(57)【要約】  透析装置は、中実プラグ（４）を用いてその底部を垂直に保持した円筒状膜（５）を収容する開放区画（３）を有する。上記膜は上部開口部（７）を介して延在し、中空プラグ（１）を用いて上部空洞（７）を塞ぐ。開放区画（３）と隣接する丸みを帯びたディープウェル、すなわち流路（２）とを接続する溝型開口部（８）が形成されている。前記開口部が、緩衝液が丸みを帯びたディープウェル（２）と開放区画（３）の円筒状膜の外側空間との間を自由に流れるために十分な幅を有する。化合物および血漿タンパクを含む試料が開口部（１）から円筒状膜の内部に導入される。緩衝液は区画（３）と接続された開口部（２）を通って導入される。【選択図】図１
2008520365.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
チャンバーを画成する管状透析膜であって、該管状透析膜が第１の末端および第２の末端を有し、該第１の末端が前記チャンバーの開口部を画成し、該開口部が第１の方向に面し、前記透析膜が内表面および外表面を有し、該外表面が前記チャンバーから外側を向くとともに前記内表面が前記チャンバー側に向いた管状透析膜と、
前記透析膜の前記外表面の少なくとも中間部分を露出させる一方、前記第１の末端および前記第２の末端を保持するハウジングであって、該ハウジングが第１の開口部および第２の開口部を有する流路を画成し、前記流路の前記第１の開口部も前記第１の方向に向き、前記流路の前記第２の開口部が前記透析膜の前記外表面の前記露出した中間部分に向くとともに前記透析膜を保持する区画と連通しているハウジングとを含むことを特徴とする透析装置。
【請求項２】
前記透析膜の１つの末端が、１つのポートまで運ばれた流体が前記膜によって形成されたチャンバーに流入するように前記ポートで固定されている、請求項１記載の装置。
【請求項３】
前記ポートが開放されている、請求項２記載の装置。
【請求項４】
前記ポートがさらに取り外し可能なプラグを含む請求項２記載の装置。
【請求項５】
両方の末端が２つのプラグによって固定されている、請求項１記載の装置。
【請求項６】
前記膜によって形成される前記チャンバーが５，０００μｌ未満の容積を有する、請求項１記載の装置。
【請求項７】
透析膜を保持するハウジングであって、前記膜がチャンバーおよび該チャンバーの開口部を画成し、
前記ハウジングが第１の開口部および第２の開口部を有する流路を画成し、該流路の前記第２の開口部が前記透析膜の外表面に向いており、
前記流路により溶液が前記第１の開口部と前記透析膜の前記外表面との間を前記第２の開口部を介して流れることができ、前記第２の開口部が前記透析膜を保持するための区画と連通することを特徴とするハウジング。
【請求項８】
前記透析膜を保持する前記区画が開放されている、請求項７記載のハウジング。
【請求項９】
前記透析膜を保持する前記区画が閉鎖されている請求項７記載のハウジング。
【請求項１０】
前記ハウジングがフッ化炭素、ポリテトラフルオロエチレン、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリオレフィン、ポリエーテルエーテルケトン、ポリメタクリル酸メチル、ポリスチレン、ポリスチレン／アクリロニトリルの共重合体、ポリフッ化ビニリデン、ガラス、またはそれらの混合体からなる、請求項１記載のハウジング。
【請求項１１】
各端が固定された、透析装置用管状透析膜。
【請求項１２】
前記膜がセルロース、酢酸セルロース、ポリテトラフルオロエチレン、ポリスルホン、ニトロセルロース、ポリカーボネート、ポリフッ化ビニリデン、ポリオレフィン、ポリアミド、またはそれらの混合体からなる、請求項１１記載の透析膜。
【請求項１３】
前記膜が少なくとも１００ダルトンの分子量カットオフ値を有する請求項２記載の透析膜。
【請求項１４】
複数のユニットを含む透析システムであって、各ユニットが請求項１記載の透析装置を含む透析システム。
【請求項１５】
各ユニットがさらに、前記透析装置を保持するようになっている固定具を含む固定部を有する、請求項１４記載の透析システム。
【請求項１６】
