(57)【要約】  本発明は、例えばタンパク質キナーゼの活性により細胞増殖を媒介および／または阻害する低酸素選択的細胞傷害剤として有用な新規な複素環トリアジンに関する。本発明はさらに、このような化合物および組成物を含有する医薬組成物、ならびに有効量のこのような化合物を投与することにより、癌および望ましくない血管形成および／または細胞増殖に関連する他の病態を治療する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
腫瘍成長、細胞増殖または血管形成に関連するタンパク質キナーゼ活性を阻害する方法であって、それを必要とする哺乳類に治療上有効な量の式Ｉの複素環トリアジン化合物：
【化１】
2008528679.tif 000039
［式中、
Ｘ１およびＹ１の双方がＮ−オキシドであるか；または
Ｘ１およびＹ１の一方がＮであり、他方がＮもしくはＮ−オキシドであり；
Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨＲ４、不飽和であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、あるいは場合により、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１０、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＮ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ（Ｒ１０）、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ２（Ｒ１０）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０より場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環、および一緒になって縮合二環式系を形成していてもよい２つのＲ１０により場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環であり；
Ｒ２およびＲ３は、各々独立に、水素、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、非置換型または置換型のアリール、飽和型または不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換された５〜７員の複素環式環、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルコキシ、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ６、−ＳＲ６、−ＳＯ２Ｒ６、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ６）２、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ６、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）Ｃ（Ｏ）Ｒ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ（Ｒ６）、−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ２（Ｒ６）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ６、ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ｐＮ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＲ６、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｑＯＲ６、−Ａ−Ｎ（Ｒ６）２あるいは−Ａ−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）から選択され、
ここで、Ａは、場合により−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｎ（Ｒ６）が挿入されたＣ１−Ｃ６アルキリジン基であり、
Ｒ２およびＲ３は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、縮合ベンゼン環または飽和型もしくは不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよい縮合５〜７員複素環式環（このベンゼン環または複素環式環は非置換型または置換型である）を形成していてもよく；
Ｒ６は、Ｈ、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、あるいは飽和型または不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含み、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、場合により、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１０、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＮ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ（Ｒ１０）、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ２（Ｒ１０）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環、および一緒になって縮合二環式系を形成していてもよい２つのＲ１０により場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環であり、かつ、同じ窒素原子と結合している１を超えるＲ６は同一または異なり、
Ｒ７およびＲ８は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって、不飽和型または飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換された、３〜９員Ｎ含有複素環式環を形成し、
ｐは、０または１〜５の整数であり；
ｑは、１〜６の整数であり；
Ｒ４は、Ｈ、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、非置換型または置換型のアリール、不飽和型または飽和型であり、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含み、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換された、５〜７員の複素環式基であり、この炭素環式基または複素環式基Ｒ４は、場合により、水素、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、非置換型または置換型のアリール、飽和型または不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルコキシ、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ６、−ＳＲ６、−ＳＯ２Ｒ６、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ６）２、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ６、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）Ｃ（Ｏ）Ｒ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ７）（Ｒ８）−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ（Ｒ６）、−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ２（Ｒ６）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ６、ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＲ６、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｑＯＲ６、−Ａ−Ｎ（Ｒ６）２あるいは−Ａ−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）から選択される１以上の置換基により置換されていてもよく、ここで、Ａは、場合により、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｎ（Ｒ６）−（ここで、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義された通りである）が挿入されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキリジン基であり；
Ｒ１０は、Ｈまたは非置換型もしくは置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型もしくは置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、または不飽和型もしくは飽和型であり、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含み、かつ、非置換型もしくは任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環であり、ここで、同じ窒素原子と結合している１を超えるＲ１０は同一または異なっている］
、または式Ｉの化合物の薬学上許容される塩、プロドラッグもしくは活性代謝物を投与することを含む、方法。
【請求項２】
式Ｉの複素環トリアジン化合物が式Ｉ（ａ）：
【化２】
2008528679.tif 000040
［式中、
Ｘ１およびＹ１の双方がＮ−オキシドであるか；または
Ｘ１およびＹ１の一方がＮであり、他方がＮもしくはＮ−オキシドであり；
各Ｒ５は、同一または異なり、Ｒ２およびＲ３に関して定義された通りであり；
ｎは、１〜４の整数である］
のベンゾトリアジン化合物、または式Ｉ（ａ）の化合物の薬学上許容される塩、プロドラッグもしくは活性代謝物である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記複素環式トリアジン化合物が、ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−ピリジン−３−イル−アミン、ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−（４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミン、７−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、１−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−３−［５−クロロ−２−（３−ジメチルアミノ−プロポキシ）−フェニル］−尿素、ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−アミン、３−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン、７−（２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、３−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン、１−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル−３−ピラジン−２−イル−尿素、ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−（６−ピペラジン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミン、（６−クロロ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン、（６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン、６−ピペラジン−１−イル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、６−（ピペリジン−４−イルメトキシ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、６−［２−（３，４−ジクロロ−フェニル）−エトキシ］−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−キノリン−３−イル−アミン、４−（ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミノ）−ベンゾニトリル、４−アミノ−Ｎ−［４−（ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミノ）−フェニル］−２−（３，４−ジクロロ−フェニル）−ブチルアミド、ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−［４−（［１，４］ジアゼパン−１−スルホニル）−フェニル］−アミン、１−［２−（２−アミノ−エトキシ）−５−クロロ−フェニル］−３−［１，２，４］トリアジン−３−イル−尿素、６−（２−アミノ−エトキシ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、６−（２−メチルアミノ−エトキシ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、６−（２−ジメチルアミノ−エトキシ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、［６−（２−アミノ−エトキシ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル］−ピリジン−３−イル−アミン、［６−（２−メチルアミノ−エトキシ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル］−ピリジン−３−イル−アミン、［６−（２−ジメチルアミノ−エトキシ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル］−ピリジン−３−イル−アミン、ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イル）−アミン、１−［５−（３−アミノ−プロポキシ）−２−クロロ−フェニル］−３−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−尿素、１−（３−アミノ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−７−イル）−３−ピラジン−２−イル−尿素、ピリド［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、Ｎ＊１＊−ピリド［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアジン−３−イル−エタン−１，２−ジアミン、Ｎ＊１＊−ピリド［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアジン−３−イル−エタン−１，２−ジアミン、７−ピリジン−４−イル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、７−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、３−（ピリジン−３−イルアミノ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−７−カルボン酸（１−ベンジル−ピロリジン−３−イル）−アミド、１−［３−（１−ベンジル−ピロリジン−３−イルアミノ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル］−３−ピラジン−２−イル−尿素、ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−アミン、４−アミノ−Ｎ−（３−アミノ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル）−２−（３，４−ジクロロ−フェニル）−ブチルアミド、１−［２−（３−アミノ−プロポキシ）−５−クロロ−フェニル］−３−（６−クロロ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−尿素、１−［２−（３−アミノ−プロポキシ）−５−クロロ−フェニル］−３−（７−フルオロ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−尿素、Ｎ−［３−（ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミノ）−４−メチル−フェニル］−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−ベンズアミド、７−フルオロ−６−ピペラジン−１−イル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、（６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３  −イル）−（３−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミン、３−ピペラジン−１−イル−７−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン、１−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−７−イル］−３−ピラジン−２−イル−尿素、（６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミン、（６−クロロ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミンからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
Ｘ１およびＹ１の少なくとも一方がＮ−オキシドである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記複素環トリアジン化合物が、１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン、（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミン、１−オキシ−７−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−アミン、３−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン  １−オキシド、１−オキシ−７−（２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、３−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン  １−オキシド、（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（６−ピペラジン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミン、（６−クロロ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン、（１−オキシ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン、１−オキシ−６−ピペラジン−１−イル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、１−オキシ−６−（ピペリジン−４−イルメトキシ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン塩酸塩、６−［２−（３，４−ジクロロ−フェニル）−エトキシ］−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、１−（３−アミノ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル）−３−ピラジン−２−イル−尿素、４−（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミノ）−ベンゾニトリル、１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−キノリン−３−イル−アミン、４−アミノー２（３，４−ジクロロ−フェニル）−N-［４−（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン）フェニル］−ブチルアミド、［４−（［１，４］ジアゼパン−１−スルホニル）−フェニル］−（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−アミン、１−［２−（２−アミノ−エトキシ）−５−クロロ−フェニル］−３（１−オキシ−［１，２，４］トリアジン−３−イル）−尿素、６−（２−アミノ−エトキシ）−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、６−（２−メチルアミノ−エトキシ）−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、６−（２−ジメチルアミノ−エトキシ）−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、［６−（２−アミノ−エトキシ）−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル］−ピリジン−３−イル−アミン、［６−（２−メチルアミノ−エトキシ）−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル］−ピリジン−３−イル−アミン、［６−（２−ジメチルアミノ−エトキシ）−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル］−ピリジン−３−イル−アミン、（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イル）−アミン、１−［５−（３−アミノ−プロポキシ）−２−クロロ−フェニル］−３−（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−尿素、１−（３−アミノ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−７−イル）−３−ピラジン−２−イル−尿素、１−オキシ−ピリド［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、Ｎ＊１＊−（１−オキシ−ピリド［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアジン−３−イル）−エタン−１，２−ジアミン、１−オキシ−７−ピリジン−４−イル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、１−オキシ−７−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、１−オキシ−３−（ピリジン−３−イルアミノ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−７−カルボン酸（１−ベンジル−ピロリジン−３−イル）−アミド、１−［３−（１−ベンジル−ピロリジン−３−イルアミノ）−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル］−３−ピラジン−２−イル−尿素、（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−アミン、４−アミノ−Ｎ−（３−アミノ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル）−２−（３，４−ジクロロ−フェニル）−ブチルアミド、１−［２−（３−アミノ−プロポキシ）−５−クロロ−フェニル］−３−（６−クロロ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−尿素、１−［２−（３−アミノ−プロポキシ）−５−クロロ−フェニル］−３−（７−フルオロ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−尿素、Ｎ−［４−メチル−３−（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミノ）−フェニル］−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−ベンズアミド、７−フルオロ−１−オキシ−６−ピペラジン−１−イル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、（１−オキシ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（３−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミン、３−ピペラジン−１−イル−７−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン  １−オキシド、１−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−７−イル］−３−ピラジン−２−イル−尿素、（１−オキシ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミン、（６−クロロ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミンからなる群から選択される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記複素環トリアジン化合物が、（１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン、４−（１，４−ジオキシーベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミノ）−ベンゾニトリル、（１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−キノリン−３−イル−アミン、４−アミノー２（３，４−ジクロロ−フェニル）−N−［４−（１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミノ）フェニル］−ブチルアミド、［４−（［１，４］ジアゼパン−１−スルホニル）−フェニル］−（１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−アミン、１−［２−（２−アミノ−エトキシ）−５−クロロ−フェニル］−３（１，４−ジオキシ−［１，２，４］トリアジン−３−イル）−尿素、３−アミノー６−（２−アミノ−エトキシ）−１−ヒドロキシ−４−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−１−イウム、６−（２−メチルアミノ−エトキシ）−１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、６−（２−ジメチルアミノ−エトキシ）−１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、６−（２−アミノ−エトキシ）−１−ヒドロキシ−４−オキシ−３−（ピリジン−３−イルアミン）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−１−イウム、１−ヒドロキシ−６−（２−メチルアミノ−エトキシ）−４−オキシ−３−（ピリジン−３−イルアミノ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−１−イウム、６−（２−ジメチルアミノ−エトキシ）−１−ヒドロキシ−４−オキシ−３−（ピリジン−３−イルアミノ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−１−イウム、（１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イル）−アミン、１−［５−（３−アミノ−プロポキシ）−２−クロロ−フェニル］−３−（１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−尿素、１−（３−アミノ−１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−７−イル）−３−ピラジン−２−イル−尿素、１−（３−アミノ−１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル）−３−ピラジン−２−イル−尿素、１，４−ジオキシ−ピリド［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、Ｎ＊１＊−（１，４−ジオキシ−ピリド［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアジン−３−イル）−エタン−１，２−ジアミン、（１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミン、１，４−ジオキシ−３−（ピリジン−３−イルアミン）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−７カルボン酸（１−ベンジル−ピロリジン−３−イル）−アミド、１，４−ジオキシ−７−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、１，４−ジオキシ−７−ピリジン−４−イル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、１，４−ジオキシ−７−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、１−［３−（１−ベンジル−ピロリジン��３−イルアミノ）−１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル］−３−ピラジン−２−イル−尿素、（１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−アミン、（１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−アミン、１，４−ジオキシ−７−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、１−［５−クロロ−２−（３−ジメチルアミノ−プロポキシ）−フェニル］−３−（１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−尿素、３−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン  １，４−ジオキシド、１，４−ジオキシ−７−（２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、３−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン  １，４−ジオキシド、１−（１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル）−３−ピラジン−２−イル−尿素、（１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（６−ピペラジン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミン、（６−クロロ−１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン、（１，４−ジオキシ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン、１，４−ジオキシ−６−ピペラジン−１−イル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、７−フルオロ−１，４−ジオキシ−６−ピペラジン−１−イル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−アミン、３−ピペラジン−１−イル−７−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン  １，４−ジオキシド、１，４−ジオキシ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−（３−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミン、１−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−７−イル］−３−ピラジン−２−イル−尿素、４−アミノ−Ｎ−（３−アミノ−１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル）−２−（３，４−ジクロロ−フェニル）−ブチルアミド、１，４−ジオキシ−６−（ピペリジン−４−イルメトキシ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、６−［２−（３，４−ジクロロ−フェニル）−エトキシ］−１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、１−［２−（３−アミノ−プロポキシ）−５−クロロ−フェニル］−３−（６−クロロ−１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−尿素、１，４−ジオキシ−７−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、１−［２−（３−アミノ−プロポキシ）−５−クロロ−フェニル］−３−（７−フルオロ−１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−尿素、Ｎ−［３−（１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミノ）−４−メチル−フェニル］−��−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−ベンズアミド、（６−クロロ−１，４−ジオキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミン、１，４−ジオキシ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミンからなる群から選択される、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
前記複素環トリアジン化合物が、低酸素環境で治療的に活性な代謝物へと選択的に還元されるプロドラッグである、請求項４に記載の方法。
【請求項８】
前記プロドラッグ化合物が、約−３００ｍＶ〜約−５５０ｍＶの範囲の一電子還元電位を有する、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記プロドラッグ化合物が、約−４００ｍＶ〜約−５１０ｍＶの範囲の一電子還元電位を有する、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
哺乳類において癌細胞の増殖を阻害する方法であって、治療上有効な量の式Ｉ：
【化３】
2008528679.tif 000041
［式中、
Ｘ１およびＹ１の双方がＮ−オキシドであるか；または
Ｘ１およびＹ１の一方がＮであり、他方がＮもしくはＮ−オキシドであり；
Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨＲ４、不飽和であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、あるいは、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１０、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＮ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ（Ｒ１０）、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ２（Ｒ１０）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０より場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環、および一緒になって縮合二環式系を形成していてもよい２つのＲ１０により場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環であり；
Ｒ２およびＲ３は、各々独立に、水素、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、非置換型または置換型のアリール、飽和型または不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルコキシ、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ６、−ＳＲ６、−ＳＯ２Ｒ６、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ６）２、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ６、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）Ｃ（Ｏ）Ｒ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ（Ｒ６）、−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ２（Ｒ６）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ６、ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ｐＮ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＲ６、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｑＯＲ６、−Ａ−Ｎ（Ｒ６）２あるいは−Ａ−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）から選択され、
ここで、Ａは、場合により−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｎ（Ｒ６）が挿入されてたＣ１−Ｃ６アルキリジン基であり、
Ｒ２およびＲ３は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、縮合ベンゼン環または飽和型もしくは不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよい縮合５〜７員複素環式環（このベンゼン環または複素環式環は非置換型または置換型である）を形成していてもよく；
Ｒ６は、Ｈ、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、あるいは飽和型または不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含み、かつ、非置換型もしくは任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、場合により、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１０、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＮ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ（Ｒ１０）、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ２（Ｒ１０）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環、および一緒になって縮合二環式系を形成していてもよい２つのＲ１０により場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環であり、かつ、同じ窒素原子と結合している１を超えるＲ６は同一または異なり、
Ｒ７およびＲ８は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって、不飽和型または飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている、３〜９員Ｎ含有複素環式環を形成し、
ｐは、０または１〜５の整数であり；
ｑは、１〜６の整数であり；
Ｒ４は、Ｈ、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、非置換型または置換型のアリール、不飽和型または飽和型であり、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含み、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている、５〜７員の複素環式基であり、この炭素環式基または複素環式基Ｒ４は、場合により、水素、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、非置換型または置換型のアリール、飽和型または不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルコキシ、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ６、−ＳＲ６、−ＳＯ２Ｒ６、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ６）２、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ６、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）Ｃ（Ｏ）Ｒ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ７）（Ｒ８）−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ（Ｒ６）、−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ２（Ｒ６）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ６、ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＲ６、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｑＯＲ６、−Ａ−Ｎ（Ｒ６）２、あるいは−Ａ−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）から選択される１以上の置換基により置換されていてもよく、ここで、Ａは、場合により、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｎ（Ｒ６）−（ここで、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義された通りである）が挿入されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキリジン基であり；
Ｒ１０は、Ｈあるいは非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、あるいは不飽和型または飽和型であり、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含み、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環であり、ここで、同じ窒素原子と結合している１を超えるＲ１０は同一または異なっている］
のタンパク質キナーゼ阻害剤プロドラッグ、または式Ｉの化合物の薬学上許容される塩を前記哺乳類に投与することを含む、方法。
【請求項１１】
前記プロドラッグが式Ｉ（ａ）：
【化４】
2008528679.tif 000042
［式中、
Ｘ１およびＹ１の双方がＮ−オキシドであるか；または
Ｘ１およびＹ１の一方がＮであり、他方がＮもしくはＮ−オキシドであり；
各Ｒ５は、同一または異なり、Ｒ２およびＲ３に関して定義された通りであり；
ｎは、１〜４の整数である］
の化合物、または式Ｉ（ａ）の化合物の薬学上許容される塩である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記プロドラッグが、低酸素環境における還元を介して治療上有効な代謝物へと選択的に還元される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記プロドラッグが、約−３００ｍＶ〜約−５５０ｍＶの範囲の一電子還元電位を有する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記プロドラッグが、約−４００ｍＶ〜約−５１０ｍＶの範囲の一電子還元電位を有する、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記哺乳類に電離放射線を施与することをさらに含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１６】
前記癌細胞のＤＮＡに酸化的傷害を与える化学療法薬を投与することをさらに含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１７】
前記化学療法薬がチラパザミンである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記プロドラッグの投与が、低酸素腫瘍細胞における前記電離放射線の細胞傷害性を増強する、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記プロドラッグの投与が、低酸素腫瘍細胞における前記チラパザミンの細胞傷害性を増強する、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ、ＮＨＲ４、不飽和であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、あるいは場合により、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１０、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ７）（ＲＳ）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＮ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ（Ｒ１０）、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ２（Ｒ１０）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０より場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環、および一緒になって縮合二環式系を形成していてもよい２つのＲ１０により場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環である、請求項１０に記載の方法。
【請求項２１】
タンパク質キナーゼの活性を阻害する方法であって、該キナーゼを有効量の式Ｉ：
【化５】
2008528679.tif 000043
［式中、
Ｘ１およびＹ１の一方がＮであり、他方がＮまたはＮ−オキシドであり；
Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨＲ４、不飽和であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、あるいはハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１０、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ７）（ＲＳ）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＮ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ（Ｒ１０）、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ２（Ｒ１０）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０より場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環、および一緒になって縮合二環式系を形成していてもよい２つのＲ１０により場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環であり；
Ｒ２およびＲ３は、各々独立に、水素、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、非置換型または置換型のアリール、飽和型または不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルコキシ、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ６、−ＳＲ６、−ＳＯ２Ｒ６、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ６）２、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ６、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）Ｃ（Ｏ）Ｒ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ（Ｒ６）、−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ２（Ｒ６）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ６、ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ｐＮ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＲ６、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｑＯＲ６、−Ａ−Ｎ（Ｒ６）２、あるいは−Ａ−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）から選択され、
ここで、Ａは、場合により−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｎ（Ｒ６）が挿入されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキリジン基であり、
Ｒ２およびＲ３は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、縮合ベンゼン環または飽和型もしくは不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよい縮合５〜７員複素環式環（このベンゼン環または複素環式環は非置換型または置換型である）を形成していてもよく；
Ｒ６は、Ｈ、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型もしくは置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、あるいは飽和型または不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含み、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、場合により、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１０、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＮ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ（Ｒ１０）、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ２（Ｒ１０）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環、および一緒になって縮合二環式系を形成していてもよい２つのＲ１０により場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環であり、かつ、同じ窒素原子と結合している１を超えるＲ６は同一または異なり、
Ｒ７およびＲ８は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって、不飽和型または飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている、３〜９員Ｎ含有複素環式環を形成し、
ｐは、０または１〜５の整数であり；
ｑは、１〜６の整数であり；
Ｒ４は、Ｈ、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、非置換型または置換型のアリール、不飽和型または飽和型であり、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含み、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている、５〜７員の複素環式基であり、この炭素環式基または複素環式基Ｒ４は、場合により、水素、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、非置換型または置換型のアリール、飽和型または不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルコキシ、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ６、−ＳＲ６、−ＳＯ２Ｒ６、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ６）２、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ６、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）Ｃ（Ｏ）Ｒ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ７）（Ｒ８）−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ（Ｒ６）、−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ２（Ｒ６）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ６、ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＲ６、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｑＯＲ６、−Ａ−Ｎ（Ｒ６）２、あるいは−Ａ−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）から選択される１以上の置換基により置換されていてもよく、ここで、Ａは、場合により、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｎ（Ｒ６）−（ここで、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義された通りである）が挿入されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキリジン基であり；
