(57)【要約】  一般式(I)の化合物(式中、X1、X2及びX3は、H又はヒドロキシ保護基から独立して選ばれ、またR1及びR2は、明細書に提供する定義を有する)を提供する。そのような化合物は、医薬組成物の製造に使用されてもよく、多様な生物学的状態の治療に有用である。【化１】2008542201.tif 000030
2008542201.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式１の化合物：
【化１】
2008542201.tif 000021
｛式中、X1、X2及びX3は、H又はヒドロキシ保護基から独立して選ばれ；
また、R1及びR2は、独立して、H又は炭素数1〜8の直鎖又は分岐鎖のアルキル基から選ばれるか；又はR1及びR2は、共に結合して一般式2の基を形成する：
【化２】
2008542201.tif 000022
（式中、波線は、ビタミンD類似体の2位で炭素に結合する点を示し、R3及びR4は、H又は炭素数1〜8の直鎖又は分岐鎖のアルキル基から独立して選ばれる。）｝
【請求項２】
X3がHであり、一般式１の化合物が以下の一般式1Aである、請求項１に記載の化合物：
【化３】
2008542201.tif 000023
【請求項３】
X1及びX2が共にヒドロキシ保護基である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
X1及びX2が共にt-ブチルジメチルシリル基である、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
X1及びX2が共にHであり、化合物が一般式3Aである、請求項２に記載の化合物：
【化４】
2008542201.tif 000024
【請求項６】
X1及びX2が共にHであり、化合物が一般式3Bである、請求項２に記載の化合物：
【化５】
2008542201.tif 000025
【請求項７】
X1及びX2が共にHであり、化合物が一般式3Cである、請求項２に記載の化合物：
【化６】
2008542201.tif 000026
【請求項８】
有効量の請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物及び医薬的に許容され得るキャリヤーを含む、医薬組成物。
【請求項９】
前記有効量が、前記組成物のグラム当たり約0.01μg〜約1mgの前記化合物を含む、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記有効量が、前記組成物のグラム当たり約0.1μg〜約500μgの前記化合物を含む、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
X3がHである、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
X1及びX2が共にHである、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
有効量の請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物を被験者に投与することを含む、生物学的疾患を患う被験者の治療方法。
【請求項１４】
生物学的疾患が、血清カルシウムの上昇が望ましくない状態であり、前記疾患が、腎性骨ジストロフィ、二次性副甲状腺機能亢進症、乾癬、I型糖尿病、狼瘡、慢性関節リウマチ、又は、白血病、大腸癌、乳癌又は前立腺癌から選ばれる癌から選ばれる、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
生物学的疾患が、高カルシウム血症、喘息又は湿疹である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
前記化合物又は組成物を、経口的、非経口的、直腸内、経皮的又は局所的に被験者に投与する、請求項１３に記載の方法。
【請求項１７】
エアロゾル中の前記化合物、化合物の混合物又は医薬製剤を送達することにより、前記化合物又は組成物を投与する、請求項１３に記載の方法。
【請求項１８】
前記化合物又は化合物の混合物を、0.01μg/日〜1mg/日の投与量で投与する、請求項１３に記載の方法。
【請求項１９】
X1、X2及びX3が、全てHである、請求項１３に記載の方法。
【請求項２０】
化合物が一般式3A、3B又は3Cである、請求項１９に記載の方法。
【化７】
2008542201.tif 000027
【化８】
2008542201.tif 000028
【化９】
2008542201.tif 000029
【請求項２１】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物の、被験者の治療用医薬の製造における使用。
【請求項２２】
治療に使用するための、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２３】
治療が、腎性骨ジストロフィ、二次性副甲状腺機能亢進症、乾癬、I型糖尿病、狼瘡、慢性関節リウマチ、白血病、大腸癌、乳癌又は前立腺癌から選ばれる癌、高カルシウム血症、喘息又は湿疹から選ばれる疾患の治療である、請求項２２に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、ビタミンD化合物、より具体的には19,26,27-トリノル-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3化合物、例えば2α-メチル-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「P10」)、2β-メチル-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「T-74」)、及び2-メチレン-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「BM」)、及びそれらの化合物又はそれらの混合物を含む医薬製剤に関する。また、本発明は、P10、T-74及びBM、それらの塩及びそれらの混合物の、様々な疾患の治療用医薬の製造における使用に関する。
【０００２】
（発明の背景）
天然のホルモン、1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(或いは1α,25-ジヒドロキシコレカルシフェロール及びカルシトリオールと呼ばれる)及びエルゴステロールシリーズのその類似体、即ち、1α,25-ジヒドロキシビタミンD2は、動物及びヒトのカルシウムホメオスタシスのかなり強力なレギュレーターとして公知であり、細胞分化でのそれらの活性は証明されている；Ostremら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA、84、2610 (1987年)。これら代謝物の多くの構造類似体、例えば1α-ヒドロキシビタミンD3、1α-ヒドロキシビタミンD2、様々な側鎖ホモロゲートビタミン及びフッ化類似体が、製造及び試験されてきた。幾つかのこれらの化合物は、細胞分化及びカルシウム調節において、活性の興味深い分離を示す。活性のこの差異は、腎性骨ジストロフィ、ビタミンD-耐性骨軟化症、骨粗鬆症、乾癬及び一定の悪性腫瘍のような様々な疾患の治療に有用かも知れない。1α,25-ジヒドロキシビタミンD3の構造及びこの化合物中で炭素原子を示すために使用される付番方式を以下に示す。
【０００３】
【化１】
2008542201.tif 000003
【０００４】
他の部類のビタミンD類似体、即ち、所謂19-ノル-ビタミンD化合物は、一般的なビタミンD系のA環の環外メチレン基（炭素19）の、二つの水素原子による置換により特徴付けられる。そのような19-ノル-類似体(例えば、1α,25-ジヒドロキシ-19-ノル-ビタミンD3)の生物学的試験により、細胞分化を生じるかなり強力な選択的活性プロフィール、及び非常に低いカルシウム動員(mobilizing)活性が示された。従って、これらの化合物は、悪性腫瘍の治療又は様々な皮膚疾患の治療に関する治療剤として、かなり有用である。そのような19-ノル-ビタミンD類似体の二つの異なる合成方法が記載されている（Perlmanら、Tetrahedron Lett. 31、1823 (1990年);Perlmanら、Tetrahedron Lett. 32、7663 (1991年)、及びDeLucaら、米国特許第5,086,191号)。
【０００５】
米国特許第4,666,634号に、1α,25-ジヒドロキシビタミンD3の2β-ヒドロキシ及びアルコキシ(例えばED-71)類似体が記載され、骨粗鬆症用の強力な薬剤として及び抗腫瘍剤としてチュウガイグループにより試験された。また、オカノら、Biochem. Biophys. Res. Commun. 163、1444 (1989年)を参照されたい。他の2-置換(ヒドロキシアルキル、例えば、ED-120及びフルオロアルキル基による)1α,25-ジヒドロキシビタミンD3のA-環類似体が既に製造され、試験された(ミヤモトら、Chem. Pharm. Bull. 41、1111(1993年);ニシイら、Osteoporosis Int. Suppl. 1、190(1993年);Posnerら、J. Org. Chem. 59、7855 (1994年)、及びJ. Org. Chem. 60、4617(1995年))。
【０００６】
1α,25-ジヒドロキシ-19-ノル-ビタミンD3の様々な2-置換類似体、即ち2位がヒドロキシ基又はアルコキシ基により(DeLucaら、米国特許第5,536,713号)、2-アルキル基(DeLucaら、米国特許第5,945,410号)、及び2-アルキリデン基(DeLucaら、米国特許第5,843,928号)により置換された化合物が合成され、それらは興味深くかつ選択的な活性プロフィールを示す。ビタミンDレセプターの結合部位は、合成ビタミンD類似体中のC-2において異なる置換に適応できることを、これら全ての研究が示している。
【０００７】
薬理学的に重要なビタミンD化合物の19-ノル部類を探索するために連続的な努力がなされ、炭素2(C-2)でのメチレン置換基、炭素1(C-1)でのヒドロキシル基、炭素20(C-20)に結合する短い側鎖の存在により特徴付けられる類似体が合成及び試験された。1α-ヒドロキシ-2-メチレン-19-ノル-プレグナカルシフェロールは、米国特許第6,566,352号に記載され、1α-ヒドロキシ-2-メチレン-19-ノル-(20S)-ホモプレグナカルシフェロールは米国特許第6,579,861号及び1α-ヒドロキシ-2-メチレン-19-ノル-ビスホモプレグナカルシフェロールは米国特許第6,627,622に記載されている。これら三つの全ての化合物は、1α,25-ジヒドロキシビタミンD3と比較してカルセミック(calcemic)活性はほとんどないが、ビタミンDレセプターに比較的高い結合活性及び比較的高い細胞分化活性を有する。'352、'861及び'622特許に示すように、それらの生物学的活性により、これらの化合物は、様々な医薬用途のための優れた候補となる。
