(57)【要約】  アナライトの検出方法が提供される。それぞれがアナライトに対する親和性を有するキャプチャ・エージェントでコーティングされた複数の粒子がサンプルと混合されて、アナライト−粒子の複合体を形成する。また、このシステムは、サンプルをセンサ表面に移動させる移動手段を含み、更にオプションであるが、磁場により、構築された構造がセンサ表面に隣接して磁場を確立する。共振センサが、センサ表面に結合されたアナライト−粒子の複合体の量に対応する信号を生じる。
2008541053.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
サンプルにおいて１又は複数の心臓マーカを検出することによって心臓損傷（cardiac injury）を検出する方法であって、
ａ）前記心臓マーカを結合することができるキャプチャ・エージェントでコーティングされた複数の粒子を流体チャンバの中に導入するステップであって、前記流体チャンバの少なくとも１つの表面は前記心臓マーカを結合することができるキャプチャ・エージェントを有する音響デバイスを含む、ステップと、
ｂ）前記音響デバイスによって出力される信号をモニタすることにより前記サンプルにおいて１又は複数の心臓マーカを検出するステップと、
を含むことを特徴とする方法。
【請求項２】
請求項１記載の方法において、前記音響デバイスはたわみ板波デバイスであることを特徴とする方法。
【請求項３】
請求項１記載の方法において、基準と比較して前記心臓マーカのレベルが高い場合には心臓損傷を示すことを特徴とする方法。
【請求項４】
請求項１記載の方法において、前記複数の粒子は前記流体チャンバの中に導入される前に前記サンプルに露出されることを特徴とする方法。
【請求項５】
請求項１記載の方法において、前記サンプルは前記複数の粒子を導入する前に前記流体チャンバの中に導入されることを特徴とする方法。
【請求項６】
請求項１記載の方法において、前記粒子は磁性体であり、前記音響デバイスの近傍において磁束を生じ、前記複数の磁性粒子の中の少なくとも１つを前記少なくとも１つの表面に引き寄せるステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項７】
請求項６記載の方法において、前記磁束はステップｃ）の前に除去されることを特徴とする方法。
【請求項８】
請求項１記載の方法において、前記サンプルは、血液、血漿、血清、脳脊髄液、尿、唾液及び生検材料で構成されるグループから選択されることを特徴とする方法。
【請求項９】
請求項１記載の方法において、前記１又は複数の心臓マーカは、ｃ−トロポニン−Ｉ、ミオグロビン、クレアチンキネーゼＭＢ（ＣＫ−ＭＢ）及び虚血修飾アルブミンで構成されるグループから選択されることを特徴とする方法。
【請求項１０】
請求項１記載の方法において、前記心臓マーカはｃ−トロポニン−Ｉであることを特徴とする方法。
【請求項１１】
請求項１記載の方法において、ステップｂ）の信号出力を制御信号と比較するステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項１２】
請求項１１記載の方法において、前記制御信号はサンプルが存在しないときに取得されることを特徴とする方法。
【請求項１３】
請求項１１記載の方法において、前記制御信号は標準曲線であることを特徴とする方法。
【請求項１４】
請求項１記載の方法において、前記心臓マーカを結合することができる前記キャプチャ・エージェントは前記表面に間接的に結合されていることを特徴とする方法。
【請求項１５】
請求項１４記載の方法において、前記表面は結合ペアの第１のメンバでコーティングされ、前記心臓マーカは前記結合ペアの第２のメンバに結合されることを特徴とする方法。
【請求項１６】
請求項１４記載の方法において、前記結合ペアは、ビオチン／アビジン、ビオチン／ストレプトアビジン及びビオチン／ニュートラアビジンで構成されるグループから選択されることを特徴とする方法。
【請求項１７】
請求項１記載の方法において、前記キャプチャ・エージェントは抗体であることを特徴とする方法。
【請求項１８】
請求項１７記載の方法において、前記粒子が結合されたキャプチャ・エージェントと表面が結合されたキャプチャ・エージェントとは同一のキャプチャ・エージェントであることを特徴とする方法。
【請求項１９】
個人における薬剤用量を調整すべきかどうかを判断する方法であって、
ａ）サンプルにおいて１又は複数の心臓マーカのレベルを検出するステップであって、
ｉ）前記心臓マーカを結合することができるキャプチャ・エージェントでコーティングされた複数の粒子と前記サンプルとを流体チャンバの中に導入するステップであって、前記流体チャンバの少なくとも１つの表面は前記心臓マーカを結合することができるキャプチャ・エージェントを有する音響デバイスを含む、ステップと、
ｉｉ）前記音響デバイスによって出力される信号をモニタすることにより前記サンプルにおける１又は複数の心臓マーカのレベルを検出するステップと、
を含むステップと、
ｂ）前記サンプルの中の前記１又は複数の心臓マーカのレベルに基づいて前記薬剤用量を調整すべきかどうかを判断するステップと、
を含むことを特徴とする方法。
【請求項２０】
サンプルにおけるバクテリアを検出する方法であって、
ａ）前記バクテリアを結合することができるキャプチャ・エージェントでコーティングされた複数の粒子を流体チャンバの中に導入するステップであって、前記流体チャンバの少なくとも１つの表面は前記バクテリアを結合することができるキャプチャ・エージェントを有する音響デバイスを含む、ステップと、
ｂ）前記音響デバイスによって出力される信号をモニタすることにより前記サンプルにおけるバクテリアを検出するステップと、
を含むことを特徴とする方法。
【請求項２１】
請求項２０記載の方法において、前記音響デバイスはたわみ板波デバイスであることを特徴とする方法。
【請求項２２】
請求項２０記載の方法において、前記複数の粒子は前記流体チャンバの中に導入される前に前記サンプルに露出されることを特徴とする方法。
【請求項２３】
請求項２０記載の方法において、前記サンプルは前記複数の粒子を導入する前に前記流体チャンバの中に導入されることを特徴とする方法。
【請求項２４】
請求項２０記載の方法において、前記粒子は磁性体であり、前記音響デバイスの近傍において磁束を生じ、前記複数の磁性粒子の中の少なくとも１つを前記少なくとも１つの表面に引き寄せるステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項２５】
請求項２４記載の方法において、前記磁束はステップｂ）の前に除去されることを特徴とする方法。
【請求項２６】
請求項２０記載の方法において、前記サンプルは、唾液、鼻腔スワブ（nasal swab）、血液、血漿、血清、脳脊髄液、尿、及び糞便（fecal matter）で構成されるグループから選択されることを特徴とする方法。
【請求項２７】
請求項２０記載の方法において、前記サンプルは鶏肉洗浄液及び鶏肉（poultry wash and meat）から選択されることを特徴とする方法。
【請求項２８】
請求項２０記載の方法において、前記バクテリアは、病原性大腸菌、淋菌（Neisseria gonorrhoeae）、ボレリア・バーグドルフェリ（ライム病原因菌、Borrelia burgdorferi）、コレラ菌（Vibrio cholerae）、ジフテリア菌（Corynebacterium diphtheriae）、ネズミチフス菌（Salmonella typhimurium/Salmonella thyphimurim）、サルモネラエンテリカ（Salmonella enterica）、赤痢菌（Shigella sp.）、カンピロバクタ（Campylobacter sp.）、クロストリジウム・ディフィシル（Clostridium difficile）、クリプトスポリジア（Cryptosporidium sp.）及び腸球菌（Enterococcus sp.）で構成されるグループから選択されることを特徴とする方法。
【請求項２９】
請求項２０記載の方法において、ステップｂ）の信号出力を制御信号と比較するステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項３０】
請求項２９記載の方法において、前記制御信号はサンプルが存在しないときに取得されることを特徴とする方法。
【請求項３１】
請求項２９記載の方法において、前記制御信号は標準曲線であることを特徴とする方法。
【請求項３２】
請求項２０記載の方法において、前記バクテリアを結合することができる前記キャプチャ・エージェントは前記表面に間接的に結合されていることを特徴とする方法。
【請求項３３】
請求項３２記載の方法において、前記表面は結合ペアの第１のメンバでコーティングされ、前記キャプチャ・エージェントは前記結合ペアの第２のメンバに結合されることを特徴とする方法。
【請求項３４】
請求項３２記載の方法において、前記結合ペアは、ビオチン／アビジン、ビオチン／ストレプトアビジン及びビオチン／ニュートラアビジンで構成されるグループから選択されることを特徴とする方法。
【請求項３５】
請求項２０記載の方法において、前記キャプチャ・エージェントは抗体であることを特徴とする方法。
【請求項３６】
請求項３５記載の方法において、前記粒子が結合されたキャプチャ・エージェントと表面が結合されたキャプチャ・エージェントとは同一のキャプチャ・エージェントであることを特徴とする方法。
【請求項３７】
請求項３６記載の方法において、前記サンプルは肉又は鶏肉洗浄液を含み、サンプルにおいてバクテリアを検出することによって食品の安全性を評価するステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項３８】
サンプルにおけるバクテリアを検出することによって食品の安全性を評価する方法であって、
ａ）前記バクテリアを結合することができるキャプチャ・エージェントでコーティングされた複数の粒子を流体チャンバの中に導入するステップであって、前記流体チャンバの少なくとも１つの表面は前記バクテリアを結合することができるキャプチャ・エージェントを有する音響デバイスを含む、ステップと、
ｂ）前記音響デバイスによって出力される信号をモニタすることにより前記サンプルにおけるバクテリアを検出するステップと、
を含むことを特徴とする方法。
【請求項３９】
請求項３８記載の方法において、前記音響デバイスはたわみ板波デバイスであることを特徴とする方法。
【請求項４０】
請求項３８記載の方法において、前記複数の粒子は前記流体チャンバの中に導入される前に前記サンプルに露出されることを特徴とする方法。
【請求項４１】
請求項３８記載の方法において、前記サンプルは前記複数の粒子を導入する前に前記流体チャンバの中に導入されることを特徴とする方法。
【請求項４２】
請求項３８記載の方法において、前記粒子は磁性体であり、前記音響デバイスの近傍において磁束を生じ、前記複数の磁性粒子の中の少なくとも１つを前記少なくとも１つの表面に引き寄せるステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項４３】
請求項４２記載の方法において、前記磁束はステップｂ）の前に除去されることを特徴とする方法。
【請求項４４】
請求項３８記載の方法において、前記サンプルは、血液、血漿、血清、脳脊髄液、尿、及び糞便で構成されるグループから選択されることを特徴とする方法。
【請求項４５】
請求項３９記載の方法において、前記サンプルは鶏肉洗浄液及び鶏肉から選択されることを特徴とする方法。
【請求項４６】
請求項３８記載の方法において、前記バクテリアは、病原性大腸菌、ネズミチフス菌（Salmonella typhimurium/Salmonella thyphimurim）、サルモネラエンテリカ（Salmonella enterica）、赤痢菌（Shigella sp.）、カンピロバクタ（Campylobacter sp.）、クロストリジウム・ディフィシル（Clostridium difficile）、クリプトスポリジア（Cryptosporidium sp.）及び腸球菌（Enterococcus sp.）で構成されるグループから選択されることを特徴とする方法。
【請求項４７】
請求項３８記載の方法において、ステップｂ）の信号出力を制御信号と比較するステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項４８】
請求項４７記載の方法において、前記制御信号はサンプルが存在しないときに取得されることを特徴とする方法。
【請求項４９】
請求項４７記載の方法において、前記制御信号は標準曲線であることを特徴とする方法。
【請求項５０】
請求項３８記載の方法において、前記バクテリアを結合することができる前記キャプチャ・エージェントは前記表面に間接的に結合されていることを特徴とする方法。
【請求項５１】
請求項５０記載の方法において、前記表面は結合ペアの第１のメンバでコーティングされ、前記キャプチャ・エージェントは前記結合ペアの第２のメンバに結合されることを特徴とする方法。
【請求項５２】
請求項５１記載の方法において、前記結合ペアは、ビオチン／アビジン、ビオチン／ストレプトアビジン及びビオチン／ニュートラアビジンで構成されるグループから選択されることを特徴とする方法。
【請求項５３】
請求項３８記載の方法において、前記キャプチャ・エージェントは抗体であることを特徴とする方法。
【請求項５４】
個人におけるウイルス負荷（viral load）を検出する方法であって、
ａ）ウイルスを結合することができるキャプチャ・エージェントでコーティングされた複数の粒子を流体チャンバの中に導入するステップであって、前記流体チャンバの少なくとも１つの表面は前記ウイルスを結合することができるキャプチャ・エージェントを有する音響デバイスを含む、ステップと、
ｂ）前記音響デバイスによって出力される信号をモニタすることにより前記個人におけるウイルス負荷を検出するステップと、
を含むことを特徴とする方法。
【請求項５５】
請求項５４記載の方法において、前記音響デバイスはたわみ板波デバイスであることを特徴とする方法。
【請求項５６】
請求項５４記載の方法において、前記複数の粒子は前記流体チャンバの中に導入される前に前記サンプルに露出されることを特徴とする方法。
【請求項５７】
請求項５４記載の方法において、前記サンプルは前記複数の粒子を導入する前に前記流体チャンバの中に導入されることを特徴とする方法。
【請求項５８】
請求項５４記載の方法において、前記粒子は磁性体であり、前記音響デバイスの近傍において磁束を生じ、前記複数の磁性粒子の中の少なくとも１つを前記少なくとも１つの表面に引き寄せるステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項５９】
請求項５８記載の方法において、前記磁束はステップｂ）の前に除去されることを特徴とする方法。
【請求項６０】
請求項５４記載の方法において、前記サンプルは、血液、血漿、血清、脳脊髄液及び尿で構成されるグループから選択されることを特徴とする方法。
【請求項６１】
請求項５４記載の方法において、前記ウイルスはヒト免疫不全ウイルス（Human Immunodeficiency virus）であることを特徴とする方法。
【請求項６２】
請求項５４記載の方法において、ステップｂ）の信号出力を制御信号と比較するステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項６３】
請求項６２記載の方法において、前記制御信号はサンプルが存在しないときに取得されることを特徴とする方法。
【請求項６４】
請求項６２記載の方法において、前記制御信号は標準曲線であることを特徴とする方法。
【請求項６５】
請求項５４記載の方法において、前記ウイルスを結合することができる前記キャプチャ・エージェントは前記表面に間接的に結合されていることを特徴とする方法。
【請求項６６】
請求項６５記載の方法において、前記表面は結合ペアの第１のメンバでコーティングされ、前記キャプチャ・エージェントは前記結合ペアの第２のメンバに結合されることを特徴とする方法。
【請求項６７】
請求項６６記載の方法において、前記結合ペアは、ビオチン／アビジン、ビオチン／ストレプトアビジン及びビオチン／ニュートラアビジンで構成されるグループから選択されることを特徴とする方法。
【請求項６８】
請求項５４記載の方法において、前記キャプチャ・エージェントは抗体であることを特徴とする方法。
【請求項６９】
請求項６８記載の方法において、前記粒子が結合されたキャプチャ・エージェントと表面が結合されたキャプチャ・エージェントとは同一のキャプチャ・エージェントであることを特徴とする方法。
【請求項７０】
アナライトの検出装置であって、
流体が入るために少なくとも１つの開口を有する流体チャンバと、
前記流体チャンバの少なくとも１つの内部表面の少なくとも一部を画定するたわみ板波デバイスと、
前記たわみ板波デバイスによって出力される少なくとも１つの信号をモニタするモニタ手段と、
前記アナライトに対する親和性を有するキャプチャ・エージェントでコーティングされた複数の磁性粒子と、
磁性粒子を前記流体チャンバの前記少なくとも１つの内部表面に向かって選択的に引き寄せる第１の磁束源と、
を備えていることを特徴とする装置。
【請求項７１】
請求項７０記載の装置において、前記流体チャンバの前記少なくとも１つの内部表面の近傍において流体のフロー、圧力又は軌跡の中の少なくとも１つを変更するように構成された流体制御手段を更に備えていることを特徴とする装置。
【請求項７２】
請求項７０記載の装置において、前記第１の磁束源は、前記流体チャンバの前記少なくとも１つの内部表面から約２００μｍの範囲内であって前記流体チャンバの外部に存在することができることを特徴とする装置。
【請求項７３】
請求項７０記載の装置において、第２の磁束源を更に備えていることを特徴とする装置。
【請求項７４】
請求項７０記載の装置において、前記少なくとも１つの内部表面に引きつけられた磁性粒子の性質を特徴付ける手段を更に備えていることを特徴とする装置。
【請求項７５】
請求項７４記載の装置において、前記性質は、粒体の濃度、密度、サイズ及びそれらの組合せで構成されるグループから選択されることを特徴とする装置。
【請求項７６】
請求項７０記載の装置において、この装置の使用をトラッキングする識別手段を更に備えていることを特徴とする装置。
【請求項７７】
請求項７０記載の装置において、前記流体チャンバの前記少なくとも１つの内部表面の近傍で流体フローを変化させるフロー発散手段を更に備えていることを特徴とする装置。
【請求項７８】
請求項７０記載の装置において、前記たわみ板波デバイスは複数の櫛形電極を備えていることを特徴とする装置。
【請求項７９】
請求項７０記載の装置において、前記流体チャンバに入る前に前記流体が通過するフィルタを更に備えていることを特徴とする装置。
【請求項８０】
共鳴デバイス・システムのためのカートリッジであって、
流体が入るために少なくとも１つの開口を有する第１の流体チャンバと、
前記流体チャンバの少なくとも１つの内部表面を画定するたわみ板波デバイスと、
磁性粒子を前記流体チャンバの前記少なくとも１つの内部表面に向かって選択的に引き寄せる第１の磁束源と、
を備えていることを特徴とするカートリッジ。
【請求項８１】
請求項８０記載のカートリッジにおいて、前記第１の流体チャンバの前記少なくとも１つの開口と流体的に連絡する少なくとも１つの出口を含む第２の流体チャンバを更に備えていることを特徴とするカートリッジ。
【請求項８２】
請求項８１記載のカートリッジにおいて、当初は前記第２の流体チャンバの内部に配置されている複数の磁性粒子を更に備えていることを特徴とするカートリッジ。
【請求項８３】
請求項８２記載のカートリッジにおいて、前記複数の磁性粒子の少なくとも一部と流体の中に配置されたアナライトとを組み合わせる手段を更に備えていることを特徴とするカートリッジ。
【請求項８４】
請求項８０記載のカートリッジにおいて、第２の磁束源を更に備えていることを特徴とするカートリッジ。
【請求項８５】
請求項８０記載のカートリッジにおいて、前記少なくとも１つの内部表面に引きつけられた磁性粒子の性質を特徴付ける手段を更に備えていることを特徴とするカートリッジ。
【請求項８６】
請求項８０記載のカートリッジにおいて、このカートリッジの使用をトラッキングする識別手段を更に備えていることを特徴とするカートリッジ。
【請求項８７】
請求項８０記載のカートリッジにおいて、前記第１の流体チャンバの前記少なくとも１つの内部表面の近傍で流体フローを変化させるフロー発散手段を更に備えていることを特徴とするカートリッジ。
【請求項８８】
請求項８０記載のカートリッジにおいて、前記第１の磁束源は、前記第１の流体チャンバの前記少なくとも１つの内部表面から約２００μｍの範囲内であって前記第１の流体チャンバの外部に存在することができることを特徴とするカートリッジ。
【請求項８９】
請求項８０記載のカートリッジにおいて、前記流体チャンバに入る前に前記流体が通過するフィルタを更に備えていることを特徴とするカートリッジ。
【請求項９０】
請求項８２記載のカートリッジにおいて、前記第１の流体チャンバの出口と流体的に連絡する少なくとも１つの入口を含む第２の流体チャンバを更に備えていることを特徴とするカートリッジ。
【請求項９１】
アナライトの検出方法であって、
アナライトを含む流体と前記アナライトに対する親和性を有するキャプチャ・エージェントを含む複数の磁性粒子とを混合し、少なくとも一部のアナライトに結合された少なくとも一部の磁性粒子を生じるステップと、
前記混合された流体を第１の流体チャンバの中に方向付けるステップであって、たわみ板波デバイスの少なくとも１つの表面は前記第１の流体チャンバの中の流体と流体的に連絡している、ステップと、
前記たわみ板波デバイスの近傍において第１の磁束を生じ、前記複数の結合された磁性粒子の少なくとも一部を前記たわみ板波デバイスの前記少なくとも１つの表面に引きつけるステップと、
を含むことを特徴とする方法。
【請求項９２】
請求項９１記載の方法において、前記たわみ板波デバイスの前記少なくとも１つの表面の近傍において前記第１の磁束の少なくとも１つを選択的に変化させる、又は、前記たわみ板波デバイスの前記少なくとも１つの表面の近傍において流体フローの少なくとも１つの性質を変化させ、前記たわみ板波デバイスの前記少なくとも１つの表面の少なくとも一部における前記複数の結合された磁性粒子の少なくとも一部を選択的に特定するステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項９３】
請求項９２記載の方法において、前記流体フローの前記少なくとも１つの性質は、流体の圧力、流率及び流体の軌跡で構成されるグループから選択されることを特徴とする方法。
【請求項９４】
請求項９２記載の方法において、前記流体の少なくとも１つの性質を変化させるステップは、前記流体のフロー経路を変化させて前記たわみ板波デバイスの前記少なくとも１つの表面の近傍において前記磁性粒子の動きを制御するステップを含むことを特徴とする方法。
【請求項９５】
請求項９１記載の方法において、前記第１の磁束と対向する方向に第２の磁束を適用するステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項９６】
請求項９５記載の方法において、前記第２の磁束を変化させ、前記磁性粒子の中でアナライトに結合されていないものの少なくとも一部を前記たわみ板波デバイスの前記少なくとも１つの表面から選択的に移動させるステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項９７】
請求項９１記載の方法において、前記第１の磁束を終了し、第２の磁束を生じて前記磁性粒子の一部を前記たわみ板波デバイスの前記少なくとも１つの表面から選択的に除去するステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項９８】
請求項９１記載の方法において、前記たわみ板波デバイスを励起し前記たわみ板波デバイスの前記少なくとも１つの表面に接着する物質を選択的に移動させるステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項９９】
請求項９１記載の方法において、前記少なくとも１つの内部表面に引き寄せられた前記磁性粒子の性質を特徴付けるステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項１００】
請求項９１記載の方法において、前記混合された流体を前記第１の流体チャンバの中に方向付ける前に前記混合された流体をフィルタリングするステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項１０１】
請求項９１記載の方法において、前記混合された流体を前記第１の流体チャンバの中に方向付けるステップは、前記混合された流体を前記第１の流体チャンバの第１の開口の中へ及び前記第１の流体チャンバの第２の開口の中から外へ移動させるステップを含むことを特徴とする方法。
【請求項１０２】
請求項９１記載の方法において、前記混合された流体を前記第１の流体チャンバの中へ方向付けるステップは、前記混合された流体を前記第１の流体チャンバの第１の開口の中へ流すステップを含むことを特徴とする方法。
【請求項１０３】
請求項９１記載の方法において、前記第１の流体チャンバはカートリッジの中に存在し、前記アナライトを含む流体と前記キャプチャ・エージェントを含む前記複数の磁性粒子の少なくとも一部とは、前記混合された流体を前記第１の流体チャンバの中に方向付ける前に、前記カートリッジの第２の流体チャンバの中で混合されることを特徴とする方法。
【請求項１０４】
請求項９１記載の方法において、前記混合された流体の少なくとも一部を前記第１の流体チャンバの開口の中から外へ方向付けるステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項１０５】
請求項９１記載の方法において、前記混合された流体を前記第１の流体チャンバの中へ方向付けるステップは、前記第１の流体チャンバを含むカートリッジを前記混合された流体を含む容器の中に沈めるステップを含むことを特徴とする方法。
【請求項１０６】
請求項９１記載の方法において、前記たわみ板波デバイスの前記少なくとも１つの表面の近傍において前記第１の磁束の少なくとも１つを選択的に変化させる、又は、前記たわみ板波デバイスの前記少なくとも１つの表面の近傍において流体フローの少なくとも１つの性質を変化させ、前記混合された流体の中にある物質を前記第１の流体チャンバから選択的に除去するステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項１０７】
請求項１０６記載の方法において、前記物質は、磁性粒子、アナライト、結合された磁性粒子及びこれらの組合せで構成されるグループから選択されることを特徴とする方法。
【請求項１０８】
アナライトの検出方法であって、
流体チャンバの中にあるたわみ板波デバイスの表面の少なくとも一部を第１のキャプチャ・エージェントでコーティングするステップと、
アナライトを含む流体を前記流体チャンバの中に方向付け、前記アナライトの一部を、前記たわみ板波デバイスの上に存在する前記キャプチャ・エージェントに結合するステップと、
第２のキャプチャ・エージェントを含む複数の磁性粒子を含む流体を、前記流体チャンバの中に方向付けるステップと、
前記たわみ板波デバイスの近傍において磁束を生じ、前記複数の磁性粒子の少なくとも一部を前記たわみ板波デバイスの前記表面の方向に引きつけるステップと、
を含むことを特徴とする方法。
【請求項１０９】
請求項１０８記載の方法において、前記複数の磁性粒子の少なくとも一部は前記たわみ板波デバイスの前記表面の上のアナライト又はキャプチャ・エージェントに結合することを特徴とする方法。
【請求項１１０】
請求項１０９記載の方法において、前記磁束を選択的に変化させ結合されていない粒子が前記流体チャンバを出ることを可能にするステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項１１１】
アナライトの検出装置であって、
サンプルに少なくとも部分的に接触する表面を画定するたわみ板波デバイスと、
前記たわみ板波デバイスによって出力される少なくとも１つの信号をモニタするモニタ手段と、
前記アナライトに対する親和性を有するキャプチャ・エージェントでコーティングされた複数の磁性粒子と、
磁性粒子を選択的に前記表面に引きつける第１の磁束源と、
を備えていることを特徴とする装置。
【請求項１１２】
共鳴デバイス・システムのためのカートリッジであって、
流体が入る少なくとも１つの開口を有する第１の流体チャンバと、
前記流体チャンバの少なくとも１つの内部表面を画定するたわみ板波デバイスと、
を備えており、前記カートリッジは、前記たわみ板波デバイスの近傍において磁束源を提供し磁性粒子を前記第１の流体チャンバの少なくとも１つの内部表面に引きつけるように構築され構成されていることを特徴とするカートリッジ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は流体サンプルの１つ以上の被検体を発見する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
液体培地の被検体（例えば生物学的因子）を発見するシステムのための著しい挑戦は、メディア中の被検体の濃縮、およびセンサ表面への被検体の輸送を含んでいる。生物学のアプリケーションについては、そのような被検体の濃縮は低い傾向があるので、濃縮問題は一般に発生する。さらに、生物学の被検体（例えば細胞、細胞フラグメント、およびタンパク質と核酸のような高分子）は、比較的大きい傾向がある。従って、これらのより大きな被検体が流動性の溶液で非常にゆっくり拡散するので、輸送問題は発生する。細胞、細胞フラグメント、およびタンパク質と核酸のような分子に加えて、小さな分子被検体の検出は、疾病（患者の中のモニタリング薬ポピュレーションファルマコキネティクス）を分析するための、および潜在的な薬ターゲット用の小さな分子ライブラリを遮るための有用なマーカーになりえる。小さな分子医薬品を含む多くの治療薬が、薬の有益な効果を最大限にし、かつ生じる場合がある悪影響を回避するために患者の中の頻繁なモニタリングを要求する。
【０００３】
疾病の診断書は、しばしば個体から得られたサンプル中の被検体の迅速な検出を要求する。被検体の検出が、しばしば緊急処置室か救急車でのように緊急条件の下で生じる。
しかしながら、忍耐強いサンプル中の被検体の検出は典型的には診療室かクリニックのサンプルを得て解析のためにサイトからサンプルを送ることを要求する。被検体によって、その解析はいくつかのことへの１週かかる場合がある。解析の結果はドクターに送信される。その後、この人は必要なときに治療を調節するために情報を使用し、新しい治療摂生を伝えるために患者と連絡をとる。サンプルの分析に関連した遅れは、ドクターが正確に適切な治療を指定することを困難にする。更に、もし疾病進行の間違ったステージで与えられれば、特別の治療は効果がない場合があるしあるいは有毒の場合がある。例えば、レベルあるいは１つ以上の心外傷マーカーが、患者が現在心臓発作を経験しているか最近の出来事に心臓発作の持病があったかどうか示す場合がある。
【０００４】
速く被検体の低濃度を検知することができる、改善された分析の必要がある。さらに、個々の患者の中の望まれない副作用を低減する間に薬の効能を維持する薬摂生をカスタマイズするために小さな分子被検体を含む被検体の改善された測定の必要がある。更に、サンプルを得ることと分析の結果を得ることの間の遅れを縮小するために生物学上測定する注意および（または）臨床的に適切な被検体のポイントで使用することができる方法および装置の必要がある。
【０００５】
競合し得る検出用の重要なメトリックは、１つの単位時間当たりのセンサに蓄積された被検体の量である。よいパフォーマンスについては、蓄積（また生じる信号の過渡現象）の割合は、センサ漂流割合に速く関連のある必要がある。被検体検出法用の別の重要な性能メトリックは、システムがセンサ表面に興味のある被検体を優先的に集めることができる程度である。多くの生物学的試料が外来の背景成分（例えば他のタンパク質、細胞、核酸、汚れ）を含んでいるので、これらの背景成分が希望の測定に邪魔をするのを防ぐことが必要である。したがって、センサに選択的に被検体を引き付けて、竪坑周囲への妨げる背景成分を許可する輸送方法は、有限の長所を持つ。センサ表面に被検体（例えば抗体、挨拶のＤＮＡ鎖など）の選択的な結合と協力して使用されるそのような方法は、被検体の量に関する大量の外来の背景成分を備えたサンプルのための高感度測定を伝えることができる。
【０００６】
センサ表面への被検体の輸送を改善する様々な方法は濾過、新しいフロー幾何学、音場、電気的なフィールド（時間変えること、そして静的）および磁界を含めて提案された。
音響の励起はフィールド結節に細胞を引き付けるために使用された。しかし、表面へ資料を輸送するためにこの技術を単独で使用するのは難しい。
【０００７】
電場（電界、電気泳動と誘電泳動）は輸送を向上させるために使用されたが、すべての被検体およびサンプル・タイプに普遍的に適用可能ではない。それらは、より大きな被検体（例えば細胞）に一般により有効である。更に、微生物の電気的性質はすべての意図した操作条件の下のシステム性能を予言することを難しくして、与えられた種および株の内に変わる場合がある。時々、輸送のパフォーマンスを改善するサンプルのイオン強度を調整することが必要である。この要求は最適結合と矛盾するか、あるいは分析の中で条件を洗うことができる。さらに、電気的なフィールドはエネルギーと熱の導電性流体（例えば０．１Ｍのリン酸緩衝液）を消すことができる。暖房と生物学の被検体を破損する場合があるので、それは不適当である。
【０００８】
免疫磁気分離（ＩＭＳ）法はサンプルから被検体を分離することで当技術の中で知られている。
【発明の概要】
【０００９】
本発明によると、サンプルにおいて１又は複数の心臓マーカを検出することによって心臓損傷（cardiac injury）を検出する方法であって、ａ）前記心臓マーカを結合することができるキャプチャ・エージェントでコーティングされた複数の粒子を流体チャンバの中に導入するステップであって、前記流体チャンバの少なくとも１つの表面は前記心臓マーカを結合することができるキャプチャ・エージェントを有する音響デバイスを含む、ステップと、ｂ）前記音響デバイスによって出力される信号をモニタすることにより前記サンプルにおいて１又は複数の心臓マーカを検出するステップと、  を含む方法が提供される。
【００１０】
更に、本発明によると、個人における薬剤用量を調整すべきかどうかを判断する方法であって、ａ）サンプルにおいて１又は複数の心臓マーカのレベルを検出するステップであって、ｉ）前記心臓マーカを結合することができるキャプチャ・エージェントでコーティングされた複数の粒子と前記サンプルとを流体チャンバの中に導入するステップであって、前記流体チャンバの少なくとも１つの表面は前記心臓マーカを結合することができるキャプチャ・エージェントを有する音響デバイスを含む、ステップと、ｉｉ）前記音響デバイスによって出力される信号をモニタすることにより前記サンプルにおける１又は複数の心臓マーカのレベルを検出するステップと、を含むステップと、ｂ）前記サンプルの中の前記１又は複数の心臓マーカのレベルに基づいて前記薬剤用量を調整すべきかどうかを判断するステップと、を含む方法が提供される。
【００１１】
また、本発明によると、サンプルにおけるバクテリアを検出する方法であって、ａ）前記バクテリアを結合することができるキャプチャ・エージェントでコーティングされた複数の粒子を流体チャンバの中に導入するステップであって、前記流体チャンバの少なくとも１つの表面は前記バクテリアを結合することができるキャプチャ・エージェントを有する音響デバイスを含む、ステップと、ｂ）前記音響デバイスによって出力される信号をモニタすることにより前記サンプルにおけるバクテリアを検出するステップと、を含む方法が提供される。
【００１２】
本発明では、前記バクテリアは、病原性大腸菌、淋菌（Neisseria gonorrhoeae）、ボレリア・バーグドルフェリ（ライム病原因菌、Borrelia burgdorferi）、コレラ菌（Vibrio cholerae）、ジフテリア菌（Corynebacterium diphtheriae）、ネズミチフス菌（Salmonella typhimurium/Salmonella thyphimurim）、サルモネラエンテリカ（Salmonella enterica）、赤痢菌（Shigella sp.）、カンピロバクタ（Campylobacter sp.）、クロストリジウム・ディフィシル（Clostridium difficile）、クリプトスポリジア（Cryptosporidium sp.）及び腸球菌（Enterococcus sp.）で構成されるグループから選択される。
【００１３】
本発明によると、サンプルにおけるバクテリアを検出することによって食品の安全性を評価する方法であって、ａ）前記バクテリアを結合することができるキャプチャ・エージェントでコーティングされた複数の粒子を流体チャンバの中に導入するステップであって、前記流体チャンバの少なくとも１つの表面は前記バクテリアを結合することができるキャプチャ・エージェントを有する音響デバイスを含む、ステップと、ｂ）前記音響デバイスによって出力される信号をモニタすることにより前記サンプルにおけるバクテリアを検出するステップと、を含む方法が提供される。
【００１４】
本発明によると、個人におけるウイルス負荷（viral load）を検出する方法であって、ａ）ウイルスを結合することができるキャプチャ・エージェントでコーティングされた複数の粒子を流体チャンバの中に導入するステップであって、前記流体チャンバの少なくとも１つの表面は前記ウイルスを結合することができるキャプチャ・エージェントを有する音響デバイスを含む、ステップと、ｂ）前記音響デバイスによって出力される信号をモニタすることにより前記個人におけるウイルス負荷を検出するステップと、を含む方法が提供される。
【００１５】
