(57)【要約】本発明は、細菌に対する抗原およびウイルスに対する抗原の組み合わせ、その組み合わせの使用、ならびに感染症に対する防御を提供するためのこれらの抗原の組み合わせを含む医薬の調製に関する。特に、本発明は、破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原と、ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原と、ダニ媒介性脳炎（ＴＢＥ）に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原とを含有する、混合ワクチンに関する。特に、本発明は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉの少なくとも１種の抗原と、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ由来の少なくとも１種の抗原と、ＴＢＥ−フラビウイルス由来の少なくとも１種の抗原との、混合ワクチンに関し、この混合ワクチンは、これらの病原性生物によって引き起こされる疾患および医学的状態に対する血清防御を提供するのに適する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原；
ｂ）ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原；および
ｃ）ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原；
を含有する、混合ワクチン。
【請求項２】
前記破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉの抗原であり、前記ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅの抗原であり、そして前記ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、ダニ媒介性脳炎ウイルス由来の抗原である、請求項１に記載の混合ワクチン。
【請求項３】
前記ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、ダニ媒介性脳炎ウイルスＮｅｕｄｏｅｒｆｌ株由来の抗原またはダニ媒介性脳炎ウイルスＫ２３株由来の抗原である、請求項１または２に記載の混合ワクチン。
【請求項４】
前記ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、ダニ媒介性脳炎ウイルスのエンベロープ糖タンパク質Ｅである、請求項１〜３に記載の混合ワクチン。
【請求項５】
前記ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、ダニ媒介性脳炎ウイルスの全ウイルスである、請求項１〜３に記載の混合ワクチン。
【請求項６】
前記ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、１用量あたり約０．１μｇ〜約５μｇの量で存在し、好ましくは１用量あたり０．５μｇ〜２．５μｇの量で存在する、請求項４に記載の混合ワクチン。
【請求項７】
前記ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、１用量あたり０．０１μｇ〜約１０μｇの量で存在する、請求項５に記載の混合ワクチン。
【請求項８】
前記破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ  Ｈａｒｖａｒｄ株に由来する、請求項１〜７に記載の混合ワクチン。
【請求項９】
前記破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、破傷風トキソイドを含む、請求項１〜８に記載の混合ワクチン。
【請求項１０】
前記破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、１用量あたり約１０ＩＵ〜約６０ＩＵの力価に対応する量で存在し、好ましくは１用量あたり１０ＩＵ〜５０ＩＵの力価に対応する量で存在し、そしてより好ましくは１用量あたり少なくとも２０ＩＵの力価に対応する量で存在する、請求項１〜９に記載の混合ワクチン。
【請求項１１】
前記ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ  Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ  ８  Ｐａｒｋ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ株に由来する、請求項１〜１０に記載の混合ワクチン。
【請求項１２】
前記ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、ジフテリアトキソイドを含む、請求項１〜１１に記載の混合ワクチン。
【請求項１３】
前記ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、１用量あたり約１０ＩＵ〜約５０ＩＵの力価に対応する量で存在し、好ましくは１用量あたり２０ＩＵ〜４０ＩＵの力価に対応する量で存在し、そしてより好ましくは１用量あたり少なくとも３０ＩＵの力価に対応する量で存在する、請求項１〜１２に記載の混合ワクチン。
【請求項１４】
前記ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、１用量あたり約０．５ＩＵ〜約１０ＩＵの力価に対応する量で存在し、好ましくは１用量あたり０．７５ＩＵ〜５ＩＵの力価に対応する量で存在し、そしてより好ましくは１用量あたり少なくとも２ＩＵの力価に対応する量で存在する、請求項１〜１２に記載の混合ワクチン。
【請求項１５】
前記破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、１用量あたり少なくとも２０ＩＵの力価に対応する量で存在し、前記ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、１用量あたり少なくとも２ＩＵの力価に対応する量で存在し、そして前記ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、１用量あたり０．７５ＩＵの量で存在する、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の混合ワクチン。
【請求項１６】
前記ワクチンは、アジュバントをさらに含有する、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の混合ワクチン。
【請求項１７】
前記アジュバントは、水酸化アルミニウムなどのアルミニウム塩である、請求項１６に記載の混合ワクチン。
【請求項１８】
前記ワクチンは、別の病原性微生物由来の少なくとも１種のさらなる抗原をさらに含有する、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の混合ワクチン。
【請求項１９】
前記少なくとも１種のさらなる抗原は、百日咳、ポリオ、Ａ型肝炎、髄膜炎菌性疾患もしくはライム病からなる群より選択される疾患または医学的状態に対する防御を提供し得る、請求項１８に記載の混合ワクチン。
【請求項２０】
前記少なくとも１種のさらなる抗原は、百日咳に対する防御を提供し得る、請求項１９に記載の混合ワクチン。
【請求項２１】
破傷風、ジフテリアおよびダニ媒介性脳炎の予防的防御のための混合ワクチンの調製のための、破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原と、ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原と、ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原との使用。
【請求項２２】
前記抗原は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉの抗原、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅの抗原、および前記ダニ媒介性脳炎ウイルスの抗原である、請求項２１に記載の使用。
【請求項２３】
破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原、ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原、ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原、および混合ワクチンを調製するのに適した試薬を備える、キット。
【請求項２４】
前記抗原は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉの抗原、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅの抗原、および前記ダニ媒介性脳炎ウイルスの抗原である、請求項２３に記載のキット。
【請求項２５】
前記抗原は、別々に保管される、請求項２３または２４に記載のキット。
【請求項２６】
前記抗原は、２個以上の別個のチャンバーを備える注射器中に存在する、請求項２５に記載のキット。
【請求項２７】
前記抗原は、２個以上の別個のバイアル中に存在する、請求項２５に記載のキット。
【請求項２８】
請求項１〜２０のいずれか１項に記載の混合ワクチンを調製するための方法であって、
ａ）破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原と、ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原と、ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原とを混合する工程；および
ｂ）該混合した抗原を適切なアジュバントに吸着させる工程；
を包含する、方法。
【請求項２９】
請求項１〜２０のいずれか１項に記載の混合ワクチンを調製するための方法であって、
ａ）破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原、ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原、およびダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原を、それぞれ別々に適切なアジュバントに吸着させる工程；ならびに
ｂ）該吸着させた抗原を互いに混合する工程；
を包含する、方法。
【請求項３０】
前記破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉの抗原であり、前記ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅの抗原であり、そして前記ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、ダニ媒介性脳炎ウイルス由来の抗原である、請求項２８または２９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細菌に対する抗原およびウイルスに対する抗原の組み合わせ、その組み合わせの使用、ならびに感染症に対する防御を提供するためのこれらの抗原の組み合わせを含む医薬の調製に関する。特に、本発明は、破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原と、ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原と、ダニ媒介性脳炎（ＴＢＥ）に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原とを含有する、混合ワクチンに関する。本発明の好ましい実施形態に従って、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉの少なくとも１種の抗原と、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ由来の少なくとも１種の抗原と、ダニ媒介性脳炎ウイルス由来の少なくとも１種の抗原とを含む組み合わせが、提供される。
【背景技術】
【０００２】
感染症に対する特異免疫の誘導は、現代医学において最も重要な里程石の１つであった。現在、膨大な数の異なるワクチンが、ヒトおよび動物の予防的防御に関する分野において公知である。とりわけ、広く用いられるワクチンは、破傷風に対するワクチンおよびジフテリアに対するワクチンである。破傷風ワクチンおよびジフテリアワクチンは、通常、投与の際に防御を誘導し得る、抗原などの不活化毒素（トキソイド）を含む。これらのトキソイドは、一般に、アルミニウム塩（例えば、水酸化アルミニウム）上に吸着されて、そのトキソイドの免疫原性が増強される。
【０００３】
利便性の問題のために、破傷風抗原およびジフテリア抗原は、破傷風およびジフテリアの両方に対する防御免疫を誘導する破傷風／ジフテリア−混合ワクチンと組み合わせられ得る。このようにして、複数の注射および大きい総注射容量が、回避され得る。数種の混合ワクチンは、既に当該分野で公知である（例えば、ジフテリア（Ｄ）と破傷風（Ｔ）と百日咳（Ｔ）とに対するワクチン；ＤＴＰといわれる組み合わせ、麻疹とムンプス（ＭＭ）とに対するワクチン、または麻疹（Ｍ）とムンプス（Ｍ）と風疹（Ｒ）とに対するワクチン；ＭＭＲといわれる組み合わせ）。さらに、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）抗原およびＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅＢ型抗原（Ｈｉｂ）と一緒になったＤＴＰなどの五価ワクチンもまた、実用化されている。さらに、無菌体百日咳（ａＰ）由来の抗原および不活化ポリオウイルス（ＩＰＶ）由来の抗原を含む多価ワクチンが、調製されている。例えば、ジフテリアの感染、破傷風の感染、百日咳の感染、Ｂ型肝炎の感染、ポリオの感染およびＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅＢ型の感染に対する防御を提供するための抗原を含む六価ワクチンＤＴａＰ−ＨＢＶ−ＩＰＶ−Ｈｉｂが、先行技術において記載された（非特許文献１）。
【０００４】
混合ワクチンについての必須条件は、「競合する」抗原の欠如、および免疫化される被験体に対する高い適合性である。免疫化に関して適用される国際基準にしたがって、混合型ワクチンは、別個の予防接種によって達成される防御に匹敵する防御を与えるべきである。しかし、抗原の配合は、多くの問題および不確実性を伴う複雑な工程である。混合ワクチンの個々の成分が不活性な物質でない場合、１つの混合物への種々の成分の配合は、個々の抗原性成分の免疫原性に対してネガティブに影響し得る。例えば、異なる抗原の間の相互作用、または抗原と、このようなワクチンに代表的に使用される他の成分との間の相互作用が、電荷、化学的残留物、洗浄剤、ホルムアルデヒド、イオンの濃度などにおける違いに起因して生じ得る。これらの変化は、異なる抗原を互いに接触させた後か、または異なる抗原をワクチン処方物にて通常存在する他の物質と接触させた後に、直ちに生じ得る。さらに、これらの変化はまた、例えば、保管、輸送などの間の混合に、顕著な遅れを伴って生じ得る。しかし、個々の抗原の免疫原性が、それらを１つの組み合わせに混合することによって影響され得る程度を、予測することはできない。結果として、上記ワクチンの１種以上の抗原が疾患の１種以上に対する不十分な血清防御（ｓｅｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ）を与えるのみである状況が、生じ得、この状況は、医療上の実施に適さない製品を提供する。
【０００５】
例えば、Ｚｏｔｔ（非特許文献２）は、全菌体百日咳成分を無菌体百日咳抗原（ＤａＰＴ）によって置換することが、全菌体百日咳と、ジフテリアトキソイドと、破傷風トキソイド（ＤＰＴ）とからなる混合ワクチン中の破傷風成分の力価を、１用量あたり３７０ＩＵから１用量あたり８４ＩＵに低下させることを報告する。
【０００６】
同様に、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅＢ型接合抗原と、ジフテリアトキソイドおよび破傷風トキソイドと、無菌体百日咳抗原と、不活化ポリオウイルス抗原とからなる混合ワクチン（ＤＴａＰ−Ｈｉｂ−ＩＰＶ）は、同時に与えられるＤＴａＰの組み合わせと、身体の異なる部位における一価ＩＰＶワクチンおよび一価Ｈｉｂワクチンとの組み合わせと比較した場合に、Ｈｉｂ抗原に対する減少した抗体形成を示すことが臨床試験において示された（非特許文献３）。血清防御における損失を生じるこのような相互作用の結果は、劇的であり得る。ＭｃＶｅｒｎｏｎら（非特許文献４）は、２０００年〜２００１年の英国における、細胞性の百日咳成分と一緒になったＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ抗原を含むこのようなより低い免疫原性の混合ワクチンの広範な使用を非難さえし、このワクチンは、１９９８年以来の英国におけるＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅＢ型による侵襲性の感染の全体的な増加の一因である。
【非特許文献１】Ｓｃａｎｄｉｎａｖｉａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ、２００４年、第３６巻、第８号、ｐ．５８５−５９２
【非特許文献２】Ｚｏｔｔ、Ｂｕｎｄｅｓｇｅｓｕｎｄｈｂｌ、１９９７年１２月発行、ｐ．４９８−５０１
【非特許文献３】Ｅｓｋｏｌａら、Ｌａｎｃｅｔ、１９９６年、第３４８号、ｐ．１６８８−１６９２
【非特許文献４】ＭｃＶｅｒｎｏｎら、ＢＭＪ、２００４年、第３２９号、ｐ．６５５−６５８
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
これらの結果は、有効な混合ワクチンの生産が、ワクチンの個々の成分の間の多次元的な（ｍｕｌｔｉｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ）相互作用に依存し、そして別々に投与される場合に観察される成分の任意の効果の推定を許容しない複雑な問題であることを明確に示す。したがって、数種の感染症に対する防御を提供する混合ワクチンに対する必要性が、存在する。この必要性は、本発明に従う混合ワクチンによって充足される。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
（発明の概要）
破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原と、ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原と、ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原とを含有する混合ワクチンが、破傷風の感染、ジフテリアの感染およびダニ媒介性脳炎ウイルスの感染に通常関連している症状に対する有効な血清防御を与えるのに適していることが、ここで、本出願人によって意外にも見出された。特に、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉの少なくとも１種の抗原と、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ由来の少なくとも１種の抗原と、ダニ媒介性脳炎ウイルス由来の少なくとも１種の抗原とを含有する混合ワクチンが、提供される。本発明によるワクチンは、優れた免疫学的防御を示す。さらに、本発明による混合ワクチンは、そのワクチン組成物の有効性を著しく減少させることなく他の抗原と組み合わせられ得る。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
（発明の詳細な説明）
本発明を詳細に記載する前に、本発明は、特定の例示された分子または特定の例示された方法のパラメータ（そういうものとして当然に変化し得る）に限定されないことが、理解されるべきである。本明細書中で使用される専門用語は、本発明の特定の実施形態のみを記載する目的のためのものであり、そしてその専門用語は、限定を意図しないことが、理解され得る。さらに、本発明の実施には、特に明記されない限り、ウイルス学、微生物学、分子生物学、組換えＤＮＡ技術および免疫学の従来の方法を利用し、その方法の全ては、当業者の技術範囲内である。このような技術は、文献において十分に説明される。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（第２版、１９８９）；ＤＮＡ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ、第Ｉ巻および第ＩＩ巻（Ｄ．Ｇｌｏｖｅｒ編）；Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｎ．Ｇａｉｔ編、１９８４）；Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ（１９８４）；およびＦｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ、第２版、第Ｉ巻および第ＩＩ巻（Ｂ．Ｎ．ＦｉｅｌｄｓおよびＤ．Ｍ．Ｋｎｉｐｅ編）を参照のこと。
【００１０】
前述または後述にかかわらず、本明細書中に列挙される全ての刊行物、特許および特許出願は、その全体が本明細書に参考として援用される。本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」が、その内容が明確にそうではないことを指定しない限り、複数の対象を含むことに、注意しなければならない。本願において使用される全ての技術用語および科学用語は、特に定められない限り、当該分野において一般的に使用される意味を有する。本願において使用される場合、以下の語または語句は、指定された意味を有する。
【００１１】
用語「含む（包含する、含有する）（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」および「からなる」を意味する。Ｘを「含む（含有する）」組成物は、Ｘのみからなり得るか、またはさらなるものも含み得る（例えば、Ｘ＋Ｙ）。
【００１２】
数値ｘに関する「約」という用語は、例えば、ｘ±１０％を意味する。
【００１３】
ジフテリアは、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅによって引き起こされる感染症である。この生物の特定の株は、約６２０００Ｄａの分子量を有する非耐熱性のポリペプチド毒素を産生する。培地中に分泌される毒素は、２つのフラグメントからなる、いわゆる「Ａ−Ｂ毒素」に属する。フラグメントＡ（約２２０００Ｄａ）は、ＮＡＤの存在下で標的細胞中の延長因子を不活化し得る致死性の毒素である。したがって、上記毒素は、タンパク質合成の阻害および細胞死をもたらす。一方で、フラグメントＢ（約４００００Ｄａ）は、標的細胞に対する結合および細胞質膜を介した細胞質へのフラグメントＡの輸送に関与し、その細胞質においてこの毒素は、その作用を示す。特に、外毒素を産生するＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅの全ての株は、上記毒素をコードするバクテリオファージ（βファージと称される）を含む。
【００１４】
ジフテリアトキソイド（「Ｄ」）は、Ｖａｃｃｉｎｅｓ、Ｐｌｏｔｋｉｎ  ＆  Ｏｒｅｎｓｔｅｉｎ編、第４版、２００４の第１３章に、より詳細に開示される。好ましいジフテリアトキソイドは、ホルムアルデヒド処理によって調製されるトキソイドである。上記ジフテリアトキソイドは、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅをウシの抽出物が補充され得る増殖培地（例えば、Ｆｅｎｔｏｎ培地、またはＬｉｎｇｇｏｕｄ  ＆  Ｆｅｎｔｏｎ培地）中で増殖させ、次いでホルムアルデヒド処理、限外濾過および沈降を行なうことによって得られ得る。次いで上記トキソイド化した（ｔｏｘｏｉｄｅｄ）材料は、無菌濾過および／または透析を包含する方法によって処理され得る。ジフテリアトキソイドの量は、国際単位（ＩＵ）で表され得る。例えば、ＮＩＢＳＣは、「Ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａ  Ｔｏｘｏｉｄ  Ａｄｓｏｒｂｅｄ  Ｔｈｉｒｄ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  １９９９」［Ｓｅｓａｒｄｉｃら、２００１、Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ  ２９：１０７−２２；ＮＩＢＳＣコード：９８／５６０］を提供し、これは、１アンプルあたり１６０ＩＵを有する。ＩＵシステムに代わるものとして、「Ｌｆ」単位（「凝集単位（ｆｌｏｃｃｕｌａｔｉｎｇ  ｕｎｉｔ）」または「限界凝集用量（ｌｉｍｅｓ  ｆｌｏｃｃｕｌａｔｉｎｇ  ｄｏｓｅ）」）が、１国際単位の抗毒素と混合されたときに最適に凝集する混合物をもたらすトキソイドの量として定義される［Ｍｏｄｕｌｅ  １  ｏｆ  ＷＨＯ’Ｔｈｅ  ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  ｂａｓｉｓ  ｆｏｒ  ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ  ｓｅｒｉｅｓ（Ｇａｌａｚｋａ）］。例えば、ＮＩＢＳＣは、１アンプルあたり３００ＬＦを有する「Ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａ  Ｔｏｘｏｉｄ，Ｐｌａｉｎ」［ＮＩＢＳＣコード：６９／０１７］を提供し、そしてまた、１アンプルあたり９００Ｌｆを含む「Ｔｈｅ  １ｓｔ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｆｏｒ  Ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａ  Ｔｏｘｏｉｄ  Ｆｏｒ  ＦＪｏｃｃｕｌａｔｉｏｎ  Ｔｅｓｔ」［ＮＩＢＳＣコード：ＤＩＦＴ］を提供する。
【００１５】
