(57)【要約】  式（Ｉ）：【化１】 2008542202.tif 000032の化合物が、これらの化合物を含有する薬学的な組成物、並びに、ヒトを含む、哺乳動物における癌を予防するために及び処置するために化合物を使用する方法と一緒に、記載される。
2008542202.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式１：
【化１】
2008542202.tif 000023
式Ｉ
の化合物；及びそれらの塩であって、
Ｘは、ＣＨ２であり；
Ｙは、Ｃ１−Ｃ６のアルキレンであり；且つ
Ｒは、水素、Ｃ１−Ｃ６のアルキル、
【化２】
2008542202.tif 000024
及び
【化３】
2008542202.tif 000025
からなる群より選択されたものであると共に、
Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ、ＣＯＯＨ、Ｃ１−Ｃ６のアルキル、アルケニル、アルキニル、及びＣ１−Ｃ６−ヒドロキシアルキルからなる群より選択されたものであり；
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、及び＝Ｏからなる群より選択されたものである；
化合物及びそれらの塩。
【請求項２】
Ｒは、水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒは、
【化４】
2008542202.tif 000026
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１は、Ｈである、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１は、ＣＯＯＨである、請求項３に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１は、ＣＨ２ＯＨである、請求項３に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１は、ＯＨである、請求項３に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒは、
【化５】
2008542202.tif 000027
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ２は、Ｈである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ２は、ＯＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ２は、＝Ｏである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
哺乳動物における癌を予防する及び処置するための薬学的な組成物であって、
該組成物は、有効な癌細胞の成長を阻害する量の、請求項１に記載の化合物、又はそれの薬学的に適切な塩を、自由選択で薬学的に適切な担体との組み合わせで、含む、組成物。
【請求項１３】
Ｒが、水素である、化合物を含む、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
Ｒが、
【化６】
2008542202.tif 000028
である、前記化合物を含む、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１５】
Ｒ１が、Ｈである、前記化合物を含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
Ｒ１が、ＣＯＯＨである、前記化合物を含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１７】
Ｒ１が、ＣＨ２ＯＨである、前記化合物を含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１８】
Ｒ１が、ＯＨである、前記化合物を含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１９】
Ｒが、
【化７】
2008542202.tif 000029
ある、請求項１に記載の化合物を含む、請求項１２に記載の組成物。
【請求項２０】
Ｒ２は、Ｈである、請求項１２に記載の組成物。
【請求項２１】
Ｒ２は、ＯＨである、請求項１２に記載の組成物。
【請求項２２】
Ｒ２は、＝Ｏである、請求項１２に記載の組成物。
【請求項２３】
哺乳動物における癌を予防する及び処置する方法であって、
該方法は、癌細胞の成長を阻害する量の、請求項１に記載の化合物、又はそれの薬学的に適切な塩を、それの必要な患者へ、投与することを含む、方法。
【請求項２４】
Ｒが、水素である、請求項１に記載の化合物が、前記患者へ投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
Ｒが、
【化８】
2008542202.tif 000030
である、請求項１に記載の化合物が、前記患者へ投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
Ｒ１が、Ｈである前記化合物が、前記患者へ投与される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
Ｒ１が、ＣＯＯＨである前記化合物が、前記患者へ投与される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
Ｒ１が、ＣＨ２ＯＨである前記化合物が、前記患者へ投与される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２９】
Ｒ１が、ＯＨである前記化合物が、前記患者へ投与される、請求項２５に記載の方法。
【請求項３０】
Ｒが、
【化９】
2008542202.tif 000031
である、請求項１に記載の化合物が、前記患者へ投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項３１】
Ｒ２が、Ｈである、請求項１に記載の化合物が、前記患者へ投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項３２】
Ｒ２が、ＯＨである、請求項１に記載の化合物が、前記患者へ投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項３３】
Ｒ２が、＝Ｏである、請求項１に記載の化合物が、前記患者へ投与される、請求項２３に記載の方法。
【請求項３４】
前記化合物は、それの必要なヒトの患者へ投与される、請求項２３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
［関連出願の相互参照］
優先権は、これによって、２００５年５月３日に出願された、仮出願シリアル番号６０／６７７，５０３号に対して請求されるが、それは、ここに組み込まれる。
【０００２】
［連邦政府の資金の声明］
この発明は、後に続く政府機関：ＮＩＨ  ＣＡ０４９８３７に授与された米国政府の支援でなされたものであった。米国は、この発明においてある一定の権利を有する。
【０００３】
［参照による組み込み］
下に引用された参考文献の全ては、ここに組み込まれる
［背景］
レチノール（化合物１）及びそれの代謝産物は、視覚、細胞分化、及び成長を含む多数の生物学的な過程を規制することに援用される。正常な細胞の機能に対して本質的なものであることの他に、レチノールの代謝産物の全てのトランス−レチノイン酸（ＲＡ，２）は、また、癌における抗増殖性の作用を示す１（非特許文献１）。しかしながら、薬理学的に有効な用量で、ＲＡは、重度の毒性を引き起こす。従って、より高い治療指数を所有するレチノイドの類似体の開発は、必要とされる。最も調査された合成のレチノイド類の一つは、Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）レチンアミド（４−ＨＰＲ；化合物３）であるが、それは、数多くのタイプの動物の腫瘍のモデルにおいて有効なものであることが示されてきたものであると共に、フェーズＩＩＩの臨床的な治験において評価されてきたものである２（非特許文献２）。可能な利益は、生体内原位置において外科的に取り除かれたステージＩの乳癌又は腺管癌を伴った閉経前の女性における第二の胸部の悪性疾患の予防について報告されたものであった。４−ＨＰＲが、一般に良好に耐容性が示されたものであるとはいえ、それは、血漿のレチノールのレベルにおける減少３，４（非特許文献３及び非特許文献４）及び付随物が減らされた暗順応に帰着する。皮膚科学的な障害は、実質的な数の被験者において報告された５（非特許文献５）。
【０００４】
薬物及び天然の生産物のグルクロン酸抱合は、通常では、排泄を容易にする共通の代謝の経路である６（非特許文献６）。３の重要な代謝産物は、４−ＨＰＲ−Ｏ−グルクロニド（４−ＨＰＲＯＧ；化合物５）であるが、それにおいて、フェノール性の水酸基は、糖質に連結される。それの発見以後に、化合物５は、合成された且つ生理活性について評価されたものであったと共に、ラットの乳房の腫瘍のモデルにおいて優れた化学的予防の活性を有することが示されたものであった７（非特許文献７）。しかしながら、それは、β−グルクロニダーゼを介して化合物３へ加水分解されることが示されたものであった８（非特許文献８）グルクロニド５が、３の改善された生物学的利用能のおかげで、好都合なものであった又は無傷の５としてのそれ自体で活性を有したとすれば、決定されたものではなかった。この論点を研究するために、酵素学的に安定なグルクロニドの類似体が、フェノール性の酸素をメチレン基に取り替えることによって合成された。炭素で連結された類似体の４−ＨＰＲ−Ｃ−グルクロニド（４−ＨＰＲＣＲ；化合物６）は、優れた化学的予防の９（非特許文献９）及び化学療法的な１０（非特許文献１０）性質を有することが示された。さらには、４−ＨＰＲとほぼ同様に、化合物５及び６は、核のレチノイン酸の受容体（ＲＡＲ）に対する結び付きについてＲＡに相対して低い親和性を示すが、それは、天然のレチノイド類の作用の大部分を媒介する９（非特許文献９）。化合物２とは違って、４−ＨＰＲは、数多くの癌細胞系統におけるアポプトーシスを引き起こす１１（非特許文献１１）。このように、これらの合成のレチノイド類の作用のモードは、不明なままである。
【０００５】
【化１】
2008542202.tif 000003
４−ＨＰＲ（化合物３）が、有効な化学的予防の及び治療の薬剤であることが示されてきた一方で、それの効果のいくつかは、ＲＡを遊離させる、アミド結合の生体内の加水分解に帰属させられることがある。この可能性を調査するために、４−ＨＰＲの非加水分解性の類似体、４−ヒドロキシベンジルレチノン（４−ＨＢＲ；化合物４）は、合成されたものであった。化合物３及び４の両方は、ジメチルベンズ［ａ］アントラセン（ＤＭＢＡ）で誘発されたラットの乳房の腫瘍のモデルにおいて等しい活性の化学療法薬であることが示された１２，１３（非特許文献１２及び非特許文献１３）。ビタミンＡ−欠乏性のラットにおいて、化合物３、しかし化合物４ではないものは、レチノイン酸を遊離させるために加水分解されたものである１３（非特許文献１３）。さらには、４−ＨＰＲ（３）、しかしＣ−連結された類似体（４）でないものは、ビタミンＡ−欠乏性のラットの肺においてＲＡと同様の様式でＣＹＰ２６Ｂ１のｍＲＮＡの発現を誘発する。化合物４の陽性の化学療法的なもの及びアポプトーシスを誘発する活性に基づいて、４−ＨＰＲの加水分解が、このレチノイドの治療の効果に要求されたものではなく、むしろ、ＲＡの遊離が、それのレチノイドに基づいた毒性の副作用に寄与することがあることは、明らかであると思われる。
【０００６】
４−ＨＰＲは、ＲＡよりも１００倍低い催奇性であることが示されてきたものであると共に、この毒性は、また、ＲＡの遊離によって引き起こされることがある。有効な抗腫瘍性の薬剤４−ＨＰＲＣＧ（化合物６）で、アミド結合の加水分解は、なお生体内で起こることがあると共に、このように４−ＨＰＲについてのものと類似の機構によってレチノイン酸を遊離させる。従って、未検討の必要性が、ＨＰＲＣＧの望ましい抗腫瘍性の活性を示す化合物に存在するが、しかし、それは、レチノイン酸を生じるために生体内で代謝されたものではない。本発明は、このような化合物に向けられたものである。
【非特許文献１】Ｍｏｏｎ，Ｒ．Ｃ；Ｍｅｔｈａ，Ｒ．Ｇ．；Ｒａｏ，Ｋ．Ｖ．Ｎ．Ｒｅｔｉｎｏｉｄｓ  ａｎｄ  ｃａｎｃｅｒ  ｉｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｉｍａｌｓ．Ｉｎ  Ｔｈｅ  Ｒｅｔｉｎｏｉｄｓ：Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ；Ｓｐｏｒｎ，Ｍ．Ｂ．，Ｒｏｂｅｒｔｓ，Ａ．Ｂ．，Ｇｏｏｄｍａｎ，Ｄ．Ｓ．，Ｅｄｓ．；Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９４；ｐ５７３
【非特許文献２】Ｖｅｒｏｎｅｓｉ，Ｕ．；Ｄｅ  Ｐａｌｏ，Ｇ；Ｍａｒｕｂｉｎｉ，Ｅ．；Ｃｏｓｔａ，Ａ．；Ｆｏｒｍｅｌｌｉ，Ｆ．；Ｍａｒｉａｎｉ，Ｌ．；Ｄｅｃｅｎｓｉ，Ａ．；Ｃａｍｅｒｉｎｉ，Ｔ．；Ｒｏｓｓｅｌｌｉ  Ｄｅｌ  Ｔｕｒｃｏ，Ｍ．；Ｄｉ  Ｍａｕｒｏ，Ｍ．Ｇ；Ｍｕｒａｃａ，Ｍ．Ｇ；Ｄｅｌ  Ｖｅｃｃｈｉｏ，Ｍ．；Ｐｉｎｔｏ，Ｃ；Ｄ’Ａｉｕｔｏ，Ｇ；Ｂｏｎｉ，Ｃ；Ｃａｍｐａ，Ｔ．；Ｍａｇｎｉ，Ａ．；Ｍｉｃｅｌｉ，Ｒ．；Ｐｅｒｌｏｆｆ，Ｍ．；Ｍａｌｏｎｅ，Ｗ．Ｆ．；Ｓｐｏｒｎ，Ｍ．Ｂ．Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．１９９９，９１，１８４７
