(57)【要約】  本発明は、シクロアルキル（例えば、シクロプロピル）で２０位の炭素が置換されている、１６位の炭素が二重結合であり、２３位の炭素が単結合、二重結合又は三重結合である、コレカルシフェロールのビタミンＤ３類似体を提供する。２５位の炭素が、種々のアルキル及びハロアルキルで置換されている。本発明は、薬学的に許容されるエステル、塩及びそれらのプロドラッグを提供する。さらに、ビタミンＤ３関連の症状の治療に前記化合物を用いるための方法、及び前記化合物を包含する医薬組成物を開示する。
2008514621.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化００１】
2008514621.tif 000060
（式中、
Ｂは、単結合、二重結合又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２は、それぞれ独立してＨ２又はＣＨ２であり、この場合Ｘ１及びＸ２は、両方が共にＣＨ２であることはない；
Ｒ１は、ヒドロキシル又はハロゲンであり；
Ｒ２及びＲ３は、Ｃ２０と共に、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキルを形成し；
Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、アルキル又はハロアルキルであり；
Ｒ６は、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、ヒドロキシアルキル又はハロアルキルであり、この場合、Ｂが三重結合であれば、Ｒ６が存在しないのは理解される通りである）
で表されるビタミンＤ３化合物、並びにその薬学的に許容されるエステル、塩及びそれらのプロドラッグ。
【請求項２】
Ｒ１が、ヒドロキシルである、請求項１に記載の化合物。       
【請求項３】
Ｒ１が、ハロゲンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１が、Ｆである、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｂが、単結合である、請求項１〜４の何れか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｂが、二重結合である、請求項１〜４の何れか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｂが、三重結合である、請求項１〜４の何れか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｘ１がＣＨ２であり、そしてＸ２がＨ２である、前記請求項の何れかに記載の化合物。
【請求項９】
Ｘ１及びＸ２が、それぞれＨ２である、前記請求項の何れかに記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ４及びＲ５が、それぞれ独立して、アルキル又はハロアルキルである、前記請求項の何れかに記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ４及びＲ５が、それぞれ独立して、アルキル又はトリハロアルキルである、前記請求項の何れかに記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ４及びＲ５が、それぞれ独立して、メチル又はトリフルオロメチルである、前記請求項の何れかに記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ４及びＲ５が、メチルである、前記請求項の何れかに記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ４及びＲ５が、トリフルオロメチルである、請求項１〜１２の何れかに記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ６が、水素である、前記請求項の何れかに記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ２及びＲ３が、Ｃ２０と共に、シクロプロピルを形成する、前記請求項の何れかに記載の化合物。
【請求項１７】
式Ｉ−ａ：
【化００２】
2008514621.tif 000061
（式中、
Ｂは、単結合、二重結合又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２は、それぞれ独立して、Ｈ２又はＣＨ２であり、この場合、Ｘ１及びＸ２は、両方共ＣＨ２ではなく；
Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、アルキル又はハロアルキルである）
で表される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１８】
前記化合物が、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール：
【化００３】
2008514621.tif 000062
である、請求項１７に記載の化合物。
【請求項１９】
前記化合物が、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２０−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール：
【化００４】
2008514621.tif 000063
である、請求項１７に記載の化合物。
【請求項２０】
前記化合物が、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール：
【化００５】
2008514621.tif 000064
である、請求項１７に記載の化合物。
【請求項２１】
前記化合物が、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール：
【化００６】
2008514621.tif 000065
である、請求項１７に記載の化合物。
【請求項２２】
前記化合物が、１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール：
【化００７】
2008514621.tif 000066
である、請求項１７に記載の化合物。
【請求項２３】
前記化合物が、１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール：
【化００８】
2008514621.tif 000067
である、請求項１７に記載の化合物。
【請求項２４】
前記化合物が、１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール：
【化００９】
2008514621.tif 000068
である、請求項１７に記載の化合物。
【請求項２５】
前記化合物が、１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール：
【化０１０】
2008514621.tif 000069
である、請求項１７に記載の化合物。
【請求項２６】
前記化合物が、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール：
【化０１１】
2008514621.tif 000070
である、請求項１７に記載の化合物。
【請求項２７】
前記化合物が、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール：
【化０１２】
2008514621.tif 000071
である、請求項１７に記載の化合物。
【請求項２８】
式Ｉ−ｂ：
【化０１３】
2008514621.tif 000072
（式中、
Ｂは、単結合、二重結合又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２は、それぞれ独立して、Ｈ２又はＣＨ２であり、この場合、Ｘ１及びＸ２は、両方が共にＣＨ２であることはなく；そして
Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、アルキル又はハロアルキルである）
で表される、請求項１に記載の化合物。
【請求項２９】
前記化合物が、１α−フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２０−シクロピロピル−コレカルシフェロール：
【化０１４】
2008514621.tif 000073
である、請求項２８に記載の化合物。
【請求項３０】
前記化合物が、１α−フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール：
【化０１５】
2008514621.tif 000074
である、請求項２８に記載の化合物。
【請求項３１】
前記化合物が、１α−フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−２０−シクロピロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール：
【化０１６】
2008514621.tif 000075
である、請求項２８に記載の化合物。
【請求項３２】
前記化合物が、１α−フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール：
【化０１７】
2008514621.tif 000076
である、請求項２８に記載の化合物。
【請求項３３】
ビタミンＤ３に関連する症状の対象を治療するために、請求項１〜３２の何れか一項に記載のビタミンＤ３化合物の有効量を、その必要とする対象に投与することを含んでなる、ビタミンＤ３に関連する症状の対象を治療する方法。
【請求項３４】
さらに、ビタミンＤ化合物を得る工程を含んでなる、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
さらに、ビタミンＤ３に関連する症状に対する治療を必要とする対象を同定することを含んでなる、請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
前記ビタミンＤ３に関連する症状が、ＩＬＴ３に関連した疾患である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３７】
前記ＩＬＴ３に関連した疾患が、免疫疾患である、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記免疫疾患が、自己免疫疾患である、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記自己免疫疾患が、１型インスリン依存性糖尿病、成人呼吸窮迫症候群、炎症性腸疾患、皮膚炎、髄膜炎、血栓性血小板減少性紫斑病、シェーグレン症候群、脳炎、ブドウ膜炎、ブドウ膜網膜炎、白血球粘着不全症、関節リウマチ、リウマチ熱、ライター症候群、乾癬性関節炎、進行性全身性硬化症、原発性胆汁性肝硬変、天疱瘡、類天疱瘡、壊死性血管炎、重症筋無力症、多発性硬化症、紅斑性狼瘡、多発性筋炎、サルコイドーシス、肉芽腫症、脈管炎、悪性貧血、ＣＮＳ炎症性疾患、抗原抗体複合体媒介疾患、自己免疫溶血性貧血、橋本甲状腺炎、バセドウ病、習慣自然流産、レイノー症候群、糸球体腎炎、皮膚筋炎、慢性活動性肝炎、セリアック病、エイズの自己免疫合併症、萎縮性胃炎、強直性脊椎炎、及びアジソン病よりなる群から選択される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記免疫疾患が、移植による拒絶反応である、請求項３７に記載の方法。
【請求項４１】
前記自己免疫疾患が、１型インスリン依存性糖尿病である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４２】
前記ビタミンＤ３に関連する症状が、ビタミンＤ３応答細胞の異常活性により特徴付けられる疾患である、請求項３３に記載の方法。
【請求項４３】
前記疾患が、過剰増殖性の皮膚細胞の異常活性を含んでなる、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記疾患が、乾癬症、基底細胞癌及び角化症から選択される、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記疾患が、乾癬症である、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記ビタミンＤ３化合物が、式Ｉ−ａ：
【化００１８】
2008514621.tif 000077
（式中、
Ｂは、単結合、二重結合又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２は、それぞれ独立して、Ｈ２又はＣＨ２であり、この場合、Ｘ１及びＸ２は、両方が共にＣＨ２であることはなく；そして
Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、アルキル又はハロアルキルである）
で表される、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記ビタミンＤ３化合物が、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール：
【化００１９】
2008514621.tif 000078
である、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記疾患が、内分泌細胞の異常活性を含んでなる、請求項４２に記載の方法。
【請求項４９】
前記内分泌細胞が、副甲状腺細胞であり、そして異常活性が副甲状腺ホルモンのプロセシング及び／又は分泌である、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記疾患が、二次性副甲状腺機能亢進症である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記疾患が、骨細胞の異常活性を含んでなる、請求項４２に記載の方法。
【請求項５２】
前記疾患が、骨粗鬆症、骨異栄養症、老人性骨粗鬆症、骨軟化症、くる病、嚢胞性線維性骨炎、及び腎性骨異栄養症から選択される、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
前記疾患が、骨粗鬆症である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記ビタミンＤ３化合物が、式Ｉ−ａ：
【化００２０】
2008514621.tif 000079
（式中、
Ｂは、単結合、二重結合又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２は、それぞれ独立して、Ｈ２又はＣＨ２であり、この場合、Ｘ１及びＸ２は、両方が共にＣＨ２であることはなく；そして
Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、アルキル又はハロアルキルである）
で表される、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記疾患が、肝硬変又は慢性腎疾患である、請求項４２に記載の方法。
【請求項５６】
前記疾患が、高血圧症である、請求項４２に記載の方法。
【請求項５７】
前記化合物が、レニンの発現を抑制し、これにより高血圧症の対象を治療する、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記ビタミンＤ３化合物が、式Ｉ−ａ：
【化００２１】
2008514621.tif 000080
（式中、
Ｂは、単結合、二重結合又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２は、それぞれ独立して、Ｈ２又はＣＨ２であり、この場合、Ｘ１及びＸ２は、両方が共にＣＨ２であることはなく；そして
Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、アルキル又はハロアルキルである）
で表される、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記ビタミンＤ３化合物が、式Ｉ−ｂ：
【化００２２】
2008514621.tif 000081
（式中、
Ｂは、単結合、二重結合又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２は、それぞれ独立して、Ｈ２又はＣＨ２であり、この場合、Ｘ１及びＸ２は、両方が共にＣＨ２であることはなく；そして
Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、アルキル又はハロアルキルである）
で表される、請求項５７に記載の方法。
【請求項６０】
前記ビタミンＤ３化合物が、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール：
【化００２３】
2008514621.tif 000082
である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６１】
前記ビタミンＤ３化合物が、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２０−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール：
【化００２４】
2008514621.tif 000083
である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６２】
前記ビタミンＤ３化合物が、１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール：
【化００２５】
2008514621.tif 000084
である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６３】
前記ビタミンＤ３化合物が、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール：
【化００２６】
2008514621.tif 000085
である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６４】
前記ビタミンＤ３化合物が、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール：
【化００２７】
2008514621.tif 000086
である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６５】
前記ビタミンＤ３化合物が、１α−フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール：
【化００２８】
2008514621.tif 000087
である、請求項５９に記載の方法。
【請求項６６】
前記ビタミンＤ３化合物が、１α−フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール：
【化００２９】
2008514621.tif 000088
である、請求項５９に記載の方法。
【請求項６７】
前記疾患が、良性前立腺肥大症である、請求項４２に記載の方法。
【請求項６８】
前記疾患が、腫瘍性疾患である、請求項４２に記載の方法。
【請求項６９】
前記腫瘍性疾患が、白血病、リンパ腫、メラノーマ、骨肉腫、結腸癌、直腸癌、前立腺癌、膀胱癌、並びに肺、胸部、消化管及び尿生殖路の悪性腫瘍よりなる群から選択される、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
前記腫瘍性疾患が、膀胱癌である、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
前記疾患が、ニューロンの欠損である、請求項４２に記載の方法。
【請求項７２】
前記疾患が、アルツハイマー病、ピック病、パーキンソン病、血管疾患、ハンチントン病、及び加齢による記憶障害よりなる群から選択される、請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
前記疾患が、ブドウ膜炎である、請求項４２に記載の方法。
【請求項７４】
前記疾患が、間質性膀胱炎である、請求項４５に記載の方法。
【請求項７５】
前記疾患が、ビタミンＤ３応答の平滑筋細胞の異常活性により特徴付けられる、請求項４２に記載の方法。
【請求項７６】
前記疾患が、子宮筋腫である、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
前記疾患が、高血圧により誘導されるの血管リモデリング、血管再狭窄及びアテローム性動脈硬化よりなる群から選択される過剰増殖性血管疾患である、請求項７５に記載の方法。
【請求項７８】
前記疾患が、動脈性高血圧である、請求項７５に記載の方法。
【請求項７９】
カルシウム及びリン酸の代謝異常を改善するように、請求項１〜３２の何れか一項に記載の化合物の治療有効量を、対象に投与することを含んでなる、カルシウム及びリン酸の代謝異常を改善する方法。
【請求項８０】
前記カルシウム及びリン酸の代謝異常が骨粗鬆症を引き起こす、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
請求項１〜３２の何れか一項に記載の化合物を、細胞における免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）表面分子の発現を調節するのに有効な量で、当該細胞と接触させることを含んでなる、細胞における免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）表面分子の発現を調節する方法。
【請求項８２】
前記細胞が、対象の内部にある、請求項８１に記載の方法。
【請求項８３】
請求項１〜３２の何れか一項に記載の化合物を、ＩＬＴ３表面分子の発現を調節するのに有効な量で対象に投与し、これにより当該対象におけるＩＬＴ３に関連した疾患を治療することを含んでなる、対象におけるＩＬＴ３に関連した疾患を治療する方法。
【請求項８４】
前記ＩＬＴ３に関連した疾患が、免疫疾患である、請求項８３に記載の方法。
【請求項８５】
前記免疫疾患が、自己免疫疾患である、請求項８４に記載の方法。
【請求項８６】
前記自己免疫疾患が、インスリン依存型の糖尿病である、請求項８５に記載の方法。
【請求項８７】
請求項１〜３２の何れか一項に記載の化合物を、ＩＬＴ３表面分子の発現を調節するのに有効な量で対象に投与し、これにより当該対象における免疫耐性を誘導することを含んでなる、対象における免疫耐性を誘導する方法。
【請求項８８】
前記免疫耐性が、抗原提示細胞において誘導される、請求項８７に記載の方法。
【請求項８９】
前記抗原提示細胞が、樹状細胞、単球及びマクロファージよりなる群から選択される、請求項８８に記載の方法。
【請求項９０】
請求項１〜３２の何れか一項に記載の化合物を、ＩＬＴ３表面分子の発現を調節するのに有効な量で対象に投与し、これにより当該対象における移植拒絶反応を阻害することを含んでなる、対象における移植拒絶反応を阻害する方法。
【請求項９１】
前記移植が、固体器官の移植である、請求項９０に記載の方法。
【請求項９２】
前記移植が、膵臓ランゲルハウス島移植である、請求項９０に記載の方法。
【請求項９３】
前記移植が、骨髄移植である、請求項９０に記載の方法。
【請求項９４】
請求項１〜３２の何れか一項に記載の化合物を、ＩＬＴ３表面分子の発現を調節するのに有効な量で抗原提示細胞に接触させ、これにより当該抗原提示細胞による免疫抑制活性を調節することを含んでなる、抗原提示細胞による免疫抑制活性を調節する方法。
【請求項９５】
前記細胞が、抗原提示細胞である、請求項８１又は９４に記載の方法。
【請求項９６】
前記抗原提示細胞が、樹状細胞、単球及びマクロファージよりなる群から選択される、請求項９５に記載の方法。
【請求項９７】
請求項１〜３２の何れか一項に記載の化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与し、これにより当該対象における膀胱機能障害を予防又は治療する方法。
【請求項９８】
前記膀胱機能障害が、膀胱肥大の存在により特徴付けられる、請求項９７に記載の方法。
【請求項９９】
前記膀胱機能障害が、過活動膀胱である、請求項９７に記載の方法。
【請求項１００】
前記対象が雄性である、請求項９７〜９９の何れか一項に記載の方法。
【請求項１０１】
前記雄性対象が、同時にＢＰＨを患っている、請求項９７〜９９の何れか一項に記載の方法。
【請求項１０２】
前記対象が雌性である、請求項９７〜９９の何れか一項に記載の方法。
【請求項１０３】
前記ビタミンＤ３化合物が、薬学的に許容される担体と組み合わせて投与される、請求項３３に記載の方法。
【請求項１０４】
前記ビタミンＤ３化合物が、薬学的に許容される製剤を用いて対象に投与される、請求項７０、８１、８３、８７又は９０の何れか一項に記載の方法。
【請求項１０５】
前記薬学的に許容される製剤が、前記薬学的に許容される製剤を対象に投与してから少なくとも４週間、ビタミンＤ３化合物を対象に継続した送達を提供する、請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０６】
前記免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）表面分子の発現が、上方制御される、請求項８１、８３、８７又は９０の何れか一項に記載の方法。
【請求項１０７】
前記化合物が、薬学的に許容される希釈剤又は担体と共に医薬組成物に製剤化される、請求項９７に記載の方法。
【請求項１０８】
前記化合物が、ビタミンＤ受容体作動薬である、請求項９８に記載の方法。
【請求項１０９】
前記対象が哺乳動物である、請求項３６３〜１０８の何れか一項に記載の方法。
【請求項１１０】
前記対象がヒトである、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１１】
前記化合物が、経口で投与される、請求項３３、７９、８１、８３、８７又は９０の何れか一項に記載の方法。
【請求項１１２】
前記化合物が、静脈内に投与される、請求項３３、７９、８１、８３、８７又は９０の何れか一項に記載の方法。
【請求項１１３】
前記化合物が、局所に投与される、請求項３３、７９、８１、８３、８７又は９０の何れか一項に記載の方法。。
【請求項１１４】
前記化合物が、非経口的に投与される、請求項３３、７９、８１、８３、８７又は９０の何れか一項に記載の方法。
【請求項１１５】
前記化合物が、０．００１μｇ〜１００μｇ／ｋｇ（体重）の濃度で投与される、請求項３３、７９、８１、８３、８７又は９０の何れか一項に記載の方法。
【請求項１１６】
請求項１〜３２の何れか一項に記載の化合物の有効量、及び薬学的に許容される希釈剤又は担体を含んでなる医薬組成物。
【請求項１１７】
前記有効量が、ビタミンＤ３関連の症状を治療するのに有効である、請求項１１６に記載の医薬組成物。
【請求項１１８】
前記ビタミンＤ３関連の症状が、ＩＬＴ３に関連した疾患である、請求項１１７に記載の医薬組成物。
【請求項１１９】
前記ビタミンＤ３関連の症状が、ビタミンＤ３応答細胞の異常活性により特徴付けられる疾患である、請求項１１７に記載の医薬組成物。
【請求項１２０】
前記ビタミンＤ３関連の症状が、膀胱機能不全である、請求項１１７に記載の医薬組成物。
【請求項１２１】
前記疾患が高血圧である、請求項１１７に記載の医薬組成物。
【請求項１２２】
請求項１〜３２の何れか一項に記載の化合物を含む医薬組成物、及びビタミンＤ３関連の症状の治療における使用説明書を含んでなる、ビタミンＤ３関連の症状の治療に用いる包装された製剤。
【請求項１２３】
前記ビタミンＤ３関連の症状が、ＩＬＴ３に関連した疾患である、請求項１２２に記載の包装された製剤。
【請求項１２４】
前記ビタミンＤ３関連の症状が、ビタミンＤ３応答細胞の異常活性により特徴付けられる疾患である、請求項１２２に記載の包装された製剤。
【請求項１２５】
前記ビタミンＤ３関連の症状が、膀胱機能不全である、請求項１２２に記載の包装された製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願）
本出願は、２００４年９月２４日出願の米国仮特許出願番号第６０／６１２，７３２号の優先権を主張するものであり、その出願の開示内容は、参照することによりその全てが本明細書に取り込まれる。
【背景技術】
【０００２】
高等動物の生体系におけるビタミンＤ（コレカルシフェロール）の重要性は、１９２０年にＭｅｌｌａｎｂｙによるその発見以来認識されてきた（Mellanby, E. (1921), Spec. Rep. Ser. Med. Res. Council (GB), SRS 61:4）。ビタミンＤが、骨格の正常な発達及びカルシウムやリンのホメオスタシスの維持に必須である「ビタミン」として公式に分類されたのは、１９２０年〜１９３０年の間であった。
【０００３】
ビタミンＤ３の代謝に関する研究は、血漿代謝物、２５−ヒドロキシビタミンＤ３［２５（ＯＨ）Ｄ３］（Blunt, J. W. et al. (1968), Biochemistry 6:3317-3322)及びホルモン活性形、１α，２５（ＯＨ）２Ｄ３(Myrtle, J.F. et al. (1970) J. Biol. Chem. 245:1190-1196; Norman, A.W. et al. (1971) Science 173:51-54; Lawson, D.E.M. et al. (1971) Nature 230:228-230; Holick, M.F. (1971) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 68:803-804）の発見と化学的解析に始まった。ビタミンＤ内分泌系の概念の形成は、入念に調節された方法で１α,２５（ＯＨ）２Ｄ３の産生における腎臓の重要な役割の正しい認識（Fraser, D.R. and Kodicek, E (1970) Nature 288:764-766; Wong, R.G. et al. (1972) J. Clin. Invest. 51:1287-1291）及び腸における１α,２５（ＯＨ）２Ｄ３（ＶＤ３Ｒ）の核内受容体の発見（Haussler, M.R. et al. (1969) Exp. Cell. Res. 58:234-242; Tsai, H.C. and Norman, A.W. (1972) J. Biol. Chem. 248:5967-5975）の両者に依存した。
【０００４】
ビタミンＤ内分泌系の働きは、以下に依存している。第一に、肝臓（Bergman, T. and Postlind, H. (1991) Biochem. J. 276:427-432; Ohyama, Y. and Okuda, K. (1991) J. Biol. Chem. 266:8690-8695）、腎臓（Henry, H.L. and Norman, A.W. (1974) J. Biol. Chem. 249:7529-7535; Gray, R.W. and Ghazarian, J.G. (1989) Biochem. J. 259:561-568）及び種々の他の組織に、チトクロムＰ４５０酵素が存在し、ビタミンＤ３が１α,２５（ＯＨ）２Ｄ３及び２４Ｒ、２５（ＯＨ）２Ｄ３のような生物活性のある代謝産物に変換すること；第二に、血漿ビタミンＤ結合タンパク質（ＤＢＰ）が存在し、これら疎水性分子がビタミンＤ内分泌系の種々の組織成分へ選択的に輸送及び送達されること（Van Baelen, H. et al. (1988) Ann. NY Acad. Sci. 538:60-68; Cooke, N.E. and Haddad, J.G. (1989) Endocr. Rev. 10:294-307; Bikle, D.D. et al. (1986) J. Clin. Endocrinol. Metab. 63:954-959）；そして第三に、アゴニスト１α, ２５（ＯＨ）２Ｄ３と相互作用する多種多様な標的組織に立体選択的な受容体が存在し、このセコステロイドホルモンに必須の特異的生物応答を生じること（Pike, J.W. (1991) Annu. Rev. Nutr. 11:189-216）。これまでに、１α, ２５（ＯＨ）２Ｄ３（ＶＤ３Ｒ）に対する核内受容体が３０を越える組織及び腫瘍細胞系に存在するという証拠がある（Reichel, H. and Norman, A.W. (1989) Annu. Rev. Med. 40:71-78）。
【０００５】
ビタミンＤ３及びそのホルモン活性形は、カルシウム及びリンのホメオスタシスのよく知られたレギュレーターである。これら化合物は、カルシウム及びリン酸塩の腸管吸収、骨ミネラルの動員及び腎臓でのカルシウムの保持の少なくとも１つを促進することが知られている。更に、３０を越える組織における特異的ビタミンＤ受容体の存在の発見は、カルシウム／骨ホメオスタシスにおける古典的な役割の外に万能のレギュレーターとしてのビタミンＤ３の同定を導いた。１α,２５（ＯＨ）２Ｄ３のパラクリンの役割が、ビタミンＤ３をその活性形に酸化することができる酵素、例えば２５−ＯＨＤ−１α−ヒドロキシラーゼと、骨、角化細胞、胎盤及び免疫細胞のような、各種組織における特異的受容体の組み合わさった存在によって、示唆されていた。更に、ビタミンＤ３ホルモン及び活性代謝物は、正常細胞及び悪性細胞の両者の細胞増殖及び分化を調節することができることが見出されていた（Reichel, H. et al. (1989) Ann. Rev. Med. 40:71-78）。
【０００６】
ビタミンＤ３及びその代謝産物の活性を前提として、これら化合物の合成類似体の開発に多くの注意が集中されてきた。多くのこれらの類似体は、Ａ環、Ｂ環、Ｃ／Ｄ環、そして、主として側鎖の構造変形を含むものである（Bouillon, R. et al., Endocrine Reviews 16(2):201-204）。今日まで開発されたビタミンＤ３類似体の圧倒的多数は側鎖の構造変形を含むものであるが、少数の研究は、Ａ環ジアステレオマーの生物学的特徴を報告している（Norman, A.W. et al. J. Biol. Chem. 268(27):20022-20030）。更に、ステロイドの生物学的エステル化が研究され（Hochberg, R.B., (1998) Endocr Rev. 19(3):331-348）、そして、ビタミンＤ３のエステル類が知られている（ＷＯ ９７/１１０５３）。
【０００７】
更に、合成類似体の開発における多大の努力にもかかわらず、ビタミンＤ及びその構造類似体の臨床応用は、ビタミンＤ化合物の知られている適応／応用に対して対象に投与した後にこれらの化合物によって誘発される望ましくない副作用によって制限されている。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、式：
【０００９】
【化０３０】
2008514621.tif 000003
【００１０】
（式中、
Ｂは、単結合、二重結合又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２は、それぞれＨ２又はＣＨ２であり、この場合Ｘ１及びＸ２は、両方が共にＣＨ２であることはなく；
Ｒ１は、ヒドロキシル又はハロゲンであり；
Ｒ２、Ｒ３及びＲ６は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、ヒドロキシアルキル又はハロアルキルであるか（Ｂが三重結合の場合、Ｒ６が存在しないのは、理解される通りである）、又はＲ２及びＲ３がＣ２０と共に、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキルを形成し；
Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、アルキル又はハロアルキルである）
で表されるビタミンＤ３化合物、並びに薬学的に許容されるエステル、塩及びそれらのプロドラッグに関する。
