(57)【要約】  アルツハイマー病に存在することが示されているＩｇ陽性ニューロンは、補体Ｃ１ｑおよびＣ５ｂ−９タンパク質を有することが示される。Ｃ１ｑおよびＣ５ｂ−９は、アルツハイマー病の診断および処置において用いられることができる。
2008508518.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
正常対照と比較した場合に被検者における増加した免疫グロブリン陽性ニューロンを検出することにより該被検者におけるアルツハイマー病の存在を診断する方法であって、該増加した免疫グロブリン陽性ニューロンを下記のとおり検出する：
該被検者の脳組織を抽出し；
免疫グロブリン陽性ニューロンについて該抽出物をアッセイし；そして
対照の脳組織からの同様な抽出物により同じアッセイにおいて示される該免疫グロブリン陽性ニューロンを比較する
方法。
【請求項２】
正常対照と比較した場合に被検者における増加したＣ１ｑタンパク質を検出することにより該被検者におけるアルツハイマー病の存在を診断する方法であって、該増加したＣ１ｑタンパク質を下記のとおり検出する：
該被検者の脳組織を抽出し；
Ｃ１ｑタンパク質について該抽出物をアッセイし；そして
対照の脳組織からの同様な抽出物により同じアッセイにおいて示される該Ｃ１ｑタンパク質を比較する
方法。
【請求項３】
正常対照と比較した場合に被検者における増加したＣ５ｂ−９タンパク質を検出することにより該被検者におけるアルツハイマー病の存在を診断する方法であって、該増加したＣ５ｂ−９タンパク質を下記のとおり検出する：
該被検者の脳組織を抽出し；
Ｃ５ｂ−９タンパク質について該抽出物をアッセイし；そして
対照の脳組織からの同様な抽出物により同じアッセイにおいて示される該Ｃ５ｂ−９タンパク質を比較する
方法。
【請求項４】
該方法が死後に行われる請求項１の方法。
【請求項５】
該方法が死後に行われる請求項２の方法。
【請求項６】
該方法が死後に行われる請求項３の方法。
【発明の詳細な説明】
【関連出願へのクロスリファレンス】
【０００１】
本願は、２００４年７月２７日に出願された出願第６０／５９１，４７９号に優先権を主張する。
【背景技術】
【０００２】
アルツハイマー病（ＡＤ）の原因の究明は、血管病理および神経炎症からアミロイド斑および神経原線維変化のような神経病理学的成分まで多岐にわたる。しかしながら、ＡＤは実際にはいくつかの同時に起こるかもしくは続いて起こる正常および病的プロセスの集合体であり得るようである。ＡＤは単一の根本原因を有し得ることが可能であると思われるが、この最初の損傷はとらえにくいままである。最近、年齢適合非認知症対照脳組織と比較して、ＡＤ脳組織における検出可能な実質免疫グロブリンの有意な増加が報告され、そして最も重要なことには、Ｉｇ陽性ニューロンの劇的な増加が認められた（非特許文献１）。さらに、かなりの数のこれらのＩｇ陽性ニューロンは、Ｉｇ陰性ニューロンではめったに認められない神経変性のアポトーシス特徴を示した（非特許文献１）。これらのデータは、不完全な血液脳関門（ＢＢＢ）と自己免疫機序によるニューロン死との間の重要な関係を意味した（非特許文献１、非特許文献２）。しかしながら、これらのＩｇ陽性ニューロンについてはほとんど分かっていない。
【非特許文献１】Ｄ’Ａｎｄｒｅａ  ＭＲ：Ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｌｉｎｋｉｎｇ  ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｃｅｌｌ  ｄｅａｔｈ  ｔｏ  ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ  ｉｎ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ．Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２００３；９８２：１９−３０
