(57)【要約】炎症性腸疾患の哺乳動物に化合物を投与することを含んで成る該疾患を処置する方法であって、化合物は下記式Iで示される方法を開示する：2008533158.tif 000024［式中、X、Y、B、R2、R3、R4、R5、R6およびnは、明細書中に定義するとおりである。］
2008533158.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
炎症性腸疾患の哺乳動物に化合物を投与することを含んで成る該疾患を処置する方法であって、化合物は下記式Iで示される方法：
【化１】
2008533158.tif 000018
［式中、
破線は、結合の存在または不存在を示し、線影付きくさび形は、α（下）配置を示し、中実三角形は、β（上）配置を示し；
Bは、単、二重または三重共有結合であり；
nは、0〜6であり；
Xは、CH2、SまたはOであり；
Yは、CO2Hの医薬的に許容される任意の塩、または、CO2R、CONR2、CONHCH2CH2OH、CON（CH2CH2OH）2、CH2OR、P（O）（OR）2、CONRSO2R、SONR2、または
【化２】
2008533158.tif 000019
であり；
Rは、H、C1〜6アルキルまたはC2〜6アルケニルであり；
R2およびR3は、同じかまたは異なっていてよいC1〜6直鎖アルキルであり、互いに結合して、それらが共に結合している炭素を組み込んだ環を形成してもよく；
R4は、水素、R、C（=O）R、またはR4が有効に水素になるように生理的条件下に容易に除去される任意の基であり；
R5は、水素またはRであり；
R6は、
i）  水素であるか；
ii）  1個またはそれ以上の二重または三重結合を有してもよい1〜8個の炭素原子を有する直鎖または分岐鎖炭化水素、または、1〜3個の炭素または水素原子がOまたはハロゲンで置き替えられていてよい該炭化水素の酸素またはハロゲン誘導体であるか；または
iii）  アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、C3〜8シクロアルキルオキシ、C3〜8シクロアルキル、C6〜10アリールまたはC3〜10ヘテロアリール（1個またはそれ以上の炭素がN、OまたはSで置き替えられている）であって；ハロゲン、トリハロメチル、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、C6〜10アリール、C3〜10ヘテロアリール、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、C1〜6アルキル、OR、SRおよびSO2Rから成る群から選択される1個またはそれ以上の置換基を有してもよい］。
【請求項２】
式Iの化合物が、下記式IIIによっても示される請求項1に記載の方法：
【化３】
2008533158.tif 000020
［式中、Yは、CO2R、またはCO2Hの医薬的に許容される任意の塩である］。
【請求項３】
R6が、C6〜10アリール、または1個またはそれ以上の炭素がN、OまたはSで置き替えられているC3〜10ヘテロアリールであり、ハロゲン、トリハロメチル、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、C1〜6アルキル、OR、SRおよびSO2Rから成る群から選択される1個またはそれ以上の置換基を有してもよい請求項2に記載の方法。
【請求項４】
R6が、ナフチル、ベンゾフラニルまたはベンゾチエニルであり、ハロゲン、トリハロメチル、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、C1〜6アルキル、OR、SRおよびSO2Rから成る群から選択される1個またはそれ以上の置換基を含有してもよい請求項4に記載の方法。
【請求項５】
Yが、CO2HまたはCO2Meである請求項5に記載の方法。
【請求項６】
R6が、3-クロロベンゾチエン-2-イルである請求項6に記載の方法。
【請求項７】
nが2である請求項7に記載の方法。
【請求項８】
Bが単結合である請求項8に記載の方法。
【請求項９】
式Iの化合物が、下記式IVによっても示される請求項2に記載の方法：
【化４】
2008533158.tif 000021
［式中、
Yは、CO2R、またはCO2Hの医薬的に許容される任意の塩であり；
R6は、C6〜10アリール、または1個またはそれ以上の炭素がN、OまたはSで置き替えられているC3〜10ヘテロアリールであり、ハロゲン、トリハロメチル、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、C1〜6アルキル、OR、SRおよびSO2Rから成る群から選択される1個またはそれ以上の置換基を有してもよい］。
【請求項１０】
Yが、CO2HまたはCO2Meである請求項10に記載の方法。
【請求項１１】
R6がフェニルである請求項11に記載の方法。
【請求項１２】
Bが二重結合である請求項12に記載の方法。
【請求項１３】
R6が、ナフチル、ベンゾフラニルまたはベンゾチエニルであり、ハロゲン、トリハロメチル、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、C1〜6アルキル、OR、SRおよびSO2Rから成る群から選択される1個またはそれ以上の置換基を有してもよい請求項11に記載の方法。
【請求項１４】
R6が3-クロロベンゾチエン-2-イルである請求項14に記載の方法。
【請求項１５】
Bが二重または三重結合である請求項15に記載の方法。
【請求項１６】
化合物が、下記化合物から成る群から選択される請求項1に記載の方法：
（3-｛（1R,4S,5S）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチルスルファニル｝-プロピルスルファニル）-酢酸メチルエステル；
（3-｛（1R,4S,5S）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチルスルファニル｝-プロピルスルファニル）-酢酸；
（Z）-7-｛（1R,4S,5R）-5-［（E）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル｝-ヘプタ-5-イン酸メチルエステル；
（Z）-7-｛（1R,4S,5R）-5-［（E）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル｝-ヘプタ-5-イン酸；
（Z）-7-｛（1R,4S,5R）-5-［（E）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル｝-ヘプタ-5-エン酸メチルエステル；
（Z）-7-｛（1R,4S,5R）-5-［（E）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル｝-ヘプタ-5-エン酸；
7-［（1R,4S,5R）-4-ヒドロキシ-5-（（E）-（S）-3-ヒドロキシ-オクタ-1-エニル）-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-イン酸メチルエステル；
7-［（1R,4S,5R）-4-ヒドロキシ-5-（（E）-（S）-3-ヒドロキシ-オクタ-1-エニル）-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-イン酸；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-4-ヒドロキシ-5-（（E）-（S）-3-ヒドロキシ-オクタ-1-エニル）-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-4-ヒドロキシ-5-（（E）-（S）-3-ヒドロキシ-オクタ-1-エニル）-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸メチルエステル；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-4-ヒドロキシ-5-（（E）-3-ヒドロキシ-4-フェニル-ブタ-1-エニル）-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-4-ヒドロキシ-5-（（E）-3-ヒドロキシ-4-フェニル-ブタ-1-エニル）-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸メチルエステル；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-4-ヒドロキシ-5-（（E）-3-ヒドロキシ-5-フェニル-ペンタ-1-エニル）-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸メチルエステル；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-4-ヒドロキシ-5-（（E）-3-ヒドロキシ-5-フェニル-ペンタ-1-エニル）-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸；
7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタン酸；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-5-（4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブチル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸エチルアミド；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸ジエチルアミド；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸（2-ヒドロキシ-エチル）-アミド；
（3S,4R,5R）-4-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-3-ヒドロキシ-2,2-ジメチル-5-［（Z）-6-（1-H-テトラゾル-5-イル）-ヘキサ-2-エニル］-シクロペンタノン；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸アミド；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸メチルエステル；
7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-イン酸メチルエステル；および
7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-イン酸。
【請求項１７】
炎症性腸疾患が潰瘍性大腸炎である請求項1に記載の方法。
【請求項１８】
炎症性腸疾患がクローン病である請求項1に記載の方法。
【請求項１９】
下記式Iで示される化合物および第二の薬物を含有する組成物：
【化５】
2008533158.tif 000022
［式中、
