(57)【要約】式（Ｉａ）：2008517969.tif 000083［式中：Ａはヒドロキシを示し、ＢはＣ（Ｏ）Ｒ３（ここで、Ｒ３は４−ｔｅｒｔ−ブチル−３−メトキシフェニルである）を示し；Ｄは１，３−チアゾール−２−イルまたは５−メチル−１，３−チアゾール−２−イルを示し；Ｅはピラジン−２−イルを示し；Ｇは１，３−チアゾール−２−イルメチル、１，３−チアゾール−４−イルメチル、１，２−チアゾール−３−イルメチル、または１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチルを示す］の抗ウイルス薬ならびにその塩、溶媒和物およびエステルは、その調製法およびＨＣＶ治療におけるその使用を提供する（ただし、Ａがエステル化され、−ＯＲ（ここで、Ｒは直鎖または分岐鎖アルキル、アラルキル、アリールオキシアルキルまたはアリールから選択される）を形成する場合、その場合はＲはｔｅｒｔ−ブチル以外の基である）。
2008517969.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉａ）：
【化１】
2008517969.tif 000079
［式中：Ａはヒドロキシを示し；
ＢはＣ（Ｏ）Ｒ３（ここで、Ｒ３は４−ｔｅｒｔ−ブチル−３−メトキシフェニルである）を示し；
Ｄは１，３−チアゾール−２−イルまたは５−メチル−１，３−チアゾール−２−イルを示し；
Ｅはピラジン−２−イルを示し；
Ｇは１，３−チアゾール−２−イルメチル、１，３−チアゾール−４−イルメチル、１，２−チアゾール−３−イルメチル、または１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチルを示す］
の化合物ならびにその塩、溶媒和物およびエステルから選択される少なくとも一の化学物質（ただし、Ａがエステル化され、−ＯＲ（ここで、Ｒは直鎖または分岐鎖アルキル、アラルキル、アリールオキシアルキルまたはアリールから選択される）を形成する場合、その場合はＲはｔｅｒｔ−ブチル以外の基である）。
【請求項２】
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸；
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−２−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸；
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，２−チアゾール−３−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸；
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，２−チアゾール−３−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸；
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸；
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸；
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−２−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸；および
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸；
からなる群より選択される式（Ｉａ）の化合物ならびにその塩、溶媒和物およびエステル、ならびに個々のエナンチオマーから選択される少なくとも一の化学物質。
【請求項３】
ウイルス感染を治療または予防する方法であって、それを必要とする対象に請求項１記載の式（Ｉａ）の化合物ならびにその塩、溶媒和物およびエステルから選択される有効量の少なくとも一の化学物質を投与することを含む方法。
【請求項４】
ウイルス感染がＨＣＶである、請求項３記載の方法。
【請求項５】
化学物質が経口剤形で投与される、請求項３記載の方法。
【請求項６】
薬物療法に用いるための式（Ｉａ）：
【化２】
2008517969.tif 000080
［式中：Ａはヒドロキシを示し；
ＢはＣ（Ｏ）Ｒ３（ここで、Ｒ３は４−ｔｅｒｔ−ブチル−３−メトキシフェニルである）を示し；
Ｄは１，３−チアゾール−２−イルまたは５−メチル−１，３−チアゾール−２−イルを示し；
Ｅはピラジン−２−イルを示し；
Ｇは１，３−チアゾール−２−イルメチル、１，３−チアゾール−４−イルメチル、１，２−チアゾール−３−イルメチル、または１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチルを示す］
の化合物ならびにその塩、溶媒和物およびエステルから選択される少なくとも一の化学物質（ただし、Ａがエステル化され、−ＯＲ（ここで、Ｒは直鎖または分岐鎖アルキル、アラルキル、アリールオキシアルキルまたはアリールから選択される）を形成する場合、その場合はＲはｔｅｒｔ−ブチル以外の基である）。
【請求項７】
薬物療法がウイルス感染の治療である、請求項６記載の式（Ｉａ）の化合物ならびにその塩、溶媒和物およびエステルから選択される少なくとも一の化学物質。
【請求項８】
ウイルス感染がＨＣＶである、請求項７記載の式（Ｉａ）の化合物ならびにその塩、溶媒和物およびエステルから選択される少なくとも一の化学物質。
【請求項９】
ウイルス感染の治療に対する医薬の製造において、式（Ｉａ）：
【化３】
2008517969.tif 000081
［式中：Ａはヒドロキシを示し；
ＢはＣ（Ｏ）Ｒ３（ここで、Ｒ３は４−ｔｅｒｔ−ブチル−３−メトキシフェニルである）を示し；
Ｄは１，３−チアゾール−２−イルまたは５−メチル−１，３−チアゾール−２−イルを示し；
Ｅはピラジン−２−イルを示し；
Ｇは１，３−チアゾール−２−イルメチル、１，３−チアゾール−４−イルメチル、１，２−チアゾール−３−イルメチル、または１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチルを示す］
の化合物ならびにその塩、溶媒和物およびエステルから選択される少なくとも一の化学物質の使用（ただし、Ａがエステル化され、−ＯＲ（ここで、Ｒは直鎖または分岐鎖アルキル、アラルキル、アリールオキシアルキルまたはアリールから選択される）を形成する場合、その場合はＲはｔｅｒｔ−ブチル以外の基である）。
【請求項１０】
ウイルス感染がＨＣＶである、請求項９記載の使用。
【請求項１１】
請求項１記載の式（Ｉａ）の化合物ならびにその塩、溶媒和物およびエステルから選択される少なくとも一の化学物質を少なくとも一の医薬上許容される希釈剤または担体と一緒に含む医薬製剤。
【請求項１２】
式（ＩＩ）：
【化４】
2008517969.tif 000082
［式中：Ａ’はアルコキシ、ベンジルオキシまたはシリルオキシ基であり；ＢはＣ（Ｏ）Ｒ３（ここで、Ｒ３は４−ｔｅｒｔ−ブチル−３−メトキシフェニルである）を示し；Ｄは１，３−チアゾール−２−イルまたは５−メチル−１，３−チアゾール−２−イルを示し；Ｅはピラジン−２−イルを示し、およびＧは１，３−チアゾール−２−イルメチル、１，３−チアゾール−４−イルメチル、１，２−チアゾール−３−イルメチル、または１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチルを示す］
の化合物の脱保護を含む請求項１記載の式（Ｉａ）の化合物の調製法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗ウイルス薬として有用な新規のＣ（４）−ピラジンアシルピロリジン誘導体に関する。具体的には、本発明は、新規のＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）阻害薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＨＣＶの感染は、世界中のヒトの肝臓病の主要な原因である。米国では、約４５０万人ものアメリカ人が、慢性的にＨＣＶに感染している。急性感染症の３０％しか症状を示さないが、感染した個人の８５％より多くが慢性的、持続的な感染症を発症する。ＨＣＶ感染の治療費は、１９９７年には５４．６億ドルであると予測されている。世界中で２億人以上もの人が、慢性的に感染していると予測される。ＨＣＶ感染は、全慢性肝臓病の４０−６０％および全肝臓移植の３０％に関与する。慢性ＨＣＶ感染は、米国において、全ての肝硬変、末期の肝臓病、および肝臓癌の３０％を占める。ＣＤＣは、ＨＣＶによる死亡の数は、２０１０年までに最低でも３８，０００／年に増加するであろうと予測する。
【０００３】
ウイルス表面抗原の高度の変動、多様なウイルス遺伝子型の存在、および立証された免疫の特異性によると、近い将来においてワクチンの開発に成功するとは考えにくい。α−インターフェロン（単独またはリバビリンとの併用）は、慢性ＨＣＶ感染の治療に対する承認から広く用いられている。しかしながら、副作用が、一般に、かかる治療に付随する：インフルエンザ様症候群、白血球減少症、血小板減少症、インターフェロンによるうつ病ならびにリバビリンにより誘導される貧血（Ｌｉｎｄｓａｙ，Ｋ．Ｌ．（１９９７）Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２６（ｓｕｐｐｌ  １）：７１Ｓ−７７Ｓ）。かかる治療は、他の５種類の主要なＨＣＶ遺伝子型により引き起こされる感染症と比べて、（発展した市場において全ＨＣＶ感染の約７５％を構成する）ＨＣＶ遺伝子型１により引き起こされる感染症に対してより低い効果のままである。残念なことに、患者の約５０−８０％しかかかる治療に応答せず（血清ＨＣＶのＲＮＡレベルの減少および肝臓酵素の正常化による測定）、治療を受けた患者の５０−７０％は治療の中断の６ヶ月以内に再発する。近年、インターフェロンの導入で、初期かつ持続的反応速度が大幅に良くなり、リバビリンとＰｅｇ−ＩＦＮの併用治療は、治療に対する判断基準となっている。しかしながら、副作用は併用療法に付随し、遺伝子型１を有する患者における応答阻害が、かかる疾患の管理の改善する機会を与える。
【０００４】
１９８９年に分子クローニングにより最初に同定され（Ｃｈｏｏ，Ｑ−Ｌら（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４４：３５９−３６２）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）は、現在も、輸血後非Ａ型、非Ｂ型肝炎（ＮＡＮＢＨ）の最も一般的な病原因子として広く認められている（Ｋｕｏ，Ｇら（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４４：３６２−３６４）。かかるゲノム構造および配列相同性によると、かかるウイルスは、フラビウイルス科ファミリー中の新属に属した。フラビウイルス属（例えば、黄熱病ウイルスおよびデングウイルス１−４型）およびペスチウイルス属（例えば、ウシウイルス性下痢ウイルス、ボーダー病ウイルスおよびブタコレラウイルス）などのフラビウイルス科の他のメンバーのように（Ｃｈｏｏ，Ｑ−Ｌら（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４４：３５９−３；Ｍｉｌｌｅｒ，Ｒ．Ｈ．およびＲ．Ｈ．Ｐｕｒｃｅｌｌ（１９９０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８７：２０５７−２０６１）、ＨＣＶは、正極性の一本鎖ＲＮＡ分子を含むエンペロープを持つウイルスである。ＨＣＶゲノムは、リポソーム内部進入部位（ＩＲＥＳ）として機能する約３４０ベースの長く、高度に保存された５’末端非翻訳領域（ＮＴＲ）を有する約９．６キロベース（ｋｂ）である（Ｗａｎｇ  ＣＹら「Ａｎ  ＲＮＡ  ｐｓｅｕｄｏｋｎｏｔ  ｉｓ  ａｎ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ｅｌｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｉｎｔｅｒｎａｌ  ｒｉｂｏｓｏｍｅ  ｅｎｔｒｙ  ｓｉｔｅ  ｌｏｃａｔｅｄ  ｗｉｔｈｉｎ  ｔｈｅ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ  ５’  ｎｏｎｃｏｄｉｎｇ  ｒｅｇｉｏｎ」ＲＮＡ−Ａ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＲＮＡ  Ｓｏｃｉｅｔｙ．１（５）：５２６−５３７，１９９５  Ｊｕｌ．）。かかる要素は、構造かつ非構造ウイルス性タンパク質を構成する約３０００個のアミノ酸のポリペプチドをコードしている一本鎖の長いオープン・リーディング・フレーム（ＯＲＦ）をコードする領域の後に続く。
【０００５】
細胞の細胞質中に注入すると、かかるＲＮＡは、構造的および非構造的ウウイルス性タンパク質を構成する約３０００個のアミノ酸のポリペプチド中で直接翻訳される。その後、かかる大きいポリペプチドは、宿主およびウイルスコード化プロテイナーゼの結合により個々の構造的および非構造的タンパク質中で処理される（Ｒｉｃｅ，Ｃ．Ｍ．（１９９６）ｉｎ  Ｂ．Ｎ．Ｆｉｅｌｄｓ，Ｄ．Ｍ．ＫｎｉｐｅおよびＰ．Ｍ．Ｈｏｗｌｅｙ（ｅｄｓ）Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  ２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ｐ９３１−９６０；Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．）。長ＯＲＦ末端の終止コドンに続いて、おおよそ３つの領域：様々な遺伝子型の間に不完全に保存された約４０塩基領域、可変長のポリ（Ｕ）／ポリピリミジン区域、および「３’Ｘ−テイル」とも呼ばれる高度に保存された９８塩基要素からなる３’ＮＴＲがある（Ｋｏｌｙｋｈａｌｏｖ，Ａ．ら（１９９６）Ｊ．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  ７０：３３６３−３３７１；Ｔａｎａｋａ，Ｔ．ら（１９９５）Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２１５：７４４−７４９；Ｔａｎａｋａ，Ｔ．ら（１９９６）Ｊ．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  ７０：３３０７−３３１２；Ｙａｍａｄａ，Ｎ．ら（１９９６）Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  ２２３：２５５−２６１）。３’ＮＴＲは、チンパンジーのＨＣＶ成長に必要であり、ウイルス性ＲＮＡ複製の開始および調節に機能すると考えられている安定な二次構造を形成すると予測される。
【０００６】
ＨＣＶのＮＳ５Ｂタンパク質（５９１個のアミノ酸、６５ｋＤａ）（Ｂｅｈｒｅｎｓ，Ｓ．Ｅ．ら（１９９６）ＥＭＢＯ  Ｊ．１５：１２−２２）は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ（ＲｄＲｐ）活性をコードし、他のＲＮＡウイルス性ポリメラーゼに存在する標準的なモチーフを含む。ＮＳ５Ｂタンパク質は、典型的に内（１ｂ分離株にわたるアミノ酸（ａａ）同一性、約９５−９８％）も典型的に間（遺伝子型１ａと１ｂ分離株の間のアミノ酸同一性、約８５％）もかなりよく保存されている。伝染性子孫ウイルス粒子の世代におけるＨＣＶのＮＳ５ＢのＲｄＲｐ活性の本質は、形式的に、チンパンジーにおいて証明された（Ａ．Ａ．Ｋｏｌｙｋｈａｌｏｖら（２０００）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，７４（４），ｐ．２０４６−２０５１）。したがって、ＮＳ５ＢのＲｄＲｐ活性の阻害（ＲＮＡ複製の阻害）は、ＨＣＶ感染を治療すると予測される。
【０００７】
世界的に優れたＨＣＶ遺伝子型は遺伝子型１であるが、これ自体は、１ａおよび１ｂと表示される２つの主要なサブタイプを有する。ロスアラモスＨＣＶデータベース（ｗｗｗ．ｈｃｖ．ｌａｎｌ．ｇｏｖ）中のエントリーから見ると（表１）、これらのサブタイプの分布には地域差がある：遺伝子型１ａは米国において最も豊富であるが、ヨーロッパおよび日本における大多数の配列は、遺伝子型１ｂ由来である。
【表１】
2008517969.tif 000003
【０００８】
いくつかの領域における遺伝子型１ａの流行は、遺伝子型１ａも遺伝子型１ｂも阻害することができる抗ウイルス剤を同定するのに非常に望ましい。これは、より広範な患者プールが、同一の医薬での治療により恩恵を受けることができることを意味する。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
前述したものに基づき、ＨＣＶの遺伝子型１ａおよび遺伝子型１ｂの両方の複製を阻害する能力について合成または生物学的化合物を同定するのに有意な要求がある。
【００１０】
ＰＣＴ公開番号ＷＯ２００３／０３７８９５は、一般に、遺伝子型１ｂに対しＨＣＶ阻害活性を有する、特定のアシルピロリジン化合物を含む特定の化合物を開示する。開示される化合物は、式（Ｉ）：
【化１】
2008517969.tif 000004
［式中：ＡはＯＲ１、ＮＲ１Ｒ２、またはＲ１を示し（Ｒ１およびＲ２は、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、およびヘテロアリールアルキルからなる群より選択され；または、Ｒ１およびＲ２は窒素原子と一緒になって結合し、５または６員の飽和環状基を形成する）；
ＢはＣ（Ｏ）Ｒ３（ここで、Ｒ３は、Ｃ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、およびヘテロアリールアルキルからなる群より選択される）を示し；
Ｃは、Ｃ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクリルを示し；
