(57)【要約】本発明は、式（ＩＩａ）および（ＩＩｂ）の１個または複数の１，８ビス−ナフタルイミド薬剤部分（Ｄ）がリンカー（Ｌ）によって抗体（Ａｂ）に共有結合している、式（Ｉ）で表される抗体薬剤結合体（ＡＤＣ）化合物に関する。本発明はまた、過剰増殖性障害および他の病気の治療のために式ＩのＡＤＣを有効量含む医薬組成物に関する。本発明はまた、患者に式（Ｉ）のＡＤＣを有効量投与することを含む、腫瘍細胞または癌細胞を死滅またはその増殖を阻害する方法に関する。2008521920.tif 000228
2008521920.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
リンカーによって１個または複数の１，８ビス−ナフタルイミド薬剤部分に共有結合している抗体を含む式Ｉの抗体薬剤結合体化合物、
【化１】
2008521920.tif 000191
または薬学的に許容されるその塩もしくは溶媒和物であって、
式中、
Ａｂは、抗体であり；
Ｌは、Ａｂに共有結合しているリンカーであり、Ｌは、Ｄに共有結合しており；
Ｄは、式ＩＩａおよびＩＩｂ：
【化２】
2008521920.tif 000192
から選択される１，８ビス−ナフタルイミド薬剤部分であり；
波線は、Ｌへの共有結合を示し；
Ｙは、Ｎ（Ｒｂ）、Ｃ（Ｒａ）２、Ｏ、またはＳであり；
Ｒａは、それぞれ独立に、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、−Ｎ（Ｒｂ）２、−Ｎ（Ｒｂ）３＋、Ｃ１〜Ｃ８ハロゲン化アルキル、カルボキシレート、スルフェート、スルファメート、スルホネート、−ＳＯ２Ｒｂ、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒｂ、−ＳＲｂ、−ＳＯ２Ｎ（Ｒｂ）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒｂ、−ＣＯ２Ｒｂ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂ）２、−ＣＮ、−Ｎ３、−ＮＯ２、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８トリフルオロアルキル、ポリエチレンオキシ、ホスホネート、ホスフェート、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８置換アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、Ｃ２〜Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６〜Ｃ２０アリール、Ｃ６〜Ｃ２０置換アリール、Ｃ１〜Ｃ２０複素環、およびＣ１〜Ｃ２０置換複素環から選択され；あるいは同じ炭素原子上の２個のＲａ基が、一緒になったとき、カルボニル（＝Ｏ）を形成し、または異なる炭素原子上の２個のＲａ基が、一緒になったとき、炭素原子が３〜７個の炭素環、複素環、もしくはアリール環を形成し；
Ｒｂは、それぞれ独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８置換アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、Ｃ２〜Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６〜Ｃ２０アリール、Ｃ６〜Ｃ２０置換アリール、Ｃ１〜Ｃ２０複素環、およびＣ１〜Ｃ２０置換複素環から選択され；
Ｃ１〜Ｃ８置換アルキル、Ｃ２〜Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６〜Ｃ２０置換アリール、およびＣ２〜Ｃ２０置換複素環は、それぞれ独立に、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、−Ｎ（Ｒｂ）２、−Ｎ（Ｒｂ）３＋、Ｃ１〜Ｃ８ハロゲン化アルキル、カルボキシレート、スルフェート、スルファメート、スルホネート、Ｃ１〜Ｃ８スルホン酸アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルアミノ、４−ジアルキルアミノピリジニウム、Ｃ１〜Ｃ８アルキルヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルチオール、−ＳＯ２Ｒｂ、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒｂ、−ＳＲｂ、−ＳＯ２Ｎ（Ｒｂ）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒｂ、−ＣＯ２Ｒｂ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂ）２、−ＣＮ、−Ｎ３、−ＮＯ２、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８トリフルオロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ３〜Ｃ１２炭素環、Ｃ６〜Ｃ２０アリール、Ｃ２〜Ｃ２０複素環、ポリエチレンオキシ、ホスホネート、およびホスフェートから選択される１個または複数の置換基で置換されており；
ｍは、１、２、３、４、５、または６であり；
ｎは、それぞれ独立に、１、２、および３から選択され；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４は、それぞれ独立に、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、−Ｎ（Ｒｂ）２、−Ｎ（Ｒｂ）３＋、−Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｒｂ、−Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂ）２、−Ｎ（Ｒｂ）ＳＯ２Ｎ（Ｒｂ）２、−Ｎ（Ｒｂ）ＳＯ２Ｒｂ、ＯＲ、ＯＣ（＝Ｏ）Ｒｂ、ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂ）２、Ｃ１〜Ｃ８ハロゲン化アルキル、カルボキシレート、スルフェート、スルファメート、スルホネート、−ＳＯ２Ｒｂ、−ＳＯ２Ａｒ、−ＳＯＡｒ、−ＳＡｒ、−ＳＯ２Ｎ（Ｒｂ）２、−ＳＯＲｂ、−ＣＯ２Ｒｂ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂ）２、−ＣＮ、−Ｎ３、−ＮＯ２、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８トリフルオロアルキル、ポリエチレンオキシ、ホスホネート、ホスフェート、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８置換アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、Ｃ２〜Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６〜Ｃ２０アリール、Ｃ６〜Ｃ２０置換アリール、Ｃ１〜Ｃ２０複素環、およびＣ１〜Ｃ２０置換複素環から選択され；あるいは
Ｘ１およびＸ２が一緒になり、そしてＸ３およびＸ４が一緒になり、それぞれ独立に、−ＣＨ２ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−を形成し；
Ｄは、それぞれ独立に、複数のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、またはＸ４を有することができ；Ｄが複数のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、またはＸ４を有する場合、２個のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、またはＸ４は、縮合したＣ６〜Ｃ２０アリール、Ｃ６〜Ｃ２０置換アリール、Ｃ１〜Ｃ２０複素環、またはＣ１〜Ｃ２０置換複素環を形成することができ；
ｐは、１から２０の整数である、
化合物。
【請求項２】
ｐが、２から８である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ｍが、３であり、ｎが、２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
各Ｒａが、Ｈである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｄが、式ＩＩａ：
【化３】
2008521920.tif 000193
から選択される１，８ビス−ナフタルイミド薬剤部分である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｙが、Ｎ（Ｒｂ）であり；ｎが、２であり；ｍが、３であり；ＲａおよびＲｂが、Ｈである、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｄが、以下の構造：
【化４】
2008521920.tif 000194
【化５】
2008521920.tif 000195
から選択される、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
Ｄが、以下の構造：
【化６】
2008521920.tif 000196
【化７】
2008521920.tif 000197
【化８】
2008521920.tif 000198
から選択される、請求項６に記載の化合物。
【請求項９】
Ｘ１およびＸ２が一緒になり、Ｘ３およびＸ４が一緒になり、それぞれ独立に、−ＣＨ２ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−を形成する、請求項５に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｄが、以下の構造：
【化９】
2008521920.tif 000199
から選択される、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
隣接した炭素原子上のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、またはＸ４の２個が、縮合したＣ６〜Ｃ２０アリール、Ｃ６〜Ｃ２０置換アリール、Ｃ１〜Ｃ２０複素環、またはＣ１〜Ｃ２０置換複素環を形成する、請求項５に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｄが、以下の構造：
【化１０】
2008521920.tif 000200
【化１１】
2008521920.tif 000201
【化１２】
2008521920.tif 000202
から選択される、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｙが、Ｎ（Ｒｂ）であり；ｍが、３であり；ｎが、２である、請求項５に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｄが、以下の構造：
【化１３】
2008521920.tif 000203
【化１４】
2008521920.tif 000204
【化１５】
2008521920.tif 000205
【化１６】
2008521920.tif 000206
【化１７】
2008521920.tif 000207
から選択される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｙが、Ｎであり、ＲａおよびＲｂが、Ｈであり、Ｄが、以下の構造：
【化１８】
2008521920.tif 000208
【化１９】
2008521920.tif 000209
から選択される、請求項５に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒｂが、Ｈである、請求項５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒｂが、ＣＨ３である、請求項５に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｙが、ＯまたはＳである、請求項５に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｄが、以下の構造：
【化２０】
2008521920.tif 000210
から選択される、請求項１８に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｘ１およびＸ２が、Ｃ１〜Ｃ２０複素環である、請求項５に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｘ１およびＸ２の一方または両方が、１−イミダゾリルである、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２２】
Ｘ１およびＸ２が、１，８−ナフタルイミド基の４位にて１−イミダゾリルである、請求項２１に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｄが、以下の構造：
【化２１】
2008521920.tif 000211
を有する、請求項２２に記載の化合物。
【請求項２４】
前記抗体薬剤結合体が、Ｈ−ＭＣ−ａｆ−ＰＡＢ−（ビス４−イミダゾリルＥ）２０３である、請求項１０に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｄが、式ＩＩｂ：
【化２２】
2008521920.tif 000212
から選択される１，８ビス−ナフタルイミド薬剤部分である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２６】
Ｙが、Ｎ（Ｒｂ）であり、Ｄが、以下の構造：
【化２３】
2008521920.tif 000213
【化２４】
2008521920.tif 000214
から選択される、請求項２５に記載の化合物。
【請求項２７】
Ｙのうちの１個または２個が、ＯまたはＳである、請求項２５に記載の化合物。
【請求項２８】
Ｄが、以下の構造：
【化２５】
2008521920.tif 000215
から選択される、請求項２７に記載の化合物。
【請求項２９】
Ｒｂが、Ｈである、請求項２５に記載の化合物。
【請求項３０】
Ｒｂが、ＣＨ３である、請求項２５に記載の化合物。
【請求項３１】
式Ｉａ
【化２６】
2008521920.tif 000216
を有する、請求項１に記載の化合物であって、
式中、Ａは、ストレッチャーユニットであり、
ａは、０または１であり、
各Ｗは、それぞれ独立に、アミノ酸ユニットであり、
ｗは、０から１２の範囲の整数であり、
ＳＰは、スペーサーユニットであり、
ｙは、０、１、または２である、
化合物。
【請求項３２】
以下の式：
【化２７】
2008521920.tif 000217
から選択される、請求項３１に記載の化合物であって、
式中、Ｒ１７は、（ＣＨ２）ｒ、Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、Ｏ−（ＣＨ２）ｒ、アリーレン、（ＣＨ２）ｒ−アリーレン、−アリーレン−（ＣＨ２）ｒ−、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル）、（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル）−（ＣＨ２）ｒ、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクリル）、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクリル）−（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２）ｒＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、および−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２）ｒ−から選択され、
ｒは、それぞれ独立に、１から１０の範囲の整数である、
化合物。
【請求項３３】
次式：
【化２８】
2008521920.tif 000218
を有する、請求項３２に記載の化合物。
【請求項３４】
次式：
【化２９】
2008521920.tif 000219
を有する、請求項３３に記載の化合物であって、
式中、ｗおよびｙはそれぞれ、０である、
化合物。
【請求項３５】
次式：
【化３０】
2008521920.tif 000220
を有する、請求項３１に記載の化合物。
【請求項３６】
次式：
【化３１】
2008521920.tif 000221
を有する、請求項３５に記載の化合物。
【請求項３７】
次式：
【化３２】
2008521920.tif 000222
を有する、請求項３６に記載の化合物。
【請求項３８】
ｗが、２から１２の範囲の整数である、請求項３１に記載の化合物。
【請求項３９】
ｗが、２である、請求項３８に記載の化合物。
【請求項４０】
Ｗｗが、−バリン−シトルリン−である、請求項３９に記載の化合物。
【請求項４１】
Ｗｗが、−アラニン−フェニルアラニン−である、請求項４０に記載の化合物。
【請求項４２】
以下の構造：
【化３３】
2008521920.tif 000223
から選択される、請求項１に記載の化合物であって、
式中、Ｘは、
【化３４】
2008521920.tif 000224
であり、
Ｚは、
【化３５】
2008521920.tif 000225
であり、
Ｒは、それぞれ独立に、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；ｎは、１から１２である、
化合物。
【請求項４３】
以下の構造：
【化３６】
2008521920.tif 000226
を有する、請求項４２に記載の化合物。
【請求項４４】
以下の構造：
【化３７】
2008521920.tif 000227
を有する、請求項４２に記載の化合物。
【請求項４５】
前記抗体が、（１）〜（３６）から選択される１種もしくは複数の腫瘍関連性抗原または細胞表面受容体に結合する、請求項１に記載の化合物：
（１）ＢＭＰＲ１Ｂ（骨形成タンパク質受容体ＩＢ型（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００１２０３））；
（２）Ｅ１６（ＬＡＴ１、ＳＬＣ７Ａ５、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００３４８６）；
（３）ＳＴＥＡＰ１（前立腺の６回膜貫通型上皮抗原、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０１２４４９）；
（４）０７７２Ｐ（ＣＡ１２５、ＭＵＣ１６、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ３６１４８６）；
（５）ＭＰＦ（ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、巨核球促進因子、メソテリン、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００５８２３）；
（６）Ｎａｐｉ３ｂ（ＮＡＰＩ−３Ｂ、ＮＰＴＩＩｂ、ＳＬＣ３４Ａ２、溶質キャリアファミリー３４（リン酸ナトリウム）、メンバー２、ＩＩ型ナトリウム依存性リン酸輸送体３ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００６４２４）；
（７）Ｓｅｍａ５ｂ（ＦＬＪ１０３７２、ＫＩＡＡ１４４５、Ｍｍ．４２０１５、ＳＥＭＡ５Ｂ、ＳＥＭＡＧ、セマフォリン５ｂ  Ｈｌｏｇ、ｓｅｍａドメイン、トロンボスポンジン７反復（１型および１型様）、膜貫通ドメイン（ＴＭ）、および短い細胞質ドメイン、（セマフォリン）５Ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＢ０４０８７８）；
（８）ＰＳＣＡ  ｈｌｇ（２７０００５０Ｃ１２Ｒｉｋ、Ｃ５３０００８Ｏ１６Ｒｉｋ、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２遺伝子、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ３５８６２８）；
（９）ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ２７５４６３）；
（１０）ＭＳＧ７８３（ＲＮＦ１２４、仮想タンパク質ＦＬＪ２０３１５、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０１７７６３）；
（１１）ＳＴＥＡＰ２（ＨＧＮＣ＿８６３９、ＩＰＣＡ−１、ＰＣＡＮＡＰ１、ＳＴＡＭＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺癌関連性遺伝子１、前立腺癌関連性タンパク質１、前立腺の６回膜貫通型上皮抗原２、６回膜貫通型前立腺タンパク質、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ４５５１３８）；
（１２）ＴｒｐＭ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容器電位カチオンチャネル、サブファミリーＭ、メンバー４、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０１７６３６）；
（１３）ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲ１、ＣＲＧＦ、ＣＲＩＰＴＯ、ＴＤＧＦ１、奇形癌誘導性増殖因子、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００３２０３またはＮＭ＿００３２１２）；
（１４）ＣＤ２１（ＣＲ２（補体受容体２）またはＣ３ＤＲ（Ｃ３ｄ／エプスタインバーウイルス受容体）またはＨｓ．７３７９２、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｍ２６００４）；
（１５）ＣＤ７９ｂ（ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ７９β、ＩＧｂ（免疫グロブリン関連性β）、Ｂ２９、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０００６２６）；
（１６）ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰ１Ａ（ＳＨ２ドメイン含有ホスファターゼアンカータンパク質１ａ）、ＳＰＡＰ１Ｂ、ＳＰＡＰ１Ｃ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０３０７６４）；
（１７）ＨＥＲ２（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｍ１１７３０）；
（１８）ＮＣＡ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｍ１８７２８）；
（１９）ＭＤＰ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＢＣ０１７０２３）；
（２０）ＩＬ２０Ｒα（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ１８４９７１）；
（２１）ブレビカン（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ２２９０５３）；
（２２）ＥｐｈＢ２Ｒ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００４４４２）；
（２３）ＡＳＬＧ６５９（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＸ０９２３２８）；
（２４）ＰＳＣＡ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＪ２９７４３６）；
（２５）ＧＥＤＡ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ２６０７６３）；
（２６）ＢＡＦＦ−Ｒ（Ｂ細胞活性化因子受容体、ＢＬｙＳ受容体３、ＢＲ３、ＮＰ＿４４３１７７．１）；および
（２７）ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２−Ｂアイソフォーム、ＮＰ−００１７６２．１）；
（２８）ＣＤ７９ａ（ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９α、免疫グロブリン関連性α、Ｉｇβ（ＣＤ７９Ｂ）と共有結合的に相互作用し、ＩｇＭ分子で表面上に結合体を形成するＢ細胞特異的タンパク質、Ｂ細胞分化に関与するシグナルを伝達する、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１７７４．１）；
（２９）ＣＸＣＲ５（バーキットリンパ腫受容体１、ＣＸＣＬ１３ケモカインによって活性化され、リンパ球遊走および体液防御において機能し、ＨＩＶ−２感染ならびにおそらくＡＩＤＳ、リンパ腫、骨髄腫、および白血病の発症に一定の役割を果たすＧタンパク質共役型受容体、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１７０７．１）；
（３０）ＨＬＡ−ＤＯＢ（ペプチドを結合し、ＣＤ４＋Ｔリンパ球にそれらを提示するＭＨＣクラスＩＩ分子（Ｉａ抗原）のβサブユニット、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００２１１１．１）；
（３１）Ｐ２Ｘ５（プリン作動性受容体Ｐ２Ｘリガンド開口型イオンチャネル５、細胞外ＡＴＰによって開口されたイオンチャネル、シナプス伝達および神経形成に関与している可能性があり、欠損は、特発性不安定膀胱の病態の一因であり得る、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００２５５２．２）；
（３２）ＣＤ７２（Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２、Ｌｙｂ−２、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１７７３．１）；
（３３）ＬＹ６４（リンパ球抗原６４（ＲＰ１０５）、ロイシンリッチリピート（ＬＲＲ）ファミリーのＩ型膜タンパク質、Ｂ細胞活性化およびアポトーシスを調節し、機能損失は、全身性エリテマトーデス患者の疾患活性の増大に関連する、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００５５７３．１）；
（３４）ＦＣＲＨ１（Ｆｃ受容体様タンパク質１、Ｉｇ様Ｃ２型およびＩＴＡＭドメインを含む免疫グロブリンＦｃドメインの推定受容体、Ｂリンパ球分化に一定の役割を果たす可能性がある、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿４４３１７０．１）；
（３５）ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転座関連性２、Ｂ細胞発生およびリンパ腫発症で役割を果たす可能性がある推定免疫受容体；転座による遺伝子の調節解除がいくつかのＢ細胞悪性腫瘍を生じる、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿１１２５７１．１）；および
（３６）ＴＥＮＢ２（増殖因子のＥＧＦ／ヘレグリンファミリーおよびフォリスタチンと関係する推定膜貫通型プロテオグリカン、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ１７９２７４）。
【請求項４６】
前記抗体が、ＥｒｂＢ遺伝子によってコードされた受容体に特異的に結合する、請求項１に記載の抗体薬剤結合体化合物。
【請求項４７】
前記抗体が、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、およびＨＥＲ４から選択されるＥｒｂＢ受容体に特異的に結合する、請求項４６に記載の抗体薬剤結合体化合物。
【請求項４８】
前記ＨＥＲ２受容体の細胞外ドメインに特異的に結合し、ＨＥＲ２受容体を過剰発現する腫瘍細胞の増殖を阻害する、請求項４７に記載の抗体薬剤結合体化合物。
【請求項４９】
前記抗体が、モノクローナル抗体である、請求項１に記載の抗体薬剤結合体化合物。
【請求項５０】
前記抗体が、二重特異性抗体である、請求項１に記載の抗体薬剤結合体化合物。
【請求項５１】
前記抗体が、キメラ抗体である、請求項１に記載の抗体薬剤結合体化合物。
【請求項５２】
前記抗体が、ヒト化抗体である、請求項１に記載の抗体薬剤結合体化合物。
【請求項５３】
前記ヒト化抗体が、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−１、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−２、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−３、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−４、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−５、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−６、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−７、およびｈｕＭＡｂ４Ｄ５−８（トラスツズマブ）から選択される、請求項５２に記載の抗体薬剤結合体化合物。
【請求項５４】
前記抗体が、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−８（トラスツズマブ）である、請求項５３に記載の抗体薬剤結合体化合物。
【請求項５５】
前記抗体が、抗体フラグメントである、請求項１に記載の結合体。
【請求項５６】
前記抗体フラグメントが、Ｆａｂフラグメントである、請求項５５に記載の結合体。
【請求項５７】
有効量の請求項１に記載の抗体薬剤結合体化合物、または薬学的に許容されるその塩、および薬学的に許容される希釈剤、担体、もしくは賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項５８】
さらに、チューブリン形成モジュレーター、トポイソメラーゼ阻害剤、およびＤＮＡ結合剤から選択される化学療法剤の治療有効量を含む請求項５７に記載の医薬組成物。
【請求項５９】
細胞培養培地中の腫瘍細胞もしくは癌細胞を、前記腫瘍細胞もしくは癌細胞を死滅または腫瘍細胞もしくは癌細胞の増殖を阻害するのに有効な量の請求項１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩もしくは溶媒和物で処理することを含む、腫瘍細胞もしくは癌細胞を死滅または腫瘍細胞もしくは癌細胞の増殖を阻害する方法。
【請求項６０】
癌治療のための医薬品の調製における、請求項１に記載の抗体薬剤結合体化合物の使用。
【請求項６１】
細胞を請求項１に記載の抗体薬剤結合体化合物に曝露すること、および前記抗体薬剤結合体化合物の前記細胞への結合の程度を決定することを含む、癌細胞を検出するためのアッセイ。
【請求項６２】
前記細胞が、乳房腫瘍細胞である、請求項６１に記載のアッセイ。
【請求項６３】
前記結合の程度が、蛍光インサイチュハイブリッド形成法（ＦＩＳＨ）によって、ＥｒｂＢをコードする核酸のレベルを測定することで決定される、請求項６１に記載のアッセイ。
【請求項６４】
前記結合の程度が、免疫組織化学法（ＩＨＣ）によって決定される、請求項６１に記載のアッセイ。
【請求項６５】
請求項１に記載の抗体薬剤結合体化合物；
容器；および
前記化合物が癌の治療に使用することができるということを示す添付文書またはラベル
を含む、製品。
【請求項６６】
前記添付文書またはラベルが、前記化合物がＥｒｂＢ２受容体の過剰発現を特徴とする癌の治療に使用することができるということを示す、請求項６５に記載の製品。
【請求項６７】
前記癌が、乳癌である、請求項６６に記載の製品。
【請求項６８】
１，８−ビスナフタルイミド薬剤部分と抗体とを結合体化することを含む、抗体薬剤結合体化合物を作製する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、一般に、抗癌活性を有する化合物、より具体的には化学療法剤または毒素と複合させた抗体に関する。本発明はまた、哺乳動物細胞のインビトロ、インサイチュ、およびインビボ診断もしくは治療、または関連する病的状態のために抗体薬剤結合体化合物を使用する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
標的細胞、組織、および腫瘍への薬物および他の薬剤の送達を向上させて最大の効果および最小の毒性を実現することは、長年にわたり研究の焦点となっている。生物活性分子を細胞に移入するための有効な方法を開発する多くの試みが行われてきたが、インビボとインビトロのどちらも完全に満足できる証明はなされていない。例えば隣接した細胞への薬剤の細胞間再分配を最小限にしながら、薬剤とその細胞内標的の関連を最適化することは、しばしば困難または非効率である。
【０００３】
モノクローナル抗体療法は、癌、免疫、および血管形成障害の患者の標的治療のために確立された。１つの例であるＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）（トラスツズマブ、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．、サウスサンフランシスコ、カリフォルニア州）は、細胞ベースアッセイにおける高親和性（Ｋｄ＝５ｎＭ）によってヒト上皮成長因子受容体２タンパク質ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）の細胞外ドメインに選択的に結合する組換えＤＮＡ由来ヒト化モノクローナル抗体である（特許文献１；米国特許第６０５４２９７号；米国特許第６４０７２１３号；米国特許第６６３９０５５号；Ｌ．Ｃｏｕｓｓｅｎｓら、（１９８５年）Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２３０巻、１１３２〜９頁；ＤＪ．Ｓｌａｍｏｎら、（１９８９年）Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２４４巻、７０７〜１２頁）。トラスツズマブは、ＨＥＲ２に結合するネズミ抗体（４Ｄ５）の相補性決定領域（ｃｄｒ）を有するヒトフレームワーク領域を含むＩｇＧ１κ抗体である。トラスツズマブは、ＨＥＲ２抗原に結合し、したがって癌細胞の増殖を阻害する。トラスツズマブは、ヒト化抗体なので、患者のいずれのＨＡＭＡ（ヒト抗マウス抗体）応答も最小限に抑える。トラスツズマブは、インビトロアッセイと動物のどちらにおいてもＨＥＲ２を過剰発現するヒト腫瘍細胞の増殖を阻害することが示されている（非特許文献１；Ｊ．Ｂａｓｅｌｇａら、（１９９８年）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、第５８巻、２８２５〜２８３１頁）。トラスツズマブは、抗体依存性細胞障害ＡＤＣＣの媒介物である（ＴＥ．Ｈｏｔａｌｉｎｇら（１９９６年）、［要旨］、Ｐｒｏｃ．Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  Ａｍ  Ａｓｓｏｃ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ、第３７巻、４７１頁；ＭＤ．Ｐｅｇｒａｍら（１９９７年）、［要旨］、Ｐｒｏｃ  Ａｍ  Ａｓｓｏｃ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ、第３８巻、６０２頁）。インビトロでは、トラスツズマブ介在性ＡＤＣＣは、ＨＥＲ２を過剰発現しない癌細胞に比べて、癌細胞を過剰発現するＨＥＲ２に優先的に作用することが示されている。単剤としてのＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）は、腫瘍がＨＥＲ２タンパク質を過剰発現する転移性乳癌の患者、およびこうした転移性疾患のための１種または複数の化学療法計画を受けている患者の治療に適用される。パクリタキセルと併用するＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）は、腫瘍がＨＥＲ２タンパク質を過剰発現する転移性乳癌の患者、およびこうした転移性疾患のための化学療法を受けていない患者の治療に適用される。ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）は、事前に広範な抗癌治療を受けたＥｒｂＢ２過剰発現転移性乳癌患者において臨床的に有効である（非特許文献２）。
【０００４】
これらの非複合型薬剤の全身投与が正常細胞ならびに除去しようとする腫瘍細胞に許容できないレベルの毒性をもたらす恐れがある場合（非特許文献３；Ｔｈｏｒｐｅ（１９８５）、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ１９８４年の「Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  Ｏｆ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ：Ａ  Ｒｅｖｉｅｗ」：Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ａ．Ｐｉｎｃｈｅｒａら（編）、４７５〜５０６頁）、癌治療において腫瘍細胞を死滅または阻害する細胞障害剤または細胞増殖阻害剤の局所送達に抗体薬剤結合体（ＡＤＣ）、すなわち免疫結合体を使用すると（非特許文献４；Ｎｉｃｕｌｅｓｃｕ−ＤｕｖａｚおよびＳｐｒｉｎｇｅｒ（１９９７年）、Ａｄｖ．Ｄｒｇ  Ｄｅｌ．Ｒｅｖ．、第２６巻、１５１〜１７２頁；米国特許第４９７５２７８号）、腫瘍に薬剤部分を標的送達し、その中に細胞内蓄積させることが理論上可能になる。それにより、毒性が最小であるという最大の効果が求められる。ＡＤＣを設計し改良する努力は、モノクローナル抗体（ｍＡｂｓ）の選択性ならびに薬剤結合および薬剤放出特性に焦点を当ててきた。ポリクローナル抗体とモノクローナル抗体はどちらも、こうした戦略に有用なものとして報告されている（非特許文献５）。これらの方法で使用する薬剤としては、ダウノマイシン、ドキソルビシン、メトトレキサート、およびビンデシンが挙げられる（非特許文献５）。抗体−毒素結合体で使用する毒素としては、ジフテリア毒素などの細菌毒素、リシンなどの植物毒素；ゲルダナマイシン（非特許文献６；Ｍａｎｄｌｅｒら、（２０００年）Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔｅｒｓ、第１０巻、１０２５〜１０２８頁；Ｍａｎｄｌｅｒら、（２００２年）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．、第１３巻、７８６〜７９１頁）、メイタンシノイド（特許文献２；欧州特許第１３９１２１３号；Ｌｉｕら、（１９９６年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第９３巻、８６１８〜８６２３頁）、カリケアミシン（Ｌｏｄｅら、（１９９８年）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、第５８巻、２９２８頁；Ｈｉｎｍａｎら、（１９９３年）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．第５３巻、３３３６〜３３４２頁）などの小分子毒素が挙げられる。これらの毒素は、チューブリン結合、ＤＮＡ結合、またはトポイソメラーゼ阻害を含めた機序により、その細胞障害および細胞増殖阻害効果をもたらす恐れがある。いくつかの細胞障害性薬物は、大きな抗体またはタンパク質受容体リガンドに結合した場合、不活性またはほとんど活性とならない傾向がある。
【０００５】
ＺＥＶＡＬＩＮ（登録商標）（イブリツモマブチウクセタン、Ｂｉｏｇｅｎ／Ｉｄｅｃ）は、チオ尿素リンカーキレート剤で結合された正常および悪性のＢリンパ球および１１１Ｉｎまたは９０Ｙ放射性同位体の表面上に見られるＣＤ２０抗原に対するネズミＩｇＧ１κモノクローナル抗体から構成される抗体放射性同位体結合体である（非特許文献７；Ｗｉｓｅｍａｎら、（２００２年）Ｂｌｏｏｄ、９９（１２）、４３３６〜４２頁；Ｗｉｔｚｉｇら、（２００２年）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．、２０（１０）、２４５３〜６３頁；Ｗｉｔｚｉｇら、（２００２年）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．、２０（１５）、３２６２〜６９頁）。ＺＥＶＡＬＩＮはＢ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）に対して活性があるが、その投与は、ほとんどの患者に重篤かつ長期間にわたる血球減少をもたらす。ＭＹＬＯＴＡＲＧ（商標）（ジェムツツマブオゾガミシン、Ｗｙｅｔｈ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、すなわち、カリケアミシンに結合したｈｕ  ＣＤ３３抗体から構成される抗体薬剤結合体は、２０００年に急性骨髄性白血病の注射による治療に承認された（非特許文献８；米国特許第４９７０１９８号；米国特許第５０７９２３３号；米国特許第５５８５０８９号；米国特許第５６０６０４０号；米国特許第５６９３７６２号；米国特許第５７３９１１６号；米国特許第５７６７２８５号；米国特許第５７７３００１号）。Ｃａｎｔｕｚｕｍａｂ  ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ（Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎ，Ｉｎｃ．）、すなわち、ジスルフィドリンカーＳＰＰによってメイタンシノイド薬剤部分ＤＭ１に結合したｈｕＣ２４２抗体から構成される抗体薬剤結合体は、結腸、膵臓、胃、その他のものなど、ＣａｎＡｇを発現する癌の治療に関する第ＩＩ相試験に進んでいる。ＭＬＮ−２７０４（Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ  Ｐｈａｒｍ．、ＢＺＬ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ、Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎ  Ｉｎｃ．）、すなわち、メイタンシノイド薬剤部分ＤＭ１に結合した抗前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）モノクローナル抗体から構成される抗体薬剤結合体は、前立腺腫瘍の電位治療に向けて開発中である。オーリスタチンペプチド、すなわち、ドラスタチンのオーリスタチンＥ（ＡＥ）およびモノメチルオーリスタチン（ＭＭＡＥ）合成類似体は、ｃＢＲ９６（癌腫のルイスＹに特異的）；ｃＡＣ１０（血液悪性腫瘍のＣＤ３０に特異的）；およびその他の抗体（特許文献３）を含めたキメラモノクローナル抗体に複合され、治療用に開発中である（非特許文献９）。
【０００６】
ビス−１，８−ナフタルイミド化合物は、その抗癌特性に関して調査が行われている（非特許文献１０；Ｂａｉｌｌｙら、（２００３年）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第４２巻、４１３６〜４１５０頁；Ｃａｒｒａｓｃｏら、（２００３年）、第４２巻、１１７５１〜１１７６１頁；Ｍ．Ｆ．ＢｒａｎａおよびＡ．Ｒａｍｏｓ、（２００１年）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．−Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ａｇｅｎｔｓ、第１巻、２３７〜２５５頁；Ｍｅｋａｐａｔｉら、（２００１年）Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、第９巻、２７５７〜２７６２頁）。調査中の抗腫瘍薬であるメシル酸ビス−１，８−ナフタルイミド（ＬＵ７９５５３、Ｎ，Ｎ−ビス［（１，８−ナフタルイミド）エチル］−１，３−ジアミノプロパンビスメタンスルホネート；Ｎ，Ｎ’−ビス［２−（１，３−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンズ［ｄｅ］イソキノリン−２−イル）エチル］−１，３−ジアミノプロパンジメタンスルホネート；２，２’−プロパン−１，３−ジイルビス（イミノエチレン）ビス（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンズ［ｄｅ］イソキノリン−１，３−ジオンジメタンスルホネート、Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｋｎｏｌｌ  ＡＧ、ルートウィックスハーフェン、ドイツ）は、アミノアルキルリンカー鎖によって分離され、薬剤のＤＮＡへのビスインターカレーションが可能になるように設計された２個の三環式１，８−ナフタルイミド発色団から構成されている（非特許文献１１；Ｂｏｕｓｑｕｅｔら、（１９９５年）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、第５５巻、１１７６〜１１８０頁；米国特許第４８７４８６３号；米国特許第５４１６０８９号；米国特許第５６１６５８９号；米国特許第５７８９４１８号；国際公開ＷＯ９５／０５３６５号）。
【特許文献１】米国特許第５８２１３３７号明細書
【特許文献２】米国特許出願公開第２００５０１６９９３３号明細書
【特許文献３】米国特許出願公開第２００５０２３８６４９号明細書
【非特許文献１】ＲＭ．Ｈｕｄｚｉａｋら、（１９８９年）Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ、第９巻、１１６５〜７２頁；ＧＤ．Ｌｅｗｉｓら、（１９９３年）Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ、第３７巻、２５５〜６３頁
【非特許文献２】Ｂａｓｅｌｇａら、（１９９６年）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．、第１４巻、７３７〜７４４頁
【非特許文献３】Ｂａｌｄｗｉｎら（１９８６年）、Ｌａｎｃｅｔ（１９８６年３月１５日）、６０３〜０５頁
【非特許文献４】ＳｙｒｉｇｏｓおよびＥｐｅｎｅｔｏｓ（１９９９年）、Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、第１９巻、６０５〜６１４頁
【非特許文献５】Ｒｏｗｌａｎｄら、（１９８６年）Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．、第２１巻、１８３〜８７頁
【非特許文献６】Ｍａｎｄｌｅｒら、（２０００年）Ｊｏｕｒ．  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．、９２（１９）、１５７３〜１５８１頁
【非特許文献７】Ｗｉｓｅｍａｎら、（２０００年）Ｅｕｒ．Ｊｏｕｒ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．、２７（７）、７６６〜７７頁
【非特許文献８】Ｄｒｕｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｆｕｔｕｒｅ（２０００年）、２５（７）、６８６頁
【非特許文献９】Ｄｏｒｏｎｉｎａら、（２００３年）Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、２１（７）、７７８〜７８４頁
【非特許文献１０】Ｂｒａｎａら、（２００４年）Ｊｏｕｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、第４７（６）巻、１３９１〜１３９９頁
【非特許文献１１】Ｖｉｌｌａｌｏｎａ−Ｃａｌｅｒｏら、（２００１年）Ｊｏｕｒ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、第１９（３）巻、８５７〜８６９頁
【発明の開示】
【０００７】
（発明の要旨）
本発明は、癌細胞に対して生物活性を有する新規化合物を提供する。本発明の化合物は、哺乳動物における腫瘍成長を阻害することができる。本発明の化合物は、ヒトの癌患者を治療するのに有用である可能性がある。
【０００８】
本発明の一態様としては、式Ｉで表される抗体薬剤結合体（ＡＤＣ）化合物が挙げられる：
【０００９】
【化３８】
2008521920.tif 000003
式中、１個または複数の１，８−ビス−ナフタルイミド薬剤部分（Ｄ）は、リンカー（Ｌ）によって抗体（Ａｂ）に共有結合されている。
【００１０】
ある実施形態では、Ａｂは、腫瘍関連性抗原または細胞表面受容体に特異的に結合する。
【００１１】
別の態様では、本発明の式ＩのＡＤＣの抗体は、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＨＥＲ４など、これらだけに限らないが、ＥｒｂＢ遺伝子によってコードされる受容体に特異的に結合する。この抗体は、ＨＥＲ２受容体に特異的に結合することができる。
【００１２】
別の態様では、抗体薬剤結合体の抗体は、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−１、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−２、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−３、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−４、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−５、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−６、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−７、およびｈｕＭＡｂ４Ｄ５−８（トラスツズマブ）から選択されるヒト化抗体である。
【００１３】
さらに別の態様では、本発明は、有効量の式ＩのＡＤＣおよび薬学的に許容される担体またはビヒクルを含む医薬組成物を提供する。
【００１４】
別の態様では、本発明は、過剰増殖性障害の患者などの哺乳動物に、式ＩのＡＤＣおよび薬学的に許容される希釈剤、担体、または賦形剤からなる配合物を投与することを含む癌の治療方法を含む。
【００１５】
別の態様では、本発明は、過剰増殖性障害の患者などの哺乳動物に式ＩのＡＤＣを有効量投与することを含む腫瘍細胞または癌細胞の増殖を阻止する方法を提供する。
【００１６】
さらに別の態様では、本発明は、過剰増殖性障害の患者に式ＩのＡＤＣを有効量投与することを含む癌を阻止する方法を提供する。
【００１７】
別の態様では、本発明は、有効量の式ＩのＡＤＣまたは薬学的に許容されるその塩、および薬学的に許容される希釈剤、担体、または賦形剤を含む医薬組成物を含む。この組成物はさらに、チューブリン形成阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、ＤＮＡ結合剤などの化学療法剤の治療有効量を含むことができる。
【００１８】
別の態様では、本発明は、腫瘍細胞または癌細胞を、その腫瘍細胞または癌細胞を死滅またはその増殖を阻害するのに有効な量の式ＩのＡＤＣまたは薬学的に許容されるその塩もしくは溶媒和物で治療することを含む、腫瘍細胞または癌細胞を死滅またはその増殖を阻害する方法を含む。
【００１９】
別の態様では、本発明は、細胞培地中の哺乳動物細胞を本発明のＡＤＣに曝露することを含む細胞増殖の阻害方法を含む。
【００２０】
別の態様では、本発明は、患者、例えば過剰増殖性障害のヒトに、自己免疫疾患を治療するのに有効な量の式ＩのＡＤＣまたは薬学的に許容されるその塩もしくは溶媒和物を投与することを含む自己免疫疾患の治療方法を含む。
【００２１】
別の態様では、本発明は、患者、例えば過剰増殖性障害のヒトに、腫瘍細胞または癌細胞を死滅またはその増殖を阻害するのに有効な量の式ＩのＡＤＣまたは薬学的に許容されるその塩もしくは溶媒和物を投与することを含む、腫瘍細胞または癌細胞を死滅またはその増殖を阻害する方法を含む。
【００２２】
別の態様では、本発明は、患者、例えば過剰増殖性障害のヒトに、癌を治療するのに有効な量の式ＩのＡＤＣまたは薬学的に許容されるその塩もしくは溶媒和物を単独でまたは有効量の別の抗癌剤と一緒に投与することを含む癌の治療方法を含む。
【００２３】
別の態様では、本発明は、ＨＥＲ２受容体およびＥＧＦ受容体からなる群から選択される増殖因子受容体を過剰発現する腫瘍細胞の増殖を阻害する方法であって、患者に、前記増殖因子受容体に特異的に結合する本発明の抗体薬剤結合体化合物および化学療法剤を投与する方法を含み、前記抗体薬剤結合体および前記化学療法剤は、患者の腫瘍細胞の増殖を阻害するのに有効な量で各々投与される。
【００２４】
別の態様では、本発明は、ＡＤＣと化学療法剤の組合せを有効量投与することを含む、ＥｒｂＢ２受容体の過剰発現を特徴とする障害に罹患しやすい、またはそれと診断されたヒト患者を治療する方法を含む。
【００２５】
別の態様では、本発明は、
（ａ）細胞を式ＩのＡＤＣに曝露すること、および
（ｂ）抗体薬剤結合体化合物の細胞への結合の程度を決定することを含む、癌細胞を検出するアッセイを含む。
【００２６】
別の態様では、本発明は、存在が異常な細胞機能と相互に関係し、乳房腫瘍の発生と因果関係がある乳腺の細胞増殖および／または分化の病因である過剰発現ＨＥＲ２タンパク質を、特異的に標的および結合するＡＤＣを同定するアッセイを提供する。
【００２７】
別の態様では、本発明は、本発明の抗体薬剤結合体化合物、容器、およびこの化合物をＥｒｂＢ受容体の過剰発現を特徴とする癌の治療に使用することができる旨を示す添付文書またはラベルを含む製品を含む。
【００２８】
別の態様では、本発明は、哺乳動物に式ＩのＡＤＣを治療有効量投与することを含む、ＥｒｂＢ受容体の過剰発現を特徴とし、抗ＥｒｂＢ抗体による治療に応答しない、または応答が不十分な哺乳動物の癌の治療方法を含む。
【００２９】
別の態様では、本発明は、１，８−ビス−ナフタルイミド薬剤部分と抗体を複合させることを含む抗体薬剤結合体化合物の作製方法を含む。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３０】
（例示的な実施形態の詳細な説明）
添付の構造、図面、図、式、および実施例に例示する本発明のいくつかの例示的な実施形態を、以下に詳細に説明する。本発明は列挙した実施形態と共に記載されるが、それらが本発明をその実施形態に限定するものではないことを理解されたい。下記の議論は、説明的、例示的、および代表的なものであり、任意の添付の特許請求の範囲によって規定される範囲を限定するものではない。他方では、本発明は、特許請求の範囲によって規定される本発明の範囲に含まれ得るあらゆる代替形態、修正形態、および等価物を包含するものとする。当業者なら、本発明の実施で使用することができる本明細書に記載のものに類似または同等な多くの方法および材料を認識するであろう。本発明は、記載の方法および材料に一切限定されるものではない。
【００３１】
別段の定義がない限り、本明細書で使用する技術的および科学的用語は、本発明が属する分野の技術者によって一般に理解されるのと同じ意味を有し、Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎら、（１９９４年）Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、第２版、Ｊ．Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、ニューヨーク州、ニューヨーク州；およびＣ．Ｊａｎｅｗａｙ、Ｐ．Ｔｒａｖｅｒｓ、Ｍ．Ｗａｌｐｏｒｔ、Ｓｈｌｏｍｃｈｉｋ、（２００１年）Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ、第５版、Ｇａｒｌａｎｄ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、ニューヨーク州と一致している。
【００３２】
本明細書で商品名を使用する場合、出願人らは、商品名製品の製剤、ジェネリック医薬品、および商品名製品の有効医薬成分をそれぞれ独立に含むことを意図している。
【００３３】
定義
別段の記載がない限り、本明細書で使用する以下の用語および語句は、以下の意味を有することを意図している。
【００３４】
本明細書の「抗体」という用語は、広範な意味で使用され、詳細には、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、および所望の生物活性を示す限り抗体フラグメントに及ぶ。これらの抗体は、ネズミ、ヒト、ヒト化、キメラ、またはその他の種に由来したものとすることができる。
【００３５】
「抗体フラグメント」は、完全長抗体の一部、一般にはその抗原結合または可変領域を含む。抗体フラグメントの例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、およびＦｖフラグメント；二重特異性抗体；直鎖状抗体；Ｆａｂ発現ライブラリー、抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体、ＣＤＲ（相補性決定領域）によって産生されるフラグメント、および癌細胞抗原、ウイルス抗原、または微生物抗原に免疫特異的に結合する上記のもののいずれかのエピトープ結合性フラグメント、単鎖抗体分子；ならびに抗体フラグメントから形成される多重特異性抗体が挙げられる。
【００３６】
本明細書における「完全な抗体」は、ＶＬおよびＶＨドメイン、ならびに完全な軽鎖および重鎖の定常ドメインを含むものである。
【００３７】
抗体は、特異性抗原を認識かつ結合することができる免疫系によって産生されるタンパク質である（Ｃ．Ｊａｎｅｗａｙ、Ｐ．Ｔｒａｖｅｒｓ、Ｍ．Ｗａｌｐｏｒｔ、Ｓｈｌｏｍｃｈｉｋ、（２００１年）Ｉｍｎａｕｎｏ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、第５版、Ｇａｒｌａｎｄ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、ニューヨーク州）。標的抗原は、一般に、多数の抗体上のＣＤＲによって認識される、エピトープとも呼ばれる多数の結合部位を有する。各抗体は、異なるエピトープに特異的に結合し、異なる構造を有する。したがって、１つの抗原が、複数の対応する抗体を有する可能性がある。
【００３８】
本明細書で使用する「抗体」という用語はまた、完全長免疫グロブリン分子または完全長免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な部分、すなわち、癌細胞または自己免疫疾患に関連する自己免疫抗体を産生する細胞を含むがそれだけに限らない標的など、対象とする標的抗原またはその一部を免疫特異的に結合する抗原結合部位を含む分子を指す。本明細書に開示する免疫グロブリンは、免疫グロブリン分子のいずれのタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、およびＩｇＡ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、およびＩｇＡ２）、またはサブクラスのものとすることができる。免疫グロブリンは、いずれの種からも誘導され得る。しかし、一態様では、免疫グロブリンは、ヒト、ネズミ、またはウサギ起源のものである。
【００３９】
明細書で使用する「モノクローナル抗体」という用語は、ほぼ同種の抗体の集団から得られる抗体を指す。すなわち、その集団を構成する個々の抗体は、少量で存在することができる天然の突然変異体を除く同一物である。モノクローナル抗体は、非常に特異的であり、１つの抗原部位に向けられている。さらに、様々な決定基（エピトープ）に対する様々な抗体を含むポリクローナル抗体調製物に比べて、各モノクローナル抗体は、抗原上の１つの決定基に向けられている。こうした特異性に加えて、モノクローナル抗体は、他の抗体に汚染されずに合成することができるという点で有利である。「モノクローナル」という修飾語は、ほぼ同種の抗体の集団から得られるような抗体の特徴を示しており、任意の特定の方法で抗体を生成する必要があると解釈されるものではない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体を、Ｋｏｈｌｅｒら、（１９７５年）Ｎａｔｕｒｅ、第２５６巻、４９５頁に初めて記載されたハイブリドーマ法によって作製してもよく、あるいは組換えＤＮＡ法（米国特許第４８１６５６７号を参照）によって作製してもよい。「モノクローナル抗体」はまた、例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎら、（１９９１年）Ｎａｔｕｒｅ、第３５２巻、６２４〜６２８頁；Ｍａｒｋｓら、（１９９１年）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、第２２２巻、５８１〜５９７頁に記載される技術を使用してファージ抗体ライブラリーから単離され得る。
【００４０】
本明細書におけるモノクローナル抗体には、具体的には、重鎖および／または軽鎖の一部が、特定の種に由来する抗体または特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体において対応する配列と同一または相同である「キメラ」抗体が含まれる。一方、鎖の残部は、別の種に由来する抗体または別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体、ならびにそれらが所望の生物活性を示す限りではこうした抗体のフラグメントにおいて対応する配列と同一または相同である（米国特許第４８１６５６７号；およびＭｏｒｒｉｓｏｎら、（１９８４年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第８１巻、６８５１〜６８５５頁）。本明細書において対象となるキメラ抗体には、ヒト以外の霊長類（例えば、旧世界ザル、類人猿など）およびヒトの定常領域配列に由来する可変ドメイン抗原結合配列を含む「霊長類化」抗体が含まれる。
【００４１】
様々な方法が、モノクローナル抗体（ＭＡｂ）の生成に使用されている。ハイブリドーマ技術は、単一タイプの抗体を産生するクローン化細胞株に言及しており、マウス（ネズミ）、ハムスター、ラット、およびヒトを含めた様々な種の細胞を使用する。ＭＡｂを調製する別の方法は、組換えＤＮＡ技術を含めた遺伝子工学を使用する。こうした技術から作製されたモノクローナル抗体には、とりわけ、キメラ抗体およびヒト化抗体が挙げられる。キメラ抗体は、複数タイプの種からのＤＮＡコード領域を組み合わせている。例えば、キメラ抗体は、マウスから可変領域を、ヒトから定常領域を誘導することができる。ヒト化抗体は、それがヒト以外の部分を含んでいても、主にヒト由来である。ヒト化抗体は、キメラ抗体のように、完全なヒトの定常領域を含むことができる。しかし、キメラ抗体と異なり、可変領域は、部分的にヒト由来である可能性がある。ヒト化抗体のヒト以外の合成部分は、しばしばネズミ抗体のＣＤＲに由来する。いずれにせよ、これらの領域は、抗体が特異性抗原を認識し、それに結合することが可能になることが重要である。ネズミ抗体は、診断法および短期治療には有用であるが、有害な免疫原性応答の危険を増加させることなく長期的に人々に投与することはできない。この応答は、ヒト抗マウス抗体（ＨＡＭＡ）と呼ばれるが、ヒト免疫系がネズミ抗体を異物として認識し、それを攻撃したときに起こる。ＨＡＭＡ応答は、毒素ショック、さらには死を引き起こす恐れがある。
【００４２】
キメラ抗体およびヒト化抗体は、投与する抗体のヒト以外部分を最小限にすることによってＨＡＭＡ応答の可能性を減少させる。さらに、キメラ抗体およびヒト化抗体は、抗体依存性細胞障害など別のヒト免疫応答を活性化するというさらなる利益を有する。
【００４３】
「抗体フラグメント」は、例えば、完全な抗体の抗原結合または可変領域を含む完全な抗体の一部を含む。抗体フラグメントの例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、およびＦｖフラグメント；二重特異性抗体；直鎖状抗体；単鎖抗体分子；ならびに抗体フラグメントから形成される多重特異性抗体が挙げられる。
【００４４】
「完全な」抗体は、抗原結合性可変領域、ならびに軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）および重鎖定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３）を含むものである。この定常ドメインは、天然配列定常ドメイン（例えば、ヒトの天然配列定常ドメイン）でもアミノ酸配列変異体でもよい。
【００４５】
完全な抗体は、抗体のＦｃ領域（天然配列Ｆｃ領域またはアミノ酸配列変異体Ｆｃ領域）に起因するそれらの生物活性を指す１種または複数の「エフェクター機能」を有することができる。抗体エフェクター機能の例としては、Ｃ１ｑ結合；補体依存性細胞障害；Ｆｃ受容体結合；抗体依存性細胞媒介性細胞障害（ＡＤＣＣ）；食作用；細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体、すなわちＢＣＲ）のダウンレギュレーションなどが挙げられる。
【００４６】
これらの重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に応じて、完全な抗体を様々な「クラス」に割り当てることができる。完全な抗体には５個の主要なクラス、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭがあり、これらのいくつかはさらに、「サブクラス」（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、およびＩｇＡ２に分けられ得る。様々なクラスの抗体に対応する重鎖定常ドメインは、それぞれα、δ、ε、γ、およびμと呼ばれる。様々なクラスの免疫グロブリンのサブユニット構造および三次元配置は、よく知られている。
【００４７】
有用な非免疫反応性タンパク質、ポリペプチド、またはペプチド抗体としては、トランスフェリン、上皮成長因子（「ＥＧＦ」）、ボンベシン、ガストリン、ガストリン放出ペプチド、血小板由来増殖因子、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＴＧＦ−αやＴＧＦ−βなどのトランスフォーミング増殖因子（「ＴＧＦ」）、ワクシニア成長因子（「ＶＧＦ」）、インスリンならびにインスリン様成長因子ＩおよびＩＩ、レクチン、ならびに低密度リポタンパク質からのアポタンパク質が挙げられるが、それらだけに限らない。
【００４８】
有用なポリクローナル抗体は、免疫動物の血清に由来する抗体分子の異種集団である。対象抗原に対するポリクローナル抗体を産生するために、当技術分野で周知の様々な方法を使用することができる。例えば、ポリクローナル抗体の産生では、様々な宿主動物、すなわち、ウサギ、マウス、ラット、およびモルモットを含むがそれらだけに限らない宿主動物を、対象となる抗原またはその誘導体を注射することによって免疫することができる。様々なアジュバントは、宿主種に応じて、免疫応答を増大させるのに使用され得、フロイントの（完全および不完全な）アジュバント、水酸化アルミニウムなどの鉱物ゲル、リゾレシチンなどの界面活性物質、プルロニックポリオール、ポリアニオン、ペプチド、油乳濁液、キーホールリンペットヘモシアニン、ジニトロフェノール、ならびにＢＣＧ（カルメット−ゲラン桿菌）やコリネバクテリウムパルブムなど潜在的に有用なヒトアジュバントが挙げられるが、それらだけに限らない。こうしたアジュバントはまた、当技術分野でよく知られている。
【００４９】
