(57)【要約】  本発明は、新規クラスの化合物、このような化合物を含む医薬組成物および異常なまたは脱制御されたキナーゼ活性と関連する疾患または障害、特にＡｂｌ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ＦＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲβ、Ｆｌｔ３およびｂ−Ｒａｆキナーゼの異常な活性化が関与する疾患または障害の処置または予防におけるこのような化合物の使用法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2008528585.tif 000030
［式中：
ｎは０、１、２、３および４から選択され；
Ｒ１は水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ５−１０ヘテロアリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ３−１２シクロアルキル−Ｃ０−４アルキル、Ｃ３−８ヘテロシクロアルキル−Ｃ０−４アルキルおよび−ＸＮＲ７Ｒ８から選択され；
ここで、Ｒ１の任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは所望によりハロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキルチオ、−ＸＮＲ７Ｒ８、−ＸＮＲ７ＸＮＲ７Ｒ８、−ＸＮＲ７Ｒ９、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ５−１０ヘテロアリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ３−１２シクロアルキル−Ｃ０−４アルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキル−Ｃ０−４アルキルから独立して選択される１から３個の基で置換されていてもよく；ここでＲ１の任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキル置換基は所望によりハロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシおよびハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシから独立して選択される１から３個の基により置換されていてもよく；そしてＲ１の任意のアルキルはＯで置換されたメチレンを有してよく；
ここで各Ｘは結合およびＣ１−６アルキレンから独立して選択され；Ｒ７およびＲ８は水素およびＣ１−６アルキルから独立して選択され；ここでＲ７およびＲ８の任意のメチレンはＯで置換されていてよく；ここでＲ９はＣ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ５−１０ヘテロアリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ３−１２シクロアルキル−Ｃ０−４アルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキル−Ｃ０−４アルキルから選択され；
Ｒ２は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ３は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ４はハロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオおよびハロ−置換−Ｃ１−６アルキルチオから選択され；
Ｒ１５は−ＮＲ５Ｙ（Ｏ）Ｒ６および−Ｙ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６から選択され；ここで
ＹはＣ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、ＰおよびＰ（Ｏ）から選択され；
Ｒ５は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；そして
Ｒ６はＣ６−１０アリール、Ｃ５−１０ヘテロアリール、Ｃ３−１２シクロアルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルから選択され；ここでＲ６の該アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは所望によりハロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ５−１０ヘテロアリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ３−１２シクロアルキル−Ｃ０−４アルキル、Ｃ３−８ヘテロシクロアルキル−Ｃ０−４アルコキシおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキル−Ｃ０−４アルキルから独立して選択される１から３個の置換基で置換されていてもよく；Ｒ６のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキル置換基は所望によりさらにヒドロキシ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシおよびハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシから独立して選択される１から３個の基により置換されていてもよい］
の化合物ならびにその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、異性体およびプロドラッグ。
【請求項２】
式Ｉａ：
【化２】
2008528585.tif 000031
［式中：
ｍは０および１から選択され；
Ｒ１は水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ５−１０ヘテロアリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ３−１２シクロアルキル−Ｃ０−４アルキル、Ｃ３−８ヘテロシクロアルキル−Ｃ０−４アルキルおよび−ＸＮＲ７Ｒ８から選択され；
ここでＲ１の任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは所望によりＣ１−６アルキル、−ＸＮＲ７Ｒ８、−ＸＮＲ７ＸＮＲ７Ｒ８、−ＸＮＲ７Ｒ９、Ｃ５−１０ヘテロアリール−Ｃ０−４アルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキル−Ｃ０−４アルキルから独立して選択される１から３個の基で置換されていてもよく；ここでＲ１の任意のヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキル置換基は所望によりＣ１−６アルキルおよびヒドロキシ−置換−Ｃ１−６アルキルから独立して選択される１から３個の基により置換されていてもよく；そしてＲ１の任意のアルキルはＯで置換されたメチレンを有してよく；
ここで各Ｘは結合およびＣ１−６アルキレンから独立して選択され；Ｒ７およびＲ８は水素およびＣ１−６アルキルから独立して選択され；ここでＲ７およびＲ８の任意のメチレンはＯで置換されていてよく；ここでＲ９はＣ３−１２シクロアルキル−Ｃ０−４アルキルであり；
Ｒ２は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ３は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ４はハロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシおよびハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシから選択され；
Ｌは−ＮＲ５Ｃ（Ｏ）−および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ５−から選択され；
Ｒ５は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；そして
Ｒ１０はハロ−置換−Ｃ１−６アルキルであり；そして
Ｒ１１は水素、ハロ、Ｃ５−１０ヘテロアリールおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルから選択され；ここでＲ１０のヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキル置換基は所望によりヒドロキシおよびＣ１−６アルキルから独立して選択される１から３個の基により置換されていてもよい］
の請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が水素、メチル、イソプロピル、イミダゾリル−プロピル、ピペラジニル−プロピル、ピリジニル、ジエチル−アミノ−プロピル、ヒドロキシ−エチル、ピリミジニル、モルホリノ−プロピル、フェニル、シクロプロピル、モルホリノ−エチル、ベンジルおよびモルホリノから選択され；ここでＲ１の任意のピリジニル、イミダゾリル、ピペラジニルまたはピリミジニルは所望によりメチル、メチル−アミノ、ジメチル−アミノ−メチル、シクロプロピル−アミノ、ヒドロキシ−エチル−アミノ、ジエチル−アミノ−プロピル−アミノ、ピロリジニル−メチル、モルホリノ、モルホリノ−メチル、ピペラジニルメチルおよびピペラジニルから独立して選択される１から３個の基で置換されていてもよく；ここでＲ１の任意のモルホリノおよびピペラジニル置換基は所望によりさらにメチル、ヒドロキシ−エチルおよびエチルから選択される基により置換されていてもよく；Ｒ２、Ｒ３およびＲ５がそれぞれ水素であり；そしてＲ４がメチルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
ｍが０および１から選択され；Ｒ１０がトリフルオロメチルであり；そしてＲ１１がハロ；モルホリノ−メチル；所望によりメチル、エチルまたはヒドロキシエチルで置換されていてもよいピペラジニル；所望によりメチルまたはエチルで置換されていてもよいピペラジニル−メチル；所望によりメチルで置換されていてもよいイミダゾリル；ピロリジニル−メトキシ；および所望によりヒドロキシで置換されていてもよいピペリジニルから選択される、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
２−（３−ジエチルアミノプロピルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−｛６−［４−（２−ヒドロキシエチル）−ピペラジン−１−イル］−２−メチルピリミジン−４−イルアミノ｝−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチルベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−｛６−［４−（２−ヒドロキシ−エチル）−ピペラジン−１−イル］−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ｝−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−（３−モルホリン−４−イル−プロピルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−（３−ジエチルアミノ−プロピルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−フェニルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−（３−ジエチルアミノ−プロピルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−（３−モルホリン−４−イル−プロピルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−［６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−（６−シクロプロピルアミノ−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−［６−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−［６−（３−ジエチルアミノ−プロピルアミノ）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−（２−メチル−６−モルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（２−モルホリン−４−イル−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−ベンジルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（２−モルホリン−４−イル−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−［６−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（６−シクロプロピルアミノ−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（２−メチル−６−モルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−［６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−［６−（３−ジエチルアミノ−プロピルアミノ）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（２−メチル−６−メチルアミノ−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−［６−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−（６−シクロプロピルアミノ−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−（２−メチル−６−モルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−［６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−［６−（３−ジエチルアミノ−プロピルアミノ）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イルメチル）−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−メチルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イルメチル）−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−アミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イルメチル）−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イルメチル）−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（４−モルホリン−４−イルメチル−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（４−ピペラジン−１−イルメチル−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル］−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル］−フェニル｝−アミド；２−メチルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル］−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（４−ピペラジン−１−イルメチル−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−メチルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（４−ピペラジン−１−イルメチル−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（４−モルホリン−４−イルメチル−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−メチルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（４−モルホリン−４−イルメチル−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸（５−｛［１−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−フェニル）−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−メチルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル］−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル］−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イルメチル）−３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−
５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸（５−｛３−［４−（２−ヒドロキシ−エチル）−ピペラジン−１−イル］−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ｝−２−メチル−フェニル）−アミド；２−（２−モルホリン−４−イル−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［（５−ｔｅｒｔ−ブチル−チオフェン−２−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［（５−ｔｅｒｔ−ブチル−チオフェン−２−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［（５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−｛５−［４−（２−ヒドロキシ−エチル）−ピペラジン−１−イル］−ピリジン−２−イルアミノ｝−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸（５−｛３−［４−（２−ヒドロキシ−エチル）−ピペラジン−１−イル］−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ｝−２−メチル−フェニル）−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−（ピリジン−３−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−（３−イミダゾール−１−イル−プロピルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−（２−モルホリン−４−イル−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［（５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［５−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−２−メチル−フェニル］−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［（１−ｔｅｒｔ−ブチル−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（ピロリジン−２−イルメトキシ）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−（６−メチル−ピリジン−３−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−（２−モルホリン−４−イル−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−イソプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−プロピルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（４−ピペラジン−１−イルメチル−３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イルメチル）−３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（４−モルホリン−４−イルメチル−３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−｛６−［４−（２−ヒドロキシ−エチル）−ピペラジン−１−イル］−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ｝−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−［６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−｛６−［４−（２−ヒドロキシ−エチル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−４−イルアミノ｝−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−［２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；および２−｛４−［４−（２−ヒドロキシ−エチル）−ピペラジン−１−イル］−ピリジン−２−イルアミノ｝−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミドから選択される請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
治療有効量の請求項１に記載の化合物と一緒に薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項７】
キナーゼ活性の阻害が疾患の病状および／または総体症状を予防、阻害または改善することができる動物の疾患を処置する方法であって、該動物に治療有効量の請求項１に記載の化合物を投与することを含む方法。
【請求項８】
キナーゼがＡｂｌ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ＦＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲβおよびｂ−Ｒａｆからなる群から選択される、請求項８に記載の方法。
【請求項９】
Ａｂｌ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ＦＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲβおよびｂ−Ｒａｆのキナーゼ活性が疾患の病状および／または総体症状に関与する動物の疾患を処置するための薬剤の製造のための請求項１に記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願との相互関連
本出願は２００５年１月２５日に出願された米国仮特許出願番号６０／６４７，６０６の優先権を主張する。この出願のすべての開示はその全体として、かつすべての目的に関して出典明示により本明細書の一部とする。
【０００２】
技術分野
本発明は、新規クラスの化合物、このような化合物を含む医薬組成物および異常なまたは脱制御されたキナーゼ活性と関連する疾患または障害、特にＡｂｌ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ＦＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲβ、Ｆｌｔ３およびｂ−Ｒａｆキナーゼの異常な活性化が関与する疾患または障害の処置または予防におけるこのような化合物の使用法を提供する。
【背景技術】
【０００３】
背景技術
タンパク質キナーゼは、広範囲の細胞過程の制御ならびに細胞機能の制御の維持に中心的役割を有する、タンパク質の大きなファミリーを代表する。これらのキナーゼの部分的、非限定的リストは下記を含む：受容体チロシンキナーゼ、例えば血小板由来増殖因子受容体キナーゼ（ＰＤＧＦ−Ｒ）、ｃ−ｅｒｂＢ２キナーゼ（ＨＥＲ−２）、ＶＥＧＦ−受容体キナーゼ（例えばＫＤＲ、Ｆｌｔ−１およびＦｌｔ−４）、ＴＧＦβ、上皮細胞増殖因子受容体（ＥＧＦ−Ｒ）、血小板由来増殖因子受容体キナーゼ（ＰＤＧＦ−Ｒ）および繊維芽細胞増殖因子受容体、ＦＧＦＲ３；非受容体チロシンキナーゼ、例えばＡｂｌおよび融合キナーゼＢＣＲ−Ａｂｌ；ならびにセリン／スレオニンキナーゼ、例えばｂ−ＲＡＦ、ＳＧＫ、ＭＡＰキナーゼ（例えば、ＭＫＫ４、ＭＫＫ６、など）ならびにＳＡＰＫ２αおよびＳＡＰＫ２β。異常なキナーゼ活性が良性および悪性増殖性障害ならびに免疫系および神経系の不適切な活性化に由来する疾患を含む、多くの疾患状態で観察されている。
【０００４】
本発明の新規化合物は、１種またはそれ以上のタンパク質キナーゼを阻害し、故に、キナーゼ−関連疾患の処置に有用であると期待される。
【発明の開示】
【０００５】
発明の概要
第１の局面において、本発明は、式Ｉ：
【化１】
2008528585.tif 000002
［式中：
ｎは０、１、２、３および４から選択され；
Ｒ１は水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ５−１０ヘテロアリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ３−１２シクロアルキル−Ｃ０−４アルキル、Ｃ３−８ヘテロシクロアルキル−Ｃ０−４アルキルおよび−ＸＮＲ７Ｒ８から選択され；
ここで、Ｒ１の任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは所望によりハロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキルチオ、−ＸＮＲ７Ｒ８、−ＸＮＲ７ＸＮＲ７Ｒ８、−ＸＮＲ７Ｒ９、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ５−１０ヘテロアリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ３−１２シクロアルキル−Ｃ０−４アルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキル−Ｃ０−４アルキルから独立して選択される１から３個の基で置換されていてもよく；ここでＲ１の任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキル置換基は所望によりハロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシおよびハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシから独立して選択される１から３個の基により置換されていてもよく；そしてＲ１の任意のアルキルはＯで置換されたメチレンを有してよく；
ここで各Ｘは結合およびＣ１−６アルキレンから独立して選択され；Ｒ７およびＲ８は水素およびＣ１−６アルキルから独立して選択され；ここでＲ７およびＲ８の任意のメチレンはＯで置換されていてよく；ここでＲ９はＣ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ５−１０ヘテロアリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ３−１２シクロアルキル−Ｃ０−４アルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキル−Ｃ０−４アルキルから選択され；
Ｒ２は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ３は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ４はハロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオおよびハロ−置換−Ｃ１−６アルキルチオから選択され；
Ｒ１５は−ＮＲ５Ｙ（Ｏ）Ｒ６および−Ｙ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６から選択され；ここで
ＹはＣ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、ＰおよびＰ（Ｏ）から選択され；
Ｒ５は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；そして