従って、一態様において、式Ｉ：
【００１１】
【化０３１】
2008514621.tif 000004
【００１２】
（式中、
Ｂは、単結合、二重結合又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２は、それぞれＨ２又はＣＨ２であり、この場合Ｘ１及びＸ２は、両方が共にＣＨ２であることはなく；
Ｒ１は、ヒドロキシル又はハロゲンであり；
Ｒ２及びＲ３は、Ｃ２０と共に、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキルを形成し；
Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、アルキル又はハロアルキルであり；
Ｒ６は、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、ヒドロキシアルキル又はハロアルキルであり、（この場合、Ｂが三重結合であれば、Ｒ６が存在しないのは理解される通りである）；
並びにその薬学的に許容されるエステル、塩及びプロドラッグを提供する。
【００１３】
別な態様において、本発明の方法は、カルシウム及びリン酸代謝の異常を改善する方法を提供する。この方法には、カルシウム及びリン酸代謝の異常を改善するように、式Ｉで表されるＤ３化合物の治療有効量を対象にすることを包含する。
別な態様において、本発明は、細胞における免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）表面分子の発現を調節する方法を提供する。この方法には、細胞における免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）表面分子の発現を調節するために、式Ｉで表されるビタミンＤ３化合物を有効な量で当該細胞に接触させることを包含する。
【００１４】
更に別な態様において、本発明は、対象におけるＩＬＴ３に関連した疾患を治療する方法を提供する。この方法には、式Ｉで表されるビタミンＤ３化合物をＩＬＴ３表面分子の発現を調節するのに有効な量で対象に投与し、これにより対象におけるＩＬＴ３に関連した疾患を治療することを包含する。
更に別な態様において、本発明は、対象における免疫耐性を誘導する方法を提供する。この方法には、式Ｉで表されるビタミンＤ３化合物を、ＩＬＴ３表面分子の発現を調節するのに有効な量で対象に投与し、これにより対象における免疫耐性を誘導することを包含する。
【００１５】
更なる態様において、本発明は、対象における移植拒絶反応を阻害する方法を提供する。この方法には、式Ｉで表されるビタミンＤ３化合物を、ＩＬＴ３表面分子の発現を調節するのに有効な量で対象に投与し、これにより対象における移植拒絶反応を阻害することを包含する。
更なる別な態様では、本発明は、式Ｉで表されるビタミンＤ３化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与し、これにより当該対象における膀胱機能障害を予防又は治療する方法を提供する。
【００１６】
更に別の態様において、本発明は、ビタミンＤ３に関連した症状の治療に用いる包装された製剤を提供する。この包装された製剤には、式Ｉで表されるビタミンＤ３化合物及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物に、ビタミンＤ３に関連した症状の治療における使用説明書が包装されたものを包含する。
別な態様において、本発明は、ＩＬＴ３に関連した症状の治療に用いる包装された製剤を提供する。この包装された製剤には、式Ｉで表されるビタミンＤ３化合物及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物に、ビタミンＤ３に関連した症状の治療における使用説明書が包装されたものを包含する。
【００１７】
更なる態様において、本発明は、抗原提示細胞による免疫抑制活性を調節する方法を提供する。この方法には、式Ｉで表されるビタミンＤ３化合物を、ＩＬＴ３表面分子の発現を調節するのに有効な量で抗原提示細胞に接触させ、これにより抗原提示細胞による免疫抑制活性を調節することを包含する。
更なる別な態様では、本発明は、医薬組成物を提供する。この組成物には、式Ｉで表されるビタミンＤ３化合物の有効量、及び薬学的に許容される担体を包含する。
【００１８】
（発明の詳細な説明）
１．定義
本発明の更なる説明の前に、そして本発明がより容易に理解されるために、いくつかの用語を先ず定義し、本明細書に便宜のために集約する。
「投与」又は「投与する」という用語は、対象に対して、それらの意図された機能を達成するために、ビタミンＤ３化合物を対象に導入する経路を包含する。使用することができる投与経路の例としては、注射（皮下、静脈内、非経口、腹腔内、髄腔内）、経口、吸入、経直腸及び経腸を包含する。医薬製剤は、もちろん、各投与経路に適した形態によって与えられる。例えば、これら製剤は、錠剤又はカプセルの形態で、注射、吸入、目薬、軟膏、座薬等によって投与される（注射、注入又は吸入による投与、ローション又は軟膏による局所投与、及び座薬による経直腸投与）。経口投与が好ましい。注射は、ボーラス注入（瞬時投与）であってよく、又は、連続注入であってもよい。投与経路に応じて、ビタミンＤ３化合物は、意図した機能を遂行する能力に有害な影響を及ぼすであろう自然条件から保護するための選択された材料で、被覆又は処理することができる。ビタミンＤ３化合物は、単独、又は上記した別の薬剤又は薬学的に許容される担体のいずれかと併せて、又は両者と併せて投与することができる。ビタミンＤ３化合物は、その他の薬剤の投与に先立って、薬剤と同時、又は薬剤の投与後に投与することができる。更に、ビタミンＤ３化合物は、その活性代謝産物、又は、インビボでより活性な代謝産物に変換されたプロフォームの形で投与することができる。
【００１９】
「アルキル」という用語は、直鎖アルキル基、分枝鎖アルキル基、シクロアルキル（脂環式）基、アルキル置換シクロアルキル基及びシクロアルキル置換アルキル基を包含する、飽和脂肪族基の基を表す。アルキルという用語は、炭化水素主鎖の１個又はそれ以上の炭素が、例えば、酸素、窒素、硫黄又はリン原子で置換された、酸素、窒素、硫黄又はリン原子を包含することができる、アルキル基を更に包含する。好ましい態様において、直鎖又は分子鎖アルキルは、３０個又はそれより少ない炭素原子を（例えば、直鎖に対してはＣ1−Ｃ30、分枝鎖に対してはＣ3−Ｃ30）、好ましくは２６個又はそれより少ない炭素原子、そしてより好ましくは２０個又はそれより少ない炭素原子、そして更に好ましくは４個又はそれより少ない炭素原子を主鎖に有する。同様に、好ましいシクロアルキルは、それらの環構造中に３〜１０個の炭素原子を有し、より好ましくは、環構造中に３、４、５、６又は７個の炭素原子を有する。
【００２０】
更に、明細書及び特許請求の範囲の中で使用されているアルキルという用語は、「非置換アルキル」及び「置換アルキル」の両方を包含し、その後者は、炭化水素主鎖の１個又はそれ以上の炭素上の水素を置換している置換基を有するアルキルの部分を表す。そのような置換基は、例えば、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、ホスフェート、ホスホネート、ホスフィネート、シアノ、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、及びアルキルアリールアミノを包含する）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイル及びウレイドを包含する）、アミジノ、イミノ、メルカプト、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、スルホネート、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、複素環式基、アルキルアリール、又は芳香族又は複素環式芳香族部分を包含することができる。炭化水素鎖上で置換された部分は、適切であればそれ自体置換され得ることは、当業者によって理解されるであろう。シクロアルキルは、更に、例えば、上記の置換基を用いて置換することができる。「アルキルアリール」部分は、アリールで置換されているアルキルである（例えば、フェニルメチル（ベンジル））。「アルキル」という用語は、長さ及び置換の可能性に関して上記のアルキルに類似しているが、少なくとも１つの二重結合又は三重結合をそれぞれ含有する不飽和脂肪族基を包含する。
【００２１】
炭素数を別に特定しない限り、本明細書で使用される「低級アルキル」は、上記で定義したようなアルキル基を意味するが、直鎖又は分枝鎖である主鎖に、１〜１０個、より好ましくは１〜６個、そしてより好ましくは１〜４個の炭素原子を有する。低級アルキルの例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、tert−ブチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル等を包含する。好ましい態様において、「低級アルキル」という用語は、主鎖に４個以下の炭素原子を有する直鎖アルキル、例えば、Ｃ1−Ｃ4アルキルを包含する。
【００２２】
「アルコキシアルキル」、「ポリアミノアルキル」及び「チオアルコキシアルキル」という用語は、上に記載したように、炭化水素主鎖の１個又はそれ以上の炭素が、例えば、酸素、窒素又は硫黄原子で置換された、酸素、窒素又は硫黄原子を更に包含するアルキル基を表す。
【００２３】
「アルケニル」及び「アルキニル」という用語は、長さ及び置換の可能性に関して上に記載したアルキルに類似しているが、少なくとも１つの二重結合又は三重結合をそれぞれ含有する不飽和脂肪族基を表す。例えば、本発明では、シアノ及びプロパギル基を意図している。
【００２４】
「抗原」という用語は、免疫応答を導き出す物質を包含する。耐性を誘導する本発明の抗原は、宿主に関連して体外から導き出されるか、又は導き出されない。例えば、本発明の方法は、「自己抗原」に耐性を誘導するのに使用することができる。自己抗原は、自己抗体と反応する正常な体の成分である。本発明は、又、「同種抗原」に耐性を誘導することを包含する。同種抗原は、種のいくつかのメンバー、例えば血液型物質、において見出される抗原をいう。同種移植は、同じ種の遺伝的に異なったメンバーへの移植である。同種移植は、組織適合性抗原に対するＴリンパ球の免疫応答に基づいて拒絶される。本発明の方法は、又、「異種抗原」に対する耐性を誘導することを提供する。異種抗原は、異なった種間の相異が原因で免疫反応を引き起こす物質である。それ故、異種移植は、１つの種のメンバーから異なった種のメンバーへの移植である。異種移植は、抗体及び組織適合性抗原に対する細胞傷害性Ｔリンパ球によって数日以内に通常拒絶される。
【００２５】
「抗原提示細胞」又は「ＡＰＣ」という用語は、抗原を、例えば、Ｔヘルパー細胞に提示することができる細胞を包含する。抗原提示細胞は、Ｂリンパ球、樹状細胞のような、補助細胞又は非リンパ球性細胞、ランゲルハンス細胞及び抗原をヘルパーＴリンパ球に提示することによって免疫応答の誘導を補助する、単核食細胞を包含する。本発明の抗原提示細胞は、好ましくは、骨髄由来であり、限定はされないが、樹状細胞、マクロファージ、単球を包含する。本発明のＡＰＣは、骨髄、血液、胸腺、表皮、肝臓、胎児肝臓又は脾臓から単離される。
【００２６】
「抗腫瘍薬」及び「抗増殖性薬」という用語は、本明細書では同義的に使われ、ビタミンＤ３応答性細胞の増殖を阻害する、例えば、特に血液生成の新生物（neoplasm）のような特徴を有する、新生物の発生又は進行を阻害する、機能特性を有する薬剤を包含する。
【００２７】
本明細書で使用される「アリール」という用語は、０〜４個のヘテロ原子を包含する５及び６員単環芳香族基、例えば、ベンゼン、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、ベンゾオキサゾール、ベンゾチアゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン及びピリミジン等を包含する、アリール基を表す。アリール基は、又、ナフチル、キノリル、インドリル等のような多環芳香族基を包含する。環構造中にヘテロ原子を有するアリール基は、又、「アリールヘテロ環」、「ヘテロアリール」又は「ヘテロ芳香族」として表される。芳香環は、１つ又はそれ以上の環の位置において、上記したような置換基、例えば、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、ホスフェート、ホスホネート、ホスフィネート、シアノ、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、及びアルキルアリールアミノを包含する）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイル及びウレイドを包含する）、アミジノ、イミノ、メルカプト、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、スルホネート、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、複素環式基、アルキルアリール、又は芳香族若しくは複素環式芳香族部分のような置換基で置換することができる。アリール基は、又、芳香族ではない脂環又は複素環と縮合又は架橋して、多環（例えば、テトラリン）を形成することもできる。
【００２８】
「自己免疫疾患」又は「自己免疫障害」という用語は、免疫系が宿主自身の組織を攻撃する症状を言う。自己免疫疾患においては、患者の免疫耐性系が自己の抗原を認識できず、この耐性の消失の結果として、免疫系の力を抗原を発現する組織の方に向けるようにしている。自己免疫障害は、１型インスリン依存性糖尿病、成人呼吸窮迫症候群、炎症性腸疾患、皮膚炎、髄膜炎、血栓性血小板減少性紫斑病、シェーグレン症候群、脳炎、ブドウ膜炎、ブドウ膜網膜炎、白血球粘着不全症、関節リウマチ、リウマチ熱、ライター症候群、乾癬性関節炎、進行性全身性硬化症、原発性胆汁性閉塞性肝硬変、天疱瘡、類天疱瘡、壊死性血管炎、重症筋無力症、多発性硬化症、紅斑性狼瘡、多発性筋炎、サルコイドーシス、肉芽腫症、脈管炎、悪性貧血、ＣＮＳ炎症性疾患、抗原抗体複合体媒介疾患、自己免疫溶血性貧血、橋本甲状腺炎、バセドウ病、習慣自然流産、レイノー症候群、糸球体腎炎、皮膚筋炎、慢性活動性肝炎、セリアック病、エイズの自己免疫合併症、萎縮性胃炎、強直性脊椎炎及びアジソン病を包含するが、これらに限定されるものではない。
【００２９】
ビタミンＤ３の「生物活性」という用語は、応答する細胞におけるビタミンＤ３化合物によって引き出される全ての活性を包含する。それは、これらの化合物によって引き出されるゲノム性又は非ゲノム性活性を包含する（Gniadecki, R. and Calverley M.J. (1998), Pharmacology & Toxicology 82: 173-176; Bouillon, R. et al. (1995) Endocrinology Reviews 16(2): 206-207; Norman, A.W. et al. (1992) J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 41:231-240; Baran, D.T. et al. (1991) J. Bone Miner Res. 6:1269-1275; Caffrey J.M. and Farach-Carson M.C. (1989), J. Biol. Chem. 264:20265-20274; Nemere I. et al. (1984) Endocrinology 115:1476-1483）。
【００３０】
「膀胱機能障害」は、排尿筋の過剰活動と関連する膀胱の症状、例えば、臨床ＢＰＨ又は過剰活動膀胱を意味する。本発明の文脈では、「膀胱機能障害」には、膀胱癌は除かれる。
「骨代謝」という用語は、カルシウム及びリン酸塩の血清中の濃度に最終的に影響を及ぼす骨構造の形成又は退化、例えば、骨形成、骨吸収等における直接又は間接的な効果を包含する。この用語は、又、骨形成又は退化を順にもたらすであろう骨細胞、例えば破骨細胞及び骨芽細胞における、本発明の化合物の効果を包含することを意図している。
【００３１】
「カルシウム及びリン酸塩のホメオスタシス」という用語は、カルシウム及びリン酸塩濃度の細胞、組織、器官又は系における変動によって引き起こされる、細胞内及び細胞外のカルシウム及びリン酸塩の注意深いバランスを表す。本発明の化合物に対する直接又は間接応答に起因するカルシウムレベルの変動は、これらの用語に包含されることを意図している。
【００３２】
「癌腫」という用語は、呼吸器癌、胃腸系癌、泌尿生殖器癌、睾丸癌、乳癌、前立腺癌、内分泌系癌、及びメラノーマを包含する上皮又は内分泌組織の悪性腫瘍を表す。典型的な癌腫は、子宮頚部、肺、前立腺、乳腺、頭頸部、大腸及び卵巣の組織から形成するものを包含する。この用語は、例えば、癌性及び肉腫性組織からなる悪性腫瘍を包含する癌肉腫も包含する。「腺癌」は、腺様組織から由来する、又は腫瘍細胞が認め得る腺様構造を形成する癌腫を言う。
【００３３】
「キラル」という用語は、鏡像相手の重ね合わせることができない特性を有する分子を言い、「アキラル」という用語は、鏡像相手に重ね合わせることができる分子を言う。
「ジアステレオマー」という用語は、２個又はそれ以上の非対称中心を有する立体異性体であり、その分子が互いに鏡像関係ではないものを言う。
【００３４】
「有効量」という用語は、投与時及び必要な期間に所望の結果を達成するために、例えば、ビタミンＤ３に関連した症状を十分に治療する、又は細胞におけるＩＬＴ３発現を調節するために、有効な量を包含する。ビタミンＤ３化合物の有効量は、対象の病態、年齢及び体重のような因子、及び対象において所望の応答を導き出すビタミンＤ３化合物の効能によって変化するであろう。投与計画は、最適治療反応を与えるように調節される。有効量は、又、治療上の有益な効果がビタミンＤ３化合物の毒性又は有害な効果（例えば、副作用）を上回る、量である。
【００３５】
ビタミンＤ３化合物の治療的有効量（即ち、有効投与量）は、約０．００１〜３０μｇ／ｋｇ（体重）、好ましくは、約０．０１〜２５μｇ／ｋｇ（体重）、より好ましくは、約０．１〜２０μｇ／ｋｇ（体重）、なおより好ましくは、約１〜１０μｇ／ｋｇ、２〜９μｇ／ｋｇ、３〜８μｇ／ｋｇ、４〜７μｇ／ｋｇ、又は５〜６μｇ／ｋｇ（体重）の範囲である。当業者は、これらに限定はされないが、対象の疾病又は障害の重篤度、過去の治療、一般的健康度及び／又は対象の年齢、及び存在しているその他の疾病を含めたある特定の因子が、対象を効果的に治療するのに必要とされる投与量に影響することを認識するであろう。更に、ビタミンＤ３化合物の治療的有効量での対象の治療は、単回治療を包含することができ、或いは、好ましくは、一連の治療を包含する。一例において、対象は、ビタミンＤ３化合物で、約０．１〜２０μｇ／ｋｇ体重の間の範囲で、週に１回、約１〜１０週間、好ましくは２〜８週間、より好ましくは約３〜７週間、及びなおより好ましくは約４、５又は６週間治療される。治療のために使用されるビタミンＤ３化合物の有効投与量は、特殊な治療の間は、増加又は減少されてよいことも、又、理解されるであろう。
【００３６】
「鏡像異性体」という用語は、互いに重ね合わせることができない鏡像である化合物の２つの立体異性体をいう。２つの鏡像異性体の等モル混合物は、「ラセミ混合物」又は「ラセミ体」と呼ばれる。
【００３７】
ビタミンＤ３の「ゲノム」活性又は効果という用語は、１α,２５（ＯＨ）２Ｄ３（ＶＤ３Ｒ）に対する核内受容体によって媒介される活性、例えば、標的遺伝子の転写活性化、を包含するものである。
【００３８】
「ハロアルキル」という用語は、ハロゲンによってモノ置換、ジ置換又は多置換された、上記に定義されたアルキル基、例えば、フルオロメチル及びトリフルオロメチル、を包含することを意図している。
「ハロゲン」という用語は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ又はＩを表す。
「ヒドロキシル」という用語は、−ＯＨを意味する。
本明細書において使用される「ヘテロ原子」という用語は、炭素又は水素以外のいずれかの元素の原子を意味する。好ましいヘテロ原子は、窒素、酸素、硫黄及びリンである。
【００３９】
「ホメオスタシス」という用語は、内部環境における静的な、又は一定の状態の維持を意味するものと、当該技術分野では認識されている。
「ホルモン分泌」という用語は、当該技術分野で認識されているものであり、ある特定のホルモン、例えばビタミンＤ３に応答する細胞の副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、の分泌に応答する転写及びプロセシングを制御する、ビタミンＤ３化合物の活性を包含する（Bouillon, R. et al. (1995) Endocrine Reviews 16(2):235-237）。
【００４０】
「高カルシウム血症」又は「高カルシウム血症活性」という用語は、その一般に認められた臨床的意味、即ち、以下の副作用によって対象において認められているカルシウムの血清レベルにおける増加、を有することを意味する：中枢及び末梢神経系の低下、筋力の低下、便秘、腹痛、食欲不振及び、心拡張期中の心臓の弛緩の低下。高カルシウム血症の症状の徴候は、以下の活発な働きの少なくとも１つの刺激によって引き起こされる：腸のカルシウム輸送、骨カルシウム代謝及びオステオカルシン合成（「Bouillon, R. et al. (1995) Endocrinology Reviews 16(2):200-257」における総説）。
【００４１】
「高増殖性」及び「新生物性（neoplastic）」という用語は同義的に使用され、自立的成長に対する能力を有する細胞を包含する、即ち、急速に増殖する細胞成長によって特徴づけられる異常状況又は症状である。高増殖性及び新生物性疾患（腫瘍性病態）は、病的（即ち、病気の症状と特徴づけられる、又は、構成する）として分類することができる、或いは、非病的（即ち、正常からの逸脱ではあるが、病気の症状と関連づけられない）として分類することもできる、。この用語は、癌性成長又は発ガン過程、転移組織又は悪性に形質転換した細胞、組織又は器官、侵襲の組織病理学の型又は段階に関係なく、全ての型を包含することを意味している。「病理学的高増殖性」細胞は、悪性腫瘍成長によって特徴づけられる病態に発生する。非病的高増殖性細胞の例としては、創傷治癒に関連した細胞の増殖を包含する。
【００４２】
「免疫グロブリン様転写物３」又は「ＩＬＴ３」という用語は、単核細胞、マクロファージ及び樹状細胞のような抗原提示細胞（ＡＰＣｓ）によって発現される、免疫グロブリンスーパーファミリーの細胞表面分子を意味する。ＩＬＴ３は、免疫グロブリン様転写物（ＩＬＴ）ファミリーの一員であり、推定される免疫受容体チロシンをベースとする阻害モチーフ（ＩＴＩＭｓ）を含有した長い細胞質テールを見せる。ＩＬＴ３は、刺激受容体に相互リンクするとき阻害受容体として作用することが示されている。ＩＬＴ３媒介シグナル伝達系の細胞質成分は、相互リンクしてＩＬＴ３と結合する、ＳＨ２含有ホスファターゼＳＨＰ−１である。ＩＬＴ３は、又、細胞内に取り込まれ、そして、ＩＬＴ３配位子は、特異性Ｔ細胞に効率よく提示される（「Cella, M. et al. (1997) J. Exp. Med. 185:1743」を参照されたい）。候補のビタミンＤ３化合物が、ＩＬＴ３表面分子の発現を調節するかどうかの決定は、例えば、ＩＬＴ３表面分子の発現を対照と比較して、ｍＲＮＡ発現を測定することによって、或いはタンパク質発現を測定することによって、実施することができる。
【００４３】
「ＩＬＴ３関連疾患」は、ＩＬＴ３分子に関連している疾患、障害又は症状を包含する。ＩＬＴ３関連障害は、ＩＬＴ３活性が異常である、又はＩＬＴ３活性の調節から恩恵を受ける非ＩＬＴ３活性が異常である、障害を包含する。一態様において、ＩＬＴ３関連障害は、例えば、１型インスリン依存性糖尿病、成人呼吸窮迫症候群、炎症性腸疾患、皮膚炎、髄膜炎、血栓性血小板減少性紫斑病、シェーグレン症候群、脳炎、ブドウ膜炎、ブドウ膜網膜炎、白血球粘着不全症、関節リウマチ、リウマチ熱、ライター症候群、乾癬性関節炎、進行性全身性硬化症、原発性胆汁性肝硬変、天疱瘡、類天疱瘡、壊死性血管炎、重症筋無力症、多発性硬化症、紅斑性狼瘡、多発性筋炎、サルコイドーシス、肉芽腫症、脈管炎、悪性貧血、ＣＮＳ炎症性疾患、抗原抗体複合体媒介疾患、自己免疫性溶血性貧血、橋本甲状腺炎、バセドウ病、習慣自然流産、レイノー症候群、糸球体腎炎、皮膚筋炎、慢性活動性肝炎、セリアック病、エイズの自己免疫合併症、萎縮性胃炎、強直性脊椎炎及びアジソン病のような自己免疫障害、又はＧＶＨＤのような移植拒絶反応、のような免疫障害である。本発明のある特定種の態様において、ＩＬＴ３関連障害は、移植拒絶、移植片対宿主病及び自己免疫障害のような免疫障害である。
【００４４】
「免疫応答」という用語は、Ｔ及び／又はＢ細胞応答、例えば、細胞質及び／又は体液性免疫応答、を包含する。本発明で特許請求する方法は、１次及び２次免疫応答の両方を減少するのに使用することができる。対象の免疫応答は、例えば、抗体産生、免疫細胞増殖、サイトカインの放出、細胞表面マーカーの発現、細胞毒性等を分析することによって定量することができる。
【００４５】
「免疫耐性」又は「抗原に対する耐性」若しくは「免疫耐性」という用語は、長期にわたる全身性免疫不全の誘導なしに抗原に無反応となることを包含する。従って、本発明によって、耐性宿主は、耐性抗原以外の抗原に反応することができる。耐性は、耐性誘導処置に付さなかったとしても、その抗原に対する免疫応答を高める能力がある対象の応答における誘導された抑制を表す。本発明の一態様において、免疫耐性は、抗原提示細胞、例えば、脊髄又はリンパ系統、樹状細胞、単球及びマクロファージから誘導される抗原提示細胞、において誘導される。
【００４６】
「免疫抑制活性」という用語は、正常な免疫応答を阻害する過程を意味する。この応答に含まれるものは、リンパ球のＴ及び／又はＢクローンのサイズが小さくなる、又はその反応性が抑制されるときの、広い範囲又は区分されるものである。免疫抑制活性は、既に進行しつつある免疫応答を阻害する或いは遮断する形式であり、又は免疫抑制の誘導を防止することを含む。活性化Ｔ細胞の機能は、免疫細胞応答を抑制することによって若しくは特異的耐性を誘導することによって、又は両方によって阻害される。Ｔ細胞応答の免疫抑制は、一般的に、Ｔ細胞の抑制剤への連続した曝露を必要とする、活性で非抗原特異的なプロセスである。Ｔ細胞における非応答性又はアネルギーの誘導を含む耐性は、一般的に抗原特異性であり、耐性剤への曝露が停止した後も持続することによって、免疫抑制とは区別される。操作上、耐性は、耐性剤の不存在下で特異的抗原に再曝露した場合のＴ細胞応答の欠損によって、実証することができる。
【００４７】
「改善された生物学的性状」という用語は、インビボでその有効性を高める、本発明の化合物に固有の何れかの活性を意味する。好ましい態様において、この用語は、減少した毒性、例えば高カルシウム活性を減少させる、ようなビタミンＤ３化合物の定性的又は定量的に改善された治療的性質の何れかを意味する。
【００４８】
新生物（neoplasm）の「増殖を阻害する」という用語は、その増殖及び転移を遅くする、妨害する、阻止する又は停止することを包含し、新生物増殖の全排除を必ずしも指していない。
【００４９】
「免疫応答の阻害」という語句は、Ｔ細胞の増殖及び活性の減少、例えば、ＩＬ２、インターフェロンγ、ＧＭ−ＣＳＦ合成及び分泌における減少、を包含することを意図している（Lemire, J.M. (1992) J. Cell Biochemistry 49:26-31, Lemire, J.M. et al. (1994) Endocrinology 135(6):2813-2821; Bouillon, R. et al. (1995) Endocrine Review 16(2):231-232）。
【００５０】
「異性体」又は「立体異性体」という用語は、同一の化学的構成を有するが、空間的な原子又は基の配列に関しては異なる化合物を意味する。
【００５１】
「白血病」という用語は、その臨床的意味、即ち、白血球成熟が細胞発生の基本段階で捕捉されている新生物性疾患、を有することを意図している。この疾患は、骨髄における増加した白血病性の芽細胞によって、及び正常な造血性細胞の産生の障害の程度の変化によって特徴づけられる。この症状は、急性又は慢性の何れかである。白血病は、更に、リンパ球性、即ち、正常リンパ球と同じような性質を有する細胞によって特徴づけられる、或いは骨髄球性（又は骨髄性）、即ち、正常な顆粒球細胞と同じ特徴を有する細胞によって特徴づけられる、の何れかとして、一般的には分類される。急性リンパ性白血病（「ＡＬＬ」）は、リンパ系組織に発生し、通常骨髄にその存在が先ず現れる。急性骨髄性白血病（「ＡＭＬ」）は、骨髄造血幹細胞又はそれらの子孫に現れる。用語、急性骨髄性白血病は、いくつかの白血病の特殊型：骨髄芽球性白血病、前骨髄球性白血病及び骨髄単球性白血病、を包含する。更に、赤血球性又は巨核球性の性質を有する白血病は、同様に骨髄性の白血病であると考えられる。
【００５２】
「白血病性癌」という用語は、造血及び免疫系（血液及びリンパ系）の全ての癌又は新生物形成を言う。急性及び慢性白血病は、血液、骨髄細胞（骨髄腫）及びリンパ組織（リンパ腫）の別の型の腫瘍と併せて、小児における全ての癌による死亡の約１０％、及び３０才未満の成人における全ての癌による死亡の約５０％の原因になっている。慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）は、慢性顆粒球性白血病（ＣＧＬ）としても知られているが、造血幹細胞の新生物疾患である。「白血病」という用語は当該技術分野で認識されたものであり、血液中及び骨髄中の白血球及びそれらの前駆体の、歪んだ増殖及び発生によって特徴づけられた、血液形成器官の進行性、悪性疾病を意味する。
【００５３】
「調節する」という用語は、本発明の化合物への曝露に応じて、細胞の活性が増加又は減少することを示す。例えば、治療結果のような所望の最終結果が達成されるように、動物において少なくとも細胞の亜母集団の増殖の阻害及び／又は分化の誘導を示す。好ましい態様において、この語句は、病的障害になる高活性状態を包含することを意図している。
【００５４】
「新生組織形成」という用語の通常の医学的意味は、正常な増殖制御に対する応答性の欠損、例えば、新生物細胞増殖となる「新しい細胞の増殖」を言う。「過形成」は、異常に早い速度で増殖する細胞を意味する。しかしながら、本明細書で使用される用語、新生組織形成及び過形成は、それらの語句が示すように、異常な細胞増殖速度を経験しつつある細胞を一般的に指し、同義的に使用することができる。新生組織形成及び過形成は、良性、前悪性又は悪性のいずれかでもある「腫瘍」を包含する。
【００５５】
「非ゲノム」ビタミンＤ３活性という用語は、応答細胞におけるビタミンＤ３化合物によって導き出される細胞質性（例えば、組織を通ってのカルシウムの輸送）及び亜細胞性の活性（例えば、電位依存性カルシウムチャンネルの開口による膜カルシウムの輸送、細胞内２次メッセンジャーの変化）、を包含する。これらの活性を検出するための電気生理学的及び生化学的技術は、当該技術分野で公知である。特によく研究された非ゲノム活性の例としては、腸内カルシウム移動の急速なホルモン性刺激、名称「トランスカルタキア（transcaltachia）」がある（Nemere I. et al. (1984) Endocrinology 115:1476-1483; Lieberherr M. et al. (1989) J. Biol. Chem. 264:20403-20406; Wali R.K. et al. (1992) Endocrinology 131:1125-1133; Wali R.K. et al. (1992) Am. J. Physiol. 262:G945-G953; Wali R.K. et al. (1990) J. Clin. Invest. 85:1296-1303; Bolt M.J.G. et al. (1993) Biochem. J. 292:271-276）。実験的なトランスカルタキアの詳細な説明は、「Norman, A.W. (1993) Endocrinology 268(27):20022-20030; Yoshimoto, Y. and Norman, A.W. (1986) Endocrinology 118:2300-2304」に提供されている。カルシウム活性及び２次メッセンジャー系の変化は、当該技術分野ではよく知られており、「Bouillon, R. et al. (1995) Endocrinology Review 16(2):200-257」に広範囲に総説されている。その記載内容は、参照することにより本明細書に組み込まれている。
【００５６】
本明細書に使用される「得ること」という用語は、本発明の実用に用いるビタミンＤ化合物の１つ又はそれ以上を、購入すること、合成すること、単離すること又はその他で入手することを包含する。
【００５７】
本明細書で使用される「非経口投与」及び「非経口的に投与する」という語句は、腸溶性投与及び局所投与以外、通常、注射による投与形態を意味し、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、関節包内、眼窩内、心腔内、皮内、腹膜内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、髄腔内及び胸骨内注射並びに注入、を包含するが、これらに限定されるものではない。
【００５８】
「多環式（polycyclyl）」又は「多環式基」という用語は、２つ又はそれ以上の炭素が隣接した２つの環に共有されている、例えば環が「縮合環」である、２つ又はそれ以上の環（例えば、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、アリール及び／又はヘテロ環（heterocyclyls））をいう。非隣接原子を通して結合している環は、「架橋した」環と呼ばれる。多環の環の各々は、上記のような置換基、例えば、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、ホスフェート、ホスホネート、ホスフィネート、シアノ、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、及びアルキルアリールアミノを包含する）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイル及びウレイドを包含する）、アミジノ、イミノ、メルカプト、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、スルホネート、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、複素環式基、アルキル、アルキルアリール又は芳香族若しくは複素環式芳香族部分で置換することができる。
【００５９】
「プロドラッグ」という用語は、インビボで代謝することができる部分を有する化合物を包含する。一般的に、プロドラッグは、エステラーゼによって、又は活性薬物に対する別の機構によって、インビボで代謝される。プロドラッグ及びそれらの使用の例は、当該技術分野ではよく知られている（例えば、「Berge et al. (1977) "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci. 66:1-19」を参照されたい）。プロドラッグは、化合物を最終的に単離する際に、又は、精製する際にin situで製造することができる、又は遊離酸又はヒドロキシル基の形で精製された化合物を適切なエステル化剤と別々に反応させることによって、製造することができる。ヒドロキシル基は、カルボン酸との反応を経てエステルに変換することができる。プロドラッグ部分の例としては、置換又は非置換、分枝状又は非分枝状低級アルキルエステル部分（例えば、プロピオン酸エステル）、低級アルケニルエステル、ジ低級アルキルアミノ低級アルキルエステル（例えば、ジメチルアミノエチルエステル）、アシルアミノ低級アルキルエステル（例えば、アセチルオキシメチルエステル）、アシルオキシ低級アルキルエステル（例えば、ピバロイルオキシメチルエステル）、アリールエステル（フェニルエステル）、アリール低級アルキルエステル（例えば、ベンジルエステル）、置換（例えば、メチル、ハロ、又はメトキシ置換基による）アリール及びアリール低級アルキルエステル、アミド、低級アルキルアミド、ジ低級アルキルアミド及びヒドロキシアミドを包含する。好ましいプロドラッグ部分は、プロピオン酸エステル及びアシルエステルである。インビボでその他の機構を経由して活性型に変換されるプロドラッグもまた、包含される。
