(57)【要約】本発明は、芳香族オルトジアミンを環化剤で処理して製造される医薬化合物又はその中間体中の、芳香族オルトジアミン混在物の新規な分析的測定方法に関する。本方法は、（ｉ）混在物を含む医薬化合物又はその中間体をアセトンで処理して芳香族オルトジアミン混在物の２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピン誘導体を形成させること；（ii）医薬化合物又はその中間体中の２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピン誘導体の量を測定すること（好ましくはＨＰＬＣによって）；そして（iii）２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピン誘導体の量を医薬化合物又はその中間体に本来存在した芳香族オルトジアミン混在物の量と相関させること；の工程を含む。２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピン誘導体の形成は混和な条件下で迅速に起り、これによって残留する環化剤による妨害が排除され、芳香族オルトジアミンのｐｐｍレベルでの検出が可能になる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
医薬化合物又はその中間体中の芳香族オルトジアミン混在物の分析的測定方法であって、（ｉ）混在物を含む医薬化合物又はその中間体をアセトンで処理して芳香族オルトジアミン混在物の２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピン誘導体を形成させること；（ii）医薬化合物又はその中間体中の２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピン誘導体の量を測定すること；そして（iii）２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピン誘導体の量を医薬化合物又はその中間体中に本来存在した芳香族オルトジアミン混在物の量と相関させること；の工程を含む上記方法。
【請求項２】
医薬化合物又はその中間体が環化剤の残留物を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
芳香族オルトジアミン混在物が、式：
【化１】
2008541037.tif 000016
［式中、Ｒは、Ｈ；Ｒ1が（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アリル、２,２,２−トリクロロエチル又は（Ｃ1−Ｃ6）アルキルであるＣＯＯＲ1；−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ；アルキル部分が場合により１〜３個のフッ素又は塩素原子で置換されていてもよい−Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；ベンジル；又はｔ−ブトキシカルボニル（ｔ−Ｂｏｃ）である］を有し；
そして工程（ｉ）で形成される２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピン誘導体が、式：
【化２】
2008541037.tif 000017
［式中、Ｒは、Ｈ；Ｒ1が（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アリル、２,２,２−トリクロロエチル又は（Ｃ1−Ｃ6）アルキルであるＣＯＯＲ1；−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ；アルキル部分が場合により１〜３個のフッ素又は塩素原子で置換されていてもよい−Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；ベンジル；又はｔ−ブトキシカルボニル（ｔ−Ｂｏｃ）である］を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
式IIの化合物及び式Ｉの化合物においてＲが−Ｃ（＝Ｏ）ＣＦ3である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
工程（ｉ）が触媒量の強酸の存在下で行われる、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
酸が塩酸である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