Ｒ６はＣ６−１０アリール、Ｃ５−１０ヘテロアリール、Ｃ３−１２シクロアルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルから選択され；ここでＲ６の該アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは所望によりハロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオ、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ５−１０ヘテロアリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ３−１２シクロアルキル−Ｃ０−４アルキル、Ｃ３−８ヘテロシクロアルキル−Ｃ０−４アルコキシおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキル−Ｃ０−４アルキルから独立して選択される１から３個の置換基で置換されていてもよく；Ｒ６のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキル置換基は所望によりさらにヒドロキシ、ハロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシおよびハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシから独立して選択される１から３個の基により置換されていてもよい］；
の化合物；ならびにそのＮ−オキシド誘導体、プロドラッグ誘導体、保護されている誘導体、個々の異性体および異性体の混合物；ならびにこのような化合物の薬学的に許容される塩および溶媒和物（例えば水和物）を提供する。
【０００６】
第二の局面において、本発明は、式Ｉの化合物またはそのＮ−オキシド誘導体、個々の異性体および異性体の混合物；またはその薬学的に許容される塩を１種またはそれ以上の適当な賦形剤と混合して含む、医薬組成物を提供する。
【０００７】
第三の局面において、本発明は、治療的有効量の式Ｉの化合物またはそのＮ−オキシド誘導体、個々の異性体および異性体の混合物、またはその薬学的に許容される塩を動物に投与することを含む、動物における、キナーゼ活性、特にＡｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＦＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲβ、Ｆｌｔ３およびｂ−Ｒａｆ活性の阻害がその疾患の病状および／または総体症状を予防、阻止または軽減できるものである疾患を処置する方法を提供する。
【０００８】
第四の局面において、本発明は、キナーゼ活性、特にＡｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＦＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲβ、Ｆｌｔ３およびｂ−Ｒａｆ活性がその疾患の病状および／または総体症状に関与するものである、動物における疾患の処置用医薬の製造における、式Ｉの化合物の使用を提供する。
【０００９】
第五の局面において、本発明は、式Ｉの化合物およびそのＮ−オキシド誘導体、プロドラッグ誘導体、被保護誘導体、個々の異性体および異性体の混合物、およびその薬学的に許容される塩の製造法を提供する。
【００１０】
発明の詳細な説明
定義
基および他の基、例えばハロ置換アルキルおよびアルコキシの構造成分としての“アルキル”は、直鎖または分岐鎖であり得る。Ｃ１−４−アルコキシはメトキシ、エトキシなどを含む。ハロ置換アルキルはトリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルなどを含む。
【００１１】
“アリール”は６から１０個の環炭素原子を含む単環式または縮合二環式芳香環集合体を意味する。例えば、アリールはフェニルまたはナフチル、好ましくはフェニルであり得る。“アリーレン”はアリール基から生じる二価のラジカルを意味する。
【００１２】
“ヘテロアリール”は１個またはそれ以上の環員がヘテロ原子であるときの上記アリールを定義するとおりのものである。例えば、ヘテロアリールはピリジル、インドリル、インダゾリル、キノキサリニル、キノリニル、ベンゾフラニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾ［１，３］ジオキソール、イミダゾリル、ベンゾ−イミダゾリル、ピリミジニル、フラニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、チエニルなどを含む。
【００１３】
“シクロアルキル”は示された環原子の数を含む飽和または部分的に不飽和、単環式、縮合二環式または架橋多環式環集合体を意味する。例えば、Ｃ３−１０シクロアルキルはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどを含む。
【００１４】
“ヘテロシクロアルキル”は本明細書に定義のとおりのシクロアルキルであるが、ただし、示された１個またはそれ以上の環炭素は−Ｏ−、−Ｎ＝、−ＮＲ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−または−Ｓ（Ｏ）２−から選択される部分により置換されており、ここでＲは水素、Ｃ１−４アルキルまたは窒素を保護する基である。例えば、本発明の化合物を記載するために本明細書で使用されるＣ３−８ヘテロシクロアルキルはモルホリノ、ピロリジニル、ピロリジニル−２−オン、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリジニロン（piperidinylone）、１，４−ジオキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−８−イルなどを含む。
【００１５】
“ハロゲン”（またはハロ）は好ましくはクロロまたはフルオロを示すが、またブロモまたはヨードであり得る。
【００１６】
“キナーゼパネル”はＡｂｌ（ヒト）、Ａｂｌ（Ｔ３１５Ｉ）、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３、ＡＬＫ、ＪＮＫ１α１、ＡＬＫ４、ＫＤＲ、Ａｕｒｏｒａ−Ａ、Ｌｃｋ、Ｂｌｋ、ＭＡＰＫ１、Ｂｍｘ、ＭＡＰＫＡＰ−Ｋ２、ＢＲＫ、ＭＥＫ１、ＣａＭＫＩＩ（ラット）、Ｍｅｔ、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＣＨＫ２、ＰＡＫ２、ＣＫ１、ＰＤＧＦＲα、ＣＫ２、ＰＤＫ１、ｃ−ｋｉｔ、Ｐｉｍ−２、ｃ−ＲＡＦ、ＰＫＡ（ｈ）、ＣＳＫ、ＰＫＢα、ｃＳｒｃ、ＰＫＣα、ＤＹＲＫ２、Ｐｌｋ３、ＥＧＦＲ、ＲＯＣＫ−Ｉ、Ｆｅｓ、Ｒｏｎ、ＦＧＦＲ３、Ｒｏｓ、Ｆｌｔ３、ＳＡＰＫ２α、Ｆｍｓ、ＳＧＫ、Ｆｙｎ、ＳＩＫ、ＧＳＫ３β、Ｓｙｋ、ＩＧＦ−１Ｒ、Ｔｉｅ−２、ＩＫＫβ、ＴｒＫＢ、ＩＲ、ＷＮＫ３、ＩＲＡＫ４、ＺＡＰ−７０、ＩＴＫ、ＡＭＰＫ（ラット）、ＬＩＭＫ１、Ｒｓｋ２、Ａｘｌ、ＬＫＢ１、ＳＡＰＫ２β、ＢｒＳＫ２、Ｌｙｎ（ｈ）、ＳＡＰＫ３、ＢＴＫ、ＭＡＰＫＡＰ−Ｋ３、ＳＡＰＫ４、ＣａＭＫＩＶ、ＭＡＲＫ１、Ｓｎｋ、ＣＤＫ２／サイクリンＡ、ＭＩＮＫ、ＳＲＰＫ１、ＣＤＫ３／サイクリンＥ、ＭＫＫ４（ｍ）、ＴＡＫ１、ＣＤＫ５／ｐ２５、ＭＫＫ６（ｈ）、ＴＢＫ１、ＣＤＫ６／サイクリンＤ３、ＭＬＣＫ、ＴｒｋＡ、ＣＤＫ７／サイクリンＨ／ＭＡＴ１、ＭＲＣＫβ、ＴＳＳＫ１、ＣＨＫ１、ＭＳＫ１、Ｙｅｓ、ＣＫ１ｄ、ＭＳＴ２、ＺＩＰＫ、ｃ−Ｋｉｔ（Ｄ８１６Ｖ）、ＭｕＳＫ、ＤＡＰＫ２、ＮＥＫ２、ＤＤＲ２、ＮＥＫ６、ＤＭＰＫ、ＰＡＫ４、ＤＲＡＫ１、ＰＡＲ−１Ｂα、ＥｐｈＡ１、ＰＤＧＦＲβ、ＥｐｈＡ２、Ｐｉｍ−１、ＥｐｈＡ５、ＰＫＢβ、ＥｐｈＢ２、ＰＫＣβＩ、ＥｐｈＢ４、ＰＫＣδ、ＦＧＦＲ１、ＰＫＣη、ＦＧＦＲ２、ＰＫＣθ、ＦＧＦＲ４、ＰＫＤ２、Ｆｇｒ、ＰＫＧ１β、Ｆｌｔ１、ＰＲＫ２、Ｈｃｋ、ＰＹＫ２、ＨＩＰＫ２、Ｒｅｔ、ＩＫＫα、ＲＩＰＫ２、ＩＲＲ、ＲＯＣＫ−ＩＩ（ヒト）、ＪＮＫ２α２、Ｒｓｅ、ＪＮＫ３、Ｒｓｋ１（ｈ）、ＰＩ３Ｋγ、ＰＩ３ＫδおよびＰＩ３−Ｋβを含むキナーゼのリストである。本発明の化合物はキナーゼパネル（野生型および／またはその変異）に対してスクリーニングされ、該パネルメンバーの少なくとも１つの活性を阻害する。
【００１７】
“ＢＣＲ−Ａｂｌの変異型”は野生型配列からの１個または複数のアミノ酸変化を意味する。ＢＣＲ−ＡＢＬの変異型は、タンパク質と阻害剤（例えば、Ｇｌｅｅｖｅｃ、など）との重要な接点を乱すこと、しばしば、不活性から活性状態へ、すなわちＢＣＲ−ＡＢＬとＧｌｅｅｖｅｃが結合できない構造への変化を誘導することにより作用する。臨床サンプルの分析から、耐性表現型と関連して見られる変異形のレパートリーは、ゆっくりであるが時間と共に容赦なく増加し続ける。変異は４つの主な領域に集中するようである。変異の第１の群（Ｇ２５０Ｅ、Ｑ２５２Ｒ、Ｙ２５３Ｆ／Ｈ、Ｅ２５５Ｋ／Ｖ）はＡＴＰに対するリン酸結合ループ（Ｐループとしても既知）を形成するアミノ酸を含む。第２の群（Ｖ２８９Ａ、Ｆ３１１Ｌ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７Ｌ）はＧｌｅｅｖｅｃ結合部位において見いだすことができ、直接、水素結合またはファンデルワールス相互作用を介して阻害剤と相互作用できる。変異の第３の群（Ｍ３５１Ｔ、Ｅ３５５Ｇ）は触媒ドメインの近くに集中する。変異の第４の群（Ｈ３９６Ｒ／Ｐ）はキナーゼ活性化／非活性化を調節する分子スイッチである構造である活性ループに位置する。ＣＭＬおよびＡＬＬ患者で検出されるＧｌｅｅｖｅｃ耐性と関連のあるＢＣＲ−ＡＢＬ点変異は：Ｍ２２４Ｖ、Ｌ２４８Ｖ、Ｇ２５０Ｅ、Ｇ２５０Ｒ、Ｑ２５２Ｒ、Ｑ２５２Ｈ、Ｙ２５３Ｈ、Ｙ２５３Ｆ、Ｅ２５５Ｋ、Ｅ２５５Ｖ、Ｄ２７６Ｇ、Ｔ２７７Ａ、Ｖ２８９Ａ、Ｆ３１１Ｌ、Ｔ３１５Ｉ、Ｔ３１５Ｎ、Ｆ３１７Ｌ、Ｍ３４３Ｔ、Ｍ３１５Ｔ、Ｅ３５５Ｇ、Ｆ３５９Ｖ、Ｆ３５９Ａ、Ｖ３７９Ｉ、Ｆ３８２Ｌ、Ｌ３８７Ｍ、Ｌ３８７Ｆ、Ｈ３９６Ｐ、Ｈ３９６Ｒ、Ａ３９７Ｐ、Ｓ４１７Ｙ、Ｅ４５９Ｋ、およびＦ４８６Ｓ（一文字表記により示されるアミノ酸領域は、ＧｅｎＢａｎｋ配列、受入番号ＡＡＢ６０３９４に対するものであり、ＡＢＬ型１ａ；Martinelli et al., Haematologica/The Hematology Journal, 2005, April; 90-4に対応する）を含む。特に明記しない限り、Ｂｃｒ−Ａｂｌは本酵素の野生型および変異型を意味する。
【００１８】
“処置”、“処置し”および“処置する”は、疾患および／または附随する症状を軽減するまたは無くす方法を意味する。
【００１９】
好ましい態様の記載
本発明は、化合物、組成物ならびにキナーゼ関連疾患、特にＡｂｌ、ＢＣＲ−Ａｂｌ、ＦＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲβ、Ｆｌｔ３およびｂ−Ｒａｆキナーゼ関連疾患の処置のための方法を提供する。例えば、白血病および他のＢＣＲ−Ａｂｌ関連増殖疾患はＢｃｒ−Ａｂｌの野生型および変異型の阻害を介して処置することができる。
【００２０】
第１の態様において、式Ｉの化合物に関して、式Ｉａ：
【化２】
2008528585.tif 000003
［式中：
ｍは０および１から選択され；
Ｒ１は水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ６−１０アリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ５−１０ヘテロアリール−Ｃ０−４アルキル、Ｃ３−１２シクロアルキル−Ｃ０−４アルキル、Ｃ３−８ヘテロシクロアルキル−Ｃ０−４アルキルおよび−ＸＮＲ７Ｒ８から選択され；
ここでＲ１の任意のアリール、ヘテロアリール、シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルは所望によりＣ１−６アルキル、−ＸＮＲ７Ｒ８、−ＸＮＲ７ＸＮＲ７Ｒ８、−ＸＮＲ７Ｒ９、Ｃ５−１０ヘテロアリール−Ｃ０−４アルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキル−Ｃ０−４アルキルから独立して選択される１から３個の基で置換されていてもよく；ここでＲ１の任意のヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキル置換基は所望によりＣ１−６アルキルおよびヒドロキシ−置換−Ｃ１−６アルキルから独立して選択される１から３個の基により置換されていてもよく；そしてＲ１の任意のアルキルはＯで置換されたメチレンを有してよく；
ここで各Ｘは結合およびＣ１−６アルキレンから独立して選択され；Ｒ７およびＲ８は水素およびＣ１−６アルキルから独立して選択され；ここでＲ７およびＲ８の任意のメチレンはＯで置換されていてよく；ここでＲ９はＣ３−１２シクロアルキル−Ｃ０−４アルキルであり；
Ｒ２は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ３は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；
Ｒ４はハロ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシおよびハロ−置換−Ｃ１−６アルコキシから選択され；
Ｌは−ＮＲ５Ｃ（Ｏ）−および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ５−から選択され；
Ｒ５は水素およびＣ１−６アルキルから選択され；そして
Ｒ１０はハロ−置換−Ｃ１−６アルキルであり；そして
Ｒ１１は水素、ハロ、Ｃ５−１０ヘテロアリールおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルから選択され；ここでＲ１０のヘテロアリールまたはヘテロシクロアルキル置換基は所望によりヒドロキシおよびＣ１−６アルキルから独立して選択される１から３個の基により置換されていてもよい］
の化合物である。
【００２１】
別の態様において、Ｒ１が水素、メチル、イソプロピル、イミダゾリル−プロピル、ピペラジニル−プロピル、ピリジニル、ジエチル−アミノ−プロピル、ヒドロキシ−エチル、ピリミジニル、モルホリノ−プロピル、フェニル、シクロプロピル、モルホリノ−エチル、ベンジルおよびモルホリノから選択され；ここでＲ１の任意のピリジニル、イミダゾリル、ピペラジニルまたはピリミジニルは所望によりメチル、メチル−アミノ、ジメチル−アミノ−メチル、シクロプロピル−アミノ、ヒドロキシ−エチル−アミノ、ジエチル−アミノ−プロピル−アミノ、ピロリジニル−メチル、モルホリノ、モルホリノ−メチル、ピペラジニルメチルおよびピペラジニルから独立して選択される１から３個の基で置換されていてもよく；ここでＲ１の任意のモルホリノおよびピペラジニル置換基は所望によりさらにメチル、ヒドロキシ−エチルおよびエチルから選択される基により置換されていてもよく；Ｒ２、Ｒ３およびＲ５がそれぞれ水素であり；そしてＲ４がメチルである。
【００２２】
別の態様において、ｍが０および１から選択され；Ｒ１０がトリフルオロメチルであり；そしてＲ１１がハロ；モルホリノ−メチル；所望によりメチル、エチルまたはヒドロキシエチルで置換されていてもよいピペラジニル；所望によりメチルまたはエチルで置換されていてもよいピペラジニル−メチル；所望によりメチルで置換されていてもよいイミダゾリル；ピロリジニル−メトキシ；および所望によりヒドロキシで置換されていてもよいピペリジニルから選択される。
【００２３】
