルオキシカルボニル、
ＤＩＣ＝塩化２−（ジメチルアミノ）イソプロピル塩酸塩、
ＤＩＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン、
ＤＭＦ＝Ｎ，Ｎ′−ジメチルホルムアミド、
ＨＢＴＵ＝Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート、
ＲＣＰ＝放射化学的純度、
ＴＥＳ＝Ｎ−トリス（ヒドロキシメチル）メチル−２−アミノエタンスルホン酸、
ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸。
【０１０９】
【化２１】
2008514580.tif 000022
【０１１０】
【化２２】
2008514580.tif 000023
【０１１１】
【化２３】
2008514580.tif 000024
【０１１２】
【化２４】
2008514580.tif 000025
【０１１３】
【化２５】
2008514580.tif 000026
第二の態様では、本発明は哺乳類への投与に適した形態の生体適合性担体と共に上記造影剤を含む医薬組成物を提供する。「生体適合性担体」とは、造影剤を懸濁又は好ましくは溶解できる流体、特に液体であって、組成物が生理学的に認容できるもの、つまり毒性も耐え難い不快感も伴わずに哺乳類の身体に投与することができるようなものである。生体適合性担体は好適には注射可能な担体液であり、例えば、発熱物質を含まない注射用の滅菌水、食塩液のような水溶液（これは注射用の最終製剤が等張性又は非低張性となるように調整するのに都合がよい）、１種以上の張度調節物質（例えば血漿陽イオンと生体適合性対イオンとの塩）、糖（例えばグルコース又はスクロース）、糖アルコール（例えばソルビトール又はマンニトール）、グリコール（例えばグリセロール）その他の非イオン性ポリオール材料（例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコールなど）の水溶液である。
【０１１４】
第三の態様では、本発明は、哺乳類への投与に適した形態の生体適合性担体（上記で定義）と共に造影基が放射性である上記造影剤を含む医薬組成物を提供する。かかる放射性医薬品は、好適には、無菌状態を維持したまま皮下注射針で一回又は複数回穿刺するのに適したシール（例えばクリンプオン式セプタムシール蓋）を備えた容器に入れて供給される。かかる容器には、１回又は複数回分の用量を入れることができる。好ましい多用量用容器は、複数回分の用量を収容した単一バルクバイアル（例えば容積１０〜３０ｃｍ３のもの）からなり、臨床症状に応じて製剤の有効期間中様々な時間間隔で１回分の用量を臨床グレードの注射器に引き出すことができる。プレフィルド型注射器は１回分の用量を収容するように設計され、そのため好ましくは使い捨て又はその他臨床用に適した注射器である。プレフィルド型注射器は、適宜、オペレーターを放射能から保護するための注射器シールドを備えていてもよい。かかる適当な放射性医薬品注射器シールドは当技術分野で公知であり、好ましくは鉛又はタングステンからなる。
【０１１５】
造影基が９９ｍＴｃを含む場合、画像診断用放射性医薬品に適した放射能含量は、生体内の撮像部位、取込み量及び標的／バックグラウンド比に応じて、１８０〜１５００ＭＢｑの９９ｍＴｃである。
【０１１６】
第四の態様では、本発明は式（Ｉ）のマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤とリガンドのコンジュゲートを提供する。リガンドコンジュゲートは放射性金属イオン又は常磁性金属イオンのいずれかで標識されたマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤の製造に適している。好ましくはリガンドコンジュゲートは上記で定義した式ＩＩａを有する。最も好ましくはリガンドコンジュゲートのＭＭＰ阻害剤は上記で定義した式ＩＶを有する。本発明の第四の態様のコンジュゲートのリガンドは、好ましくはキレート剤である。好ましくはキレート剤は、ジアミンジオキシム、Ｎ２Ｓ２又はＮ３Ｓドナーセットを有する。
【０１１７】
第五の態様では、本発明は、造影基が非金属放射性同位体即ちγ線放射性ハロゲン同位体又は陽電子放射性非金属を含む放射性医薬品の製造に有用な前駆体を提供する。かかる「前駆体」は、所望の放射能をもつ生成物を生じさせるための所望の非金属放射性同位体の好適な化学的形態との化学反応が最少の段階数（理想的には一段階）と大した精製を必要とせず（理想的にはそれ以上精製せず）に実施できるように設計されたマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤の非放射性誘導体を含む。かかる前駆体は、良好な化学的純度で都合よく得ることができる。適当な前駆体は、ＢｏｌｔｏｎのＪ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，４５，４８５−５２８（２００２）に記載の実施例から得ることができる。
【０１１８】
この実施形態の好ましい前駆体には、求電子又は求核ハロゲン化のいずれかを起こす誘導体、アルキルハライド、フルオロアルキルハライド、トシレート、トリフレート（即ち、トリフルオロメタンスルホネート）又はメシレートから選択されるアルキル化剤で容易にアルキル化される誘導体、或いはチオール部分をアルキル化してチオエーテル連鎖を形成する誘導体が包含される。第一のカテゴリーの例は、以下の（ａ）〜（ｃ）である。
（ａ）トリアルキルスタンナン（例えば、トリメチルスタンニル又はトリブチルスタンニル）又はトリアルキルシラン（トリメチルシリル）のような有機金属誘導体、
（ｂ）ハロゲン交換のための非放射性ヨウ化アルキル又は臭化アルキル並びに求核ハロゲン化のためのアルキルトシレート、メシレート又はトリフレート、
（ｃ）求電子ハロゲン化に向けて活性化された芳香環（例えばフェノール）及び求核ハロゲン化に向けて活性化された芳香環（例えばアリールヨードニウム、アリールジアゾニウム、ニトロアリール）。
【０１１９】
容易にアルキル化される好ましい誘導体は、アルコール、フェノール又はアミン基、特にフェノール及び立体障害のない第一級アミン又は第二級アミンである。
【０１２０】
チオール含有放射性同位体反応体をアルキル化する好ましい誘導体は、Ｎ−ハロアセチル基、特にＮ−クロロアセチル及びＮ−ブロモアセチル誘導体である。
【０１２１】
したがって、式ＩのＸ１がＨである場合、式ＩのＭＭＰｉの適当な前駆体はＸ１がヒドロキサム酸部分の保護基（ＰＧ）である誘導体を含む。
「保護基」という用語は、不都合な化学反応は阻害又は抑制するが、分子の残りの部分を修飾しない十分穏和な条件下で当該官能基から開裂できる十分な反応性をもつように設計された基を意味する。脱保護後に、所望の生成物が得られる。保護基は当業者に周知であり、好適には好適には以下のものから選択される。アミン基に対しては：Ｂｏｃ（Ｂｏｃは、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルである。）、Ｆｍｏｃ（Ｆｍｏｃは、フルオレニルメトキシカルボニルである。）、トリフルオロアセチル、アリルオキシカルボニル、Ｄｄｅ［即ち、１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキシリデン）エチル］又はＮｐｙｓ（即ち、３−ニトロ−２−ピリジンスルフェニル）；及びカルボニル基に対しては：メチルエステル、ｔｅｒｔ−ブチルエステル又はベンジルエステルである。ヒドロキシ基に対する適当な保護基は、ベンジル、アセチル、ベンゾイル、トリチル（Ｔｒｔ）又はテトラブチルジメチルシリルのようなトリアルキルシリルである。チオール基に対する適当な保護基は、トリチル及び４−メトキシベンジルである。ヒドロキサメート部分のヒドロキシ基に対する好ましい保護基は、ベンジル又はトリアルキルシリルである。その他の保護基の使用については、‘Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ’，Ｔｈｅｏｒｏｄｏｒａ  Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐｅｔｅｒ  Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ（Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９９）に記載されている。
【０１２２】
望ましい非金属放射性同位体の好ましい好適な化学形態としては、以下のものが挙げられる。
（ａ）ハライドイオン（例えば、１２３Ｉヨーダイド又は１８Ｆフルオライド）で特に置換反応のために水性媒体中のもの、