本発明によると、アナライトの検出装置であって、流体が入るために少なくとも１つの開口を有する流体チャンバと、前記流体チャンバの少なくとも１つの内部表面の少なくとも一部を画定するたわみ板波デバイスと、前記たわみ板波デバイスによって出力される少なくとも１つの信号をモニタするモニタ手段と、前記アナライトに対する親和性を有するキャプチャ・エージェントでコーティングされた複数の磁性粒子と、磁性粒子を前記流体チャンバの前記少なくとも１つの内部表面に向かって選択的に引き寄せる第１の磁束源と、を備えている装置が提供される。
【００１６】
本発明によると、共鳴デバイス・システムのためのカートリッジであって、流体が入るために少なくとも１つの開口を有する第１の流体チャンバと、前記流体チャンバの少なくとも１つの内部表面を画定するたわみ板波デバイスと、磁性粒子を前記流体チャンバの前記少なくとも１つの内部表面に向かって選択的に引き寄せる第１の磁束源と、を備えているカートリッジが提供される。
【００１７】
本発明によると、アナライトの検出方法であって、アナライトを含む流体と前記アナライトに対する親和性を有するキャプチャ・エージェントを含む複数の磁性粒子とを混合し、少なくとも一部のアナライトに結合された少なくとも一部の磁性粒子を生じるステップと、前記混合された流体を第１の流体チャンバの中に方向付けるステップであって、たわみ板波デバイスの少なくとも１つの表面は前記第１の流体チャンバの中の流体と流体的に連絡している、ステップと、前記たわみ板波デバイスの近傍において第１の磁束を生じ、前記複数の結合された磁性粒子の少なくとも一部を前記たわみ板波デバイスの前記少なくとも１つの表面に引きつけるステップと、を含む方法が提供される。
【００１８】
本発明によると、アナライトの検出方法であって、流体チャンバの中にあるたわみ板波デバイスの表面の少なくとも一部を第１のキャプチャ・エージェントでコーティングするステップと、アナライトを含む流体を前記流体チャンバの中に方向付け、前記アナライトの一部を、前記たわみ板波デバイスの上に存在する前記キャプチャ・エージェントに結合するステップと、第２のキャプチャ・エージェントを含む複数の磁性粒子を含む流体を、前記流体チャンバの中に方向付けるステップと、前記たわみ板波デバイスの近傍において磁束を生じ、前記複数の磁性粒子の少なくとも一部を前記たわみ板波デバイスの前記表面の方向に引きつけるステップと、を含む方法が提供される。
【００１９】
本発明によると、アナライトの検出装置であって、サンプルに少なくとも部分的に接触する表面を画定するたわみ板波デバイスと、前記たわみ板波デバイスによって出力される少なくとも１つの信号をモニタするモニタ手段と、前記アナライトに対する親和性を有するキャプチャ・エージェントでコーティングされた複数の磁性粒子と、磁性粒子を選択的に前記表面に引きつける第１の磁束源と、を備えている装置が提供される。
【００２０】
本発明によると、共鳴デバイス・システムのためのカートリッジであって、流体が入る少なくとも１つの開口を有する第１の流体チャンバと、前記流体チャンバの少なくとも１つの内部表面を画定するたわみ板波デバイスと、を備えており、前記カートリッジは、前記たわみ板波デバイスの近傍において磁束源を提供し磁性粒子を前記第１の流体チャンバの少なくとも１つの内部表面に引きつけるように構築され構成されているカートリッジが提供される。
【００２１】
本発明は診断書疾病に慣れることができるか、あるいはサンプルに検知された被検体のレベルに基づいた疾病にかかる危険を評価することができる。さらに、患者が１つ以上の心臓のマーカーのレベルに基づいた心臓発作を経験したとしても、その発明は例えば、患者の条件を評価するために使用することができる。その発明は感染（例えば、バクテリア、ウイルス、あるいは寄生生物）および（または）感染がどれくらい遠くに進歩したかを検知するために使用することができる。本発明は、実時間（すなわちサンプルが分析されているとともに）の被検体の検出を許可する。さらに、本発明は、注意をカスタマイズし、かつ忍耐強いコンプライアンスのレベルを増加させるために遅れ（例えば離れた試験施設への送るサンプルに関係していた）を回避する間に生物学上測定する注意および（または）臨床的に適切な被検体のポイントで使用することができる。ここに使用されるように、注意の項ポイントは例えば、診療室、クリニック、緊急処置室およびモバイルの処理施設（例えば救急車）を含むことができる。本発明の結果、被検体の下位レベルは従来の分析と比較して検知することができる。驚いたことに、１つのサンプル当たりのより少数の粒子状物質の使用は、被検体のより感知可能な検出を考慮に入れる。被検体のサイズが粒子のサイズの命令である場合、および被検体が小さな分子である場合、これは見つかった。更に、センサ表面が薄いので（例えば数ミクロンの命令の１つの実施例中で）、作り上げられた装置、および本発明の法則によって行なわれた方法は、粒子状物質の低濃度を捕らえるのに特に役立つ。１つの実施例では、薄い表面は傾斜磁場と磁気微粒子と共に使用される。センサ表面が薄いので、大きな傾斜磁場は引き起こされた１つでありえる、センサ表面の側面。サンプルに含まれていた他の資料がそばに流れることを可能にしている間、大きな傾斜磁場はセンサの表面に近いフィールドを集中させることにより、センサ表面への磁気微粒子の魅力を高める。このように、傾斜磁場が、それらが境界被検体と対話することができるか、分析フォーマットに依存して、エージェントを捕らえることができる、感知表面の近くの粒子状物質を集中する役目をするので、より低い微粒子数は使用することができ、それによって、システムの検出限界を改善する。傾斜磁場は任意の非特異的に拘束された粒子状物質が押し流されることを可能にするために撤去される。したがって、本発明は精度および被検体検出の感度を改善する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
本発明の以上の及びそれ以外の目的と本発明自体とその様々な特徴とは、添付の図面を参照して以下の詳細な説明を読むことによって、より完全に理解されうる。
本発明は音響の装置を使用して、アナライトを検知する方法に引き付けられる、やあ、一般項、アナライトは音響の装置の鳴り響く度数を変更するためにキャプチャ・エージェント（さらにここに１位と呼ばれた、エージェントを捕らえる）で覆われた粒子状物質の能力に基づいて検知される。キャプチャ・エージェントはアナライトに拘束することができる。キャプチャ・エージェントで覆われた多くの粒子状物質は、サンプルがある状態、および自由に競争者分子がある状態で音響の装置の感知表面に露出される。検知されるアナライトのタイプによって、感知表面は、アナライト（例えばサンドイッチ結合フォーマット）を拘束することができる、キャプチャ・エージェント（さらにここに別のキャプチャ・エージェントと呼ばれた）で覆われる。あるいは、感知表面は、競争者分子（ｅ．ｇ（小さな分子フォーマット））で覆われる。感知表面はここに記述されるような流体チャンバかチャネルの一部である、やあ、例えば、追加、上塗りを施した粒子状物質および（または）サンプルは、静的なモードにおける感知表面に露出することができる、上塗りを施した粒子状物質および（または）サンプルは、薬室へ導入し、与えられた期間用の期間でかえすことができる。別の実施例では、上塗りを施した粒子状物質は、流体チャンバかチャネルを通って上塗りを施した粒子状物質を流すことにより、非静的なモードにおける感知表面に例えば露出することができる。
【００２３】
一般に、本発明のサンドイッチ分析フォーマットでは、音響の装置の感知表面へ拘束することができる粒子状物質の量は、サンプルの中にあるアナライトの量に比例する。サンプルからのアナライトによって占められている粒子状物質上のキャプチャ・エージェントのより多くの物の中のサンプル結果中のアナライトの高位レベル。アナライトは粒子状物質を覆った、表面を感じて上着を着たキャプチャ・エージェントにそのとき拘束することができること好ましい実施例では、粒子状物質は磁気である。また、磁束は、接近に感知表面への多くの磁粉の少なくとも１つを引きつける音響の装置に適用される。
【００２４】
ここに記述されるように、アナライトのより低い濃縮の検出のために許可された粒子状物質のより低い濃縮の使用は驚くほどそれと分かられた。発見はそうだった、予期しない、ので、含んでいる分析中の一般通念、捕獲効率を最大限にするために高い量の粒子状物質の使用の粒子状物質要請をそばに捕らえる。しかしながら、図１７に示されるように、粒子濃度、およびより低い濃縮でアナライトの検出のために許可された、より低い粒子濃度のその使用によって検出限界が非常に影響されたことが分かった。簡潔に、実際の大腸菌の様々な濃縮は３×１０5、３ｘ１Ｏ4でかえされた。あるいは６×１０3ｄｙｎａｌなビード、また本発明の方法によって分析された。
【００２５】
より低い粒子濃度はさらに捕獲効率を低下させる。しかしながら、すべてを考慮して、検出限界における大きな改良は、捕獲効率に対するより小さな影響より重要だった。粒子の命令のサイズのアナライトの場合には理論によって拘束されていたくない間、１つの粒子当たり１つのアナライトの結合はアナライトに拘束された粒子がキャプチャ・エージェントを拘束することを可能にすることが十分であると思われる、ひとつには境界アナライトが典型的にはキャプチャ・エージェントによって結ぶことができる多数のサイトを含んでいるので、表面を覆った。多数に使用してください。さもないと、粒子状物質の高濃度は、表面を非特異的に拘束する粒子状物質の量を増加させることにより、アナライト境界（その後、それは背景信号を増加させる）を持っていない多くの粒子状物質に帰着する。更に、粒子状物質の濃縮が高い場合、非特異的に拘束された粒子状物質は表面へ拘束することからのアナライトを拘束した粒子状物質を閉鎖する場合があるし防ぐ場合がある。粒子状物質は、約１×１０2から約１×１０7までの濃縮の中で使用することができる。別の実施例では、粒子状物質は、約５×１０3〜約５×１０5の濃縮にある。
【００２６】
音響の装置の感知表面１２がキャプチャ・エージェントで覆われる場合、図７は２つの実施例を示す。パネル（Ａ）では、キャプチャ・エージェント１４は、感知表面１２へ直接境界である。パネルＢでは、キャプチャ・エージェント１４は結合ペア３２の最初のメンバーで標識付けされる。表面は、結合ペア３２の最初のメンバーおよび結合ペア２２の第２のメンバーで覆われる。
【００２７】
図８に示されるように、小さな分子フォーマットの１つの実施例では、競争者分子２４は音響の装置（パネルＡ）の感知表面１２への興味１０境界のアナライトを含む。キャプチャ・エージェント１６で覆われた粒子状物質１４はアナライト１０（パネルＢ）を含んでサンプリングするために露出される。粒子拘束された、それがアナライトを拘束していないエージェントを捕らえる、サンプル２０は、自由にアナライト境界を音響の装置（パネルＣ）の表面に結び付けることができる。パネルの中で示されたように、ＣおよびＤ、粒子状物質上のキャプチャ・エージェント・プレゼントのより多くの物がサンプルからのアナライトに従事するので音響の装置の感知表面を拘束する、より少数の粒子状物質中のサンプル結果中のアナライトの高位レベル。音響の装置による信号の出力は表面へ拘束した量および（または）微粒子数をそのために決定するためにモニタされる、検知、かどうか、１つ以上のアナライト、サンプルの中にある。さらに、サンプルの中にあるアナライトの存在あるいは量は、信号をコントロールと比較することにより例えば決定することができる。代替実施例の中で、ここに記述されるように、粒子状物質は磁気微粒子になりえる。流体チャンバへ粒子状物質を導入した後に、磁束は、感知表面（同様に図１Ａ、１Ｂおよび２に、例えば述べられていたとともに）への多くの磁粉の少なくとも１つを引きつける音響の装置への接近に作成される。
【００２８】
小さな分子フォーマットの別の実施例の中で、図９に示されるように、音響の装置の感知表面１２は、競争者分子２４と結合することができるキャプチャ・エージェント２２（さらにここに別のキャプチャ・エージェントと呼ばれた）で覆われる。競争者分子は例えばタグ２６への興味１０境界のアナライトになりえる。また、第２はエージェントを捕らえる、タグに拘束することができること。図９（粒子状物質１６上で出席しているキャプチャ・エージェントのより多くの物がサンプルからのアナライトに従事するので、音響の装置の感知表面へのより少数の粒子状物質１４結合の中のサンプル結果中のアナライトの高位レベル）に示されたように。第２のキャプチャ・エージェントが競争者分子のタグ部分に拘束することができるので、粒子状物質が競争者分子を拘束している場合のみ、上塗りを施した粒子状物質は音響の装置の感知表面へ拘束する。
【００２９】
小さな分子フォーマットの別の実施例の中で、図１０に示されるように、競争者分子２４は、例えば２つ以上のアナライト分子あるいはキャリヤ２８への興味１０境界の部分になりえる。また、第２はエージェント４０を捕らえる、アナライトを拘束することができること。図１０に示されるように、第２のキャプチャ・エージェントは音響の装置感知表面に間接的に結び付けることができる。表面の境界および粒子拘束されたキャプチャ・エージェントは同じキャプチャ・エージェントになりえる。キャプチャ・エージェント１６で覆われた粒子状物質１４は、アナライト１０および競争者分子２４（パネルＢ）を含んでサンプリングするために露出される。粒子拘束された、それがアナライトを拘束していないエージェントを捕らえる、サンプルは自由に競争者分子を拘束することができる。それは、感知表面（パネルＣ）に結び付けられるキャプチャ・エージェントによって次には拘束される。パネルＤの中で示されたように、粒子状物質上のキャプチャ・エージェント・プレゼントのより多くの物がサンプルからのアナライトに従事するので音響の装置の感知表面を拘束する、より少数の粒子状物質中のサンプル結果の中にあるアナライトの高位レベル。アナライトが与えられたエピトープか結合部位のたった１つのコピーがある小さな分子である場合、もしただ粒子状物質が競争者分子と結合していれば、上塗りを施した粒子状物質は音響の装置の感知表面へ拘束するだろう。
【００３０】
本発明の方法はサンプル中のアナライトの濃縮あるいはレベルを決定するために使用することができる。本発明の方法によって検知されたか測定された濃縮は、絶対的集中または相対的集中になりえる。例えば、その濃縮は、体液の同じサンプルの中にある参照アナライトの濃縮に関する比率である場合がある。その濃縮はデータを実際の濃縮の重要な変化が生じたかどうか判断する異なる時に得られた類似データと比較することにより得ることができる。さらに、検知されたアナライトの量が前もって定義したレベルか濃縮未満である場合、本発明は、検知されたアナライトの量が前もって定義したレベルか濃縮以上ある場合、陽性の読出しを提供するバイナリフォーマットの中で使用しかつ、または否定になりえる。他の実施例では、アナライトのあるスレショルドが検知される場合、方法は陽性の読出しを提供することができる。
【００３１】
のために、個々、実施例の、ここに記述した、多くの変異は発明のスコープから外れずに、下記に述べられるような方法に作ることができる。
サンプル
本発明で使用するにふさわしいサンプルは、アナライトを含んでいた疑いをかけられたどんな資料も含んでいる。ソースから得られるか、サンプルを修正する１ステップ以上に続いていたように、サンプルは直接使用することができる。１つの実施例では、サンプルは生物学的試料である。サンプルは、生理的な流体｛（例えば血液、唾液、唾液、血漿、血清、接眼レンズ流体、脳脊髄液、汗、尿）のような任意の生物学のソース、ミルク、腹水、関節液、腹水、羊水などに由来する場合がある、また糞便。サンプルは、鼻か直腸綿棒のような生物学のスワブから得ることができる。さらに、サンプルは生検資料になりえる。サンプルは人間、霊長類、動物、鳥あるいは他の適切なソースから得ることができる。
【００３２】
下記に述べられるように、サンプルは、粘性流体などを薄めて、血液からの準備をする血漿のような使用に先立って前処理することができる。サンプルも酵素でろ過し、蒸留し、抽出され、要約されるかあるいは集中することができる。１つの実施例では、血液サンプルは個体から得られ遠心分離機にかけられる。また、血漿が分析される。サンプルもアナライトまたは検出工程に邪魔をすることができるサンプル中のあるアクティビティを不活性化するか修正するために処理することができる。例えば、複合解除（ｄｅｃｏｍｐｌｅｘ）するアンタゴニストは、拘束される場合がある他の分子からのアナライトを分離するサンプルに加えることができ、かつ、またはキャプチャ・エージェントがアナライトに結び付ける能力に邪魔をする場合がある。そのようなアンタゴニストは例えばステロイド・アンタゴニストになりえる。エストラジオール検出の場合には、サンプルは、性ホルモン結合蛋白質からのエストラジオールを分離するためにダナゾールを加えることにより処理することができる。
【００３３】
生理液および固体に加えて他のサンプルは水、食物製品などのように環境上の分析あるいは食糧生産分析のパフォーマンスに使用することができる。例えば、サンプルはミート、あるいは鶏肉洗濯（溶液は鶏肉を洗うために使用される）になりえる。さらに、アナライトを含んでいた疑いをかけられた固形物質は、試験サンプルとして使用することができる。固体の試験サンプルは、液体培地を形成するかあるいはアナライトをリリースするために修正することができる（例えば、均質化したか、抽出したか、消化された（ｓｔｏｍａｃｈｅｄ）したか、可溶性にした）。
【００３４】
サンプルボリュームは、１０μＬあるいは２５０ｍｌでもありえる。別の実施例では、サンプルボリュームは約５ｍｌまで約１である。
キャプチャ・エージェント
本発明で使用される適切なキャプチャ・エージェントは、興味のあるアナライトに拘束することができるどんな分子も含む。用語「キャプチャ・エージェント」は、興味のあるアナライトと結合することができる分子あるいは多重分子複合体を含んでいる。キャプチャ・エージェントは、本質的に特定のやり方でそれらがパートナーを拘束することにむしろ拘束する。約１０未満の解離定数（ＫＤ）を持ったエージェントを捕らえることが好まれる。キャプチャ・エージェントは、さらに例えばポリペプチド、核酸、炭水化物、核タンパク質、糖タンパク質、糖脂質およびリポタンパク質になりえる。抗体または抗体断片は、キャプチャ・エージェントのように高度に適切である。それらが拘束力のある抗体ができるので、エージェントを捕らえるように、抗原はさらに貢献する場合がある。配位子を拘束するレセプターは可能なキャプチャ・エージェントの別の例である。タンパク質キャプチャ・エージェントは単に非共有相互作用を通じてそれらがパートナーを拘束することと対話するエージェントに制限されていないために了解される。キャプチャ・エージェントは、さらに自由にそれらが拘束するタンパク質に共有結合で付けられるようになる場合がある。例えば、キャプチャ・エージェントは結合に続くその結合パートナーにフォトクロスリンク（ｐｈｏｔｏｃｒｏｓｓｌｉｎｋｅｄ）される場合がある。
【００３５】