一般的に、約１０年毎のワクチンブースター用量が、獲得免疫の維持のために必要とされる。ＷＨＯによって示される推奨にしたがって、ジフテリアワクチンが、通常、一次免疫のため、および免疫化を強化する（「ブースター（ｂｏｏｓｔｅｒ）」）のために、就学前の小児に対して三価ワクチン（ＤＴＰ）として投与される一方で、二価ワクチン（ＤＴ）が、これらの就学前の小児においてブースター用量のために使用される。このようなワクチンにおいて使用されるジフテリアトキソイドの量は、約２０Ｌｆ／ｍｌ（Ｌｆは、以下で詳細に定義される凝集単位（Ｌｉｍｅｓ  ｆｌｏｃｃｕｌａｔｉｏｎｉｓ）の略語である）またはそれ以上であり、かつ１用量あたり少なくとも２０国際単位〜５０国際単位（１用量あたりのＩＵ）の力価を有する。この量は、上記トキソイド（ＤＴ）の小児形態として指定される。
【００１６】
このような高濃度のジフテリア抗原は、５歳より老いた者において比較的高い反応性（ｒｅａｃｔｏｇｅｎｉｃｉｔｙ）を誘導し得るので、より老いた者のためのジフテリアワクチンは、より少ない抗原量のジフテリアトキソイドを含む。５歳〜７歳の年長者（ａｇｅ  ｏｎｗａｒｄｓ）に対して、成人形態（成人投与形態または成人形態）に適した濃度の上記トキソイド（Ｔｄ）が、使用され、この形態は、小児形態よりかなり少ないトキソイドを含む。例えば、Ｃｈｉｒｏｎ  Ｂｅｈｒｉｎｇ  ＧｍｂＨ  ＆  Ｃｏ  ＫＧによって生産される、成人のための上記一価ジフテリアワクチンは、１．５Ｌｆのジフテリアトキソイドを含み、そして１用量あたり少なくとも２ＩＵを示す。
【００１７】
このワクチンは、５歳以上の者、および新生児期の間にジフテリアに対する完全な一次予防接種を有した者、およびジフテリアに対する免疫応答のブーストを必要とする者を予防接種するために、使用され得る。多くの国において、ジフテリアに対するブースター予防接種は、１０年毎が推奨される。破傷風に対する抗体価もまた、時間と共に徐々に減少するので、破傷風に対するブースター予防接種もまた、１０年毎が推奨される。破傷風に対する免疫応答のブーストおよびジフテリアに対する免疫応答のブーストについての推奨に従わない場合、これらの者は、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅもしくはＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉによる感染の際に、ジフテリアまたは破傷風を発症する危険性がある。
【００１８】
破傷風は、病原性微生物Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉによって引き起こされる。クロストリジウム属の微生物は、嫌気条件下においてのみ増殖し得る。Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉは、数種の毒素を合成し、その毒素のうちで最も重要なものは、テタノスパミン（１５００００Ｄａの分子量を有する非耐熱性タンパク質）である。テタノスパミンは、非常に強力な細菌性毒素である；１０−４μｇの量の純粋な毒素は、４８時間以内にマウスを殺すのに十分である。上記ジフテリア毒素のように、破傷風毒素は、いわゆる「Ａ−Ｂ毒素」に属し、そしてこの破傷風毒素は、２つのサブユニット（約１０００００Ｄａの重鎖および約５００００Ｄａの軽鎖）からなる。上記重鎖が、標的細胞への結合を担うのに対して、上記軽鎖は、毒性成分に相当する。
【００１９】
破傷風の臨床症状は、感染された生物における破傷風毒素の合成によって引き起こされる。Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉは、嫌気性を生じる深い刺創（ｗｏｕｎｄ  ｐｕｎｃｔｕｒｅ）において増殖し得る。上記微生物自体は、最初の感染部位から身体に侵襲しないが、産生された毒素は、拡散し得、そして死をもたらす重篤な神経学的障害を引き起こす。中枢神経系への毒素の進入の際、この毒素は、神経シナプスの膜の一方の脂質に結合することによって、神経シナプスを硬直させる（ｆｉｘｅｄ）。具体的には、上記毒素は、筋肉の弛緩を可能にする神経因子の活性をブロックし、代表的に、破傷風に付随する痙攣性麻痺をもたらす、運動ニューロンの持続的な発火を生じる。
【００２０】
破傷風トキソイド（「Ｔ」）は、Ｖａｃｃｉｎｅｓ、Ｐｌｏｔｋｉｎ  ＆  Ｏｒｅｎｓｔｅｉｎ編、第４版、２００４の第２７章において、より詳細に開示される。好ましい破傷風トキソイドは、ホルムアルデヒド処理によって調製されるトキソイドである。上記破傷風トキソイドは、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉを増殖培地（例えば、ウシのカゼインに由来するＬａｔｈａｍ培地）中で増殖させ、次いでホルムアルデヒド処理、限外濾過および沈降を行なうことによって得られ得る。次いで上記材料は、無菌濾過および／または透析を包含する方法によって処理され得る。破傷風トキソイドの量は、国際単位（ＩＵ）で表され得る。例えば、ＮＩＢＳＣは、「Ｔｅｔａｎｕｓ  Ｔｏｘｏｉｄ  Ａｄｓｏｒｂｅｄ  Ｔｈｉｒｄ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  ２０００」［ｅｓａｒｄｉｃら、２００１、Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ  ３０：４９−６８；ＮＩＢＳＣコード：９８／５５２］を提供し、これは、１アンプルあたり４６９ＩＵを有する。ＩＵシステムに代わるものとして、「Ｌｆ」単位（「凝集単位」または「限界凝集用量」）が、１国際単位の抗毒素と混合されたときに最適に凝集する混合物をもたらすトキソイドの量として定義される［Ｍｏｄｕｌｅ  １  ｏｆ  ＷＨＯ’Ｔｈｅ  ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  ｂａｓｉｓ  ｆｏｒ  ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ  ｓｅｒｉｅｓ（Ｇａｌａｚｋａ）］。例えば、ＮＩＢＳＣは、１アンプルあたり１０００ＬＦを含む「Ｔｈｅ  １ｓｔ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｒｅａｇｅｎｔ  ｆｏｒ  Ｔｅｔａｎｕｓ  Ｔｏｘｏｉｄ  Ｆｏｒ  Ｆｌｏｃｃｕｌａｔｉｏｎ  Ｔｅｓｔ」［ＮＩＢＳＣコード：ＴＥＦＴ］を提供する。
【００２１】
ダニ媒介性脳炎（ＴＢＥ）ウイルスは、フラビウイルスのうちの、ダニが媒介する群の種である。ＴＢＥウイルス（中央ヨーロッパ脳炎ウイルスもしくはロシア春夏脳炎ウイルス、またはドイツにおいて、Ｆｒｕｅｈｓｏｍｍｅｒ−Ｍｅｎｉｎｇｏ−Ｅｎｚｅｐｈａｌｉｔｉｓウイルス（ＦＳＭＥウイルスとも称される）は、ヒトにおいて種々の臨床症状を引き起こし、これらの症状としては、不顕性感染、軽度もしくは重度の発熱および髄膜炎、髄膜脳炎ならびに深刻な続発症を伴う髄膜脳脊髄炎が挙げられる（Ｋａｉｓｅｒ、Ｂｒａｉｎ  １９９９；１２２：２０６７−２０７８）。ヨーロッパおよびアジアの多くの地域は、ＴＢＥに関して風土的であり、したがって、ＴＢＥ予防接種が、ヨーロッパおよびアジアの多くの国において推奨される（Ｄｕｍｐｉｓら、Ｃｌｉｎ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．１９９９；２８：８８２−８９０；Ｓｕｅｓｓ、Ｖａｃｃｉｎｅ  ２００３；Ｓ１：１９−３５）。
【００２２】
ＴＢＥワクチンは、一様に、不活化ウイルス（主に、エンベロープ糖タンパク質Ｅ）を含み、そしてそのウイルス抗原もまた、Ｔ抗原およびＤ／ｄ抗原と同様に、アルミニウム塩に吸着される。利用可能なＴＢＥは、Ｎｅｕｄｏｅｒｆｌ株（Ｈｅｉｎｚら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｖｉｒｏｌ．１９８０；６：２１３−２２１）またはＫ２３株（Ｋｌｏｃｋｍａｎｎら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｓｔａｎｄａｒｄ．１９８９；１７：３３１−３４２）のいずれかに由来する、不活化ウイルス抗原および精製ウイルス抗原からなる。ヨーロッパ、シベリアおよび極東アジアからの単離体（ｉｓｏｌａｔｅ）の血清学的分析ならびに遺伝的分析に基づいて、ダニ媒介性脳炎ウイルスは、近い関係にある３種の血清型に細分されているが、免疫防御を与える糖タンパク質Ｅ抗原の、アミノ酸レベルにおける変動の程度は、低く（Ｅｃｋｅｒら、Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．１９９９；８０：１７９−１８５）、したがって、Ｎｅｕｄｏｅｒｆｌ株またはＫ２３株のいずれかに基づくＴＢＥワクチンは、交換可能であり、そしてそれらの両方は、広範な種々のＴＢＥウイルス株に対する防御を誘導する。
【００２３】
最初に開発されたＴＢＥワクチンは、幼い小児において全身的な副作用（例えば、発熱）を引き起こし得、したがって、減少した量のＴＢＥ抗原を含むＴＢＥワクチンが、小児の免疫化のために開発されている（ＧｉｒｇｓｄｉｅｓおよびＲｏｓｅｎｋｒａｎｚ，Ｖａｃｃｉｎｅ  １９９６；１４：１４２１−１４２８；Ｚｅｎｔら、Ｖａｃｃｉｎｅ  ２００３；２１：３５８４−３９５２）。例えば、成人用のＴＢＥワクチンであるＥｎｃｅｐｕｒ（登録商標）（Ｃｈｉｒｏｎ  Ｂｅｈｒｉｎｇ  ＧｍｂＨ  ＆  Ｃｏ  ＫＧ）は、１用量あたり１．５μｇの抗原を含むが、小児用のＥｎｃｅｐｕｒ（登録商標）（Ｃｈｉｒｏｎ  Ｂｅｈｒｉｎｇ  ＧｍｂＨ  ＆  Ｃｏ  ＫＧ）は、１用量あたり０．７５μｇの抗原からなり、そして小児用のＥｎｃｅｐｕｒ（登録商標）は、１歳〜１１歳の小児に適用される。特に、ＴＢＥの場合において、抗原の力価に関して、抗原量についての列挙を可能にする国際的な基準（ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ）は、存在しない。したがって、ＴＢＥの場合において使用される抗原の量は、μｇで取り扱われる。興味深いことに、幼い者および成人の者における、上記ＴＢＥワクチンの反応性プロフィールならびに上記のジフテリアワクチンの反応性プロフィールまたは破傷風／ジフテリアワクチンの反応性プロフィールは、全く異なって挙動する。高いジフテリア抗原量を含むワクチンの副作用は、小児と比較して、成人において、より一般的であるが、ＴＢＥワクチンに関する副作用の数は、抗原量が高い場合、成人と比較して、小児において増加する。
【００２４】
ＴＢＥに対する一次免疫は、３種のワクチン用量からなり、これらの用量は、Ｎｅｕｄｏｅｒｆｌ株またはＫ２３株のいずれかに基づくワクチンの両方に関して、０日目、１〜３ヶ月目（第１の用量の後）および９〜１２ヶ月目（第２の用量の後）に、製造業者の特定の製品特性（Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ）に従って与えられる。ブースター予防接種は、ＴＢＥ感染の危険性がある者に対して、３年毎が推奨される。これらの推奨に基づいて、ダニ媒介性脳炎ウイルスが風土的である地域に生きる者は、ＴＢＥに対する防御を確実にするために、その者の生涯において、２５回以上のＴＢＥ予防接種を受ける。
【００２５】
最近、血清学的調査は、免疫化におけるＴＢＥに対する防御が３年より長く持続することを示し（Ｒｅｎｄｉ−Ｗａｇｎｅｒら、Ｖａｃｃｉｎｅ  ２００４；２２、ｐｐ．２７４３−２７４９）、したがって、オーストリア予防接種諮問機関「Ｏｂｅｒｓｔｅｒ  Ｓａｎｉｔａｔｓｒａｔ」のＶａｃｃｉｎａｔｉｏｎ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ（Ｉｍｐｆａｕｓｓｃｈｕｓｓ）は、２００４年から、第１のブースター予防接種が行なわれている際に、５９歳までの者についてのブースター間隔を３年間から５年間に延長することを推奨する（Ｈｏｅｒａｎｄｌ、Ｉｍｐｆｐｌａｎ  ２００４、Ｗｅｌｃｈｅ  Ｎｅｕｅｒｕｎｇｅｎ  ｇｉｂｔ  ｅｓ？  Ｊａｔｒｏｓ  Ｖａｃｃｉｎｅｓ、１／２００４、４−５；Ｈｏｅｒａｎｄｌ、ＦＳＭＥ−Ｉｍｐｆｕｎｇ．Ｉｍｐｆｓｃｈｕｔｚ  ａｕｆ  ｆｕｅｎｆ  Ｊａｈｒｅ  ｖｅｒｌａｅｎｇｅｒｔ．Ｊａｔｒｏｓ  Ｖａｃｃｉｎｅｓ  １／２００４、６−７）。他の国がこれらの推奨に従うことが、予想され得る。長期的に、ＴＢＥ予防接種についてのブースター間隔が１０年間にさえ延長され得ることは、同じく除外することができない。この場合において、破傷風と、ジフテリアと、ＴＢＥとに対する防御を提供する混合ワクチンが、特に有利である。なぜなら、上記３種の疾患についてのブースター間隔が、同じであるからである。
【００２６】
（本発明の混合ワクチンの利点）
破傷風とジフテリアとに対する一次免疫は、一般的に、３〜１２月齢の乳児において実施され、そしてブースター予防接種は、学校入学および小学校卒業の頃、ならびにその後１０年間毎にて推奨される。ヒトが老いる一方で、免疫系の効力は低下する。したがって、オーストリアにおいて、６０歳を超える者についての、破傷風とジフテリアとに対するブースター免疫は、破傷風と、ジフテリアとに対する十分な免疫応答および防御抗体価のレベルを保証するために、５年間毎が推奨される一方で、ドイツにおいては、予防接種諮問機関であるＳＴＩＫＯ（Ｓｔａｎｄｉｇｅ  Ｉｍｐｆｋｏｍｍｉｓｓｉｏｎ  ａｍ  Ｒｏｂｅｒｔ  Ｋｏｃｈ−Ｉｎｓｔｉｔｕｔ）が、高齢者についても１０年間のブースター間隔を推奨する。ＴＢＥに対する一次予防接種は、３歳以上の小児、ダニ媒介性脳炎ウイルスが風土的な地域に生きるか、またはその地域に行く、青年および成人に対して推奨され、そしてブースター予防接種は、３年間毎が推奨され、かつ種々の年齢層に対する予防接種の間隔に関して、全く異ならない。
【００２７】
破傷風と、ジフテリアと、ＴＢＥとに対するブースター予防接種が、５歳以上の者において行なわれるべきときには、事実上、２種のワクチン注射（ｓｈｏｔ）、すなわち、ＴｄおよびＴＢＥ予防接種が、実施される必要がある。これらの２種のワクチンは、２週間または４週間のいずれかの間隔を空けることと同時に、身体の２つの部位（例えば、左上腕および右上腕）において、別々に与えられ得る。本発明にしたがって、破傷風と、ジフテリアと、ＴＢＥとに対する防御は、Ｔ抗原と、ｄ抗原と、ＴＢＥ抗原とからなる混合ワクチンによって促進され得る。本明細書中で使用される場合、この混合ワクチンは、Ｔｄ−ＴＢＥと称される。５歳〜１１歳の者は、好ましくは、既に現在の一価ＴＢＥワクチンに応用されているような、減少したＴＢＥ抗原量を含むＴｄ−ＴＢＥ混合ワクチンを受容する（Ｚｅｎｔら、Ｖａｃｃｉｎｅ  ２００３；２１：３５８４−３９５２；Ｅｈｒｌｉｃｈら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．２００４；３７：１２６−１２７）。他の強力なワクチンの大部分に関して、Ｔｄ−ＴＢＥワクチンは、１２歳以上の者に対する上記ＴＢＥ抗原量からなるべきであり、その抗原量は、より年長の小児、青年および成人の免疫化のために、既に使用されている（Ｚｅｎｔら、Ｖａｃｃｉｎｅ、２００３；２１：７３８−７４１；Ｅｈｒｌｉｃｈら、Ｖａｃｃｉｎｅ  ２００３；２２：２１７−２２３）。本発明の文脈において、減少した抗原濃度を有するジフテリアトキソイドワクチンの成人形態は、一般に、「ｄ」と表されるが、小児用のワクチンに使用される高い量のジフテリアトキソイドを有する小児形態は、「Ｄ」と称される。例えば、ＤＴ−Ｉｍｐｆｓｔｏｆｆ  Ｂｅｈｒｉｎｇ  ｆｕｒ  Ｋｉｎｄｅｒ（小児用のＤＴ吸着物ワクチン；Ｃｈｉｒｏｎ  Ｂｅｈｒｉｎｇ  ＧｍｂＨ  ＆  Ｃｏ  ＫＧ）は、１用量あたり少なくとも４０ＩＵの力価を有する２０Ｌｆの破傷風トキソイド、および１用量あたり少なくとも３０ＩＵの力価を有する２０Ｌｆのジフテリアトキソイドを含む。比較して、混合ワクチンＴｄ−ｐｕｒ（登録商標）（Ｃｈｉｒｏｎ  Ｂｅｈｒｉｎｇ  ＧｍｂＨ  ＆  Ｃｏ  ＫＧ）は、１用量あたり少なくとも２０ＩＵの力価を有する２０Ｌｆの破傷風トキソイド、および１用量あたり少なくとも２ＩＵの力価を有する１．５Ｌｆだけのジフテリアトキソイドを含む。
【００２８】
この新規混合ワクチンは、患者の望みをかなえる。なぜなら、破傷風とジフテリアとＴＢＥとに関する防御免疫状態を維持するのに必要な注射の数が、顕著に減少し得るからである。さらに、この新規混合ワクチンは、ＴＢＥワクチンを季節性の予防接種のみであることから遠ざける取り組みを支援し、そしてこの新規混合ワクチンは、好ましくは、その後の夏の間にＴＢＥから防御するために、春期に与えられる。
【００２９】
Ｔｄブースター予防接種が、最後のＴｄ予防接種後の間隔が１０年以上を超えることに起因して、秋に人々に与えられるべき場合、被験体は、しばしば、ＴＢＥブースター予防接種が必要とされる場合でさえ、同時での２つの針による注射の懸念に起因して、ＴＢＥについても同時に予防接種されることを控える。このような状況において、多くの者は、翌年の春期の間に予防接種されることを好むが、不運なことに、その後、これらの免疫化は、頻繁に忘れられ、そしてこれら者は、防御されないままである。ダニ媒介性脳炎ウイルスによる感染が年の早期に発生し得ることを、考慮すべきである。例えば、２００１年にオーストリアにおいて第１に報告されたダニ媒介性脳炎ウイルスは、早くも２月であった（Ｗａｌｄｎｅｒら、Ｗｉｅｎ．Ｋｌｉｎ．Ｗｏｃｈｅｎｓｃｈｒ．１１３、４５４−４５８（２００１））。この例は、ＴＢＥブースター予防接種の遅延が感染をもたらし得、その感染が、早発の予防接種によって予防され得たこと、およびＴｄ−ＴＢＥ混合ワクチンが、ＴＢＥブースター予防接種の受け入れを増加させることを示す。
【００３０】
Ｔｄ予防接種が必要とされるときはいつでも、上記新規Ｔｄ−ＴＢＥワクチンの使用は、ＴＢＥ感染の危険性がある者に対して望ましく、ＴＢＥに対する最後の予防接種が少なくとも３年前であった場合に望ましい。
【００３１】
上記新規Ｔｄ−ＴＢＥ混合ワクチンの価値は、ＴＢＥが風土的である地域に生きる者の、破傷風と、ジフテリアとＴＢＥとに対する免疫化の数を顕著に減少させ得る。２０歳の者は、８０歳になるまでに、実際のドイツ予防接種勧告に従うと約７回のＴｄブースター予防接種を受け、そしてＴＢＥ予防接種について５年のブースター間隔を予測すると、１３回のＴＢＥブースター注射を受け、混合型Ｔｄ−ＴＢＥブースター予防接種は、合計で７回の注射を、予防接種の数から減少させると、仮定される。このことは、注射の数が３５％減少し得ることを意味する。特に、２０歳の者は、２０歳で、破傷風と、ジフテリアと、ＴＢＥとに対するブースターのために、Ｔｄ−ＴＢＥ混合ワクチンによって免疫化される。次のＴＢＥブースターは、２５歳のときに一価ＴＢＥワクチンによって与えられる。３０歳になった者は、Ｔｄ−ＴＢＥブースター注射を再び受容し、次いで、一価ＴＢＥ予防接種を、３０歳などのときに受ける。
【００３２】
上記の場合において、ＴＢＥブースター予防接種についての推奨は、３年間から１０年間までか、または５年間から１０年間まで変化し、破傷風と、ジフテリアと、ＴＢＥとに対するブースター免疫の管理は、新規Ｔｄ−ＴＢＥ混合ワクチンによって、さらに容易になり、かつ実施可能であり、そしてその新規Ｔｄ−ＴＢＥ混合ワクチンによって、その注射が５０％減少する。注射の数の減少は、予防接種の受け入れを増加させるだけでなく、副作用の数を減少させる。したがって、ＴＢＥブースター予防接種についての推奨は、さらなる医学上の進歩である。
【００３３】
予防接種される者が、それまでにＴＢＥ予防接種を受けていない場合でさえ、Ｔｄブースター免疫と、この新規Ｔｄ−ＴＢＥワクチンを使用する一次ＴＢＥ免疫の第１の用量とを組み合わせ得る。次いで、一次ＴＢＥ予防接種を完全にするための次の第２のＴＢＥ免疫化は、一価ＴＢＥワクチン処方物によって与えられる。
【００３４】
本発明に従うＴｄ−ＴＢＥ混合ワクチンは、ＴＢＥ予防接種についての受け入れを支援するだけでなく、破傷風とジフテリアとから防御するための一般的なブースター予防接種の割合を上昇させる手段でもある。破傷風およびジフテリアに対する免疫化の大きな隔たりが、特に、成人および高齢者の者の群において存在し（Ｈａｍｍｅｒら、ＩｎｆＦｏ  １／９７、３５−３７）、この隔たりは、多くの者が、破傷風とジフテリアとに対する防御を有さないか、または破傷風とジフテリアとに対する限定的な防御のみを有するというようなことである。ほとんどの者は、一般的に、すすんで予防接種されるようになり、そして予防接種されることに興味をもつが、低い達成範囲の割合についての理由は、患者および医師の両方が、患者の来診の機会において、破傷風予防接種および／またはジフテリア予防接種についてほとんど考えないことであると理解され得る。患者が、ＴＢＥに対して免疫化されることについての具体的な望みを有する場合（例えば、患者が、ＴＢＥが風土的でない地域から、ＴＢＥが風土的である地域への旅行を望む場合）、これは、一価ＴＢＥワクチンのみを用いることに代えて、必要とされる場合、上記Ｔｄ−ＴＢＥ混合ワクチンを用いて予防接種するよい機会である。
【００３５】
予防接種の間に最大限の間隔が存在しないことが、一般的に、賛同される。破傷風、ジフテリアおよび／またはＴＢＥに対するブースター予防接種の推奨される間隔を超える場合、この新規Ｔｄ−ＴＢＥワクチンを用いた１回の単一の注射は、これらの３種の感染に対する防御を確実にするのに十分である。
【００３６】
本発明に従って、少なくとも３種の異なる感染症に対する防御を提供する抗原を含有する混合ワクチンが、提供される。具体的に、本発明は、破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原と、ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原と、ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原とを含有する混合ワクチンに関する。本発明の好ましい実施形態に従って、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ由来の少なくとも１種の抗原と、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ由来の少なくとも１種の抗原と、ダニ媒介性脳炎ウイルスに由来する少なくとも１種の抗原とを含有する混合ワクチンが、提供される。
【００３７】
さらなる局面に従って、本発明は、破傷風とジフテリアとダニ媒介性脳炎との予防的処置のための混合ワクチンの調製のための、破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原と、ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原と、ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原との使用に関する。
【００３８】
本明細書中で使用される場合、表現「Ｌｆ」は、いわゆる限界凝集量（Ｌｉｍｅｓ  ｆｌｏｃｃｕｌａｔｉｏｎｉｓ）の略語である。１Ｌｆは、１ＩＵの抗毒素の存在下において凝集を生じる、毒素（またはトキソイド）の量として定義される。したがって、Ｌｆ単位は、サンプル中の特定のタンパク質の含量を示す。抗原の量（例えば、毒素（またはトキソイド）の量）は、通常、ＬｆまたはＬｆ／ｍｌと表される。Ｌｆ値の決定は、毒素（またはトキソイド）および抗毒素が等量で混合される場合に、凝集が生じることに従う、Ｒａｍｏｎ（１９２２）の知見に基づく。これは、Ｌｆが、規定された量の抗原の存在下において沈降する抗原の量をいうことを意味する。上記Ｌｆは、ワクチン調製の分野において一般的な方法（例えば、Ｒｏｃｋｅｔ電気泳動（Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｓｃｈｗａｎｉｇ、「Ｄｉｐｈｔｈｅｒｉｅ  ｕｎｄ  Ｔｅｔａｎｕｓ：Ｗｉｅ  ｈａｅｕｆｉｇ  ｂｒａｕｃｈｔ  ｄｅｒ  Ｍｅｎｓｃｈ  Ｂｏｏｓｔｅｒｄｏｓｅｎ？」、Ａｌｔｅ  ｕｎｄ  ｎｅｕｅ  Ｉｍｐｆｓｔｏｆｆｅ  ｉｎ  Ｄｅｕｔｓｃｈｌａｎｄ．Ｇｒｕｎｄｌａｇｅｎ  ｆｕｅｒ  ｋｕｅｎｆｔｉｇｅ  Ｅｎｔｓｃｈｅｉｄｕｎｇｅｎ、２７−３３（２００１）  、Ｉｎｆｏｍｅｄ  Ｍｅｄｉｚｉｎｉｓｃｈｅ  Ｖｅｒｌａｇｓｇｅ−ｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ  ｍｂＨ、Ｂｅｒｌｉｎを参照のこと））によって決定され得る。
【００３９】
上に記載される通り、用語Ｌｆは、物理化学的方法によって測定されるトキソイドの量を定義する。しかし、水酸化アルミニウムに吸着されていない抗原を含むワクチンを上回る非常に向上した有効性を有する、水酸化アルミニウムに吸着された抗原を含むワクチンの開発は、ワクチンに対する新規評価方法を提供する必要性をもたらした。なぜなら、凝集法によって決定される結合値は、免疫学的応答についての信頼にたる値を示さないからである。したがって、（トキソイド）ワクチンの効力の評価のために、上記力価は、所与のワクチン中のＬｆの量より、ずっと適切である（Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｓｃｈｗａｎｉｇ、「Ｄｉｐｈｔｈｅｒｉｅ  ｕｎｄ  Ｔｅｔａｎｕｓ：Ｗｉｅ  ｈａｅｕｆｉｇ  ｂｒａｕｃｈｔ  ｄｅｒ  Ｍｅｎｓｃｈ  Ｂｏｏｓｔｅｒｄｏｓｅｎ？」、Ａｌｔｅ  ｕｎｄ  ｎｅｕｅ  Ｉｍｐｆｓｔｏｆｆｅ  ｉｎ  Ｄｅｕｔｓｃｈｌａｎｄ．Ｇｒｕｎｄｌａｇｅｎ  ｆｕｅｒ  ｋｕｅｎｆｔｉｇｅ  Ｅｎｔｓｃｈｅｉｄｕｎｇｅｎ、２７−３３（２００１）、Ｉｎｆｏｍｅｄ  Ｍｅｄｉｚｉｎｉｓｃｈｅ  Ｖｅｒｌａｇｓｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ  ｍｂＨ、Ｂｅｒｌｉｎを参照のこと）。ワクチンの上記力価は、国際単位（通常は、１ｍｌあたり（ＩＵ／ｍｌ）か、または１用量あたり（ＩＵ／用量））と称され、国際単位で表される。本明細書中で使用される場合、「ワクチンの力価」は、ＩＵで検定された基準のワクチンに対する、所与の抗原の有効性または所与のワクチンの有効性として定義される。上記力価の決定は、例えば、動物モデルまたは細胞培養物において、周知の方法によって行なわれる。さらなる詳細は、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ、第５版５．０から推論され得る。
【００４０】