工程（ii）における２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピン誘導体の量がＨＰＬＣで定量される、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
式：
【化３】
2008541037.tif 000018
［式中、Ｒは、Ｈ；Ｒ1が（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アリル、２,２,２−トリクロロエチル又は（Ｃ1−Ｃ6）アルキルであるＣＯＯＲ1；−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ；アルキル部分が場合により１〜３個のフッ素又は塩素原子で置換されていてもよい−Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；ベンジル；又はｔ−ブトキシカルボニル（ｔ−Ｂｏｃ）である］の化合物。
【請求項９】
ＲがＨである、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
式：
【化４】
2008541037.tif 000019
の化合物を製造する方法であって、式：
【化５】
2008541037.tif 000020
［式中、Ｒ2は、Ｒ1が（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アリル、２,２,２−トリクロロエチル又は（Ｃ1−Ｃ6）アルキルであるＣＯＯＲ1；−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ；アルキル部分が場合により１〜３個のフッ素又は塩素原子で置換されていてもよい−Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；又はｔ−ブトキシカルボニル（ｔ−Ｂｏｃ）から選択される保護基である］の化合物を水性の塩基で処理する、上記方法。
【請求項１１】
式：
【化６】
2008541037.tif 000021
［式中、Ｒ2は、Ｒ1が（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アリル、２,２,２−トリクロロエチル又は（Ｃ1−Ｃ6）アルキルであるＣＯＯＲ1；−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ；アルキル部分が場合により１〜３個のフッ素又は塩素原子で置換されていてもよい−Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；又はｔ−ブトキシカルボニル（ｔ−Ｂｏｃ）から選択される保護基である］の化合物を製造する方法であって、式：
【化７】
2008541037.tif 000022
［式中、Ｒは、Ｈ；Ｒ1が（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アリル、２,２,２−トリクロロエチル又は（Ｃ1−Ｃ6）アルキルであるＣＯＯＲ1；−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ；アルキル部分が場合により１〜３個のフッ素又は塩素原子で置換されていてもよい−Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；又はｔ−ブトキシカルボニル（ｔ−Ｂｏｃ）である］の化合物を少なくとも２モル当量のアセトンで処理する、上記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬品及びそれら医薬品の前駆体である中間体の潜在的な混在物である、低レベルの芳香族オルトジアミン類の分析的検出及び測定方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
芳香族オルトジアミン類は、医薬品及び医薬中間体の製造においてヘテロ環構造を形成させるためには、環化剤で処理するのが一般的である。例えば、Coeらは、国際特許出願公開第９９／３５１３１号（米国特許第６,４１０,５５０号Ｂ１）に、神経細胞のニコチン性アセチルコリン特異的受容体部位に結合し、コリン作動性機能の調節に有用である化合物、この化合物は芳香族オルトジアミン類から誘導されることを記載している。