(57)【要約】  リスクのある被験体を同定し、同定されたリスクのある被験体を増加された量の酸素に曝露する前に、リスクのある被験体に抗炎症剤を投与する、リスクのある被験体において増加された酸素レベルへの応答を調節する方法であって、該抗炎症がないときにリスクのある被験体の該増加された量の酸素への応答と比較して、リスクのある被験体の該増加された量の酸素への応答が調節される、方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
リスクのある被験体をスクリーニングする工程；
リスクのある被験体を同定する工程；
同定されたリスクのある被験体を増加された量の酸素に曝露する前に、リスクのある被験体に抗炎症剤を投与する工程を含み、
該抗炎症がないときにリスクのある被験体の該増加された量の酸素への応答と比較して、リスクのある被験体の該増加された量の酸素への応答が調節される、リスクのある被験体において増加された酸素レベルへの応答を調節する方法。
【請求項２】
増加された量の酸素が周囲酸素レベルより高い、請求項1記載の方法。
【請求項３】
増加された量の酸素が吸入投与される、請求項１記載の方法。
【請求項４】
増加された量の酸素が周囲より高い酸素レベルを有するチャンバまたは部屋に患者を置くことによって投与される、請求項１記載の方法。
【請求項５】
増加された量の酸素が周囲より高い酸素レベルを有する高圧酸素中に患者を置くことによって投与される、請求項１記載の方法。
【請求項６】
増加された量の酸素が酸素飽和血液または合成血液成分を含む血液産物を患者に静脈注射することによって投与される、請求項１記載の方法。
【請求項７】
リスクのある被験体が進行中の炎症の状態にある、請求項１記載の方法。
【請求項８】
リスクのある被験体が該進行中の炎症がない時に増加された酸素レベルに正常に応答する状態を有する、請求項７記載の方法。
【請求項９】
該抗炎症剤がリスクのある被験体に対して該増加された酸素量の有害な影響を阻害するのに十分な用量および経路で投与される、請求項１記載の方法。
【請求項１０】
抗炎症剤が被験体において増加された酸素レベルの有害な影響を阻害するのに十分な用量および経路で投与されるアデノシンレセプターアゴニストである、請求項１記載の方法。
【請求項１１】
抗炎症剤が、吸入されるアデノシン5'-一リン酸(AMP)、肥満細胞安定剤、ヒスタミンH1レセプターアンタゴニスト、選択的システイニルロイコトリエン-1レセプターアンタゴニスト、5-リポキシゲナーゼおよびシクロオキシゲナーゼのインヒビター、先天性免疫系細胞における膜貫通シグナル伝達経路のインヒビター、cAMP媒介免疫抑制経路の活性剤およびcAMP分解のインヒビターからなる群より選択される、請求項１記載の方法。
【請求項１２】
抗炎症剤が、ナプロキセン、スリンダク、トルメチン、ケトロラク、セレコキシブ、イブプロフェン、ジクロフェナク、アセチルサリチル酸、ナブメトン、エトドラク、インドメタシン、ピロキシカム、cox-2インヒビター、ケトプロフェン、抗血小板薬、サルサラート、バルデコキシブ、オキサプロジン、ジフルニサル、フルルビプロフェン、コルチコステロイド、およびロイコトリエン修飾物質からなる群より選択される、請求項１記載の方法。
【請求項１３】
リスクのある被験体が免疫炎症状態を患っているか、または免疫炎症状態に脆弱である、請求項１記載の方法。
【請求項１４】
免疫炎症状態が、喘息、成人呼吸促進症候群(ARDS)、炎症肺症候群、虚血性再灌流障害、全身性狼瘡紅斑、炎症腸疾患、クローン病、COPD、潰瘍性大腸炎、多発性硬化症、インシュリン依存性真性糖尿病、自己免疫関節炎、慢性関節リウマチ、若年性関節リウマチ、乾癬性関節炎、炎症肺症候群、尋常性天疱瘡、特発性血小板減少性紫斑病、自己免疫髄膜炎、重症筋無力症、自己免疫甲状腺炎、皮膚炎、アトピー性皮膚炎、湿疹性皮膚炎、乾癬、シェーグレン症候群、シェーグレン症候群に続く乾性角結膜炎、円形脱毛症、節足動物咬傷反応によるアレルギー反応、アフタ性潰瘍、虹彩炎、結膜炎、角結膜炎、皮膚エリテマトーデス、強皮症、膣炎、直腸炎、薬疹、スティーヴンス-ジョンソン症候群、らい菌逆反応、らい性結節性紅斑、自己免疫ブドウ膜炎、アレルギー性脳脊髄炎、再生不良性貧血、赤芽球ろう、特発性血小板減少症、多発性軟骨炎、ヴェーゲナー肉芽腫症、慢性能動肝炎、グレーブス眼症、原発性胆汁性肝硬変、後部ブドウ膜炎、細菌感染、ウイルス感染、マイコプラズマ感染、寄生虫感染、日和見感染、ニューモシスティス感染、サイトメガロウイルス感染、ヘルペスウイルス感染、マイコバクテリウム感染、ヒト免疫不全ウイルス感染、慢性呼吸器疾患、上気道疾患、静脈洞炎、傍静脈洞炎、またはライノウイルス感染もしくはインフルエンザ感染、アレルギー、枯草熱、鼻炎、春季結膜炎、好酸球媒介状態および間質性肺線維症からなる群より選択される、請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
被験体が急性炎症状態を患っている、請求項１記載の方法。
【請求項１６】
被験体が慢性炎症障害を患っている、請求項１記載の方法。
【請求項１７】
抗炎症剤および酸素が増加されたレベルの酸素の投与と関連する酸素再結合影響を改善するリスクのある被験体に投与される、請求項１記載の方法。
【請求項１８】
アデノシンレセプターアゴニスト；および
酸素を酸素療法に正常に応答する状態を患っている被験体に投与する工程を含み、酸素のみを被験体に投与する場合と比較して被験体の酸素への応答が調節される、被験体においてコルチコステロイドへの応答を調節する方法。
【請求項１９】
アデノシンレセプターアゴニストがA1アゴニスト、A2Aアゴニスト、A2Bアゴニスト、A3アゴニストからなる群より選択される、請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
正常組織に好ましく、かつ疾患組織に好ましくない抗炎症剤を選択的に提供することによって正常組織に対する増加された酸素レベルの有害な影響を緩和する方法。
【請求項２１】
増加されたレベルの酸素に曝露される組織において予め存在する炎症レベルを測定する工程を含み、上昇したレベルの炎症が該組織への増加されたレベルの酸素の導入の際に組織損傷に対する増加された脆弱性の指標である、酸素の導入による組織損傷に対する脆弱性を予測する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願）
本願は、2005年2月4日に出願された米国仮特許出願第60/650,267号の利益を主張する。上記出願の全体の教示は、参照により本明細書に援用される。
【０００２】
(政府支援)
本発明は、米国政府基金の援助でなされた。米国政府は本発明において特定の権利を有する。
【０００３】
（分野）
本願は、酸素療法および免疫応答の分野、ならびに治療および予防手順における21％より高い酸素含有ガス混合物の使用に関する。本願はまた、酸素の生理学的抗炎症性機構による阻害のための、酸素誘導性炎症の悪化および器官損傷の予防に関する。
【背景技術】
【０００４】
（背景）
例えば酸素がATP形成中に電子レセプターとして機能する酸化的リン酸化を含む必要不可欠な代謝過程のために、哺乳類は酸素分子を必要とする。酸素の欠乏は許容されず、ヒトを含む哺乳類は肺による酸素供給に非常に依存する。したがって、挿管法および機械換気は、重篤な肺炎症または他の病状を患う患者の不十分な肺の酸素送達能力を妨げるために、最も広く用いられる予防および治療の臨床的介入の1つを表す。
【０００５】
吸引、外傷および出血性ショックを含む多くの臨床状態に続いて、肺機能不全およびその後の肺不全を導く肺感染と全身感染および敗血症の合併症が頻繁に起こる。急性肺傷害（ALI）またはそのより重篤な形態である急性呼吸促進症候群（ARDS）は、およそ130,000症例の頻度で起こり、米国のみで一年につきARDSで50,000を超える死がある。
【０００６】