本明細書中で使用される場合、用語「混合ワクチン」とは、１種より多くの感染症に対する防御を提供するワクチンをいう。この用語は、例えば、病原性微生物によって１種より多くの疾患に対する防御を提供する抗原を含有するワクチンを包含する。したがって、上記混合ワクチンは、２種、３種、４種、５種または６種の、異なる疾患に対する防御を提供し得る。したがって、このようなワクチンは、それぞれ、二価、三価、四価、五価、および六価と称される。対照的に、ただ１つの特定の疾患に対する防御を提供するワクチンは、本明細書中で一価と称される。一様に、混合ワクチンは、異なる生物から生じる数種の抗原を含有する。
【００４１】
本発明にしたがって、以下が提供される：投与の際に被験体（例えば、哺乳動物）において免疫学的応答を誘導するのに適している、少なくとも１種の抗原を含む混合ワクチン（この応答は、その被験体が破傷風に対して防御されるようなものである）；同時投与の際にその被験体において免疫学的応答を誘導するのに適している、少なくとも１種のさらなる抗原を含む混合ワクチン（この応答は、その被験体がジフテリアに対して防御されるようなものである）；および投与の際にその被験体において免疫学的応答を誘導するのに適している、少なくとも１種の抗原を含むワクチン（この応答は、その被験体がダニ媒介性脳炎に対して防御されるようなものである）。好ましくは、上記抗原は、これらの抗原に対して特異的な抗体を誘導すること（能動免疫）によって、免疫化された被験体において、その抗原の防御効果を達成する。
【００４２】
本発明に従う混合ワクチンが、１種以上のさらなる抗原と組み合わされ得、かつ有効および安定なままであり得ることが、見出されている。本発明の文脈において使用される場合、用語「安定な（ｓｔａｂｌｅ）」は、混合ワクチン処方物が、８日間、またはより好ましくは１４日間、その異なる抗原化合物の免疫原性および安定性に関してあらゆる実質的な損失を伴わずに、室温にて保たれることを意味する。安定性を向上させるために、ショ糖などの安定化剤が、上記ワクチン組成物に添加され得る。ショ糖の代わりにか、またはショ糖に加えて、他の安定剤（例えば、ヒト血清アルブミン、マンノース、トレハロース、マンニット、またはポリゲリン（ｐｏｌｙｇｅｌｉｎｅ））がまた、安定化剤として添加され得る。本発明のワクチンは、好ましくは５．０〜８．０の間のｐＨ値、より好ましくは６．０〜７．０の間のｐＨ値を示し、６．８〜７．８のｐＨ値が、最も好ましい。
【００４３】
本明細書中で使用される場合、用語「有効な（ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ）」とは、被験体に対する単回投与または被験体（例えば、哺乳動物）に対する反復投与の際に、上記抗原が、特定の疾患に対する防御を提供するという事実をいう。本明細書中で使用される場合、用語「防御を提供する」は、投与の際に、上記抗原が、予防接種された被験体において免疫学的応答を誘導し、この応答が、その被験体をその後の感染から防御し得ることを、意味する。本明細書中で使用される場合「免疫学的応答」は、被験体と、病原性微生物、その生物の一部またはその生物の産物との接触の際に、その生物によって引き起こされる疾患に関連した症状が、減少するか、または完全に排除されるように、その被験体の免疫系が抗原に順応することを、意味する。好ましくは、予防接種された被験体において誘導される免疫学的応答は、病原性微生物、その病原性微生物の部分、またはその微生物によって産生される代謝産物（例えば、毒素）を、直接指向する特異的抗体の産生に基づく。好ましくは、上記破傷風抗原および／またはジフテリア抗原は、少なくとも０．０１ＩＵ／ｍｌ〜２．０ＩＵ／ｍｌの抗原、好ましくは０．１ＩＵ／ｍｌ以上の抗原、および最も好ましくは１．０ＩＵ／ｍｌ以上の抗原に関して、予防接種の後、１４日間、幾何的な（ｇｅｏｍｅｔｒｉｃ）抗体価まで上昇させる程度に、抗体の産生を誘導する。簡単にいうと、最小限の防御が、幾何的な抗体価が約０．０１ＩＵ／ｍｌである場合に達成される一方で、長期の防御は、上記力価が、約０．５ＩＵ／ｍｌ、好ましくは約１．０ＩＵ／ｍｌである場合に達成される。予防接種された者の抗体価の決定は、一般的な方法の使用によって行われ得る。好ましくは、投与の際に達成される防御の程度は、一価ワクチン、二価ワクチンまたは三価ワクチン（例えば、ＤＴ混合、ＴＢＥワクチン、またはＴｄ−ＴＢＥ混合ワクチン）を投与することによって達成される防御と同程度に高い。
【００４４】
本発明の文脈において、用語「抗原」とは、疾患を引き起こす微生物に由来する任意の物質であって、投与の際に、その特定の疾患に対する防御を提供するのに適した物質をいう。特に、この用語は、病原性微生物（好ましくは、細菌、原生動物、ウイルスまたは真菌）から生じる物質であって、（例えば、経皮注射もしくは筋肉内注射、または経口摂取による）投与の際に、被験体（例えば、哺乳動物）において、この微生物、この微生物の部分またはこの生物の代謝産物に対する抗体の形成を誘導し得る物質について言及する；この型の免疫性は、本明細書中で能動免疫と称される。
【００４５】
上記抗原は、殺したウイルス、弱毒化ウイルスもしくは不活化ウイルス、または殺した細菌、弱毒化細菌もしくは不活化細菌、またはそれらのタンパク質、ポリペプチド、ペプチド、糖タンパク質、もしくはフラグメント、脂質、オリゴ糖、多糖、リポ多糖であり得る。
【００４６】
本発明の免疫原性組成物に使用される抗原は、個別に分離したポリペプチドとして上記組成物中に存在し得る。一般に、本発明の組換えタンパク質は、ＧＳＴ融合タンパク質および／またはＨｉｓタグ化融合タンパク質として調製される。
【００４７】
しかし、好ましくは、上記抗原の少なくとも２種（すなわち、２種、３種、４種、５種、６種、７種、８種、９種、１０種、１１種、１２種、１３種、１４種、１５種、１６種、１７種、１８種、１９種または２０種）は、単一のポリペプチド鎖（「ハイブリッド」ポリペプチド）として発現される。パイブリッドポリペプチドは、２つの主要な利点を提供する：第１に、それ自体で、不安定であり得るか、または乏しく発現され得るポリペプチドが、それらの問題を克服する適切なハイブリッドパートナーを加えることによって補助される；第２に、商業的な製造が、２つのポリペプチドを産生するために利用される必要がある１つの発現および精製のみとして単純化され、この２つのポリペプチドは、両方とも抗原として有用である。
【００４８】
異なるハイブリッドポリペプチドは、単一の処方物中に、一緒に混合され得る。このような組成物において、本発明の免疫原性組成物の抗原は、１つより多いハイブリッドポリペプチドで存在し得、そして／または非ハイブリッドポリペプチドとして存在し得る。しかし、抗原は、ハイブリッドまたは非ハイブリッドのいずれかとして存在するが、その両方として存在しないことが、好ましい。
【００４９】
ハイブリッドポリペプチドは、式ＮＨ２−Ａ−｛−Ｘ−Ｌ−｝ｎ−Ｂ−ＣＯＯＨによって表され、Ｘは、本発明の抗原のアミノ酸配列またはそのフラグメントであり；Ｌは、必要に応じたリンカーアミノ酸配列であり；Ａは、必要に応じたＮ末端アミノ酸配列であり；Ｂは、必要に応じたＣ末端アミノ酸配列であり；そしてｎは、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４または１５である。
【００５０】
−Ｘ−部分が、その野生型形態においてリーダーペプチド配列を有する場合、これは、上記ハイブリッド抗原中に含まれても、そのハイブリッド抗原から省かれてもよい。いくつかの実施形態において、上記リーダーペプチドは、ハイブリッドタンパク質のＮ末端に配置される−Ｘ−部分のリーダペプチドを除いて、削除される（すなわち、Ｘ１のリーダーペプチドは、保持されるが、Ｘ２．．．Ｘｎのリーダーペプチドは、省かれる）。これは、全てのリーダーペプチドを削除すること、およびＸ１のリーダーペプチドを部分−Ａ−として使用することと等しい。
【００５１】
各ｎに関して、（−Ｘ−Ｌ−）の場合、リンカーアミノ酸配列−Ｌ−は、存在しても、存在していなくてもよい。例えば、ｎ＝２である場合、上記ハイブリッドは、ＮＨ２−Ｘ１−Ｌ２−Ｘ２−Ｌ２−ＣＯＯＨ、ＮＨ２−Ｘ１−Ｘ２−ＣＯＯＨ、ＮＨ２−Ｘ１−Ｌ１−Ｘ２−ＣＯＯＨ、ＮＨ２−Ｘ１−Ｘ２−Ｌ２−ＣＯＯＨなどであり得る。リンカーアミノ酸配列−Ｌ−は、代表的に、短い（例えば、２０アミノ酸、またはより少ないアミノ酸（すなわち、２０アミノ酸、１９アミノ酸、１８アミノ酸、１７アミノ酸、１６アミノ酸、１５アミノ酸、１４アミノ酸、１３アミノ酸、１２アミノ酸、１１アミノ酸、１０アミノ酸、９アミノ酸、８アミノ酸、７アミノ酸、６アミノ酸、５アミノ酸、４アミノ酸、３アミノ酸、２アミノ酸、１アミノ酸））。例としては、クローニングを容易にする短いペプチド配列、ポリ−グリシンリンカー（ＧＩｙｎ、ｎは、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上である）、およびヒスチジンタグ（Ｈｉｓｎ、ｎは、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上である）が挙げられる。他の適切なリンカーアミノ酸配列は、当業者にとって明らかである。有用なリンカーは、クローニングおよび操作を補助するＢａｍＲＩ制限酵素部位から形成されるＧｌｙ−Ｓｅｒジペプチド、ならびに代表的なポリ−グリシンリンカーである（Ｇｌｙ）４テトラペプチドを有する、ＧＳＧＧＧＧである。
【００５２】
−Ａ−は、必要に応じたＮ末端アミノ酸配列である。これは、代表的に、短い（例えば、４０アミノ酸、またはより少ないアミノ酸（すなわち、４０アミノ酸、３９アミノ酸、３８アミノ酸、３７アミノ酸、３６アミノ酸、３５アミノ酸、３４アミノ酸、３３アミノ酸、３２アミノ酸、３１アミノ酸、３０アミノ酸、２９アミノ酸、２８アミノ酸、２７アミノ酸、２６アミノ酸、２５アミノ酸、２４アミノ酸、２３アミノ酸、２２アミノ酸、２１アミノ酸、２０アミノ酸、１９アミノ酸、１８アミノ酸、１７アミノ酸、１６アミノ酸、１５アミノ酸、１４アミノ酸、１３アミノ酸、１２アミノ酸、１１アミノ酸、１０アミノ酸、９アミノ酸、８アミノ酸、７アミノ酸、６アミノ酸、５アミノ酸、４アミノ酸、３アミノ酸、２アミノ酸、１アミノ酸））。例としては、タンパク質輸送（ｐｒｏｔｅｉｎ  ｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ）を指揮するリーダー配列、またはクローニングもしくは精製を容易にする短いペプチド配列（例えば、ヒスチジンタグ（Ｈｉｓｎ、ｎは、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上である））が挙げられる。他の適切なＮ末端アミノ酸配列は、当業者にとって明らかである。Ｘ１が、それ自体のＮ末端メチオニンを欠く場合、−Ａ−は、好ましくは、（例えば、１アミノ酸、２アミノ酸、３アミノ酸、４アミノ酸、５アミノ酸、６アミノ酸、７アミノ酸または８アミノ酸を含む）オリゴペプチドであり、このオリゴペプチドは、Ｎ末端メチオニンを提供する。
【００５３】
−Ｂ−は、必要に応じたＣ末端アミノ酸配列である。これは、代表的に、短い（例えば、４０アミノ酸、またはより少ないアミノ酸（すなわち、４０アミノ酸、３９アミノ酸、３８アミノ酸、３７アミノ酸、３６アミノ酸、３５アミノ酸、３４アミノ酸、３３アミノ酸、３２アミノ酸、３１アミノ酸、３０アミノ酸、２９アミノ酸、２８アミノ酸、２７アミノ酸、２６アミノ酸、２５アミノ酸、２４アミノ酸、２３アミノ酸、２２アミノ酸、２１アミノ酸、２０アミノ酸、１９アミノ酸、１８アミノ酸、１７アミノ酸、１６アミノ酸、１５アミノ酸、１４アミノ酸、１３アミノ酸、１２アミノ酸、１１アミノ酸、１０アミノ酸、９アミノ酸、８アミノ酸、７アミノ酸、６アミノ酸、５アミノ酸、４アミノ酸、３アミノ酸、２アミノ酸、１アミノ酸））。例としては、タンパク質輸送を指揮するリーダー配列、クローニングもしくは精製を容易にする短いペプチド配列（例えば、Ｈｉｓｎ、ｎは、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上である）、またはタンパク質安定性を向上させる配列が挙げられる。他の適切なＣ末端アミノ酸配列は、当業者にとって明らかである。
【００５４】
上記ハイブリッド内の免疫原性組成物の個々の抗原（個々の−Ｘ−部分）は、１種以上の株に由来しても、１種以上のＭ型に由来してもよい。ｎ＝２である場合、例えば、Ｘ２は、Ｘ１と、同じ株または同じ型に由来しても、異なる株または異なる型に由来してもよい。ｎ＝３である場合、上記株は、以下：
【００５５】
【化１】
2008515842.tif 000002
であり得る。
【００５６】
ハイブリッドポリペプチドが使用される場合、上記ハイブリッド内の個々の抗原（すなわち、個々の−Ｘ−部分）は、１種以上の株に由来し得る。ｎ＝２である場合、例えば、Ｘ２は、Ｘ１と、同じ株に由来しても、異なる株に由来してもよい。ｎ＝３である場合、上記株は、以下：
【００５７】
【化２】
2008515842.tif 000003
であり得る。例として、ＴＢＥウイルス抗原は、Ｅｃｋｅｒら、（１９９９）、Ｊ  Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  ８０：１７９−１８５の表１に示される１種以上の疫学的に流行性の血清型から選択される。
【００５８】
このような分子の、フラグメント、誘導体および他の改変形態もまた、抗原として使用され得ることが、理解される。
【００５９】
本発明はまた、本発明のポリペプチドをコードする核酸を提供する。さらに、本発明は、好ましくは、「高ストリンジェンシー」な条件下（例えば、０．１×ＳＳＣ、０．５％  ＳＤＳ溶液で６５℃）においてこの核酸にハイブリダイズし得る核酸を提供する。
【００６０】
本発明のポリペプチドは、種々の手段（例えば、組換え発現、細胞培養物からの精製、化学合成など）によって、種々の形態（例えば、ネイティブ形態、融合体、非グリコシル化形態、脂質付加した形態など）にて調製され得る。それらのポリペプチドは、好ましくは、実質的に純粋な形態にて調製される（すなわち、他の宿主細胞タンパク質または他の非宿主細胞タンパク質を実質的に含まない）。
【００６１】
本発明に従う核酸は、多くの方法（例えば、ゲノムライブラリーまたはｃＤＮＡライブラリーからの化学合成、生物自体からの化学合成など）によって調製され得、そしてその核酸は、種々の形態（例えば、一本鎖、二本鎖、ベクター、プローブなど）をとり得る。それらの核酸は、好ましくは、実質的に純粋な形態にて調製される（すなわち、他の宿主細胞核酸または他の非宿主細胞核酸を実質的に含まない）。
【００６２】
用語「核酸」は、ＤＮＡおよびＲＮＡ、ならびにまた、ＤＮＡのアナログおよびＲＮＡのアナログ（例えば、改変型骨格（例えば、ホスホロチオエートなど）を含むもの）、ならびにまた、ペプチド核酸（ＰＮＡ）などを含む。本発明は、上に記載される核酸と相補的な配列を含む核酸を包含する（例えば、アンチセンス目的またはプロービング（ｐｒｏｂｉｎｇ）目的のため）。
【００６３】
さらに、上記抗原は、核酸（例えば、デオキシ核酸またはリボ核酸）であり得る。ＤＮＡに基づくワクチンまたはＲＮＡに基づくワクチンは、近年、非常に興味を集めている。このアプローチにおいて、上記ワクチンに含有される核酸は、投与後に被験体の身体内で、それぞれのタンパク質またはポリペプチドへと翻訳される。ＤＮＡワクチンまたはＲＮＡワクチンの場合において、上記核酸の抗原性が単純な配列改変によって改変され得ることは、特に有益である。
【００６４】
本発明はまた、本発明のポリペプチドを産生するための方法を提供し、この方法は、本発明の核酸によって形質転換された宿主細胞を、ポリペプチド発現を誘導する条件下において培養する工程を包含する。例として、上記ダニ媒介性脳炎ウイルスの糖タンパク質Ｅは、組換え技術によって発現され得、そしてその糖タンパク質Ｅは、組換えサブユニットＴＢＥワクチンを含有する免疫原性組成物を開発するために使用され得る。あるいは、ウイルスカプシドタンパク質遺伝子がまた、ＴＢＥ混合ワクチンを目的として使用され得る。
【００６５】
上記異種の宿主は、原核生物（例えば、細菌）であっても、真核生物であってもよい。その宿主は、好ましくは、Ｅ．ｃｏｌｉであるが、他の適切な宿主としては、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ、Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｈｏｌｅｒａｅ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｌａｃｔａｍｉｃａ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｃｉｎｅｒｅａ、ミコバクテリア（例えば、Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、酵母などが挙げられる。
【００６６】
本発明のポリペプチドは、種々の形態（例えば、ネイティブ形態、融合体、グリコシル化形態、非グリコシル化形態など）にて調製され得る。
【００６７】
本発明のポリペプチドは、固体支持体に結合され得る。
【００６８】
本発明のポリペプチドは、検出可能な標識（例えば、放射性標識もしくは蛍光標識、またはビオチン標識）を含み得る。
【００６９】
本発明はまた、本発明のポリペプチドを産生するための方法を提供し、この方法は、このポリペプチドの少なくとも一部を、化学的手段によって合成する工程を包含する。
【００７０】
さらに、本発明は、本発明の核酸を産生するための方法を提供し、この核酸は、（少なくとも部分的に）化学合成によって調製される。
【００７１】
本発明はまた、本発明の核酸を産生するための方法を提供し、この方法は、プライマーベースの増幅方法（例えば、ＰＣＲ）を使用して核酸を増幅する工程を包含する。
【００７２】
本発明はさらに、本発明のタンパク質複合体を産生するための方法を提供し、この方法は、クラスＩ  ＭＨＣタンパク質と、本発明のポリペプチド、またはそのフラグメントとを接触させる工程を包含する。
【００７３】
本発明は、本発明のタンパク質複合体を産生するための方法を提供し、この方法は、本発明のポリペプチド、またはそのフラグメントを、被験体に投与する工程を包含する。この方法は、上記複合体を、上記被験体から精製する工程をさらに包含する。
【００７４】
本発明はまた、組成物を産生するための方法を提供し、この方法は、本発明のポリペプチドおよび／もしくは本発明の核酸を、薬学的に受容可能なキャリアまたは薬学的に受容可能な希釈剤と一緒に投与する工程を、包含する。
【００７５】
上記抗原は、異なる製造業者から純粋な形態で入手されても、適切な供給源から、それぞれの抗原性分子を精製することによって調製されてもよい。上記抗原が、例えば、産生する生物によって分泌される細菌のエキソポリペプチド（ｅｘｏｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ）である場合、そのエキソポリペプチドは、一般的なクロマトグラフィー法によって、培養上清から容易に精製され得る（例えば、上記ジフテリア毒素）。あるいは、上記抗原が、核酸である場合、その核酸は、ポリメラーゼ連鎖反応などを包含する方法によって得られ得る。上記抗原が、全ウイルスである場合、その全ウイルスは、例えば、感染後の細胞培養上清、およびその細胞の溶解物から、分離器および濾過器の使用によって精製され得る。抗原のさらなる例、ならびにそれらの単離方法および精製方法のための手段のさらなる例は、ｖｏｎ  Ｂｅｈｒｉｎｇら、Ｓｅｒａ  ｕｎｄ  Ｉｍｐｆｓｔｏｆｆｅ．、Ｕｌｌｍａｎｎｓ  Ｅｎｃｙｋｌｏｐａｅｄｉｅ  ｄｅｒ  ｔｅｃｈｎｉｓｃｈｅｎ  Ｃｈｅｍｉｅ．Ｂａｎｄ  ２１、２７３−３１０（１９８２）、Ｖｅｒｌａｇ  Ｃｈｅｍｉｅ  ＧｍｂＨ、Ｗｅｉｎｈｅｉｍによって記載されている。あるいは、ペプチド抗原、ポリペプチド抗原またはタンパク質抗原もまた、組換えＤＮＡ技術（例えば、異種発現）によって産生され得る。このような産生工程に適した方法は、当該分野において公知である。
【００７６】
抗原性分子（例えば、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質）もまた、組換えＤＮＡ技術（例えば、異種発現）によって産生され得ることが、当業者によって理解される。このような産生工程に適した方法は、当該分野において公知であり、そしてこれらの方法は、例えば、バキュロウイルス発現システム、酵母ツーハイブリッドシステム、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）システムおよび多くの他のシステムを包含する。
【００７７】
用語「抗原」は、特に、微生物（細菌）によって分泌される、エキソタンパク質（ｅｘｏｐｒｏｔｅｉｎ）またはエキソポリペプチドを包含する。溶解の際に上記産生する細胞から放出される、エンドタンパク質（ｅｎｄｏｐｒｏｔｅｉｎ）またはエンドポリペプチド（ｅｎｄｏｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ）もまた、包含される。このようなエキソタンパク質／エキソポリペプチドまたはエンドタンパク質／エンドポリペプチドは、例えば、タンパク質毒素またはペプチド毒素であり得る。ワクチンにおいて、これらの毒素は、好ましくは、改変形態で使用される。なぜなら、多くの場合において、純粋な毒素は、直接注射に適さないからである。ここで、上記毒素は、通常、それらの毒素がその抗原性を保持するが、その毒性（一部）を失うように、化学的に改変される。このような改変型毒素は、通常、トキソイドと称される。トキソイドの形成は、例えば、その分子中の自由なアミノ基のいくつかをブロックするホルムアルデヒド用いて毒素を処理し、それによって、上記毒素からトキソイドへと変換することによって達成され得る。好ましくは、上記トキソイドは、対応する毒素と比較して、ずっと少ない効果を有し、したがってそのトキソイドは、安全であり、かつ高用量にて与えられ得る。トキソイド抗原の例は、上記ジフテリアトキソイドおよび上記破傷風トキソイドである。トキソイドを産生する方法は、当該分野において周知であり、そして、例えば、ｖｏｎ  Ｂｅｈｒｉｎｇら（上記を参照のこと）による記載において要約される。未改変形態もしくは改変形態の、ポリペプチド毒素のフラグメントまたはトキソイドのフラグメントもまた、本発明の実施において使用され得ることが、理解される。
【００７８】
そのままの微生物に対する免疫化が目的とされる場合、本発明に従う抗原は、グラム陰性菌の外膜の特定のタンパク質などのその微生物の一部、またはその微生物自体であり得る。後者の場合において、上記微生物は、ホルムアルデヒド、フェノールまたは熱などの因子によって殺され得、次いで、その死んだ細胞は、ワクチン中に抗原として組み込まれ得、そして注射され得る。これらの場合において、上記抗原は、細胞全体／全ウイルス、またはこのような分画の抽出物からなる。この様式の予防接種は、例えば、一様に、病原性生物（例えば、Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｈｏｌｅｒａｅ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓおよびＹｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ）に関して適用される。
【００７９】
本発明の好ましい実施形態に従って、上記混合ワクチン中の破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、破傷風トキソイドを含む。本発明のさらに好ましい実施形態に従って、上記混合ワクチン中のジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、ジフテリアトキソイドを含む。このことは、本発明に従う混合ワクチンが、他の抗原性物質とほぼ同じく、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉおよびＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅの毒素産生株から得られ得るトキソイドを含むことを意味する。
【００８０】
一般的に、トキソイドは、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉの培養物およびＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅの培養物において、毒素から調製され得る。これらの生物によって産生される毒素は、それらの一次構造に関して記載されている；例えば、Ｅｉｓｅｌ，Ｕら、ＥＭＢＯ  Ｊ．、１９８６年１０月；５（１０）：２４９５−５０２。
【００８１】
Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅのトキソイドおよびＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉのトキソイドはまた、ＤＴ混合ワクチン（ＤＴ−Ｉｍｐｆｓｔｏｆｆ  Ｂｅｈｒｉｎｇ  ｆｕｅｒ  Ｋｉｎｄｅｒ；Ｄｉｐｈｔｈｅｒｉｅ−Ｔｅｔａｎｕｓ−Ａｄｓｏｒｂａｔ−Ｉｍｐｆｓｔｏｆｆ  ｆｕｅｒ  Ｋｉｎｄｅｒ（Ｃｈｉｒｏｎ  Ｂｅｈｒｉｎｇ  ＧｍｂＨ  ＆  Ｃｏ  ＫＧ））の形態で購入され得、この形態は、１用量あたり少なくとも４０ＩＵの力価を有する２０Ｌｆの破傷風トキソイド、および１用量あたり少なくとも３０ＩＵの力価を有する２０Ｌｆのジフテリアトキソイドを含む。さらに、混合ワクチンＴｄ−ｐｕｒ（登録商標）（Ｃｈｉｒｏｎ  Ｂｅｈｒｉｎｇ  ＧｍｂＨ  ＆  Ｃｏ  ＫＧ）は、１用量あたり少なくとも２０ＩＵの力価を有する２０Ｌｆの破傷風トキソイド、および１用量あたり少なくとも２ＩＵの力価を有する１．５Ｌｆだけのジフテリアトキソイドを含む。本発明に従って、これらのワクチン、またはこれらのワクチンの成分である上記抗原は、本発明の混合ワクチンを調製するための出発材料として、直接使用され得る。あるいは、上述の通り、上記トキソイドはまた、それぞれの生物の培養物の上清から上記毒素を精製することによって調製され得る。次いで、上記精製された毒素は、トキソイドを産生するために、当該分野において周知である方法によって改変され得る。
【００８２】
本発明に従って、上記破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原（例えば、上記破傷風トキソイド）は、１用量あたり約１ＩＵ〜約７０ＩＵの力価に対応する量で存在し得る。１２歳未満の小児用の混合ワクチンにおいて使用される場合、その抗原は、１用量あたり約２０ＩＵ〜約６０ＩＵの力価に対応する量で存在し得るが、１用量あたり約３０ＩＵ〜約５０ＩＵの力価が、好ましく、そして１用量あたり少なくとも４０ＩＵの力価が、最も好ましい。少なくとも１２歳の小児用の混合ワクチンおよび成人用の混合ワクチンにおいて使用される場合、その抗原は、１用量あたり約５ＩＵ〜約４０ＩＵの力価に対応する量で存在し得るが、１用量あたり約１０ＩＵ〜約３０ＩＵの力価が好ましく、そして１用量あたり少なくとも２０ＩＵの力価が、最も好ましい。