本発明の好ましい化合物は２−（３−ジエチルアミノプロピルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−｛６−［４−（２−ヒドロキシエチル）−ピペラジン−１−イル］−２−メチルピリミジン−４−イルアミノ｝−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチルベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−｛６−［４−（２−ヒドロキシ−エチル）−ピペラジン−１−イル］−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ｝−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−（３−モルホリン−４−イル−プロピルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−（３−ジエチルアミノ−プロピルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−フェニルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−（３−ジエチルアミノ−プロピルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−（３−モルホリン−４−イル−プロピルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−［６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−（６−シクロプロピルアミノ−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−［６−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−［６−（３−ジエチルアミノ−プロピルアミノ）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−（２−メチル−６−モルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（２−モルホリン−４−イル−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−ベンジルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；
【００２４】
２−（２−モルホリン−４−イル−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−［６−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（６−シクロプロピルアミノ−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（２−メチル−６−モルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−［６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−［６−（３−ジエチルアミノ−プロピルアミノ）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（２−メチル−６−メチルアミノ−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−［６−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−（６−シクロプロピルアミノ−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−（２−メチル−６−モルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−［６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−［６−（３−ジエチルアミノ−プロピルアミノ）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イルメチル）−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−メチルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イルメチル）−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−アミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イルメチル）−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イルメチル）−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（４−モルホリン−４−イルメチル−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（４−ピペラジン−１−イルメチル−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；
【００２５】
２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル］−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル］−フェニル｝−アミド；２−メチルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル］−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（４−ピペラジン−１−イルメチル−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−メチルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（４−ピペラジン−１−イルメチル−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（４−モルホリン−４−イルメチル−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−メチルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（４−モルホリン−４−イルメチル−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸（５−｛［１−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボニル］−アミノ｝−２−メチル−フェニル）−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−メチルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル］−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル］−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イルメチル）−３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸（５−｛３−［４−（２−ヒドロキシ−エチル）−ピペラジン−１−イル］−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ｝−２−メチル−フェニル）−アミド；２−（２−モルホリン−４−イル−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［（５−ｔｅｒｔ−ブチル−チオフェン−２−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［（５−ｔｅｒｔ−ブチル−チオフェン−２−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［（５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−｛５−［４−（２−ヒドロキシ−エチル）−ピペラジン−１−イル］−ピリジン−２−イルアミノ｝−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸（５−｛３−［４−（２−ヒドロキシ−エチル）−ピペラジン−１−イル］−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ｝−２−メチル−フェニル）−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−（ピリジン−３−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−（３−イミダゾール−１−イル−プロピルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；
【００２６】
２−（２−モルホリン−４−イル−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［（５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−メチル−２Ｈ−ピラゾール−３−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［５−（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−２−メチル−フェニル］−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［（１−ｔｅｒｔ−ブチル−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボニル）−アミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（ピロリジン−２−イルメトキシ）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド；２−（６−メチル−ピリジン−３−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−（２−モルホリン−４−イル−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−イソプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−プロピルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−フェニルカルバモイル）−フェニル］−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（４−ピペラジン−１−イルメチル−３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−（ピリジン−２−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イルメチル）−３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド；２−シクロプロピルアミノ−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（４−モルホリン−４−イルメチル−３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−｛６−［４−（２−ヒドロキシ−エチル）−ピペラジン−１−イル］−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ｝−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−［６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−｛６−［４−（２−ヒドロキシ−エチル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−４−イルアミノ｝−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；２−［２−メチル−６−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド；および２−｛４−［４−（２−ヒドロキシ−エチル）−ピペラジン−１−イル］−ピリジン−２−イルアミノ｝−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミドから選択される。
【００２７】
薬理学および有用性
本発明の化合物は、キナーゼの活性を調節し、それ自体、キナーゼがその疾患の病状および／または総体症状に関与する疾患または障害の処置に有用である。本明細書に記載の化合物および組成物ならびに本明細書に記載の方法で有用である薬剤により阻害されるキナーゼの例は、限定しないが、Ａｂｌ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ＦＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲβ、Ｆｌｔ３およびｂ−Ｒａｆキナーゼを含む。
【００２８】
アベルソンチロシンキナーゼ(すなわちＡｂｌ、ｃ−Ａｂｌ)は、細胞サイクルの制御、遺伝毒性ストレスに対する細胞応答、およびインテグリンシグナル伝達を介した細胞環境についての情報伝達に関与する。全体として、Ａｂｌタンパク質は、様々な細胞外および細胞内供給源からのシグナルを統合し、細胞サイクルおよびアポトーシスに関する決定に影響を与える、細胞性モジュールとして複雑な役割を果たしているように見える。アベルソンチロシンキナーゼは、脱制御されたチロシンキナーゼ活性を伴うキメラ融合体(オンコプロテイン)ＢＣＲ−Ａｂｌまたはｖ−Ａｂｌのようなサブタイプ誘導体を含む。ＢＣＲ−Ａｂｌは、９５％の慢性骨髄性(myelogenous)白血病(ＣＭＬ)および１０％の急性リンパ性白血病の病因において重要である。ＳＴＩ５７１(Gleevec)は発癌性ＢＣＲ−Ａｂｌチロシンキナーゼの阻害剤であり、慢性骨髄性(myeloid)白血病(ＣＭＬ)の処置に使用されている。しかしながら、ＣＭＬの急性転化期にある患者の幾分かは、ＢＣＲ−Ａｂｌキナーゼの変異により、ＳＴＩ−５７１に耐性である。２２を超える変異が今日までに報告されており、最も一般的なのはＧ２５０Ｅ、Ｅ２５５Ｖ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７ＬおよびＭ３５１Ｔである。
【００２９】
本発明の化合物は、ａｂｌキナーゼ、とりわけｖ−ａｂｌキナーゼを阻害する。本発明の化合物はまた野生型ＢＣＲ−ＡｂｌキナーゼおよびＢＣＲ−Ａｂｌキナーゼの変異を阻害し、故に、白血病(とりわけアポトーシス作用の機構が見られるとき、とりわけ慢性骨髄性(myeloid)白血病および急性リンパ芽球性白血病)のようなＢｃｒ−ａｂｌ−陽性癌および腫瘍疾患の処置に適当であり、また、白血病性幹細胞のサブグループにおける効果を示し、ならびにこれらの細胞を、該細胞を摘出した後(例えば、骨髄摘出)インビトロで精製し、それらが癌細胞から浄化された後細胞を再移植する(例えば、精製骨髄細胞の再移植)可能性がある。
【００３０】
