(57)【要約】  本発明は、式Ｉの強力なカリウムチャンネルブロッカー化合物、または患者の眼において高眼圧を引き起こす緑内障および他の状態の治療のためのこの組成物に関する。また、本発明は、哺乳類種、特にヒトの眼に対して神経保護効果を与えるための、このような化合物の使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造式Ｉの化合物
【化１】
2008515973.tif 000026
または薬剤として許容される塩、ｉｎ  ｖｉｖｏで加水分解可能なエステル、光学異性体、ジアステレオマー、幾何異性体もしくはこれらの混合物
［式中、
Ｙ１およびＹ２は、独立に、Ｏ；Ｈ２；ＨおよびＲ３；ＨおよびＲ２；またはＲ２およびＲ３であり、
Ｘは、−（ＣＨＲ７）ｐ−または−（ＣＨＲ７）ｐＣＯ−を表し、
Ｗ、ＹおよびＺは、独立に、ＣＨおよびＮであり、
Ｒ１は、水素、Ｃ１〜６アルコキシ、ＯＨ、Ｃ３〜８シクロアルコキシ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ１〜６アルケニル、Ｓ（Ｏ）ｑＲ、ＣＯＯＲ、ＣＯＲ、ＳＯ３Ｈ、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｒ、−ＯＰＯ（ＯＨ）２、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ５〜１０ヘテロアリール、Ｃ５〜１０ヘテロシクリル、ＣＦ３、ＯＣＦ３、−Ｎ（Ｒ）２、ニトロ、シアノ、Ｃ１〜６アルキルアミノまたはハロゲンを表し、前記アリール、アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、アリールまたはヘテロアリールは、Ｒａの１から３個の基で場合により置換されており、
Ｒ２およびＲ３は、独立に、水素、Ｃ１〜６アルコキシ、ＯＨ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルキル−Ｓ、Ｃ１〜６アルキル−ＣＯ−、Ｃ１〜６アルケニル、Ｃ３〜８シクロアルコキシ、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル−Ｓ、Ｃ３〜８シクロアルキル−ＣＯ−、ＣＯＯＲ、ＳＯ３Ｈ、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｒ、−ＯＰＯ（ＯＨ）２、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ５〜１０ヘテロアリール、Ｃ５〜１０ヘテロシクリル、ＣＦ３、−Ｎ（Ｒ）２、ニトロ、シアノ、Ｃ１〜６アルキルアミノまたはハロゲンを表し、前記アリール、アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、アリールまたはヘテロアリールは、Ｒａの１から３個の基で場合により置換されており、または
Ｒ２およびＲ３は、環における介在原子と一緒になって、４員から８員環を形成することができ、この環は、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１から２個の原子が割り込むことができ、または１から４個の二重結合を有し、
Ｑは、水素、Ｃ１〜１０アルキル、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＯＲ９、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮＲ８Ｒ９、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ３〜８シクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ５〜１４縮合シクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ３〜１０ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ５〜１０ヘテロアリール、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣＯＯＲ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ６〜１０アリール、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮＨＲ９、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮＨＣＯＯＲ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮ（Ｒ９）ＣＯ２Ｒ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮ（Ｒ９）ＣＯＲ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮＨＣＯＲ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣＯＮＨ（Ｒ９）、アリール、ＣＦ３、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＳＯ２Ｒ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、−（ＣＨ２）ｎＣＯＮ（Ｒ）２、−（ＣＨ２）ｎＣＯＮＨＣ（Ｒ）３、−（ＣＨ２）ｎＣＯＮＨＣ（Ｒ）２ＣＯ２Ｒ、−（ＣＨ２）ｎＣＯＲ９、ニトロ、シアノまたはハロゲンを表し、前記アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、アリールまたはヘテロアリールは、Ｒａの１から３個の基で場合により置換されており、
Ｒは、水素、またはＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ６〜１０アリールまたはＣ５〜１０ヘテロアリールを表し、
Ｒ７は、水素、Ｃ１〜６アルキル、−（ＣＨ２）ｎＣＯＯＲ、−（ＣＨ２）ｎＣＯＲまたは−（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２を表し、
Ｒ８は、水素、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキルＳＲ、−（ＣＨ２）ｎＯ（ＣＨ２）ｍＯＲ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ１〜６アルコキシ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ３〜８シクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ３〜１０ヘテロシクリル、−Ｎ（Ｒ）２、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣＯＯＲ、または−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ６〜１０アリール、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ５〜１０ヘテロアリールを表し、前記アルキル、アルケニル、アルコキシ、ヘテロシクリルまたはアリールは、Ｒａから選択される１から３個の基で場合により置換されており、
Ｒ９は、水素、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ１〜６アルキルＳＲ、−（ＣＨ２）ｎＯ（ＣＨ２）ｍＯＲ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ１〜６アルコキシ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ３〜８シクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ３〜１０ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ５〜１０ヘテロアリ−ル、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮ（Ｒ）２、ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮＨＲ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣＯＯＲ、または（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ６〜１０アリール、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮＲＣＯＯＲ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣＯＲ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＳＯ２Ｒ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＳＯ２Ｎ（Ｒ）２を表し、前記アルキル、アルコキシ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールまたはヘテロアリールは、Ｒａから選択される１から３個の基で場合により置換されており、または
Ｒ８およびＲ９は、ＱのＮＲ８Ｒ９の介在「Ｎ」と一緒になって、Ｏ、Ｓ、Ｃ（Ｏ）またはＮＲの１から２個の原子により場合により割り込まれ、および１から４個の二重結合を場合により有し、およびＲａから選択される１から３個の基で場合により置換されている、３員から１０員炭素環式または複素環式炭素環を形成し、
Ｒａは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＦ３、ＯＨ、Ｎ（Ｒ）２、ＮＯ２、ＣＮ、−ＣＯＲ、−ＣＯＮＨＲ、−ＣＯＮＲ２、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＲ、−ＮＨ（ＣＨ２）ｎＯＲ、−ＣＯＯＲ、−ＯＣＦ３、−ＮＨＣＯＲ、−ＳＯ２Ｒ、−ＳＯ２ＮＲ、−ＳＲ、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｏ−、−（ＣＨ２）ｎＯ（ＣＨ２）ｍＯＲ、−（ＣＨ２）ｎＣ１〜６アルコキシ、（アリール）Ｏ−、−（ＣＨ２）ｎＯＨ、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｓ（Ｏ）ｍ−、Ｈ２Ｎ−Ｃ（ＮＨ）−、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｃ（Ｏ）−、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）ＮＲｗ（ＣＨ２）ｎＣ３〜１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｏ（ＣＨ２）ｎＣ３〜１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｓ（ＣＨ２）ｎＣ３〜１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）−Ｃ３〜１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（ＣＨ２）ｎ−Ｚ１−Ｃ（＝Ｚ２）Ｎ（Ｒ）２、−（Ｃ２〜６アルケニル）ＮＲｗ（ＣＨ２）ｎＣ３〜１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ２〜６アルケニル）Ｏ（ＣＨ２）ｎＣ３〜１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ２〜６アルケニル）Ｓ（ＣＨ２）ｎＣ３〜１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ２〜６アルケニル）−Ｃ３〜１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ２〜６アルケニル）−Ｚ１−Ｃ（＝Ｚ２）Ｎ（Ｒ）２、−（ＣＨ２）ｎＳＯ２Ｒ、−（ＣＨ２）ｎＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）ｎＰＯ（ＯＲ）２、−（ＣＨ２）ｎＯＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ３〜１０シクロアルキル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ３〜１０ヘテロシクリル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ１〜Ｃ１０アルキルを表し、前記アルキル、アルケニル、アルコキシ、ヘテロシクリルおよびアリールは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＣＮ、ＮＯ２、ＯＨ、ＣＯＮ（Ｒ）２およびＣＯＯＲから選択される１から３個の基で場合により置換されており、
Ｒｗは、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜６アルキル、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、−ＳＯ２Ｃ１〜６アルキル、−ＳＯ２Ｃ６〜１０アリール、ＮＯ２、ＣＮまたは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２を表し、
Ｚ１およびＺ２は、独立に、ＮＲｗ、Ｏ、ＣＨ２またはＳを表し、
ｍは、０から３であり、
ｎは、０から４であり、
ｐは、０から１であり、および
ｑは、０から２である。］。
【請求項２】
Ｑが、Ｃ１〜１０アルキル、−（Ｃ１〜６−アルキル）ｎＯＲまたは（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮＲ８Ｒ９であり、およびＷ＝Ｙ＝Ｚ＝ＣＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｘが−（ＣＨＲ７）ｐＣＯ−であり、ならびにＹ１およびＹ２が共にＨ２である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１が、Ｃ１〜６アルコキシ、ＯＨ、Ｃ１〜６アルキルであり、Ｑが、Ｃ１〜１０アルキルまたは（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮＲ８Ｒ９であり、Ｘが−（ＣＨＲ７）ｐＣＯ−であり、Ｒ３およびＲ２が、独立に、ＨおよびＣ１〜６アルキルであり、ならびにＹ１およびＹ２がＨ２であり、ならびに他のすべての変数が初めに記載された通りである、請求項１に記載の化合物。
（請求項４ａ）  遊離ＯＨ基が存在する、請求項１に記載の化合物。
（請求項４ｂ）  ＯＨ基が、ＯＰＯ（ＯＨ）２として誘導される、請求項４ａに記載の化合物。
【請求項５】