【非特許文献２】Ｄ’Ａｎｄｒｅａ  ＭＲ：Ａｄｄ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｌｉｓｔ  ｏｆ  ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｈｙｐｏｔｈｅｓｅｓ  ２００５；６４（３）：４５８−４６３
【発明の開示】
【０００３】
［発明の要約］
Ｉｇ陽性ニューロンの炎症プロフィールは、特性化されている。特に、古典的抗体誘導性補体経路の特異的成分、補体生成物Ｃ１ｑ（３）、および細胞膜傷害複合体に相当するＣ５ｂ−９（４）は、Ｉｇ陽性ニューロンと共局在化されたことが決定されている。これらのＩｇ陽性ニューロンと反応性小神経膠細胞との関連もまた特性化されており、そして陽性ニューロンはＩｇ陰性ニューロンと比較して反応性小神経膠細胞により優先的に関連しているかもしくは標的とされることが決定された。
【０００４】
［発明の詳細な記述］
散発性ＡＤにかかっている患者（ｎ＝１２）および年齢適合対照（ｎ＝６）からの死後内嗅皮質脳組織をＨａｒｖａｒｄ  Ｂｒａｉｎ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｒｅｓｏｕｒｃｅ  Ｃｅｎｔｅｒ（ＨＢＴＲＣ、Ｂｅｌｍｏｎｔ、ＭＡ、ＵＳＡ）から入手し、そして１０％中性緩衝ホルマリンにおいて固定した。ＡＤの病理学的確認には、（１）アミロイド斑の存在、（２）神経原線維変化の存在および（３）減少したニューロン密度が含まれた（１、５、６）。組織を切り取り、そして常法に従ってパラフィン包埋用に処理した。５ミクロン切片を連続的に切断し、ＳｕｐｅｒＦｒｏｓｔ  Ｐｌｕｓ＋（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ、ＰＡ）顕微鏡スライドガラス上に載せ、そして一晩乾燥させた。日常的な単一免疫組織化学（ＩＨＣ）のプロトコルは、以前に詳細に記述されている（１、５、６）。簡潔に言えば、顕微鏡スライドガラス上の組織切片から蝋を除去し、そして再水和させた。スライドガラスをＴａｒｇｅｔバッファー（Ｄａｋｏ、Ｃａｒｐｅｎｔｕｒｉａ、ＣＡ）においてレンジ加熱し、冷却し、リン酸緩衝食塩水（ｐＨ７．４、ＰＢＳ）中に置き、そして３．０％のＨ２Ｏ２で室温で１０分間処理した。全てのインキュベーション（各々３０分）および洗浄は室温で行った。正常ブロッキング血清（Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｓ、Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ、ＣＡ）を全てのスライドガラス上に１０分間置いた。ＰＢＳにおける短時間のすすぎの後に、切片を一次抗体で処理した：ポリクローナル抗ヒトｐａｎ−Ｉｇは、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡを認識する（１：１０００、Ｓｅｒｏｔｅｃ、ＮＣ；Ｄａｋｏ、ＣＡ）；ポリクローナル抗ヒトＣ１ｑ（１：２００、Ｑｕｉｄｅｌ、ＣＡ）；モノクローナル抗ヒトＣ５ｂ−９（１：２００、Ｑｕｉｄｅｌ、ＣＡ）；およびモノクローナル抗ヒトＨＬＡ−ＤＲ、反応性小神経膠細胞のマーカー（３、４、６、７、８）（１：２００、Ｃｈｅｍｉｃｏｎ、Ｔｅｍｅｃｕｌａ、ＣＡ）。次に、スライドガラスをＰＢＳにおいて洗浄し、そしてヤギ抗ウサギ（ポリクローナルｐｒｉｍａｒｉｅｓ）もしくはウマ抗マウス（モノクローナルプライマリー（ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌ  ｐｒｉｍａｒｉｅｓ））ビオチニル化二次抗体（Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｓ）で処理した。