【００８３】
同様に、上記ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原（例えば、上記ジフテリアトキソイド）は、１用量あたり０．１ＩＵ〜７０ＩＵの力価に対応する量で存在し得る。１２歳未満の小児用の混合ワクチンにおいて使用される場合、その抗原は、１用量あたり約１０ＩＵ〜約５０ＩＵの力価に対応する量で存在し得るが、１用量あたり約２０ＩＵ〜約４０ＩＵの力価が、好ましく、そして１用量あたり少なくとも３０ＩＵの力価が、最も好ましい。少なくとも１２歳の小児用の混合ワクチンおよび成人用の混合ワクチンにおいて使用される場合、その抗原は、１用量あたり約０．５ＩＵ〜約１０ＩＵの力価に対応する量で存在し得るが、１用量あたり約０．７５ＩＵ〜約５ＩＵの力価が好ましく、そして１用量あたり少なくとも２ＩＵの力価が、最も好ましい。
【００８４】
本発明の好ましい実施形態に従って、上記破傷風に対する防御を提供する混合ワクチン中の少なくとも１種の抗原は、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ  Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ  Ｆ１株に由来する。その株は、Ｃｏｍｍｏｎｗｅａｌｔｈ  ｏｆ  Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ、Ｄｅｐａｒｔｕｒｅ  ｏｆ  Ｐｕｂｌｉｃｈ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｄｉｖｉｓｉｏｎ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｂｏｓｔｏｎから入手され得る。さらに、上記ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、好ましくは、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ  Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ  ８  Ｐａｒｋ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ株（Ｊ．Ｈ．Ｍｕｅｌｌｅｒ、１９３９、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３７、１０３−１１１；Ｒｕｓｓｅｌｌ，Ｌ．およびＲ．Ｈｏｌｍｅｓ、１９８５、Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．４７：５７５−５７８を参照のこと）に由来する。この株は、Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ  Ａｎｔｉｔｏｘｉｎ  ａｎｄ  Ｖａｃｃｉｎｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｆｏｒｅｓｔ  Ｈｉｌｌｓ、Ｂｏｓｔｏｎから入手され得る。
【００８５】
ウイルスワクチンの場合において、上記ワクチンの抗原は、全ウイルスまたは全ウイルスの抽出物、およびそのウイルスに由来する異なる純粋な分子（例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ、タンパク質、ペプチド、またはタンパク質のフラグメントおよびペプチドのフラグメン）からなり得る。本明細書中で使用される場合、表現「全ウイルス」は、上記ワクチン処方物のために単離されるウイルスは、サブユニット抗原分画が調製されるように処理されないことを、意味する。対照的に、完全な分画は、培地成分から分離した後に培養物から得られるウイルスを含む。上記完全な分画もまた、抗原として使用され得る。特定の抗原について濃縮される分画もまた、この用語によって包含される。例えば、上記ダニ媒介性脳炎ウイルスの場合において、糖タンパク質Ｅについて濃縮される分画が、使用される；しかし、その分画はまた、他のウイルス成分を含む（すなわち、その分画は、精製されたウイルスを含有する分画ではない）。「全ウイルス」を得るための方法および手段は、例えば、「Ｖａｃｃｉｎｅｓ」、ＰｌｏｔｋｉｎおよびＯｒｅｎｓｔｅｉｎ（編）、２００４に記載される。
【００８６】
本発明の好ましい実施形態に従って、上記ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、その抗原がＴＢＥ−フラビウイルスＮｅｕｄｏｅｒｆｌ株またはＴＢＥ−フラビウイルスＫ２３株から生じることによって特徴付けられ、その抗原の両方は、先行技術において、その配列に関して公知である（Ｈｅｉｎｚら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｖｉｒｏｌ．１９８０；６：２１３−２２１；Ｋｌｏｃｋｍａｎｎら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｓｔａｎｄａｒｄ．１９８９；１７：３３１−３４２）。しかし、上記ダニ媒介性脳炎ウイルスの他の株（例えば、Ｌｏｕｐｉｎｇ  Ｉｌｌ株、Ｐｅｔｒａｃｏｖａ株、Ｓｏｆｙｎ株）もまた、ＴＢＥに対する抗原を得るために使用され得る。
【００８７】
本発明の好ましい実施形態に従って、上記ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、ＴＢＥ−フラビウイルスに由来する（すなわち、その抗原は、ダニ媒介性脳炎ウイルスの抗原である）。本発明の特に好ましい実施形態に従って、ＴＢＥ−フラビウイルス由来の抗原は、エンベロープ糖タンパク質Ｅまたはそのフラグメントである。この糖タンパク質の一次構造は、先行技術において公知であり、そしてそれは、例えば、Ｅｃｋｅｒら、Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．８０、１７９−１８５（１９９９）の刊行物において記載される。本発明の代替的な実施形態に従って、上記ＴＢＥ−ウイルスの抗原は、全ウイルスである。
【００８８】
本発明に従って、上記ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原（例えば、ダニ媒介性脳炎ウイルスに由来する抗原）の量は、全ウイルスワクチン（例えば、Ｅｎｃｅｐｕｒ（登録商標））が使用される場合、上記混合ワクチンにおいて、１用量あたり約０．０１μｇ〜１用量あたり約１０μｇの範囲であり得る。あるいは、上記ウイルスの純粋な成分が使用される場合において、その量は、その抗原分子の性質に依存する。例えば、精製された糖タンパク質Ｅが上記混合ワクチンに組み込まれるべき場合、１用量あたり約０．１μｇ〜約５μｇの量、好ましくは１用量あたり０．５μｇ〜２．５μｇの量が、使用され得る。好ましくは、上記ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する抗原は、１用量あたり１．５μｇの量で存在する。
【００８９】
このましい局面に従って、本発明は、混合ワクチンを提供し、上記破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、１用量あたり少なくとも２０ＩＵの力価に対応する量で存在し、上記ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、１用量あたり少なくとも２ＩＵの力価に対応する量で存在し、そして上記ダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、１用量あたり少なくとも０．７５μｇの量で存在する。
【００９０】
本明細書中で使用される場合、用語「用量」とは、投与されるべき医薬の量または投与されるべきワクチンの量をいう。具体的に、この用語は、医薬またはワクチンの、投薬単位形態に言及する。例えば、問題となる医薬が液体である場合、上記用量は、その容量に関して言及される。本発明の文脈における適切な用量は、０．１ｍｌ〜２．０ｍｌの容量を有し、好ましくは０．５ｍｌ〜１．０ｍｌの容量を有する。問題となる医薬が丸剤として存在する場合、上記用量は、投与されるべき丸剤の数に関して言及される。本発明の文脈において、用語「用量」は、好ましくは、投与されるべき容量を扱うために使用される。本明細書中で使用される場合、本発明に従う混合ワクチンの力価は、１用量あたりのＩＵと称される。このことは、上記用量が投与される場合に、特定のＩＵ値によって表されるような力価が適用されることを、意味する。例えば、ワクチンが１用量あたり２０ＩＵの力価を示し、かつ上記用量が１ｍｌの用量で存在する場合、２０ＩＵ（それぞれの検定ワクチンに対して）に対応する防御の効果が、完全に１ｍｌが投与されるときに、達成される。
【００９１】
本発明に従う混合ワクチンは、さらなる疾患に対する防御を提供する少なくとも１種のさらなる抗原（例えば、別の病原性微生物（例えば、ウイルスおよび／または細菌病原体）由来の抗原）を、さらに含有し、その結果、四価ワクチン、五価ワクチンまたは六価ワクチンが、生産され得る。好ましくは、上記１種以上のさらなる抗原は、百日咳、ポリオ、Ａ型肝炎、髄膜炎菌性疾患、ライム病からなる群より選択される疾患または医学的状態に対する防御を提供し得る。本発明に従って調製され得るこのような多価ワクチンの例としては、Ｔｄ−ａＰ−ＴＢＥワクチン、Ｔｄ−ＩＰＶ−ＴＢＥワクチン、およびＴｄ−ａＰ−ＩＰＶ−ＴＢＥワクチンが挙げられる（しかし、これらに限定されない）。
【００９２】
一般的に、特異的抗原の至適量は、その抗体価を測定することを包含する標準的な方法、および予防接種された被験体の他の応答を用いて、評価され得る。予防接種の過程は、国内機関または国際機関の提議に採用され得る。本発明に従う混合ワクチンの抗原は、防御を提供する免疫学的応答をもたらす量で使用されることが、予想される。具体的に、これらの量は、特異的抗原（破傷風またはジフテリア）に対する抗体の、少なくとも約０．０１ＩＵ／ｍｌの幾何平均の力価、好ましくは少なくとも０．１ＩＵ／ｍｌの幾何平均の力価、および最も好ましくは少なくとも１．０ＩＵ／ｍｌの幾何平均の力価を、予防接種後に少なくとも１４日間もたらす。
【００９３】
本発明の好ましい実施形態に従って、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉの抗原、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅの抗原、および上記ダニ媒介性脳炎ウイルスの抗原は、アジュバントに吸着されたワクチン中に存在する。アジュバントは、頻繁に、ワクチン組成物の処方において使用される。本発明の文脈において、用語「アジュバント」とは、アジュバントを伴わずにワクチンを投与することと比較して、免疫化を受容する被験体の、上昇した免疫学的反応または上昇した免疫学的応答を引き出すあらゆる物質をいう。このような増強した応答は、例えば、それぞれの抗原に対する上昇した抗体価として観察され得る。
【００９４】
本発明と使用するためのアジュバントとしては、以下の１つ以上が挙げられるが、これらに限定されない：組成を有する無機質（例えば、アルミニウム塩および／またはカルシウム塩）；スクアレン−水エマルションなどの油エマルション（例えば、ＭＦ５９（５％スクアレン、０．５％  Ｔｗｅｅｎ  ８０、および０．５％  Ｓｐａｎ  ８５）；ＱＳ７、ＱＳ１７、ＱＳ１８、ＱＳ２１、ＱＨ−Ａ、ＱＨ−ＢおよびＱＨ−Ｃが挙げられるサポニン処方物；免疫刺激性オリゴヌクレオチド（例えば、ＣｐＧモチーフを含む配列）；生体接着因子（ｂｉｏａｄｈｅｓｉｖｅｓ）および粘膜接着因子（ｍｕｃｏａｄｈｅｓｉｖｅｓ）（例えば、エステル化ヒアルロン酸マイクロスフェア（Ｓｉｎｇｈら、（２００１）、Ｊ．Ｃｏｎｔ．ＲｅＩｅ．７０：２６７−２７６））、またはポリ（アクリル酸）の架橋型誘導体、ポリビニルアルコールの架橋型誘導体、ポリビニルピロリドンの架橋型誘導体、多糖の架橋型誘導体およびカルボキシメチルセルロースの架橋型誘導体などの粘膜接着因子；生分解性微粒子（例えば、ポリ−α−ヒドロキシ酸の粒子、ポリヒドロキシ酪酸の粒子、ポリオルトエステルの粒子、ポリ無水物の粒子、ポリカプロラクトンの粒子など）；リポソーム；ポリオキシエチレンエーテルおよびポリオキシエチレンエステル（例えば、ＷＯ９９／５２５４９を参照のこと）、ポリホスファゼン（ＰＣＰＰ）処方物；ムラミルペプチド；イミダゾキノロン化合物；インターロイキン（例えば、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−１２など）、インターフェロン（例えば、インターフェロン−γ）、マクロファージコロニー刺激因子、および腫瘍壊死因子などのヒト免疫調節因子；など。
【００９５】
無機塩類（例えば、アルミニウム塩および／またはカルシウム塩）を含有する無機質含有組成物は、アジュバントとして、本発明において特に好ましい。本発明は、水酸化物（例えば、オキシ水酸化物（ｏｘｙｈｙｄｒｏｘｉｄｅ））、リン酸塩（例えば、ヒドロキシリン酸塩（ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、オルトリン酸塩）、硫酸塩など（例えば、Ｖａｃｃｉｎｅ  Ｄｅｓｉｇｎ（１９９５）、ＰｏｗｅｌｌおよびＮｅｗｍａｎ編、ＩＳＢＮ：０３０６４４８６７Ｘ．Ｐｌｅｎｕｍ．の第８章および第９章）などの無機塩類、または異なる無機化合物の混合物（例えば、必要に応じて過剰なリン酸塩を含む、リン酸塩と水酸化物アジュバントとの混合物）を包含し、その混合物は、任意の適切な形態（例えば、ゲル形態、結晶形態、非晶質形態など）をとる化合物を含み、そして好ましい塩に対する吸着を伴う。上記無機質含有化合物はまた、金属塩の粒子として処方され得る（例えば、ＷＯ  ００／２３１０５を参照のこと）。本発明の好ましい実施形態に従って、使用されるアジュバントは、アルミニウム塩である。本発明の特に好ましい実施形態に従って、使用されるアルミニウム塩は、水酸化アルミニウムである。使用されるべきアジュバントの正確な量は、そのアジュバントの性質に依存する。例えば、水酸化アルミニウムが上記アジュバントである場合、水酸化アルミニウムは、１リットルの抗原懸濁液あたり２ｇ〜２０ｇの量で使用され得る。
【００９６】
本明細書中で使用される場合、用語「混合ワクチン」とは、例えば、ポリペプチド抗原または核酸分子を含有する免疫原性組成物をいう。
【００９７】
このような組成物のｐＨは、好ましくは、６と８との間であり、好ましくは約７である。上記ｐＨは、緩衝液の使用によって維持され得る。上記組成物は、無菌であり得、かつ／または発熱物質を含まない可能性がある。上記組成物は、ヒトに対して等張であり得る。本発明に従うワクチンは、予防的か、または治療的のいずれかで使用され得るが、そのワクチンは、代表的に、予防的であり、そして（コンパニオン哺乳動物（ｃｏｍｐａｎｉｏｎ  ｍａｍｍａｌ）および実験用哺乳動物を含む）動物（特に、ヒト）を処置するために使用され得る。
【００９８】
本発明の組成物は、本発明の治療方法、予防方法、または診断方法に使用するための１種以上の抗原と組み合わせて投与され得る。好ましい抗原としては、下に列挙されるものが挙げられる。さらに、本発明の組成物は、下に列挙される病原体のいずれかによって引き起こされる感染を、処置または予防するために使用され得る。下に記載される抗原との組み合わせに加えて、本発明の組成物はまた、本明細書中に記載されるようなアジュバントと組み合わされ得る。
【００９９】
本発明で使用するための抗原としては、下に示される以下の抗原の１種以上、または下に示される病原体の１種以上に由来する抗原が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１００】
（Ａ．細菌抗原）
本発明における使用に適した細菌抗原としては、細菌から単離され得るか、細菌から精製され得るか、または細菌に由来し得る、タンパク質、多糖、リポ多糖、および外膜小胞が挙げられる。さらに、細菌抗原としては、細菌溶解物および不活化細菌の処方物が挙げられ得る。細菌抗原は、組換え発現によって産生され得る。細菌抗原は、好ましくは、その生活環の少なくとも１つの段階の間にその細菌の表面に露出されるエピトープを含む。細菌抗原は、好ましくは、複数の血清型にわたって保存される。細菌抗原としては、下に示される細菌の１種以上に由来する抗原、および以下に同定される特定の抗原の例が挙げられる。
【０１０１】
Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓ：髄膜炎抗原は、Ａ、Ｃ、Ｗ１３５、Ｙ、および／もしくはＢなどの血清群のＮ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓから精製されるか、またはそのような血清群のＮ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓに由来する、タンパク質（例えば、参考文献１〜７において同定されるタンパク質）、糖類（多糖、オリゴ糖またはリポ多糖が挙げられる）、あるいは外膜小胞（参考文献８、９、１０、１１）を含み得る。髄膜炎タンパク質抗原は、接着因子（ａｄｈｅｓｉｏｎｓ）、自己輸送体（ａｕｔｏｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ）、毒素、Ｆｅ捕捉タンパク質、および膜関連タンパク質（好ましくは、完全な外膜タンパク質）から選択され得る。
【０１０２】
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ：Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ抗原は、Ｓｔｒｅｐｔｏｅｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ由来の、糖類（多糖またはオリゴ糖が挙げられる）および／またはタンパク質を含み得る。糖抗原は、血清型１、２、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２０、２２Ｆ、２３Ｆ、および３３Ｆから選択され得る。タンパク質抗原は、ＷＯ  ９８／１８９３１、ＷＯ  ９８／１８９３０、米国特許第６，６９９，７０３号、同第６，８００，７４４号、ＷＯ  ９７／４３３０３、およびＷＯ  ９７／３７０２６において同定されたタンパク質から選択され得る。Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅタンパク質は、ポリヒスチジン三連構造（Ｐｏｌｙ  Ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ  Ｔｒｉａｄ）ファミリー（ＰｈｔＸ）、コリン結合タンパク質ファミリー（ＣｂｐＸ）、ＣｂｐＸ短縮物（ｔｒｕｎｃａｔｅ）、ＬｙｔＸファミリー、ＬｙｔＸ短縮物、ＣｂｐＸ短縮物−ＬｙｔＸ短縮物キメラタンパク質、ニューモリシン（Ｐｌｙ）、ＰｓｐＡ、ＰｓａＡ、Ｓｐ１２８、Ｓｐ１０１、Ｓｐ１３０、Ｓｐ１２５またはＳｐ１３３から選択され得る。
【０１０３】
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ（Ａ群連鎖球菌）：Ａ群連鎖球菌抗原としては、ＷＯ  ０２／３４７７１またはＷＯ  ２００５／０３２５８２において同定されたタンパク質（ＧＡＳ  ４０が挙げられる）、ＧＡＳ  Ｍタンパク質のフラグメントの融合体（ＷＯ  ０２／０９４８５１、およびＤａｌｅ、Ｖａｃｃｉｎｅ、（１９９９）、１７：１９３−２００、およびＤａｌｅ、Ｖａｃｃｉｎｅ、１４（１０）：９９４−９４８に記載されるものが挙げられる）、フィブロネクチン結合タンパク質（Ｓｆｂ１）、連鎖球菌性ヘム関連タンパク質（Ｓｈｐ）、およびストレプトリシンＳ（ＳａｇＡ）が挙げられ得る。
【０１０４】
Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ：モラクセラ属抗原としては、ＷＯ  ０２／１８５９５およびＷＯ  ９９／５８５６２において同定された抗原、外膜タンパク質抗原（ＨＭＷ−ＯＭＰ）、Ｃ−抗原、ならびに／またはＬＰＳが挙げられる。
【０１０５】
Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ：百日咳抗原としては、必要に応じてペルタクチンならびに／または凝集原２抗原および凝集原３抗原とも組み合わされる、Ｂ．ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ由来の百日咳（ｐｅｔｕｓｓｉｓ）ホロ毒素（ＰＴ）および繊維状赤血球凝集素（ＦＨＡ）が挙げられる。
【０１０６】
百日咳抗原（「Ｐ」）は、全菌体性（「ｗＰ」）または無菌体性（「ａＰ」）のいずれかであり得る。全菌体百日咳抗原は、代表的に、不活化したＢ．ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ細胞の形態をとる。全菌体百日咳抗原の調製は、十分に記録されており［例えば、Ｖａｃｃｉｎｅｓの第２１章、ＰｌｏｔｋｉｎおよびＯｒｅｎｓｔｅｉｎ編、第４版、２００４］、例えば、全菌体百日咳抗原は、Ｂ．ｐｅｒｔｕｓｓｉｓの第一相培養物（ｐｈａｓｅ  Ｉ  ｃｕｌｔｕｒｅ）の熱失活によって得られ得る。ｗＰ抗原の量は、国際単位（ＩＵ）で表され得る。例えば、ＮＩＢＳＣは、「Ｔｈｉｒｄ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｆｏｒ  Ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ  Ｖａｃｃｉｎｅ」［ＮＩＢＳＣコード：６６／３０３］を提供し、これは、１アンプルあたり４６ＩＵを有する。各アンプルは、水溶液の２．０ｍｌアリコートの凍結乾燥残留物を含み、これは、８リットルのＭ／１５  Ｓｏｒｅｎｓｅｎ緩衝液（ｐＨ７．０）によって希釈された１０リットルの細菌懸濁液（Ｕ．Ｓ．Ｏｐａｃｉｔｙ  ＳｔａｎｄａｒｄについてのＩＳＯ混濁単位（ｏｐａｃｉｔｙ  ｕｎｉｔ）に相当する）を含んだ。ＩＵ系に代わるものとして、「ＯＵ」単位（「混濁単位」）もまた、使用される（例えば、４０Ｕは、約１ＩＵであり得る）。全菌体百日咳抗原は、現在、百日咳トキソイド（ＰＴ）、繊維状赤血球凝集素（ＦＨＡ）、ペルタクチン（「６９キロダルトンの外膜タンパク質」としても公知である）、および線毛（例えば、凝集原２および凝集原３）を含むワクチンにおいて使用される。本発明は、好ましくは、ＰＴ、ＦＨＡおよびペルタクチンのうちの、少なくとも２つを使用し、そして好ましくは、それらの３つ全てを使用する（すなわち、凝集原の使用を伴わない）。これらの３つの抗原は、好ましくは、Ｓｌａｉｎｅｒ−Ｓｃｈｏｌｔｅ改変液体培地中で増殖させたｆｔ．ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ培養物からの単離によって調製される。ＰＴおよびＦＨＡが、（例えば、ヒドロキシアパタイトゲル上の吸着によって）発酵ブロスから単離され得るのに対して、ペルタクチンは、熱処理および（例えば、塩化バリウムを使用した）凝集によって細胞から抽出され得る。上記抗原は、連続的なクロマトグラフィー工程および／または沈降工程において精製され得る。ＰＴおよびＦＨＡは、疎水性クロマトグラフィー（ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉａ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）、アフィニティークロマトグラフィーおよびサイズ排除クロマトグラフィーによって精製され得る。ペルタクチンは、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性クロマトグラフィーおよびサイズ排除クロマトグラフィーによって精製され得る。ＦＩ−ＩＡおよびペルタクチンは、本発明に従って使用する前に、ホルムアルデヒドによって処理され得る。ＦＰは、好ましくは、ホルムアルデヒドおよび／またはグルタルアルデヒドを用いた処理によって無毒化される。この化学的な無毒化手順に代わるものとして、上記ＰＴは、酵素活性が突然変異誘発によって減少した変異体ＰＴ［Ｒｏｐｐｕｏｌｉら、１９９１、ＴＩＢＴＥＣＨ  ９：２３２−２３８］であり得るが、化学的処理による無毒化が、好ましい。無菌体百日咳抗原の量は、代表的に、マイクログラムで表される。
【０１０７】
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ：Ｓｔａｐｈ  ａｕｒｅｕｓ抗原としては、必要に応じて非毒性の組換Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ体外毒素Ａと結合体化されるＳ．ａｕｒｅｕｓ５型およびＳ．ａｕｒｅｕｓ８型の莢膜多糖類（例えば、ＳｔａｐｈＶＡＸＴＭ）、もしくは表面タンパク質に由来する抗原、インベーシン（ロイコシジン、キナーゼ、ヒアルロニダーゼ）、食作用の飲み込みを阻害する表面因子（莢膜、プロテインＡ）、カロテノイド、カタラーゼ産生、プロテインＡ、凝固酵素、凝固因子、ならびに／または真核生物の細胞膜を溶解する膜障害性毒素（必要に応じて無毒化される）（ヘモリシン、ロイコトキシン、ロイコシジン）が挙げられる。
【０１０８】
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ：Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ抗原としては、粘液関連抗原（ＳＡＡ）を含む。
【０１０９】
Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ（破傷風）：破傷風抗原としては、破傷風トキソイド（ＴＴ）（好ましくは、本発明の組成物との組み合わせ／結合体化においてキャリアタンパク質として使用される）が挙げられる。
【０１１０】
Ｃｒｎｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ（ジフテリア）：ジフテリア抗原は、ジフテリア毒素（好ましくは、無毒化される）（例えば、ＣＲＭ１９７）を含み、さらに、ＡＤＰリボシル化を調節し得るか、ＡＤＰリボシル化を阻害し得るか、またはＡＤＰリボシル化に関連し得る抗原が、本発明の組成物との組み合わせ／同時投与／結合体化に関して企図され、ジフテリアトキソイドは、キャリアタンパク質として使用される。
【０１１１】
Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ  Ｂ（Ｈｉｂ）：Ｈｉｂ抗原としては、Ｈｉｂが挙げられる。
【０１１２】