大多数の患者は、酸素療法に対して十分に応答し、酸素毒性が集中治療薬においてまれに発生するが、有害な肺炎症を促進し得、この疾患プロセスを悪化させる場合の酸素療法はARDS患者に最適下限であり得る可能性がなお残っている。肺炎症の大きさと持続時間がARDS患者の最終結果を決定するために示されたので、炎症過程に対する酸素のありうる有害な影響を回避することが重要である。Day YJ, Marshall MA, Huang L, McDuffie MJ, Okusa MDおよびLinden J. Protection from ischemic liver injury by activation of A2A adenosine receptors during reperfusion: inhibition of chemokine induction，Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol,286: G285〜G293，2004; Sullivan GW, Lee DD, Ross WG, DiVietro JA, Lappas CM, Lawrence MBおよびLinden J. Activation of A2A adenosine receptors inhibits expression of ｛alpha｝4/｛beta｝1 integrin (very late antigen -4) on stimulated human neutrophils, J Leukoc Biol, 75: 127〜134, 2004; Day YJ, Huang L, McDuffie MJ, Rosin DL, Ye H, Chen JF, Schwarzschild MA, Fink JS, Linden JおよびOkusa MD．Renal protection from ischemia mediated by A2A adenosine receptors on bone marrow-derived cells, J Clin Invest, 112: 883〜891, 2003;ならびにPlatts SH, Linden JおよびDuling BR．Rapid modification of the glycocalyx caused by ischemia-reperfusion is inhibited by adenosine A2A receptor activation，Am J Physiol Heart Circ Physiol, 284: H2360〜H2367, 2003。
【０００７】
（概要）
本発明は、酸素療法の間および／または前後に、炎症および細胞媒介性免疫または体液性免疫のいずれかの1つ以上の徴候を減少させるために、前記徴候の前記減少を誘導するのに適した条件の下で、有効量の少なくとも1つの抗炎症化合物を被験体に投与する工程を含む、それを必要とする被験体を処置することによって酸素療法の危険性を除去する方法であり、ここで該低酸素からアデノシン活性化からA2アデノシンレセプター経路までの阻害化合物は、アデノシンの蓄積、A2アデノシンレセプターの発現および機能を阻害し得る化合物、A2レセプターを阻害する化合物およびA2レセプター遺伝子発現に干渉する化合物、ならびに炎症過程を阻害する化合物からなる群より選択される。リスクのある被験体をスクリーニングする工程；リスクのある被験体を同定する工程；および同定されたリスクのある被験体を増加した量の酸素に曝露する前に、リスクのある被験体に抗炎症剤を投与する工程を含む、リスクのある被験体の増加した酸素レベルに対する応答を調節する方法であり、前記増加した量の酸素に対するリスクのある被験体の応答が、前記抗炎症の非存在下において前記増加した量の酸素に対するリスクのある被験体の応答と比較して調節される方法も開示される。本発明によれば、例えば吸入法によって、または周囲レベルより高い酸素のレベルを有する適切なチャンバもしくは部屋に被験体を置くことによって、または周囲レベルより高い酸素のレベルを有する適切な高圧酸素チャンバ中に被験体を置くことによって、増加した量の酸素はリスクのある被験体に投与され得、治療はまた、本明細書で「高圧酸素療法」（HBOT）という。本発明はまた、酸素飽和血液または合成血液成分を含む血液産物を被験体に静脈注射することによって、増加した量の酸素をリスクのある被験体に投与することを提供する。
【０００８】
出願人らは、肺組織が、同一の低酸素作動機構、ならびに種々のモデルにおける炎症および組織損傷の下方調節で決定的な役割を果たすことが最近示された免疫抑制A2Aアデノシンレセプター（A2AR）媒介機構によって、過剰活性免疫細胞から保護されることを予測した。したがって、急性肺傷害の病因論において、細菌性毒素活性化免疫細胞（例えば顆粒球）は、局所微小循環および血液供給の障害を有する付随的肺組織損傷を引き起こすことが示唆される。続く組織損傷が関連する低酸素は、細胞外アデノシンの蓄積を促進し、次いで活性化した免疫細胞上で免疫抑制A2ARを誘発する。これは、免疫細胞による前炎症性および細胞傷害性メディエイタの合成および分泌に必要なシグナル伝達経路を順に阻害する免疫抑制細胞内cAMPの蓄積を導き、それにより残存する健康な組織を連続的な免疫損傷から保護する。この記載された生理学的組織保護機構は、低酸素により生成した細胞外アデノシンに依存し、かつ挿管された患者における肺の酸素添加は、酸素圧を増加させるために行われ、それにより低酸素が排除されてアデノシン蓄積が阻害されるので、酸素添加による低酸素→アデノシン→A2AR経路のかかる阻害は、決定的な組織保護機構の離脱（disengagement）および炎症性肺損傷（医原性疾患）の想定しない拡大を導き得ることを出願人らは推論した。したがって酸素添加は、この肺保護経路を排除し得、直接的な酸素毒性と共に肺の合併症の一因となり得る。
【０００９】
出願人らは、肺感染および炎症のいくつかのインビボモデルにおいて、酸素添加が実際に炎症性肺損傷を酷く悪化させ、低酸素→アデノシン→A2AR経路の阻害によるマウスの死を加速させることを予測した。外因的に添加された抗炎症剤、例えば合成A2ARアゴニストは、酸素添加されたマウスの炎症した肺中で内因的に形成されたアデノシンの損失を補い、それにより肺損傷を予防してマウスを死から救出したことから、酸素添加のこれらの有害な影響は予防可能である。
【００１０】
該方法の実施において、生物学的体液もしくは組織の試料における処置前の評価から処置後のより低い評価までの血液細胞の数、割合、割合の比率または活性を減少させるのに効果的であるか、あるいは、生物学体液の試料における処置前の評価から処置後のより低い評価までの血液タンパク質の濃度を減少させるのに効果的な条件下で、少なくとも1つのA2レセプターおよび／または細胞外アデノシンレベルに作用する化合物を被験体に投与する。血液細胞は、白血球、リンパ球、単球、T-リンパ球、B-リンパ球、幹細胞、CD2+-リンパ球、CD4+-リンパ球、CD8+-リンパ球、CD19+-リンパ球、形質細胞、好中球、桿状球、分葉好中球、好塩基球、好酸球、血小板および赤血球の中から選択され得る。
【００１１】
該方法は、炎症した肺および気管支（例えばARDS、COPDおよび喘息）を有する患者だけでなく、感染疾患および外傷、例えば事故または手術と関連する外傷を有する患者も含む広い種々の臨床的状況に用いられるべきである。一態様において、本発明の方法は、虚血-再灌流誘導性炎症組織傷害を最小限にするか、または予防する。抗炎症剤は、存在する特定の炎症状態（１つまたは複数）によって示される場合、全身的にまたは局所的に投与される。例えば、虚血-再灌流傷害を有するなどの組織傷害が局所的であるような場合、抗炎症剤の局所投与は、増加した量の酸素の投与前が好ましい。
【００１２】
炎症状態について個体をスクリーニングするためのいくつかの適切な方法が公知である。例えば、本発明の1つのスクリーニング方法は、血液タンパク質レベルを測定する工程である。被験体における炎症の存在と関連する血液タンパク質としては、限定されないが、免疫グロブリン、リゾチーム、サイトカイン、インターフェロン、補体タンパク質、凝固タンパク質、フィブリン溶解系タンパク質、酵素インヒビター、ブラジキニン系タンパク質、ホルモン、サイトカインおよびレセプタータンパク質が挙げられる。炎症の存在に対する他の試験として、炎症の目で見える徴候（例えば赤み、腫れ物および痛み）または血球算定などが使用され得る。
【００１３】
一態様において、該方法は、生物学的体液の試料における血液細胞、特に白血球の数もしくは割合を減少させること、ならびに／または免疫および非免疫性細胞の前炎症性エフェクター機能を減少させるのに効果的な条件下で、少なくとも1つのA2レセプターおよび／または細胞外アデノシンレベルに作用する化合物をリスクのある被験体に投与する工程をさらに含む。白血球、特にリンパ球、単球および顆粒球の正常レベルが公知である。
【００１４】
別の態様において、本発明はA2レセプターおよび／または細胞外アデノシンレベルに作用する化合物を投与することによる病原体誘導性組織からの保護方法である。適当な抗炎症剤としては、アデノシンキナーゼインヒビター、A2レセプターの発現を不安定にする生物活性剤、ならびにA2レセプターの発現および機能を妨げる生物活性剤が挙げられる。一態様において、前記A2レセプターおよび／または細胞外アデノシンレベルに作用する化合物は、低分子干渉RNA（siRNA）またはリボザイムである。
【００１５】
（発明の詳細な説明）