Ｒ１０は、Ｈ、あるいは非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、あるいは不飽和型または飽和型であり、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含み、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環であり、ここで、同じ窒素原子と結合している１を超えるＲ１０は同一または異なっている］
のキナーゼ阻害剤に曝すことを含む、方法。
【請求項２２】
前記キナーゼ阻害剤が式Ｉ（ａ）：
【化６】
2008528679.tif 000044
［式中、
Ｘ１およびＹ１の一方がＮであり、他方がＮまたはＮ−オキシドであり；
各Ｒ５は、同一または異なり、Ｒ２およびＲ３に関して定義された通りであり；
ｎは、１〜４の整数である］
のベンゾトリアジン化合物である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記キナーゼ阻害剤が、ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−ピリジン−３−イル−アミン、ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−（４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミン、７−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、１−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−３−［５−クロロ−２−（３−ジメチルアミノ−プロポキシ）−フェニル］−尿素、ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−アミン、３−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン、７−（２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、３−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン、１−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル−３−ピラジン−２−イル−尿素、ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−（６−ピペラジン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミン、（６−クロロ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン、（６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン、６−ピペラジン−１−イル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、６−（ピペリジン−４−イルメトキシ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、６−［２−（３，４−ジクロロ−フェニル）−エトキシ］−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−キノリン−３−イル−アミン、４−（ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミノ）−ベンゾニトリル、４−アミノ−Ｎ−［４−（ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミノ）−フェニル］−２−（３，４−ジクロロ−フェニル）−ブチルアミド、ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−［４−（［１，４］ジアゼパン−１−スルホニル）−フェニル］−アミン、１−［２−（２−アミノ−エトキシ）−５−クロロ−フェニル］−３−［１，２，４］トリアジン−３−イル−尿素、６−（２−アミノ−エトキシ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、６−（２−メチルアミノ−エトキシ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、６−（２−ジメチルアミノ−エトキシ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、［６−（２−アミノ−エトキシ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル］−ピリジン−３−イル−アミン、［６−（２−メチルアミノ−エトキシ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル］−ピリジン−３−イル−アミン、［６−（２−ジメチルアミノ−エトキシ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル］−ピリジン−３−イル−アミン、ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−（５−ピペラジン−１−イル−ピリジン−２−イル）−アミン、１−［５−（３−アミノ−プロポキシ）−２−クロロ−フェニル］−３−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−尿素、１−（３−アミノ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−７−イル）−３−ピラジン−２−イル−尿素、ピリド［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、Ｎ＊１＊−ピリド［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアジン−３−イル−エタン−１，２−ジアミン、Ｎ＊１＊−ピリド［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアジン−３−イル−エタン−１，２−ジアミン、７−ピリジン−４−イル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、７−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、３−（ピリジン−３−イルアミノ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−７−カルボン酸（１−ベンジル−ピロリジン−３−イル）−アミド、１−［３−（１−ベンジル−ピロリジン−３−イルアミノ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル］−３−ピラジン−２−イル−尿素、ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−アミン、４−アミノ−Ｎ−（３−アミノ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル）−２−（３，４−ジクロロ−フェニル）−ブチルアミド、１−［２−（３−アミノ−プロポキシ）−５−クロロ−フェニル］−３−（６−クロロ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−尿素、１−［２−（３−アミノ−プロポキシ）−５−クロロ−フェニル］−３−（７−フルオロ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−尿素、Ｎ−［３−（ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミノ）−４−メチル−フェニル］−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−ベンズアミド、７−フルオロ−６−ピペラジン−１−イル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、（６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（３−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミン、３−ピペラジン−１−イル−７−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン、１−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−７−イル］−３−ピラジン−２−イル−尿素、（６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミン、（６−クロロ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミンからなる群から選択される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
前記キナーゼ阻害剤が、１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン、（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミン、１−オキシ−７−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−アミン、３−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン  １−オキシド、１−オキシ−７−（２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、３−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン  １−オキシド、（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（６−ピペラジン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミン、（６−クロロ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン、（１−オキシ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン、１−オキシ−６−ピペラジン−１−イル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、１−オキシ−６−（ピペリジン−４−イルメトキシ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン塩酸塩、６−［２−（３，４−ジクロロ−フェニル）−エトキシ］−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、１−（３−アミノ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル）−３−ピラジン−２−イル−尿素、４−（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミノ）−ベンゾニトリル、１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−キノリン−３−イル−アミン、４−アミノー２（３，４−ジクロロ−フェニル）−Ｎ-［４−（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミノ）フェニル］−ブチルアミド、［４−（［１，４］ジアゼパン−１−スルホニル）−フェニル］−（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−アミン、１−［２−（２−アミノ−エトキシ）−５−クロロ−フェニル］−３−（１−オキシ−［１，２，４］トリアジン−３−イル）−尿素、６−（２−アミノ−エトキシ）−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、６−（２−メチルアミノ−エトキシ）−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、６−（２−ジメチルアミノ−エトキシ）−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、［６−（２−アミノ−エトキシ）−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル］−ピリジン−３−イル−アミン、［６−（２−メチルアミノ−エトキシ）−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル］−ピリジン−３−イル−アミン、６−（２−ジメチルアミノ−エトキシ）−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル］−ピリジン−３−イル−アミン、（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（５−ピ���ラジン−１−イル−ピリジン−２−イル）−アミン、１−［５−（３−アミノ−プロポキシ）−２−クロロ−フェニル］−３−（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−尿素、１−（３−アミノ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−７−イル）−３−ピラジン−２−イル−尿素、１−オキシ−ピリド［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、Ｎ＊１＊−（１−オキシ−ピリド［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアジン−３−イル）−エタン−１，２−ジアミン、１−オキシ−７−ピリジン−４−イル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、１−オキシ−７−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、１−オキシ−３−（ピリジン−３−イルアミノ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−７−カルボン酸（１−ベンジル−ピロリジン−３−イル）−アミド、１−［３−（１−ベンジル−ピロリジン−３−イルアミノ）−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル］−３−ピラジン−２−イル−尿素、（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−アミン、４−アミノ−Ｎ−（３−アミノ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル）−２−（３，４−ジクロロ−フェニル）−ブチルアミド、１−［２−（３−アミノ−プロポキシ）−５−クロロ−フェニル］−３−（６−クロロ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−尿素、１−［２−（３−アミノ−プロポキシ）−５−クロロ−フェニル］−３−（７−フルオロ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−尿素、Ｎ−［４−メチル−３−（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミノ）−フェニル］−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−ベンズアミド、７−フルオロ−１−オキシ−６−ピペラジン−１−イル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン、（１−オキシ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（３−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミン、３−ピペラジン−１−イル−７−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン  １−オキシド、１−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−７−イル］−３−ピラジン−２−イル−尿素、（１−オキシ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミン、（６−クロロ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミンからなる群から選択される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２５】
前記キナーゼ阻害剤がin vivoにおいてそのＮ−オキシドプロドラッグの還元により生成される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２６】
前記キナーゼが、Ａｒｇ、Ａｂｌ、オーロラ  Ａ、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＣＤＫ２／サイクリンＥ、ＣＨＫ１、ｃ−ＲＡＦ、ｃＳＲＣ、ＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ４、ＧＦＲ１、ＪＮＫ１α１、ＫＤＲ、ＭＡＰＫ２、ＭＥＫ１、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＤＧＦＲβ、ＰＫＣθ、およびＰｌｋ３、Ｆｌｔ−１、Ｃ＝Ｋｉｔ、ＦＧＦＲ１、ＥＲＢＢＺ、ＣＭｅｔ、ＴＩＥＺ、ＲＥＴ、ＶＥＧＦＲ、ＩＧＦ−１Ｒ、Ａｋｔ、ＰＫＡ、Ｐ１３Ｋ、ＰＤＫ１、ＰＤＫ２、Ｃｄｋ２、Ｃｄｋ４、Ｃｋ２、Ｍｙｔ１、Ｗｅｅｌ、オーロラ  Ｂ、Ｐｌｋ、Ｂｕｌｂ１、Ｂｕｌｂ３、Ｃｈｋ２、ＡＴＭ、ＡＴＲ、およびＤＮＡ−ＰＫからなる群から選択される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２７】
前記キナーゼが、Ｃｋ２、Ａｒｇ、Ａｂｌ、オーロラ  Ａ、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＫＤＲ、およびｐ７０Ｓ６からなる群から選択される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
式Ｉ：
【化７】
2008528679.tif 000045
［式中、
Ｘ１およびＹ１の双方がＮ−オキシドであるか；または
Ｘ１およびＹ１の一方がＮであり、他方がＮもしくはＮ−オキシドであり；
Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨＲ４、不飽和であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、あるいはハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１０、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＮ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ（Ｒ１０）、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ２（Ｒ１０）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０より場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環、および一緒になって縮合二環式系を形成していてもよい２つのＲ１０により場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環であり；
Ｒ２およびＲ３は、各々独立に、水素、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、非置換型または置換型のアリール、飽和型または不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルコキシ、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ６、−ＳＲ６、−ＳＯ２Ｒ６、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ６）２、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ６、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）Ｃ（Ｏ）Ｒ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ（Ｒ６）、−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ２（Ｒ６）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ６、ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ｐＮ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＲ６、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｑＯＲ６、−Ａ−Ｎ（Ｒ６）２、あるいは−Ａ−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）から選択され、
ここで、Ａは、場合により−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｎ（Ｒ６）が挿入されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキリジン基であり、
Ｒ２およびＲ３は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、縮合ベンゼン環または飽和型もしくは不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよい縮合５〜７員複素環式環（このベンゼン環または複素環式環は非置換型または置換型である）を形成していてもよく；
Ｒ６は、Ｈ、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、あるいは飽和型または不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含み、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、場合により、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１０、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＮ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ（Ｒ１０）、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ２（Ｒ１０）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環、および一緒になって縮合二環式系を形成していてもよい２つのＲ１０により場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環であり、かつ、同じ窒素原子と結合している１を超えるＲ６は同一または異なり、
Ｒ７およびＲ８は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって、不飽和型または飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている、３〜９員Ｎ含有複素環式環を形成し、
ｐは、０または１〜５の整数であり；
ｑは、１〜６の整数であり；
Ｒ４は、Ｈ、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、非置換型または置換型のアリール、不飽和型または飽和型であり、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含み、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている、５〜７員の複素環式基であり、この炭素環式基または複素環式基Ｒ４は、場合により、水素、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、非置換型または置換型のアリール、飽和型または不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルコキシ、非置換型もしくは置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ６、−ＳＲ６、−ＳＯ２Ｒ６、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ６）２、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ６、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）Ｃ（Ｏ）Ｒ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ７）（Ｒ８）−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ（Ｒ６）、−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ２（Ｒ６）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ６、ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＲ６、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｑＯＲ６、−Ａ−Ｎ（Ｒ６）２、あるいは−Ａ−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）から選択される１以上の置換基により置換されていてもよく、ここで、Ａは、場合により、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｎ（Ｒ６）−（ここで、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義された通りである）が挿入されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキリジン基であり；