破線は、結合の存在または不存在を示し、線影付きくさび形は、α（下）配置を示し、中実三角形は、β（上）配置を示し；
Bは、単、二重または三重共有結合であり；
nは、0〜6であり；
Xは、CH2、SまたはOであり；
Yは、CO2Hの医薬的に許容される任意の塩、または、CO2R、CONR2、CONHCH2CH2OH、CON（CH2CH2OH）2、CH2OR、P（O）（OR）2、CONRSO2R、SONR2、または
【化６】
2008533158.tif 000023
であり；
Rは、H、C1〜6アルキルまたはC2〜6アルケニルであり；
R2およびR3は、同じかまたは異なっていてよいC1〜6直鎖アルキルであり、互いに結合して、それらが共に結合している炭素を組み込んだ環を形成してもよく；
R4は、水素、R、C（=O）R、またはR4が有効に水素になるように生理的条件下に容易に除去される任意の基であり；
R5は、水素またはRであり；
R6は、
iv）  水素であるか；
v）  1個またはそれ以上の二重または三重結合を有してもよい1〜8個の炭素原子を有する直鎖または分岐鎖炭化水素、または、1〜3個の炭素または水素原子がOまたはハロゲンで置き替えられていてよい該炭化水素の酸素またはハロゲン誘導体であるか；または
vi）  アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、C3〜8シクロアルキルオキシ、C3〜8シクロアルキル、C6〜10アリールまたはC3〜10ヘテロアリール（1個またはそれ以上の炭素がN、OまたはSで置き替えられている）であって；ハロゲン、トリハロメチル、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、C6〜10アリール、C3〜10ヘテロアリール、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、C1〜6アルキル、OR、SRおよびSO2Rから成る群から選択される1個またはそれ以上の置換基を有してもよい］。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
プロスタグランジンは、下記式で示されるプロスタン酸の誘導体であるといえる：
【化１】
2008533158.tif 000003
【０００２】
プロスタン酸骨格の脂環上の構造および置換基によって、様々な種類のプロスタグランジンが知られている。更なる分類は、側鎖中の不飽和結合数に基づいてなされ、プロスタグランジンの種類の後に数字で示され［例えば、プロスタグランジンＥ1（ＰＧＥ1）、プロスタグランジンＥ2（ＰＧＥ2）］、また、脂環上の置換基の配置に基づいてもなされ、αまたはβで示される［例えば、プロスタグランジンＦ2α（ＰＧＦ2β）］。
【０００３】
プロスタグランジンは緑内障の長期処置に好適である（例えば、Ｂito，Ｌ．Ｚ．，Ｂiological  Ｐrotection  with  Ｐrostaglandins，Ｃohen，Ｍ．Ｍ．編，Ｂoca  Ｒaton，Ｆla，ＣＲＣ  Ｐress  Ｉnc．，１９８５，第２３１〜２５２頁；並びにＢito，Ｌ．Ｚ．，Ａpplied  Ｐharmacology  in  the  Ｍedical  Ｔreatment  of  Ｇlaucomas，Ｄrance，Ｓ．Ｍ．およびＮeufeld，Ａ．Ｈ．編，Ｎew  Ｙork，Ｇrune  ＆  Ｓtratton，１９８４，第４７７〜５０５頁参照）。そのようなプロスタグランジンは、ＰＧＦ2α、ＰＧＦ1α、ＰＧＥ2、およびそれらの脂溶性エステル(例えば、１−イソプロピルエステルのようなＣ1−Ｃ2アルキルエステル)を包含する。
【０００４】
降圧作用、胃酸分泌抑制作用および平滑筋刺激作用を有するある種の15,15−ジメチルプロスタグランジンが、改善された代謝安定性を有することが知られている。それらは次のような文献に記載されている：
Pernetら, 米国特許第4,117,014号（1976年12月23日出願）;
Pernet, Andre G. ら, Prostaglandin analogs modified at the 10 and 11 positions, Tetrahedron Letters, (41), 1979, pp. 3933-3936;
Plantema, Otto G. ら, Synthesis of (.+-.)-10.10-dimethylprostaglandin E1 methyl ester and its 15-epimer, Journal of the Chemical Society, Perkin Transactions 1: Organic and Bio-organic Chemistry (1972-1999), (3), 1978, pp. 304-308;
Plantema, O. G. ら, Synthesis of 10,10-dimethylprostaglandin E1, Tetrahedron Letters, (51), 1975, 4039;
Hamon, A.ら, Synthesis of (+-)- and 15-EPI(+-)-10,10-Dimethylprostaglandin E1, Tetrahedron Letters, Elsevier Science Publishers, Amsterdam, NL, no. 3, January 1976, pp. 211-214; および
Patent Abstracts of Japan, Vol. 0082, no. 18 (C-503), June 10, 1988 & JP 63 002972 A (Nippon Iyakuhin Kogyo KK), 7 January 1988。
これら文献の開示を引用により本発明の一部とする。
【０００５】
炎症性腸疾患 (IBD) は、大腸および小腸の炎症を特徴とする疾患群で、下痢、痛み、および体重減少のような症状が現れる。非ステロイド性抗炎症剤がIBD発症の危険性と関連付けられており、Kabashimaおよび共同研究者が最近開示したところによると、「EP4は、粘膜保全を保ち、先天免疫を抑制し、CD4+T細胞の増殖および活性化をダウンレギュレートするよう作用する。このような知見は、NSAIDによるIBDのメカニズムを解明しただけでなく、IBDの予防および治療におけるEP4選択的アゴニストの有用性を示唆するものでもある。」 (Kabashima ら, The Journal of Clinical Investigation, 2002年4月、第9巻、883-893)
【発明の開示】
【０００６】
炎症性腸疾患の哺乳動物に化合物を投与することを含んで成る該疾患の処置方法を開示する。該化合物は下記式Iで示される：
【化２】
2008533158.tif 000004
【０００７】
［式中、
破線は、結合の存在または不存在を示し、線影付きくさび形は、α（下）配置を示し、中実三角形は、β（上）配置を示し；
Bは、単、二重または三重共有結合であり；
nは、0〜6であり；
Xは、CH2、SまたはOであり；
Yは、CO2Hの医薬的に許容される任意の塩、または、CO2R、CONR2、CONHCH2CH2OH、CON（CH2CH2OH）2、CH2OR、P（O）（OR）2、CONRSO2R、SONR2、または
【化３】
2008533158.tif 000005
であり；
Rは、H、C1〜6アルキルまたはC2〜6アルケニルであり；
【０００８】
R2およびR3は、同じかまたは異なっていてよいC1〜6直鎖アルキルであり、互いに結合して、それらが共に結合している炭素を組み込んだ環を形成してもよく；
R4は、水素、R、C（=O）R、またはR4が有効に水素になるように生理的条件下に容易に除去される任意の基であり；
R5は、水素またはRであり；
R6は、
i）  水素であるか；
ii）  1個またはそれ以上の二重または三重結合を有してもよい1〜8個の炭素原子を有する直鎖または分岐鎖炭化水素、または、1〜3個の炭素または水素原子がOまたはハロゲンで置き替えられていてよい該炭化水素の酸素またはハロゲン誘導体であるか；または
iii）  アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、C3〜8シクロアルキルオキシ、C3〜8シクロアルキル、C6〜10アリールまたはC3〜10ヘテロアリール（1個またはそれ以上の炭素がN、OまたはSで置き替えられている）であって；ハロゲン、トリハロメチル、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、C6〜10アリール、C3〜10ヘテロアリール、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、C1〜6アルキル、OR、SRおよびSO2Rから成る群から選択される1個またはそれ以上の置換基を有してもよい］。
【０００９】
それに関連する組成物および薬剤をも開示する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本書に記載する化合物を哺乳動物に投与することによって、炎症性腸疾患を処置しうる。炎症性腸疾患には、腸の炎症によって特徴付けられる様々な疾患があり、潰瘍性大腸炎およびクローン病が含まれるが、それらに限定されない。処置は、経口投与、坐剤もしくは非経口投与によって、または他の適当な方法で行いうる。
【００１１】
本発明の処置に使用する化合物は、下記式Iで示される：
【化４】
2008533158.tif 000006
【００１２】
本発明化合物の好ましい群は、下記の構造式IIを有さない化合物を包含する：
【化５】
2008533158.tif 000007
［式中、
Aは、CO2H、CO2MeまたはCO2Etであり；
Dは、単、二重または三重共有結合であり；
Eは、3〜7個の炭素原子を有する直鎖、分岐鎖またはシクロアルキル鎖、トリフルオロメチルブチル、ヒドロキシルアルキルまたはCH2R7であり、R7は、フェニル、シクロペンチル、フェノキシ、クロロフェノキシ、プロポキシまたは-CH2SCH2CH3であり；
Jは、水素、R、C（=O）R、またはR4が有効に水素になるように生理的条件下に容易に除去される任意の基であり；
Gは、HまたはCH3である］。
【００１３】
本明細書に使用される記号「Me」および「Et」は、当業者によって「メチル」および「エチル」と一般に称される成分を意味する。
【００１４】
式Iおよび式IIに関連した他の化合物において、AはCO2R8であり、R8は3〜6個の炭素原子を有する直鎖、分岐鎖または環式アルキル基である。
【００１５】
他の好ましい群は、式IIIの化合物を包含する：
【化６】
2008533158.tif 000008
【００１６】
他の好ましい群は、式IVの化合物を包含する：
【化７】
2008533158.tif 000009
【００１７】
他の好ましい群は、式Vの化合物を包含する：
【化８】
2008533158.tif 000010
［式中、R2およびR3の少なくとも1つはメチルでない］。
【００１８】
前記の式において、置換基および記号は、先に定義したとおりである。
前記の式において、
好ましくは、Yは、CO2Hの医薬的に許容される任意の塩、またはCO2Rであり、より好ましくは、Yは、CO2HまたはCO2Meであり；