前記透析システムが、少なくとも４台の長方形ユニットを含む、請求項１５記載の透析システム。
【請求項１７】
透析膜用のハウジングであって、該ハウジングが流体を保有する第１の区画と、
該第１の区画へ流体を送り込むための第１ポートと、
透析膜によって画成される少なくとも１つの外周を有するチャンバーへ流体を送り込む第２ポートとを含むことを特徴とするハウジング。
【請求項１８】
前記透析膜が前記第１の区画内にあり、また前記透析膜が管状であって各末端で固定され、該末端の１つが前記第２ポートで固定される、請求項１７記載のハウジング。
【請求項１９】
さらに別の末端が固定される第３ポートを含む、請求項１８記載のハウジング。
【請求項２０】
さらに前記第１の区画と流体連通する第２の区画を含み、前記透析膜が前記第２の区画内に存在する、請求項１７記載のハウジング。
【請求項２１】
前記ハウジングが前記ポートの少なくとも１つを包含する上面を有する、請求項１７記載のハウジング。
【請求項２２】
前記第１ポートおよび第２ポートが同一平面内にある、請求項１７記載のハウジング。
【請求項２３】
前記第１ポートおよび第２ポートが前記上面内にある、請求項２１記載のハウジング。
【請求項２４】
各ポートの直径が５０ｍｍ未満である、請求項１７記載のハウジング。
【請求項２５】
透析膜用のハウジングであって、該ハウジングが流体を保有する第１の区画と、
該第１の区画へ流体を送り込む第１ポートと、
非平面状透析膜を含むチャンバーへ流体を送り込む第２ポートを含むことを特徴とするハウジング。
【請求項２６】
請求項１記載の平衡透析装置の１以上のユニットを含むキット。
【請求項２７】
（ａ）請求項１７記載のハウジングを複数用意するステップと、
（ｂ）並行して前記第１のポートに第１緩衝液を分配するステップと、
（ｃ）第２ポートに試料を分配するステップとを含むことを特徴とする方法。
【請求項２８】
ステップ（ｂ）がステップ（ｃ）の前に実行される、請求項２７記載の方法。
【請求項２９】
ステップ（ｂ）がステップ（ｃ）の後に実行される、請求項２７記載の方法。
【請求項３０】
ステップ（ｂ）およびステップ（ｃ）が同時に実行される、請求項２７記載の方法。
【請求項３１】
前記第１ポートと前記第２ポートとが異なる列にある、請求項２７記載の方法。
【請求項３２】
前記第１ポートと前記第２ポートとが交互の列にある、請求項２７記載の方法。
【請求項３３】
液体処理装置を用いて流体を１つまたは複数のポートに送出する、請求項２７記載の方法。
【請求項３４】
（ａ）請求項２５記載の複数のハウジングを用意するステップと、
（ｂ）並行して前記第１ポートに第１緩衝液を分配するステップと、
（ｃ）第２ポートに試料を分配するステップとを含むことを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、参照により全体が本明細書に援用される、２００４年１１月１８日出願の米国仮出願第６０／６２９，０００号に基づく優先権を主張する。
【背景技術】
【０００２】
経口または静脈から投与された薬物は、期待される薬理作用を生ずるために特定の受容体と結合する。しかしながら、薬物は血液を循環中に血漿タンパクとも結合する可能性がある。この結合が薬物の分布および半減期に影響を及ぼし、好ましくない副作用の原因となる。薬理作用を考える上で、タンパク質と結合していない薬物の量が極めて重要である。投与した薬物全体の中の非結合部分の濃度を測定するため、限外濾過および平衡透析を利用できる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