Ｒ１０は、Ｈあるいは非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、あるいは不飽和型または飽和型であり、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含み、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環であり、ここで、同じ窒素原子と結合している１を超えるＲ１０は同一または異なっている］
を有する、低酸素癌細胞の増殖を選択的に阻害するためのプロドラッグ、または薬学上許容される塩。
【請求項２９】
前記プロドラッグが式Ｉ（ａ）：
【化８】
2008528679.tif 000046
Ｘ１およびＹ１の双方がＮ−オキシドであるか；または
Ｘ１およびＹ１の一方がＮであり、他方がＮ−オキシドであり；
各Ｒ５は、同一または異なり、Ｒ２およびＲ３に関して定義された通りであり；
ｎは、１〜４の整数である］
の化合物またはその薬学上許容される塩である、請求項２８に記載のプロドラッグ。
【請求項３０】
前記プロドラッグが、約−４００ｍＶ〜約−５１０ｍＶの範囲の一電子還元電位を有する、請求項２８に記載のプロドラッグ。
【請求項３１】
低酸素環境において少なくとも１つのＮ−オキシド部分が還元を受けて、タンパク質キナーゼ活性を阻害する代謝物を形成する、請求項２８に記載のプロドラッグ。
【請求項３２】
前記代謝物が、Ａｒｇ、Ａｂｌ、オーロラ  Ａ、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＣＤＫ２／サイクリンＥ、ＣＨＫ１、ｃ−ＲＡＦ、ｃＳＲＣ、ＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ４、ＧＦＲ１、ＪＮＫ１α１、ＫＤＲ、ＭＡＰＫ２、ＭＥＫ１、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＤＧＦＲβ、ＰＫＣθ、およびＰｌｋ３、Ｆｌｔ−１、Ｃ＝Ｋｉｔ、ＦＧＦＲ１、ＥＲＢＢＺ、ＣＭｅｔ、ＴＩＥＺ、ＲＥＴ、ＶＥＧＦＲ、ＩＧＦ−１Ｒ、Ａｋｔ、ＰＫＡ、Ｐ１３Ｋ、ＰＤＫ１、ＰＤＫ２、Ｃｄｋ２、Ｃｄｋ４、Ｃｋ２、Ｍｙｔ１、Ｗｅｅｌ、オーロラ  Ｂ、Ｐｌｋ、Ｂｕｌｂ１、Ｂｕｌｂ３、Ｃｈｋ２、ＡＴＭ、ＡＴＲ、およびＤＮＡ−ＰＫからなる群から選択されるタンパク質キナーゼの活性を阻害する、請求項３１に記載のプロドラッグ。
【請求項３３】
前記代謝物が、Ｃｋ２、Ａｒｇ、Ａｂｌ、オーロラ  Ａ、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＫＤＲ、およびｐ７０Ｓ６からなる群から選択されるタンパク質キナーゼの活性を阻害する、請求項３１に記載のプロドラッグ。
【請求項３４】
制御を欠いた細胞増殖に関連する病態を治療するための医薬組成物であって、薬学上許容される担体と治療上有効な量の、請求項２８に記載のタンパク質キナーゼ阻害剤プロドラッグとを含んでなる、医薬組成物。
【請求項３５】
チラパザミンをさらに含んでなる、請求項３４に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本願は、３５Ｕ．Ｓ．Ｃ１１９条および１２０条の下、２００５年５月６日出願の米国仮特許出願第６０／６７８２０２号および２００５年２月１日出願のＵＫ特許出願第０５０１９９９．７号に対する優先権を主張するものである。
【発明の分野】
【０００２】
本発明は、タンパク質キナーゼの阻害に有用な３置換１，２，４−ベンゾトリアジン化合物、並びに単独または放射線および／もしくは他の抗癌剤と組み合わせた治療のための、低酸素選択的プロドラッグおよび放射線増感剤として有用なそのオキシドに関する。
【発明の背景】
【０００３】
タンパク質キナーゼは、細胞内の多様なシグナル伝達プロセスの制御を担う構造上関連のある酵素の大きなファミリーを構成している(Hardie, G. and Hanks, S. (1995) The Protein Kinase Facts Book. I and II, Academic Press, San Diego, CA)。タンパク質キナーゼはこれを、ヌクレオシド三リン酸からシグナル伝達経路に関与する標的タンパク質へのホスホリル転移を果たすことにより行っている。これらのタンパク質キナーゼおよび経路のいくつかは細胞外刺激により刺激され、例えば、環境ストレスおよび化学ストレスシグナル（例えば、熱ショック、紫外線、Ｈ２Ｏ２、浸透圧ショック）、サイトカイン（例えば、インターロイキン−１（ＩＬ−Ｉ）および腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）が挙げられる。このようなシグナルは細胞内でいくつかの経路をもたらし、多くの病態の進行に重要であり得る。癌では多くのタンパク質キナーゼが調節を受けないか、構成的に活性であるのが一般的である。さらに、総ての細胞の細胞周期は主としてタンパク質キナーゼにより調節され、これらを妨害すると、アポトーシス、すなわちプログラムされた細胞死による細胞死が起こり得る。アップレギュレーションにより不適切な増殖をもたらすタンパク質キナーゼとしては、ＥＧＦＲ、ＥＲＢＢ２、ＰＤＧＦＲ、ｃＭｅｔ、ＴＩＥ２、ＲＥＴ、ＦＧＦＲ、ＶＥＧＦＲ、ＩＧＦ−１Ｒが挙げられる。シグナル伝達に関与するタンパク質キナーゼとしては、ＰＫＣ、Ａｋｔ、Ｐ７０Ｓ６、ＰＫＡ、ＰＤＫ１、ＰＤＫ２が挙げられる。細胞周期の進行に関与するタンパク質キナーゼとしては、Ｃｄｋ１、Ｃｄｋ２、Ｃｄｋ４、Ｍｙｔ１、Ｃｈｋ１、Ｗｅｅｌ、オーロラＡまたはＢ、Ｐｌｋ、Ｂｕｌｂ１または３が挙げられる。さらに、ＤＮＡ損傷に関与するタンパク質キナーゼとしては、Ｃｈｋ１、Ｃｈｋ２、ＡＴＭ、ＡＴＲ、ＤＮＡ−ＰＫ、＋ａｂｌ、ＡｒｇおよびＣＫＩＩが挙げられる。
【０００４】
細胞増殖のメカニズムは、細胞レベルや分子レベルで活発な研究が進められている。細胞レベルでは、シグナル伝達経路の脱調節、細胞周期制御の欠如、制御を欠いた血管形成または炎症経路の刺激は精査下にあるが、分子レベルでは、これらのプロセスは様々なタンパク質により調整され、中でもタンパク質キナーゼが突出して検討されている。また、プログラムされた細胞死、すなわちアポトーシスから全体的な増殖低下が起こることもあり、これもまたいくつかのタンパク質分解酵素タンパク質が関与する。複数の経路によって調整される。
【０００５】
候補調節タンパク質の中でも、タンパク質キナーゼは、タンパク質の特定のチロシン、セリン、またはトレオニン残基のヒドロキシル基のリン酸化を触媒する酵素ファミリーである。一般に、このようなリン酸化はこのタンパク質の機能を劇的に摂動し、よって、タンパク質キナーゼは、代謝、細胞増殖、細胞分化、および細胞生存を含む多様な細胞プロセスの調節の中枢である。タンパク質キナーゼの活性が必要であることが知られている多くの異なる細胞機能のうちいくつかのプロセスは、ある特定の病態の治療的介入の魅力ある標的である。タンパク質キナーゼが中枢的な役割を果たす２つの例が細胞周期の制御と血管形成であり、これらのプロセスは固形腫瘍の増殖ならびに他の疾病に不可欠である。
【０００６】
固形腫瘍は総てのヒト癌の９０％以上を占め、酸素の極めて少ない、すなわち、低酸素の領域を有する(Brown, Molecular Medicine Today, 2000 (vol 6), 157-161)。これは、血液供給が支えることができるよりも速く細胞が増殖するためであり、特に非常に蛇行している血管では血流が遅くなるので、細胞は血管の酸素の拡散距離（１００〜１５０μｍ）からさらに離れてしまう。これらの低酸素細胞は、電離放射線のよる死滅に抵抗性がある(Movsas et al., Cancer, 2000, 89, 2018; Rudat et al., Radiother. Oncol, 2000, 57, 31)。低酸素細胞はまた、固形腫瘍の細胞傷害化学療法に対する応答を損なうとも考えられている(Brown and Giaccia, Cancer Res., 1998, 58, 1408)。低酸素癌細胞はまた悪性進行を促進し、腫瘍をより転移しやすくする。典型的には、低酸素性の高い腫瘍ほど治癒しにくいということが、多くの臨床試験で実証されている。しかしながら、腫瘍の低酸素状態を利用することもでき、低酸素癌細胞内の異なる化学環境を利用する薬剤が開発されている。このような化合物の１つに、チラパザミン(TPZ - Denny and Wilson, Exp Opin. Invest. Drugs, 2000, 9, 2889)と呼ばれる、３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシドがある。ＴＰＺは治療的濃度では有望な臨床活性を示すが、この薬剤はまた、非低酸素細胞にも著しい毒性を示し、悪心、嘔吐、下痢、好中球減少、血小板減少および筋肉痙攣などの望ましくない副作用を生じる。これらの毒性制限があるので、ＴＰＺは腫瘍の低酸素状態を完全に利用するに十分な用量では投与するこができない。よって、単独で、またはＴＰＺとの併用において、低酸素特異的な高い細胞傷害性を示す化合物が必要である。
【０００７】
モノ−Ｎ−オキシドＳＲ４３１７は、モノ−Ｎ−オキシドから酸素を供与して親複素環を生じさせるために提案されているメカニズムにより、電離放射線およびチラパザミンの双方と相乗作用を示すことが示されている(Siim BG. Cancer Research, 2004, 64:736-742)。
【化１】
2008528679.tif 000002
【０００８】
低酸素下で生体還元(bioreduction)が上手くいくための重要なパラメーターは、一電子還元電位(one-electron reduction potential)、Ｅ（Ｉ）である。このΕ（１）値が高すぎると、還元は低酸素条件に限定されず、化合物は正常細胞にも有毒となり得る。逆に、Ｅ（１）値が低すぎると、還元速度が遅すぎて治療利益を提供することができない。結局、低酸素選択的生体還元の至適範囲は、約−４５０ｍＶ〜−５１０ｍＶの間であると考えられる。値が−３００ｍＶより高いと有酸素毒性が誘発され、−５１０ｍＶより低いと還元が遅くなることが分かっている(Hay MP. J. Med. Chem., 2003, 46:169-182)。置換３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン１，４−ジオキシドのモノ−Ｎ−オキシドは低酸素生体還元に必要な範囲のＥ（１）値を有すること、また、これらの値が置換パターンによって直線的に変化することが報告されている(Anderson RF. Org. Biomol. Chem., 2005, 3:2167-2174)。
【０００９】
本発明の目的は、この強化された低酸素特異的毒性という要求を満たす化合物を提供することである。特に、本発明の目的は、低酸素腫瘍環境で選択的な還元が可能であり、有効なタンパク質キナーゼ阻害剤となり得るＮ−オキシドを提供することである。さらに、本発明の目的は、単独で投与した場合に、それらが還元された際にＤＮＡに酸化的傷害を負わせて腫瘍毒性を高める、および／または併用した場合に、照射処置またはＴＰＺなどの薬剤によりに生じる腫瘍ＤＮＡへの傷害を増強する化合物を提供することである。本発明のこのような化合物は、腫瘍の低酸素環境で選択的に還元されるまでタンパク質キナーゼ活性をほとんど、または全く持たないと考えられる。このようなメカニズムは、より安全なタンパク質キナーゼ阻害剤を提供し、さらに一緒に投与した際にＴＰＺの最初のＤＮＡ傷害作用を有意に増強する。
【００１０】
よって、本発明の目的は、それらの酸化状態においてキナーゼ活性を持たないが、腫瘍低酸素下では選択的に還元されて活性キナーゼ阻害剤を放出するような、−３００ｍＶ〜−５５０ｍＶ、好ましくは−４００ｍＶ〜−５１０ｍＶ、より好ましくは−４５０ｍＶ〜−５１０ｍＶの範囲のＥ（１）値を有する、ある範囲の複素環式Ｎ−オキシドを提供することである。本発明の第二の態様では、低酸素環境で電離放射線またはチラパザミンもしくは類似のＤＮＡ傷害化学療法薬（例えば、ブレオマイシン）と組み合わせて投与した際に、これらの分子は、（ａ）ＤＮＡ傷害を「固定」または永続的なものとするための酸素源を提供すること、および（ｂ）全体的な細胞死滅作用を増強する活性キナーゼ阻害剤を放出すること、により放射線または化学療法薬の作用を増強すると予測される。
【００１１】
本発明のさらなる目的は、タンパク質キナーゼの活性を阻害し、かつ、容易に酸化されて低酸素選択的プロドラッグを形成する、ある範囲の化合物を提供することである。
（発明の概要）
【００１２】
本発明は、キナーゼ阻害および／またはＤＮＡ酸化的傷害により、癌適応症を治療するための化合物および方法に向けられている。本発明の化合物は、キナーゼ阻害剤、または低酸素腫瘍環境で選択的に還元を受けて、ａｂ１、Ａｒｇ、オーロラ、ＣＤＫ、ＶＥＧＦ（ＫＤＲ）、およびＣＨＫ−１、またはそのサイクリン複合体などのキナーゼの有効な阻害剤を形成するプロドラッグ化合物である。本明細書において「低酸素選択的還元」、「低酸素腫瘍環境での選択的還元」などは、治療的濃度で、化合物の還元が、低酸素環境において治療上有意なレベルで起こるが、酸素正常環境では治療上有意には起こらないことを意味する。さらに、それらの低酸素誘導性の還元に関して、本発明のプロドラッグ化合物は、選択的状況において、周囲のＤＮＡに酸化的傷害を与える能力を有する。この付加的な機能性は、単独でも腫瘍毒性を与え得るし、または低酸素腫瘍細胞において、電離放射線またはＴＰＺなどの化学療法薬といった他の治療処置の細胞傷害作用の相乗作用的増強をもたらし得る。よって、一実施形態において、本発明は低酸素腫瘍細胞においてタンパク質キナーゼの活性を選択的に調整または阻害する方法に向けられている。もう１つの実施形態において、本発明は、低酸素腫瘍細胞においてＤＮＡへの酸化的傷害を選択的に引き起こすまたは増強する方法に向けられている。
【００１３】
もう１つの実施形態では、本発明は、哺乳類に投与した際にタンパク質キナーゼの活性を阻害するのに有用な、式Ｉ：
【化２】
2008528679.tif 000003
［式中、
Ｘ１およびＹ１の双方がＮ−オキシドであるか；または
Ｘ１およびＹ１の一方がＮであり、他方がＮもしくはＮ−オキシドであり；
Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨＲ４、不飽和であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、あるいはハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１０、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＮ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ（Ｒ１０）、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ２（Ｒ１０）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０より場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環、および一緒になって縮合二環式系を形成していてもよい２つのＲ１０により場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環であり；
Ｒ２およびＲ３は、各々独立に、水素、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、非置換型または置換型のアリール、飽和型または不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルコキシ、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ６、−ＳＲ６、−ＳＯ２Ｒ６、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ６）２、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ６、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）Ｃ（Ｏ）Ｒ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ７）（ＲＳ）、−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ（Ｒ６）、−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ２（Ｒ６）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ６、ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ｐＮ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＲ６、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｑＯＲ６、−Ａ−Ｎ（Ｒ６）２、あるいは−Ａ−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）から選択され、
ここで、Ａは、場合により−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｎ（Ｒ６）が挿入されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキリジン基であり、
Ｒ２およびＲ３は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、縮合ベンゼン環または飽和型もしくは不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよい縮合５〜７員複素環式環（このベンゼン環または複素環式環は非置換型または置換型である）を形成していてもよく；
Ｒ６は、Ｈ、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、あるいは飽和型または不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含み、かつ、非置換型もしくは任意の環炭素または環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、場合により、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１０、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＮ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ（Ｒ１０）、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ２（Ｒ１０）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環、および一緒になって縮合二環式系を形成していてもよい２つのＲ１０により場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環であり、かつ、同じ窒素原子と結合している１を超えるＲ６は同一または異なり、
Ｒ７およびＲ８は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって、不飽和型または飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている、３〜９員Ｎ含有複素環式環を形成し、
ｐは、０または１〜５の整数であり；
ｑは、１〜６の整数であり；
Ｒ４は、Ｈ、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、非置換型または置換型のアリール、不飽和型または飽和型であり、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含み、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている、５〜７員の複素環式基であり、この炭素環式基または複素環式基Ｒ４は、場合により、水素、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、非置換型または置換型のアリール、飽和型または不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型もしくは任意の環炭素または環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルコキシ、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ６、−ＳＲ６、−ＳＯ２Ｒ６、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ６）２、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ６、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）Ｃ（Ｏ）Ｒ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ７）（Ｒ８）−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ（Ｒ６）、−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ２（Ｒ６）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ６、ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＲ６、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｑＯＲ６、−Ａ−Ｎ（Ｒ６）２、あるいは−Ａ−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）から選択される１以上の置換基により置換されていてもよく、ここで、Ａは、場合により、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｎ（Ｒ６）−（ここで、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義された通りである）が挿入されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキリジン基であり；
Ｒ１０は、Ｈあるいは非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、あるいは不飽和型または飽和型であり、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含み、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環であり、ここで、同じ窒素原子と結合している１を超えるＲ１０は同一または異なっている］
のある種の複素環トリアジン化合物に向けられている。
【００１４】
特に好ましい実施形態では、式Ｉのトリアジン化合物は、約−３００ｍＶ未満、好ましくは約−４００ｍＶ〜約−５１０ｍＶ、より好ましくは−４５０ｍＶ〜−５１０ｍＶの範囲の一電子還元電位（Ｅ（１））値を有し、例えばタンパク質キナーゼの活性により、細胞増殖を媒介および／または阻害する細胞傷害性代謝物の低酸素選択的プロドラッグとして有用なモノ−Ｎオキシドまたはジ−Ｎオキシドプロドラッグ化合物である。本発明の好ましい化合物は、in vivoにおいて低酸素条件下で選択的還元を受けて、キナーゼ活性を媒介または阻害する、対応するモノ−ＮオキシドまたはＮ−複素環活性代謝物を産生する。
【００１５】
タンパク質キナーゼとの結合に重要な要件は、活性分子の配置である。ＡＴＰのアデニン部分は、ヒンジ結合として知られる特徴であって多くのタンパク質キナーゼ阻害剤の共通かつ重要な特徴である、一連の主鎖アミドへの水素結合によりキナーゼ活性部分と結合する(Williams, D.H. Current opinion in Pharmacology, 2002, 2, 567-573）。よって、好ましい実施形態では、本発明の化合物は、匹敵するヒンジ結合モチーフを介してキナーゼ活性部位と結合する。例えば、１つの好ましい実施形態では、ひと度還元されると、元々オキシド部分を持っていたアゾ基はタンパク質キナーゼと結合し、その結果、阻害剤とタンパク質キナーゼの間にヒンジ結合部分を形成し、キナーゼをその本来の基質と相互作用できないようにする。
【００１６】
さらに、本発明のさらなる実施形態では、複素環Ｎ−オキシドプロドラッグの還元の際に遊離された酸化基は、腫瘍細胞のＤＮＡへの酸化的傷害を付与または増強し得る。よって、本発明はさらに、低酸素環境において腫瘍ＤＮＡに対して単独で酸化的傷害を生じるには低い（例えば−５１０ｍＶ）が、チラパザミン（ＴＰＺ）および／または電離放射線の細胞傷害作用を増強することができるとともに、タンパク質キナーゼ阻害または調整作用を有する活性代謝物を提供する一電子還元電位を有する、複素環式Ｎ−オキシドに関する。
【００１７】
もう１つの好ましい実施形態では、本発明は、Ｘ１およびＹ１の一方がＮであり、他方がＮまたはＮ−オキシドである式Ｉの化合物を対象とし、この化合物は曝された際にタンパク質キナーゼの活性を阻害する。
【００１８】
本発明はさらに、本発明の化合物を含有する医薬組成物、並びにこのような化合物の有効量を投与することによる、癌ならびに望ましくない血管形成および／または細胞増殖に関連する他の病態を治療する方法に関する。
【００１９】
好ましい実施形態の詳細な説明
上記の目的を達成するため、具体的かつ広範に記載された本発明の目的に従い、本発明の第一の態様は、哺乳類に投与した際にタンパク質キナーゼの活性を阻害するのに有用な式Ｉ：
【化３】
2008528679.tif 000004
［式中、
Ｘ１およびＹ１の双方がＮ−オキシドであるか；または
Ｘ１およびＹ１の一方がＮであり、他方がＮもしくはＮ−オキシドであり；
Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ２、ＮＨＲ４、不飽和であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、あるいはハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１０、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＮ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ（Ｒ１０）、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ２（Ｒ１０）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０より場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環、および一緒になって縮合二環式系を形成していてもよい２つのＲ１０により場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環であり；
Ｒ２およびＲ３は、各々独立に、水素、非置換型もしくは置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、非置換型または置換型のアリール、飽和型または不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルコキシ、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ６、−ＳＲ６、−ＳＯ２Ｒ６、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ６）２、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ６、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）Ｃ（Ｏ）Ｒ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ（Ｒ６）、−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ２（Ｒ６）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ６、ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ｐＮ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＲ６、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｑＯＲ６、−Ａ−Ｎ（Ｒ６）２、あるいは−Ａ−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）から選択され、