有用なモノクローナル抗体は、特定の抗原決定基（例えば、癌細胞抗原、ウイルス抗原、微生物抗原、タンパク質、ペプチド、炭水化物、化学薬品、核酸、またはそのフラグメント）に対する抗体の同種集団である。対象抗原に対するモノクローナル抗体（ｍＡｂ）を、培養中の連続継代性細胞株によって抗体分子を産生する当技術分野で周知の任意の技術を使用して調製することができる。これらには、ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ（１９７５年、Ｎａｔｕｒｅ、第２５６巻、４９５〜４９７頁）によって初めて記載されたハイブリドーマ技術、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術（Ｋｏｚｂｏｒら、１９８３年、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ、第４巻、７２頁）、ならびにＥＢＶハイブリドーマ技術（Ｃｏｌｅら、１９８５年、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ、Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．、７７〜９６頁）が挙げられるが、それらだけに限らない。こうした抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、およびＩｇＤを含めたいずれかの免疫グロブリンクラス、ならびにそのいずれのサブクラスのものとすることができる。本発明に使用するｍＡｂを産生するハイブリドーマは、インビトロまたはインビボで培養され得る。
【００５０】
有用なモノクローナル抗体としては、ヒトモノクローナル抗体、ヒト化モノクローナル抗体、抗体フラグメント、またはキメラ型ヒト−マウス（またはその他の種）モノクローナル抗体が挙げられるが、それらだけに限らない。ヒトモノクローナル抗体は、当技術分野で周知の多数の技術のいずれかで作製され得る（例えば、Ｔｅｎｇら、１９８３年、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第８０巻、７３０８〜７３１２頁；Ｋｏｚｂｏｒら、１９８３年、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ、第４巻、７２〜７９頁；およびＯｌｓｓｏｎら、１９８２年、Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．、第９２巻、３〜１６頁）。
【００５１】
抗体はまた、二重特異性抗体とすることができる。二重特異性抗体の作製方法は、当技術分野で周知である。完全長二重特異性抗体の従来の産生は、２種の免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の同時発現に基づいており、この２種の鎖は、異なる特異性を有するものである（Ｍｉｌｓｔｅｉｎら、１９８３年、Ｎａｔｕｒｅ、第３０５巻、５３７〜５３９頁）。免疫グロブリン重鎖および軽鎖の任意組合せのために、これらのハイブリドーマ（クアドローマ）は、その一方のみが正確な二重特異性構造を有する１０個の異なる抗体分子の潜在的混合物を産生する。正確な分子の精製は、通常、アフィニティークロマトグラフィー工程を使用して実施されるが、やや面倒であり、生成収率が低い。類似の方法は、国際公開ＷＯ９３／０８８２９号、およびＴｒａｕｎｅｃｋｅｒら、ＥＭＢＯ  Ｊ．、第１０巻、３６５５〜３６５９頁（１９９１年）に開示されている。
【００５２】
異なる手法によれば、所望の結合特異性（抗体抗原結合部）を有する抗体可変ドメインは、免疫グロブリン定常ドメイン配列に融合される。この融合は、ヒンジ、ＣＨ２、およびＣＨ３領域の少なくとも一部を含む免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含む可能性がある。第１重鎖定常領域（ＣＨ１）は、融合物の少なくとも１個に存在する、軽鎖結合に必要な部位を含む可能性がある。免疫グロブリン重鎖融合および所望により免疫グロブリン軽鎖をコードする配列を有する核酸を、個々の発現ベクターに挿入し、適切な宿主生物へ同時形質移入する。これは、構築中に使用する３種のポリペプチド鎖の不等な比が最適収量をもたらす実施形態において３種のポリペプチドフラグメントの相互割合を調整する上で大きな柔軟性を実現する。しかし、等比の少なくとも２種のポリペプチド鎖の発現が高収率をもたらす場合、またはその比が特に重要ではない場合、１種の発現ベクターの２種または３種すべてのポリペプチド鎖にコード配列を挿入することが可能である。
【００５３】
二重特異性抗体は、一方の腕に第１結合特異性を有するハイブリッド免疫グロブリン重鎖を有し、もう一方の腕にハイブリッド免疫グロブリン重鎖−軽鎖対（第２結合特異性をもたらす）を有することができる。二重特異性分子の半分だけに免疫グロブリン軽鎖が存在することによって容易な方法で分離が実現されるので、この非対称構造は、望ましくない免疫グロブリン鎖の組合せから所望の二重特異性化合物を分離する一助となる（国際公開ＷＯ９４／０４６９０号；Ｓｕｒｅｓｈら、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、１９８６年、第１２１巻、２１０頁；Ｒｏｄｒｉｇｕｅｓら、１９９３年、Ｊ．ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、第１５１巻、６９５４〜６９６１頁；Ｃａｒｔｅｒら、１９９２年、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、第１０巻、１６３〜１６７頁；Ｃａｒｔｅｒら、１９９５年、Ｊ．ｏｆ  Ｈｅｍａｔｏｔｈｅｒａｐｙ、第４巻、４６３〜４７０頁；Ｍｅｒｃｈａｎｔら、１９９８年、Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、第１６巻、６７７〜６８１頁）。こうした技術を使用して、二重特異性抗体を、本明細書で定義する疾患の治療または予防におけるＡＤＣとしての結合体に調製することができる。
【００５４】
ハイブリッドまたは二元機能（ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ）抗体を、生物学的に、すなわち、細胞融合技術によって、または化学的に、詳細には、架橋剤もしくはジスルフィド架橋形成剤によって誘導することができ、これは抗体全体またはそのフラグメントを含むことができる（欧州特許第１０５３６０号、国際公開ＷＯ８３／０３６７９号、欧州特許第２１７５７７号）。
【００５５】
抗体は、癌細胞抗原、ウイルス抗原、もしくは微生物抗原に免疫特異的に結合する抗体の機能的に活性なフラグメント、誘導体、もしくは類似体、または腫瘍細胞もしくはマトリクスに結合する他の抗体とすることができる。この点に関して、「機能的に活性な」は、フラグメント、誘導体、または類似体が、そのフラグメント、誘導体、または類似体を誘導する抗体が認識したのと同じ抗原を認識する抗抗イディオタイプ抗体を誘発することができることを意味する。具体的には、例示的な実施形態では、免疫グロブリン分子のイディオタイプの抗原性は、抗原を特異的に認識するＣＤＲ配列に対してＣ末端であるフレームワークおよびＣＤＲ配列の欠失によって増強され得る。どのＣＤＲ配列が抗原を結合するかを決定するのに、ＣＤＲ配列を含む合成ペプチドを、当技術分野で周知の任意の結合アッセイ法（例えばＢＩＡコアアッセイ）による抗原を用いる結合アッセイにおいて使用することができる（例えば、Ｋａｂａｔら、１９９１年、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、ベセスダ、メリーランド州；Ｅ．Ｋａｂａｔら、１９８０年、Ｊ．ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、第１２５（３）巻、９６１〜９６９頁を参照）。
【００５６】
他の有用な抗体としては、可変領域を含むＦ（ａｂ’）２フラグメントなどの、それだけに限らないが、抗体フラグメントが挙げられ、軽鎖定常領域および重鎖のＣＨ１ドメインは、抗体分子のペプシン消化、およびＦ（ａｂ’）２フラグメントのジスルフィド架橋の還元によって作製され得るＦａｂフラグメントから生成することができる。他の有用な抗体は、抗体の重鎖と軽鎖の二量体、またはＦｖや単鎖抗体（ＳＣＡ）などそのいずれかの最小フラグメント（例えば、米国特許第４９４６７７８号；Ｂｉｒｄ、１９８８年、Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２４２巻、４２３〜４２頁；Ｈｕｓｔｏｎら、１９８８年、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第８５巻、５８７９〜５８８３頁；およびＷａｒｄら、（１９８９年）Ｎａｔｕｒｅ、第３３４巻、５４４〜５４頁に記載されるような）、または抗体と同じ特異性を有する他の任意の分子である。
【００５７】
さらに、標準的な組換えＤＮＡ技術を使用して作製することができる、キメラ型およびヒト化モノクローナル抗体などヒトおよびヒト以外の部分のどちらも含む組換え抗体は、有用な抗体である。キメラ抗体は、ネズミモノクローナルおよびヒト免疫グロブリン定常領域に由来する可変領域を有するものなど、様々な部分が様々な動物種から誘導される分子である（例えば、参照によりその全体が本明細書に組み込まれるＣａｂｉｌｌｙら、米国特許第４８１６５６７号；およびＢｏｓｓら、米国特許第４８１６３９７号を参照）。ヒト化抗体は、ヒト以外の種由来の１種または複数の相補性決定領域（ＣＤＲ）およびヒト免疫グロブリン分子由来のフレームワーク領域を有するヒト以外の種に由来する抗体分子である（例えば、参照によりその全体が本明細書に組み込まれるＱｕｅｅｎ、米国特許第５，５８５，０８９号を参照）。こうしたキメラ型およびヒト化モノクローナル抗体は、例えば、参照によりそれぞれその全体が本明細書に組み込まれる国際公開ＷＯ８７／０２６７１号；欧州特許第１８４，１８７号；欧州特許第１７１４９６号；欧州特許第１７３４９４号；国際公開ＷＯ８６／０１５３３号；米国特許第４８１６５６７号；欧州特許第１２０２３号；Ｂｅｒｔｅｒら、１９８８年、Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２４０巻、１０４１〜１０４３頁；Ｌｉｕら、１９８７年、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第８４巻、３４３９〜３４４３頁；Ｌｉｕら、１９８７年、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第１３９巻、３５２１〜３５２６頁；Ｓｕｎら、１９８７年、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第８４巻、２１４〜２１８頁；Ｎｉｓｈｉｍｕｒａら、１９８７年、Ｃａｎｃｅｒ．Ｒｅｓ．、第４７巻、９９９〜１００５頁；Ｗｏｏｄら、１９８５年、Ｎａｔｕｒｅ、第３１４巻、４４６〜４４９頁；およびＳｈａｗら、１９８８年、Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．、第８０巻、１５５３〜１５５９頁；Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、１９８５年、Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２２９巻、１２０２〜１２０７頁；Ｏｉら、１９８６年、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、第４巻、２１４頁；米国特許第５２２５５３９号；Ｊｏｎｅｓら、１９８６年、Ｎａｔｕｒｅ、第３２１巻、５５２〜５２５頁；Ｖｅｒｈｏｅｙａｎら、（１９８８年）Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２３９巻、１５３４頁；およびＢｅｉｄｌｅｒら、１９８８年、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第１４１巻、４０５３〜４０６０頁に記載される方法を使用して、当技術分野で周知の組換えＤＮＡ技術によって生成され得る。
【００５８】
完全なヒト抗体は、内因性免疫グロブリンの重鎖および軽鎖遺伝子を発現することはできないがヒトの重鎖および軽鎖遺伝子を発現することができるトランスジェニックマウスを使用して生成することができる。トランスジェニックマウスは、選択された抗原、例えば、本発明のポリペプチドのすべてまたは一部を用いて通常の方法で免疫される。抗原に対するモノクローナル抗体を、従来のハイブリドーマ技術を使用して得ることができる。トランスジェニックマウスによって内包されたヒト免疫グロブリントランス遺伝子は、Ｂ細胞の分化中に再配列し、続いてクラススイッチおよび体細胞突然変異を受ける。したがって、こうした技術を使用して、治療上有用なＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、およびＩｇＥ抗体を生成することは可能である。ヒト抗体を生成するためのこの技術の概観については、ＬｏｎｂｅｒｇおよびＨｕｓｚａｒ（１９９５年、Ｉｎｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第１３巻、６５〜９３頁）を参照されたい。ヒト抗体およびヒトモノクローナル抗体を生成するためのこの技術の詳細ならびにこうした抗体を生成するためのプロトコルについては、例えば、参照によりそれぞれその全体が本明細書に組み込まれる米国特許第５６２５１２６号、同第５６３３４２５号、同第５５６９８２５号、同第５６６１０１６号、同第５５４５８０６号を参照されたい。その他のヒト抗体は、例えば、Ａｂｇｅｎｉｘ，Ｉｎｃ．（フリーモント、カリフォルニア州）およびＧｅｎｐｈａｒｍ（サンノゼ、カリフォルニア州）から市販されるものを入手することができる。
【００５９】
選択されたエピトープを認識する完全なヒト抗体を、「誘導選択（ｇｕｉｄｅｄ  ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ）」と呼ばれる技術を使用して作製することができる。この手法では、選択されたヒト以外のモノクローナル抗体、例えばマウス抗体は、同じエピトープを認識する完全なヒト抗体の選択を誘導するのに使用される（Ｊｅｓｐｅｒｓら、（１９９４年）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、第１２巻、８９９〜９０３頁）。ヒト抗体はまた、ファージディスプレイライブラリーを含めた当技術分野で周知の様々な技術を使用して生成され得る（ＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍおよびＷｉｎｔｅｒ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、第２２７巻、３８１頁（１９９１年）；Ｍａｒｋｓら、Ｊ．Ｍｏｔ．Ｂｉｏｌ．、第２２２巻、５８１頁（１９９１年））。
【００６０】
抗体は、抗体の融合タンパク質、または、例えば、抗体がＮ末端またはＣ末端で抗体ではない別のタンパク質のアミノ酸配列（またはその一部、例えば、タンパク質の少なくとも１０、２０、または５０個のアミノ酸部分など）に共有結合（例えばペプチド結合）によって融合される機能的に活性なそのフラグメントとすることができる。抗体またはそのフラグメントは、定常ドメインのＮ末端で別のタンパク質に共有結合で結合され得る。
【００６１】
抗体としては、すなわち、こうした共有結合のおかげで抗体がその抗原結合性免疫特異性を保持することができる限り、任意のタイプの分子の共有結合で修飾される類似体および誘導体が挙げられる。例えば、限定するものではないが、抗体の誘導体および類似体としては、例えば、グリコシル化、アセチル化、ＰＥＧ化、リン酸化、アミド化、周知の保護基／ブロック基による誘導体化、タンパク質分解切断、細胞性抗体ユニットまたは他のタンパク質への結合などによってさらに修飾されたものが挙げられる。多数の化学修飾のいずれも、特異的化学的切断、アセチル化、ホルミル化、ツニカマイシンの存在下での代謝合成などを含むがそれらだけに限らない周知の技術によって行われ得る。さらに、類似体または誘導体は、１個または複数の非天然アミノ酸を含むことができる。
【００６２】
ＡＤＣの抗体としては、Ｆｃ受容体と相互作用するアミノ酸残基中に改変部（例えば、置換部、欠失部、または追加部）を有する抗体が挙げられる。具体的には、これらの抗体には、抗ＦｃドメインとＦｃＲｎ受容体の間の相互作用に関与するとして同定された、アミノ酸残基に修飾部を有する抗体がある（例えば、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる国際公開ＷＯ９７／３４６３１号を参照）。癌細胞抗原に関して免疫特異的な抗体を、例えばＧｅｎｅｎｔｅｃｈ（サンフランシスコ、カリフォルニア州）から市販されるものを入手してもよく、あるいは例えば化学合成や組換え発現技術など当業者に周知の任意の方法で生成してもよい。癌細胞抗原に関して免疫特異的な抗体をコードする塩基配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋデータベースもしくはそのようなデータベース、文献刊行物から、またはルーチンなクローニングおよびシーケンシングによって得ることができる。
【００６３】
本発明の抗体薬剤結合体（ＡＤＣ）の抗体は、ＥｒｂＢ遺伝子によってコードされた受容体に特異的に結合することができる。この抗体は、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＨＢＲ３、およびＨＥＲ４から選択されるＥｒｂＢ受容体に特異的に結合することができる。このＡＤＣは、ＨＥＲ２受容体の細胞外ドメインに特異的に結合し、ＨＥＲ２受容体を過剰発現する腫瘍細胞の増殖を阻害することができる。このＡＤＣの抗体は、モノクローナル抗体、例えば、ネズミモノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体でもよい。ヒト化抗体は、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−１、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−２、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−３、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−４、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−５、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−６、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−７、またはｈｕＭＡｂ４Ｄ５−８（トラスツズマブ）とすることができる。この抗体は、抗体フラグメント、例えばＦａｂフラグメントでもよい。
【００６４】
癌の治療または予防のための周知の抗体を、ＡＤＣとして結合体化することができる。癌細胞抗原に関して免疫特異的な抗体を、市販品として入手してもよく、あるいは例えば組換え発現技術など当業者に周知の任意の方法によって生成してもよい。癌細胞抗原に関して免疫特異的な抗体をコードする塩基配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋデータベースもしくはそのようなデータベース、文献刊行物から、またはルーチンなクローニングおよびシーケンシングによって得ることができる。癌の治療に利用可能な抗体の例としては、転移性乳癌患者の治療用のヒト化抗ＨＥＲ２モノクローナル抗体；非ホジキンリンパ腫患者の治療用のキメラ型抗ＣＤ２０モノクローナル抗体であるＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標）（リツキシマブ；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）；卵巣癌治療用のネズミ抗体であるＯｖａＲｅｘ（ＡｌｔａＲｅｘ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、マサチューセッツ州）；直腸結腸癌治療用のネズミＩｇＧ２ａ抗体であるＰａｎｏｒｅｘ（Ｇｌａｘｏ  Ｗｅｌｌｃｏｍｅ、ノースカロライナ州）；頭頸部癌などの上皮成長因子陽性癌の治療用の抗ＥＧＦＲ  ＩｇＧキメラ抗体であるＣｅｔｕｘｉｍａｂ  Ｅｒｂｉｔｕｘ（Ｉｍｃｌｏｎｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．、ニューヨーク州）；肉腫治療用のヒト化抗体であるＶｉｔａｘｉｎ（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ，Ｉｎｃ．、メリーランド州）慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）治療用のヒト化ＩｇＧ１抗体であるＣａｍｐａｔｈ  Ｉ／Ｈ（Ｌｅｕｋｏｓｉｔｅ、マサチューセッツ州）；急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）治療用のヒト化抗ＣＤ３３  ＩｇＧ抗体であるＳｍａｒｔ  ＭＩ９５（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｌａｂｓ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州）非ホジキンリンパ腫治療用のヒト化抗ＣＤ２２  ＩｇＧ抗体であるＬｙｍｐｈｏＣｉｄｅ（Ｉｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓ，Ｉｎｃ．、ニュージャージー州）；非ホジキンリンパ腫治療用のヒト化抗ＨＬＡ−ＤＲ抗体であるＳｍａｒｔ  ＩＤ１０（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｌａｂｓ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州）；非ホジキンリンパ腫治療用の放射性標識ネズミ抗ＨＬＡ−Ｄｒ１０抗体であるＯｎｃｏｌｙｍ（Ｔｅｃｈｎｉｃｌｏｎｅ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州）；ホジキン病または非ホジキンリンパ腫治療用のヒト化抗ＣＤ２  ｍＡｂであるＡｌｌｏｍｕｎｅ（ＢｉｏＴｒａｎｓｐｌａｎｔ、カリフォルニア州）；肺および直腸結腸癌治療用の抗ＶＥＧＦヒト化抗体であるＡｖａｓｔｉｎ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州）；非ホジキンリンパ腫治療用の抗ＣＤ２２抗体であるＥｐｒａｔｕｚａｍａｂ（Ｉｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓ，Ｉｎｃ．、ニュージャージー州、およびＡｍｇｅｎ、カリフォルニア州）；および直腸結腸癌治療用のヒト化抗ＣＥＡ抗体であるＣＥＡｃｉｄｅ（Ｉｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓ、ニュージャージー州）が挙げられるが、それらだけに限らない。
【００６５】
癌治療に有用なその他の抗体としては、以下の抗原に対する抗体、すなわち、ＣＡ１２５（卵巣）、ＣＡ１５−３（癌腫）、ＣＡ１９−９（癌腫）、Ｌ６（癌腫）、ルイスＹ（癌腫）、ルイスＸ（癌腫）、αフェトプロテイン（癌腫）、ＣＡ２４２（結腸直腸）、胎盤性アルカリホスファターゼ（癌腫）、前立腺特異的抗原（前立腺）、前立腺酸性ホスファターゼ（前立腺）、上皮成長因子（癌腫）、ＭＡＧＥ−１（癌腫）、ＭＡＧＥ−２（癌腫）、ＭＡＧＥ−３（癌腫）、ＭＡＧＥ−４（癌腫）、抗トランスフェリン受容体（癌腫）、ｐ９７（メラノーマ）、ＭＵＣ１−ＫＬＨ（乳癌）、ＣＥＡ（結腸直腸）、ｇｐ１００（メラノーマ）、ＭＡＲＴ１（メラノーマ）、ＰＳＡ（前立腺）、ＩＬ−２受容体（Ｔ細胞白血病およびリンパ腫）、ＣＤ２０（非ホジキンリンパ腫）、ＣＤ５２（白血病）、ＣＤ３３（白血病）、ＣＤ２２（リンパ腫）、ヒト絨毛性ゴナドトロピン（癌腫）、ＣＤ３８（多発性骨髄腫）、ＣＤ４０（リンパ腫）、ムチン（癌腫）、Ｐ２１（癌腫）、ＭＰＧ（メラノーマ）、およびＮｅｕ癌遺伝子産物（癌腫）が挙げられるが、それらだけに限らない。いくつかの特異的で有用な抗体としては、ＢＲ９６  ｍＡｂ（Ｐ．Ａ．Ｔｒａｉｌら、Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９９３年）第２６１巻、２１２〜２１５頁）、ＢＲ６４（Ｐ．Ａ．Ｔｒａｉｌら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ（１９９７年）第５７巻、１００〜１０５頁）、ＣＤ４０抗原に対するｍＡｂｓ、例えばＳ２Ｃ６  ｍＡｂなど（Ｊ．Ａ．Ｆｒａｎｃｉｓｃｏら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．（２０００年）第６０巻、３２２５〜３２３１頁）、ＣＤ７０抗原に対するｍＡｂｓ、例えば１Ｆ６  ｍＡｂなど、およびＣＤ３０抗原に対するｍＡｂｓ、例えばＡＣ１０など（Ｍ．Ａ．Ｂｏｗｅｎら、（１９９３年）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第１５１巻、５８９６〜５９０６頁；Ｗａｈｌら、２００２年、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、第６２（１３）巻、３７３６〜４２頁）が挙げられるが、それらだけに限らない。腫瘍関連性抗原に結合する他の多くの内在性抗原が使用され得、調査が行われた（Ａ．Ｅ．Ｆｒａｎｋｅら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｔｈｅｒ  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．（２０００年）、第１５巻、４５９〜７６頁；Ｊ．Ｌ．Ｍｕｒｒａｙ、（２０００年）Ｓｅｍｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．、第２７巻、６４〜７０頁；Ｆ．ＢｒｅｉｔｌｉｎｇおよびＳ．Ｄｕｂｅｌ、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ，  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、ニューヨーク州、１９９８年）。
【００６６】
自己免疫障害の治療または予防のための周知の抗体を、ＡＤＣとして結合体化することができる。自己免疫障害としては、全身性エリトマトーデス（ＳＬＥ）、リウマチ性関節炎、シェーグレン症候群、免疫性血小板減少、および多発性硬化症が挙げられる。自己免疫抗体の産生に関与する細胞の抗原に対する免疫特異的な抗体は、例えば化学合成や組換え発現技術など当業者に周知の任意の方法によって得られる。ＳＬＥは、インターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）サイトカイン遺伝子の過剰発現によって特徴付けられる（Ｂｅｎｎｅｔｔら、（２００３年）Ｊｏｕｒ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．、第１９７巻、７１１〜７２３頁）。Ｉ型インターフェロン（ＩＦＮ−α／β）は、ループスの病因に重要な役割を果たしている（Ｓａｎｔｉａｇｏ−Ｒａｂｅｒ、（２００３年）Ｊｏｕｒ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．、第１９７巻、７７７〜７８８頁）。ノックアウトマウス（−ＩＦＮ−α／β）は、抗赤血球自己抗体、赤芽球症、溶血性貧血、抗ＤＮＡ自己抗体、腎臓病、および死亡率の有意な低下を示した。これらの結果は、Ｉ型ＩＦＮがネズミのループスを介在し、ヒト対応物におけるそれらの活性の低下が有益であるかもしれないということを示唆している。ビス−１，８−ナフタルイミド薬剤部分に複合した抗ＩＦＮ  Ａｂは、ＳＬＥおよびその他の自己免疫障害に対して有効な治療薬である可能性がある。
【００６７】
別の実施形態では、自己免疫疾患の治療に免疫特異的であるＡＤＣの有用な抗体としては、抗核抗体；抗ｄｓＤＮＡ；抗ｓｓＤＮＡ、抗カルジオリピン抗体ＩｇＭ、ＩｇＧ；抗リン脂質抗体ＩｇＭ、ＩｇＧ；抗ＳＭ抗体；抗ミトコンドリア抗体；甲状腺抗体；ミクロソーム抗体；サイログロブリン抗体；抗ＳＣＬ−７０；抗Ｊｏ；抗Ｕ１ＲＮＰ；抗Ｌａ／ＳＳＢ；抗ＳＳＡ；抗ＳＳＢ；抗壁細胞抗体；抗ヒストン；抗ＲＮＰ；Ｃ−ＡＮＣＡ；Ｐ−ＡＮＣＡ；抗セントロメア；抗フィブリラリン、および抗ＧＢＭ抗体が挙げられるが、それらだけに限らない。
【００６８】
ＡＤＣの抗体は、自己免疫疾患に関連するものなど、活性化リンパ球に発現する受容体または受容体結合体の両方に結合することができる。この受容体または受容体結合体は、免疫グロブリン遺伝子スーパーファミリーメンバー、ＴＮＦ受容体スーパーファミリーメンバー、インテグリン、サイトカイン受容体、ケモカイン受容体、主な組織適合性タンパク質、レクチン、または補体制御タンパク質を含むことができる。適切な免疫グロブリンスーパーファミリーメンバーの非限定的な例は、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ２８、ＣＤ７９、ＣＤ９０、ＣＤ１５２／ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、およびＩＣＯＳである。適切なＴＮＦ受容体スーパーファミリーメンバーの非限定的な例は、ＣＤ２７、ＣＤ４０、ＣＤ９５／Ｆａｓ、ＣＤ１３４／ＯＸ４０、ＣＤ１３７／４−１ＢＢ、ＴＮＦ−Ｒ１、ＴＮＦＲ−２、ＲＡＮＫ、ＴＡＣＩ、ＢＣＭＡ、オステオプロテゲリン、Ａｐｏ２／ＴＲＡＩＬ−Ｒ１、ＴＲＡＩＬ−Ｒ２、ＴＲＡＩＬ−Ｒ３、ＴＲＡＩＬ−Ｒ４、およびＡＰＯ−３である。適切なインテグリンの非限定的な例は、ＣＤ１１ａ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１８、ＣＤ２９、ＣＤ４１、ＣＤ４９ａ、ＣＤ４９ｂ、ＣＤ４９ｃ、ＣＤ４９ｄ、ＣＤ４９ｅ、ＣＤ４９ｆ、ＣＤ１０３、およびＣＤ１０４である。適切なレクチンの非限定的な例は、Ｃ型、Ｓ型、およびＩ型レクチンである。
【００６９】
本明細書では、「ウイルス抗原」という用語には、免疫応答を誘発することができるあらゆるウイルスペプチド、ポリペプチドタンパク質（例えば、ＨＩＶ  ｇｐ１２０、ＨＩＶ  ｎｅｆ、ＲＳＶ  Ｆ糖タンパク質、インフルエンザウイルスノイラミニダーゼ、インフルエンザウイルス赤血球凝集素、ＨＴＬＶ  ｔａｘ、単純ヘルペスウイルス糖タンパク質（例えば、Ｇｂ、Ｇｃ、Ｇｄ、およびＧｅ）、およびＢ型肝炎表面抗原）が含まれるが、それらだけに限らない。本明細書では、「微生物抗原」という用語には、免疫応答を誘発することができるあらゆる微生物ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、サッカライド、多糖、または脂質分子（例えば、細菌、真菌、病原性原虫、または例えばＬＰＳおよび莢膜多糖５／８を含めた酵母ポリペプチド）が含まれるが、それらだけに限らない。
【００７０】
ウイルスまたは微生物抗原に関して免疫特異的な抗体は、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（サンフランシスコ、カリフォルニア州）、Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．（テメキュラ、カリフォルニア州）、またはＶｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．（バーリンゲーム、カリフォルニア州）から市販されるものを入手してもよく、あるいは例えば化学合成や組換え発現技術など当業者に周知の任意の方法によって生成してもよい。ウイルスまたは微生物抗原に関して免疫特異的な抗体をコードする塩基配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋデータベースもしくはそのようなデータベース、文献刊行物から、またはルーチンなクローニングおよびシーケンシングによって得ることができる。
【００７１】
特定の一実施形態では、ＡＤＣの有用な抗体は、本明細書に開示する方法に従ってウイルスまたは微生物の感染を治療または予防するものである。ウイルス感染または微生物感染の治療に役立つ利用可能な抗体の例としては、ＲＳＶ感染患者の治療に有用なヒト化抗呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）モノクローナル抗体であるＳＹＮＡＧＩＳ（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ，Ｉｎｃ．、メリーランド州）；ＨＩＶ感染治療に有用なＣＤ４融合抗体であるＰＲＯ５４２（Ｐｒｏｇｅｎｉｃｓ）；Ｂ型肝炎ウイルス治療に有用なヒト抗体であるＯＳＴＡＶＩＲ（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｌａｂｓ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州）；サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）治療に有用なヒト化ＩｇＧ１抗体であるＰＲＯＴＯＶＩＲ（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｌａｂｓ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州）；および抗ＬＰＳ抗体が挙げられるが、それらだけに限らない。
【００７２】
感染症治療用のＡＤＣに有用なその他の抗体としては、細菌の病原性株由来の抗原に対する抗体（化膿性連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、淋菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｅａｅ）、髄膜炎菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）、ジフテリア菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）、ボツリヌス菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ）、ウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、破傷風菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ）、インフルエンザ菌（Ｈｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、肺炎桿菌（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、クレブシエラオツェーナ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｏｚａｅｎａｓ）、クレブシエラリノシェレロモーティス（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｒｈｉｎｏｓｃｌｅｒｏｍｏｔｉｓ）、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）、コレラ菌（Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｏｌｅｒａｅ）、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｉｌ）、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、カンピロバクター（ビブリオ）フィータス（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  （Ｖｉｂｒｉｏ）  ｆｅｔｕｓ）、アエロモナスハイドロフィラ（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ  ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）、セレウス菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ）、エドワードシエラタルダ（Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ  ｔａｒｄａ）、エンテロコリチカ菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ）、ペスト菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ）、仮性結核菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、志賀赤痢菌（Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｄｙｓｅｎｔｅｒｉａｅ）、フレキシネル菌（Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｆｌｅｘｎｅｒｉ）、ソンネ赤痢菌（Ｓｈｉｇｅｌｌａ  ｓｏｎｎｅｉ）、ネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）、梅毒トレポネーマ（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｐａｌｌｉｄｕｍ）、フランベジアトレポネーマ（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｐｅｒｔｅｎｕｅ）、トレポネーマカラテネウム（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｃａｒａｔｅｎｅｕｍ）、バンサンボレリア（Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｖｉｎｃｅｎｔｉｉ）、ボレリアブルグドルフェリ（Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ）、黄疸出血病レプトスピラ（Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ  ｉｃｔｅｒｏｈｅｍｏｒｒｈａｇｉａｅ）、結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、ニューモシスチスカリニ（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｃａｒｉｎｉｉ）、野兎病菌（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ  ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ）、ウシ流産菌（Ｂｒｕｃｅｌｌａ  ａｂｏｒｔｕｓ）、ブタ流産菌（Ｂｒｕｃｅｌｌａ  ｓｕｉｓ）、マルタ熱菌（Ｂｒｕｃｅｌｌａ  ｍｅｌｉｔｅｎｓｉｓ）、マイコプラズマ種（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｓｐｐ．）、発疹チフスリケッチア（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ  ｐｒｏｗａｚｅｋｉ）、リケッチアツツグムシ（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ  ｔｓｕｔｓｕｇｕｍｕｓｈｉ）、クラミジア種（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｓｐｐ．））；病原菌（コクシジオイデスイミチス（��ｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ  ｉｍｍｉｔｉｓ）、アスペルギルスフミガーツフ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）、カンジダアルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ）、ブラストミセスデルマティティディス（Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｄｉｓ）、クリプトコッカスネオフォルマンス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）、ヒストプラズマカプスラーツム（Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ  ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ））；原生動物（赤痢アメーバ（Ｅｎｔｏｍｏｅｂａ  ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ）、トキソプラズマ原虫（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｇｏｎｄｉｉ）、口腔トリコモナス（Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ  ｔｅｎａｓ）、腸トリコモナス（Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ  ｈｏｍｉｎｉｓ）、膣トリコモナス（Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ  ｖａｇｉｎａｌｉｓ）、ガンビアトリパノソーマ（Ｔｒｙｏａｎｏｓｏｍａ  ｇａｍｂｉｅｎｓｅ）、ローデシアトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｒｈｏｄｅｓｉｅｎｓｅ）、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）、ドノバンリーシュマニア（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ  ｄｏｎｏｖａｎｉ）、熱帯リーシュマニア（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ  ｔｒｏｐｉｃａ）、ブラジルリーシュマニア（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ  ｂｒａｚｉｌｉｅｎｓｉｓ）、ニューモシスティス性肺炎（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ）、三日熱マラリア（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｖｉｖａｘ）、熱帯熱マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）、四日熱マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｍａｌａｒｉａ））；または蠕虫（蟯虫（Ｅｎｔｅｒｏｂｉｕｓ  ｖｅｒｍｉｃｕｌａｒｉｓ）、ヒト鞭虫（Ｔｒｉｃｈｕｒｉｓ  ｔｒｉｃｈｉｕｒａ）、回虫（Ａｓｃａｒｉｓ  ｌｕｍｂｒｉｃｏｉｄｅｓ）、トリヒナ（Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ  ｓｐｉｒａｌｉｓ）、糞線虫（Ｓｔｒｏｎｇｙｌｏｉｄｅｓ  ｓｔｅｒｃｏｒａｌｉｓ）、日本住血吸虫（Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ  ｊａｐｏｎｉｃｕｍ）、マンソン住血吸虫（Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ  ｍａｎｓｏｎｉ）、ビルハルツ住血吸虫（Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ  ｈａｅｍａｔｏｂｉｕｍ）、および十二指腸虫（ｈｏｏｋｗｏｒｍｓ））が挙げられるが、それらだけに限らない。
【００７３】
ウイルス性疾患治療用のＡＤＣに有用なその他の抗体としては、限定するものではないが、例として、ポックスウイルス、ヘルペスウイルス、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、アデノウイルス、パポバウイルス、エンテロウイルス、ピコルナウイルス、パルボウイルス、レオウイルス、レトロウイルス、インフルエンザウイルス、パラインフルエンザウイルス、耳下腺炎、麻疹、呼吸器合胞体ウイルス、風疹、アルボウイルス、ラブドウイルス、アレナウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、非Ａ／非Ｂ型肝炎ウイルス、ライノウイルス、コロナウイルス、ロタウイルス（Ｒｏｔｏｖｉｒｉｄａｅ）、およびヒト免疫不全ウイルスを含めた病原性ウイルスの抗原に対する抗体が挙げられるが、それらだけに限らない。
【００７４】
「ＥｒｂＢ受容体」は、メンバーが細胞の増殖、分化、および生存の媒介物であるＥｒｂＢ受容体ファミリーに属する受容体タンパク質チロシンキナーゼである。ＥｒｂＢ受容体ファミリーとしては、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ１、ＨＥＲ１）、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２またはｐ１８５ｎｅｕ）、ＨＥＲ３（ＥｒｂＢ３）、およびＨＥＲ４（ＥｒｂＢ４またはｔｙｒｏ２）を含めた４個の個々のメンバーが挙げられる。抗ＥｒｂＢ２抗体のパネルは、ヒト乳房腫瘍細胞株ＳＫＢＲ３を使用して特徴付けられている（Ｈｕｄｚｉａｋら、（１９８９年）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．、第９（３）巻、１１６５〜１１７２頁）。最大阻害は、細胞増殖を５６％阻害した４Ｄ５と呼ばれる抗体で得られた。このパネルの他の抗体は、このアッセイにおいて細胞増殖を程度はより小さいが低下させた。抗体４Ｄ５はさらに、ＥｒｂＢ２過剰発現乳房腫瘍細胞株をＴＮＦ−αの細胞障害効果に対して感作させることがわかった（米国特許第５６７７１７１号）。Ｈｕｄｚｉａｋらが論じた抗ＥｒｂＢ２の抗体はさらに、Ｆｅｎｄｌｙら、（１９９０年）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、第５０巻、１５５０〜１５５８頁；Ｋｏｔｔｓら、（１９９０）インビトロ、第２６（３）巻、５９Ａ；Ｓａｒｕｐら、（１９９１年）Ｇｒｏｗｔｈ  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ、第１巻、７２〜８２頁；Ｓｈｅｐａｒｄら、（１９９１年）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第１１（３）巻、１１７〜１２７頁；Ｋｕｍａｒら、（１９９１年）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．、第１１（２）巻、９７９〜９８６頁；Ｌｅｗｉｓら、（１９９３年）Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．、第３７巻、２５５〜２６３頁；Ｐｉｅｔｒａｓら、（１９９４年）Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、第９巻、１８２９〜１８３８頁；Ｖｉｔｅｔｔａら、（１９９４年）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、第５４巻、５３０１〜５３０９頁；Ｓｌｉｗｋｏｗｓｋｉら、（１９９４年）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２６９（２０）巻、１４６６１〜１４６６５頁；Ｓｃｏｔｔら、（１９９１年）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２６６巻、１４３００〜５頁；Ｄ’ｓｏｕｚａら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（１９９４年）、第９１巻、７２０２〜７２０６；Ｌｅｗｉｓら、（１９９６年）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、第５６巻、１４５７〜１４６５頁；およびＳｃｈａｅｆｅｒら、（１９９７年）Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、第１５巻、１３８５〜１３９４頁において特徴付けられている。
【００７５】
ＥｒｂＢ受容体は、一般に、ＥｒｂＢリガンド；親油性膜貫通ドメイン；保存細胞内チロシンキナーゼドメイン；およびリン酸化することができるいくつかのチロシン残基を内包するカルボキシル末端シグナル伝達ドメインを結合することができる細胞外ドメインを含む。ＥｒｂＢ受容体は、「天然配列」ＥｒｂＢ受容体またはその「アミノ酸配列変異体」でもよい。ＥｒｂＢ受容体は、天然配列ヒトＥｒｂＢ受容体でもよい。したがって、「ＥｒｂＢ受容体ファミリーのメンバー」は、ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢ１）、ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ３、ＥｒｂＢ４、または現在周知のもしくは将来同定される任意の他のＥｒｂＢ受容体である。
【００７６】
「ＥｒｂＢ１」、「上皮成長因子受容体」、「ＥＧＦＲ」、および「ＨＥＲ１」という用語は、本明細書において互換的に使用され、例えば、Ｃａｒｐｅｎｔｅｒら、（１９８７年）Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、第５６巻、８８１〜９１４頁に開示されるようなＥＧＦＲ、その天然突然変異体（例えば、Ｈｕｍｐｈｒｅｙら、ＰＮＡＳ（米国）、第８７巻、４２０７〜４２１１頁（１９９０年）におけるような欠失突然変異体ＥＧＦＲ）を含めて指す。ｅｒｂＢ１という用語は、ＥＧＦＲタンパク質物をコードする遺伝子を指す。ＨＥＲ１に対する抗体は、例えば、Ｍｕｒｔｈｙら、（１９８７年）Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．、第２５２巻、５４９〜５６０頁および国際公開ＷＯ９５／２５１６７号に記載されている。
【００７７】
「ＥＲＲＰ」、「ＥＧＦ受容体関連性タンパク質」、「ＥＧＦＲ関連性タンパク質」、および「上皮成長因子受容体関連性タンパク質」という用語は、本明細書において互換的に使用され、例えば、米国特許第６３９９７４３号および米国特許出願第２００３／００９６３７３号に開示されるようなＥＲＲＰを指す。
【００７８】
「ＥｒｂＢ２」および「ＨＥＲ２」という表示は、本明細書において互換的に使用され、例えば、Ｓｅｍｂａら、ＰＮＡＳ（米国）、第８２巻、６４９７〜６５０１頁（１９８５年）；およびＹａｍａｍｏｔｏら、（１９８６年）Ｎａｔｕｒｅ、第３１９巻、２３０〜２３４頁（Ｇｅｎｅｂａｎｋ受託番号Ｘ０３３６３）に記載されるヒトＨＥＲ２タンパク質を指す。「ｅｒｂＢ２」という用語は、ヒトＥｒｂＢ２をコードする遺伝子を指し、「ｎｅｕ」という用語は、ラットｐ１８５ｎｅｕをコードする遺伝子を指す。ＥｒｂＢ２は、天然配列ヒトＥｒｂＢ２でもよい。
【００７９】
「ＥｒｂＢ３」および「ＨＥＲ３」は、例えば、米国特許第５１８３８８４号および米国特許第５４８０９６８号、ならびにＫｒａｕｓら、ＰＮＡＳ（米国）、第８６巻、９１９３〜９１９７頁（１９８９年）に開示されるような受容体ポリペプチドを指す。ＥｒｂＢ３に対する抗体は、当技術分野で周知であり、例えば、米国特許第５１８３８８４号、同第５４８０９６８号、および国際公開ＷＯ９７／３５８８５号に記載されている。
【００８０】
本明細書における「ＥｒｂＢ４」および「ＨＥＲ４」という用語は、例えば、欧州特許出願公開第５９９，２７４号；Ｐｌｏｗｍａｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第９０巻、１７４６〜１７５０頁（１９９３年）；およびＰｌｏｗｍａｎら、Ｎａｔｕｒｅ、第３６６巻、４７３〜４７５頁（１９９３年）に開示されるような受容体ポリペプチドを指し、それには、例えば、国際公開ＷＯ９９／１９４８８号に開示されるようなそのアイソフォームが含まれる。ＨＥＲ４に対する抗体は、例えば国際公開ＷＯ０２／１８４４４号に記載されている。
【００８１】
ＥｒｂＢ受容体の抗体は、例えば、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州、米国を含めたいくつかの供給元から市販されている。
【００８２】
「アミノ酸配列変異体」という用語は、天然配列ポリペプチドとある程度異なるアミノ酸配列を有するポリペプチドを指す。通常、アミノ酸配列変異体は、天然抗体の少なくとも１つの受容体結合ドメインまたは天然受容体の少なくとも１つのリガンド結合ドメインとの配列同一性が少なくとも約７０％であり、好ましくは、こうした受容体またはリガンド結合領域を有する配列による相同性が少なくとも約８０％、より好ましくは少なくとも約９０％である。アミノ酸配列変異体は、天然アミノ酸配列のアミノ酸配列内のある位置に置換、欠失、および／または挿入がなされている。アミノ酸は、慣用名、１文字、および３文字コードで記されている。
【００８３】
「配列同一性」は、必要に応じて配列同一性が最大パーセントに達するように、配列を整列させ、ギャップを導入した後、同一であるアミノ酸配列変異体の残基のパーセントとして定義される。整列のための方法およびコンピュータプログラムは、当技術分野でよく知られている。こうしたコンピュータプログラムの１つは、１９９１年１２月１０日に米国著作権局（ＵＳ  Ｃｏｐｙｒｉｇｈｔ  Ｏｆｆｉｃｅ）、ワシントン、ＤＣ２０５５９にユーザー文書で提出された、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．が製作した「Ａｌｉｇｎ  ２」である。
【００８４】
「Ｆｃ受容体」または「ＦｃＲ」という用語は、抗体のＦｃ領域に結合する受容体を説明するのに使用される。典型的なＦｃＲは、天然配列ヒトＦｃＲである。さらに、ＦｃＲは、ＩｇＧ抗体（γ受容体）を結合するものでもよく、それには、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、およびＦｃγＲＩＩＩサブクラスの受容体が挙げられ、さらにこれらの受容体の対立遺伝子変異体およびその代わりとしてスプライシングされた形態が含まれる。ＦｃγＲＩＩ受容体には、ＦｃγＲＩＩＡ（「活性化受容体」）およびＦｃγＲＩＩＢ（「阻害受容体」）があり、それらは、その細胞質ドメインにおいて主に異なる類似アミノ酸配列を有する。活性化受容体ＦｃγＲＩＩＡは、その細胞質ドメインに免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を含んでいる。阻害受容体ＦｃｙＲＩＩＢは、その細胞質ドメインに免疫受容体チロシンベースの阻害モチーフ（ＩＴＩＭ）を含んでいる（Ｍ．ｉｎ  Ｄａｅｒｏｎ、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第１５巻、２０３〜２３４頁（１９９７年）を参照）。ＦｃＲは、ＲａｖｅｔｃｈおよびＫｉｎｅｔ、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第９巻、４５７〜９２頁（１９９１年）；Ｃａｐｅｌら、Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ、第４巻、２５〜３４頁（１９９４年）；ならびにｄｅ  Ｈａａｓら、Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．、第１２６巻、３３０〜４１頁（１９９５年）に概説されている。将来同定されるものを含めたその他のＦｃＲを、本明細書の「ＦｃＲ」という用語に包含する。この用語にはまた、母親のＩｇＧを胎児に輸送することに関与する新生児期（ｎｅｏｎａｔａｌ）受容体ＦｃＲｎも含まれる（Ｇｕｙｅｒら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第１１７巻、５８７頁（１９７６年）；およびＫｉｍら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第２４巻、２４９頁（１９９４年））。
【００８５】
「補体依存性細胞障害」または「ＣＤＣ」は、分子が補体存在下で標的を溶解する能力を指す。補体活性化経路は、同系抗原で複合された分子（例えば抗体）に補体系の第１成分（Ｃ１ｑ）を結合させることによって開始される。補体活性化を評価するのに、例えば、Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ、第２０２巻、１６３頁（１９９６年）に記載されるようなＣＤＣアッセイを実施することができる。
【００８６】
「天然抗体」は、通常、２本の同一の軽（Ｌ）鎖および２本の同一の重（Ｈ）鎖から構成される約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質である。各軽鎖は１個のジスルフィド共有結合によって重鎖に結合されるが、ジスルフィ結合の数は、様々な免疫グロブリンアイソタイプの重鎖間で変動する。また、重鎖および軽鎖はそれぞれ、内部鎖ジスルフィド架橋により規則的に間隔をあけている。各重鎖は、一端に、可変ドメイン（ＶＨ）と、それに続くいくつかの定常ドメインを有する。各軽鎖は、一端に可変ドメイン（ＶＬ）およびもう一端に定常ドメインを有する。軽鎖の定常ドメインは、重鎖の第１定常ドメインと整合し、軽鎖可変ドメインは、重鎖の可変ドメインと整合する。特定のアミノ酸残基は、軽鎖と重鎖可変ドメインの間の界面を形成すると考えられる。
【００８７】
「可変」という用語は、可変ドメインのある部分が、抗体中の配列が広範囲に異なるということを指し、特定の抗原に対する各特定の抗体の結合および特異性において使用される。しかし、可変性は、抗体の可変ドメイン全体に均一に分布してはいない。それは、軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインの両方において超可変領域と呼ばれる３個のセグメントに集中している。可変ドメインのより高度に保存された部分は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。天然の重鎖および軽鎖の可変ドメインは各々、主にβシート配置をとり、３個の超可変領域によって連結された４個のＦＲを含み、それらは、このβシート構造と連結するループを形成し、場合によるとβシート構造の一部を形成する。各鎖の超可変領域はＦＲに近接してまとまっており、もう一方の鎖の超可変領域と共に抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（Ｋａｂａｔら、（１９９１年）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、ベセスダ、メリーランド州を参照）。定常部ドメインは、抗原に抗体が結合するのに直接関与しないが、抗体依存性細胞障害（ＡＤＣＣ）における抗体の関与など様々なエフェクター機能を示す。
【００８８】
「超可変領域」という用語は、本明細書で使用する場合、抗原結合に関与する抗体のアミノ酸残基を指す。超可変領域は、一般に、「相補性決定領域」もしくは「ＣＤＲ」からのアミノ酸残基（例えば、軽鎖可変ドメインの残基２４〜３４（Ｌ１）、５０〜５６（Ｌ２）、および８９〜９７（Ｌ３）、ならびに重鎖可変ドメインの３１〜３５（Ｈ１）、５０〜６５（Ｈ２）、および９５〜１０２（Ｈ３）；Ｋａｂａｔら、同上）、および／または「超可変ループ」からのアミノ酸残基（例えば、軽鎖可変部ドメインの残基２６〜３２（Ｌ１）、５０〜５２（Ｌ２）、および９１〜９６（Ｌ３）、ならびに重鎖可変部ドメインの２６〜３２（Ｈ１）、５３〜５５（Ｈ２）、および９６〜１０１（Ｈ３）；ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ、（１９８７年）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、第１９６巻、９０１〜９１７頁）を含む。「フレームワーク領域」または「ＦＲ」の残基は、本明細書で定義したような超可変領域の残基以外の可変ドメイン残基である。
【００８９】
抗体のパパイン分解により、「Ｆａｂ」フラグメントと呼ばれる２個の同一の抗原結合性フラグメントが生成し、各「Ｆａｂ」フラグメントは、単一の抗原結合部位、および残余の「Ｆｃ」フラグメントを有し、この「Ｆｃ」という名前は容易に結晶化できる能力を表すものである。ペプシン処理によって、２個の抗原結合部位を有し、依然として抗原と交叉結合することができるＦ（ａｂ’）２フラグメントが得られる。
【００９０】
「Ｆｖ」は、完全抗原認識および抗原結合部位を含む最小の抗体フラグメントである。この領域は、１本の重鎖と１本の軽鎖可変ドメインが非共有結合的に密接に会合した二量体からなる。各可変ドメインの３個の超可変領域が相互作用してＶＨ−ＶＬ二量体の表面に抗原結合部位を規定するのは、この配置においてである。まとめると、６個の超可変領域は、抗体に対して抗原と結合する特異性を付与する。しかし、単一の可変ドメイン（すなわち、抗原に対して特異的な超可変領域を３個だけ含む、Ｆｖの半分）でさえ、結合部位全体よりも親和性は低いものの抗原を認識して結合する能力を有する。
【００９１】
Ｆａｂフラグメントはまた、軽鎖の定常ドメインおよび重鎖の第１定常ドメイン（ＣＨ１）も含んでいる。Ｆａｂ’フラグメントは、重鎖ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端に、抗体ヒンジ領域からの１個または複数のシステインを含めた少数の残基が付加していることがＦａｂフラグメントと異なる。Ｆａｂ’−ＳＨは、定常ドメインのシステイン残基（１個または複数）が少なくとも１個の遊離チオール基を有するＦａｂ’のために本明細書に示すものである。Ｆ（ａｂ’）２抗体フラグメントは、最初、Ｆａｂ’フラグメント間にヒンジシステインを有するＦａｂ’フラグメントの対として産生された。抗体フラグメントの他の化学カップリングも知られている。
【００９２】
任意の脊椎動物種の抗体の「軽鎖」を、定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（κ）およびラムダ（λ）と呼ばれる２個の明らかに異なる型のどちらかに割り振ることができる。
【００９３】
「単鎖Ｆｖ」または「ｓｃＦｖ」抗体フラグメントは、抗体のＶＨおよびＶＬドメインを含み、これらのドメインは単ポリペプチド鎖に存在するものである。Ｆｖポリペプチドはさらに、ｓｃＦｖが抗原結合に関して所望の構造を形成することを可能にするようなポリペプチドリンカーをＶＨおよびＶＬドメインの間に有することができる。ｓｃＦｖの概説については、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ  ｉｎ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、第１１３巻、ＲｏｓｅｎｂｕｒｇおよびＭｏｏｒｅ編集、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、ニューヨーク州、２６９〜３１５頁（１９９４年）を参照されたい。抗ＥｒｂＢ２抗体ｓｃＦｖフラグメントは、国際公開ＷＯ９３／１６１８５号、米国特許第５５７１８９４号、および同第５５８７４５８号に記載されている。
【００９４】
「二重特異性抗体」という用語は、２個の抗原結合部位を有する小型の抗体フラグメントを指し、そのフラグメントは同じポリペプチド鎖（ＶＨ−ＶＬ）において軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に結合した重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む。同じ鎖上の２個のドメイン間に対形成するには短すぎるリンカーを使用することによって、これらのドメインは、強制的に他の鎖の相補的ドメインと対形成して２個の抗原結合部位を生成する。二重特異性抗体は、例えば、欧州特許第４０４，０９７号；国際公開第９３／１１１６１号；およびＨｏｌｌｉｎｇｅｒら、（１９９３年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第９０巻、６４４４〜６４４８頁により詳細に記載されている。
【００９５】
ヒト以外（例えば齧歯動物）の抗体の「ヒト化」形態は、ヒト以外の免疫グロブリンに由来する最小配列を含むキメラ抗体である。ヒト化は、非免疫原性ヒト抗体受容体にネズミ抗原結合情報を転移させる方法であり、多くの治療上有用な薬剤をもたらしている。ヒト化の方法は、一般に、ヒト抗体フレームワーク上に６個のネズミ相補性決定領域（ＣＤＲ）すべてを転移させることによって始まる（Ｊｏｎｅｓら、（１９８６年）Ｎａｔｕｒｅ、第３２１巻、５２２〜５２５頁）。これらのＣＤＲ移植抗体は、一般に、抗原結合に関してその原型の類似性を保持せず、実際に、類似性はしばしば極度に低下する。適切なＣＤＲ立体構造を維持するのに、ＣＤＲに加えて、選択したヒト以外の抗体フレームワーク残基を組み込まなければならない（Ｃｈｏｔｈｉａら、（１９８９年）Ｎａｔｕｒｅ、第３４２巻、８７７頁）。移植ＣＤＲの構造立体配置を支持するために鍵となるマウスフレームワーク残基をヒト受容体に転移させると、抗原結合および親和性が復元されることが示された（Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、（１９９２年）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、第２２４巻、４８７〜４９９年；ＦｏｏｔｅおよびＷｉｎｔｅｒ、（１９９２年）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、第２２４巻、４８７〜４９９頁；Ｐｒｅｓｔａら、（１９９３年）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第１５１巻、２６２３〜２６３２頁；Ｗｅｒｔｈｅｒら、（１９９６年）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ、第１５７巻、４９８６〜４９９５頁；およびＰｒｅｓｔａら、（２００１年）Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈａｅｍｏｓｔ．、第８５巻、３７９〜３８９頁）。大抵は、ヒト化抗体は、レシピエントの超可変領域からの残基が、所望の特異性、親和性、および能力を有するマウス、ラット、ウサギ、ヒト以外の霊長類など、ヒト以外の種の超可変領域からの残基（ドナー抗体）と交換されているヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。いくつかの例では、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）残基は、対応するヒト以外の残基と交換されている。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体またはドナー抗体に見られない残基を含むことができる。こうした変更は、抗体の性能をさらに改良するためになされる。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１個、通常２個の可変ドメインのほぼすべてを含み、そこでは、超可変ループのすべてまたはほぼすべてが、ヒト以外の免疫グロブリンのものに対応しており、ＦＲのすべてまたはほぼすべてが、ヒト免疫グロブリン配列のものである。ヒト化抗体はまた、場合によっては、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部、通常、ヒト免疫グロブリンの一部を含むであろう。より詳細については、米国特許第６４０７２１３号；Ｊｏｎｅｓら、（１９８６年）Ｎａｔｕｒｅ、第３２１号、５２２〜５２５頁；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、（１９８８年）Ｎａｔｕｒｅ、第３３２号、３２３〜３２９頁；およびＰｒｅｓｔａ、（１９９２年）Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．、第２巻、５９３〜５９６頁を参照されたい。
【００９６】