出願人らは、酸素療法が進行中の炎症応答を悪化させ、活性化免疫細胞による組織損傷を拡大させること、すなわち酸素は、進行中の炎症過程の間に投与される場合、前炎症効果を有することを発見した。これらの酸素の前炎症効果は、リスクのある被験体が進行中の炎症状態を患っている間に増加した量の酸素を受け入れるときの状態に見られる。本発明は、医原性疾患および／またはかかる状態の悪化をさらに避けるための方法を提供する。
【００１６】
本発明は、リスクのある被験体が酸素の前炎症特性を患わないように、リスクのある被験体をスクリーニングおよび同定する。本発明は増加した量の酸素の有害な影響を最も受けそうな被験体（リスクのある被験体）の集団を同定する方法を提供し、前炎症効果を最小限にするか、または排除するためにかかる被験体を前処置する。「リスクのある被験体」とは、増加した量の酸素の任意の導入前に炎症性疾患を患う被験体である。増加した量の酸素とは、周囲の酸素量より大きいレベルを意味すると理解される。本発明の方法によるかかる酸素量の増加は、例えば、高圧酸素装置の治療的および娯楽的使用の両方の結果である。
【００１７】
一態様において、本発明は医原性状態のリスクを低下させる方法を提供する。一態様において、本発明の方法は、炎症の悪化を伴わずに酸素療法の適用を提供する。1つの好ましい態様において、リスクのある被験体は吸入法によって増加した量の酸素を投与される。別の好ましい態様において、周囲レベルより高い酸素のレベルを有する適切なチャンバもしくは部屋に被験体を置くことによって、リスクのある被験体は増加した量の酸素を投与される。別の好ましい態様において、周囲レベルより高い酸素のレベルを有する適切な高圧酸素チャンバ中に被験体を置くことによって、リスクのある被験体は増加した量の酸素を投与される。さらに別の態様において、酸素飽和血液または合成血液成分を含む血液産物を被験体に静脈注射することによって、リスクのある被験体に増加した量の酸素が投与される。
【００１８】
このように、本発明は、予防的に抗炎症化合物を投与することによって免疫応答、炎症および組織損傷による状態の処置方法、予防方法または診断方法に関する。単一の理論に束縛されることを望まないが、増加した量の酸素を投与する前に抗炎症剤を投与することによって、インビボでの酸素の生理学的抗炎症機構の阻害が停止すると考えられる。つまり、抗炎症機構は無気性である酸素の欠乏によって誘発され、かつ依存する。したがって抗炎症剤の先行投与は、免疫細胞の天然活性による早期終了の有害な影響を最小限にするか、または排除する。さらにまだ、本発明はまた、病原性疾患の向上した処置、予防および診断を提供する。例えば、再度単一の理論に束縛されることを望まないが、リスクのある被験体において、酸素療法などにおける免疫細胞の不十分で短期間および／または早期終了の活性による病原体（例えば細菌およびウイルス）の生存が、病原性疾患を引き起こし、定着され、新しくなるかまたはより危険になる。
【００１９】
直観に反するが、出願人らは、複数細菌感染および敗血症をモデリングする条件において、酸素の投与が炎症した肺を有するマウスの肺傷害をさらに悪化させることを発見した。肺疾患を有する患者の処置を模倣する条件において酸素に曝露されたマウスは、前炎症性サイトカインおよび炎症のレベルを劇的に増加させた。なおさらに、これは炎症性肺組織損傷の強い増加を伴い、かなり加速された死をもたらした。
【００２０】
この発見は、酸素が反応性酸素種のためにいくつかの毒性効果を有すると考えた場合、当該技術の見地から完全に異なる。実際、反応性酸素種の毒性効果は、たとえあるにしても重要ではない。反応性酸素種を減少させることによって同じものを無効にする目的の処置は、広く成功していない。出願人らの発見は処置の焦点を変化させ、組織保護抗炎症低酸素および活性化した免疫細胞の陽性前炎症効果を可能とする。
【００２１】
出願人らは、他の救命の酸素の重大な副作用を予防する方法も発見した。本発明は、広く用いられる酸素療法の臨床手順の医原性合併症の予防方法を提供する。本明細書で用いられる場合、用語「医原性」疾患は、目下任意の処置または医学従業者と関連する任意の有害な影響に適用される。増加した量の酸素の導入前に外因性抗炎症剤を投与することは、酸素の娯楽的使用であろうと医薬的使用であろうと、かかる酸素導入の望まない副作用を最小限にするように妨げ得る。例えば、酸素療法の分野において、15%、例えば20または21%を超えて含有するガス混合物が、それを必要とする患者にしばしば投与される。実際15%、例えば約21%を超える量の酸素を用いることは危険であり得る。自発的な呼吸、機械的換気による吸息、および増加した酸素レベルを有する血液または溶液の注入によって、被験体は増加した量の酸素を受け入れ得る。例えば、炎症した器官を有する患者は、輸血を受け入れ得るか、または上昇した酸素レベルを含むi.v.を静脈投与され得る。かかる処置の経過は、これ以上にない想定されない危害を患者に引き起こし得、実際全く処置が施されなかった場合、患者をより高い危険な状態にすることが発見されている。
【００２２】
さらに記載されるように、酸素および抗炎症化合物の両方を用いる肺炎症マウスの処置は、酸素処置が関連する肺炎症の悪化を完全に予防し、マウスの炎症および酸素療法が誘導する死からの救出をもたらした。単一の理論に束縛されないが、処置が酸素誘導による外因性抗炎症経路の損失を補うと考えられる。
【００２３】
一態様において、抗炎症化合物の応用は、劇的に減少した前炎症性サイトカインのレベル、減少した組織損傷および死からのマウスの救出をもたらした。出願人らは、炎症を起こした患者の酸素処置間の抗炎症事象の促進が肺における高酸素圧を維持し、炎症組織損傷の悪化を予防することを発見した。例えば、喘息患者の炎症した肺は、本発明の非存在下において、酸素処置を用いて改善せずに悪くなるようである。
【００２４】
例えば、一態様において、抗炎症化合物A2Aレセプターアゴニストの応用は、前炎症性サイトカインのレベルを減少させ、組織損傷を減少させ、マウスを死から救出した。
【００２５】
インビボで提供されたこれらのデータは、酸素療法とA2レセプターの標的化された活性化または別の抗炎症薬との組み合わせが、進行中の炎症状態における安全な酸素療法の新規の方法を表すことを示す。これらのデータはまた、似たようなアプローチが他の疾患を炎症化合物で処置する間の酸素療法を改善するために用いられ得るという原則の証明を提供した。
【００２６】
本発明は、酸素促進性炎症組織傷害を予防し、それにより臨床において広く用いられる治療手順を改善する方法を提供する。
【００２７】
本発明の方法は、酸素療法による組織損傷を予防するためのA2レセプターを介した抗炎症シグナルを増加させるために、A2アデノシンレセプターの発現および機能を活性化させること、A2レセプター遺伝子発現を増加させること、またはA2レセプター分解を防ぐことを可能にする化合物を投与する工程を含む。
【００２８】
一態様において、本発明の方法は、認識および／またはシグナルおよび／または限定されないが、サイトカイン、反応性酸素種および他の抗炎症経路のメディエイタを含む細胞傷害性の前炎症性分子の分泌などのエフェクター機能に干渉する抗炎症剤の特性を有する合成化合物または天然化合物の投与を含む。
【００２９】
他の態様において、本発明の方法は、A2アデノシンレセプターおよび／またはそのシグナル伝達経路の活性剤または安定剤の特性を有する合成化合物または天然化合物を含む。
【００３０】
特定の局面において、本発明の方法は、免疫応答すなわち炎症を減少させ、それにより前炎症経路のインヒビター、または前炎症性分子の発現を破壊する生物活性剤（例えば低分子干渉RNA（siRNA）もしくはリボザイム）、または抗炎症性分子の発現を安定化させる生物活性剤のいずれかを投与することによって、酸素誘導性組織損傷からの保護が達成される。一態様において、生物活性剤はA2アデノシンレセプターに作用する。
【００３１】
本発明に用いるための適切な化合物（生物活性剤）としては、限定されないが、i）先天免疫系の細胞、例えば骨髄細胞またはT細胞などの適応免疫系の細胞における膜貫通シグナル伝達経路のインヒビター；ii）cAMP媒介免疫抑制経路の活性剤、iii）cAMP分解経路のインヒビター、例えばロリプラムなどのcAMPホスホジエステラーゼのインヒビターが挙げられる。一態様において、Gsタンパク質共役型レセプター（例えばベータアドレナリン性ヒスタミンレセプター）のアゴニストが用いられる。
【００３２】
非ステロイド抗炎症薬は、本発明に用いるための適当な化合物であり、ナプロキセン（アリーブ、ナプロシン等）、スリンダク（クリノリル等）、トルメチン（トレクチン等）、ケトロラク（トラドール等）、セレコキシブ（セレブレクス等）、イブプロフェン（アドビル、モトリン、メジプレン（Mediprene）、ヌプリン等）、ジクロフェナク（ボルタレン、カタフラム、ボルタレン-XR等）、アセチルサリチル酸（アスピリン、エコトリン等）、ナブメトン（レラフェン等）、エトドラク（ロジン（Lodine）等）、インドメタシン（インドシン、インドシン-SR等）、ピロキシカム（フェルデン等）、Cox-2インヒビター、ケトプロフェン（オルジス、オルバイル（Oruvail））、抗血小板薬、サルサラート（ジサルシド、サルフレクス（Salflex）等）、バルデコキシブ（ベクストラ等）、オキサプロジン（デイプロ（Daypro））、ジフルニサル（ドロビッド等）、およびフルルビプロフェン（アンセッド（Ansaid）等）を含む。塩、多形体などの上記の誘導体は、本発明の使用に適していることを理解されたい。