【非特許文献３】Ｆｏｒｍｅｌｌｉ，Ｆ．；Ｃａｒｓａｎａ，Ｒ．；Ｃｏｓｔａ，Ａ．；Ｂｕｒａｎｅｌｌｉ，Ｆ．；Ｃａｍｐａ，Ｔ．；Ｄｏｓｓｅｎａ，Ｇ；Ｍａｇｎｉ，Ａ．；Ｐｉｚｚｉｃｈｅｔｔａ，Ｍ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１９８９，４９，６１４９
【非特許文献４】Ｆｏｒｍｅｌｌｉ，Ｆ．；Ｃｌｅｒｉｃｉ，Ｍ．；Ｃａｍｐａ，Ｔ．；Ｇａｅｔａｎａ  Ｄｉ  Ｍａｕｒｏ，Ｍ．；Ｍａｇｎｉ，Ａ．；Ｍａｓｃｏｔｔｉ，Ｇ；Ｍｏｇｌｉａ，Ｄ．；Ｄｅ  Ｐａｌｏ，Ｇ；Ｃｏｓｔａ，Ａ．；Ｖｅｒｏｎｅｓｉ，Ｕ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１９９３，１１，２０３６
【非特許文献５】Ｃａｍｅｒｉｎｉ，Ｔ．，Ｍａｒｉａｎｉ，Ｌ．；Ｄｅ  Ｐａｌｏ，Ｇ．；Ｍａｒｕｂｉｎｉ，Ｅ．；Ｇａｅｔａｎａ  Ｄｉ  Ｍａｕｒｏ，Ｍ．；Ｄｅｃｅｎｓｉ，Ａ．；Ｃｏｓｔａ，Ａ．；Ｖｅｒｏｎｅｓｉ，Ｕ．Ｊ．Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．２００１，１９，１６６４
【非特許文献６】Ｍｕｌｄｅｒ，Ｇ．Ｊ．；Ｃｏｕｇｈｔｒｉｅ，Ｍ．Ｗ．Ｈ．；Ｂｕｒｃｈｅｌｌ，Ｂ．Ｉｎ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ：Ａｎ  Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ  Ａｐｐｒｏａｃｈ；Ｍｕｌｄｅｒ，Ｇ．Ｊ．，Ｅｄ．；Ｔａｙｌｏｒ  ａｎｄ  Ｆｒａｎｃｉｓ：Ｌｏｎｄｏｎ，１９９０；ｐ５２
【非特許文献７】Ａｂｏｕ−Ｉｓｓａ，Ｈ．；Ｃｕｒｌｅｙ，Ｒ．Ｗ．，Ｊｒ．；Ｐａｎｉｇｏｔ，Ｍ．Ｉ；Ｔａｎａｇｈｏ，Ｓ．Ｎ．；Ｓｉｄｈｕ，Ｂ．Ｓ．；Ａｌｓｈａｆｉｅ，Ｇ  Ａ．Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１９９７，１７，３３３５
【非特許文献８】Ｐａｎｉｇｏｔ，Ｍ．Ｉ；Ｈｕｍｐｈｒｉｅｓ，Ｋ．Ａ．；Ｃｕｒｌｅｙ，Ｒ．Ｗ．，Ｊｒ．Ｊ．Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｃｈｅｍ．１９９４，１３，３０３
【非特許文献９】Ａｂｏｕ−Ｉｓｓａ，Ｈ．Ｍ．；Ａｌｓｈａｆｉｅ，Ｇ．Ａ．；Ｃｕｒｌｅｙ，Ｒ．Ｗ．，Ｊｒ．；Ｗｏｎｇ，Ｍ．Ｆ．；Ｃｌａｇｅｔｔ−Ｄａｍｅ，Ｍ．；Ｒｅｐａ，Ｊ．Ｉ；Ｓｉｋｒｉ，Ｖ．Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１９９９，１９，９９９
【非特許文献１０】Ｗａｌｋｅｒ，Ｊ．Ｒ．；Ａｌｓｈａｆｉｅ，Ｇ．；Ａｂｏｕ−Ｉｓｓａ，Ｈ．；Ｃｕｒｌｅｙ，Ｒ．Ｗ．，Ｊｒ．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２００２，１２，２４４７
【非特許文献１１】Ｗｕ，Ｊ．Ｍ．；ＤｉＰｉｅｔｒａｎｔｏｎｉｏ，Ａ．Ｍ．；Ｈｓｉｅｈ，Ｔ．−Ｃ．Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ２００１，６，３７７
【非特許文献１２】Ｗｅｉｓｓ，Ｋ．Ｌ．；Ａｌｓｈａｆｉｅ，Ｇ．；Ｃｈａｐｍａｎ，Ｊ．Ｓ．；Ｍｅｒｓｈｏｎ，Ｓ．Ｍ．；Ａｂｏｕ−Ｉｓｓａ，Ｈ．；Ｃｌａｇｅｔｔ−Ｄａｍｅ，Ｍ．；Ｃｕｒｌｅｙ，Ｒ．Ｗ．，Ｊｒ．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２００１，１１，１５８３
【非特許文献１３】Ｃｈａｐｍａｎ，Ｊ．Ｓ．；Ｗｅｉｓｓ，Ｋ．Ｌ．；Ｃｕｒｌｅｙ，Ｒ．Ｗ．，Ｊｒ．；Ｈｉｇｈｌａｎｄ，Ｍ．Ａ．；Ｃｌａｇｅｔｔ−Ｄａｍｅ，Ｍ．Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２００３，４１９，２３４
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
［本発明の概要］
本発明は、式１：
【０００８】
【化２】
2008542202.tif 000004
式Ｉ
の化合物；及びそれらの塩へ向けられたものであるが、
それにおいて、Ｘは、ＣＨ２である；Ｙは、Ｃ１−Ｃ６のアルキレンである；及びＲは、水素、Ｃ１−Ｃ６のアルキル、
【０００９】
【化３】
2008542202.tif 000005
及び
【００１０】
【化４】
2008542202.tif 000006
からなる群より選択されたものであると共に、
それにおいて、Ｒ１は、Ｈ、ＯＨ、ＣＯＯＨ、Ｃ１−Ｃ６のアルキル、アルケニル、アルキニル、及びＣ１−Ｃ６−ヒドロキシアルキルからなる群より選択されたものである；Ｒ２は、Ｈ、ＯＨ、及び＝Ｏからなる群より選択されたものである。
【００１１】
“Ｒ”置換基は、真上に示された“Ｒ”についての二つの構造において描かれた波形の結合によって示されたもののような、いずれの立体化学的な配置（即ち、Ｄ又はＬ；Ｒ又はＳ、など）にあることができる。同様にして、９，１３−ジメチルで置換されたアルケニレンの鎖は、それが、式Ｉにおいて全てトランスの配座で描かれたものであるが、また、鎖内のいずれの点においても、しかし最も顕著には、９及び１３の位置に、一つの又はより多くのシスの二重結合を含むことがある。このように、本発明は、明示的に、（例えば、及び限定の目的ではない）９−シスの異性体及び１３−シスの異性体：
【００１２】
【化５】
2008542202.tif 000007
式１，９−シス
【００１３】
【化６】
2008542202.tif 000008
式１，１３−シス
のような、アルケニレンの鎖内のシス又はトランスの二重結合のいずれの組み合わせをも有する式Ｉの化合物を包含する。
【００１４】
本発明は、さらに、哺乳動物における癌を予防する及び／又は処置するための薬学的な組成物に向けられたものである。組成物は、（自由選択で、薬学的に適切な担体との組み合わせで）ここに記載されたもののような有効な癌細胞の成長を阻害する量の一つの又はより多くの化合物を含む。
【００１５】
本発明は、さらに、哺乳動物における癌を予防する及び／又は処置する方法に向けられたものである。本方法は、癌細胞の成長を阻害する量の、ここに開示された化合物又は薬学的な組成物を、ヒトの患者を含む、それの必要な患者へ投与することを含む。
【００１６】
化合物は、ヒトを含む、哺乳動物における癌を予防することに及び処置することに、有用なものである。この実用性は、乳癌の受け入れられた生体内のラットのモデルを使用する腫瘍の成長の阻害の評価分析の結果を介して示されたものである。（例を参照のこと）。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
［発明の詳細な説明］
省略及び定義：
後に続く省略及び定義は、明細書及び特許請求の範囲のいたるところで使用されたものである。ここに明示的な定義が与えられない用語は、有機化学、薬理学、及び／又は薬学的な調合物の分野において理解されたそれらの用語に従って解釈されるものである。
【００１８】
Ａｃ２Ｏ＝無水酢酸。
【００１９】
ＡｃＯＨ＝酢酸。
【００２０】
ａｔＲＡ＝全てのトランスレチノイン酸。
【００２１】
９−ＢＢＮ−Ｈ＝９−ボラビシクロ［３．３．１］ノナン。
【００２２】
ＢＭＣ＝骨の無機質の含有率。
【００２３】
Ｃｐ＝シクロペンタジエニル。
【００２４】
ＤＭＡＰ＝４−ジメチルアミノピリジン。
【００２５】
ＤＭＢＡ＝ジメチルベンズ［ａ］アントラセン。
【００２６】
ＤＭＦ＝Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド。
【００２７】
ＤＭＫ＝ジメチルケトン，アセトン。
【００２８】
ｄｐｐｆ＝１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン。
【００２９】
ＥＤＴＡ＝エチレンジアミン四酢酸。
【００３０】
Ｅｔ３Ｎ＝トリエチルアミン。
【００３１】
４−ＨＢＲ＝４−ヒドロキシベンジルレチノン。
【００３２】
４−ＨＢＲＣＧ＝４−ヒドロキシベンジルレチノン−Ｃ−グルクロニド。
【００３３】
４−ＨＢＲＣグルクロニド＝４−ヒドロキシベンジルレチノン−Ｃ−グルクロニド。
【００３４】
４−ＨＢＲＣグルコース＝４−ヒドロキシベンジルレチノン−Ｃ−グルコース。
【００３５】
ＨＰＬＣ＝高速液体クロマトグラフィー。
【００３６】
４−ＨＰＲ＝Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）レチンアミド。
【００３７】
４−ＨＰＲＣＧ＝Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）レチンアミド−Ｃ−グルクロニド。
【００３８】
４−ＨＰＲＯＧ＝Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）レチンアミド−Ｏ−グルクロニド。
【００３９】
ＨＲＭＳ（ＥＳ）＝高分解能質量分析，電気スプレー電離。
【００４０】
ＩＲ＝赤外。
【００４１】
ＬｉＨＭＤＳ＝リチウム＝ヘキサメチルジシラジド。
【００４２】
ＭｅＯＨ＝メタノール。
【００４３】
ＭＯＭ＝メトキシメチル。
【００４４】
ＭＯＭＣｌ＝メトキシメチルクロリド。
【００４５】
ｍｐ＝融点。
【００４６】
ｍＲＮＡ＝伝令リボ核酸。
【００４７】
ＮＭＲ＝核磁気共鳴。
【００４８】
Ｐｈ＝フェニル。
【００４９】
薬学的に適切な塩＝いずれの酸又は塩基の添加の塩であって、それの対イオンは、遊離の塩基又は遊離の酸に固有な有益な効果が、対イオンに帰せられた副作用によって損なわれないように、塩の薬学的な容量において患者に非毒性のものである。薬学的に適切な塩のホストは、当技術において周知のものである。塩基性の活性な処方成分のために、全ての酸の添加の塩は、たとえ特定の塩が、それ自体で、例えば、塩が精製及び同定の目的にのみ形成されたものであるとき又はそれがイオン交換の手順によって薬学的に適切な塩を調製する際の中間体として使用されたものであるときのような中間の生産物としてのみ望まれたものであるとしても、遊離の塩基の形態の源として有用なものである。薬学的に適切な塩は、限定無しに、ハロゲン化水素酸塩、例．塩化水素酸塩及び臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、スルファミン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、マロン酸塩、シュウ酸塩、サリチル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、メチレン−ビス−ｂ−ヒドロキシナフトエ酸塩、ゲンチジン酸塩、イソチオン酸塩、ジ−ｐ−トルオイル酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、シクロヘキシルスルファミン酸塩、キナ酸塩、及び同様のものを明示的に含む、無機質の酸及び有機酸から誘導されたものを含む。塩基の添加の塩は、アルカリ若しくはアルカリ土類金属の塩基、又は、トリエチルアミン、ピリジン、ピペリジン、モルホリン、Ｎ−メチルモルホリン、及び同様のもののような、従来の有機塩基から誘導されたものを含む。
【００５０】
Ｑ−ＰＣＲ＝定量的なポリメラーゼ連鎖反応。
【００５１】
ＲＡ＝レチノイン酸。
【００５２】
ＲＡＲ＝レチノイン酸の受容体。
【００５３】
ＲＢＰ＝レチノールを結び付けるタンパク質。
【００５４】
ｒｔ＝室温。
【００５５】
ＲＸＲ＝レチノイドＸの受容体。
【００５６】
ＳＥＭ＝平均の標準誤差。
【００５７】
ＴＢＡＦ＝テトラブチルアンモニウム＝フルオリド。
【００５８】
ＴＢＤＭＳＣＮ＝ｔ−ブチルジメチルシリルシアニド。
【００５９】
ＴＥＭＰＯ＝２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシの遊離基。
【００６０】
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン。
【００６１】
ＴＭＳ＝テトラメチルシラン。
【００６２】
導入：
レチノイン酸を解放するための酵素学的な加水分解の可能性を除去するために、本発明は、Ｃ−連鎖された化合物（４−ＨＢＲＣＧ；化合物７）及びそれの類似体へ向けられたものである。４−ＨＢＲＣＧにおいて、４−ＨＰＲＣＧのアミド結合は、４−ＨＰＲ−Ｏ−グルクロニド、化合物７、の十分にＣ−連鎖された誘導体を生じるように、メチレン基で取り替えられたものである。４−ＨＢＲＣＧ及びそれの類似体の合成及び治療学的な評価は、ここに開示された及び請求されたものである。
【００６３】
【化７】
2008542202.tif 000009
４−ＨＢＲＣＧ      ７      Ｘ＝Ｙ＝ＣＨ２
化学：
４−ＨＰＲＣＧへの最近報告された改善された合成のルートは、エキソアノマーのメチレンの糖質とアリール＝ブロミドとの間のＳｕｚｕｋｉカップリング反応を用いる１０。元来Ｊｏｈｎｓｏｎ及び共同研究者によって開発された１４，１５、この方法論は、β−アリールメチル−Ｃ−グリコシドに対する準備のできたアクセスを与える。ここに書き留められた変更と共に、同じ化学を使用することで、鍵となるベンジル＝ブロミド１４は、合成された（スキーム１を参照のこと）。そして、収束性のアプローチを使用することで、レチナールのウムポルンク（umpolung）誘導体が、最終的なターゲット、４−ＨＢＲＣＧの炭素の骨格を得るために、ベンジル＝ブロミドでアルキル化された（スキーム２を参照のこと）。
【００６４】
