(57)【要約】  本発明は、作用物質として、アルキルホスホコリン及び類似体、アルキル−アルカンジオール−ホスホコリン及び類似体並びに（エーテル）−リゾレシチン及び類似体を、種々の実施形態において含有する新規の医薬品配合物に関する。その際、作用物質は、リポソームの一体成分であって、更にコレステリン及び類似体並びに負電荷担体を含有するものである。該医薬品配合物は、癌の治療及び／又は予防のために、原虫疾患、例えばリーシュマニア症及びアメーバ疾患、ダニ症の治療及び／又は予防のために、かつ節足動物によって引き起こされる疾患の治療及び／又は予防のために、並びに細菌性疾患、例えば腺熱リケッチア症の治療及び／又は予防のために適している。また、制御不能な細胞プロセスを伴う眼疾患にも有利な影響を与えることができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
作用物質として、
ａ）一般式Ｉ：
【化１】
2008517023.tif 000016
［式中、
Ｒ1は、１５〜２６個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和の炭化水素基であり、その際、
Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、それぞれが存在する場合に、それぞれ無関係に、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ6−アルキル基、Ｃ3〜Ｃ6−シクロアルキル基又はＣ2〜Ｃ6−ヒドロキシアルキル基であり、その際、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4の２つは、互いにＣ2〜Ｃ5−アルキレン基を形成してよく、その際、ｎは、２〜６の整数である］で示されるリン脂質化合物を含有するか、又は作用物質として、一般式ＩＩ：
【化２】
2008517023.tif 000017
［式中、
Ｒ11は、１５〜２６個の炭素原子を有する、飽和の、不飽和の又は多不飽和の炭化水素基であり、その際、
Ｒ12及びＲ13は、それぞれ存在する場合に、それぞれ無関係に、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ6−アルキル基又はＣ2〜Ｃ6−ヒドロキシアルキル基であり、その際、ｍは、１又は２の整数である］で示されるリン脂質化合物（環窒素を有するアルキルホスホコリン）を含有するか、又は作用物質として、一般式ＩＩＩ：
【化３】
2008517023.tif 000018
［式中、
ＰIは、
【化４】
2008517023.tif 000019
を表し、かつＰIIは、
【化５】
2008517023.tif 000020
を表す］で示されるリン脂質化合物（アルキルエチレングリコールホスホコリン）を含有するか、又は作用物質として、一般式ＩＶ：
【化６】
2008517023.tif 000021
［式中、
基Ｒ1及びＰI又はＰIIは、相互に交換されてもよく、その際、
Ｒ1、ＰI及びＰIIは、上述の意味に相当し、その際、ｘは、０〜４の整数である］で示されるリン脂質化合物（アルキルアルカンジオールホスホコリン）を含有するか、又は作用物質として、一般式Ｖ：
【化７】
2008517023.tif 000022
［式中、
Ｒ21は、１５〜２６個の炭素原子を有する、飽和の又は一不飽和もしくは多不飽和の炭化水素基であり、その際、
Ｒ22は、Ｃ1〜Ｃ6−アルキル基を意味し、その際、
ＰI及びＰIIは、上述の意味に相当し、その際、基Ｒ21、Ｒ22及びＰIもしくはＰIIは、任意にグリセリン分子中の位置に分布していてよい］で示されるリン脂質化合物（エーテルリゾレシチン）を含有するか、又は作用物質として、一般式ＶＩ：
【化８】
2008517023.tif 000023
［式中、
Ｒ31は、１５〜２６個の炭素原子を有する、飽和又は一不飽和もしくは多不飽和の炭化水素基であり、その際、
ｙ及びｚは、互いに無関係に０〜３の整数であってよいが、ｙ及びｚは、両方とも同時に０となりえず、その際、
ＰI及びＰIIは、上述の意味に相当する］で示されるリン脂質化合物（アルキル置換されたアルカンジオールホスホコリン）を含有するか、又は作用物質として、一般式ＶＩＩ：
【化９】
2008517023.tif 000024
［式中、
Ｒ41は、１５〜２６個の炭素原子を有する、飽和又は一不飽和もしくは多不飽和の炭化水素基であり、その際、
ＰI及びＰIIは、上述の意味を有する］で示されるリン脂質化合物（アルキル−２−メチルプロパンジオール−（１，３）−ホスホコリン）を含有する医薬品調剤であって、該調剤が、更に、コレステリン、７β−ヒドロキシコレステリン及び／又はβ−シトステリンを含む成分ｂ）を含有し、かつ成分ｃ）として負電荷担体を含有し、該担体が、
１６〜３６個の炭素原子を有するカルボン酸であって、有利には飽和の、一不飽和の及び多不飽和の脂肪酸であり、かつ特に有利にはシス−二重結合を有するカルボン酸、又は
胆汁酸の天然物質種からの化合物、又は
アミノ酸と飽和の又は一不飽和もしくは多不飽和であってよい脂肪酸との脂肪酸アミド、又は一般式ＶＩＩＩ：
【化１０】
2008517023.tif 000025
［式中、
Ｒ51は、１５〜２５個の炭素原子を有する炭化水素基である］で示される化合物（ＧＰＥの脂肪酸アミド）
から選択されることを特徴とする医薬品調剤。
【請求項２】
請求項１記載の医薬品調剤であって、該剤がリポソームの形で存在することを特徴とする医薬品調剤。
【請求項３】
請求項１又は２記載の医薬品調剤であって、それが１０〜６０モル％の作用物質ａ）、１０〜６５モル％の化合物ｂ）及び３〜３０モル％の負電荷担体ｃ）を含有することを特徴とする医薬品調剤。
【請求項４】
請求項１から３までのいずれか１項記載の医薬品調剤であって、Ｒ1、Ｒ11、Ｒ21、Ｒ31及び／又はＲ41が、Ｃ15〜Ｃ24−アルキル基、Ｃ15〜Ｃ24−アルケニル基、Ｃ15〜Ｃ24−アルカジエニル基又はＣ15〜Ｃ24−アルカトリエニル基であることを特徴とする医薬品調剤。
【請求項５】
請求項１から４までのいずれか１項記載の医薬品調剤であって、ｎが２であることを特徴とする医薬品調剤。
【請求項６】
請求項１から５までのいずれか１項記載の医薬品調剤であって、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4が、それぞれ存在する場合に、メチル基であることを特徴とする医薬品調剤。
【請求項７】
請求項１から６までのいずれか１項記載の医薬品調剤であって、作用物質として、１−Ｏ−オクタデシル−２−Ｏ−メチル−グリセロ−３−ホスホコリン（ＥＴ１８ＯＣＨ３）を含有することを特徴とする医薬品調剤。
【請求項８】
請求項１から７までのいずれか１項記載の医薬品調剤であって、Ｒ1、Ｒ11、Ｒ21、Ｒ31もしくはＲ41がオレイルであることを特徴とする医薬品調剤。
【請求項９】
請求項１から８までのいずれか１項記載の医薬品調剤であって、負電荷担体が、オレイン酸、リノール酸、ラウリン酸及び／又はパルミチン酸から選択されることを特徴とする医薬品調剤。
【請求項１０】
請求項１から９までのいずれか１項記載の医薬品調剤であって、それが更に薬理学的に適した担持媒体及び／又は希釈剤を含有することを特徴とする医薬品調剤。
【請求項１１】
請求項１から１０までのいずれか１項記載の医薬品調剤であって、成分ａ）、ｂ）及びｃ）が一緒になって１００モル％となることを特徴とする医薬品調剤。
【請求項１２】
請求項１から１１までのいずれか１項記載の医薬品調剤であって、式Ｉの化合物を０．１〜２００マイクロモル／ｇの量で含有することを特徴とする医薬品調剤。
【請求項１３】
請求項１から１２までのいずれか１項記載の医薬品調剤であって、静脈内投与、経口投与又は皮下投与のために適した形で存在し、かつ経口投与の場合に錠剤又はカプセル剤として製剤されることを特徴とする医薬品調剤。
【請求項１４】
請求項１から１３までのいずれか１項記載の医薬品調剤の製造方法において、
ａ）作用物質としての化合物ａ）を、化合物ｂ）及び化合物ｃ）と混合することを特徴とする方法。
【請求項１５】
請求項１から１３までのいずれか１項記載の医薬品調剤を、白血球生成の刺激のための及び／又はダニ症及び節足動物によって引き起こされる疾患の治療及び／又は予防のための又は腫瘍疾患の治療及び／又は予防のための又は原虫疾患、特にリーシュマニア症及び／又はアメーバ疾患の治療及び／又は予防のための又は回虫、特にダニ又はマダニによって引き起こされる疾患、特に疥癬の治療及び／又は予防のための又は細菌性疾患、特に腺熱リケッチア症の治療及び／又は予防のための又は細胞性増殖を伴う眼疾患、特に網膜剥離の治療及び／又は予防のための医薬品の製造のために用いる使用。
【請求項１６】
請求項１から１３までのいずれか１項記載の医薬品調剤を、獣医学用の医薬品調剤の製造のために用いる使用。
【請求項１７】
請求項１６記載の使用であって、腫瘍疾患及び／又は原虫疾患の治療及び／又は予防のための使用。
【請求項１８】
請求項１から１３までのいずれか１項記載の医薬品調剤、特に獣医学で使用するための医薬品調剤であって、コレステリン、７β−ヒドロキシコレステリン及び／又はβ−シトステリンと、負電荷担体ｃ）としてオレイン酸を含有することを特徴とする医薬品調剤。
【請求項１９】
エルホシンを、腫瘍の治療のための薬剤の製造のために用いる使用。
【請求項２０】
放射線治療と組み合わせての請求項１９記載の使用。
【請求項２１】
式ＶＩＩ
【化１１】
2008517023.tif 000026
［式中、
Ｒ41は、１５〜２６個の炭素原子を有する飽和又は一不飽和もしくは多不飽和の炭化水素基であり、かつ
ＰI及びＰIIは、請求項１に示される意味を有する］で示される化合物。
