(57)【要約】本発明は、皮下または筋肉内貯留物形成のための、注射可能なナノ粒子の免疫抑制性組成物に向けられている。本発明はまた、可溶化剤としてのポリオキシル60硬化ヒマシ油(HCO-60)および/またはポリソルベート80の使用の必要性を排除する、ナノ粒子のタクロリムスおよび/またはシロリムスの注射可能組成物にも向けられている。本発明は注射可能なナノ粒子のタクロリムスおよび/またはシロリムス組成物を作製する方法を更に開示しており、かつ、臓器拒絶反応の予防、および乾癬または他の免疫疾患の処置のための、皮下または筋肉内の貯留物用のタクロリムス、シロリムス、またはこれらの組み合わせを含む注射可能なナノ粒子製剤を使用する処置方法にも向けられている。2008533165.tif 000014
2008533165.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下を含む、注射可能なナノ粒子製剤：
(a)約2000nm未満の有効平均粒度を有するタクロリムス粒子；および
(b)少なくとも1種の表面安定剤。
【請求項２】
約2000nm未満の有効平均粒度を有するシロリムス粒子、および表面安定剤を更に含む組成物であって、シロリムスの該表面安定剤がタクロリムスの表面安定剤と同一のまたは異なる安定剤であり得る、請求項1記載の組成物。
【請求項３】
タクロリムスが、結晶相、非晶質相、半結晶相、半非晶質相、およびそれらの混合物からなる群より選択される、請求項1または2記載の組成物。
【請求項４】
ナノ粒子のタクロリムス粒子の有効平均粒度が、約1900nm未満、約1800nm未満、約1700nm未満、約1600nm未満、約1500nm未満、約1400nm未満、約1300nm未満、約1200nm未満、約1100nm未満、約1000nm未満、約900nm未満、約800nm未満、約700nm未満、約650nm未満、約600nm未満、約550nm未満、約500nm未満、約450nm未満、約400nm未満、約350nm未満、約300nm未満、約250nm未満、約200nm未満、約150nm未満、約100nm未満、約75nm未満および約50nm未満からなる群より選択される、請求項1〜3のいずれか一項記載の組成物。
【請求項５】
患者に注射される場合に、長期にわたって免疫抑制剤を放出するための皮下または筋肉内の貯留物を形成する、請求項1〜4のいずれか一項記載の組成物。
【請求項６】
1つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤、担体、またはそれらの組合せを更に含む、請求項1〜5のいずれか一項記載の組成物。
【請求項７】
少なくとも1種の表面安定剤が、他の賦形剤を含まない、タクロリムスおよび少なくとも1種の表面安定剤の全合計乾燥重量に基づき、約0.5重量％〜約99.999重量％、約5.0重量％〜約99.9重量％、および約10重量％〜約99.5重量％からなる群より選択される量で存在する、請求項1〜6のいずれか一項記載の組成物。
【請求項８】
タクロリムスが、他の賦形剤を含まない、タクロリムスおよび少なくとも1種の表面安定剤の全合計重量に基づき、約99.5重量％〜約0.001重量％、約95重量％〜約0.1重量％、および約90重量％〜約0.5重量％からなる群より選択される量で存在する、請求項1〜7のいずれか一項記載の組成物。
【請求項９】
少なくとも2種の表面安定剤を含む、請求項1〜8のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１０】
表面安定剤が、陰イオン表面安定剤、陽イオン表面安定剤、両性イオン性表面安定剤、非イオン性表面安定剤、およびイオン性表面安定剤からなる群より選択される、請求項1〜9のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１１】
少なくとも1種の表面安定剤が、塩化セチルピリジニウム、ゼラチン、カゼイン、ホスファチド、デキストラン、グリセロール、アラビアゴム、コレステロール、トラガントゴム、ステアリン酸、塩化ベンザルコニウム、ステアリン酸カルシウム、グリセロールモノステアレート、セトステアリルアルコール、セトマクロゴール乳化ワックス、ソルビタンエステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール、ドデシル臭化トリメチルアンモニウム、ステアリン酸ポリオキシエチレン、コロイド状二酸化ケイ素、ホスフェート、ドデシル硫酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒプロメロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒプロメロースフタレート、非晶質セルロース、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、トリエタノールアミン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、エチレンオキシドおよびホルムアルデヒドを有する4-(1,1,3,3-テトラメチルブチル)-フェノールポリマー、ポロキサマー；ポロキサミン、帯電したリン脂質、スルホコハク酸ジオクチル、スルホコハク酸ナトリウムのジアルキルエステル、ラウリル硫酸ナトリウム、スルホン酸アルキルアリールポリエーテル、スクロースステアレートおよびスクロースジステアレートの混合物、p-イソノニルフェノキシポリ-(グリシドール)、デカノイル-N-メチルグルカミド；n-デシルβ-D-グルコピラノシド；n-デシルβ-D-マルトピラノシド；n-ドデシルβ-D-グルコピラノシド；n-ドデシルβ-D-マルトシド；ヘプタノイル-N-メチルグルカミド；n-ヘプチル-β-D-グルコピラノシド；n-ヘプチルβ-D-チオグルコシド；n-ヘキシルβ-D-グルコピラノシド；ノナノイル-N-メチルグルカミド；n-ノイルβ-D-グルコピラノシド；オクタノイル-N-メチルグルカミド；n-オクチル-β-D-グルコピラノシド；オクチルβ-D-チオグルコピラノシド；リゾチーム、PEG-リン脂質、PEG-コレステロール、PEG-コレステロール誘導体、PEG-ビタミンA、PEG-ビタミンE、酢酸ビニルおよびビニルピロリドンのランダムコポリマー、陽イオン性ポリマー、陽イオン性バイオポリマー、陽イオン性多糖、陽イオン性セルロース、陽イオン性アルギネート、陽イオン性非ポリマー化合物、陽イオン性リン脂質、陽イオン性脂質、ポリメチルメタクリレート臭化トリメチルアンモニウム、スルホニウム化合物、ポリビニルピロリドン-2-ジメチルアミノエチルメタクリレート硫酸ジメチル、ヘキサデシル臭化トリメチルアンモニウム、ホスホニウム化合物、第4級アンモニウム化合物、ベンジル-ジ(2-クロロエチル)エチル臭化アンモニウム、ココナツ塩化トリメチルアンモニウム、ココナツ臭化トリメチルアンモニウム、ココナツ塩化メチルジヒドロキシエチルアンモニウム、ココナツ臭化メチルジヒドロキシエチルアンモニウム、塩化デシルトリエチルアンモニウム、塩化デシルジメチルヒドロキシエチルアンモニウム、塩化-臭化デシルジメチルヒドロキシエチルアンモニウム、塩化C12-15ジメチルヒドロキシエチルアンモニウム、塩化-臭化C12-15ジメチルヒドロキシエチルアンモニウム、ココナツ塩化ジメチルヒドロ���シエチルアンモニウム、ココナツ臭化ジメチルヒドロキシエチルアンモニウム、ミリスチルトリメチル硫酸アンモニウムメチル、塩化ラウリルジメチルベンジルアンモニウム、臭化ラウリルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ラウリルジメチル(エテノキシ)4アンモニウム、臭化ラウリルジメチル(エテノキシ)4アンモニウム、塩化N-アルキル(C12-18)ジメチルベンジルアンモニウム、塩化N-アルキル(C14-18)ジメチル-ベンジルアンモニウム、塩化N-テトラデシルジメチルベンジルアンモニウム一水和物、塩化ジメチルジデシルアンモニウム、塩化N-アルキル(C12-14)ジメチル1-ナフチルメチルアンモニウム、ハロゲン化トリメチルアンモニウム、アルキル-トリメチルアンモニウム塩、ジアルキル-ジメチルアンモニウム塩、塩化ラウリルトリメチルアンモニウム、エトキシル化されたアルキルアミドアルキルジアルキルアンモニウム塩、エトキシル化されたトリアルキルアンモニウム塩、ジアルキルベンゼンジアルキル塩化アンモニウム、塩化N-ジデシルジメチルアンモニウム、塩化N-テトラデシルジメチルベンジルアンモニウム一水和物、N-アルキル(C12-14)ジメチル1-ナフチルメチル塩化アンモニウム、塩化ドデシルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ジアルキルベンゼンアルキルアンモニウム、塩化ラウリルトリメチルアンモニウム、塩化アルキルベンジルメチルアンモニウム、臭化アルキルベンジルジメチルアンモニウム、臭化C12トリメチルアンモニウム、臭化C15トリメチルアンモニウム、臭化C17トリメチルアンモニウム、塩化ドデシルベンジルトリエチルアンモニウム、ポリ-塩化ジアリルジメチルアンモニウム(DADMAC)、塩化ジメチルアンモニウム、ハロゲン化アルキルジメチルアンモニウム、塩化トリセチルメチルアンモニウム、臭化デシルトリメチルアンモニウム、臭化ドデシルトリエチルアンモニウム、臭化テトラデシルトリメチルアンモニウム、塩化メチルトリオクチルアンモニウム、POLYQUAT 10(商標)、臭化テトラブチルアンモニウム、臭化ベンジルトリメチルアンモニウム、コリンエステル、塩化ベンザルコニウム、塩化ステアラルコニウム化合物、臭化セチルピリジニウム、塩化セチルピリジニウム、第4級ポリオキシエチルアルキルアミンのハロゲン化物塩、MIRAPOL(商標)、ALKAQUAT(商標)、アルキルピリジニウム塩；アミン、アミン塩、アミンオキシド、イミドアゾリニウム塩、プロトン化された第4級アクリルアミド、メチル化された第4級ポリマー、および陽イオン化グアールからなる群より選択される、請求項1〜10のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１２】
表面安定剤として、分子量約40,000ダルトン以下のポビドンポリマーを含有する、請求項1〜11のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１３】
1つまたは複数の非タクロリムス活性物質または非シロリムス活性物質を追加的に含有する、請求項1〜12のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１４】
タクロリムス粒子が約2μm未満、約1900nm未満、約1800nm未満、約1700nm未満、約1600nm未満、約1500nm未満、約1400nm未満、約1300nm未満、約1200nm未満、約1100nm未満、約1000nm未満、約900nm未満、約800nm未満、約700nm未満、約650nm未満、約600nm未満、約550nm未満、約500nm未満、約450nm未満、約400nm未満、約350nm未満、約300nm未満、約250nm未満、約200nm未満、約150nm未満、約100nm未満、約75nm未満および約50nm未満からなる群より選択される有効平均粒度を有するように、生体関連媒体中に再分散される、請求項1〜13のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１５】
生体関連媒体が、水、水性電解液、塩の水溶液、酸の水溶液、塩基の水溶液、およびそれらの組合せからなる群より選択される、請求項14記載の組成物。
【請求項１６】
投与後に哺乳類対象の血漿中で分析された場合に、タクロリムスのTmaxが、同用量で投与された非ナノ粒子のタクロリムスのTmaxを下回る、請求項1〜15のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１７】
以下の(a)〜(c)である、請求項16記載の組成物：
(a) Tmaxが、同用量で投与された非ナノ粒子のタクロリムス製剤により示されたTmaxの約90％以下、約80％以下、約70％以下、約60％以下、約50％以下、約30％以下、約25％以下、約20％以下、約15％以下、約10％以下、および約5％以下からなる群より選択される；
(b) 組成物が、絶食している対象への投与後、約6時間未満、約5時間未満、約4時間未満、約3時間未満、約2時間未満、約1時間未満、および約30分未満からなる群より選択されるTmaxを示す；または
(c) (a)および(b)の組み合わせである。
【請求項１８】
投与後に哺乳類対象の血漿中で分析された場合に、タクロリムスのCmaxが、同用量で投与された非ナノ粒子のタクロリムス製剤のCmaxよりも大きい、請求項1〜17のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１９】
Cmaxが、同用量で投与された非ナノ粒子のタクロリムス製剤により示されるCmaxを少なくとも約50％、少なくとも約100％、少なくとも約200％、少なくとも約300％、少なくとも約400％、少なくとも約500％、少なくとも約600％、少なくとも約700％、少なくとも約800％、少なくとも約900％、少なくとも約1000％、少なくとも約1100％、少なくとも約1200％、少なくとも約1300％、少なくとも約1400％、少なくとも約1500％、少なくとも約1600％、少なくとも約1700％、少なくとも約1800％、または少なくとも約1900％上回るCmaxからなる群より選択される、請求項18記載の組成物。
【請求項２０】
投与後の哺乳類対象の血漿中で分析された場合に、タクロリムスのAUCが、同用量で投与された非ナノ粒子のタクロリムス製剤のAUCを上回る、請求項1〜19のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２１】
AUCが、同じ用量で投与された非ナノ粒子の免疫抑制製剤により示されたAUCよりも、少なくとも約25％、少なくとも約50％、少なくとも約75％、少なくとも約100％、少なくとも約125％、少なくとも約150％、少なくとも約175％、少なくとも約200％、少なくとも約225％、少なくとも約250％、少なくとも約275％、少なくとも約300％、少なくとも約350％、少なくとも約400％、少なくとも約450％、少なくとも約500％、少なくとも約550％、少なくとも約600％、少なくとも約750％、少なくとも約700％、少なくとも約750％、少なくとも約800％、少なくとも約850％、少なくとも約900％、少なくとも約950％、少なくとも約1000％、少なくとも約1050％、少なくとも約1100％、少なくとも約1150％、または少なくとも約1200％からなる群より選択される比率で大きい、請求項20記載の組成物。
【請求項２２】
摂食時に投与された場合に、絶食状態と比べて、有意に異なる吸収レベルを生じない、請求項1〜21のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２３】
絶食状態に対して摂食状態で投与された場合に、タクロリムス組成物の吸収の差が、約100％未満、約90％未満、約80％未満、約70％未満、約60％未満、約50％未満、約40％未満、約30％未満、約25％未満、約20％未満、約15％未満、約10％未満、約5％未満および約3％未満からなる群より選択される、請求項22記載の組成物。
【請求項２４】
絶食状態のヒトへの組成物の投与が、摂食状態の対象への組成物の投与と生物学的に同等である、請求項1〜23のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２５】
医薬の製造のための、請求項1〜24のいずれか一項記載の組成物の使用。
【請求項２６】
医薬が、臓器拒絶反応の予防的処置、または乾癬もしくは他の免疫疾患の処置において有用である、請求項25記載の使用。
【請求項２７】
医薬が、長期放出のための皮下または筋肉内貯留物を形成する注射可能な薬学的組成物である、請求項25記載の使用。
【請求項２８】
タクロリムス粒子と、少なくとも1種の表面安定剤とを、約2000nm未満の有効平均粒度を有するタクロリムス粒子を提供するのに十分な時間および条件下で接触させる工程を含む、注射可能なナノ粒子タクロリムス組成物を製造する方法。
【請求項２９】
接触工程が、粉砕、湿式粉砕、均質化、沈降、または超臨界流体粒子作製技術を含む、請求項28記載の方法。
【請求項３０】
ナノ粒子のシロリムス組成物をナノ粒子のタクロリムス組成物に添加する工程を更に含む方法であって、該ナノ粒子のシロリムス組成物が約2000nm未満の有効平均粒度のシロリムス粒子および表面安定剤を含み、シロリムスの該表面安定剤がタクロリムスの表面安定剤と同一のまたは異なる安定剤であり得る、請求項28記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、少なくとも1種の免疫抑制性化合物を含む、注射可能なナノ粒子組成物に向けられる。例示的な態様において、本発明はタクロリムス、シロリムス、またはこれらの組み合わせなどのナノ粒子免疫抑制性化合物の注射可能な組成物を説明する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
A. 免疫抑制性化合物に関する背景
免疫抑制性化合物の例は、限定されるものではないがタクロリムスおよびシロリムスを含む。
【０００３】
1. タクロリムスに関する背景
タクロリムスまたはFK-506は、シクロスポリンよりも100倍より有効であると評価されるマクロライド系免疫抑制薬である。これは、ストレプトマイセスの単型種であるストレプトマイセス・ツクバエンシス(Streptomyces tsukubaensis)の発酵により生成される。米国特許第4,894,366号およびEPO公開第0184162号は、タクロリムスを開示し、これらは全体が参照として組入れられている。
【０００４】
