(57)【要約】  式中の変数は本明細書に記載の通りである式：【化００１】2008523152.tif 000059で表される、ピペラジニル−ピリジン類縁体を提供する。 当該の化合物は、インビボ又はインビトロにおいて特定の受容体活性を調節するために使用できるリガンドであり、ヒト、ペット動物及び家畜における病的な受容体活性に関連する疾患の治療に特に有用である。当該の化合物を用いた医薬組成物及び方法がこのような疾患を治療するために提供され、そして当該のリガンドを受容体の局在化検討のために用いる方法が提供される。
2008523152.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化００１】
2008523152.tif 000049
[式中、
Ａｒ１は、Ｒ１からそれぞれ独立して選ばれる１〜４個の置換基で置換されている、フェニル又は５若しくは６員の芳香族の複素環であり；
【化００２】
2008523152.tif 000050
で表される基は、（ｉ）及び（ｉｉ）である複素環を示し；
（ｉ）複素環は、４〜１２員のＮ結合のヘテロシクロアルキル基であり、このヘテロアルキル基は、フェニル又は５若しくは６員のヘテロアリール環と縮合していてもよい；そして
（ｉｉ）複素環は、Ｒ２からそれぞれ独立して選ばれる０〜４個の置換基で置換されており；
Ｗは、ＣＨ又はＮであり；
Ｘ、Ｙ及びＺは、それぞれ独立して、ＣＲｘ又はＮであり、この場合、Ｘ、Ｙ及びＺの内の少なくとも１つは、Ｎであり；
Ｒｘは、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、アミノ、シアノ及びモノ−又はジ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノから、それぞれ独立して選ばれ；
Ｒ１の各々は、（ｉｉｉ）及び（ｉｖ）からそれぞれ独立して選ばれ；
（ｉｉｉ）は、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ＣＯＯＨ及びアミノカルボニルであり；そして
（ｉｖ）は、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ２アルキル）アミノから、それぞれ独立して選ばれる０〜３個の置換基で置換されている、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ２−Ｃ６アルキルエーテル、Ｃ２−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、Ｃ３−Ｃ６アルカノン、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルホニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニル並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノカルボニルであり；
Ｒ２の各々は、（ａ）及び（ｂ）からそれぞれ独立して選ばれ；
（ａ）は、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、−ＣＯＯＨ、アミノスルホニル、アミノカルボニル、オキソ及びニトロであり；そして
（ｂ）は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ、Ｃ２−Ｃ６アルキルエーテル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、Ｃ２−Ｃ６アルカノイルオキシ、Ｃ３−Ｃ６アルカノン、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノＣ０−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルホニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノカルボニル、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニルであり；
Ｒ３は、（Ｃ４−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ２アルキル又は式：
【化００３】
2008523152.tif 000051
（式中、
Ｌ１は、存在しないか、Ｃ１−Ｃ６アルキレン、又はＲ５若しくはＲ６と一緒になって、４〜７員の複素環を形成するＣ１−Ｃ６アルキレンであり；
Ｌ２は、存在しないか、Ｃ１−Ｃ６アルキレン、又はＲ７と一緒になって、４〜１２員の複素環を形成するＣ１−Ｃ６アルキレンであり；
Ｒ５及びＲ６は、
（ａ）水素、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、（Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルホニル、（４〜７員の複素環）Ｃ０−Ｃ６アルキル、及びＬ１と一緒になって、４〜１２員の複素環を形成する基から、それぞれ独立して選ばれるか；又は
（ｂ）一緒になって、４〜７員の複素環を形成し；そして
Ｒ７は、水素、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、（Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル）Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルカノイル、（４〜７員の複素環）Ｃ０−Ｃ６アルキル、又はＬ２と一緒になって、４〜１２員の複素環を形成する）
で表される基であり；
Ｒ３の各々は、（１）及び（２）から選ばれる０〜４個の置換基で置換されており；    （１）は、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、−ＣＯＯＨ、アミノスルホニル、オキソ、ニトロ及びアミノカルボニルであり、この場合、Ｌ２は、オキソで置換されていない；そして
（２）は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノＣ０−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルホニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニル、Ｃ２−Ｃ６アルカノイルアミノ、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノカルボニルＣ０−Ｃ４アルキルであり；
この場合、Ｒ３は、ｔｅｒｔ−ブチルアミノではなく；
Ｒ４は、環の炭素原子に位置する０〜２個の置換基を示し、そしてＣ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル及びオキソから、それぞれ独立して選ばれる］
で表される化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
ＺがＮである、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項３】
ＸがＮである、請求項１又は請求項２に記載の化合物又はその塩。
【請求項４】
ＹがＮである、請求項１〜３の何れか一項に記載の化合物又はその塩。
【請求項５】
前記化合物が、式：
【化００４】
2008523152.tif 000052
（式中、
Ａは、ＣＲ８Ｒ９、ＮＲ１０、Ｏ又はＳＯｎであり、この場合のｎは、０、１又は２であり；
Ｂは、ＣＨ又はＮであり；
Ｒ１は、（ｉｉｉ）及び（ｉｖ）からそれぞれ独立して選ばれる１〜２個の置換基を示し；
（ｉｉｉ）は、ハロゲン、シアノ、ＣＯＯＨ及びアミノカルボニルであり；そして
（ｉｖ）は、置換されていないか、又はヒドロキシ及びアミノから選ばれる１個の置換基で置換されている、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ２−Ｃ６アルキルエーテル、Ｃ２−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、Ｃ３−Ｃ６アルカノン、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルホニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニル並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノカルボニルであり；
Ｒ２は、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、アミノスルホニル、オキソ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノカルボニル、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニルから、それぞれ独立して選ばれる０、１又は２個の置換基を示し；
Ｒ８及びＲ９は、
（ａ）ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、アミノスルホニル、オキソ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニルから、それぞれ独立して選ばれるか；又は
（ｂ）一緒になって、スピロの５〜７員の炭素環又は複素環を形成し；
Ｒ１０は、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル又はＣ１−Ｃ６アルキルスルホニルであり；そして
Ｒｘは、水素、メチル、アミノ及びシアノから、それぞれ独立して選ばれる）
で表される、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項６】
前記化合物が、式：
【化００５】
2008523152.tif 000053
で表される、請求項５に記載の化合物又はその塩。
【請求項７】
前記化合物が、式：
【化００６】
2008523152.tif 000054
（式中、Ｒ８は、水素、ハロゲン又はメチルである）
で表される、請求項６に記載の化合物又はその塩。
【請求項８】
Ｒ５及びＲ６が、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル及びＣ１−Ｃ６アルキルスルホニルから、それぞれ独立して選ばれる、請求項６に記載の化合物又はその塩。
【請求項９】
Ｒ５及びＲ６が、一緒になって、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、オキソ、メチル及びエチルから、それぞれ独立して選ばれる０〜２個の置換基で置換されている、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン及びチオモルホリンから選ばれるヘテロシクロアルキルを形成する、請求項６に記載の化合物又はその塩。
【請求項１０】
Ｒ１が、
（ｉ）ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ＣＯＯＨ及びアミノカルボニル；及び
（ｉｉ）ヒドロキシ又はＣ１−Ｃ２アルコキシで、それぞれ独立して置換していてもよい、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルコキシカルボニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノ、Ｃ１−Ｃ４アルキルスルホニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノスルホニル並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノカルボニル；
からそれぞれ独立して選ばれる１又は２個の置換基を示す、請求項１〜９の何れかの一項に記載の化合物又はその塩。
【請求項１１】
Ｒ１が、ハロゲン、シアノ、ＣＯＯＨ、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ、Ｃ１−Ｃ３ヒドロキシアルコキシ及びＣ１−Ｃ３アルコキシカルボニルから、それぞれ独立して選ばれる１又は２個の置換基を示す、請求項１０に記載の化合物又はその塩。
【請求項１２】
前記化合物が、式：
【化００７】
2008523152.tif 000055
（式中、
Ａは、ＣＲ８Ｒ９、ＮＲ１０、Ｏ又はＳＯｎであり、この場合のｎは、０、１又は２であり；
Ｒ１ａ及びＲ１ｂは、水素、ハロゲン、アミノ、シアノ、ＣＯＯＨ、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４アルキルスルホニル、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノスルホニルから、それぞれ独立して選ばれ、この場合Ｒ１ａ及びＲ１ｂの内の少なくとも１つは、水素ではなく；
Ｒ２は、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、アミノスルホニル、オキソ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノカルボニル、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニルから、それぞれ独立して選ばれる０、１又は２個の置換基を示し；
Ｒ８及びＲ９は、
（ａ）ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、アミノスルホニル、オキソ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニルから、それぞれ独立して選ばれるか；又は
（ｂ）一緒になって、スピロの５〜７員の炭素環又は複素環を形成し；
Ｒ１０は、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル又はＣ１−Ｃ６アルキルスルホニルであり；そして
Ｒｘは、水素、メチル、アミノ及びシアノから、それぞれ独立して選ばれる）
で表される、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項１３】
前記化合物が、式：
【化００８】
2008523152.tif 000056
（式中、Ｒ８は、水素、ハロゲン又はメチルである）
で表される、請求項１２に記載の化合物又はその塩。
【請求項１４】
Ｒ５及びＲ６が、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル及びＣ１−Ｃ６アルキルスルホニルから、それぞれ独立して選ばれる、請求項１３に記載の化合物又はその塩。
【請求項１５】
Ｒ５及びＲ６が、一緒になって、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、オキソ、メチル及びエチルから、それぞれ独立して選ばれる０〜２個の置換基で置換されている、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン及びチオモルホリンから選ばれるヘテロシクロアルキルを形成する、請求項１３に記載の化合物又はその塩。
【請求項１６】
前記化合物が、式：
【化００９】
2008523152.tif 000057
（式中、
Ａは、ＣＲ８Ｒ９、ＮＲ１０、Ｏ又はＳＯｎであり、この場合のｎは、０、１又は２であり；
Ｄは，ＣＨ又はＮであり；
Ｒ１ａ及びＲ１ｃは、水素、ハロゲン、アミノ、シアノ、ＣＯＯＨ、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４アルキルスルホニル、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノスルホニルから、それぞれ独立して選ばれ、この場合Ｒ１ａ及びＲ１ｃの内の少なくとも１つは、水素ではなく；
Ｒ２は、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、アミノスルホニル、オキソ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノカルボニル、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニルから、それぞれ独立して選ばれる０、１又は２個の置換基を示し；
Ｒ８及びＲ９は、
（ａ）ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、アミノスルホニル、オキソ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニルから、それぞれ独立して選ばれるか；又は
（ｂ）一緒になって、スピロの５〜７員の炭素環又は複素環を形成し；
Ｒ１０は、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル又はＣ１−Ｃ６アルキルスルホニルであり；そして
Ｒｘは、水素、メチル、アミノ及びシアノから、それぞれ独立して選ばれる）
で表される、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項１７】
前記化合物が、式：
【化０１０】
2008523152.tif 000058
（式中、Ｒ８は、水素、ハロゲン又はメチルである）
で表される、請求項１６に記載の化合物又はその塩。
【請求項１８】
Ｒ５及びＲ６が、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル及びＣ１−Ｃ６アルキルスルホニルから、それぞれ独立して選ばれる、請求項１７に記載の化合物又はその塩。
【請求項１９】
Ｒ５及びＲ６が、一緒になって、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、オキソ、メチル及びエチルから、それぞれ独立して選ばれる０〜２個の置換基で置換されている、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン及びチオモルホリンから選ばれるヘテロシクロアルキルを形成する、請求項１７に記載の化合物又はその塩。
【請求項２０】
前記化合物が、
４−（４−ピペリジン−１−イル−６−｛４−［３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］ピペラジン−１−イル｝ピリミジン−２−イル）モルホリン；
４，４’−（６−｛４−［３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］ピペラジン−１−イル｝ピリミジン−２，４−ジイル）ジモルホリン；
４−（４−ピロリジン−１−イル−６−｛４−［３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］ピペラジン−１−イル｝ピリミジン−２−イル）モルホリン；
８−（２−モルホリン−４−イル−６−｛４−［３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］ピペラジン−１−イル｝ピリミジン−４−イル）−１，４−ジオキサ−８−アザスピロ［４，５］デカン；
［１−（２−モルホリン−４−イル−６−｛４−［３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］ピペラジン−１−イル｝ピリミジン−４−イル）ピペリジン−４−イル］メタノール；
１−（２−モルホリン−４−イル−６−｛４−［３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］ピペラジン−１−イル｝ピリミジン−４−イル）ピペリジン−４−カルボン酸エチル；
２−［１−（２−モルホリン−４−イル−６−｛４−［３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］ピペラジン−１−イル｝ピリミジン−４−イル）ピペリジン−４−イル］エタノール；
５−フルオロ−１−（２−モルホリン−４−イル−６−｛４−［３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル］ピペラジン−１−イル｝ピリミジン−４−イル）インドリン；
（５−メチル−６−｛３−メチル−４−［２−（２−メチルピロリジン−１−イル）−６−ピペリジン−１−イルピリミジン−４−イル］ピペラジン−１−イル｝ピリジン−３−イル）メタノール；
５−メチル−６−｛３−メチル−４−［２−（２−メチルピロリジン−１−イル）−６−ピペリジン−１−イルピリミジン−４−イル］ピペラジン−１−イル｝ニコチン酸；
６−｛４−［６−（４−フルオロピペリジン−１−イル）−２−（２−メチルピロリジン−１−イル）ピリミジン−４−イル］−３−メチルピペラジン−１−イル｝−５−メチルニコチン酸；
５−メチル−６−｛３−メチル−４−［２−（２−メチルピロリジン−１−イル）−６−ピペリジン−１−イルピリミジン−４−イル］ピペラジン−１−イル｝ニコチン酸エチル；及び
５−メチル−６−｛３−メチル−４−［２−（２−メチルピロリジン−１−イル）−６−ピペリジン−１−イルピリミジン−４−イル］ピペラジン−１−イル｝ニコチンアミド；
から選ばれる、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項２１】
前記化合物が、ＩＣ５０値に等しい化合物濃度で、カプサイシン受容体作動のインビトロアッセイにおいて、検出可能な程度のアゴニスト活性を示さない、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項２２】
前記化合物が、ＩＣ５０値の１０倍高い化合物濃度で、カプサイシン受容体作動のインビトロアッセイにおいて、検出可能な程度のアゴニスト活性を示さない、請求項２１に記載の化合物又はその塩。
【請求項２３】
前記化合物が、ＩＣ５０値の１００倍高い化合物濃度で、カプサイシン受容体作動のインビトロアッセイにおいて、検出可能な程度のアゴニスト活性を示さない、請求項２１に記載の化合物又はその塩。
【請求項２４】
前記化合物が、ＶＲ１アンタゴニストであり、そしてカプサイシン受容体のカルシウム非固定化アッセイにおいて、１マイクロモル以下のＩＣ５０値を有する、請求項１〜２３の何れか一項に記載の化合物又はその塩。
【請求項２５】
請求項１〜２３の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物又はその塩を、生理学的に許容される担体又は賦形剤と共に組み合わせて含有する医薬組成物。
【請求項２６】
前記組成物が、注射用液、エアロゾル、クリーム、ゲル、錠剤、カプセル、シロップ剤又は経皮パッチとして、製剤化される、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
カプサイシン受容体を発現する細胞に、請求項１〜２３の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物又はその塩を接触させ、これによりカプサイシン受容体のカルシウム透過性を低減することを含んでなる、細胞のカプサイシン受容体のカルシウム透過性を低減する方法。
【請求項２８】
前記細胞を、動物体内でインビボ接触させる、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記細胞が、神経細胞である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３０】
前記細胞が、尿路上皮細胞である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３１】
接触中に前記化合物又はその塩を、動物の体液中に存在させる、請求項２８に記載の方法。
【請求項３２】
前記化合物又はその塩を、１マイクロモル以下の濃度で動物の血液中に存在させる、請求項２８に記載の方法。
【請求項３３】
前記動物がヒトである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３４】
前記化合物又はその塩を経口で投与する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３５】
バニロイドリガンドがカプサイシン受容体に結合するのを検出可能な程度阻害するのに十分な量及び条件下で、カプサイシン受容体に請求項１〜２３の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物又はその塩を接触させることを含んでなる、バニロイドリガンドがインビトロでカプサイシン受容体に結合するのを阻害する方法。
【請求項３６】
バニロイドリガンドがインビトロでクローンのカプサイシン受容体を発現する細胞に結合するのを検出可能な程度阻害するのに十分な量で、カプサイシン受容体を発現している細胞に請求項１〜２３の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物又はその塩を接触させ、これにより患者においてバニロイドリガンドがカプサイシン受容体に結合するのを阻害することを含んでなる、患者においてバニロイドリガンドがカプサイシン受容体に結合するのを阻害する方法。
【請求項３７】
前記化合物を、１マイクロモル以下の濃度で患者の血液中に存在させる、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
患者に、請求項１〜２３の何れか一項に記載の化合物又はその塩の治療有効量を投与し、これにより患者の疾患を軽減することを含んでなる、患者のカプサイシン受容体調節の応答に関連する疾患を治療する方法。
【請求項３９】
前記患者が、（ｉ）カプサイシンへの暴露、（ｉｉ）熱への暴露による火傷若しくは炎症、（ｉｉｉ）光への暴露による火傷若しくは炎症、（ｉｖ）催涙ガス、感染性物質、大気汚染若しくは唐辛子スプレーへの暴露による、火傷、気管支収縮若しくは炎症、又は（ｖ）酸への暴露による火傷若しくは炎症に患っている、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記疾患が、喘息又は慢性閉塞性肺疾患である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
疼痛を患っている患者に、請求項１〜２３の何れか一項に記載の少なくとも１つの化合物又はその塩の治療有効量を投与し、これにより患者の疼痛を軽減することを含んでなる、患者の疼痛を治療する方法。
【請求項４２】
前記化合物を、１マイクロモル以下の濃度で患者の血液中に存在させる、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記患者が、神経性疼痛に患っている、請求項４１に記載の方法。
【請求項４４】
前記患者が、乳房切除後疼痛症候群、切断痛、幻肢痛、口腔内神経性疼痛、歯痛、ヘルペス後神経痛、糖尿病性神経障害、反射交感神経性ジストロフィー、三叉神経痛、変形性関節症、関節リウマチ、繊維筋痛、ギラン・バーレ症候群、知覚異常性大腿神経痛、口内焼灼感症候群、両側性末梢神経障害、灼熱痛、神経炎、ニューロン炎、神経痛、ＡＩＤＳ関連神経障害、ＭＳ関連神経障害、脊髄損傷関連の疼痛、手術関連の疼痛、筋骨格の疼痛、背中の疼痛、頭痛、片頭痛、狭心症、陣痛、痔、消化不良、シャルコー痛、腸内ガス、生理、ガン、毒汚染、過敏性腸症候群、炎症性大腸炎及び外傷から選ばれる疾患に苦しんでいる、請求項４１に記載の方法。
【請求項４５】