【請求項２２】
請求項１に定義されるアルキル−ホスホコリン化合物の製造方法において、出発材料として、植物油、特にオリーブ油を使用することを特徴とする方法。
【請求項２３】
請求項１から１３までのいずれか１項記載の医薬品調剤であって、それがリポソームのアルキルホスホコリンを含有し、かつ経口投与に予定されていることを特徴とする医薬品調剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、作用物質としてかつ同時にリポソームの一体成分としてアルキルホスホコリン化合物を含有する新規の医薬品配合物に関する。該医薬品配合物は、腫瘍疾患の、迅速増殖性細胞によって引き起こされる疾患の、及び原虫疾患の、特にリーシュマニア症及びアメーバ疾患の、ダニ症の及び節足動物によって引き起こされる疾患の治療及び／又は予防のために特に適している。しかしながらこれらの配合物は、細菌性疾患、例えば腺熱リケッチア症の治療のためにも効果的に引き合いに出すことができる。また制御不能な細胞プロセスを伴う眼疾患も、これらの配合物で効果的に治療することができる。
【０００２】
アルキルホスホコリン化合物は、抗増殖性作用を有し、かつ腫瘍疾患及び原虫疾患に対して良好な作用効果を有する。しかしながらこれらの化合物の大きな欠点は、第一には、特に長鎖炭化水素基を有する該化合物が水溶液中に難溶性を示し、このことが該化合物を静脈内（Ｉ．Ｖ．）投与と、飲用液剤の形での経口投与についても不適なものとすることである。更に、該化合物は経口投与においてしばしば僅かにのみ再吸収されるにすぎないか又は主に再吸収されない。他方では、前記の有効な化合物の多くが少なからぬ副作用を伴うため、該化合物は、長期間にわたり高い用量で投与することができない。毒力の副作用は、大部分が該化合物の溶血性作用に基づくものである。
【０００３】
原虫は、単細胞生物であり、そのうち幾つかは病原性寄生体である。ヒトに取り付く最も頻繁な代表には、プラズモディウム（マラリア）、トリパノソーマ（睡眠病）、アメーバ、例えばエントアメーバ及びアカントアメーバ（アメーバ赤痢、脳炎）及びリーシュマニア（リーシュマニア症）が該当する。
【０００４】
リーシュマニア症としては、リーシュマニア属の原虫によって引き起こされ、かつ吸血昆虫によって伝染される種々の熱帯病が呼称される。目下の所、３種のリーシュマニアの種類が知られており、それらは極めて異なる病相を呈する："カラ−アザール"は脾臓と肝臓の疾患を伴い、"東方腫"は皮膚に炎症反応を伴い、そして"エスプンジア"は上部気管と消化管の粘膜にも症状を伴う。全ての３腫の疾患の経過は、別の原虫疾患の場合と比べてあまり特徴的ではなく、何倍もゆっくりと進行する。潜伏期間は、何週間、それどころか何ヶ月であることがある。治療しない場合には、しばしば非常に高い死亡率が見られる。
【０００５】
リーシュマニア症の治療は、主になおも古くから知られるアンチモン調剤、とりわけスチボグルコネートナトリウム（ペントスタム）をよりどころとしている。その治療は、主に２週間から３週間にわたって実施されるが、その際１週間から２週間にわたって中断せねばならない。それというのも頻繁に副作用はさもなくば危険な規模に達し、不可逆的になることがあるためである。それらの副作用には、胃腸刺激、循環器障害ないしショック及び肝実質障害が含まれる。更なる欠点としては、既にアンチモン耐性のリーシュマニア株が存在することが明らかになった。他の医薬としては、芳香族ジアミジン、ペンタミジン及びアンフォテリシンBが使用される。これらの剤は、しかも大抵はアンチモン化合物と組み合わせてのみ使用され、更に該剤は同様に相当の副作用を有する。
【０００６】
ヒトに取り付きうるアメーバとしては、特に以下に挙げられるものが重要である。エントアメーバ・ヒストリティカ（Ｅｎｔａｍｏｅｂａ ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ）は、ヒトにおいて赤痢及び肝膿瘍を引き起こす。その病原体は、全世界の多くの国々で頻発し、１年間に約３６〜５０百万の疾患事例と４００００〜１１００００の死亡事例を生ずる。生活環は単純で、感染は汚染水又は汚染食品で増殖するシストを介して起こる。シストは胃の中を不変で通過し、大腸に存在する、その際、各シストから多くの栄養型、つまり本来のアメーバが生ずる。後腸において、再び栄養型の一部は包嚢を形成し、こうして耐久形を形成し、人体外で生きながらえる。大腸において、栄養型は一方では大きな障害を引き起こすことなく生存しうるが、それらは腸壁でも成熟しうる。その際、粘膜病変は生じないが、激しい出血を伴う潰瘍が生ずることがある。その結果が出血性下痢であり、赤痢アメーバの枠組みである。アメーバ症の更なる頻繁な症状発現は、アメーバ肝膿瘍である。この場合、アメーバは腸から腸間膜血管をつうじて肝臓に突き進み、そこで大きな膿瘍を生ずる。アメーバ肝膿瘍と同様に腸アメーバ症も、治療しないと肝臓を激しい危険にさらすこととなる。
【０００７】
Ｅ．ヒストリティカの栄養型は、ヒト宿主なくして生きながらえることができる。それに対して、滅多にヒトに深刻な疾患を引き起こし得ない自由生活性アメーバが存在する。アカントアメーバ（例えばアカントアメーバ・カステラニイ（Ａｃａｎｔｈａｍｏｅｂａ ｃａｓｔｅｌｌａｎｉｉ）、アカントアメーバ・クルベルトソニ（Ａｃａｎｔｈａｍｏｅｂａ ｃｕｌｂｅｒｔｓｏｎｉ）は、免疫抑制された場合に慢性肉芽腫症を引き起こすことがあり、更には比較的頻繁にアカントアメーバ角膜炎の事例がコンタクトレンズ着用者で存在する。ナエグレリア・フォウレリ（Ｎａｅｇｌｅｒｉａ ｆｏｗｌｅｒｉ）は、自由生活性のアメーバ鞭毛虫である。それは一般に淡水中に生息し、入浴感染することができる。該寄生体は、鼻と嗅神経を介して脳内に突き進み、そして最急性の髄膜脳炎を引き起こす。アカントアメーバ又はナエグレリアによる髄膜脳炎の事例は、極めて稀であるが、これまでに極めて予後不良となっている。
【０００８】
Ｅ．ヒストリティカ感染に際しての化学治療薬は、これまでニトロイミダゾールであり、第一にメトロニダゾールである。
【０００９】
Ｅ．ヒストリティカは、酸化的リン酸化を有さずに、そのエネルギーを解糖によって獲得する。ピルビン酸がアセチルＣｏＡに酸化される際に、アメーバ中で還元されたフェレドキシンが生じ、フェレドキシンはニトロイミダゾールを還元してニトロソイミダゾールとすることができる。その攻撃的な物質によってアメーバの生体分子は損傷を受ける。ヒトは係る強力な還元性作用物質を有さず、メトロニダゾールをより毒性のニトロソイミダゾール形に変換しない。今までには、メトロニダゾール耐性のＥ．ヒストリティカ株の蔓延に関する確かな報告はまだ存在しない。それでもやはり繰り返し、メトロニダゾール治療が効かなくなるという事例について報告され、かつ研究室では既に部分耐性株が発生され得た。可能性のある耐性形成の場合に、Ｅ．ヒストリティカに対する有効性を有する新規の物質クラスを所有しておくことは非常に重要である。それというのも目下ニトロイミダゾールに代わる満足のいく代替物は存在しないからである。
【００１０】
Ｅ．ヒストリティカに対して、アカントアメーバ及びナエグレリアはミトコンドリアを有し、好気的に生存できる。それらはニトロイミダゾールを還元せず、従ってこれらの化合物は全く効果がない。アカントアメーバは、リファンピシン及びパロモマイシンに対して感受性であり、ナエグレリアはアンフォテリシンＢに対して感受性であるが、それでもやはり少ない特殊な事例において初めて、自由生活性アメーバによる脳炎の治癒が成功しているにすぎない。
【００１１】
ドイツ国出願第Ｐ４１３２３４４．０−４１では、原虫疾患、特にリーシュマニア症の治療に際して経口投与又は局所投与するために適しており、かつ作用物質として一般式：
【化１】
2008517023.tif 000002
［式中、
Ｒ1は、１２〜２０個の炭素原子を有する、飽和もしくは不飽和の炭化水素基であり、
Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、それぞれ無関係に、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ5−アルキル基、Ｃ3〜Ｃ6−シクロアルキル基又はＣ1〜Ｃ5−ヒドロキシアルキル基であり、その際、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4の２つは互いにＣ2〜Ｃ5−アルキレン基を形成でき、前記基は場合により−Ｏ−基、−Ｓ−基又はＮＲ5−基で置換されていてよく、その際、Ｒ5は、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ5−アルキル基、Ｃ3〜Ｃ6−シクロアルキル基又はＣ1〜Ｃ5−ヒドロキシアルキル基である］で示される１もしくはそれ以上の化合物を含有する医薬品の製造方法が開示されている。
【００１２】
前記の一般式の化合物は、経口適用又は局所適用の場合に特に、スチボグルコネートナトリウムよりもかなり高い活性を示した。しかしながらより高い用量ではしばしば副作用、例えば胃腸管の刺激を生じ、これは実験動物において食欲不振とかなりの体重低下がもたされ、ラットでは体重の２５％より高い減少が観察された。
【００１３】
上述の化合物の更なる欠点は、今までに２１個を超える炭素原子の鎖長を有するアルキルホスホコリンの静脈内投与は、その低い水溶性のために不可能であり、かつ２１個以下の炭素原子の鎖長を有するアルキルホスホコリンの静脈内投与は、溶血性作用のため不可能であった。過去には、アルキルホスホコリン含有剤は、静脈内投与のためにリポソーム中に包まれていた。そのリポソームは、ヘキサデシルホスホコリン、コレステリン及びホスファチジルグリセリンからなるか又はヘキサデシルホスホコリン、コレステリン及びホスファチジルポリエチレングリコールから成っていた。前記のリポソームの製造は、しかしながら非常に費用がかかり高価である。それというのも該リポソームは高圧加圧又は類似の方法を必要とし、それに加えて完成製品は、非常に困難にのみ滅菌濾過可能であるにすぎないという欠点を有する。
