(57)【要約】  本発明は、ノナデプシペプチドおよびそれらの製造方法、並びに疾患、特に細菌感染疾患の処置および／または予防用の医薬を製造するためのそれらの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
2008517004.tif 000029
式中、
Ｒ１は、水素、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルまたはＣ６−Ｃ１０−アリールを表し
｛ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員ないし７員の複素環、５員ないし１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノからなる群から相互に独立して選択される０個、１個、２個または３個の置換基により置換されていてもよい
（ここで、シクロアルキル、アリール、複素環およびヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員ないし７員の複素環からなる群から相互に独立して選択される０個、１個、２個または３個の置換基により置換されていてもよい）｝
Ｒ２は、水素またはＣ１−Ｃ４−アルキルを表し、
Ｒ３は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５員ないし７員の複素環、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員または６員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルカルボニル、５員ないし７員の複素環カルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニル、５員または６員のヘテロアリールカルボニルまたはＣ１−Ｃ６−アルキルアミノカルボニルを表し
｛ここで、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリール、ヘテロアリール、アルコキシカルボニル、シクロアルキルカルボニル、複素環カルボニル、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニルおよびアルキルアミノカルボニルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノおよびフェニルからなる群から相互に独立して選択される０個、１個、２個または３個の置換基により置換されていてもよく、そして、
アルキルカルボニルは、置換基アミノまたはＣ１−Ｃ６−アルキルアミノにより置換されており、そして、
アルキルカルボニルは、ハロゲン、ヒドロキシ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルチオ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、フェニル、ナフチル、５員ないし１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルオキシ、ベンジルオキシカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノからなる群から相互に独立して選択される０個、１個または２個の置換基によりさらに置換されていてもよい
（ここで、フェニルおよびヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシおよびフェニルからなる群から相互に独立して選択される０個、１個、２個または３個の置換基により置換されていてもよい）｝、
Ｒ４は、水素、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、シクロプロピルまたはシクロプロピルメチルを表し、
Ｒ５は、式
【化２】
2008517004.tif 000030
（式中、＊は、窒素原子への結合部位であり、
Ｒ６およびＲ７は、相互に独立して、Ｃ１−Ｃ６−アルキルまたはトリフルオロメチルを表す）
を表し、
Ｒ８は、水素またはメチルを表す、
の化合物、またはその塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ。
【請求項２】
式
【化３】
2008517004.tif 000031
式中、
Ｒ１は、水素、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルまたはＣ６−Ｃ１０−アリールを表し
｛ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員ないし７員の複素環、５員ないし１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノからなる群から相互に独立して選択される０個、１個、２個または３個の置換基により置換されていてもよい
（ここで、シクロアルキル、アリール、複素環およびヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員ないし７員の複素環からなる群から相互に独立して選択される０個、１個、２個または３個の置換基により置換されていてもよい）｝
Ｒ２は、水素またはＣ１−Ｃ４−アルキルを表し、
Ｒ３は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５員ないし７員の複素環、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員または６員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルカルボニル、５員ないし７員の複素環カルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニル、５員または６員のヘテロアリールカルボニルまたはＣ１−Ｃ６−アルキルアミノカルボニルを表し
｛ここで、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリール、ヘテロアリール、アルコキシカルボニル、シクロアルキルカルボニル、複素環カルボニル、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニルおよびアルキルアミノカルボニルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノおよびフェニルからなる群から相互に独立して選択される０個、１個、２個または３個の置換基により置換されていてもよく、そして、
アルキルカルボニルは、置換基アミノまたはＣ１−Ｃ６−アルキルアミノにより置換されており、そして、
アルキルカルボニルは、ハロゲン、ヒドロキシ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルチオ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、フェニル、ナフチル、５員ないし１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルオキシ、ベンジルオキシカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノからなる群から相互に独立して選択される０個、１個または２個の置換基によりさらに置換されていてもよい
（ここで、フェニルおよびヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシおよびフェニルからなる群から相互に独立して選択される０個、１個、２個または３個の置換基により置換されていてもよい）｝、
Ｒ４は、水素、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、シクロプロピルまたはシクロプロピルメチルを表し、
Ｒ５は、式
【化４】
2008517004.tif 000032
（式中、＊は、窒素原子への結合部位であり、
Ｒ６およびＲ７は、相互に独立して、Ｃ１−Ｃ６−アルキルまたはトリフルオロメチルを表す）
を表す、
に相当することを特徴とする、請求項１に記載の化合物、またはその塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ。
【請求項３】
式中、
Ｒ１が、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、１−トリメチルシリルメチル、２−トリメチルシリルエト−１−イル、１−ヒドロキシ−２−メチルプロプ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルプロプ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルブト−１−イル、１−ヒドロキシ−２−エチル−２−メチルブト−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジエチルブト−１−イル、フェニルメチル、１−ヒドロキシ−１−フェニルメチル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し
（ここで、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルは、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルからなる群から相互に独立して選択される０個、１個、２個または３個の置換基により置換されていてもよい）、
Ｒ２が、水素を表し、
Ｒ３が、１−アミノ−３−メチルブト−１−イルカルボニル、１−アミノ−３,３−ジメチルブト−１−イルカルボニルまたは１−アミノ−２−トリメチルシリルエト−１−イルカルボニルを表し、
Ｒ４が、水素を表し、
Ｒ５が、式
【化５】
2008517004.tif 000033
（式中、＊は、窒素原子への結合部位であり、
Ｒ６およびＲ７は、相互に独立して、Ｃ１−Ｃ６−アルキルまたはトリフルオロメチルを表す）
を表す、
ことを特徴とする、請求項２に記載の化合物、またはその塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ。
【請求項４】
式中、
Ｒ１が、２−メチルプロプ−１−イルを表し、
Ｒ２が、水素を表し、
Ｒ３が、１−アミノ−３−メチルブト−１−イルカルボニルを表し、
Ｒ４が、水素を表し、
Ｒ５が、式
【化６】
2008517004.tif 000034
（式中、＊は、窒素原子への結合部位であり、
Ｒ６およびＲ７は、相互に独立して、Ｃ１−Ｃ６−アルキルを表す）
を表す、
ことを特徴とする、請求項２または請求項３のいずれかに記載の化合物、またはその塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ。
【請求項５】
式中、
Ｒ１が２,２−ジメチルプロプ−１−イルを表し、
Ｒ２が水素を表し、
Ｒ３が１−アミノ−３,３−ジメチルブト−１−イルカルボニルを表し、
Ｒ４が水素を表し、
Ｒ５が、式
【化７】
2008517004.tif 000035
（式中、＊は、窒素原子への結合部位であり、
Ｒ６およびＲ７は、相互に独立して、Ｃ１−Ｃ６−アルキルを表す）
を表す、
ことを特徴とする、請求項２または請求項３のいずれかに記載の化合物、またはその塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ。
【請求項６】
式中、
Ｒ１が、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、１−トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し
（ここで、３−ピリジルメチルは、置換基トリフルオロメチルで置換されていてもよい）、
Ｒ２が、水素を表し、
Ｒ３が、１−アミノ−３,３−ジメチルブト−１−イルカルボニルまたは１−アミノ−２−トリメチルシリルエト−１−イルカルボニルを表し、
Ｒ４が、水素を表し、
Ｒ５が、式
【化８】
2008517004.tif 000036
（式中、＊は、窒素原子への結合部位であり、
Ｒ６およびＲ７は、相互に独立して、Ｃ１−Ｃ６−アルキルまたはトリフルオロメチルを表す）
を表す、
ことを特徴とする、請求項２または請求項３のいずれかに記載の化合物、またはその塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ。
【請求項７】
請求項１に記載の式（Ｉｃ）の化合物の製造方法であって、
方法［Ａ］に従い、式
【化９】
2008517004.tif 000037
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ８は、請求項１に記載の意味を有する）
の化合物を、式
【化１０】
2008517004.tif 000038
（式中、Ｒ６およびＲ７は、請求項１に記載の意味を有する）
の化合物と反応させ、式
【化１１】
2008517004.tif 000039
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、請求項１に記載の意味を有する）
の化合物を得るか、
または、
方法［Ｂ］に従い、式（Ｉａ）の化合物を還元剤と反応させ、式
【化１２】
2008517004.tif 000040
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、請求項１に記載の意味を有する）
の化合物を得る、
ことを特徴とする方法。
【請求項８】
疾患の処置および／または予防のための、請求項１ないし請求項６のいずれかに記載の化合物。
【請求項９】
疾患の処置および／または予防用の医薬を製造するための、請求項１ないし請求項６のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１０】
細菌感染の処置および／または予防用の医薬を製造するための、請求項１ないし請求項６のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１１】
請求項１ないし請求項６のいずれかに記載の化合物を、不活性、非毒性の医薬的に許容し得る補助剤と組み合わせて含む、医薬。
【請求項１２】
細菌感染の処置および／または予防用の請求項１１に記載の医薬。
【請求項１３】
抗菌的に有効な量の少なくとも１種の請求項１ないし請求項６のいずれかに記載の化合物、請求項１１に記載の医薬、または請求項９または請求項１０により得られる医薬を投与することによる、ヒトおよび動物における細菌感染の制御方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ノナデプシペプチド（nonadepsipeptide）およびそれらの製造方法、並びに疾患、特に細菌感染疾患の処置および／または予防用の医薬を製造するためのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
細菌の細胞壁は、数々の酵素により合成され（細胞壁生合成）、微生物の生存および生殖に必須である。この巨大分子の構造およびその合成に関与するタンパク質は、細菌類内で高度に保存されている。その本質的な性質および均一性の理由で、細胞壁生合成は新規抗生物質の理想的な攻撃点である（D.W.Green, The bacterial cell wall as a source of antibacterial targets, Expert Opin. Ther. Targets, 2002, 6, 1-19)。
【０００３】
