(57)【要約】  界面活性剤の溶媒との混合と、混合物と半透膜との接触と、を含み、前記半透膜が、前記界面活性剤中に存在しかつ膜の分子量カットオフよりも小さな分子量を有する不純物を膜通過させるとともに、精製界面活性剤を保持する、医薬製剤用の界面活性剤の精製方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
界面活性剤の溶媒との混合と、混合物と半透膜との接触と、を含み、前記半透膜が、前記界面活性剤中に存在しかつ膜の分子量カットオフよりも小さな分子量を有する不純物を膜通過させるとともに、精製界面活性剤を保持する、医薬製剤用の界面活性剤の精製方法。
【請求項２】
前記界面活性剤が前記混合物中で１つ以上の凝集体を形成する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記界面活性剤がコロイド分散または懸濁の形態で溶媒中に存在する、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記界面活性剤が自身の臨界ミセル濃度以上の濃度で前記混合物中に存在する、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記混合物が前記半透膜の分子量カットオフよりも大きな平均分子量を有するミセルの形態で界面活性剤を含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
少なくとも１つの不純物が前記ミセルの平均分子量よりも小さな分子量を有する、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記界面活性剤が溶媒との混合剤として存在しない場合に少なくとも１つの不純物が前記界面活性剤の分子量よりも大きな分子量を有する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記界面活性剤が、溶媒の非存在下で、前記半透膜の分子量カットオフよりも小さな分子量を有する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記混合物が水性混合物である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
精製界面活性剤の再生と精製界面活性剤の脱水とをさらに含み、前記脱水が好ましくは精製界面活性剤中に存在する水の蒸留を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記界面活性剤が非イオン性界面活性剤である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記界面活性剤が植物油に由来し、好ましくは前記界面活性剤がポリエトキシル化植物油であり、好ましくは前記界面活性剤がヒマシ油とエチレンオキシドとの縮合物であり、好ましくは前記界面活性剤がリシノール酸グリセロールポリエチレングリコールを含む、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記半透膜が限外濾過膜であり、好ましくは２〜２０ｋＤの範囲の分子量カットオフを有する、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法によって得られうる精製界面活性剤。
【請求項１５】
請求項１４に記載の精製界面活性剤と製剤的に許容されうる溶媒担体とを含む溶媒系。
【請求項１６】
請求項１５に記載の溶媒系を含む安定化液体医薬製剤。
【請求項１７】
パクリタキセル、無水アルコール、およびリシノール酸グリセロールポリエチレングリコールを含み、０．１％未満のバッカチンＩＩＩを含有する、医薬製剤。
【請求項１８】