【発明の開示】
【０００８】
(発明の概要)
本発明は、19,26,27-トリノル-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3化合物、例えば2α-メチル-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「P10」)、2β-メチル-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「T-74」)、及び2-メチレン-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「BM」)、及び関連化合物、これら化合物を含む医薬製剤、及びこれら化合物又はそれらの混合物の、治療における及び様々な疾患状態の治療用医薬の製造における使用を提供する。特に、本発明の化合物は、ビタミンDレセプターにより介在される生物学的疾患の治療及び/又は血清カルシウムの上昇が望ましくない疾患の治療に有用であってもよい。
【０００９】
従って、ある態様において、本発明は、以下の一般式１の19,26,27-トリノルビタミンD3化合物を提供する：
【００１０】
【化２】
2008542201.tif 000004
【００１１】
｛式中、X1、X2及びX3は、同一でも異なっていてもよく、H又はヒドロキシ保護基から独立して選ばれ；
また、R1及びR2は、独立して、H又は炭素数1〜8の直鎖又は分岐鎖のアルキル基から選ばれるか；又はR1及びR2は、共に結合して一般式2の基を形成する：
【００１２】
【化３】
2008542201.tif 000005
【００１３】
（式中、波線は、ビタミンD類似体の2位で炭素に結合する点を示し、R3及びR4は、H又は炭素数1〜8の直鎖又は分岐鎖のアルキル基から独立して選ばれる。）｝
【００１４】
一般式１の化合物のある態様において、X3はHである。
【００１５】
一般式１の化合物のある態様において、X3はHであり、一般式１の化合物は以下の一般式1Aを有し、他の変数は一般式１の化合物に関する記載と同じものを示す：
【００１６】
【化４】
2008542201.tif 000006
【００１７】
一般式1Aの化合物のある態様において、X1及びX2は、共に、ヒドロキシ保護基、例えばシリル基である。あるそのような態様において、X1及びX2は、共に、t-ブチルジメチルシリル基である。他の態様において、X1及びX2は、共にHである。
【００１８】
一般式1Aの化合物のある態様において、R1はHであり、R2はメチルである。そのような化合物の例としては、以下に示す一般式3Aの化合物、2β-メチル-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「T-74」)が挙げられる：
【００１９】
【化５】
2008542201.tif 000007
【００２０】
一般式1Aの化合物のある態様において、R1はメチルであり、R2はHである。そのような化合物の例としては、以下に示す一般式3Bの化合物、2α-メチル-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「P10」)が挙げられる：
【００２１】
【化６】
2008542201.tif 000008
【００２２】
一般式1Aの化合物のある態様において、R1及びR2は共に結合して、一般式2の基(式中、R3及びR4は共にHである)を形成する。そのような化合物の例としては、以下に示す一般式3Cの化合物、2-メチレン-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「BM」)が挙げられる：
【００２３】
【化７】
2008542201.tif 000009
【００２４】
ある態様において、一般式3A及び3Bの化合物は精製された形態において存在するが、他の態様においてこれらの化合物は両方の化合物を含む混合物中の成分として存在してもよい、。あるそのような態様において、化合物は精製された形態で存在する。他の態様において、組成物中の化合物は、混合物として存在してもよい。ある態様において、混合物は一般式3Aの化合物及び一般式3Bの化合物を含み、一般式3Aの化合物対一般式3Bの化合物の比は、50：50〜99.9：0.１である。あるそのような態様において、一般式3Aの化合物対一般式3Bの化合物の比は、70：30〜99.9：0.1、80：20〜99.9：0.1、90：10〜99.9：0.1又は95：５〜99.9：0.1である。他の態様において、混合物は、一般式3Aの化合物及び一般式3Bの化合物を含み、一般式3Bの化合物対一般式3Aの化合物の比は、50：50〜99.9：0.1である。あるそのような態様において、一般式3Bの化合物対一般式3Aの化合物の比は、70：30〜99.9:0.1、80：20〜99.9：0.1、90：10〜99.9：0.1又は95：5〜99.9：0.1である。
【００２５】
前記化合物は、望ましくかつかなり好都合な生物学的活性パターンを示す。P10、T-74及びBMは、ビタミンDレセプターに結合する。P10は、1α,25-ジヒドロキシビタミンD3よりもこの点に関してわずかに活性である。BMは、この点に関して1α,25-ジヒドロキシビタミンD3よりも僅かに活性が低い。T-74は、ビタミンDレセプターに結合するが、この点に関して1α,25-ジヒドロキシビタミンD3よりも明らかに活性が低い。BMは、HL-60細胞の分化の誘導において、1α,25-ジヒドロキシビタミンD3とほぼ同じ活性を示す。P10は、HL-60細胞の分化の誘導において、1,25-(OH)2D3よりも低い活性を示し、T-74はHL-60細胞の分化の誘導において明らかに低い活性を示す。P10、T-74及びBMは、骨カルシウム動員により測定した場合、カルセミック活性がなかった。また、それらは、腸管カルシウム輸送を増加しない。これらの特性は、これらの化合物が治療、特にカルシウムの増加が望ましくない疾患の治療に有用であることを示唆している。そのような疾患としては、自己免疫疾患、例えば関節リウマチ、多発性硬化症、I型糖尿病、狼瘡及び腎性骨形成異常及び二次性副甲状腺機能亢進症が挙げられる。
【００２６】
また、本明細書に記載の化合物は、適度な細胞分化活性により特徴付けられる。従って、本発明の方法のある態様において、本明細書に記載の化合物又は医薬組成物をそれらが必要な被験者に投与することにより、被験者に細胞分化が誘導される。そのような治療により、被験者の細胞分化のレベルを、治療前に存在するレベルよりも上昇させることは、容易に認識されるであろう。従って、本発明の化合物は、乾癬の治療用薬剤及び/又は抗癌剤、具体的には白血病、大腸癌、乳癌及び前立腺癌の治療用薬剤として使用してもよい。さらに、それらの適度な細胞分化活性により、しわ、適切な皮膚水分の欠如、即ち、ドライスキン、適切な皮膚硬さの欠如、即ち弛んだ皮膚、及び不十分な皮脂分泌を生じる様々な皮膚状態の治療用薬剤として、その化合物を使用してもよい。従って、本化合物の使用により、皮膚を潤し、皮膚のバリヤ機能を改善する。
【００２７】
本発明の方法のある態様において、化合物又は医薬組成物を、経口的、直腸内、非経口的、経皮的又は局所的に投与する。他の態様において、化合物又は医薬製剤を、インヘラー又はネブライザーを使用して達成可能なエアロゾルにおいて投与する。
【００２８】
本発明の化合物又はその混合物を医薬的に許容され得るキャリヤーとの組み合わせにおいて含む医薬製剤又は薬剤の製造のために、本発明の化合物を使用してもよい。そのような医薬製剤及び薬剤は、様々な生物学的疾患、例えば本明細書に記載のもの、例えばビタミンDレセプターにより介在されるものの治療に使用してもよい。そのような疾患の治療方法は、一般的に、化合物の有効量又は化合物を含む医薬製剤又は薬剤の適切な量を、生物学的疾患を患う被験者に投与することを含む。ある態様において、被験者は哺乳類である。そのようなある態様において、哺乳類は、げっ歯類、霊長類、ウシ亜科、ウマ科、イヌ科、ネコ科、クマ科、ブタ、ウサギ又はモルモットから選ばれる。あるそのような態様において、哺乳類は、ラット又はマウスである。ある態様において、被験者は霊長類、例えば、ある態様においてはヒトである。
【００２９】
前記疾患及び症候を治療するために、化合物は、組成物中約0.01μg/gm〜約1mg/gm、好ましくは組成物中約0.1μg/gm〜約500μg/gmの量において存在してもよく、また、局所的、経皮的、経口的、直腸内又は非経口的に、約0.01μg/日〜約1mg/日、好ましくは約0.1μg/日〜約500μg/日で投与されてもよい。
【００３０】
さらなる被験者、本発明の特徴及び利点は、以下の詳細な説明及び図面から明らかになると考えられる。
【００３１】
（図面の簡単な説明）
図１〜８は、2α-メチル-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(図中、「P10」と称する)、2β-メチル-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(図中、「T-74」と称する)、及び2-メチレン-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(図中、「BM」と称する)の様々な生物学的活性を、ネイティブホルモン、1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(図中、「1,25(OH)2D3」と称する)と比較して示す。
【００３２】
（発明の詳細な説明）
様々な19,26,27-トリノル-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3化合物、例えば2α-メチル-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「P10」)、2β-メチル-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「T-74」)、及び2-メチレン-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「BM」)を合成し、試験し、本明細書に記載の様々な生物学的状態の治療に有用なことを見い出した。
【００３３】
本発明は、19,26,27-トリノル-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3化合物、例えば2α-メチル-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「P10」)、2β-メチル-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「T-74」)、及び2-メチレン-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「BM」)及び関連化合物、これら化合物を含む医薬製剤、及び様々な疾患状態の治療用医薬の製造におけるこれら化合物又はそれらの混合物の使用を提供する。
