(57)【要約】  本発明は温血動物の拡張機能障害または拡張期心不全の予防、顕性になるまでの進行の遅延、または処置のための医薬品の製造のための治療上有効量のレニン阻害剤またはその薬学的に許容される塩の単独でまたは（ｉ）ＡＣＥ阻害剤もしくはその薬学的に許容される塩；または（ｉｉ）アンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬もしくはその薬学的に許容される塩との組み合わせでの使用を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
温血動物に治療上有効量のレニン阻害剤またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む拡張機能障害または拡張期心不全の予防、顕性になるまでの進行の遅延、または処置のための方法。
【請求項２】
レニン阻害剤がＲＯ６６−１１３２、ＲＯ６６−１１６８および式（ＩＩＩ）：
【化１】
2008515903.tif 000022
（式中、
Ｒ１はハロゲン、Ｃ１−６ハロゲンアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルオキシまたはＣ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルであり；Ｒ２はハロゲン、Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシであり；Ｒ３およびＲ４は独立して分岐したＣ３−６アルキルであり；そしてＲ５はシクロアルキル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルオキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アミノアルキル、Ｃ１−６アルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ジアルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルアミノ−Ｃ１−６アルキル、ＨＯ（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−Ｏ−（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｈ２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルまたは（Ｃ１−６アルキル）２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルである）の化合物；または各々の場合のその薬学的に許容される塩からなる群から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項３】
レニン阻害剤が式：
【化２】
2008515903.tif 000023
（式中、Ｒ１は３−メトキシプロピルオキシであり；Ｒ２はメトキシであり；そしてＲ３およびＲ４はイソプロピルである）を有する式（ＩＩＩ）の化合物；またはその薬学的に許容される塩である請求項２に記載の方法。
【請求項４】
式（ＩＶ）の化合物がそのセミフマル酸塩の形態である請求項３に記載の方法。
【請求項５】
温血動物にレニン阻害剤またはその薬学的に許容される塩と
（ｉ）アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤もしくはその薬学的に許容される塩；または
（ｉｉ）アンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬もしくはその薬学的に許容される塩；
との治療上有効量の組み合わせを投与することを含む拡張機能障害または拡張期心不全の予防、顕性になるまでの進行の遅延、または処置のための方法。
【請求項６】
レニン阻害剤がＲＯ６６−１１３２、ＲＯ６６−１１６８および式（ＩＩＩ）：
【化３】
2008515903.tif 000024
（式中、
Ｒ１はハロゲン、Ｃ１−６ハロゲンアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルオキシまたはＣ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルであり；Ｒ２はハロゲン、Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシであり；Ｒ３およびＲ４は独立して分岐したＣ３−６アルキルであり；そしてＲ５はシクロアルキル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルオキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アミノアルキル、Ｃ１−６アルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ジアルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルアミノ−Ｃ１−６アルキル、ＨＯ（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−Ｏ−（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｈ２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルまたは（Ｃ１−６アルキル）２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルである）の化合物；または各々の場合のその薬学的に許容される塩からなる群から選択される請求項５に記載の方法。
【請求項７】
レニン阻害剤が式：
【化４】
2008515903.tif 000025
（式中、Ｒ１は３−メトキシプロピルオキシであり；Ｒ２はメトキシであり；そしてＲ３およびＲ４はイソプロピルである）を有する式（ＩＩＩ）の化合物；またはその薬学的に許容される塩である請求項６に記載の方法。
【請求項８】
式（ＩＶ）の化合物がそのセミフマル酸塩の形態である請求項７に記載の方法。
【請求項９】
ＡＣＥ阻害剤がベナゼプリルおよびエナラプリルからなる群から選択される請求項５から８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
アンギオテンシンＩＩ受容体がバルサルタンまたはその薬学的に許容される塩である請求項５から８のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
拡張機能障害または拡張期心不全の予防、顕性になるまでの進行の遅延、または処置のための
（ｉ）ＡＣＥ阻害剤もしくはその薬学的に許容される塩；または
（ｉｉ）アンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬もしくはその薬学的に許容される塩；
と組み合わせたレニン阻害剤またはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項１２】
レニン阻害剤がＲＯ６６−１１３２、ＲＯ６６−１１６８および式（ＩＩＩ）：
【化５】
2008515903.tif 000026
（式中、
Ｒ１はハロゲン、Ｃ１−６ハロゲンアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルオキシまたはＣ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルであり；Ｒ２はハロゲン、Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシであり；Ｒ３およびＲ４は独立して分岐したＣ３−６アルキルであり；そしてＲ５はシクロアルキル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルオキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アミノアルキル、Ｃ１−６アルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ジアルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルアミノ−Ｃ１−６アルキル、ＨＯ（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−Ｏ−（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｈ２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルまたは（Ｃ１−６アルキル）２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルである）の化合物；または各々の場合のその薬学的に許容される塩からなる群から選択される請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
