(57)【要約】【課題】インシュリン抵抗性及び心筋ミオパチーを治療する化合物及び方法を提供する【解決手段】新規化合物、化合物を含む組成物及び化合物を製造及び使用するための方法のための方法がここに記載される。インシュリン抵抗性、膵臓β細胞アポトーシス、肥満、血栓形成促進状態、心筋梗塞、高血圧、異常脂質血症、シンドロームＸの発現、鬱血性心不全、心血管系の炎症性疾患、アテローム性動脈硬化症、敗血症、Ｉ型糖尿病、肝臓障害及び悪液質を含む種々の状態を治療又は改善する方法であって、ここに記載された化合物を投与することによる方法。ここに示される化合物はセリンパルミトイルトランスフェラーゼ活性を調節するために使用し得る。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2008515987.tif 000039
｛式中、Ｒ1は、Ｈ又は所望により置換された低級アルキル基、アリール基、アラルキル
基又はアルキルオキシアルキル基を表し；
各Ｒ2は独立して、Ｈ、保護基又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＲa−ＮＨＲb（式中、Ｒaはアルキル基、アリール基、アシル基、ケト基、アジド基、ヒドロキシル基、ヒドラジン基、シアノ基、ハロゲン原子、ヒドラジド基、アルケニル基、アルキニル基、エーテル基、チオール基、セレノ基、スルホニル基、ボレート基、ボロネート基、ホスホ基、ホスホノ基、ホスフィン基、複素環基、エノン基、イミン基、アルデヒド基、エステル基、チオ酸基、ヒドロキシルアミン基、アミノ基及びそれらの組み合せからなる群より選択され；及び
ＲbはＨ又はアミノ保護基を表す。）を表し；
各Ｖ及びＺは独立して、（ＣＲcＲd）n、Ｏ、ＮＲe、Ｓ、Ａｒ、ＣＲcＲdＡｒ、ＯＡｒ、ＮＲ4Ａｒ、ＳＡｒ又はＡｒ（式中、各Ｒc及びＲdは独立して、Ｈ、低級アルキル基、Ｏ
Ｈ、Ｏ−低級アルキル基を表すか又はＲc及びＲdは一緒になって、＝Ｏ、＝Ｎ−ＯＨ、＝Ｎ−Ｏ−低級アルキル基又は＝Ｎ−Ｏ−ＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3を表し；
ＲeはＨ、低級アルキル基又は−ＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3を表し；及び
ｎは１ないし７を表す。）を表し；
ｑは０ないし３を表し；
Ａｒは、所望により置換されたアリール基又はヘテロアリール基を表し；
ｕは０又は１を表し；
各Ｘは独立して、Ｈ又はハロゲン原子を表し；及び
ｍは４ないし１２を表す。｝に対応する化合物及びその医薬的に許容可能な塩。
【請求項２】
式（ＩＩ）
【化２】
2008515987.tif 000040
｛式中、ＬはＣＨ2、ＣＨＲf、ＣＲfＲg、Ｏ、ＮＲh、Ｓ、Ａｒ、ＣＨ2Ａｒ、ＣＨＲfＡ
ｒ、ＣＲfＲgＡｒ、ＯＡｒ、ＮＲhＡｒ、ＳＡｒ又はＡｒＡｒ（式中、ＲfはＨ、低級アルキル基、ＯＨ、Ｏ−低級アルキル基を表し、
ＲgはＨを表すか又はＲf及びＲgは一緒になって、＝Ｏ、＝Ｎ−ＯＨ、＝Ｎ−Ｏ−低級ア
ルキル基又は＝Ｎ−Ｏ−ＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3を表し、及び
ＲhはＨ、低級アルキル基又は−ＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3を表す。）を表す。｝に対応するところの請求項１記載の化合物。
【請求項３】
式（ＩＩＩ）
【化３】
2008515987.tif 000041
に対応するところの請求項１記載の化合物。
【請求項４】
式（ＩＩＩＡ）
【化４】
2008515987.tif 000042
に対応するところの請求項１記載の化合物。
【請求項５】
式（ＩＩＩＢ）
【化５】
2008515987.tif 000043
に対応するところの請求項１記載の化合物。
【請求項６】
Ａｒが所望により置換されたフェニル基、ピリジニル基、ピリミジル基、イミダゾリル基、ベンズイミダゾリル基、トリアゾリル基、オキサゾリル基、イソキサゾリル基、ベンズチアゾリル基又はベンズオキサゾリル基であるところの請求項１記載の化合物。
【請求項７】
Ａｒがフェニル基、ピリジニル基又はオキサゾリル基であるところの請求項６記載の化合物。
【請求項８】
Ｘがハロゲン原子であるところの請求項１記載の化合物。
【請求項９】
Ｘがフッ素原子であるところの請求項８記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ1が炭素原子数２ないし３のアルキル基であるところの請求項１記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ1がＣＨ3−Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−、ＨＯ−ＣＨ2−ＣＨ2−、ＨＯ−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−又はＣＨ3−Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−であるところの請求項
１記載の化合物。
【請求項１２】
ｎが２であるところの請求項１記載の化合物。
【請求項１３】
ｍが７であるところの請求項１記載の化合物。
【請求項１４】
前記化合物がセリンパルミトイルトランスフェラーゼ（ＳＰＴ）を調節するところの請求項１記載の化合物。
【請求項１５】
前記化合物がセリンパルミトイルトランスフェラーゼ（ＳＰＴ）を阻害するところの請求項１４記載の化合物。
【請求項１６】
請求項１記載の化合物及び医薬的に許容可能なキャリアを含む組成物。
【請求項１７】
請求項１記載の化合物、並びに、インシュリン、インシュリン類似体、インクレチン、インクレチン類似体、グルカゴン様ペプチド、グルカゴン様ペプチド類似体、エキセンディン、エキセンディン類似体、ＰＡＣＡＰ及びＶＩＰ類似体、スルホニルウレア、ビグアニド、α−グルコシダーゼ阻害剤、アセチルＣｏＡカルボキシラーゼ阻害剤、カスパーゼ阻害剤及びＰＰＡＲリガンドからなる群より選択される少なくとも１種の活性剤の治療有効量を含む組成物。
【請求項１８】
インシュリン抵抗性の治療方法であって、該方法は請求項１記載の化合物を、これを必要とする患者へ投与することを含む方法。
【請求項１９】
膵臓β細胞アポトーシスを治療する方法であって、該方法は請求項１記載の化合物を、これを必要とする患者へ投与することを含む方法。
【請求項２０】
肥満を治療する方法であって、該方法は請求項１記載の化合物を、これを必要とする患者へ投与することを含む方法。
【請求項２１】
血栓形成促進状態、心筋梗塞、高血圧、異常脂質血症又はその他のシンドロームＸの症状発現を治療する方法であって、該方法は請求項１記載の化合物を、これを必要とする患者へ投与することを含む方法。
【請求項２２】
鬱血性心不全を治療する方法であって、該方法は請求項１記載の化合物を、これを必要とする患者へ投与することを含む方法。
【請求項２３】
炎症性疾患（該炎症性疾患は心血管系、アテローム性動脈硬化症又は敗血症の疾患である。）を治療する方法であって、該方法は請求項１記載の化合物を、これを必要とする患者へ投与することを含む方法。
【請求項２４】
培養液中のヒト細胞又は生体異物の膵島細胞の欠損又は死を予防する方法であって、該方法は請求項１記載の化合物を前記培養液に添加することを含む方法。
【請求項２５】
培養液中の肝臓組織を保存する方法であって、該方法は請求項１記載の化合物を前記培養液に添加することを含む方法。
【請求項２６】
Ｉ型糖尿病の治療又は予防方法であって、該方法は請求項１記載の化合物を、これを必要とする患者へ投与することを含む方法。
【請求項２７】
肝臓障害の治療又は予防方法であって、該方法は請求項１記載の化合物を、これを必要とする患者へ投与することを含む方法。
【請求項２８】
悪液質の治療又は予防方法であって、該方法は請求項１記載の化合物を、これを必要とする患者へ投与することを含む方法。
【請求項２９】
更に、インシュリン、インシュリン類似体、インクレチン、インクレチン類似体、グルカゴン様ペプチド、グルカゴン様ペプチド類似体、エキセンディン、エキセンディン類似体、ＰＡＣＡＰ及びＶＩＰ類似体、スルホニルウレア、ビグアニド、α−グルコシダーゼ阻害剤、アセチルＣｏＡカルボキシラーゼ阻害剤、カスパーゼ阻害剤、不飽和脂肪酸、ポリ不飽和脂肪酸及びＰＰＡＲリガンドからなる群より選択される少なくとも１種の活性剤の治療有効量を同時投与することを含む請求項１８記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
背景
ここに記載される全ての刊行物は、本発明の背景と共に読者に把握させる目的のために引用される。本記載の何れも、これらの文献がここに記載された発明に関連する先行技術であることの承認と解釈されるべきでない。
【背景技術】
【０００２】
ＩＩ型糖尿病（即ち、Ｔ２Ｄ、糖尿病、インシュリン非依存性糖尿病、成人発症糖尿病）は高血糖により引き起こされる疾患として考えられる傾向にあるが、最近の考えは、血糖レベルを主に異常調節された脂肪代謝に関連する内在する疾患の症状とみなしている。従って高脂肪酸濃度は、様々な脂肪毒性：インシュリン抵抗性、膵臓β細胞アポトーシス及び“メタボリックシンドローム”と呼ばれる障害、を導く。インシュリン抵抗性は以下の兆候により発見され得る：血中インシュリンの高濃度、経口的グルコース負荷試験（ＯＧＴＴ）に応答するグルコースの高い血中濃度、インシュリン投与に応答するリン酸化タンパク質キナーゼＢ（ＡＫＴ）の低濃度等。インシュリン抵抗性は、細胞中のインシュリン受容体関連のシグナル伝達系の低下した感受性及び／又はアポトーシスを介した膵臓中のβ細胞の損失により引き起こされ得る。インシュリン抵抗性が、内在する炎症性成分を有するものとして特徴付けられ得る証拠も存在する。
【０００３】
座りがちの生活スタイル及び肥満がＴ２Ｄの発生増加の原因となる。治療行為は耐糖能異常（ＩＧＴ）の人々を対象としてきた。ＩＧＴはグルコース負荷に続く高血糖（健常人と糖尿病患者間の中間のグルコース値を伴う）として定義され、世界中で少なくとも２億人に発症している。ＩＧＴに苦しむ人々は、糖尿病の発症に関し、一般集団よりも高い将来的なリスクを有する。ＩＧＴの人々の約４０％が５ないし１０年間に糖尿病へ進展するが、幾らかは正常へ戻るか又はＩＧＴのままである。
【０００４】
更にＩＧＴの人々はまた、高血圧、異常脂質血症及び中心性肥満のような心臓血管疾患発症の高度なリスクを有する。従って、ＩＧＴの診断は、特に見掛けは健康そうで、歩行可能な個人において、重要な予測的意味あいを有する。更に詳細な総説のために、その開示が参照としてここに組み込まれるＺｉｍｍｅｔ  Ｐ，等，Ｎａｔｕｒｅ，４１４：７８３−７頁（２００１年）参照。
【０００５】
最近、空腹時血糖異常（ＩＦＧ）が異常糖代謝の別の範疇として導入された。ＩＧＴは空腹時血糖濃度に基づいて特定され、ＩＧＴのように、心臓血管疾患及び将来的な糖尿病のリスクにも関連する。
【０００６】
Ｔ２Ｄは種々の要因により引き起こされ得る。加えて、該疾患はまた、多様な症状を示す。以前、Ｔ２Ｄは比較的明確な疾患とみなされていたが、現時点での理解は、Ｔ２Ｄ（及びそれに関連する高血糖又は糖代謝異常）は、しばしばメタボリックシンドロームを含むより広範な内在する障害の発現であることが示されている。このシンドロームは時々シンドロームＸとして言及され、耐糖能異常に加えて、高インシュリン血症、異常脂質血症、高血圧、内臓型肥満、凝固性亢進及び微量アルブミン尿を含む心臓血管疾患の危険因子の一群である。
【０００７】
Ｔ２Ｄに導く要因の最近の理解は、該疾患の現行の治療に影響してきた。ＩＩ型糖尿病における、高血糖症並びに高血圧、異常脂質血症及び中心性肥満のような他の危険因子を治療するための、より積極的なアプローチが続けられてきた。加えて、危険な状態にある
個人のより簡単で包括的なスクリーニングが米国糖尿病協会のような保険機関によって推奨されてきた。
【０００８】
セラミドは、インシュリン抵抗性及びβ細胞アポトーシスのようなＴ２Ｄに関連する要因の幾つかにおいて活性を示すと報告されてきた。例えば、Ｓｃｈｉｍｉｔｚ−Ｐｆｉｆｆｅｒ等は、パルミチン酸又はセラミドを細胞に供給することがインシュリン抵抗性を誘導することを報告している（Ｓｃｈｉｍｉｔｚ−Ｐｆｉｆｆｅｒ  Ｃ等，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７４：２４０２−１０頁（１９９９年））。細胞中での増加したパルミチン酸の濃度は、デノボセラミド合成経路中に供給されるパルミトイル−ＣｏＡの濃度増加を介して直接的にセラミドの高濃度を誘導する。研究は、フミノシン（ｆｕｍｉｎｏｓｉｎ）を用いるセラミドシンターゼの阻害がβ細胞アポトーシスを阻止するため、セラミドのデノボセラミド合成が重要な要因であることを示唆する（Ｓｈｉｍａｂｕｋｕｒｏ  Ｍ等，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９５：２４９８−２５０２頁（１９９８年））。同様に、セラミドシンターゼのためのデノボ経路の律速段階に関わる酵素、セリンパルミトイルトランスフェラーゼ（ＳＰＴ）がβ細胞アポトーシスの阻止のための実行可能な標的であり得ると認識されてきた。例えば、シマブクロ等はシクロセリンを用いるＳＰＴの阻害が、糖尿病のズッカー（Ｚｕｃｋｅｒ）脂肪ラットモデルにおいて、部分的なβ細胞保護効果（〜５０％活性）を有することを報告している（Ｓｈｉｍａｂｕｋｕｒｏ等，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７３：３２４８７−９０頁（１９９８年）、この開示は参照としてここに組み込まれる）。
【０００９】
よく知られた炎症性のシグナル、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ）は、培養中の細胞におけるセラミド濃度を上昇させることが示されてきた（Ｓａｗａｄａ，Ｍ，等，Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  Ｄｉｆｆｅｒ．，１１：９９７−１００８頁（２００４年）；Ｍｅｙｅｒ，ＳＧ，等，Ｂｉｏｃｈｉｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ．１６４３（１−３）：１−４頁（２００３年））。ＴＮＦ投与は脂肪細胞中のＰＰＡＲ−γ濃度を減少するが、これはセラミドと関わりがあることを示す（Ｋａｊｉｔａ，Ｋ，等，Ｄｉａｂｅｔｅｓ．Ｒｅｓ．Ｃｌｉ．Ｐｒａｃｔ．，６６Ｓｕｐｐｌ  １：Ｓ７９−８３頁（２００４年））。ＴＮＦはまた、肝臓細胞においてアポトーシスを導き、ウイルス性肝炎、アルコール依存症、虚血及び劇症肝炎に起因する傷害に関与してきた（Ｄｉｎｇ，ＷＸ及びＹｉｎ，ＸＭ，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．８：４４５−５４頁（２００４年）；Ｋａｎｚｌｅｒ  Ｓ．，等，Ｓｅｍｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ．１０（３）：１７３−８４頁（２０００年））。同様に、ＴＮＦ及びＩＬ−６は、エフェクターとしてセラミドと関わる炎症性成分の強力な証拠を有する別のシンドロームである悪液質に関与する。アテローム性動脈硬化症は炎症性成分を有することが知られている。アミロイドによる酸化的ストレスの誘導は、神経細胞中のセラミド濃度を増加するカスケードの誘導を併う（Ａｙａｓｏｌｌａ  Ｋ．，等，Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．，３７（３）：３２５−３８頁（２００４年））。従って、変化したセラミド濃度は、アルツハイマー病及びＨＩＶ認知症のような認知症における原因となり得、またＳＰＴ阻害剤を用いるこれらの濃度の調節は治療として有望であると考えられる（Ｃｕｔｌｅｒ  ＲＧ，等，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，１０１：２０７０−５頁（２００４年））。ＴＮＦは敗血症中に関与することが知られ、また、インシュリンが保護効果を有する（Ｅｓｍｏｎ，ＣＴ．Ｃｒｏｓｓｔａｌｋ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ，Ｍａｔｕｒｉｔａｓ，４７：３０５−１４頁（２００４年））。デノボセラミド濃度は、多くの疾患及び状態の中核をなす炎症プロセスにおける主要なエフェクター機構として働く可能性がある。しかし、炎症プロセスにおけるエフェクターとしてのセラミドの関与に関連する疾患及び状態のための治療剤としてのＳＰＴの調節剤の使用の可能性はこれまで示されてこなかった。
【００１０】
脂肪酸の高濃度は心筋ミオパチー（即ち、心不全）の病変に類似したシンドロームを導