好ましくは、nは2であり；
好ましくは、R6は、C6〜10アリールまたはC3〜10ヘテロアリールであり、ハロゲン、トリハロメチル、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、C1〜6アルキル、OR、SRおよびSO2Rから成る群から選択される1個またはそれ以上の置換基を有してもよく、より好ましくは、R6は、フェニル、ナフチル、ベンゾフラニルまたはベンゾチエニルであり、ハロゲン、トリハロメチル、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、C1〜6アルキル、OR、SRおよびSO2Rから成る群から選択される1個またはそれ以上の置換基を有してもよく、最も好ましくは、3-クロロベンゾチエン-2-イルである。
【００１９】
他の好ましい群は、式XIIIの化合物を包含する：
【化９】
2008533158.tif 000011
［式中、
Bは、単結合または二重結合を表し；
R6は、ナフチル、ベンゾフラニルまたはベンゾチエニルであり、ハロゲン、トリハロメチル、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、C1〜6アルキル、OR、SRおよびSO2Rから成る群から選択される1個またはそれ以上の置換基を有してもよい］。
【００２０】
本発明の方法に有用な化合物は、当業者に既知の方法で製造できる。そのようないくつかの化合物の合成を、反応式2〜7に示す。ここに示すこれらの反応式は、例示にすぎず、本発明の範囲をいかなる方法においても限定するものではない。いくつかの方法があるが、式VIの化合物の式VIIの化合物への還元をこれらの化合物の合成に組み込むことができ、これを行なう1つの都合のよい方法を反応式2に示す。この反応式において、化合物2は式VIの化合物であり、化合物3は式VIIの化合物である。しかし、当業者は、還元を使用して本発明化合物を製造する多くの方法があることを理解する。
【００２１】
【表１−１】
2008533158.tif 000012
【００２２】
【表１−２】
2008533158.tif 000013
【００２３】
【表１−３】
2008533158.tif 000014
【００２４】
下記に列挙し、表1に示した化合物は、本発明化合物の特に好ましい例である。
（3-｛（1R,4S,5S）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチルスルファニル｝-プロピルスルファニル）-酢酸メチルエステル（21、22）；
（3-｛（1R,4S,5S）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチルスルファニル｝-プロピルスルファニル）-酢酸（23、24）；
（Z）-7-｛（1R,4S,5R）-5-［（E）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル｝-ヘプタ-5-イン酸メチルエステル（34、35）；
（Z）-7-｛（1R,4S,5R）-5-［（E）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル｝-ヘプタ-5-イン酸（36、37）；
（Z）-7-｛（1R,4S,5R）-5-［（E）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル｝-ヘプタ-5-エン酸メチルエステル（38、39）；
（Z）-7-｛（1R,4S,5R）-5-［（E）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル｝-ヘプタ-5-エン酸（40、41）；
【００２５】
7-［（1R,4S,5R）-4-ヒドロキシ-5-（（E）-（S）-3-ヒドロキシ-オクタ-1-エニル）-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-イン酸メチルエステル（42）；
7-［（1R,4S,5R）-4-ヒドロキシ-5-（（E）-（S）-3-ヒドロキシ-オクタ-1-エニル）-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-イン酸（43）；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-4-ヒドロキシ-5-（（E）-（S）-3-ヒドロキシ-オクタ-1-エニル）-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸（44）；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-4-ヒドロキシ-5-（（E）-（S）-3-ヒドロキシ-オクタ-1-エニル）-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸メチルエステル（45）；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-4-ヒドロキシ-5-（（E）-3-ヒドロキシ-4-フェニル-ブタ-1-エニル）-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸（46、47）；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-4-ヒドロキシ-5-（（E）-3-ヒドロキシ-4-フェニル-ブタ-1-エニル）-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸メチルエステル（48、49）；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-4-ヒドロキシ-5-（（E）-3-ヒドロキシ-5-フェニル-ペンタ-1-エニル）-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸メチルエステル（50、51）；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-4-ヒドロキシ-5-（（E）-3-ヒドロキシ-5-フェニル-ペンタ-1-エニル）-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸（52、53）；
【００２６】
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸（54、55）；
7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタン酸（56、57）；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-5-（4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブチル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸（58、59）；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸エチルアミド（60、61）；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸ジエチルアミド（62、63）；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸（2-ヒドロキシ-エチル）-アミド（64、65）；
【００２７】
（3S,4R,5R）-4-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-3-ヒドロキシ-2,2-ジメチル-5-［（Z）-6-（1-H-テトラゾル-5-イル）-ヘキサ-2-エニル］-シクロペンタノン（66、67）；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸アミド（68、69）；
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸メチルエステル（70、71）；
7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-イン酸メチルエステル（72、73）；
7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-イン酸（74、75）。
【００２８】
医薬組成物は、少なくとも１種の本発明化合物または医薬的に許容し得るその酸付加塩の処置有効量を活性成分として、眼科的に許容し得る通常の薬剤賦形剤と組み合わせることによって、および眼への局所適用に適当な単位用量形態を形成することによって調製し得る。処置有効量は通例、液体製剤中約０.０００１〜５％(w／v)、好ましくは約０.００１〜１.０％(w／v)である。
【００２９】
眼科的な適用のためには、主な賦形剤として生理食塩液を用いて液剤を調製することが好ましい。そのような眼用液剤のpＨは、適当な緩衝系によって６.５〜７.２に保つことが好ましい。このような製剤は、医薬的に許容し得る通常の保存剤、安定剤および界面活性剤をも含有し得る。
【００３０】
本発明の医薬組成物中に使用し得る好ましい保存剤は、塩化ベンザルコニウム、クロロブタノール、チメロサール、酢酸フェニル水銀および硝酸フェニル水銀を包含するが、これらに限定されるものではない。好ましい界面活性剤は、例えば、Ｔween  ８０である。同様に、本発明の眼用製剤中に種々の好ましい賦形剤を使用し得る。このような賦形剤は、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポロキサマー、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロースおよび精製水を包含するが、これらに限定されるものではない。
【００３１】
必要に応じて、または好都合に、浸透圧調整剤を添加し得る。浸透圧調整剤は、塩、とりわけ塩化ナトリウム、塩化カリウム、マンニトールおよびグリセリンを包含するが、これらに限定されるものではなく、眼科的に許容し得る他の適当な浸透圧調整剤も使用し得る。
【００３２】
眼科的に許容し得る製剤が得られるのであれば、pＨ調整のためにどのような緩衝剤および手段を用いてもよい。緩衝剤は、酢酸、クエン酸、リン酸およびホウ酸の緩衝剤を包含する。製剤のpＨを調整するために、必要に応じて酸または塩基を使用し得る。
【００３３】
同様に、本発明において使用するための眼科的に許容し得る抗酸化剤は、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、アセチルシステイン、ブチル化ヒドロキシアニソールおよびブチル化ヒドロキシトルエンを包含するが、それらに限定されるものではない。
【００３４】
本発明の眼用製剤が含有し得る他の佐剤成分はキレート剤である。好ましいキレート剤はエデト酸二ナトリウムであるが、その代わりに、またはそれと組み合わせて他のキレート剤も使用し得る。
【００３５】
上記成分は通例、次のような量で使用する:
2008533158.tif 000015
【００３６】