Ｄは、各々独立して、Ｒ４およびＲ５で所望により置換されていてもよい３個またはそれ以上の炭素原子、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒ３、ＳＯ２Ｒ３、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルで所望により置換されていてもよく；独立して、Ｎ、Ｏ；およびＳから選択され、１または２個の酸素原子で所望により置換されていてもよい１ないし３個のヘテロ原子を含む飽和または不飽和６員複素環を示し；ここで、６員環は環内炭素原子で結合していてもよく、飽和または不飽和５員または６員の炭素環または複素環と所望により縮合されていてもよく、Ｃ１−６アルキル、ハロ、ＯＲ８、Ｃ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ７、Ｃ（Ｏ）Ｒ３、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｒ３、ＮＲ６Ｒ７、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３、ＮＨＣＯ２Ｒ３、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＲ１Ｒ２、ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２、ＳＯ２Ｒ３、ニトロ、シアノ、オキソ、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクリルにより非縮合炭素原子上でそれ自身が所望により置換されていてもよい；
Ｒ４およびＲ５は、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、ハロ、ＯＲ８、Ｃ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ７、Ｃ（Ｏ）Ｒ３、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２Ｒ３、ＮＲ６Ｒ７、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ３、ＮＨＣＯ２Ｒ３、ＮＨＣ（Ｏ）ＮＲ１Ｒ２、ＳＯ２ＮＲ１Ｒ２、ＳＯ２Ｒ３、ニトロ、オキソ、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクリルから選択され；
Ｒ６およびＲ７は、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、アリールおよびヘテロアリールから選択され；および
Ｒ８は、水素、Ｃ１−６アルキル、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルを示し；
Ｅは、水素またはＣ１−６アルキルを示し；
Ｆは、水素、Ｃ１−６アルキル、アリールまたはヘテロアリールを示し；ならびに
Ｇは、水素、Ｃ１−６アルキル、ヘテロシクリルアルキル、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキルを示す］
ならびにその塩、溶媒和物およびエステルを有する（ただし、ＡがＯＲ１である場合、Ｒ１はｔｅｒｔ−ブチル以外の基である）。
【００１１】
意外にも、この度、ＷＯ２００３／０３７８９５にて総称的に開示され、特定の置換パターンを有する、本発明に記載の化合物が、ＷＯ２００３／０３７８９５に具体的に開示される化合物に比べて改良された特性を示すことが見出された。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、以下に示されるＣ（２）−ヘテロアリールメチル−Ｃ（４）−ピラジン−２−イルアシルピロリジン化合物、かかる化合物を含む医薬組成物およびウイルス感染、特に、ＨＣＶ感染を治療する化合物の使用に関する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明は、式（Ｉａ）：
【化２】
2008517969.tif 000005
［式中：Ａはヒドロキシを示し；
ＢはＣ（Ｏ）Ｒ３（ここで、Ｒ３は４−ｔｅｒｔ−ブチル−３−メトキシフェニルである）を示し；
Ｄは１，３−チアゾール−２−イルまたは５−メチル−１，３−チアゾール−２−イルを示し；
Ｅはピラジン−２−イルを示し；
Ｇは１，３−チアゾール−２−イルメチル、１，３−チアゾール−４−イルメチル、１，２−チアゾール−３−イルメチル、または１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチルを示す］
の化合物ならびにその塩、溶媒和物およびエステルから選択される少なくとも一の化学物質を提供する（ただし、Ａがエステル化され、−ＯＲ（Ｒは、直鎖または分岐鎖アルキル、アラルキル、アリールオキシアルキル、またはアリールから選択される）を形成する場合、その場合はＲはｔｅｒｔ−ブチル以外の基である）。
【００１４】
一の態様において、式（Ｉａ）のラセミ化合物の相対立体化学は、式（Ｉｐ）または（Ｉｑ）：
【化３】
2008517969.tif 000006
［式中：Ａ、Ｂ、Ｄ、ＥおよびＧは上記の式（Ｉａ）と同意義である］
により示される。
【００１５】
さらなる態様において、式（Ｉａ）のキラル化合物の絶対立体化学は、式（Ｉｐｐ）または（Ｉｑｑ）：
【化４】
2008517969.tif 000007
［式中：Ａ、Ｂ、Ｄ、ＥおよびＧは上記の式（Ｉａ）と同意義である］
により示される。
【００１６】
それぞれの式Ｉａ、Ｉｐ、Ｉｐｐ、ＩｑおよびＩｑｑについては、適当には、以下の置換基が好ましい：
一の態様において、Ａはヒドロキシである（すなわち、エステル結合ではない）。
一の態様において、Ｇは、１，３−チアゾール−４−イルメチルまたは１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチルを示す。さらなる態様において、Ｇは１，３−チアゾール−４−イルメチルを示す。別の態様において、Ｇは１，３−チアゾール−４−イルメチルを示し、Ｄは１，３−チアゾール−２−イルを示す。
一の態様において、式（Ｉａ）の化合物は、式（Ｉｐｐ）の化合物により示される。
【００１７】
本発明は、態様の全ての組み合わせ、本明細書に記載の適当な、便利でかつ好ましい置換基に及ぶことが理解される。
【００１８】
本発明の化学物質は、ＨＣＶポリメラーゼに対して改良された遺伝子型１ａ／１ｂの特性を示し、そのため、広い患者集団の男性に効果を得る可能性を有する。
【００１９】
「遺伝子型１ａ／１ｂの特性」なる語は、遺伝子型１ａおよび遺伝子型１ｂの野生型ＨＣＶにおけるＨＣＶポリメラーゼ酵素の阻害薬としての有効性を意味する。両遺伝子型における高い有効性は、有効であると考えられる。
【００２０】
本発明のさらなる態様として、ヒトまたは獣医の薬物療法、特に、ウイルス感染、特に、ＨＣＶ感染の治療または予防における使用に対する式（Ｉａ）の化合物およびその生理学上許容される塩、溶媒和物またはエステルから選択される少なくとも一の化学物質が提供される。
【００２１】
治療および／または処置に対する本明細書の出典は、疾患の阻止、遅延、予防、治療および療養を含むが、これに限定されるものではないことが理解されるであろう。ＨＣＶ感染の治療または予防に対する本明細書の出典は、肝線維症、肝硬変および肝細胞癌などのＨＣＶ関連疾患の治療または予防を含むことがさらに理解されるであろう。
【００２２】
本発明の別の態様によれば、ウイルス感染、特に、ＨＣＶ感染の治療および／予防に対する医薬の製造において、式（Ｉａ）の化合物およびその生理学上許容される塩、溶媒和物またはエステルから選択される少なくとも一の化学物質の使用が提供される。
【００２３】
さらなるまたは別の態様において、ウイルス感染、特にＨＣＶ感染を有するヒトまたは動物の対象の治療に対する方法が提供され、方法は、式（Ｉａ）の化合物およびその生理学上許容される塩、溶媒和物またはエステルから選択される有効量の少なくとも一の化学物質を前記ヒトまたは動物の対象に投与することを含む。
【００２４】
本発明の化合物は、１個またはそれ以上の非対称の炭素原子を含んでいてもよく、ラセミ体、ジアステレオ異性体および所望により活性型として存在してもよいことが理解されるであろう。
【００２５】
一の態様において、本発明の有用な化学物質は：
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸；
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−２−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸；
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，２−チアゾール−３−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸；
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，２−チアゾール−３−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸；
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸；
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸；
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−２−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸；および
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸からなる群より選択される式（Ｉａ）の化合物ならびにその塩、溶媒和物およびエステルならびに個々のエナンチオマーから選択されてもよい。
【００２６】
さらなる態様において、本発明の有用な化学物質は：
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸；
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸；
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸；
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸からなる群より選択される式（Ｉａ）の化合物ならびにその塩、溶媒和物およびエステル、ならびに個々のエナンチオマーから選択されていてもよい。
【００２７】
さらにさらなる態様において、本発明の有用な化学物質は：
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸；
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸からなる群より選択される式（Ｉａ）の化合物ならびにその塩、溶媒和物およびエステル、ならびに個々のエナンチオマーから選択されてもよい。
【００２８】
別の態様において、本発明の有用な化学物質は：
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸からなる群より選択される式（Ｉａ）の化合物ならびにその塩、溶媒和物およびエステル、ならびに個々のエナンチオマーから選択されてもよい。
【００２９】
医薬上許容される塩複合体もまた、本発明に含まれる。本発明はまた、式（Ｉａ）の化合物の生理学上許容される塩にも及ぶ。式（Ｉａ）の化合物の適当な生理学上許容される塩は、酸塩、例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムおよびテトラアルキルアンモニウムなど、または適当な酸、例えば、酢酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、イセチオン酸、ラクトビオン酸およびコハク酸などの有機カルボン酸；メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸などの有機スルホン酸ならびに塩酸、硫酸、リン酸およびスルファミン酸などの無機酸との一塩基性塩もしくは二塩基性塩を含む。
【００３０】
本発明はまた、式（Ｉａ）の化合物の溶媒和物、例えば、水和物に関する。
【００３１】
本発明はまた、式（Ｉａ）の化合物の医薬上許容されるエステル、例えば、カルボン酸エステル−ＣＯＯＲ（ここで、Ｒは、直鎖または分岐鎖アルキル、例えば、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、アルコキシアルキル（例、メトキシメチル）、アルコキシカルボニルアルキル（例、メトキシカルボニルメチル）、アシルオキシアルキル（例、ピバロイルオキシメチル）、アラルキル（例、ベンジル）、アリールオキシアルキル（例、フェノキシメチル）、アリール（例、所望によりハロゲン、Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシで置換されてもよいフェニルまたはアミノ）から選択される）に関する。特段の定めがない限り、アルキル部分は、好ましくは、１ないし１８個の炭素原子、特に、１ないし４個の炭素原子を含有するかかるエステル中に含まれる。アリール部分は、好ましくは、フェニル基を含むかかるエステル中に含まれる。
【００３２】
一の態様において、式（Ｉａ）の化合物は、親化合物、塩または溶媒和物の形態である。
【００３３】
本明細書に用いられる、患者に対し投与する医薬製剤中に含まれていてもよい成分（有効成分、例えば、有効成分、その塩または賦形剤）に関して用いられる「医薬上許容される」なる語は、医薬製剤中に含まれる他の成分と適合し、その移植患者に有害ではないという意味で成分を許容することをいう。
【００３４】
本発明の特定の化合物は、異なる互変異性型中に存在してもよいことがさらに理解されるであろう。全ての互変異性体は、本発明の範囲内にあると意図される。
【００３５】
Ａがヒドロキシである、式（Ｉａ）の化合物は、脱保護により式（ＩＩ）：
【化５】
2008517969.tif 000008
［式中：Ａ’は保護されたヒドロキシ基、例えば、アルコキシ、ベンジルオキシまたはシリルオキシ、例えば、トリ−（Ｃ１−４アルキル）−シリルオキシ基であり、Ｂ、Ｄ、ＥおよびＧは、上記の式（Ｉａ）と同意義である］
の化合物から調製してもよい。適当な保護基は、Ｔ  Ｗ  ＧｒｅｅｎｅおよびＰ  Ｇ  Ｍ  Ｗｕｔｓ‘Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ’，３ｒｄ  Ｅｄ（１９９９），Ｊ  ＷｉｌｅｙおよびＳｏｎｓに含まれるものから見出されうるが、これに限定されるものではない。
【００３６】
例えば、Ａ’がｔｅｒｔ−ブトキシであり、Ｂ、Ｄ、ＥおよびＧが上記の式（Ｉａ）と同意義である場合、適当な酸、例えば、トリフルオロ酢酸で処理する。所望により、反応は溶媒、例えば、ジクロロメタン中で実施される。好ましくは、温度は０ないし５０℃の範囲であり、より好ましくは２０ないし３０℃である。
例えば、Ａ’がベンジルオキシであり、Ｂ、Ｄ、ＥおよびＧが上記の式（Ｉａ）と同意義である場合、適当な触媒、例えば、炭素担体パラジウムの存在下で水素化分解する。適当に、反応は溶媒、例えば、エタノール中で実施される。好ましくは、温度は０ないし５０℃の範囲である。
例えば、Ａ’がアリールオキシであり、Ｂ、Ｄ、ＥおよびＧが上記の式（Ｉａ）と同意義である場合、適当な触媒、例えば、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）および適当なプロトン源、例えば、フェニルシランで処理する。反応は適当な溶媒、例えば、ジクロロメタン中で実施される。
例えば、Ａ’がトリ（メチル）シリルオキシであり、Ｂ、Ｄ、ＥおよびＧが上記の式（Ｉａ）と同意義である場合、適当なフッ化物源、例えば、フッ化テトラアンモニウムで処理する。反応は適当な溶媒、例えば、テトラヒドロフラン中で実施される。
【００３７】
式（Ｉａ）または（ＩＩ）の化合物は、式（ＩＩＩ）：
【化６】
2008517969.tif 000009
［式中：Ａ’’はヒドロキシまたはアルコキシ、ベンジルオキシまたはトリ−（Ｃ１−４アルキル）−シリルオキシ基であり、Ｄ、ＥおよびＧは、上記の式（Ｉａ）と同意義である］
の化合物と適当なアシル化剤、例えば、Ｒ３−Ｃ（Ｏ）−ｈａｌ（ここで、ｈａｌはハロゲン原子であり、好ましくは、クロロまたはブロモであり、Ｒ３は上記の式（Ｉａ）と同意義である）の反応により調製してもよい。好ましくは、反応は適当な塩基、例えば、トリエチルアミンの存在下において、適当な溶媒、例えば、ジクロロメタン中で実施される。好ましくは、温度は０ないし５０℃の範囲であり、より好ましくは、２０ないし３０℃である。所望により、反応は、溶媒の還流温度で実施されてもよい。
【００３８】
式（ＩＩＩ）の化合物は、式（ＩＶ）：
【化７】
2008517969.tif 000010
［式中：ＤおよびＧは上記の式（Ｉａ）と同意義であり、Ａ’’は上記の式（ＩＩＩ）と同意義である］
の化合物と式（Ｖ）：
【化８】
2008517969.tif 000011
［式中：Ｅは上記の式（Ｉａ）と同意義である］
の化合物の反応により調製してもよい。好ましくは、反応は、所望によりルイス酸触媒、例えば、臭化リチウムまたは酢酸銀、ならびに塩基、例えば、トリエチルアミン、１，８−ジアザビシクロ［５，４，０］ウンデス−７−エン（ＤＢＵ）またはテトラメチルグアニジンの存在下において、適当な溶媒、例えば、ＴＨＦまたはアセトニトリル中で実施される。好ましくは、温度は０ないし５０℃の範囲であり、より好ましくは、２０ないし３０℃である。一方、反応は、酸、例えば、酢酸の存在下において、適当な溶媒、例えば、ＴＨＦまたはアセトニトリル中で実施し、または反応は、触媒非存在下にて適当な溶媒、例えば、トルエン、キシレンまたはアセトニトリル中で式（ＩＶ）および式（Ｖ）の化合物を加熱することにより実施してもよい。
【００３９】
式（ＩＩＩ）の化合物はまた、式（ＶＩ）：
【化９】
2008517969.tif 000012
［式中：Ｇは上記の式（Ｉａ）と同意義であり、Ａ’’は上記の式（ＩＩＩ）と同意義である］
の化合物と式（Ｖ）の化合物および式Ｄ−ＣＨＯの化合物の反応によるワンポット合成で調製してもよい。好ましくは、反応は、所望によりルイス酸触媒、例えば、臭化リチウムまたは酢酸銀、ならびに塩基、例えば、トリエチルアミン、１，８−ジアザビシクロ［５，４，０］ウンデス−７−エン（ＤＢＵ）またはテトラメチルグアニジンの存在下において、適当な溶媒、例えば、ＴＨＦまたはアセトニトリル中で実施される。好ましくは、反応は、０ないし５０℃の範囲で、より好ましくは、２０ないし３０℃の温度で実施される。所望により、乾燥剤は、例えば、モレキュラーシーブを該工程にて使用してもよい。
【００４０】
式（ＩＶ）の化合物は、所望により適当な乾燥剤、例えば、リン酸マグネシウムの存在下において、適当な溶媒、例えば、ジクロロメタン中で式（ＶＩ）（Ｇは上記の式（Ｉａ）と同意義であり、Ａ’’は上記の式（ＩＩＩ）と同意義である）の化合物と式Ｄ−ＣＨＯ（Ｄは上記の式（Ｉａ）と同意義である）の化合物の反応により調製してもよい。好ましくは、反応は０ないし５０℃の範囲の温度で実施される。
【００４１】
式（ＶＩ）（Ｇは１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチルであり、Ａ’’はヒドロキシである）の化合物は、イオン交換樹脂、例えば、ＡｍｂｅｒｌｙｓｔＴＭ  １２０（Ｈ＋）の存在下において、（ＶＩＩ）：
【化１０】