ＰＢＳにおいて洗浄した後に、アビジン−ビオチン−西洋ワサビペルオキシダーゼ複合体試薬（ＡＢＣｈｐ、Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｓ）を加えた。全てのスライドガラスを洗浄し、そして３，３’−ジアミノベンジジン（ＤＡＢ、Ｂｉｏｍｅｄａ、Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ、ＣＡ）で２回５分処理し、蒸留水においてすすぎ、そしてヘマトキシリンで対比染色した。
【０００５】
さらに、反応性小神経膠細胞とＩｇ陽性ニューロンとの間に空間的（二次元的）関連があったかどうかを決定するために、画像解析（Ｉｍａｇｅ  Ｐｒｏ、ｖｅｒ．４．０１、Ｐｈａｓｅ  ＩＩＩ  Ｉｍａｇｉｎｇ、Ｇｌｅｎ  Ｍｉｌｌｓ、ＰＡ）を用いてＩｇ陽性もしくはＩｇ陰性ニューロンの核と顕著な赤色に標識されたＨＬＡ−ＤＲ免疫反応性小神経膠線維との間の距離（μｍ）を測定した。この目的を達成するために、二重ＩＨＣを適用した。簡潔に言えば、第一の一次抗体はＡＢＣ−アルカリホスファターゼ（ＡＢＣａｐ）試薬、続いてＦａｓｔ  Ｒｅｄ（Ｓｉｇｍａ、ＭＯ）色素原を用いて検出し、一方、第二の一次抗体（ｐａｎ−Ｉｇ）はＡＢＣｈｐ−ＤＡＢ系を用いて検出した（１、６、８）。陰性対照には、抗体希釈剤での一次抗体の置換もしくはＩｇ抗体について以前に示されたような（１）その特定の抗原での一次抗体の前吸収が包まれた。Ｉｇ陽性およびＩｇ陰性ニューロン（平均２０／組織）は、１０個の無作為視野（４０ｘ対物）／組織（ｎ＝５）において分析した。ＳｉｇｍａＳｔａｔを使用してマン−ホイットニー順位和検定を用いて統計分析を行い、そしてＳｉｇｍａＰｌｏｔを用いてプロットした。
【０００６】
典型的な褐色に標識されたＩｇ−、Ｃ１ｑ−およびＣ５ｂ−９−免疫陽性ニューロン（矢印）が、ＡＤ脳組織の内嗅皮質において検出された（図１）。検出可能な免疫標識は、陰性対照において認められなかった（データは提示されない）。図１Ａにおけるパネルは、以前にも報告されている（１、２）、Ｉｇ陰性ニューロン（矢じり）の近接近内（ミクロン以内）の強く免疫標識されたＩｇ陽性ニューロン（矢印）の存在を示す。以前にも記述された（１、２）、正常に見える転写活性核真正染色質に埋め込まれた顕著な核小体を有する正常に見えるＩｇ陰性ニューロン（矢じり）の中のＩｇ陽性ニューロン（矢印、挿入物）の細胞萎縮および高密度の濃縮した核染色質（図１Ａ、挿入物）のような神経変性の特徴に注目すべきである。
【０００７】
図１Ｂにおけるパネルは、Ｃ１ｑ陰性ニューロン（矢じり）の中の顕著なＣ１ｑ免疫陽性ニューロン（矢印）を示す。この標識は、体細胞−樹状突起（ｓｏｍａｔｉｃ−ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ）領域において減少したシグナルを有してニューロン核周囲部に主に位置した。興味深いことには、これらのＣ１ｑ陽性ニューロンは、萎縮した核周囲部および高密度の濃縮した核染色質を有するＩｇ陽性ニューロンと同じ神経変性の特徴を示し（図１Ｂ、挿入物）、Ｃ１ｑ陽性ニューロンが変性しているだけでなく、ＩｇおよびＣ１ｑ免疫標識パターンがニューロンにおいて共局在化され得ることを示唆した。
【０００８】
弱いＣ１ｑ免疫標識はまたいくつかの形態学的に健常なニューロンにおいても検出され、別の研究におけるＣ１ｑの発現はナイーブマウスにおいて低かったが実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）において増加したので（９）、基礎発現検出を示唆した。
【０００９】