レニン阻害剤が式：
【化６】
2008515903.tif 000027
（式中、Ｒ１は３−メトキシプロピルオキシであり；Ｒ２はメトキシであり；そしてＲ３およびＲ４はイソプロピルである）を有する式（ＩＩＩ）の化合物；またはその薬学的に許容される塩である請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
式（ＩＶ）の化合物がそのセミフマル酸塩の形態である請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
ＡＣＥ阻害剤がベナゼプリルおよびエナラプリルからなる群から選択される請求項１１から１４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１６】
アンギオテンシンＩＩ受容体がバルサルタンまたはその薬学的に許容される塩である請求項１１から１４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１７】
拡張機能障害または拡張期心不全の予防、顕性になるまでの進行の遅延、または処置のための医薬品の製造のためのレニン阻害剤の使用。
【請求項１８】
レニン阻害剤がＲＯ６６−１１３２、ＲＯ６６−１１６８および式（ＩＩＩ）：
【化７】
2008515903.tif 000028
（式中、
Ｒ１はハロゲン、Ｃ１−６ハロゲンアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルオキシまたはＣ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルであり；Ｒ２はハロゲン、Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシであり；Ｒ３およびＲ４は独立して分岐したＣ３−６アルキルであり；そしてＲ５はシクロアルキル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルオキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アミノアルキル、Ｃ１−６アルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ジアルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルアミノ−Ｃ１−６アルキル、ＨＯ（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−Ｏ−（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｈ２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルまたは（Ｃ１−６アルキル）２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルである）の化合物；または各々の場合のその薬学的に許容される塩からなる群から選択される請求項１７に記載の使用。
【請求項１９】
式（ＩＩＩ）の化合物が式：
【化８】
2008515903.tif 000029
（式中、Ｒ１は３−メトキシプロピルオキシであり；Ｒ２はメトキシであり；そしてＲ３およびＲ４はイソプロピルである）を有するか；またはその薬学的に許容される塩である請求項６に記載の使用。
【請求項２０】
式（ＩＶ）の化合物がそのセミフマル酸塩の形態である請求項１９に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
天然酵素レニンは腎臓から血液に入り、ここでそれはアンギオテンシノーゲンを切断し、デカペプチドアンギオテンシンＩを放出し、これは次いで肺、腎臓およびその他の器官で切断されてオクタペプチドアンギオテンシノーゲンＩＩを形成する。オクタペプチドは動脈血管収縮により直接的に、および副腎からナトリウムイオン保持性ホルモンアルドステロンを遊離し、細胞外液容量の増加を伴うことにより間接的に、の双方で血圧を上昇させる。その増加はアンギオテンシンＩＩの作用に起因し得る。レニンの酵素活性の阻害剤はアンギオテンシンＩの形成の低下をもたらす。結果的により少量のアンギオテンシンＩＩが生成される。活性ペプチドホルモンの濃度低下は例えばレニン阻害剤の血圧低下効果の直接原因である。
【０００２】
さらなる評価によりレニン阻害剤を広範囲の治療適応に用いることもできることが示されている。
【０００３】
今や驚くべきことに、血圧および血液容量を制御することによる拡張機能障害および拡張期心不全の処置にレニン阻害剤を用いることができることが見出されている。なおさらに驚くべきことに、レニン阻害剤は、プロフィブリン形成性（profibrogenic）アンギオテンシンＩＩのレベルを抑制することにより左心室（ＬＶ）肥大およびそれに付随する心線維症の亢進の発症を遅延させるかまたはさらには逆転させることが見出されている。
【０００４】
したがって、本発明は温血動物に治療上有効量のレニン阻害剤またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、拡張機能障害または拡張期心不全の予防、顕性になるまでの進行の遅延、または処置のための方法に関する。
【０００５】
本明細書で用いる拡張機能障害は心臓筋肉（心筋）の機械的特性の異常を意味し、そしてＬＶ拡張期伸展性の異常、充満障害、および駆出分画が正常であるか低下しているか、および患者が無症候性であるかまたは症候性であるかにかかわらず、緩徐なまたは遅延した弛緩を含む。無症候性拡張機能障害は駆出分画が正常で、そして例えば高血圧性心疾患の患者においてしばしば認められるＬＶ充満のエコードップラーパターンが異常である無症候性の患者を意味する。
【０００６】
このように、高血圧性左心室肥大であり、そして心エコー図が正常な駆出分画および異常な左心室充満を示す無症候性の患者は、拡張機能障害を有していると言うことができる。
【０００７】
かかる患者が運動に耐えられないおよび呼吸困難の状態を呈するならば、特に静脈性うっ血および肺浮腫の徴候があれば、拡張期心不全なる用語を用いることがさらに適切である。この用語はＬＶ収縮機能障害を有する無症候性および症候性患者において用いられる用語と同等であり、そしてそれにより患者が症候を有しても有さなくとも、ＬＶ機能障害の全患者を含む病態生理学的、診断的および治療的構想の使用が促進される（William H. Gaasch and Michael R. Zile, Annu. Rev. Med. ５５：３７３９４（２００４）；Gerard P. Aurigemma, William H. Gaasch, N. Engl. J. Med. ３５１：１０９７−１０５（２００４））。
【０００８】
換言すれば、心臓が効率よくポンピングするために、ＬＶは続いて大動脈に送り出すために血液（左心房から来る）をその心室に受け入れることができなければならない。左心房からの血液の収容は１つには血液流入に応答してＬＶがどのくらい弛緩および膨張できるかに依存する。時にＬＶは左心房からの血液容量を収容するのに十分に膨張できず、結果的にＬＶの（血液での）充満障害に至る。これは心筋の機械的機能障害のために起こり得る。それは駆出分画、すなわち実際に送り出されるＬＶの血液分画の異常（低い）に至る。
【０００９】
拡張機能障害または拡張期心不全に至る因子の中で、制御不能な高血圧および体液貯留が顕著である。レニン阻害剤は少なくともアンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤およびアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬（ＡＲＢ、ＡＴ１受容体アンタゴニストとも称される）と同程度有効に血圧を低下させることが解っており、したがってこれはその抗高血圧効果のために拡張機能障害の進展の発症の遅延を示唆している。さらに、レニン阻害剤はアンギオテンシンＩＩの生成を有効に調整するので、アルドステロンレベルもまた低下すると予測され、そしてしたがってレニン阻害剤はまた体液貯留をも制限し得る。レニンアンギオテンシン系（ＲＡＳ）の遮断薬、特にレニン阻害剤の抗線維化特性に基づいて、かかる薬剤はプロフィブリン形成性（profibrogenic）アンギオテンシンＩＩのレベルを抑制することによりＬＶ肥大の進展およびそれに付随する心線維症の亢進を阻害し得る。
【００１０】
さらにレニン阻害剤と（ｉ）ＡＣＥ阻害剤または（ｉｉ）アンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬との組み合わせにより各々の単剤療法の構成成分単独を超える相加的または相乗的な治療効果が付与されることが本発明により示された。
【発明の開示】
【００１１】