【００３４】
一つの態様において、本発明は、以下に示す一般式１の19,26,27-トリノル-ビタミンD3化合物を提供する：
【００３５】
【化８】
2008542201.tif 000010
【００３６】
(式中、X1、X2及びX3は、同一でも異なっていてもよく、H又はヒドロキシ保護基から独立して選ばれ；
また、R1及びR2は、独立して、H又は炭素数1〜8の直鎖又は分岐鎖のアルキル基から選ばれ；又はR1及びR2は、共に結合して一般式２の基を形成する：
【００３７】
【化９】
2008542201.tif 000011
【００３８】
（式中、波線は、ビタミンD類似体の2位で炭素に結合する点を示し、R3及びR4は、H又は炭素数1〜8の直鎖又は分岐鎖のアルキル基から独立して選ばれる。）｝
炭素数1〜8の直鎖又は分岐鎖のアルキル基の例としては、直鎖アルキル基、例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル及びオクチルが挙げられる。炭素数1〜8の分岐鎖アルキル基の例としては、-CH(CH3)2、-CH(CH3)(CH2CH3)、-CH(CH2CH3)2、-C(CH3)3、-C(CH2CH3)3、-CH2CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)(CH2CH3)、-CH2CH(CH2CH3)2、-CH2C(CH3)3、-CH2C(CH2CH3)3、CH(CH3)CH(CH3)(CH2CH3)、-CH2CH2CH(CH3)2、-CH2CH2CH(CH3)(CH2CH3)、-CH2CH2CH(CH2CH3)2、-CH2CH2C(CH3)3、-CH(CH3)CH2CH(CH3)2、-CH(CH3)CH(CH3)CH(CH3)2、-CH2CH2CH2C(CH3)3、-CH2CH2CH2CH(CH3)2、-CH2CH2CH(CH3)C(CH3)3、-CH2CH2CH(CH3)CH(CH3)2等が挙げられる。
【００３９】
ある態様において、一般式１の化合物は、X3がHである化合物を含む。あるそのような態様において、一般式１の化合物は、変数が一般式１の化合物に関する記載と同じものを示す以下の一般式1Aである：
【００４０】
【化１０】
2008542201.tif 000012
【００４１】
一般式1Aの化合物のある態様において、X1及びX2は、共に、ヒドロキシ保護基、例えばシリル基である。あるそのような態様において、X1及びX2は、共に、t-ブチルジメチルシリル基である。他の態様において、X1及びX2は、共にHである。
【００４２】
一般式1Aの化合物のある態様において、R1はHであり、R2はメチルである。そのような化合物の例は、以下に示す一般式3Aの化合物、2β-メチル-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「T-74」)である：
【００４３】
【化１１】
2008542201.tif 000013
【００４４】
一般式1Aの化合物のある態様において、R1はメチルであり、R2はHである。そのような化合物の例は、以下に示すような一般式3Bの化合物、2α-メチル-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「P10」)である：
【００４５】
【化１２】
2008542201.tif 000014
【００４６】
一般式1Aの化合物のある態様において、R1及びR2は共に結合して一般式２の基(式中R3及びR4は共にHである)を形成する。そのような化合物の例は、以下に示す一般式3Cの化合物、2-メチレン-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「BM」)である：
【００４７】
【化１３】
2008542201.tif 000015
【００４８】
19,26,27-トリノル-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3化合物の製造に使用される反応順序の中の一工程は、好適な二環Windaus-Grundmann型ケトン(II)を、アリルホスフィンオキシドIIIと縮合させ、その後、TBS除去、及び後の工程において脱保護(Y1及びY2基の除去)をすることにより達成可能である。
【００４９】
【化１４】
2008542201.tif 000016
【００５０】
ホスフィンオキシドIIIにおいて、Y1及びY2は、好ましくは、ヒドロキシ保護基、例えば、シリル保護基である。t-ブチルジメチルシリル(TBDMS又はTBS)基は、特に有用なヒドロキシ保護基の例である。前記プロセスは、収束性合成コンセプトの応用を表しており、多くのビタミンD化合物の製造に有効に応用されている(Lythgoeら、J. Chem. Soc. Perkin Trans. I、590頁(1978年)；Lythgoe、Chem. Soc. Rev. 9、449頁(1983年)；Tohら、J. Org. Chem. 48、1414頁(1983年)；Baggioliniら、J. Org. Chem. 51、3098頁(1986年)；Sardinaら、J. Org. Chem. 51、1264頁(1986)；Mascarenasら、J. Org. Chem. 51、1269頁(1986年)；DeLucaら、米国特許第5,086,191号；DeLucaら、米国特許第5,536,713号；DeLucaら、米国特許第5,843,928号及び2004年11月24日に出願されたClagett-DameらのU.S.S.N. 10/997,698を参照されたく、それら全ては、本明細書に十分に示されているものとして、全体的に及び全ての目的に関して、参考文献として本明細書に含まれるものとする。)
【００５１】
ホスフィンオキシドIIIは、好都合な試薬であり、それらは多くの19-ノルビタミンD化合物を製造するために使用可能であり、Sicinskiら、J. Med. Chem.、41、4662頁(1998年)、DeLucaら、米国特許第5,843,928号；Perlmanら、Tetrahedron Lett. 32、7663(1991年)；及びDeLucaら、米国特許第5,086,191号に記載される方法により製造してもよい。スキームIは、米国特許第5,843,928号(本明細書に十分に示されているように参考文献として全体的に含まれるものとする)に概略されているようにホスフィンオキシドIIIの一般的な合成方法を示している。スキームIに示す方法の変更は、当業者に自明なように、多くのビタミンD類似体を製造するために行われてもよい。例えば、広範囲のホスホニウム化合物は、ケトンBからアルケンCに変換するために使用されるMePh3P+Br-の代わりに使用されてもよい。そのような化合物の例としては、EtPh3P+Br-、PrPh3P+Br-、及びトリフェニルホスフィンとアルキルハロゲン化物、アルケニルハロゲン化物、保護ヒドロキシアルキルハロゲン化物及び保護ヒドロキシアルケニルハロゲン化物との反応により一般的に製造される化合物が挙げられる。この方法を使用して製造されるアルケンは、その後、スキーム1中のホスフィンオキシドHを製造するために使用されるものと同様の方法において、ホスフィンオキシドの製造中に保持されてもよい。或いは、スキームIの化合物Cと同様のアルケンを(Ph3P)3RhCl及びH2で還元し、他のビタミンD類似体を提供してもよい。米国特許第5,945,410号及びSicinski, R. R.ら、J. Med. Chem.、41、4662〜4674頁(1998年)を参照されたく、それらは共に、全体的に及び全ての目的に関して参考文献として本明細書に含まれるものとする。従って、スキームIに示すホスフィンオキシドの形成方法を使用して、本発明の化合物の他に、多様なビタミンD類似体を製造してもよい。
【００５２】
【化１５】
2008542201.tif 000017
【００５３】
構造式IIのヒドロインダノンは、当業者に自明でありまた本明細書に記載の公知の方法又は適合する方法により製造可能である。ビタミンD類似体を合成するために使用される幾つかの重要な二環ケトンの具体例としては、Mincioneら、Synth. Commun 19、723頁(1989年)；及びPetersonら、J. Org. Chem. 51、1948頁(1986年)に記載されているものが挙げられる。
【００５４】
2-アルキリデン-19-ノル-ビタミンD化合物の全合成方法は、米国特許第5,843,928号（本明細書に十分に示されているものとしてように、その全体において及び全ての目的に関して参考文献として、本明細書に含まれるものとする）に説明及び記載されている。
【００５５】
本明細書に使用する場合、用語「ヒドロキシ保護基」は、ヒドロキシ(-OH)官能基の一時的保護に一般的に使用されるいずれかの基、例えば、以下のものに限定されないが、アルコキシカルボニル基、アシル基、トリアルキルシリル基又はジアルキルアリールシリル基(以下、単に「シリル」基と呼ぶ)、及びアルコキシアルキル基を表す。アルコキシカルボニル保護基は、アルキル-O-CO-基、例えば、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、イソプロポキシカルボニル基、ブトキシカルボニル基、イソブトキシカルボニル基、tert-ブトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基又はアリルオキシカルボニル基である。用語「アシル」は、全ての異性型において、炭素数1〜6のアルカノイル基、又は炭素数1〜6のカルボキシアルカノイル基、例えば、オキサリル基、マロニル基、スクシニル基、グルタリル基又は芳香族アシル基、例えばベンゾイル基、又はハロ基、ニトロ基又はアルキル置換ベンゾイル基を表す。アルコキシアルキル保護基は、基、例えば、メトキシメチル基、エトキシメチル基、メトキシエトキシメチル基又はテトラヒドロフラニル基及びテトラヒドロピラニル基である。好ましいシリル保護基は、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、t-ブチルジメチルシリル基、ジブチルメチルシリル基、ジフェニルメチルシリル基、フェニルジメチルシリル基、ジフェニル-t-ブチルシリル基及び同様のアルキル化シリル基である。用語「アリール」は、具体的には、フェニル-、アルキル-、ニトロ-又はハロ-置換フェニル基である。ヒドロキシ官能性に関する保護基の広範囲リストは、Protective Groups in Organic Synthesis、Greene, T.W.；Wuts, P. G. M.、John Wiley & Sons、ニューヨーク、NY、(第3版、1999年)に見い出されてもよく、そこに記載の前駆体を使用して添加又は除去可能であり、それは本明細書に十分に示されているものとして、全体的に及び全ての目的に関して本明細書に含まれるものとする。