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ：シュードモナス属抗原としては、内毒素Ａ、Ｗｚｚタンパク質、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＬＰＳ（より具体的には、ＰＡＯ１（Ｏ５血清型）から単離されたＬＰＳ）、および／または外膜タンパク質Ｆ（ＯｐｒＦ）（Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ．、２００１年５月；６９（５）：３５１０−３５１５）が挙げられる外膜タンパク質が挙げられる。
【０１１３】
Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ：細菌抗原は、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａに由来し得る。
【０１１４】
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｇａｌａｃｔｉａｅ（Ｂ群連鎖球菌）：Ｂ群連鎖球菌抗原としては、ＷＯ  ０２／３４７７１、ＷＯ  ０３／０９３３０６、ＷＯ  ０４／０４１１５７、またはＷＯ  ２００５／００２６１９において同定されたタンパク質または糖抗原（タンパク質ＧＢＳ  ８０、ＧＢＳ  １０４、ＧＢＳ  ２７６およびＧＢＳ  ３２２、ならびに血清型Ｉａ、Ｉｂ、Ｉａ／ｃ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩおよびＶＩＩＩに由来する糖抗原が挙げられる）が挙げられる。
【０１１５】
Ｎｅｉｓｅｒｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ：ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ抗原としては、Ｐｏｒ（すなわち、ポーリン）タンパク質（例えば、ＰｏｒＢ（Ｚｈｕら、Ｖａｃｃｉｎｅ（２００４）、２２：６６０−６６９を参照のこと）、輸送する結合タンパク質（例えば、ＴｂｐＡおよびＴｂｐＢ（Ｐｒｉｃｅら、Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ（２００４）、７１（１）：２７７−２８３を参照のこと）、混濁タンパク質（例えば、Ｏｐａ）、還元−改変可能タンパク質（Ｒｍｐ）、および外膜小胞（ＯＭＶ）調製物（Ｐｌａｎｔｅら、Ｊ．Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ（２０００）、１８２：８４８−８５５を参照のこと）（例えば、ＷＯ９９／２４５７８、ＷＯ９９／３６５４４、ＷＯ９９／５７２８０、ＷＯ０２／０７９２４３も参照のこと）が挙げられる。
【０１１６】
Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ：Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ抗原としては、血清型Ａ、Ｂ、ＢａおよびＣ（トラコーマ（失明の原因）の因子である）に由来する抗原、血清型Ｌ１、Ｌ２およびＬ３（性病性リンパ肉芽腫に関連する）に由来する抗原、ならびに血清型Ｄ〜Ｋに由来する抗原が挙げられる。Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｓ抗原としてはまた、ＷＯ  ００／３７４９４、ＷＯ  ０３／０４９７６２、ＷＯ  ０３／０６８８１１、またはＷＯ  ０５／００２６１９において同定された抗原（ＰｅｐＡ（ＣＴ０４５）、ＬｃｒＥ（ＣＴ０８９）、ＡｒｔＪ（ＣＴ３８１）、ＤｎａＫ（ＣＴ３９６）、ＣＴ３９８、ＯｍｐＨ様（ＣＴ２４２）、Ｌ７／Ｌ１２（ＣＴ３１６）、ＯｍｃＡ（ＣＴ４４４）、ＡｔｏｓＳ（ＣＴ４６７）、ＣＴ５４７、Ｅｎｏ（ＣＴ５８７）、ＨｒｔＡ（ＣＴ８２３）、ａｎｄ  ＭｕｒＧ（ＣＴ７６１）が挙げられる）が挙げられ得る。
【０１１７】
Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｐａｌｌｉｄｕｍ（梅毒）：梅毒抗原としては、ＴｍｐＡ抗原が挙げられる。
【０１１８】
Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｄｕｃｒｅｙｉ（軟性下疳を引き起こす）：ｄｕｃｒｅｙｉ抗原としては、外膜タンパク質（ＤｓｒＡ）が挙げられる。
【０１１９】
Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓまたはＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ：抗原としては、三糖の繰り返しの抗原、または米国特許第６，７５６，３６１号に提供される他のエンテロコッカス属由来の抗原が挙げられる。
【０１２０】
Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ：Ｈ  ｐｙｌｏｒｉ抗原としては、Ｃａｇ、Ｖａｃ、Ｎａｐ、ＨｏｐＸ、ＨｏｐＹおよび／またはウレアーゼ抗原が挙げられる。
【０１２１】
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ：抗原としては、Ｓ．ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ抗原の１６０ｋＤａのヘマグルチニンが挙げられる。。
【０１２２】
Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ：抗原としては、ＬＰＳ（Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ．、２００２年８月；７０（８）：４４１４）が挙げられる。
【０１２３】
Ｅ．ｃｏｌｉ：Ｅ．ｃｏｌｉ抗原は、腸毒性Ｅ．ｃｏｌｉ（ＥＴＥＣ）、凝集型付着性Ｅ．ｃｏｌｉ（ＥＡｇｇＥＣ）、分散型付着性Ｅ．ｃｏｌｉ（ＤＡＥＣ）、腸病原性Ｅ．ｃｏｌｉ（ＥＰＥＣ）、および／または腸出血性Ｅ．ｃｏｌｉ（ＥＨＥＣ）に由来し得る。
【０１２４】
Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ（炭疽）：Ｂ．ａｎｔｈｒａｃｉｓ抗原は、必要に応じて無毒化され、そしてＡ成分（致死因子（ＬＦ）および浮腫因子（ＥＦ）（これらの両方は、保護抗原（ＰＡ）として公知である共通のＢ成分を共有し得る））から選択され得る。
【０１２５】
Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ（ペスト）：ペスト抗原としては、Ｆ１莢膜抗原（Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ．、２００３年６月；７１（１）：３７４−３８３）、ＬＰＳ（Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ．、１９９９年１０月；６７（１０）：５３９５）、Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ  Ｖ抗原（Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ、１９９７年１１月；６５（１１）：４４７６−４４８２）が挙げられる。
【０１２６】
Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ：結核抗原としては、リポタンパク質抗原、ＬＰＳ抗原、ＢＣＧ抗原、必要に応じてカチオン性脂質小胞中に処方される、抗原８５Ｂ（Ａｇ８５Ｂ）および／もしくはＥＳＡＴ−６の融合タンパク質（Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ．、２００４年１０月；７２（１０）：６１４８）、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ（Ｍｔｂ）のイソクエン酸デヒドロゲナーゼ関連抗原（Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｅａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．、２００４年８月２４日；１０１（３４）：１２６５２）、ならびに／またはＭＰＴ５１抗原（Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ．、２００４年７月；７２（７）：３８２９）が挙げられる。
【０１２７】
Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ：抗原は、外膜タンパク質Ａおよび／または外膜タンパク質Ｂ（ＯｍｐＢ）が挙げられる外膜タンパク質（ＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ．、２００４年１１月１日；１７０２（２）：１４５）、ＬＰＳ、および表面タンパク質抗原（ＳＰＡ）（Ｊ  Ａｕｔｏｉｍｍｕｎ．、１９８９年６月；第２補遺：８１）が挙げられる。
【０１２８】
Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ：細菌抗原は、Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓに由来し得る。
【０１２９】
Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ：抗原としては、ＷＯ  ０２／０２６０６において同定された抗原が挙げられる。
【０１３０】
Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｈｏｌｅｒａｅ：抗原としては、プロテイナーゼ抗原、ＬＰＳ（特に、Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｈｏｌｅｒａｅ  ＩＩのリポ多糖）、Ｏ１  Ｉｎａｂａ  Ｏ特異的多糖、Ｖ．ｃｈｏｌｅｒａ  ０１３９、ＩＥＭ１０８ワクチンの抗原（Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ．、２００３年１０月；７１（１０）：５４９８−５０４）、および／または閉鎖帯毒素（Ｚｏｔ）が挙げられる。
【０１３１】
Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｔｙｐｈｉ（腸チフス）：抗原としては、莢膜多糖類（好ましくは、結合体（Ｖｉ、すなわち、ｖａｘ−ＴｙＶｉ）が挙げられる。
【０１３２】
Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ（ライム病）：抗原としては、リポタンパク質（例えば、ＯｓｐＡ、ＯｓｐＢ、ＯｓｐＣおよびＯｓｐＤ）、他の表面タンパク質（例えば、ＯｓｐＥ関連タンパク質（Ｅｒｐｓ））、デコリン結合タンパク質（例えば、ＤｂｐＡ）、および抗原性可変ＶＩタンパク質（例えば、Ｐ３９およびＰ１３（内在性膜タンパク質、Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ．、２００１年５月；６９（５）：３３２３−３３３４）に関連した抗原）、ＶＩｓＥ抗原変異タンパク質（Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．、１９９９年１２月；３７（１２）：３９９７））が挙げられる。
【０１３３】
Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ：抗原としては、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ外膜タンパク質（ＯＭＰ）が挙げられる。
【０１３４】
クレブシエラ属：抗原としては、ＯＭＰ  Ａが挙げられるＯＭＰ、または必要に応じて破傷風トキソイドと結合体化した多糖が挙げられる。
【０１３５】
本発明のさらなる細菌抗原は、上記のあらゆるの莢膜抗原、多糖抗原またはタンパク質抗原であり得る。さらなる細菌抗原としてはまた、外膜小胞（ＯＭＶ）調製物が挙げられ得る。さらに、抗原としては、上述の細菌のいずれかの生きたバリエーション、弱毒化したバリエーション、および／または精製したバリエーションが挙げられる。本発明の細菌由来の抗原は、グラム陰性菌またはグラム陽性菌に由来し得る。本発明の抗原は、および好気性菌または嫌気性菌に由来し得る。
【０１３６】
さらに、あらゆる上記の細菌由来の糖類（多糖、ＬＰＳ、ＬＯＳまたはオリゴ糖）は、別の因子または別の抗原（例えば、キャリアタンパク質（例えば、ＣＲＭ１９７））に結合体化され得る。このような結合体化は、米国特許第５，３６０，８９７号およびＣａｎ  Ｊ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．、１９８４年５月；６２（５）：２７０−５に提供されるような、タンパク質上のアミノ基への糖類上のカルボニル部分の還元的アミノ化によって達成される、直接的な結合体化であり得る。あるいは、これらの糖類は、例えば、スクシンイミド連結、またはＢｉｏｃｏｉｉｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、１９９６およびＣＲＣ、Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｒｏｓｓ−Ｌｉｎｋｉｎｇ、１９９３に提供される他の連結を用いたリンカーによって結合体化され得る。
【０１３７】
（Ｂ．ウイルス抗原）
本発明に使用するのに適したウイルス抗原としては、不活化（または殺した）ウイルス処方物、弱毒化ウイルス処方物、分解したウイルス処方物、精製したサブユニット処方物、ウイルスから単離され得るウイルスタンパク質か、ウイルスから精製され得るウイルスタンパク質、またはウイルスからに由来し得るウイルスタンパク質、およびウイルス様粒子（ＶＬＰ）が挙げられる。ウイルス抗原は、細胞培養または他の培養基において増殖されたウイルス、あるいは、ウイルス抗原は、組換え発現され得る。ウイルス抗原は、好ましくは、その生活環の少なくとも１つの段階の間にそのウイルスの表面に露出されるエピトープを含む。ウイルス抗原は、好ましくは、複数の血清型または複数の単離体にわたって保存される。ウイルス抗原としては、下に示されるウイルスの１つ以上に由来する抗原、および下で同定される特定の抗原の例が挙げられる。
【０１３８】
オルソミクソウイルス：ウイルス抗原は、オルソミクソウイルス（例えば、インフルエンザＡ型、インフルエンザＢ型およびインフルエンザＣ型）に由来し得る。オルソミクソウイルス抗原は、ヘマグルチニン（ＨＡ）、ノイラミニダーゼ（ＮＡ）、核タンパク質（ＮＰ）、マトリックスタンパク質（Ｍ１）、膜タンパク質（Ｍ２）、転写酵素成分（ＰＢ１、ＰＢ２およびＰＡ）の１つ以上が挙げられる、ウイルスタンパク質の１つ以上から選択され得る。好ましい抗原としては、ＨＡおよびＮＡが挙げられる。
【０１３９】
インフルエンザ抗原は、流行の間（年間）のｆｌｕ株に由来し得る。あるいは、インフルエンザ抗原は、流行性の感染を引き起こす可能性を有する株（すなわち、現在広まっている株におけるヘマグルチニンと比較して新しいヘマグルチニンを有するインフルエンザ株、または鳥類の被験体において病原性であり、かつヒト集団に水平に伝染する可能性を有するインフルエンザ株、またはヒトに対して病原性であるインフルエンザ株）に由来し得る。
【０１４０】
パラミクソウイルス科ウイルス：ウイルス抗原は、パラミクソウイルス科ウイルス（例えば、肺炎ウイルス（ＲＳＶ）、パラミクソウイルス（ＰＩＶ）および麻疹ウイルス（麻疹）に由来し得る。
肺炎ウイルス：ウイルス抗原は、肺炎ウイルス（例えば、ＲＳウイルス（ＲＳＶ）、ウシＲＳウイルス、マウス肺炎ウイルス、およびシチメンチョウ鼻気管炎ウイルス）に由来し得る。好ましくは、肺炎ウイルスは、ＲＳＶである。肺炎ウイルス抗原は、以下に挙げられるタンパク質の１つ以上から選択され得る：表面タンパク質融合体（Ｆ）、糖タンパク質（Ｇ）および低分子疎水性タンパク質（ＳＨ）、マトリックスタンパク質ＭおよびＭ２、ヌクレオカプシドタンパク質Ｎ、ＰおよびＬ、ならびに非構造タンパク質ＮＳ１およびＮＳ２。好ましい肺炎ウイルス抗原としては、Ｆ、ＧおよびＭが挙げられる。例えば、Ｊ  Ｇｅｎ  Ｖｉｒｏｌ．、２００４年１１月；８５（Ｐｔ  １１）：３２２９を参照のこと。肺炎ウイルス抗原はまた、キメラウイルスにて処方されても、キメラウイルスに由来してもよい。例えば、キメラＲＳＶ／ＰＩＶウイルスは、ＲＳＶおよびＰＩＶの両方の成分を含み得る。
【０１４１】
パラミクソウイルス：ウイルス抗原は、パラミクソウイルス（例えば、パラインフルエンザウイルス１型〜４型（ＰＩＶ）、ムンプス、センダイウイルス、シミアンウイルス５、ウシパラインフルエンザウイルス、およびニューカッスル病ウイルス）に由来し得る。好ましくは、パラミクソウイルスは、ＰＩＶまたはムンプスである。パラミクソウイルス抗原は、以下のタンパク質の１つ以上から選択され得る：ヘマグルチニン−ノイラミニダーゼ（ＨＮ）、融合タンパク質Ｆ１およびＦ２、核タンパク質（ＮＰ）、リンタンパク質（Ｐ）、大（ｌａｒｇｅ）タンパク質（Ｌ）、ならびにマトリックスタンパク質（Ｍ）。好ましいパラミクソウイルスタンパク質としては、ＨＮ、Ｆ１およびＦ２が挙げられる。パラミクソウイルス抗原はまた、キメラウイルスにて処方されても、キメラウイルスに由来してもよい。例えば、キメラＲＳＶ／ＰＩＶウイルスは、ＲＳＶおよびＰＩＶの両方の成分を含み得る。市販されているムンプスワクチンは、一価形態、または麻疹・風疹ワクチンとの組み合わせのいずれかにおいて、弱毒化した生きたムンプスウイルスを含む（ＭＭＲ）。
【０１４２】
麻疹ウイルス：ウイルス抗原は、麻疹ウイルス（例えば、麻疹）に由来し得る。麻疹ウイルス抗原は、以下のタンパク質の１つ以上から選択され得る：ヘマグルチニン（Ｈ）、糖タンパク質（Ｇ）、融合因子（Ｆ）、大タンパク質（Ｌ）、核タンパク質（ＮＰ）、ポリメラーゼリンタンパク質（Ｐ）、およびマトリックス（Ｍ）。市販されている麻疹ワクチンは、ムンプスおよび風疹との組み合わせにおいて、代表的に、弱毒化した生きた麻疹ウイルスを含む（ＭＭＲ）。
【０１４３】
ピコルナウイルス：ウイルス抗原は、ピコルナウイルス（例えば、エンテロウイルス、ライノウイルス、ヘパルナウイルス（Ｈｅｐａｒｎａｖｉｒｕｓ）、カーディオウイルスおよびアフトウイルス）に由来し得る。エンテロウイルス（例えば、ポリオウイルス）に由来する抗原が、好ましい。
【０１４４】
エンテロウイルス：ウイルス抗原は、エンテロウイルス（例えば、ポリオウイルス１型、２型または３型、コサッキーＡウイルス１型〜２２型および２４型、コサッキーＢウイルス１型〜６型、エコーウイルス（ＥＣＨＯウイルス）１型〜９型、エコーウイルス１１型〜２７型およびエコーウイルス２９型〜３４型ならびにエンテロウイルス６８〜７１）に由来し得る。好ましくは、上記エンテロウイルスは、ポリオウイルスである。エンテロウイルス抗原は、好ましくは、以下のカプシドタンパク質の１つ以上から選択される：ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３およびＶＰ４。市販されているポリオワクチンとしては、不活化ポリオウイルスワクチン（ＩＰＶ）および／または経口ポリオウイルスワクチン（ＯＰＶ）が挙げられる。
【０１４５】
ヘパルナウイルス：ウイルス抗原は、ヘパルナウイルス（例えば、Ａ型肝炎ウイルス（ＨＡＶ））に由来し得る。市販されているＨＡＶワクチンとしては、不活化ＨＡＶワクチンが挙げられる。
【０１４６】
トガウイルス：ウイルス抗原は、トガウイルス（例えば、ルビウイルス、アルファウイルス、またはアルテリウイルス）に由来し得る。ルビウイルス（例えば、風疹ウイルス）に由来する抗原が、好ましい。トガウイルス抗原は、Ｅ１、Ｅ２、Ｅ３、Ｃ、ＮＳＰ−１、ＮＳＰＯ−２、ＮＳＰ−３またはＮＳＰ−４から選択され得る。トガウイルス抗原は、好ましくは、Ｅ１、Ｅ２またはＥ３から選択される。市販されている風疹ワクチンとしては、代表的に、ムンプスワクチンおよび麻疹ワクチンと組み合わせた、生きた低温順応ウイルスが挙げられる（ＭＭＲ）。
【０１４７】
フラビウイルス：ウイルス抗原は、フラビウイルス（例えば、ダニ媒介脳炎（ＴＢＥ）ウイルス、デング熱ウイルス（１型、２型、３型または４型）、黄熱病ウイルス、日本脳炎ウイルス、西ナイル脳炎ウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、ロシア春夏脳炎ウイルス、ポーワッサン脳炎ウイルス）に由来し得る。フラビウイルス抗原は、ＰｒＭ、Ｍ、Ｃ、Ｅ、ＮＳ−１、ＮＳ−２ａ、ＮＳ２ｂ、ＮＳ３、ＮＳ４ａ、ＮＳ４ｂ、およびＮＳ５から選択され得る。フラビウイルス抗原は、好ましくは、ＰｒＭ、ＭおよびＥから選択される。市販されているＴＢＥワクチンとしては、不活化ウイルスワクチンが挙げられる。
【０１４８】
ペスチウイルス：ウイルス抗原は、ペスチウイルス（例えば、ウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）、古典的な豚コレラウイルス（ＣＳＦＶ）またはボーダー病ウイルス（ＢＤＶ））に由来し得る。
【０１４９】
ヘパドナウイルス：ウイルス抗原は、ヘパドナウイルス（例えば、Ｂ型肝炎ウイルス）に由来し得る。ヘパドナウイルス抗原は、表面抗原（Ｌ、ＭおよびＳ）、コア抗原（ＨＢｃ、ＨＢｅ）から選択され得る。市販されているＨＢＶワクチンとしては、表面抗原Ｓタンパク質を含むサブユニットワクチンが挙げられる。
【０１５０】
Ｃ型肝炎ウイルス：ウイルス抗原は、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）に由来し得る。ＨＣＶ抗原は、Ｅ１、Ｅ２、Ｅ１／Ｅ２、ＮＳ３４５ポリタンパク質、ＮＳ  ３４５−コアポリタンパク質、コア、および／または非構造領域由来のペプチド（Ｈｏｕｇｈｔｏｎら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ、（１９９１）、１４：３８１）の１つ以上から選択され得る。
【０１５１】
ラブドウイルス：ウイルス抗原は、ラブドウイルス（例えば、リッサウイルス（狂犬病ウイルス）およびベシクロウイルス（ＶＳＶ））に由来し得る。ラブドウイルス抗原は、糖タンパク質（Ｇ）、核タンパク質（Ｎ）、大タンパク質（Ｌ）、非構造タンパク質（ＮＳ）から選択され得る。市販されている狂犬病ウイルスワクチンは、ヒト２倍体細胞または胎仔アカゲザル肺細胞で増殖する殺したウイルスを含む。
【０１５２】
カリシウイルス科；ウイルス抗原は、カリシウイルス科（例えば、ノーウォークウイルス、およびノーウォーク様ウイルス（例えば、ハワイウイルスおよびスノーマウンテンウイルス））に由来し得る。
【０１５３】
コロナウイルス：ウイルス抗原は、コロナウイルス、ＳＡＲＳ、ヒト呼吸器コロナウイルス、トリ感染性気管支炎（ＩＢＶ）、マウス肝炎ウイルス（ＭＨＶ）、およびブタ伝染性胃腸炎ウイルス（ＴＧＥＶ）に由来し得る。コロナウイルス抗原は、スパイク（Ｓ）、エンベロープ（Ｅ）、マトリックス（Ｍ）、ヌクレオカプシド（Ｎ）、およびヘマグルチニン−エステラーゼ糖タンパク質（ＨＥ）から選択され得る。好ましくは、コロナウイルス抗原は、ＳＡＲＳウイルスに由来する。ＳＡＲＳウイルス抗原は、ＷＯ  ０４／９２３６０に記載される。
【０１５４】
レトロウイルス：ウイルス抗原は、レトロウイルス（例えば、オンコウイルス、レンチウイルスまたはスプマウイルス）に由来し得る。オンコウイルス抗原は、ＨＴＬＶ−１、ＨＴＬＶ−２またはＨＴＬＶ−５に由来し得る。レンチウイルス抗原は、ＨＩＶ−１またはＨＩＶ−２に由来し得る。レトロウイルス抗原は、ｇａｇ、ｐｏｌ、ｅｎｖ、ｔａｘ、ｔａｔ、ｒｅｘ、ｒｅｖ、ｎｅｆ、ｖｉｆ、ｖｐｕ、およびｖｐｒから選択され得る。ＨＩＶ抗原は、ｇａｇ（ｐ２４ｇａｇおよびｐ５５ｇａｇ）、ｅｎｖ（ｇｐ１６０およびｇｐ４１）、ｐｏｌ、ｔａｔ、ｎｅｆ、ｒｅｖ、ｖｐｕ、小型タンパク質（好ましくは、ｐ５５ｇａｇ欠失およびｇｐ１４０ｖ欠失）から選択され得る。ＨＩＶ抗原は、以下の株の１つ以上に由来し得る：ＨＩＶＩＩＩｂ、ＨＩＶＳＦ２、ＨＩＶＬＡＶ、ＨＩＶＬＡＩ、ＨＩＶＭＮ、ＨＩＶ−１ＣＭ２３５、ＨＩＶ−１ＵＳ４。
【０１５５】
レオウイルス：ウイルス抗原は、レオウイルス（例えば、オルソレオウイルス、ロタウイルス、オルビウイルス、またはコルチウイル）に由来し得る。レオウイルス抗原は、非構造タンパク質λ１、λ２、λ３、μ１、μ２、σ１、σ２、もしくはσ３、または非構造タンパク質σＮＳ、μＮＳ、もしくはσ１ｓから選択され得る。好ましいレオウイルス抗原は、ロタウイルスに由来し得る。ロタウイルス抗原は、ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３、ＶＰ４（または分解産物ＶＰ５およびＶＰ８）、ＮＳＰ１、ＶＰ６、ＮＳＰ３、ＮＳＰ２、ＶＰ７、ＮＳＰ４、またはＮＳＰ５から選択され得る。好ましいロタウイルス抗原としては、ＶＰ４（または分解産物ＶＰ５およびＶＰ８）、およびＶＰ７が挙げられる。
【０１５６】
パルボウイルス：ウイルス抗原は、パルボウイルス（例えば、パルボウイルスＢ１９）に由来し得る。パルボウイルス抗原は、ＶＰ−１、ＶＰ−２、ＶＰ−３、ＮＳ−１およびＮＳ−２から選択され得る。好ましくは、パルボウイルス抗原は、カプシドタンパク質ＶＰ−２である。
【０１５７】
Ｄ型肝炎ウイルス（ＨＤＶ）：ウイルス抗原は、ＨＤＶに由来し得る（特に、ＨＤＶ由来のδ−抗原）（例えば、米国特許第５，３７８，８１４号を参照のこと）。
【０１５８】
Ｅ型肝炎ウイルス（ＨＥＶ）：ウイルス抗原は、ＨＥＶに由来し得る。
【０１５９】
Ｇ型肝炎ウイルス（ＨＧＶ）：ウイルス抗原は、ＨＧＶに由来し得る。
【０１６０】
ヒトヘルペスウイルス：ウイルス抗原は、ヒトヘルペスウイルス（例えば、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、水痘−帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、エプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、ヒトヘルペスウイルス６（ＨＨＶ６）、ヒトヘルペスウイルス７（ＨＨＶ７）、およびヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８））に由来し得る。ヒトヘルペスウイルス抗原は、最初期タンパク質（α）、初期タンパク質（β）、および後期タンパク質（γ）から選択され得る。ＨＳＶ抗原は、ＨＳＶ−１株またはＨＳＶ−２株に由来し得る。ＨＳＶ抗原は、糖タンパク質ｇＢ、ｇＣ、ｇＤおよびｇＨ、融合タンパク質（ｇＢ）、または免疫回避タンパク質（ｇＣ、ｇＥ、またはｇＩ）から選択され得る。ＶＺＶ抗原は、コアタンパク質、ヌクレオカプシドタンパク質、外被タンパク質、またはエンベロープタンパク質から選択され得る。弱毒化した生のＶＺＶワクチンが、市販されている。ＥＢＶ抗原は、初期抗原（ＥＡ）タンパク質、ウイルスカプシド抗原（ＶＣＡ）、および膜抗原（ＭＡ）の糖タンパク質から選択され得る。ＣＭＶ抗原は、カプシドタンパク質、エンベロープ糖タンパク質（例えば、ｇＢおよびｇＨ）、および外被タンパク質から選択され得る。