パクリタキセル、無水アルコール、およびリシノール酸グリセロールポリエチレングリコールを含み、０．１％未満のパクリタキセルのエチルエステル側鎖を含有する、医薬製剤。
【請求項１９】
パクリタキセル、無水アルコール、およびリシノール酸グリセロールポリエチレングリコールを含み、０．１％未満の１０−デアセチルパクリタキセルを含有する、医薬製剤。
【請求項２０】
パクリタキセル、無水アルコール、およびリシノール酸グリセロールポリエチレングリコールを含み、０．１％未満の１０−デアセチル−７−エピパクリタキセルを含有する、医薬製剤。
【請求項２１】
パクリタキセル、無水アルコール、およびリシノール酸グリセロールポリエチレングリコールを含み、０．２％未満の７−エピパクリタキセルを含有する、医薬製剤。
【請求項２２】
溶媒中での界面活性剤のコロイド懸濁液の形成と、コロイド状界面活性剤とは異なる分子量を有する不純物の除去を目的とした懸濁液への物理的分離技術の適用と、を含む医薬製剤用の界面活性剤の精製方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
明細書
本発明は界面活性剤の精製方法に関する。特に、本発明は半透膜濾過技術を用いた、安定化液体医薬製剤用の界面活性剤の精製方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
水難溶性の薬剤活性剤は、特に液体形態で投与される場合に、困難な製剤の問題を引き起こすことが多い。例えば、特に水不溶性の強力な抗腫瘍薬パクリタキセルの製剤の場合、重大な困難に遭遇してきた。パクリタキセルおよびそのより重要な誘導体の一部の構造を以下に示す。
【０００３】
【化１】
2008530052.tif 000002
【０００４】
【表１】
2008530052.tif 000003
【０００５】
タキソール（登録商標）はアメリカ合衆国、１０１５４−００３７、ニューヨーク州、ニューヨーク、パークアベニュー３４５所在のブリストル−マイヤーズスクイブ社（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｃｏｍｐａｎｙ）が製造する市販のパクリタキセル製剤である。タキソール（登録商標）は無水エタノールおよびクレモフォール（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ、登録商標）ＥＬ（ドイツ、６７０５６、ルートヴィヒスハーフェン、カール−ボッシュ−シュトラッセ３８所在のＢＡＳＦアクチエンゲゼルシャフトから入手可能なポリエトキシル化ヒマシ油；他の呼称は欧州薬局方第４版、２００２のヒマシ油、ポリオキシル；米国薬局方−国民医薬品集（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ）のポリオキシル３５ヒマシ油を含む）の５０：５０の混合物との組み合わせでパクリタキセルを含有する。クレモフォール（登録商標）ＥＬはヒマシ油を酸化エチレンと１：３５のモル比で反応させて製造される非イオン性界面活性剤である。タキソール（登録商標）において、クレモフォール（登録商標）ＥＬはドラッグデリバリー媒体として使用される。これは静脈注射用に生理食塩水または５％のブドウ糖溶液のような適当な流体で再構成された後に、大きい極性ミセルを形成し、封入された薬剤をターゲットへ輸送および送達する（例えば、ｖａｎ  Ｔｅｌｌｉｎｇｅｎ  Ｏ．ら，Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  （１９９９）  ８１，  ３３０−３３５頁を参照）。
【０００６】