バンコマイシンおよびペニシリン類は、細菌の細胞壁生合成の阻害剤であり、この作用原理による抗菌力の成功例である。それらは、細菌感染、特にグラム陽性病原体による感染の処置のために、数十年間臨床的に用いられてきた。例えばメチシリン耐性ブドウ球菌、ペニシリン耐性肺炎球菌およびバンコマイシン耐性腸球菌（F. Baquero, Gram-positive resistance: challenge for the development of new antibiotics, J. Antimicrob. Chemother., 1997, 39, Suppl A: 1-6; A.P. Johnson, D.M. Livermore, G.S. Tillotson, Antimicrobial susceptibility of Gram-positive bacteria: what's current, what's anticipated ?, J. Hosp. Infect., 2001, (49), Suppl A: 3-11）および最近初めてのバンコマイシン耐性ブドウ球菌（B. Goldrick, First reported case of VRSA in the United States, Am. J. Nurs., 2002, 102, 17）などの耐性微生物の発生が増えているので、これらの物質はそれらの治療効力を次第に失いつつある。
【０００４】
本発明は、既知のクラスの抗生物質と交差耐性のない、新規のクラスの細胞壁生合成阻害剤に関する。
【０００５】
天然産物のリソバクチン（lysobactin）およびいくつかの誘導体は、抗菌活性を有するとＵＳ４,７５４,０１８に記載されている。リソバクチンの単離および抗菌活性は、ＥＰ−Ａ１９６０４２およびＪＰ０１１３２６００にも記載されている。ＷＯ０４／０９９２３９は、抗菌活性を有するリソバクチンの誘導体を記載している。
【０００６】
リソバクチンおよびカタノシン（katanosin）Ａの抗菌活性は、O'Sullivan, J. et al., J. Antibiot. 1988, 41, 1740 - 1744, Bonner, D. P. et al., J. Antibiot. 1988, 41, 1745 - 1751, Shoji, J. et al., J. Antibiot. 1988, 41, 713 - 718 および Tymiak, A. A. et al., J. Org. Chem. 1989, 54, 1149 - 1157 にさらに記載されている。
【０００７】
本発明の１つの目的は、ヒトおよび動物の細菌性疾患の処置用の、同等か、または改良された抗菌活性およびより良好な耐性、例えば低い腎毒性を有する、代替的化合物を提供することである。
【発明の開示】
【０００８】
本発明は、式
【化１】
2008517004.tif 000002
【０００９】
式中、
Ｒ１は、水素、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルまたはＣ６−Ｃ１０−アリールを表し
｛ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員ないし７員の複素環、５員ないし１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノからなる群から相互に独立して選択される０個、１個、２個または３個の置換基により置換されていてもよい
（ここで、シクロアルキル、アリール、複素環およびヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員ないし７員の複素環からなる群から相互に独立して選択される０個、１個、２個または３個の置換基により置換されていてもよい）｝
Ｒ２は、水素またはＣ１−Ｃ４−アルキルを表し、
【００１０】
Ｒ３は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５員ないし７員の複素環、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員または６員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルカルボニル、５員ないし７員の複素環カルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニル、５員または６員のヘテロアリールカルボニルまたはＣ１−Ｃ６−アルキルアミノカルボニルを表し
｛ここで、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリール、ヘテロアリール、アルコキシカルボニル、シクロアルキルカルボニル、複素環カルボニル、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニルおよびアルキルアミノカルボニルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノおよびフェニルからなる群から相互に独立して選択される０個、１個、２個または３個の置換基により置換されていてもよく、そして、
アルキルカルボニルは、置換基アミノまたはＣ１−Ｃ６−アルキルアミノにより置換されており、そして、
アルキルカルボニルは、ハロゲン、ヒドロキシ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルチオ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、フェニル、ナフチル、５員ないし１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルオキシ、ベンジルオキシカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノからなる群から相互に独立して選択される０個、１個または２個の置換基によりさらに置換されていてもよい
（ここで、フェニルおよびヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシおよびフェニルからなる群から相互に独立して選択される０個、１個、２個または３個の置換基により置換されていてもよい）｝、
Ｒ４は、水素、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、シクロプロピルまたはシクロプロピルメチルを表し、
【００１１】
Ｒ５は、式
【化２】
2008517004.tif 000003
（式中、＊は、窒素原子への結合部位であり、
Ｒ６およびＲ７は、相互に独立して、Ｃ１−Ｃ６−アルキルまたはトリフルオロメチルを表す）
を表し、
Ｒ８は、水素またはメチルを表す、
の化合物、並びにそれらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物に関する。
【００１２】
本発明の化合物は、後述する式（Ｉ）および（Ｉｃ）の化合物およびそれらの塩、溶媒和物、塩の溶媒和物およびプロドラッグ、後述する、式（Ｉ）および（Ｉｃ）に包含される式の化合物およびそれらの塩、溶媒和物、塩の溶媒和物およびプロドラッグ、並びに、例示的実施態様として後述する、式（Ｉ）および（Ｉｃ）に包含される化合物およびそれらの塩、溶媒和物、塩の溶媒和物およびプロドラッグ（後述する、式（Ｉ）および（Ｉｃ）に含まれる化合物が既に塩、溶媒和物、塩の溶媒和物およびプロドラッグでない場合に）である。
【００１３】
それらの構造に依存して、本発明の化合物は、立体異性体で存在できる（エナンチオマー、ジアステレオマー）。従って、本発明は、エナンチオマーまたはジアステレオマー、およびそれらの各々の混合物に関する。そのようなエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーの混合物から、立体異性的に均一な成分を既知のやり方で単離できる。
本発明の化合物が互変異性体で生じ得るならば、本発明は、全ての互変異性体を含む。
【００１４】
本発明の目的上、好ましい塩は、本発明の化合物の生理的に許容し得る塩である。しかしながら、それら自体は医薬適用に適さないが、例えば本発明の化合物の単離または精製に使用できる混合塩または塩も含まれる。
【００１５】
本発明の化合物の生理的に許容し得る塩には、鉱酸、カルボン酸およびスルホン酸の酸付加塩、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸および安息香酸の塩が含まれる。
【００１６】
本発明の化合物の生理的に許容し得る塩には、通常の塩基の塩、例えば、そして好ましくは、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウムおよびカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウムおよびマグネシウム塩）およびアンモニアまたは１個ないし１６個のＣ原子を有する有機アミン類（例えば、そして好ましくは、エチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、ジメチルアミノエタノール、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、アルギニン、リジン、エチレンジアミンおよびＮ−メチルピペリジン）から誘導されるアンモニウム塩も含まれる。
【００１７】
本発明の目的上、溶媒和物は、溶媒分子との配位により固体または液体状態で錯体を形成する本発明の化合物の形態を表す。水和物は、配位が水と起こる、溶媒和物の特別な形態である。
【００１８】
本発明の目的上、断りの無い限り、置換基は以下の意味を有する：
アルキル自体、並びにアルコキシ、アルキルアミノ、アルキルチオ、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノおよびアルコキシカルボニルアミノ中の「アルコ（alk）」および「アルキル」は、通常１個ないし６個、好ましくは１個ないし４個、特に好ましくは１個ないし３個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖のアルキルラジカル、例えば、そして好ましくは、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、ｎ−ペンチルおよびｎ−ヘキシルを表す。
【００１９】
アルコキシは、例えば、そして好ましくは、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｎ−ペントキシおよびｎ−ヘキソキシを表す。
【００２０】
アルキルチオは、例えば、そして好ましくは、メチルチオ、エチルチオ、ｎ−プロピルチオ、イソプロピルチオ、ｔｅｒｔ−ブチルチオ、ｎ−ペンチルチオおよびｎ−ヘキシルチオを表す。
【００２１】
アルケニルは、２個ないし６個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖のアルケニルラジカルを表す。２個ないし４個、特に好ましくは２個ないし３個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖のアルケニルラジカルが好ましい。例えば、そして好ましくは、以下のものに言及し得る：ビニル、アリル、ｎ−プロプ−１−エン−１−イル、ｎ−ブト−２−エン−１−イル、２−メチルプロプ−１−エン−１−イルおよび２−メチルプロプ−２−エン−１−イル。
【００２２】
アルキルアミノは、１個または２個の（相互に独立して選択される）アルキル置換基を有するアルキルアミノラジカル、例えば、そして好ましくは、メチルアミノ、エチルアミノ、ｎ−プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルアミノ、ｎ−ペンチルアミノ、ｎ−ヘキシルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジエチルアミノ、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ、Ｎ−メチル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノ、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノ、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ、Ｎ−エチル−Ｎ−ｎ−ペンチルアミノおよびＮ−ｎ−ヘキシル−Ｎ−メチルアミノを表す。例えば、Ｃ１−Ｃ３−アルキル−アミノは、１個ないし３個の炭素原子を有するモノアルキルアミノラジカルまたはアルキル置換基毎に１個ないし３個の炭素原子を有するジアルキルアミノラジカルを表す。
【００２３】
アリールアミノは、アミノ基を介して結合しており、さらなる置換基がアミノ基に結合していることもあるアリール置換基、例えば、アリールまたはアルキル、例えば、そして好ましくは、フェニルアミノ、ナフチルアミノ、フェニルメチルアミノまたはジフェニルアミノを表す。
【００２４】
アルキルカルボニルは、例えば、そして好ましくは、メチルカルボニル、エチルカルボニル、ｎ−プロピルカルボニル、イソプロピルカルボニル、ｔｅｒｔ−ブチルカルボニル、ｎ−ペンチルカルボニルおよびｎ−ヘキシルカルボニルを表す。
【００２５】
アルコキシカルボニルは、例えば、そして好ましくは、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ｎ−ペントキシカルボニルおよびｎ−ヘキソキシカルボニルを表す。
【００２６】
アルコキシカルボニルアミノは、例えば、そして好ましくは、メトキシカルボニルアミノ、エトキシカルボニルアミノ、ｎ−プロポキシカルボニルアミノ、イソプロポキシカルボニルアミノ、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ、ｎ−ペントキシカルボニルアミノおよびｎ−ヘキソキシカルボニルアミノを表す。
【００２７】
シクロアルキルカルボニルは、カルボニル基を介して結合しているシクロアルキル置換基、例えば、そして好ましくは、シクロプロピルカルボニル、シクロブチルカルボニル、シクロペンチルカルボニルおよびシクロヘキシルカルボニルを表す。
【００２８】
複素環カルボニルは、カルボニル基を介して結合している複素環置換基、例えば、そして好ましくは、テトラヒドロフラニルカルボニル、ピロリジニルカルボニル、ピロリニルカルボニル、ピペリジニルカルボニル、テトラヒドロピラニルカルボニル、ピペラジニルカルボニル、モルホリニルカルボニルおよびペルヒドロアゼピニルカルボニルを表す。
【００２９】
アリールカルボニルは、カルボニル基を介して結合しているアリール置換基、例えば、そして好ましくは、フェニルカルボニル、ナフチルカルボニルおよびフェナントレニルカルボニルを表す。
【００３０】
ヘテロアリールカルボニルは、カルボニル基を介して結合しているヘテロアリール置換基、例えば、そして好ましくは、チエニルカルボニル、フリルカルボニル、ピロリルカルボニル、チアゾリルカルボニル、オキサゾリルカルボニル、イミダゾリルカルボニル、ピリジルカルボニル、ピリミジルカルボニル、ピリダジニルカルボニル、インドリルカルボニル、インダゾリルカルボニル、ベンゾフラニルカルボニル、ベンゾチオフェニルカルボニル、キノリニルカルボニルおよびイソキノリニルカルボニルを表す。
【００３１】
アルキルカルボニルアミノは、例えば、そして好ましくは、メチルカルボニルアミノ、エチルカルボニルアミノ、ｎ−プロピルカルボニルアミノ、イソプロピルカルボニルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルアミノ、ｎ−ペンチルカルボニルアミノおよびｎ−ヘキシルカルボニルアミノを表す。
【００３２】
アリールカルボニルアミノは、例えば、そして好ましくは、フェニルカルボニルアミノ、ナフチルカルボニルアミノおよびフェナントレニルカルボニルアミノを表す。