従来の平衡透析は、定常的な平衡状態に達するまでに６〜１６時間ものインキュベーション時間を要する。このように長いインキュベーション時間は、浸透圧差による透析液から血漿含有液への体積変位に結びつく可能性がある。この変化によって血漿タンパクが希釈される可能性があり、生体内における化合物の血漿タンパクとの部分的結合を減じることは明らかになっている。また、長いインキュベーション時間は化合物の安定性に影響を及ぼす可能性もある。したがって、効率的で正確な平衡透析方法および平衡透析装置が必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明は透析装置を開示する。ここに開示する透析装置は、表面積の体積に対する比率が改善されているため、結果として平衡に至るまでの進行が加速される。本発明の一態様は、（ｉ）チャンバーを画成する管状透析膜であって、該管状透析膜が第１の末端および第２の末端を有し、該第１の末端が前記チャンバーの開口部を画成し、該開口部が第１の方向に面し、前記透析膜が内表面および外表面を有し、該外表面が前記チャンバーから外側を向くとともに前記内表面が前記チャンバー側に向いた管状透析膜と、（ｉｉ）前記透析膜の前記外表面の少なくとも中間部分を露出させる一方、前記第１の末端および前記第２の末端を保持するハウジングであって、該ハウジングが第１の開口部および第２の開口部を有する流路を画定し、前記流路の第１の開口部も前記第１の方向に向き、前記流路の第２の開口部が前記透析膜外表面の露出した中間部分に向くとともに前記透析膜を保持する区画に連通しているハウジングとを含む透析装置を提供する。前記透析膜の１つの末端は、１つのポートまで運ばれた流体が前記膜によって形成されたチャンバーに流入するように前記ポート部で固定するのが好ましい。一実施形態において、前記ポートは開放されている。前記ポートはさらに取り外し可能なプラグを含んでもよい。両方の末端を２つのプラグで固定してもよい。前記膜によって形成されるチャンバーは５０００，１０００，５００，３００，２００，５０，または１０μｌ未満の体積を有してよい。
【０００５】
本発明の別の態様は、透析膜を保持するハウジングを提供する。前記膜はチャンバーおよびチャンバーの開口部を画定し、前記ハウジングは第１の開口部および第２の開口部を有する流路、すなわちウェルを画定する。前記流路の第２の開口部は前記透析膜の外表面を向いている。前記流路は溶液を第１の開口部と透析膜の外表面との間を第２の開口部を介して流れることができる。前記第２の開口部は透析膜を保持する区画に連通される。透析膜を保持する前記区画は開放されていても閉鎖されていてもよい。前記ハウジングは、その材料がフッ化炭素、ポリテトラフルオロエチレン、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリオレフィン、ポリエーテルエーテルケトン、ポリメタクリル酸メチル、ポリスチレン、ポリスチレン／アクリロニトリルの共重合体、ポリフッ化ビニリデン、ガラス、またはそれらの混合体であってよい。一態様において、本発明は両端を固定して保持された透析装置用管状透析膜を提供する。前記膜は、その材料がセルロース、酢酸セルロース、ポリテトラフルオロエチレン、ポリスルホン、ニトロセルロース、ポリカーボネート、ポリフッ化ビニリデン、ポリオレフィン、ポリアミド、またはそれらの混合体であってよい。
前記透析膜は、少なくとも１００，５００，１０００，２０００，５０００，１００００，２５０００，５００００，１０００００，または３０００００ダルトンの分子量カットオフ値を有してよい。別の態様において、本発明はさらに複数のユニット、たとえばユニットの配列を含む透析システムを提供する。各ユニットは上述の透析装置を含む。各ユニットはさらに透析装置を保持するようになっている固定具を含む固定部を有してもよい。一例をあげれば、前記透析システムは４つの長方形ユニットを包含する。前記システムは、８ウェル、１２ウェル、９６ウェル、３８４ウェル、１５３６ウェル、またはその他のマルチウェル構成に適合するように設計されたホルダーを含むことができる。透析システムは平衡透析および非平衡透析に使用できる。
【０００６】