タクロリムスは、商品名PROGRAF(登録商標)(Fujisawa USA, Inc.より入手可能)で販売され、一部の体液性免疫を抑制し、およびより大きい程度細胞-媒介型反応、例えば同種移植拒絶反応、遅延型過敏症、コラーゲン誘導関節炎、実験的アレルギー性脳脊髄炎、および移植片対宿主疾患を抑制する。タクロリムスは、宿主の生存を延長し、ならびに肝臓、腎臓、心臓、骨髄、小腸および膵臓、肺および気管支、皮膚、角膜、および四肢の動物移植モデルにおいて移植された移植片の生存を延長する。
【０００５】
実験的証拠は、タクロリムスは、細胞内タンパク質FKBP-12に結合することを示唆している。その後タクロリムス-FKBP-12、カルシウム、カルモジュリン、およびカルシニューリンの複合体が形成され、カルシニューリンのリン酸化酵素活性が阻害される。この作用は、活性化されたT-細胞の核因子(NF-AT)の脱リン酸化および転座を妨害し、核成分は、リンホカイン(例えばインターロイキン-2、γインターフェロン)形成のための遺伝子転写を開始すると考えられる。正味の結果は、T-リンパ球活性化の阻害(すなわち免疫抑制)である。
【０００６】
タクロリムスは、実験式C44H69NO12・H2Oおよび式量822.05を有する。タクロリムスは、白色結晶または結晶性粉末として出現し、水にほとんど溶けず、エタノールに溶け易く、メタノールおよびクロロホルムに極めて溶け易い。タクロリムスは、下記化学構造を有する：
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(The Merck Index, 12版, 9200 (Merck & Co., Inc., Rahway, NJ, 1996)参照)。
【０００７】
経口投与後の胃腸管からのタクロリムスの吸収は、不完全でありかつ変動する。タクロリムスの絶対生物学的利用能は、成人腎臓移植患者(N=26)において17±10％であり、成人肝臓移植患者(N=17)において22±6％であり、および健常志願者(N=16)において18±5％であった。
【０００８】
32名の健常志願者において行った単回投与試験は、1mgおよび5mgカプセル剤の生物学的同等性を確立した。別の32名の健常志願者における単回投与試験は、0.5mgおよび1mgカプセル剤の生物学的同等性を確立した。タクロリムス最高血中濃度(Cmax)および曲線下面積(AUC)は、単回経口投与量3mg、7mgおよび10mgを受け取った18名の絶食健常志願者において、用量比例様式で増加することが明らかであった。
【０００９】
18名の腎臓移植患者において、タクロリムス投与後10〜12時間に測定した谷（trough）濃度3〜30ng/mL(Cmin)は、AUCとよく相関していた(相関係数0.93)。濃度範囲10〜60ng/mLを上回る24名の肝臓移植患者において、相関係数は0.94であった。
【００１０】
食物の作用に関して、タクロリムス吸収の速度および程度は、絶食状態で最高であった。食物の存在および組成は、15名の健常志願者に投与した場合、タクロリムス吸収の速度および程度の両方を低下した。この作用は、高脂肪食(848kcal, 46％脂肪)で最も顕著であり：平均AUCおよびCmaxは、各々、37％および77％低下し；Tmaxは、5倍延長した。高炭水化物食(668kcal, 85％炭水化物)は、平均AUCおよび平均Cmaxを、各々、28％および65％低下した。
【００１１】
健常志願者(N=16)において、食事時間も、タクロリムスの生物学的利用能に影響を及ぼした。食事の直後に投与される場合、絶食状態と比べ、平均Cmaxは71％低下し、および平均AUCは39％低下した。食事の1.5時間後に投与される場合、絶食状態と比べ、平均Cmaxは63％低下し、および平均AUCは39％低下した。
【００１２】
11名の肝臓移植患者において、高脂肪(400kcal, 34％脂肪)朝食の15分後に投与されたタクロリムスは、絶食状態と比べ、低下したAUC(27±18％)およびCmax(50±19％)を生じた。
【００１３】
タクロリムスの血漿タンパク質結合は、約99％であり、5〜50ng/mLの範囲を超える濃度とは無関係である。タクロリムスは、アルブミンおよびα-1-酸性糖タンパク質と主に結合し、ならびに赤血球との高レベルの会合を有する。全血および血漿の間のタクロリムス分布は、ヘマトクリット値、血漿分離時の温度、薬物濃度、および血漿タンパク質濃度などを含む、いくつかの要因により決まる。米国での研究(U.S. study)において、全血濃度対血漿濃度の比は、平均35(12〜67の範囲)であった。
【００１４】
タクロリムスは、混合機能オキシダーゼ系、主にシトクロムP-450系(CYP3A)によって大量に代謝される。8つの実現可能な代謝産物の形成につながる代謝経路が提唱されている。脱メチル反応およびヒドロキシル化が、インビトロにおける生体内変化の主要な機序として同定されている。ヒト肝臓ミクロソームとのインキュベーションにおいて同定された大部分の代謝産物は、13-デメチルタクロリムスである。インビトロにおける研究において、31-デメチル代謝産物がタクロリムスと同一の活性を有することが報告されている。
【００１５】
タクロリムスのIV投与後の平均クリアランスは、健常ボランティア、成人の腎臓移植患者、および成人の肝臓移植患者において、それぞれ0.040、0.083、および0.053 L/hr/kgである。男性においては、投与された用量の1%未満が変化せずに尿に排泄される。
【００１６】
IV投与された放射標識タクロリムスの、6人の健常ボランティアに対する物質収支研究において、放射標識の平均回収率は77.8±12.7%であった。糞便排出は92.4±1.0%を占め、放射能に基づく排出半減期は48.1±15.9時間であり、排出半減期はタクロリムス濃度に基づく場合は43.5±11.6時間であった。放射標識の平均クリアランスは0.029±0.015 L/hr/kgであり、タクロリムスのクリアランスは0.029±0.009 L/hr/kgであった。経口投与した場合、放射標識の平均回収率は94.9±30.7%であった。糞便排出は92.6±30.7%を占め、尿排出は2.3±1.1%を占め、放射能に基づく排出半減期は31.9±10.5時間であり、排出半減期はタクロリムス濃度に基づく場合は48.4±12.3時間であった。放射標識の平均クリアランスは 0.226±0.116 L/hr/kgであり、タクロリムスのクリアランスは0.172±0.088 L/hr/kgであった。
【００１７】
経口PROGRAF(登録商標)カプセル剤を摂取できない患者において、療法は、PROGRAF(登録商標)注射により開始することができる。PROGRAF(登録商標)注射剤の使用を考慮する場合、アナフィラキシー反応が、CREMAPHOR(登録商標)などの、ヒマシ油誘導体を含有する注射可能なタクロリムスにより発生することは注目されるべきである。従ってPROGRAF(登録商標)注射剤は、HCO-60(ポリオキシル60硬化ヒマシ油)に過敏である患者には、禁忌である。PROGRAF(登録商標)の初回投与量は、移植後6時間以内に投与されなければならない。PROGRAF(登録商標)注射剤の推奨開始量は、連続IV点滴として0.03〜0.05mg/kg/日である。成人患者は、この用量範囲の下限の投与量を受け取らなければならない。副腎コルチコステロイド療法の併用が、移植後早期に推奨される。PROGRAF(登録商標)注射剤の連続静脈内(IV)点滴は、患者が、PROGRAF(登録商標)カプセル剤の経口投与を忍容できるようになるまでのみ継続されることとする。
【００１８】
PROGRAF(登録商標)注射剤は、使用前に、0.9％塩化ナトリウム注射剤または5％デキストロース注射剤で、濃度0.004mg/mL〜0.02mg/mLへ希釈されなければならない。希釈された点滴液は、ガラス製またはポリエチレン製容器に貯蔵され、24時間後には廃棄されなければならない。希釈された点滴液は、安定性の低下および可能性のあるフタル酸塩抽出のために、PVC容器内には貯蔵してはならない。より希釈液が利用される状況(例えば小児投与量など)において、チューブ上への著しい薬物吸着の可能性を最小とするために、更にPVC非含有チューブが使用されなければならない。非経口薬製品は、溶液および容器が許される場合はいつも、投与前に、粒状の物質および脱色について、目視検査されることとする。PROGRAF(登録商標)のアルカリ媒体中での化学的不安定性のために、PROGRAF(登録商標)注射剤は、pH9またはそれよりも高い溶液(例えば、ガンシクロビルまたはアシクロビル)と混合または同時点滴してはならない。
【００１９】
IV療法が必要であるならば、IVから経口タクロリムスへの転換は、経口療法が忍容し得るようになってできる限り早い時期が推奨される。IV点滴を受け取る患者において、経口療法の初回量は、IV点滴の中断後、8〜12時間で与えられなければならない。タクロリムスカプセル剤の推奨される経口開始量では、0.10〜0.15mg/kg/日が12時間毎に1日に2回に分割して投与される。肝臓移植患者において、グレープフルーツジュースとの同時摂取は、タクロリムス血中谷濃度を上昇することが報告されている。用量設定は、拒絶反応および忍容性の臨床評価に基づき、タイトレーションされる。
【００２０】
2. シロリムスに関する背景
シロリムスは、ストレプトミセス・ハイグロスコピクス(Streptomyces hygroscopicus)により産生される免疫抑制性の大球性ラクトンである。シロリムス(ラパマイシンとしても公知)の化学名は、(3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-ヘキサデカヒドロ-9,27-ジヒドロキシ-3-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-ヒドロキシ-3-メトキシシクロヘキシル]-l-メチルエチル]-10,21-ジメトキシ-6,8,12,14,20,26-ヘキサメチル-23,27-エポキシ-3H-ピリド[2,1-c][1,4]オキサアザシクロヘントリアコンチン(oxaazacyclohentriacontine)-1,5,11,28,29 (4H,6H,31H)-ペントンである。その分子式はC51H79NO13であり、その分子量は914.2である。シロリムスの構造式を以下に示す。
2008533165.tif 000004
【００２１】
シロリムスは白色からオフホワイトの粉末であり、水に不溶性であるが、ベンジルアルコール、クロロホルム、アセトン、およびアセトニトリルには溶けやすい。シロリムスは現在、Wyeth-Ayerst Inc. (Madison, N. J.)によりRapamune(登録商標)という商品名で販売される経口剤形として入手可能である。Rapamune(登録商標)は、1 mg/mLのシロリムスを含有する経口液剤としての投与に利用可能である。Rapamuneはまた、1 mgのシロリムスを含有する白色の三角形の錠剤として、および2 mgのシロリムスを含有する黄色からベージュの三角形の錠剤として入手可能である。
【００２２】
Rapamune(登録商標)経口液剤中の不活性成分は、Phosal 50 PG(登録商標)(ホスファチジルコリン、プロピレングリコール、モノグリセリドおよびジグリセリド、エタノール、大豆脂肪酸、ならびにアスコルビン酸パルミテート)、およびポリソルベート80である。Rapamune経口液剤は、1.5%〜2.5%のエタノールを含有する。Rapamune(登録商標)錠剤中の不活性成分は、ショ糖、乳糖、ポリエチレングリコール8000、硫酸カルシウム、微結晶性セルロース、薬学的グレーズ(glaze)、タルク、二酸化チタン、ステアリン酸マグネシウム、ポビドン、ポロキサマー188、ポリエチレングリコール20,000、グリセリルモノオレアート、カルナウバ蝋、および他の成分を含む。2mgの用量強度はまた、黄色酸化鉄10および褐色酸化鉄70を含有する。
【００２３】
シロリムスは、他の免疫抑制剤のものとは異なる機序による、抗原性の、およびサイトカイン(インターロイキン[IL]-2、IL-4、およびIL-15)の刺激に応答して起こるTリンパ球の活性化および増殖を阻害する。シロリムスはまた、抗体産生も阻害する。細胞において、シロリムスはイムノフィリン、FK結合タンパク質12(FKBP-12)に結合し、免疫抑制性複合体を生じさせる。シロリムス:FKBP-12複合体は、カルシニューリン活性における効果を有さない。この複合体は、重要な調節キナーゼである、シロリムスの哺乳類標的(mTOR)に結合して、この活性化を阻害する。この阻害は、サイトカイン駆動性T細胞増殖を抑制し、細胞周期のG1期からS期への進行を阻害する。
【００２４】
実験モデルにおける研究は、シロリムスがマウス、ラット、ブタ、および/または霊長類において、同種移植片(腎臓、心臓、皮膚、島、小腸、膵十二指腸、および骨髄)の生存を延長させることを示す。シロリムスは、ラットにおいて心臓および腎臓の同種移植片の急性拒絶反応を逆行させ、予め感作させたラットにおける移植片の生存を延長させる。いくつかの研究においては、シロリムスの免疫抑制効果は治療中止後最大6ヶ月間持続する。この耐性効果は同種抗原特異的である。
【００２５】
自己免疫疾患の齧歯類モデルにおいて、シロリムスは、全身性エリテマトーデス、コラーゲン誘導関節炎、自己免疫性I型糖尿病、自己免疫性心筋炎、実験的アレルギー性脳脊髄炎、移植片対宿主疾患、および自己免疫性ブドウ膜網膜炎に関連する免疫介在性事象を抑制する。
【００２６】
シロリムスの薬物動態活性が、健常な対象、小児透析患者、肝臓障害(hepatically-impaired)患者、および腎臓移植患者の経口投与後に決定されている。シロリムスは、Rapamune(登録商標)経口液剤の投与後速やかに吸収され、ピーク濃度(Tmax)までの平均時間は健常な対象では単回投与後約1時間であり、腎臓移植レシピエントでは複数回の経口投薬後約2時間である。シロリムスの全身の消化吸収率は、Rapamune(登録商標)経口液剤の投与後、約14%であると推定された。錠剤投与後の、シロリムスの平均の生物学的利用率は、経口液剤と比較して約27%高い。シロリムス経口錠剤は経口液剤に対して生物学的等価でなないが、臨床的同等性は2mg用量レベルで実証されている。安定な腎臓移植患者に対するRapamune(登録商標)経口液剤投与後のシロリムス濃度は、3〜12mg/m2の間で用量に比例している。
【００２７】
B. ナノ粒子の活性物質組成物に関する背景
ナノ粒子活性剤組成物は、最初に米国特許第5,145,684号(「684号特許」)に開示され、これはそれらの表面上に吸着されたまたは表面に会合された架橋していない表面安定剤を有する、難溶性の治療用または診断用物質の粒子を含む。684号特許は、そのようなナノ粒子活性剤組成物を作製する方法も開示しているが、ナノ粒子型のタクロリムスを含有する組成物は開示していない。ナノ粒子組成物の製造法は、例えば米国特許第5,518,187号および第5,862,999号、これらは両方とも「Method of Grinding Pharmaceutical Substances」；米国特許第5,718,388号、「Continuous Method of Grinding Pharmaceutical Substances」；および、米国特許第5,510,118号、「Process of Preparing Therapeutic Compositions Containing Nanoparticles」に開示されている。
【００２８】