【００３３】
アリールカルボニルオキシは、例えば、そして好ましくは、フェニルカルボニルオキシ、ナフチルカルボニルオキシおよびフェナントレニルカルボニルオキシを表す。
【００３４】
アルキルアミノカルボニルは、１個または２個の（相互に独立して選択される）アルキル置換基を有するアルキルアミノカルボニルラジカル、例えば、そして好ましくは、メチルアミノカルボニル、エチルアミノカルボニル、ｎ−プロピルアミノカルボニル、イソプロピルアミノカルボニル、ｔｅｒｔ−ブチルアミノカルボニル、ｎ−ペンチルアミノカルボニル、ｎ−ヘキシルアミノカルボニル、Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノカルボニル、Ｎ,Ｎ−ジエチルアミノカルボニル、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノカルボニル、Ｎ−メチル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノカルボニル、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノカルボニル、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−メチルアミノカルボニル、Ｎ−エチル−Ｎ−ｎ−ペンチルアミノカルボニルおよびＮ−ｎ−ヘキシル−Ｎ−メチルアミノカルボニルを表す。Ｃ１−Ｃ３−アルキルアミノカルボニルは、例えば、１個ないし３個の炭素原子を有するモノアルキルアミノカルボニルラジカルまたはアルキル置換基毎に１個ないし３個の炭素原子を有するジアルキルアミノカルボニルラジカルを表す。
【００３５】
シクロアルキルは、通常３個ないし６個の炭素原子を有するシクロアルキル基、例えば、そして好ましくは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルを表す。
【００３６】
アリールは、通常６個ないし１４個の炭素原子を有する、単環式ないし三環式、芳香族性、炭素環式のラジカル；例えば、そして好ましくは、フェニル、ナフチルおよびフェナントレニルを表す。
【００３７】
複素環は、通常５個ないし７個の環原子、および、Ｎ、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２の系列から３個まで、好ましくは２個までのヘテロ原子および／またはヘテロ基を有する、単環式または多環式、好ましくは単環式または二環式の複素環ラジカルを表す。複素環ラジカルは、飽和または部分不飽和であり得る。Ｏ、ＮおよびＳの系列から２個までのヘテロ原子を有する５員ないし７員の単環式飽和複素環ラジカル、例えば、そして好ましくは、テトラヒドロフラニル、ピロリジニル、ピロリニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、ピペラジニル、モルホリニルおよびペルヒドロアゼピニルが好ましい。
【００３８】
ヘテロアリールは、通常５個ないし１０個、好ましくは５個ないし６個の環原子およびＳ、ＯおよびＮの系列から５個まで、好ましくは４個までのヘテロ原子を有する芳香族性の単環式または二環式ラジカル、例えば、そして好ましくは、チエニル、フリル、ピロリル、チアゾリル、オキサゾリル、イミダゾリル、ピリジル、ピリミジル、ピリダジニル、インドリル、インダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、キノリニルおよびイソキノリニルを表す。
ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素、好ましくはフッ素および塩素を表す。
【００３９】
図面の説明
図１：Ｎω.６,Ｎω'.６−（ペント［２］エン［２］イル［４］イリデン）リソバクチントリフルオロアセテートの１Ｈ ＮＭＲ（ｄ５−ピリジン、５００ＭＨｚ）。
図２：Ｎω.６,Ｎω'.６−（ペント［２］エン［２］イル［４］イリデン）リソバクチントリフルオロアセテートのＭＡＬＤＩ−ＭＳ／ＭＳ−スペクトル（陽イオン、プレカーサー（precursor）イオンｍ／ｚ１３４０.８）
図３：Ｎω.６,Ｎω'.６−（ペント［２］エン［２］イル［４］イリデン）リソバクチントリフルオロアセテートのＭＡＬＤＩ−ＭＳ／ＭＳスペクトル（断片）（陽イオン、プレカーサーイオンｍ／ｚ１３４０.８）
図４：加水分解により開環したＮω.６,Ｎω'.６−（ペント［２］エン［２］イル［４］イリデン）リソバクチントリフルオロアセテートのＭＡＬＤＩ−ＭＳスペクトル（陽イオン）
図５：加水分解により開環したＮω.６,Ｎω'.６−（ペント［２］エン［２］イル［４］イリデン）リソバクチントリフルオロアセテートのＭＡＬＤＩ−ＭＳ／ＭＳ−スペクトル（陽イオン、プレカーサーイオンｍ／ｚ１３５８.８）
図６：加水分解により開環したＮω.６,Ｎω'.６−（ペント［２］エン［２］イル［４］イリデン）リソバクチントリフルオロアセテートのＭＡＬＤＩ−ＭＳ／ＭＳスペクトル（陽イオン、プレカーサーイオンｍ／ｚ１３５８.８）
図７：Ｎω.６,Ｎω'.６−（ペンタン［２,４］ジイル）リソバクチントリフルオロアセテート（ｄ５−ピリジン、５００ＭＨｚ）の１Ｈ−ＮＭＲ
【００４０】
本発明に関して好ましい化合物は、式
【化３】
2008517004.tif 000004
【００４１】
式中、
Ｒ１は、水素、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ２−Ｃ６−アルケニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルまたはＣ６−Ｃ１０−アリールを表し
｛ここで、アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびアリールは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員ないし７員の複素環、５員ないし１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノからなる群から相互に独立して選択される０個、１個、２個または３個の置換基により置換されていてもよい
（ここで、シクロアルキル、アリール、複素環およびヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、フェニルおよび５員ないし７員の複素環からなる群から相互に独立して選択される０個、１個、２個または３個の置換基により置換されていてもよい）｝
Ｒ２は、水素またはＣ１−Ｃ４−アルキルを表し、
【００４２】
Ｒ３は、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、５員ないし７員の複素環、Ｃ６−Ｃ１０−アリール、５員または６員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニル、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキルカルボニル、５員ないし７員の複素環カルボニル、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニル、５員または６員のヘテロアリールカルボニルまたはＣ１−Ｃ６−アルキルアミノカルボニルを表し
｛ここで、アルキル、シクロアルキル、複素環、アリール、ヘテロアリール、アルコキシカルボニル、シクロアルキルカルボニル、複素環カルボニル、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニルおよびアルキルアミノカルボニルは、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノおよびフェニルからなる群から相互に独立して選択される０個、１個、２個または３個の置換基により置換されていてもよく、そして、
アルキルカルボニルは、置換基アミノまたはＣ１−Ｃ６−アルキルアミノにより置換されており、そして、
アルキルカルボニルは、ハロゲン、ヒドロキシ、トリメチルシリル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルチオ、ベンジルオキシ、Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル、フェニル、ナフチル、５員ないし１０員のヘテロアリール、Ｃ１−Ｃ６−アルキルカルボニルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルアミノ、Ｃ６−Ｃ１０−アリールカルボニルオキシ、ベンジルオキシカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルアミノからなる群から相互に独立して選択される０個、１個または２個の置換基によりさらに置換されていてもよい
（ここで、フェニルおよびヘテロアリールは、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、Ｃ１−Ｃ６−アルキル、Ｃ１−Ｃ６−アルコキシおよびフェニルからなる群から相互に独立して選択される０個、１個、２個または３個の置換基により置換されていてもよい）｝、
Ｒ４は、水素、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、シクロプロピルまたはシクロプロピルメチルを表し、
【００４３】
Ｒ５は、式
【化４】
2008517004.tif 000005
（式中、＊は、窒素原子への結合部位であり、
Ｒ６およびＲ７は、相互に独立して、Ｃ１−Ｃ６−アルキルまたはトリフルオロメチルを表す）
を表す、
の化合物、並びにそれらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物である。
【００４４】
好ましい式（Ｉ）の化合物は、また、式中、
Ｒ１が、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、１−トリメチルシリルメチル、２−トリメチルシリルエト−１−イル、１−ヒドロキシ−２−メチルプロプ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルプロプ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルブト−１−イル、１−ヒドロキシ−２−エチル−２−メチルブト−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジエチルブト−１−イル、フェニルメチル、１−ヒドロキシ−１−フェニルメチル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し
（ここで、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルは、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルからなる群から相互に独立して選択される０個、１個、２個または３個の置換基により置換されていてもよい）、
Ｒ２が、水素を表し、
Ｒ３が、１−アミノ−３−メチルブト−１−イルカルボニル、１−アミノ−３,３−ジメチルブト−１−イルカルボニルまたは１−アミノ−２−トリメチルシリルエト−１−イルカルボニルを表し、
Ｒ４が、水素を表し、
Ｒ５が、式
【化５】
2008517004.tif 000006
（式中、＊は、窒素原子への結合部位であり、
Ｒ６およびＲ７は、相互に独立して、Ｃ１−Ｃ６−アルキルまたはトリフルオロメチルを表す）
を表す、
化合物、並びにそれらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物である。
【００４５】
好ましい式（Ｉ）の化合物は、また、式中、
Ｒ１が、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、１−トリメチルシリルメチルまたは３−ピリジルメチルを表し
（ここで、３−ピリジルメチルは、置換基トリフルオロメチルで置換されていてもよい）、
Ｒ２が、水素を表し、
Ｒ３が、１−アミノ−３,３−ジメチルブト−１−イルカルボニルまたは１−アミノ−２−トリメチルシリルエト−１−イルカルボニルを表し、
Ｒ４が、水素を表し、
Ｒ５が、式
【化６】
2008517004.tif 000007
（式中、＊は、窒素原子への結合部位であり、
Ｒ６およびＲ７は、相互に独立して、Ｃ１−Ｃ６−アルキルまたはトリフルオロメチルを表す）
を表す、
のもの、並びにそれらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物である。
【００４６】
好ましい式（Ｉ）の化合物は、また、式中、
Ｒ１が、２−メチルプロプ−１−イルを表し、
Ｒ２が、水素を表し、
Ｒ３が、１−アミノ−３−メチルブト−１−イルカルボニルを表し、
Ｒ４が、水素を表し、
Ｒ５が、式
【化７】
2008517004.tif 000008
（式中、＊は、窒素原子への結合部位であり、
Ｒ６およびＲ７は、相互に独立して、Ｃ１−Ｃ６−アルキルを表す）
を表す、
の化合物、並びにそれらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物である。
【００４７】
好ましい式（Ｉ）の化合物は、また、式中、
Ｒ１が２,２−ジメチルプロプ−１−イルを表し、
Ｒ２が水素を表し、
Ｒ３が１−アミノ−３,３−ジメチルブト−１−イルカルボニルを表し、
Ｒ４が水素を表し、
Ｒ５が、式
【化８】
2008517004.tif 000009
（式中、＊は、窒素原子への結合部位であり、
Ｒ６およびＲ７は、相互に独立して、Ｃ１−Ｃ６−アルキルを表す）
を表す、
の化合物、並びにそれらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物である。
【００４８】
好ましい式（Ｉ）の化合物は、また、式中、Ｒ１が、２−メチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルプロプ−１−イル、２,２−ジメチルブト−１−イル、２−トリメチルシリルエト−１−イル、１−ヒドロキシ−２−メチルプロプ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルプロプ−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジメチルブト−１−イル、１−ヒドロキシ−２−エチル−２−メチルブト−１−イル、１−ヒドロキシ−２,２−ジエチルブト−１−イル、フェニルメチル、１−ヒドロキシ−１−フェニルメチル、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルを表す（ここで、２−ピリジルメチルまたは３−ピリジルメチルは、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル、メチル、メトキシおよびモルホリニルからなる群から相互に独立して選択される０個、１個、２個または３個の置換基により置換されていてもよい）ものである。
【００４９】
好ましい式（Ｉ）の化合物は、また、式中、Ｒ３中のアミノ酸に由来する立体中心がＤ配置であるものである。
好ましい式（Ｉ）の化合物は、また、式中、Ｒ１が２,２−ジメチルプロプ−１−イルであり、Ｒ２が水素であるものである。
好ましい式（Ｉ）の化合物は、また、式中、Ｒ３が１−アミノ−３,３−ジメチルブト−１−イルカルボニルを表し、Ｒ４が水素を表すものである。
【００５０】
ラジカルの各々の組合せおよび好ましい組合せで詳細に示したラジカルの定義は、また、任意に、示したラジカルの個々の組合せから独立して、異なる組合せのラジカルの定義により置き換えられる。
上述の好ましい範囲の２つまたはそれ以上の組合せもことさら特に好ましい。