ヒト化抗ＥｒｂＢ２抗体としては、参照により本明細書に明らかに組み込まれる米国特許第５８２１３３７号の表３に記載のｈｕＭＡｂ４Ｄ５−１、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−２、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−３、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−４、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−５、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−６、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−７、およびｈｕＭＡｂ４Ｄ５−８（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標））；ヒト化５２０Ｃ９（国際公開ＷＯ９３／２１３１９号）、ならびに本明細書の以下に記載されるようなヒト化２Ｃ４抗体が挙げられる。
【００９７】
「親抗体」は、１個または複数のアミノ酸残基が１個または複数のシステイン残基と交換されているアミノ酸配列を含む抗体である。親抗体は、天然または野生型の配列を含むことができる。親抗体は、他の天然型、野生型、または修飾型の抗体に関して既存のアミノ酸配列改変部（追加部、欠失部、および／または置換部など）を有することができる。親抗体は、対象となる標的抗原に対して作製されている。非ポリペプチド抗原（腫瘍関連性の糖脂質抗原など、米国特許第５０９１１７８号を参照）に対する抗体も考えられる。
【００９８】
親抗体の他の例としては、抗エストロゲン剤受容体抗体、抗プロゲステロン受容体抗体、抗ｐ５３抗体、抗ＨＥＲ−２／ｎｅｕ抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、抗カテプシンＤ抗体、抗Ｂｃｌ−２抗体、抗Ｅカドヘリン抗体、抗ＣＡ１２５抗体、抗ＣＡ１５−３抗体、抗ＣＡ１９−９抗体、抗ｃ−ｅｒｂＢ−２抗体、抗Ｐ−糖タンパク質抗体、抗ＣＥＡ抗体、抗網膜芽細胞腫タンパク質抗体、抗ｒａｓ腫瘍性タンパク質抗体、抗ルイスＸ抗体、抗Ｋｉ−６７抗体、抗ＰＣＮＡ抗体、抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ４抗体、抗ＣＤ５抗体、抗ＣＤ７抗体、抗ＣＤ８抗体、抗ＣＤ９／ｐ２４抗体、抗ＣＤ１０抗体、抗ＣＤ１１ｃ抗体、抗ＣＤ１３抗体、抗ＣＤ１４抗体、抗ＣＤ１５抗体、抗ＣＤ１９抗体、抗ＣＤ２０抗体、抗ＣＤ２２抗体、抗ＣＤ２３抗体、抗ＣＤ３０抗体、抗ＣＤ３１抗体、抗ＣＤ３３抗体、抗ＣＤ３４抗体、抗ＣＤ３５抗体、抗ＣＤ３８抗体、抗ＣＤ４１抗体、抗ＬＣＡ／ＣＤ４５抗体、抗ＣＤ４５ＲＯ抗体、抗ＣＤ４５ＲＡ抗体、抗ＣＤ３９抗体、抗ＣＤ１００抗体、抗ＣＤ９５／Ｆａｓ抗体、抗ＣＤ９９抗体、抗ＣＤ１０６抗体、抗ユビキチン抗体、抗ＣＤ７１抗体、抗ｃ−ｍｙｃ抗体、抗サイトケラチン抗体、抗ビメンチン抗体、抗ＨＰＶタンパク質抗体、抗κ軽鎖抗体、抗λ軽鎖抗体、抗メラノソーム抗体、抗前立腺特異的抗原抗体、抗Ｓ−１００抗体、抗ｔａｕ抗原抗体、抗フィブリン抗体、抗ケラチン抗体、および抗Ｔｎ抗原抗体から選択されるものが挙げられるが、それらだけに限らない。
【００９９】
「単離された」抗体は、同定され、かつその天然の環境の成分から分離および／または回収された抗体である。その天然の環境の混入成分は、抗体の診断用途および治療用途を妨げる材料であり、酵素、ホルモン、および他のタンパク様または非タンパク様溶質を含む可能性がある。ある実施形態では、抗体は、（１）Ｌｏｗｒｙ法によって決定されるように、抗体の９５重量％超に、またはより好ましくは９９重量％超に、（２）気相タンパク質配列解析器の使用によって、Ｎ末端の少なくとも１５残基または内部アミノ酸配列を得るのに十分な程度に、あるいは（３）クマシーブルー染色または銀染色を使用して、還元または非還元条件下でのＳＤＳ−ＰＡＧＥによる均一なまでに精製される。単離された抗体には、組換え細胞中のインサイチュの抗体が含まれる。というのは、抗体の天然環境の少なくとも１種の成分も存在しないからである。しかし、通常、単離された抗体は、少なくとも１種の精製工程によって調製される。
【０１００】
分子標的または対象となる抗原（例えば、ＥｒｂＢ２抗原）を「結合する」抗体は、その抗体が、その抗原を発現する細胞を標的化する上で有用であるような十分な親和性で、その抗原を結合することができる抗体である。抗体がＥｒｂＢ２を結合する抗体である場合、この抗体は、通常、他のＥｒｂＢ受容体とは対照的にＥｒｂＢ２を優先的に結合し、ＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ３、ＥｒｂＢ４など、その他のタンパク質と有意に交差反応しない抗体とすることができる。こうした実施形態では、この抗体がこれらの非ＥｒｂＢ２タンパク質へ結合（例えば、内因性受容体への細胞表面結合）する程度は、蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）分析または放射免疫沈降法（ＲＩＡ）によって決定した場合、１０％未満である。時には、この抗ＥｒｂＢ２抗体は、例えば、Ｓｃｈｅｃｔｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ、第３１２巻、５１３頁（１９８４年）、およびＤｒｅｂｉｎら、Ｎａｔｕｒｅ、第３１２巻、５４５〜５４８頁（１９８４年）に記載されるようなラットｎｅｕタンパク質と有意に交差反応しない。
【０１０１】
本発明に包含される抗体薬剤結合体（ＡＤＣ）用分子標的としては、（ｉ）腫瘍関連性抗原；（ｉｉ）細胞表面受容体；（ｉｉｉ）ＣＤタンパク質およびそれらのリガンド、例えば、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３４、ＣＤ４０、ＣＤ７９α（ＣＤ７９ａ）、ＣＤ７９β（ＣＤ７９ｂ）など；（ｉｖ）ＥｒｂＢ受容体ファミリーのメンバー、例えば、ＥＧＦ受容体、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、またはＨＥＲ４受容体など；（ｖ）細胞接着分子、例えば、ＬＦＡ−１、Ｍａｃ  １、ｐ１５０，９５、ＶＬＡ−４、ＩＣＡＭ−１、ＶＣＡＭ、αｖ／β３インテグリン（そのαまたはβサブユニットを含む）（例えば、抗ＣＤ１１ａ、抗ＣＤ１８、または抗ＣＤ１１ｂ抗体）など；および（ｖｉ）ＶＥＧＦなどの増殖因子；ＩｇＥ；血液型抗原；ｆｌｋ２／ｆｌｔ３受容体；肥満（ＯＢ）受容体；ｍｐｌ受容体；ＣＴＬＡ−４；プロテインＣ、ＢＲ３、ｃ−ｍｅｔ、組織因子、β７などが挙げられる。
【０１０２】
別段の指示がない限り、「モノクローナル抗体４Ｄ５」という用語は、ネズミ４Ｄ５抗体（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １０４６３）の、またはそれ由来の抗原結合残基を有する抗体を指す。例えば、モノクローナル抗体４Ｄ５は、ネズミモノクローナル抗体４Ｄ５、またはヒト化４Ｄ５などその変異体でもよい。ヒト化４Ｄ５抗体の例としては、米国特許第５８２１３３７号におけるようなｈｕＭＡｂ４Ｄ５−１、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−２、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−３、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−４、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−５、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−６、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−７、およびｈｕＭＡｂ４Ｄ５−８（トラスツズマブ、ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標））が挙げられる。
【０１０３】
「処置する」または「処置」という用語は、治療上の処置および予防的または再発防止的処置の両方を指し、ここではその目的は、癌の発症や伝播など、望ましくない生理学的変化または障害を予防または遅くする（低下させる）ことである。本発明の目的では、有益なまたは望ましい臨床的結果としては、検出可能または検出不可能のいずれにせよ、症状の軽減、疾患の程度の低下、疾患状態の安定化（すなわち悪化しない）、疾患の進行の遅延または減速、疾患状態の改善または緩和、および寛解（部分的または完全）が挙げられるが、それらだけに限らない。「処置」はまた、処置を受けなかった場合に予想される生存に比べて、生存を延長させることも意味する。処置を必要とする人々としては、既に病態もしくは障害を有する人々、ならびに病態もしくは障害を有する傾向がある人々、または病態もしくは障害が予防されるべき人々が挙げられる。
【０１０４】
「治療有効量」という用語は、哺乳動物における疾患または障害を治療するのに有効な薬剤の量を指す。癌の場合、治療有効量の薬剤は、癌細胞の数を減少させ；腫瘍の大きさを縮小し；周辺器官への癌細胞浸潤を阻害し（すなわち、ある程度遅延させる、好ましくは停止させる）；腫瘍転移を阻害し（すなわち、ある程度遅延させる、好ましくは停止させる）；腫瘍成長をある程度阻害し；かつ／または癌に関連する症状の１つもしくは複数をある程度軽減させることができる。薬剤が成長を妨げ、かつ／または既存の癌細胞を死滅させることができるという点で、それは細胞増殖抑制性および／または細胞障害性がある可能性がある。癌治療では、例えば、疾患進行までの時間（ＴＴＰ）を評価し、および／または反応速度（ＲＲ）を決定することによって有効性を測定することができる。
【０１０５】
「生体利用能」という用語は、患者に投与された薬剤の所定量の全身有効性（すなわち、血液／血漿レベル）を指す。生体利用能は、投与した剤形から体循環に達する時間（速度）と薬剤の総量（範囲）の両方の目安を示す絶対用語である。
【０１０６】
「癌」および「癌の」という用語は、一般に無秩序な細胞増殖を特徴とする哺乳動物の生理的条件を指し、または説明するものである。「腫瘍」は、１個または複数の癌細胞を含む。癌の例としては、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、および白血病またはリンパ性悪性腫瘍が挙げられるが、それらだけに限らない。こうした癌のより詳細な例としては、扁平上皮癌（例えば上皮の扁平上皮癌）、肺小細胞癌を含めた肺癌、肺非小細胞癌（「ＮＳＣＬＣ」）、肺の腺癌および肺の扁平上皮癌、腹膜癌、肝細胞癌、消化器癌を含めた胃（ｇａｓｔｒｉｃまたはｓｔｏｍａｃｈ）癌、膵臓癌、膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝臓癌、乳癌、大腸癌、直腸癌、直腸結腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓（ｋｉｄｎｅｙまたはｒｅｎａｌ）癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、ならびに頭頸部癌が挙げられる。
【０１０７】
「ＥｒｂＢ発現性癌」は、細胞表面に存在するＥｒｂＢタンパク質を有する細胞を含むものである。「ＥｒｂＢ２発現性癌」は、抗ＥｒｂＢ２抗体が癌に結合することができ、その癌に対して治療効果を有するような、その細胞表面に十分なレベルのＥｒｂＢ２を産生するものである。
【０１０８】
ＥｒｂＢ受容体の「過剰活性化を特徴とする」癌は、癌細胞のＥｒｂＢ受容体活性化の範囲が、同じ組織型の非癌細胞でその受容体の活性化のレベルを著しく越えるものである。こうした過剰活性化は、ＥｒｂＢ受容体の過剰発現、および／または癌細胞のＥｒｂＢ受容体を活性化する上で利用可能なＥｒｂＢリガンドの通常レベルより高いレベルからもたらされる可能性がある。こうした過剰活性化は、癌細胞の悪性状態を引き起こし、かつ／またはそれにより引き起こされる可能性がある。いくつかの実施形態では、ＥｒｂＢ受容体のこうした過剰活性化を生じるＥｒｂＢ受容体の増殖および／または過剰発現が引き起こされるかどうかを決定するのに、癌を診断または予後アッセイを行う。あるいは、またはさらに、受容体の過剰活性化によるＥｒｂＢリガンドの増殖および／または過剰発現が癌で起こるかどうかを決定するのに、癌を診断または予後アッセイを行ってもよい。こうした癌のサブセットでは、受容体の過剰活性化は、自己分泌刺激経路に起因する可能性がある。
【０１０９】
ＥｒｂＢ受容体を「過剰発現」する癌は、同じ組織タイプの非癌性細胞に比べて、その細胞表面に、ＥｒｂＢ２など、著しくより高いレベルのＥｒｂＢ受容体を有するものである。こうした過剰発現は、遺伝子増幅によって、または転写もしくは翻訳の増大によって引き起こされ得る。ＥｒｂＢ受容体の過剰発現を、診断または予後アッセイ（例えば、免疫組織化学アッセイ、すなわちＩＨＣによって）において、細胞表面に存在するＥｒｂＢタンパク質の増大レベルを評価することによって決定することができる。あるいは、またはさらに、例えば、蛍光インサイチュハイブリッド形成法（ＦＩＳＨ、国際公開ＷＯ９８／４５４７９号を参照）、サザンブロット法、またはリアルタイム定量（ｒｅａｌ  ｔｉｍｅ  ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ）ＰＣＲ（ＲＴ−ＰＣＲ）などのポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）技術によって、細胞内のＥｒｂＢをコードする核酸レベルを測定することができる。ＥｒｂＢリガンドの過剰発現は、例えば、腫瘍生検において、または前述のＩＨＣ、ＦＩＳＨ、サザンブロット法、ＰＣＲ、インビボアッセイなど様々な診断アッセイによって、患者のリガンド（またはそれをコードする核酸）レベルを評価することで診断により決定され得る。また、血清など生体液中に流れる抗原（例えば、ＥｒｂＢ細胞外ドメイン）を測定することによってもＥｒｂＢ受容体の過剰発現を研究することができる（例えば、米国特許第４９３３２９４号；国際公開ＷＯ９１／０５２６４号；米国特許第５４０１６３８号；およびＳｉａｓら、（１９９０年）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ、第１３２巻、７３〜８０頁を参照）。上記のアッセイの他に、当業者には、様々なインビボアッセイが利用可能である。例えば、患者身体内の細胞を、検出可能な標識、例えば放射性同位元素を用いて任意選択で標識化した抗体にさらすことができ、この患者の細胞への抗体の結合性を、例えば、放射能の外部走査によって、または事前に抗体にさらされた患者から得た生検を分析することによって評価することができる。
【０１１０】
腫瘍が過剰発現するＥｒｂＢ２（ＨＥＲ２）は、細胞１個当たりに発現されるＨＥＲ２分子のコピー数に対応した免疫組織化学的スコアによって評価され、生化学的に、０は、０〜１０，０００コピー／細胞、１＋は、少なくとも約２００，０００コピー／細胞、２＋は、少なくとも約５００，０００コピー／細胞、３＋は、約１〜２×１０６コピー／細胞と決定され得る。ＨＥＲ２のレベル３＋での過剰発現は、チロシンキナーゼのリガンド非依存活性をもたらし（Ｈｕｄｚｉａｋら、（１９８７年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第８４巻、７１５９〜７１６３頁）、乳癌のおよそ３０％で生じ、これらの患者における無再発性生存および全生存を減少させる（Ｓｌａｍｏｎら、（１９８９年）Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２４４巻、７０７〜７１２頁；Ｓｌａｍｏｎら、（１９８７年）Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２３５巻、１７７〜１８２頁）。
【０１１１】
これに対して、「ＥｒｂＢ２受容体の過剰発現を特徴としない」癌は、診断アッセイにおいて、同じ組織タイプの非癌性細胞と比べてＥｒｂＢ２受容体の正常レベルより発現が高くない癌である。
【０１１２】
本明細書で使用する「細胞毒性剤」という用語は、細胞の機能を阻害または防止し、かつ／または細胞破壊をもたらす物質を指す。この用語には、放射性同位元素（例えば、２１１Ａｔ、１３１Ｉ、１２５Ｉ、９０Ｙ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１５３Ｓｍ、２１２Ｂｉ、３２Ｐ、６０Ｃ、およびＬｕの放射性同位元素）、化学療法剤、ならびに小分子毒素や、細菌、真菌、植物、または動物起源の酵素活性毒素  その合成類似体および誘導体を含めたものなどの毒が含まれることを意図する。
【０１１３】
「化学療法剤」および「抗癌剤」は、癌治療に有用な化学化合物を示す用語であり、本発明の抗体薬剤結合体化合物と共に併用療法で投与され得る。化学療法剤の例としては、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／ＯＳＩ  Ｐｈａｒｍ．）、ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）、Ｍｉｌｌｅｎｉｕｍ  Ｐｈａｒｍ．）、フルベストラント（ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標）、Ａｓｔｒａｚｅｎｅｃａ）、スーテント（ＳＵ１１２４８、Ｐｆｉｚｅｒ）、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、メシル酸イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、オキサリプラチン（Ｅｌｏｘａｔｉｎ（登録商標）、Ｓａｎｏｆｉ）、５−ＦＵ（５−フルオロウラシル）、ロイコボリン、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）、ラパチニブ（ＧＳＫ５７２０１６、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、ロナファーニブ（ＳＣＨ６６３３６）、ソラフェニブ（ＢＡＹ４３−９００６、Ｂａｙｅｒ  Ｌａｂｓ．）、およびゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標）、Ａｓｔｒａｚｅｎｅｃａ）、ＡＧ１４７８、ＡＧ１５７１（ＳＵ５２７１、Ｓｕｇｅｎ）；アルキル化剤、例えば、チオテパやＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）シクロスホスファミドなど；スルホン酸アルキル、例えば、ブスルファン、インプロスルファン、ピポスルファンなど；アジリシン、例えば、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、ウレドーパなど；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、およびトリメチルオロメラミンを含めたエチレンイミンおよびメチルアメラミン（ｍｅｔｈｙｌａｍｅｌａｍｉｎｅ）；ＴＬＫ２８６（ＴＥＬＣＹＴＡ（商標））；アセトゲニン（具体的にはブラタシンおよびブラタシノン）；δ−９−テトラヒドロカンナビノール（ドロナビノール、ＭＡＲＩＮＯＬ（登録商標））；β−ラパコン；ラパコール；コルヒチン；ベツリン酸；カンプトテシン（合成類似体トポテカン（ＨＹＣＡＭＴＩＮ（登録商標））、ＣＰＴ−１１（イリノテカン、ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（登録商標））、アセチルカンプトテシン、スコポレクチンおよび９−アミノカンプトセシンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン、およびビゼレシン合成薬似体を含む）；ポドフィロトキシン；ポドフィリニック酸；テニポシド；クリプトフィシン（特に、クリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；ドラスチン；デュオカルマイシン（合成類似体、ＫＷ−２１８９、およびＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エレウセロビン；パンクラチスタチン；サルコジシチン；スポンジスタチン；ナイトロジェンマスタード、例えば、クロランブシル、クロルナファジン、コロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、酸化メクロレタミン塩酸塩、メルファラン、ノベムビシン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロフォスファミド、ウラシルマスタードなど；ニトロスウレア、例えば、カルムスチン、チオロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムス��ン、ラニムヌスチンなど；ビスホスホネート、例えば、クロドロネートなど；抗生物質、例えば、エンジイン抗生物質など（例えば、カリケアミシン、特に、カリケアミシンガンマ１ＩおよびカリケアミシンオメガＩ１（例えば、Ａｇｎｅｗ、Ｃｈｅｍ  Ｉｎｔｌ．Ｅｄ  Ｅｎｇｌ．、第３３巻、１８３〜１８６頁（１９９４年）を参照））、ならびにアントラサイクリン、例えば、アンパマイシン、ＡＤ３２、アルカルビシン、ダウノルビシン、デクスラゾキサン、ＤＸ−５２−１、エピルビシン、ＧＰＸ−１００、イダルビシン、ＫＲＮ５５００、メノガリル、ダイネマイシン（ダイネマイシンＡ、エスペラマイシン、ネオカルチノスタチン発色団、およびそれに関連する色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団を含む）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アウスラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カルビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシニス、ダクチノマイシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（登録商標）ドキソルビシン（モルホリノドキソルビシン、シアノモルホリノドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン、リポソームドキソルビシン、およびデオキシドキソルビシンを含む）エソルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンＣなどのマイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシンなど；葉酸類似体、例えば、デノプテリン、プテロプテリン、トリメトレキセートなど；プリン類似体、例えば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなど；ピリミジン類似体、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリシン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリシン、ドキシフルリシン、エノシタビン、フロクスウリシンなど；アンドロゲン、例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなど；抗アドレナル剤、例えば、アミノグルテシルニド、ミトタン、トリロスタンなど；葉酸補充剤、例えば、フォリニン酸（ロイコボリン）など；アセグラトン；抗葉酸塩の抗腫瘍性薬剤、例えば、ＡＬＩＭＴＡ（登録商標）、ＬＹ２３１５１４ペメトレキセド、メトトレキサートなどのジヒドロ葉酸還元酵素阻害剤、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）やそのプロドラッグ（ＵＦＴ、Ｓ−１、カペシタビンなど）などの抗代謝剤、チミジル酸生成酵素阻害剤、ラルチトレキセド（ＴＯＭＵＤＥＸ（登録商標）、ＴＤＸ）などのグリシンアミドリボヌクレオチドギ酸転移酵素阻害剤など；ジヒドロピリミジン脱水素酵素阻害剤、例えば、エニルウラシルなど；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキセート；デフォファミン；デメコルチン；ジアジコン；エルフォルニチン；酢酸エリプチニウウ；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロイダイニン；メイタンシンやア���サミトシンなどのメイタンシノイド；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモール；ニトラエリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖結合体（ＪＨＳ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、ユージーン、オレゴン州）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；アウピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特に、Ｔ−２毒素、ベラクリンＡ、ロリシンＡ、およびアングイジン）；ウレタン；ビンデシン（ＥＬＤＩＳＩＮＥ（登録商標）、ＦＩＬＤＥＳＩＮ（登録商標））；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシッド；（「Ａｒａ−Ｃ」）シクロホスファミド；チオテパ；タキソイドおよびタキサン、例えば、ＴＡＸＯＬ（登録商標）パクリタキセル（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、プリンストン、ニュージャージー州）、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（商標）クレモフォー不要のパクリタキセルのアルブミン人工ナノ粒子配合物（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ、ショウンバーグ、イリノイ州）、およびＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）ドキセタキセル（Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ、アントニー、フランス）；クロランブシル；ゲムシタビン（ＧＥＭＺＡＲ（登録商標））；６−チオグアニン；メルカプトプリン；プラチナ；シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチンなどのプラチナ類似物またはプラチナベースの類似体；ビンブラスチン（ＶＥＬＢＡＮ（登録商標））；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン（ＯＮＣＯＶＩＮ（登録商標））；ビンカアルカロイド；ビノレルビン（ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標））；ノバントロン；エダトレキセート；ダウノマイシン；アミノプテリン；キセローダ；イバンドロネート；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸などのレチノイド；上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸、または誘導体；ならびにＣＨＯＰ、すなわち、シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、およびプレドニゾロンの併用治療の略語、ＦＯＬＦＯＸ、すなわち、５−ＦＵおよびロイコボリンを組み合わせたオキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（商標））を用いる治療計画の略語など、上記の２種以上の組合せなどが挙げられる。
【０１１４】
また、この定義では、腫瘍に対するホルモン作用を調節または阻害する抗ホルモン剤、例えば、タモキシフェン（ＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標）タモキシフェンを含む）、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、およびＦＡＲＥＳＴＯＮ（登録商標）トレミフェンを含めた、抗エストロゲン剤や選択的エストロゲン受容体調節物質（ＳＥＲＭ）など；副腎中のエストロゲン産生を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、例えば、４（５）−イミダゾール、アミノグルテチミド、ＭＥＧＡＳＥ（登録商標）酢酸メゲストロール、ＡＲＯＭＡＳＩＮ（登録商標）エキセメスタン、フォルメスタニエ、ファドロゾール、ＲＩＶＩＳＯＲ（登録商標）ボロゾール、ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）レトロゾール、ＡＲＩＭＩＤＥＸ（登録商標）アナストロゾールなど；および抗アンドロゲン剤、例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、ゴセレリンなど；ならびにトロキサシタビン（１，３−ジオキソランヌクレオシドシトシン類似体）；アンチセンスオリゴヌクレオチド、具体的には、不接着（ａｂｈｅｒａｎｔ）細胞の増殖に関与するシグナル伝達経路の遺伝子発現を阻害するもの、例えば、ＰＫＣ−α、Ｒａｆ、Ｈ−Ｒａｓ、上皮成長因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）など；遺伝子治療ワクチンなどのワクチン、例えば、ＡＬＬＯＶＥＣＴＩＮ（登録商標）ワクチン、ＬＥＵＶＥＣＴＩＮ（登録商標）ワクチン、およびＶＡＸＩＤ（登録商標）ワクチン；ＰＲＯＬＥＵＫＩＮ（登録商標）ｒＩＬ−２；ＬＵＲＴＯＴＥＣＡＮ（登録商標）トポイソメラーゼ１阻害剤；ＡＢＡＲＥＬＩＸ（登録商標）ｒｍＲＨ；ならびに上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸、または誘導体も挙げられる。
【０１１５】
本明細書では、「ＥＧＦＲ標的指向性薬剤」という用語は、ＥＧＦＲに結合し、場合によってはＥＧＦＲ活性化を阻害する治療薬を指す。こうした薬剤の例としては、ＥＧＦＲに結合する抗体および小分子が挙げられる。ＥＧＦＲに結合する抗体の例としては、ＭＡｂ５７９（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  ＨＢ  ８５０６）、ＭＡｂ４５５（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  ＨＢ８５０７）、ＭＡｂ２２５（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  ８５０８）、ＭＡｂ５２８（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  ８５０９）（米国特許第４９４３５３３号、Ｍｅｎｄｅｌｓｏｈｎらを参照）、およびそれらの変異体、例えば、キメラ型２２５（Ｃ２２５またはセツキシマブ；  ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標））や再構成型ヒト２２５（Ｈ２２５）（国際公開ＷＯ９６／４０２１０号、Ｉｍｃｌｏｎｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．を参照）など；ＩＩ型突然変異体ＥＧＦＲを結合する抗体（米国特許第５２１２２９０号）；米国特許第５８９１９９６号に記載されるようなＥＧＦＲを結合するヒト化およびキメラ抗体；ならびにＥＧＦＲを結合するヒト抗体、例えば、ＡＢＸ−ＥＧＦなど（国際公開ＷＯ９８／５０４３３号を参照）が挙げられる。抗ＥＧＦＲ抗体は、細胞毒性剤と複合され、したがって免疫結合体が生成され得る（例えば、欧州特許第６５９，４３９Ａ２号、Ｍｅｒｃｋ  Ｐａｔｅｎｔ  ＧｍｂＨを参照）。ＥＧＦＲに結合する小分子の例としては、ＺＤ１８３９またはゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（商標）、Ａｓｔｒａ  Ｚｅｎｅｃａ）、エルロチニブＨＣｌ（ＣＰ−３５８７７４、ＴＡＲＣＥＶＡ（商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／ＯＳＩ）、およびＡＧ１４７８、ＡＧ１５７１（ＳＵ５２７１、Ｓｕｇｅｎ）が挙げられる。
【０１１６】
「チロシンキナーゼ阻害剤」は、ＥｒｂＢ受容体などのチロシンキナーゼのチロシンキナーゼ活性をある程度阻害する分子である。こうした阻害剤の例としては、前節に記したＥＧＦＲ標的指向性薬剤、ならびにＰＤ１５３０３５などのキナゾリン、４−（３−クロロアニリノ）キナゾリン、ピリドピリミジン、ピリミドピリミジン、ピロロピリミジン（例えば、ＣＧＰ５９３２６、ＣＧＰ６０２６１、ＣＧＰ６２７０６など）、およびピラゾロピリミジン、４−（フェニルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン、クルクミン（ジフェルロイルメタン、４，５−ビス（４−フルオロアニリノ）フタルイミド）、ニトロチオフェン部分を有するチルホスチン；ＰＤ−０１８３８０５（Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ）；アンチセンス分子（例えば、ＥｒｂＢをコードする核酸に結合するもの）；キノキサリン（米国特許第５８０４３９６号）；チルホスチン（米国特許第５８０４３９６号）；ＺＤ６４７４（Ａｓｔｒａ  Ｚｅｎｅｃａ）；ＰＴＫ−７８７（Ｎｏｖａｒｔｉｓ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  ＡＧ）；ＣＩ−１０３３（Ｐｆｉｚｅｒ）などの全ＥｒｂＢ阻害剤；アフィニタック（ＩＳＩＳ３５２１、Ｉｓｉｓ／Ｌｉｌｌｙ）；メシル酸イマチニブ（グリベック、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）；ＰＫＩ１６６（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）；ＧＷ２０１６（Ｇｌａｘｏ  ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）；ＣＩ−１０３３（Ｐｆｉｚｅｒ）；ＥＫＢ−５６９（Ｗｙｅｔｈ）；セマクサニブ（Ｓｅｍａｘａｎｉｂ）（Ｓｕｇｅｎ）；ＺＤ６４７４（Ａｓｔｒａ  Ｚｅｎｅｃａ）；ＰＴＫ−７８７（Ｎｏｖａｒｔｉｓ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  ＡＧ）；ＩＮＣ−１Ｃ１１（Ｉｍｃｌｏｎｅ）；または以下の特許出願のいずれかに記載のもの：国際公開ＷＯ９９／０９０１６号（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｙａｎａｍｉｄ）、国際公開ＷＯ９８／４３９６０号（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｙａｎａｍｉｄ）、国際公開ＷＯ９７／３８９８３号（Ｗａｒｎｅｒ  Ｌａｍｂｅｒｔ）、国際公開ＷＯ９９／０６３７８号（Ｗａｒｎｅｒ  Ｌａｍｂｅｒｔ）、国際公開ＷＯ９９／０６３９６号（Ｗａｒｎｅｒ  Ｌａｍｂｅｒｔ）、国際公開ＷＯ９６／３０３４７号（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ）、国際公開ＷＯ９６／３３９７８号（Ｚｅｎｅｃａ）、国際公開ＷＯ９６／３３９７号（Ｚｅｎｅｃａ）、および国際公開ＷＯ９６／３３９８０号（Ｚｅｎｅｃａ）が挙げられる。
【０１１７】
「血管新生阻害剤」は、血管の発生をある程度阻止または妨害する化合物を指す。抗血管新生因子は、例えば、血管新生の促進に関与する増殖因子または増殖因子受容体に結合する小分子または抗体とすることができる。本明細書における抗血管新生因子の例は、脈管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）に結合する抗体である。
【０１１８】
「サイトカイン」という用語は、ある細胞集団によって放出された、細胞間介在物として別の細胞に作用するタンパク質の総称である。こうしたサイトカインの例は、リンホカイン、モノカイン、および従来のポリペプチドホルモンである。これらのサイトカインには、成長ホルモン、例えば、ヒト成長ホルモン、Ｎ−メチオニルヒト成長ホルモン、ウシ成長ホルモンなど；副甲状腺ホルモン；チロキシン；インスリン；プロインシュリン；リラキシン；プロリラキシン；糖タンパク質ホルモン、例えば、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、黄体形成ホルモン（ＬＨ）など；肝増殖因子；線維芽細胞増殖因子；プロラクチン；胎盤性ラクトゲン；腫瘍壊死因子−αおよび−β；ミューラー阻害物質；マウスの性腺刺激ホルモン関連性ペプチド；インヒビン；アクチビン；脈管内皮増殖因子；インテグリン；トロンボポイエチン（ＴＰＯ）；ＮＧＦ−βなどの神経成長因子；血小板増殖因子；ＴＧＦ−αやＴＧＦ−βなどのトランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）；インスリン様成長因子−Ｉおよび−ＩＩ；エリトロポイエチン（ＥＰＯ）；骨誘導因子；インターフェロン−α、−β、および−γなどのインターフェロン；マクロファージ−ＣＳＦ（Ｍ−ＣＳＦ）などのコロニー刺激因子（ＣＳＦ）；顆粒細胞マクロファージ−ＣＳＦ（ＧＭ−ＣＳＦ）；ならびに顆粒細胞−ＣＳＦ（Ｇ−ＣＳＦ）；ＩＬ−１、ＩＬｌα、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２などのインターロイキン（ＩＬ）；ＴＮＦ−αやＴＮＦ−βなどの腫瘍壊死因子；ならびにＬＩＦおよびキットリガンド（ＫＬ）を含めた他のポリペプチド因子が挙げられる。本明細書ではサイトカインという用語には、天然の供給源または組換え細胞培養に由来するタンパク質、および天然配列サイトカインの生物学的に活性な等価物が含まれる。
【０１１９】
「リポソーム」は、様々なタイプの脂質、リン脂質、および／または哺乳動物への薬剤（本明細書に開示する抗ＥｒｂＢ２抗体、場合によっては化学療法剤など）の送達に有用な界面活性剤から構成される小胞である。リポソームの成分は、一般に、生体膜の脂質配列に類似した二重層形態に編成される。
【０１２０】
「添付文書」という用語は、指示、使用法、用量、投与法、禁忌、および／またはこうした治療薬の使用に関する警告についての情報を含む、治療薬の市販用包装に慣習的に同封される説明書を指すのに使用される。
【０１２１】
「ファージディスプレイ」は、変異体ポリペプチドを、コートタンパク質への融合タンパク質として、ファージ、例えば繊維状ファージの粒子表面に表示する技術である。ファージディスプレイの有用性の１つは、ランダム化されたタンパク質変異体の大きなライブラリーを、標的分子に高い親和性で結合するそれらの配列を迅速かつ効率的に選別することができることである。ペプチドおよびタンパク質ライブラリーのファージ上のディスプレイは、数百万のポリペプチドを特異的な結合特性を有するものについてスクリーニングするのに使用されている。多価ファージディスプレイ法は、小さなランダムペプチドおよび小さなタンパク質を、一般に繊維状ファージのＰＩＩＩまたはＰＶＩＩＩに融合させることによって表示するのに使用されている。ＷｅｌｌｓおよびＬｏｗｍａｎ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．、第３巻、３５５〜３６２頁（１９９２年）、ならびにそこに引用された参照文献。一価ファージディスプレイでは、タンパク質またはペプチドライブラリーを、ファージコートタンパク質またはその一部に融合し、野生型タンパク質の存在下で低レベルで発現させる。結合活性効果は、多価ファージに対して低減され、それにより、選別は固有のリガンド親和性に基づいており、ＤＮＡ操作を単純化するファージミドベクターが使用される。ＬｏｗｍａｎおよびＷｅｌｌｓ、Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ａ  ｃｏｍｐａｎｉｏｎ  ｔｏ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、第３巻、２０５〜０２１６頁（１９９１年）。ファージディスプレイには、抗体様分子を生成する技術が含まれる（Ｃ．Ｊａｎｅｗａｙ、Ｐ．Ｔｒａｖｅｒｓ、Ｍ．Ｗａｌｐｏｒｔ、Ｓｈｌｏｍｃｈｉｋ、（２００１年）Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ、第５版、Ｇａｒｌａｎｄ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、ニューヨーク州、６２７〜６２８頁）。
【０１２２】
「ファージミド」は、細菌の複製起点、例えばＣｏｌＥ１、およびバクテリオファージの遺伝子間領域のコピーを有するプラスミドベクターである。ファージミドは、糸状バクテリオファージおよびλ系バクテリオファージを含めた任意の既知のバクテリオファージに使用され得る。プラスミドはまた、一般に、抗生物質耐性に関する選択可能なマーカーも含むことになる。これらのベクターにクローニングされたＤＮＡのセグメントは、プラスミドとして増殖させることができる。これらのベクターを内包する細胞に、ファージ粒子の産生に必要なすべての遺伝子が付与されたとき、このプラスミドの複製様式は、ローリングサークル複製に変化して、プラスミドＤＮＡの一本鎖のコピーを生成し、ファージ粒子をパッケージングする。ファージミドは、感染性または非感染性ファージ粒子を形成し得る。この用語には、異種ポリペプチドがファージ粒子の表面に現れるように遺伝子融合として異種ポリペプチド遺伝子に結合するファージコートタンパク質遺伝子またはそのフラグメントが含まれる。
【０１２３】
「アルキル」は、ノルマル、第二級、第三級、または環状炭素原子を有するＣ１〜Ｃ１８炭化水素部分である。アルキル基の例としては、メチル（Ｍｅ、−ＣＨ３）、エチル（Ｅｔ、−ＣＨ２ＣＨ３）、１−プロピル（ｎ−Ｐｒ、ｎ−プロピル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−プロピル（ｉ−Ｐｒ、ｉ−プロピル、−ＣＨ（ＣＨ３）２）、１−ブチル（ｎ−Ｂｕ、ｎ−ブチル、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−メチル−１−プロピル（ｉ−Ｂｕ、ｉ−ブチル、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）、２−ブチル（ｓ−Ｂｕ、ｓ−ブチル、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）、２−メチル−２−プロピル（ｔ−Ｂｕ、ｔ−ブチル、−Ｃ（ＣＨ３）３）、１−ペンチル（ｎ−ペンチル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３））、２−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）２）、２−メチル−２−ブチル（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ３）、３−メチル−２−ブチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）２）、３−メチル−１−ブチル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）、２−メチル−１−ブチル（−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）、１−ヘキシル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、２−ヘキシル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３−ヘキシル（−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３））、２−メチル−２−ペンチル（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３）、３−メチル−２−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３）、４−メチル−２−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）、３−メチル−３−ペンチル（−Ｃ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）２）、２−メチル−３−ペンチル（−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ３）ＣＨ（ＣＨ３）２）、２，３−ジメチル−２−ブチル（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ（ＣＨ３）２）、３，３−ジメチル−２−ブチル（−ＣＨ（ＣＨ３）Ｃ（ＣＨ３）３）、１−ヘプチル、１−オクチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロへキシル、シクロヘプチル、シクロオクチルなどのＣ１〜Ｃ１８炭化水素部分が挙げられる。
【０１２４】
「アルケニル」は、不飽和、すなわち、炭素−炭素ｓｐ２二重結合を少なくとも一箇所有するノルマル、第二級、第三級、または環状炭素原子を含むＣ２〜Ｃ１８炭化水素部分である。例としては、エチレンまたはビニル（−ＣＨ＝ＣＨ２）、アリル（−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）、１−シクロペンタ−１−エニル、１−シクロペンタ−２−エニル、１−シクロペンタ−３−エニル、５−ヘキセニル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）、１−シクロヘキサ−１−エニル、１−シクロヘキサ−２−エニル、および１−シクロヘキサ−３−エニルが挙げられるが、それらだけに限らない。
【０１２５】
「アルキニル」は、不飽和、すなわち、炭素−炭素ｓｐ三重結合を少なくとも一箇所有するノルマル、第二級、第三級、または環状炭素原子を含むＣ２〜Ｃ１８炭化水素部分である。例としては、アセチレン（−Ｃ≡ＣＨ）およびプロパルギル（−ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）が挙げられるが、それらだけに限らない。
【０１２６】
「アルキレン」は、親アルカンの同じまたは２個の異なる炭素原子から水素原子を２個取り去ることによって誘導される２個の一価基中心を有する、炭素原子が１〜１８個の飽和の枝分かれ状もしくは直鎖、または環状の炭化水素基を指す。典型的なアルキレン基としては、メチレン（−ＣＨ２−）、１，２−エチル（−ＣＨ２ＣＨ２−）、１，３−プロピル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、１，４−ブチル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、およびその他同種のものが挙げられるが、それらだけに限らない。
【０１２７】
「アルケニレン」は、親アルケンの同じまたは２個の異なる炭素原子から水素原子を２個取り去ることによって誘導される２個の一価基中心を有する、炭素原子が２〜１８個の不飽和の枝分かれ状もしくは直鎖、または環状の炭化水素基を指す。典型的なアルケニレン基としては、１，２−エチレン（−ＣＨ＝ＣＨ−）が挙げられるが、それだけに限らない。
【０１２８】
「アルキニレン」は、親アルキンの同じまたは２個の異なる炭素原子から水素原子を２個取り去ることによって誘導される２個の一価基中心を有する、炭素原子が２〜１８個の不飽和の枝分かれ状もしくは直鎖、または環状の炭化水素基を指す。典型的なアルキニレン基としては、アセチレンプロパルギル（−ＣＨ２Ｃ≡Ｃ−）および４−ペンチニル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｃ≡Ｃ−）が挙げられるが、それらだけに限らない。
【０１２９】
「アリール」は、親芳香族環系の１個の炭素原子から水素原子を１個取り去ることによって誘導される炭素原子が６〜２０個の一価の芳香族炭化水素基を意味する。いくつかのアリール基は、「Ａｒ」として典型的な構造で表される。典型的なアリール基としては、ベンゼン、置換ベンゼン、ナフタレン、アントラセン、ビフェニル、およびその他同種のものから誘導される基が挙げられるが、それらだけに限らない。
【０１３０】
「アリールアルキル」は、炭素原子、一般には末端またはｓｐ３炭素原子に結合した水素原子の１個がアリール基と置き換えられている非環式アルキル基を指す。典型的なアリールアルキル基としては、ベンジル、２−フェニルエタン−１−イル、２−フェニルエテン−１−イル、ナフチルメチル、２−ナフチルエタン−１−イル、２−ナフチルエテン−１−イル、ナフトベンジル、２−ナフトフェニルエタン−１−イル、およびその他同種のものが挙げられるが、それらだけに限らない。アリールアルキル基は、炭素原子を６〜２０個有し、例えば、アルカニル、アルケニル、またはアルキニル基を含めた、アリールアルキル基のアルキル部は、炭素原子が１〜６個であり、アリール部は、炭素原子が５〜１４個である。
【０１３１】
「ヘテロアリールアルキル」は、炭素原子、一般には末端またはｓｐ３炭素原子に結合した水素原子の１個がヘテロアリール基と置き換えられている非環式アルキル基を指す。典型的なヘテロアリールアルキル基としては、２−ベンズイミダゾリルメチル、２−フリルエチル、およびその他同種のものが挙げられるが、それらだけに限らない。ヘテロアリールアルキル基は、炭素原子を６〜２０個有し、例えば、アルカニル、アルケニル、またはアルキニル基を含めた、ヘテロアリールアルキル基のアルキル部は、炭素原子が１〜６個であり、ヘテロアリール部は、炭素原子が５〜１４個、Ｎ、Ｏ、Ｐ、およびＳから選択されるヘテロ原子が１〜３個である。ヘテロアリールアルキル基のヘテロアリール部は、３〜７環員（炭素原子が２〜６個）の一環でも、７〜１０環員（炭素原子が４〜９個、Ｎ、Ｏ、Ｐ、およびＳから選択されるヘテロ原子が１〜３個）の二環、例えば、ビシクロ［４，５］、［５，５］、［５，６］、または［６，６］系でもよい。
【０１３２】
「置換アルキル」、「置換アリール」、および「置換アリールアルキル」は、１個または複数の水素原子がそれぞれ独立に置換基と置き換えられたアルキル、アリール、およびアリールアルキルをそれぞれ意味する。典型的な置換基としては、−Ｘ、−Ｒ、−Ｏ−、−ＯＲ、−ＳＲ、−Ｓ−、−ＮＲ２、−ＮＲ３、＝ＮＲ、−ＣＸ３、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、−ＮＣＳ、−ＮＯ、−ＮＯ２、＝Ｎ２、−Ｎ３、ＮＣ（＝Ｏ）Ｒ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２、−ＳＯ３−、−ＳＯ３Ｈ、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ、−ＯＳ（＝Ｏ）２ＯＲ、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲ、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ）２、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ）２、−ＰＯ−３、−ＰＯ３Ｈ２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｘ、−Ｃ（＝Ｓ）Ｒ、−ＣＯ２Ｒ、−ＣＯ２−、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ、−Ｃ（＝Ｓ）ＳＲ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２、−Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ２、−Ｃ（＝ＮＲ）ＮＲ２、（ここでは、各Ｘは、それぞれ独立に、ハロゲン、すなわち、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり、各Ｒは、それぞれ独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１８アルキル、Ｃ６〜Ｃ２０アリール、Ｃ３〜Ｃ１４複素環、または保護基である）が挙げられるが、それらだけに限らない。上述のアルキレン、アルケニレン、およびアルケニレン基もまた、同様に置換され得る。
【０１３３】
「ヘテロアリール」、「ヘテロシクリル」、および「複素環」はすべて、１個または複数の環原子がヘテロ原子、例えば、窒素、酸素、および硫黄である環系を指す。複素環基は、１〜２０個の炭素原子、Ｎ、Ｏ、Ｐ、およびＳから選択される１〜５個のヘテロ原子を有する。複素環は、３〜７環員（炭素原子が２〜６個、Ｎ、Ｏ、Ｐ、およびＳから選択されるヘテロ原子が１〜３個）の一環でも、７〜１０環員（炭素原子が４〜９個、Ｎ、Ｏ、Ｐ、およびＳから選択されるヘテロ原子が１〜３個）の二環、例えば、ビシクロ［４，５］、［５，５］、［５，６］、または［６，６］系でもよい。複素環は、Ｌｅｏ  Ａ．Ｐａｑｕｅｔｔｅ、「Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｍｏｄｅｒｎ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」（Ｗ．Ａ．Ｂｅｎｊａｍｉｎ、ニューヨーク州、１９６８年）、特に、１、３、４、６、７、および９章；「Ｔｈｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ、Ａ  ｓｅｒｉｅｓ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｇｒａｐｈｓ」（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、ニューヨーク州、１９５０年出版）、特に、１３、１４、１６、１９、および２８巻；およびＪ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９６０年）、第８２巻、５５６６頁に記載されている。
【０１３４】
複素環の例としては、ピリジル、ジヒドロキシピリジル、テトラヒドロピリジル（ピペリジル）、チアゾリル、テトラヒドロチオフェニル、硫黄酸化テトラヒドロチオフェニル、ピリミジニル、フラニル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、テトラゾリル、ベンゾフラニル、チアナフタレニル、インドリル、インドレニル、キノリニル、イソキノリニル、ベンゾイミダゾリル、ピペリジニル、４−ピペリドニル、ピロリジニル、２−ピロリドニル、ピロリニル、テトラヒドロフラニル、ビス−テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、ビス−テトラヒドロピラニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、デカヒドロキノリニル、オクタヒドロイソキノリニル、アゾシニル、トリアジニル、６Ｈ−１，２，５−チアジアジニル、２Ｈ，６Ｈ−１，５，２−ジチアジニル、チエニル、チアントレニル、ピラニル、イソベンゾフラニル、クロメニル、キサンテニル、フェノキサンチニル、２Ｈ−ピロリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、インドリジニル、イソインドリル、３Ｈ−インドリル、１Ｈ−インダゾリル、プリニル、４Ｈ−キノリジニル、フタラジニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、シンノリニル、プテリジニル、４Ａｈ−カルバゾリル、カルバゾリル、β−カルボリニル、フェナントリジニル、アクリジニル、ピリミジニル、フェナントロリニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フラザニル、フェノキサジニル、イソクロマニル、クロマニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピベラジニル、インドリニル、イソインドリニル、キヌクリジニル、モルホリニル、オキサゾリジニル、ベンゾトリアゾリル、ベンズイソオキサゾリル、オキシンドリル、ベンゾキサゾリニル、およびイサチニルが挙げられるが、一例であり、それらだけに限らない。
【０１３５】
一例であり、これらだけに限らないが、炭素結合型複素環は、ピリシンの２、３、４、５、もしくは６位、ピリダジンの３、４、５、もしくは６位、ピリミジンの２、４、５、もしくは６位、ピラジンの２、３、５、もしくは６位、フラン、テトラヒドロフラン、チオフラン、チオフェン、ピロールもしくはテトラヒドロピロールの２、３、４、もしくは５位、オキサゾール、イミダゾール、もしくはチアゾールの２、４、もしくは５位、イソオキサゾール、ピラゾール、もしくはイソチアゾールの３、４、もしくは５位、アジリシンの２もしくは３位、アゼチジンの２、３、もしくは４位、キノリンの２、３、４、５、６、７、もしくは８位、またはイソキノリンの１、３、４、５、６、７、もしくは８位で結合される。さらにより一般には、炭素結合型複素環としては、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、５−ピリジル、６−ピリジル、３−ピリダジニル、４−ピリダジニル、５−ピリダジニル、６−ピリダジニル、２−ピリミジニル、４−ピリミジニル、５−ピリミジニル、６−ピリミジニル、２−ピラジニル、３−ピラジニル、５−ピラジニル、６−ピラジニル、２−チアゾリル、４−チアゾリル、または５−チアゾリルが挙げられる。
【０１３６】
一例であり、これらだけに限らないが、窒素結合型複素環は、アジリシン、アゼチジン、ピロール、ピロリシン、２−ピロリン、３−ピロリン、イミダゾール、イミダゾリシン、２−イミダゾリン、３−イミダゾリン、ピラゾール、ピラゾリン、２−ピラゾリン、３−ピラゾリン、ピペリシン、ピペラジン、インドール、インドリン、１Ｈ−インダゾールの１位；イソインドールまたはイソインドリンの２位、モルホリンの４位、およびカルバゾールまたはβ−カルボリンの９位で結合される。さらにより一般には、窒素結合型複素環としては、１−アジリジル、１−アゼテジル、１−ピロリル、１−イミダゾリル、１−ピラゾリル、および１−ピペリジニルが挙げられる。
【０１３７】
「炭素環」および「カルボシクリル」は、一環としては炭素原子を３〜７個、二環としては炭素原子を７〜１２個有する飽和または不飽和の環を意味する。単環式炭素環は、環原子が３〜６個、さらにより一般には環原子が５または６個である。二環式炭素環は、環原子が７〜１２個、例えば、ビシクロ［４，５］、［５，５］、［５，６］、または［６，６］系として配置されており、あるいは環原子が９または１０個、ビシクロ［５，６］または［６，６］系として配置されている。単環式炭素環の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、１−シクロペンタ−１−エニル、１−シクロペンタ−２−エニル、１−シクロペンタ−３−エニル、シクロへキシル、１−シクロヘキサ−１−エニル、１−シクロヘキサ−２−エニル、１−シクロヘキサ−３−エニル、シクロヘプチル、およびシクロオクチルが挙げられる。
【０１３８】
「リンカー」、「リンカーユニット」、「リンカー試薬」、または「リンク」は、抗体を共有結合で薬剤部分に結合する諸原子の共有結合または鎖を有する化学化合物部分を意味する。様々な実施形態では、リンカーは、Ｌとして指定さている。リンカーとしては、二価の基、例えば、アルキルジイル、アリールジイル、ヘテロアリールジイル；−（ＣＲ２）ｎＯ（ＣＲ２）ｎ−、アルキロキシの繰り返しユニット（例えば、ポリエチレンオキシ、ＰＥＧ、ポリメチレンオキシ）、アルキルアミノの繰り返しユニット（例えば、ポリエチレンアミノ、Ｊｅｆｆａｍｉｎｅ（商標））などの部分など；ならびに二酸エステルおよびアミド（マレイミド、コハク酸塩、スクシンアミド、ジグリコレート、マロン酸塩、およびカプロアミドを含む）が挙げられるが、それらだけに限らない。
【０１３９】
「標識」という用語は、抗体に共有結合で結合することができ、（ｉ）検出可能シグナルを提供する；（ｉｉ）第１または第２標識によって提供される検出可能なシグナルを改変するのに第２標識と相互作用する、例えば、ＦＲＥＴ（蛍光共鳴エネルギー転移）；（ｉｉｉ）抗原もしくはリガンドとの相互作用を安定化させるか、または結合親和性を増大させる；（ｉｖ）電荷、疎水性、形状、またはその他の物理的パラメータによって、可動性、例えば、電気泳動移動度または細胞透過性に影響を及ぼす；あるいは（ｖ）捕獲部分を付与して、リガンド親和性、抗体／抗原結合性、またはイオン性複合化を調節する働きをする部分を意味する。
【０１４０】
「キラル」という用語は、鏡像相手と重なり合わない（ｎｏｎ−ｓｕｐｅｒｉｍｐｏｓａｂｉｌｉｔｙ）特性を有する分子を指し、「アキラル」という用語は、鏡像相手と重なり合うことができる分子を指す。
【０１４１】
「立体異性体」という用語は、同一の化学構造を有するが、原子または基の空間における配置に関して異なる化合物を指す。
【０１４２】
「ジアステレオマー」は、キラリティを２個以上有し、分子が互いに鏡像ではない立体異性体を指す。ジアステレオマーは、異なる物理的特性、例えば、融点、沸点、分光特性、反応性を有する。ジアステレオマーの混合物は、電気泳動やクロマトグラフィーなどの高分解分析法で分離することができる。
【０１４３】
「エナンチオマー」は、互いに重ね合うことができない鏡像である化合物の２個の立体異性体を指す。
【０１４４】
本明細書で使用する立体化学の定義および規定は、一般に、Ｓ．Ｐ．Ｐａｒｋｅｒ編集、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｔｅｒｍｓ（１９８４年）、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｂｏｏｋ  Ｃｏｍｐａｎｙ、ニューヨーク州；ならびにＥ．ＥｌｉｅｌおよびＳ．Ｗｉｌｅｎ、Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ（１９９４年）、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、ニューヨーク州に従う。多くの有機化合物は、光学活性な形態で存在する、すなわち、それらは平面偏光の面を回転する能力を有する。光学活性化合物の記述では、分子のキラル中心（１個または複数）に関する分子の絶対配置を示すのに、接頭語ＤおよびＬ、またはＲおよびＳが使用される。接頭語ｄおよびｌ、または（＋）および（−）は、その化合物による平面偏光の回転の符号を指定するのに使用され、（−）またはｌは、その化合物が左旋性であることを意味する。（＋）またはｄが接頭に付いた化合物は、右旋性である。所与の化学構造に関して、こうした立体異性体は、それらが互いの鏡像であること以外は同一である。また、特定の立体異性体をエナンチオマーと呼ぶこともでき、こうした異性体の混合物は、しばしばエナンチオマー混合物と呼ばれる。エナンチオマーの５０：５０の混合物は、ラセミ混合物またはラセミ化合物と呼ばれ、それらは、化学的な反応またはプロセスにおいて立体選択性または立体特異性がない場合に生じる可能性がある。「ラセミ混合物」および「ラセミ化合物」という用語は、２個のエナンチオマー種からなる光学活性を欠く等モルの混合物を指す。
【０１４５】
本明細書で使用する「薬学的に許容される塩」という語句は、薬学的に許容されるＡＤＣの有機塩または無機塩を指す。塩の例としては、硫酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グロクロン酸塩、サッカリン酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、およびパモ酸塩（すなわち、１，１’−メチレン−ビス−（２−ヒドロキシ−３−ナフトアート））が挙げられるが、それらだけに限らない。薬学的に許容される塩は、酢酸イオン、コハク酸イオン、その他の対イオンなど別の分子を混在物として含むことができる。対イオンは、親化合物の電荷を安定化させる任意の有機または無機部分とすることができる。さらに、薬学的に許容される塩は、その構造に複数の帯電した原子を有することができる。多数の帯電した原子が薬学的に許容される塩の一部である場合、多数の対イオンを有することができる。したがって、薬学的に許容される塩は、１個もしくは複数の帯電した原子、および／または１個もしくは複数の対イオンを有することができる。
【０１４６】
「薬学的に許容される溶媒和物」は、１種または複数の溶媒分子とＡＤＣの会合を指す。薬学的に許容される溶媒和物を形成する溶媒の例としては、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、酢酸エチル、酢酸、およびエタノールアミンが挙げられるが、それらだけに限らない。
【０１４７】
以下の頭文字、用語、および略語が、本明細書で使用されており、以下のような指示された定義を有する。
【０１４８】
Ｂｏｃは、Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）であり、ｃｉｔは、シトルリン（２−アミノ−５−ウレイドペンタン酸）であり、ｄａｐは、ドラプロインであり、ＤＣＣは、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミドであり、ＤＣＭは、ジクロロメタンであり、ＤＥＡは、ジエチルアミンであり、ＤＥＡＤは、ジエチルアゾジカルボキシレートであり、ＤＥＰＣは、ジエチルホスホリルシアニデートであり、ＤＩＡＤは、ジイソプロピルアゾジカルボキシレートであり、ＤＩＥＡは、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンであり、ｄｉｌは、ドライソレウインであり、ＤＭＡＰは、４−ジメチルアミノピリシンであり、ＤＭＥは、エチレングリコールジメチルエーテル（すなわち、１，２−ジメトキシエタン）であり、ＤＭＦは、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドであり、ＤＭＳＯは、ジメチルスルホキシドであり、ｄｏｅは、ドラフェニンであり、ｄｏｖは、Ｎ，Ｎ−ジメチルバリンであり、ＤＴＮＢは、５，５’−ジチオビス（２−ニトロ安息香酸）であり、ＤＴＰＡは、ジエチレントリアミンペンタ酢酸であり、ＤＴＴは、ジチオトレイトールであり、ＥＤＣＩは、塩酸１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドであり、ＥＥＤＱは、２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１，２−ジヒドロキノリンであり、ＥＳ−ＭＳは、エレクトロスプレー質量分析であり、ＥｔＯＡｃは、酢酸エチルであり、Ｆｍｏｃは、Ｎ−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）であり、ｇｌｙは、グリシンであり、ＨＡＴＵは、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートであり、ＨＯＢｔは、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールであり、ＨＰＬＣは、高圧液体クロマトグラフィーであり、ｉｌｅは、イソロイシンであり、ｌｙｓは、リシンであり、ＭｅＣＮ（ＣＨ３ＣＮ）は、アセトニトリルであり、ＬＣ／ＭＳは、液体クロマトグラフィーおよび質量分析であり、ＭｅＯＨは、メタノールであり、Ｍｔｒは、４−アニシルジフェニルメチル（すなわち、４−メトキシトリチル）であるが、（１Ｓ，２Ｒ）−（＋）−ノルエフェドリンではない、ＰＢＳは、リン酸緩衝生理食塩水（Ｐｈ７．４）であり、ＰＥＧは、ポリエチレングリコールであり、Ｐｈは、フェニルであり、Ｐｎｐは、ｐ−ニトロフェニルであり、ＰｙＢｒｏｐは、臭素トリス−ピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェートであり、ＳＥＣは、サイズ排除クロマトグラフィーであり、Ｓｕは、スクシンイミドであり、ＴＦＡは、トリフルオロ酢酸であり、ＴＬＣは、薄層クロマトグラフィーであり、ＵＶは、紫外線であり、ｖａｌは、バリンである。
【０１４９】
抗体：ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）（トラスツズマブ）＝完全長ヒト化抗ＨＥＲ２（分子量１４５１６７）、トラスツズマブＦ（ａｂ’）２＝抗ＨＥＲ２に酵素的に由来（分子量１０００００）、４Ｄ５＝ハイブリドーマ由来の完全長ネズミ抗ＨＥＲ２、ｒｈｕ４Ｄ５＝一過性発現型の完全長ヒト化抗体、ｒｈｕＦａｂ４Ｄ５＝組換えヒト化Ｆａｂ（分子量４７７３８）、４Ｄ５Ｆｃ８＝突然変異したＦｃＲｎ結合ドメインを有する完全長ネズミ抗ＨＥＲ２。