本発明の活性化合物の実際の用量は、化合物によって、および処置する症状によって異なる。当業者はその知識の範囲内で、適当な用量を選択することができる。
本発明の眼用製剤は、眼への適用を容易にするよう、計量適用に適した形態(例えばドロッパー付き容器)に充填することが好都合である。滴下適用に適した容器は通例、不活性で無毒性の適当なプラスチック材料製であり、液剤を通例約０.５〜１５ml収容する。
【００３７】
合成例
本発明化合物の製法を以下の非限定的実施例によってさらに示し、実施例は図1〜7の反応式に概要が示され、実施例および図の両方において、化合物は同じ符号で示されている。
【００３８】
2-アルキル-シクロペンタン-1,3-ジオン（1a）：  H2O（25mL）／ジオキサン（75mL）中の1,3-シクロペンタンジオン（89.4mmol、Aldrich）、I-R2（96.4mmol、Aldrich）およびKOH（5.097g、90.8mmol）の混合物を、還流させながら加熱する。5時間後、H2O（5mL）／ジオキサン（15mL）中のKOH（2g）およびI-R2（2mmol）の溶液を添加し、さらに3時間還流させた後に、溶液を室温で一晩攪拌する。午前中に、H2O（5mL）／ジオキサン（15mL）中のKOH（2g）およびI-R2（2.4mmol）の溶液を添加し、還流させながら加熱することによって、反応を継続させる。4時間後、混合物を室温に冷却し、エーテル（1x100mL、3x75mL）で抽出する。合わしたエーテル抽出物を蒸発させ、残渣をHCl（50mL 10％）と合わし、得られた混合物を、沸騰が観察されるまで（約15分間）120℃の油浴に入れる。次に、混合物を室温に冷却し、NaHCO3溶液（150mL、飽和）の添加によって中和し、次に、得られた混合物をCH2Cl2（4x75mL）で抽出する。合わしたCH2Cl2溶液を乾燥し（MgSO4）、濾過し、蒸発させて、褐色油状物を得、これを次の段階に直接使用する。
【００３９】
2-アルキル-2-メチル-シクロペンタン-1,3-ジオン（2a）：  H2O（25mL）／ジオキサン（75mL）中の2-メチル-1,3-シクロペンタンジオン（10.025g、89.4mmol、Aldrich）、I-R2（96.4mmol、Aldrich）およびKOH（5.097g、90.8mmol）の混合物を、還流させながら加熱する。5時間後、H2O（5mL）／ジオキサン（15mL）中のKOH（2g）およびI-R2（2mmol）の溶液を添加し、さらに3時間還流させた後に、溶液を室温で一晩攪拌する。午前に、H2O（5mL）／ジオキサン（15mL）中のKOH（2g）およびI-R2（2.4mmol）の溶液を添加し、還流させながら加熱することによって、反応を継続させる。4時間後、混合物を室温に冷却し、エーテル（1x100mL、3x75mL）で抽出する。合わしたエーテル抽出物を蒸発させ、残渣をHCl（50mL  10％）と合わし、得られた混合物を、沸騰が観察されるまで（約15分間）120℃の油浴に入れる。次に、混合物を室温に冷却し、NaHCO3溶液（150mL、飽和）の添加によって中和し、次に、得られた混合物をCH2Cl2（4x75mL）で抽出する。合わしたCH2Cl2溶液を乾燥し（MgSO4）、濾過し、蒸発させて、褐色油状物を得、これを次の段階に直接使用する。
【００４０】
2,2-ジアルキル-メチル-シクロペンタン-1,3-ジオン（2b）：  H2O（25mL）／ジオキサン（75mL）中の2-アルキル-1,3-シクロペンタンジオン  1a（89.4mmol、Aldrich）、I-R3（96.4mmol、Aldrich）およびKOH（5.097g、90.8mmol）の混合物を、還流させながら加熱する。5時間後、H2O（5mL）／ジオキサン（15mL）中のKOH（2g）およびI-R3（2mmol）の溶液を添加し、さらに3時間還流させた後に、溶液を室温で一晩攪拌する。午前に、H2O（5mL）／ジオキサン（15mL）中のKOH（2g）およびI-R3（2.4mmol）の溶液を添加し、還流させながら加熱することによって、反応を継続させる。4時間後、混合物を室温に冷却し、エーテル（1x100mL、3x75mL）で抽出する。合わしたエーテル抽出物を蒸発させ、残渣をHCl（50mL  10％）と合わし、得られた混合物を、沸騰が観察されるまで（約15分間）120℃の油浴に入れる。次に、混合物を室温に冷却し、NaHCO3溶液（150mL、飽和）の添加によって中和し、次に、得られた混合物をCH2Cl2（4x75mL）で抽出する。合わしたCH2Cl2溶液を乾燥し（MgSO4）、濾過し、蒸発させて、褐色油状物を得、これを次の段階に直接使用する。
【００４１】
スピロ［2.4］ヘプタン-4,7-ジオン（2c）：  H2O（25mL）／ジオキサン（75mL）中の2-アルキル-1,3-シクロペンタンジオン  1a（89.4mmol、Aldrich）、1,2-ジブロモエタン（120mmol、Aldrich）およびKOH（5.097g、90.8mmol）の混合物を、24時間にわたって還流させながら加熱する。混合物を冷却し、粗生成物をエーテル（1x100mL、3x75mL）で抽出する。合わしたエーテル抽出物を蒸発させ、残渣をHCl（50mL  10％）と合わし、得られた混合物を、沸騰が観察されるまで（約15分間）120℃の油浴に入れる。次に、混合物を室温に冷却し、NaHCO3溶液（150mL、飽和）の添加によって中和し、次に、得られた混合物をCH2Cl2（4x75mL）で抽出する。合わしたCH2Cl2溶液を乾燥し（MgSO4）、濾過し、蒸発させて、褐色油状物を得、これを次の段階に直接使用する。
【００４２】
2,2-ジメチル-シクロペンタン-1,3-ジオン（2）：  文献記載の手順に従って行なった（Agosta, W.C.;Smith, A.B. J.Org.Chem. 1970, 35, 3856）。H2O（25mL）／ジオキサン（75mL）中の2-メチル-1,3-シクロペンタンジオン（10.025g、89.4mmol、Aldrich）、沃化メチル（6.0mL、96.4mmol、Aldrich）およびKOH（5.097g、90.8mmol）の混合物を、還流させながら加熱した。5時間後、H2O（5mL）／ジオキサン（15mL）中のKOH（2g）およびMeI（2.4mL）の溶液を添加し、さらに3時間還流させた後に、溶液を室温で一晩攪拌した。午前に、H2O（5mL）／ジオキサン（15mL）中のKOH（2g）およびMeI（2.4mL）の溶液を添加し、還流させながら加熱することによって、反応を継続させた。4時間後、混合物を室温に冷却し、エーテル（1x100mL、3x75mL）で抽出した。合わしたエーテル抽出物を蒸発させ、残渣をHCl（50mL  10％）と合わし、得られた混合物を、沸騰が観察されるまで（約15分間）120℃の油浴に入れた。次に、混合物を室温に冷却し、NaHCO3溶液（150mL、飽和）の添加によって中和し、次に、得られた混合物をCH2Cl2（4x75mL）で抽出した。合わしたCH2Cl2溶液を乾燥し（MgSO4）、濾過し、蒸発させて、褐色油状物（10.474g、83mmol、93％）を得、これを次の段階に直接使用した。
【００４３】
（S）-3-ヒドロキシ-2,2-ジメチル-シクロペンタノン（3）：  文献記載の手順に従って行なった（Brooks, D.W.;Hormoz, M.;Grothaus, P.G.J.Org.Chem. 1987, 52, 3223）。4Lの三角フラスコ中の、H2O（690mL）中のD-グルコース（106.73g、592mmol、Aldrich）の35℃（内部温度）溶液を、パン酵母（71.065g、Fleischmann）で処理した。混合物を2時間発酵させ、次に、2,2-ジメチル-シクロペンタン-1,3-ジオン（2）（7.316g、58mmol）を添加した。
【００４４】
混合物を48時間攪拌し、次に、セライトで濾過し、約1LのCH2Cl2で洗浄した。酵母の高粘稠性により濾過しにくく、CH2Cl2を混合物に連続的に添加し、セライト層の上部をスパチュラでこすって補助した。濾液を分離漏斗に移し、ブライン100mLを添加し、層を分離した。ブライン（400mL）を水性相に添加し、得られた溶液をCH2Cl2（3x500mL）でさらに抽出した。合わしたCH2Cl2溶液を乾燥し（MgSO4）、濾過し、蒸発させて、黄色油状物を得た。フラッシュクロマトグラフィー（11x5cm、20％ EtOAc／へキサン→25％→30％→40％→50％）にかけて、アルコール3（2.435g、19mmol、33％）を得た。
【００４５】
ピリジン（27μL、0.33mmol、Aldrich）および（R）-α-メトキシ-α-トリフルオロメチルフェニル酢酸クロリド（58μL、0.31mmol、Fluka）を用いてジクロロエタン（0.3mL、Aldrich）中のアルコール3（11mg、0.09mmol）を処理することによって製造した対応するMosherエステルの1H NMRによって、3についての鏡像異性体過剰率を分析した。混合物を一晩攪拌し、次に、水（10mL）とエーテル（10mL）の間に分配した。エーテル層を1M HCl（10mL）およびNaHCO3飽和溶液で洗浄し、次に、乾燥し（MgSO4）、濾過し、蒸発させた。1H NMR分析を、粗エステルについて行なった。
【００４６】
（S）-3-（tert）-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ-2,2-ジメチル-シクロペンタノン（4）：  CH2Cl2（8.0mL、Aldrich）中のアルコール3（520mg、4.1mmol）および2,6-ルチジン（0.56mL、4.8mmol、Aldrich）の溶液を、TBSOTf（1.0mL、4.3mmol、Aldrich）で処理した。5.5時間後、NaHCO3飽和溶液（20mL）を添加し、混合物をCH2Cl2（20mL）で抽出した。CH2Cl2溶液を1M HCl、NaHCO3飽和溶液およびブライン各20mLで洗浄し、次に、乾燥し（MgSO4）、濾過し、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（5x5cm、10％ Et2O／ペンタン）にかけて、TBSエーテル4（698mg、2.9mmol、70％）を得た。
【００４７】
（S）-3-（tert）-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ-2,2-ジメチル-5-フェニルセラニル-シクロペンタノン（5）：  THF（2mL、Aldrich）中のTBSエーテル4（1.496g、6.2mmol）の溶液を、THF（22mL、Aldrich）中のLDA（4.9mL、7.3mmol、1.5M／シクロヘキサン、Aldrich）の-78℃溶液に滴下し、THF2mLで濯いだ。15分後、THF（2mL）中のPhSeCl（1.424g、7.4mmol、Aldrich）の溶液をカニューレですばやく添加し、THF2mLで濯いだ。溶液を10分間攪拌し、次に、0.5M HCl 50mLとエーテル75mLの間に分配した。エーテル層を、水、NaHCO3飽和溶液およびブライン各30mLで洗浄し、次に、乾燥し（MgSO4）、濾過し、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（2％EtOAc／へキサン→4％）にかけて、フェニルセレニド 5（1.641g、4.1mmol、67％）を、低Rf不純物を含有する混合画分476mgと共に得た。