前記患者がヒトである、請求項５１に記載の方法。
【請求項４６】
患者に、請求項１〜２３の何れか一項に記載の化合物又はその塩の治療有効量を投与し、これにより患者の痒みを軽減することを含んでなる、患者の痒みを治療する方法。
【請求項４７】
患者に、請求項１〜２３の何れか一項に記載の化合物又はその塩の治療有効量を投与し、これにより患者の咳又はしゃっくりを軽減することを含んでなる、患者の咳又はしゃっくりを治療する方法。
【請求項４８】
患者に、請求項１〜２３の何れか一項に記載の化合物又はその塩の治療有効量を投与し、これにより患者の尿失禁又は過活動膀胱を軽減することを含んでなる、患者の尿失禁又は過活動膀胱を治療する方法。
【請求項４９】
患者に、請求項１〜２３の何れか一項に記載の化合物又はその塩の治療有効量を投与し、これにより患者の減量を促進することを含んでなる、肥満患者の減量を促進する方法。
【請求項５０】
前記化合物又はその塩が、放射性標識されている、請求項１〜２３の何れか一項に記載の化合物又はその塩。
【請求項５１】
（ａ）ＶＲ１調節剤がカプサイシン受容体と結合することが可能な条件下で、カプサイシン受容体に、請求項５０に記載の放射性標識の化合物又はその塩を接触させ、これにより結合した標識のＶＲ１調節剤を生成すること；
（ｂ）テスト薬剤の非存在下に於ける、結合した標識のＶＲ１調節剤の量に対応するシグナルを検出すること；
（ｃ）結合した標識のＶＲ１調節剤に、テスト薬剤を接触させる；
（ｄ）テスト薬剤の存在下に於ける、結合した標識のＶＲ１調節剤の量に対応するシグナルを検出すること；そして
（ｅ）工程（ｂ）で検出したシグナルと比較して、工程（ｄ）で検出されたシグナルの減少量を検出し、これによりカプサイシン受容体に結合する薬剤を同定すること；
からなる、カプサイシン受容体に結合する薬剤を同定する方法。
【請求項５２】
（ａ）当該化合物がカプサイシン受容体と結合することが可能な条件下で、サンプルに、請求項１に記載の化合物又はその塩を接触させること；
（ｂ）カプサイシン受容体に結合した化合物の量を検出し、それによりサンプル中のカプサイシン受容体の有無を決定すること；
の工程からなる、サンプル中のカプサイシン受容体の有無を決定する方法。
【請求項５３】
前記化合物が、放射性標識されている化合物であり、検出の工程が、
（ｉ）結合した化合物から結合していない化合物を分離すること；及び
（ｉｉ）サンプル中の結合した化合物の有無を検出すること；
の工程からなる、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
（ａ）容器中の請求項２５に記載の医薬組成物；及び
（ｂ）当該組成物を疼痛の治療に用いるための説明書；
を含有してなる、包装された医薬製剤。
【請求項５５】
（ａ）容器中の請求項２５に記載の医薬組成物；及び
（ｂ）当該組成物を咳又はしゃっくりの治療に用いるための説明書；
を含有してなる、包装された医薬製剤。
【請求項５６】
（ａ）容器中の請求項２５に記載の医薬組成物；及び
（ｂ）当該組成物を肥満の治療に用いるための説明書；
を含有してなる、包装された医薬製剤。
【請求項５７】
（ａ）容器中の請求項２５に記載の医薬組成物；及び
（ｂ）当該組成物を尿失禁又は過活動膀胱の治療に用いるための説明書；
を含有してなる、包装された医薬製剤。
【請求項５８】
カプサイシン受容体調節の応答に関連する疾患を治療する薬剤を製造するための、請求項１〜２３の何れか一項に記載の化合物又はその塩の使用。
【請求項５９】
疾患が、疼痛、喘息、慢性閉塞性肺疾患、咳、しゃっくり、肥満症、尿失禁若しくは過活動膀胱、カプサイシンへの暴露、熱への暴露による火傷若しくは炎症、光への暴露による火傷若しくは炎症、催涙ガス、感染性物質、大気汚染若しくは唐辛子スプレーへの暴露による火傷、気管支収縮若しくは炎症、又は酸への暴露による火傷若しくは炎症である、請求項５９に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は一般に、有用な薬理学的特性を有するピペラジニル−ピリジン類縁体に関する。本発明は更に、カプサイシン受容体の活性化に関連する疾患を治療するために、カプサイシン受容体に結合するその他の薬剤を同定するために、そしてカプサイシン受容体の検出及び局在化のためのプローブとして、当該化合物を使用することに関する。
【背景技術】
【０００２】
疼痛知覚、又は痛覚（侵害受容）には、「侵害受容体」という特化した知覚神経群の末梢ターミナルが介在している。多岐に亘る物理的及び化学的な刺激は、哺乳動物のこのような神経を活性化させるものであり、潜在的に有害な刺激の認知へとつながる。しかしながら、侵害受容体の不適切な又は過剰な活性化は、衰弱性の急性又は慢性の疼痛を生じさせる。
【０００３】
神経性疼痛は、刺激がなくても疼痛シグナルの伝達を生じ、主として神経系の損傷に起因している。ほとんどの場合、このような疼痛は末梢系の初期損傷（例えば、直接の損傷又は全身性疾患を介して）後の末梢及び中枢神経系の鋭敏化によって生じるものと考えられている。神経性疼痛は、一般にその強さにより、灼熱痛（burning）、疼くような痛み（shooting）及び強烈な間断のない（unrelenting）痛みであり、時には、その誘引となった初期の損傷又は病気を凌ぐほどのものである。
【０００４】
既存の神経性疼痛の治療法は、ほとんどが効果がない。モルヒネのような麻薬は強力な鎮痛薬であるが、その実用性は、身体的嗜癖、退薬性のような、更には呼吸障害、情緒変調、並びに付随性便秘、悪心、嘔吐、及び内分泌及び自律神経系の変化に伴う腸運動の低下のような、副作用のために限定されている。更に、神経性疼痛は従来のオピオイド鎮痛薬による治療に対して多くの場合は反応しないか又は部分的に反応するのみである。Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラテートアンタゴニストケタミン又はアルファ（２）−アドレナリンアゴニストクロニジンを用いる治療法は、急性又は慢性の疼痛を緩和することができ、オピオイド消費の減少を可能にするが、これらの薬剤は副作用のために症状を悪化させる場合がある。
【０００５】
カプサイシンを用いる局所療法が、神経性疼痛を含む慢性及び急性疼痛の治療に用いられている。カプサイシンはなす科（辛いチリ・ペパーを含む）植物から得られる刺激的な物質であり、痛みに介在するとされる小さな直径を有する求心性神経線維（Ａ−デルタ及びＣ繊維）上で特異的に作用するものとされている。カプサイシンに対する応答は、末梢組織の侵害受容体の持続的な活性化に続いて、１つ又はそれ以上の刺激に対して次第に末梢の侵害受容体が脱感作されるものと特徴付けられている。動物を用いた検討により、カプサイシンは、カルシウム及びナトリウムに対してカチオン選択性チャネルを開くことにより、Ｃ繊維膜の脱分極化を誘発するものと思われる。
【０００６】
同様の応答が、バニロイド部位を共通にするカプサイシンの構造的な類縁体によっても引き起こされる。そのような類縁体の１つは、ユーホルビア（Euphorbia）植物の天然生成物であるレシニフェラトキシン（resiniferatoxin：ＲＴＸ）である。バニロイド受容体（ＶＲ）という用語は、カプサイシン及びこれに関連する刺激性物質の神経膜認識部位を表すために造られた用語である。カプサイシンの応答はその他の類縁体、カプサゼピンによって競合的に阻害され（従って拮抗され）、また非選択的カチオンチャネルブロッカーのルテニウムレッドによっても阻害され、このブロッカーは中等度以下の親和性で（一般に１４０μＭ以上のＫｉ値で）ＶＲと結合する。
【０００７】
ラット及びヒトのバニロイド受容体は、脊髄後根神経節細胞（dorsal root ganglion cells）からクローン化されている。最初に同定されたバニロイド受容体の型は、バニロイド受容体１型（ＶＲ１）として知られているが、「ＶＲ１」及び「カプサイシン受容体」という用語は、ラット及び／又はヒトのこの型の受容体、更に哺乳動物の同属体を意味するもので、本明細書では同義的に用いられる。痛覚におけるＶＲ１の役割は、バニロイドが誘発する疼痛症状を示さず、熱及び炎症に対して応答障害を示す、当該受容体が欠如しているマウスを用いて確認された。ＶＲ１は、高温、低ｐＨ及びカプサイシン受容体アゴニストに応答して、チャネルを開く閾値が低くなる、非選択的なカチオンチャネルである。カプサイシン受容体チャンネルの開放は、一般に、この受容体を発現している神経細胞及び隣接する神経細胞からの炎症ペプチドの放出に引き続いて起こり、疼痛応答を増強させる。カプサイシンによる初期活性化の後に、カプサイシン受容体は、ｃＡＭＰ依存プロテインキナーゼによるリン酸化によって急速に脱感作を受ける。
【０００８】
末梢組織の侵害受容体を脱感作するこれらの能力により、ＶＲ１アゴニストであるバニロイド化合物は局所麻酔薬として使用されている。しかしながら、アゴニストの投与自体が灼熱痛を引き起こす場合があるため、治療への使用が制限されている。
最近、非バニロイド化合物を含むＶＲ１アンタゴニストも疼痛の治療に有用であることが報告されている（例えば、ＰＣＴ国際出願公開第ＷＯ０２／０８２２１号公報、同第ＷＯ０３／０６２２０９号公報、同第ＷＯ０４／０５４５８２号公報、同第ＷＯ０４／０５５０３号公報、同第ＷＯ０４／０５５００４号公報、同第ＷＯ０４／０５６７７４号公報、同第ＷＯ０５／００７６４６号公報、同第ＷＯ０５／００７６４８号公報、同第ＷＯ０５／００７６５２号公報、同第ＷＯ０５／００９９７７号公報、同第ＷＯ０５／００９９８０号公報及び同第ＷＯ０５／００９９８２号公報を参照されたい）。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
従って、ＶＲ１と相互に作用するが、ＶＲ１アゴニストであるバニロイド化合物のように初期疼痛を誘発しない化合物が、神経性疼痛、更にはカプサイシン受容体調節に応答するその他の疾患を含む、慢性及び急性の疼痛の治療には望ましい。本発明はこの要求を満たし、更に関連する効果を提供するものである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
（発明の要約）
本発明は、式Ｉで表されるピペラジニル−ピリジン類縁体、更にこのような化合物の薬学的に許容される塩を提供する。
【００１１】
【化０１１】
2008523152.tif 000003
【００１２】
式Ｉにおいて、
Ａｒ１は、Ｒ１からそれぞれ独立して選ばれる１〜４個の置換基で置換されている、フェニル又は５若しくは６員の芳香族の複素環であり；
【００１３】
【化０１２】
2008523152.tif 000004
【００１４】
で表される基は、（ｉ）及び（ｉｉ）である複素環を示し；
（ｉ）複素環は、４〜１２員のＮ結合のヘテロシクロアルキル基であり、このヘテロアルキル基は、フェニル又は５若しくは６員のヘテロアリール環と縮合していてもよく；そして
（ｉｉ）複素環は、Ｒ２からそれぞれ独立して選ばれる０〜４個の置換基で置換されており；
Ｗは、ＣＨ又はＮであり；
Ｘ、Ｙ及びＺは、それぞれ独立して、ＣＲｘ又はＮであり、この場合、Ｘ、Ｙ及びＺの内の少なくとも１つは、Ｎであり；
Ｒｘは、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル、アミノ、シアノ及びモノ−又はジ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノから、それぞれ独立して選ばれ；
Ｒ１の各々は、（ｉ）及び（ｉｉ）からそれぞれ独立して選ばれ；
（ｉ）は、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ＣＯＯＨ及びアミノカルボニルであり；そして
（ｉｉ）は、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、Ｃ１−Ｃ２アルコキシ並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ２アルキル）アミノから、それぞれ独立して選ばれる０〜３個の置換基で置換されている、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ２−Ｃ６アルキルエーテル、Ｃ２−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、Ｃ３−Ｃ６アルカノン、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルホニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニル、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノカルボニルであり；
【００１５】
Ｒ２の各々は、（ａ）及び（ｂ）からそれぞれ独立して選ばれ；
（ａ）は、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、−ＣＯＯＨ、アミノスルホニル、アミノカルボニル、オキソ及びニトロであり；そして
（ｂ）は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ、Ｃ２−Ｃ６アルキルエーテル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、Ｃ２−Ｃ６アルカノイルオキシ、Ｃ３−Ｃ６アルカノン、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノＣ０−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルホニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノカルボニル、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニルであり；
Ｒ３は、（Ｃ４−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ２アルキル又は式：
【００１６】
【化０１３】
2008523152.tif 000005
【００１７】
（式中、
Ｌ１は、存在しないか、Ｃ１−Ｃ６アルキレン、又はＲ５若しくはＲ６と一緒になって、４〜７員の複素環を形成するＣ１−Ｃ６アルキレンであり；
Ｌ２は、存在しないか、Ｃ１−Ｃ６アルキレン、又はＲ７と一緒になって、４〜１２員の複素環を形成するＣ１−Ｃ６アルキレンであり；
Ｒ５及びＲ６は、
（ａ）水素、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、（Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルホニル、（４〜７員の複素環）Ｃ０−Ｃ６アルキル、及びＬ１と一緒になって、４〜１２員の複素環を形成する基から、それぞれ独立して選ばれるか；又は
（ｂ）一緒になって、４〜７員の複素環を形成し；そして
Ｒ７は、水素、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、（Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルカノイル、（４〜７員の複素環）Ｃ１−Ｃ６アルキル、又はＬ２と一緒になって、４〜１２員の複素環を形成する）
で表される基であり；
Ｒ３の各々は、（１）及び（２）から、それぞれ独立して選ばれる０〜４個の置換基で置換されており；
（１）は、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、−ＣＯＯＨ、アミノスルホニル、オキソ、ニトロ及びアミノカルボニルであり、この場合、Ｌ２はオキソで置換されていない；そして
（２）は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノＣ０−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルホニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニル、Ｃ２−Ｃ６アルカノイルアミノ、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノカルボニルＣ０−Ｃ４アルキルであり；
この場合、Ｒ３は、ｔｅｒｔ−ブチルアミノではなく、そして
Ｒ４は、環の炭素原子に位置する０〜２個の置換基を示し、そしてＣ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル及びオキソから、それぞれ独立して選ばれる。
【００１８】
ある態様において、式Ｉで表される化合物は、ＶＲ１調節剤であり、カプサイシン受容体の結合アッセイにおいて、１マイクロモル、５００ナノモル、１００ナノモル、５０ナノモル、１０ナノモル又は１ナノモル以下のＫｉ値を示し、及び／又はカプサイシン受容体アゴニスト若しくはアンタゴニストの活性のインビトロ測定アッセイにおいて、１マイクロモル、５００ナノモル、１００ナノモル、５０ナノモル、１０ナノモル又は１ナノモル以下のＥＣ５０値又はＩＣ５０値を有している。
ある態様において、このようなＶＲ１調節剤は、ＶＲ１アンタゴニストであり、そしてカプサイシン受容体活性化のインビトロアッセイ（例えば、本明細書の実施例６のアッセイ）において、ＩＣ５０値に等しい、ＩＣ５０値の１０倍又はＩＣ５０値１００倍の濃度で、検出可能な程の作動活性を示さない。
【００１９】
ある態様において、本明細書で記載されているような化合物は、検出可能な標識（例えば、放射性標識又は蛍光結合）で標識されている。
その他の態様では、式Ｉで表される化合物の少なくとも１つを、生理的に許容される担体又は賦形剤と共に含有してなる医薬組成物を提供する。
【００２０】
更なる態様において、カプサイシン受容体を発現している細胞（例えば、中枢神経系及び／又は末梢神経節、尿路上皮、又は肺のような、神経細胞）に、本明細書に記載されているような、少なくとも１つのＶＲ１調節剤を接触させることからなる、細胞カプサイシン受容体のカルシウム透過性を減少させる方法を提供する。このような接触は、インビボ又はインビトロで実施してもよく、そして一般にインビトロでバニロイドリガンドのＶＲ１への結合（実施例５に示されるアッセイを用いて）及び／又はＶＲ１介在のシグナル伝達（実施例６に示されるアッセイを用いて）を、変化させるのに十分なＶＲ１調節剤濃度を用いて実施される。
【００２１】
バニロイドリガンドのカプサイシン受容体との結合を阻害する方法も更に提供される。このような態様においては、この阻害がインビトロで行われる。このような方法は、バニロイドリガンドがカプサイシン受容体に結合するのを検出可能な程阻害するのに充分な量又は濃度及び条件下で、カプサイシン受容体に本明細書に記載されているような少なくとも１つのＶＲ１調節剤を接触させることを包含する。その他のこのような態様では、カプサイシン受容体は患者の体内にある。このような方法は、患者体内のカプサイシン受容体を発現している細胞に、インビトロでバニロイドリガンドがクローンのカプサイシン受容体を発現する細胞に結合するのを検出可能な程阻害するのに充分な量又は濃度で、本明細書に記載されているような少なくとも１つのＶＲ１調節剤を接触させることを包含する。
【００２２】
本発明は更に、本明細書に記載されているような少なくとも１つのＶＲ１調節剤の治療有効量を、患者に投与することからなる、患者のカプサイシン受容体調節の応答に関連する疾患を治療する方法を提供する。
その他の態様において、本明細書に記載されているような少なくとも１つのＶＲ１調節剤の治療有効量を、疼痛に罹っている（又は罹りやすい）患者に投与することからなる、患者の疼痛を治療する方法を提供する。
【００２３】
痒み、尿失禁、過活動膀胱、咳及び／又はしゃっくりの症状の１つ又はそれ以上に罹っている（又は罹りやすい）患者に、本明細書に記載されているような少なくとも１つのＶＲ１調節剤の治療有効量を投与することからなる、患者における痒み、尿失禁、過活動膀胱、咳及び／又はしゃっくりを治療する方法が、更に提供される。
本発明は更に、本明細書に記載されているような少なくとも１つのＶＲ１調節剤の治療有効量を、肥満患者に投与することからなる、肥満患者の減量を促進する方法を提供する。
【００２４】
（ａ）当該化合物がカプサイシン受容体と結合できる条件下に、カプサイシン受容体に本明細書に記載のような標識化合物を接触させて、これにより結合した標識化合物を生成すること；
（ｂ）テスト薬剤の非存在下で、結合した標識化合物の量に相当するシグナルを検出すること；
（ｃ）結合した標識化合物に、テスト薬剤を接触させること；
（ｄ）テスト薬剤の存在下で、結合した標識化合物の量に相当するシグナルを検出すること；そして
（ｅ）工程（ｂ）で検出されるシグナルと比較して、工程（ｄ）で検出されるシグナルの減少を測定すること；
からなる、カプサイシン受容体に結合する薬剤を同定するための方法を更に提供する。
【００２５】
更なる態様によれば、本発明は、（ａ）当該化合物がカプサイシン受容体と結合することが可能な条件で、サンプルに本明細書に記載されているような化合物を接触させること；そして（ｂ）当該化合物がカプサイシン受容体と結合するレベルを示すシグナルを検出すること；からなる、サンプル中に於けるカプサイシン受容体の有無を決定する方法を提供する。
【００２６】
本発明はまた、（ａ）容器中の本明細書に記載されているような医薬組成物；及び（ｂ）疼痛、痒み、尿失禁、過活動膀胱、咳、しゃっくり及び／又は肥満のような、カプサイシン受容体調節の応答に関連する１つ又はそれ以上の疾患の治療に、当該化合物を使用するための使用説明書を含有してなる、包装された医薬組成物を提供する。
【００２７】
更に別な態様によれば、本発明は中間体を含め、本明細書に開示されている化合物の製造方法を提供する。
本発明のこれら及びその他の態様は、以下の詳細な説明を参照することにより明瞭となるであろう。
【００２８】
（発明の詳細な説明）
上で述べたように、本発明は、ピペラジニル−ピリジン類縁体を提供する。このような化合物は、インビトロ又はインビボで、カプサイシン受容体の活性を調節するために様々な状況下で使用できる。
【００２９】
（用語）  
化合物は一般に、本明細書には標準の命名法を用いて記載されている。不斉中心を有する化合物については、（特定される以外は）全ての光学異性体及びこれらの混合物は範囲内であることを理解すべきである。更に、炭素−炭素２重結合を有する化合物は、Ｚ体及びＥ体を生じ、特定される以外は、全ての異性体の化合物が本発明に含まれる。多種の互変異性体の形態で存在する化合物においては、表示されている化合物は一つの特定の互変異性体に限定されず、むしろ全ての互変異性体の形態を含むように意図されている。本明細書では、ある特定の化合物は、可変基（例えば、Ｒ１、Ｘ、Ａｒ２）を含む一般式を用いて記載されている。そのような式の可変基のそれぞれは、特に定められていない限り、その他の可変基からそれぞれ独立して定義されており、式中に１回以上現れる何れの可変基も、その都度それぞれ独立して定義される。
【００３０】
本明細書で用いられる「ピペラジニル−ピリジン類縁体」という用語は、式Ｉで表される全ての化合物、更に本明細書で提供されるその他の式の化合物（エナンチオマー、ラセミ体及び立体異性体を包含する）及びこのような化合物の薬学的に許容される塩も包含する。つまり、コアの芳香族環：
【００３１】
【化０１４】
2008523152.tif 000006
【００３２】
が、ピリジル、ピリミジル又はトリアジニル（例えば、
【００３３】
【化０１５】
2008523152.tif 000007
【００３４】
）である、化合物は、特にピペラジニル−ピリジン類縁体の定義に包含される。同様に、コアのヘテロシクロアルキル環：
【００３５】
【化０１６】
2008523152.tif 000008
【００３６】
が、ピペラジン又はピペリジン（置換されていてもよい）である、化合物は、特にピペラジニル−ピリジン類縁体の定義に包含される。
【００３７】
化合物の「薬学的に許容される塩」は、化合物の酸又は塩基の塩形態であり、この塩形態は、過度な毒性及び発ガン性がなく、そして好ましくは、刺激、アレルギー反応又はその他の問題若しくは合併症をもたらさずに、ヒト又は動物の組織に接触させて用いるのに適していると、当該技術分野で一般に認められているものである。このような塩は、アミンのような塩基残基の無機及び有機酸塩を、更にカルボン酸のような酸残基のアルカリ又は有機塩を包含する。具体的な薬学的な塩は、これらに限定されないが、塩酸、リン酸、臭化水素酸、リンゴ酸、グリコール酸、フマル酸、硫酸、スルファミン酸、スルファニル酸、ギ酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、エタンジスルホン酸、２−ヒドロキシエチルスルホン酸、硝酸、安息香酸、２−アセトキシ安息香酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、ステアリン酸、サリチル酸、グルタミン酸、アスコルビン酸、パモン酸、コハク酸、フマール酸、マレイン酸、プロピオン酸、ヒドロキシマレイン酸、ヨウ化水素酸、フェニル酢酸、酢酸のようなアルカン酸、ＨＯＯＣ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ（ｎは、０〜４である）等のような酸の塩を包含する。同様に薬学的に許容されるカチオンは、これらに限定されないが、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アルミニウム、リチウム及びアンモニウムを包含する。当業者は、本発明で提供される化合物のための更なる薬学的に許容される塩が、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎの「The Science and Practice of Pharmacy, 21st ed., Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, PA (2005)」に記載されているものを包含していることを認識するであろう。一般的に、薬学的に許容される酸又は塩基の塩は、塩基又は酸の部位を含んでいる親化合物から慣用の化学的方法の何れかにより合成することができる。つまり、このような塩は、これらの化合物の遊離の酸又は塩基形態に、水、有機溶媒又はこれらの混合物中で化学量論的な量の適当な塩又は酸を反応させることによって製造でき、一般的に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール又はアセトニトリルのような非水溶媒の使用が好ましい。
【００３８】
式Ｉで表される化合物の各々は、水和物、溶媒和物又は非共有結合錯体の形態とすることができるが、必ずしも必要というわけではない。更に、各種の結晶形及び多形体は、本発明の範囲内である。式Ｉの化合物のプロドラッグも本明細書で提供される。
「プロドラッグ」は、本明細書で提供される化合物の構造的な要求を完全に充たすものではないが、患者へ投与した後に、インビボで修飾されて、本明細書に示される式Ｉ又はその他の式で表される化合物を生成するものである。例えば、プロドラッグは本発明の化合物のアシル化誘導体であってよい。プロドラッグは、哺乳動物対象に投与した後に開裂してそれぞれ遊離のヒドロキシ、アミノ又はメルカプト基を形成する、ヒドロキシ、アミノ又はメルカプト基と任意の基とが結合する化合物を包含している。プロドラッグの例は、これらに限定されないが、本発明の化合物中のアルコール及びアミン官能基の酢酸、ギ酸及び安息香酸の誘導体を包含する。本発明の化合物のプロドラッグは、化合物中に存在する官能基を、修飾体がインビボで開裂して親化合物になるような方法で、修飾することによって調製することができる。