2008517969.tif 000013
［式中：Ｇは１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチルであり、Ｍは金属カチオン、例えば、カリウムである］
の化合物と適当な酸、例えば、１０％水性塩酸の処理により調製してもよい。
【００４２】
式（ＶＩ）（Ｇは１，３−チアゾール−２−イルメチルまたは１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチルであり、Ａ’’はアルコキシ、ベンジルオキシまたはトリ−（Ｃ１−４アルキル）−シリルオキシ基である）の化合物は、従来のエステル化または保護基の製法による式（ＶＩ）（Ｇは１，３−チアゾール−２−イルメチルまたは１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチルであり、Ａ’’はヒドロキシである）の化合物の処理で調製してもよい。例えば、式（ＶＩ）（Ｇは１，３−チアゾール−２−イルメチルまたは１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチルであり、Ａ’’はｔｅｒｔ−ブトキシである）の化合物は、適当な酸触媒、例えば、７０％の過塩素酸の存在下において、式（ＶＩ）（Ｇは１，３−チアゾール−２−イルメチルまたは１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチルであり、Ａ’’はヒドロキシである）の化合物を適当なｔｅｒｔ−ブチルトランスファー剤、例えば、ｔｅｒｔ−ブチル酢酸で処理することにより調製してもよい。
【００４３】
式（ＶＩ）（Ｇは１，３−チアゾール−２−イルメチルまたは１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチルであり、Ａ’’はヒドロキシである）の化合物は、当業者に周知である。
【００４４】
式（ＶＩＩ）（Ｇは１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチル）の化合物は、さらに、適当な塩基、例えば、Ｍがカリウムである場合、炭酸カリウムの存在下において、および適当な溶媒、例えば、水性アセトニトリルの存在下において、式（ＶＩＩＩ）：
【化１１】
2008517969.tif 000014
の化合物と１Ｈ−ピラゾールの反応により調製してもよい。好ましくは、反応は５０−７０℃の範囲で、より好ましくは６０℃の温度で実施される。
【００４５】
式（ＶＩ）（Ｇは１，３−チアゾール−２−イルメチル、１，３−チアゾール−４−イルメチルまたは１，２−チアゾール−３−イルメチルであり、Ａ’’はアルコキシ、ベンジルオキシまたはトリ−（Ｃ１−４アルキル）−シリルオキシ基である）の化合物は、式（ＩＸ）：
【化１２】
2008517969.tif 000015
［式中：Ｇは１，３−チアゾール−２−イルメチル、１，３−チアゾール−４−イルメチルまたは１，２−チアゾール−３−イルメチルであり、Ａ’’はアルコキシ、ベンジルオキシまたはトリ−（Ｃ１−４アルキル）−シリルオキシ基である］
の化合物の酸、例えば、１５％の水性クエン酸での処理により調製してもよい。好ましくは、反応は適当な溶媒、例えば、ＴＨＦ中で実施される。
【００４６】
式（ＩＸ）の化合物は、式（Ｘ）：
【化１３】
2008517969.tif 000016
［式中：Ａ’’はアルコキシ、ベンジルオキシまたはトリ−（Ｃ１−４アルキル）−シリルオキシ基である］
の化合物と式Ｇ−ｈａｌ（Ｇは１，３−チアゾール−２−イルメチル、１，３−チアゾール−４−イルメチルまたは１，２−チアゾール−３−イルメチルであり、ｈａｌはハロ原子、好ましくは、クロロまたはブロモである）の化合物の反応により調製してもよい。一の態様において、反応は、適当な塩基、例えば、カリウムｔ−ブトキシドの存在下において実施される。一の態様において、反応は、適当な溶媒、例えば、ＴＨＦ中で実施される。一の態様において、反応は、適当な触媒、例えば、ヨードリチウムの存在下において実施される。一の態様において、反応は、−１０℃ないし室温の範囲で、適当には、０℃の温度で実施される。
【００４７】
式（Ｉａ）または（ＩＩ）の化合物はまた、式（ＸＩ）：
【化１４】
2008517969.tif 000017
［式中：Ａ’’はヒドロキシまたはヒドロキシ、ベンジルオキシまたはトリ−（Ｃ１−４アルキル）−シリルオキシ基であり、Ｂ、ＤおよびＥは式（Ｉａ）における記載と同意義である］
の化合物と式Ｇ−ｈａｌ（Ｇは式（Ｉ）における記載と同意義であり、ｈａｌはハロ原子であり、好ましくは、クロロまたはブロモである）の化合物の反応により調製してもよい。一の態様において、反応は適当な塩基、例えば、リチウムヘキサメチルジシラジド（ＬＨＭＤＳ）の存在下において、適当な溶媒、例えば、ＴＨＦ中で実施される。
【００４８】
式（ＸＩ）の化合物は、式（ＸＩＩ）：
【化１５】
2008517969.tif 000018
［式中：Ａ’’、ＤおよびＥは式（Ｉａ）における記載と同意義である］
の化合物と、適当なアシル化剤、例えば、Ｒ３−Ｃ（Ｏ）−ｈａｌ（ここで、ｈａｌはハロ原子であり、好ましくは、クロロまたはブロモであり、Ｒ３は式（Ｉａ）における記載と同意義である）の反応により調製してもよい。好ましくは、反応は適当な塩基、例えば、トリエチルアミンの存在下において、適当な溶媒、例えば、ジクロロメタン中で実施される。好ましくは、温度は０ないし５０℃の範囲であり、適当には、２０ないし３０℃である。所望により、反応は、溶媒の還流温度で実施してもよい。
【００４９】
式（ＸＩＩ）の化合物は、式（ＸＩＩＩ）：
【化１６】
2008517969.tif 000019
［式中：Ａ’’は式（ＩＩＩ）における記載と同意義である］
の化合物と式（Ｖ）の化合物および式Ｄ−ＣＨＯの化合物の反応によるワンポット合成で調製してもよい。好ましくは、反応は所望により、ルイス酸触媒、例えば、臭化リチウムまたは酢酸銀、ならびに塩基、例えば、トリエチルアミン、１，８−ジアザビシクロ［５，４，０］ウンデス−７−エン（ＤＢＵ）またはテトラメチルグアニジンの存在下において、適当な溶媒、例えば、ＴＨＦまたはアセトニトリル中で実施される。好ましくは、反応は０ないし５０℃の範囲の温度で、適当には、２０ないし３０℃で実施される。所望により、乾燥剤は、例えば、モレキュラーシーブを該工程にて使用してもよい。
【００５０】
式（Ｖ）、（ＶＩＩＩ）、（Ｘ）、（ＸＩＩＩ）、Ｇ−ｈａｌおよびＤ−ＣＨＯは、当該分野にて周知であるかまたは標準的な文献の製法により調製してもよい。
【００５１】
本発明は、ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−ジアステレオ異性体と式（Ｉ）または（ＩＩ）（Ａはヒドロキシ以外である）の化合物のｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−ジアステレオ異性体の相互変換する方法を提供することが理解されるであろう。例えば、メタノールなどの適当な溶媒の存在下において、水性水酸化ナトリウムなどの適当な塩基でｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−ジアステレオ異性体の処理をすることにより塩基触媒のエピマー化に付す。
【００５２】
式（Ｉａ）（Ａはエステルである）の化合物は、エステル化の標準的な文献製法で式（Ｉａ）（Ａはヒドロキシである）の化合物のエステル化により調製してもよい。
【００５３】
ジアステレオ異性体として存在する式（Ｉａ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＸＩ）および（ＸＩＩ）の化合物は、所望により、当業者に周知な技法、例えば、カラムクロマトグラフィーにより分離してもよい。
【００５４】
式（Ｉａ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＸＩ）および（ＸＩＩ）のラセミ化合物は、所望により、個々のエナンチオマーに分離してもよいことが理解されるであろう。かかる分離は、都合のよいことに、当該分野にて標準的な方法により達成されてもよい。例えば、式（Ｉａ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＸＩ）または（ＸＩＩ）のラセミ化合物は、キラル調製用ＨＰＬＣにより分離されてもよい。一方、適当な酸性または塩基性基、例えば、カルボン酸基、アミン基を含む、式（Ｉａ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＸＩ）および（ＸＩＩ）のラセミ化合物は、各々必要に応じて、キラル塩基または酸試薬で標準的なジアステレオ異性体塩の形成により分離されてもよい。かかる技法は、当業者において周知である。例えば、式（ＩＩＩ）のラセミ化合物は、適当な溶媒、例えば、ジクロロメタン、イソプロパノールまたはアセトニトリル中でキラル酸、例えば、（Ｒ）−（−）−１，１’−ビナフチル−２，２’−ジイル−リン酸水素で処理することにより分離されてもよい。続いて、式（ＩＩＩ）のエナンチオマーを適当な溶媒、例えば、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル中で、適当な塩基、例えば、トリエチルアミンで塩処理することにより得てもよい。続いて、式（ＩＩ）および／または（ＩＩＩ）の個々のエナンチオマーは、ラセミ化合物に関する上記の化学反応により式（Ｉａ）のエナンチオマー化合物に進行してもよい。
【００５５】
式（ＩＩＩ）および／または（ＸＩＩ）の個々のエナンチオマー化合物はまた、適当なキラル補助基またはキラル触媒試薬を用い、さらにかかるキラル補助基の付加または除去を含む、本明細書に記載の適当な官能基の相互変換の工程を実施する不斉合成の一般的方法により調製してもよいことも理解されるであろう。不斉合成のかかる一般的方法は、当業者に周知であり、「Ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，」Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９８４および／または「Ｃｈｉｒａｌ  Ａｕｘｉｌｉａｒｉｅｓ  ａｎｄ  Ｌｉｇａｎｄｓ  ｉｎ  Ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」，Ｗｉｌｅｙ，１９９５に記載のものを含むが、これに限定されるものではない。例えば、適当な一般的なキラル補助基は、キラルアルコール、例えば、メタノールまたは１−フェニルエタノール；キラルオキサゾリジノン、例えば、４−ベンジルオキサゾリジン−２−オンまたは４−イソプロピルオキサゾリジン−２−オン；キラルスルタム、例えば、カンファースルタム；またはキラルアミン、例えば、１フェニルエチルアミンまたは２−アミノ−２−フェニルエタノールを含む。適当な一般的なキラル触媒試薬は、所望により、金属塩、例えば、ＭｍＸｘ（ここで、Ｍは銀、コバルト、亜鉛、チタン、マグネシウムまたはマンガンであり、Ｘはハロゲン化物（例えば、塩化物または臭化物）、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、トリフルオロメチルスルホン酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩または硝酸塩であり、ｍおよびｘは１、２、３または４である）の存在下および所望により、塩基、例えば、トリエチルアミンの存在下において、キラル塩基性アミンおよびキラルリガンド、例えば、Ｎ−メチルエフェドリン、１−フェニル−２−（１−ピロリジニル）−１−プロパノール、３−（ジメチルアミノ）−１，７，７−トリメチルビシクロ［２．２．１］−ヘプタン−２−オール、３，４−ビス（ジフェニルホスファニル）−１−（フェニルメチル）−ピロリジン、シンコニン（ｃｈｉｎｃｈｏｎｉｎｅ）、シンコニジン（ｃｈｉｎｃｈｏｎｉｄｉｎｅ）、スパルテイン、ヒドロキニーネまたはキニーネ、ＢＩＮＡＰあるいはキラルビス（オキサゾリン）（ＢＯＸ）リガンドおよび誘導体を含む。これらの全てのキラル補助基またはキラル触媒試薬は、当業者に十分に記載されている。キラル補助基またはキラル触媒試薬を用いて不斉合成による様々なキラルピロリジンの調製の一般的な例示は、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．，（２００２），４１：４２３６；Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．，（１９９８），９８：８６３；Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，（２００２），１２４：１３４００；Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，（２００３），１２５：１０１７５；Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．，（２００３），５，５０４３；Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，（１９９５），５１：２７３；Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ：Ａｓｙｍｍ．，（１９９５），６：２４７５；Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ：Ａｓｙｍｍ．，（２００１），１２：１９７７；Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ：Ａｓｙｍｍ．，（２００２），１３：２０９９およびＴｅｔ．Ｌｅｔｔ．，（１９９１），４１：５８１７に記載されるものを含むが、これに限定��れるものではない。
【００５６】
特定の態様において、式（ＩＩＩａ）：
【化１７】
2008517969.tif 000020
［式中：Ａ’’、Ｄ、ＥおよびＧは上記の式（ＩＩＩ）と同意義であり、＊は鏡像異性的に豊富なキラル中心を示す］
のキラルピロリジン化合物は、不斉反応条件下、本明細書の前記の式（Ｖ）の化合物と式（ＩＶ）の化合物の反応により調製してもよい。かかる不斉反応条件を、例えば、本明細書の前記のキラル触媒試薬の反応混合物を含むことにより提供してもよいことが当業者に理解されるであろう。
一の態様において、反応は、適当なキラル触媒試薬、例えば、（−）−Ｎ−メチルエフェドリンおよび適当な金属塩、例えば、臭化マンガン（ＩＩ）の存在下において、適当な溶媒、例えば、アセトニトリル中で実施される。好ましくは、反応は−３０℃ないし室温の範囲内の温度で、適当には−２０℃で実施される。
【００５７】
別の態様において、反応は、適当な触媒試薬、例えば、（Ｓ）−（−）−２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，’１−ビナフチル（Ｓ−ＢＩＮＡＰ）、および適当な金属塩、例えば、酢酸銀の存在下、適当な塩基、例えば、ジイソプロピルエチルアミンの存在下において、適当な溶媒、例えば、所望によりトルエンと共溶媒和したアセトニトリル中で実施される。好ましくは、反応は−１５℃ないし室温の範囲内の温度で、適当には−５℃で実施される。
【００５８】
所望により、かかる不斉反応から生じる式（ＩＩＩａ）の化合物の主要なキラルジアステレオ異性体は、当業者に周知な標準的な精製技法、例えば、クロマトグラフィーまたは分別結晶によりさらに鏡像異性的に豊富であってもよい。好適な結晶化方法は、主要なキラルジアステレオ異性体の塩、例えば、塩酸塩または（Ｒ）−（−）−１，１’−ビナフチル−２，２’−ジイル−リン酸水素塩の分別結晶である。
式（ＩＩＩａ）の化合物の塩酸塩は、適当な溶媒、例えば、ジエチルエーテル中で無水塩酸と式（ＩＩＩａ）の化合物を処理することにより調製してもよい。好ましくは、反応は、−１０ないし１０℃の範囲内の温度で実施される。
式（ＩＩＩａ）の化合物の（Ｒ）−（−）−１，１’−ビナフチル−２，２’−ジイル−リン酸水素塩は、式（ＩＩＩ）のラセミ化合物の分離について本明細書の前記のとおりに調製してもよい。
【００５９】
上記の適当なさらなる工程で、式（Ｉａ）、（ＩＩ）および／または（ＸＩ）のキラル化合物は、式（ＩＩＩ）、例えば、（ＩＩＩａ）または式（ＸＩＩ）のキラル化合物から調製してもよいことが理解されるであろう。
【００６０】
化学官能性の適当な操作および保護のために、式（Ｉａ）の化合物の合成は、上記のものおよび実験の項に記載のものに類似している方法により達成される。適当な保護基は、Ｔ  Ｗ  ＧｒｅｅｎｅおよびＰ  Ｇ  Ｍ  Ｗｕｔｓ「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」，３ｒｄ  Ｅｄ（１９９９），Ｊ  ＷｉｌｅｙおよびＳｏｎｓに含まれるものから見出されうるが、これに限定されるものではない。
【実施例】
【００６１】
中間体１
２−［Ｎ−（ジフェニルメチレン）アミノ］−３−（１，３−チアゾール−４−イル）プロパン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化１８】
2008517969.tif 000021
パートＡ
（氷浴）冷却した２−［Ｎ−（ジフェニルメチレン）アミノ］エタン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９８２，４７，２６６３；４２．３ｇ、１４３ｍｍｏｌ）の乾ＴＨＦ（４５０ｍＬ）中溶液に、窒素雰囲気下、１Ｍのカリウムｔ−ブトキシドのＴＨＦ（１４６ｍＬ）中溶液を２５分かけて（滴下漏斗で）滴下した。混合物を氷浴中でさらに４５分間攪拌した。
パートＢ
独立してこの間に、塩酸４−（クロロメチル）−１，３−チアゾール（２５．５ｇ、１５０ｍｍｏｌ）を、以下のように新たに遊離塩基に変換した：塩酸をジクロロメタン（５００ｍＬ）と合わせ、５％ｗ／ｖ水性重炭酸ナトリウム溶液（３７５ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、慎重に蒸発し（回転式蒸発器；８０ｔｏｒｒ、水浴２５℃）、遊離塩基を得た。
パートＣ
（パートＢで形成された）４−（クロロメチル）−１，３−チアゾールは、ＴＨＦ（１００ｍＬ）で溶解し、氷浴温度で反応を維持しながら、パートＡからの反応混合物に３０分かけて（滴下漏斗で）滴下した。固体無水ヨウ化リチウム（１ｇ、７．５ｍｍｏｌ）を、アシル化剤の添加を開始した５分後に、直接反応混合物に添加した。滴下漏斗を、さらに反応物に添加した乾ＴＨＦ（５０ｍＬ）ですすいだ。反応物を４５分かけて氷浴温度で攪拌し、３０分かけて室温に加温し、飽和ブライン（４００ｍＬ）、水（２００ｍＬ）および酢酸エチル（８００ｍＬ）の混合物の間で分配する前に、室温でさらに２．５時間攪拌した。有機層を分離し、水層をさらに酢酸エチルで再抽出した（２ｘ３００ｍＬ）。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発し、標記化合物を得（５７．８ｇ、粗製物）、さらに精製することなく用いた。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ８．６５（ｄ、１Ｈ）、７．５５−７．６２（ｍ、２Ｈ）、７．２−７．５５（ｍ、６Ｈ）、７．０５（ｄ、１Ｈ）、６．７８−６．８７（ｍ、２Ｈ）、４．３６−４．４１（ｍ、１Ｈ）、３．４７−３．５４（ｍ、１Ｈ）、３．３６−３．４４（ｍ、１Ｈ）および１．４４（ｓ、９Ｈ）。