したがって、本発明はさらに温血動物にレニン阻害剤または、その薬学的に許容される塩と
（ｉ）ＡＣＥ阻害剤もしくはその薬学的に許容される塩；または
（ｉｉ）アンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬もしくはその薬学的に許容される塩
との治療上有効量の組み合わせを投与することを含む、拡張機能障害または拡張期心不全の予防、顕性になるまでの進行の遅延、または処置のための方法に関する。
【００１２】
本発明のその他の目的、特徴、利点および態様は以下の記載および添付の請求の範囲から当業者には明らかになろう。しかしながら、以下の記載、添付の請求の範囲および具体的な実施例は本発明の好ましい実施態様を示すものであるが、説明のためだけに提供されるものであると理解されるべきである。開示した本発明の精神および範囲内での種々の変更および修飾は下記を読むことにより当業者には容易に明らかになろう。略語は一般的に当分野において公知のものである。
【００１３】
本発明の特定の態様を記載するために本明細書にて使用する種々の用語の定義を以下に列挙する。しかしながら、本明細書で用いる定義およびその略語は一般的に当分野において公知のものであり、そして具体例で特記しない場合は本明細書全体にわたって用いる用語に適用する。
【００１４】
「予防」なる用語は本明細書で言及する状態の進展を予防するための健常な患者への防止的投与を意味する。さらに、「予防」なる用語は処置すべき状態の前段階にある患者への防止的投与を意味する。
【００１５】
本明細書で用いる「顕性になるまでの進行の遅延」なる用語は、処置すべき対応する状態の前段階にある患者への投与を意味し、ここで、患者はその状態の前形態と診断されている。
【００１６】
「処置」なる用語は疾患、状態または障害に対抗する目的での患者の管理および介護と理解される。
【００１７】
「治療上有効量」なる用語は研究者または臨床医により求められている組織、系または動物（ヒトを含む）の望ましい生物学的または医学的応答を引き出す薬物または治療薬の量を意味する。
【００１８】
本明細書で用いる「相乗的」なる用語は、本発明の方法、組み合わせおよび医薬組成物で得られる効果が、本発明の活性成分を別々に含む個々の方法および組成物の結果である効果の合計よりも大きいことを意味する。
【００１９】
「温血動物または患者」なる用語は本明細書では互換的に用いられ、限定するものではないがヒト、イヌ、ネコ、ウマ、ブタ、ウシ、サル、ウサギ、マウスおよび実験動物を含む。好ましい哺乳動物はヒトである。
【００２０】
「薬学的に許容される塩」なる用語は医薬産業において一般的に用いられる無毒性の、当分野において周知の方法に従って調製され得る塩を意味する。
【００２１】
レニン阻害剤、とりわけアリスキレンおよびＡＣＥ阻害剤もしくはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、または各々の場合のその薬学的に許容される塩の「組み合わせ」なる用語は、構成成分を医薬組成物としてまたは同一の単位投与形態の一部として一緒に投与できることを意味する。組み合わせはまたレニン阻害剤、とりわけアリスキレンもしくはその薬学的に許容される塩、およびＡＣＥ阻害剤もしくはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、または各々の場合のその薬学的に許容される塩を各々別々であるが、同一の治療計画の一部として投与することを含む。構成成分は別々に投与されるとき、本質的に同時に投与される必要はないが、それが望ましいときはそのようにできる。したがって、組み合わせはまた例えばレニン阻害剤、とりわけアリスキレンもしくはその薬学的に許容される塩、およびＡＣＥ阻害剤もしくはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、または各々の場合のその薬学的に許容される塩を別々の投与量または投与形態としてであるが、同時に投与することを意味する。組み合わせはまた異なる時間で、および任意の順序での別々の投与もまた含む。
【００２２】
本発明が適用されるレニン阻害剤はインビボでレニン阻害活性を有する、したがって例えば拡張機能障害または拡張期心不全の予防、顕性になるまでの進行の遅延、または処置のための治療薬として医薬的有用性を有するいずれかのものである。とりわけ本発明は米国特許第５５５９１１１号；第６１９７９５９号；および第６３７６６７２号に開示されるレニン阻害剤に関し、その全内容は出典明示により本明細書の一部とする。
【００２３】
レニン阻害剤には様々な構造上の特徴を有する化合物が含まれる。例えばジテキレン（化学名：［１Ｓ−［１Ｒ＊,２Ｒ＊,４Ｒ＊（１Ｒ＊,２Ｒ＊）］］−１−［（１,１−ジメチルエトキシ）カルボニル］−Ｌ−プロリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−５−メチル−１−（２−メチルプロピル）−４−［［［２−メチル−１−［［（２−ピリジニルメチル）アミノ］カルボニル］ブチル］アミノ］カルボニル］ヘキシル］−Ｎ−アルファ−メチル−Ｌ−ヒスチジンアミド）；テルラキレン（化学名：［Ｒ−（Ｒ＊,Ｓ＊）］−Ｎ−（４−モルホニリルカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニル−Ｎ−［１−（シクロヘキシルメチル）−２−ヒドロキシ−３−（１−メチルエトキシ）−３−オキソプロピル］−Ｓ−メチル−Ｌ−システインアミド）；およびザンキレン（化学名：［１Ｓ−［１Ｒ＊［Ｒ＊（Ｒ＊）］,２Ｓ＊,３Ｒ＊］］−Ｎ−［１−（シクロヘキシルメチル）−２,３−ジヒドロキシ−５−メチルヘキシル］−アルファ−［［２−［［（４−メチル−１−ピペラジニル）スルホニル］メチル］−１−オキソ−３−フェニルプロピル］−アミノ］−４−チアゾールプロパンアミド）、好ましくは各々の場合のその塩酸塩からなる群から選択される化合物に言及することができる。
【００２４】
本発明の好ましいレニン阻害剤には各々式（Ｉ）および（ＩＩ）：
【化１】
2008515903.tif 000002
および
【化２】
2008515903.tif 000003
のＲＯ６６−１１３２およびＲＯ６６−１１６８または各々の場合のその薬学的に許容される塩が含まれる。
【００２５】
とりわけ本発明は式：
【化３】
2008515903.tif 000004
（式中、
Ｒ１はハロゲン、Ｃ１−６ハロゲンアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルオキシまたはＣ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルであり；Ｒ２はハロゲン、Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシであり；Ｒ３およびＲ４は独立して分岐したＣ３−６アルキルであり；そしてＲ５はシクロアルキル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルオキシ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アミノアルキル、Ｃ１−６アルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ジアルキルアミノ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイルアミノ−Ｃ１−６アルキル、ＨＯ（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−Ｏ−（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキル、Ｈ２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルまたは（Ｃ１−６アルキル）２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルである）またはその薬学的に許容される塩のδ−アミノ−γ−ヒドロキシ−ω−アリール−アルカン酸アミド誘導体であるレニン阻害剤に関する。
【００２６】
アルキルとしては、Ｒ１は直鎖状または分岐していてよく、そして好ましくは１から６個のＣ原子、特に１または４個のＣ原子を含んでよい。例はメチル、エチル、ｎ−およびｉ−プロピル、ｎ−、ｉ−およびｔ−ブチル、ペンチルならびにヘキシルである。
【００２７】
ハロゲンアルキルとしては、Ｒ１は直鎖状または分岐していてよく、そして好ましくは１から４個のＣ原子、特に１または２個のＣ原子を含んでよい。例はフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、クロロメチル、ジクロロメチル、トリクロロメチル、２−クロロエチルおよび２,２,２−トリフルオロエチルである。
【００２８】
アルコキシとしては、Ｒ１およびＲ２は直鎖状または分岐していてよく、そして好ましくは１から４個のＣ原子を含んでよい。例はメトキシ、エトキシ、ｎ−およびｉ−プロピルオキシ、ｎ−、ｉ−およびｔ−ブチルオキシ、ペンチルオキシならびにヘキシルオキシである。