（ｂ）１１Ｃ−ヨウ化メチル又はブロマイド、メシレートもしくはトシレートのような良好な脱離基を有する１８Ｆフルオロアルキレン化合物、
（ｃ）Ｎ−クロロアセチル又はＮ−ブロモアセチル誘導体のようなアルキル化前駆体とのＳ−アルキル化反応のためのＨＳ（ＣＨ２）３１８Ｆ。
【０１２３】
適当な上記「前駆体」の例及びそれらの調製方法は、第一の実施形態（上記）に記載されている。
【０１２４】
第六の態様では、本発明は、リガンドと式（Ｉ）のマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤とのコンジュゲートを含む放射性医薬組成物を調製するための非放射性キットであって、造影基が放射性金属を含む非放射性キットを提供する。放射性金属が９９ｍＴｃである場合、キットは好適にはさらに生体適合性の還元剤を含む。リガンドコンジュゲート及びその好ましい態様は、上記の第四の態様に記載されている。
【０１２５】
かかるキットは例えば血流中への直接注射によるヒトへの投与に適した滅菌放射性医薬品を与えるように設計される。９９ｍＴｃ用には、キットは好ましくは凍結乾燥したもので、９９ｍＴｃ放射性同位体ジェネレータからの無菌９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸（ＴｃＯ４−）で再構成すればそれ以上操作しなくてもヒトへの投与に適した溶液が得られるように設計される。適当なキットは、リガンド又は遊離塩基もしくは酸塩の形態のキレーターコンジュゲートを亜ジチオン酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、アスコルビン酸、ホルムアミジンスルフィン酸、第一スズイオン、Ｆｅ（ＩＩ）又はＣｕ（Ｉ）のような生体適合性還元剤と共に収容した容器（例えばセプタムシールバイアル）を備える。生体適合性還元剤は、好ましくは塩化第一スズや酒石酸第一スズのような第一スズ塩である。或いは、キットは、放射性金属の添加時にトランスメタレーション（金属交換）を起こして所望の生成物を与える金属錯体を適宜含んでいてもよい。
【０１２６】
非放射性キットはさらに、トランスキレーター、放射線防護剤、抗菌保存剤、ｐＨ調節剤又は充填剤のような追加成分を適宜含んでいてもよい。「トランスキレーター」とは、テクネチウムと迅速に反応して弱い錯体を形成し、次に上記リガンドで置換される化合物である。
これはテクネチウム錯体化と競合する過テクネチウム酸塩の迅速な還元に起因した還元型加水分解テクネチウム（ＲＨＴ）が形成するおそれを最小限に抑制する。かかる適当なトランスキレーターは、弱有機酸（つまりｐＫａが３〜７の範囲内にある有機酸）と生体適合性陽イオンとの塩である。かかる適当な弱有機酸は、酢酸、クエン酸、酒石酸、グルコン酸、グルコヘプトン酸、安息香酸、フェノール又はホスホン酸である。従って、適当な塩は、酢酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、安息香酸塩、フェノラート又はホスホン酸塩である。好ましい塩は、酒石酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、安息香酸塩又はホスホン酸塩であり、最も好ましくはホスホン酸塩、特にジホスホン酸塩である。好ましいトランスキレーターは、ＭＤＰ（メチレンジホスホン酸）と生体適合性陽イオンとの塩である。
【０１２７】
「放射線防護剤」という用語は、水の放射線分解で生成する含酸素フリーラジカルのような反応性の高いフリーラジカルを捕捉することによって、酸化還元過程のような分解反応を阻害する化合物をいう。本発明の放射線防護剤は、好適には、アスコルビン酸、パラアミノ安息香酸（即ち４−アミノ安息香酸）、ゲンチシン酸（即ち２，５−ジヒドロキシ安息香酸）並びにこれらと生体適合性陽イオンとの塩から選択される。
「抗菌保存剤」という用語は、細菌、酵母又はカビなどの有害微生物の増殖を阻害する薬剤を意味する。抗菌保存剤は、濃度に応じてある程度の殺菌作用を示すこともある。本発明の抗菌保存剤の主な役割は、再構成後の放射性医薬組成物（つまり、放射性診断薬自体）での微生物の増殖を阻害することである。ただし、抗菌保存剤は、再構成前の本発明の非放射性キットの１以上の成分における有害微生物の増殖の防止にも適宜使用できる。適当な抗菌保存剤としては、パラベン類、即ちメチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン又はこれらの混合物、ベンジルアルコール、フェノール、クレゾール、セトリミド及びチオメルサールが挙げられる。好ましい抗菌保存剤はパラベン類である。
【０１２８】
「ｐＨ調節剤」という用語は、再構成したキットのｐＨが、ヒト又は哺乳類への投与に関する許容範囲（約ｐＨ４．０〜１０．５）内に収まるようにするのに有用な化合物又は化合物の混合物を意味する。かかる適当なｐＨ調節剤としては、トリシン、リン酸塩又はＴＲＩＳ（即ちトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン）のような薬学的に許容される緩衝剤、並びに炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム又はこれらの混合物などの薬学的に許容される塩基が挙げられる。コンジュゲートを酸塩の形態で用いる場合、キットのユーザーが多段階法の一部としてｐＨを調節できるようにｐＨ調節剤を適宜別のバイアル又は容器で提供してもよい。
【０１２９】
「充填剤」という用語は、製造時及び凍結乾燥時の材料の取扱いを容易にする薬学的に許容される増量剤を意味する。適当な充填剤としては、塩化ナトリウムのような無機塩並びに水溶性糖類又は糖アルコール、例えばスクロース、マルトース、マンニトール又はトレハロースが挙げられる。
【０１３０】
第七の態様では、本発明は造影基が非金属放射性同位体、即ちγ線放出型放射性ハロゲン又は陽電子放出型放射性非金属を含む放射性医薬組成物の製造用キットを提供する。かかるキットは第五の実施形態の「前駆体」を、好ましくは滅菌放射性同位体源との反応によって最小限の操作で所望の放射性医薬品が得られるように発熱物質を含まない無菌状態で含む。かかる事項は、放射性同位体が比較的短い半減期を有する放射性医薬品では特に重要であり、取り扱いの容易さと放射性薬剤師に対する放射線量の低減という点でも重要である。したがって、かかるキットの再構成のための反応媒体は、好ましくは水性で、哺乳類への投与に適した形態である。
【０１３１】
キットの「前駆体」は、好ましくは固体担体マトリックスに共有結合した形態で供給される。こうすれば、所望の放射性薬剤生成物は溶液中で形成され、出発原料及び不純物は固相に結合したままとなる。１８Ｆ−フルオライドによる固相求電子的フッ素化のための前駆体は、国際公開第０３／００２４８９に記載されている。１８Ｆフルオライドによる固相求核的フッ素化のための前駆体は、国際公開第０３／００２１５７に記載されている。したがって、キットは、適切に適合化した自動化合成装置に挿入できるカートリッジを備えていてもよい。カートリッジは、固体担体に結合した前駆体の他に、不要なフッ素イオンを除去するためのカラム及び反応混合物を蒸発させることができて必要に応じて生成物を製剤化できるように接続された適切な容器を備えていてもよい。反応体及び溶媒その他合成に必要な消耗品を、放射能濃度、容積、送付時刻などの顧客要件を満たすように合成装置を操作できるソフトウェアを格納したコンパクトディスクと共に備えていてもよい。好適には、各作業間の汚染の可能性を最小限に抑え、無菌で品質が保証されるように、キットのすべての構成要素が使い捨てであると便利である。
【０１３２】
第八の態様では、本発明は、アテローム性動脈硬化症、特に脆弱な不安定プラークの画像診断のための、上述のマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤造影剤の使用に関する。
【０１３３】
さらに別の態様では、本発明は、他の炎症性疾患、癌又は変性疾患の画像診断のための上述のマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤造影剤の使用に開する。
【０１３４】
さらに別の態様では、本発明は、アテローム性動脈硬化症、特に脆弱な不安定プラークの、近接検出を用いた血管内検出のための上述のマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤造影剤使用に開する。かかる近接検出は、カテーテルのような血管内器具又は手術中にハンドヘルド式検出器（例えば、γ線検出器）を用いて達成できる。かかる血管内検出は、造影基がインビボ光学イメージングに適したレポーター基又はβ線放射体である場合、かかる基は哺乳類の体外では簡単には検出できなくても、近接検出には適しているので、特に有用である。