【００５６】
「保護ヒドロキシ」基は、ヒドロキシ官能基の一時的又は持続的な保護用に一般的に使用される前記基により誘導体化又は保護されるヒドロキシ基、例えば、前記のようなシリル基、アルコキシアルキル基、アシル基又はアルコキシカルボニル基である。
【実施例】
【００５７】
2α-メチル-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「P10」)、2β-メチル-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「T-74」)、及び2-メチレン-19,26,27-トリノル-(20S)-1α,25-ジヒドロキシビタミンD3(「BM」)の合成
【００５８】
様々な19-ノルビタミンD類似体の合成及び特性は、多くの米国特許、例えば米国特許第5,843,928号、米国特許第6,627,622号、米国特許6,579,861号、米国特許第5,086,191号、米国特許第5,585,369号及び米国特許第6,537,981号に記載されている。前記の各文献は、本明細書に十分に記載されているものとして、全体的にかつ全ての目的に関して、本明細書に含まれるものとする。
【００５９】
スキームI、IIA、IIB及びIICは、下記合成方法を詳細に概説している。
【００６０】
(20S)-de-A,B-8β-(tert-ブチルジメチルシリル)オキシ-20-（ヒドロキシメチル）-プレグナン(2)
オゾンを、メタノール(250mL)及びピリジン(2.44g、2.5mL、31mmol)中のビタミンD2(3g、7.6mmol)の溶液に、50分間、-78℃で通した。反応混合物にその後、酸素を15分間流し、残留オゾンを除去し、溶液をNaBH4(0.75g、20mmol)で処理した。20分後、NaBH4(0.75g、20mmol)の第二の部分を加え、混合物を室温まで温めた。NaBH4(0.75g、20mmol)の第三の部分をその後加え、反応混合物を18時間攪拌した。その反応を水(40mL)でクエンチし、溶液を減圧下で濃縮した。残渣を酢酸エチルで抽出し(3×80mL)、合わせた有機層を1M HCl水で洗い、NaHCO3水で飽和し、乾燥し(Na2SO4)、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲル上、ヘキサン/酢酸エチル(75:25)でクロマトグラフ化し、白色結晶として(20S)-de-A,B-20-(ヒドロキシメチル)プレグナン-8β-オール 1(1.21g、収率75％)を得た。
【００６１】
tert-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート(3.24mL、3.72g、14.1mmol)を、無水DMF(15mL)中に8β,20-ジオール 1(1g、4.7mmol)及び2,6-ルチジン(1.64mL、1.51g、14.1mmol)を含む溶液を0℃で加えた。混合物をアルゴン下、0℃で1時間、その後、室温で18時間攪拌した。反応物を水(50mL)でクエンチし、酢酸エチルで抽出した(3×30mL)。合わせた有機層を鹹水で洗い、乾燥し(Na2SO4)、減圧下で濃縮した。残渣を無水THF(8mL)中に溶解し、トリエチルアミン(3mL、2.17g、21.5mmol)及びテトラブチルアンモニウムフッ化物(THF中1M、6.5mL、6.5mmol)の溶液を加え、その後新鮮な活性化分子篩4A(3g)を加えた。反応混合物を室温で4時間攪拌し、その後、セライトの短い層を通してろ過し、蒸発させた。残渣を、酢酸エチル(30mL)に溶解し、鹹水、水で洗い、乾燥し((Na2SO4)、減圧下で濃縮した。純粋なアルコール 2(1.42g、収率93％)をシリカゲル上、ヘキサン/酢酸エチル(97.5：2.5〜95：5)のクロマトグラフィーを使用して、無色油状物として単離した：[α]D +38.8°(c 0.83, CHCl3); 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 4.00 (1H, d, J = 2.4 Hz, 8α-H), 3.63 (1H, dd, J = 10.5, 3.2 Hz, 22-H), 3.39 (1H, dd, J = 10.5, 6.8 Hz, 22-H), 1.94 (1H, br.d, J = 12.5 Hz), 1.02 (3H, d, J = 6.6 Hz, 21-H3), 0.924 (3H, s, 18-H3), 0.882 (9H, s, Si-t-Bu), 0.005及び-0.010 (各3H、各s、各Si-Me); 13C NMR (125 MHz) δ 69.29 (d, C-8), 67.94 (t, C-22), 53.06 (d), 52.80 (d), 42.12 (s, C-13), 40.54 (t), 38.27 (d), 34.39 (t), 26.79 (t), 25.79 (q, SiCMe3), 23.08 (t), 18.00 (s, SiCMe3), 17.61 (t), 16.65 (q, C-21), 13.75 (q, C-18), -4.81及び-5.18 (各q, 各SiMe); MS (EI) m/z 326 (2, M+), 283 (3, M+ -C3H7), 269 (21, M+ - C4H9), 251 (21, M+ -C4H9 -H2O), 193 (18, M+ -ｔ-BuMe2SiOH-H), 177 (72), 135 (43), 121 (31), 107 (31), 95 (52), 75 (100); C15H29O2Si(M+ -C4H9)に関して計算した正確な質量269.1937、実測値269.1932.。
【００６２】
(20S)-de-A,B-8β-(tert-ブチルジメチルシリル)オキシ-20-ホルミルプレグナン(3)
三酸化硫黄ピリジン複合体(1.32g、8.28mmol)を、無水塩化メチレン(20mL)及び無水DMSO(5mL)中にアルコール2(451mg、1.38mmol)、トリエチルアミン(960μL、697mg、6.9mmol)を含む溶液に0℃で加えた。反応混合物をアルゴン下、0℃で20分間攪拌し、その後濃縮した。残渣をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより、ヘキサン/酢酸エチル(95:5)で精製し、アルデヒド3(364mg、収率81％)を油状物として得た:  [α]D +43.8°(c 1.31, CHCl3); 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.55 (1H, d, J = 3.1 Hz, CHO), 4.00 (1H, s, 8α-H), 2.33 (1H, m, 20-H), 1.89 (1H, dm, J = 12.4 Hz), 1.07 (3H, d, J = 6.8 Hz, 21-H3), 0.939 (3H, s, 18-H3), 0.862 (9H, s, Si-t-Bu), -0.009 及び-0.026 (各3H, 各s, 各SiMe); 13C NMR (125 MHz) δ205.37 (d, CHO), 68.99 (d, C-8), 52.28 (d), 51.58 (d), 49.15 (d), 42.58 (s, C-13), 40.35 (t), 34.29 (t), 26.16 (t), 25.74 (q, SiCMe3), 23.27 (t), 17.96 (s, SiCMe3), 17.52 (t), 14.04 (q, C-21), 13.28 (q, C-18), -4.85及び-5.23 (各q, 各SiMe); MS (EI) m/z 324 (4, M+), 309 (3, M+-CH3), 281 (8, M+ -C3H7), 267 (48, M+ -C4H9), 209 (6, M+ -t-BuMe2Si), 191 (16, M+ -t-BuMe2SiOH-H), 175 (95), 135 (68), 119 (33), 93 (33), 75 (100); C19H36O2Si(M+)に関して計算した正確な質量324.2485、実測値324.483。
【００６３】
(20R)-de-A,B-8β-(tert-ブチルジメチルシリル)オキシ-20-(ヒドロキシメチル)プレグナン(4)
アルデヒド3(364mg、1.12mmol)を塩化メチレン(15mL)に溶解し、40％ n-Bu4NOH水溶液(1.47mL、1.45g、2.24mmol)を加えた。得られた混合物をアルゴン下、室温で16時間攪拌し、塩化メチレン(20mL)で希釈し、水で洗い、乾燥し(Na2SO4)、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲル上で、ヘキサン/酢酸エチル(95:5)でクロマトグラフ化し、アルデヒド3の混合物及びその20-エピマーの混合物(292mg、収率80％)を約1:2比(1H NMR)で得た。
【００６４】
アルデヒド(292mg、0.9mmol)のこの混合物を、THF(5mL)に溶解し、NaBH4(64mg、1.7mmol)を加え、エタノール(5mL)を滴下して加えた。反応混合物を室温で30分間攪拌し、その後、飽和NH4Cl水溶液でクエンチした。混合物をエーテルで抽出し(3×20mL)、合わせた有機層を水で洗い、乾燥し(NaSO4)、減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲル上、ヘキサン/酢酸エチル(96:4〜80:20)でクロマトグフ化し、所望の純粋な(20R)-アルコール4(160mg、収率55％)を油状物として、及び4とその20-エピマー2(126mg、収率43％)の混合物を約1:3比(1H NMRにより測定した場合)で得た。4：[α]D +40.8°(c 1.09, CHCl3); 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 4.00 (1H, d, J = 1.9 Hz, 8α-H), 3.70 (1H, dd, J = 10.6, 3.2 Hz, 22-H), 3.43 (1H, dd, J = 10.6, 7.0 Hz, 22-H), 0.94 (3H, d, J = 6.7 Hz, 21-H3), 0.927 (3H, s, 18-H3), 0.884 (9H, s, Si-t-Bu), 0.007 及び-0.006 (各3H, 各s, SiMe2); 13C NMR (125 MHz) δ 69.30 (d, C-8), 66.83 (t, C-22), 53.02 (d), 52.96 (d), 41.91 (s, C-13), 40.12 (t), 37.48 (d), 34.38 (t), 26.71 (t), 25.79 (q, SiCMe3), 22.85 (t), 18.01 (s, SiCMe3), 17.64 (t), 16.58 (q, C-21), 14.07 (q, C-18), -4.81 及び-5.18 (各q, 各SiMe); MS (EI) m/z 326 (3, M+), 311 (3, M+ -CH3), 283 (4, M+ -C3H7), 269 (62, M+ -C4H9), 251 (100, M+ -C4H9 -H2O), 193 (35, M+ -t-BuMe2SiOH -H), 177 (29), 135 (56), 121 (28), 107 (24), 95 (41), 75 (99); C19H38O2Si (M+)に関して計算した正確な質量326.2641、実測値326.2635。