【００４８】
（S）-4-（tert）-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ-5,5-ジメチル-シクロペンタ-2-エノン（6）：  CH2Cl2（13mL、Aldrich）中のセレニド 5（1.641g、4.1mmol）およびピリジン（0.62mL、7.7mmol、Aldrich）の溶液を、H2O（1mL）および30％ H2O2（1.1mL、Aldrich）で処理した。混合物を30分間攪拌し、次に、CH2Cl2 25mLとNaHCO3飽和溶液25mLの間に分配した。水性相をCH2Cl2 25mLで抽出し、合わしたCH2Cl2溶液を1M HCl（2x25mL）およびブライン（50mL）で洗浄した。次に、溶液を乾燥し（MgSO4）、濾過し、蒸発させて、オレンジ色油状物を得た。フラッシュクロマトグラフィー（6x4cm、10％エーテル／ペンタン）にかけて、エノン6（572mg、2.4mmol、59％）を得た。
【００４９】
（3-メルカプト-プロピルスルファニル）-酢酸メチルエステル（8）：  THF（40mL）中の1,3-ジチアン（2.0mL、19.9mmol）の氷冷溶液を、NaH（819mg、20.5mmol）で処理した。30分後、メチルブロモアセテート（1.9mL、20.0mmol）を添加し、混合物を室温で3.5時間攪拌した。MeOH、次に1M HCl 50mLの添加によって反応を停止した。混合物をエーテル（2x50mL）で抽出し、合わしたエーテル溶液を、炭酸水素ナトリウム飽和溶液（50mL）およびブライン（50mL）で洗浄し、次に、乾燥し（MgSO4）、濾過し、蒸発させた。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（10〜15％ 酢酸エチル／へキサン）によって精製して、チオール（971mg、5.38mmol、27％）を得た。
【００５０】
｛3-［（S）-3-（tert）-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ）-4,4-ジメチル-5-オキソ-シクロペンタ-1-エニルスルファニル］-プロピルスルファニル｝-酢酸メチルエステル（10）：  MeOH（4.3mL）中のエノン6（156mg、0.65mmol）の溶液を、30％ H2O2（0.21mL）および1M NaOH（32μL）で処理した。4時間後、塩化アンモニウム飽和溶液20mLを添加し、混合物をジクロロメタン（3x10mL）で抽出した。合わしたジクロロメタン溶液を乾燥し（Na2SO4）、濾過し、真空蒸発させた。
【００５１】
ジクロロメタン（3mL）中のチオール 8（110mg、0.61mmol）の溶液を、粗エポキシド（9）にカニューレで添加し、1.2mLで濯いだ。塩基性アルミナ（628mg）を添加し、混合物を16時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残渣を、シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（15％ 酢酸エチル／へキサン）によって精製して、カップリングしたエノン（10）（129mg、0.31mmol、48％）を得た。
【００５２】
（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-メタノール（12）：  THF200mL中の3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-カルボン酸（11）（10.0g、47.0mmol）の氷冷溶液に、LiAlH4 （47mL、47mmol、1M／THF）を添加した。3時間後、MeOH（約40mL）の添加によって反応を停止した。揮発性物質を蒸発させ、残渣を1M HCl 50mLで処理した。10分間攪拌した後、混合物をCH2Cl2（3x150mL）で抽出した。合わしたCH2Cl2溶液を乾燥し（MgSO4）、濾過し、蒸発させた。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（10〜20％ 酢酸エチル／へキサン）によって精製して、アルコール（12）（4.32g、21.6mmol、46％）を得た。
【００５３】
3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-カルボアルデヒド（13）：  CH2Cl2 40mL中のアルコール（4.32g、21.6mmol）の溶液を、4Å分子篩、NMO（3.81g、32.5mmol）およびTPAP（381mg、1.08mmol）で処理した。反応を10分間攪拌し、次に、蒸発乾固した。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（2％ 酢酸エチル／へキサン）によって精製して、アルデヒド（13）（3.52g、18.3mmol、84％）を得た。
【００５４】
（E）-3-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-アクリル酸メチルエステル（14）：  トルエン50mL中の13（3.52g、18.3mmol）の溶液を、メチル（トリフェニルホスホラニリデン）アセテート（7.48g、21.9mmol）で処理した。4時間後、NaHCO3飽和溶液（50mL）を添加し、混合物を酢酸エチル（2x75mL）で抽出した。合わした酢酸エチル溶液をブライン（50mL）で洗浄し、乾燥し（Na2SO4）、濾過し、蒸発させた。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（5％ 酢酸エチル／へキサン）によって精製して、エノエート（14）（3.60g、14.6mmol、80％）を得た。
【００５５】
3-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-プロピオン酸メチルエステル（15）：  THF50mL中の14（3.60g、14.6mmol）の溶液を、Wilkinson触媒（3.35g、3.62mmol）で処理した。混合物を1気圧のH2下に18時間攪拌し、次に、セライトで濾過した。溶媒を蒸発させ、残渣を、シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（0〜2％ 酢酸エチル／へキサン）によって精製して、飽和エステル（15）（3.63g、14.3mmol、99％）を得た。
【００５６】
3-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-プロパン-1-オール（16）：  エーテル60mL中の15（3.63g、14.3mmol）の氷冷溶液を、LiBH4（621mg、28.5mmol）およびメタノール（2mL）で処理した。30分後、0.5M NaOH溶液30mLを添加した。混合物を酢酸エチル（2x25mL）で抽出し、合わした酢酸エチル溶液をブライン（50mL）で洗浄し、乾燥し（MgSO4）、濾過し、蒸発させた。残渣を、シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（5〜20％ 酢酸エチル／へキサン）によって精製して、アルコール（16）（2.57g、11.3mmol、79％）を得た。
【００５７】
3-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-プロピオンアルデヒド（17）：  ジクロロメタン（20mL）中の塩化オキサリル（1.73g、13.6mmol）の-78℃溶液を、DMSO（20mL）で処理した。5分後、ジクロロメタン（20mL）中のアルコール16（2.57g、11.3mmol）の溶液を添加した。さらに15分後、トリエチルアミン（7.1mL、50.6mmol）を添加した。反応を-78℃で5分間攪拌し、次に、室温に温めた。30分後、水100mLを添加し、混合物をジクロロメタン（3x60mL）で抽出した。合わしたジクロロメタン溶液を乾燥し（Na2SO4）、濾過し、蒸発させた。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（10％ 酢酸エチル／へキサン）によって精製して、アルデヒド（17）（2.11g、9.4mmol、83％）を得た。
【００５８】
5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-ペンタ-1-イン-3-オール（18）：  THF15mL中のアルデヒド 17（2.11g、9.4mmol）の溶液を、臭化エチニルマグネシウムの溶液（28.2mL、14.1mmol、0.5M THF）に0℃で添加した。1.5時間後、NH4Cl飽和溶液（75mL）を添加し、混合物を酢酸エチル（3x50mL）で抽出した。合わした酢酸エチル溶液をブライン（50mL）で洗浄し、次に、乾燥し（Na2SO4）、濾過し、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（5〜20％ 酢酸エチル／へキサン）によって精製して、アルコール（18）（2.20g、8.78mmol、93％）を得た。
【００５９】
tert-ブチル-｛1-［2-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-エチル］-プロパ-2-イニルオキシ｝-ジメチル-シラン（19）：  ジクロロメタン15mL中のアルコール18（2.20g、8.78mmol）の溶液を、DMAP（215mg、1.8mml）、TBSCl（1.59g、10.5mmol）およびトリエチルアミン（1.8mL、13.2mmol）で処理した。反応を24時間攪拌し、次に、炭酸水素ナトリウム飽和溶液（50mL）を添加した。混合物をジクロロメタン（2x50mL）で抽出し、合わしたジクロロメタン溶液を乾燥し（Na2SO4）、濾過し、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（4％ 酢酸エチル／へキサン）によって精製して、保護アルコール（19）（3.06g、6.4mmol、73％）を得た。
【００６０】
（3-｛（1R,4S,5S）-4-（tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ）-5-［（E）-3-（tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-ペンタ-1-エニル］-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチルスルファニル｝-プロピルスルファニル）-酢酸メチルエステル（20）：  THF（1.2mL）中のアルキン 19（105mg、0.28mmol）の溶液を、ビス（シクロペンタジエニル）ジルコニウムクロリドヒドリド（91mg、0.35mmol）で処理した。反応を30分間攪拌し、次に、-78℃に冷却し、メチルリチウム（0.46mL、0.64mmol、エーテル中1.4M）で処理した。10分後、予め冷却（-78℃）したリチウム2-チエニルシアノクプレートの溶液（1.3mL、0.33mmol、THF中0.25M）を、カニューレで添加した。反応を45分間攪拌し、次に、THF0.2mL中のエノン 10（61mg、0.15mmol）をカニューレで添加し、THF0.2mLで濯いだ。1時間後、20mLの1:1 塩化アンモニウム飽和溶液／濃水酸化アンモニウムの添加によって、反応を停止した。混合物を45分間攪拌し、次に、酢酸エチル（3x20mL）で抽出した。合わした酢酸エチル溶液を乾燥し（Na2SO4）、濾過し、蒸発させた。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（10％ 酢酸エチル／へキサン）によって精製して、カップリングした生成物（20）（51mg、0.064mmol、43％）を得た。