【０１５０】
リンカー：ＭＣ＝６−マレイミドカプロイル、ＭＰ＝マレイミドプロパノイル、ｖａｌ−ｃｉｔ＝バリン−シトルリン、プロテアーゼ開裂可能リンカーのジペプチド部分、ａｌａ−ｐｈｅ＝アラニン−フェニルアラニン、プロテアーゼ開裂可能リンカーのジペプチド部分、ＰＡＢ＝ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル（リンカーの「自壊的」部分）、ＳＰＰ＝ペンタン酸Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルチオ）、ＳＭＣＣ＝Ｎ−スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート、ＳＩＡＢ＝Ｎ−スクシンイミジル（４−ヨード−アセチル）アミノベンゾアート。
【０１５１】
抗体薬剤結合体
本発明の化合物は、抗癌活性、過剰増殖性障害、自己免疫障害、および感染症の治療に潜在的な有用性を有するものを含む。具体的には、この化合物は、リンカーによって１，８−ビス−ナフタルイミド薬剤部分に複合された、すなわち共有結合している抗体を含み、ここでは対応する薬剤は、抗体に複合していないとき、細胞障害または細胞増殖阻害効果を有するものである。したがって、薬剤の生物活性は、抗体に結合体化することで調節される。本発明の抗体薬剤結合体（ＡＤＣ）は、腫瘍組織に有効用量の細胞毒性剤を選択的に送達することができ、それによって、抗体に複合していない同用量の１，８−ビス−ナフタルイミド化合物を送達したときよりも高い選択性、すなわちより少ない用量で効果を実現することができる。
【０１５２】
一実施形態では、本発明のＡＤＣの生体利用能またはＡＤＣの細胞内代謝物質は、そのＡＤＣの１，８−ビス−ナフタルイミド部分を構成する１，８−ビス−ナフタルイミド化合物に比べて哺乳動物において向上している。また、このＡＤＣの生体利用能またはＡＤＣの細胞内代謝物質は、１，８−ビス−ナフタルイミド薬剤部分を含まないＡＤＣの類似体と比べても哺乳動物において向上している。
【０１５３】
一実施形態では、このＡＤＣの薬剤部分は、抗体薬剤結合体がその抗体薬剤結合体の抗体に特異的な細胞表面受容体によって細胞に侵入するまで抗体から開裂せず、この薬剤部分は、抗体薬剤結合体が細胞に侵入したとき抗体から開裂する。１，８−ビス−ナフタルイミド薬剤部分は、哺乳動物において、酵素作用、加水分解、酸化、または他の機序によって、化合物の抗体または化合物の細胞内代謝物質から細胞内開裂され得る。
【０１５４】
抗体薬剤結合体化合物は、リンカーによって１個または複数の１，８−ビス−ナフタルイミド薬剤部分に共有結合している抗体を含み、その化合物は、次式の式Ｉ
【０１５５】
【化３９】
2008521920.tif 000004
または薬学的に許容されるその塩もしくは溶媒和物であり、
式中、Ａｂは、抗体であり；
Ｌは、Ａｂに共有結合しているリンカーであり、Ｌは、Ｄに共有結合で結合されており；
Ｄは、式ＩＩａおよびＩＩｂから選択される１，８−ビス−ナフタルイミド薬剤部分であり：
【０１５６】
【化４０】
2008521920.tif 000005
波線は、Ｌへの共有結合を示し、
Ｙは、Ｎ（Ｒｂ）、Ｃ（Ｒａ）２、Ｏ、またはＳであり；
Ｒａは、それぞれ独立に、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、−Ｎ（Ｒｂ）２、−Ｎ（Ｒｂ）３＋、Ｃ１〜Ｃ８ハロゲン化アルキル、カルボキシレート、スルフェート、スルファメート、スルホネート、−ＳＯ２Ｒｂ、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒｂ、−ＳＲｂ、−ＳＯ２Ｎ（Ｒｂ）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒｂ、−ＣＯ２Ｒｂ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂ）２、−ＣＮ、−Ｎ３、−ＮＯ２、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８トリフルオロアルキル、ポリエチレンオキシ、ホスホネート、ホスフェート、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８置換アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、Ｃ２〜Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６〜Ｃ２０アリール、Ｃ６〜Ｃ２０置換アリール、Ｃ１〜Ｃ２０複素環、およびＣ１〜Ｃ２０置換複素環から選択され；あるいは同じ炭素原子上の２個のＲａ基が、一緒になったとき、カルボニル（＝Ｏ）を形成し、または異なる炭素原子上の２個のＲａ基が、一緒になったとき、炭素原子が３〜７個の炭素環、複素環、もしくはアリール環を形成し；
Ｒｂは、それぞれ独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８置換アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、Ｃ２〜Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６〜Ｃ２０アリール、Ｃ６〜Ｃ２０置換アリール、Ｃ１〜Ｃ２０複素環、およびＣ１〜Ｃ２０置換複素環から選択され；
Ｃ１〜Ｃ８置換アルキル、Ｃ２〜Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６〜Ｃ２０置換アリール、およびＣ２〜Ｃ２０置換複素環は、それぞれ独立に、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、−Ｎ（Ｒｂ）２、−Ｎ（Ｒｂ）３＋、Ｃ１〜Ｃ８ハロゲン化アルキル、カルボキシレート、スルフェート、スルファメート、スルホネート、Ｃ１〜Ｃ８スルホン酸アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルアミノ、４−ジアルキルアミノピリジニウム、Ｃ１〜Ｃ８アルキルヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ８アルキルチオール、−ＳＯ２Ｒｂ、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒｂ、−ＳＲｂ、−ＳＯ２Ｎ（Ｒｂ）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒｂ、−ＣＯ２Ｒｂ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂ）２、−ＣＮ、−Ｎ３、−ＮＯ２、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８トリフルオロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ３〜Ｃ１２炭素環、Ｃ６〜Ｃ２０アリール、Ｃ２〜Ｃ２０複素環、ポリエチレンオキシ、ホスホネート、およびホスフェートから選択される１個または複数の置換基で置換されており；
ｍは、１、２、３、４、５、または６であり；
ｎは、それぞれ独立に、１、２、および３から選択され；
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４は、それぞれ独立に、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、−Ｎ（Ｒｂ）２、−Ｎ（Ｒｂ）３＋、−Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｒｂ、−Ｎ（Ｒｂ）Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂ）２、−Ｎ（Ｒｂ）ＳＯ２Ｎ（Ｒｂ）２、−Ｎ（Ｒｂ）ＳＯ２Ｒｂ、ＯＲ、ＯＣ（＝Ｏ）Ｒｂ、ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂ）２、Ｃ１〜Ｃ８ハロゲン化アルキル、カルボキシレート、スルフェート、スルファメート、スルホネート、−ＳＯ２Ｒｂ、−ＳＯ２Ａｒ、−ＳＯＡｒ、−ＳＡｒ、−ＳＯ２Ｎ（Ｒｂ）２、−ＳＯＲｂ、−ＣＯ２Ｒｂ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒｂ）２、−ＣＮ、−Ｎ３、−ＮＯ２、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ８トリフルオロアルキル、ポリエチレンオキシ、ホスホネート、ホスフェート、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８置換アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８置換アルケニル、Ｃ２〜Ｃ８アルキニル、Ｃ２〜Ｃ８置換アルキニル、Ｃ６〜Ｃ２０アリール、Ｃ６〜Ｃ２０置換アリール、Ｃ１〜Ｃ２０複素環、およびＣ１〜Ｃ２０置換複素環から選択され；あるいは
Ｘ１およびＸ２が一緒になり、Ｘ３およびＸ４が一緒になり、それぞれ独立に、−ＣＨ２ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−を形成し；
Ｄは、それぞれ独立に、複数のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、またはＸ４を有することができ；Ｄが複数のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、またはＸ４を有する場合、２個のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、またはＸ４は、縮合したＣ６〜Ｃ２０アリール、Ｃ６〜Ｃ２０置換アリール、Ｃ１〜Ｃ２０複素環、またはＣ１〜Ｃ２０置換複素環を形成することができ；
ｐは、１〜２０の整数である。
【０１５７】
薬剤充填量（ｌｏａｄｉｎｇ）は、式Ｉの分子における抗体１個当たりの薬剤の平均数ｐで表される。薬剤充填量は、抗体（ＡｂまたはｍＡｂ）１個当たり薬剤（Ｄ）を１〜２０個の範囲で変えることができる。式ＩのＡＤＣの組成物には、１〜２０個の一連の薬剤と複合した抗体の集合が含まれる。複合反応からＡＤＣを調製する際の抗体１個当たりの薬剤平均数は、質量分析、ＥＬＩＳＡアッセイ、ＨＰＬＣなどの従来手段で特徴付けられ得る。また、ｐによってＡＤＣの量的配分を決定することもできる。いくつかの例では、均一系ＡＤＣの分離、精製、およびキャラクタリゼーションは、ｐが他の薬剤充填量のＡＤＣに由来するある値である場合、逆相ＨＰＬＣや電気泳動などの手段によって実現され得る。
【０１５８】
いくつかの抗体薬剤結合体では、ｐは、抗体の結合部分の数によって制限される可能性がある。例えば、上記の例示的な実施形態でのように、結合部分がシステインチオールである場合、抗体は、１個またはいくつかのシステインチオール基しか有さない可能性があり、あるいはリンカーが結合されている１個またはいくつかの反応性チオール基しか有さない可能性もある。薬剤充填量がより高いと（例えばｐ＞５）、ある種の抗体薬剤結合体の凝集、不溶性、毒性、または細胞浸透性低下を引き起こす恐れがある。
【０１５９】
一般に、薬剤部分が理論的最大量より少ないと、複合反応中に抗体に結合体化する。例えば、抗体は、薬剤リンカー中間体またはリンカー試薬と反応しない多くのリシン残基を含有することができる。反応性が最も高いリシン基のみが、アミン反応性リンカー試薬と反応することができる。また、反応性が最も高いシステインチオール基のみが、チオール反応性リンカー試薬と反応することができる。一般に、抗体は、薬剤部分に結合することができる遊離した反応性システインチオール基を、たとえあったとしても多く含むことはない。本発明の化合物の抗体中のほとんどのシステインチオール残基は、ジスルフィド架橋として存在し、部分的または完全な還元条件下でジチオトレイトール（ＤＴＴ）などの還元剤で還元されなければならない。さらに、リシンやシステインなどの反応性求核基を露出させるのに、抗体を変性条件下に置かなければならない。ＡＤＣの充填量（薬剤／抗体比）は、（ｉ）抗体に対して薬剤リンカー中間体またはリンカー試薬のモル過剰を制限すること、（ｉｉ）複合反応時間または温度を制限すること、および（ｉｉｉ）システインチオール修飾の還元条件を部分的にするか、または制限することを含めたいくつかの様々な方法で制御され得る。
【０１６０】
複数の求核基が薬剤リンカー中間体またはリンカー試薬、続いて薬剤部分の試薬と反応した場合、得られる生成物は、抗体に結合した１個または複数の薬剤部分が分布したＡＤＣ化合物の混合物であることを理解されたい。抗体１個当たりの薬剤の平均数を、抗体に特異的かつ薬剤に特異的な二重ＥＬＩＳＡ抗体アッセイによってその混合物から計算することができる。個々のＡＤＣ分子を、質量分析によって混合物で同定し、ＨＰＬＣ、例えば疎水性相互作用クロマトグラフィーによって分離することができる（「Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｄｒｕｇ  ｌｏａｄｉｎｇ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ，  ａｎｄ  ｔｏｘｉｃｉｔｙ  ｏｆ  ａｎ  ａｎｔｉ−ＣＤ３０  ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｄｒｕｇ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅ」、Ｋ．Ｊ．Ｈａｍｂｌｅｔｔら、Ａｂｓｔｒａｃｔ  Ｎｏ．６２４、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ；２００４年度年会、２００４年３月２７〜３１日、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＡＡＣＲ、第４５巻、２００４年３月；「Ｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｌｏｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ  ｉｎ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｄｒｕｇ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ」、Ｓ．Ｃ．Ａｌｌｅｙら、Ａｂｓｔｒａｃｔ  Ｎｏ．６２７、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ；２００４年度年会、２００４年３月２７〜３１日、Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＡＡＣＲ、第４５巻、２００４年３月）。したがって、単一の充填量値を有する均一系ＡＤＣを、電気泳動またはクロマトグラフィーによって結合体混合物から単離することができる。
【０１６１】
１，８−ビス−ナフタルイミド薬剤部分
薬剤部分（Ｄ）は、１，８−ビス−ナフタルイミド型であり、式ＩＩａおよびＩＩｂを有する。ビス−１，８−ナフタルイミド薬剤部分の一実施形態は、非置換ビス−１，８−ナフタルイミド、「エリナフィド」、すなわち以下の構造を有する薬剤部分（Ｅ）である：
【０１６２】
【化４１】
2008521920.tif 000006
式中、ＹはＮ（Ｒｂ）であり、ＲｂはＨであり、ｍは３であり、ｎは２である。
【０１６３】
１，８−ナフタルイミド芳香族炭素原子のＤ部分ＩＩａおよびＩＩｂは、それぞれ独立に、Ｈの他に一連の置換基（Ｘ１〜Ｘ４）で置換され得る。ＩＩａの例示的な実施形態（但し、２個の１，８−ナフタルイミド基は同じであり、ＹはＮ（Ｒｂ）であり、ｎ＝２、ｍ＝３、ＲａおよびＲｂはＨである）としては、以下の例示的な構造が挙げられる：
【０１６４】
【化４２】
2008521920.tif 000007
【０１６５】
【化４３】
2008521920.tif 000008
【０１６６】
【化４４】
2008521920.tif 000009
Ｄ部分ＩＩａの例示的な実施形態（但し、２個の１，８−ナフタルイミド基は異なり、ＹはＮ（Ｒｂ）であり、ｎ＝２、ｍ＝３、ＲａおよびＲｂはＨである）としては、以下の例示的な構造が挙げられる：
【０１６７】
【化４５】
2008521920.tif 000010
【０１６８】
【化４６】
2008521920.tif 000011
【０１６９】
【化４７】
2008521920.tif 000012
Ｘ１およびＸ２が一緒になったもの、またはＸ３およびＸ４が一緒になったものは、それぞれ独立に、−ＣＨ２ＣＨ２−または−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−を形成することができる。これらの例示的な実施形態（但し、ＹはＮ（Ｒｂ）であり、ｎ＝２、ｍ＝３、ＲａおよびＲｂはＨである）としては、以下のＤ部分ＩＩａ構造が挙げられる：
【０１７０】
【化４８】
2008521920.tif 000013
隣接した炭素原子上のＸ１、Ｘ２、Ｘ３、またはＸ４の２個は、縮合されたＣ６〜Ｃ２０アリール、Ｃ６〜Ｃ２０置換アリール、Ｃ１〜Ｃ２０複素環、またはＣ１〜Ｃ２０置換複素環を形成することができる。これらの例示的な実施形態（但し、ＹはＮ（Ｒｂ）であり、ｎ＝２、ｍ＝３、ＲａおよびＲｂはＨである）としては、以下のＤ部分ＩＩａ構造が挙げられる：
【０１７１】
【化４９】
2008521920.tif 000014
【０１７２】
【化５０】
2008521920.tif 000015
２個の１，８−ナフタルイミド基を付随するビス−アミノアルキル基は、炭素原子上のＨ（Ｒａ）およびＬに結合していない窒素原子（Ｒｂ）の他に一連の置換基を有することができる。Ｄの例示的な実施形態（但し、ビス−アミノアルキル基において、ＹはＮ（Ｒｂ）であり、ｍは３であり、ｎは２である）としては、以下のＤ部分ＩＩａ構造が挙げられる：
【０１７３】
【化５１】
2008521920.tif 000016
【０１７４】
【化５２】
2008521920.tif 000017
【０１７５】
【化５３】
2008521920.tif 000018
【０１７６】
【化５４】
2008521920.tif 000019
【０１７７】
【化５５】
2008521920.tif 000020
２個の１，８−ナフタルイミド基を付随するビス−アミノアルキル基の３個のアルキレン基は、それぞれ独立に、異なる長さのものでよく、炭素原子上のＨ（Ｒａ）およびＬに結合していない窒素原子（Ｙ＝ＮＲｂ）（Ｒｂ）の他に一連の置換基を有することができる。各１，８−ナフタルイミド基と窒素原子の間の２個の不等価なアルキレン基（ｎ）は、それぞれ独立に、炭素が長さで１、２、または３個である。窒素原子間のアルキレン基（ｍ）は、炭素が長さで１、２、３、４、５、または６個である。したがって、本発明の化合物には、薬剤部分（Ｄ）ＩＩａおよびＩＩｂ（Ｙ＝ＮＲｂ）の３個のアルキレン基の長さの可能な組合せが全部で５４通りある。ビス−アミノアルキル基のアルキレン基のｎおよびｍ値を示す数的マトリクスを、表１に組合せとして例示する。リンカーに結合した窒素原子（Ｎ  ｔｏ  Ｌ）を含むアルキレン基の長さ（ｎ）が１番目であり、窒素原子間のアルキレン基の長さ（ｍ）が２番目であり、Ｌに結合していない窒素原子（Ｎ  ｎｏｔ  ｔｏ  Ｌ）に結合したアルキレン基の長さ（ｎ）が３番目である（左から右）。
【０１７８】
表１  ｎ（１〜３、Ｎ  ｔｏ  Ｌ）．ｍ（１〜６）．ｎ（１〜３、Ｎ  ｎｏｔ  ｔｏ  Ｌ）
【０１７９】
【化５６】
2008521920.tif 000021
リンカー（Ｌ）が１，８−ナフタルイミド基のアリール炭素原子を介して共有結合で結合する薬剤部分ＩＩｂに関する実施形態の同じ組合せのセットは、本発明の化合物に含まれる。
【０１８０】
ＹがＮ、ＲａおよびＲｂがＨであるビス−アミノアルキル基の例示的な実施形態としては、以下の薬剤部分ＩＩａ構造が挙げられる：
【０１８１】
【化５７】
2008521920.tif 000022
【０１８２】
【化５８】
2008521920.tif 000023
ＩＩｂの例示的な実施形態（但し、２個の１，８−ナフタルイミド基は同じであり（Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４＝Ｈ）、ｎ＝２、ｍ＝３、ＹはＮ（Ｒｂ）であり、ＲａおよびＲｂはＨであるとしては、以下の例示的な構造が挙げられる：
【０１８３】
【化５９】
2008521920.tif 000024
【０１８４】
【化６０】
2008521920.tif 000025
ＩＩｂの例示的な実施形態（但し、リンカー（Ｌ）は、１，８−ナフタルイミド基の１個を介して結合され、２個の１，８−ナフタルイミド基は異なり、ｎ＝２、ｍ＝３、ＲａはＨである）としては、以下の例示的な構造が挙げられる：
【０１８５】
【化６１】
2008521920.tif 000026
【０１８６】
【化６２】
2008521920.tif 000027
ＩＩａおよびＩＩｂの例示的な実施形態（但し、ＹはＯまたはＳである）としては、以下の構造が挙げられる。
【０１８７】
【化６３】
2008521920.tif 000028
【０１８８】
【化６４】
2008521920.tif 000029
。
【０１８９】
ビス−１，８−ナフタルイミド薬剤部分の合成
ビス−１，８−ナフタルイミド薬剤部分を、Ｂｒａｎａら、（２００４年）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、第４７巻、１３９１〜１３９９頁；Ｂｒａｎａら、（２００３年）Ｏｒｇ．Ｂｉｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第１巻、６４８〜６５４頁；Ｍ．Ｆ．ＢｒａｎａおよびＡ．Ｒａｍｏｓ、（２００１年）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．−Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ａｇｅｎｔｓ、第１巻、２３７〜２５５頁、ならびに従来の有機化学的方法に従って調製した。
【０１９０】
一般に、１，８−ナフタルイミド中間体は、１，８−ナフタル酸無水物化合物から調製され得る（Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．（１９７０年）、第７０巻、４３９〜４６９頁；  米国特許第４１４６７２０号；同第５６１６５８９号；同第５４１６０８９号；同第５５８５３８２号；同第５５５２５４４号）。４−ブロモ−１，８−ナフタル酸無水物（Ａｌｄｒｉｃｈ、ミルウォーキー、ウィスコンシン州）など様々な置換１，８−ナフタル酸無水物化合物が、市販されている。１，８−ナフタル酸無水物化合物を第一級アミンと反応させると、１，８−ナフタルイミドが得られる。臭素の４位からの置換が、様々な求核試薬によって起こる。
【０１９１】
【化６５】
2008521920.tif 000030
アミン試薬がビス−アミノ化合物である場合、２個の１，８−ナフタル酸無水物が反応して、ビス−１，８−ナフタルイミド中間体が生成される（Ｍ．Ｆ．ＢｒａｎａおよびＡ．Ｒａｍｏｓ、（２００１年）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．−Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ａｇｅｎｔｓ、第１巻、２３７〜２５５頁；Ｂｒａｎａら、（１９９３年）Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓ．、第８巻、２５７頁；Ｂｒａｎａら、（１９９６年）Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓ．、第１１巻、２９７頁；国際公開ＷＯ９４／０２４６６号；および米国特許第４８７４８６３号；同第５２０６２４９号；同第５４１６０８９号；同第５４８８１１０号；同第５９８１７５３号；同第６１７７５７０号）。例えば、トルエン中の無水物２当量を、エタノール中の対応するポリアミン１当量で処理する。反応が完了するまで、混合物を還流温度で加熱する。Ｂｒａｎａら、（２００４年）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、第４７巻、１３９１〜１３９９頁の方法に従って、ビス−１，８−ナフタルイミドを、例えばろ過および結晶化によって遊離塩基として単離し、メタンスルホン酸とのメシル酸塩やトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）とのトリフルオロ酢酸塩などの塩に変換し、有機溶媒で洗浄する。
【０１９２】
【化６６】
2008521920.tif 000031
あるいは、１，８−ナフタルイミド基を、反応中のポリアミン試薬の末端アミノ基の一方を最初の１，８−ナフタル酸無水物試薬で保護することによって、ポリアミンユニットに順次結合することができる（国際公開ＷＯ９４／０２４６６号）。モノ−１，８−ナフタルイミド中間体の末端アミノ基を脱保護した後、別の１，８−ナフタル酸無水物試薬を反応させて、ビス−１，８−ナフタルイミド生成物を生成することができる。この経路によって、非対称のビス−１，８−ナフタルイミド化合物を調製することができる、すなわち、ここでは、Ｘ１およびＸ２が、Ｘ３およびＸ４と異なっている。適切なアミノ保護基としては、メシチレンスルホニル、ジニトロベンゼンスルホニル、ＢＯＣ（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル、ＣＢｚ（カルボベンゾキシ）、またはＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｔｈｅｏｄｏｒａ  Ｗ．  Ｇｒｅｅｎｅ、（１９９１年）Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、ニューヨーク州、もしくは後続の版に詳述されているものが挙げられる。あるいは、２番目の１，８−ナフタル酸無水物試薬に結合する末端アミノ基を、アルデヒドやエステルなどのカルボニル基の還元アミノ化、またはニトリル基の還元によって生成することができる。
【０１９３】
リンカー
リンカー（Ｌ）は、１個または複数の薬剤部分（Ｄ）および抗体ユニット（Ａｂ）に共有結合して本発明の抗体薬剤結合体（ＡＤＣ）を生成する二官能性または多官能性部分である。
【０１９４】
一実施形態では、ＡＤＣのリンカーＬは、次式の通りである：
【０１９５】
【化６７】
2008521920.tif 000032
式中、
−Ａ−は、ストレッチャーユニットであり；
ａは、０または１であり；
各−Ｗ−は、それぞれ独立に、アミノ酸ユニットであり；
ｗは、それぞれ独立に、０〜１２の整数であり；
−ＳＰ−は、スペーサーユニットであり；
ｙは、０、１、または２である。
【０１９６】
この実施形態では、ＡＤＣを次式の式Ｉａによって表すことができる：
【０１９７】
【化６８】
2008521920.tif 000033
リンカーは、複数の薬剤部分を枝分かれ状の多官能性リンカー部分を介して抗体に共有結合させるための樹状（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ）型リンカーとすることができる（Ｓｕｎら、（２００２年）Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、第１２巻、２２１３〜２２１５頁；Ｓｕｎら、（２００３年）Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第１１巻、１７６１〜１７６８頁）。樹状リンカーにより、ＡＤＣの性能と関係のある、薬剤と抗体のモル比、すなわち充填量を増加させることができる。したがって、抗体が反応性基、例えばリシンアミノまたはシステインチオールを１個しか保持しない場合、多くの薬剤部分を樹状リンカーによって結合させることができる。
【０１９８】
樹状リンカー試薬の以下の例示的な実施形態によって、最高９個の求核性薬剤部分試薬を、クロロエチルナイトロジェンマスタード官能基との反応で複合させることが可能になる：
【０１９９】
【化６９】
2008521920.tif 000034
【０２００】
【化７０】
2008521920.tif 000035
。
【０２０１】
ストレッチャーユニット
ストレッチャーユニット（−Ａ−）は、存在する場合、抗体（Ａｂ）をアミノ酸ユニット（−Ｗ−）に結合することができる。この点に関して、抗体（Ａｂ）は、ストレッチャーの官能基と結合を形成することができる官能基を有する。天然にまたは化学的操作によって抗体上に存在することができる有用な官能基としては、スルフヒドリル（−ＳＨ）、アミノ、ヒドロキシル、カルボキシ、炭水化物のアノマーヒドロキシル基、およびカルボキシルが挙げられるが、それらだけに限らない。一態様では、抗体上の反応性官能基は、スルフヒドリルおよびアミノである。スルフヒドリル基は、抗体の分子内システインジスルフィド結合を還元することで生成され得る。あるいは、スルフヒドリル基は、２−イミノチオラン（Ｔｒａｕｔ試薬）または別のスルフヒドリル生成試薬を使用して、抗体のリシン部分のアミノ基を反応させることで生成され得る。
【０２０２】
一実施形態では、このストレッチャーユニットは、抗体ユニットの硫黄原子、例えばシステインアミノ酸残基と結合を形成する。この硫黄原子は、抗体のスルフヒドリル基由来でもよい。この実施形態の代表的なストレッチャーユニットは、式ＩＩＩａおよびＩＩＩｂで示され、式中、Ａｂ−、−Ｗ−、−ＳＰ−、−Ｄ、ｗ、およびｙは、上記で定義した通りであり、Ｒ１７は、（ＣＨ２）ｒ、Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル、Ｏ−（ＣＨ２）ｒ、アリーレン、（ＣＨ２）ｒ−アリーレン、−アリーレン−（ＣＨ２）ｒ−、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル）、（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクリル）−（ＣＨ２）ｒ、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクリル）、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクリル−（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２）ｒＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、および−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２）ｒ−から選択され、ｒは、それぞれ独立に、１〜１０の整数である。
【０２０３】
【化７１】
2008521920.tif 000036
例示的なストレッチャーユニットは、マレイミド−カプロイル（ＭＣ）から誘導される、Ｒ１７が−（ＣＨ２）５−である式ＩＩＩａのものである：
【０２０４】
【化７２】
2008521920.tif 000037
例示的なストレッチャーユニットは、マレイミド−プロパノイル（ＭＰ）から誘導される、Ｒ１７が−（ＣＨ２）２−である式ＩＩＩａのものである：
【０２０５】
【化７３】
2008521920.tif 000038
別の例示的なストレッチャーユニットは、Ｒ１７が−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣＨ２−であり、ｒが２である式ＩＩＩａのものである：
【０２０６】
【化７４】
2008521920.tif 000039
別の例示的なストレッチャーユニットは、Ｒ１７が−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−であり、ＲｂがＨ、各ｒが２である式ＩＩＩａのものである：
【０２０７】
【化７５】
2008521920.tif 000040
別の例示的なストレッチャーユニットは、Ｒ１７が−（ＣＨ２）５−である式ＩＩＩｂのものである。
【０２０８】
【化７６】
2008521920.tif 000041
別の実施形態では、このストレッチャーユニットは、抗体ユニットの硫黄原子とストレッチャーユニットの硫黄原子の間のジスルフィド結合によって抗体ユニットに結合される。この実施形態の代表的なストレッチャーユニットは、式ＩＶの角括弧内に示されており、式中、Ｒ１７、Ａｂ−、−Ｗ−、−ＳＰ−、−Ｄ、ｗ、およびｙは、上記で定義した通りである。
【０２０９】
【化７７】
2008521920.tif 000042
さらに別の実施形態では、このストレッチャーの反応性基は、抗体の第一級または第二級アミノ基と結合を形成することができる反応部位を含む。これらの反応部位の例としては、スクシンイミドエステル、４−ニトロフェニルエステル、ペンタフルオロフェニルエステル、テトラフルオロフェニルエステルなどの活性化エステル、無水物、酸塩化物、塩化スルフォニル、イソシアネート、およびイソチオシアネートが挙げられるが、それらだけに限らない。この実施形態の代表的なストレッチャーユニットは、式Ｖａ、Ｖｂ、およびＶｃの角括弧内に示されており、式中、Ｒ１７、Ａｂ−、−Ｗ−、−ＳＰ−、−Ｄ、ｗ、およびｙは、上記で定義した通りである。
【０２１０】
【化７８】
2008521920.tif 000043
さらに別の態様では、このストレッチャーの反応性基は、グリコシル化抗体の糖（炭水化物）のアルデヒド、アセタール、またはケタール基と反応する。例えば、炭水化物を、過ヨウ素酸ナトリウムなどの試薬を使用して穏やかに酸化することができ、酸化して得られた炭水化物の（−ＣＨＯ）ユニットを、ヒドラジド、オキシム、第一級または第二級アミン、ヒドラジン、チオセミカルバゾン、ヒドラジンカルボキシレート、Ｔ．Ｋａｎｅｋｏら、（１９９１年）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ、第２巻、１３３〜４１頁によって記載されたものなどのアリールヒドラジドなど、官能性を有するストレッチャーと縮合させることができる。この実施形態の代表的なストレッチャーユニットは、式ＶＩａ、ＶＩｂ、およびＶＩｃの角括弧内に示されており、式中、Ｒ１７、Ａｂ−、−Ｗ−、−ＳＰ−、−Ｄ、ｗ、およびｙは、上記で定義した通りである。
【０２１１】
【化７９】
2008521920.tif 000044
【０２１２】
【化８０】
2008521920.tif 000045
。
【０２１３】
アミノ酸ユニット
アミノ酸ユニット（−Ｗ−）は、存在する場合、（ｉ）スペーサーユニットが存在する場合、ストレッチャーユニットをスペーサーユニットに結合し、（ｉｉ）スペーサーユニットが存在しない場合、ストレッチャーユニットを薬剤ユニットに結合し、（ｉｉｉ）ストレッチャーユニットおよびスペーサーユニットが存在しない場合、抗体ユニットを薬剤ユニットに結合する。
【０２１４】
アミノ酸ユニット−Ｗｗ−は、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド、ペンタペプチド、ヘキサペプチド、ヘプタペプチド、オクタペプチド、ノナペプチド、デカペプチド、ウンデカペプチド、またはドデカペプチドユニットである。各−Ｗ−ユニットは、それぞれ独立に、以下に示す角括弧内の式を有し、ｗは、０〜１２の整数である：
【０２１５】
【化８１】
2008521920.tif 000046
式中、Ｒ１９としては、天然由来のアミノ酸側鎖のすべて、およびその類似体が挙げられる。Ｒ１９は、水素、メチル、イソプロピル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ベンジル、ｐ−ヒドロキシベンジル、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２ＳＣＨ３、−ＣＨ２ＣＯＮＨ２、−ＣＨ２ＯＯＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＨ、−（ＣＨ２）３ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−（ＣＨ２）３ＮＨ２、−（ＣＨ２）３ＮＨＣＯＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＮＨＣＨＯ、−（ＣＨ２）４ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２、−（ＣＨ２）４ＮＨ２、−（ＣＨ２）４ＮＨＣＯＣＨ３、−（ＣＨ２）４ＮＨＣＨＯ、−（ＣＨ２）３ＮＨＣＯＮＨ２、−（ＣＨ２）４ＮＨＣＯＮＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２ＮＨ２、２−ピリジルメチル−、３−ピリジルメチル−、４−ピリジルメチル−、フェニル、シクロへキシル、および以下のものから選択される。
【０２１６】
【化８２】
2008521920.tif 000047
アミノ酸ユニットは、薬剤部分（−Ｄ）を遊離するのに、腫瘍関連性プロテアーゼ、またはカテプシンＢ、Ｃ、Ｄなどのアポトーシス関連性酵素、またはプラスミンプロテアーゼを含めた１種または複数の酵素によって酵素的に開裂され得る。
【０２１７】
例示的なＷｗユニットは、式（ＶＩＩ）〜（ＩＸ）で表される。
【０２１８】
【化８３】
2008521920.tif 000048
式中、Ｒ２０およびＲ２１は、以下の通りである：
【０２１９】
【化８４】
2008521920.tif 000049
【０２２０】
【化８５】
2008521920.tif 000050
式中、Ｒ２０、Ｒ２１、およびＲ２２は、以下の通りである：
【０２２１】
【化８６】
2008521920.tif 000051
【０２２２】
【化８７】
2008521920.tif 000052
式中、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２、およびＲ２３は、以下の通りである：
【０２２３】
【化８７Ａ】
2008521920.tif 000053
アミノ酸ユニットの例としては、Ｒ２０がベンジル、Ｒ２１が−（ＣＨ２）４ＮＨ２；Ｒ２０がイソプロピル、Ｒ２１が−（ＣＨ２）４ＮＨ２；Ｒ２０がイソプロピル、Ｒ２１が−（ＣＨ２）３ＮＨＣＯＮＨ２である式（ＶＩＩ）のユニットが挙げられるが、それらだけに限らない。別のアミノ酸ユニットの例は、Ｒ２０がベンジル、Ｒ２１がベンジル、Ｒ２２が−（ＣＨ２）４ＮＨ２である式（ＶＩＩＩ）のユニットである。
−Ｗｗ−アミノ酸ユニットの例としては、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド、またはペンタペプチドが挙げられる。ジペプチドの例としては、バリン−シトルリン（ｖｃまたはｖａｌ−ｃｉｔ）、アラニン−フェニルアラニン（ａｆまたはａｌａ−ｐｈｅ）が挙げられる。トリペプチドの例としては、グリシン−バリン−シトルリンおよびグリシン−グリシン−グリシンが挙げられる。
【０２２４】
Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２、またはＲ２３が水素以外の場合、Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２、またはＲ２３が結合する炭素原子は、キラルである。
【０２２５】
Ｒ１９、Ｒ２０、Ｒ２１、Ｒ２２、またはＲ２３が結合する各炭素原子は、それぞれ独立に、（Ｓ）または（Ｒ）配置にあり、あるいはラセミ混合物である。したがって、アミノ酸ユニットは、エナンチオマー的に純粋でもラセミ体でもジアステレオマーでもよい。
【０２２６】
スペーサーユニット
スペーサーユニット（−ＳＰ−）は、存在する場合、（ｉ）アミノ酸ユニットが存在する場合、アミノ酸ユニットを薬剤ユニットに結合し、（ｉｉ）アミノ酸ユニットが存在しない場合、ストレッチャーユニットを薬剤部分に結合し、または（ｉｉｉ）アミノ酸ユニットとストレッチャーユニットが共に存在しない場合、薬剤部分を抗体ユニットに結合する。スペーサーユニットには、２種の一般的な型、すなわち自壊的および非自壊的なものがある。非自壊的スペーサーユニットは、スペーサーユニット残余の一部またはすべてが、薬剤−リンカー−抗体結合体または薬剤−リンカー化合物からのアミノ酸ユニットを特に酵素で開裂した後に薬剤部分に結合したものである。非自壊的スペーサーユニットの例としては、（グリシン−グリシン）スペーサーユニットおよびグリシンスペーサーユニットが挙げられるが、それらだけに限らない。グリシン−グリシンスペーサーユニットまたはグリシンスペーサーユニットを含む例示的な化合物が、腫瘍細胞関連性プロテアーゼ、癌細胞関連性プロテアーゼ、またはリンパ球関連性プロテアーゼによって酵素開裂を受けた場合、グリシン−グリシン薬剤部分またはグリシン薬剤部分は、Ａｂ−Ａａ−Ｗｗ−から切断される。一実施形態では、他と関係のない加水分解反応が標的細胞内で起こり、その結果、グリシン−薬剤部分の結合が切断され、薬剤が遊離される。
【０２２７】
別の実施形態では、−ＳＰｙ−は、フェニレン部がＱｍ（式中、Ｑは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−ハロゲン、−ニトロ、または−シアノであり、ｍは、０〜４の整数である）で置換されたパラ−アミノベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢ）ユニットである。
【０２２８】
非自壊的スペーサーユニット（−ＳＰ−）の例示的な実施形態は、−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−、−Ｇｌｙ−、−Ａｌａ−Ｐｈｅ−、−Ｖａｌ−Ｃｉｔ−である。
【０２２９】
一実施形態では、薬剤部分−リンカーまたはＡＤＣ、あるいは薬学的に許容されるその塩もしくは溶媒和物は、スペーサーユニットが存在しない（ｙ＝０）場合にもたらされる。
【０２３０】
あるいは、自壊的スペーサーユニットを含むＡＤＣは、−Ｄを放出することができる。一実施形態では、−ＳＰ−は、ＰＡＢ基のアミノ窒素原子を介して−Ｗｗ−に結合され、カルボネート、カルバメート、またはエーテル基を介して−Ｄに直接結合されるＰＡＢ基であり、ここでは、ＡＤＣは、以下の例示的な構造を有し、
【０２３１】
【化８８】
2008521920.tif 000054
式中、Ｑは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−ハロゲン、−ニトロ、または−シアノであり；ｍは、０〜４の整数であり；ｐは、１〜４の範囲である。
【０２３２】
自壊的スペーサーの他の例としては、２−アミノイミダゾール−５−メタノール誘導体  （Ｈａｙら、（１９９９年）Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．、第９巻、２２３７頁）やオルトまたはパラ−アミノベンジルアセタールなど、ＰＡＢ基に電子的に類似した芳香族系化合物が挙げられるが、それらだけに限らない。また、自壊的スペーサーには、ＰＡＢ基が複素環基で置換された場合も含まれる（国際公開ＷＯ２００５／０８２０２３号）。置換および非置換４−アミノ酪酸アミド（Ｒｏｄｒｉｇｕｅｓら、（１９９５年）Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、第２巻、２２３頁）、適切な置換ビシクロ［２．２．１］およびビシクロ［２．２．２］環系（Ｓｔｏｒｍら、（１９７２年）Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、第９４巻、５８１５頁）、２−アミノフェニルプロピオン酸アミド（Ａｍｓｂｅｒｒｙら、（１９９０年）Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、第５５巻、５８６７頁）など、アミド結合の加水分解時に環化を受けるスペーサーを使用することができる。グリシンの位置で置換されるアミン含有薬剤の脱離（Ｋｉｎｇｓｂｕｒｙら、（１９８４年）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、第２７巻、１４４７頁）はまた、ＡＤＣに有用な自壊的スペーサーの例である。
【０２３３】
一実施形態では、スペーサーユニットは、多数の薬剤を組み込みかつ放出させるのに使用することができる枝分かれ状ビス（ヒドロキシメチル）スチレン（ＢＨＭＳ）であり、次式の構造を有する。
【０２３４】
【化８９】
2008521920.tif 000055
式中、Ｑは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−ハロゲン、−ニトロ、または−シアノであり；ｍは、０〜４の整数であり；ｎは、０または１であり；ｐは、１〜４の範囲である。
【０２３５】
別の実施形態では、−Ｄ部分は、同じである。
【０２３６】
さらに別の実施形態では、−Ｄ部分は、異なる。
【０２３７】
一態様では、スペーサーユニット（−ＳＰｙ−）は、次式の式（Ｘ）〜（ＸＩＩ）で表される。
【０２３８】
【化９０】
2008521920.tif 000056
式中、Ｑは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−ハロゲン、−ニトロ、または−シアノであり；ｍは、０〜４の整数である。
【０２３９】
【化９１】
2008521920.tif 000057
式Ｉの抗体薬剤結合体化合物の実施形態としては、次式のＸＩＩＩａ（ｖａｌ−ｃｉｔ）、ＸＩＩＩｂ（ＭＣ−ｖａｌ−ｃｉｔ）、ＸＩＩＩｃ（ＭＣ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢ）が挙げられる。
【０２４０】
【化９２】
2008521920.tif 000058
【０２４１】
【化９３】
2008521920.tif 000059
式Ｉａの抗体薬剤結合体化合物の他の例示的な実施形態としては、次式のＸＩＶａ〜ｈが挙げられる。
【０２４２】
【化９４】
2008521920.tif 000060
【０２４３】
【化９５】
2008521920.tif 000061
式中、Ｘは、次式の通りであり、
【０２４４】
【化９６】
2008521920.tif 000062
Ｚは、次式の通りであり、
【０２４５】
【化９７】
2008521920.tif 000063
Ｒは、それぞれ独立に、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルであり；ｎは、１〜１２である。
【０２４６】
ビス−１，８−ナフタルイミド−リンカー試薬
ビス−１，８−ナフタルイミド薬剤部分および反応性リンカーユニットを含む中間体あるいは試薬は、（ビス−１，８−ナフタルイミド）薬剤部分とリンカーユニットのいずれの組合せも含むことができる。ビス−１，８−ナフタルイミド−リンカー試薬は、試薬を抗体に共有結合、すなわち複合させて本発明の抗体薬剤結合体（ＡＤＣ）が調製できるように抗体と反応する官能性を有する。例示的な実施形態としては、以下のビス−１，８−ナフタルイミド−リンカー試薬が挙げられる。
【０２４７】
【化９８】
2008521920.tif 000064
式中、ＭＣは、マレイミド−カプロイルであり、ｖｃは、バリン−シトルリンアミノ酸サブユニットであり、ＰＡＢは、パラ−アミノベンジルオキシカルボニルであり、Ｅは、ビス−１，８−ナフタルイミド薬剤部分ＩＩａ（但し、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４は、Ｈであり、Ｒｂは、Ｈであり、ｍは、３であり、ｎは、２である）である。
【０２４８】
【化９９】
2008521920.tif 000065
式中、ａｆは、アラニン−フェニルアラニンアミノ酸サブユニットである。
【０２４９】
別の例示的なビス−１，８−ナフタルイミド薬剤−リンカー試薬は、ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）１１１ａである。
【０２５０】
【化１００】
2008521920.tif 000066
。
【０２５１】
抗体
抗体ユニット（Ａｂ−）には、その範囲内に、所与の標的細胞集団に関連する受容体、抗体、またはその他の受容部分と結合または反応的会合または結合体化するどんな抗体（Ａｂ）ユニットも包含される。抗体は、治療的または生物学的に改変されることが求められる細胞集団の一部と結合、複合、または反応するどんなタンパク質またはタンパク質様分子でもよい。一態様では、抗体ユニットは、抗体ユニットが反応する特定の標的細胞集団に薬剤ユニットを送達する働きをする。こうした抗体としては、例えば、完全長抗体、抗体フラグメントなど、高分子量のタンパク質が挙げられるが、それだけに限らない。
【０２５２】
抗体ユニットは、リンカー、ストレッチャーユニット、アミノ酸ユニット、スペーサーユニット、または薬剤部分に直接結合を形成することができる。抗体ユニットは、抗体のヘテロ原子を介してリンカーユニットに結合を形成することができる。抗体の結合性ヘテロ原子は、システインチオール、リシンアミン、アスパラギン酸またはグルタミン酸のカルボキシル；セリン、スレオニン、またはチロシンのヒドロキシル、アルギニンなど、任意のアミノ酸側鎖上の反応性求核基とすることができる。抗体ユニット上に存在することができるヘテロ原子としては、硫黄（一実施形態では、システインチオールなど抗体のスルフヒドリル基由来）、酸素（一実施形態では、抗体のカルボニル、カルボキシル、またはヒドロキシル基由来）、および窒素（一実施形態では、抗体の第一級または第二級アミノ基由来）が挙げられる。これらのヘテロ原子は、抗体の天然状態、例えば天然由来抗体での抗体に存在してもよく、あるいは化学修飾によって抗体に導入されてもよい。
【０２５３】
別の実施形態では、抗体は、１個または複数のスルフヒドリル基を導入するのに化学的に修飾することができる１個または複数のリシン残基を有する。次いで、抗体ユニットは、スルフヒドリル基の硫黄原子を介してリンカー試薬または薬剤リンカー部分に結合することができる。リシンの修飾に使用することができる試薬としては、Ｎ−スクシンイミジルＳ−アセチルチオアセタート（ＳＡＴＡ）および２−イミノチオラン塩酸塩（Ｔｒａｕｔ試薬）が挙げられるが、それらだけに限らない。
【０２５４】
別の実施形態では、抗体は、１個または複数のスルフヒドリル基を有するのに化学的に修飾することができる１個または複数の炭水化物基を有する。抗体ユニットは、スルフヒドリル基の硫黄原子を介して、ストレッチャーユニットなどのリンカー試薬または薬剤リンカー部分に結合する。
【０２５５】
さらに別の実施形態では、抗体は、リンカー試薬または薬剤リンカー部分との複合に適したアルデヒド（−ＣＨＯ）基を生じるのに酸化することができる１個または複数の炭水化物基を有する（例えば、Ｌａｇｕｚｚａら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、１９８９年、第３２（３）巻、５４８〜５５頁を参照）。適切な酸化剤としては、過ヨウ素酸試薬が挙げられる。対応するアルデヒドは、ストレッチャー上の反応部位と結合を形成することができる。その反応は、シッフ塩基中間体を通って進行し、続いて還元されて安定なアミン結合を生じる。抗体上のカルボニル基と反応することができるストレッチャー上の反応部位としては、ヒドラジンおよびヒドロキシルアミンが挙げられるが、それらだけに限らない。薬剤ユニットを結合または会合するためのタンパク質修飾に関する他のプロトコルは、参照により本明細書に組み込むＣｏｌｉｇａｎら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２巻、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ（２００２年）に記載されている。
【０２５６】
さらに別の実施形態では、抗体のチロシン残基は、リンカー試薬または薬剤リンカー部分とのジアゾ結合を形成させるのに、求電子芳香族置換でジアゾ化することができる。
【０２５７】
癌の診断および治療のための有効な細胞標的を発見する試みでは、研究者らは、１個または複数の正常な非癌細胞に比べて、１個または複数の特定の癌細胞タイプの表面上に特異的に発現する膜貫通型または腫瘍関連性ポリペプチドを同定しようと試みた。しばしば、こうした腫瘍関連性ポリペプチドは、非癌細胞の表面上に比べて癌細胞の表面上でより多く発現される。こうした腫瘍関連性細胞表面抗原ポリペプチドの同定のおかげで、抗体ベースの治療によって特異的に標的癌細胞を破壊することができるようになった。
【０２５８】
式Ｉの抗体薬剤結合体（ＡＤＣ）のＡｂを構成し、癌治療に有用な可能性がある抗体としては、腫瘍関連性抗原（ＴＡＡ）に対する抗体が挙げられるが、それだけに限らない。こうした腫瘍関連性抗原は、当技術分野で周知であり、当技術分野でよく知られる方法および情報を使用して、抗体を生成する際の使用のために調製することができる。ＴＡＡの例としては、以下に列挙する（１）〜（３５）があげられるが、ＴＡＡ（１）〜（３６）に限定されるわけではない。便宜上、これらの抗原に関係する情報を、それらすべては当技術分野で周知であるが、以下に列挙し、名称、代替名、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号、および主要な参照文献を挙げておく。抗体の標的となる腫瘍関連性抗原としては、引用文献で確認された配列に対して配列同一性が少なくとも約７０％、８０％、８５％、９０％、または９５％であり、引用文献に見られる配列を有するＴＡＡとほぼ同じ生物学的特性または特徴を示すすべてのアミノ酸配列変異体およびアイソフォームが挙げられる。例えば、変異体配列を有するＴＡＡは、一般に、リストの対応する配列を有するＴＡＡに特異的に結合する抗体に特異的に結合することができる。特に本明細書に列挙する配列および開示情報を、参照により明らかに組み込む。
【０２５９】
腫瘍関連性抗原（１）〜（３６）：
（１）ＢＭＰＲＩＢ（骨形成タンパク質受容体ＩＢ型（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００１２０３））
Ｐ．ｔｅｎ  Ｄｉｊｋｅら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２６４（５１５５）巻、１０１〜１０４頁（１９９４年）、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、第１４（１１）巻、１３７７〜１３８２頁（１９９７年）；国際公開ＷＯ２００４０６３３６２号（請求項２）；国際公開ＷＯ２００３０４２６６１号（請求項１２）；米国特許出願公開第２００３１３４７９０−Ａ１号（３８〜３９頁）；国際公開ＷＯ２００２１０２２３５号（請求項１３、２９６頁）；国際公開ＷＯ２００３０５５４４３号（９１〜９２頁）；国際公開ＷＯ２００２９９１２２号（実施例２、５２８〜５３０頁）；国際公開ＷＯ２００３０２９４２１号（請求項６）；国際公開ＷＯ２００３０２４３９２号（請求項２、図１１２）；国際公開ＷＯ２００２９８３５８号（請求項１、１８３頁）；国際公開ＷＯ２００２５４９４０号（１００〜１０１頁）；国際公開ＷＯ２００２５９３７７号（３４９〜３５０頁）；国際公開ＷＯ２００２３０２６８号（請求項２７、３７６頁）；国際公開ＷＯ２００１４８２０４号（実施例、図４）
ＮＰ＿００１１９４骨形成タンパク質受容体ＩＢ型／ｐｉｄ＝ＮＰ＿００１１９４．１
相互参照：ＭＩＭ：６０３２４８；ＮＰ＿００１１９４．１；ＮＭ＿００１２０３＿１
（２）Ｅ１６（ＬＡＴ１、ＳＬＣ７Ａ５、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００３４８６）
Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．、第２５５（２）巻、２８３〜２８８頁（１９９９年）、Ｎａｔｕｒｅ、第３９５（６６９９）巻、２８８〜２９１頁（１９９８年）、Ｈ．Ｗ．Ｇａｕｇｉｔｓｃｈら、（１９９２年）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２６７（１６）巻、１１２６７〜１１２７３頁）；国際公開ＷＯ２００４０４８９３８号（実施例２）；国際公開ＷＯ２００４０３２８４２号（実施例ＩＶ）；国際公開ＷＯ２００３０４２６６１号（請求項１２）；国際公開ＷＯ２００３０１６４７５号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００２７８５２４号（実施例２）；国際公開ＷＯ２００２９９０７４号（請求項１９、１２７〜１２９頁）；国際公開ＷＯ２００２８６４４３号（請求項２７、２２２、３９３頁）；国際公開ＷＯ２００３００３９０６号（請求項１０、２９３頁）；国際公開ＷＯ２００２６４７９８号（請求項３３、９３〜９５頁）；国際公開ＷＯ２０００１４２２８号（請求項５、１３３〜１３６頁）；米国特許出願公開第２００３２２４４５４号（図３）；国際公開ＷＯ２００３０２５１３８号（請求項１２、１５０頁）；
ＮＰ＿００３４７７溶質キャリアファミリー７（カチオン性アミノ酸輸送体、ｙ＋系）、メンバー５／ｐｉｄ＝ＮＰ＿００３４７７．３−ホモサピエンス
相互参照：ＭＩＭ：６００１８２；ＮＰ＿００３４７７．３；ＮＭ＿０１５９２３；ＮＭ＿００３４８６＿１
（３）ＳＴＥＡＰ１（前立腺の６回膜貫通型上皮抗原、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０１２４４９）
Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、第６１（１５）巻、５８５７〜５８６０頁（２００１年）、Ｒ．Ｓ．Ｈｕｂｅｒｔら、（１９９９年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第９６（２５）巻、１４５２３〜１４５２８頁）；国際公開ＷＯ２００４０６５５７７号（請求項６）；国際公開ＷＯ２００４０２７０４９号（図１Ｌ）；欧州特許第１３９４２７４号（実施例１１）；国際公開ＷＯ２００４０１６２２５号（請求項２）；国際公開ＷＯ２００３０４２６６１号（請求項１２）；米国特許出願公開第２００３１５７０８９号（実施例５）；米国特許出願公開第２００３１８５８３０号（実施例５）；米国特許出願公開第２００３０６４３９７号（図２）；国際公開ＷＯ２００２８９７４７号（実施例５、６１８〜６１９頁）；国際公開ＷＯ２００３０２２９９５号（実施例９；図１３Ａ、実施例５３；１７３頁、実施例２；図２Ａ）；
ＮＰ＿０３６５８１  前立腺の６回膜貫通型上皮抗原
相互参照：ＭＩＭ：６０４４１５；ＮＰ＿０３６５８１．１；ＮＭ＿０１２４４９＿１
（４）０７７２Ｐ（ＣＡ１２５、ＭＵＣ１６、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ３６１４８６）
Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２７６（２９）巻、２７３７１〜２７３７５頁（２００１年）；国際公開ＷＯ２００４０４５５５３号（請求項１４）；国際公開ＷＯ２００２９２８３６号（請求項６、図１２）；国際公開ＷＯ２００２８３８６６号（請求項１５、１１６〜１２１頁）；米国特許出願公開第２００３１２４１４０号（実施例１６）；米国特許出願公開第２００３０９１５８０号（請求項６）；国際公開ＷＯ２００２０６３１７号（請求項６、４００〜４０８頁）；
相互参照：ＧＩ：３４５０１４６７；ＡＡＫ７４１２０．３；ＡＦ３６１４８６＿１
（５）ＭＰＦ（ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、巨核球促進因子、メソテリン、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００５８２３）
Ｎ．Ｙａｍａｇｕｃｈｉら、Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２６９（２）巻、８０５〜８０８頁（１９９４年）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第９６（２０）巻、１１５３１〜１１５３６頁（１９９９年）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第９３（１）巻、１３６〜１４０頁（１９９６年）、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２７０（３７）巻、２１９８４〜２１９９０頁（１９９５年）；国際公開ＷＯ２００３１０１２８３号（請求項１４）；国際公開ＷＯ２００２１０２２３５号（請求項１３、２８７〜２８８頁）；国際公開ＷＯ２００２１０１０７５号（請求項４、３０８−３０９頁）；国際公開ＷＯ２００２７１９２８号（３２０〜３２１頁）；国際公開ＷＯ９４１０３１２号（５２〜５７頁）；
相互参照：ＭＩＭ：６０１０５１；ＮＰ＿００５８１４．２；ＮＭ＿００５８２３＿１
（６）Ｎａｐｉ３ｂ（ＮＡＰＩ−３Ｂ、ＮＰＴＩＩｂ、ＳＬＣ３４Ａ２、溶質キャリアファミリー３４（リン酸ナトリウム）、メンバー２、ＩＩ型ナトリウム依存性リン酸輸送体３ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００６４２４）
Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２７７（２２）巻、１９６６５〜１９６７２頁（２００２年）、Ｇｅｎｏｍｉｃｓ、第６２（２）巻、２８１〜２８４頁（１９９９年）、Ｊ．Ａ．Ｆｅｉｌｄら、（１９９９年）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．、第２５８（３）巻、５７８〜５８２頁；国際公開ＷＯ２００４０２２７７８号（請求項２）；欧州特許第１３９４２７４号（実施例１１）；国際公開ＷＯ２００２１０２２３５号（請求項１３、３２６頁）；欧州特許第８７５５６９号（請求項１、１７〜１９頁）；国際公開ＷＯ２００１５７１８８号（請求項２０、３２９頁）；国際公開ＷＯ２００４０３２８４２号（実施例ＩＶ）；国際公開ＷＯ２００１７５１７７号（請求項２４、１３９〜１４０頁）；
相互参照：ＭＩＭ：６０４２１７；ＮＰ＿００６４１５．１；ＮＭ＿００６４２４＿１
（７）Ｓｅｍａ５ｂ  （ＦＬＪ１０３７２、ＫＩＡＡ１４４５、Ｍｍ．４２０１５、ＳＥＭＡ５Ｂ、ＳＥＭＡＧ、セマフォリン５ｂ  Ｈｌｏｇ、ｓｅｍａドメイン、トロンボスポンジン７反復（Ｉ型およびＩ型様）、膜貫通ドメイン（ＴＭ）、および短い細胞質ドメイン（セマフォリン）５Ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＢ０４０８７８）
Ｔ．Ｎａｇａｓｅら、（２０００年）ＤＮＡ  Ｒｅｓ．、第７（２）巻、１４３〜１５０頁；国際公開ＷＯ２００４０００９９７号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００３００３９８４号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００２０６３３９号（請求項１、５０頁）；国際公開ＷＯ２００１８８１３３号（請求項１、４１〜４３頁、４８〜５８頁）；国際公開ＷＯ２００３０５４１５２号（請求項２０）；国際公開ＷＯ２００３１０１４００号（請求項１１）；
受託：Ｑ９Ｐ２８３；ＥＭＢＬ；ＡＢ０４０８７８；ＢＡＡ９５９６９．１．Ｇｅｎｅｗ；ＨＧＮＣ：１０７３７；
（８）ＰＳＣＡ  ｈｌｇ（２７０００５０Ｃ１２Ｒｉｋ、Ｃ５３０００８Ｏ１６Ｒｉｋ、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２、ＲＩＫＥＮ  ｃＤＮＡ  ２７０００５０Ｃ１２遺伝子、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ３５８６２８）；
米国特許出願公開第２００３１２９１９２号（請求項２）；米国特許出願公開第２００４０４４１８０号（請求項１２）；米国特許出願公開第２００４０４４１７９号（請求項１１）；米国特許出願公開第２００３０９６９６１号（請求項１１）；米国特許出願公開第２００３２３２０５６号（実施例５）；国際公開ＷＯ２００３１０５７５８号（請求項１２）；米国特許出願公開第２００３２０６９１８号（実施例５）；欧州特許第１３４７０４６号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００３０２５１４８号（請求項２０）；
相互参照：ＧＩ：３７１８２３７８；ＡＡＱ８８９９１．１；ＡＹ３５８６２８＿１
（９）ＥＴＢＲ（エンドセリンＢ型受容体、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ２７５４６３）；
Ｍ．Ｎａｋａｍｕｔａら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．、第１７７巻、３４〜３９頁、１９９１年；Ｙ．Ｏｇａｗａら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．、第１７８巻、２４８〜２５５頁、１９９１年；Ｈ．Ａｒａｉら、Ｊｐｎ．Ｃｉｒｃ．Ｊ．、第５６巻、１３０３〜１３０７頁、１９９２年；Ｈ．Ａｒａｉら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２６８巻、３４６３〜３４７０頁、１９９３年；Ａ．Ｓａｋａｍｏｔｏ、Ｍ．Ｙａｎａｇｉｓａｗａら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．、第１７８巻、６５６〜６６３頁、１９９１年；Ｎ．Ａ．Ｅｌｓｈｏｕｒｂａｇｙら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２６８巻、３８７３〜３８７９頁、１９９３年；Ｂ．Ｈａｅｎｄｌｅｒら、Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、第２０巻、ｓ１〜Ｓ４、１９９２年；Ｍ．Ｔｓｕｔｓｕｍｉら、Ｇｅｎｅ、第２２８巻、４３〜４９頁、１９９９年；Ｒ．Ｌ．Ｓｔｒａｕｓｂｅｒｇら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第９９巻、１６８９９〜１６９０３、２００２年；Ｃ．Ｂｏｕｒｇｅｏｉｓら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．、第８２巻、３１１６〜３１２３頁、１９９７年；Ｙ．Ｏｋａｍｏｔｏら、Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２７２巻、２１５８９〜２１５９６頁、１９９７年；Ｊ．Ｂ．Ｖｅｒｈｅｉｊら、Ａｍ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｇｅｎｅｔ．、第１０８巻、２２３〜２２５頁、２００２年；Ｒ．Ｍ．Ｗ．Ｈｏｆｓｔｒａら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．、第５巻、１８０〜１８５頁、１９９７年；Ｅ．Ｇ．Ｐｕｆｆｅｎｂｅｒｇｅｒら、Ｃｅｌｌ、第７９巻、１２５７〜１２６６、１９９４年；Ｔ．Ａｔｔｉｅら、Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．、第４巻、２４０７〜２４０９頁、１９９５年；Ａ．Ａｕｒｉｃｃｈｉｏら、Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．、第５巻、３５１〜３５４頁、１９９６年；Ｊ．Ａｍｉｅｌら、Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．、第５巻、３５５〜３５７頁、１９９６年；Ｒ．Ｍ．Ｗ．Ｈｏｆｓｔｒａら、Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．、第１２巻、４４５〜４４７頁、１９９６年；Ｐ．Ｊ．Ｓｖｅｎｓｓｏｎら、Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．、第１０３巻、１４５〜１４８頁、１９９８年；Ｓ．Ｆｕｃｈｓら、Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．、第７巻、１１５〜１２４頁、２００１年；Ｖ．Ｐｉｎｇａｕｌｔら、（２００２年）Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．、第１１１巻、１９８〜２０６頁；国際公開ＷＯ２００４０４５５１６号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００４０４８９３８号（実施例２）；国際公開ＷＯ２００４０４００００号（請求項１５１）；国際公開ＷＯ２００３０８７７６８号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００３０１６４７５号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００３０１６４７５号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００２６１０８７号（図１）；国際公開ＷＯ２００３０１６４９４号（図６）；国際公開ＷＯ２００３０２５１３８号（請求項１２、１４４頁）；国際公開ＷＯ２００１９８３５１号（請求項１、１２４〜１２５頁）；欧州特許第５２２８６８号（請求項８、図２）；国際公開ＷＯ２００１７７１７２号（請求項１、２９７〜２９９頁）；米国特許出願公開第２００３１０９６７６号；米国特許第６５１８４０４号（図３）；米国特許第５７７３２２３号（請求項１ａ、第３１〜３４欄）；国際公開ＷＯ２００４００１００４号