【００６２】
中間体２
２−アミノ−３−（１，３−チアゾール−４−イル）プロパン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化１９】
2008517969.tif 000022
アルゴン下、２−［Ｎ−（ジフェニルメチレン）アミノ］−３−（１，３−チアゾール−４−イル）プロパン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体１に記載の同様の方法で調製；２０ｇ）のＴＨＦ（１５０ｍＬ）溶液に、クエン酸の水溶液（１５％ｗ／ｖ、１５０ｍＬ）を添加した。混合物を室温で６時間攪拌し、一晩静置し、次いで、ＴＨＦの大部分を減圧下で除去し（回転式蒸発器；２５℃の水浴）、１Ｍの水性塩酸（６０ｍＬ）を添加した。混合物をジエチルエーテル（２ｘ２００ｍＬ）で抽出し、合わせたエーテル抽出物を水で逆抽出した（５０ｍＬ）。合わせた水層をさらにジエチルエーテルで抽出した（１００ｍＬ）。全てのエーテル層を廃棄した。続いて、水層を炭酸カリウムで慎重にｐＨ９．５に合わせ、ブライン（１００ｍＬ）を添加し、混合物をジエチルエーテルで抽出した（４ｘ２００ｍＬ）。これらの合わせたエーテル層を硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下で溶媒を除去し、油である標記化合物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ８．７７（ｄ、１Ｈ）、７．０８（ｄ、１Ｈ）、３．７７−３．８５（ｍ、１Ｈ）、３．２２−３．３２（ｍ、１Ｈ）、３．０２−３．１３（ｍ、１Ｈ）および１．４２（ｓ、９Ｈ）。アミンプロトンは観察されなかった。
【００６３】
中間体３
２−［Ｎ−（１，３−チアゾール−２−イルメチレン）アミノ］−３−（１，３−チアゾール−４−イル）プロパン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化２０】
2008517969.tif 000023
２−アミノ−３−（１，３−チアゾール−４−イル）プロパン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体２、９．１３ｇ、４０ｍｍｏｌ）、１，３−チアゾール−２−カルボキサアルデヒド（４．５２ｇ、４０ｍｍｏｌ）および硫酸マグネシウム（約５ｇ）のジクロロメタン（８０ｍＬ）中混合物を、室温で１８時間攪拌した。反応混合物を濾過し、濾液を蒸発し、油として標記化合物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ８．７５（ｄ、１Ｈ）、８．２３（ｓ、１Ｈ）、７．９０（ｄ、１Ｈ）、７．４３（ｄｄ、１Ｈ）、７．０３（ｄ、１Ｈ）、４．５０（ｄｄ、１Ｈ）、３．５８（ｄｄ、１Ｈ）、３．３４（ｄｄ、１Ｈ）および１．４５（ｓ、９Ｈ）。
【００６４】
中間体４
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）−ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化２１】
2008517969.tif 000024
２−［Ｎ−（１，３−チアゾール−２−イルメチレン）アミノ］−３−（１，３−チアゾール−４−イル）プロパン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体３、１３．７２ｇ、４０ｍｍｏｌ）、ビニルピラジン（４．２４ｇ、４０ｍｍｏｌ）、臭化リチウム（６．９６ｇ、８０ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（８．４０ｍＬ、６０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１１０ｍＬ）中混合物を、窒素下、室温で２４時間攪拌した。塩化アンモニウムの飽和溶液（２５０ｍＬ）を添加し、混合物を酢酸エチルで抽出した（２ｘ３００ｍＬ）。抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発した。残渣を、溶離液として酢酸エチル−メタノール（９５：５  ｖ／ｖ）を用いてシリカゲル上のクロマトグラフィーに付して精製し、ゴムとして標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２０Ｈ２３Ｎ５Ｏ２Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：４３０
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝４３０
【００６５】
中間体５
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化２２】
2008517969.tif 000025
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体４、１０．９０ｇ、２５．４ｍｍｏｌ）、塩化３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル（９．１０ｇ、４３．２ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（９．７１ｍＬ）のジクロロメタン（２００ｍＬ）中混合物を、室温で４時間攪拌した。混合物を水で洗浄し、疎水性フリットを通すことにより乾燥させ、蒸発した。残渣を、溶離液としてシクロヘキサン−酢酸エチル（２：１  ｖ／ｖ）、次いで、酢酸エチルを用いてシリカゲル上のクロマトグラフィーに付して精製し、固体として標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ３２Ｈ３７Ｎ５Ｏ４Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：６２０
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝６２０
【００６６】
中間体６
２−［Ｎ−（ジフェニルメチレン）アミノ］−３−（１，３−チアゾール−２−イル）プロパン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエスエル
【化２３】
2008517969.tif 000026
標記化合物を、４−（クロロメチル）−１，３−チアゾールの代わりに２−（クロロメチル）−１，３−チアゾールを用いて、中間体１と同様の方法で調製した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ７．６５（ｍ、３Ｈ）、７．４０−７．３０（ｍ、６Ｈ）、７．１９（ｄ、１Ｈ）、６．９１（ｍ、２Ｈ）、４．３８（ｄｄ、１Ｈ）、３．６５（ｍ、２Ｈ）および１．４３（ｓ、９Ｈ）。
【００６７】
中間体７
２−アミノ−３−（１，３−チアゾール−２−イル）プロパン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化２４】
2008517969.tif 000027
標記化合物を、中間体１の代わりに中間体６を用いて、中間体２と同様の方法で調製した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ７．７０（ｄ、１Ｈ）、７．２１（ｄ、１Ｈ）、３．７９（ｄｄ、１Ｈ）、３．４２（ｄｄ、１Ｈ）、３．２４（ｄｄ、１Ｈ）、１．７４（ｂｒｏａｄ  ｓ、２Ｈ）および１．４２（ｓ、９Ｈ）。
【００６８】
中間体８
２−［Ｎ−（１，３−チアゾール−２−イルメチレン）アミノ］−３−（１，３−チアゾール−２−イル）プロパン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化２５】
2008517969.tif 000028
標記化合物を、中間体２の代わりに中間体７を用いて、中間体３と同様の方法で調製した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ８．３９（ｓ、１Ｈ）、７．９３（ｄ、１Ｈ）、７．７０（ｄ、１Ｈ）、７．４６（ｄ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、１Ｈ）、４．５１（ｄｄ、１Ｈ）、３．７７（ｄｄ、１Ｈ）、３．５９（ｄｄ、１Ｈ）および１．４５（ｓ、９Ｈ）。
【００６９】
中間体９
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−２−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）−ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化２６】
2008517969.tif 000029
標記化合物を、中間体３の代わりに中間体８を用いて、中間体４と同様の方法で調製した。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２０Ｈ２３Ｎ５Ｏ２Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：４３０
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝４３０。
【００７０】
中間体１０
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−２−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化２７】
2008517969.tif 000030
標記化合物を、中間体４の代わりに中間体９を用いて、中間体５と同様の方法で調製した。
ＭＳ（測定値）（Ｃ３２Ｈ３７Ｎ５Ｏ４Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：６２０
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝６２０．
【００７１】
中間体１１
２−［Ｎ−（ジフェニルメチレン）アミノ］−３−（１，２−チアゾール−３−イル）プロパン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化２８】
2008517969.tif 000031
標記化合物を、４−（クロロメチル）−１，３−チアゾールの代わりに３−（ブロモメチル）−１，２−チアゾールを用いて、中間体１と同様の方法で調製した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ８．５１（ｄ、１Ｈ）、７．６１−７．１８（ｍ、８Ｈ）、７．０８（ｄｄ、１Ｈ）、６．８３（ｍ、２Ｈ）、４．３８（ｄｄ、１Ｈ）、３．４８（ｄ、２Ｈ）および１．４３（ｓ、９Ｈ）。
【００７２】
中間体１２
２−アミノ−３−（１，２−チアゾール−３−イル）プロパン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化２９】
2008517969.tif 000032
標記化合物を、中間体１の代わりに中間体１１を用いて、中間体２と同様の方法で調製した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ８．６０（ｄ、１Ｈ）、７．１３（ｄ、１Ｈ）、３．８４（ｄｄ、１Ｈ）、３．２９（ｄｄ、１Ｈ）、３．１５（ｄｄ、１Ｈ）および１．４３（ｓ、９Ｈ）。
【００７３】
中間体１３
２−［［Ｎ−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）メチレン］アミノ］−３−（１，２−チアゾール−３−イル）プロパン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化３０】
2008517969.tif 000033
標記化合物を、中間体２の代わりに中間体１２および１，３−チアゾール−２−カルボキサアルデヒドの代わりに５−メチル−１，３−チアゾール−２−カルボキサアルデヒドを用いて、中間体３と同様の方法で調製した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ８．５３（ｄ、１Ｈ）、８．２３（ｄ、１Ｈ）、７．５６（ｄ、１Ｈ）、７．０８（ｄ、１Ｈ）、４．５０（ｄｄ、１Ｈ）、３．５７（ｄｄ、１Ｈ）、３．３９（ｄｄ、１Ｈ）、２．５０（ｄ、３Ｈ）および１．４４（ｓ、９Ｈ）。
【００７４】
中間体１４
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，２−チアゾール−３−イル−メチル）−ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化３１】
2008517969.tif 000034
標記化合物を、中間体３の代わりに中間体１３を用いて、中間体４と同様の方法で調製した。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２１Ｈ２５Ｎ５Ｏ２Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：４４４
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝４４４
【００７５】
中間体１５
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，２−チアゾール−３−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化３２】
2008517969.tif 000035
標記化合物を、中間体４の代わりに中間体１４を用いて、中間体５と同様の方法で調製した。
ＭＳ（測定値）（Ｃ３３Ｈ３９Ｎ５Ｏ４Ｓ２＋  Ｈ）＋：６３４
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝６３４
【００７６】
中間体１６
２−［Ｎ−（１，３−チアゾール−２−イルメチレン）アミノ］−３−（１，２−チアゾール−３−イル）プロパン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化３３】
2008517969.tif 000036
標記化合物を、中間体２の代わりに中間体１２を用いて、中間体３と同様の方法で調製した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ８．５４（ｄ、１Ｈ）、８．３４（ｓ、１Ｈ）、７．９２（ｄ、１Ｈ）、７．４４（ｄｄ、１Ｈ）、７．１０（ｄ、１Ｈ）、４．５４（ｄｄ、１Ｈ）、３．６０（ｄｄ、１Ｈ）、３．４２（ｄｄ、１Ｈ）および１．４３（ｓ、９Ｈ）。
【００７７】
中間体１７
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，２−チアゾール−３−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）−ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化３４】
2008517969.tif 000037
標記化合物を、中間体３の代わりに中間体１６を用いて、中間体４と同様の方法で調製した。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２０Ｈ２３Ｎ５Ｏ２Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：４３０
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝４３０
【００７８】
中間体１８
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，２−チアゾール−３−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化３５】
2008517969.tif 000038
標記化合物を、中間体４の代わりに中間体１７を用いて、中間体５と同様の方法で調製した。
ＭＳ（測定値）（Ｃ３２Ｈ３７Ｎ５Ｏ４Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：６２０
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝６２０
【００７９】
中間体１９
２−アミノ−３−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）プロパン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化３６】
2008517969.tif 000039
２−アミノ−３−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）プロパン酸（１０．２ｇ、６５．９ｍｍｏｌ）の酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（４００ｍＬ）中攪拌懸濁液に、７０％水性過塩素酸の溶液（１５．７ｍＬ）を添加した。混合物を、室温で０．５時間攪拌し、次いで、２０時間静置した。反応混合物を、酢酸エチルで希釈し、次いで、飽和水性重炭酸ナトリウムおよび固体重炭酸ナトリウムの組み合わせを用いて中和した。水相を分離し、酢酸エチルで抽出した。有機相を合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、蒸発し、油である標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ１０Ｈ１７Ｎ３Ｏ２  ＋  Ｈ）＋：２１２
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝２１２
【００８０】
中間体２０
２−［［Ｎ−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）メチレン］アミノ］−３−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）プロパン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化３７】
2008517969.tif 000040