【００２９】
アルコキシアルキルとしては、Ｒ１は直鎖状または分岐していてよい。アルコキシ基は好ましくは１から４個、および特に１または２個のＣ原子を含み、そしてアルキル基は好ましくは１から４個のＣ原子を含む。例はメトキシメチル、２−メトキシエチル、３−メトキシプロピル、４−メトキシブチル、５−メトキシペンチル、６−メトキシヘキシル、エトキシメチル、２エトキシエチル、３−エトキシプロピル、４−エトキシブチル、５−エトキシペンチル、６−エトキシヘキシル、プロピルオキシメチル、ブチルオキシメチル、２−プロピルオキシエチルおよび２−ブチルオキシエチルである。
【００３０】
Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルオキシとしては、Ｒ１は直鎖状または分岐していてよい。アルコキシ基は好ましくは１から４個、および特に１または２個のＣ原子を含み、そしてアルキルオキシ基は好ましくは１から４個のＣ原子を含む。例はメトキシメチルオキシ、２−メエトキシエチルオキシ、３−メトキシプロピルオキシ、４−メトキシブチルオキシ、５−メトキシペンチルオキシ、６−メトキシヘキシルオキシ、エトキシメチルオキシ、２−エトキシエチルオキシ、３−エトキシプロピルオキシ、４−エトキシブチルオキシ、５−エトキシペンチルオキシ、６−エトキシヘキシルオキシ、プロピルオキシメチルオキシ、ブチルオキシメチルオキシ、２−プロピルオキシエチルオキシおよび２−ブチルオキシエチルオキシである。
【００３１】
好ましい実施態様では、Ｒ１はメトキシ−またはエトキシ−Ｃ１−４アルキルオキシであり、そしてＲ２は好ましくはメトキシまたはエトキシである。特に好ましいのは式（ＩＩＩ）（式中、Ｒ１は３−メトキシプロピルオキシであり、そしてＲ２はメトキシである）の化合物である。
【００３２】
分岐アルキルとしては、Ｒ３およびＲ４は好ましくは３から６個のＣ原子を含む。例はｉ−プロピル、ｉ−およびｔ−ブチル、ならびにペンチルおよびヘキシルの分岐異性体である。好ましい実施態様では、式（ＩＩＩ）の化合物のＲ３およびＲ４は各々の場合でｉ−プロピルである。
【００３３】
シクロアルキルとしては、Ｒ５は好ましくは３から８個の環炭素原子を含んでよく、３または５個が特に好ましい。いくつかの例はシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロオクチルである。シクロアルキルは場合によっては、アルキル、ハロ、オキソ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、チオール、アルキルチオ、ニトロ、シアノ、ヘテロシクリル等のような１つまたはそれより多い置換基により置換されていてよい。
【００３４】
アルキルとしては、Ｒ５はアルキルの形態で直鎖状または分岐していてよく、そして好ましくは１から６個のＣ原子を含んでよい。アルキルの例は前記で列挙した。メチル、エチル、ｎ−およびｉ−プロピル、ｎ−、ｉ−およびｔ−ブチルが好ましい。
【００３５】
Ｃ１−６ヒドロキシアルキルとしては、Ｒ５は直鎖状または分岐していてよく、そして好ましくは２から６個のＣ原子を含んでよい。いくつかの例は２−ヒドロキシエチル、２−ヒドロキシプロピル、３−ヒドロキシプロピル、２−、３−または４−ヒドロキシブチル、ヒドロキシペンチルおよびヒドロキシヘキシルである。
【００３６】
Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ１−６アルキルとしては、Ｒ５は直鎖状または分岐していてよい。アルコキシ基は好ましくは１から４個のＣ原子を、そしてアルキル基は好ましくは２から４個のＣ原子を含む。いくつかの例は２−メトキシエチル、２−メトキシプロピル、３−メトキシプロピル、２−、３−または４−メトキシブチル、２−エトキシエチル、２−エトキシプロピル、３−エトキシプロピルおよび２−、３−または４−エトキシブチルである。
【００３７】
Ｃ１−６アルカノイルオキシ−Ｃ１−６アルキルとしては、Ｒ５は直鎖状または分岐していてよい。アルカノイルオキシ基は好ましくは１から４個のＣ原子を、そしてアルキル基は好ましくは２から４個のＣ原子を含む。いくつかの例はホルミルオキシメチル、ホルミルオキシエチル、アセチルオキシエチル、プロピオニルオキシエチルおよびブチロイルオキシエチルである。
【００３８】
Ｃ１−６アミノアルキルとしては、Ｒ５は直鎖状または分岐していてよく、そして好ましくは２から４個のＣ原子を含んでよい。いくつかの例は２−アミノエチル、２−または３−アミノプロピルおよび２−、３−または４−アミノブチルである。
【００３９】
Ｃ１−６アルキルアミノ−Ｃ１−６アルキルおよびＣ１−６ジアルキルアミノ−Ｃ１−６アルキルとしては、Ｒ５は直鎖状または分岐していてよい。アルキルアミノ基は好ましくはＣ１−４アルキル基を含み、そしてアルキル基は好ましくは２から４個のＣ原子を有する。いくつかの例は２−メチルアミノエチル、２−ジメチルアミノエチル、２−エチルアミノエチル、２−エチルアミノエチル、３−メチルアミノプロピル、３−ジメチルアミノプロピル、４−メチルアミノブチルおよび４−ジチルアミノブチルである。
【００４０】
ＨＯ（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキルとしては、Ｒ５は直鎖状または分岐していてよく、そしてアルキル基は好ましくは２から４個のＣ原子を含む。いくつかの例はカルボキシメチル、カルボキシエチル、カルボキシプロピルおよびカルボキシブチルである。
【００４１】
Ｃ１−６アルキル−Ｏ−（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−６アルキルとしては、Ｒ５は直鎖状または分岐していてよく、そしてアルキル基は好ましくは互いに独立して１から４個のＣ原子を含む。いくつかの例はメトキシカルボニルメチル、２−メトキシカルボニルエチル、３−メトキシカルボニルプロピル、４−メトキシ−カルボニルブチル、エトキシカルボニルメチル、２−エトキシカルボニルエチル、３−エトキシカルボニルプロピルおよび４−エトキシカルボニルブチルである。
【００４２】
Ｈ２Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルとしては、Ｒ５は直鎖状または分岐していてよく、そしてアルキル基は好ましくは２から６個のＣ原子を含む。いくつかの例はカルバミドメチル、２−カルバミドエチル、２−カルバミド−２,２−ジメチルエチル、２−または３−カルバミドプロピル、２−、３−または４−カルバミドブチル、３−カルバミド−２−メチルプロピル、３−カルバミド−１,２−ジメチルプロピル、３−カルバミド−３−エチルプロピル、３−カルバミド−２,２−ジメチルプロピル、２−、３−、４−または５−カルバミドペンチル、４−カルバミド−３,３−または−２,２−ジメチルブチルである。
【００４３】
したがって、好ましいのは式：
【化４】
2008515903.tif 000005
（式中、Ｒ１は３−メトキシプロピルオキシであり；Ｒ２はメトキシであり；そしてＲ３およびＲ４はイソプロピルである）を有する式（ＩＩＩ）のδ−アミノ−γ−ヒドロキシ−ω−アリール−アルカン酸アミド誘導体またはその薬学的に許容される塩であり；化学的に２（Ｓ）,４（Ｓ）,５（Ｓ）,７（Ｓ）−Ｎ−（３−アミノ−２,２−ジメチル−３−オキソプロピル）−２,７−ジ（１−メチルエチル）−４−ヒドロキシ−５−アミノ−８−［４−メトキシ−３−（３−メトキシ−プロポキシ）フェニル］−オクタンアミドとして定義され、アリスキレンとしても公知である。
【００４４】
「アリスキレン」なる用語は、具体的に定義されない場合、遊離塩基として、およびその塩としての双方で、特にその薬学的に許容される塩、最も好ましくはそのヘミフマル酸塩として理解される。
【００４５】
アンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬はアンギオテンシンＩＩ受容体のＡＴ１受容体サブタイプに結合するが、結果的に受容体の活性化には至らないこれらの活性薬剤であると理解される。
【００４６】
ＡＴ１受容体の遮断の結果として、これらのアンタゴニストを例えば抗高血圧剤として用いることができる。
【００４７】
本発明の組み合わせで用いることができる適当なアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬には異なる構造上の特徴を有するＡＴ１受容体アンタゴニストが含まれ、好ましいのは非ペプチド構造を有するものである。例えばバルサルタン（欧州特許第４４３９８３号）、ロサルタン（欧州特許第２５３３１０号）、カンデサルタン（欧州特許第４５９１３６号）、エプロサルタン（欧州特許第４０３１５９号）、イルベサルタン（欧州特許第４５４５１１号）、オルメサルタン（欧州特許第５０３７８５号）、タソサルタン（欧州特許第５３９０８６号）、テルミサルタン（欧州特許第５２２３１４号）、式：
【化５】
2008515903.tif 000006