【００６５】
(20R)-de-A,B-8β-(tert-ブチルジメチルシリル)オキシ-20-(ヨードメチル)プレグナン(5)
塩化メチレン(30mL)中にヨウ素(471mg、1.84mmol)を含む溶液を、塩化メチレン(15mL)中にトリフェニルホスフィン(482mg、1.84mmol)及びイミダゾール(250mg、3.68mmol)を含む溶液に、0℃でゆっくりと加えた。15分後、塩化メチレン(3mL)中にアルコール4(149mg、0.46mmol)を含む溶液を、混合物に加えた。0℃で20分間、その後室温で18時間攪拌した後、反応混合物を水で洗い、乾燥し(Na2SO4)、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲル上、ヘキサン/酢酸エチル(97:3)でクロマトグラフ化し、所望のヨウ化物5(201mg、100％)を得た： [α]D -0.3° (c 0.97, CHCl3); 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 3.99 (1H, s, 8α-H), 3.46 (1H, dd, J = 9.5, 2.9 Hz, 22-H), 3.18 (1H, dd, J = 9.5, 6.4 Hz), 1.88 - 1.74 (3H, m), 1.67 (1H, dm, J = 13.9 Hz), 0.95 (3H, d, J = 6.4 Hz, 21-H3), 0.918 (3H, s, 18-H3), 0.882 (9H, s, Si-t-Bu 0.008及び-0.008 (各3H, 各s, SiMe2); 13C NMR (125 MHz) δ 69.27 (d, C-8), 55.19 (d), 52.69 (d), 41.99 (s, C-13), 40.48 (t), 36.15 (d), 34.24 (t), 26.90 (t), 25.80 (q, SiCMe3), 22.81 (t), 21.38 (q, C-21), 19.58 (t), 18.02 (s, SiCMe3), 17.63 (t), 14.12 (q, C-18), -4.79及び-5.17 (各q, 各SiMe); MS (EI) m/z 436 (15, M+), 421 (8, M+ -CH3), 393 (9, M+ -C3H7), 379 (98, M+ -t-Bu), 303 (65, M+ -t-BuMe2SiOH -H), 177 (70), 135 (70), 95 (55), 75 (100); C19H37OSiI (M+) に関して計算した正確な質量436.1658、実測値436.1672。
【００６６】
(20S)-de-A,B-8β-(tert-ブチルジメチルシリル)オキシ-20-(3-イソプロポキシカルボニル)プロピル-プレグナン(6)
亜鉛パウダー(124mg、1.9mmol)、無水ピリジン（4mL)及びイソプロピルアクリレート(235μL、217mg、1.9mmol)の混合物を50℃に温め、その後、塩化ニッケル(II)ヘキサヒドレート(109mg、0.46mmol)を加えた。得られた混合物を65℃に温め、緑色が赤茶色に変わるまで、2時間攪拌した。0℃に冷却した後、無水ピリジン(3mL)中にヨウ化物5(222mg、0.51mmol)を含む溶液を加え、室温で反応混合物を4時間攪拌した。混合物を酢酸エチル(20mL)で希釈し、得られた沈殿物をセライトパッドを通して濾過した。ろ液を5％水性HCl及び鹹水で洗い、乾燥し(Na2SO4)、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲル上、ヘキサン/酢酸エチル(95:5)でクロマトグラフ化し、エステル6(177mg、82％)を得た: [α]D + 19.7°(c 1.13, CHCl3); 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.00 (1H, sep, J = 6.3 Hz, OCHMe2), 3.99 (1H, d, J = 2.2 Hz, 8α-H), 2.22 (2H, dt, J = 7.1, 2.2 Hz, 24-H2), 1.90 (1H, dm, J = 12.2 Hz), 1.22 (6H, d, J = 6.3 Hz, OCHMe2), 0.895 (3H, s, 18-H3), 0.881 (9H, s, Si-t-Bu, 0.82 (3H, d, J = 6.6 Hz, 21-H3), 0.001及び-0.012 (各, 3H, 各s, SiMe2); 13C NMR (100 MHz) δ 173.48 (s, COO-iPr), 69.45 (d, C-8), 67.31 (d, COOCHMe2), 56.29 (d), 53.08 (d), 42.16 (s, C-13), 40.64 (t), 35.05 (t), 34.71 (t), 34.51 (d), 34.44 (t), 27.16 (t), 25.80 (q, SiCMe3), 22.93 (t), 21.92 (t), 21.86 (q, COOCHMe2), 18.48 (q, C-21), 18.02 (t), 17.69 (s, SiCMe3), 14.01 (q, C-18), -4.79及び-5.16 (各q, 各SiMe); MS (EI) m/z 424 (5, M+), 409 (15, M+ -CH3), 381 (35, M+ -C3H7), 367 (89, M+ -t-Bu), 321 (39, M+ -CH3COOCHMe2 -H), 307 (85, M+ -CH3CH2COOCHMe2 -H), 283 (65), 265 (41), 249 (45), 233 (60), 215 (73), 189 (70), 163 (78), 135 (86), 109 (70), 95 (79), 75 (100); C25H48O3Si (M+)に関して計算した正確な質量424.3373、実測値424.3371。
【００６７】
(20S)-de-A,B-20-(3-イソプロポキシカルボニル)プロピル-プレグナン-8β-オール(7)
アセトニトリル(3mL)に化合物6(94mg、0.22mmol)を含む溶液に、水性48％HF/アセトニトリル(1:9比、2mL)の混合物を0℃で加え、得られた混合物を室温で2日間攪拌した。飽和NaHCO3水溶液を加え、反応混合物を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を鹹水で洗い、乾燥し(Na2SO4)、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲル上、ヘキサン/酢酸エチル(97:3、95:5)でクロマトグラフ化し、回収された物質6(9mg、0.02mmol)及び所望の生成物7(51mg、80％)を得た： [α]D + 10.1°(c 2.5, CHCl3); 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.99 (1H, sep, J = 6.3 Hz, OCHMe2), 4.06 (1H, d, J = 2.2 Hz, 8α-H), 2.22 (2H, dt, J = 7.4, 1.6 Hz, 24-H2), 1.93 (1H, dm, J = 11.9 Hz), 1.22 (6H, d, J = 6.3 Hz, OCHMe2), 0.913 (3H, s, 18-H3), 0.86 (3H, d, J = 6.6 Hz, 21-H3); 13C NMR (100 MHz) δ173.42 (s, COO-iPr), 69.35 (d, C-8), 67.33 (d, COOCHMe2), 56.16 (d), 52.62 (d), 41.87 (s, C-13), 40.30 (t), 34.98 (t), 34.61 (t), 34.51 (d), 33.55 (t), 27.02 (t), 22.37 (t), 21.90 (t), 21.84 (q, COOCHMe2), 18.41 (q, C-21), 17.44 (t), 13.77 (q, C-18); MS (EI) m/z 310 (48, M+), 292 (76, M+ -H2O), 277 (22, M+ -H2O -CH3), 250 (87, M+ -H2O -C3H6), 233 (66, M+ -H2O -C3H7O), 222 (24, M+ -Me2CHCOOH), 196 (40), 163 (72), 154 (74), 135 (92), 125 (90), 112 (94), 97 (98), 81 (100);C19H34O3 (M+)に関して計算した正確な質量310.2508、実測値310.2508。
【００６８】
(20S)-de-A,B-20-(4-ヒドロキシブチル)-プレグナン-8β-オール(8)            
水素化アルミニウムリチウム(40mg、1.05mmol)を、無水THF(8mL)中にエステル7(55mg、0.18mmol)を含む溶液に、0℃で加えた。冷却浴を除去し、反応混合物を30分間、室温で攪拌した。過剰量の水素化物を、注意深く連続的な飽和NH4Cl水の添加によりクエンチした。酒石酸の飽和水溶液を加え、混合物を塩化メチレンで抽出した。合わせた有機層を水で洗い乾燥し(Na2SO4)、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲル上、ヘキサン/酢酸エチル(95:5、9:1、8:2)でクロマトグラフ化し、ジオール8(44mg、96％)を得た: [α]D+12.6° (c 2.2, CHCl3); 1H NMR (500 MHz, CDCl3+TMS) δ4.07 (1H, s, 8α-H), 3.63 (2H, t, J = 6.6 Hz, 25-H2), 1.97 (1H, dm, J = 12.7 Hz), 0.927 (3H, s, 18-H3), 0.82 (3H, d, J = 6.6 Hz, 21-H3); 13C NMR (125 MHz) δ69.29 (d, C-8), 62.96 (t, C-25), 56.13 (d), 52.58 (d), 41.82 (s, C-13), 40.27 (t), 34.96 (t), 34.66 (d), 33.48 (t), 33.10 (t), 26.99 (t), 22.34 (t), 22.33 (t), 18.43 (q, C-21), 17.43 (t), 13.73 (q, C-18); MS (EI) m/z 254 (37, M+), 236 (35, M+ -H2O), 221 (28, M+ -H2O -CH3), 163 (32), 157 (33), 135 (78), 125 (81), 111 (97), 97 (95), 81 (100); C16H30O (M+)に関して計算した正確な質量254.2246、実測値254.2454。