容易に入手可能なδ−Ｄ−グルコノラクトン（化合物８）から開始すると、メトキシメチル＝クロリド（ＭＯＭＣｌ）及びジイソプロピルエチルアミンを伴った穏やかな条件を使用するヒドロキシルの保護は、保護されたラクトン９を与える（スキーム１）。Ｐｅｔａｓｉｓの試薬１６，１７を使用するオレフィン化は、良好な収率１４で、知られたエキソアノマーのメチレンの糖質１０を与える。９−ボラビシクロ［３．３．１］ノナン（９−ＢＢＮ−Ｈ）での環外のオレフィンのヒドロホウ素化は、ｐ−ブロモベンジルアルコールでのＳｕｚｕｋｉカップリングが後に続けられるが、排他的にβ−アリールメチル−Ｃ−グルコシド、化合物１１を与える。先の報告は、この反応が立体選択的なものであることを示す１０，１５，１８。ベンジルアルコールは、メチルエーテル１２を生じるために、簡易に保護されたものであった。グルクロニドを得るために、ＭＯＭ基は、酸において開裂されたと共に、第一級アルコールは、２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシの遊離基（ＴＥＭＰＯ）１９，２０を使用することで、カルボン酸塩へ選択的に酸化された。典型的には、ＴＥＭＰＯは、触媒的に使用される。しかしながら、これらの条件は、ベンジル系のケトンの混合物を生じる、非選択的な酸化に帰着した。時間、温度、塩基、ＴＥＭＰＯの量、次亜塩素酸ナトリウムの量、及び添加の順序における変動は、清浄に発生する化合物１３におけるいずれのアクセスも無しに、試みられたものであった。発明者の過去の実験から、他の酸化的な敏感な糖質タイプの分子は、過剰なＴＥＭＰＯが使用されるとき、選択的な酸化をうけることができる２１。過剰なＴＥＭＰＯ、ＫＢｒ、及びＮａＣｌＯが、ＮａＨＣＯ３の溶液において予備混合されるとき、脱保護されたもの１２は、添加されたと共に選択的に酸化されたものであったが、効率的に６−の位置のカルボン酸塩を生じる。カルボン酸塩のメチル化は、残留するアルコール類のアセチル化が後に続けられるが、四つのステップにわたって、良好な収率で、保護されたＣ−アリール−グルクロニド１３を与える。ベンジル系のメチルエーテルは、臭化水素酸を使用することで、臭化物によって、はずされることができる２２，２３と共に、酢酸におけるＨＢｒへ露出されたとき、メチルエーテル１３は、円滑に、鍵となるベンジル＝ブロミドのＣ−グルクロニドの中間体１４を与えた。この驚くべき手軽な反応は、非常に安定なベンジル＝ブロミドを生じたが、それは、結晶化によって単離されたものであった。
【００６５】
【化８】
2008542202.tif 000010
反応スキーム１
スキーム１についての試薬及び条件：（ａ）ＭＯＭＣｌ，（ｉ−Ｐｒ）２ＮＥｔ，Ｂｕ４ＮＩ，ＣＨ２Ｃｌ２，４８時間，８３％；（ｂ）Ｃｐ２Ｔｉ（ＣＨ３）２，ＰｈＣＨ３，７０℃，１８時間，８７％；（ｃ）（ｉ）９−ＢＢＮ−Ｈ，ＴＨＦ，還流，６時間；（ｉｉ）ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ），３ＭのＫ３ＰＯ４，ＤＭＦ，ｐ−ブロモベンジルアルコール，１８時間，６７％；（ｄ）（ｉ）ＮａＨ，ＴＨＦ，１．５時間；（ｉｉ）ＣＨ３Ｉ，１８時間，９０％；（ｅ）（ｉ）６ＮのＨＣｌ，ＭｅＯＨ，１８時間；（ｉｉ）ＴＥＭＰＯ，ＮａＣｌＯ，ＫＢｒ，ＮａＨＣＯ３，０℃，４５分；（ｉｉｉ）ＣＨ３Ｉ，ＤＭＦ，２０時間；（ｉｖ）Ａｃ２Ｏ，ピリジン，ＤＭＡＰ，１８時間，８２％；（ｆ）ＨＢｒ，ＡｃＯＨ，１８時間，８６％。
【００６６】
このルートにおける次のステップは、レチナールの陰イオンの等価物での求電子体１４の鍵となるアルキル化であった（スキーム２を参照のこと）。化学的に敏感なレチナールのための最も適切なウムポルンクストラテジーは、レチナールの、保護されたシアノヒドリン誘導体２４、及びより詳しくはシリルシアノヒドリン２５、を用いることである。レチナールのトリメチル−シリルシアノヒドリンは、最初に現れた且つ４−ＨＢＲの合成に使用されたものであった１２，２６。触媒性のＥｔ３Ｎと共にｔ−ブチルジメチルシリルシアニド（ＴＢＤＭＳＣＮ）へ露出されたレチナール（化合物１５，スキーム２）は、クロマトグラフ的に安定なシアノヒドリン１６を与えた。アルキル化の反応において、ＴＢＤＭＳ−シアノヒドリンは、ＬｉＨＭＤＳで脱保護されたと共に臭化物１４の添加が後に続けられたものであった。アルキル化されたＴＢＤＭＳで保護された生産物１７のその後のクロマトグラフィーは、価値のある未反応の臭化物の回収を可能にする。フッ化物でのアルキル化された生産物の処置は、終わりから二番目の材料１８を与えるように、ケトンをアンマスキングした。モデルの反応を使用することで、アルキル化の反応の収率を改善するための実質的な努力が、引き受けられた。努力は、ＴＭＳ−及びＴＢＤＭＳ−シリルシアノヒドリンの反応性を比較すること、異なる塩基を用いること、並びに、化学量論、温度、及び時間を変化させることを含むものであった。たとえ未反応の臭化物１４の回収が、重要なものであったとしても、１７の収率は、ポリエンのレチノイドの反応物の感度のおかげで、適度なもののままであった。最後に、酢酸エステルの注意深い脱保護及びメチルエステルのけん化は、最終的なターゲット、４−ＨＢＲＣＧ（７）を与えた。この合成のルートを使用することで、２グラムよりも多くの４−ＨＢＲＣＧは、ここに開示された動物の研究及び生体内の評価分析を容易にするために、生産されたものであった。
【００６７】
【化９】
2008542202.tif 000011
反応スキーム２
スキーム２についての試薬及び条件：（ａ）ＴＢＤＳＭＣＮ，Ｅｔ３Ｎ，ＣＨ２Ｃｌ２，２０時間，７８％；（ｂ）（ｉ）ＬｉＨＭＤＳ，ＴＨＦ，−７８℃，３０分；（ｉｉ）１４，ＴＨＦ，−７８℃，３時間，４７％；（ｃ）ＴＢＡＦ，ＴＨＦ，１時間，７５％；（ｄ）（ｉ）Ｋ２ＣＯ３，ＭｅＯＨ，４℃，２０時間；（ｉｉ）ＫＯＨ，ＭｅＯＨ，４℃，２０時間，８２％。
【００６８】
ここに開示された他の類似体は、適当な初期の反応物と共に開始することによって、並びに、そして、同じ反応のルート並びに真上に及び例に記載された化学を追跡することによって、製作されることができる。例えば、類似の９−シス及び１３−シスの前駆体は、商業的にＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｉｓｓｏｕｒi）から得られることができる。
【００６９】
Ｒ２がヒドロキシ又は二重結合させられた酸素（即ち、４−ヒドロキシ及び４−オキソの誘導体）である化合物を製作するために、４−ヒドロキシ及び４−オキソレチナールの反応物は、Ｃｕｒｌｅｙ及びＣａｒｓｏｎ４５に記載された方法を使用することで、作られることができる。
【００７０】
生物学的な結果及び議論：
４−ＨＢＲＣＧ（７）の乳房の腫瘍の化学療法的な活性についての予備的な評価が、行われたと共に、それの毒性の大略が、また評定された。先に記載されたもの７，１２のように、（７，１２−ジメチルベンズ（ａ）アントラセン［ＤＭＢＡ］で約５０日より早く処置された）腫瘍をもつ雌のラットには、２２日間２ミリモル／ｋｇの飼料で対照の又はレチノイドを含有する飼料（ＲＡ（２），４−ＨＰＲ（３）又は４−ＨＢＲＣＧ（７））が給餌された。表１に示されたように、対照の群の腫瘍の体積が、２２日までに２００％近く増加したのに対して、化合物７は、腫瘍の体積を低減する（３０−４０％の低減）点で２及び３と同じくらい有効なものである。図１は、腫瘍の体積における時間経過の変化が、全ての三つの処置のレチノイド類について類似のものであったことを示す。同様に、表２におけるデータは、化合物７について、その群における個々の腫瘍が、他のレチノイドで処置された群における腫瘍に類似して応答したことを示す。
【００７１】
特に注目すべきものは、４−ＨＢＲＣＧ（７）が、ＲＡ（２）及び４−ＨＰＲ（３）の両方に相対した大いに低減された毒性の証拠を示したことである。表３に示されたように、給餌する期間の間に、ＲＡのみが、正常な体重のゲインにおける顕著な低減、レチノイド毒性の共通の符号、を引き起こした。おそらく、いっそうより大きい重要なもののうち、４−ＨＢＲＣＧは、血漿のレチノールのレベルにおける４−ＨＰＲ又はＲＡのいずれかがしたよりも、大いにより小さい低減を引き起こした。ＲＡ２７及び４−ＨＰＲ３の両方が、血液のレチノールの循環するレベルを低減することができることは、周知のことである。血漿のレチノールにおける４−ＨＰＲで誘発された低減が、減ぜられた暗順応を生じさせることを、示されてきたことであると共に、ヒトの臨床的な治験において使用されてきたものである４−ＨＰＲの用量を限定する単一の最も重要な因子である２８。２ｍｍｏｌ／ｋｇの飼料で給餌された４−ＨＢＲＣＧが、４−ＨＰＲの同じ量がしたのに対して、血液のレチノールにおけるいずれの顕著な低減をも生じさせるものではなかったため、化合物７は、夜盲症の危険性をこうむる前に、３と比較された相対的により高い用量で投与されることができる。
【００７２】
いずれの特定の基礎をなす生物学的な機構に限定されるものではない一方で、４−ＨＢＲＣＧ（７）が、血液のレチノールのレベルの顕著な低下を示すものではないことの理由は、それが、生体内に分配される様式に関係付けられたものであることがある（表４を参照のこと）。４−ＨＰＲは、血清のレチノールを結び付けるタンパク質，ＲＢＰ３，２９に結び付くことについて競合することによって、血液のレチノールのレベルを低減することが、知られたものである。興味深いことに、４−ＨＰＲ及び関係付けられた類似体、４−ＨＢＲの両方は、ＲＢＰへの等価な結び付きを示すが、まだ４−ＨＢＲは、血液のレチノールのレベルを低下させるものではない１２。４−ＨＢＲが、等モルの量で投与されたとき、４−ＨＰＲと比較された、より低いレベルで血液において循環する１２ことは、留意されるべきことである。このように、少なくとも化合物３及び４に関して、血液のレチノールのレベルは、血液に存在するものである４−ＨＰＲの濃度に逆比例して関係付けられる。本発明においては、４−ＨＰＲと比較して、より少ない４−ＨＢＲＣＧが、試験の動物が、犠牲にされた時間に血漿に存在するものであったが、この減少させられた血漿の濃度が、循環する血液のレチノールのレベルについてのグルクロニドの類似体７のより少ない効果の説明をすることがあることを示唆する。
【００７３】
表１．ＤＭＢＡで誘発されたラットの乳房の腫瘍の体積ａについてのレチノイドの処置の効果
【００７４】
【表１】
2008542202.tif 000012
ａ値＝平均±ＳＥＭ
ｂ２ｍｍｏｌ／ｋｇの飼料のレチノイドの用量が、２２日間動物へ給餌されたものであった。
【００７５】
ｃ基準線からの変化
ｄ統計学的な有意性，ｐ＜０．０５を表記する
表２．個々の腫瘍についてのレチノイドの処置の効果
【００７６】
【表２】
2008542202.tif 000013
ａ全体として消失した且つ触診されることができなかった腫瘍を表す
ｂ体積における２５−７５％の減少を示した腫瘍を表す
表３．体重及び血漿のレチノールのレベルにおける食事のレチノイドの効果
【００７７】
【表３】
2008542202.tif 000014
＊値＝平均＋ＳＥＭ
ａ２２日にわたる基準線の体重に相対したもの
ｂ参考文献９におけるもののように測定された処置の２２日における濃度（μｇ／ｍｌ）
ｃ参考文献２４におけるもののように測定された処置の２２日における濃度（ｍｇ／ｍｌ）
ｄ他の群に相対した平均の体重のゲインにおける傾向についてｐ＜０．０５
ｅ対照の群に相対したｐ＜０．０５
表４．末期の血漿の薬物のレベル
【００７８】
【表４】
2008542202.tif 000015
ａ処置の２２日における濃度（μｇ／ｍｌ）±ＳＥＭ
図２Ａに示されたように、４−ＨＢＲＣＧが、この望ましくない効果を引き起こすものではなかったのに対して、ＲＡでの処置は、血清のトリグリセリドの濃度を劇的に増加させた。血清のトリグリセリドにおける増加は、経口的なＲＡの投与の周知の副作用である３０，３１と共に、ＲＡＲの族３２への結び付きによって媒介されたものである。ヒトの治験において支持されたように、４−ＨＰＲは、この副作用を生じさせる点でＲＡよりも明らかにより効力のないものである５。非加水分解性の４−ＨＢＲＣＧが、血清のトリグリセリドのレベルを増加させる性質の無いことを示したのに対して、４−ＨＰＲの加水分解が、本仕事においてこのレチノイドの給餌をする際の小さいが、しかし些細な増加の説明をしてきたものであることがあることは、可能なことである。
【００７９】
骨格の異常は、高い用量のレチノイドの治療の別の逆効果である３３−３５。４−ＨＰＲ及び類似体７についてのいずれの類似の効果の程度をも決定するためには、動物の大腿の骨の無機質の含有率（ＢＭＣ）は、給餌の研究の終了の際に測定された。期待されたように、３又は７のいずれかを受容する群が、このような効果の無いことを示したのに対して、ＲＡは、対照の動物と比較された（図２Ｂを参照のこと）とすると、大腿のＢＭＣにおける顕著な低減を生じさせた。４−ＨＰＲを受容する早期の乳癌を伴った女性の早期の臨床的な研究において、骨の再吸収のマーカーにおける増加に向かった傾向が、注意された３６。顕著なものではないとはいえ、これは、ＲＡを遊離することができない４−ＨＢＲＣＧのような４−ＨＰＲの類似体が、骨の危険性を最小にする点で好都合なものであるかもしれないことを示唆する。
【００８０】
４−ＨＰＲ及び他の関係付けられた類似体（５及び６）を伴ったもののように、４−ＨＢＲＣＧは、レチノイン酸の受容体β及びγ（ＲＡＲβ及びＲＡＲγ）へ乏しく結び付く（図３Ａ及び３Ｂを参照のこと）。４−ＨＰＲは、ＲＡＲβへ結び付く［３Ｈ］ａｔＲＡについて競合する点で、全てのトランスレチノイン酸（ａｔＲＡ）よりも３０００倍近く効力の少ない及びＲＡＲγへ結び付くことに競合することが２５００倍少なくできるものであった９，３７。本仕事において、４−ＨＢＲＣＧは、また、（それぞれ、ＲＡＲβ及びＲＡＲγへ結び付く点でａｔＲＡよりも３００倍及び１４００倍効力の少ないもの）弱いＲＡＲの結び付きのみを示した。１０−４．５Ｍまでの濃度での４−ＨＢＲＣＧは、ＲＡＲαへの類似の乏しい結び付きを示した（データが示されない）。さらには、１０−４．５Ｍまでの濃度での４−ＨＢＲＣＧは、ほとんど、ＲＸＲへ結び付く［３Ｈ］９−シスＲＡについて競合の無いことを示した（データが示されない）。４−ＨＢＲＣＧに類似のもので、４−ＨＢＲＣのグルコースの類似体（２３）は、また、ＲＡＲβ及びＲＡＲγ（それぞれ、図３Ａ及び３Ｂを参照のこと）、並びにＲＡＲα及びＲＸＲγ（データが示されない）、へ乏しく結び付く。