のＥ−４１７７と称される化合物、以下の式：
【化６】
2008515903.tif 000007
のＳＣ−５２４５８と称される化合物、および式：
【化７】
2008515903.tif 000008
の化合物ＺＤ−８７３１と称される化合物、または各々の場合のその薬学的に許容される塩；からなる群から選択される化合物に言及することができる。
【００４８】
好ましいＡＴ１受容体アンタゴニストは上市されているこれらの薬剤であり、最も好ましいのはバルサルタンまたはその薬学的に許容される塩である。
【００４９】
ＡＣＥ阻害剤でのアンギオテンシンＩのアンギオテンシンＩＩへの酵素分解の妨害は血圧調節のための一種の成功例であり、そしてしたがって高血圧の処置のための利用可能な治療方法になる。
【００５０】
本発明の組み合わせで用いられる適当なＡＣＥ阻害剤は例えばアラセプリル、ベナゼプリル、ベナゼプリラート、カプトプリル、セロナプリル、シラザプリル、デラプリル、エナラプリル、エナプリラート、フォシノプリル、イミダプリル、リシノプリル、モベルトプリル、ペリンドプリル、キナプリル、ラミプリル、スピラプリル、テモカプリルおよびトランドラプリル、または各々の場合のその薬学的に許容される塩からなる群から選択される化合物である。
【００５１】
好ましいＡＣＥ阻害剤は市販されているこれらの薬剤であり、最も好ましいのはベナゼプリルおよびエナラプリルである。
【００５２】
好ましくは本発明の組み合わせはレニン阻害剤、例えばアリスキレン、特にそのヘミフマル酸塩の形態、およびＡＣＥ阻害剤、例えばベナゼプリルもしくはエナラプリルまたはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、例えばバルサルタン、または各々の場合のその薬学的に許容される塩を含む。
【００５３】
最も好ましいのはアリスキレン、特にそのヘミフマル酸塩の形態およびバルサルタン、またはその薬学的に許容される塩を含む本発明の組み合わせである。
【００５４】
本明細書前記で言及したような、組み合わせられた化合物はその薬学的に許容される塩として存在し得る。これらの化合物が例えばアミノ基のような少なくとも１つの塩基性中心を有するとき、それらはその酸付加塩を形成することができる。同様に、少なくとも１つの酸基（例えばＣＯＯＨ）を有する化合物は塩基と塩を形成することができる。
【００５５】
化合物が例えばカルボキシおよびアミノ基の双方を含むとき、対応する分子内塩がさらに形成され得る。
【００５６】
対応する活性成分または薬学的に許容される塩はまた水和物のようなまたは例えばその結晶化において用いられたその他の溶媒を含む溶媒和物の形態で用いてよい。
【００５７】
さらに本発明はレニン阻害剤またはその薬学的に許容される塩、好ましくはそのヘミフマル酸塩の形態のアリスキレン、および薬学的に許容される担体を含む、拡張機能障害または拡張期心不全の予防、顕性になるまでの進行の遅延、または処置のための医薬組成物を提供する。
【００５８】
別の態様では、本発明はさらに、
（ｉ）ＡＣＥ阻害剤、好ましくはベナゼプリルもしくはエナラプリル、または各々の場合のその薬学的に許容される塩；または
（ｉｉ）アンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、好ましくはバルサルタン、もしくはその薬学的に許容される塩；
と組み合わせたレニン阻害剤、またはその薬学的に許容される塩、好ましくはそのヘミフマル酸塩の形態のアリスキレン、および薬学的に許容される担体を含む拡張機能障害または拡張期心不全の予防、顕性になるまでの進行の遅延、または処置のための医薬組成物を提供する。
【００５９】
本明細書前記に開示したとおり、レニン阻害剤、とりわけアリスキレン、好ましくはそのヘミフマル酸塩の形態を単独で、またはＡＣＥ阻害剤、例えばベナゼプリルもしくはエナラプリル、またはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、例えばバルサルタン、または各々の場合のその薬学的に許容される塩と組み合わせて医薬組成物として同時投与することができる。構成成分を任意の従来の投与形態で、通常はまた薬学的に許容される担体または希釈剤と一緒に投与することができる。
【００６０】
本発明の医薬組成物はヒトを含む哺乳動物への経口または経直腸のような経腸的、経皮的および非経腸的投与に適したものである。経口投与用にはレニン阻害剤、とりわけアリスキレン、好ましくはそのヘミフマル酸塩の形態を単独で、またはＡＣＥ阻害剤、例えばベナゼプリルもしくはエナラプリル、またはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、例えばバルサルタン、または各々の場合のその薬学的に許容される塩と組み合わせて含む医薬組成物は溶液、懸濁液、錠剤、丸剤、カプセル、粉末、マイクロエマルジョン、単位用量の薬包等の形態を取ることができる。ａ）希釈剤、例えばラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロースおよび／もしくはグリシン；ｂ）滑沢剤、例えばシリカ、タルク、ステアリン酸、そのマグネシウムもしくはカルシウム塩および／またはポリエチレングリコール；錠剤用にはまたｃ）結合剤、例えばケイ酸マグネシウムアルミニウム、デンプンペースト、ゼラチン、トラガント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムおよび／もしくはポリビニルピロリドン；所望によりｄ）崩壊剤、例えばデンプン、寒天、アルギン酸もしくはそのナトリウム塩、または発泡混合物；ならびに／またはｅ）吸収剤、着色剤、着香剤および甘味剤と一緒に活性成分を含む錠剤およびゼラチンカプセルが好ましい。注射用組成物は好ましくは水性等張溶液または懸濁液であり、そして坐剤は脂肪エマルジョンまたは懸濁液から調製されるのが有利である。
【００６１】
該組成物は滅菌されていてよく、そして／または保存剤、安定剤、湿潤剤もしくは乳化剤、溶解促進剤、浸透圧調節のための塩および／またはバッファーのような佐剤を含有できる。加えてそれらはまたその他の治療上価値のある物質を含有することもできる。該組成物を各々従来の混合、造粒またはコーティング方法に従って調製し、そして約０.１−９０％、好ましくは約１−８０％の活性成分を含有する。
【００６２】
活性成分の投与量は投与様式、恒温動物種、年齢および／または個々の状態のような種々の因子に依存し得る。
【００６３】
本発明の医薬用の組み合わせの活性成分のための好ましい投与量は治療上有効な投与量、特に市販により利用可能なものである。
【００６４】
通常経口投与の場合、例えばおよそ７５ｋｇの体重の患者で、約１ｍｇから約３６０ｍｇのおよその１日用量が概算される。
【００６５】
例えば体重およそ７５ｋｇのヒトを含む温血動物に投与されるアリスキレンの用量は、特にレニン活性の阻害に、例えば血圧低下に有効な用量は約３ｍｇから約３ｇ、好ましくは約１０ｍｇから約１ｇ、例えば２０から２００ｍｇ／ヒト／日であり、好ましくは、例えば同一の大きさでよい単回用量の１から４回に分割される。通常子供には成体用量の約半分が投与される。各個体に必要な用量を例えば活性成分の血清濃度を測定することによりモニタリングすることができ、そして最適レベルに調整することができる。単回用量は例えば成体患者あたり７５ｍｇ、１５０ｍｇまたは３００ｍｇを含む。
【００６６】
ＡＣＥ阻害剤の場合、ＡＣＥ阻害剤の好ましい投与量単位は、例えばベナゼプリル約５ｍｇから約２０ｍｇ、好ましくは５ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇもしくは４０ｍｇ；カプトプリル約６.５ｍｇから１００ｍｇ、好ましくは６.２５ｍｇ、１２.５ｍｇ、２５ｍｇ、５０ｍｇ、７５ｍｇもしくは１００ｍｇ；エナラプリル約２.５ｍｇから約２０ｍｇ、好ましくは２.５ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇもしくは２０ｍｇ；フォシノプリル約１０ｍｇから約２０ｍｇ、好ましくは１０ｍｇもしくは２０ｍｇ；ペリンドプリル約２.５ｍｇから約４ｍｇ、好ましくは２ｍｇもしくは４ｍｇ；キナプリル約５ｍｇから約２０ｍｇ、好ましくは５ｍｇ、１０ｍｇもしくは２０ｍｇ；またはラミプリル約１.２５ｍｇから５ｍｇ、好ましくは１.２５ｍｇ、２.５ｍｇ、もしくは５ｍｇを含む錠剤またはカプセルである。好ましいのは１日３回投与である。
【００６７】
アンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、例えばバルサルタンは適当な投与量単位形態、例えばカプセルまたは錠剤の形態で供給され、そして治療上有効量のアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、例えばバルサルタン約２０から約３２０ｍｇを含み、それを患者に適用することができる。活性成分の適用を１日３回まで、例えばアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、例えばバルサルタンの１日用量２０ｍｇまたは４０ｍｇで出発して、１日８０ｍｇを経て、そしてさらには１日１６０ｍｇまで、そして最終的には１日３２０ｍｇまで増量して行うことができる。好ましくはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、例えばバルサルタンを１日１回または１日２回、各々８０ｍｇまたは１６０ｍｇの用量で適用する。対応する用量を例えば朝、昼または夕方に取ることができる。