き得る。この致命的状態の病因はよく解っていないが、脂肪毒性に関係するようである。研究は、心筋細胞における脂質の過負荷が心筋ミオパチーの内在する原因であろうことを示唆する。加えて、最近の研究は、心不全のヒトの心臓において低いレベルの筋細胞アポトーシス（１０5個の細胞核当たり８０−２５０個の筋細胞）を確認した。しかし、この
細胞死が保護過程の偶然の発見であるのか、疾患発症における原因成分であるのかは不明確のままである（例えば、Ｗｅｎｃｋｅｒ  Ｄ，等，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１１１：１４９７−１５０４頁（２００３年）参照、この開示は参照としてここに組み込まれる。）。細胞における脂肪酸濃度の増加は、直接デノボセラミド合成の高い速度をもたらす。ＴＮＦはＣＨＦに関与し、そのため、ＴＮＦシグナル伝達の関連エフェクターであるセラミドは独立した方向を介して関与する（ＭｃＴｉｅｒｎａｎ，ＣＦ，等，Ｃｕｒｒ
Ｃａｒｄｉｏｌ  Ｒｅｐ．２（３）：１８９−９７頁（２０００年））。しかし、心筋ミオパチーにおける心筋の進展を阻止し及び心筋の治癒を可能にするための薬剤としての、デノボセラミド合成調節剤の有用性は、未だ明示されていない。
【００１１】
悪液質は、骨格筋質量及び脂肪組織の損失を伴う消耗性シンドロームである（Ｆｒｏｓｔ  ＲＡ及びラングＬａｎｇ  ＣＨ．；Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒｉｔ．Ｍｅｔａｂ．Ｃａｒｅ．，２５５−２６３頁（２００５年））。このシンドロームは、感染症、炎症、癌（Ｔｉｓｄａｌｅ  ＭＪ；Ｌａｎｇｅｎｂｅｃｋｓ  Ａｒｃｈ  Ｓｕｒｇ．，３８９：２９９−３０５頁（２００４年））又は関節リュウマチのような幾つかの慢性疾患（Ｒａｌｌ  ＬＣ及びＲｏｕｂｅｎｏｆｆ，Ｒ，Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ  ４３：１２１９−２３頁（２００４年））に対応して見出される。種々のサイトカインの放出がこのシンドロームにおいて関与し、ＴＮＦとＩＬ−６の双方が主要プレイヤーとして認識されている。従って、悪液質は慢性炎症状態として考えることができる。セラミドはよく知られたＴＮＦシグナル伝達の主要エフェクターである。加えて、セラミドはＩＬ−６の発現を調節することが知られている（Ｓｈｉｎｏｄａ  Ｊ，Ｋｏｚａｗａ  Ｏ，Ｔｏｋｕｄａ
Ｈ，Ｕｅｍａｔｓｕ，Ｔ．Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌ．，１１：４３５−４１頁（１９９９年）；Ｃｏｒｏｎｅｏｓ，Ｅ；Ｗａｎｇ，Ｙ；Ｐａｎｕｓｋａ，ＪＲ；Ｔｅｍｐｌｅｔｏｎ，ＤＪ；Ｋｅｓｔｅｒ，Ｍ．；Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ；３１６：１３−７頁（１９９６年））。既存のデータは、デノボセラミド合成がこの炎症状態に付いても同様にシグナルとして中心的な役割を演じていることを我々に信じらせるに至った。従って我々は、セラミドを介するＴＮＦ及び／又はＩＬ−６シグナル伝達の阻害はこの消耗性シンドロームを有する患者に臨床的有益性を提供するであろうことを確信する。
【００１２】
Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ等は、移植のための、例えば、糖尿病の治療における使用のための膵島の分離は、分離の結果として得られる低い生産性により困難であることを示し、そしてこれらの低い生産性は主にβ細胞アポトーシスによるものであることを示した。膵島分離の結果として生じる構造的及び機能的な変化は膵島細胞死を導く（Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ
Ｌ，Ｗａｎｇ  Ｒ，Ｐａｒａｓｋｅｖａｓ  Ｓ，Ｍａｙｓｉｎｇｅｒ  Ｄ．；Ｓｕｒｇｅｒｙ，１２６：３９３９８頁（１９９９年）。分離されたヒト膵島における細胞損失はアポトーシスにより生じる。Ｐａｒａｓｋｅｖａｓ  Ｓ，Ｍａｙｓｉｎｇｅｒ  Ｄ，Ｗａｎｇ  Ｒ，Ｄｕｇｕｉｄ  ＴＰ，Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ  Ｌ；Ｐａｎｃｒｅａｓ，２０（３）：２７０−７６頁（２０００年）。Ｉ型糖尿病の治療のための膵島移植が直面する課題。Ｒｏｔｈｅｒ  ＫＩ，Ｈａｒｌａｎ  ＤＭ，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１４：８７７−８３頁（２００４年））。
【００１３】
Ｂｅａｔｔｉｅ等は、種々の治療（例えば、トレハロース、培地からのアルギニン（Ａｒｇ）の除去等）が移植可能な膵島の収量を改善し得ることを報告するが、実質的な細胞死は残される（Ｂｅａｔｔｉｅ  ＧＭ，Ｌｅｉｂｏｗｉｔｚ  Ｇ，Ｌｏｐｅｚ  ＡＤ，Ｌｅｖｉｎｅ  Ｆ，Ｈａｙｅｋ  Ａ，Ｃｅｌｌ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．９：４３１−３８頁）（２０００年））。カスパーゼ阻害剤による細胞及び組織の処理は、種々の代謝的損
傷への応答において、アポトーシスの部分的な阻止を導くが、アポトーシスは、多くの機構により引き起こされ得るものであり、カスパーゼ阻害剤は、研究されている具体的な事例次第で有用な効果又は限界的効果を有し得るものである。哺乳類細胞培養中の細胞死の制限のためのカスパーゼ阻害剤の研究。Ｓａｕｅｒｗａｌｄ  ＴＭ，Ｏｙｌｅｒ  ＧＡ，Ｂｅｔｅｎｂａｕｇｈ  ＭＪ．）（Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，８１：３２９−４０頁（２００３年））。
【００１４】
セラミドのデノボ合成阻害の研究は、そのような阻害が多くの重要な状況において抗アポトーシス効果を有するよう思われることを示した。遊離パルミチン酸及び／又はグルコースの高濃度の組み合わせでの治療に応答するβ細胞アポトーシスは、例えば、フモニシンＢ１（セラミドシンターゼの阻害剤）での治療により阻止され得る（Ｍａｅｄｌｅｒ，Ｋ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ，５２：７２６−３３頁（２００３年））。従って、デノボセラミド合成の阻害がアポトーシスの事象の予防に適用され得ることは可能である。しかし、セラミドシンターゼを阻害する薬剤を用いた治療は、フモニシンＢ１の摂取により観られたように、結果として毒性効果を生じることを示してきた（Ｂｅｎｎｅｔｔ  ＪＷ及びＫｌｉｃｈ  Ｍ．，Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｒｅｖ．，１６：４９７−５１６頁（２００３年））。ＳＰＴの阻害は膵臓β細胞のアポトーシスを予防するためのもう一つの方法を提供するが、ＳＰＴの調節剤が、移植に先立って培養中の膵臓β細胞の損失を予防することは示されてこなかった。
【００１５】
従って、デノボセラミド合成の調節剤は、エフェクター薬剤としてセラミドを使用して、炎症成分を併うさまざまなヒト及び動物疾患のための重要な新規の治療剤を提供し得る。しかし、デノボセラミド合成経路の幾つかの点における障害（例えば、フモニシンＢ１を用いたと同様に）は、毒性を導くことが知られている。セリンパルミトイルトランスフェラーゼの濃度における阻害は、しかしながら、無毒な細胞成分セリン及びパルミトイルＣｏＡを構築することを導く。
【００１６】
公知のＳＰＴの阻害剤は、シクロセリン、Ｄ−セリン、ミリオシン、スフィンゴフンギンＢ、ビリディオフンギン（ｖｉｒｉｄｉｏｆｕｎｎｇｉｎ）Ａ、及びリポキサマイシン（ｌｉｐｏｘａｍｙｃｉｎ）を含む。ミリオシンのような、これらの天然生成物の多くは、許容不能な毒性を有することが示されてきた。更に、これらのセラミドは、部分的な保護活性しか付与しない。加えて、シクロセリンのような幾つかのＳＰＴ阻害剤は、弱い阻害しか示さず、低い特異性しか提示しない。構造的な研究は、天然のセラミドが出発物質又は生成物の活性部位で結合する形に類似していることを示唆する（Ｈａｎａｄａ  Ｋ．，等、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｙｓ．Ａｃｔａ，１６３２：１６−３０頁（２００３年））。
【００１７】
ＳＰＴ阻害剤ミリオシンは強力な免疫抑制分子であることが知られている。多数の類似体がその構造に基づいて設計されてきた。以下で説明する化合物ＦＴＹ７２０に関連するもののようなミリオシンの免疫抑制活性を有する構造は、ＳＰＴを阻害しない。加えて、化合物２として以下に示される、ＦＴＹ７２０のカルボン酸誘導体は、ＦＴＹ７２０様活性についての免疫抑制アッセイにおいて提示されたようにＳＰＴに対する活性を示さず（Ｋｉｕｃｈｉ  Ｍ．等、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４３：２９４６−６１頁（２０００年））、そしてそれは、結合親和性それ自体が欠如しているわけではないにしろ、極端に低い溶解性のため不活性となることが示唆された。
【化１】
2008515987.tif 000002
【００１８】
ＳＰＴの調節はインシュリン抵抗性を弱めるための、及び、膵臓β細胞の損失を予防するための魅力的な手段を提示する。ＳＰＴの阻害剤は、特に、Ｔ２Ｄの治療のための新規療法を提示する。これらの薬剤は、膵島移植及び肝臓移植のような移植のための組織の保護のために有益であり得る。上記のように、そのような阻害剤は、心筋ミオパチー、アテローム性動脈硬化症、肝臓障害、再かん流傷害、アルツハイマー病、アポトーシスが一因となるＩ型糖尿病及び他の炎症性疾患の治療においても有益に使用され得る。強力で選択的なＳＰＴの阻害剤である生物学的に利用可能な薬剤は、これまで入手可能ではなかった。非毒性の、生物学的に利用可能な、強力で及び選択的なＳＰＴの調節剤は、ここで開示されたような疾患及び状態並びにアポトーシスに関連し、当業者に公知のようにＴＮＦが一因となる他の疾患及び状態の治療のための重要な新規薬剤であることが立証され得る。そのような化合物の創出及びこれらの適応症の治療のためのそれらの有用性は、これ以前に示されてこなかった。
【非特許文献１】Ｚｉｍｍｅｔ  Ｐ，等，Ｎａｔｕｒｅ，４１４：７８３−７頁（２００１年）
【非特許文献２】Ｓｃｈｉｍｉｔｚ−Ｐｆｉｆｆｅｒ  Ｃ等，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７４：２４０２−１０頁（１９９９年）
【非特許文献３】Ｓｈｉｍａｂｕｋｕｒｏ  Ｍ等，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９５：２４９８−２５０２頁（１９９８年）
【非特許文献４】Ｓｈｉｍａｂｕｋｕｒｏ等，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７３：３２４８７−９０頁（１９９８年）
【非特許文献５】Ｓａｗａｄａ，Ｍ，等，Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  Ｄｉｆｆｅｒ．，１１：９９７−１００８頁（２００４年）
【非特許文献６】Ｍｅｙｅｒ，ＳＧ，等，Ｂｉｏｃｈｉｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ．１６４３（１−３）：１−４頁（２００３年）
【非特許文献７】Ｋａｊｉｔａ，Ｋ，等，Ｄｉａｂｅｔｅｓ．Ｒｅｓ．Ｃｌｉ．Ｐｒａｃｔ．，６６Ｓｕｐｐｌ  １：Ｓ７９−８３頁（２００４年）
【非特許文献８】Ｄｉｎｇ，ＷＸ及びＹｉｎ，ＸＭ，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．８：４４５−５４頁（２００４年）
【非特許文献９】Ｋａｎｚｌｅｒ  Ｓ．，等，Ｓｅｍｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ．１０（３）：１７３−８４頁（２０００年）
【非特許文献１０】Ａｙａｓｏｌｌａ  Ｋ．，等，Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．，３７（３）：３２５−３８頁（２００４）
【非特許文献１１】Ｃｕｔｌｅｒ  ＲＧ，等，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，１０１：２０７０−５頁（２００４年）
【非特許文献１２】Ｅｓｍｏｎ，ＣＴ．Ｃｒｏｓｓｔａｌｋ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ，Ｍａｔｕｒｉｔａｓ，４７：３０５−１４頁（２００４年）
【非特許文献１３】Ｗｅｎｃｋｅｒ  Ｄ，等，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１１１：１４９７−１５０４頁（２００３年）
【非特許文献１４】ＭｃＴｉｅｒｎａｎ，ＣＦ，等，Ｃｕｒｒ  Ｃａｒｄｉｏｌ  Ｒｅｐ．２（３）：１８９−９７頁（２０００年）
【非特許文献１５】Ｆｒｏｓｔ  ＲＡ及びＬａｎｇ  ＣＨ．；Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒｉｔ．Ｍｅｔａｂ．Ｃａｒｅ．，２５５−２６３頁（２００５年）
【非特許文献１６】Ｔｉｓｄａｌｅ  ＭＪ；Ｌａｎｇｅｎｂｅｃｋｓ  Ａｒｃｈ  Ｓｕｒｇ．，３８９：２９９−３０５頁（２００４年）
【非特許文献１７】Ｒａｌｌ  ＬＣ及びＲｏｕｂｅｎｏｆｆ，Ｒ，Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ  ４３：１２１９−２３頁（２００４年）
【非特許文献１８】Ｓｈｉｎｏｄａ  Ｊ，Ｋｏｚａｗａ  Ｏ，Ｔｏｋｕｄａ  Ｈ，Ｕｅｍａｔｓｕ，Ｔ．Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌ．，１１：４３５−４１頁（１９９９年）
【非特許文献１９】Ｃｏｒｏｎｅｏｓ，Ｅ；Ｗａｎｇ，Ｙ；Ｐａｎｕｓｋａ，ＪＲ；Ｔｅｍｐｌｅｔｏｎ，ＤＪ；Ｋｅｓｔｅｒ，Ｍ．；Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ；３１６：１３−７頁（１９９６年）
【非特許文献２０】Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ  Ｌ，Ｗａｎｇ  Ｒ，Ｐａｒａｓｋｅｖａｓ  Ｓ，Ｍａｙｓｉｎｇｅｒ  Ｄ．；Ｓｕｒｇｅｒｙ，１２６：３９３９８頁（１９９９年）
【非特許文献２１】Ｐａｒａｓｋｅｖａｓ  Ｓ，Ｍａｙｓｉｎｇｅｒ  Ｄ，Ｗａｎｇ  Ｒ，Ｄｕｇｕｉｄ  ＴＰ，Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ  Ｌ；Ｐａｎｃｒｅａｓ，２０（３）：２７０−７６頁（２０００年）
【非特許文献２２】Ｒｏｔｈｅｒ  ＫＩ，Ｈａｒｌａｎ  ＤＭ，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１４：８７７−８３頁（２００４年）
【非特許文献２３】Ｂｅａｔｔｉｅ  ＧＭ，Ｌｅｉｂｏｗｉｔｚ  Ｇ，Ｌｏｐｅｚ  ＡＤ，Ｌｅｖｉｎｅ  Ｆ，Ｈａｙｅｋ  Ａ，Ｃｅｌｌ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．９：４３１−３８頁）（２０００年）
【非特許文献２４】Ｓａｕｅｒｗａｌｄ  ＴＭ，Ｏｙｌｅｒ  ＧＡ，Ｂｅｔｅｎｂａｕｇｈ  ＭＪ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，８１：３２９−４０頁（２００３年）
【非特許文献２５】Ｍａｅｄｌｅｒ，Ｋ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ，５２：７２６−３３頁（２００３年）
【非特許文献２６】Ｂｅｎｎｅｔｔ  ＪＷ及びＫｌｉｃｈ  Ｍ．，Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｒｅｖ．，１６：４９７−５１６頁（２００３年）
【非特許文献２７】Ｈａｎａｄａ  Ｋ．，等、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｙｓ．Ａｃｔａ，１６３２：１６−３０頁（２００３年）
【非特許文献２８】Ｋｉｕｃｈｉ  Ｍ．等、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４３：２９４６−６１頁（２０００年）
【発明の開示】
【００１９】
発明の詳細
ここに示されるものは新規な化合物及び使用方法である。好ましい態様において、ここで提供される化合物は、酵素、セリンパルミトイルトランスフェラーゼ（ＳＰＴ）に対応する活性を提示する。