これらの化合物は、炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎、壊疽性膿皮症及びクローン病を含むが、これらに限定されない）、過敏性腸症候群、痙攣性ジストニー、慢性疼痛、急性疼痛、セリアック病、回腸嚢炎、血管収縮、不安、パニック障害、うつ病、双極性障害、自閉症、睡眠障害、ジェットラグ、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、認知機能障害、高血圧、過食症、食欲不振、肥満、心不整脈、胃酸分泌過多、潰瘍、褐色細胞腫、進行性筋上性麻痺、薬物依存及び中毒（例えば、ニコチン（及び／又はタバコ製品）、アルコール、ベンゾジアゼピン類、バルビツレート類、オピオイド又はコカインの依存症又は中毒）、頭痛、発作（stroke）、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、強迫性障害、精神病、ハンチントン舞踏病、遅発性ジスキネジー、運動過剰症、失読症、統合失調症、多発脳梗塞性痴呆、加齢に伴う認知低下、てんかん（小発作性欠神発作を含む）、アルツハイマー型（ＡＤ）老年痴呆、パーキンソン病（ＰＤ）、注意欠陥過活動性障害（ＡＤＨＤ）及びトウレット症候群の治療に有用である。
【０００３】
このような医薬品及びその製造に使われる医薬中間体は、芳香族オルトジアミン残留物を含む可能性があり、それらの残留物は潜在的な遺伝毒性を持つ故に、低ｐｐｍレベルでも好ましくない。従って、芳香族オルトジアミンについて、医薬品及びその前駆体を分析する能力は、たとえ低レベルであっても決定的に重要な意味を有する。
【０００４】
この課題は、医薬品又は前駆体中に存在する残留環化剤が、芳香族オルトジアミンと反応して更に医薬品又は前駆体を形成し、存在する芳香族オルトジアミンの実際の量を不明瞭にするため、しばしば複雑になる。
【０００５】
アッセイマトリックスのこのような妨害を克服する一つの方法は、分析中の環化剤との更なる反応を阻止するために、検体を誘導体化することである。Ｎ−アシル化、Ｎ−アルキル化及び環化（塩基性又は酸性条件下）などの従来の誘導体化技術では、１−（４,５−ジアミノ−１０−アザ−トリシクロ［６.３.１.０2,7］ドデカ−２（７）、３,５−トリエン−１０−イル）−２,２,２−トリフルオロ−エタノンの有用な誘導体を作り出すことができなかった。これは主として、ＨＰＬＣ分析を妨害する塩基性又は酸性の反応物質が存在することによる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
従って、潜在的な副反応を最小限にするか又は排除し、ＨＰＬＣなどの分析方法に適合する別の誘導体化の方法が必要である。芳香族オルトジアミンと２モルのアセトンから、対応する２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピンを形成させる既知の反応（G. Kaupp, U. Pogodda, J. Schmeyers; Chem. Ber; EN; 127;11, 1994; 2249-2262; H. Morales, A. Bulbarela, R. Contreras; Heterocycles, EN; 24;1, 1986; 135-139; M. Pozarentzi, J. Stephanidou, C. Tsoleridis; Tetrahedron Lett.; EN; 43; 9; 2002; 1755-1758）は、そのような方法であり、本発明の分析方法の基盤を提供している。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、医薬化合物又はその中間体中の芳香族オルトジアミン混在物の分析的測定方法であって、（ｉ）混在物を含む医薬化合物又はその中間体をアセトンで処理して芳香族オルトジアミン混在物の２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピン誘導体を形成させること；（ii）医薬化合物又はその中間体中の２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピン誘導体の量を測定すること；そして（iii）２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピン誘導体の量を医薬化合物又はその中間体中に本来存在した芳香族オルトジアミン混在物の量と相関させること；の工程を含む方法を提供する。
【０００８】
本発明は、また、環化剤の残留物を含む医薬化合物又はその中間体中の芳香族オルトジアミン混在物の分析的測定方法を提供する。
【０００９】
本発明は、また、医薬化合物又はその中間体中の芳香族オルトジアミン混在物の分析的測定方法であって、芳香族オルトジアミン混在物が、式：
【化１】
2008541037.tif 000002
［式中、Ｒは、Ｈ；Ｒ1が（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アリル、２,２,２−トリクロロエチル又は（Ｃ1−Ｃ6）アルキルであるＣＯＯＲ1；−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ；アルキル部分が場合により１〜３個のフッ素又は塩素原子で置換されていてもよい−Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；ベンジル；又はｔ−ブトキシカルボニル（ｔ−Ｂｏｃ）である］