【実施例】
【０１３５】
本発明を以下の非限定的な実施例で例証する。実施例１では、２種類のヨウ素含有ＭＭＰｉ誘導体（化合物２及び３）の合成について記載する。実施例２、４、５及び７では、放射性ハロゲン化、特に放射性ヨウ素化に有用な各種トリブチルスズ前駆体の合成について記載する。実施例３では、式（ＩＶ）の２種類のインドリル化合物（化合物６及び７）の合成について記載する。実施例６では、Ｘ４の位置にリンカー基が結合した誘導体の合成について記載する。実施例８では、Ｙ１の位置にリンカー基が結合した誘導体の合成について記載する。実施例９では、化合物１，１，１−トリス（２−アミノエチル）メタンの合成について記載する。実施例１０では、潜在的に危険なアジド中間体を使用しない１，１，１−トリス（２−アミノエチル）メタンの代替合成法について記載する。実施例１１では、クロロニトロソアルカン前駆体の合成について記載する。実施例１２では、本発明の好ましいアミノ置換二官能性ジアミンジオキシム（キレーター１）の合成について記載する。実施例１３では、Ｎ−アルキル化に適当な１８Ｆ誘導体の合成について記載する。実施例１４では、Ｓ−アルキル化に適した１８Ｆチオール誘導体の合成について記載する。実施例１５では、放射性同位体１２３Ｉによるトリアルキルスズ前駆体の放射性ヨウ素化法について記載する。実施例１６では、放射性同位体９９ｍＴｃによるＭＭＰｉ−キレーターコンジュゲートの放射性標識法について記載する。
【０１３６】
実施例１７では、インビトロＭＭＰｉの阻害アッセイと、本発明の数種類の化合物に関してＭＭＰ−１、ＭＭＰ−２、ＭＭＰ−９及びＭＭＰ−１２効力の結果について記載する。この結果から、一群のＭＭＰ阻害剤について［ｎＭ乃至ｎＭ未満の範囲での］高い効力が確認される。かかる「幅広い」効力は、ある種のＭＭＰは疾患進行過程で上方調節されるので、アテローム性動脈硬化症における脆弱プラークのようなある種の疾患のターゲティングに特に有益である。これらのＭＭＰ（特にコラゲナーゼ及びゼラチナーゼ）に対する本明細書に記載のＭＭＰｉのターゲティング能力から、ＭＭＰｉの蓄積は病変部位で最大となる。
【０１３７】
実施例１８では、活性ＭＭＰを発現することが知られている生体内病変部（ルイス肺癌、ＬＬＣと略す。）における本発明の代表的な１２３Ｉ−標識化合物（化合物２Ａ）の動物生体内分布データについて記載する。化合物２Ａは、腫瘍取り込み及び注射後５〜１２０分間の保持を示し、ＭＭＰ発現腫瘍組織での特有の保持と一貫していた。対照的に、正常組織（例えば、血液その他のバックグラウンド組織）からのクリアランスは、注入後５〜１２０分の間で起こり、ＭＭＰ発現腫瘍に特有の標的機序を裏付けていた。
【０１３８】
実施例１９では、ＡｐｏＥ結紮ＭＭＰ発現動物モデルにおける化合物２Ａ、６Ａ及び１８Ａの動物生体内分布データについて記載する。化合物２Ａは、頚動脈取り込み及び注入後５〜１２０分の間の保持を示し、ＭＭＰの豊富な病変組織に特有の保持と一貫していた。対照的に、正常組織（例えば、血液その他のバックグラウンド組織）からのクリアランスは顕著であり、良好な頚動脈／血液比を有し、ＭＭＰ発現病変に特有の標的機序を示していた。実施例２０〜２４は、化合物９、１０、１３、１４及び１８〜２１の合成について記載する。
【０１３９】
図１は、本発明の数種の化合物の化学構造を示す図である。
【０１４０】
実施例１：化合物２及び３の合成
化合物３は、スキーム１によって調製した。Ｂｏｃ−ｐＩ−Ｐｈｅ−ＯＨとＭｅＮＨ２・ＨＣｌの、ＤＩＥＡ存在下でＨＢＴＵをカップリング剤として使用するカップリングで完全に保護されたフェニルアラニンを得た。酸分解（ジオキサン中ＨＣｌ）によるＢｏｃ基の除去に続いて（Ｒ）−２−イソブチルコハク酸−４−ｔ−ブチルエステル（実施例３参照）によるカップリングによって示されている中間体を得た。酸性条件下（ＴＦＡ／ＴＥＳ／ＣＨ２Ｃｌ２）でのｔ−ブチル基の開裂に続いてカルボン酸を、ヨードメタンを使用してメチルエステルに転化させた。メチルエステルを、塩基性条件下（部分的なラセミ化が観察された）においてヒドロキシルアミンで処理して固体（粗収率５４．１％）を得た。粗製品をＲＰ−ＨＰＣＬによりＴＦＡ／水／アセトニトリルを溶媒として使用して精製した。純粋な画分を集めて凍結乾燥して白色固体を得た（全収率２７．７％）。ＨＰＬＣ分析９３％。
【０１４１】
化合物２は、類似の方法で調製した。粗収率３８．３％、全収率１６．４％、ＨＰＬＣ分析９５％
実施例２：トリブチルスズ前駆体化合物１及び４の合成
化合物３（精製）を出発原料として使用し、反応は窒素雰囲気下で行った。化合物３を、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４を触媒として使用して、ビス（トリブチルスズ）で処理した。反応混合物をトルエン／アセトニトリル（３／２５）混合物中で加熱還流した。粗生成物を固体として単離した（粗収率５７．５％）。粗化合物４をＲＰ−ＨＰＬＣによってＡｃＯ−ＮＨ４＋／Ｈ２Ｏ／アセトニトリルを溶媒として使用して精製した（全収率４．２％）。ＨＰＬＣ分析９０．２％
化合物１は、類似の方法で化合物２から調製した。粗収率６５．５％、全収率１１．２％、ＨＰＬＣ分析９８．８％
実施例３：化合物６及び７の合成
化合物７は、スキーム１によって調製した。Ｂｏｃ−Ｔｒｐ−ＯＨと４−ヨードベンジルアミンの、ＤＩＥＡ存在下でＨＢＴＵをカップリング剤として使用するカップリングで完全に保護されたトリプトファンを得た。酸分解（ジオキサン中ＨＣｌ）によるＢｏｃ基の除去に続いて（Ｒ）−２−イソブチルコハク酸−４−ｔ−ブチルエステル［Ｌｅｖｙ，Ｄ．Ｆ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４１，１９９−２２３（１９９８）の方法によって調製した］によるカップリングによって示されている中間体を得た。酸性条件下（ＴＦＡ／ＴＥＳ／ＣＨ２Ｃｌ２）でのｔ−ブチル基の開裂に続いて、ヨードメタンを使用してカルボン酸をメチルエステルに転化させた。メチルエステルを塩基性条件下においてヒドロキシルアミンで処理して固体（粗収率６２．８％）を得た。粗製品をＲＰ−ＨＰＣＬによりＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／アセトニトリルを溶媒として使用して精製した。純粋な画分を集めて凍結乾燥して白色固体を得た（全収率２１．６％）。ＨＰＬＣ分析９３．３％。
【０１４２】
化合物６は、類似の方法で調製した。粗収率７０．４％、全収率４４．９％、ＨＰＬＣ分析９５％
実施例４：トリアルキルスズ前駆体化合物５及び８の合成
化合物７（粗）を、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４を触媒として使用して、ビス（トリブチルスズ）を用いて窒素雰囲気下で実施例２１と類似の方法で処理した。反応混合物をトルエン／アセトニトリル（３／２５）混合物中で加熱還流した。粗生成物を固体として単離した（粗収率５９．１％）。粗化合物８をＲＰ−ＨＰＬＣによってＡｃＯ−ＮＨ４＋／Ｈ２Ｏ／アセトニトリルを溶媒として使用して精製した（全収率２％）。ＨＰＬＣ分析８４．７％
化合物５は、類似の方法で化合物６から調製した。反応中に生成物の多少の分解が観察された。ＲＰ−ＨＰＬＣ精製を試みたが溶解性（ＤＭＳＯに可溶、アセトニトリル及びメタノールに不溶）の故に無効であった。粗収率６８％、全収率１２．５％、ＨＰＬＣ分析５７．４％
実施例５：化合物１１の合成
精製された化合物１２を、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４を触媒として使用して、ビス（トリブチルスズ）を用いて窒素雰囲気下で処理した。反応混合物をトルエン／アセトニトリル（３／２５）混合物中で加熱還流した。粗生成物を油として単離した（粗収率１００％）。粗生成物をＲＰ−ＨＰＬＣによってＡｃＯ−ＮＨ４＋／Ｈ２Ｏ／アセトニトリルを溶媒として使用して精製した（全収率１６．６％）。ＨＰＬＣ分析４５．６％＊
＊この化合物は油として得られ、凍結乾燥の間に多少分解した。
【０１４３】
実施例６：化合物１２の合成
この化合物は、固相合成を使用して調製された保護断片を使用して、溶液中カップリングによって合成された。
【０１４４】
段階（ａ）：保護ペプチド断片の固相合成
アミノ酸のカップリングは、クロロトリチルＰＳ樹脂（０．８ミリ当量／ｇ）上で１段階ずつ実行した。Ｆｍｏｃ−ＰＥＧ−ＯＨを、ＤＭＦ中、ＤＩＥＡの存在下でクロロトリチルＰＳ樹脂にカップリングさせた。脱保護／カップリングサイクルを以下に記載した。