【００２０】
ここで提供される化合物は種々のヒトの疾患及び状態の治療において使用され得る。好ましい態様において、化合物は、Ｔ２Ｄ、インシュリン抵抗性、膵臓β細胞アポトーシス又は肥満のような疾患を治療するために使用される。別の好ましい態様において、化合物は、血栓形成促進状態、鬱血性心不全、心筋梗塞、高血圧、異常脂質血症又はメタボリックシンドロームの他の症状（即ち、シンドロームＸ）を治療するために使用される。更なる別の好ましい態様において、化合物は、心臓血管系、敗血症及び悪液質の炎症性疾患のような炎症性疾患を治療するために使用される。心臓血管系の例示的な炎症性疾患には、アテローム性動脈硬化症が含まれる。更なる別の好ましい態様において、これらの化合物は、上記のような、ウイルス性の、アルコール関連の、再かん流傷害からの肝臓障害を予防するために使用される。更なる別の好ましい態様において、これらの化合物は、単独で
又は現在承認されているカクテル及び／又はカスパーゼ阻害剤と組み合わせて、膵臓肝臓細胞及び／又は肝臓移植を保護し及び収量を増加させるために使用される。
【００２１】
同様に提供されるものは、別の活性薬剤の治療有効量との組み合わせにおける、ここで示された化合物を含む組成物である。例示的な薬剤には、インシュリン、インシュリン類似体、インクレチン、インクレチン類似体、グルカゴン様ペプチド、グルカゴン様ペプチド類似体、エキセンディン、エキセンディン類似体、ＰＡＣＡＰ及びＶＩＰ類似体、スルホニルウレア、ビグアニド、α−グルコシダーゼ阻害剤、アセチルＣｏＡカルボキシラーゼ阻害剤、カスパーゼ阻害剤、δ３不飽和脂肪酸、ポリ不飽和脂肪酸及びＰＰＡＲリガンドが含まれる。従って、種々の疾患を治療するための方法の態様には、ここに示される化合物と別の活性薬剤の治療有効量の同時投与又はここで提供される組み合せ組成物の投与が含まれる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
詳細な記載
本明細書中で使用されるように、“ａ”及び“ａｎ”は１又はそれ以上を意味する。請求項において使用されるように、用語“含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）”と組み合せて使用される場合、用語“ａ”及び“ａｎ”は１又はそれ以上を意味する。ここで使用されるように、“別の（ａｎｏｔｈｅｒ）”は少なくとも２番目又はそれ以上を意味する。
【００２３】
今、本発明の種々の態様及び特定の適用に対し詳細に言及する。本発明が種々の態様及び用途と組み合せて記載されるが、そのような態様及び用途は本発明を限定することを意図しないことが理解される。むしろ、本発明は、本発明の精神及び範囲内において含まれ得る変形物、改良物及び等価物を網羅することを意図する。加えて、この開示の全範囲にわたり、種々の特許、特許出願、ウェブサイト、が参照され、そして他に指示がない限り、それぞれはその全てが参照としてここに組み込まれる。ここに記述される全ての刊行物は、本発明の試薬、方法論及びコンセプトの記載及び開示目的のために示される。本記載のいずれも、これらの文献がここに記載された本発明に関連する先行技術であるとの承認として解釈されるものではない。
【００２４】
Ｉ．化合物
ここに示されるものは、式（Ｉ）：
【化２】
2008515987.tif 000003
｛式中、Ｒ1は、Ｈ又は所望により置換された低級アルキル基、アリール基、アラルキル
基又はアルキルオキシアルキル基を表し；
各Ｒ2は独立して、Ｈ、保護基又は−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨＲa−ＮＨＲb（式中、Ｒaはアルキル基、アリール基、アシル基、ケト基、アジド基、ヒドロキシル基、ヒドラジン基、シアノ基、ハロゲン原子、ヒドラジド基、アルケニル基、アルキニル基、エーテル基、チオール基、セレノ基、スルホニル基、ボレート基、ボロネート基、ホスホ基、ホスホノ基、ホスフィン基、複素環基、エノン基、イミン基、アルデヒド基、エステル基、チオ酸基、ヒドロキシルアミン基、アミノ基及びそれらの組み合せからなる群より選択され；及び
ＲbはＨ又はアミノ保護基を表す。）を表し；
各Ｖ及びＺは独立して、（ＣＲcＲd）n、Ｏ、ＮＲe、Ｓ、Ａｒ、ＣＲcＲdＡｒ、ＯＡｒ、ＮＲ4Ａｒ、ＳＡｒ又はＡｒ（式中、各Ｒc及びＲdは独立して、Ｈ、低級アルキル基、Ｏ
Ｈ、Ｏ−低級アルキル基を表すか又はＲc及びＲdは一緒になって、＝Ｏ、＝Ｎ−ＯＨ、＝Ｎ−Ｏ−低級アルキル基又は＝Ｎ−Ｏ−ＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3を表し；
ＲeはＨ、低級アルキル基又は−ＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3を表し；及び
ｎは１ないし７を表す。）を表し；
ｑは０ないし３を表し；
Ａｒは、所望により置換されたアリール基又はヘテロアリール基を表し；
ｕは０又は１を表し；
各Ｘは独立して、Ｈ又はハロゲン原子を表し；及び
ｍは４ないし１２を表す。｝に対応する新規化合物及びその医薬的に許容可能な塩である。
【００２５】
本発明の幾つかの態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、
【化３】
2008515987.tif 000004
を含まない。
【００２６】
好ましい式（Ｉ）で表される化合物は、Ｒ1がメチル基、エチル基、イソプロピル基等
のような低級アルキル基であるものを含む。更なる好ましい態様は、Ｒ1がＣＨ3−Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−のようなアルキルオキシアルキル基、ＨＯ−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｏ−、ＨＯ−（ＣＨ2−ＣＨ2−Ｏ−）p−、ヒドロキシエチルアルコール、ヒドロキシプロピルアルコー
ル、ヒドロキシエチルオキシエチルアルコール、及びポリエチレングリコール又はそれらの誘導体である化合物を含む。他の好ましい式（Ｉ）で表される化合物は、Ｘがフッ素原子のようなハロゲン原子である。更なる好ましい式（Ｉ）で表される化合物は、ＺがＮＲ4、Ｏ又はＳであるものを含む。別の好ましい態様は、Ａｒが任意に置換されたヘテロア
リール基である式（Ｉ）で表される化合物を含む。別の好ましい態様は、Ａｒが、５−５、５−６又は６−６環系のような、任意に置換された縮合環系である式（Ｉ）で表される化合物を含む。
【００２７】
一つの態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、式（ＩＩ）
【化４】
2008515987.tif 000005
｛式中、ＬはＣＨ2、ＣＨＲf、ＣＲfＲg、Ｏ、ＮＲh、Ｓ、Ａｒ、ＣＨ2Ａｒ、ＣＨＲfＡ
ｒ、ＣＲfＲgＡｒ、ＯＡｒ、ＮＲhＡｒ、ＳＡｒ又はＡｒＡｒ（式中、ＲfはＨ、低級アル
キル基、ＯＨ、Ｏ−低級アルキル基を表し、
ＲgはＨを表すか又はＲf及びＲgは一緒になって、＝Ｏ、＝Ｎ−ＯＨ、＝Ｎ−Ｏ−低級ア
ルキル基又は＝Ｎ−Ｏ−ＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3を表し、及び
ＲhはＨ、低級アルキル基又は−ＣＨ2ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3を表す。）を表す。｝に対応する。
【００２８】
一つの態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、式（ＩＩＡ）
【化５】
2008515987.tif 000006
（式中、それぞれのＹは、独立して、Ｃ、ＣＨ、Ｏ、Ｓ、Ｎ又はＮＨを表す。）に対応する。
【００２９】
別の態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、式（ＩＩＢ）
【化６】
2008515987.tif 000007
（式中、それぞれのＷは、独立して、Ｃ、ＣＨ、Ｎ又はＮＨを表す。）に対応する。
【００３０】
更なる別の態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、式（ＩＩＣ）
【化７】
2008515987.tif 000008
（式中、それぞれのＹは、独立して、Ｃ、ＣＨ、Ｏ、Ｓ、Ｎ又はＮＨを表す。）に対応す
る。
【００３１】
別の態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、式（ＩＩＤ）
【化８】
2008515987.tif 000009
に対応する。
【００３２】
別の態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、式（ＩＩＥ）
【化９】
2008515987.tif 000010
に対応する。
【００３３】
別の態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、式（ＩＩＦ）
【化１０】
2008515987.tif 000011
に対応する。
【００３４】
更なる態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、式（ＩＩＩ）
【化１１】
2008515987.tif 000012
に対応する。
【００３５】
別の態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、式（ＩＩＩＡ）
【化１２】
2008515987.tif 000013
に対応する。
【００３６】
別の態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、式（ＩＩＩＢ）
【化１３】
2008515987.tif 000014
に対応する。
【００３７】
別の態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、式（ＩＩＩＣ）
【化１４】
2008515987.tif 000015
（式中、それぞれのＹは、独立して、Ｃ、ＣＨ、Ｏ、Ｓ、Ｎ又はＮＨを表す。）に対応する。
【００３８】
別の態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、式（ＩＩＩＤ）
【化１５】
2008515987.tif 000016
（式中、それぞれのＹは、独立して、Ｃ、ＣＨ、Ｏ、Ｓ、Ｎ又はＮＨを表す。）に対応する。
【００３９】
別の態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、式（ＩＩＩＥ）
【化１６】
2008515987.tif 000017
（式中、それぞれのＹは、独立して、Ｃ、ＣＨ、Ｏ、Ｓ、Ｎ又はＮＨを表す。）に対応する。
【００４０】
別の態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、式（ＩＩＩＦ）
【化１７】
2008515987.tif 000018
（式中、それぞれのＷは、独立して、Ｃ、ＣＨ、Ｎ又はＮＨを表す。）に対応する。
【００４１】
別の態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、式（ＩＩＩＧ）
【化１８】
2008515987.tif 000019
（式中、それぞれのＷは、独立して、Ｃ、ＣＨ、Ｎ又はＮＨを表す。）に対応する。
【００４２】
別の態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、式（ＩＩＩＨ）
【化１９】
2008515987.tif 000020
（式中、それぞれのＷは、独立して、Ｃ、ＣＨ、Ｎ又はＮＨを表す。）に対応する。
【００４３】
別の態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、式（ＩＩＩＪ）
【化２０】
2008515987.tif 000021
（式中、それぞれのＹは、独立して、Ｃ、ＣＨ、Ｏ、Ｓ、Ｎ又はＮＨを表す。）に対応する。
【００４４】
別の態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、式（ＩＩＩＫ）
【化２１】
2008515987.tif 000022
（式中、それぞれのＹは、独立して、Ｃ、ＣＨ、Ｏ、Ｓ、Ｎ又はＮＨを表す。）に対応する。
【００４５】
別の態様において、式（Ｉ）で表される化合物は、式（ＩＩＩＬ）
【化２２】
2008515987.tif 000023
（式中、それぞれのＹは、独立して、Ｃ、ＣＨ、Ｏ、Ｓ、Ｎ又はＮＨを表す。）に対応する。
【００４６】
更なる別の態様において、式（Ｉ）で表される化合物のプロドラッグ形態が提示される。化合物のプロドラッグ形態は、経口投与のために最適であり、典型的には酸活性種のエステルに対応する。プロドラッグの活性種は、活性薬剤化合物を製造するために使用され得る。
【００４７】
一つの態様において、プロドラッグ化合物は式（ＩＩＩＭ）
【化２３】
2008515987.tif 000024
（式中、Ｒaは、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、
グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、ピロリジン及びセレノシステインの側鎖を表す。）に対応する。
【００４８】
式（ＩＩＩＭ）に対応する代表的なプロドラッグ化合物は、式（ＩＩＩＮ）
【化２４】
2008515987.tif 000025
に対応する化合物を含む。
【００４９】
別の態様において、プロドラッグ化合物は、式（ＩＩＩＰ）
【化２５】
2008515987.tif 000026
（式中、Ｒaは、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、
グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、ピロリジン及びセレノシステインの側鎖を表す。）に対応する。
【００５０】
式（ＩＩＩＰ）に対応する代表的なプロドラッグ化合物は、式（ＩＩＩＱ）
【化２６】
2008515987.tif 000027
に対応する化合物を含む。
【００５１】
ここで提供される例示的な化合物を以下の表１に列記した。
表１−代表的な化合物
【表１Ａ】
2008515987.tif 000028
【表１Ｂ】
2008515987.tif 000029
【表１Ｃ】
2008515987.tif 000030
【００５２】
ＩＩ．定義
ここで示される化合物は同位体で標識された化合物を包含し、それらは１個以上の原子が、天然において通常観察される原子量又は質量数とは異なる原子量又は質量数を有する原子によって置換されていること以外は、式（Ｉ）で提示されるものと同一である。本発明の化合物中に組み込まれ得る同位体の例には、それぞれ2Ｈ、3Ｈ、13Ｃ、14Ｃ、15Ｎ、18Ｏ、17Ｏ、35Ｓ、18Ｆ、36Ｃｌのような、水素原子、炭素原子、窒素原子、酸素原子、フッ素原子及び塩素原子の同位体が含まれる。前述の同位体及び／又は他の原子の他の同位体を含む、ここに示される化合物、そのプロドラッグ及び前記化合物又は前記プロドラッグの医薬的に許容可能な塩は、本発明の範囲内である。本発明の、同位体で標識された特定の化合物、例えば、3Ｈ及び14Ｃのような放射性同位体が組み込まれたものは、薬剤
及び／又は基質組織分布試験において有用である。3Ｈ及び14Ｃは、それらの製造の容易
さ及び検出能において好ましい。更に、重水素、即ち、2Ｈのようなより重い同位体での
置換は、より大きな代謝安定性に起因する特定の治療的利点を提供することができ、例えば、インビボ半減期を増大するか又は必要薬量を減少し、従って、ある状況において好ましいものであり得る。ここで示される同位体で標識された化合物及びそのプロドラッグは、一般に、同位体で標識されていない試薬を容易に入手できる同位体で標識された試薬に置き換えることにより、以下に示すスキーム中及び／又は実施例中で開示された手順を行
うことにより製造することができる。
【００５３】
