(57)【要約】本発明は、式（Ｉ）のピロロピリジン−２−カルボン酸アミドの新規形態、並びにグリコーゲンホスホリラーゼのインヒビター、それを含む組成物および治療におけるその使用に関する。本発明はまた、該新規形態の生成方法、前記方法において用いられる新規中間体および前記中間体の製造方法にも関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2008521874.tif 000019
の化合物の塩酸塩である化合物またはその溶媒和物。
【請求項２】
結晶形である、請求項１の化合物。
【請求項３】
水和物である、請求項１または２の化合物。
【請求項４】
１５重量％までの水を含む、請求項１〜３のいずれか一つの化合物。
【請求項５】
アモルファス型である、請求項１の化合物。
【請求項６】
図２−５のいずれか一つに示されるものに実質的に一致するＸ線回折パターンを示すことを特徴とする、請求項１の化合物。
【請求項７】
医薬的に許容される担体と混合した、請求項１〜６のいずれか一つの化合物を含む医薬組成物。
【請求項８】
経口投与に適した分離した単位として提供される、請求項７の医薬組成物。
【請求項９】
固形製剤として提供される、請求項７または８の医薬組成物。
【請求項１０】
錠剤、サシェットまたはカプセルの形態である、請求項７から９のいずれか一つの医薬組成物。
【請求項１１】
高血糖または糖尿病の予防方法または治療方法であって、請求項１から１０のいずれか一つの化合物または組成物を投与する段階を含むことを特徴とする方法。
【請求項１２】
前糖尿病性高血糖または耐糖能障害を示すヒトにおける糖尿病の予防方法であって、請求項１から１０のいずれか一つの化合物または組成物を投与する段階を含むことを特徴とする方法。
【請求項１３】
高コレステロール血症、高インスリン血症、高脂血症、アテローム性動脈硬化症または心筋虚血の予防方法または治療方法であって、請求項１から１０のいずれか一つの化合物または組成物を投与する段階を含むことを特徴とする方法。
【請求項１４】
請求項１から１０のいずれか一つの化合物または組成物を投与する段階を含むことを特徴とする心臓保護方法。
【請求項１５】
請求項１から６のいずれか一つにおいて定義される式（Ｉ）の化合物の塩酸塩の製造方法であって、式（Ｉ）の化合物をＨＣｌで処理することを特徴とする方法。
【請求項１６】
請求項１から６のいずれか一つにおいて定義される式（Ｉ）の化合物の塩酸塩の製造方法であって、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩を、ＨＣｌ水およびアルコール溶媒の混合物あるいはアルコール溶媒およびアセトニトリルの混合物から再結晶することを特徴とする方法。
【請求項１７】
請求項１から６のいずれか一つにおいて定義される式（Ｉ）の化合物の塩酸塩の製造方法であって、式（ＩＩ）：
【化２】
2008521874.tif 000020
の化合物またはその活性誘導体を、式（ＩＩＩ）：
【化３】
2008521874.tif 000021
の化合物と反応させ、該反応の生成物をＨＣｌで処理して、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩を形成させることを特徴とする方法。
【請求項１８】
請求項１から６のいずれか一つにおいて定義される式（Ｉ）の化合物の塩酸塩の製造方法であって、式（ＸＶ）：
【化４】
2008521874.tif 000022
の化合物またはその活性誘導体を、式（ＸＶＩ）：
【化５】
2008521874.tif 000023
の化合物と反応させ、該反応の生成物をＨＣｌで処理して、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩を形成させることを特徴とする方法。
【請求項１９】
式（ＸＶ）：
【化６】
2008521874.tif 000024
の化合物またはその酸付加塩の製造方法であって、式（ＸＶＩＩＩ）：
【化７】
2008521874.tif 000025
の化合物またはその酸付加塩を、式（ＸＶＩＩ）：
【化８】
2008521874.tif 000026
の化合物またはその保護誘導体と反応させることを特徴とする方法。
【請求項２０】
式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩の製造方法であって、請求項１９の方法に従って式（ＸＶ）の化合物を製造し、次いでそれを式（ＸＶＩ）：
【化９】
2008521874.tif 000027
の化合物と反応させることを特徴とする方法。
【請求項２１】
式（Ｉ）：
【化１０】
2008521874.tif 000028
の化合物またはその酸付加塩の製造方法であって、式（ＸＶＩＩＩ）：
【化１１】
2008521874.tif 000029
の化合物またはその酸付加塩を、式（ＩＩＩ）：
【化１２】
2008521874.tif 000030
の化合物またはその保護誘導体と反応させることを特徴とする方法。
【請求項２２】
塩基性水溶液中で行われる、請求項１９から２１のいずれか一つの方法。
【請求項２３】
請求項２０または２２の方法であって、式（ＸＶ）の化合物および式（ＸＶＩ）の化合物の反応生成物をＨＣｌで処理して、あるいは式（ＸＶＩＩＩ）の化合物および式（ＩＩＩ）の化合物の反応生成物をＨＣｌで処理して、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩を形成させる段階をさらに含む方法。
【請求項２４】
式（ＩＡ）：
【化１３】
2008521874.tif 000031
［式中、
Ｒ３は
（ｉ）４−８員環窒素含有ヘテロシクリル基（環窒素原子を介してアミノ酸のカルボニルに結合したもの）を表し；
該ヘテロシクリル基は、１−３個の独立したハロゲン、シアノ、Ｃ１−４アルキル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、−Ｃ０−４アルキルＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−４アルキル）、−Ｃ０−４アルキルＮＲ７Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、Ｃ１−４アルコキシＣ０−４アルキル−、−ＣＯＯＣ０−４アルキル、−Ｃ０−４アルキルＮＨＣ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ０−４アルキルＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ１−４アルコキシＣ１−４アルコキシ、ヒドロキシＣ０−４アルキル−、−ＮＨＳＯ２Ｒ１０、−ＳＯ２（Ｃ１−４アルキル）、−ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、５から６員環ヘテロシクリル、フェニルＣ０−２アルコキシ、またはフェニルＣ０−２アルキル置換基で適宜置換され；
その中で、フェニルは１−２個の独立したハロゲン、シアノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、−Ｎ（Ｃ０−４アルキル）（Ｃ０−４アルキル）、−ＳＯ２Ｃ１−４アルキル、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ０−４アルキル）（Ｃ０−４アルキル）、ヒドロキシ、フルオロメチル、ジフルオロメチル、またはトリフルオロメチル置換基で適宜置換され、あるいはヘテロシクリル基の環炭素原子における２つの結合はオキソ（＝Ｏ）置換基を適宜形成してもよく；あるいは
（ｉｉ）−ＮＲ４（−Ｃ０−４アルキルＲ５）部分を表し；
その中で、Ｒ４はＣ０−３アルキル、−Ｃ２−３アルキル−ＮＲ７Ｒ８、ヒドロキシＣ０−４アルキル−によって適宜置換されヒドロキシによってさらに適宜置換されるＣ３−６シクロアルキル、Ｃ１−２アルコキシＣ２−４アルキル−、またはＣ１−２アルキル−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｃ２−３アルキル−であり；
ｎは０、１、または２であり；並びに
Ｒ５は水素、ヒドロキシＣ２−３アルキル−、Ｃ１−２アルコキシＣ０−４アルキル−、またはアリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルであり；
ヘテロ環状窒素含有Ｒ５環は、環窒素原子においてＣ１−４アルキル、ベンジル、ベンゾイル、Ｃ１−４アルキル−Ｃ（Ｏ）−、−ＳＯ２Ｃ１−４アルキル、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ０−４アルキル）（Ｃ０−４アルキル）、Ｃ１−４アルコキシカルボニルまたはアリール（Ｃ１−４アルコキシ）カルボニルで適宜一置換され；並びに
Ｒ５環は、環炭素原子においてハロゲン、シアノ、Ｃ１−４アルキル−Ｃ（Ｏ）−、Ｃ１−４アルキル−ＳＯ２−、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ヒドロキシ、−Ｎ（Ｃ０−４アルキル）（Ｃ０−４アルキル）、ヒドロキシＣ０−４アルキル−、またはＣ０−４アルキルカルバモイル−で適宜一置換されるが、
但し、四級化された窒素原子は含まれず；あるいは