【００６９】
(20S)-de-A,B-20-[4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)ブチル]-プレグナン-8β-オール(9)
tert-ブチルジメチルシリル塩化物(18mg、0.12mmol)を、無水塩化メチレン(2mL)中にジオール8(23mg、0.09mmol)及び2,6-ルチジン(42μL、39mg、0.36mmol)を含む溶液に加えた。混合物を室温で、18時間アルゴン下で攪拌した。反応物を水でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を鹹水で洗い、乾燥し(Na2SO4)、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲル上、ヘキサン/酢酸エチル(98:2)でクロマトグラフ化し、アルコール9(31mg、94％)を得た：[α]D +7.7°(c 1.6, CHCl3); 1H NMR (400 MHz, CDCl3+TMS) δ4.07 (1H, d, J = 2.0 Hz, 8α-H), 3.60 (2H, t, J = 6.5 Hz, 25-H2), 1.97 (1H, dm, J = 13.1 Hz), 0.928 (3H, s, 18-H3), 0.895 (9H, s, Si-t-Bu), 0.82 (3H, d, J = 6.6 Hz, 21-H3), 0.047 (6H, s, SiMe2); 13C NMR (100 MHz) δ 69.43 (d, C-8), 63.31 (t, C-25), 56.23 (d), 52.67 (d), 41.89 (s, C-13), 40.32 (t), 35.02 (t), 34.74 (d), 33.60 (t), 33.25 (t), 27.05 (t), 25.97 (q, SiCMe3), 22.42 (t), 22.36 (t), 18.50 (q, C-21), 18.36 (s, SiCMe3), 17.47 (t), 13.78 (q, C-18), -5.24 (q, SiMe2); MS (EI) m/z 369 (0.5, M+ + H), 352 (1, M+ -CH4), 311 (2, M+ -C4H9), 295 (10, M+ -C4H9 -CH4), 219 (39, M+ -H2O -t-BuSiMe2O), 163 (60), 135 (54), 123 (66), 109 (100), 95 (69), 83 (78);C22H45O2Si (M+ + H)に関して計算した正確な質量369.3189、実測値369.3177。
【００７０】
(20S)-de-A,B-20-[4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-ブチル]-プレグナン-8-オン(10)
ピリジニウムジクロメート(123mg、0.33μmol)を、無水塩化メチレン(6mL)中にアルコール9(30mg、82μmol)及びピリジニウムp-トルエンスルホネート(3mg、12μmol)を含む溶液に加えた。得られたサスペンジョンを室温で3時間攪拌した。反応混合物をWaters silica Sep-Pakカートリッジ(5g)を通してろ過し、塩化メチレンでさらに洗った。溶媒の除去後、ケトン10(27mg、収率90％)を無色油状物として得た：[α]D-27.4°(c 1.5, CHCl3); 1H NMR (400 MHz, CDCl3+TMS) δ 3.61 (2H, t, J = 6.4 Hz, 25-H2), 2.44 (1H, dd, J = 11.5, 7.7 Hz), 0.899 (9H, s, Si-t-Bu), 0.85 (3H, d, J = 5.9 Hz, 21-H3), 0.635 (3H, s, 18-H3), 0.052 (6H, s, SiMe2); 13C NMR (100 MHz) δ 212.03 (s, C-8), 63.19 (t, C-25), 62.00 (d), 56.16 (d), 49.92 (s, C-13), 40.95 (t), 38.85 (t), 35.25 (t), 34.84 (d), 33.18 (t), 27.13 (t), 25.95 (q, SiCMe3), 24.03 (t), 22.33 (t), 18.93 (t), 18.44 (q, C-21), 18.33 (s, SiCMe3), 12.71 (q, C-18), -5.28 (q, SiMe2); MS (EI) m/z no M+, 351 (2, M+ -CH3), 323 (3, M+ -C3H7), 309 (62, M+ -C4H9), 217 (24, M+ -H2O -t-BuSiMe2O), 161 (23), 135 (100), 121 (33), 109 (32), 95 (35), 75 (83); C18H33O2Si (M+ -C4H9)に関して計算した正確な質量309.2250、実測値309.2257。
【００７１】
(20S)-2-メチレン-19,26,27-トリノル-1α,25-ジヒドロキシカルシフェロール(13)
-20℃の無水THF(700μL)中にホスフィンオキシド11(102mg、175μmol)を含む溶液に、PhLi(シクロヘキサン-エーテル中、1.3M、225μL、293μmol)を攪拌しながら、アルゴン下でゆっくりと加えた。溶液は濃オレンジ色に変化した。30分後、混合物を-78℃に冷却し、無水THF(300μL)中にケトン10(27mg、74μmol)を含む予冷却した(-78℃)溶液をゆっくり添加した。混合物をアルゴン下で、-78℃で3時間、0℃で18時間攪拌した。酢酸エチルを加え、有機層を鹹水で洗い、乾燥し(Na2SO4)、蒸発させた。残渣をヘキサンに溶解し、Waters silica Sep-Pakカートリッジ(2g)に塗布した。カートリッジをヘキサン及びヘキサン/酢酸エチルで洗い、19-ノルビタミン誘導体12(49mg)を得た。Sep-Pakを、その後ヘキサン/酢酸エチル（96:4）で洗い、未変化C,D-環ケトン10(4mg、11μmol)を回収し、酢酸エチルで洗い、ジフェニルホスフィンオキシド11(68mg)を回収した。保護ビタミン12を、さらにHPLC(10×250mm Zorbax-Silicaカラム、4 mL/分)により、ヘキサン/2-プロパノール(99.9：0.1)溶媒系を使用して精製した。純粋な化合物12(43mg、収率93％)を、無色油状物としてRt=4.07分で溶出した：UV (ヘキサン中)λmax 262.3, 252.0, 243.6 nm; 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.23及び5.83 (各1H, 各d, J = 11.2 Hz, 6-及び7-H), 4.97及び4.92 (各1H, 各s, =CH2), 4.41 (2H, m, 1β-及び3α-H), 3.60 (2H, t, J = 6.5 Hz, 25-H2), 2.82 (1H, dm, J = 12.4 Hz, 9β-H), 2.55 (1H, dd, J = 13.3, 5.9 Hz, 10α-H), 2.47 (1H, dd, J = 12.6, 4.4 Hz, 4α-H), 2.33 (1H, dd, J = 13.3, 2.6 Hz, 10β-H), 2.18 (1H, dd, J = 12.6, 8.3 Hz, 4β-H), 1.98 (2H, m), 1.86 (1H, m), 0.890 (18H, s, 2 x Si-t-Bu), 0.849 (9H, s, Si-t-Bu), 0.82 (3H, d, J = 6.5 Hz, 21-H3), 0.524 (3H, s, 18-H3), 0.077 (3H, s, SiMe), 0.059 (3H, s, SiMe), 0.051(9H, s, 3 x SiMe), 0.015 (3H, s, SiMe); 13C NMR (100 MHz) δ 152.98 (s, C-2), 141.22 (s, C-8), 132.71 (s, C-5), 122.42 (d, C-6), 116.10 (d, C-7), 106.26 (t, =CH2), 72.52及び71.63 (各d, C-1及びC-3), 63.32 (t), 56.32 (d), 56.16 (d), 47.61 (t), 45.70 (s, C-13), 40.51 (t), 38.55 (t), 35.50 (d), 35.30 (t), 33.24 (t), 28.76 (t), 27.41 (t), 25.99 (q, SiCMe3), 25.84 (q, SiCMe3), 25.78 (q, SiCMe3), 23.43 (t), 22.42 (t), 22.10 (t), 18.56 (q, C-21), 18.37 (s, SiCMe3), 18.25 (s, SiCMe3),  18.16 (s, SiCMe3), 12.31 (q, C-18), -4.87 及び-5.10及び-5.25 (各q, 6 x SiMe); MS (EI) m/z no M+, 673 (11, M+ -C4H9), 628 (3, M+ -t-BuMeSiH2), 612 (3, M+ -t-BuMeSiH2 -CH4), 598 (100, M+ -t-BuMe2SiOH), 584 (4), 541 (6), 496 (3), 366 (45), 257 (12), 234 (12), 147 (21), 73 (84); C39H73O3Si3 (M+-C4H9)に関して計算した正確な質量673.4868、実測値673.4859。
【００７２】