（１０）ＭＳＧ７８３（ＲＮＦ１２４、仮想タンパク質ＦＬＪ２０３１５、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０１７７６３）；
国際公開ＷＯ２００３１０４２７５号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００４０４６３４２号（実施例２）；国際公開ＷＯ２００３０４２６６１号（請求項１２）；国際公開ＷＯ２００３０８３０７４号（請求項１４、６１頁）；国際公開ＷＯ２００３０１８６２１号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００３０２４３９２号（請求項２、図９３）；国際公開ＷＯ２００１６６６８９号（実施例６）；
相互参照：ＬｏｃｕｓＩＤ：５４８９４；ＮＰ＿０６０２３３．２；ＮＭ＿０１７７６３＿１
（１１）ＳＴＥＡＰ２（ＨＧＮＣ＿８６３９、ＩＰＣＡ−１、ＰＣＡＮＡＰ１、ＳＴＡＭＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺癌関連性遺伝子１、前立腺癌関連性タンパク質１、前立腺の６回膜貫通型上皮抗原２、６回膜貫通型前立腺タンパク質、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ４５５１３８）
Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓｔ．、第８２（１１）巻、１５７３〜１５８２頁（２００２年）；国際公開ＷＯ２００３０８７３０６号；米国特許出願公開第２００３０６４３９７号（請求項１、図１）；国際公開ＷＯ２００２７２５９６号（請求項１３、５４〜５５頁）；国際公開ＷＯ２００１７２９６２号（請求項１、図４Ｂ）；国際公開ＷＯ２００３１０４２７０号（請求項１１）；国際公開ＷＯ２００３１０４２７０号（請求項１６）；米国特許出願公開第２００４００５５９８号（請求項２２）；国際公開ＷＯ２００３０４２６６１号（請求項１２）；米国特許出願公開第２００３０６０６１２号（請求項１２、図１０）；国際公開ＷＯ２００２２６８２２号（請求項２３、図２）；国際公開ＷＯ２００２１６４２９号（請求項１２、図１０）；
相互参照：ＧＩ：２２６５５４８８；ＡＡＮ０４０８０．１；ＡＦ４５５１３８＿１
（１２）ＴｒｐＭ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容器電位カチオンチャネル、サブファミリーＭ、メンバー４、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０１７６３６）
Ｘ．Ｚ．Ｘｕら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第９８（１９）巻、１０６９２〜１０６９７頁（２００１年）、Ｃｅｌｌ、第１０９（３）巻、３９７〜４０７頁（２００２年）、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２７８（３３）巻、３０８１３〜３０８２０頁（２００３年）；  米国特許出願公開第２００３１４３５５７号（請求項４）；国際公開ＷＯ２０００４０６１４号（請求項１４、１００〜１０３頁）；国際公開ＷＯ２００２１０３８２号（請求項１、図９Ａ）；国際公開ＷＯ２００３０４２６６１号（請求項１２）；国際公開ＷＯ２００２３０２６８号（請求項２７、３９１頁）；米国特許出願公開第２００３２１９８０６号（請求項４）；国際公開ＷＯ２００１６２７９４号（請求項１４、図１Ａ〜Ｄ）；
相互参照：ＭＩＭ：６０６９３６；ＮＰ＿０６０１０６．２；ＮＭ＿０１７６３６＿１
（１３）ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲ１、ＣＲＧＦ、ＣＲＩＰＴＯ、ＴＤＧＦ１、奇形癌誘導性増殖因子、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００３２０３またはＮＭ＿００３２１２）
Ａ．Ｃｉｃｃｏｄｉｃｏｌａら、ＥＭＢＯ  Ｊ．、第８（７）巻、１９８７〜１９９１頁（１９８９年）、Ａｍ．  Ｊ．  Ｈｕｍ．  Ｇｅｎｅｔ．、第４９（３）巻、５５５〜５６５頁（１９９１年）；米国特許出願公開第２００３２２４４１１号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００３０８３０４１号（実施例１）；国際公開ＷＯ２００３０３４９８４号（請求項１２）；国際公開ＷＯ２００２８８１７０号（請求項２、５２〜５３頁）；国際公開ＷＯ２００３０２４３９２号（請求項２、図５８）；国際公開ＷＯ２００２１６４１３号（請求項１、９４〜９５頁と１０５頁）；国際公開ＷＯ２００２２２８０８号（請求項２、図１）；米国特許第５８５４３９９号（実施例２、第１７〜１８欄）；米国特許第５７９２６１６号（図２）；
相互参照：ＭＩＭ：１８７３９５；ＮＰ＿００３２０３．１；ＮＭ＿００３２１．２＿１
（１４）ＣＤ２１（ＣＲ２（補体受容体２）またはＣ３ＤＲ（Ｃ３ｄ／エプスタインバーウイルス受容体）またはＨｓ．７３７９２、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｍ２６００４）
Ｆｕｊｉｓａｋｕら、（１９８９年）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２６４（４）巻、２１１８〜２１２５頁）；Ｊ．Ｊ．Ｗｅｉｓら、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．、第１６７巻、１０４７〜１０６６頁、１９８８年；Ｍ．Ｍｏｏｒｅら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第８４巻、９１９４〜９１９８頁、１９８７年；Ｍ．Ｂａｒｅｌら、Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第３５巻、１０２５〜１０３１頁、１９９８年；Ｊ．Ｊ．Ｗｅｉｓら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第８３巻、５６３９〜５６４３頁、１９８６年；Ｓ．Ｋ．Ｓｉｎｈａら、（１９９３年）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第１５０巻、５３１１〜５３２０頁；国際公開ＷＯ２００４０４５５２０号（実施例４）；米国特許出願公開第２００４００５５３８号（実施例１）；国際公開ＷＯ２００３０６２４０１号（請求項９）；国際公開ＷＯ２００４０４５５２０号（実施例４）；国際公開ＷＯ９１０２５３６号（図９．１〜９．９）；国際公開ＷＯ２００４０２０５９５号（請求項１）；
受託：Ｐ２００２３；Ｑ１３８６６；Ｑ１４２１２；ＥＭＢＬ；Ｍ２６００４；ＡＡＡ３５７８６．１
（１５）ＣＤ７９ｂ（ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ７９β、ＩＧｂ（免疫グロブリン関連性β）、Ｂ２９、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０００６２６または１１０３８６７４）
Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国（２００３年）、第１００（７）巻、４１２６〜４１３１頁、Ｂｌｏｏｄ（２００２年）、第１００（９）巻、３０６８〜３０７６頁、Ｍｕｌｌｅｒら、（１９９２年）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第２２（６）巻、１６２１〜１６２５頁）；国際公開ＷＯ２００４０１６２２５号（請求項２、図１４０）；国際公開ＷＯ２００３０８７７６８号、米国特許出願公開第２００４１０１８７４号（請求項１、１０２頁）；国際公開ＷＯ２００３０６２４０１号（請求項９）；国際公開ＷＯ２００２７８５２４号（実施例２）；米国特許出願公開第２００２１５０５７３号（請求項５、１５頁）；米国特許第５６４４０３３；国際公開ＷＯ２００３０４８２０２号（請求項１、３０６および３０９頁）；国際公開ＷＯ９９／５５８６５８号、米国特許第６５３４４８２号（請求項１３、図１７Ａ／Ｂ）；国際公開ＷＯ２０００５５３５１号（請求項１１、１１４５〜１１４６頁）；
相互参照：ＭＩＭ：１４７２４５；ＮＰ＿０００６１７．１；ＮＭ＿０００６２６＿１
（１６）ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰ１Ａ（ＳＨ２ドメイン含有ホスファターゼアンカータンパク質１ａ）、ＳＰＡＰ１Ｂ、ＳＰＡＰ１Ｃ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿０３０７６４）
Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．、第１３（１０）巻、２２６５〜２２７０頁（２００３年）、Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ、第５４（２）巻、８７〜９５頁（２００２年）、Ｂｌｏｏｄ、第９９（８）巻、２６６２〜２６６９頁（２００２年）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第９８（１７）巻、９７７２〜９７７７頁（２００１年）、Ｍ．Ｊ．Ｘｕら、（２００１年）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．、第２８０（３）巻、７６８〜７７５頁；国際公開ＷＯ２００４０１６２２５号（請求項２）；国際公開ＷＯ２００３０７７８３６号；国際公開ＷＯ２００１３８４９０号（請求項５、図１８Ｄ−１〜１８Ｄ−２）；国際公開ＷＯ２００３０９７８０３号（請求項１２）；国際公開ＷＯ２００３０８９６２４号（請求項２５）；
相互参照：ＭＩＭ：６０６５０９；ＮＰ＿１１０３９１．２；ＮＭ＿０３０７６４＿１
（１７）ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｍ１１７３０）
Ｌ．Ｃｏｕｓｓｅｎｓら、Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９８５年）、第２３０（４７３０）巻、１１３２〜１１３９頁；Ｔ．Ｙａｍａｍｏｔｏら、Ｎａｔｕｒｅ、第３１９巻、２３０〜２３４頁、１９８６年；Ｋ．Ｓｅｍｂａら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第８２巻、６４９７〜６５０１頁、１９８５年；Ｊ．Ｍ．Ｓｗｉｅｒｃｚら、Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．、第１６５年、８６９〜８８０頁、２００４年；Ｊ．Ｊ．Ｋｕｈｎｓら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２７４巻、３６４２２〜３６４２７頁、１９９９年；Ｈ．−Ｓ．Ｃｈｏら、Ｎａｔｕｒｅ、第４２１巻、７５６〜７６０頁、２００３年；Ａ．Ｅｈｓａｎｉら、（１９９３年）Ｇｅｎｏｍｉｃｓ、第１５巻、４２６〜４２９頁；国際公開ＷＯ２００４０４８９３８号（実施例２）；国際公開ＷＯ２００４０２７０４９号（図１Ｉ）；国際公開ＷＯ２００４００９６２２号；国際公開ＷＯ２００３０８１２１０号；国際公開ＷＯ２００３０８９９０４号（請求項９）；国際公開ＷＯ２００３０１６４７５号（請求項１）；米国特許出願公開第２００３１１８５９２号；国際公開ＷＯ２００３００８５３７号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００３０５５４３９号（請求項２９、図１Ａ〜Ｂ）；国際公開ＷＯ２００３０２５２２８号（請求項３７、図５Ｃ）；国際公開ＷＯ２００２２２６３６号（実施例１３、９５〜１０７頁）；国際公開ＷＯ２００２１２３４１号（請求項６８、図７）；国際公開ＷＯ２００２１３８４７号（７１〜７４頁）；国際公開ＷＯ２００２１４５０３号（１１４〜１１７頁）；国際公開ＷＯ２００１５３４６３号（請求項２、４１〜４６頁）；国際公開ＷＯ２００１４１７８７号（１５頁）；国際公開ＷＯ２０００４４８９９号（請求項５２、図７）；国際公開ＷＯ２０００２０５７９号（請求項３、図２）；米国特許第５８６９４４５号（請求項３、第３１〜３８欄）；国際公開ＷＯ９６３０５１４号（請求項２、５６〜６１頁）；欧州特許第１４３９３９３号（請求項７）；国際公開ＷＯ２００４０４３３６１号（請求項７）；国際公開ＷＯ２００４０２２７０９号；国際公開ＷＯ２００１００２４４号（実施例３、図４）；
受託：Ｐ０４６２６；ＥＭＢＬ；Ｍ１１７６７；ＡＡＡ３５８０８．１。ＥＭＢＬ；Ｍ１１７６１；ＡＡＡ３５８０８．１
（１８）ＮＣＡ（ＣＥＡＣＡＭ６、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｍ１８７２８）；
Ｔ．Ｂａｒｎｅｔｔら、Ｇｅｎｏｍｉｃｓ、第３巻、５９〜６６、１９８８年；Ｙ．Ｔａｗａｒａｇｉら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．、第１５０巻、８９〜９６頁、１９８８年；Ｒ．Ｌ．Ｓｔｒａｕｓｂｅｒｇら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第９９巻：１６８９９〜１６９０３頁、２００２年；国際公開ＷＯ２００４０６３７０９号；欧州特許第１４３９３９３号（請求項７）；国際公開ＷＯ２００４０４４１７８号（実施例４）；国際公開ＷＯ２００４０３１２３８号；国際公開ＷＯ２００３０４２６６１号（請求項１２）；国際公開ＷＯ２００２７８５２４号（実施例２）；国際公開ＷＯ２００２８６４４３号（請求項２７、４２７頁）；国際公開ＷＯ２００２６０３１７号（請求項２）；
受託：Ｐ４０１９９；Ｑ１４９２０；ＥＭＢＬ；Ｍ２９５４１；ＡＡＡ５９９１５．１、ＥＭＢＬ；Ｍ１８７２８；
（１９）ＭＤＰ（ＤＰＥＰ１、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＢＣ０１７０２３）
Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第９９（２６）巻、１６８９９〜１６９０３頁（２００２年）；国際公開ＷＯ２００３０１６４７５号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００２６４７９８号（請求項３３、８５〜８７頁）；特開平０５−００３７９０号（図６〜８）；国際公開ＷＯ９９４６２８４号（図９）；
相互参照：ＭＩＭ：１７９７８０；ＡＡＨ１７０２３．１；ＢＣ０１７０２３＿１
（２０）ＩＬ２ＯＲａ（ＩＬ２ＯＲａ、ＺＣＹＴＯＲ７、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ１８４９７１）；
Ｈ．Ｆ．Ｃｌａｒｋら、Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．、第１３巻、２２６５〜２２７０頁、２００３年；Ａ．Ｊ．Ｍｕｎｇａｌｌら、Ｎａｔｕｒｅ、第４２５巻、８０５〜８１１頁、２００３年；Ｈ．Ｂｌｕｍｂｅｒｇら、Ｃｅｌｌ、第１０４巻、９〜１９頁、２００１年；Ｌ．Ｄｕｍｏｕｔｉｅｒら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第１６７巻、３５４５〜３５４９頁、２００１年；Ｊ．Ｐａｒｒｉｓｈ−Ｎｏｖａｋら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２７７巻、４７５１７〜４７５２３頁、２００２年；Ｓ．Ｐｌｅｔｎｅｖら、（２００３年）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第４２巻、１２６１７〜１２６２４頁；Ｆ．Ｓｈｅｉｋｈら、（２００４年）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第１７２巻、２００６〜２０１０頁；欧州特許第１３９４２７４号（実施例１１）；米国特許出願公開第２００４００５３２０号（実施例５）；国際公開ＷＯ２００３０２９２６２号（７４〜７５頁）；国際公開ＷＯ２００３００２７１７号（請求項２；  ６３頁）；国際公開ＷＯ２００２２２１５３号（４５〜４７頁）；米国特許出願公開第２００２０４２３６６号（２０〜２１頁）；国際公開ＷＯ２００１４６２６１号（５７〜５９頁）；国際公開ＷＯ２００１４６２３２号（６３〜６５頁）；国際公開ＷＯ９８３７１９３号（請求項１、５５〜５９頁）；
受託：Ｑ９ＵＨＦ４；Ｑ６ＵＷＡ９；Ｑ９６ＳＨ８；ＥＭＢＬ；ＡＦ１８４９７１；ＡＡＦ０１３２０．１
（２１）ブレビカン（ＢＣＡＮ、ＢＥＨＡＢ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ２２９０５３）
Ｓ．Ｃ．Ｇａｒｙら、Ｇｅｎｅ、第２５６巻、１３９〜１４７頁、２０００年；Ｈ．Ｆ．Ｃｌａｒｋら、Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．、第１３巻、２２６５〜２２７０頁、２００３年；Ｒ．Ｌ．Ｓｔｒａｕｓｂｅｒｇら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第９９巻、１６８９９〜１６９０３頁、２００２年；米国特許出願公開第２００３１８６３７２号（請求項１１）；米国特許出願公開第２００３１８６３７３号（請求項１１）；米国特許出願公開第２００３１１９１３１号（請求項１、図５２）；米国特許出願公開第２００３１１９１２２号（請求項１、図５２）；米国特許出願公開第２００３１１９１２６号（請求項１）；米国特許出願公開第２００３１１９１２１号（請求項１、図５２）；米国特許出願公開第２００３１１９１２９号（請求項１）；米国特許出願公開第２００３１１９１３０号（請求項１）；米国特許出願公開第２００３１１９１２８号（請求項１、図５２）；米国特許出願公開第２００３１１９１２５号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００３０１６４７５号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００２０２６３４号（請求項１）；
（２２）ＥｐｈＢ２Ｒ（ＤＲＴ、ＥＲＫ、Ｈｅｋ５、ＥＰＨＴ３、Ｔｙｒｏ５、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿００４４４２）
Ｊ．ＣｈａｎおよびＶ．Ｍ．Ｗａｔｔ、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、第６（６）号、１０５７〜１０６１頁、（１９９１年）、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、第１０（５）巻：８９７〜９０５頁（１９９５年）、Ａｎｎｕ、Ｒｅｖ、Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．、第２１巻、３０９〜３４５頁（１９９８年）、Ｉｎｔ、Ｒｅｖ、Ｃｙｔｏｌ．、第１９６巻、１７７〜２４４頁（２０００年）；国際公開ＷＯ２００３０４２６６１号（請求項１２）；国際公開ＷＯ２０００５３２１６号（請求項１、４１頁）；国際公開ＷＯ２００４０６５５７６号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００４０２０５８３号（請求項９）；国際公開ＷＯ２００３００４５２９号（１２８〜１３２頁）；国際公開ＷＯ２０００５３２１６号（請求項１、４２頁）；
相互参照：ＭＩＭ：６００９９７；ＮＰ＿００４４３３．２；ＮＭ＿００４４４２＿１
（２３）ＡＳＬＧ６５９（Ｂ７ｈ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＸ０９２３２８）米国特許出願公開第２００４０１０１８９９号（請求項２）；国際公開ＷＯ２００３１０４３９９号（請求項１１）；国際公開ＷＯ２００４０００２２１号（図３）；米国特許出願公開第２００３１６５５０４号（請求項１）；米国特許出願公開第２００３１２４１４０号（実施例２）；米国特許出願公開第２００３０６５１４３号（図６０）；国際公開ＷＯ２００２１０２２３５号（請求項１３、２９９頁）；米国特許出願公開第２００３０９１５８０号（実施例２）；国際公開ＷＯ２００２１０１８７号（請求項６、図１０）；国際公開ＷＯ２００１９４６４１号（請求項１２、図７ｂ）；国際公開ＷＯ２００２０２６２４号（請求項１３、図１Ａ〜１Ｂ）；米国特許出願公開第２００２０３４７４９号（請求項５４、４５〜４６頁）；国際公開ＷＯ２００２０６３１７号（実施例２、３２０〜３２１頁；請求項３４、３２１〜３２２頁）；国際公開ＷＯ２００２７１９２８号（４６８〜４６９頁）；国際公開ＷＯ２００２０２５８７号（実施例１、図１）；国際公開ＷＯ２００１４０２６９号（実施例３、１９０〜１９２頁）；国際公開ＷＯ２０００３６１０７号（実施例２、２０５〜２０７頁）；国際公開ＷＯ２００４０５３０７９号（請求項１２）；国際公開ＷＯ２００３００４９８９号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００２７１９２８号（２３３〜２３４頁、４５２〜４５３頁）；国際公開ＷＯ０１１６３１８号；
（２４）ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原前駆体、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＪ２９７４３６）
Ｒ．Ｅ．Ｒｅｉｔｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第９５巻、１７３５〜１７４０頁、１９９８年；Ｚ．Ｇｕら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、第１９巻、１２８８〜１２９６頁、２０００年；Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．（２０００年）、第２７５（３）巻、７８３〜７８８頁；国際公開ＷＯ２００４０２２７０９号；欧州特許第１３９４２７４号（実施例１１）；米国特許出願公開第２００４０１８５５３号（請求項１７）；国際公開ＷＯ２００３００８５３７号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００２８１６４６号（請求項１、１６４頁）；国際公開ＷＯ２００３００３９０６号（請求項１０、２８８頁）；国際公開ＷＯ２００１４０３０９号（実施例１、図１７）；米国特許出願公開第２００１０５５７５１号（実施例１、図１ｂ）；国際公開ＷＯ２０００３２７５２号（請求項１８、図１）；国際公開ＷＯ９８５１８０５号（請求項１７、９７頁）；国際公開ＷＯ９８５１８２４号（請求項１０、９４頁）；国際公開ＷＯ９８４０４０３号（請求項２、図１Ｂ）；
受託：Ｏ４３６５３；ＥＭＢＬ；ＡＦ０４３４９８；ＡＡＣ３９６０７．１
（２５）ＧＥＤＡ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＹ２６０７６３）；
ＡＡＰ１４９５４脂肪腫ＨＭＧＩＣ融合パートナー様タンパク質／ｐｉｄ＝ＡＡＰ１４９５４．１−ホモサピエンス
種：ホモサピエンス（ヒト）
国際公開ＷＯ２００３０５４１５２号（請求項２０）；国際公開ＷＯ２００３０００８４２号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００３０２３０１３号（実施例３、請求項２０）；米国特許出願公開第２００３１９４７０４号（請求項４５）；
相互参照：ＧＩ：３０１０２４４９；ＡＡＰ１４９５４．１；ＡＹ２６０７６３＿１
（２６）ＢＡＦＦ−Ｒ（Ｂ細胞活性化因子受容体、ＢＬｙＳ受容体３、ＢＲ３、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿４４３１７７．１）；
ＮＰ＿４４３１７７  ＢＡＦＦ受容体／ｐｉｄ＝ＮＰ＿４４３１７７．１−ホモサピエンス
Ｊ．Ｓ．Ｔｈｏｍｐｓｏｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２９３（５５３７）号、２１０８〜２１１１頁（２００１年）；国際公開ＷＯ２００４０５８３０９号；国際公開ＷＯ２００４０１１６１１号；国際公開ＷＯ２００３０４５４２２号（実施例、３２〜３３頁）；国際公開ＷＯ２００３０１４２９４号（請求項３５、図６Ｂ）；国際公開ＷＯ２００３０３５８４６号（請求項７０、６１５〜６１６頁）；国際公開ＷＯ２００２９４８５２号（第１３６〜１３７欄）；国際公開ＷＯ２００２３８７６６号（請求項３、１３３頁）；国際公開ＷＯ２００２２４９０９号（実施例３、図３）；
相互参照：ＭＩＭ：６０６２６９；ＮＰ＿４４３１７７．１；ＮＭ＿０５２９４５＿１
（２７）ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２−Ｂアイソフォーム、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ−００１７６２．１）；
Ｉ．ＳｔａｍｅｎｋｏｖｉｃおよびＢ．Ｓｅｅｄ、Ｎａｔｕｒｅ、第３４５（６２７０）巻、７４〜７７頁（１９９０年）；米国特許出願公開第２００３１５７１１３号；米国特許出願公開第２００３１１８５９２号；国際公開ＷＯ２００３０６２４０１号（請求項９）；国際公開ＷＯ２００３０７２０３６号（請求項１、図１）；国際公開ＷＯ２００２７８５２４号（実施例２）；
相互参照：ＭＩＭ：１０７２６６；ＮＰ＿００１７６２．１；ＮＭ＿００１７７１＿１
（２８）ＣＤ７９ａ（ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９α、免疫グロブリン関連性α、Ｉｇβ（ＣＤ７９Ｂ）と共有結合的に相互作用し、ＩｇＭ分子で表面上に結合体を形成するＢ細胞特異的タンパク質は、Ｂ細胞分化に関与するシグナルを伝達する、２２６ａａ、ｐＩ：４．８４、ＭＷ：２５０２８、ＴＭ：２［Ｐ］遺伝子染色体：１９ｑ１３．２、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１７７４．１０）
国際公開ＷＯ２００３０８８８０８号、米国特許出願公開第２００３０２２８３１９号；国際公開ＷＯ２００３０６２４０１号（請求項９）；米国特許出願公開第２００２１５０５７３号（請求項４、１３〜１４頁）；国際公開ＷＯ９９５８６５８号（請求項１３、図１６）；国際公開ＷＯ９２０７５７４号（図１）；米国特許出願公開第５６４４０３３号；Ｈａら、（１９９２年）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第１４８（５）巻、１５２６〜１５３１頁；Ｍｕｅｌｌｅｒら、（１９９２年）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、第２２巻、１６２１〜１６２５頁；Ｈａｓｈｉｍｏｔｏら、（１９９４年）Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ、第４０（４）巻、２８７〜２９５頁；Ｐｒｅｕｄ’ｈｏｍｍｅら、（１９９２年）Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第９０（１）巻、１４１〜１４６頁；Ｙｕら、（１９９２年）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第１４８（２）巻、６３３〜６３７頁；Ｓａｋａｇｕｃｈｉら、（１９８８年）ＥＭＢＯ  Ｊ．、第７（１１）巻、３４５７〜３４６４頁）；
（２９）ＣＸＣＲ５（バーキットリンパ腫受容体１、ＣＸＣＬ１３ケモカインによって活性化され、リンパ球遊走および体液防御において機能し、ＨＩＶ−２感染ならびにおそらくＡＩＤＳ、リンパ腫、骨髄腫、および白血病の発症に一定の役割を果たすＧタンパク質共役型受容体、３７２ａａ、ｐＩ：８．５４、ＭＷ：４１９５９、ＴＭ：７［Ｐ］遺伝子染色体：１１ｑ２３．３、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１７０７．１）
国際公開ＷＯ２００４０４００００号；国際公開ＷＯ２００４０１５４２６号；米国特許出願公開第２００３１０５２９２号（実施例２）；米国特許第６５５５３３９号（実施例２）；国際公開ＷＯ２００２６１０８７号（図１）；国際公開ＷＯ２００１５７１８８号（請求項２０、２６９頁）；国際公開ＷＯ２００１７２８３０号（１２〜１３頁）；国際公開ＷＯ２０００２２１２９号（実施例１、１５２〜１５３頁、実施例２、２５４〜２５６頁）；国際公開ＷＯ９９２８４６８号（請求項１、３８頁）；米国特許第５４４００２１号（実施例２、第４９〜５２欄）；
国際公開ＷＯ９４２８９３１号（５６〜５８頁）；国際公開ＷＯ９２１７４９７号（請求項７、図５）；Ｄｏｂｎｅｒら、（１９９２年）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第２２巻、２７９５〜２７９９頁；Ｂａｒｅｌｌａら、（１９９５年）Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｊ．、第３０９巻、７７３〜７７９頁
（３０）ＨＬＡ−ＤＯＢ（ペプチドを結合し、ＣＤ４＋Ｔリンパ球にそれらを提示するＭＨＣクラスＩＩ分子（Ｉａ抗原）のβサブユニット、２７３ａａ、ｐＩ：６．５６、ＭＷ：３０８２０、ＴＭ：１［Ｐ］遺伝子染色体：６ｐ２１．３、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００２１１１．１）
Ｔｏｎｎｅｌｌｅら、（１９８５年）ＥＭＢＯ  Ｊ．、第４（１１）巻、２８３９〜２８４７頁；Ｊｏｎｓｓｏｎら、（１９８９年）Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ、第２９（６）巻、４１１〜４１３頁；Ｂｅｃｋら、（１９９２年）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、第２２８巻、４３３〜４４１頁；Ｓｔｒａｕｓｂｅｒｇら、（２００２年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ、米国、第９９巻、１６８９９〜１６９０３頁；Ｓｅｒｖｅｎｉｕｓら、（１９８７年）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２６２巻、８７５９〜８７６６頁；Ｂｅｃｋら、（１９９６年）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、第２５５巻、１〜１３頁；Ｎａｒｕｓｅら、（２００２年）Ｔｉｓｓｕｅ  Ａｎｔｉｇｅｎｓ、第５９巻、５１２〜５１９頁；国際公開ＷＯ９９５８６５８号（請求項１３、図１５）；米国特許第６１５３４０８号（第３５〜３８欄）；米国特許第５９７６５５１号（第１６８〜１７０欄）；米国特許第６０１１１４６号（第１４５〜１４６欄）；Ｋａｓａｈａｒａら、（１９８９年）Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ、第３０（１）巻、６６〜６８頁；Ｌａｒｈａｍｍａｒら、（１９８５年）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２６０（２６）巻、１４１１１〜１４１１９頁
（３１）Ｐ２Ｘ５（プリン作動性受容体Ｐ２Ｘリガンド開口型イオンチャネル５、細胞外ＡＴＰが開口したイオンチャネルは、シナプス伝達および神経形成に関与している可能性があり、欠陥は、特発性不安定膀胱の病態の一因である、４２２ａａ、ｐＩ：７．６３、ＭＷ：４７２０６  ＴＭ：１［Ｐ］遺伝子染色体：１７ｐｌ３．３、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００２５５２．２）
Ｌｅら、（１９９７年）ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．、第４１８（１〜２）巻、１９５〜１９９頁；国際公開ＷＯ２００４０４７７４９号；国際公開ＷＯ２００３０７２０３５号（請求項１０）；Ｔｏｕｃｈｍａｎら、（２０００年）Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．、第１０巻、１６５〜１７３頁；国際公開ＷＯ２００２２２６６０号（請求項２０）；国際公開ＷＯ２００３０９３４４４号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００３０８７７６８号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００３０２９２７７号（８２頁）
（３２）ＣＤ７２（Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２、Ｌｙｂ−２、３５９ａａ、ｐＩ：８．６６、ＭＷ：４０２２５  ＴＭ：１［Ｐ］遺伝子染色体：９ｐ１３．３、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１７７３．１）
国際公開ＷＯ２００４０４２３４６号（請求項６５）；国際公開ＷＯ２００３０２６４９３号（５１〜５２、５７〜５８頁）；国際公開ＷＯ２０００７５６５５号（１０５〜１０６頁）；Ｖｏｎ  Ｈｏｅｇｅｎら、（１９９０年）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第１４４（１２）巻、４８７０〜４８７７頁；Ｓｔｒａｕｓｂｅｒｇら、（２００２年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ、米国、第９９巻、１６８９９〜１６９０３頁
（３３）ＬＹ６４（リンパ球抗原６４（ＲＰ１０５）、ロイシンリッチリピート（ＬＲＲ）ファミリーのＩ型膜タンパク質は、Ｂ細胞活性化およびアポトーシスを調節し、機能損失は、全身性エリテマトーデス患者の疾患活性の増大に関連する、６６１ａａ、ｐＩ：６．２０、ＭＷ：７４１４７  ＴＭ：１［Ｐ］遺伝子染色体：５ｑ１２、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００５５７３．１）
米国特許第２００２１９３５６７号；国際公開ＷＯ９７０７１９８号（請求項１１、３９〜４２頁）；Ｍｉｕｒａら、（１９９６年）Ｇｅｎｏｍｉｃｓ、第３８（３）巻、２９９〜３０４頁；Ｍｉｕｒａら、（１９９８年）Ｂｌｏｏｄ、第９２巻、２８１５〜２８２２頁；国際公開ＷＯ２００３０８３０４７号；国際公開ＷＯ９７４４４５２号（請求項８、５７〜６１頁）；国際公開ＷＯ２０００１２１３０号（２４〜２６頁）
（３４）ＦＣＲＨ１（Ｆｃ受容体様タンパク質１、Ｉｇ様Ｃ２型およびＩＴＡＭドメインを含む免疫グロブリンＦｃドメインの推定受容体は、Ｂリンパ球分化に一定の役割を果たす可能性がある、４２９ａａ、ｐＩ：５．２８、ＭＷ：４６９２５、ＴＭ：１［Ｐ］遺伝子染色体：１ｑ２１〜１ｑ２２、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿４４３１７０．１）
国際公開ＷＯ２００３０７７８３６号；国際公開ＷＯ２００１３８４９０号（請求項６、図１８Ｅ−１〜１８Ｅ−２）；Ｄａｖｉｓら、（２００１年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ、米国、第９８（１７）巻、９７７２〜９７７７頁；国際公開ＷＯ２００３０８９６２４号（請求項８）；欧州特許第１３４７０４６号（請求項１）；国際公開ＷＯ２００３０８９６２４号（請求項７）
（３５）ＩＲＴＡ２（免疫グロブリンスーパーファミリー受容体転座関連性２、Ｂ細胞発生およびリンパ腫発症で役割を果たす可能性がある推定免疫受容体；転座による遺伝子の調節解除がいくつかのＢ細胞悪性腫瘍を生じる、９７７ａａ、ｐＩ：６．８８、ＭＷ：１０６４６８、ＴＭ：１［Ｐ］遺伝子染色体：１ｑ２１、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿１１２５７１．１）
国際公開ＷＯ２００３０２４３９２号（請求項２、図９７）；Ｎａｋａｙａｍａら、（２０００年）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．、第２７７（１）巻、１２４〜１２７頁；国際公開ＷＯ２００３０７７８３６号；国際公開ＷＯ２００１３８４９０号（請求項３、図１８Ｂ−１〜１８Ｂ−２）
（３６）ＴＥＮＢ２（ＴＭＥＦＦ２、トモレグリン、ＴＰＥＦ、ＨＰＰ１、ＴＲ、増殖因子のＥＧＦ／ヘレグリンファミリーおよびフォリスタチンと関係する推定膜貫通型プロテオグリカン）；３７４ａａ、ＮＣＢＩ受託：ＡＡＤ５５７７６、ＡＡＦ９１３９７、ＡＡＧ４９４５１、ＮＣＢＩ  ＲｅｆＳｅｑ：ＮＰ＿０５７２７６；ＮＣＢＩ  Ｇｅｎｅ：２３６７１；ＯＭＩＭ：６０５７３４；ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ  Ｑ９ＵＩＫ５；Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＡＦ１７９２７４；ＡＹ３５８９０７、ＣＡＦ８５７２３、ＣＱ７８２４３６
国際公開ＷＯ２００４０７４３２０号（配列番号８１０）特開２００４−１１３１５１号（配列番号２、４、８）；国際公開ＷＯ２００３０４２６６１号（配列番号５８０）国際公開ＷＯ２００３００９８１４号（配列番号４１１）欧州特許第１２９５９４４号（６９〜７０頁）；国際公開ＷＯ２００２３０２６８号（３２９頁）；国際公開ＷＯ２００１９０３０４号（配列番号２７０６）米国特許出願公開第２００４２４９１３０号；米国特許出願公開第２００４０２２７２７号；国際公開ＷＯ２００４０６３３５５号；米国特許出願公開第２００４１９７３２５号；米国特許出願公開第２００３２３２３５０号；米国特許出願公開第２００４００５５６３号；米国特許出願公開第２００３１２４５７９号；Ｈｏｒｉｅら、（２０００年）Ｇｅｎｏｍｉｃｓ、第６７巻、１４６〜１５２頁；Ｕｃｈｉｄａら、（１９９９年）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．、第２６６巻、５９３〜６０２頁；Ｌｉａｎｇら、（２０００年）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、第６０巻、４９０７〜１２頁；Ｇｌｙｎｎｅ−Ｊｏｎｅｓら、（２００１年）Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．、１０月１５日、第９４（２）巻、１７８〜８４頁
その他の腫瘍関連性抗原およびそれに対する特定の抗体については、参照によりそれらの全体を本明細書に組み込む国際公開ＷＯ０４／０４５５１６号（２００４年６月３日）；国際公開ＷＯ０３／０００１１３号（２００３年１月３日）；国際公開ＷＯ０２／０１６４２９号（２００２年２月２８日）；国際公開ＷＯ０２／１６５８１号（２００２年２月２８日）；国際公開ＷＯ０３／０２４３９２号（２００３年３月２７日）；国際公開ＷＯ０４／０１６２２５号（２００４年２月２６日）；国際公開ＷＯ０１／４０３０９号（２００１年６月７日）；米国特許出願公開第２００５０２３８６５０Ａ１号も参照されたい。
【０２６０】
組換え抗体の生成
本発明の抗体を、抗体の合成に有用な当技術分野で周知の任意の方法を使用して、具体的には、化学合成または組換え発現技術によって生成することができる。
【０２６１】
抗体、またはそのフラグメント、誘導体、もしくは類似体の組換え発現を、抗体の塩基配列が周知の場合、化学的に合成したオリゴヌクレオチド（例えば、Ｋｕｔｍｅｉｅｒら、１９９４年、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、第１７巻、２４２頁に記載されるような）から抗体をコードする核酸を構築することによって行うことができる。この方法には、抗体をコードする配列の部分を含む重複オリゴヌクレオチドの合成、そのオリゴヌクレオチドのアニーリングおよびライゲーション、ならびに次いでＰＣＲによってライゲーションされたオリゴヌクレオチドの増幅が含まれる。
【０２６２】
あるいは、抗体をコードする核酸分子を、適切な源から生成することができる。特定の抗体をコードする核酸を含むクローンは利用できないが、抗体の配列が既知である場合、配列の３’および５’末端にハイブリッド形成し得る合成プライマーを使用するＰＣＲ増幅によって、または特定の遺伝子配列に特異的なオリゴヌクレオチドプローブを使用したクローニングによって、抗体をコードする核酸を、適切な源（例えば、抗体ｃＤＮＡライブラリー、または免疫グロブリンを発現する任意の組織もしくは細胞から生成されるｃＤＮＡライブラリー）から得ることができる。
【０２６３】
特定の抗原を特異的に認識する抗体（またはこうした免疫グロブリンをコードする核酸をクローニングするためのｃＤＮＡライブラリーの源）が市販されていない場合、特定の抗原に特異的な抗体を、当技術分野で周知の任意の方法、例えば、ウサギなどの患畜を免疫してポリクローナル抗体を作製することによって、あるいは例えばＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ（１９７５年、Ｎａｔｕｒｅ、第２５６巻、４９５〜４９７頁）によって記載されたように、またはＫｏｚｂｏｒら（１９８３年、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ、第４巻、７２頁）もしくはＣｏｌｅら（１９８５年、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ、Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．、７７〜９６頁）によって記載されたようにモノクローナル抗体を作製することによって作製することができる。あるいは、少なくとも抗体のＦａｂ部分をコードするクローンを、特異性抗原を結合するＦａｂフラグメントのクローンに関するＦａｂ発現ライブラリーをスクリーニングすること（例えば、Ｈｕｓｅら、１９８９年、Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２４６巻、１２７５〜１２８１頁に記載されるような）によって、または抗体ライブラリーをスクリーニングすること（例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎら、１９９１年、Ｎａｔｕｒｅ、第３５２巻、６２４頁；Ｈａｎｅら、１９９７年、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第９４巻、４９３７頁を参照）によって得ることができる。
【０２６４】
少なくとも抗体の可変ドメインをコードする核酸配列が得られれば、これを抗体の定常領域をコードする塩基配列を含むベクターに導入することができる（例えば、国際公開ＷＯ８６／０５８０７号；国際公開ＷＯ８９／０１０３６号；および米国特許第５１２２４６４号を参照）。完全抗体分子の発現を可能にする完全な軽鎖または重鎖を含むベクターを利用することができる。次いで、抗体をコードする核酸を、スルフヒドリル基を含まないアミノ酸残基を有する鎖内ジスルフィド結合に関与する１個または複数の可変領域システイン残基を置換（または欠失）するのに必要なヌクレオチドの置換または欠失の導入に使用することができる。こうした修飾は、塩基配列における特異的突然変異または欠失の導入に関する技術分野で周知の任意の方法、例えば、これらだけに限らないが、化学的突然変異誘発法およびｉｎｖｉｔｒｏの部位特異的突然変異誘発法によって実施され得る（Ｈｕｔｃｈｉｎｓｏｎら、１９７８年、Ｊ．Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．、第２５３巻、６５５１頁）。
【０２６５】
さらに、適切な抗原特異性を有するマウス抗体分子由来の遺伝子を適切な生物活性を有するヒト抗体分子由来の遺伝子とスプライシングすることによる「キメラ抗体」の製造を目的として開発された技術（Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、１９８４年、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、第８１巻、８５１〜８５５頁；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら、１９８４年、Ｎａｔｕｒｅ、第３１２巻、６０４〜６０８頁；Ｔａｋｅｄａら、１９８５年、Ｎａｔｕｒｅ、第３１４巻、４５２〜４５４頁）を、使用することができる。キメラ抗体は、ネズミモノクローナル抗体およびヒト免疫グロブリン定常領域由来の可変領域を有するもの、例えばヒト化抗体など、様々な部分が異なる動物種に由来する分子である。
【０２６６】
あるいは、単鎖抗体の産生に関して記載された技術（米国特許第４，６９４，７７８号；Ｂｉｒｄ、１９８８年、Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２４２巻、４２３〜４２頁；Ｈｕｓｔｏｎら、１９８８年、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第８５巻、５８７９〜５８８３頁；およびＷａｒｄら、１９８９年、Ｎａｔｕｒｅ、第３３４巻、５４４〜５４頁）を、単鎖抗体の産生に適用することができる。単鎖抗体は、アミノ酸架橋を介してＦｖ領域の重鎖フラグメントと軽鎖フラグメントを結合して単鎖ポリペプチドを生じることによって形成される。大腸菌における機能性Ｆｖフラグメントのアセンブリ用技術も使用することができる（Ｓｋｅｒｒａら、１９８８年、Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２４２巻、１０３８〜１０４１頁）。
【０２６７】
特異的エピトープを認識する抗体フラグメントは、既知の技術によって作製され得る。例えば、こうしたフラグメントとしては、抗体分子のペプシン消化によって産生され得るＦ（ａｂ’）２フラグメント、およびＦ（ａｂ’）２フラグメントのジスルフィド架橋を還元することによって作製され得るＦａｂフラグメントが挙げられるが、それらだけに限らない。
【０２６８】
抗体をコードする核酸配列が得られれば、抗体の産生のためのベクターは、当技術分野でよく知られる組換えＤＮＡ技術を使用する技術によって産生され得る。当業者によく知られる方法を使用して、抗体コード配列ならびに適切な転写および翻訳制御シグナルを含む発現ベクターを構築することができる。これらの方法としては、例えば、インビトロ組換えＤＮＡ技術、合成技術、およびインビボ遺伝子組換えが挙げられる。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら（１９９０年、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ、Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、第２版、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ、ニューヨーク州）、およびＡｕｓｕｂｅｌら（編集、１９９８年、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、ニューヨーク州）に記載される技術を参照されたい。
【０２６９】
ポリクローナル抗体を、関連する抗原およびアジュバントを多数の皮下（ｓｃ）または腹腔内（ｉｐ）注射することによって動物中に産生させることができる。これは、二官能性または誘導化剤、例えば、メレイミドベンゾイルスルホスクシンイミドエステル（システイン残基を介して複合）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（リシン残基を介して）、グルタルアルデヒド、無水コハク酸、ＳＯＣｌ２、またはＲ１Ｎ＝Ｃ＝ＮＲ（式中、ＲおよびＲ１は、異なるアルキル基である）を使用して、関連する抗原を、免疫すべき種の免疫原性であるタンパク質、例えば、キーホールリンペットヘモシアニン、血清アルブミン、ウシのチログロブリン、またはダイズトリプシンインヒビターと複合させるのに有用である可能性がある。
【０２７０】
モノクローナル抗体は、ほぼ均一な抗体集団から得られる、つまり、この集団を含む個々の抗体は、少量存在する可能性がある起こりうる自然発生的突然変異を除いて同一である。したがって、「モノクローナル」という形容詞は、別個の抗体の混合物ではないような抗体の特徴を示すものである。例えば、モノクローナル抗体を、Ｋｏｈｌｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ、第２５６巻、４９５頁（１９７５年）によって最初に記載されたハイブリドーマ法を使用して作製してもよく、あるいは組換えＤＮＡ法（米国特許第４８１６５６７号）によって作製してもよい。次いで、リンパ球を、ポリエチレングリコールなど適切な融合剤を使用して骨髄腫細胞と融合させて、ハイブリドーマ細胞を形成させる（Ｇｏｄｉｎｇ、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、５９〜１０３頁、１９８６年）。抗体をコードするＤＮＡの細菌における組換え発現についての総説としては、Ｓｋｅｒｒａら、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第５巻、２５６〜２６２頁（１９９３年）、およびＰｌｕｃｋｔｈｕｎ、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖｓ．、第１３０巻、１５１〜１８８頁（１９９２年）が挙げられる。
【０２７１】
モノクローナル抗体または抗体フラグメントは、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、（１９９０年）Ｎａｔｕｒｅ、第３４８巻、５５２〜５５４頁；Ｃｌａｃｋｓｏｎら、（１９９１年）Ｎａｔｕｒｅ、第３５２巻、６２４〜６２８頁；およびＭａｒｋｓら、（１９９１年）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、第２２２巻、５８１〜５９７頁に記載される技術を使用して作製された抗体ファージライブラリーから単離され得る。後の刊行物には、チェーンシャフリング法による高親和性（ｎｍ範囲）ヒト抗体の産生（Ｍａｒｋｓら、（１９９２年）Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、第１０巻、７７９〜７８３頁）、ならびに非常に大きなファージライブラリーを構築する戦略としての組合せ感染およびインビボ組換え（Ｗａｔｅｒｈｏｕｓｅら、（１９９３年）Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ．Ｒｅｓ．、第２１巻、２２６５〜２２６６頁）が記載されている。したがって、これらの技術は、モノクローナル抗体を単離するための従来のモノクローナル抗体ハイブリドーマ技術に代わる実施可能な代替法である。
【０２７２】
ＤＮＡはまた、例えば、相同のネズミ配列の代わりにヒト重鎖および軽鎖定常ドメインのコード配列を使用することによって（米国特許第４８１６５６７号；およびＭｏｒｒｉｓｏｎら、（１９８４年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第８１巻、６８５１頁）、または免疫グロブリンコード配列のすべてもしくはそのコード配列の一部を非免疫グロブリンポリペプチドに共有結合で結合させることによって修飾され得る。
【０２７３】
ヒト化は、ヒト抗体の対応する配列の代わりに超可変領域配列を使用することによって実施され得る（Ｊｏｎｅｓら、（１９８６年）Ｎａｔｕｒｅ、第３２１巻、５２２〜５２５頁；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、（１９８８年）Ｎａｔｕｒｅ、第３３２巻、３２３〜３２７頁；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎら、（１９８８年）Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２３９巻、１５３４〜１５３６頁）。したがって、こうした「ヒト化」抗体は、完全なヒト可変ドメインより実質的に小さい部分がヒト以外の種の対応する配列で置換されているキメラ抗体（米国特許第４８１６５６７号）である。実際には、ヒト化抗体は、一般に、いくつかの超可変領域残基および場合によりいくつかのＦＲ残基が齧歯動物抗体の相似性部分由来の残基で置換されているヒト抗体である（Ｓｉｍｓら、（１９９３年）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第１５１巻、２２９６頁；Ｃｈｏｔｈｉａら、（１９８７年）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、第１９６巻、９０１頁；Ｃａｒｔｅｒら、（１９９２年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第８９巻、４２８５頁；Ｐｒｅｓｔａら、（１９９３年）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第１５１巻、２６２３頁）。
【０２７４】
ヒト化抗体の様々な形態について考える。例えば、ヒト化抗体は、Ｆａｂなどの抗体フラグメントでもよい。あるいは、ヒト化抗体は、完全なＩｇＧ１抗体などの完全な抗体でもよい。ＥｒｂＢ２の細胞外ドメインを特異的に結合するネズミモノクローナル抗体４Ｄ５は、Ｆｅｎｄｌｙら、（１９９０年）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、第５０巻、１５５０〜１５５８頁に記載されるように、Ｈｕｄｚｉａｋら、（１９８７年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第８４巻、７１５８〜７１６３頁に記載されるようなＮＩＨ  ３Ｔ３／ＨＥＲ２−３４００細胞（約１×１０５個のＥｒｂＢ２分子／細胞を発現する）から産生され、ＥＤＴＡ２５ｍＭを含むリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を用いて収集し、ＢＡＬＢ／ｃマウスを免疫するのに使用される。ハイブリドーマの上澄液を、ＥＬＩＳＡおよび放射免疫沈降法によってＥｒｂＢ２結合に関してスクリーニングした。
【０２７５】
ヒト化の代わりに、ヒト抗体を作製することができる（Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓら、（１９９３年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、米国、第９０巻、２５５１頁；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓら、（１９９３年）Ｎａｔｕｒｅ、第３６２巻、２５５〜２５８頁；Ｂｒｕｇｇｅｒｍａｎｎら、（１９９３年）Ｙｅａｒ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏ．、第７巻、３３頁；および米国特許第５５９１６６９号、米国特許第５５８９３６９号、米国特許第５５４５８０７号）。
【０２７６】
あるいは、ファージディスプレイ技術（ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、（１９９０年）Ｎａｔｕｒｅ、第３４８巻、５５２〜５５３頁）は、免疫されていないドナー由来の免疫グロブリン可変（Ｖ）ドメイン遺伝子レパートリーから、インビトロでヒト抗体および抗体フラグメントを産生させるのに使用され得る（Ｋｅｖｉｎ  Ｓ．ＪｏｈｎｓｏｎおよびＤａｖｉｄ  Ｊ．Ｃｈｉｓｗｅｌｌ、（１９９３年）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、第３巻、５６４〜５７１頁；Ｃｌａｃｋｓｏｎら、（１９９１年）Ｎａｔｕｒｅ、第３５２巻、６２４〜６２８頁）。ヒト抗体はまた、インビトロで活性化されたＢ細胞によって作製され得る（米国特許第５５６７６１０号および米国特許第５２２９２７５号を参照）。ヒト抗ＥｒｂＢ２抗体は、米国特許第５７７２９９７号および国際公開ＷＯ９７／００２７１号に記載されている。
【０２７７】
様々な技術が、抗体フラグメントの産生のために開発されている（Ｍｏｒｉｍｏｔｏら、（１９９２年）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ、第２４巻、１０７〜１１７頁；およびＢｒｅｎｎａｎら、（１９８５年）Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２２９巻、８１頁；Ｃａｒｔｅｒら、（１９９２年）Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、第１０巻、１６３〜１６７頁；国際公開ＷＯ９３／１６１８５号；米国特許第５５７１８９４号；米国特許第５５８７４５８号；米国特許第５６４１８７０号）。
【０２７８】
本明細書に記載の抗体のアミノ酸配列の改変について考える。例えば、抗体の結合親和性および／または他の生物学的特性を向上させることは望ましい可能性がある。アミノ酸配列変異体は、抗体を発現する核酸に適切なヌクレオチド変化を導入することによって、またはペプチド合成によって調製される。こうした改変としては、例えば、抗体のアミノ酸配列内の残基からの欠失、および／またはそれへの挿入、および／またはそれの置換が挙げられる。最終構築物が所望の特性を有していれば、最終構築物を得るのに、欠失、挿入、および置換をどのように組み合わせてもよい。アミノ酸変化はまた、グリコシル化部位の数または位置を変えることなど、抗体の翻訳後プロセスを改変することが可能である。
【０２７９】
突然変異誘発に関して好ましい位置である抗体のある種の残基または領域の同定に有用な方法は、「アラニンスキャニング突然変異誘発」と呼ばれる（ＣｕｎｎｉｎｇｈａｍおよびＷｅｌｌｓ、（１９８９年）Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２４４巻、１０８１〜１０８５頁）。アミノ酸配列挿入には、長さの範囲が残基１個から残基１００個以上を含むポリペプチドのアミノ末端融合および／またはカルボキシル末端融合、ならびに１個または複数のアミノ酸残基の配列内挿入がある。末端挿入の例としては、Ｎ末端メチオニル残基、または細胞障害ポリペプチドに融合した抗体が挙げられる。他の挿入変異体としては、抗体の血清半減期を延長させる酵素（例えばＡＤＥＰＴ）またはポリペプチドの抗体Ｎ末端またはＣ末端への融合体が挙げられる。
【０２８０】
アルブミンに特異的に結合するペプチド配列を、抗体薬剤結合体（ＡＤＣ）を含む抗体に融合しても複合してもよい。血漿タンパク結合は、抗体やＡＤＣなど、短寿命分子の薬物動態特性を向上させる効果的な手段となり得る。血清アルブミン結合ペプチド（ＡＢＰ）は、組織の取込み、クリアランス、浸透、および拡散の変化、ならびに血清半減期の延長を含めた、融合された活性ドメインタンパク質の薬動力学を変えることができる。こうした薬動力学パラメータは、適切な血清アルブミン結合ペプチド配列の特異的選択によって調節され得る（米国特許出願公開第２００４０００１８２７号の［００７６］）。一連のアルブミン結合ペプチドは、ファージディスプレイスクリーニングによって同定された（Ｄｅｎｎｉｓら、（２００２年）Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．、第２７７巻、３５０３５〜３５０４３頁、３５０３８頁の表ＩＩＩおよびＩＶ；国際公開ＷＯ０１／４５７４６号；および国際公開ＷＯ０１／４５７４６号の１２〜１３頁、参照によりこれらの全体を本明細書に組み込む）。
【０２８１】
別のタイプの変異体は、アミノ酸置換変異体である。代わりの突然変異誘発の最も重要な部位は超可変領域を含むが、ＦＲ変化も考えられる。
【０２８２】
抗体の生物学的特性における実質的な修飾は、（ａ）置換領域のポリペプチド骨格の構造、例えばシートもしくはヘリカル構造、（ｂ）標的部位の電荷もしくは疎水性、または（ｃ）側鎖の嵩高さの維持において効果が著しく異なる置換基を選択することによって実現される。天然の残基を、共通の側鎖特性に基づいてグループに分けることができる。
【０２８３】
（１）疎水性：ノルロイシン、ｍｅｔ、ａｌａ、ｖａｌ、ｌｅｕ、ｉｌｅ；
（２）中性の親水性：ｃｙｓ、ｓｅｒ、ｔｈｒ；
（３）酸性：ａｓｐ、ｇｌｕ；
（４）塩基性：ａｓｎ、ｇｌｎ、ｈｉｓ、ｌｙｓ、ａｒｇ；
（５）鎖方向に影響を及ぼす残基：ｇｌｙ、ｐｒｏ；および
（６）芳香族：ｔｒｐ、ｔｙｒ、ｐｈｅ。
【０２８４】
非保存的置換は、これらの分類の１つのメンバーを他の分類と交換することを必要とする。
【０２８５】
また、抗体の適切な立体配座の維持に関与しないいずれのシステイン残基も、分子の酸化安定性を向上させ、異常な架橋を防止するのに、一般にセリンで置換することができる。逆に、システイン結合を抗体に付加して、その安定性を向上させてもよい（特に、抗体がＦｖフラグメントなどの抗体フラグメントである場合）。
【０２８６】
本発明の抗体をエフェクター機能に関して改変して、例えば、抗体の抗原依存性細胞媒介細胞障害（ＡＤＣＣ）および／または補体依存性細胞障害（ＣＤＣ）を増強することが望ましい可能性がある。これは、１個または複数のアミノ酸置換基を抗体のＦｃ領域に導入することによって実現され得る。あるいは、またはさらに、システイン残基（１個または複数）をＦｃ領域に導入し、それによってこの領域の鎖間ジスルフィド結合を形成させる。このようにして産生されたホモダイマー抗体は、内部移行能力を向上させ、かつ／または補体媒介性細胞死滅および抗体依存性細胞障害（ＡＤＣＣ）を増大させる可能性がある。Ｃａｒｏｎら、Ｊ．Ｅｘｐ  Ｍｅｄ．、第１７６巻、１１９１〜１１９５頁（１９９２年）、およびＢ．Ｓｈｏｐｅｓ、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第１４８巻、２９１８〜２９２２頁（１９９２年）を参照されたい。抗腫瘍活性が高められたホモダイマー抗体も、Ｗｏｌｆｆら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、第５３巻、２５６０〜２５６５頁（１９９３年）に記載されるようなヘテロ二官能性架橋剤を使用して調製することができる。あるいは、二重Ｆｃ領域を有し、それによって補体溶解およびＡＤＣＣ能力を増強し得る抗体を作製することができる。Ｓｔｅｖｅｎｓｏｎら、Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ、第３巻、２１９〜２３０頁（１９８９年）を参照されたい。
【０２８７】
抗体の血清半減期を延長させるのに、例えば、米国特許第５７３９２７７号に記載されるように、抗体（特に抗体フラグメント）にサルベージ受容体結合エピトープを組み込むことができる。本明細書では、「サルベージ受容体結合エピトープ」という用語は、インビボでＩｇＧ分子の血清半減期の延長に関与するＩｇＧ分子（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４）のＦｃ領域のエピトープを指す。
【０２８８】
いくつかの抗体を、それらの定常領域の保存された位置でグリコシル化する（ＪｅｆｆｅｒｉｓおよびＬｕｎｄ、（１９９７年）Ｃｈｅｍ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第６５巻、１１１〜１２８頁；ＷｒｉｇｈｔおよびＭｏｒｒｉｓｏｎ、（１９９７年）ＴｉｂＴＥＣＨ、第１５巻、２６〜３２頁）。免疫グロブリンのオリゴ糖側鎖は、タンパク質機能に影響を及ぼし（Ｂｏｙｄら、（１９９６年）Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、第３２巻、１３１１〜１３１８頁；ＷｉｔｔｗｅおよびＨｏｗａｒｄ、（１９９０）Ｂｉｏｃｈｅｍ．、第２９巻、４１７５〜４１８０頁）、立体配座、および糖タンパク質の提示された三次元表面に影響を及ぼし得る糖タンパク質の部分間の分子内相互作用に影響を及ぼす（ＨｅｆｆｅｒｉｓおよびＬｕｎｄ、同上；ＷｙｓｓおよびＷａｇｎｅｒ、（１９９６年）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．、第７巻、４０９〜４１６頁；Ｍａｌｈｏｔｒａら、（１９９５年）Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．、第１巻、２３７〜２４３頁；Ｈｓｅら、（１９９７年）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、第２７２巻、９０６２〜９０７０頁；米国特許第５０４７３３５号；米国特許第５５１０２６１号；米国特許第５２７８２９９号）。
【０２８９】
インビトロ細胞増殖アッセイ
一般に、抗体薬剤結合体（ＡＤＣ）の細胞障害または細胞増殖抑制活性は、受容体タンパク質、例えばＨＥＲ２を有する哺乳動物細胞を細胞培地中のＡＤＣの抗体に曝露すること；約６時間〜約５日間細胞を培養すること；および細胞生存率を測定することによって測定される。細胞ベースのインビトロアッセイを、本発明のＡＤＣのアポトーシス（カスパーゼ活性化）の生存力（増殖）、細胞障害性、および誘導を測定するのに使用した。
【０２９０】
抗体薬剤結合体のインビトロ性能を、細胞増殖アッセイによって測定した（図１〜５）。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）発光細胞生存アッセイは、鞘翅類のルシフェラーゼの組換え発現に基づいた市販（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐ．、マディソン、ウィスコンシン州）の均一アッセイ法である（米国特許第５５８３０２４号；米国特許第５６７４７１３号、および米国特許第５７００６７０号）。この細胞増殖アッセイは、ＡＴＰ存在の定量化に基づく培養中の生きた細胞の数、代謝性活性細胞の指標を決定する（Ｃｒｏｕｃｈら、（１９９３年）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．、第１６０巻、８１〜８８頁、米国特許第６６０２６７７号）。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）アッセイを、自動ハイスループットスクリーニング（ＨＴＳ）に従わせて９６ウェルフォーマットで行った（Ｃｒｅｅら、（１９９５年）ＡｎｔｉＣａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇｓ、第６巻、３９８〜４０４頁）。均一系アッセイ法は、単一試薬（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）試薬）を、血清補足培地で培養した細胞に直接添加することを伴う。細胞洗浄、培地の除去、および多数のピペット操作工程は、必要ではない。このシステムでは、試薬を添加し、混合した１０分後に、３８４ウェルフォーマットにわずか１５細胞／ウェルが検出される。細胞をＡＤＣで連続的に処理してもよく、あるいはそれらを処理し、ＡＤＣから分離してもよい。一般に、一時的に、すなわち３時間処理した細胞は、連続処理した細胞と同じ性能効果を示した。
【０２９１】
均一な「添加−混合−測定」形式は、ＡＴＰの存在量に比例する細胞溶解および発光シグナル発生をもたらす。ＡＴＰの量は、培養中に存在する細胞の数に正比例する。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）アッセイは、ルシフェラーゼ反応によって生成する「グロータイプ」発光シグナルを生じ、これは使用する細胞タイプおよび培地に応じて半減期が一般に５時間を越える。生きた細胞は、相対発光量（ＲＬＵ）で表される。基質のカブトムシルシフェリンは、組換えホタルルシフェラーゼによって酸化的に脱カルボキシル化され、ＡＴＰがＡＭＰに同時転化し、光子が発生する。半減期の延長に、試薬注入器を使用する必要性をなくし、多数のプレートの加工に連続またはバッチ式の柔軟性を付与する。この細胞増殖アッセイは、様々な多数ウェルフォーマット、例えば、９６または３８４ウェルフォーマットで使用され得る。データは、ルミノメータまたはＣＣＤカメラ画像化装置によって記録され得る。発光出力は、時間と共に測定した相対発光量（ＲＬＵ）として示される。
【０２９２】
【化１０１】
2008521920.tif 000067
抗体薬剤結合体の抗増殖効果を、２個の乳房腫瘍細胞株に対する上記のインビトロ細胞死滅アッセイの細胞増殖によって測定した（図１〜５）。ＡＤＣのＩＣ５０値を、ＨＥＲ２受容体タンパク質を過剰発現することが知られるＳＫ−ＢＲ−３およびＢＴ−４７４に対して立証した（表２）。