１−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン、
Ｎ，Ｎ−ジブチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ，Ｎ−ジプロピルアセトアミド、
２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ，Ｎ−ビス（３−メチルブチル）アセトアミド、
Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−（３−メチルブチル）アセトアミド、
Ｎ，Ｎ−ジイソブチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
Ｎ−（シクロプロピルメチル）−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−プロピルアセトアミド、
Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
Ｎ−ブチル−Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
Ｎ−ブチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−プロピルアセトアミド、
７−メトキシ−９−［２−（ｔｒａｎｓ−オクタヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−２−オキソエチル］−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
７−メトキシ−９−［２−（ｃｉｓ−オクタヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−２−オキソエチル］−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
９−［２−（ｔｒａｎｓ−２，５−ジプロピルピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］−７−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
９−［２−（ｃｉｓ−２，５−ジプロピルピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］−７−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
Ｎ−（３，３−ジメチルブチル）−Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−１，３−チアゾール−２−イルアセトアミド、
Ｎ−（２，２−ジメチルプロピル）−Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド１−（５−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン、
Ｎ，Ｎ−ジブチル−２−（５−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
２−（５−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ，Ｎ−ジプロピルアセトアミド、
Ｎ−エチル−２−（５−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−（３−メチルブチル）アセトアミド、
１−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン、
４−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−２，２，７，７−テトラメチルオクタン−３，６−ジオン、
９−（３，３−ジメチルブチル）−７−メトキシ−２，２−ジメチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ，Ｎ−ジプロピルアセトアミド、
２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ，Ｎ−ビス（３−メチルブチル）アセトアミド、
Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−（３−メチルブチル）アセトアミド、
Ｎ，Ｎ−ジイソブチル−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
Ｎ−（シクロプロピルメチル）−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−プロピルアセトアミド、
Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
Ｎ−ブチル−Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
Ｎ−ブチル−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−プロピルアセトアミド、
７−メトキシ−２，２−ジメチル−９−［２−（ｔｒａｎｓ−オクタヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−２−オキソエチル］−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
７−メトキシ−２，２−ジメチル−９−［２−（ｃｉｓ−オクタヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−２−オキソエチル］−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
９−［２−（ｔｒａｎｓ−２，５−ジプロピルピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］−７−メトキシ−２，２−ジメチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
９−［２−（ｃｉｓ−２，５−ジプロピルピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］−７−メトキシ−２，２−ジメチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
Ｎ−（３，３−ジメチルブチル）−Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−１，３−チアゾール−２−イルアセトアミド
Ｎ−（３，３−ジメチルブチル）−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−プロピルアセトアミド、
９−（３，３−ジメチルブチル）−７−メトキシ−１，２，３，９−テトラヒドロ−４Ｈ−カルバゾール−４−オン、
２−（７−メトキシ−４−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ，Ｎ−ビス（３−メチルブチル）アセトアミド、
Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−４−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−（３−メチルブチル）アセトアミド、
Ｎ−ブチル−２−（７−メトキシ−４−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−プロピルアセトアミド、
９−［２−（ｔｒａｎｓ−２，５−ジプロピルピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］−７−メトキシ−４−オキソ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
９−［２−（ｃｉｓ−２，５−ジプロピルピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］−７−メトキシ−４−オキソ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
Ｎ−（３，３−ジメチルブチル）−Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−４−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−４−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−１，３−チアゾール−２−イルアセトアミド、
Ｎ−（３，３−ジメチルブチル）−２−（７−メトキシ−４−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−プロピルアセトアミド
の化合物、または薬剤として許容される塩、ｉｎ  ｖｉｖｏで加水分解可能なこのエステル、光学異性体、ジアステレオマーもしくはこれらの混合物。
【請求項６】
高眼圧症または緑内障を治療するための医薬の製造における式Ｉの化合物の使用であって、請求項１の構造式Ｉの化合物の治療有効量を、そのような治療を必要とする患者に投与することを含む、使用。
【請求項７】
黄斑浮腫、黄斑変性症を治療するための、網膜および視神経頭部血流速度を増加するための、網膜および視神経酸素分圧を増加するための、および／または神経保護効果のための医薬の製造における式Ｉの化合物の使用であって、請求項１の化合物、または薬剤として許容される塩、光学異性体、ジアステレオマーもしくはこれらの混合物の薬剤としての有効量を、そのような治療を必要とする患者に投与することを含む、使用。
【請求項８】
カリウムチャンネルを含む哺乳類細胞の再分極または過分極を予防するための医薬の製造における式Ｉの化合物の使用、あるいは、請求項１に記載の化合物、または薬剤として許容されるこの塩、光学異性体、ジアステレオマーもしくはこれらの混合物の薬剤としての有効量を投与することを含む、アルツハイマー病、鬱病、認知障害、および／または不整脈障害を、その必要がある患者において治療する方法。
【請求項９】
糖尿病をその必要がある患者において治療するための医薬の製造における式Ｉの化合物の使用であって、請求項１に記載の化合物、または薬剤として許容されるこの塩、光学異性体、ジアステレオマーもしくはこれらの混合物の薬剤として有効な量を投与することを含む、使用。
【請求項１０】
請求項１の式Ｉの化合物および薬剤として許容される担体を含む組成物。
【請求項１１】
式Ｉの化合物が、局所製剤として適用され、前記局所製剤が、溶液または懸濁液として、場合によりキサンタンゴムもしくはゲランゴムを含めて投与される、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
βアドレナリン遮断薬、副交感神経作用薬、交感神経作用薬、炭酸脱水酵素阻害薬、ＥＰ４作用薬、プロスタグランジンまたはこの誘導体、降圧脂質、神経保護剤、および／または５−ＨＴ２レセプター作用薬からなる群に属する活性成分の１つ以上が、場合により添加される、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
βアドレナリン遮断薬が、チモロール、ベタキソロール、レボベタキソロール、カルテオロールまたはレボブノロールであり、副交感神経作用薬がピロカルピンであり、交感神経作用薬が、エピネフリン、ブリモニジン、イオピジン、クロニジンまたはパラアミノクロニジンであり、炭酸脱水酵素阻害薬が、ドルゾールアミド、アセタゾールアミド、メタゾールアミドまたはブリンゾールアミドであり、プロスタグランジンが、ラタノプロスト、トラバプロスト、ユノプロストン、レスキュラまたはＳ１０３３であり、降圧脂質がルミガンであり、神経保護剤が、エリプロジル、Ｒ−エリプロジルまたはメマンチンであり、および５−ＨＴ２レセプター作用薬が、１−（２−アミノプロピル）−３−メチル−１Ｈ−イミダゾール−６−オールフマレートまたは２−（３−クロロ−６−メトキシ−インダゾール−１−イル）−１−メチル−エチルアミンである、請求項１２に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
緑内障は、眼圧が、正常な眼の機能を可能とするには高過ぎる、眼における変性疾患である。その結果、損傷が視神経頭部に起り、視覚機能の不可逆的損失を引き起こす可能性がある。治療をしなければ、緑内障は、最終的には失明を引き起こす可能性がある。高眼圧症、即ち、視神経頭部損傷または特徴的な緑内障性視野欠損を伴わない高眼圧の状態は、緑内障の兆候における初期段階を単に表しているに過ぎないものであると、大部分の眼科医は現在考えている。
【０００２】
緑内障および高眼圧を治療するためのいくつかの治療法が存在するが、これらの作用薬は、有効性および副作用の面から理想的ではない。最近、カリウムチャンネルブロッカーが、眼における眼圧を下げることが分かり、したがって、高眼圧症およびこれに関わる変性眼状態の治療に対してさらに今一度の手段を提供することが分かった。カリウムチャンネルの閉塞は、液体分泌を減少させることができ、ある環境の下では、平滑筋収縮を増加し、ＩＯＰを下げることが期待され、眼における神経保護効果を有することができる。（米国特許第５５７３７５８号および第５９２５３４２号；Ｍｏｏｒｅ等、Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｉｓ．Ｓｃｉ  ３８、１９９７年；ＷＯ８９／１０７５７、ＷＯ９４／２８９００、およびＷＯ９６／３３７１９を参照されたい。）。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明は、強力なカリウムチャンネルブロッカー、または患者の眼における高眼圧に関わる緑内障および他の状態の治療における、この組成物の使用に関する。本発明は、また、哺乳類種、特にヒトの眼に対して神経保護効果を与える、このような化合物の使用に関する。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
さらに詳しくいえば、本発明は、構造式Ｉ：
【０００５】
【化２】
2008515973.tif 000002
［式中、
Ｙ１およびＹ２は、独立に、Ｏ；Ｈ２；ＨおよびＲ３；ＨおよびＲ２；またはＲ２およびＲ３であり、
Ｘは、−（ＣＨＲ７）ｐ−または−（ＣＨＲ７）ｐＣＯ−を表し、
Ｗ、ＹおよびＺは、独立に、ＣＨおよびＮであり、
Ｒ１は、水素、Ｃ１〜６アルコキシ、ＯＨ、Ｃ３〜８シクロアルコキシ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ１〜６アルケニル、Ｓ（Ｏ）ｑＲ、ＣＯＯＲ、ＣＯＲ、ＳＯ３Ｈ、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｒ、−ＯＰＯ（ＯＨ）２、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ５〜１０ヘテロアリール、Ｃ５〜１０ヘテロシクリル、ＣＦ３、ＯＣＦ３、−Ｎ（Ｒ）２、ニトロ、シアノ、Ｃ１〜６アルキルアミノまたはハロゲンを表し、前記アリール、アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、アリールまたはヘテロアリールは、Ｒａの１から３個の基で場合により置換されており、