【００１４】
ＰＣＴ／ＥＰ０１／０３６０９号は、
ａ）式Ｉ
【化２】
2008517023.tif 000003
［式中、
Ｒ1は、１６〜２４個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和の炭化水素基であり、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、それぞれ無関係に、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ5−アルキル基、Ｃ3〜Ｃ6−シクロアルキル基又はＣ1〜Ｃ5−ヒドロキシアルキル基であり、その際、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4の２つは、それぞれＣ2〜Ｃ5−アルキレン基を形成でき、前記基は場合により−Ｏ−基、−Ｓ−基又はＮＲ5−基で置換されていてよく、その際、Ｒ5は、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ5−アルキル基、Ｃ3〜Ｃ6−シクロアルキル基又はＣ1〜Ｃ5−ヒドロキシアルキル基であり、ｎは、２〜６の整数である］で示されるリン脂質化合物を作用物質として３０〜６０モル％まで、
ｂ）コレステリン及び／又はコレステリン誘導体を２５〜６５モル％まで、及び
ｃ）少なくとも１つのオレイル基を有するホスファチジルモノグリセリン又はホスファチジルオリゴグリセリンを５〜１５質量％までと
その際、ａ）、ｂ）及びｃ）が全体で１００モル％となり、かつ
ｄ）２〜４個の炭素原子を有し、場合により水を含有する水混和可能な生理学的に許容されるアルコール、並びに場合により通常の医薬品助剤及び／又は作用物質からなり、その際、それらの成分が水中に分散された複合体として存在する混合物である医薬品配合物を記載している。
【００１５】
前記の配合物によって、上述の欠点の幾つかは克服される。
【００１６】
ＰＣＴ／ＥＰ０２／１０８８２号は、
ａ）作用物質として、一般式Ｉ：
【化３】
2008517023.tif 000004
［式中、
Ｒ1は、１５〜２４個の炭素原子、特に１６〜２４個の炭素原子を有する、飽和もしくは不飽和の、特に一不飽和もしくは多不飽和の炭化水素基であり、前記基は、場合により１もしくはそれ以上の、Ｏ、Ｎ又はＳから選択されるヘテロ原子を有してよく、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、それぞれ無関係に、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ5−アルキル基、Ｃ3〜Ｃ6−シクロアルキル基又はＣ1〜Ｃ5−ヒドロキシアルキル基であり、その際、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4の２つは、互いにＣ2〜Ｃ5−アルキレン基を形成してよく、前記基は、場合により−Ｏ−基、−Ｓ−基又はＮＲ5−基で置換されていてよく、その際、Ｒ5は、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ5−アルキル基、Ｃ3〜Ｃ6−シクロアルキル基又はＣ1〜Ｃ5−ヒドロキシアルキル基であり、ｎは、２〜６の整数である］で示されるリン脂質化合物を３０〜６０モル％まで
ｂ）コレステリンを１０〜６５モル％まで、特に２５〜６５モル％まで、及び
ｃ）コレステリルホスホモノグリセリン、コレステリルホスホオリゴグリセリン、アルキルホスホグリセリン、アルキルホスホオリゴグリセリン、アルキルホスホグリコール、アルキルホスホプロパンジオール−（１，３）及び／又はアルキルホスホプロパンジオール−（１，２）を３〜３０モル％まで、特に５〜１５モル％まで
含有する医薬品調剤を記載している。
【００１７】
それにもかかわらず、特にまた発生頻度に基づいて、かつそれに関連する上述の疾患の重大性に基づいて、更に前記の疾患の治療及び／又は予防のために効果的に使用できる医薬品調剤に大きな要求がある。
【００１８】
更に、動物、特にイヌの使用に適した配合物に大きい要求がある。ヒトで使用するために開発された配合物は、しばしば動物、特にイヌでは使用できない。それというのも該配合物は主により敏感に作用し、しばしば不所望な副作用が治療を難しくするか又は不可能にするからである。
【００１９】
しかしながら獣医学分野には、医薬品の製造費用及び開発費用も特に重要である。
【００２０】
従って本発明の課題は、上述の疾患の治療及び／又は予防のために効果的に使用することができ、かつ特にヒトの治療のためだけでなく、動物、特にイヌの治療にも適している、新規の医薬品調剤を提供することであった。
【００２１】
前記課題は、本発明によれば、作用物質として、
ａ）一般式Ｉ：
【化４】
2008517023.tif 000005
［式中、
Ｒ1は、１５〜２６個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和の炭化水素基であり、その際、
Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、それぞれが存在する場合に、それぞれ無関係に、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ6−アルキル基、Ｃ3〜Ｃ6−シクロアルキル基又はＣ2〜Ｃ6−ヒドロキシアルキル基であり、その際、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4の２つは、互いにＣ2〜Ｃ5−アルキレン基を形成してよく、その際、ｎは、２〜６の整数である］で示されるリン脂質化合物（アルキルホスホコリン）を含有する医薬品調剤、又は作用物質として、一般式ＩＩ：
【化５】
2008517023.tif 000006
［式中、
Ｒ11は、１５〜２６個の炭素原子を有する、飽和の、不飽和の又は多不飽和の炭化水素基であり、その際、
Ｒ12及びＲ13は、それぞれ存在する場合に、それぞれ無関係に、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ6−アルキル基又はＣ2〜Ｃ6−ヒドロキシアルキル基であり、その際、ｍは、１又は２の整数である］で示されるリン脂質化合物（環窒素を有するアルキルホスホコリン）を含有する医薬品調剤、又は作用物質として、一般式ＩＩＩ：
【化６】
2008517023.tif 000007
［式中、
ＰIは、
【化７】
2008517023.tif 000008
を表し、かつＰIIは、
【化８】
2008517023.tif 000009
を表す］で示されるリン脂質化合物（アルキルエチレングリコールホスホコリン）を含有する医薬品調剤、又は作用物質として、一般式ＩＶ：
【化９】
2008517023.tif 000010
［式中、
基Ｒ1及びＰI又はＰIIは、相互に交換されてもよく、その際、
Ｒ1、ＰI及びＰIIは、上述の意味に相当し、その際、ｘは、０〜４の整数である］で示されるリン脂質化合物（アルキルアルカンジオールホスホコリン）を含有する医薬品調剤、又は作用物質として、一般式Ｖ：
【化１０】
2008517023.tif 000011
［式中、
Ｒ21は、１５〜２６個の炭素原子を有する、飽和の又は一不飽和もしくは多不飽和の炭化水素基であり、その際、
Ｒ22は、Ｃ1〜Ｃ6−アルキル基を意味し、その際、
ＰI及びＰIIは、上述の意味に相当し、その際、基Ｒ21、Ｒ22及びＰIもしくはＰIIは、任意にグリセリン分子中の位置に分布していてよい］で示されるリン脂質化合物（エーテルリゾレシチン）を含有する医薬品調剤、又は作用物質として、一般式ＶＩ：
【化１１】
2008517023.tif 000012
［式中、
Ｒ31は、１５〜２６個の炭素原子を有する、飽和又は一不飽和もしくは多不飽和の炭化水素基であり、その際、
ｙ及びｚは、互いに無関係に０〜３の整数であってよいが、ｙ及びｚは、両方とも同時に０となりえず、その際、
ＰI及びＰIIは、上述の意味に相当する］で示されるリン脂質化合物（アルキル置換されたアルカンジオールホスホコリン）を含有する医薬品調剤、又は作用物質として、一般式ＶＩＩ：
【化１２】
2008517023.tif 000013
［式中、
Ｒ41は、１５〜２６個の炭素原子を有する、飽和又は一不飽和もしくは多不飽和の炭化水素基であり、その際、
ＰI及びＰIIは、上述の意味を有する］で示されるリン脂質化合物（１−Ｏ−アルキル−２−メチルグリセロ−３−ホスホコリン）を含有する医薬品調剤であって、該組成物が、更に、コレステリン、７β−ヒドロキシコレステリン及び／又はβ−シトステリンを含む成分ｂ）を含有し、かつ成分ｃ）として負電荷担体を含有し、該担体が、
１６〜３６個の炭素原子を有するカルボン酸であって、有利には飽和の、一不飽和の及び多不飽和の脂肪酸であり、かつ特に有利にはシス−二重結合を有するカルボン酸、又は
胆汁酸の天然物質種からの化合物、又は
アミノ酸と脂肪酸との脂肪酸アミドであって、飽和の又は一不飽和もしくは多不飽和であってよい脂肪酸アミド、又は一般式ＶＩＩＩ：
【化１３】
2008517023.tif 000014
［式中、
Ｒ51は、１５〜２５個の炭素原子を有する炭化水素基である］で示される化合物（ＧＰＥの脂肪酸アミド）
から選択されることを特徴とする医薬品調剤によって解決される。