【０１６１】
パポバウイルス：抗原は、パポバウイルス（例えば、パピローマウイルスおよびポリオーマウイルス）に由来し得る。パピローマウイルスは、ＨＰＶ血清型１、２、４、５、６、８、１１、１３、１６、１８、３１、３３、３５、３９、４１、４２、４７、５１、５７、５８、６３および６５を含む。好ましくは、ＨＰＶ抗原は、血清型６、１１、１６または１８に由来する。ＨＰＶ抗原は、カプシドタンパク質（Ｌ１）および（Ｌ２）、もしくはカプシドタンパク質Ｅ１〜Ｅ７、またはそれらの融合体から選択され得る。ＨＰＶ抗原は、好ましくは、ウイルス様粒子（ＶＬＰ）中に処方される。ポリオーマウイルス（Ｐｏｌｙｏｍｙａｖｉｒｕｓ  ｖｉｒｕｓ）としては、ＢＫウイルスおよびＪＫウイルスが挙げられる。ポリオーマウイルス抗原は、ＶＰ１、ＶＰ２またはＶＰ３から選択され得る。
【０１６２】
Ｖａｃｃｉｎｅｓ、第４版（ＰｌｏｔｋｉｎおよびＯｒｅｎｓｔｅｉｎ編、２００４）；Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ、第４版（Ｍｕｒｒａｙら編、２００２）；Ｖｉｒｏｌｏｇｙ、第３版（Ｗ．Ｋ．Ｊｏｋｌｉｋ編、１９８８）；Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ、第２版（Ｂ．Ｎ．ＦｉｅｌｄｓおよびＤ．Ｍ．Ｋｎｉｐｅ編、１９９１）に含まれる抗原、組成物、方法、および微生物が、さらに提供され、これらは、本発明の組成物に関連して企図される。
【０１６３】
（Ｃ．真菌抗原）
本発明で使用するための真菌抗原は、以下に示される真菌の１種以上に由来し得る。
【０１６４】
真菌抗原は、以下の皮膚糸状菌に由来し得る：
【０１６５】
【化３】
2008515842.tif 000004
真菌病原体は、以下に由来し得る：
【０１６６】
【化４】
2008515842.tif 000005
真菌抗原を産生するための方法は、当該分野において周知である（米国特許第６，３３３，１６４号を参照のこと）。好ましい方法において、細胞壁が実質的に除去されたか、または少なくとも部分的に除去された真菌細胞から入手可能な不溶性分画から抽出され、そして分離される可溶化された分画は、以下の工程を包含する方法において特徴付けられる：生きている真菌細胞を得る工程；細胞壁が、実質的に除去されたか、または少なくとも部分的に除去された真菌細胞を得る工程；細胞壁が、実質的に除去されたか、または少なくとも部分的に除去された真菌細胞を破裂させる工程；不溶性分画を得る工程；およびこの不溶性分画から可溶化された分画を抽出し、そして分離する工程。
【０１６７】
（Ｄ．ＳＴＤ抗原）
本発明の組成物は、性感染症（ＳＴＤ）に由来する１種以上の抗原を含有し得る。このような抗原は、ＳＴＤ（例えば、クラミジア、陰部ヘルペス、肝炎（例えば、ＨＣＶ）、性器いぼ、淋病、梅毒および／または軟性下疳（ＷＯ  ００／１５２５５を参照のこと））の予防または治療を提供し得る。抗原は、１種以上のウイルス性ＳＴＤまたは１種以上の細菌性ＳＴＤに由来し得る。本発明で使用するためのウイルス性ＳＴＤ抗原は、例えば、ＨＩＶ、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ−１およびＨＳＶ−２）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、および肝炎（ＨＣＶ）に由来し得る。本発明で使用するための細菌性ＳＴＤ抗原は、例えば、Ｎｅｉｓｅｒｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｐａｌｌｉｄｕｍ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｄｕｃｒｅｙｉ、Ｅ．ｃｏｌｉ、およびＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｇａｌａｃｔｉａｅに由来し得る。これらの病原体に由来する特異的抗原の例は、上に記載される。
【０１６８】
（Ｅ．呼吸器抗原）
本発明の組成物は、呼吸器疾患を引き起こす病原体に由来する１種以上の抗原を含有し得る。例えば、呼吸器抗原は、呼吸器のウイルス（例えば、オルトミクソウイルス（インフルエンザ）、肺炎ウイルス（ＲＳＶ）、パラミクソウイルス（ＰＩＶ）、麻疹ウイルス（麻疹）、トガウイルス（風疹）、ＶＺＶ、およびコロナウイルス（ＳＡＲＳ））に由来し得る。呼吸器抗原は、呼吸器疾患を引き起こす細菌（例えば、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ、およびＭｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）に由来し得る。これらの病原体に由来する特異的抗原の例は、上に記載される。
【０１６９】
（Ｆ．小児用ワクチン抗原）
本発明の組成物は、小児の被験体において使用するのに適した１種以上の抗原を含有し得る。小児の被験体は、代表的に、約３歳未満であるか、または約２歳未満であるか、または約１歳未満である。小児用抗原は、６ヶ月間、１年間、２年間または３年間の過程にわたって、複数回投与され得る。小児用抗原は、小児集団を標的とし得るウイルスおよび／または小児集団が感染に対して感受性であるウイルスに由来し得る。小児用ウイルス抗原としては、オルトミクソウイルス（インフルエンザ）、肺炎ウイルス（ＲＳＶ）、パラミクソウイルス（ＰＩＶおよびムンプス）、麻疹ウイルス（麻疹）、トガウイルス（風疹）、エンテロウイルス（ポリオ）、ＨＢＶ、コロナウイルス（ＳＡＲＳ）、および水痘−帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、エプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）のうちの１種以上に由来する抗原が挙げられる。小児用細菌抗原としては、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ（Ａ群連鎖球菌）、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ（破傷風）、Ｃｏｒｎｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ（ジフテリア）、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ  Ｂ（Ｈｉｂ）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｇａｌａｃｔｉａｅ（Ｂ群連鎖球菌）、およびＥ．ｃｏｌｉのうちの１種以上に由来する抗原が挙げられる。これらの病原体に由来する特異的抗原の例は、上に記載される。
【０１７０】
（Ｇ．高齢者または免疫無防備状態の個体における使用に適した抗原）
本発明の組成物は、高齢者または免疫無防備状態の個体における使用に適した１種以上の抗原を含有し得る。このような個体は、より頻繁に、より高い用量、または標的化された抗原に対する個体の免疫応答を改良するアジュバント型処方物を用いて、予防接種される必要があり得る。高齢者または免疫無防備状態の個体において使用するために標的化され得る抗原としては、以下の病原体のうちの１種以上に由来する抗原が挙げられる：Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ（Ａ群連鎖球菌）、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ（破傷風）、Ｃｏｒｎｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ（ジフテリア）、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ  Ｂ（Ｈｉｂ）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｇａｌａｃｔｉａｅ（Ｂ群連鎖球菌）、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ、Ｃｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、オルトミクソウイルス（インフルエンザ）、肺炎ウイルス（ＲＳＶ）、パラミクソウイルス（ＰＩＶおよびムンプス）、麻疹ウイルス（麻疹）、トガウイルス（風疹）、エンテロウイルス（ポリオ）、ＨＢＶ、コロナウイルス（ＳＡＲＳ）、水痘−帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、エプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）。これらの病原体に由来する特異的抗原の例は、上に記載される。
【０１７１】
（Ｈ．青年用ワクチンにおいて使用するのに適した抗原）
本発明の組成物は、青年の被験体において使用するのに適した１種以上の抗原を含有し得る。青年は、先に投与された小児抗原のブーストを必要とし得る。青年に使用するのに適切であり得る小児用抗原は、上に記載される。さらに、青年は、性的活動が始まる前に防御免疫または治療免疫を確実にするために、ＳＴＤ病原体に由来する抗原を受容するように、目的を定められ得る。青年に使用するのに適切であり得るＳＴＤ抗原は、上に記載される。
【０１７２】
（Ｉ．抗原処方物）
本発明の他の局面において、吸着された抗原を有する微粒子を生成する方法が、提供される。この方法は、以下を包含する：（ａ）（ｉ）水、（ｉｉ）洗浄剤、（ｉｉｉ）有機溶媒、および（ｉｖ）ポリ（α−ヒドロキシ酸）、ポリヒドロキシ酪酸、ポリカプロラクトン、ポリオルトエステル、ポリ無水物、およびポリシアノアクリレートからなる群より選択される生分解性ポリマーを含有する混合物を分散することによってエマルションを提供する工程（このポリマーは、代表的に、この有機溶媒に対して約１％〜約３０％の濃度で、この混合物中に存在する一方で、この洗浄剤は、代表的に、約０．００００１：１〜約０．１：１（より代表的には、約０．０００１：１〜約０．１：１、約０．００１：１〜約０．１：１、または約０．００５：１〜約０．１：１）の洗浄剤  対  ポリマーの重量比でこの混合物中に存在する）；（ｂ）このエマルションからこの有機溶媒を除去する工程；および（ｃ）微粒子の表面上に抗原を吸着する工程。特定の実施形態において、この生分解性ポリマーは、この有機溶媒に対して約３％〜約１０％の濃度にて存在する。
【０１７３】
本明細書中で使用するための微粒子は、滅菌可能であり、非毒性であり、そして生分解性である材料から形成される。このような材料としては、ポリ（α−ヒドロキシ酸）、ポリヒドロキシ酪酸、ポリカプロラクトン、ポリオルトエステル、ポリ無水物、ＰＡＣＡおよびポリシアノアクリレートが挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、本発明で使用するための微粒子は、ポリ（α−ヒドロキシ酸）（特に、ポリ（ラクチド）（「ＰＬＡ」）、またはＤ，Ｌ−ラクチドと、グリコリドもしくはグリコール酸とのコポリマー（例えば、ポリ（Ｄ，Ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（「ＰＬＧ」または「ＰＬＧＡ」）、またはＤ、Ｌ−ラクチドとカプロラクトンとのコポリマー）である。上記微粒子は、多様な分子量、およびコポリマー（例えば、ＰＬＧ）の場合においては、多様なラクチド：グリコリドの比（この選択の大部分が好みの問題である）を有する、種々のポリマー出発材料のいずれかに由来し得、そのポリマー出発材料は、部分的に、同時投与される高分子に依存する。これらのパラメータは、下でより完全に考察される。
【０１７４】
さらなる抗原としてはまた、外膜小胞（ＯＭＶ）調製物が挙げられ得る。
【０１７５】
さらなる処方方法およびさらなる抗原（特に、腫瘍抗原）は、米国特許出願番号第０９／５８１，７７２号において提供される。
【０１７６】
（Ｊ．抗原の参考文献）
以下の参考文献は、本発明の組成物との組み合わせにおいて有用な抗原を含む：
【０１７７】
【化５】
2008515842.tif 000006
【０１７８】
【化６】
2008515842.tif 000007
【０１７９】
【化７】
2008515842.tif 000008
本発明の組成物は、代表的に、上述の化合物に加えて、１種以上の「薬学的に受容可能なキャリア」を含有する。これらはとしては、上記組成物を受容する個体に対して有害な抗体の産生をそれ自体は誘導しない任意のキャリアが挙げられる。適切なキャリアは、代表的に、大きくゆっくりと代謝される高分子（例えば、タンパク質、多糖類、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、アミノ酸のポリマー、アミノ酸コポリマー、乳糖、および脂質集合体（例えば、油滴またはリポソーム））である。このようなキャリアは、当業者にとって周知である。組成物はまた、希釈剤（例えば、水、食塩水、グリセロールなど）を含み得る。さらに、補助物質（例えば、湿潤剤または乳化剤、ｐＨ緩衝物質など）が、存在し得る。薬学的に受容可能なキャリアの徹底的な考察は、Ｇｅｎｎａｒｏ、（２０００）、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版、ＩＳＢＮ：０６８３３０６４７２において入手可能である。
【０１８０】
本発明の免疫原性組成物は、種々の形態にて調製され得る。例えば、上記組成物は、上記組成物は、溶液または懸濁液のいずれかとして、注射剤として調製され得る。注射前に、液体ビヒクル中の溶液または懸濁液に適した固体形態もまた、調製され得る（例えば、凍結乾燥された組成物または噴霧凍結乾燥された組成物）。上記組成物は、例えば、軟膏、クリームまたは粉末として、局所投与のために調製され得る。上記組成物は、例えば、錠剤もしくはカプセル、スプレー、または（必要に応じて香り付けされた）シロップとして、経口投与のために調製され得る。上記組成物は、例えば、微細な粉末またはスプレーを使用する吸入器として、肺投与のために調製され得る。上記組成物は、坐剤または膣坐剤として調製され得る。上記組成物は、例えば、点滴剤として、鼻投与、耳投与または眼投与のために調製され得る。上記組成物は、組み合わせた組成物が、患者に投与する直前に再構成されるように設計されたキット形態中にあり得る。このようなキットは、液体形態にある１種以上の抗原および１種以上の凍結乾燥された抗原を備え得る。
【０１８１】
ワクチンとして使用される免疫原性組成物は、抗原の免疫学的有効量、および必要に応じて、任意の他の成分を含有する。「免疫学的有効量」によって、個体に対するその量の投与（単一用量または一連の用量の一部のいずれかとして）が処置または予防に有効であることが、意味される。この量は、処置される個体の健康状態および身体状態、年齢、処置される個体の分類群（例えば、非ヒト霊長類、霊長類など）、個体の免疫系が抗体を合成する能力、所望される防御の程度、上記ワクチンの処方、処置する医師による医学的状況の評価、および他の関連因子に依存して変動する。その量は、慣用的な試行によって決定され得る比較的幅広い範囲内にあることが予想される。
【０１８２】
本発明の免疫原性組成物は、他の免疫刺激性因子と組み合わせて投与され得る。例えば、本発明のワクチンは、アジュバントを含有し得る。好ましいアジュバントとしては、下に記載される以下の型のアジュバントの１種以上が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１８３】
（Ａ．無機質含有組成物）
本発明においてアジュバントとして使用するのに適した無機質含有組成物としては、無機塩類（アルミニウム塩およびカルシウム塩）が挙げられる。本発明は、水酸化物（例えば、オキシ水酸化物）、リン酸塩（例えば、ヒドロキシリン酸塩、オルトリン酸塩）、硫酸塩など（例えば、Ｖａｃｃｉｎｅ  Ｄｅｓｉｇｎ（１９９５）、ＰｏｗｅｌｌおよびＮｅｗｍａｎ編、ＩＳＢＮ：０３０６４４８６７Ｘ．Ｐｌｅｎｕｍ．の第８章および第９章）などの無機塩類、または異なる無機化合物の混合物（例えば、必要に応じて過剰なリン酸塩を含む、リン酸塩と水酸化物アジュバントとの混合物）を包含し、その混合物は、任意の適切な形態（例えば、ゲル形態、結晶形態、非晶質形態など）をとる化合物を含み、そして好ましい塩に対する吸着を伴う。上記無機質含有化合物はまた、金属塩の粒子として処方され得る（例えば、ＷＯ  ００／２３１０５を参照のこと）。
【０１８４】
アルミニウム塩は、Ａｌ３＋の用量が、１用量あたり０．２ｍｇと１．０ｍｇとの間であるように、本発明のワクチンに含有され得る。
【０１８５】
１つの実施形態において、本発明において使用するためのアルミニウムベースのアジュバントは、ミョウバン（硫酸アルミニウムカリウム（ＡｌＫ（ＳＯ４）２））、またはリン酸緩衝液中の抗原とミョウバンとを混合し、次いで塩基（例えば、水酸化アンモニウムまたは水酸化ナトリウム）を用いて、滴定および沈殿を行うことによって形成されるようなミョウバン誘導体である。
【０１８６】
本発明のワクチン処方物において使用するための別のアルミニウムベースのアジュバントは、水酸化アルミニウムアジュバント（Ａｌ（ＯＨ）３）、または優れたアジュバントであって、約５００ｍ２／ｇの表面積を有する結晶性オキシ水酸化アルミニウム（ＡｌＯＯＨ）である。あるいは、リン酸アルミニウムアジュバント（ＡｌＰＯ４）、またはヒドロキシリン酸アルミニウム（水酸化アルミニウムアジュバントのいくつかのヒドロキシル基または全てのヒドロキシル基に代えて、リン酸基を有する）が、提供される。本明細書中に提供される好ましいリン酸アルミニウムアジュバントは、酸性媒体、塩基性媒体および中性媒体において、非晶質かつ可溶性である。
【０１８７】
別の実施形態において、本発明のアジュバントは、リン酸アルミニウムおよび水酸化アルミニウムの両方を含む。より特定のその実施形態において、上記アジュバントは、水酸化アルミニウムより大きい量のリン酸アルミニウムを有する（例えば、リン酸アルミニウム  対  水酸化アルミニウムの重量比で、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１または９：１より大きい）。よりさらに具体的には、上記ワクチン中のアルミニウム塩は、１ワクチン用量あたり０．４ｍｇ〜１．０ｍｇ、または１ワクチン用量あたり０．４ｍｇ〜０．８ｍｇ、または１ワクチン用量あたり０．５ｍｇ〜０．７ｍｇ、または１ワクチン用量あたり約０．６ｍｇにて存在する。
【０１８８】
一般的に、好ましいアルミニウムベースのアジュバント、または複数のアルミニウムベースのアジュバントの比（例えば、リン酸アルミニウム  対  水酸化アルミニウム）は、上記抗原が、所望のｐＨにて上記アジュバントと反対の電荷を保有するように、分子間の静電引力の最適化によって選択される。例えば、リン酸アルミニウムアジュバント（等電点＝４）は、ｐＨ７．４にて、リゾチームを吸着するが、アルブミンを吸着しない。アルブミンが、その標的である場合、水酸化アルミニウムアジュバント（等電点１１．４）が選択される。あるいは、リン酸塩による水酸化アルミニウムの前処理は、水酸化アルミニウムの等電点を低下させ、水酸化アルミニウムを、より塩基性の抗原に対する好ましいアジュバントにする。
【０１８９】
（Ｂ．油エマルション）
本発明においてアジュバントとして使用するのに適した油エマルション組成物としては、スクアレン−水エマルション（例えば、ＭＦ５９（マイクロフルイダイザー（ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ）を使用してサブミクロン粒子へと処方される５％スクアレン、０．５％  Ｔｗｅｅｎ  ８０、および０．５％  Ｓｐａｎ  ８５））が挙げられる。ＷＯ９０／１４８３７を参照のこと。Ｐｏｄｄａ、「Ｔｈｅ  ａｄｊｕｖａｎｔｅｄ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａ  ｖａｃｃｉｎｅｓ  ｗｉｔｈ  ｎｏｖｅｌ  ａｄｊｕｖａｎｔｓ：ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  ＭＦ５９−ａｄｊｕｖａｎｔｅｄ  ｖａｃｃｉｎｅｓ」、Ｖａｃｃｉｎｅ（２００１）１９：２６７３−２６８０；Ｆｒｅｙら、「Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｓａｆｅｔｙ、ｔｏｌｅｒａｂｉｌｉｔｙ、ａｎｄ  ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ  ｏｆ  ａ  ＭＦ５９−ａｄｊｕｖａｎｔｅｄ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａ  ｖａｃｃｉｎｅ  ａｎｄ  ａ  ｎｏｎ−ａｄｊｕｖａｎｔｅｄ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａ  ｖａｃｃｉｎｅ  ｉｎ  ｎｏｎ−ｅｌｄｅｒｌｙ  ａｄｕｌｔｓ」、Ｖａｃｃｉｎｅ（２００３）２１：４２３４−４２３７もまた参照のこと。ＭＦ５９は、ＦＬＵＡＤＴＭインフルエンザウイルス三価サブユニットワクチン中でアジュバントとして使用される。
【０１９０】
上記組成物において使用するための特に好ましいアジュバントは、サブミクロンの水中油型エマルションである。本明細書中で使用するための好ましいサブミクロンの水中油型エマルションは、スクアレン／水エマルションであり、このエマルションは、必要に応じて、種々の量のＭＴＰ−ＰＥ（例えば、４％〜５％（ｗ／ｖ）のスクアレン、０．２５％〜１．０％（ｗ／ｖ）のＴｗｅｅｎ  ８０ＴＭ（ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート）、および／または０．２５％〜１．０％のＳｐａｎ  ８５ＴＭ（ソルビタントリオレエート））、および必要に応じて、種々の量のＮ−アセチルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミニル−Ｌ−アラニン−２−（１’−２’−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ヒドロキシホスホリルオキシ（ｈｕｙｄｒｏｘｙｐｈｏｓｐｈｏｐｈｏｒｙｌｏｘｙ））−エチルアミン（ＭＴＰ−ＰＥ）（例えば、「ＭＦ５９」として公知であるサブミクロンの水中油型エマルション（国際公開第９０／１４８３７号；米国特許第６，２９９，８８４号および同第６，４５１，３２５号、ならびにＯｔｔら、「ＭＦ５９−−Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  Ｓａｆｅ  ａｎｄ  Ｐｏｔｅｎｔ  Ａｄｊｕｖａｎｔ  ｆｏｒ  Ｈｕｍａｎ  Ｖａｃｃｉｎｅｓ」、Ｖａｃｃｉｎｅ  Ｄｅｓｉｇｎ：Ｔｈｅ  Ｓｕｂｕｎｉｔ  ａｎｄ  Ａｄｊｕｖａｎｔ  Ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｐｏｗｅｌｌ，Ｍ．Ｆ．およびＮｅｗｍａｎ，Ｍ．Ｊ．編）、Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９５、ｐｐ．２７７−２９６））を含む。ＭＦ５９は、４％〜５％（ｗ／ｖ）のスクアレン（例えば、４．３％）、０．２５％〜０．５％（ｗ／ｖ）のＴｗｅｅｎ  ８０ＴＭ、および０．５％（ｗ／ｖ）のＳｐａｎ  ８５ＴＭを含み、そしてＭＦ５９は、必要に応じて、マイクロフルイダイザー（例えば、Ｍｏｄｅｌ  ＨＯＹマイクロフルイダイザー（Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ、Ｎｅｗｔｏｎ、ＭＡ））を使用してサブミクロン粒子へと処方される種々の量のＭＴＰ−ＰＥを含む。例えば、ＭＴＰ−ＰＥは、１用量あたり約０μｇ〜約５００μｇの量、より好ましくは１用量あたり０μｇ〜２５０μｇの量、および最も好ましくは１用量あたり０μｇ〜１００μｇの量で存在し得る。本明細書中で使用される場合、用語「ＭＦ５９−０」とは、ＭＴＰ−ＰＥを欠く上記のサブミクロンの水中油型エマルションをいうが、用語ＭＦ５９−ＭＴＰは、ＭＴＰ−ＰＥを含む処方を示す。例えば、「ＭＦ５９−１００」は、１用量あたり１００μｇのＭＴＰ−ＰＥなどを含む。ＭＦ６９（本明細書中で使用するための別のサブミクロンの水中油型エマルション）は、４．３％（ｗ／ｖ）のスクアレン、０．２５％（ｗ／ｖ）のＴｗｅｅｎ  ８０ＴＭ、および０．７５％（ｗ／ｖ）のＳｐａｎ  ８５ＴＭを含み、そしてＭＦ６９は、必要に応じて、ＭＴＰ−ＰＥを含む。なお別のサブミクロンの水中油型エマルションは、ＳＡＦとしても公知であるＭＦ７５であり、ＭＦ７５は、１０％スクアレン、０．４％  Ｔｗｅｅｎ  ８０ＴＭ、５％プルロニック（ｐｌｕｒｏｎｉｃ）ブロックポリマーＬ１２１、およびｔｈｒ−ＭＤＰを含み、ＭＦ７５もまた、サブミクロンエマルションへとマイクロフルイダイズされる。Ｍ���７５−ＭＴＰは、ＭＴＰ（例えば、１用量あたり１００μｇ〜４００μｇのＭＴＰ−ＰＥ）を含むＭＦ７５処方物を示す。
【０１９１】
サブミクロンの水中油型エマルション、それを作製する方法、および上記組成物において使用するための免疫刺激因子（例えば、ムラミルペプチド）は、国際公開第９０／１４８３７号ならびに米国特許第６，２９９，８８４号および同第６，４５１，３２５号において詳細に記載される。
【０１９２】
フロイント完全アジュバント（ＣＦＡ）およびフロイント不完全アジュバント（ＩＦＡ）もまた、本発明においてアジュバントとして使用され得る。
【０１９３】
（Ｃ．サポニン処方物）
サポニン処方物もまた、本発明においてアジュバントとして使用され得る。サポニンは、広範な植物種の樹皮、葉、茎、根および花においてさえ見出される、ステロールグリコシドおよびトリテルペノイドグリコシドの異種の群である。Ｑｕｉｌｌａｉａ  ｓａｐｏｎａｒｉａ  Ｍｏｌｉｎａの木の樹皮から単離されたサポニンは、アジュバントとして広く研究されている。サポニンはまた、Ｓｍｉｌａｘ  ｏｒｎａｔａ（サルサパリラ）、Ｇｙｐｓｏｐｈｉｌｌａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ（ブライダルベール）、およびＳａｐｏｎａｒｉａ  ｏｆｆｉｃｉａｎａｌｉｓ（サボンソウの根（ｓｏａｐ  ｒｏｏｔ））から商業的に入手され得る。サポニンアジュバント処方物としては、精製された処方物（例えば、ＱＳ２１）、および脂質処方物（例えば、ＩＳＣＯＭ）が挙げられる。