保護ビタミン12(19mg、26μmol)を、THF(2mL)及びアセトニトリル(2mL)中に溶解した。アセトニトリル(1:9比、1mL)中に水性48％HFを含む溶液を0℃で加え、得られた混合物を室温で3時間攪拌した。飽和NaHCO3水溶液を加え、反応混合物を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を鹹水で洗い、乾燥し(Na2SO4)、減圧下で濃縮した。残渣をヘキサン/酢酸エチル(8:2)2mLで希釈し、Waters silica Sep-Pakカートリッジ(2g)に塗布した。ヘキサン/酢酸エチル(8:2)及び酢酸エチルでの溶出により、粗生成物13(15mg)を得た。ビタミン13をさらに、ストレートフェーズ(straight phase)HPLC[10 x 250 mmZorbax-Silicaカラム、4 mL/分、ヘキサン/2-プロパノール(85:15)溶媒系、Rt= 7.77分]及びその後逆相HPLC[9.4 x 250 mm Zorbax Eclipse XDB-C18 カラム、3 mL/分、メタノール/水(85:15)溶媒系、Rt= 9.97分]により精製し、無色油状物(8.8 mg、収率87%)を得た: UV (EtOH中) λmax 261.1, 251.0, 243.0 nm; 1H NMR (500 MHz, CDCl3) λ 6.34及び5.87 (1H及び1H, 各d, J = 11.2 Hz, 6-及び7-H), 5.09及び5.07 (各1H, 各s, =CH2), 4.46 (2H, m, 1β-及び3α-H), 3.63 (2H, t, J = 6.5 Hz, 25-H2), 2.87 (1H, dd, J = 12.8, 3.8 Hz, 10β-H), 2.80 (1H, br d, J = 13.3 Hz, 9β-H), 2.54 (1H, br d, J = 13.3 Hz, 4α-H), 2.33 (1H, dd, J = 13.3, 5.8 Hz, 4β-H), 2.25 (1H, dd, J = 12.8, 8.7 Hz, 10α-H), 0.82 (3H, d, J = 6.4 Hz, 21-H3), 0.521 (3H, s, 18-H3); 13C NMR (125 MHz) δ 151.68 (s, C-2), 143.43 (s, C-8), 130.40 (s, C-5), 124.06 (d, C-6), 115.15 (d, C-7), 107.80 (t, =CH2), 71.74及び70.38 (各d, C-1及びC-3), 63.09 (t, C-25), 56.20 (d), 55.83 (d), 45.68 (s, C-13), 45.46 (t), 40.17 (t), 37.93 (t), 35.48 (d), 35.04 (t), 33.02 (t), 28.82 (t), 27.43 (t), 23.41 (t), 22.20 (t), 22.06 (t), 18.55 (q, C-21), 12.25 (q, C-18); MS (EI) m/z 388 (30, M+), 370 (2, M+ -H2O), 322 (4, M+ -2H2O -C2H6), 303 (13), 287 (14, M+ -C6H13O), 269 (12, M+ -C6H13O -H2O), 251 (10, M+ -C6H13O -2 H2O), 235 (10), 186 (17), 155 (33), 135 (35), 114 (100), 91 (74);C25H40O3 (M+)に関して計算した正確な質量388.2977、実測値388.2985。
(20S)-2α-メチル-19,26,27-トリノル-1α,25-ジヒドロキシカルシフェロール(14)及び(20S)-2β-メチル-19,26,27-トリノル-1α,25-ジヒドロキシカルシフェロール(15)
【００７３】
トリス(トリフェニルホスフィン)ロジウム(I)塩化物(8mg、8.6μmol)を、水素で予め飽和した乾燥ベンゼン(8mL)に添加した。混合物を、均一な溶液が形成されるまで(約45分間)室温で攪拌した。乾燥ベンゼン（3mL)中にビタミン13(3mg、7.7μmol)を含む溶液を加え、反応を、水素の連続ストリーム下で、8時間続けた。ベンゼンを減圧下で除去し、残渣を、ヘキサン/酢酸エチル(1:1)に再び溶解しWaters silica Sep-Pakカートリッジ(2g)に塗布した。2-メチルビタミンの混合物を、同じ溶媒系を使用して溶出した。さらに、化合物をHPLC (9.4 x 250 mm Zorbax-Silカラム、6 mL/分)により、ヘキサン/2-プロパノール(85:15)溶媒系を使用して精製した。2-メチル-19-ノルビタミン14及び15の混合物は、単一のピークを Rt= 7.4分に示した。両方のエピマーの分離を、メタノール/水(85:15)溶媒系を使用して、逆相HPLC(9.4 x 250 mm Zorbax Eclipse XDB-C18カラム、3 mL/分)により達成した。2β-メチルビタミン15(456μg、収率15％)を、Rt=7.7分で回収し、その2α-エピマー14(505μg、収率17％)をRt=10.6分で回収した。
【００７４】
2α-メチル類似体14：UV(EtOH中)λmas260.0, 250.1, 241.9 nm；1H NMR (500MHz, CDCl3) δ6.36及び5.82 (1H及び1H、各d, J = 11.3 Hz, 6-及び7-H), 3.96 (1H, m, 1β-H), 3.62 (3H, m, 3α-H及び25-H2), 2.80 (2H, br m, 9β-及び10α-H), 2.60 (1H, dd, J = 12.8, 4.3 Hz, 4α-H), 2.22 (1H, br d, J = 13.6 Hz, 10β-H), 2.13 (1H, 〜t, J 〜 11.3 Hz, 4β-H), 1.132 (3H, d, J = 6.8Hz, 2α-CH3), 0.842 (3H, d, J = 6.5 Hz, 21-H3), 0.530 (3H, s, 18-H3); MS (EI) m/z 390 (100, M+), 372 (8, M+ -H2O), 357 (3, M+ -H2O -CH3), 339 (5, M+ -2H2O -CH3), 317 (12, M+ - C4H8OH), 289 (39, M+ -C6H12OH), 271 (23, M+ -C6H12OH -H2O), 235 (37), 194 (23), 177 (43), 135 (68), 95 (74)；C25H42O3(M+)に関して計算した正確な質量390.3134、実測値390.3135。
【００７５】
2β-メチル類似体15：UV(EtOH中)λmas 260.0, 249.9, 241.8nm; 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.25及び5.87 (1H及び1H, 各d, J = 11.1Hz, 6-H及び7-H), 3.89 (1H, m, 3α-H), 3.64 (2H, dd, J = 12.1, 6.3Hz, 25-H2), 3.50 (1H, m, 1β-H), 3.08 (1H, dd, J = 12.9, 4.0 Hz, 10β-H), 2.80 (1H, dd, J = 12.0, 4.3Hz, 9β-H), 2.43 (1H, br d, J =約13.6Hz, 4α-H), 2.34 (1H, dd, J = 13.5, 2.8Hz, 4β-H), 1.142 (3H, d, J = 6.8Hz, 2β-CH3), 0.847 (3H, d, J = 6.5 Hz, 21-H3), 0.542 (3H, s, 18-H3); MS (EI) m/z 390 (72, M+), 372 (8, M+ -H2O), 354 (3, M+ -2H2O), 339 (10, M+ -2H2O -CH3), 317 (14, M+ -C4H8OH), 297 (40, M+ -2H2O -C4H9), 289 (42, M+ -C6H12OH), 271 (26, M+ -C6H12OH -H2O), 235 (32), 194 (31), 177 (97), 135 (99), 95 (100)；C25H42O3(M+)に関して計算した正確な質量390.3134、実測値390.3119。
【００７６】
【化１６】
2008542201.tif 000018
【００７７】
【化１７】
2008542201.tif 000019
【００７８】
【化１８】
2008542201.tif 000020
【００７９】
生物学的活性
ビタミンDレセプター結合
試験材料
プロテイン源
【００８０】
完全長の組換えラットレセプターを、E. coli BL21(DE3) Codon Plus RIL細胞に発現させ、二つの異なるカラムクロマトグラフィ系を使用して均一になるように精製した。第一の系は、このタンパクのC-末端ヒスチジンを利用するニッケルアフィニティ樹脂であった。この樹脂から溶出されたタンパクを、さらに、イオン交換クロマトグラフィーを使用して精製した(S-Sepharose Fast Flow))。精製タンパクのアリコートにおける液体窒素中で素早く凍結させ、使用するまで-80℃で貯蔵した。結合アッセイでの使用のため、そのタンパクをTEDK50(50mM トリス、1.5mM EDTA、pH 7.4、5mM DTT、150mM KCl)に0.1％Chaps 清浄剤で希釈した。添加した放射ラベルリガンドの20％以下がレセプターに結合するように、レセプタータンパク及びリガンドの濃度を最適化した。
【００８１】
試験薬
非標識リガンドをエタノールに溶解し、UV分光光度計を使用して濃度を測定した((1,25(OH)2D3:モル吸光度計数=18,200及びλmax=265nm；類似体：モル吸光度計数=42,000及びλmax=252nm)。放射標識リガンド(3H-1,25(OH)2D3〜159 Ci/mmol)をエタノールに、最終濃度1nMで添加した。
【００８２】
分析条件
放射標識及び非標識リガンドを、最終エタノール濃度≦10％で100mcl希釈タンパクに添加し、混合し、結合平衡に達するまで、氷上で一晩インキュベートした。次の日、100mclヒドロキシルアパタイトスラリー(50％)を各チューブに加え、10分間インターバルで30分間混合した。ヒドロキシルアパタイトを、遠心分離により回収し、その後、0.5％Titron X-100を含むトリス-EDTAバッファー(50mMトリス、1.5mM EDTA、pH 7.4)で三回洗った。最終洗浄後、ペレットを、Biosafe IIシンチレーションカクテル4mLを含むシンチレーションバイアルに移し、混合し、シンチレーションカウンターに置いた。全結合を、放射標識リガンドのみを含むチューブから測定した。
【００８３】
HL-60 分化
試験材料
試験薬
試験薬をエタノールに溶解し、UV分光光度計を使用して濃度を測定した。細胞培養物に存在するエタノールの最終濃度(≦0.2％)を変化させずに薬物濃度範囲を試験できるように、段階希釈を調製した。
【００８４】
細胞
ヒト前骨髄球性白血病(HL60)細胞を、10％ウシ胎児血清を含有するRPMI-1640倍地中で成長させた。細胞を5％CO2の存在下、37℃でインキュベートした。
【００８５】
分析条件