【００６０】
化合物の「予防的に有効な抗新生物薬の量」という用語は、患者に単回又は多回用量の投与で、新生物性疾患症状の発症を防止する又は遅延することにおいて有効である、式（Ｉ）のビタミンＤ３化合物又は別に本明細書に記載の化合物の量をいう。
【００６１】
「乾癬」という用語は、その医学的意味、即ち、主として皮膚を苦しめ、隆起し、肥厚し、鱗状、非鱗状の病変を産生する疾患を有することを意図している。病変は、通常、重なり合ったきらきらした鱗状で覆われた鋭く境界のある紅斑性丘疹である。鱗状は、典型的には、銀色又は幾分オパール色である。爪が罹患すると、しばしば穴があき、爪がはがれ、肥厚及び脱色をもたらす。乾癬は、ときには関節炎を伴い、有害となる。  
【００６２】
「低下した毒性」という用語は、インビボで投与された場合、ビタミンＤ３化合物によって導き出された望ましくない副作用の低下、例えば、高カルシウム活性の低下、を包含することを意図している。
「肉腫」という用語は、当該技術分野では認識されており、間質由来の悪性腫瘍をいう。
【００６３】
「セコステロイド」という用語は、当該技術分野では認識されており、ステロイド環構造のシクロペンタノペルヒドロ−フェナントレン環の１つが壊されている化合物を包含する。１α，２５（ＯＨ）２Ｄ３及びその類似体はホルモンとして活性なセコステロイドである。ビタミンＤ３の場合、Ｂ環の９〜１０位の炭素−炭素結合が壊されており、セコ−Ｂ−ステロイドを生成する。ビタミンＤ３の公式ＩＵＰＡＣ名は、９，１０−セココレスタ−５，７，１０（１９）−トリエン−３Ｂ−オールである。便宜上、１α，２５（ＯＨ）２Ｄ３の６−ｓ−トランス  コンホーマーは、本明細書では、標準ステロイド表記法を用いて付番した全ての炭素原子を図解する。
【００６４】
【化０３２】
2008514621.tif 000005
【００６５】
本明細書に提示した式において、環Ａの種々の置換基は、それらの表記の一つによりステロイド核に結合しているとして図解する：破線（−−−−）又は
【化０３３】
2008514621.tif 000006
は、β-配位（即ち、環の面の上方）にある置換基を示し、くさび形の実線（▼）は、α−配位（即ち、分子の面の下方）にある置換基を示し、また波腺（〜〜）は、置換基が環の面の上方又は下方の何れかにあることを示している。環Ａに関しては、ビタミンＤの分野における立体化学の規則は、一般化学分野、即ち破線は、α−配位（即ち、分子の面の下方）にある環Ａの置換基を示し、そしてくさび形の実線は、β-配位（即ち、環の面の上方）にある環Ａの置換基を示す、とは反対であることを理解すべきである。示すように、ホルモン１α，２５（ＯＨ）２Ｄ３のＡ環は、１位及び３位の炭素に２つの不斉中心を含み、それぞれは、立体配置が十分判っているヒドロキシル基、即ち、１α−及び３β-ヒドロキシル基、を含有している。言い換えれば、Ａ環の１位炭素及び３位炭素は、いわゆる、「キラル炭素」又は「キラル中心」である。
【００６６】
更に、炭素−炭素の二重結合での立体化学的な表示は、「Ｚ」が「シス（cis）」（同じ側）の立体構造として示すものを意味し、一方「Ｅ」が「トランス（trans）」（反対側）の立体構造として示すものを意味し、一般の化学分野とは反対である。示すように、１位及び３位の炭素に不斉中心を含むホルモン１−α，２５（ＯＨ）２Ｄ３のＡ環は、それぞれによく特徴付けられる立体配置のヒドロキシル基、つまり１−α−及び３−β−のヒドロキシル基を包含する。即ち、Ａ環の１位及び３位の炭素は、「キラル炭素」又は「キラル炭素中心」と言える。この両方の立体配置が、シス／トランス及びＺ／Ｅに関係なく、本発明に用いる化合物として意図されている。
【００６７】
キラル中心の命名に関して、「ｄ」及び「ｌ」の立体配置という用語は、ＩＵＰＡＣ勧告で定義されている通りである。用語の使用については、ジアステレオマー、ラセミ体、エピマー及び鏡像異性体は、標準的な文脈において製剤の立体化学を記載するのに使用される。
本発明の記述を通して、ビタミンＤ化合物のＡ環は、一般式として以下のような化学構造式Ｉ又はＩＩの何れかとして表す。
【００６８】
【化０３４】
2008514621.tif 000007
【００６９】
式中のＸ１及びＸ２は、Ｈ又は＝ＣＨ２として明示され；又は
【００７０】
【化０３５】
2008514621.tif 000008
【００７１】
式中のＸ１及びＸ２は、Ｈ又はＣＨ２として明示する。
セットになった約束事がないようにみえるが、式Ｉ又はＩＩの何れかのＡ環では、以下の式で表されるように、Ｘ１は＝ＣＨ２であり、Ｘ２はＨ２と明示される。
【００７２】
【化０３６】
2008514621.tif 000009
【００７３】
本発明の目的のために、式ＩＩを一般の化学構造式に用いる。
「メルカプト」又は「チオール」という用語は、−ＳＨを意味する。
「対象（subject）」という用語は、ビタミンＤ３に関連した症状に罹患する可能性のある生物体、又はヒト及び非ヒト動物のような本発明のビタミンＤ３化合物の投与から別の利益を得ることができる生物体を包含する。好ましいヒト動物は、本明細書に記載するように、ビタミンＤ３に関連したに症状に罹患する、又は罹患する傾向があるヒトの患者を包含する。本発明の「非ヒト動物」という用語は、非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ウシ、ニワトリ、両生類、は虫類等のような全ての脊椎動物、例えば、哺乳動物、齧歯類、マウス及び非哺乳動物を包含する。
【００７４】
本明細書で使用される「全身投与」、「全身に投与する」、「末梢投与」及び「末梢に投与する」という語句は、ビタミンＤ３化合物、薬物又はその他の物質を、患者の系に入るようにし、そして、代謝及びその他の同様なプロセスに付すこと、例えば、皮下投与を意味する。
【００７５】
本発明のビタミンＤ３化合物の「治療有効な抗新生物量」という用語は、患者に単回又は多回用量を投与して、ビタミンＤ３に応答する新生物細胞の増殖を阻害する、又は、そのような治療がない場合に予測されるよりも、このような新生物細胞に罹患した患者の生存性を延長することに効果がある薬剤の量をいう。
【００７６】
「移植拒絶反応（transplant rejection）」という用語は、別のヒトドナー（同種移植）から、或いは、ヒツジ、ブタ又は非ヒト霊長類（異種移植片）のような他の種からの、移植された器官に対して向けられた免疫反応をいう。従って、本発明の方法は、別のヒトドナー（同種移植）又は他の種（異種移植）から移植された器官に対する免疫反応を防止するのに有用である。そのような移植用組織は、心臓、肝臓、腎臓、肺臓、膵臓、膵島、骨髄、脳組織、角膜、骨、腸、皮膚、及び造血幹細胞を包含するが、これらに限定されるもんどえはない。この定義に含まれるものは、移植細胞が宿主に対して免疫応答を高める、「ＧＶＨＤ」の「移植片対宿主病」である。それ故、本発明の方法は、急性白血病、再生不良性貧血、及び、例えば、酵素又は免疫欠損の治療に対して移植した不適合の骨髄又はリンパ組織の場合における移植片対宿主病を防止するのに有用である。「移植拒絶反応」という用語は、又、器官機能の喪失によって特徴づけられる疾病症状を包含する。例えば、腎臓拒絶反応は、血中のクレアチニンレベルの上昇によって特徴づけられる。心臓拒絶反応は、心内膜心筋生検によって特徴づけられ、膵臓拒絶反応は、血中グルコースレベルの上昇によって特徴づけられる。肝臓拒絶反応は、肝臓由来のトランスアミナーゼのレベル及び血中のビリルビンレベルによって特徴づけられる。腸の拒絶反応は、生検によって決定され、肺の拒絶反応は、血液の酸素化の測定によって決定される。
【００７７】
ビタミンＤ受容体「ＶＤＲ」という用語は、受容体のＩＩ型ステロイド／甲状腺スーパーファミリーのメンバー（Stunnenberg, H.G. (1993) Bio Essays 15(5):309-15）を包含することを意図しており、このものは、リガンドの不存在下でビタミンＤ応答配列（ＶＤＲＥ）を通して結合し、転写活性化することができる（Damm ete al. (1989) Nature 339:593-97; Sap et al. Nature 343:177-180）。
【００７８】
「ＶＤＲＥ」という用語は、直接反復として、片側配列からなるＤＮＡ配列をいう。ＩＩ型受容体は、ホモダイマーとして、それぞれの結合部位には結合しないが、高親和性結合のために補助因子、ＲＸＲ（例えば、ＲＸＲα、ＲＸＲβ、ＲＸＲγ）を必要とすることが、当該技術分野では知られている（Yu et al. (1991) Cell 67:1251-1266; Bugge ete al. (1992) EMBO J. 11:1409-1418; Kliewer et al. (1992) Nature 355:446-449; Leid et al. (1992) EMBO J. 11:1419-1435; Zhang et al. (1992) Nature 355:441-446）。
【００７９】
「ビタミンＤ３に関連した症状」という用語は、本発明の１つ又はそれ以上の化合物を投与することによって予防、治療又は別に緩和することができる症状である。ビタミンＤ３に関連した症状は、ＩＬＴ３関連の障害、ビタミンＤ３応答細胞の異常活性によって特徴づけられる障害、カルシウム及びリン代謝の脱制御によって特徴づけられる障害、及び本明細書に記載されたその他の障害又は症状を包含する。
【００８０】
「ビタミンＤ３応答細胞」という用語は、式Ｉを有する、又は別に本明細書に記載の、ビタミンＤ３化合物に応答することができる、又は抗増殖性皮膚細胞、副甲状腺細胞、新生物細胞、免疫細胞及び骨細胞の異常活性に関与する疾患に関連した何れかの細胞を包含する。これらの細胞は、細胞増殖の調節、分化生存及び／又はホルモン分泌のようなその他の細胞活性を最終的にもたらすゲノム及び／又は非ゲノム反応を引き起こすことによって、ビタミンＤ３活性化に応答することができる。好ましい態様において、細胞の最終的な応答は、細胞増殖の阻害及び／又は分化特異的遺伝子の誘導である。典型的なビタミンＤ３応答細胞は、免疫細胞、骨細胞、神経細胞、内分泌細胞、新生物細胞、上皮細胞、内胚葉細胞、平滑筋細胞、その他を包含する。
【００８１】
キラル中心の命名法に関して、「ｄ」及び「ｌ」立体配置という用語は、ＩＵＰＡＣ勧告で定義されている通りである。用語の使用については、ジアステレオマー、ラセミ体、エピマー及び鏡像異性体は、標準的な文脈において製剤の立体化学を記載するのに使用される。
【００８２】
２．本発明のビタミンＤ３化合物
本発明のビタミンＤ３化合物の重要な特徴は、Ａ環に１，３−ジヒドロキシ置換基、側鎖に２０位のシクロプロピル基、そしてＢ環に１６−エンの二重結合を包含している。米国特許第６，４９２，３５３Ｂ１号（Manchand et al.）には、１，３−ジヒドロキシ，２０−シクロプロピルビタミンＤ３化合物の記載がある。しかしながら、米国特許第６，４９２，３５３Ｂ１号に具体的に開示したこのような化合物は何れも添付の特許請求の範囲から除かれている。
【００８３】
上記式ＩのビタミンＤ３化合物は、特定の核受容体のＶＤＲへの結合、５／６腎摘出ラットにおける副甲状腺ホルモンレベルの増加の抑制、ＭＬＲ細胞におけるＩＮＦ−γ放出の抑制、ＨＬ６０白血病細胞分化の促進及び固体腫瘍細胞増殖の阻害のような、１，２５（ＯＨ）２Ｄ３生物活性の全領域に力を発揮する。インビボ及び細胞培養において、１，２５−（ＯＨ）２Ｄ３は、２４Ｒ−ヒドロキシラーゼ酵素の影響で開始される代謝修飾のカスケードを受ける。最初に、２４Ｒ−ヒドロキシの代謝物が生成し、それが２４−ケト中間体に酸化され、次いで、２３Ｓ−ヒドロキシ化及び分裂で完全に非活性なカルシトロン酸を生成する。
従って、一態様において、本発明は式Ｉ：
【００８４】
【化０３７】
2008514621.tif 000010
【００８５】
（式中、
Ｂは、単結合、二重結合又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２は、それぞれＨ２又はＣＨ２であり、この場合Ｘ１及びＸ２は、両方が共にＣＨ２であることはなく；
Ｒ１は、ヒドロキシル又はハロゲンであり；
Ｒ２及びＲ３は、Ｃ２０と共に、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキルを形成し；
Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、アルキル又はハロアルキルであり；
Ｒ６は、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、ヒドロキシアルキル又はハロアルキルであり、この場合、Ｂが三重結合であれば、Ｒ６は存在しないのは理解される通りである）
で表されるビタミンＤ３化合物、並びにその薬学的に許容されるエステル、塩及びプロドラッグを提供する。
【００８６】
一態様では、Ｒ１はヒドロキシルである。別な態様では、Ｂは、単結合、二重結合又は三重結合である。別な態様では、Ｘ１はＣＨ２で、Ｘ２はＨ２であるか、又はそれぞれＨ２である。更なる態様では、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、アルキル又はハロアルキルであり、好ましくはアルキル又はトリハロアルキルであり、好ましくはメチル又はトリフルオロメチルである。別な態様では、Ｒ２及びＲ３は、Ｃ２０と共に、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、好ましくはシクロプロピルを形成する。
別な態様において、式Ｉ−ａ：
【００８７】
【化０３８】
2008514621.tif 000011
【００８８】
（式中、
Ｂは、単結合、二重結合又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２は、それぞれＨ２又はＣＨ２であり、この場合Ｘ１及びＸ２は、両方が共にＣＨ２であることはなく；
Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、アルキル又はハロアルキルである）
で表されるビタミンＤ３化合物を提供する。
【００８９】
更なる態様では、Ｘ１はＣＨ２で、Ｘ２はＨ２である。好ましい態様では、Ｂは三重結合であり、Ｒ４及びＲ５は、アルキル又はハロアルキルである。好ましくは、Ｒ４及びＲ５は、好ましくはアルキル又はトリハロアルキルであり、好ましくはメチル又はトリフルオロメチルである。別な好ましい態様では、Ｂは二重結合であり、Ｒ４及びＲ５は、ハロアルキルであり、好ましくはトリハロアルキルであり、好ましくはトリフルオロメチルである。更に別な態様では、Ｂは単結合であり、Ｒ４及びＲ５は、アルキルであり、好ましくはメチルである。
別な態様では、Ｘ１及びＸ２は、それぞれＨ２である。好ましい態様では、Ｂは三重結合であり、Ｒ４及びＲ５は、アルキル又はハロアルキルである。好ましくは、Ｒ４及びＲ５は、アルキル又はトリハロアルキルであり、好ましくはメチル又はトリフルオロメチルである。別な好ましい態様では、Ｂは二重結合であり、Ｒ４及びＲ５は、ハロアルキルであり、好ましくはトリハロアルキルであり、好ましくはトリフルオロメチルである。更に別な態様では、Ｂは単結合であり、Ｒ４及びＲ５は、アルキルであり、好ましくはメチルである。
【００９０】
本発明のその他の好ましい化合物は、次の化合物：１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール（１）、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２０−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール（２）、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（３）、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（４）、１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（５）、１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（６）、１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（７）、１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（８）、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール（９）及び１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール（１０）、を包含する。
【００９１】
本発明の追加の好ましい化合物は、次の化合物：１α−フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール（１１）、１α−フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（１２）、１α−フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（１３）及び１α−フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（１４）である。
本発明の好ましい化合物は、表１で要約する。そして、本発明の追加の好ましい化合物は表２で要約する。
【００９２】
【表１】
2008514621.tif 000012
【００９３】
【表２】
2008514621.tif 000013
【００９４】
本発明の幾つかの化合物の化学構造は、不斉炭素原子を包含する。従って、このような非対称から生じる異性体（例えば、全ての鏡像異性体及びジアステレオマー）は、特に断らない限り、本発明の範囲内に含まれる。このような異性体は、伝統的な分離技術及び／又は立体化学的に制御された合成法によって、実質的に純粋な形で得ることができる。
【００９５】
天然物又は合成の異性体は、当該技術分野で知られている幾つかの方法で分離することができる。２つの鏡像異性体のラセミ混合物を分離する方法には、キラル固定相を用いたクロマトグラフィーを包含する（例えば、「"Chiral Liquid Chromatography," W.J. Lough, Ed. Chapman and Hall, New York (1989)」を参照されたい）。鏡像異性体は、又、伝統的な分割技術で分離することができる。例えば、ジアステレオマー塩の形成及び分別結晶を、鏡像異性体を分離するのに使用することができる。カルボン酸の鏡像異性体を分離するために、ジアステレオマー塩を、ブルシン、キニン、エフェドリン、ストリキニン、その他のような鏡像異性的に純粋なキラル塩基を加えることによって形成することができる。或いは、ジアステレオマーエステルを、メントールのような鏡像異性的に純粋のキラルアルコールを用いて形成することができ、次いで、ジアステレオマーエステルの分離及び加水分解で、遊離の、鏡像異性的に濃縮されたカルボン酸を得ることができる。アミノ化合物の光学異性体の分離のために、カンファースルホン酸（camphorsulfonic acid）、酒石酸、マンデル酸又は乳酸のような、キラルカルボン酸又はスルホン酸を添加することにより、ジアステレオマー塩を形成させることができる。
【００９６】
３．本発明のビタミンＤ３化合物の使用
一態様において、本発明は、本明細書での式Ｉａ及びＩｂ並びに好ましい化合物を包含する、本発明の式ＩのビタミンＤ３化合物の有効量を、対象がビタミンＤ３に関連した症状を治療されるように、当該対象に投与することを含んでなる、ビタミンＤ３に関連した症状の対象を治療する方法を提供する。
【００９７】
一態様に於いて、本発明の方法は、ビタミンＤ３化合物を得る工程も更に包含する。別な態様では、この方法は、ビタミンＤ３に関連した症状の治療を必要とする対象を同定することも更に包含する。
一態様では、前記ビタミンＤ３に関連した症状は、ＩＬＴ３関連の疾患である。更なる態様では、前記ＩＬＴ３関連の疾患は、免疫疾患である。別な態様では、前記免疫疾患は、自己免疫疾患である。
【００９８】
更なる態様において、前記自己免疫疾患は、１型インスリン依存性糖尿病、成人呼吸窮迫症候群、炎症性腸疾患、皮膚炎、髄膜炎、血栓性血小板減少性紫斑病、シェーグレン症候群、脳炎、ブドウ膜炎、ブドウ膜網膜炎、白血球粘着不全症、関節リウマチ、リウマチ熱、ライター症候群、乾癬性関節炎、進行性全身性硬化症、原発性胆汁性肝硬変、天疱瘡、類天疱瘡、壊死性血管炎、重症筋無力症、多発性硬化症、紅斑性狼瘡、多発性筋炎、サルコイドーシス、肉芽腫症、脈管炎、悪性貧血、ＣＮＳ炎症性疾患、抗原抗体複合体媒介疾患、自己免疫性溶血性貧血、橋本甲状腺炎、バセドウ病、習慣自然流産、レイノー症候群、糸球体腎炎、皮膚筋炎、慢性活動性肝炎、セリアック病、エイズの自己免疫合併症、萎縮性胃炎、強直性脊椎炎及びアジソン病よりなる群から選択される。
【００９９】
別な態様では、前記免疫疾患は、移植拒絶反応である。
別な態様では、前記自己免疫疾患は、１型インスリン依存性糖尿病である。
更に別な態様では、前記ビタミンＤ３に関連した症状は、ビタミンＤ３応答細胞の異常活性により特徴付けられる疾患である。別な態様では、前記疾患には、乾癬、基底細胞癌及び角化症から選ばれる。別な態様では、疾患は乾癬である。
更なる態様では、乾癬を治療するのに用いるビタミンＤ３化合物は、式Ｉ−ａ：
【０１００】
【化０３９】
2008514621.tif 000014
【０１０１】
（式中、
Ｂは、単結合、二重結合又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２は、それぞれＨ２又はＣＨ２であり、この場合Ｘ１及びＸ２は、両方が共にＣＨ２であることはなく；
Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、アルキル又はハロアルキルである。）
で表される化学式を有する。
更なる態様では、ビタミンＤ３化合物は、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール：
【０１０２】
【化０４０】
2008514621.tif 000015
【０１０３】
別な態様では、前記疾患は、内分泌細胞の異常活性を包含する。更なる態様では、前記内分泌細胞は副甲状腺細胞であり、前記異常活性は副甲状腺ホルモンのプロセシング及び／又は分泌である。
更に別な態様では、前記疾患は、二次性副甲状腺亢進症である。
更なる別な態様では、前記疾患は、骨細胞の異常活性を包含する。更なる態様では、疾患は、骨粗鬆症、骨異栄養症、老人性骨粗鬆症、骨軟化症、くる病、嚢胞性線維性骨炎、及び腎性骨異栄養症から選択される。一態様では、前記疾患は、骨粗鬆症である。別な態様では、骨粗鬆症の治療に用いるビタミンＤ３化合物は、式Ｉ−ａ：
【０１０４】
【化０４１】
2008514621.tif 000016
【０１０５】
（式中、
Ｂは、単結合、二重結合又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２は、それぞれＨ２又はＣＨ２であり、この場合Ｘ１及びＸ２は、両方が共にＣＨ２であることはなく；
Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、アルキル又はハロアルキルである。）
で表される化学式を有する。
更なる態様では、骨粗鬆症の治療に用いるビタミンＤ３化合物は、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール：
【０１０６】
【化０４２】
2008514621.tif 000017
【０１０７】
更なる態様では、骨粗鬆症の治療に用いるビタミンＤ３化合物は、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール：
【化０４３】
2008514621.tif 000018
【０１０８】
別な態様では、前記疾患は、肝硬変又は慢性腎疾患である。
別な態様では、前記疾患は、高血圧症である。
別な態様では、本発明の化合物は、レニンの発現を抑制し、これにより高血圧症の対象を治療する。
更なる態様では、レニンの発現を抑制するのに用いるビタミンＤ３化合物は、式Ｉ−ａ：
【０１０９】
【化０４４】
2008514621.tif 000019
【０１１０】
（式中、
Ｂは、単結合、二重結合又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２は、それぞれＨ２又はＣＨ２であり、この場合Ｘ１及びＸ２は、両方が共にＣＨ２であることはなく；
Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、アルキル又はハロアルキルである。）
で表される化学式を有する。
別な態様では、レニンの発現を抑制するのに用いるビタミンＤ３化合物は、式Ｉ−ｂ：
【０１１１】
【化０４５】
2008514621.tif 000020
【０１１２】
（式中、
Ｂは、単結合、二重結合又は三重結合であり；
Ｘ１及びＸ２は、それぞれＨ２又はＣＨ２であり、この場合Ｘ１及びＸ２は、両方が共にＣＨ２であることはなく；
Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、アルキル又はハロアルキルである。）
で表される化学式を有する。
更なる態様では、レニンの発現を抑制するのに用いるビタミンＤ３化合物は、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール：
【０１１３】
【化０４６】
2008514621.tif 000021
【０１１４】
である。
更なる態様では、レニンの発現を抑制するのに用いるビタミンＤ３化合物は、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２０−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール：
【化０４７】
2008514621.tif 000022
【０１１５】
である。
更なる態様では、レニンの発現を抑制するのに用いるビタミンＤ３化合物は、１，２５−ジヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール：
【化０４８】
2008514621.tif 000023
【０１１６】
である。
更なる態様では、レニンの発現を抑制するのに用いるビタミンＤ３化合物は、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール：
【化０４９】
2008514621.tif 000024
【０１１７】
である。
更なる態様では、レニンの発現を抑制するのに用いるビタミンＤ３化合物は、１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール：
【化０５０】
2008514621.tif 000025
【０１１８】
である。
更なる態様では、レニンの発現を抑制するのに用いるビタミンＤ３化合物は、１α−フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６，２３Ｅ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール：
【化０５１】
2008514621.tif 000026
【０１１９】
である。
更なる態様では、レニンの発現を抑制するのに用いるビタミンＤ３化合物は、１α−フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６，２３Ｚ−ジエン−２０−シクロプロピル−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール：
【化０５２】
2008514621.tif 000027
【０１２０】
である。
別な態様では、前記疾患は、良性前立腺肥大症である。
別な態様では、前記疾患は、腫瘍性疾患である。更なる態様では、前記腫瘍性疾患が、白血病、リンパ腫、メラノーマ、骨肉腫、結腸癌、直腸癌、前立腺癌、膀胱癌、並びに肺、胸部、胃腸管及び尿生殖路の悪性腫瘍よりなる群から選択される。別な態様では、前記腫瘍性疾患は、膀胱癌である。
別な態様では、前記疾患は、ニューロンの欠損である。更なる態様では、前記疾患は、アルツハイマー病、ピック病、パーキンソン病、血管疾患、ハンチントン病、及び年齢関連の記憶障害よりなる群から選択される。
【０１２１】
別な態様では、前記疾患は、ブドウ膜炎である。
別な態様では、前記疾患は、間質性膀胱炎である。
別な態様では、前記疾患は、ビタミンＤ３応答の平滑筋細胞の異常活性に特徴付けられる。一態様では、前記疾患は、子宮筋腫である。別な態様では、前記疾患は、高血圧誘導の血管リモデリング、血管再狭窄及びアテローム性動脈硬化よりなる群から、選択される過剰増殖性血管疾患である。更に別な態様では、前記疾患は、動脈性高血圧である。
【０１２２】
一態様において、本発明は、カルシウム及びリン酸代謝の脱制御を改善するように、本発明の化合物の治療有効量を、対象に投与することを含んでなる、カルシウム及びリン酸代謝の脱制御を改善する方法を提供する。更なる態様では、カルシウム及びリン酸代謝の異常が、骨粗鬆症につながる。
【０１２３】
更に別な態様において、本発明は、細胞における免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）表面分子の発現を調節するのに有効な量で、本発明の化合物を、当該細胞と接触させることを含んでなる、細胞における免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）表面分子の発現を調節する方法を提供する。別な態様では、前記細胞は、対象の内部にある。
【０１２４】
更なる別な態様において、本発明は、ＩＬＴ３表面分子の発現を調節するのに有効な量で、本発明の化合物を、対象に投与し、これにより当該対象におけるＩＬＴ３に関連した疾患を治療することを含んでなる、対象におけるＩＬＴ３に関連した疾患を治療する方法を提供する。別な態様では、前記ＩＬＴ３に関連した疾患が、免疫疾患である。別な態様では、前記免疫疾患は、自己免疫疾患である。別な態様では、前記自己免疫疾患は、インスリン依存型の糖尿病である。
【０１２５】
一態様において、本発明は、ＩＬＴ３表面分子の発現を調節するのに有効な量で、本発明の化合物を、対象に投与し、これにより当該対象における免疫耐性を誘導することを含んでなる、対象における免疫耐性を誘導する方法を提供する。一態様では、前記免疫耐性は、抗原提示細胞において誘導される。一態様では、前記抗原提示細胞は、樹状細胞、単球及びマクロファージよりなる群から選択される。
【０１２６】
別な態様において、本発明は、ＩＬＴ３表面分子の発現を調節するのに有効な量で、本発明の化合物を、対象に投与し、これにより当該対象における移植拒絶反応を阻害することを含んでなる、対象における移植拒絶反応を阻害する方法を提供する。一態様では、前記移植は、固体器官の移植である。一態様では、前記移植は、膵臓ランゲルハウス島移植である。一態様では、前記移植は、骨髄移植である。
【０１２７】
別な様態において、本発明は、ＩＬＴ３表面分子の発現を調節するのに有効な量で、本発明の化合物を、抗原提示細胞に接触させ、これにより当該抗原提示細胞による免疫抑制活性を調節することを含んでなる、抗原提示細胞による免疫抑制活性を調節する方法を提供する。
更なる態様では、前記細胞は、抗原提示細胞である。別な態様では、抗原提示細胞は、樹状細胞、単球及びマクロファージよりなる群から選択される。
【０１２８】
更に別な態様において、本発明は、本発明の化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与し、これにより当該対象における膀胱機能障害を予防又は治療する方法を提供する。一態様では、前記膀胱機能障害は、膀胱肥大の存在で特徴付けられる。別な態様では、  前記膀胱機能障害は、過活動膀胱である。別な態様では、前記対象はオスである。別な態様では、前記オスは、同時にＢＰＨを患っている。一態様では、前記対象はメスである。
【０１２９】
更なる態様において、本発明は、前記ビタミンＤ３化合物が、薬学的に許容される担体と組み合わせて投与される方法を提供する。
更に別な態様では、本発明は、前記ビタミンＤ３化合物が、薬学的に許容される製剤を用いて対象に投与される方法を提供する。
更なる別な態様において、本発明は、前記薬学的に許容される製剤が、前記薬学的に許容される製剤を対象に投与してから少なくとも４週間、ビタミンＤ３化合物を対象に継続した送達を提供する方法を提供する。
【０１３０】
一態様において、本発明は、前記免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）表面分子の発現が、上方制御される方法を提供する。
別な態様において、本発明は、前記化合物が、薬学的に許容される希釈剤又は担体と共に医薬組成物に製剤化される方法を提供する。別な態様において、本発明は、前記化合物が、ビタミンＤ受容体作動薬である方法を提供する。
【０１３１】
別な態様において、本発明は、前記対象が哺乳動物、好ましくはヒトである方法を提供する。
更なる態様では、前記化合物は、経口で投与される。別な態様では、前記化合物は、静脈内に投与される。別な態様では、前記化合物は、局所に投与される。別な態様では、前記化合物は、非経口的に投与される。
更に別な態様では、前記化合物は、０．００１μｇ〜１００μｇ／ｋｇ（体重）の濃度で投与される。
【０１３２】
別な態様において、本発明は、本発明の化合物の有効量、及び薬学的に許容される希釈剤又は担体を含んでなる医薬組成物を提供する。一態様では、前記有効量は、ビタミンＤ３関連の症状を治療するのに有効である。別な態様において、本発明は、前記ビタミンＤ３関連の症状が、ＩＬＴ３に関連した疾患であるところの医薬組成物を提供する。別な態様において、本発明は、前記ビタミンＤ３関連の症状が、ビタミンＤ３応答細胞の異常活性で特徴付けられる疾患であるところの医薬組成物を提供する。別な態様において、本発明は、前記ビタミンＤ３関連の症状が、膀胱機能不全であるところの医薬組成物を提供する。別な態様において、本発明は、前記疾患が高血圧であるところの医薬組成物を提供する。
【０１３３】
一態様において、本発明は、本発明の化合物を含む医薬組成物、及びビタミンＤ３関連の症状の治療における使用説明書を含んでなる、ビタミンＤ３関連の症状の治療に用いる包装された製剤を提供する。一態様において、本発明は、前記ビタミンＤ３関連の症状が、ＩＬＴ３に関連した疾患であるところの包装された製剤を提供する。別な態様において、本発明は、前記ビタミンＤ３関連の症状が、ビタミンＤ３応答細胞の異常活性に特徴付けられる疾患であるところの包装された製剤を提供する。別な態様において、本発明は、前記ビタミンＤ３関連の症状が、膀胱機能不全であるところの包装された製剤を提供する。
【０１３４】
ある特定の態様において、本発明の方法は、ビタミンＤ３化合物の治療有効量を、別な薬学的に有効な化合物と組み合わせて、対象に投与することを包含する。薬学的に有効な化合物の例として、自己免疫疾患の治療に用いられる公知の化合物、例えば、サイクロスポリンＡ、ラパマイシン、デスオキシスペルグアリン（desoxyspergualine）、ＦＫ５０６、ステロイド、アザチオプリン、抗Ｔ細胞抗体及びＴ細胞亜集団へのモノクローナル抗体のような免疫抑制薬が包含される。使用してもよいその他の薬学的に有効な化合物は、「Harrison's Principles of Internal medicine, Thirteenth Edition, Eds. T.R. Harrison et al. McGraw-Hil N.Y., NY」及び「the Physicians Desk Reference 50th Edition 1997, Oradell New Jersey, Medical Economics Co.」に見出すことができ、これらの内容は、その全てを参照することにより本明細書に取り込まれている。ビタミンＤ３化合物及び薬学的に有効な化合物は、同じ医薬組成物で又は（同時若しくは異なる時間での）異なる医薬組成物で、対象に投与することができる。