【００８１】
生体内においてＲＡＲで媒介された遺伝子の転写を活性化させるためのレチノイドの能力を評価するために、ＣＹＰ２６の誘発が、肝臓及び肺における犠牲で測定された。ＲＡは、肝臓におけるＣＹＰ２６Ａ１のｍＲＮＡ（上記の対照の６７倍；図４を参照のこと）及び肺におけるＣＹＰ２６Ｂ１（上記の対照の４６倍；データが示されない）を誘発する点で高度に有効なものであった。４−ＨＢＲＣＧが、これらのチトクロームｐ４５０のｍＲＮＡを誘発するものではなかったのに対して、４−ＨＰＲは、また、肝臓及び肺におけるＣＹＰ２６のｍＲＮＡを誘発する点で顕著な活性（対照と比較された、それぞれ、ＣＹＰ２６Ａ１及びＣＹＰ２６Ｂ１について３７及び２０倍）を示した。ＲＡは、ＲＡＲへ結び付くことを介してＣＹＰ２６Ａ１のｍＲＮＡを誘発すること、及び、このＲＡに応答性の遺伝子のプロモーター領域におけるレチノイン酸の応答の要素との、配位されたＲＡＲ／ＲＸＲのヘテロ二量体の相互作用を方向付けることが、示されてきたものである３８，３９。ＲＡ及びより少ない程度の４−ＨＰＲが、ビタミンＡ−欠乏性のラットの肺におけるＣＹＰ２６Ｂ１のｍＲＮＡの発現を誘発させることは、また、先に示されてきたことである１３。４−ＨＢＲＣＧが、ＲＡＲについての４−ＨＰＲと比較された、向上させられた親和性を現実に示すが、まだ、遺伝子の発現を誘発させるものではないことを見出すこととカップルにされた、化合物３又は化合物７のいずれもＲＡＲへの特に強い結び付きを示すものではないという事実は、これらのｍＲＮＡを誘発させるためのそれの能力を説明するための機構としての受容体との４−ＨＰＲの直接的な相互作用に対して論争する。むしろ、ａｔＲＡへの４−ＨＰＲの加水分解は、この誘発の説明をすることがある。ビタミンＡ−欠乏性のラットへ経口的に与えられた４−ＨＰＲが、ＨＰＬＣによって検出可能なものである血漿にＲＡを発生させることは、先に示されてきたことである１３。生体内における４−ＨＢＲＣＧによるＲＡＲで媒介された遺伝子の転写の誘発の欠如は、このように、ＲＡＲへの７の直接的な結び付きが、本仕事において給餌されたレチノイドのレベルで起こるものではないという結論を支持すると共に、ＲＡで媒介された毒性が、４−ＨＰＲと比較されたとすると、本化合物では問題のより少ないものであるべきであることをさらに示す。
【００８２】
４−ＨＰＲの毒性が、ＲＡと比較して、低減されることが、報告されてきたものであるとはいえ、遭遇された毒性のスペクトルは、類似のものである４０。このように、４−ＨＢＲＣＧは、４−ＨＰＲと比較されたとき、ここで研究された毒性の全ての尺度（重量の喪失、血清のトリグリセリドの上昇、骨の無機質の含有率における低減、低減された血液のレチノール、及びＲＡＲで媒介された遺伝子の転写の誘発）について、及び、毒性の後者の二つの尺度について、天然のホルモン、ＲＡ、と比較された治療の窓における顕著な改善を示す。
【００８３】
８日の期間にわたるＭＣＦ−７のヒトの乳癌の細胞の成長の阻害が、４−ＨＢＲＣＧ及び類似体の４−ＨＢＲＣグルコースの活性を評定するための手段として使用された。両方の化合物は、１０−５Ｍで生存する細胞の数における低減を生じさせた。図５を参照のこと。しかしながら、４−ＨＢＲＣグルコースの類似体の場合において、ＭＣＦ−７の細胞の大多数が、評価分析の終了の際に死んだ。この結果は、グルコースの類似体が、４−ＨＢＲＣＧよりもいっそう効力のある化合物であるかもしれないことを強く示唆する。ＭＣＦ−７の細胞の成長を阻害する点での活性は、これらの類似体の潜在的な生体内の化学的予防の／化学療法的な活性の予測的なものであることが、示されてきたものである。
【００８４】
概要を述べれば、４−ＨＢＲＣＧ及び４−ＨＢＲＣグルコースの両方は、図５に示されたような、培養物におけるＭＣＦ−７のヒトの乳癌の細胞の成長を阻害する。４−ＨＢＲＣＧは、ラットの乳房の腫瘍の大きさ及び数を低減するために、４−ＨＰＲ及びＲＡと能力を共有する。しかしながら、母体のレチノイド類によって示された毒性の効果の多くのものは、４−ＨＢＲＣＧで低減される又は除去される。このように、これらの十分に非加水分解性の類似体は、ヒトを含む、哺乳動物における使用のための低い毒性の化学的予防の／化学療法的な薬剤としての顕著な有用性及び利点を有する。
【００８５】
薬学的な組成物：
本発明の別の態様は、自由選択で許容可能な担体との組み合わせで、及び、自由選択で他の治療学的に活性な処方成分又は不活性な補助的な処方成分との組み合わせで、活性な化合物、即ち、式Ｉの化合物又はそれの薬学的に許容可能な塩を含む、医学的な使用のための、薬学的な組成物を提供する。担体は、調合物の他の処方成分と相溶なものであると共にレシピエントに対して有害なものではないという意味で、薬学的に許容可能なものでなければならない。薬学的な組成物は、経口的な、局所的な、吸入の、直腸の、又は（皮下の、筋肉内の、及び静脈内のものを含む）非経口的な投与に適切なものを含む。
【００８６】
調合物は、便利に、単位用量の形態で与えられることがあると共に薬学的な技術における周知の方法のいずれによっても調製されることがある。用語の“単位薬用量”又は“単位用量”は、示された活性又は条件を処置するために有効なものであるために十分な活性な処方成分の所定の量を意味することが表記される。各々のタイプの薬学的な組成物を作ることは、活性な化合物を担体及び一つの又はより多くの自由選択の補助的な処方成分と関連したものにもってくるステップを含む。一般には、調合物は、活性な化合物を液体又は固体の担体と関連したものに均一に且つ親密にもってくること、及び、そして、必要なものであるとすれば、生産物を望まれた単位薬用量の形態へと整形することによって、調製される。
【００８７】
経口的な投与に適切な本発明の調合物は、カプセル、カシェ剤、錠剤、丸薬、又は口内剤のような不連続な単位として与えられることがあるが、各々は、粉末又は顆粒として；又は液体の形態における、例．油、水溶液、懸濁液、シロップ剤、エリキシル剤、乳濁液、分散系、又は同様のものとして、；活性な化合物の所定の量を含有する。
【００８８】
錠剤は、自由選択で一つの又はより多くの補助的な処方成分と、圧縮又は成形することによって作られることがある。圧縮された錠剤は、適切な機械において、自由に流動する形態、例．粉末又は顆粒における活性な化合物を圧縮することによって、調製されると共に自由選択で補助的な処方成分、例．結合剤、潤滑剤、不活性な希釈剤、界面活性剤、又は分散剤と混合されることがある。成形された錠剤は、適切な機械において、任意の適切な担体との粉末化された活性な化合物の混合物を成形することによって、作られることがある。
【００８９】
非経口的な投与に適切な調合物は、便利に、例えば、注射用の水、生理食塩水、ポリエチレングリコールの溶液、及び同様のものにおける活性な化合物の無菌の調製を含むが、それは、好ましくは、レシピエントの血液と等張性のものである。
【００９０】
有用な調合物は、また、式Ｉの化合物を含有する濃縮された溶液又は固体を含むが、それは、適当な溶媒での希釈において、非経口的な投与に適切な溶液を与える。
【００９１】
局所的な又は局在の用途用の調製は、エアロゾルの噴霧、ローション剤、ゲル、軟膏剤、坐剤など、並びに、水、生理食塩水、低級の脂肪族のアルコール類、グリセロールのようなポリグリセロール類、ポリエチレングリセロール、脂肪酸のエステル、油脂、シリコーン類、及び他の従来の局所的な担体のような、それらのための薬学的に許容可能な賦形剤を含む。局所的な調合物において、主題の化合物は、好ましくは、約０．１重量％から５．０重量％までの濃度で利用される。
【００９２】
直腸の投与に適切な組成物は、活性な処方成分、及び、硬い脂肪、水素化されたココグリセリド、ポリエチレングリコール及び同様のもののようなそれのための薬学的に許容可能な賦形剤を含有する、坐剤、好ましくは銃弾状に整形されたもの、を含む。坐剤の調合物において、主題の化合物は、好ましくは、約０．１重量％から１０重量％までの濃度で利用される。
【００９３】
直腸の投与に適切な組成物は、また、活性な処方成分、及び、５０％の水性のエタノール又は直腸若しくは大腸と生理学的に適合性のものである水性の塩の溶液のようなそれのための薬学的に許容可能な賦形剤を含有する直腸の浣腸のユニットを含むことがある。直腸の浣腸のユニットは、白色の鉱油のような潤滑剤で潤滑にされた及び好ましくは施された式の及び十分な長さ、好ましくは二インチ、の逆流が肛門を介して大腸へと挿入されることを予防するための一方向性の弁によって保護された、好ましくはポリエチレンが含まれた、不活性なカバーによって保護されたアプリケーターチップからなる。直腸の調合物において、主題の化合物は、好ましくは、約０．１重量から約１０重量％までの濃度で利用される。
【００９４】
有用な調合物は、また、活性な処方成分を含有する濃縮された溶液又は固体を含むが、それは、適当な溶媒、好ましくは生理食塩水、での希釈において、直腸の投与に適切な溶液を与える。直腸の組成物は、水性の及び非水性の調合物を含むが、それは、緩衝剤、静菌薬、糖質、増粘剤、及び同様のもののような従来の補助剤を含有することがある。組成物は、直腸の単一の用量又は多重の用量の容器、例えば直腸の浣腸のユニット、において与えられることがある。
【００９５】
創傷を処置するための局所的な又は局在の外科的な用途についての調製は、創傷の保護に適切な包帯剤を含む。局所的な又は局在の用途の両方において、式Ｉの化合物の無菌の調製は、好ましくは、包帯剤に適用された約０．１重量％から５．０重量％までの濃度で利用されたものである。
【００９６】
吸入による投与に適切な組成物は、調合物を含むが、それにおいて、活性な処方成分が、約５ミクロン又はそれより少ないものから約５００ミクロン又は適切な希釈剤における液体の調合物の範囲における粒子の大きさを有する微粉化された粉末に混ぜられた固体又は液体である。これらの調合物は、吸入器、計量吸入器、噴霧器、及び同様のもののような従来の送出システムからの経口的な通路を通じた急速な吸入に設計される。適切な液体の経鼻の組成物は、活性な処方成分の水性の溶液の、従来の経鼻の噴霧、経鼻の滴、及び同様のものを含む。
【００９７】
上述した処方成分に加えて、この発明の調合物は、薬学的な調合物の技術において利用された一つの又はより多くの自由選択の補助的な処方成分、例．希釈剤、緩衝剤、調味料、着色剤、結合剤、界面活性剤、増粘剤、潤滑剤、懸濁化剤、（酸化防止剤を含む）防腐剤、及び同様のものをさらに含むことがある。
【００９８】
いずれの示された条件にも有効なものであることが要求された式Ｉの化合物の量は、もちろん、処置される個々の哺乳動物と共に変動することになると共に、究極的には医学の又は獣医学の実務家の裁量にある。考慮される因子は、処置される条件、投与のルート、調合物の性質、哺乳動物の体重、表面積、年齢、及び一般的な条件、並びに、投与される特定の化合物を含む。一般的には、適切な有効な用量は、式Ｉの塩でない形態として計算された、一日当たり約０．０５ｍｇ／体重ｋｇから約２００ｍｇ／体重ｋｇまでの範囲にある。合計の日々の用量は、単一の用量、多重の用量、例．一日当たり二から六回までとして、又は、選択された持続時間の間の静脈内の点滴によって、与えられることがある。上で引用された範囲よりも上の又はそれよりも下の薬用量は、本発明の範囲内にあると共に、望まれると共に必要なものであるとすれば、個々の患者へ投与されることがある。
【００９９】
一般的には、この発明の薬学的な組成物は、単位用量当たり約０．５ｍｇから約１．５ｇまで、及び好ましくは、単位用量当たり約７．５ｍｇから約１０００ｍｇまで、の活性な処方成分を含有する。不連続な多重の用量が、示されるとすれば、処置は、典型的には、一日当たり二から四回まで与えられた式Ｉの化合物の１００ｍｇであるかもしれない。
【０１００】
本発明に従った化合物は、予防的に、慢性的に、又は、急性的に投与されることがある。例えば、このような化合物は、処置される主体における癌の形成を阻害するために、予防的に投与されることがある。主題の化合物は、また、転移性の癌の発生を予防するために一次性の癌を患う患者へ予防的に投与されることがある。一次性の及び転移性の癌の予防に加えて、主題の化合物の慢性的な投与は、典型的には、再発する癌を処置する際に示されることになる。主題の化合物の急性の投与は、例えば、外科的な又は放射線医学的な介入に先立ち、攻撃的な癌を処置することが、示される。
【０１０１】
例
後に続く例は、ここに開示された且つ請求された本発明のより完全な記載を単に提供するために、含まれる。例は、いずれの様式でも本発明の範囲を限定するものではない。
【０１０２】
合成：