【００３３】
コルチコステロイドおよびロイコトリエンの使用に基づく抗炎症剤を含む他の適切な生物活性剤が適切である。これらは、限定されないが、経口（および静脈内）コルチコステロイド剤（全身性コルチコステロイド剤）、吸入コルチコステロイド剤、ロイコトリエン修飾物質（アコレートおよびシンギュラー（Singular））が挙げられる。経口または静脈内コルチコステロイドの適切な例としては、限定されないが、コルチゾン、ヒドロコルチゾン（コルテフ（登録商標）等）、プレドニゾン（デルタゾン（登録商標）、メチコルテン（Meticorten）（登録商標）、オラゾン（Orasone）（登録商標）等）、プレドニゾロン（デルタ-コルテフ（登録商標）、ペジアプレド（Pediapred）（登録商標）、プレロン（登録商標）等）、トリアムシノロン（アリストコート（登録商標）、ケナコート（登録商標）等）、メチルプレドニゾロン（メドロール、メチルプレド、ソル・メドロール等）、デキサメタゾン（デカドロン（登録商標）、デキソン（Dexone）（登録商標）、ヘキサドロール（Hexadrol）（登録商標）等）、ベタメタゾン（セレストン（登録商標）等）などが挙げられる。
【００３４】
適切な吸入コルチコステロイド剤としては、限定されないが、ベクロメタゾン（ベクロベント（Beclovent）（登録商標）、ベコナーゼ（登録商標）、バンセリル（Vanceril）（登録商標）、バンセナーゼ（登録商標）等）、ブデソニド（プルミコート（登録商標）、リノコート（登録商標）等）、モメタゾン（ナゾネックス（登録商標）等）、トリアムシノロン（アズマコート（登録商標）、ナサコート（登録商標）等）、フルニソリド（エアロビド（AeroBid）（登録商標）、ナサリド（Nasalide）（登録商標）、ナサレル（Nasarel）（登録商標）等）、フルチカゾン（フロベント（登録商標）、フロナーゼ（登録商標）等）が挙げられる。
【００３５】
他の適当な抗炎症剤としては、アドベアー（長期作用の気管支拡張薬を加えたコルチコステロイドを含む併用医薬）、エアロビド、アズマコート、フロベント、プルミコート、キュバールなど、いくつかの市販で入手可能な薬剤が挙げられる。当業者に公知なように、吸入コルチコステロイドは少なくとも3つの形態、例えば定量用量吸入器（MDI）、乾燥粉末吸入器（DPI）およびネブライザ溶液によって投与され得る。投与のかかる様式は、本発明の実施に適している。
【００３６】
まだ他の適切な例は、限定されないがアコレート、シングレア（Singulair）、ジフロなどのロイコトリエン修飾物質を含む。
【００３７】
酸素の前炎症影響を予防するかまたは最小限にするために、活性化抗炎症経路を弱めることによって、特に酸素および抗炎症薬の併用使用によって、出願人らは、非常に病気の重い患者に対して潜在的に救命手順を提供する。
【００３８】
さらに別の局面において、本発明は、アデノシンキナーゼインヒビター、または例えば、アデノシンキナーゼ発現を破壊する低分子干渉RNA（siRNA）である生物活性剤、またはアデノシンキナーゼの分解を妨げる生物活性剤を被験体に投与する工程を含む、かかる処置を必要とする被験体におけるアデノシンキナーゼ活性の減少により緩和され得る疾患の処置方法を含む。
【００３９】
酸素療法の有害な影響を最小限にするかまたは除去するために、被験体に抗炎症化合物を投与する工程を含む、かかる処置を必要とする被験体において酸素療法と関連する疾患の処置方法が開示される。
【００４０】
さらに別の局面において、疾患が局所血液供給の阻害および／または局所酸素圧の減少および／または細胞代謝の異常調節と関連する、かかる処置を必要とする被験体において酸素療法と関連する疾患の処置方法が開示される。
【００４１】
本発明の方法は、器官、組織または細胞移植、例えば同種組織または異種組織の哺乳類レシピエントへの移植、関節置換、自己免疫疾患による炎症応答ならびに炎症応答を開始する病状もしくは外傷を有する血管形成、ステント配置、シャント配置または移植を含む循環病状およびその処置による炎症状態の処置に使用される。
【００４２】
別の説明がない限り、本明細書に用いられる全ての技術用語および科学用語は、この開示が属する分野の当業者に共通して理解されるような同一の意味を有する。分子生物学における共通の用語の定義は、Benjamin LewinのOxford Unversity Pressで出版されたGenes V, 1994 (ISBN 0-19-854287-9)；Kendrew et al.(編)のBlackwell Science Ltd.で出版されたThe Encyclopedia of Molecular Biology, 1994 (ISBN 0-632-02182-9)；およびRobert A. Meyers (編)のVCH Publishers, Inc.で出版されたMolecular Biology and Biotechnology: a Comprehensive Desk Reference, 1995 (ISBN 1-56081-569-8)に見出され得る。本明細書に記載されるものと類似しているか、または同等の方法および物質は、本開示の実施または試験に用いられ得る。物質、方法および実施例は例証するのみであり、制限する意図はない。
【００４３】
低酸素：酸素の需要が供給を上回る状態。
【００４４】
アジュバント：別の薬剤（化学化合物または抗原性エピトープ等）の1つ以上の免疫刺激特性を増強または増大させる任意の薬剤。アジュバントは、細胞レベルまたは体液レベルでの免疫応答を増大させ、刺激し、活性化し、増強し、または調節する。
【００４５】
例えば、アジュバントのワクチンへの添加は、被験体の細胞などの細胞の免疫応答を向上させる。免疫応答を起こすためにワクチンをあまり必要としないようにするためにアジュバントが用いられ得る。アジュバントの1つの特定の非限定例は、イムノゲン、乳化剤およびミコバクテリアを含む油中水型エマルジョンのフロイントアジュバントである。古典的な薬剤（フロイントアジュバント、BCG、ざ瘡菌）は、細菌抗原を含む。いくつかのアジュバントは内因性（例えばヒスタミン、インターフェロン、移入因子、タフトシン、インターロイキン-1およびインターロイキン-12）である。アジュバントの作用様式は非特異的であり、種々の抗原に対して増加した免疫応答をもたらし得るか、または抗原特異的であり、すなわち狭い抗原群に対して制限された型の免疫応答に作用し得る。多くの生物的応答修飾物質の治療効能は、その抗原特異的免疫アジュバント（immunoadjuvanticity）と関連がある。
【００４６】
薬剤：任意のポリペプチド、化合物、小分子、有機化合物、塩、ポリヌクレオチド、ペプチド模倣物、または目的の他の分子。
【００４７】
動物：生存する多細胞脊椎生物、例えば哺乳類および鳥類を含むカテゴリー。用語哺乳類は、ヒトおよび非ヒト哺乳類の両方を含む。同様に、用語「被験体」はヒトおよび家畜被験体の両方を含む。
【００４８】
アンチセンス、センスおよびアンチジーン（antigene）：二本鎖DNA（dsDNA）は、プラス鎖とよばれる5’->3’鎖、およびマイナス鎖とよばれる3’->5’鎖（逆補完物）の二本鎖を有する。RNAポリメラーゼは核酸を5’->3’方向に付加するために、DNAのマイナス鎖は転写の間RNAに対する鋳型としての機能を果たす。したがって、形成されたRNAは、マイナス鎖に対して相補的配列を有し、プラス鎖に対して（UがTで置換されること以外）同一配列を有する。アンチセンス分子は、RNAもしくはDNAのプラス鎖のいずれかに特異的にハイブリダイズし得るか、または特異的に相補的である分子である。センス分子は、DNAのマイナス鎖に特異的にハイブリダイズし得るか、または特異的に相補的である分子である。アンチジーン分子は、dsDNA標的に指向されるアンチセンス分子またはセンス分子のいずれかである。
【００４９】
アンチセンスオリゴヌクレオチド：少なくとも約10、12、15、20、30または50ヌクレオチドなどの少なくとも約8ヌクレオチドの配列、ここで該配列は、形質転換ベクターのプロモーター配列と比較して逆方向に配置される遺伝子配列（cDNAもしくは遺伝子配列の全部もしくは一部分、またはその逆補完物など）由来である。
【００５０】
自己免疫障害：免疫系が内因性抗原に対して免疫応答（例えばB細胞またはT細胞応答）を生じ、組織に対して必然的な傷害を有する障害。