【０１９４】
サポニン組成物は、高性能薄層クロマトグラフィー（ＨＰ−ＴＬＣ）および逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）を使用して精製されている。これらの技術を使用する特定の精製された分画が、同定され、その分画としては、ＱＳ７、ＱＳ１７、ＱＳ１８、ＱＳ２１、ＱＨ−Ａ、ＱＨ−ＢおよびＱＨ−Ｃが挙げられる。好ましくは、上記サポニンは、ＱＳ２１である。ＱＳ２１を生成する方法は、米国特許第５，０５７，５４０号に開示される。サポニン処方物はまた、ステロール（例えば、コレステロール（ＷＯ９６／３３７３９を参照のこと））を含み得る。
【０１９５】
サポニンとコレステロールとの組み合わせは、免疫刺激複合体（ＩＳＣＯＭ）と称される独特の粒子を形成するために使用され得る。ＩＳＣＯＭはまた、代表的に、リン脂質（例えば、ホスファチジルエタノールアミンまたはホスファチジルコリン）を含む。任意の公知のサポニンが、ＩＳＣＯＭ中に使用され得る。好ましくは、上記ＩＳＣＯＭは、Ｑｕｉｌ  Ａ、ＱＨＡおよびＱＨＣのうちの１種を含む。ＩＳＣＯＭは、ＥＰ０１０９９４２、ＷＯ９６／１１７１１およびＷＯ９６／３３７３９においてさらに記載される。必要に応じて、上記ＩＳＣＯＭは、さらなる洗浄剤を欠き得る。ＷＯ００／０７６２１を参照のこと。
【０１９６】
サポニンベースのアジュバントの開発についての概説は、Ｂａｒｒら、「ＩＳＣＯＭｓ  ａｎｄ  ｏｔｈｅｒ  ｓａｐｏｎｉｎ  ｂｅｓｅｄ  ａｄｊｕｖａｎｔｓ」、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ（１９９８）３２：２４７−２７１において見出され得る。Ｓｊｏｌａｎｄｅｒら、「Ｕｐｔａｋｅ  ａｎｄ  ａｄｊｕｖａｎｔ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｏｒａｌｌｙ  ｄｅｌｉｖｅｒｅｄ  ｓａｐｏｎｉｎ  ａｎｄ  ＩＳＣＯＭ  ｖａｃｃｉｎｅｓ」、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  ＤｅＩｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ（１９９８）３２：３２１−３３８もまた参照のこと。
【０１９７】
（Ｄ．ビロソームおよびウイルス様粒子（ＶＬＰ））
ビロソームおよびウイルス様粒子（ＶＬＰ）もまた、本発明においてアジュバントとして使用され得る。これらの構造物は、一般に、ウイルス由来の１種以上のタンパク質を含み、そのタンパク質は、必要に応じて、リン脂質と組み合わされるか、またはリン脂質と一緒に処方される。それらは、一般に、非病原性であり、そして一般に、あらゆるネイティブなウイルスゲノムを含まない。上記ウイルスタンパク質は、組換え的に産生されても、そのままのウイルスから単離されてもよい。ビロソームまたはＶＬＰにおいて使用するのに適したこれらのウイルスタンパク質としては、以下に由来するタンパク質が挙げられる：インフルエンザウイルス（例えば、ＨＡまたはＮＡ）、Ｂ型肝炎ウイルス（例えば、コアまたはカプシドタンパク質）、Ｅ型肝炎ウイルス、麻疹ウイルス、シンドビスウイルス、ロタウイルス、手足口病ウイルス、レトロウイルス、ノーウォークウイルス、ヒトパピローマウイルス、ＨＩＶ、ＲＮＡファージ、Ｑβファージ（例えば、コートタンパク質）、ＧＡファージ、ｆｒファージ、ＡＰ２０５ファージ、およびＴｙ（例えば、レトロトランスポゾンＴｙタンパク質ｐ１）。ＶＬＰは、以下：
【０１９８】
【化８】
2008515842.tif 000009
においてさらに考察される。ビロソームは、例えば、Ｇｌｕｃｋら、「Ｎｅｗ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｐｌａｔｆｏｒｍｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｖａｃｃｉｎｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｆｕｔｕｒｅ」、Ｖａｃｃｉｎｅ、（２００２）、２０：Ｂ１０−Ｂ１６においてさらに考察される。免疫増強性の再構成されたインフルエンザビロソーム（Ｉｍｍｕｎｏｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｎｇ  ｒｅｃｏｎｓｔｉｔｕｔｅｄ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａ  ｖｉｒｏｓｏｍｅ（ＩＲＩＶ））は、鼻腔内用で三価のＩＮＦＬＥＸＡＬＴＭ製品｛ＭｉｓｃｈｌｅｒおよびＭｅｔｃａｌｆｅ、（２００２）、Ｖａｃｃｉｎｅ、２０、第５補遺：Ｂ１７−２３｝、およびＩＮＦＬＵＶＡＣ  ＰＬＵＳＴＭ製品において、サブユニット抗原送達システムとして使用される。
【０１９９】
（Ｅ．細菌性誘導体または微生物性誘導体）
本発明において使用するのに適したアジュバントとしては、以下のような、細菌性誘導体または微生物性誘導が挙げられる。
【０２００】
（（１）腸内細菌のリポ多糖（ＬＰＳ）の非毒性誘導体）
このような誘導体としては、一リン酸化リピドＡ（ＭＰＬ）および３−Ｏ−脱アシル化ＭＰＬ（３ｄＭＰＬ）が挙げられる。３ｄＭＰＬは、３脱−Ｏ−アシル化した一リン酸化リピドＡと、４アシル化鎖、５アシル化鎖、または６アシル化鎖との混合物である。３脱−Ｏ−アシル化した一リン酸化リピドＡの好ましい「小粒子」形態は、ＥＰ０６８９４５４において開示される。３ｄＭＰＬのこのような「小粒子」は、０．２２ミクロンのメンブレン（ＥＰ０６８９４５４を参照のこと）を通して濾過滅菌されるほどに小さい。他の非毒性ＬＰＳ誘導体としては、一リン酸化リピドＡ模倣物（ｍｉｍｉｃ）（例えば、アミノアルキルグルコサミニドホスフェート誘導体（例えば、ＲＣ−５２９））が挙げられる。Ｊｏｈｎｓｏｎら、（１９９９）、Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ  ９：２２７３−２２７８を参照のこと。
【０２０１】
（（２）リピドＡ誘導体）
リピドＡ誘導体としては、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ由来のリピドＡの誘導体（例えば、ＯＭ−１７４）が挙げられる。ＯＭ−１７４は、例えば、以下：
【０２０２】
【化９】
2008515842.tif 000010
に記載される。
【０２０３】
（（３）免疫刺激性オリゴヌクレオチド）
本発明においてアジュバントとして使用するのに適した免疫刺激性オリゴヌクレオチドは、ＣｐＧモチーフ（リン酸結合によって連結される、メチル化されていないシトシン、およびそれに続くグアノシンを含む配列）を有するヌクレオチド配列を含む。パリンドローム配列もしくはポリ（ｄＧ）配列を含む細菌の二本鎖ＲＮＡ、またはパリンドローム配列もしくはポリ（ｄＧ）配列を含むオリゴヌクレオチドもまた、免疫刺激性を有することが見出されている。
【０２０４】
ＣｐＧ’は、ヌクレオチド修飾物（ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ）／ヌクレオチドアナログ（例えば、ホスホロチオエート修飾物）を含み得、そしてＣｐＧ’は、二本鎖または一本鎖であり得る。必要に応じて、上記グアノシンは、２’−デオキシ−７−デアザグアノシンなどのアナログによって置換され得る。可能なアナログ置換の例については、Ｋａｎｄｉｍａｌｌａら、「Ｄｉｖｅｒｇｅｎｔ  ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  ｍｏｔｉｆ  ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｐａｔｔｅｒｎ：ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ｐｏｔｅｎｔ  ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ  ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  ａｇｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｐｒｏｆｉｌｅｓ」、Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、（２００３）、３１、（９）：２３９３−２４００；ＷＯ０２／２６７５７およびＷＯ９９／６２９２３を参照のこと。ＣｐＧオリゴヌクレオチドのアジュバント効果は、Ｋｒｉｅｇ、「ＣｐＧ  ｍｏｔｉｆｓ：ｔｈｅ  ａｃｔｉｖｅ  ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ  ｉｎ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｅｘｔｒａｃｔｓ？」、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、（２００３）、９（７）：８３１−８３５；ＭｃＣｌｕｓｋｉｅら、「Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  ａｎｄ  ｍｕｃｏｓａｌ  ｐｒｉｍｅ−ｂｏｏｓｔ  ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ  ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ  ｉｎ  ｍｉｃｅ  ｗｉｔｈ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｂ  ｓｕｒｆａｃｅ  ａｎｔｉｇｅｎ  ａｎｄ  ＣｐＧ  ＤＮＡ」、ＦＥＭＳ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ、（２００２）、３２：１７９−１８５；ＷＯ９８／４０１００；米国特許第６，２０７，６４６号；米国特許第６，２３９，１１６号および米国特許第６，４２９，１９９号においてさらに考察される。
【０２０５】
上記ＣｐＧ配列は、ＴＬＲ９を指向し得る（たとえば、モチーフＧＴＣＧＴＴまたはモチーフＴＴＣＧＴＴ）。Ｋａｎｄｉｍａｌｌａら、「Ｔｏｌｌ−ｌｉｋｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ９：ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｂｙ  ｎｏｖｅｌ  ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ＣｐＧ  ＤＮＡｓ」、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ、（２００３）、３１（第３部）：６５４−６５８を参照のこと。上記ＣｐＧ配列は、Ｔｈ１免疫応答を誘導することについて特異的（例えば、ＣｐＧ−Ａ  ＯＤＮ）であり得るか、またはＣｐＧ配列は、Ｂ細胞応答を誘導することについて、より特異的（例えば、ＣｐＧ−Ｂ  ＯＤＮ）であり得る。ＣｐＧ−Ａ  ＯＤＮおよびＣｐＧ−Ｂ  ＯＤＮは、以下：
【０２０６】
【化１０】
2008515842.tif 000011
において考察される。好ましくは、ＣｐＧは、ＣｐＧ−Ａ  ＯＤＮである。
【０２０７】
好ましくは、上記ＣｐＧオリゴヌクレオチドは、５’末端がレセプター認識のために利用しやすいように構築される。必要に応じて、２つのＣｐＧオリゴヌクレオチド配列が、「イムノマー（ｉｍｍｕｎｏｍｅｒ）」を形成するように、それらの３’末端にて結合され得る。例えば、以下：
【０２０８】
【化１１】
2008515842.tif 000012
を参照のこと。
【０２０９】
（（４）ＡＤＰリボシル化毒素およびその無毒化誘導体）
細菌のＡＤＰリボシル化毒素およびその無毒化誘導体は、本発明においてアジュバントとして使用され得る。好ましくは、そのタンパク質は、Ｅ．ｃｏｌｉ（すなわち、Ｅ．ｃｏｌｉの非耐熱性エンテロトキシン（「ＬＴ」））、コレラ（「ＣＴ」）、または百日咳（「ＰＴ」）に由来する。粘膜アジュバントとしての無毒化したＡＤＰリボシル化毒素の使用は、ＷＯ９５／１７２１１に記載され、そして非経口アジュバントとしての無毒化したＡＤＰリボシル化毒素の使用は、ＷＯ９８／４２３７５に記載される。好ましくは、そのアジュバントは、無毒化ＬＴ変異体（例えば、ＬＴ−Ｋ６３、ＬＴ−Ｒ７２、およびＬＴＲ１９２Ｇ）である。アジュバントとしてのＡＤＰリボシル化毒素およびその無毒化誘導体の使用（特に、ＬＴ−Ｋ６３およびＬＴ−Ｒ７２）は、以下の参考文献において見出され得る：
【０２１０】
【化１２】
2008515842.tif 000013
アミノ酸置換についての数字の参照は、Ｄｏｍｅｎｉｇｈｉｎｉら、Ｍｏｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、（１９９５）、１５（６）：１１６５−１１６７に示される、ＡＤＰリボシル化毒素のＡサブユニットと、ＡＤＰリボシル化毒素のＢサブユニットとのアラインメントに基づく。
【０２１１】
（Ｆ．生体接着因子および粘膜接着因子）
生体接着因子および粘膜接着因子もまた、本発明においてアジュバントとして使用され得る。適切な生体接着因子としては、エステル化ヒアルロン酸マイクロスフェア（Ｓｉｎｇｈら、（２００１）、Ｊ．Ｃｏｎｔ．ＲｅＩｅ．７０：２６７−２７６）、または粘膜接着因子（例えば、の架橋型誘導体ポリアクリル酸の架橋型誘導体、ポリビニルアルコールの架橋型誘導体、ポリビニルピロリドンの架橋型誘導体、多糖の架橋型誘導体およびカルボキシメチルセルロースの架橋型誘導体）が挙げられる。キトサンおよびその誘導体もまた、本発明においてアジュバントとして使用され得る。例えば、ＷＯ９９／２７９６０。
【０２１２】
（Ｇ．微粒子）
微粒子もまた、本発明においてアジュバントとして使用され得る。生分解性かつ非毒性である材料（例えば、ポリ（α−ヒドロキシ酸）、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリ無水物、ポリカプロラクトンなど）と、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）とによって形成される微粒子（すなわち、直径が約１００ｎｍ〜約１５０μｍの粒子、より好ましくは直径が約２００ｎｍ〜約３０μｍの粒子、および最も好ましくは直径が約５００ｎｍ〜約１０μｍの粒子）が、好ましい。その粒子は、必要に応じて、（例えば、ＳＤＳによって）負に荷電した表面を有するように処理されるか、または（例えば、カチオン性洗浄剤（例えば、ＣＴＡＢ）によって）正に荷電した表面を有するように処理される。
【０２１３】
（Ｈ．リポソーム）
アジュバントとして使用するのに適したリポソーム処方物の例は、米国特許第６，０９０，４０６号、米国特許第５，９１６，５８８号、ＥＰ０６２６１６９に記載される。
【０２１４】
（Ｉ．ポリオキシエチレンエーテル処方物およびポリオキシエチレンエステル処方物）
本発明において使用するのに適したアジュバントとしては、ポリエチレンエーテルおよびポリエチレンエステルが挙げられる。ＷＯ９９／５２５４９。このような処方物は、オクトキシノールと組み合わせたポリエチレンソルビタンエステル界面活性剤（ＷＯ０１／２１２０７）、および少なくとも１種のさらなる非イオン性界面活性剤（例えば、オクトキシノール）と組み合わせたポリエチレンアルキルエーテルエステル界面活性剤（ＷＯ０１／２１１５２）を含む。
【０２１５】
好ましいポリエチレンエーテルは、以下の群から選択される：ポリエチレン−９−ラウリルエーテル（ラウレス９）、ポリエチレン−９−ステロイル（ｓｔｅｏｒｙｌ）エーテル、ポリオキシエチレン（ｐｏｌｙｏｘｙｔｈｅｙｌｅｎｅ）−８−ステロイル（ｓｔｅｏｒｙｌ）エーテル、ポリエチレン−４−ラウリルエーテル、ポリエチレン−３５−ラウリルエーテル、およびポリエチレン−２３−ラウリルエーテル。
【０２１６】
（Ｊ．ポリホスファチジン（ＰＣＰＰ））
ＰＣＰＰ処方物は、例えば、以下：
【０２１７】
【化１３】
2008515842.tif 000014
に記載される。
【０２１８】
（Ｋ．ムラミルペプチド）
本発明においてアジュバントとして使用するのに適したムラミルペプチドの例としては、Ｎ−アセチル−ムラミル−Ｌ−トレオニル−Ｄ−イソグルタミン（ｔｈｒ−ＭＤＰ）、Ｎ−アセチル−ノルムラミル−ｌ−アラニル−ｄ−イソグルタミン（ノル−ＭＤＰ）、およびＮ−アセチルムラミル−ｌ−アラニル−ｄ−グルタミニル−ｌ−アラニン−２−（１’−２’−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ヒドロキシホルホリルオキシ）−エチルアミン（ＭＴＰ−ＰＥ）が挙げられる。
【０２１９】
（Ｌ．イミダゾキノリン化合物）
本発明においてアジュバントとして使用するのに適したイミダゾキノリン化合物としては、「Ｉｍｉｑｕｉｍｏｄ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｉｍｉｄａｚｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅｓ：ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ａｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ」、Ｃｌｉｎ  Ｅｘｐ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ、（２００２）、２７（７）：５７１−５７７；Ｊｏｎｅｓ、「Ｒｅｓｉｑｕｉｍｏｄ  ３Ｍ」、Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ  Ｄｒｕｇｓ、（２００３）、４（２）：２１４−２１８；ならびに米国特許第４，６８９，３３８号、同第５，３８９，６４０号、同第５，２６８，３７６号、同第４，９２９，６２４号、同第５，２６６，５７５号、同第５，３５２，７８４号、同第５，４９４，９１６号、同第５，４８２，９３６号、同第５，３４６，９０５号、同第５，３９５，９３７号、同第５，２３８，９４４号、同第および５，５２５，６１２号においてさらに記載される、イミキモドおよびそのアナログが挙げられる。
【０２２０】
（Ｍ．チオセミカルバゾン化合物）
チオセミカルバゾン化合物の例、ならびに本発明においてアジュバントとして使用するのに完全に適した化合物について処方し、製造し、そしてスクリーニングする方法の例としては、ＷＯ０４／６０３０８に記載されるものが挙げられる。上記チオセミカルバゾンは、サイトカイン（例えば、ＴＮＦ−α）の産生ためのヒト末梢血単核細胞の刺激において、特に有効である。
【０２２１】
（Ｎ．トリプタントリン化合物）
トリプタントリン化合物の例、および本発明においてアジュバントとして使用するのに完全に適した化合物について処方し、製造し、そしてスクリーニングする方法の例としては、ＷＯ０４／６４７５９に記載されるものが挙げられる。上記トリプタントリン化合物は、サイトカイン（例えば、ＴＮＦ−α）の産生ためのヒト末梢血単核細胞の刺激において、特に有効である。
【０２２２】
本発明はまた、上で特定したアジュバントのうちの１種以上の組成物の局面を包含し得る。例えば、以下のアジュバント組成物が、本発明において使用され得る：
（１）サポニンおよび水中油型エマルション（ＷＯ９９／１１２４１）；
（２）サポニン（例えば、ＱＳ２１）＋非毒性ＬＰＳ誘導体（例えば、３ｄＭＰＬ）（ＷＯ９４／００１５３を参照のこと）；
（３）サポニン（例えば、ＱＳ２１）＋非毒性ＬＰＳ誘導体（例えば、３ｄＭＰＬ）＋コレステロール；
（４）サポニン（例えば、ＱＳ２１）＋３ｄＭＰＬ＋ＩＬ−１２（必要に応じて、＋ステロール）（ＷＯ９８／５７６５９）；
（５）３ｄＭＰＬと、例えば、ＱＳ２１および／または水中油型エマルションとの組み合わせ（欧州特許出願第０８３５３１８号、同第０７３５８９８号および同第０７６１２３１号を参照のこと）；
（６）ＳＡＦ（１０％スクアレン、０．４％  Ｔｗｅｅｎ  ８０、５％  プルロニックブロックポリマーＬ１２１、およびｔｈｒ−ＭＤＰを含み、サブミクロンエマルション中にマイクロフルイダイズされるか、またはボルテックスされてより大きい粒径のエマルションを生じる）
（７）ＲｉｂｉＴＭアジュバントシステム（ＲＡＳ）（Ｒｉｂｉ  Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍ）（２％スクアレン、０．２％  Ｔｗｅｅｎ  ８０、ならびに一リン酸化リピドＡ（ＭＰＬ）、トレハロースジマイコレート（ＴＤＭ）、および細胞壁骨格（ＣＷＳ）（好ましくは、ＭＰＬ＋ＣＷＳ（ＤｅｔｏｘＴＭ）からなる１種以上の細菌細胞壁成分を含む）；ならびに
（８）１種以上の無機塩類（例えば、アルミニウム塩）＋ＬＰＳ（例えば、３ｄＰＭＬ）の非毒性誘導体
（９）１種以上の無機塩類（例えば、アルミニウム塩）＋免疫刺激性オリゴヌクレオチド（例えば、ＣｐＧモチーフを含むヌクレオチド配列）。
【０２２３】
（Ｏ．ヒト免疫調節因子）
本発明においてアジュバントとして使用するのに適したヒト免疫調節因子としては、サイトカイン（例えば、インターロイキン（例えば、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−１２など）、インターフェロン（例えば、インターフェロン−γ）、マクロファージコロニー刺激因子、および腫瘍壊死因子が挙げられる。
【０２２４】
アルミニウム塩およびＭＦ５９が、注射用インフルエンザワクチンと一緒に使用するのに好ましいアジュバントである。細菌毒素および生体接着因子が、粘膜送達されるワクチン（例えば、鼻用のワクチン）と一緒に使用するのに好ましいアジュバントである。
【０２２５】
本発明の混合ワクチンは、異なる方法（その全ては、当該分野において公知である）によって容易に調製され得る。ワクチンを生産するための方法およびワクチンを生産するための手段は、例えば、「Ｖａｃｃｉｎｅｓ」、ＰｌｏｔｋｉｎおよびＯｒｅｎｓｔｅｉｎ（編）、２００４に記載される。さらに、「Ｉｍｐｆｃｏｄｅｘ，Ｉｍｐｆｕｎｇ  ｆｕｅｒ  Ｋｉｎｄｅｒ，Ｅｒｗａｃｈｓｅｎｄｅ  ｕｎｄ  Ｒｅｉｓｅｎｄｅ」、第５版、Ｃｈｉｒｏｎ  Ｂｅｈｒｉｎｇ  ＧｍｂＨ  ＆  Ｃｏ（編）、２００１は、有用な情報を提供する。上記ワクチンの成分は、例えば、混合され、次いでその混合物は、適切なアジュバントに吸着される。しかし、当業者によって認識されるように、各抗原成分はまた、この成分と他の抗原成分とを混合する前に、別々にアジュバントに吸着され得る。
【０２２６】
例えば、混合ワクチンＴｄ−ＩＰＶ−ＴＢＥが、処方される場合、別々に濃縮された、血清型１のＩＰＶ抗原、血清型２のＩＰＶ抗原、および血清型３のＩＰＶ抗原は、予め混合されたＴｄ−ＴＢＥの組み合わせまたは予め混合されたＴｄの組み合わせのいずれかに添加され得る。後者の場合において、ＴＢＥ濃縮物は、最後に添加される。あるいは、上記３種の別個のＩＰＶ抗原は、三価のＩＰＶ濃縮物へと混合され、次いでこの三価のＩＰＶ濃縮物は、Ｔｄ予製混合物またはＴｄ−ＴＢＥ予製混合物に添加される。その製造方法は、百日咳抗原化合物が、Ｔｄ−ａＰ−ＴＢＥワクチンまたはＴｄ−ａＰ−ＩＰＶ−ＴＢＥワクチンを生成するために添加される場合も、同様である。百日咳抗原含有ワクチンは、全菌体、無菌体産物または組換え的に生成された産物を含有し得る。好ましくは、上記百日咳成分は、上記百日咳トキソイドもしくはそのフラグメント、繊維状赤血球凝集素抗原、または外膜のタンパク質である。
【０２２７】
さらなる実施形態に従って、異なる抗原処方物は、上記混合ワクチンをボトリングする前にブレンドされる。このことは、上記異なる抗原処方物が、混合型多価ワクチンへと混合され、次いで適切なキャリア／アジュバント（例えば、水酸化アルミニウム）に吸着されることを意味する。
【０２２８】
上記生産方法は、優良試験所基準の指針に従って行われる必要がある。例えば、異なる抗原処方物の混合は、得られるワクチンが危険な物質（例えば、免疫化される被験体に対して有害である感染性因子）によって汚染されないように、滅菌条件下で行われる必要がある。一般的に、上記混合ワクチンの混合および上記混合ワクチンのボトリングは、当該分野において周知である方法によって行われ得る。
【０２２９】
さらなる局面に従って、本発明は、破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原、ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原；およびダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原、ならびに本発明に従う混合ワクチンを調製するのに適したさらなる試薬を備えるキットに関する。好ましくは、本発明のキットは、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉの少なくとも１種の抗原、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａの少なくとも１種の抗原、およびダニ媒介性脳炎ウイルスの少なくとも１種の抗原を備える。さらなる試薬は、例えば、緩衝液、安定剤、抗酸化剤および／または保存剤を含み得る。
【０２３０】
本発明はまた、本発明の組成物の１つ以上の容器を備えるキットを提供する。組成物は、個々の抗原がそうであり得るように、液体形態であっても、凍結乾燥されてもよい。組成物の適切な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、注射器、および試験管が挙げられる。容器は、種々の材料（例えば、ガラスまたはプラスチック）から形成され得る。容器は、無菌アクセスポートを有し得る（例えば、その容器は、皮下注射針によって貫通可能なストッパーを有する、静脈内用溶液のバッグまたは静脈内用溶液のバイアルであり得る）。
【０２３１】
上記キットは、薬学的に受容可能な緩衝液（例えば、リン酸緩衝化生理食塩水、リンゲル溶液、またはデキストロース溶液）を含む第２の容器を、さらに備え得る。上記キットはまた、エンドユーザーにとって有用な他の材料（他の薬学的に受容可能な処方用溶液（例えば、緩衝液）、希釈剤、フィルター、針、および注射器、または他の送達デバイス）を含み得る。上記キットは、アジュバントを包含する第３の構成要素をさらに備え得る。
【０２３２】
上記キットはまた、免疫を誘導する方法のためか、または感染を処置するための文書化された説明書を含む、パッケージの挿入物を備え得る。上記パッケージの挿入物は、未承認の起案（ｄｒａｆｔ）であるパッケージの挿入物であっても、Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ（ＦＤＡ）または取締機関によって承認されたパッケージの挿入物であってもよい。