【０２９３】
図１は、相対発光量（ＲＬＵ）と抗体またはＡＤＣのμｇ／ｍｌ濃度について測定した、−○−トラスツズマブおよび−●−トラスツズマブ−ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）２０２を用いて処理したＳＫ−ＢＲ−３細胞のインビトロ細胞増殖アッセイを示している。Ｈ＝トラスツズマブ（Ｈはシステイン［ｃｙｓ］で結合されている）。
【０２９４】
図２は、相対発光量（ＲＬＵ）と抗体またはＡＤＣのμｇ／ｍｌ濃度について測定した、−●−トラスツズマブおよび−○−トラスツズマブ−ＭＣ−ａｌａ−ｐｈｅ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）２０３を用いて処理したＳＫ−ＢＲ−３細胞のインビトロ細胞増殖アッセイを示している。Ｈ＝トラスツズマブ（Ｈはシステイン［ｃｙｓ］で結合されている）。
【０２９５】
図３は、相対発光量（ＲＬＵ）と抗体またはＡＤＣのμｇ／ｍｌ濃度について測定した、−●−トラスツズマブおよび−○−トラスツズマブ−（コハク酸−ｇｌｙ−ａｌａ−ｐｈｅ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）２０４を用いて処理したＢＴ−４７４細胞のインビトロ細胞増殖アッセイを示している。Ｈ＝トラスツズマブ（Ｈはアミノ基で結合されている）。
【０２９６】
図４は、相対発光量（ＲＬＵ）と抗体またはＡＤＣのμｇ／ｍｌ濃度について測定した、−●−トラスツズマブおよび−▲−トラスツズマブ−（ＭＣ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−３−ニトロ，４−アミノ−１，８−ナフタルイミド）２０５を用いて処理したＢＴ−４７４細胞のインビトロ細胞増殖アッセイを示している。Ｈ＝トラスツズマブ（Ｈはシステイン［ｃｙｓ］で結合されている）。
【０２９７】
図５は、相対発光量（ＲＬＵ）と抗体またはＡＤＣのμｇ／ｍｌ濃度について測定した、−●−トラスツズマブ、−◆−トラスツズマブ−ＭＣ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）２０６、および−▼−トラスツズマブ−Ｎ１−シクロプロピルメチル，Ｎ２−マレイミドプロピル−ｇｌｙ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）２０７、を用いて処理したＳＫ−ＢＲ−３細胞のインビトロ細胞増殖アッセイを示している。Ｈ＝トラスツズマブ（Ｈはシステイン［ｃｙｓ］で結合されている）。
【０２９８】
【化１０２】
2008521920.tif 000068
【０２９９】
【化１０３】
2008521920.tif 000069
Ｈ＝注記以外はシステイン［ｃｙｓ］で結合されたトラスツズマブ
Ｅ＝ビス−１，８−ナフタルイミド
ＮＳＡ＝有意な活性なし。
【０３００】
Ａｂが抗ＥｐｈＢ２Ｒおよび抗ＣＤ２２抗体を含む場合の式Ｉの抗体薬剤結合体を調製した。これらの結合体はまた、インビトロで細胞障害または細胞増殖抑制活性を示した。
【０３０１】
マウスのインビボ血清クリアランスおよび安定性
ＡＤＣの血清クリアランスおよび安定性は、ヌードナイーブ（外来性移植によって受けた腫瘍は含まない）マウスにおいて調査され得る。抗体とＡＤＣの合計量の差は、リンカーの開裂およびその薬剤部分からの抗体の分離を示している。
【０３０２】
インビボ効果
本発明の抗体薬剤結合体の効果を、齧歯動物に癌細胞の同種移植片または異種移植片を移植し、ＡＤＣでその腫瘍を治療することによってインビボで測定した。細胞株、癌細胞に存在する受容体へのＡＤＣの抗体結合特異性、用量計画、およびその他の要因に応じて、可変的な結果が予測される。例えば、抗ＨＥＲ２  ＡＤＣのインビボ効果が、高発現性のＨＥＲ２トランスジェニック外植片マウスモデルによって測定された。同種移植片は、ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ治療に応答しない、または応答の乏しいＦｏ５  ＭＭＴＶトランスジェニックマウスから増殖され得る。対象をＡＤＣで事前に治療し、時間に対する腫瘍倍加、対数細胞死滅、および腫瘍収縮を測定するのに３〜６週間に渡って記録した。本発明のＡＤＣは、腫瘍成長の進行を遅らせる上で小さな効果しか示さなかった。例えば、動物１ｋｇ当たりＨ−ＭＣ−ａｆ−ＰＡＢ−（ビス−４−イミダゾリルＥ）２０３を１０ｍｇ投与（ＩＶ）すると、無胸腺ヌードマウスにおけるＭＭＴＶ−ＨＥＲ２  Ｆｏ５腫瘍の平均体積倍加にかかる時間は、対照（注射ビヒクル、ＰＢＳ緩衝液）に対してわずかな増加を示しただけであった。用量反応および複数投与実験の経過観察を行うことができる。
【０３０３】
齧歯動物毒性
抗体薬剤結合体、およびＡＤＣマイナス対照の「ビヒクル」を、急性毒性ラットモデルにおいて評価することができる（Ｂｒｏｗｎら、（２００２年）Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、第５０巻、３３３〜３４０頁）。ＡＤＣの毒性は、ラットをＡＤＣで治療し、その後に検査し、様々な器官に対する影響を分析することによって調査され得る。巨視的観察（体重）、臨床病理学的パラメータ（血液生化学的検査および血液学的検査）、および病理組織学的検査に基づいて、ＡＤＣの毒性を観察し、特徴付け、測定することができる。また、臨床化学、血清酵素、および血液学的検査の分析も、定期的に行うことができ、組織病理学的評価と共に全面的な剖検で結論を下す。体重減少の臨床観察に見られる毒性シグナルは、その体重減少、またはＡＤＣを投与した後の動物におけるビヒクルのみを投与した動物に対する体重変化を考慮すると、全身的または局所的毒性の巨視的かつ一般的な指標となる。肝毒性は、（ｉ）ＡＳＴ（アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ）、ＡＬＴ（アラニンアミノトランスフェラーゼ）、ＧＧＴ（ｇ−グルタミルトランスフェラーゼ）などの肝酵素の増加；（ｉｉ）有糸分裂数およびアポトーシス数の増加；および（ｉｉｉ）肝細胞壊死によって測定され得る。ヘマトリンパ球（ｈｅｍａｔｏｌｙｍｐｈｏｉｄ）毒性は、白血球、主として顆粒球（好中球）、および／または血小板の減少、ならびにリンパ器官の関与、すなわち萎縮またはアポトーシス活性によって観察される。毒性はまた、有糸分裂数およびアポトーシス数の増加や変性全腸炎など胃腸管の病変によって示される。
【０３０４】
抗体薬剤結合体の合成
本発明の抗体薬剤結合体（ＡＤＣ）は、以下に概説する合成手順を使用して作製され得る。ＡＤＣは、好都合には、薬剤および抗体に結合する反応部位を有するリンカーを使用して調製され得る。一態様では、リンカーは、抗体に存在する求核基に反応的な求電子基を有する反応部位を含む。抗体上の有用な求核基としては、スルフヒドリル、ヒドロキシル、およびアミノ基が挙げられるが、それらだけに限らない。抗体の求核基のヘテロ原子は、リンカー上の求電子基に反応的であり、リンカーユニットに共有結合を形成する。有用な求電子基としては、マレイミドおよびハロアセトアミド基が挙げられるが、それらだけに限らない。求電子基は、抗体結合に好都合な部位を提供する。
【０３０５】
別の実施形態では、リンカーは、抗体上に存在する求電子基に反応的な求核基を有する反応部位を含む。抗体上の有用な求電子基としては、アルデヒドおよびケトンカルボニル基が挙げられるが、それらだけに限らない。リンカーの求核基のヘテロ原子は、抗体上の求電子基と反応し、抗体ユニットに共有結合を形成することができる。リンカー上の有用な求核基としては、ヒドラジド、オキシム、アミノ、ヒドラジン、チオセミカルバゾン、ヒドラジンカルボキシレート、およびアリールヒドラジドが挙げられるが、それらだけに限らない。抗体上の求電子基は、リンカーへの結合に好都合な部位を提供する。
【０３０６】
カルボン酸官能基およびクロロホルメート官能基は薬剤の第二級アミノ基と反応してアミド結合を形成することができるので、リンカーのための有用な反応部位である。また、薬剤のアミノ基（Ｎ−メチルバリンなどがあるがこれだけに限らない）と反応してカルバメート結合を形成することができるリンカー上のカルボネート官能基（ｐ−ニトロフェニルカルボネートなどがあるがこれだけに限らない）も、反応部位として有用である。一般には、ペプチドベースの薬剤は、２個以上のアミノ酸および／またはペプチドフラグメントの間にペプチド結合を形成することによって調製され得る。こうしたペプチド結合は、例えば、ペプチド化学分野でよく知られている液相合成法（Ｅ．ＳｃｈｒｏｄｅｒおよびＫ．Ｌｕｂｋｅ、「Ｔｈｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ」、第１巻、７６〜１３６頁、１９６５年、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓを参照）に従って調製され得る。
【０３０７】
以下により詳細に記載するように、本発明のＡＤＣは、好都合には、薬剤および抗体に結合する２個以上の反応性官能基を有するリンカーを使用して調製される。本発明の一態様では、リンカーは、抗体上に存在する求核基と反応する求電子基を有する。抗体上の有用な求核基としては、スルフヒドリル、ヒドロキシル、およびアミノ基が挙げられるが、それらだけに限らない。抗体の求核基のヘテロ原子は、リンカー上の求電子基に反応的であり、リンカーユニットに共有結合を形成する。有用な求電子基としては、マレイミド、カルボネート、およびハロアセトアミド基が挙げられるが、それらだけに限らない。求電子基は、抗体結合に好都合な部位を提供する。
【０３０８】
別の実施形態では、リンカーは、抗体上に存在する求電子基に反応的な求核基を有する反応性官能基を含む。抗体上の有用な求電子基としては、アルデヒドおよびケトンカルボニル基が挙げられるが、それらだけに限らない。リンカーの求核基のヘテロ原子は、抗体上の求電子基と反応し、抗体ユニットに共有結合を形成することができる。リンカー上の有用な求核基としては、ヒドラジド、オキシム、アミノ、ヒドラジン、チオセミカルバゾン、ヒドラジンカルボキシレート、およびアリールヒドラジドが挙げられるが、それらだけに限らない。抗体上の求電子基は、リンカーへの結合に好都合な部位を提供する。
【０３０９】
一般には、ペプチド型リンカーは、２個以上のアミノ酸および／またはペプチドフラグメントの間にペプチド結合を形成することによって調製され得る。こうしたペプチド結合は、例えば、ペプチド化学分野でよく知られている液相合成法（Ｅ．ＳｃｈｒｏｄｅｒおよびＫ．Ｌｕｂｋｅ、「Ｔｈｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ」、第１巻、７６〜１３６頁、１９６５年、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓを参照）に従って調製され得る。
【０３１０】
リンカー中間体は、スペーサー、ストレッチャー、およびアミノ酸ユニットを含めた、任意の組合せまたは一連の反応で構築され得る。スペーサー、ストレッチャー、およびアミノ酸ユニットは、天然の求電子基、求核基、遊離基である反応性官能基を使用することができる。反応性官能基としては、以下のものが挙げられるが、それらだけに限らない。
【０３１１】
【化１０４】
2008521920.tif 000070
式中、Ｘは、脱離基、例えば、Ｏ−メシル、Ｏ−トシル、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、アルキルジスルフィドもしくはアリールジスルフィド（ＲＳＳ−）、またはマレイミド基である。
【０３１２】
別の実施形態では、リンカーを、溶解性または反応性を調節した基で置換することができる。例えば、ＡＤＣの調製に使用する合成経路に応じて、スルホネート置換基は、試薬の水溶性を向上させ、リンカー試薬と抗体または薬剤部分とのカップリング反応を促進させ、あるいはＡｂ−ＬとＤとの、またはＤ−ＬとＡｂとのカップリング反応を促進させることができる。
【０３１３】
本発明の化合物としては、明らかに、架橋剤試薬、すなわちＰｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．、ロックフォード、Ｉｌ．６１１０５、米国から市販される、ＢＭＰＳ、ＥＭＣＳ、ＧＭＢＳ、ＨＢＶＳ、ＬＣ−ＳＭＣＣ、ＭＢＳ、ＭＰＢＨ、ＳＢＡＰ、ＳＩＡ、ＳＩＡＢ、ＳＭＣＣ、ＳＭＰＢ、ＳＭＰＨ、スルフォ−ＥＭＣＳ、スルフォ−ＧＭＢＳ、スルフォ−ＫＭＵＳ、スルフォ−ＭＢＳ、スルフォ−ＳＩＡＢ、スルフォ−ＳＭＣＣ、およびスルフォ−ＳＭＰＢ、ならびにＳＶＳＢ（安息香酸スクシンイミジル−（４−ビニルスルホン））で調製されたＡＤＣが企図されるが、それらだけに限らない。２００３〜２００４年の適用ハンドブックおよびカタログの４６７〜４９８頁を参照されたい。
【０３１４】
有用なリンカーはまた、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．（ボールダー、コロラド州）などの商業的供給元から得ることもでき、あるいは米国特許第６２１４３４５号；Ｆｉｒｅｓｔｏｎｅら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、１９９５年、第６０巻、５３５２〜５頁；Ｆｒｉｓｃｈら、（１９９６年）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．、第７巻、１８０〜１８６頁に記載される方法に従って合成され得る。
【０３１５】
有用なストレッチャーを、有機合成の既知技術を利用して、以下に記載のＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（ボールダー、コロラド州）製の市販の中間体を使用してリンカーに組み込むことができる。
【０３１６】
式（ＩＩＩａ）のストレッチャーを、以下の中間体をアミノ酸ユニットのＮ末端と反応させることによって、リンカーに導入することができる。
【０３１７】
【化１０５】
2008521920.tif 000071
式中、ｎは、１〜１０の整数であり、Ｔは、−Ｈまたは−ＳＯ３Ｎａであり；
【０３１８】
【化１０６】
2008521920.tif 000072
式中、ｎは、０〜３の整数である。
【０３１９】
【化１０７】
2008521920.tif 000073
ストレッチャーユニットを、以下の二官能性試薬をアミノ酸ユニットのＮ末端と反応させることによって、リンカーに導入することができる。
【０３２０】
【化１０８】
2008521920.tif 000074
式中、Ｘは、ＢｒまたはＩである。式ＩＩＩａおよびＩＩＩｂのストレッチャーユニットもまた、以下の二官能性試薬をアミノ酸ユニットのＮ末端と反応させることによって、リンカーに導入することができる。
【０３２１】
【化１０９】
2008521920.tif 000075
式（Ｖａ）のストレッチャーユニットを、以下の中間体をアミノ酸ユニットのＮ末端と反応させることによって、リンカーに導入することができる。
【０３２２】
【化１１０】
2008521920.tif 000076
他の有用なストレッチャーを、周知の方法に従って合成することができる。アミノオキシストレッチャー（Ｈ２Ｎ−Ｏ−Ｒ１７−Ｃ（Ｏ）−）は、Ｄ．Ｓ．Ｊｏｎｅｓら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、２０００年、第４１（１０）巻、１５３１〜１５３３頁；およびＣ．Ｇｉｌｏｎら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、１９６７年、第２３（１１）巻、４４４１〜４４４７頁に記載される方法に従って、ハロゲン化アルキルをＮ−Ｂｏｃ−ヒドロキシルアミンで処理することによって調製され得、式中、−Ｒ１７−は、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ−、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）−、−アリーレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−アリーレン−、−アリーレン−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８カルボシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ−、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−、−（Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−から選択され；ｒは、１〜１０の整数である。イソチオシアネートストレッチャー（Ｓ＝Ｃ＝Ｎ−Ｒ１７−Ｃ（Ｏ）−）は、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．、１９７５年、第８７（１４）巻、５１７頁に記載されるようにイソチオシアネートカルボン酸塩化物から調製され得る。
【０３２３】
図６は、マレイミドストレッチャーおよび場合によってはｐ−アミノベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢ）自壊的スペーサーを有するバリン−シトルリン（ｖａｌ−ｃｉｔ、またはｖｃ）ジペプチドリンカーの調製方法を示しており、式中、Ｑは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−ハロゲン、−ニトロ、または−シアノであり、ｍは、０〜４の整数である。
【０３２４】
図７は、マレイミドストレッチャーユニットおよびｐ−アミノベンジルオキシカルボニル自壊的スペーサーユニットを有するｐｈｅ−ｌｙｓ（Ｍｔｒ）ジペプチドリンカーの合成を例示しており、式中、Ｑは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−ハロゲン、−ニトロ、または−シアノであり、ｍは、０〜４の整数である。出発原料のｌｙｓ（Ｍｔｒ）は、市販されており（Ｂａｃｈｅｍ、トランス、カリフォルニア州）、またはＤｕｂｏｗｃｈｉｋら、（１９９７年）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、第３８巻、５２５７〜６０頁に従って調製され得る。
【０３２５】
図８は、薬剤ユニットをリンカーユニットに結合させて、アミドまたはカルバメート基を含むＡＤＣを形成させるのに薬剤部分のアミノ基と反応するリンカーを示している。リンカーＡＪでのようにリンカー中間体がカルボン酸基を有する場合、ＨＡＴＵまたはＰｙＢｒｏｐおよび適切なアミン塩基を使用してカップリング反応を行なうと、その結果、薬剤ユニットとリンカーユニットの間にアミド結合を有する薬剤−リンカー化合物ＡＫが得られる。リンカーＡＬでのように官能基がカルボネートである場合、ＤＭＦ／ピリジンの混合物中でＨＯＢｔを使用してリンカーを薬剤にカップリングさせると、薬剤ユニットとリンカーユニットの間にカルバメート結合を有する薬剤−リンカー化合物ＡＭが得られる。あるいは、リンカーＡＮのハロゲン化物など、反応性官能基が良好な脱離基である場合、求核置換法によってリンカーを薬剤のアミン基とカップリングさせると、薬剤ユニットとリンカーユニットの間にアミン結合（ＡＯ）を有する薬剤−リンカー化合物が得られる。薬剤を抗体に結合して薬剤−リンカー化合物を形成するのに有用な例示的な方法を図８に示し、一般的手順Ｇ〜Ｈで概説する。
【０３２６】
一般的手順Ｇ：ＨＡＴＵを使用するアミド形成。薬剤（Ｉｂ）（１．０当量）、およびカルボン酸基（１．０当量）を含むＮ保護リンカーをジクロロメタンなどの適切な有機溶媒で希釈し、得られた溶液を、ＨＡＴＵ（１．５当量）、およびピリジン（１．５当量）などの有機塩基で処理する。反応混合物をアルゴンなどの不活性雰囲気下で６時間撹拌し、その間、この反応混合物をＨＰＬＣを使用して監視する。反応混合物を濃縮し、得られた残渣をＨＰＬＣを使用して精製すると、式ＡＫのアミドが得られる。
【０３２７】
一般的手順Ｈ：ＨＯＢｔを使用するカルバメート形成。ｐ−ニトロフェニルカルボネート（１．１当量）を有するリンカーＡＬと薬剤（Ｉｂ）（１．０当量）の混合物を、ＤＭＦなどの非プロトン性有機溶媒で希釈して、濃度が５０〜１００ｍＭの溶液を生成し、得られた溶液をＨＯＢｔ（２．０当量）で処理し、アルゴンなどの不活性雰囲気下に置く。反応混合物を１５分間撹拌し、ピリジン（１／４（体積／体積））などの有機塩基を添加し、反応の進行をＨＰＬＣを使用して監視する。リンカーは、一般に、１６時間以内で消費される。次いで、反応混合物を真空下で濃縮し、得られた残渣を、例えばＨＰＬＣを使用して精製すると、カルバメートＡＭが得られる。
【０３２８】
図８に薬剤−リンカー化合物を調製する代替法を概説しており、そこでは薬剤部分Ｄをストレッチャーユニットが結合していないリンカー試薬と反応させている。これは、Ｆｍｏｃ保護Ｎ末端を有するアミノ酸ユニットを含む中間体ＡＰを提供する。その後Ｆｍｏｃ基を除去し、次いで得られたアミン中間体ＡＱをＰｙＢｒｏｐまたはＤＥＰＣを触媒に使用したカップリング反応によってストレッチャーユニットに結合させる。図９にブロモアセトアミドストレッチャーＡＲまたはＰＥＧマレイミドストレッチャーＡＳを含む薬剤−リンカー化合物の構築を例示しており、そこでは、Ｑは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−ハロゲン、−ニトロ、または−シアノであり；ｍは、０〜４の整数である。
【０３２９】
図１０は、枝分かれ状スペーサーを含むリンカーユニットの調製を示しており、そこには、マレイミドストレッチャーユニットおよびビス（４−ヒドロキシメチル）スチレン（ＢＨＭＳ）ユニットを有するｖａｌ−ｃｉｔジペプチドリンカーの合成を例示している。ＢＨＭＳ中間体（ＡＷ）の合成は、以前の文献の方法（国際公開ＷＯ９８／１３０５９号、およびＣｒｏｚｅｔら、（１９８５年）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．、第２６巻、５１３３〜５１３４頁を参照）から改善されており、市販のジエチル（４−ニトロベンジル）ホスホネート（ＡＴ）および市販の２，２−ジメチル−１，３−ジオキサン−５−オン（ＡＵ）を出発原料として利用する。リンカーＡＹおよびＢＡは、中間体ＡＷから調製され得る。
【０３３０】
薬剤部分の抗体への結合体化
本発明のビス−１，８−ナフタルイミド薬剤部分と結合体化するための抗体を調製する典型的な一方法には、ジチオトレイトール（ＤＴＴ）などの還元剤で抗体を処理して、システインジスルフィド残基のうちのいくつかまたはすべてを還元して、高求核性のシステインチオール基（−ＣＨ２ＳＨ）を形成することが必要である。したがって、部分的に還元された抗体は、Ｋｌｕｓｓｍａｎら、（２００４年）、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第１５（４）巻、７６５〜７７３頁の７６６頁の複合方法に従って、ビス−１，８−ナフタルイミド薬剤−リンカー化合物、またはマレイミドやα−ハロカルボニルなどの求電子官能基を有するリンカー試薬と反応する。
【０３３１】
例えば、ｐＨ８．０のホウ酸ナトリウム５００ｍＭおよび塩化ナトリウム５００ｍＭに溶解させた抗体、例えばトラスツズマブを、過剰なジチオトレイトール（ＤＴＴ）１００ｍＭで処理する。３７℃で約３０分間インキュベートした後、緩衝液をＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ２５樹脂で溶出させて交換し、ＤＴＰＡ１ｍＭを含むＰＢＳで溶出する。チオール／Ａｂ値は、還元済み抗体の濃度を溶液の２８０ｎｍの吸光度から決定し、ＤＴＮＢ（Ａｌｄｒｉｃｈ、ミルウォーキー、ウィスコンシン州）との反応によるチオールの濃度を４１２ｎｍの吸光度から決定することによって確認される。ＰＢＳに溶解した還元済み抗体を、氷上で冷却する。既知濃度のアセトニトリルと水に溶解したＤＭＳＯ中の薬剤リンカー、例えばＭＣ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢ−ビス−１，８−ナフタルイミドを、ＰＢＳ中の冷却した還元済み抗体に添加する。約１時間後、マレイミドを過剰に添加して、反応をクエンチし、いずれの未反応の抗体のチオール基にキャップをつける。反応混合物を遠心限外ろ過によって濃縮し、ＡＤＣ、例えばトラスツズマブ−ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ビス−１，８−ナフタルイミドを、ＰＢＳ中のＧ２５樹脂に通して溶出させて精製および脱塩し、滅菌条件下で０．２μｍのフィルタに通してろ過し、貯蔵のために凍結させる。
【０３３２】
抗体薬剤結合体と医薬製剤の投与
本発明の抗体薬剤結合体（ＡＤＣ）は、治療すべき病態に任意の適切な経路で投与され得る。このＡＤＣは、一般に、非経口的に、すなわち、注入、皮下、筋肉内、静脈内、皮内、くも膜下腔内、および硬膜外に投与されるであろう。
【０３３３】
本発明の治療用抗体薬剤結合体（ＡＤＣ）の医薬配合物は、一般に、薬学的に許容される非経口用ビヒクルと共に単位投与量注射剤形で、非経口投与、すなわち、ボーラス、静脈内、腫瘍内注射用に調製される。純度が所望の程度である抗体薬剤結合体（ＡＤＣ）は、場合によっては、薬学的に許容される希釈剤、担体、賦形剤、または安定化剤（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１９８０年）、第１６版、Ａ．Ｏｓｏｌ編集）と一緒に凍結乾燥された配合物または水溶液の形で混合される。
【０３３４】
許容される希釈剤、担体、賦形剤、および安定化剤は、使用される用量および濃度においてレシピエントに対して無毒であり、それらとしては、緩衝液、例えば、リン酸塩、クエン酸塩、他の有機酸；アスコルビン酸およびメチオニンを含めた抗酸化剤；防腐剤（オクタデシルジメチルベンジル塩化アンモニウム；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチルアルコールまたはベンジルアルコール；メチルパラベンやプロピルパラベンなどのアルキルパラベン；カテコール；レソルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；ｍ−クレゾールなど）；低分子量（残基が約１０個未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチン、免疫グロブリンなど；親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドンなど；アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、リシンなどの；単糖、二糖、およびグルコース、マンノース、またはデキストリンを含めた他の炭水化物；キレート剤、例えば、ＥＤＴＡなど；糖、例えば、ショ糖、マンニトール、トレハロース、ソルビトールなど；塩形成対イオン、例えば、ナトリウムなど；金属錯体（例えばＺｎタンパク質錯体）；ならびに／あるいは非イオン性界面活性剤、例えば、ＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などが挙げられる。例えば、凍結乾燥された抗ＥｒｂＢ２抗体配合物は、参照により明らかに本明細書に組み込む国際公開ＷＯ９７／０４８０１号に記載されている。
【０３３５】
有効医薬成分はまた、例えば、コアセルベーション技術によって、または界面重合によって製造されたマイクロカプセル、例えば、ヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチンマイクロカプセル、およびポリ−（メタクリル酸メチル）マイクロカプセル中に、それぞれコロイド状薬剤送達システム（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子、およびナノカプセル）として、またはマクロエマルジョンとして封入され得る。こうした技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１６版、Ａ．Ｏｓｏｌ編集、（１９８０年）に開示されている。
【０３３６】
徐放性製剤を調製することができる。徐放性製剤の適切な例としては、マトリクスが成形品、例えばフィルムまたはマイクロカプセルの形をしている、ＡＤＣを含む固体の疎水性ポリマーからなる半透性マトリクスが挙げられる。徐放性マトリクスの例としては、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）またはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（米国特許第３７７３９１９号）、Ｌ−グルタミン酸とγ−エチル−Ｌ−グルタミン酸塩のコポリマー、非分解性エチレン酢酸ビニル、ＬＵＰＲＯＮ  ＤＥＰＯＴ（商標）などの分解性乳酸−グリコール酸コポリマー（乳酸−グリコール酸コポリマーおよび酢酸ロイプロリドからなる注射可能なマイクロスフェア）、およびポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸が挙げられる。
【０３３７】
インビボ投与に使用される配合物は、無菌でなければならず、それは除菌ろ過膜によるろ過で容易に実現される。
【０３３８】
こうした配合物としては、前述の投与経路に適したものが挙げられる。この配合物は、好都合には単位剤形で存在し、薬学分野でよく知られる方法のどれによっても調製され得る。これらの技術および配合物は、一般に、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、イーストン、ペンシルベニア州）に見られる。こうした方法には、有効成分を１種または複数の補助成分となる担体と会合させる工程が含まれる。一般に、これらの配合物は、有効成分を、液体の担体もしくは微粉固体の担体またはその両方と一様にかつ完全に会合させることによって製造され、必要に応じて製品に成形する。
【０３３９】
本発明の水性懸濁液は、水性懸濁液の製造に適した賦形剤を含む混合物として有効材料を含む。こうした賦形剤としては、懸濁化剤、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、クロスカルメロース、ポビドン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴム、アラビアゴムなど；および分散剤または湿潤剤、例えば、天然リン脂質（例えばレシチン）、酸化アルキレンと脂肪酸との縮合物（例えばステアリン酸ポリオキシエチレン）、酸化エチレンと長鎖脂肪族アルコールとの縮合物（例えばヘプタデカエチレンオキシエタノール）、酸化エチレンと脂肪酸およびヘキシトール無水物由来の部分エステルとの縮合物（例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン）などが挙げられる。この水性懸濁液はまた、１種または複数の防腐剤、例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルやｐ−ヒドロキシ安息香酸ｎ−プロピルなど；１種または複数の着色剤、１種または複数のフレーバー付与剤、および１種または複数の甘味剤、例えば、ショ糖やサッカリンなどを含むことができる。
【０３４０】
ＡＤＣの医薬組成物は、無菌注射可能な水性または油性の懸濁液などの無菌注射用製剤の形状とすることができる。この懸濁液は、上記で言及したこうした適切な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤を使用して既知の技術に従って製造され得る。また、この無菌注射用製剤を、１，３−ブタンジオール中の溶液など、無毒な非経口上許容される希釈剤または溶媒中の無菌注射用溶液または懸濁液としてもよく、あるいは凍結乾燥された散剤として製造してもよい。使用可能な許容されるビヒクルおよび溶媒には、水、リンゲル液、および等張食塩水がある。さらに、無菌の不揮発性油は、常法により、溶媒または懸濁媒として使用され得る。この目的では、任意のブランドの不揮発性油も、合成によるモノまたはジグリセリドを含めて使用することができる。さらに、オレイン酸などの脂肪酸は、同様に注射可能な製剤において使用され得る。
【０３４１】
担体材料と一緒にして単一剤形を形成することができる有効成分の量は、治療されるホストおよび投与の特定の形式に応じて変わる。例えば、静脈注射を対象とした水溶液は、約３０ｍＬ／時間の速度で適切な量を注入することができるように、溶液１ミリリットル当たり有効成分を約３〜５００μｇ含むことができる。
【０３４２】
非経口投与に適した配合物としては、配合物を所期のレシピエントの血液と等張にする酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤、および溶質を含むことができる水性および非水性の無菌注射溶液；ならびに懸濁化剤および増粘剤を含むことができる水性および非水性の無菌懸濁液が挙げられる。
【０３４３】
タンパク質治療剤の経口投与は腸内での加水分解または変性のために疎んじられるが、経口投与に適したＡＤＣの配合物は、各々が所定量のＡＤＣを含む、カプセル剤、カシェ剤、錠剤などの個別のユニットとして製造され得る。
【０３４４】
これらの配合物は、単位投与または多数回投与容器、例えば密封されたアンプルおよびバイアルに包装され得、注射のために使用直前に無菌の液状担体、例えば水の添加のみを必要とする凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｉｅｄ）（凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ））状態で貯蔵され得る。即席の注射溶液および懸濁液は、先に記載した種類の無菌の散剤、顆粒、および錠剤から調製される。例示的な単位用量製剤には、有効成分の上記に列記したような一日量もしくは一日量を何回分かに分けた用量、またはその適切なフラクションが含まれる。
【０３４５】
本発明はさらに、獣用担体と一緒に上記で定義したような少なくとも１種の有効成分を含む獣用組成物を提供する。獣用担体は、組成物を投与する目的に有用な材料であり、固体、液体、または気体状の材料であり得、そうでなければ、獣医学技術において不活性または受容可能であり、有効成分と適合する。これらの獣用組成物は、非経口的、経口的、またはその他の所望のどんな経路によっても投与され得る。
【０３４６】
抗体薬剤結合体治療
本発明の抗体薬剤結合体（ＡＤＣ）は、様々な疾患または障害、例えば腫瘍抗原の過剰発現を特徴とするものを治療するのに使用され得ると考えられる。例示的な病態または障害としては、良性または悪性の腫瘍；白血病およびリンパ系悪性腫瘍；ニューロン、グリア、アストロサイト、視床下部、腺性、マクロファージ、上皮、ストロマ、胞胚腔、炎症性、血管形成、および免疫性の障害などその他の障害が挙げられる。
【０３４７】
動物モデルおよび細胞ベースアッセイで確認されるＡＤＣ化合物はさらに、腫瘍を有する高等霊長類およびヒトの治験において試験され得る。ヒトの治験は、Ｂａｓｅｌｇａら、（１９９６年）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．、第１４巻、７３７〜７４４頁に報告されるような予め抗癌治療を広範囲に受けたＨＥＲ２過剰発現性転移性乳癌の患者における抗ＨＥＲ２モノクローナル抗体ＨＥＲＣＥＰＴＩＮの効果を試験する治験と同様に設計され得る。この治験は、既知の化学療法剤および／または細胞毒性剤に関する放射線および／または化学療法など、既知の治療計画と組み合わせたＡＤＣの効果を評価するように設計され得る。
【０３４８】
一般に、治療すべき疾患または病気は、癌である。本明細書で治療すべき癌の例としては、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、および白血病またはリンパ系悪性腫瘍が挙げられるが、それらだけに限らない。こうした癌のより詳細な例としては、扁平細胞癌（例えば上皮扁平細胞癌）、小細胞肺癌を含めた肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌および肺の扁平上皮癌、腹膜の癌、肝細胞癌、消化器癌を含めた腸または胃癌、膵臓癌、神経膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝細胞腫、乳癌、大腸癌、直腸癌、直腸結腸癌、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓（ｋｉｄｎｅｙまたはｒｅｎａｌ）癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、ならびに頭頸部癌が挙げられる。
【０３４９】
癌は、一般に、ＨＥＲ２発現性細胞を含み、それにより本発明のＡＤＣが癌細胞に結合することができる。癌におけるＥｒｂＢ２発現を決定するのに、様々な診断／予知診断アッセイを利用することができる。一実施形態では、ＥｒｂＢ２過剰発現は、例えばＨＥＲＣＥＰＴＥＳＴ（Ｄａｋｏ）を使用するＩＨＣによって分析され得る。パラフィンに包埋された腫瘍生検由来の組織セクションをＩＨＣアッセイにかけ、ＥｒｂＢ２タンパク質染色強度基準を以下のように与える：スコア０、染色が観察されないか、または１０％以下の腫瘍細胞において膜染色が観察される；スコア１＋、１０％超の腫瘍細胞において、かすかに／わずかに認知可能な膜染色が検出され、細胞はその膜が部分的に染色されているのみである；スコア２＋、１０％超の腫瘍細胞において、弱〜中程度の完全膜染色が観察される；スコア３＋、１０％超の腫瘍細胞において、中程度〜強い完全膜染色が観察される。
【０３５０】
ＥｒｂＢ２過剰発現評価に関するスコアが０または１＋のこうした腫瘍は、ＥｒｂＢ２を過剰発現していないことを特徴とし、２＋または３＋の腫瘍は、ＥｒｂＢ２の過剰発現を特徴とすることができる。
【０３５１】
あるいは、またはさらに、ＩＮＦＯＲＭ（商標）（Ｖｅｎｔａｎａ  Ｃｏ．、アリゾナ州）やＰＡＴＨＶＩＳＩＯＮ（商標）（Ｖｙｓｉｓ、イリノイ州）などのＦＩＳＨアッセイを、ホルマリン固定、パラフィン包埋腫瘍組織に対して行って、腫瘍におけるＥｒｂＢ２過剰発現の程度（存在すれば）を決定することができる。
【０３５２】
本明細書で治療すべき癌は、ＥｒｂＢ受容体、例えばＨＥＲ２の過剰活性化を特徴とする癌であり得る。こうした過剰活性化は、ＥｒｂＢ受容体またはＥｒｂＢリガンドの過剰発現または産生増大に原因がある可能性がある。本発明の一実施形態では、診断または予知診断アッセイは、患者の癌がＥｒｂＢ受容体の過剰活性化を特徴とするかどうかを判断するために行なわれる。例えば、癌のＥｒｂＢ受容体のＥｒｂＢ遺伝子増幅および／または過剰発現を判断することができる。こうした増幅／過剰発現を決定するための様々なアッセイは、当技術分野で利用可能であり、上述のＩＨＣ、ＦＩＳＨ、および脱落抗原アッセイが挙げられる。あるいは、またはさらに、腫瘍内のまたは腫瘍に関連するＴＧＦ−αなどのＥｒｂＢリガンドのレベルを、既知の方法に従って決定することができる。こうしたアッセイは、試験されるサンプル中のそれをコードするタンパク質および／または核酸を検出することができる。一実施形態では、腫瘍中のＥｒｂＢリガンドレベルは、免疫組織化学（ＩＨＣ）を使用して決定され得、例えば、Ｓｃｈｅｒら、（１９９５年）、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、第１巻、５４５〜５５０頁を参照されたい。あるいは、またはさらに、例えば、ＦＩＳＨ、サザンブロット法、またはＰＣＲ技術によって試験されるサンプル中のＥｒｂＢリガンドコード核酸のレベルを評価することができる。
【０３５３】
さらに、ＥｒｂＢ受容体もしくはＥｒｂＢリガンドの過剰発現または増幅は、インビボ診断アッセイを使用して、例えば、検出される分子を結合し、検出可能なラベル（例えば放射性同位元素）で標識される分子（抗体など）を投与し、ラベルの局在化を見るのに患者を外側からスキャニングすることによって評価され得る。
【０３５４】
疾患の予防または治療では、ＡＤＣの適切な投与用量は、上記で定義したような治療される疾患の種類、疾患の重さおよび経路、分子が予防目的で投与されるのかまたは治療目的で投与されるのか、過去の治療歴、患者の病歴および抗体に対する反応、ならびに主治医の判断に依存するであろう。この分子は、適切には、患者に一度にまたは一連の治療に渡り投与される。疾患の種類および重さに応じて、分子約１μｇ／ｋｇ〜１５ｍｇ／ｋｇ（例えば、０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ）が、例えば、１個もしくは複数の別個の投与によって、または連続注入によって患者に投与される最初の投与用量候補である。上述の因子に応じて、通常の一日投与用量は、約１μｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇまたはそれ以上の範囲である。患者に投与すべきＡＤＣの通常の投与用量は、患者の体重１Ｋｇ当たり約０．１〜約１０ｍｇの範囲にある。
【０３５５】
数日間またはそれ以上に渡って繰り返される投与では、病態に応じて、疾患症状の所望の抑制が起こるまで治療を維持する。例示的な投与計画は、抗ＥｒｂＢ２抗体を初負荷投与量として約４ｍｇ／ｋｇ投与し、続いて毎週約２ｍｇ／ｋｇの維持量を投与することを含む。他の投与計画も有用かもしれない。この治療の経過は、従来の技術およびアッセイによって容易に監視される。
【０３５６】
併用療法
本発明の抗体薬剤結合体（ＡＤＣ）を、医薬品併用配合、または併用療法としての投与法において抗癌特性を有する別の化合物と併用することができる。この医薬品併用配合または投与法の別の化合物は、併用物のＡＤＣに対して相補的な活性を有する可能性があり、それによりそれらは互いに悪影響を及ぼさない。
【０３５７】
この別の化合物は、化学療法剤、細胞毒性剤、サイトカイン、増殖阻害剤、抗ホルモン剤、および／または心臓保護剤（ｃａｒｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔ）とすることができる。こうした分子は、適切には、所期の目的に有効な量で組み合わさって存在する。本発明のＡＤＣを含有する医薬組成物はまた、チューブリン形成阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、ＤＮＡ結合剤などの化学療法剤の治療有効量を含むことができる。
【０３５８】
あるいは、またはさらに、この別の化合物は、ＥｒｂＢ２を結合し、ＥｒｂＢ受容体のリガンド活性化をブロックする抗体とすることができる。この第２の抗体は、モノクローナル抗体２Ｃ４またはヒト化２Ｃ４とすることができる。この第２の抗体は、細胞障害剤または化学療法剤、例えば１，８−ビスナフタルイミド部分と複合され得る。例えば、ある配合または投与法では、ＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ３、ＥｒｂＢ４、または血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）に結合する抗体を提供することが望ましい。本発明の例示的な併用療法は、式ＩのＡＤＣおよびベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ、サウスサンフランシスコ、カリフォルニア州）である。
【０３５９】
他の治療計画を、本発明に従って確認された抗癌剤の投与と組み合わせることができる。併用療法は、同時または連続療法として管理され得る。連続投与の場合、組合せは、２回以上の投与で施され得る。併用投与としては、別々の配合物または単一の医薬配合物を使用する共投与、およびいずれかの順序による連続的な投与が挙げられ、その場合、両方（またはすべて）の活性剤がそれらの生物学的活性を同時に発揮する期間が存在する。
【０３６０】
一実施形態では、本発明のＡＤＣによる治療は、場合によってはトラスツズマブなどの抗ＥｒｂＢ２抗体による治療と共に、様々な化学療法剤のカクテルからなる同時投与を含めた本明細書で確認された抗癌剤と１種もしくは複数の化学療法剤または増殖阻害剤との併用投与を含む。化学療法剤としては、タキサン（パクリタキセルやドキセタキセルなど）および／またはアントラサイクリン系抗生物質が挙げられる。こうした化学療法剤の調製および投与スケジュールは、製造元の指示に従い、または当業者によって経験的に決定されるように使用され得る。こうした化学療法の調製および投与スケジュールはまた、Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  Ｓｅｒｖｉｃｅ編、Ｍ．Ｃ．Ｐｅｒｒｙ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ、ボルティモア、メリーランド州（１９９２年）に記載されている。
【０３６１】
抗癌剤を、抗ホルモン化合物；例えばタモキシフェンなどの抗エストロゲン化合物；オナプリストン（欧州特許第ＥＰ６１６８１２号）などの抗プロゲステロン剤；またはフルタミドなどの抗アンドロゲン剤と、こうした分子に関して周知の投与用量で併用することができる。治療すべき癌がホルモン依存性癌である場合、患者は予め抗ホルモン療法を受け、癌がホルモン依存性になった後、抗ＥｒｂＢ２抗体（場合によっては本明細書に記載の他の薬剤）を、患者に投与することができる。また、（治療に関連する心筋機能障害を予防または減少させるのに）心臓保護剤または１種もしくは複数のサイトカインを患者に同時投与することも有益である可能性がある。上記の治療法に加えて、患者は、癌細胞の外科的除去および／または放射線療法を受けることができる。
【０３６２】
上記の同時投与される薬剤のいずれかの適切な投与用量は、現在使用されている用量であり、新規に同定された薬剤とその他の化学療法剤または治療との共同作用（相乗作用）に起因して減らすことができる。
【０３６３】
併用療法は、一緒に使用される有効成分が化合物を別々に使用して得られる効果の合計よりも大きい場合、「相乗作用」をもたらし、「相乗的」、すなわち効果が実現されたことを示すことができる。相乗効果は、有効成分が：（１）同時処方され、併用された単位投与配合物として同時に投与または送達され；（２）別個の配合物として交互にまたは平行して送達される場合、あるいは（３）他のいくつかの計画によって達成され得る。交互療法で送達される場合、相乗効果は、化合物が、例えば別個のシリンジで異なった注射によって、連続して投与または送達されるときに達成され得る。一般に、交互療法中は、各有効成分の有効用量が逐次的、つまり連続的に投与されるが、併用療法では２種以上の有効成分の有効用量が一緒に投与される。
【０３６４】
抗体薬剤結合体の代謝産物
本明細書に記載のＡＤＣ化合物のインビボ代謝生成物はまた、こうした生成物が、従来技術に対して新規であり、自明ではないという点で、本発明の範囲内にある。こうした生成物は、例えば、投与された化合物の酸化、還元、加水分解、アミド化、エステル化、酵素開裂、およびその他同種のものから生じ得る。従って、本発明は、本発明の化合物を、その代謝生成物を産生するのに十分な期間、哺乳動物に接触させる工程を含むプロセスによって産生される新規で自明ではない化合物を含む。
【０３６５】
これらの代謝生成物は、一般に、放射性同位体で標識された（例えば、Ｃ１４またはＨ３）ＡＤＣを調製し、これを非経口的に検出可能用量（例えば、約０．５ｍｇ／ｋｇ超）でラット、マウス、モルモット、サルなどの動物、またはヒトに投与し、代謝が起こるのに十分な時間（一般に、約３０秒〜３０時間）放置し、尿、血液、またはその他の生物学的サンプルから転換生成物を単離することによって同定され得る。これらの生成物は、標識されているので容易に単離される（他は、代謝産物中に残存するエピトープを結合し得る抗体の使用によって単離される）。代謝産物の構造は、従来の方法、例えば、ＭＳ、ＬＣ／ＭＳ、またはＮＭＲ分析によって決定される。一般に、代謝産物の分析は、当業者によく知られる薬物代謝研究と同様に行われる。転換生成物は、それらがインビボで他に見られない限り、本発明のＡＤＣ化合物の治療投薬に対する診断アッセイに有用である。
【０３６６】
製品
本発明の別の実施形態では、上述の障害の治療に有用な材料を含む製品、または「キット」を提供する。この製品は、容器、および容器上にまたは添付されてラベルまたは添付文書を有する。適切な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、シリンジ、ブリスターパックなどが挙げられる。容器は、ガラスやプラスチックなど様々な材料から形成され得る。容器は、病態の治療に有効な抗体薬剤結合体（ＡＤＣ）組成物を収容し、無菌のアクセスポートを有することができる（例えば、容器は、皮下注射針によって貫通可能な栓を有する静脈注射溶液バッグまたはバイアルでもよい）。組成物中の少なくとも１種の活性剤は、ＡＤＣである。ラベルまたは添付文書は、組成物が、癌など選択される病態の治療に使用されることを示すものである。
【０３６７】
製品は、（ａ）その製品中に含まれる化合物が入った第１容器であって、その化合物が、ＡＤＣの抗体が癌細胞の増殖を阻害する最初の抗体である本発明のＡＤＣを含む第１容器と；（ｂ）その製品中に含まれる化合物が入った第２容器であって、その化合物が、生物活性を有する別の化合物、組成物、または配合物を含む第２容器とを有することができる。本発明のこの実施形態における製品はさらに、第１および第２の化合物が、癌またはその他の障害の治療に使用することができることを示す添付文書を有することができる。あるいは、またはさらに、この製品は、静菌性注射用水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リンゲル液、デキストロース溶液などの薬学的に許容される緩衝剤を含む第２（または第３）の容器をさらに有することができる。これはさらに、他の緩衝剤、希釈剤、フィルタ、針、およびシリンジを含めた、商業的にかつ使用者の立場から望ましい他の材料を含むことができる。
【実施例】
【０３６８】
（実施例１）４−モルホリノ−ナフトエ酸無水物１の合成
【０３６９】
【化１１１】
2008521920.tif 000077
４−ブロモナフタル酸無水物（０．２１ｇ、０．７４ｍｍｏｌ）とモルホリン（０．６１ｍｌ、０．７０ｍｍｏｌ）とエタノール５ｍｌとの混合物を、１５ｍｌ容の密封した管において１６０℃で４．５時間加熱した。冷却後、混合物を真空下で濃縮し、ジクロロメタン３０ｍｌに溶解させ、１Ｍのクエン酸で洗浄し、乾燥させ、濃縮した。オレンジ色固体をトルエンで摩砕（ｔｒｉｔｕｒａｔｅ）して、オレンジ色固体の４−モルホリノ−１，８−ナフタル酸無水物１（０．０８９ｇ、収率５１％）を得た。ＬＣ／ＭＳ  −  ２８３ＭＷ。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），８．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），８．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．７５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）；７．２７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）；４．３１（４Ｈ，ｍ）；３．３１（４Ｈ，ｍ）。
【０３７０】
（実施例２）１，３−ビスグリシル−１，３−ジアミノプロパン２の合成
【０３７１】
【化１１２】
2008521920.tif 000078
カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ、０．７１ｇ、４．４０ｍｍｏｌ）を、窒素下、０℃で、ジクロロメタン１０ｍｌとＢＯＣ−グリシン（０．７３ｇ、４．１９ｍｍｏｌ）との混合物に添加した。０℃で２時間した後、１，３−プロパンジアミン（０．１８ｍｌ、２．０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温に温め、一晩撹拌した。混合物をジクロロメタンで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３で抽出した。水相をジクロロメタンで２回抽出した。一緒にした有機相を飽和ＮａＣｌで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮して、１，３−ビス−ＢＯＣ−グリシル−１，３−ジアミノプロパン中間体を白色粘性固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ６．７６（２Ｈ，ｓ，ｂｒ）；５．３０（２Ｈ，ｓ，ｂｒ）；３．７７（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ）；３．３１（４Ｈ，ｍ）；１．６６（２Ｈ，ｍ）；１．４（９Ｈ，ｍ）。この中間体を１ＭのＨＣｌを含むＡｃＯＨ１６ｍｌで採取し、窒素下の室温で２時間撹拌した。混合物を真空下で濃縮して白色固体を得、それをジエチルエーテルで摩砕して、１，３−ビスグリシル−１，３−ジアミノプロパン２のビス塩酸塩を黄色オイルとして得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）：δ  ３．７８（４Ｈ，ｓ），３．２６（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ）；１．６６（２Ｈ，ｍ）。
【０３７２】
（実施例３）Ｎ１，Ｎ３−ビス（２−アミノエチル）マロンアミド３の合成
【０３７３】
【化１１３】
2008521920.tif 000079
塩化マロニル（０．５ｍｌ、５．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液４ｍｌを窒素下で０℃で撹拌し、次いで、モノＢＯＣ−１，２−ジアミノエタン（１．６ｍｌ、１０．０ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（１．６７ｍｌ、１２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン撹拌溶液５ｍｌに、３０分かけて０℃で滴下した。溶液を室温に温め、一晩撹拌した。濁ったオレンジ色の混合物をジクロロメタン９０ｍｌで希釈し、２ＮのＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ３、および飽和ＮａＣｌで各々３０ｍｌで洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮して、ビスＢＯＣ中間体を粘性オレンジ色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．２７（２Ｈ，ｍ）；５．０１（４Ｈ，ｓ，ｂｒ）；３．３８（４Ｈ，ｍ）；３．２８（４Ｈ，ｍ）；３．１６（ｓ，２Ｈ）。ＢＯＣ基を除去してＮ１，Ｎ３−ビス（２−アミノエチル）マロンアミド３を得た。
【０３７４】
（実施例４）Ｎ−グリシル−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド４の合成
【０３７５】
【化１１４】
2008521920.tif 000080
ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）１．５ｍｌ中の３−ニトロ−１，８−ナフタル酸無水物（０．１５５ｇ、０．６４ｍｍｏｌ）とグリシン（０．０４８ｇ、０．６４ｍｍｏｌ）との混合物を、窒素下で１００℃で約１２時間加熱した。混合物を酢酸エチルで希釈し、１．０Ｍのクエン酸で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮して、Ｎ−グリシル−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド４を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ９．５４（１Ｈ、Ｊ＝２．２Ｈｚ；８．９９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ）；８．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；８．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）；８．０９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；４．７６（ｓ，２Ｈ）。
【０３７６】
（実施例５）Ｎ−グリシル−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド５の合成
【０３７７】
【化１１５】
2008521920.tif 000081
ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）３ｍｌ中の４−アミノ−１，８−ナフタル酸無水物（０．２３０ｇ、１．０３ｍｍｏｌ）とグリシン（０．２３９ｇ、３．１９ｍｍｏｌ）との混合物を、窒素下で２００℃で１０分間マイクロ波処理によって加熱した。混合物のＬＣ／ＭＳ分析は、出発材料の無水物の転換が完了したことを示した。混合物を冷却し、ろ過し、沈澱物を乾燥させてＮ−グリシル−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド５を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．６５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ）；８．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ）；８．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）；７．６７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）；６．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）；４．６７（ｓ，２Ｈ）。
【０３７８】
（実施例６）Ｎ−グリシル−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド６の合成
【０３７９】
【化１１６】
2008521920.tif 000082
ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）３ｍｌ中の４−モルホリノ−１，８−ナフタル酸無水物（０．１６３ｇ、０．６３ｍｍｏｌ）とグリシン（０．１０ｇ、１．３３ｍｍｏｌ）との混合物を、窒素下で１０分間マイクロ波処理を用いて２００℃に加熱した。混合物を酢酸エチルで希釈し、１．０Ｍのクエン酸で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮して、Ｎ−グリシル−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド６を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．６３（２Ｈ，ｍ），８．５５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；７．９５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）；７．５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）；４．８２（２Ｈ，ｓ）；４．２０（４Ｈ，ｍ）；３．３６（４Ｈ，ｍ）。
【０３８０】
（実施例７）Ｎ−アミノエチルエトキシ−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド７の合成
【０３８１】
【化１１７】
2008521920.tif 000083
０．２Ｍの２，２’−オキシジエチルアミンジヒドロクロリド（０．２４７ｇ、１．３５ｍｍｏｌ）と０．４ＭのＤＩＥＡ（０．４７ｍｌ、２．７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ４．５ｍｌ懸濁液を、３−ニトロ−１，８−ナフタル酸無水物（０．０１８ｇ、０．０７３ｍｍｏｌ）に添加し、窒素下で５分間マイクロ波処理を用いて１５０℃に加熱した。混合物を冷却し、１．３ＭのＴＦＡ水溶液２５ｍｌで処理し、約２ｍｌに濃縮した。残渣をジクロロメタンで希釈し、飽和ＮａＣｌで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮して、Ｎ−アミノエチルエトキシ−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド７を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３３０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３８２】
（実施例８）Ｎ−アミノエチルエトキシ−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド８の合成
【０３８３】
【化１１８】
2008521920.tif 000084
０．２Ｍの２，２’−オキシジエチルアミンジヒドロクロリド（０．１６７ｇ、０．９２ｍｍｏｌ）と０．４ＭのＤＩＥＡ（０．４０ｍｌ、２．３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ２．５ｍｌ懸濁液を、４−アミノ−１，８−ナフタル酸無水物（０．０６７ｇ、０．３０ｍｍｏｌ）に添加し、窒素下で１０分間マイクロ波処理を用いて１７０℃に加熱した。混合物を冷却し、真空下で濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ−アミノエチルエトキシ−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド８を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３００（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３８４】
（実施例９）Ｎ−アミノエチルエトキシ−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド９の合成
【０３８５】
【化１１９】
2008521920.tif 000085
０．２Ｍの２，２’−オキシジエチルアミンジヒドロクロリド（０．１３５ｇ、０．７４ｍｍｏｌ）と０．４ＭのＤＩＥＡ（０．３２ｍｌ、１．８５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ２．５ｍｌ懸濁液を、４−モルホリノ−１，８−ナフタル酸無水物（０．０６８ｇ、０．２４ｍｍｏｌ）に添加し、窒素下で１２分間マイクロ波処理を用いて１５０℃に加熱した。混合物を冷却し、ジクロロメタンで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮して、Ｎ−アミノエチルエトキシ−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド９を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ８．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）；８．５３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；８．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）；７．７０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）；７．２５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）；４．４３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ）；４．０２（４Ｈ，ｍ）；３．８０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ）；３．５４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ）；３．２６（４Ｈ，ｍ）；２．８１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ）。
【０３８６】
（実施例１０）Ｎ−アミノプロピルエチルアミン−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１０ａおよびＮ−アミノエチルプロピルアミン−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１０ｂの合成
【０３８７】
【化１２０】
2008521920.tif 000086
３−ニトロ−１，８−ナフタル酸無水物（０．６４１ｇ、２．６４ｍｍｏｌ）と２−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン（１ｍｌ、７．６８ｍｍｏｌ）とエタノール２．５ｍｌとの混合物を、３０分間かけて０℃から１００℃に加熱し、次いで１００℃で２時間加熱した。ＬＣ／ＭＳ分析は、反応が完了し、諸生成物が２：１の比で生成されたことを示した。混合物を冷却し、真空下で濃縮し、ＤＭＦにおいて採取し、分取ＨＰＬＣで精製し、それによって諸生成物のＮ−アミノプロピルエチルアミン−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１０ａ（１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＦ３ＣＯ２Ｄ）：δ９．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ）；９．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ）；８．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）；８．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ）；８．０４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；４．７５（２Ｈ，ｍ）；３．７９（ｍ，２Ｈ）；３．５０（２Ｈ，ｍ）；３．４０（２Ｈ，ｍ）；２．４２（ｍ，２Ｈ））、およびＮ−アミノエチルプロピルアミン−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１０ｂに純度が約８５〜９１％で分離された。
【０３８８】
（実施例１１）Ｎ−アミノプロピルエチルアミン−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド１１ａおよびＮ−アミノエチルプロピルアミン−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド１１ｂの合成
【０３８９】
【化１２１】
2008521920.tif 000087
４−アミノ−１，８−ナフタル酸無水物（０．４７７ｇ、２．１３ｍｍｏｌ）と２−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン（０．８３ｍｌ、６．３８ｍｍｏｌ）とエタノール２．５ｍｌとの混合物を、３０分間かけて０℃から１００℃に加熱し、次いでマイクロ波処理を用いて１００℃で２時間加熱した。ＬＣ／ＭＳ分析は、反応が完了し、諸生成物が２：１の比で生成されたことを示した。混合物を冷却し、真空下で濃縮し、ＤＭＦにおいて採取し、分取ＨＰＬＣで精製し、それによって諸生成物のＮ−アミノプロピルエチルアミン−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド１１ａ（１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＦ３ＣＯ２Ｄ）：δ８．８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）；８．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）；８．０７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；４．７５（２Ｈ，ｍ）；３．８０（２Ｈ，ｍ）；３．４９（２Ｈ，ｍ）；３．４１（２Ｈ，ｍ）；３．３４（２Ｈ，ｍ））、およびＮ−アミノエチルプロピルアミン−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド１１ｂに各々純度が約９８％で分離された。
【０３９０】
（実施例１２）Ｎ−アミノプロピルエチルアミン−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド１２ａおよびＮ−アミノエチルプロピルアミン−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド１２ｂの合成