Ｒ２およびＲ３は、独立に、水素、Ｃ１〜６アルコキシ、ＯＨ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルキル−Ｓ、Ｃ１〜６アルキル−ＣＯ−、Ｃ１〜６アルケニル、Ｃ３〜８シクロアルコキシ、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル−Ｓ、Ｃ３〜８シクロアルキル−ＣＯ−、ＣＯＯＲ、ＳＯ３Ｈ、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｒ、−ＯＰＯ（ＯＨ）２、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ５〜１０ヘテロアリール、Ｃ５〜１０ヘテロシクリル、ＣＦ３、−Ｎ（Ｒ）２、ニトロ、シアノ、Ｃ１〜６アルキルアミノまたはハロゲンを表し、前記アリール、アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、アリールまたはヘテロアリールは、Ｒａの１から３個の基で場合により置換されており、または
Ｒ２およびＲ３は、環における介在原子と一緒になって、４員から８員環を形成することができ、この環は、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１から２個の原子が割り込むことができ、および／または１から４個の二重結合を有し、
Ｑは、水素、Ｃ１〜１０アルキル、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＯＲ９、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮＲ８Ｒ９、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ３〜８シクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ５〜１４縮合シクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ３〜１０ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ５〜１０ヘテロアリール、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣＯＯＲ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ６〜１０アリール、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮＨＲ９、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮＨＣＯＯＲ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮ（Ｒ９）ＣＯ２Ｒ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮ（Ｒ９）ＣＯＲ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮＨＣＯＲ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣＯＮＨ（Ｒ９）、アリール、ＣＦ３、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＳＯ２Ｒ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、−（ＣＨ２）ｎＣＯＮ（Ｒ）２、−（ＣＨ２）ｎＣＯＮＨＣ（Ｒ）３、−（ＣＨ２）ｎＣＯＮＨＣ（Ｒ）２ＣＯ２Ｒ、−（ＣＨ２）ｎＣＯＲ９、ニトロ、シアノまたはハロゲンを表し、前記アルキル、アルコキシ、ヘテロシクリル、アリールまたはヘテロアリールは、Ｒａの１から３個の基で場合により置換されており、
Ｒは、水素、またはＣ１〜６アルキル、Ｃ３〜８シクロアルキル、Ｃ６〜１０アリールまたはＣ５〜１０ヘテロアリールを表し、
Ｒ７は、水素、Ｃ１〜６アルキル、−（ＣＨ２）ｎＣＯＯＲ、−（ＣＨ２）ｎＣＯＲまたは−（ＣＨ２）ｎＮ（Ｒ）２を表し、
Ｒ８は、水素、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ１〜６アルキルＳＲ、−（ＣＨ２）ｎＯ（ＣＨ２）ｍＯＲ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ１〜６アルコキシ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ３〜８シクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ３〜１０ヘテロシクリル、−Ｎ（Ｒ）２、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣＯＯＲ、または−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ６〜１０アリール、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ５〜１０ヘテロアリールを表し、前記アルキル、アルケニル、アルコキシ、ヘテロシクリルまたはアリールは、Ｒａから選択される１から３個の基で場合により置換されており、
Ｒ９は、水素、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ１〜６アルキルＳＲ、−（ＣＨ２）ｎＯ（ＣＨ２）ｍＯＲ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ１〜６アルコキシ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ３〜８シクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ３〜１０ヘテロシクリル、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ５〜１０ヘテロアリ−ル、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮ（Ｒ）２、ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮＨＲ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣＯＯＲ、または（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣ６〜１０アリール、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮＲＣＯＯＲ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＣＯＲ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＳＯ２Ｒ、−（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＳＯ２Ｎ（Ｒ）２を表し、前記アルキル、アルコキシ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールまたはヘテロアリールは、Ｒａから選択される１から３個の基で場合により置換されており、または
Ｒ８およびＲ９は、ＱのＮＲ８Ｒ９の介在「Ｎ」と一緒になって、Ｏ、Ｓ、Ｃ（Ｏ）またはＮＲの１から２個の原子により場合により割り込まれ、１から４個の二重結合を場合により有し、Ｒａから選択される１から３個の基で場合により置換されている、３員から１０員炭素環式または複素環式環を形成し、
Ｒａは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＦ３、ＯＨ、Ｎ（Ｒ）２、ＮＯ２、ＣＮ、−ＣＯＲ、−ＣＯＮＨＲ、−ＣＯＮＲ２、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＲ、−ＮＨ（ＣＨ２）ｎＯＲ、−ＣＯＯＲ、−ＯＣＦ３、−ＮＨＣＯＲ、−ＳＯ２Ｒ、−ＳＯ２ＮＲ、−ＳＲ、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｏ−、−（ＣＨ２）ｎＯ（ＣＨ２）ｍＯＲ、−（ＣＨ２）ｎＣ１〜６アルコキシ、（アリール）Ｏ−、−（ＣＨ２）ｎＯＨ、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｓ（Ｏ）ｍ−、Ｈ２Ｎ−Ｃ（ＮＨ）−、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｃ（Ｏ）−、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）ＮＲｗ（ＣＨ２）ｎＣ３〜１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｏ（ＣＨ２）ｎＣ３〜１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｓ（ＣＨ２）ｎＣ３〜１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）−Ｃ３〜１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（ＣＨ２）ｎ−Ｚ１−Ｃ（＝Ｚ２）Ｎ（Ｒ）２、−（Ｃ２〜６アルケニル）ＮＲｗ（ＣＨ２）ｎＣ３〜１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ２〜６アルケニル）Ｏ（ＣＨ２）ｎＣ３〜１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ２〜６アルケニル）Ｓ（ＣＨ２）ｎＣ３〜１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ２〜６アルケニル）−Ｃ３〜１０ヘテロシクリル−Ｒｗ、−（Ｃ２〜６アルケニル）−Ｚ１−Ｃ（＝Ｚ２）Ｎ（Ｒ）２、−（ＣＨ２）ｎＳＯ２Ｒ、−（ＣＨ２）ｎＳＯ３Ｈ、−（ＣＨ２）ｎＰＯ（ＯＲ）２、−（ＣＨ２）ｎＯＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ３〜１０シクロアルキル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ３〜１０ヘテロシクリル、Ｃ２〜６アルケニルおよびＣ１〜Ｃ１０アルキルを表し、前記アルキル、アルケニル、アルコキシ、ヘテロシクリルおよびアリールは、Ｃ１〜６アルキル、ＣＮ、ＮＯ２、ＯＨ、ＣＯＮ（Ｒ）２およびＣＯＯＲから選択される１から３個の基で場合により置換されており、
Ｒｗは、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＯＣ１〜６アルキル、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）２、−ＳＯ２Ｃ１〜６アルキル、−ＳＯ２Ｃ６〜１０アリール、ＮＯ２、ＣＮまたは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）２を表し、
Ｚ１およびＺ２は、独立に、ＮＲｗ、Ｏ、ＣＨ２またはＳを表し、
ｍは、０から３であり、
ｎは、０から４であり、
ｐは、０から１であり、および
ｑは、０から２である。］を有する、新規なテトラヒドロカルバゾールおよび関連化合物または薬剤として許容されるこの塩、ｉｎ  ｖｉｖｏで加水分解可能なこのエステル、光学異性体、ジアステレオマー、幾何異性体もしくはこれらの混合物を使用する、緑内障および／または高眼圧症（高眼圧）の治療に関する。
【０００６】
本発明のこの態様および他の態様は、全体としての本発明の検討により実現される。
【０００７】
本発明は、式Ｉの新規なカリウムチャンネルブロッカーに関わるものである。また、本発明は、上述の式Ｉのカリウムチャンネルブロッカーおよび薬剤として許容される担体を含む組成物の投与、好ましくは、局所的またはカマラル内（ｉｎｔｒａ−ｃａｍａｒａｌ）投与により、高眼圧を減少させ、または緑内障を治療するための方法に関する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明の一実施形態は、Ｑが、Ｃ１〜１０アルキル、−（Ｃ１〜６アルキル）ｎＯＲ、または（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮＲ８Ｒ９であり、他のすべての変数が、初めに記載された通りである場合に実現される。
【０００９】
本発明の別の実施形態は、Ｗ＝Ｙ＝Ｚ＝ＣＨであり、他のすべての変数が、初めに記載された通りである場合に実現される。
【００１０】
本発明の別の実施形態は、Ｒ１が、Ｃ１〜６アルコキシ、ＯＨ、Ｃ１〜６アルキルであり、他のすべての変数が、初めに記載された通りである場合に実現される。
【００１１】
本発明の別の実施形態は、Ｘが、−（ＣＨＲ７）ｐ−であり、他のすべての変数が、初めに記載された通りである場合に実現される。
【００１２】
本発明の別の実施形態は、Ｘが、−（ＣＨＲ７）ｐＣＯ−であり、他のすべての変数が、初めに記載された通りである場合に実現される。
【００１３】
本発明のなお別の実施形態は、Ｙ１およびＹ２が共にＨ２であり、またはＹ１およびＹ２の一方がＯであり、他方がＨ２であり、他のすべての変数が初めに記載された通りである場合に実現される。
【００１４】
本発明のなお別の実施形態は、Ｙ１およびＹ２の一方がＨおよびＲ３であり、他方がＨおよびＲ２であり、他のすべての変数が初めに記載された通りである場合に実現される。
【００１５】
本発明の別の実施形態は、Ｑが、Ｃ１〜１０アルキル、または（ＣＨ２）ｎ（ＣＨＲ）ｑ（ＣＨ２）ｍＮＲ８Ｒ９であり、Ｘが、−（ＣＨＲ７）ｐＣＯ−であり、Ｒ３およびＲ２が、独立に、ＨおよびＣ１〜６アルキルであり、Ｙ１およびＹ２がＨ２であり、他のすべての変数が、初めに記載された通りである場合に実現される。
【００１６】