【０１４５】
Ｆｍｏｃ−アミノ酸２当量及びＨＯＢｔ２当量をＤＭＦ（アミノ酸１ｍｍｏｌ当たり２〜３ｍｌ）に溶解させた。溶液を、樹脂を収容している反応容器に注いだ。ＤＩＣ２当量を加えた。
【０１４６】
【表１】
2008514580.tif 000027
ペプチドの樹脂からの開裂はＣＨ２Ｃｌ２中の１％ＴＦＡを使用して行った。
【０１４７】
粗生成物は油として得られた。粗収率６０．７％
段階（ｂ）：溶液中合成
段階（ａ）からの生成物を、ＤＩＥＡの存在下で、ＨＢＴＵをカップリング剤として使用して、４−ヨードベンジルアミンとカップリングさせた。ｔ−ブチル基の酸性条件下（ＴＦＡ／ＴＥＳ／ＣＨ２Ｃｌ２）での除去に続いて、ヨードメタンを使用してカルボン酸をメチルエステルに転化させた。メチルエステルを塩基性条件下においてヒドロキシルアミンで処理した。粗生成物を油として単離した（粗収率７２．５％）。粗製品をＲＰ−ＨＰＣＬによりＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／アセトニトリルを溶媒として使用して精製した。純粋な画分を集めて凍結乾燥して油を得た（全収率１８．５％）。ＨＰＬＣ分析９８．３％
実施例７：化合物１５の合成
精製された化合物１６を、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４を触媒として使用して、ビス（トリブチルスズ）を用いて窒素雰囲気下で処理した。反応混合物をトルエン／アセトニトリル（３／２５）混合物中で加熱還流した。粗生成物を油として単離した（粗収率１００％）。粗生成物をＲＰ−ＨＰＬＣによってＡｃＯ−ＮＨ４＋／Ｈ２Ｏ／アセトニトリルを溶媒として使用して精製し、油を得た（全収率１４．４％）。ＨＰＬＣ分析９１．３％
化合物１８Ａのトリブチルスズ前駆体は、化合物１８から類似の方法で調製した。ＨＰＬＣ純度＝９３．３％、ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７１４．５［Ｍ−Ｈ］−
実施例８：化合物１６の合成
化合物１６は、スキーム４によって調製した。化合物１６は、固相合成を使用して調製された保護ペプチド断片を使用して、溶液中カップリングによって合成された。
【０１４８】
段階（ａ）：保護ペプチド断片の固相合成
アミノ酸のカップリングは、クロロトリチルＰＳ樹脂（０．８ミリ当量／ｇ）上で１段階ずつ実行した。Ｆｍｏｃ−ＰＥＧ−ＯＨを、ＤＭＦ中、ＤＩＥＡの存在下でクロロトリチルＰＳ樹脂にカップリングさせた。脱保護／カップリングサイクルを以下に記載する。
【０１４９】
Ｆｍｏｃ−アミノ酸２当量及びＨＯＢｔ２当量をＤＭＦ（アミノ酸１ｍｍｏｌ当たり２〜３ｍｌ）に溶解させた。溶液を、樹脂を収容している反応容器に注いだ。ＤＩＣ２当量を加えた。
【０１５０】
【表２】
2008514580.tif 000028
ペプチドの樹脂からの開裂はＣＨ２Ｃｌ２中の１％ＴＦＡを使用して行った。
【０１５１】
粗生成物は油として得られた。粗収率１００％
段階（ｂ）溶液中合成
段階（ａ）からの保護ペプチド形態を、ＤＩＥＡの存在下で、ＨＢＴＵをカップリング剤として使用して、４−ヨードベンジルアミンとカップリングさせて化合物１２を得た。ｔ−ブチル基の酸性条件下（ＴＦＡ／ＴＥＳ／ＣＨ２Ｃｌ２）での除去に続いて、ヨードメタンを使用してカルボン酸をメチルエステルに転化させた。メチルエステルを塩基性条件下においてヒドロキシルアミンで処理した。粗生成物を油として得た（粗収率４３．１％）。粗製品をＲＰ−ＨＰＣＬによりＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／アセトニトリルを溶媒として使用して精製した。純粋な画分を集めて凍結乾燥して化合物１６を油として得た（全収率６％）。ＨＰＬＣ分析８７．７％
実施例９：１，１，１−トリス（２−アミノエチル）メタンの合成
（段階ａ）：３−（メトキシカルボニルメチレン）グルタル酸ジメチルエステル
トルエン（６００ｍｌ）中のカルボメトキシメチレントリフェニルホスホラン（１６７ｇ、０．５ｍｏｌ）を、ジメチル３−オキソグルタレート（８７ｇ、０．５ｍｏｌ）で処理し、反応物を窒素雰囲気下、１２０℃の油浴で１００℃に３６時間加熱した。次に反応物を真空下で濃縮し、油状残留物を４０／６０石油エーテル／ジエチルエーテル１：１、６００ｍｌと共に砕いた。トリフェニルホスフィンオキシドが析出し、上澄み液をデカンテーション／ろ別した。真空蒸発残留物を、高真空、沸点（オーブン温度１８０〜２００℃、０．２ｔｏｒｒ）で、クーゲルロール蒸留して３−（メトキシカルボニルメチレン）グルタル酸ジメチルエステルを得た（８９．０８ｇ、５３％）。
【０１５２】
ＮＭＲ  １Ｈ（ＣＤＣｌ３）：δ３．３１（２Ｈ，ｓ，ＣＨ２）、３．７（９Ｈ，ｓ，３×ＯＣＨ３）、３．８７（２Ｈ，ｓ，ＣＨ２）、５．７９（１Ｈ，ｓ，＝ＣＨ，）ｐｐｍ。
【０１５３】
ＮＭＲ  １３Ｃ（ＣＤＣｌ３）、δ３６．５６、ＣＨ３、４８．７、２×ＣＨ３、５２．０９及び５２．５（２×ＣＨ２）；１２２．３及び１４６．１６  Ｃ＝ＣＨ；１６５．９、１７０．０及び１７０．５  ３×ＣＯＯ  ｐｐｍ。
【０１５４】
（段階ｂ）：３−（メトキシカルボニルメチレン）グルタル酸ジメチルエステルの水素化
メタノール（２００ｍｌ）中の３−（メトキシカルボニルメチレン）グルタル酸ジメチルエステル（８９ｇ、２６７ｍｍｏｌ）を（１０％パラジウム担持木炭：水５０％）（９ｇ）と共に水素ガス雰囲気下（３．５ｂａｒ）で３０時間振とうした。溶液を、珪藻土を通してろ過し、真空で濃縮して３−（メトキシカルボニルメチル）グルタル酸ジメチルエステルを油として得た、収量（８４．９ｇ、９４％）。
【０１５５】
ＮＭＲ  １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ２．４８（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，３×ＣＨ２）、２．７８（１Ｈ，六重線，Ｊ＝８Ｈｚ  ＣＨ，）３．７（９Ｈ，ｓ，３×ＣＨ３）。
【０１５６】
ＮＭＲ  １３Ｃ（ＣＤＣｌ３）、δ２８．６、ＣＨ；３７．５０、３×ＣＨ３；５１．６、３×ＣＨ２；１７２．２８、３×ＣＯＯ。
【０１５７】
（段階ｃ）：トリメチルエステルのトリアセテートへの還元及びエステル化
窒素雰囲気下の２Ｌ三口丸底フラスコ中で、テトラヒドロフラン（４００ｍｌ）中のリチウムアルミニウムハイドライド（２０ｇ、５８８ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２００ｍｌ）中のトリス（メトキシカルボニルメチル）メタン（４０ｇ、２１２ｍｍｏｌ）で注意深く１時間かけて処理した。強く発熱する反応が起こり、溶媒を強く還流させた。反応物を９０℃の油浴で加熱して３日間還流させた。反応物を、酢酸（１００ｍｌ）を注意深く水素の発生が止むまで滴下することによってクエンチした。攪拌した反応混合物を無水酢酸溶液（５００ｍｌ）で、穏やかな還流を起こすような速度で注意深く処理した。フラスコに蒸留の備えをして攪拌し、次に９０℃（油浴温度）で加熱してテトラヒドロフランを留出させた。酢酸（３００ｍｌ）を追加し、反応器を還流構成に戻して攪拌し、１４０℃の油浴で５時間加熱した。反応物を放冷してろ過した。酸化アルミニウム沈殿を酢酸エチルで洗浄し、合わせたろ液をロータリーエバポレーター中で、水浴温度５０℃、真空（５ｍｍＨｇ）で濃縮して油を得た。油を酢酸エチル（５００ｍｌ）中に溶解させ、飽和炭酸カリウム溶液で洗浄した。酢酸エチル溶液を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、真空で濃縮して油を得た。油をクーゲルロールで高真空蒸留してトリス（２−アセトキシエチル）メタン（４５．３ｇ、９６％）を油として得た。沸点２２０℃、０．１ｍｍＨｇ。
【０１５８】
ＮＭＲ  １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ１．６６（７Ｈ，ｍ，３×ＣＨ２，ＣＨ）、２．０８（１Ｈ，ｓ，３×ＣＨ３）；４．１（６Ｈ，ｔ，３×ＣＨ２Ｏ）。
【０１５９】
ＮＭＲ  １３Ｃ（ＣＤＣｌ３）、δ２０．９、ＣＨ３；２９．３４、ＣＨ；３２．１７、ＣＨ２；６２．１５、ＣＨ２Ｏ；１７１、ＣＯ。
【０１６０】
（段階ｄ）：トリアセテートからの酢酸基の取り外し