【００５１】
生物学的試料：適切な生物学的試料は、被験体の細胞から得られるゲノムDNA、RNA（mRNAを含む）、および／またはタンパク質を含む試料を含む。例としては、限定されないが、末梢血、尿、精液、唾液、組織バイオプシー、外科用標本、羊水穿刺試料、血清などの血液派生物および血液分画、ならびに生検材料が挙げられる。
【００５２】
癌：分化の欠失、成長速度の増加、周囲組織の浸潤を有する特徴的な退生を経過して、転移し得る悪性新生物。
【００５３】
cDNA（相補的DNA）：内部非コード部分（イントロン）および転写を決定する調節配列を欠いたDNAの一部分。cDNAは、細胞から抽出されたメッセンジャーRNAからの逆転写により、実験室で合成される。
【００５４】
含む（Comprises）：「含む（including）」を意味する用語。例えば「AまたはBを含む（comprising A or B）」とは、明確に別のことが示されない限り、AまたはB、あるいはAおよびBの両方を含むことを意味する。
【００５５】
サイトカイン：リンパ球など他の細胞の動きに影響を与える細胞によって作られたタンパク質。一態様において、サイトカインは細胞輸送に影響を与える分子であるケモカインである。
【００５６】
DNA：デオキシリボ核酸。DNAは、ほとんどの生命体の遺伝物質（いくつかのウイルスはリボ核酸(RNA)を含む遺伝子を有する）を含む長鎖ポリマーである。DNAポリマーにおける繰り返し単位は、4つの異なるヌクレオチドであり、その各々は、リン酸基が結合するデオキシリボース糖に結合した4つの塩基、アデニン、グアニン、シトシンおよびチミンのうちの1つを含む。ヌクレオチドのトリプレット（コドンという）は、ポリペプチドの各アミノ酸をコードする。用語コドンはまた、DNA配列が転写されるmRNAの3つのヌクレオチドの対応する（および相補的）配列に対して用いられる。
【００５７】
欠失：共に結合しているいずれかの側上の領域であるDNAの配列の除去。
【００５８】
分化：細胞がより特殊化して生物学的機能を行う過程。分化とは、悪性形質転換した細胞により全体的にまたは部分的に失われる特性である。
【００５９】
エピトープ：抗原決定基。これらは、抗原的、すなわち特定の免疫応答を誘発する分子上の特定の化学基またはペプチド配列である。抗体は特定の抗原エピトープと結合する。
【００６０】
コード：ポリヌクレオチドが、ネイティブの状態または当業者にとって周知の方法で処理されるときにおいて、mRNAおよび／またはポリペプチドもしくはそのフラグメントを生成するために転写および／または翻訳され得る場合、ポリペプチドを「コードする」という。アンチセンス鎖はかかる核酸の補完物であり、コードされる配列はそれ由来であり得る。
【００６１】
過敏症：再曝露の際に症候性反応を導く無害性抗原に対する免疫応答を過敏性反応とよぶ。これらは、繰り返し起こる場合、過敏性疾患を引き起こし得る。抗原に対して高められた状態を過敏症とよぶ。過敏反応は、機構：タイプI過敏反応は、肥満細胞を誘発するIgE抗体を含む；タイプII過敏反応は、細胞表面またはマトリクス抗原に対するIgG抗体を含む；タイプIII過敏反応は、抗原：抗体複合体を含む；およびタイプIV過敏反応は、T細胞媒介である、によって分類される。
【００６２】
免疫細胞：前炎症性サイトカインを生成する細胞など、ならびに組織損傷および／または疾患病因と関連する細胞など、宿主防御機構と関連する任意の細胞。例としては、限定されないが、T細胞、B細胞、ナチュラルキラー細胞、好中球、肥満細胞、マクロファージ、抗原提示細胞、好塩基球および好酸球が挙げられる。
【００６３】
免疫応答：刺激に対する、B細胞またはT細胞などの免疫系細胞の応答。一態様において、該反応は特定の抗原に対して特異的である（「抗原特異的反応」）。一態様において、免疫応答はTh1、Th2、またはTh3応答などのT細胞応答である。
【００６４】
炎症：組織に対する損傷が生じるとき、損傷に対する身体反応は通常炎症である。損傷は、外傷、血液供給の欠乏、出血、自己免疫攻撃、移植された外因組織または感染によるものであり得る。身体によるこの全身反応は、免疫系の多くの成分（例えばIL-1およびTNF）の放出、損傷部位に対する細胞の誘引、体液の放出による組織の腫脹および他のプロセスを含む。
【００６５】
傷害に対する組織の反応である炎症は、急性および慢性と名付けられた2つの期に分けられる。急性期において、炎症は、増大した血液の流れおよび血管透過性、体液の蓄積、ならびに白血球および炎症性メディエイタ（例えばサイトカイン）の蓄積で特徴付けられる。亜急性／慢性期において、炎症は、組織傷害の部位に存在する病原体（１つまたは複数）に対する特定の体液性および細胞性免疫応答の発現で特徴付けられる。急性および慢性炎症プロセスの両方の間で、種々の可溶性因子が、細胞接着分子の増加した発現および化学誘引による白血球増加に関連する。これらの多くの可溶性メディエイタは、レジデント細胞（線維芽細胞、内皮細胞、組織マクロファージおよび肥満細胞など）および新規補充炎症性細胞（単球、リンパ球、好中球および好酸球など）の両方の活性化を調節する。
【００６６】
白血球：感染性生物および異物に対して身体を防御することに関連する、「白細胞」ともよばれる血液中の細胞。白血球は骨髄中で生成される。白血球の5つの主要型が存在し、2つの主要群：多形核白血球（好中球、好酸球、好塩基球）および単核白血球（単球およびリンパ球）にさらに分けられる。感染が存在するとき、白血球の産生が増加する。
【００６７】
リンパ球：身体の免疫防御に関連する白血球の一種。リンパ球の2つの主要型：B細胞およびT細胞が存在する。
【００６８】
哺乳動物：この用語は、ヒトおよび非ヒト哺乳動物の両方を含む。同様に、用語「被験体」はヒトおよび家畜被験体の両方を含む。
【００６９】
モノクローナル抗体：Bリンパ球の単一クローンによって作られた抗体。モノクローナル抗体は当業者に公知の方法、例えば骨髄腫細胞と免疫脾臓細胞との融合からハイブリッドな抗体形成細胞を作り出すことによって作られる。
【００７０】
ナチュラルキラー（NK）細胞：これらは特定の腫瘍細胞を殺す、巨大で通常顆粒状の非T、非Bリンパ球である。NK細胞は、ウイルスおよび他の細胞内病原体に対する先天免疫において、ならびに抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ADCC）において重要である。
【００７１】
新生物：過度な細胞分裂から生じ、制御されずに進行性であり、腫瘍とも呼ばれる異常な塊の組織。新生物は良性(begin)（浸潤性でなく癌性でもない）または悪性（侵襲性）であり得る。
【００７２】
核酸：単鎖形態または二本鎖形態のいずれかのデオキシリボヌクレオチドポリマーまたはリボヌクレオチドポリマーは、別に限定されない場合、天然ヌクレオチドと同様な様式で核酸とハイブリダイズする公知の天然ヌクレオチドのアナログを包含する。
【００７３】
オリゴヌクレオチド：約200ヌクレオチド塩基長までの鎖状ポリヌクレオチド配列、例えば、少なくとも6ヌクレオチド、例えば、少なくとも15、25、50、75、100または200でさえのヌクレオチド長であるポリヌクレオチド（DNAまたはRNA等）。
【００７４】
薬剤：被験体または細胞に適宜に投与される場合に所望の治療効果または予防効果を誘導し得る化学化合物または組成物。「インキュベートする」は、薬剤が細胞と反応するための十分な時間を含む。「接触する」は、固形形態または液体形態の薬剤を細胞とインキュベートすることを含む。
【００７５】
薬学的に許容され得る担体：本開示に有用な薬学的に許容され得る担体は慣例的である。E. W. Martin, Mack Publishing Co., Easton, PA, 第15版（1975）によるRemington's Pharmaceutical Sciencesはアデノシンレセプターモジュレーターの医薬送達に適切な組成物および製剤を記載する。
【００７６】
一般に、担体の性質は、使用される特定の投与の様式に依存する。例えば、非経口製剤は通常、水、生理学的食塩水、平衡化塩溶液、水性デキストロース、グリセロール等のような薬学的におよび生理学的に許容され得る液体をビヒクルとして含む注射可能な液体を含む。固形組成物（例えば、粉末、丸剤、錠剤、またはカプセル形態）について、従来の非毒性固形担体としては、例えば医薬等級のマンニトール、ラクトース、スターチ、またはステアリン酸マグネシウムが挙げられ得る。生物学的に中性な担体に加えて、投与される医薬組成物は、湿潤剤または乳剤、防腐剤、およびpH緩衝剤等、例えば酢酸ナトリウムまたはモノラウリン酸ソルビタンのような少量の非毒性補助物質を含み得る。
【００７７】
ポリペプチド：長さまたは翻訳後修飾（例えばグリコシル化またはリン酸化）と関係のない、任意のアミノ酸鎖。