以下においても、ナノ粒子組成物が開示されている：例えば米国特許第5,298,262号、「Use of Ionic Cloud Point Modifiers to Prevent Particle Aggregation During Sterilization」；米国特許第5,302,401号、「Method to Reduce Particle Size Growth During Lyophilization」；米国特許第5,318,767号、「X-Ray Contrast Compositions Useful in Medical Imaging」；米国特許第5,326,552号、「Novel Formulation For Nanoparticulate X-Ray Blood Pool Contrast Agents Using High Molecular Weight Non-ionic Surfactants」；米国特許第5,328,404号、「Method of X-Ray Imaging Using Iodinated Aromatic Propanedioates」；米国特許第5,336,507号、「Use of Charged Phospholipids to Reduce Nanoparticle Aggregation」；米国特許第5,340,564号、「Formulations Comprising Olin 10-G to Prevent Particle Aggregation and Increase Stability」；米国特許第5,346,702号、「Use of Non-Ionic Cloud Point Modifiers to Minimize Nanoparticulate Aggregation During Sterilization」；米国特許第5,349,957号、「Preparation and Magnetic Properties of Very Small Magnetic-Dextran Particles」；米国特許第5,352,459号、「Use of Purified Surface Modifiers to Prevent Particle Aggregation During Sterilization」；米国特許第5,399,363号および第5,494,683号、両方とも「Surface Modified Anticancer Nanoparticles」；米国特許第5,401,492号、「Water Insoluble Non-Magnetic Manganese Particles as Magnetic Resonance Enhancement Agents」；米国特許第5,429,824号、「Use of Tyloxapol as a Nanoparticulate Stabilizer」；米国特許第5,447,710号、「Method for Making Nanoparticulate X-Ray Blood Pool Contrast Agents Using High Molecular Weight Non-ionic Surfactants」；米国特許第5,451,393号、「X-Ray Contrast Compositions Useful in Medical Imaging」；米国特許第5,466,440号、「Formulations of Oral Gastrointestinal Diagnostic X-Ray Contrast Agents in Combination with Pharmaceutically Acceptable Clays」；米国特許第5,470,583号、「Method of Preparing Nanoparticle Compositions Containing Charged Phospholipids to Reduce Aggregation」；米国特許第5,472,683号、「Nanoparticulate Diagnostic Mixed Carbamic Anhydrides as X-Ray Contrast Agents for Blood Pool and Lymphatic System Imaging」；米国特許第5,500,204号、「Nanoparticulate Diagnostic Dimers as X-Ray Contrast Agents for Blood Pool and Lymphatic System Imaging」；米国特許第5,518,738号、「Nanoparticulate NSAID Formulations」；米国特許第5,521,218号、「Nanoparticulate Iododipamide Derivatives for Use as X-Ray Contrast Agents」；米国特許第5,525,328号、「Nanoparticulate Diagnostic Diatrizoxy Ester X-Ray Contrast Agents for Blood Pool and Lymphatic System Imaging」；米国特許第5,543,133号、「Process of Preparing X-Ray Contrast Compositions Containing Nanoparticles」；米国特許第5,552,160号、「Surface Modified NSAID Nanoparticles」；米国特許第5,560,931号、「Formulations of Compounds as Nanoparticulate Dispersions in Digestible Oils or Fatty Acids」；米国特許第5,565,188号、「Polyalkylene Block Copolymers as Surface Modifiers for Nanoparticles」；米国特許第5,569,448号、「Sulfated Non-ionic Block Copolymer Surfactant as Stabilizer Coatings for Nanoparticle Compositions」；米国特許第5,571,536号、「Formulations of Compounds as Nanoparticulate Dispersions in Digestible Oils or Fatty Acids」；米国特許第5,573,749号、「Nanoparticulate Diagnostic Mixed Carboxylic Anydrides as X-Ray Contrast Agents for Blood Pool and Lymphatic System Imaging」；米国特許第5,573,750号、「Diagnostic Imaging X-Ray Contrast Agents」；米国特許第5,573,783号、「Redispersible Nanoparticulate Film Matrices With Protective Overcoats」；米国特許第5,580,579号、「Site-specific Adhesion Within the GI Tract Using Nanoparticles Stabilized by High Molecular Weight, Linear Poly(ethylene Oxide) Polymers」；米国特許第5,585,108号、「Formulations of Oral Gastrointestinal Therapeutic Agents in Combination with Pharmaceutically Acceptable Clays」；米国特許第5,587,143号、「Butylene Oxide-Ethylene Oxide Block Copolymers Surfactants as Stabilizer Coatings for Nanoparticulate Compositions」；米国特許第5,591,456号、「Milled Naproxen with Hydroxypropyl Cellulose as Dispersion Stabilizer」；米国特許第5,593,657号、「Novel Barium Salt Formulations Stabilized by Non-ionic and Anionic Stabilizers」；米国特許第5,622,938号、「Sugar Based Surfactant for Nanocrystals」；米国特許第5,628,981号、「Improved Formulations of Oral Gastrointestinal Diagnostic X-Ray Contrast Agents and Oral Gastrointestinal Therapeutic Agents」；米国特許第5,643,552号、「Nanoparticulate Diagnostic Mixed Carbonic Anhydrides as X-Ray Contrast Agents for Blood Pool and Lymphatic System Imaging」；米国特許第5,718,388号、「Continuous Method of Grinding Pharmaceutical Substances」；米国特許第5,718,919号、「Nanoparticles Containing the R(-)Enantiomer of Ibuprofen」；米国特許第5,747,001号、「Aerosols Containing Beclomethasone Nanoparticle Dispersions」；米国特許第5,834,025号、「Reduction of Intravenously Administered Nanoparticulate Formulation Induced Adverse Physiological Reactions」；米国特許第6,045,829号、「Nanocrystalline Formulations of Human Immunodeficiency Virus (HIV) Protease Inhibitors Using Cellulosic Surface Stabilizers」；米国特許第6,068,858号、「Methods of Making Nanocrystalline Formulations of Human Immunodeficiency Virus (HIV) Protease Inhibitors Using Cellulosic Surface Stabilizers」；米国特許第6,153,225号、「Injectable Formulations of Nanoparticulate Naproxen」；米国特許第6,165,506号、「New Solid Dose Form of Nanoparticulate Naproxen」；米国特許第6,221,400号、「Methods of Treating Mammals Using Nanocrystalline Formulations of Human Immunodeficiency Virus (HIV) Protease Inhibitors」；米国特許第6,264,922号、「Nebulized Aerosols Containing Nanoparticle Dispersions」；米国特許第6,267,989号、「Methods for Preventing Crystal Growth and Particle Aggregation in Nanoparticle Compositions」；米国特許第6,270,806号、「Use of PEG-Derivatized Lipids as Surface Stabilizers for Nanoparticulate Compositions」；米国特許第6,316,029号、「Rapidly Disintegrating Solid Oral Dosage Form」；米国特許第6,375,986号、「Solid Dose Nanoparticulate Compositions Comprising a Synergistic Combination of a Polymeric Surface Stabilizer and Dioctyl Sodium Sulfosuccinate」；米国特許第6,428,814号、「Bioadhesive Nanoparticulate Compositions Having Cationic Surface Stabilizers」；米国特許第6,431,478号、「Small Scale Mill」；米国特許第6,432,381号、「Methods for Targeting Drug Delivery to the Upper and/or Lower Gastrointestinal Tract」；米国特許第6,582,285号、「Apparatus for Sanitary Wet Milling」；米国特許第6,592,903号、「Nanoparticulate Dispersions Comprising a Synergistic Combination of a Polymeric Surface Stabilizer and Dioctyl Sodium Sulfosuccinate」；米国特許第6,656,504号、「Nanoparticulate Compositions Comprising Amorphous Cyclosporine」；米国特許第6,742,734号、「System and Method for Milling Materials」；米国特許第6,745,962号、「Small Scale Mill and Method Thereof」；米国特許第6,811,767号、「Liquid droplet aerosols of nanoparticulate drugs」；米国特許第6,908,626号、「Compositions having a combination of immediate release and controlled release characteristics」；米国特許第6,969,529号、「Nanoparticulate compositions comprising copolymers of vinyl pyrrolidone and vinyl acetate as surface stabilizers」；米国特許第6,976,647号、「System and Method for Milling Materials」；および米国特許第6,991,191号、「Method of Using a Small Scale Mill」；これらは全て、具体的に参照により本明細書に組入れられている。加えて、2002年1月31日に公開された米国特許出願第20020012675A1号、「Controlled Release Nanoparticulate Compositions���はナノ粒子組成物を説明しており、これは具体的に参照により本明細書に組入れられている。これらの参考文献はいずれも、ナノ粒子タクロリムス組成物またはナノ粒子シロリムス組成物を記載していない。
【００２９】
米国特許出願20030054042号、「Stabilization of chemical compounds using nanoparticulate formulations」は、注射可能製剤を含むナノ粒子ラパマイシン製剤を説明している。米国特許第5,989,591号、「Rapamycin formulations for oral administration」は、錠剤剤形での経口投与のための、ナノ粒子ラパマイシン組成物を説明している。
【００３０】
非晶質小型粒子組成物は、例えば米国特許第4,783,484号、「Particulate Composition and Use Thereof as Antimicrobial Agent」；米国特許第4,826,689号、「Method for Making Uniformly Sized Particles from Water-Insoluble Organic Compounds」；米国特許第4,997,454号、「Method for Making Uniformly-Sized Particles From Insoluble Compounds」；米国特許第5,741,522号、「Ultrasmall, Non-aggregated Porous Particles of Uniform Size for Entrapping Gas Bubbles Within and Methods」；および、米国特許第5,776,496号、「Ultrasmall Porous Particles for Enhancing Ultrasound Back Scatter」に開示され、これらは全て具体的に参照により本明細書に組入れられている。
【００３１】
増大された溶解度特性を有する、従って患者への投与時に増大された生物学的利用能、更には低下した摂食/絶食時の吸収変動性を提供する、タクロリムスおよびシロリムスなどの免疫抑制剤の組成物が必要とされている。本発明は、タクロリムス、シロリムス、およびこれらの混合物の注射可能なナノ粒子製剤を含む方法および組成物を提供することにより、これらの必要性を満足するものである。このような注射可能なナノ粒子製剤は、ポリオキシル60硬化ヒマシ油(HCO-60)などの可溶化剤や、ポリソルベート80などのポリソルベートの必要性を排除する。
【発明の開示】
【００３２】
発明の概要
本発明は、タクロリムス、シロリムス、またはこれらの組み合わせなどの免疫抑制性化合物を含む、注射可能なナノ粒子製剤に向けられている。ナノ粒子製剤は、タクロリムス、シロリムス、またはこれらの組み合わせの粒度を変更することにより、所望の速度で連続的に注射部位から放出されることを可能にする。ある態様では、本製剤は皮下にまたは筋肉内に投与されて薬物の長期放出を提供する貯留物を形成し得る、注射可能な組成物である。そのような製剤は、より良好な薬理効果および患者の服薬遵守を保証する。
【００３３】
本発明はまた、ナノ粒子のタクロリムス、ナノ粒子のシロリムス、またはこれらの組み合わせを含み、このタクロリムスおよび/またはシロリムスが約2000nmの有効平均粒度を有する、注射可能な免疫抑制性製剤を提供する。更に、本組成物は、タクロリムス粒子および/またはシロリムス粒子の表面に吸着されたまたは結合した少なくとも1種の表面安定剤を含む。本発明の他の態様において、ナノ粒子のタクロリムス粒子またはシロリムス粒子の有効平均粒度は、約1900nm未満、約1800nm未満、約1700nm未満、約1600nm未満、約1500nm未満、約1400nm未満、約1300nm未満、約1200nm未満、約1250nm未満、約1000nm未満、約900nm未満、約800nm未満、約700nm未満、約600nm未満、約550nm未満、約500nm未満、約450nm未満、約400nm未満、約350nm未満、約300nm未満、約250nm未満、約200nm未満、約150nm未満、約100nm未満、約75nm未満、または約50nm未満である。
【００３４】
本発明の他の局面は、可溶化剤としてポリオキシル60硬化ヒマシ油(HCO-60)および/またはポリソルベート80を使用する必要性を解消する、注射可能なナノ粒子のタクロリムス、ナノ粒子のシロリムス、またはタクロリムス/シロリムス製剤の組み合わせを提供する。これは、従来の非ナノ粒子の注射可能なタクロリムス製剤またはシロリムス製剤が可溶化剤としてポリオキシル60硬化ヒマシ油またはポリソルベート80を含むため、有益である。このような可溶化剤の存在は、患者のアナフィラキシーショック(すなわち重篤なアレルギー反応)および死亡につながり得る。
【００３５】
本発明はまた、投与時に薬物がゆっくりと長期にわたって溶解する薬物貯留物を形成させる、注射量で高濃度のタクロリムス、シロリムス、またはこれらの組み合わせを含む製剤を提供する。
【００３６】
本発明のもう1つの局面では、タクロリムス、シロリムス、またはこれらの組み合わせを含む注射可能なナノ粒子の免疫抑制性製剤を調製する方法が提供される。本方法には下記の工程が含まれる：(1)好ましい免疫抑制性化合物を液体分散媒中に分散する工程；および、(2)免疫抑制性化合物の粒度を、望ましい有効平均粒度、例えば約2000nm未満へ機械的に低下させる工程。1種または複数の表面安定剤を、免疫抑制性化合物の粒度低下の前、途中、または後に組成物に添加することができる。1つの態様において、表面安定剤は、分子量約40,000ダルトン未満のポビドンポリマーである。好ましくは、液体分散媒は、粒度低下プロセスの間、生理的pH、例えば約3〜約8の範囲内に維持される。