【００６８】
前記の用量は本発明の活性成分の治療上有効量を包含する。
【００６９】
本発明は別々に投与することができる化合物の組み合わせでの予防、顕性になるまでの進行の遅延、または処置のための方法に関し、本発明はまたキットの形態での別々の医薬組成物を組み合わせることにも関する。キットは例えば別々の２つの医薬組成物：（１）レニン阻害剤、とりわけアリスキレンまたはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む組成物；ならびに（２）ＡＣＥ阻害剤、例えばベナゼプリルもしくはエナラプリル、またはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、例えばバルサルタン、または各々の場合のその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む組成物を含み得る。（１）および（２）の量は、別々に同時投与したときに有益な治療効果が得られるような量である。キットは分かれたビンまたは分かれたホイルのような別々の組成物を含有する容器を含み、ここで各区画は例えば（１）または（２）を含む複数の投与形態（例えば錠剤）を含有する。これに代えて、活性成分を含有する投与形態を別々にするよりもむしろ、キットは別々の区画を含有でき、その各々が今度は別々の投与形態を含む全投与量を含有する。この型のキットの例はブリスターパックであり、ここで各個々のブリスターは２つ（またはそれより多い）錠剤、医薬組成物（１）を含む第１の（またはそれより多い）錠剤、および医薬組成物（２）を含む第２の（またはそれより多い）錠剤を含有する。典型的にはキットは別々の構成成分の投与のための指示書を含む。別々の構成成分が様々な投与形態（例えば経口および非経口）で投与されるのが好ましく、様々な投与間隔で投与されるか、または組み合わせの個々の構成成分のタイトレーションが処方医により望まれるとき、キット形態は特に有利である。したがって本発明の場合、キットは：
（１）第１の投与形態でレニン阻害剤、とりわけアリスキレン、好ましくはそのヘミフマル酸塩の形態、および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む治療上有効量の組成物；
（２）第２の投与形態で、投与後に有益な治療効果が得られるような量のＡＣＥ阻害剤、例えばベナゼプリルもしくはエナラプリル、またはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、例えばバルサルタン、または各々の場合のその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む組成物；ならびに
（３）該第１および第２投与形態を含有するための容器；
を含む。
【００７０】
レニン阻害剤、例えばアリスキレンの作用を、とりわけインビトロ試験により実験的に実証することができ、種々の系で（ヒト血漿、精製ヒトレニンを合成または天然レニン基質と一緒に）アンギオテンシンＩの形成の低下を測定する。
【００７１】
レニンはその基質に対して種特異性を示すので、ヒトレニン阻害剤は従来のインビボ動物モデルにおいて効率よく試験することができない。この問題を回避するために、ヒトレニンまたはヒトアンギオテンシノーゲン遺伝子のいずれかを抱く遺伝子導入ラットが開発されている。ヒトレニンはラットアンギオテンシノーゲンを効率よく切断せず、そして同様にラットレニンはヒトアンギオテンシノーゲンをあまり切断しない。結果的に単一遺伝子導入ラット（すなわちヒトアンギオテンシノーゲンまたはレニンのいずれかのための遺伝子導入）が正常血圧である。しかしながら、異種交配させたとき、二重遺伝子導入（ｄＴＧＲ）の子孫は例えば高血圧および拡張機能障害を進展させ、そして７または８週齢を超えて生存しない。
【００７２】
レニン阻害剤、例えばアリスキレンまたはその薬学的に許容される塩を単独でまたはＡＣＥ阻害剤、例えばベナゼプリルもしくはエナラプリル、またはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、例えばバルサルタン、または各々の場合のその薬学的に許容される塩と組み合わせて、種々の投与経路で投与することができる。各薬剤を広範な投与量にわたって試験して、各治療薬単独またはその具体的な組み合わせのための最適薬物レベルを決定して最大応答を引き出すことができる。これらの研究のために、群あたり少なくとも６匹の動物からなる処置群を用いることが好ましい。各研究は、組み合わせ処置群の効果が、個々の構成成分が評価されるのと同時に決定される方式で行われるのが最も良い。薬物効果は急性投与で観察され得るが、慢性の設定での応答を観察するのが好ましい。長期間研究は生ずる代償応答を完全に進展させるのに十分な期間であり、したがって観察された効果は、継続または持続効果を示す試験系の実際の応答を表す可能性が最も高い。
【００７３】
したがって、レニン阻害剤、またはその薬学的に許容される塩を単独でまたはＡＣＥ阻害剤もしくはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、または各々の場合のその薬学的に許容される塩との組み合わせで、ヒトレニンおよびヒトアンギオテンシノーゲン（ｄＴＧＲ）を発現する二重遺伝子導入ラットの拡張機能障害または拡張期心不全に及ぼすその阻害効果に関して試験することができる。例えば拡張機能障害を進展させる前（予防計画）または拡張機能障害を進展させた後（処置計画）に動物をアリスキレン（１ｍｇ／ｋｇ／日−３０ｍｇ／ｋｇ／日）で処置することができる。心機能の測定をインビボでラット心臓の組織ドップラー撮像により行うことができる。
【００７４】
同様にレニン阻害剤、またはその薬学的に許容される塩を単独でまたはＡＣＥ阻害剤もしくはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、または各々の場合のその薬学的に許容される塩との組み合わせで、マウスｒｅｎ−２（レニン）遺伝子を発現するＲｅｎ−２遺伝子導入ラットの拡張機能障害または拡張期心不全に及ぼすその阻害効果に関して試験することができる。これらのラットをストレプトゾトシンで注射することのより糖尿病にすることができ、そして冠動脈を結紮（糸で縛る）して心筋梗塞を誘起することにより拡張機能障害を誘起することができる。その後から１か月までにわたって心線維症および拡張機能障害が進展する。例えば拡張機能障害を進展させる前（予防計画）または拡張機能障害を進展させた後（処置計画）に動物をアリスキレン（１ｍｇ／ｋｇ／日−６０ｍｇ／ｋｇ／日）で処置することができる。心機能の測定をインビボでラット心臓の組織ドップラー撮像により行うことができる。
【００７５】
例としては、４週齢、雄ｄＴＧＲに高血圧を進展させ、そして５.５週齢で代謝ケージに入れる。収縮期血圧（テールカフ）および２４時間アルブミン排泄（ＥＬＩＳＡ、CellTrend, Germany）を Muller et al. Am J Pathol. １６１：１６７９−９３（２００２）および Muller et al. Am J Pathol.１６４：５２１−３２（２００４）により先に記載されたように測定する。ｄＴＧＲは２４時間アルブミン排泄に関して６週目で一致させ、そして各１９匹のラット５群に分配される。ラットが６週齢のときに処置を開始する。ラットにベヒクル処置、アリスキレン０.３ｍｇ／ｋｇ／日および３ｍｇ／ｋｇ／日（皮下ミニポンプによる）、バルサルタン１ｍｇ／ｋｇ／日、およびバルサルタン１０ｍｇ／ｋｇ／日（食餌中で与える）を投与する。死亡率を低下させ、しかも血圧および器官損傷への影響は最低限にする閾値処置として低用量のバルサルタンを選択する。ベヒクル処置動物が８週齢を超えて生存しないことは先の研究から解っており、そしてしたがって、この低用量バルサルタン群が９週で対照群として提供される。心エコー検査（短軸のＭモードトレーシングおよび組織ドップラー撮像；７および９週で群あたりｎ＝５−６）をイソフルラン麻酔下で１５ＭＨｚフェーズドアレイトランスデューサーを用いて実施した（Mazak et al. Circulation. １０９：２７９２−８００（２００４））。心臓ごとのこれらの測定値を決定し、平均化し、そして統計分析する。ＬＶ短軸でＭモードを実施し、そしてリーディングエッジ法に従って測定する。全壁厚を中隔＋左心室後壁の合計として計算する。
【００７６】