【０１３５】
Ａ．高増殖症状
別の態様において、本発明は、ビタミンＤ3応答細胞の異常活性によって特徴づけられる障害に対して対象を治療する方法を提供する。この方法は、細胞の活性が調節されるように、式Ｉ又は別に本明細書に記載のビタミンＤ３化合物の医薬組成物の有効量を対象に投与することを含む。
【０１３６】
ある特定の態様において、治療される細胞は高増殖細胞である。以下により詳細に説明するように、本発明のビタミンＤ３化合物は、種々の過形成性組織及び新生物組織の増殖を阻害するのに使用することができる。本発明によれば、本発明のビタミンＤ３化合物は、ビタミンＤ３応答細胞の望ましくない増殖によって特徴づけられる病的及び非病的増殖症状の両方、例えば、高増殖性皮膚細胞、免疫細胞、及び、例えば、癌腫、肉腫及び白血病のような形質転換細胞を有する組織の治療に使用することができる。別の態様において、治療される細胞は、異常分泌細胞、例えば、副甲状腺細胞、免疫細胞である。
【０１３７】
高増殖性症状の治療にビタミンＤ化合物を使用することは、高カルシウム血の効果のために制限されている。従って、本発明のビタミンＤ３化合物は、現行の治療方法に低毒性の別な方法を提供する。
一態様において、本発明は、細胞を本発明のビタミンＤ３化合物と接触させることにより、高増殖性皮膚細胞、例えば、表皮細胞又は上皮細胞、例えば角化細胞、の増殖を阻害する、及び／又は、分化を誘導する方法を特徴とする。一般的に、本方法は、高増殖細胞の分化を促進するために、病的又は非病的増殖細胞を、そのようなビタミンＤ３化合物の有効量と接触させる工程を包含する。本方法は、培養中の細胞で、例えば、インビトロ又はエキソビボで実行することができ、或いは、動物対象に存在する細胞で、例えば、インビボ治療計画の一部として実行することができる。本治療法は、ヒト又は他のいずれかの動物対象で実施することができる。
【０１３８】
本発明のビタミンＤ３化合物は、高増殖性皮膚細胞障害の治療に使用することができる。典型的な障害は、乾癬、基底細胞癌、角質化障害及び角化症を包含するがこれらに限定されるものではない。これら障害の更なる例は、湿疹；狼瘡に関連した皮膚病変；乾癬性関節炎；関節包の内側を覆う上皮関連細胞の高増殖及び炎症を含む関節リウマチ；脂漏性皮膚炎及び日光皮膚炎のような皮膚炎；脂漏性角化症、老人性角化症、光線性角化症、光誘発角化症及び毛包性角化症のような角化症；尋常性座瘡；ケロイド及びケロイドに対する予防；母斑；いぼ状突起、コンジローム又は尖圭コンジローム、及び性病性いぼのようなヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）感染症を包含するいぼ；白斑症；扁平苔癬；及び角膜炎を包含する。
【０１３９】
例証となる実施例において、本発明のビタミンＤ３化合物は、治療を必要とする対象に、それら化合物の有効量を投与することによって、乾癬のような疾患の治療において、角化細胞の高増殖を阻害するために使用することができる。「乾癬」という用語は、医学的には、即ち、主として皮膚を悪化させて、隆起、肥厚、鱗状、非鱗状の病変を産生する疾患を意味するものである。病変は、通常、重なり合ったきらきらした鱗状で覆われたはっきりとした境界をもつ紅斑性丘疹である。鱗状は、典型的には、銀色又は幾分オパール色である。爪が罹患すると、しばしば穴があき、爪がはがれ、肥厚及び脱色をもたらす。乾癬は、関節炎を伴う重傷の場合がある。角化細胞の高増殖は、角化細胞の表皮性炎症及び分化の減少を伴った乾癬性表皮過形成の主要特徴である。乾癬を特徴付けている角化細胞の高増殖を説明するには複数のメカニズムが用いられるが、障害を受けた細胞免疫も、又、乾癬の病因に係わっている。
【０１４０】
Ｂ．新生組織形成
本発明は、又、細胞を式Ｉ又は別に本明細書に記載のビタミンＤ３化合物と接触させることによる、ビタミンＤ3応答高増殖性細胞の増殖を阻害する、及び／又は、形質転換された表現型を逆転させる方法を特徴とする。一般的に、本方法は、高増殖細胞の分化を促進するために、病的又は非病的増殖細胞を、本発明のビタミンＤ３化合物の有効量と接触させる工程を包含する。本方法は、例えば、インビトロ又はエキソビボで培養中の細胞で、又は、例えば、インビボ治療計画の一部として動物対象の細胞で実施することができる。本治療法は、ヒト又はその他の対象で実施可能である。
【０１４１】
式Ｉ又は別に本明細書に記載のビタミンＤ３化合物は、新生細胞の増殖における阻害効果について、まず最初にインビトロで試験することができる。使用可能な細胞株の例としては、形質転換細胞、例えば、ヒト前骨髄性白血病細胞株ＨＬ−６０、及びヒト骨髄性白血病細胞Ｕ９３７細胞株（Abe, E. et al. (1981) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78:4990-4994; Song L.N. and Cheng T. (1992) Biochem Pharmacol 43:2292-2295; Zhou J.Y. et al. (1989) Blood 74:82-93; U.S. Pat. Nos. 5,401,733, U.S. 5,087,619）。又、本発明のビタミンＤ３化合物の抗腫瘍効果は、当該技術分野公知の種々の動物モデルを用いてインビボで試験可能であり、「Bouillon, R. et al. (1995) Endocrine Reviews 16(2):233 (Table E)」に要約されている。この文献は、参照することにより本明細書の一部に取り込まれている。当該技術分野では、本発明のビタミンＤ３化合物を試験するのに、例えばＳＬマウスが、ＭＩ骨髄性白血病のモデルとして通常使用されている（Honma et al. (1983) Cell Biol. 80:201-204; Kasukabe T. et al. (1987) Cancer Res. 47:567-572）；乳ガンの研究、例えば、ヒトＭＸ１（ＥＲ）についてはヌードマウスで行われている（Abe J. et al. (1991) Endocrinology 129:832-837）；その他の癌、例えば、大腸癌、メラノーマ、骨肉腫については、例えば、文献に記載されているようにヌードマウスモデルにおいて特徴づけることができる（Eisman J.A. et al. (1987) Cancer Res. 47:21-25; Kawaura A. et al. (1990) Cancer Lett. 55:149-152; Belleli A. (1992) Carcinogenesis 13:2293-2298; Tsuchiya H. et al. (1993) J. Orthopaed Res. 11:122-130）。
【０１４２】
また、主題の方法は、例えば脊髄、リンパ若しくは赤血球系統又はその前駆細胞から生じる造血性細胞由来の過形成／新生細胞の増殖を阻害するために使用される。例えば、本発明は、これらに限定されないが、急性前骨髄性白血病（ＡＰＭＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）及び慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）を包含する種々の脊髄障害の治療を意図している（Vaickus, L. (1991) Crt Rev. in Oncol./ Hemotol. 11:267-97）。主題の方法によって治療可能なリンパ性悪性疾患は、Ｂ系ＡＬＬ及びＴ系ＡＬＬ、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、前リンパ性白血病（ＰＬＬ）、ヘアリー細胞白血病（ＨＬＬ）及びヴァルデンストレームマクログログリン血症（ＷＭ）を包含する急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）を含むが、これらに限定されるものではない。本発明の治療法で意図されているリンパ性悪性疾患の更なる形態は、非ホジキンリンパ腫及びその変種、末梢Ｔ細胞リンパ腫、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫（ＡＴＬ）、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫（ＣＴＣＬ）、大顆粒リンパ性白血病（ＬＧＦ）及びホジキン病を包含するが、これらに限定されるものではない。
【０１４３】
ある特定の態様において、本発明のビタミンＤ３化合物は、通常の癌化学療法剤と併用療法に使用することができる。白血病及びその他の腫瘍の通常の治療計画は、放射線、薬剤、又は両者の併用を含む。放射線に加えて、以下の薬剤が通常互いに併用されて、急性白血病を治療するためにしばしば使用される：ビンクリスチン、プレドニゾン、メトトレキサート、メルカプトプリン、シクロホスファミド及びシタラビン。慢性白血病においては、例えば、ブスルファン、メルファラン及びクロラムブシルが併用で使用される。通常の抗ガン剤の全てが高毒性であり、治療中の対象をかなり苦しめる傾向がある。主導的な療法は、全ての白血病細胞が破壊されない限り、残りの細胞が増殖して再発の原因になるという前提に基づいている。
【０１４４】
主題の方法は、例えば、罹患した肺、乳腺、リンパ、胃腸及び泌尿生殖管のような種々の器官系の悪性腫瘍、及び殆どの大腸癌、腎細胞癌、前立腺癌及び／又は精巣腫瘍、膀胱癌、肺の非小細胞癌、小腸の癌、食道癌のような、悪性腫瘍を含む腺癌を治療するのに有用である。
【０１４５】
形質転換細胞の分化に関与するビタミンＤ３の一般的なパラダイムによれば、本発明の方法によって治療することができる典型的な固形腫瘍は、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、軟骨腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング肉腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、膀胱癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭状癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原性癌、腎細胞癌、肝臓癌、胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胎生期癌、ウイルムス腫瘍、子宮頚癌、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌腫、上皮癌、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽細胞腫、頭蓋咽頭腫、上衣細胞腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫、メラノーマ、神経芽細胞腫、及び網膜芽細胞腫のような肉腫及び癌腫のビタミンＤ３応答表現型を包含するが、これらに限定されない。
【０１４６】
本発明のビタミンＤ３化合物の治療的に有効な抗新生物剤の量、又は、予防的に有効な抗新生物剤の量を決定することは、公知技術を用い、また、類似条件下で得られた結果を観察するによって、当業者として医師又は獣医師（「主治臨床医」）であれば容易に行うことができる。用量は、主治臨床医の判断で対象の必要条件、治療されている症状の重篤度、及び採用される特定の化合物によって変化する。治療に有効な抗新生物剤の量又は用量、及び予防に有効な抗新生物剤の量又は投与量を決定するに際して、多くの因子が主治臨床医によって考慮される。それらの因子は：関係する特異的な過形成／新生細胞；特定の薬剤の薬効学的特性及びその投与形態と経路；目的とする治療の時間的経過；哺乳動物の種；大きさ、年齢及び一般的健康；関係する特異的な疾病；疾病の程度、又は関与若しくは重篤度；個々の患者の反応；投与される特定の化合物；投与形態；投与された製剤の生物学的利用能の特性；選択された投与計画；同時に行われる治療の種類（即ち、本発明のビタミンＤ３化合物とその他の同時に投与される治療剤の相互作用）；及びその他の関連する状況を包含するが、これらに限定されない。例えば、米国特許第５，４２７，９１６号には、個々の患者における抗新生物治療の効果を予測する方法が記載され、その発明の治療計画に関連して使用することができる、ある特定の方法を例示している。
【０１４７】
治療は、化合物の至適用量未満である、より少ない用量で開始することができる。その後、用量は、その条件下で最適効果が達成されるまで、少しずつ増加する方法で増やすべきである。便宜上、必要に応じて、１日の総用量を分割し、１日の間に何回かに分けて投与することができる。本発明のビタミンＤ３化合物の治療的に有効な抗新生物剤量及び予防的に有効な抗新生物剤量は、１日当たり体重１キログラムにつき約０．１ミリグラム（１ｍｇ／ｋｇ／日）〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日であるのが望ましい。
【０１４８】
動物、例えばイヌ、齧歯類において、腫瘍の予防又は治療に有効であると決定されている化合物は、ヒトでの腫瘍の治療においても有用である。ヒトの腫瘍を治療する当業者は、動物実験で得られたデータに基づいて、ヒトへの化合物の投与量及び投与経路が理解できる。一般的に、ヒトでの投与量及び投与経路は動物におけるそれに類似しているとされている。
【０１４９】
過形成／腫瘍性疾患症状を予防的に治療する必要がある患者の同定は、当業者の能力及び知識の範囲内でよい。主題の方法によって治療することができる腫瘍性疾患症状を発症するリスクがある患者の同定方法のいくつかは、特定の病態の発症についての家族歴、及び対象患者の病状の発症に関連する危険因子の存在のような医術で正当に評価される。当業者の臨床家は、そのような候補患者を、例えば、臨床検査、身体検査及び医療歴／家族歴を使うことによって、容易に同定することができる。
【０１５０】
Ｃ．免疫活性
健康な個人は、身体的バリア、血液中及び組織中の食細胞、リンパ球として知られている免疫細胞群、及び種々の血液から生成する分子、を含む多くの異なった機構を用いて外来の侵襲者に対して自身を防御している。これらの全ての機構は、潜在的な厳しい環境から個人を防御するのに貢献している。自然免疫又は先天性免疫として知られている、それら防御機構のいくつかは、感染微生物又はその他の異物の巨大分子に曝露する前に個人に存在しており、そのような曝露によって増強されず、殆どの外来物質を区別しない。後天的免疫又は特異免疫として知られている、その他の防御機構は、異物に曝露して誘導され、又は促進され、巨大分子をこの上なく特異的に区別し、特定の巨大分子への一連の曝露で規模と防御能力を増加する。特異的免疫応答を誘導する物質は、抗原として知られている（Abbas, A. et al., Cellular and Molecular Immunology, W.B. Saunders Company, Philadelphia, 1991; Silverstein, A.M. a history of Immunology, San Diego, Academic Press, 1989; Unanue A. et al. Textbook of Immunology, 2nd ed. Williams and Wilkens, Baltimore, 1984）。
【０１５１】
免疫系の最も顕著な性質の一つは、異種抗原と自己抗原を区別する能力である。それ故、各個人のリンパ球は、多くの異種抗原を認識し反応するが、個人に存在する潜在的に抗原性である物質には通常非応答的である。この免疫学的な非応答性は、免疫耐性と呼ばれる（Burt, R.K. et al. (2002) Blood 99:768; Coutinho, A. et al. (2001) Immunol. Rev. 182:89; Schwartz, RH (1990) Science 248:1349; Miller, J.F. et al. (1989) Immunology Today 10:53）。
【０１５２】
自己耐性は、各個人のリンパ球によって学習されるべき後天的なプロセスである。それは、抗原提示細胞（ＡＰＣｓ）によって提示された抗原への遭遇が、正か負の選択として知られているプロセスでリンパ球の死又は不活化をもたらす場合に、リンパ球はその発生の段階を通過することから、部分的に生起する（Debatin, KM (2001) Ann. Hematol. 80 Suppl. 3:B29; Abbas, A. (1991), supra）。従って、自己を認識する潜在的能力をもっているリンパ球が、機能的に未成熟のこの段階で自己抗原に接触するが、自己抗原に応答することができるようになるであろう段階に発展するのを防止される。自己免疫は、自己耐性の誘導又は維持における異常が起こる場合に、特定の抗原に対する耐性の消失と、抗原を発現する宿主の組織での宿主の免疫系による引き続いて起こる攻撃となって現れる（「Boyton, RJ et al. (2002) Clin. Exp. Immunol. 127:4; Hagiwara, E. (2001) Ryumachi 41:888; Burt RK et al. (1992) Blood 99:768」を参照されたい）。
【０１５３】
自己抗原と異種抗原とを区別する免疫系の能力はまた、組織移植において重要な役割を果たす。移植の成功は、宿主レシピエントの免疫系が移植片を異物として認識するのを防止すること、及び、いくつかの場合において、移植片が宿主組織を異物として認識するのを防止することに依存する。例えば、宿主が骨髄移植を受けたとき、移植された骨髄は、新しい宿主を異物として認識し、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）をもたらすであろう。従って、宿主の生存は、移植免疫反応によるドナーの骨髄の拒絶反応と宿主の拒絶反応の両方を防止することに依存している（「Waldmann, H. et al. (2001) Int. Arch. Allergy Immunol. 126:11」を参照されたい）。
【０１５４】
現在、自己免疫疾患及び移植拒絶反応をもたらす有害な免疫反応は、ステロイド、アザチオプリン、抗Ｔ細胞抗体、及びより最近では、Ｔ細胞亜集団へのモノクローナル抗体のような薬剤を使用して防止又は治療されている。サイクロスポリンＡ（ＣｓＡ）、ラパマイシン、デスオキシスペルグアリン及びＦＫ−５０６のような免疫抑制薬が広く使用されている。
【０１５５】
ステロイドやリンパ球への抗体のような非特異的免疫抑制剤は、日和見感染や腫瘍の発症といった宿主にリスクの増加を起こしている。更に、多くの免疫抑制剤は、宿主内の骨の脱ミネラルをもたらす（「Chhajed, P.N. et al. (2002) Indian J. Chest Dis. Allied 44:31」、「 Wijdicks, EF (2001) Liver Transpl. 7:937」、「Karamehic J. et al. (2001) Med. Arh. 55:243」、米国特許第５，５９７，５６３号（Beschorner, W.E.）及び米国特許第６，０７１，８９７号（DeLuca, HF et al.）を参照されたい）。免疫抑制様式の存在に関連した大きな欠点のために、免疫障害を治療するため、例えば宿主に免疫耐性を誘導するための新しい取り組みが必要とされている。
【０１５６】
従って、別の態様において、本発明は、式Ｉ又は別に本明細書に記載のビタミンＤ３化合物を、細胞と接触させることによる、免疫細胞の活性を調節する方法を提供する。
【０１５７】
一態様において、本発明は、病的又は非病的免疫細胞を本発明のビタミンＤ３化合物の有効量と接触させて、治療されていない細胞に関連する免疫応答を阻害する、免疫細胞において免疫活性を抑制する方法を提供する。本発明の方法は、培養中の細胞で、例えばインビトロ又はエキソビボで実行することができ、或いは、動物対象に存在する細胞で、例えば、インビボ治療計画の一部として実行することができる。インビボ治療は、ヒト又はその他の動物対象で実行することができる。
【０１５８】
本発明のビタミンＤ３化合物は、「Reichel, H. et al. (1987) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84:3385-3389」及び「Lemire, J.M. et al. (1985) J. Immunol 34:2032-2035」に記載されているように、Ｔ細胞増殖及び分泌活性に対する阻害効果を先ずインビトロでテストすることができる。他方、免疫抑制効果は、当該技術分野公知であり、「Bouillon, R. et al. (1995) Endocrine Reviews 16(2) 232 (Table 6 and 7)」に要約されている種々のモデル動物を使って、インビボでテストすることができる。例えば、狼瘡、甲状腺炎、脳炎、糖尿病及び腎炎のような自己免疫障害のモデル動物は、以下の文献に記載されている（Lemire, J.M. (1992) J. Cell Biochem. 49:26-31; Koizumi, T. et al. (1985) Int. Arch. Allergy Appl. Immunol. 77:396-404; Abe, J. et al. (1990) Calcium Regulation and Bone Metabolism 146-151; Fournier, C. et al. (1990) Clin. Immunol. Immunopathol. 54:53-63; Lemire, J.M. and Archer, D.C. (1991) J. Clin. Invest. 87:1103-1107; Lemire, J.M. et al. (1994) Endocrinology 135(6):2818-2821; Inaba, M. et al. (1992) Metabolism 41:631-635; Mathieu, C. et al. (1992) Diabetes 41:1491-1495; Mathieu, C. et al. (1994) Diabetologia 37:552-228; Lillevang, S.T. et al. (1992) Clin. Exp. Immunol. 88:301-306)。臓器移植時、例えば、皮膚移植、心臓移植、膵島移植時の免疫抑制の活性を特徴づけるモデルは、以下の文献に記載されている（Jordan, S.C. et al. (1988) v Herrath D (eds) Molecular, Cellular and Clinical Endocrinology 346-347; Veyron, P. et al. (1993) Transplant Immunol. 1:72-76; Jordan, S.C. (1998) v Herrath D (eds) Molecular, Cellular and Clinical Endocrinology 334-335; Lemire, J.M. et al. (1992) Transplantation 54:762-763; Mathieu, C. et al. (1994) Transplant. Proc. 26:3128-3129）。
【０１５９】
インビトロで免疫応答の効果的な抑制剤としてある特定のテスト化合物を同定した後、これらの化合物は、治療計画の一部としてインビボで使用することができる。従って、本発明の別の態様は、本発明のビタミンＤ３化合物の医薬製剤を、移植拒絶反応、自己免疫障害及び炎症のような免疫反応を阻害するために、対象に投与することを含んでなる、免疫応答を抑制する方法を提供する。
【０１６０】
一態様において、本発明は、本発明のビタミンＤ３化合物の有効量を対象に投与することによって、対象のビタミンＤ３関連の症状を治療する方法を提供するものであり、ここでビタミンＤ３関連の症状はＩＬＴ３関連の疾患である。一態様では、前記ＩＬＴ３関連の症状は、免疫疾患である。ある特定の態様では、前記免疫疾患は、自己免疫疾患である。特別な態様では、前記免疫疾患は、１型糖尿病である。その他の態様では、前記免疫疾患は、移植拒絶反応である。
【０１６１】
例えば、本発明の主題のビタミンＤ３化合物は、Ｔ細胞応答を下方調節することが望ましい臨床状態において、応答を阻害するために使用することができる。例えば、移植片対宿主病において、移植の症例、自己免疫疾患（例えば、糖尿病、関節炎（関節リウマチ、若年性関節リウマチ、変形性関節炎、乾癬性関節炎を包含する）、多発性硬化症、脳脊髄炎、糖尿病、重症筋無力症、全身性紅斑性狼瘡、自己免疫性甲状腺炎、皮膚炎（アトピー性皮膚炎及び湿疹様皮膚炎を包含する）、乾癬、シェーグレン症候群、シェーグレン症候群に続発する乾性角結膜炎を包含する、円形脱毛症、節足動物の咬傷反応によるアレルギー性反応、クローン病、アフター性潰瘍、虹彩炎、結膜炎、角結膜炎、潰瘍性大腸炎、喘息、アレルギー性喘息、皮膚紅斑性狼瘡、強皮症、膣炎、直腸炎、薬疹、ハンセン病リバーサル反応、癩性結節性紅斑、自己免疫性ブドウ膜炎、アレルギー性脳脊髄炎、急性壊死性出血性脳炎、突発性両側性進行性感音難聴、再生不良性貧血、真正赤血球性貧血、突発性血小板減少症、多発性軟骨炎、ヴェグナー肉芽腫症、慢性活動性肝炎、スティーヴンス-ジョンソン症候群、突発性スプルー、扁平苔癬、クローン病、グレーブス眼病、サルコイドーシス、原発性胆汁性肝硬変、後部ブドウ膜炎、及び間質性肺線維症を含む）。免疫活性の下方調節（downmodulaton）も、又、アトピー性皮膚炎のようなアレルギーの症例に望ましいであろう。
【０１６２】
本発明の別な態様は、細胞において免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）表面分子の発現を調節する方法を提供する。この方法は、細胞において免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）表面分子の発現を調節するのに有効な量で、式Ｉの化合物を当該細胞と接触させることを包含する。一態様では、細胞は対象の内部にある。別な態様では、前記調節は、発現の上方調節である。その他の態様では、前記調節は、下方調節である。
【０１６３】
本発明の関連する態様は、対象に於いてＩＬＴ３関連の疾患を治療する方法を提供する。この方法は、ＩＬＴ３表面分子の発現を調節するのに有効な量で、式Ｉの化合物を当該対象に投与し、これにより対象におけるＩＬＴ３関連の疾患を治療することを包含する。
ある特定の態様において、本発明は、例えば、自己免疫疾患及び（移植片対宿主病：ＧＶＨＤのような）移植拒絶反応のような、免疫疾患を治療する方法及び組成物を提供する。本発明のこのような態様は、本発明のビタミンＤ３化合物が、細胞、例えば抗原提示細胞上で免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）の発現を調節できることを見出したことに基づいている。
【０１６４】
従って、本発明の別の態様は、対象における移植拒絶反応を阻害する方法を提供する。この方法は、ＩＬＴ３表面分子の発現を調節するのに有効な量で、式Ｉの化合物を対象に投与し、これにより、対象における移植拒絶反応を阻害することを包含する。一態様では、前記移植は、器官の移植である。別な態様では、前記移植は、腎臓ランゲルハンス島移植である。更に別な態様では、前記移植は骨髄移植である。
【０１６５】
前記のように、治療に有効な免疫抑制量の決定は、当業者としての主治臨床医によって、公知の技術の使用により、そして類似の状況下で得られた結果を観察することにより、容易に行うことができる。動物、例えば、イヌ、齧歯類において効果があると決定された化合物は、当業者によってヒトにも応用可能である。動物に用いられる開始用量／計画は、先の検討を基にして推定することができる。例えば、齧歯類における自己免疫障害を治療する本発明のビタミンＤ３化合物の投与量は、０．１ｇ／ｋｇ／日〜１ｇ／ｋｇ／日の範囲で、経口又は注射によって投与されることが先ず推定される。
【０１６６】
当業者であれば、動物実験で得られたデータに基づいて、ヒトにおける用量及び投与経路は動物のものと同様のものであることが推定できる。ヒトに用いられる典型的な用量は、成人一人当たり０．２５〜１０μｇ／日、好ましくは０．５〜５μｇ／日の範囲である（米国特許第４，３４１，７７４号）。
【０１６７】
Ｄ．カルシウム及びリンのホメオスタシス
本発明はまた、対象のカルシウム代謝の脱制御により特徴づけられる疾患を治療する方法に関する。この方法は、本発明のビタミンＤ３化合物の有効量を、病的又は非病的ビタミンＤ３応答細胞に接触させ、カルシウム及びリンのホメオスタシスを直接又は間接に調節することを包含する。インビボ又はインビトロでカルシウムの変動を検出する技術は、当該技術分野では公知である。
【０１６８】
典型的なＣａ＋＋ホメオスタシス関連アッセイは、腸に焦点を当て、腸の４５Ｃａ２＋吸収を、以下の何れかによって測定するアッセイを包含する：１）インビボ（Hibberd K.A. and Norman A.W. (1969) Biochem. Pharmacol. 18:2347-2355; Hurwitz, S. et al. (1967) J. Nutr. 91:319-323; Bickle, D.D. et al. (1984) Endocrinology 114:260-267）、又は２）反転十二指腸嚢によるインビトロ（Schachter, D. et al. (1961) Am. J. Physiol. 200:1263-1271）、又は３）ニワトリ（chick）におけるカルビンジンＤ２８ｋ又はラットにおけるカルビンジンＤ９ｋのゲノム誘導（Thomasset, M. et al. (1981) FEBS Lett. 127:13-16; Brehier, A. and Thomasset M. (1990) Endocrinology 127: 580-587）。骨指向性アッセイは、以下を包含する：１）インビボで骨からのＣａ２＋の放出で決定される骨吸収の評価（動物で、Ｃａ２＋ゼロの給餌）（Hibberd, K.A. and Norman A.W. (1969) Biochem. Pharmacol. 18:2347-2355; Hurwitz, S. et al. (1967) J. Nutr. 91:319-323）、又はインビトロで骨の外移植（Bouillon, R. et al. (1992) J. Biol. Chem. 267:3044-3051）、２）血清オステオカルシンレベルの測定（オステオカルシンは、骨芽細胞特異的タンパク質で、その合成後に、骨マトリックスに殆ど取り込まれるが、一部循環内（又は組織培養培地）に放出されるので、骨の形成又は代謝回転（turnover）のよいマーカーである）（Bouillon, R. et al. (1992) Clin. Chem. 38:2055-2060）、又は３）骨灰分含量（Norman, A.W. and Wong, R.G. (1972) J. Nutr. 102:1709-1718）。
【０１６９】
腎臓指向性のアッセイが一つだけ採用されている。このアッセイでは、尿中Ｃａ２＋排泄が測定される（Hartenbower, D.L. et al. (1977) Walter de Gruyter, Berlin pp 587-589）；このアッセイは、血清Ｃａ２＋レベルの上昇に依存しており、腎臓よりも骨のＣａ２＋動員活性を反映している。最後に、本発明の化合物の投与の結果を検出するのに使用することができる「軟部組織石灰化」アッセイがある。このアッセイにおいて、ラットに４５Ｃａ２＋を腹腔内投与し、次いで、７日間、相対的に高用量の本発明の化合物を投与し、重症高カルシウム血漿の発症の場合に、軟部組織石灰化を４５Ｃａ２＋のレベルを決めることにより評価することができる。これら全てのアッセイにおいて、本発明のビタミンＤ３化合物をビタミンＤ充足又は欠損動物に（アッセイ計画に従って）単回又は長期に渡って投与し、アッセイの終点前まで適当な時間間隔で定量する。
【０１７０】
ある特定の態様において、本発明のビタミンＤ３化合物は、骨代謝を調節するのに使用することができる。「骨代謝」という用語は、カルシウム及びリン酸塩の血清中の濃度に最終的に影響を及ぼす骨構造の形成又は退化、例えば、骨形成、骨吸収等における直接又は間接的な効果を包含する。この用語は、又、骨形成又は退化を順にもたらすであろう骨細胞、例えば破骨細胞及び骨芽細胞における、ビタミンＤ３化合物の効果を包含することを意図している。例えば、ビタミンＤ３化合物が、ゲノム及び非ゲノム経路を通して骨形成細胞である、骨芽細胞に対して効果を発揮することは当該技術分野において公知である（Walters, M.R. et al. (1982) J. Biol. Chem. 257:7481-7484; Jurutka, P.W. et al. (1993) Biochemistry 32:8184-8192; Mellon W.S. and DeLuca H.F. (1980) J. Biol. Chem. 255:4081-4086）。同様に、ビタミンＤ３化合物が、単球及び単核の食細胞の破骨細胞への分化の促進のような骨を吸収する破骨細胞の異なった活性をサポートすることは当該技術分野において公知である（Abe, E. et al. (1988) J. Bone Miner. Res. 3:635-645; Takahshi N. et al. (1988) Endocrinology 123:1504-1510; Udagawa N. et al. (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:7260-7264）。従って、骨細胞の産生を調節する本発明のビタミンＤ３化合物は、骨形成及び退化に影響を与えることができる。
【０１７１】
本発明は、本発明のビタミンＤ３化合物の有効量を、病的又は非病的骨細胞に接触させ、これにより骨形成及び退化を調節する、骨細胞代謝を調節する方法を提供する。本方法は、例えばインビトロ又はエキソビボで培養中の細胞で実行することができる、又は動物対象に存在する細胞、例えば、インビボでの細胞で実行することができる。使用することができる典型的な培養系は、骨芽細胞株、例えばＲＯＳ１７／２．８細胞株、単球、骨髄培養系その他を包含する（Suda, T. et al. (1990) Med. Res. Rev. 7:333-366; Suda, T. et al. (1992) J. Cell Biochem. 49:53-58）。選択された化合物は、更にインビボ、例えば大理石骨病のモデル動物において、及びヒトの疾患においてテストすることができる（Shapira F. (1993) Clin. Orthop. 294:34-44）。
【０１７２】
好ましい態様において、本発明のビタミンＤ３化合物の医薬製剤を、対象に投与し、治療を受けていない対象に較べて症状を改善することを含む、骨粗鬆症を治療する方法が提供される。
【０１７３】
本発明のビタミンＤ３化合物は、卵巣を摘出した動物、例えば、イヌ、齧歯類において、正常な動物とエストロゲン欠損動物の両者における骨量及び骨形成率の変化を評価してテストすることができる。臨床試験は、骨粗鬆症を予防及び治療するための本発明のビタミンＤ３化合物の治療有効量を決定するために、臨床医が、ヒトにおいて実施することができる。
【０１７４】
別の態様において、本発明のビタミンＤ３化合物の治療適用は、代謝性カルシウム及びリン欠損により特徴づけられるその他の疾病の治療を包含する。そのような疾病の例としては、以下の通りである：骨粗鬆症、骨異栄養症、骨軟化症、くる病、嚢胞性線維性骨炎、腎性骨異栄養症、骨硬化症、抗けいれん治療、骨減少症、骨繊維形成不全症、二次性副甲状腺機能亢進症、副甲状腺機能低下症、副甲状腺機能亢進症、肝硬変、閉塞性黄疸、薬剤誘発性代謝、髄様癌、慢性腎疾患、低リン酸血症性ＶＤＲＲ、ビタミンＤ依存性くる病、サルコイドーシス、グルココルチコイド拮抗作用症（antagonism）、吸収不良症候群、脂肪便症、熱帯性スプルー、特発性高カルシウム血症及び授乳熱。
【０１７５】
Ｅ．ホルモン分泌