一般的な方法：無水のＴＨＦ及びＣＨ２Ｃｌ２は、それぞれ、ナトリウム＝ベンゾフェノン＝ケチル及びカルシウム＝ヒドリドからの蒸留を使用することで、得られた。Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩ）は、出発材料及び試薬を供給した。Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｉｓｏｔｏｐｅｓ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）は、同位体で標識付けされた試薬を供給した。レチノイドを含有する化合物の全ての反応及び取り扱いは、金の蛍光性の光の下でされた。薄層クロマトグラフィーは、Ｍｅｒｃｋ（Ｇｉｂｂｓｔｏｗｎ，ＮＪ）のシリカゲル  ６０  Ｆ２５４  アルミニウムプレートで行われた。カラムクロマトグラフィーは、Ｍｅｒｃｋ  シリカゲル  ６０で、及び、逆相フラッシュクロマトグラフィーは、Ｍｅｒｃｋ  Ｌｉｃｈｒｏｐｒｅｐ（Ｒ）  ＲＰ−１８で、行われた。分析のＨＰＬＣが、Ｍｅｔａｃｈｅｍ  Ｐｏｌａｒｉｓ（Ｖａｒｉａｎ），５μｍ  Ｃ−１８，２５０×４．６ｍｍのカラムが備え付けられた、ポンプ構成部品１２７及び検出器モジュール１６６と共に、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ（Ｓａｎ  Ｒａｍｏｎ，ＣＡ）でされた。全てのレチノイド類は、３５０ｎｍの波長で検出された。融点は、Ｔｈｏｍａｓ−Ｈｏｏｖｅｒ（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＰＡ）のキャピラリー装置を使用することで、決定されたと共に、補正されないものである。光学的な回転は、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ（Ｗｅｌｌｅｓｌｅｙ，ＭＡ）２４１旋光計で行われ且つｍｏｌ・ｄｍ−１グラム−１で報告された。紫外スペクトルは、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  ＤＵ−４０分光光度計に記録された。赤外スペクトルは、Ｎｉｃｏｌｅｔ（Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）Ｐｒｏｔｅｇｅ  ４６０分光光度計を使用することで、塩化銀のプレート上のフィルムとして記録された。ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ（Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）ＤＲＸ４００分光器に記録された。質量スペクトルは、Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ（Ｍｉｆｏｒｄ，ＭＡ）ＱＴＯＦエレクトロスプレー質量分析計に記録された。
【０１０３】
２，３，４，６−テトラ−Ｏ−（メトキシメチル）−Ｄ−グルコン酸−δ−ラクトン（９）。炎で乾燥させられたフラスコへ、アルゴン雰囲気下で、添加されたものは、δ−グルコノラクトン（８）（７．３８ｇ，４１．４ｍｍｏｌ）及びＣＨ２Ｃｌ２（４００ｍＬ）であった。氷浴で懸濁液を冷却する際に、ジイソプロピルエチルアミン（５７．６ｍＬ，３３１ｍｍｏｌ）が、滴の様式で添加され、付加的なロートを介してクロロメチル＝メチル＝エーテル（５０ｇ，６２１ｍｍｏｌ）の注意深い添加が後に続けられた。顕著な量の白色の煙が、反応ベッセルにおいて形成した。固体のテトラブチルアンモニウム＝ヨージド（５０ｇ，１３４ｍｍｏｌ）が、添加され且つ溶液は、室温（以後“ｒｔ”）まで暖まることが許容された。反応は、４８時間の間、暗闇の中で攪拌したが、それで溶液は、徐々に赤色に変色した。ベッセルを０℃まで冷却した後、飽和の水性のＮＨ４Ｃｌ（７５ｍＬ）が、添加された。次に、内容物は、水で希釈され、且つ層が、分離された。有機層は、塩水で洗浄され且つ組み合わせられた水性の層は、（３×）ＣＨ２Ｃｌ２で抽出された。組み合わせられた有機層は、乾燥させられ（ＭｇＳＯ４）、濾過され、且つ濃縮された。次に、固体は、（４×）エーテルで粉砕され且つエーテルは、濃縮された。結果として生じる油は、シリカゲル（１：１のヘキサン／エチル＝アセタート）でクロマトグラフ分析され、１２．０４ｇ（８３％）の澄んだ油を生じた。［α］Ｄ  １１８．４（ｃ２．１５，ＣＨ２Ｃｌ２）；ＩＲ（ｃｍ−１）  ２９４８（ｓ），２８８５（ｓ），１７５７（ｓ），１４６４（ｍ），１４４３（ｍ），１２１３（ｓ），１１５０（ｓ），１０３５（ｓ），９１２（ｍ）；１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ３．３６−３．４２（ｍ，１２Ｈ），３．７７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．８，１１．３Ｈｚ），３．８２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．８，１１．３Ｈｚ），３．９９−４．０５（ｍ，２Ｈ），４．２９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），４．５５−４．５６（ｍ，１Ｈ），４．６５（ｓ，２Ｈ），４．６９−４．９２（ｍ，７Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ５５．４２，５６．０５，５６．１１，５６．２２，６６．１２，７３．６９，７４．７７，７８．４３，９６．５６，９６．６６，９６．７８，９６．９１，９７．１３，１６８．７０；ＨＲＭＳ（ＥＳ）  Ｃ１４Ｈ２６Ｏ１０（Ｍ＋Ｎａ）についての計算値  ３７７．１４２４，実測値  ３７７．１４０８。
【０１０４】
ジメチルチタノセン，Ｃｐ２Ｔｉ（ＣＨ３）２（Ｐｅｔａｓｉｓの試薬）。炎で乾燥させられたフラスコへ、アルゴン雰囲気下で、添加されたものは、チタノセン＝クロリド（１４．６３ｇ，５８，８ｍｍｏｌ）及び純エーテル（３００ｍＬ）であったが、それは、１０℃まで冷却された。メチルリチウム（１００ｍＬ，１４０ｍｍｏｌ，１．４Ｍ）は、暗闇の中で付加的なロートを介して滴の様式で注意深く添加された。冷浴が、取り除かれ、且つ、赤色の溶液が、１０分間攪拌することが許容された。次に、溶液は、０℃まで冷却され、且つ、氷水（２５ｍＬ）が、未反応のメチルリチウムを急冷するために注意深く添加された。層は、分離され、且つ、水性の層は、（２×）エーテルで抽出された。組み合わせられた有機層は、１時間の間、アルゴン下で乾燥させられ（Ｎａ２ＳＯ４）、且つ、２０℃におおける暗闇の中で濃縮され、１２．４ｇの橙色の固体を与えた。乾燥のトルエン（１００ｍＬ）が、添加され、且つ、試薬が、４℃で貯蔵され、且つ、特性決定無しに使用された。
【０１０５】
２，６−アンヒドロ−１−デオキシ−３，４，５，７−テトラ−Ｏ−（メトキシメチル）−Ｄ−グルコヘプタ−１−エニトール（１０）。炎で乾燥させられたフラスコへ、アルゴン雰囲気下で、添加されたものは、付加的なロートを介して乾燥したトルエン（１４０ｍＬ）に溶解させられた糖質のラクトン９（１０．０５ｇ、２８．４ｍｍｏｌ）であった。次に、ジメチルチタノセン（１２．４ｇ，５９ｍｍｏｌ）のトルエン溶液が、付加的なロートを介して滴の様式で添加され、赤色の溶液を与えた。次に、フラスコには、還流凝縮器が備え付けられ、且つ、７０℃まで加熱され、且つ、１８時間の間、暗闇の中で攪拌させた。結果として生じる黒色の溶液は、冷却され且つヘキサン（〜５００ｍＬ）へ注がれた。沈殿が、形成され且つセライトを通じて濾過された。上澄みは、濃縮され、赤色の油を生じたが、それは、シリカゲル（４：１次に２：１のヘキサン／エチル＝アセタート）上でクロマトグラフ分析され、８．６６ｇ（８７％）の黄色がかった油を生じた。［α］Ｄ  ４６．８（ｃ２．３３，ＣＨ２Ｃｌ２）；ＩＲ（ｃｍ−１）  ２９４０（ｍ），２８９５（ｍ），１７５０（ｗ），１４４０（ｗ），１１５４（ｓ），１０３２（ｓ），９１８（ｍ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＫ−ｄ６）  δ３．３１−３．３７（ｍ，１２Ｈ），３．６４−３．７１（ｍ，２Ｈ），３．７８−３．８３（ｍ，２Ｈ），３．８８−３．８９（ｍ，１Ｈ），４．１２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），４．３５（ｓ，１Ｈ），４．５１（ｓ，１Ｈ），４．６２（ｓ，２Ｈ），４．６６−４．８４（ｍ，６Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＫ−ｄ６）  δ５５．１５，５５．８７，５６．０４，５６．１９，６７．５０，７５．４２，７６．６８，７７．３６，８１．０８；９３．４３，９５．３５，９７．２３，９７．６４，９７．８１，１５６．３９；ＨＲＭＳ（ＥＳ）  Ｃ１５Ｈ２８Ｏ９（Ｍ＋Ｎａ）についての計算値  ３７５．１６３１，実測値  ３７５．１６２８。
【０１０６】
２，６−アンヒドロ−１−デオキシ−１−［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］−３，４，５，７−テトラ−Ｏ−（メトキシメチル）−Ｄ−グリセロ−Ｄ−グルオ−ヘプチトール（１１）。炎で乾燥させられたフラスコへ、アルゴン雰囲気下で、添加されたものは、乾燥したＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解させられた環外のオレフィン１０（３．７５ｇ，１０．６ｍｍｏｌ）であった。９−ＢＢＮ−Ｈ（５３．２ｍＬ，２６．６ｍｍｏｌ，０．５Ｍ）が、付加的なロートを介して添加された。次に、フラスコは、還流凝縮器が備え付けられ、７５−８０℃まで加熱され、且つ、４．５時間の間還流させられた。混合物は、ｒｔまで冷却され、次に、Ｋ３ＰＯ４（１０ｍＬ，３Ｍ）が、添加され、且つ、１０分の間に攪拌することが許容された。ＤＭＦ（１００ｍＬ）に溶解させられたｐ−ブロモベンジルアルコール（３．９８ｇ，２１．３ｍｍｏｌ）及びＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）（０．６８６ｇ，０．８５ｍｍｏｌ）が、付加的なロートを介して添加され且つ１８時間の間攪拌された。反応は、水及びエーテルで希釈され、且つ、次に層が、分離された。有機層は、水及び塩水で洗浄された。組み合わせられた水性の層は、（３×）エーテルで抽出された。有機層は、組み合わせられ、乾燥させられ（ＭｇＳＯ４）、濃縮され、且つ（１：１次に１：２のヘキサン／エチル＝アセタート）クロマトグラフ分析され、３．２９ｇ（６７％）の橙色の油を生じた。［α］Ｄ  −２６．２（ｃ１．１５，ＤＭＫ）；ＩＲ（ｃｍ−１）  ３４７０（ｗ），２９３２（ｍ），２８８７（ｍ），１６９２（ｍ），１４４４（ｗ），１１５０（ｓ），１１０１（ｓ），１０２４（ｓ），９１８（ｍ）；１Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＫ−ｄ６）  δ２．６０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．４，１４．４Ｈｚ），３．１８−３．４２（ｍ，５Ｈ），３．２５（ｓ，３Ｈ），３．３５（ｓ，３Ｈ），３．４０（ｓ，３Ｈ），３．４４（ｓ，３Ｈ），３．５４−３．６１（ｍ，２Ｈ），３．７３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８，１１．３Ｈｚ），４．５１−４．５８（ｍ，４Ｈ），４．７０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），４．７７−４．８５（ｍ，４Ｈ），４．９３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），７．２５（ｓ，４Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＫ−ｄ６）  δ３８．３５，５５．０４，５６．４５，５６．５５，６４．４４，６４．５７，６７．４２，７７．９７，７９．０７，８０．３２，８１．６３，８４．８３，９７．２０，９９．０１，９９．１９，９９．３２，１２７．１５，１３０．１１，１３８．７５，１４１．０３；ＨＲＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２２Ｈ３６Ｏ１０（Ｍ＋Ｎａ）についての計算値  ４８３．２２０６，実測値  ４８３．２１８８。
【０１０７】
２，６−アンヒドロ−１−デオキシ−１−［４−（メトキシメチル）フェニル］−３，４，５，７−テトラ−Ｏ−（メトキシメチル）−Ｄ−グリセロ−Ｄ−グルオ−ヘプチトール（１２）。炎で乾燥させられたフラスコへ、アルゴン雰囲気下で、添加されたものは、乾燥したＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解させられたＣ−グリコシドベンジルアルコール１１（２．４４ｇ，５．３ｍｍｏｌ）であった。水素化ナトリウム（０．６３ｇ，２６．５ｍｍｏｌ）が、フラスコへ添加され且つ懸濁液が、１．５時間の間攪拌された。ＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させられたヨードメタン（４．５ｇ，３１．７ｍｍｏｌ）は、反応混合物へカニューレ挿入され且つ１８時間の間攪拌することが許容された。氷浴で冷却した後に、水が、過剰のＮａＨを急冷するために、注意深く添加された。混合物は、（３×）エーテルで抽出され、有機層が、組み合わせられ、塩水で洗浄され、乾燥させられ（ＭｇＳＯ４）、濃縮され、且つ次に、クロマトグラフ分析され（１：１次に１：２のヘキサン／エチル＝アセタート）、２．３７ｇ（９４％）の澄んだ油を与えた。［α］Ｄ  −２７．０（ｃ４．７０，ＤＭＫ）；ＩＲ（ｃｍ−１）  ２９８１（ｓ），２８８３（ｓ），１７０１（ｗ），１５１３（ｍ），１４４４（ｍ），１３７８（ｍ），１３０１（ｍ），１１５８（ｓ），１１０５（ｓ），１０２８（ｓ），９１８（ｓ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＫ−ｄ６）  δ２．６１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．４，１４．４Ｈｚ），３．１９−３．４２（ｍ，５Ｈ），３．２４（ｓ，３Ｈ），３．３０（ｓ，３Ｈ），３．３５（ｓ，３Ｈ），３．４０（ｓ，３Ｈ），３．４４（ｓ，３Ｈ），３．５４−３．６４（ｍ，２Ｈ），３．７３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．６，１３．５Ｈｚ），４．３８（ｓ，２Ｈ），４．５０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），４．５４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），４．７０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），４．７７−４．８５（ｍ，４Ｈ），４．９３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），７．２１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．２８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＫ−ｄ６）  δ３３．３９，５５．０５，５６．４７，５６．４９，５６．５７，５７．９７，６７．４６，７４．８４，７８．００，７９．１０，８０．２３，８１．６６，８４．８６，９７．２０，９９．０１，９９．２１，９９．３２，１２８．１５，１３０．１９，１３７．２３，１３９．４５；ＨＲＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２３Ｈ３８Ｏ１０（Ｍ＋Ｎａ）についての計算値  ４９７．２３６３，実測値４９７．２３８４。