さらに別の態様において、本発明は透析膜用ハウジングを提供する。前記ハウジングは、流体を保有する第１の区画、第１の区画へ流体を送り込む第１ポート、透析膜によって画定される少なくとも１つの外周を有するチャンバーへ流体を送り込む第２ポートを含む。前記外周は流体がポートに流入する経路に垂直な平面内に位置してもよい。前記透析膜は第１の区画内にあってもよい。前記透析膜は管状であり、各端部で固定され、各端部のうち１つが第２ポートにおいて固定されていてもよい。一例において、ハウジングは別の末端が固定される第３のポートを含む。上記ハウジングはさらに第１の区画と流体連通した第２の区画を含んでもよく、透析膜は第２の区画中に存在する。ハウジングは少なくとも１つのポートを含む上面を有していてもよい。上述の第１ポートおよび第２ポートは同一平面内、たとえば上面内にあってもよい。各ポートの直径は５０，４０，３０，２０，１０，５，３，２，または１ｍｍ未満でよい。本発明は透析膜用のその他のハウジングも提供する。前記ハウジングは、流体を保有する第１の区画、第１の区画へ流体を送り込む第１ポート、非平面状透析膜を含むチャンバーへ流体を送り込む第２ポートを含む。
【０００７】
本発明の範囲に上述の透析装置を１以上有するキットが含まれる。上述の透析装置は、結合分析を行う方法に使用できる。前記方法は、（ａ）複数の上述のハウジングを用意するステップと、（ｂ）各第１ポートに第１の緩衝液を並行して分配するステップと、（ｃ）第２ポートに試料を分配するステップとが含まれる。ステップ（ｂ）はステップ（ｃ）の前あるいは後、またはステップ（ｃ）と同時に行われる。前記第１ポートおよび第２ポートは別の列、たとえば交互の列にあってもよい。１つまたは複数のポートに液体を送出するために液体処理装置（たとえばロボット／マルチピペット）が利用できる。
【０００８】
本発明は結合分析を行う方法を提供する。上記方法は、上述の透析システムの少なくとも１つのウェルの１つのチャンバーに膜を通過できない第１の試料を加えるステップと、透析システムの下方のチャンバーに膜を通過できる第２の試料を加えるステップと、第１の試料および第２の試料を平衡状態にさせて、結果として生じた試料を定量分析または定性分析するステップを含む。
【０００９】
以下、本発明の１以上の実施形態の詳細について、添付図面を参照して説明する。本発明のその他の特徴、目的、利点は以下の説明および図面、ならびに請求項によって明らかになるであろう。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
透析システムは、複数の試料を同時に調合するマルチウェル構成に適合するように設計できる。たとえば、それらのシステムは８ウェル、１２ウェル、９６ウェル、３８４ウェル、１５３６ウェル、およびその他のマルチウェル構成で適当な平衡透析を行うものでもよい。
【００１１】
図１を参照して、円筒状膜５を収容する開放区画３を有する代表的な装置について説明する。円筒状膜５は、中実プラグ４を用いて底部で垂直に保持されている。上記膜管を中実プラグ４の外面上に滑り込ませ、次にそのプラグを底部ベース６内に挿入する。上記膜が上部開口部７を通って延伸するようにする。中空プラグ１上に膜を滑り込ませ、次に上部空洞部７に中空プラグ１を差し込む。開放区画と隣接する丸みを帯びたディープウェル（ｄｅｅｐ  ｗｅｌｌ）、即ち流路２とを接続する溝形開口部８が設けてある。その開口部は、緩衝液が丸みを帯びたディープウェル２および開放区画３の円筒状膜外側の空間を自由に流れるために十分な幅を有する。化合物および血漿タンパクを含む試料は開口部１から円筒状膜の内部に導入される。緩衝液は、区画３と接続した開口部２を通して導入される。動作時、透析装置は２つの液体で満たされたチャンバー、すなわち膜５の内部により構成されるチャンバーと、丸みを帯びたディープウェル２及び開放区画３からなる連続した空間により構成されるチャンバーとを含む。
【００１２】
図２に、円筒状膜５を収容する閉鎖区画３を有する代表的な装置を示す。円筒状膜５は、中実プラグ４を用いて底部で垂直に保持されている。上記膜管を中実プラグ４の外面上に滑り込ませ、次にそのプラグを底部支持体６内に挿入する。上記膜が上部開口部７を通って延伸する。中空プラグ１上に膜を滑り込ませ、次に、次に上部空洞７に中空プラグ１を差し込む。区画３と隣接する丸みを帯びたディープウェル２とを接続する溝形開口部８が設けてある。その開口部は、緩衝液が丸みを帯びたディープウェル２および閉鎖区画３の円筒状膜外側の空間を自由に流れるために十分な幅を有している。化合物および血漿タンパクを含む試料は開口部１から円筒状膜の内部に導入される。緩衝液は、区画３と接続されている開口部２を通して導入される。動作時、透析装置は２つの液体で満たされたチャンバー、すなわち膜５の内部により構成されるチャンバーと、丸みを帯びたディープウェル２及び開放区画３からなる連続した空間により構成されるチャンバーとを含む。