組織ドップラーは基底中隔での心臓の縦の動きの速度を測定して、拡張期充満の評価が可能になる。組織ドップラー測定は四腔像の基底中隔の試料容量で実施する。速度範囲、増幅率およびフィルター設定を最適化して低速度を検出し、そしてパルス波ドップラースペクトルを２００ｍｍ／秒で表示する。測定値はピーク初期（Ｅａ）および後期（Ａａ）拡張拡大速度の速度を示す。Ｅａ／Ａａ比は拡張機能の指標として報告される。
【００７７】
ラットを９週齢で屠殺する。腎臓および心臓を取り出し、そして氷冷食塩水で洗浄し、吸い取り乾燥し、そして重量測定する。組織調製および免疫組織学的技術をMuller et al. Am J Pathol.１６１：１６７９−９３（２００２）で以前に記載されたように実施する。切片をラット単球／マクロファージ（ＥＤ−１、Serotec, Germany）、ＭＨＣ  ＩＩ＋、ＣＤ４＋およびＣＤ８６＋細胞（全てBD Pharmingen, Germany）に対する一次抗体と共にインキュベートする。ＫＳ３００  ３.０（Zeiss, Germany）プログラムを用いて浸潤した細胞の採点を実施する。各腎臓の１５の異なる部分（全群でｎ＝５）を分析する。各動物の平均スコアを計算し、そして群平均スコアを導くために用いる。具体的な処置の知識なしに分析を行う。
【００７８】
TRIZOL（Gibco Life Technology）を用いてＲＴ−ＰＣＲのためのＬＶ  ｍＲＮＡを単離する。α−ミオシン重鎖（α−ＭＨＣ）およびβ−ＭＨＣならびに心房性ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）のためのＲＴ−ＰＣＲを０.３または０.９モル／ｌプライマーを含有する SybrGreen ＰＣＲ Master Mix（Applied Biosystems, Germany）２５μｌおよび５７００ Sequence Detection System（Applied Biosystems）中逆転写反応物１μｌ中で実施する。熱循環条件は９５℃で１０分の初期変性工程、続く９５℃で１５秒間および６５℃で１分間の４０サイクルを含む。ハウスキーピング遺伝子（要求に応じて利用可能なプライマー配列）としてヒポキサンチンホスホリボシルトランスフェラーゼ遺伝子にｍＲＮＡ発現を標準化する。
【００７９】
屠殺時に、心臓肥大指標スコアはバルサルタン１０ｍｇ／ｋｇ／日、アリスキレン０.３ｍｇ／ｋｇ／日およびアリスキレン３ｍｇ／ｋｇ／日群（ｐ＜０.０５）で低下する。しかしながら、心臓肥大指標はバルサルタン１０ｍｇ／ｋｇ／日処置したｄＴＧＲに比較してアリスキレン３ｍｇ／ｋｇ／日処置したもので有意に低い。心エコー検査によりバルサルタン１ｍｇ／ｋｇ／日の動物が求心性肥大を有することが示される。壁厚は約３.４ｍｍで左心室拡張末期径は正常であることが見出される。アリスキレン（３ｍｇ／ｋｇ／日）またはバルサルタン１０ｍｇ／ｋｇ／日での処置は壁厚を各々約２.２ｍｍおよび約２.７ｍｍまで低下させる。組織ドップラー測定により、バルサルタン１ｍｇ／ｋｇ／日群でＥａ／Ａａ比約０.６８が示されるが、バルサルタン１０ｍｇ／ｋｇ／日によりＥａ／Ａａの商が約１.０まで改善される。高および低双方のアリスキレン用量によりＥａ／Ａａ値が各々約１.４および約１.５まで増加し、これは拡張期充満が改善されたことを実証している。未処置ｄＴＧＲは７週で死亡直前にすでにＬＶ厚みの増加（約３.５ｍｍ）を示し、そしてＡａに対するＥａの比率が約０.４８であり、これは拡張機能障害を示している。
【００８０】
ＲＴ−ＰＣＲを用いてα−ＭＨＣ  ｍＲＮＡおよびβ−ＭＨＣ発現を左心室で試験する。バルサルタン１０ｍｇ／ｋｇ／日および双方のアリスキレン処置によりα−ＭＨＣ発現から胎児β−ＭＨＣアイソフォームへのシフトが阻害される。この点でアリスキレン３ｍｇ／ｋｇ／日が最も有効である（ｐ＜０.０５）。バルサルタン１ｍｇ／ｋｇ／日処置ｄＴＧＲに比較して、ＬＶ  ＡＮＰ  ｍＲＮＡ発現は双方のアリスキレン処置により低下する。バルサルタン１０ｍｇ／ｋｇ／日はこの遺伝子の発現を低下させるが、有意な程度ではない。
【００８１】
データによりバルサルタン１ｍｇ／ｋｇ／日の動物が顕著な拡張機能障害（拡張期心不全）を伴う重篤な左心室肥大を有することが示される。ＬＶ肥大はバルサルタン１０ｍｇ／ｋｇ／日および双方のアリスキレン用量で顕著に良くなる。しかしながら、心臓肥大の退行にもかかわらず、高用量バルサルタンを投与されたｄＴＧＲでは拡張機能障害が依然存在する。双方のアリスキレン用量は拡張機能障害を顕著に改善し、アリスキレン３ｍｇ／ｋｇ／日により壁厚の値が結果的に最も低くなり、そして拡張期充満が最も良くなる。加えて、左心室αおよびβ−ＭＨＣアイソフォームならびに心房性ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）の遺伝子発現に及ぼすアリスキレンの影響はレニン阻害剤で観察される心臓保護効果と合致する。結果により、心筋に及ぼすレニン阻害剤の分子効果が実証される。
【００８２】
図１：９週齢ｄＴＧＲのＬＶ中隔および後壁のＭモード心エコー検査を示す。パネルＡは重篤な中隔および後壁肥大を伴うバルサルタン（Ｖａｌ）１ｍｇ／ｋｇ／日のラットを示す。Ｖａｌ１０ｍｇ／ｋｇ／日は中隔および後壁肥大を実質的に低下させる。アリスキレン（Alisk）０.３ｍｇ／ｋｇ／日およびAlisk ３ｍｇ／ｋｇ／日はまた左心室肥大を低下させ、そして３ｍｇ／ｋｇ／日用量はＬＶの大きさを正常化する。パネルＢはＬＶ壁厚の定量化を示す。結果は平均±ＳＥＭである（ｎ＝１０−１４；＊ｐ＜０.０５  Ｖａｌ  １ｍｇ／ｋｇ／日対その他の群、＄ Alisk ３ｍｇ／ｋｇ／日対その他の群）。
図２：９週齢ｄＴＧＲの拡張期充満の組織ドップラー評価を示す：同一動物のＥａ波（初期拡張期充満）およびＡａ波（心房収縮）を同時に測定する。Ｖａｌ１ｍｇ／ｋｇ／日によりＥａ波よりも深いＡａが示され、それは重篤な拡張機能障害を示している（Ｅｅ／Ａｅ＝０.６６）。Ｖａｌ１０ｍｇ／ｋｇ／日はさらに同様に深いＥａおよびＡａ波を示し、これは拡張機能障害を示している（Ｅａ／Ａａ１.０）。Alisk ０.３ｍｇ／ｋｇ／日およびAlisk ３ｍｇ／ｋｇ／日はＡａ波より深いＥａを示し、これは適切な拡張期充満を示している（Ｅａ／Ａａ１.５）。
【００８３】
図３：９週齢ｄＴＧＲの心臓肥大のマーカーに及ぼす処置の効果を示す：パネルＡは各処置での、β−ＭＨＣ（パネルＢ）ｍＲＮＡ発現の低下を伴うα−ＭＨＣ  ｍＲＮＡ発現の用量依存的な増加を示す。パネルＣは各処置でのＬＶ  ＡＮＦ  ｍＲＮＡ発現の用量依存的な低下を示す。結果は平均±ＳＥＭである（各々ｎ＝６）。
【００８４】
さらに、レニン阻害剤、例えばアリスキレン、特にそのヘミフマル酸塩の形態、およびＡＣＥ阻害剤、例えばベナゼプリルもしくはエナラプリル、またはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、例えばバルサルタン、または各々の場合のその薬学的に許容される塩の組み合わせにより、レニン阻害剤単独の投与よりもより大きな治療効果が得られることが見出されている。より大きな効果を作用時間の延長によっても実証できる。次の投与の前に基線に戻る時間または曲線下面積（ＡＵＣ）のいずれかとして作用期間をモニタリングすることができる。
【００８５】
さらなる利益は本発明により組み合わされる個々の薬物の低用量を用いて投与量を減らすことができること、例えば投与量が少なくてよいだけでなく、低頻度で適用される、または副作用の発生を低減させるために用いることができるということである。レニン阻害剤、またはその薬学的に許容される塩およびＡＣＥ阻害剤、例えばベナゼプリルもしくはエナラプリル、またはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、例えばバルサルタン、または各々の場合のその薬学的に許容される塩の組み合わせ投与の結果、処置された患者のより大きなパーセンテージで有意な応答、すなわち応答比率がより大きいという結果に至る。
【００８６】
レニン阻害剤、例えばアリスキレン、特にそのヘミフマル酸塩の形態、およびＡＣＥ阻害剤、例えばベナゼプリルもしくはエナラプリル、またはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、例えばバルサルタン、または各々の場合のその薬学的に許容される塩での組み合わせ治療は結果的に拡張機能障害または拡張期心不全の予防、顕性になるまでの進行の遅延、または処置のためのより有効な治療である。とりわけ、一層驚くべきことは、本発明の組み合わせの結果、有益な、特に相乗的な治療効果に至るが、驚くべき有効性の延長のような組み合わせ処置の結果である利益にも至る。
【００８７】
本発明はさらに拡張機能障害または拡張期心不全の予防、顕性になるまでの進行の遅延、または処置のための医薬品の製造のための、レニン阻害剤、例えばアリスキレンの単独で、またはＡＣＥ阻害剤、例えばベナゼプリルもしくはエナラプリル、またはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、例えばバルサルタン、または各々の場合のその薬学的に許容される塩との組み合わせでの使用に関する。
【００８８】