【００２２】
本発明によれば、所定の負電荷担体の目標を定めた選択によって、優れた特性を有する医薬品調剤、特にリポソームを得ることができると確認された。負電荷担体としては、有利には１６〜３６個の、より有利には１６〜２４個の、最も有利には１６〜２２個の炭素原子を有するカルボン酸、特に脂肪酸が使用される。カルボン酸は、直鎖状又は分枝鎖状で、飽和又は一不飽和もしくは多不飽和であってよい。シス二重結合を有する多不飽和の脂肪酸が好ましい。特に有利には、オレイン酸、リノール酸、エルカ酸又はレチノール酸が使用される。胆汁酸は、同様に１つのカルボキシル基を有する。有利に使用される胆汁酸の代表は、コール酸、デスオキシコール酸、リトコール酸、ケノデスオキシコール酸、コラン−２４−酸並びにウルソデスオキシコール酸である。
【００２３】
本発明により負電荷担体として使用されるカルボン酸は、それらの容易入手性と廉価性の点で優れている。
【００２４】
好ましい廉価な代替物においては、約８５％のオレイン酸、１０％のリノール酸及び残りの５％は他の脂肪酸を含有するオリーブ油から加水分解により得られる酸の組合せ物が使用される。しかし該配合物の価格構成のために、脂肪酸が副次的な役割を担う。それというのも脂肪酸が配合物全体の１０％未満になるからである。しかし作用物質であるオレイルホスホコリンの合成のための出発生成物として、オリーブ油は、出発生成物として純粋なオレイン酸を使用する代わりに関心が持たれる代替物である。
【００２５】
特に良好な結果は、実質的に脱プロトン化されたカルボン酸、例えば５０％より多くまで、より有利には７０％より多くまで、更により有利には９０％より多くまで、最も有利には９５％より多くまでが脱プロトン化されているカルボン酸が使用される場合に達成される。脱プロトン化は、ｐＨ値の調整によって、例えばカルボン酸溶液にアルカリ液を添加することによってなすことができる。カルボン酸に苛性ソーダ液を添加する場合に、例えばカルボン酸のナトリウム塩が形成される。
【００２６】
約５のｐＨ値を有するカルボン酸を使用する場合に、更に好ましい緩衝作用が得られる。多くのカルボン酸、例えばオレイン酸は更に熱安定性なので、本発明による加熱滅菌可能な医薬品調剤、特に加熱滅菌可能なリポソームを得ることができる。
【００２７】
負電荷担体としては、更に有利にはアミノ酸の脂肪酸アミドが使用される。ここでも、脱プロトン化可能な基はカルボキシル基である。アミノ酸としては、天然アミノ酸、例えばグリシン、サルコシン、アラニン、セリンなどが使用される。脂肪酸アミドの脂肪酸部分は、有利には不飽和又は一不飽和もしくは多不飽和の、より有利にはシス二重結合を有する脂肪酸（Ｃ16〜Ｃ36）に由来する。
【００２８】
更に、リポソームの形成のために適した他の負電荷担体を、大豆加工の際の副生成物であるグリセロホスホエタノールアミン（Ｇ−ＰＥ）から出発して得ることができると確認された。グリセロホスホエタノールアミンに、アミド結合によって脂肪酸を導入することができる。通常は正電荷のアミノ基をブロックすることによって、従って、負電荷担体として適した全体的に負電荷の分子が得られる。今までに記載されてきた、全てカルボキシル基の脱プロトン化（ｐｋ５〜６）に基づく負電荷担体との実質的な差異は、この場合ｐＫ値約２を有する負電荷担体としてホスフェート基が使用されることにある。
【００２９】
式ＶＩＩＩの化合物中の基Ｒ51は、飽和又は一不飽和もしくは多不飽和の基であって、有利にはシス二重結合を有する基である。
【００３０】
作用物質としては、式Ｉで示され、その式中、Ｒ1が１５〜２６個の炭素原子を有する一不飽和炭化水素基、例えばシス二重結合をそれぞれ有するオレイル又はエルシルであり、それぞれｎ＝２又はｎ＝３であるが、また飽和基であるヘキサデシルも有する化合物である。式ＩＩの化合物についても、同様に、Ｒ1の有利な使用は、１５〜２６個の炭素原子を有する一不飽和炭化水素基、例えばシス二重結合をそれぞれ有するオレイル又はエルシルと見なされ、その際、それぞれｎ＝２又はｎ＝３であるが、また飽和基であるヘキサデシルも有する。
【００３１】
ａ）、ｂ）及びｃ）は、一緒になって有利には１００モル％となる。しかしながら更に該配合物は、２〜４個の炭素原子を有する水混和可能な生理学的に許容される、場合により水を含有するアルコールと、場合により通常の医薬品助剤及び／又は作用物質が添加されていてよい。それらの成分は、有利には水中に分散された複合体として、通常は７０〜１５０ｎｍの直径を有し、従ってなおも問題なく滅菌濾過可能なリポソームの形で存在する。しかしながら、該配合物が加熱滅菌でき、かつ２０℃で貯蔵できることに更に大きな意義がある。前記のいわゆるリポソームは、水中で適度な超音波処理によって形成する。従って製造のためには高圧均質化は必要ない。
【００３２】
驚くべきことに、本発明によるリポソーム中に作用物質を包むことは遊離の作用物質に対してかなりの利点を提供すると確認された。リポソーム中に包むことによって、特に所望の作用の向上と同時に不所望な副作用の低下を達成することができる。このように、リポソームの形での投与の際に溶血性活性は、溶血試験で示すことができたように明らかに低減されている。リポソーム中に一緒に閉じ込められたコレステリン、７−β−ヒドロキシ−コレステリン又はβ−シトステリンは、アルキルホスホコリンの、従って作用物質化合物の溶血性活性を抑制する。それによって作用物質は、かなり高い濃度で使用し、適用することができる。遊離の作用物質が既に約１０-4Ｍの濃度で組織刺激性であり、潰瘍をもたらす一方で、リポソーム形では６０ｍＭより高い前記作用物質濃度を使用することができる。その際、例えば静脈内、筋内、皮下などから経口又は局所的な使用まであらゆる適用形も可能である。
【００３３】
注意を引くことは、本願で紹介されたリポソーム配合物は、経口投与の場合にも、遊離の作用物質、つまり生理食塩溶液中のアルキルホスホコリンに対して明らかな利点を有することである。遊離のアルキルホスホコリンがより高い濃度である場合に、実験動物としてのラットにおいては、胃腸管の激しい刺激をもたらし、それに関連して食欲不振を引き起こし、それは３週間の期間内で３０％までを多大な体重減少に導く。リポソーム配合物の形における相応の量のアルキルホスホコリンでの試験は、全く問題ない。それらの動物は、目立った点を示さず、体重減少は観察されない。リポソームのアルキルホスホコリンでの経口治療は、従って遊離の作用物質での治療を遙かに凌駕するものである。
【００３４】
先行技術において、しばしば、生理学的に新規であり、その毒性が知られておらず、そのことは、この物質の無害性を明らかにするための関連する出費の他にも、かなりの時間的遅延をも引き起こしうることが障害となる助剤が使用された。更に、ここで予定されるリポソーム分散液の２０℃での貯蔵安定性が非常に重要であった。それというのもこれらの医薬品はしばしば南の国々まで使用されるからである。該配合物は、可能であれば、該医薬品の３年の期間にわたる使用許可を得るために加熱滅菌可能であることが望ましい。全ての前記の前提条件を、それどころかほぼ獣医学分野で使用するためでもある条件を、本願で紹介されたリポソーム配合物については守ることができた。
【００３５】
本発明は、式ＩないしＶＩＩで挙げられた作用物質が、簡単に、リポソームの一体成分として、コレステリン、７−β−ヒドロキシコレステリン又はβ−シトステリンと負電荷担体と一緒に導入されることを基礎としている。該作用物質は廉価に製造できる。コレステリン及びβ−シトステロールは安く購入でき、殆どの負電荷担体も同様である。
【００３６】
非常に重要な点は、リポソームが容易にかつ廉価に製造されること、その加熱滅菌可能性と２０℃での貯蔵性である。従って、前記の生存を脅かす疾患に際して十分に副作用なく使用できる作用物質のリポソーム配合物が提供される。
【００３７】
本発明による医薬品調剤は、作用物質として、リン脂質化合物、特にアルキルホスホコリン化合物を含有してよい。
【００３８】
成分ａ）、つまり式Ｉのリン脂質もしくはアルキルホスホコリンにおいては、炭化水素基Ｒ1は、１６〜２６個の炭素原子を有してよく、特に１６〜２４個の炭素原子であり、より有利には１８〜２２個の炭素原子である。特に有利には、Ｒ1は、アルキル基又は一不飽和もしくは多不飽和のアルケニル基、特にヘキサデシル基、ヘプタデシル基、オクタデシル基、ノナデシル基、エイコシル基、ヘキサデセニル基、ヘプタデセニル基、オクタデセニル基（オレイル）、ノナデセニル基、エイコセニル基、エライジル基、エイコセニル−シス−（ｗ−９）基、ヘンエイコシル基、ヘンエイコセニル基、ドコシル基、ドコセニル基、リノレイル基、リノレニル基、エルシル基又はテトラコサジエニル基である。該炭化水素基は、飽和又は一不飽和もしくは多不飽和であってよいが、特に一不飽和又はに不飽和であってよく、その際、該不飽和基の二重結合は、より有利にはシスである。１つより多くのシス二重結合が存在する場合には、これらの二重結合は有利には共役で存在しない。該炭化水素基は、分枝鎖状又は直鎖状であってよいが、直鎖状が好ましい。
【００３９】
リーシュマニア症の治療のためには、シス二重結合を有する化合物、ノナデセニル、エイコセニル、ヘンエイコセニル及びオレイルが特に好ましい。しかしながら最も好ましいのは、式Ｉで示され、Ｒ1がオレイルであり、かつｎ＝２である化合物、従ってオレイルホスホコリンデある。
【００４０】
癌の治療のためには、シス二重結合を有する化合物、例えばオレイル及びエルシルが特に好ましい。最も好ましいのは、式Ｉで示され、ａ）Ｒ1がエルシルであり、かつｎ＝２である化合物、従ってエルシルホスホコリンと、ｂ）Ｒ1がエルシルであり、かつｎ＝３である化合物、従ってエルシルホスホ−（Ｎ，Ｎ，Ｎ）−トリメチル−プロピルアンモニウムとの２種の化合物である。