ヘテロシクリル基の環炭素原子における２つの結合はオキソ（＝Ｏ）置換基を適宜形成してもよく；
Ｒ７およびＲ８は独立して、Ｃ０−４アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、またはＣＯ（Ｃ１−４アルキル）であり；
Ｒ９はＣ１−４アルキル、またはＣ３−６シクロアルキルであり；
Ｒ１０はＣ０−４アルキル、またはＣ３−６シクロアルキルであり；
Ｒ１１およびＲ１２は独立してＣ０−４アルキルであり、あるいはそれらに結合する窒素原子と共に４−６員ヘテロ環を形成してもよい］
の化合物、またはその医薬的に許容される塩の製造方法であって、請求項１９の方法に従って式（ＸＶ）の化合物を製造し、次いでそれを式Ｒ３−Ｈのアミン化合物と反応させることを特徴とする方法。
【請求項２５】
式（ＸＶＩＩＩ）の化合物がそのＨＣｌ酸付加塩として用いられる場合の、請求項１９から２４のいずれかの方法。
【請求項２６】
式（ＸＶＩＩＩ）：
【化１４】
2008521874.tif 000032
の化合物、またはその酸付加塩。
【請求項２７】
ＨＣｌ酸付加塩の形態である、式（ＸＶＩＩＩ）の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ピロロピリジン−２−カルボン酸アミドの新規形態、並びにグリコーゲンホスホリラーゼのインヒビター、それを含む組成物および治療におけるその使用に関する。本発明はまた、該新規形態の生成方法、前記方法において用いられる新規中間体および前記中間体の製造方法にも関する。
【０００２】
グリコーゲンホスホリラーゼのインヒビターは、糖尿病、高血糖、高コレステロール血症、高インスリン血症、高脂血症、アテローム性動脈硬化症、または心筋虚血の治療に有益である。
【背景技術】
【０００３】
国際特許出願番号PCT/US2004/016243（本発明の優先日後に公開）によって、グリコーゲンホスホリラーゼのピロロピリジン−２−カルボン酸アミドインヒビター、例えば化合物５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸［１−（Ｓ）−（４−フルオロベンジル）−２−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−２−オキソエチル］アミドが開示される。
【０００４】
PCT/US2004/016243によって、遊離塩基としての５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸［１−（Ｓ）−（４−フルオロベンジル）−２−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−２−オキソエチル］アミドの合成が記載され、それは２−（Ｓ）−［（５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボニル）アミノ］−３−（４−フルオロフェニル）プロピオン酸と４−ヒドロキシピペリジン、あるいは５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸と２−（Ｓ）−アミノ−３−（４−フルオロフェニル）−１−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）プロパン−１−オン塩酸塩のアミドカップリングによって、ジメチルホルムアミド中、ジイソプロピルエチルアミンの存在下で合成されることが記載されている。
【０００５】
有利な医薬特性を有する本化合物の新規形態を得て、このような化合物の改良された生成方法を提供することが望ましい。
【０００６】
（発明の概要）
５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸［１−（Ｓ）−（４−フルオロベンジル）−２−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−２−オキソエチル］アミド塩酸塩は、グリコーゲンホスホリラーゼのインヒビターであり、糖尿病、高血糖、高コレステロール血症、高インスリン血症、高脂血症、高血圧、アテローム性動脈硬化症または組織虚血、例えば心筋虚血の予防または治療、並びに心臓保護剤として有用である。該生成方法もまた提供される。
【０００７】
（発明の詳細な説明）
本発明は、５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸［１−（Ｓ）−（４−フルオロベンジル）−２−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−２−オキソエチル］アミドの塩酸塩である化合物を提供する。
【０００８】
以下において、５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸［１−（Ｓ）−（４−フルオロベンジル）−２−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−２−オキソエチル］アミドは式（Ｉ）：
【化１】
2008521874.tif 000002
の化合物をいい、そのため本発明の化合物は式（Ｉ）の化合物の塩酸塩でありうる。
【０００９】
式（Ｉ）の化合物の塩酸塩は、好ましくは結晶形である。式（Ｉ）の化合物の塩酸塩はまた、アモルファスでもありうる。
【００１０】
本発明にはまた、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩の溶媒和物も含まれる。溶媒和物には、医薬的に許容される溶媒とともに式（Ｉ）の化合物の塩酸塩の複合体が含まれ、それは特に水和物をいう。
【００１１】
式（Ｉ）の化合物の塩酸塩には、約１５重量％までの水が含まれうる。式（Ｉ）の化合物の塩酸塩が水和物である場合、それには好ましくは５から１５重量％、例えば１０から１５重量％の水が含まれる。
【００１２】
式（Ｉ）の化合物の塩酸塩は、無水物でありうる。
【００１３】
式（Ｉ）の化合物の塩酸塩の多形体は、その特徴的な粉末Ｘ線回折パターンによって同定されうる。
【００１４】
塩酸塩の形態は図２−５に示され、Ｘ線回折パターンにおいて特徴的なピークを示す。塩酸塩のさらなる形態は図６に示され、また該Ｘ線回折パターンにおいても特徴的なピークを示す。特徴的なピーク１つは、粉末ＸＲＤパターンにおいて最大ピークの１０％以上である相対強度を有するものである。これらのピークのいずれか一つのみ、またはその組み合わせは、塩酸塩の形態を同定するのに用いられうる。
【００１５】
これらの特徴的なピークに加え、図２−５および図６は、全サンプルにおいて１０％の閾値に達しない他のマイナーピークを示す。これらのピークの強度は、該多形の特定の配向とともに変化する。これらの追加のピークは、塩酸塩のこれらの形態の存在を確認するのに用いられうるが、それらの欠如は、その特定の物質が塩酸塩でないことを決定するのに用いられるべきではない。
【００１６】
当業者に直ちに明らかなように、いずれの粉末Ｘ線回折の結果も変化しうる。この変動は、試験用サンプルの調製、用いられるＸ線回折計の特定のモデル、該オペレーターの技術などに起因しうる。用語「およそ」は、もし粉末Ｘ線回折パターンにおいて特徴化されるピークの位置の定義に用いられるなら、それは述べられた２θ値±０．２°２θとして定義される。
【００１７】
本発明はまた、医薬的に許容される担体と混合した、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩を含む医薬組成物も提供する。
【００１８】
本発明はまた、グリコーゲンホスホリラーゼを阻害することにより、糖尿病、高血糖、高コレステロール血症、高インスリン血症、高脂血症、高血圧、アテローム性動脈硬化症、または組織虚血（例えば心筋虚血）の予防または治療をする結果となる、医薬的に許容される担体および式（Ｉ）の化合物の塩酸塩の無毒性の治療上の有効量を含む、疾患の治療用医薬組成物も提供する。
【００１９】
式（Ｉ）の化合物の塩酸塩は医薬的な使用が意図されるので、好ましくは実質的に純粋な形、例えば少なくとも純度６０％、より適当なのは少なくとも純度７５％、特に少なくとも純度９８％で提供される（％は重量に基づく）。
【００２０】
本発明の医薬組成物には、活性成分としての式（Ｉ）の化合物の塩酸塩、医薬的に許容される担体および適宜、他の治療上の成分または添加剤が含まれる。いずれの所定の場合においても、最も適した経路は特定の患者、並びに活性成分が投与されている症状の性質および重症度に依存するが、該組成物には、経口、直腸、局所、および非経口（例えば皮下、筋肉内、および静脈内）投与に適したものが含まれる。該組成物は、好ましくは経口投与に適している。該医薬組成物は単一製剤で便利なように提供され、薬学の技術分野で周知のいずれの方法によっても製造されうる。
【００２１】