を有し；
そして上記手順の工程（ｉ）で形成される２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピン誘導体が、式：
【化２】
2008541037.tif 000003
［式中、Ｒは、Ｈ；Ｒ1が（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アリル、２,２,２−トリクロロエチル又は（Ｃ1−Ｃ6）アルキルであるＣＯＯＲ1；−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ；アルキル部分が場合により１〜３個のフッ素又は塩素原子で置換されていてもよい−Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；ベンジル；又はｔ−ブトキシカルボニル（ｔ−Ｂｏｃ）である］
を有する方法を提供する。
【００１０】
本発明は、また、医薬化合物又はその中間体中の芳香族オルトジアミン混在物の分析的測定方法であって、式IIの化合物及び式Ｉの化合物におけるＲが−Ｃ（＝Ｏ）ＣＦ3である方法に関する。
【００１１】
本発明は、また、医薬化合物又はその中間体中の芳香族オルトジアミン混在物の分析的測定方法であって、触媒量の塩酸などの強酸の存在下で２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピン誘導体を形成させる方法に関する。
【００１２】
本発明は、また、医薬化合物又はその中間体中の芳香族オルトジアミン混在物の分析的測定方法であって、２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピン誘導体の量を、ＨＰＬＣのようなクロマトグラフィー的方法で測定する方法を提供する。
【００１３】
本発明は、また、式：
【化３】
2008541037.tif 000004
［式中、Ｒは、Ｈ；Ｒ1が（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アリル、２,２,２−トリクロロエチル又は（Ｃ1−Ｃ6）アルキルであるＣＯＯＲ1；−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ；アルキル部分が場合により１〜３個のハロゲン原子、好ましくは１〜３個のフッ素又は塩素原子で置換されていてもよい−Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；ベンジル；又はｔ−ブトキシカルボニル（ｔ−Ｂｏｃ）である］
の化合物を、式：
【化４】
2008541037.tif 000005
［式中、Ｒは、Ｈ；Ｒ1が（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アリル、２,２,２−トリクロロエチル又は（Ｃ1−Ｃ6）アルキルであるＣＯＯＲ1；−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ；アルキル部分が場合により１〜３個のハロゲン原子、好ましくは１〜３個のフッ素又は塩素原子で置換されていてもよい−Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；ベンジル；又はｔ−ブトキシカルボニル（ｔ−Ｂｏｃ）である］
の芳香族オルトジアミンから製造する方法であって、式IIの化合物を少なくとも２モル当量のアセトンで処理し、そして式Ｉの化合物が式IIの化合物の分析的測定において有用である方法を提供する。
【００１４】
本発明は、また、対応する芳香族オルトジアミンの分析的測定に有用な、式：
【化５】
2008541037.tif 000006
［式中、Ｒは、Ｈ；Ｒ1が（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アリル、２,２,２−トリクロロエチル又は（Ｃ1−Ｃ6）アルキルであるＣＯＯＲ1；−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ；アルキル部分が場合により１〜３個のフッ素又は塩素原子で置換されていてもよい−Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；ベンジル；又はｔ−ブトキシカルボニル（ｔ−Ｂｏｃ）である］
の化合物に関する。
【００１５】
本発明は、また、式：
【化６】
2008541037.tif 000007