比較的高濃度のクレモフォール（登録商標）ＥＬはパクリタキセルの不溶性を補う必要があり、この界面活性剤がこのような高濃度で投与される場合、一部の患者はアレルギー反応を示すことがある。さらに、クレモフォール（登録商標）の特定の脂肪酸成分、特にリシノール酸およびオクタデカン酸は肝毒性を引き起こし得る。これらの問題を悪化させることとして、クレモフォール（登録商標）ＥＬはパクリタキセルの分解を触媒し得る不純物を含有するが、後者は特に温和な塩基性加水分解の影響を受けやすい。そのため、無水エタノールおよび市販銘柄のクレモフォール（登録商標）ＥＬの混合物とともに配合されたパクリタキセルは長期にわたると十分に安定でなく、５０℃で１２週間保存された後は６０％を越える効能が失われることが示されている（例えば、欧州特許第０，６４５，１４５号明細書を参照）。これらの問題を考慮して、市販銘柄のクレモフォール（登録商標）ＥＬを精製する多様な方法が研究されてきた。
【０００７】
クレモフォール（登録商標）ＥＬの主成分はリノシール酸グリセロールポリエチレングリコールであり、これはポリエチレングリコールの脂肪酸エステルとともに生成物の疎水部を形成する。より小さな親水部は遊離ポリエチレングリコールおよびエトキシル化グリセロールから構成される。クレモフォール（登録商標）ＥＬは透明な水溶液を形成し、そのような水溶液中では電解質、例えば酸および塩に対しても、それらの濃度が高すぎない場合には、安定である。クレモフォール（登録商標）ＥＬは約１６３０の蒸気浸透圧法（フィードラー、Ｈ．Ｐ．、Ｌｅｘｉｃｏｎ  ｄｅｒ  Ｈｉｌｆｓｓｔｏｆｆｅ  ｆｕｒ  Ｐｈａｒｍａｚｉｅ、Ｋｏｓｍｅｔｉｋ  ａｎｇｒｅｎｚｅｎｄｅ  Ｇｅｂｉｅｔｅ、Ｅｄｉｔｉｏ  Ｃａｎｔｏｒ、１９８９）によって測定される分子量を有する。
【０００８】
パクリタキセルは温和な塩基加水分解の影響を受けやすいとされるため、一部の研究はクレモフォール（登録商標）ＥＬ中のアニオン性カルボン酸塩不純物の除去および／またはクレモフォール（登録商標）ＥＬのｐＨ制御に集中してきた。例えば、国際公開第９４／１２０３１号パンフレットの開示によると、パクリタキセル、クレモフォール（登録商標）ＥＬおよび無水エタノールを含む組成物の安定性は、酸を組成物に添加し、そのｐＨを１〜８の範囲、好ましくは５〜７の範囲まで低下させることによって改良され得る。粉末の酸、特にクエン酸が好ましいが、酢酸などの他の酸もまた使用し得る。
【０００９】
米国特許第５，９２５，７７６号明細書では約５０℃で加熱して水を除去した後に、無水アルコールの添加と、陽イオンをＨ＋イオンと交換する強陽イオン交換樹脂、特にスチレンジビニルベンゼン樹脂との接触と、が続く、クレモフォール（登録商標）ＥＬの処理が開示されている。これにより溶液のｐＨは４．２未満にまで低下し、この溶液はパクリタキセル製剤の調製に用いられうる。
【００１０】
国際公開第００／２３０７０号パンフレットではクレモフォール（登録商標）ＥＬおよび無水エタノールの用液を活性炭カラムと接触させ、水ならびに不飽和脂肪族および不飽和芳香族の不純物を吸収させる方法が開示されている。その後、溶液を混床式イオン交換樹脂カラムと接触させて、カルボン酸陰イオンのような陰イオンをＯＨ−と、かつカリウムイオンのような陽イオンをＨ＋と、交換する。残留水およびエタノールを蒸発させ、処理されたクレモフォール（登録商標）ＥＬを無水エタノール中に再溶解させて、パクリタキセル製剤の調製に用いる。この製剤は未処理のクレモフォール（登録商標）ＥＬを用いて調製した製剤に比べてより安定であることが示されている。
【００１１】
欧州特許第０，６４５，１４５号明細書の開示によると、調製に用いられるクレモフォール（登録商標）ＥＬに酸を添加して、中に含まれるカルボン酸陰イオンを中和することによって、安定化パクリタキセル製剤が得られうる。酸は鉱酸であることが好ましい。また、クレモフォール（登録商標）ＥＬを、例えばクロマトグラフィーカラム中で、酸化アルミニウムと接触させ、カルボン酸陰イオンを除去してもよい。
【００１２】