用語「抗体」はどんな免疫グロブリンも含んでいる、かどうか、当然全体の中で、あるいは一部分製作されたか合成的に製作された。抗体が興味のあるアナライトに結び付ける能力を維持する抗体の派生語も、用語に含まれている。用語は、さらに免疫グロブリン束縛領域へ同族か、大部分は同族の束縛領域があるどんなタンパク質も含んでいる。これらのタンパク質は全体の中で、あるいは一部分合成的に製作されて、自然源に由来する場合がある。抗体は単クローンの場合がありあるいは多クローンの場合がある。抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤおよびＩｇＥを含む任意の免疫グロブリンクラスのメンバーである場合がある。アナライトが担体蛋白質を拘束すると知られている場合、抗体は、アナライトの自由形式あるいはアナライトのキャリヤに拘束された形式には特定の場合がある。選択のアナライトを拘束することができる抗体は営利上得ることができるか、あるいは抗体を生成する既知の方法を使用して製作した。
【００３６】
用語「抗体」はさらに抗体断片を含んでいる。用語「抗体断片」は、短縮していないとは言い難い抗体の任意の派生語を指す。むしろ、抗体断片は、興味のあるアナライトを拘束する能力を少なくとも保存する。抗体断片の例は含んでいる、しかし制限されない、Ｆａｂ、驚くべき。」Ｆ（ａｂ」）２、ｓｃＦｖ、Ｆｖ、ｄｓＦｖ  ｄｉａｂｏｄｙおよびＦｄフラグメント。抗体断片は任意の手段によって生まれる場合がある。例えば、抗体断片は、完全な抗体のフラグメンテーションによって酵素であるいは化学上生まれる場合がある。あるいは、それは部分的な抗体シーケンスをコード化する遺伝子から組み換えに製作される場合がある。あるいは、抗体断片は、全体の中で、あるいは一部分合成的に生まれる場合がある。抗体断片は自由に単一のチェーン抗体断片である場合がある。あるいは、フラグメントは、ジスフィルド結合によって、ともにリンクされる複数連鎖を例えば含む場合がある。フラグメントはさらに自由に多重分子の複合体である場合がある。機能的な抗体断片は典型的には少なくとも約５０のアミノ酸を含み、典型的には少なくとも約２００のアミノ酸を含むだろう。
【００３７】
単一のチェーンのＦｖｓ（ｓｃＦｖｓ）は、ポリペプチド・リンカーによって互いに共有結合で接続された、可変軽鎖（ＶＬ）および可変重鎖（ＶＨ）だけから成る組み換えの抗体断片である。ＶＬかＶＨのいずれかはＮＨ２の―ターミナルのドメインである場合がある。橋が重大な立体障害なしで２つの可変ドメインに架けられる限り、ポリペプチド・リンカーは可変長と組成である場合がある。典型的には、リンカーは、主としてグリシン、あるグルタミン酸を備えたセリン残基あるいは溶解度のために点在したリジン残基の伸張で構成される。「ダイアボディ（Ｄｉａｂｏｄｉｅｓ）」は二量体のｓｃＦｖｓである。ダイアボディのコンポーネントは典型的にはほとんどのｓｃＦｖｓより短いペプチド・リンカーを持っている。また、それらは、二量体として関連させることに対する好みを示す。「Ｆｖ」フラグメントは、非共有相互作用によって一緒にしておかれた１つのＶＨおよび１つのＶＬドメインから成る抗体断片である。用語「ｄｓＦｖ」はＶＨ  ―ＶＬペアを安定させるために巧みに計画実行された分子間にあるジスルフィド結合とＦｖを参照するためにここに使用される。１つの「Ｆ（ａｂ」）２」（フラグメントは、ｐＨ  ４．０−４．５で酵素ペプシンを備えた消化によって免疫グロブリン（典型的にＩｇＧ）から得られたそれと本質的に等価な抗体断片である。）フラグメントは組み換えに生まれる場合がある。「驚くべき」〈１〉ｆｒａｇｍｅｎｔｉｓ、Ｆ（ａｂ」）２フラグメントの中で２つの重鎖部分を連結するジスルフィド架橋の還元あるいはブリッジによって得られたそれと本質的に等価な抗体断片。驚くべき」フラグメントは組み換えに生まれる場合がある。「驚くべき」フラグメントは、酵素パパインで免疫グロブリン（典型的にＩｇＧ）の消化によって得られたそれと本質的に等価な抗体断片である。抗原結合性フラグメントは組み換えに製作される場合がある。抗原結合性フラグメントの重鎖セグメントはＦｄピースである。
【００３８】
適切なポリペプチドキャプチャ・エージェントは、さらに興味のあるアナライトに拘束することができるか、小さな有機分子のような小さな分子あらゆるペプチド、ポリペプチドあるいはタンパク質を事実上含む。１つの実施例では、キャプチャ・エージェントは興味のあるアナライトに拘束することができる抗体である。適切なポリペプチド、エージェントを捕らえる、合成生産方式を使用して、組み換え法を使用して、例えば営利上得られる場合がある、あるいは自然源からの浄化によって。ポリペプチドは例えば、細胞表面タンパク質、細胞表面および可溶の受容蛋白質（リンパ球表面レセプタ、ステロイド受容体のような）、核タンパク、情報伝達分子、転写因子、アロステリック酵素インヒビター、凝固因子、酵素（例えばプロテアーゼおよびｆｈｙｍｉｄｙｌａｔｅシンテターゼ、セリン／トレオニン・キナーゼ、トレオニン・キナーゼ、ホスファターゼ、細菌酵素、菌による酵素およびウイルスの酵素）、ＤＮＡ、ＲＮＡ合成あるいはデグラデーションに関連したタンパク質、およびその他同種のものを含んでいる。１つを超えるキャプチャ・エージェントが使用される場合、より詳細に下に記述されるように、キャプチャ・エージェントは例えば互いのアイソフォームになりえる。
【００３９】
特別の実施例中で、アナライトがウィルスである場合、キャプチャ・エージェントはウィルス用の細胞表面レセプターになりえる。例えば、ウィルスがＨＩＶである場合、キャプチャ・エージェントは、樹状細胞に特有のＩＣＡＭ−３つかむ非インテグリン（ＤＣ−ＳＩＧＮ）あるいはＣＤ４になりえる。別の実施例では、キャプチャ・エージェントは拘束力のあるウイルス抗原ができる抗体になりえる。例えば、抗原はｇｐ４１またはｇｐｌ２０でありえる。キャプチャ・エージェントは拘束力のあるホストを派生した抗原に有能な抗体になりえる。例えば、抗原はＣＤ４４（ＣＤ５４）になりえる、ＨＬＡ−ＤＲ、あるいはＨＬＡ−ＤＲＤＰＤＱのようなヒト白血球抗原（ＨＬＡ）。
【００４０】
キャプチャ・エージェントは、さらにＲＮＡまたはＤＮＡのような核酸、あるいはペプチド核酸になりえる。１つの実施例では、核酸かペプチド核酸が核酸あるいはペプチド核酸アナライトに交雑することができる。さらに、キャプチャ・エージェントは、アプタマー（非ヌクレオチドアナライト（例えばタンパク質、小さな有機分子あるいは無機の分子）に拘束することができる核酸）になりえる。ここに使用されるように、アプタマーは、自然発生のヌクレオチドあるいは修正されたヌクレオチドからできているＲＮＡあるいはＤＮＡチェーンのいずれかになりえる。
【００４１】
適切なキャプチャ・エージェントは、さらに拘束力のあるペアのメンバーを含む。適切な拘束力のあるペアは例えば、ビオチン、アビジンあるいはアビジン（例えばストレプトアビジンとニュートラアビジン）のビオチンおよび派生語を含んでいる。
【００４２】
エージェントを捕らえる、表面あるいは表面へポリペプチド、核酸などを付けるために標準配置を使用すること以下に、あるいは使用により記述されるようなビードに結び付けることができる。
アナライト
ここに使用されるように、用語「アナライト」は例えばキャプチャ・エージェントによって認識される分子構造を指す。例えば、用語アナライトは、抗体によって認識されたエピトープを指すことができるか、あるいはレセプターによって拘束される配位子のその部分を含むことができる。用語アナライトは、さらにキャプチャ・エージェントによって認識される分子構造を含んでいる、より大きな分子を含んでいる。アナライトは細胞（例えば細胞表面タンパク質）の一部になりえる。アナライトはユーザー（例えば、あらかじめ選ばれた）によって選ばれた興味のあるアナライトになりえる。アナライトは、小さな分子ライブラリ・スクリーニングで興味のあるキャプチャ・エージェントを拘束する能力に、例えば基づいて選択することができる。
【００４３】
ここに記述されるように、本発明はアナライトのパネルの１つ以上のアナライトを測定するために使用することができる。アナライトのパネルは、ここに記述されるような競合フォーマットを使用して検知される１つ以上のアナライトを含むことができる。アナライトのパネルは１つ以上のアナライトを含むことができる、ここに記述されるようなサンドイッチ分析フォーマットを使用して検知された。１つの実施例では、アナライトはそれぞれ１つ以上のアナライトのパネルをテストするために下記に述べられるような個別のカートリッジを使用して、検知される、単一のサンプルは２つ以上の部分標本に分割することができる。部分標本はそれぞれ、各々アナライトがテストされるように異なるカートリッジを使用して、異なるアナライトに関して例えばテストすることができる。このように、異なるアナライトのパネルは多数のサンプルが得られることを要求せず、かつ、またはそれ、テストされる場合がある、異なるタイプの装置、ｄｅｔｅｃｔをテストするために使用される、異なるアナライト。
【００４４】
１つの実施例では、興味のあるアナライトは小さな分子である。小さな分子は、約１０００ｇ／ｍｏｌの分子の重量がある有機か無機の分子を含んでいる、あるいはより少ない
典型的には、小さな分子アナライトは単一あるいはほんの少数の結合部位を含むだろう。
小さな分子が少数あるいはたった１つの結合部位を持つので、本発明は、小さな分子アナライトを検知しかつ／または量を計るために競合的結合を使用する。
【００４５】
小さな分子は例えば、ステロイド、脂質、炭水化物、ペプチド、および複素環式化合物（例えばＦＡＤとＮＡＤＨのような共同要因を含む基礎）を含むことができる。アナライト、例えば、小さな分子は、アルデヒドを含む小さな有機分子のライブラリおよびケトン、オキシム、ヒドラゾン、セミカルバゾン、カルバジド、第一アミン、第二アミン、第三アミン、Ｎに代用されたヒドラジン、ヒドラジド、アルコール、エーテル、チオール類、チオエーテル、チオエステル、ジスルフィド、カルボン酸、エステル、アミド、尿素、カルバミン酸塩、炭酸塩、ケタール、チオケタール、アセタール、チオアセタール、ハロゲン化アリールの一部になりえる。アリル基を含むスルフォナート、ハロゲン化アルキル、スルホン酸アルキル、芳香族化合物、複素環式化合物、アニリン、アルケン、アルキン、ジオール、アミノアルコール、ｏｘａｚｏｌｉｄｉｎｅｓ、オキサゾリン、チアゾリジン、ｔｈｉａｚｏｌｉｎｅｓ、エナミン、スルホンアミド、エポキシド、アジリジン、イソシアナート、塩化スルフォニル、ジアゾ化合物、酸塩化物（できればアルデヒド）、ケトン、第一アミン、第二アミン、アルコール、チオエステル、ジスルフィド、カルボン酸、アセタール、アニリン、ジオール、アミノアルコールおよび（または）エポキシド、最も好ましくは、アルデヒド、ケトン、第一アミン、第二アミンおよび（または）ジスルフィドおよび組合せ、それについて。
【００４６】
興味のあるアナライトは、さらにポリペプチド、核酸、炭水化物、核タンパク質、糖ペプチドあるいは糖脂質になりえる。有用なアナライトは例えば、酵素、ステロイド、ホルモン、転写因子、発育因子、免疫グロブリン、ステロイド受容体、核タンパク、情報伝達コンポーネント、アロステリック酵素調整器などを含んでいる。興味のあるアナライトは、自然源から例えば、営利上、組み換えに、合成的にあるいは浄化によって得ることができる。好ましい実施例では、興味のあるアナライトは特定の人間の疾病あるいは症状に関係している。
【００４７】
適切な発育因子は、エリトロポイエチン／ＥＰＯのようなサイトカインのために、顆粒球コロニーを含んでいる、刺激的なレセプター、顆粒球マクロファージ・コロニー刺激的なレセプター、トロンボポイエチン（ＴＰＯ）、ＥＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ―１０、ＥＬ―１１、ＩＬ  −    １２、成長ホルモン、プロラクチン、ヒト胎盤性ラクトゲン（ＬＰＬ）、ＣＮＴＦおよびｏｃｔｏｓｔａｔｉｎ、適切なステロイドは含んでいる、しかし制限されない、エストラジオール、プロゲステロン、テストステロンおよび派生語、それについて。他の適切なアナライトは例えば、インシュリンを含んでいる、インシュリン様増殖因子（ＩＧＦ−Ｉ）、表皮成長因子（ＥＧＦ）、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）、胎盤の発育因子（ＰＬＧＦ）１、ＴＧＦ  −［α］およびＴＧＦ  −［β］、他のホルモン、および硬骨のようなレセプター、ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｉｃな要因、濾胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）およびｌｅｕｔｉｎｉｚｉｎｇするホルモン（ＬＨ）（組織壊死要因（ＴＮＦ））、細胞死要因  −  １および−２（ＡＰ−ＩおよびＡＰ−２）、ならびにｍｄｍ２。
【００４８】
１つの実施例では、アナライトは心臓のマーカーである。心臓のマーカーは当技術において有名で、例えば、ｃ−トロポニンＩを含んでいる。また、Ｔ、ミオグロビン、クレアチン・キナーゼＭＢ（ＣＫ−ＭＢ）および乏血は、アルブミンを修正した。１つの実施例では、本発明は患者の状態を評価するためにアナライトのパネルを検知するために使用することができる。１つの実施例では、心臓のマーカーのパネルはテストされる。パネルは例えば、ｃ−トロポニン−Ｉ、ＣＫ−ＭＢおよびミオグロビンアナライトを含むことができる。
【００４９】
別の実施例では、アナライトはバイアル感染のためのマーカーである。ウィルス感染のためのマーカーは、ウィルス蛋白質、ＣＤ４＋細胞、肝酵素および抗ウイルスの抗体を循環させて、例えば、炎症性のマーカーを含んでいる。
【００５０】
薬経営目的あるいは忍耐強いコンプライアンスのために忍耐強いサンプル中で例えば薬のレベルを測定することが有用だろうところで、興味のあるアナライトはさらに治療薬になりえる。適切な治療薬は含んでいる、しかしプロテアーゼインヒビターと免疫抑制剤（ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｒｅｓｓａｎｔｓ）に制限されていない。適切なプロテアーゼインヒビターはａｇｅｎｅｒａｓｅｒ、ｒｅｙａｔａｚ、ｌｅｘｉｖａ、ｔｅｌｚｉｒ、ｃｒｉｘｉｖａｎ、ｋａｌｅｔｒａ、ｖｉｒａｃｅｐ、ｎｏｒｖｉ、ｉｎｖｉｒａｓｅ、ａｏｒｔｏｖａｓｅ、ａｐｔｉｖｕｓおよびその他同種のものを含んでいる。適切な免疫抑制薬はシクロスポリン、ｔａｃｒｏｌｉｍｕｓ（ＦＫ−５０６）、ｒａｐａｍｙｃｉｎ、ｍｙｃｏｐｈｅｎｏｌｉｃなｍｏｆｅｔｉｌおよびその他同種のものを含んでいる。
【００５１】
興味のあるアナライトは、バクテリアまたは芽胞胞子のような病原体か微生物、ウィルス、寄生生物、プリオンあるいは他の病原体になりえる、あるいはグラム陽性のペプチドグリカンのようなそれらの細胞壁か表面のコンポーネント、リポタイコ酸、そしてｔｅｉｃｈｏｉｃａｃｉｄｓ、またグラム陰性の内毒素（例えば）リポ多糖類。バクテリアのアナライトは例えば、赤痢菌ｓｐを含んでいる。志賀赤痢菌、キャンピロバクターｓｐのように。キャンピロバクターｊｅｊｕｎｉ、腸球菌ｓｐのように。エンテロコッカス−フェカーリス、バチルス菌［α］ｎｔｈｒ［α］シス、ペスト菌、百日咳菌、連鎖球菌の種、黄色ブドウ球菌、結核菌、クロストリジウム・ディフィシル、破傷風菌、ボツリヌス菌、大腸菌、サルモネラ菌ｔｈｙｐｈｉｍｕｒｉｍ、サルモネラ菌ｅｎｔｅｒｉｃａ、クラミジア種、梅毒トレポネーマ、淋菌、ボレリア・ブルグドルフェリ、コレラ菌、ジフテリア菌およびヘリコバクターピロリのように。寄生生物は例えば、ギアリダ属、マラリアおよびｃｒｙｔｏｓｐｏｒｉｄｉａを含んでいる。ウイルスのアナライトは例えば、ライノウイルス（黄熱病）を含んでいる、Ｂ  Ｃｏｘｓａｃｈｉｅｖｉｒｕｓｅｓ（ＣＢｌ、ＣＢ２、ＣＢ３、ＣＢ４、ＣＢ５およびＣＢ６）をグループ化する、犬のパルボウィルス（ＣＰＶ）、単純性疱疹ウィルスタイプ（ＨＳＶｌ）、Ｖａｃｃｉｎａウィルス、Ｔ４のようなウィルス、アデノウイルス、インフルエンザＢ型ウィルス、インフルエンザＡ型、鳥インフルエンザ、ライノウイルス、コロナウイルス（例えばＳＡＲＳ）、ヒト免疫不全ウィルス（ＨＩＶ）、肝炎ウイルス、ヘルペスウイルス、西ナイルウイルス１、またエボラウイルス。
【００５２】
上に記述されるように、いくつかの実施例では、１つを超えるアナライトは検知される。１つの実施例では、アナライトには同じ分子構造がある。例えば、アナライトはある場合がある、興味のある同じ分子種。別の実施例では、異なるアナライト（さらにここに１番目と２番目アナライトと呼ばれた）は、より大きな分子の一部である。したがって、アナライトは特別の結合部位（エピトープのような）になりえる、より大きな分子に付くか、含む。そのため、検知されている異なるアナライトは異なる分子の一部になりえる。
【００５３】
アナライトは表面あるいは表面へポリペプチド、核酸などを付けるために標準配置を使用すること以下に、あるいは使用により記述されるようなビードに結び付けることができる。１つの実施例では、アナライトは、表面に間接的に結び付けられる。
アナライトは、結合ペアの最初のメンバーで表面を覆うことにより、表面に例えば間接的に結び付けることができる。アナライトは結合ペアの別のメンバーに結び付けられるか付けられる。次に、アナライトは、結合ペアの１番目と２番目メンバー間のインタラクションによって表面に結び付けられる。適切な拘束力のあるペアは例えば、ビオチン、アビジンあるいはストレプトアビジンとニュートラアビジンのようなアビジンのビオチンおよび派生語を含んでいる。
分析フォーマット
上に記述されるように、本発明の１つの実施例では、多くの磁気微粒子は流体チャンバへ導入される。磁気微粒子は１位で覆われる、アナライトおよび流体チャンバの少なくとも１つの表面を拘束することができるエージェントを捕らえる、第２で覆われた音響の装置を含む、競争者分子と結合することができるエージェントを捕らえる。表面は、どんな適切な方法も使用して、結合ペアの第２のメンバーで覆うことができる。例えば、表面は下記に述べられるようなビオチンで覆い、次に、ビオチン化された表面を、アビジンあるいはアビジンの派生語に露出することができる。また、第２のキャプチャ・エージェントはビオチンにリンクすることができる。
【００５４】
別の実施例では、多くの磁気微粒子および競争者分子は流体チャンバへ導入される。
磁気微粒子はアナライトを拘束することができる最初のキャプチャ・エージェントで覆われる。流体チャンバの少なくとも１つの表面は、競争者分子と結合することができる別のキャプチャ・エージェントで覆われた音響の装置を含む。１つの実施例では、競争者分子は、リンクしたアナライトあるいはタグへの境界を含む。また、第２はエージェントを捕らえる、タグに拘束することができること。タグはキャプチャ・エージェントによって認識することができるあらゆる部分になりえる。１つの実施例では、タグは結合ペアの１人のメンバーである。また、キャプチャ・エージェントは結合ペアの別のメンバーである。
例えば、タグはビオチンになりえる。また、キャプチャ・エージェントはアビジン、ストレプトアビジンあるいはニュートラアビジンになりえる。この実施例では、ビオチンは分子をビオチンにリンクする既知の方法を使用して、競争者分子を形成するためにアナライトにリンクされる。表面は、どんな適切な方法も使用して、結合ペアの第２のメンバーで覆うことができる。例えば、表面は下記に述べられるようなビオチンで覆うことができる。次に、ビオチン化された表面は、アビジンあるいはアビジンの派生語に露出することができる。
【００５５】