【００４１】
１つの不飽和基Ｒ1を有する化合物は、広い治療範囲と同時に、非常に低い毒性を有するという利点を有する、例えばオレイルホスホコリン、エルシルホスホコリン及びエルシルホスホ−（Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル）−プロピルアンモニウムである。
【００４２】
式Ｉにおいては、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、有利にはそれぞれメチルである。別の好適な基の例は、エチル基、プロピル基、ブチル基及びペンチル基、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基及びシクロヘキシル基、ヒドロキシエチル基及びヒドロキシプロピル基である。基Ｒ2、Ｒ3及びＲ4の２つは、例えばピロリジン基、ピペリジン基又はモルホリン基を形成することができる。基Ｒ2、Ｒ3及びＲ4の少なくとも１つが水素とは異なることが好ましく、全ての３つの基が水素とは異なることが特に好ましい。
【００４３】
式Ｉの化合物の極性成分は、有利にはホスホコリン（ＰＣ）からなる、すなわちｎは特に有利には２であり、ｎは有利には３又は４であってよい。驚くべきことに、特にｎが３である化合物においては白血球形成への刺激作用をもたらす。
【００４４】
成分ａ）として適しておりかつ使用可能なアルキルホスホコリンは、例えばＥＰ０５０７３３７号又はＷＰ００／０８０３１号に記載される化合物である。
【００４５】
リン脂質化合物、特に基Ｒ1中に短鎖の炭化水素鎖を有するリン脂質化合物では、従来の配合物ではしばしば有害な溶血性作用を有する。この作用は、本発明による組合せ物によって実質的に下げられる。従って、１５〜２１個の炭素原子を有する炭化水素基を有する短鎖の基Ｒ1の場合に、コレステリンもしくはコレステリン誘導体もしくはβ−シトステリンは、上記の量範囲で好ましい。従って、小過剰のコレステリンもしくはその誘導体を該複合体もしくはリポソーム中に有することが好ましく、そのため式Ｉの化合物とコレステリン／その誘導体とのモル比は、１：１〜１．２であることが好ましい。本発明による組成物であって、成分ａ）として使用される作用物質が２１個以下の炭素原子を有する基Ｒを有する組成物については、混合比は、有利には３０〜４５モル％の成分ａ）、３０〜６０モル％の成分ｂ）（コレステリン）及び３〜３０モル％の成分ｃ）、すなわち脂肪酸などのような負電荷担体である。
【００４６】
基Ｒ1が２２〜２６個の、特に２４個までの炭素原子を有する長鎖の炭化水素基である化合物の場合に、低い水溶性のものよりも溶血の問題はほとんどない。この理由から、ここではリン脂質化合物：コレステリン／その誘導体のモル比は、有利には１：０．５〜１と見込まれる。
【００４７】
本発明による組成物であって、成分ａ）の作用物質として、Ｒ1が２２個以上の炭素原子を有する化合物が使用される組成物については、個々の成分の混合比は、有利には３０〜５５モル％の成分ａ）、１０〜４０モル％の成分ｂ）（コレステリン）及び３〜３０モル％の成分ｃ）、従って脂肪酸などの負電荷担体である。
【００４８】
良好な抗腫瘍作用のための条件、特に器官と組織内での６０〜１００時間の半値時間は、上述の作用物質によって達成することができる。
【００４９】
より一般的には、式ＩないしＶＩＩの化合物は非常に類似した物理特性を有し、リゾレシチン類に匹敵しうるといることができる。前記分子は、共通して、アルキルホスホコリンの場合のように、ホスホコリン（式ＰI）又は類似体（式ＰII）と直接結合されていてよい長いアルキル鎖である。しかしながらその結合は、ジオールによる橋かけを介して行われていてよく、例えば式ＩＩＩではエチレングリコールを介して、式ＩＶではアルカンジオール−（１，２）を介して、式Ｖではグリセリンを介して、式ＶＩではプロパンジオール−（１，３）を介して、式ＶＩＩでは２−メチル−グリセリンを介して行われる。
【００５０】
溶血性特性及び細胞溶解性特性において物理的には、前記のリゾレシチン類の分子が身体固有物質と非常に類似しており、また臨界ミセル濃度は同じアルキル鎖長の場合には同等である。しかしながら生物学的には、大きな相違点が存在する。生物学的な細胞及び器官においてリゾレシチン類の半値時間は短く、１分未満である。リゾレシチン類は、迅速に代謝される、すなわちアシルトランスフェラーゼによるアシル化によってレシチンに変換される。前記の再アシル化は、式ＩないしＶＩの分子では不可能である、従って再アシル化は、遊離の第２級のヒドロキシル基がリゾレシチンにおいては欠落しているか又は既にブロックされている（式Ｖを参照）ため不可能である。式ＶＩＩにおいて特別な状況が見出された。そこではしかも２位に１つのヒドロキシル官能基が存在する。しかしながら、それは第３級のヒドロキシル基であり、該基は、アシルトランスフェラーゼによってアシル化することができない。従ってリゾレシチン類との差異において、式ＩないしＶＩＩの化合物は、６０〜１００時間の長い生物学的半値時間を有する。
【００５１】
本発明による医薬品調剤は、作用物質として、前記の議論された式Ｉのアルキルホスホコリンの他に、式ＩＩないしＶＩＩの化合物を含有してもよい。ここで前記に議論したＲ1についての意味は、基Ｒ11、Ｒ21、Ｒ31及びＲ41についても同様に適用される。既に挙げた物理特性における大きな類似性は、それどころかコレステリン、β−ヒドロキシ−コレステリン及びβ−シトステリンの保護機能も式ＩＩないしＶＩＩで挙げられた物質の全てについて、特に溶血及び細胞溶解に対する保護機能が維持されたままである限りは通っている。式のアルキルホスホコリンについて詳細に議論された基は、また式ＩＩないしＶＩＩの物質における相応の有利な基である。
【００５２】
式ＩＩないしＶＩＩのアルキルホスホコリン類似化合物では、炭化水素基Ｒ11、Ｒ21、Ｒ31もしくはＲ41は、１６〜２６個の炭素原子を有してよく、特に１６〜２２個の炭素原子が好ましく、１８〜２２個の炭素原子がより好ましい。特に有利には、少なくとも１つのシス二重結合が分子中に存在する。特に有利には、Ｒ11、Ｒ21、Ｒ31又はＲ41は、アルキル基、アルケニル基、アルかジエニル基又はアルカトリエニル基、特にヘキサデシル基、ヘプタデシル基、オクタデシル基、ノナデシル基、エイコシル基、ヘキサデセニル基、ヘプタデセニル基、オクタデセニル基（オレイル）、リノリル基、リノレニル基、ノナデセニル基、エイコセニル基、エライジル基、エイコセニル−シス−（ｗ−９）基、ヘンエイコシル基、ヘンエイコセニル基、ドコシル基又はドコセニル基である。該炭化水素基は、飽和又は一不飽和もしくは多不飽和であってよいが、特に一不飽和又はに不飽和であってよく、その際、該不飽和基の二重結合はシスである。１つより多くのシス二重結合が存在する場合に、該二重結合は有利には共役で存在しない。該炭化水素基は、直鎖状又は分枝鎖状であってよく、直鎖状が好ましい。
【００５３】
リーシュマニア症の治療のためには、シス二重結合を有する化合物、例えばノナデセニル、エイコセニル、ヘンエイコセニル及びオレイルが特に好ましい。最も好ましいのは、式ＩＩないしＶＩＩで示され、その式中、Ｒ11、Ｒ21、Ｒ31もしくはＲ41がオレイルであり、かつｎ＝２である化合物である、すなわち式ＩＩについては：オレイル−エチレングリコール−ホスホ−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）−ピロリジニウム；式ＩＩＩについては：オレイル−エチレングリコール−ホスホコリン（ＰIの場合）又はオレイル−エチレングリコール−ホスホ−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）−ピロリジニウム（ＰIIの場合）；式ＩＶについては：１−オレイル−プロパンジオール−（１，２）−ホスホコリン（ＰIの場合）又は１−オレイル−プロパンジオール−（１，２）−ホスホ−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）−ピロリジニウム（ＰIIの場合）；式Ｖについては：１−オレイル−２−メチル−グリセロ−３−ホスホコリン（ＰIの場合）又は１−オレイル−２−メチル−グリセロ−３−ホスホ−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）−ピロリジニウム（ＰIIの場合）、例えば全ての立体異性体及び配置異性体；式ＶＩについては：オレイル−２，２−ジメチル−プロパンジオール−（１，３）−ホスホコリン（ＰIの場合）又はオレイル−２，２−ジメチル−プロパンジオール−（１，３）−ホスホ−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）−ピロリジニウム（ＰIIの場合）；式ＶＩＩについては：１−オレイル−２−メチル−プロパントリオール−ホスホコリン（ＰIの場合）又は１−オレイル−２−メチル−プロパントリオール−ホスホ−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）−ピロリジニウムである。
【００５４】