本発明の別の実施形態は、Ｒａが、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＣＦ３、Ｎ（Ｒ）２、ＮＯ２、ＣＮ、−ＣＯＮＨＲ、−ＣＯＮＲ２、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＲ、−ＮＨ（ＣＨ２）ｎＯＲ、−ＣＯＯＲ、−ＯＣＦ３、−ＮＨＣＯＲ、−ＳＯ２Ｒ、−ＳＯ２ＮＲ２、−ＳＲ、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｏ−、−（ＣＨ２）ｎＯ（ＣＨ２）ｍＯＲ、−（ＣＨ２）ｎＣ１〜６アルコキシ、（アリール）Ｏ−、−（ＣＨ２）ｎＯＨ、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｓ（Ｏ）ｍ−、Ｈ２Ｎ−Ｃ（ＮＨ）−、（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）ｎＰＯ（ＯＲ）２、−（ＣＨ２）ｎＯＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ２〜６アルケニル、およびＣ１〜Ｃ１０アルキルから選択され、前記アルキルおよびアルケニルが、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、およびＣＯＯＲから選択される１から３個の基で場合により置換されている場合に実現される。
【００１７】
本発明の式Ｉの化合物の例は、
１−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン、
Ｎ，Ｎ−ジブチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ，Ｎ−ジプロピルアセトアミド、
２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ，Ｎ−ビス（３−メチルブチル）アセトアミド、
Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−（３−メチルブチル）アセトアミド、
Ｎ，Ｎ−ジイソブチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
Ｎ−（シクロプロピルメチル）−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−プロピルアセトアミド、
Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
Ｎ−ブチル−Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
Ｎ−ブチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−プロピルアセトアミド、
７−メトキシ−９−［２−（ｔｒａｎｓ−オクタヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−２−オキソエチル］−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
７−メトキシ−９−［２−（ｃｉｓ−オクタヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−２−オキソエチル］−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
９−［２−（ｔｒａｎｓ−２，５−ジプロピルピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］−７−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
９−［２−（ｃｉｓ−２，５−ジプロピルピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］−７−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
Ｎ−（３，３−ジメチルブチル）−Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−１，３−チアゾール−２−イルアセトアミド、
Ｎ−（２，２−ジメチルプロピル）−Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド１−（５−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン、
Ｎ，Ｎ−ジブチル−２−（５−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
２−（５−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ，Ｎ−ジプロピルアセトアミド、
Ｎ−エチル−２−（５−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−（３−メチルブチル）アセトアミド、
１−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン、
４−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−２，２，７，７−テトラメチルオクタン−３，６−ジオン、
９−（３，３−ジメチルブチル）−７−メトキシ−２，２−ジメチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ，Ｎ−ジプロピルアセトアミド、
２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ，Ｎ−ビス（３−メチルブチル）アセトアミド、
Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−（３−メチルブチル）アセトアミド、
Ｎ，Ｎ−ジイソブチル−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
Ｎ−（シクロプロピルメチル）−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−プロピルアセトアミド、
Ｎ−シクロヘキシル−Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
Ｎ−ブチル−Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
Ｎ−ブチル−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−プロピルアセトアミド、
７−メトキシ−２，２−ジメチル−９−［２−（ｔｒａｎｓ−オクタヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−２−オキソエチル］−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
７−メトキシ−２，２−ジメチル−９−［２−（ｃｉｓ−オクタヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−２−オキソエチル］−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
９−［２−（ｔｒａｎｓ−２，５−ジプロピルピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］−７−メトキシ−２，２−ジメチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
９−［２−（ｃｉｓ−２，５−ジプロピルピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］−７−メトキシ−２，２−ジメチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
Ｎ−（３，３−ジメチルブチル）−Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−１，３−チアゾール−２−イルアセトアミド
Ｎ−（３，３−ジメチルブチル）−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−プロピルアセトアミド、
９−（３，３−ジメチルブチル）−７−メトキシ−１，２，３，９−テトラヒドロ−４Ｈ−カルバゾール−４−オン、
２−（７−メトキシ−４−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ，Ｎ−ビス（３−メチルブチル）アセトアミド、
Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−４−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−（３−メチルブチル）アセトアミド、
Ｎ−ブチル−２−（７−メトキシ−４−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−プロピルアセトアミド、
９−［２−（ｔｒａｎｓ−２，５−ジプロピルピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］−７−メトキシ−４−オキソ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
９−［２−（ｃｉｓ−２，５−ジプロピルピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル］−７−メトキシ−４−オキソ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール、
Ｎ−（３，３−ジメチルブチル）−Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−４−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド、
Ｎ−エチル−２−（７−メトキシ−４−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−１，３−チアゾール−２−イルアセトアミド、
Ｎ−（３，３−ジメチルブチル）−２−（７−メトキシ−４−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−Ｎ−プロピルアセトアミド、
または薬剤として許容されるこの塩、ｉｎ  ｖｉｖｏで加水分解可能なこのエステル、光学異性体、ジアステレオマーもしくはこれらの混合物である。
【００１８】
本発明は、別途特定されない限り、以下において定義される用語を使用して、詳細に本明細書において記載される。
【００１９】
本発明の化合物は、不斉中心、キラル軸およびキラル面を有し、本発明に含まれる、光学異性体を含めたすべての可能な異性体を伴う、ラセミ化合物、ラセミ体混合物として、および個々のジアステレオマーとして存在することができる。（Ｅ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌ  ａｎｄ  Ｓ．Ｈ．Ｗｉｌｅｎ  Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｃａｒｂｏｎ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  （Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  １９９４年）、特に、１１１９頁〜１１９０頁を参照されたい。）。
【００２０】
任意の変数（例えば、アリール、ヘテロシクリル、Ｒ１、Ｒ６等）が、任意の構成において１度より多く存在する場合は、各存在についての定義は、他の存在毎に独立したものである。また、置換基／または変数の組合せは、このような組合せが、安定な化合物をもたらす場合に限り許される。
【００２１】
Ｒａが、−Ｏ−であり、炭素に結合している場合は、カルボニル基と称し、これが、窒素（例えば、ピリジル基の窒素原子）またはイオウ原子に結合している場合は、それぞれに、Ｎ−オキシドおよびスルホキシド基と称する。
【００２２】
「アルキル」という用語は、別途定義されていない限り、１〜１０個の炭素原子を含む、一価アルカン（炭化水素）から誘導される基を意味する。これは、直鎖、分岐または環状であってもよい。好ましいアルキル基としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、シクロプロピル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが挙げられる。アルキル基が、アルキル基で置換されるといわれる場合は、これは、「分岐アルキル基」で交換できるように使用される。
【００２３】
シクロアルキルは、別途定義されていない限り、炭素原子間に交互または共鳴二重結合を持たない、３〜１５個の炭素原子を含むアルキルの１種である。これは、結合することのできる、１から４個の環を含んでもよい。このようなシクロアルキル要素の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、アダマンチル、ジアマンチル、［２．２．２］ビシクロオクチル、および［１．１．１］ビシクロペンチルが挙げられるがこれらに限定されない。
【００２４】
アルケニルは、Ｃ２〜Ｃ６アルケニルである。
【００２５】
アルコキシは、本明細書において言及されている、場合により置換されているアルキル基を伴う、酸素架橋を介して結合した炭素原子の表示された数のアルキル基を意味する。前記基は、直鎖または分岐配列において指定された長さの基であり、長さにおいて２以上の炭素原子が存在すれば、これらは、二重結合または三重結合を含んでもよい。このようなアルコキシ基の例は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｔ−ブトキシ、ペントキシ、イソペントキシ、ヘキソキシ、イソヘキソキシ、アリロキシ、プロパルギルオキシ等である。
【００２６】
ハロゲン（ハロ）は、塩素、フッ素、ヨウ素または臭素を意味する。
【００２７】
アリールは、芳香族環、例えば、フェニル、置換フェニル等、加えて、結合した環、例えば、ナフチル、フェナントレニル等を意味する。したがって、アリール基は、少なくとも６個の原子を有する少なくとも１つの環を含み、このような環が５個まで存在し、この中に２２個までの原子を含み、隣接炭素原子または適切なヘテロ原子間に交互（共鳴）二重結合を持つ。アリール基の例は、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、ビフェニル、フェナントリル、アントリルまたはアセナフチルおよびフェナントレニル、好ましくは、フェニル、ナフチルまたはフェナントレニルである。アリール基は、同様に、定義されている様に置換されていてもよい。好ましい置換されるアリールとしては、フェニルおよびナフチルが挙げられる。
【００２８】