別の実施例では、競争者分子は２つ以上のアナライト分子を含む、キャリヤと第２にはねる、エージェントを捕らえる、アナライトを拘束することができること。キャリヤは２つ以上のアナライト分子がリンクされるか拘束することができるあらゆる分子になりえる。キャリヤはタンパク質、核酸あるいは他のポリマーになりえる。１つの実施例では、キャリヤはウシ血清アルブミンのようなアルブミンである。別の実施例では、キャリヤはワサビペルオキシダーゼである。この実施例では、２つ以上のアナライト分子は下記に述べられるようなキャリヤにリンクすることができる。あるいは、既知のリンク技術は競争者分子を形成するために使用することができる。表面は下記に述べられるようなキャプチャ・エージェントで覆うことができる。
【００５６】
本発明の方法の１つの実施例によれば、多くの粒子状物質は照射線量の様々な異なる注文を使用して、サンプルに露出することができる。例えば、１つの実施例では、多くの粒子状物質はサンプルに露出され、次に、流体チャンバへ導入される。サンプルは、流体チャンバへサンプルを露出した粒子状物質を導入する前に集中される場合がある。サンプルは、溶液から粒子状物質を取り除いて、例えば集中され、液体のより小さなボリューム中の粒子状物質をｒｅｓｕｓｐｅｎｄｉｎｇする場合がある。
【００５７】
別の実施例では、サンプルは多くの粒子状物質を導入する前に流体チャンバへ導入される。まだ別の実施例では、多くの粒子状物質は流体チャンバにサンプルを加える前に流体チャンバへ導入される。
【００５８】
別の実施例中で、上に記述されるように、多くの粒子状物質はサンプルおよび競争者分子に露出される。多くの粒子状物質はサンプルおよび多くの異なる注文での競争者分子に露出することができる。例えば、１つの実施例では、多くの粒子状物質はサンプルおよび競争者分子に露出され、次に、流体チャンバへ導入される。別の実施例では、サンプルおよび競争者分子は多くの粒子状物質を導入する前に流体チャンバへ導入される。まだ別の実施例では、多くの粒子状物質は、流体チャンバにサンプルおよび（または）競争者分子を加える前に流体チャンバへ導入される。
制御信号／正規化
別の実施例では、サンプル露出に応答する音響デバイスの信号出力は、制御信号と比較される、又は、制御信号を用いて標準化される。制御信号は、ユーザによって提供されるか、又は、ユーザによって取得されうる。例えば、制御信号は、特定のアナライト、キャプチャ・エージェント、又は、用いられているデバイスの特定のモデル、バージョン若しくはタイプに基づいて、ユーザに提供される値でありうる。ある実施例では、制御信号は、ロットに基づいて得られる。例えば、制御信号は、ユーザが取得したアナライトの特別のロットを表す信号でありうる。代表的な信号は、例えば、サンプルの試験の前、間、又は後に実験的に導くことができる。いくつかの実施例では、制御信号は、例えば特定のキャプチャ・エージェントとのアナライトの分析する既知数および音響デバイスの特定のバージョンによって得られる標準曲線である。
【００５９】
別の実施例では、制御信号は使用方式で得られる。例えば、特別のアナライトおよび（または）キャプチャ・エージェントが特別の音響デバイス上でテストされるごとに、ユニークな制御信号は得ることができる。１つの実施例では、制御信号はサンプルがない状態で、しかしながら、同じアナライトおよび（または）キャプチャ・エージェントを使用して得られる。制御信号はキャプチャ・エージェントで覆われる流体チャンバの中への粒子の別の複数の導入により得ることができる。流体チャンバの少なくとも１つの表面は、別のアナライトをそれに結合する音響デバイスを含む。信号の出力、によって、後の試験の中で使用されるために制御信号を決定するために、音響デバイスがモニタされると言った。
音響装置
音響デバイスは、装置と流体の間の音響のインタラクションによって流体に主に連結される。典型的な音響デバイスは表面弾性波デバイス、屈曲の薄板波装置、子羊波装置および片持ばり（カンチレバー）装置を含んでいる。音響デバイスは、さらに装置と流体の間のある粘着性のインタラクションによって流体に連結される。しかし、カップリングは主に音響結合である。粘着性のインタラクション装置は、装置と流体の間の粘着性のインタラクションによって流体に主に連結される。典型的な粘着性のインタラクション装置は石英微量天秤（ＱＣＭ）装置、シヤー高調波表面弾性波デバイスおよび音響のプレート・モード装置を含んでいる。項「表面弾性波」は、エネルギーがデバイス構造で運ばれる方法を指す、ではなく、どのように、流体への装置カップル。流体が装置の飛行機の本質的なエリア一帯に対話するところで、音響デバイスは装置である。音響デバイスは答える、で、装置（つまり、運動エネルギー、位置エネルギーおよび損失は、流体に入れて主に運ばれる）の飛行機への接近中の流体に音響的に連結される飛行機運動から本質的。粘着性のインタラクション装置は、主として装置の飛行機への接近中の流体に音響的に連結されない、面内運動で答える。
一般的な考察
アプリケーションについては、粘着性のインタラクション装置と流体の間のカップリングが厚さ（装置の飛行機に関する）約１０ｎｍと約１００ｎｍの間にある場合、包含（例えば流体中の生物学か化学物質の検出および量化）、音響デバイス間のカップリングおよび流体が、厚さ（装置の飛行機に関する）約１００ｎｍと約１０ミクロンの間に典型的にある。
【００６０】
表面弾性波デバイスおよびシヤー高調波表面弾性波デバイスは両方とも、同様の風習でそれぞれの構造に入れてエネルギーを運ぶ。表面弾性波デバイスは、音響的に流体に著しく連結される。その一方でシヤー高調波表面弾性波デバイスは粘着性のインタラクションによって流体に主に連結されている。
【００６１】
発明によって構築されたアナライト検出法１００の１つの実施例は、ＦＩＧ  ＩＡで示される。システム１００は、ＦＰＷ装置１０４を通って様々な試液（さらに「テスト流体」あるいは「流体」とここに呼ばれた）を輸送するためにチャネル１０２のネットワークを含んでいる。次の米国特許および特許出願（それらのすべては参照によって本出願で援用される）が、本発明で使用するにふさわしい様々なタイプのＦＰＷ装置の例について記述する。米国特許第５，１８９，９１４号、第５，１２９，２６２号、米国特許第６，６８８，１５８号Ｂ２、米国特許出願第１０／３２４，６８５号、米国特許５，６６８，３０３号、米国特許５，８３６，２０３号および米国特許出願２００４００３８１９５号である。
【００６２】
例えば、米国特許第５，１２９，２６２号は、形成材料の薄い平面のシートがある超音波センサについて記述する、ラム波伝播媒体。プレート・モード波として知られている板波は、有限の厚さの材料によってのみ繁殖することができる。表面弾性波（ＳＡＷ）とは対照的に、それは厚さを持っている伝播媒体を要求する、の命令で、何百回、繁殖するＳＡＷの波長、板波、大部分だけにある伝播媒体を要求する、いくつかの波長、厚い、そして典型的に、繁殖するラム波の波長の小片だけ。シートの厚さは高々約２０ミクロンである。ラム波ジェネレータは、平面のシート中の板波を生成する。また、出力デバイスは、シートに沿って繁殖する板波の伝播特性を表わす電気信号を生成する。測定装置は、出力電気信号の選択された特性を測定する。平面のシートにはある物性がある、それはシートに作用する測定量の値に依存する、そしてそれら、物性、シートに沿って繁殖する板波の伝播特性を従って決定する。出力デバイスからの電気信号が伝播特性を表わすので、電気信号はさらにシートに作用する測定量の値を表わす。
【００６３】
米国特許第５，１２９，２６２号に述べられていたラム波装置は、生物学的感知の中で、例えば使用することができる。平面のシートは上に記述した、予めコーティングされた抗体分子で覆われた、その結果浸漬上の装置変更の度数、の中で、あるいは対応する抗原を含んでいる液体とのコンタクト。伝播媒体の表面での抗原抗体アタッチメントはシート中の板波の位相速度を変更するために作用する。位相速度の変化は装置の遅延ライン発振器形式で振動数を変わらせる。さらに、シートはシートのより大きな表面積一帯の抗体分子のコーティングを許可し、さらに抗原抗体アタッチメントを促進するために抗原含んでいる液体がメンブレンによって流れられることを可能にして、多孔性および透過性材料で作られている場合があらん。他の生物相互作用もセンスされる場合がある。また、追加のアプリケーションは免疫測定、臨床検査室試験、生体内の生物医学的なモニタリングおよび生体臨床医学研究を含んでいる。
【００６４】
記述された実施例（例えばブロッキング溶液１０６、サンプル１０８、バッファ１１０）の中で使用される試液は、貯水池コンテナ１１２から部品外注される。チャネルパス、から、個々、貯水池１１２の、ＦＰＷ装置１０４の通関港１１８に通じる、組合せポイント１１６への特別の試液のフローをコントロールするためにバルブ１１４でゲート制御される。試液は出口ポート１２０経由でＦＰＷ装置１０４および出口を通って流れる。それはポンプ１２２に結びつく。ポンプ１２２は、チャネル１０２のネットワーク、およびＦＰＷ装置１０４を通って試液を引き寄せて、汚物投入器１２４に試液を向ける。
【００６５】
図１Ｂは、アナライト検出システム１００の別の実施例を示す。この実施例は、カートリッジ１０３（つまり削除され交換することができる消費可能なコンポーネント）としてＦＰＷ装置１０４およびその関連する流体薬室１６０をパッケージにする。いくつかの実施例は、プラグ、閉塞症、あるいは装置１０４を通ってフローを変更するじゃま板のような流体素子１０１を含んでいる場合があらん。１つの実施例では、流体素子１０１は流体素子１０１が存在しなかった場合によりセンサ表面１４３に接近して通る装置１０４を通って、流量を引き起こすために作動する。さらに、入力試液のソースは、カートリッジ１０３の入口１０９に試液を向けるために出口１０７を持っている入力流体薬室１０５として示される。いくつかの実施例、磁気微粒子は、最初に流体チャンバ１０５、およびアナライトを含んでいる流体が入力での磁気微粒子で調合される入力に位置する、流体チャンバ１０５、そして次に、ＦＰＷ装置１０４が位置するカートリッジ１０３に向けられた
磁気微粒子は、入力流体薬室１０５内に装置（例えばポンプまたは磁気撹拌器のアクションによる）によってアナライトを含んでいる流体と結合する場合がある。図１Ｂさらなるショー、出力、カートリッジ１０３の出口１１５から流体を受け取る入口１１３を備えた流体チャンバ１１１。この出力流体薬室１１１は１つ含んでいるか、流体素子にもっとここに記述した。また、それは廃液の格納及び／又は処理のために１つ以上のメカニズムを含んでいる場合があらん。
【００６６】
少なくとも１つの実施例では、入力流体薬室１０５の出口１０７がカートリッジ１０３のその入口１０９に遭遇するところで、接合・結合は反復可能な接続および切断を許可すると構築され整えられる。同様に、カートリッジ１０３の出口１１５が出力流体薬室１１１のその入口１１３に遭遇するところで、接合・結合は反復可能な接続および切断を許可すると構築され整えられる。いくつかの実施例では、これらの接合・結合はスパナあるいはカップリングとデカップリングに影響する他のそのようなツールを要求する、糸が通されたカップリングのような、接続および切断用ツールを要求すると構築され整えられる。他の実施例では、これらの接合・結合は余分なツールあるいはアクセサリーなしで、迅速で容易な手動接続および切断を許可すると構築され整えられる。そのようなカップリング、要求および要求しないツールは当技術の中で知られている。いくつかの実施例では、マルチ入力流体薬室および出力流体薬室がある。いくつかの実施例では、１つ以上の入力および（または）出力流体薬室はカートリッジ１０３の一部である。さらに、いくつかの実施例では、磁束の１つ以上のソースはカートリッジの一部である。
【００６７】
ＦＰＷ装置１０４は、図２に、より詳細に示される。ＦＰＷ装置１０４では、歪エネルギーは曲がることおよび装置中の張力に入れて運ばれる。いくつかの実施例では、それは、１未満であるＦＰＷ装置１０４の厚さから波長への比率には、および非常に１未満のいくつかの場合において望ましい。一般に、波長「λ」は、ＦＰＷ装置１０４にここに記述されるようなインターディジット型（櫛型）電極のピッチとほぼ等しい。１つの実施例では、ＦＰＷ装置１０４の厚さから波長への比率は、２μｍ／３８μｍである。他の実施例では、ＦＰＷ装置１０４は、装置に関連したモードの特別のモード（例えばゼロ次のオーダー・モードから高位モードまでの任意のモード）か帯域幅を分離するように設計されている。例えば、上に記述されるような２μｍ／３８μｍの厚さ／波長を持っているＦＰＷ装置１０４は、ＦＰＷ装置１０４の８０番目モードを分離するだろう。ＦＰＷ装置１０４は、装置に置かれたインターディジット型電極に特定パターンを選ぶことにより、この結果を達成するように設計することができる。１つの実施例では、ＦＰＷ装置１０４は形において長方形である。ＦＰＷ装置１０４は循環的になりえるか（二者択一で）あるいは楕円になりえる、あるいは他のある平面形状。
【００６８】
一般に、ＦＰＷ装置１０４は当技術の中で既知の微細加工技術を使用して、シリコンウエハ１３０から構築される。記述された実施例では、キャビティ１３２は、長さおよそ１．６ｍｍである薄く保留されたメンブレン１３４を０．３ｍｍ広く生産するウェーハ１３０および２μｍにエッチングされる。全面的なウェーハ１３０厚さはおよそ５００μｍである。したがって、キャビティー１３２の深さはちょうどわずかにウェーハ１３０厚さ未満である。図２の拡張した視界挿入物の中で示されるように、窒化アルミニウム（ＡｌＮ）の０．５μｍ層１３６は、メンブレン１３４の外部表面（つまりキャビティー１３２の向こうの表面）に置かれる。２セットの相互指のある金属溶接棒１３８はＡｌＮ層で置かれる。キャプチャ・エージェント（より詳細に下に記述された）の不動化を促進するために、金（およそ５００オングストローム）の薄層１４０は、メンブレン１３４の内部表面（つまりキャビティー１３２に面する表面）に置かれる。
【００６９】
オペレーションでは、保留されたメンブレン１３４中の振動を生成するために、機器／制御電子回路１２６（図ＩＡを参照して）は少なくとも１セットの電極１３８に時間を変わる電気信号を適用する。機器／制御電子回路１２６は、さらに少なくとも電極１３８の別のセットからセンサ・シグナルを受け取ることにより、メンブレン１３４の震動の特性をモニタする。液体がメンブレン１３４のキャビティーサイド１３２に接している場合、プレート構造の最大のレスポンスは約１５−２５ＭＨｚである。度数の機能としてセンサ・シグナルの相対的な大きさおよび位相角の変化を決定するために、機器／制御電子回路１２６は、基準信号を電極の第２のセットからのセンサ・シグナルと比較する。機器／制御電子回路１２６は、ターゲットとされたアナライトの存在を検出するためにこれらの変更を解釈する。いくつかの実施例では、機器／制御電子回路は、さらに例えば、メンブレン１３４の内部表面上のターゲットとされたアナライトの濃縮を決定する。
【００７０】
興味のあるアナライトをターゲットとするエージェントを捕らえる、上に記述されるように、メンブレン１３４の内部表面をカバーする金１４０の薄層上で動けなくされる。
表面は適切なリンクする化合物で覆われた＝でありえる。適切なリンクする化合物は市販で入手可能である。１つの実施例では、下記に述べられるように、リンク化合物はビオチンＰＥＧジスルフィドを含む。別の実施例では、チオールを終了したアルキル・チェーンは、自己集合した単分子層（ＳＡＭ）を形成する金表面にリンクされる。ＳＡＭチェーンの小片、許可するために反応的なグループ（例えばカルボキシル）で終了する、共有結合、ＳＡＭにキャプチャ・エージェントをリンクすることはつなぐ、当技術の中で既知の生化学的プロセスステップの使用。ＳＡＭチェーンの剰余は、非リアクタンス性のグループ（できれば非特異性の結合（例えばエチレングリコールのオリゴマー）に抵抗するために親水性の形質を持っているオン）で終了してください。他の界面化学は文献に述べられており、捕獲表面を生むために使用することができる。
【００７１】
ＦＰＷ装置１０４はメンブレン１３４の外部表面上の電極１３８への電気接続を許可するためにパッケージにされる。さらに、ＦＰＷ装置１０４は、メンブレン１３４の内部表面のために試液と連絡をとることを可能にするためにチャネルブロック１４２に機械的に支援される。また、インターフェースはセンサ表面１４３を液体試料と接触させるために提供される。チャネルブロック１４２は、入力ポート１１８から、メンブレン１３４の内部表面を過ぎて、その後出口ポート１２０から試液が流れるためにパス（流体チャンバ１６０）を作成する。シール１４４は、ＦＰＷ装置１０４およびチャネルブロック１４２の組合せの内に形成されたチャネル１０２から試液が逃げるのを防ぐＦＰＷ装置１０４とチャネルブロック１４２の間で形成される。チャネルブロック１４２はこのように流体チャンバ（ＦＰＷ装置１０４はそれに内壁のうちの１つを含む）を形成する。
【００７２】
ＦＰＷ装置１０４およびチャネルブロック１４２の組合せによるチャネル１０２は、直径およそ０．５ｍｍである。チャネルブロック１４２は他の材料中にプラスチック、金属あるいは陶磁器を含む様々な材料から形成することができる。
【００７３】
システム１００は、システム１００の内で、少数を指定するフロー、圧力あるいは軌道のような少なくとも１つの流動性の財産を変更するために１つ以上の流体素子を含んでいる。ＦＩＧ１Ａの中で示されるポンプ１２２およびバルブ１１４。それは装置を通って、およびセンサ表面１４３（試験プロトコルを実行するために必要とされたとともに）上に様々な試液のフローを指図しコントロールする、すべて流体素子の例である。一般に、流体素子は、装置１０４の流体チャンバ１６０内の少なくとも１つの表面の近くに少なくとも１つの流動性の特性を変更する。一般に、これは少なくともセンサ表面１４３の一部に沿った磁気微粒子を分配するために行われる。上に記述されるように、いくつかの実施例では、流体素子は、ポンプ（例えば蠕動ポンプ、遠心ポンプ、回転ポンプ、電気浸透のポンプ）である。いくつかの実施例では、ポンプは流体チャンバのエントランス側に置かれる。また、他の実施例では、ポンプは流体チャンバの出口側に置かれる。いくつかの実施例では、装置は、分流器（例えばプラグ、閉塞症壁、流体チャンバに関連があって、流体チャンバの少なくとも１つの内表面の近くに流量を変更するために配置されるじゃま板）である。
【００７４】
図１Ａを参照すると、単一のポンプ１２２はＦＰＷ装置１０４の不用の側に置かれる。ポンプ１２２が生成するサクションは、ＦＰＷ装置１０４の供給横のそれぞれの貯水池コンテナ１１２からサンプル１０８中のバッファ１１０あるいはアナライトを取り出す。バルブ１１４は、どの試液が試験プロトコル中にセンサ表面１４３上にいつでも導かれるかコントロールする装置１０４の供給側に置かれる。ポンプ１２２は、テストの流量をコントロールする。
【００７５】
温度（例えば熱電冷却機）を規制するための装置はＦＰＷ装置１０４およびチャネルブロック１４２に関係している場合がある。これは、比較的一定の知られていた温度で装置１０４を維持することにより、ＦＰＷ装置１０４出力への可変環境要因の影響を縮小する。代替実施例では、温度センサは、ＦＰＷ装置１０４の一部としてシステム１００内に例えば含まれている。ＦＰＷ装置１０４からのセンサ・シグナルは、温度変化の影響に依存しない信号を生成するために温度センサの出力に基づいて、特定の瞬間で、そのうちに（あるいは期間中に）計られる。数理モデル、解析的モデル、あるいは数学的・分析的なモデルのあるハイブリッドの組合せに基づいて、この大はがれを行うことができる場合があらん。