【００３９】
本明細書で用いられる「アルキル」という用語は、直鎖又は分枝鎖の飽和脂肪族炭化水素を示す。アルキル基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、２−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、２−ヘキシル、３−ヘキシル及び３−メチルペンチルのような、１〜８個の炭素原子の（Ｃ１−Ｃ８アルキル）、１〜６個の炭素原子の（Ｃ１−Ｃ６アルキル）及び１〜４個の炭素原子の（Ｃ１−Ｃ４アルキル）を有する基を包含する。
「Ｃ０−Ｃｎアルキル」は、単共有結合（Ｃ０）又は１〜ｎ個炭素原子を有するアルキル基を示し；例えば、「Ｃ０−Ｃ４アルキル」は、単共有結合又はＣ１−Ｃ４アルキルを示し；「Ｃ０−Ｃ８アルキル」は、単共有結合又はＣ１−Ｃ８アルキル基を示す。幾つかの事例では、アルキル基の置換基は、特別に指示されている。例えば、「ヒドロキシアルキル」は、少なくとも１つのヒドロキシ置換基で置換されているアルキル基を示す。
【００４０】
「アルキレン」は、上で定義されるような２個の結合手のアルキル基を示す。Ｃ０−Ｃ３アルキレンは、単共有結合又は１、２又は３個の炭素原子を有するアルキレン基であり；Ｃ０−Ｃ４アルキレンは、単共有結合又は１〜４個の炭素原子を有するアルキレン基であり；そして、Ｃ１−Ｃ６アルキレンは、１〜６個の炭素原子を有するアルキレン基である。
【００４１】
「アルケニル」は、少なくとも１つの不飽和の炭素−炭素の二重結合を包含する、直鎖又は分枝鎖のアルケン基である。アルケニル基は、エテニル、アリル又はイソプロペニルのような、それぞれ２〜８個、２〜６個又は２〜４個の炭素原子を有する、Ｃ２−Ｃ８アケニル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル及びＣ２−Ｃ４アルケニル基を包含する。
「アルキニル」は、１つ又はそれ以上の不飽和の炭素−炭素結合を有し、それらの少なくとも１つは三重結合である、直鎖又は分枝鎖のアルキン基を示す。アルキニル基は、それぞれ２〜８個、２〜６個又は２〜４個の炭素原子を有する、Ｃ２−Ｃ８アルキニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル及びＣ２−Ｃ４アルキニル基を包含する。
【００４２】
「シクロアルキル」は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、アダマンチル、デカヒドロ−ナフタレニル、オクタヒドロ−インデニル、及びシクロヘキセニルのようなこれらの部分飽和変異体のような、全ての環員が炭素である、１つ又はそれ以上の飽和及び／又は部分飽和の環を含有する基である。シクロアルキル基は、芳香族環及び複素環を包含しない。ある特定のシクロアルキル基は、３〜８の環員原子を有し、全てが炭素である単環を含む、Ｃ３−Ｃ８シクロアルキルである。「（Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ４アルキル」は、単共有結合又はＣ１−Ｃ４アルキル基を介して結合する３〜８員のシクロアルキル基である。
【００４３】
本明細書で用いられる「アルコキシ」は、酸素結合を介して結合している上記のようなアルキル基を意味する。アルコキシ基は、それぞれ１〜６個又は１〜４個の炭素原子を有する、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ及びＣ１−Ｃ４アルコキシ基を包含する。メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｎ−ペントキシ、２−ペントキシ、３−ペントキシ、イソペントキシ、ネオペントキシ、ヘキソキシ、２−ヘキソキシ、３−ヘキソキシ及び３−メチルペントキシが、具体的なアルコキシ基である。
同様に、「アルキルチオ」は、硫黄結合を介して結合している上記のようなアルキル基を示す。
【００４４】
本明細書で用いられる「オキソ」という用語は、ケト基（Ｃ＝Ｏ）を示す。非芳香族炭素原子の置換基であるオキソ基は、−ＣＨ２−の−Ｃ＝Ｏ−への変換をもたらす。
【００４５】
「アルカノイル」という用語は、炭素原子が直鎖又は分枝鎖状にアルキル配列していて、ケト基の炭素を介して結合する、アシル基（例えば、−（Ｃ＝Ｏ）−アルキル）を示す。アルカノイル基は、指示された数の炭素原子を有し、ケト基の炭素がその数えられた炭素原子の数に含まれる。例えば、Ｃ２アルカノイル基は、式：−（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ３を有するアセチル基である。アルカノイル基は、例えば、それぞれ２〜８個、２〜６個又は２〜４個の炭素原子を有する、Ｃ２−Ｃ８アルカノイル、Ｃ２−Ｃ６アルカノイル及びＣ２−Ｃ４アルカノイル基を包含する。「Ｃ１アルカノイル」は、−（Ｃ＝Ｏ）Ｈを示し、（Ｃ２−Ｃ８アルカノイルと共に）「Ｃ１−Ｃ８アルカノイル」という用語によって包含される。
【００４６】
「アルカノン」は、炭素原子が直鎖又は分枝鎖状にアルキル配列しているケトン基である。「Ｃ３−Ｃ８アルカノン」、「Ｃ３−Ｃ６アルカノン」及び「Ｃ３−Ｃ４アルカノン」は、それぞれ３〜８個、６個又は４個の炭素原子を有するアルカノンを示す。Ｃ３アルカノン基は、構造：−ＣＨ２−（Ｃ＝Ｏ）−ＣＨ３を有する。
【００４７】
同様に、「アルキルエーテル」は、直鎖又は分枝鎖のエーテル置換基を示す。アルキルエーテル基は、それぞれ２〜８個、６個又は４個の炭素原子を有する、Ｃ２−Ｃ８アルキルエーテル、Ｃ２−Ｃ６アルキルエーテル及びＣ２−Ｃ４アルキルエーテル基を包含する。Ｃ２アルキルエーテル基は、構造：−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３を有する。
【００４８】
「アルコキシカルボニル」という語は、ケト（−（Ｃ＝Ｏ）−）結合を介して結合しているアルコキシ基（すなわち、一般構造：−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−アルキルを有する基）を示す。アルコキシカルボニル基は、その基のアルキル部にそれぞれ１〜８個、６個又は４個の炭素原子を有する（すなわち、ケト結合の炭素は指示された炭素数に含まれない）、Ｃ１−Ｃ８、Ｃ１−Ｃ６及びＣ１−Ｃ４アルコキシカルボニル基を包含する。「Ｃ１アルコキシカルボニル」は、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−ＣＨ３を示し、Ｃ３アルコキシカルボニルは、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）２ＣＨ３又は−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ）（ＣＨ３）２を示す。
【００４９】
本明細書で用いられる「アルカノイルオキシ」は、酸素結合を介して結合しているアルカノイル基（すなわち、一般構造：−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキルを有する基）を示す。アルカノイルオキシ基は、それぞれ２〜８個、６個又は４個の炭素原子を有する、Ｃ２−Ｃ８、Ｃ２−Ｃ６及びＣ２−Ｃ４アルカノイルオキシ基を包含する。例えば、「Ｃ２アルカノイルオキシ」は、−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ３を示す。
【００５０】
同様に、本明細書で用いられる「アルカノイルアミノ」は、窒素結合を介して結合しているアルカノイル基（すなわち、一般構造：−Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−アルキルを有する基）を示す。アルカノイルアミノ基は、それぞれ２〜８個、６個又は４個の炭素原子を有する、Ｃ２−Ｃ８、Ｃ２−Ｃ６及びＣ２−Ｃ４アルカノイルアミノ基を包含する。
【００５１】
「アルキルスルホニル」は、式：−（ＳＯ２）−アルキルの基を示し、ここでは硫黄原子が結合点である。アルキルスルホニル基は、それぞれ１〜６個又は１〜４個の炭素原子を有するＣ１−Ｃ６アルキルスルホニル及びＣ１−Ｃ４アルキルスルホニル基を包含する。メチルスルホニルは、代表的なアルキルスルホニル基の１つである。「Ｃ１−Ｃ４ハロアルキルスルホニル」は、１〜４個の炭素原子を有して、少なくとも１個のハロゲンで置換されているアルキルスルホニル基（例えば、トリフルオロメチルスルホニル）である。
【００５２】
「アミノスルホニル」は、式：−（ＳＯ２）−ＮＨ２の基を示し、ここでは硫黄原子が結合点である。「モノ−又はジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニル」という用語は、式：−（ＳＯ２）−ＮＲ２を満たす基を示し、この場合、硫黄原子が結合点であり、一方のＲがＣ１−Ｃ６アルキルで、他方のＲが、水素又は独立して選ばれるＣ１−Ｃ６アルキルである。
【００５３】
「アルキルアミノ」は、一般構造：−ＮＨ−アルキル又は−Ｎ（アルキル）（アルキル）を有する２級又は３級アミンを示し、ここにおいて、アルキルの各々は、同一でも異なっていてもよい。このような基は、例えば、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ８アルキル）アミノ基を包含し、ここにおいて、Ｃ１−Ｃ８アルキルアルキル基の各々は同一でも異なっていてもよく、更にモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ基並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノ基も包含する。
【００５４】
「アルキルアミノアルキル」は、アルキレン基を介して結合しているアルキルアミノ基（すなわち、一般構造：−アルキレン−ＮＨ−アルキル又は−アルキレン−Ｎ（アルキル）（アルキル）を有する基）を示し、アルキルの各々は、それぞれ独立して選ばれる。アルキルアミノアルキル基は、例えば、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ８アルキル）アミノＣ１−Ｃ８アルキル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノＣ１−Ｃ６アルキル並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノＣ１−Ｃ４アルキルを包含する。「モノ−又はジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノＣ０−Ｃ６アルキル」は、単共有結合又はＣ１−Ｃ６アルキレン基を介して結合しているモノ−又はジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ基を示す。
以下は代表的アルキルアミノアルキル基である。
【００５５】
【化０１７】
2008523152.tif 000009
【００５６】
「アミノカルボニル」という用語は、アミド基（すなわち、−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ２）を示す。「モノ−又はジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノカルボニル」は、式：−（Ｃ＝Ｏ）−Ｎ（Ｒ）２を示し、この場合、カルボニルが結合点であり、一方のＲがＣ１−Ｃ６アルキルで、他方のＲが水素又は独立して選ばれるＣ１−Ｃ６アルキルである。「モノ−又はジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノカルボニルＣ０−Ｃ４アルキル」は、単共有結合又はＣ１−Ｃ４アルキレンを介して結合しているモノ−又はジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノカルボニルである（すなわち、−（Ｃ０−Ｃ４アルキル）−（Ｃ＝Ｏ）Ｎ（Ｃ１−Ｃ８アルキル）２）。
「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素を示す。
【００５７】
「ハロアルキル」は、それぞれ独立して選ばれる１つ又はそれ以上のハロゲン原子で置換されている、アルキル基（例えば、「Ｃ１−Ｃ８ハロアルキル」基は、１〜８個の炭素原子を有し、「Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル」基は、１〜６個の炭素原子を有する）である。ハロアルキル基の例は、これらに限定されないが、モノ−、ジ−又はトリ−フルオロメチル；モノ−、ジ−又はトリ−クロロメチル；モノ−、ジ−、トリ−、テトラ−又はペンタ−フルオロエチル；モノ−、ジ−、トリ−、テトラ−又はペンタ−クロロエチル；及び１，２，２，２−テトラフルオロ−１−トリフルオロメチル−エチルを包含する。代表的なハロアルキル基は、トリフルオロメチル及びジフルオロメチルである。「ハロアルコキシ」という用語は、酸素結合を介して結合している、上で定義したハロアルキル基を示す。「Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ」基は、１〜６個の炭素原子を有する。
２つの文字又は記号の間にない、ダッシュ（「−」）は、置換基の結合位置を示すために用いられている。例えば、−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ２は、炭素原子を介して結合している。
【００５８】
「炭素環」又は「炭素環基」は、全てが炭素−炭素結合で形成されている環（本明細書では炭素環として示す）を少なくとも１つ含有しており、複素環を含んでいない。特定する以外は、炭素環基中の各々の環は、それぞれ独立して飽和、部分飽和又は芳香族であってもよく、指示されているように置換されていてもよい。炭素環は一般に、１〜３個の縮合、懸吊又はスピロ環を有し；ある特定の態様における炭素環は、１個の環又は２個の縮合環を有している。通常、各々の環は、３〜８個の環員原子を含み（すなわち、Ｃ３−Ｃ８）；縮合、懸吊又はスピロ環からなる炭素環は、通常９〜１４個の環員原子を含んでいる。ある特定の炭素環は、Ｃ５−Ｃ７（つまり、５、６又は７個の環員）である。炭素環のある代表例は、上記のようなシクロアルキルである。その他の炭素環は、アリール（すなわち、１個又はそれ以上の追加の芳香族環及び／又はシクロアルキル環を有するか又は有しない、少なくとも１つの芳香族炭素環を含有している）である。このようなアリール炭素環は、例えば、フェニル、ナフチル（例えば、１−ナフチル及び２−ナフチル）、フルオレニル、インダニル及び１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフチルを包含する。
【００５９】
「複素環」又は「複素環基」は、１〜３個の縮合、懸吊又はスピロ環を有し、それらの環の少なくとも１つが複素環（すなわち、１つ又はそれ以上の環員原子が、Ｏ、Ｓ及びＮからそれぞれ独立して選ばれるヘテロ原子で、残りの環員原子が炭素原子である）である。追加の環が、もし存在するならば、複素環又は炭素環であってもよい。一般に、複素環は、１、２、３又は４個のヘテロ原子を含み；ある特定の態様によれば、各々の複素環は、環当り１又は２個のヘテロ原子を有する。各々の複素環は、一般に３〜８個の環員原子を含み（ある特定の態様では、４又は５〜７個の環員原子を有する環）、そして縮合、懸吊又はスピロ環を含む複素環は、一般に９〜１４個の環員原子を含んでいる。ある特定の複素環は、環員原子として硫黄を含有し、ある特定の態様においては、この硫黄原子は、ＳＯ又はＳＯ２に酸化されている。複素環は、指示されるような種々の置換基で置換されていてもよい。特定しない限り、複素環は、ヘテロシクロアルキル基（すなわち、各々の環が、飽和又は部分飽和である）又は５〜１０員のヘテロアリール（これは、単環式でも二環式であってもよい）若しくは６員のヘテロアリール（例えば、ピリジル又はピリミジル）のような、ヘテロアリール基（すなわち、基の少なくとも１つの環が、芳香族である）であってもよい。特定しない限り、複素環基は、安定な化合物となるならば、環の何れの原子を介して結合していてもよい。Ｎ−結合の複素環基は、環の窒素原子を介して結合している。
【００６０】
複素環基は、例えば、アクリジニル、アゼパニル、アゾシニル、ベンズイミダゾリル、ベンズイミダゾリニル、ベンズイソチアゾリル、ベンズイソキサゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフラニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンズトリアゾリルカルバゾリル、ベンズテトラゾリル、ＮＨ−カルバゾリル、カルボリニル、クロマニル、クロメニル、シンノリニル、デカヒドロキノリニル、ジヒドロフロ［２，３−ｂ］テトラヒドロフラニル、ジヒドロイソキノリニル、ジヒドロテトラヒドロフラニル、１，４−ジオキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−８−イル、ジチアジニル、フラニル、フラザニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、イミダゾリル、インダゾリル、インドレニル、インドリニル、インドリジニル、インドリル、イソベンゾフラニル、イソクロマニル、イソインダゾリル、イソインドリニル、イソインドリル、イソチアゾリル、イソキサゾリル、イソキノリニル、モルホリニル、ナフチリジニル、オクタヒドロイソキノリニル、オキサジアゾリル、オキサゾリジニル、オキサゾリル、フェナントリジニル、フェナントロリニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサチイニル、フェノキサジニル、フタラジニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリジニル、ピペリドニル、プテリジニル、プリニル、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリドイミダゾリル、ピリドオキサゾリル、ピリドチアゾリル、ピリジル、ピリミジル、ピロリジニル、ピロリドニル、ピロリニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、キノキサリニル、キヌクリジニル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、テトラゾリル、チアジアジニル、チアジアゾリル、チアントレニル、チアゾリル、チエノチアゾリル、チエノオキサゾリル、チエノイミダゾリル、チエニル、チオフェニル、チオモルホリニル及び硫黄原子が酸化されたその変異体、トリアジニル、キサンテニル及び前述のような１〜４個の置換基で置換されている前記のものを包含する。
【００６１】
「複素環Ｃ０−Ｃ８アルキル」は、単共有結合又はＣ１−Ｃ８アルキレン基を介して結合している複素環基である。（４〜７員の複素環）Ｃ０−Ｃ６アルキルは、単共有結合又は１〜６個の炭素原子を有するアルキレン基を介して結合している４〜７個の環員原子を有する複素環基である。
【００６２】
ある特定の複素環は、１個の複素環又は２個の縮合、懸吊又はスピロ環を含有し、置換されていてもよい、４〜１２員、４〜７員又は５〜６員の基である。４〜１２員のヘテロシクロアルキル基は、例えば、ピペリジニル、ピペラジニル、ピロリジニル、アゼパニル、１，４−ジオキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−８−イル、モルホリニル、チオモルホリニル及び１，１−ジオキソ−チオモルホリン−４−イルを包含し、このような基は、指示されているように置換されていてもよい。代表的な芳香族複素環は、ピリジル、ピリミジル、イミダゾリル、テトラゾリル及び３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−イルである。
【００６３】
本明細書で用いられる「置換基」は、対象の分子中の原子に共有結合している分子の部分（基）を示す。例えば、環の置換基は、環員である原子（好ましくは、炭素又は窒素原子）に共有結合しているハロゲン、アルキル基、ハロアルキル基又はその他の基のような基であってよい。芳香族基の置換基は、一般に環の炭素原子に共有結合している。「置換」という用語は、分子構造中の水素原子を置換基で、指定された原子の原子価が過剰にならないように、かつ置換の結果化学的に安定な化合物（すなわち、単離でき、特定化でき、生物活性をテストすることができる化合物）が得られるように、置き換えることを示す。
【００６４】
「置換されていてもよい」基は、非置換であるか、又は水素以外のもので１つ又はそれ以上の可能な位置、具体的には１、２、３、４又は５位を、１つ又はそれ以上の適当な基（これは、同一でも異なっていてもよい）で置換されている。置換されていてもよいは、「０〜Ｘ個の置換基で置換されている」（ここにおいて、Ｘは置換可能な最大数である）という語句でも表される。ある特定の置換されていてもよい基は、０〜２、３又は４個のそれぞれ独立して選ばれる置換基で置換されている（すなわち、これらは非置換であるか、又は挙げられている置換基の最大数まで置換されている）。その他の置換されていてもよい基は、少なくとも１個の置換基で置換されている（例えば、１〜２個、３個又は４個のそれぞれ独立して選ばれる置換基で置換されている）。
【００６５】
「ＶＲ１」及び「カプサイシン受容体」という用語は、本明細書ではどちらもバニロイド受容体１型を示す同義語として用いられている。他に特定されない限り、これらの用語は、ラット及びヒトのＶＲ１受容体の両方（例えば、ＧｅｎＢａｎｋの受託番号ＡＦ３２７０６７、ＡＪ２７７０２８及びＮＭ ０１８７２７；特定のヒトＶＲ１のｃＤＮＡ配列表及びそのコードするアミノ酸配列は、米国特許第６，４８２，６１１号に示されている）を含み、更にその他の種で見出されるこれらの同族体をも含む。
【００６６】
「ＶＲ１調節剤」（本明細書では「調節剤」とも示される）は、ＶＲ１活性化及び／又はＶＲ１が介在するシグナル伝達を調節する化合物である。本明細書で具体的に提供されるＶＲ１調節剤は、式Ｉの化合物及びそれらの薬学的に許容される塩である。ある好ましいＶＲ１調節剤は、バニロイドではない。ＶＲ１調節剤は、ＶＲ１のアゴニスト又はアンタゴニストであってもよい。ある特定の調節剤は、１マイクロモル未満、好ましくは５００ナノモル、１００ナノモル、１０ナノモル又は１ナノモル未満のＫｉ値でＶＲ１と結合する。ＶＲ１におけるＫｉ値を測定する代表的なアッセイは、本明細書の実施例５に提供されている。
【００６７】
調節剤は、バニロイドリガンドのＶＲ１との結合及び／又はＶＲ１が介在するシグナル伝達（例えば、実施例６で提供されている代表的なアッセイを用いて）を検出可能な程阻害するならば、「アンタゴニスト」と考えられ；一般に、このようなアンタゴニストは、ＶＲ１活性化を、実施例６に提供されているアッセイにおいて、１マイクロモル未満、好ましくは５００ナノモル未満、より好ましくは１００ナノモル、１０ナノモル又は１ナノモル未満のＩＣ５０値で阻害する。ＶＲ１アンタゴニストは、ニュートラルアンタゴニスト及びインバースアゴニストを包含する。
【００６８】
ＶＲ１の「インバースアゴニスト」は、追加のバニロイドリガンドの非存在下で、ＶＲ１の活性をその基礎活性レベル以下に減少させる化合物である。ＶＲ１のインバースアゴニストは、ＶＲ１におけるバニロイドリガンドの活性も阻害でき、及び／又はバニロイドリガンドのＶＲ１との結合も阻害できる。ＶＲ１の基礎活性、更にＶＲ１アンタゴニストの存在に因るＶＲ１活性の減少は、実施例６のアッセイのような、カルシウム非固定化アッセイにより測定できる。
【００６９】
ＶＲ１の「ニュートラルアンタゴニスト」は、ＶＲ１におけるバニロイドリガンドの活性を阻害するが、この受容体の基礎活性を有意に変化させない（すなわち、バニロイドリガンドの非存在下で行われる実施例６に記載のカルシウム非固定化アッセイにおいて、ＶＲ１活性の低下が、１０％以下、好ましくは５％以下、より好ましくは２％以下、最も好ましくは検出可能な活性低下を示さない）化合物である。ＶＲ１のニュートラルアンタゴニストは、バニロイドリガンドがＶＲ１に結合するのを阻害できる。
【００７０】
本発明の「カプサイシン受容体アゴニスト」又は「ＶＲ１アゴニスト」は、受容体の活性を基礎活性レベルより上に上昇させる（すなわち、ＶＲ１活性及び／又はＶＲ１介在のシグナル伝達を増強する）化合物である。カプサイシン受容体アゴニストの活性は、実施例６で提供されている代表的なアッセイを用いて同定できる。一般に、このようなアゴニストは、実施例６で提供されているアッセイにおいて、１マイクロモル未満、好ましくは５００ナノモル未満、より好ましくは１００ナノモル又は１０ナノモル以下のＥＣ５０値を有する。
【００７１】
「バニロイド」は、隣接する環の炭素原子（この炭素原子のうちの１つは、フェニル環に結合している第３の基が結合している位置とパラ位にある）に結合した２つの酸素原子を有するフェニル環を含有してなる何れかの化合物である。カプサイシンは、代表的なバニロイドである。「バニロイドリガンド」は、１０μＭ以下のＫｉ値（本明細書に記載されているように測定された）でＶＲ１と結合する、バニロイドである。バニロイドリガンドのアゴニストは、カプサイシン、オルバニル（olvanil）、Ｎ−アラキドノイル−ドーパミン及びレシニフェラトキシン（resiniferatoxin：ＲＴＸ）を包含する。バニロイドリガンドのアンタゴニストは、カプサゼピン及びヨード−レシニフェラトキシンを包含する。
【００７２】
「治療有効量」（又は用量）とは、患者に投与することにより、患者に認識できる程の利点（例えば、治療中の少なくとも１つの疾患を検出可能な程軽減する）をもたらすのに十分な量である。このような軽減は、痛みのような１つ又はそれ以上の症状の緩和を含む、適当な基準によって検出可能である。治療有効量又は用量とは一般に、結果として（血液、血漿、血清、脳脊髄液（ＣＳＦ）、滑液、リンパ液、細胞間質液、涙液又は尿のような）体液中に、インビトロでバニロイドリガンドのＶＲ１との結合（実施例５で提供されているアッセイを用いての測定）及び／又はＶＲ１介在のシグナル伝達（実施例６で提供されているアッセイを用いての測定）を変化させるのに十分な量である、ある濃度の化合物を存在させることである。この患者に認識できる程の利点は、１回用量の投与後に現れるか、又は投与される化合物の適応に基づく、予め設定された投与計画に従う治療有効用量の繰り返し投与の後に現れるようになることは明らかであろう。
【００７３】
本明細書で用いられる「統計的有意に」とは、スチューデントＴ検定のような統計的有意性の標準パラメーターアッセイを用いて測定した、有意性のレベルがｐ＜０．１で、対照との差異をもたらすことを意味する。
【００７４】
「患者」とは、本発明の化合物で治療される個体である。患者は、ヒト、更にペット（例えば、イヌ及びネコ）及び家畜のようなその他の動物も包含する。患者は、カプサイシン受容体調節の応答に関連する疾患の１つ又はそれ以上の症状（例えば、疼痛、バニロイドリガンドへの暴露、痒み、尿失禁、過活動膀胱、呼吸器疾患、咳及び／又はしゃっくり）を呈していてもよいし、又はそのような症状を呈していなくてもよい（即ち、治療とは、このような症状の進行のリスクがある患者における、予防的な治療であってもよい）。
【００７５】
（ピペラジニル−ピリジン類縁体）