ここで示される化合物の幾つかは不斉炭素原子を有し、そのため、光学異性体又は立体異性体として存在する。立体異性体の混合物は、公知の方法により、例えば、クロマトグラフィー及び／又は分別結晶化により、それらの物理化学的差異に基づいて、各々の立体異性体へ分離され得る。光学異性体は、光学異性体の混合物を適当な光学活性化合物（例えば、アルコール）との反応により立体異性体の混合物へと変換し、該立体異性体を分離し、それぞれの立体異性体を対応する純粋な光学異性体へ変換する（例えば、加水分解）ことにより分離され得る。光学異性体は、不斉試薬を用いても合成することができ、例えば、ミリオシン及びその類似体のαアルキルアミノ酸頭部基を製造できる（例えば、Ｓｅｅｂａｃｈ，Ｄ．等、Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ．，７０：１１９４−１２１６頁（１９８７年）；Ｈａｌｅ，ＪＪ，等、Ｂｉｏ−ｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１２：４８０３−０７頁（２００４年）；Ｋｏｂａｙａｓｈｉ，Ｓ．等、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１２０：９０８−１９頁（１９９８年））。そのほかにも、天然物からのキラルシントンを用いる不斉中心の不斉合成は、そのような合成、例えば、ｄ−マンノースからのミリオシンの合成（Ｏｉｓｈｉ，Ｔ．等、Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｍｕｎ．１９３２−３３頁（２００１年）；及びその中でのミリオシン合成への参照）及び単離された天然ミリオシンからのミリオシン類似体の合成（Ｃｈｅｎ，ＪＫ，等、Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ．６，２２１−３５頁（１９９９年）；Ｆｕｊｉｔａ，Ｔ．等Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３９、４４５１−５９頁（１９９６年））に対する簡易な手法である。加えて、不斉中心の一つを優先的に修飾し、それにより光学異性体の分離又は相互変換を可能にする酵素（遊離の又は担持された）の使用が本技術において周知であり（例えば、Ｗａｎｇ，Ｙ．，−Ｆ．，等（１９８８年）Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１０、７２００−５頁）、医薬品の製造において大きな有用性を有する。立体異性体、光学異性体及びそれらの混合物を含む全てのそのような異性体は、本発明の一部分として考慮される。
【００５４】
当業者は、ここに示された化合物幾つかが、数種の互変異性体で存在し得ることを理解するだろう。全てのそのような互変異性体は、本発明の一部分として考慮される。例えば、ここに示されるあらゆる化合物の全てのエノール−ケト体もまた、本発明に含まれる。
【００５５】
本発明の化合物の幾つかは酸性であり、医薬的に許容可能なカチオン（陽イオン）と塩を形成し得る。本発明の化合物の幾つかは塩基性であり、従って、医薬的に許容可能なアニオン（陰イオン）と塩を形成し得る。二価塩を含む全てのそれらの塩は、本発明の範囲内のものであり、それらは慣用の方法により製造され得る。例えば、塩は単に、水性の、非水性の又は部分的に水性の媒体の何れかの中で、酸性及び塩基性物を接触させることにより製造し得る。塩は、濾過、無溶媒での沈殿に続く濾過、溶媒の留去、又は水性溶液の場合において、適当ならば、凍結乾燥の何れかにより回収される。
【００５６】
加えて、ここで示される化合物は、それらの代謝物、水和物又は溶媒和物を包含し、それらの全ては本発明の範囲内のものである。
【００５７】
用語“置換された（ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ）”は、化学的に実現可能な何れかの置換基での、何れかの炭素原子又はヘテロ原子における置換を言及する。代表的な置換には、ハロゲン置換又は何れかのヘテロ原子含有基、例えば、アルコキシ基、ホスホリル基、スルフヒドリル基等での置換が含まれる。
【００５８】
用語“アルキル”は、直鎖、分岐又は環状炭化水素基を言及する。そのようなアルキル基（指定された鎖長が特定の例を含むと前提して）の例示は、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、第二ブチル基、第三ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、第三ペンチル基、１−メチルブチル基、２−メチルブチル基
、３−メチルブチル基、ヘキシル基、イソヘキシル基、ヘプチル基及びオクチル基である。用語“低級アルキル基”は、炭素原子数１ないし２０を含む、上記で定義された通りのアルキル基を言及する。“置換されたアルキル基”は、上記のように置換されたアルキル基を言及し、ハロアルキル基、例えば、ＣＦ3、ＣＨＦ2、ＣＨ2Ｆ他により例示される。
【００５９】
用語“アリール”は炭素原子数３ないし２０を含む如何なる芳香族基をも言及する。アリール基はまた、５−５、５−６及び６−６環系のような縮合環系も包含する。代表的なアリール基には、フェニル基、ビフェニル基、アントラシル基、ノルボルニル基等が含まれる。アリール基は、上で規定された定義に従って置換され得る。
【００６０】
用語“ヘテロアリール”は、芳香環の中に少なくとも１個以上のヘテロ原子を含む如何なるアリール基をも言及する。ヘテロアリール基はまた、５−５、５−６及び６−６環系のような縮合環系も包含する。代表的なヘテロアリール基は、イミダゾール基、チアゾール基、オキサゾール基、フェニル基、ピリジニル基、ピリミジル基、イミダゾリル基、ベンズイミダゾリル基、チアゾリル基、オキサゾリル基、イソキサゾリル基、ベンズチアゾリル基又はベンズオキサゾリル基等である。ヘテロアリール基は、上で規定された定義に従って置換され得る。
【００６１】
用語“アラルキル”又は“アリールアルキル”は、上記のようなアルキル基を含有するアリール基を言及する。アラルキル又はアリールアルキル基は、アルキル部分又はアリール部分から付加され得る。
【００６２】
用語“アルコキシ”は酸素原子を介して結合されたアルキル基を言及する。例示的なアルコキシ基（指定された鎖長が特定の例を含むと前提して）は、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、イソブトキシ基、第三ブトキシ基、ペントキシ基、イソペントキシ基、ネオペントキシ基、第三ペントキシ基、ヘキソキシ基、イソヘキソキシ基、ヘプトキシ基及びオクトキシ基である。アルコキシ基は、上で規定された定義に従って置換され得る。
【００６３】
用語“アルコキシアルキル”は、上記のようにアルキル基を含有するアルコキシ基を言及する。アルコキシアルキル基は、上で規定された定義に従って置換され得る。
【００６４】
用語“ハロゲン”は、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子又はフッ素原子を言及する。
【００６５】
用語“調節剤”は直接的又は間接的に標的物と相互作用する分子を意味する。該相互作用は、アゴニスト、アンタゴニスト等を含むが、それらに限定されるものではない。
【００６６】
用語“アゴニスト”は、別の分子の活性又は受容体部位の活性を増加させる、化合物、薬剤、酵素活性化剤又はホルモンのような分子を意味する。
【００６７】
用語“アンタゴニスト”は、別の分子の作用又は受容体部位の活性を減少又は阻止する、化合物、薬剤、酵素阻害剤又はホルモンのような分子を意味する。
【００６８】
用語“有効量”又は“治療有効量”は、望ましい生物学的結果を提供するのに十分な薬剤の量を言及する。その結果は、疾患の徴候、症状又は原因の減少及び／又は緩和或いは他の望ましい如何なる生物系の変化でもあり得る。例えば、治療的な使用のための“有効量”は、疾患における臨床的に明白な減少を提供するために要求される、ここで開示されたような化合物を含む組成物の量である。全ての個々の場合における適当な“有効”量は、経常的な実験を使用して当業者により決定され得る。
【００６９】
ここで使用されるように、用語“治療（ｔｒｅａｔ）”又は“治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）”は同じ意味で使用され、疾患の発症の延期及び／又は今後又は現在発症することが見込まれる症状の重篤度の減少を示すことを意味する。用語“更なる”は、現在の症状を改善すること、更なる症状を予防すること及び内在する代謝的な症状の原因を改善又は予防することを含む。
【００７０】
“医薬的に許容可能な”又は“薬理的に許容可能な”は、生物学的に又はその他に望ましくないものでない材料、即ち、該材料は、如何なる望ましくない効果も起こすことなく、又は含まれる如何なる組成物の成分とも有害な様式で相互作用することなく患者に投与され得る材料であることを意味する。
【００７１】
ＩＩＩ．化合物の製造
ここで提供される化合物は当業者に周知の合成方法により製造され得る。使用され得る代表的な製造方法が論じられる例示的な文献は、Ｋｉｕｃｈｉ，等、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４３：２９４６−６１頁（２０００年）；Ｓｅｉｄｅｌ  Ｇ．等、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，６９：３９５０−５２頁（２００４年）；Ｃｌｅｍｅｎｓ  Ｊ．Ｊ．等、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１４：４９０３−０６頁（２００４年）；Ｄｕｒａｎｄ，Ｐ．等、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，５０６：６頁（２０００年）；Ｈａｌｅ等、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１４：３３５１−５５頁（２００４年）；Ｓｅｅｂａｃｈ，Ｄ．等、Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ．，７０：１１９４−１２１６頁（１９８７年）；Ｏｉｓｈｉ，Ｔ，等（２００１年）、Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．１９３２−３頁；Ｗａｎｇ，Ｙ．−Ｆ．等、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１０，７２００−０５頁（１９８８年）；Ｐｉｐｉｋ，Ｂ，等、Ｓｙｎｔｈ．Ｃｏｍｍｕｎ．３４，１８６３−７０頁（２００４年）；を含み、それらの全ての開示は参照としてここに組み込まれる。
【００７２】
合成の一般法、特にエステルの合成は“Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ
Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ”第２版、Ｌａｒｏｃｋ，ＲＣ，Ｗｉｌｅｙ，ニューヨーク、１９９９年及び“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｔ  ａｎｄ  Ｗｕｔｓ  ＰＧＭ，第３版、Ｗｉｌｅｙ，ニューヨーク、１９９９年において提供される。
【００７３】
Ｋｉｕｃｈｉ等（Ｋｉｕｃｈｉ  Ｍ，等、Ｊ．Ｍｅｄ，Ｃｈｅｍ．，４３：２９４６−６１頁（２０００年））は、化合物２の合成のための手順を論じている。本明細書における化合物の代表的な製造方法は、該文献に報告された合成前駆体を含み得る。ハロゲン化アルキルからＣα−置換セリン部分を製造する（又は対応するヒドロキシル又はアルデヒド構造から変換によりハロゲン化アルキルにする）ための一般的な手順（スキーム１）は本発明の化合物を製造するために広範に使用し得る。以下の合成スキームにおいて示されるものは、本発明の化合物を製造するための例示的な方法である。
【００７４】
以下のスキーム１は、化合物２を製造するためのＫｉｕｃｈｉ等において報告された製造ルートを示す。
【化２７】
2008515987.tif 000031
【００７５】
スキーム２は、向上した水溶性を有する類似体の製造のための類似の合成手順を示す。
【化２８】
2008515987.tif 000032
【００７６】
以下のスキーム３で示されるように、頭部基のα及びβに２つのヒドロキシル官能基を
含むミリオシンの類似体は、Ｃｈｅｎ，ＪＫ，等（１９９９年）により報告された手法の変形を用いて本来のミリオシンから製造され得る。以下に示されるのは、ヨウ化アルキル化合物とのＷｉｔｔｉｇタイプの反応を使用することにより、Ｒ´において種々の官能基を有する広範な類似体を得るために、Ｃｈｅｎ等において報告された出発物質を用いる例示的な合成手順である。例えば、Ｒ´は、アルキル基、ハロアルキル基、アリール基、アラルキル基等であり得る。スキーム３は不斉製造であり、対応する光学異性体は、一級のＯＨ及びＮＨ／ＣＯ2Ｈ官能基を保護し、続いて二級のＯＨ基における反転化学によりこ
の手法を用いて製造し得る。例示的な化合物、１３、１７、１８及び１９は、以下に示される手法を用いて対応するヨウ化アルキル化合物から容易に製造される。
【化２９】
2008515987.tif 000033
【００７７】
セリン頭部基のα位に１個のヒドロキシル官能基を有する化合物は、以下のスキーム４中で示された合成方法で合成され得る。類似の試薬が、実際に使用される基質に依存して、より多い又はより少ない収率を伴ってこれらの合成工程を行うために使用され得る。例示的な化合物、１４、１９及び２０がスキーム４を使用して容易に製造される。
【化３０】
2008515987.tif 000034
【００７８】
同様に、セリン様頭部基のβ位に１個のヒドロキシル官能基を有する化合物（例えば、化合物２０）は、スキーム５に従う、容易に入手可能な、対応するα−ハロケトン又はα−ヒドロキシケトンから開始される経路を介して製造される。
【化３１】
2008515987.tif 000035
【００７９】
ＩＶ．医薬組成物
ここに示される組成物はここで提供される化合物及び医薬的に許容可能なキャリアを含む。
【００８０】
Ａ．処方
本発明の化合物を含む医薬的に有用な組成物は、医薬的に許容可能なキャリアの混合によるような公知の方法に従って処方され得る。処方のそのようなキャリア及び方法の例は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ´ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ中に見出さ
れ得る。効果的な投与のために好適な医薬的に許容可能な組成物を形成するために、そのような組成物は化合物、例えば、本発明のプロドラッグ又は活性種（例えば、エステル又はプロドラッグの対応する酸）の有効量を含む。
【００８１】
本発明の化合物を投与するための好適な製剤は、局所の、経皮の、経口の、全身の及び非経口の医薬製剤を含む。ここで示される化合物含む組成物は、投与のための慣用の賦形剤において多種多様の治療的な剤形において投与され得る。例えば、化合物又は調節剤は、錠剤、カプセル剤（それぞれ徐放及び持続放出処方を含む）、丸薬（ｐｉｌｌｓ）、粉剤、顆粒剤、エリキシル剤、チンキ剤、液剤、懸濁剤、シロップ及び乳剤のような経口剤形において、又は経皮デリバリー若しくは注入により投与され得る。同様にそれらはまた、静脈内の（急速静注及び輸液の両方）、腹腔内の、皮下の、血管閉塞を伴うか又は伴わない局所の、経皮の又は筋肉内の様式で投与され得、使用される全ての様式は医薬分野の当業者に周知である。本発明の化合物は、経皮デリバリー又は注射器若しくは無針注入手段による注入を含むがそれらに限定されない、広範な機構によりデリバリー（送達）され得る。
【００８２】
Ｂ．薬量
態様には、ここに示された化合物の有効量を含む医薬組成物が含まれる。ここに開示された化合物の有効量は、全ての潜在的な毒性を最小化しながら、セリンパルミトイルトランスフェラーゼの最適な阻害を得るための日常的な試験により特定され得る。
【００８３】
当業者に周知のように、有効量は日常的に決定され得、患者個人の状態、体重、性別、年齢、患者の病状、治療される状態の重篤度、投与経路、患者の腎機能及び肝機能及び使用される特定の化合物のような種々の要因に従って変化し得る。通常の技術を有する医師又は獣医は、状態の進行を予防し、対抗し又は阻むの必要な薬剤の有効量を容易に決定して処方することができる。毒性を伴わない効果が得られる範囲内の、薬剤の濃度の達成における最適な精密性は、標的部位への薬剤利用の動力学に基づくレジメを必要とする。これは、薬剤の分布、平衡及び排泄の考慮を含む。
【００８４】
要求される化合物の有効で、しかし非毒性の量は、セリンパルミトイルトランスフェラーゼ調節剤として使用され得る。本発明化合物の投与のために意図される薬量は、患者１人、１日当たり０．０１ないし１，０００ｍｇの範囲である。経口投与のため、組成物は、好ましくは、治療される患者へ投与される症状調節のための活性成分が０．０１、０．０５、０．１、０．５、１．０、２．５、５．０、１０．０、１５．０、２５．０及び５０．０ｍｇ含まれる分割錠又は非分割錠の形態で提供される。薬量もまた、体重により変化し、例えば、１日当たり体重の約０．０００１ｍｇ／ｋｇないし約１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは、１日当たり体重の０．００１ｍｇ／ｋｇないし約１０ｍｇ／ｋｇの範囲である。