【００３７】
本発明はまた、臓器拒絶反応予防のため、タクロリムス、シロリムス、またはこれらの組み合わせを含む本発明の注射可能なナノ粒子製剤を使用する、ヒトを含む哺乳類の処置法にも向けられる。例えば、本組成物は、同種肝臓または腎臓移植を受けた患者において有用であり、および乾癬または他の免疫疾患の処置に有用である。このような方法は、タクロリムス、シロリムス、またはこれらの組み合わせの注射可能なナノ粒子製剤の治療的有効量を対象に皮下にまたは筋肉内に投与して、その中に薬物の長期投与のための貯留物を形成させる工程を含む。
【００３８】
本発明の注射可能なナノ粒子のタクロリムス製剤またはシロリムス製剤は、無毒の生理的に許容できる液体担体、pH調節剤、または保存剤のような、1つまたは複数の薬理学的に許容できる賦形剤を任意に含むことができる。
【００３９】
前述の一般的説明および以下の詳細な説明はどちらも、例証および説明であり、特許請求された本発明の更なる説明を提供することが意図されている。他の目的、利点、および新規性は、当業者には、本発明の以下の詳細な説明から容易に明らかであろう。
【００４０】
発明の詳細な説明
A. 緒言
本発明は、ナノ粒子のタクロリムス、ナノ粒子のシロリムス、またはこれらの組み合わせなどの注射可能な製剤などの、注射可能なナノ粒子の免疫抑制性製剤を含む組成物に向けられている。本発明に用いられる免疫抑制剤は、任意の水に溶けにくい免疫抑制剤であることができる。本発明のある態様において、本免疫抑制剤はタクロリムス、シロリムス、またはこれらの組み合わせである。ナノ粒子免疫抑制剤は、約2000nm未満の有効平均粒度を有する。
【００４１】
タクロリムスまたはシロリムスの従来の非ナノ粒子または可溶性形態と比較した、ナノ粒子のタクロリムス、ナノ粒子のシロリムス、またはこれらの組み合わせを含む本発明の製剤の利点は、非限定的に、以下を含む：(1)水への溶解度の増大；(2)生物学的利用能の増大；(3)生物学的利用能の増大による、より小さな剤形サイズ；(4)生物学的利用能の増大による、より少ない治療量；(5)より少ない投与による望ましくない副作用リスクの低下；(6)向上した患者の便宜および服薬遵守；ならびに、(7)臓器移植手術後の臓器拒絶反応のより有効な予防、または乾癬または他の免疫疾患のより有効な処置。注射可能なタクロリムスまたはシロリムスの従来の形態を超える、本発明のタクロリムス、シロリムス、またはこれらの組み合わせを含む注射可能なナノ粒子製剤のさらなる利点は、ポリオキシル60硬化ヒマシ油(HCO-60)またはポリソルベート80などのポリソルベートの可溶化剤としての使用の必要性の排除である。
【００４２】
本発明は、集合的に担体と称される、1つまたは複数の無毒の生理的に許容できる担体、アジュバント、またはビヒクルと一緒にした、タクロリムス、シロリムス、およびそれらの組み合わせを含むナノ粒子組成物も含む。これらの組成物は、非経口注射(例えば、静脈内、筋肉内、または皮下)、固形、液体またはエアロゾル形での経口投与、経膣、鼻腔内、直腸内、眼内、局所的(散剤、軟膏剤または液滴剤)、口腔内、槽内、腹腔内、または外用投与などのために製剤化することができる。
【００４３】
B. 定義
本発明は、以下におよび本出願を通して示されるような、いくつかの定義を用い、本明細書において、説明されている。
【００４４】
本明細書において使用される「約2000nm未満の有効平均粒度」という用語は、タクロリムス、シロリムス、またはタクロリムスとシロリムスの粒子の少なくとも50％が、重量あたり、例えば沈降場流動分画、光子相関分光、光散乱、ディスク遠心および他の当業者に公知の技術により測定された場合に、約2000nm未満のサイズを有することを意味する。
【００４５】
本明細書において使用される「約」は、当業者により理解されるものであり、およびそれが使用される状況に応じてある程度変動するであろう。この用語が使用される状況が当業者に明確に示されずにこの用語が使用される場合、「約」は、特定の用語の±10％までを意味するであろう。
【００４６】
安定なタクロリムスまたはシロリムス粒子に関して本明細書において使用される「安定な」という用語は、以下のパラメータの1つまたは複数を暗示するが、これらに限定されるものではない：(1)タクロリムスまたはシロリムス粒子が、粒子間引力に起因し認知可能に凝集沈殿または凝集せず、経時的に粒度を著しく増大すること；(2)タクロリムスまたはシロリムス粒子の物理構造が、例えば非晶質相から結晶相への転換により、経時的に変更されないこと；(3)タクロリムスまたはシロリムス粒子が化学的に安定していること；ならびに/または、(4)タクロリムスおよび/またはシロリムスに、本発明のナノ粒子の調製において、タクロリムスまたはシロリムスの融点またはそれを上回る加熱工程が供されること。
【００４７】
「従来の」または「非ナノ粒子の」タクロリムス、シロリムス、またはそれらの組み合わせという用語は、可溶化されたまたは約2000nmよりも大きい有効平均粒度を有する活性物質を意味するものである。本明細書に定義されたナノ粒子の活性物質は、約2000nm未満の有効平均粒度を有する。
【００４８】
本明細書において使用される「水に難溶性の薬物」という語句は、約30mg/ml未満の、約20mg/ml未満の、約10mg/ml未満の、または約1mg/ml未満の水への溶解度を有する薬物を意味する。
【００４９】
本明細書において使用される「治療的有効量」という語句は、そのような治療を必要とするかなりの数の対象において、そのために薬物が投与される、特定の薬理学的反応を提供する薬用量を意味するものである。特定の場合に特定の対象へ投与される薬物の「治療的有効量」は、例えそのような用量が当業者により「治療的有効量」とみなされたとしても、本明細書に説明された状態/疾患の治療においては常に有効ではないことは強調されるべきである。
【００５０】
本明細書において使用される「粒子」という用語は、それらのサイズ、形状または形態に関わりなく、個別の粒子、ペレット、ビーズまたは顆粒の存在により特徴付けられる物質の状態を意味する。本明細書において使用される「多成分」という用語は、それらのサイズ、形状または形態に関わりなく、複数の個別のまたは凝集した粒子、ペレット、ビーズ、顆粒またはそれらの混合物を意味する。
【００５１】
C. ナノ粒子免疫抑制組成物の特徴
本発明のナノ粒子の免疫抑制組成物の多くの増強された薬理学的特性が存在する。
【００５２】
1. 増大した生物学的利用能
タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物を含む本発明の製剤は、先行する従来のタクロリムスまたはシロリムス製剤と比べて、同じタクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物の同じ投与量において、増大した生物学的利用能を示し、より少ない投与量を必要とする。
【００５３】
非生物学的同等性は、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物のナノ粒子剤形が著しく大きい薬物吸収を示すことを意味するので、重要である。かつ、従来の微晶質剤形と生物学的に同等であるナノ粒子剤形に関して、ナノ粒子剤形は、著しく少ない薬物を含有するであろう。従って、ナノ粒子剤形は、この薬物の生物学的利用能を著しく増加する。
【００５４】
更に、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物を含むナノ粒子剤形は、従来の微晶質剤形(例えばPROGRAF(登録商標))で認められるものと同じ薬理学的作用を得るために必要な薬物が、より少ない。従って、ナノ粒子剤形は、従来の微晶質剤形と比べ、増加した生物学的利用能を有する。
【００５５】
2. 組成物を摂取する対象の摂食または絶食状態により影響されない本発明のタクロリムスおよび/またはシロリムス組成物の薬物動態プロファイル
本発明の組成物は、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物を包含するが、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物の薬物動態プロファイルは、組成物を摂取する対象の摂食または絶食状態により実質的に影響されない。このことは、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物を含むナノ粒子組成物が絶食状態に対して摂食状態で投与される場合、吸収された薬物量および薬物吸収率において認知可能な差異がほとんどまたは全く存在しないことを意味する。
【００５６】
対象が、食品と一緒にまたは一緒でなく投与量を摂取することを確実にする必要がないので、食品の作用を実質的に排除する剤形の恩恵は、対象の便宜向上を含み、これにより対象の服薬遵守が向上する。タクロリムスまたはシロリムスの対象の服薬遵守不良により、薬物が処方される医学的状態の増加が認められる−例えば患者は臓器拒絶反応に冒される、または乾癬もしくはその他免疫疾患について治療されない可能性があるので、このことは重大である。
【００５７】
本発明は好ましくは、哺乳類対象へ投与される場合に、望ましい薬物動態プロファイルを有する、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物を含む組成物も提供する。タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物を含む組成物の望ましい薬物動態プロファイルは、好ましくは以下を含むが、これらに限定されるものではない：(1)投与後哺乳類対象の血漿中で分析された場合、好ましくは、同用量で投与された非ナノ粒子のタクロリムスまたはシロリムス製剤のCmaxよりも大きい、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物のCmax；および/または、(2)投与後哺乳類対象の血漿中で分析された場合、好ましくは、同用量で投与された非ナノ粒子のタクロリムスまたはシロリムス製剤のAUCよりも大きい、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物のAUC；および/または、(3)投与後哺乳類対象の血漿中で分析された場合、好ましくは、同用量で投与された非ナノ粒子のタクロリムスまたはシロリムス製剤のTmax未満である、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物のTmax。本明細書において使用される望ましい薬物動態プロファイルは、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物の初回投与量の後に測定される薬物動態プロファイルである。
【００５８】
ひとつの態様において、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物を含む組成物は、同用量で投与された非ナノ粒子のタクロリムスまたはシロリムス製剤との比較薬物動態試験において、非ナノ粒子のタクロリムスまたはシロリムス製剤により示されたTmaxの約90％以下、約80％以下、約70％以下、約60％以下、約50％以下、約30％以下、約25％以下、約20％以下、約15％以下、約10％以下、または約5％以下のTmaxを示す。
【００５９】
別の態様において、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物を含む本発明の組成物は、同用量で投与された非ナノ粒子のタクロリムスまたはシロリムス製剤との比較薬物動態試験において、非ナノ粒子のタクロリムスまたはシロリムス製剤により示されるCmaxを、少なくとも約50％、少なくとも約100％、少なくとも約200％、少なくとも約300％、少なくとも約400％、少なくとも約500％、少なくとも約600％、少なくとも約700％、少なくとも約800％、少なくとも約900％、少なくとも約1000％、少なくとも約1100％、少なくとも約1200％、少なくとも約1300％、少なくとも約1400％、少なくとも約1500％、少なくとも約1600％、少なくとも約1700％、少なくとも約1800％、または少なくとも約1900％上回るCmaxを示す。
【００６０】
更に別の態様において、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物を含む本発明の組成物は、同用量で投与された非ナノ粒子のタクロリムスまたはシロリムス製剤との比較薬物動態試験において、非ナノ粒子のタクロリムスまたはシロリムス製剤により示されるAUCを、少なくとも約25％、少なくとも約50％、少なくとも約75％、少なくとも約100％、少なくとも約125％、少なくとも約150％、少なくとも約175％、少なくとも約200％、少なくとも約225％、少なくとも約250％、少なくとも約275％、少なくとも約300％、少なくとも約350％、少なくとも約400％、少なくとも約450％、少なくとも約500％、少なくとも約550％、少なくとも約600％、少なくとも約750％、少なくとも約700％、少なくとも約750％、少なくとも約800％、少なくとも約850％、少なくとも約900％、少なくとも約950％、少なくとも約1000％、少なくとも約1050％、少なくとも約1100％、少なくとも約1150％、または少なくとも約1200％上回るAUCを示す。
【００６１】
3. 絶食状態に対して摂食状態で投与された本発明の組成物を含む免疫抑制化合物の生物学的同等性
本発明は、絶食状態の対象への組成物の投与が、摂食状態の対象への組成物の投与と生物学的に同等であるナノ粒子タクロリムス、ナノ粒子シロリムス、またはそれらの混合物を含有する組成物も包含している。絶食状態に対して摂食状態で投与されたナノ粒子タクロリムス、ナノ粒子シロリムス、またはそれらの混合物を含有する組成物の吸収の差は、約35％未満、約30％未満、約25％未満、約20％未満、約15％未満、約10％未満、約5％未満または約3％未満が好ましい。
【００６２】
本発明のひとつの態様において、本発明は、ナノ粒子タクロリムス、ナノ粒子シロリムス、またはそれらの混合物を含有する組成物を包含し、ここでこの組成物の絶食状態の対象への投与は、この組成物の摂食状態の対象への投与と、特に米国食品医薬品局および対応する欧州規制機関(EMEA)によりもたらされたCmaxおよびAUCガイドラインにより規定されたように、生物学的に同等である。米国FDAガイドラインの下で、AUCおよびCmaxに関する90％信頼区間(CI)は、0.80〜1.25である場合(Tmax測定値は、規制目的での生物学的同等性には関連しない)、二つの製品または方法は生物学的に同等である。欧州EMEAガイドラインに準拠し、二つの化合物または投与条件の間の生物学的同等性を示すためには、AUCの90％CIは0.80〜1.25でなければならず、およびCmaxの90％CIは0.70〜1.43でなければならない。
【００６３】
4. 本発明の免疫抑制組成物の溶解プロファイル
タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物を含む本発明の組成物は、予想外の劇的溶解プロファイルを有する。より早い溶解は一般に、より早い作用開始およびより大きい生物学的利用能につながるので、投与された活性物質の即時溶解が好ましい。タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物を含むの溶解プロファイルおよび生物学的利用能を改善するために、100％に近いレベルに到達することができるように、薬物の溶解を増加することは有用である。
【００６４】
タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物を含む本発明の組成物は好ましくは、約5分以内に、組成物の少なくとも約20％が溶解される溶解プロファイルを有する。別の本発明の態様において、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物を含む組成物の少なくとも約30％または少なくとも約40％は、約5分以内に溶解される。更に別の本発明の態様において、好ましくは、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物を含む組成物の少なくとも約40％、少なくとも約50％、少なくとも約60％、少なくとも約70％、または少なくとも約80％が、約10分以内に溶解される。最終的に本発明の別の態様において、好ましくは、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物を含む組成物の少なくとも約70％、少なくとも約80％、少なくとも約90％、または少なくとも約100％が、約20分以内に溶解される。
【００６５】
溶解は、差示的な媒体中で測定されることが好ましい。このような溶解媒体は、胃液中中で、非常に異なる溶解プロファイルを有する二つの製品に関して、二つの非常に異なる溶解曲線を生じるであろう、すなわち、溶解媒体が組成物のインビボ溶解を予測する。溶解媒体の例は、界面活性剤ラウリル硫酸ナトリウムを0.025M含有する水性媒体である。溶解された量の決定は、分光光度法により行うことができる。回転ブレード法(欧州薬局方)を使用し、溶解を測定することができる。
【００６６】
5. 生体関連媒体における、免疫抑制性組成物の安定性
本発明のタクロリムス、シロリムス、またはこれらの組み合わせを含む組成物のさらなる特徴は、生体関連媒体中に分散した場合に本組成物が実質的にナノ粒子の粒度を維持することである。生体関連媒体は、インビボで見られる条件を模倣する。本発明のナノ粒子活性物質組成物が活性物質の小さい粒度に起因する利点を有するため、投与時に活性物質がナノ粒子の粒度を実質的に維持しなければ、「クランプ」または凝集した活性物質粒子が形成される。このような凝集した粒子の形成により、剤形の生物学的利用率は低下する可能性がある。