上記のように、本発明は、式Ｉのピペラジニル−ピリジン類縁体を提供する。ある態様では、このような化合物は、疼痛（例えば、神経性又は末梢神経介在の疼痛）；カプサイシンへの暴露；酸、熱、光、催涙ガス、大気汚染（例えば、タバコの煙のような）、感染性物質（ウィルス、バクテリア及びイーストを含む）、唐辛子スプレー又は関連する薬剤への暴露；喘息又は慢性閉塞性肺疾患のような呼吸器疾患；痒み；尿失禁又は過活動膀胱；咳又はしゃっくり；及び／又は肥満の治療を含む、多岐にわたる状況下で使用できるＶＲ１調節剤である。このような化合物は、インビトロアッセイ（例えば、受容体活性のアッセイ）において、ＶＲ１の検出及び局在性のためのプローブとして、並びにリガンド結合及びＶＲ１介在のシグナル伝達アッセイにおける標準としても使用できる。
ある態様において、本発明の化合物は、式Ｉａのピペラジニル−ピリジン類縁体又はそれらの薬学的に許容される塩である。
【００７６】
【化０１８】
2008523152.tif 000010
【００７７】
式Ｉａにおいて、
Ａは、ＣＲ８Ｒ９、ＮＲ１０、Ｏ又はＳＯｎであり、この場合のｎは、０、１又は２であり；
Ｂ及びＤは、それぞれ独立して、ＣＨ（Ｒ１で置換されていてもよい）又はＮであり；
Ｒ１は、（ｉ）及び（ｉｉ）からそれぞれ独立して選ばれる１〜２個の置換基を示し；
（ｉ）は、ハロゲン、シアノ、ＣＯＯＨ及びアミノカルボニルであり；そして
（ｉｉ）は、置換されていないか、又はヒドロキシ及びアミノから選ばれる１個の置換基で置換されている、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ２−Ｃ６アルキルエーテル、Ｃ２−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、Ｃ３−Ｃ６アルカノン、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルコキシ、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルホニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニル並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノカルボニルであり；
Ｒ２は、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、アミノスルホニル、オキソ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニルから、それぞれ独立して選ばれる０、１又は２個の置換基を示し；
【００７８】
Ｒ８及びＲ９は、
（ａ）ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、アミノスルホニル、オキソ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニルから、それぞれ独立して選ばれるか；又は
（ｂ）一緒になって、スピロの５〜７員の炭素環又は複素環を形成し；
Ｒ１０は、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル又はＣ１−Ｃ６アルキルスルホニルであり；そして
Ｒｘは、水素、メチル、アミノ及びシアノから、それぞれ独立して選ばれる。
ある特定の化合物において、本発明の化合物は、式ＩＩ〜Ｖの１つ又はそれ以上を満たすものである。式ＩＩＩにおいて、Ｒ８は、水素、ハロゲン又はメチルであり；残りの変数は、上記に示したものである。
【００７９】
【化０１９】
2008523152.tif 000011
【００８０】
式ＩＶのある特定の化合物では、
Ａは、ＣＲ８Ｒ９、ＮＲ１０、Ｏ又はＳＯｎであり、この場合のｎは、０、１又は２であり；
Ｒ１ａ及びＲ１ｂは、水素、ハロゲン、アミノ、シアノ、ＣＯＯＨ、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４アルキルスルホニル、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノスルホニルから、それぞれ独立して選ばれ、この場合、Ｒ１ａ及びＲ１ｂの内の少なくとも１つは、水素ではなく；
Ｒ２は、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、アミノスルホニル、オキソ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニルから、それぞれ独立して選ばれる０、１又は２個の置換基を示し；
【００８１】
Ｒ８及びＲ９は、
（ａ）ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、アミノスルホニル、オキソ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニルから、それぞれ独立して選ばれるか；又は
（ｂ）一緒になって、スピロの５〜７員の炭素環又は複素環を形成し；
Ｒ１０は、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル又はＣ１−Ｃ６アルキルスルホニルであり；そして
Ｒｘは、水素、メチル、アミノ及びシアノから、それぞれ独立して選ばれる。
式ＩＶのある特定の化合物は、式：
【００８２】
【化０２０】
2008523152.tif 000012
【００８３】
（式中、Ｒ８は、水素、ハロゲン又はメチルである。）
で表される化合物である。
式ＩＶのある特定の化合物では、
Ａは、ＣＲ８Ｒ９、ＮＲ１０、Ｏ又はＳＯｎであり、この場合のｎは、０、１又は２であり；
Ｄは、ＣＨ又はＮであり；
Ｒ１ａ及びＲ１ｂは、水素、ハロゲン、アミノ、シアノ、ＣＯＯＨ、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４ヒドロキシアルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４アルキルスルホニル、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノスルホニルから、それぞれ独立して選ばれ、この場合、Ｒ１ａ及びＲ１ｂの内の少なくとも１つは、水素ではなく；
Ｒ２は、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、アミノスルホニル、オキソ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニルから、それぞれ独立して選ばれる０、１又は２個の置換基を示し；
【００８４】
Ｒ８及びＲ９は、
（ａ）ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ハロゲン、アミノスルホニル、オキソ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニルから、それぞれ独立して選ばれるか；又は
（ｂ）一緒になって、スピロの５〜７員の炭素環又は複素環を形成し；
Ｒ１０は、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル又はＣ１−Ｃ６アルキルスルホニルであり；そして
Ｒｘは、水素、メチル、アミノ及びシアノから、それぞれ独立して選ばれる。
式Ｖのある特定の化合物は、式：
【００８５】
【化０２１】
2008523152.tif 000013
【００８６】
（式中、Ｒ８は、水素、ハロゲン又はメチルである。）
で表される化合物である。
上記式のある特定の態様では、変数は以下の通りである。
Ｘ、Ｙ及びＺ
上記のようなＸ、Ｙ及びＺは、それぞれ独立して、ＣＲｘ又はＮであり、この場合、Ｘ、Ｙ及びＺの内の少なくとも１つは、Ｎである。ある特定の態様では、Ｒｘの各々は、水素及びメチルからそれぞれ独立して選ばれるか、又はＲｘの各々は水素である。ある代表的な化合物では、ＺはＮである（例えば、Ｘ及びＹは、ＣＨである）。本発明のその他の化合物では、ＸはＮである（例えば、Ｙ及びＺは、ＣＨである）。更なる化合物では、Ｚ及びＸがＮであるか、Ｘ及びＹがＮであるか、又はＺ及びＹがＮである。更なる化合物では、Ｘ、Ｙ及びＺは、それぞれＮである。
【００８７】
Ｒ３、Ｒ５及びＲ６
式Ｉａ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶａ及びＶａのある特定の化合物において、Ｒ５及びＲ６は、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル及びＣ１−Ｃ６アルキルスルホニルから、それぞれ独立して選ばれる。その他のこのような化合物では、Ｒ５及びＲ６は、一緒になって、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、オキソ、メチル及びエチルから、それぞれ独立して選ばれる０〜２個の置換基で置換されている、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン及びチオモルホリンから選ばれるヘテロシクロアルキルを形成する。
【００８８】
Ａｒ１、Ｒ１、Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ及びＲ１ｃ
上記のようにＡｒ１は、少なくとも１個の置換基、好ましくはＲ１から選ばれる置換基で置換されている、フェニル又は５若しくは６員の芳香族の複素環である。代表的なＡｒ１基は、例えば、置換されているフェニル、置換されているピリジル及び置換されているピリミジルである。ある特定の態様では、Ａｒ１は、結合位置のオルト位で（例えば、Ａｒ１がフェニルの場合には２位で；Ａｒ１がピリジン−２−イルの場合には３位で）置換されている。更なる態様では、Ａｒ１は、結合位置のオルト位及びパラ位で、又は結合位置のオルト位及びメタ位で置換されている。このようなＡｒ１基は、以下の構造式で表される基を含む。
【００８９】
【化０２２】
2008523152.tif 000014
【００９０】
ある特定の化合物では、Ｒ１は、（ｉ）及び（ｉｉ）から、それぞれ独立して選ばれる１又は２個の置換基を示し；
（ｉ）は、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、ＣＯＯＨ及びアミノカルボニルであり；そして
（ｉｉ）は、ヒドロキシ又はＣ１−Ｃ２アルコキシで置換されていてもよい、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルコキシ、Ｃ１−Ｃ４アルコキシカルボニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノ、Ｃ１−Ｃ４アルキルスルホニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノスルホニル、並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノカルボニルである。
更なるこのような化合物では、Ｒ１は、ハロゲン、シアノ、ＣＯＯＨ、アミノカルボニル、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ３アルコキシ、Ｃ１−Ｃ３ヒドロキシアルコキシ及びＣ１−Ｃ３アルコキシカルボニルから、それぞれ独立して選ばれる１又は２個の置換基を示す。
【００９１】
下記構造式で表される基
【化０２３】
2008523152.tif 000015
【００９２】
上記のような、上記構造式で表される基は、置換されていてもよい複素環を示し、この複素環は、４〜１２員のＮ結合のヘテロシクロアルキル基であり、このヘテロアルキル基は、フェニル又は５若しくは６員のヘテロアリール環と縮合していてもよい。あるこのような基（それぞれ置換されていてもよい）は、例えば、
【００９３】
【化０２４】
2008523152.tif 000016
【００９４】
で表される基を包含する。あるこのような基は、非置換であるか、又は、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、オキソ、アミノカルボニル、アミノスルホニル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、Ｃ１−Ｃ６アルカノイル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、モノ−若しくはジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ、モノ−若しくはジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノカルボニル、又はモノ−若しくはジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニルのような置換基で、モノ−又はジ−置換されている。
【００９５】
Ｒ３
Ｒ３の定義において、「Ｌ１」及び「Ｌ２」という変数は、存在しないか、Ｃ１−Ｃ６アルキレンであるか、又はＲ５、Ｒ６若しくはＲ７と一緒になって、複素環を形成するＣ１−Ｃ６アルキレンとして、定義される。形成される複素環において、Ｌ１又はＬ２に存在する少なくとも１つの炭素原子は環員原子であり、Ｒ５、Ｒ６又はＲ７の構成原子に共有結合している。得られた複素環は、ヘテロシクロアルキル基（例えば、テトラヒドロフラニル、モルホリニル、ピペリジニル又はピペラジニル）又は、ピリジル、ピリミジル又はテトラヒドロフラニルのようなヘテロアリール基であってもよい。このような複素環を包含するＲ３基は、例えば、下記で表される基を含む。
【００９６】
【化０２５】
2008523152.tif 000017
【００９７】
その他の代表的なＲ３基は、例えば、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、オキソ、アミノカルボニル、−ＣＯＯＨ、アミノスルホニル、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、Ｃ５−Ｃ７シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ２−Ｃ４アルキルエーテル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４アルキルスルホニル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイルアミノ並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノから、それぞれ独立して選ばれる０〜４個の置換基で置換されている、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノ基を包含する。
【００９８】
その他のＲ３基は、（ａ）ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、オキソ、アミノカルボニル、アミノスルホニル及び−ＣＯＯＨ；並びに（ｂ）ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、−ＣＯＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル及びＣ１−Ｃ４ハロアルキルから、それぞれ独立して選ばれる０〜４個の第２の置換基で置換されている、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、（Ｃ５−Ｃ７シクロアルキル）Ｃ０−Ｃ２アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ２−Ｃ４アルキルエーテル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４アルキルスルホニル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイルアミノ、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノ、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノカルボニル、モノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノスルホニル、フェニルＣ０−Ｃ４アルキル並びに（４〜７員の複素環）Ｃ０−Ｃ４アルキル、からそれぞれ独立して選ばれる０〜４個の置換基で置換されている、フェニル及び４〜７員の複素環を包含する。
ある特定のこのようなＲ３基は、（ａ）ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、オキソ、アミノカルボニル、アミノスルホニル及び−ＣＯＯＨ；及び（ｂ）ヒドロキシ及びハロゲンから、それぞれ独立して選ばれる０〜４個の第２の置換基で置換されている、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、Ｃ５−Ｃ７シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ２−Ｃ４アルキルエーテル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイル、Ｃ１−Ｃ４アルキルスルホニル、Ｃ２−Ｃ４アルカノイルアミノ並びにモノ−及びジ−（Ｃ１−Ｃ４アルキル）アミノ、からそれぞれ独立して選ばれる０〜４個の置換基で置換されている、アゼチジニル、ピロリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ピペリジニル、ピペラジニル、テトラヒドロピリジル及びアゼパニルを包含する。
このようなＲ３基の例として、以下に示すような基が含まれる。
【００９９】
【化０２６】
2008523152.tif 000018
【０１００】
Ｒ４
本発明のある特定の化合物でのＲ４は、０個の置換基であるか、又は１個のメチル、エチル又はオキソ基であり、好ましくはピペラジンの２位に位置する。メチル又はエチル基が結合する炭素は、ある特定の態様ではキラル（不斉炭素）である。その他の化合物では、Ｒ４は、１個のオキソ置換基を示す。更なる化合物では、Ｒ４は、０個の置換基（つまり、ヘテロシクロアルキルのコア環は、置換されていない）を示す。
【０１０１】
本発明の代表的な化合物は、実施例１〜３に具体的に記載されているものを包含するが、これらに限定されるものではない。本明細書に示されている具体的な化合物は代表例に過ぎず、本発明の範囲を限定するように意図されたものではないということは明らかであろう。更に、上記のように、本発明の全ての化合物は、遊離の酸又は塩基として、又は薬学的に許容される塩として存在するものである。更に、このような化合物の水和物及びプロドラッグのようなその他の形態は、本発明によって具体的に意図されている。
【０１０２】
本発明のある態様において、本発明のピペラジニル−ピリジン類縁体は、カルシウム非固定化アッセイのような、インビトロのＶＲ１機能アッセイを用いて測定すると、ＶＲ１活性を検出可能な程度変化させる（調節する）。このような活性の初期選別として、ＶＲ１リガンド結合アッセイが適用される。本明細書に於ける「ＶＲ１リガンド結合アッセイ」とは、実施例５で挙げられているような標準インビトロ受容体結合アッセイを参照することを意図しており、そして「カルシウム非固定化アッセイ」（本明細書では「シグナル伝達アッセイ」とも言う）は、実施例６に記載されているように実施することができる。つまり、ＶＲ１との結合を評価するために、ＶＲ１調合液をＶＲ１（例えば、ＲＴＸのようなカプサイシン受容体アゴニスト）と結合する（例えば、１２５Ｉ又は３Ｈで）標識された化合物及び標識されていないテスト化合物と共に培養して、競合アッセイを行うことができる。本明細書に示されるアッセイにおいて、使用されるＶＲ１は哺乳動物のＶＲ１が好ましく、より好ましくはヒト又はラットのＶＲ１である。受容体は組み換え技術で発現させたもの又は自然に発現しているものを用いてもよい。ＶＲ１調合液は、例えば、ヒトＶＲ１を組み換え技術で発現するＨＥＫ２９３又はＣＨＯ細胞からの膜調合液であってよい。バニロイドリガンドがＶＲ１に結合するのを検出可能な程度調節する化合物と培養すると、当該化合物を添加していない場合の結合した標識の量に比べて、ＶＲ１調合液と結合する標識の量が減少又は増加する。この様な増減は、本明細書に記載されているように、ＶＲ１におけるＫｉ値の測定に用いられる。一般には、このようなアッセイにおいてＶＲ１調合液と結合する標識の量を減少させる化合物が好ましい。
【０１０３】
本発明のある特定のＶＲ１調節剤は、ＶＲ１活性を、ナノモル（サブマイクロモル）濃度で、サブナノモル濃度で、又は１００ピコモル、２０ピコモル、１０ピコモル又は５ピコモル以下の濃度で、検出可能な程調節する。
【０１０４】
上記のように、ＶＲ１アンタゴニストである化合物が、ある特定の態様においては好ましい。このような化合物のＩＣ５０値は、実施例６で示されているような、標準のインビトロでのＶＲ１が介在するカルシウム非固定化アッセイを用いて測定できる。つまり、カプサイシン受容体を発現する細胞を、目的の化合物及び細胞内カルシウム濃度の指示薬（例えば、Ｆｌｕｏ−３又はＦｕｒａ−２のような膜透過性カルシウム感受性染料（両方とも、例えば、Molecular Probes社（Eugene, OR）から購入可能）で、共にカルシウムイオンと結合すると蛍光シグナルを生成する）と接触させる。このような接触は、溶液中に当該化合物及び指示薬の一方又は両方を含有する緩衝液又は培養液中で、細胞を１回又はそれ以上培養することによって実施することが好ましい。染料が細胞に入るのに十分な時間（例えば、１〜２時間）接触を保持させる。過剰な染料を除去するために細胞を洗浄又はろ過し、次いでバニロイド受容体のアゴニスト（例えば、カプサイシン、ＲＴＸ又はオルバニル）と、一般にはＥＣ５０値と等しい濃度で接触させて、蛍光応答を測定する。アゴニストと接触させた細胞をＶＲ１アンタゴニストである化合物と接触させると、蛍光応答は一般に、テスト化合物を添加していないアゴニストと接触させた細胞と比較して、少なくとも２０％、好ましくは少なくとも５０％、そしてより好ましくは少なくとも８０％減少する。本発明のＶＲ１アンタゴニストのＩＣ５０値は、１マイクロモル未満、１００ｎＭ未満、１０ｎＭ未満又は１ｎＭ未満が好ましい。ある特定の態様において、本発明のＶＲ１アンタゴニストは、ＩＣ５０値に等しい化合物濃度でのインビトロカプサイシン受容体アゴニストアッセイで検出可能な程のアゴニスト活性を示さない。このようなある特定のアンタゴニストは、ＩＣ５０値より１００倍高い濃度でのインビトロカプサイシン受容体アゴニストアッセイで検出可能な程のアゴニスト活性を示さない。
【０１０５】
その他の態様においては、カプサイシン受容体のアゴニストである化合物が好ましい。カプサイシン受容体のアゴニスト活性は一般に、実施例６に記載されているように測定できる。細胞をＶＲ１アゴニストである化合物の１マイクロモルと接触させると、蛍光応答は一般に、細胞を１００ｎＭのカプサイシンと接触させて観測される増加の少なくとも３０％の量で増加する。本発明のＶＲ１アゴニストのＥＣ５０値は、１マイクロモル未満、１００ｎＭ未満又は１０ｎＭ未満が好ましい。
【０１０６】
ＶＲ１調節活性も同様に、また一方では、実施例７に示されるような培養脊髄後根神経節アッセイ及び／又は実施例８に示されるようなインビボ疼痛緩和アッセイを用いて評価できる。本発明のＶＲ１調節剤は、好ましくは、本明細書で示される１つ又はそれ以上の機能アッセイでＶＲ１活性について統計的に有意な特異的効果を有している。
【０１０７】
ある特定の態様において、本発明のＶＲ１調節剤は、ＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ又はニコチン性アセチルコリン受容体のような、その他の細胞表面受容体とのリガンド結合を実質的に調節しない。すなわち、このような調節剤は、ヒト上皮細胞増殖因子（ＥＧＦ）受容体チロシンキナーゼ又はニコチン性アセチルコリン受容体のような細胞表面受容体の活性を実質的に阻害しない（例えば、このような受容体におけるＩＣ５０値又はＩＣ４０値は、１マイクロモルより大きいことが好ましく、１０マイクロモルより大きいことが、最も好ましい）。好ましくは、調節剤は、０．５マイクロモル、１マイクロモル又はより好ましくは１０マイクロモルの濃度で、ＥＧＦ受容体又はニコチン性アセチルコリン受容体の活性を検出可能な程阻害しない。細胞表面受容体の活性を測定するアッセイは、パンベラ社（Panvera: Madison, WI）から入手できる、チロシンキナーゼアッセイキットを含め、市販されている。
【０１０８】
ある特定の態様において、好ましいＶＲ１調節剤は非鎮静剤である。すなわち、疼痛緩和測定の動物モデル（本明細書の実施例８に示されているモデルのような）において無痛覚を十分にもたらす最小用量の２倍であるＶＲ１調節剤用量は、鎮静動物モデルアッセイ（「Fitsgerald et al. (1988) Toxicology 49(2-3): 433-9」に記載の方法を用いて）において、一時的（すなわち、疼痛緩和持続時間の１／２以下持続する）又は好ましくは、統計的に有意性のない鎮静のみを引き起こす。好ましくは、無痛覚をもたらすのに十分な最小用量の５倍の用量が統計的に有意な鎮静を引き起こさない。より好ましくは、本発明のＶＲ１調節剤は、２５ｍｇ／ｋｇ未満（好ましくは１０ｍｇ／ｋｇ未満）の静脈内用量、又は１４０ｍｇ／ｋｇ未満（好ましくは、５０ｍｇ／ｋｇ未満、より好ましくは、３０ｍｇ／ｋｇ未満）の経口用量で鎮静を引き起こさない。
【０１０９】
必要に応じて、本発明の化合物は、幾つかの薬理学的性質を評価することができ、この性質には、これらに限定されないが、経口バイオアベイラビリティー（好ましい化合物は、１４０ｍｇ／ｋｇ未満、好ましくは５０ｍｇ／ｋｇ未満、より好ましくは３０ｍｇ／ｋｇ未満、更に好ましくは１０ｍｇ／ｋｇ未満、更により好ましくは１ｍｇ／ｋｇ未満そして最も好ましくは０．１ｍｇ／ｋｇ未満の経口用量で、この化合物の治療有効濃度が達成される程度まで経口で体内に吸収され利用され得る）、毒性（好ましい化合物は、治療有効量を対象に投与したときに非毒性である）、副作用（好ましい化合物は、化合物の治療有効量を対象に投与したとき、プラセーボと同等の副作用を生ずる）、血清蛋白との結合性並びにインビトロ及びインビボ半減期（好ましい化合物は、１日４回（Ｑ．Ｉ．Ｄ．）の投与、好ましくは１日３回（Ｔ．Ｉ．Ｄ．）の投与、より好ましくは１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ．）の投与、そして最も好ましくは１日１回の投与ができるインビボ半減期を示す）を包含する。
【０１１０】
更に、上述のような１日の総経口投与量が、治療効果のある調節をするように、中枢神経系（ＣＮＳ）のＶＲ１活性を調節することによる疼痛の治療に用いるＶＲ１調節剤には、血液脳関門の差別化された透過（differential penetration）が望ましいが、一方、末梢神経介在の疼痛の治療には、ＶＲ１調節剤の脳レベルが低い方が好ましい（すなわち、化合物の脳（例えばＣＳＦ）レベルは、ＶＲ１活性を有意に調節するのに十分ではない用量である）。当該技術分野でよく知られた通常のアッセイは、これらの性質を評価し、そして特定の使用のための優れた化合物を同定するために用いられる。例えば、バイオアベイラビリティーを予測するために用いられるアッセイは、Ｃａｃｏ−２細胞単層を含む、ヒト腸細胞単層間の輸送試験を含む。ヒトにおける化合物の血液脳関門の透過は、化合物を投与（例えば、静脈内投与）した実験動物の脳内レベルから予測できる。血清蛋白結合性は、アルブミン結合アッセイから予測できる。化合物の半減期は、化合物の投与頻度に反比例する。化合物のインビトロ半減期は、公開された米国特許出願第２００５／００７０５４７号公報の実施例７で記載されているようなミクロソーム半減期のアッセイから予測できる。