【００８５】
化合物は１日１回投与で投与され得るか又は総１日薬量が１日２回、３回又は４回の分割投与で投与され得る。経皮デリバリーシステムの形態で投与するために、薬量投与は投与レジメの間中、断続的よりもむしろ連続的である。
【００８６】
本発明の化合物の薬量は、他の治療剤と組み合わされる場合調整される。これらの種々の薬剤の薬量は、何れかの薬剤が単独で使用されるよりも病状が減少されるところの相乗的結果を達成するために、独立して最適化されて組み合わされ得る。加えて、他の薬剤の同時投与又は連続投与が望ましい。
【００８７】
Ｃ．誘導体
ここに示される化合物の態様は“化学的誘導体”を含む。化学的誘導体は、ここに示さ
れた化合物及び該化合物の溶解性、半減期、吸収等を改善する更なる部分を有するものを含む。化学的誘導体はまた、望ましくない副作用を少なくするか又は毒性を減少させる部分を含有する。そのような部分の例は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ´ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅのような種々のテキスト中に記載されており、また、当業者に周知である。
【００８８】
Ｄ．キャリア及び賦形剤
ここに示される化合物は、経口錠剤、カプセル剤、エリキシル剤、シロップ等である、対象とする投与形態に関して好適に選択され、慣用の医薬実務に合致する、好適な医薬の希釈剤、賦形剤又はキャリア（ここではまとめて「キャリア材料」として言及する。）と混合されて投与され得る。
【００８９】
錠剤又はカプセル剤の形態における経口投与のために、活性薬剤成分は、エタノール、グリセロール、水等のような、経口の、非毒性の医薬的に許容可能な不活性キャリアと組み合され得る。更に、望ましいか又は必要な場合、好適な結合剤、潤滑剤、崩壊剤及び着色剤もまた、混合物中へ添加され得る。好適な結合剤は、限定されないが、デンプン、ゼラチン、グルコース又はβ−ラクトースのような天然糖、トウモロコシ甘味料、アカシア、トラガカント又はアルギン酸ナトリウムのような天然及び合成ガム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングルコール、ワックス等を含む。これらの投与形態において使用される潤滑剤は、限定されないが、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム等を含む。崩壊剤は、限定されないが、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガム等を含む。
【００９０】
液体形態のために、活性薬剤成分は、合成及び天然のガム、例えば、トラガカント、アカシア、メチルセルロース等のような、好適には香りの付いた懸濁剤又は分散剤と組み合わせられ得る。使用され得る他の分散剤は、グリセリン等を含む。
【００９１】
非経口投与のために、無菌の懸濁液又は溶液が望ましい。静脈内投与が望まれる場合、一般に好適な防腐剤を含む等浸透圧の配合物が使用される。
【００９２】
本発明の化合物を含む局所配合物は、アルコール、アロエベラゲル、アラントイン、グリセリン、ビタミンＡ及びＥ油、鉱油、ＰＰＧ２ミリスチルプロピオネート等のような当該分野において周知の種々のキャリア材料と混合して、例えば、アルコール溶液、局所クレンザー、洗顔クリーム、スキンゲル、スキンローション及びクリーム又はゲル配合物におけるシャンプーを形成し得る。
【００９３】
化合物はまた、小さな単層ベシクル、大きな単層ベシクル及び複層ベシクルのようなリポソームデリバリーシステムの形態において投与され得る。リポソームは、コレステロール、ステアリルアミン又はホスファチジルコリンのような種々のリン脂質から形成され得る。
【００９４】
ここに示される化合物はまた、該化合物が結合された個別のキャリアとしてのモノクローナル抗体の使用によりデリバリーされ得る。化合物は、目標設定可能な薬剤キャリアとしての可溶性ポリマーと結合され得る。そのようなポリマーは、パルミトイル残基で置換された、ポリビニル−ピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリル−アミドフェノール、ポリヒドロキシ−エチルアスパルタミドフェノール又はポリエチル−エンオキシドポリリジンを含み得る。更に、化合物は、ポリ乳酸、ポリεカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロ−ピラン、ポリシアノアクリレート、架橋された又は両親媒性のハイドロゲルのブロックコポリ
マー及び他の好適な当業者に公知のポリマーのような、薬剤の放出制御の達成において有用な生物分解性ポリマーと結合され得る。
【００９５】
経口投与のために、化合物は、カプセル、錠剤又はボーラス形態において投与され得る。前記カプセル、錠剤及びボーラスは、デンプン、タルク、ステアリン酸マグネシウム又は第二リン酸カルシウムのような、適当なキャリアビヒクルを含む。
【００９６】
単位投与形態は、均一な混合物が得られるように、化合物を、希釈剤、充填剤、崩壊剤及び／又は結合剤を含む好適な微細に粉末化された不活性成分と密に混合することにより製造される。活性成分は化合物と不利に反応しないものである。好適な不活性成分は、デンプン、乳糖、タルク、ステアリン酸マグネシウム、植物ガム及び植物油等を含む。化合物は、破砕、攪拌、製粉又は回転により不活性キャリアと密に混合され得る。
【００９７】
注入可能な製剤は、適当な不活性液体キャリアと混合されたここに示された化合物を含む。許容可能な液体キャリアは、ピーナッツ油、綿実油、ゴマ油等のような植物油並びにソルケタール、グリセロールホルマール等のような有機溶媒を含む。代替物として、水性の非経口製剤がまた使用され得る。植物油が好ましい液体キャリアである。該製剤は液体キャリア中で化合物を溶解又は懸濁させることによって製造される。
【００９８】
化合物の局所適用は、例えば、本発明化合物を含む液体ドレンチ又はシャンプーの使用を介して或いは水溶液又は懸濁液としての調節剤における使用を介して可能である。これらの製剤は、ベントナイトのような懸濁剤及び所望による消泡剤を含み得る。
【００９９】
Ｅ．投与様式
投与量に影響を及ぼす他の要因は投与様式である。本発明の医薬組成物は、皮下、筋肉内、静脈内、局所、経皮、経口及び如何なる他の非経口の又は非経口でない（ｎｏｎ−ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ）経路を含むが限定されない種々の経路により個々の患者に提供され得る。更に、化合物は、好適な経鼻ビヒクルの局所使用を介する経鼻形態で又は当業者に周知の経皮の皮膚用パッチ剤の形態を使用する経皮経路を介して投与し得る。
【０１００】
化合物又は調節剤は、不活性液体キャリア中に溶解された活性成分からなる製剤の注入を介して、択一的に非経口的に投与され得る。注入は、注射器又は無針手段の何れかによる、筋肉内、胃内、気管内又は皮下の何れかであり得る。
【０１０１】
Ｆ．医薬的に許容可能な塩
態様は、遊離塩基又は医薬的に許容可能な塩の形態におけるここに示される化合物を含む。例示的な医薬的に許容可能な塩は、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、塩酸塩、過塩素酸塩、硫酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩、ヒドロエタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パモン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、シクロヘキサンスルファミン酸塩及び糖酸塩を含む。要求される塩形態を形成するために、イオン交換、メタセシス又は中和工程が使用され得る。
【０１０２】
Ｇ．併用
態様は別の活性薬剤との組み合わせにおけるここに示される化合物を含む組成物を含む。使用され得る例示的な活性薬剤は、インシュリン、インシュリン類似体、インクレチン、インクレチン類似体、グルカゴン様ペプチド、グルカゴン様ペプチド類似体、エキセンディン、エキセンディン類似体、ＰＡＣＡＰ及びＶＩＰ類似体、スルホニルウレア、ビグアニド、α−グルコシダーゼ阻害剤及び全ての種類のペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲｓ）のリガンドを含む。
【０１０３】
１種以上の活性薬剤（ここで活性薬剤は別々の投与製剤である）を用いる併用治療のために、該活性薬剤は同時に投与され得るか又はそれらはそれぞれ別々のずれた時間で投与され得る。
【０１０４】
本発明の化合物の薬量は、他の治療剤と組み合わされる場合調整される。これらの種々の薬剤の薬量は、何れかの薬剤が単独で使用されるよりも病状が減少されるところの相乗的結果を達成するために、独立して最適化されて組み合わされ得る。加えて、他の薬剤の同時投与又は連続投与が望ましい。
【０１０５】
Ｈ．キット
好ましい態様において、ここで示される化合物はキットにおいてパッケージ化される。そのようなキットの例は、いわゆるブリスター包装と呼ばれる。ブリスター包装は、包装産業において周知であり、医薬単位投与形態のパッケージ化のために広範に使用されている（錠剤、カプセル剤等）。ブリスター包装は、一般に、好ましくは透明なプラスチック材料からなるホイルで覆われた比較的堅いシートである。パッケージ化加工の間に、プラスチックホイル中に窪みが形成される。該窪みは包装される錠剤又はカプセル剤の大きさ及び形状を有する。次に、錠剤又はカプセル剤は窪みの中に置かれ、比較的堅い材料のシートは、窪みが形成される方向とは反対であるホイルの面でプラスチックホイルに対して密封される。結果として、該錠剤又はカプセル剤はプラスチックホイルとシートの間の窪みの中に密封される。好ましくはシートの強度は、錠剤又はカプセル剤が、窪み上に手圧力を加え、それにより開口部が窪みの場所でシート中に形成されることにより、ブリスター包装から取り除くことができる程度である。錠剤又はカプセル剤はその後、前記開口部を介して取り除かれ得る。
【０１０６】
キット上に、例えば、番号が錠剤又はカプセル剤が摂取されるよう特定されたレジメの日に対応するところの錠剤又はカプセル剤の隣に番号の形式態の記憶補助を設けることが望ましいだろう。そのような記憶補助の別の例は、カード上に印刷されたカレンダー、例えば、次の“第１週、月曜、火曜、・・・他・・・第２週、月曜、火曜、・・・”他、のようなものである。他の記憶補助のバリエーションは容易に見出せる。“１日薬量”は、１日に摂取される１個の錠剤又はカプセル剤であるか或いは幾つかの錠剤又はカプセル剤である。同様に、式（Ｉ）で表される化合物の１日薬量は、１個の錠剤又はカプセル剤からなり得、一方、２番目の化合物の１日薬量は幾つかの錠剤又はカプセル剤からなり得るが、逆もまたある。記憶補助はこれを反映すべきである。
【０１０７】
本発明の別の特別な態様において、１日薬量が使用される順番で１度に１回分が分配されるように設計された分配器が提供される。好ましくは、分配器は記憶補助を備えており、それにより、更にレジメへの遵守（コンプライアンス）を容易にする。そのような記憶補助の例は、分配された１日薬量の番号を表示する機械的計数器である。そのような記憶補助の別の例は、液晶読み出しと一緒になった、電池を動力源とするマイクロチップメモリー又は、例えば、最後に１日薬量が摂取された日付を読み上げる及び／又は次の投与が摂取される時を指摘する可聴式の催促信号である。
【０１０８】
Ｖ．治療方法
本発明の重要な特徴は、炎症過程におけるシグナル分子としてのセラミドの関与に関連する。Ｔ２Ｄに関連するβ細胞のアポトーシスにおけるその効果に加えて、デノボセラミドは、ヒトの健康における広範なアポトーシス効果を有し得る。セラミドの濃度に影響を及ぼすことは、インビトロの及び移植後の膵島の生存率を改善する意図での、移植のための単離の間の培養において、ヒトの膵島又は他の商業的に若しくは医薬的に重要な供給源からの膵島の新規な治療を誘導し得る。ＳＰＴ阻害剤は、単独及び／又は相乗的な方法の
何れかで、アポトーシスの及び／又はネクローシスの過程に起因する膵島及びβ細胞の損失を阻害するために、現在使用されているか又は承認されている治療プロトコールに追加され得る。
【０１０９】
改善されるそのような基本的なプロトコールは、Ｂｅａｔｔｉｅ等、２０００年（上記及びここでの参照）中に及び“Ｅｄｍｏｎｔｏｎ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌ”（Ｄｉａｂｅｔｅｓ．２００１年；５０：７１０−９頁．  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｏｕｔｃｏｍｅｓ  ａｎｄ
ｉｎｓｕｌｉｎ  ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ  ａｆｔｅｒ  ｉｓｌｅｔ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  Ｅｄｍｏｎｔｏｎ  ｐｒｏｔｏｃｏｌ．  Ｒｙａｎ  ＥＡ，Ｌａｋｅｙ  ＪＲ，Ｒａｊｏｔｔｅ  ＲＶ，Ｋｏｒｂｕｔｔ  ＧＳ，Ｋｉｎ  Ｔ，Ｉｍｅｓ  Ｓ，Ｒａｂｉｎｏｖｉｔｃｈ  Ａ，Ｅｌｌｉｏｔｔ  ＪＦ，Ｂｉｇａｍ  Ｄ，Ｋｎｅｔｅｍａｎ  ＮＭ，Ｗａｒｎｏｃｋ  ＧＬ，Ｌａｒｓｅｎ  Ｉ，Ｓｈａｐｉｒｏ  ＡＭ，及びここでの参照）を記載する公報中に記載されている。これらのプロトコールは、トレハロース抗凍結剤の添加及びＡｒｇ（Ｄｉａｂｅｔｅｓ．４６：５１９−２３頁（１９９７年）．  Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ：ａ  ｃｒｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔ  ｔｈａｔ  ｅｎｈａｎｃｅｓ  ｒｅｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  ｐｒｅｓｅｒｖｅｓ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ
ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｉｓｌｅｔｓ  ａｆｔｅｒ  ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  ｓｔｏｒａｇｅ．  Ｂｅａｔｔｉｅ  ＧＭ，Ｃｒｏｗｅ  ＪＨ，Ｌｏｐｅｚ  ＡＤ，Ｃｉｒｕｌｌｉ  Ｖ，Ｒｉｃｏｒｄｉ  Ｃ，Ｈａｙｅｋ  Ａ．）、ウシ胎児血清、トランスフェリン、セレン（Ｃｅｌｌ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｂａｎｋ．，４（２／４）：８５−９３頁（２００３年）。Ａ  ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｕｌｔｕｒｅ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｓｈｏｒｔ−ｔｅｒｍ  ｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅ（＜２４ｈｒ）  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｉｓｌｅｔｓ  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｕｓｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｅｄｍｏｎｔｏｎ  ｐｒｏｔｏｃｏｌ．  Ｍａｔｓｕｍｏｔｏ  Ｓ，Ｇｏｅｌ  Ｓ，Ｑｕａｌｌｅｙ  Ｓ，Ｓｔｒｏｎｇ  ＤＭ，Ｒｅｅｍｓ  ＪＡ．）、又はＺ−ＶＡＤ−ＦＭＫ及びＢ−Ｄ−ＦＭＫのような種々のカスパーゼ阻害剤（Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，８１（３）：３２９−４０頁（２００３年）．  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｃａｓｐａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｆｏｒ  ｌｉｍｉｔｉｎｇ  ｄｅａｔｈ  ｉｎ  ｍａｍｍａｌｉａｎ  ｃｅｌｌ  ｃｕｌｔｕｒｅ．  Ｓａｕｅｒｗａｌｄ  Ｔ．Ｍ．，Ｏｙｌｅｒ  Ｇ．Ａ．，Ｂｅｔｅｎｂａｕｇｈ  Ｍ．Ｊ．；Ｎｅｐｈｒｏｎ．Ｅｘｐ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．，９６(２)：ｅ３９−５１頁（２００４年）．  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ｔｏｗａｒｄｓ  ｃａｓｐａｓｅ−１  ａｎｄ  −３  ａｒｅ  ｌｅｓｓ  ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ｔｈａｎ  ｐａｎ  ｃａｓｐａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｉｎ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ  ｒｅｎａｌ  ｐｒｏｘｉｍａｌ  ｔｕｂｕｌａｒ  ｃｅｌｌ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．  Ｙａｎｇ  Ｂ，Ｅｌ  Ｎａｈａｓ  ＡＭ，Ｆｉｓｈｅｒ  Ｍ，Ｗａｇｎｅｒ  Ｂ，Ｈｕａｎｇ  Ｌ，Ｓｔｏｒｉｅ  Ｉ，Ｂａｒｎｅｔｔ  Ｄ，Ｂａｒｒａｔｔ  Ｊ，Ｓｍｉｔｈ  ＡＣ，Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＴＳ．）、ニコチンアミド、酪酸ナトリウム（Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．，６８（１１）：１６７４−８３頁（１９９９年）．  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｏｒｃｉｎｅ  ｆｅｔａｌ  ｉｓｌｅｔ  ｃｅｌｌ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ａｎｄ