他の研究はクレモフォール（登録商標）ＥＬへの特定の安定剤の添加に集中してきた。例えば、国際公開第０１／７２３００号パンフレットでは、亜鉛、銅または鉄の硫酸塩またはグルコン酸塩のような酸の非毒性金属塩を用いたクレモフォール（登録商標）ＥＬの処理、すなわちこれらをともに加熱するか、またはクレモフォール（登録商標）ＥＬを上述した塩を含むカラムに通すことによる処理が開示されている。また、クロマトグラフィーが使用されている。クレモフォール（登録商標）ＥＬのクロマトグラフィー精製は肝毒性薬剤媒体の生成量がより少ない（Ｏｌｉｖｅｒ  Ｐ．  Ｆｌｉｎｔら，  ２００１  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ）。
【００１３】
ＢＡＳＦから入手可能なクレモフォール（登録商標）ＥＬの精製型であるクレモフォール（登録商標）ＥＬＰは、影響を受けやすい薬剤成分用に開発され、含水量、ｐＨ、および粘度がより低く、また、特にリシノール酸、オレイン酸、およびパルミチン酸に関しては、カリウムイオンおよび遊離脂肪酸の含有量も少ない。しかしながら、クレモフォール（登録商標）ＥＬＰでさえ、パクリタキセル製剤の十分に満足のいく安定性のプロファイルを提供せず、この界面活性剤のさらなる精製方法が研究されてきた。例えば、国際公開第００／３２１８６号パンフレットの開示によると、パクリタキセルおよびクレモフォール（登録商標）ＥＬＰを含む組成物はメタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、ブドウ糖、フェノール、チオフェノールまたはこれらの組み合わせのような抗酸化剤を添加することによって安定化し得る。
【００１４】
米国特許第５，９２５，７７６号明細書に記載された方法はクレモフォール（登録商標）ＥＬＰの処理に適用できることも開示されている。しかしながら、国際公開第０３／１０３７１４号パンフレットでは、米国特許第５，９２５，７７６号明細書で使用されるような強陽イオン交換樹脂の使用に伴う不利益、すなわちこれがポリオキシエチル化ヒマシ油の部分分解および遊離脂肪酸の増加をもたらすことが開示されている。その記載によると、市販のクレモフォール（登録商標）ＥＬＰはクレモフォール（登録商標）ＥＬに比べて塩基性化合物の含有量が低いが、それでもなお遊離酸およびそのオキシエチル化形態のような酸性不純物、ジリシノール酸ポリエチレングリコール、ならびに少量の対応する遊離グリコールを含有する。その開示によると、シリカゲルまたはアルミノケイ酸塩のような吸着剤を用いたクレモフォール（登録商標）ＥＬＰの処理は極性および酸性不純物の含有量を削減でき、かつ処理されたクレモフォール（登録商標）ＥＬＰを用いて調製されたパクリタキセル製剤は１０−デアセチルパクリタキセルおよび７−エピ−パクリタキセルのような生成物への分解度合いの有意な低下を示す。
【００１５】
これらの研究にもかかわらず、パクリタキセルの分解に影響する因子は依然として十分に理解されていない。
【００１６】
上記の方法はすべて、それぞれが独自の付随した問題を伴った、化学的手法による界面活性剤の精製を含む。例えば、陽イオン樹脂の使用または酸の添加による処理は、界面活性剤のｐＨを生理的なｐＨから遠ざけるように変化させ、これは特に注射製剤に不利益となり得る。一方、安定化学物質の添加を伴う方法はこのような化学物質に含有される有害な不純物をさらに導入する危険性がある。したがって、本技術分野においては医薬製剤、特にタキサン（ｔａｘａｎｅ）のような化学反応の影響を受けやすい活性剤を含む製剤に用いられる、単純で温和であるが効果的な界面活性剤の精製方法が必要とされている。本発明は膜濾過を用いて界面活性剤を精製することによってこの問題を解決するものである。
【発明の開示】
【００１７】