【００１３】
図４に、透析装置用のホルダーを示す。ホルダーの寸法および構成は変更可能である。
ホルダーを自動液体ハンドラーとともに使用する場合は、従来型のディープウェル型マイクロタイタプレートの寸法が好ましい。長方形ディープウェルは、透析装置の寸法に合った平底を有し、長方形ディープウェル一体が透析装置を一ユニット保持するように設計される。透析装置の寸法は必要に応じて変更可能である。透析装置の各ユニットは従来の９６ウェルプレートの正方形ディープウェル２体分を占めることがあるため、上記プレートは４８体の長方形ディープウェルを含むように設計される。各長方形ディープウェルは透析装置の一ユニットを保持するために用いられる。他の一般的な寸法（たとえば、８ウェル、１２ウェル、３８４ウェル、または１５３６ウェルを含む）のプレートも使用可能であり、透析装置の寸法はそれらのホルダーを保持できるように変更できる。しかしながら、ホルダーは、自動液体処理装置の構成を収容可能な寸法に設計してもよい。図３に、代表的な９６ウェル構成における８台１組の透析装置インサートを示す。かかるインサート６組が図５に示すベースホルダー内に収容できる。マルチウェル平衡透析システムは、たとえば図４または図５のホルダーに収めた図１、図２、または図３の透析装置の複数ユニットを含むことができる。マルチウェル平衡透析システムは、スループットの高いスクリーニング、結合分析、生体分子相互作用（たとえばタンパク質間相互作用）を含むが、これに限定されない様々な用途に、複数の試料を同時に調合できる。透析システムは、８ウェル、１２ウェル、９６ウェル、３８４ウェル、１５３６ウェル、およびその他のマルチウェル構成と適合可能である。たとえば、８ウェル構成に適合する透析システムは４台の長方形ウェルを含み、１２ウェル構成に適合する透析システムは６台の長方形ウェルを含み、９６ウェル構成に適合する透析システムは４８台の長方形ウェルを含み、３８４ウェル構成に適合する透析システムは１９２台の長方形ウェルを含み、１５３６ウェル構成に適合する透析システムは７６８台の長方形ウェルを含むようにする。上記透析装置の長軸は上記ホルダーの長軸、短軸の何れの方向に沿って配列してもよい。上記透析装置のハウジングは当業界で知られている任意の材料で製造できる。代表的な材料として、フッ化炭素、ポリテトラフルオロエチレン（たとえばデュポン社製のテフロン（登録商標））、ポリオレフィン（たとえばポリプロピレン、ポリエチレン、およびそれらの混合体）、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリエーテルエーテルケトン、ポリメタクリル酸メチル、ポリスチレン、ポリスチレン／アクチロニトリルの共重合体、ポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）、ガラス等が含まれる。
【００１４】
半透膜５は当該技術分野で知られている任意の分子量のカットオフ膜でよく、当該技術分野で知られている任意の材料で製造してよい。代表的な分子量カットオフ値は１００〜１０，０００，０００ダルトンである。膜は、たとえば、１００ダルトン、５００ダルトン、１，０００ダルトン、２，０００ダルトン、５，０００ダルトン、１０，０００ダルトン、２５，０００ダルトン、５０，０００ダルトン、１００，０００ダルトン、および３００，０００ダルトンの分子量カットオフ値を有していてもよい。あるいは、上記膜は約０．０１ミクロンから約１ミクロンの孔径を有していてもよい。膜は、たとえば、０．０１ミクロン、０．０５ミクロン、または０．６０ミクロンの孔径を有していてもよい。
【００１５】
代表的な膜材料には、セルロース（たとえば再生セルロース）、酢酸セルロース、ポリテトラフルオロエチレン（たとえばデュポン社製のテフロン（登録商標））、ポリスルホン、ニトロセルロース、ポリカーボネート、ポリオレフィン（たとえばポリプロピレン、ポリエチレン、およびそれらの混合体）、ポリアミド、ポリフッ化ビニリデン等が含まれる。平衡透析膜を表現するためにここで用いる「円筒状」という用語は、たとえば、立方体、円筒、四角柱、五角柱、三角柱、六角柱、円錐等の任意の管状形状を意味するものとする。