【００６７】
好ましくは、生体関連媒体、本発明の組成物における以下の分散は、約2000nm未満の有効平均粒度を維持する。本発明の他の態様において、本発明の再分散したタクロリムスおよび/またはシロリムス粒子は、光散乱法、顕微鏡、または他の適当な方法により測定された、約1900nm未満、約1800nm未満、約1700nm未満、約1600nm未満、約1500nm未満、約1400nm未満、約1300nm未満、約1200nm未満、約1100nm未満、約1000nm未満、約900nm未満、約800nm未満、約700nm未満、約650nm未満、約600nm未満、約550nm未満、約500nm未満、約450nm未満、約400nm未満、約350nm未満、約300nm未満、約250nm未満、約200nm未満、約150nm未満、約100nm未満、約75nm未満、または約50nm未満の有効平均粒度を有する。有効平均粒度の測定に適したこのような方法は、当業者に公知である。
【００６８】
そのような生体関連水性媒体は、所望のイオン強度およびpHを示す任意の水性媒体であることができ、これは媒体の生体関連性の基礎を形成する。所望のpHおよびイオン強度は、人体において認められる生理的条件を代表するものである。このような生体関連水性媒体は、例えば水性電解液または塩、酸もしくは塩基のいずれかの水溶液、またはそれらの組合せであり、これは所望のpHおよびイオン強度を示す。
【００６９】
生体関連pHは、当技術分野において周知である。例えば、胃のpHは、2をわずかに下回る(しかし典型的には1よりも大きい)から4または5までの範囲である。小腸のpHは、4〜6の範囲であることができ、および結腸において6〜8の範囲であることができる。生体関連イオン強度も、当技術分野において周知である。絶食状態の胃液は、イオン強度約0.1Mを有するのに対し、絶食状態の腸液は、イオン強度約0.14を有する。例えば、Lindahlらの「Characterization of Fluids from the Stomach and Proximal Jejunum in Men and Women」、Pharm. Res., 14(4):497-502(1997)参照。
【００７０】
被検液のpHおよびイオン強度は、具体的な化学内容物よりもより重要であると考えられる。従って、適当なpHおよびイオン強度値は、強酸、強塩基、単独または複数の共役酸-塩基対(すなわち、弱酸およびそれに対応する酸の塩)、一塩基性および多塩基性電解質などの多くの組合せにより得ることができる。代表的電解液は、濃度が約0.001〜約0.1Mの範囲であるHCl溶液、および濃度が約0.001〜約0.1Mの範囲であるNaCl溶液、およびそれらの混合物であることができるが、これらに限定されるものではない。例えば電解液は、約0.1Mまたは未満のHCl、約0.01Mまたは未満のHCl、約0.001Mまたは未満のHCl、約0.1Mまたは未満のNaCl、約0.01Mまたは未満のNaCl、約0.001Mまたは未満のNaCl、およびそれらの混合物であることができるが、これらに限定されるものではない。近位消化管のpHおよびイオン強度の条件により、これらの電解液で、0.01M HClおよび/または0.1M NaClは、絶食のヒトの生理的条件を最も代表するものである。
【００７１】
電解質濃度0.001M HCl、0.01M HCl、および0.1M HClは、各々、pH3、pH2、およびpH1に相当する。従って0.01M HCl溶液は、胃の典型的酸性条件を模倣している。0.1M NaClの溶液は、胃腸液を含む全身で認められるイオン強度条件に妥当な近似を提供するが、0.1Mよりも高い濃度を、ヒト消化管内の摂食状態を模倣するために使用してもよい。所望のpHおよびイオン強度を示す塩、酸、塩基またはそれらの組合せ溶液の例は、リン酸/リン酸塩＋塩酸のナトリウム、カリウムおよびカルシウムの塩、酢酸/酢酸塩＋塩酸のナトリウム、カリウムおよびカルシウムの塩、カルボン酸/炭酸水素塩＋塩酸のナトリウム、カリウムおよびカルシウムの塩、ならびにクエン酸/クエン酸塩＋塩酸のナトリウム、カリウムおよびカルシウムの塩を含むが、これらに限定されるものではない。
【００７２】
再分散性は、当技術分野において公知の適当な手段を用いて試験することができる。例えば米国特許第6,375,986号「Solid Dose Nanoparticulate Compositions Comprising a Synergistic Combination of a Polymeric Surface Stabilizer and Dioctyl Sodium Sulfosuccinate」の実施例の項を参照のこと。
【００７３】
6. 他の活性物質と併用される免疫抑制組成物
タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物を含む本発明の組成物は、加えて臓器拒絶反応の予防または乾癬もしくはその他免疫疾患の治療に有用な1つまたは複数の化合物を含有することができる。本発明の組成物は、そのような他の活性物質と共製剤化することができるか、または本発明の組成物は、そのような活性物質と組合せて同時投与もしくは逐次投与することができる。タクロリムスおよび/またはシロリムスと同時投与または共製剤化することができる薬物の例は、シクロスポリン、ミコフェノール酸、アレムツズマブ、ミコフェノレート・モフェチル、コルチコステロイド、グルココルチコステロイド、ドキシサイクリン、インターフェロンβ-1b、マロノニトリルアミドFK778、アザチオプリン、Campath-1H、バジリキシマブ、およびメトトレキサートを含むが、これらに限定されるものではない。
【００７４】
D. 組成物
本発明は、ナノ粒子のタクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物および少なくとも1種の表面安定剤を含有する組成物を提供する。表面安定剤は好ましくは、タクロリムスまたはシロリムス粒子の表面に吸着または会合される。本明細書において有用な表面安定剤は、タクロリムスもしくはシロリムス粒子またはそれ自身と化学的に反応しない。好ましくは表面安定剤の個々の分子は、分子間架橋を本質的に含まない。別の態様において、本発明の組成物は、2種またはそれよりも多い表面安定剤を含むことができる。
【００７５】
本発明は、1つまたは複数の無毒の生理的に許容できる担体、アジュバント、またはビヒクルで、集合的に担体と称されるものと一緒にされた、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物を含むナノ粒子組成物も含む。これらの組成物は、非経口注射(例えば、静脈内、筋肉内、または皮下)、腹腔内注射などのために製剤化することができる。
【００７６】
1. 免疫抑制性活性物質
本発明の注射可能剤形における使用のための、例示的な免疫抑制性活性物質は、タクロリムスおよびシロリムスである。
【００７７】
FK-506またはFujimycinとしても公知であるタクロリムスは、23員のマクロライド系ラクトンである。本明細書において使用される場合、「タクロリムス」という用語はそれらのアナログおよび塩を含み、結晶相、非晶質相、半結晶相、半非晶質相、およびそれらの混合物であることができる。タクロリムスは、実質的に光学的に純粋な鏡像異性体のひとつの形で、または鏡像異性体の混合物、ラセミ体、もしくはそれ以外としてのいずれかで存在し得る。タクロリムスの従来の形態は、望ましくないCremophor(登録商標)などの可溶化剤を含有する。
【００７８】
シロリムスは、免疫抑制剤および抗真菌性抗生物質として有用であり、その使用は例えば米国特許第3,929,992号、第3,993,749号、および第4,316,885号、ならびにベルギー特許第877,700号に記載されている。水のみにわずかに溶ける、すなわち1mL当たり20マイクログラム溶けるこの化合物は、水に曝露した場合に迅速に加水分解される。シロリムスは液体媒体に曝露した場合に極めて不安定であるため、欧州特許第 041,795号に記載されるような、患者に投与するための特別な注射可能製剤が開発されている。このような製剤は、往々にして非水性可溶化剤が毒性の副作用を示すため、多くの場合望ましくない。本明細書において使用される「シロリムス」という用語は、それらのアナログおよび塩を含み、結晶相、非晶質相、半結晶相、半非晶質相、およびそれらの混合物であることができる。シロリムスは、ひとつの実質的に光学的に純粋な鏡像異性体または鏡像異性体の混合物、ラセミ体または別のもののいずれかの形で存在することができる。
【００７９】
2. 表面安定剤
1種よりも多い表面安定剤の組合せを、本発明のタクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物を含む注射可能な製剤において使用することができる。適当な表面安定剤は、公知の有機および無機の薬学的賦形剤を含むが、これらに限定されるものではない。このような賦形剤は、様々なポリマー、低分子量オリゴマー、天然の生成物、および界面活性剤を含む。表面安定剤は、非イオン性、陰イオン、陽イオン、イオン性、および両性イオン界面活性剤を含む。注射可能なナノ粒子タクロリムスおよび/またはナノ粒子シロリムスの製剤用の表面安定剤の例は、ポビドンポリマーである。
【００８０】
表面安定剤の代表例は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(現在ヒプロメロースとして公知)、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、ラウリル硫酸ナトリウム、スルホコハク酸ジオクチル、ゼラチン、カゼイン、レシチン(ホスファチド)、デキストラン、アラビアゴム、コレステロール、トラガントゴム、ステアリン酸、塩化ベンザルコニウム、ステアリン酸カルシウム、グリセロールモノステアレート、セトステアリルアルコール、セトマクロゴール乳化ワックス、ソルビタンエステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル(例えばセトマクロゴール1000のようなマクロゴールエーテル)、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル(例えば、市販のTweens(登録商標)、例えばTween 20(登録商標)およびTween 80(登録商標)(ICI Speciality Chemicals))；ポリエチレングリコール(例えばCarbowaxes 3550(登録商標)および934(登録商標)(Union Carbide))、ステアリン酸ポリオキシエチレン、コロイド状二酸化ケイ素、ホスフェート、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒプロメロースフタレート、非晶質セルロース、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、トリエタノールアミン、ポリビニルアルコール(PVA)、エチレンオキシドおよびホルムアルデヒドを有する4-(1,1,3,3-テトラメチルブチル)-フェノールポリマー(チロキサポール、スペリオン(superione)、およびトリトンとしても公知)、ポロキサマー(例えば、Pluronics F68(登録商標)およびF108(登録商標)、これらはエチレンオキシドとプロピレンオキシドのブロックコポリマーである)；ポロキサミン(例えば、Tetronic 908(登録商標)、Poloxamine 908(登録商標)としても公知、これはプロピレンオキシドとエチレンオキシドのエチレンジアミンへの逐次付加に由来した4官能性ブロックコポリマーである(BASF Wyandotte Corporation, Parsippany, NJ))；Tetronic 1508(登録商標)(T-1508)(BASF Wyandotte Corporation)、Tritons X-200(登録商標)、これはスルホン酸アルキルアリールポリエーテルである(Rohm and Haas)；Crodestas F-110(登録商標)、これは、スクロースステアレートおよびスクロースジステアレートの混合物である(Croda Inc.)；p-イソノニルフェノキシポリ-(グリシドール)、Olin-10G(登録商標)またはSurfactant 10-G(登録商標)としても公知(Olin Chemicals, Stamford, CT)；Crodestas SL-40(登録商標)(Croda, Inc.)；および、SA9OHCO、これはC18H37CH2(CON(CH3)-CH2(CHOH)4(CH2OH)2(Eastman Kodak Co.)；デカノイル-N-メチルグルカミド；n-デシルβ-D-グルコピラノシド；n-デシルβ-D-マルトピラノシド；n-ドデシルβ-D-グルコピラノシド；n-ドデシルβ-D-マルトシド；ヘプタノイル-N-メチルグルカミド；n-ヘプチル-β-D-グルコピラノシド；n-ヘプチルβ-D-チオグルコシド；n-ヘキシルβ-D-グルコピラノシド；ノナノイル-N-メチルグルカミド；n-ノニルβ-D-グルコピラノシド；オクタノイル-N-メチルグルカミド；n-オクチル-β-D-グルコピラノシド；オクチルβ-D-チオグルコピラノシド；PEG-リン脂質、PEG-コレステロール、PEG-コレステロール誘導体、PEG-ビタミンA、PEG-ビタミンE、リゾチーム、ビニルピロリドンおよび酢酸ビニルのランダムコポリマーなどを含むが、これらに限定されない。
【００８１】
有用な陽イオン性表面安定剤の例は、ポリマー、バイオポリマー、多糖、セルロース、アルギネート、リン脂質および非ポリマー化合物、例えば両性イオン性安定剤、ポリ-n-メチルピリジニウム、アンスリウル(anthryul)塩化ピリジニウム、陽イオン性リン脂質、キトサン、ポリリシン、ポリビニルイミダゾール、ポリブレン、ポリメチルメタクリレート臭化トリメチルアンモニウム(PMMTMABr)、ヘキサデシル臭化トリメチルアンモニウム(HDMAB)、およびポリビニルピロリドン-2-ジメチルアミノエチルメタクリレート硫酸ジメチルを含むが、これらに限定されるものではない。他の有用な陽イオン性安定剤は、陽イオン性脂質、スルホニウム化合物、ホスホニウム化合物、および第4級アンモニウム化合物、例えばステアリルトリメチル塩化アンモニウム、ベンジル-ジ(2-クロロエチル)エチル臭化アンモニウム、ココナツ塩化または臭化トリメチルアンモニウム、ココナツ塩化または臭化メチルジヒドロキシエチルアンモニウム、塩化デシルトリエチルアンモニウム、塩化または臭化デシルジメチルヒドロキシエチルアンモニウム、塩化または臭化C12-15ジメチルヒドロキシエチルアンモニウム、ココナツ塩化または臭化ジメチルヒドロキシエチルアンモニウム、ミリスチルトリメチル硫酸アンモニウムメチル、塩化または臭化ラウリルジメチルベンジルアンモニウム、塩化または臭化ラウリルジメチル(エテノキシ)4アンモニウム、塩化N-アルキル(C12-18)ジメチルベンジルアンモニウム、塩化N-アルキル(C14-18)ジメチル-ベンジルアンモニウム、塩化N-テトラデシルジメチルベンジルアンモニウム一水和物、塩化ジメチルジデシルアンモニウム、塩化N-アルキルおよび(C12-14)ジメチル1-ナフチルメチルアンモニウム、ハロゲン化トリメチルアンモニウム、アルキル-トリメチルアンモニウム塩およびジアルキル-ジメチルアンモニウム塩、塩化ラウリルトリメチルアンモニウム、エトキシル化されたアルキルアミドアルキルジアルキルアンモニウム塩および/またはエトキシル化されたトリアルキルアンモニウム塩、ジアルキルベンゼンジアルキル塩化アンモニウム、塩化N-ジデシルジメチルアンモニウム、塩化N-テトラデシルジメチルベンジルアンモニウム一水和物、N-アルキル(C12-14)ジメチル1-ナフチルメチル塩化アンモニウムおよび塩化ドデシルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ジアルキルベンゼンアルキルアンモニウム、塩化ラウリルトリメチルアンモニウム、塩化アルキルベンジルメチルアンモニウム、臭化アルキルベンジルジメチルアンモニウム、臭化C12,C15,C17トリメチルアンモニウム、塩化ドデシルベンジルトリエチルアンモニウム、ポリ-塩化ジアリルジメチルアンモニウム(DADMAC)、塩化ジメチルアンモニウム、ハロゲン化アルキルジメチルアンモニウム、塩化トリセチルメチルアンモニウム、臭化デシルトリメチルアンモニウム、臭化ドデシルトリエチルアンモニウム、臭化テトラデシルトリメチルアンモニウム、塩化メチルトリオクチルアンモニウム(ALIQUAT 336)、POLYQUAT、臭化テトラブチルアンモニウム、臭化ベンジルトリメチルアンモニウム、コリンエステル(例えば脂肪酸のコリンエステル)、塩化ベンザルコニウム、ステアラルコニウムクロリド化合物(例えば塩化ステアリルトリモニウムおよび塩化ジステアリルジモニウム)、臭化または塩化セチルピリジニウム、第4級ポリオキシエチルアルキルアミンのハロゲン化物塩、MIRAPOLおよびALKAQUAT(Alkaril Chemical Company)、アルキルピリジニウム塩；アミン、例えば、アルキルアミン、ジアルキルアミン、アルカノールアミン、ポリエチレンポリアミン、N,N-ジアルキルアミノアルキルアクリレート、およびビニルピリジン、アミン塩、例えば酢酸ラウリルアミン、酢酸ステアリルアミン、アルキルピリジニウム塩、およびアルキルイミダゾリウム塩、ならびにアミンオキシド、イミドアゾリニウム塩；プロトン化された第4級アクリルアミド；メチル化された第4級ポリマー、例えばポリ[塩化ジアリルジメチルアンモニウム]およびポリ-[N-塩化メチルビニルピリジニウム]；ならびに陽イオン化グアールを含むが、これらに限定されるものではない。
【００８２】