【００５１】
本発明はさらに、式（Ｉｃ）の化合物の製造方法に関し、その方法は、
［Ａ］式
【化９】
2008517004.tif 000010
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ８は、上記の意味を有する）
の化合物を、式
【化１０】
2008517004.tif 000011
（式中、Ｒ６およびＲ７は、上記の意味を有する）
の化合物と反応させ、
【００５２】
式
【化１１】
2008517004.tif 000012
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、上記の意味を有する）
の化合物を得る、
【００５３】
または、
［Ｂ］式（Ｉａ）の化合物を還元剤と反応させ、式
【化１２】
2008517004.tif 000013
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、上記の意味を有する）
の化合物を得る、
のいずれかの方法に従うものである。
【００５４】
式（Ｉｃ）の化合物は、それ自体、式（Ｉａ）および（Ｉｂ）の化合物からなる。
【００５５】
ラジカルＲ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４中の遊離アミノ基は、必要に応じて、当業者に知られている方法に従い、例えばＢｏｃ保護基またはＺ保護基を用いて、反応前に保護し、それを反応後に再度除去する。
【００５６】
式（ＩＩ）の化合物は、知られているか、または、式
【化１３】
2008517004.tif 000014
（式中、Ｒ８は、上記の意味を有する）
の化合物を、式
【化１４】
2008517004.tif 000015
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、上記の意味を有し、そして、Ｘ１は、ハロゲン、好ましくは臭素、塩素またはフッ素、またはヒドロキシを表す）
の化合物と反応させることにより製造できる。
【００５７】
Ｘ１がハロゲンであるならば、この反応は、一般的に、不活性溶媒中、必要に応じて塩基の存在下、好ましくは−３０℃ないし１５０℃の温度範囲で、大気圧下に行う。
【００５８】
不活性溶媒は、例えば、テトラヒドロフラン、塩化メチレン、アセトニトリル、ピリジン、ジオキサンまたはジメチルホルムアミドである。好ましい不活性溶媒は、テトラヒドロフランまたは塩化メチレンである。
塩基は、例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンまたはＮ−メチルモルホリンである；ジイソプロピルエチルアミンが好ましい。
【００５９】
Ｘ１がヒドロキシであるならば、反応は、一般的に、不活性溶媒中、脱水試薬の存在下、必要に応じて塩基の存在下、好ましくは−３０℃ないし５０℃の温度範囲で、大気圧下に行う。
【００６０】
不活性溶媒は、例えば、ジクロロメタンまたはトリクロロメタンなどのハロ炭化水素、ベンゼン、ニトロメタン、ジオキサン、ジメチルホルムアミドまたはアセトニトリルなどの炭化水素である。これらの溶媒の混合物を用いることも同様に可能である。ジクロロメタンまたはジメチルホルムアミドが特に好ましい。
【００６１】
ここで適する脱水試薬は、例えばカルボジイミド類、例えば、Ｎ,Ｎ'−ジエチル−、Ｎ,Ｎ'−ジプロピル−、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピル−、Ｎ,Ｎ'−ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−（３−ジメチルアミノイソプロピル）−Ｎ'−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）、Ｎ−シクロヘキシルカルボジイミド−Ｎ'−プロピルオキシメチルポリスチレン（ＰＳカルボジイミド）またはカルボニル化合物、例えばカルボニルジイミダゾール、または、１,２−オキサゾリウム化合物、例えば２−エチル−５−フェニル−１,２−オキサゾリウム−３−サルフェート、または２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−メチルイソオキサゾリウムパークロレート、または、アシルアミノ化合物、例えば２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１,２−ジヒドロキノリン、またはプロパンホスホン酸無水物、または、イソブチルクロロホルメート、または、ビス−（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）−ホスホリルクロリド、または、ベンゾトリアゾリルオキシトリ（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートまたはＯ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）、２−（２−オキソ−１−（２Ｈ）−ピリジル）−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＰＴＵ）またはＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、または、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、または、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ）、または、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、またはこれらの塩基との混合物である。
【００６２】
塩基は、例えば、アルカリ金属炭酸塩、例えば、ナトリウムまたはカリウムの炭酸塩または炭酸水素塩、またはトリアルキルアミン、例えばトリエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピペリジン、４−ジメチルアミノピリジンまたはジイソプロピルエチルアミンなどの有機塩基である。
【００６３】
好ましくは、縮合は、ＨＡＴＵを使用して、またはＨＯＢｔの存在下でＥＤＣを使用して実施する。
【００６４】
式（Ｖ）の化合物は、場合により保護基を有し、これらの場合では、式（ＩＶ）の化合物の式（Ｖ）の化合物との反応に続いて、例えば当業者に知られている方法に従いトリフルオロ酢酸を使用して保護基を除去するようにする。
【００６５】
式（ＩＶ）の化合物は、リソバクチン（実施例１Ａ）から二重のエドマン分解により合成できる。
式（ＩＩＩ）および（Ｖ）の化合物は、知られているか、既知方法により対応する出発物質から合成できる。
【００６６】
本発明の化合物の製造は、以下の合成スキームにより例示説明できる。
合成スキーム：
【化１５】
2008517004.tif 000016
【００６７】
本発明の化合物は、予測し得なかった価値ある薬理活性スペクトルを示す。それらは、抗菌活性を示す。
従って、それらは、ヒトおよび動物の疾患の処置および／または予防用の医薬としての使用に適する。
【００６８】
本発明の化合物は、リソバクチンと比較して低い腎毒性により卓越している。
記載したノナデプシペプチドは、細菌の細胞壁生合成の阻害剤として作用する。
【００６９】
本発明の製剤は、細菌および細菌様微生物に対して特に有効である。それらは、従って、これらの病原体に起因するヒトの医学および獣医学における局所および全身の感染の予防および化学療法に特に適する。
【００７０】
原則として、本発明の製剤は、細菌細胞壁（ムレイン小嚢（Murein sacculus））または対応する酵素系を有する全ての細菌および細菌様微生物に対して、例えば以下の病原体または以下の病原体の混合物に使用できる：
【００７１】
グラム陰性球菌（淋菌）並びにグラム陰性桿菌、例えば腸内細菌科、例えば大腸菌、インフルエンザ菌、シュードモナス属、クレブシエラ属、シトロバクター属（Ｃ.フロインデイ、Ｃ.ジベルニス（divernis））、サルモネラ属および赤痢菌属；さらに、エンテロバクター属（Ｅ.アエロゲネス、Ｅ.アグロメランス（agglomerans））、ハフニア属、セラチア属（Ｓ.マルセセンス）、プロビデンシア属、エルシニア属、並びにアシネトバクター属、ブランハメラ属およびクラミジア属。さらに、抗菌スペクトルには、厳密に嫌気性の細菌、例えば、バクテロイデス・フラジリス、ペプトコッカス属、ペプトストレプトコッカス属およびクロストリジウム属の代表例；さらに、ミコバクテリア、例えば結核菌が含まれる。本発明の化合物は、グラム陽性球菌、例えばブドウ球菌（黄色ブドウ球菌、表皮ブドウ球菌、Ｓ.ヘモリティクス（haemolyticus）、Ｓ.カルノサス（carnosus））、腸球菌（フェカリス菌、Ｅ.フェシウム）および連鎖球菌（Ｓ.アガラクチア、肺炎連鎖球菌、化膿性連鎖球菌）に対して、特に明白な効果を示す。
【００７２】
上記の病原体のリストは、例示としてのみ解釈されるべきであり、決して限定的に解釈すべきではない。上述の病原体または混合感染に起因すると言える、そして本発明の製剤により予防、改善または治癒できる疾患は、例えば以下のものである：
【００７３】
ヒトの感染性疾患、例えば、非複雑性および非複雑性尿路感染、非複雑性皮膚および表在性感染、複雑性皮膚および軟部組織感染、病院または通院で獲得される肺炎、院内肺炎、慢性気管支炎の急性増悪および二次的細菌感染、急性中耳炎、急性副鼻腔炎、連鎖球菌性咽頭炎、細菌性髄膜炎、非複雑性淋菌性および非淋菌性尿道炎／子宮頚管炎、急性前立腺炎、心内膜炎、非複雑性および複雑性腹腔内感染、婦人科の感染、骨盤内炎症性疾患、細菌性膣炎、急性および慢性骨髄炎、急性細菌性関節炎、熱性好中球減少性患者の経験的治療、さらに菌血症、ＭＲＳＡ感染、急性感染性下痢、ヘリコバクター・ピロリ感染、術後感染、歯性感染、眼科の感染、術後感染（直腸周囲膿瘍、創傷感染、胆道感染、乳腺炎および急性虫垂炎を含む）、嚢胞性線維症および気管支拡張症。
【００７４】
ヒトの他に、他の種でも細菌感染を処置できる。言及し得る例には、以下のものがある：
ブタ：下痢、腸毒血症、敗血症、赤痢、サルモネラ症、子宮炎−乳腺炎−アガラクチア症候群、乳腺炎；
反芻動物（ウシ、ヒツジ、ヤギ）：下痢、敗血症、気管支肺炎、サルモネラ症、パスツレラ症、性器感染；
ウマ：気管支肺炎、関節の病気、産褥性および産褥後感染、サルモネラ症；
イヌおよびネコ：気管支肺炎、下痢、皮膚炎、耳炎、尿路感染、前立腺炎；
家禽（ニワトリ、シチメンチョウ、ウズラ、ハト、観賞用鳥類など）：大腸菌感染、慢性呼吸器疾患、サルモネラ症、パスツレラ症、オウム病。
【００７５】
生産用および観賞用の魚類の飼育および維持における細菌性疾患の処置も同様に可能であり、そこでは抗菌スペクトルは前述した病原体を超えて、例えば、パスツレラ属、ブルセラ属、カンピロバクター属、リステリア属、エリシペロスリス属（Erysipelothris）、コリネバクテリウム属、ボレリア属（Borellia）、トレポネーマ属、ノカルジア属、リケッチア属、エルシニア属などのさらなる病原体に及ぶ。
【００７６】
本発明はさらに、疾患、特に細菌感染疾患の処置および／または予防のための、本発明の化合物の使用に関する。
本発明はさらに、疾患、特に上述の疾患の処置および／または予防のための、本発明の化合物の使用に関する。
本発明はさらに、疾患、特に上述の疾患の処置および／または予防用の医薬を製造するための、本発明の化合物の使用に関する。
本発明の化合物は、好ましくは、細菌性疾患の予防および／または処置に適する医薬の製造に使用する。
本発明はさらに、本発明の化合物の抗菌的有効量を使用する、疾患、特に上述の疾患の処置および／または予防方法に関する。
【００７７】
本発明はさらに、特に上述の疾患の処置および／または予防のための、少なくとも１種の本発明の化合物および少なくとも１種またはそれ以上のさらなる活性化合物を含む医薬に関する。組合せに好ましい活性化合物は、異なる活性スペクトル、特に補足的活性スペクトルを有する抗菌的に活性な化合物、および／または、本発明の化合物の佐薬である。
【００７８】
本発明の化合物は、全身的および／または局所的に作用できる。それらは、この目的のために、例えば、経口で、非経腸で、肺に、鼻腔に、舌下に、舌に、頬側に、直腸に、皮膚に、経皮で、結膜に、耳に、または、インプラントもしくはステントとして、適するやり方で投与できる。
【００７９】
本発明の化合物をこれらの投与経路に適する投与形で投与できる。
経口投与に適する投与は、先行技術に準じて機能し、本発明の化合物を、迅速に、かつ／または、修飾されたやり方で送達し、そして、本発明の化合物を結晶形および／または無定形および／または溶解形で含有する投与形、例えば、錠剤（非被覆または被覆錠剤、例えば、不溶であるかまたは遅れて溶解し、本発明の化合物の放出を制御する腸溶性被覆を有するもの）、口腔中で迅速に崩壊する錠剤またはフィルム／オブラート、フィルム／凍結乾燥剤、カプセル剤（例えば、ハードまたはソフトゼラチンカプセル剤）、糖衣錠剤、顆粒剤、ペレット剤、散剤、乳剤、懸濁剤、エアゾール剤または液剤である。
【００８０】
非経腸投与は、吸収段階を避けて（例えば、静脈内、動脈内、心臓内、脊髄内または腰椎内）、または、吸収を含めて（例えば、筋肉内、皮下、皮内、経皮または腹腔内）行うことができる。非経腸投与に適する投与形は、なかんずく、液剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥剤または滅菌散剤の形態の、注射および点滴用製剤である。
【００８１】
他の投与経路に適するのは、例えば、吸入用医薬形（なかんずく、散剤吸入器、噴霧器）、点鼻薬、液、スプレー；舌に、舌下に、または頬側に投与するための、錠剤、フィルム／オブラートまたはカプセル剤、坐剤、耳または眼用製剤、膣カプセル剤、水性懸濁剤（ローション剤、振盪混合物）、親油性懸濁剤、軟膏、クリーム、経皮治療システム（例えばパッチなど）、ミルク、ペースト、フォーム、散布用粉末剤（dusting powder）、インプラントまたはステントである。
【００８２】
本発明の化合物は、上述の投与形に変換できる。これは、不活性、非毒性、医薬的に許容し得る補助剤と混合することにより、それ自体既知のやり方で行うことができる。これらの補助剤には、なかんずく、担体（例えば微結晶セルロース、ラクトース、マンニトール）、溶媒（例えば液体ポリエチレングリコール類）、乳化剤および分散剤または湿潤剤（例えばドデシル硫酸ナトリウム、ポリオキシソルビタンオレエート）、結合剤（例えばポリビニルピロリドン）、合成および天然ポリマー（例えばアルブミン）、安定化剤（例えばアスコルビン酸などの抗酸化剤）、着色料（例えば無機色素、例えば酸化鉄など）および味および／または臭気の隠蔽剤。
【００８３】
本発明はさらに、少なくとも１種の本発明の化合物を、通常１種またはそれ以上の不活性、非毒性、医薬的に許容し得る補助剤と共に含有する医薬、および上述の目的のためのそれらの使用に関する。
【００８４】
静脈内投与で約０.００１ないし１００ｍｇ／体重ｋｇ、好ましくは約０.１ないし１０ｍｇ／体重ｋｇの量を投与するのが、有効な結果を達成するために有利であると、一般に明らかになった。経口投与では、投与量は、約０.０１ないし５０ｍｇ／体重ｋｇ、好ましくは０.５ないし１０ｍｇ／体重ｋｇである。
【００８５】
それにも関わらず、必要に応じて、特に体重、投与経路、活性化合物に対する個体の応答、製剤のタイプおよび投与を行う時間または間隔に応じて、上述の量から逸脱することが必要であり得る。従って、上述の最小量より少なくても十分な場合があり、一方上述の上限を超えなければならない場合もある。大量に投与する場合、これらを１日に亘る数回の個別投与に分割するのが望ましいことがある。
【００８６】
以下の試験および実施例における百分率は、断りの無い限り、重量パーセントである；部は、重量部である。液体／液体溶液の溶媒比、希釈比および濃度は、各場合で体積に基づく。