【０１１１】
上記のように、本発明の好ましい化合物は非毒性である。一般に、本明細書で用いられる「非毒性」という用語は、相対的に理解すべきであり、米国食品医薬品局（「ＦＤＡ」）によって哺乳動物（好ましくはヒト）への投与が承認されたか又は、判定基準を保持している、ＦＤＡによって哺乳動物（好ましくはヒト）への投与が承認される可能性のある幾つかの物質を参照することを意図している。更に、非常に好ましい非毒性の化合物は一般的に、以下の判定基準：（１）細胞のＡＴＰ生成を実質的に阻害しない；（２）心臓のＱＴ間隔を有意に延長しない；（３）実質的な肝肥大を引き起こさない；又は（４）肝酵素の実質的な放出を引き起こさない；の１つ又はそれ以上を充たすものである。
【０１１２】
本発明で用いられている、細胞のＡＴＰ生成を実質的に阻害しない化合物は、公開された米国特許出願第２００５／００７０５４７号公報の実施例８で示されている判定基準を充たしている化合物である。つまり、そこで述べられているように１００μＭのこのような化合物で処理された細胞は、非処理の細胞で検出されるＡＴＰレベルの少なくとも５０％のＡＴＰレベルを示す。更に非常に好ましい態様によると、このような細胞は非処理の細胞で検出されるＡＴＰレベルの少なくとも８０％のＡＴＰレベルを示す。
【０１１３】
心臓のＱＴ間隔を有意に延長しない化合物とは、当該化合物のＥＣ５０値又はＩＣ５０値に等しい血清濃度を生ずる用量を投与したモルモット、ミニブタ又はイヌにおいて、心臓のＱＴ間隔を統計的有意に延長しない（心電図記録で測定して）化合物のことである。ある好ましい態様においては、０．０１、０．０５、０．１、０．５、１、５、１０、４０又は５０ｍｇ／ｋｇの非経口又は経口用量は、心臓のＱＴ間隔の統計的に有意な延長をもたらさない。
【０１１４】
実験用齧歯動物（例えば、マウス又はラット）に、当該化合物のＥＣ５０値又はＩＣ５０値に等しい血清濃度を生ずる用量を、５〜１０日間毎日投与する処置を施しても、対応する対照と比較した場合の、肝臓の対体重比の増加が１００％未満であれば、化合物は、実質的な肝肥大をもたらさない。更に極めて好ましい態様においては、このような用量は、対応する対照と比較して７５％を越える又は５０％を越える肝肥大をもたらさない。非齧歯動物（例えば、イヌ）を用いると、このような用量は、対応する治療を施していない対照に対して５０％を超える、好ましくは２５％を超える、そしてより好ましくは１０％を超える肝臓の対体重比の増加をもたらさない。このようなアッセイにおける好ましい用量は、０．０１、０．０５、０．１、０．５、１、５、１０、４０又は５０ｍｇ／ｋｇの非経口又は経口投与を包含する。
【０１１５】
同様に、当該化合物のＥＣ５０値又はＩＣ５０値に等しい血清濃度を生じる最小用量の２倍量を、実験用動物（例えば、齧歯動物）に投与しても、ＡＬＴ、ＬＤＨ又はＡＳＴの血清レベルを、偽治療を施した対照の１００％を越えて上昇させないならば、化合物は肝酵素の実質的な放出を促進しない。更に極めて好ましい態様においては、このような用量は、これらの血清レベルを対応する対照と較べて７５％を越えて又は５０％を越えて上昇させない。また、インビトロ肝細胞アッセイにおいて、当該化合物のＥＣ５０値又はＩＣ５０値に等しい濃度（インビトロで肝細胞と接触させて培養する培養液又は溶液中の濃度）が、培養液中にこのような肝酵素を、対応する偽治療を施した対照細胞の培養液中で見られる基礎レベルを超えて、検出可能な程の放出を引き起こさないなら、この化合物は肝酵素の実質的な放出を促進しない。更に極めて好ましい態様においては、このような化合物の濃度が、当該化合物のＥＣ５０値又はＩＣ５０値の５倍及び好ましくは１０倍であっても、基礎レベル以上に、このような肝酵素を培養液に検出可能な程放出しない。
【０１１６】
その他の態様において、ある好ましい化合物は、当該化合物のＶＲ１におけるＥＣ５０値又はＩＣ５０値と等しい濃度で、ＣＹＰ１Ａ２活性、ＣＹＰ２Ａ６活性、ＣＹＰ２Ｃ９活性、ＣＹＰ２Ｃ１９活性、ＣＹＰ２Ｄ６活性、ＣＹＰ２Ｅ１活性又はＣＹＰ３Ａ４活性のような、ミクロソーム・チトクロームＰ４５０酵素活性を阻害又は誘発しない。
【０１１７】
ある好ましい化合物は、当該化合物のＥＣ５０値又はＩＣ５０値と等しい濃度では、（例えば、マウス赤血球前駆細胞小核アッセイ、エームス小核アッセイ、らせん小核アッセイなどを用いて測定されるように）染色体異常を誘発しない。その他の態様において、ある好ましい化合物は、このような濃度では（例えば、チャイニーズハムスター卵巣細胞において）姉妹染色分体交換を誘発しない。
【０１１８】
以下で更に詳細に考察されるように、本発明のＶＲ１調節剤は、検出を目的とする同位体標識又は放射性標識が可能である。例えば、化合物は、一般に自然界で見出される原子量又は質量数とは異なる原子量又は質量数を有する同じ元素の原子で置き換えられた１つ又はそれ以上の原子を有することができる。本発明の化合物に存在させることができる同位体の例は、２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏ、１７Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ及び３６Ｃｌのような、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素及び塩素の同位体を包含する。更に、重水素（すなわち、２Ｈ）のような重同位体は、例えばインビボ半減期の増加又は必要用量の減少のような代謝安定性がより大きいことに起因する治療効果をもたらすので、特定の状況においては好ましい。
【０１１９】
（ピペラジニル−ピリジン類縁体の製造）
ピペラジニル−ピリジン類縁体は一般的に、標準的な合成法を用いて製造できる。出発物質は、シグマ−アルドリッチ社（Sigma-Aldrich Corp.；St. Louis, MO）のような供給業者から購入できるか、又は市販の前駆物質から確立された方法で合成することできる。例として、以下のスキームの何れかに示されているのと同様な合成経路は、有機化学合成の技術において知られている合成方法、又は当業者によって評価されているこれらの変法、と共に使用することができる。下記スキーム中の各可変基は、本明細書に於ける化合物の記載に一致した基を示す。
【０１２０】
以下のスキーム及び明細書の他の箇所で用いられている略語は次の通りである。
ＢＩＮＡＰ              （ｒａｃ）−２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，                        １’−ビナフチル
ＣＤＣｌ３              重クロロホルム
δ                      ケミカルシフト
ＤＣＭ                  ジクロロメタン又は塩化メチレン
ＤＤＱ                  ２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４−ベンゾキノン
ＤＩＥＡ                Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡ                  Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド
ＤＭＦ                  ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ                ジメチルスルホキシド
ＤＰＰＦ                １，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン
Ｅｔ３Ｎ                トリエチルアミン
ＥｔＯＡｃ              酢酸エチル
ＥｔＯＨ                エタノール
１Ｈ  ＮＭＲ            プロトン核磁気共鳴
ＨＯＡｃ                酢酸
ＨＰＬＣ                高圧液体クロマトグラフィー
Ｈｚ                    ヘルツ
ＫＯＡｃ                酢酸カリウム
ＬＣＭＳ                液体クロマトグラフィー／質量分析
ＭＳ                    質量分析
（Ｍ＋１）              質量＋１
ｍ−ＣＰＢＡ            ｍ−クロロ過安息香酸
ＭｅＯＨ                メタノール
ＭｓＣｌ                塩化メタンスルホニル
ｎ−ＢｕＬｉ            ｎ−ブチルリチウム
Ｔｆ                    −ＳＯ２ＣＦ３
Ｐｄ２（ｄｂａ）３      トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）
Ｐｄ（ＰＰｈ３）４      テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）
ＰｈＮＥｔ２            ジエチル−フェニル−アミン（Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン）
ＰＰｈ３                トリフェニルホスフィン
ｔ−ＢｕＯＫ            カリウム ｔｅｒｔ−ブトキシド
ＴＨＦ                  テトラヒドロフラン
ＴＬＣ                  薄層クロマトグラフィー
【０１２１】
【化０２７】
2008523152.tif 000019
【０１２２】
【化０２８】
2008523152.tif 000020
【０１２３】
【化０２９】
2008523152.tif 000021
【０１２４】
【化０３０】
2008523152.tif 000022
【０１２５】
【化０３１】
2008523152.tif 000023
【０１２６】
ある態様において、本発明の化合物は、１つ又はそれ以上の不斉炭素原子を含有することができるので、その化合物は異なった立体異性形態で存在することができる。このような形態は、例えば、ラセミ体又は任意の光学活性体の形態になる。上記のように、全ての立体異性体は、本発明により包含される。それにもかかわらず、一つの鏡像異性体（すなわち、光学活性体）を得ることが望ましい。一つの鏡像異性体を製造する標準的な方法は、不斉合成及びラセミ分割方法を包含する。ラセミ分割は、例えば、分割剤の存在下での結晶化、又は例えばキラルＨＰＬＣカラムを用いるクロマトグラフィーのような通常の方法によって達成できる。
【０１２７】
化合物は、放射性同位体である原子を少なくとも１つ含有する前駆物質を用いる合成を行うことにより放射性標識できる。各々の放射性同位体は、炭素（例えば、１４Ｃ）、水素（例えば、３Ｈ）、硫黄（例えば、３５Ｓ）又はヨウ素（例えば、１２５Ｉ）が好ましい。トリチウム標識化合物も、基質として当該化合物を用いて、トリチウム化酢酸中での白金触媒交換、トリチウム化トリフルオロ酢酸中での酸触媒交換、又はトリチウムガスとの不均一系触媒交換、を介する触媒作用によって製造することができる。更に、ある特定の前駆体は、必要に応じて、トリチウムガスとトリチウム−ハロゲン交換、不飽和結合のトリチウムガス還元、又はナトリウムボロトリタイドを用いる還元に付すことができる。放射性標識化合物は、プローブとして用いる放射性標識化合物の受注合成を専門とする放射性同位体供給業者によって容易に製造することができる。
【０１２８】
（医薬組成物）
本発明は、１つ又はそれ以上の本発明の化合物を、少なくとも１つの生理的に許容される担体又は賦形剤と共に含有してなる医薬組成物も提供する。
医薬組成物は、例えば、水、緩衝液（例えば、中性に緩衝された食塩水、又はリン酸緩衝食塩水）、エタノール、鉱物油、植物油、ジメチルスルホキシド、糖質（例えば、ブドウ糖、マンノース、蔗糖又はデキストラン）、マンニトール、タンパク質、アジュバント、ポリペプチド若しくはグリシンのようなアミノ酸、酸化防止剤、ＥＤＴＡ若しくはグルタチオンのようなキレート剤及び／又は保存剤を、１つ又はそれ以上含有していてもよい。更に、その他の有効成分を本発明の医薬組成物に含有させてもよい（が、必ずしも必要ではない）。
【０１２９】
医薬組成物は、例えば、局所、経口、経鼻、直腸内又は非経口投与を含む、適切な投与方法のために製剤化できる。本明細書で用いられる非経口という用語は、皮下、皮内、血管内（例えば、静脈内）、筋肉内、脊髄、頭蓋内、鞘内及び腹腔内注射を、また同様な注射又は注入法も包含する。ある特定の態様においては、経口使用に適する組成物が好ましい。このような組成物は、例えば、錠剤、トローチ、ロゼンジ（薬用キャンディー）、水性若しくは油性懸濁液、分散性の粉末若しくは顆粒、乳剤、硬若しくは軟カプセル、又はシロップ若しくはエリキシルを包含する。更なるその他の態様においては、医薬組成物は、凍結乾燥物として製剤化できる。局所投与用の製剤は、ある特定の状況（例えば、火傷や痒みのような皮膚の症状を治療する場合）では好ましい。膀胱に直接投与する製剤（膀胱内投与：intravesicular administratin）は、尿失禁及び過活動膀胱の治療に好ましい。
【０１３０】
経口使用のための組成物は更に、魅力的かつ味の良い製剤を提供するために、甘味剤、着香剤、着色剤及び／又は保存剤のような成分を１つ又はそれ以上含有していても良い。錠剤は、有効成分を錠剤の製造に適当な生理的に許容される賦形剤と共に含有している。このような賦形剤は、例えば、不活性希釈剤（例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、乳酸、リン酸カルシウム又はリン酸ナトリウム）、顆粒化及び崩壊剤（例えば、トウモロコシ澱粉又はアルギン酸）、結合剤（例えば、澱粉、ゼラチン又はアラビアゴム）及び滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルク）を包含する。錠剤は、非被覆であるか、又は公知の技術によって被覆することができる。
【０１３１】
経口使用のための製剤は、有効成分を不活性固体希釈剤（例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム又はカオリン）と混合した硬カプセル、又は有効成分を水若しくは油性媒体（例えば、ピーナッツオイル、流動パラフィン又はオリーブオイル）と混合した軟ゼラチンカプセルとして提供されてもよい。
【０１３２】
水性懸濁剤は、適切な賦形剤と共に活性物質を含有している。このような賦形剤は、懸濁化剤（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴム及びアラビアゴム）；及び分散又は湿潤剤（例えば、レクチンのような自然界にあるリン脂質、ステアリン酸ポリオキシエチレンのようなアルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物、ヘプタデカエチレンオキシセタノールのようなエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトールのようなエチレンオキシドと脂肪酸及びヘキシトールから誘導される部分エステルとの縮合生成物、又はモノオレイン酸ポリエチレンソルビタンのようなエチレンオキシドと脂肪酸及びヘキシトール無水物から誘導される部分エステルとの縮合生成物）を包含する。水性懸濁剤は、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル又はｎ−プロピルのような１つ又はそれ以上の保存剤、１つ又はそれ以上の着色剤、１つ又はそれ以上の着香剤、及び／又は蔗糖又はサッカリンのような１つ又はそれ以上の甘味剤を含有していてもよい。
【０１３３】
油性懸濁剤は、有効成分を植物油（例えば、ラッカセイ油、オリーブオイル、ごま油又はココナッツ油）又は流動パラフィンのよう鉱物油に懸濁させることによって製剤化できる。油性懸濁剤は蜜蝋、固形パラフィン又はセチルアルコールのような増粘剤を含有することができる。味の良い経口用製剤を提供するために、上記のような甘味剤及び／又は着香剤を添加することができる。このような懸濁剤は、アスコルビン酸のような酸化防止剤の添加により保存されてもよい。
【０１３４】
水を加えて水性懸濁剤を調製するのに適した分散性の粉末又は顆粒は、分散剤又は湿潤剤、懸濁化剤、及び１つ又はそれ以上の保存剤と混合して、有効成分を提供する。適切な分散又は湿潤剤及び懸濁化剤は、既に上に例示されている。甘味、着香及び着色剤のような追加の賦形剤も存在させることができる。
【０１３５】
医薬組成物は、水中油型乳剤として製剤化してもよい。油層は植物油（例えば、オリーブオイル又はラッカセイ油）、鉱物油（例えば、流動パラフィン）又はこれらの混合物であってよい。適当な乳化剤は、自然界に存在するゴム（例えば、アラビアゴム又はトラガカントゴム）、自然界に存在するリン脂質（例えば、大豆レシチン、及び脂肪酸及びヘキシトールから誘導されるエステル又は部分エステル）、無水物（例えば、モノオレイン酸ソルビタン）及び脂肪酸とヘキシトールから誘導される部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物（例えば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン）を包含する。乳剤は、１つ又はそれ以上の甘味剤及び／又は着香剤を含有していてもよい。
【０１３６】
シロップ及びエリキシルは、グリセリン、プロピレングリコール、ソルビトール又は蔗糖のような甘味剤と製剤化できる。このような製剤は、１つ又はそれ以上の粘滑剤、保存剤、着香剤及び／又は着色剤も含有していてもよい。
【０１３７】
局所投与用の製剤は一般的に、活性薬剤と一緒にした局所用賦形剤を、追加の任意成分と共に又はこれなしで含有している。適当な局所用賦形剤及び追加の成分は、当該技術分野ではよく知られており、賦形剤の選択は、特殊な物理的形態及び送達方法によって決まるものと考えられる。局所用賦形剤は、水；アルコール（例えばエタノール又はイソプロピルアルコール）又はグリセリンのような有機溶媒；グリコール（例えば、ブチレン、イソプレン又はプロピレングリコール）；脂肪族アルコール（例えば、ラノリン）；水と有機溶媒との混合物及びアルコールのような有機溶媒とグリセリンの混合物；脂肪酸、アシルグリセロール（鉱物油のような油、及び天然又は合成の脂肪を含む）、ホスホグリセリド、スフィンゴリピド及びワックスのような脂肪をベースとする物質；コラーゲン及びゼラチンのようなタンパク質をベースとする物質；シリコンをベースとする物質（不揮発性と揮発性の両方）；及びマイクロスポンジ及び高分子基質のような炭化水素をベースとする物質を包含する。組成物は、用いる製剤の安定性又は効果を高めるのに適した、１つ又はそれ以上の成分を更に含有していてもよく、この成分は、安定化剤、懸濁化剤、乳化剤、粘度調節剤、ゲル化剤、保存剤、酸化防止剤、皮膚浸透増強剤、保湿剤及び徐放物質のようなものである。このような成分の例は、「Martindale- The Extra Pharmacopoeia (Pharmaceutical Press, London 1993)」及びＲｅｍｉｎｇｔｏｎの「The Science and Practice of Pharmacy, 21st ed., Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, PA (2005)」に記載されている。製剤は、ヒドロキシメチルセルロース又はゼラチン−マイクロカプセルのようなマイクロカプセル、リポソーム、アルブミン小球体、マイクロエマルジョン、ナノ粒子又はナノカプセルを含有していてもよい。
【０１３８】
局所製剤は例えば、固体、ペースト、クリーム、フォーム、ローション、ゲル、パウダー、水性液体及び乳剤を包含する多種の物理的な形態に製剤化することができる。このような薬学的に許容される形態の物理的な外観及び粘度は、当該製剤に存在する乳化剤及び粘度調節剤の有無及び量によって規定できる。固体製剤は、硬質で非注入性であって、一般に棒状若しくはスティック状、又は特定な形態で製剤化され；固定製剤は、不透明又は透明で、溶媒、乳化剤、保湿剤、皮膚軟化剤、香料、染料／着色剤、保存剤及び最終物の効能を増加又は増強させる、その他の有効成分を任意に含有していてもよい。クリーム及びローションは、互いに同様なものであることが多く、主にこれらの粘度が異なる。ローションとクリームの両者は、不透明、透明又は透明感があり、乳化剤、溶媒、及び粘度調節剤を、更に保湿剤、皮膚軟化剤、香料、染料／着色剤、保存剤及び最終物の効能を増加又は増強させる、その他の有効成分をも含むことが多い。ゲルは高粘度から低粘度の範囲の粘度で調製できる。これらの製剤は、ローション及びクリームと同様に、溶媒、乳化剤、保湿剤、皮膚軟化剤、香料、染料／着色剤、保存剤及び最終物の効能を増加又は増強させる、その他の有効成分を含有していてもよい。液剤は、クリーム、ローション、又はゲルよりも薄く、乳化剤を含まないことが多い。液状の局所用製品は、溶媒、乳化剤、保湿剤、皮膚軟化剤、香料、染料／着色剤、保存剤及び最終物の効能を増加又は増強させる、その他の有効成分を含有していることが多い。
【０１３９】
局所製剤に使用するのに適している乳化剤は、イオン性乳化剤、セテアリルアルコール、ポリオキシエチレンオレイルエーテルのような非イオン性乳化剤、ステアリン酸ＰＥＧ−４０、セテアレス−１２、セテアレス−２０、セテアレス−３０、セテアレスアルコール、ステアリン酸ＰＥＧ−１００及びステアリン酸グリセリルを包含するが、これらに限定されるものではない。
適当な粘度調節剤は、これらに限定されないが、保護コロイド又はヒドロキシエチルセルロースのような非イオン性のゴム、キサンタンガム、マグネシウムアルミニウムシリケート、シリカ、微結晶性ワックス、蜜蝋、パラフィン及びパルミチン酸セチルを包含する。
ゲル組成物は、キトサン、メチルセルロース、エチルセルロース、ポリビニルアルコール、ポリクオタニウム（polyquaterniums）、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボマー（carbomer）又はグリシルリジン酸アンモニウム（ammoniated glycyrrhizinate）のようなゲル化剤の添加によって形成できる。
【０１４０】
適当な界面活性剤は、これらに限定されないが、非イオン、両性、イオン性及び陰イオン性界面活性剤を包含する。例えば、ジメチコンコポリオール（dimethicone copolyol)、ポリソルベート（polysorbate）２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０、ラウラミドＤＥＡ，コカミドＤＥＡ、及びコカミドＭＥＡ、オレイルベタイン、コカミドプロピルホスファチジルＰＧ−ジモニウムクロライド（PG-dimonium chloride）、及びラウリル硫酸アンモニウムの１つ又はそれ以上を局所製剤に用いることができる。
好ましい保存剤は、これらに限定されないが、メチルパラベン、プロピルパラベン、ソルビン酸、安息香酸及びホルムアルデヒドのような抗菌薬を、更に物理的安定剤、及びビタミンＥ、アスコルビン酸ナトリウム／アスコルビン酸及び没食子酸プロピルのような酸化防止剤をも包含する。
適当な保湿剤は、これらに限定されないが、乳酸及びその他のヒドロキシ酸及びそれらの塩、グリセリン、プロピレングリコール、及びブチレングリコールを包含する。
適当な皮膚軟化剤は、ラノリンアルコール、ラノリン、ラノリン誘導体、コレステロール、ワセリン、ネオペンタン酸イソステアリル及び鉱油を包含する。
適当な香料及び着色剤は、これらに限定されないが、ＦＤ＆Ｃ Ｒｅｄ Ｎｏ．４０及びＦＤ＆Ｃ Ｙｅｌｌｏｗ Ｎｏ．５を包含する。
局所製剤に包含できるその他の適当な更なる成分は、これらに限定されないが、研磨剤、吸湿剤、固結防止剤、消泡剤、帯電防止剤、収れん剤（例えば、ヘーゼル、アルコール及びカモミールエキスのようなハーブエキス）、結合剤／賦形剤、緩衝剤、キレート化剤、フィルム形成剤、品質改良剤、高圧ガス、不透明化剤、ｐＨ調節剤及び保護剤を包含する。
【０１４１】
ゲルの製剤化のために適した局所賦形剤の例は：ヒドロキシプロピルセルロース（２．１％）；７０／３０のイソプロピルアルコール／水（９０．９％）；プロピレングリコール（５．１％）；及びポリソルベート８０（１．９％）である。フォーム（泡）として製剤化するための適当な局所賦形剤の例は：セチルアルコール（１．１％）；ステアリルアルコール（０．５％）； クオタニウム５２（Quaternium 52）（１．０％）；プロピレングリコール（２．０％）；エタノール９５ＰＧＦ３（６１．０５％）；脱イオン水（３０．０５％）；Ｐ７５炭化水素高圧ガス（４．３０％）である。全てのパーセントは重量によるものである。
局所用組成物の局所送達方法は、指を使用する塗布；布、ティッシュー、綿棒、スティック又はブラシのような物理的な塗布具を用いる塗布；スプレー（霧、エアロゾル又は泡のスプレーを包含する）；点滴投与、散布；浸漬；及びすすぎ；を包含する。
【０１４２】
医薬組成物は、無菌注射用の水溶液又は油性懸濁液として、調製することができる。本発明の化合物は、使用する賦形剤及び濃度に応じて、賦形剤に懸濁させても溶解させてもよい。このような組成物は、上記のように適した分散、湿潤剤及び／又は懸濁剤を用いて、公知の技術に従って製剤化することができる。許容される賦形剤及び溶媒のうち使用し得るものは、水、１，３−ブタンジオール、リンゲル液及び生理食塩液である。更に、無菌の不揮発性油を、溶媒又は懸濁媒体として使用できる。この目的のために、合成モノ−又はジグリセライドを含む、幾つかの無菌の不揮発性油を使用することができる。更に、オレイン酸のような脂肪酸は、注射用組成物の調製において使用できると考えられ、局所麻酔剤、保存剤及び／又は緩衝剤のようなアジュバントを賦形剤に溶解することができる。
【０１４３】
医薬組成物は、坐薬（例えば、直腸内投与用）としても製剤化できる。このような組成物は、薬剤を常温では固体であるが、直腸の温度では液体であり、直腸内で溶けて薬剤を放出する、適当な非刺激性の賦形剤と混合することによって調製できる。適当な賦形剤は、例えば、ココアバター及びポリエチレングリコールを包含する。
【０１４４】
吸入用の組成物は一般に、ドライパウダーとして又は通常の高圧ガス（例えば、ジクロロジフルオロメタン又はトリクロロフルオロメタン）を用いるエアロゾルの形態で投与することができる溶液、懸濁液又は乳剤の形態で提供できる。
【０１４５】
医薬組成物は、徐放又は放出制御製剤（すなわち、投与後に有効成分の徐放をもたらすカプセルのような製剤）として製剤化することができる。このような製剤は一般に、公知の技術で製造され、例えば、経口、直腸若しくは皮下移植によって、又は所望の標的部位に移植することによって投与される。好ましくは、この製剤は比較的一定のレベルで有効成分を放出し；この放出の特徴は、（ａ）コーティング剤の厚さ又は組成物を変化させること、（ｂ）コーティング剤中の流動化剤の追加の量又は方法を変化させること、（ｃ）放出調整剤のような追加の成分を含むこと、（ｄ）組成物、粒子サイズ又は基質の粒子サイズを変化させること、及び（ｅ）コーティングに１つ又はそれ以上の通路を設けること、による方法を包含する、当該技術分野で公知の方法を用いて変えることができる。徐放製剤中に含有する調節剤の量は、例えば、投入方法（例えば、移植部位）、放出の速度及び期待される時間、並びに治療又は予防する疾患の性質によって決まる。