【０１０８】
２，６−アンヒドロ−７−デオキシ−７−［４−（メトキシメチル）フェニル］−３，４，５−トリ−Ｏ−アセチル−Ｌ−グリセロ−Ｌ−グルオ−ヘプチン酸のメチルエステル（１３）。メタノール（５００ｍＬ）に溶解させられたＭＯＭで保護されたグルコシド１２（２．４３ｇ，５．１２ｍｍｏｌ）が、ｒｔにおけるフラスコの中に置かれた。水性のＨＣｌ（６Ｎ，２６ｍＬ）が、添加され且つ溶液は、１８時間の間攪拌され、それの後で、混合物は、次に、乾燥状態まで濃縮され且つ取っておいた。別個のフラスコに、ＫＢｒ（２．４２ｇ，２０．３８ｍｍｏｌ）及びＴＥＭＰＯ（３．１９ｇ，２０．４１ｍｍｏｌ）が、飽和のＮａＨＣＯ３の溶液（４００ｍＬ）へ添加され且つ０℃で２０分の間攪拌された。水性のＮａＯＣｌ（１１．２ｍＬ，１．６−２．０Ｍ）が、次に、添加され且つ１０分の間攪拌された。脱保護された糖質は、飽和のＮａＨＣＯ３の溶液（１００ｍＬ）に溶解させられ且つＴＥＭＰＯの混合物と共にフラスコへ添加された。合計の混合物は、０℃で４５分の間攪拌された。次に、反応は、ＥｔＯＨ（５０ｍＬ）で失活され且つ内容物は、分液ロートにおいてエーテルで洗浄された。水性の層は、乾燥状態まで濃縮され、且つ、残留する固体は、メタノールで徹底的に粉砕された。メタノールは、次に濃縮され且つ乾燥させられた。乾燥させられた残留物は、ＤＭＦ（１８０ｍＬ）中に懸濁させられ、且つ次に、ＤＭＦ（１０ｍＬ）中に溶解させられたヨードメタン（６．４ｇ）が、添加され且つｒｔにおけるアルゴン下で２０時間の間攪拌することが許容された。反応混合物には、次に、無水酢酸（４０ｍＬ）、ピリジン（２０ｍＬ）、及びＤＭＡＰ（１５ｍｇ）が補充され且つ１８時間の間攪拌することが許容された。反応混合物は、水で希釈され且つエチル＝アセタートで（３×）抽出された。有機層は、水、塩水で洗浄され、乾燥させられ（ＭｇＳＯ４）、濃縮され、且つクロマトグラフ分析され（２：１次に１：１のヘキサン／エチル＝アセタート）、１．９０ｇ（８２％）の澄んだ油を与えたが、それは、静止した状態で固化した，ｍｐ８４−８６℃。［α］Ｄ  −１３．０４（ｃ１．１５，ＤＭＫ）；ＩＲ（ｃｍ−１）  ２９５６（ｗ），２８１８（ｗ），１７５０（ｓ），１４４０（ｍ），１３７０（ｍ），１２１１（ｓ），１１０５（ｍ），１０２８（ｍ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＫ−ｄ６）  δ１．９４（ｓ，３Ｈ），１．９４（ｓ，３Ｈ），１．９５（ｓ，３Ｈ），２．７４−２．８１（ｍ，１Ｈ），２．９０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．４，７．３Ｈｚ），３．３０（ｓ，３Ｈ），３．６５（ｓ，３Ｈ），３．９４−３．９９（ｍ，１Ｈ），４．１８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．８Ｈｚ），４．３８（Ｓ，２Ｈ），４．９０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．８Ｈｚ），５．０５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．８Ｈｚ），５．２９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．８Ｈｚ），７．２２（ｓ，４Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＫ−ｄ６）  δ２０．３９，２０．５２，２０．６０，３８．１２，５２．６７，５８．０３，７０．６２，７２．５３，７４．０９，７４．７３，７６．４１，７８．６２，１２８．２５，１３０．１６，１３７．４３，１３７．７６，１６８．４０，１６９．８９，１７０．０７，１７０．３０；ＨＲＭＳ���ＥＳ）  Ｃ２２Ｈ２８Ｏ１０（Ｍ＋Ｎａ）についての計算値  ４７５．１５８０，実測値  ４７５．１５７７。
【０１０９】
２，６−アンヒドロ−７−デオキシ−７−［４−（ブロモメチル）フェニル］−３，４，５−トリ−Ｏ−アセチル−Ｌ−グリセロ−Ｌ−グルオ−ヘプチン酸のメチルエステル（１４）。ＣａＳＯ４の乾燥用のチューブが備え付けられた乾燥したフラスコへ、添加されたのは、０℃での酢酸（５ｍＬ，２５ｍｍｏｌ）における３０％ＨＢｒと一緒のＣ−グルクロニドのメチルエーテル１３（４６２ｍｇ，１．０２ｍｍｏｌ）であった。混合物は、３０分の間、及び次に、室温で１８時間の間攪拌された。混合物は、塩化メチレンで希釈され、且つ次に、水及び飽和のＮａＨＣＯ３の溶液で注意深く洗浄された。有機層は、乾燥させられ（ＭｇＳＯ４）、濃縮され、且つクロマトグラフ分析され（２：１次に１：１のヘキサン／エチル＝アセタート）、４４０ｍｇ（８６％）の白色の泡を与えたが、それは、エーテルで結晶化された、ｍｐ１１６−１１７℃。［α］Ｄ  −１２．０３（ｃ５．５７，ＤＭＫ）；ＩＲ（ｃｍ−１）  ３０２６（ｗ），２９５２（ｗ），１７５４（ｓ），１４４０（ｍ），１３７０（ｍ），１２１５（ｓ），１１０１（ｍ），１０３６（ｍ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＫ−ｄ６）  δ１．９３（ｓ，３Ｈ），１．９４（ｓ，３Ｈ），１．９５（ｓ，３Ｈ），２．７６−２．８３（ｍ，１Ｈ），２．９２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５，７．３Ｈｚ），３．６４（ｓ，３Ｈ），３．９６−３．９９（ｍ，１Ｈ），４．２０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．７Ｈｚ），４．６２（ｓ，２Ｈ），４．９０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．７Ｈｚ），５．０５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．７Ｈｚ），５．２９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．７Ｈｚ），７．２５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．３６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＫ−ｄ６）  δ２０．４０，２０．５２，２０．６３，３４．３７，３８．１２，５２．６９，７０．５８，７２．５２，７４．０４，７６．３５，７８．４３，１２９．８８，１３０．６８，１３７．２６，１３８．６７，１６８．３９，１６９．９１，１７０．０９，１７０．２９；ＨＲＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２１Ｈ２５ＢｒＯ９（Ｍ＋Ｎａ）についての計算値  ５２３．０５８０，実測値  ５２３．０６０２。
【０１１０】
レチナールのｔｅｒｔ−ブチル−ジメチルシリルシアノヒドリン（１６）。炎で乾燥させられたフラスコへ、アルゴン雰囲気下で、添加されたものは、乾燥したＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）に溶解させられたレチナール（１５）（１．０３ｇ，３．６２ｍｍｏｌ）であった。触媒作用の量のＥｔ３Ｎ（０．１ｍＬ）は、添加され、次に、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）に溶解させられたｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルシアニド（１．０ｇ，７．０８ｍｍｏｌ）が、カニューレ挿入によって添加された。反応は、２０時間の間攪拌され、それの後に、溶液が、濃縮され、クロマトグラフ分析され（９５：５のヘキサン／エチル＝アセタート）、アルゴン下で乾燥され（Ｎａ２ＳＯ４）、且つ、一晩中真空にかけられ、１．２０ｇ（７８％）の橙色の油を与えた。ＵＶのλｍａｘ＝３２９ｎｍ（ε＝４９４６２）；ＩＲ（ｃｍ−１）  ３０４２（ｗ），２９６０（ｓ），２９２８（ｓ），２８５０（ｓ），２２３９（ｗ），１５８６（ｗ），１４７２（ｍ），１３５８（ｍ），１２５６（ｍ），１１０５（ｓ），９６３（ｓ），８３２（ｓ），７７５（ｍ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＫ−ｄ６）  δ０．１６（ｓ，３Ｈ），０．２０（ｓ，３Ｈ），０．９０（ｓ，９Ｈ），１．０２（ｓ，６Ｈ），１．４５−１．４８（ｍ，２Ｈ），１．５８−１．６３（ｍ，２Ｈ），１．７０（ｓ，３Ｈ），１．９９（ｓ，６Ｈ），５．５７−５．６１（ｍ，２Ｈ），６．１３−６．２３（ｍ，３Ｈ），６．３８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ），６．８６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．３，１５．２Ｈｚ）；ＨＲＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２７Ｈ４３ＮＯＳｉ（Ｍ＋Ｎａ）についての計算値  ４４８．３０１２，実測値  ４４８．２９８２。
【０１１１】
２，６−アンヒドロ−７−デオキシ−７−［４−（レチノールメチル）−フェニル］−３，４，５−トリ−Ｏ−アセチル−Ｌ−グリセロ−Ｌ−グルオ−ヘプチン酸のメチルエステル（１８）。炎で乾燥させられたフラスコへ、アルゴン雰囲気下で、添加されたものは、ＬｉＨＭＤＳ（ヘキサン中で１．０Ｍ，３．８ｍＬ，３．８ｍｍｏｌ）と一緒のＴＨＦ（４０ｍＬ）であった。混合物は、−７８℃まで冷却されたが、それにおいては、ＴＨＦ（１５ｍＬ）におけるレチナール１６（１．０８ｇ，２．５４ｍｍｏｌ）のシリルシアノヒドリンが、フラスコへのカニューレ挿入によって添加された。暗赤色の溶液は、−７８℃で３０分の間攪拌することが許容された。ＴＨＦ（１５ｍＬ）における結晶質のブロモグルクロニド１４（２．７８ｇ，５．５６ｍｍｏｌ）が、フラスコの中へとカニューレ挿入され、且つ、混合物は、−７８℃で３時間の間攪拌され、それの後で、溶液は、淡い赤色へと変化した。反応は、冷浴から取り出され、且つ、１ＭのＮＨ４Ｃｌ（１０ｍＬ）の溶液で失活させられた。混合物は、（３×）エチル＝アセタートで抽出され、且つ、有機層は、組み合わせられ、塩水で洗浄され、乾燥させられ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過され、濃縮され、且つ、クロマトグラフ分析され（２：１のヘキサン／エチル＝アセタート）、１．０ｇ（４７％）の黄色の泡１７及び１．７ｇの回収された臭化物１４を与えた。アルキル化された生産物は、１％の水性のＴＨＦ（２００ｍＬ）に取り上げられ、且つ、０℃まで冷やされた。ＴＢＡＦ（３０９ｍｇ，１．１８ｍｍｏｌ）が、添加され且つ薄黒くなった溶液が、１時間の間攪拌された。反応は、水で希釈され且つ（３×）エチル＝アセタートで抽出された。有機層は、組み合わせられ、塩水で洗浄され、乾燥させられ（ＮａＳＯ４）、濾過され、濃縮され、及びクロマトグラフ分析され（２：１のヘキサン／エチル＝アセタート）、６２８ｍｇ（二つのステップにわたって３５％）の黄色の泡を与えた。ＵＶ  λｍａｘ＝３７９ｎｍ（ε＝３６１８２）；ＨＰＬＣ  ｔＲ＝２４．０分，１ｍＬ／分（８５：１５  ＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ，両方とも１０ｍＭのＮＨ４ＯＡｃを伴ったもの）；ＩＲ（ｃｍ−１）  ２９５６（ｗ），２９２４（ｗ），２８６３（ｗ），１７５４（ｓ），１６７２（ｗ），１５５４（ｍ），１４３６（ｗ），１３６２（ｗ），１２１５（ｓ），１０８１（ｗ），１０２８（ｗ），９７１（ｗ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＫ−ｄ６）  δ１．０２（ｓ，６Ｈ），１．４５−１．４８（ｍ，２Ｈ），１．５８−１．６２（ｍ，２Ｈ），１．６９（ｓ，３Ｈ），１．９０（ｓ，３Ｈ），１．９３（ｓ，３Ｈ），１．９５（ｓ，３Ｈ），２．０１（ｓ，３Ｈ），２．０３−２．０５（ｍ，２Ｈ），２．２８，（ｓ，３Ｈ），２．７５−２．８９（ｍ，２Ｈ），３．６４（ｓ，３Ｈ），３．７１（ｓ，２Ｈ），３．９５−３．９８（ｍ，１Ｈ），４．１９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．８Ｈｚ），４．９０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．８Ｈｚ），５．０５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．８Ｈｚ），５．２９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．８Ｈｚ），６．１５−６．３５（ｍ，５Ｈ），７．１３−７．２０（ｍ，５Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＫ−ｄ６）  δ１３．４５，１４．６８，２０．４１，２０．９６，２��．０８，２１．１５，２２．４７，３４．１５，３５．４１，３８．７６，４０．８６，５２．２５，５３．２３，７１．１８，７３．０９，７４．６３，７６．９３，７９．１３，１２６．８９，１２９．８６，１３０．７３，１３０．９３，１３１．０１，１３１．４７，１３３．６９，１３４．８９，１３５．１１，１３７．１４，１３７．２６，１３８．９５，１３９．０９，１４０．９６，１５２．６８，１６８．９７，１７０．４５，１７０．６４，１７０．８４，１９８．７８；ＨＲＭＳ（ＥＳ）  Ｃ４１Ｈ５２Ｏ１０（Ｍ＋Ｎａ）についての計算値  ７２７．３４５８，実測値  ７２７．３４５６。