ここで、Ａは、場合により−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｎ（Ｒ６）が挿入されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキリジン基であり、
Ｒ２およびＲ３は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、縮合ベンゼン環または飽和型もしくは不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよい縮合５〜７員複素環式環（このベンゼン環または複素環式環は非置換型または置換型である）を形成していてもよく；
Ｒ６は、Ｈ、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、あるいは飽和型または不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含み、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、場合により、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ１０、−ＳＲ１０、−ＳＯ２Ｒ１０、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＯＲ１０、−Ｎ（Ｒ１０）ＣＯＮ（Ｒ１０）２、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ（Ｒ１０）、−Ｎ（Ｒ１０）ＳＯ２（Ｒ１０）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環、および一緒になって縮合二環式系を形成していてもよい２つのＲ１０により場合により置換されていてもよい芳香環または複素芳香環であり、かつ、同じ窒素原子と結合している１を超えるＲ６は同一または異なり、
Ｒ７およびＲ８は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって、不飽和型または飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている、３〜９員Ｎ含有複素環式環を形成し、
ｐは、０または１〜５の整数であり；
ｑは、１〜６の整数であり；
Ｒ４は、Ｈ、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、非置換型または置換型のアリール、不飽和型または飽和型であり、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含み、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている、５〜７員の複素環式基であり、この炭素環式基または複素環式基Ｒ４は、場合により、水素、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、非置換型または置換型のアリール、飽和型または不飽和型であり、かつ、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含んでもよく、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環、非置換型または置換型のＣ１−Ｃ６アルコキシ、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＯＲ６、−ＳＲ６、−ＳＯ２Ｒ６、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ６）２、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、シアノ、ニトロ、−ＣＯＯＲ６、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）Ｃ（Ｏ）Ｒ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＯＲ６、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ７）（Ｒ８）−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ（Ｒ６）、−Ｎ（Ｒ６）ＳＯ２（Ｒ６）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ６、ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＲ６、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑＣ（Ｏ）Ｒ６、−Ｏ（ＣＨ２）ｑ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｑＯＲ６、−Ａ−Ｎ（Ｒ６）２、あるいは−Ａ−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）から選択される１以上の置換基により置換されていてもよく、ここで、Ａは、場合により、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−または−Ｎ（Ｒ６）−（ここで、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は上記で定義された通りである）が挿入されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキリジン基であり；
Ｒ１０は、Ｈあるいは非置換型もしくは置換型のＣ１−Ｃ６アルキル、非置換型または置換型のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、あるいは不飽和型または飽和型であり、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含み、かつ、非置換型または任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている５〜７員の複素環式環であり、ここで、同じ窒素原子と結合している１を超えるＲ１０は同一または異なっている］
で示される複素環式トリアジンを提供する。
【００２０】
特に好ましい実施形態では、式Ｉの化合物は、約−３００ｍＶ未満、好ましくは約−４００ｍＶ〜約−５１０ｍＶ、より好ましくは−４５０ｍＶ〜−５１０ｍＶの範囲の一電子還元電位（Ｅ（１））を有し、例えばタンパク質キナーゼの活性により、細胞増殖を媒介および／または阻害する細胞傷害性代謝物の低酸素選択的プロドラッグとして有用である。本発明の好ましい化合物は、in vivoにおいて、低酸素条件下で選択的還元を受けて、キナーゼ活性を媒介または阻害する、対応するモノ−Ｎ−オキシドまたは親Ｎ−複素環活性代謝物を生じる。
【００２１】
本願の化合物は次のキナーゼ：Ａｒｇ、Ａｂｌ、オーロラ  Ａ、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＣＤＫ２／サイクリンＥ、ＣＨＫ１、ｃ−ＲＡＦ、ｃＳＲＣ、ＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ４、ＧＦＲ１、ＪＮＫ１α１、ＫＤＲ、ＭＡＰＫ２、ＭＥＫ１、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＰＤＧＦＲβ、ＰＫＣθ、およびＰｌｋ３、Ｆｌｔ−１、Ｃ＝Ｋｉｔ、ＦＧＦＲ１、ＥＲＢＢＺ、ＣＭｅｔ、ＴＩＥＺ、ＲＥＴ、ＶＥＧＦＲ、ＩＧＦ−１Ｒ、Ａｋｔ、ＰＫＡ、Ｐ１３Ｋ、ＰＤＫ１、ＰＤＫ２、Ｃｄｋ２、Ｃｄｋ４、Ｃｋ２、Ｍｙｔ１、Ｗｅｅｌ、オーロラ  Ｂ、Ｐｌｋ、Ｂｕｌｂ１、Ｂｕｌｂ３、Ｃｈｋ２、ＡＴＭ、ＡＴＲ、およびＤＮＡ−ＰＫに対して親和性を有する。特に、本発明の化合物は、ＣＫ２、Ａｒｇ、Ａｂｌ、オーロラ−Ａ、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＣＤＫ２／サイクリンＥ、ＣＨＫ１、ＫＤＲおよびｐ７０Ｓ６Ｋを阻害するのに有用である。
【００２２】
さらに、本発明のさらなる実施形態では、複素環式Ｎ−オキシドプロドラッグの還元時に遊離された酸化基は腫瘍細胞のＤＮＡへの酸化傷害を付与または増強し得る。よって、本発明はさらに、低酸素環境において腫瘍ＤＮＡに対して単独で酸化傷害を生じるには低い（例えば−５１０ｍＶより低い）が、チラパザミン（ＴＰＺ）および／または電離放射線の細胞傷害作用を増強することができるとともに、タンパク質キナーゼ阻害または調整作用を有する活性代謝物を提供する一電子還元電位を有する、複素環式Ｎ−モノオキシドに関する。腫瘍ＤＮＡに対する傷害の細胞傷害作用は、阻害されるキナーゼがＤＮＡ傷害に対する細胞の応答に直接的または間接的に関与する場合には、キナーゼ阻害剤の放出によりさらに増幅される。この作用は阻害されるキナーゼがＡｒｇ、ａｂｌ、ＡＴＭ、Ａｔｒ、Ｃｈｋ１、Ｃｈｋ２、ＤＮＡ−ＰＫ、およびＣＫ１１から選択される場合に特に有意であり得る。
【００２３】
好ましい一実施形態では、複素環式トリアジン化合物は式（Ｉａ）：
【化４】
2008528679.tif 000005
［式中、
Ｘ１およびＹ１の双方がＮ−オキシドであるか；または
Ｘ１およびＹ１の一方がＮであり、他方がＮもしくはＮ−オキシドであり；
Ｒ１は上記で定義された通りであり；
各Ｒ５は、同一または異なり、Ｒ２およびＲ３に関して定義された通りであり；
ｎは、１〜４の整数である］
のものである。
【００２４】
本発明の別の態様では、本明細書に記載の複素環式トリアジン化合物のジオキシド形態が使用され、その結果、これらの化合物は、チラパザミンに関して記載されたものと同様の方法により、低酸素条件下で還元された際に放出される「保護された」タンパク質キナーゼ阻害剤を提供する。この結果、腫瘍の酸性環境により放出されるまでタンパク質キナーゼ活性はマスクされる。例えば、以下に示すように、本発明Ａのジオキシドプロドラッグが低酸素下で投与される場合、モノオキシドＢおよび／または完全に還元された親複素環Ｃが生じる。ジオキシドＡにはタンパク質キナーゼ活性は無いが、モノオキシドＢおよび親複素環Ｃはタンパク質キナーゼ活性を阻害し、Ａの還元プロセスによって引き起こされる、または他のＤＮＡ傷害性治療薬の傷害を増強し得る。
【化５】
2008528679.tif 000006
【００２５】
よって、本発明のさらなる態様は、曝された際にタンパク質キナーゼの活性を阻害する、式（Ｉ）のモノ−Ｎ−オキシドおよび親複素環化合物を含む。よって、本発明はまた、キナーゼを式ＩまたはＩ（ａ）（式中、Ｘ１およびＹ１の一方はＮであり、他方はＮまたはＮ−オキシドである）の化合物に曝すことによりキナーゼ活性を調整および／または阻害する方法も提供する。
【００２６】
上記一般式において、Ｃ１−Ｃ６アルキル基は直鎖型であっても分枝型であってもよい。Ｃ１−Ｃ６アルキル基は一般にＣ１−Ｃ４アルキル基、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチルまたはｔｅｒｔ−ブチル基である。Ｃ１−Ｃ６アルキル基は非置換型であってもよいし、またはＲ５の選択肢として上記で特定された１以上の基により置換されていてもよい。より一般には、Ｃ１−Ｃ６アルキル基は非置換型であるか、またはハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ニトロ、アミノ、シアノ、非置換型もしくは置換型のアリール、上記で定義された５〜７員の複素環式基（モルホリニル、ピペリジニル、ピペラジニルまたはピリジル）、−Ｎ（Ｒ６）２、−ＳＲ６および−ＣＯＯＲ６（式中、Ｒ６は上記で定義された通りである）から選択される１以上の基により置換されている。
【００２７】
ハロゲンにより置換されたＣ１−Ｃ６アルキル基は「ハロ−Ｃ１−Ｃ６アルキル」により表すことができ、これは１以上の水素がハロに置換されているアルキル基を意味する。ハロ−Ｃ１−Ｃ６アルキル基は好ましくは１個、２個または３個のハロ基を含む。このような基の好ましい例はトリフルオロメチルである。
【００２８】
ハロゲンはＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである。好ましくは、Ｆ、ＣｌまたはＢｒである。
【００２９】
Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基は直鎖型であっても分枝型であってもよい。これは一般にＣ１−Ｃ４アルコキシ基、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ｉ−プロポキシ、ｎ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシまたはｔｅｒｔ−ブトキシ基である。Ｃ１−Ｃ６アルコキシ基は非置換型であってもよいし、または一般にＣ１−Ｃ６アルキルの置換基として上記で特定されたものから選択される１以上の基により置換されていてもよい。
【００３０】
Ｃ３−Ｃ１０シクロアルキル基は、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルまたはシクロヘプチルなどのＣ３−Ｃ８シクロアルキルである。一般にそれはＣ３−Ｃ６シクロアルキルである。Ｃ３−Ｃ１０シクロアルキル基は非置換型であってもよいし、または一般にＣ１−Ｃ６アルキルの置換基として上記で特定されたものから選択される１以上の基により置換されていてもよい。
【００３１】
Ｃ３−Ｃ１０シクロアルコキシ基は、シクロアルキル部分は３〜１０個の炭素原子を含む基−Ｏ−シクロアルキルである。一般にそれはＣ３−Ｃ８またはＣ３−Ｃ６シクロアルコキシ基である。それは例えば、シクロプロポキシ、シクロブトキシ、シクロペントキシ、シクロヘキソキシ、シクロヘプトキシまたはシクロオクトキシ基であり得る。
【００３２】
アルキリジン基はポリメチレン基、すなわち、−（ＣＨ２）ｎ−（式中、ｎは正の整数である）である。好ましくは、ｎは１〜６の整数である。
【００３３】
Ｒ２およびＲ３が、それらが結合している炭素原子と一緒になってベンゼン環または５員もしくは６員の複素環式環を形成する場合、生じる二環式複素環は一般にベンゾトリアジン、キナゾリン、ベンゾピリダジン、テトラヒドロベンゾトリアジン、テトラヒドロキナゾリン、テトラヒドロベンゾピリダジン、ピラノトリアジン、ジヒドロピラノトリアジン、ピリドトリアジン、ピリドピリミジン、ピリドピリダジン、ピリミドトリアジン、ピリミドピリミジン、ピリミドピリダジン、ピロロトリアジン、ピロロピリミジン、ピロロピリダジン、オキサゾロトリアジン、オキサゾロキノリン、オキサゾロピリダジン、チエノトリアジン、チエノキノリン、チエノピリダジン、フロトリアジン、フロキノリン、フロピリダジン、チアゾロトリアジン、チアゾロキノリン、チアゾロピリダジン、イミダゾトリアゾン、イミダゾキノリンまたはイミダゾピリダジンである。
【００３４】
チエノトリアジンは、チエノ［２，３−ｅ］トリアジンまたはチエノ［３，２−ｅ］トリアジンであり得る。ピロロトリアジンは、ピロロ［２，３−ｅ］トリアジンまたはピロロ［３，２−ｅ］トリアジンであり得る。フロトリアジンは、フロ［２，３−ｅ］トリアジンまたはフロ［３，２−ｅ］トリアジンであり得る。チアゾロトリアジンは、チアゾロ［４，５−ｅ］トリアジンまたはチアゾロ［５，４−ｅ］トリアジンであり得る。オキサゾロトリアジンは、オキサゾロ［４，５−ｅ］トリアジンまたはオキサゾロ［５，４−ｅ］トリアジンであり得る。イミダゾトリアジンは一般に、５Ｈ−イミダゾ［４，５−ｅ］トリアジンまたは７Ｈ−イミダゾ［４，５−ｅ］トリアジンであり得る。
【００３５】
不飽和型または飽和型であり、かつ、Ｏ、Ｎ、およびＳから選択される０、１、または２の付加的ヘテロ原子を含む３〜９員、または５〜７員のＮ含有複素環式環は、例えば、イミダゾリル、イミダゾリノイル、イミダゾリジニル、ペルヒドロピリダジル、ピリダジル、ピリジル、ピロリル、ピロリニル、ピロリジニル、ピラゾリル、ピラジニル、ピペリジニル、ピラゾリニル、ピペラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、モルホリニル、チアモルホリニル、トリアゾリル、テトラゾリル、イソチアゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、チアゾリジニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリルおよびオキサジアゾリジニルであり得る。このような複素環の好ましい例は、ピリジル、ピロリル、ピロリニル、ピペリジニル、ピペラジニルおよびモルホリニルである。このＮ含有複素環は非置換型であるか、または例えばＣ１−Ｃ６アルキルの置換基として上記で特定された１以上の基により、任意の環炭素もしくは環ヘテロ原子上で置換されている。好ましくは、この置換基は、Ｒ５に関して上記で定義された選択肢の１つである。
【００３６】
Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含む５〜７員の複素環式基は不飽和型または飽和型である。好適な例としては、５〜７員のＮ含有複素環式環の例として上記で特定されたものであり得る。さらなる例としては、フリル、チエニル、ピラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、チアゾリルおよびチオフェニル環が挙げられる。好ましくは、この基は、上述のＮ含有複素環式基の１つ、またはピロリル、フリル、ピリジル、ピペリジニルもしくはモルホリニルである。５〜７員複素環式基は非置換であってもよいし、またはＣ１−Ｃ６アルキルの置換基として上記で特定された１以上の基により、任意の環炭素または環ヘテロ原子上で置換されていてもよい。一般に、この置換基はハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはハロ−Ｃ１−Ｃ６アルキルである。
【００３７】
アリール基は、６〜１４個の炭素原子、好ましくは６〜１０個の原子を含む炭素環式芳香族である。例としては、フェニル、ナプチル(napthyl)、インデニルおよびインダニル基が挙げられる。アリール基は非置換型であってもよいし、または例えば、Ｃ１−Ｃ６アルキルの置換基として上記で特定された１以上の基により置換されていてもよい。好ましくは、この置換基はＲ５に関して上記で明示された選択肢の１つである。一般に、アリール基は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ハロ−Ｃ１−Ｃ６アルキルまたはハロゲンにより置換されている。
【００３８】
式（Ｉ）および（Ｉａ）の構造において、
Ｒ２、Ｒ３またはＲ５が−ＳＯ２Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ７）（Ｒ８）、または−Ａ−Ｎ（Ｒ７）（Ｒ８）である場合、基Ｒ７およびＲ８は、上記で定義されたＮ含有複素環式環、好ましくは、非置換型またはＣ１−Ｃ６アルキルにより置換されている、モルホリノ、ピペリジニルまたはピペラジニル基を形成する。このようなＲ７およびＲ８の複素環式選択肢の好ましい例としては、ピペラジン−１−イル、４−メチル−ピペラジン−１−イルおよびモルホリン−４−イル基が挙げられる。
【００３９】
Ｒ２、Ｒ３またはＲ５が−Ｎ（Ｒ６）２、ＯＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＣＯＮＨＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、ＣＯＮ（Ｒ６）２、ＮＨ（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２（ＣＨ２）ＰＮ（Ｒ６）２、−Ｎ（Ｒ６）ＣＯＮ（Ｒ６）２または−Ａ−Ｎ（Ｒ６）２である場合、各Ｒ６は一般に、独立に、ＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルである。
式Ｉ（ａ）の基Ｒ５はベンゾトリアジン環系の５位、６位、７位および８位のいずれかを占めている。よって、ｎが１である場合、ベンゾトリアジンは、５位、６位、７位または８位において、Ｒ５の選択肢として上記で特定された基のいずれかで一置換されている。ｎが２である場合、ベンゾトリアジンは、Ｒ５の選択肢として上記で特定された基のいずれかで、５，６−、５，７−、６，７−、６，８−または７，８−二置換されている。ｎが３である場合、ベンゾトリアジンは、Ｒ５の選択肢として上記で特定された基のいずれかで、５，６，７−、６，７，８−または５，６，８−三置換されている。ｎが４である場合、ベンゾトリアジンは、Ｒ５の選択肢として上記で特定された基のいずれかで、５，６，７，８−四置換されている。ｎが２であり、かつ、両Ｒ５置換基が互いにオルト位であり、かつ、それらが結合している原子と一緒になって縮合ベンゼン環または縮合５〜７員複素環式環（飽和型もしくは不飽和型であり、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含む）を形成している場合、このベンゼン環または複素環式環は、上記のように基Ｒ５で置換されていてもよいし、または非置換型であってもよい。
【００４０】
また、本発明によれば、本発明のタンパク質キナーゼ阻害剤を含んでなる医薬組成物も提供される。好ましくは、このような組成物は、低酸素環境で還元された際にタンパク質キナーゼ活性の阻害を示す活性代謝物に変換される、式Ｉ、またはより好ましくは式Ｉ（ａ）の低酸素選択的プロドラッグを含んでなる。好ましくは、プロドラッグのモノ−Ｎ−オキシド部分は、約−３００ｍＶ未満、より好ましくは約−４００ｍＶ〜約−５１０ｍＶの範囲の一電子還元電位を有する。式ＩおよびＩ（ａ）の化合物の他、このような化合物の薬学上許容される塩またはプロドラッグも使用可能である。さらに、当技術分野で一般的なように、本発明の化合物はその塩またはプロドラッグ形態を含め、当技術分野で公知の通常の担体、希釈剤、増量剤、界面活性剤、および賦形剤を用いて医薬製剤へと処方することもできる。
【００４１】
さらに、本発明によれば、キナーゼ活性の阻害により媒介される疾病または障害を治療するために、プロドラッグ化合物を用いてタンパク質キナーゼ調整剤を選択的に放出させる方法であって、それを必要とする患者に、治療上有効な量の式ＩまたはＩ（ａ）の化合物または薬学上許容される塩またはプロドラッグを投与することを含む方法が提供される。この方法は悪性腫瘍または癌ならびに望ましくない血管形成および／または細胞増殖に関連する他の病態の治療に特に好適である。よって、本発明はまた、有効量の本発明の薬剤を投与することによりこのような疾病を治療する方法も対象とする。
【００４２】
本発明の別の態様は、チラパザミンなどの化学療法薬および／または電離放射線により生じる酸化的ＤＮＡ傷害の放射線増感剤または促進剤としての、本明細書に記載されている、約−３００ｍＶ未満、好ましくは約−４００ｍＶ〜約−５１０ｍＶの範囲の一電子還元電位を有する複素環式  トリアジン−Ｎ−オキシドの使用である。チラパザミンおよび／または電離放射線とともに投与した場合、腫瘍細胞の低酸素環境で起こるこれらのＮ−オキシドプロドラッグの選択的還元はタンパク質キナーゼ阻害剤を放出するだけでなく、遊離した酸素原子はＴＰＺおよび／または放射線の有効性を高める能力を有する。
【００４３】
本発明のこれらの態様によれば、式ＩもしくはＩ（ａ）、または式ＩもしくはＩ（ａ）の化合物の薬学上許容される塩もしくはプロドラッグを含有する医薬組成物は、癌などのキナーゼ活性により媒介される疾病ならびに望ましくない血管形成および／または細胞増殖に関連する他の病態を治療する上で使用可能である。よって、本発明はまた、有効量の本発明の薬剤を投与することにより、このような疾病を治療する方法も対象とする。
【００４４】
以上の概説および以下の本発明の特定の化合物の詳細な説明は双方とも例示であり説明的なものであって、特許請求される本発明を限定するものではないと理解すべきである。本発明の他の対象および特徴は、本発明の実施および以下の詳細な説明から明らかになるであろう。本明細書に引用されている参照文献は総て、引用することにより明らかに本明細書の一部とされる。
【００４５】
式ＩおよびＩ（ａ）の化合物例としては、モノ−Ｎ−オキシドおよび親複素環：
【化６】
2008528679.tif 000007
2008528679.tif 000008
2008528679.tif 000009
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【００４６】
ならびにジオキシド：
【化７】
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が挙げられる。
【００４７】
式１の化合物を製造する方法例は次のものが挙げられる。
方法（１）  これまでに報告されている条件（ＵＳ２００４／０１９２６８６Ａ１）を用い、種々の求核試薬を用いて３−クロロ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン１−オキシドを置換すると、目的生成物が得られる。
【００４８】
【化８】
2008528679.tif 000018
工程Ａに関する手順はＵＳ２００４／０１９２６８６Ａ１に明記されており、引用することにより本明細書の一部とする。試薬および得られる生成物の例を表１に示す。
【００４９】
【表１】
2008528679.tif 000019
【００５０】
方法（２）  文献（ＷＯ０４０２６８４６Ａ１）に記載されている手順に従い、３−ニトロ−ピリジン−４−イルアミンから出発し、１−オキシ−ピリド［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアジン−３（Ｖ）および３−クロロ−ピリド［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアジン１−オキシド−イルアミン（ＶＩ）を製造することができる（スキーム２）。
【００５１】
【化９】
2008528679.tif 000020
さらに、スキーム１で概説した条件に従い、ＶＩのクロロ基を他の有機基に置換することができる。
【００５２】
【表２】
2008528679.tif 000021
【００５３】
方法（３）  フルオロ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン（ＩＩＩ−スキーム３）から出発し、これまでに報告されているもの（ＵＳ２００４／０１９２６８６Ａ１）と同じ手順を用い、一定範囲のアルコール（表２）で、フッ素のＳｎＡｒ置換を行うと、目的生成物が得られる。
【化１０】
2008528679.tif 000022
工程Ａに関する手順は、J. Med. Chem. 2003, 46, 169-182に明記されており、引用することにより本明細書の一部とする。
【００５４】
【表３】
2008528679.tif 000023
【００５５】
方法（４）  ＵＳ２００４／０１９２６８６Ａ１で概説されている手順に従い、ニトロアニリンＩＶから出発し、１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミンの誘導体が製造できると予測される（スキーム４）。この臭化物から(A.Suzuki, Synthetic Communications, 11(7), 513-519)または塩化物から(Gregory C. Fu, J. Am. Chem. Soc, 2000, 122, 4020-4028)のsusukiクロスカップリングによりさらに修飾すると、最終生成物が得られると予測される。
【００５６】
【化１１】
2008528679.tif 000024
試薬および得られる生成物の例を表３に示す。
【００５７】