更に別の態様において、本発明は、ビタミンＤ３応答細胞、例えば内分泌細胞のホルモン分泌を調節する方法を提供する。ホルモン分泌は、ビタミンＤ３応答細胞における、任意のホルモン、例えば副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、カルシトニン、インスリン、プロラクチン（ＰＲＬ）及びＴＲＨの分泌に関与する転写及びプロセシングを制御する、本発明のビタミンＤ３化合物のゲノム及び非ゲノム活性の両者を包含する（Bouillon, R. et al. (1995) Endocrine Reviews 16(2):235-237）。
【０１７６】
本発明の方法は、培養中の細胞、例えば、インビトロ又はエキソビボで、又は動物対象、例えばインビボで、実施可能である。本発明のビタミンＤ３化合物は、副甲状腺細胞の初代培養を用いてインビトロで初期テストすることができる。別の使用可能な系は、ラット下垂体部腫瘍細胞、例えば、ＧＨ４Ｃ１細胞株（Wark, J.D. and Tashjian Jr. A.H. (1982) Endocrinology 111:1755-1757; Wark J.D. and Tashjian Jr. A.H. (1983) J. Biol. Chem. 258:2118-2121; Wark J.D. and Gurtler V. (1986) Biochem. J. 233:513-518）におけるプロラクチン分泌、及びＧＨ４Ｃ１細胞におけるＴＲＨ分泌によるテストを包含する。他方、本発明のビタミンＤ３化合物の効果は、以下の文献に記載されたモデル動物を使用して、インビボで特徴づけることができる：（Nko M. et al. (1982) Miner Electrolyte Metab. 5: 67-75; Oberg F. et al. (1993) J. Immunol. 150: 3487-3495; Bar-Shavit Z. et al. (1986) Endocrinology 118: 679-686; Testa U. et al. (1993) J. Immunol. 150: 2418-2430; Nakamaki T. et al. (1992) Anticancer Res. 12:1331- 1337;  Weinberg J. B. and Larrick J.W. (1987) Blood 70 : 994-1002; Chambaut-Guerin A.M. and Thomopoulos P. (1991) Eur. Cytokine New. 2:355; Yoshida M. et al. (1992) Anticancer Res. 12: 1947-1952; Momparler R.L. et al. (1993) Leukemia 7: 17-20; Eisman J.A. (1994) Kanis JA(eds) Bone and Mineral R
esearch 2: 45-76; Veyron P. te al. (1993) Transplant Immunol. 1:72-76; Gross M. te al. (1986)  J Bone Miner Res. 1: 457-467; Costa E.M. et al. (1985) Endocrinology 117: 2203-2210; Koga M. et al. (1988) Cancer Res. 48: 2734-2739; Franceschi R.T. et al. (1994) J. Cell Physiol. 123: 401-409; Cross H.S. et al. (1993) Naunyn Schmiedebergs Arch. Pharmacol. 347: 105-110; Zhao X. and Feldman D. (1993) Endocrinology 132: 1808-1814; Skowronski R.J. et al. (1993) Endocrinology 132: 1952-1960; Henry H.L. and Norman A.W. (1975) Biochem. Biophys. Res. Commun. 62: 781-788; Wecksler W.R. et al. (1980) Arch. Biochem. Biophys. 201: 95-103; Brumbaugh P.F. et al. (1975) Am. J. Physiol. 238: 384-388; Oldham S.B. et al. (1979) Endocrinology 104: 248-254; Chertow B.S. et al. (1975) J. Clin Invest. 56: 668-678; Canterbury J.M. et al. (1978) J Clin. Invest. 61: 1375-1383; Quesad J.M. et al. (1992) J. Clin. Endocrinol. Metab. 75:494-501）。
【０１７７】
ある態様において、本発明のビタミンＤ３化合物は、治療計画の一部として、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）プロセシング、例えば、転写、翻訳プロセシング及び／又は副甲状腺細胞の分泌を阻害するのに使用することができる。これらの化合物を用いた治療方法は、ＰＴＨ活性の直接又は間接効果、例えば１次及び２次応答を含む全ての疾患に容易に適用することができる。
【０１７８】
従って、本発明のビタミンＤ３化合物の治療適用は、慢性腎不全の二次性副甲状腺機能亢進症のような疾病を治療することを包含する（Slatopolsky, E. et al. (1990) Kidney Int. 38:S41-S47; Brown, A.J. et al. (1989) J. Clin. Invest. 84:728-732）。治療影響量及び投与計画は、当業者であれば技術的に記載されたデータを用いて決定することができる。
【０１７９】
Ｆ．神経細胞脱落に対する防御
更に別の態様において、本発明は、神経細胞脱落を防止する又は遅延させるために、本発明のビタミンＤ３化合物を、ビタミンＤ３応答細胞、例えば、神経細胞に接触させ、神経細胞脱落に対して防御する方法を提供する。「・・に対して防御する」という用語は、神経細胞の劣化、障害又は死の予防、遅延及び／又は停止を包含するものである。
【０１８０】
神経細胞脱落とは、神経細胞の正常な機能が障害された結果として起こり得るものである。神経細胞の劣化は、神経細胞の脱落をもたらす神経細胞の機能障害の結果として起こり得るものである。神経細胞の機能は、例えば、神経細胞の生化学的、生理学的又は解剖学的な変化により障害され得る。神経細胞の劣化は、正常な神経細胞が機能するのに有害である、膜、樹状突起又はシナプスの変化を包含している。神経細胞の劣化、障害及び／又は死の原因は知られていない。或いは、対象の神経系に起こった年齢及び／又は疾病に関連した変化の結果であるかもしれない。
【０１８１】
神経細胞脱落が、「加齢に関連する（age-related）」と本明細書に記載する場合、加齢に伴う対象の、知られているかどうかにかかわらず、身体的変化に起因する神経細胞脱落を包含するものである。神経細胞脱落が、「疾病に関連する（disease-related）」と本明細書に記載する場合、疾病に罹っている対象の、知られているかどうかにかかわらず、身体的変化に起因する神経細胞脱落を包含するものである。しかしながら、これらの用語は、相互に限定的なものではなく、実際は、神経細胞の脱落となる多くの条件は年齢（加齢）及び疾病の両方に関係していると理解されるべきである。
【０１８２】
神経細胞脱落及び神経細胞の形態における変化を伴う、典型的な加齢に関連する疾病は、例えば、アルツハイマー病、ピック病、パーキンソン病、血管疾患、ハンチントン病及び加齢に伴う記憶障害を包含する。アルツハイマー病の対象において、神経細胞脱落は、海馬、前頭野、頭頂及び前側頭皮質、扁桃体、及び嗅覚系に顕著である。海馬の最も顕著に影響を受ける領域は、ＣＡ１領域、鉤状回及び内嗅皮質を含んでいる。海馬が記憶における重要な役割を演じていることはよく知られているので、記憶喪失は最も初期の、最も代表的な認知変化であると考えられている。ピック病は、ときには線条体における神経細胞の死を伴う、前頭葉及び前側頭葉の新皮質における重症神経細胞変性によって特徴づけられる。パーキンソン病は、黒質及び青斑における神経細胞の脱落によって同定することができる。ハンチントン病は、線条体内及び皮質のコリン作動性ニューロン及びＧＡＢＡ作動性ニューロンの変性によって特徴づけられる。パーキンソン病及びハンチントン病は、通常運動障害を伴うが、しばしば同時に認識機能障害（記憶喪失）を示す。
【０１８３】
加齢性記憶障害（ＡＡＭＩ）は、もう一つの加齢性障害であって、晩年の数十年に健康な、高齢者における記憶消失として特徴づけられる（Crook, T. et al. (1986) Devel. Neuropsych. 2(4):261-276）。現在、ＡＡＭＩに対する神経基盤は正確には定義されていない。しかし、加齢に伴う神経細胞死が、皮質、海馬、小脳扁桃、大脳基底核、コリン作動性脳基底、青斑、縫線核及び小脳を含む、記憶にかかわる脳の領域において、多くの種で起こっていることが報告されている（Crook, T. et al. (1986) Devel. Neuropsych. 2(4): 261-276）。
【０１８４】
本発明のビタミンＤ３化合物は、ゲノム又は非ゲノムのメカニズムに基づいて、神経細胞の脱落を防御することができる。核ビタミンＤ３受容体は、末梢に存在することがよく知られているが、脳、特に海馬及び新皮質にも見出されている。非ゲノムのメカニズムも、又、神経内及び／又は末梢のカルシウム及びリンのレベルを制御することによって、神経細胞脱落を防御又は遅延させる可能性がある。更に、本発明のビタミンＤ３化合物は、間接的に作用することによって、例えば、血清ＰＴＨレベルを調節することによって、神経細胞脱落も防御する可能性がある。例えば、アルツハイマー病において、血清ＰＴＨレベルと認識の低下の間には、正の相関が実証されている。
【０１８５】
本方法は、培養細胞、例えばインビトロ又はエキソビボで、又は動物対象、例えばインビボの細胞で実施できる。本発明のビタミンＤ３化合物は、先ず、胚期の齧歯類の仔（米国特許第５，１７９，１０９号：胎仔ラット組織培養）、又はその他の哺乳動物（米国特許第５，０８９，５１７号：胎仔マウス組織培養）、又は非哺乳動物モデル、からの神経細胞を使用してインビトロでテストすることができる。これらの培養系は、虚血、脳卒中、外傷、神経損傷、アルツハイマー病、ピック病及びパーキンソン病、その他のモデル動物又は組織培養モデルにおける、末梢神経及び中枢神経系の神経細胞の防御を特徴付けるのに使用されてきた。
【０１８６】
新皮質の神経細胞の崩壊を予防する研究のインビトロ系の例には、前もって、カイニン酸、ＮＭＤＡ、及びα−アミノ−３−ヒドロキシ−５−メチル−４−イソキサゾールプロピオン酸（ＡＭＰＡ）のような、種々のグルタミン酸アゴニストに曝露した胎仔マウス神経細胞及びグリア細胞のインビトロ培養を使用することを含む（米国特許第５，０８９，５１７号）。又、米国特許第５，１７９，１０９号（神経保護化合物処理の前にラット皮質／海馬神経細胞培養のグルタミン酸処理）；米国特許第５，１６３，１９６号及び第５，１９６，４２１号（神経保護興奮性アミノ酸受容体アンタゴニストはラットのグリシン、カイニン酸、ＡＭＰＡ受容体結合を阻害する）も参照されたい。
【０１８７】
また、本発明のビタミンＤ３化合物の効果は、モデル動物を使用してインビボで特徴づけることもできる。これらのモデル系での神経細胞劣化は、しばしば実験的外傷又は介入（例えば、トキシンの応用、神経破壊、酸素供給の阻害）によって誘導される。
【０１８８】
Ｇ．平滑筋細胞
更に別の態様において、本発明は、本発明のビタミンＤ３化合物をビタミンＤ３応答平滑筋細胞に接触させ、細胞の活性を活性化する、又は好ましくは、阻害することによる血管平滑筋細胞の活性を調節する方法を提供する。「平滑筋細胞の活性」という用語は、増殖、遊走、接着及び／又は代謝のような、平滑筋細胞のいずれの活性も包含するものである。
【０１８９】
ある特定の態様において、本発明のビタミンＤ３化合物は、ビタミンＤ３応答平滑筋細胞の異常活性を伴う疾患及び症状を治療するのに使用することができる。例えば、本発明は、高血圧誘導血管リモデリング、血管再狭窄及びアテローム性動脈硬化のような、高増殖性血管疾患の治療において使用することができる。別の態様において、本発明の化合物は、ビタミンＤ３応答平滑筋細胞の異常代謝、例えば、動脈性高血圧によって特徴づけられる障害を治療するのに使用することができる。
【０１９０】
本発明の方法は、培養細胞で、例えば、インビトロ又はエキソビボで、又は動物対象の細胞、例えば、インビボ細胞で実施できる。本発明のビタミンＤ３化合物は、「Catellot  et al. (1982) J. Biol. Chem. 257(19):11256」に記載されているように、インビトロで初期テストすることができる。
【０１９１】
４．レニン発現の抑制及び高血圧の治療
本発明の化合物は、レニン発現の抑制によって血圧を制御し、抗高血圧症薬として有用である。レニン−アンジオテンシン制御カスケードは、血圧、電解質及び容量ホメオスタシスの制御において重要な役割を演じている（Y.C. Li, Abstrct, DeLuca Symposium on Vitamin D３, Tauc, New Mexico, June 15 - June 19, 2002, p.18）。それ故に、本発明は、ビタミンＤ３に関連した症状がレニン発現する細胞の異常活性によって特徴付けられるところの、ビタミンＤ３に関連した症状の対象を治療する方法を提供するものである。この方法は、式Ｉの化合物の有効量を当該対象に投与して、細胞のレニン発現を抑制し、当該対象が高血圧症について治療されるようにすることを含む。
【０１９２】
５．膀胱機能不全
膀胱壁の進行性の脱神経及び肥大を含む膀胱の形態変化は、例えば良性の前立腺肥大（ＢＰＨ）及び脊髄損傷に関連する膀胱疾患のような、過剰活動膀胱に至る異なった膀胱機能疾患を有する患者によくある組織学的知見である。
【０１９３】
このような症状に観察される膀胱の緊張及び／又は歪みの増加は、例えば、平滑筋細胞の細胞骨格及び収縮性タンパク質における、ミトコンドリアの機能における、及び種々の酵素活性における、細胞性及び分子性の変化が関連していることが示されている。膀胱壁の肥大もまた、その細胞外マトリックス及び非平滑筋成分おける変化に関連している。
膀胱におけるこれらの変化は、貯留（刺激）症状、特に頻尿、切迫尿、急迫性尿失禁及び夜間頻尿に関連している。これらの症状は、患者の社会的、心理的、家庭的、職業的、身体的及び性的生活に影響し、生活の質に深刻なマイナス影響を与える。
【０１９４】
現時点では、これらの症状に対する望ましい治療法は見出されていない。利用できる治療法の各々（例えば、抗ムスカリニクス（anti-muscarinics）又はαブロッカー）は、この症状の管理だけでなく、この状態の病因の治療に基づく作用のメカニズムに関連した不具合を伴う。事実上、幾つかの利用できる薬剤の治療実用性は、低い効率及び多くの重大な副作用のために一般患者の承諾が得にくいことにより制限されている。
結果として、膀胱平滑筋細胞の内在する病因的要素、異常な成長及びその結果としての機能不全を標的とすることにより改良された医療的有効性を提供する、新しい治療法が必要とされている。
【０１９５】
本明細書に記載のように、ビタミンＤ類似体は、膀胱過活動及び臨床的ＢＰＨのような膀胱肥大に関連する疾患での膀胱機能不全を治療及び予防することができる。排尿筋過活動又は排尿筋不安定としても知られている過活動膀胱は、無意識の膀胱けいれんを含んでいる。過活動の排尿筋は、過活動膀胱の原因となることがある。過活動膀胱の内在的な原因は、神経系疾患（例えば、多発性硬化症、パーキンソン病、脳梗塞、脊髄損傷）、腹部外傷、骨盤外傷又は手術による神経障害、脳梗塞、多発性硬化症、感染、膀胱癌、薬物副作用又は肥大した前立腺（ＢＰＨ）であるが、多くのケースでは原因は、特発性、つまり原因不明である。
【０１９６】
更に、このようなビタミンＤ関連の化合物は、ＢＰＨに関係する刺激性排尿症状の治療に適用される。ＢＰＨは、膀胱排尿障害（ＢＯＯ）及びＢＯＯに続発する症状を導く腺（前立腺）の拡大だけでなく、膀胱壁の肥大及び進行性麻痺を含む形態的膀胱変化を伴っている。このような変化は、膀胱の平滑筋細胞内での増大する機能要求、そして連携の崩壊をもたらす。
【０１９７】
６．ブドウ膜炎
ブドウ膜炎、つまり虹彩、毛様体及び脈絡膜を含む目の炎症を包含する疾患は、実際にはブドウ膜だけでなく、網膜、視神経及びガラス体に影響する多種類の疾患を包含する。国際的ブドウ膜炎の検討グループによれば、ブドウ膜炎には幾つかの分類：前部、中間部、後部及び全ブドウ膜炎（全体）、がある。炎症は、外傷又は毒性若しくは感染物質により誘導されるが、多くの場合そのメカニズムは、事実上自己免疫であるように思われる。症状は、急性、亜急性、慢性（３ヶ月の期間より長い）、再発の可能性がある。内因性のブドウ膜炎の多くの場合、病因は不明である。ブドウ膜炎は、深刻な視力障害の主な原因である。ブドウ膜炎が原因の失明の患者数は不明であるが、ブドウ膜炎が米国内における全失明のケースの１０〜１５％を占めると評価されている。
【０１９８】
種々の疾患は、前部ブドウ膜炎：焦点、多焦点又はびらん性脈絡膜炎、脈絡網膜炎、ブドウ膜網膜炎又は神経性ブドウ膜炎、として記載できる。疾患は通常痛みがないが、飛蚊症、（突然又は徐々に）視界のぼやけ（霧視）等及び失明のような視力障害であることで特徴付けられる。後部ブドウ膜炎は、幾つかの病因を有しており、そして複合してその徴候が現れ、時には臨床疾患を誤って導くことがある。内因性の後部ブドウ膜網膜炎が、組織崩壊をもたらす誇大な免疫応答のよってしばしば特徴付けられることは、経験的なモデル及び臨床の両方で証拠が増えている。明白な伝染性又は新生物の原因論が見出されていない場合、治療は結果として生じる炎症性カスケードを弱め、望ましくは組織損傷を低減する方向に導くことができる。一態様では、本発明はブドウ膜炎を治療する方法を提供する。
【０１９９】
７．間質性膀胱炎
本明細書では「ＩＣ」として示す間質性膀胱炎は、慢性的な炎症性膀胱疾患であり、骨盤痛、尿意逼迫及び頻尿により特徴付けられる、慢性の骨盤痛症候群（ＣＰＰＳ）又は痛みのある膀胱症候群（ＰＢＳ）としても知られている。この疾患は、男性はＩＣとしても診断されるが、主に女性に影響を与える。その他の膀胱の機能不全疾患とは違い、ＩＣは、症候学が関与する膀胱壁の慢性的な炎症により特徴付けられろ。つまり、異常な膀胱収縮性及び慢性の骨盤痛の原因は、慢性の炎症であり、その結果として、治療はこの病因的な要素を標的とすべきである。事実、過活動膀胱のような、平滑筋弛緩薬剤を用いる膀胱機能不全の伝統的な治療は、ＩＣの患者には効果がない。一態様では、本発明は、間質性膀胱炎を治療する方法を提供する。
【０２００】
８．子宮筋腫
子宮筋腫（子宮平滑筋腫、類線維腫、筋腫、線維筋腫、筋線維腫、線維平滑筋腫として知られる）は、子宮筋層由来の平滑筋の良性腫瘍である。それらは、粘膜下、漿膜下及び壁内の筋腫を包含する。一態様では、本発明は、子宮筋腫を治療する方法を提供する。
【０２０１】
９．医薬組成物
本発明はまた、式Ｉ又は別に本明細書に記載された、ビタミンＤ３化合物の有効量及び薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物を提供する。更なる態様において、有効量は、既に記載したように、ビタミンＤ３に関連した症状を治療するのに効果的である。
【０２０２】
態様において、ビタミンＤ３化合物は、例えば、薬学的に許容される製剤が患者に投与された後に、少なくとも１２時間、２４時間、３６時間、４８時間、１週間、２週間、３週間又は４週間かけて、患者に、ビタミンＤ３化合物の持続した送達を提供する薬学的に許容される製剤であるような、薬学的に許容される製剤を用いて患者に投与される。
【０２０３】
ある特定の態様において、これらの医薬組成物は、患者に局所又は経口投与するのに適している。別の態様において、以下に詳細に記載するように、本発明の医薬組成物は、以下に記載するのに適したものを包含する固体又は液体の形で投与するように特別に製剤化される：（１）経口投与、例えば、水薬（水性、非水性溶液又は懸濁液）、錠剤、大きな丸薬、粉末、顆粒、ペースト；（２）非経口投与、例えば、皮下、筋肉内又は静脈内注射、例えば、滅菌溶液又は懸濁液として；（３）局所適用、例えば、皮膚に適用するクリーム、軟膏又はスプレー；（４）膣内又は直腸内、例えば、ペッサリー、クリーム又はフォームとして；又は（５）エアロゾル、例えば、水性エアロゾル、リポソーム製剤又は化合物を含有する固体粒子。
【０２０４】
「薬学的に許容される」という用語は、本発明のビタミンＤ３化合物、そのような化合物を含有する組成物及び／又は妥当な医学判断の範囲内で、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応又はその他の問題又は合併症がなく、理にかなった便益／リスクの比率が釣り合って、ヒト及び動物の組織との接触に使用するのに適した剤型を意味する。
【０２０５】
「薬学的に許容される担体」という用語は、医薬として許容される材料、組成物又は媒体、例えば、液体又は固体の充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒又はカプセル化材料であって、主題の化合物を１つの器官又は身体の部分から他の器官又は身体の部分へと、運搬又は輸送することに関るものである。各々の担体は、製剤の他の成分と適合し、患者に有害でないという意味で「許容されるもの」でなければならない。薬学的に許容される担体として役に立つことのできる材料のいくつかの例としては以下を包含する：（１）乳糖、グルコース及びショ糖のような糖；（２）コーンスターチ及びポテトスターチのようなデンプン；（３）セルロース及びその誘導体、例えばカルボキシメチル・セルロース・ナトリウム、エチルセルロース及びセルロースアセテート；（４）粉末トラガカント；（５）モルト；（６）ゼラチン；（７）タルク；（８）カカオバター及び座薬ワックスのような賦形剤；（９）油、例えば、ピーナツ油、綿実油、ベニバナ油、ごま油、オリーブオイル、コーン油及び大豆油；（１０）グリコール、例えばプロピレングリコール；（１１）ポリオール、例えば、グリセリン、ソルビトール、マンニトール及びポリエチレングリコール；（１２）エステル、例えばオレイン酸エチル及びラウリン酸エチル；（１３）寒天；（１４）緩衝剤、例えば、水酸化マグネシウム及び水酸化アルミニウム；（１５）アルギン酸；（１６）発熱物質なしの水；（１７）等張食塩水；（１８）リンゲル液；（１９）エチルアルコール；（２０）リン酸バッファ溶液；及び（２１）その他の医薬製剤に採用される非毒性適合物質。
【０２０６】
湿潤剤、乳化剤及び滑沢剤、例えばラウリル硫酸ナトリウム及びステアリン酸マグネシウム、並びに着色剤、離型剤、コーティング剤、甘味剤、香料添加剤及び香料、保存剤及び抗酸化剤も又組成物中に存在することができる。
薬学的に許容される抗酸化剤の例は以下を包含する：（１）水溶性抗酸化剤、例えば、アスコルビン酸、塩酸システイン、重硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム等；（２）油溶性抗酸化剤、例えば、アスコルビン酸パルミテート、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α−トコフェロール等；及び（３）金属キレート剤、例えば、クエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸等。
【０２０７】
ビタミンＤ３化合物を含有する組成物は、経口、経鼻、局所（バッカル及び舌下を含む）、経直腸、経膣、エアロゾル及び／又は非経口投与に適したものを包含する。組成物は、単位用量形態で都合よく提示され、医薬技術分野でよく知られた方法のいずれかによって製造することができる。単回用量形態のための担体材料と組み合わせることのできる有効成分の量は治療される宿主、特定の投与形態によって異なる。単回用量形態のための担体材料と組み合わせることのできる有効成分の量は一般的に、治療効果を発揮する化合物の量である。一般的に、１００パーセントの中、この量は、有効成分の約１パーセント〜約９９パーセントまでの範囲であろうが、好ましくは、約５パーセント〜約７０パーセント、最も好ましくは、約１０パーセント〜約３０パーセントである。
【０２０８】
これら組成物を製造する方法は、ビタミンＤ３化合物と担体及び、場合により１つ又はそれ以上の付随する成分を配合する工程を含む。一般的に、製剤は、ビタミンＤ３化合物と液体の担体、又は細かく分けた固体の担体、又は両者を均一且つていねいに混ぜ合わせて配合し、次いで、必要に応じて成形して製造される。
【０２０９】
経口投与に適した本発明の組成物は、カプセル、カシェ、ピル、錠剤、トローチ剤（香料ベース、通常、ショ糖及びアラビアゴム又はトラガカントゴムを使用する）、粉末、顆粒又は水性若しくは非水性液体の溶液若しくは懸濁液として、又はエリキシル若しくはシロップとして、又は芳香錠（不活性ベース、例えば、ゼラチン及びグリセリン、又はショ糖及びアラビアゴムを使用する）として、及び／又はうがい薬、その他の形態であり、各々前もって決められた量の有効成分としてのビタミンＤ３化合物を含有している。化合物は、又、ボーラス、舐剤又はペーストとして投与される。
【０２１０】
経口投与の本発明の固形投与形態（カプセル、錠剤、ピル、糖衣錠、粉末、顆粒等）において、有効成分は、１つ又はそれ以上の薬学的に許容される担体、例えば、クエン酸ナトリウム又は第二リン酸カルシウム、及び／又は以下のいずれかと混合される：（１）充填剤又は増量剤、例えば、デンプン、乳糖、ショ糖、グルコース、マンニトール、及び／又はケイ酸；（２）結合剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ショ糖及び／又はアラビアゴム；（３）湿潤剤、例えばグリセリン；（４）崩壊剤、例えば、寒天、炭酸カルシウム、ポテトスターチ又はタピオカスターチ、アルギン酸、ある特定のケイ酸塩、及び炭酸ナトリウム；（５）溶液の遅延剤、例えばパラフィン；（６）吸収促進剤、例えば第４アンモニウム化合物；（７）湿潤剤、例えば、アセチルアルコール及びグリセロール・モノステアレート；（８）吸着剤、例えばカオリン及びベントナイト；（９）滑沢剤、例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固形ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、及びそれらの混合物；及び（１０）着色剤。カプセル、錠剤及びピルの場合、医薬組成物は、又、緩衝剤を含んでいてもよい。同様なタイプの固形組成物が、乳糖又はミルクシュガー、及び高分子量ポリエチレングリコールその他のような賦形剤を用いて軟質及び硬質充填ゼラチンカプセル内への充填剤として採用される。
【０２１１】
錠剤は、所望により１つ又はそれ以上の付随成分と共に、圧縮又は成形によって作製される。圧縮錠剤は、結合剤（例えば、ゼラチン又はヒドロキシプロピルセルロース）、滑沢剤、不活性希釈剤、保存剤、崩壊剤（例えば、デンプングリコール酸ナトリウム、又は架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム）、界面活性剤又は分散剤を用いて製造することができる。成形錠剤は、適当な機械で、粉末の有効成分を不活性の液体希釈剤で湿潤化した混合物を成形することによって製造できる。
【０２１２】
本発明の医薬組成物の錠剤及びその他の固形剤型、例えば、糖衣錠、カプセル、ピル及び顆粒は、医薬製剤化技術でよく知られている腸溶コーティング及びその他のコーティングのような被覆及び被殻で、任意に得ること、又は、製造することができる。それらは、又、例えば、所望の放出の特徴を出すように比率を変えて、ヒドロキシプロピルメチルセルロースや、その他のポリマーマトリックス、リポソーム及び／又はミクロスフェアを用いて、有効成分の徐放性又は制御された放出を与えるように製剤化することもできる。それらは、例えば、細菌を保持するフィルターを通す濾過によって、又は使用直前に滅菌水又はある種の別の滅菌した注射し得る媒体に溶解することができる、滅菌した固体組成物の形で滅菌剤を取り入れることによって、滅菌することができる。これらの組成物は、不透明化剤を含有していてもよく、そして、消化管の特定の部位でのみ又は優先的に、有効成分を放出し、場合によっては遅延放出も可能な形状にすることもできる。使用することができる包埋組成物の例としては、ポリマー物質とワックスを包含する。有効成分は、適当であれば上記の１つ又はそれ以上の賦形剤と共に、マイクロカプセルに封入することもできる。
【０２１３】
ビタミンＤ３化合物の経口投与用の液体製剤は、薬学的に許容されるエマルジョン、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップ及びエリキシルを包含する。上記の有効成分に加えて、液体製剤は、当該技術分野で一般に使用されている不活性な希釈剤を含有する。それらは、例えば、水又はその他の溶媒、溶解剤及び乳化剤で、例えばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、オイル（特に、綿実油、ラッカセイ油、コーンオイル、胚芽油、オリーブオイル、ヒマシ油、及びごま油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコール及びソルビタン脂肪酸エステル、及びこれらの混合物である。
【０２１４】
不活性希釈剤に加えて、経口組成物は、湿潤剤、乳化剤及び懸濁剤、甘味料、芳香剤、着色料、香料及び保存剤のような補助剤を包含することができる。
活性ビタミンＤ３化合物に加えて、懸濁液は、懸濁剤、例えば、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトール及びソルビタンエステル、結晶セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天及びトラガカントゴム、並びにこれらの混合物を含有してもよい。
【０２１５】
直腸投与又は膣投与用の本発明の医薬組成物は、座薬として提示される。座薬は、１つ又はそれ以上のビタミンＤ３化合物を、例えばカカオバター、ポリエチレングリコール、座薬ワックス又はサリチル酸塩（ここで座薬ワックスは、室温で固体であり、体温では液体である。よって、直腸内又は膣内で溶融し、活性剤を放出する）を含む１つ又はそれ以上の適切な非刺激的な希釈剤又は担体と混合することによって、製造することができる。
【０２１６】
膣投与に適した本発明の組成物は、当該技術分野公知の適当な担体を含有する、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム又はスプレー製剤を包含する。
ビタミンＤ３化合物の局所投与又は経皮投与の剤型は、粉末、スプレー、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、溶液、パッチ及び吸入剤を包含する。活性なビタミンＤ３化合物は、滅菌状態で薬学的に許容される担体と混合され、必要により保存剤、バッファ又は高圧ガスとも混合される。
【０２１７】
軟膏、ペースト、クリーム及びゲルは、本発明のビタミンＤ３化合物に加えて、賦形剤、例えば、動物及び植物油脂、オイル、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルク及び酸化亜鉛、又はこれらの混合物を含有する。
粉末及びスプレーは、本発明のビタミンＤ３化合物に加えて、賦形剤、例えば、乳糖、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウム及びポリアミド粉末、又はこれら物質の混合物を含有することができる。スプレーは、更に、通例噴射ガス、例えば、クロロフルオロハイドロカーボン、及びブタン及びプロパンのような揮発性非置換炭化水素を含有することができる。
【０２１８】
ビタミンＤ３化合物はまた、エアロゾルによって投与することもできる。これは、化合物を含有する水性エアロゾル、リポソーム調製物又は固体粒子を製造することによって可能となる。非水性（例えば、フルオロカーボン噴射ガス）懸濁液を使用することができる。ソニック噴霧器（sonic nebulizer）は、分解剤を遮断して化合物がそれらに曝露されるのを最小限にするので好ましい。
【０２１９】
通常、水性エアロゾルは、材料の水性溶液又は懸濁液を、在来の薬学的に許容される担体及び安定化剤と共に製剤化することによって作られる。担体及び安定化剤は、特定の化合物の要件により変化するが、通常、非イオン性界面活性剤（Ｔｗｅｅｎｓ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ、又はポリエチレングリコール）、血清アルブミンのような無害のタンパク質、ソルビタンエステル、オレイン酸、レシチン、グリシンのようなアミノ酸、バッファー、塩、糖又は糖アルコールを包含する。エアロゾルは、一般的に等張液から調製される。
【０２２０】
経皮パッチは、身体にビタミンＤ３化合物の制御された送達を提供するという追加の利点を有している。そのような剤型は、薬剤を適切な媒体に溶解又は分散することによって製造可能である。吸収促進剤は、皮膚を通しての有効成分の流れを増進させるためにも用いられる。この流速は、速度を制御する膜を設置するか、又はポリマーマトリックス若しくはゲルの中に有効成分を分散するかのいずれかによって、制御することができる。
眼科用製剤、眼軟膏、粉末、溶液等は、本発明の範囲内のものである。
【０２２１】
非経口投与用に適した本発明の医薬組成物は、１つ又はそれ以上のビタミンＤ３化合物と、１つ又はそれ以上の薬学的に許容される滅菌等張水性若しくは非水性溶液、分散液、懸濁液又はエマルジョン、又は滅菌された粉末（この粉末は、使用直前に滅菌された注射可能な溶液又は分散液に再構成することができ、且つ、抗酸化剤、バッファー、静菌剤、（意図されたレシピエント（recipient）の血液と等張に製剤化した）溶質、又は懸濁剤若しくは増粘剤を含有する）との組合せを含む。
【０２２２】
本発明の医薬組成物に採用される、適切な水性及び非水性担体の例としては、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等）、及びそれらの適切な混合物、植物油、例えばオリーブオイル、及び注射し得る有機エステル、例えばオレイン酸エチルを包含する。適切な流動性は、例えば、レシチンのような被覆材の使用によって、分散の場合における必要な粒子サイズの維持によって、及び界面活性剤の使用によって、維持することができる。
【０２２３】
これらの組成物は、又、保存剤、湿潤剤、乳化剤及び分散剤のような補助剤を含有してもよい。微生物の作用の防止は、種々の抗菌剤及び抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸等の含有によって確保することができる。糖、塩化ナトリウム等のような等張剤を組成物に含有することが望ましい。更に、注射可能な医薬形態の長期にわたる吸収は、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンのような、吸収を遅らせる物質を含有させることによって可能である。
【０２２４】
いくつかの例において、薬剤の効果を延長するために、皮下注射又は筋肉内注射から薬剤の吸収を遅延させることが望ましい。これは、水溶性の低い結晶構造又はアモルファス材料の懸濁液の使用によって可能となる。薬剤の吸収の速度は、その解離速度に依存するもので、それは又、結晶のサイズと結晶構造に依存する。または、非経口投与された薬剤の遅延吸収は、油性の媒体に薬剤を溶解又は懸濁することにより成される。
【０２２５】
注入可能な持続性薬剤形態は、ポリラクチド−ポリグリコリドのような生分解性ポリマー中にビタミンＤ３化合物のマイクロカプセルマトリックスを形成することによって製造することができる。薬物のポリマーに対する割合、及び採用された特定のポリマーの性質に依存して、薬物の放出速度を制御することができる。別の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）及びポリ（アンヒドリド）を包含する。持続性薬剤の注射可能な製剤は、又、薬物を、体組織に適合性であるリポソーム又はマイクロエマルジョンに封入することによって製造される。