【実施例】
【００８７】
Ａ．実施例
略号
【表１】
2008517004.tif 000017
【００８８】
【表２】
2008517004.tif 000018
【００８９】
文献
ペプチドおよびシクロデプシペプチドの命名法について、以下を参照：
１. A Guide to IUPAC Nomenclature of Organic Compounds (Recommendations 1993), 1993, Blackwell Scientific publications.
２. Nomenclature and symbolism for amino acids and peptides. Recommendations 1983. IUPAC-IUB Joint Commission on Biochemical Nomenclature, UK. Biochemical Journal 1984, 219, 345-373. および引用文献。
３. アミノ酸側鎖で誘導体化されているノナデプシペプチド誘導体の命名法について、各誘導体化部位を指定するのに、ＩＵＰＡＣの接頭辞系を使用する（IUPAC, Nomenclature and Symbolism for Amino Acids and Peptides, Names and Symbols for Derivative of Named Peptides, Section 3AA-22, Recommendations 1983-1992)。例えば、Ｎω.６−アセチルリソバクチンは、アミノ酸６（デプシペプチドのＮ末端から、即ち、ここではＤ−Ａｒｇから計算する）で、特に末端の窒素原子でアセチル化されたリソバクチンを示す。
【００９０】
ＬＣ−ＭＳ、ＨＲ−ＭＳ、ＨＰＬＣおよびゲルクロマトグラフィーの一般法
方法１（ＨＰＬＣ）：装置タイプＨＰＬＣ：HP 1100 Series; UV DAD カラム: Zorbax Eclipse XBD-C8 (Agilent), 150 mm x 4.6 mm, 5 μm；溶離剤Ａ：ＨＣｌＯ４５ｍｌ／水１ｌ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−１分１０％Ｂ、１−４分１０−９０％Ｂ、４−５分９０％Ｂ；流速：２.０ｍｌ／分；オーブン：３０℃；ＵＶ検出：２１０および２５４ｎｍ。
【００９１】
方法２（ＨＰＬＣ）：カラム：Kromasil RP-18, 60 mm x 2 mm, 3.5 μm；溶離剤Ａ：ＨＣｌＯ４５ｍｌ／水１ｌ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０分２％Ｂ、０.５分２％Ｂ、４.５分９０％Ｂ、９分９０％Ｂ；流速：０.７５ｍｌ／分；オーブン：３０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【００９２】
方法３（ＬＣ−ＭＳ）：装置タイプＭＳ：Micromass ZQ；装置タイプＨＰＬＣ：HP 1100 Series; UV DAD; カラム: Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20 mm x 4 mm；溶離剤Ａ：水１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分９０％Ａ→２.５分３０％Ａ→３.０分５％Ａ→４.５分５％Ａ；流速：０.０分、１ｍｌ／分、２.５分／３.０分／４.５分、２ｍｌ／分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【００９３】
方法４（ＨＰＬＣ）：カラム：Kromasil RP-18, 250 mm x 4 mm, 5 μm；溶離剤Ａ：ＨＣｌＯ４５ｍｌ／水１ｌ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０分５％Ｂ、１０分９５％Ｂ；流速：１ｍｌ／分；オーブン：４０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【００９４】
方法５（ＨＰＬＣ）：カラム：Kromasil RP-18, 250 mm x 4 mm, 5 μm；溶離剤Ａ：ＨＣｌＯ４２ｍｌ／水１ｌ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；均一濃度：４５％Ｂ、５５％Ａ；流速：１ｍｌ／分；オーブン：４０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【００９５】
方法６（Sephadex LH-20 のゲルクロマトグラフィー): Sephadex LH-20 (Pharmacia) に圧力をかけずにゲルクロマトグラフィーを実施する。ＵＶ活性（２５４ｎｍ用のＵＶ検出機、Knauer) に従い、分別（フラクションコレクターISCO Foxy 200）を実施する。カラム寸法：３２ｘ７ｃｍ（１０００−１００μｍｏｌスケール）；３０ｘ４ｃｍ（１００−１０μｍｏｌスケール）；２５ｘ２ｃｍ（１０−１μｍｏｌスケール）。
【００９６】
方法７（分取ＨＰＬＣ）：装置：Gilson Abimed HPLC；ＵＶ検出器２１０ｎｍ；バイナリポンプシステム；カラム：Reprosil ODS-3, 5 μm, 250 x 20 mm；溶離剤Ａ：０.２％トリフルオロ酢酸を含む水、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；流速：２５ｍｌ／分；カラム温度４０℃；０−１２分３５％Ｂ。
【００９７】
方法８（ＬＣ−ＭＳ）：装置タイプＭＳ：Micromass ZQ；装置タイプＨＰＬＣ：HP 1100 Series; UV DAD; カラム: Phenomenex Synergi 2 μ Hydro-RP Mercury 20 mm x 4 mm；溶離剤Ａ：水１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ、溶離剤Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋５０％ギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分９０％Ａ→２.５分３０％Ａ→３.０分５％Ａ→４.５分５％Ａ；流速：０.０分１ｍｌ／分、２.５分／３.０分／４.５分２ｍｌ／分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【００９８】
方法９（ＨＰＬＣ）：装置タイプＨＰＬＣ：HP 1050 Series; UV DAD 1100 Series; カラム SymmetryPrepTMC18, Waters, 50 x 2.1 mm, 3.5 μm；溶離剤Ａ：水／０.０５％トリフルオロ酢酸、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−９分０−１００％Ｂ、９−１１分１００％Ｂ、１１−１２分１００−０％Ｂ、続いてクロマトグラフィーカラムの再生。オーブン：４０℃、流速：０.４ｍｌ／分、ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【００９９】
方法１０（ＦＴ−ＩＣＲ−ＨＲ−ＭＳ）：質量精密測定は、７Ｔｅｓｌａの磁石、外部のエレクトロスプレーイオン源および Unix をベースとする XMASS データシステムを備えた高分解能 Apex II フーリエ変換イオンサイクロトロン共鳴質量分析機 (Bruker Daltonik GmbH, Bremen）で実施する。質量分解能は約４０,０００（５０％ valley definition）である。
【０１００】
方法１１（分取ＨＰＬＣ）：装置：Gilson Abimed HPLC；ＵＶ検出器２１０ｎｍ；バイナリポンプシステム；カラム：Kromasil C-18, 5 μm, 100 Å, 250 x 20 mm；溶離剤Ａ：０.２％トリフルオロ酢酸を含む水、溶離剤Ｂ：アセトニトリル：流速：２５ｍｌ／分；０分２０％Ｂ、勾配０−１５分８０％Ｂ、勾配、１５−１５.１分２０％Ｂ、１５.１−２０分２０％Ｂ。Ｎ−ブトキシカルボニル保護物質には、溶離剤中のトリフルオロ酢酸を０.０５％酢酸により基本的に置き換える。
【０１０１】
方法１２（ＬＣ−ＭＳ）：装置タイプＭＳ：Micromass ZQ；装置タイプＨＰＬＣ：Waters Alliance 2790；カラム：Grom-Sil 120 ODS-4 HE 50 x 2 mm, 3.0 μm；溶離剤Ａ：水＋５０％ギ酸５００μｌ／ｌ；溶離剤Ｂ：アセトニトリル＋５０％ギ酸５００μｌ／ｌ；グラジエント：０.０分０％Ｂ→０.２分０％Ｂ→２.９分７０％Ｂ→３.１分９０％Ｂ→４.５分９０％Ｂ；オーブン：４５℃；流速：０.８ｍｌ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１０２】
方法１３（ＴＯＦ−ＨＲ−ＥＳＩ−ＭＳ）：Micromass-LCT 質量分析機（キャピラリー３.２ＫＶ、コーン４２Ｖ、ソース：１２０℃）を使用して、ＴＯＦ−ＨＲ−ＥＳＩ−ＭＳスペクトルを測定する。サンプルは、シリンジポンプ（Harvard Instrument）を使用して注入する。ロイシンエンケファリンを標準として使用する。
【０１０３】
方法１４（分取ＨＰＬＣ）：装置：Gilson Abimed HPLC；ＵＶ検出器２１０ｎｍ；バイナリポンプシステム；カラム：Nucleodur C18 Gravity, Macherey-Nagel, 5 μm; 250 ｘ 40 mm；流速：１５−４５ｍＬ／分；溶離剤Ａ：水／０.１％トリフルオロ酢酸、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−１２分１０％Ｂ、１２−２０分１０−３５％Ｂ、２０−２５分３５−４０％Ｂ、２５−３５分４０％Ｂ、３５−４５分４０−５０％Ｂ、４５−５０分５０−６０％Ｂ１００％Ｂ、５０−６０分６０−１００％Ｂ、６０−７５分１００％Ｂ、続いてクロマトグラフィーカラムの再生。
【０１０４】
方法１５（ＭＡＬＤＩ−ＭＳ）：ＴＯＦ／ＴＯＦイオン光学系および 200 Hz Nd:YAG レーザー（３５５ｎｍ）を備えた 4700 Proteomics Analyzer (Applied Biosystems, Framingham, MA, USA) で、ＭＡＬＤＩ−ＭＳ／ＭＳ調査を実施する。８ｋＶを使用してイオン源中の準分子イオンを加速し、電気的デフレクター（ＭＳ１）を使用して選択し、ＭＳ１とＭＳ２との間に配置された衝突セル内でアルゴン原子と衝突させる。得られる分離片イオンを１５ｋＶを使用して再加速し、第２の飛行時間型質量分析機（ＭＳ２）を使用して特徴解析する。
【０１０５】
方法１６（ＬＣ−ＭＳ）：装置タイプＭＳ：Micromass ZQ；装置タイプＨＰＬＣ：Waters Alliance 2790；カラム：Grom-Sil 120 ODS-4 HE 50 mm x 2 mm, 3.0 μm；溶離剤Ｂ：アセトニトリル＋０.０５％ギ酸、溶離剤Ａ：水＋０.０５％ギ酸；グラジエント：０.０分５％Ｂ→２.０分４０％Ｂ→４.５分９０％Ｂ→５.５分９０％Ｂ；オーブン：４５℃；流速：０.０分０.７５ｍｌ／分→４.５分０.７５ｍｌ／分→５.５分１.２５ｍｌ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１０６】
方法１７（分取ＨＰＬＣ）：装置：Gilson Abimed HPLC；ＵＶ検出器２１０ｎｍ；バイナリポンプシステム；カラム：Nucleodur C18 Gravity, Macherey-Nagel, 5 μm; 250 x 21 mm；流速：２０ｍｌ／分；溶離剤Ａ：水／０.２５−０.５％酢酸、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０−３分５％Ｂ、３−３０分５−１００％Ｂ、３０−３８分１００％Ｂ、続いてクロマトグラフィーカラムの再生。