ＰＤＧＦ(血小板由来増殖因子)は非常に一般的に存在する増殖因子であり、発癌および血管の平滑筋細胞の疾患、例えばアテローム性動脈硬化症および血栓症に見られるように、正常増殖およびまた病的細胞増殖の両方において重要な役割を演ずる。本発明の化合物は、ＰＤＧＦ受容体(ＰＤＧＦＲ)活性を阻害でき、従って、神経膠腫、肉腫、前立腺腫瘍、および結腸、乳房および卵巣の腫瘍のような腫瘍疾患の処置に適当である。
【００３１】
本発明の化合物は、例えば小細胞肺癌における腫瘍阻害物質としてだけでなく、またアテローム性動脈硬化症、血栓症、乾癬、強皮症および線維症のような非悪性増殖性障害にも、ならびに幹細胞を、例えば、５−フルオロウラシルのような化学療法剤の血液毒性作用と戦うために保護するために、および喘息において使用できる。本発明の化合物は、とりわけＰＤＧＦ受容体キナーゼの阻害に応答する疾患の処置に有用である。
【００３２】
本発明の化合物は、移植、例えば、異種移植に起因する障害、とりわけ閉塞性細気管支炎(ＯＢ)、すなわち異種肺移植の慢性拒絶のような、とりわけ組織拒絶反応の処置に有効である。ＯＢのない患者と比較して、ＯＢを有する者は、しばしば気管支肺胞洗浄液中のＰＤＧＦ濃度の上昇を示す。
【００３３】
本発明の化合物はまた再狭窄およびアテローム性動脈硬化症のような、血管平滑筋細胞移動および増殖(ＰＤＧＦおよびＰＤＧＦ−Ｒがしばしば役割を有する場所である)が関連する疾患に有用である。血管平滑筋細胞インビトロおよびインビボにおけるこれらの効果および増殖または移動に対するそれらの結果は、本発明の化合物の投与により、またインビボでの血管内膜の機械的損傷後の肥厚に対する影響の試験により証明し得る。
【００３４】
ある種の異常増殖状態はｒａｆ発現と関連していると考えられており、したがって、発現の阻害に感受性であると考えられている。ｒａｆタンパク質の異常高レベル発現はまた形質転換および異常細胞増殖に関わる。これらの異常増殖状態はまたｒａｆ発現の阻害に感受性であると考えられている。例えば、すべての肺癌腫細胞系の６０％が異常な高レベルのｃ−ｒａｆのｍＲＮＡおよびタンパク質を発現するため、ｃ−ｒａｆタンパク質の発現は異常細胞増殖において役割を果たすと考えられている。異常増殖状態のさらなる例は過剰増殖性疾患、例えば癌、腫瘍、過形成、肺線維症、血管形成、乾癬、アテローム性動脈硬化症および血管における平滑筋細胞増殖、例えば、狭窄または血管形成後の再狭窄である。ｒａｆが関係する細胞シグナル経路はまたＴ細胞増殖（Ｔ細胞活性化および増殖）、例えば組織移植拒絶反応、内毒素性ショック、および糸球体腎炎により特徴づけられる炎症性疾患に関わる。
【００３５】
Ｆｌｔ３はタイプＩＩＩ受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）ファミリーのメンバーである。Ｆｌｔ３（ｆｍｓ様チロシンキナーゼ）はまたＦＬｋ−２（胎児の肝臓キナーゼ２）としても既知である。Ｆｌｔ３遺伝子の異常発現は急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成を伴うＡＭＬ（ＡＭＬ／ＴＭＤＳ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、および骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）を含む白血病および小児白血病で報告されている。Ｆｌｔ３受容体の活性化変異は急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を有する患者の約３５％において見られ、予後不良と関連する。もっとも普通の変異は膜近傍ドメイン内の構造重複を含み、さらに５−１０％の患者がアスパラギン８３５で点変異を有する。これらの変異両方はＦｌｔ３のチロシンキナーゼ活性の構成的活性化と関連し、リガンドの非存在下で増殖および生存シグナルをもたらす。受容体の変異型を発現する患者は治癒の機会が少ないことが示されている。したがって、ヒト白血病および骨髄異形成症候群の過活性（変異）Ｆｌｔ３キナーゼ活性に対する役割に関して蓄積している証拠がある。これが出願人を現在の薬剤治療がほとんど有効でない患者、および現在利用できる薬剤治療および／または幹細胞移植治療で以前に失敗している患者において可能性のある治療アプローチとして、Ｆｌｔ３受容体の新規阻害剤の探索に駆り立てた。
【００３６】
白血病は一般に骨髄、リンパ節、脾臓、または血管系および免疫系の他の器官の未成熟造血細胞のＤＮＡへの後天性（遺伝性ではない）遺伝子損傷に起因する。その結果は下記のとおりである：正常血液細胞として機能しない“白血病性芽球”と呼ばれる細胞の蓄積に帰着する細胞の成熟における加速的増殖および妨害；および赤血球の欠失（貧血）、血小板の欠失および正常白血球の欠失に至る正常骨髄細胞の製造の機能不全。芽細胞は普通は骨髄により製造され、通常、すべての骨髄細胞の約１％である成熟血液細胞へ成長する。白血病において、芽細胞は適切に成熟せず、骨髄に蓄積する。急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）において、これらは骨髄芽球と呼ばれ、一方、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）において、それらはリンパ芽球として知られている。他の白血病は混合系統白血病（ＭＬＬ）である。
【００３７】
“骨髄異形成を伴うＡＭＬ（ＡＭＬ／ＴＭＤＳ）”は急性白血病に付随する造血不全性の病像、導入化学療法に応答不良、および骨髄異形成症候群が再発する傾向により特徴づけられる白血病のまれな型に関する。
【００３８】
“骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）”は健康な血液細胞の数の欠失をもたらす骨髄の正常な機能が停止する血液疾患の群に関する。１つの型の血液細胞が多数製造される白血病と比較して、いずれかのおよびときどきすべての型の血液細胞がＭＤＳに罹患している。少なくとも１０，０００人の新規患者が米国において毎年発症する。ＭＤＳと診断された最大１／３の患者が急性骨髄性白血病を発症する。この理由のため、該疾患はときどき前白血病と呼ばれる。骨髄異形成症候群はまたときどき骨髄異形成、髄鞘形成またはオリゴ芽球（oligoblastic）白血病と呼ばれる。多数の芽細胞が骨髄内に維持されるとき、ＭＤＳはまた、くすぶり型白血病と呼ばれる。
【００３９】
白血病などの骨髄異形成症候群は、骨髄における単細胞のＤＮＡへの遺伝子損傷の結果である。染色体の特定の異常がＭＤＳ患者に存在する。これらの異常は転座と呼ばれ、染色体の一部が折れ、異なる染色体の損傷部分に結合するときに起こる。同じ欠陥が頻繁に急性骨髄性白血病で見られる。しかし、すべての患者の血液細胞が異常であり、すべてが同じ損傷幹細胞由来であるためＭＤＳは白血病と異なる。白血病患者において、骨髄は疾患のおよび健康な血液細胞の混合を含む。
【００４０】
ＡＭＬおよび進行性骨髄異形成症候群は最近、シトシンアラビノシドおよびダウノルビシンのような高用量の細胞毒性化学治療剤で処置される。この処置のタイプは約７０％の患者を血液学的寛解に誘導する。しかし、寛解している患者の半数以上が長期間の化学療法の投与にもかかわらず、後に再発する。最初に寛解しないか、または寛解後の再発するいずれかのほとんど全ての患者が結局、白血病のために死ぬ。骨髄移植はこれを受けた５０−６０％までの患者を治癒させ得るが、ＡＭＬまたはＭＤＳを有する患者全体の約１／３しか移植の資格がない。新規なおよび有効な薬剤が標準治療で寛解しない患者、後に再発する患者、および幹細胞移植の資格がない患者を処置するために至急に必要である。さらに、有効な新規薬剤を、全ての患者に対して改善された導入化学療法をもたらす標準治療に、適度な期待を持って加えることができる。
【００４１】
ＦＧＦＲ３は４つの異なる遺伝子によりコードされている構造的に関連しているチロシンキナーゼ受容体ファミリーの一部である。ＦＧＦＲ３遺伝子の異なるドメインの特定の点変異は、受容体の構成的活性化をもたらし、常染色体優性骨障害、多発性骨髄腫、ならびに膀胱および子宮頸癌の大部分と関連がある（Cappellen, et al, Nature, vol.23）。マウスＦＧＦＲ３遺伝子内およびマウスの活性化ＦＧＦＲ３の標的の成長軟骨板への変異の活性化は小人症をもたらす。我々の概念と同様に、マウスのＦＧＦＲ３の標的崩壊は長骨および脊椎の異常増殖をもたらす。加えて、２０−２５％の多発性骨髄腫細胞は動原体からＦＧＦＲ３の５０−１００ｋｂに位置する４ｐ１６切断点でｔ（４；１４）（ｐ１６．３；ｑ３２．３）染色体転座を含む。多発性骨髄腫のまれな場合において、あらかじめ骨障害において見られるＦＧＦＲ３の変異の活性化が見いだされ、常にこの染色体転座と同時に起こる。最近、ＦＧＦＲ３ミスセンス体細胞変異（Ｒ２４８Ｃ、Ｓ２４９Ｃ、Ｇ３７２Ｃ、およびＫ６５２Ｅ）は膀胱癌細胞の大部分およびいくつかの子宮頸癌細胞で同定され、事実これらは新生児期において致命的な小人症の型である致死性異形成を引き起こす胚の活性化変異と同一である。本発明の化合物は現在の処置よりも、より有効である多発性骨髄腫のための、生活を変える膀胱切除を避けることによる膀胱癌のための、および将来の生殖能力の保持を望む患者の子宮頸癌のための治療有効性を有することができる。
【００４２】
前記によって、本発明は、さらに、処置を必要とする対象における、上記のいずれかの疾患または障害を処置する方法であり、該対象に治療的有効量(下記“投与および医薬組成物”参照)の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することをを含む、方法を提供する。上記の全ての使用に関して、必要な投与量は投与形態、処置すべき特定の状態および所望の効果に依存して変化する。
【００４３】
投与および医薬組成物：
一般に、本発明の化合物は単独でまたは１種もしくはそれ以上の治療剤との組合せのいずれかで当分野で既知の通常のおよび許容される形式のいずれかを介して、治療有効量を投与される。治療有効量は、疾患の重症度、対象の年齢および相対的な健康度、使用される化合物の有効性および他の要素に依存して広く変化し得る。一般に、満足な結果は体重あたり約０．０３から２．５ｍｇ／ｋｇの１日投与量で全身に得られることが示される。大型哺乳動物、例えばヒトにおいて指示される１日投与量は、例えば１日に４回までの分割用量でまたは遅延形で都合良く投与される約０．５ｍｇから約１００ｍｇの範囲である。経口投与のための適当な単位用量形は約１から５０ｍｇの活性成分を含む。
【００４４】
本発明の化合物は任意の慣用の経路、特に経腸的に、例えば経口的に、例えば錠剤形もしくはカプセル形で、または非経腸的に、例えば注射溶液形もしくは懸濁液形で、局所的に、例えばローション形、ゲル形、軟膏形もしくはクリーム形で、または経鼻形もしくは坐薬形で医薬組成物として投与できる。少なくとも１種の薬学的に許容される担体もしくは希釈剤と一緒に遊離形または薬学的に許容される塩形の本発明の化合物を含む医薬組成物を、混合、造粒または被覆方法による慣用の方法で製造できる。例えば、経口組成物は、活性成分とａ）希釈剤、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロースおよび／またはグリシン；ｂ）滑剤、例えば、シリカ、タルク、ステアリン酸、そのマグネシウムもしくはカルシウム塩および／またはポリエチレングリコール；錠剤のためにまたｃ）結合剤、例えば、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、デンプンペースト、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムおよび／またはポリビニルピロリドン；所望によりｄ）崩壊剤、例えば、デンプン、寒天、アルギン酸もしくはそのナトリウム塩または起沸性混合物；および／またはｅ）吸収剤、着色剤、香味剤および甘味剤を一緒に含む錠剤またはゼラチンカプセルであり得る。注射組成物は、等張水溶液または懸濁液であり得、そして座薬は脂肪エマルジョンまたは懸濁液から製造し得る。該組成物は滅菌し得そして／またはアジュバント、例えば保存剤、安定化剤、湿潤剤もしくは乳化剤、溶解促進剤、浸透圧を調節するための塩および／またはバッファーを含む。加えて、それらはまた、治療に有効な他の物質を含み得る。適当な経皮投与用製剤は有効量の本発明の化合物を担体と含む。担体は宿主の皮膚を介する輸送を助けるために、薬理学的に許容される吸収性溶媒を含み得る。例えば、経皮デバイスは裏当て部分、化合物と所望により担体を含む貯蔵部、所望により長時間にわたって制御されたおよびあらかじめ決められた速度で宿主の皮膚に化合物を送達するための速度制御バリア、および皮膚にデバイスを固定するための手段を含む、バンデージ形である。マトリックス経皮製剤もまた使用され得る。例えば、皮膚および眼への、適当な局所投与用製剤は、当分野で既知の好ましくは水溶液、軟膏、クリームまたはゲルである。このような製剤は、可溶化剤、安定化剤、等張増加剤、バッファーおよび保存剤を含み得る。
【００４５】
本発明の化合物は、治療有効量の１種またはそれ以上の治療剤との組合せ（薬学的組合せ剤）で投与され得る。例えばシクロスポリン、ラパマイシン、もしくはアスコマイシン、またはそれらの免疫抑制剤類似体、例えばシクロスポリンＡ（ＣｓＡ）、シクロスポリンＧ、ＦＫ−５０６、ラパマイシン、もしくは同等な化合物、コルチコステロイド、シクロホスファミド、アザチオプリン、メトトレキサート、ブレキナール、レフルノミド、ミゾルビン、ミコフェノール酸、ミコフェノール酸モフェチル、１５−デオキシスパガリン、免疫抑制性抗体、とりわけ白血球受容体に対するモノクローナル抗体、例えばＭＨＣ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ２５、ＣＤ２８、Ｂ７、ＣＤ４５、ＣＤ５８もしくはそれらのリガンド、または他の免疫調節化合物、例えばＣＴＬＡ４１ｇと一緒に使用されるとき、例えば、相乗効果が、他の免疫調節剤もしくは抗炎症剤と生じ得る。本発明の化合物が他の治療と一緒に投与されるとき、共投与される化合物の用量は、もちろん使用される共薬剤の型、使用される特定の薬剤、処置される状態などに依存して変化する。
【００４６】
本発明はまた、ａ）遊離形または薬学的に許容される塩形の本明細書に記載のとおりの本発明の化合物である第１の薬剤、およびｂ）少なくとも１つの共薬剤を含む薬学的組合せ剤、例えばキットを提供する。該キットはその投与のための指示書を含み得る。
【００４７】
本明細書で利用される“共投与”または“組合せ投与”などの用語は、個々の患者に選択された治療剤を投与することを含むことを意味し、そして必ずしも薬剤が同じ投与経路によりまたは同時に投与されない処置レジメンを含むことを意図する。
【００４８】
本明細書で使用される“薬学的組合せ剤”なる用語は、１種を超える活性成分の混合または組合せから生じる生産物を意味し、そして活性成分の固定された組合せ剤および固定されていない組合せ剤の両方を含む。“固定された組合せ剤”なる用語は、複数の活性成分、例えば式Ｉの化合物、および共薬剤両方が、単一の物または投与形で同時に患者に投与されることを意味する。“固定されていない組合せ剤”なる用語は、複数の活性成分、例えば式Ｉの化合物、および共薬剤両方が、同時に、共にまたは特定の時間制限なしに連続してのいずれかで、別々の物として投与することを意味し、このような投与は、治療有効量の２つの化合物を患者の体内に提供する。後者は、カクテル治療、例えば３つまたはそれ以上の活性成分の投与にも適用する。