【０３９１】
【化１２２】
2008521920.tif 000088
４−モルホリノ−１，８−ナフタル酸無水物（０．３１７ｇ、１．０６ｍｍｏｌ）と２−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン（０．４４ｍｌ、３．３８ｍｍｏｌ）とエタノール２．５ｍｌとの混合物を、３０分間かけて０℃から１００℃に加熱し、次いで１００℃で２時間加熱した。ＬＣ／ＭＳ分析は、反応が完了し、諸生成物が３：１の比で生成されたことを示した。混合物を冷却し、真空下で濃縮し、１．３ＭのＴＦＡ４ｍｌと６ｍｌの酢酸において採取し、分取ＨＰＬＣで精製し、それによって諸生成物のＮ−アミノプロピルエチルアミン−（４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド１２ａ（１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＦ３ＣＯ２Ｄ）：δ８．８０（２Ｈ，ｍ）；８．６９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）；８．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；８．０７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）；４．７４（２Ｈ，ｍ）；４．５４（２Ｈ，ｍ）；４．２１（２Ｈ，ｍ）；３．７９（２Ｈ，ｍ）；３．４４（２Ｈ，ｍ）；３．３４（ｍ，２Ｈ）；２．３６（２Ｈ，ｍ））、およびＮ−アミノエチルプロピルアミン−（４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド１２ｂに各々純度が約９３〜９９％で分離された。
【０３９２】
（実施例１３）Ｎ−メタンスルホニルオキシエチル−（３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１３の合成
【０３９３】
【化１２３】
2008521920.tif 000089
Ｎ−ヒドロキシエチル−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミドを、エタノール中において３−ニトロ−１，８−ナフタルイミドとエタノールアミンから、１５０℃で５分間マイクロ波加熱することによって調製し、沸騰トルエンで沈澱させた。塩化メタンスルホニル（１．０５ｍｌ、１３ｍｍｏｌ）を、Ｎ−ヒドロキシエチル−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド（１．７０ｇ、５．９４ｍｍｏｌ）とピリジン１００ｍｌの溶液に添加した。窒素下の室温で数時間撹拌した後、水１リットルを添加し、沈澱物をろ過して、Ｎ−メタンスルホニルオキシエチル−（３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１３（２．０ｇ、収率９２％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ９．５１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）；８．９８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）；８．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；８．７１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；８．０７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）；４．４６（４Ｈ，ｍ）；３．１５（３Ｈ，ｓ）。
【０３９４】
（実施例１４）Ｎ−ヨードエチル−（３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１４の合成
【０３９５】
【化１２４】
2008521920.tif 000090
Ｎ−メタンスルホニルオキシエチル−（３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１３（２．０ｇ、５．４９ｍｍｏｌ）を、２−ブタノン２５０ｍｌに溶解し、ヨウ化ナトリウム（５．１５ｇ、３３．９ｍｍｏｌ）で処理し、窒素下の室温で一晩撹拌した。沈澱物をろ過し、溶出液を飽和ＮａＣｌで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮して、Ｎ−ヨードエチル−（３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１４を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ９．５１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ）；８．９７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ）；８．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）；８．７１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ）；８．０７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；４．４０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）；３．４１（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）。
【０３９６】
（実施例１５）Ｎ−（２，４−ジニトロフェニルアミノエチルエトキシ）−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１５の合成
【０３９７】
【化１２５】
2008521920.tif 000091
Ｎ−アミノエチルエトキシ−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド７（ＴＦＡ塩、０．１９０ｇ、０．０４３ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（０．１８ｍｌ、１．２９ｍｍｏｌ）とＤＭＦ５ｍｌとの溶液を、０℃に冷却した。塩化２，４−ジニトロベンゼンスルホニル（０．１２８ｇ、０．４７ｍｍｏｌ）を添加し、溶液を室温に温め、窒素下で１時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳ分析は、スルホン化がほぼ完了したことを示した。残っている塩化２，４−ジニトロベンゼンスルホニルをクエンチするのに、エタノール１ｍｌ中の少し過剰なナトリウムエトキシドを添加した。混合物をセライトによってろ過し、ＤＭＦ１５ｍｌおよびエタノール２０ｍｌで濯いだ。ろ液を真空下で濃縮し、ＤＭＦ６ｍｌに溶解し、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ−（２，４−ジニトロフェニルアミノエチルエトキシ）−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１５を収率６１％で得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ９．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）；９．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ）；８．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；８．６３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ）；８．４８（ｍ，２Ｈ）；８．３３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）；７．９８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）；５．９２（１Ｈ，ｍ）；４．３５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ）；３．７０（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ）；３．６２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ）；３．３２（２Ｈ，ｍ）。
【０３９８】
（実施例１６ａ）Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１６ａの合成
【０３９９】
【化１２６】
2008521920.tif 000092
Ｎ，Ｎ−ビス（アミノエチル）−１，３−プロパンジアミン（０．９１ｇ、５．２９ｍｍｏｌ）のＮ−メチルモルホリン（ＮＭＭ）５ｍｌ溶液を、４−ニトロ−１，８−ナフタル酸無水物（２．５４ｇ、９．９２ｍｍｏｌ）のＮＭＭ１０ｍｌ溶液に添加した。反応を窒素下の室温で５分間撹拌し、次いで３８℃で１時間加熱し、次いで１２０℃（還流）で２時間加熱した。混合物を熱ろ過し、真空下で濃縮し、最低限のジクロロメタンに溶解し、シリカゲルクロマトグラフィーで精製して、Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１６ａを得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ６１１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４００】
（実施例１６ｂ）Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１６ｂの合成
【０４０１】
【化１２７】
2008521920.tif 000093
実施例１６ａと同じ方法に従って、Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１６ｂを、３−ニトロ−１，８−ナフタル酸無水物（１．００ｇ、３．９１ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ビス（アミノエチル）−１，３−プロパンジアミン（１１．７ｍｍｏｌ、３当量）３ｍｌから、１００℃で５分間調製した。
【０４０２】
（実施例１７）Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−クロロ−１，８−ナフタルイミド１７の合成
【０４０３】
【化１２８】
2008521920.tif 000094
Ｎ，Ｎ−ビス（アミノエチル）−１，３−プロパンジアミン（また、１，４，８，１１−テトラアザウンデカン、０．８７ｍｌ、５．０３ｍｍｏｌ）のエタノール２ｍｌ溶液を、４−クロロ−１，８−ナフタル酸無水物（２．３５ｇ、１０．１０ｍｍｏｌ）のＮＭＭ１２ｍｌ溶液にゆっくりと添加した。反応を窒素下の室温で５分間撹拌し、次いで３８℃で４５分間加熱し、熱をゆっくりと１１５℃に上昇させ、１．５時間保持した。混合物を冷却し、ろ過し、真空下で濃縮し、最低限のジクロロメタンに溶解し、シリカゲルクロマトグラフィーで精製して、Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−クロロ−１，８−ナフタルイミド１７のビスＴＦＡ塩を鮮黄色固体として得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ５８９（Ｍ＋）。
【０４０４】
（実施例１８）Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ブロモ−１，８−ナフタルイミド１８の合成
【０４０５】
【化１２９】
2008521920.tif 000095
Ｎ，Ｎ−ビス（アミノエチル）−１，３−プロパンジアミン（また、１，４，８，１１−テトラアザウンデカン、０．０８１ｍｌ、０．４７ｍｍｏｌ）のジオキサン５ｍｌ溶液に、３−ブロモ−１，８−ナフタル酸無水物（０．２６７ｇ、０．９３ｍｍｏｌ）のＮＭＭ１．２ｍｌ溶液をゆっくりと添加した。反応を窒素下の室温で５分間撹拌し、次いで３８℃で４５分間加熱し、熱をゆっくりと１１５℃に上昇させ、１．５時間保持した。混合物を冷却し、ろ過し、真空下で濃縮し、最低限のジクロロメタンに溶解し、シリカゲルクロマトグラフィーで精製して、Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ブロモ−１，８−ナフタルイミド１８のビスＴＦＡ塩を白色固体として得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ６７９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４０６】
（実施例１９）Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド１９の合成
【０４０７】
【化１３０】
2008521920.tif 000096
炭素担持パラジウム（１０％Ｐｄ／Ｃ、７６ｍｇ）を、Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１６ａ（約６０％純度、０．１２ｇ、０．１２ｍｍｏｌ）とＤＭＦ２０ｍｌの溶液に添加した。フラスコを水素ガスでフラッシングし、反応を室温で一晩撹拌した。混合物をセライトによってろ過し、ＤＭＦで濯ぎ、濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、ＮＮ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド１９を赤色固体として得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ５５１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４０８】
（実施例２０）Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド２０の合成
【０４０９】
【化１３１】
2008521920.tif 000097
Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−ブロモ−１，８−ナフタルイミド（１９ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）とＮＭＭ１ｍｌの溶液を、密封した管において７０℃に加熱し、３時間保持し、次いで１００℃に上昇させ、２時間保持した。混合物を冷却し、酢酸５ｍｌおよび０．１％ＴＦＡ水溶液１ｍｌに溶解し、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド２０をビス−ＴＦＡ塩として得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ６９１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４１０】
（実施例２１）Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−ジメチルアミノ−１，８−ナフタルイミド２１の合成
【０４１１】
【化１３２】
2008521920.tif 000098
Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−ブロモ−１，８−ナフタルイミド（１６ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）と４０％ジメチルアミン水溶液１．５ｍｌの溶液を、密封した管に室温で１時間放置し、次いで６０℃に加熱し、１時間保持し、次いで７０℃に上昇させ、３０分間保持した。ジメチルホルムアミド（０．７５ｍｌ）を添加し、７０℃に加熱して１．５時間継続し、次いで４８時間室温で放置した。混合物を冷却し、酢酸５ｍｌおよび０．１％ＴＦＡ水溶液１ｍｌに溶解させ、分取ＨＰＬＣで精製して、鮮オレンジ色固体のＮ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−ジメチルアミノ−１，８−ナフタルイミド２１をビス−ＴＦＡ塩として得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ６０７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４１２】
（実施例２２）Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メトキシエチル）−１，８−ナフタルイミド２２の合成
【０４１３】
【化１３３】
2008521920.tif 000099
Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−ブロモ−１，８−ナフタルイミド（２６ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）と２−メトキシエチルアミン４ｍｌの溶液を密封した管に入れ、温度を１５分間かけて８０℃に上昇させ、３．５時間保持した。混合物を冷却し、濃縮し、ＤＭＦ２ｍｌおよび０．１％ＴＦＡ水溶液８ｍｌに溶解し、分取ＨＰＬＣで精製して、オレンジ色固体のＮ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メトキシエチル）−１，８−ナフタルイミド２２をビス−ＴＦＡ塩として得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ６６７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４１４】
（実施例２３）Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−ヒドロキシエチル）−１，８−ナフタルイミド２３の合成
【０４１５】
【化１３４】
2008521920.tif 000100
Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−ブロモ−１，８−ナフタルイミド（３６ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ）とエタノールアミン２ｍｌの溶液を密封した管に入れ、温度を１５分間かけて８０℃に上昇させ、一晩保持した。混合物を冷却し、濃縮し、ＤＭＦ２ｍｌおよび０．１％ＴＦＡ水溶液８ｍｌに溶解し、分取ＨＰＬＣで精製して、鮮赤色固体のＮ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−ヒドロキシエチル）−１，８−ナフタルイミド２３をビス−ＴＦＡ塩として得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ６３９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４１６】
（実施例２４ａ）Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド２４ａの合成
【０４１７】
【化１３５】
2008521920.tif 000101
Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−ブロモ−１，８−ナフタルイミド（０．１１２ｇ、０．１２ｍｍｏｌ）と１−メチルピペラジン７ｍｌの溶液を、１５ｍｌ容の密封した管に入れ、温度を１５分間かけて８０℃に上昇させ、１５時間保持した。混合物を冷却し、濃縮し、酢酸１ｍｌおよび０．１％ＴＦＡ水溶液２ｍｌに溶解し、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド２４ａをテトラ−ＴＦＡ塩として得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ７１７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４１８】
（実施例２４ｂ）Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド２４ｂの合成
【０４１９】
【化１３６】
2008521920.tif 000102
実施例２４ａと同じプロトコルに従って、Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド２４ｂを、ＤＭＦ中でＮ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−ブロモ−１，８−ナフタルイミド、イミダゾール、炭酸カリウムから加熱して調製した。
【０４２０】
（実施例２４ｃ）Ｎ１−メチル，Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド２４ｃの合成
【０４２１】
【化１３７】
2008521920.tif 000103
また、実施例２４ａと同じプロトコルに従って、Ｎ１−メチル−Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド２４ｃを、Ｎ１−メチル，Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−ブロモ−１，８−ナフタルイミドおよびイミダゾールから調製した。
【０４２２】
（実施例２４ｄ）Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−アジド）−１，８−ナフタルイミド２４ｄの合成
また、実施例２４ａと同じプロトコルに従って、Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−アジド）−１，８−ナフタルイミド２４ｄを、ＤＭＦ中においてＮ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−ブロモ−１，８−ナフタルイミド、アジ化ナトリウム、炭酸カリウムから５分間１５０℃で加熱して調製した。
【０４２３】
【化１３８】
2008521920.tif 000104
。
【０４２４】
（実施例２５）Ｎ，Ｎ’−（ビス−Ｎ−ホルミル−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド２５ａおよびエナミニウム２５ｂの合成
【０４２５】
【化１３９】
2008521920.tif 000105
Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド（０．０２９ｇ、０．０４７ｍｍｏｌ）とギ酸エチル５ｍｌとＤＭＦ２ｍｌとの溶液を、窒素下で３．５時間還流した。混合物を冷却し、濃縮し、酢酸１ｍｌおよび０．１％ＴＦＡ水溶液２ｍｌに溶解し、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−（ビス−Ｎ−ホルミル−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド２５ａ（副生成物）および環化エナミニウム塩２５ｂ（主生成物）を分離した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ９．７７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）；８．８９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）；８．７５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ）；８．５９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）；８．３０（ｓ，１Ｈ）；８．００（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）；４．１６（ｍ，４Ｈ）；３．５８（ｍ，８Ｈ）；２．０９（ｍ，２Ｈ）。
【０４２６】
（実施例２６）Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−ベンジル−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド２６ａおよびＮ，Ｎ’−（ビス−Ｎ−ベンジル−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド２６ｂの合成
【０４２７】
【化１４０】
2008521920.tif 000106
Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド（０．１１２ｇ、０．１８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ２０ｍｌ溶液に、臭化ベンジル（０．２７ｍｌ、０．２２ｍｍｏｌ）、続いて０．５ＮのＮａＯＨ（０．４４ｍｌ、０．２２ｍｍｏｌ）を窒素下で添加し、一晩撹拌した。混合物をろ過し、ろ液を分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−ベンジル−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド２６ａ（ＭＳ  ｍ／ｚ  ７０１（Ｍ＋Ｈ）＋）およびＮ，Ｎ’−（ビス−Ｎ−ベンジル−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド２６ｂ（ＭＳ  ｍ／ｚ  ７９１（Ｍ＋Ｈ）＋）を各々ビスＴＦＡ塩として分離した。
【０４２８】
（実施例２７）Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−アリル−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド２７ａおよびＮ，Ｎ’−（ビス−Ｎ−アリル−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド２７ｂの合成
【０４２９】
【化１４１】
2008521920.tif 000107
Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド（０．０４０ｇ、０．０６５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ１５ｍｌ溶液に、臭化アリル（０．１２ｍｌ、０．１４ｍｍｏｌ）、続いて０．５ＮのＮａＯＨ（０．２７ｍｌ、０．１４ｍｍｏｌ）を窒素下で添加し、一晩撹拌した。混合物をろ過し、ろ液を分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−アリル−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド２７ａ（ＭＳ  ｍ／ｚ  ６５１  （Ｍ＋Ｈ）＋）およびＮ，Ｎ’−（ビス−Ｎ−アリル−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド２７ｂ（ＭＳ  ｍ／ｚ  ６９１  （Ｍ＋Ｈ）＋）を各々ビスＴＦＡ塩として分離した。
【０４３０】
（実施例２８）Ｎ，Ｎ’−（ビス−Ｎ−アセトアミドメチル−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド２８の合成
【０４３１】
【化１４２】
2008521920.tif 000108
Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド（０．０４０ｇ、０．０６５ｍｍｏｌ）と２−ブロモアセトアミド（０．０４５ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）と炭酸セシウム（ＣｓＣＯ３、０．０２２ｇ、０．０６７ｍｍｏｌ）とＤＭＦ３ｍｌとの混合物を、窒素下の室温で一晩撹拌した。ＬＣ／ＭＳ分析は、出発物のＮ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミドおよびＮ，Ｎ’−（ビス−Ｎ−アセトアミドメチル−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド２８を示した。ＭＳ  ｍ／ｚ  ７２５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４３２】
（実施例２９）Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−アセチル−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド２９の合成
【０４３３】
【化１４３】
2008521920.tif 000109
以下の構造：
【０４３４】
【化１４４】
2008521920.tif 000110
を有するＮ，Ｎ’−（Ｎ−Ｆ１７ＢＯＣ−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド（１４ｍｇ、０．０１０ｍｍｏｌ）と、無水酢酸３ｍｌとの混合物を、１時間還流（１１０℃）し、次いで冷却した。数滴の水を添加し、溶液を濃縮して白色固体にした。ＴＦＡ１ｍｌを添加し、混合し、室温で１時間放置した。真空下で濃縮すると、黄色固体のＮ，Ｎ’−（Ｎ−アセチル−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド２９をＴＦＡ塩として得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ６５３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４３５】
（実施例３０ａ）Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−エチル−ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド３０ａの合成
【０４３６】
【化１４５】
2008521920.tif 000111
Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド２０のビス−ＴＦＡ塩（３２ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ）と炭酸セシウム（３６ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）とアセトニトリル５ｍｌとＤＭＦ５ｍｌとの混合物を、窒素下の室温で撹拌した。ヨウ化エチル（０．０３１ｍｌ、０．０３８ｍｍｏｌ）を添加し、一晩撹拌した。１０％ＴＦＡ２ｍｌを添加した後、混合物を真空下で濃縮し、１．３ＭのＴＦＡ水溶液３．５ｍｌおよび酢酸６ｍｌに溶解し、分取ＨＰＬＣカラムに注入して、Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−エチル，ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド３０ａ（ＭＳ  ｍ／ｚ  ７１９（Ｍ＋Ｈ）＋）、ならびに少量のビスエチル化合物を得た。
【０４３７】
（実施例３０ｂ）Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−シクロプロピルメチル，ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−Ｎ−イミダゾリル−１，８−ナフタルイミド３０ｂの合成
【０４３８】
【化１４６】
2008521920.tif 000112
実施例３０ａに従って、Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−シクロプロピルメチル，ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−Ｎ−イミダゾリル−１，８−ナフタルイミド３０ｂを、（ブロモメチル）シクロプロパンおよびＮ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−Ｎ−イミダゾリル−１，８−ナフタルイミド２４ｂから調製した。
【０４３９】
（実施例３０ｃ）Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−シクロプロピルメチル，（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド３０ｃの合成
【０４４０】
【化１４７】
2008521920.tif 000113
実施例３０ａに従って、Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−シクロプロピルメチル，ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド３０ｃを、（ブロモメチル）シクロプロパンおよびＮ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１６ｂから調製した。
【０４４１】
（実施例３１）Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−（４−アセチルベンズアミド），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド３１ａおよびＮ，Ｎ’−（ビス−Ｎ−（４−アセチルベンズアミド），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド３１ｂの合成
【０４４２】
【化１４８】
2008521920.tif 000114
【０４４３】
【化１４９】
2008521920.tif 000115
４−アセチル安息香酸（０．０６１ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（０．１３ｍｌ、０．７２ｍｍｏｌ）、２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ、０．１３３ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）、およびＤＭＦ３ｍｌを、窒素下の室温で１５分間撹拌した。Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド（０．２１２ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）とＤＭＦ１２ｍｌとの溶液を添加した。３０分後、ＬＣ／ＭＳ分析は、反応物、ならびに生成物３１ａおよび３１ｂの存在を示した。反応を室温で一晩撹拌し、ＴＦＡ水溶液でクエンチし、濃縮し、酢酸およびＤＭＦに溶解し、分取ＨＰＬＣで精製して、分離かつ精製されたＮ，Ｎ’−（Ｎ−（４−アセチルベンズアミド），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド３１ａ（ＭＳ  ｍ／ｚ  ７５７（Ｍ＋Ｈ）＋）およびＮ，Ｎ’−（ビス−Ｎ−（４−アセチルベンズアミド），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド３１ｂを得た。
【０４４４】
（実施例３２）Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−（３−ベンゾイルプロピオンアミド），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド３２の合成
【０４４５】
【化１５０】
2008521920.tif 000116
３−ベンゾイルプロピオン酸（０．０３７ｇ、０．２０ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（０．０７ｍｌ、０．４０ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（０．０７７ｇ、０．２０ｍｍｏｌ）、およびＤＭＦ２ｍｌを、窒素下の室温で１０分間撹拌し、次いでそれをＮ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド（０．１６２ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）とジイソプロピルエチルアミン（０．１７ｍｌ、０．９０ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、ＤＭＦ６ｍｌを添加した。３０分後、ＬＣ／ＭＳ分析は、反応物および生成物３２の存在を示した。反応を室温で一晩撹拌し、ＴＦＡ水溶液でクエンチし、濃縮し、酢酸およびＤＭＦに溶解し、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−（３−ベンゾイルプロピオンアミド），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド３２を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ７７１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４４６】
（実施例３３ａ）Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−（レブリンアミド），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド３３ａの合成
【０４４７】
【化１５１】
2008521920.tif 000117
レブリン酸（０．０１５ｍｌ、０．１５ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（０．０４ｍｌ、０．２５ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（０．０５４ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、およびＤＭＦ１ｍｌを、窒素下の室温で１５分間撹拌し、次いでそれを以下の構造を有するＮ，Ｎ’−（Ｎ−Ｆ１７ＢＯＣ−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド（６２ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ）と：
【０４４８】
【化１５２】
2008521920.tif 000118
ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ、０．０２ｍｌ）とＤＭＦ１ｍｌとの溶液に、室温で添加した。ＬＣ／ＭＳ分析は、反応物および生成物３２の存在を示した。反応を室温で一晩撹拌し、ＴＦＡ水溶液でクエンチしてフルオロカルバメート保護基を加水分解し、濃縮し、酢酸およびＤＭＦに溶解し、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−（レブリンアミド），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド３３ａを得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ７０９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４４９】
（実施例３３ｂ）Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルマロンアミド），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−Ｎ−イミダゾリル−１，８−ナフタルイミド３３ｂの合成
【０４５０】
【化１５３】
2008521920.tif 000119
実施例３３ａと同じプロトコルに従って、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルマロンアミド），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−Ｎ−イミダゾリル−１，８−ナフタルイミド３３ｂを、モノ−ｔｅｒｔ−ブチルマロン酸およびＮ，Ｎ’−（Ｎ−Ｆ１７ＢＯＣ−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−Ｎ−イミダゾリル−１，８−ナフタルイミドから調製し、続いてＮ−Ｆ１７ＢＯＣ基を加水分解した。
【０４５１】
（実施例３４）Ｎ，Ｎ’−（ビス−２−アセトアミド−１，３プロパンジアミン）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド３４の合成
【０４５２】
【化１５４】
2008521920.tif 000120
１，３−ビスグリシル−１，３−ジアミノプロパン２のビスＴＦＡ塩（２２ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．０４６ｍｌ、０．２６ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ０．５ｍｌに窒素下の室温で溶解した。４−モルホリノ−１，８−ナフタル酸無水物１（３１ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１５０℃で５分間マイクロ波加熱し、次いで加熱を１０分間で２００℃に上昇させた。反応を１．３ＭのＴＦＡ水溶液４ｍｌでクエンチし、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−（ビス−２−アセトアミド−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド３４を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ７１９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４５３】
（実施例３５）Ｎ，Ｎ’−（ビス−エチル，マロンジアミド）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド３５の合成
【０４５４】
【化１５５】
2008521920.tif 000121
Ｎ１，Ｎ３−ビス（２−アミノエチル）マロンアミド３のＴＦＡ塩（０．０４１ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．０５８ｍｌ、０．３３ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ０．５ｍｌに窒素下の室温で溶解した。４−モルホリノ−１，８−ナフタル酸無水物１（２３ｍｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１８０℃で１０分間マイクロ波加熱し、次いで加熱を５分間２００℃に上昇させた。反応を１．３ＭのＴＦＡ水溶液４ｍｌでクエンチし、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−（ビス−エチル，マロンジアミド）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド３５を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ７１９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４５５】
（実施例３６）Ｎ，Ｎ’−（ビス−エチル，マロンジアミド）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド３６の合成
【０４５６】
【化１５６】
2008521920.tif 000122
Ｎ１，Ｎ３−ビス（２−アミノエチル）マロンアミド３（０．０７４ｍｍｏｌ）のＴＦＡ塩およびＤＩＥＡ（０．１０ｍｌ、０．５９ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ１ｍｌに窒素下の室温で溶解した。３−ニトロ−１，８−ナフタル酸無水物（３６ｍｇ、０．１４８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１５０℃で５分間マイクロ波加熱した。反応を１．３ＭのＴＦＡ水溶液４ｍｌでクエンチし、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−（ビス−エチル，マロンジアミド）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド３６を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ６３９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４５７】
（実施例３７）Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，３−プロパンジアミン−エチル）−ビス−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド３７の合成
【０４５８】
【化１５７】
2008521920.tif 000123
Ｎ−グリシル−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド５（２５ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０４３ｍｌ、０．２５ｍｍｏｌ）とベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ、５２ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）とＤＭＦ０．５ｍｌとの溶液を、窒素下の室温で７５分間撹拌した。Ｎ−アミノプロピルエチルアミン−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド１１ａのＴＦＡ塩（５７ｍｇ、０．１０３ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０７０ｍｌ、０．４０ｍｍｏｌ）とＤＭＦ１ｍｌとの溶液を、窒素下の室温で４０分間撹拌した。２種の溶液を混合し、一晩撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、ＴＦＡ水溶液で希釈し、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，３−プロパンジアミン−エチル）−ビス−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド３７を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ５６５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４５９】
（実施例３８）Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，２−エタンジアミン−プロピル）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド３８の合成
【０４６０】
【化１５８】
2008521920.tif 000124
Ｎ−グリシル−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド６（２５ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０４３ｍｌ、０．２５ｍｍｏｌ）とベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ、５２ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）とＤＭＦ０．５ｍｌとの溶液を、窒素下の室温で７５分間撹拌した。Ｎ−アミノエチルプロピルアミン−（４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド１２ｂのＴＦＡ塩（５７ｍｇ、０．１０３ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０７０ｍｌ、０．４０ｍｍｏｌ）とＤＭＦ１ｍｌとの溶液を、窒素下の室温で４０分間撹拌した。２種の溶液を混合し、一晩撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、ＴＦＡ水溶液で希釈し、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，３−エタンジアミンプロピル）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド３８のＴＦＡ塩を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ７０５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４６１】
（実施例３９）Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，２−エタンジアミン−プロピル）−ビス−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド３９の合成
【０４６２】
【化１５９】
2008521920.tif 000125
Ｎ−グリシル−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド５（３１ｍｇ、０．１１４ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０４０ｍｌ、０．２３ｍｍｏｌ）とベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ、６１ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）とＤＭＦ１ｍｌとの第１溶液を、窒素下の室温で７５分間撹拌した。Ｎ−アミノエチルプロピルアミン−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド１１ｂのＴＦＡ塩（６３ｍｇ、０．１１５ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０７０ｍｌ、０．４０ｍｍｏｌ）とＤＭＦ１ｍｌとの第２溶液を、窒素下の室温で４０分間撹拌した。第１溶液を第２溶液にゆっくりと添加し、得られた混合物を一晩撹拌した。混合物を１０％ＴＦＡ水溶液でクエンチし、真空下で濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，３−エタンジアミン−プロピル）−ビス−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド３９のＴＦＡ塩を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ５６５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４６３】
（実施例４０）Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，２−エタンジアミン−プロピル）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド４０の合成
【０４６４】
【化１６０】
2008521920.tif 000126
Ｎ−グリシル−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド４（４７ｍｇ、０．１４５ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０３８ｍｌ、０．２１ｍｍｏｌ）とベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ、１１１ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）とＤＭＦ１ｍｌとの第１溶液を、窒素下の室温で７５分間撹拌した。Ｎ−アミノエチルプロピルアミン−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１０ｂのＴＦＡ塩（１０６ｍｇ、０．１７７ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０９２ｍｌ、０．５３ｍｍｏｌ）とＤＭＦ１ｍｌとの第２溶液を、窒素下の室温で４０分間撹拌した。第１溶液を第２溶液にゆっくりと添加し、得られた混合物を一晩撹拌した。混合物を１０％ＴＦＡ水溶液でクエンチし、真空下で濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，２−エタンジアミン−プロピル）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド４０のＴＦＡ塩を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ６２５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４６５】
（実施例４１）Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，２−プロパンジアミン−エチル）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド４１の合成
【０４６６】
【化１６１】
2008521920.tif 000127
Ｎ−グリシル−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド６（３１ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０３８ｍｌ、０．２１ｍｍｏｌ）とベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ、５７ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）とＤＭＦ１ｍｌとの第１溶液を、窒素下の室温で７５分間撹拌した。Ｎ−アミノプロピルエチルアミン−（４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド１２ａのＴＦＡ塩（５７ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０５０ｍｌ、０．５３ｍｍｏｌ）とＤＭＦ１ｍｌとの第２溶液を、窒素下の室温で４０分間撹拌した。第１溶液を第２溶液にゆっくりと添加し、得られた混合物を一晩撹拌した。混合物を１０％ＴＦＡ水溶液でクエンチし、真空下で濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，２−プロパンジアミン−エチル）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド４１のＴＦＡ塩を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ７０５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４６７】
（実施例４２）Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，２−プロパンジアミン−エチル）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド４２の合成
【０４６８】
【化１６２】
2008521920.tif 000128
Ｎ−グリシル−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド４（３７ｍｇ、０．１１４ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０４０ｍｌ、０．２３ｍｍｏｌ）とベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ、７８ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）とＤＭＦ１ｍｌとの第１溶液を、窒素下の室温で７５分間撹拌した。Ｎ−アミノプロピルエチルアミン−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１０ａのＴＦＡ塩（６６ｍｇ、０．１０５ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０５５ｍｌ、０．３１ｍｍｏｌ）とＤＭＦ１ｍｌとの第２溶液を、窒素下の室温で４０分間撹拌した。第１溶液を第２溶液にゆっくりと添加し、得られた混合物を一晩撹拌した。混合物を１０％ＴＦＡ水溶液でクエンチし、真空下で濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，２−プロパンジアミン−エチル）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド４２のＴＦＡ塩を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ６２５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４６９】
（実施例４３）Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−２−エチレンオキシエチル）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド４３の合成
【０４７０】
【化１６３】
2008521920.tif 000129
Ｎ−グリシル−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド４（１８ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０３０ｍｌ、０．１７ｍｍｏｌ）とベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ、２８ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）とＤＭＦ０．２ｍｌとの第１溶液を、窒素下の室温で３０分間混合した。Ｎ−アミノエチルエトキシ−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド７のＴＦＡ塩（２５ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０２０ｍｌ、０．１２ｍｍｏｌ）とＤＭＦ０．５ｍｌとの第２溶液を、窒素下の室温で４０分間混合した。第１溶液を第２溶液にゆっくりと添加し、得られた混合物を一晩撹拌した。混合物を１０％ＴＦＡ水溶液でクエンチし、真空下で濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−２−エチレンオキシエチル）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド４３のＴＦＡ塩を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ６１２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４７１】
（実施例４４）Ｎ，Ｎ’−（４−アザ−オクタニル）−ビス−４−ブロモ−１，８−ナフタルイミド４４の合成
【０４７２】
【化１６４】
2008521920.tif 000130
３−ブロモ−１，８−ナフタル酸無水物（０．４０９ｇ、１．４０ｍｍｏｌ）とＮ１−（３−アミノプロピル）ブタン−１，４−ジアミン（スペルミジン、０．１１ｍｌ、０．７０ｍｍｏｌ）とエタノール４ｍｌとの溶液を、１５０℃で５分間マイクロ波加熱した。混合物を冷却し、ろ過し、真空下で濃縮し、酢酸１ｍｌおよびＤＭＦ０．５ｍｌに溶解し、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−（４−アザ−オクタニル）−ビス−４−ブロモ−１，８−ナフタルイミド４４のＴＦＡ塩を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ６６４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４７３】
（実施例４５）Ｎ，Ｎ’−（４−アザ−オクタニル）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド４５の合成
【０４７４】
【化１６５】
2008521920.tif 000131
Ｎ，Ｎ’−（４−アザ−オクタニル）−ビス−４−ブロモ−１，８−ナフタルイミド４４（０．０２９ｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）とモルホリン３ｍｌとの溶液を、８０℃で１６時間加熱した。ＬＣ／ＭＳ分析は、反応が完了したことを示した。混合物を冷却し、濃縮し、酢酸２．５ｍｌおよび０．１％ＴＦＡ水溶液０．５ｍｌに溶解し、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−（４−アザ−オクタニル）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド４５を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ６７６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４７５】
（実施例４６）Ｎ，Ｎ’−（２−エトキシ−Ｎ−（２，４−ジニトロベンゼンスルホニル）−エチルエタンアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド４６の合成
【０４７６】
【化１６６】
2008521920.tif 000132
炭酸セシウム（０．１４４ｇ、０．４４２ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ１．５ｍｌ中のＮ−（２，４−ジニトロフェニルアミノエチルエトキシ）−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１５（７９ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）に窒素下の室温で添加した。７．５ｍｌ中のＮ−ヨードエチル−（３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド１４（０．１１ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を４０℃で一晩撹拌した。混合物を濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−（２−エトキシ−Ｎ−（２，４−ジニトロベンゼンスルホニル）−エチルエタンアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド４６を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ８２７（Ｍ＋）。
【０４７７】
（実施例４７）Ｎ，Ｎ’−（２−エトキシ−Ｎ−エチルエタンアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド４７の合成
【０４７８】
【化１６７】
2008521920.tif 000133
Ｎ，Ｎ’−（２−エトキシ−Ｎ−（２，４−ジニトロベンゼンスルホニル）−エチルエタンアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド４６（３６ｍｇ、０．０４３ｍｍｏｌ）と炭酸セシウム（０．０４５ｇ、０．１４ｍｍｏｌ）とチオフェノール（０．０４５ｍｌ、０．０４３ｍｍｏｌ）とＤＭＦ２ｍｌとの溶液を、窒素下の室温で２０分間撹拌した。混合物を濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−（２−エトキシ−Ｎ−エチルエタンアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド４７を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ５９８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４７９】
（実施例４８）Ｎ，Ｎ’−（ビス−２−アセトアミド−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド４８の合成  
【０４８０】
【化１６８】
2008521920.tif 000134
１，３−ビスグリシル−１，３−ジアミノプロパン２（３７ｍｇ、０．１４１ｍｍｏｌ）のビスＨＣｌ塩およびＤＩＥＡ（０．０５８ｍｌ、０．３３ｍｍｏｌ）を、窒素下の室温でエタノール２ｍｌに溶解した。エタノール１ｍｌ中の４−アミノ−１，８−ナフタル酸無水物（６３ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０４５ｍｌ、０．２６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１５０℃で５分間マイクロ波加熱した。反応を１．３ＭのＴＦＡ水溶液４ｍｌでクエンチし、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ，Ｎ’−（ビス−２−アセトアミド−１，３−プロパンジアミン）−ビス−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド４８を得た。
【０４８１】
（実施例４９）Ｎ１，Ｎ２−ビスメチル，Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−４−Ｎ−イミダゾリル，４’−（３−アミノプロピル）アミノ）−１，８−ナフタルイミド４９の合成
【０４８２】
【化１６９】
2008521920.tif 000135
Ｎ１，Ｎ２−ビスメチル，Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−４−Ｎ−イミダゾリル，４’−ブロモ−１，８−ナフタルイミドのトリフルオロ酢酸塩（０．０５０ｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）と１，３−プロパンジアミン（０．１８ｍｌ、２．４ｍｍｏｌ）とエタノールとＤＭＦとＮ−メチルモルホリン（ＮＭＭ）との溶液を、１５０℃で５分間加熱した。分取ＨＰＬＣによって、Ｎ１，Ｎ２−ビスメチル，Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−４−Ｎ−イミダゾリル，４’−（３−アミノプロピル）アミノ）−１，８−ナフタルイミド４９を得た。
【０４８３】
（実施例５０）Ｎ１，Ｎ２−ビスメチル，Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−４−Ｎ−イミダゾリル，４’−（４−メルカプトプロピルピペラジニル）−１，８−ナフタルイミド５０の合成
【０４８４】
【化１７０】
2008521920.tif 000136
Ｎ１，Ｎ２−ビスメチル，Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−４−Ｎ−イミダゾリル，４’−ブロモ−１，８−ナフタルイミドのトリフルオロ酢酸塩と過剰ピペラジンとエタノールとＤＭＦとＮ−メチルモルホリン（ＮＭＭ）との溶液を加熱した。ピベラジニル付加物を単離し、過剰のエチレンスルフィドで処理した。分取ＨＰＬＣによって、Ｎ１，Ｎ２−ビスメチル，Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−４−Ｎ−イミダゾリル，４’−（４−メルカプトプロピルピペラジニル）−１，８−ナフタルイミド５０を得た。
【０４８５】
（実施例５１）Ｎ，Ｎ’−（ビス−２−アセトアミド−１，３−プロパンジアミン）−４−ピベラジニル，４’−（４Ｎ−（３−メルカプトプロピル）−ピベラジニル−１，８−ナフタルイミド５１の合成
【０４８６】
【化１７１】
2008521920.tif 000137