標記化合物を、中間体２の代わりに中間体１９および１，３−チアゾール−２−カルボキサアルデヒドの代わりに５−メチル−１，３−チアゾール−２−カルボキサアルデヒドを用いて、中間体３と同様の方法で調製した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ７．９８（ｓ、１Ｈ）、７．５６（ｂｄ、１Ｈ）、７．５０（ｂｄ、１Ｈ）、７．３４（ｄ、１Ｈ）、６．１３（ｔ、１Ｈ）、４．８２−４．７３（ｍ、１Ｈ）、４．５０−４．４３（ｍ、２Ｈ）、２．５１（ｓ、３Ｈ）および１．４７（ｓ、９Ｈ）。
【００８１】
中間体２１
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル−メチル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化３８】
2008517969.tif 000041
標記化合物を、中間体３の代わりに中間体２０を用いて、中間体４と同様の方法で調製した。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２１Ｈ２６Ｎ６Ｏ２Ｓ  ＋  Ｈ）＋：４２７
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝４２７
【００８２】
中間体２２
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化３９】
2008517969.tif 000042
標記化合物を、中間体４の代わりに中間体２１を用いて、中間体５と同様の方法で調製した。
ＭＳ（測定値）（Ｃ３３Ｈ４０Ｎ６Ｏ４Ｓ  ＋  Ｈ）＋：６１７
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝６１７
【００８３】
中間体２３
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）−ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化４０】
2008517969.tif 000043
モレキュラーシーブ（３Å、０．７５ｇ）を、１，３−チアゾール−２−カルボキサアルデヒド（０．１７０ｍＬ）および中間体１９（３１７ｍｇ）の乾テトラヒドロフラン（４．５ｍＬ）中溶液に添加した。混合物を、窒素下、室温で１８時間攪拌し、次いで、臭化リチウム（２６０ｍｇ）、ビニルピラジン（１９１ｍｇ）およびトリエチルアミン（０．２５１ｍＬ）で処理した。混合物を、窒素下、室温で一晩攪拌した。酢酸エチル（１０ｍＬ）を添加し、モレキュラーシーブを濾過により除去した。濾液を飽和塩化アンモニウム溶液（１０ｍＬ）で洗浄し、有機溶液を分離し、水性溶液を酢酸エチル（２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を、硫酸マグネシウムで乾燥さえ、濾過し、減圧下で蒸発した。残渣を、溶離液として酢酸エチルを用いてシリカゲル上のクロマトグラフィーに付して精製し、固体として標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２０Ｈ２４Ｎ６Ｏ２Ｓ  ＋  Ｈ）＋：４１３
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝４１３
【００８４】
中間体２４
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化４１】
2008517969.tif 000044
標記化合物を、中間体４の代わりに中間体２３を用いて、中間体５と同様の方法で調製した。
ＭＳ（測定値）（Ｃ３２Ｈ３８Ｎ６Ｏ４Ｓ  ＋  Ｈ）＋：６０３
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝６０３
【００８５】
中間体２５
２−［［Ｎ−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）メチレン］アミノ］−３−（１，３−チアゾール−２−イル）プロパン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化４２】
2008517969.tif 000045
標記化合物を、中間体２の代わりに中間体７および１，３−チアゾール−２−カルボキサアルデヒドの代わりに５−メチル−１，３−チアゾール−２−カルボキサアルデヒドを用いて、中間体３と同様の方法で調製した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２８（ｓ、１Ｈ）、７．６９（ｄ、１Ｈ）、７．６０（ｄ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、１Ｈ）、４．４６（ｍ、１Ｈ）、３．７５（ｄｄ、１Ｈ）、３．５８（ｄｄ、１Ｈ）、２．５０（ｓ、３Ｈ）および１．４２（ｓ、９Ｈ）。
【００８６】
中間体２６
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−２−イル−メチル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化４３】
2008517969.tif 000046
標記化合物を、中間体３の代わりに中間体２５を用いて、中間体４と同様の方法で調製した。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２１Ｈ２５Ｎ５Ｏ２Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：４４４
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝４４４
【００８７】
中間体２７
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−２−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化４４】
2008517969.tif 000047
標記化合物を、中間体４の代わりに中間体２６を用いて、中間体５と同様の方法で調製した。
ＭＳ（測定値）（Ｃ３３Ｈ３９Ｎ５Ｏ４Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：６３４
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝６３４
【００８８】
中間体２８
２−［［Ｎ−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）メチレン］アミノ］−３−（１，３−チアゾール−４−イル）プロパン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化４５】
2008517969.tif 000048
標記化合物を、１，３−チアゾール−２−カルボキサアルデヒドの代わりに５−メチル−１，３−チアゾール−２−カルボキサアルデヒドを用いて、中間体３と同様の方法で調製した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ８．７７（ｄ、１Ｈ）、８．１１（ｓ、１Ｈ）、７．５５（ｂｒ  ｓ、１Ｈ）、７．０３（ｄ、１Ｈ）、４．４５（ｄｄ、１Ｈ）、３．５６（ｄｄ、１Ｈ）、３．３２（ｍ、１Ｈ）、２．５０（ｓ、３Ｈ）および１．４４（ｓ、９Ｈ）。
【００８９】
中間体２９
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イル−メチル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化４６】
2008517969.tif 000049
標記化合物を、中間体３の代わりに中間体２８を用いて、中間体４と同様の方法で調製した。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２１Ｈ２５Ｎ５Ｏ２Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：４４４
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝４４４。
【００９０】
中間体３０
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化４７】
2008517969.tif 000050
標記化合物を、中間体４の代わりに中間体２９を用いて、中間体５と同様の方法で調製した。
ＭＳ（測定値）（Ｃ３３Ｈ３９Ｎ５Ｏ４Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：６３４
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝６３４
【００９１】
中間体３１
（Ｒ）−（−）−１，１’−ビナフチル−２，２’−ジイル−リン酸水素とｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステルのキラルジアステレオ異性体塩Ａ
【化４８】
2008517969.tif 000051
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）−ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体４、１０．８ｇ、２５．１ｍｍｏｌ）および（Ｒ）−１，１’−ビナフチル−２，２’−ジイル−リン酸水素（８．７６ｇ、２５．１ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（５５ｍＬ）中で懸濁し、攪拌しながら加熱還流し、透明な溶液を得た。室温に冷却した後、混合物を、さらに１時間氷で冷却しながら攪拌し、析出した固体を濾過し、次いで、さらにアセトニトリル（５５ｍＬ）の一部でスラリー状にした。混合物を、さらに１時間氷で冷却しながら攪拌し、固体を濾過し、氷冷アセトニトリル（５５ｍＬ）で洗浄し、減圧下で４０℃に乾燥し、標記化合物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ８．７５（ｄ、１Ｈ）、８．３０（ｍ、２Ｈ）８．２３（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｍ、４Ｈ）、７．５４（ｍ、２Ｈ）、７．４２（ｍ、５Ｈ）、７．３５（ｄ、１Ｈ）、７．２５（ｍ、２Ｈ）、６．８８（ｓ、１Ｈ）、５．６４（ｍ、１Ｈ）、４．２５（ｍ、１Ｈ）、３．６８（ｍ、２Ｈ）、３．１７（ｍ、１Ｈ）、２．９０（ｍ、１Ｈ）および１．４１（ｓ、９Ｈ）。アミンプロトンは見られなかった。
【００９２】
中間体３２
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステルのエナンチオマーＡ
【化４９】
2008517969.tif 000052
中間体３１（１５ｇ、１９，３ｍｍｏｌ）をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１５０ｍＬ）中で懸濁し、攪拌しながらトリエチルアミン（２．９６ｍＬ、２１．２ｍｍｏｌ）を添加した。１時間後、固体を濾過し、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１５０ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を油に蒸発し、シクロヘキサンとの磨砕で結晶化した。固体を濾過し、洗浄し、減圧下で乾燥させ、標記化合物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ８．７６（ｄ、１Ｈ）、８．３０（ｄｄ、１Ｈ）、８．２４（ｄ、１Ｈ）、８．１６（ｄ、１Ｈ）、７．４６（ｄ、１Ｈ）、７．２３（ｄ、１Ｈ）、７．０２（ｄ、１Ｈ）、５．０３（ｄ、１Ｈ）、３．９１（ｄｄ、１Ｈ）、３．６６（ｂｒ、１Ｈ）、３．４１（ｄ、１Ｈ）、３．３５（ｄ、１Ｈ）、３．０７（ｄｄ、１Ｈ）、２．５５（ｄｄ、１Ｈ）および１．４６（ｓ、９Ｈ）。
１Ｈ  ＮＭＲは、かかる化合物が、中間体４に記載の対応するラセミ体と一致することを示した。溶離液としてヘプタン−エタノール（１：１  ｖ／ｖ）を用いるキラルセルＯＤ−Ｈカラム上の分析用キラルＨＰＬＣによる対応するラセミ中間体４と中間体３２の比較は、最初に溶出するエナンチオマーである標記化合物を示した。
【００９３】
中間体３３
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステルのエナンチオマーＡ
【化５０】
2008517969.tif 000053
標記化合物を、中間体４の代わりに中間体３２を用いて、中間体５と同様の方法で調製した。
ＭＳ（測定値）（Ｃ３２Ｈ３７Ｎ５Ｏ４Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：６２０
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝６２０
１Ｈ  ＮＭＲは、かかる化合物が、中間体４に記載の対応するラセミ体と一致することを示した。
【００９４】
中間体３４
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステルのエナンチオマーＡ
【化５１】
2008517969.tif 000054
中間体３（１１．８ｇ）のアセトニトリル（１７７ｍＬ）中攪拌溶液に臭化マグネシウム（ＩＩ）（１５．７ｇ）を滴下した。かかる添加は、穏やかな発熱を伴った。反応混合物を、氷水浴中で２０℃の温度に冷却し、（１Ｒ，２Ｓ）−（−）−Ｎ−メチルエフェドリン（９．８ｇ）を添加した。混合物を５分間攪拌した。続いて、ビニルピラジン（５．８ｇ）を添加し、酢酸エチルで希釈する前に混合物を室温で一晩攪拌し、塩化アンモニウムの水性溶液に注いだ。有機層を分離し、水層を酢酸エチルで再抽出した。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させた。硫酸ナトリウムを濾過により除去し、次いで、濾液を減圧下で蒸発し、油として粗生成物を得た（１８．９ｇ）。粗生成物を、最初にジクロロメタンで、次いで、酢酸エチルで、最後に酢酸−メタノール（９：１  ｖ／ｖ）で溶出しながら、シリカゲル上のカラムクロマトグラフィーに付して精製し、ゴムとして標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２０Ｈ２３Ｎ５Ｓ２Ｏ２  ＋  Ｈ）＋：４３０
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝４３０
１Ｈ  ＮＭＲは、かかる化合物が、中間体３２に記載の塩分解により調製したものおよび中間体４に記載のラセミ体と一致することを示した。溶離液としてヘプタン−エタノール（１：１  ｖ／ｖ）を用いるキラルセルＯＤ−Ｈカラム上の分析用キラルＨＰＬＣによる対応するラセミ中間体４と中間体３４の比較は、最初に溶出するエナンチオマーである標記化合物を示した。
【００９５】
実施例１
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸
【化５２】
2008517969.tif 000055
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体５、１３．９０ｇ、２２．４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）中溶液を、室温で４時間トリフルオロ酢酸（８５ｍＬ）で処理した。混合物を蒸発乾固した。粗生成物をジクロロメタン（２５０ｍＬ）で溶解し、洗浄物がｐＨ７になるまで水で洗浄した。有機相を（疎水性フリットで）乾燥させ、蒸発した。残渣をエーテルで磨砕し、固体として標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２８Ｈ２９Ｎ５Ｏ４Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：５６４
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝５６４。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  １４．６１（ｓ、１Ｈ）、８．９３（ｄ、１Ｈ）、８．３１（ｄ、１Ｈ）、８．２５（ｄｄ、１Ｈ）、８．０８（ｄ、１Ｈ）、７．７３（ｄ、１Ｈ）、７．３６（ｄ、１Ｈ）、７．１３（ｄ、１Ｈ）、７．０４（ｄ、１Ｈ）、６．６７（ｄｄ、１Ｈ）、６．４３（ｄ、１Ｈ）、５．３９（ｄ、１Ｈ）、４．３５（ｄ、１Ｈ）、３．８２（ｄ、１Ｈ）、３．６０（ｓ、３Ｈ）、３．３５（ｍ、１Ｈ）、３．２１（ｔ、１Ｈ）、２．７８（ｄｄ、１Ｈ）、１．２７（ｓ、９Ｈ）。
【００９６】
実施例２
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸のエナンチオマーＡ
【化５３】
2008517969.tif 000056
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸（実施例１）を、溶離液として０．１％トリフルオロ酢酸を含有するヘプタン−エタノール（７０：３０  ｖ／ｖ）を用いてキラルパック（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ）ＡＤカラム上の調製用キラルＨＰＬＣにより分離した。二番目に溶出するエナンチオマーを含むカラムフラクションを合わせ、蒸発した。二番目に溶出するエナンチオマーをジクロロメタンで溶解し、水で洗浄し；（疎水性フリットで）乾燥させ、溶媒を除去し、標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２８Ｈ２９Ｎ５Ｏ４Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：５６４
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝５６４。
１Ｈ  ＮＭＲは、かかる化合物が、実施例１の化合物と一致することを示した。
【００９７】
実施例３
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−２−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸
【化５４】
2008517969.tif 000057
粗生成物を、中間体５の代わりに中間体１０を用いて、実施例１と同様の方法で得、エーテルで磨砕し、標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２８Ｈ２９Ｎ５Ｏ４Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：５６４