【０２２６】
ビタミンＤ３化合物を医薬品として、ヒト及び動物に投与する場合、それ自体を投与することができ、或いは、薬学的に許容される担体と組み合わせた有効成分の、例えば０．１〜９９．５％（より好ましくは０．５〜９０％）を含有する医薬組成物として、投与することができる。
選択された投与経路にかかわらず、好適な水和物の形態で使用されるビタミンＤ３化合物及び／又は本発明の医薬組成物は、当業者には公知の従来の方法によって薬学的に許容される投与形態に製剤化される。
【０２２７】
本発明の医薬組成物中の有効成分の実用量レベル及び投与の時間的経過は、患者に対して毒性でなく、特定の患者、組成物、及び投与形態に対して望ましい治療応答を達成するために効果的である有効成分の量を得るために、変えることができる。用量の範囲の例は、１日当たり０．ｌ〜１０ｍｇである。
本発明の、ビタミンＤ３化合物の好ましい用量は、患者が耐えられる、重篤な高カルシウム血症を発症しない最大量である。好ましくは、本発明のビタミンＤ３化合物は、体重１ｋｇ当たり、約０．００１μｇ〜約１００μｇ、約０．００１〜約１０μｇ／ｋｇ、又は約０．００１μｇ〜約１００μｇ／ｋｇ体重の濃度で投与される。上に列挙した値の中間の範囲もまた、本発明に含まれるものである。
【０２２８】
本発明の実施例
以下の実施例は本発明を説明するものであり、それによって本発明は何ら制限されるものではない。
本発明の化合物の合成
実験
ビタミンＤ３類似体を用いる全ての操作は、琥珀色ガラスを用いて、窒素雰囲気下で行った。テトラヒドロフランは、使用の直前にナトリウムベンゾフェノンケチルから蒸留し、その溶液は硫酸ナトリウムで乾燥した。融点はＴｈｏｍａｓ−Ｈｏｏｖｅｒキャピラリー装置によって測定し、校正を行っていない。旋光度は２５℃で測定した。１Ｈ ＮＭＲスペクトルは、別に記載しない限り、ＣＤＣｌ３中で４００ＭＨｚで測定した。ＴＬＣはシリカゲル板（Ｍｅｒｃｋ ＰＦ−２５４）を用いて測定し、短波長ＵＶ下又は、１０％リンモリブデン酸のメタノール溶液を板に吹き付けた後に加熱することで可視化した。フラッシュクロマトグラフィーは、４０〜６５μｍメッシュシリカゲルを用いて行った。分取ＨＰＬＣは、５×５０ｃｍカラム及び１５〜３０μｍメッシュシリカゲルを用いて、流速１００ｍｌ／ｍｉｎで行った。化合物１〜１４についての結果を表１及び表２にまとめた。
【実施例１】
【０２２９】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンタ−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オールの合成
【０２３０】
【化０５３】
2008514621.tif 000028
【０２３１】
攪拌した（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−１−｛１−［４−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−１−イル］）−シクロプロピル｝−エチニル（１．０ｇ、２．９０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（１５ｍＬ）に、−７８℃で、ｎ−ＢｕＬｉ（２．７２ｍＬ、４．３５ｍｍｏｌ、１．６Ｍヘキサン溶液）を加えた。−７８℃で１時間攪拌した後、アセトン（２．５ｍＬ、３４．６ｍｍｏｌ）を加え、さらに２．５時間攪拌を続けた。ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１５ｍＬ）を加え、混合液を室温で１５分攪拌した後、ＡｃＯＥｔ（５０ｍＬ×２）で抽出した。反応抽出液を、食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒蒸発後の残留物（２．４ｇ）を、ＦＣ（５０ｇ、１０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−５−｛１−［４−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−１−イル］）−シクロプロピル｝−２−メチル−ペンタ−３−イン−２−オール（１．０５ｇ、２．６１ｍｍｏｌ）を得た。これをフッ化テトラブチルアンモニウム（６ｍＬ、６ｍｍｏｌ、１．０ＭのＴＨＦ溶液）で処理し、６５〜７５℃で４８時間攪拌した。混合液をＡｃＯＥｔ（２５ｍＬ）で薄め、水（２５ｍＬ×５）、食塩水（２５ｍＬ）で洗浄した。合わせた水溶液をＡｃＯＥｔ（２５ｍＬ）で抽出し、そして合わせた有機抽出液を硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒蒸発後の残留物（１．１ｇ）を、ＦＣ（５０ｇ、２０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、標題の化合物（０．７５ｇ、２．５９ｍｍｏｌ、９０％）を得た。
［α］３０Ｄ＝＋２．７ｃ０．７５、ＣＨＣｌ３
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：５．５０（１Ｈ、ｍ）、４．１８（１Ｈ、ｍ)、２．４０（２Ｈ、ｓ）、２．３５〜１．１６（１１Ｈ、ｍ）、１．４８（６Ｈ、ｓ）、１．２０（３Ｈ、ｓ）、０．７６〜０．５０（４Ｈ、ｍ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１５６．３９、１２５．２６、８６．３９、８０．１９、６９．２１、６５．１６、５５．１４、４６．９４、３５．７９、３３．６０、３１．６７、２９．９１、２７．２２、１９．３２、１９．１９、１７．７３、１０．９４、１０．３７；
ＭＳ ＨＲＥＩ Ｃ２２Ｈ２８Ｏ２ 計算値 Ｍ＋ ２８８．２０８９ 実測値 Ｍ＋ ２８８．２０９１
【実施例２】
【０２３２】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンタ−２Ｚ−エニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オールの合成
【０２３３】
【化０５４】
2008514621.tif 000029
【０２３４】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンタ−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（０．７２ｇ、２．５０ｍｍｏｌ）、酢酸エチル（１０ｍＬ）、ヘキサン（２４ｍＬ）、無水エタノール（０．９ｍＬ）、キノリン（４７μＬ）及びリンドラー触媒（１５６ｍｇ、５％ＰｄのＣａＣＯ３担体）の混合液を室温で二時間水素添加した。反応混合液をセライトパッドでろ過し、パッドをＡｃＯＥｔで洗浄した。ろ液と洗浄液を合わせて、１ＭのＨＣｌ、ＮａＨＣＯ３及び食塩水で洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した後に、溶媒を蒸発させ、残留物（０．７９ｇ）を、ＦＣ（４５ｇ、２０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、標題の化合物（６４０ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ、８８％）を得た。
【実施例３】
【０２３５】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンチル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オールの合成
【０２３６】
【化０５５】
2008514621.tif 000030
【０２３７】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンタ−２Ｚ−エニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（１００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）、 テトラフルオロホウ酸１，４−ビス（ジフェニル−ホスフィノ）ブタン１，５−シクロオクタジエンロジウム（２５ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（５ｍＬ）及び水銀（一滴）の混合液を、室温で５０ｐｓｉの圧力で３時間、Ｐａａｒ装置を用いて水素添加した。反応混合液をセライトパッドでろ過し、パッドを酢酸エチルで洗浄した。ろ液と洗浄液を合わせて、蒸発させて１ＭのＨＣｌ、ＮａＨＣＯ３及び食塩水で洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した後に、溶媒を蒸発させた残留物（１１０ｍｇ）を、ＦＣ（１０ｇ、２０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、標題の化合物（７５ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ、７５％）を得た。
［α］３０Ｄ＝−８．５ｃ０．６５、ＣＨＣｌ３
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：５．３７（１Ｈ、ｍ）、４．１４（１Ｈ、ｍ)、２．３７〜１．１６（１７Ｈ、ｍ）、１．１９（６Ｈ、ｓ）、１．１８（３Ｈ、ｓ）、０．６６〜０．２４（４Ｈ、ｍ）；
ＭＳ ＨＲＥＩ Ｃ１９Ｈ３２Ｏ２ 計算値 Ｍ＋Ｈ ２９２．２４０２ 実測値 Ｍ＋Ｈ ２９２．２４０４
【実施例４】
【０２３８】
（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−メチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンチル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オンの合成
【０２３９】
【化０５６】
2008514621.tif 000031
【０２４０】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンチル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（４４０ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）及びセライト（２．０ｇ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）中で室温で攪拌した懸濁液に、二クロム酸ピリジニウム（１．１３ｇ、３．０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を５時間攪拌し、シリカゲル（１０ｇ）を通してろ過し、シリカゲルパッドを２０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液で洗浄した。ろ液と洗浄液を混合して蒸発させ、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンテニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（４２６ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ、９８％）の組生成物を得た。（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンテニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（４２４ｍｇ，１．４７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）中で室温で攪拌した溶液に、トリメチルシリル−イミダゾール（０．４４ｍＬ，３．０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を１．０時間攪拌し、シリカゲル（１０ｇ）を通してろ過し、シリカゲルパッドを１０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液で洗浄した。ろ液と洗浄液を混合して蒸発させ、標題の化合物（４６０ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ、８６％）を得た。
［α］２９Ｄ＝−９．９ｃ０．５５、ＣＨＣｌ３
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：５．３３（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝３．２、１．５Ｈｚ）、２．８１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１０．７、６．２Ｈｚ）、２．４４（１Ｈ、ｄｄｄ、Ｊ＝１５．６、１０．７、１．５Ｈｚ）、２．３０〜１．１５（１３Ｈ、ｍ）と重なって、２．０３（ｄｄｄ、Ｊ＝１５．８、６．４、３．２Ｈｚ）、１．１８（６Ｈ、ｓ）、０．９２（３Ｈ、ｓ）、０．６６〜０．２８（４Ｈ、ｍ）、０．０８（９Ｈ、ｓ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：２１１．０８（０）、１５５．３２（０）、１２４．７７（１）、７３．９８（０）、６４，３２（１）、５３．９１（０）、４４．７０（２）、４０．４５（２）、３８．１２（２）、３４．７０（２）、２９．８６（３）、２９．８０（３）、２６．８０（２）、２４．０７（２）、２２．２８（２）、２１．２４（０）、１８．３５（３）、１２．６０（２）、１０．６４（２）、２．６３（３）；
ＭＳ ＨＲＥＳ Ｃ２２Ｈ３８Ｏ２Ｓｉ 計算値 Ｍ＋ ３６２．２６４１ 実測値 Ｍ＋ ３６２．２６４８
【実施例５】
【０２４１】
（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−メチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンタ−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オンの合成
【０２４２】
【化０５７】
2008514621.tif 000032
【０２４３】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンタ−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（３８１ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）及びセライト（２．０ｇ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）中で室温で攪拌した懸濁液に、二クロム酸ピリジニウム（１．０ｇ、２．６５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を１．５時間攪拌し、シリカゲル（１０ｇ）を通してろ過し、シリカゲルパッドを２０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液で洗浄した。ろ液と洗浄液を混合して蒸発させ、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンタ−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（３６０ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ、９５％）の粗成生物を得た。（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−ヒドロキシ−４−メチル−ペンタ−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（３６０ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）中で室温で攪拌した溶液に、トリメチルシリル−イミダゾール（０．２５ｍＬ、１．７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を０．５時間攪拌し、シリカゲル（１０ｇ）を通してろ過し、シリカゲルパッドを５％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液で洗浄した。ろ液と洗浄液を混合して蒸発させ、標題の化合物（３８２ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ、８１％）を得た。
【実施例６】
【０２４４】
１α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−コレカルシフェロール（１）の合成
【０２４５】
【化０５８】
2008514621.tif 000033
【０２４６】
（１Ｓ，５Ｒ）−１，５−ビス−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−３−［２−（ジフェニルホスフィノイル）−エタ−（Ｚ）−イリデン］−２−メチレン−シクロヘキサン（５１３ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（６ｍＬ）溶液を−７８℃で攪拌し、ｎ−ＢｕＬｉ（０．５５ｍＬ、０．８８ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を１５分間撹拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−メチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンタ−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（１７９ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液を滴下して加えた。反応混合物を−７２℃で３．５時間撹拌し、ヘキサン（２５ｍＬ）で希釈し、食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（７１６ｍｇ）を、ＦＣ（１５ｇ、５％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−コレカルシフェロール（３２４ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）を得た。１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−コレカルシフェロール（３２２ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）に室温でフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、４ｍｍｏｌ、１ＭのＴＨＦ溶液）を加えた。混合物を１８時間攪拌し、ＡｃＯＥｔ（２５ｍＬ）で希釈し、水（２０ｍＬ×５）及び食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒を蒸発させた残留物（２８０ｍｇ）をＦＣ（１０ｇ、５０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液及びＡｃＯＥｔ）で精製し、標題の化合物（１）（１７２ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ、８２％）を得た。
［α］３１Ｄ＝＋３２．４ｃ０．５０、ＭｅＯＨ
ＵＶ λｍａｘ（ＥｔＯＨ）：２６１ｎｍ（ε１１９３０）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：６．３６（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．３Ｈｚ）、６．０９（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．３Ｈｚ）、５．４５（１Ｈ、ｍ）、５．３３（１Ｈ、ｍ）、５．０１（１Ｈ、ｓ）、４．４５（１Ｈ、ｍ）、４．２２（１Ｈ、ｍ）、２．８０（１Ｈ、ｍ）、２．６０（１Ｈ、ｍ）、２．５０〜１．１０（１６Ｈ、ｍ）、１．４５（６Ｈ、ｓ）０．８１（３Ｈ、ｓ）、０．７２〜０．５０（４Ｈ、ｍ）；
ＭＳ ＨＲＥＳ Ｃ２８Ｈ３８Ｏ３の計算値 Ｍ＋ ４２２．２８２１、実測値 Ｍ＋ ４２２．２８５４
【実施例７】
【０２４７】
１α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−１９−ノル−コレカルシフェロール（２）の合成
【０２４８】
【化０５９】
2008514621.tif 000034
【０２４９】
（１Ｒ，３Ｒ）−１，３−ビス−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−５−［２−（ジフェニルホスフィノイル）エチリデン］−シクロヘキサン（６７４ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（８ｍＬ）溶液を−７８℃で攪拌し、ｎ−ＢｕＬｉ（０．７４ｍＬ、１．１８ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を１５分攪拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−メチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンタ−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（２３５ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（３ｍＬ）溶液を滴下して加えた。反応混合液を−７２℃で３．５時間攪拌し、ヘキサン（２５ｍＬ）で希釈し、食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒を蒸発させた残留物（８５０ｍｇ）をＦＣ（１５ｇ、５％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−１９−ノル−コレカルシフェロール（３３０ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を得た。１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−１９−ノル−コレカルシフェロール（３２８ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）にフッ化テトラブチルアンモニウム（５ｍＬ、５ｍｍｏｌ、１ＭのＴＨＦ溶液）を室温で加えた。混合液を６２時間攪拌した。ＡｃＯＥｔ（２５ｍＬ）で希釈し、水（２０ｍＬ×５）及び食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒を蒸発させた残留物（４１０ｍｇ）を、ＦＣ（１０ｇ、５０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液及びＡｃＯＥｔ）で精製し、標題の化合物（２）（１８３ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ、６８％）を得た。
［α］２９Ｄ＝＋７２．１ｃ０．５８、ＭｅＯＨ
ＵＶ λｍａｘ（ＥｔＯＨ）：２４２ｎｍ（ε２９２８６）、２５１ｎｍ（ε３４５１８）、２６０ｎｍ（ε２３８７５）；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：６．３０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．３Ｈｚ）、５．９４（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．３Ｈｚ）、５．４８（１Ｈ、ｍ）、４．１４（１Ｈ、ｍ）、４．０７（１Ｈ、ｍ）、２．７８（２Ｈ、ｍ）、２．５２〜１．１０（１８Ｈ、ｍ）、１．４９（６Ｈ、ｓ）０．８１（３Ｈ、ｓ）、０．７２〜０．５０（４Ｈ、ｍ）；
ＭＳ ＨＲＥＳ Ｃ２７Ｈ３８Ｏ３の計算値 Ｍ＋ ４１０．２８２１、実測値 Ｍ＋ ４１０．２８２３
【実施例８】
【０２５０】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペンタ−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オールの合成
【０２５１】
【化０６０】
2008514621.tif 000035
【０２５２】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−１−｛１−［４−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−１−イル］）−シクロプロピル｝−エチニル（１．９５ｇ、５．６６ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（３５ｍＬ）溶液を−７８℃で攪拌し、ｎ−ＢｕＬｉ（４．３ｍＬ、６．８８ｍｍｏｌ）を加えた。−７８℃で１時間攪拌した後、ヘキサフルオロアセトン（冷やしたフィンガーバーで、６滴）を加え、さらに１時間攪拌した。ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１０ｍＬ）を加え、混合液を室温まで温めた。反応混合物を食塩水（１００ｍＬ）で希釈し、ヘキサン（１２５ｍＬ×２）で抽出した。合わせた抽出液をＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（８．２ｇ）をＦＣ（１５０ｇ、１０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、得られた（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−５−｛１−［４−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−７ａ−メチル−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−１−イル］−シクロプロピル｝−１，１，１−トリフルオロ−２−トリフルオロメチル−ペンタ−３−イン−２−オール（２．７３ｇ、５．３５ｍｍｏｌ）を、フッ化テトラブチルアンモニウム（２０ｍＬ、２０ｍｍｏｌ、１．０ＭのＴＨＦ溶液）で処理し、６５〜７５℃で３０時間攪拌した。混合液をＡｃＯＥｔ（１５０ｍＬ）で希釈し、水（１５０ｍＬ×５）及び食塩水（１５０ｍＬ）で洗浄した。合わせた水溶性の洗浄液をＡｃＯＥｔ（１５０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（３．２ｇ）をＦＣ（１５０ｇ、２０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、標題の化合物（２．０５ｇ、５．１７ｍｍｏｌ、９７％）を得た。
［α］２８Ｄ＝＋６．０ｃ０．４７、ＣＨＣｌ３
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：５．５０（１Ｈ、ｂｒ．ｓ）、４．１６（１Ｈ、ｂｒ．ｓ）、３．９１（１Ｈ、ｓ）、２．４８（１Ｈ、ＡＢ四重線のＡパート、Ｊ＝１７．５Ｈｚ）、２．４３（１Ｈ、ＡＢ四重線のＢパート、Ｊ＝１７．５Ｈｚ）、２．２７（１Ｈ、ｍ）、２．００〜１．４０（９Ｈ、ｍ）、１．１８（３Ｈ、ｓ）、０．８〜０．５（４Ｈ、ｍ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１５５．２６（０）、１２６．６８（１）、１２１．３２（０、ｑ、Ｊ＝２８４Ｈｚ）、９０．２４（０）、７１．４４（０、ｓｅｐ．Ｊ＝３４Ｈｚ）、７０．５４(０)、６９．５７(１)、５５．１７（１）、４７．１７（０）、３６．０５（２）、３３．６３（２）、３０．１０（２）、２７．９４(２)、１９．５０(３)、１９．２７（０）、１７．９０（２）、１１．５６（２）、１１．２１（２）；
ＭＳ ＨＲＥＩ Ｃ１９Ｈ２２Ｏ２Ｆ６の計算値 Ｍ＋ ３９６．１５２４、実測値 Ｍ＋ ３９６．１５１３
【実施例９】
【０２５３】
（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−ヒドロキシ−ペンタ−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オンの合成
【０２５４】
【化０６１】
2008514621.tif 000036
【０２５５】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペンタ−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（５０４ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）とセライト（１．５ｇ）をジクロロメタン（１２ｍＬ）中で室温で撹拌した懸濁液に、二クロム酸ピリジニウム（０．９８ｇ、２．６ｍｍｏｌ）を加えた。混合液を２．５時間攪拌し、シリカゲル（５ｇ）を通してろ過し、シリカゲルパッドを２０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液で洗浄した。ろ液と洗浄液を混合して蒸発させ、標題の化合物（４２４ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ、８５％）を得た。
［α］２８Ｄ＝＋３．１ｃ０．５５、ＣＨＣｌ３
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：５．４６（１Ｈ、ｂｒ．ｓ）、３．５３７（１Ｈ、ｓ）、２．８１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１０．７、６．５Ｈｚ）、２．４９〜１．７６（１０Ｈ、ｍ）、０．９０（３Ｈ、ｓ）、０．７７〜０．５３（４Ｈ、ｍ）；
ＭＳ ＨＲＥＩ Ｃ１９Ｈ２０Ｏ２Ｆ６の計算値 Ｍ＋Ｈ ３９５．１４４０、実測値 Ｍ＋Ｈ ３９５．１４４３
【実施例１０】
【０２５６】
１α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コルカシフェロール（３）の合成
【０２５７】
【化０６２】
2008514621.tif 000037
【０２５８】
（１Ｒ，３Ｒ）−１，３−ビス−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−５−［２−（ジフェニルホスフィノイル）エチリデン］−シクロヘキサン（９００ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（８ｍＬ）を−７８℃で撹拌し、ｎ−ＢｕＬｉ（１．０ｍＬ、１．６ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を１５分間撹拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−ヒドロキシ−ペンタ−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（２００ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（３ｍＬ）を滴下して加えた。反応混合液を−７２℃で３．５時間撹拌し、ヘキサン（２５ｍＬ）で希釈し、食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（８５０ｍｇ）をＦＣ（２０ｇ、１０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（３２７ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、８６％）を得た。１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（３２７ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）に室温でフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、４ｍｍｏｌ、１ＭのＴＨＦ溶液）を加えた。混合液を２４時間撹拌し、ＡｃＯＥｔ（２５ｍＬ）で希釈し、水（２０ｍＬ×５）及び食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒を蒸発させた残留物（２５０ｍｇ）をＦＣ（１０ｇ、５０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液及びＡｃＯＥｔ）で精製し、標題の化合物（３）（１８３ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ、６８％）を得た。
［α］３０Ｄ＝＋７３．３ｃ０．５１、ＥｔＯＨ
ＵＶ λｍａｘ （ＥｔＯＨ）：２４３ｎｍ（ε２９３８４）、２５１ｎｍ（ε３４９７３）、２６０ｎｍ（ε２３９２４）；
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：６．２９（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．１Ｈｚ）、５．９３（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．１Ｈｚ）、５．５０（１Ｈ、ｍ）、４．１２（１Ｈ、ｍ）、４．０５（１Ｈ、ｍ）、２．７６（２Ｈ、ｍ）、２．５５〜１．５２（１８Ｈ、ｍ）、０．８０（３Ｈ、ｓ）、０．８０〜０．４９（４Ｈ、ｍ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１５５．２４（０）、１４１．７８（０）、１３１．２８（０）、１２６．２３（１）、１２３．６５（１）、１２１．０９（０、ｑ、Ｊ＝２８５Ｈｚ）、１１５．６７（１）、８９．６３（０）、７０．４２（０）、６７．４８（１）、６７．２９（１）、５９．１９（１）、４９．８７（０）、４４．４９（２）、４１．９８（２）、３７．１４（２）、３５．７６（２）、２９．２２（２）、２８．４７（２）、２７．５７（２）、２３．４６（２）、１９．３２（０）、１７．９７（３）、１１．８９（２）、１０．１８（２）；
ＭＳ ＨＲＥＳ Ｃ２７Ｈ３２Ｏ３Ｆ６の計算値 Ｍ＋ ５１９．２３２９、実測値 Ｍ＋ ５１９．２３２５
【実施例１１】
【０２５９】
１α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コルカシフェロール（４）の合成
【０２６０】
【化０６３】
2008514621.tif 000038
【０２６１】
（１Ｓ，５Ｒ）−１，５−ビス−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−３−［２−（ジフェニルホスフィノイル）エタ−（Ｚ）−イリデン］−２−メチレン−シクロヘキサン（９２１ｍｇ、１．５８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（８ｍＬ）を−７８℃で撹拌し、ｎ−ＢｕＬｉ（１．０ｍＬ、１．６ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を１５分撹拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−ヒドロキシ−ペンタ−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（１９７ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（２ｍＬ）を滴下して加えた。反応混合液を−７２℃で３．５時間撹拌し、ヘキサン（２５ｍＬ）で希釈し、食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（８７６ｍｇ）をＦＣ（２０ｇ、１０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（３５６ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）を得た。