そのような陽イオン表面安定剤の例および他の有用な陽イオン表面安定剤は、J. Cross and E. Singer、「Cationic Surfactants: Analytical and Biological Evaluation」(Marcel Dekker, 1994)；P. and D. Rubingh(編集)、「Cationic Surfactants: Physical Chemistry」(Marcel Dekker, 1991)；および、J. Richmond、「Cationic Surfactants: Organic Chemistry」(Marcel Dekker, 1990)に説明されている。
【００８３】
非ポリマー性表面安定剤は、任意の非ポリマー性化合物、例えば塩化ベンザルコニウム、カルボニウム化合物、ホスホニウム化合物、オキソニウム化合物、ハロニウム化合物、陽イオン性有機金属化合物、第4級リン化合物、ピリジニウム化合物、アニリニウム化合物、アンモニウム化合物、ヒドロキシルアンモニウム化合物、式NR1R2R3R4(+)の第1級アンモニウム化合物、第2級アンモニウム化合物、第3級アンモニウム化合物、および第4級アンモニウム化合物である。式NR1R2R3R4(+)の化合物について：
(i)R1-R4はCH3ではない；
(ii)R1-R4のひとつはCH3である；
(iii)R1-R4の3つはCH3である；
(iv)R1-R4の全てはCH3である；
(v)R1-R4の2つはCH3であり、R1-R4のひとつはC6H5CH2であり、およびR1-R4のひとつは7個またはそれ以下の炭素原子のアルキル鎖である；
(vi)R1-R4の2つはCH3であり、R1-R4のひとつはC6H5CH2であり、およびR1-R4のひとつは19個またはそれ以上の炭素原子のアルキル鎖である；
(vii)R1-R4の2つはCH3であり、R1-R4のひとつは基C6H5(CH2)nであり、ここでn＞1である；
(viii)R1-R4の2つはCH3であり、R1-R4のひとつはC6H5CH2であり、R1-R4のひとつは少なくとも1個のヘテロ原子を含む；
(ix)R1-R4の2つはCH3であり、R1-R4のひとつはC6H5CH2であり、R1-R4のひとつは少なくとも1個のハロゲンを含む；
(x)R1-R4の2つはCH3であり、R1-R4のひとつはC6H5CH2であり、R1-R4のひとつは少なくとも1個の環状断片を含む；
(xi)R1-R4の2つはCH3であり、R1-R4のひとつはフェニル環である；か、または
(xii)R1-R4の2つはCH3であり、R1-R4の2つは純粋に脂肪族断片である。
【００８４】
このような化合物は、塩化ベヘンアルコニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化セチルピリジニウム、塩化ベヘントリモニウム、塩化ラウルアルコニウム、塩化セタコニウム、臭化セトリモニウム、塩化セトリモニウム、フッ化水素セチルアミン、クロロアリルメテンアミンクロリド(Quaternium-15)、ジステアリルジモニウムクロリド(Quaternium-5)、ドデシルジメチルエチルベンジルアンモニウムクロリド(Quaternium-14)、Quaternium-22、Quaternium-26、Quaternium-18ヘクトライト、塩酸ジメチルアミノエチルクロリド、塩酸システイン、ジエタノールアンモニウムPOE(10)オレイルエーテルリン酸、ジエタノールアンモニウムPOE(3)オレイルエーテルリン酸、タロウアルコニウムクロリド、ジメチルジオクタデシルアンモニウムベントナイト、ステアラルコニウムクロリド、臭化ドミフェン、安息香酸デナトニウム、ミリストアルコニウムクロリド、ラウルトリモニウムクロリド、エチレンジアミン二塩酸塩、塩酸グアニジン、塩酸ピリドキシン、塩酸イオフェタミン、塩酸メグルミン、塩化メチルベンゼトニウム、臭化ミリトリモニウム(myrtrimonium bromide)、塩化オレイルトリモニウム、ポリクアテルニウム-1、塩酸プロカイン、ココベタイン、ステアラルコニウムベントナイト、ステアラコニウムヘクトナイト、ステアリルトリヒドロキシエチルプロピレンジアミンジヒドロフルオリド、タロウトリモニウムクロリド、およびヘキサデシル臭化トリメチルアンモニウムを含むが、これらに限定されるものではない。
【００８５】
これらの表面安定剤のほとんどは、公知の薬学的賦形剤であり、米国薬剤師会および英国薬剤師会(The Pharmaceutical Society of Great Britain)から共同出版されている「Handbook of Pharmaceutical Excipients」(The Pharmaceutical Press, 2000)において詳細に説明されており、これは具体的に参照として組入れられている。
【００８６】
ポビドンポリマー
ポビドンポリマーは、注射可能なナノ粒子タクロリムスおよび/またはナノ粒子シロリムス製剤の製剤化における使用に関する例示的な表面安定剤である。ポリビドン、ポビドナム、PVP、およびポリビニルピロリドンとしても公知のポビドンポリマーは、商品名Kollidon(登録商標)(BASF Corp.)およびPlasdone(登録商標)(ISP Technologies, Inc.)で販売されている。これらは、化学名1-エテニル-2-ピロリジノンポリマーおよび1-ビニル-2-ピロリジノンポリマーを有する、多分散系巨大分子である。ポビドンポリマーは、平均分子量約10,000〜約700,000ダルトンの範囲を有する一連の製品として市販されている。40,000ダルトンよりも大きい分子量は、体内でのクリアランスが困難であるので、哺乳類へ投与される薬物化合物のための表面改変剤として有用であるためには、ポビドンポリマーは、約40,000ダルトン未満の分子量を有さなければならない。
【００８７】
ポビドンポリマーは、例えば下記工程を含む、Reppe法により調製される：(1)Reppeブタジエン合成によりアセチレンおよびホルムアルデヒドから1,4-ブタンジオールを得る工程；(2)1,4-ブタンジオールを銅上で200℃で脱水素し、γ-ブチロラクトンを形成する工程；ならびに、(3)γ-ブチロラクトンをアンモニアと反応し、ピロリドンを得る工程。アセチレンによる引き続きの処置は、ビニルピロリドンモノマーを生じる。重合は、H2OおよびNH3の存在下での加熱により、実行される。The Merck Index, 第10版、pp.7581(Merck & Co., Rahway, NJ, 1983)を参照のこと。
【００８８】
このポビドンポリマーの製造法は、鎖長の等しくない分子を含むポリマー、従って分子量が異なるポリマーを生成する。これらの分子の分子量は、特定の市販の等級の各々についてほぼ中間値または平均で変動する。ポリマーの分子量を直接決定することは困難であるので、様々な分子量の等級の分類に最も広範に使用される方法は、粘度測定に基づきした、K値である。ポビドンポリマーの様々な等級のK値は、平均分子量の関数を表し、粘度測定に由来し、Fikentscher式に従い計算される。
【００８９】
重量平均分子量Mwは、例えば光散乱によるなど、個々の分子の重量を測定する方法により決定される。表1は、全て可溶性である、いくつかの市販のポビドンポリマーの分子量データを提供する。
【００９０】
【表１】
2008533165.tif 000005
*これらの分子量は40,000ダルトンよりも大きいので、このポビドンポリマーは、非経口投与される(すなわち注射される)薬物化合物の表面安定剤として有用ではない。
**Mvは粘度-平均分子量であり、Mnは数-平均分子量であり、およびMwは重量平均分子量である。MwおよびMnは、光散乱および超遠心により決定され、ならびにMvは粘度測定により決定される。
【００９１】
表1に示されたデータに基づき、有用な市販のポビドンポリマーの例は、Plasdone C-15(登録商標)、Kollidon 12 PF(登録商標)、Kollidon 17 PF(登録商標)、およびKollidon 25(登録商標)を含むが、これらに限定されるものではない。
【００９２】
3. ナノ粒子のタクロリムスおよびシロリムスの粒度
本明細書において使用される粒度は、当業者に周知の従来の粒度測定技術により測定された、重量平均粒度に基づき決定される。このような技術は、例えば沈降場流動分画、光子相関分光、光散乱、ディスク遠心を含む。
【００９３】
本発明の免疫抑制組成物は、有効平均粒度約2000nm(すなわち2μm)未満のタクロリムスおよび/またはシロリムスナノ粒子を含有する。本発明の他の態様において、タクロリムスおよびシロリムスナノ粒子は、光散乱法、顕微鏡、または他の適当な方法により測定された、約1900nm未満、約1800nm未満、約1700nm未満、約1600nm未満、約1500nm未満、約1400nm未満、約1300nm未満、約1200nm未満、約1100nm未満、約1000nm未満、約900nm未満、約800nm未満、約700nm未満、約650nm未満、約600nm未満、約550nm未満、約500nm未満、約450nm未満、約400nm未満、約350nm未満、約300nm未満、約250nm未満、約200nm未満、約150nm未満、約100nm未満、約75nm未満および約50nm未満の有効平均粒度を有する。
【００９４】
「約2000nm未満の有効平均粒度」とは、タクロリムス、シロリムス、またはタクロリムスおよびシロリムス粒子の少なくとも50重量％が、約2000nm未満の重量平均粒度を有することを意味する。「有効平均粒度」が約1900nm未満である場合、タクロリムス、シロリムス、またはタクロリムスおよびシロリムス粒子の少なくとも約50％が、前述の技術で測定された場合、約1900nm未満のサイズを有する。同じことが、先に言及した他の粒度についても当てはまる。別の態様において、タクロリムス、シロリムス、またはタクロリムスおよびシロリムス粒子の少なくとも約60重量％、少なくとも約70重量％、少なくとも約80重量％、少なくとも約90重量％、少なくとも約95重量％、または少なくとも約99重量％は、有効平均未満の、すなわち約2000nm未満、約1900nm未満、約1800nm未満などの粒度を有する。
【００９５】
本発明において、ナノ粒子のタクロリムス、シロリムス、またはタクロリムスおよびシロリムス組成物のD50値は、タクロリムス、シロリムス、またはタクロリムスおよびシロリムス粒子の50重量％がそれを下回るような粒度である。同様にD90は、タクロリムス、シロリムス、またはタクロリムスおよびシロリムス粒子の90重量％がそれを下回るような粒度である。
【００９６】
4. ナノ粒子免疫抑制化合物および表面安定剤の濃度
タクロリムス、シロリムス、およびそれらの混合物と、1種または複数の表面安定剤の相対量は、広範に変動することができる。個々の成分の最適量は、例えば疎水性親油性バランス(HLB)、融点、および安定剤水溶液の表面張力などの、選択された表面安定剤の物理的および化学的属性により左右される。
【００９７】
好ましくはタクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物の濃度は、他の賦形剤を含まない、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物および少なくとも1種の表面安定剤の全合計重量に基づき、約99.5重量％〜約0.001重量％、約95重量％〜約0.1重量％、または約90重量％〜約0.5重量％を変動することができる。より高い濃度の活性成分が、一般に投与量および費用効果の観点から好ましい。
【００９８】
好ましくは、表面安定剤の濃度は、他の賦形剤を含まない、活性作用物質および少なくとも1種の表面安定剤の全合計乾燥重量に基づき、約0.5重量％〜約99.999重量％、約5.0重量％〜約99.9重量％、または約10重量％〜約99.5重量％を変動することができる。
【００９９】
5. 他の薬学的賦形剤
本発明の薬学的組成物は、所望の投与経路および剤形に応じて、結合剤、充填剤、滑沢剤、懸濁化剤、甘味剤、香味剤、保存剤、緩衝剤、湿潤剤、崩壊剤、発泡剤、および他の賦形剤を1つまたは複数含有してもよい。このような賦形剤は、当技術分野において周知である。
【０１００】
充填剤の例は、乳糖一水和物、乳糖無水物、および様々なデンプンであり；結合剤の例は、様々なセルロースおよび架橋したポリビニルピロリドン、微晶質セルロース、例えばAvicel(登録商標)PH101およびAvicel(登録商標)PH102、微晶質セルロース、およびシリカを含む微晶質セルロース(ProSolv SMCC(商標))である。
【０１０１】
圧縮される散剤の流動性に作用する物質を含む、適当な滑沢剤は、コロイド状二酸化ケイ素、例えばAerosil(登録商標)200、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、およびシリカゲルである。
【０１０２】
甘味剤の例は、任意の天然または人工の甘味剤、例えばショ糖、キシリトール、サッカリンナトリウム、シクラメート、アスパルターム、およびアセスルファム(acsulfame)がある。香味剤の例は、Magnasweet(登録商標)(商標MAFCO)、バブルガム香料、および果実香料などである。
【０１０３】
保存剤の例は、ソルビン酸カリウム、メチルパラベン、プロピルパラベン、安息香酸およびその塩、パラヒドロキシ安息香酸の他のエステル、例えばブチルパラベン、アルコール、例えばエチルアルコールまたはベンジルアルコール、フェノール化合物、例えばフェノール、および第4級化合物、例えば塩化ベンザルコニウムである。
【０１０４】
適当な希釈剤は、薬学的に許容できる不活性充填剤、例えば微晶質セルロース、乳糖、リン酸水素カルシウム、糖質、および/または前述のいずれかの混合物を含む。希釈剤の例は、微晶質セルロース、例えばAvicel(登録商標)PH101およびAvicel(登録商標)PH102；乳糖、例えば乳糖一水和物、乳糖無水物、およびPharmatose(登録商標)DCL21；リン酸水素カルシウム、例えばEmcompress(登録商標)；マンニトール；デンプン；ソルビトール；ショ糖；および、グルコースを含む。
【０１０５】
適当な崩壊剤は、軽度に架橋したポリビニルピロリドン、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、メイズデンプン、および改質されたデンプン、架橋したカルメロースナトリウム、架橋した-ポビドン、デンプングリコール酸ナトリウム、およびそれらの混合物を含む。
【０１０６】
発泡剤の例は、発泡剤組合せ、例えば有機酸または炭酸塩と炭酸水素塩である。適当な有機酸は、例えば、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、フマル酸、アジピン酸、コハク酸、およびアルギン酸、および無水物および酸塩を含む。適当な炭酸塩および炭酸水素塩は、例えば炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素カリウム、炭酸マグネシウム、炭酸ナトリウムグリシン、炭酸L-リシン、および炭酸アルギニンを含む。あるいは、発泡剤組合せの唯一の炭酸水素ナトリウム成分のみが存在することができる。
【０１０７】
6. 注射可能なナノ粒子タクロリムス製剤
本発明は、少ない注射容積中に高い薬物濃度を含有し得る、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物を含む注射可能なナノ粒子製剤を提供する。例示的な製剤は、％w/wに基づき以下を含有する。
免疫抑制剤活性      1.0〜50％
表面安定剤          0.1〜50％
保存剤              0.05〜0.25％
pH調節剤            約pH6〜約pH7
水                  適宜
【０１０８】
保存剤の例は、メチルパラベン(％w/wに基づき約0.18％)、プロピルパラベン(％w/wに基づき約0.02％)、フェノール(％w/wに基づき約0.5％)、およびベンジルアルコール(最大2％v/v)を含む。pH調節剤の例は、水酸化ナトリウムであり、液体担体の例は、注射用滅菌水である。他の有用な保存剤、pH調節剤、および液体担体は、当技術分野において周知である。
【０１０９】
本発明において活性なタクロリムスまたはシロリムスは、1つの実質的に光学的に純粋な鏡像異性体の形状で、または鏡像異性体の混合物、ラセミ体もしくはそれ以外のいずれかで、存在しうる。免疫抑制剤は、本発明の注射可能なナノ粒子製剤で約0.01mg〜約50mgの量、または約0.05mg〜約20mgの量で存在することが好ましい。
【０１１０】
E. ナノ粒子タクロリムスおよび/またはシロリムス製剤の製造法
ナノ粒子タクロリムスおよび/またはシロリムス組成物は、例えば、ミル粉砕、均質化、沈降、または超臨界流体作製技術などの、当技術分野において公知の任意の適当な方法を用い製造することができる。ナノ粒子活性物質組成物の製造法の例は、米国特許第5,145,684号に開示されている。同じくナノ粒子活性物質組成物の製造法は、米国特許第5,518,187号「Method of Grinding Pharmaceutical Substances」；米国特許第5,718,388号「Continuous Method of Grinding Pharmaceutical Substances」；米国特許第5,862,999号「Method of Grinding Pharmaceutical Substances」；米国特許第5,665,331号「Co-Microprecipitation of Nanoparticulate Pharmaceutical Agents with Crystal Growth Modifiers」；米国特許第5,662,883号「Co-Microprecipitation of Nanoparticulate Pharmaceutical Agents with Crystal Growth Modifiers」；米国特許第5,560,932号「Microprecipitation of Nanoparticulate Pharmaceutical Agents」；米国特許第5,543,133号「Process of Preparing X-Ray Contrast Compositions Containing Nanoparticles」；米国特許第5,534,270号「Method of Preparing Stable Drug Nanoparticles」；米国特許第5,510,118号「Process of Preparing Therapeutic Compositions Containing Nanoparticles」；および、米国特許第5,470,583号「Method of Preparing Nanoparticle Compositions Containing Charged Phospholipids to Reduce Aggregation」にも開示されており、これらは全て具体的に参照として組入れられている。