【００６１】
（3-｛（1R,4S,5S）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチルスルファニル｝-プロピルスルファニル）-酢酸メチルエステル（21、22）：  CH3CN（1.6mL）中の20（51mg、0.064mmol）の溶液を、HF-ピリジン（0.26mL）で処理した。反応を24時間攪拌し、次に、炭酸水素ナトリウム飽和溶液15mLの添加によって停止した。混合物をジクロロメタン（3x10mL）で抽出し、合わしたジクロロメタン溶液を乾燥し（Na2SO4）、濾過し、蒸発させた。シリカゲル上での分取薄層クロマトグラフィー（40％ 酢酸エチル／へキサン）によって精製して、各ジアステレオマー（12mg、0.023mmol、71％）を得た。
【００６２】
（3-｛（1R,4S,5S）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチルスルファニル｝-プロピルスルファニル）-酢酸（23、24）：  pH7.2の燐酸塩緩衝液（0.5mL）／CH3CN（0.1mL）中のより低いRfのエステル 21（11mg、0.021mmol）の溶液に、ウサギ肝臓エステラーゼ（9mg）を添加した。混合物を一晩攪拌し、次に、0.5M HCl 10mLを数mLのブラインと共に添加した。混合物を酢酸エチル（3x10mL）で抽出し、合わした酢酸エチル溶液を乾燥し（Na2SO4）、濾過し、蒸発させた。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（3〜5％ MeOH／CH2Cl2）によって精製して、酸（23）（4mg、0.0078mmol、37％）を得た。
300MHz 1H NMR（CDCl3, ppm） δ7.73（2H, d, J=8.4Hz）, 7.4-7.3（2H, m）, 5.9-5.8（1H, m）, 5.8-5.7（1H, m）, 4.4-4.3（1H, m）, 3.63（1H, d, J=9.7Hz）, 3.21（2H, s）, 3.1-2.4（11H, 重複m）, 2.1-1.7（4H, 重複m）, 1.12（3H, s）, 1.03（3H, s）
【００６３】
より高いRfのエステルも同様に加水分解したが、但し、pH7.2の燐酸塩緩衝液0.5mL中のウサギ肝臓エステラーゼ（10mg）の溶液を、CH3CN（0.2mL）中のエステル（10mg、0.019mmol）の溶液に添加した。反応を22時間攪拌し、次に、前記のようにワークアップを行い精製した。これによって酸（24）（7mg、0.013mmol、71％）を得た。
300MHz 1H NMR（CDCl3, ppm） δ7.73（2H, d, J=8.8Hz）, 7.44-7.31（2H, m）, 5.9-5.8（1H, m）, 5.8-5.7（1H, m）, 4.4-4.3（1H, m）, 3.64（1H, d, J=9.7Hz）, 3.3-2.3（13H, 重複m）, 2.1-1.7（4H, 重複m）, 1.12（3H, s）, 1.03（3H, s）
【００６４】
tert-ブチル-ヘキサ-5-イニルオキシ-ジメチル-シラン（26）
7-（tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ）-ヘプタ-2-イン-1-オール（27）
【００６５】
酢酸7-（tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ）-ヘプタ-2-イニルエステル（28）：  ピリジン（20mL）中の7-（tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ）-ヘプタ-2-イン-1-オール27（4.507g、21mmol）の溶液を、無水酢酸（3.0mL、31.8mmol）で処理した。18時間後、溶媒を蒸発させ、残渣をトルエンと共に同時蒸発させた。残渣を次の段階に直接使用した。
【００６６】
7-アセトキシ-ヘプタ-5-イン酸（29）：  アセトン（100mL）中の粗28の溶液を、Jones試薬（18.0mL、41.4mmol、2.3M）で処理した。混合物が発熱したので、氷浴で冷却した。室温で1時間後、イソプロピルアルコール10mLを添加し、さらに15分間にわたって混合物を攪拌した。混合物がまだ褐色であったので、さらに10mLのイソプロピルアルコールを添加した。さらに15分後、色が変化していなかったので、混合物をセライトで濾過し、濾液を真空蒸発させた。残渣を、エーテル100mLと塩化アンモニウム飽和溶液100mLの間に分配した。水性相をエーテル100mLで抽出し、合わしたエーテル溶液をブラインで洗浄し、次に、乾燥し（MgSO4）、濾過し、蒸発させて、黄色油状物（6.333g）を得、これを次の段階に直接使用した。
【００６７】
7-ヒドロキシ-ヘプタ-5-イン酸メチルエステル（30）：  粗酸29（6.333g）を、メタノール（60mL）中の塩化アセチル1％溶液で処理した。16時間後、炭酸水素ナトリウム（1.966g、23.4mmol）を添加した。混合物を乾燥し（MgSO4）、セライトで濾過し、真空蒸発させた。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（30〜40％ 酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、7-ヒドロキシ-ヘプタ-5-イン酸メチルエステル 30（3.022g、19.3mmol、7-（tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ）-ヘプタ-2-イン-1-オール（27）から92％）を得た。
【００６８】
7-ヨード-ヘプタ-5-イン酸メチルエステル（31）：  ジクロロメタン5mL中の30（1.347g、8.6mmol）の溶液を、ジクロロメタン34mL中のトリフェニルホスフィン（2.725g、10.4mmol）、イミダゾール（726mg、10.7mmol）および沃素（2.602g、10.3mmol）の混合物に添加し、ジクロロメタン5mLで濯いだ。40分後、ジクロロメタンを数mLに真空蒸発させ、得られた混合物を塩基性アルミナで濾過し、10％ 酢酸エチル／へキサンで洗浄した。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（10％ 酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、沃化プロパルギル（1.878g、7.1mmol、83％）を得た。
【００６９】
tert-ブチル-｛（E）-1-［2-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-エチル］-3-ヨード-アリルオキシ｝-ジメチル-シラン（32）：  ジクロロメタン（50mL）中のアルキン19（5.547g、15.2mmol）の溶液を、Cp2ZrHCl（5.794g、22.5mmol）で処理した。反応を45分間攪拌し、次に、N-ヨードスクシンイミド（4.966g、22.1mmol）を添加した。15分後、炭酸水素ナトリウム飽和溶液（200mL）を添加し、混合物をジクロロメタン（2x100mL）で抽出した。合わしたジクロロメタン溶液を乾燥し（MgSO4）、濾過し、蒸発させた。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（0〜5％ 酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、沃化ビニル（32）（6.608g、13.1mmol、86％）を得た。
【００７０】
7-｛（1R,4S,5R）-4-（tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ）-5-［（E）-3-（tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-ペンタ-1-エニル］-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル｝-ヘプタ-5-イン酸メチルエステル（33）：  THF（2.0mL）中の沃化物32（675mg、1.34mmol）の-78℃溶液を、tert−ブチルリチウム（1.73mL、2.94mL、1.7M／ペンタン）で処理した。暗赤色混合物を25分間攪拌し、次に、ジメチル亜鉛（0.80mL、1.6mmol、2M／トルエン）を添加した。溶液を0℃で15分間攪拌し、次に、-78℃に再冷却した。次に、THF（1.0mL）中のエノン 6（208mg、0.87mmol）の溶液を、2時間にわたってシリンジポンプで添加し、THF0.5mLで濯いだ。30分後、HMPA（1.34mL、CaH2から蒸留）を添加し、次に、THF（1.0mL）中の沃化プロパルギル 31（1.286g、4.83mmol）の溶液を添加した。溶液を-40℃浴内で一晩攪拌し、次に、塩化アンモニウム飽和溶液20mLおよび水10mLを添加した。混合物をジクロロメタン（20mL）および酢酸エチル（2x20mL）で抽出した。合わした有機抽出物を乾燥し（MgSO4）、濾過し、蒸発させた。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（5〜10％ 酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、33（198mg、0.27mmol、31％）を得た。
【００７１】
（Z）-7-｛（1R,4S,5R）-5-［（E）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル｝-ヘプタ-5-イン酸メチルエステル（34、35）：  CH3CN（6.5mL）中の33（198mg、0.27mmol）の溶液を、HF-ピリジン（1.2mL）で処理した。溶液を3時間攪拌し、炭酸水素ナトリウム飽和溶液（120mL）を添加した。混合物をジクロロメタン（3x50mL）で抽出し、合わしたジクロロメタン溶液を乾燥し（Na2SO4）、濾過し、蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィー（50％ 酢酸エチル／ヘキサン）、次に、分取TLC（55％ 酢酸エチル／へキサン）によって精製して、より低い極性のジアステレオマー（34）（55mg、0.11mmol、41％）およびより高い極性のジアステレオマー（35）（51mg、0.10mmol、37％）を得た。