【００７８】
疾患の予防または処置：疾患を「予防する」とは、例えば、疾患への疾患素因を有することが公知な人間において、疾患の十分な発現を阻害または減少することをいう。公知の疾患素因を有する人間の例は、家族に糖尿病の病歴を有する誰か、または被験体を狼瘡もしくは慢性関節リウマチ等の状態に罹患しやすくする因子に曝露されている誰かである。「処置」とは、発現し始めた後に疾患または病理学的状態の徴候または症状を緩和する治療介入のことをいう。
【００７９】
精製：用語精製は絶対的な純度を要求しない；むしろ関連用語として意図される。従って、例えば、精製ペプチドまたは核酸調製物は、細胞内の天然環境にあるペプチドまたは核酸よりも豊富なペプチドまたは核酸である。好ましくは、タンパク質または核酸が調製物の全ペプチド含量または核酸含量の少なくとも50％を示すように、調製物は精製される。
【００８０】
レセプター：特定の物質の選択的結合および結合を伴う特定の生理学的効果を特徴とする細胞内または細胞表面上の分子構造、例えば、ペプチドホルモン、神経伝達物質、免疫グロブリン、低分子のための細胞表面レセプター、およびステロイドホルモンのための細胞質レセプター。アデノシンレセプターはアデノシンのための細胞表面レセプターであり、限定されないがA2レセプターまたはA3レセプターを含む。
【００８１】
リボザイム：リボザイムは大いに特異的なエンドリボヌクレアーゼ活性を有する合成RNA分子である。リボザイムの生成および使用は、Cechの米国特許第4,987,071号およびHaselhoffの米国特許第5,543,508号に開示される。アンチセンスRNA内のリボザイム配列の含入は、RNA切断活性をアンチセンスRNAに付与するために使用され得、アンチセンスRNAに結合する内在性mRNA分子が切断され、次に内在性遺伝子発現の高いアンチセンス阻害となる。
【００８２】
特異的な結合剤：定義される標的にのみ実質的に結合する薬剤。従って抗体または抗体断片特異的結合剤は定義される抗体または抗体断片、または融合タンパク質等のタンパク質内の抗体領域のみに実質的に結合する。本明細書で使用される場合、用語「アデノシンレセプター特異的結合剤」は、抗アデノシンレセプター抗体（およびその機能性抗体断片）ならびにアデノシンレセプターのみに実質的に結合する他の薬剤（潜在的な治療剤等）を含む。
【００８３】
HarlowおよびLane(Antibodies, A Laboratory Manual, CSHL, New York, 1988)を含む多くの教科書に記載される標準の分子手順を用いて、抗体は生成され得る。特定の薬剤が標的のタンパク質またはペプチドのみに実質的に結合するという決定は、慣用の手順を使用または適合することによって容易になされ得る。1つの適切なインビトロアッセイは、ウエスタンブロット手順を使用する（Harlow and Lane, Antibodies, A Laboratory Manual, CSHL, New York, 1988）。
【００８４】
抗体のより短い断片は特異的な結合剤としても働き得る。例えば、アデノシンレセプターに結合するFAb、Fv、および単鎖Fv(SCFv)は、アデノシンレセプター特異的結合剤である。
【００８５】
被験体：生きた多細胞脊椎動物生物、ヒトおよび非ヒト哺乳動物の両方を含むカテゴリー。
【００８６】
T細胞；免疫応答に関わる白血球。T細胞としては、限定されないが、CD4+T細胞およびCD8+T細胞が挙げられる。CD4+Tリンパ球は、その表面上に「分化４のクラスター」（CD4）として公知のマーカーを有する免疫細胞である。ヘルパーT細胞としても公知のこれらの細胞は、抗体反応およびキラーT細胞応答を含む、免疫応答を調節するのに役立つ。CD8+T細胞は、「分化８のクラスター」（CD8）マーカーを有する。1つの態様において、CD8T細胞は細胞傷害性Tリンパ球である。別の態様において、CD8細胞はサプレッサーT細胞である。
【００８７】
標的配列：治療上有効なオリゴヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドアナログへのハイブリダイゼーションの際に、ssDNA、dsDNAまたはRNAの一部は、アデノシンレセプター遺伝子発現のような遺伝子発現の阻害となる。アンチセンス分子またはセンス分子がdsDNAの一部を標的とするために使用され得るのは、両方がdsDNAの一部の発現に干渉するからである。アンチセンス分子は、プラス鎖に結合し得、センス分子はマイナス鎖に結合し得る。従って、標的配列はssDNA、dsDNAおよびRNAであり得る。
【００８８】
治療上有効量：処置されている被験体において所望な効果を達成するのに十分な薬剤または組成物の量。例えば、これは、被験体において免疫細胞の活性を増大させ、かつ／または免疫応答を高めるのに必要な量であり得る。1つの例において、ウイルス複製、真菌複製または細菌複製を阻害するか、あるいはウイルス感染、真菌感染、または細菌感染の外見症状を測定可能に変更する量である。別の例において、さらなる腫瘍増殖を減少または予防する量である。被験体に投与される場合、標的組織濃度（例えば、リンパ球における）を達成し、インビトロでウイルス複製の阻害または腫瘍細胞の減少を達成することが示された用量が一般に使用される。
【００８９】
治療上有効な用量：進行を予防するために、または疾患の退行を生じるために十分な用量、例えば、腫瘍の体積またはサイズを減少するのに十分な用量。別の例において、痛みまたは腫大等の疾患によって生じる症状を緩和し得る量である。
【００９０】
治療上有効なアデノシンレセプターオリゴヌクレオチドおよびオリゴヌクレオチドアナログ：アデノシンレセプターの発現を阻害または減少する能力を特徴とする。以下に記載される場合、完全な阻害は治療有効性に必要ではない。治療上有効なオリゴヌクレオチドは、アデノシンレセプターの発現を阻害または減少する能力を特徴とする。阻害は、オリゴヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドアナログの非存在下でアデノシンレセプター生成と比較した場合に観察されるアデノシンレセプター発現の減少である。例えば、オリゴヌクレオチドは、アデノシンレセプターの発現を少なくとも15％以上、30％以上、40％以上、50％以上、60％以上または70％以上阻害し得、さらに、有効であると考えられ得る。
【００９１】
有効量のオリゴヌクレオチドおよびオリゴヌクレオチドアナログは、アデノシンレセプターコード化核酸配列に十分に相補性であることをさらに特徴とする。本明細書で記載される場合、十分な相補性とは、有効なオリゴヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドアナログは、アデノシンレセプターの発現を特異的に阻害し得、アデノシンレセプター以外の遺伝子の発現を有意に変更し得ないことを意味する。
【００９２】
形質導入および形質転換：細胞に核酸を移入する場合にウイルスまたはベクターは細胞を「形質導入」する。核酸の細胞ゲノムへの取り込みによるか、またはエピソーム複製によるかのいずれかで、DNAが細胞によって安定的に複製される場合、細胞に形質導入される核酸によって細胞は「形質転換」される。本明細書で使用される場合、用語形質転換は、ウイルスベクターを用いるトランスフェクション、プラスミドベクターを用いる形質転換、およびエレクトロポレーション、リポフェクション、および粒子銃加速による裸のDNAの導入を含む、核酸分子がかかる細胞に導入され得る全ての技術を包含する。
【００９３】
処置：最初の感染の予防阻害、およびウイルスを伴う感染のような自然過程の処置されない疾患プロセスを変更する治療介入の両方のことをいう。
【００９４】
腫瘍：過度の細胞分裂から生じ、制御されずに進行性であり、新生物とも呼ばれる異常な塊の組織。腫瘍は良性（浸潤性でなく癌性でもない）または悪性（侵襲性）であり得る。
【００９５】
ワクチン：病原への適合免疫を誘導するために被験体に投与される、病原の死んだ形態もしくは減衰した（非病原）形態、または病原から単離された抗原。
【００９６】
ベクター：宿主細胞に導入される核酸分子、それによって形質転換される宿主細胞を生成する。ベクターは、宿主細胞で複製することを可能にする核酸配列、複製開始点等を含み得る。ベクターはまた、1つ以上の選択可能なマーカー遺伝子および当該分野で公知の他の遺伝子エレメントを含み得る。用語「ベクター」は、アデノウイルス、アデノ関連ウイルス、ワクシニア、およびレトロウイルスベクターのようなウイルスベクターを含む。
【００９７】
多細菌感染および敗血症モデルの研究において到達した結論は、この特定のモデルを超えて、炎症化合物と共に他の主要な疾患の病原を含むことに到達することが当業者に認められよう。本発明の特定の態様が図面によって示され、本発明の限定ではないことが理解されよう。本発明の主な特徴は、本発明の範囲から逸脱することなく種々の態様に用いられ得る。