同様の結果はまた、Ｃ５ｂ−９免疫陽性ニューロン（矢印、図１Ｃ）においても認められた。この場合もやはり、小集団のニューロンのみがＣ５ｂ−９免疫標識され、それらのいくつかは神経変性しているように見えた（図１Ｃ、挿入物）。図１Ｃにおける矢じりは、隣接したニューロンにおけるＣ５ｂ−９検出の欠如を示す。
【００１０】
Ｉｇ、Ｃ１ｑおよびＣ５ｂ−９の標識パターンは神経変性ニューロンと関連するように見えたが、我々が連続（５μｍ）切片標識組織を分析するまでそれらがまた同じ細胞にも存在するかどうかは不明であった。これらのデータは、Ｃ１ｑおよびＣ５ｂ−９が実際にＩｇ陽性ニューロンに存在することを示した（図２）。特に、典型的な連続組において、図２Ａ〜ＣはＩｇ陽性ニューロンにおけるＣ１ｑ免疫反応性（図２Ａ〜Ｃ）を示した。Ｃ５ｂ−９免疫反応性もまた、Ｉｇ陽性ニューロンにおいて検出された（図２Ｄ）。しかしながら、この特定の例において、比較的より弱いＩｇ免疫標識がＣ５ｂ−９ニューロンにおいて検出され（図２Ｄ挿入物）、それは細胞が死に近づくにつれてＩｇ免疫反応性を失ったことを示唆し得る。重要なことには、これらのアッセイから得られるデータはまた、Ｉｇ陽性ニューロンが神経変性しており、そしてＣ１ｑおよびＣ５ｂ−９免疫陽性であることも示し、これらの特徴もしくはプロフィール間の強い関連を示唆した。
【００１１】
上述のように、年齢適合対照脳もまた、Ｉｇ、Ｃ１ｑおよびＣ５ｂ−９の存在について分析した。実質Ｉｇ免疫標識はこれらの組織において検出されたが、標識の大部分は、以前に記述されたように（１）、大血管の周囲に限定された（データは提示されない）。いくつかのＩｇ陽性ニューロンは、６つの年齢適合対照脳組織の１つにおいて認められただけであり（データは提示されない）、それはまたＣ１ｑおよびＣ５ｂ−９免疫標識パターンも示した。
【００１２】
古典的補体経路成分、Ｃ１ｑ（３、１０）（図１Ｂ）および補体経路における最終段階のマーカーでありそして細胞膜傷害複合体に相当する、Ｃ５ｂ−９（４、１０、１１）（図１Ｃ）はＩｇ陽性ニューロンにおいて検出され（図２）、Ｉｇ陽性ニューロンに細胞死の古典的抗体依存性（代替抗体非依存性ではない）補体経路の存在の証拠を与える。補体カスケードはＡＤ海馬および新皮質において十分に活性化され、ジストロフィー性神経炎（ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｃ  ｎｅｕｒｉｔｉｓ）、ＮＦＴおよび老人斑上に（１２、１３）そして今回はＩｇ陽性ニューロン核周囲部内にＣ５ｂ−９の「沈着」をもたらすことが免疫細胞化学的研究により示されている。細胞内Ｉｇ、Ｃ１ｑおよびＣ５ｂ−９の意味は不明であるが、内在化ならびにデノボ合成を意味し得る（１４）。注釈として、補体活性化生成物は沈着物質として記述されている（１５、１６）。しかしながら、無作為な観点からの「沈着」のいかなる証拠も認められなかった。明確にするために、補体成分のどの検出も本研究において細胞と関連した。
【００１３】
次に、組織切片上の二重ＩＨＣを用いてＩｇ陽性ニューロン（褐色に標識される）と反応性小神経膠細胞（赤色に標識される）の空間分布を特性化するために一連のアッセイを行った（図３）。図３Ａ〜Ｅにおいて、反応性小神経膠細胞は、多数のＩｇ陽性ニューロン（矢印）に非常に近接近内で（場合により接触して）位置し、それらは近隣のＩｇ陰性ニューロン（矢じり）では容易に認められなかった。過剰解釈を前提とするが、図３Ａにおいて検出される小神経膠細胞は、わずかにジストロフィーのように見えるＩｇ陽性ニューロン核周囲部と接触していると思われる図３パネルＢ〜Ｄにおいて検出される小神経膠細胞と比較した場合に、Ｉｇ陽性ニューロンは形態学的に健常であるように見えるので発見の初期段階に相当し得る。図３Ｅ〜Ｇにおける小神経膠細胞およびＩｇ陽性ニューロンの配置は、いくつかの赤色に標識された反応性小神経膠細胞が変性Ｉｇ陽性ニューロンと劇的にかかわり合うように見える戦闘地帯（後期）のものに似ている（図３Ｅ、Ｆ、Ｇ）。Ｉｇ陰性ニューロン（矢じり、図３）と関連する反応性小神経膠細胞の欠如に注目すべきである。