実際には、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩は、通常の医薬混合技術に従って医薬担体と密接に混合した活性成分として混合されうる。該担体は、投与、例えば経口または非経口（例えば静脈内）に望ましい製造の形態に依存する幅広い種類の形態をとりうる。したがって、本発明の医薬組成物は、活性成分の所定の量を各々含む、カプセル、サシェット（小袋）(cachets)または錠剤のような経口投与に適した分離した単位として提供されうる。さらに、該組成物は粉末として、顆粒として、溶液として、水性液体における懸濁液として、非水液体として、水中油型乳濁液として、または油中水型液体乳濁液として提供されうる。上記に示される通常の製剤に加え、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩はまた、調節された放出方法および／または運搬装置によっても投与されうる。該組成物は薬学のいずれの方法によっても製造されうる。一般に、このような方法には活性成分を一つまたはそれ以上の必要成分を構成する担体と会合させる段階が含まれる。一般に、該組成物は活性成分を液体担体または微粉化した固体担体またはその両方に均一および密接に混合することによって製造される。該生成物は、次いで望ましい体裁へと都合よく成形されうる。
【００２２】
式（Ｉ）の化合物の塩酸塩はまた、一つまたはそれ以上の他の治療上の活性化合物と組み合わせた医薬組成物にも含まれうる。
【００２３】
用いられる医薬担体は、例えば、固体、液体、または気体でありうる。固体担体の例には、乳糖、白土、ショ糖、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウムおよびステアリン酸が含まれる。液体担体の例は、シュガーシロップ、ピーナッツ油、オリーブ油、および水である。ガス状の担体の例には、二酸化炭素および窒素が含まれる。
【００２４】
経口製剤のための組成物の製造において、いずれの都合のよい医薬媒体も用いられうる。例えば、水、グリコール、油、アルコール、香料、防腐剤、着色料などが、経口液体製剤、例えば懸濁液、エリキシル剤および溶液の形成に用いられ；一方、担体、例えばデンプン、糖、微結晶性セルロース、希釈剤、造粒剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤などは経口固形製剤、例えば粉末、カプセルおよび錠剤を形成するのに用いられうる。投与を容易にするために、錠剤およびカプセルは好ましい経口投与単位であり、それによって固体医薬担体が用いられる。適宜、錠剤は標準的な水性または非水性技術によってコートティングされうる。
【００２５】
本発明の組成物を含む錠剤は、圧縮または成形によって、適宜一つまたはそれ以上の付属成分または添加剤とともに製造されうる。圧縮された錠剤は、結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤、界面活性剤、または分散剤に適宜混合した粉末または顆粒のような自由流動型の活性成分を、適当な機械で圧縮することによって製造されうる。成形された錠剤は、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末状の化合物の混合物を、適当な機械で成形することによって作成されうる。各錠剤には、好ましくは約０.０５ｍｇから約５ｇの活性成分が含まれ、各サシェット（小袋）またはカプセルには、好ましくは約０.０５ｍｇから約５ｇの活性成分が含まれる。
【００２６】
例えば、ヒトへの経口投与に意図される製剤には、適当な都合のよい量の担体物質と混合した約０.５ｍｇから約５ｇの活性剤が含まれ、それは全組成物の約５％から約９５％変化しうる。単一製剤には、約１ｍｇから約２ｇの活性成分、典型的には２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、８００ｍｇ、または１０００ｍｇが一般に含まれる。
【００２７】
非経口投与に適した本発明の医薬組成物は、水中の活性化合物の溶液または懸濁液として製造されうる。適当な界面活性剤、例えばヒドロキシプロピルセルロースが含まれうる。分散剤はまた、グリセロール、液体ポリエチレングリコール、および油中のそれらの混合物においても製造されうる。さらに、防腐剤が含まれ、微生物の有害な成長を妨げうる。
【００２８】
注射用に適した本発明の医薬組成物には、無菌水溶液または分散剤が含まれる。さらに、該組成物は、このような無菌注射液または分散剤を即座に製造するために、無菌粉末の形態でありうる。すべての場合において、最終的な注射剤型は無菌でなければならず、容易に注射できるように効果的な流体でなければならない。該医薬組成物は製造および保管の条件下で安定でなければならず；そのため、好ましくは細菌および真菌のような微生物の汚染行為から保護されるべきである。該担体は溶媒または分散媒体であり、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えばグリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコール）、植物油、およびその適当な混合物が含まれうる。
【００２９】
本発明の医薬組成物は、局所使用に適した形態、例えば、エアゾール、クリーム、軟膏、ローション、散布剤などでありうる。さらに、該組成物は経皮性のデバイスに使用するのに適した形態でありうる。これらの製剤は、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩、またはその医薬的に許容される塩を利用し、通常の加工方法を経て製造されうる。例として、クリームまたは軟膏は、親水性物質および水を約５重量％から約１０重量％の化合物と混合して、望ましい濃度を有するクリームまたは軟膏を生成することによって製造される。
【００３０】
本発明の医薬組成物は、該担体が固体である直腸投与に適した形態でありうる。該混合物が単一用量の坐薬を形成することが好ましい。適当な担体には、カカオバターおよび当該技術分野で通常用いられる他の物質が含まれる。坐薬は、最初に該組成物を軟化または溶融した担体に混合して、その後鋳型の中で冷却および成形することによって都合よく形成されうる。
【００３１】
上述の担体成分に加えて、上記に記載される医薬製剤には、必要に応じて一つまたはそれ以上の追加の担体成分、例えば、希釈剤、緩衝剤、香料、結合剤、界面活性剤、増粘剤、滑沢剤、防腐剤（抗酸化剤が含まれる）などが含まれうる。さらに、他の添加剤が含まれて、該製剤を意図される患者の血液と等張にしうる。式（Ｉ）の化合物の塩酸塩、またはその医薬的に許容される塩を含む組成物はまた、粉末または濃縮液の形態でも製造されうる。
【００３２】
一般に、１日につき体重あたり０.０１ｍｇ／ｋｇから約１５０ｍｇ／ｋｇオーダーの投与レベルが、上記に示される症状の治療において有効であり、あるいは１日につき患者あたり約０.５ｍｇから約７ｇで有効である。例えば、糖尿病および高血糖は、１日につき体重１キログラムあたり約０.０１から５０ｍｇの式（Ｉ）の化合物の塩酸塩、あるいは１日につき患者あたり約０.５ｍｇから約３.５ｇの投与によって効果的に治療されうる。同様に、高コレステロール血症、高インスリン血症、高脂血症、高血圧、アテローム性動脈硬化症、または組織虚血、例えば心筋虚血は、１日につき体重１キログラムあたり約０.０１から５０ｍｇの式（Ｉ）の化合物の塩酸塩、あるいは１日につき患者あたり約０.５ｍｇから約３.５ｇ、例えば５０ｍｇから１０００ｍｇの投与によって効果的に治療されうる。
【００３３】
しかしながら、いずれの特定の患者についても、特定の投与量は様々な要因、例えば、年齢、体重、全般の健康状態、性別、食事、投与の時間、投与の経路、排泄速度、混合薬および治療を受ける特定の疾患の重症度に依存することが理解される。
【００３４】
式（Ｉ）の化合物の塩酸塩は、グリコーゲンホスホリラーゼが役割を果たす疾患または症状の治療に用いられうる。
【００３５】
そのため本発明はまた、グリコーゲンホスホリラーゼが役割を果たす疾患または症状の治療方法も提供し、それは治療が必要な患者に対して式（Ｉ）の化合物の塩酸塩の有効量を投与する段階を含むことを特徴とする。
【００３６】
グリコーゲンホスホリラーゼが役割を果たす疾患または症状には、糖尿病（例えば、Ｉ型およびＩＩ型、耐糖能障害、インスリン抵抗性および糖尿病合併症、例えば、神経障害、腎障害、網膜症、および白内障）、高血糖、高コレステロール血症、高インスリン血症、高脂血症、高血圧、アテローム性動脈硬化症、組織虚血、例えば心筋虚血が含まれる。
【００３７】
本発明はまた、高血糖または糖尿病の治療方法も提供し、それは治療が必要な患者に対して式（Ｉ）の化合物の塩酸塩の有効量を投与する段階を含むことを特徴とする。
【００３８】
本発明はまた、前糖尿病性高血糖または耐糖能障害を示すヒトにおける糖尿病の予防方法も提供し、それは治療が必要な患者に対して式（Ｉ）の化合物の塩酸塩の有効予防量を投与する段階を含むことを特徴とする。
【００３９】
本発明はまた、高コレステロール血症、高インスリン血症、高脂血症、高血圧、アテローム性動脈硬化症、または組織虚血の治療方法も提供し、それは治療が必要な患者に対して式（Ｉ）の化合物の塩酸塩の有効量を投与する段階を含むことを特徴とする。
【００４０】
本発明はまた、例えば再灌流傷害後の心臓保護方法も提供し、それは治療が必要な患者に対して式（Ｉ）の化合物の塩酸塩の有効量を投与する段階を含むことを特徴とする。
【００４１】
本発明はまた、上記で定義される症状の治療において、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩の使用も提供する。
【００４２】
本発明はまた、上記で定義される症状の治療のための薬物の製造において、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩の使用も提供する。