メタノール（２００ｍｌ）中のトリス（２−アセトキシエチル）メタン（４５．３ｇ、１６５ｍｍｏｌ）及び８８０アンモニア（１００ｍｌ）を８０℃の油浴で２日間加熱した。反応物を追加の８８０アンモニア（５０ｍｌ）で処理し、油浴中、８０℃で２４時間加熱した。さらに８８０アンモニア（５０ｍｌ）を追加し、反応物を８０℃で２４時間加熱した。次に反応物を真空で濃縮し、すべての溶媒を除去して油を得た。これを８８０アンモニア（１５０ｍｌ）に溶解させ、８０℃で２４時間加熱した。次に反応物を真空濃縮し、すべての溶媒を除去して油を得た。クーゲルロール蒸留でアセトアミドを得た、沸点１７０〜１８０  ０．２ｍｍ。アセトアミドを収容している球状部をきれいに洗浄してから蒸留を続けた。トリス（２−ヒドロキシエチル）メタン（２２．５３ｇ、９２％）が、沸点２２０℃、０．２ｍｍで留出した。
【０１６１】
ＮＭＲ  １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ１．４５（６Ｈ，ｑ，３×ＣＨ２）、２．２（１Ｈ，五重線，ＣＨ）；３．７（６Ｈ，ｔ  ３×ＣＨ２ＯＨ）；５．５（３Ｈ，ｂｒｓ，３×ＯＨ）。
【０１６２】
ＮＭＲ  １３Ｃ（ＣＤＣｌ３）、δ２２．１３、ＣＨ；３３．９５、３×ＣＨ２；５７．８、３×ＣＨ２ＯＨ。
【０１６３】
（段階ｅ）：トリオールのトリス（メタンスルホネート）への転化
攪拌され、氷冷されているジクロロメタン（５０ｍｌ）中のトリス（２−ヒドロキシエチル）メタン（１０ｇ、０．０６７６ｍｏｌ）に、メタンスルホニルクロライド（４０ｇ、０．３４９ｍｏｌ）のジクロロメタン（５０ｍｌ）溶液を、窒素下で温度が１５℃を超えて上昇しないような速度でゆっくり滴下した。次いでジクロロメタン（５０ｍｌ）に溶解させたピリジン（２１．４ｇ、０．２７ｍｏｌ、４当量）を、温度が１５℃を超えて上昇しないような速度で滴下した（発熱反応）。反応物を室温で２４時間攪拌させ、次に５Ｎ塩酸溶液（８０ｍｌ）で処理し、層分離した。水層を追加のジクロロメタン（５０ｍｌ）で抽出し、有機抽出液を合わせて硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、真空濃縮して過剰のメタンスルホニルクロライドで汚染されているトリス［２−（メチルスルホニルオキシ）エチル］メタンを得た。理論量は２５．８ｇであった。
【０１６４】
ＮＭＲ  １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ４．３（６Ｈ，ｔ，２×ＣＨ２）、３．０（９Ｈ，ｓ，３×ＣＨ３）、２（１Ｈ，六重線，ＣＨ）、１．８５（６Ｈ，ｑ，３×ＣＨ２）。
【０１６５】
（段階ｆ）：１，１，１−トリス（２−アジドエチル）メタンの調製
攪拌されたトリス［２−（メチルスルホニルオキシ）エチル］メタン［段階１（ｅ）からのもの、過剰のメタンスルホニルクロライドで汚染されていた］（２５．８ｇ、６７ｍｍｏｌ、理論量）の乾燥ＤＭＦ（２５０ｍｌ）溶液を、窒素下でナトリウムアジド（３０．７ｇ、０．４７ｍｏｌ）を少しずつ加えて１５分間かけて処理した。発熱が観察され、反応物を氷浴で冷却した。３０分後に、反応混合物を５０℃の油浴で２４時間加熱した。反応物は茶色になった。反応物を放冷し、希薄な炭酸カリウム溶液（２００ｍｌ）で処理し、４０／６０石油エーテル／ジエチルエーテル１０：１（３×１５０ｍｌ）で３回抽出した。有機抽出液を水（２×１５０ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。石油／エーテル溶液に、トリアジドを溶液で保つためにエタノール（２００ｍｌ）を加え、真空で２００ｍｌを下回らないように減容した。エタノール（２００ｍｌ）を加え、真空で再濃縮して最後の痕跡の石油を除去し、２００ｍｌを下回らないエタノール溶液を残した。トリアジドのエタノール溶液はそのまま、段階１（ｇ）で使用した。
【０１６６】
注意：アジドは爆発性がありうるので溶媒を全部除去してはいけない。常に希薄な溶液に保つこと。
【０１６７】
０．２ｍｌ未満の溶液を真空で蒸発させてエタノールを除去し、この少量の試料についてＮＭＲを行った。
【０１６８】
ＮＭＲ  １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ３．３５（６Ｈ，ｔ，３×ＣＨ２）、１．８（１Ｈ，七重線，ＣＨ，）、１．６（６Ｈ，ｑ，３×ＣＨ２）。
【０１６９】
（段階ｇ）：１，１，１−トリス（２−アミノエチル）メタンの調製
エタノール（２００ｍｌ）中のトリス（２−アジドエチル）メタン（１５．０６ｇ、０．０６７６ｍｏｌ）（前の反応から収率１００％を仮定）を、１０％パラジウム担持木炭（２ｇ、水５０％）で処理し、１２時間水素化した。反応から生じる窒素を除去するために、２時間毎に反応容器を真空にしてから再度水素を満たした。トリアジドのトリアミンへの完全な転化を確認するためにＮＭＲ分析用の試料を採取した。
【０１７０】
注意：未反応のアジドは蒸留の際に爆発することがありうる。反応物は、触媒を除去するためにセライトパッドを通してろ過し、真空濃縮してトリス（２−アミノエチル）メタンを油として得た。これは、クーゲルロール蒸留（沸点１８０〜２００℃、０．４ｍｍ／Ｈｇ）によってさらに精製して無色の油を得た（８．１ｇ、トリオールからの全収率８２．７％）。
【０１７１】
ＮＭＲ  １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、２．７２（６Ｈ，ｔ，３×ＣＨ２Ｎ）、１．４１（Ｈ，七重線，ＣＨ）、１．３９（６Ｈ，ｑ，３×ＣＨ２）。
【０１７２】
ＮＭＲ  １３Ｃ（ＣＤＣｌ３）、δ３９．８（ＣＨ２ＮＨ２）、３８．２（ＣＨ２．）、３１．０（ＣＨ）。
【０１７３】
実施例１０：１，１，１−トリス（２−アミノエチル）メタンの代替調製法
（段階ａ）：トリメチルエステルのｐ−メトキシ−ベンジルアミンとのアミド化
トリス（メチルオキシカルボニルメチル）メタン［２ｇ、８．４ｍｍｏｌ；前記段階１（ｂ）のように調製された］をｐ−メトキシ−ベンジルアミン（２５ｇ、１７８．６ｍｍｏｌ）に溶解させた。装置を蒸留用に組み立て、窒素流の下に１２０℃で２４時間加熱した。反応の進行を集められたメタノールの量によって監視した。反応混合物を周囲温度まで冷却し、酢酸エチル３０ｍｌを加え、次いで沈殿したトリアミド生成物を３０分間攪拌した。トリアミドをろ過によって単離し、フィルターケーキを十分な量の酢酸エチルで数回洗浄して過剰のｐ−メトキシ−ベンジルアミンを除去した。乾燥後、４．６ｇ、１００％の白色粉末を得た。この高度に不溶性の生成物は、これ以上の精製又はキャラクタリゼーションをせず、そのまま次の段階において使用した。
【０１７４】
（段階ｂ）：１，１，１−トリス［２−（ｐ−メトキシベンジルアミノ）エチル］メタンの調製
氷水中で冷却した１０００ｍｌの三口丸底フラスコに、段階２（ａ）からのトリアミド（１０ｇ、１７．８９ｍｍｏｌ）を、１Ｍボラン溶液２５０ｍｌ（３．５ｇ、２４４．３ｍｍｏｌ）ボランに注意深く加える。添加完了後、氷水浴を取り除き、反応混合物を６０℃までゆっくり加熱する。反応混合物を６０℃で２０時間攪拌した。反応混合物の試料（１ｍｌ）を抜き出し、５ＮのＨＣｌ０．５ｍｌと混合し、３０分間置いた。試料に５０ＮａＯＨ０．５ｍｌを加え、続いて水２ｍｌを加え、溶液をすべての白色沈殿が溶解するまで攪拌した。溶液をエーテル（５ｍｌ）で抽出し、蒸発させた。残留物をアセトニトリルに１ｍｇ／ｍｌの濃度で溶解させ、ＭＳによって分析した。ＭＳスペクトル中にモノアミン及びジアミン（Ｍ＋Ｈ／ｚ＝５２０及び５３４）が見られる場合は、反応は完結していない。反応を完結させるためには、さらに１ＭボランＴＨＦ溶液１００ｍｌを加え、反応混合物を６０℃でさらに６時間攪拌し、前記のサンプリング手順にしたがって新たな試料を抜き出す。トリアミンへの転化が完結するまで、必要に応じて１ＭボランＴＨＦ溶液の追加を続ける。
【０１７５】
反応混合物を周囲温度まで冷却し、５ＮのＨＣｌをゆっくり加える［注意：活発な発泡が起こる！］ＨＣｌは、それ以上ガスの発生が見られなくなるまで加えた。混合物を３０分間攪拌し、次いで蒸発させた。ケーキをＮａＯＨ水溶液（２０〜４０％；１：２重量／容積）中に懸濁させて３０分間攪拌した。混合物を水（３倍容）で希釈した。次に混合物をジエチルエーテル（２×１５０ｍｌ）で抽出した［注意：ハロゲン化溶媒を使用しないこと］。合わせた有機相を、次いで水（１×２００ｍｌ）、食塩水（１５０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。油として蒸発後収量：７．６ｇ、８４％。
【０１７６】
ＮＭＲ  １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ：１．４５、（６Ｈ，ｍ，３×ＣＨ２；１．５４、（１Ｈ，七重線，ＣＨ）；２．６０（６Ｈ，ｔ，３×ＣＨ２Ｎ）；３．６８（６Ｈ，ｓ，ＡｒＣＨ２）；３．７８（９Ｈ，ｓ，３×ＣＨ３Ｏ）；６．９４（６Ｈ，ｄ，６×Ａｒ）。７．２０（６Ｈ，ｄ，６×Ａｒ）。
【０１７７】