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝５６４
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ  ８．２９（ｍ、２Ｈ）、８．２２（ｍ、１Ｈ）、７．９６（ｄ、１Ｈ）、７．７４（ｄ、１Ｈ）、７．６８（ｄ、１Ｈ）、７．３４（ｄ、１Ｈ）、７．１８（ｄ、１Ｈ）、６．８２（ｄ、１Ｈ）、６．５９（ｓ、１Ｈ）、５．７７（ｄ、１Ｈ）、４．３２（ｄ、１Ｈ）、３．９６（ｄ、１Ｈ）、３．６７（ｓ、３Ｈ）、３．４６（ｍ、１Ｈ）、３．３２（ｍ、１Ｈ）、２．６７（ｄｄ、１Ｈ）、１．２７（ｓ、９Ｈ）。カルボン酸プロトンは溶媒で置換された。
【００９８】
実施例４
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−２−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸のエナンチオマーＡ
【化５５】
2008517969.tif 000058
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−２−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸（実施例３）を、溶離液として０．１％トリフルオロ酢酸を含有するヘプタン−エタノール（７０：３０  ｖ／ｖ）を用いてキラルパックＡＤカラム上の調製用キラルＨＰＬＣにより分離し、最初および二番目に溶出するエナンチオマーを得た。二番目に溶出するエナンチオマーを含むフラクションを合わせ、蒸発した。かかる粗生成物をジクロロメタンで溶解し、炭酸水素ナトリウムで洗浄し；（疎水性フリットで）乾燥させ、溶媒を除去し、標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２８Ｈ２９Ｎ５Ｏ４Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：５６４
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝５６４
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ  ８．１２（ｓ、２Ｈ）、８．０１（ｓ、１Ｈ）、７．８９（ｄ、１Ｈ）、７．６６（ｄ、１Ｈ）、７．２９（ｄ、１Ｈ）、７．１４（ｄ、１Ｈ）、６．９５（ｍ、２Ｈ）、６．７５（ｓ、１Ｈ）、５．４４（ｄ、１Ｈ）、４．４８（ｄ、１Ｈ）、４．０２（ｄ、１Ｈ）、３．５７（ｓ、３Ｈ）、３．３６（ｔ、１Ｈ）、３．０３（ｍ、１Ｈ）、２．５５（ｄｄ、１Ｈ）および１．２５（ｓ、９Ｈ）。カルボン酸プロトンは溶媒で置換された。
【００９９】
実施例５
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，２−チアゾール−３−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸
【化５６】
2008517969.tif 000059
粗生成物を、中間体５の代わりに中間体１５を用いて、実施例１と同様の方法で得、ジクロロメタンで溶解し、炭酸水素ナトリウムで洗浄し、（疎水性フリットで）乾燥させ、溶媒を除去し、標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２９Ｈ３１Ｎ５Ｏ４Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：５７８
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝５７８
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ８．７４（１Ｈ、ｄ）、８．３２（１Ｈ、ｄ）、８．２８（１Ｈ、ｔ）、８．０８（１Ｈ、ｄ）、７．３７（１Ｈ、ｄ）、７．３５（１Ｈ、ｂｄ）、７．１５（１Ｈ、ｄ）、６．７０（１Ｈ、ｄｄ）、６．４５（１Ｈ、ｄ）、５．２９（１Ｈ、ｄ）、４．３３（１Ｈ、ｄ）、３．６３（３Ｈ、ｓ）、３．８５（１Ｈ、ｄ）、３．２３−３．０９（２Ｈ、ｍ）、２．７６−２．６９（１Ｈ、ｍ）、２．１８（３Ｈ、ｓ）および１．２８（９Ｈ、ｓ）。カルボン酸プロトンは見られなかった。
【０１００】
実施例６
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，２−チアゾール−３−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸のエナンチオマーＡ
【化５７】
2008517969.tif 000060
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，２−チアゾール−３−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸（実施例５）を、溶離液として０．１％トリフルオロ酢酸を含有するヘプタン−エタノール（６０：４０  ｖ／ｖ）を用いてキラルパックＡＤカラム上の調製用キラルＨＰＬＣで分離した。二番目に溶出するエナンチオマーを含むフラクションを合わせ、蒸発した。かかる粗生成物をジクロロメタンで溶解し、炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄し；（疎水性フリットで）乾燥させ、溶媒を除去し、標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２９Ｈ３１Ｎ５Ｏ４Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：５７８
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝５７８
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ８．７４（ｄ、１Ｈ）、８．３２（ｄ、１Ｈ）、８．２８（ｔ、１Ｈ）、８．０８（ｄ、１Ｈ）、７．３８（ｄ、１Ｈ）、７．３５（ｄ、１Ｈ）、７．１５（ｄ、１Ｈ）、６．７０（ｄｄ、１Ｈ）、６．４５（ｄ、１Ｈ）、５．２９（ｄ、１Ｈ）、４．３３（ｄ、１Ｈ）、３．８４（ｄ、１Ｈ）、３．６３（ｓ、３Ｈ）、３．２２−３．１０（ｍ、２Ｈ）、２．７８−２．６８（ｍ、１Ｈ）、２．１８（ｄ、３Ｈ）および１．２８（ｓ、９Ｈ）。酸プロトンは見られなかった。
【０１０１】
実施例７
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，２−チアゾール−３−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸
【化５８】
2008517969.tif 000061
粗生成物を、中間体５の代わりに中間体１８を用いて、実施例１と同様の方法で得た。粗生成物を、最初にシクロヘキサン−酢酸エチル（５０：１  ｖ／ｖないし１：９  ｖ／ｖの勾配溶離）で、次いで、ジクロロメタン−メタノール（９：１  ｖ／ｖ）で溶出しながら、シリカゲル上のカラムクロマトグラフィーに付して精製し、標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２８Ｈ２９Ｎ５Ｏ４Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：５６４
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝５６４
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ  ９．００（ｄ、１Ｈ）、８．２５（ｄ、１Ｈ）、８．１９（ｄ、２Ｈ）、７．６４（ｄ、１Ｈ）、７．４９（ｄ、１Ｈ）、７．３１（ｄ、１Ｈ）、７．１５（ｄ、１Ｈ）、６．７１（ｄｄ、１Ｈ）、６．６６（ｄ、１Ｈ）、５．６０（ｄ、１Ｈ）、４．１６（ｄ、１Ｈ）、３．７３（ｄ、１Ｈ）、３．７０（ｓ、３Ｈ）、３．２５（ｍ、１Ｈ）、３．０５（ｍ、１Ｈ）、２．６６（ｄｄ、１Ｈ）および１．２８（ｓ、９Ｈ）。
【０１０２】
実施例８
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，２−チアゾール−３−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸のエナンチオマーＡ
【化５９】
2008517969.tif 000062
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，２−チアゾール−３−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸（実施例７）を、溶離液として０．１％トリフルオロ酢酸を含有するヘプタン−エタノール（７０：３０  ｖ／ｖ）を用いてキラルパックＡＤカラム上の調製用キラルＨＰＬＣで分離した。二番目に溶出するエナンチオマーを含むフラクションを合わせ、蒸発した。かかる粗生成物をジクロロメタンで溶解し、水で洗浄し；（疎水性フリットで）乾燥させ、溶媒を除去し、標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２８Ｈ２９Ｎ５Ｏ４Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：５６４
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＝５６４
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ  ８．９９（ｄ、１Ｈ）、８．２３（ｄ、１Ｈ）、８．１９（ｄ、２Ｈ）、７．６４（ｄ、１Ｈ）、７．４９（ｄ、１Ｈ）、７．３０（ｄ、１Ｈ）、７．１５（ｄ、１Ｈ）、６．７１（ｄｄ、１Ｈ）、６．６７（ｄ、１Ｈ）、５．５９（ｄ、１Ｈ）、４．１６（ｄ、１Ｈ）、３．７２（ｄ、１Ｈ）、３．７１（ｓ、３Ｈ）、３．２７（ｍ、１Ｈ）、３．０５（ｍ、１Ｈ）、２．６６（ｄｄ、１Ｈ）および１．２９（ｓ、９Ｈ）。
【０１０３】
実施例９
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸
【化６０】
2008517969.tif 000063
標記化合物を、中間体１０の代わりに中間体２２を用いて、実施例３と同様の方法で調製した。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２９Ｈ３２Ｎ６Ｏ４Ｓ  ＋  Ｈ）＋：５６１
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝５６１
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ８．３３（１Ｈ、ｄ）、８．２７（１Ｈ、ｂｔ）、８．１３（１Ｈ、ｂｓ）、７．６７（１Ｈ、ｄ）、７．６５（１Ｈ、ｄ）、７．３５（１Ｈ、ｄ）、７．１７（１Ｈ、ｄ）、６．７２（１Ｈ、ｄｄ）、６．４６−６．４３（２Ｈ、ｍ）、５．４３（１Ｈ、ｄ）、５．２８（１Ｈ、ｄ）、５．０３（１Ｈ、ｄ）、３．６３（３Ｈ、ｓ）、３．１７（１Ｈ、ｔ）、２．９７−２．８８（１Ｈ、ｍ）、２．８０（１Ｈ、ｄｄ）、２．１９（３Ｈ、ｄ）および１．２９（９Ｈ、ｓ）。酸プロトンは見られなかった。
【０１０４】
実施例１０
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸のエナンチオマーＡ
【化６１】
2008517969.tif 000064
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸（実施例９）を、溶離液として０．１％トリフルオロ酢酸を含有するヘプタン−エタノール（７０：３０  ｖ／ｖ）を用いてキラルパックＡＤカラム上の調製用キラルＨＰＬＣで分離した。二番目に溶出するエナンチオマーを含むフラクションを合わせ、蒸発した。かかる粗生成物をジクロロメタンで溶解し、炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄し；（疎水性フリットで）乾燥させ、溶媒を除去し、標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２９Ｈ３２Ｎ６Ｏ４Ｓ  ＋  Ｈ）＋：５６１
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝５６１
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ８．３３（１Ｈ、ｄ）、８．２７（１Ｈ、ｔ）、８．１１（１Ｈ、ｄ）、７．６６（１Ｈ、ｄ）、７．６２（１Ｈ、ｄ）、７．３５（１Ｈ、ｂｓ）、７．１７（１Ｈ、ｄ）、６．７１（１Ｈ、ｄｄ）、６．４６−６．４３（２Ｈ、ｍ）、５．４３（１Ｈ、ｄ）、５．２６−５．２４（１Ｈ、ｍ）、５．０３（１Ｈ、ｍ）、３．６３（３Ｈ、ｓ）、３．２１−３．１０（１Ｈ、ｍ）２．８９−２．７９（２Ｈ、ｍ）、２．１９（３Ｈ、ｓ）および１．２９（９Ｈ、ｓ）。酸プロトンは見られなかった。
【０１０５】
実施例１１
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸
【化６２】
2008517969.tif 000065
粗生成物を、中間体５の代わりに中間体２４を用いて、実施例１と同様の方法で得、溶離液としてメタノール−ギ酸（９９：１  ｖ／ｖ）を用いてＳＰＥ（ＮＨ２）カートリッジ上のクロマトグラフィーに付して精製し、固体として標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２８Ｈ３０Ｎ６Ｏ４Ｓ  ＋  Ｈ）＋：５４７
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝５４７
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  １４．８５（ｓ、１Ｈ）、８．３１（ｄ、１Ｈ）、８．２２（ｔ、１Ｈ）、８．１２（ｄ、１Ｈ）、７．７４（ｄ、１Ｈ）、７．６９（ｄ、１Ｈ）、７．６４（ｄ、１Ｈ）、７．１５（ｄ、１Ｈ）、７．０６（ｄ、１Ｈ）、６．７０（ｄｄ、１Ｈ）、６．４７（ｄ、１Ｈ）、６．４６（ｔ、１Ｈ）、５．４５（ｄ、１Ｈ）、５．３６（ｄ、１Ｈ）、５．０４（ｄ、１Ｈ）、３．６２（ｓ、３Ｈ）、３．２０（ｔ、１Ｈ）、２．８９（ｍ、１Ｈ）、２．８１（ｄｄ、１Ｈ）および１．２７（ｓ、９Ｈ）。
【０１０６】
実施例１２
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸のエナンチオマーＡ
【化６３】
2008517969.tif 000066
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸（実施例１１）を、溶離液として。０．１％トリフルオロ酢酸を含有するヘプタン−エタノール（８０：２０  ｖ／ｖ）を用いてキラルパックＡＤカラム上の調製用キラルＨＰＬＣで分離した。二番目に溶出するエナンチオマーを含むフラクションを合わせ、蒸発した。かかる粗生成物をジクロロメタンで溶解し、炭酸ナトリウム溶液で洗浄し；（疎水性フリットで）乾燥させ、溶媒を除去し、標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２８Ｈ３０Ｎ６Ｏ４Ｓ  ＋  Ｈ）＋：５４７
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝５４７
１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：δ  ８．１７（ｍ、２Ｈ）、７．９１（ｄ、１Ｈ）、７．８７（ｓ、１Ｈ）、７．６４（ｓ、１Ｈ）、７．３５（ｄ、１Ｈ）、７．０６（ｄ、１Ｈ）、６．９８（ｓ、１Ｈ）、６．７４（ｄ、１Ｈ）、６．５４（ｓ、１Ｈ）、６．３９（ｓ、１Ｈ）、５．２６（ｄ、１Ｈ）、５．０９（ｄ、１Ｈ）、４．８７（ｄ、１Ｈ）、３．５１（ｓ、３Ｈ）、３．０２（ｔ、１Ｈ）、２．３１（ｄｄ、１Ｈ）、２．０３（ｍ、１Ｈ）および１．２４（ｓ、９Ｈ）。
【０１０７】
実施例１３
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−２−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸
【化６４】
2008517969.tif 000067
粗生成物を、中間体５の代わりに中間体２７を用いて、実施例１と同様の方法で得、最初にシクロヘキサン−酢酸エチル（５０：１  ｖ／ｖないし１：９  ｖ／ｖの勾配溶離）、次いで、ジクロロメタン：メタノール（９：１  ｖ／ｖ）で溶出しながらシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーに付して精製し、標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２９Ｈ３１Ｎ５Ｏ４Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：５７８
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝５７８
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ  ８．２９（ｍ、１Ｈ）、８．２２（ｄ、２Ｈ）、７．９０（ｄ、１Ｈ）、７．６９（ｄ、１Ｈ）、７．３６（ｍ、１Ｈ）、７．２０（ｄ、１Ｈ）、６．８７（ｄｄ、１Ｈ）、６．５４（ｄ、１Ｈ）、５．５８（ｄ、１Ｈ）、４．２７（ｄ、１Ｈ）、３．９２（ｄ、１Ｈ）、３．６９（ｓ、３Ｈ）、３．２７（ｍ、２Ｈ）、２．６６（ｍ、１Ｈ）、２．１７（ｄ、３Ｈ）および１．２９（ｓ、９Ｈ）。
【０１０８】
実施例１４
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−２−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸のエナンチオマーＡ
【化６５】
2008517969.tif 000068
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−２−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸（実施例１３）を、溶離液として０．１％トリフルオロ酢酸を含有するヘプタン−エタノール（７０：３０  ｖ／ｖ）を用いてキラルパックＡＤカラム上の調製用キラルＨＰＬＣで分離した。二番目に溶出するエナンチオマーを含むフラクションを合わせ、蒸発した。かかる粗生成物をジクロロメタンで溶解し、水で洗浄し；（疎水性フリットで）乾燥させ、溶媒を除去し、標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２９Ｈ３１Ｎ５Ｏ４Ｓ２  ＋  Ｈ）＋  ５７８