【００４３】
本発明はまた、上記で定義される症状の治療に使用するための式（Ｉ）の化合物の塩酸塩も提供する。
【００４４】
本発明の方法および使用において、用語「治療（処置）」には、治療上の処置および予防的な処置の両方が含まれる。
【００４５】
式（Ｉ）の化合物の塩酸塩は、特にＩＩ型糖尿病の治療のために、患者に対し、グリコーゲンホスホリラーゼの阻害が絶食期間の間に起こるように、夜間、例えば就寝時、好ましくは該患者がその日の最後の食事を消化してしまった後に投与されうる。
【００４６】
式（Ｉ）の化合物の塩酸塩は、単独あるいは一つまたはそれ以上の他の治療上の活性化合物と組み合わせて投与されうる。他の治療上の活性化合物は、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩と同じ疾患または症状の治療用、あるいは別の疾患または症状の治療用でありうる。治療上の活性化合物は、同時に、連続して、または別々に投与されうる。
【００４７】
式（Ｉ）の化合物の塩酸塩は、糖尿病の治療のための他の活性化合物、例えばＰＰＡＲアゴニスト、ビグアナイド、スルホニル尿素および他のインスリン分泌促進物質、インスリン増感剤、アルファ−グルコシダーゼインヒビター、ジペプチジルペプチダーゼＩＶインヒビター、グルコキナーゼアクチベーター、ＧＬＰ−１およびＧＬＰ−１類縁体、インスリン、インスリン類縁体、α２アゴニスト、脂肪酸酸化インヒビター、α-グルコシダーゼインヒビター、β−アゴニスト、ホスホジエステラーゼインヒビター、高脂血症治療薬、抗肥満薬、アミリンアンタゴニスト、リポキシゲナーゼインヒビター、ソモスタチン(somostatin)類縁体、グルカゴンアンタゴニスト、インスリンシグナル伝達アゴニスト、ＰＴＰ１Ｂインヒビター、糖新生インヒビター、抗脂肪分解剤(antilypolitic agents)、ＧＳＫインヒビター、ガラニン受容体アゴニスト、食欲低下剤、ＣＣＫ受容体アゴニスト、レプチン、ＣＲＦアンタゴニスト、およびＣＲＦ結合タンパク質とともにポリファーマシーとして投与されうる。式（Ｉ）の化合物の塩酸塩はまた、甲状腺ホルモン様化合物、アルドース還元酵素インヒビター、グルココルチコイド受容体アンタゴニスト、ＮＨＥ−１インヒビターまたはソルビトール脱水素酵素インヒビターと組み合わせても投与されうる。これらの添加剤は、当業者に公知の方法によって製剤化および投与されうる。
【００４８】
式（Ｉ）の化合物の塩酸塩は、公知のグリコーゲンホスホリラーゼインヒビターと比較して有利な特性を示し、例えば、該固体化合物は式（Ｉ）の化合物の公知の形態よりも単離および製剤化を容易にする改良された取扱い上の特性を示しうる。式（Ｉ）の化合物の塩酸塩の単離は、遊離塩基に関して化学的およびエナンチオマー的に改良される。結晶形において、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩はまた、医薬活性成分について望ましい有利な特性も示す。
【００４９】
式（Ｉ）の化合物の塩酸塩は、例えば、式（Ｉ）の化合物をＨＣｌで処理することによって製造されうる。適当な条件には、アルコール溶媒、例えばメタノール、エタノールまたはプロパノール中、式（Ｉ）の化合物の溶解、続いて塩酸、例えば２Ｍ塩酸の添加、およびその後の減圧下での該溶媒の除去が含まれる。
【００５０】
式（Ｉ）の化合物、５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸［１−（Ｓ）−（４−フルオロベンジル）−２−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−２−オキソエチル］アミドは、PCT/US2004/016243に記載される方法によって製造されうる。
【００５１】
したがって、第一の方法において、式（Ｉ）の化合物は、反応式１に示されるように式（ＩＩ）の化合物、すなわち５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸、あるいはその保護または活性化誘導体を、式（ＩＩＩ）のアミン、すなわち２−（Ｓ）−アミノ−３−（４−フルオロフェニル）−１−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）プロパン−１−オン塩酸塩とカップリングさせることによって製造されうる。
【化２】
2008521874.tif 000003
【００５２】
典型的には、式（ＩＩ）の化合物、あるいはその保護または活性化誘導体は、適当なカップリング剤の存在下で式（ＩＩＩ）の化合物と結合する。適当なカップリング剤の例は、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩／ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＥＤＣＩ／ＨＯＢｔ）、１，１−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、ジシクロヘキシルカルボジイミド／ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＤＣＣ／ＨＯＢｔ）、Ｏ−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロホウ酸塩(R. Knorr et al., Tetrahedron Lett., 1989, 30, 1927-1930)、およびポリマー担持カルボジイミド−１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（代表的な手順については、例えば、Argonaut Technologies, Inc., Foster City, California から入手可能な Argonaut Technical Note 501を参照）である。該カップリングは、不活性溶媒、好ましくは非プロトン溶媒中、約０℃から約４５℃の温度で約１時間から７２時間、第三アミン塩基、例えばジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）またはトリエチルアミンの存在下で行われうる。溶媒の例には、アセトニトリル、クロロホルム、ジクロロメタン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）またはその混合物が含まれる。これらのカップリング剤の使用並びに溶媒および温度の適当な選択は当業者に公知であり、または該文献から容易に決定されうる。カップリングカルボン酸に有用なこれらおよび他の条件の例は、Houben-Weyl, Vol XV, part II, E. Wunsch, Ed., G. Thieme Verlag, 1974, Stuttgart, and M. Bodansky, Principles of Peptide Synthesis, Springer-Verlag, Berlin, 1984、およびThe Peptides, Analysis, Synthesis and Biology (Ed., E. Gross and J. Meienhofer), Vols 1-5, Academic Press NY 1979-1983に記載されている。
【００５３】
式（ＩＩ）の化合物は、以下の反応式２に図示される合成によって得られうる。
【化３】
2008521874.tif 000004
【００５４】
式（Ｖ）の化合物は、ジエチルエーテルのような溶媒中、カリウムエトキシドまたはＤＢＵのような塩基の存在下、シュウ酸エステルとの式（ＩＶ）のオルトメチルニトロ化合物の縮合によって製造されうる。式（ＶＩ）の化合物は、還元条件、例えば鉄粉および塩化アンモニウムの下、あるいはエタノール中、パラジウム触媒を用いて水素化することによって、式（Ｖ）の化合物から製造される。式（ＶＩ）の化合物は、水性アルカリを用いてエステル加水分解を受け、式（ＩＩ）のピロロピリジン−２−カルボン酸が得られる。式（ＩＶ）の化合物の式（ＩＩ）の化合物への変換に関するさらなる情報は、文献(Kermack, et al., J. Chem, Soc., 1921, 119, 1602； Cannon et al., J. Med. Chem., 1981, 24, 238； Julian et al., in Heterocyclic Compounds, Vol 3 (Wiley, New York, NY, 1962, R.C. Elderfield, Ed.) p 18)において入手可能である。式（ＩＶ）の化合物は市販品として入手可能である。もう一つの方法として、式（ＩＩ）の化合物はまた、反応式３における合成によっても得られうる。
【化４】
2008521874.tif 000005
【００５５】
反応式３に従って、式（ＩＩ）の化合物は、オルト−ヨードアミノピリジン（ＶＩＩＩ）をヘックカップリングし、その後１００℃から１５０℃の温度で、酢酸パラジウムのような触媒およびＤＡＢＣＯのような塩基の存在下、ＤＭＦのような溶媒中で環化することによって製造される(Chen et al, J. Org. Chem. 1997, 62, 2676参照)。オルト−ヨードアミノピリジン（ＶＩＩＩ）は、硫酸銀の存在下、エタノールのような溶媒中、周囲の温度でヨウ素を用いてアミノピリジン（ＶＩＩ）を直接ヨウ素化することによって製造されうる(Sy, W., Synth. Commun., 1992, 22, 3215参照）。式（ＶＩＩ）の化合物は市販品として入手可能である。