癌の治療のためには、オレイル及びエルシルを有し、またそれぞれ１つのシス二重結合を有する相応の化合物が特に好ましい。しかしながら最も好ましくは、式ＩＩないしＶＩＩで示され、Ｒ11、Ｒ21、Ｒ31もしくはＲ41中にエルシル基を有する全ての化合物である、例えば式ＩＩについては：エルシル−ホスホ−（Ｎ，Ｎ−トリメチル）−ピロリジニウム；式ＩＩＩについては：エルシル−エチレングリコール−ホスホコリン（ＰI、ｎ＝２の場合）又はエルシル−エチレングリコール−ホスホ−（Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル）−プロピルアンモニウム（ＰI、ｎ＝３の場合）；又は式ＩＶについては：エルシル−プロパンジオール−（１，２）−ホスホコリン（ＰI、ｎ＝２の場合）又はエルシル−Ｐｕｒパンジオール−（１，２）−ホスホ−（Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル）−プロピルアンモニウム（ＰI、ｎ＝３の場合）；又は式Ｖについては：１−エルシル−２−メチル−グリセロ−３−ホスホコリン（ＰI、ｎ＝２の場合）又は１−エルシル−２−ホスホ−（Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル）−プロピルアンモニウム（ＰI、ｎ＝３の場合）；又は式ＶＩについては：エルシル−２，２−ジメチル−プロパンジオール−（１，３）−ホスホコリン（ＰI、ｎ＝２の場合）又はエルシル−２，２−ジメチル−プロパンジオール−１，３−ホスホ−（Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル）−プロピルアンモニウム（ＰI、ｎ＝３の場合）；又は式ＶＩＩについては：エルシル−２−メチル−プロパントリオール−ホスホコリン（ＰI、ｎ＝２の場合）又はエルシル−２−メチル−プロパントリオール−ホスホ−（Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル）−プロピル−アンモニウムである。
【００５５】
特に有利には、ヘキサデシル、オクタデシル及びオレイルである。最も有利には、式Ｉで示され、Ｒ1がオレイル基、特にシス−オレイル基である化合物である。更に有利な基Ｒ1は、リノレイル基、リノレニル基並びにエルシル基である。
【００５６】
１つの不飽和基Ｒ11、Ｒ21、Ｒ31もしくはＲ41を有する化合物は、該化合物が広い治療範囲を有するのと同時に、非常に低い毒性を有するという利点を有する。それにより、飽和基を有する化合物と比較して、より高い用量が可能である。
【００５７】
Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、有利にはメチル、エチル又はプロピルである。
【００５８】
ＰI及びＲ2、Ｒ3及びＲ4を有する実施態様においては、これらの基は、有利にはそれぞれメチルである。別の好適な基についての例は、エチル基、プロピル基、ブチル基及びペンチル基、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基及びシクロヘキシル基、ヒドロキシメチル基、ヒドロエチル基及びヒドロキシプロピル基である。基Ｒ2、Ｒ3及びＲ4の２つは、例えばピロリジン基、ピペリジン基又はモルホリン基を形成することができる。
【００５９】
式Ｉないし式ＶＩＩの作用物質の本発明による医薬品調剤中の量は、１０〜６０モル％、有利には少なくとも２０モル％、特に少なくとも２５モル％、より有利には少なくとも４０モル％〜有利には５０モル％、特に４５モル％までである。
【００６０】
他の成分として、本発明によるリポソームは、コレステリン又はβ−シトステロールを含有する。本願で使用されるコレステリンとは、コレステリン自体並びにコレステリン誘導体、例えば７−β−ヒドロキシコレステリンを表す。
【００６１】
コレステリンの代わりに又はその他に、成分ｂ）として、β−シトステリンが含まれていてもよい。β−シトステリンは、植物ステロイドであり、それらは所定の部分範囲でコレステリンと非常に類似しており、通常はコレステリンより１又は２つ多いメチル基を有する。このように、コレステリン不含のリポソームを製造することができる。係る医薬品調剤は、特にコレステリン濃度の問題を伴う患者において好ましい。それというのも該調剤は、コレステリン濃度増大の原因とはならず、加えて専ら植物性の出発材料から製造できるからである。β−シトステロールは、それだけでなくコレステリン濃度の低下に所定の意義を獲得している。
【００６２】
コレステリンもしくはβ−シトステリンの量は、１０〜６０モル％、有利には２５〜５０モル％、特に３０〜４０モル％である。
【００６３】
本発明によるリポソームの成分ｃ）は、前記に議論したように負電荷担体である。Ｒa及びＲ10は、有利には１６〜２２個の炭素原子を有する炭化水素基である。有利には、成分ｃ）の量は、５〜１５モル％、特に７〜１０モル％である
有利な一実施態様では、本発明による医薬品調剤は、作用物質ａ）として、式中のＲ1、Ｒ11、Ｒ21、Ｒ31もしくはＲ41が１６〜２６個の炭素原子を有する飽和又は不飽和の炭化水素基である化合物を含有し、かつ負電荷担体としての成分ｃ）として、１６〜３６個の炭素原子を有するカルボン酸を含有する。特に有利には、これらの両方の成分は、基Ｒ1、Ｒ11、Ｒ21、Ｒ31もしくはＲ41がまさに成分ｃ）のカルボン酸基に相当するように選択される、例えばＲ1などについてオレイル基が使用され、かつ負電荷担体としてオレイン酸が使用される。
【００６４】
驚くべきことに、前記の負電荷担体を使用することで、熱安定性であり、従って加熱滅菌することができるリポソームを得ることができると確認された。このことは、他のリポソーム配合物に対して、特にリポソームの静脈内又は皮下での適用の可能性の点で相当の利点である。従って有利には、係るリポソームはその形成後に投与前に加熱滅菌される。
【００６５】
本発明による医薬品調剤、特にリポソームの形でもある医薬品調剤は、更に、高い安定性及び長期の貯蔵性を有する。このように、本発明による配合物においては、負電荷担体を含む全ての成分は水中で安定性である。またｐＨ１〜ｐＨ１１の極度のｐＨ値範囲でも、顕著な崩壊は生じない。更に該配合物は、酸素に対して高い安定性を有する。本発明による医薬品調剤が有する高い大気温度での貯蔵安定性は、特に温暖な国々での使用のためにも主に好ましく、その際、本願で議論した疾患はしばしばまさに温暖な、南の国々において多くの問題を呈している。高い貯蔵安定性は、更に獣医の希望に添うことである。それというのも前記の不可欠な医薬品はしばしば長期間にわたって貯蔵せねばならないからである。
【００６６】
有利には該医薬品配合物は、成分を、全体で負の過剰な電荷を有するような量で含有する。このことは、特に長鎖の炭化水素鎖を有する作用物質を使用する場合に好ましい。長鎖、例えばＣ22を有する化合物での難水溶性の問題は、特に静脈内投与の場合に重要である。それに対して経口適用は、１０％未満が再吸収されるだけなので合理的でない。
【００６７】
本発明によるリポソームの個々の成分のモル比は、例えば式ＩないしＶＩＩの作用物質が若干小過剰で存在するように変更することができる。しかしながら一般に、１：１から極端にずれない比率が好ましく、式ＩないしＶＩＩの作用物質とコレステリンもしくはβ−シトステロールとのモル比が１：１．２〜１：１であることが好ましい。コレステリンもしくはβ−シトステロールは、有利にはリポソーム中に４５〜５５モル％まで存在する。
【００６８】
成分ａ）、ｂ）及びｃ）から形成されるリポソーム様複合体は、問題なく、孔径０．８μ、０．４５μ、それどころか０．２μを有する膜によって滅菌濾過することができる。このことは、従来の簡単に滅菌濾過できなかったリポソームに対して相当の利点である。しかしながら更に重要なことは、該リポソームが加熱滅菌できることである。更に、驚くべきことに、本発明によるリポソームは極めて貯蔵安定性であると明らかになった。
【００６９】
成分ａ、ｂ及びｃは、一緒になって本発明によるリポソームの１００％となる。しかしながらまた、更なる外被成分及び／又はカプセル化された物質を含有するリポソームを形成することも可能である。更なる作用物質をカプセル化された形で含むリポソームが好ましい。本発明によるリポソーム中に有利には含まれていてよい更なる作用物質は、例えば殺細菌作用を有するオキシテトラサイクリン、ドキシサイクリン又はミノサイクリン；殺真菌作用を有するアンフォテリシンＢ又はグリセオフルビン並びに免疫抑制作用を有するシクロスポリン並びにマラリアに対して良好な作用を有するＡｒｔｈｅｍｅｔｅｒ及び類似物質である。
【００７０】
水性液体で希釈する代わりに、本発明による医薬品配合物は、別の形で、例えば粉剤、錠剤、カプセル剤又は軟膏としても製造することもできる。この場合に、アルコールは有利には、液体系で使用するための配合物の製造の場合よりも少量で添加される。有利にはここでは、リン脂質化合物：アルコールのモル混合比は１：５〜１００である。場合によりアルコールを該混合物から少なくとも部分的に更に除去して、濃縮された配合物を得ることができる。そのためには、該医薬品配合物を通常の生理学的に許容された充填剤、担持物質、希釈物質及び／又は補助物質と混合してよく、かつ例えば相応の大きさの中空セル中に注ぎ込むか又は相応の大きさのカプセル中に充填するか又は造粒し、次いで場合により更なる通常の補助物質を添加して加圧して錠剤とすることができる。該配合物は、例えば以下の補助物質の１もしくはそれ以上と混合できる：デンプン、セルロース、ラクトース、ホルマリン、カゼイン、変性デンプン、ステアリン酸マグネシウム、リン酸水素カルシウム、高分散性シリカ、タルク及びフェノキシエタノール。得られた混合物を場合により、例えばゼラチン、デンプン、ポリビニルピロリドン、ビニルピロリドン−ビニルアセテート−共重合体及び／又はポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートからなる水溶液を用いて造粒し、そして引き続き加圧して錠剤とするか又はカプセル中に充填することができる。
【００７１】