【００７２】
（Z）-7-｛（1R,4S,5R）-5-［（E）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル｝-ヘプタ-5-イン酸（低Rfジアステレオマー、36）：  pH7.2の燐酸塩緩衝液（2mL）／CH3CN（0.1mL）中の34（9mg、0.017mmol）およびウサギ肝臓エステラーゼ（1mg）の溶液を、17時間攪拌した。次に、混合物をCH3CNと共に同時蒸発させて、水を除去し、残渣をシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（3〜7％ MeOH／CH2Cl2）によって精製して、酸（36）（8mg、0.016mmol、93％）を得た。
【００７３】
（Z）-7-｛（1R,4S,5R）-5-［（E）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル｝-ヘプタ-5-イン酸（高Rfジアステレオマー、37）：  pH7.2の燐酸塩緩衝液（2mL）／CH3CN（0.1mL）中の35（12mg、0.023mmol）およびウサギ肝臓エステラーゼ（1mg）の溶液を、17時間攪拌した。TCLが出発物質の存在を示したので、さらに2mgのエステラーゼを添加した。さらに24時間攪拌した後、反応が終了した。36に関して先に記載したようにワークアップおよび精製を行なって、酸（37）（8mg、0.016mmol、69％）を得た。
【００７４】
（Z）-7-｛（1R,4S,5R）-5-［（E）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル｝-ヘプタ-5-エン酸メチルエステル（低Rfジアステレオマー、38）：  エタノール（95％、2.5mL）をNiCl2（50mg、0.39mmol）およびNaBH4（7mg、0.19mmol）に添加した。得られた黒色混合物を5分間攪拌し、次に、エチレンジアミン（41μL、0.61mmol）を添加した。15分後、95％エタノール0.5mL中のアルキン34（40mg、0.077mmol）の溶液を添加し、エタノール0.5mLで濯いだ。フラスコをH2でパージし、1気圧のH2下に22時間攪拌した。次に、混合物をセライトで濾過し、シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（55％ 酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、アルケン（38）（17mg、0.032mmol、43％）を得た。
【００７５】
（Z）-7-｛（1R,4S,5R）-5-［（E）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル｝-ヘプタ-5-エン酸メチルエステル（高Rfジアステレオマー、39）：  36と同様の手順によって、39（17mg、0.032mmol、41％）を得た。
【００７６】
（Z）-7-｛（1R,4S,5R）-5-［（E）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル｝-ヘプタ-5-エン酸（低Rfジアステレオマー、40）：  36と同様の手順を使用して、酸40（9mg、0.018mmol、85％）を得た。
300MHz 1H NMR（CDCl3, ppm） δ7.73（2H, d, J=8.4Hz）, 7.45-7.30（2H, m）, 5.8-5.6（2H, m）, 5.4-5.3（2H, m）, 4.3-4.1（1H, m）, 3.57（1H, d, J=9.7Hz）, 3.1-2.9（2H, m）, 2.5-1.9（10H, m）, 1.7-1.6（2H, m）, 1.09（3H, s）, 0.89（3H, s）
【００７７】
（Z）-7-｛（1R,4S,5R）-5-［（E）-5-（3-クロロ-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル）-3-ヒドロキシ-ペンタ-1-エニル］-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル｝-ヘプタ-5-エン酸（高Rfジアステレオマー、41）：  36と同様の手順を使用して、酸41（9mg、0.018mmol、85％）を得た。
300MHz 1H NMR（CDCl3, ppm） δ7.73（2H, d, J=8.8Hz）, 7.45-7.30（2H, m）, 5.8-5.6（2H, m）, 5.45-5.30（2H, m）, 4.3-4.2（1H, m）, 3.61（1H, d, J=9.7Hz）, 3.1-3.0（2H, m）, 2.5-1.9（10H, m）, 1.7-1.6（2H, m）, 1.10（3H, s）, 0.90（3H, s）
【００７８】
2-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-エタノール（9-2, 図9）：  n-BuLi（100mL、160mmol、1.6M/ヘキサン）を、THF（70mL）／エーテル（30mL）中のチアナフテン（17.31g、129mmol）の-78℃混合物に添加した。混合物を-78℃で2時間撹拌し、次いでTHF（70mL）／エーテル（30mL）中のエチレンオキシド（42.86g、1071mmol）の溶液をカニューレで15分間にわたって加えた。混合物を-78℃で2時間撹拌し、次いで室温で15時間撹拌した。次いで混合物を蒸発させ、H2O（200mL）を添加し、混合物を酢酸エチル（3x150mL）で抽出した。合わした有機溶液をブラインで洗浄し、乾燥し（Na2SO4）、濾過し、蒸発させた。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（20％ 酢酸エチル／へキサン）によって精製して、8-2（13.61g、78mmol、60％）を得た。
【００７９】
ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-アセトアルデヒド（9-3）：  ジクロロメタン（100mL）中の9-2（8.019g、44.9mmol）の0℃混合物を、Dess-Martin試薬（20g, 47.2mmol）で処理した。混合物を0℃で10分間および室温で40分間撹拌した。NaHCO3飽和溶液（200mL）および0.1M NaHSO3溶液を添加し、混合物を酢酸エチル（3x300mL）で抽出した。合わした有機溶液を乾燥し（Na2SO4）、濾過し、蒸発させて、9-3（8.77g）を得た。このアルデヒドを粗生成物として次の反応に使用した。
【００８０】
1-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-ブタ-3-イン-2-オール（9-4）：  THF（100mL）中の粗9-3（8.77g）の溶液を、臭化エチニルマグネシウムの溶液（450mL、225mmol、0.5M/THF）に0℃でカニューレで添加した。混合物を0℃で1時間および室温で1時間撹拌した。次いで、NH4Cl飽和溶液（200mL）を添加して反応を停止した。相を分離し、水相を酢酸エチル（3x200mL）で抽出した。合わした有機溶液をブラインで洗浄し、次に、乾燥し（Na2SO4）、濾過し、蒸発させた。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（10％→20％ 酢酸エチル／へキサン）によって精製して、8-4（7.67g、37.9mmol、9-2から84％）を得た。
【００８１】
（1-ベンゾ［b］チオフェン-2-イルメチル-プロパ-2-イニルオキシ）-tert-ブチル-ジメチル-シラン（9-5）：  ジクロロメタン（120mL）中の9-4（7.67g、37.9mmol）の溶液に、DMAP（2.306g、18.9mmol）、TBSCl（11.502g、76.3mmol）およびトリエチルアミン（5.25mL、37.7mmol）を添加した。17時間後、NH4Cl飽和溶液（150mL）を添加し、相を分離した。水相をジクロロメタン（3x100mL）で抽出し、合わした有機溶液を乾燥し（Na2SO4）、濾過し、蒸発させた。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（4％ 酢酸エチル／へキサン）によって精製して、9-5（8.38g、26.5mmol、70％）を得た。
【００８２】
（（E）-1-ベンゾ［b］チオフェン-2-イルメチル-3-ヨード-アリルオキシ）-tert-ブチル-ジメチル-シラン（9-6）：  ジクロロメタン（30mL）中の9-5（1.372g、4.34mmol）の溶液に、Cp2ZrHCl（1.719g、6.67mmol）を添加した。反応混合物を室温で30分間攪拌し、N-ヨードスクシンイミド（1.997g、8.88mmol）を添加した。1時間後、反応混合物をNaHCO3飽和溶液（100mL）に注いだ。混合物をジクロロメタン（3x75mL）で抽出し、合わした有機抽出物を乾燥し（MgSO4）、濾過し、蒸発させた。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（2％ 酢酸エチル／ヘキサン）によって精製して、9-6（1.7484g、91％）を得た。
【００８３】
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル］-ヘプタ-5-エン酸（2-ヒドロキシエチル）-アミド（65）（第二級および第三級アミドの一般合成手順）：  DMF（0.5mL）中の酸55（7mg、0.015mmol）の溶液を、N-ヒドロキシスクシンイミド（6.9mg、0.056mmol）で処理した。混合物を5分間攪拌し、1-［3-（ジメチルアミノ）プロピル］-3-エチルカルボジイミドヒドロクロリド（EDCI、20.7mg、0.11mmol）を添加した。7時間攪拌した後、2-アミノエタノール（5μL、0.083mmol）を添加し、混合物をさらに16時間攪拌した。酢酸エチル（50mL）を添加し、混合物を水（3x50mL）およびブライン（50mL）で洗浄した。有機相を乾燥し（Na2SO4）、濾過し、蒸発させた。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（5％ メタノール／ジクロロメタン）、次に、分取薄層クロマトグラフィー（10％ メタノール／ジクロロメタン）によって精製して、アミド65（5mg、0.010mmol、65％）を得た。
アミド60〜63を同様の方法で合成した。
【００８４】
（Z）-7-［（1R,4S,5R）-5-（（E）-4-ベンゾ［b］チオフェン-2-イル-3-ヒドロキシ-ブタ-1-エニル）-4-ヒドロキシ-3,3-ジメチル-2-オキソ-シクロペンチル｝-ヘプタ-5-エン酸アミド（69）：  ジクロロメタン（0.2mL）中の酸55（9mg、0.02mmol）の溶液を、トリエチルアミン（15μL、0.11mmol）で処理した。溶液を0℃に冷却し、10分後、エチルクロロホルメート（7μL、0.073mmol）を添加した。さらに1時間にわたって溶液を0℃で攪拌し、次に、濃水酸化アンモニウム水溶液（10μL、0.26mmo）を添加した。反応を室温で一晩攪拌し、次に、0.5M HCl（7mL）の添加によって停止した。混合物を酢酸エチル（3x30mL）で抽出し、合わした酢酸エチル溶液を、NaHCO3飽和溶液（20mL）およびブライン（20mL）で洗浄し、次に、乾燥し（Na2SO4）、濾過し、蒸発させた。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（2％〜6％ メタノール／ジクロロメタン）によって精製して、標記アミド（2.6mg、28％）を得た。