【００１４】
反応性小神経膠細胞がＩｇ陰性細胞よりＩｇ陽性ニューロンを標的とするかどうかを決定しようとして、画像解析を用いてＩｇ陽性およびＩｇ陰性ニューロン核に対する小神経膠細胞のＨＬＡ−ＤＲ陽性突起間の平均距離を測定した。図４に提示されるように、反応性小神経膠細胞はＩｇ陰性ニューロンよりＩｇ陽性ニューロンと有意に（ｐ＜０．００１）関連することが分析データにより示された。これらのデータは静止二次元画像から得られたが、反応性小神経膠細胞がＩｇ陰性（ｎ＝１７２；平均＝３１．７４μｍ±１．４４ＳＥ）ニューロンよりＩｇ陽性（ｎ＝１０１；平均＝７．６９μｍ±０．７２ＳＥ）と関連する可能性を無視することは難しい。
【００１５】
これらのデータは、未決定の細胞死プロセスにおける小神経膠細胞の関与を示唆する。裏づけとして、Ｃ１ｑおよびＣ５ｂ−９はアポトーシス細胞の表面に結合し、小神経膠細胞によるこれらの細胞の貪食をもたらすことができる（１７、１８）。また、反応性小神経膠細胞により局所的に生産される補体は、ハンチントン病においてニューロンの膜上で活性化され、ニューロンの壊死ならびに前炎症活性に寄与した（１４）。従って、これらのＩｇ陽性の補体に支配されたニューロン上のこれらの小神経膠細胞の存在を説明することは論理的であるが、神経膠細胞がこれらのニューロンに召集されるかどうかもしくはそれらがこれらのニューロン上の補体蓄積に寄与するかどうかはまだ決定されていない。しかしながら、Ｃ１ｑヌルマウスにおいて線維状Ａβ沈着物を囲む有意に少ない小神経膠細胞活性化があったので（７）、前者は真実であることが最近の研究により示唆された。
【００１６】
これまで、ＡＤ脳において報告される古典的経路成分および活性化フラグメントの圧倒的な証拠にもかかわらず抗体の発見はまだ「明白に示されて」いないので抗体誘導性古典的補体経路の存在はＡＤにないことが提示された（１３、１９、２０）。続いて、β−アミロイドならびに他の神経病理学的マーカーは、補体活性化に関与することが提示されていた（２１）。個人的所見として、Ａβ４２はＩｇ陽性およびＩｇ陰性ニューロンにおいて検出され、Ｉｇ免疫反応性はニューロンにおけるＡβ４２免疫反応性から独立していることを示唆した（データは提示されない）。
【００１７】
血管由来の実質ＩｇおよびＩｇ陽性の神経変性ニューロンの劇的増加に基づく自己免疫性ＡＤ仮説が示唆されていた（１、２）。本研究からのデータは、脳実質への血管由来のＩｇの無差別通過を可能にする機能不全の調節されていないＢＢＢから始まる可能性が最も高い提示された経路（１、２）を実証し、そして拡張する。いったんＣＮＳに入ると、これらのかつては害のない抗体のいくつかは、ニューロン上のそれらのニューロンもしくはニューロン様抗原（１つもしくは複数）に不合理に結合し、補体形成（ＭＡＣ）を引き起こし、ＡＤ脳において自己免疫性／古典的（抗体依存性）補体−細胞死プロセスをもたらす。古典的補体系の活性化はまた自己免疫性脱髄（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｄｅｍｙｌｉｎｅａｔｉｏｎ）において（９）、そして多発性硬化症、重症筋無力症、頭部外傷および脳卒中において（２２）中心的役割を果たすことも既知であるので、これらの結果はＡＤに限定されない。明らかではないが、それらのニューロン標的に特異的にもしくは非特異的に結合するこれらの血管由来の抗体の能力もしくは潜在的可能性は、そのアイソタイプ、アビディティーおよび親和性（１、２）ならびに補体を固定するその能力によって決まることができる可能性がある。各因子は、その抗原への自己抗体応答の「臨床」病原性を決定することにおいて重要な役割を果たし（２０）、そしてＢＢＢ突破単独、もしくは実質Ｉｇの存在が必ずしもＡＤをもたらすとは限らない可能性がある理由を説明し得る。にもかかわらず、ニューロンの特定集団へのこれらの抗体の「不合理な」結合の効果は、