【００５６】
もう一つの方法として、反応式３において使用する式（ＶＩＩＩ）の化合物は、反応式４に従って、塩酸を用いた還流下での加熱による式（Ｘ）のＮ−ピバロイル化合物の脱保護によって生成されうる。式（Ｘ）のＮ−ピバロイル化合物も同様に、ｔｅｒｔ−ブチルリチウムのような有機リチウムで、ＴＨＦのような適当な溶媒中で式（ＩＸ）の化合物の脱プロトン化、その後低温でヨウ素でのクエンチによって生成される。式（ＩＸ）の化合物は、塩化トリメチルアセチルおよびトリエチルアミンのような塩基とともに、ジクロロメタンのような溶媒中で、式（ＶＩＩ）のアミノピリジンの保護によって生成されうる。
【化５】
2008521874.tif 000006
【００５７】
式（ＶＩＩＩ）の化合物を製造するためのさらなるもう一つの方法は、反応式５に示され、トリフルオロ酢酸のような酸を用いて、ジクロロメタンのような溶媒中、周囲の温度で式（ＸＩＩ）のＮ−Ｂｏｃで保護された化合物の脱保護によってなされる。式（ＸＩＩ）のＮ−ＢＯＣ化合物も同様に、ｎ−ブチルリチウムのような有機リチウムで、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルエチレンジアミン（ＴＭＥＤＡ）の存在下、エーテルのような適当な溶媒中、およそ−７０℃の温度で式（ＸＩ）の化合物を脱プロトン化し、その後およそ−１０℃の温度でヨウ素を添加することによって生成される。式（ＸＩ）のＮ−Ｂｏｃアミノピリジンは、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルを用いて、１，４−ジオキサンのような溶媒中で加熱することによって、式（ＶＩＩ）のアミノピリジンから通常製造される。
【化６】
2008521874.tif 000007
【００５８】
式（ＩＩＩ）の化合物は、以下の反応式６に記載される合成によって得られうる。
【化７】
2008521874.tif 000008
【００５９】
式（ＸＩＩＩ）の化合物は、公知の技術によって容易に製造される。ＰＧは保護基、例えばｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）を表す。式（ＸＩＶ）の化合物は、標準的なカップリング条件、例えば反応式１について上記に記載される条件を用いて、式（ＸＩＩＩ）のカルボン酸から生成される。
【００６０】
式（ＩＩＩ）の化合物は、酸性条件下、例えばトリフルオロ酢酸を用いて、ジクロロメタン中、およそ２５℃の温度で、ＰＧ＝Ｂｏｃである場合の保護基の除去によって、式（ＸＩＶ）の化合物から製造されうる。
【００６１】
式（Ｉ）の化合物を製造するための第二の方法は、反応式７に図示される。
【化８】
2008521874.tif 000009
【００６２】
式（Ｉ）の化合物は、反応式７に従って、式（ＸＶ）のカルボン酸、あるいはその保護または活性化誘導体を、式（ＸＶＩ）のアミンとカップリングさせることによって製造されうる。適当なカップリング剤および条件の例は以下に記載される。式（ＸＶＩ）のアミンは市販品として入手可能である。
【００６３】
式（ＸＶ）の化合物は反応式８に従って製造され、それは反応式１において上記に示されるものに類似する方法を使用する。
【化９】
2008521874.tif 000010
【００６４】
式（ＩＩ）のカルボン酸は、反応式１において提供される条件下で、市販品として入手可能なＬ−４−フルオロフェニルアラニンと反応する。例えば、メチルまたはｔｅｒｔ−ブチルで保護されたＬ−４−フルオロフェニルアラニン（ＸＶＩＩ）は、ＤＭＦ中、カルボジイミドカップリング剤を用いて、式（ＩＩ）の化合物と反応する。もう一つの方法として、式（ＩＩ）の化合物の活性化サクシンイミジルエステルが最初に製造され、その後、塩基の存在下でＬ−４−フルオロフェニルアラニン（ＸＶＩＩ）と反応しうる。
【００６５】
本発明のさらなる態様として、式（ＸＶ）の化合物を製造するための新規の方法が提供される。以下に議論されるように、本方法は、特定のキーとなる中間体のラセミ化を回避したという利点によって効率がよく、容易に結晶化できる試薬および生成物の使用を通して容易に精製させることによって効率がよい。本方法は、５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸［１−（Ｓ）−（４−フルオロベンジル）−２−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−２−オキソエチル］アミド遊離塩基（式（Ｉ）の化合物）およびその塩型、例えば該塩酸塩の合成において用いられうる。
【００６６】
したがって、本発明の本態様に従って、式（ＸＶ）：
【化１０】
2008521874.tif 000011
の化合物またはその酸付加塩の製造方法であって、式（ＸＶＩＩＩ）：
【化１１】
2008521874.tif 000012
の化合物またはその酸付加塩を、式（ＸＶＩＩ）：
【化１２】
2008521874.tif 000013
の化合物またはその保護誘導体と反応させることを特徴とする方法が提供される。該反応は、好ましくは塩基性水溶液中で行われる。
【００６７】
本発明に従って、式（Ｉ）：
【化１３】
2008521874.tif 000014
の化合物またはその酸付加塩の製造方法であって、式（ＸＶＩＩＩ）：
【化１４】
2008521874.tif 000015
の化合物またはその酸付加塩を、式（ＩＩＩ）：
【化１５】
2008521874.tif 000016
の化合物またはその保護誘導体と反応させることを特徴とする方法もまた提供される。該反応は、好ましくは塩基性水溶液中で行われる。
【００６８】
上記で言及された方法に従って、式（ＸＶＩＩＩ）および式（ＸＶＩＩ）あるいは式（ＸＶＩＩＩ）および式（ＩＩＩ）の化合物を、好ましくは水溶液中ショッテン−バウマン条件下(The Chemistry of Amides, Wiley, New York, 1970 pp 73-185参照)すなわち塩基の存在下で反応させる。
【００６９】
該塩基性水溶液には、水と混合することができない有機溶媒、例えばＴＨＦが適当に含まれうる。
【００７０】
該水溶液は、水酸化物または炭酸塩、例えば水酸化ナトリウムおよび／または炭酸ナトリウムで適当に塩基性にされうる。
【００７１】
例えば、Ｎ−５−クロロピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボニルクロリドまたはその塩、好ましくは該塩酸塩の無水ＴＨＦ懸濁液は、（Ｌ）−４−フルオロフェニルアラニン（ＸＶＩＩ）含有ＮａＯＨ／Ｎａ２ＣＯ３の水溶液へ液滴で添加されうる。好ましくは、わずかに超過した（Ｌ）−４−フルオロフェニルアラニン、例えば約１．２モル当量が用いられる。該塩化アシルの加水分解および該アミノ酸（アシル化体でさえ）のラセミ化を防ぐのに低温が必要でありうる。好ましくは、該反応は低温によって撹拌が困難になりうるので０−５℃で行われる。該反応混合物は中和され、ＴＨＦは真空下で除去されうる。該生成物は溶液の酸性化後（ｐＨ＝１−２）、沈殿物として回収されうる。酸性化およびろ過前に水溶液へＥｔＯＡｃを添加することによって、良質の沈殿物が得られうる。
【００７２】
式（ＸＶ）の化合物は、結晶化によって精製されうる。結晶化に好ましい溶媒系は、２Ｍ ＨＣｌ水溶液およびアルコール溶媒、例えばメタノール、エタノール、またはプロパノール、例えば２Ｍ ＨＣｌ水溶液および２−プロパノールの約２：１混合物であり、これらの溶媒から拡張された酸中間体（式（ＸＶ）の化合物）が結晶性塩酸塩として得られうる。
【００７３】
式（ＸＶ）の化合物の本製造方法の特別な利点は、それがアミノ酸（式（ＸＶＩＩ）の化合物）を保護する必要なしに行われうることである。また該方法は不斉炭素のラセミ化の機会を最小限にする。
【００７４】
式（ＸＶＩＩＩ）の化合物を生成するために、５−クロロピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸は、不活性溶媒中ＳＯＣｌ２で処理されうる。反応は懸濁液、例えばトルエンまたはアセトニトリル中で、３−４当量のＳＯＣｌ２とともに還流温度で行われうる。もし該反応がトルエン中で行われれば、該酸塩化物の生成物（ＸＶＩＩＩ）はろ過によって単離されうる。もし該反応がアセトニトリル中で行われれば、該溶媒は減圧下で除去されて該酸塩化物が回収されうる。
【００７５】
式（Ｉ）の化合物の製造において、そのように生成された式（ＸＶ）の化合物は、式（ＸＶＩ）の化合物と反応しうる。
【化１６】
2008521874.tif 000017
【００７６】
本カップリングを行うための一連の方法は当業者に明らかである。塩基を遊離せずに拡張された酸の単離された塩酸塩を使用できるようにするために、適当な溶媒が例示される。用いられる溶媒がＥｔＯＡｃ、プロパノールまたはＴＨＦである場合に、ラセミ化または副反応の量の減少が観察される。適当なカップリング剤には、２−クロロ−４，６−ジメチル−１，３，５−トリアジン（ＣＤＭＴ）または（ＤＭＴＭＭ）が含まれる。該反応は、塩基、例えばＮ−メチルモルフォリンまたは過剰な４−ヒドロキシピペリジン、好ましくは過剰な４−ヒドロキシピペリジンの存在下で行われる。クルードの式（Ｉ）の化合物は反応後に単離されうる。