前記の作用物質の錠剤、カプセル剤などの形での特定の付随して有効な実施態様は、作用物質と組み合わせてコレステリン、β−シトステリン又は別のコレステリン類似体を、リポソームについて記載されたモル比で使用することである。
【００７２】
本発明による医薬品調剤は、特に原虫疾患の治療及び／又は予防のために使用することができる。該リポソーム調剤は、原虫疾患及びそれにより引き起こされる疾患に対して優れた作用効果を有し、かつ特にプラスモディウムに対して、従ってマラリアの治療又は予防のために、トリパノソーマに対して、従って睡眠病の治療又は予防のために、アメーバ、例えばエンドアメーバ及びアカントアメーバに対して、アメーバ赤痢及び脳炎の治療又は予防のために、かつ特にリーシュマニアに対して、従ってリーシュマニア症の治療又は予防のために適している。ヒトの治療の他に、本発明による医薬品調剤は、有利には動物の治療においても、特にイヌにおけるリーシュマニア症においても使用することができる。特に有利には、該医薬品配合物は、リーシュマニア症の治療のために及び／又はアメーバによって引き起こされる疾患の治療のために使用される。リーシュマニア症の治療に際して、有利には、付加的な作用物質としてアンフォテリシンＢを含有する配合物が使用される。
【００７３】
更に、本発明による医薬品配合物は優れた抗腫瘍剤であることが明らかとなった。該配合物は、従って、癌、特に白血病及び充実性腫瘍の治療及び／又は予防のために使用することができる。イヌにおける癌の治療においても、同じ物質が選択される。そのように、例えばクッシング病及び乳癌は、エルシルホスホ−（Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル）−プロピルアンモニウムによって良好な成果をもって治療することができた。
【００７４】
更に、該配合物は、白血球生成の刺激のために並びに、節足動物によって引き起こされる疾患及びダニ症の治療のために使用することができる。
【００７５】
驚くべきことに、本発明による医薬品配合物は、ダニ症、特に疥癬に対して、かつ節足動物並びに回虫によって、例えばダニ又はマダニによって引き起こされる疾患に対して良好な作用効果をも有することが明らかになった。
【００７６】
付加的な作用物質は、前記の適応症を望ましく支援し、補足し、又は拡張することができる。特にアンフォテリシンＢの添加は、原虫疾患に対する作用効果の相乗的増強と全身性真菌性疾患への拡張を示した。
【００７７】
更に、本発明による医薬品配合物は、細菌性疾患に対して優れた有効性をも示す。従って、該配合物は、細菌性疾患の治療及び／又は予防のために、特に腺熱リケッチア症の治療及び／又は予防のために使用することもできる。腺熱リケッチア症は、マダニによって伝播される細菌性疾患である。本発明による医薬品配合物によるイヌの治療において、腺熱リケッチア症力価の明らかな低減が確認されるだけでなく、治癒も達成された。腺熱リケッチア症の治療は、テトラサイクリンと組み合わせて行うことができる。
【００７８】
細胞増殖を伴う眼疾患、例えば眼における増殖性硝子体網膜症又は網膜剥離は、手術により困難にのみ治療することができ、かつ同様にしばしば非常に激しく増殖する細胞を伴うが、該疾患を、本発明による医薬品調剤によって効果的に治療もしくは避けることができる。
【００７９】
前記の疾患の治療は、実際に副作用無く実施することができる。驚くべきことに、本発明による医薬配合物の使用は、化学療法で危惧される免疫抑制をもたらさず、それどころか白血球生成の刺激はもたらす。治療期間が経過すればするほど、血液像が正常化する。換言すると、本願に記載される作用物質としてアルキルホスホコリンを有する配合物は、長期療法のために非常に適しており、治療的に有効な用量で副作用無く治療することを可能にする。本願で特に際だたせたアルキルホスホコリンは、分子中に少なくとも１つのシス二重結合を有するアルキルホスホコリン、例えばオレイルホスホコリン、エルシルホスホコリン又はエルシルホスホ−（Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル）−プロピルアンモニウムである。シス二重結合を有するアルキルホスホコリンは、実質的により広い治療範囲の点で優れている、すなわち該化合物は、飽和アルキルホスホコリンよりも明らかに高い用量が適用される。その際このことは、エルホシン（Ｅｒｕｆｏｓｉｎ）治療を放射線治療と組み合わせた場合に特に好ましい。エルホシンが注入された腫瘍細胞は、放射線治療に対して感受性となり、特に抵抗力をなくす。
【００８０】
特にシクロスポリンＡとの組み合わせにおいて、該調剤は、免疫抑制のためにも使用することができる。
【００８１】
本発明による医薬品調剤、特にリポソームの形の医薬品調剤は、有利には哺乳動物の治療のために、最も有利にはイヌ又はヒトの治療のために使用される。
【００８２】
驚くべきことに、本発明による医薬品調剤は、動物の治療及び／又は予防のために、特にイヌにおいて顕著に適していることが確認された。従って、本発明による医薬品調剤は、有利には獣医学において、かつそこで特に腫瘍疾患及び原虫疾患の治療のために使用される。特に、今までにヒトに適していた剤がしばしば断念されていたイヌにおいて、本発明による組成物によって優れた成果を達成できた。このように、例えば動物、特にイヌにおけるリーシュマニア症及び腺熱リケッチア症は、本発明による医薬品調剤をもって効果的に治療することができる。特に有利には、この場合に、作用物質としてオレイルホスホコリンが使用され、かつ負電荷担体としてオレイン酸が使用される。
【００８３】
更に、本発明による配合物によって眼疾患、特に制御不能な細胞プロセスを伴う眼疾患も効果的に治療することができると確認された。
【００８４】
本発明は、作用物質としてアルキルホスホコリン及び類似体、アルキル−アルカンジオール−ホスホコリン及び類似体並びに（エーテル）−リゾレシチン及び類似体を種々の実施形態で含有する新規の医薬品配合物に関する。その際、作用物質は、リポソームの一体成分であって、更にコレステリン及び類似体並びに負電荷担体を含有するものである。
【００８５】
該医薬品配合物は、癌、原虫疾患、例えばリーシュマニア症及びアメーバ疾患、ダニ症及び節足動物によって引き起こされる疾患並びに細菌性疾患、例えば腺熱リケッチア症の治療及び／又は予防のために特に適している。また制御不能な細胞プロセスを伴う眼疾患にも有利な影響を与えることができる。
【００８６】
以下の実施例は本発明を具体的に示すものである。
【００８７】
実施例
実施例群１：オレイルホスホコリン／コレステリン比の変動
オレイルホスホコリン  （ＭＧ４３３．６１）（Ｏｌ−ＰＣ）
コレステリン          （ＭＧ３８６．６６）（Ｃｈｏｌ）
オレイン酸            （ＭＧ２８２．４７）
ＮａＯＨ              （ＭＧ４０．００）
【００８８】
実施例１（ａ）  Ｏｌ−ＰＣ、４０ｍＭ；Ｃｈｏｌ、３５ｍＭ
Ｏｌ−ＰＣ      ４０．０ｍＭ；１．７３ｇ
Ｃｈｏｌ        ３５．０ｍＭ；１．３５ｇ
オレイン酸      １０．０ｍＭ；０．２８３ｇ
ＮａＯＨ          ９．５ｍＭ；９．５０ｇ  ０．１ＮのＮａＯＨ
全質量：１００ｇ＝１００ｍｌ
製造
出発物質を、３０ｍｌのＣＨ2Ｃｌ2中に溶解させ、ＣＨ2Ｃｌ2を取り去り、質量が一定になるまで乾燥させ、５０ｇの０．３Ｍのプロパンジオール−１，２及び９．５ｇの０．１ＮのＮａＯＨを混合し、次いで０．３Ｍのプロパンジオール−１，２を添加して、全質量を１００ｇとする。
【００８９】
ａ）５５℃で１０分間熱処理する。
【００９０】
ｂ）５５℃で２０分間超音波処理（１００％）する。
【００９１】
温かい内に０．２μで濾過し、＋４℃〜＋８℃で貯蔵する。
【００９２】
備考：＋４℃〜＋８℃で少なくとも１年間安定。
【００９３】
実施例１（ｂ）  Ｏｌ−ＰＣ、４０ｍＭ；Ｃｈｏｌ、４０ｍＭ
Ｏｌ−ＰＣ      ４０．０ｍＭ；１．７３ｇ
Ｃｈｏｌ        ４０．０ｍＭ；１．５５ｇ
オレイン酸      １０．０ｍＭ；０．２８３ｇ
ＮａＯＨ          ９．５ｍＭ；９．５０ｇ  ０．１ＮのＮａＯＨ
全質量：１００ｇ＝１００ｍｌ
製造は、実施例１（ａ）と同様
備考：＋４℃〜＋８℃で少なくとも１年間安定。
【００９４】
実施例１（ｃ）  Ｏｌ−ＰＣ、４０ｍＭ；Ｃｈｏｌ、４５ｍＭ
Ｏｌ−ＰＣ      ４０．０ｍＭ；１．７３ｇ
Ｃｈｏｌ        ４５．０ｍＭ；１．７４ｇ
オレイン酸      １０．０ｍＭ；０．２８３ｇ
ＮａＯＨ          ９．５ｍＭ；９．５０ｇ  ０．１ＮのＮａＯＨ
全質量：１００ｇ＝１００ｍｌ
製造は、実施例１（ａ）と同様
備考：＋４℃〜＋８℃で少なくとも１年間安定。
【００９５】
実施例１（ａ）ないし１（ｃ）での結果の後に、イヌの皮下治療用の調剤は、以下の組成を有することができる：
ｍＭ
Ｏｌ−ＰＣ（作用物質）                        ３５〜４５
Ｃｈｏｌ（補助物質）                          ３５〜４５
オレイン酸（９５％）                            ８〜１２
【００９６】
実施例群２：オレイン酸含有率の変動
組成を、オレイン酸含有率に関して変更したが、常にプロトン化度は９５％であった。この変動は、
Ｏｌ−ＰＣ    ４０．０ｍＭ
Ｃｈｏｌ      ４０．０ｍＭ
で調査した。
【００９７】
ナトリウム塩としてのオレイン酸を、２．０ｍＭ〜２５ｍＭの間で変動させた。幾つかの良好に使用可能で貯蔵可能な配合物を、２（ａ）ないし２（ｄ）として正確に記載した。
オレイルホスホコリン  （ＭＧ４３３．６１）
コレステリン          （ＭＧ３８６．６６）
オレイン酸            （ＭＧ２８２．４７）
ＮａＯＨ              （ＭＧ４０．００）