ＮＭＲ  １３Ｃ（ＣＤＣｌ３）、δ：３２．１７、ＣＨ；３４．４４、ＣＨ２；４７．００、ＣＨ２；５３．５６、ＡｒＣＨ２；５５．２５、ＣＨ３Ｏ；１１３．７８、Ａｒ；１２９．２９、Ａｒ；１３２．６１；Ａｒ；１５８．６０、Ａｒ；
（段階ｃ）：１，１，１−トリス（２−アミノエチル）メタンの調製
１，１，１−トリス［２−（ｐ−メトキシベンジルアミノ）エチル］メタン（２０．０ｇ、０．０３６ｍｏｌ）をメタノール（１００ｍｌ）に溶解させ、Ｐｄ（ＯＨ）２（５．０ｇ）を加えた。混合物を水素化し（３ｂａｒ、１００℃オートクレーブ中）、５時間攪拌した。１０時間後及び１５時間後にＰｄ（ＯＨ）２をさらに２部（２×５ｇ）に分けて加えた。反応混合物をろ過し、ろ液をメタノールで洗浄した。合わせた有機相を蒸発させ、残留物を真空蒸留（１×１０−２、１１０℃）して２．６０ｇ（５０％）の先に記載した実施例１と同一の１，１，１−トリス（２−アミノエチル）メタンを得た。
【０１７８】
実施例１１：３−クロロ−３−メチル−２−ニトロソブタンの調製
２−メチルブト−２−エン（１４７ｍｌ、１．４ｍｏｌ）及びイソアミルニトリル（１５６ｍｌ、１．１６ｍｏｌ）の混合物をドライアイスとメタノール浴中で−３０℃まで冷却し、オーバーヘッドエアスターラーで激しく攪拌し、濃塩酸（１４０ｍｌ）を温度が−２０℃未満に維持される速度で滴下処理した。顕著な発熱があるので、これには約１時間を要し、過熱を避けるように注意しなければならない。添加の終わりに形成されるスラリーの粘度を低下させるためにエタノール（１００ｍｌ）を加え、反応を完結させるために、反応混合物を−２０〜−１０℃でさらに２時間攪拌した。真空ろ過によって沈殿を集め、冷（−２０℃）エタノール４×３０ｍｌ及び氷水１００ｍｌで洗浄し、真空乾燥して３−クロロ−３−メチル−２−ニトロソブタンを白色固体として得た。エタノールろ液及び洗浄液を合わせて水（２００ｍｌ）で希釈し、冷却して−１０℃で１時間放置すると追加の３−クロロ−３−メチル−２−ニトロソブタンが析出した。沈殿をろ過によって集め、最小限の水で洗浄し、真空乾燥して３−クロロ−３−メチル−２−ニトロソブタンの合計収量（１１５ｇ、０．８５ｍｏｌ、７３％）、ＮＭＲによる純度＞９８％を得た。
【０１７９】
ＮＭＲ  １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、異性体の混合物として（異性体１，９０％）１．５  ｄ、（２Ｈ，ＣＨ３）、１．６５  ｄ、（４Ｈ，２×ＣＨ３）、５．８５、ｑ及び５．９５、ｑ、全体で１Ｈ（異性体２，１０％）、１．７６  ｓ、（６Ｈ，２×ＣＨ３）、２．０７（３Ｈ，ＣＨ３）。
【０１８０】
実施例１２：ビス［Ｎ−（１，１−ジメチル−２−Ｎ−ヒドロキシイミンプロピル）２−アミノエチル］−（２−アミノエチル）メタン（キレーター１）の合成
トリス（２−アミノエチル）メタン（４．０４７ｇ、２７．９ｍｍｏｌ）の乾燥エタノール（３０ｍｌ）溶液に、無水炭酸カリウム（７．７ｇ、５５．８ｍｍｏｌ、２当量）を室温で窒素雰囲気下で活発に攪拌しながら加えた。３−クロロ−３−メチル−２−ニトロソブタン（７．５６ｇ、５５．８ｍｏｌ、２当量）の溶液を乾燥エタノール（１００ｍｌ）に溶解させ、この溶液７５ｍｌを反応混合物にゆっくり滴下した。反応は、シリカプレート上のＴＬＣ［ジクロロメタン、メタノール、濃（比重０．８８）アンモニア、１００／３０／５で展開、ＴＬＣプレートはニンヒドリンをスプレーして加熱することによって発色させた］によって追跡した。モノ−、ジ−、トリ−アルキル化生成物は、この順序で増加するＲＦで見られる。分析用ＨＰＬＣは、ＲＰＲ逆相カラムを使用して３％アンモニア水中７．５〜７５％アセトニトリルの勾配で行った。反応物を真空濃縮してエタノールを除去し、水（１００ｍｌ）に再懸濁させた。この水性スラリーをエーテル（１００ｍｌ）で抽出してトリアルキル化された化合物の一部及び親油性の不純物を除去し、モノ及び所望のジアルキル化生成物を水層に残した。良好なクロマトグラフィーを確保するために水溶液を酢酸アンモニウム（２当量、４．３ｇ、５５．８ｍｍｏｌ）で緩衝化した。自動化分取ＨＰＬＣによって精製するまで、水溶液を４℃で一晩貯蔵した。
【０１８１】
収量（２．２ｇ、６．４ｍｍｏｌ、２３％）。
【０１８２】
質量分析；正イオン１０Ｖコーン電圧。分析値：３４４；計算値Ｍ＋Ｈ＝３４４
ＮＭＲ  １Ｈ（ＣＤＣｌ３）、δ１．２４（６Ｈ，ｓ，２×ＣＨ３）、１．３（６Ｈ，ｓ，２×ＣＨ３）、１．２５〜１．７５（７Ｈ，ｍ，３×ＣＨ２，ＣＨ）、（３Ｈ，ｓ，２×ＣＨ２）、２．５８（４Ｈ，ｍ，ＣＨ２Ｎ）、２．８８（２Ｈ，ｔ  ＣＨ２Ｎ２）、５．０（６Ｈ，ｓ，ＮＨ２，２×ＮＨ，２×ＯＨ）。
【０１８３】
ＮＭＲ  １Ｈ（（ＣＤ３）２ＳＯ）δ１．１  ４×ＣＨ；１．２９、３×ＣＨ２；２．１（４Ｈ，ｔ，２×ＣＨ２）；
ＮＭＲ  １３Ｃ（（ＣＤ３）２ＳＯ）、δ９．０（４×ＣＨ３）、２５．８（２×ＣＨ３）、３１．０  ２×ＣＨ２、３４．６  ＣＨ２、５６．８  ２×ＣＨ２Ｎ；１６０．３、Ｃ＝Ｎ。
【０１８４】
ＨＰＬＣ条件：流速８ｍｌ／分２５ｍｍＰＲＰカラム使用
Ａ＝３％アンモニア溶液（比重＝０．８８）／水；Ｂ＝アセトニトリル
時間      ％Ｂ
０        ７．５
１５      ７５．０
２０      ７５．０
２２      ７．５
３０      ７．５
１回のラン当り水溶液３ｍｌをロードし、１２．５〜１３．５分の時間枠で回収する。
実施例１３：Ｎ−アルキル化のための１８Ｆ−標識誘導体の合成
３−［１８Ｆ］フルオロプロピルトシレートの合成
【０１８５】
【化２６】
2008514580.tif 000029
ガラスバイアル中で調製した、アセトニトリル（３００μｌ）中のＫｒｙｐｔｏｆｉｘ２２２（１０ｍｇ）及び水（３００μｌ）中の炭酸カリウム（４ｍｇ）を、プラスチックの注射器（１ｍｌ）を使用し、二股栓を経由して、真ちゅう製ヒーター中に置かれたカーボングラス製反応容器に移した。次にターゲット水（０．５〜２ｍｌ）中の１８Ｆ−フルオライド（１８５〜３７０ＭＢｑ）を、二股栓を通して加えた。ヒーターを１２５℃に設定し、タイマーをスタートさせた。１５分後、アセトニトリル（０．５ｍｌ）を３分割して１分間隔で加えた。１８Ｆ−フルオライドを合計４０分間以内で乾燥させた。４０分後、ヒーターを圧縮空気で冷却し、ポットのふたを取り外して１，３−プロパンジオール−ジ−ｐ−トシレート（５〜１２ｍｇ）及びアセトニトリル（１ｍｌ）を加えた。ポットのふたを戻してすべてのラインを栓で閉じた。ヒーターを１００℃に設定し、１００℃で１０分間標識化した。標識化後、３−［１８Ｆ］フルオロプロピルトシレートを、Ｇｉｌｓｏｎ  ＲＰ  ＨＰＬＣによって以下の条件を使用して単離した。
【０１８６】
カラム          ｕ−ｂｏｎｄａｐａｋ  Ｃ１８  ７．８×３００ｍｍ
溶出液          水（ポンプＡ）：アセトニトリル（ポンプＢ）
ループサイズ    １ｍｌ
ポンプ速度      ４ｍｌ／分
波長            ２５４ｎｍ
勾配            ２０分で５〜９０％の溶出液Ｂ
生成物Ｒｔ      １２分。
【０１８７】
単離されたら、切り出した試料（約１０ｍｌ）を水（１０ｍｌ）で希釈し、調整済みのＣ１８  Ｓｅｐ  Ｐａｋに装填した。Ｓｅｐ  Ｐａｋは、窒素で１５分間乾燥し、有機溶媒、ピリジン（２ｍｌ）、アセトニトリル（２ｍｌ）又はＤＭＦ（２ｍｌ）で追い出した。
【０１８８】
アミンをＮ−アルキル化するためには、３−［１８Ｆ］フルオロプロピルトシレートを、ピリジン中で還流することによって使用する。
【０１８９】
実施例１４：Ｓ−アルキル化のための［１８Ｆ］−チオール誘導体
段階（ａ）：３−［１８Ｆ］フルオロ−トリチルスルファニル−プロパンの調製
【０１９０】
【化２７】
2008514580.tif 000030
ガラスバイアル中で調製したアセトニトリル（８００μｌ）中のＫｒｙｐｔｏｆｉｘ２２２（１０ｍｇ）及び水（５０ｍｌ）中の炭酸カルシウム（１ｍｇ）を、プラスチックの注射器（１ｍｌ）を使用し、二股栓を経て、真ちゅう製ヒーター中のカーボングラス反応容器に移した。次にターゲット水（０．５〜２ｍｌ）中の１８Ｆ−フルオライド（１８５〜３７０ＭＢｑ）も、二股栓を通じて加えた。ヒーターを１２５℃に設定し、タイマーをスタートさせた。１５分後に、アセトニトリル（０．５ｍｌ）を３部に分けて１分間隔で加えた。１８Ｆ−フルオライドを、合計４０分間まで乾燥した。４０分後に、ヒーターを圧縮空気で冷却し、ポットのふたを取り外し、トリメチル−（３−トリチルスルファニル−プロポキシ）シラン（１〜２ｍｇ）及びＤＭＳＯ（０．２ｍｌ）を加えた。ポットのふたを戻し、ラインに栓をして閉め切った。ヒーターを８０℃に設定し、８０℃で５分間標識した。標識後、反応混合物をＲＰ  ＨＰＬＣによって以下のＨＰＬＣ条件を使用して分析した。