HL60細胞を、1.2×105細胞/mLでプレーティングした。プレーティングの18時間後、複製の細胞を薬物で処理した。4日後、細胞を採取し、ニトロブルーテトラゾリウムリダクション分析を行った((Collinsら、1979年; J. Exp. Med. 149:969〜974頁)。全200細胞を計数し、細胞内ブラック-ブルーホルマザン堆積物を含む数を記録することにより、分化した細胞の割合を測定した。単球への分化の立証は、食細胞活性を計測することにより行った（データは示していない）。
【００８６】
インビトロ転写分析
転写活性は、ルシフェラーゼレポーター遺伝子の24-ヒドロキシラーゼ(24Ohase)遺伝子プロモーターアップストリームで安定的に軽質移入されるROS 17/2.8(骨)細胞において測定した(Arbourら、1998)。細胞は、投与範囲を示した。投与16時間後、細胞を収集し、ルシフェラーゼ活性を、照度計を使用して測定した。RLU=相対的ルシフェラーゼ単位。
【００８７】
腸管カルシウム輸送及び骨カルシウム動員
雄性離乳児Sprague-Dawleyラットを、食餌11(Sudaら、J. Nutr.100:1049,1970年)(0.47% Ca)食餌+ビタミンAEKに1週間、その後食餌11(0.02％Ca)+AEKに3週間置いた。その後、ラットを、0.47％Caを含む食餌に１週間、0.02％Caを含む食餌に2週間に変えた。0.02％Ca食餌の最終週の間に、薬物投与を開始した。4回の連続的なip投与は、約24時間離して行った。最終投与24時間後、血液を切断した(severed)首から採取し、骨カルシウム動員の測定として血清カルシウム濃度を測定した。腸の第一の10cmを、腸管カルシウム輸送分析のために、反転小腸嚢法を使用して収集した。
【００８８】
P10及びT-74の両方を、ビタミンDレセプターに結合した。P10は、ビタミンDレセプターへの結合において、1α,25-ジヒドロキシビタミンD3よりも僅かに活性であるが、T-74は活性が低かった(図１を参照されたい)。BMは、また、ビタミンDレセプターに結合するが、1α,25-ジヒドロキシビタミンD3よりも僅かに活性が低かった（図２を参照されたい）。P10、T-74及びBMは、また、HL-60細胞の分化の誘導において、1α,25-ジヒドロキシビタミンD3よりも活性が低いことを示した(図３)。しかし、BMは、HL-60細胞の分化の誘導において、1α,25-ジヒドロキシビタミンD3よりも僅かに活性は低いのみであった。図４に示すように、BM及びP10は、転写の発生において1α,25-ジヒドロキシビタミンD3よりも僅かに活性が低く、T-74は、これに関して1α,25-ジヒドロキシビタミンD3よりも明らかに活性が低かった。P10、T-74及びBMは、7,020pmol/日の量で与える場合でさえも、骨カルシウム動員による測定の場合にカルセミック活性はなかった(図５及び７を参照されたい)。P10、T-74及びBMは、腸管カルシウム輸送を上昇しなかった(図６及び８を参照されたい)。従って、これらの化合物は、血清カルシウムの上昇が望ましくない疾患の治療への使用が見い出されてもよい。そのような疾患の例としては、それらに限定されないが、腎性骨ジストロフィ、乾癬、I型糖尿病、慢性関節リウマチ、狼瘡、白血病、結腸直腸癌、前立腺癌及び乳癌が挙げられる。T-74は、日焼け肌の治療、皺除去用の化粧用薬剤又は化粧品として、又は皮膚の保湿を高めるためのバリヤー増強剤としての使用が見い出されてもよい。
【００８９】
治療目的に関して、本発明の化合物は、当技術分野に公知の従来法により、無害な溶媒中の溶液として、又は好適な溶媒又はキャリヤーにおけるエマルジョン、サスペンジョン又は分散系として、又は固形キャリヤーと共にピル、錠又はカプセルとして、医薬用に製剤化されてもよい。また、そのような製剤は、他の医薬的に許容され得る非毒性の賦形剤、例えば、安定化剤、抗酸化剤、結合剤、着色剤又は乳化剤又は食味改質剤を含んでいてもよい。
医薬的に許容され得る賦形剤及びキャリヤーは、一般的に、当業者に公知であり、従って、本発明に含まれる。そのような賦形剤及びキャリヤーは、例えば、「Remingtons Pharmaceutical Sciences」 Mack Pub. Co.、ニュージャージー(1991)、に記載されており、それは本明細書に十分に記載されているものとして、全体的に全ての目的に関して参考文献として本明細書に含まれるものとする。
【００９０】
経口的、局所的、非経口的、直腸的又は経皮的に、本化合物を投与してもよい。注入により、又は静脈内注入又は好適な滅菌溶液により、又は食餌用管(alimentary canal)により液体又は固形投与の形態において、又はクリーム、軟膏、パッチ又は経皮適用に好適な同様の媒体の形態において、化合物を好都合に投与する。ある態様において、化合物の量1日当たり0.001μg〜約1mgが、治療目的に好適である。あるそのような態様において、好適かつ有効な量は、化合物1日当たり0.01μg〜1mgが治療目的に好適であってもよい。他のそのような態様において、好適かつ有効な量は、化合物1日当たり0.1μg〜500μgであってもよい。そのような量は、治療すべき疾患又は状態のタイプ、疾患又は状態の重症度、及び当技術分野において十分理解されるような被験者の応答により調整されると考えられる。化合物は、単独で、又は他の活性ビタミンD化合物と共に、好適に投与されてもよい。
【００９１】
本発明の使用のための組成物は、(一つ又は複数の)活性成分としてP10、T-74、及び/又はBMの有効量及び好適なキャリヤーを含む。本発明のある態様における使用のための(一つ又は複数の)化合物の有効量は、本明細書に記載の投与量と一般的に考えられ、局所的、経皮的、経口的、経鼻的、直腸又は非経口的に投与してもよい。
【００９２】
本発明の化合物を、前骨髄球から通常のマクロファージへの分化に有効にするのに十分な量、即ち、被験者の前骨髄球の量を投与前に存在する量よりも少なくするのに十分な量において、被験者に投与してもよい。
前記投与量は好適であり、その量は、疾患の重症度及び当技術分野において十分に理解されるような被験者の状態及び応答により調節されるべきと理解される。前記のように、本発明の化合物は、精製された形態において使用されてもよいか又は混合物として存在してもよい。例えば、一般式3A及び一般式3Bの化合物は、二つの化合物の混合物として存在してもよい。ある態様において、混合物は、一般式3Aの化合物、一般式3Bの化合物を含み、一般式3Aの化合物対一般式3Bの化合物の比は、50:50〜99.9:0.1である。あるそのような態様において、一般式3Aの化合物対一般式3Bの化合物の比は、70:30〜99.9:0.1、80:20〜99.9:0.1、90:10〜99.9:0.1、95:5〜99.9:0.1である。他の態様において、混合物は、一般式3Aの化合物及び一般式3Bの化合物を含み、一般式3Bの化合物対一般式3Aの化合物の比は、50:50〜99.9:0.1である。あるそのような態様において、一般式3Bの化合物対一般式3Aの化合物の比は、70:30〜99.9:0.1、80:20〜99.9:0.1、90:10〜99.9:0.1又は95:5〜99.9:0.1である。
(一つ又は複数の)化合物を、クリーム、ローション、軟膏、エアロゾル、坐剤、局所パッチ、丸、カプセル又は錠、又は、医薬的に無害かつ許容され得る溶媒（類）又は油(類)中の溶液、エマルジョン、分散系又はサスペンジョンとしての液体形態として製剤化してもよく、そのような製剤は、さらに、他の医薬的に無害又は有効な成分、例えば安定化剤、抗酸化剤、乳化剤、着色剤、結合剤又は食味改質剤を含んでいてもよい。
【００９３】
本発明の製剤は、活性成分を、医薬的に許容され得るキャリヤー、及び、従って所望により他の治療成分と共に含む。キャリヤーは、製剤の他の成分と適合性でありそれらのレシピエントに有害でないという意味において「許容され得」なければならない。
【００９４】
経口投与に好適な本発明の製剤は、所定量の活性成分を各々含むカプセル、サシェ、錠又はトローチの別々の単位形態；粉末又は顆粒の形態；溶液又は水性液体又は非水性液体におけるサスペンジョン；又は水中油型エマルジョン又は油中水型エマルジョンの形態であってもよい。
【００９５】
直腸投与用製剤は、活性成分及びキャリヤー、例えばココアバターを含む坐剤の形態又は浣腸の形態であってもよい。
【００９６】
非経口投与に好適な製剤は、レシピエントの血液に好ましく等張性である、活性成分の滅菌油性又は水性製剤を都合よく含む。
【００９７】
局所投与に好適な製剤としては、液体又は半液体製剤、例えば、リニメント、ローション、アプリカント(applicants)、水中油型又は油中水型エマルジョン、例えばクリーム、軟膏又はペースト；又は溶液又はサスペンジョン、例えばドロップ；又はスプレーが挙げられる。
【００９８】
経鼻投与に関して、スプレーカン、ネブライザー又はアトマイザーカンで分配される粉末、自己噴霧又はスプレー製剤の吸入が使用される。分配される場合、製剤の粒度は、好ましくは10〜100μｍ（ミクロン）である。
【００９９】
製剤は、投与単位形態において都合よく存在してもよく、薬学分野に十分知られているいずれかの方法により製造されてもよい。用語「投与単位」は、単位、即ち、単回投与であって、活性成分それ自体、又は固体又は液体の医薬希釈剤又はキャリヤーとの混合物を含む物理的及び化学的に安定な単位量として被験者に投与され得るものである。
【０１００】
本明細書に記載の全ての参考文献は、本明細書に十分に記載されているものとして、全体的に全ての目的に関して、本明細書に含まれるものとする。
【０１０１】
本発明は、本明細書に記載の説明のための態様に制限されないが、以下の特許請求の範囲の範囲内に入る全てのそのような形態を包含すると理解される。
【図面の簡単な説明】
【０１０２】
【図１】全長組換えラットビタミンDレセプターへの[3H]-1,25-(OH)2-D3の結合に競合するP10、T-74及び1,25(OH)2D3の相対活性を比較するグラフである。
【図２】全長組換えラットビタミンDレセプターへの[3H]-1,25-(OH)2-D3の結合に競合するBM及び1,25(OH)2D3の相対活性を比較するグラフである。
【図３】P10、T-74、BM及び1,25(OH)2D3の濃度の関数としてHL-60細胞分化百分率を比較するグラフである。
【図４】P10、T-74、BM及び1,25(OH)2D3のインビトロ転写活性濃度を比較するグラフである。
【図５】P10、T-74、BM及び1,25(OH)2D3の骨カルシウム動員活性を比較する棒グラフである。
【図６】P10、T-74、BM及び1,25(OH)2D3の腸管カルシウム輸送活性を比較する棒グラフである。
【図７】BM及び1,25(OH)2D3の骨カルシウム動員活性を比較する棒グラフである。
【図８】BM及び1,25(OH)2D3の腸管カルシウム輸送活性を比較する棒グラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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