【００７７】
式（Ｉ）の化合物の塩酸塩は再結晶によって精製され、再結晶の条件によって得られる物質の多形体が決定されうる。結晶化のための適当な溶媒系は、２Ｍ ＨＣｌ水溶液とアルコール溶媒（例えばメタノール、エタノール、またはプロパノール）の混合物、例えば２Ｍ ＨＣｌ水溶液および２−プロパノールの約２：１混合物であり、アルコール溶媒（例えばメタノール、エタノール、またはプロパノール）とアセトニトリルの混合物、例えばメタノールおよび２−プロパノールの約１：５混合物である。
【００７８】
そのため、本発明のさらなる態様に従って、式（Ｉ）の化合物の塩酸塩の製造方法であって、ＨＣｌ水溶液およびアルコール溶媒の混合物あるいはアルコール溶媒およびアセトニトリルの混合物から式（Ｉ）の化合物の塩酸塩を再結晶させることを特徴とする方法が提供される。
【００７９】
本発明はまた、このような再結晶法によって得られる式（Ｉ）の化合物の塩酸塩も提供する。
【００８０】
本発明の方法に従って、式（ＸＶＩＩＩ）の酸塩化物を（ＸＶＩＩ）と反応させて式（ＸＶ）の化合物を得るのがより有効であり、反応式８の先の方法（例えば、特に（ＩＩ）のサクシンイミジルエステルは操作が困難であり、水中で分解する）よりもキラル中心のラセミ化の量の低下をもたらす。本発明の方法は、それによって式（Ｉ）の化合物の高収率を可能にしうる（それゆえ、その塩酸塩が得られるはずである）。
【００８１】
式（ＸＶＩＩＩ）の化合物の酸塩化物は、塩酸塩の形で有利に利用される。このような条件下で、式（ＸＶ）の化合物はＨＣｌとともに酸付加塩として生成され、それは結晶化されて容易に精製されうる。最終生成物はそのため高純度で得られる。それに対して、反応式３の方法を用いて製造される式（ＩＩＩ）の化合物は油状物で得られるので、反応式１に従って製造される式（Ｉ）の化合物には、類似する極性を有するいくつかの副生成物が一般に混入しており、そのためこの経路は好まれない。
【００８２】
上記に定義される本発明の方法の利点の一つは、中間体化合物における不安定な官能基の保護が不要であることである。しかしながら、上記に記載される他の方法の間、中間体化合物における不安定な官能基、例えばヒドロキシ、カルボキシ、およびアミノ基は保護されうる。５−クロロピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸は、１位において、例えばアリールメチル、アシル、アルコキシカルボニル、スルホニル、またはシリル基で保護されうる。該保護基は、式（Ｉ）の化合物の合成におけるいずれの段階でも除去されうるか、または最終の式（Ｉ）の化合物において存在しうる。様々な不安定な官能基が保護されうる方法の包括的な議論、および生じる保護誘導体の開裂方法は、例えば、Protective Groups in Organic Chemistry, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, (1991) Wiley-Interscience, New York, 2nd edition において与えられる。
【００８３】
本発明の新規の方法は、式（Ｉ）の化合物の類縁体の製造において追加的に利用されうる。特に、４−ヒドロキシピペリジン−１−イル部分が部分Ｒ３で置換される場合の類縁体が意図され、Ｒ３は
（ｉ）４−８員環窒素含有ヘテロシクリル基（環窒素原子を介してアミノ酸のカルボニルに結合したもの）を表し；
該ヘテロシクリル基は、１−３個の独立したハロゲン、シアノ、Ｃ１−４アルキル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、−Ｃ０−４アルキルＮＨＣ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１−４アルキル）、−Ｃ０−４アルキルＮＲ７Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、Ｃ１−４アルコキシＣ０−４アルキル−、−ＣＯＯＣ０−４アルキル、−Ｃ０−４アルキルＮＨＣ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ０−４アルキルＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０）２、−Ｃ１−４アルコキシＣ１−４アルコキシ、ヒドロキシＣ０−４アルキル−、−ＮＨＳＯ２Ｒ１０、−ＳＯ２（Ｃ１−４アルキル）、−ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２、５から６員環ヘテロシクリル、フェニルＣ０−２アルコキシ、またはフェニルＣ０−２アルキル置換基で適宜置換され；
その中で、フェニルは１−２個の独立したハロゲン、シアノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、−Ｎ（Ｃ０−４アルキル）（Ｃ０−４アルキル）、−ＳＯ２Ｃ１−４アルキル、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ０−４アルキル）（Ｃ０−４アルキル）、ヒドロキシ、フルオロメチル、ジフルオロメチル、またはトリフルオロメチル置換基で適宜置換され、あるいはヘテロシクリル基の環炭素原子における２つの結合はオキソ（＝Ｏ）置換基を適宜形成してもよく；あるいは
（ｉｉ）−ＮＲ４（−Ｃ０−４アルキルＲ５）部分を表し；
その中で、Ｒ４はＣ０−３アルキル、−Ｃ２−３アルキル−ＮＲ７Ｒ８、ヒドロキシＣ０−４アルキル−によって適宜置換されヒドロキシによってさらに適宜置換されるＣ３−６シクロアルキル、Ｃ１−２アルコキシＣ２−４アルキル−、またはＣ１−２アルキル−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｃ２−３アルキル−であり；
ｎは０、１、または２であり；並びに
Ｒ５は水素、ヒドロキシＣ２−３アルキル−、Ｃ１−２アルコキシＣ０−４アルキル−、またはアリール、ヘテロアリール(hetaryl)、またはヘテロシクリルであり；
ヘテロ環状窒素含有Ｒ５環は、環窒素原子においてＣ１−４アルキル、ベンジル、ベンゾイル、Ｃ１−４アルキル−Ｃ（Ｏ）−、−ＳＯ２Ｃ１−４アルキル、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ０−４アルキル）（Ｃ０−４アルキル）、Ｃ１−４アルコキシカルボニルまたはアリール（Ｃ１−４アルコキシ）カルボニルで適宜一置換され；並びに
Ｒ５環は、環炭素原子においてハロゲン、シアノ、Ｃ１−４アルキル−Ｃ（Ｏ）−、Ｃ１−４アルキル−ＳＯ２−、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ヒドロキシ、−Ｎ（Ｃ０−４アルキル）（Ｃ０−４アルキル）、ヒドロキシＣ０−４アルキル−、またはＣ０−４アルキルカルバモイル−で適宜一置換されるが、
但し、四級化された窒素原子は含まれず；あるいは
ヘテロシクリル基の環炭素原子における２つの結合はオキソ（＝Ｏ）置換基を適宜形成してもよく；
Ｒ７およびＲ８は独立して、Ｃ０−４アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、またはＣＯ（Ｃ１−４アルキル）であり；
Ｒ９はＣ１−４アルキル、またはＣ３−６シクロアルキルであり；
Ｒ１０はＣ０−４アルキル、またはＣ３−６シクロアルキルであり；
Ｒ１１およびＲ１２は独立してＣ０−４アルキルであり、あるいはそれらに結合する窒素原子と共に４−６員ヘテロ環(heterocycle)を形成してもよい。
【００８４】
このような類縁体は、その医薬的に許容される塩、例えば該ＨＣｌ塩の形で製造されうる。
【００８５】
式（Ｉ）の化合物の４-ヒドロキシピペリジン−１−イル部分が置換されうる窒素含有ヘテロシクリル基の特定の例には、アゼチジン−１−イル、ピロリジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、１，４−ジアザパン(diazapan)−１−イル、ピペラジン−１−イル、モルフォリン−４−イル、チオモルフォリン−４−イル、１，１−ジオキソチオモルフォリン−４−イル、またはチアゾリジン−３−イルが含まれ；それらの化学基は、上記に記載されるように適宜置換されうる。４−ヒドロキシピペリジン−１−イル置換のための好ましい置換基には、−Ｃ１−４アルコキシ、ヒドロキシ、およびオキソが含まれる。
【００８６】
さらに好ましくは、該置換基は、ヒドロキシルで適宜置換されたピロリジン−１−イルまたはピペリジン−１−イル、例えば３−（Ｓ）−ヒドロキシピロリジン−１−イルである。
【００８７】
したがって、式（ＩＡ）：
【化１７】
2008521874.tif 000018
［式中、Ｒ３は上記で定義される］
によって定義される式（Ｉ）の化合物の類縁体は、式（ＸＶＩＩＩ）の化合物を式（ＸＶＩＩ）の化合物と水性塩基性条件下で反応させ、次いで前記反応生成物を式Ｒ３−Ｈのアミン化合物と反応させることによって製造されうる。適当な条件には、式（ＸＶ）の化合物を式（ＸＶＩ）の化合物と反応させるための上記に記載されたものに類似する条件が含まれる。
【００８８】