本明細書において使用される、ヘテロシクリルまたは複素環式という用語は、飽和または不飽和であり、炭素原子ならびにＮ、ＯおよびＳからなる群から選択される１から４個のヘテロ原子からなり、任意の上記定義された複素環式環が、ベンゼン環に結合している任意の二環式基を含む、安定な３〜７員単環式または安定な８〜１１員二環式複素環式環を表す。複素環式環は、任意のヘテロ原子または炭素原子に結合して、安定な構造の構築をもたらしてもよい。結合した複素環式環系は、炭素環式環を含んでもよく、１つだけの複素環式環を含むことを必要とする。ヘテロシクリルまたは複素環式という用語は、ヘテロアリール部分を含む。このような複素環式要素の例としては、アゼピニル、ベンゾイミダゾリル、ベンジイソオキサゾリル、ベンゾフラザニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル、クロマニル、シンノリニル、ジヒドロベンゾフリル、ジヒドロベンゾチエニル、ジヒドロベンゾチオピラニル、ジヒドロベンゾチオピラニルスルホン、ジヒドロピロリル、１，３−ジオキソラニル、フリル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、イソクロマニル、イソインドリニル、イソキノリニル、イソチアゾリジニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、モルホリニル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、２−オキソアゼピニル、オキサゾリル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロリジニル、ピペリジル、ピペラジニル、ピリジル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、キノキサリニル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、チアモルホリニル、チアモルホリニルスルホキシド、チアゾリル、チアゾリニル、チエノフリル、チエノチエニル、およびチエニルが挙げられるがこれらに限定されない。好ましくは、ヘテロシクリルは、２−アゼピノニル、ベンゾイミダゾリル、２−ジアゼピノニル、ジヒドロイミダゾリル、ジヒドロピロリル、イミダゾリル、２−イミダゾリジノニル、インドリル、イソキノリニル、モルホリニル、ピペリジル、ピペラジニル、ピリジル、ピロリジニル、２−ピペリジノニル、２−ピリミジノニル、２−ピロリジノニル、キノリニル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロイソキノリニル、およびチエニルから選択される。
【００２９】
「ヘテロ原子」という用語は、独立の基準に基づいて選択される、Ｏ、ＳまたはＮを意味する。
【００３０】
「ヘテロアリール」という用語は、５もしくは６個の環原子を有する単環式芳香族炭化水素基、または８〜１０個の原子を有する二環式芳香族基で、少なくとも１つのヘテロ原子、Ｏ、ＳもしくはＮを含み、炭素原子または窒素原子が、結合の点であり、１個または２個のさらなる炭素原子が、ＯまたはＳから選択されるヘテロ原子により場合により置換されており、１から３個のさらなる炭素原子が、窒素へテロ原子により場合により置換されている基を意味し、前記ヘテロアリール基は、本明細書において記載されている様に、場合により置換されている。このような複素環式要素の例としては、ベンゾイミダゾリル、ベンジイソオキサゾリル、ベンゾフラザニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル、クロマニル、シンノリニル、ジヒドロベンゾフリル、ジヒドロベンゾチエニル、ジヒドロベンゾチオピラニル、ジヒドロベンゾチオピラニルスルホン、フリル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、イソクロマニル、イソインドリニル、イソキノリニル、イソチアゾリル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、ピリジル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、キノキサリニル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、チアゾリル、チエノフリル、チエノチエニル、チエニルおよびトリアゾリルが挙げられるがこれらに限定されない。さらなる窒素原子は、例えば、チアジアゾールを与えるために、最初の窒素および酸素またはイオウと一緒に存在してもよい。
【００３１】
本発明は、また、式Ｉの化合物の１つを単独で、または、次の活性成分の１つ以上との組合せにおいて、即ち、βアドレナリン遮断薬、例えば、チモロール（ｔｉｍｏｌｏｌ）、ベタキソロール（ｂｅｔａｘｏｌｏｌ）、レボベタキソロール（ｌｅｖｏｂｅｔａｘｏｌｏｌ）、カルテオロール（ｃａｒｔｅｏｌｏｌ）、レボブノロール（ｌｅｖｏｂｕｎｏｌｏｌ）等、副交感神経作用薬、例えば、エピネフリン（ｅｐｉｎｅｐｈｒｉｎｅ）、イオピジン（ｉｏｐｉｄｉｎｅ）、ブリモニジン（ｂｒｉｍｏｎｉｄｉｎｅ）、クロニジン（ｃｌｏｎｉｄｉｎｅ）、パラ−アミノクロニジン（ｐａｒａ−ａｍｉｎｏｃｌｏｎｉｄｉｎｅ）等、炭酸脱水酵素阻害剤、例えば、ドルゾールアミド（ｄｏｒｚｏｌａｍｉｄｅ）、アセタゾールアミド（ａｃｅｔａｚｏｌａｍｉｄｅ）、メタゾールアミド（ｍｅｔａｚｏｌａｍｉｄｅ）またはブリンゾールアミド（ｂｒｉｎｚｏｌａｍｉｄｅ）等、ＥＰ４作用薬（例えば、ＷＯ０２／２４６４７、ＷＯ０２／４２２６８、ＥＰ１１１４８１６、ＷＯ０１／４６１４０、ＰＣＴ特許出願番号ＣＡ２００４０００４７１、およびＷＯ０１／７２２６８において記載されているもの等）、プロスタグランジン、例えば、ラタノプロスト（ｌａｔａｎｏｐｒｏｓｔ）、トラバプロスト（ｔｒａｖａｐｒｏｓｔ）、ユノプロストン（ｕｎｏｐｒｏｓｔｏｎｅ）、レスキュラ（ｒｅｓｃｕｌａ）、Ｓ１０３３（米国特許第５８８９０５２号、第５２９６５０４号、第５４２２３６８号および第５１５１４４４号において示されている化合物）等、降圧脂質、例えば、ルミガン（ｌｕｍｉｇａｎ）および米国特許第５３５２７０８号において示されている化合物等、メマンチン（ｍｅｍａｎｔｉｎｅ）を含めた、米国特許第４６９０９３１号において開示されている神経保護剤、特に、ＷＯ９４／１３２７５において示されている、エリプロジル（ｅｌｉｐｒｏｄｉｌ）およびＲ−エリプロジル等、ＰＣＴ／ＵＳ００／３１２４７において示されている５−ＨＴ２レセプターの作用薬、特に、１−（２−アミイノピロピル）−３−メチル−１Ｈ−イムダゾール−６−オールフマレートおよび２−（３−クロロ−６−メトキシ−インダゾール−１−イル）−１−メチル−エチルアミンまたはこれらの混合物との組合せにおいて、高眼圧症または緑内障の治療を必要とする患者に投与することにより、高眼圧症または緑内障を治療するための組成物および方法に関する。降圧脂質（基体プロスタグランジン構造のα−鎖結合におけるカルボン酸基が、電気化学的に中性の置換基で置換されている。）の例は、カルボン酸基が、Ｃ１〜６アルコキシ基、例えば、ＯＣＨ３（ＰＧＦ２ａ１−ＯＣＨ３）等、またはヒドロキシ基（ＰＧＦ２ａ１−ＯＨ）で置換されているものである。
【００３２】
好ましいカリウムチャンネルブロッカーは、カルシウム活性化カリウムチャンネルブロッカーである。さらに好ましいカリウムチャンネルブロッカーは、高伝導性カルシウム活性化カリウム（Ｍａｘｉ−Ｋ）チャンネルブロッカーである。Ｍａｘｉ−Ｋチャンネルは、神経平滑筋および上皮組織において優勢な、膜電位および細胞内Ｃａ２＋でゲートされるイオンチャンネルの仲間である。
【００３３】
本発明は、Ｍａｘｉ−Ｋチャンネルが、ブロックされた場合に、正味の溶質およびＨ２Ｏ流出を阻害して、ＩＯＰを低下させることにより、房水産生を阻害することの知見に基づくものである。この知見は、Ｍａｘｉ−Ｋチャンネルブロッカーが、他の眼科学的機能障害、例えば、黄斑浮腫および黄斑変性症等の治療に有用であることを示唆する。ＩＯＰを下げると、網膜および視神経への血流を促進することが知られている。したがって、本発明の化合物は、黄斑浮腫および／または黄斑変性症を治療するのに有用である。
【００３４】
ＩＯＰを低下させるＭａｘｉ−Ｋチャンネルブロッカーは、神経保護効果を与えるのに有用であると考えられる。これらは、また、ＩＯＰを低下させることにより、網膜および視神経頭部血流速度を増加させ、網膜および視神経酸素を増加させるのに有効であり、これらが一緒に結合した場合は、視神経の健康に役立つものと考えられる。結果として、本発明は、さらに、網膜および視神経頭部血流速度を増加させ、網膜および視神経酸素分圧を増加せるための方法に加えて、神経保護効果またはこれらの組合せを与える方法に関する。
【００３５】
市販薬剤の多くは、カリウムチャンネル拮抗薬として機能する。これらの内で最も重要なものとしては、化合物のグリブリド（Ｇｌｙｂｕｒｉｄｅ）、グリピジド（Ｇｌｙｐｉｚｉｄｅ）およびトルブタミド（Ｔｏｌｂｕｔａｍｉｄｅ）が挙げられる。これらのカリウムチャンネル拮抗薬は、抗糖尿病薬として有用である。本発明の化合物は、糖尿病を治療するために、これらの化合物の１つ以上と組み合わされてもよい。
【００３６】
カリウムチャンネル拮抗薬は、また、クラス３抗不整脈剤として、およびヒトにおける急性梗塞を治療するのに利用される。自然界に存在する毒素の多くは、アパミン（Ａｐａｍｉｎ）、イベリオトキシン（Ｉｂｅｒｉｏｔｏｘｉｎ）、カルブドトキシン（Ｃｈａｒｙｂｄｏｔｏｘｉｎ）、ノキアストキシン（Ｎｏｘｉｕｓｔｏｘｉｎ）、カリオトキシン（Ｋａｌｉｏｔｏｘｉｎ）、デンドロトキシン（Ｄｅｎｄｒｏｔｏｘｉｎ）、肥満細胞脱顆粒（ＭＣＤ）ペプチド、およびβ−ブンガロトキシン（Ｂｕｎｇａｒｏｔｏｘｉｎ）（β−ＢＴＸ）を含めて、カリウムチャンネルを閉塞することが知られている。本発明の化合物は、不整脈を治療するために、これらの化合物の１つ以上と組み合わされてもよい。
【００３７】
鬱病は、神経伝達物質の放出における減少に関わりがある。鬱病の現在の治療は、神経伝達物質取込みのブロッカー、および神経伝達物質の寿命を延ばすために作用する、神経伝達物質劣化において含まれる酵素の阻害剤を含む。
【００３８】
アルツハイマー病は、また、減少した神経伝達物質の放出が特徴である。薬剤の３つのクラスが、アルツハイマー病の治療のために研究されている。即ち、コリン作用性増強剤、例えば、抗コリンエステラーゼ薬剤（例えば、フィソスチグミン（ｐｈｙｓｏｓｔｉｇｍｉｎｅ）（エセリン（ｅｓｅｒｉｎｅ））、およびタクリン（Ｔａｃｒｉｎｅ）（テトラヒドロアミノクリジン（ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏａｍｉｎｏｃｒｉｄｉｎｅ））等；他の場所で、僅かな効果でもって神経細胞代謝に影響を及ぼす向知性薬（例えば、ピラセタム（Ｐｉｒａｃｅｔａｍ）、オキシラセタム（Ｏｘｉｒａｃｅｔａｍ）；および脳の脈管構造に影響を及ぼす薬剤、例えば、ニモジピン（Ｎｉｍｏｄｉｐｉｎｅ）を含む、エルゴロイド（ｅｒｇｏｌｏｉｄ）メシレートａｍｄカルシウムチャンネルブロック薬剤の混合物等。セレギリン（Ｓｅｌｅｇｉｌｉｎｅ）、即ち、脳のドーパミンを増加する、モノアミンオキシダーゼＢ阻害剤およびノルエピネフリン（ｎｏｒｅｐｉｎｅｐｈｒｉｎｅ）は、幾人かのアルツハイマー患者において穏やかな改善を引き起こすことが報告されている。アルミニウムキレート剤は、アルツハイマー病が、アルミニウムの毒性によるものと考えている人達にとって興味の対象となっている。神経安定薬を含めた、挙動に影響を及ぼす薬剤、および不安緩解剤が使用されている。穏やかなトランキライザーである不安緩解剤は、神経安定薬よりも効果が少ない。本発明は、カリウムチャンネル拮抗薬として有用な新規な化合物に関する。
【００３９】
本発明の化合物は、アルツハイマー病の治療において、抗コリンエステラーゼ薬剤、例えば、フィソスチグミン（エセリン）およびタクリン（テトラヒドロアミノクリジン）等、向知性薬、例えば、ピラセタム、オキシラセタム等、エルゴロイドメシレート、選択的カルシウムチャンネルブロッカー、例えば、ニモジピン等、またはモノアミンオキシダーゼＢ阻害剤、例えば、セレギリン等と組み合わされてもよい。また、本発明の化合物は、不整脈治療において、アパミン、イベリオトキシン、カルブドトキシン、ノキアストキシン、カリオトキシン、デンドロトキシン、肥満細胞脱顆粒（ＭＣＤ）ペプチド、β−ブンガロトキシン（β−ＢＴＸ）またはこれらの組合せと組み合わされてもよい。本発明の化合物は、さらに、糖尿病を治療するために、グリブリド、グリピジド、トルブタミドと組み合わされてもよい。
【００４０】
本明細書における実施例は、本発明を例示するのであって限定するものではない。言及されている化合物のそれぞれは、カリウムチャンネル拮抗薬であり、したがって、最大限の神経伝達物質の放出を達成するために、細胞を脱分極状態に維持することが望ましい、言及されている神経疾患において有用である。本発明において生成される化合物は、適切な、知られている、薬剤として許容される賦形剤と簡単に組み合わせて、有効なカリウムチャンネル閉塞を達成するために、ヒトを含む哺乳類に投与されてもよい組成物を生成する。
【００４１】
医薬における使用のためには、式Ｉの化合物の塩は、薬剤として許容される塩である。しかしながら、他の塩は、本発明による化合物または薬剤として許容されるこの塩の調製において有用であってもよい。本発明の化合物が酸性である場合は、適切な「薬剤として許容される塩」は、無機塩基および有機塩基を含む、薬剤として許容される非毒性塩基から調製される塩を意味する。無機塩基から誘導される塩としては、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン塩、マンガン、カリウム、ナトリウム、亜鉛等が挙げられる。特に好ましいものは、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウムおよびナトリウム塩である。薬剤として許容される有機非毒性塩基から誘導される塩としては、第一級、第二級および第三級アミン、天然に存在する置換アミンを含む置換アミン、環状アミンおよび塩基性イオン交換樹脂、例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リシン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミン等の塩が挙げられる。
【００４２】
本発明の化合物が塩基性である場合は、塩は、無機および有機酸を含む、薬剤として許容される非毒性酸から調製されてもよい。このような酸としては、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、樟脳スルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマール酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸等が挙げられる。特に好ましいものは、クエン酸、臭化水素酸、塩酸、マレイン酸、リン酸、硫酸および酒石酸である。
【００４３】
上述の薬剤として許容される塩および他の一般的な薬剤として許容される塩の調製は、Ｂｅｒｇ等、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ」、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、１９７７年：６６：１頁〜１９頁でさらに完全に記載されている。
【００４４】