【０２６２】
１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（３５６ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）に室温でフッ化テトラブチルアンモニウム（５ｍＬ、５ｍｍｏｌ、１ＭのＴＨＦ溶液）を加えた。混合液を１５時間撹拌し、ＡｃＯＥｔ（２５ｍＬ）で希釈し、水（２０ｍＬ×５）及び食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒を蒸発させた残留物（２７０ｍｇ）をＦＣ（２０ｇ、５０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液及びＡｃＯＥｔ）で精製し、標題の化合物（４）（２１６ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ、８７％）を得た。
［α］３０Ｄ＝＋４０．０ｃ０．５３、ＥｔＯＨ
ＵＶ λｍａｘ （ＥｔＯＨ）：２６２ｎｍ（ε１２９１９）；
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：６．３８（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．５Ｈｚ）、６．１０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．１Ｈｚ）、５．４９（１Ｈ、ｍ）、５．３５（１Ｈ、ｓ）、５．０２（１Ｈ、ｓ）、４．４５（１Ｈ、ｍ）、４．２５（１Ｈ、ｍ）、３．５７（１Ｈ、ｓ）、２．８３〜１．４５（１８Ｈ、ｍ）、０．８２（３Ｈ、ｓ）、０．８０〜０．５１（４Ｈ、ｍ）；
ＭＳ ＨＲＥＳ Ｃ２８Ｈ３２Ｏ３Ｆ６の計算値 Ｍ＋Ｈ ５３１．２３２９、実測値 Ｍ＋Ｈ ５３１．２３３７
【実施例１２】
【０２６３】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−ペンタ−２Ｅ−エニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オールの合成
【０２６４】
【化０６４】
2008514621.tif 000039
【０２６５】
５℃の水素化リチウムアルミニウム（４．５ｍＬ、４．５ｍｍｏｌ、１．０ＭのＴＨＦ溶液）に、ナトリウムメトキシド（２４５ｍｇ、４．６ｍｍｏｌ）を加え、次いで（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペンタ−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（３６０ｍｇ、０．９１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（５ｍＬ）を滴下した。滴下が終了した混合液を２．５時間撹拌しつつ還流した。その後、氷浴槽で冷却し、水（２．０ｍＬ）及び水酸化ナトリウム（２．０ｍＬ、２．０Ｍの水溶液）を加えて反応を停止し、エーテル（５０ｍＬ）で希釈して３０分撹拌し、ＭｇＳＯ４（５ｇ）を加えてさらに３０分撹拌した。ろ過し、ろ液の溶媒を蒸発させた残留物（０．４２ｇ）をＦＣ（２０ｇ、２０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、標題の化合物（３１５ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ、８７％）を得た。
［α］２８Ｄ＝＋２．０ｃ０．４１、ＣＨＣｌ３
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：６．２４（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１５．７、６．７Ｈｚ）、５．６０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１５．７Ｈｚ）、５．３８（１Ｈ、ｂｒ．ｓ）、４．１３（１Ｈ、ｂｒ．ｓ）、３．２７（１Ｈ、ｓ）、２．３２〜１．３４（１２Ｈ、ｍ）、１．１５（３Ｈ、ｓ）、０．８０〜０．４５（４Ｈ、ｍ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１５５．８９（０）、１３８．１０（１）、１２６．２１（１）、１２２．５０（０、ｑ、Ｊ＝２８７Ｈｚ）、１１９．１５（１）、７６．０９（０、ｓｅｐ．Ｊ＝３１Ｈｚ）、６９．５７（１）、５５．３３（１）、４７．３０（０）、４０．３１（２）、３６．０５（２）、３３．７１（２）、３０．１０（２）、２０．３６（０）、１９．４６（３）、１７．９４（２）、１１．９６（２）、１１．４６（２）；
ＭＳ ＨＲＥＩ Ｃ１９Ｈ２４Ｏ２Ｆ６の計算値 Ｍ＋ ３９８．１６８０、実測値 Ｍ＋ ３９８．１６７５
【実施例１３】
【０２６６】
（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンタ−２Ｅ−エニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オンの合成
【０２６７】
【化０６５】
2008514621.tif 000040
【０２６８】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペンタ−２Ｅ−エニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（６００ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）とセライト（２．０ｇ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）中で室温で撹拌した懸濁液に、二クロム酸ピリジニウム（１．１３ｇ、３．０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を３．５時間攪拌し、シリカゲル（１０ｇ）を通してろ過し、シリカゲルパッドを２５％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液で洗浄した。ろ液と洗浄液を混合して蒸発させ、（３ａ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペンタ−２Ｅ−エニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（５５０ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ、９２％）の粗成生物を得た。（３ａ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペンタ−２Ｅ−エニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（５５０ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１５ｍＬ）を室温で撹拌し、トリメチルシリル−イミダゾール（１．７６ｍＬ、１２．０ｍＬ）を加えた。得られた混合液を１時間撹拌し、シリカゲル（１０ｇ）を通してろ過し、シリカゲルパッドを１０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液で洗浄した。ろ液と洗浄液を混合し、蒸発させ、標題の化合物（６２３ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ、８８％）を得た。
［α］２８Ｄ＝−１．６ｃ０．５１、ＣＨＣｌ３
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：６．１４（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１５．５、６．７Ｈｚ）、５．５５（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１５．５Ｈｚ）、５．３５（１Ｈ、ｍ）、２．８０（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１０．７、６．４Ｈｚ）、２．４７〜１．７４（１０Ｈ、ｍ）、０．９０（３Ｈ、ｓ）、０．７６〜０．４０（４Ｈ、ｍ）、０．２（９Ｈ、ｓ）；１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：２１０．９９（０）、１５４．２８（０）、１３７．４１（１）、１２６．２６（１）、１２２．５９（０、ｑ、Ｊ＝２８９Ｈｚ）、１２０．８９（１）、６４．３１（１）、５３．９６（０）、４０．６０（２）、４０．１３（２）、３５．００（２）、２７．０３（２）、２４．２１（２）、２０．５７（０）、１８．５３（３）、１２．４１（２）、１０．７９（２）、１．６５（３）；
ＭＳ ＨＲＥＳ Ｃ２２Ｈ３０Ｏ２Ｆ６Ｓｉの計算値 Ｍ＋Ｈ ４６９．１９９２、実測値 Ｍ＋Ｈ ４６９．１９９５
【実施例１４】
【０２６９】
１α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（５）の合成
【０２７０】
【化０６６】
2008514621.tif 000041
【０２７１】
（１Ｒ，３Ｒ）−１，３−ビス−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−５−［２−（ジフェニルホスフィノイル）エチリデン］−シクロヘキサン（５１４ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（６ｍＬ）溶液を−７８℃で撹拌し、ｎ−ＢｕＬｉ（０．５７ｍＬ、０．９１ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を１５分間撹拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンタ−２Ｅ−エニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（２００ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液を滴下して加えた。反応混合液を−７２℃で３．５時間撹拌し、ヘキサン（３５ｍＬ）で希釈し、食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（７５０ｍｇ）をＦＣ（１５ｇ、５％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール及び １α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロールの混合物（２５０ｍｇ）を得た。１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール及び １α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロールの混合物（２５０ｍｇ）に室温でフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、４ｍｍｏｌ、１ＭのＴＨＦ溶液）を加えた。混合液を２４時間撹拌し、ＡｃＯＥｔ（２５ｍＬ）で希釈し、水（２０ｍＬ×５）及び食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（２７０ｍｇ）をＦＣ（１０ｇ、５０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液及びＡｃＯＥｔ）で精製し、標題の化合物（５）（１５７ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ、７０％）を得た。
［α］３Ｄ＝＋６３．３ｃ０．４５、ＥｔＯＨ
ＵＶ λｍａｘ （ＥｔＯＨ）：２４３ｎｍ（ε３０８２１）、２５１ｎｍ（ε３６０６４）、２６０ｎｍ（ε２４６７８）；
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：６．２９（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．３Ｈｚ）、６．２４（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１５．９、６．４Ｈｚ）、５．９２（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．１Ｈｚ）、５．６１（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１５．７Ｈｚ）、５．３８（１Ｈ、ｍ）、４．１３（１Ｈ、ｍ）、４．０５（１Ｈ、ｍ）、２．８８（１Ｈ、ｓ）、２．８２〜１．３４（１９Ｈ、ｍ）、０．７７０（３Ｈ、ｓ）、０．８０〜０．３６（４Ｈ、ｍ）；
ＭＳ ＨＲＥＳ Ｃ２７Ｈ３４Ｏ３Ｆ６ 計算値 Ｍ＋Ｈ ５２１．２４８５  実測値 Ｍ＋Ｈ ５２１．２４８９
【実施例１５】
【０２７２】
１α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（６）の合成
【０２７３】
【化０６７】
2008514621.tif 000042
【０２７４】
（１Ｓ，５Ｒ）−１，５−ビス−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−３−［２−（ジフェニルホスフィノイル）−エチ−Ｚ−リデン］−２−メチレン−シクロヘキサン（５２５ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（６ｍＬ）を−７８℃で撹拌し、ｎ−ＢｕＬｉ（０．５７ｍＬ、０．９１ｍｍｏｌ）を加えた。混合液を１５分撹拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンタ−２Ｅ−エニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（２００ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（２ｍＬ）を滴下して加えた。反応混合液を−７２℃で２．５時間撹拌し、ヘキサン（３５ｍＬ）で希釈し、食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（７６０ｍｇ）をＦＣ（１５ｇ、１０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール及び１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロールの混合物（２７４ｍｇ）を得た。１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール及び１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロールの混合物（２７４ｍｇ）にフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、４ｍｍｏｌ、１ＭのＴＨＦ溶液）を室温で加えた。混合液を１５時間撹拌し、ＡｃＯＥｔ（２５ｍＬ）で希釈し、水（２０ｍＬ×５）及び食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（２８０ｍｇ）をＦＣ（１５ｇ、５０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液及びＡｃＯＥｔ）で精製し、標題の化合物（６）（１６７ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ、７３％）を得た。
［α］３Ｄ＝＋１８．３ｃ０．４１、ＥｔＯＨ
ＵＶ λｍａｘ （ＥｔＯＨ）：２０７ｎｍ（ε１７７７８）、２６４ｎｍ（ε１５７６７）；
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：６．３６（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．１Ｈｚ）、６．２４（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１５．７、６．７Ｈｚ）、６．０７（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．３Ｈｚ）、５．６０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１５．５Ｈｚ）、５．３５（１Ｈ、ｍ）、５．３３（１Ｈ、ｓ）、５．００（１Ｈ、ｓ）、４．４４（１Ｈ、ｍ）、４．２３（１Ｈ、ｍ）３．１４（１Ｈ、ｓ）、２．８０（１Ｈ、ｍ）、２．６０（１Ｈ、ｍ）、２．４０〜１．４０（１５Ｈ、ｍ）、０．７７（３Ｈ、ｓ）、０．８０〜０．３６（４Ｈ、ｍ）；
ＭＳ ＨＲＥＳ Ｃ２８Ｈ３４Ｏ３Ｆ６の計算値 Ｍ＋Ｈ ５３３．２４８５、実測値 Ｍ＋Ｈ ５３３．２４８３
【実施例１６】
【０２７５】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペンタ−２Ｚ−エニル）−シクロプロピル−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オールの合成
【０２７６】
【化０６８】
2008514621.tif 000043
【０２７７】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペンタ−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（３００ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）、酢酸エチル（５ｍＬ）、ヘキサン（１２ｍＬ）、無水エタノール（０．５ｍＬ）、キノリン（３０μＬ）及びリンドラー触媒（７５ｍｇ、５％Ｐｄ担時のＣａＣＯ３）の混合液を、室温で２時間水素添加した。反応混合液をセライトパッドを通してろ過し、パッドをＡｃＯＥｔで洗浄した。溶媒を蒸発させ、標題の化合物（２５７ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ、８７％）を得た。
［α］２８Ｄ＝＋１．８ｃ０．６１、ＣＨＣｌ３
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：６．０８（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１２．３、６．７Ｈｚ）、５．４７（１Ｈ、ｍ）、５．３９（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１２．１Ｈｚ）、４．１５（１Ｈ、ｂｒ．ｓ）、３．２８（１Ｈ、ｓ）、２．５２〜１．３４（１２Ｈ、ｍ）、１．１６（３Ｈ、ｓ）、０．７８〜０．３６（４Ｈ、ｍ）；
１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１５６．６６（０）、１４１．７７（１）、１２６．５１（１）、１２２．７９（０、ｑ、Ｊ＝２８５Ｈｚ）、１１５．７７（１）、６９，５９（１）、５５．４１（１）、４７．２８（０）、３６．４４（２）、３５．９０（２）、３３．７５（２）、３０．２２（２）、２０．８９（０）、１９．４１（３）、１７．９４（２）、１２．０５（２）、１１．１１（２）；
ＭＳ ＨＲＥＳ Ｃ１９Ｈ２４Ｏ２Ｆ６の計算値 Ｍ＋Ｈ ３９９．１７５３、実測値 Ｍ＋Ｈ ３９９．１７５７
【実施例１７】
【０２７８】
（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンタ−２Ｚ−エニル）−シクロプロピル−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オンの合成
【０２７９】
【化０６９】
2008514621.tif 000044
【０２８０】
（３ａＲ，４Ｓ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペンタ−２Ｚ−エニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オール（６１７ｍｇ、１．５５ｍｍｏｌ）及びセライト（２．０ｇ）を室温でジクロロメタン（１０ｍＬ）中で撹拌した懸濁液に、二クロム酸ピリジニウム（１．１７ｇ、３．１ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を２．５時間攪拌し、シリカゲル（５ｇ）を通してろ過し、シリカゲルパッドを２０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液で洗浄した。ろ液と洗浄液を混合して蒸発させ、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペンテニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（６００ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ、９８％）の粗成生物を得た。（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−ヒドロキシ−４−トリフルオロメチル−ペンタ−２Ｅ−エニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（６００ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１５ｍＬ）を室温で撹拌し、トリメチルシリル−イミダゾール（１．７６ｍＬ、１２．０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を１．０時間撹拌し、シリカゲル（１０ｇ）を通してろ過し、シリカゲルパッドを１０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液で洗浄した。ろ液と洗浄液を混合し、蒸発させ、標題の化合物（６４０ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ、８８％）を得た。
［α］２８Ｄ＝−０．２ｃ０．５５、ＣＨＣｌ３
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：５．９７（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１２．２、６．２Ｈｚ）、５．４０（１Ｈ、ｍ）、５．３８（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１２．２Ｈｚ）、２．８２（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１０．７、６．６Ｈｚ）、２．６０〜１．７４（１０Ｈ、ｍ）、０．８９（３Ｈ、ｓ）、０．７５〜０．３６（４Ｈ、ｍ）、０．２１（９Ｈ、ｓ）；
１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：２１０．５６（０）、１５４．３０（０）、１３９．２８（１）、１２５．８１（１）、１２２．５２（０、ｑ、Ｊ＝２８９Ｈｚ）、１１８．１７（１）、６４．１１（１）、５３．６９（０）、４０．４３（２）、３５．５１（２）、３４．８５（２）、２６．９４（２）、２４．０７（２）、２０．８９（０）、１８．３９(３)、１２．２６（２）、１０．６１（２）、１．４３（３）；
ＭＳ ＨＲＥＳ Ｃ２２Ｈ３０Ｏ２Ｆ６Ｓｉの計算値 Ｍ＋Ｈ ４６９．１９９２、実測値 Ｍ＋Ｈ ４６９．１９９２
【実施例１８】
【０２８１】
１α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール（７）の合成
【０２８２】
【化０７０】
2008514621.tif 000045
【０２８３】
（１Ｒ，３Ｒ）−１，３−ビス−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−５−［２−（ジフェニルホスフィノイル）−エチリデン］−シクロヘキサン（５１４ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（６ｍＬ）を−７８℃で撹拌し、ｎ−ＢｕＬｉ（０．５７ｍＬ、０．９１ｍｍｏｌ）を加えた。混合液を１５分間撹拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンタ−２Ｚ−エニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（１９４ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（２ｍＬ）を滴下して加えた。反応混合液を−７２℃で３．０時間撹拌し、ヘキサン（３５ｍＬ）で希釈し、食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（７５０ｍｇ）をＦＣ（１５ｇ、１０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール及び１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロールの混合物（２３０ｍｇ）を得た。１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロール及び１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−１９−ノル−コレカルシフェロールの混合物（２３０ｍｇ）にフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、４ｍｍｏｌ、１ＭのＴＨＦ溶液）を室温で加えた。混合液を４０時間撹拌し、ＡｃＯＥｔ（２５ｍＬ）で希釈し、水（２０ｍＬ×５）及び食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（２６０ｍｇ）をＦＣ（１０ｇ、５０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液及びＡｃＯＥｔ）で精製し、標題の化合物（７）（１３２７ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ、６２％）を得た。
［α］２８Ｄ＝＋５３．６ｃ０．３３、ＥｔＯＨ
ＵＶ λｍａｘ（ＥｔＯＨ）：２４３ｎｍ（ε２６９８２）、２５１ｎｍ（ε３２０８１）、２６０ｎｍ（ε２１６８９）；
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：６．２９（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１０．７Ｈｚ）、６．０８（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１２．５、６．７Ｈｚ）、５．９３（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．１Ｈｚ）、５．４６（１Ｈ、ｍ）、５．４０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１２．７Ｈｚ）、４．１２（１Ｈ、ｍ）、４．０５（１Ｈ、ｍ）、３．１４（１Ｈ、ｓ）、２．８０〜１．４０（１９Ｈ、ｍ）、０．７７（３Ｈ、ｓ）、０．８０〜０．３６（４Ｈ、ｍ）；
ＭＳ ＨＲＥＳ Ｃ２７Ｈ３４Ｏ３Ｆ６の計算値 Ｍ＋Ｈ ５２１．２４８５、実測値 Ｍ＋Ｈ ５２１．２４８７
【実施例１９】
【０２８４】
１α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（８）の合成
【０２８５】
【化０７１】
2008514621.tif 000046
【０２８６】
（１Ｓ，５Ｒ）−１，５−ビス−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−３−［２−（ジフェニルホスフィノイル）−エタ−（Ｚ）−イリデン］−２−メチレン−シクロヘキサン（５２５ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（６ｍＬ）を−７８℃で撹拌し、ｎ−ＢｕＬｉ（０．５７ｍＬ、０．９１ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を１５分撹拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンタ−２Ｚ−エニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（２００ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（２ｍＬ）を滴下して加えた。反応混合液を−７２℃で２．５時間撹拌し、ヘキサン（３５ｍＬ）で希釈し、食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（６８０ｍｇ）をＦＣ（１５ｇ、１０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール及び１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロールの混合物（３１０ｍｇ）を得た。１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール及び１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロールの混合物（３１０ｍｇ）にフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、４ｍｍｏｌ、１ＭのＴＨＦ溶液）を室温で加えた。混合液を１５時間撹拌し、ＡｃＯＥｔ（２５ｍＬ）で希釈し、水（２０ｍＬ×５）及び食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（３７０ｍｇ）をＦＣ（１０ｇ、５０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液及びＡｃＯＥｔ）で精製し、標題の化合物（８）（１９５ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ、８５％）を得た。
［α］３０Ｄ＝＋９．４ｃ０．４９、ＥｔＯＨ
ＵＶ λｍａｘ（ＥｔＯＨ）：２６２ｎｍ（ε１１８４６）；
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：６．３６（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．１Ｈｚ）、６．０８（２Ｈ、ｍ）、５．４４（１Ｈ、ｍ）、５．４０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１２．３Ｈｚ）、５．３２（１Ｈ、ｓ）、５．００（１Ｈ、ｓ）、４．４３（１Ｈ、ｍ）、４．２３（１Ｈ、ｍ）、３．０８（１Ｈ、ｓ）、２．８０（１Ｈ、ｍ）、２．６０（１Ｈ、ｍ）、２．５５〜１．４０（１５Ｈ、ｍ）、０．７７（３Ｈ、ｓ）、０．８０〜０．３４（４Ｈ、ｍ）；
ＭＳ ＨＲＥＳ Ｃ２８Ｈ３４Ｏ３Ｆ６の計算値 Ｍ＋Ｈ ５３３．２４８５、実測値 Ｍ＋Ｈ ５３３．２５０２
【実施例２０】
【０２８７】
１α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール（９）の合成
【０２８８】
【化０７２】
2008514621.tif 000047
【０２８９】
（１Ｒ，３Ｒ）−１，３−ビス−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−５−［２−（ジフェニルホスフィノイル）−エチリデン］−シクロヘキサン（６９７ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（９ｍＬ）を−７８℃で撹拌し、ｎ−ＢｕＬｉ（０．７７ｍＬ、１．２３ｍｍｏｌ）を加えた。混合液を１５分間撹拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−メチル−トリメチルシラニルオキシ−ペンチル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（２２０ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（２ｍＬ）を滴下して加えた。反応混合液を−７２℃で３．５時間撹拌し、ヘキサン（３５ｍＬ）で希釈し、食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（９００ｍｇ）をＦＣ（１５ｇ、１０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール（４２１ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を得た。１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−１９−ノル−コレカルシフェロール（４２１ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）にフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、４ｍｍｏｌ、１ＭのＴＨＦ溶液）を室温で加えた。混合液を４０時間撹拌し、ＡｃＯＥｔ（２５ｍＬ）で希釈し、水（２０ｍＬ×５）及び食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（４５０ｍｇ）をＦＣ（１５ｇ、５０％のＡｃＯＥｔのヘキサン及びＡｃＯＥｔ溶液）で精製し、標題の化合物（９）（２２５ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ、８９％）を得た。
［α］２９Ｄ＝＋６９．５ｃ０．３７、ＥｔＯＨ
ＵＶ λｍａｘ（ＥｔＯＨ）：２４３ｎｍ（ε２７９６４）、２５１ｎｍ（ε３３０３９）、２６１ｎｍ（ε２２７０１）；
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：６．３０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．３Ｈｚ）、５．９３（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．３Ｈｚ）、５．３６（１Ｈ、ｍ）、４．１２（１Ｈ、ｍ）、４．０４（１Ｈ、ｍ）、２．７５（２Ｈ、ｍ）、２．５２〜１．０４（２２Ｈ、ｍ）、１．１８（６Ｈ、ｓ）、０．７９（３Ｈ、ｓ）、０．６５〜０．２６（４Ｈ、ｍ）；
１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１５７．１６（０）、１４２．３３（０）、１３１．２５（０）、１２４．７３（１）、１２３．７６（１）、１１５．５０（１）、７１．１０（０）、６７．３９（１）、６７．１９（１）、５９．４７（１）、５０．１２（０）、４４．６０（２）、４３．８４（２）、４２．１５（２）、３８．１２（２）、３７．１８（２）、３５．５７（２）、２９．２６（３）、２９．１１（２）、２９．０８（３）、２８．４８（２）、２３．４６（２）、２２．２６（２）、２１．２７（０）、１７．９４（３）、１２．７０（２）、１０．２７（２）；
ＭＳ ＨＲＥＳ Ｃ２７Ｈ４２Ｏ３の計算値 Ｍ＋Ｈ ４１５．３２０７、実測値 Ｍ＋Ｈ ４１５．３２０７
【実施例２１】
【０２９０】
１α，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール（１０）の合成