の化合物であって、該化合物が医薬品中の芳香族オルトジアミン不純物の検出に有用である化合物に関する。
【００１６】
本発明は、また、式：
【化７】
2008541037.tif 000008
の化合物を製造する方法であって、  式：
【化８】
2008541037.tif 000009
［式中、Ｒ2は、Ｒ1が（Ｃ1−Ｃ6）アルキル、アリル、２,２,２−トリクロロエチル又は（Ｃ1−Ｃ6）アルキルであるＣＯＯＲ1；−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ；アルキル部分が場合により１〜３個のフッ素又は塩素原子で置換されていてもよい−Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；又はｔ−ブトキシカルボニル（ｔ−Ｂｏｃ）から選択される保護基である］の化合物を水性の塩基で処理する方法を提供する。
【００１７】
本発明は、また、医薬品及び医薬中間体中の残留物である１−（４,５−ジアミノ−１０−アザ−トリシクロ［６.３.１.０2.7］ドデカ−２（７）、３,５−トリエン−１０−イル）−２,２,２−トリフルオロ−エタノン、即ち、Ｒがトリフルオロアセチルである式IIの化合物の分析的測定方法であって、試験化合物の完全性を保護するために、触媒量の塩酸水溶液のみを用いて、ほぼ中性の条件下で、２モルのアセトンと反応させ、対応する２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピン誘導体を形成させることによる方法に関する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
別に記載のある場合を除いて、以下の反応スキーム及び考察におけるＲ、Ｒ1、Ｒ2は、上記で定義した通りである。特に断りのない限り、全ての反応スキームの反応条件は周囲の雰囲気条件下で行われた。
【００１９】
スキーム１は、対応する芳香族オルトジアミンから２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピンを製造する本発明の方法について記載する。
【００２０】
スキーム１において、２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピンは、芳香族オルトジアミン又は該芳香族オルトジアミンの残留物を含む混合物から、触媒量の強酸、好ましくは塩酸の存在下、ほぼ中性条件下、約２０℃〜約２５℃で、少なくとも２モル当量のアセトン、過剰のアセトン、又は大過剰のアセトン、好ましくは大過剰のアセトンで処理することによって製造される。
【００２１】
【化９】
2008541037.tif 000010
スキーム１の方法の後、定量的ＨＰＬＣが行われる。
【００２２】
スキーム２は、実質的に純粋な形態の式IIの化合物からの、又は残留物として式IIの化合物を含む混合物からの、式Ｉの化合物の製造について示しており。該残留物は、例えば、式IIの化合物を環化剤で処理した後に反応生成物中に残留する。その様な環化反応は、Coeらの米国特許第６,４１０,５５０Ｂ１号に記載されており、その全文は、参照により本明細書に組み込まれる。芳香族オルトジアミン残留物レベルの過小評価につながる可能性のある、環化剤との分析中の更なる反応を避けるため、試料はアセトンとの反応で誘導体化される。一般に、式IIの化合物の環化剤による処理から生じる反応生成物のアリコートを、触媒量の強酸、好ましくは塩酸を含むアセトンで、室温程度で処理して式Ｉの２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピンを生成させ、次いで、特定の量のアセトニトリルなどの反応不活性溶媒で希釈し溶解する。本発明の方法において、過度の酸性又は過度の塩基性条件は、試験化合物の構造を危険に曝し、その結果分析を混乱させる恐れがある。アセトンの使用は、潜在的な副反応を最小限に抑えるので、誘導体の形成に好適であり、他の従来の誘導体化剤よりもより環境に優しい。大過剰のアセトンを使用することができ、従って、上で論じた従来の試薬によるよりも高レベルの誘導体化が達成され、そしてアセトンはこの分析的アッセイ方法論に適合する。
【００２３】
次に、式Ｉの２,２,４−トリメチル−１,５−ベンゾジアゼピン誘導体の量は、式Ｉの化合物を式IIの化合物と環化剤との反応生成物から識別することが出来る、当技術分野で既知の如何なる分析方法、好ましくはクロマトグラフィー的方法、最も好ましくは分析用ＨＰＬＣによって定量することができる。次いで、最初から反応混合物にある式IIの化合物の量は、既知の量の式IIの化合物をアセトンで誘導体化して得た検量線に対比させて測定する。式Ｉの化合物及び式IIの化合物中のＲがトリフルオロアセチルである場合、分析によって、検体中の１−（４,５−ジアミノ−１０−アザトリシクロ［６.３.１.０2,7］ドデカ−２（７）、３,５−トリエン−１０−イル）−２,２,２−トリフルオロエタノンの量が提示される。