【０１１１】
得られるナノ粒子のタクロリムスおよび/またはシロリムス組成物または分散体は、液体分散剤、ゲル剤、エアロゾル剤、軟膏剤、クリーム剤、制御放出製剤、速溶製剤、凍結乾燥製剤、錠剤、カプセル剤、遅延放出製剤、徐放性製剤、パルス型放出製剤、即時放出および制御放出製剤の混合型などの、固形、半固形、または液体の剤形において利用することができる。本発明においては、注射可能剤形が好ましい。
【０１１２】
本発明の別の局面において、本発明の注射可能なナノ粒子の免疫抑制性製剤の調製法が提供される。本方法は、以下の工程を含む：(1)望ましい用量のタクロリムス、シロリムス、またはこれらの組み合わせを液体分散媒中に分散する工程；および、(2)タクロリムス、シロリムス、またはこれらの組み合わせの粒度を、約2000nm未満の望ましい有効平均粒度へ機械的に低下させる工程。表面安定剤は、分散媒へ、活性物質の粒度低下の前、途中、または後のいずれかで添加することができる。1つの態様において、表面安定剤は約40,000ダルトン未満の分子量を有するポビドンポリマーである。この液体分散媒は、粒度低下プロセスの間、生理的pHで、例えば約3.0〜約8.0の範囲内で維持することができ；より好ましくは、粒度低下プロセスの間、約5.0〜約7.5の範囲で維持することができる。もう1つの態様において、粒度低下プロセスに使用される分散媒は、水性である。
【０１１３】
粒度低下法を使用して、免疫抑制剤の粒度を約2000nm未満の有効平均粒度に低下させる。タクロリムスまたはシロリムス免疫抑制剤の粒度低下のために機械的力を提供する有効な方法は、ボールミル、媒体ミル粉砕、および例えばMicrofluidizer(登録商標)(Microfluidics Corp.)による均質化を含む。ボールミルは、ミリング媒体、薬物、安定剤および液体を使用する低エネルギーのミル粉砕法である。これらの物質は、媒体がなだれ落ち(cascade)および衝撃により薬物粒度を低下するのに最適な速度で回転されるミル容器に配置される。粒子低下のエネルギーは、重力および摩砕媒体の重量により提供されるので、使用される媒体は、高い密度を有さなければならない。
【０１１４】
媒体ミル粉砕は、高エネルギーミル粉砕法である。薬物、安定剤および液体は、貯蔵庫に入れられ、媒体および回転シャフト/羽根車を備えるチャンバー内で再循環される。薬物に衝撃力および剪断力を加え、これにより薬物粒度を低下するために、回転シャフトは、媒体を攪拌する。
【０１１５】
均質化は、ミリング媒体を使用しない技術である。薬物、安定剤、および液体(または薬物および液体と、粒度低下後に添加された安定剤)は、Microfluidizer(登録商標)において、インターアクションチャンバーと称される処理ゾーンへ噴出された処理流れを構成している。処理される生成物が、ポンプに入れられ、その後力が取り除かれる。Microfluidizer(登録商標)のプライミングバルブは、空気をポンプの外へ一掃する。一旦ポンプが生成物で満たされると、プライミングバルブが閉じられ、生成物はインターアクションチャンバーを通るように力が加えられる。インターアクションチャンバーの形状寸法は、粒度の低下に貢献する、強力な剪断力、衝撃力およびキャビテーションを生じる。具体的には、インターアクションチャンバーの内側では、加圧された生成物は、二つの流れに分けられ、超高速に加速される。次に形成された噴流は、互いに対し方向付けられ、およびインターアクションゾーン内で衝突する。得られる生成物は、非常に細かくかつ均質な粒度または液滴サイズを有する。Microfluidizer(登録商標)は、生成物の冷却を可能にする熱交換器も提供する。本明細書に具体的に参照として組入れられている米国特許第5,510,118号は、Microfluidizer(登録商標)の使用法を開示している。
【０１１６】
免疫抑制剤は、それが本質的に不溶性の液体媒体へ添加し、プレミックスを形成することができる。表面安定剤は、このプレミックス中に存在することができるか、または粒度低下後に薬物分散体に添加することができる。プレミックスは、分散体中のタクロリムスまたはシロリムスの平均粒度を約2000nm未満に低下するために、機械的手段を供することにより、直接使用することができる。ボールミルが摩砕に使用される場合、プレミックスは、直接使用されることが好ましい。あるいは免疫抑制剤および少なくとも1種の表面安定剤は、例えばCowles型ミキサーのような、適当な攪拌を使用し、裸眼により目視可能な大きい凝集体が存在しない均質な分散体が認められるまで、液体媒体中に分散することができる。再循環型媒体ミルが摩砕に使用される場合には、プレミックスは、そのような予備的ミル粉砕分散工程に供されることが好ましい。
【０１１７】
タクロリムスまたはシロリムスの粒度を低下するために適用される機械的手段は、分散ミルの形をとることができる。適当な分散ミルは、ボールミル、アトライタミル、振動ミル、ならびにサンドミルおよびビーズミルのような媒体ミルを含む。媒体ミルは、粒度の望ましい低下を提供するために必要なミル粉砕時間が比較的短いので好ましい。媒体ミルに関するプレミックスの見かけの粘度は、好ましくは約100〜約1000センチポアズであり、ボールミルに関するプレミックスの見かけの粘度は、好ましくは約1から約100センチポアズまでである。このような範囲は、有効粒度低下と媒体崩壊の間の最適なバランスをもたらす傾向がある。
【０１１８】
摩砕時間は、広範に変動することができ、主に具体的な機械的手段および選択された処理条件によって決まる。ボールミルに関して、最長5日間またはそれよりも長い処理期間が必要なことがある。あるいは1日未満の処理時間(滞留時間は1分間から数時間まで)は、高剪断媒体ミルの使用により可能である。
【０１１９】
免疫抑制分子を著しく分解しない温度で、これらのタクロリムスまたはシロリムス粒子の粒度が低下を低下させることができる。処理温度約30℃未満から約40℃未満が通常好ましい。望ましいならば、この処理装置は、従来の冷却装置で冷却することができる。例えば氷水中のミルチャンバーの外装または浸漬による温度制御が企図される。一般に本発明の方法は、ミル粉砕プロセスに関して安全かつ有効な周囲温度および処理圧である条件下で都合良く実行される。周囲処理圧は、典型的にはボールミル、アトライタミルおよび振動ミルのものである。
【０１２０】
粉砕媒体
粒度低下工程のための粉砕媒体は、約3mm未満、より好ましくは約1mm未満の平均サイズを有する形態である、好ましくは球状または粒子の剛性媒体から選択することができる。このような媒体は、より短い処理時間、および粉砕装置のより少ない摩耗で本発明の粒子を提供可能であることが望ましい。粉砕媒体の物質の選択は、重要ではないと考えられる。マグネシア、ケイ酸ジルコニウム、セラミック、ステンレス鋼、チタニア、アルミナにより安定化された95% ZrO、イットリウムにより安定化された95% ZrOなどの酸化ジルコニウム、ガラス粉砕媒体、およびポリマー粉砕媒体が例示的な粉砕媒体である。
【０１２１】
粉砕媒体は、好ましくは本質的にポリマー樹脂またはその他適切な材料からなる、形状が実質的に球形の粒子、例えばビーズを含むことができる。あるいは、粉砕媒体は、それらの上に接着されたポリマー樹脂のコーティングを有するコアを含むことができる。ポリマー樹脂は、約0.8〜約3.0g/cm3の密度を有することができる。
【０１２２】
一般に適当なポリマー樹脂は、化学的または物理的に不活性であり、実質的に金属、溶媒およびモノマーを含まず、ならびに粉砕時にそれらがチッピングまたは破砕されることを避けることができるのに十分な硬度および摩損度を有する。適当なポリマー樹脂は、架橋されたポリスチレン、例えばジビニルベンゼンで架橋されたポリスチレン；スチレンコポリマー；ポリカーボネート；ポリアセタール、例えばDelrin(登録商標)(E.I. du Pont de Nemours and Co.)；塩化ビニルポリマーおよびコポリマー；ポリウレタン；ポリアミド；ポリ(テトラフルオロエチレン)、例えばTeflon(登録商標)(E.I. du Pont de Nemours and Co.)、および他のフルオロポリマー；高密度ポリエチレン；ポリプロピレン；セルロースエーテルおよびエステル、例えば酢酸セルロース；ポリヒドロキシメタクリレート；ポリヒドロキシエチルアクリレート；ならびに、シリコーン含有ポリマー、例えばポリシロキサンなどを含む。このポリマーは、生分解性であることができる。生分解性ポリマーの例は、ポリ(ラクチド)、ラクチドおよびグリコリドのポリ(グリコリド)コポリマー、ポリ酸無水物、ポリ(ヒドロキシエチルメタシレート)、ポリ(イミノカーボネート)、ポリ(N-アシルヒドロキシプロリン)エステル、ポリ(N-パルミトイルヒドロキシプロリン)エステル、エチレン-酢酸ビニルコポリマー、ポリ(オルトエステル)、ポリ(カプロラクトン)、およびポリ(ホスファザン)を含む。生分解性ポリマーに関して、有利なことに媒体それ自身由来の夾雑は、インビボにおいて、体から排泄することができる生体が許容できる生成物へ代謝することができる。
【０１２３】
粉砕媒体は、サイズ約0.01〜約3mmの範囲が好ましい。細かい粉砕に関して、粉砕媒体はサイズが、好ましくは約0.02〜約2mmであり、より好ましくは約0.03〜約1mmである。
【０１２４】
好ましい粉砕プロセスにおいて、粒子は連続して作製される。そのような方法は、活性なタクロリムスまたはシロリムスをミル粉砕チャンバーへ連続導入する工程、化合物を粉砕媒体と接触すると同時に、チャンバー内で粒度を低下させる工程、および活性ナノ粒子をミル粉砕チャンバーから連続的に取り出す工程を含む。
【０１２５】
この粉砕媒体は、単純な濾過、メッシュフィルターもしくはスクリーンを通した篩分けなどの二次的処理において、通常の分離技術を用い、ミル粉砕されたナノ粒子のタクロリムスまたはシロリムスから分離することができる。遠心分離のようなその他の分離技術も使用することができる。
【０１２６】
滅菌製品の製造
注射可能な組成物の開発は、滅菌製品の製造が必要である。本発明の製造法は、滅菌懸濁剤の典型的公知の製造法に類似している。典型的滅菌懸濁剤の製造法のフローチャートを以下に示す。
2008533165.tif 000006
【０１２７】
括弧内の任意の工程により示されるように、この処理の一部は、粒度低下法および/または滅菌法に左右される。例えば媒体前処理は、媒体を用いないミル粉砕法には不要である。最終滅菌が、化学的および/または物理的不安定性のために実行できない場合は、無菌的処理を使用することができる。
【０１２８】
F. 処置法
更に本発明の別の局面は、臓器拒絶反応の予防または乾癬もしくは他の免疫疾患の処置のための、本発明の注射可能なナノ粒子のタクロリムス製剤またはシロリムス製剤を使用し、ヒトを含む哺乳類を処置する方法を提供する。このような方法は、治療的有効量の注射可能な本発明のナノ粒子のタクロリムス製剤またはシロリムス製剤を対象に投与し、患者において皮下にまたは筋肉内に貯留物を形成させる工程を含む。この貯留物は活性を経時的にゆっくりと放出し、長期にわたる同種臓器レシピエントに対する処置、または乾癬もしくは他の免疫疾患の処置を提供する。この、タクロリムスまたはシロリムスの貯留物製剤は、必要であれば最大1年の免疫抑制剤療法を提供することが可能である。
【０１２９】
本発明の他の態様において、注射可能な貯留物のナノ粒子であるタクロリムス、シロリムス、またはこれらの組み合わせの組成物は、最大約1週間、最大約2週間、最大約3週間、最大約4週間、最大約5週間、最大約6週間、最大約7週間、最大約8週間、最大約9週間、最大約10週間、最大約11週間、最大約12週間、最大約1ヶ月、最大約2ヶ月、最大約3ヶ月、最大約4ヶ月、最大約5ヶ月、最大約6ヶ月、最大約7ヶ月、最大約8ヶ月、最大約9ヶ月、最大約10ヶ月、最大約11ヶ月、または最大約1年の、薬物の治療レベルを提供する。
【０１３０】
本発明の特定の有利な特徴は、本発明の注射可能なナノ粒子のタクロリムス製剤、シロリムス製剤、またはタクロリムスおよびシロリムスの製剤が、貯留物として患者に注射可能であり、かつ、更に可溶化剤としてのポリオキシル60硬化ヒマシ油(HCO-60)および/またはポリソルベート80などのポリソルベートの使用の必要性が排除されることである。更に、本発明の注射可能製剤は、長期にわたって治療的に有効な貯留物送達系で、高濃度のタクロリムス、シロリムス、またはこれらの組み合わせを提供し得る。
【０１３１】
当業者は、タクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物の有効量は、経験的に決定することができ、および純粋形で使用することができるか、または薬学的に許容できる塩、エステル、もしくはプロドラッグの形が存在する場合には、そのような形状で利用することができることを理解するであろう。従って選択された用量レベルは、望ましい治療作用、投与経路、投与されたタクロリムス、シロリムス、またはそれらの混合物の効能、望ましい治療期間、および他の要因により決定される。
【０１３２】
単位用量の組成物は、一日量をもたらすために使用され得る、それらの分割量(submultiple)のような量を含むことができる。しかし、任意の特定の患者に関する特定の投与量レベルは、以下のような様々な要因により決定されることは理解されるであろう：実現される細胞反応または生理的反応の種類および程度；使用される特定の作用物質または組成物の活性；使用される特定の作用物質または組成物；患者の年齢、体重、全身の健康状態、性別および食事；作用物質の投与時刻、投与経路および排泄速度；治療期間；特定の作用物質と組合せてまたは同時に使用される薬物；などの医療技術分野において周知の要因。
【０１３３】
以下の実施例は、本発明を例証するために示される。しかし、本発明の精神および範囲は、これらの実施例において説明された具体的条件および詳細に限定されることはないが、添付の特許請求の範囲によってのみ限定されることは理解されなければならない。米国特許を含む、本明細書において確定された全ての参考文献は、明確に参照により本明細書に組入れられている。
【０１３４】
実施例
実施例1
本実施例の目的は、注射可能剤形としての使用に適したナノ粒子のタクロリムス製剤を調製することであった。図1は、ミル粉砕していないタクロリムスの、x100での位相差光学顕微鏡写真である。
【０１３５】
10％(w/w)タクロリムス(Camida LLC)の、2％(w/w)ポリビニルピロリドン(PVP)K29/32および0.05％(w/w)スルホコハク酸ジオクチル(DOSS)と一緒にした水性分散体を、NanoMill(登録商標)0.01(NanoMill Systems, King of Prussia, PA；例えば米国特許第6,431,478号参照)の10mlチャンバーにおいて、500μm PolyMill(登録商標)摩砕媒体(Dow Chemical)(89％媒体負荷)と共に、ミル粉砕した。この混合物は、速度2500rpmで60分間ミル粉砕した。
【０１３６】
ミル粉砕後、ミル粉砕されたタクロリムス粒子の粒度を、脱イオン蒸留水中で、Horiba LA 910粒度分析計を用い測定した。表2に示すように、最初の平均ミル粉砕したタクロリムス粒度は192nmであり、D50は177nmおよびD90は278nmであった。図2は、ミル粉砕したタクロリムスのx100での位相差光学顕微鏡写真である。＜15℃で1週間冷蔵後の蒸留水中での2回目の測定は、平均タクロリムス粒度245nmであり、D50は219nmおよびD90は374nmであった。図3は、1週間冷蔵後の、ミル粉砕したタクロリムスのx100での位相差光学顕微鏡写真である。
【０１３７】
【表２】
2008533165.tif 000007
【０１３８】
これらの結果は、得られた平均粒度192nmであったので、安定なナノ粒子のタクロリムス製剤がうまく調製されたこと、および貯蔵後に最低の粒度の増加が認められたことを明らかにしている。
【０１３９】
実施例2
本実施例の目的は、注射可能剤形としての使用に適したナノ粒子のタクロリムス製剤を調製することであった。
【０１４０】
10％(w/w)タクロリムス(Camida LLC)の、2％ PVP K12および0.15％デオキシコール酸ナトリウムと一緒にした水性分散体を、NanoMill(登録商標)0.01(NanoMill Systems, King of Prussia, PA；例えば米国特許第6,431,478号参照)の10mlチャンバーにおいて、500μm PolyMill(登録商標)摩砕媒体(Dow Chemical)(89％媒体負荷)と共に、ミル粉砕した。この混合物は、速度2500rpmで150分間ミル粉砕した。
【０１４１】
ミル粉砕後、ミル粉砕されたタクロリムス粒子の粒度を、脱イオン蒸留水中で、Horiba LA 910粒度分析計を用い測定した。平均ミル粉砕したタクロリムス粒度は329nmであり、D50は303nmおよびD90は466nmであった。図4は、ミル粉砕したタクロリムスのx100での位相差光学顕微鏡写真である。
【０１４２】
これらの結果は、得られた平均粒度329nmの、安定なナノ粒子のタクロリムス製剤がうまく調製されたことを明らかにしている。
【０１４３】
実施例3
本実施例の目的は、注射可能剤形としての使用に適したナノ粒子のタクロリムス製剤を調製することであった。
【０１４４】