【０１４６】
一般に、徐放及び／又は放出制御製剤は、胃腸管（又は、移植部位）での崩壊及び吸収を遅らせる基質及び／又はコーティング剤を包含し、これにより長期に渡る遅延作用又は持続作用を提供する。例えば、モノステアリン酸グリセリル又はジステアリン酸グリセリルのような、時間遅延させる物質を用いてもよい。調節剤の放出を制御するコーティング剤は、ｐＨ依存性のコーティング剤（これは、胃で調節剤を放出するのに用いることができる）及び腸溶性のコーティング剤（これは、胃腸管に沿って調節剤を放出するのに用いることができる）を包含する。ｐＨ依存性のコーティング剤は、例えば、セラックニス、酢酸フタル酸セルロース、酢酸フタル酸ポリビニル、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メタクリル酸エステルコポリマー及びゼインを包含する。
【０１４７】
更に又は上記投与方法と共に、本発明の化合物は、（例えば、（イヌ又はネコのような）ペット及び家畜を含む非ヒト動物への投与用に）簡便に食物又は飲料水に添加することができる。動物用の餌及び飲料水の組成物は、動物が食事と共に組成物の適当量を摂取できるように処方することができる。組成物を餌又は飲料水に添加するための、プレミックスとしても簡便に提供できる。
【０１４８】
化合物は、一般に治療有効量を投与する。好ましい全身用量は、１日に体重１ｋｇ当り５０ｍｇ以下（例えば、１日に体重１ｋｇ当り約０．００１ｍｇ〜約５０ｍｇの範囲）であり、経口では一般に、静脈内投与に較べて約５〜２０倍高い（例えば、１日に体重１ｋｇ当り約０．０１ｍｇ〜約４０ｍｇの範囲）。
【０１４９】
単回投与単位を調製するために、担体物質と混合する有効成分の量は、例えば、治療する患者、特定の投与方法及びその他の併用薬剤によって変わる。投与単位は一般に、約１０μｇ〜約５００ｍｇの有効成分を含有している。最適投与量は、日常の検査、及び当該技術分野でよく知られている手順によって決めることができる。
【０１５０】
医薬組成物は、ＶＲ１調節の応答に関連する疾患の治療（例えば、バニロイドリガンド又はその他の刺激物への暴露、疼痛、痒み、肥満又は尿失禁の治療）用に包装することができる。包装された医薬組成物は一般に、（ｉ）本明細書に記載されている少なくとも１つのＶＲ１調節剤を包含する医薬組成物を入れた容器、及び（ｉｉ）含まれる組成物は、ＶＲ１調節の応答に関連する疾患に罹っている患者を治療するために使用するものであることを示す使用説明書（例えば、ラベル又は添付文書)を包含する。
【０１５１】
（使用方法）
本発明のＶＲ１調節剤は、インビトロ及びインビボの両方での様々な状況下で、カプサイシン受容体の活性及び／又は活性化を変化させるために使用できる。ある特定の態様においては、ＶＲ１アンタゴニストはインビトロ又はインビボにおいて、（カプサイシン及び／又はＲＴＸのような）バニロイドリガンドアゴニストがカプサイシン受容体に結合するのを、阻害するために用いることができる。一般に、このような方法は、水溶液中でバニロイドリガンドの存在下に、及びこのリガンドがカプサイシン受容体と結合する好ましい条件下に、本発明の１つ又はそれ以上のＶＲ１調節剤を、カプサイシン受容体に接触させる工程を含有してなる。ＶＲ１調節剤は一般に、インビトロでバニロイドリガンドのＶＲ１との結合（実施例５で示されるアッセイを用いて）及び／又はＶＲ１介在のシグナル伝達（実施例６で示されるアッセイを用いて）を、変化させる十分な濃度で存在している。カプサイシン受容体は、溶液若しくは懸濁液中（例えば、単離した膜又は細胞の調合液中）に、又は培養された若しくは単離された細胞中に存在する。ある特定の態様において、カプサイシン受容体は患者の神経細胞に発現し、当該水溶液は体液である。好ましくは、１つ又はそれ以上のＶＲ１調節剤は、このＶＲ１調節剤が動物の少なくとも１つの体液中に、１マイクロモル以下、好ましくは５００ナノモル以下、更に好ましくは１００ナノモル以下、５０ナノモル以下、２０ナノモル以下、又は１０ナノモル以下の治療有効濃度で存在するような量で、動物に投与される。例えば、このような化合物は、２０ｍｇ／（ｋｇ・体重）未満、好ましくは５ｍｇ／（ｋｇ・体重）、ある場合には、１ｍｇ／（ｋｇ・体重）未満の投与が可能である。
【０１５２】
細胞カプサイシン受容体のシグナル伝達活性（すなわち、カルシウム透過性）を調節する、好ましくは低減する方法も本発明で提供される。このような調節は、カプサイシン受容体に（インビトロ又はインビボのどちらかで）、調節剤が受容体と結合するのに適当な条件下で、本発明の１つ又はそれ以上のＶＲ１調節剤を接触させることによって達成することができる。ＶＲ１調節剤は一般に、本明細書で記載されるようなインビトロでバニロイドリガンドのＶＲ１との結合及び／又はＶＲ１介在のシグナル伝達を、変化させるのに十分な濃度で存在する。この受容体は、溶液又は懸濁液中に、培養又は単離した細胞の調合液中に、又は患者の細胞内に存在する。例えば、この細胞は動物のインビボで接触している神経細胞であってもよい。また、この細胞は、動物のインビボで接触している、膀胱上皮細胞（尿路上皮細胞）又は気道上皮細胞のような、上皮細胞であってもよい。シグナル伝達活性の調節は、カルシウムイオンの透過性（カルシウム非固定化又は流動化ともいう）を検出することによって評価することができる。シグナル伝達活性の調節は、また本発明の１つ又はそれ以上のＶＲ１調節剤で治療されている患者の症状（例えば、疼痛、灼熱感、気管支収縮、炎症、咳、しゃっくり、痒み、尿失禁又は過活動膀胱）の変化を検出することによっても評価することができる。
【０１５３】
本発明のＶＲ１調節剤は、患者（例えば、ヒト）に経口で又は局所に投与され、ＶＲ１シグナル伝達活性を調節している間、動物の少なくとも１つの体液中に存在させることが好ましい。このような方法に用いられる好ましいＶＲ１調節剤は、ＶＲ１シグナル伝達活性を、インビトロでは１ナノモル以下、好ましくは１００ピコモル以下、より好ましくは２０ピコモル以下の濃度で、インビボでは血液のような体液中で１マイクロモル以下の、５００ナノモル以下の又は１００ナノモル以下の濃度で調節する。
【０１５４】
本発明は更に、ＶＲ１調節の応答に関連する疾患を治療する方法を提供する。本発明の文脈においては、「治療」という用語は、予防維持療法及び対症療法の両方、このどちらかは予防（すなわち、症状の発現前に、阻止し、遅らせ、症状の重症度を減少させるために）又は治療（すなわち、症状の発現後に、症状の重症度及び／又は期間を減少させるために）であるが、を含んでいる。疾患が局所的に存在するバニロイドリガンドの量に関係なく、カプサイシン受容体の不適切な活性によって特徴付けられるものであり、且つ／又はカプサイシン受容体活性の調節がこれらの疾患又は症状の緩和をもたらすものであれば、疾患は「ＶＲ１調節に応答性である」と言える。このような疾患とは例えば、以下で更に詳細に説明されるように、ＶＲ１を活性化する刺激への暴露、疼痛、呼吸器疾患（咳、喘息、慢性閉塞性肺疾患、慢性気管支炎、嚢胞性線維症、並びに季節性及び通年性鼻炎のようなアレルギー性鼻炎及び非アレルギー性鼻炎を含む鼻炎のような）、うつ病、痒み、尿失禁、過活動膀胱、しゃっくり及び肥満からくる症状を包含する。これらの疾患は、当該技術分野で確立されている評価基準を用いて診断及びモニターすることができる。上記の用量で治療される患者は、ヒト、ペット及び家畜を含む。
【０１５５】
投薬計画は、使用する化合物及び治療すべき特定の疾患に応じて変わるが、殆どの病気の治療には、１日４回以下の投与頻度が望ましい。一般に、１日２回の投与計画が更に望ましく、１日１回が特に望ましい。急性の疼痛治療には、直ちに有効濃度に到達することが可能な単回投与が望ましい。しかし、それぞれ個別の患者における投与量レベル及び投薬計画は、使用される特定の化合物の活性、年齢、体重、健康状況、性別、治療食、投与期間、投与経路、そして排出速度、薬剤の組合せ及び治療中の特定の病気の重症度を含む、種々の要因によって異なるものであることは理解されたい。一般に、効果的な治療を提供できる最少の投与量が望ましい。患者の治療効果は、通常、疾患の治療又は予防される疾患に適した、医療又は獣医学上の判断基準を用いて観察（モニター）される。
【０１５６】
カプサイシン受容体を活性化する刺激への暴露による症状を呈している患者には、熱、光、催涙ガス又は酸による火傷を負った者、及び彼らの粘膜がカプサイシン（例えば、唐辛子又は唐辛子スプレーから）又は酸、催涙ガス、感染性物質若しくは空気汚染のような関連刺激に（例えば、摂食、吸入又は目からの接触を介して）曝されている者が含まれる。結果として生じる症状（本発明のＶＲ１調節剤、特にアンタゴニストを用いて治療される）には例えば、疼痛、気管支収縮及び炎症が含まれる。
【０１５７】
本発明のＶＲ１調節剤を用いて治療できる疼痛は、慢性又は急性のものであり、末梢神経介在の疼痛（特に、神経性疼痛）を含むが、これに限定されるものではない。本発明の化合物は、例えば、乳房切除後疼痛症候群、断端痛、幻肢痛、口腔内神経性疼痛、歯痛、義歯痛、ヘルペス後神経痛、糖尿病性神経障害、化学療法による神経障害、反射性交感神経性ジストロフィー、三叉神経痛、変形性関節症、関節リウマチ、線維筋痛、ギラン−バーレ症候群、知覚異常性大腿神経痛、口内焼灼感症候群、及び／又は末梢神経疾患（例えば、神経絞扼及び腕神経叢裂離、切断、両側性末梢神経障害を含む末梢神経障害、疼痛性チック、非定型顔面痛、神経根障害、くも膜炎）に関連するするような疼痛を包含する、神経及び神経根障害に関連する疼痛の治療に用いることができる。
【０１５８】
更なる神経障害性疼痛は、灼熱痛（反射性交感神経性ジストロフィーＲＳＤ、末梢神経損傷に続発する）、神経炎（例えば、坐骨神経炎、末梢神経炎、多発性神経炎、視神経炎、発熱後神経炎、移動性神経炎、分節性神経炎及びゴンボール神経炎（Gombault's neuritis）を含む）、ニューロン炎、神経痛（例えば、上で述べたもの、 頸腕神経痛、頭蓋神経痛、膝神経痛、舌咽神経痛、群発頭痛、特発性神経痛、肋間神経痛、乳房神経痛、顎関節神経痛、モートン神経痛（Morton's neuralgia）、鼻毛様体神経痛、後頭神経痛、紅神経痛、スルダー神経痛（Sluder's neuralgia）、スプレノパラチン（splenopalatine）神経痛、上部眼窩点神経痛及びヴィディウス神経痛）、手術関連疼痛、筋骨格痛、筋筋膜性疼痛症候群、エイズ関連神経性疼痛、ＭＳ関連神経性疼痛、中枢神経系痛（例えば、脳幹障害による疼痛、坐骨神経痛、及び強直性脊椎炎）、及び脊髄損傷に関連する疼痛を包含する脊髄痛を包含する。末梢神経の活性に伴う頭痛を包含する頭痛も、本明細書に記載されているように治療することができる。このような疼痛は、例えば膿瘻、クラスター（すなわち、群発頭痛）及び緊張性頭痛、片頭痛、側頭下顎骨痛及び上顎洞痛を包含する。
【０１５９】
例えば、片頭痛は、患者が片頭痛の前兆を感じたら直ちに本発明の化合物を投与することによって阻止することができる。本明細書に記載されているように治療することが可能な更なる疼痛は、シャルコー疼痛、腸内ガスによる疼痛、耳痛、心臓痛、筋肉痛、眼痛、口腔顔面痛（例えば、歯痛）、腹痛、婦人科の疼痛（例えば、生理痛、月経困難症、膀胱炎に伴う疼痛、陣痛、慢性骨盤痛、慢性直腸炎及び子宮内膜症）、急性及び慢性の背痛（例えば、腰痛）、痛風、瘢痕痛、痔痛、消化不良性疼痛、狭心症、神経根痛、「非疼痛」神経障害、複合性局所疼痛症候群、同所痛及び異所痛（腫瘍に関連する疼痛でしばしば癌性疼痛（例えば、骨癌患者における）というものを含む）、毒への暴露による疼痛（及び炎症）（例えば、蛇、くもに咬まれたり昆虫に刺されたことによる）及び外傷性疼痛（例えば、手術後疼痛、会陰切開痛、切り傷からの痛み、筋骨格痛、打撲及び骨折からの痛み、及び火傷の痛み、特にこれらに関連する初期の痛覚過敏）を包含する。本明細書に記載されているように治療することが可能な更なる疼痛は、上記のような呼吸器疾患、自己免疫疾患、免疫不全疾患、ほてり、炎症性腸疾患、胃食道逆流性疾患（ＧＥＲＤ）、過敏性腸症候群及び／又は炎症性腸疾患に関連する疼痛を包含する。
【０１６０】
ある特定の態様において、本発明のＶＲ１調節剤は、機械的疼痛の治療に用いることができる。本明細書で用いられる「機械的疼痛」という用語は、神経性ではない頭痛、又は熱、寒冷若しくは外からの化学的な刺激への暴露によるもの以外の疼痛を示す。機械的疼痛は、術後疼痛及び切り傷、打撲及び骨折からの痛み；歯痛；神経根痛、変形性関節症；関節リウマチ；線維筋痛；知覚異常性大腿神経痛；背痛；癌関連疼痛；狭心症；カーペルトンネル症候群（carpel tunnel syndrome）；及び骨折、陣痛、痔、腸内ガス、消化不良、及び生理からくる疼痛のような物理的な外傷（熱的若しくは化学的な火傷又はその他の刺激及び／又は有毒な化学物質への有痛性の暴露以外の）を包含する。
【０１６１】
治療できる掻痒症は、乾癬性掻痒、血液透析による痒み、水性掻痒、並びに膣前庭炎、接触皮膚炎、昆虫に咬まれる及び皮膚アレルギーに関連する痒みを包含する。本明細書に記載されているように治療することができる尿路疾患は、尿失禁（溢流性尿失禁、急迫性尿失禁及びストレス性尿失禁を包含する）、更に過活動又は不安定膀胱症（膀胱排尿筋過反射、脊髄因性排尿筋過反射及び膀胱過敏症を包含する）を包含する。このようなある特定の治療方法においては、ＶＲ１調節剤を直接膀胱に注射できるように、カテーテルまたは同様な器具を介してＶＲ１調節剤を投与する。本発明の化合物は鎮該薬（咳を阻止し、緩和し又は抑える）として、及びしゃっくりの治療及び肥満患者の減量を促進するためにも使用することができる。
【０１６２】
その他の態様において、本発明のＶＲ１調節剤は、疼痛及び／又は炎症要素を含む疾患の治療のための併用療法で使用することができる。このような疾患には、例えば、自己免疫疾患、及びこれらに限定されないが、関節炎（特に関節リウマチ）、乾癬、クローン病、紅斑性狼瘡、過敏性腸症候群、組織移植拒絶反応、及び移植臓器の超急性拒絶反応を包含する炎症要素を有するものと知られている病的自己免疫反応を包含する。その他のこのような疾患は、外傷（例えば、頭部又は骨髄の損傷）、心臓及び脳の血管疾患並びにある特定の感染症を包含する。
【０１６３】
このような併用療法において、ＶＲ１調節剤は鎮痛剤及び／又は抗炎症剤と共に患者に投与される。このＶＲ１調節剤と鎮痛剤及び／又は抗炎症剤は、同じ医薬組成物中に存在させても、いずれかの順序で別々に投与されてもよい。抗炎症剤は、例えば、非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤｓ）、非特異的及びシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）特異的シクロオキシゲナーゼ酵素阻害剤、金化合物、コルチコステロイド、メトトレキセート、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体アンタゴニスト、抗ＴＮＦアルファー抗体、抗Ｃ５抗体、及びインターロイキン−１（ＩＬ−１）受容体アンタゴニストを包含する。ＮＳＡＩＤｓの例は、これらに限定されないが、イブプロフェン（例えば、ＡＤＶＩＬ（登録商標）、ＭＯＴＲＩＮ（登録商標））、フルビプロフェン（ＡＮＳＡＩＤ（登録商標））、ナプロキセン又はナプロキセンナトリウム（例えば、ＮＡＰＲＯＳＹＮ、ＡＮＡＰＲＯＸ、ＡＬＥＶＥ（登録商標））、ジクロフェナク（例えば、ＣＡＴＡＦＬＡＭ（登録商標）、ＶＯＬＴＡＲＥＮ（登録商標））、ジクロフェナクナトリウムとミソプロストールの合剤（例えば、ＡＲＴＨＲＯＴＥＣ（登録商標））、スリンダック（ＣＬＩＮＯＲＩＬ（登録商標））、オキサプロジン（ＤＡＹＰＲＯ（登録商標））、ジフルニサール（ＤＯＬＯＢＩＤ（登録商標））、ピロキシカム（ＦＥＬＤＥＮＥ（登録商標））、インドメタシン（ＩＮＤＯＣＩＮ（登録商標））、エトドラック（ＬＯＤＩＮＥ（登録商標））、フェノプロフェンカルシウム（ＮＡＬＦＯＮ（登録商標））、ケトプロフェン（例えば、ＯＲＵＤＩＳ（登録商標）、ＯＲＵＶＡＩＬ（登録商標））、ナトリウムナブメトン（ＲＥＬＡＦＥＮ（登録商標））、スルファサラジン（ＡＺＵＬＦＩＤＩＮＥ（登録商標））、トルメチンナトリウム（ＴＯＬＥＣＴＩＮ（登録商標））、及びヒドロキシクロロキン（ＰＬＡＱＵＥＮＩＬ（登録商標））を包含する。
ある特定の種類のＮＳＡＩＤｓは、シクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）酵素を阻害する化合物を包含する；このような化合物は、セレコキシブ（ＣＥＬＥＢＲＥＸ（登録商標）及びロフェコキシブ（ＶＩＯＸＸ（登録商標））を含む。ＮＳＡＩＤｓは更に、アセチルサリチル酸又はアスピリン、サリチル酸ナトリウム、サリチル酸コリン及びマグネシウム（ＴＲＩＬＩＳＡＴＥ（登録商標））、及びサルサラーテ（ＤＩＳＡＬＣＩＤ（登録商標））のようなサリチル酸塩を、更にコーチゾン（ＣＯＲＴＯＮＥ（登録商標）アセテート）、デキサメサゾン（例えば、ＤＥＣＡＤＲＯＮ（登録商標））、メチルプレドニゾロン（ＭＥＤＲＯＬ（登録商標））、プレドニゾロン（ＰＲＥＬＯＮＥ（登録商標））、プレドニゾロン・リン酸ナトリウム（ＰＥＤＩＡＰＲＥＤ（登録商標））、及びプレドニゾン（例えば、ＰＲＥＤＮＩＣＥＮ−Ｍ（登録商標）、ＤＥＬＴＡＳＯＮＥ（登録商標）、ＳＴＥＲＡＰＲＥＤ（登録商標））のような副腎皮質ステロイドを包含する。
更なる抗炎症剤は、メロキシカン、ロフェコキシブ、セレコキシブ、エトリコキシブ、パレコキシブ、バルデコキシブ及びチリコキシブを包含する。
【０１６４】
このような併用療法におけるＶＲ１調節剤の適切な用量は、一般に上記のようである。抗炎症剤の用量及び投与方法は、例えば「Physician's Desk Reference」中の製造会社の説明書に見出すことができる。ある特定の態様において、ＶＲ１調節剤と抗炎症剤との併用投与は、治療効果を生ずるのに必要な抗炎症剤の用量の減少をもたらす（つまり、最小治療有効量を減少させる）。従って、好ましくは、本発明の併用又は併用療法における抗炎症剤の用量は、ＶＲ１アンタゴニストの併用投与なしで抗炎症剤を投与する際の製造会社が助言している最大用量未満である。より好ましくは、この用量はこの最大用量の３／４未満、更に好ましくは１／２未満、非常に好ましくは１／４未満であり、更に最も好ましい用量は、ＶＲ１アンタゴニストと併用投与しないで投与するときの抗炎症剤の投与に対して製造会社が助言する最大量の１０％未満である。望ましい効果を達成するのに必要な併用薬のＶＲ１アンタゴニスト成分の用量は、併用薬の抗炎症剤成分の用量及び効力によって影響されることは明らかであろう。
【０１６５】
ある好ましい態様において、ＶＲ１調節剤と抗炎症剤との併用投与は、１つ又はそれ以上のＶＲ１調節剤及び１つ又はそれ以上の抗炎症剤を、パッケージ内の別の容器に入れるか、又は１つ又はそれ以上のＶＲ１調節剤及び１つ又はそれ以上の抗炎症剤の混合物として同じ容器に入れるかして、同じパッケージに包装することによって遂行できる。好ましい混合物は経口投与用（例えば、ピル、カプセル、錠剤など）に製剤化される。ある特定の態様においては、このパッケージは、炎症性の疼痛を治療するために、１つ又はそれ以上のＶＲ１調節剤及び１つ又はそれ以上の抗炎症剤を一緒に用いることを、指示するしるし付きのラベルを含有する。
【０１６６】
更なる態様において、本発明のＶＲ１調節剤は、１つ又はそれ以上の追加の疼痛緩和薬剤と併用して用いることができる。このような薬剤のあるものは抗炎症剤で、上に記載されている。その他のこのような薬剤は、通常１つ又はそれ以上のオピオイド受容体のサブタイプ（例えば、μ、κ及び／又はδ）上で、好ましくはアゴニスト又は部分アゴニストとして作用する、麻薬を含む鎮痛薬である。このような薬剤は、アヘン剤、アヘン誘導体及びオピオイドを、更にこれらの薬学的に許容される塩及び水和物を包含する。麻薬性鎮痛薬の具体的な例は、好ましい態様において、アルフェンタニル、アルファプロジン、アニレリジン、ベジトラミド、ブプレノルフィン、ブトルファノール、コデイン、ジアセチルジヒドロモルフィン、ジアセチルモルフィン、ジヒドロコデイン、ジフェノキシレート、エチルモルフィン、フェンタニル、ヘロイン、ヒドロコドン、ヒドロモルホン、イソメタドン、レボメトルファン、レボルファン、レボルファノール、メペリジン、メタゾシン、メタドン、メトルファン、メトポン、モルヒネ、ナルブフィン、アヘン抽出物、アヘン流エキス剤、粉末化アヘン、顆粒化アヘン、原料アヘン、アヘンチンキ剤、オキシコドン、オキシモルホン、パレゴリック、ペンタゾシン、ペチジン、フェナゾシン、ピミノジン、プロポキシフェン、ラセメトルファン、ラセモルファン、スルフェンタニル、テバイン並びにこれら薬剤の薬学的に許容される塩及び水和物を包含する。
【０１６７】
麻薬性鎮痛薬のその他の例は、アセトルフィン、アセチルジヒドロコデイン、アセチルメタドール、アリルプロジン、アルファアセチルメタドール、アルファメプロジン、アルファメタドール、ベンゼチジン、ベンジルモルフィン、ベータアセチルメタドール、ベータメプロジン、ベータメタドール、ベータプロジン、クロニタゼン、コデインメチルブロマイド、コデイン−Ｎ−オキシド、シプレノルフィン（cyprenorphine）、デソモルフィン、デキストロモルアミド、ジアンプロミド、ジエチルチアンブテン、ジヒドロモルフィン、ジメノキサドール、ジメフェプタノール、ジメチルチアンブテン、ジオキサフェチルブチレート、ジピパノン、ドロテバノール、エタノール、エチルメチルチアンブテン、エトニタゼン、エトルフィン、エトキセリジン、フレチジン、ヒドロモルフィノール、ヒドロキシペチジン、ケトベミドン、レボモラミド、レボフェナシルモルファン、メチルデソルフィン、メチルジヒドロモルフィン、モルフェリジン、モルフィンメチルプロミド、モルフィンメチルスルホネート、モルフィン−Ｎ−オキシド、ミロフィン、ナロキソン、ナルチヘキソン、ニココデイン、ニコモルフィン、ノルアシメタドール、ノルレボルファノール、ノルメタドン、ノルモルフィン、ノルピパノン、ペンタゾカイン、フェナドキソン、フェナンプロミド、フェノモルファン、フェノペリジン、ピリトラミド、フォルコジン、プロヘプタゾイン、プロペリジン、プロピラン、ラセモラミド、テバコン、トリメペリジン並びにこれらの薬学的に許容される塩及び水和物を包含する。
【０１６８】
更に具体的な代表的鎮痛剤は、例えば、アセトアミノフェン（パラセタモール）、アスピリン及びその他の上記ＮＳＡＩＤｓ；ＮＲ２Ｂアンタゴニスト；ブラジキニンアンタゴニスト；抗片頭痛薬；オクスカルバゼピン及びカルバマゼピンのような抗痙攣薬；抗うつ薬（ＴＣＡｓ、ＳＳＲＩｓ、ＳＮＲＩｓ、サブスタンスＰアンタゴニストなどのような）；腰椎麻酔薬；ガバペンチン；喘息治療剤（β２アドレナリン受容体アゴニスト、ロイコトリエンＤ４アンタゴニスト（例えば、モンテルカスト）のような）；ＴＡＬＷＩＮ（登録商標）Ｎｘ及びＤＥＭＥＲＯＬ（登録商標）（両者は「Sanofi Winthrop Pharmaceuticals; New York, NY」より入手可能）；ＬＥＶＯ−ＤＲＯＭＯＲＡＮ（登録商標）；ＢＵＰＲＥＮＥＸ（登録商標）（Reckitt & Coleman Pharmaceuticals, Inc.; Richmond, VA）；ＭＳＩＲ（登録商標）（Purdue Pharma L. P.; Norwalk, CT）；ＤＩＬＡＵＤＩＤ（登録商標）（Knoll Pharmaceutical Co.; Mount Olive, NJ）；ＳＵＢＬＩＭＡＺＥ（登録商標）；ＳＵＦＥＮＴＡ（登録商標）（Janssen Pharmaceutical Inc.; Titusville, NJ）；ＰＥＲＣＯＣＥＴ（登録商標）、ＮＵＢＡＩＮ（登録商標）及びＮＵＭＯＲＰＨＡＮ（登録商標）（全てが「Endo Pharmaceuticals Inc.; Chadds Ford, PA」から入手可能）；ＨＹＤＲＯＳＴＡＴ（登録商標）ＩＲ、ＭＳ／Ｓ及びＭＳ／Ｌ（全てが「Richwood Pharmaceutical Co. Inc; Florence, KY」から入手可能）；ＯＲＡＭＯＲＰＨ（登録商標）ＳＲ及びＲＯＸＩＣＯＤＯＮＥ（登録商標）（両者は「Roxanne Laboratories; Columbus, OH」から入手可能）及びＳＴＡＤＯＬ（登録商標）（Bristol-Myers Squibb; New York, NY）を包含する。更なる鎮痛剤は、ＡＭ１２４１のようなＣＢ２受容体アゴニスト、及びＮｅｕｒｏｎｔｉｎ（Gabapentin）及びプレガバリンのようなα２δサブユニットに結合する化合物を包含する。
【０１６９】
本発明のＶＲ１調節剤と併用して使用するための代表的な抗片頭痛薬は、ＣＧＲＰアンタゴニスト、エルゴタミン、及びスマトリパン、ナラトリプタン、ゾルマトリプタン及びリザトリプタンのような５−ＨＴ１アゴニストを包含する。
更なる態様において、本発明のＶＲ１調節剤は  １つ又はそれ以上のロイコトリエン受容体アンタゴニスト（例えば、システイニルロイコトリエンＣｙｓＬＴ１受容体を阻害する薬剤）と併用して使用することができる。ＣｙｓＬＴ１アンタゴニストは、モンテルカスト（ＳＩＮＧＵＬＡＩＲ（登録商標）；Merck & Co., Inc.）を包含する。このような併用は、喘息のような肺疾患の治療に使用できることが見出されている。
【０１７０】
咳を治療又は予防するために、本発明のＶＲ１調節剤は、このような症状を治療するためにデザインされたその他の薬剤と併用して使用することができる。このような薬剤は、抗生物質、抗炎症剤、システイニルロイコトリエン、ヒスタミンアンタゴニスト、コルチコステロイド、オピオイド、ＮＭＤＡアンタゴニスト、プロトンポンプ阻害剤、ノシセプチン、ニューロキニン（ＮＫ１、ＮＫ２及びＮＫ３）及びブラジキニン（ＢＫ１及びＢＫ２）受容体アンタゴニスト、カンナビノイド、ナトリウム依存性チャンネルのブロッカー、及び大きい透過性のカルシウム依存性カリウムチャンネル活性化剤を含む。具体的な薬剤は、デキスブロンフェニラミン＋プソイドエフェドリン、ロラタジン、オキシメタゾリン、イプラトロピウム、アルブテロール、ベクロメタゾン、モルヒネ、コデイン、フォルコデイン及びデキストロメトルファンを包含する。
【０１７１】
本発明は、更に尿失禁の治療としての併用療法を提供する。このような態様において、本発明のＶＲ１調節剤は、このような症状を治療するためにデザインされたその他の薬剤治療と併用して使用することができる。このような薬剤療法は、エストロゲン置換療法、プロゲステロン同族体、電気刺激、カルシウムチャンネルブロッカー、 鎮痙剤、コリン作用性アンタゴニスト、抗ムスカリン薬、三環性の抗うつ剤、ＳＮＲＩｓ、ベータアドレナリン受容体アゴニスト、ホスホジエステラーゼ阻害剤、カリウム・チャンネル開口薬、ノシセプチン／オルファニンＦＱ（ＯＰ４）アゴニスト、ニューロキニン（ＮＫ１及びＮＫ２）アンタゴニスト、Ｐ２Ｘ３アンタゴニスト、筋肉増強剤及び仙骨神経調節を含む。具体的な薬剤は、オキシブチニン、エメプロニウム、トルテロジン、フラボキサート、フルルビプロフェン、トルテロジン、ジシクロミン、プロピベリン、プロパンテリン、ジシクロミン、イミプラミン、ドキセピン、デュロキセチン、１−デアミノ−８−Ｄ−アルギニンバソプレシン、トルテロジン（ＤＥＴＲＯＬ（登録商標）；Pharmacia Corporation）のようなムスカリン受容体アンタゴニスト、及びオキシブチニン（ＤＩＴＲＯＰＡＮ（登録商標）；Ortho-McNeil Pharmeceutical, Inc., Raritan, NJ）のような抗コリン作用薬を包含している。
【０１７２】
このような併用療法でのＶＲ１調節剤の好ましい用量は、一般に上記のようである。その他の疼痛緩和薬剤の用量及び投与方法は、例えば「Physician's Desk Reference」中の製造会社の説明書に見出すことができる。ある特定の態様において、ＶＲ１調節剤と１つ又はそれ以上の追加の疼痛薬剤との併用投与は、各々の治療薬が治療効果を示すのに必要な用量を減少させる（例えば、片方又は両方の薬剤の用量は、上で示した又は製造会社が助言している最大容量の３／４未満、１／２未満、１／４未満又は１０％未満であろう）。