膜濾過はライフサイエンスにおいて幅広く用いられる、最も一般的なタンパク質の分離、精製または濃縮技術である。これは膜型に応じて精密濾過（膜孔サイズ０．１〜１０μｍ）または限外濾過（膜孔サイズ０．００１〜０．１μｍ）に分類されうる。限外濾過膜は溶解分子（タンパク質、ペプチド、核酸、炭水化物および他の生体分子）の濃縮、緩衝液の脱塩または交換、および全体分画に使用される。限外濾過膜は膜孔よりも大きな分子を保持するが、塩、溶媒および水のようなより小さな分子は１００％透過でき、自由に膜を通過する。次の２つの主な膜濾過法がある。シングルパス／デッドエンド／ダイレクトフロー濾過（ＤＦＦ）では、濾過される流体が膜に垂直な方向に向けられる。クロスフロー／タンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）では、流体が膜表面の接線方向に流れる。ＴＦＦは保持液の循環による膜の目詰まりの問題を解決する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
本発明の第一の態様では、界面活性剤の溶媒との混合と、混合物と半透膜との接触と、を含み、前記半透膜が、前記界面活性剤中に存在しかつ膜の分子量カットオフよりも小さな分子量を有する不純物を膜通過させるとともに、精製界面活性剤を保持する、医薬製剤用の界面活性剤の精製方法を提供する。
【００１９】
本発明の第二の態様では、本発明の第一の態様に係る方法によって得られうる精製界面活性剤を提供する。
【００２０】
本発明の第三の態様では、本発明の第二の態様に係る精製界面活性剤を含む溶媒系を提供する。
【００２１】
本発明の第四の態様では、本発明の第二の態様に係る精製界面活性剤を含む安定化液体医薬製剤を提供する。
【００２２】
本発明のさらに別の態様では、パクリタキセル、無水アルコール、およびリシノール酸グリセロールポリエチレングリコールを含み、以下のものを含有する、医薬製剤を提供する。  
【００２３】
０．１％未満のバッカチンＩＩＩ；
０．１％未満のパクリタキセルのエチルエステル側鎖；
０．１％未満の１０−デアセチルパクリタキセル；
０．１％未満の１０−デアセチル−７−エピパクリタキセル；および／または
０．２％未満の７−エピパクリタキセル。
【００２４】
本発明の最後の態様では、溶媒中での界面活性剤のコロイド懸濁液の形成と、コロイド状界面活性剤とは異なる分子量を有する不純物の除去を目的とした懸濁液への物理的分離技術の適用と、を含む医薬製剤用の界面活性剤の精製方法を提供する。
【００２５】
あらゆる多様な態様において好ましい本発明の実施形態は下記の記載または従属クレームにおける記載のとおりである。
【００２６】
溶媒と組み合わされた場合、界面活性剤は自己凝集して、多種多様な形状を有する、単分子層、二分子層およびミセルのような多数の超分子構造を形成することができる。このような凝集体は単量体（すなわち、非凝集体）の界面活性剤分子と平衡を保って存在する傾向がある。ミセルは臨界ミセル濃度と称する界面活性剤の特定濃度を超えると形成される可能性がある。この濃度では表面張力、懸濁度、モル伝導率および浸透圧などのさまざまな物理特性が不連続となる。臨界ミセル濃度は温度や電解質の存在による影響を受け得る。例えば、イオン性界面活性剤のミセルはクラフト（Ｋｒａｆｆｔ）温度として知られている特定温度を超えた場合のみ形成される可能性がある。しかしながら、非イオン性界面活性剤の溶解度は曇点と呼ばれる温度限界を有する。これらのパラメータは特定の界面活性剤では既知であるか、さもなければ既知の方法によって実験的に決定され得る。
【００２７】
ミセル溶液のミセルは２０〜１００前後の凝集数（すなわち、凝集する界面活性剤分子の数）を有する傾向がある。本発明の一実施形態において、界面活性剤は膜の分子量カットオフよりも大きな平均分子量を有するミセル凝集体を形成し、この凝集体は濾過時に膜を通過しない。凝集形態における界面活性剤の平均分子量よりも分子量の小さな界面活性剤中に存在する不純物は膜の分子量カットオフを適切に選択することによって分離され得る。単量体形態における界面活性剤の分子量は膜の分子量カットオフよりも大きくてもよいし、小さくてもよい。本発明は特に、単量体の界面活性剤の分子量に比べて同程度のまたはより大きいが、界面活性剤ミセルの分子量よりは小さい分子量を有する不純物の除去に有用である。