【００２４】
スキーム２は、また、式IIの化合物からアセトンで処理することによる、式Ｉの化合物の製造について示してoり、これは触媒量の強酸、好ましくは塩酸の存在下、ほぼ室温で、又は酸の非存在下、ほぼアセトンの還流温度で、好ましくは酸の非存在下、ほぼアセトンの還流温度で、アセトン、好ましくは大過剰のアセトンで処理する。
【００２５】
【化１０】
2008541037.tif 000011
【００２６】
スキーム３は、式Ｉａの化合物から式IIIの化合物の製造について示しており、ここでＲ2は上記でＲ2について定義した通り、加水分解できる保護基、好ましくはトリフルオロアセチルであり、式Ｉａの化合物を酸性又は塩基性の加水分解用剤で処理して保護基Ｒ2を除去することによる。保護基がトリフルオロアセチルなどである場合、加水分解は、ＮａＯＨ、ＫＯＨ又はＬｉＯＨ、好ましくは４モル当量のＮａＯＨなどの過剰の塩基性加水分解用剤水溶液で達成される。当業者は、式Ｉ又はＩａの化合物から保護基を除去するために、還元及び接触水素化など他の手段を使うことが出来ることを認識するであろう。式IIIの化合物は、また、当技術分野でよく知られた方法を使い、例えば、式Ｉの化合物から、接触水素化によってベンジル保護基を除去することにより、製造することができる。
【００２７】
【化１１】
2008541037.tif 000012
【実施例】
【００２８】
〔実施例１〕
７,１１−メタノアゼピノ［４,５−ｈ］−１,５−ベンゾジアゼピン、１,２,３,７,８,９,１０,１１−オクタヒドロ−２,２,４−トリメチル−９−（トリフルオロアセチル）−
１−（４,５−ジアミノ−１０−アザトリシクロ［６.３.１.０2,7］ドデカ−２（７）,３,５−トリエン−１０−イル）−２,２,２−トリフルオロエタノンをアセトン（５０ｍＬ）に溶解し、加温して２時間還流した。反応の進行はＴＬＣ（溶離液としてＥｔＯＡｃ−ヘキサン；７：３）で監視した。生成物形成を示す極性のより高いスポットの出現に伴って、１−（４,５−ジアミノ−１０−アザトリシクロ［６.３.１.０2,7］ドデカ−２（７）,３,５−トリエン−１０−イル）−２,２,２−トリフルオロエタノンのスポットの消失が観察された。反応を停止させた時、僅かな量の出発物質が未確認の極性の低いスポットと共に観察された。オレンジ色の溶液を減圧蒸留して粘り気のあるオイルを得た。粘り気のあるオイルをＣＨ2Ｃｌ2に溶解し、シリカゲル（１５ｇ）を添加し、その物質をシリカゲルに吸着させた。その物質をクロマトグラフィーカラム（カラム充填液としてＥｔＯＡｃ−ヘキサン；７：３）上に装填し、１００％のＥｔＯＡｃで溶離した。
【００２９】
所望するアセトン付加化合物だけを含むきれいな画分をまとめ、減圧蒸留してオイルを得た。４５℃で一晩減圧乾燥し、２.５ｇの黄褐色の固体を得た（４９.０％）。分析データ：ＨＰＬＣ、面積による純度９９.５％； 1ＨＮＭＲ（ｄ6ＤＭＳＯ）：δ＝６.７７（１Ｈ,ｄ）,６.６９（１Ｈ,ｄ）,４.４７（１Ｈ,ｄ）,４.０４（１Ｈ,ｄ）,３.６３（１Ｈ,ｍ）,３.５６（１Ｈ,ｍ）,３.３５（２Ｈ,ｓ）,３.０６−３.１７（３Ｈ,ｍ）,２.１７（３Ｈ,ｓ）,１.９５−２.０４（２Ｈ,ｍ）,１.１９（６Ｈ,ｄ）；ＭＳ（ｍ＋１）３６６；ｍｐ１６８−１６９℃。
【００３０】
〔実施例２〕
７,１１−メタノアゼピノ［４,５−ｈ］−１,５−ベンゾジアゼピン、１,２,３,７,８,９,１０,１１−オクタヒドロ−２,２,４−トリメチル−
７,１１−メタノアゼピノ［４,５−ｈ］−１,５−ベンゾジアゼピン、１,２,３,７,８,９,１０,１１−オクタヒドロ−２,２,４−トリメチル−９−（トリフルオロアセチル）−（４０５ｍｇ）をトルエン（３ｍＬ）に加え、溶解し易くするため穏やかに３５℃に加温した。別の容器でＮａＯＨ（１７７ｍｇ、４.０当量）を水（２ｍＬ）に溶解し、温めたトルエン溶液に添加した。二相性混合物を４０℃に３時間加温した後、ゆっくり室温まで冷却し、次いで、一晩攪拌した。反応の進行はＴＬＣ（ＣＨ2Ｃｌ2−ＭｅＯＨ；９：１）で監視し、出発原料の消失及び所望する脱保護生成物として同定された、更により極性の高いスポットの出現を認めた。
【００３１】