Ｎ，Ｎ’−（ビス−２−アセトアミド−１，３−プロパンジアミン）−４−ピベラジニル，４’−（４Ｎ−（３−メルカプトプロピル）−ピベラジニル−１，８−ナフタルイミド５１を、実施例５０のプロトコルに従って調製した。
【０４８７】
（実施例５２）Ｎ，Ｎ’−（Ｎ１−エチル，Ｎ２−（Ｎ−メチル，Ｎ−ＢＯＣグリシル），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−２−ニトロ−１，８−ナフタルイミド５２の合成
【０４８８】
【化１７２】
2008521920.tif 000138
２−フルオロ−１−エチル−ピリジニウムテトラフルオロホウ酸塩（ＦＥＰ、０．０７９ｇ）、Ｎ−メチル，Ｎ−ＢＯＣグリシン（０．０７０ｇ、０．３７ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０．０７１ｍｌ）、およびＤＭＦ１ｍｌを窒素下の室温で混合かつ撹拌し、次いで、Ｎ，Ｎ’−（Ｎ１−エチル，Ｎ２−Ｈ，ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−２−ニトロ−１，８−ナフタルイミド（０．３１ｇ、０．３７ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．８１ｍｍｏｌ）とのＤＭＦ３ｍｌ溶液に添加して、Ｎ，Ｎ’−（Ｎ１−エチル，Ｎ２−（Ｎ−メチル，Ｎ−ＢＯＣグリシル），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−２−ニトロ−１，８−ナフタルイミド５２を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ８５２．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４８９】
（実施例５３）Ｎ，Ｎ’−（Ｎ１−エチル，Ｎ２−（Ｎ−メチルグリシル），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−２−ニトロ−１，８−ナフタルイミド５３の合成
【０４９０】
【化１７３】
2008521920.tif 000139
ＢＯＣ基を酸で除去して、Ｎ，Ｎ’−（Ｎ１−エチル，Ｎ２−（Ｎ−メチルグリシル），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−２−ニトロ−１，８−ナフタルイミド５３を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ７５２．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４９１】
（実施例５４）ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，３−プロパンジアミン−エチル）−ビス−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド）１０１の合成
【０４９２】
【化１７４】
2008521920.tif 000140
Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，３−プロパンジアミン−エチル）−ビス−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド３７（１８ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．００４４ｍｌ、０．０５ｍｍｏｌ）とＤＭＦ１．２ｍｌとの混合物を、窒素下の室温で１０分間撹拌し、次いで、以下の構造を有するマレイミド−カプロイル−バリン−シトルリン−パラ−アミノベンジル−４−ニトロフェニルカルボネート（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＯＰＮＰ、１９ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）、
【０４９３】
【化１７５】
2008521920.tif 000141
およびＤＩＥＡ（０．００５ｍｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を１．３ＭのＴＦＡ水溶液０．２０ｍｌおよび酢酸０．３０ｍｌでクエンチし、分取ＨＰＬＣで精製して、ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，３−プロパンジアミン−エチル）−ビス−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド）１０１を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  １１６４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４９４】
（実施例５５）ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，３−エタンジアミン−プロピル）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド）１０２の合成
【０４９５】
【化１７６】
2008521920.tif 000142
Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，３−エタンジアミン−プロピル）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド３８（９ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．００４４ｍｌ、０．０５ｍｍｏｌ）とＤＭＦ１．２ｍｌとの混合物を、窒素下の室温で１０分間撹拌し、次いで、マレイミド−カプロイル−バリン−シトルリン−パラ−アミノベンジル−４−ニトロフェニルカルボネート（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＯＰＮＰ、１８ｍｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．００５ｍｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を１．３ＭのＴＦＡ水溶液０．２０ｍｌおよび酢酸０．３０ｍｌでクエンチし、分取ＨＰＬＣで精製して、ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，３−エタンジアミン−プロピル）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド）１０２を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  １３０４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４９６】
（実施例５６）ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，２−プロパンジアミン−エチル）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド）１０３の合成
【０４９７】
【化１７７】
2008521920.tif 000143
Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，２−プロパンジアミン−エチル）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド４１（９ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．００４４ｍｌ、０．０５ｍｍｏｌ）とＤＭＦ１．２ｍｌとの混合物を、窒素下の室温で１０分間撹拌し、次いで、マレイミド−カプロイル−バリン−シトルリン−パラ−アミノベンジル−４−ニトロフェニルカルボネート（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＯＰＮＰ、７ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．００５ｍｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を１．３ＭのＴＦＡ水溶液０．２０ｍｌおよび酢酸０．３０ｍｌでクエンチし、分取ＨＰＬＣで精製して、ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，３−プロパンジアミン−エチル）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド）１０３を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  １３０４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０４９８】
（実施例５７）ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，３−エタンジアミン−プロピル）−ビス−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド）１０４の合成
【０４９９】
【化１７８】
2008521920.tif 000144
Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，３−エタンジアミン−プロピル）−ビス−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド３９（１０ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．００３ｍｌ、０．０３ｍｍｏｌ）とＤＭＦ０．７ｍｌとの混合物を、窒素下の室温で１０分間撹拌し、次いで、マレイミド−カプロイル−バリン−シトルリン−パラ−アミノベンジル−４−ニトロフェニルカルボネート（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＯＰＮＰ、１０ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．００５ｍｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を１．３ＭのＴＦＡ水溶液０．１０ｍｌおよび酢酸０．３０ｍｌでクエンチし、分取ＨＰＬＣで精製して、ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，３−エタンジアミン−プロピル）−ビス−４−アミノ−１，８−ナフタルイミド）１０４を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  １１６４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５００】
（実施例５８）ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，２−プロパンジアミン−エチル）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１０５の合成
【０５０１】
【化１７９】
2008521920.tif 000145
Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，２−プロパンジアミン−エチル）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド４２（２１ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０１６ｍｌ、０．０９２ｍｍｏｌ）とＤＭＦ０．２ｍｌとの混合物を、窒素下の室温で１０分間撹拌し、次いで、マレイミド−カプロイル−バリン−シトルリン−パラ−アミノベンジル−４−ニトロフェニルカルボネート（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＯＰＮＰ、２６ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．０１３ｍｌ、０．０７５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を１．３ＭのＴＦＡ水溶液０．５０ｍｌでクエンチし、分取ＨＰＬＣで精製して、ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，３−プロパンジアミン−エチル）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１０５を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  １２２３（Ｍ＋）。
【０５０２】
（実施例５９）ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，３−エタンジアミン−プロピル）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１０６の合成
【０５０３】
【化１８０】
2008521920.tif 000146
Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，２−エタンジアミン−プロピル）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド４０（９ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．００４ｍｌ、０．０２３ｍｍｏｌ）とＤＭＦ０．７ｍｌとの混合物を、窒素下の室温で１０分間撹拌し、次いで、マレイミド−カプロイル−バリン−シトルリン−パラ−アミノベンジル−４−ニトロフェニルカルボネート（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＯＰＮＰ、９ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．００５ｍｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を１．３ＭのＴＦＡ水溶液０．１０ｍｌおよび酢酸０．３０ｍｌでクエンチし、分取ＨＰＬＣで精製して、ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，３−エタンジアミン−プロピル）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１０６を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  １２２４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５０４】
（実施例６０）ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（４−アザ−オクタニル）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１０７の合成
【０５０５】
【化１８１】
2008521920.tif 000147
Ｎ，Ｎ’−（４−アザ−オクタニル）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド（１５ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０１０ｍｌ、０．０５７ｍｍｏｌ）とＤＭＦ０．２ｍｌとの混合物を、窒素下の室温で１０分間撹拌し、次いで、ＤＭＦ０．８ｍｌ中のマレイミド−カプロイル−バリン−シトルリン−パラ−アミノベンジル−４−ニトロフェニルカルボネート（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＯＰＮＰ、１５ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）とＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ、０．００２ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．００５ｍｌ）を添加し、混合物を３５℃で１．５時間撹拌した。混合物をろ過し、分取ＨＰＬＣで精製して、ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（４−アザ−オクタニル）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１０７を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  １１９５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５０６】
（実施例６１）ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（２−エトキシ−Ｎ−エチルエタンアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１０８の合成
【０５０７】
【化１８２】
2008521920.tif 000148
Ｎ，Ｎ’−（２−エトキシ−Ｎ−エチルエタンアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド４７（７ｍｇ、０．００９ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．００４ｍｌ、０．０２３ｍｍｏｌ）とＤＭＦ０．７ｍｌとの混合物を、窒素下の室温で１０分間撹拌し、次いで、マレイミド−カプロイル−バリン−シトルリン−パラ−アミノベンジル−４−ニトロフェニルカルボネート（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＯＰＮＰ、７ｍｇ、０．００９ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．００５ｍｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。混合物をＤＭＦ１．６ｍｌで希釈し、分取ＨＰＬＣで精製して、ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（２−エトキシ−Ｎ−エチルエタンアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１０８を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  １１９６（Ｍ＋）。
【０５０８】
（実施例６２）ＭＣ−ヒドラゾン−（Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−（レブリンアミド），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１０９の合成
【０５０９】
【化１８３】
2008521920.tif 000149
Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−（レブリンアミド），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド３３ａのＴＦＡ塩（１５ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）、Ｎ−［６−マレイミドカプロン酸］ヒドラジド（ＥＭＣＨ、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、２０ｍｇ、０．０８８ｍｍｏｌ）、酢酸（０．０１０ｍｌ、０．００２ｍｍｏｌ）、およびＤＭＦ３ｍｌを、室温で約４８時間撹拌した。混合物をＤＭＦで希釈し、分取ＨＰＬＣで精製して、ＭＣ−ヒドラゾン−（Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−（レブリンアミド），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１０９を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ９１６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５１０】
（実施例６３）ＭＣ−ヒドラゾン−（Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−（レブリンアミド），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１１０の合成
【０５１１】
【化１８４】
2008521920.tif 000150
Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−（４−アセチルベンズアミド），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド３１ａのＴＦＡ塩（３４ｍｇ、０．０３９ｍｍｏｌ）、ＥＭＣＨ（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、２８ｍｇ、０．１２４ｍｍｏｌ）、酢酸（０．０１１ｍｌ、０．００２ｍｍｏｌ）、エタノール５ｍｌ、およびＤＭＦ１ｍｌを、室温で一晩撹拌した。混合物をＤＭＦで希釈し、分取ＨＰＬＣで精製して、ＭＣ−ヒドラゾン−（Ｎ，Ｎ’−（Ｎ−（レブリンアミド），ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１１０を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ９６４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５１２】
（実施例６４）ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド）１１１の合成
【０５１３】
【化１８５】
2008521920.tif 000151
Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド２４のテトラ−ＴＦＡ塩（１１ｍｇ、０．００９ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．００８ｍｌ、０．０９２ｍｍｏｌ）とＤＭＦ０．２ｍｌとの混合物を、窒素下の室温で１０分間撹拌し、次いで、ＤＭＦ３ｍｌ中のマレイミド−カプロイル−バリン−シトルリン−パラ−アミノベンジル−４−ニトロフェニルカルボネート（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＯＰＮＰ、７ｍｇ、０．００９ｍｍｏｌ）とＨＯＢｔ（０．００２ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０１３ｍｌ、０．０７５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を１．３ＭのＴＦＡ水溶液０．５０ｍｌでクエンチし、分取ＨＰＬＣで精製して、ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド）１１１を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  １３１５（Ｍ）＋。
【０５１４】
（実施例６４ａ）ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）１１１ａの合成
【０５１５】
【化１８６】
2008521920.tif 000152
実施例６４のプロトコルに従って、ＭＣ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢ−ＯＰＮＰとＮ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド２４ｂを反応させて、ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）１１１ａを得た。
【０５１６】
（実施例６４ｂ）ＭＣ−ａｌａ−ｐｈｅ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）１１１ｂの合成
【０５１７】
【化１８７】
2008521920.tif 000153
実施例６４のプロトコルに従って、ＭＣ−ａｌａ−ｐｈｅ−ＰＡＢ−ＯＰＮＰとＮ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド２４ｂを反応させて、ＭＣ−ａｌａ−ｐｈｅ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド１１１ｂを得た。
【０５１８】
（実施例６５）ＭＰ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド）１１２の合成
【０５１９】
【化１８８】
2008521920.tif 000154
Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド２４のテトラＴＦＡ塩（２３ｍｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０１７ｍｌ、０．０９８ｍｍｏｌ）とＤＭＦ０．２ｍｌとの混合物を、窒素下の室温で１０分間撹拌し、次いで、ＤＭＦ３ｍｌ中のマレイミド−プロパノイル−バリン−シトルリン−パラ−アミノベンジル−４−ニトロフェニルカルボネート（ＭＰ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＯＰＮＰ、９ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０１３ｍｌ、０．０７５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を１．３ＭのＴＦＡ水溶液０．５０ｍｌでクエンチし、分取ＨＰＬＣで精製して、ＭＰ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド）１１２を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  １３３１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５２０】
（実施例６７）ＭＣ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド）１１３の合成
【０５２１】
【化１８９】
2008521920.tif 000155
６−マレイミドカプロン酸（３．３ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）とＰｙＢＯＰ（７ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．００４ｍｌ、０．０２４ｍｍｏｌ）とＨＯＢｔ（２ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）とＤＭＦ０．２ｍｌとの混合物を、窒素下の室温で５分間撹拌し、次いで、Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド２４のテトラＴＦＡ塩（１４ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０１０ｍｌ、０．０５９ｍｍｏｌ）とのＤＭＦ０．２ｍｌ溶液に添加した。混合物を室温で２時間撹拌し、０．１％ＴＦＡ水溶液７ｍｌおよび酢酸２ｍｌでクエンチし、分取ＨＰＬＣで精製して、ＭＣ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド）１１３を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ９１０（Ｍ＋）。
【０５２２】
（実施例６８）ＭＣ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）１１３ａの合成
【０５２３】
【化１９０】
2008521920.tif 000156
実施例６７の手順に従って、Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド２４ｂを、マレイミドカプロイルアミド，ＭＣ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）１１３ａに転換した。
【０５２４】
（実施例６９）ｔＢｕ−Ａｄｉｐ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド）１１４の合成
【０５２５】
【化１９１】
2008521920.tif 000157
Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド２４のテトラＴＦＡ塩（１０ｍｇ、０．００９ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０１２ｍｌ、０．０７０ｍｍｏｌ）とＤＭＦ０．２ｍｌとの混合物を、窒素下の室温で１０分間撹拌し、次いで、ＤＭＦ３ｍｌ中のｔｅｒｔ−ブチルアジパート−バリン−シトルリン−パラ−アミノベンジル−４−ニトロフェニルカルボネート（ｔＢｕＡｄｉｐ−ｖｃ−ＰＡＢ−ＯＰＮＰ、６．４ｍｇ、０．００９ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．０１３ｍｌ、０．０７５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を１．３ＭのＴＦＡ水溶液０．０５０ｍｌでクエンチし、分取ＨＰＬＣで精製して、ｔＢｕ−Ａｄｉｐ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド）１１４を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  １３０６（Ｍ）＋。
【０５２６】
（実施例７０）Ｎ１−アセチル，Ｎ２−Ａｄｉｐ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド）１１５の合成
【０５２７】
【化１９２】
2008521920.tif 000158
ｔＢｕ−Ａｄｉｐ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド）１１４のＴＦＡ塩（２ｍｇ、０．００１ｍｍｏｌ）と無水酢酸（０．０１３ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（０．０１３ｍｍｏｌ）とジクロロメタン０．５ｍｌとの混合物を、室温で約２５分間撹拌し、次いで、水１滴を添加し、真空下で濃縮して、Ｎ１−アセチル，Ｎ２−ｔ−ＢｕＡｄｉｐ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド）を得た。１０％ＴＦＡ（２ｍｌ）溶液を添加し、２．５時間撹拌し、濃縮して、Ｎ１−アセチル，Ｎ２−Ａｄｉｐ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド）１１５を得た。
【０５２８】
（実施例７１）Ｎ１−アセチル，Ｎ２−ＮＨＳ−Ａｄｉｐ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド）１１６の合成
【０５２９】
【化１９３】
2008521920.tif 000159
Ｎ１−アセチル，Ｎ２−Ａｄｉｐ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド）１１５（約２ｍｇ、０．００１ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ’−ジスクシンイミジルカルボネート（ＤＳＣ、１０ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）とアセトニトリル０．１ｍｌとＤＭＦ０．１ｍｌとの混合物を、室温で約１．５時間撹拌し、次いで、酢酸および希釈ＴＦＡ水溶液でクエンチし、真空下で濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ１−アセチル，Ｎ２−ＮＨＳ−Ａｄｉｐ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−メチルピペリジン）−１，８−ナフタルイミド）１１６を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  １３９１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０５３０】
（実施例７２）Ｎ１−メチル，Ｎ２−ＭＣ−ａｆ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）１１７の合成
【０５３１】
【化１９４】
2008521920.tif 000160
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−メチル，Ｎ２−ＭＣ−ａｆ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）１１７を調製した。
【０５３２】
（実施例７３）Ｎ１−メチル，Ｎ２−（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−Ｎ−メチルグリシル）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）１１８の合成
【０５３３】
【化１９５】
2008521920.tif 000161
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−メチル，Ｎ２−（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−Ｎ−メチルグリシル）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）１１８を調製した。
【０５３４】
（実施例７４）Ｎ１−メチル，Ｎ２−（ＭＣ−ａｆ−ＰＡＢ−Ｎ−メチルグリシル）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）１１９の合成
【０５３５】
【化１９６】
2008521920.tif 000162
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−メチル，Ｎ２−（ＭＣ−ａｆ−ＰＡＢ−Ｎ−メチルグリシル）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）１１９を調製した。
【０５３６】
（実施例７５）Ｎ１−メチル，Ｎ２−（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（３−Ｎ−メチルプロパンアミド））−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾール）−１，８−ナフタルイミド）１２０の合成
【０５３７】
【化１９７】
2008521920.tif 000163
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−メチル，Ｎ２−（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（３−Ｎ−メチルプロパンアミド））−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）１２０を調製した。
【０５３８】
（実施例７６）Ｎ１−メチル，Ｎ２（Ｍｃ−ａｆ−ＰＡＢ−（３−Ｎ−メチルプロパンアミド））−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド１２１の合成
【０５３９】
【化１９８】
2008521920.tif 000164
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−メチル，Ｎ２−（ＭＣ−ａｆ−ＰＡＢ−（３−Ｎ−メチルプロパンアミド））−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミドノ１２１を調製した。
【０５４０】
（実施例７７）Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−ビスＮ−メチル−プロパンジアミン）−（４−Ｎ−イミダゾリル，４’−Ｎ−（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ）−１，８−ナフタルイミド）１２２の合成
【０５４１】
【化１９９】
2008521920.tif 000165
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−ビスＮ−メチル−プロパンジアミン）−（４−Ｎ−イミダゾリル，４’−Ｎ−（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ）−１，８−ナフタルイミド）１２２を調製した。
【０５４２】
（実施例７８）Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−ビスＮ−メチル−プロパンジアミン）−（４−Ｎ−イミダゾリル，４’−Ｎ−（ＭＣ−ａｆ−ＰＡＢ）−１，８−ナフタルイミド）１２２ａの合成
【０５４３】
【化２００】
2008521920.tif 000166
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−ビスＮ−メチル−プロパンジアミン）−（４−Ｎ−イミダゾリル，４’−Ｎ−（ＭＣ−ａｆ−ＰＡＢ）−１，８−ナフタルイミド）１２２ａを調製した。
【０５４４】
（実施例７９）Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−ビスＮ−メチル−プロパンジアミン）−（４−Ｎ−イミダゾリル，４’−Ｎ−（ＭＣ−ｖｃ）−１，８−ナフタルイミド）１２３の合成
【０５４５】
【化２０１】
2008521920.tif 000167
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−ビスＮ−メチル−プロパンジアミン）−（４−Ｎ−イミダゾリル，４’−Ｎ−（ＭＣ−ｖｃ）−１，８−ナフタルイミド）１２３を調製した。
【０５４６】
（実施例８０）Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−ビスＮ−メチル−プロパンジアミン）−（３−ニトロ，４’−Ｎ−（ＭＰ−ｇｌｙ−ｖａｌ−ｃｉｔ）−１，８−ナフタルイミド）１２３ａの合成
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−ビスＮ−メチル−プロパンジアミン）−（４−Ｎ−イミダゾリル，４’−Ｎ−（ＭＣ−ｖｃ）−１，８−ナフタルイミド）１２３ａを調製した。
【０５４７】
【化２０２】
2008521920.tif 000168
。
【０５４８】
（実施例８１）Ｎ１−エチル，Ｎ２−ＭＣ−ａｆ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１２４の合成
【０５４９】
【化２０３】
2008521920.tif 000169
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−エチル，Ｎ２−ＭＣ−ａｆ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１２４を調製した。
【０５５０】
（実施例８２）Ｎ１−エチル，Ｎ２−ＭＣ−ａｆ−ＰＡＢ−（Ｎ−メチルバリン）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１２５の合成
【０５５１】
【化２０４】
2008521920.tif 000170
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−エチル，Ｎ２−ＭＣ−ａｆ−ＰＡＢ−（Ｎ−メチルバリン）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１２５を調製した。
【０５５２】
（実施例８３）Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１２６の合成
【０５５３】
【化２０５】
2008521920.tif 000171
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１２６を調製した。
【０５５４】
（実施例８４）Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−３−ニトロ，４−アミノ−１，８−ナフタルイミド）１２６ａの合成
【０５５５】
【化２０６】
2008521920.tif 000172
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−３−ニトロ，４−アミノ−１，８−ナフタルイミド）１２６ａを調製した。
【０５５６】
（実施例８５）Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−ＭＣ−ａｆ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１２７の合成
【０５５７】
【化２０７】
2008521920.tif 000173
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−ＭＣ−ａｆ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１２７を調製した。
【０５５８】
（実施例８６）Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブチルアジパート−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ＰＡＢ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１２８の合成
【０５５９】
【化２０８】
2008521920.tif 000174
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブチルアジパート−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ−ＰＡＢ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１２８を調製した。
【０５６０】
（実施例８７）Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（ＭＣ−ｖａｌ−ｃｉｔ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１２９の合成
【０５６１】
【化２０９】
2008521920.tif 000175
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（ＭＣ−ｖａｌ−ｃｉｔ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１２９を調製した。
【０５６２】
（実施例８８）Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（ＭＣ−ｖｃ−ｇｌｙ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３０の合成
【０５６３】
【化２１０】
2008521920.tif 000176
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（ＭＣ−ｖｃ−ｇｌｙ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３０を調製した。
【０５６４】
（実施例８９）Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（ＭＣ−ａｆ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３１の合成
【０５６５】
【化２１１】
2008521920.tif 000177
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（ＭＣ−ａｆ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３１を調製した。
【０５６６】
（実施例９０）Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（ＭＣ−ａｌａ−ｐｈｅ−ｇｌｙ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３２の合成
【０５６７】
【化２１２】
2008521920.tif 000178
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（ＭＣ−ａｌａ−ｐｈｅ−ｇｌｙ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３２を調製した。
【０５６８】
（実施例９１）Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（コハク酸−ｇｌｙ−ｖａｌ−ｃｉｔ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３３の合成
【０５６９】
【化２１３】
2008521920.tif 000179
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（コハク酸−ｇｌｙ−ｖａｌ−ｃｉｔ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３３を調製した。
【０５７０】
（実施例９２）Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（コハク酸−ｇｌｙ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ｇｌｙ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３４の合成
【０５７１】
【化２１４】
2008521920.tif 000180
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（コハク酸−ｇｌｙ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ｇｌｙ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３４を調製した。
【０５７２】
（実施例９３）Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（コハク酸−ｇｌｙ−ａｌａ−ｐｈｅ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３５の合成
【０５７３】
【化２１５】
2008521920.tif 000181
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（コハク酸−ｇｌｙ−ａｌａ−ｐｈｅ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３５を調製した。
【０５７４】
（実施例９４）Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド−コハク酸−ｇｌｙ−ａｌａ−ｐｈｅ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３５ａの合成
実施例６９のプロトコルに従って、実施例８９からの酸１３５を、ＮＨＳエステルのＮ１−Ｈ，Ｎ２−（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド−コハク酸−ｇｌｙ−ａｌａ−ｐｈｅ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３５ａに転換した。
【０５７５】
【化２１６】
2008521920.tif 000182
。
【０５７６】
（実施例９５）Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（コハク酸−ｇｌｙ−ａｌａ−ｐｈｅ−ｇｌｙ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３６の合成
【０５７７】
【化２１７】
2008521920.tif 000183
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（コハク酸−ｇｌｙ−ａｌａ−ｐｈｅ−ｇｌｙ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビスアミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３６を調製した。
【０５７８】
（実施例９６）Ｎ１−エチル，Ｎ２−（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−Ｎ−メチルバリン）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス２−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３７の合成
【０５７９】
【化２１８】
2008521920.tif 000184
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−エチル，Ｎ２−（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−Ｎ−メチルバリン）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス２−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３７を調製した。
【０５８０】
（実施例９７）Ｎ１−エチル，Ｎ２−（マレイミド−４−オキソ−カプロイル−ｖｃ−ＰＡＢ−Ｎ−メチルバリン）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス２−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３８の合成
【０５８１】
【化２１９】
2008521920.tif 000185
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−エチル，Ｎ２−（マレイミド−４−オキソ−カプロイル−ｖｃ−ＰＡＢＮ−メチルバリン）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス２−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３８を調製した。
【０５８２】
（実施例９８）Ｎ１−メチル，Ｎ２−（Ｎ−メチルグリシル）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス４−Ｎ−イミダゾリル−１，８−ナフタルイミド）１３９の合成
【０５８３】
【化２２０】
2008521920.tif 000186
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−メチル，Ｎ２−（Ｎ−メチルグリシル）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス４−Ｎ−イミダゾリル−１，８−ナフタルイミド）１３９を調製した。
【０５８４】
（実施例９９）Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（メトキシエトキシエトキシアセトアミド）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス４−Ｎ−イミダゾリル−１，８−ナフタルイミド）１４０の合成
【０５８５】
【化２２１】
2008521920.tif 000187
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−（メトキシエトキシエトキシアセトアミド）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス４−Ｎ−イミダゾリル−１，８−ナフタルイミド）１４０を調製した。
【０５８６】
（実施例１００）Ｎ１−（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ），Ｎ２−（メトキシエトキシエトキシアセトアミド）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス４−Ｎ−イミダゾリル−１，８−ナフタルイミド）１４１の合成
【０５８７】
【化２２２】
2008521920.tif 000188
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−（ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ），Ｎ２−（メトキシエトキシエトキシアセトアミド）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス４−Ｎ−イミダゾリル−１，８−ナフタルイミド）１４１を調製した。
【０５８８】
（実施例１０１）Ｎ１−（ＭＣ−ａｆ−ＰＡＢ），Ｎ２−（メトキシエトキシエトキシアセトアミド）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス４−Ｎ−イミダゾリル−１，８−ナフタルイミド）１４２の合成
【０５８９】
【化２２３】
2008521920.tif 000189
前述の実施例のプロトコルに従って、Ｎ１−（ＭＣ−ａｆ−ＰＡＢ），Ｎ２−（メトキシエトキシエトキシアセトアミド）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス４−Ｎ−イミダゾリル−１，８−ナフタルイミド）１４２を調製した。
【０５９０】
（実施例１０２）Ｎ１−シクロプロピルメチル，Ｎ２−ＭＰ−ｇｌｙ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１４３の合成
【０５９１】
【化２２４】
2008521920.tif 000190
前述の実施例のプロトコルに従って、ＭＰ−ｇｖｃ−ＰＡＢ−ＯＰＮＰとＮ，Ｎ’−（Ｎ−シクロプロピルメチル，ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド３０ｃを反応させて、Ｎ１−シクロプロピルメチル，Ｎ２−マレイミドプロピル−ｇｌｙ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１４３を得た。
【０５９２】
（実施例１０３）トラスツズマブと１０２の複合によるトラスツズマブ−ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，３−エタンジアミン−プロピル）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド）２０１の調製
１個のバイアルに入っているＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）（ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−８、ｒｈｕＭＡｂ  ＨＥＲ２、米国特許第５８２１３３７号）抗体４４０ｍｇを、ＭＥＳ緩衝液（ＭＥＳが２５ｍＭ、ＮａＣｌが５０ｍＭ、ｐＨ５．６）５０ｍＬに溶解し、同じ緩衝液において平衡に保たれている陽イオン交換カラム（Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  Ｓ、１５ｃｍ×１．７ｃｍ）に装入した。次いで、カラムを同じ緩衝液（５カラム体積）で洗浄した。トラスツズマブを、緩衝液のＮａＣｌ濃度を２００ｍＭに上昇させることによって溶出させた。抗体を含む分画を集め、１０ｍｇ／ｍＬに希釈し、リン酸カリウムが５０ｍＭ、ＮａＣｌが５０ｍＭ、ＥＤＴＡが２ｍＭ、ｐＨが６．５の緩衝液に透析した。
【０５９３】
ｐＨ８．０の５００ｍＭホウ酸ナトリウムおよび５００ｍＭ塩化ナトリウムに溶解したトラスツズマブを、過剰な１００ｍＭジチオトレイトール（ＤＴＴ）で処理した。３７℃で約３０分間インキュベートした後、緩衝液をＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ２５樹脂で溶出して交換し、１ｍＭのＤＴＰＡを含むＰＢＳで溶出した。チオール／Ａｂ値は、還元済み抗体の濃度を溶液の２８０ｎｍの吸光度から決定し、ＤＴＮＢ（Ａｌｄｒｉｃｈ、ミルウォーキー、ウィスコンシン州）との反応によるチオールの濃度を４１２ｎｍの吸光度から決定することによって確認される。ＰＢＳに溶解した還元済み抗体を、氷上で冷却する。
【０５９４】
ＤＭＳＯに溶解した薬剤リンカー試薬のマレイミドカプロイル−（バリン−シトルリン）−（パラ−アミノベンジルオキシカルボニル）−（Ｎ，Ｎ’−２−アセトアミド−１，３−エタンジアミン−プロピル）−ビス−４−モルホリノ−１，８−ナフタルイミド１０２を、既知濃度のアセトニトリルおよび水に希釈し、ＰＢＳ中の冷却した還元済み抗体トラスツズマブに添加した。約１時間後、マレイミドを過剰に添加して、反応をクエンチし、いずれの未反応の抗体のチオール基にキャップをつける。反応混合物を遠心限外ろ過によって濃縮し、２０１を、ＰＢＳ中のＧ２５樹脂に通して溶出させて精製かつ脱塩し、滅菌条件下で０．２μｍのフィルタに通してろ過し、貯蔵のために凍結させる。
【０５９５】
（実施例１０４）トラスツズマブ−ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）２０２の調製
実施例１０３のプロトコルに従って、抗体薬剤結合体のトラスツズマブ−ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）２０２を、トラスツズマブとＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）１１１ａを結合体化することによって調製した。
【０５９６】
（実施例１０５）トラスツズマブ−ＭＣ−ａｌａ−ｐｈｅ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）２０３の調製
実施例１０３のプロトコルに従って、抗体薬剤結合体のトラスツズマブ−ＭＣ−ａｌａ−ｐｈｅ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）２０３を、トラスツズマブとＭＣ−ａｌａ−ｐｈｅ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）１１１ｂを結合体化することによって調製した。
【０５９７】
（実施例１０６）トラスツズマブ−（コハク酸−ｇｌｙ−ａｌａ−ｐｈｅ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）２０４の調製
トラスツズマブを単離するために実施例１０３のプロトコルに従って、抗体薬剤結合体のトラスツズマブ−（コハク酸−ｇｌｙ−ａｌａ−ｐｈｅ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）２０４を、トラスツズマブとＮ１−Ｈ，Ｎ２−（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド−コハク酸−ｇｌｙ−ａｌａ−ｐｈｅ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１３５ａを結合体化することによって調製した。
【０５９８】
（実施例１０７）トラスツズマブ−ＭＣ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−３−ニトロ，４−アミノ−１，８−ナフタルイミド）２０５の調製
実施例１０３のプロトコルに従って、抗体薬剤結合体のトラスツズマブ−ＭＣ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−３−ニトロ，４−アミノ−１，８−ナフタルイミド）２０５を、トラスツズマブと（Ｎ１−Ｈ，Ｎ２−ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−３−ニトロ，４−アミノ−１，８−ナフタルイミド）１２６ａを結合体化することによって調製した。
【０５９９】
（実施例１０８）トラスツズマブ−ＭＣ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）２０６の調製
実施例１０３のプロトコルに従って、抗体薬剤結合体のトラスツズマブ−ＭＣ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）２０６を、トラスツズマブとＭＣ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）１１３ａを結合体化することによって調製した。
【０６００】
（実施例１０９）トラスツズマブ−ＭＣ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）２０７の調製
実施例１０３のプロトコルに従って、抗体薬剤結合体のトラスツズマブ−Ｎ１−シクロプロピルメチル，Ｎ２−マレイミドプロピル−ｇｌｙ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８ナフタルイミド２０７を、トラスツズマブとＮ１−シクロプロピルメチル，Ｎ２−マレイミドプロピル−ｇｌｙ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）１４３を結合体化することによって調製した。
【０６０１】
（実施例１１０）インビトロでの細胞増殖アッセイ
ＡＤＣの効果を、以下のプロトコルを使用する細胞増殖アッセイによって測定した（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｃｏｒｐ．  Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  ＴＢ２８８；Ｍｅｎｄｏｚａら、（２００２年）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、第６２巻、５４８５〜５４８８頁）：
１．培地中に約１０４個の細胞（ＳＫＢＲ−３、ＢＴ４７４、ＭＣＦ７、またはＭＤＡ−ＭＢ−４６８）を含む細胞培養１００μｌのアリコートを、９６ウェルの不透明な壁付きプレートの各ウェルに配置した。
２．培地を有し、細胞を含まない対照ウェルを製造した。
３．ＡＤＣを実験用ウェルに添加し、３〜５日間インキュベートした。
４．プレートを、約３０分間室温で平衡に保った。
５．各ウェルに存在する細胞培地の体積と等しい体積のＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ試薬を添加した。
６．細胞溶解を誘発させるのに、内容物をオービタルシェーカー上で２分間混合した。
７．発光シグナルを安定化させるのに、プレートを室温で１０分間インキュベートした。
８．発光を、ＲＬＵ＝相対発光量としてグラフに記録し、報告した。
【０６０２】
本発明は、本発明の少数の態様の例示として意図される実施例において開示した特定の実施形態によって範囲を限定されるものではなく、機能的に等価などんな実施形態も本発明の範囲内にある。実際、本明細書に示され開示されるものに加えて本発明の様々な改変形態は、当業者には明らかになるであろうし、添付の特許請求の範囲内にあることが意図される。
【０６０３】
本明細書に引用したすべての参照は、個々の刊行物または特許または特許出願のそれぞれが、その全体がすべての目的のために参照により組み込まれていることが具体的かつ個別に示されているのと同程度に、その全体においてすべての目的のために参照によって組み込まれている。
【図面の簡単な説明】
【０６０４】
【図１】図１は、相対発光量（ＲＬＵ）と抗体またはＡＤＣのμｇ／ｍｌ濃度について測定した、−○−トラスツズマブおよび−●−トラスツズマブ−ＭＣ−ｖｃ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）２０２を用いて処理したＳＫ−ＢＲ−３細胞のインビトロ細胞増殖アッセイを示している。Ｈ＝トラスツズマブ（Ｈはシステイン［ｃｙｓ］で結合されている）。
【図２】図２は、相対発光量（ＲＬＵ）と抗体またはＡＤＣのμｇ／ｍｌ濃度について測定した、−●−トラスツズマブおよび−○−トラスツズマブ−ＭＣ−ａｌａ−ｐｈｅ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）２０３を用いて処理したＳＫ−ＢＲ−３細胞のインビトロ細胞増殖アッセイを示している。Ｈ＝トラスツズマブ（Ｈはシステイン［ｃｙｓ］で結合されている）。
【図３】図３は、相対発光量（ＲＬＵ）と抗体またはＡＤＣのμｇ／ｍｌ濃度について測定した、−●−トラスツズマブおよび−○−トラスツズマブ−（コハク酸−ｇｌｙ−ａｌａ−ｐｈｅ）−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）２０４を用いて処理したＢＴ−４７４細胞のインビトロ細胞増殖アッセイを示している。Ｈ＝トラスツズマブ（Ｈはアミノ基で結合されている）。
【図４】図４は、相対発光量（ＲＬＵ）と抗体またはＡＤＣのμｇ／ｍｌ濃度について測定した、−●−トラスツズマブおよび−▲−トラスツズマブ−（ＭＣ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−３−ニトロ，４−アミノ−１，８−ナフタルイミド）２０５を用いて処理したＢＴ−４７４細胞のインビトロ細胞増殖アッセイを示している。Ｈ＝トラスツズマブ（Ｈはシステイン［ｃｙｓ］で結合されている）。
【図５】図５は、相対発光量（ＲＬＵ）と抗体またはＡＤＣのμｇ／ｍｌ濃度について測定した、−●−トラスツズマブ、−◆−トラスツズマブ−ＭＣ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−（４−Ｎ−イミダゾリル）−１，８−ナフタルイミド）２０６、および−▼−トラスツズマブ−Ｎ１−シクロプロピルメチル，Ｎ２−マレイミドプロピル−ｇｌｙ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢ−（Ｎ，Ｎ’−（ビス−アミノエチル−１，３−プロパンジアミン）−ビス−３−ニトロ−１，８−ナフタルイミド）２０７を用いて処理したＳＫ−ＢＲ−３細胞のインビトロ細胞増殖アッセイを示している。Ｈ＝トラスツズマブ（Ｈはシステイン［ｃｙｓ］で結合されている）。
【図６】図６は、マレイミドストレッチャーおよび場合によってはｐ−アミノベンジルオキシカルボニル（ＰＡＢ）自壊的スペーサーを有するバリン−シトルリン（ｖａｌ−ｃｉｔ、またはｖｃ）ジペプチドリンカーの調製方法を示しており、Ｑは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−ハロゲン、−ニトロ、または−シアノであり、ｍは、０〜４の整数である。
【図７】図７は、マレイミドストレッチャーユニットおよびｐ−アミノベンジル自壊的スペーサーユニットを有するｐｈｅ−ｌｙｓ（Ｍｔｒ）ジペプチドリンカー試薬の調製方法を示しており、Ｑは、−Ｃ１〜Ｃ８アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ８アルキル）、−ハロゲン、−ニトロ、または−シアノであり、ｍは、０〜４の整数である。
【図８】図８は、薬剤部分のアミノ基をリンカー試薬に共有結合させてビス−１，８−ナフタルイミドリンカー試薬を生成する３種の典型的な方法を示している。
【図９】図９は、ビス−１，８−ナフタルイミドリンカー試薬の合成方法を示している。
【図１０】図１０は、ＢＨＭＳ基を含む枝分かれ状リンカー試薬の合成方法を示している。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【国際調査報告】
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