【００４９】
本発明の化合物の製造方法
本発明はまた、本発明の化合物の製造方法を含む。記載されている反応において、反応性官能基、例えばヒドロキシ、アミノ、イミノ、チオまたはカルボキシ基を、これらが最終産物において望ましいとき、これらの望ましくない反応の参加を避けるために保護することが必要であり得る。慣用の保護基は、標準的技法にしたがって使用し得る、例えばT.W. Greene and P. G. M. Wuts in “Protective Groups in Organic Chemistry”, John Wiley and Sons, 1991参照。
【００５０】
式Ｉの化合物は下記反応スキームＩのとおりに行うことにより製造できる：
反応スキームＩ
【化３】
2008528585.tif 000004
式中、ｎ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は発明の概要に定義のとおりである。式Ｉの化合物は適当な溶媒（例えば、１，３−ジメチル−２−イミダゾリドン、など）の存在下で式２の化合物と式３の化合物を反応させることにより製造できる。該反応は５０℃から約１２０℃の温度範囲で行い、１２時間以内に完全に終了し得る。
【００５１】
式Ｉの化合物の合成の詳細な例は下記実施例で見いだすことができる。
【００５２】
本発明の化合物のさらなる製造方法
本発明の化合物を、遊離塩基形の化合物を薬学的に許容される無機酸または有機酸と反応させることにより薬学的に許容される酸付加塩として製造できる。あるいは、本発明の化合物の薬学的に許容される塩基付加塩を、遊離塩基形の化合物を薬学的に許容される無機塩基または有機塩基と反応させることにより製造できる。
【００５３】
あるいは、塩形の本発明の化合物を出発物質または中間体の塩を使用して製造できる。
【００５４】
遊離酸形または遊離塩基形の本発明の化合物を、対応する塩基付加塩形または酸付加塩形、各々から製造できる。例えば酸付加塩形の本発明の化合物は、適当な塩基（例えば水酸化アンモニウム溶液、水酸化ナトリウムなど）と処理することにより対応する遊離塩基に変換できる。塩基付加塩形の本発明の化合物は、適当な酸（例えば塩酸など）と処理することにより対応する遊離酸に変換できる。
【００５５】
非酸化形の本発明の化合物を、適当な不活性有機溶媒（例えばアセトニトリル、エタノール、ジオキサン溶液など）中で、０から８０℃で還元剤（例えば硫黄、二酸化硫黄、トリフェニルホスフィン、水素化ホウ素リチウム、水素化ホウ素ナトリウム、三塩化リン、三臭化物など）と処理することにより本発明の化合物のＮ−オキシドから製造できる。
【００５６】
本発明の化合物のプロドラッグ誘導体を当業者に既知の方法で製造できる（例えばさらなる詳細のためにSaulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, p. 1985参照のこと）。例えば、適当なプロドラッグを本発明の非誘導化化合物を適当なカルバミル化剤（例えば、１，１−アシルオキシアルキルカルバノクロリデート、パラ−ニトロフェニルカーボネートなど）と反応させることにより製造できる。
【００５７】
本発明の化合物の保護されている誘導体を当業者に既知の方法で製造できる。保護基の創造およびその除去に適用できる技術の詳細な説明はT. W. Greene, “Protecting Groups in Organic Chemistry”, 3rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999において見ることができる。
【００５８】
本発明の化合物を、本発明の工程中に溶媒和物（例えば水和物）として都合良く製造または形成できる。本発明の化合物の水和物を、有機溶媒、例えばジオキシン、テトラヒドロフランまたはメタノールを使用し、水性／有機溶媒混合物から再結晶することにより都合良く製造できる。
【００５９】
本発明の化合物を、化合物のラセミ混合物を光学的に活性な分割剤と反応させ、一組のジアステレオマー化合物を形成し、該ジアステレオマーを分離し、そして光学的に純粋なエナンチオマーを回収することにより、それらの個々の立体異性体として製造できる。エナンチオマーの分離は本発明の化合物の共有結合ジアステレオマー誘導体を使用して行い得るが、分離できる複合体が好ましい（例えば、結晶のジアステレオマー塩）。ジアステレオマーは異なる物理的性質（例えば、融点、沸点、溶解度、反応性など）を有し、そしてこれらの相違を利用して容易に分離できる。ジアステレオマーをクロマトグラフィー、または好ましくは溶解度の差異に基づく分割／分離技術により分割できる。次いで光学的に純粋なエナンチオマーを、ラセミ化をもたらさないであろう実用的手段により分割剤と一緒に回収する。ラセミ混合物から化合物の立体異性体の分離に適用できる技術のより詳細な説明はJean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, “Enantiomers, Racemates and Resolutions”, John Wiley And Sons, Inc., 1981において見ることができる。
【００６０】
手短に言えば、式Ｉの化合物を下記の工程を含む方法により製造できる：
（ａ）反応スキームＩの工程；ならびに
（ｂ）所望により本発明の化合物の薬学的に許容される塩への変換；
（ｃ）所望により塩形の本発明の化合物の非塩形への変換；
（ｄ）所望により非酸化形の本発明の化合物の薬学的に許容されるＮ−オキシドへの変換；
（ｅ）所望によりＮ−オキシド形の本発明の化合物の非酸化形への変換；
（ｆ）所望により異性体の混合物からの本発明の化合物の個々の異性体への分離；
（ｇ）所望により本発明の非誘導化合物の薬学的に許容されるプロドラッグ誘導体への変換；および
（ｈ）所望により本発明の化合物のプロドラッグ誘導体のその非誘導形への変換。
【００６１】
出発物質の製造において特に記載のない限り、化合物は既知であるか、または当分野で既知の方法に準じてもしくは下記の実施例に記載のとおりに製造できる。
【００６２】
当業者は、上記変換は本発明の化合物の製造法の代表例のみであり、そして他の既知の方法を同様に使用できることを理解できよう。
【実施例】
【００６３】
本発明は、本発明による式Ｉの化合物の製造を説明する下記実施例により限定されることなくさらに例示される。
【００６４】
実施例１
２−（３−ジエチルアミノプロピルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド
【化４】
2008528585.tif 000005
０℃で４−メチル−３−ニトロアニリン（１．００ｇ、６．５７ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．１０ｍＬ、７．８９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に３−トリフルオロメチル塩化ベンゾイル（４．９０ｇ、３１．０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１時間、室温で撹拌する。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄する。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮し、粗生成物を得る。粗生成物をＭｅＯＨ中に溶解させ、１０％Ｐｄ／Ｃを溶液に加える。反応混合物を１２時間、室温で水素下で撹拌する。反応混合物をセライトプレートで濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、Ｎ−（３−アミノ−４−メチルフェニル）−３−トリフルオロメチル−ベンズアミドを暗灰色の固体として得る。
【００６５】
ＤＭＦ中のＮ−（４−メチル−３−ニトロフェニル）−３−トリフルオロメチルベンズアミド（２５０ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）、２−ブロモチアゾール−５−カルボン酸（１７７ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）、およびジイソプロピルエチル−アミン（０．５９ｍＬ、３．４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（３５５ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１２時間、室温で撹拌する。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、１０％のチオ硫酸ナトリウム水溶液で洗浄する。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮する。粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製し、２−ブロモチアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミドを褐色がかった固体として得る。
【００６６】
２−ブロモチアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチルベンゾイル−アミノ）−フェニル］−アミド（２５ｍｇ、５２μｍｏｌ）を３−（ジエチルアミノ）−プロピルアミン中に溶解させ、混合物を４時間、８０℃で撹拌する。粗生成物をＤＭＳＯ（１ｍＬ）で希釈し、分取ＨＰＬＣにより精製し、ＴＦＡ塩形の２−（３−ジエチルアミノプロピルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミドを得る:1H NMR 400 MHz (DMSO-d6) δ 9.67 (s, 1H), 9.43 (br, 1H), 8.35 (t, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.26 (d, 1H), 7.96 (d, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.25 (d, 1H), 3.35 (q, 2H), 2.89 (m, 6H), 2.19 (s, 3H), 1.93 (m, 2H), 1.20 (t, 6H); MS m/z 534.4(M + 1).
【００６７】
実施例２
２−｛６−［４−（２−ヒドロキシエチル）−ピペラジン−１−イル］−２−メチルピリミジン−４−イルアミノ｝−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチルベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド
【化５】
2008528585.tif 000006
０℃でＤＭＦ中の２−アミノチアゾール−５−カルボン酸メチル（４．９０ｇ、３１．０ｍｍｏｌ）およびＮａＨ（鉱油中６０％の分散、１．３６ｇ、３４．１ｍｍｏｌ）の懸濁液にＤＭＦ中の４，６−ジクロロ−２−メチル−ピリミジン（５．０５ｇ、３１．０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２時間、室温で撹拌する。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、１０％のチオ硫酸ナトリウム水溶液で洗浄する。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮する。粗生成物をＭｅＯＨから結晶化し、２−（６−クロロ−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸メチルを白色固体として得る。
【００６８】
ＭｅＯＨ中の２−（６−クロロ−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸メチル（３．９７ｇ、１４．０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に４ＮのＮａＯＨ（１５ｍＬ）を加え、混合物を１２時間、６０℃で撹拌する。反応混合物を１ＮのＨＣｌで中性化し、得られる沈殿を濾過し、ＭｅＯＨで洗浄し、白色固体の２−（６−クロロ−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸を得る。
【００６９】
ＤＭＦ中の２−（６−クロロ−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸（２３０ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）、Ｎ−（３−アミノ−４−メチル−フェニル）−３−トリフルオロメチルベンズアミド（２５０ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）、およびジイソプロピルエチルアミン（０．５９ｍＬ、３．４ｍｍｏｌ）の溶液にＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（３５５ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１２時間、室温で撹拌する。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、１０％のチオ硫酸ナトリウム水溶液で洗浄する。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮する。粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製し、２−（６−クロロ−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミドを白色固体として得る。
【００７０】
１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノン（０．２ｍＬ）中の２−（６−クロロ−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド（２５ｍｇ、４６μｍｏｌ）の撹拌溶液に１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノン（０．２ｍＬ）中の過剰２−ピペラジン−１−イル−エタノール（１００ｍｇ）を加え、混合物を４時間、６０℃で撹拌する。粗生成物をＤＭＳＯ（１ｍＬ）で希釈し、分取ＨＰＬＣにより精製し、ＴＦＡ塩形の２−｛６−［４−（２−ヒドロキシエチル）−ピペラジン−１−イル］−２−メチルピリミジン−４−イルアミノ｝−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチルベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミドを得る:1H NMR 400 MHz (MeOH-d4) δ 8.26 (s, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.74 (t, 1H), 7.55 (d, 1H), 7.31 (d, 1H), 6.20 (br, 1H), 3.93 (dd, 2H), 3.50 (br, 8H), 3.35 (dd, 2H), 2.53 (s, 3H), 2.31 (s, 3H); MS m/z 641.5(M + 1).