【０１１２】
２，６−アンヒドロ−７−デオキシ−７−［４−（レチノールメチル）−フェニル］−Ｌ−グリセロ−Ｌ−グルオ−ヘプチン酸（７）。フラスコへ添加されたものは、メタノール（５００ｍＬ）に溶解させられた且つ４℃まで冷やされた保護されたグルクロニド−レチノイド共役体１８（１．１５ｇ，１．６４ｍｍｏｌ）であった。炭酸カリウム（１３６ｍｇ，０．９８ｍｍｏｌ）が、添加され且つ２０時間の間攪拌することが許容された。反応混合物は、〜２００ｍＬまで２５−３０℃で濃縮された。メタノールでの元来の体積の調節は、１ＮのＫＯＨ（１４ｍｌ，１４ｍｍｏｌ）の添加が後に続けられた。４℃で２０時間の間攪拌した後に、反応は、暖められ且つｒｔで５時間の間攪拌することが許容された。反応は、次に、０℃まで冷却され且つ４ＮのＨＣｌでｐＨ７まで注意深く調節された。反応混合物は、〜１００ｍＬまで２５−３０℃で濃縮され、０℃まで逆に冷却され、且つ、ｐＨは、１ＮのＨＣｌで３まで注意深く調節された。懸濁液は、エチル＝アセタートで抽出され、且つ、有機層は、組み合わせられ、２時間の間アルゴン下で乾燥させられ（Ｎａ２ＳＯ４）、且つ注意深く濃縮された。残留物は、逆相のシリカゲル（勾配７０：３０から８５：１５までのメタノール／水）上でクロマトグラフ分析され、７５９ｍｇ（８２％）の黄色の泡を生じたが、それは、必要とされるまで−８０℃で貯蔵された。ＵＶ  λｍａｘ＝３８２ｎｍ（ε＝３００１９）；ＨＰＬＣ  ｔＲ＝９．２分（１ｍＬ／分，８５：１５のＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ，両方とも１０ｍＭのＮＨ４ＯＡｃを備えたもの）；ＩＲ（ｃｍ−１）  ３３８４（ｂｒ），２９２０（ｓ），１７２１（ｍ），１６６４（ｓ），１５５０（ｓ），１４２７（ｍ），１３６２（ｍ），１２３２（ｗ），１０８９（ｍ），１０５２（ｍ），１１０２（ｓ），９６７（ｗ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＭｅＯＨ−（ｄ４）  δ０．９４（ｓ，６Ｈ），１．３８−１．４１（ｍ，２Ｈ），１．５４−１．５８（ｍ，２Ｈ），１．６１（ｓ，３Ｈ），１．９１（ｓ，３Ｈ），１．９３−１．９６（ｍ，２Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ），２．６０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７，１４．４Ｈｚ），３．０３−３．０８（ｍ，２Ｈ），３．２１−３．２９（ｍ，２Ｈ），３．３７（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．５Ｈｚ），３．５３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．５Ｈｚ），３．６２（ｓ，２Ｈ），６．０３−６．２５（ｍ，５Ｈ），７．０２−７．１６（ｍ，５Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＭｅＯＨ−ｄ４）  δ１２．８８，１４．４５，２０．２９，２１．０４，２１．９３，２９．４０，３４．００，３５．２５，３８．３４，４０．７６，５２．１１，７３．４４，７４．６３，７９．２８，８０．３６，８２．３６，１２４．３７，１２６．２６，１２９．９２，１３０．１９，１３０．８６，１３１．０１，１３１．１２，１３４．００，１３４．２３，１３６．８２，１３８．７０，１３８．９１，１３９．０４，１４１．１２，１５４．２２，１７３．２６，２０１．２１；ＨＲＭＳ（ＥＳ）Ｃ３４Ｈ４４Ｏ７（Ｍ＋Ｎａ）について計算値  ５８７．２９８５，実測値  ５８７．２９８９。
【０１１３】
【化１０】
2008542202.tif 000016
２，６−アンヒドロ−１−デオキシ−１−［４（メトキシメチル）フェニル］−３，４，５，７−テトラ−Ｏ−アセチル−Ｄ−グリセロ−Ｄ−グルオ−ヘプチトール（２０）。メタノール（３４ｍＬ）に溶解させられたＭＯＭで保護されたグルコシド１２（０．６４３ｇ，１．３５ｍｍｏｌ）が、ｒｔにおけるフラスコに置かれた。水性のＨＣｌ（６Ｎ，６．７ｍＬ）が、添加され且つ溶液は、１８時間の間攪拌された。混合物は、次に、乾燥状態まで濃縮された。無水酢酸（４ｍＬ）及びピリジン（３ｍＬ）は、触媒作用の量のＤＭＡＰと一緒に、ペーストへ添加され、且つ、混合物は、ｒｔにおいて１８時間の間攪拌することが許容された。反応は、水で希釈され且つ（３×）エチル＝アセタートで抽出された。有機層は、組み合わせられ、水及び塩水で洗浄され、乾燥させられ（ＭｇＳＯ４）、濾過され、濃縮され、且つクロマトグラフ分析され（１：１のヘキサン／エチル＝アセタート）、５７０ｍｇ（９０％）の白色の固体を与えた，ｍｐ１２０−１２２℃。［α］Ｄ  −４．０（ｃ０．７８，ＤＭＫ）；ＩＲ（ｃｍ−１）  ２９４０（ｗ），２８６２（ｗ），１７５０（ｓ），１４３６（ｗ），１３７０（ｍ），１２２４（ｓ），１１０５（ｍ），１０３２（ｍ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ１．９６−２．０２（ｍ，１２Ｈ），２．７８（ｓ，２Ｈ，Ｊ＝５．８Ｈｚ），３．３６（ｓ，３Ｈ），３．５２−３．５７（ｍ，２Ｈ），４．０２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３，１２．２Ｈｚ），４．２０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．３，１２．２Ｈｚ），４．４０（ｓ，２Ｈ），４，９２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．６Ｈｚ），５．０３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．６Ｈｚ），５．１５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．６Ｈｚ），７．１６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．２３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＫ−ｄ６）  δ２０．５５，２０．５７，２０．６５，３８．０８，５８．０２，６３．０５，６９．７０，７２．８１，７４．７６，７４．８６，７６．０５，７８．６０，１２８．２０，１３０．２１，１３７．６５，１３７．７５，１７０．０４，１７０．１６，１７０．３７，１７０．５９；ＨＲＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２３Ｈ３０Ｏ１０（Ｍ＋Ｎａ）についての計算値  ４８９．１７３７，実測値  ４８９．１７２７。
【０１１４】
【化１１】
2008542202.tif 000017
２，６−アンヒドロ−１−デオキシ−１−［４−（ブロモメチル）フェニル］−３，４，５，７−テトラ−Ｏ−アセチル−Ｄ−グリセロ−Ｄ−グルオ−ヘプチトール（２１）。乾燥用のチューブが備え付けられた乾燥したフラスコへ、添加されたのは、０℃で酢酸（５ｍＬ，２５ｍｍｏｌ）における３０％のＨＢｒと一緒のＣ−グリコシドのメチルエーテル２０（０．５４ｇ，１．１６ｍｍｏｌ）であった。混合物は、３０分間の間攪拌され、且つ、次に、１８時間の間ｒｔで放置された。混合物は、塩化メチレンで希釈され、且つ、次に、水及び飽和のＮａＨＣＯ３の溶液で注意深く洗浄された。有機層は、乾燥させられ（ＭｇＳＯ４）、濃縮され、且つクロマトグラフ分析され（２：１次に１：１のヘキサン／エチル＝アセタート）、５９３ｍｇ（９７％）の白色の固体を与えた，ｍｐ１４１−１４２℃。［α］Ｄ  −４．６７（ｃ２．５７，ＤＭＫ）；ＩＲ（ｃｍ−１）  ２９９３（ｗ），２９５２（ｗ），１７５４（ｓ），１４４０（ｗ），１３７４（ｍ），１２４４（ｓ），１１０５（ｗ），１０５２（ｍ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＫ−ｄ６）  δ１．９２−１．９８（ｍ，１２Ｈ），２．７２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．３，８．６Ｈｚ），２．８８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．２，７．３Ｈｚ），３．７７−３．８５（ｍ，２Ｈ），４．００（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４，６．１Ｈｚ），４．２１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．９，６．１Ｈｚ），４．６３（ｓ，２Ｈ），４．８６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），４．９７（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．６Ｈｚ），５．２２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．６Ｈｚ），７．２５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；７．３７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＫ−ｄ６）  δ２０．４９，２０．６０，３４．３２，３８．０７，６３．０３，６９．２３，７２．８２，７４．８５，７６．０７，７８．４０，１２９．７２，１３０．６８，１３７．１２，１３８，９２，１６９．９７，１７０．１０，１７０．３０，１７０．５２；ＨＲＭＳ（ＥＳ）  Ｃ２２Ｈ２７ＢｒＯ９（Ｍ＋Ｎａ）についての計算値  ５３７．０７３６，実測値  ５３７．０７２４。
【０１１５】
【化１２】
2008542202.tif 000018
２，６−アンヒドロ−７−デオキシ−７−［４−（レチノイルメチル）−フェニル］−３，４，５，７−テトラ−Ｏ−アセチル−Ｄ−グリセロ−Ｄ−グルオ−ヘプチノール（２２）。炎で乾燥させられたフラスコへ、アルゴン雰囲気下で、添加されたものは、ＬｉＨＭＤＳ（ヘキサンにおいて１．０Ｍ，０．７８ｍＬ，０．７８ｍｍｏｌ）と一緒のＴＨＦ（１０ｍＬ）であった。混合物は、−７８℃まで冷却されたが、それにおいては、ＴＨＦ（５ｍＬ）におけるレチナールのシリルシアノヒドリン１６（２１８ｍｇ，５１ｍｍｏｌ）が、フラスコへのカニューレ挿入によって添加された。暗赤色の溶液は、−７８℃で３０分間の間攪拌することが許容された。ＴＨＦ（５ｍＬ）における結晶質のグルコシドの臭化物２１（２７７ｍｇ，０．５３ｍｍｏｌ）は、フラスコへカニューレ挿入され、且つ、混合物は、−７８℃で２時間の間攪拌されたが、それの後に、溶液は、淡い赤色に変化した。反応は、冷浴から取り出され、且つ、１ＭのＮＨ４Ｃｌ（１ｍＬ）の溶液で失活させられた。混合物は、（３×）エチル＝アセタートで抽出され、且つ、有機層は、組み合わせられ、塩水で洗浄され、乾燥させられ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過され、且つ濃縮された。粗いアルキル化された生産物は、１％の水性のＴＨＦ（２０ｍＬ）において取り上げられ且つ０℃まで冷やされた。ＴＢＡＦ（１３４ｍｇ，０．５１ｍｍｏｌ）が、添加され且つ薄黒くされた溶液が、ｒｔまで暖まる一方で、一晩中攪拌された。反応は、水で希釈され、且つ、（３×）エチル＝アセタートによって抽出された。有機層は、組み合わせられ、塩水で洗浄され、乾燥させられ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過され、濃縮され、且つクロマトグラフ分析（２：１のヘキサン／エチル＝アセタート）され、１３２ｍｇ（二つのステップにわたって３６％）の黄色の泡を与えた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＫ−ｄ６）  δ１．００（ｓ，６Ｈ），１．４３−１．４６（ｍ，２Ｈ），１．５８−１．５９（ｍ，２Ｈ），１．６８（ｓ，３Ｈ），１．９０（ｓ，３Ｈ），１．９２（ｓ，３Ｈ），１．９４（ｓ，３Ｈ），１．９５（ｓ，３Ｈ），２．２６，（ｓ，３Ｈ），２．７０−２．８７（ｍ，２Ｈ），３．３０（ｓ，２Ｈ），３．７４−３．８３（ｍ，２Ｈ），３．９７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），４．１９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．９，１２．０Ｈｚ）４．８５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．６Ｈｚ），４．９５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．６Ｈｚ），５．２０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．６Ｈｚ），６．１５−６．３７（ｍ，５Ｈ），７．１０−７．１７（ｍ，５Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＥＳ）  Ｃ４２Ｈ５４Ｏ１０（Ｍ＋Ｎａ）についての計算値  ７４１．３６１５，実測値  ７４１．３６１７。