【表４】
2008528679.tif 000025
【００５８】
方法（５）  Ｎ−オキシドから親複素環を生成するため、Ｎ−オキシドの還元は、スキーム５に示されるように文献の手順（ＵＳ２００４／０１９２６８６Ａ１）に従い、水性エタノール中、ジチオン酸ナトリウムで処理することにより達成することができる。さらに、親複素環またはモノＮ−オキシドがＭＣＰＢＡ、過酢酸またはトリフルオロ過酢酸で酸化される場合(J. Med. Chem 2003, 46, 169-182)、対応するベンゾトリアジン、１−４ジオキシドが製造されると予測される。
【００５９】
【化１２】
2008528679.tif 000026
【００６０】
方法（６）  スキーム４に記載のプロトコールと同様に、鈴木クロスカップリングを用いて、３−置換ベンゾトリアジンおよびそれらの対応するジオキシドを製造することができる。
【００６１】
【化１３】
2008528679.tif 000027
【００６２】
方法（７）  特に、構造ＶＩＩの化合物は、次の手順によって製造することができる。
【化１４】
2008528679.tif 000028
【００６３】
方法（８）  同じ手順に従い、次のピラゾールＶＩＩＩも製造可能である。
【化１５】
2008528679.tif 000029
【００６４】
方法（９）  ベンゾトリアジンのアミド誘導体は次のスキームにより製造することができる。
【化１６】
2008528679.tif 000030
【００６５】
方法（１０）  尿素修飾は、以下に概説するプロトコールに従って実施することができる。
【化１７】
2008528679.tif 000031
【００６６】
本発明では、式ＩまたはＩ（ａ）の化合物は互変異性の現象を示す場合があり、本明細書の式の図は、存在し得る互変異性型の１つだけを表すものと理解される。本発明はキナーゼ活性を調整および／または阻害するいずれの互変異性型も含み、式の図に用いられている１つの互変異性形だけに限定されるものではないと理解すべきである。
【００６７】
本発明の化合物のいくつかは単一の立体異性体（すなわち、本質的に他の立体異性体を含まない）、ラセミ体、ならびに／または鏡像異性体および／もしくはジアステレオ異性体の混合物として存在し得る。このような単一の立体異性体、ラセミ体およびそれらの混合物は総て本発明の範囲内にあるものとする。光学的に活性な本発明の化合物は、光学的に純粋な形態で使用するのが好ましい。
【００６８】
当業者に一般に理解されているように、１つのキラル中心（すなわち、１つの不斉炭素原子）を有する光学的に純粋な化合物は、存在し得る２つの鏡像異性体のうち１つから本質的になる（すなわち、鏡像異性体的に純粋な）ものであり、１を超えるキラル中心を有する光学的に純粋な化合物は、ジアステレオ異性体的に純粋、かつ、鏡像異性体的に純粋であるものである。本発明の化合物は、少なくとも９０％光学的に純粋な形態、すなわち、少なくとも９０％の単一異性体（鏡像体過剰率（「ｅ．ｅ．」）またはジアステレオ異性体過剰率（「ｄ．ｅ．」）８０％）、より好ましくは少なくとも９５％（９０％ｅ．ｅ．またはｄ．ｅ．）、いっそうより好ましくは少なくとも９７．５％（９５％ｅ．ｅ．またはｄ．ｅ．）、最も好ましくは少なくとも９９％（９８％ｅ．ｅ．またはｄ．ｅ．）を含む形態で使用するのが好ましい。
【００６９】
さらに、式ＩまたはＩ（ａ）は構造が同定された非溶媒和形態だけでなく溶媒和形態も含むものとする。例えば、式ＩまたはＩ（ａ）には、示されている構造の、水和型と非水和型双方の化合物が含まれる。溶媒和物の他の例としては、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、酢酸エチル、酢酸、またはエタノールアミンと組み合わさった構造が含まれる。
【００７０】
本発明の治療選択肢
「プロドラッグ」とは、薬学上許容される式ＩまたはＩ（ａ）の化合物（またはその塩）の代謝前駆体を指す。プロドラッグは、被験体に投与した際は不活性であり得るが、in vivoで式ＩまたはＩ（ａ）の活性化合物に変換される。「活性代謝物」とは、医薬上許容され、かつ、有効である、式ＩまたはＩ（ａ）の化合物の代謝生成物を指す。式ＩまたはＩ（ａ）の化合物のプロドラッグおよび活性代謝物は、当技術分野で公知の技術を用いて同定することができる。例えば、Bertolini et al, J. Med. Chem., 40, 2011-2016 (1997); Shan, et al., J. Pharm. Sci, 86 (7), 765-767; Bagshawe, Drug Dev. Res., 34, 220-230 (1995); Bodor, Advances in Drug Res., 13, 224-331 (1984); Bundgaard, Design of Prodrugs (Elsevier Press 1985);およびLarsen, Design and Application of Prodrugs, Drug Design and Development (Krogsgaard-Larsen et al., eds., Harwood Academic Publishers, 1991)参照。
【００７１】
「薬学上許容される塩」は、特定の化合物の遊離酸および塩基の生体有効性を保持し、かつ、生物学的または他の点で望ましくないものではない塩を意味するものとする。本発明の化合物は、十分な酸性官能基、十分な塩基性官能基、またはその双方の官能基を有し得るので、いくつかの無機または有機塩基と、また、無機および有機酸と反応して薬学上許容される塩を形成する。薬学上許容される塩の例としては、本発明の化合物と無機酸もしくは有機酸または無機塩基との反応より作製される、硫酸塩、ピロ硫酸塩、二硫酸塩、亜硫酸塩、二亜硫酸塩、リン酸塩、リン酸一水素塩、リン酸二水素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イソ酪酸塩、カプロン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオール酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ブチン−１，４−ジオエート、ヘキシン−１，６−ジオエート、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、スルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、γ−ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、およびマンデル酸塩などの塩が挙げられる。
本発明の化合物が塩基である場合、目的の薬学上許容される塩は、例えば、遊離塩基を、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸で、または酢酸、マレイン酸、コハク酸、マンデル酸、フマル酸、マロン酸、ピルビン酸、シュウ酸、グリコール酸、サリチル酸、ピラノシジル酸（グルクロン酸またはガラクツロン酸など）、α−ヒドロキシ酸（クエン酸または酒石酸など）、アミノ酸（アスパラギン酸またはグルタミン酸など）、芳香族酸（安息香酸または桂皮酸など）、スルホン酸（ｐ−トルエンスルホン酸またはエタンスルホン酸など）などの有機酸で処理するなど、当技術分野で利用可能な好適ないずれかの方法によって作製することができる。
【００７２】
本発明の化合物が酸である場合、目的の薬学上許容される塩は、この遊離酸を、例えば、アミン（第一級、第二級または第三級）、アルカリ金属水酸化物またはアルカリ土類金属水酸化物などの無機または有機塩基で処理するなど、好適ないずれかの方法によって作製することができる。好適な塩の例としては、アミノ酸（グリシンおよびアルギニンなど）、アンモニア、第一級、第二級および第三級アミン、および環状アミン（ピペリジン、モルホリンおよびピペラジンなど）から誘導される有機塩、ならびにナトリウム、カルシウム、カリウム、マグネシウム、マンガン、鉄、銅、亜鉛、アルミニウムおよびリチウムから誘導される無機塩が挙げられる。
【００７３】
固体の薬剤の場合、当業者ならば、本発明の化合物および塩は異なる結晶形または多型で存在する場合があり、その総てが本発明および特定されている式の範囲内にあるものとされることが理解できるであろう。
【００７４】
開示されている式ＩおよびＩ（ａ）の化合物およびそれらの薬学上許容される塩およびプロドラッグ（本明細書では「本発明の化合物」と呼ぶ）は、有利には、タンパク質キナーゼを阻害することにより有益な治療作用または予防作用が達成され得る被験体、すなわち、タンパク質キナーゼ阻害を必要とする被験体においてタンパク質キナーゼを阻害するために投与される。「被験体」は哺乳類、好ましくはヒトであるが、獣医学的処置を必要とする動物、例えば、愛玩動物（例えば、イヌ、ネコなど）、農場動物（例えば、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウマなど）および実験動物（例えば、ラット、マウス、モルモットなど）であってもよい。
【００７５】
本発明の化合物は、例えば、癌を有する被験体で有益な治療作用または予防作用を達成するために使用可能である。本発明の化合物で治療可能な癌としては、結腸癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、膵臓癌などの固形腫瘍、または非ホジキンリンパ腫および白血病などの非固形腫瘍が挙げられる。
【００７６】
本発明の化合物はまた、多剤耐性癌を有する者を含む被験体を治療するためのＤＮＡ傷害性抗癌薬および／または放射線療法と併用する場合にも有効である。癌は、腫瘍が最初に薬剤に応答した後に、その薬剤で処置を受けている間に腫瘍の増殖が通常の増殖速度で再開する場合に耐性である。腫瘍は、腫瘍質量の低下または腫瘍増殖速度の低下を示す場合に「薬剤に応答する」。「多剤耐性癌」とは、２種類以上の薬剤、一般には５種類以上に耐性である癌を指す。
【００７７】
本発明の医薬組成物または製剤は、有効量のタンパク質キナーゼ調整剤またはその低酸素選択的還元性プロドラッグと、場合により１以上の他の有効薬と、その薬剤の希釈剤または賦形剤などの薬学上許容される担体を含んでなる。担体が希釈剤として働く場合、それは固体、半固体、または有効成分のビヒクル、賦形剤もしくは媒体として働く液体材料であり得る。本発明の組成物は、有効成分を担体と混合するか、または有効成分を担体で希釈するか、または有効成分をカプセル、サシェもしくは紙容器などの形態であり得る担体内に封入もしくはカプセル封入することにより製造してもよい。１種類以上のタンパク質キナーゼ調整剤またはそのプロドラッグ、および他の有効成分に加えての成分の例としては、アビセル（微晶質セルロース）、デンプン、ラクトース、硫酸カルシウム二水和物、テラアルバ(terra alba)、スクロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアガム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ラッカセイ油、オリーブ油、モノステアリン酸グリセリル、Ｔｗｅｅｎ  ８０（ポリソルベート８０）、１，３−ブタンジオール、カカオ脂、蜜蝋、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、モノステアリン酸ソルビタン、ポリソルベート６０、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコール、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、リン酸水素二ナトリウム、塩化ナトリウム、および水が挙げられる。
【００７８】
これらの組成物は、所望の投与様式に好適な様々な形態のいずれで作製してもよい。例えば、医薬組成物は、錠剤、丸剤、散剤、ロゼンジ剤、サシェ剤、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁液、エマルション、溶液、シロップ剤、エアゾール剤（固体として、または液体媒体中）、軟膏（例えば、１０重量％までのタンパク質キナーゼ調整剤を含有）、軟カプセルおよび硬カプセル、坐剤、無菌注射液、無菌包装散剤などの形態で製造することができる。
【００７９】
同様に、担体または希釈剤としては、モノステアリン酸グリセリルもしくはジステアリン酸グリセリル単独、またはワックス、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルメタクリレートなどを伴った、当技術分野で公知の遅延型または徐放性材料を含んでもよい。
【００８０】
よって、様々な剤形が使用可能である。固体担体を用いる場合、製剤を打錠するか、粉末もしくはペレット形態でゼラチン硬カプセルに入れるか、またはトローチもしくはロゼンジの形態とすることができる。固体担体の量は様々であり得るが、一般には約２５ｍｇ〜約１ｇである。液体担体を用いる場合、製剤は、アンプルもしくはバイアル中のシロップ、エマルション、ゼラチン軟カプセル剤、無菌注射溶液もしくは懸濁液、または非水性液体懸濁液であり得る。
【００８１】
好適な水溶性投与形を得るためには、本発明の薬剤の薬学上許容される塩を、コハク酸またはクエン酸の０．３Ｍ溶液などの有機または無機酸の水溶液に溶解させればよい。可溶な塩形態が得られない場合、薬剤を好適な補助溶媒または補助溶媒の組合せに溶解させればよい。好適な補助溶媒の例としては、限定されるものではないが、アルコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール３００、ポリソルベート８０、およびギルセリン(gylcerin)などが挙げられる（全容量の０〜６０％の範囲の濃度）。式ＩまたはＩ（ｅ）の化合物をＤＭＳＯに溶解させ、水で希釈してもよい。この組成物はまた、水または等張生理食塩水またはデキストロース溶液などの適当な水性ビヒクル中、塩形態の有効成分の溶液の形態であってもよい。
【００８２】
「治療する」とは、少なくとも一部に、１以上のキナーゼの活性により影響を受けているヒトなどの哺乳類における病状の、少なくとも軽減を意味するものとし、哺乳類において、特に、その哺乳類がその病状を持つ素因があると分かっているが、その病状を有するとはまだ診断されてない場合に、その病状の発生を予防すること、その病状を調整および／または阻害すること、かつ／またはその病状を緩和することを含む。
【００８３】
被験体に投与する本発明の化合物の量は、疾病または症状のタイプおよび重篤度、ならびに健康状態、年齢、性、体重および薬剤に対する許容性などの被験体の特徴によって異なる。当業者ならば、これらおよび他の要因に応じて適当な用量を決定することができる。一般的に用いられている抗癌剤および放射線療法の有効用量は当業者には周知である。本化合物の有効量は一般に、約１ｍｇ／ｍ２／日〜約１０ｇ／ｍ２／日の間、好ましくは１０ｍｇ／ｍ２／日〜約５ｇ／ｍ２の間である。
【００８４】
本発明の化合物の処方および投与の技術は、Remington: the Science and Practice of Pharmacy, 19th edition, Mack Publishing Co., Easton, PA (1995)に示されている。本発明の組成物は、例えば、混合、溶解、造粒、糖衣錠製造、摩砕(levigating)、乳化、カプセル封入、捕捉または凍結乾燥などの常法を用いるなど、医薬組成物を製造するために一般に公知の方法で製造することができる。医薬組成物は、有効化合物を医薬上使用可能な製剤へと加工するのを助ける賦形剤および補助剤から選択され得る１種類以上の生理学上許容される担体を用い、常法にて処方することができる。
【００８５】
適切な処方は選択される投与経路によって異なる。注射用としては、本発明の薬剤を、水溶液中、好ましくは、ハンクス液、リンゲル液または生理食塩水バッファーなどの生理学上適合するバッファー中に処方すればよい。経粘膜投与用には、処方物中に、浸透させる障壁に適当な浸透剤を用いる。このような浸透剤は一般に当技術分野で公知である。
【００８６】
経口投与投与用としては、化合物は、有効化合物を当技術分野で公知の薬学上許容される担体と合わせることにより、容易に処方することができる。このような担体により、本発明の化合物は、治療される患者による経口摂取のための錠剤、丸剤、糖衣錠、カプセル剤、液体、ゲル、シロップ、スラリー、および懸濁液などに処方することができる。経口用医薬製剤は、固体賦形剤を有効成分（薬剤）と混合して使用し、場合により得られた混合物を摩砕し、所望により好適な補助剤を添加した後に顆粒混合物を処理、所望により錠剤または糖衣錠核を得ることによって得られる。好適な賦形剤としては、ラクトース、スクロース、マンニトール、またはソルビトールをはじめとする糖類、ならびにセルロース調製物、例えば、トウモロコシデンプン、小麦デンプン、米デンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、ガム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）などの増量剤が含まれる。所望により、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギン酸もしくはアルギン酸ナトリウムなどのその塩といった崩壊剤を加えてもよい。
【００８７】
糖衣錠核には好適なコーティングを施す。このため、濃糖溶液を使用することができ、これは場合によりアラビアガム、ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコール、および／または二酸化チタン、ラッカー溶液、および好適な有機溶媒または溶媒混合物を含んでもよい。錠剤または糖衣錠のコーティングには、有効剤(active agent)の異なる組合せを識別または特徴付けるため、染料または色素を加えてもよい。
【００８８】
経口使用可能な医薬製剤としては、ゼラチンでできたプッシュフィットカプセル、ならびにゼラチンとグリセロールまたはソルビトールなどの可塑剤でできた密閉軟カプセルが挙げられる。プッシュフィットカプセルは、有効成分を、ラクトースなどの増量剤、デンプンなどの結合剤、および／またはタルクもしくはステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤、場合により、安定剤と混合して含有することができる。軟カプセルでは、有効剤は、脂肪油、液体パラフィン、または液体ポリエチレングリコールなどの好適な液体に溶解または懸濁させることができる。さらに、安定剤を加えてもよい。経口用の処方物は総て、このような投与に好適な用量とすべきである。頬側投与用としては、これらの組成物は常法で処方された錠剤またはロゼンジの形態をとってもよい。
【００８９】
鼻腔内または吸入による投与用としては、本発明に従った使用のための化合物は、好適な噴射剤、例えば、ジクロロジフルオロエタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素または他の好適なガスを用いた、加圧パックまたはネブライザーからのエアゾールスプレー剤形の形態で送達するのが便宜である。加圧エアゾールの場合では、投与単位は、計量量を送達するためのバルブを設けることにより決定することができる。該化合物とラクトースまたはデンプンなどの好適な粉末基剤との混合粉末を含有する吸入器または吸気器などに使用するためのゼラチンのカプセルおよびカートリッジを処方することができる。
【００９０】
該化合物は注射、例えば、ボーラス注射または連続注入による非経口投与用に処方してもよい。注射用処方物は、単位剤形、例えば、アンプル中または保存剤を添加した多回用量容器で提供することができる。これらの組成物は、油性または水性ビヒクル中の懸濁液、溶液またはエマルションなどの形態をとってもよく、沈殿防止剤、安定剤および／または分散剤などの処方剤を含んでもよい。
【００９１】
非経口投与用の医薬製剤としては、水溶性形態の有効化合物の水溶液を含む。さらに、これらの有効剤の懸濁液を、好適な油性注射懸濁液として調製してもよい。好適な親油性溶媒またはビヒクルとしては、ゴマ油などの脂肪油、またはオレイン酸エチルもしくはトリグリセリドなどの合成脂肪酸エステル、またはリポソームが挙げられる。水性注射懸濁液は、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、またはデキストランなど、その懸濁液の粘度を高める物質を含み得る。場合により、この懸濁液はまた、好適な安定剤、または高濃度の溶液を作製可能とするために化合物の溶解度を高める薬剤を含んでもよい。
【００９２】
眼への投与用としては、有効剤は、化合物を、角膜および眼の内部領域（例えば、前眼房、後眼房、硝子体、眼房水、硝子体液、角膜、虹彩／毛様体、レンズ、脈絡膜／網膜および強膜など）、へ浸透させるのに十分な時間、化合物が眼の表面と接触を維持するような、薬学上許容される眼用ビヒクルにて送達される。薬学上許容される眼用ビヒクルは、軟膏、植物油、またはカプセル封入剤であり得る。本発明の化合物はまた、硝子体液および眼房水へ直接注入することもできる。
【００９３】
あるいは、有効成分は、使用前に好適なビヒクル、例えば、無菌パイロジェンフリー水、で構成するための粉末形態であってもよい。これらの化合物はまた、例えば、カカオ脂または他のグリセリドなどの通常の坐剤基材を含有する、坐剤または保留浣腸などの直腸用組成物として処方してもよい。
【００９４】
これらの化合物はまた、デポー製剤として処方してもよい。このような持続性処方物は移植（例えば、皮下もしくは筋肉内）によるか、または筋肉内注射により投与してもよい。よって、例えば、これらの化合物は、好適なポリマー材料または疎水性材料を用いて（例えば、許容される油中のエマルションとして）、またはイオン交換樹脂を用いて、または難溶性誘導体、例えば、難溶性塩として処方することもできる。
【００９５】
疎水性化合物用の医薬担体は、ベンジルアルコール、非極性界面活性剤、水混和性有機ポリマーと水相を含んでなる補助溶媒系である。補助溶媒系はＶＰＤ補助溶媒系であってもよい。ＶＰＤは、３％ｗ／ｖベンジルアルコール、８％ｗ／ｖ非極性界面活性剤ポリソルベート８０、および６５％ｗ／ｖポリエチレングリコール３００の溶液を無水エタノールで一定量としたものである。このＶＰＤ補助溶媒系（ＶＰＤ：５Ｗ）は、５％デキストロース水溶液で１：１希釈したＶＰＤを含む。この補助溶媒系は疎水性の化合物を十分溶解させ、それ自体、全身投与した場合にも毒性は低い。本来、補助溶媒系の割合は、その溶解性および毒性特性を損なうことなく、相当可変である。さらに、補助溶媒成分の性質も変更可能であり、例えば、ポリソルベート８０の代わりに他の低毒性非極性界面活性剤を使用してもよく、ポリエチレングリコールの分画サイズを変更してもよいし、ポリエチレングリコールを他の生体適合性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドンに置き換えてもよいし、デキストロースを他の糖類または多糖類に置換してもよい。
【００９６】
あるいは、疎水性医薬化合物の他の送達系を用いてもよい。リポソームおよびエマルションは疎水性薬剤の送達ビヒクルまたは担体の既知の例である。ジメチルスルホキシドなどの特定の有機溶媒も、毒性が大きいという代償はあるが、使用可能である。さらに、これらの化合物は、治療薬を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスなどの徐放系を用いて送達することもできる。種々の徐放性材料が確立されており、当業者には公知である。徐放性カプセルは、それらの化学的性質に応じて、数週間から最大１００日にわたって化合物を放出し得る。治療試薬の化学的性質および生体安定性に応じ、付加的なタンパク質安定化戦略を採用することもできる。
【００９７】
これらの医薬組成物はまた、好適な固相またはゲル相の担体または賦形剤を含んでもよい。このような担体または賦形剤の例としては、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、糖類、デンプン類、セルロース誘導体、ゼラチン、およびポリエチレングリコールなどのポリマーが挙げられる。
【００９８】
本発明の化合物のいくつかは、医薬上適合する対イオンによる塩として提供してもよい。  医薬上適合する塩は、塩酸、硫酸、酢酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸などをはじめとする多くの酸を用いて形成させることができる。塩は、水性またはその他プロトン性溶媒中で、対応する遊離塩基形態のものよりも溶解度が高くなる傾向がある。
【００９９】
これらの化合物を含有する、開示の化合物または医薬処方物は、哺乳類に投与するための単位剤形であることが好ましい。この単位剤形は、例えば、カプセル、ＩＶバッグ、錠剤、またはバイアルをはじめとする当技術分野で公知のいずれの単位剤形であってもよい。組成物の単位用量における有効成分（すなわち、構造式ＩもしくはＩ（ａ）の化合物またはその塩もしくはプロドラッグ）の量は有効な量であり、含まれる特定の治療に応じて異なり得る。当然のことながら、用量には通常、患者の齢および状態に応じて変更を加える必要がある。用量はまた投与経路によっても異なり、この投与経路としては、経口、エアゾール、直腸、経皮、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内および鼻腔内をはじめとする様々な経路であり得る。
【実施例】
【０１００】
本発明の複素環トリアジン化合物の製造
実施例１および２  １−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミンおよびベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミンは、J. Med. Chem. 2003, 46, 169-182に公開されている方法に従って製造した。
【０１０１】
実施例３
ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−ピリジン−３−イル−アミン
エタノール（１０ｍｌ）および水（３ｍｌ）中、（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン（実施例４、０．５ｇ）の溶液にジチオン酸ナトリウム（１．０９ｇ）を１時間かけて少量ずつ加えた。この反応混合物を２時間還流させた。完了したところで、この化合物を酢酸エチル（５０ｍｌ）で抽出し、水（３０ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウム（２ｇ）で乾燥させた。粗物質をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、４０％ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘキサン）により精製し、目的生成物を得た（０．３５ｇ、７６％）。
【０１０２】
実施例４
（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン
３−クロロ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン１−オキシドを文献の手順（ＵＳ２００４０１９２６８６Ａ１）に従って製造した。乾燥ＤＭＦ（５０ｍｌ）中、３−アミノピリジン（２．３ｇ）を０〜５℃まで冷却し、ＮａＨ（１．７８ｇ）を０．５時間かけて少量ずつ加えた。この反応混合物を室温で１５分間攪拌した後、この混合物を３−クロロ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン１−オキシド（４．５ｇ）に加え、室温で２時間攪拌した。完了したところで、化合物を酢酸エチル（５００ｍｌ）で抽出し、水（１０００ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウム（１０ｇ）で乾燥させた。減圧下で溶媒を除去し、残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、５０％ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘキサン）により精製し、（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミンを得た（２．５ｇ、収率４２％）。
【０１０３】
実施例５
（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミン
４−（４−アミノ−フェニル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１ｇ）、３−クロロ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン１−オキシド（０．６５ｇ）、炭酸カリウム（０．６４ｇ）、Ｎ，Ｎ−ジメチル−ホルムアミド（１５ｍｌ）および酢酸銅（０．１ｇ）を８５℃で６時間加熱した。完了したところで、この反応混合物を室温まで温め、水（１００ｍｌ）を加えた。この反応混合物を酢酸エチル（３×５０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水（３×５０ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下で溶媒を除去して残渣を得、これをさらにカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、２５％ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘキサン）により精製し、４−［４−（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミノ）−フェニル］−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを収率３１％で得た。この生成物（０．６２ｇ）をクロロホルム（９ｍｌ）に溶解させ、０℃まで冷却し、この反応混合物に乾燥塩化水素ガスの気泡を３０分間通じた。完了したところで、この反応混合物を０℃にて、ＮａＣｌで飽和させた５％ＮａＯＨ（〜４０ｍｌ）でｐＨ〜９まで塩基性化した。この反応混合物を濾過し、有機層を分離した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下で溶媒を除去して残渣を得、これをヘキサン（〜２０ｍｌ）および酢酸エチル（〜２０ｍｌ）で洗浄し、目的生成物（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミンを収率５１％で得た。
【０１０４】
実施例６
ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−（４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−アミン
実施例３で概説した手順に従って製造した。
【０１０５】
実施例７
７−ブロモ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン
４−ブロモ−２−ニトロアニリン（２ｇ、９．２ｍｍｏｌ）およびシアンアミド（１．９７ｇ、４７ｍｍｏｌ）を一緒に１００℃で融解した。この反応混合物を５０℃前後に冷却し、濃ＨＣｌ（１７ｍｌ）を、温度を５０℃に維持しながら、３０分かけて注意深く加えた。この反応混合物をこの温度で発熱が収まるまで攪拌した後、１００℃で４時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却し、７．５Ｍ  ＮａＯＨ（１６０ｍｌ）で強塩基性とし、その後、１００℃で１時間攪拌した。これを室温まで冷却し、水（１００ｍｌ）で希釈した。生じた沈殿を濾過し、水、エーテルで洗浄し、乾燥させ、１．２ｇの７−ブロモ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミンを黄色固体として得た。
１−オキシ−７−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン
【０１０６】
ＤＭＥ（３０ｍｌ）／Ｈ２Ｏ（１０ｍｌ）中、７−ブロモ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン（０．３ｇ、１．２４ｍｍｏｌ）、ピラゾール−４−ボロン酸ピナコールエステル（０．２８ｇ、１．５ｍｍｏｌ）およびＣｓＣＯ３（１．２ｇ、３．７ｍｍｏｌ）の脱気溶液に、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０７１ｇ、０．０６ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を１００℃で一晩攪拌し（アルゴン下）、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得、これをカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０〜１２０、ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ）により精製し、０．２００ｇの１−オキシ−７−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミンを黄色固体として得た。
【０１０７】
実施例８
７−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン
ＭｅＯＨ（１０ｍｌ）中、１−オキシ−７−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン（０．１０ｇ）の溶液に１０％Ｐｄ／Ｃ（０．０２ｇ）を加え、この反応混合物をＨ２（バルーン）下、室温で１時間、攪拌した。反応が完了したところで（ＴＬＣ）、触媒を濾別し、メタノールで洗浄した。合わせた濾液を濃縮して粗生成物を得、これをカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ）により精製し、０．０３ｇの７−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミンを黄色固体として得た。
【０１０８】
実施例９
１−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−３−［５−クロロ−２−（３−ジメチルアミノ−プロポキシ）フェニル］−尿素
５−クロロ−２−（３−ジメチルアミノ−プロポキシ）−フェニルアミンをＷＯ０３１０１４４４に概説された手順に従って製造した。ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミンを実施例２に記載のように製造した。ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン（１００ｍｇ）を５ｍｌジクロロメタンに懸濁させ、２．０当量のトリエチルアミンを加えた後、０．４５２ミリモルのトリホスゲンを加えた。この混合物を室温で３０分間攪拌した後、０．６８ｍｍｏｌの５−クロロ−２−（３−ジメチルアミノ−プロポキシ）−アニリンを加えた。この反応混合物をさらに３０分間攪拌した。生成物をカラムクロマトグラフィー（トリエチルアミン／メタノール／ジクロロメタン＝１／９／９０）により精製した。
【０１０９】
実施例１０
（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−アミン
５−メチル−３−アミノピラゾール（０．５３ｇ）およびＮ−メチルピロリドン（５ｍｌ）を窒素下で攪拌した。銅粉末（０．０８ｇ）、ヨウ化銅（０．２ｇ）および炭酸カリウム（１．１ｇ）を加えた。この反応混合物を室温で１０分間攪拌した。次に、上記反応混合物に３−クロロ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン１−オキシド（０．５ｇ）を加え、５５〜６０℃まで加熱した。この反応混合物を５５〜６０℃で３０分間攪拌した。完了したところで、反応混合物に水（１００ｍｌ）を加え、酢酸エチル（３×１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下で溶媒を除去して残渣を得、これをさらにカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、６０％ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘキサン）により精製し、（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−アミンを収率６％で得た。
【０１１０】
実施例１１
ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−アミン
実施例３で概説した手順に従い、（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−アミンから出発して製造した。
【０１１１】
実施例１２
３−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン１−オキシド
ＤＭＥ（３０ｍｌ）／Ｈ２Ｏ（１０ｍｌ）中、３−クロロ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン１−オキシド（０．４ｇ、２．２ｍｍｏｌ）、４−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール（０．５１ｇ、２．６ｍｍｏｌ）およびＣｓＣＯ３（２．１５ｇ、６．６ｍｍｏｌ）の脱気溶液に、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．１２ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を８０℃で２時間攪拌し（アルゴン下）、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得、これをカラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０〜１２０、ＣＨＣｌ３ＭｅＯＨ）および分取ＨＰＬＣにより精製し、０．０３ｇの３−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン１−オキシドを黄色固体として得た。
【０１１２】
実施例１３
３−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ベンゾ［１，２，４］トリアジン
ＭｅＯＨ（１０ｍｌ）中、３−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン１−オキシド（０．１０ｇ）の溶液に１０％Ｐｄ／Ｃ（０．０２ｇ）を加え、この反応混合物をＨ２（バルーン）下、室温で１時間、攪拌した。反応が完了した後、触媒を濾別し、メタノールで洗浄した。合わせた濾液を濃縮して粗生成物を得、これをカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ）により精製し、０．０３ｇの３−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジンを黄色固体として得た。
【０１１３】
実施例１４
７−（２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン
ＭｅＯＨ（１０ｍｌ）中、１−オキシ−７−（２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン（０．１０ｇ）の溶液に１０％Ｐｄ／Ｃ（０．０２ｇ）を加え、この反応混合物をＨ２（バルーン）下、室温で１時間、攪拌した。反応が完了した後、触媒濾別し、メタノールで洗浄した。合わせた濾液を濃縮して粗生成物を得、これをカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ）により精製し、０．０４ｇの７−（２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミンを黄色固体として得た。
【０１１４】
実施例１５
１−オキシ−７−（２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン
ＤＭＥ（３０ｍｌ）／Η２Ｏ（１０ｍｌ）  中、７−ブロモ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン（０．４ｇ、１．６６ｍｍｏｌ）、１−（テトラヒドロ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル−ボロン酸（０．４８５ｇ、２．５ｍｍｏｌ）およびＣｓＣＯ３（１．８２ｇ、５．６ｍｍｏｌ）の脱気溶液に、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０９５ｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を１００℃で一晩（アルゴン下）攪拌し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得、これをカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ）により精製し、１−オキシ−７−［２−（テトラヒドロ−ピラン−２−イル）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミンを得た。これを室温で３０分間、エーテル性塩化水素（１０ｍｌ）とともに攪拌した。この反応混合物をＮａ２ＣＯ３で中和し、酢酸エチルで抽出した。溶媒を蒸発させ、残渣をエーテルで洗浄し、０．１２５ｇの１−オキシ−７−（２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミンを黄色固体として得た。
【０１１５】
実施例１６
３−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）ベンゾ［１，２，４］トリアジン
ＭｅＯＨ（１０ｍｌ）中、３−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン１−オキシド（０．１０ｇ）の溶液に１０％Ｐｄ／Ｃ（０．０２ｇ）を加え、この反応混合物をさらにＨ２（バルーン）下、室温で１時間、攪拌した。反応が完了した後、触媒を濾別し、メタノールで洗浄した。合わせた濾液を濃縮して粗生成物を得、これをカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ）により精製し、０．０３ｇの３−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジンを黄色固体として得た。
【０１１６】
実施例１７
３−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン１−オキシド
ＤＭＥ（１０ｍｌ）／Η２Ｏ（５ｍｌ）中、３−クロロ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン１−オキシド（０．２ｇ、１．１ｍｍｏｌ）、１−（テトラヒドロ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル−ボロン酸（０．３２ｇ、１．６ｍｍｏｌ）およびＣｓＣＯ３（１．０７ｇ、３．３ｍｍｏｌ）の脱気溶液に、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．０６３ｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を１００℃で一晩（アルゴン下）攪拌し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得、これをカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ）により精製し、０．１ｇの３−［２−（テトラヒドロ−ピラン−２−イル）−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−ベンゾ［１，２，４］トリアジン１−オキシドを得た。これを室温で３０分間、ＨＣｌ／エーテル（１０ｍｌ）とともに攪拌した。この反応混合物をＮａ２ＣＯ３で中和し、酢酸エチルで抽出した。溶媒を蒸発させ、残渣をエーテルで洗浄し、０．０７ｇの３−（１Ｈ−ピラゾール−３−イル）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン１−オキシドを黄色固体として得た。
【０１１７】
実施例１８
６−フルオロ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン
標題化合物は、J. Med. Chem. 2003, 46, 169-182およびＵＳ２００４／０１９２６８６に概説されているプロトコールに従い、１，４−ジフルオロ−２−ニトロ−ベンゼンおよびグアニジンから製造した。
【０１１８】
Ｎ＊６＊−（２，４−ジメトキシ−ベンジル）−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３，６−ジアミン
６−フルオロ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン（１．０ｇ）を１０ｍｌ  ＤＭＳＯに溶解させ、１．２当量の２，４−ジメトキシ−ベンジルアミンを加えた。この反応を１００℃まで２日間加熱した。出発材料が消費されたところで、この反応混合物を室温まで冷却し、水を加えて目的生成物を沈殿させ、これを濾過し、十分な水で洗浄し、黄色固体を得た。
【０１１９】
１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３，６−ジアミン
Ｎ＊６＊−（２，４−ジメトキシ−ベンジル）−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３，６−ジアミン（０．３５ｇ）を５ｍｌトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）に溶解させ、反応混合物を室温で３時間攪拌した。完了したところで、このＴＦＡ塩をエーテルから沈殿させ、濾過し、エーテルで洗浄し、乾燥させ、４２０ｍｇの目的化合物をＴＦＡ塩として得た。
【０１２０】
１−（３−アミノ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル）−３−ピラジン−２−イル−尿素
ピラジン−２−カルボニルアジド（０．２５ｇ）を２ｍｌジクロロメタンに溶解させ、１２０℃で５分間マイクロ波を照射した。このＤＭＳＯ溶液（２ｍｌ中、６１ｍｇ）に１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３，６−ジアミンを加え、得られた反応混合物を１２０℃でさらに１０分間加熱した。目的生成物を水で沈殿させ、ジクロロメタンを蒸発により除去した。この沈殿を濾過し、水およびエタノールで洗浄した後、ジクロロメタン中、１０％飽和ＮＨ３／ＭｅＯＨを用いてカラム精製した。
【０１２１】
１−（３−アミノ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル）−３−ピラジン−２−イル−尿素
１−（３−アミノ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル）−３−ピラジン−２−イル−尿素（１００ｍｇ）を７０％エタノール５０ｍｌに懸濁させ、２．０当量のＮａ２Ｓ２Ｏ４を加えた。得られた反応混合物を一晩還流させ、生成物を、１０％飽和ＮＨ３／ＭｅＯＨおよび９０％ジクロロメタン（ＤＣＭ）で溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製した。
【０１２２】
１−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル−３−ピラジン−２−イル−尿素
１−（３−アミノ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル）−３−ピラジン−２−イル−尿素（７０ｍｇ）を１０ｍｌのＤＭＦに溶解させ、５．０当量の亜硝酸イソアミルを加え、得られた反応混合物を６０℃まで１時間加熱した。目的生成物を、ＤＣＭ中０〜１５％飽和ＮＨ３／メタノールで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製した。
【０１２３】
実施例１９
ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル−（６−ピペラジン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミン
（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（６−ピペラジン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミン（２０ｍｇ）、酢酸（６ｍｌ）、ジチオン酸ナトリウム（２５ｍｇ）および水（２ｍｌ）を１００℃まで３０分間加熱した。この反応混合物に１００℃でジチオン酸ナトリウム（１０ｍｇ）を追加し、さらに３０分間攪拌を続け、残りのジチオン酸ナトリウム（５ｍｇ）を加え、この反応混合物を１００℃で最後に２時間攪拌した。完了したところで、減圧下で溶媒を除去し、水（１００ｍｌ）を加えた。この反応混合物を炭酸ナトリウム溶液でｐＨ〜８まで塩基性化した。反応混合物をクロロホルム：ＩＰＡ（８０ｍｌ：２０ｍｌ）で抽出し、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下で溶媒を除去して残渣を得、これを酢酸エチルで洗浄して標題化合物を得た。
【０１２４】
実施例２０
４−（５−ニトロ−ピリジン−２−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ＤＭＦ（７５ｍｌ）中、ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５ｇ）および２−クロロ−５−ニトロピリジン（４．５ｇ）の溶液に、炭酸カリウム（５ｇ）およびＣｕ（ＯＡｃ）２・２Ｈ２Ｏ（０．４ｇ）を加え、この反応混合物を８５℃で３時間攪拌した。完了したところで、反応混合物を室温まで冷却し、ＤＭＦを減圧下で除去した。この反応混合物に水（２００ｍｌ）を加えたところ固体が生じ、これを濾過し、酢酸エチル（４００ｍｌ）に溶解した。有機層を水（２００ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下で溶媒を除去し、４−（５−ニトロ−ピリジン−２−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを得た。
【０１２５】
４−（５−アミノ−ピリジン−２−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
４−（５−ニトロ−ピリジン−２−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５ｇ）、１０％Ｐｄ／Ｃ（０．５ｇ）およびエタノール（２００ｍｌ）を水素化フラスコ内で一緒にし、反応混合物を６０ｐｓｉで２時間水素化した。完了したところで、この反応混合物をセライトベッドで濾過し、エタノールを減圧下で除去し、粗生成物を得た。この化合物をさらに５０％ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘキサン（２００ｍｌ）から結晶化させることで精製し、４−（５−アミノ−ピリジン−２−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを得た。
【０１２６】
４−［５−（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミノ）−ピリジン−２−イル］−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
４−（５−アミノ−ピリジン−２−イル）−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．５ｇ）、３−クロロ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン１−オキシド（１．２ｇ）およびＤＭＦ（２０ｍｌ）および炭酸カリウム（１．５ｇ）を５０〜６０℃まで加熱し、一晩攪拌した。完了したところで、水（２００ｍｌ）を加え、酢酸エチル（２×２００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機抽出液を硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下で溶媒を除去して残渣を得、これをさらにカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、２５％ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘキサン）により精製し、４−［５−（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミノ）−ピリジン−２−イル］−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを得た。
【０１２７】
（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（６−ピペラジン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミン
ＤＣＭ（３０ｍｌ）中、（１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−（６−ピペラジン−１−イル−ピリジン−３−イル）−アミン（０．４５ｇ）に１０分かけてＴＦＡ（４．５ｍｌ）をゆっくり加えた。この反応混合物を室温でさらに４５分間攪拌した。完了したところで、反応混合物に水（２００ｍｌ）を加え、有機層を分離し、水層を酢酸エチル（１００ｍｌ）で逆抽出した。水層を炭酸ナトリウム溶液でｐＨ〜８まで塩基性化した。生じた固体を濾過し、乾燥させ、標題化合物を得た。
【０１２８】
実施例２１
（６−クロロ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン
メタノール（３０ｍｌ）中、（６−クロロ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン（０．２ｇ）および亜鉛末（０．０９ｇ）にギ酸アンモニウム（０．１３ｇ）を加えた。次に、この反応混合物を７０℃で１０時間攪拌した。完了したところで、反応混合物を室温まで冷却し、セライトベッドで濾過した。メタノールを減圧下で除去して残渣を得、これに水（〜１００ｍｌ）を加えた。反応混合物を酢酸エチル（４×１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で溶媒を除去して残渣を得、これをさらにカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、２０％ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘキサン）により精製し、標題化合物を得た。
【０１２９】
実施例２２
（６−クロロ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン
標題化合物は、実施例２３に概説した手順に従って製造した。
【０１３０】
実施例２３
４−ニトロ−ビフェニル−３−イルアミン
５−クロロ−２−ニトロ−フェニルアミン（９ｇ）、フェニルボロン酸（９．５ｇ）、ＢＩＮＡＰ（１．６２ｇ）、炭酸カリウム（１８ｇ）および１，４−ジオキサン（２７０ｍｌ）を９０℃まで加熱し、この反応混合物を２４時間攪拌した。完了したところで、この反応混合物をセライトベッドで濾過し、減圧下で溶媒を除去して残渣を得、これをさらにカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、５％ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘキサン）により精製した。
【０１３１】
１−オキシ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン
４−ニトロ−ビフェニル−３−イルアミン（４ｇ）およびシアンアミド（７．８ｇ）を１００℃で３０分間加熱した。この反応混合物を５０℃まで冷却し、濃ＨＣｌ（４０ｍｌ）を３０分かけてゆっくり加えた。この反応混合物を再び１００℃まで２時間加熱した。上記反応混合物に１００℃でシアンアミド（７．８ｇ）を加え、４時間攪拌した。この反応混合物を２０℃まで冷却し、３０％ＮａＯＨ溶液（３４０ｍｌ）を２０℃でゆっくり加えた。この反応混合物を再び１００℃まで１時間半加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、生じた固体を濾過した。この固体を水（２×５０ｍｌ）、エーテル（２×５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥させ、１−オキシ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミンを得た。
【０１３２】
１−オキシ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−オール
ＣＨ３ＣＯＯＨ：水（１９．２ｍｌ）中、１−オキシ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン（０．９６ｇ）の溶液に、濃Ｈ２ＳＯ４（１．９２ｍｌ）をゆっくり加えた。この反応混合物を１００℃で３０分間攪拌した後、５０℃まで冷却した。この反応混合物に水（２ｍｌ）中ＮａＮＯ２（０．６７ｇ）を５０℃で１０分かけて滴下した。反応を１００℃まで１時間加熱した。完了したところで、混合物を室温まで冷却し、冷蔵庫で一晩置いた。生じた固体を濾過し、水（２×５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥させた。
【０１３３】
３−クロロ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン１−オキシド
ＰＯＣｌ３（１１．６ｍｌ）中、１−オキシ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−オール（０．５８ｇ）を、触媒量のＮ，Ｎ−ジメチルアニリンとともに１００℃で２時間攪拌した。完了したところで、余分なＰＯＣｌ３を減圧下で除去し、得られた残渣を氷水混合物中に注いだ。得られた固体を濾過し、水（２０ｍｌ）で洗浄し、３−クロロ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン１−オキシドを得た。
【０１３４】
（１−オキシ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン
６０％ＮａＨを加えた（０．１３ｇ）ＲＢフラスコに、３−クロロ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン１−オキシド（０．５ｇ）、３−アミノピリジン（０．３ｇ）およびＤＭＳＯ（１０ｍｌ）の混合物を入れた。この反応混合物を７０〜８０℃まで１時間半加熱した。完了したところで、反応混合物を室温まで冷却し、水（〜５０ｍｌ）を加えた。この反応混合物を酢酸エチル（４×１５０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機抽出液を硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下で溶媒を除去して残渣を得、これをさらにカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、４０％ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘキサン）により精製し、（１−オキシ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミンを得た。
【０１３５】
（６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン
（１−オキシ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン（０．１６ｇ）、ジチオン酸ナトリウム（０．１６ｇ）および酢酸（２４ｍｌ）を１００℃まで１時間加熱した。残りのジチオン酸ナトリウム（０．１６ｇ）を加え、加熱を１００℃でさらに１時間半続けた。完了したところで、反応混合物を室温まで冷却し、酢酸を減圧下で除去した。この反応混合物を飽和重炭酸ナトリウム溶液（〜１０ｍｌ）でｐＨ〜８となるまで塩基性化した。この混合物を酢酸エチル（３×１００ｍｌ）で抽出し、合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下で溶媒を除去して残渣を得、これをさらにカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、４０％ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘキサン）により精製し、（６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミンを得た。
【０１３６】
実施例２４
（１−オキシ−６−フェニル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イル）−ピリジン−３−イル−アミン
標題化合物は、実施例２３に記載のように製造した。
【０１３７】
実施例２５
１−オキシ−６−ピペラジン−１−イル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン
６−フルオロ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン（２．７８ミリモル）を５０ｍｌＤＭＦに溶解させ、水中４０％のピペリジン（１０当量）を加えた。この反応混合物を４０℃で２時間攪拌し、その後、反応を室温まで冷却し、沈殿を濾過し、ＴＨＦおよびエーテルで洗浄し、０．５２７ｇの目的生成物を洗浄した。
【０１３８】
実施例２６
６−ピペラジン−１−イル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン
１−オキシ−６−ピペラジン−１−イル−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン（１．２ミリモル）を７０％エタノール２０ｍｌに懸濁させ、１．２０当量のＮａ２Ｓ２Ｏ４を加えた。この反応混合物を一晩還流させ、その後、反応を室温まで冷却し、沈殿を濾過し、エタノールで洗浄した。得られた濾液にジエチルエーテルを加え、生成物を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥させた。
【０１３９】
実施例２７
４−（３−フルオロ−４−ニトロ−フェノキシメチル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
３−フルオロ−４−ニトロ−フェノール（２３ミリモル）、４−ヒドロキシメチル−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２３ミリモル）およびトリフェニルホスフィン（２３ミリモル）を５０ｍｌのテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中に一緒に混合し、アゾジカルボン酸ジイソプロピル（ＤＩＡＤ−２３ミリモル）をゆっくり加えた。この反応混合物を１時間攪拌した。粗生成物を、２０〜４０％酢酸エチル／ヘキサンで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製する。
【０１４０】
４−（３−アミノ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イルオキシメチル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
４−（３−フルオロ−４−ニトロ−フェノキシメチル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１０ｍｍｏｌ）を５０ｍｌのＴＨＦに溶解させ、８４ミリモルのグアニジン（エタノール中で塩酸グアニジンおよび１．０当量のカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドを混合し、塩の沈殿を取り出し、エタノールを蒸発させることにより製造）を加え、この混合物を還流下で一晩攪拌した。この反応を冷却し、上層をデカントし、ＴＨＦで３回（５０ｍｌ×３）洗浄した。合わせたＴＨＦ溶液を濃縮し、１０％ＭｅＯＨ／酢酸エチルおよびヘキサンで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製した。
【０１４１】
１−オキシ−６−（ピペリジン−４−イルメトキシ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン塩酸塩
４−（３−アミノ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イルオキシメチル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．５ｇ）を１０ｍｌ  ＤＣＭに溶解させ、ジオキサン中４ＮのＨＣｌを加えた。沈殿を濾過し、エーテルで洗浄し、目的生成物を得た。
【０１４２】
実施例２８
４−（３−アミノ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イルオキシメチル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
４−（３−アミノ−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イルオキシメチル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．０ｇ）を７０％エタノール１５ｍｌ中、２．０当量のＮａ２Ｓ２Ｏ４と混合し、この反応混合物を１時間還流させた。この生成物を、５０％酢酸エチル／ヘキサンで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製した。
【０１４３】
６−（ピペリジン−４−イルメトキシ）−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン塩酸塩
４−（３−アミノ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イルオキシメチル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．４ｇ）を５ｍｌのＤＣＭに溶解させ、これに２ｍｌのジオキサン中４ＮのＨＣｌを加えた。この反応混合物を室温で一晩攪拌し、その後、生成物を濾過し、エーテルで洗浄した。
【０１４４】
実施例２９
２−フルオロ−４−［２−（３，４−ジクロロ−フェニル）−エトキシ］−１−ニトロ−ベンゼン
３−フルオロ−４−ニトロ−フェノール（１０ミリモル）、２−（３，４−ジクロロ−フェニル）−エタノール（１０ミリモル）およびトリフェニルホスフィン（１０ミリモル）を５０ｍｌのＴＨＦ中に一緒に混合し、ＤＩＡＤ（１０ミリモル）をゆっくり加えた。この反応混合物を１時間攪拌し、その後、粗生成物を、４０％酢酸エチル／ヘキサンで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製した。
【０１４５】
６−［２−（３，４−ジクロロ−フェニル）−エトキシ］−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン
２−フルオロ−４−［２−（３，４−ジクロロ−フェニル）−エトキシ］−１−ニトロ−ベンゼン（２．５ｇ）を５０ｍｌのＴＨＦに溶解させ、８４ミリモルのグアニジン（塩酸グアニジンと１．０当量のカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドを混合することにより製造）を加えた。この反応混合物を７０℃で一晩攪拌し、その後、反応を室温まで冷却し、水で希釈した生じた沈殿を濾過し、水およびエタノールで洗浄した。この材料を２０ｍｌのエタノール中でさらに加熱還流し、室温まで冷却した。沈殿を濾過し、エーテルで洗浄し、乾燥させ、目的生成物を得た。
【０１４６】
実施例３０
６−［２−（３，４−ジクロロ−フェニル）−エトキシ］−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン
６−［２−（３，４−ジクロロ−フェニル）−エトキシ］−１−オキシ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−３−イルアミン（０．８６ｇ）を、７０％エタノール１５ｍｌ中、１．５当量のＮａ２Ｓ２Ｏ４と混合し、３日間還流させた。反応を室温まで冷却し、生成物を濾過し、水、エタノールおよびエーテルで洗浄した。
【０１４７】
実施例３１
１−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル−３−ピラジン−２−イル−尿素
実施例１８に記載の化合物。
【０１４８】
実施例３２
１−（３−アミノ−ベンゾ［１，２，４］トリアジン−６−イル）−３−ピラジン−２−イル−尿素
実施例１８に記載の化合物。
得られた実施例１〜３２の生成物に対して核磁気共鳴法（ＮＭＲ）、液体クロマトグラフィーおよび質量分析法（ＭＳ）による分析を行った。結果を表４に示す。
【０１４９】
【表５】
2008528679.tif 000032
2008528679.tif 000033
2008528679.tif 000034
2008528679.tif 000035
2008528679.tif 000036
【０１５０】
ＬＣＭＳ／ＭＳ：  Ｗａｔｅｒｓ  ２７９５、Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＱ、９９６ダイオードアレイ（２２０〜４００）
方法：  流速２ｍｌ／分、測定時間  ５．８分、勾配：  ４．２５分間９５％Ａｑ〜５％、４．２５分〜５．８分まで５％Ａｑ
Ａｑ：１０ｍＭギ酸アンモニウム  Ｏｒｇ：９５％アセトニトリル／０．１％アンモニア／５％Ａｑ
カラム：  ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  ５μ  Ｃ１８  ３０×４．６ｍｍ
ＮＭＲ：  Ｂｒｕｋｅｒ  ４００ＭＨｚ
【０１５１】
実施例３３  キナーゼ阻害の生物学的アッセイ
実施例１〜３２で製造された本発明の化合物を、一定範囲の一般的なタンパク質キナーゼに対するキナーゼ阻害に関して試験した。キナーゼアッセイは総て、Upstate Ltd, Gemini Crescent, Dundee Technology Park, Dundee, DD2 ISW, UKにて、次のように標準的なプロトコールに従って実施した。
【０１５２】
Ａｒｇ（ｈ）
最終反応量２５μｌにおいて、Ａｒｇ（ｈ）（５〜１０ｍＵ）を、８ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、０．２ｍＭ  ＥＤＴＡ、５０μＭ  ＥＡＩＹＡＡＰＦＡＫＫＫ、１０ｍＭ酢酸マグネシウムおよび［□−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比活性約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要に応じて濃縮）とともにインキュベートする。ＭｇＡＴＰ混合物を加えることで反応を開始させる。室温で４０分間インキュベートした後、３％リン酸溶液５μｌを加えることで反応を停止させる。次に、この反応液１０μｌをＰ３０フィルターマットにスポットし、７５ｍＭリン酸中で５分間３回、メタノールで１回洗浄した後、乾燥させ、シンチレーション計数を行う。
【０１５３】
Ａｂｌ（ｈ）
最終反応量２５μｌにおいて、Ａｂｌ（ｈ）（５〜１０ｍＵ）を、８ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、０．２ｍＭ  ＥＤＴＡ、５０μＭ  ＥＡＩＹＡＡＰＦＡＫＫＫ、１０ｍＭ酢酸マグネシウムおよび［□−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比活性約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要に応じて濃縮）とともにインキュベートする。ＭｇＡＴＰ混合物を加えることで反応を開始させる。室温で４０分間インキュベートした後、３％リン酸溶液５μｌを加えることで反応を停止させる。次に、この反応液１０μｌをＰ３０フィルターマットにスポットし、７５ｍＭリン酸中で５分間３回、メタノールで１回洗浄した後、乾燥させ、シンチレーション計数を行う。
【０１５４】
オーロラ−Ａ（ｈ）
最終反応量２５μｌにおいて、オーロラ−Ａ（ｈ）（５〜１０ｍＵ）を、８ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、０．２ｍＭ  ＥＤＴＡ、２００μＭ  ＬＲＲＡＳＬＧ（Ｋｅｍｐｔｉｄｅ）、１０ｍＭ酢酸マグネシウムおよび□□−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比活性約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要に応じて濃縮）とともにインキュベートする。ＭｇＡＴＰ混合物を加えることで反応を開始させる。室温で４０分間インキュベートした後、３％リン酸溶液５μｌを加えることで反応を停止させる。次に、この反応液１０μｌをＰ３０フィルターマットにスポットし、５０ｍＭリン酸中で５分間３回、メタノールで１回洗浄した後、乾燥させ、シンチレーション計数を行う。
【０１５５】
ＣＨＫ１（ｈ）
最終反応量２５μｌにおいて、ＣＨＫ１（ｈ）（５〜１０ｍＵ）を、８ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、０．２ｍＭ  ＥＤＴＡ、２００μＭ  ＫＫＫＶＳＲＳＧＬＹＲＳＰＳＭＰＥＮＬＮＲＰＲ、１０ｍＭ酢酸マグネシウムおよび□□−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比活性約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要に応じて濃縮）とともにインキュベートする。ＭｇＡＴＰ混合物を加えることで反応を開始させる。室温で４０分間インキュベートした後、３％リン酸溶液５μｌを加えることで反応を停止させる。次に、この反応液１０μｌをＰ３０フィルターマットにスポットし、７５ｍＭリン酸中で５分間３回、メタノールで１回洗浄した後、乾燥させ、シンチレーション計数を行う。
【０１５６】
ＫＤＲ（ｈ）
最終反応量２５μｌにおいて、ＫＤＲ（ｈ）（５〜１０ｍＵ）を、８ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、０．２ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．３３ｍｇ／ｍｌミエリン塩基性タンパク質、１０ｍＭ酢酸マグネシウムおよび［□−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比活性約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要に応じて濃縮）とともにインキュベートする。ＭｇＡＴＰ混合物を加えることで反応を開始させる。室温で４０分間インキュベートした後、３％リン酸溶液５μｌを加えることで反応を停止させる。次に、この反応液１０μｌをＰ３０フィルターマットにスポットし、７５ｍＭリン酸中で５分間３回、メタノールで１回洗浄した後、乾燥させ、シンチレーション計数を行う。
【０１５７】
ｐ７０Ｓ６Ｋ（ｈ）
最終反応量２５μｌにおいて、ｐ７０Ｓ６Ｋ（ｈ）（５〜１０ｍＵ）を、８ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、０．２ｍＭ  ＥＤＴＡ、１００μＭ  ＫＫＲＮＲＴＬＴＶ、１０ｍＭ酢酸マグネシウムおよび［□−３３Ｐ−ＡＴＰ］（比活性約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、必要に応じて濃縮）とともにインキュベートする。ＭｇＡＴＰ混合物を加えることで反応を開始させる。室温で４０分間インキュベートした後、３％リン酸溶液５μｌを加えることで反応を停止させる。次に、この反応液１０μｌをＰ３０フィルターマットにスポットし、７５ｍＭリン酸中で５分間３回、メタノールで１回洗浄した後、乾燥させ、シンチレーション計数を行う。
【０１５８】
これらのアッセイの結果を表５にまとめる。これらの結果から分かるように、本発明の化合物の多くはこれら一般的なタンパク質キナーゼの１以上の有効な阻害剤である。
化合物のデータ  ＡＴＰ濃度：Ａｒｇ＝４５μＭ；ａｂｌ＝４５μＭ；オーロラＡ＝１５μＭ；Ｃｈｋ１＝９ＯμＭ；ＫＤＲ＝９０μＭ；Ｐ７０Ｓ６＝１５μＭ。図は、阻害剤１００μＭで試験した場合の阻害率％を表す。
【０１５９】
【表６】
2008528679.tif 000037
【０１６０】
実施例３４  本発明の化合物の一電子還元電位の測定
本発明の化合物の一電子還元電位は、当技術分野で公知の技術により測定することができる。酸素への反応性のフリーラジカル中間体への還元による低酸素選択的作用の候補となる薬剤は、一般に、ニトロイミダゾール類、ニトロベンゼン類、キノリン類、および芳香族Ｎ−オキシド類である。これらは、レダクターゼ酵素により、この酵素（通常、フラボタンパク質）から薬剤Ｄへ一電子を付加することによってフリーラジカル中間体へと「生体還元的に」活性化される。
Ｄ＋電子→Ｄ・−（薬剤ラジカル）
【０１６１】
この薬剤の電子親和性が酸素の電子親和性よりも小さければ、十分酸素が送り込まれている細胞または組織では、酸素は逆還元される。
Ｄ・−＋Ｏ２→Ｄ＋Ｏ２・−
薬剤は元に戻るが、スーパーオキシドラジカルが生じる。しかし、細胞はそれに対する抗酸化防御を備えている。無酸素または低酸素組織では、この薬物ラジカルはさらなる還元生成物の形成へ進む場合があり、この還元生成物が細胞材料に結合し、そうでなくとも有毒であり得る。
【０１６２】
電子親和性は還元電位により測定され、この場合、一電子の付加に関して、（酸化剤／還元剤）の「対」により表される記号Ｅで示される、例えばＥ（Ｄ／Ｄ・−）。ｐＨが下付き文字で表される場合がある：Ｅ７、またはＥは、中点電位（Ｅｍ）、または一電子電位（Ｅ１７）と記載される場合がある。
【０１６３】
フリーラジカルＤ・−が対象ｐＨで安定であれば、通常の電気化学的技術を用いてＥ（Ｄ／Ｄ・−）を測定することができる。しかしながら、ほとんどの場合、ラジカルは短命である。その場合には、電子移動平衡：
【０１６４】
【数１】
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の位置を測定することにより、相対的電子親和性（酸化還元指標（Ｉｎｄ）に対して）を定量することができる。この平衡が右へ傾けば（平衡定数Ｋ＞１）、ＩｎｄはＤより電子親和性が高くなり（すなわち、Ｅ（Ｉｎｄ／Ｉｎｄ・−）、Ｅ（Ｄ／Ｄ・−）より陽性が高くなる。左へ傾けば（Ｋ＜１）、この逆である。平衡定数は、
Ｋ＝（［Ｄ］［Ｉｎｄ・−］）／（［Ｄ・−］［Ｉｎｄ］）
（式中、角括弧は濃度を表す）
として定義される。Ｋと還元電位差ΔＥの間の関係は、Ｅをボルトとすれば、
ΔＥ＝Ｅ（Ｉｎｄ／Ｉｎｄ・−）−Ｅ（Ｄ／Ｄ・−）＝０．０５９１５  ｌｏｇ  Ｋ
である。（有用な生体還元薬の典型的な値は−０．３〜−０．６Ｖ前後であり、これは同じ尺度で表されるＥ（Ｏ２／Ｏ２・−）の値が水素電極標準ＮＨＥに対して測定された−０．２に近く、細胞酵素が電位の低い薬剤を極めてゆっくり還元するためである。）Ｅ（Ｉｎｄ／Ｉｎｄ・−）の値が既知であれば（例えば、ラジカルが安定であるパラコートなどの数種のビオロゲンの場合）、Ｅ（Ｄ／Ｄ・−）の値は算出可能である。
【０１６５】
この試みは、ＤとＩｎｄを含有する溶液中でＤ・−および／またはＩｎｄ・−を生じさせることで、ＤとＩｎｄの間に電子移動平衡を実験的に作り出し、ラジカルが他の経路によって減衰する前にＫを測定することである。理想的には、この平衡アプローチは、所望の化学過程が起こっていることが確認されるような観察がなされなければならない。これはまた、Ｋを算出するためのもう１つの独立した経路を提供する。低濃度のラジカルしか生じず、その結果、［Ｄ・−］および［Ｉｎｄ・−］が双方とも［Ｄ］および［Ｉｎｄ］よりもずっと小さくなる場合には、この平衡アプローチの動態は指数関数となり、ｓ−１として測定された（一次）速度定数ｋｏｂｓにより特徴付けられる。ゆえに、
ｋｏｂｓ＝ｋｆ［Ｉｎｄ］＋ｋｒ［Ｄ］
（式中、ｋｆ、ｋｒは、それぞれ正反応および逆反応の速度定数であり、［Ｉｎｄ］／［Ｄ］に対するｋｏｂｓ／［Ｄ］の直線的プロットは傾きｋｆと切片ｋｒを有する）。従って、Ｋ＝ｋｆ／ｋｒである。
パルス放射線分解として知られる方法は、所望のラジカルが約マイクロ秒内に生成され、一般に数十マイクロ秒内にＤ・−とＩｎｄの間の反応の平衡の位置を測定することができるという有力な技術である。水に高エネルギー電子（一般に１〜１０ＭｅＶ）のマイクロ秒下のパルスを照射することにより生じたラジカルは酸化性と還元性の双方を備えているが、２−プロパノールのようなアルコールまたはギ酸塩を加えることにより、前者（・ＯＨ）は後者へ変換することができる。これらの二次的ラジカルは次にＤおよび／またはＩｎｄをＤ・−および／またはＩｎｄ・−へ還元する。
Ｈ２Ｏ→照射→  ｅａｑ−＋・ＯＨ＋Ｈ・
ｅａｑ−＋Ｄ（またはＩｎｄ）→Ｄ・−（またはＩｎｄ・−）
・ＯＨ（またはＨ・）＋（ＣＨ３）２ＣＨＯＨ→Ｈ２Ｏ（またはＨ２）＋（ＣＨ３）Ｃ・ＯＨ
（ＣＨ３）２Ｃ・ＯＨ＋Ｄ（またはＩｎｄ）→（ＣＨ３）２ＣＯ＋Ｈ＋＋Ｄ・−（またはＩｎｄ・−）
・ＯＨ（またはＨ・）＋ＨＣＯ２ー→Ｈ２Ｏ（またはＨ２）＋ＣＯ２・−
ＣＯ２・−＋Ｄ（またはＩｎｄ）→ＣＯ２＋Ｄ・−（またはＩｎｄ・−）
ラジカルの濃度は分光光度法により測定される。一般に、Ｄ・−またはＩｎｄ・−のいずれか（または双方）が吸収する波長で、時間（マイクロ秒またはミリ秒）に対する吸光度の表示が得られ、それからラジカルの濃度が算出される。ＤおよびＩｎｄの濃度が一般に２０マイクロモル〜２ミリモルの場合にはラジカル濃度は通常、数マイクロモルであるので、ＤおよびＩｎｄはほとんど消耗しない。２−プロパノールまたはギ酸塩の濃度は一般に０．１モルであるので、・ＯＨおよびＨ・およびＤまたはＩｎｄの間の望ましくない反応が避けられる。
【０１６６】
パルス放射線分解を用いてこれらの相対的電子親和性を測定する初期の例の１つが、Patel and Willson (K B Pateland R L Willson. Semiquinone free radicals and oxygen. Pulse radiolysis study of one electron transfer equilibria. Journal of the Chemical Society, Faraday Transactions 1, 1973, 69, 814-825)に記載されている。これはニトロ芳香族およびキノンに適用されている（例えば、D Meisel and P Neta One-electron redox potentials of nitro compounds and radiosensitizers. Correlation with spin densities of their radical anions. Journal of the American Chemical Society, 1975, 97, 5198-5203; P Wardman and E D Clarke. One- electron reduction potentials of substituted nitroimidazoles measured by pulse radiolysis. Journal of the Chemical Society, Faraday Transactions 1, 1976, 72, 1377-1390 A review describes many further examples   and some refinements of the mathematical treatment: P Wardman. Reduction potentials of one-electron couples involving free radicals in aqueous solution. Journal of Physical and Chemical Reference Data, 1989, 18, 1637-1755）。
【国際調査報告】
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