【００７１】
実施例３
２−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミド
【化６】
2008528585.tif 000007
ＤＭＦ中の４−メチル−３−ニトロアニリン（２５９ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）、３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−安息香酸（５１４ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）、およびジイソプロピルエチル−アミン（１．１９ｍＬ、６．８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液にＯ−（７−アザベンゾトリゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（７１０ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１２時間、室温で撹拌する。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、１０％のチオ硫酸ナトリウム水溶液で洗浄する。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮し、粗生成物を得る。粗生成物をＭｅＯＨ中に溶解し、１０％のＰｄ／Ｃを溶液に加える。反応混合物を１２時間、室温で水素下で撹拌する。反応混合物をセライトプレートで濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、Ｎ−（３−アミノ−４−メチルフェニル）−３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチルベンズアミドを得る。
【００７２】
ＤＭＦ中のＮ−（３−アミノ−４−メチルフェニル）−３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチルベンズアミド（３４５ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）、２−ブロモチアゾール−５−カルボン酸（１７７ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）、およびジイソプロピルエチル−アミン（０．５９ｍＬ、３．４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液にＯ−（７−アザベンゾトリゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（３５５ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１２時間、室温で撹拌する。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、１０％のチオ硫酸ナトリウム水溶液で洗浄する。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮する。粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製し、２−ブロモチアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチルベンゾイルアミノ］−２−メチルフェニル｝−アミドを褐色がかった固体として得る。
【００７３】
２−ブロモチアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチルベンゾイルアミノ］−２−メチルフェニル｝−アミド（２５ｍｇ、４２μｍｏｌ）をエタノールアミン中に溶解し、混合物を４時間、８０℃で撹拌する。粗生成物をＤＭＳＯ（１ｍＬ）で希釈し、分取ＨＰＬＣにより精製し、ＴＦＡ塩形の２−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛５−［３−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−２−メチル−フェニル｝−アミドを得る：1H NMR 400 MHz (MeOH-d4) δ 7.87 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.24 (d, 1H), 4.50 (br, 2H), 3.72 (m, 2H), 3.68 (br, 2H), 3.45 (m, 2H), 3.22 (br, 6H), 2.23 (s, 3H), 1.38 (t, 3H); MS m/z 577.5(M + 1).
【００７４】
上記の実施例に記載の方法を繰り返し、適当な出発物質を使用して、表１に示す通りの下記の式Ｉの化合物を得る。
表１
【表１】
2008528585.tif 000008
【表２】
2008528585.tif 000009
【表３】
2008528585.tif 000010
【表４】
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【表５】
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【００７５】
【表６】
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【表７】
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【表８】
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【表９】
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【００７６】
【表１０】
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【表１１】
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【表１２】
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【表１３】
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【表１４】
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【表１５】
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【００７７】
【表１６】
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【表１７】
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【表１８】
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【表１９】
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【００７８】
【表２０】
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【表２１】
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【表２２】
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【００７９】
アッセイ
本発明の化合物を、それらがＢＣＲ−Ａｂｌを発現するＢａ／Ｆ３細胞(Ｂａ／Ｆ３−ｐ２１０)の細胞増殖を、親Ｂａ／Ｆ３細胞と比較して選択的に阻害する能力についてアッセイする。これらのＢＣＲ−Ａｂｌで形質転換した細胞の増殖を選択的に阻害する化合物を、Ｂｃｒ−ａｂｌの野生型またはGreevec耐性患者において発見された変異型（変異Ｇ２５０Ｅ、Ｅ２５５Ｖ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７ＬおよびＭ３５１Ｔ）のいずれかを発現するＢａ／Ｆ３細胞の増殖性活性について試験する。
加えて、化合物を、それらがＡｂｌ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ＦＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲβ、Ｆｌｔ３およびｂ−Ｒａｆキナーゼを阻害する能力についてアッセイする。
【００８０】
細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ依存性増殖の阻害（ハイスループット法）
使用するマウス細胞系は、ＢＣＲ−Ａｂｌ  ｃＤＮＡで形質転換したＢａ／Ｆ３マウス前Ｂ細胞系（Ｂａ／Ｆ３−ｐ２１０）である。これらの細胞を、ペニシリン５０μｇ／ｍＬ、ストレプトマイシン５０μｇ／ｍＬおよびＬ−グルタミン２００ｍＭを添加したＲＰＭＩ／１０％胎児ウシ血清（ＲＰＭＩ／ＦＣＳ）に維持する。形質転換されていないＢａ／Ｆ３細胞を、マウス組み換えＩＬ３を添加された馴化培地で同様に維持する。
【００８１】
細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ依存性増殖の阻害
Ｂａ／Ｆ３−ｐ２１０細胞を９６ウェルＴＣプレートに１５,０００細胞／ウェルの密度で播種する。５０μLの試験化合物の２倍連続希釈(Ｃｍａｘは−１０μM)を各ウェルに添加する(ＳＴＩ５７１を陽性対照として包含する)。細胞を４８時間、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベート後、１５μLのＭＴＴ(Promega)を各ウェルに添加し、細胞をさらに５時間インキュベートする。５７０nmの光学密度を分光測光により定量し、ＩＣ５０値、すなわち５０％阻害に必要な化合物の濃度を用量応答曲線から決定する。
【００８２】
細胞サイクル分布に対する効果
Ｂａ／Ｆ３およびＢａ／Ｆ３−ｐ２１０細胞を６ウェルＴＣプレートに、５mlの培地中２.５×１０６細胞／ウェルで播種し、１または１０μMの試験化合物を添加する(ＳＴＩ５７１を対照として包含する)。細胞を次いで２４時間または４８時間、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートする。２mlの細胞懸濁液をＰＢＳで洗浄し、７０％ＥｔＯＨに１時間固定し、ＰＢＳ／ＥＤＴＡ／ＲＮａｓｅ  Ａで３０分処置する。ヨウ化プロピジウム(Ｃｆ＝１０μg／ml)を添加し、蛍光強度をFACScaliburＴＭシステム(BD Biosciences)でのフローサイトメトリーにより定量する。本発明の試験化合物は、Ｂａ／Ｆ３−ｐ２１０細胞に対してアポトーシス作用を証明するが、Ｂａ／Ｆ３親細胞ではアポトーシスを誘発しない。
【００８３】
細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ自己リン酸化に対する効果
ＢＣＲ−Ａｂｌ自己リン酸化を、ｃ−ａｂｌ特異的捕捉抗体および抗ホスホチロシン抗体を使用した、捕捉Ｅｌｉｓａで定量する。Ｂａ／Ｆ３−ｐ２１０細胞を９６ウェルＴＣプレートに、５０μＬの培地中２×１０５細胞／ウェルで播種する。５０μＬの試験化合物の２倍連続希釈（Ｃｍａｘは１０μＭ）を各ウェルに添加する（ＳＴＩ５７１を陽性対照として包含する）。細胞を、９０分、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートする。次いで、細胞を１時間、氷上でプロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤を含む１５０μＬの融解緩衝液（５０ｍＭのＴｒｉｓ  ＨＣｌ、ｐＨ７．４、１５０ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＥＤＴＡ、１ｍＭのＥＧＴＡおよび１％ＮＰ−４０）で処理する。５０μＬの細胞融解物を、予め抗ａｂｌ特異的抗体でコーティングし、ブロックした９６ウェルｏｐｔｉｐｌａｔｅに添加する。プレートを、４時間、４℃でインキュベートする。ＴＢＳ−Ｔｗｅｅｎ  ２０緩衝液で洗浄後、５０μＬのアルカリホスファターゼ結合抗ホスホチロシン抗体を添加し、プレートをさらに一晩４℃でインキュベートする。ＴＢＳ−Ｔｗｅｅｎ  ２０緩衝液で洗浄後、９０μＬの発光基質を添加し、発光をＡｃｑｕｅｓｔＴＭシステム（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用して定量する。ＢＣＲ−Ａｂｌ発現細胞の増殖を阻害する本発明の試験化合物は、細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ自己リン酸化を用量依存的方法で阻害する。