ａｆｔｅｒ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．  Ｏｔｏｎｋｏｓｋｉ  Ｔ，Ｕｓｔｉｎｏｖ  Ｊ，Ｒａｓｉｌａｉｎｅｎ  Ｓ，Ｋａｌｌｉｏ  Ｅ，Ｋｏｒｓｇｒｅｎ  Ｏ，Ｈａｙｒｙ  Ｐ．）、セルレイン、ＩＢＭＸ（Ｐａｎｃｒｅａｓ．６：６２５−３０頁（１９９１年）．  Ｓｕｒｖｉｖａｌ  ａｎｄ  Ｂ−ｃｅｌｌ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｅｏｎａｔａｌ  ｐｉｇ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｉｓｌｅｔ−ｌｉｋｅ  ｃｅｌｌ  ｃｌｕｓｔｅｒｓ  ｉｎ  ａｎ  ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｍａｔｒｉｘ．  Ｏｈｇａｗａｒａ  Ｈ，Ｍｏｃｈｉｚｕｋｉ  Ｎ，Ｋａｒｉｂｅ  Ｓ，Ｏｍｏｒｉ  Ｙ．）、ＩＧＦ−ＩＩ（Ｊ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．１６１：３５７−６４頁（１９９９年）．  Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｉｓｌｅｔ  ｃｅｌｌ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  ｉｓｌｅｔ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ：ｔｈｅ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｉｎｔｅ
ｒａｃｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｐａｎｃｒｅａｓ．  Ｉｌｉｅｖａ  Ａ，Ｙｕａｎ  Ｓ，Ｗａｎｇ  ＲＮ，Ａｇａｐｉｔｏｓ  Ｄ，Ｈｉｌｌ  ＤＪ，Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ  Ｌ．）、等の除去を含み得る。
【０１１０】
デノボセラミド合成の阻止は、本発明の化合物、例えば、ＳＰＴ阻害剤の、上に列挙されたプロトコール等への追加が含まれる場合、細胞生存における相乗的な改善を示す。Ｉ型糖尿病における膵島の損失はまた、アポトーシス及びネクローシスを誘導する炎症過程の証拠を示す。
【０１１１】
本発明の態様は、本発明の化合物、例えば、ＳＰＴ阻害剤の現行の治療プロトコールへの追加を含む、進展しているＩ型糖尿病及び／又は移植（ヒトの又は生体異物の膵島細胞移植）に続く更なる膵島の損失を治療するための方法を含む（ＩＵＢＭＢ  Ｌｉｆｅ．２００４年７月、５６：３８７−９４頁．  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ
ｂｅｔａ−ｃｅｌｌｓ．  Ｐｉｌｅｇｇｉ  Ａ，Ｆｅｎｊｖｅｓ  ＥＳ，Ｋｌｅｉｎ  Ｄ，Ｒｉｃｏｒｄｉ  Ｃ，Ｐａｓｔｏｒｉ  ＲＬ．）。本発明の方法における使用のために意図される生体異物細胞は、限定されないが、豚、牛、ネズミ及び他の哺乳類細胞系を含む。デノボセラミド合成の阻害は、単独で又は現存するプロトコールへの追加として使用された場合、有利な効果を示す。そのような治療は、β細胞の量又は機能の損失の検出後すぐに開始し得、単独で又は免疫抑制のレジメ（例えば、シクロスポリン、ミコフェノール酸剤、ＦＴＹ７２０等）と供に使用され得る。これは、結果としてアポトーシス及びネクローシスを生じるさまざまな傷害からβ細胞を保護するための広範にわたる機構である。
【０１１２】
本発明の更なる態様において、本発明の化合物は、例えば、アルツハイマー病又は脳梗塞における脊髄傷害及びＣＮＳニューロンの損失に続く神経細胞のアポトーシスの阻止のために使用される。ＳＰＴの阻害剤を用いるこの治療は、単独の又は抗酸化剤、カスパーゼ阻害剤（Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ  Ｒｅｓ．，２８：１４３−５２頁（２００３年）．  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍａｔｕｒｅ  ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅｓ  ｂｙ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｃａｓｐａｓｅｓ  ａｎｄ  ｃａｌｐａｉｎｓ．  Ｂｅｎｊａｍｉｎｓ  ＪＡ，Ｎｅｄｅｌｋｏｓｋａ  Ｌ，Ｇｅｏｒｇｅ  ＥＢ）及び／又は当業者に周知である脳梗塞の遅発効果からの保護のための他の治療剤のような他の治療剤との併用において、効果的に使用され得る。
【０１１３】
ここに示される化合物及び組成物は、種々の疾患の治療において患者に投与され得る。好ましくは、ここに示される治療の方法は、セリンパルミトイルトランスフェラーゼ（ＳＰＴ）の活性又は活動過剰を伴った障害又は状態を有する患者（即ち、ヒト及び他の哺乳類）を対象とする。従って、インシュリン抵抗性及び心筋ミオパチーの治療方法が提供される。心筋ミオパチーの治療において有効な化合物は心筋ミオパチー発症の過程を妨害し得る。本発明の化合物は、悪液質及び敗血症を治療するために使用され得る。
【０１１４】
治療方法において使用される好ましい化合物は、望ましい生物学的利用能特性を示す。例示的化合物は、改善された溶解性、作用持続時間及びインビボ効能を有するプロドラッグの形態として機能し得るエステルである。治療方法において使用される好ましい化合物は、水における改善された溶解性及び変化した摂食行動のような副作用を引き起こす血管脳関門の横断に対するより弱い可能性を示す。
【０１１５】
医薬組成物は、セリンパルミトイルトランスフェラーゼ活性の調節が必要とされる障害を治療又は診断するのに十分な量において患者個人に投与される。セリンパルミトイルトランスフェラーゼにより仲介される公知の又は疑われる疾患又は障害の例は、限定されないが、インシュリン抵抗性、ＩＩ型糖尿病及びその合併症、肥満、血栓形成促進状態、心
筋梗塞、鬱血性心不全、高血圧、異常脂質血症及び一般に“メタボリックシンドローム”及び“シンドロームＸ”として認められている他の徴候を含む。ここに示される治療方法において有効な化合物は、強力に及び特異的に酵素セリンパルミトイルトランスフェラーゼを調節する。
【０１１６】
上記の記載は、説明的なもので及び限定しないことを意図していることが理解されるべきである。従って、本発明の範囲は、上記の記載を参照してではなく、むしろ、添付の請求項並びにそれらの等価物の全範囲を参照して決定されるべきである。
【実施例】
【０１１７】
本発明を説明するために、以下の実施例が包含される。これらの実施例は本発明を限定しない。それらは、ここに示された方法及び化合物を例示的に説明することのみを意図する。化学合成及びセリンパルミトイルトランスフェラーゼが関連する障害の治療における知識を有する者は本発明の実施の他の方法を見出し得る。しかしながら、これらの方法は、本発明の範囲内であるとみなされる。
【０１１８】
実施例１  化合物２のメチルエステルの合成
丸底フラスコ中、ＭｅＯＨ  ５００ｍＬを−５℃に冷却し、攪拌しながら滴下の様式においてＳＯＣｌ2  ０．１１モルで処理された。粉末状の化合物２（０．１モル）が冷却
及び攪拌しながら早急に添加された。溶液を２時間かけて室温までゆっくり暖めた。過剰のＭｅＯＨの留去により、望まれる化合物（Ｒ1＝Ｍｅ）がＨＣｌ塩として、白色結晶と
して高収率で得られた。好適な溶媒（ＭｅＯＨ／Ｅｔ2Ｏ）からの再結晶により、望まれ
る化合物が白色ワックス状の固体として高純度で得られた。同様の方法で、ここに示された化合物の更なるエステル形態が製造され得る。化合物２の合成はＫｉｕｃｈｉ等、２０００年（上記）中に記載されている。
【０１１９】
実施例２  化合物２のエチルエステルの合成
丸底フラスコ中、ＭｅＯＨ  ５００ｍＬを、ＥｔＯＡｃ中のＨＣｌ０．０１モルで処理し、粉末状の化合物２（０．１モル）が冷却及び攪拌しながら早急に添加された。溶液を還流するまで暖め、２４時間加熱した。過剰のＥｔＯＨの留去により、望まれる化合物（Ｒ1＝Ｍｅ）がＨＣｌ塩として、白色結晶として高収率で得られた。好適な溶媒（ＥｔＯ
Ｈ／Ｅｔ2Ｏ）からの再結晶により、望まれる化合物が、ゆっくりとワックス状の固体を
形成する無色のオイルとしてとして高純度で得られた。同様の方法で、ここで示された化合物の更なるエステル形態が製造され得る。もう一つの方法として、ＥｔＯＨ中の等量のＨＣｌ及びＨ2ＳＯ4の添加及び２日間の還流により生成物が高収率で得られる。
【０１２０】
実施例３  化合物２３の合成
化合物２３は、４−（３−ヒドロキシプロピル）フェノール（アルドリッチケミカルカンパニー）から出発し、スキーム２中に概説された経路を用いて製造された。得られた収率はスキーム２中に報告されている。化合物２３はオフホワイトの固体として得られ、融点は広範囲であった。
【０１２１】
（Ｍ−１）分子イオンは、３２２．３ａ．ｍ．ｕ．であった。1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ3ＯＤ）δ：０．９５（３Ｈ、ｔｒ）、１．３７（４Ｈ、ｍ）、１．４５（２Ｈ、ｍ）、１．７５（６Ｈ、ｍ）、２．５５（２Ｈ、ｍ）、３．７（２Ｈ、ｄｄ）、３．９（２Ｈ、ｔ）、６．９（４Ｈ、ｄｄ）
【０１２２】
実施例４  化合物２４の合成
化合物２４は、４−（４−ヒドロキシブチル）フェノールから出発し、スキーム２中に概説された経路を用いて製造された。化合物２４はオフホワイトの固体として得られ、融
点は広範囲であった。
【０１２３】
（Ｍ−１）分子イオンは、３３６．３ａ．ｍ．ｕ．であった。1Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ6−ＤＭＳＯ）δ：０．９３（３Ｈ、ｔ）、１．４（１２Ｈ、ブロードｍ）、２．４５（２Ｈ、ｄ）、３．５（２Ｈ、ｑ）、３．９（２Ｈ、ｔ）、６．９（４Ｈ、ｄｄ）
【０１２４】
実施例５  β細胞アポトーシス試験
ラット膵島
生物試験は、ある程度の変更をして、Ｓｈｉｍａｂｕｋｕｒｏ等、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７３：３２４８７−９０頁（１９９８年）に従って行われた。ズッカー肥満ラット（Ｚｕｃｋｅｒ  Ｄｉａｂｅｔｉｃ  Ｆａｔｔｙ  ｒａｔｓ）はここに示された化合物を用いた腹腔内注射により２週間処理された。膵島は単離され、アポトーシスの程度は電気泳動により評価された。顕著な程度の保護が対照ラットとの比較において処理されたラットで示された。この保護は、ＳＰＴ経路を介するセラミドのデノボ合成が特異的に阻害され、結果としてアポトーシスからβ細胞が保護されたことを提示した。
【０１２５】
ヒトの膵島
β細胞アポトーシスの検出のためのもう一つの試験は、Ｍａｅｄｌｅｒ，Ｋ，等、（２００３年）．Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ５２，７２６−３３頁に従って行われた。この試験において、高濃度のパルミチン酸又は高濃度のグルコースを用いる培養はアポトーシスの増加引き起こし、セラミドシンターゼの阻害剤の保護効果は有利な効果を示した。この試験からの結果は、ＳＰＴの阻害のような酵素経路において、異なった早期の地点でデノボセラミド合成を阻害する本発明化合物の有利な効果を提示した。
【０１２６】
膵島単離及び培養−
膵島は、Ｏｂｅｒｈｏｌｚｅｒ  Ｊ，等、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ６９：１１１５−２３頁（２０００年）中に記載されるようにして、臓器提供者の膵臓から単離された。ジチゾン染色により決定される膵島純度は、＞９５％であった。この純度の程度が日常的な単離により最初に達成されない場合、膵島が厳選された。提供者は、典型的には、以前に糖尿病又は代謝性障害の病歴を有さない脳死状態の臓器提供者であった。
【０１２７】
Ｍａｅｄｌｅｒ等、（２００３年）により報告されたように、長期間のインビトロ研究の間、膵島はウシの角膜内皮細胞（Ｎｏｖａｍｅｄ、エルサレム、イスラエル）から導かれた細胞外マトリックスで被覆されたプレート上で培養され、細胞はそれらの機能の完全性を保存するために、ディッシュに結合され展開された。４日後の培養における導管細胞による汚染は、５及び１５％の間であると推定されたが、殆ど全ての導管細胞は膵島の周辺で観察され、β細胞と共局在化していなかった。膵島は、ペニシリン  １００ユニット／ｍＬ、ストレプトマイシン  １００μｇ／ｍＬ及び１０％ＦＣＳ（Ｇｉｂｃｏ，ゲイサーズバーグ、メリーランド州）を含むＣＭＲＬ  １０６６媒体中で培養され、該媒体は以後、培養媒体として言及する。
【０１２８】
殆どの膵島が結合され平坦化し始めた平板培養２日後、媒体は、５．５又は３３．３ｍｍｏｌ／Ｌのグルコースを含み、脂肪酸が補われるか又は補われない培養媒体に交換された（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ、セントルイス、ミズーリ州；パルミチン酸［１６：０］、パルミトレイン酸［１６：１］、オレイン酸［１８：１］、又は脂肪酸の混合物［１６：０／１６：１，１６：０／１８：１］）。脂肪酸は、窒素雰囲気下で、１１％の脂肪酸のないＢＳＡ（Ｓｉｇｍａ）を含む培養媒体中に１０ｍｍｏｌ／Ｌで溶解され、３７℃で１晩振とうし、１５分超音波で振動され、殺菌濾過された（貯蔵溶液）。対照実験のために、脂肪酸の存在しないＢＳＡが上記のようにして製造された。有効なＦＦＡ濃度は市販で入手可能なキット（Ｗａｋｏ  ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、ノイス、ドイツ）を用いて、
殺菌濾過の後に決定され得た。アルブミンが結合していないＦＦＡの計算された濃度は、Ｓｐｅｃｔｏｒ  ＡＡ，等、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１０：３２２６−３２頁（１９７１年）中で報告された段階的平衡モデルを用いて全てのＦＦＡ（０．５ｍｍｏｌ／Ｌ）及びアルブミン（０．１５ｍｍｏｌ／Ｌ）のモル比から導かれた。ＦＦＡの最終濃度０．５ｍｍｏｌ／Ｌに関して、パルミチン酸、パルミトレイン酸及びオレイン酸の結合していない濃度は、それぞれ０．８３２μｍｏｌ／Ｌ、０．５７５μｍｏｌ／Ｌ及び２．０８９μｍｏｌ／Ｌであった。幾つかの実験において、膵島は、１５μｍｏｌ／Ｌ  Ｃ２−セラミド、１５μｍｏｌ／Ｌ  Ｃ２−ジヒドロセラミド（Ｂｉｏｍｏｌ、プリマスミーティング、ペンシルベニア州）、１５μｍｏｌ／Ｌ  フモニシン  Ｂ１（Ｓｉｇｍａ）又は、１０ｎｍｏｌ／Ｌないし１００μｍｏｌ／Ｌの種々の濃度の試験化合物を用いるか又は用いずに培養された。それらの全ては最初に、３７℃に前加温したＤＭＳＯ（Ｆｌｕｋａ、ブーフス、スイス）中に５ｍｍｏｌ／Ｌで溶解された。対照実験のために膵島は溶媒単独（０．３％ＤＭＳＯ）に曝された。
【０１２９】
細胞アポトーシス