【００９８】
実施例２（ａ）  Ｏｌ−ＰＣ、４０ｍＭ；Ｃｈｏｌ、４０ｍＭ；オレイン酸、１６ｍＭ
Ｏｌ−ＰＣ      ４０．０ｍＭ；１．７３ｇ
Ｃｈｏｌ        ４０．０ｍＭ；１．５５ｇ
オレイン酸      １６．０ｍＭ；０．４５２ｇ
ＮａＯＨ        １５．２ｍＭ；７．６０ｇ  ０．１ＮのＮａＯＨ
全質量：１００ｇ＝１００ｍｌ
製造は、実施例１（ａ）と同様
備考：＋４℃〜＋８℃で少なくとも１年間安定；イヌにおいて組織刺激性でない。
【００９９】
実施例２（ｂ）  Ｏｌ−ＰＣ、４０ｍＭ；Ｃｈｏｌ、４０ｍＭ；オレイン酸、８ｍＭ
Ｏｌ−ＰＣ      ４０．０ｍＭ；１．７３ｇ
Ｃｈｏｌ        ４０．０ｍＭ；１．５５ｇ
オレイン酸        ８．０ｍＭ；０．２２５ｇ
ＮａＯＨ        １５．２ｍＭ；７．６０ｇ  ０．１ＮのＮａＯＨ
全質量：１００ｇ＝１００ｍｌ
製造は、実施例１（ａ）と同様
備考：＋４℃〜＋８℃で少なくとも１年間安定；イヌにおいて組織刺激性でない。
【０１００】
実施例２（ｃ）  Ｏｌ−ＰＣ、４０ｍＭ；Ｃｈｏｌ、４０ｍＭ；オレイン酸、６ｍＭ
Ｏｌ−ＰＣ      ４０．０ｍＭ；１．７３ｇ
Ｃｈｏｌ        ４０．０ｍＭ；１．５５ｇ
オレイン酸        ６．０ｍＭ；０．１７０ｇ
ＮａＯＨ          ５．６ｍＭ；５．６０ｇ  ０．１ＮのＮａＯＨ
全質量：１００ｇ＝１００ｍｌ
製造は、実施例１（ａ）と同様
備考：＋４℃〜＋８℃で少なくとも１年間安定；イヌにおいて組織刺激性でない。
【０１０１】
実施例２（ｄ）  Ｏｌ−ＰＣ、４０ｍＭ；Ｃｈｏｌ、４０ｍＭ；オレイン酸、４ｍＭ
Ｏｌ−ＰＣ      ４０．０ｍＭ；１．７３ｇ
Ｃｈｏｌ        ４０．０ｍＭ；１．５５ｇ
オレイン酸        ４．０ｍＭ；０．１１２ｇ
ＮａＯＨ          ３．８ｍＭ；３．８０ｇ  ０．１ＮのＮａＯＨ
全質量：１００ｇ＝１００ｍｌ
製造は、実施例１（ａ）と同様
備考：＋４℃〜＋８℃で少なくとも１年間安定；イヌにおいて組織刺激性でない。
【０１０２】
実施例群３：動物実験で使用するためのＯｌ−ＰＣ分散液の製造
オレイルホスホコリン  （ＭＧ４３３．６１）  ３９．２０ｍＭ
コレステリン          （ＭＧ３８６．６６）  ４１．４０ｍＭ
オレイン酸            （ＭＧ２８２．４７）    ５．６６ｍＭ
ＮａＯＨ              （ＭＧ４０．００）      ５．４０ｍＭ
【０１０３】
【表１】
2008517023.tif 000015
【０１０４】
実施例３（ａ）  １００ｇのＯｌ−ＰＣの試料分散液の製造
０．１ｌ、つまり１００ｍｌに必要な物質量を、５００ｍｌの丸底フラスコ中に量り入れ、そして４０ｍｌのＣＨ2Ｃｌ2中に完全に溶解させる。該溶液は澄明かつ粒子不含でなければならない。ＣＨ2Ｃｌ2を、回転蒸発器において軽い真空下で取り去り、そして残留物を一定質量になるまで、最も容易には一晩真空中で乾燥させる：結果３．４４ｇ〜３．４６ｇ、それは出発重量の＞９９％に相当する。
【０１０５】
該残留物を、９０ｍｌの０．２８９Ｍのプロパンジオール−１，２と５．４ｍｌの０．１ＭのＮａＯＨとからなる溶液と混合して、全質量を１００ｇとする。その際に生ずる０．２８９Ｍのプロパンジオール−１，２の容量誤差が少ないのは、該分散液の密度が約１に相当するからである。５５℃で回転させながら加温し、そして該系をこの温度で保持する：
ａ）５５℃で１０分間熱処理する。
【０１０６】
ｂ）５５℃で２０分間超音波処理（１００％）する。
【０１０７】
温かい内に０．２μで濾過し、＋４℃〜＋８℃で貯蔵する。
【０１０８】
備考：該分散液は、少なくとも１年間の貯蔵に安定である。該分散液は、全ての重要な基準を満たしている。
【０１０９】
貯蔵安定性
濾過滅菌可能
加熱滅菌可能
補助物質のための合成の省略
補助物質が製薬学的に公知
補助物質が更にｐＨ５．０で緩衝能を有する。
【０１１０】
実施例３（ｂ）  １００ｇのＯｌ−ＰＣの試料分散液の製造
０．５ｌ、つまり５００ｍｌに必要な物質量を、１ｌの丸底フラスコ中に量り入れ、そして１００ｍｌのＣＨ2Ｃｌ2中に完全に溶解させる。該溶液は澄明かつ粒子不含でなければならない。ＣＨ2Ｃｌ2を、回転蒸発器において軽い真空下で取り去り、そして残留物を一定質量になるまで、最も容易には一晩真空中で乾燥させる：結果１７．２〜１７．３ｇ、それは出発重量の＞９９％に相当する。
【０１１１】
該残留物を、４５０ｍｌの０．２８９Ｍのプロパンジオール−１，２と２７ｍｌの０．１ＭのＮａＯＨとからなる溶液と混合して、全質量を５００ｇとする。分散液の比重はほぼ１なので、容量誤差は少ない。５５℃で回転させながら加温し、そして該系をこの温度で水浴を用いて保持する：
ａ）５５℃で１０分間熱処理する。
【０１１２】
ｂ）５５℃で２０分間超音波処理（１００％）する。
【０１１３】
温かい内に０．２μで濾過し、＋４℃〜＋８℃で貯蔵する。
【０１１４】
備考：該分散液は、少なくとも１年間の貯蔵に安定である。該分散液は、全ての重要な基準を満たしている。
【０１１５】
貯蔵安定性
濾過滅菌可能
加熱滅菌可能
補助物質のための合成の省略
補助物質が製薬学的に公知
補助物質が更にｐＨ５．０で緩衝能を有する。
【０１１６】
実施例群４：負電荷担体としてのアミノ酸の脂肪酸アミド
オレイルホスホコリン              （ＭＧ４３３．６１）
コレステリン                      （ＭＧ３８６．６６）
Ｎ−オレオイルアラニンのＮａ+塩   （ＭＧ３７５．５３）
【０１１７】
実施例４（ａ）  Ｏｌ−ＰＣ、４０ｍＭ；Ｃｈｏｌ、４０ｍＭ；Ｎ−オレイルアラニン、５ｍＭ
Ｏｌ−ＰＣ              ４０．０ｍＭ；１．７３ｇ
Ｃｈｏｌ                ４０．０ｍＭ；１．５５ｇ
Ｎ−オレオイル−Ａｌ      ５．０ｍＭ；０．１９ｇ
全質量：１００ｇ＝１００ｍｌ
製造
出発物質を、３０ｍｌのＣＨ2Ｃｌ2中に溶解させ、溶剤を取り去り、残留物を質量が一定になるまで乾燥させる。残留物を、０．３Ｍのプロパンジオール−１，２で、全体で１００ｇとし、５５℃に加熱する。
【０１１８】
ａ）５５℃で１０分間熱処理する。
【０１１９】
ｂ）５５℃で２０分間超音波処理（１００％）する。
【０１２０】
温かい内に０．２μで濾過し、＋４℃〜＋８℃で貯蔵する。
【０１２１】
実施例４（ｂ）  Ｏｌ−ＰＣ、４０ｍＭ；Ｃｈｏｌ、４０ｍＭ；Ｎ−オレイルアラニン、１０ｍＭ
Ｏｌ−ＰＣ              ４０．０ｍＭ；１．７３ｇ
Ｃｈｏｌ                ４０．０ｍＭ；１．５５ｇ
Ｎ−オレオイル−Ａｌ    １０．０ｍＭ；０．３８ｇ
全質量：１００ｇ＝１００ｍｌ
製造
出発物質を、３０ｍｌのＣＨ2Ｃｌ2中に溶解させ、溶剤を取り去り、残留物を質量が一定になるまで乾燥させる。残留物を、０．３Ｍのプロパンジオール−１，２で、全体で１００ｇとし、５５℃に加熱する。
【０１２２】
ａ）５５℃で１０分間熱処理する。
【０１２３】
ｂ）５５℃で２０分間超音波処理（１００％）する。
【０１２４】
温かい内に０．２μで濾過し、＋４℃〜＋８℃で貯蔵する。
【０１２５】
実施例群５：負電荷担体としてのグリセロ−ホスホ−エタノールアミンの脂肪酸アミド
オレイルホスホコリン                                    （ＭＧ４３３．６１）
コレステリン                                            （ＭＧ３８６．６６）
Ｎ−オレオイルグリセロホスホエタノールアミドのＮａ+塩   （ＭＧ５０１．５７）
【０１２６】
実施例５（ａ）  Ｏｌ−ＰＣ、４０ｍＭ；Ｃｈｏｌ、４０ｍＭ；Ｎ−オレイル−ＧＰＥ、５ｍＭ
Ｏｌ−ＰＣ                ４０．０ｍＭ；１．７３ｇ
Ｃｈｏｌ                  ４０．０ｍＭ；１．５５ｇ
Ｎ−オレオイル−ＧＰＥ      ５．０ｍＭ；０．２５ｇ
全質量：１００ｇ＝１００ｍｌ
製造
出発物質を、３０ｍｌのＣＨ2Ｃｌ2中に溶解させ、溶剤を取り去り、残留物を質量が一定になるまで乾燥させる。残留物を、０．３Ｍのプロパンジオール−１，２で、全体で１００ｇとし、５５℃に加熱する。
【０１２７】
ａ）５５℃で１０分間熱処理する。
【０１２８】
ｂ）５５℃で２０分間超音波処理（１００％）する。
【０１２９】
温かい内に０．２μで濾過し、＋４℃〜＋８℃で貯蔵する。
【０１３０】
実施例５（ｂ）  Ｏｌ−ＰＣ、４０ｍＭ；Ｃｈｏｌ、４０ｍＭ；Ｎ−オレイル−ＧＰＥ、１０ｍＭ
Ｏｌ−ＰＣ              ４０．０ｍＭ；１．７３ｇ
Ｃｈｏｌ                ４０．０ｍＭ；１．５５ｇ
Ｎ−オレオイル−Ａｌ    １０．０ｍＭ；０．５０ｇ
全質量：１００ｇ＝１００ｍｌ
製造
出発物質を、３０ｍｌのＣＨ2Ｃｌ2中に溶解させ、溶剤を取り去り、残留物を質量が一定になるまで乾燥させる。残留物を、０．３Ｍのプロパンジオール−１，２で、全体で１００ｇとし、５５℃に加熱する。
【０１３１】
ａ）５５℃で１０分間熱処理する。
【０１３２】
ｂ）５５℃で２０分間超音波処理（１００％）する。
【０１３３】
温かい内に０．２μで濾過し、＋４℃〜＋８℃で貯蔵する。
【国際調査報告】
2008517023.tif 000027
2008517023.tif 000028
2008517023.tif 000029
2008517023.tif 000030
2008517023.tif 000031
2008517023.tif 000032
2008517023.tif 000033
2008517023.tif 000034
2008517023.tif 000035
2008517023.tif 000036