【００２８】
溶媒は極性溶媒、特に水が好ましい。本発明の一実施形態では、界面活性剤は、臨界ミセル濃度以上の濃度で水と混合された後に、膜濾過、好ましくはＴＦＦを適用される。大きなミセルは保持されるが、コロイド懸濁液中のより小さな不純物は膜を通過する。タンジェンシャルフロー濾過の後に、水は低圧下で蒸留することによって保持液から除去され得る。必要であれば、水の除去後に、界面活性剤を活性炭またはイオン交換樹脂で処理して、着色（λ＝４２５ｎｍにおける吸光度）を低減し、得られた医薬製剤の安定性を改善する。界面活性剤は室温で３０分間攪拌しながら活性炭で処理された後に濾過されるのが好ましい。
【００２９】
界面活性剤はイオン性および非イオン性を含むいずれのタイプであってもよいが、非イオン性であることが好ましい。本発明の一実施形態では、精製される界面活性剤はクレモフォール（登録商標）ＥＬまたはＥＬＰなどのポリオキシルヒマシ油である。クレモフォール（登録商標）ＥＬまたはＥＬＰは水溶液中で大きな極性ミセルを形成し、これは濾過時に膜に保持される。臨界ミセル濃度は約０．０２％である。その一方で、より小さな分子はパクリタキセルのような活性剤の分解を引き起こす可能性があり、ミセルを形成せずに膜を通過する。このような不純物はイオン性種、例えばカルボン酸陰イオンもしくは金属陽イオン、または非イオン性種であってよい。精製界面活性剤は市販のクレモフォール（登録商標）ＥＬＰよりも低濃度の脂肪酸を含有していてもよい。
【００３０】
膜濾過の適切な条件は当業者によって決定され得る。例えば、適切な流速は保持液に関しては３０〜１００ｍｌ／分の範囲、好ましくは５０〜８０ｍｌ／分の範囲であり、濾過に関しては０．５〜１０ｍｌ／分の範囲、好ましくは０．５〜５ｍｌ／分の範囲、特に好ましくは１〜２ｍｌ／分の範囲である。膜は限外濾過膜が好ましく、適切な分子量カットオフは２〜２０ｋＤの範囲、好ましくは３〜１５ｋＤの範囲、特に好ましくは５〜１０ｋＤの範囲である。濾過は０．１〜２０ｂａｒの圧力下で実施されうる。
【００３１】
本発明は上記のように膜濾過技術の使用に関して記載されてきたが、当業者は蔗糖勾配遠心法のような類似の物理的分離技術が代替として使用されてもよいことを認識するであろう。
【００３２】
適切な溶媒系は活性剤を可溶化しかつ製剤の安定性を確保して十分に長期の保存期間を与えるために必要とされる。また、注射製剤の場合には、これらは投与する前に流体で希釈されることが多く、溶媒系は希釈された形態の安定性を維持できるものでなければならない。
【００３３】
この目的のために潜在的に有用な溶媒系は、エタノールのような製剤的に許容されうる極性溶媒、および界面活性剤の混合物であろう。一般に、界面活性剤は安定化液体製剤中で可溶化剤または乳化剤として機能する。多くの有用な界面活性剤はエチレンオキシドのようなアルキレンオキシドと脂肪酸または脂肪アルコールとの縮合物である。ポリオキシルヒマシ油およびポリソルベート（エトキシル化ソルビタンエステル）は特に本発明において有益であることが分かっている。適切な場合には、界面活性剤は界面活性剤化合物の混合物から構成されてよい。
【００３４】
本発明の精製界面活性剤は脂溶性薬剤を含む多様な安定化液体製剤、特に注射製剤における使用に特に適している。例えば、本発明に従って精製されるクレモフォール（登録商標）ＥＬまたはＥＬＰはミコナゾール（ｍｉｃｏｎａｚｏｌｅ）、ヘキセデチン（ｈｅｘｅｄｅｔｉｎｅ）、クロトリマゾール（ｃｌｏｔｒｉｍａｚｏｌｅ）およびベンゾカイン（ｂｅｎｚｏｃａｉｎｅ）を含む多数の薬剤ならびに脂溶性ビタミンの多様な溶液の調製に用いられ得る。パクリタキセル、ドセタキセル（ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）、テニポシド（ｔｅｎｉｐｏｓｉｄｅ）およびカンプトテシン（ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ）誘導体のような特に分解の影響を受けやすい薬剤が主要な関心対象である。