【０１７３】
併用療法で用いるために、上記のような医薬組成物は、上記のような追加の薬剤の１つ又はそれ以上を更に含有することができる。このような組成物において、追加の薬剤は鎮痛剤である。１つ又はそれ以上のＶＲ１調節剤及び１つ又はそれ以上の追加の薬剤（例えば、鎮痛剤）を同じ包装体に含有してなる、包装された医薬製剤も、本発明で提供される。このような包装された医薬製剤は一般に、（ｉ）少なくとも１つの本発明のＶＲ１調節剤を含有している医薬組成物を入れた容器；（ｉｉ）少なくとも１つの上記のような追加の薬物（疼痛緩和及び／又は抗炎症薬）を含有している医薬組成物を入れた容器；及び（ｉｉｉ）この組成物は、患者におけるＶＲ１調節に応答する症状（疼痛及び／又は炎症が主な症状であるような）を治療又は予防するために、同時に、別々に又は順次使用すべきことを指示している説明書（例えば、ラベル又は添付文書）を包含している。
【０１７４】
ＶＲ１アゴニストである化合物は、例えば、群衆整理で（催涙ガスの代用品として）若しくは身辺警護で（例えば、スプレー製剤中に）、又はカプサイシン受容体の脱感作による疼痛、痒み、尿失禁若しくは過活動膀胱の治療用の薬剤として、更に使用できるであろう。一般に、群集整理又は個人警護で用いられる化合物は、通常の催涙ガス又は唐辛子スプレー技術に従って製剤化及び使用される。
【０１７５】
別の態様では、本発明は、本発明の化合物についてのインビトロ及びインビボでの多種の非医薬用途を提供する。例えば、このような化合物は標識されて、カプサイシン受容体の検出及び局在化（細胞調合液又は組織片、これらの調合液又は分画のようなサンプル中の）のためのプローブとして使用できる。更に、適当な反応性の基（アリールカルボニル、ニトロ又はアジド基のような）を包含する本発明の化合物は、受容体結合部位の光親和性標識の検討に使用できる。更に、本発明の化合物は、受容体活性アッセイにおいて陽性対照として、候補薬剤のカプサイシン受容体との結合能力を測定するための標準として、又は陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）用若しくは単光子放射型コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）用の放射性追跡子としても使用できる。
【０１７６】
このような方法は、生体でのカプサイシン受容体を特定化するために使用することができる。例えば、ＶＲ１調節剤を多種のよく知られた技術を用いて標識し（例えば、本明細書に記載のように、トリチウムのような放射性核種で放射性標識し）、そしてサンプルと共に適当な培養時間（例えば、まず最初に結合時間についてアッセイして決定された時間）培養する。培養に続いて、未結合の化合物を除去し（例えば、洗浄によって）、結合した化合物を用いた標識に適した何れかの方法（例えば、放射性標識された化合物はオートラジオグラフィー又はシンチレーションカウントで；発光性の基及び蛍光性の基を検出するためには分光方法が使用できる）により検出する。対照として、標識された化合物及び大量の（例えば１０倍以上の）標識されていない化合物を含む対応のサンプルを、同様の方法で処理する。テストサンプル中に、対照中より多い量の検出可能な標識が残っていれば、サンプル中にカプサイシン受容体が存在することを示す。培養細胞又は組織サンプル中のカプサイシン受容体の受容体オートラジオグラフィー（受容体マッピング）を含む検出アッセイは、Ｋｕｈａｒによる記載「section 8.1.1〜8.1.9 of Current Protocols in Pharmacology (1998) John Wiley & Sons, New York」のようにして行うことができる。
【０１７７】
本発明の化合物は、公知の各種細胞分離方法にも使用できる。例えば、調節剤を、インビトロでカプサイシン受容体を固定化し、それにより分離する（例えば、カプサイシン受容体を発現する細胞を分離する）ための親和性リガンドとして用いるために、組織培養のプレート又はその他の支持体の内部表面に結合させてもよい。一つの好ましい態様では、フルオレセインのような蛍光マーカーに結合させた調節剤を細胞に接触させ、次いでこれを蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）によって分析（又は単離）する。
【０１７８】
本発明のＶＲ１調節剤は更に、カプサイシン受容体に結合するその他の薬剤を同定するためのアッセイに使用できる。一般に、このようなアッセイは、標識されたＶＲ１調節剤の結合が、テスト化合物によって置き換えられる、標準の競合結合アッセイである。つまり、このようなアッセイは、（ａ）ＶＲ１調節剤がカプサイシン受容体と結合可能な条件下に、カプサイシン受容体に本明細書に記載のような放射性標識したＶＲ１調節剤を接触させて、これにより標識されたＶＲ１調節剤を結合させる；（ｂ）テスト薬剤の非存在下での、標識されたＶＲ１調節剤の結合量に相当するシグナルを検出する；（ｃ）標識されたＶＲ１調節剤の結合したものをテスト薬剤と接触させる；（ｄ）テスト薬剤の存在下での、標識されたＶＲ１調節剤の結合量に相当するシグナルを検出する；そして（ｅ）工程（ｂ）で検出されるシグナルと比較して、工程（ｄ）で検出されるシグナルの減少を測定する；ことによって実施される。
【０１７９】
以下の実施例は、説明の目的で提供されているものであり、限定を目的としたものではない。特に明記されない限り、全ての試薬及び溶媒は標準の商用等級であり、更に精製せずに使用した。通常の改変方法で、出発物質を変えてもよく、追加の工程を採用して本明細書で提供されるその他の化合物を製造することができる。
（実施例）
【実施例１】
【０１８０】
代表的なピペラジニル−ピリジン類縁体の製造
本実施例は、代表的なピペラジニル−ピリジン類縁体の製造を説明する。
Ａ．  ５’−［６−（４−フルオロ−フェニル）−２−（２−メチル−ピロリジン−１−イル）−ピリミジン−４−イル］−３，４，５，６−テトラヒドロ−２Ｈ−［１，２’］ビピリジニル−４−オール
１．  ４，６−ジクロロ−２−モルホリノピリミジン
【０１８１】
【化０３２】
2008523152.tif 000024
【０１８２】
２，４，６−トリクロロピリミジン（８ｇ、４４ミリモル）及びＮａＨＣＯ３（１０ｇ）を含む氷冷のＭｅＯＨ（８０ｍＬ）溶液に、モルホリン（４ｍＬ、４６ミリモル）のメタノール溶液（２０ｍＬ）をゆっくり滴下する。混合物を２５℃にして、一晩攪拌する。水で希釈し、１時間激しく攪拌する。得られた白色固体（位置異性体の混合物として）を採取する。トルエンから注意深く再結晶して、６−モルホリノ−２，４−ジクロロピリミジンを得る。母液を濃縮し、ＥｔＯＨから注意深く再結晶して標題の化合物を得る。
２．  ４−｛４−クロロ−６−［４−（３−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−２−イル｝−モルホリン
【０１８３】
【化０３３】
2008523152.tif 000025
【０１８４】
４，６−ジクロロ−２−モルホリノピリミジン（０．２Ｍのジオキサン溶液、０．２５ｍＬ）及び４−（６−トリフルオロメチル−２−ピリジル）ピペラジン（０．２Ｍのジオキサン溶液、０．２８ｍＬ）を含むゴムのセプタムキャップ付きバイアル瓶に、Ｋ３ＰＯ４水溶液（０．５Ｍ、０．１２５ｍＬ）を加える。混合物を９０℃にて２４時間加熱する。混合物を冷やして、減圧下で濃縮する。ＥｔＯＡｃ及び水で分配した後、有機層を（Ｎａ２ＳＯ４で）乾燥し、減圧下で濃縮する。粗製物をシリカゲル・パッド（１：１のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）でろ過し、そして減圧下で溶媒を除いて、標題の化合物を得る。
３．  ４−｛４−ピペリジン−１−イル−６−［４−（３−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−２−イル｝−モルホリン
【０１８５】
【化０３４】
2008523152.tif 000026
【０１８６】
ＤＭＡ中の４−｛４−クロロ−６−［４−（３−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−ピペラジン−１−イル］−ピリミジン−２−イル｝−モルホリン（４０ｍｇ、０．０９３ミリモル）及びピペリジン（０．３７３ミリモル）の混合物を、１００℃にて１６時間加熱する。混合物をＥｔＯＡｃ及び水で分配し、有機層を（Ｎａ２ＳＯ４で）乾燥し、減圧下で濃縮する。フラッシュ・シリカゲルカラム（１５％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出）で精製して、標題の化合物を得る。
Ｂ．  ５−メチル−６−｛３−（Ｒ）−メチル−４−［２−（２−メチル−ピロリジン−１−イル）−６−ピペリジン−１−イル−ピリミジン−４−イル］−ピペラジン−１−イル｝−ニコチン酸エチルエステル
１．  ４，６−ジクロロ−２−（２−メチル−ピロリジン−１−イル）−ピリミジン
【０１８７】
【化０３５】
2008523152.tif 000027
【０１８８】
２，４，６−トリクロロピリミジン（８ｇ、４４ミリモル）及びＮａＨＣＯ３（１０ｇ）を含む氷冷のＭｅＯＨ（８０ｍＬ）溶液に、２−メチル−ピロリジン（４６ミリモル）のメタノール溶液（２０ｍＬ）をゆっくり滴下する。混合物を２５℃にして、一晩攪拌する。濃縮して、ＥｔＯＡｃ及び水で分配して後、有機層を（Ｎａ２ＳＯ４で）乾燥し、減圧下で濃縮する。フラッシュ・シリカゲルカラム（２５％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出）で精製して、標題の化合物を得る。
２．  １−（５−ブロモ−３−メチル−ピリジン−２−イル）−３−（Ｒ）−メチル−ピペラジン
【０１８９】
【化０３６】
2008523152.tif 000028
【０１９０】
２，５−ジブロモ−３−メチル−ピリジン（Chontech Inc.）（２．０ｇ、７．９７ミリモル）及び（Ｒ）−２−メチル−ピペラジン（３．２ｇ、３１．９ミリモル）のＤＭＡ溶液を、１３０℃にて１６時間加熱する。反応混合物をＥｔＯＡｃ及び水で分配する。ＥｔＯＡｃ層を水（１回）及び塩水（１回）で洗浄し、（Ｎａ２ＳＯ４で）乾燥し、そして減圧下で濃縮して、標題の化合物を得る。
３．  ４−（５−ブロモ−３−メチル−ピリジン−２−イル）−２−（Ｒ）−メチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０１９１】
【化０３７】
2008523152.tif 000029
【０１９２】
ＴＨＦ−Ｈ２Ｏ（４：５）中の１−（５−ブロモ−３−メチル−ピリジン−２−イル）−３−（Ｒ）−メチル−ピペラジン（１６．０ｇ、５９．８ミリモル）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート（１４．４ｇ、６５．８ミリモル）及びＮａ２ＣＯ３（１２．７ｇ、１２０ミリモル）の懸濁液を、還流下で２時間加熱し、その後室温で１６時間攪拌する。混合物をＥｔＯＡｃ及び水で分配し、有機層を（Ｎａ２ＳＯ４で）乾燥し、そして減圧下で濃縮する。フラッシュ・シリカゲルカラム（１５％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出）で精製して、標題の化合物を得る。
４．  ４−（５−シアノ−３−メチル−ピリジン−２−イル）−２−（Ｒ）−メチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０１９３】
【化０３８】
2008523152.tif 000030
【０１９４】
ＤＭＦ中の４−（５−ブロモ−３−メチル−ピリジン−２−イル）−２−（Ｒ）−メチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１５．０ｇ、４０．５ミリモル）及びＺｎ（ＣＮ）２（２．９ｇ、２４．３ミリモル）の混合物に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（２．３ｇ、２．０ミリモル）を加える。反応混合物を乾燥Ｎ２で１０分間パージする。反応混合物を攪拌しながら８０℃にて一晩加熱し、その後室温に冷却して、ＥｔＯＡｃ及び水で分配する。溶液を（Ｎａ２ＳＯ４で）乾燥し、減圧下で濃縮する。フラッシュ・カラム（２５％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出）で精製して、標題の化合物を得る。
５．  ５−メチル−６−｛３−（Ｒ）−メチル−ピペラジン−１−イル）−ニコチン酸
【０１９５】
【化０３９】
2008523152.tif 000031
【０１９６】
１２ＭのＨＣｌ中の４−（５−シアノ−３−メチル−ピリジン−２−イル）−２−（Ｒ）−メチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５．０ｇ、１５．８ミリモル）の溶液を、９０℃にて４時間加熱する。混合物を減圧下で濃縮し、標題の化合物を得る。
６．  ５−メチル−６−（３−（Ｒ）−メチル−ピペラジン−１−イル）−ニコチン酸エチルエステル
【０１９７】
【化０４０】
2008523152.tif 000032
【０１９８】
５−メチル−６−（３−（Ｒ）−メチル−ピペラジン−１−イル）−ニコチン酸塩酸（４．０ｇ、１４．７ミリモル）の冷却したＥｔＯＨ溶液に、ＨＣｌガスを１５分間通す。封管中で６０℃にて１６時間加熱する。混合物を減圧下で濃縮して、ＥｔＯＡｃ及び飽和のＮａＨＣＯ３液で分配する。溶液を（Ｎａ２ＳＯ４で）乾燥し、減圧下で濃縮して、標題の化合物を得る。
７．  ６−｛４−［６−クロロ−２−（２−メチル−ピロリジン−１−イル）−ピリミジン−４−イル］−３−（Ｒ）−メチル−ピペラジン−１−イル｝−５−メチル−ニコチン酸エチルエステル
【０１９９】
【化０４１】
2008523152.tif 000033
【０２００】
ＤＭＡ中の５−メチル−６−（３−（Ｒ）−メチル−ピペラジン−１−イル）−ニコチン酸エチルエステル（２．０ｇ、７．５９ミリモル）、４，６−ジクロロ−２−（２−メチル−ピロリジン−１−イル）−ピリミジン（１．６ｇ、６．９０ミリモル）及びＮａＨＣＯ３（１．１ｇ、１４．０ミリモル）の混合物を、６０℃にて１６時間加熱する。混合物を冷却し、減圧下で濃縮する。ＥｔＯＡｃ及び水で分配して、有機層を（Ｎａ２ＳＯ４で）乾燥し、減圧下で濃縮する。フラッシュ・シリカゲルカラム（１５％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出）で精製して、標題の化合物を得る。
８．  ５−メチル−６−｛３−（Ｒ）−メチル−４−［２−（２−メチル−ピロリジン−１−イル）−６−ピペリジン−１−イル−ピリミジン−４−イル］−ピペラジン−１−イル｝−ニコチン酸エチルエステル
【０２０１】
【化０４２】
2008523152.tif 000034
【０２０２】
ＤＭＡ中の６−｛４−［６−クロロ−２−（２−メチル−ピロリジン−１−イル）−ピリミジン−４−イル］−３−（Ｒ）−メチル−ピペラジン−１−イル｝−５−メチル−ニコチン酸エチルエステル（３００ｍｇ、０．６５４ミリモル）、ピペリジン（１６７ｍｇ、１．９６ミリモル）及びジイソプロピルエチルアミン（３３７ｍｇ、２．６１ミリモル）の混合物を、１３０℃にて１６時間加熱する。混合物を冷却して、減圧下で濃縮する。ＥｔＯＡｃ及び水で分配して、有機層を（Ｎａ２ＳＯ４で）乾燥し、減圧下で濃縮する。プレパラティブＴＬＣ（１５％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出）で精製して、標題の化合物を得る。
Ｃ．  ５−メチル−６−｛３−（Ｒ）−メチル−４−［２−（２−メチル−ピロリジン−１−イル）−６−ピペリジン−１−イル−ピリミジン−４−イル］−ピペラジン−１−イル｝−ニコチン酸
【０２０３】
【化０４３】
2008523152.tif 000035
【０２０４】
５−メチル−６−｛３−（Ｒ）−メチル−４−［２−（２−メチル−ピロリジン−１−イル）−６−ピペリジン−１−イル−ピリミジン−４−イル］−ピペラジン−１−イル｝−ニコチン酸エチルエステル（１００ｍｇ、０．１９７ミリモル）のＴＨＦ溶液に、濁りがほぼ持続するまで水を加える。この混合物にＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（３３ｍｇ、０．７８８ミリモル）を加え、続いて少量のＭｅＯＨを添加する。この混合物を８０℃にて３時間加熱し、その後減圧下で濃縮する。残渣に少量の水を加えて、最終のｐＨを４に調整する。混合物をＥｔＯＡｃ及び水で分配して、有機層を（Ｎａ２ＳＯ４で）乾燥し、減圧下で濃縮して、標題の化合物を得る。
Ｄ．  ５−メチル−６−｛３−（Ｒ）−メチル−４−［２−（２−メチル−ピロリジン−１−イル）−６−ピペリジン−１−イル−ピリミジン−４−イル］−ピペラジン−１−イル｝−ニコチンアミド
【０２０５】
【化０４４】
2008523152.tif 000036
【０２０６】
５−メチル−６−｛３−（Ｒ）−メチル−４−［２−（２−メチル−ピロリジン−１−イル）−６−ピペリジン−１−イル−ピリミジン−４−イル］−ピペラジン−１−イル｝−ニコチン酸（１２５ｍｇ、０．２６１ミリモル）のＤＣＭ溶液に、塩化オキサリル（１６３μＬ、０．３２６ミリモル）及び１滴のＤＭＦを加える。溶液を室温にて１時間攪拌し、濃縮し、そしてＤＣＭに溶解する。氷浴槽で溶液を冷却して、溶液にＮＨ３ガスを１５分間通し、室温にて２時間攪拌する。水で洗浄し、溶液を（Ｎａ２ＳＯ４で）乾燥し、減圧下で濃縮する。残渣をプレパラティブＴＬＣ（ＤＣＭ−ＭｅＯＨ（１９：１）で溶出）で精製して、標題の化合物を得る。
Ｅ．  （５−メチル−６−｛３−（Ｒ）−メチル−４−［２−（２−メチル−ピロリジン−１−イル）−６−ピペリジン−１−イル−ピリミジン−４−イル］−ピペラジン−１−イル｝−ピリジン−３−イル）−メタノール
【０２０７】
【化０４５】
2008523152.tif 000037
【０２０８】
ＤＣＭに５−メチル−６−｛３−（Ｒ）−メチル−４−［２−（２−メチル−ピロリジン−１−イル）−６−ピペリジン−１−イル−ピリミジン−４−イル］−ピペラジン−１−イル｝−ニコチン酸エチルエステル（１００ｍｇ、０．１９７ミリモル）を溶解し、ドライアイス／アセトン浴槽で−７８℃に冷却する。水素化ジイソブチルアルミニウム（０．８０ｍＬ、１Ｎのヘキサン溶液）を滴下して、−７８℃にて１時間攪拌する。過剰のＮａ２ＳＯ４・１０Ｈ２Ｏを加えて−７８℃で５分間攪拌した後、冷却浴槽を取り除き、放置して室温まで温める。混合物をセライトでろ過し、ＤＣＭで洗浄し、その後減圧下で濃縮する。得られたオイルをフラッシュ・クロマトグラフィー（５０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出）で精製して、標題の化合物を得る。
【実施例２】
【０２０９】
代表的なピペラジニル−ピリジン類縁体：５−フルオロ−１−（２−モルホリノ−６−（４−（３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）ピリミジン−４−イル）インドリン
１．  ６−モルホリノ−２，４−ジクロロピリミジン
【０２１０】
【化０４６】
2008523152.tif 000038
【０２１１】
２，４，６−トリクロロピリミジン（５０ｇ、０．２７モル）及びＮａＨＣＯ３（１１４ｇ、１．３５モル）を含む氷冷のＭｅＯＨ（５００ｍＬ）溶液に、モルホリン（２３．７ｇ、０．２７モル）のメタノール溶液（１０ｍＬ）をゆっくり滴下する。混合物を２５℃にして、一晩攪拌する。真空下で濃縮し、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で抽出し、水で洗浄し、そしてＭｇＳＯ４で乾燥する。ろ過し、真空下で蒸発させて、白色固体を得る。粗製物をフラッシュ・カラムクロマトグラフィーで精製して、標題の化合物を白色固体として得る。
２．  ４−クロロ−２−モルホリノ−６−（４−（３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）ピリミジン
【０２１２】
【化０４７】
2008523152.tif 000039
【０２１３】
ＣＨ３ＣＮ（１５．０ｍＬ）に窒素雰囲気下で６−モルホリノ−２，４−ジクロロピリミジン（１．１６ｇ、０．００５モル）及び（３−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−ピペラジン（１．４ｇ、０．００６モル）を溶解する。この混合物に無水のＫ２ＣＯ３粉末（１．３８ｇ、０．０１モル）を加えて、２０時間還流する。反応混合物を真空下で濃縮し、水（１００ｍＬ）で希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ×３）で抽出し、そしてＭｇＳＯ４で乾燥する。ろ過し、真空下で濃縮し、粗製物を得る。粗製物をエーテルで洗浄して精製し、標題の化合物を得る。
３．  ５−フルオロインドリン
【０２１４】
【化０４８】
2008523152.tif 000040
【０２１５】
ＣＨ３ＣＯＯＨ（１０．０ｍＬ）に窒素雰囲気下で５−フルオロインドール（１．０ｇ）を溶解する。この混合物に無水のＮａＣＮＢＨ３粉末（１．４４ｇ）を加えて、室温で２０時間攪拌する。反応混合物を真空下で濃縮し、水（５０ｍＬ）で希釈し、反応混合物をｐＨ９．０に調整し、ＣＨ２Ｃｌ２（７５ｍＬ×２）で抽出し、そしてＭｇＳＯ４で乾燥する。ろ過し、真空下で濃縮し、粗製物を得る。粗製物をフラッシュ・カラムクロマトグラフィー（２５％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いて）で精製し、標題の化合物を得る。
４．  ５−フルオロ−１−（２−モルホリノ−６−（４−（３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）ピリミジン−４−イル）インドリン
【０２１６】
【化０４９】
2008523152.tif 000041
【０２１７】
４−クロロ−２−モルホリノ−６−（４−（３−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）ピリミジン（１０７ｍｇ、０．２５ミリモル）及び５−フルオロインドリン（６８ｍｇ、０．５ミルモル）の混合物を、１４０℃にて２０時間加熱する。反応混合物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で希釈し、飽和のＮａＨＣＯ３液で洗浄し、そしてＭｇＳＯ４で乾燥する。ろ過し、真空下で蒸発させ、粗製物を得る。粗製物をフラッシュ・カラムクロマトグラフィーで精製し、標題の化合物を白色固体として得る。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ；２．４８（２Ｈ、ｓ）、３．１２（２Ｈ、ｍ）、３．２５〜３．３２（６Ｈ、ｍ）、３．６３（８Ｈ、ｓ）、３．９６（２Ｈ、ｔ）、５．４１（１Ｈ、ｓ）、６．９６（１Ｈ、ｔ）、７．０５（１Ｈ、ｄ）、７．２５（１Ｈ、ｄ）、８．０８（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１．９Ｈｚ）、８．１５（１Ｈ、ｍ）、８．５３（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１．９Ｈｚ）
質量分析  ｍ／ｚ＝５３０．２４．
【実施例３】
【０２１８】
追加の代表的なピペラジニル−ピリジン類似体
通常の修飾方法を用いて、出発物質を変更すること及び追加の工程を導入することにより、本明細書に示したその他の化合物を製造することができる。表Ｉ及びＩＩに記載された化合物は、このような方法を用いて製造される。表Ｉにおいて、「ＩＣ５０」と表示されている欄の星印（＊）は、（この化合物が実施例６に記載のようにして測定された）化合物のＩＣ５０値が、１マイクロモル未満であることを示す。質量分析データは、「ＭＳ」と表示された欄に、Ｍ＋１として示す。
【０２１９】
本実施例での質量分析の値は、Ｗａｔｅｒｓ６００ポンプ（Waters Corp.; Milford, MA）、Ｗａｔｅｒｓ９９６フォトダイオード配列検出器、Ｇｉｌｓｏｎ２１５オートサンプラー(Gilson, Inc.; Milford, Wi)、及びＧｉｌｓｏｎ８４１マイクロインジェクターを備えたＭｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｔｉｍｅ−ｏｆ−Ｆｌｉｇｈｔ ＬＣＴ（Micromass, Beverly MA）を用い、陽イオンモードによって得られるエレクトロスプレーＭＳである。ＯｐｅｎＬｙｎｘプロセシングを有するＭａｓｓＬｙｎｘ（Advanced Chemistry Development, Inc; Toronto, Canada）のバージョン４．０ソフトウェアを、データ収集及び分析に用いた。
ＭＳ条件は以下の通りである。
キャピラリー電圧＝３．５ｋＶ；
コーン電圧＝３０Ｖ；
脱溶媒及びイオン源温度＝それぞれ、３５０℃及び１２０℃；
質量範囲＝１８１〜７５０；
スキャン時間  ０．２２秒、そしてスキャン間ディレイ時間  ０．０５分。
【０２２０】
１マイクロリッター量のサンプルを、５０ｘ４．６ｍｍの Ｃｈｒｏｍｏｌｉｔｈ ＳｐｅｅｄＲＯＤ ＲＰ−１８ｅカラム（Merck KGaA, Darmstadt, Germany）上に注入し、６ｍｌ／ｍｉｎの速度で、２相線形グラジエントを用いて溶出する。サンプルは、２２０〜３４０ｎｍのＵＶ範囲における総吸収量を用いて検出する。
溶出条件は、
移動相Ａ：  ９５／５／０．０５    水／メタノール／ＴＦＡ
移動相Ｂ：  ５／９５／０．０２５  水／メタノール／ＴＦＡ
グラジエント：                  時間（分）     ％Ｂ  
０                  １０
０．５            １００
１．２            １００
１．２１            １０
注入から注入までサイクル時間は、２．２分である。
【０２２１】
【表１】
2008523152.tif 000042
2008523152.tif 000043
2008523152.tif 000044
【０２２２】
【表２】
2008523152.tif 000045
2008523152.tif 000046
2008523152.tif 000047
2008523152.tif 000048
【実施例４】
【０２２３】
ＶＲ１導入細胞及び膜調合液
本実施例は、カプサイシン結合アッセイ（実施例５）で用いるためのＶＲ１導入細胞及びＶＲ１含有膜調合液の調製を説明する。
ヒトカプサイシン受容体（米国特許第６，４８２，６１１号の配列番号１、２又は３）の全長をコードするｃＤＮＡを、哺乳動物の細胞中で組み換え体を発現させるために、プラスミドｐＢＫ−ＣＭＶ（Stratagene、 La Jolla, CA）にサブクローンする。
【０２２４】
ヒト胎児腎細胞（ＨＥＫ２９３）に、標準の方法を用いて、ヒトカプサイシン受容体の全長をコードするコンストラクトを発現するｐＢＫ−ＣＭＶを導入する。導入された細胞をＧ４１８（４００μｇ／ｍｌ）を含有する培地で２週間培養して選択し、安定に導入された細胞の集合（pool）を得る。この集合から独立したクローンを限界希釈法によって単離して、次の実験に用いる、安定なクローンの細胞株を得る。
【０２２５】