Ｍａｅｄｌｅｒ等、（２００３年）により報告されたように、ＤＮＡ分解の結果として生じる遊離３−ＯＨ鎖の分解は、末端デオキシヌクレオチド転移酵素を媒介するｄＵＴＰニック末端標識（ＴＵＮＥＬ）技術により検出された（Ｇａｖｒｉｅｌｉ  Ｙ，等、Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１１９：４９３−５０１頁（１９９２年））。膵島培養物はＰＢＳで洗浄され、４％パラホルムアルデヒド中に固定され（３０分、室温）、続いて０．５％トリトン（Ｔｒｉｔｏｎ）Ｘ−１００で透過化され（４分、室温）、続いてＴＵＮＥＬ試験が製造者の指示に従って行われた（Ｉｎ  Ｓｉｔｕ  Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ｋｉｔ，ＡＰ；Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｍａｎｎｈｅｉｍ、ドイツ）。該調製物はその後、トリス（Ｔｒｉｓ）で緩衝された食塩水ですすがれ、５−ブロモ−４−クロロ−インドリルホスフェート／ニトロブルーテトラゾリウム液体基質システム（Ｓｉｇｍａ）でインキュベートされた（１０分、室温）。活性化されたカスパーゼ３の染色のために、固定化及び透過化の後に、膵島は、ウサギの抗開裂カスパーゼ３抗体（１：５０希釈、D１７５；Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ、ベバリー、マサチューセッツ州）で、３
７℃で２時間インキュベートされ、続いてＣｙ３−縮合ロバ抗ウサギ抗体（１：１００希釈；Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，ウエストグローブ、ペンシルバニア州）でインキュベート（３０分、３７℃）された。その後、膵島は上記のモルモット抗インシュリン抗体でインキュベートされ、続いて、ストレプトアビジン−ビオチン−ペルオキシダーゼ錯体（Ｚｙｍｅｄ）を用いるか又はフルオレセイン結合のウサギ抗−モルモット抗体（Ｄａｋｏ）の１：２０希釈で３０分インキュベートされることにより検出された。ＴＵＮＥＬ試験は、アポトーシス性の及びネクローシス性の細胞死の両方と関連するＤＮＡ断片化を検出する；従って、膵島はまた、製造者の指示に従って蛍光性のアネキシンＶプローブ（Ａｎｎｅｘｉｎ−Ｖ−ＦＬＵＯＳ染色キット、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｍａｎｎｈｅｉｍ）で処理された。ヨウ化プロピジウム及びアネキシンＶを用いる細胞の二重染色は、ネクローシス細胞からアポトーシス細胞を区別することを可能にする。
【０１３０】
実施例７  抗炎症用途
Ｓｈｉｍａｂｕｋｕｒｏ等に従って、ズッカー肥満ラット（Ｚｕｃｋｅｒ  Ｄｉａｂｅｔｉｃ  Ｆａｔｔｙ  ｒａｔｓ）を解剖し、膵島を採った。培養において、これらの膵島は、腫瘍壊死因子αの有効量で処理された。セラミドのデノボ合成は、実施例８に記載されるように、トリチウム化したセリン添加により評価された。ここに示される化合物の有効な濃度での処理は、対照群との比較において、顕著に減少したセラミドの濃度を生じた。このことは、抗炎症用途において、概して、化合物の有効性及びＳＰＴに対する特異的な阻害活性を提示する。
【０１３１】
実施例８  セリンパルミトイルトランスフェラーゼ活性
試験Ａ
この試験は、Ｍｅｒｒｉｌｌ等、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１７１：３７３−３８１（１９８８年）により報告された方法を僅かに変更して行った。
【０１３２】
凍結されたラット又は他の哺乳類の肝臓は、ｐＨ７．４で、ＤＴＴ（５ｍＬ）、スクロース（０．２５Ｍ）及びＥＤＴＡを含む標準ＨＥＰＥＳ緩衝系中で均質化された。ホモジネートは０．５時間３０ｋｇで回転され、上澄みが除去された。試験は、上記の上澄み（５０−１５０μｇのタンパク質のために十分な）を用いて、しかし、均質化の緩衝液と類似であるがｐＨ８．３での緩衝液中の、ピリドキサール５０μＭ、パルミトイルＣｏＡ  ２００μＭ及び3Ｈ−Ｌ−セリン１ｍＭを添加して行われた。放射性標識生成物、３−ケ
トスフィンガニンがＣＨＣｌ3／ＣＨ3ＯＨ中に抽出され、放射活性が液体シンチレーション計数管で計数された。
【０１３３】
セリンパルミトイルトランスフェラーゼの阻害は、脂質生成物へのトリチウム標識の組み込みにより評価された。ＣＴＬＬ−２細胞系における化合物の活性の更なる提示は、Ｎａｋａｍｕｒａ，Ｓ．等、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７１：１２５５−５７頁（１９９６年）中に記載されている試験を用いて行うことができる。
【０１３４】
試験Ｂ
普通に培養細胞中に存在する酵素であるＳＰＴの阻害を評価するためのもう一つの試験は、ＣＨＯ細胞系又はヒトの細胞系を用いて行われた。細胞は、氷冷のリン酸で緩衝された食塩水（ＰＢＳ）で３回洗浄された。総量０．５ｍＬの溶解緩衝液［エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）５ｍＭ及びジチオスレイトール（ＤＴＴ）５ｍＭを含むＨｅｐｅｓ（ｐＨ８．０）５０ｍＭ］が各皿に添加された。細胞はラバーポリスマンを用いて擦り取られ、その後、氷上の試験管へ移された。細胞懸濁液は、氷上で、１ないし２分間隔で５秒間を３回、超音波で振動された。細胞ホモジネート中のタンパク質濃度はＢｒａｄｆｏｒｄタンパク質試験キット（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）を用いて測定された。ＳＰＴ活性を測定するために、細胞ホモジネート０．１ｍＬが反応緩衝液［ＥＤＴＡ  ５ｍＭ、ＤＴＴ  １０ｍＭ、ピリドキサール−５´−ホスフェート５０μＭ、パルミトイルＣｏＡ  ０．４ｍＭ、Ｌ−セリン２ｍＭ、［3Ｈ］セリン  １０μＣｉ及び試験化合物又は標準阻害剤（ミリオ
シン）を含むＨｅｐｅｓ（ｐＨ８．０）２０ｍＭ］０．１ｍＬに添加された。３７℃で２０分間振り混ぜながらのインキュベーションの後、反応はＬ−セリン１０ｍＭを含む０．５Ｎ  ＮＨ4ＯＨ  ０．５ｍＬで終結された。脂質生成物は溶媒系：クロロホルム／メタ
ノール（１：２）３ｍＬ、キャリアとしてのスフィンゴシン（エタノール中、１ｍｇ／ｍＬ）２５μＬ、クロロホルム２ｍＬ及び０．５Ｎ  ＮＨ4ＯＨ  ３．８ｍＬ、を用いて抽
出された。激しく混合した後、５分間２５００ｒｐｍで遠心分離することにより相が分離した。水層が吸引により除去され、下のクロロホルム層は４．５ｍＬの水で３回洗浄された。クロロホルム層はシンチレーション瓶に移され、溶媒がＮ2ガス下で留去された。放
射活性が、ＬＳ６０００ＴＡ液体シンチレーション計数管（Ｂｅｃｋｍａｎ）を用いて測定された。［3Ｈ］セリンのクロロホルムに可溶な種への非特異的な転換が、パルミトイ
ルＣｏＡの非存在下における試験を行うことにより決定された。バックグラウンドの計数は１００％活性の計数の約１／６であった。
【０１３５】
試験Ｃ
Ｓｍｅｄｅｓ（Ｓｍｅｄｅｓ，Ｆ．，Ａｎａｌｙｓｔ  １２４：１７１１−１８頁（１９９９年））において報告されたＢｌｙｅ  ａｎｄ  Ｄｙｅｒ脂質抽出法の非塩素化溶媒への変法を用いるもう一つの試験が、例示的な化合物を評価するために使用された。このアプローチにおいて、細胞は氷冷のリン酸で緩衝された食塩水で３回洗浄され、溶解緩衝液０．５ｍＬが各皿に添加された。細胞は、ラバーポリスマンを用いて擦り取られ、氷上
の試験管へ移された。細胞懸濁液は、氷上で１−２分間隔で５秒間を３回、超音波で振動された。細胞ホモジネートのサンプル０．１ｍＬは、適当な濃度の試験物質と［3Ｈ］セ
リン  １０μＣｉを含む試験管中の反応緩衝液０．１ｍＬに添加された。反応混合物は、３７℃で２０分間振り混ぜながらインキュベーションされ、反応は未標識のＬ−セリン１０ｍＭを含む０．０５Ｎ  ＮＨ4ＯＨ停止溶液０．５ｍＬで終結された。全ての脂質は、
試験管の内容物を：キャリアとしてのスフィンゴシン（エタノール中、１ｍｇ／ｍＬであり、イソプロパノール／シクロヘキサン混合物中にと希釈される）２５μＬを含むイソプロパノール／シクロヘキサン（４：５）４．５ｍＬを含む１５ｍＬの遠心分離管へ移すことにより抽出された。内容物は激しく混合され、０．５Ｎ  ＮＨ4ＯＨ  ４ｍＬが添加さ
れた。５分間２５００ｒｐｍでの遠心分離により相が分離された。正確に測量された分量の有機層（４．０ｍＬ）が１ｍＬの水と一緒にシンチレーション瓶に添加された。Ｕｌｔｉｍａ  Ｇｏｌｄ  Ｆ（５ｍＬ）が添加され、該瓶はボルテックスされ、静置されて分離した層となった。脂質中へ添加された［3Ｈ］セリンの放射活性の量がシンチレーション
計数管で定量化された。非特異的な計数は、パルミトイルＣｏＡを含まない対照サンプルを用いた試験を行うことにより決定された。下の表２に示されるように、陽性対照であるＩＳＰ−１（即ち、ミリオシン）は強力であるが非特異的なＳＰＴの阻害を示した。例示的な化合物１２はこの試験中で評価され、表２中に示されるように、示される薬量で程々の活性を示した。
【表２】
2008515987.tif 000036
【０１３６】
表３は、１０ｎＭ及び１００ｎＭで、この試験において試験された例示的化合物２３及び２４のデータを提供する。
【表３】
2008515987.tif 000037
【０１３７】
実施例９  ＳＰＴ阻害剤による膵島の保護
例示的化合物による膵島の保護はＥｉｔｅｌ，Ｋ，等（２００２年）に従う試験において評価され、この試験において得られた結果は下の表４中で報告されている。ラット膵島は３日間、対照媒体（１０％ウシ胎児血清及び抗生物質で補助され、グルコースが８％とされたＲＰＭＩ１６４０）で培養されるか又はパルミチン酸ナトリウム（脂肪酸媒体）１ｍｍｏｌが補足された媒体中で培養された。該培養媒体は２日後に適当なウェルにおいて、新しい阻害剤を加えた同一組成の培養媒体に代えた。細胞はヨウ化プロピジウム（ＰＩ）で染色され、洗浄され、細胞のプロピジウム染色（細胞内ＤＮＡ含有量の測定として）はフローサイトメトリーにより評価された。ＰＩ染色の通常量よりも少ない染色を有する細胞の百分率がアポトーシス細胞であると考えられた（Ｅｉｔｅｌ，Ｋ，等（２００２年））。
【０１３８】
この試験において、例示的化合物１２を用いた処理は、この試験における脂肪酸処理から完全に細胞を保護するように見え、対照媒体での処理との比較において驚くべき利点を付与する。
【表４】
2008515987.tif 000038
【０１３９】
参照文献
アヤソラ（Ａｙａｓｏｌｌａ）Ｋ．，等，Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．，３７（３）：３２５−３８頁（２００４年）
Ｂｅａｔｔｉｅ  ＧＭ，Ｌｅｉｂｏｗｉｔｚ  Ｇ，Ｌｏｐｅｚ  ＡＤ，Ｌｅｖｉｎｅ  Ｆ，Ｈａｙｅｋ  Ａ，（２０００年）．  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｆｒｏｍ  ｃｅｌｌ  ｄｅａｔｈ  ｉｎ  ｃｕｌｔｕｒｅｄ  ｈｕｍａｎ  ｆｅｔａｌ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ．  Ｃｅｌｌ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．９：４３１−８頁）
Ｂｅｎｊａｍｉｎｓ  ＪＡ，等、（２００３年）．  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍａｔｕｒｅ  ｏｌｉｇｏｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅｓ  ｂｙ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｃａｓｐａｓｅｓ  ａｎｄ  ｃａｌｐａｉｎｓ．  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ  Ｒｅｓ．，２８：１４３−５２頁．
Ｂｅｎｎｅｔｔ  ＪＷ及びＫｌｉｃｈ  Ｍ．（２００３年），Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｒｅｖ．，１６：４９７−５１６頁
Ｃｈｅｎ，ＪＫ，等、（１９９９年）．  Ｔｈｅ  ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ
ｍｙｒｉｏｃｉｎ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ．Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ．６，２２１−３５頁
Ｃｌｅｍｅｎｓ  Ｊ．Ｊ．等、（２００４年）．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｂｅｎｚｉｍｉｄａｚｏｌｅ  ｂａｓｅｄ  ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ｏｆ  ａｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ−１−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ：ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  ｐｏｔｅｎｔ，ｓｕｂｔｙｐｅ−ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｓ１Ｐ４  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｇｏｎｉｓｔｓ．  Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１４：４９０３−０６頁
Ｃｏｒｏｎｅｏｓ，Ｅ；Ｗａｎｇ，Ｙ；Ｐａｎｕｓｋａ，ＪＲ；Ｔｅｍｐｌｅｔｏｎ，ＤＪ；Ｋｅｓｔｅｒ，Ｍ．（１９９６年）．  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ；３１：１３−７頁
Ｃｕｔｌｅｒ  ＲＧ，等，（２００４年）．Ｉｎｖｏｌｎｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｏｘｉｄａ
ｔｉｖｅ  ｓｔｒｅｓｓ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ  ｉｎ  ｃｅｒａｍｉｄｅ  ａｎｄ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｉｎ  ｂｒａｉｎ  ａｇａｉｎ  ａｎｄ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ´ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ．  Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，１０１：２０７０−５頁
Ｄｉｎｇ，ＷＸ及びＹｉｎ，ＸＭ，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．８：４４５−５４頁（２００４年）
Ｄｕｒａｎｄ，Ｐ．等、（２０００年）．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，５０５：６頁
Ｅｉｔｅｌ，Ｋ，等（２００２年）．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｓａｔｕｒａｔｅｄ  ａｎｄ  ｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄ  ｆａｔｔｙ  ａｃｉｄ  ｉｎ  ｂｅｔａ−ｃｅｌｌ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．，２９９，８５３−６頁
Ｅｓｍｏｎ，ＣＴ．Ｃｒｏｓｓｔａｌｋ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ，（２００４年）Ｍａｔｕｒｉｔａｓ，４７：３０５−１４頁
Ｆｒｏｓｔ  ＲＡ及びＬａｎｇ  ＣＨ．（２００５年）．  Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒｉｔ．Ｍｅｔａｂ．Ｃａｒｅ．，２５５−２６３頁
Ｆｕｊｉｔａ，Ｔ．等（１９９６年）．Ｐｏｔｅｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓａｎｔｓ，２−ａｌｋｙｌ−２−ａｍｉｎｏｐｒｏｐａｎｅ−１，３−ｄｉｏｌｓ．  Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３９、４４５１−５９頁