【００７６】
システム１００のいくつかの実施例では、フィルタは試液のパスに含まれている、に、選択的に、彼らが流体チャンバに入るのを防ぐ特別のサイズのフィルター粒子（例えば磁気微粒子と生体試料）。例経由で、特別の試験プロトコルはテストの間にフィルタを変更するためにステップを含んでいる場合があらん。これは、異なるタイプのアナライト（つまりサイズ）および磁気微粒子が流体チャンバへ導かれ、そのために、システム１００によってテストされることをテストの異なる部分中に可能にするだろう。
【００７７】
１つの実施例では、磁気微粒子（例えば常磁性のビードあるいはスーパー正磁性ビード、ミクロスフェア）（それらはキャプチャ・エージェントでそれらの表面を覆う）は、アナライトを含んでいるサンプルと混じり合っている。規定された混合時間アナライトの後に  −  何も結合していない非特異性の材料および粒子状物質１４８を結合した粒子状物質１４７が行うように、粒子は１４６の結果を複雑にする。粒子状物質１４６、１４７および１４８はサンプル貯水池１１２に位置する。
【００７８】
システム１００は、メンブレン１３４の近くに磁束を生産するために構造１５０を引き起こす磁界をさらに含んでいる。図１Ａにおいて、磁束のソースは、通常ＦＰＷ装置１０４のメンブレン１３４に隣接していると整えられた伸縮自在の磁石１５０である。磁石１５０がメンブレン１３４に隣接している場合、磁石１５０はメンブレン１３４の近くに重要な傾斜磁場を生産する。機器／制御電子回路１２６の管理の下で、伸縮自在の磁石１５０は、本質的にメンブレン１３４の近くに磁界を縮小するのに十分な距離によってメンブレン１３４から遠ざけて撤回することができる。１つの実施例の中で、メンブレン１３４への隣接では、磁石１５０が位置している場合、メンブレン１３４のセンサ表面１４３からのおよそ２００μｍ。別の実施例の中で、メンブレンへの隣接中にいる場合、磁石１５０は、メンブレン１３４のセンサ表面１４３からの約１００μｍに約５０μｍの間で位置している。
【００７９】
磁石１５０がメンブレン１３４に隣接している場合、磁石１５０は、サンプルからセンサ表面１４３に磁気微粒子を引き付けるために磁束のソースを提供する。アナライト粒子複合体１４６、粒子状物質１４７と同様に、で、非特異的に、無を備えた、境界資料および粒子状物質１４８、境界、それらがセンサ表面１４３に遭遇するまで、液体試料から移動する。アナライトはセンサ表面１４３上のキャプチャ・エージェントと団結する。したがって、アナライトは、磁粉とセンサ表面の間のリンクを形成する。粒子状物質１４７、で、非特異的に、無を備えた、境界資料および粒子状物質１４８、境界、磁界によってセンサ表面１４３で保持される。さらに、弱い結合力は、粒子状物質１４６と１４７、１４８およびセンサ表面１４３の間に作用することができる。プロトコル（より詳細に下に記述された）の洗濯ステップの間、磁石１５０はセンサ表面１４３で蓄積した粒子状物質によって経験された磁力を縮小するために撤回される。洗濯流量はアナライトによって表面に結び付けられない粒子状物質１４７および１４８を削除するために増加される。粒子状物質１４７以来、で、不明確に、無を備えた粒子状物質１４８と同様に境界資料も、境界、もっと弱くアナライト粒子複合体１４６よりセンサ表面１４３にリンクされる、それらはより低い洗濯流量（また対応する流体力学のフォース）でセンサ表面１４３からリリースする。従って、磁石１５０（つまり、センサ表面１４３の粒子状物質１４６、１４７および１４８によって経験された磁力を本質的に縮小して）の削除はそれらからアナライト１４６を備えた粒子を識別するために使用される、なしで（粒子状物質１４７および１４８）。磁石１５０を取り撤回するための１つの技術は、それをカム・システム（図示せず）が始動するキャリッジ（図示せず）にマウントする予定である。
【００８０】
磁石１５０資料、幾何学およびセンサ表面１４３からの距離は、フィールド形および磁場勾配を決定する、そしてしたがって、フォース、アナライト粒子複合体１４６経験。伸縮自在の磁石１５０として使用される高い強さ永久磁石は営利上利用可能である。例えば１ｍｍ、円筒状のＮｄＦｅＢ磁石から購入することができる直径、数人のベンダー（例えばデクスター・マグネチック・テクノロジーズ）、やあ、取られた時、１つの実施例、１ｍｍの直径および５ｍｍの長いＮｄＦｅＢ磁石１５０は、センサ表面１４３の０．１ｍｍ以内に位置する。撤回された時、磁石１５０はセンサ表面１４３からの少なくとも０．５ｍｍである。ＦＰＷ装置１０４のメンブレン１３４が非常に薄く、非磁性体（例えばシリコン、窒化アルミニウムあるいは金）で作られているので（２μｍ）、メンブレン１３４は著しく装置１０４のセンサ表面１４３横の磁界を乱さない。その結果、高捕集効率に必要なように、非常に高い大きさ磁界および大きな磁場勾配は達成することができる。
【００８１】
チャネル１０２による試料噴霧速度はよい捕集効率に必要な滞留時間によって決定される（例えば、オペレーターによって指定された）。センサ表面１４３上の平均速度が約１と約５ｍｍ／ｓの間にあるように、試料噴霧速度が調節される。
およそ３μｍの直径を備えた酸化鉄の常磁性の粒子で、５０％に接近する捕集効率は達成することができる。
【００８２】
磁束（つまり磁石）のソース１５０の他の構成は使用されてもよい。例えば、電磁石は永久磁石の代わりに使用することができる。電磁石は、装置１０４のセンサ表面１４３の近くのフィールド・フラックスを集中させるために伸びるポール片を含んでいる。
【００８３】
あるいは、磁化できる資料は、センサ表面１４３（０．１ｍｍ以内に）、および磁化できる材料中の磁界を引き起こすために磁化できる材料の開いた切羽と結合した個別の磁石に隣接していて、作り位置することができる。資料に引き起こされた磁界は、センサ表面１４３の近くの望ましい磁場勾配を見つける役目をする。このように、大きな低価格磁石は使用することができる。また、単一の磁石は資料の成形に依存して、多数のセンサをアドレスするために使用することができる。この目的のための有用物質の例は高く純鉄である、合金（高いニッケル含有率鉄）、ｓｎａケイ素鋼（典型的な１−２％のシリコン）４９のようなμメタル。関連する磁石を備えたそのような磁化できる材料を使用するという利点は、より低コスト生産を許可して、センサ組立を単純化することができるということである。低精度アクチュエーターは磁石が単に強磁性の核心と連絡をとる必要があるか、完全に取消しされる必要があるので、磁石を取り撤回するために使用することができる。磁石１５０がセンサ表面１４３のすぐ近くに位置する場合、記述された実施例では、精度の高位レベルはよい分析繰返し精度を達成するために要求される。このアプローチを備えた電界強度のある損失があるが、よい捕獲効率（例えば〉１０％）を達成する総合体系を設計することはまだ可能である。
【００８４】
構造（例えば磁石または強磁性体）を引き起こすフィールドのチップの形は表面で磁場勾配を向上させて及び／又は集中するために調整される場合がある。ＦＰＷ装置１０４（例えば０．３ｍｍｘ１．６ｍｍ）のサイズが、慣例通りに決まった磁石より典型的に小さいか、誘導物質を機械加工したので、メンブレン１３４に隣接している構造を引き起こすフィールドの部分はセンサ表面１４３に１つ以上の場所の磁界を集中するために先細りになりえる。チップを先細りにすることは局所場大きさおよび局所場勾配の両方を増加させるために作用する。例えば、Ｖ字形のチップは、よく現在のＦＰＷ装置形状に適する。
【００８５】
システム１００の１つの実施例は、磁束の最初のソース１５０に反対するか部分的に反対する磁束のオプションのセカンドソース１５０ａを含んでいる。磁束のこのセカンドソース１５０ａはセンサ表面１４３に付着した磁気微粒子のうちのいくつかを移動させるために使用することができる。それは、例えば、どんな結合されたアナライトもない磁気微粒子１４８を移動させる場合がある。それらは、アナライトを結合した粒子状物質１４６としてセンサ表面１４３に強く付けられなかった。いくつかの実施例では、磁束の最初のソース１５０は切られるかセンサ表面１４３から立ち去った。次に、磁束のセカンドソース１５０ａは、流体チャンバの少なくとも１つの表面に関連があって、選択的に磁気微粒子を削除するために位置する。これは例えば、どんな結合されたアナライトもない磁気微粒子１４８を削除するために行われる場合がある。したがって、それらはセンサ表面１４３に強く結び付けられない。これはどんな結合されたアナライトもない磁気微粒子１４８を削除するために流体のフローを増加させるとして同様の結果を達成するだろう。
【００８６】
装置１０４が保留されたメンブレン１３４を持ち、メンブレン１３４のすべての部分が等しく検出できる共振の動いている質量に寄与するとは限らないので、装置１０４の表面１４３上のアナライト粒子複合体１４６の分配のコントロールは、デバイス性能を改善する場合がある。例えば、システム１００はメンブレン１３４の長軸の中心線の中央の３分の２に沿ったＦＰＷ装置１０４幅の３分の１の内のアナライト粒子複合体１４６を分配すると構築され整えることができる。考慮に入れる、フロー電界効果、フィールドのチップの形―構造（例えば磁石１５０）を引き起こすことは、センサ・メンブレン１３４上のフローの方向にフィールド大きさおよび磁場勾配が増加するような状態である場合がある。
すなわち、下流領域のアナライト粒子複合体１４６（ここで境界層はアナライトを部分的に失う）は、上流領域のアナライト粒子複合体１４６を行うより高いフィールドおよび磁場勾配を経験する。
【００８７】
一般に、システム１００はセンサ表面１４３の１つ以上の特別のリージョンの磁気微粒子を集中すると構築され整えることができる。装置１０４のレスポンスは、製作材料あるいはセンサ設計の詳細の特性によりセンサ表面１４３上に一定ではない場合がある。したがって、装置１０４の高感度リージョンは、装置１０４の長く短い軸椎中心線に関して非同一で非対称の場合がある。したがって、構造を引き起こすフィールドのチップは最も高い感度のリージョンかリージョンの磁気微粒子を集中するために形作られる場合がある。
【００８８】
装置１０４を通って流量を変えることも与えられた磁界分布のためのアナライト粒子複合体１４６のより一定の適用範囲を達成するために使用される場合がある。与えられたフィールドに向かって、磁気微粒子は非常に弾道のオブジェクトのように、バルク流量割合によって決定されるようなセンサ表面１４３と対話する、重力物体力がある状態に落ちる場合がある。この場合、しかしながら、磁気引き起こされたフォースは支配する。流量を変えることによって、アナライト粒子複合体１４６にストリーム賢明な流れの向きに沿って本質的に異なる場所でセンサ表面１４３と対話させる場合がある。更に、磁気微粒子がフローを積重ねる（それらがセンサ表面１４３にさらされることになっている場合、望ましくない発生）ので、逆にすることができ、続いて、パイルを引くために前に脈を打った、の上に、またしたがってセンサ表面１４３でより多くの粒子状物質を通信する。システム１００の１つの実施例では、センサ表面１４３に沿った磁気微粒子の選択的な場所は、検出プロトコル、１つあるいは磁束ソース、およびセンサ表面１４３に沿った流量の特性か、特性両方のいずれかの間に、選択的に変わることにより達成される。
【００８９】
システム１００の１つの実施例は装置｛を含んでいる、例えば、視覚、センサ表面１４３に付けられているか引きつけられる磁気微粒子の少なくとも１つの特性を特徴づけることには磁気この装置はＦＰＷ装置１０４の不可欠な部品でありえる。あるいは、それは磁石１５０の一部でありえる。あるいは、それはシステム１００の他のコンポーネントとは別に個別部品でありえる。そのような装置は、粒子状物質の存在を検出し、かつ粒子（例えばサイズ、量、濃縮、センサ表面１４３に引きつけられる粒子状物質の密度）と関係するパラメーターをさらに決定するために使用されてもよい。
【００９０】
システム１００の１つの実施例は、オペレーターかコンピューターがシステムかコンポーネントの使用法の追跡のためにシステム１００あるいはシステムの特別のコンポーネントを識別することを可能にするための同定（識別）装置（identification device）を含んでいる。同定装置は、バーコード、識別番号あるいは他の識別マークのようなシンボルかイメージを含んでいる場合があらん。同定装置は、識別情報の提供で当技術の中で知られていた、ＲＦＩＤタグ、集積回路あるいは他のそのようなコンポーネントのように、受動か活発である実際のコンポーネントを含んでいる場合があらん。どんな熟考された同定装置も使用されてもよいが、多くのそのような装置が当技術の中で知られている。
【００９１】
生物学のアナライトの検出のためのアナライト粒子複合体１４６と結合してＦＰＷ装置１０４を使用するための一般的な検出プロトコル２００は、図３に示される。
検出プロトコル２００の第一歩２０２は２０２を得ており準備している、アナライトサンプル。様々な準備プロセスはテストされているアナライトの特定タイプに依存して、試験に先立って行なわれる必要がある場合がある。例えば、食物（例えば牛挽肉中の大腸菌）の微生物を発見すると、サンプルは、濃縮ブイヨンと最初に混じり合って、身体に入り（stomached）、インキュベートされ、ろ過した。血液のタンパク質の発見のために、サンプルは最初にろ過されるか遠心分離機にかけられるだろう。また、血清は分離した。試料調製ステップを含んでいる試験プロトコルの特定の例はここに記述される。
【００９２】
検出工程の次のステップ２０４はアフィニティーを上塗りを施した常磁性の粒子状物質（つまりビード）を準備したアナライトサンプルと混合している。常磁性か、非常に常磁性の粒子状物質は、多くのベンダー（例えば、ノルウェイのオスロ所在のダイナル・バイオテック社）から市販されている。典型的な直径は５０ｎｍから１０μｍまで及ぶ。また、そのような粒子状物質は、様々なアナライト（例えばセル、タンパク質および核酸）をターゲットとする、アフィニティー・エージェント（例えば抗体、タンパク質および核酸プローブ）で既に覆われて獲得することができる。あるいは、粒子状物質は選択のキャプチャ・エージェントを付けるために様々な反応的な化学基（例えばエポキシ、カルボキシルおよびアミン）で購入することができる。標準の生化学のプロトコルはこの目的に利用可能である。
【００９３】
常磁性の粒子状物質を備えたサンプルは加えた、特別のアナライトによって決定された時間の量のための動揺した２０６である、またエージェントを捕らえる。このプロセス中に、アナライトが粒子状物質上で捕らえられるように、粒子状物質はアナライトで結合する。ある場合には、サンプルは、この時点で直接テストすることができる。しかし、他の場合では、元見本の残りから粒子状物質へのアナライト境界を分離するセパレーション・ステップ２０８を行なうことは有利である。これらのセパレーション・ステップ２０８は、分析中の他の生体試料からの干渉を縮小する。そのようなセパレーション・ステップを行なうためのマニュアルあるいは自動化機器は、市販されている（例えばデクスター・マグネティック・テクノロジーズ、ダイナル・バイオティック）。塩基性製鋼法は、大多数のサンプル液体を吸引することができるように表面上の常磁性の粒子状物質を局地化するために磁石を使用する。その後、磁石（例えばＦＩＧの磁石１５０。ＩＡ）は削除される。また、清潔な緩衝液は粒子状物質を再保留するために付け加えられる。
【００９４】
１つの実施例では、基線ステップ２１０は、ＦＰＷ装置１０４を備えた処理されたアナライトサンプルをテストする前に実行される。基線ステップ２１０の間、対照溶液１０６はすすぎ／ブロックへのシステムによって流れられる、センサ１０４、また、機器／制御電子回路１２６は装置１０４を興奮させる、また装置１０４からの生じる最初の基線信号を記録する。
【００９５】
サンプル輸送ステップ２１２は基線ステップ２１０に従う。アナライト粒子複合体１４６を含んでいるサンプル１０８は、磁石１５０を取って、センサ表面１４３上に流れられる。アナライト粒子複合体１４６はセンサ表面１４３に集められる。サンプル１０８の規定されたボリュームが装置１０４を通って流れた後、磁石１５０はアナライトを結合していないセンサ表面１４３からの粒子状物質１４７および１４８を放すために撤回される。また、フローは洗濯溶液（例えば緩衝液１１０）に切り替えられる。洗濯溶液の流量はセンサ表面１４３に結合した場合があるサンプル中の他の資料と同様に境界粒子状物質１４７および１４８を緩く削除するのを支援するために増加される。
【００９６】
取得ステップ２１４はサンプル輸送ステップ２１２に従う。対照溶液１０６は、装置１０４に再び突き通される。また、機器／制御電子回路１２６は、装置１０４からの最終の基線信号を得て記録する装置１０４を興奮させる。
【００９７】
システム１００は、２１６の比較により輸送ステップ２１２の間にセンサ表面１４３に蓄積されたアナライトの量を決定する、最初の基線信号および最終の基線信号、それは対照溶液でのＦＰＷ装置１０４の震動の特性に以前に一致する、そしての後に、それぞれ、取得ステップ２１４。アナライト−粒子は、センサ表面１４３への１４６の境界を複雑にする、ＦＰＷ装置１０４の震動の特性、および震動の特性への変更の量を変更する、アナライト粒子複合体の量に一致する、センサ表面１４３にはねる。
【００９８】
図４は、典型的な検出プロトコルのための時間の機能として多数のＦＰＷ装置１０４からの信号の変化を示す。正方形のシンボルはアナライトに露出された装置１０４に相当する。三角形とスターは、負の対照（アナライトがそれにビード上にない）に相当する。図４（また下記に述べられるような図５）に示されるデータは、アナライトがそのために大腸菌バクテリアである典型的な検出プロトコル、あるいは一般にセルのアナライトを表わす。
【００９９】
特にこの実験では、共振するピークの度数は追跡された。図４は、磁気微粒子１４６、１４７および１４８が表面で蓄積するとともに、ＦＰＷ装置１０４の共振周波数が減少することを示す。一旦磁石１５０が削除され、磁気微粒子のうちのいくつかが押し流されれば、装置１０４の度数は増加する。結局、システムは、テストの最初に得られた、最初の基線、あるいはコントロールのそれと比較することができる最終基線を確立する。
【０１００】
図５は、オリジナルのアナライト濃縮の機能として検出された最終信号変化を示す簡略なプロットである。
他の検出プロトコルは上に記述されたシステム１００と共に使用されてもよい。個々のステップは特定のアプリケーションかアナライトの必要条件に依存して、除去するか加えることができる。例えば、図６は、検出プロトコル（図４に示されるものに似ている）のための時間進化プロットを示す。しかしながら、図６は、ＰＳＡの分析のための検出プロトコルを描く。それは、タンパク質の検出に対するシステム１００の能力を実証する。
さらに、流れの向きはプロトコル中に逆転することができる。例えば、流れの向きの逆転は、不明確に装置からの境界物質を洗うのに、あるいは利用可能なサンプルをより効率的に利用するのに役立つ場合がある。
【０１０１】
検出プロトコルにおける別の変異は洗濯ステップと結合力のあるステップを交互にすることを含んでいる。これは、装置のダイナミックレンジのよりよい使用を認めることができる、やあ、来る、ケース、粒子状物質の大きな小片、特に低いアナライト濃縮で、アナライトを結合していない。遠方に繰り返し粒子状物質を結合し洗うことによって、より多くのアナライト粒子複合体１４６を蓄積し、従って、測定の感度を改善することは可能である。