本明細書において使用される「組成物」という用語は、特定の量において特定された成分を含む生成物、加えて、特定された量における特定の成分の組合せから、直接または間接的に得られる任意の生成物を包含することを意図するものである。
【００４５】
本発明による化合物が、ヒト対象に投与される場合は、毎日の投薬量は、個々の患者の年齢、体重、性別および応答、加えて、患者の症状の重篤度により一般的に変動する投薬量で、指定された医者により通常決定される。
【００４６】
使用されるＭａｘｉ−Ｋチャンネルブロッカーは、静脈内に、皮下に、局所に、経皮的に、非経口的にまたは当業者に知られている任意の他の方法により、治療有効量において投与することができる。
【００４７】
眼科薬剤組成物は、好ましくは、溶液、懸濁液、軟膏、クリームの形態において、または固体体挿入物として、眼に対して、局部投与のために適合される。この化合物の眼科組成物は、医薬の０．０１ｐｐｍ〜５％、特に、０．１ｐｐｍ〜１％を含んでもよい。より高い投薬量、例えば、約１０％、またはより低い投薬量は、投与量が、眼圧を減少させ、緑内障を治療し、血流速度または酸素分圧を増加することにおいて有効であれば、採用することができる。単独投与量に対しては、化合物の１ｎｇ〜５０００μｇ、好ましくは、１０ｎｇ〜５００μｇ、特に、１００ｎｇ〜２００μｇが、ヒトの眼に適用することができる。
【００４８】
化合物を含む薬学的製剤は、非毒性薬学的有機担体、または非毒性薬学的無機担体と都合よく混合されてもよい。薬剤として許容される担体の一般的なものは、例えば、水、水および水相溶性溶剤、例えば、低級アルカノールまたはアラルカノールとの混合物、植物油、ポリアルキレングリコール、石油を基としたゼリー、エチルセルロース、オレイン酸エチル、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、イソプロピルミリステートおよび他の普通に使用される許容される担体である。薬学的製剤は、また、非毒性補助物質、例えば、乳化剤、保存剤、湿潤剤、体質剤等、例えば、ポリエチレングリコール２００、３００、４００および６００、カーボワックス１，０００、１，５００、４，０００、６，０００および１０，０００、第四級アンモニウム化合物等の抗菌成分、低温殺菌性を有することが知られていて、使用において無害であるフェニル水銀塩、チメロサール（ｔｈｉｍｅｒｏｓａｌ）、メチルおよびプロピルパラベン、ベンジルアルコール、フェニルエタノール、緩衝液成分、例えば、ホウ酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、グルコネート緩衝液等、および他の通常成分、例えば、ソルビタンモノラウレート、トリエタノールアミン、オレエート、ポリオキシエチレンソルビタンモノパルミチレート、ジオクチルナトリウムスルホスクシネート、モノチオグリセロール、チオソルビトール、エチレンジアミン四酢酸等を含んでもよい。さらに、適切な眼科ビヒクルは、通常のリン酸塩緩衝液ビヒクル系、等張ホウ酸ビヒクル、等張塩化ナトリウムビヒクル、等張ホウ酸ナトリウムビヒクル等を含めて、本発明の目的のための担体媒体として使用することができる。薬学的製剤は、また、ミクロ粒子組成物の形態において存在してもよい。薬学的製剤は、また、固体挿入物の形態において存在してもよい。例えば、医薬のための担体として、固体水溶性ポリマーを使用してもよい。挿入物を形成するために使用されるポリマーは、任意の水溶性非毒性ポリマー、例えば、セルロース誘導体、例えば、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、（ヒドロキシ低級アルキルセルロース）、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等；アクリレート、例えば、ポリアクリル酸塩、エチルアクリレート、ポリアクリルアミド等；天然製品、例えば、ゼラチン、アルギネート、ペクチン、トラガカント、カラヤ、コンドラス（ｃｈｏｎｄｒｕｓ）、寒天、アカシア等；デンプン誘導体、例えば、酢酸デンプン、ヒドロキシメチルデンプンエーテル、ヒドロキシプロピルデンプン等、加えて、他の合成誘導体、例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリビニルメチルエーテル、ポリエチレンオキシド、中和されたカルボポールおよびキサンタンゴム、ゲラン（ｇｅｌｌａｎ）ゴム、および前記ポリマーの混合物等であってもよい。
【００４９】
本発明の組成物の投与にとって適切な対象としては、霊長類、ヒトおよび他の動物、特に、ヒトおよび家畜、例えば、ネコおよびイヌ等が挙げられる。
【００５０】
薬学的製剤は、非毒性補助物質、例えば、使用において無害である抗菌成分等、例えば、チメロサール、ベンズアルコニウムクロライド、メチルおよびプロピルパラベン、ベンジルドデシニウムブロミド、ベンジルアルコール、またはフェニルエタノール；緩衝液成分、例えば、塩化ナトリウム、ホウ酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、またはグルコネート緩衝液等；および他の通常の成分、例えば、ソルビタンモノラウレート、トリエタノールアミン、ポリオキシエチレンソルビタンモノパルミチレート、エチレンジアミン四酢酸等を含んでもよい。
【００５１】
眼科溶液または懸濁液は、眼における許容されるＩＯＰ水準を維持するために、必要の度毎に投与されてもよい。哺乳類の眼に対する投与は、１日約１回または２回であることが考えられる。
【００５２】
局所的眼投与のためには、本発明の新規な組成物は、単位投薬量が、活性成分の治療有効量または併用療法の場合にはこの数倍の量を含む様に組成された、溶液、ゲル、軟膏、懸濁液または固体挿入物の形態を取ってもよい。
【実施例】
【００５３】
例示の目的で与えられる以下の実施例は、本発明の実証である。実施例において使用される用語の定義は、次の通りである：
ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物
ＥＤＣ：１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸
ＮＭＲ：核磁気共鳴
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＤＩＥＡ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＳＧＣ：シリカゲルクロマトグラフィー
ｈ＝ｈｒ：時間
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド
ｍｉｎ：分
ＬＣ／ＭＣ：液体クロマトグラフィー／質量分析
ＲＰ−ＨＰＬＣ：逆相高性能液体クロマトグラフィー
ｅｑｕｉｖ＝ｅｑ：当量。
【００５４】
一般的実験条件：ＮＭＲスペクトルは、残留溶媒ピークを基準としたＶａｒｉａｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓにおいて、室温で記録された。ＬＣ−ＭＳは、２．０×５０ｍｍ  Ｘ−Ｔｅｒｒａ  Ｃ１８カラムおよび３．７５分にわたる１０〜９８％ＭｅＣＮ勾配と、それに続く１分間の９８％ＭｅＣＮ勾配を使用して、Ａｇｌｉｅｎｔ  ＨＰＬＣおよびエレクトロスプレーイオン化を伴うＭｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＱ検出器において測定された。水性およびＭｅＣＮ溶離液は、それぞれに、０．０６および０．０５％（ｖ／ｖ）トリフルオロ酢酸を含んでいた。質量ピークは、相対的発生量の減少順序において列挙される。分離用ＨＰＬＣ分離は、Ｃ１８カラム、例えば、ＹＭＣ  ２０×１５０ｍｍ５μＰｒｏＣ１８、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  １００×２１．２ｍｍ５μＣ１８Ｌｕｎａ、または９．４×２５０ｍｍ  ＳＢ−Ｃ１８  Ｚｏｒｂａｘカラム等を使用して行った。
【００５５】
例示の目的で与えられる以下の実施例は、本発明の実証である。本発明の化合物は、以下のスキームにおいて、適切な場合には、変更を伴って作ることができる。
【００５６】
【化３】
2008515973.tif 000003
【００５７】
スキーム１は、カリウムチャンネル変性剤のテトラヒドロカルバゾールクラスの調製を示す。シクロヘキサノンおよび３−メトキシフェニルヒドラジンを使用するフィッシャーインドール合成は、２つのメトキシテトラヒドロカルバゾールの混合物を与えた。これらは、ＳＧＣで分離された。これらは、ブロモケトンでアルキル化して、最終生成物を与えることができる。α−ブロモアセテートでのアルキル化、続いて、酸およびアミド形成への加水分解は、アセトアミド誘導体を与えた。類似の方法は、スキーム２において示される置換テトラヒドロカルバゾールを調製するために使用された。
【００５８】
【化４】
2008515973.tif 000004
【００５９】
いくつかの方法が、オキソ−テトラヒドロカルバゾールの調製のために報告されている。例えば、Ｓｃｏｔｔ等、（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ；５９；３３；２００３年；６３２３頁）およびＩｙｅｒ等；（Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｐｅｒｋｉｎ  Ｔｒａｎｓ．２；１９７３年；８７８頁）は、それぞれに、７−メトキシ−１，２，３，９−テトラヒドロ−４Ｈ−カルバゾール−４−オンおよび７−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール−１−オンへの手段を報告している。本発明者等は、インドール形成工程（スキーム３）における酸素に代えて、塩化銅（ＩＩ）を使用する、７−メトキシ−１，２，３，９−テトラヒドロ−４Ｈ−カルバゾール−４−オンの合成のためのＩｉｄａ等の変更方法（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９８０年、４５、２９３８頁）を使用した。工程の残りは、先に使用されたものと同様のものであった。
【００６０】
【化５】
2008515973.tif 000005
【００６１】
【化５】
2008515973.tif 000006
【００６２】
１−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン
工程Ａ．７−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール
１６ｍＬの酢酸における、４．０４ｇの３−メトキシフェニルヒドラジン塩酸、２．２７ｇのシクロヘキサノンおよび１．９０ｇの酢酸ナトリウムの混合物を窒素下で４時間還流した。溶媒を減圧下で除去した。残渣を水およびＥｔＯＡｃとに分割した。合わせたＥｔＯＡｃ抽出物を０．１Ｎ  ＨＣｌ、５％ＮａＨＣＯ３、および飽和ブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させて、粗生成物を得た。粗生成物をヘキサンにおける１５〜２５％ＥｔＯＡｃを使用して、シリカゲルで繰り返し精製し、２つの異性体生成物を得た。ゆっくりと溶出する異性体が標記化合物であった。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）δ７．５７（ｂｒ  ｓ，１ＮＨ）、７．３５（ｄ，８．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．８４（ｄ，２．１Ｈｚ，１Ｈ）、６．７７（ｄｄ，２．１  ＆  ８．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．８６（ｓ，３Ｈ）、２．６７〜２．７４（ｍ，４Ｈ）、１．８５〜１．９５（ｍ，４Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：３．６０分。（ｍ／Ｚ＝２０２．２）。速く溶出する少量異性体は、５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾールと同定された。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）δ７．６７（ｂｒ  ｓ，１ＮＨ）、７．０１（ｄｄ，８．０  ＆  ７．１Ｈｚ，１Ｈ）、６．９１（ｄ，８．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．４８（ｄ，７．６Ｈｚ，１Ｈ）、３．９１（ｓ，３Ｈ）、２．９５〜２．９８（ｍ，２Ｈ）、２．７０〜２．７４（ｍ，２Ｈ）、１．８３〜１．９３（ｍ，４Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：３．６３分。（ｍ／Ｚ＝２０２．２）。
【００６３】
工程Ｂ．１−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン
１ｍＬの無水ＤＭＦにおける、上記工程Ａからの７−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール３３．７ｍｇの溶液に、１２ｍｇのＮａＨ（６０％油分散体）を添加した。２〜３分後に、３１．３ｍｇの１−ブロモ−３，３−ジメチルブタン−２−オンを添加した。反応混合物を０．１％ＴＦＡを伴う水における６０〜１００％ＭｅＣＮを使用して、ＲＰ−ＨＰＬＣで精製し、凍結乾燥後に固体として標記化合物を得た。ＬＣ−ＭＳ：４．０２分。（ｍ／Ｚ＝３００．２）。
【００６４】
【化６】
2008515973.tif 000007
【００６５】
Ｎ，Ｎ−ジブチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド
工程Ａ．（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）酢酸
１０ｍＬの無水ＤＭＦにおける、実施例１の工程Ａからの７−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール０．２５ｇの溶液に、１５０ｍｇのＮａＨ（６０％油分散体）を添加した。１０分後に、０．２１ｇのメチルブロモアセテートを添加し、得られた混合物を室温で５時間撹拌した。水および５Ｎ  ＮａＯＨのそれぞれ１ｍＬを反応混合物に注意深く添加した。一晩中、室温で撹拌後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を水およびエーテルを使用して処理し、標記化合物を含む酸性画分を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）δ７．３７（ｄ，８．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．７９（ｄｄ，２．３  ＆  ８．６Ｈｚ，１Ｈ）、６．７０（ｄ，２．３Ｈｚ，１Ｈ）、４．７４（ｓ，２Ｈ）、３．８７（ｓ，３Ｈ）、２．７０〜２．７２（ｍ，２Ｈ）、２．６３〜２．６６（ｍ，２Ｈ）、１．９３〜１．９８（ｍ，２Ｈ）、１．８４〜１．８９（ｍ，２Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：３．２９分。（ｍ／Ｚ＝２６０．２）。