【００３５】
本発明の実施形態において、パクリタキセル、無水アルコールおよびリシノール酸グリセロールポリエチレングリコールを含む医薬製剤は以下を含有する。  
【００３６】
０．０６％未満のバッカチンＩＩＩ；
０．０５％未満のパクリタキセルのエチルエステル側鎖；
０．０６％未満の１０−デアセチルパクリタキセル；
非検出の１０−デアセチル−７−エピ−パクリタキセル；および／または
０．１６％未満の７−エピ−パクリタキセル。
【実施例】
【００３７】
以下の実施例は本発明を実証することを意図しているが、いかなる方法によってもクレームを限定することを意図しているわけではない。
【００３８】
（実施例１）
８０ｇのクレモフォール（登録商標）ＥＬ（ＢＡＳＦアクチエンゲゼルシャフト）を４００ｇの注射用蒸留水と混合した。得られた溶液に５ｋＤの限外濾過膜（パール（Ｐａｌｌ）社、アメリカ合衆国、１１５４８、ニューヨーク州、イーストヒルズ、ノーザンブルバード２２００）が装着されたミニメイト（Ｍｉｎｉｍａｔｅ、登録商標）ＴＦＦシステムを用いたタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）を室温で４８時間実施した。濾過圧力は２ｂａｒから３ｂａｒの間であった。濾液の体積と等しい体積の水を１時間毎に保持液に添加した。保持液に添加された水の総量は約４５００ｍｌであった。得られた水溶液を水浴上で低圧（５００μｂａｒ）で蒸留した。５８ｇの精製クレモフォール（登録商標）ＥＬを得た（クレモフォール（登録商標）ＥＬ−ＴＦＦ−１）。
【００３９】
クレモフォール（登録商標）ＥＬ−ＴＦＦ−１を無水エタノールおよびパクリタキセルと混合し、医薬製剤（製剤１）を得た。
【００４０】
【表２】
2008530052.tif 000004
【００４１】
（実施例２）
８０ｇのクレモフォール（登録商標）ＥＬＰを４００ｇの注射用蒸留水と混合した。得られた溶液に５ｋＤの限外濾過膜およびパール（Ｐａｌｌ）製のミニメイト（Ｍｉｎｉｍａｔｅ、登録商標）ＴＦＦシステムを使用したＴＦＦを室温で４０時間実施した。濾過圧力は２ｂａｒから３ｂａｒの間であった。濾液の体積と等しい体積の水を１時間毎に保持液に添加した。保持液に添加された水の総量は約４４００ｍｌであった。得られた水溶液を水浴上で低圧（５００μｂａｒ）で蒸留した。５９ｇの精製クレモフォール（登録商標）ＥＬＰを得た（クレモフォール（登録商標）ＥＬＰ−ＴＦＦ−２）。
【００４２】
クレモフォール（登録商標）ＥＬＰ−ＴＦＦ−２を無水エタノールおよびパクリタキセルと混合し、医薬製剤（製剤２）を得た。
【００４３】
【表３】
2008530052.tif 000005
【００４４】
（比較例１）
市販銘柄のクレモフォール（登録商標）ＥＬおよび無水エタノールを含有するパクリタキセル製剤は以下のように調製される（製剤３）。
【００４５】
【表４】
2008530052.tif 000006
【００４６】
（比較例２）
市販銘柄のクレモフォール（登録商標）ＥＬＰおよび無水エタノールを含有するパクリタキセル製剤は以下のように調製される（製剤４）。
【００４７】
【表５】
2008530052.tif 000007
【００４８】
（比較例３）
市販銘柄のクレモフォール（登録商標）ＥＬ、無水エタノールおよびクエン酸を含有するパクリタキセル製剤は以下のように調製される（製剤５）。
【００４９】
【表６】
2008530052.tif 000008
【００５０】