二相性混合物をトルエン（２０ｍＬ）で希釈して１５分間攪拌し、分液ロートに移して相を分離した。水層をトルエン（１０ｍＬ）で抽出し、トルエン層を併合させた。トルエン溶液をＮａ2ＳＯ4及び活性炭と攪拌し、ろ過し、減圧蒸留してオイルを得た。４５℃の真空オーブンで一晩乾燥し、１９３ｍｇ（６４.５％）の淡いオレンジ色の皮殻性の固体を得た。ＨＰＬＣ：面積による純度９５.８％；1ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：δ＝６.９４（１Ｈ,ｓ）,６.５８（１Ｈ,ｓ）,２.８６−２.９４（５Ｈ,ｍ）,２.６３（２Ｈ,ｄ）,２.３５（３Ｈ,ｓ）,２.２１（２Ｈ,ｍ）,１.９０（１Ｈ,ｄ）,１.８３（２Ｈ,ｍ）,１.３７（３Ｈ,ｓ）,１.３１（３Ｈ,ｓ）；ＭＳ（ｍ＋１）：＝２７０；ｍｐ：６３−６５℃。
【００３２】
〔実施例３〕
１−（５,８,１４−トリアザテトラシクロ［１０.３.１.０2,11.０4,9］ヘキサデカ−２（１１）,３,５,７,９−ペンタエン−１４−イル）−２,２,２−トリフルオロエタノン（グリオキサールとの反応生成物）中の１−（４,５−ジアミノ−１０−アザトリシクロ［６.３.１.０2,7］ドデカ−２（７）,３,５−トリエン−１０−イル）−２,２,２−トリフルオロエタノン残留物の定量
標準品の調製
誘導体化剤：３７％塩酸（３００ｍｇ）をＨＰＬＣグレードのアセトン（５０ｍＬ）に溶解した。
標準原液：１−（４,５−ジアミノ−１０−アザトリシクロ［６.３.１.０2,7］ドデカ−２（７）、３,５−トリエン−１０−イル）−２,２,２−トリフルオロエタノン試料（１０ｍｇ）を秤量し、１００ｍＬのメスフラスコに移した。誘導体化剤のアリコート（１０ｍＬ）を添加し、混合物を室温でミクロ攪拌棒を用いて１５分間攪拌した。続いて溶液にアセトニトリルを加えて１００ｍＬにした。外部標準は、溶媒としてアセトニトリルを用いて原液から調製した。標準品は、３０ｇ／ｍＬの試料濃度を基準にして、１ｐｐｍから１００ｐｐｍを調製し分析した。
【００３３】
試料の調製
１−（５,８,１４−トリアザテトラシクロ［１０.３.１.０2,11.０4,9］ヘキサデカ−２（１１）,３,５,７,９−ペンタエン−１４−イル）−２,２,２−トリフルオロエタノン（約３００ｍｇ）を秤量し、１０ｍＬのメスフラスコに移した。誘導体化剤のアリコート（１ｍＬ）をフラスコに加え、スラリーを激しく渦巻かせた。次いで、アセトニトリルを用いてスラリーを溶解し、液量を１０ｍＬにした。
【００３４】
クロマトグラフィー：
移動相Ａ：    水／ＴＦＡ＝２０００／２（ｖ／ｖ）、ＮＨ4ＯＨでｐＨ３.０に調整
移動相Ｂ：    水／アセトニトリル／ＴＦＡ＝２００／１８００／２（ｖ／ｖ／ｖ）、ＮＨ4ＯＨでｐＨ３.０に調整
カラム：      Waters Symmetry C18、４.６×２５０ｃｍ、又は同等品
実行時間：    ３０分
流速：        １.０ｍＬ／分
ダイオードアレイ検出器：      λ＝２３０ｎｍ
注入量：      ５０.０μＬ
カラム温度：  ４０℃
勾配（グラジエント）：
【表１】
2008541037.tif 000013
【００３５】
ＭＳＤ条件：  （エレクトロスプレー）
シグナル１（ポジティブ）：
【表２】
2008541037.tif 000014
【表３】
2008541037.tif 000015
【００３６】
１−（４,５−ジアミノ−１０−アザトリシクロ［６.３.１.０2,7］ドデカ−２（７）,３,５−トリエン−１０−イル）−２,２,２−トリフルオロエタノン用相関曲線の作成：
直線性
標準品重量（ｍｇ）：        １０.４９
標準品効力：                ０.９９１
標準原液（ｍｇ／ｍＬ）：    ０.１０４０
【００３７】
標準品 ｐｐｍ ｍｇ／ｍＬ 面積
Ａ        １００        ０.００２０７９１    ２.６６５Ｅ＋０６
Ｂ          ５０        ０.００１０３９６    １.４０６Ｅ＋０６
Ｃ         ２０         ０.０００４１５８    ５.７６９Ｅ＋０５
Ｄ         １０         ０.０００２０７９    ２.９９０Ｅ＋０５
Ｅ           ５         ０.０００１０４０    １.４９５Ｅ＋０５
Ｆ           １         ０.００００２０８    ３.０７２Ｅ＋０４
Ｇ           ０.５      ０.００００１０４    １.５４３Ｅ＋０４
Ｈ           ０.１      ０.０００００２１    ３.０２３Ｅ＋０３
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】１−（４,５−ジアミノ−１０−アザトリシクロ［６.３.１.０2,7］ドデカ−２（７）、３,５−トリエン−１０−イル）−２,２,２−トリフルオロエタノンの相関曲線を示す。
【図１】
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【国際調査報告】
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