【００６６】
工程Ｂ．Ｎ，Ｎ−ジブチル−２−（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド
０．５ｍＬの無水ＤＭＦにおける、上記工程Ａからの（７−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）酢酸２．６ｍｇの溶液に、２．３ｍｇのＨＯＢｔ、２．６ｍｇのジブチルアミン、７．７ｍｇのＥＤＣ、および２．６ｍｇのＤＩＥＡを添加した。一晩中、室温で放置後、反応混合物を０．１％ＴＦＡを伴う水における６５〜１００％ＭｅＣＮ勾配を使用して、ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。標記化合物を凍結乾燥後に、無色固体として得た。ＬＣ−ＭＳ：４．３１分。（ｍ／Ｚ＝３７１．３、３９３．３）。
【００６７】
【化７】
2008515973.tif 000008
【００６８】
表１における実施例３〜１７を実施例３の工程Ｂにおいて記載されている方法と同じ方法を使用して、適切なアミンから調製した。実施例１３〜１６に対して使用されたアミンの調製は、全体が本明細書に参照として組み込まれるＷＯ２００４／０４３５４において記載されている。
【００６９】
【表１】
2008515973.tif 000009
2008515973.tif 000010
【００７０】
【化８】
2008515973.tif 000011
【００７１】
１−（５−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン
標記化合物を実施例１の工程Ａからの５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾールで、実施例１の工程Ｂに記載された方法と同じ方法を使用して調製した。ＬＣ−ＭＳ：４．０７分。（ｍ／Ｚ＝３００．２）。
【００７２】
【化９】
2008515973.tif 000012
【００７３】
表２における実施例１９〜２１を実施例１の工程Ａからの５−メトキシ−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾールで開始して、実施例２に記載された方法と同じ方法を使用して調製した。
【００７４】
【表２】
2008515973.tif 000013
【００７５】
【化１０】
2008515973.tif 000014
【００７６】
１−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン
工程Ａ．７−メトキシ−２，２−ジメチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール
標記化合物を３，３−ジメチルシクロヘキサノンおよび３−メトキシフェニルヒドラジン塩酸を使用して、実施例１の工程Ａにおいて記載されている方法を使用して調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）δ７．５３（ｂｒ  ｓ，１ＮＨ）、７．３６（ｂｒ  ｄ，１Ｈ）、６．８４（ｄ，２．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．７７（ｄｄ，２．０  ＆  ８．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．８６（ｓ，３Ｈ）、２．６９（ｂｒ  ｔ，２Ｈ）、２．４９（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、１．６４（ｔ，６．３Ｈｚ，２Ｈ）、１．０７（ｓ，６Ｈ）。速く溶出する少量異性体をまた、ＳＧＣから単離した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）δ７．６２５（ｂｒ  ｓ，１ＮＨ）、７．０１（ｄｄ，８．０  ＆  ８．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．９２（ｄ，８．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．４９（ｄ，７．８Ｈｚ，１Ｈ）、３．９２（ｓ，３Ｈ）、２．９６（ｂｒ  ｔ，５．６Ｈｚ，２Ｈ）、２．４９（ｓ，２Ｈ）、１．６２（ｔ，６．３Ｈｚ，２Ｈ）、１．０７（ｓ，６Ｈ）。後者は、５−メトキシ−２，２−ジメチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾールと同定された。
【００７７】
工程Ｂ．１−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−３，３−ジメチルブタン−２−オン
標記化合物を７−メトキシ−２，２−ジメチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾールおよび１−ブロモ−３，３−ジメチルブタン−２−オンを使用して、実施例１の工程Ｂにおいて記載されている方法を使用して調製した。ＬＣ−ＭＳ：４．２４分。（ｍ／Ｚ＝３２８．２、３５０）。
【００７８】
【化１１】
2008515973.tif 000015
【００７９】
４−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）−２，２，７，７−テトラメチルオクタン−３，６−ジオン
標記化合物を実施例２２に対する精製中に単離した。ＬＣ−ＭＳ：４．９０分。（ｍ／Ｚ＝４４８．３、４２６．２）。
【００８０】
【化１２】
2008515973.tif 000016
【００８１】
９−（３，３−ジメチルブチル）−７−メトキシ−２，２−ジメチル−２，３，４、９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール
標記化合物を実施例２２の工程Ａからの７−メトキシ−２，２−ジメチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾール１７．２ｍｇの溶液に、３．６ｍｇの６０％ＮａＨ油分散体を添加し、次いで、１３．６ｍｇの１−ブロモ−３，３−ジメチルブタンを添加して調製した。４５℃で３時間加熱後、反応混合物を１：１ジオキサンおよび水で希釈し、０．１％ＴＦＡを伴う水における７５〜１００％ＭｅＣＮ勾配を使用して、直接ＲＰ−ＨＰＬＣで精製し、凍結乾燥後に無色固体として標記化合物を得た。ＬＣ−ＭＳ：４．８４分。（ｍ／Ｚ＝３１４．３）。
【００８２】
【化１３】
2008515973.tif 000017
【００８３】
Ｎ，Ｎ−ジブチル−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド
工程Ａ．（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）酢酸
標記化合物を実施例２の工程Ａにおいて記載された方法を使用して、実施例２２の工程Ａからの７−メトキシ−２，２−ジメチル−２，３，４，９−テトラヒドロ−１Ｈ−カルバゾールから調製した。粗生成物を０．１％ＴＦＡを伴う水における５５〜１００％ＭｅＣＮ勾配を使用して、ＲＰ−ＨＰＬＣでさらに精製し、純粋な標記化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）δ７．３８（ｄ，８．４Ｈｚ，１Ｈ）、６．７９（ｄｄ，２．３  ＆  ８．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．７１（ｄ，２．２Ｈｚ，１Ｈ）、４．７３（ｓ，２Ｈ）、３．８７（ｓ，３Ｈ）、２．７０（ｔ，６．３Ｈｚ，２Ｈ）、２．４１（ｓ，２Ｈ）、１．６４（ｔ，６．４Ｈｚ，２Ｈ）、１．０８（ｓ，６Ｈ）。４．７３ｐｐｍシグナルを放射するＮＯＥ差スペクトルは、６．７１および２．４１ｐｐｍにおけるポジティブＮＯＥを与えた。ＬＣ−ＭＳ：３．５５分。（ｍ／Ｚ＝２８８．２）。
【００８４】
工程Ｂ．Ｎ，Ｎ−ジブチル−２−（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド
０における、上記工程Ａからの（７−メトキシ−２，２−ジメチル−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）酢酸、１１．５ｍｇのＨＯＢｔ、および９．７ｍｇのジブチルアミンに、２４ｍｇのＥＤＣおよび１９．４ｍｇのＤＩＥＡを添加した。反応混合物を４０℃で２時間加熱し、０．１％ＴＦＡを伴う水における７５〜１００％ＭｅＣＮ勾配を使用して、ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。標記化合物を凍結乾燥後に無色固体として得た。ＬＣ−ＭＳ：４．４６分。（ｍ／Ｚ＝３９９．３、４２１．３）。
【００８５】
【化１４】
2008515973.tif 000018
【００８６】
表３における実施例２６〜４０を実施例２５の工程Ｂにおいて記載されている方法と同じ方法を使用して、適切なアミンから調製した。実施例３６〜３９に対して使用されたアミンの調製は、全体が参照として本明細書に組み込まれるＷＯ２００４／０４３５４において記載されている。
【００８７】
【表３】
2008515973.tif 000019
2008515973.tif 000020
【００８８】
【化１５】
2008515973.tif 000021
【００８９】
９−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−７−メトキシ−１，２，３，９−テトラヒドロ−４Ｈ−カルバゾール−４−オン
工程Ａ．３−［（３−メトキシフェニル）アミノ］シクロヘキス−２−エン−１−オン
２５．６２ｇの３−メトキシアニリンおよび２４．７７ｇのシクロヘキサン−１，３−ジオンの混合物を１３０℃で、窒素下で６．５時間加熱した。形成された水を蒸留により除去した。残渣を３００ｍＬのクロロホルムに溶解し、約１０ｇの活性炭と一緒に、２〜３時間撹拌し、濾過し、蒸発させて、標記化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）δ７．２６（ｔ，８．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．７２〜６．７９（ｍ，３Ｈ）、６．１３（ｂｒ  ｓ，１ＮＨ）、５．６５（ｓ，１Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、２．５２（ｔ，６．３Ｈｚ，２Ｈ）、２．３９（ｔ，６．５Ｈｚ，２Ｈ）、２．０４（ｔｔ，６．５  ＆  ６．３Ｈｚ，２Ｈ）。この粗生成物をさらなる精製なしで使用した。
【００９０】
工程Ｂ．７−メトキシ−１，２，３，９−テトラヒドロ−４Ｈ−カルバゾール−４−オン
１．５ＬのＭｅＣＮにおける、上記工程Ａからの３−［（３−メトキシフェニル）アミノ］シクロヘキス−２−エン−１−オンに、６．６０ｇのＰｄ（ＯＡｃ）２、および８０．１０ｇのＣｕ（ＯＡｃ）２を添加した。この混合物を窒素下で２６時間還流した。温かい混合物をさらに２．５ＬのＭｅＣＮと一緒に、２００ｇのシリカゲルを通して濾過した。濾液を蒸発させて固体を得た。この固体を５００ｍＬの水と一緒に沸騰させ、室温まで冷却し、濾過した。濾液から緑色が消えるまで固体を水で洗浄した。この粗生成物をＭｅＣＮを使用するＳＧＣを使用して精製した。ＳＧＣからの生成物を１：１ＥｔＯＡｃおよびＭｅＣＮでさらに洗浄し、褐色固体として標記化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，５００ＭＨｚ）δ７．８７（ｄ，８．４Ｈｚ，１Ｈ）、６．９０５（ｄ，２．１Ｈｚ，１Ｈ）、６．８２（ｄｄ，２．１  ＆  ８．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．８２（ｓ，３Ｈ）、２．９８（ｔ，６．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．５３（ｔ，６．５Ｈｚ，２Ｈ）、２．２２（ｔｔ，６．２  ＆  ６．５Ｈｚ，２Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：２．３２分。（ｍ／Ｚ＝２１６．１）。
【００９１】
工程Ｃ．９−（３，３−ジメチル−２−オキソブチル）−７−メトキシ−１，２，３，９−テトラヒドロ−４Ｈ−カルバゾール−４−オン
１ｍＬの無水ＤＭＦにおける、上記工程Ｂからの７−メトキシ−１，２，３，９−テトラヒドロ−４Ｈ−カルバゾール−４−オンに、２９．５ｍｇの１−ブロモ−３，３−ジメチルブタン−２−オンおよび５３．８ｍｇの炭酸セシウムを添加した。室温で２４時間後に、反応混合物を１：１ジオキサンおよび水で希釈し、０．１％ＴＦＡを伴う水における５０〜１００％ＭｅＣＮ勾配を使用して、ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。標記化合物を凍結乾燥後に無色固体として得た。ＬＣ−ＭＳ：３．０９分。（ｍ／Ｚ＝３１４．１）。
【００９２】
【化１６】
2008515973.tif 000022
【００９３】
９−（３，３−ジメチルブチル）−７−メトキシ−１，２，３，９−テトラヒドロ−４Ｈ−カルバゾール−４−オン
１ｍＬの無水ＤＭＦにおける、実施例４１の工程Ｂからの７−メトキシ−１，２，３，９−テトラヒドロ−４Ｈ−カルバゾール−４−オンに、２７．２ｍｇの１−ブロモ−３，３−ジメチルブタンおよび５３．８ｍｇの炭酸セシウムを添加した。反応混合物を４５℃で１時間、３５℃で３日間加熱した。室温まで冷却後、反応混合物を１：１ジオキサンおよび水で希釈し、０．１％ＴＦＡを伴う水における６０〜１００％ＭｅＣＮ勾配を使用して、ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。標記化合物を凍結乾燥後に無色固体として得た。ＬＣ−ＭＳ：３．６６分。（ｍ／Ｚ＝３００．２、３２２．１）。
【００９４】
【化１７】
2008515973.tif 000023
【００９５】
Ｎ，Ｎ−ジブチル−２−（７−メトキシ−４−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド
工程Ａ．エチル（７−メトキシ−４−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセテート
４０ｍＬの無水ＤＭＦおける、実施例４１の工程Ｂからの７−メトキシ−１，２，３，９−テトラヒドロ−４Ｈ−カルバゾール−４−オン１．８２２ｇの溶液に、１．４８ｇのエチルブロモアセテートおよび２．８９７ｇの炭酸セシウムを添加した。混合物を室温で３日間撹拌後、３５０ｍＬの水で希釈し、４×１００ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出した。合わせたＥｔＯＡｃ抽出物を水（３×１５０ｍＬ）および飽和ブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させて、黄色固体として標記化合物を得た。それは、３０ｍＬのＥｔＯＡｃから、白っぽい固体として再結晶化することができる。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）δ８．１５（ｄ，８．７Ｈｚ，１Ｈ）、６．９４（ｄｄ，２．２  ＆  ８．７Ｈｚ，１Ｈ）、６．７３（ｄ，２．１Ｈｚ，１Ｈ）、４．７７（ｓ，２Ｈ）、４．２６（ｑ，７．１Ｈｚ，２Ｈ）、３．８８（ｓ，３Ｈ）、２．９０（ｔ，６．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．５９〜２．６２（ｍ，２Ｈ）、２．２６〜２．３１（ｍ，２Ｈ）、１．３０（ｔ，７．３Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：２．８５分。（ｍ／Ｚ＝３０２．１，３２４．０）。
【００９６】
工程Ｂ．（７−メトキシ−４−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）酢酸
５０ｍＬのＭｅＯＨにおける、上記工程Ａからのエチル（７−メトキシ−４−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセテート１．１７ｇ、４．１５ｍＬの水、および０．８５ｍＬの５Ｎ  ＮａＯＨの混合物を３５℃で、一晩中加熱した。溶媒を減圧下で除去した。残渣を水に溶解し、５０ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出した。この抽出物は棄てた。水性相を１ｍＬの濃ＨＣｌで酸性化し、３×７５ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出した。合わせたものを飽和ブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させて、黄色固体として標記化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＣＮ，５００ＭＨｚ）δ９．７９（ｂｒ  ｓ，１０Ｈ）、７．９４（ｄ，８．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．９２（ｄ，２．３Ｈｚ，１Ｈ）、６．８６（ｄｄ，２．２  ＆  ８．６Ｈｚ，１Ｈ）、４．９１（ｓ，２Ｈ）、３．８３（ｓ，３Ｈ）、２．８７（ｔ，６．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．４６〜２．４９（ｍ，２Ｈ）、２．１７〜２．２２（ｍ，２Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：２．３７分。（ｍ／Ｚ＝２７４．１）。
【００９７】
工程Ｃ．Ｎ，Ｎ−ジブチル−２−（７−メトキシ−４−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）アセトアミド
０．９ｍＬの無水ＤＭＦにおける、上記工程Ｂからの（７−メトキシ−４−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−９Ｈ−カルバゾール−９−イル）酢酸２０．５ｍｇの溶液に、１７．２ｍｇのＨＯＢｔ、１４．５ｍｇのジブチルアミン、２８．８ｍｇのＥＤＣ、および２９．１ｍｇのＤＩＥＡを添加した。室温で一晩中放置した後、反応混合物を０．１％ＴＦＡを伴う水における５０〜１００％ＭｅＣＮ勾配を使用して、ＲＰ−ＨＰＬＣで精製した。標記化合物を凍結乾燥後に無色固体として得た。ＬＣ−ＭＳ：３．５０分。（ｍ／Ｚ＝３８５．１）。
【００９８】
【化１８】
2008515973.tif 000024
【００９９】
表４における実施例４４〜５８を実施例４３の工程Ｃにおいて記載されている方法と同じ方法を使用して、適切なアミンから調製した。実施例５４〜５７に対して使用されたアミンの調製は、全体が参照として本明細書に組み込まれるＷＯ２００４／０４３５４において記載されている。
【０１００】
【表４】
2008515973.tif 000025
【０１０１】
機能分析
Ａ．Ｍａｘｉ−Ｋチャンネル
化合物の活性はまた、以下の分析により定量化することができる。
【０１０２】
Ｍａｘｉ−Ｋチャンネルの阻害剤の同定は、ＨＥＫ−２９３細胞におけるチャンネルのアルファおよびベータ１サブユニット両方のトランスフェクション後、およびＨＥＫ−２９３細胞の内因性カリウム伝導性を選択的に排除するカリウムチャンネルブロッカーと一緒に培養した後に、細胞の静止電位を設定するための、発現したＭａｘｉ−Ｋチャンネルの能力に基づくものである。Ｍａｘｉ−Ｋチャンネル阻害剤が存在しない場合は、遺伝子移入ＨＥＫ−２９３細胞は、Ｍａｘｉ−Ｋチャンネルの活性の結果である、ＥＫに近い、負側の、過分極膜電位（−８０ｍＶ）を示す。Ｍａｘｉ−Ｋチャンネルブロッカーと一緒の培養によるＭａｘｉ−Ｋチャンネルの閉塞は、細胞脱分極の原因となる。膜電位における変化は、２つの成分、供与体クマリン（ＣＣ２ＤＭＰＥ）および受容体オキサノール（ＤｉＳＢＡＣ２（３））を使用する、電圧感応性蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）染料対で決定することができる。
【０１０３】
オキサノールは、親油性アニオンであり、膜電位によって膜全体に分布する。正常状態の下では、細胞の内側が、外側に関して負である場合は、オキサノールは、膜の外側小葉で蓄積され、クマリンの励起が、ＦＲＥＴを引き起こす原因となる。膜の脱分極を引き起こす状態は、細胞の内側へのオキサノールの再分布を引き起こし、結果として、ＦＲＥＴにおける減少の原因となる。したがって、比率変化（供与体／受容体）は、テスト化合物が、Ｍａｘｉ−Ｋチャンネルを活発に閉塞する場合に決定する膜の脱分極後に増加する。
【０１０４】
ＨＥＫ−２９３細胞は、受託番号ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１５７３の下で、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、１２３０１  Ｐａｒｋｌａｗｎ  Ｄｒｉｖｅ、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、Ｍａｒｙｌａｎｄ、２０８５２から入手した。微生物に対する一般からのアクセスに関するいずれの制限も、特許発行により確定的に除去される。
【０１０５】
ＨＥＫ−２９３細胞におけるＭａｘｉ−Ｋチャンネルのアルファおよびベータ１サブユニットのトランスフェクションは、次の様にして行われた：ＨＥＫ−２９３細胞を１００ｍｍの組織培養処置皿において、皿当たり３×１０６細胞の密度で蒔き、合計５枚の皿を用意した。細胞を１０％ウシ胎仔血清、１Ｘ  Ｌ−グルタミン、および１Ｘ  ペニシリン／ストレプトマイシンで補給されるダルベッコ変性イーグル培地（ＤＭＥＭ）からなる媒体において、３７℃、１０％ＣＯ２で成長させた。Ｍａｘｉ−Ｋ  ｈα（ｐＣＩｎｅｏ）およびＭａｘｉ−Ｋ  ｈβ１（ｐＩＲＥＳｐｕｒｏ）ＤＮＡでのトランスフェクションのために、１５０μｌのＦｕＧＥＮＥ６３を血清なし／フェノールレッドなしのＤＭＥＭの１０ｍｌ中に滴状添加し、室温で５分間培養した。次いで、ＦｕＧＥＮＥ６３溶液を各プラスミドＤＮＡの２５μｇを含むＤＮＡ溶液に滴状添加し、室温で３０分間培養した。培養期間後に、ＦｕＧＥＮＥ６３／ＤＮＡ溶液の２ｍｌを細胞の各プレートに滴状添加し、細胞を上述の条件と同じ条件下で２日増殖させた。２日目の最後で、細胞を６００μｇ／ｍｌＧ４１８および０．７５μｇ／ｍｌプロマイシンの両方で補給されるＤＭＥＭからなる選択媒体の下に置いた。細胞を別々のコロニーが形成されるまで成長させた。５つのコロニーが収集され、６ウェル組織培養処理皿に移した。合計７５のコロニーが収集された。細胞を融合性単層が得られるまで成長させた。次いで、細胞をチャンネルへの１２５Ｉ−イベリオトキシン−Ｄ１９Ｙ／Ｙ３６Ｆの結合を監視するアッセイを使用して、Ｍａｘｉ−Ｋチャンネルアルファおよびベータ１サブユニットの存在に対してテストした。次いで、１２５Ｉ−イベリオトキシン−Ｄ１９Ｙ／Ｙ３６Ｆ結合活性を発現する細胞をＶＩＰＲ装置で、蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）ＡＢＳ方法を使用して、遺伝子移入ＨＥＫ−２９３細胞の膜電位を調節するＭａｘｉ−Ｋチャンネルの能力を監視する機能分析において評価した。ノイズ比に対して最大のシグナルを与えるコロニーを希釈制限の対象とした。このために、細胞を約５細胞／ｍｌで再懸濁し、２００μｌを９６ウェル組織培養処理プレートにおける個々のウェルに蒔き、１ウェル当たり約１個の細胞を加えた。合計で２つの９６ウェルプレートを作った。融合性単層が形成された時に、細胞を６ウェル組織培養処理プレートに移した。合計で６２ウェルを移した。融合性単層が得られた時に、細胞をＦＲＥＴ−機能分析を使用してテストした。ノイズ比に対して最良のシグナルを与える遺伝子移入細胞を同定し、次の機能分析において使用した。
【０１０６】
機能分析のために：
次いで、遺伝子移入細胞（２Ｅ＋０６細胞／ｍＬ）を９６−ウェルポリ−Ｄ−リシンプレート上で、約１００，０００細胞／ウェルの密度で蒔き、約１６時間〜約２４時間培養する。細胞の媒体を吸引し、細胞をダルベッコのリン酸塩緩衝生理食塩水（Ｄ−ＰＢＳ）の１００μｌで１度洗浄する。ウェル当たり、Ｄ−ＰＢＳにおいて約９μＭのクマリン（ＣＣ２ＤＭＰＥ）−０．０２％プルロニック−１２７の１００μｌを添加し、ウェルを暗所において、約３０分間培養する。細胞をダルベッコのリン酸塩緩衝生理食塩水の１００μｌで２度洗浄し、（ｍＭ）１４０ＮａＣｌ、０．１ＫＣｌ、２ＣａＣｌ２、１ＭｇＣｌ２、２０Ｈｅｐｅｓ−ＮａＯＨ、ｐＨ７．４、１０グルコースにおけるオキサノール（ＤｉＳＢＡＣ２（３））の約４．５μＭの１００μｌを添加する。ＨＥＫ−２９３細胞の内因性カリウム伝導性の阻害剤の３マイクロモルを添加する。Ｍａｘｉ−Ｋチャンネルブロッカーを添加し（約０．０１マイクロモル〜約１０マイクロモル）、細胞を室温で、暗所において、約３０分間培養する。
【０１０７】
プレートを電圧／イオンプローブリーダー（ＶＩＰＲ）装置に掛け、ＣＣ２ＤＭＰＥおよびＤｉＳＢＡＣ２（３）両方の蛍光発光を１０秒間記録する。この点で、高カリウム溶液（ｍＭ）：１４０ＫＣｌ、２ＣａＣｌ２、１ＭｇＣｌ２、２０Ｈｅｐｅｓ−ＫＯＨ、ｐＨ７．４、１０グルコースの１００μｌを添加し、両染料の蛍光発光をさらに１０秒間記録する。ＣＣ２ＤＭＰＥ／ＤｉＳＢＡＣ２（３）比は、高カリウム溶液の添加前は、１に等しい。Ｍａｘｉ−Ｋチャンネル阻害剤が存在しない場合、高カリウム溶液の添加後の比は、１．６５〜２．０の間で変動する。Ｍａｘｉ−Ｋチャンネルが、知られている標準の化合物またはテスト化合物により完全に阻害されている場合は、この比は、１のままである。したがって、蛍光比における濃度依存性変化を観察することにより、Ｍａｘｉ−Ｋチャンネル阻害剤の活性を滴定することが可能である。
【０１０８】
本発明の化合物は、約１ｎＭ〜約２０μＭ、さらに好ましくは、約１０ｎＭ〜約５００ｎＭの範囲におけるＩＣ５０を伴い、蛍光比の濃度依存性阻害を引き起こすことが分かった。
【０１０９】
Ｂ．高伝導性カルシウム活性化カリウムチャンネルにおける化合物効果の電気生理学的分析
方法：
大伝導性カルシウム活性化カリウム（Ｍａｘｉ−Ｋ）チャンネルを通過する電流の流れを記録するパッチクランプを室温で、通常の方法（Ｈａｍｉｌｌ等、１９８１年、Ｐｆｌｕｅｇｅｒｓ  Ａｒｃｈｉｖ．３９１、８５頁〜１００頁）を使用して、Ｍａｘｉ−Ｋチャンネルのα−サブユニットを構造的に発現するＣＨＯ細胞、またはα−およびβ−サブユニットの両方を構造的に発現するＨＥＫ−２９３細胞から切除された膜パッチで作った。ガラス毛細管作製（Ｇａｒｎｅｒ  ＃７０５２またはＤｒｕｍｍｏｎｄ  ｃｕｓｔｏｍ  ｂｏｒｏｓｉｌｉｃａｔｅ  ｇｌａｓｓ  １−０１４−１３２０）を２段階で行い、約１〜２ミクロンの先端直径を持つマイクロピペットを用意した。ピペットを（ｍＭ）：１５０ＫＣｌ、１０Ｈｅｐｅｓ（４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンメタンスルホン酸）、１Ｍｇ、０．０１Ｃａを含み、ＫＯＨでｐＨ７．２０に調整された溶液で一般的に満たした。プラズマ膜およびピペット間に、高抵抗性（＞１０９オーム）シールを形成後、内側を外にして切除される膜パッチを形成するために、ピペットを細胞から引き出した。パッチを（ｍＭ）：１５０ＫＣｌ、１０Ｈｅｐｅｓ、５ＥＧＴＡ（エチレングリコールビス（β−アミノエチルエーテル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラ酢酸）、１〜５μＭの遊離Ｃａ濃度を生成するのに十分なＣａを含む浴溶液の中に切除し、ｐＨをＫＯＨで７．２に調整した。例えば、４．１９３ｍＭのＣａを１μＭの遊離濃度を与えるために、２２℃で添加した。ＥＰＣ９増幅器（ＨＥＫＡ  Ｅｌｅｋｔｒｏｎｉｃ、Ｌａｍｂｒｅｃｔ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を電圧調節および膜パッチを横切る電流の流れを測定するために使用した。先頭段階に対する入口をＡｇ／ＡｇＣｌワイヤーでピペット溶液に接続し、増幅器の底を０．２Ｍ  ＫＣｌにおいて溶解した寒天で充填した管でカバーされたＡｇ／ＡｇＣｌワイヤーで、浴溶液に接続した。Ｍａｘｉ−Ｋ電流の存在は、膜電位および細胞内カルシウム濃度に対するチャンネル開口確率の感度により確認した。
【０１１０】
データ収集は、ＰＵＬＳＥソフトウェア（ＨＥＫＡ  Ｅｌｅｋｔｒｏｎｉｃ）で制御し、ＰＵＬＳＥＦＩＴ（ＨＥＫＡ  Ｅｌｅｋｔｒｏｎｉｃ）およびＩｇｏｒ（Ｗａｖｅｍｅｔｒｉｃｓ、Ｏｓｗｅｇｏ、ＯＲ）ソフトウェアを使用して、後の分析のために、マッキントッシュコンピュータ（Ａｐｐｌｅ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒｓ）のハードドライブに蓄えた。
【０１１１】
結果：
Ｍａｘｉ−Ｋチャンネルについての本発明の化合物の効果を浴溶液の一定過融解を伴って、内側を外にして切除された膜パッチにおいて試験した。膜電位を−８０ｍＶに保持し、正膜電位（一般的に、＋５０ｍＶ）に対する短時間（１００〜２００ｍｓ）電圧工程をＭａｘｉ−Ｋチャンネルを一時的に開口させるために１５秒毎に１度適用した。各試験における正制御として、Ｍａｘｉ−Ｋ電流をパッチが、カルシウムが添加されていない標準浴溶液に、１ｍＭのＥＧＴＡを添加することより作られるカルシウムの低濃度（＜１０ｎＭ）に一時的に曝露された後に、パルス電位で排除した。各実験において閉塞されたチャンネルの画分を膜パッチの内側に対する特定化合物の適用により引き起こされたピーク電流における減少から計算した。化合物は、閉塞の定常状態水準が達成されるまで適用された。チャンネルブロックのＫ１値は、Ｈｉｌｌ式で、各化合物濃度において得られた画分閉塞を適合させることにより計算した。本発明において記載された化合物によるチャンネルブロックに対するＫ１値は、０．０１ｎＭ〜１０μＭを超える範囲である。
【国際調査報告】
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