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝５７８
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ  ８．３１（ｍ、１Ｈ）、８．２４（ｄ  ２Ｈ）、７．９０（ｄ  １Ｈ）、７．６９（ｄ  １Ｈ）、７．３５（ｍ  １Ｈ）、７．２０（ｄ  １Ｈ）、６．８８（ｄｄ  １Ｈ）、６．５４（ｄ、１Ｈ）、５．５８（ｄ  １Ｈ）、４．２９（ｄ  １Ｈ）、３．９３（ｄ  １Ｈ）、３．６８（ｓ  ３Ｈ）、３．２５（ｍ  ２Ｈ）、２．６８（ｍ  １Ｈ）、２．１９（ｄ  ３Ｈ）、１．３０（ｓ  ９Ｈ）。
【０１０９】
実施例１５
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸
【化６６】
2008517969.tif 000069
標記化合物を、中間体１０の代わりに中間体３０を用いて、実施例３と同様の方法で調製した。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２９Ｈ３１Ｎ５Ｏ４Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：５７８
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝５７８．
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ  ９．１５（ｄ、１Ｈ）、８．２８（ｄ、１Ｈ）、８．２５（ｍ、１Ｈ）、８．２０（ｄ、１Ｈ）、７．５９（ｄ、１Ｈ）、７．３７（ｓ、１Ｈ）、７．２０（ｄ、１Ｈ）、６．８２（ｄｄ、１Ｈ）、６．６０（ｄ、１Ｈ）、５．４５（ｄ、１Ｈ）、４．１７（ｄ、１Ｈ）、３．７０（ｓ、３Ｈ）、３．６６（ｄ、１Ｈ）、３．２２（ｄ、１Ｈ）、３．０４（ｍ、１Ｈ）、２．６５（ｄｄ、１Ｈ）、２．１８（３、３Ｈ）および１．２９（ｓ、９Ｈ）。
【０１１０】
実施例１６
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸のエナンチオマーＡ
【化６７】
2008517969.tif 000070
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−５−（５−メチル−１，３−チアゾール−２−イル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）ピロリジン−２−カルボン酸（実施例１５）を、溶離液として０．１％トリフルオロ酢酸を含有するヘプタン−エタノール（７０：３０  ｖ／ｖ）を用いてキラルパックＡＤカラム上の調製用キラルＨＰＬＣで分離した。二番目に溶出するエナンチオマーを含むフラクションを合わせ、蒸発した。かかる粗生成物をエーテルで磨砕し、標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２９Ｈ３１Ｎ５Ｏ４Ｓ２  ＋  Ｈ）  ＋：５７８
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝５７８
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ  ９．１５（ｄ、１Ｈ）、８．２８（ｄ、１Ｈ）、８．２５（ｍ、１Ｈ）、８．２０（ｄ、１Ｈ）、７．５９（ｄ、１Ｈ）、７．３７（ｓ、１Ｈ）、７．２０（ｄ、１Ｈ）、６．８２（ｄｄ、１Ｈ）、６．６０（ｄ、１Ｈ）、５．４５（ｄ、１Ｈ）、４．１７（ｄ、１Ｈ）、３．７０（ｓ、３Ｈ）、３．６６（ｄ、１Ｈ）、３．２２（ｄ、１Ｈ）、３．０４（ｍ、１Ｈ）、２．６５（ｄｄ、１Ｈ）、２．１８（３、３Ｈ）および１．２９（ｓ、９Ｈ）。
【０１１１】
実施例１７
ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−２−（１，３−チアゾール−４−イルメチル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸のエナンチオマーＡ
【化６８】
2008517969.tif 000071
粗生成物を、中間体５の代わりに中間体３３を用いて、実施例１と同様の方法で得、ジクロロメタンで溶解し、水で洗浄し、（疎水性フリットで）乾燥させ、溶媒を除去し、標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２８Ｈ２９Ｎ５Ｏ４Ｓ２  ＋  Ｈ）＋：５６４
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝５６４
キラルパックＡＤカラム上の分析用キラルＨＰＬＣは、溶離液として０．１％トリフルオロ酢酸を含有するヘプタン−エタノールを用い、標記化合物が実施例２と一致することを示した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  １４．６１（ｓ、１Ｈ）、８．９３（ｄ、１Ｈ）、８．３１（ｄ、１Ｈ）、８．２５（ｄｄ、１Ｈ）、８．０８（ｄ、１Ｈ）、７．７３（ｄ、１Ｈ）、７．３６（ｄ、１Ｈ）、７．１３（ｄ、１Ｈ）、７．０４（ｄ、１Ｈ）、６．６７（ｄｄ、１Ｈ）、６．４３（ｄ、１Ｈ）、５．３９（ｄ、１Ｈ）、４．３５（ｄ、１Ｈ）、３．８２（ｄ、１Ｈ）、３．６０（ｓ、３Ｈ）、３．３５（ｍ、１Ｈ）、３．２１（ｔ、１Ｈ）、２．７８（ｄｄ、１Ｈ）および１．２７（ｓ、９Ｈ）。
【０１１２】
ＷＯ２００３／０３７８９５Ａ１から実施例１９のラセミ体の調製
中間体Ａ１
２−［Ｎ−（１，３−チアゾール−２−イルメチレン）アミノ］−４−メチルペンタン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化６９】
2008517969.tif 000072
２−アミノ−４−メチルペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル、塩酸塩（５．００ｇ、２２．３４ｍｍｏｌ）、１，３−チアゾール−２−カルボキサアルデヒド（２．５３ｇ、２２．３４ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（３．１０ｍＬ、２２．３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（６０ｍＬ）中攪拌混合物を、窒素下、１９時間加熱還流した。反応混合物を室温に冷却し、水で２回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発し、油として標記化合物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ８．４６（ｓ、１Ｈ）、７．９４（ｄ、１Ｈ）、７．４４（ｄｄ、１Ｈ）、４．０７（ｄｄ、１Ｈ）、１．８９−１．７４（ｍ、２Ｈ）、１．６４−１．５２（ｍ、１Ｈ）、１．４８（ｓ、９Ｈ）、０．９６（ｄ、３Ｈ）および０．９０（ｄ、３Ｈ）。
【０１１３】
中間体Ａ２
ｒｅｌ−（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−イソブチル−４−（ピラジン−２−イル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化７０】
2008517969.tif 000073
２−［Ｎ−（１，３−チアゾール−２−イルメチレン）アミノ］−４−メチルペンタン酸，ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体Ａ１；１．０ｇ、３．５４ｍｍｏｌ）、ビニルピラジン（０．４１３ｇ、３．９ｍｍｏｌ）、臭化リチウム（０．６１５ｇ、７．０８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．７４ｍＬ、５．３１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１５ｍＬ）中混合物を、０℃で１０分間窒素ガス下にて攪拌し、次いで、一晩室温に加温した。塩化アンモニウムの飽和溶液を添加し、混合物を酢酸エチルで抽出した（３ｘ５０ｍＬ）。合わせた抽出物を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発した。残渣を、溶離液としてシクロヘキサン−酢酸エチル（５０：１  ｖ／ｖないし１：２  ｖ／ｖの勾配溶離）を用いてシリカゲル上のクロマトグラフィーに付して精製し、油として標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２０Ｈ２８Ｎ４Ｏ２Ｓ  ＋  Ｈ）＋：３８９
ＭＳ（実測値）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝３８９
【０１１４】
中間体Ａ３
ｒｅｌ−（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−イソブチル−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化７１】
2008517969.tif 000074
ｒｅｌ−（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−イソブチル−４−（ピラジン−２−イル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体Ａ２；１．０７ｇ、２．７５ｍｍｏｌ）、塩化３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル（０．８１２ｇ、３．５８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．５ｍＬ、３．５８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）中混合物を、室温で２４時間攪拌した。混合物を水で洗浄し、水相をジクロロメタンで抽出した（２ｘ２０ｍＬ）。合わせた有機溶液をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発した。残渣を、溶離液としてシクロヘキサン−酢酸エチル（５０：１  ｖ／ｖないし３：２  ｖ／ｖの勾配溶離）を用いてシリカゲル上のクロマトグラフィーに付して精製し、固体として標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ３２Ｈ４２Ｎ４Ｏ４Ｓ  ＋  Ｈ）＋：５７９
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝５７９
【０１１５】
実施例Ａ
ｒｅｌ−（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−イソブチル−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸
【化７２】
2008517969.tif 000075
ｒｅｌ−（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−イソブチル−１−（３−メトキシ−４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル（中間体Ａ３；１．０３５ｇ、１．７９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）中溶液を、トリフルオロ酢酸（１５ｍＬ）で処理し、混合物を室温で５時間攪拌した。混合物を蒸発乾固し、残渣を、溶離液としてシクロヘキサン−酢酸エチル（５０：１  ｖ／ｖないし１：４  ｖ／ｖの勾配溶離）、次いで、ジクロロメタン−メタノール（５０：１  ｖ／ｖないし１９：１  ｖ／ｖの勾配溶離）を用いてシリカゲル上のクロマトグラフィーに付して精製し、標記化合物を得た。
ＭＳ（測定値）（Ｃ２８Ｈ３４Ｎ４Ｏ４Ｓ  ＋  Ｈ）＋：５２３
ＭＳ（実測値）（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋  ＝５２３
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ  ８．５３（ｄ、１Ｈ）、８．３２（ｄ、１Ｈ）、８．２８（ｄｄ、１Ｈ）、７．６６（ｄ、１Ｈ）、７．３３（ｄ、１Ｈ）、７．１９（ｄ、１Ｈ）、６．７６（ｄｄ、１Ｈ）、６．４０（ｄ、１Ｈ）、６．０２（ｄ、１Ｈ）、４．５６（ｍ、１Ｈ）、３．６１（ｓ、３Ｈ）、３．２７（ｔ、１Ｈ）、２．５２（ｄｄ、１Ｈ）、２．３５（ｍ、２Ｈ）、２．１７（ｍ、１Ｈ）、１．２８（ｓ、９Ｈ）、１．２０（ｄ、３Ｈ）および１．１４（ｄ、３Ｈ）。
【０１１６】
本発明に記載の化学物質は、便利な方法で投与するために処方してもよく、そのため、本発明は、少なくとも一の生理学上許容される希釈剤または担体と合わせる式（Ｉａ）の化合物およびその生理学上許容される塩または溶媒和物から選択される少なくとも一の化学物質を含む治療の使用のための医薬組成物も範囲内に含む。
【０１１７】
本発明の化学物質は、静脈内、腹腔内、皮下、筋肉内、経口、局所的、経皮、経粘膜投与を含む異なる経路により投与されうる。全身投与においては、経口投与が好ましい。経口投与においては、例えば、化合物は、カプセル、錠剤ならびにシロップ、エリキシル剤および濃縮ドロップなどの液体製剤などの慣習的な経口剤形中に処方されうる。
【０１１８】
一方、注射（非経口投与）は、例えば、筋肉内、静脈内、腹腔内および皮下で用いてもよい。注射においては、本発明の化学物質は、液体溶液中で、好ましくは、食塩水、ハンクス溶液またはリンガー溶液などの生理学上許容される緩衝液または溶液中で処方される。さらに、化学物質は、固体形態で処方してもよく、使用前に直ちに再溶解または懸濁してもよい。凍結乾燥形態でも製造されうる。
【０１１９】
全身投与はまた、経粘膜的または経皮的方法でありうる。経粘膜または経皮投与においては、浸透させるための障害に適当である浸透剤は製剤として用いられる。かかる浸透剤は、一般に、当業者に周知であり、例えば、経粘膜投与において、胆汁塩およびフシジン酸誘導体を含む。加えて、洗浄剤は、浸透を促進するために用いられてもよい。経粘膜投与は、例えば、スプレー式点鼻薬、肛門坐剤または膣坐剤を介してもよい。
【０１２０】
局所的投与においては、本発明の化学物質は、一般に、当業者に周知である、軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、軟膏（ｓａｌｖｅ）、ゲルまたはクリーム中に処方されうる。
【０１２１】
投与される様々な化学物質の量は、化合物（ＩＣ５０）有効性、（ＥＣ５０）効果、および（化合物の）生物学的半減期、患者の年齢、大きさおよび体重、ならびに患者に付随する疾患または障害などの因子を考慮する標準的な製法で測定されうる。考慮されるかかる因子および別の因子の重要性は、当業者に周知である。
【０１２２】
投与される量はまた、投与経路および経口バイオアベイラビリティの程度によって決まる。例えば、低い経口バイオアベイラビリティを有する化合物においては、比較的高用量を投与する必要があるであろう。経口投与は、本化合物の好ましい投与方法である。
【０１２３】
好ましくは、組成物は、一回量剤形である。例えば、経口適用においては、錠剤またはカプセルを投与してもよく、経鼻適用においては、定量のエアロゾルを投与してもよく、経皮適用においては、局所製剤またはパッチを投与してもよく、経粘膜送達においては、口腔パッチを投与してもよい。各場合において、投薬は、患者が一回量を投与しうることである。
【０１２４】
経口投与における各一回量は、適当に遊離塩基として計算される式（Ｉａ）の化合物またはその医薬上許容される塩または溶媒和物の０．０１ないし５００ｍｇ／Ｋｇ、好ましくは、０．１ないし５０ｍｇ／ｋｇを含む。非経口、経鼻、経口吸収、経粘膜または経皮経路における一日量は、適当に化合物（Ｉａ）の化合物の０．０１ないし１００ｍｇ／Ｋｇを含む。局所製剤は、適当に化合物（Ｉａ）の化合物の０．０１ないし５．０％を含む。活性成分は、一日に１ないし６回、好ましくは、１回投与してもよく、当業者に周知であるので、望ましい活性を示すのに十分である。
【０１２５】
式（Ｉａ）の組成物およびその医薬上許容される塩は、経口投与されると活性となり、シロップ、錠剤、カプセルおよびトローチ剤として処方されうる。シロップ製剤は、一般に、香味料または着色料と化合物または塩の液体担体、例えば、エタノール、ラッカセイ油、オリーブ油、グリセリンもしくは水中懸濁液または溶液からなるであろう。組成物が錠剤の形態である場合、固体製剤を調製するために通常用いられる医薬担体を用いてもよい。かかる担体の例として、ステアリン酸マグネシウム、石こう、タルク、ゼラチン、アカシア、ステアリン酸、澱粉、乳糖および白糖が挙げられる。組成物がカプセルの形態である場合、通常のカプセル化は、例えば、硬ゼラチンカプセル外殻中に前記の担体を用いることが適当である。組成物が軟ゼラチン外殻カプセルの形態である場合、分散液または懸濁液を調製するために通常用いられる医薬担体は、例えば、水性ゴム、セルロース、ケイ酸塩または油と考えてもよく、軟ゼラチンカプセル外殻中に充填される。
【０１２６】
典型的な非経口組成物は、化合物または塩の非経口的に許容される油、例えば、ポリエチレン、グリコール、ポリビニルピロリドン、レシチン、ラッカセイ油またはゴマ油を所望により含有する無菌の水性または非水性担体中溶液または懸濁液からなる。
【０１２７】
典型的な吸入組成物は、溶液、懸濁液またはエマルジョンの形態であり、ドライパウダーとしてまたは１，１，１，２−テトラフルオロエタンまたは１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパンなどの慣習的非ＣＦＣ推進剤を用いるエアゾールの形態で投与してもよい。
【０１２８】
典型的な坐剤製剤は、結合剤および／または潤滑剤、例えば、重合グリコール、ゼラチン、ココアバターまたは他の低融点植物ワックスまたは油あるいはその合成類似体と式（Ｉａ）の化合物またはかかる方法で投与されると活性となるその医薬上許容される塩を含む。
【０１２９】
典型的な皮膚および経皮製剤は、慣習的水性または非水性ビヒクル、例えば、クリーム、軟膏、ローションまたはペーストを含むかあるいは薬用絆創膏、パッチまたは膜の形態である。
【０１３０】
本発明の化合物が、本発明にしたがって投与されると、許容されない毒性学的効果を全く予期しない。
【０１３１】
アッセイ
ＮＳ５Ｂ野生型ＨＣＶポリメラーゼ活性、遺伝子型１ａおよび遺伝子型１ｂを阻害する本発明の化学物質の可能性は、例えば、以下のインビトロアッセイを用いて測定してもよい：
ＨＣＶのＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ活性の阻害薬のインビトロ検出
ＲＮＡへの［３３Ｐ］−ＧＭＰの取り込みの後に、ＳＰＡビーズを含むストレプトアジピンによるビオチン標識化ＲＮＡポリマーを吸着させた。ｐｏｌｙｒＣに混成したビオチン化１３ｍｅｒ−ｏｌｉｇｏＧからなる合成鋳型は、ホモポリマー基質として用いられた。