製剤１〜４に加速分解調査（５６℃で３６時間）を施し、以下の分解生成物の存在を検査した：バッカチンＩＩＩ、エチルエステル側鎖、１０−デアセチルパクリタキセル、１０−デアセチル−７−エピ−パクリタキセル、および７−エピ−パクリタキセル。その結果を表１に示す。
【００５１】
【表７】
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【００５２】
０．９％ＮａＣｌ潅流溶液（１．２ｍｇ／ｍｌパクリタキセル  ／ｍｌ希釈溶液）における製剤２の安定性を検査し、同じ条件下での製品タキソール（登録商標）および製剤５の安定性と比較した。パクリタキセルアッセイは製剤２、タキソール（登録商標）および製剤５については同程度であった（表２）。製剤２で調製された溶液の懸濁度はタキソール（登録商標）および製剤５を用いて得た潅流溶液の懸濁度に比べて小さかった（表３）。
【００５３】
【表８】
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【００５４】
【表９】
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【００５５】
（実施例３）
８０ｇのクレモフォール（登録商標）ＥＬＰを４００ｇの注射用蒸留水と混合した。得られた溶液に１０ｋＤの膜およびパール（Ｐａｌｌ）製のミニメイト（Ｍｉｎｉｍａｔｅ、登録商標）ＴＦＦシステムを使用したＴＦＦを室温で３０時間実施した。濾過圧力は２ｂａｒから３ｂａｒの間であった。濾液の体積と等しい体積の水を１時間毎に保持液に添加した。保持液に添加された水の総量は約３２００ｍｌであった。得られた水溶液を水浴上で低圧（５００μｂａｒ）で蒸留した。７０ｇの精製クレモフォール（登録商標）ＥＬＰを得た（クレモフォール（登録商標）ＥＬＰ−ＴＦＦ−３）。
【００５６】
クレモフォール（登録商標）ＥＬＰ−ＴＦＦ−３（１５ｇ）を無水エタノールおよびパクリタキセルと混合し、医薬製剤（製剤６）を得た。
【００５７】
【表１０】
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【００５８】
精製クレモフォール（登録商標）ＥＬＰ−ＴＦＦ３（１５ｇ）を無水エタノール（１／１  ｖ／ｖ）と混合した。溶媒混合物を室温で３０分間攪拌しながら活性炭（メルク（Ｍｅｒｃｋ））で処理した後に、濾過した。活性炭処理した溶媒をパクリタキセルに添加し、医薬製剤（製剤７）を得た。
【００５９】
【表１１】
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【００６０】
精製クレモフォール（登録商標）ＥＬＰ−ＴＦＦ３（１５ｇ）を無水エタノール（１／１  ｖ／ｖ）と混合した。溶媒混合物を室温で３０分間攪拌しながら弱陽イオン交換樹脂ピュロライト（Ｐｕｒｏｌｉｔｅ）Ｃ１０６ＥＰで処理した後に、濾過した。樹脂処理した溶媒をパクリタキセルに添加し、医薬製剤（製剤８）を得た。
【００６１】
【表１２】
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【００６２】
製剤４および６〜８に加速分解調査（５６℃で７日間）を施し、以下の分解生成物の存在を検査した：バッカチンＩＩＩ、エチルエステル側鎖、１０−デアセチルパクリタキセル、１０−デアセチル−７−エピ−パクリタキセル、および７−エピ−パクリタキセル。その結果を表４に示す。
【００６３】
【表１３】
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【００６４】
５６℃における加速分解調査および潅流溶液における安定性検査の結果は本発明に従って精製されたポリオキシルヒマシ油がパクリタキセルを含有する安定製剤の調製に好適であることを示した。
【国際調査報告】
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