【００８４】
Ｂｃｒ−ａｂｌの変異型を発現する細胞の増殖に対する効果
本発明の化合物を、ＢＣＲ−Ａｂｌの野生型または、ＳＴＩ５７１に対する耐性を付与するか感受性を低下させる変異型(Ｇ２５０Ｅ、Ｅ２５５Ｖ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７Ｌ、Ｍ３５１Ｔ)のいずれかを発現するＢａ／Ｆ３細胞に対するそれらの抗増殖効果を試験する。変異体ＢＣＲ−Ａｂｌ発現細胞および非形質転換細胞に対するこれらの化合物の抗増殖性効果を、上記の通り試験した。非形質転換細胞に対して毒性がない化合物のＩＣ５０値を、上記の通りに得た用量応答曲線から決定した。
【００８５】
ＦＧＦＲ３（酵素アッセイ）
精製ＦＧＦＲ３（Ｕｐｓｔａｔｅ）でキナーゼ活性アッセイをキナーゼバッファー（３０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ  ｐＨ７．５、１５ｍＭのＭｇＣｌ２、４．５ｍＭのＭｎＣｌ２、１５μＭのＮａ３ＶＯ４および５０μｇ／ｍＬのＢＳＡ）中の０．２５μｇ／ｍＬの酵素、および基質（５μｇ／ｍＬのビオチン−ポリ−ＥＹ（Ｇｌｕ、Ｔｙｒ）（CIS-US, Inc.）および３μＭのＡＴＰ）を含む最終容量１０μＬで行う。２つの溶液を作る：５μｌの第１の溶液はキナーゼバッファー中にＦＧＦＲ３酵素を含み、まず３８４フォーマットＰｒｏｘｉＰｌａｔｅ（商標登録）（Perkin-Elmer）に分配し、次いでＤＭＳＯ中に溶解させた５０ｎＬの化合物を加え、次いで５μｌの第２の溶液はキナーゼバッファー中に基質（ポリ−ＥＹ）およびＡＴＰを含み、各ウェルに加えた。室温で１時間インキュベートして反応させ、３０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ  ｐＨ７．５、０．５ＭのＫＦ、５０ｍＭのＥＴＤＡ、０．２ｍｇ／ｍＬのＢＳＡ、１５μｇ／ｍＬのストレプトアビジン−ＸＬ６６５（CIS-US, Inc.）および１５０ｎｇ／ｍＬのクリプタート結合抗ホスホチロシン抗体（CIS-US, Inc.）を含む１０μＬのＨＴＲＦ検出混合物の添加により停止する。ストレプトアビジン−ビオチン相互作用をするため室温で１時間インキュベーション後、時間分解蛍光シグナルはＡｎａｌｙｓｔ  ＧＴ（Molecular Devices Corp.）で読む。ＩＣ５０値は１２個の濃度（５０μＭから０．２８ｎＭの１：３希釈）で各化合物の阻害％の線形回帰分析により計算する。このアッセイにおいて、本発明の化合物は１０ｎＭから２μＭの範囲のＩＣ５０を有する。
【００８６】
ＦＧＦＲ３（細胞アッセイ）
本発明の化合物をＦＧＦＲ３細胞キナーゼ活性に依存している基質転換Ｂａ／Ｆ３−ＴＥＬ−ＦＧＦＲ３細胞増殖を阻害する能力に対して試験する。Ｂａ／Ｆ３−ＴＥＬ−ＦＧＦＲ３を培養培地として１０％の胎児ウシ血清を補ったＲＰＭＩ  １６４０を含む懸濁液中に８００，０００細胞／ｍＬまで培養する。細胞５０μＬの培養培地中に５０００細胞／ウェルで３８４ウェル形式のプレート中に分配する。本発明の化合物をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中に溶解し、希釈する。一般的に１０ｍＭから０．０５μＭの範囲の濃度勾配を作るため、１：３連続希釈で１２点をＤＭＳＯ中に作る。細胞を５０ｎＬの希釈化合物で加え、４８時間、細胞培養インキュベーター中でインキュベーションする。増殖している細胞により作られる還元環境をモニタリングするために使用できるＡｌａｍａｒＢｌｕｅ（商標登録）（TREK Diagnostic Systems）を最終濃度１０％で細胞に加える。３７℃で細胞培養インキュベーター内でさらに４時間インキュベーション後、還元ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ（商標登録）（５３０ｎｍで励起、５８０ｎｍで放射）からの蛍光シグナルをＡｎａｌｙｓｔ  ＧＴ（Molecular Devices Corp.）で定量化する。ＩＣ５０値は１２個の濃度で各化合物の阻害％の線形回帰分析により計算する。
【００８７】
ＦＬＴ３およびＰＤＧＦＲβ（細胞アッセイ）
ＦＬＴ３およびＰＤＧＦＲβの細胞活性における本発明の化合物の効果を、Ｂａ／Ｆ３−ＴＥＬ−ＦＧＦＲ３を使用する代わりに、Ｂａ／Ｆ３−ＦＬＴ３−ＩＴＤおよびＢａ／Ｆ３−Ｔｅｌ−ＰＤＧＦＲβ各々を使用することを除いて上記ＦＧＦＲ３細胞活性と同一の方法を使用して実施する。
【００８８】
ｂ−Ｒａｆ−酵素アッセイ
本発明の化合物を、それらのｂ−Ｒａｆを阻害する能力について試験する。アッセイを、黒色壁かつ透明底の３８４ウェルMaxiSorpプレート(NUNC)で行う。基質、ＩκＢαをＤＰＢＳ(１：７５０)で希釈し、１５μlを各ウェルに添加する。プレートを４℃で一晩インキュベートし、ＥＭＢＬＡプレート洗浄機を使用して、３回ＴＢＳＴ（２５ｍＭのＴｒｉｓ、ｐＨ８．０、１５０ｍＭのＮａＣｌおよび０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０）で洗浄する。プレートをSuperblock(１５μｌ／ウェル）で３時間、室温でブロックし、ＴＢＳＴで３回洗浄し、軽く叩いて乾燥させる。２０μＭのＡＴＰ(１０μｌ）含有アッセイ緩衝液、続いて１００ｎｌまたは５００ｎｌの化合物を各ウェルに添加する。Ｂ−Ｒａｆをアッセイ緩衝液で希釈し（２５μｌ中に１μｌ）、１０μｌの希釈したｂ−Ｒａｆを各ウェルに添加する(０.４μｇ／ウェル）。プレートを室温で２．５時間インキュベートする。キナーゼ反応を、プレートを６回ＴＢＳＴで洗浄することにより停止させる。Ｐｈｏｓｐｈ−ＩκＢα(Ｓｅｒ３２／３６)抗体をSuperblock中で希釈し(１：１０,０００)、１５μｌを各ウェルに添加する。プレートを４℃で一晩インキュベートし、ＴＢＳＴで６回洗浄する。ＡＰ結合ヤギ抗マウスＩｇＧをSuperblockで希釈し(１：１,５００)、１５μｌを各ウェルに添加する。プレートを室温で１時間インキュベートし、ＴＢＳＴで６回洗浄する。１５μｌの蛍光Attophos AP基質(Promega)を各ウェルに添加し、プレートを室温で１５分インキュベートする。プレートをAcquestまたはAnalyst GTで、Fluorescence Intensity Program (励起４５５ｎｍ、放射５８０ｎｍ）を使用して読み取る。
【００８９】
ｂ−Ｒａｆ−細胞アッセイ
本発明の化合物をＡ３７５細胞でＭＥＫのリン酸化を阻害する能力に対して試験する。Ａ３７５細胞系（ＡＴＣＣ）はヒト黒色腫患者由来であり、Ｂ−Ｒａｆ遺伝子にＶ５９９Ｅ変異を有する。リン酸化ＭＥＫのレベルがＢ−Ｒａｆ変異のため上昇する。サブコンフルエントからコンフルエントＡ３７５細胞を化合物と２時間３７℃で無血清培地中でインキュベーションする。次いで細胞を冷ＰＢＳで１回洗浄し、１％のＴｒｉｔｏｎ  Ｘ１００を含む溶解バッファーで溶解する。遠心分離後、上清をＳＤＳ−ＰＡＧＥに付し、次いでニトロセルロース膜に移す。次いで膜を抗−リン酸−ＭＥＫ抗体（ｓｅｒ２１７／２２１）（細胞シグナル）でウエスタンブロッティングに付す。リン酸化ＭＥＫの量はニトロセルロース膜のリン酸−ＭＥＫバンドの密度によりモニタリングする。
【００９０】
Upstate KinaseProfilerＴＭ−放射酵素的フィルター結合アッセイ
本発明の化合物を、一連のキナーゼの個々のメンバーを阻害する能力についてアッセイする。化合物を、１０μＭの最終濃度でデュプリケートで、この一般的プロトコールに従い試験する。キナーゼ緩衝液（２．５μＬ、１０×−必要であればＭｎＣｌ２含有)、キナーゼ緩衝液中の活性キナーゼ(０.００１−０.０１単位；２．５μＬ）、特異的またはポリ(Ｇｌｕ４−Ｔｙｒ)ペプチド(５−５００μＭまたは.０１ｍｇ／ｍｌ）およびキナーゼ緩衝液（５０μＭ；５μＬ）を、氷上でエッペンドルフで混合する。Ｍｇ／ＡＴＰミックス(１０μＬ；６７.５(または３３.７５）ｍＭのＭｇＣｌ２、４５０(または２２５)μＭのＡＴＰおよび１μＣｉ／μｌ［γ−３２Ｐ]−ＡＴＰ（３０００Ｃｉ／ｍｍｏｌ））を添加し、反応物を約３０℃で約１０分インキュベートする。反応混合物を２ｃｍ×２ｃｍのＰ８１(ホスホセルロース、正に荷電したペプチド基質のため)またはWhatman No. 1(ポリ(Ｇｌｕ４−Ｔｙｒ)ペプチド基質のため)試験紙升目にスポット（２０μＬ)する。アッセイ升目を４回、各５分、０．７５％リン酸で、そして１回アセトンで５分洗浄する。アッセイ升目をシンチレーションバイアルに移し、５mlシンチレーションカクテルを添加し、基質への３２Ｐ取り込み（ｃｐｍ）をBeckmanシンチレーションカウンターで計数する。各反応について阻害パーセントを計算する。
【００９１】
遊離形または薬学的に許容される塩形の式Ｉの化合物は、例えば、本願に記載のインビトロ試験法により示される通り、価値のある薬理学的特性を示す。例えば、式Ｉの化合物は、好ましくは少なくとも下記のキナーゼの１つに対して１×１０−１０から１×１０−５Ｍの範囲、好ましくは１５０ｎＭ未満のＩＣ５０を示す：Ａｂｌ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ＦＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲβ、ｂ−Ｒａｆ、およびＦｌｔ−３。例えば：
（ｉ）２−［６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸［２−メチル−５−（３−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ）−フェニル］−アミド（実施例８）は野生型、Ｇ２５０Ｅ、Ｅ２５５Ｖ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７ＬおよびＭ３５１ＴＢｃｒ−ａｂｌ、各々対して５ｎＭ、２．２９μＭ、１２ｎＭ、１．２７μＭ５ｎＭおよび５ｎＭのＩＣ５０を有し；
（ｉｉ）２−［６−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド（実施例２９）は野生型およびＴ３１５ＩＢｃｒ−Ａｂｌ各々に対して８ｎＭおよび５７０ｎＭのＩＣ５０を有し；
（ｉｉｉ）２−（２−メチル−６−モルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イルアミノ）−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド（実施例２８）はＰＤＧＦＲβに対して５ｎＭのＩＣ５０を有し、そして
（ｉｖ）２−［６−（２−ヒドロキシ−エチルアミノ）−２−メチル−ピリミジン−４−イルアミノ］−チアゾール−５−カルボン酸｛２−メチル−５−［３−（４−メチル−イミダゾール−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ベンゾイルアミノ］−フェニル｝−アミド（化合物５）はＦｌｔ−３に対して４１ｎＭのＩＣ５０を有する。
【００９２】
１０μＭの濃度で式Ｉの化合物は、好ましくは１個またはそれ以上の下記のキナーゼ：  Ａｂｌ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ＦＧＦＲ３、ＰＤＧＦＲβ、ｂ−Ｒａｆ、およびＦｌｔ−３に対して５０％以上、好ましくは約７０％以上の阻害％を示す。
【００９３】
ここに記載の例および態様は、説明の目的のためのみであり、それに照らした様々な修飾または変化が当業者には示唆され、それらは本発明の精神および範囲の範囲内および添付の特許請求の範囲内に包含されることは理解されるべきである。本明細書で引用する全ての刊行物、特許および特許出願は全ての目的のために引用して本明細書に包含する。
【国際調査報告】
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