【０１０７】
方法１８（ＮＭＲ、定量的ＴＦＡ分析／絶対的含有量）：溶解したフッ素含有有機物質および較正用物質（例えば１,４−ジブロモテトラフルオロベンゼン）を秤量し、適する溶媒を添加し、続いてサンプルの１９Ｆ−ＮＭＲスペクトルを記録する（３７６ＭＨｚ）。試験物質および較正用物質の積分値を、ＮＭＲスペクトルから決定する。これから、フッ素（またはＴＦＡ）の含有量を決定する。
【０１０８】
方法１９（ＭＡＬＤＩ−ＭＳ）：ＴＯＦ／ＴＯＦイオン光学系および 200 Hz Nd:YAG レーザー（３５５ｎｍ）を備えた 4700 Proteomics Analyzer (Applied Biosystems, Framingham, MA, USA) で、ＭＡＬＤＩ−ＭＳ／ＭＳ調査を実施する。８ｋＶを使用してイオン源中の準分子イオンを加速し、電気的デフレクター（ＭＳ１）を使用して選択し、ＭＳ１とＭＳ２との間に配置された衝突セル内でアルゴン原子と衝突させる。得られる分離片イオンを１５ｋＶを使用して再加速し、第２の飛行時間型質量分析機（ＭＳ２）を使用して特徴解析する。
【０１０９】
方法２０（ＦＴ−ＩＣＲ−ＨＲ−ＭＳ）：質量精密測定は、７Ｔｅｓｌａの磁石、外部のエレクトロスプレーイオン源および Unix をベースとする XMASS データシステムを備えた高分解能 Apex II フーリエ変換イオンサイクロトロン共鳴質量分析機 (Bruker Daltonik GmbH, Bremen）で実施する。質量分解能は約４０,０００（５０％ valley definition）である。
【０１１０】
方法２１（分取ＨＰＬＣ）：装置：Gilson Abimed HPLC；ＵＶ検出器２１０ｎｍ；バイナリポンプシステム；カラム：Reprosil ODS-A, 5 μm, 250 x 20 mm；溶離剤Ａ：０.２％トリフルオロ酢酸を含む水、溶離剤Ｂ：アセトニトリル；流速：２５ｍｌ／分；カラム温度４０℃；０−１０分２０％Ｂ、１０−１５分８０％Ｂ。
【０１１１】
一般的実施方法
一般的実施方法１（ＭＡＬＤＩ−ＭＳ用の加水分解サンプル調製）
開環しようとするデプシペプチド（例えばリソバクチン、０.０５μｍｏｌ）を、最初に、微小バイアル中、ボレート−塩酸バッファー（Merck）ｐＨ８（２５０μｌ）で処理する。混合物を終夜静置し、酢酸（１００μｌ）を添加し、サンプルを凍結乾燥する。粗生成物を、これ以上精製せずに、ＭＡＬＤＩ−ＭＳ配列解読を利用する段階により調査する。
【０１１２】
一般的実施方法２（エドマン０.５および１.５）
フェニルイソチオシアネート（５０ｍｍｏｌ）を、乾燥ピリジン（３０ｍｌ）中のＮ−末端遊離ペプチド（０.３ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン保護気体雰囲気下で滴下して添加する。分析用ＨＰＬＣによる確認（方法１３）が適切な変換（＞９５％）を示すまで、反応混合物を３７℃で撹拌する（約１時間）。温度を制御して（＜４０℃）、反応混合物を真空で濃縮し、次いで凍結乾燥する。
【０１１３】
一般的実施方法３（エドマン１.０および２.０）
アルゴン保護気体雰囲気下、ペプチドチオウレア（０.２ｍｍｏｌ）を固体として乾燥トリフルオロ酢酸で激しく撹拌しながら処理し、次いで、分析用ＨＰＬＣによる確認が適切な変換（＞９５％）を示すまで、４０℃で撹拌する（約２０分）。反応混合物を迅速に真空で、室温（温度制御）で濃縮する。粗生成物からさらにトリフルオロ酢酸を除くために、粗生成物をジクロロメタンに取り、再度真空で溶媒を除く。トルエンで（２回）、そしてジクロロメタンで（２回）、この方法を数回繰り返す。最後に、粗生成物を凍結乾燥する。
【０１１４】
出発化合物
実施例１Ａ
Ｄ−ロイシル−Ｎ１−｛（３Ｓ,６Ｓ,１２Ｓ,１５Ｓ,１８Ｒ,２１Ｓ,２４Ｓ,２７Ｓ,２８Ｒ）−６−［（１Ｓ）−２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチル］−１８−（３−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝プロピル）−１２−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−３−（ヒドロキシメチル）−２４−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−メチルプロピル］−２１−イソブチル−１５−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５,８,１１,１４,１７,２０,２３,２６−ノナオキソ−２８−フェニル−１−オキサ−４,７,１０,１３,１６,１９,２２,２５−オクタアザシクロオクタコサン−２７−イル｝−Ｌ−ロイシンアミドビストリフルオロアセテート（リソバクチン）
【化１６】
2008517004.tif 000019
【０１１５】
発酵：
培養培地：
ＹＭ：酵母−麦芽寒天：Ｄ−グルコース（４ｇ／ｌ）、酵母抽出物（４ｇ／ｌ）、麦芽抽出物（１０ｇ／ｌ）、Lewatit 水１ｌ。滅菌（２０分間、１２１℃）前に、ｐＨを７.２に調節する。
ＨＰＭ：マンニトール（５.４ｇ／ｌ）、酵母抽出物（５ｇ／ｌ）、肉ペプトン（３ｇ／ｌ）。
作業用一時保存物：凍結乾燥系統（ＡＴＣＣ５３０４２）を、ＹＭ培地５０ｍｌ中で増殖させる。
【０１１６】
フラスコ発酵：１ｌの三角フラスコ中のＹＭ培地１５０ｍｌまたはＨＰＭ培地１００ｍｌを、作業用一時保存物２ｍｌで播種し、２８℃で、２４０ｒｐｍの振盪機上、３０−４８時間増殖させる。
【０１１７】
３０ｌ発酵：フラスコ発酵物（ＨＰＭ培地）３００ｍｌを使用して、無菌の栄養培地溶液（１ｍｌの消泡剤ＳＡＧ５６９３／ｌ）３０ｌを播種する。この培養物を、２１時間、２８℃、３００ｒｐｍおよび滅菌空気０.３ｖｖｍによる通気で増殖させる。１Ｍ塩酸を使用してｐＨをｐＨ＝７.２に一定に保つ。培養期間中に、全部で８８０ｍｌの１Ｍ塩酸を添加する。
【０１１８】
主培養（２００ｌ）：１ｌの三角フラスコ中のＹＭ培地１５ｘ１５０ｍｌを、作業用一時保存物２ｍｌで播種し、振盪機上、４８時間、２８℃、２４０ｒｐｍで増殖させる。この培養物２２５０ｍｌを使用して、無菌の栄養培地溶液（ＹＭ）（１ｍｌの消泡剤ＳＡＧ５６９３／ｌ）２００ｌを播種し、それを、１８.５時間、２８℃、１５０ｒｐｍおよび滅菌空気０.３ｖｖｍによる通気で増殖させる。
【０１１９】
毎時間のサンプル（５０ｍｌ）を取り、発酵過程を確認する。メタノール１ｍｌ（０.５％トリフルオロ酢酸）をこの培養ブロス２ｍｌに添加し、０.４５μｍフィルターを通して混合物を濾過する。この懸濁液３０μｌを、ＨＰＬＣ（方法１および方法２）を利用して分析する。
１８.５時間後、１７０００ｒｐｍで主培養の培養ブロスを上清と沈降物に分離する。
【０１２０】
単離：
上清（１８３ｌ）を濃トリフルオロ酢酸または水酸化ナトリウム溶液を使用してｐＨ６.５−７に調節し、Lewapol カラム (OC 1064、６０ｌ容量）に負荷する。続いて、純水、水／メタノール１：１および続いて純粋なメタノール（０.１％トリフルオロ酢酸を含有する）で溶出を実施する。この有機相を真空で濃縮し、水性残留物１１.５ｌを残す。
【０１２１】
残存する水相をシリカゲルＣ１８に結合させ、分離する（MPLC, Biotage Flash 75, 75 x 30 cm, KP-C18-WP, 15-20 μm, 流速：３０ｍｌ；溶離剤：アセトニトリル／０.１％トリフルオロ酢酸を含有する水；グラジエント：１０％、１５％および４０％アセトニトリル）。実施例１Ａの大部分を含有する４０％アセトニトリル相を真空で濃縮し、続いて凍結乾燥する（〜１３ｇ）。この固体の混合物を１.２ｇずつ、最初に分取用ＨＰＬＣ（方法３）により、続いて Sephadex LH-20 （５ｘ７０ｃｍ、アセトニトリル／水１：１、各場合で０.０５％トリフルオロ酢酸を含有する）のゲル濾過により、さらに分取用ＨＰＬＣ（方法４）で、分離する。
この方法により、実施例１Ａ２２５０ｍｇを得る。
【０１２２】
沈降物を４ｌのアセトン／水４：１に取り、Celite ２ｋｇを添加し、トリフルオロ酢酸を使用して混合物をｐＨ＝６に調節し、撹拌し、遠心分離する。溶媒を真空で濃縮し、残渣を凍結乾燥する。得られる凍結乾燥物（８９.９ｇ）をメタノールに取り、濾過し、濃縮し、シリカゲル（方法５）で分離する。次いで、実施例１Ａをゲル濾過（Sephadex LH-20、５ｘ６８ｃｍ、水／アセトニトリル９：１（０.０５％トリフルオロ酢酸を含有する）、流速：２.７ｍｌ／分、画分サイズ１３.５ｍｌ）により精製し、純粋な物質を得る。
この方法により実施例１Ａ４４７ｍｇを得る。
【０１２３】
HPLC (方法 1): Rt = 6.19 分
MS (ESIpos): m/z = 1277 (M+H)+
1H NMR (500.13 MHz, d6-DMSO): δ = 0.75 (d, 3H), 0.78 (d, 6H), 0.80 (t, 3H), 0.82 (d, 3H), 0.90 (d, 3H), 0.91 (d, 3H), 0.92 (d, 3H), 0.95 (d, 3H), 0.96 (d, 3H), 1.05 (m, 1H), 1.19 (d, 3H), 1.25 (m, 2H), 1.50 (m, 4H), 1.51 (m, 2H), 1.55 (m, 1H), 1.61 (m, 1H), 1.65 (m, 1H), 1.84 (m, 1H), 1.85 (m, 1H), 1.86 (m, 1H) , 1.89 (m, 1H), 1.95 (m, 1H), 2.75 (m, 2H), 3.40 (m, 1H), 3.52 (m, 2H), 3.53 (dd, 1H), 3.64 (m, 2H), 3.66 (m, 1H), 3.68 (dd, 1H), 3.73 (m, 2H), 4.00 (dd, 1H), 4.02 (br., 1H), 4.13 (br., 1H), 4.32 (dd, 1H), 4.39 (t, 1H), 4.55 (m, 1H), 4.75 (dd, 1H), 5.19 (t, 1H), 5.29 (d, 1H), 5.30 (br., 1H), 5.58 (m, 2H), 6.68 (m, 3H), 6.89 (d, 1H), 6.93 (m, 3H), 6.94 (br., 1H), 6.98 (d, 1H), 7.12 (br., 1H), 7.20 (br., 2H), 7.23 (m, 2H), 7.42 (m, 2H), 7.54 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 8.32 (br., 1H), 9.18 (br., 1H), 9.20 (m, 2H), 9.50 (br., 1H).
【０１２４】
13C-NMR (125.77 MHz, d6-DMSO): δ = 10.3, 15.3, 19.0, 19.2, 19.6, 20.0, 20.9, 22.0, 22.4, 23.0, 23.2, 24.3, 24.4, 25.0, 25.4, 26.0, 27.8, 30.9, 35.4, 39.5, 40.8, 40.9, 41.6, 44.1, 51.5, 52.7, 55.9, 56.2, 56.4, 57.9, 58.8, 60.2, 61.1, 62.6, 70.1, 71.6, 71.7, 75.5, 128.1, 128.6, 136.7, 156.8, 168.2, 170.1, 170.4, 171.2, 171.5, 171.9, 172.2, 172.4, 173.7.