好ましいように見えなかった。
【００１８】
Ｉｇ陽性ニューロンの集団は古典的補体経路によって死にかけていることおよび小神経膠細胞はこれらの変性ニューロンの多くと優先的に関連することがデータにより示唆される。残念なことに、いったん２ヒット（特定のニューロン損傷抗体の存在およびＢＢＢ突破）カスケード経路が始まると、それに続く炎症のプロセスが免疫グロブリンおよび補体とは独立にさらなるニューロン細胞死を与え得る（２３）。以前に記載されたように（１、２）、かつて特性化された、この「自己」抗体の存在は、ＡＤを処置しそして場合により予防するために新規治療標的を提供するはずである。その間に、自己抗体（１つもしくは複数）の異常な存在およびその後のＣＮＳへのその有害な作用を阻止しようとしてＢＢＢの完全性を保持するように治療機会が考案されるはずであり、一方、自己抗体がＣＮＳに回り道して入り込む前にそれが血管系に存在する間にそれを増やすか、取り除くかもしくは阻止するように他の戦略が指示され得る。最低限、本研究との関連で、血管疾患指標および自己免疫生成物（すなわち、補体）の存在と「一緒に」ＢＢＢ完全性を評価するＣＮＳ画像データは、臨床認識力試験パラダイムに加えて、診断および予後能力を提供し得る。
【００１９】
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【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】ｐａｎ−Ｉｇ、Ｃ１ｑもしくはＣ５ｂ−９検出のないニューロン（矢じり）の間のＡＤ内嗅皮質のいくつかの錐体ニューロンにおけるｐａｎ−Ｉｇ（Ａ）、Ｃ１ｑ（Ｂ）およびＣ５ｂ−９（Ｃ）免疫標識（矢印）の典型的な例。棒＝５０μｍ（挿入物、２５μｍ）。
【図２】典型的な連続切片（５ｍｍ）組は、顕著なｐａｎ−Ｉｇ、Ｃ１ｑもしくはＣ５ｂ−９検出のないニューロン（矢じり）の間のＡＤ内嗅皮質のいくつかのニューロンにおけるｐａｎ−ＩｇとＣ１ｑ免疫標識の共局在化（Ａ、Ｂ、Ｃ）およびｐａｎ−ＩｇとＣ５ｂ−９免疫標識の共局在化（Ｄ）（矢印）を示す。星印は、連続している血管の領域を示す。棒＝１００μｍ（Ａ）；２５μｍ（挿入物Ａ）；５０μｍ（Ｂ〜Ｄ）；Ｄ＝１２μｍ（挿入物Ｄ）。
【図３】典型的な二重ＩＨＣ画像（Ａ〜Ｈ）は、ＡＤ内嗅皮質における褐色に標識されたＩｇ陽性ニューロン（矢印）と接触したもしくは関連する赤色に標識されたＨＬＡ−ＤＲ陽性反応性小神経膠細胞の存在を示す。矢じりは、関連する反応性小神経膠細胞のない近隣のＩｇ陰性ニューロンの存在を示す。棒＝２５μｍ。
【図４】グラフで表すデータは、ＨＬＡ−ＤＲ免疫標識反応性小神経膠細胞がＡＤ（ｎ＝５）内嗅皮質の代表的領域（ｎ＝１０、本文を参照）においてＩｇ陰性ニューロン（ｎ＝１７２；３１．７４μｍ±１．４４ＳＥ）よりもＩｇ陽性ニューロン（ｎ＝１０１；７．６９μｍ±０．７２ＳＥ）に有意に近い傾向があることを示す。マン−ホイットニー順位和検定（＊ｐ＜０．００１）。
【図１】
2008508518.tif 000003
【図２】
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【図３】
2008508518.tif 000005
【図４】
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【国際調査報告】
2008508518.tif 000007
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