上記で定義されたいずれの新規中間体もまた、本発明の範囲内に含まれる。
【００８９】
本発明はまた、５−クロロピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボニルクロリド、またはその酸付加塩、特に５−クロロピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボニルクロリド塩酸塩も提供する。
【００９０】
すべての公報、例えば、これらに限らないが、本明細書で引用される特許および特許出願は、まるで各々の公報が本明細書に十分記載されるように引用されることが明確および個別的に示されるかのように、本明細書に引用される。
【００９１】
本発明を以下の実施例に関してこれから説明する。
【００９２】
実施例
分析方法
熱重量分析を以下のように行った：該物質（およそ４−５ｍｇ）のサンプルを、プラチナ容器中、ゆっくりと不活性ガス（窒素）を流して、５℃／分の加熱速度でデリバトグラフ(Derivatograph)Ｃ装置を用いて加熱した。
【００９３】
Ｘ線回折測定を、フィリップスＰＷ３７１０／ＰＷ１０５０回折計（Ｃｕ Ｋα ４０ｋＶ、３５ｍＡ）を用いて行った。
【００９４】
実施例１
５−クロロピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸［１−（Ｓ）−４−フルオロベンジル）−２−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−２−オキソエチル］アミド塩酸塩の合成
（ａ）５−クロロピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボニルクロリド塩酸塩の製造
方法Ａ：５−クロロピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸（３９．３ｇ、０．２０ｍｏｌ）をアセトニトリル中で懸濁し、加熱還流した。塩化チオニル（４４ｍＬ、７１．４ｇ、０．６０ｍｏｌ）を２０分かけて還流温度で液滴で添加した。生じた懸濁液を、さらに三時間加熱還流した（ＴＬＣモニタリング：ｎ−ブタノール−酢酸−水 ４：１：１、紫外可視。メタノールＮＨ３溶液の中へクエンチすることによってサンプルを調製した）。該反応混合物を減圧下で蒸発乾固し、該粗生成物をさらに精製せずに次の段階に用いた。収量４９．３ｇ（９８．０％）。
【００９５】
方法Ｂ：アセトニトリル（３．７５Ｌ）中の５−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］−ピリジン−２−カルボン酸（３００ｇ、１．５２ｍｏｌ）のスラリーを加熱還流した。塩化チオニル（３６３ｇ、３．０５２ｍｏｌ、２２３ｍＬ）を混合物へ液滴で添加し、該反応をＴＬＣおよびＨＰＬＣによってモニターした。該反応の完了後、過剰な塩化チオニルおよびアセトニトリルを減圧下で蒸留して除き、濃厚スラリーを得た。トルエン（２Ｌ）を該残留物に添加し、溶媒を減圧下で蒸発した。該生成物を窒素下でろ過し、トルエン（０．２Ｌ）およびヘキサン（０．２Ｌ）で洗浄した。該生成物を真空中４５−５０℃で水酸化カリウムによって乾燥し、標題の化合物を得た。収量３６８ｇ（９６％）。
IR (KBr) 1750 cm-1 (他に 2436 br, 1981, 1869, 1631, 1588, 1529, 1447, 1389, 1340, 1289, 1203, 1140 and 1001 cm-1).
【００９６】
（ｂ）Ｎ−（５−クロロピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボニル）−Ｌ−４−フルオロフェニルアラニン塩酸塩の製造
方法Ａ：ＮａＯＨ（９．４１ｇ、０．２３５ｍｏｌ、１．２当量）およびＮａ２ＣＯ３（６２．３ｇ、０．５８８ｍｏｌ、３．０当量）の脱イオン水溶液（２４０ｍＬ）へ、Ｌ−４−フルオロフェニルアラニン（４３．１ｇ、０．２３５ｍｏｌ、１．２当量）を添加し、その後ＴＨＦ（２４０ｍＬ）を加えた。生じた溶液を０−５℃まで冷却し、５−クロロピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボニルクロリド塩酸塩（４９．３ｇ、０．１９６ｍｏｌ、１．０当量）の乾燥ＴＨＦ懸濁液を加えた（〜３０分間）。該反応混合物を０−５℃で１５分間撹拌した（ＨＰＬＣモニタリング、該サンプルの直接分析）。温度を０−５℃で維持し、一方反応混合物のｐＨを濃塩酸を加えて〜７に調整し、ＴＨＦを減圧留去した。ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）を残存する水溶液に添加し、ｐＨを濃塩酸（全体で〜８０ｍＬ）を加えて１−２に調節した。生じた懸濁液を３０分間０−５℃で撹拌した。沈殿物を次いでろ過し、ＥｔＯＡｃ（２ｘ１００ｍＬ）で洗浄し、４０℃で真空中乾燥した。クルードの収量６７．６ｇ（８６．６％）。該粗生成物を２Ｍ ＨＣｌ（５４０ｍＬ）および２−プロパノール（２７０ｍＬ）の混合物から結晶化した。収量６０．９ｇ（７８．０％）。
1H-NMR (DMSO): 13.02 (br s, 1H), 9.2 (d, 1H), 8.80 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.34 (dd, 2H), 6.96 (dd, 2H), 4.81 (m,1H), 3.29 (dd, 1H), 3.16 (dd, 1H).
【００９７】
方法Ｂ：ＮａＯＨ（７３．０ｇ、１．８２ｍｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３（４８６ｇ、４．５８ｍｏｌ）の脱イオン水溶液（１．９０Ｌ）へ、Ｌ−４−フルオロフェニルアラニン（３３６ｇ、１．８２ｍｏｌ）を添加し、その後ＴＨＦ（２．８０Ｌ）を加えた。生じた溶液を０−５℃まで冷却し、５−クロロピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボニルクロリド塩酸塩（３８３ｇ、１．５２ｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ懸濁液を加えた（〜３０分間）。該反応混合物を０−５℃で３０分間撹拌した（ＨＰＬＣモニタリング、該サンプルの直接分析）。温度を０−５℃で維持し、一方反応混合物のｐＨを濃塩酸（２３０ｍＬ）を加えて〜７に調整し、ＴＨＦを減圧留去した。ＥｔＯＡｃ（３．０Ｌ）を該残留物に添加し、濃塩酸（０．６Ｌ）を加えてｐＨを１−２に調節した。生じたスラリーを３０分間０−５℃で撹拌した。沈殿物を次いでろ過し、ＥｔＯＡｃ（２ｘ５００ｍＬ）で洗浄し、４０−５０℃で真空中乾燥した。（ＨＰＬＣで純度９５％）。
【００９８】
（ｃ）５−クロロピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸［１−（Ｓ）−４−フルオロベンジル）−２−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−２−オキソエチル］アミド塩酸塩の製造
方法Ａ：Ｎ−（５−クロロピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボニル）−Ｌ−４−フルオロフェニルアラニン塩酸塩（６０．９ｇ、０．１５３ｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ中（４６０ｍＬ）懸濁し、該混合物を室温で撹拌した。４−ヒドロキシピペリジン（３５．７ｇ、０．３５３ｍｏｌ）を何回かに分けて添加し（わずかに発熱した）、該混合物を室温で１０分間撹拌した。４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルフォリニウムクロリド（５１．２ｇ、０．１８５ｍｏｌ、Kunishima et al, Tetrahedron Letters, 1999, 40, 5327-5330 の方法に従って製造した）を次いで一回で加えた。該反応混合物を室温で一時間撹拌した（ＨＰＬＣモニタリング、直接サンプル分析）。該溶媒を減圧留去し、該残留物をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）および飽和Ｎａ２ＣＯ３溶液（５００ｍＬ）−水（６００ｍＬ）混合物の間で分液処理した。有機層を分離し、該水層をＥｔＯＡｃ（２ｘ１５０ｍＬ）で抽出し、該混合有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４によって乾燥し、蒸発させた。クルードの収量（塩基）７０．９ｇ。該粗生成物を２Ｍ ＨＣｌ（４２０ｍＬ）および２−プロパノール（２１０ｍＬ）の混合物から結晶化して、３５．１ｇ（４７．７％）の淡黄色結晶性物質（含水量１３．２％および光学純度＞９８％）を得た。同混合物から第二の結晶化によって、２１．４ｇ（２９．１％）の純粋生成物を光学純度＞９９％で得た。
1H-NMR (DMSO): 13.2 (br s, 1H), 9.24 (dd, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.28 (dd, 2H), 6.96 (dd, 2H), 5.25 (qa, 1H), 3.12 (m, 1H), 1.85-1.115 (m, 9H).