【０２３３】
本発明はまた、本発明の免疫原性組成物によって予め充填された送達システムを提供する。
【０２３４】
好ましくは、上記混合ワクチンの抗原は、注射前の即時的な混合のために、別々に保存される。ここで、上記抗原は、再構成のために、溶液または凍結乾燥形態のいずれかとして、別個のバイアル中に存在し得る。さらなる実施形態に従って、上記抗原処方物は、２つ以上の別個のチャンバーを備える注射器中に存在し得る。注射の際に、これらのチャンバーは、上記異なる抗原処方物が、注射前に短時間で本発明の混合ワクチンへと混合されるように連結される。
【０２３５】
さらなる局面に従って、本発明は、本発明に従う組成物を調製するための方法に関し、この方法において、破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原、ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原、およびダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、混合され、次いでその混合された抗原は、適切なアジュバントに吸着される。あるいは、本発明は、本発明に従う組成物を調製するための方法に関し、この方法において、破傷風に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原、ジフテリアに対する防御を提供する少なくとも１種の抗原、およびダニ媒介性脳炎に対する防御を提供する少なくとも１種の抗原は、互いとそれぞれ別々に適切なアジュバントに吸着され、次いでその吸着された抗原は、互いに混合される。
【０２３６】
本発明はまた、医薬として使用するための、本発明の組成物を提供する。上記医薬は、好ましくは、哺乳動物において、免疫応答を惹起し得る（すなわち、その医薬は、免疫原性組成物である）。本発明はまた、哺乳動物において免疫応答を惹起するための医薬の製造における、本発明の組成物の使用を提供する。
【０２３７】
本発明は、上に記載される組成物を使用して免疫応答を誘導するための方法、または上に記載される組成物を使用して増加させるための方法を提供する。上記免疫応答は、好ましくは、防御的であり、そしてその免疫応答は、抗体媒介性免疫および／または細胞媒介性免疫（全身性免疫および粘膜性免疫が挙げられる）を誘導し得る。免疫応答は、ブースター応答を含む。
【０２３８】
本発明はまた、哺乳動物において、免疫応答をもたらすための方法、または免疫応答を惹起するための方法を提供し、これらの方法は、請求項１〜２０のいずれか１項に従う混合ワクチンの有効量を投与する工程を包含する。上記免疫応答は、好ましくは、防御的であり、そしてその免疫応答は、好ましくは、抗体媒介性免疫および／または細胞媒介性免疫を包含する。好ましくは、上記免疫応答は、ＴＨ１免疫応答およびＴＨ２免疫応答の、一方または両方を包含する。この方法は、ブースター応答を惹起し得る。
【０２３９】
上記哺乳動物は、好ましくは、ヒトである。好ましくは、上記ワクチンは、予防的に使用するためのワクチンであり、そのヒトは、好ましくは、小児（例えば、歩き初めの小児または乳児、好ましくは就学前、好ましくは１歳以下または３歳を超える年長者）、または１０歳〜１９歳の者である；上記ワクチンが、治療的使用のためのワクチンである場合、そのヒトは、好ましくは、１０歳〜１９歳の者または成人である。小児を目的とするワクチンはまた、例えば、安全性、投薬量、免疫原性などを評価するために、成人に投与され得る。好ましくは、上記ヒトは、１０歳〜１９歳の者である。より好ましくは、上記ヒトは、青年になる前の１０歳〜１９歳の者である。よりさらに好ましくは、上記ヒトは、青年になる前の女性または青年になる前の男性である。好ましくは、上記青年になる前の男性または上記青年になる前の女性は、約９歳〜約１２歳である。好ましくは、上記青年になる前の男性または上記青年になる前の女性は、約１５歳〜約１９歳である。好ましくは、上記男性または上記女性は、約２０歳〜約４９歳である。好ましくは、上記男性または上記女性は、４９歳を超えている。
【０２４０】
本発明の組成物は、一般的に、患者に対して直接投与される。直接送達は、非経口注射（例えば、皮下注射、腹腔内注射、静脈内注射、筋肉内注射、または組織の間隙空間に対する注射）、もしくは粘膜投与（例えば、直腸投与、経口投与（例えば、錠剤、スプレー）、膣投与、局所投与、経皮（ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ）投与（例えば、ＷＯ９９／２７９６１を参照のこと）、または経皮（ｔｒａｎｓｃｕｔａｎｅｏｕｓ）投与（例えば、ＷＯ０２／０７４２４４およびＷＯ０２／０６４１６２を参照のこと）、鼻腔内投与（例えば、ＷＯ０３／０２８７６０を参照のこと）、眼投与、耳投与、肺投与もしくは他の粘膜投与によって達成され得る。
【０２４１】
上記免疫原性組成物は、全身性免疫および／または粘膜性免疫を誘発するために使用され得、好ましくは全身性免疫および／または粘膜性免疫を増強するために使用され得る。
【０２４２】
投薬処置は、単一用量スケジュールまたは複数用量スケジュールであり得る。複数用量は、一次免疫スケジュールおよび／またはブースター免疫スケジュールで使用され得る。複数用量スケジュールにおいて、種々の用量は、同一の経路または異なる経路（例えば、非経口の初回刺激経路および粘膜のブースト経路、粘膜の初回刺激経路および非経口のブースト経路など）によって与えられ得る。
【０２４３】
好ましくは、上記免疫原性組成物は、一般的に、迅速な免疫化スケジュールを用いて投与され、この免疫化スケジュールは、０日目、７日目および２１日目における３回の免疫化を含み、そして長期の防御が必要とされる場合に、１２ヶ月目〜１８ヶ月目におけるその後のブースター用量を含む（Ｚｅｎｔら、（２００４）、Ｖａｃｃｉｎｅ、２３；３１２−３１５およびＺｅｎｔら、（２００５）、Ｊ  Ｔｒａｖｅｌ  Ｍｅｄ、１７：３３１−３４２）。一次免疫の完了のための３回の用量が３週間以内に与えられる迅速な免疫化スケジュールは、従来のスケジュールとは異なり、ここで従来のスケジュールにおいて、一次免疫のために必要とされる用量は、０日目、１ヶ月後〜３ヵ月後、および９ヶ月後〜１２ヶ月後において、１年以内に与えられる。迅速な免疫化スケジュールは、Ｒａｂｉｅｓ曝露前予防接種（Ｒａｂｉｅｓ  ｐｒｅ−ｅｘｐｏｓｕｒｅ  ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ）などの他のワクチンについてのスケジュールと、ほぼ同様であり、そして他のウイルスワクチン（例えば、Ａ型肝炎ワクチンおよびＢ肝炎ワクチンならびに日本脳炎ワクチン）について評価されている（Ｎｏｔｈｄｕｒｆｔら、（２００２）、Ｖａｃｃｉｎｅ、２０：１１５７−１１６２）。これは、時間的な制約に起因して、従来のスケジュールを、例えば、ダニの季節の間に風土的な地域に生きる者、および風土的な地域に旅行する直前の旅行者に対して行なうことができない状況において、特に適切である。後者に対しては特に、ブースターの推奨が、常に行なわれるとは限らない。
【０２４４】
好ましくは、上記投薬レジメンは、中和特性を有する抗体を生じる抗体反応のアビディティーを増強する。
【０２４５】
（免疫応答の効力を決定するための試験）
治療的処置の効力を評価する１つの方法は、本発明の組成物の投与後に感染をモニタリングすることを包含する。予防的処置の効力を評価する１つの方法は、本発明の組成物中の抗原に対する免疫応答を、その組成物の投与後にモニタリングすることを包含する。
【０２４６】
本発明の免疫原性組成物の成分タンパク質の免疫原性を評価する別の方法は、そのタンパク質を組換え的に発現させること、および免疫ブロットによって患者の血清または患者の粘膜切片をスクリーニングすることである。上記タンパク質と患者の血清との間のポジティブな反応は、問題のタンパク質に対する免疫応答をこれまでにマウント（ｍｏｕｎｔ）したことを示す（すなわち、そのタンパク質は、免疫原である）。この方法はまた、免疫優勢（ｉｍｍｕｎｏｄｏｍｉｎａｎｔ）な、タンパク質および／またはエピトープを同定するために使用され得る。
【０２４７】
本明細書中で使用される場合、用語「エピトープ」とは、一般に、Ｔ細胞レセプターおよび／または抗体によって認識される抗原上の部位をいう。好ましくは、エピトープは、タンパク質抗原に由来する短いペプチドであるか、またはタンパク質抗原の一部としての短いペプチドである。しかし、この用語はまた、グリコペプチドを有するペプチドおよび炭水化物エピトープを有するペプチドを含むことを意図する。数種の異なるエピトープは、単一の抗原性分子によって保有され得る。用語「エピトープ」はまた、アミノ酸の改変配列または炭水化物の改変配列を含み、その改変配列は、そのままの生物を認識する応答を刺激する。このことは、選択されたエピトープが、感染症を引き起こす感染性因子のエピトープである場合に、有益である。
【０２４８】
上記エピトープは、そのペプチドまたはポリペプチドのアミノ酸および対応するＤＮＡ配列の知見、ならびに特定のアミノ酸の性質（例えば、大きさ、電荷など）およびコドン一覧表（ｃｏｄｏｎ  ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ）から、過度な実験を伴わずにもたらされ得る。例えば、Ｉｖａｎ  Ｒｏｉｔｔ、Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、１９８８；Ｋｅｎｄｒｅｗ、前出；Ｊａｎｉｓ  Ｋｕｂｙ、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、１９９２（例えば、ｐｐ．７９−８１）を参照のこと。タンパク質が応答を刺激するか否かを決定するいくつかの指針としては、以下が挙げられる：ペプチドの長さ（好ましくは、そのペプチドは、ＭＨＣクラスＩ複合体に適合するために、約８アミノ酸長または約９アミノ酸長であり、そしてそのペプチドは、クラスＩＩ  ＭＨＣ複合体に適合するために、約１３アミノ酸長または約２５アミノ酸長である）。この長さは、ＭＨＣ複合体に結合するペプチドに関して最低限である。これらの長さより長いことが、上記ペプチドに関して好ましい。なぜなら、細胞は、ペプチドを切断し得るからである。上記ペプチドは、適切なアンカーモチーフを含み得、このアンカーモチーフは、それが、免疫応答をもたらすのに十分に高い特異性を有する種々のクラスＩ分子または種々のクラスＩＩ分子に結合することを、可能にする（Ｂｏｃｃｈｉａ，Ｍ．ら、Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｂｉｎｄｉｎｇ  ｏｆ  Ｌｅｕｋｅｍｉａ  Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  Ｆｕｓｉｏｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｐｅｎｔｉｄｅｓ  ｔｏ  ＨＬＡ  Ｃｌａｓｓ  Ｉ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ、Ｂｌｏｏｄ  ８５：２６８０−２６８４；Ｅｎｇｌｅｈａｒｄ，ＶＨ、Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｃｌａｓｓ  Ｉ  ａｎｄ  ｃｌａｓｓ  ＩＩ  ＭＨＣ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２：１８１（１９９４）を参照のこと）。このことは、過度な実験を伴わずに、目的のタンパク質の配列と、ＭＨＣ分子に関連するペプチドの公開された構造とを比較することによって行われ得る。したがって、当業者は、目的のエピトープを、そのタンパク質と、タンパク質データベースに列挙される配列とを比較することによって確認し得る。
【０２４９】
本明細書中で使用される場合、用語「Ｔ細胞エピトープ」とは、一般に、Ｔ細胞応答を誘導し得るペプチド構造の形をいい、「Ｂ細胞エピトープ」とは、一般に、Ｂ細胞応答を誘導し得るペプチド構造の形をいう。
【０２５０】
治療的処置の効力を確認する別の方法は、本発明の上記組成物の投与後に、感染をモニタリングすることを包含する。予防的処置の効力を確認する１つの方法は、本発明の組成物中の抗原に対する全身の免疫応答をモニタリングすること（例えば、ＩｇＧ１産生のレベルおよびＩｇＧ２ａ産生のレベルをモニタリングすること）および本発明の組成物中の抗原に対する粘膜の免疫応答をモニタリングすること（例えば、ＩｇＡ産生のレベルをモニタリングすること）の両方を包含する。代表的に、血清特異的な抗体応答は、免疫化後に決定されるが、負荷（ｃｈａｌｌｅｎｇｅ）前には決定されないのに対して、粘膜特異的な抗体応答は、免疫化後および負荷後に決定される。
【０２５１】
本発明の免疫原性組成物は、宿主（例えば、ヒト）に対する投与前に、インビトロ動物モデルおよびインビボ動物モデルにおいて評価され得る。特に有用なマウスモデルとしては、腹腔内の免疫化が行なわれ、次いで腹腔内の負荷または鼻腔内の負荷が行なわれるマウスモデルが挙げられる。
【０２５２】
本発明の免疫原性組成物の効力はまた、上記免疫原性組成物を用いて、感染の負荷動物モデル（例えば、モルモットまたはマウス）によって、インビボで決定され得る。上記免疫原性組成物は、負荷する株と同じ株に、由来しても、由来しなくてもよい。好ましくは、免疫原性組成物は、上記負荷する株と同じ株に由来することが可能である。
【０２５３】
インビボ効力モデルとしては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：（ｉ）ヒトの株を使用するマウス感染モデル；（ｉｉ）マウス適合株（例えば、マウスに対して特に毒性を有する株）を使用するマウスモデルであるマウス疾患モデル、および（ｉｉｉ）ヒト単離体を使用する霊長類モデル。
【０２５４】
上記免疫応答は、ＴＨ１免疫応答およびＴＨ２応答の、一方または両方であり得る。
【０２５５】
上記免疫応答は、改善した免疫応答であっても増強した免疫応答であっても変化した免疫応答であってもよい。上記免疫応答は、全身性免疫応答および粘膜性免疫応答の、一方または両方であり得る。
【０２５６】
好ましくは、上記免疫応答は、全身および／または粘膜の増強した応答である。
【０２５７】
増強した全身性免疫および／または増強した粘膜性免疫は、増強したＴＨ１免疫応答および／または増強したＴＨ２免疫応答に反映される。好ましくは、増強した免疫応答としては、ＩｇＧ１の産生および／もしくはＩｇＧ２ａの産生の増加、ならびに／またはＩｇＡの産生の増加が挙げられる。
【０２５８】
好ましくは、上記粘膜性免疫応答は、ＴＨ２免疫応答である。好ましくは、上記粘膜性免疫応答としては、ＩｇＡの産生の増加が挙げられる。
【０２５９】
活性化したＴＨ２細胞は、抗体産生を増強し、それによって細胞外感染に対して応答するものである。活性化したＴＨ２細胞は、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、およびＩＬ−１０の１つ以上を分泌し得る。ＴＨ２免疫応答は、ＩｇＧ１の産生、ＩｇＥの産生、ＩｇＡの産生および未来の防御のための記憶Ｂ細胞の産生をもたらし得る。
【０２６０】
ＴＨ２免疫応答は、ＴＨ２免疫応答に関連するサイトカイン（例えば、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６およびＩＬ−１０）の１種以上における増加、またはＩｇＧ１の産生の増加、ＩｇＥの産生の増加、ＩｇＡの産生の増加および記憶Ｂ細胞の産生の増加のうちの、１つ以上を含み得る。好ましくは、上記増強したＴＨ２免疫応答としては、ＩｇＧ１産生の増加が挙げられる。
【０２６１】
ＴＨ１免疫応答は、ＣＴＬの増加、ＴＨ１免疫応答に関連するサイトカイン（例えば、ＩＬ−２、ＩＦＮγ、およびＴＮＦβ）の１種以上における増加、活性化マクロファージの増加、ＮＫ活性の増加、またはＩｇＧ２ａの産生の増加のうちの、１つ以上を含み得る。好ましくは、上記増強したＴＨ１免疫応答としては、ＩｇＧ２ａ産生の増加が挙げられる。
【０２６２】
本発明の免疫原性組成物（特に、本発明の抗原のうちの１種以上を含有する免疫原性組成物）は、単独で使用されても、他の抗原との組み合わせ（必要に応じて、Ｔｈ１応答および／またはＴｈ２応答を誘発し得る免疫刺激性因子を伴う）において使用されてもよい。
【０２６３】
本発明はまた、無機塩類（例えば、アルミニウム塩）と、ＣｐＧモチーフを含むオリゴヌクレオチドなどの１種以上の免疫刺激性因子とを含有する免疫原性組成物を包含する。最も好ましくは、上記免疫原性組成物は、アルミニウム塩と、ＣｐＧモチーフを含むオリゴヌクレオチドとの両方を含む。あるいは、上記免疫原性組成物は、ＡＤＰリボシル化毒素（例えば、無毒化したＡＤＰリボシル化毒素）と、ＣｐＧモチーフを含むオリゴヌクレオチドとを含む。好ましくは、上記１種以上の免疫刺激性因子としては、アジュバントが挙げられる。上記アジュバントは、ＴＨ１アジュバントおよびＴＨ２アジュバント（上でさらに考察される）からなる群のうちの１つ以上から選択され得る。
【０２６４】
本発明の免疫原性組成物は、好ましくは、感染に対して有効に取り組むために、細胞媒介性免疫応答および粘膜性免疫応答を誘発する。この免疫応答は、好ましくは、長く持続する（例えば、中和）抗体、および感染による１種以上の抗原に対する曝露の際に迅速に応答し得る細胞媒介性免疫を誘導する。例えば、患者の血液サンプル中の中和抗体の証拠は、中和抗体の形成がＴＢＥ感染におけるウイルスの排除についての重要な確証であるので、防御に関する代理のパラメータと見なされる（ＫａｉｓｅｒおよびＨｏｌｚｍａｎｎ、（２０００）、Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ、２８；７８−８４を参照のこと）。
【０２６５】
本発明は、以下の非限定的な実施例によってさらに示される。
【実施例】
【０２６６】
（実施例１：Ｔｄ−ＴＢＥ混合ワクチンの生産）
この実施例は、Ｔｄ−ＴＢＥ混合ワクチンの製造を開示する。好ましくは、全ての上記抗原を、少なくとも３０分間、別々に水酸化アルミニウムに吸着させる。
【０２６７】
破傷風トキソイドおよびジフテリアトキソイドを、当該分野において周知の方法によって、入手し、そして精製する。簡単にいうと、一般的な半合成媒体を、前培養として発酵槽中に１回〜２回継代したＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ（Ｈａｒｖａｒｄ株）によって接種する。その細胞を、６〜７日間培養する。破傷風毒素は、播種した後の最初の３日間で産生される。上記毒素を、細胞の溶解後に、培地中に放つ。培養期間の終わりに、上記毒素を、濾過滅菌により入手し、そしてホルマリンの添加および３７℃で３〜４週間のインキュベーションによって無毒化する。トキソイドの濃度を、限外濾過および塩析によって得る。同様に、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ（Ｐａｒｋ  ＆  Ｗｉｌｌｉａｍｓ，ＢＷ  ８株）の培養物を、１回〜２回継代した後に、発酵槽中に接種する。上記細胞を、撹拌条件および強力な曝気条件下において４８時間培養する。培養温度は、通常、３３℃〜３７℃である。ジフテリア毒素は、細胞によって、培養上清中に分泌される。この毒素を、濾過滅菌によって入手し、そして通常、（ホルマリンを添加せずに）数週間インキュベートする。次いで、ホルマリンを添加し、そしてこの毒素を、３７℃でのインキュベーションによって６週間無毒化する。精製および濃縮を、限外濾過および硫酸アンモニウム沈殿によって行なう。
【０２６８】
あるいは、すぐに使用できる混合ワクチン（例えば、Ｔｄ−ｐｕｒ（登録商標）（Ｃｈｉｒｏｎ  Ｂｅｈｒｉｎｇ  ＧｍｂＨ  ＆  Ｃｏ  ＫＧ）またはＤＴ  Ｉｍｐｆｓｔｏｆｆ  ｆｕｅｒ  Ｋｉｎｄｅｒ（Ｃｈｉｒｏｎ  Ｂｅｈｒｉｎｇ  ＧｍｂＨ  ＆  Ｃｏ  ＫＧ）も、出発材料として使用し得る。簡単にいうと、Ｔｄ−ｐｕｒ（登録商標）は、１用量あたり２０ＩＵの破傷風トキソイド（約２０Ｌｆに対応する）、および１用量あたり約２ＩＵのジフテリアトキソイド（約１．５Ｌｆに対応する）を含有する。比較して、ＤＴ  Ｉｍｐｆｓｔｏｆｆ  ｆｕｅｒ  Ｋｉｎｄｅｒは、１用量あたり少なくとも４０ＩＵの破傷風トキソイド（約２０Ｌｆに対応する）、および１用量あたり少なくとも３０ＩＵのジフテリアトキソイド（約２０Ｌｆに対応する）を含む。それぞれの場合において、１５ｇ／ｌの濃度の水酸化アルミニウムを、使用する。
【０２６９】
上記ワクチンを調製するために、破傷風抗原を、７５０Ｌｆ／ｍｌの濃縮物を得るために、水酸化アルミニウムに吸着させる。同様に、上記ジフテリアトキソイドを、３００Ｌｆ／ｍｌの濃縮物を得るために、吸着させる。最後に、精製した全ＴＢＥ−ウイルスを、６０μｇ／ｍｌの濃縮物が得られるように、使用する。上記破傷風トキソイド懸濁液および上記ジフテリアトキソイド懸濁液を、最終的な混合ワクチンの濃度と比較して、７５倍に濃縮する。上記ＴＢＥ抗原の濃度は、最終的な混合ワクチンの濃度と比較して、２０倍である。
【０２７０】
水酸化アルミニウムの濃度は、各濃縮物について１５ｇ／ｌである。これらの濃縮物を、処方容器（Ｈｅｒｍａｎｎ  Ｗａｌｄｎｅｒ  ＧｍｂＨ  ＆  Ｃｏ  ＫＧ、Ｗａｎｇｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ  ｏｒ  Ｐｈａｒｍａｔｅｃ  Ｄｅｕｔｓｃｈｌａｎｄ  ＧｍｂＨ、Ｄｒｅｓｄｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）に移し、次いで適切な量の水酸化アルミニウム懸濁液（１５ｇ／１）を、最終的な混合ワクチンにおいて１ｍｌあたり２．０ｍｇの水酸化アルミニウムの最終濃度が得られるように添加する。次いで、濾過滅菌したショ糖溶液を、５０ｍｇ／ｍｌの最終濃度が得られるように添加し、そして濾過滅菌したＮａＣｌ溶液および注射用水を、マスターバッチを満たすように、上記最終容量に添加する。必要な場合、ｐＨ値を、６．８〜７．８に調整し、そしてそのマスターバッチを、３０分間撹拌する。次いで、ＴＢＥ−Ｔｄワクチン部分を、バイアルまたは注射器にボトリングした。数種のさらなる混合ワクチン（とりわけ、Ｔｄ−ＴＢＥ−ａＰの組み合わせ、Ｔｄ−ＴＢＥ−ＩＰＶの組み合わせおよびＴｄ−ＴＢＥ−ａＰ−ＩＰＶの組み合わせ）を、この方法によって生産し得る。
【０２７１】
（実施例２：投与の様式および保存の様式）
保存／投与の異なる様式を、上記混合ワクチンの有効性に関する推定上の違いを考慮して、使用し得る。簡単にいうと、以下のアプローチを、使用し得る：
（Ａ）Ｔｄ抗原およびＴＢＥ抗原を、その２つの液体成分がデバイス中で別個に保存され、かつそれらの抗原が注射時において即時的（ｉｎｓｔａｎｔａｎｅｏｕｓｌｙ）であるように、２つのチャンバーを備えるワクチン注射器（Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）または２個のバイアル中に配合する。
【０２７２】
（Ｂ）上記２つの抗原成分のうちの一方（上記Ｔｄ成分または上記ＴＢＥ成分のいずれか）を、凍結乾燥器（Ｈｏｆ−Ｓｏｎｄｅｒａｎｌａｇｅｎｂａｕ、Ｌｏｈｒａ、Ｇｅｒｍａｎｙ）の使用によって凍結乾燥する一方で、上記他の抗原を、実施例１に記載される方法によって液体形態で得る。その凍結乾燥した成分を、免疫化の前に、液体成分によって再構成する。
【０２７３】
（Ｃ）上記Ｔｄ抗原および上記ＴＢＥ抗原を、注射器またはバイアル中で１つの懸濁液としてブレンドし、そしてその混合物を、免疫化の前に、４℃にて７日間保存する。
【０２７４】
（実施例３：四価Ｔｄ−ＴＢＥ混合ワクチンの生産または五価Ｔｄ−ＴＢＥ混合ワクチンの生産）
実施例１に記載する通り、全ての成分を、別々に水酸化アルミニウムに吸着させ、次いで混合する。
【０２７５】
上述の実施例に従うＴＢＥ成分とブレンドするために、Ｔｄ−ａＰなどの三価成分（無菌体百日咳抗原を伴うＴｄ；例えば、Ｃｈｉｒｏｎ  Ｖａｃｃｉｎｅｓ、Ｃｈｉｒｏｎ  Ｓ．ｐ．Ａ．、Ｓｉｅｎａ、Ｉｔａｌｙの一価ワクチンＡｃｅｌｌｕｖａｘとして入手可能である）またはＴｄ−ＩＰＶ（不活化ポリオウイルス；例えば、Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄ  Ｖａｃｃｉｎｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ、Ｂｉｌｔｈｏｖｅｎ、Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄから入手可能な抗原）を、Ｔｄを使用する代わりに使用して、それぞれ、四価Ｔｄ−ＴＢＥ−ａＰワクチンまたは四価Ｔｄ−ＴＢＥ−ＩＰＶワクチンを入手し得る。さらに、より広範な組み合わせが、可能である（例えば、Ｔｄ−ＴＢＥ−ａＰ−ＩＰＶワクチン）。
【０２７６】
（実施例４：単独か、または免疫刺激性因子との組み合わせにおける、Ｔ抗原と、Ｄ（ｄ）抗原と、ＴＢＥ抗原との組み合わせによる免疫化）
以下の実施例は、Ｔ抗原と、Ｄ（ｄ）抗原と、ＴＢＥ抗原との種々の組み合わせを用いた、マウスモデルにおける免疫化を示す。上記Ｔ抗原、上記Ｄ（ｄ）抗原、上記ＴＢＥ抗原を、本明細書中に記載する通りに、調製し、かつ特徴付ける。
【０２７７】
ＣＤ１マウスを、以下の通り、９個の群に分け、そしてそのＣＤ１マウスを、免疫化する：
【０２７８】
【表１】
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マウスを、２週間の間隔を空けて免疫化する。最後の免疫化の後に２週間、全てのマウスを、適切な株を用いて負荷する。粘膜を介した免疫化（例えば、鼻腔内（ｉｎ））を使用し、上記動物モデルをまた、粘膜を介する免疫原の防御効果を試験するために、粘膜に負荷する。
【０２７９】
添付の明細書において言及される全ての刊行物は、参考として本明細書中に援用される。記載された本発明の方法および本発明のシステムの種々の改変およびバリエーションは、当業者にとって明らかであり、本発明の範囲および精神から逸脱しない。本発明は、特定の好ましい実施形態を伴って記載されているが、特許請求される本発明は、不当にこのような特定の実施形態に制限されるべきではないことが、理解されるべきである。実際に、本発明を実施するための記載された様式の種々の改変は、分子生物学分野の当業者または関連分野の当業者にとって明らかであり、これらの改変は、本発明によって網羅されることが意図される。
【国際調査報告】
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