シグナルの割当ては、文献に記載の割当てに従い実施した (T. Kato, H. Hinoo, Y. Terui, J. Antibiot., 1988, 61, 719-725)。
【０１２５】
実施例２Ａ
Ｎ２.１−［１−メチル−３−オキソブト−１−エン−１−イル］−Ｎ７.ω,Ｎ７.ω'−（ペント［２］エン［２］イル［４］イリデン）リソバクチン
【化１７】
2008517004.tif 000020
【０１２６】
粉末状分子ふるい（４Å、１０ｍｇ）および２,４−ペンタンジオン（２００当量、０.２ｍｌ、２.０ｍｍｏｌ）を、耐圧反応容器（サイズ：１ｍｌ）中、ピリジン（０.４ｍｌ）中のリソバクチンビストリフルオロアセテート（１５ｍｇ、０.０１ｍｍｏｌ）の溶液に添加する。反応混合物を最初に４時間８０℃で、次いで９０℃で、ＨＰＬＣクロマトグラムが完全な変換を示すまで加熱する（約１２時間）。反応混合物をガラスフリット（孔サイズ２）を通して濾過し、まだ熱いうちに、真空で蒸発させ、高真空下に乾燥させる（１２時間）。分取ＨＰＬＣ（例えばＴＦＡを用いない方法１７）を利用して、残渣を精製する。固体（８ｍｇ、理論値の５４％）を生成物として得る。
LC-MS (方法 16): Rt = 3.43 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 712 (100) [M + 2H]2+.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 710 (100) [M - 2H ]2-.
【０１２７】
実施例３Ａ
Ｎ−（アニリノカルボノチオイル）−Ｄ−ロイシル−Ｎ１−｛（３Ｓ,６Ｓ,１２Ｓ,１５Ｓ,１８Ｒ,２１Ｓ,２４Ｓ,２７Ｓ,２８Ｒ）−６−［（１Ｓ）−２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチル］−１８−（３−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝プロピル）−１２−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−３−（ヒドロキシメチル）−２４−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−メチルプロピル］−２１−イソブチル−１５−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５,８,１１,１４,１７,２０,２３,２６−ノナオキソ−２８−フェニル−１−オキサ−４,７,１０,１３,１６,１９,２２,２５−オクタアザシクロオクタコサン−２７−イル｝−Ｌ−ロイシンアミドモノトリフルオロアセテート
｛Ｎ−（アニリノカルボノチオイル）リソバクチンモノトリフルオロアセテート｝
【化１８】
2008517004.tif 000021
【０１２８】
リソバクチンビストリフルオロアセテート（５００ｍｇ、０.３３ｍｍｏｌ）（実施例１Ａ）を、一般的実施方法２に従い反応させる。生成物６００ｍｇ（定量的）を得、それを未精製形態でさらに反応させることができる。
さらなる精製のために、粗生成物をゲルクロマトグラフィー（方法６；メタノール／０.１％酢酸）できる。生成物含有画分を、真空、室温で濃縮し、次いで凍結乾燥する。生成物を収率８０％で得る。
HPLC/UV-vis (方法 13): Rt = 6.84 分,
λmax (定量的) = 220 nm (s), 248 (m), 269 (m).
LC-MS (方法 11): Rt = 2.64 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 706.5 (50) [M + 2H]2+, 1412 (20) [M + H]+;
LC-MS (方法 12) : Rt = 4.95 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 1412 (100) [M + H]+.
【０１２９】
実施例４Ａ
Ｎ１−｛（３Ｓ,６Ｓ,１２Ｓ,１５Ｓ,１８Ｒ,２１Ｓ,２４Ｓ,２７Ｓ,２８Ｒ）−６−［（１Ｓ）−２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチル］−１８−（３−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝プロピル）−１２−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−３−（ヒドロキシメチル）−２４−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−メチルプロピル］−２１−イソブチル−１５−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５,８,１１,１４,１７,２０,２３,２６−ノナオキソ−２８−フェニル−１−オキサ−４,７,１０,１３,１６,１９,２２,２５−オクタアザシクロオクタコサン−２７−イル｝−Ｌ−ロイシンアミドビストリフルオロアセテート
｛デ−Ｄ−ロイシルリソバクチンビストリフルオロアセテート｝
【化１９】
2008517004.tif 000022
【０１３０】
チオウレア（実施例３Ａ）（３００ｍｇ、０.２ｍｍｏｌ）を、一般的実施方法３に従い反応させる。粗生成物をゲルクロマトグラフィー（方法６；メタノール／０.２５％酢酸）し、続いて分取ＨＰＬＣ（方法８）を利用して丁寧に精製する。生成物１４７ｍｇ（理論値の６５％）を得る。
HPLC/UV-vis (方法 13): Rt = 4.96 分,
λmax(定量的) = 220 nm (s), 255-270 (w).
LC-MS (方法 12): Rt = 3.84 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 582.4 (100) [M + 2H]2+, 1164 (20) [M + H]+.
FT-ICR-HR-MS (方法 20):       
C52H88N14O16 [M + 2H]2+  計算値 582.32459, 実測値 582.32460;
C52H87N14NaO16 [M + H + Na]2+  計算値 593.31556, 実測値 593.31564.
アミノ酸配列決定のために、生成物の分析用サンプルを一般的実施方法１に従い加水分解する。
MALDI-MS (方法 19): m/z (%) = 1181.7 (100) [M + H]+.
【０１３１】
より大きい規模での代替的製造方法：
実施例１Ａ（６.４７ｇ、４.３０ｍｍｏｌ）を、ピリジン（９０ｍｌ）にアルゴン雰囲気下で溶解する。フェニルイソチオシアネート（１.１６ｇ、８.６０ｍｍｏｌ、２当量）を、次いで添加し、反応混合物を３７℃で１時間撹拌する。続いて、溶媒をロータリーエバポレーターで留去し、残渣を終夜油ポンプによる真空下で乾燥させる。中間体の実施例２Ａを粗収量６.６０ｇで得る。中間体を精製せずにさらに反応させる。この目的で、実施例３Ａ（６.６０ｇ）をトリフルオロ酢酸（１０７ｍｌ）にアルゴン雰囲気下で溶解し、室温で３０分間撹拌する。次いで、溶液を真空で、ロータリーエバポレーターで濃縮し、油ポンプによる真空下で短時間乾燥させ、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２５０ｍｌ）に取り、粉末状の無定形固体が得られるまで激しく撹拌する。これを真空濾過により回収し、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２００ｍｌ）で洗浄し、次いでジクロロメタン（２回、１００ｍｌ）で洗浄する。固体をフラスコに移し、油ポンプによる真空下で乾燥させる。実施例４Ａを粗収量６.０ｇで得る（定量的）。生成物をこれ以上精製せずに反応させることができる。
【０１３２】
実施例５Ａ
Ｎ２−（アニリノカルボノチオイル）−Ｎ１−｛（３Ｓ,６Ｓ,１２Ｓ,１５Ｓ,１８Ｒ,２１Ｓ,２４Ｓ,２７Ｓ,２８Ｒ）−６−［（１Ｓ）−２−アミノ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチル］−１８−（３−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝プロピル）−１２−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−３−（ヒドロキシメチル）−２４−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−メチルプロピル］−２１−イソブチル−１５−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５,８,１１,１４,１７,２０,２３,２６−ノナオキソ−２８−フェニル−１−オキサ−４,７,１０,１３,１６,１９,２２,２５−オクタアザシクロオクタコサン−２７−イル｝−Ｌ−ロイシンアミドモノトリフルオロアセテート
【化２０】
2008517004.tif 000023
【０１３３】
デ−Ｄ−ロイシルリソバクチンビストリフルオロアセテート（実施例４Ａ、２５５ｍｇ、０.１８ｍｍｏｌ）を、一般的実施方法２に従い反応させる。生成物３２２ｍｇ（定量的）を得、それを未精製形態でさらに反応させることができる。
さらなる後処理のために、粗生成物をゲルクロマトグラフィー（方法６；メタノール／０.１％酢酸）できる。生成物含有画分を真空で、室温で濃縮し、次いで凍結乾燥する。
HPLC/UV-vis (方法 13): Rt = 6.56 分,
λmax (定量的) = 220 nm (s), 245 (m), 268 (m).
LC-MS (方法 12): Rt = 4.85 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 1299 (100) [M + H]+.
【０１３４】
実施例６Ａ
（２Ｓ）−２−｛（３Ｓ,６Ｓ,１２Ｓ,１５Ｓ,１８Ｒ,２１Ｓ,２４Ｓ,２７Ｓ,２８Ｒ）−２７−アミノ−１８−（３−｛［アミノ（イミノ）メチル］アミノ｝プロピル）−１２−［（１Ｓ）−１−ヒドロキシエチル］−３−（ヒドロキシメチル）−２４−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシ−２−メチルプロピル］−２１−イソブチル−１５−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５,８,１１,１４,１７,２０,２３,２６−ノナオキソ−２８−フェニル−１−オキサ−４,７,１０,１３,１６,１９,２２,２５−オクタアザシクロオクタコサン−６−イル｝−２−ヒドロキシエタンアミドビストリフルオロアセテート
｛デ（１−Ｄ−ロイシル−２−Ｌ−ロイシル）リソバクチンビストリフルオロアセテート｝
【化２１】
2008517004.tif 000024
【０１３５】
チオウレア（実施例５Ａ、６６ｍｇ、３４μｍｏｌ）を、一般的実施方法３に従い反応させる。粗生成物を迅速なゲルクロマトグラフィー（方法６；メタノール／０.２５％酢酸）により予精製できる。分取ＨＰＬＣ（方法８または方法９、続いてＴＦＡ（１００μｍｏｌ）の添加によるクロマトグラフィー生成物の複分解）により、生成物４５ｍｇ（理論値の７５％）を得る。
HPLC/UV-vis (方法 13): Rt = 4.71 分,
λmax (定量的) = 220 nm (s), 255-270 (w).
LC-MS (方法 11): Rt = 1.65 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 526 (100) [M + 2H]2+, 1051 (15) [M + H]+.
【０１３６】
より大きい規模での代替的製造方法：
実施例化合物４Ａ（６.４７ｇ、４.３０ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下でピリジン（９２ｍｌ）に溶解する。次いで、フェニルイソチオシアネート（８.７５ｇ、６４.６８ｍｍｏｌ、１５当量）を添加し、反応混合物を３７℃で１時間撹拌する。続いて、溶媒をロータリーエバポレーターで留去し、残渣を終夜油ポンプによる真空下で乾燥させる。実施例５Ａを粗収量６.０ｇで得る。中間体を精製せずにさらに反応させる。この目的で、粗製実施例５Ａをトリフルオロ酢酸（８２ｍｌ）にアルゴン雰囲気下で溶解し、室温で３０分間撹拌する。次いで、溶液を真空で、ロータリーエバポレーターで濃縮し、油ポンプによる真空下で短時間乾燥させ、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２５０ｍｌ）に取り、粉末状無定形固体が得られるまで激しく撹拌する。これを真空濾過により回収し、さらなるメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２００ｍｌ）で洗浄し、次いで各１００ｍｌのジクロロメタン２回分で洗浄する。固体をフラスコに移し、油ポンプによる真空下で乾燥させる。表題化合物を粗収量５.４ｇ（定量的）で得る。生成物を分取ＨＰＬＣ（方法２１）によりさらに精製する。表題化合物（理論値の３２％）１.７９ｇを得る。
【０１３７】
例示的実施態様
実施例１
Ｎω.６,Ｎω'.６−（ペント［２］エン［２］イル［４］イリデン）リソバクチントリフルオロアセテート
【化２２】
2008517004.tif 000025
【０１３８】
粉末状分子ふるい（４Å、０.５ｇ）および２,４−ペンタンジオン（４０当量、３.３ｍｌ、３２.１ｍｍｏｌ）を、還流冷却器を備えた三口フラスコ中、ピリジン（５５ｍｌ）中のリソバクチンビストリフルオロアセテート（２.０ｇ、０.８ｍｍｏｌ）の溶液に添加する。反応混合物を最初に３.５時間８５℃で、次いで１１０℃で、ＨＰＬＣクロマトグラムが完全な変換を示すまで（約４−８時間）加熱する。ガラスフリット（孔サイズ２）を通して反応混合物を濾過し、熱いうちに、真空で蒸発させ、高真空下に乾燥させる（１２時間）。残渣（１.９ｇ）を、アセトニトリル（３０ｍｌ）および０.５Ｎ水性塩酸（４０ｍｌ）の混合物に取り、室温でＨＰＬＣクロマトグラムが完全な変換を示すまで（約０.４時間）撹拌する。反応混合物を真空で濃縮し、凍結し、凍結乾燥する。切断生成物をゲルクロマトグラフィー（方法６、溶離剤メタノール／酢酸９９／１）を利用して精製し、粗生成物１.５ｇを得る。これを続いて分取ＨＰＬＣ（方法７）を利用して丁寧に精製する。生成物５３６ｍｇ（理論値の４６％）を得る。
【０１３９】
HPLC/UV-vis (方法 9): Rt = 5.9 分, 
λmax (定量的) = 220 nm (s), 310 (s).