したがって、本発明の別の実施態様は拡張機能障害または拡張期心不全の予防、顕性になるまでの進行の遅延、または処置のための医薬品の製造のための、レニン阻害剤、例えばアリスキレンの単独で、またはＡＣＥ阻害剤、例えばベナゼプリルもしくはエナラプリル、またはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、例えばバルサルタン、または各々の場合のその薬学的に許容される塩との組み合わせでの使用に関する。
【００８９】
前記の記載はその好ましい実施態様を含む本発明を十分に開示する。本明細書に具体的に開示した実施態様の修飾および改善は請求の範囲の範囲内である。さらなる詳述がなくとも、当業者は先行の記載を用いて本発明を最大限に利用できると考えられる。したがって、本明細書の実施例は本発明の特定の態様の単なる説明と解釈され、そして本発明の範囲をいかなるようにも限定するものではない。
【実施例】
【００９０】
実施例１：
アリスキレン１５０ｍｇ（遊離塩基）素錠の組成（ｍｇ／単位）。
【表１】
2008515903.tif 000009
【００９１】
アリスキレン１５０ｍｇ（遊離塩基）素錠の組成（重量％）。
【表２】
2008515903.tif 000010
【００９２】
アリスキレン１５０ｍｇ（遊離塩基）素錠の組成（内相／外相に分割）（ｍｇ／単位）。
【表３】
2008515903.tif 000011
【００９３】
アリスキレン１５０ｍｇ（遊離塩基）素錠の組成（内相／外相に分割）（重量％）。
【表４】
2008515903.tif 000012
【００９４】
実施例２：
アリスキレン（投与形態３）フィルムコーティング錠の組成（ｍｇ／単位）。
【表５】
2008515903.tif 000013
【００９５】
例えば以下のように投与形態１、２および３を調製することができる：
１）活性成分および添加剤を混合し、そして該構成成分を造粒液と共に造粒し；
２）得られた顆粒を乾燥させ；
３）乾燥した顆粒を外相賦形剤と混合し；
４）得られた混合物を圧縮して核錠として固体経口投与量を形成し；そして
５）場合によっては得られた核錠をコーティングしてフィルムコーティング錠が得られる。
【００９６】
造粒液はエタノール、エタノールおよび水の混合物、エタノール、水およびイソプロパノールの混合物、または前記した混合物中のポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）の溶液でよい。好ましいエタノールおよび水の混合物は約５０／５０から約９９／１（重量／重量％）の範囲であり、最も好ましくはそれは約９４／６（重量／重量％）である。好ましいエタノール、水およびイソプロパノールの混合物は約４５／４５／５から約９８／１／１（重量／重量／重量％）、最も好ましくは約８８.５／５.５／６.０から約９１.５／４.５／４.０（重量／重量／重量％）の範囲である。前記の混合物中のＰＶＰの好ましい濃度は約５から約３０重量％、好ましくは約１５から約２５％、さらに好ましくは約１６から約２２％の範囲である。
【００９７】
当分野において用いられる造粒、乾燥および混合の非常に多くの公知の方法、例えば流動床でのスプレー造粒、高剪断ミキサー中での湿式造粒、溶融造粒、流動床乾燥機中での乾燥、フリーフォールまたはタンブラーブレンダー中の混合、単発式またはロータリー式打錠機での錠剤への圧縮に留意する。
【００９８】
顆粒の製造を有機造粒方法に適当な標準的な装置で実施することができる。最終混和および錠剤の圧縮の製造もまた標準的な装置で実施することができる。
【００９９】
例えば工程（１）を高速剪断造粒機、例えばCollette Gralにより実施することができ；工程（２）を流動床乾燥機中で行うことができ；工程（３）をフリーフォールミキサー（例えば容器ブレンダー、タンブラーブレンダー）により実施することができ；そして工程（４）を乾燥圧縮法、例えばロータリー式打錠機を用いて実施することができる。
【０１００】
実施例３（フィルムコーティング錠）：
【表６】
2008515903.tif 000014
＊）加工中に除去された
【０１０１】
フィルムコーティング錠を例えば下記のとおりに製造することができる。
バルサルタン、微結晶性セルロース、クロスポビドン、コロイド性無水シリカ／コロイド性二酸化ケイ素／Aerosile ２００の一部、二酸化ケイ素およびステアリン酸マグネシウムの混合物を拡散ミキサー中で前もって混合し、そして次にスクリーニングミルを通してふるいにかける。得られた混合物を再度拡散ミキサー中で前もって混合し、回転圧縮機中で圧縮し、そして次にスクリーニングミルを通してふるいにかける。得られた混合物に残りのコロイド性無水シリカ／コロイド性二酸化ケイ素／Aerosile ２００を加え、そして拡散ミキサー中で最終混和を行う。全混合物をロータリー打錠機中で圧縮し、そして有孔パン中でDiolackペールレッドを用いることにより錠剤をフィルムでコーティングする。
【０１０２】
実施例４（フィルムコーティング錠）：
【表７】
2008515903.tif 000015
例えば実施例３に記載するとおりにフィルムコーティング錠を製造する。
【０１０３】
実施例５（フィルムコーティング錠）：
【表８】
2008515903.tif 000016
＊）Opadry（登録商標）ブラウンＯＯＦ１６７１１着色剤を以下に表にする。
＊＊）加工中に除去される。
【０１０４】
Opadry（登録商標）組成物：
【表９】
2008515903.tif 000017
例えば実施例３に記載するとおりにフィルムコーティング錠を製造する。
【０１０５】
実施例６（カプセル）：
【表１０】
2008515903.tif 000018
【０１０６】
例えば下記のとおりにカプセルを製造できる：
造粒／乾燥：
流動床造粒機中で精製水に溶解したポビドンおよびラウリル硫酸ナトリウムからなる造粒液を用いてバルサルタンおよび微晶性セルロースをスプレー造粒する。得られた顆粒を流動床乾燥機中で乾燥させる。
【０１０７】
製粉／混和：
乾燥した顆粒をクロスポビドンおよびステアリン酸マグネシウムと一緒に製粉する。次いで塊をコニカルスクリュー型ミキサー中でおよそ１０分間混和する。
【０１０８】
カプセル化：
制御された温度および湿度条件下で空の硬質ゼラチンカプセルを混和したバルク顆粒で充填する。充填されたカプセルを脱塵し、肉眼検査し、重量検査し、そして品質保証部が検疫する。
【０１０９】
実施例７（カプセル）：
【表１１】
2008515903.tif 000019
例えば実施例５に記載するとおりにカプセルを製造する。
【０１１０】
実施例８（硬質ゼラチンカプセル）：
【表１２】
2008515903.tif 000020
【０１１１】
実施例９（硬質ゼラチンカプセル）：
【表１３】
2008515903.tif 000021
【０１１２】
構成成分（１）および（２）を構成成分（３）および（４）の水溶液で造粒する。構成成分（５）および（６）を乾燥顆粒に加え、そして混合物をサイズ１の硬質ゼラチンカプセルに充填する。
【０１１３】
本明細書で言及した全出版物および特許はその全てを出典明示により本明細書の一部とする。
【図面の簡単な説明】
【０１１４】
【図１】９週齢ｄＴＧＲのＬＶ中隔および後壁のＭモード心エコー検査を示す。パネルＡは重篤な中隔および後壁肥大を伴うバルサルタン（Ｖａｌ）１ｍｇ／ｋｇ／日のラットを示す。Ｖａｌ１０ｍｇ／ｋｇ／日は中隔および後壁肥大を実質的に低下させる。アリスキレン（Alisk）０.３ｍｇ／ｋｇ／日およびAlisk ３ｍｇ／ｋｇ／日はまた左心室肥大を低下させ、そして３ｍｇ／ｋｇ／日用量はＬＶの大きさを正常化する。パネルＢはＬＶ壁厚の定量化を示す。結果は平均±ＳＥＭである（ｎ＝１０−１４；＊ｐ＜０.０５  Ｖａｌ  １ｍｇ／ｋｇ／日対その他の群、＄ Alisk ３ｍｇ／ｋｇ／日対その他の群）。
【図２】９週齢ｄＴＧＲの拡張期充満の組織ドップラー評価を示す：同一動物のＥａ波（初期拡張期充満）およびＡａ波（心房収縮）を同時に測定する。Ｖａｌ１ｍｇ／ｋｇ／日によりＥａ波よりも深いＡａが示され、それは重篤な拡張機能障害を示している（Ｅｅ／Ａｅ＝０.６６）。Ｖａｌ１０ｍｇ／ｋｇ／日はさらに同様に深いＥａおよびＡａ波を示し、これは拡張機能障害を示している（Ｅａ／Ａａ１.０）。Alisk ０.３ｍｇ／ｋｇ／日およびAlisk ３ｍｇ／ｋｇ／日はＡａ波より深いＥａを示し、これは適切な拡張期充満を示している（Ｅａ／Ａａ１.５）。
【図３】図３：９週齢ｄＴＧＲの心臓肥大のマーカーに及ぼす処置の効果を示す：パネルＡは各処置での、β−ＭＨＣ（パネルＢ）ｍＲＮＡ発現の低下を伴う、α−ＭＨＣ  ｍＲＮＡ発現の用量依存的な増加を示す。パネルＣは各処置でのＬＶ  ＡＮＦ  ｍＲＮＡ発現の用量依存的な低下を示す。結果は平均±ＳＥＭである（各々ｎ＝６）。
【図１】
2008515903.tif 000030
【図２】
2008515903.tif 000031
【図３】
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【国際調査報告】
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