【０１９１】
カラム          ｕ−ｂｏｎｄａｐａｋ  Ｃ１８  ７．８×３００ｍｍ
溶出液          ０１．％ＴＦＡ／水（ポンプＡ）：０．１％ＴＦＡ／アセトニトリル（ポンプＢ）
ループサイズ    １００μｌ
ポンプ速度      ４ｍｌ／分
波長            ２５４ｎｍ
勾配            １分      ４０％Ｂ
１５分    ４０〜８０％Ｂ
５分      ８０％Ｂ。
反応混合物を、ＤＭＳＯ／水（１：１ｖ／ｖ、０．１５ｍｌ）で希釈し、調整されたｔ−Ｃ１８  Ｓｅｐ−Ｐａｋに装填した。カートリッジを水（１０ｍｌ）で洗浄し、窒素で乾燥し、３−［１８Ｆ］フルオロ−１−トリチルスルファニル−プロパンを、アセトニトリル（１部０．５ｍｌ）４部で溶出した。
【０１９２】
段階（ｂ）３−［１８Ｆ］フルオロ−プロパン−１−チオールの調製
【０１９３】
【化２８】
2008514580.tif 000031
３−［１８Ｆ］フルオロ−トリチルスルファニル−プロパンのアセトニトリル（１〜２ｍｌ）溶液を、１００℃の窒素流を使用して１０分間蒸発乾固させた。ＴＦＡ（０．０５ｍｌ）、トリイソプロピルシラン（０．０１ｍｌ）及び水（０．０１ｍｌ）の混合物を加え、次に８０℃で１０分間加熱して３−［１８Ｆ］フルオロ−プロパン−１−チオールを生成させた。
【０１９４】
段階（ｃ）：−Ｎ（ＣＯ）ＣＨ２Ｃｌ前駆体との反応
クロロアセチル前駆体を標識する一般的手順は、段階（ｂ）からの３−［１８Ｆ］フルオロ−１−メルカプト−プロパンを収容している反応器を圧縮空気で冷却すること及び次いでアンモニア（水中２７％、０．１ｍｌ）及び水（０．０５ｍｌ）中の前駆体（１ｍｇ）を加えることである。混合物は、８０℃で１０分間加熱する。
【０１９５】
実施例１５：トリブチルスズ前駆体の１２３Ｉ放射能標識
以下の一般的に適用可能な方法を使用した。
【０１９６】
０．０１Ｍ  ＮａＯＨ中の１ｍＭ  Ｎａ１２７Ｉ  １０μｌを、０．２Ｍ  ＮＨ４ＯＡｃ（ｐＨ４）２００μｌに加えた。次にこのＮａ１２７Ｉ／ＮＨ４ＯＡｃ溶液を、０．０５Ｍ  ＮａＯＨ中のＮａ１２３Ｉ  ２５．０μｌ（約５００ＭＢｑ；Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｃｙｇｎｅ）に加えた。合わせた溶液を、ガラス製の小さな円錐形挿入物を収容しているシラン化されたプラスチックバイアルに移した。このプラスチックバイアルは、ＳＩＧＭＡＣＯＴＥ（商標）（ヘプタン中の塩素化有機ポリシロキサン；Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）を使用してシラン化されていた。過酢酸３６〜４０％の酢酸溶液１０μｌをＨ２Ｏ５ｍｌに加えることによって過酢酸溶液を調製した。次に希釈過酢酸溶液１００μｌをＨ２Ｏ  ９００μｌに加え、次にこの希釈液１０μｌをＮａ１２３／１２７Ｉを収容しているバイアルに加えた。最後に、シラン化されたプラスチックバイアル中のトリブチルスズ前駆体（化合物１）の１．５ｍＭ溶液６４μｌを、反応混合物に加え、溶液を３分間置いた。
【０１９７】
１２３Ｉ化合物２を、γ検出器及びＵＶ検出器並びに逆相Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｃ１８（２）Ｌｕｎａ  ５μ、１５０×４．６ｍｍカラムを備えた勾配ＨＰＬＣクロマトグラフィーを使用して精製した。
ＨＰＬＣ条件      溶出液Ａ：Ｈ２Ｏ中０．１％ＴＦＡ
溶出液Ｂ：ＣＨ３ＣＮ中０．１％ＴＦＡ
１２分間３０〜７０％の溶出液Ｂ
１３分間１００％Ｂ
２５分間１００％Ｂ
２５．５分間３０％Ｂ
流速：    １ｍｌ／分
λ：      ２５４  ｎｍ。
【０１９８】
このように、反応混合物２６０μｌをＨＰＬＣに注入して１２３Ｉ化合物２（保持時間７．３分）に対応するピークをＭｅＯＨ  ２００μｌ中の４−アミノ安息香酸２００μｇに精製した。ＨＰＬＣによるＲＣＰは４７％であった。有機溶媒を真空で除去後、容積を５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で１．６ｍｌとした。７３．７５ＭＢｑ／ｍｌを含有している最終溶液は、７〜７．５のｐＨを有していた（比放射能＝４８ＭＢｑ／ｎｍｏｌ）。室温で１９８分間放置後、ＨＰＬＣは、精製された１２３Ｉ化合物２のＲＣＰが９４％であることを示した。
【０１９９】
反応で形成された１２３Ｉ生成物（ＲＴ＝７．３分）はＨＰＬＣによって１２７Ｉ化合物２のｃｏｌｄ  ｓｔａｎｄａｒｄと共溶出する。反応は上記と同様に、但し今回は０．０５Ｍ  ＮａＯＨ中にＮａ１２３Ｉは不在で、繰り返した。反応混合物を、電子スプレー質量分析を使用する陽イオンモードのＬＣＭＳによって分析した。ＨＰＬＣ条件は上記と同様であったが、今回は溶出液Ａとして水中の０．０１％ＴＦＡ及び溶出液ＢとしてＣＨ３ＣＮ中の０．０１％ＴＦＡを使用した。生成物は真正の非放射性化合物２の場合と同じ保持時間を有していた。反応混合物から得た５．８５分のピークの質量分析は、質量４８０．７５（１００％）に主ピークを与えた。
【０２００】
実施例１６：９９ｍＴｃ放射能標識（一般法）
９９ｍＴｃ錯体は、窒素パージされたＰ４６バイアルに以下のものを加えることによって調製することができる。
【０２０１】
Ｎ２パージしたＭｅＯＨ  １ｍｌ、
１００μｌのＭｅＯＨ中の１００μｇのリガンド−ＭＭＰｉコンジュゲート、
０．５ｍｌのＮａ２ＣＯ３／ＮａＨＣＯ３緩衝液（ｐＨ９．２）、
Ｔｃジェネレータからの０．５ｍｌのＴｃＯ４−、
０．１ｍｌのＳｎＣｌ２／ＭＤＰ溶液（１０．２ｍｇのＳｎＣｌ２及び１０１ｍｇのメチレンジホスホン酸を含有する１００ｍｌのＮ２パージした生理食塩水中の溶液）。
ＲＣＰを決定するためにはＩＴＬＣ（インスタント薄層クロマトグラフィー）を使用した。ＳＧプレート及びＭｅＯＨ／（ＮＨ４ＯＡｃ  ０．１Ｍ）１：１移動層は、ＲＨＴ（還元加水分解Ｔｃ）を原点に、過テクネチウム酸塩を溶媒先端に及びテクネチウム錯体を中間Ｒｆに示す。反応混合物は、逆相ＨＰＬＣ（ＸｔｅｒｒａカラムＲＰ１８  ３．５μｍ、１００ｍｍ×４．６ｍｍ）によっても、０．０７％アンモニアを溶出液Ａとし、アセトニトリルを溶出液Ｂとして使用して分析することができる。
【０２０２】
実施例１７：インビトロメタロプロテイナーゼ阻害アッセイ
化合物を次の市販の生体分子アッセイキットを使用してスクリーニングを行った。
【０２０３】
ＭＭＰ−１比色定量アッセイキット−カタログ番号ＡＫ−４０４、
ＭＭＰ−２比色定量アッセイキット−カタログ番号ＡＫ−４０８、
ＭＭＰ−８比色定量アッセイキット−カタログ番号ＡＫ−４１４、
ＭＭＰ−９比色定量アッセイキット−カタログ番号ＡＫ−４１０、
ＭＭＰ−１２比色定量アッセイキット−カタログ番号ＡＫ−４０２、
これらは、Ａｆｆｉｎｉｔｉ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｌｔｄ．（Ｐａｌａｔｉｎｅ  Ｈｏｕｓｅ、Ｍａｔｆｏｒｄ  Ｃｏｕｒｔ、Ｅｘｅｔｅｒ、ＥＸ２  ８ＮＬ、ＵＫ）から入手できる。
【０２０４】
（ａ）試験化合物の調製
阻害剤を粉末形態で準備し、４℃で貯蔵した。各阻害剤について、ＤＭＳＯ中の１ｍＭ保存液を調製し、２０μｌの一定分量に分配し、それらの一定分量を−２０℃で貯蔵した。保存液を希釈して、８段階の阻害剤濃度（推奨：５０μＭ、５μＭ、５００ｎＭ、５０ｎＭ、５ｎＭ、５００ｐＭ、５０ｐＭ及び５ｐＭ）を得た。希釈は、キットのアッセイ緩衝液で行った。アッセイウェルに加えられると、阻害剤貯蔵物は５倍に希釈され、したがって最終濃度範囲は１０μＭ〜１ｐＭであった。
【０２０５】
（ｂ）実験手順
詳細は、市販のキットにより提供されるが、次のように要約することができる。
【０２０６】
−  上記の通り試験化合物の希釈物を用意する、
−  アッセイ緩衝液をプレートに加える、
−  試験化合物をプレートに加える、
−  標準キット阻害剤ＮＮＧＨを用意する（希釈係数はキットを参照）、
−  ＮＮＧＨを対照阻害剤ウェルに加える、
−  ＭＭＰ酵素を用意する（希釈係数はキットを参照）、
−  ＭＭＰをプレートに加える、
−  プレートを３７℃で約１５分インキュベートする、
−  チオペプトリド（ｔｈｉｏｐｅｐｔｏｌｉｄｅ）基質を用意する（希釈係数はキットを参照）、
−  基質をプレートに加える、
−  ＬａｂｓｙｓｔｅｍｓｉＥＭＳプレートリーダーで３７℃、４１４ｎｍを、１時間にわたり２分毎にカウントする（ＭＭＰ−１については３０秒毎に２０分間カウントする）、
（ｃ）結果
結果を表１に示す。
【０２０７】
【表３】
2008514580.tif 000032
実施例１８：ＭＭＰ発現の動物腫瘍モデルにおける放射ヨウ素標識された誘導体化合物２Ａの体内分布