【００９８】
本発明は、進行中の炎症疾患を有する哺乳動物における酸素療法の方法に関する。該方法は、炎症の悪化および組織損傷を予防する治療上有効量の生物活性剤の投与を含む。本発明は、酸素の副作用を減少することによって酸素療法を必要とする患者の処置方法を提供する。
【００９９】
酸素療法中の抗炎症経路を維持する必要は、本発明より前に新規であり、この主要な臨床手続き（酸素投与）は前炎症であると考えられない。なお、かかる投与は、医原性疾患（医学的に治癒誘導される疾患）のまさしく定義である。本発明の実施において、医原性疾患が予防される。
【０１００】
炎症した局所組織環境は、低酸素であり、組織損傷関連低酸素は、細胞外アデノシンの上昇したレベルの蓄積に伝導性がある。インビボでの活性化免疫細胞のダウンレギュレーションにおける細胞外アデノシンおよびGsタンパク質共役型A2Aアデノシンレセプターの重要な役割について最近提供された遺伝的証拠（Ohta A and Sitkovsky M. Role of G-protein-coupled adenosine receptors in downregulation of inflammation and protection from tissue damage. Nature, 414: 916-920, 2001）は、炎症誘導局所組織損傷関連低酸素および酸素センサーが免疫細胞を脱活性化するために過度の組織損傷の一次シグナルとして働き得ることを示唆した。
【０１０１】
吸引、外傷、および出血性ショックを含む多くの臨床状態の後に、肺機能不全および続く肺不全をもたらす肺性および全身性感染性ならびに敗血性合併症がしばしば続く。例えば、急性肺損傷（ALI）またはそのより重篤な形態である、急性呼吸促迫症候群（ARDS）は、およそ130.000件の症例の頻度、および米国だけで1年当たり50.000件を超えるARDSに由来する死亡を生ずる。
【０１０２】
挿管法および機械的換気は、重篤な肺炎症を患うこれらの患者の不十分な肺酸素送達能力を阻止するように、最も広く使用されている予防的および治療的臨床介入の1つを表す。大半の患者は酸素療法に十分に応答し、酸素毒性が集中治療薬において稀に発生するが、有害な肺炎症を促進し得、この疾患プロセスを悪化させる場合の酸素療法は、ARDS患者において次善であり得るという可能性がなお残る。肺炎症の大きさおよび継続期間がARDS患者の最終結果を決定するために示されたので、炎症プロセスに対する酸素のありうる有害な影響を注意深く評価することが重要である。
【０１０３】
出願人らは、酸素療法を受ける患者の条件を模倣する条件での酸素への曝露が、進行中の炎症を増大させ、インビボでの炎症組織損傷を悪化させる仮説を立てた。出願人らは、これが細菌感染および敗血症の臨床的に関連するモデルにおいて疾患の過程に影響を与えることを予測した。この調査を可能とするために、出願人らは多細菌肺感染のマウスモデルを適合した。
【０１０４】
出願人らは、グラム陽性細菌およびグラム陰性細菌由来の毒素の組み合わせ吸引にマウスを供した。多細菌肺感染のこのモデルにおいて、脂質多糖（LPS）およびスタフィロコッカスエンテロトキシンＢ（SEB）の両方の気管内（i.t.）注射は、毒性を強力に増強する。これらのアッセイは治療的酸素添加を模倣する条件のマウスにおいて悪化した肺損傷の予測を確認し、これは異なるインビボおよびエクスビボアッセイにおいて炎症肺損傷の劇的な増加において反映される。結果は、以前に認められない酸素療法の、肺組織損傷および疾患病原を悪化させる前炎症効果を明らかにした。出願人らは、酸素療法を抗炎症剤の使用と組み合わせることでこの医原性合併症に対する治療対抗手段を見出した。
【０１０５】
実施例：
実施例１（図１）：
急性炎症肺損傷を有するマウスの酸素添加の際に死亡率が増加した。モデル多細菌感染に対して、マウスにSEBおよびLPSを気管内（i.t.）注射し、21％または100％酸素に48〜60時間曝露した。時間依存生存曲線の決定は、緩和されない重篤な呼吸促迫の考慮によって禁じられ、群間の差異が明らかになった直後に実験の終了を必要とした。炎症肺を有する酸素添加動物の大半が死亡した場合、群間の主要な差異は毒素の気管内注射後48〜60時間内に生じたが、炎症肺を有する非酸素添加マウスおよび明らかに病気コントロールマウスはなお生存した。
【０１０６】
21％周囲酸素圧に置かれた炎症肺を有するコントロールマウス間で観察されるよりも、5倍を超える炎症肺を有するマウスが100％酸素への曝露後に死亡した（図１）。これは肺胞−毛細血管透過性の非常により著しい増加、ならびに気管支肺胞洗浄（BAL）による肺胞空間から回収したタンパク質の量の増加によって、および以前に酸素に曝露されたマウスが正常雰囲気に戻される場合の動脈pO2値の減少によって証明されるような肺ガス交換の重篤な全体障害によってさらに確認された（図２Ａ）。100％酸素のみへのマウスの曝露（毒素吸入を有さない）はBAL液体タンパク質のわずかな蓄積を誘導したが、その影響の大きさは、肺血管透過性の劇的な増加ならびに毒素および酸素添加の両方を使用した場合の肺ガス交換の障害の観察を説明できなかった（図２Ａ）。
【０１０７】
21％酸素を吸い込む動物と比較して、患者においてかなり安全と考えられた濃度である60％酸素にマウスが曝露された場合に炎症肺損傷の悪化も観察され、これは肺胞空間の滲出タンパク質の蓄積および損なわれた動脈血液酸素圧において反映されている（図２Ｂ）。しかしながら、毒素注射マウスの60％酸素への曝露は、使用された短期アッセイにおいて死亡とならなかった。
【０１０８】
これらの観察は酸素添加による炎症肺損傷の悪化の予測を確認したが、治療対抗手段の開発は出願人らの基礎となる仮説の妥当性の試験および酸素のこれらの前炎症影響の分子メカニズムの決定的な同定を必要とする。
【０１０９】
酸素添加の観察される影響が酸素の直接的な毒素影響によって説明されなかったのは、酸素のこれらの影響が現れるのにより長い時間を要し、従ってこれらの短期実験で観察される劇的な肺損傷を十分に説明しそうにないからである（図１、２Ａ、Ｂ）。
【０１１０】
実施例２（図２）  周囲21％酸素含有雰囲気と比較した場合の100％または60％酸素含有ガス混合へのマウスの曝露後の炎症肺損傷の悪化。
２Ａ）急性肺損傷の誘導の際に100％酸素を吸い込むマウスにおける上昇した肺血管透過性および肺ガス交換の障害。マウスにSEBおよびLPSを気管内注射した後に、動物は21％または100％酸素を吸い込んでいた。48時間後に、肺血管透過性および肺ガス交換を気管支肺胞洗浄によって回収されたタンパク質の量によって、またはマウスが正常雰囲気に戻されて15分後に採られた動脈血液のpO2値を測定することによって決定した。この平衡期間の間、以前に100％酸素に曝露された7匹のマウスのうち3匹が死亡し、動脈血液ガス分析が実施されなかったが、BALタンパク質濃度を直後に測定した。
２Ｂ）臨床的に安全と考えられるより低いレベルの酸素（60％）への曝露の際でさえも急性肺傷害を有するマウスにおける増加した肺血管透過性および肺ガス交換の障害。実験条件は、酸素濃度が60％であることを除いてＡ）と同じであった。
【０１１１】
肺胞−毛細血管透過性の非常により著しい増加、および肺ガス交換の重篤な全体障害は、気管支肺胞洗浄（BAL）による肺胞空間から回収されたタンパク質の量の増加によって、および以前に酸素曝露されたマウスが正常雰囲気に戻された場合の動脈pO2値の減少によって証明された（図２Ａ）。マウスの100％酸素のみ（毒素吸入を有さない）への曝露はBAL液体タンパク質のわずかな蓄積を誘導したが、その影響の大きさは、肺血管透過性の劇的な増加ならびに毒素および酸素添加の両方を用いた場合の肺ガス交換の障害の観察を説明できなかった（図２Ａ）。
【０１１２】
21％酸素を吸い込む動物と比較して患者においてかなり安全と考えられる濃度である60％酸素に曝露された場合に炎症肺損傷の悪化も観察され、これは肺胞空間の滲出タンパク質の蓄積および損なわれた動脈血液酸素圧において反映される（図２Ｂ）。しかしながら、毒素注射マウスの60％酸素への曝露は、使用された短期アッセイにおける死亡とならなかった。
【０１１３】
実施例３（図３）  抗炎症薬の気管内投与は急性肺損傷を有するマウスの酸素添加の際に増加した死亡率から保護し、それによって前炎症副作用のない酸素療法の新しい方法を提供する。抗炎症薬のインビボ投与の方法：抗炎症A2AレセプターアゴニストCGS21680をPBSに溶解し、マウスあたり50μlの全体積中0.1 mg/kg b.w.の気管内注射によって投与した。CGS21680の気管内注射は実験の終了までに8時間ごとに繰り返した。コントロール動物において、CGS21680の溶媒、すなわち、PBSのみを投与した。CGS21680溶液または溶媒は、それぞれ肺損傷の両方のモデルにおいてSEBまたはLPSのいずれかの投与後の15分以内に注射された。