【０２９１】
【化０７３】
2008514621.tif 000048
【０２９２】
（１Ｓ，５Ｒ）−１，５−ビス−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−３−［２−（ジフェニルホスフィノイル）−エタ−（Ｚ）−イリデン］−２−メチレン−シクロヘキサン（６７５ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（８ｍＬ）を−７８℃で撹拌し、ｎ−ＢｕＬｉ（０．７３ｍＬ、１．１７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を１５分間撹拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−メチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンチル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（２１０ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（２ｍＬ）を滴下して加えた。反応混合液を−７２℃で３．５時間撹拌し、ヘキサン（３５ｍＬ）で希釈し、食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（８５０ｍｇ）をＦＣ（１５ｇ、１０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール（３８２ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を得た。１α，３β−ジ（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−コレカルシフェロール（３８２ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）にフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、４ｍｍｏｌ、１ＭのＴＨＦ溶液）を室温で加えた。混合液を１５時間撹拌し、ＡｃＯＥｔ（２５ｍＬ）で希釈し、水（２０ｍＬ×５）及び食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（３８０ｍｇ）をＦＣ（１５ｇ、５０％のＡｃＯＥｔのヘキサン及びＡｃＯＥｔ溶液）で精製し、標題の化合物（１０）（２０４ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ、８３％）を得た。
［α］２９Ｄ＝＋１６．１ｃ０．３６、ＥｔＯＨ
ＵＶ λｍａｘ（ＥｔＯＨ）：２０８ｎｍ（ε１７０２４）、２６４ｎｍ（ε１６０２８）；
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：６．３７（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．３Ｈｚ）、６．０９（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．１Ｈｚ）、５．３３（２Ｈ、ｍ）、５．０１（１Ｈ、ｓ）、４．４４（１Ｈ、ｍ）、４．２３（１Ｈ、ｍ）、２．８０（１Ｈ、ｍ）、２．６０（１Ｈ、ｍ）、２．３８〜１．０８（２０Ｈ、ｍ）、１．１９（６Ｈ、ｓ）、０．７９（３Ｈ、ｓ）、０．６６〜０．２４（４Ｈ、ｍ）；
１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１５７．０７（０）、１４７．６２（０）、１４２．４９（０）、１３３．００（０）、１２４．９０（１）、１２４．７３（１）、１１７．１９（１）、１１１．６４（２）、７１．１０（１）、７０．７０（０）、６６．８８（１）、５９．５３（１）、５０．２８（０）、４５．１９（２）、４３．８５（２）、４２．８６（２）、３８．１３（２）、３５．５９（２）、２９．２７（２）、２９．１４（３）、２８．６５（２）、２３．５７（２）、２２．６２（２）、２１．２９（０）、１７．８４（３）、１２．７４（２）、１０．３０（２）； 
ＭＳ ＨＲＥＳ Ｃ２８Ｈ４２Ｏ３の計算値 Ｍ＋Ｎａ ４４９．３０２６、実測値 Ｍ＋Ｎａ ４４９．３０２３
【実施例２２】
【０２９３】
１α-フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−コレカルシフェロール（１１）の合成
【０２９４】
【化０７４】
2008514621.tif 000049
【０２９５】
（１Ｓ，５Ｒ）−１−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−３−［２−（ジフェニルホスフィノイル）−エタ−（Ｚ）−イリデン］−５−フルオロ−２−メチレン−シクロヘキサン（３２０ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（６ｍＬ）を−７８℃で撹拌し、ｎ−ＢｕＬｉ（０．４３ｍＬ、０．６８ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を１５分間撹拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（４−メチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンタ−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（１２２ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（２ｍＬ）を滴下して加えた。反応混合液を−７２℃で３．５時間撹拌し、ヘキサン（２５ｍＬ）で希釈し、食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物をＦＣ（１５ｇ、５％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、１α−フルオロ−３β−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−コレカルシフェロール（１６２ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を得た。  １α−フルオロ−３β−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−コレカルシフェロール（１６２ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）にフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、４ｍｍｏｌ、１ＭのＴＨＦ溶液）を室温で加えた。混合液を１８時間撹拌し、ＡｃＯＥｔ（２５ｍＬ）で希釈し、水（２０ｍＬ×５）及び食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（１６０ｍｇ）をＦＣ（１０ｇ、３０％のＡｃＯＥｔのヘキサン及びＡｃＯＥｔ溶液）で精製し、標題の化合物（１０６ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ、７４％）を得た。
［α］３１Ｄ＝＋６０．６ｃ０．５１、ＭｅＯＨ；
ＵＶ λｍａｘ（ＭｅＯＨ）：２４２ｎｍ（ε１２２６５）、２６９ｎｍ（ε１２６１８）；
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：６．４０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．１Ｈｚ）、６．１０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．１Ｈｚ）、５．４５（１Ｈ、ｍ）、５．４０（１Ｈ、ｓ）、５．１５（１Ｈ、ｄｍ、Ｊ＝５０Ｈｚ）、５．１２（１Ｈ、ｓ）、４．２３（１Ｈ、ｍ）、２．８５〜１．５０（１７Ｈ、ｍ）、１．４７（６Ｈ、ｓ）、０．８１（３Ｈ、ｓ）、０．７２〜０．５０（４Ｈ、ｍ）；
ＭＳ ＨＲＥＳ Ｃ２８Ｈ３７ＦＯ２の計算値 Ｍ＋ ４２４．２７７８、実測値 Ｍ＋ ４２４．２７４５
【実施例２３】
【０２９６】
１α-フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（１２）の合成
【０２９７】
【化０７５】
2008514621.tif 000050
【０２９８】
（１Ｓ，５Ｒ）−１−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−３−［２−（ジフェニルホスフィノイル）−エタ−（Ｚ）−イリデン］−５−フルオロ−２−メチレン−シクロヘキサン（５６５ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（６ｍＬ）を−７８℃で撹拌し、ｎ−ＢｕＬｉ（０．７５ｍＬ、１．２ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を１５分間撹拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−ヒドロキシ−ペンタ−２−イニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（１５６ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（２．５ｍＬ）を滴下して加えた。反応混合液を−７２℃で３．５時間撹拌し、ヘキサン（２５ｍＬ）で希釈し、食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（６１０ｍｇ）をＦＣ（２０ｇ、１０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、１α−フルオロ−３β−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（２０６ｍｇ）を得た。１α−フルオロ−３β−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−イン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（２０６ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）にフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、４ｍｍｏｌ、１ＭのＴＨＦ溶液）を室温で加えた。混合液を１５時間撹拌し、ＡｃＯＥｔ（５０ｍＬ）で希釈し、水（５２０ｍＬ×４）及び食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（４１０ｍｇ）をＦＣ（２０ｇ、３０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、標題の化合物（１６３ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ、７８％）を得た。
［α］３０Ｄ＝＋３９．８ｃ０．４８、ＥｔＯＨ；
ＵＶ λｍａｘ（ＥｔＯＨ）：２４４ｎｍ（ε９５２１）；
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：６．３９（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．３Ｈｚ）、６．１０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．１Ｈｚ）、５．４８（１Ｈ、ｍ）、５．４０（１Ｈ、ｓ）、５．１５（１Ｈ、ｄｍ、Ｊ＝５２Ｈｚ）、５．１１（１Ｈ、ｓ）、４．２３（１Ｈ、ｍ）、３．５６（１Ｈ、ｍ）、２．８２〜１．５２（１６Ｈ、ｍ）、０．８０（３Ｈ、ｓ）、０．８０〜０．５０（４Ｈ、ｍ）；
ＭＳ ＨＲＥＳ Ｃ２８Ｈ３１Ｏ２Ｆ７の計算値 Ｍ＋Ｈ ５３３．２２８５、実測値 Ｍ＋Ｈ ５３３．２３００
【実施例２４】
【０２９９】
１α-フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（１３）の合成
【０３００】
【化０７６】
2008514621.tif 000051
【０３０１】
（１Ｓ，５Ｒ）−１−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−３−［２−（ジフェニルホスフィノイル）−エタ−（Ｚ）−イリデン］−５−フルオロ−２−メチレン−シクロヘキサン（４２４ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（６ｍＬ）を−７８℃で撹拌し、ｎ−ＢｕＬｉ（０．５７ｍＬ、０．９１ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を１５分撹拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンタ−２Ｅ−エニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（２００ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（２ｍＬ）を滴下して加えた。反応混合液を−７２℃で２．５時間撹拌し、ヘキサン（２５ｍＬ）で希釈し、食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（６６０ｍｇ）をＦＣ（１５ｇ、１０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、１α−フルオロ−３β−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール及び１α−フルオロ−３β−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（１９７ｍｇ）を得た。
１α−フルオロ−３β−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール及び１α−フルオロ−３β−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｅ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（１９７ｍｇ）にフッ化テトラブチルアンモニウム（４ｍＬ、４ｍｍｏｌ、１ＭのＴＨＦ溶液）を室温で加えた。混合液を１５時間撹拌し、ＡｃＯＥｔ（２５ｍＬ）で希釈し、水（２０ｍＬ×５）及び食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（１９０ｍｇ）をＦＣ（１０ｇ、３０％、５０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、標題の化合物（１４３ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ、６２％）を得た。
［α］３０Ｄ＝＋４７．４ｃ０．３８、ＥｔＯＨ；
ＵＶ λｍａｘ（ＥｔＯＨ）：２４３ｎｍ（ε９６９９）、２６５ｎｍ（ε９３１５）；
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：６．３９（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．３Ｈｚ）、６．２５（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１５．８、６．６Ｈｚ）、６．０９（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．３Ｈｚ）、５．６１（１Ｈ、ｄ、１５．６Ｈｚ）、５．４０（１Ｈ、ｓ）、５．３６（１Ｈ、ｍ）、５．１５（１Ｈ、ｄｍ、Ｊ＝５２Ｈｚ）、５．１１（１Ｈ、ｓ）、４．２３（１Ｈ、ｍ）、３．１８（１Ｈ、ｓ）、２．８０（１Ｈ、ｍ）、２．６３（１Ｈ、ｍ）、２．４０〜１．４６（１４Ｈ、ｍ）、０．７８（３Ｈ、ｓ）、０．７６〜０．３６（４Ｈ、ｍ）；
ＭＳ ＨＲＥＳ Ｃ２８Ｈ３３Ｏ２Ｆ７の計算値 Ｍ＋Ｈ ５３５．２４４２、実測値 Ｍ＋Ｈ ５３５．２４５０
【実施例２５】
【０３０２】
１α-フルオロ−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（１４）の合成
【０３０３】
【化０７７】
2008514621.tif 000052
【０３０４】
（１Ｓ，５Ｒ）−１−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチル）シラニルオキシ）−３−［２−（ジフェニルホスフィノイル）−エタ−（Ｚ）−イリデン］−５−フルオロ−２−メチレン−シクロヘキサン（４２４ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（６ｍＬ）を−７８℃で撹拌し、ｎ−ＢｕＬｉ（０．５７ｍＬ、０．９１ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を１５分間撹拌し、（３ａＲ，７ａＲ）−７ａ−メチル−１−［１−（５，５，５−トリフルオロ−４−トリフルオロメチル−４−トリメチルシラニルオキシ−ペンタ−２Ｚ−エニル）−シクロプロピル］−３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−オン（１００ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（２ｍＬ）を滴下して加えた。反応混合液を−７２℃で４．５時間撹拌し、ヘキサン（２５ｍＬ）で希釈し、食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（５９０ｍｇ）をＦＣ（１５ｇ、１０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、１α−フルオロ−３β−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール及び１α−フルオロ−３β−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（８５ｍｇ）を得た。
１α−フルオロ−３β−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ−２５−トリメチルシラニルオキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール及び１α−フルオロ−３β−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ−２５−ヒドロキシ−１６−エン−２０−シクロプロピル−２３，２４−Ｚ−エン−２６，２７−ヘキサフルオロ−コレカルシフェロール（８５ｍｇ）にフッ化テトラブチルアンモニウム（２ｍＬ、２ｍｍｏｌ、１ＭのＴＨＦ溶液）を室温で加えた。混合液を１５時間撹拌し、ＡｃＯＥｔ（２５ｍＬ）で希釈し、水（２０ｍＬ×５）及び食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を蒸発させた残留物（１１０ｍｇ）をＦＣ（１０ｇ、３０％、５０％のＡｃＯＥｔのヘキサン溶液）で精製し、標題の化合物（６２ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ、４６％）を得た。
［α］３０Ｄ＝＋２６．５ｃ０．３７、ＥｔＯＨ；
ＵＶ λｍａｘ（ＥｔＯＨ）：２４３ｎｍ（ε１０７０６）、２６６ｎｍ（ε１００９８）；
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：６．３９（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．３Ｈｚ）、６．０９（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１１．８Ｈｚ）、６．０８（１Ｈ、ｄｔ、Ｊ＝１２．１、６．９Ｈｚ）、５．４４（１Ｈ、ｍ）、５．４０（１Ｈ、ｄ、１２．１Ｈｚ）、５．３９（１Ｈ、ｓ）、５．１４（１Ｈ、ｄｍ、Ｊ＝５０Ｈｚ）、５．１０（１Ｈ、ｓ）、４．２３（１Ｈ、ｍ）、３．０８（１Ｈ、ｓ）、２．７９（１Ｈ、ｍ）、２．６２（１Ｈ、ｍ）、２．６０〜１．５０（１４Ｈ、ｍ）、０．７７（３Ｈ、ｓ）、０．８０〜０．３４（４Ｈ、ｍ）；
ＭＳ ＨＲＥＳ Ｃ２８Ｈ３３Ｏ２Ｆ７の計算値 Ｍ＋Ｈ ５３５．２４４２、実測値 Ｍ＋Ｈ ５３５．２４５３
（生物学的実施例）
【実施例２６】
【０３０５】
最大耐性量（ＭＴＤ）の決定
本発明のビタミンＤ3化合物の最大耐性量は、８週令雌性Ｃ５７ＢＬ／６マウス（３マウス／群）に、種々の濃度のビタミンＤ3類似体を、４日間、毎日経口投与（０．１ｍｌ／マウス）して決定した。類似体は、０．１ｍｌ／マウス／日を、経口投与するとき、最終濃度が０．０１、０．０３、０．１、０．３、１、３、１０、３０、１００及び３００μｇ／ｋｇになるようにミグリオール（Miglyol）で製剤化した。血清カルシウムアッセイ用の血液は、試験の最終日である第５日目に尾部採血により採取した。血清カルシウムレベルは、比色法（Sigma Diagnostics、試験手順Ｎｏ．５９７）にて決定した。高カルシウム血性（血清カルシウム＞１０．７mg/dl）を誘導しないで耐えた類似体の最高投与量を最大耐性量（ＭＴＤ）とした。表３に化合物（１）〜（１４）についての相対ＭＴＤを示す。
【実施例２７】
【０３０６】
化合物（１）〜（１４）の免疫学的アッセイ
未成熟樹枝状細胞（ＤＣ）を「Romani, N. et al. J. Immunol. Meth. 196:137」の記載に従って調製した。リンパ球混合培養反応（ＭＬＲ）における同種Ｔ細胞活性化によるＩＦＮ−γ産生を「Penna, G., et al., J. Immunol., 164:2405-2411(2000)」の記載に従って決定した。
簡潔には、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）をフィコール勾配（Ficoll gradient）によりバフィーコート（buffy coats）から分離し、２種の異なったドナーからの同種ＰＢＭＣを同数（３×１０5個）９６ウエル平底プレートで共培養した。培養の各々に、ビタミンＤ３化合物を加えた。５日後に、ＭＬＲアッセイにおけるＩＦＮ−γ産生を、ＥＬＩＳＡで測定し、結果を、ＩＦＮ−γ産生の５０％阻害を誘導するのに必要なテスト化合物の量（ｎＭ）として表した（ＩＣ５０値）。表３に結果をまとめた。
【０３０７】
【表３】
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【実施例２８】
【０３０８】
膀胱癌細胞株を使用する増殖アッセイ
膀胱癌細胞株（Ｔ２４、ＲＴ１１２、ＨＴ１３７６及びＲＴ４は、ヒト膀胱癌細胞株であり；ＮＨＥＫは、正常ヒト角化細胞である）は、ヨーロッパ細胞培養コレクション（European Collction of Cell Culture）（Salisbry, UK）から入手した。細胞３×１０３／ウエルを、ＤＭＥＭ培地（５％の胎仔クローンＩ、５０μｇ／ｌのゲンタマイシン、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム及び１％の非必須アミノ酸を含有する）１００μｌの平底９６−ウエルプレートに播種した。３７℃にて２４時間、５％のＣＯ２で培養して細胞をプレートに接着させ、ＶＤＲリガンド（化合物（１）〜（１４））を、１００μＭから０．３μＭの濃度範囲で、上記の完全培地の１００μｌに加えた。更に、７２時間培養を続けた後、細胞増殖を、蛍光をベースにした増殖アッセイキット（ＣｙＱｕａｎｔ細胞増殖アッセイキット、（Molecular Probes, Eugene, OR, USA））を使用して測定した。滴定データの回帰曲線から、ＩＣ５０値を計算した。結果を表４に示す。
【０３０９】
【表４】
2008514621.tif 000054
【実施例２９】
【０３１０】
膀胱細胞の成長及び機能性におけるカルシトリオール及びビタミンＤ３類似体
本発明者らは、カルシトリオール及びビタミンＤ３類似体が膀胱細胞の成長及び機能性に効果を有することを見出したが、これはヒト膀胱間質細胞のインビトロモデルで実証された。本発明者らは、前に文献で報告したように、これらの細胞でのビタミンＤ受容体（ＶＤＲｓ）の存在を確認した（図１を参照されたい）。
これらのモデルにおいて、カルシトリオール（ビタミンＤ３の活性化タイプ）及び他のビタミンＤ３類似体（化合物（４）、（６）、（８）及び（１０））は、膀胱細胞の基礎増殖を阻害するのに効果があることが示された（図２）。この活性は、以前に報告されたことがないが、カルシトリオール（１，２５−ジヒドロキシコレカルシフェロール）の９．８±７×１０−１５での用量依存性（基礎細胞において）がある。
【０３１１】
同様の検討を、多くのその他のビタミンＤ化合物で実施し、その結果（ＬｏｇＩＣ５０として表示）を以下の表に示す。表中のデータは、ヒト膀胱細胞の基礎増殖での化合物の阻害効果を示す（この細胞はテストステロンで活性化されいないか又は活性化されている）。ラットにおける最大耐性用量（ＭＴＤ）もまた、各々の化合物に対して記載した。
【０３１２】
【表５】
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【実施例３０】
【０３１３】
マウス傍糸球体細胞株Ａｓ４．１．におけるレニンｍＲＮＡ阻害
Ａｓ４．１細胞（８０％のサブ集密的）を、本発明の化合物の１０−８、１０−９及び１０−１０Ｍを有する完全培地で２４時間処理した。全ＲＮＡは、ＲＮｅａｓｙミニキット（Qiagen）を用いて抽出（ＤＮａｓｅＩ（Qiagen）で処理）し、そしてランダムイグザマー（Random Examers）で逆転写試薬（Applied Biosystems）を製造者の指示書に従って、逆転写のために使用した。リアルタイムＰＣＲ分析を、市販のβアクチンＶＩＣ結合のプローブ（cat. n. 4352341E, Applied Biosystems）及び特注のｍＲＥＮＩＮ  ＦＡＭ結合のプローブ（Assay by Design, Applied Biosystems；フォーワードプライマー（Forward）：ＡＧＧＣＣＴＴＣＣＴＴＧＡＣＣＡＡＴＣＴＴＡＣ；リバースプライマー（Reverse）：ＧＣＴＧＡＡＣＣＣＧＴＧＴＣＡＡＡＧＡＴＧ；プローブ：ＦＡＭ−ＡＣＣＡＡＣＴＡＣＣＴＧＡＡＴＡＣＣＧＡＧＴ−ＭＧＢ）を用いて多重的に実施した。反応は、１２．５μｌ２×マスター混合液（Applied Biosystems）、１０ｎｇ／（反応・ウェル）のｃＤＮＡ及び２．５μＭの各々の遺伝子特定プライマーを、含んでいる２５μＬ中で実施した。ＡＢＩ ＰＲＩＳＭ７７００分析計（Applied Biosystems）を用いて、５０℃にて２分間及び９５℃にて１０分間、続いて９５℃にて１５秒間及び６０℃にて１分間を４０サイクル実施した。サイクル閾（Ｃｔ）値は、分析のためにエクセルのワークシートに転送した。テストｃＤＮＡ結果は、マウスβアクチンのキーピング遺伝子に対して標準化した。サブトラクションの集団と非サブトラクション集団の間の遺伝子発現の差異を２−△△Ｃｔの方法を用いて表す（表６）。
【０３１４】
【表６】
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【実施例３１】
【０３１５】
コンピュータ内でのプロファイリング
化合物を、それらの２次元構造をベースに薬効に関する多くの物理化学的及び化学構造的特性を計算して評価した。ＡＣＤ／ラボソフトウェア（v.7.0, Advanced Chemistry Development Inc., Toronto, Canada）を使用した。計算された物理化学的特性には、対数目盛でのオクタノール／水の分配係数（ＡＣＤｌｏｇＰ）、対数目盛のｐＨ７．４でのオクタノール／水の分配係数（ｌｏｇＤ７．４）及び対数変換されたｐＨ７．４でのモル溶解度（ｌｏｇＳ７．４）を包含する。計算された化学構造的特性には、分子量（ＭＷ）、モル容量（ｃｍ３として示す）、モル屈折度（ｃｍ３として示す）、水素結合ドナー及びアクセプターの数（つまり、ＨＤｏｎｏｒｓ及びＨＡｃｅｐｔｏｒｓ）、自由回転結合の数（ＦＲＢ）、リピンスキ則に反する数及び極性表面積（ＰＳＡ、Åとして示す）を包含する。結果は、表７に示す。
【０３１６】
選択した化合物の潜在的な腸での吸収度を評価するために、マウス、ラット及びヒトの腸での最大吸収用量を、修正した独自の式（Johnson 1996, hilgers 2003）：ＭＡＤ（ｍｇ）＝Ｓ・Ｐｅ・（Ａ／ＩＬＶ）・ＳＩＶ・ＳＩＴＴ（式Ｉ）を用いて計算した。式中、Ｓは、ｐＨ７．４で測定した溶解度（ｍｇ／ｍｌ）、Ｐｅは、人工膜での透過性（ＰＡＭＰＡ）又はＣａｃｏ−２細胞の基底外側方向の先端での透過性（ｃｍ／秒）、Ａは、腸の表面積（ｃｍ２）、ＩＬＶは、腸の内腔容積（ｃｍ３）、ＳＩＶは、小腸の容積（ｃｍ３）、そしてＳＩＴＴは、小腸の通過時間（秒）である。結果は、表８に示す。
【０３１７】
【表７】
2008514621.tif 000057
【０３１８】
【表８】
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【実施例３２】
【０３１９】
インビトロ・プロファイリング
次のインビトロテストは、化合物を特定化するために適用した。
ｐＨ７での溶解度
９６ウェルプレート形式のアッセイを使用した。化合物の保存溶液を、ｐＨ値７の緩衝液で１０μＭの濃度に希釈した。溶液を０．２２μｍのメッシュを通してろ過し、ろ液での化合物濃度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳを用いて１及び１０μＭ標準液と比較して測定した。測定値は、ｍＭとして示す。
【０３２０】
代謝安定性（ｈＣＹＰ３４Ａ４）
基質の相対的安定性を、ＣＹＰ３Ａ４発現のヒトｃＤＮＡミクロソーム調製液（Gentest, 6pmol）での培養後に保持されている基質の量を、活性のシトクロームＰ４５０を全く含んでいない対照のミクロソーム培養に対して、測定することにより決定する。アッセイは、９６ウェルプレート形式で実施した。各々の化合物は、２μＭの濃度で３７℃にて６０分間培養した。ＬＣ−ＭＳ／ＭＳを用いて、培養後の化合物を測定した。結果は、残存％として示した。
【０３２１】
受動拡散による浸透性（ＰＡＭＰＡ）
実験は、ｎ−ドデカン人工膜中の１５％大豆レクチンを用いて、９６ウェル・ドナー及びアクセプタープレートで実施した。アクセプタープレート（９６ウェル疎水性フィルタープレート（MAIP N45, Millipore）に、フィルターの上部に４μＬの人工膜物を加えて調製し、そしてプレートにＨＢＳＳのＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．４）２００μＬを満たした。ドナープレート（ｐ−ＩＯＮ（ＭＡ）からのギザギザの９６ウェルプレート）に、１０μＬのテスト化合物を含むＨＢＳＳのＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．４）２００μＬを満たした。アクセプタープレートを、「サンドイッチ」の形にドナープレートの上に置き、３７℃にて４時間培養した。培養の後、アクセプター、ドナー及び初期のドナー溶液（参考として）をＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより分析した。データは、膜でのｃｍ×１０−６／秒での相互的なＰｅｆｆ及び保持％を報告した。
【０３２２】
Ｃａｃｏ−２細胞での見掛け浸透性
ヒト大腸腺癌（Ｃａｃｏ−２）細胞を「American Culture Collection (Rockville, MD)」より得た。浸透性の検討は、Ｃａｃｏ−２単層上の、先端から基底外側（Ａ→Ｂ）及び基底外側から先端（Ｂ→Ａ）の両方向での浸透で、２４ウェル形式で実施した。１０μＭのテスト化合物を含む未使用のドナー溶液を、先端側又は基底外側のどちらかに加えて、反対側には薬物のない培地を加えた。２４トランスウェルを、３７℃にてプレートシェーカーに置き、２時間後、受け手側及びドナー側の室から緩衝液を集めて、アリコートをＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより分析した。データは、膜における相対的なＰｅｆｆ（ｃｍ×１０−６／秒）及び保持率（％）を報告するものである。結果は、表９に示す。
【０３２３】
【表９】
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【実施例３３】
【０３２４】
ソフトゼラチンカプセル製剤Ｉ
項目    成分                                            ｍｇ／カプセル
１．  化合物（１）                                    １０．００１〜０．０２
２．  ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）              ０．０１６
３．  ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）            ０．０１６
４．  Ｍｉｇｌｙｏｌ  ８１２ｑｓ．                  １６０．０
製造手順：
１．ＢＨＴ及びＢＨＡを、「Miglyol 812」に懸濁し、撹拌しつつ溶解するまで約５０℃に暖める。
２．１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２０−シクロピル−コレカルシフェロールを、ステップ１の溶液に５０℃で溶解する。
３．ステップ２の溶液を、室温に冷却する。
４．ステップ３の溶液を、ソフトゼラチンカプセルに充填する。
注：全ての製造ステップは窒素雰囲気下で実施し、光から保護すること。
【実施例３４】
【０３２５】
ソフトゼラチンカプセル製剤ＩＩ
項目  成分                                             ｍｇ／カプセル
１．  化合物（１）                                   １０．００１〜０．０２
２．  ジ−α−トコフェロール                           ０．０１６
３．  Ｍｉｇｌｙｏｌ  ８１２ｑｓ．                 １６０．０
【０３２６】
製造手順：
１． ジ−α−トコフェロールを「Miglyol 812」に懸濁し、撹拌しつつ溶解するまで約５０℃に暖める。
２．１，２５−ジヒドロキシ−１６−エン−２３−イン−２０−シクロピル−コレカルシフェロールを、ステップ１の溶液に５０℃で溶解する。
３．ステップ２の溶液を、室温に冷却する。
４．ステップ３の溶液を、ソフトゼラチンカプセルに充填する。
【０３２７】
文献の取り込み
本出願を通して引用した全ての文献（参考文献、発行された特許、公開された特許出願、及び継続中の特許出願を含む）の内容は、参照することにより、その全てが本明細書の一部として明白に取り込まれている。
【０３２８】
均等物
当業者であれば、本明細書に記載された発明の特異的な態様の多くの均等物を、通常の実験によって認識するであろうし、確認することができるであろう。そのような均等物は、前記の特許許請求の範囲に含まれるものである。
【図面の簡単な説明】
【０３２９】
本発明は、以上の実施例に制限されるものではなく、以下の図を参照して更に説明するものであり、ここで：
【図１】図１は、膀胱細胞でのビタミンＤ受容体（ＶＤＲｓ）の存在を示し；
【図２】図２は、膀胱細胞の基礎増殖の阻害に効果を発揮するカルシトリオール（ビタミンＤ３の活性タイプ）を示し；
【図３】図３は、Ａｓ４．１細胞でのレニン阻害を示す；及び
【図４】図４は、Ａｓ４．１細胞でのレニン阻害の用量応答を示す。
【図１】
2008514621.tif 000089
【図２】
2008514621.tif 000090
【図３】
2008514621.tif 000091
【図４】
2008514621.tif 000092
【国際調査報告】
2008514621.tif 000093