その腫瘍中で幾つかのＭＭＰの再現性が上方制御されるために、インビボのＬｅｗｉｓ肺［ＬＬＣ］癌腫瘍モデルがＭＭＰｉのスクリーニングに使用されている。それなりに、このモデルは、ＭＭＰを発現させる病変のインビボ標的指向化のためのＭＭＰｉの効力について優れた評価をもたらす。文献の報告では、ＬＬＣ細胞が、プロＭＭＰ−２、活性ＭＭＰ−２、プロＭＭＰ−９、並びにＬＬＣ腫瘍ＭＭＰ−２及びＭＭＰ−９（プロ又は活性として分類されない）を発現させることが示されている［Ｂａｅら、Ｄｒｕｇｓ  Ｅｘｐ  Ｃｌｉｎ  Ｒｅｓ．２９（１）：１５−２３（２００３）］。
【０２０８】
結果
結果の概要を表２に示す。
【０２０９】
【表４】
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実施例１９：ＭＭＰ発現のＡｐｏＥ結紮動物モデルにおける放射ヨウ素標識された誘導体化合物２Ａ、６Ａ及び１８Ａの体内分布
ＡｐｏＥ結紮モデルについても研究した。ＡｐｏＥマウスは、ＡｐｏＥ遺伝子を欠いており、したがって、その血漿コレステロールレベルを調節することができないトランスジェニックノックアウトマウスである。そのため、ＡｐｏＥマウスは、動脈硬化性病変、即ち高脂肪食の摂取と共に加速される過程を起こす。病変発生のさらなる促進は、外科手術及び高脂肪食摂取から４週間以内に進行型の病変形成をもたらす頚動脈の結紮によって実現することができる。このモデルは、マクロファージ及びＭＭＰの発現が高度であり、組織リモデリングのレベルが高いことが示されており、Ｉｖａｎら［Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ．１０５，２６８６−２６９１（２００２）］によって記述されている。結果の概要を表３に示す。
【０２１０】
【表５】
2008514580.tif 000034
実施例２０：化合物１４及び２１の合成
【０２１１】
【化２９】
2008514580.tif 000035
この化合物は、保護断片化合物Ａを使用して、溶液中カップリングによって合成した。化合物Ａは、固相合成を使用して調製した。アミノ酸のカップリングは、クロロトリチルＰＳ樹脂（０．８ミリ当量／ｇ）上で段階的に行った。
【０２１２】
段階（ａ）：化合物Ａの合成
Ｆｍｏｃ−ＰＥＧ−ＯＨを、ＤＭＦ中でＤＩＥＡの存在下において、クロロトリチルＰＳ樹脂にカップリングさせた。脱保護／カップリングサイクルを以下に記載する。
【０２１３】
Ｆｍｏｃアミノ酸２当量及びＨＯＢｔ  ２当量を、ＤＭＦ（アミノ酸１ｍｍｏｌ当たり２〜３ｍｌ）に溶解させた。溶液を、樹脂を収容している反応容器に注いだ。ＤＩＣ  ２当量を加えた。
【０２１４】
【表６】
2008514580.tif 000036
段階（ｂ）：溶液中合成
ＤＩＥＡの存在下でＨＢＴＵをカップリング剤として使用する、化合物Ａと４−ヨードベンジルアミンのカップリングにより、化合物Ｂを得た。化合物Ｂを、塩基性条件下において、ヒドロキシルアミンで処理した。粗生成物は油として得た（粗収率９１．６％）。粗生成物を、ＲＰ−ＨＰＬＣによってＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／アセトニトリルを溶媒として使用して精製した。純粋な画分を集め、凍結乾燥して油を得た（全収率２８．３％）。ＨＰＬＣ分析９０％
化合物２１は、類似の方法で調製した。
【０２１５】
ＨＰＬＣによる純度＝９０％
ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１７８９．６［ＭＨ］＋
実施例２１：化合物１３の合成
精製した化合物１４を出発原料として使用した。反応は窒素雰囲気で行った。化合物１４を、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（０．０５当量）を触媒として使用して、ビス（トリブチルスズ）（１．５当量）で処理した。反応混合物を、トルエン／アセトニトリル（３／２５）混合物中、還流下で加熱した。粗生成物を油として単離した（粗収率１００％）。粗生成物を、ＲＰ−ＨＰＬＣによってＡｃＯ−ＮＨ４＋／Ｈ２Ｏ／アセトニトリルを溶媒として用いて精製して油を得た（全収率６．８５％）。ＨＰＬＣ分析４４％。この化合物は、油として得たが、凍結乾燥を試みる間に分解した。凍結乾燥前のＨＰＬＣ分析は９０．２％であった。
【０２１６】
実施例２２：化合物１０の合成
【０２１７】
【化３０】
2008514580.tif 000037
この化合物は、保護断片化合物Ｃを使用する、溶液中カップリングによって合成した。化合物Ｃは固相合成を使用して調製した。アミノ酸のカップリングは、クロロトリチルＰＳ樹脂（０．８ミリ当量／ｇ）上で、段階的に行った。
【０２１８】
段階（ａ）：化合物Ｃの合成
Ｆｍｏｃ−ＰＥＧ−ＯＨを、ＤＭＦ中、ＤＩＥＡの存在下において、クロロトリチルＰＳ樹脂にカップリングさせた。脱保護／カップリングサイクルを以下に記載する。
【０２１９】
Ｆｍｏｃアミノ酸２当量及びＨＯＢｔ  ２当量を、ＤＭＦ（アミノ酸１ｍｍｏｌ当たり２〜３ｍｌ）に溶解させた。溶液を、樹脂を収容している反応容器に注いだ。ＤＩＣ  ２当量を加えた。
【０２２０】
【表７】
2008514580.tif 000038
ペプチドの樹脂からの開裂は、ＤＣＭ中の１％ＴＦＡを使用して行った。
【０２２１】
粗生成物は、油として得た。粗収率４０．７％
段階（ｂ）：溶液中合成
ＤＩＥＡの存在下にＨＢＴＵをカップリング剤として使用する、化合物Ｃと４−ヨードベンジルアミンのカップリングは、化合物Ｄを得た。化合物Ｄを、塩基性条件下において、ヒドロキシルアミンで処理した。粗生成物は油として得た（粗収率９３．１％）。粗生成物１０を、ＲＰ−ＨＰＬＣによってＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／アセトニトリルを溶媒として使用して精製した。純粋な画分を集め、凍結乾燥して油を得た（全収率２５％）。ＨＰＬＣ分析８７．２％
実施例２３：化合物９の合成
精製した化合物１０を出発原料として使用した。反応は窒素雰囲気で行った。化合物１０を、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（３×０．０５当量）を触媒として使用して、ビス（トリブチルスズ）（２×１．５当量）で処理した。反応混合物を、トルエン／アセトニトリル（３／２５）混合物中、還流下で加熱した。粗生成物を油として単離した（粗収率１００％）。粗生成物を、ＲＰ−ＨＰＬＣによって、ＡｃＯ−ＮＨ４＋／Ｈ２Ｏ／アセトニトリルを溶媒として用いて、精製した（全収率１５％）。ＨＰＬＣ分析７８．８％。
【０２２２】
実施例２４：化合物１８〜２０の合成
化合物１９は、ＤＩＥＡの存在下で、ＨＢＴＵをカップリング剤として使用する、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨとｐ−Ｉ−ベンジルアミンＨＣｌの、完全に保護されたフェニルアラニンを与えるカップリングによって調製された。酸分解（ジオキサン中のＨＣｌ）によるＢｏｃ基の除去に続いて（Ｒ）−２−イソブチルコハク酸−１−ｔ−ブチルエステルとのカップリングは、コハク酸エステル−Ｐｈｅ−ｐＩ−ベンジルアミン断片を与えた。酸性条件下のｔ−ブチル基の開裂（ＴＦＡ／ＴＥＳ／ＤＣＭ）に続いて、このカルボン酸を、ヨードメタンを使用して、メチルエステルに転化させた。メチルエステルを、塩基性条件下においてヒドロキシルアミンで処理して固体を得た。粗生成物を、ＲＰ−ＨＰＬＣによってＴＦＡ／水／アセトニトリルを溶媒として使用して精製した。純粋な画分を集め、凍結乾燥して白色結晶を得た。
【０２２３】
ＨＰＬＣによる純度＝９０．１％、ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５５１．９［ＭＨ］＋
化合物１８及び２０は、類似の方法で調製した。
【０２２４】
化合物１８：ＨＰＬＣによる純度＝９１％、ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４７５．９［ＭＨ］＋
化合物２０：ＨＰＬＣによる純度＝９６．１％、ＥＳＩ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５１６．３［ＭＨ］＋
【図面の簡単な説明】
【０２２５】
【図１】本発明の数種の化合物の化学構造を示す図。
【図１】
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【国際調査報告】
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