【００８５】
本発明化合物を所望の生物学的活性についてスクリーニングする方法を、以下の実施例により本発明を制限することなく説明する。本発明の化合物例の結果を表２に示す。この結果は単に説明の目的で示すものであって、本発明の範囲の制限を意図するものではない。
【００８６】
ラジオリガンド結合
ＥＰ１、ＥＰ２、ＥＰ３、ＥＰ４およびＦＰ受容体を安定に発現する細胞
ヒトまたはネコのＦＰ受容体またはＥＰ１、ＥＰ２、ＥＰ３もしくはＥＰ４受容体を安定に発現するＨＥＫ−２９３細胞をＴＭＥ緩衝液で洗い、フラスコ底から掻き取り、Ｂrinkman  ＰＴ１０／３５ポリトロンを用いて３０秒間ホモジナイズした。遠心管内で、ＴＭＥ緩衝液を加えて、終体積を４０ｍｌとした。（ＴＭＥの組成は、１００ｍＭ  ＴＲＩＳ塩基、２０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、２Ｍ  ＥＤＴＡ；１０Ｎ−ＨＣｌの添加によりｐＨを７．４とする。）
【００８７】
細胞ホモジネートを、Ｂeckman  Ｔｉ−６０ローターを用いて４℃で２０分間、１９０００ｒｐｍで遠心した。得られたペレットをＴＭＥ緩衝液に再懸濁させて、タンパク質の終濃度を１ｍｇ／ｍｌとした（Ｂioradアッセイにより測定）。［３Ｈ−］１７−フェニルＰＧＦ２α（５ｎＭ）とのラジオリガンド結合競合アッセイを、１００μｌの体積で６０分間行った。細胞膜フラクションを加えることにより、結合反応を開始させた。氷冷ＴＲＩＳ−ＨＣｌ緩衝液（４ｍｌ）を加えて反応を停止し、Ｂrandelセルハーベスターを用いてグラスファイバーＧＦ／Ｂフィルターで手早く濾過した。フィルターを氷冷緩衝液で３回洗い、オーブンで１時間乾燥した。１０μＭ非標識１７−フェニルＰＧＦ２αを用いて非特異的結合を測定した。
【００８８】
ＥＰ受容体のラジオリガンドとしては、［３Ｈ−］ＰＧＥ２（５ｎＭ；比放射能１８０Ｃｉ／ミリモル）を使用した。ＥＰ１、ＥＰ２、ＥＰ３、ＥＰ４を用いる結合試験は、二重に、そして少なくとも３回の独立した実験として行った。アッセイ体積は２００μｌとした。インキュベーションを２５℃で６０分間行い、氷冷５０ｍＭ  ＴＲＩＳ−ＨＣｌ（４ｍｌ）を加えて停止し、次いでＷhatman  ＧＦ／Ｂフィルターで手早く濾過し、セルハーベスター（Ｂrandel）内で更に３回、４ｍｌでの洗浄を行った。１０−５Ｍ非標識ＰＧＥ２を用いて非特異的結合を測定した。
【００８９】
ＦＬＩＰＲ（登録商標）試験の方法
（ａ）細胞培養
１０％ウシ胎児血清、２ｍＭのｌ−グルタミン、２５０μｇ／ｍｌのジェネティシン（Ｇ４１８）および２００μｇ／ｍｌのハイグロマイシンＢ（選択マーカーとして）、並びに１００単位／ｍｌのペニシリンＧ、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシンおよび０．２５μｇ／ｍｌのアンホテリシンＢを含有する高グルコースＤＭＥＭ培地中で、１００ｍｍ培養皿内で、組換えヒトプロスタグランジン受容体タイプまたはサブタイプの一つを安定に発現するＨＥＫ−２９３（ＥＢＮＡ）細胞を培養した。（発現したプロスタグランジン受容体：ｈＤＰ／Ｇｑｓ５；ｈＥＰ１；ｈＥＰ２／Ｇｑｓ５；ｈＥＰ３Ａ／Ｇｑｉ５；ｈＥＰ４／Ｇｑｓ５；ｈＦＰ；ｈＩＰ；ｈＴＰ。）
【００９０】
（ｂ）ＦＬＩＰＲ（登録商標）におけるカルシウムシグナル試験
ポリ−Ｄ−リジンコーティングした黒色壁透明底の９６ウェルプレート（Ｂiocoat（登録商標）、Ｂecton−Ｄickinson）に、５×１０４細胞／ウェルの密度で細胞を播き、３７℃のインキュベーター内で一晩付着させた。次いで、Ｄenley  Ｃellwashプレートウォッシャー（Ｌabsystems）を用いて、ＨＢＳＳ−ＨＥＰＥＳ緩衝液（バイカーボネートおよびフェノールレッドを含まないハンクス液、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４）で細胞を２回洗った。カルシウム感受性色素Ｆluo−４ＡＭを終濃度２μＭで使用して暗所で色素導入した４５分後に、ＨＢＳＳ−ＨＥＰＥＳ緩衝液でプレートを４回洗って、各ウェルに１００μｌを残して過剰の色素を除去した。プレートを再度３７℃に数分間にわたって平衡化した。
【００９１】
細胞を４８８ｎｍのアルゴンレーザーで励起し、バンド幅５１０〜５７０ｎｍの発光フィルターを通して発光を測定した（ＦＬＩＰＲ（登録商標）、Ｍolecular  Ｄevices、Ｓunnyvale、ＣＡ）。薬物溶液は５０μｌ体積で各ウェルに加えて、所望の終濃度とした。各ウェルについて、蛍光強度の増加ピークを記録した。プレート１枚につき、ウェル４個ずつを、負の対照（ＨＢＳＳ−ＨＥＰＥＳ緩衝液）および正の対照（標準アゴニスト：受容体に応じて、ＢＷ２４５Ｃ（ｈＤＰ）；ＰＧＥ２（ｈＥＰ１；ｈＥＰ２／Ｇｑｓ５；ｈＥＰ３Ａ／Ｇｑｉ５；ｈＥＰ４／Ｇｑｓ５）；ＰＧＦ２α（ｈＦＰ）；カルバサイクリン（ｈＩＰ）；Ｕ−４６６１９（ｈＴＰ））に充てた。次いで、各薬物含有ウェル中の蛍光ピーク変化を、対照に対して相対的に表した。
【００９２】
ハイスループット（ＨＴＳ）または濃度−応答（ＣｏＲｅ）フォーマットで化合物を試験した。ＨＴＳフォーマットでは、プレート１枚当たり４４の化合物を１０−５Ｍ濃度で二重に試験した。濃度−応答曲線を得るために、プレート１枚当たり４化合物を、１０−５〜１０−１１Ｍの濃度範囲で二重に試験した。二重に測定した値を平均した。ＨＴＳまたはＣｏＲｅフォーマットのいずれにおいても、異なる継代に由来する細胞を用いて少なくとも３枚の異なるプレートにおいて各化合物を試験し、ｎ≧３とした。
【００９３】
【表２−１】
2008533158.tif 000016
【００９４】
【表２−２】
2008533158.tif 000017
上段の数値はラジオリガンド結合ＩＣ５０値（ｎＭ）
下段の数値は関数ＥＣ５０データ（ｎＭ）
【００９５】
本発明の制限を意図するわけではないが、表２に示す結果は本書に記載する化合物が選択的ＥＰ４アゴニストであることを示唆しており、従って炎症性腸疾患の処置に有用でありうる。
【００９６】
本書に記載する化合物は、緑内障または他の症状の処置に有用な他の薬剤と併用しても有用である。緑内障の治療において、以下の種類の薬剤との併用治療が考えられる：
β-ブロッカー（またはβ-アドレナリン拮抗薬）：  カルテオロール、レボブノロール、メチプラノロール、チモロール半水化物、マレイン酸チモロール、β1-選択的拮抗薬、例えばベタキソロール等、または薬学的に許容されるそれらの塩またはプロドラッグを包含する；
アドレナリン作用薬：  非選択的アドレナリン作用薬、例えば、ホウ酸エピネフリン、塩酸エピネフリンおよびジピベフリン等、または薬学的に許容されるそれらの塩またはプロドラッグ；および、α2-選択的アドレナリン作用薬、例えば、アプラクロニジン、ブリモニジン等、または薬学的に許容されるそれらの塩またはプロドラッグを包含する；
カルボニックアンヒドラーゼ阻害薬：  アセタゾールアミド、ジクロルフェナミド、メタゾラミド、ブリンゾラミド、ドルゾラミド等、または薬学的に許容されるそれらの塩またはプロドラッグを包含する；
コリン作用薬：  直接作用コリン作用薬、例えば、カルバコール、塩酸ピロカルピン、硝酸ピロカルビン、ピロカルピン等、または薬学的に許容されるそれらの塩またはプロドラッグ；コリンエステラーゼ阻害薬、例えば、デメカリウム、エコチオフェート、フィゾスチグミン等、または薬学的に許容されるそれらの塩またはプロドラッグを包含する；
【００９７】
グルタミン酸拮抗薬および他の神経保護剤、例えばCa2+チャネルブロッカー：  例えば、メマンチン、アマンタジン、リマンタジン、ニトログリセリン、デキストロファン、デキストロメトルファン、CGS-19755、ジヒドロピリジン類、ベラパミル、エモパミル、ベンゾチアゼピン、ベプリジル、ジフェニルブチルピペリジン類、ジフェニルピペラジン類、HOE 166および関連薬、フルスピリレン、エリプロジル、イフェンプロジル、CP-101,606、チバロシン、2309BTおよび840S、フルナリジン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、バルニジピン、ベラパミル、リドフラジン、乳酸プレニルアミン、アミロライド等、または薬学的に許容されるそれらの塩またはプロドラッグ；
プロスタミド：  例えばビマトプロスト、または薬学的に許容されるそれらの塩またはプロドラッグ；
プロスタグランジン：  トラボプロスト、UFO-21、クロプロステノール、フルプロステノール、13,14-ジヒドロ-クロプロステノール、イソプロピルウノプロストン、ラタノプロスト等を包含する；
カンナビノイド：  CB1拮抗薬、例えばWIN-55212-2およびCP-55940等、または薬学的に許容されるそれらの塩またはプロドラッグを包含する。
【００９８】
緑内障を包含する眼疾患の処置のためには、前記化合物を局所投与、眼周囲投与、眼内投与するか、または当分野で知られた他の有効な手段で投与しうる。
【００９９】
先の記載は、本発明を実施するのに使用しうる特定の方法および組成物を説明するものであり、考えられる最良の方式を示すものである。しかし、所望の薬理学的特性を有する他の化合物を同様の方法で製造することができ、開示した化合物を種々の出発化合物から種々の化学反応によって得られることは、当業者に明らかである。同様に、種々の医薬組成物を製造し、使用して、実質的に同じ結果を得ることもできる。従って、本文における先の記載がいかに詳細なものであっても、それは全般的範囲を限定するものと解すべきでなく、むしろ、本発明の範囲は、特許請求の範囲の法的解釈によってのみ制限されるものとする。
【図面の簡単な説明】
【０１００】
【図１】本発明の化合物を合成する可能な方法を説明する図である。
【図２】本発明の化合物を合成する可能な方法を説明する図である。
【図３】本発明の化合物を合成する可能な方法を説明する図である。
【図４】本発明の化合物を合成する可能な方法を説明する図である。
【図５】本発明の化合物を合成する可能な方法を説明する図である。
【図６】本発明の化合物を合成する可能な方法を説明する図である。
【図７】本発明の化合物を合成する可能な方法を説明する図である。
【図８】本発明の化合物を合成する可能な方法を説明する図である。
【図９】本発明の化合物を合成する可能な方法を説明する図である。
【図１】
2008533158.tif 000025
【図２】
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【図３】
2008533158.tif 000027
【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【国際調査報告】
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