【００９９】
方法Ｂ：Ｎ−（５−クロロピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボニル）−Ｌ−４−フルオロフェニルアラニン塩酸塩（４５０ｇ、１．１３ｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（３．４０Ｌ）中で懸濁し、該混合物を２０−２５℃まで冷却した。４−ヒドロキシピペリジン（２６４ｇ、２．６０ｍｏｌ）を何回かに分けて添加し（わずかに発熱した）、該混合物を２０−２５℃で５−１０分間撹拌した。４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルフォリニウムクロリド（３８０ｇ、１．３７ｍｏｌ、Kunishima et al, Tetrahedron Letters, 1999, 40, 5327-5330 の方法に従って製造した）を次いで添加した。該反応混合物を２０−２５℃で撹拌した（ＨＰＬＣモニタリング、直接サンプル分析）。該反応混合物を、撹拌した炭酸ナトリウム（７００ｇ）の脱イオン水溶液（７Ｌ）の中に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）を添加し、該混合物を１０分間撹拌した。有機層を分離し、該水層をＥｔＯＡｃ（１ｘ１Ｌおよび１ｘ５００ｍＬ）で抽出し、該混合有機層を食塩水（２．０Ｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４（７０ｇ）および活性炭（１５ｇ）で終夜乾燥し、次いで溶媒を蒸留した。該粗生成物をメタノール（２．０Ｌ）および２Ｍ ＨＣｌ（２．５０Ｌ）に溶解し、セライト（１０ｇ）および活性炭（１０ｇ）を添加した。生じたスラリーは３０分間撹拌した。該混合物をろ過し、該メタノールを減圧留去した。該結晶スラリーを４−５℃まで終夜冷却し、ろ過し、２Ｍ ＨＣｌ（０．２０Ｌ）で洗浄し、真空中５０℃で乾燥した。該生成物を２Ｍ ＨＣｌ（２．１０Ｌ）および２−プロパノール（０．９Ｌ）の混合物から再結晶し、該生成物をＫＯＨによって真空中５０℃で乾燥した。
【０１００】
分析方法
実施例１の生成物における熱安定性データを、上記に記載される熱重量分析法によって得た。生じたトレースを図１に示す。該物質は１９０℃以下で安定に見えた。４０℃あたりでの変化は、存在しうる溶媒または水の気化に対応する。
【０１０１】
実施例１の生成物の特性を、Ｘ線散乱を用いて上記に記載される方法に従って調べた。分析を４段階の精製方法で行った：
【０１０２】
図２は、洗浄後に湿った状態で得られた粗生成物に対応するトレースを示す。
【０１０３】
図３は、ＥｔＯＡｃで洗浄した後に得られた粗生成物に対応するトレースを示す。
【０１０４】
図４は、乾燥後の最終生成物に対応するトレースを示す。その湿った生成物（５０−６０％揮発性成分）を３０℃で乾燥し（８時間）、次いで温度を１０時間かけて徐々に５０℃まで昇温し、乾燥をこの温度で２４時間続けた。
【０１０５】
図５は、上記に記載される乾燥をし、次いで１２時間湿ったシリカゲルの上の大気で保管し、平衡水分を有し、実質的な結晶性構造を持つ物質を生成する結果となった後の、最終生成物に対応するトレースを示す。
【０１０６】
実施例２
メタノール：アセトニトリルからの５−クロロピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸［１−（Ｓ）−４−フルオロベンジル）−２−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−２−オキソエチル］アミド塩酸塩の再結晶
５−クロロピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−２−カルボン酸［１−（Ｓ）−４−フルオロベンジル）−２−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−２−オキソエチル］アミド塩酸塩（１０ｇ、実施例１に従って、但し再結晶せずに得られた物質）を５０℃でメタノール（２０ｍＬ）中に溶解し、継続的な撹拌の下、アセトニトリル（１００ｍＬ）を加えた。該生成物は、アセトニトリルの添加の終わりに沈殿し始めた。該混合物を４０℃まで暖めて均一溶液を得た。アセトニトリルの添加後、該懸濁液を継続的な撹拌の下、０℃まで冷却した。該生成物を１２時間０℃で結晶化した。該沈殿物を焼結ガラスフィルター上でろ過した。該ろ過ケーキをアセトニトリル（１０ｍＬ）で洗浄し、該生成物を４５℃で真空中で乾燥し、光学純度＞９９％で生成物が生じた。Ｍｐ７７−７８℃。含水量４．５−５．５重量％。
分析方法
【０１０７】
実施例２の生成物の特性を、Ｘ線散乱を用いて上記に記載される方法に従って調べた。図６は、実施例１の物質について得られたトレースに重ねたこの生成物に対応するトレースを示す。
【０１０８】
インビトロＧＰ活性
物質
α−Ｄ−グルコース−１−リン酸（二ナトリウム塩）、グリコーゲン、Ｄ−グルコース、マラカイトグリーン塩酸塩、モリブデン酸アンモニウム四水和物、ＢＳＡ、ＨＥＰＥＳ、およびウサギ筋ホスホリラーゼａ（Ｐ１２６１）をシグマから購入した。すべての他の試薬は分析グレードであった。
方法
【０１０９】
インビトログリコーゲンホスホリラーゼアッセイ：
逆方向のグリコーゲンホスホリラーゼ活性についてのアッセイを、Engers et al., Can. J. Biochem.,1970,. 48, 746-754 に記載される方法に基づいて展開した。ウサギ筋グリコーゲンホスホリラーゼａ（シグマ）を、２５ｍＭ トリス／ＨＣｌ中、１００μｇ／ｍＬの保管濃度(stock concentration)で再構成した。該ｐＨを、９６穴プレートにおいて、５０ｍＭ ヘペス ｐＨ７．２、７．５ｍＭ グルコース、０．５ｍＭ グルコース−１−リン酸および１ｍｇ／ｍＬ グリコーゲンを含む１００μＬの最終的な体積において測定した。３０℃で３０分間インキュベーションした後、グルコース−１−リン酸から遊離した無機リン酸を、以下に従って調製される１５０μＬのマラカイトグリーン／モリブデン酸溶液の添加によって測定した：４Ｎ ＨＣｌ中の５ｍＬの４．２％モリブデン酸アンモニウム、１５ｍＬの０．０４５％マラカイトグリーン、５０μＬのトゥイーン２０(Tween 20)。室温での３０分のインキュベーション後、該吸光度を６２０ｎｍで測定した。ＩＣ５０決定のために、ＤＭＳＯ中の１０μＬの段階希釈化合物（１００μＭから０．００４μＭ）を、阻害されていない対照反応に添加した当量濃度のＤＭＳＯとともに、複製した各反応に添加した。用量反応曲線を、次いで％阻害 対 ｌｏｇ１０化合物濃度をプロットすることによって得た。ＩＣ５０は、記載されるアッセイ条件下で５０％阻害に達する化合物の濃度として定義される。式（Ｉ）の化合物は、＜１ｍＭのＩＣ５０を有する。
【図面の簡単な説明】
【０１１０】
【図１】図１は、本発明の塩酸塩の熱重量分析を示す（実施例１）。
【図２】図２は、異なる水和状態での本発明の塩酸塩についてのＸ線回折パターンを示す（実施例１）。
【図３】図３は、異なる水和状態での本発明の塩酸塩についてのＸ線回折パターンを示す（実施例１）。
【図４】図４は、異なる水和状態での本発明の塩酸塩についてのＸ線回折パターンを示す（実施例１）。
【図５】図５は、異なる水和状態での本発明の塩酸塩についてのＸ線回折パターンを示す（実施例１）。
【図６】図６は、実施例１のパターンに重ねた本発明の塩酸塩についてのＸ線回折パターンを示す（実施例２）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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