Ｇａｖｒｉｅｌｉ  Ｙ，等、（１９９２年）．  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ  ｃｅｌｌ  ｄｅａｔｈ  ｉｎ  ｓｉｔｕ  ｖｉａ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｌａｂｅｌｉｎｇ  ｏｆ  ｎｕｃｌｅａｒ  ＤＮＡ  ｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ．  Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１１９：４９３−５０１頁
Ｇｒｅｅｎｅ  Ｔ  ａｎｄ  Ｗｕｔｓ  ＰＧＭ．（１９９９年）“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ
Ｇｒｏｕｐ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，第３版、Ｗｉｌｅｙ，ニューヨーク
Ｈａｌｅ，ＪＪ，等、（２００４年）．  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｉｃ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ
ｅｓｔｅｒｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｎｏｖｅｌ  ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  ａｇｅｎｔ  ＦＴＹ７２０．Ｂｉｏ−ｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１２：４８０３−０７頁
Ｈａｌｅ  ＪＪ，等、（２００４年）．  Ｐｏｔｅｎｔ  Ｓ１Ｐ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｇｏｎｉｓｔｓ  ｒｅｐｌｉｃａｔｅ  ｔｈｅ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃ  ａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｎｏｖｅｌ  ｉｍｍｕｎｅ  ｍｏｄｕｌａｔｏｒ  ＦＴＹ７２０．
Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１４：３３５１−５頁
Ｈａｎａｄａ  Ｋ．，等、（２００３年）．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｙｓ．Ａｃｔａ，１６３２：１６−３０頁
Ｋａｊｉｔａ，Ｋ，等，Ｄｉａｂｅｔｅｓ．Ｒｅｓ．Ｃｌｉ．Ｐｒａｃｔ．，６６Ｓｕｐｐｌ  １：Ｓ７９−８３頁（２００４年）
Ｋａｎｚｌｅｒ  Ｓ．，等，Ｓｅｍｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ．１０（３）：１７３−８４頁（２０００年）
Ｋｉｕｃｈｉ  Ｍ．等、（２０００年）．  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ２−Ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ２−Ａｍｉｎｏｐｒｏｐａｎｅ−１，３−ｄｉｏｌｓ  ａｎｄ  ２−Ａｍｉｎｏｅｔｈａｎｏｌｓ．  Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４３：２９４６−６１頁
Ｋｏｂａｙａｓｈｉ，Ｓ．等、（１９９８年）．  Ｃａｔａｌｙｔｉｃ  Ａｓｙｍｍｅｔｒｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ａｎｔｉｆｕｎｇａｌ  Ｓｐｈｉｎｇｏｆｕｎｇｉｎｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｉｒ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｓ  Ｐｏｔｅｎｔ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｓｅｒｉｎｅ  Ｐａｌｍｉｔｏｙｌｔｒａｎｓｆｅ
ｒａｓｅ（ＳＰＴ）．  Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１２０：９０８−１９頁
Ｌａｒｏｃｋ，ＲＣ，（１９９９年）．“Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ
Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ”第２版、Ｗｉｌｅｙ，ニューヨーク．
Ｍａｅｄｌｅｒ，Ｋ．等（２００３年）．  Ｍｏｎｏｓａｔｕｒａｔｅｄ  Ｆａｔｔｙ  Ａｃｉｄｓ  Ｐｒｅｖｅｎｔ  ｔｈｅ  Ｄｅｌｅｔｅｒｉｏｕｓ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ
Ｐａｌｍｉｔａｔｅ  ａｎｄ  Ｈｉｇｈ  Ｇｌｕｃｏｓｅ  ｏｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  β−Ｃｅｌｌ  Ｔｕｒｎｏｖｅｒ  ａｎｄ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ．  Ｄｉａｂｅｔｅｓ，５２：７２６−３３頁
ＭｃＴｉｅｒｎａｎ，ＣＦ，等，Ｃｕｒｒ  Ｃａｒｄｉｏｌ  Ｒｅｐ．２（３）：１８９−９７頁（２０００年）
Ｍｅｒｒｉｌｌ等、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１７１：３７３−３８１（１９８８年）
Ｍｅｙｅｒ，ＳＧ，等，（２００３年）．Ｂｉｏｃｈｉｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ．１６４３：１−４頁
Ｎａｋａｍｕｒａ，Ｓ．等、（１９９６年）．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７１：１２５５−７頁
Ｏｉｓｈｉ，Ｔ．等、（２００１年）．  Ｓｔｅｒｅｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｔｏｔａｌ
ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  （＋）−ｍｙｒｉｏｃｉｎ  ｆｒｏｍ  Ｄ−ｍａｎｎｏｓｅ．  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｍｕｎ．１９３２−３頁
Ｏｂｅｒｈｏｌｚｅｒ  Ｊ，等、（２０００年）．  Ｈｕｍａｎ  ｉｓｌｅｔ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ：ｌｅｓｓｏｎｓ  ｆｒｏｍ  １３  ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ  ａｎｄ  １３  ａｌｌｏｇｅｎｅｉｃ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｓ．  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ６９：１１１５−１１２３頁
Ｐａｒａｓｋｅｖａｓ  Ｓ，Ｍａｙｓｉｎｇｅｒ  Ｄ，Ｗａｎｇ  Ｒ，Ｄｕｇｕｉｄ  ＴＰ，Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ  Ｌ（２０００年）．  Ｃｅｌｌ  ｌｏｓｓ  ｉｎ  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｈｕｍａｎ  ｉｓｌｅｔｓ  ｏｃｃｕｒｓ  ｂｙ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．  Ｐａｎｃｒｅａｓ，２０００，２０：２７０−６頁
Ｐｉｌｅｇｇｉ  Ａ，等、（２００４年）．  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｂｅｔａ−ｃｅｌｌｓ．  ＩＵＢＭＢ  Ｌｉｆｅ．５６：３８７−９４頁．
Ｐｉｐｉｋ，Ｂ，等、（２００４年）．  Ａ  Ｐｒｅｆｅｒｒｅｄ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ
ｏｆ  １，２，４−Ｏｘａｄｉａｚｏｌｅ．  Ｓｙｎｔｈ．Ｃｏｍｍｕｎ．３４，１８６３−７０頁
Ｒａｌｌ  ＬＣ及びＲｏｕｂｅｎｏｆｆ，Ｒ，Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ  ２００４：４３：１２１９−２３頁
Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ  Ｌ，Ｗａｎｇ  Ｒ，Ｐａｒａｓｋｅｖａｓ  Ｓ，Ｍａｙｓｉｎｇｅｒ  Ｄ．（１９９９年）．  Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ａｎｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｃｈａｎｇｅｓ  ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ  ｆｒｏｍ  ｉｓｌｅｔ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ｌｅａｄ  ｔｏ  ｉｓｌｅｔ  ｃｅｌｌ  ｄｅａｔｈ．  Ｓｕｒｇｅｒｙ，１２６：３９３−８頁
Ｒｏｔｈｅｒ  ＫＩ，Ｈａｒｌａｎ  ＤＭ；Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．２００４年；１１４：８７７−８３頁
Ｓａｕｅｒｗａｌｄ  ＴＭ，等（２００３年）．  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｃａｓｐａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｆｏｒ  ｌｉｍｉｔｉｎｇ  ｄｅａｔｈ  ｉｎ  ｍａｍｍａｌｉａｎ  ｃｅｌｌ  ｃｕｌｔｕｒｅ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，８１：３２９−４０頁
Ｓａｕｅｒｗａｌｄ  ＴＭ，等（２００４年）．  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ｔｏｗａｒｄｓ  ｃａｓｐａｓｅ−１  ａｎｄ  −３  ａｒｅ  ｌｅｓｓ  ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ｔｈａｎ  ｐａｎ  ｃａｓｐａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｉｎ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ  ｒｅｎａｌ  ｐｒｏｘｉｍａｌ  ｔｕｂｕｌａｒ  ｃｅｌｌ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．  Ｎｅｐｈｒｏｎ．Ｅｘｐ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．，９６：ｅ３９−５１頁
Ｓａｗａｄａ，Ｍ，等，（２００４年）．Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  Ｄｉｆｆｅｒ．，１１：９９７−１００８頁
Ｓｃｈｉｍｉｔｚ−Ｐｆｉｆｆｅｒ  Ｃ等，（１９９９年）．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７４：２４２０２−１０頁
Ｓｅｅｂａｃｈ，Ｄ．等、（１９８７年）．  Ｓｔｅｒｅｏｓｅｌｅｋｔｉｖｅ  Ａｌｋｙｌｉｅｒｕｎｇ  ａｎ  Ｃ（α）  ｖｏｎ  Ｓｅｒｉｎ，Ｇｌｙｃｅｒｉｎｓａｕｒｅ，Ｔｈｒｅｏｎｉｎ  ｕｎｄ  Ｗｅｉｎｓａｕｒｅ  ｕｂｅｒ  ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｉｓｃｈｅ  Ｅｎｏｌａｔｅ  ｍｉｔ  ｅｘｏｃｙｃｌｉｓｃｈｅｒ  Ｄｏｐｐｅｌｂｉｎｄｕｎｇ．  Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ．，７０：１１９４−１２１６頁
Ｓｅｉｄｅｌ  Ｇ．等、（２００４年）．  Ｉｒｏｎ−Ｃａｔａｌｙｚｅｄ  Ｃｒｏｓｓ−Ｃｏｕｐｌｉｎｇ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ．ＡＳｃａｌａｂｌｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  Ａｇｅｎｔ  ＦＴＹ７２０．  Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，６９：３９５０−５２頁
Ｓｈｉｍａｂｕｋｕｒｏ等，（１９９８年）．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７３：３２４８７−９０頁
Ｓｈｉｍａｂｕｋｕｒｏ  Ｍ等，（１９９８年）．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９５：２４９８−２５０２頁
Ｓｈｉｎｏｄａ  Ｊ，等、（１９９９年）．  Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌ．，１１：４３５−４１頁
Ｓｍｅｄｅｓ，Ｆ．（１９９９年）．  Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｏｔａｌ
ｌｉｐｉｄ  ｕｓｉｎｇ  ｎｏｎ−ｃｈｌｏｒｉｎａｔｅｄ  ｓｏｌｖｅｎｔｓ．  Ａｎａｌｙｓｔ  １２４：１７１１−１８頁
Ｓｐｅｃｔｏｒ  ＡＡ，等、（１９７１年）．  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｌｏｎｇ−ｃｈａｉｎ  ｆｒｅｅ  ｆａｔｔｙ  ａｃｉｄ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｔｏ  ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ  ａｌｂｕｍｉｎ  ｂｙ  ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｔｅｐｗｉｓｅ  ｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍ  ｃｏｎｓｔａｎｔｓ．  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１０：３２２６−３２頁
Ｔｉｓｄａｌｅ  ＭＪ；Ｌａｎｇｅｎｂｅｃｋｓ  Ａｒｃｈ  Ｓｕｒｇ．，２００４年；３８９：２９９−３０５頁
Ｗａｎｇ，Ｙ．，−Ｆ．，等（１９８８年）．  Ｌｉｐａｓｅ−ｃａｔａｌｙｚｅｄ  ｉｒｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  ｔｒａｎｓｅｓｔｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ  ｕｓｉｎｇ  ｅｎｏｌ  ｅｓｔｅｒｓ  ａｓ  ａｃｙｌａｔｉｎｇ  ｒｅａｇｅｎｔｓ：ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ  ｅｎａｎｔｉｏ−  ａｎｄ  ｒｅｇｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ａｌｃｏｈｏｌｓ，ｇｌｙｃｅｒｏｌ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ，ｓｕｇａｒｓ，ａｎｄ  ｏｒｇａｎｏｍｅｔａｌｌｉｃｓ．  Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１０、７２００−５頁
Ｗｅｎｃｋｅｒ  Ｄ，等，（２００３年）．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１１１：１４９７−１５０４頁
Ｚｉｍｍｅｔ  Ｐ，等，（２００１年）．Ｎａｔｕｒｅ，４１４：７８３−７頁
【国際調査報告】
2008515987.tif 000044