【００１６】
円筒状膜を保持するプラグは当該技術分野で知られている任意の材料で製造してよい。
代表的な材料にはコルク、プラスチック、ゴム、シリコーン等が含まれる。
【００１７】
上部プラグ１および対応する空洞７の形状と下部プラグ４および対応する空洞６の形状は、それぞれ独立してよく、たとえば立方体、円筒、四角柱、五角柱、三角柱、六角柱、円錐等でよい。
【００１８】
膜で囲まれた空間５で画成されるチャンバーの容積と丸みを帯びたディープウェル２と連なる区画３からなるチャンバーの容積は、それぞれ独立してよく、たとえば約１０μｌから約５，０００μｌでよい。上記２つのチャンバーの容積は、約１０μｌから約２００μｌ、または約５０μｌから約２００μｌ、または約２５μｌから約３００μｌ、または約５００μｌから約１，５００μｌ、または約３，０００μｌから約５，０００μｌの範囲内でよい。好ましい実施形態において、膜で囲まれた空間５で画成されるチャンバーの容積と丸みを帯びたディープウェル２と連なる区画３からなるチャンバーの容積は、それぞれ独立してよく、約５００μｌから約１，５００μｌでよい。
【００１９】
マルチウェル透析システムの各ユニットは互いに異なる分子量カットオフ値を有してもよく、および／または異なる材料から製造されてもよい。
【００２０】
ここに説明した透析システムを１以上含むキットを組み立てることができる。上記キットは、１以上の透析装置およびホルダーにそれらの使用法を説明するマニュアルを添付したパッケージでもよい。
【００２１】
ここに述べた透析システムを用いて結合分析（たとえば受容体・リガンド分析）を行う１つの方法は、以下の工程を含む。１つの試料チャンバーをあるタンパク質試料（たとえば受容体）で充たしてもよい。このタンパク質試料は、大きすぎて膜の孔を通過できない分子を含む。他方のチャンバーは膜の孔を通過できる小さな分子（たとえばリガンド）で充たす。このシステムが平衡に達すると、小さな分子は両方のチャンバー、すなわち膜で囲まれた空間の内側と外側の両方に存在することになる。仮に小さな分子がタンパク質と結合すると、平衡状態に影響が及び、小さな分子の試料のチャンバーよりもタンパク質の試料のチャンバーにより多くの小さな分子が存在することになる。平衡透析時および平衡透析完了後に、定量分析および／または定性分析を行って、試料の調査をさらに進めることができる。この方法はしばしば新薬の開発方法に用いられる。適切なサイズの膜を選択することによって、平衡透析はＤＮＡ・タンパク質相互作用、タンパク質間相互作用、および多くの生体分子およびその他の分子間の相互作用の研究にも利用できる。（膜によって画成される区画または、それを取り囲む区画の何れかが試料を包含できる。）ここで説明した透析システムは従来の液体処理システムとともに使用できる。通常これらのシステムは、標準的なプレート構成、たとえば８ウェル×１２ウェルの寸法の９６ウェルプレートを用いて動作する。透析システムはこの構成の利点を生かして配置できる。個々のユニットをすべて同じ方向に向けて、ポート１とポート２の列が交互になるようにホルダー内に収納できる。
【００２２】
たとえば、９６ウェル型構成において、透析ユニットは８列×６段または１２列×４段に配置できる。この型式の構成を用いることによって、透析システムのポート開口部の配列を標準的な９６ウェルプレートのウェルの位置と合わせられる。ポートは一列に並べることができる。たとえば、交互に並ぶ列がそれぞれ緩衝液用ポートと試料用ポートを含むように並べることができる。別の例においてポートは、段毎に交互に入れ替わるように並べられる。
【００２３】
同様の構成で、透析システムのポート開口部の配列を、その他の任意の標準プレート構成（たとえば８ウェル、１２ウェル、３８４ウェル、１５３６ウェル）のウェルの位置に合わせることができる。これによって、透析システムの充填、試料採取、およびその他の操作を行うように、従来の液体処理システムをプログラムすることが容易になる。
【００２４】