【０１１４】
A2AR選択的アゴニストCGS21680を用いた処置は肺損傷のより重篤な多細菌毒素モデルに応用される場合でさえも効果的であり、高酸素条件下でこのアゴニストのi.t.注射は、酸素添加誘導死から大半のマウスを救出した。死亡率は、コントロール群において、炎症肺損傷を有する酸素添加されたマウスの中で80％であったが、死亡数はA2ARアゴニスト処置酸素添加動物の中で劇的に減少された（図３）。
【０１１５】
選択的A2ARアゴニストCGS21680のi.t.注射はエンドトキシン処置マウスにおいて肺損傷を有意に阻害し、i)有意に減少されたPMNの蓄積、ii)反応性酸素代謝物の減少された生成、iii)肺血管透過性のより低い著しい増加、およびiv)改善された肺ガス交換をもたらしたことを見出した（データは示されない）。A2ARアゴニスト処置マウスの組織学的調査は、アゴニストCGS21680の治療効果がマウスの低酸素への曝露の効果と類似したことを明らかにした。CGS21680処置は肺PMN壊死巣分離の阻害となり、肺損傷スコア（示されない）において4倍の減少によって評価されるような肺組織損傷の有意な減少が続いた。
【０１１６】
従って、外因的に添加された選択的で、合成的A2ARアゴニストは酸素添加および炎症の肺において内在的に形成されるアデノシンの損失を補い、それによって肺損傷を減少し、死からマウスを救出した。重要なコントロールにおいて、WTマウスを処置するために使用された用量レジメンのCGS21680が選択的であると証明されたのは、A2AR遺伝子欠損マウスの肺炎症に影響を与えなかったからである（データは示されない）。
【０１１７】
本発明はその好ましい態様への参照と共に特に示され、記載されているが、形態および詳細における種々の変化が添付の特許請求の範囲に包含される本発明の範囲から逸脱することなくなされ得ることが当業者に理解されよう。
【図面の簡単な説明】
【０１１８】
【図１】図１は、急性炎症性肺傷害を有するマウスの酸素添加時に増加した死亡率を示す。
【図２Ａ】図２Aは、周囲の21%酸素を含有する雰囲気と比較して、100%または60%酸素含有ガス混合物へのマウスの曝露後、炎症性肺傷害の悪化を示す。
【図２Ｂ】図２Bは、周囲の21%酸素を含有する雰囲気と比較して、100%または60%酸素含有ガス混合物へのマウスの曝露後、炎症性肺傷害の悪化を示す。
【図３】図３は、急性肺傷害を有するマウスの酸素添加時に増加した死亡率から保護する抗炎症薬の気管内投与を示す。
【図１】
2008530008.tif 000002
【図２Ａ】
2008530008.tif 000003
【図２Ｂ】
2008530008.tif 000004
【図３】
2008530008.tif 000005
【手続補正書】
【提出日】平成19年10月10日(2007.10.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
リスクのある被験体をスクリーニングする工程；
リスクのある被験体を同定する工程；
同定されたリスクのある被験体を増加された量の酸素に曝露する前に、リスクのある被験体に抗炎症剤を投与する工程を含み、
該抗炎症剤がないときにリスクのある被験体の該増加された量の酸素への応答と比較して、リスクのある被験体の該増加された量の酸素への応答が調節される、リスクのある被験体において増加された酸素レベルへの応答を調節する方法に使用するための抗炎症剤。
【請求項２】
増加された量の酸素が周囲酸素レベルより高い、請求項1記載の抗炎症剤。
【請求項３】
増加された量の酸素が吸入投与される、請求項１記載の抗炎症剤。
【請求項４】
増加された量の酸素が周囲より高い酸素レベルを有するチャンバまたは部屋に患者を置くことによって投与される、請求項１記載の抗炎症剤。
【請求項５】
増加された量の酸素が周囲より高い酸素レベルを有する高圧酸素中に患者を置くことによって投与される、請求項１記載の抗炎症剤。
【請求項６】
増加された量の酸素が酸素飽和血液または合成血液成分を含む血液産物を患者に静脈注射することによって投与される、請求項１記載の抗炎症剤。
【請求項７】
リスクのある被験体が進行中の炎症の状態にある、請求項１記載の抗炎症剤。
【請求項８】
リスクのある被験体が該進行中の炎症がない時に増加された酸素レベルに正常に応答する状態を有する、請求項７記載の抗炎症剤。
【請求項９】
該抗炎症剤がリスクのある被験体に対して該増加された酸素量の有害な影響を阻害するのに十分な用量および経路で投与される、請求項１記載の抗炎症剤。
【請求項１０】
抗炎症剤が被験体において増加された酸素レベルの有害な影響を阻害するのに十分な用量および経路で投与されるアデノシンレセプターアゴニストである、請求項１記載の抗炎症剤。
【請求項１１】
抗炎症剤が、吸入されるアデノシン5'-一リン酸(AMP)、肥満細胞安定剤、ヒスタミンH1レセプターアンタゴニスト、選択的システイニルロイコトリエン-1レセプターアンタゴニスト、5-リポキシゲナーゼおよびシクロオキシゲナーゼのインヒビター、先天性免疫系細胞における膜貫通シグナル伝達経路のインヒビター、cAMP媒介免疫抑制経路の活性剤およびcAMP分解のインヒビターからなる群より選択される、請求項１記載の抗炎症剤。
【請求項１２】
抗炎症剤が、ナプロキセン、スリンダク、トルメチン、ケトロラク、セレコキシブ、イブプロフェン、ジクロフェナク、アセチルサリチル酸、ナブメトン、エトドラク、インドメタシン、ピロキシカム、cox-2インヒビター、ケトプロフェン、抗血小板薬、サルサラート、バルデコキシブ、オキサプロジン、ジフルニサル、フルルビプロフェン、コルチコステロイド、およびロイコトリエン修飾物質からなる群より選択される、請求項１記載の抗炎症剤。
【請求項１３】
リスクのある被験体が免疫炎症状態を患っているか、または免疫炎症状態に脆弱である、請求項１記載の抗炎症剤。
【請求項１４】
免疫炎症状態が、喘息、成人呼吸促進症候群(ARDS)、炎症肺症候群、虚血性再灌流障害、全身性狼瘡紅斑、炎症腸疾患、クローン病、COPD、潰瘍性大腸炎、多発性硬化症、インシュリン依存性真性糖尿病、自己免疫関節炎、慢性関節リウマチ、若年性関節リウマチ、乾癬性関節炎、炎症肺症候群、尋常性天疱瘡、特発性血小板減少性紫斑病、自己免疫髄膜炎、重症筋無力症、自己免疫甲状腺炎、皮膚炎、アトピー性皮膚炎、湿疹性皮膚炎、乾癬、シェーグレン症候群、シェーグレン症候群に続く乾性角結膜炎、円形脱毛症、節足動物咬傷反応によるアレルギー反応、アフタ性潰瘍、虹彩炎、結膜炎、角結膜炎、皮膚エリテマトーデス、強皮症、膣炎、直腸炎、薬疹、スティーヴンス-ジョンソン症候群、らい菌逆反応、らい性結節性紅斑、自己免疫ブドウ膜炎、アレルギー性脳脊髄炎、再生不良性貧血、赤芽球ろう、特発性血小板減少症、多発性軟骨炎、ヴェーゲナー肉芽腫症、慢性能動肝炎、グレーブス眼症、原発性胆汁性肝硬変、後部ブドウ膜炎、細菌感染、ウイルス感染、マイコプラズマ感染、寄生虫感染、日和見感染、ニューモシスティス感染、サイトメガロウイルス感染、ヘルペスウイルス感染、マイコバクテリウム感染、ヒト免疫不全ウイルス感染、慢性呼吸器疾患、上気道疾患、静脈洞炎、傍静脈洞炎、またはライノウイルス感染もしくはインフルエンザ感染、アレルギー、枯草熱、鼻炎、春季結膜炎、好酸球媒介状態および間質性肺線維症からなる群より選択される、請求項１３記載の抗炎症剤。
【請求項１５】
被験体が急性炎症状態を患っている、請求項１記載の抗炎症剤。
【請求項１６】
被験体が慢性炎症障害を患っている、請求項１記載の抗炎症剤。
【請求項１７】
抗炎症剤および酸素が増加されたレベルの酸素の投与と関連する酸素再結合影響を改善するリスクのある被験体に投与される、請求項１記載の抗炎症剤。
【請求項１８】
アデノシンレセプターアゴニスト；および
酸素を酸素療法に正常に応答する状態を患っている被験体に投与する工程を含み、酸素のみを被験体に投与する場合と比較して被験体の酸素への応答が調節される、被験体においてコルチコステロイドへの応答を調節する方法に使用するためのアデノシンレセプターアゴニスト。
【請求項１９】
アデノシンレセプターアゴニストがA1アゴニスト、A2Aアゴニスト、A2Bアゴニスト、およびA3アゴニストからなる群より選択される、請求項１８記載のアデノシンレセプターアゴニスト。
【請求項２０】
増加されたレベルの酸素に曝露される組織において予め存在する炎症レベルを測定する工程を含み、上昇したレベルの炎症が該組織への増加されたレベルの酸素の導入の際に組織損傷に対する増加された脆弱性の指標である、酸素の導入による組織損傷に対する脆弱性を予測する方法。
【国際調査報告】
2008530008.tif 000006
2008530008.tif 000007