【０１３２】
ａ）遺伝子型１ａのＣ末端が切断された（デルタ２１）酵素
ＨＣＶのＲＮＡポリメラーゼ（イー・コリ（Ｅ．ｃｏｌｉ）で発現し、均一に精製した、Ｃ末端にて２１個のアミノ酸が欠失し、Ｃ末端にて６個のＨｉｓ−ｔａｇを有する組換えＮＳ５Ｂ（Ｆｅｒｒａｒｉら、Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．７３（２），１９９９，１６４９．「Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｏｌｕｂｌｅ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ  ＲＮＡ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ＲＮＡ  ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  ｉｎ  Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ．」））を、２５ｎＭの最終濃度まで添加した。遺伝子型１ａのポリメラーゼは、１８０番目でバリンからイソロイシンに変換する配列を含む株Ｈ７７（Ｙａｎａｇｉ，Ｍ．，Ｐｕｒｃｅｌｌ，Ｒ．Ｈ．，Ｅｍｅｒｓｏｎ，Ｓ．Ｕ．＆  Ｂｕｋｈ，Ｊ．（１９９７），Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，ＵＳＡ  ９４，８７３８−８７４３）由来であった。
反応条件は、２５ｎＭの酵素、１．５μｇ／ｍｌのｏｌｉｇｏ−ｒＧ１３／ｐｏｌｙ−ｒＣおよび０．５μＭのＧＴＰ（２０Ｃｉ／ｍＭｏｌ）中０．２μＣｉのα−３３Ｐ−ＧＴＰ、ｐＨ７．５の２０ｍＭのＴｒｉｓ、２３ｍＭのＮａＣｌ、３ｍＭのＤＴＴ、５ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのＭｎＣｌ２であった。
酵素を、２０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．５、２５ｍＭのＮａＣｌおよび３ｍＭのＤＴＴ中で５００ｎＭの濃度に希釈した。
４倍濃縮アッセイ緩衝液混合物は、１ＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．５（１ｍＬ）、５ＭのＮａＣｌ（０．２５ｍＬ）、１ＭのＤＴＴ（０．１２ｍＬ）および水（８．６３ｍＬ）、総量１０ｍＬを用いて調製した。
２倍濃縮第一試薬は、４倍濃縮アッセイ緩衝液混合物（５μＬ）、４０ｕ／μＬのＲＮａｓｉｎ（０．１μＬ）、２０μｇ／ｍＬのｐｏｌｙｒＣ／ビオチン化ｏｌｉｇｏｒＧ（１．６μＬ）、５００ｎＭの酵素（１μＬ）および水（２．３μＬ）、総量１０μＬ／ウェルを用いて調製した。
２倍濃縮第二試薬は、１ＭのＭｇＣｌ２（０．１μＬ）、１ＭのＭｎＣｌ２（０．０２μＬ）、２５μＭのＧＴＰ（０．４μＬ）、α−［３３Ｐ］−ＧＴＰ（１０μＣｉ／μＬ、０．０２μＬ）および水（９．５μＬ）、総量１０μＬ／ウェルを用いて調製した。
アッセイを、化合物（１００％ＤＭＳＯ中１μＬ）、第一試薬（１０μＬ）、および第二試薬（１０μＬ）、総量２１μＬを用いて開始した。
反応をＵ底、白色、９６ウェルプレートで実施した。酵素の添加後、反応物をプレート振盪台上で合わせ、２２℃で１時間インキュベートした。この後、反応を、ＰＢＳ中の０．１ＭのＥＤＴＡ中６０μＬの１．５ｍｇ／ｍｌのストレプトアジピンＳＰＡビーズ（Ａｍｅｒｓｈａｍ）の添加により停止した。ビーズを、ＰＢＳ中１００μＬの０．１ＭのＥＤＴＡを添加した後、２２℃で１時間反応混合物とインキュベートした。プレートを密封し、合わせ、遠心分離し、取り込まれる放射能をＴｒｉｌｕｘ（Ｗａｌｌａｃ）またはＴｏｐｃｏｕｎｔ（Ｐａｃｋａｒｄ）シンチレーション計数器でカウントすることにより測定した。
酵素を含有しない基礎濃度を減じた後、化合物の存在下にて取り込まれる放射能の量の減少が、非存在下と比較して、阻害濃度の尺度として得られた。化合物の１０個の濃度を３倍または４倍に希釈して試験した。１分当たりのカウントから、試験した最も高濃度の阻害率または化合物におけるＩＣ５０は、ＧｒａＦｉｔ３、ＧｒａＦｉｔ４またはＧｒａＦｉｔ５（Ｅｒｉｔｈａｃｕｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｌｔｄ．）ソフトウェアパッケージあるいはＸＬＦｉｔソフトウェア（ＩＤＢＳ）に基づくエクセルのデータ評価マクロを用いて計算した。
【０１３３】
ｂ）遺伝子型１ｂの全長酵素
反応条件は、０．５μＭの［３３Ｐ］−ＧＴＰ（２０Ｃｉ／ｍＭｏｌ）、１ｍＭのジチオスレイトール、２０ｍＭのＭｇＣｌ２、５ｍＭのＭｎＣｌ２、２０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．５、１．６μｇ／ｍＬのｐｏｌｙＣ／０．２５６μＭのビオチン化ｏｌｉｇｏＧ１３、１０％のグリセロール、０．０１％のＮＰ−４０、０．２ｕ／μＬのＲＮａｓｉｎおよび５０ｍＭのＮａＣｌであった。
ＨＣＶのＲＮＡポリメラーゼ（バキュロ・ウイルスで発現し、均一に精製した、組換え全長ＮＳ５Ｂ（Ｌｏｈｍａｎｎら、Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．７１（１１），１９９７，８４１６．「Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ  ＮＳ５Ｂ  ＲＮＡ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ＲＮＡ  ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  ａｎｄ  ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｍｏｔｉｆｓ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  ｆｏｒ  ｅｎｚｙｍａｔｉｃ  ａｃｔｉｖｉｔｙ」））を、４ｎＭの最終濃度まで添加した。
５倍濃縮アッセイ緩衝液混合物を、１ＭのＭｎＣｌ２（０．２５ｍＬ）、グリセロール（２．５ｍＬ）、１０％のＮＰ−４０（０．０２５ｍＬ）および水（７．２２５ｍＬ）、総量１０ｍＬを用いて調製した。
２倍濃縮酵素緩衝液は、１Ｍ−Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．５（０．４ｍＬ）、５ＭのＮａＣｌ（０．２ｍＬ）、１Ｍ−ＭｇＣｌ２（０．４ｍＬ）、グリセロール（１ｍＬ）、１０％のＮＰ−４０（１０μＬ）、１ＭのＤＴＴ（２０μＬ）および水（７．９７ｍＬ）、総量１０ｍＬを含有した。
基質混合物を、５倍濃縮アッセイ緩衝液混合物（４μＬ）、［３３Ｐ］−ＧＴＰ（１０μＣｉ／μＬ、０．０２μＬ）、２５μＭのＧＴＰ（０．４μＬ）、４０ｕ／μＬのＲＮａｓｉｎ（０．１μＬ）、２０μｇ／ｍＬのｐｏｌｙｒＣ／ビオチン化ｏｌｉｇｏｒＧ（１．６μＬ）および水（３．９４μＬ）、総量１０μＬを用いて調製した。
酵素混合物を、１ｍｇ／ｍｌの全長ＮＳ５Ｂポリメラーゼ（１．５μＬ）を２．８１ｍＬの２倍濃縮酵素緩衝液に添加することにより調製した。
アッセイを、化合物（１μＬ）、基質混合物（１０μＬ）および酵素混合物（開始反応の最後に添加した）（１０μＬ）、総量２１μＬを用いて開始した。
反応をＵ底、白色、９６ウェルプレートで実施した。反応物をプレート振盪台上で合わせ、酵素の添加後に、２２℃で１時間インキュベートした。この後、反応を４０μＬの０．１ＭのＥＤＴＡ中の１．８７５ｍｇ／ｍｌのストレプトアジピンＳＰＡビーズの添加により停止した。ビーズを、１２０μＬのＰＢＳ中０．１ＭのＥＤＴＡを添加した後、２２℃で１時間反応混合物とインキュベートした。プレートを密封し、合わせ、遠心分離し、取り込まれる放射能をＴｒｉｌｕｘ（Ｗａｌｌａｃ）またはＴｏｐｃｏｕｎｔ（Ｐａｃｋａｒｄ）シンチレーション計測器でカウントすることにより測定した。
酵素を含有しない基礎濃度を減じた後、化合物の存在下にて取り込まれる放射能の量の減少が、非存在下と比較して、阻害濃度の尺度として得られた。化合物の１０個の濃度を３倍または４倍に希釈して試験した。カウントから、試験した最も高濃度の阻害率または化合物におけるＩＣ５０は、ＧｒａＦｉｔ３、ＧｒａＦｉｔ４またはＧｒａＦｉｔ５（Ｅｒｉｔｈａｃｕｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｌｔｄ．）ソフトウェアパッケージまたはＸＬＦｉｔソフトウェア（ＩＤＢＳ）に基づくエクセルのデータ評価マクロを用いて計算した。
【０１３４】
ＮＳ５Ｂ野生型ＨＣＶポリメラーゼ活性、遺伝子型１ａおよび遺伝子型１ｂを阻害する本発明の化学物質の可能性は、例えば、以下の細胞に基づくアッセイを用いて測定してもよい：
レプリコンＥＬＩＳＡ細胞に基づくアッセイ
方法
１０％ＦＣＳを含有する１００μＬの培地を、透明な、平底９６ウェルマイクロプレートの先端の列のウェル以外の各ウェルに添加した。試験化合物を、ＤＭＳＯ中の４０ｍＭのストック溶液から最後の必要開始濃度をアッセイ培地で２倍に希釈した。２００μＬの開始希釈物を、先端の列の２個のウェルに導入し、ウェル中で完全に合わせながら１００μＬのアリコートの連続的移動によりプレートで２倍希釈した；最後の１００μＬを廃棄した。２つの下端の列を、化合物希釈には用いなかった。密集しているＨｕｈ−７のＨＣＶのレプリコン細胞の単分子層を、ヴェルセン−トリプシン溶液で増殖フラスコから剥ぎ、細胞を２ｘ１０５細胞／ｍＬ（サブライン５−１５；遺伝子型１ｂ；Ｌｏｈｍａｎｎ，Ｖ．，Ｋｏｒｎｅｒ，Ｆ．，Ｋｏｃｈ，Ｊ−Ｏ．，Ｈｅｒｉａｎ，Ｕ．，Ｔｈｉｅｌｍａｎｎ，Ｌ．およびＢａｒｔｅｎｓｃｈｌａｇｅｒ，Ｒ．，１９９９，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８５，ｐｐ  １１０−１１３）または３ｘ１０５細胞／ｍＬ（遺伝子型１ａ；Ｇｕ，Ｂ．，Ｇａｔｅｓ，Ａ．Ｔ．，Ｉｓｋｅｎ，Ｏ．，Ｂｅｈｒｅｎｓ，Ｓ．Ｅ．およびＳａｒｉｓｋｙ，Ｒ．Ｔ．，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．，２００３，７７，５３５２−５３５９）でアッセイ培地中にて再懸濁した。１００μＬの細胞懸濁液を全ウェルに添加し、プレートを５％のＣＯ２雰囲気下で、３７℃で７２時間インキュベートした。
インキュベーション後、アッセイ培地をプレートから吸引した。細胞シートを、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中に軽く浸すことにより洗浄し、次いで、吸引し、５分間アセトン：メタノール（１；１）で戻した。さらにＰＢＳで洗浄した後、１００μＬのＥＬＩＳＡ希釈剤（ＰＢＳ＋０．０５％ｖ／ｖのＴｗｅｅｎ  ２０＋２％ｗ／ｖの脱脂粉乳）を、全ウェルに添加し、プレートを軌道プラットホーム上にて３７℃で３０分間インキュベートした。希釈剤を除去し、次いで、負の対照として作用する希釈剤のみを得た化合物のない対照列の一つのウェル以外の各ウェルは、５０μＬの抗ＨＣＶ特異的マウスモノクローナル抗体（Ｖｉｒｏｓｔａｔ  ＃１８７２または＃１８７７のいずれか）の１／２００の希釈剤を得た。プレートを３７℃で２時間インキュベートし、ＰＢＳ／０．０５％のＴｗｅｅｎ  ２０で３回洗浄し、次いで、５０μＬの１／１０００に希釈した西洋ワサビペルオキシダーゼ標識抗マウス、ウサギポリクローナル血清（Ｄａｋｏ  ＃Ｐ０２６０）を全ウェルに添加した。プレートをさらに１時間インキュベートし、抗体を除去し、細胞シートをＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎで５回洗浄し、ブロット乾燥した。アッセイは、各ウェルに対する５０μＬの尿素／クエン酸塩緩衝液（ＳｉｇｍａＦａｓｔ、Ｓｉｇｍａ  ＃Ｐ−９１８７）中のオルト−フェニレンジアミン／ペルオキシダーゼ基質の添加により発展し、色は最大１５分間発展した。反応を、２Ｍの硫酸のウェル当たり２５μＬの添加により停止し、プレートをＦｌｕｏｓｔａｒ  Ｏｐｔｉｍａ分光光度計の４９０ｎｍで読み取った。
基質溶液を除去し、プレートを水道水で洗浄し、ブロット乾燥し、細胞を、水中の５％石炭酸フクシンで３０分間染色した。染色液を廃棄し、細胞シートを洗浄し、乾燥させ、細胞毒性を評価するために検鏡した。
【０１３５】
データ分析
一次抗体も二次抗体も添加した化合物のない全ウェルからの吸光度値は、正の対照値を得るために平均した。一次抗体を添加しなかった化合物のないウェルからの平均吸光度値は、負（バックグラウンド）の対照値を提供するために用いられた。全測定値から平均バックグラウンドを引いた後に、各化合物濃度の複製ウェルからの測定値は平均され、正の対照シグナルの百分率として表された。薬剤の存在下においてＥＬＩＳＡにより検出される発現タンパク質の定量的および特異的減少は、一定のレプリコン阻害としても用いられうる。ＧｒａＦｉｔソフトウェアは、化合物濃度に対する阻害率を曲線にプロットし、化合物の５０％阻害濃度（ＩＣ５０）を得るために用いられた。
【０１３６】
結果
【表２】
2008517969.tif 000076
2008517969.tif 000077
化合物Ａは、ＷＯ０３／０３７８９５の実施例１９として開示されるエナンチオマー化合物のラセミ体、ｒｅｌ−（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−イソブチル−１−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−３−メトキシベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸に対応する。
化合物Ｂは、ＷＯ０３／０３７８９５の実施例１９に開示されるエナンチオマー化合物、ｒｅｌ−（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−イソブチル−１−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−３−メトキシベンゾイル）−４−（ピラジン−２−イル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸のエナンチオマーＡに対応する。
化合物Ｃは、ＷＯ０３／０３７８９５の実施例４０として開示されるラセミ化合物、ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−３−メトキシベンゾイル）−２−（ピリジン−２−イルメチル）−４−（ピラジン−２−イル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸に対応する。
化合物Ｄは、ＷＯ０３／０３７８９５の実施例４９として開示されるラセミ化合物、ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−３−メトキシベンゾイル）−２−（１Ｈ−イミダゾール−４−イルメチル）−４−（ピラジン−２−イル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）−ピロリジン−２−カルボン酸に対応する。
化合物Ｅは、ＷＯ０３／０３７８９５の実施例５１として開示されるラセミ化合物、ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−３−メトキシベンゾイル）−２−（２−（メチルチオ）エチル）−４−（ピラジン−２−イル）−５−（１，３−チアゾール−５−イル）−ピロリジン−２−カルボン酸に対応する。
化合物Ｆは、ＷＯ０３／０３７８９５の実施例５７として開示されるラセミ化合物、ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−３−メトキシベンゾイル）−２−（２−（メチルスルホニル）エチル）−４−ピラジン−２−イル−５−（１，３−チアゾール−２−イル）−ピロリジン−２−カルボン酸に対応する。
化合物Ｇは、ＷＯ０３／０３７８９５の実施例６７として開示されるラセミ化合物、ｒｅｌ−（２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−１−（４−ｔｅｒｔ−ブチル−３−メトキシベンゾイル）−２−（フェニルメチル）−４−（ピラジン−２−イル）−５−（１，３−チアゾール−２−イル）ピロリジン−２−カルボン酸に対応する。
化合物Ａは、「ＷＯ２００３／０３７８９５Ａ１から実施例１９のラセミ体の調製」として上記の実施例の項における記載で調製してもよい。
化合物Ｂ−Ｇは、ＷＯ０３／０３７８９５に記載の工程にしたがって作製してもよい。
化合物Ａ−Ｇの構造を疑問のないように以下に示す。
【表３】
2008517969.tif 000078
【０１３７】
ＨＣＶの遺伝子型１ａおよび１ｂの両方にわたって酵素および細胞に基づくアッセイにおいてＩＣ５０値により示されると、試験した本発明の化合物は、化合物Ａ−Ｇと比較すると、意外にも優れた遺伝子１ａ／１ｂ分析結果を示す。したがって、本発明の化合物は、ＨＣＶの治療および予防において有力な治療的有用性に優れている。
【０１３８】
本発明に記載の医薬組成物はまた、少なくとも一の別の治療薬、例えば、免疫療法（例、インターフェロン）、治療ワクチン、抗繊維化剤、副腎皮質ステロイドまたはＮＳＡＩＤなどの抗炎症薬、β２アドレナリン作動薬およびキサンチン（例、テオフィリン）などの気管支拡張薬、粘液溶解薬、抗ムスカリン、抗ロイコトリエン、細胞接着の阻害薬（例、ＩＣＡＭアンタゴニスト）、抗酸化剤（例、Ｎ−アセチルシステイン）、サイトカインアゴニスト、サイトカインアンタゴニスト、肺表面活性剤および／または抗菌剤ならびに抗ウイルス剤（例、リバビリンおよびアマンチジン）と併用して用いてもよい。本発明に記載の組成物はまた、遺伝子置換療法と併用して用いてもよい。
【０１３９】
したがって、さらなる態様において、本発明は、少なくとも一の治療的に別の活性剤と一緒に式（Ｉａ）の化合物およびその生理学上許容される塩または溶媒和物から選択される少なくとも一の化学物質を含む組み合わせを提供する。
【０１４０】
前記の組み合わせは、都合のよいことに、医薬製剤の形態で使用するために調製してもよく、したがって、少なくとも一のその医薬上許容される希釈剤または担体と一緒に上記の組み合わせを含む医薬製剤は、本発明のさらなる態様を表す。
【０１４１】
かかる組み合わせの個々の成分は、別々のまたは合わせた医薬製剤において連続的にまたは同時に投与してもよい。周知の治療薬の適量は、当業者に容易に理解されるであろう。
【０１４２】
本明細書で引用される特許および特許出願を含むがこれらに限定されないすべての刊行物は、個々の刊行物が十分に開示されているかの如く具体的かつ個別的に出典明示により本明細書の一部とすることが明示されているかのように出典明示により本明細書の一部とする。
【国際調査報告】
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