【０１０２】
輸送ステップ２１２の間にセンサ表面１４３で磁界分布を変更するか操作することは、特別の粒子に付けられたアナライトがセンサ表面１４３に遭遇する見込みを向上させる場合がある。例えば、フィールドの空間分布が結合中に交互にされる場合、常磁性の粒子状物質をセンサ表面１４３で回転させることは可能である。いくつかの実施例では、フィールドの空間分布のコントロールによって、オペレーターあるいは機器／制御電子回路１２６はセンサ表面１４３に沿った常磁性の粒子状物質の圧延をコントロールするために使用することができる。
【０１０３】
上に記述されるように、システム１００に別の磁界（つまり磁束のセカンドソース）を導入することは、分析条件のコントロールを改善し、分析の特異性を向上させることができる。結合中に、例えば、あるいはセンサ表面１４３に第２の磁界を適用して、上に記述されるようなプロトコルのステップを洗う、弱い境界磁気微粒子を取り外すために作用することができる。第２のフィールド（磁場）の強さは結合力未満であるセンサ表面１４３でアナライト粒子複合体１４６上のフォースを生成するために調整することができる、特に境界アナライト、しかし典型的な結合力上に、のために、不明確に、境界資料。ステップのこのシーケンスは、さらにテストの特異性を増加させる分析中の繰り返された複数回になりえる。
【０１０４】
ＦＰＷ装置１０４のレスポンスをモニタしている間、センサ表面１４３上の様々なアナライト粒子複合体１４６の相対的な結着強度は、洗濯ステップの間にこの磁気道路寄せフォースを増加させること（連続的にあるいは個別に）により決定することができる。相対的な結着強度についての情報はサンプル１０８中の異なるアナライトを識別するために使用することができる。
【０１０５】
サンプルが装置１０４と接続する特別の方法は他の実施例において異なることができる。上記実施例では、アナライト粒子複合体１４６とセンサ表面１４３の間のコンタクトを確立するために、システム１００はチャネルを通ってサンプルを流す。システム１００の相対変異では、ＦＰＷ装置１０４はプローブにマウントされ、アナライトに結び付けられた磁気微粒子を含んでいる試液へ少なくとも部分的に没頭する。この実施例については、浸漬はここに記述されるように、粒子状物質がセンサ表面１４３の方へ引きつけられ、続いて、検出されるように、センサ表面１４３への接近に境界磁気微粒子を置くのに十分である。ベースライン（基線）信号を得るために、装置１０４（あるいは１０３にカートリッジを付ける）は参考試験溶液に浸される、ｍ、いくつかの実施例、装置１０４（例えばメンブレン１３４）の一部はプローブにマウントされる。さらに、メンブレン１３４のセンサ表面１４３の一部だけが、アナライトに結び付けられた磁気微粒子を含んでいる溶液に接して置かれる。これらの実施例の中で、浸漬、あるいは流体中のプローブの移動をコントロールした、粒子状物質がセンサ表面１４３の方へ引きつけられ、続いて、検出されるように、センサ表面１４３への接近に境界磁気微粒子を置くのに十分である。
【０１０６】
システム１００の別の代替実施例は装置１０４をマウントすることを含んでいる、サンプル１０８を保持し、次に、撤回された井戸へ部分的に没頭することができるチューブの内部。サンプルが没頭する場合、ポンプは、チューブに、およびセンサ表面１４３（あるいは１０３にカートリッジを付ける）上にサンプルを引っ張って行くためにサクションを適用する。その後、サンプルは、ポンプを逆にすることにより、あるいは単にチューブの放出により井戸へ後ろに取り出される。サンプルを引きリリースするこのサイクルは捕集効率およびしたがって分析のパフォーマンスを改善するために繰り返すことができる。
【０１０７】
次の例は、ここに記述されたシステム１００、準備をするためのステップおよびアナライトの検出のためにシステム１００を利用することの１つの実施例のために示す。
例
例１：屈曲薄板波装置の表面のキャプチャ・エージェント機能化のための一般化された方法
１．屈曲の薄板波装置（たわみ板波デバイス）１０４の表面（例えばセンサ表面１４３）上への預金金、また例えば酸素プラズマを備えた金表面１４３を清潔にする。
【０１０８】
２．金の表面１４３のための理想的な界面化学は、キャプチャ・エージェントの共有結合のアタッチメントのための表面に置かれた非特異性の結合抵抗性および２）反応的なグループを１）に供給するオンである。金の表面１４３のための典型的な界面化学は、アルカン・チオール類の自己集合した単分子層（ＳＡＭ）である。ＳＡＭは、２つのアルカン・チオール類の混合物から形成することができる；非リアクタンス性のグループで終了して、キャプチャ・エージェントの後の共有結合のアタッチメントのための反応的なグループおよび１で終了した１つ。例、ＥＧ３−ＯＨ（ＥＧ３）およびＥＧ６−ＯＣＨ２ＣＯＯＨ（ＥＧ６）の混合物と終了したＣ１１経由でアルカン・チオール類はこの目的に使用されてもよい。１つの実施例では、屈曲の薄板波装置１０４（特に装置１０４の表面１４３）は、アルカンに接して置かれる、メルカプト基を含む溶液、また例えば約１６時間室温でかえるために許可された。その後、屈曲の薄板波装置１０４の表面１４３はエタノールですすがれ、窒素で乾燥しているように吹かれる。
【０１０９】
３．次のステップは、屈曲の薄板波装置１０４の表面１４３へのキャプチャ・エージェントあるいはアナライトの共有結合のアタッチメントを含んでいる。多くの方法はキャプチャ・エージェントあるいはアナライトの共有結合のアタッチメントに使用されてもよい。典型的な方法はビオチン・リンカー部分をＳＡＭに共有結合でリンクし、その後、ストレプトアビジンをリンクする層によってビオチン化された抗体かアナライトを屈曲の薄板波デバイス面１４３に結び付けることを含んでいる。
【０１１０】
例ＩＩ：病原性大腸菌Ｏ１５７の検出：牛挽肉使用でのＨ７、例えば図３（図５は、大腸菌の様々な濃縮のデータ代表を牽制する）の方法。
１．約１００ｃｆｕ／ｍＬより大きな濃縮を備えた大腸菌Ｏ１５７：Ｈ７を含んでいるアナライトサンプルを準備する。
【０１１１】
２．免疫磁気分離を行なうことにより溶液でのアナライトサンプルを集中する。様々な市販の装置（例えば、マトリクス・マイクロサイエンス社によるパサトリックス（Pathatrix）や、ダイナル・バイオテック社によるビーズ・レトリーバなど）あるいは手動の方法を用いて、免疫磁気分離を行ってもよい。典型的な手動での方法は次のものを含んでいる：
ａ．再延期する、チューブの底の磁気ビーズペレットが消えるまで、大腸菌抗体（例えばＤｙｎａｂｅａｄｓ反大腸菌０１５７（Ｄｙｎａｌバイテクから利用可能））で覆われた磁気ビーズ。磁性プレートのラック（例えばＤｙｎａｌ  ＭＰＣ−Ｓ）にｍｉｃｒｏｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅチューブを置いてください。チューブ（磁気ビーズストックのボリュームは選択した、希望の最終のビード濃縮に基づく）の中への磁気ビーズ保存溶液のピペット１−２０μＬ。
【０１１２】
ｂ．磁性プレートのラック中のチューブにアナライトサンプルの１  ｍＬを加えて、チューブを閉じてください。
ｃ．ラックを数回逆にしてください。磁気ビーズが解決するのを防ぐために温和な連続的なかくはんで１０〜６０分間室温でチューブ中の溶液を培養してください。
【０１１３】
ｄ．ペレットへチューブの横に磁気ビーズを集中するためにラックを数回逆にしてください。適切な回復のために約３分をみておいてください。
ｅ．チューブを開く、そして注意深く、吸引液、またサンプル上澄みを廃棄する、と同様に、チューブのキャップにおいて液体のままであること。
【０１１４】
ｆ．磁性プレートを削除してください。
ｇ．チューブに洗濯バッファ（ＰＢＳトゥイーン）の１  ｍＬを加えてください。チューブのキャップを閉じて、ビードを再保留するためにラックを数回逆にしてください。
【０１１５】
ｈ．２度ステップｄ−ｇを繰り返してください。
ｉ．簡潔にボルテックス・ミキサーを使用して、チューブの内容を混合してください。
３．大腸菌Ｏ１５７：Ｈ７の検出
ａ．大腸菌Ｏ１５７：Ｈ７抗体を備えた屈曲の薄板波装置１０４の表面１４３を機能的にしてください（同様にＡ．３とＡ．４のステップによって記述されたとともに）。
【０１１６】
ｂ．チューブを含んでいる標準洗濯バッファ（０．０５％のトゥイーン２０とのＩｘＰＢＳ）に最初入口ホースを入れて、大腸菌Ｏ１５７：Ｈ７（Ｂ．２の中で準備された）と結び付けられた磁気ビーズを含んでいるチューブに別の入口ホースを入れてください。最初の入口ホースおよび第２の入口ホースはｔ−継ぎ目によって連結され、したがって、２本のホースが流動性のコミュニケーションにある。また、一方の最初の入口ホース、あるいは第２の入口ホースからの流体は、流体チャンバ１６０の入口に導かれる。２本のホースの各々にはそれぞれのホースを通って流体のフローを許すか制限することができるバルブがある。
【０１１７】
ｃ．流体チャンバ１６０の出口との流動性のコミュニケーションに最初の出口ホースを置いてください。最初の出口ホースからの流体は不用の収集ボトルに集められる。
ｄ．基線出力信号は屈曲の薄板波装置を使用して得られる。基線信号は測定される、標準、標準ポンプ速度（例えば２００μＬ／ｍｉｎ）で約５分間流体チャンバ１６０に、および流体チャンバ１６０から流れ込むバッファを洗う。
【０１１８】
ｅ．磁束１５０の最初のソースは取られる。次に、アナライトを含んでいるチューブからの流体は流体チャンバ１６０の入口へ導かれる。所望量が少なくとも１つの表面１４３へ付けられているまで、屈曲の薄板波装置１６０の少なくとも１つの表面１４３上の大腸菌Ｏ１５７：Ｈ７と結び付けられた磁気ビーズを蓄積するために、流体は、流体チャンバ１６０の入口へ導かれる。１つの実施例では、例えば、約４０００ｐｐｍ．の屈曲の薄板波装置１０４の出力に振動数シフトがある場合、所望量は達成される。
【０１１９】
ｆ．その後、アナライトを含んでいるチューブからの流体のフローは中止される。その後、境界アナライトで不明確に結合された資料（つまり１以外の材料）磁気ビーズおよび２）磁気ビーズを洗うために、洗濯緩衝管からの流体は、流体チャンバ１６０へ導かれる。
【０１２０】
ｇ．その後、磁束１５０の最初のソースは解放される。
ｈ．どんな磁気ビーズあるいはマトリクス成分も削除するために自動的な洗濯プロトコルを始めてください。
【０１２１】
ｉ．その後、屈曲の波長板装置１０４による最終の信号出力は測定される。基線信号は、アナライトサンプル中の大腸菌Ｏ１５７：Ｈ７の濃縮を決定する最終信号と比較される。
【０１２２】
例ＩＩＩ：例えば、図３の方法ステップを使用する人間の血清の中での前立腺特異性抗原（ＰＳＡ）の検出
１．遠心分離によって人間の血液サンプルから得られた人間の血清を含んでいるアナライトサンプルを準備してください。
【０１２３】
２．免疫磁気分離を行なうことにより溶液でのアナライトサンプルを集中してください。様々な市販の装置（例えば、マトリクス・マイクロサイエンス社によるパサトリックス（Pathatrix）や、ダイナル・バイオテック社によるビーズ・レトリーバなど）あるいは手話教授法は、免疫磁気分離を行なうために使用されてもよい。典型的な手話教授法は次のものを含んでいる：
ａ．再延期する、チューブの底の磁気ビーズペレットが消えるまで、ＰＳＡの抗体（例えばＤｙｎａｂｅａｄｓ反ＰＳＡ（Ｄｙｎａｌバイテクから利用可能））で覆われた磁気ビーズ。磁性プレートのラック（例えば、ダイナル社のＭＰＣ−Ｓ）にマイクロ遠心管を置いてください。チューブ（磁気ビーズストックのボリュームは選択した、希望の最終のビード濃縮に基づく）の中への磁気ビーズ保存溶液のピペットｌ−２０μＬ。
【０１２４】
ｂ．磁性プレートのラック中のチューブにアナライトサンプルの１ｍＬを加えて、チューブを閉じてください。
ｃ．ラックを数回逆にしてください。磁気ビーズが解決するのを防ぐために温和な連続的なかくはんで１０〜６０分間室温でチューブ中の溶液を培養してください。
【０１２５】
ｄ．ペレットへチューブの横に磁気ビーズを集中するためにラックを数回逆にしてください。適切な回復のために約３分をみておいてください。
ｅ．チューブを開く、そして注意深く、吸引液、またサンプル上澄みを廃棄する、と同様に、チューブのキャップにおいて液体のままであること
ｆ．磁性プレートを削除してください。
【０１２６】
ｇ．チューブに洗濯バッファ（ＰＢＳトゥイーン）の１ｍＬを加えてください。チューブのキャップを閉じて、ビードを再保留するためにラックを数回逆にしてください。
ｈ．２度ステップｄ−ｇを繰り返してください。
【０１２７】
ｉ．簡潔にボルテックス・ミキサーを使用して、チューブの内容を混合してください。
３．ＰＳＡの検出
ａ．ＰＳＡの抗体を備えた屈曲の薄板波装置１０４の表面１４３を機能的にしてください（同様にＡ．３とＡ．４のステップによって記述されたとともに）。
【０１２８】
ｂ．チューブを含んでいる標準洗濯バッファ（０．０５％のトゥイーン２０とのＩｘＰＢＳ）に最初入口ホースを入れて、ＰＳＡ（Ｂ．２の中で準備された）と結び付けられた磁気ビーズを含んでいるチューブに別の入口ホースを入れてください。最初の入口ホースおよび第２の入口ホースはｔ−関節によって連結され、したがって、２本のホースが流動性のコミュニケーションにある。また、一方の最初の入口ホース、あるいは第２の入口ホースからの流体は、流体チャンバ１６０の入口に導かれる。２本のホースの各々にはそれぞれのホースを通って流体のフローを許すか制限することができるバルブがある。
【０１２９】
ｃ．流体チャンバ１６０の出口との流動性のコミュニケーションに最初の出口ホースを置いてください。最初の出口ホースからの流体は不用の収集ボトルに集められる。
ｄ．基線出力信号は屈曲の薄板波装置１０４を使用して得られる。基線信号は測定される、標準、標準ポンプ速度（例えば２００μＬ／ｍｉｎ）で約５分間流体チャンバ１６０に、および流体チャンバ１６０から流れ込むバッファを洗う。
【０１３０】
ｅ．磁束１５０の最初のソースは取られる。次に、アナライトを含んでいるチューブからの流体は流体チャンバ１６０の入口へ導かれる。所望量が少なくとも１つの表面１４３へ付けられているまで、屈曲の薄板波装置１０４の少なくとも１つの表面１４３上のＰＳＡと結び付けられた磁気ビーズを蓄積するために、流体は、流体チャンバ１６０の入口へ導かれる。１つの実施例では、例えば、約４０００ｐｐｍ．の屈曲の薄板波装置１０４の出力に振動数シフトがある場合、所望量は達成される。
【０１３１】
ｆ．その後、アナライトを含んでいるチューブからの流体のフローは中止される。その後、洗濯緩衝管からの流体は、押し流す流体チャンバ１６０へ導かれる、非特異的に結合され、境界アナライトを備えた、境界資料（つまり１以外の材料）磁気ビーズおよび２）磁気ビーズ。
【０１３２】
ｇ．その後、磁束１５０の最初のソースは解放される。
ｈ．どんな磁気ビーズあるいはマトリクス成分も削除するために自動的な洗濯プロトコルを始めてください。
【０１３３】
ｉ．その後、屈曲の波長板装置１０４による最終の信号出力は測定される。基線信号は、アナライトサンプル中のＰＳＡの濃縮を決定する最終信号と比較される。
例ＩＶ：口径測定器（キャリブレータ）Ｉ中のＰＳＡ
実例経由で、実験はどのデータが、本発明の原理による図１Ａのシステム１００を使用して得られたかに行なわれた。ダイナル社のトシルに活性化された最高の常磁性のビード、反前立腺特異性抗原（ＰＳＡ）で機能的にされた、抗体（ＰＮ、サンディエゴ（ＣＡ）のオフィスを持つスクリップス・ラボラトリーズ社９０２０５）を捕らえる、サンプルにさらされた。サンプルはスパイクがおよそ０ｐｇ／ｍＬでつけられて、１ｘＰＢＳ（燐酸塩緩衝食塩水）および１％のウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含んだ、自由なＰＳＡの１０ｐｇ／ｍＬ、１００ｐｇ／ｍＬおよび５００ｐｇ／ｍＬ（マサチューセッツ州コンコード所在のフィッツジェラルド・インダストリーズ・インターナショナル社）。ほぼサンプルに関しての２ｘ１０〈４〉ビーズ／ｍＬの命令のビード濃縮は、実験の中で使用された。１時間温和な連続的なかくはんを備えたビードでかえされた場合スパイクがつけられたサンプル。
【０１３４】
カートリッジ（図示せず）中のシングル・チップ上で提供される図２の屈曲の薄板波（ＦＰＷ）装置１０４のうちの８つは、１つのｘ  ＰＢＳが０．０５％のトゥイーン２０（ポリエチレングリコール・ソルビタンｍｏｎｏｌａｕｒａｔｅ）を牽制して、火薬が最初に詰められた後に挨拶の反ＰＳＡ抗体（ＰＮ、サンディエゴ（ＣＡ）のオフィスを持つスクリップス・ラボラトリーズ社９０１９７）で機能的にされた［シグマ−セントルイス（ＭＯ）のオフィスを持つオールドリッチ社］。
【０１３５】
２００６年５月２日（代理人ドケット番号ＢＩＯ−００８）にファイルされて、マスターズ他による「方法および分析測定用装置」とタイトルをつけられた米国の特許出願で、記述されるように、データは例えば得られ分析された。８つの個々の度数（レファレンス信号に関して無限軌道のセンサ位相に各々各々一致して）の基線測定（同様に以前にここに記述されたとともに）は、約１７８００秒でなされた。レスポンスの大きさがピーク値に近い場合、および位相特性が周波数変化に関して重要な線形の範囲を持つところで、追跡する位相は、度数の近くで、装置の共振帯域内にある各装置に、最初に選ばれる。センサ位相を追跡する場合、各時間点では、独立デバイスを追跡する度数は、一連の度数の上に１）各装置をさっと動かし、基準信号に関して各励起周波数でレスポンスの位相を記録し、２）各装置の測定された位相に励起周波数を関連づける機能に適合し、３）以前に決定されたトラッキング位相に対応するトラッキング度数を計算するその機能を使用することにより見つかる。
【０１３６】
この実施例では、装置は２０ＭＨｚの近くで操作される。また、一掃範囲はほぼ２ＯｋＨｚである。この範囲にわたり、適当な機能が線形であることを可能にして、位相特性は本質的に線形である。各装置の基準信号は、励起によって同時に運転されて、受動の電気部品、抵抗器およびコンデンサのネットワークの出力を含む。参照ネットワークは、減衰と一致し、かつ共振の近くの装置のために好ましい位相ずれを提供するために選択されている。基線度数は参考文献として載せられ、標準化される、無限軌道の度数、また選択された時点でｐｐｍ（ｐｐｍ）として示される。
【０１３７】
各装置１０４の感知表面１４３は、キャプチャ・エージェントと機能的にされた。金の上塗りを施したチップは、典型的な加工条件が約２分間約５０Ｗだった酸素プラズマソースを使用して清潔になった。チップは、３０分間純粋なエタノールに続いて浸された。
次に、チップは、エタノールの中でビオチンＰＥＧジスルフィド解決策（カタログ番号４１１５１−０８９５番、ノルウェイのオスロ所在のポリピュア社）の０．５のＨｉＭ解決策に転送され、夜通しかえることを許された。チップは、３０分間純粋なエタノール溶液へ後ろに転送された。チップは簡潔で最終のエタノールすすぎを受け取り吹分けられた、乾燥している、窒素ストリームの使用。準備条件上の変異は達成された同様の結果で作ることができる。
【０１３８】