以下に特定の実施例について説明するが、これは単なる例示として解釈すべきであり、いかなる形であり、この開示以外の内容を制限するものと解釈すべきではない。これ以上の詳細な説明がなくとも、当業者であれば、本明細書の説明に基づいて、本発明を最大限に利用できると考えられる。本明細書において引用される全ての刊行物は、それらの全開示内容が本明細書に参照により援用される。
【００２５】
（実施例）
１台の透析装置をワルファリンの血漿タンパク結合を測定する平衡透析研究に使用した。
０．１５４ｇのワルファリンを５ｍｌのリン酸緩衝塩（ＰＢＳ）に溶解させ、ワルファリンの０．１モル濃度溶液を調合した。６モル濃度のＮａＯＨ４００μｌによってｐＨを調節し、最終体積を５．７６１ｍｌ、最終濃度を８６．８ミリモルとした。次に、ワルファリン溶液を希釈し、血漿溶液に加える前に１ミリモル濃度とした。１ミリモル濃度のワルファリン２．２μｌを２．２ｍｌの血漿に加え、血漿中のワルファリンの最終濃度を１マイクロモルとした。ワルファリンを含有したイヌの血漿１ｍｌを各透析装置の円筒状膜の内側に加え、ＰＢＳ１ｍｌを膜の外側に加えた。液を満たした透析装置は３７℃のインキュベータにセットしてゆっくり振盪させた。１００μｌの試料を、血漿チャンバーおよび緩衝液チャンバーそれぞれから０．５，１，２，３，および４時間間隔で抜き取った。
血漿試料には１００μｌのブランク緩衝液を加えた。緩衝液試料には１００μｌのブランク血漿を加えた。混合後、５０μｌの血漿試料を抜き取った。血漿試料（５０μｌ）に血漿：緩衝液の比が１：１の溶液４５０μｌを加え、１０倍に希釈した。緩衝液試料は希釈しなかった。血漿試料および緩衝液試料各２００μｌにアセトニトリル２００μｌを加えた。混合液はそれぞれボルテックス混合した後、１３，０００ｒｐｍ、３分間の遠心分離を行った。結果として得られた抽出物をＡＰＩ−４０００（登録商標）ＬＣ／ＭＳ／ＭＳシステム（アプライドバイオサイエンス／ＭＤＳ  ＳＣＩＥＸ）を用いて分析した。その結果から、１時間以内の平衡曲線の一貫性が示された。実験は２回行った。図６および図７の図表に示すようにタンパク結合比は９９％に近かった。試験結果により、３０分以内に透析が平衡状態に達したことがわかる。
【００２６】
（他の実施形態）
この明細書において開示したすべての特徴は、任意の組み合わせで組み合わせることができる。この明細書で開示したそれぞれの特徴は、同一、同等、または類似の目的を果たすその他の特徴によって置き換えることができる。そのため、特段の記載がない限り、開示したそれぞれの特徴は等価または類似の一連の特徴の一般的体系の例に過ぎない。
【００２７】
上記の説明から、当業者は、本発明の基本的な特長が、本発明の技術的思想とその範囲を逸脱することなく、本発明に種々の変化や変更を加えて種々の用途や条件に適用させ得ることを、容易に確認することができる。そのため、その他の実施形態もまた本願の特許請求の範囲に含まれるものである。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】開放区画を有する代表的な透析装置の図である。
【図２】閉鎖区画を有する代表的な透析装置の図である。
【図３】９６ウェル構成における代表的な８台１組の透析装置インサートの図である。
【図４】９６ウェル構成における代表的な複数の平衡透析装置用ホルダーの図である。
【図５】９６ウェル構成における８台１組の透析装置６組用ベースプレートホルダーの代表的なブロックの図である。
【図６】平衡透析処理の実験から得られたデータである。上部は経過時間毎のチャンバー内のワルファリンの相対濃度を示す表である。下部は経過時間毎のチャンバー内のワルファリンの相対濃度を示すグラフである。
【図７】代表的な平衡透析処理の実験から得られたデータである。上部は経過時間毎のチャンバー内のワルファリンの相対濃度を示す表である。下部は経過時間毎のチャンバー内のワルファリンの相対濃度を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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