LC-MS (方法 8): Rt = 1.45 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 671 (100) [M + 2H]2+, 1341 (10) [M + H]+.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 669 (80), 1339 (50) [M - H]-, 1385 [M - H + HCO2H]-.
FT-ICR-HR-MS (方法 10): C63H103N15O17 [M + 2H]2+ 計算値 670.88227, 実測値 670.88169
TOF-HR-ESI-MS (方法 13): C63H102N15O17 [M + H]+ 計算値 1340.7578, 実測値 1340.7552;
アミノ酸配列決定のために、生成物の分析用サンプルを一般的実施方法１に従い加水分解する。
MALDI-MS (方法 15): m/z (%) = 1358.8 (100) [M + H]+.
ＴＦＡ含有量を、１９Ｆ−ＮＭＲ（方法１８；較正物質１,４−ジブロモテトラフルオロベンゼン）により決定する：計算値 ＴＦＡの重量で１４.５％、実測値 ＴＦＡの重量で１３.８％。
【０１４０】
実施例２
Ｎω.６,Ｎω'.６−（１,１,１,５,５,５−ヘキサフルオロペント［２］エン［２］イル［４］イリデン）リソバクチン
【化２３】
2008517004.tif 000026
【０１４１】
粉末状分子ふるい（４Å、０.０５ｇ）および１,１,１,５,５,５−ヘキサフルオロ−２,４−ペンタンジオン（１０当量、７０μｌ、４８０μｍｏｌ）を、還流冷却器を備えた三口フラスコ中、ピリジン（５ｍｌ）中のリソバクチンビストリフルオロアセテート（１０.０ｍｇ、０.０５ｍｍｏｌ）の溶液に添加する。反応混合物を最初に４８時間８５℃で、次いで９５℃でＨＰＬＣクロマトグラムが完全な変換を示すまで（約１２時間）加熱する。ガラスフリット（孔サイズ２）を通して反応混合物を濾過し、熱いまま、真空で蒸発させ、高真空下に乾燥させる（１２時間）。残渣をアセトニトリル（３ｍｌ）および０.５Ｎ水性塩酸（４ｍｌ）の混合物に取り、ＨＰＬＣクロマトグラムが完全な変換を示すまで（約０.５時間）室温で撹拌する。反応混合物を真空で濃縮し、凍結し、凍結乾燥する。切断生成物を分取ＨＰＬＣ（方法１１）を利用して精製する。生成物３.５ｍｇ（理論値の４.６％）を得る。
LC-MS (方法 12): Rt = 2.68 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 725 (100) [M + 2H]2+, 1449 (20) [M + H]+.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 687 (50), 1447 (100) [M - H]-, 1493 (15) [M - H + HCO2H]-.
FT-ICR-HR-MS (方法 10): C63H95F6N15O17 [M + 2H]2+ 計算値 724.85400, 実測値 724.85427
【０１４２】
実施例３
Ｎω.６,Ｎω'.６−（ペンタン［２,４］ジイル）リソバクチン
【化２４】
2008517004.tif 000027
【０１４３】
Ｎω.６,Ｎω'.６−（ペント［２］エン［２］イル［４］イリデン）リソバクチントリフルオロアセテート（２０５ｍｇ、０.１４ｍｍｏｌ）、２−プロパノール（１０ｍｌ）、水（１０ｍｌ）、炭素上のパラジウム（１０％、１００ｍｇ）および濃塩酸（１.８ｍｌ）の混合物を、大気圧下に室温で水素化する。ＨＰＬＣクロマトグラムが完全な変換を示したら（約２４時間）、水素化を停止する。Celite を通して反応混合物を濾過し（ここでそれを２−プロパノールで数回洗浄する）、続いて真空で濃縮する。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（方法１４）を利用して精製し、凍結乾燥する。固体（５２ｍｇ、理論値の２５％）を生成物として得る。
HPLC/UV-vis (方法 9): Rt = 6.0 分, 
λmax (定量的) = 220 nm (s), 260 (m).
LC-MS (方法 8): Rt = 1.59 分;
MS (ESIpos.): m/z (%) = 673 (100) [M + 2H]2+, 1345 (10) [M + H]+.
MS (ESIneg.): m/z (%) = 671 (80) [M - 2H]2-, 1343 (40) [M - H]-, 1390 (100) [M - H + HCO2H]-
TOF-HR-ESI-MS (方法 13): C63H106N15O17 [M + H]+ 計算値 1344.7891, 実測値 1344.7867
【０１４４】
Ｂ．生理活性の評価
本発明の化合物のインビトロの活性は、以下のアッセイで示すことができる：
最低阻害濃度（ＭＩＣ）の決定：
ＮＣＣＬＳのガイドラインに準じる液体希釈試験でＭＩＣを決定する。黄色ブドウ球菌１３３、エンテロコッカス・フェカリス２７１５９、Ｅ.フェシウム４１４７および肺炎連鎖球菌Ｇ９ａの終夜培養物を、１：２希釈系列の記載した試験物質と共に培養する。ＭＩＣ決定は、Isosensitest 培地 (Difco, Irvine/USA）中、１ｍｌ当たり１０５個の微生物の細胞数で実施し、肺炎連鎖球菌は例外とし、これは１０％ウシ血清を含有するＢＨＩブロス (Difco, Irvine/USA) 中、微生物の細胞数１０６個で試験する。培養物を３７℃で１８−２４時間、肺炎連鎖球菌は１０％ＣＯ２の存在下で、培養する。
各場合でもはや視認できる細菌の増殖がない最低の物質濃度をＭＩＣと定義する。ＭＩＣ値は、μｇ／ｍｌで報告する。
【０１４５】
本発明の化合物の代表的インビトロ活性データを表Ａに示す：
表Ａ
【表３】
2008517004.tif 000028
【０１４６】
細菌感染の処置に対する本発明の化合物の適合性は、以下の動物モデルで示すことができる：
黄色ブドウ球菌１３３による全身感染：
黄色ブドウ球菌１３３の細胞を、ＢＨＩブロス（Oxoid, New York/USA）中で終夜増殖させる。終夜培養物を新鮮なＢＨＩブロス中で１：１００に希釈し、３時間培養する。そのとき対数増殖期にある細胞を、遠心分離し、緩衝生理塩水で２回洗浄する。次いで、塩水中の細胞の懸濁液を、測光法で吸光度５０に調節する。希釈段階の後（１：１５）、この懸濁液を１０％ムチン溶液と１：１で混合する。この感染溶液０.２５ｍｌ／マウス２０ｇを腹腔内投与する（微生物１ｘ１０６個／マウスに相当する）。感染の３０分後に、腹腔内または静脈内で治療を行う。雌のＣＦＷ１マウスを感染実験に使用する。動物の生存を６日間記録する。
【０１４７】
腎耐性に関する本発明の化合物の特性は、以下の動物モデルで示すことができる：
腎毒性作用の決定のためのマウスモデル：
ノナデプシペプチドの腎毒性の副作用を、特定用量の複数回投与後のマウスおよび／またはラットの腎臓の組織病理学的調査により分析する。このために、５−６匹の動物を、静脈内（ｉ.ｖ.）または腹腔内（ｉ.ｐ.）で、水性溶液に、または Solutol を添加して溶解した物質により毎日処置する。腎臓のヘマトキシリンおよびエオジン（Ｈ＆Ｅ）染色パラフィン切片の光学顕微鏡による評価で腎毒性作用を決定する。糖タンパク質のより良好な可視化のために、「過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）」反応を実施することもある。各動物について腎毒性作用を、尿細管の好塩基球増加症および変性／再生の発生の重篤度（重篤度：０＝作用なし；１＝最小の作用；２＝僅かな作用；３＝中度の作用；４＝重篤な病変）として、準定量的に決定する。尿細管の変性／再生の平均重篤度および発生率（関係する動物の数）を各動物群または誘導体について算出する。尿細管の拡張および壊死並びに壊死性物質の蓄積など、これを超えて進行する腎臓の変化を同様に列挙する。
【０１４８】
Ｃ．医薬組成物の例示的実施態様
本発明の化合物は、以下のやり方で医薬製剤に変換できる：
錠剤：
組成：
実施例１の化合物１００ｍｇ、ラクトース（一水和物）５０ｍｇ、トウモロコシデンプン（天然）５０ｍｇ、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ２５）（BASF, Ludwigshafen, Germany）１０ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム２ｍｇ。
錠剤重量２１２ｍｇ、直径８ｍｍ、曲率半径１２ｍｍ。
製造：
有効成分、ラクトースおよびデンプンの混合物を、５％ＰＶＰ水溶液（ｍ／ｍ）で造粒する。顆粒を乾燥し、次いで、ステアリン酸マグネシウムと５分間混合する。この混合物を常套の打錠機を使用して打錠する（錠剤の形状は上記参照）。打錠に使用する打錠力のガイドラインは、１５ｋＮである。
【０１４９】
経口投与できる懸濁液：
組成：
実施例１の化合物１０００ｍｇ、エタノール（９６％）１０００ｍｇ、Rhodigel (FMC, Pennsylvania, USA のキサンタンゴム）４００ｍｇおよび水９９ｇ。
経口懸濁液１０ｍｌは、本発明の化合物の単回用量１００ｍｇに相当する。
製造：
Rhodigel をエタノールに懸濁し、活性化合物を懸濁液に添加する。撹拌しながら水を添加する。混合物を約６時間、Rhodigel の膨張が完了するまで撹拌する。
【０１５０】
静脈内投与できる液剤：
組成：
実施例１の化合物１００−２００ｍｇ、ポリエチレングリコール４００ １５ｇおよび注射用の水２５０ｇ。
製造：
実施例１の化合物をポリエチレングリコール４００と共に水に撹拌しながら溶解する。溶液を濾過滅菌し（孔の直径０.２２μｍ）、無菌条件下で加熱滅菌した点滴瓶に分配する。後者を点滴ストッパーおよびクリンプキャップで閉じる。
【図面の簡単な説明】
【０１５１】
【図１】図１は、Ｎω.６,Ｎω'.６−（ペント［２］エン［２］イル［４］イリデン）リソバクチントリフルオロアセテートの１Ｈ ＮＭＲ（ｄ５−ピリジン、５００ＭＨｚ）である。
【図２】図２は、Ｎω.６,Ｎω'.６−（ペント［２］エン［２］イル［４］イリデン）リソバクチントリフルオロアセテートのＭＡＬＤＩ−ＭＳ／ＭＳ−スペクトル（陽イオン、プレカーサーイオンｍ／ｚ１３４０.８）である。
【図３】図３は、Ｎω.６,Ｎω'.６−（ペント［２］エン［２］イル［４］イリデン）リソバクチントリフルオロアセテートのＭＡＬＤＩ−ＭＳ／ＭＳスペクトル（断片）（陽イオン、プレカーサーイオンｍ／ｚ１３４０.８）である。
【図４】図４は、加水分解により開環したＮω.６,Ｎω'.６−（ペント［２］エン［２］イル［４］イリデン）リソバクチントリフルオロアセテートのＭＡＬＤＩ−ＭＳスペクトル（陽イオン）である。
【図５】図５は、加水分解により開環したＮω.６,Ｎω'.６−（ペント［２］エン［２］イル［４］イリデン）リソバクチントリフルオロアセテートのＭＡＬＤＩ−ＭＳ／ＭＳ−スペクトル（陽イオン、プレカーサーイオンｍ／ｚ１３５８.８）である。
【図６】図６は、加水分解により開環したＮω.６,Ｎω'.６−（ペント［２］エン［２］イル［４］イリデン）リソバクチントリフルオロアセテートのＭＡＬＤＩ−ＭＳ／ＭＳスペクトル（陽イオン、プレカーサーイオンｍ／ｚ１３５８.８）である。
【図７】図７は、Ｎω.６,Ｎω'.６−（ペンタン［２,４］ジイル）リソバクチントリフルオロアセテート（ｄ５−ピリジン,５００ＭＨｚ）の１Ｈ ＮＭＲである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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