装置１０４の合成のビオチン化された表面は、１時間ビオチン化された表面に関するニュートラアビジンのｌＯｊｔｉｇ／ｍｌ解決策を流すことにより、ニュートラアビジン（ＰＮ、ロックフォード、ＥＬのオフィスを持つピアス・バイオテクノロジー社３１０００）で覆われた。抗体は、メーカーの命令（ＰＮ  Ｆ−６３４７、カールスバード（ＣＡ）のオフィスを持つＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ株式会社）によってビオチン化され、次に、ニュートラアビジンの上にビオチン化された抗体（Ｉｘ  ＰＢＳ  ０．１％のＢＳＡバッファへ薄められた）の５つのμｇ／ｍｌ解決策を流すことにより、ニュートラアビジン化された表面につながれた、１時間表面を覆った。
【０１３９】
ＰＳＡのサンプルは導入された。また、同時に、磁界は約１７９００から約１８２００秒までセンサ表面１４３の近くで生成された。自由なＰＳＡのおよそ０ｐｇ／ｍＬ、１０ｐｇ／ｍＬ、１００ｐｇ／ｍＬおよび５００ｐｇ／ｍＬのサンプルは各々、２つの異なる装置１０４（８つの装置に達する）に提供された。サンプルは、センサ上に流れる５００のμポンドの完全なサンプル実行／ボリューム用のおよそ１００μＬ／ｍｉｎでセンサ上に流れられた。このように、自由なＰＳＡで覆われた、ダイナル社のトシルに活性化された最高の常磁性のビードは、装置１０４の本質的な表面（表面１４３）に結び付けられた。ビードはそれぞれ多くのボンドによって装置１０４の表面１４３に結び付けられた。区別となるフォースを生じさせる各々多くのボンド、どれで、各々、装置の表面への束縛。群集、および各サンプルのビードのアンサンブルの解離の特性は、そのサンプル中のアナライトの濃縮を決定する。
【０１４０】
およそ１８２００秒で、サンプルは、発火用意をするバッファ（１つのｘ  ＰＢＳ、０．０５％のトゥイーン２０（polyethylene glycol sorbitan monolaurate、ポリエチレングリコール・ソルビタン・モノロレート）と取り替えられた。図１１に示されるように、信号の各々の変化（場所３０を参照）は１８２００秒から１８４００秒まで観察され、バッファ流体にサンプル流体から変わることに関連したバルク流体特性の変化を表わす。およそ１８４００秒で、磁界は解放された。バッファ流体（０．０５％のトゥイーン２０を牽制する１ｘＰＢＳ）のフロー速度はそうだった、ほぼ、約１８２００秒と１８４００秒（センサ表面１４３のおよそ１．５ｍｍ／秒のフロー速度に対応する）の間のおよそ５０μＬ／分。
【０１４１】
フロー速度は、線形のインクリメント（フロー速度は３０秒ごとにそのとき４５０秒間約１７μＬ／ｍｉｎ増加された、フロー速度はおよそ５０μＬ／ｍｉｎに減らされた）中の次の４５０秒（約１８４００秒から約１８８５０まで）間およそ５０μＬ／ｍｉｎからおよそ３００μＬ／ｍｉｎに増加された。このように、抑制された外部影響（つまりこの実施例中のフロー速度）は、約１８４００と約１８８５０秒の間のフロー速度を増加させることにより、ビードに適用された。約１８４００と約１８８５０秒の間のカーブの部分は、その時限にわたるセンサ表面１４３へのビード（また他の非特異性の資料）境界の量の変化を示す信号を表わす。
【０１４２】
図１１は、時間に対して獲得したデータのプロットのグラフ式の実例である。プロットのＹ軸は、装置１０４の共振の近くの無限軌道のセンサ位相で装置１０４（ｐｐｍで）による信号の出力の相対的な大きさの変化である。プロットのＸ軸は秒のユニットで時間である。プロットは無限軌道の度数の変化である、参考文献として載せられた、また選択された時点で無限軌道の度数によって標準化された。
【０１４３】
無限軌道の度数のｐｐｍで示される各カーブのデータは、約１８３５０秒でそのカーブの値によってさらに標準化され、サンプル流体の導入の前に測定された基線度数に参考文献として載せられた。データ・カーブはそれぞれ、サンプルがいつ導入されるかと比較して、約１８３５０秒で１００％の値にそのために計られた。データ、提携された、個々、標準化されたカーブの、磁界が約１８４００秒で削除された後、その後、４５０秒（約１８４００秒から約１８８５０秒まで）間時間に関して統合された。
【０１４４】
積分は、それぞれの間隔時間期間を掛けたそれぞれの装置信号レベルおよび各区間レベルを蓄積し和が行なわれた期間で最終和を割ることにより行なわれた。これは時間を提供する、装置の表面１４３への資料元素（ビード）境界の量およびこれらの値を標準化した、各サンプルに関連したアナライトの濃縮の基準であるためにここに示される。このように、アナライトの濃縮は、約１８８５０秒まで約１８４００秒の間の期間中に各装置１０４の表面１４３に結び付けられた資料元素の量の変化に基づいて決定される。図１１に示されるように、自由なＰＳＡのおよそ１０  ｐｇ／ｍＬが、システムへサンプルを導入する約９分未満以内に検出された。
【０１４５】
いくつかの実施例では、カーブの中で観察された正常変動の外部に、例えばあるデータポイントは省略される。例えば、隣接したデータポイントに関連のある値の中の桁を越えるものによって変わる偽性のデータポイントは、後の解析から省略される場合がある。例えば、データポイントは、データからそばに取り除かれる場合があるオペレーター、あるいはコンピュータプログラムによって。
【０１４６】
例Ｖ：血清中のエストラジオール用競合アッセイ
自由なエストラジオールには特定の羊単クローン抗体は標準分析法を使用して、ダイナル社によるＭ２８０トシルに活性化されたビードにつながれた。
【０１４７】
センサ表面は、金のセンサ表面に二硫化物−ＰＥＧビオチンをつなぎ、その後、ニュートラアビジン（ピアスＰＮ３１０００）を連結することにより構築された。次に、上に記述されるように、ビオチン化された抗体は行なわれた。
【０１４８】
ＢＳＡはエストラジオールを連結した、その後、Ｅ２−６−ＣＭＯ−ＢＳＡ（シグマＰＮ  Ｅ５６３０）はＢＳＡが連結した１０  ｕｇ／ｍｌを流すことにより抗体表面につながれた、１時間抗体表面に関する１つのｘ  ＰＢＳのバッファの中で薄められたエストラジオール。エストラジオールがＢＳＡ（ＢＳＡの１ｍｏｌ当たりの３０ｍｏｌのエストラジオール）の上の多数のアミン・サイトにつながれるので、前述のアプローチは、溶液に提示された適度に濃厚な小さな分子表面に備える。
【０１４９】
７０％の木炭を含む試料溶液は、人間の血清（テキサス生物学的製剤）に３０％縞を付けた、１人のｘ  ＰＢＳ  ０．０５％のトゥイーン２０（ポリエチレングリコール・ソルビタン・モノロレート）が、０ｐｇ／ｍｌ、１０ｐｇ／ｍｌ、３０ｐｇ／ｍｌ、２００ｐｇ／ｍｌで急上昇された、自由なエストラジオール（シグマ）で作られた。ビード、濃縮￣２〈４〉／ｍｌの中で、２時間の間サンプルでかえされた。その後、ビードはａｐｐｒｏｘの中で０．５時間得られた典型的なプロトコルおよび結果を使用して、ＦＰＷの上に流れられた。
【０１５０】
いくつかのサンプルでは、ダナゾールもエストラジオールからの性ホルモン結合蛋白質のようなどんな妨げる分子も削除するためにｄｅｃｏｍｐｌｅｘｉｎｇするアンタゴニストとして加えられた。およそ１０−１００ナノグラム／ｍｌレベルが加えられた。
【０１５１】
サンプルは磁界を取って、およそ７０［ミュー］ｌ／ｍｉｎのＦＰＷの上に流れられた。また、ビードはセンサ表面に蓄積された。５０μＬ／ｍｉｎ３０秒ごとの区間で５００μＬ／ｍｉｎで終わって、５０μＬ／ｍｉｎで始まる洗濯プロトコルは、センサ表面から境界ビードを洗い流すために使用された。ＦＰＷ信号は標準化された合図で知らせる露光レベルによって標準化された。また、これらの信号は洗濯期間の間統合された。図１２に示されるように、１０未満ｐｇ／ｍＬは、アンタゴニスト添加剤３６がある状態で検出することができる。また、５０未満ｐｇ／ｍＬは、アンタゴニスト添加剤３４がない状態に検出することができる。
【０１５２】
図１２に示されるように、１，０００  ｐｇ／ｍＬから１０  ｐｇ／ｍＬまで及ぶエストラジオール濃縮は検出された。
例ＶＩ：ＦＫ−５０６のための競合アッセイ
１．０、０．５、２．０および２０ナノグラム／ｍｌのＦＫ−５０６濃縮を備えたアナライトサンプルを生産するために、ＦＫ−５０６は、２ｍｌのバッファ（０．０５％の１ＸＰＢＳのトゥイーン、２０、１％のＢＳＡを含んでいること）に加えられた。
【０１５３】
２．１×１０7／ｍｌのアンチＦＫ−５０６ＩｇＭの８μＬが、上に記述されるように準備されたビードを覆った、各サンプルに加えられ、室温で３０−６０分間培養された。ビードは、メーカーの指示（インビトロゲン社）による常磁性のビードにアンチＦＫ−５０６ＩｇＭ（フィッツジェラルド社）をつなぐことにより準備されている。アナライトサンプルは上に記述されるような溶液で集中された。
【０１５４】
３．ラベルがＦＫで付けられた、溶液の含むキャリヤ（ＨＲＰ）の５００μＬ―５０６（ダイアソリン社）はサンプルに加えられ、室温で６０分間培養された。
４．サンプルは、センサがキャプチャ・エージェント（アンチ−ＦＫ−５０６ＩｇＭ）と機能的にされた場合ＦＰＷ装置を使用して分析された。図１０を参照して、センサ１２は上に記述されるようにニュートラアビジン３０で機能的にされた。また、アンチＦＫ−５０６ＩｇＭは標準のビオチンラベル化法を使用して、ビオチン化された３２だった。図１０のパネルＢの中で示されるように、アナライト１０（このインスタンスＦＫ−５０６の中の）は、キャプチャ・エージェント１４（このインスタンス反−ＦＫ−５０６抗体中の）とラベルが付けられた、競争者分子２４および粒子状物質１６と混じり合った。
この例については、競争者分子２４は、ラベルがアナライトＦＫ−５０６で付けられたキャリヤＨＲＰを含んだ。パネルＣおよびＤで示されるように、粒子状物質が競争者分子と結合し、そのためにセンサ表面に結び付けるのをサンプル中のＦＫ−５０６の下位レベルが可能にすると予想される。粒子状物質のより多くの物がサンプルからのＦＫ−５０６に結び付けられるので、ＦＫ−５０６の高位レベルが感知表面へ結合する、より少数の粒子状物質に帰着すると予想される。図１３および１４（ＦＫ）に示されたように―０．５ナノグラム／ｍｌから２０ナノグラム／ｍｌに及ぶ５０６の濃縮が、装置へサンプルを導入することから１５ｍｉｎほどで検出された。
【０１５５】
例ＶＩＩ：処理された人間の全血マトリックス中のＦＫ−５０６のための競合アッセイ
１．血液の各々のひとつの１００μＬが元あった４つのサンプルが、０、３、１０、あるいは３０ナノグラム／ｍｌのＦＫ−５０６で急上昇した。薬は、メーカーの指示（ダイナソリン社）によってタンパク質消化プロトコルを行なうことにより、血液マトリックスから抽出された。
【０１５６】
２．６００マイクロリットルのタンパク質消化試薬は各サンプルに加えられた。
３．サンプルは攪拌により混合され、半透明な混合物を生産して、室温（約２３度Ｃ）で１５分間かえった。
【０１５７】
４．消化リアクションは、暗褐色混合物を生産して、３５分の７５の度Ｃでサンプルをかえすことにより止められた。
５．サンプルは攪拌により混合され、上澄みの５００−６００μＬを生産して、１０ｍｉｎで１８００ｇで遠心分離機にかけられた。
【０１５８】
６．５００マイクロリットル、表面に浮かぶ、新しいチューブへ転送された、４つは、ＦＫ−５０６の同じ濃縮をサンプリングする、ＦＫ−５０６の各濃縮の２ｍｌの上澄みを生産して、１本のチューブの中で組み合わせられた。
【０１５９】
７．上に記述されるように、サンプルが分析された。図１５および１６に示されるように、０．５ナノグラム／ｍｌから２０ナノグラム／ｍｌに及ぶＦＫ−５０６濃縮は、装置へサンプルを導入することから８ｍｉｎほどで検出された。
【０１６０】
例ＶＩＩ  バッファ中のｃトロポニン
３つのモノクローナルキャプチャ抗体（フィッツジェラルド１０−Ｔ７９  −    クローン番号）中のＭ８０１０５２１、ＭＯｌ１０６０９およびＭＯｌ１０５１０）は、比率２：２：１中のＤｙｎａｌ  Ｍ２８０トシルに活性化されたビーズにそれぞれつながれた。単クローンのＡｂ、１０−Ｔ７９Ｂ、クローン数Ｍ８０１０５０９はインビトロゲン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）ラベル化キットＦ−６３４７でビオチン化され、ＰｏｌｙｐｕｒｅビオチンＰＥＧ二硫化物リンカー（上に記述されたとともに）を使用して、金の上塗りを施したＦＰＷセンサにつながれた（ニュートラアビジン（Ｎｅｕｔｒａｖｉｄｉｎ）（ＰＮ  ３１０００を貫通する）で続いて修正）。
【０１６１】
トロポニンＩ（心臓病患者）抗原は、濃縮での１つのｘ  ＰＢＳ  １％のＢＳＡサンプルへ０ナノグラム／ｍｌ  ０．２ナノグラム／ｍｌ  １ナノグラム／ｍｌおよび５ナノグラム／ｍｌ薄められた。ビード（さらにここに粒子状物質と呼ばれた）は、５ｍｉｎの洗濯を後に続けて、センサ（３−５  ｍｉｎｓ）に引き付けられる前に７−１０  ｍｉｎｓのためにかえされた、２  ｘ  １０〈４〉／ｍｌおよびサンプルの濃縮で加えられた。結果は図１８に示される。０ナノグラム／ｍｌの被検体を含んでいるサンプルに関係する背景強度は、参考のための０．０１ナノグラム／ｍｌで計画される。
【０１６２】
例ＶＩＩＩ  チャコールストリップされた血清中のｃトロポニン
サンプルは、７０％の木炭に裸にされた血清、３０％の燐酸塩緩衝食塩水０．０５％のトゥイーン２０で準備された。心臓のトロポニンＩ（Ｂｉｏｓｐａｃｉｆｉｃ）は、終濃度に０ナノグラム／ｍｌ  ０．４ナノグラム／ｍｌ  １ナノグラム／ｍｌおよび５ナノグラム／ｍｌ加えられた。ビードはＤｙｎａｌ標準プロトコルによって反ｃＴｒｏｐｏｎｉｎ抗体（Ｂｉｏｓｐａｃｉｆｉｃ  ＰＮ  Ａ３４４４０）で機能的にされ、サンプルがそれぞれのセンサ上に流れられる前に、１５分間サンプルでかえされた。ニュートラアビジンおよび上に記述されるようなビオチン化された多クローン性抗体（Ｂｉｏｓｐａｃｉｆｉｃ  ＰＮ  Ｇ−１２９−Ｃ）で機能的にされた場合［０１７３］［００２２９］センサ。ビーズ／複合剤合剤はセンサ上に流れられた。また、センサは、５分間１５  ｕＬ／ｍｉｎでバッファを流すことにより洗われた。データは、２分のポスト磁界削除の時間点で観察された。０ナノグラム／ｍｌのサンプルは負の正確な信号に背景強度に使用された。図１９に示されるように、わずか０．４ｍｇ／ｍｌのｃＴｒｏｐｏｎｉｎが検知された。
例ＩＸ  溶解された全血中のｃトロポニン
サンプルは、５０％の全血（テキサス生物学的製剤）５０％の燐酸塩緩衝食塩水０．０５％のトゥイーンと構築された、２０．心臓のトロポニンＩ（Ｂｉｏｓｐａｃｉｆｉｃ）は、濃縮で０ナノグラム／ｍｌ  ０．４ナノグラム／ｍｌ  １ナノグラム／ｍｌおよび５ナノグラム／ｍｌ加えられた。Ｄｙｎａｌ標準プロトコルによって反ｃＴｒｏｐｏｎｉｎ抗体（Ｂｉｏｓｃｐａｃｉｆｉｃ  ＰＮ  Ａ３４４４０）で機能的にされたビードは、それぞれのセンサ上に流れられた結果の前に１５分間サンプルでかえされた。
【０１６３】
ニュートラアビジンおよび上に記述されるようなビオチン化された反ｃＴｒｏｐｏｎｉｎ多クローン性抗体（Ｂｉｏｓｐａｃｉｆｉｃ  ＰＮ  Ｇ−１２９−Ｃ）で機能的にされた場合センサ。ビーズ／複合剤にセンサを露出した後に、センサは１０  ｕｌ／ｍｉｎのインクリメントの中で５０  ｕＬ／ｍｉｎから１５０  ｕＬ／ｍｉｎまでなだらかなバッファによって３０秒ごとに洗われた。信号データは洗浄時期の本質的な部分上に統合された。０ナノグラム／ｍｌのサンプルは負の正確な信号に背景強度に使用された。図２０に示されるように、わずか０．４ｍｇ／ｍｌのｃトロポニンが検知された。
【０１６４】
本発明は、その精神又は本質的な特性から逸脱することなく、他の特定の形式でも実現することができる。従って、ここで説明した実施例は、例示的であり非制限的であると考えるべきであり、本発明の範囲は、以上の発明の詳細な説明ではなく、特許請求の範囲によって画定される。特許請求の範囲の意味範囲に含まれるすべての変更は、従って、本発明の範囲に含まれる。
【図面の簡単な説明】
【０１６５】
【図１Ａ】本発明によって構築されたアナライト検出システムの１つの実施例を示している。
【図１Ｂ】図１Ａに示されたアナライト検出システムの一部に関する別の実施例を示している。
【図２】図１に示されたＦＰＷセンサのより詳細な図解を示している。
【図３】生体アナライトの検出のためのアナライト・粒子複合体と組み合わせてＦＰＷセンサを用いるための一般的な検出プロトコルを示している。
【図４】例示的な検出プロトコルに関して時間の関数としての複数のＦＰＷセンサからの信号の変化を示している。
【図５】有機アナライト濃度の関数として、検出された最終信号変化を示す概略的なプロットである。
【図６】図４に示されたプロットと類似するがむしろＰＳＡアナライトに関する検出プロトコルのための時間的進展を示している。
【図７】キャプチャ・エージェントを音響デバイスの感知表面に付着させる２つのフォーマットの概略である。
【図８】本発明の１つの実施例の概略であり、競合分子（例えば、アナライト）が感知表面に結合された様子が示されている。
【図９】本発明の１つの実施例の概略であり、競合分子がタグにリンクされた関心対象のアナライトであり、音響デバイスの感知表面が前記タグを結合することができるキャプチャ・エージェントでコーティングされている様子が示されている。
【図１０】本発明の１つの実施例の概略であり、競合分子がキャリアとそれに結合された関心対象である２以上のアナライト分子とを含み、音響デバイスの感知表面が前記関心対象のアナライトに結合することができるキャプチャ・エージェントでコーティングされている様子が示されている。
【図１１】ＰＳＡ濃度の関数としての複数のＦＰＷセンサからの信号の変化を示している。
【図１２】血清中のエストラジオール濃度の関数としての複数のＦＰＷセンサからの信号の変化を示している。
【図１３】バッファにおけるＦＫ−５０６の用量応答曲線である。
【図１４】バッファにおけるＦＫ−５０６濃度の関数としての複数のＦＰＷセンサからの信号の変化を示している。
【図１５】血清中のＦＫ−５０６の用量応答曲線である。
【図１６】血清中のＦＫ−５０６濃度の関数としての複数のＦＰＷセンサからの信号の変化を示している。
【図１７】粒子濃度の関数としての複数のＦＰＷセンサからの信号の変化を示している。
【図１８】バッファにおけるｃ−トロポニン−Ｉの用量応答曲線を示している。
【図１９】血清中のｃ−トロポニン−Ｉの用量応答曲線を示している。
【図２０】溶解全血（lysed whole blood）中のｃ−トロポニン−Ｉの用量応答曲線を示している。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図２Ａ】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図８Ｄ】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【図９Ｃ】
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【図９Ｄ】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１０Ｃ】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【国際調査報告】
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