放射性リガンド結合実験のために、細胞をＴ１７５細胞培養フラスコ中の抗生物質を含有しない培地に播種して約９０％の集密度になるまで増殖させる。次いで、フラスコをＰＢＳで洗浄し、５ｍＭのＥＤＴＡを含有するＰＢＳ中に細胞を集めた。細胞は緩やかに遠心分離してペレット状にし、アッセイまで−８０℃で保管した。
【０２２６】
以前に凍結した細胞を、組織ホモジナイザーを用いて氷冷したＨＥＰＥＳホモジネート緩衝液（５ｍＭのＫＣｌ５、５．８ｍＭのＮａＣｌ、０．７５ｍＭのＣａＣｌ２、２ｍＭのＭｇＣｌ２、３２０ｍＭの蔗糖、及び１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４）中でバラバラにする。組織のホモジネートはまず１０００×ｇ（４℃）で１０分間遠心分離して核画分及び破片を除去し、次いで最初の遠心分離の上澄液を更に３５，０００×ｇ（４℃）で３０分間遠心分離して、部分的に精製された膜画分を得る。膜はアッセイ前に再度ＨＥＰＥＳホモジネート緩衝液に懸濁する。この膜ホモジネートの１アリコートを、ブラッドフォード法［Bradford method (BIO-RAD Protein Assay Kit, #500-0001, BIO-RAD, Hercules, CA）］による蛋白濃度測定に用いる。
【実施例５】
【０２２７】
カプサイシン受容体結合アッセイ
本実施例は、化合物のカプサイシン（ＶＲ１）受容体に対する結合親和性を測定するために用いることができる、代表的なカプサイシン受容体結合アッセイを説明するものである。
【０２２８】
［３Ｈ］レシニフェラトキシン（ＲＴＸ）を用いる結合の検討は、実質的に、「Szallasi and Blumberg (1992) J. Pharmacol. Exp. Ter. 262: 883-888」に記載されているように実施される。この手順では、結合反応の終了後にウシα１酸性糖タンパク（１管当たり１００μｇ）を添加することによって非特異的なＲＴＸ結合を減少させる。
［３Ｈ］ＲＴＸ（３７Ｃｉ／ｍｍｏｌ）は、「Chemical Synthesis and Analysis Laboratory, National Cancer Institute-Fredrick Cancer Research and Development Center, Fredrick, MD」で合成されたものを入手する。また、［３Ｈ］ＲＴＸは、一般業者（例えば、Amersham Pharmacia Biotech, Inc.; Piscataway, NJ）からも入手できる。
【０２２９】
実施例４の膜ホモジネートを前述のように遠心分離して、蛋白濃度が３３３μｇ／ｍｌになるように、ホモジネート緩衝液に再懸濁する。結合アッセイ用の混合物は、氷の上に備え付けるが、［３Ｈ］ＲＴＸ（比活性：２２００ｍＣｉ／ｍｌ）、２μｌの非放射性のテスト化合物、０．２５ｍｇ／ｍｌのウシ血清アルブミン（コーン分画Ｖ）、及び５×１０４〜１×１０５個のＶＲ１導入細胞を含有している。上記の氷冷ＨＥＰＥＳホモジネート緩衝液（ｐＨ７．４）で、最終容量を５００μｌ（競合結合アッセイ用）又は１，０００μｌ（飽和結合アッセイ用）に調整する。非特異的結合は、１μＭの非放射性のＲＴＸ（ALexis Corp.; San Diego, CA）が存在する時に生じるものであると定義する。結合を飽和させるために、［３Ｈ］ＲＴＸを、１〜２倍希釈にて、７〜１，０００ｐＭの濃度範囲で添加する。一般に、飽和結合曲線当り１１個の濃度ポイントが収集される。
【０２３０】
競合結合アッセイは、６０ｐＭの［３Ｈ］ＲＴＸ及び各種の濃度のテスト化合物の存在下で実施される。結合反応は、アッセイ混合物を３７℃の水浴槽に移すことにより開始し、６０分間培養した後、管を氷の上で冷却して終了する。膜に結合したＲＴＸは、使用前の２時間１．０％のＰＥＩ（ポリエチレンイミン）に予備浸漬した、ＷＡＬＬＡＣグラスファイバーフィルター（PERKIN-ELMER, Gaithersburg, MD）でろ過して、遊離のＲＴＸから分離し、同様にα１酸性糖タンパクに結合したＲＴＸからも分離する。フィルターを一晩乾燥して、ＷＡＬＬＡＣ  ＢＥＴＡ  ＳＣＩＮＴシンチレーション液を添加した後に、ＷＡＬＬＡＣ  １２０５  ＢＥＴＡ  ＰＬＡＴＥカウンターでカウントする。
【０２３１】
平衡結合変数は、「Szallasi, et al. (1993) J. Pharmacol. Exp. Ther. 266: 678-683」に記載のように、コンピュータプログラムＦＩＴ  Ｐ（Biosoft, Ferguson, MO）を用いて、アロステリックのヒルの式を測定値に当てはめて算出する。本発明の化合物は、当該アッセイにおいて、一般にカプサイシン受容体に対して１μＭ、１００ｎＭ、５０ｎＭ、２５ｎＭ、１０ｎＭ又は１ｎＭ未満のＫｉ値を示す。
【実施例６】
【０２３２】
カルシウム非固定化アッセイ
本実施例は、テスト化合物のアゴニスト及びアンタゴニストの活性を評価するために用いる代表的なカルシウム非固定化アッセイを説明するものである。
発現プラスミドを導入してヒトカプサイシン受容体を発現している細胞（実施例４に記載のような）を、ＦＡＬＣＯＮの壁が黒く、底が透明な、９６ウェルプレート（#3904, BECTON-DICKINSON, Franklin Lakes, NJ）に播種し、７０〜９０％の集密度になるまで増殖させる。９６ウェルプレートから培養液をとり除き、ＦＬＵＯ−３  ＡＭカルシウム感受性染料（Molecular Probes, Eugene, OR）を各々のウェルに加える（染料溶液：ＦＬＵＯ−３  ＡＭ（１ｍｇ）、ＤＭＳＯ（４４０μｌ）及び２０％のプルロン酸のＤＭＳＯ溶液（４４０μｌ）を、クレブス−リンガーＨＥＰＥＳ（ＫＲＨ）緩衝液（２５ｍＭのＨＥＰＥＳ、５ｍＭのＫＣｌ、０．９６ｍＭのＮａＨ２ＰＯ４、１ｍＭのＭｇＳＯ４、２ｍＭのＣａＣｌ２、５ｍＭのグルコース、１ｍＭのプロベネシド、ｐＨ７．４）で１：２５０に希釈し、希釈液をウェル当たり５０μｌ加える）。プレートをアルミニウムホイルで覆って、５％のＣＯ２を含有する環境下、３７℃にて１〜２時間培養する。培養後、プレートから染料を除き、細胞をＫＲＨ緩衝液で一回洗浄して、ＫＲＨ緩衝液に再懸濁する。
【０２３３】
（カプサイシンＥＣ５０値の算出）
カプサイシン受容体を発現している細胞において、カプサイシン又はその他のバニロイドアゴニストに対するカルシウム非固定化の応答を作動させる又は拮抗させる、テスト化合物の能力を調べるために、先ずアゴニストカプサイシンのＥＣ５０値を測定する。上記のようにして調製した、各ウェルの細胞に、追加の２０μｌのＫＲＨ緩衝液及び１μｌのＤＭＳＯを加える。ＫＲＨ緩衝液中の１００μｌのカプサイシンを、ＦＬＩＰＲ装置により各ウェルに自動的に移す。カプサイシンが誘導するカルシウムの非固定化は、ＦＬＵＯＲＯＳＫＡＮ  ＡＳＣＥＮＴ（Labsystems; Franklin, MA）又はＦＬＩＰＲ（蛍光イメージングプレートリーダーシステム；Molecular Devices, Sunnyvale, CA）装置の何れかを用いて観察する。アゴニストを適用してから３０秒〜６０秒後に得られたデータを用いて、カプサイシンの最終濃度が１ｎＭ〜３μＭに於ける、８点の濃度応答曲線を作成する。ＫＡＬＥＩＤＡＧＲＡＰＨソフトウェア（Synergy Software, Reading, PA）を使用して、このデータを式：
ｙ＝ａ×（１／（１＋（ｂ／ｘ）ｃ））
に当てはめ、応答に対して５０％の反応率を示す濃度（ＥＣ５０値）を算出する。この式において、ｙは最大蛍光シグナルであり、ｘはアゴニスト又はアンタゴニスト（この場合は、カプサイシン）の濃度であり、ａはＥｍａｘで、ｂはＥＣ５０値に対応し、そしてｃはヒル（Hill）係数である。
【０２３４】
（作動活性の測定）
テスト化合物をＤＭＳＯに溶解し、ＫＲＨ緩衝液で希釈し、直ちに、上記のように調製した細胞に加える。１００ｎＭのカプサイシン（おおよそＥＣ９０値の濃度）を、陽性対照として同様の９６ウェルプレート中の細胞に加える。アッセイウェル中のテスト化合物の最終濃度は、０．１ｎＭ〜５μＭである。
【０２３５】
テスト化合物のカプサイシン受容体のアゴニストとして作用する能力を、カプサイシン受容体を発現している細胞に於ける、化合物が誘発する蛍光応答を測定することにより、化合物濃度の関数として決定する。このデータを上記のように当てはめて、ＥＣ５０値を得る。一般に、このＥＣ５０値は、１マイクロモル未満、好ましくは１００ｎＭ未満、より好ましくは１０ｎＭ未満である。各テスト化合物の有効性の範囲も、１００ｎＭのカプサイシンが誘発する応答に対する、特定の濃度（通常、１μＭ）のテスト化合物が誘発する応答の割合を算定することにより決定される。シグナルのパーセント（ＰＯＳ）と呼ばれる、この値は以下の式によって算出される：
ＰＯＳ＝１００×（テスト化合物による応答）／（１００ｎＭカプサイシンによる応答）
【０２３６】
この分析は、テスト化合物のヒトカプサイシン受容体アゴニストとしての能力及び有効性の両方の定量的な評価を提供する。ヒトカプサイシン受容体のアゴニストは一般に、１００μＭ未満の濃度で、又は好ましくは１μＭ未満の濃度で、最も好ましくは１０ｎＭ未満の濃度で検出可能な応答を誘発する。ヒトカプサイシン受容体に対する有効性の範囲は、１μＭの濃度で、好ましくは３０ＰＯＳより大きく、より好ましくは８０ＰＯＳより大きい。あるアゴニストは、以下に記載されるアッセイにおいて、化合物の４ｎＭ未満の濃度で、より好ましくは１０μＭ未満の濃度で、最も好ましくは１００μＭ以下の濃度で、検出可能なアンタゴニスト活性がないことが示されるように、実質的にアンタゴニスト活性がない。
【０２３７】
（アンタゴニスト活性の測定）
テスト化合物をＤＭＳＯに溶解し、アッセイウェル中のテスト化合物の最終濃度が１μＭ〜５μＭになるように、２０μｌのＫＲＨ緩衝液で希釈して、上記のように調製した細胞に加える。調製細胞及びテスト化合物を含有する９６ウェルプレートを、暗所において室温で０．５〜６時間培養する。６時間を越えて培養を続けないことが重要である。蛍光応答を測定する直前に、上記のように測定したＥＣ５０値の２倍濃度の、ＫＲＨ緩衝液中のカプサイシン１００μｌを、９６ウェルプレートの各ウェルに、最終サンプル容量が２００μｌそしてカプサイシン濃度がＥＣ５０値と等しくなるように、ＦＬＩＰＲ装置により自動的に加える。アッセイウェル中のテスト化合物の最終濃度は、１μＭ〜５μＭである。カプサイシン受容体のアンタゴニストは、対応する対照（すなわち、テスト化合物の非存在下に、カプサイシンのＥＣ５０値の２倍濃度で処理した細胞）と比べて、１０マイクモル以下の濃度で、好ましくは１マイクモル以下の濃度で、この応答を少なくとも約２０％、好ましくは少なくとも約５０％、最も好ましくは少なくとも約８０％減少させる。カプサイシンの存在下で、アンタゴニストなしで観測される応答に対して、５０％の減少を示すのに必要なアンタゴニストの濃度が、アンタゴニストのＩＣ５０値であり、この値は１マイクロモル、１００ナノモル、１０ナノモル又は１ナノモル未満が好ましい。
【０２３８】
ある好ましいＶＲ１調節剤は、上記アッセイにおいて、化合物の４ｎＭ未満の濃度で、より好ましくは１０μＭ未満の濃度で、最も好ましくは１００μＭ以下の濃度で、検出可能なアゴニスト活性がないことが示されるように、実質的にアゴニスト活性がないアンタゴニストである。
【実施例７】
【０２３９】
ミクロソームインビトロ半減期
本実施例は、代表的な肝ミクロソーム半減期アッセイを用いる、化合物の半減期（ｔ１／２値）の評価を説明する。
プールされたヒト肝ミクロソームは、「XenoTech LLC,（Kansas  City, KS）」から入手する。このような肝ミクロソームは、「In Vitro Technologies (Baltimore, MD)」 又は「Tissue Transformation Technologies (Edison, NJ)」からも入手できる。各々がミクロソームを２５μｌ、テスト化合物の１００μＭ溶液を５μｌ及び０．１Ｍのリン酸緩衝液（０．１ＭのＮａＨ２ＰＯ４液１９ｍｌ、０．１ＭのＮａ２ＨＰＯ４液８１ｍｌ、Ｈ３ＰＯ４液でｐＨ７．４に調整）を３９９μｌ含有する、６つのテスト反応物を調製する。ミクロソームを２５μｌ、０．１Ｍリン酸緩衝液を３９９μｌ、及び既知の代謝特性を有する化合物（例えば、ＤＩＡＺＥＰＡＭ又はＣＬＯＺＡＰＩＮＥ）の１００μＭ溶液を５μｌ含有する、陽性対照としての７番目の反応物を調製する。反応物は３９℃で１０分間予備培養する。
【０２４０】
ＮＡＤＰ（１６．２ｍｇ）及びグルコース−６−リン酸（４５．４ｍｇ）を１００ｍＭのＭｇＣｌ２（４ｍｌ）に希釈して、コファクター混合物を調製する。グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ懸濁液（Roche Molecular Biochemicals, Indianapolis, IN）の２１４．３μｌを蒸留水（１２８５．７μｌ）に希釈して、グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ溶液を調製する。出発反応混合物（３ｍＬのコファクター混合物；１．２ｍＬのグルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ溶液）の７１μｌを、６つのテスト反応物のうちの５つ及び陽性対照に加える。１００ｍＭのＭｇＣｌ２（７１μｌ）を６番目のテスト反応物に加え、これを陰性対照として用いる。各時点（０、１、３、５及び１０分）での各テスト反応物７５μｌを、氷冷アセトニトリル（７５μｌ）を含有しているディープウェルを有する９６ウェルプレートのウェルに、ピペットで添加する。サンプルをボルテックス撹拌して、３５００ｒｐｍでの１０分の遠心分離（Sorval T 6000D centrifuge, H1000B rotor）を行う。各反応物から７５μｌの上澄液を、各々のウェルに既知のＬＣＭＳプロファイルを有する化合物（内部標準）の０．５μＭ溶液１５０μｌを含有させた９６ウェルプレートのウェルに移す。各サンプルのＬＣＭＳ分析を行い、代謝されなかったテスト化合物をＡＵＣとして測定し、化合物の濃度対時間をプロットしてテスト化合物のｔ１／２値を外挿する。
本発明の好ましい化合物は、ヒト肝ミクロソームにおいて、１０分超４時間未満の、好ましくは３０分〜１時間のインビトロｔ１／２値を示す。
【実施例８】
【０２４１】
ＭＤＣＫ毒性アッセイ
本実施例は、Ｍａｄｉｎ  Ｄａｒｂｙイヌ腎（ＭＤＣＫ）細胞の細胞毒性アッセイを用いて化合物の毒性の評価を説明する。
１μｌのテスト化合物を透明底の９６ウェルプレート（PACKARD, Meriden, CT）の各ウェルに、アッセイにおける化合物の最終濃度が１０マイクロモル、１００マイクロモル又は２００マイクロモルになるように加える。テスト化合物を含まない溶媒を、対照のウェルに加える。
【０２４２】
ＭＤＣＫ細胞であるＡＴＣＣ  ｎｏ．ＣＣＬ−３４（アメリカ培養細胞系統保存機関：American Type Culture Collection, Manassas, VA）を、ＡＴＣＣ製品情報シートの指示に従って無菌条件下に保つ。集密になったＭＤＣＫ細胞をトリプシン処理し、採取し、そして温めた（３７℃）培地（ＶＩＴＡＣＥＬＬイーグル最小必須培地、ＡＴＣＣカタログ＃３０−２００３）で、細胞０．１×１０６個／ｍｌの濃度に希釈する。細胞を含まない１００μｌの温培地を含む標準曲線用の対照である５個のウェルを除いた各ウェルに、希釈した細胞１００μｌを加えた。ウェルプレートを３７℃で、９５％のＯ２及び５％のＣＯ２の雰囲気下で、振盪しながら２時間培養する。培養後、哺乳動物細胞溶解溶液（ＰＡＣＫＡＲＤ（Meriden, CT）ＡＴＰ−ＬＩＴＥ−Ｍ発光ＡＴＰ検出キットから）５０μＬを各ウェルに加え、ウェルをＰＡＣＫＡＲＤ  ＴＯＰＳＥＡＬステッカーで覆い、ウェルプレートを約７００ｒｐｍで適当な振盪器上で２分間振盪する。
【０２４３】
毒性を生じる化合物は、非処理の細胞に比べて、ＡＴＰの産生を減少させる。処理及び非処理のＭＤＣＫ細胞に於けるＡＴＰの産生を測定するためには、一般に、ＡＴＰ−ＬＩＴＥ−Ｍ発光ＡＴＰ検出キットを製造会社の説明書に従って使用する。ＰＡＣＫＡＲＤ  ＡＴＰ−ＬＩＴＥ−Ｍ試薬は、室温にて平衡化させる。平衡化したら、凍結乾燥した基質溶液を基質緩衝液（キットから）５．５ｍＬ中で解凍する。凍結乾燥したＡＴＰ標準溶液を、脱イオン水中で解凍して１０ｍＭのストックを得る。５個の対照ウェルについては、連続的に希釈したＰＡＣＫＡＲＤ標準１０μｌを、各々の標準曲線用の対照ウェルに、各ウェルの最終濃度が順次２００ｎＭ、１００ｎＭ、５０ｎＭ、２５ｎＭ及び１２．５ｎＭになるように加える。ＰＡＣＫＡＲＤ基質溶液（５０μＬ）を全てのウェルに加え、ウェルを覆い、プレートを約７００ｒｐｍで適当な振盪器上で２分間振盪する。白色のＰＡＣＫＡＲＤステッカーを各プレートの底に貼り、フォイルでプレートを包んで暗所に１０分置くことによってサンプルを暗順応させる。次いで、発光計測器（例えば、ＰＡＣＫＡＲＤ  ＴＯＰＣＯＵＮＴ  Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ  Ｓｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ  Ｃｏｕｎｔｅｒ又はＴＥＣＡＮ  ＳＰＥＣＴＲＡＦＬＵＯＲ  ＰＬＵＳ）を用いて２２℃で発光を測定して、標準曲線からＡＴＰレベルを算出する。テスト化合物で処理した細胞中のＡＴＰレベルを、非処理の細胞について測定したレベルと比較する。好ましいテスト化合物の１０μＭで処理した細胞は、非処理の細胞の少なくとも８０％、好ましくは少なくとも９０％のＡＴＰレベルを示した。テスト化合物の１００μＭ濃度を使用したときは、好ましいテスト化合物で処理した細胞は、非処理の細胞において検出されたＡＴＰレベルの少なくとも５０％、好ましくは少なくとも８０％のＡＴＰレベルを示した。
【実施例９】
【０２４４】
脊髄後根神経節細胞アッセイ
本実施例は、化合物のＶＲ１アンタゴニスト又はアゴニスト活性を評価するための代表的な脊髄後根神経節細胞アッセイについて説明する。
ＤＲＧ（脊髄後根神経節）は新生児ラットから解剖して得、解離して、標準的な方法（Aguayo and White (1992) Brain Research 570: 61-67）を用いて培養する。細胞を４８時間培養した後、一回洗浄し、カルシウム感受性染料Ｆｌｕｏ４ＡＭ（２．５〜１０ｕｇ／ｍｌ；TefLabs, Austin, TX）と共に３０〜６０分間培養する。次いで細胞を一回洗浄する。細胞にカプサイシンを加えることにより、ＶＲ１に依存して細胞内のカルシウムレベルが増加するが、これは蛍光光度計によるＦｌｕｏ−４の蛍光の変化として観察する。６０〜１８０秒のデータを集めて最大蛍光シグナルを算定する。
【０２４５】
アンタゴニストアッセイについては、種々の濃度の化合物を細胞に加える。蛍光シグナルを化合物濃度の関数としてプロットして、カプサイシン活性化応答を５０％阻害するのに必要な濃度、又はＩＣ５０値を決定する。カプサイシン受容体のアンタゴニストは、好ましくは１マイクロモル、１００ナノモル、１０ナノモル又は１ナノモル未満のＩＣ５０値を有している。
アゴニストアッセイについては、種々の濃度の化合物をカプサイシンを添加していない細胞に加える。カプサイシン受容体のアゴニストである化合物は、ＶＲ１に依存する細胞内のカルシウムレベルが増加するが、これは蛍光光度計によるＦｌｕｏ−４の蛍光の変化として観察する。ＥＣ５０値又はカプサイシン活性化応答の最大シグナルの５０％を達成する濃度は、１マイクロモル未満、１００ナノモル未満又は１０ナノモル未満が好ましい。
【実施例１０】
【０２４６】
疼痛緩和測定のための動物実験
本実施例は、化合物がもたらす疼痛緩和の程度を評価する代表的な方法について説明する。
Ａ．疼痛緩和テスト
以下の方法は、疼痛緩和を評価するために使用される。
【０２４７】
（機械的異痛）
機械的異痛（無害の刺激に対する異常な応答）は、本質的に、「Chaplan et al. (1994) J. Neurosci. Methods 53: 55-63」及び「Tal and Eliav (1998) Pain 64 (3): 511-518」の記載のように評価する。各種硬度を有する一組のフォン・フライのフィラメント（von Frey filaments：一般に、１組に８〜１４本のフィラメント）を、後足の足底面にフィラメントが曲がるのに十分な力で適用する。フィラメントを、この位置で３秒以内、又はラットが陽性の異痛応答を示すまで保持する。陽性の異痛応答とは、ラットが刺激された足を上げ、直ちに足を舐めるか振ることである。個々のフィラメントを適用する順序及び頻度は、ディクソンのアップダウン法を用いて決定する。テストは一組の内の中程度のヘアーから始め、最初に適用されたフィラメントでそれぞれ陰性又は陽性応答のどちらが得られたかによって、上行性又は下行性の連続法で次のフィラメントを適用する。
【０２４８】
このような化合物で処置されたラットが陽性の異痛応答を示すのに、非処置の又は賦形剤で処置された対照のラットに比べて、より硬い強度のフォン・フライのフィラメントでの刺激が必要であれば、化合物は機械的異痛様の症状の改善又は予防に有効であると言える。また更には、化合物を前投与又は後投与して動物の慢性疼痛のテストを実施することができる。このようなアッセイにおいて有効な化合物とは、化合物で処置する前に応答を引き起こす、又は、慢性疼痛であるが未処置のままか賦形剤で処置されている動物に応答を引き起こす場合と較べて、化合物で処置した後に応答を引き起こすのに、より硬度の高いフィラメントを要するものである。テスト化合物は疼痛が発現する前又は後に投与する。疼痛発現の後にテスト化合物を投与する場合は、投与してから１０分から３時間経過した後にテストを実施する。
【０２４９】
（機械的痛覚過敏）
機械的痛覚過敏（疼痛刺激に対する誇張された応答）は、実質的に、「Koch et al. (1996) Analgesia 2(3): 157-164」の記載のように評価する。ラットを温められた、穴の開いた金属の床でできているオリの個室に入れる。両後足の足底面に中程度に針を刺してから、後足を引っ込めている状態が持続している時間（すなわち、動物が足を床に戻す前の足を抱えている時間の量）を測定する。
後足を引っ込める時間を統計学的に有意に減少させるならば、化合物は機械的痛覚過敏を減弱させると言える。テスト化合物は、疼痛発現の前又は後で投与してもよい。疼痛発現の後に化合物を投与する場合は、テストは投与してから１０分から３時間後に実施する。
【０２５０】
（熱的痛覚過敏）
熱的痛覚過敏（有害な熱刺激に対する誇張された応答）は、本質的に、「Hargreaves et al. (1988) Pain. 32(1): 77-88」の記載のように測定する。つまり、一定の放射熱源を動物の一方の後足の足底面に当てる。引っ込める時間（すなわち、熱が当てられてから動物が足を動かすまでの時間の量）、別に熱閾値（thermal threshold）又は待ち時間（latency）と記載されるが、動物の後足の熱に対する感受性を決定する。
後足を引っ込める時間において統計学的に有意な増加が認められれば（すなわち、応答に対する熱閾値又は待ち時間が増加すれば）、化合物は熱的痛覚過敏を減弱させると言える。テスト化合物は、疼痛発現の前又は後で投与してもよい。疼痛発現の後に化合物を投与する場合は、テストは投与してから１０分から３時間後に実施する。
【０２５１】
Ｂ．疼痛モデル
化合物の鎮痛効果をテストするために、疼痛を下記の方法を用いて導入することができる。一般に、本発明の化合物は、雄性ＳＤラット及び少なくとも１つの下記モデルを用いて、先に述べた少なくとも１つのテスト方法によって確認されるように、統計的有意に疼痛を減弱させる。
【０２５２】
（急性炎症性疼痛モデル）
急性炎症性疼痛モデルはカラギナンモデルを用いて、本質的に、「Field et al. (1997) Br. J. Pharmacol. 121(8): 1513-1522」の記載のように導入する。１〜２％のカラギナン溶液１００〜２００μｌを、ラットの後足に注射する。注射して３〜４時間後に、熱及び機械刺激に対する動物の感応性を上記の方法を用いてテストする。テスト化合物（０．０１〜５０ｍｇ／ｋｇ）をテスト前又はカラギナン注射前に、動物に投与する。化合物は経口若しくは何れかの非経口経路を介して、又は足に局所的に投与することができる。当該モデルにおいて疼痛を緩和する化合物は、機械的異痛及び／又は熱的痛覚過敏を統計的有意に減弱させる。
【０２５３】
（慢性炎症性疼痛モデル）
慢性炎症性疼痛モデルは下記の手順のうちの１つを用いて導入される。
１．本質的に、「Bertorelli et al. (1999) Br. J. Pharmacol. 128(6): 1252-1258」及び「Stein et al. (1998) Pharmacol. Biochem. Behav. 31(2): 455-51」に記載のように、完全フロインドアジュバント（ＣＦＡ：加熱死させ乾燥した結核菌（M.Tuberculosis）の０．１ｍｇ）をラットの後足に注射する（１００μｌを背面に、１００μｌを足底面に）。
２．本質的に、「Abbadie et al. (1994) J. Neurosci. 14(10): 5865-5871」による記載のように、１５０μｌのＣＦＡ（１．５ｍｇ）をラットの脛骨足根骨関節に注射する。
どちらの手順においてもＣＦＡの注射前に、動物の後足の機械的及び熱的刺激に対する個々の基準感受性を、各実験動物に対して求める。
【０２５４】
ＣＦＡの注射に続いて、ラットに上記のような熱的痛覚過敏、機械的異痛及び機械的痛覚過敏のテストを行う。症状の進行を確認するために、ＣＦＡの注射から５，６、７日目にラットをテストする。７日目に、動物をテスト化合物、モルヒネ又は賦形剤で処置する。モルヒネ（１〜５ｍｇ／ｋｇ）の経口投与が、陽性対照として適当である。一般に、テスト化合物の０．０１〜５０ｍｇ／ｋｇの用量が用いられる。化合物はテストの前に単回ボーラス投与か、又はテスト前の数日間、１日当たり１回、２回又は３回投与することができる。薬剤は、経口若しくは何れかの非経口経路を介して、又は動物に局所的に投与する。
結果は、最大潜在的有効性に対する割合（Percent Maximum Potential Efficacy; MPE）として表す。０％ＭＰＥを、賦形剤の鎮痛効果と定義し、１００％ＭＰＥを動物がＣＦＡ投与前の基準感受性に戻ることと定義する。当該モデルにおいて疼痛を緩和する化合物は、少なくとも３０％のＭＰＥをもたらす。
【０２５５】
（慢性神経性疼痛モデル）
慢性神経性疼痛は本質的に、「Bennett and Xie (1988) Pain 33: 87-107」に記載のように、ラットの坐骨神経に対する慢性の狭窄損傷（ＣＣＩ）を用いて導入される。ラットを麻酔する（例えば、ペントバルビタール５０〜６５ｍｇ／ｋｇの腹腔内投与で、必要により追加用量を投与して）。各後肢の外側面の毛をそり、消毒する。無菌法を用いて、後肢の外側面を大腿の真ん中あたりで切開する。大腿二頭筋をずばり切り開き、坐骨神経を露出する。各動物の一方の後肢上に、坐骨神経の周りに１〜２ｍｍ離して４つのゆるく結ぶ結紮を行う。他方の坐骨神経は結紮せず、処理しない。筋肉を連続法で閉じ、皮膚を創傷クリップ又は縫合糸で閉じる。ラットを上記のように、機械的異痛、機械的痛覚過敏及び熱的痛覚過敏について評価する。
【０２５６】
当該モデルにおいて疼痛を緩和する化合物は、テストの直前に単回ボーラス投与、又はテスト前の数日間（１日当たり１回、２回又は３回）投与（０．０１〜５０ｍｇ／ｋｇ経口、注射又は局所投与）する場合、機械的異痛、機械的痛覚過敏及び／又は熱的痛覚過敏を統計的有意に緩和する。
【国際調査報告】
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