20％(w/w)タクロリムス(Camida LLC)の、3％(w/w)Pluronic(登録商標)S630および0.05％(w/w)DOSSと一緒にした水性分散体を、NanoMill(登録商標)0.01(NanoMill Systems, King of Prussia, PA；例えば米国特許第6,431,478号参照)の10mlチャンバーにおいて、500μm PolyMill(登録商標)摩砕媒体(Dow Chemical)(89％媒体負荷)と共に、ミル粉砕した。この混合物は、速度2500rpmで60分間ミル粉砕した。ミル粉砕したタクロリムスのx100での位相差光学顕微鏡写真を、図5に示した。
【０１４５】
ミル粉砕後、ミル粉砕されたタクロリムス粒子の粒度を、脱イオン蒸留水中で、Horiba LA 910粒度分析計を用い測定した。以下の表3に示すように、最初の平均ミル粉砕したタクロリムス粒度は171nmであり、D50は163nmおよびD90は230nmであった。2回目の＜15℃で1週間冷蔵後の蒸留水中での測定において、平均タクロリムス粒度は194nmであり、D50は180nmおよびD90は279nmであった。冷蔵下で1週間貯蔵後の、ミル粉砕したタクロリムスのx100での位相差光学顕微鏡写真を、図6に示した。
【０１４６】
【表３】
2008533165.tif 000008
【０１４７】
これらの結果は、得られた平均粒度171nmであったので、安定なナノ粒子のタクロリムス製剤がうまく調製されたこと、および貯蔵後に最低の粒度の増加が認められたことを明らかにしている。
【０１４８】
実施例4
本実施例の目的は、注射可能剤形としての使用に適したナノ粒子のタクロリムス製剤を調製することであった。
【０１４９】
10％(w/w)タクロリムス(Camida LLC)の、2％(w/w)ヒドロキシプロピルセルロース(HPC-SL)および0.1％(w/w)DOSSと一緒にした水性分散体を、NanoMill(登録商標)0.01(NanoMill Systems, King of Prussia, PA；例えば米国特許第6,431,478号参照)の10mlチャンバーにおいて、500μm PolyMill(登録商標)摩砕媒体(Dow Chemical)(89％媒体負荷)と共に、ミル粉砕した。この混合物は、速度2500rpmで150分間ミル粉砕した。ミル粉砕したタクロリムスのx100での位相差光学顕微鏡写真を、図7に示した。
【０１５０】
ミル粉砕後、ミル粉砕されたタクロリムス粒子の粒度を、脱イオン蒸留水中で、Horiba LA 910粒度分析計を用い測定した。平均ミル粉砕したタクロリムス粒度は389nmであり、D50は328nmおよびD90は614nmであった。
【０１５１】
これらの結果は、得られた平均粒度389nmであったので、安定なナノ粒子のタクロリムス製剤がうまく調製されたことを明らかにしている。
【０１５２】
実施例5
本実施例の目的は、注射可能剤形としての使用に適したナノ粒子のタクロリムス製剤を調製することであった。
【０１５３】
5％(w/w)タクロリムス(Camida LLC)の、1％(w/w)HPC-SLおよび0.15％(w/w)DOSSと一緒にした水性分散体を、NanoMill(登録商標)0.01(NanoMill Systems, King of Prussia, PA；例えば米国特許第6,431,478号参照)の10mlチャンバーにおいて、500μm PolyMill(登録商標)摩砕媒体(Dow Chemical)(89％媒体負荷)と共に、ミル粉砕した。この混合物は、速度5500rpmで90分間ミル粉砕した。ミル粉砕したタクロリムスのx100での位相差光学顕微鏡写真を、図8に示した。
【０１５４】
ミル粉砕後、ミル粉砕されたタクロリムス粒子の粒度を、脱イオン蒸留水中で、Horiba LA 910粒度分析計を用い測定した。以下の表4に示すように、最初の平均ミル粉砕したタクロリムス粒度は169nmであり、D50は160nmおよびD90は225nmであった。＜15℃で12日間冷蔵後の蒸留水中での2回目の測定において、平均タクロリムス粒度は155nmであり、D50は138nmおよびD90は216nmであった。冷蔵下で12日間貯蔵後の、ミル粉砕したタクロリムスのx100での位相差光学顕微鏡写真を、図9に示した。
【０１５５】
【表４】
2008533165.tif 000009
【０１５６】
これらの結果は、得られた平均粒度169nmであったので、安定なナノ粒子のタクロリムス製剤がうまく調製されたこと、および貯蔵後に最低の粒度の増加が認められたことを明らかにしている。
【０１５７】
実施例6
本実施例の目的は、注射可能剤形としての使用に適したナノ粒子のタクロリムス製剤を調製することであった。
【０１５８】
5％(w/w)タクロリムス(Camida LLC)の、1％(w/w)HPC-SLおよび0.1％(w/w)デオキシコール酸ナトリウムと一緒にした水性分散体を、NanoMill(登録商標)0.01(NanoMill Systems, King of Prussia, PA；例えば米国特許第6,431,478号参照)の10mlチャンバーにおいて、500μm PolyMill(登録商標)摩砕媒体(Dow Chemical)(89％媒体負荷)と共に、ミル粉砕した。この混合物は、速度5500rpmで75分間ミル粉砕した。ミル粉砕したタクロリムスのx100での位相差光学顕微鏡写真を、図10に示した。
【０１５９】
ミル粉砕後、ミル粉砕されたタクロリムス粒子の粒度を、脱イオン蒸留水中で、Horiba LA 910粒度分析計を用い測定した。以下の表5に示すように、最初の平均ミル粉砕したタクロリムス粒度は1,780nmであり、D50は220nmおよびD90は6,665nmであった。＜15℃で12日間冷蔵後の蒸留水中での2回目の測定において、平均タクロリムス粒度は65,100nmであり、D50は31,252nmおよびD90は175,813nmであった。冷蔵下で12日間貯蔵後の、ミル粉砕したタクロリムスのx100での位相差光学顕微鏡写真を、図11に示した。
【０１６０】
【表５】
2008533165.tif 000010
【０１６１】
これらの結果は、12日間の貯蔵後著しい粒度成長および凝集が認められたので、安定なナノ粒子のタクロリムス製剤がうまく調製されなかったことを明らかにしている。更に、ミル粉砕後のタクロリムスのx100での位相差光学顕微鏡写真も、巨大な「ミル粉砕されなかった」可能性のある結晶を示している。
【０１６２】
実施例7
本実施例の目的は、注射可能剤形としての使用に適したナノ粒子のタクロリムス製剤を調製することであった。
【０１６３】
10％(w/w)タクロリムス(Camida LLC)の、2％(w/w)ヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC)および0.05％(w/w)DOSSと一緒にした水性分散体を、NanoMill(登録商標)0.01(NanoMill Systems, King of Prussia, PA；例えば米国特許第6,431,478号参照)の10mlチャンバーにおいて、500μm PolyMill(登録商標)摩砕媒体(Dow Chemical)(89％媒体負荷)と共に、ミル粉砕した。この混合物は、速度2500rpmで60分間ミル粉砕した。ミル粉砕したタクロリムスのx100での位相差光学顕微鏡写真を、図12に示した。
【０１６４】
ミル粉砕後、ミル粉砕されたタクロリムス粒子の粒度を、脱イオン蒸留水中で、Horiba LA 910粒度分析計を用い測定した。以下の表6に示すように、最初の平均ミル粉砕したタクロリムス粒度は215nmであり、D50は196nmおよびD90は311nmであった。＜15℃で1週間冷蔵後の蒸留水中での2回目の測定において、平均タクロリムス粒度は227nmであり、D50は206nmおよびD90は337nmであった。冷蔵下で1週間貯蔵後の、ミル粉砕したタクロリムスのx100での位相差光学顕微鏡写真を、図13に示した。
【０１６５】
【表６】
2008533165.tif 000011
【０１６６】
これらの結果は、得られた平均粒度215nmであったので、安定なナノ粒子のタクロリムス製剤がうまく調製されたこと、および貯蔵後に最低の粒度の増加が認められたことを明らかにしている。
【０１６７】
実施例8
本実施例の目的は、注射可能剤形としての使用に適したナノ粒子のタクロリムス製剤を調製することであった。
【０１６８】
10％(w/w)タクロリムス(Camida LLC)および2％(w/w)Pluronic(登録商標)F108の水性分散体を、NanoMill(登録商標)0.01(NanoMill Systems, King of Prussia, PA；例えば米国特許第6,431,478号参照)の10mlチャンバーにおいて、500μm PolyMill(登録商標)摩砕媒体(Dow Chemical)(89％媒体負荷)と共に、ミル粉砕した。この混合物は、速度2500rpmで60分間ミル粉砕した。ミル粉砕したタクロリムスのx100での位相差光学顕微鏡写真を、図14に示した。
【０１６９】
ミル粉砕後、ミル粉砕されたタクロリムス粒子の粒度を、脱イオン蒸留水中で、Horiba LA 910粒度分析計を用い測定した。以下の表7に示すように、最初の平均ミル粉砕したタクロリムス粒度は237nmであり、D50は212nmおよびD90は355nmであった。＜15℃で1週間冷蔵後の蒸留水中での2回目の測定において、平均タクロリムス粒度は332nmであり、D50は306nmおよびD90は467nmであった。冷蔵下で1週間貯蔵後の、ミル粉砕したタクロリムスのx100での位相差光学顕微鏡写真を、図15に示した。
【０１７０】
【表７】
2008533165.tif 000012
【０１７１】
これらの結果は、得られた平均粒度237nmであるので、安定なナノ粒子のタクロリムス製剤がうまく調製されたこと、および貯蔵後に最低の粒度の増加が認められたことを明らかにしている。
【０１７２】
実施例9
本実施例の目的は、注射可能剤形としての使用に適したナノ粒子のタクロリムス製剤を調製することであった。
【０１７３】
10％(w/w)タクロリムス(Camida LLC)および2％(w/w)Tween(登録商標)80の水性分散体を、NanoMill(登録商標)0.01(NanoMill Systems, King of Prussia, PA；例えば米国特許第6,431,478号参照)の10mlチャンバーにおいて、500μm PolyMill(登録商標)摩砕媒体(Dow Chemical)(89％媒体負荷)と共に、ミル粉砕した。この混合物は、速度2500rpmで60分間ミル粉砕した。ミル粉砕したタクロリムスのx100での位相差光学顕微鏡写真を、図16に示した。
【０１７４】
ミル粉砕後、ミル粉砕されたタクロリムス粒子の粒度を、脱イオン蒸留水中で、Horiba LA 910粒度分析計を用い測定した。以下の表8に示すように、最初の平均ミル粉砕したタクロリムス粒度は208nmであり、D50は191nmおよびD90は298nmであった。＜15℃で1週間冷蔵後の蒸留水中での2回目の測定において、平均タクロリムス粒度は406nmであり、D50は348nmおよびD90は658nmであった。冷蔵下で1週間貯蔵後の、ミル粉砕したタクロリムスのx100での位相差光学顕微鏡写真を、図17に示した。
【０１７５】
【表８】
2008533165.tif 000013
【０１７６】
これらの結果から、タクロリムス粒度が1週間の貯蔵後ほぼ2倍になっていたので、この製剤は恐らく好ましくないことを明らかにしている。しかしながら、粒度は依然として、好ましい2ミクロン未満の粒度以内である。
【０１７７】
実施例10
本実施例の目的は、ナノ粒子のタクロリムスおよびシロリムスを含む注射可能剤形を説明することである。
【０１７８】
ナノ粒子のタクロリムスおよびナノ粒子のシロリムスを含む注射可能組成物は、実施例1〜5または7〜9に記載されている任意のナノ粒子のタクロリムス製剤をナノ粒子のシロリムス組成物と混合することにより調製可能である。ナノ粒子のシロリムス組成物は、US 20030054042、「Stabilization of chemical compounds using nanoparticulate formulations」に記載されているように作製することができる。
【０１７９】
本発明の精神または範囲から逸脱することなく、本発明の方法および組成物において様々な改変および変更を行うことができることが、当業者には明らかであろう。従って、本発明の改変および変更が添付の特許請求の範囲およびその同等物の範囲内に収まるならば、本発明はこれらを含むことが意図される。
【図面の簡単な説明】
【０１８０】
【図１】ミル粉砕していないタクロリムスの、x100での位相差光学顕微鏡写真である。
【図２】10％(w/w)ナノ粒子タクロリムス(Camida LLC)の、2％(w/w)ポリビニルピロリドン(PVP)K29/32および0.05％(w/w)スルホコハク酸ジオクチル(DOSS)との水性分散体の、x100での位相差光学顕微鏡写真である。
【図３】10％(w/w)ナノ粒子のタクロリムス(Camida LLC)の、2％(w/w)ポリビニルピロリドン(PVP)K29/32および0.05％(w/w)スルホコハク酸ジオクチル(DOSS)との水性分散体の、1週間冷蔵保存後の、x100での位相差光学顕微鏡写真である。
【図４】10％(w/w)ナノ粒子のタクロリムス(Camida LLC)の、2％(w/w)PVP K12および0.15％(w/w)デオキシコール酸ナトリウムとの水性分散体の、x100での位相差光学顕微鏡写真である。
【図５】20％(w/w)ナノ粒子のタクロリムス(Camida LLC)の、3％(w/w)Plasdone(登録商標)S630(ビニルピロリドンおよび酢酸ビニルの60:40比でのランダムコポリマー)との水性分散体の、x100での位相差光学顕微鏡写真である。
【図６】20％(w/w)ナノ粒子のタクロリムス(Camida LLC)の、3％(w/w)Plasdone(登録商標)S630(ビニルピロリドンおよび酢酸ビニルの60:40比でのランダムコポリマー)との水性分散体の、1週間冷蔵保存後の、x100での位相差光学顕微鏡写真である。
【図７】10％(w/w)ナノ粒子のタクロリムス(Camida LLC)の、2％(w/w)ヒドロキシプロピルセルロース(HPC-SL)および0.1％(w/w)DOSSとの水性分散体の、x100での位相差光学顕微鏡写真である。
【図８】5％(w/w)ナノ粒子のタクロリムス(Camida LLC)の、1％(w/w)HPC-SLおよび0.15％(w/w)DOSSとの水性分散体の、x100での位相差光学顕微鏡写真である。
【図９】5％(w/w)ナノ粒子のタクロリムス(Camida LLC)の、1％(w/w)HPC-SLおよび0.15％(w/w)DOSSとの水性分散体の、12日間冷蔵保存後の、x100での位相差光学顕微鏡写真である。
【図１０】5％(w/w)ナノ粒子のタクロリムス(Camida LLC)の、1％(w/w)HPC-SLおよび0.1％(w/w)デオキシコール酸ナトリウムとの水性分散体の、x100での位相差光学顕微鏡写真である。
【図１１】5％(w/w)ナノ粒子のタクロリムス(Camida LLC)の、1％(w/w)HPC-SLおよび0.1％(w/w)デオキシコール酸ナトリウムとの水性分散体の、12日間冷蔵保存後の、x100での位相差光学顕微鏡写真である。
【図１２】10％(w/w)ナノ粒子のタクロリムス(Camida LLC)の、2％(w/w)ヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC)および0.05％(w/w)DOSSとの水性分散体の、x100での位相差光学顕微鏡写真である。
【図１３】10％(w/w)ナノ粒子のタクロリムス(Camida LLC)の、2％(w/w)ヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC)および0.05％(w/w)DOSSとの水性分散体の、1週間冷蔵保存後の、x100での位相差光学顕微鏡写真である。
【図１４】10％(w/w)ナノ粒子のタクロリムス(Camida LLC)の、2％Pluronic(登録商標)F108との水性分散体の、x100での位相差光学顕微鏡写真である。
【図１５】10％(w/w)ナノ粒子のタクロリムス(Camida LLC)の、2％Pluronic(登録商標)F108との水性分散体の、1週間冷蔵保存後の、x100での位相差光学顕微鏡写真である。
【図１６】10％(w/w)ナノ粒子のタクロリムス(Camida LLC)の2％Tween(登録商標)80との水性分散体の、x100での位相差光学顕微鏡写真である。
【図１７】10％(w/w)ナノ粒子のタクロリムス(Camida LLC)の、2％Tween(登録商標)80との水性分散体の、1週間冷蔵保存後の、x100での位相差光学顕微鏡写真である。
【図１】
2008533165.tif 000015
【図２】
2008533165.tif 000016
【図３】
2008533165.tif 000017
【図４】
2008533165.tif 000018
【図５】
2008533165.tif 000019
【図６】
2008533165.tif 000020
【図７】
2008533165.tif 000021
【図８】
2008533165.tif 000022
【図９】
2008533165.tif 000023
【図１０】
2008533165.tif 000024
【図１１】
2008533165.tif 000025
【図１２】
2008533165.tif 000026
【図１３】
2008533165.tif 000027
【図１４】
2008533165.tif 000028
【図１５】
2008533165.tif 000029
【図１６】
2008533165.tif 000030
【図１７】
2008533165.tif 000031
【国際調査報告】
2008533165.tif 000032
2008533165.tif 000033
2008533165.tif 000034