【０１１６】
【化１３】
2008542202.tif 000019
２，６−アンヒドロ−７−デオキシ−７−［４−（レチノイルメチル）−フェニル］−Ｄ−グリセロ−Ｄ−グルオ−ヘプチノール（２３）。フラスコへ添加されたものは、メタノール（７５ｍＬ）に溶解された且つ４℃まで冷やされた保護されたグルコシド−レチノイドの共役体２２（１３０ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）であった。炭酸カリウム（２５ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）が、添加され且つ２０時間の間攪拌することが許容された。反応は、次に０℃まで冷却され且つ１ＮのＨＣｌでｐＨ５まで注意深く調節された。溶液は、エチル＝アセタートで抽出され且つ有機層は、組み合わせられ、乾燥させられ（Ｎａ２ＳＯ４）、且つ注意深く濃縮された。残留物は、逆相シリカゲル（勾配７０：３０から８５：１５までのメタノール／水）上でクロマトグラフ分析され、４９ｍｇ（４９％）の黄色の泡を生じた。ＵＶ  λｍａｘ＝３８０ｎｍ（ε＝３４５６７）；ＨＰＬＣ  ｔＲ＝１３．８分（１  ｍＬ／分，８５：１５のＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ  両方とも１０ｍＭのＮＨ４ＯＡｃを備えたもの）；ＩＲ（ｃｍ−１）  ３３８８（ｂｒ），２９４８（ｍ），２８４６（ｍ），１６５２（ｍ），１５５４（ｗ），１４５６（ｗ），１４１５（ｗ），１１１３（ｗ），１０５６（ｍ），１０１６（ｓ），６９４（ｂｒ）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＫ−ｄ６）  δ１．０２（ｓ，６Ｈ），１．４５−１．４８（ｍ，２Ｈ），１．５８−１．６４（ｍ，２Ｈ），１．６９（ｓ），３Ｈ），２．０１（ｓ，３Ｈ），２．０３−２．０５（ｍ，２Ｈ），２．２９，（ｓ，３Ｈ），２．６５，ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３，１４．３Ｈｚ），３．０９−３．３８（ｍ，６Ｈ），３．５７−３．６０（ｍ，１Ｈ），３．７０（ｓ，３Ｈ），６．１５−６．３５（ｍ，５Ｈ），７．１２−７．２６（ｍ，５Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＫ−ｄ６）  δ１３．４３，１４．６６，２０．４１，２２．４６，２６．３１，３０．９５，３４．１４，３８．６９，４０．８５，５２．３４，６３．８１，７２．７０，７５．０５，８０．３７，８１．３１，８１．５０，１２９．８２，１３０．４３，１３０．９０，１３１．２０，１３１．４８，１３３．６４，１３４．４６，１３７．３１，１３８．９６，１３９．０８，１４０．８９，１５２．５７，１９８．９７；ＨＲＭＳ（ＥＳ）  Ｃ３４Ｈ４６Ｏ６（Ｍ＋Ｎａ）についての計算値  ５７３．３１９２，実測値  ５７３．３２０４。
【０１１７】
生物学的なもの：
動物の研究：乳房の腫瘍は、ラット当たり０．１ｍｌのゴマ油における１５ｍｇのＤＭＢＡの単一の用量で、５０日の年齢の雌のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（Ｈａｒｌａｎ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）の異内の挿管によって、誘発された。ラットは、次に、粉末化されたＴｅｋｌａｄ２２／５の齧歯類の食物の飼料（Ｗ）８６４０（Ｈａｒｌａｎ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）上に維持され、且つ、随意の食料及び水を許容した。その四ヶ月後に、触知可能な腫瘍を発現してしまったラットが、無作為に、実験の群（４匹のラット／群）に指定された。レチノイドで処置された群には、それぞれ、ａｔＲＡ、４−ＨＰＲ、又は４−ＨＢＲＣＧの２ｍｍｏｌ／ｋｇの飼料が補充された飼料が給餌された。レチノイドは、先に記載されたもの９のような２５ｍｌのエタノール：トリカプリン（１：４体積／体積）プラス２％（重量／体積）のα−トコフェロールからなる、賦形剤の中の飼料へ添加された。この賦形剤は、対照の飼料にもまた添加された。添加剤は、Ｈｏｂａｒｔのフードミキサーを使用することで食物の飼料へブレンドされた。飼料は、フードホッパーと共に設計されたステンレススチールの給餌機に給餌された。食料は、毎週、新鮮に用意された飼料に取り替えられた。食料の消費は、毎週一度、決定され、且つそれから、平均の一日の消費／ラットが見積もられた。これらの飼料は、２２日間の間連続的に給餌された。動物は、また、毎週秤量され、一般的な健康状態及び処置のせいによる可能性のある毒性の徴候について監視された。
【０１１８】
初期の腫瘍の大きさ、数、及びラットの体重の基準線測定は、処置の着手の直前に決定され、且つ、最後の測定は、動物の犠牲のすぐ前に記録された。動物は、毎週二回、腫瘍について触診され、且つ、腫瘍の直径は、毎週、マイクロメーターカリパスによって測定された。腫瘍の体積は、式［Ｖ＝４／３πｒ３］を使用することで、計算されたが、ここでｒは、最大の直径の総和の平均の二分の一であり且つ軸はそれに対して直角の角度にある。肺、肝臓、腎臓、及び大腿のみならず、全ての腫瘍は、化学的な及び組織病理学的な評価のために実験の終了の際に切除された。血液の試料が、また、血漿のレチノール及びトリグリセリドのレベルの決定について各々の動物から取得された。
【０１１９】
血漿のトリグリセリドの測定。血液が、抗凝血剤としてのＥＤＴＡの存在下で、麻酔された動物から抜き取られ、且つ、結果として生じる血漿は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓａｉｎｔ  Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）からのキットを使用する血漿の“真の”トリグリセリドのレベルの測定に使用された。手短に、合計の血漿のトリグリセリド及びグリセロールの濃度が、決定され、且つ、グリセロール構成成分は、“真の”血清のトリグリセリドの濃度を得るために、合計の血漿のトリグリセリドの測定から減算された。
【０１２０】
血漿のレチノイドの評価分析。５００μＬの血漿へ、添加されたものは、０．７５μｇの内部標準（Ｎ−（４−クロロフェニル）レチンアミド）を含有する１５０μＬのエタノールであった。３０秒混合した後に、５００μＬのエチル＝アセタートが、添加され、１分間の混合及びＩＥＣ  ＣＬ遠心機において１０００回転毎分での５分間の遠心分離が後に続けられた。エチル＝アセタートの層は、取り除かれ、且つ、０．４５μｍのフィルターを通じて注射器で濾過された。エチル＝アセタートでの抽出は、二回だけより多く、繰り返された。組み合わせられた抽出物は、蒸発させられ、且つ、残留物は、１００μＬのメタノールにおいて再構成された。メタノールの抽出物（２０μＬ）は、ｍｏｄｅｌ  １６６のＵＶ検出器が備え付けられたＢｅｃｋｍａｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓのｍｏｄｅｌ  １２７の機器におけるＨＰＬＣによって分析された。クロマトグラフィーは、１ｍＬ／分で流動する８５％のメタノール／水の移動相（両方とも１０ｍＭのアンモニウム＝アセタートを含有するものである）で２５０×４．６ｍｍのＢｅｃｈｍａｎ  Ｕｌｔｒａｓｐｈｅｒｅ  ＯＤＳカラムが備え付けられたプレカラムでされた。内部標準及びレチノールの両方についての分析は、３５０ｎｍで行われ、且つ、内部標準の回収及びレチノールのレベルは、回収に基づいたレチノールのレベルの調節と共に、標準曲線との比較によって決定された。内部標準の回収は、平均して約７８％であった。ビタミンＡ欠乏性のラットからの血漿の先の抽出は、レチノール又は内部標準の溶出の位置と干渉する物質の無いことを示した。４−ＨＰＲで処置された群においては、このレチノイドの血漿レベルは、上記のものと同じ試料において同時に評価された。干渉する物質を回避するためには、ＲＡ及び４−ＨＢＲＣＧについての血漿の処置のレチノイドのレベルが、上記のシステム及び４０分間の８５％のメタノールが後に続けられた１５分間におけるステップ勾配の７５％のメタノールを使用することで、測定された。
【０１２１】
骨の無機質の含有率。大腿は、脚の関節がはずされ、且つ、付着する軟部組織が、解剖によって取り除かれた。大腿は、Ｌｕｎａｒ  ＰＩＸＩｍｕｓ  ２  システム（Ｍｏｄｅｌ  Ｘ２６０８，ＬＵＮＡＲのソフトウェアのバージョン１．４５を使用するＧｅｎｅｒａｌ  Ｅｌｅｃｔｒｉｃ）を使用することで、走査され、且つ、対照の測定が、小さい動物の質の対照の模型を使用することで、なされた。大腿は、各々の尺度での各々再度の位置決めと共に、５回走査された。各々の動物についてのグラムでの骨の無機質の含有率（ＢＭＣ）の平均の値は、一つの独立の尺度として報告されたものである。
【０１２２】
核のレチノイド受容体の結び付きの評価分析。ＲＡＲβ及びＲＡＲγへ結び付くための［３Ｈ］−全てのトランス−ＲＡ（４．２−４．６ｎＭ）との並びにＲＸＲγへ結び付くための［３Ｈ］−９−シスＲＡ（１．９ｎＭ）との３及び７並びに４−ＨＢＲＣグルコースの競合は、試験管内のリガンドを結び付ける評価分析４１，４２を使用することで決定された。［３Ｈ］−全てのトランス−ＲＡ（４０．５Ｃｉ／ｍｍｏｌ）又は［３Ｈ］−９−シス−ＲＡ（６９．４Ｃｉ／ｍｍｏｌ）が、３時間の間に４℃で、競合するリガンドの増加する濃度の欠如及び存在の下で、受容体を含有する抽出物へ添加された。ヒドロキシアパタイト（ＨＡＰ）評価分析が、溶液中における遊離のものから受容体へ結び付けられたリガンドを分離するために、使用され、且つ、ＨＡＰのペレットと関連させられた放射能が、シンチレーションの計数によって測定された。
【０１２３】
ＲＮＡの単離及び定量的なＰＣＲ。合計の及びポリＡ＋ＲＮＡは、記載されたもの４３のように単離された。手短に、肺及び肝臓の組織は、収集され且つ使用まで液体窒素中で急速に凍結させられた。組織（０．５から１ｇまで）は、緩衝剤（１：１０；重量／体積）中で均質化され、且つ、合計のＲＮＡは、Ｃｈｏｍｅｃｚｙｎｓｋｉ及びＳａｃｃｈｉの方法４４に従って単離された。
【０１２４】
ラットのＣＹＰ２６Ａ１の部分的なｃＤＮＡは、Ｅ１０．５日のラットの胎児のｃＤＮＡからＰＣＲ増幅によって発生させられた。
【０１２５】
上流（５’ＧＣＡ  ＧＡＴ  ＧＡＡ  ＧＣＧ  ＣＡＧ  ＧＡＡ  ＡＴＡ  ＣＧ  ３’）  （ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ：１）及び下流（５’ＣＣＣ  ＡＣＧ  ＡＧＴ  ＧＣＴ  ＣＡＡ  ＴＣＡ  ＧＧＡ  ３’）（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ：２）のプライマーが、マウスのｃＤＮＡ（ｇｉ：６６８１１００）に基づいて、設計された。６３５個の塩基対のｃＤＮＡが、ｐＧＥＭ−Ｔｅａｓｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）へとサブクローニングされ且つ順序付けられた。類似して、ラットのＣＹＰ２６Ｂ１の部分的なｃＤＮＡは、Ｅ１１．５日のラットの胎児のｃＤＮＡからのＰＣＲ増幅によって発生させられた。上流（５’  ＧＣＴ  ＡＣＡ  ＧＧＧ  ＴＴＣ  ＣＧＧ  ＣＴＴ  ＣＣＡ  ＧＴＣ  ３’）  （ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ：３）及び下流（５’  ＴＣＣ  ＡＧＧ  ＧＣＧ  ＴＣＣ  ＧＡＧ  ＴＡＧ  ＴＣＴ  ＴＴＧ  ３’）（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ：４）のプライマーは、マウスのｃＤＮＡ（ｇｉ：３１３４１９８７）に基づいて、設計され、且つ、６０６個の塩基対の対照のｃＤＮＡが、サブクローニングされ且つ順序付けられた。
【０１２６】
定量的なポリメラーゼ連鎖反応（Ｑ−ＰＣＲ）評価分析は、製造業者のプロトコルに従ってＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ  ｆａｓｔｓｔａｒｔ  ＤＮＡ  ｍａｓｔｅｒ  ＳＹＢＲ  ｇｒｅｅｎ  １のキット（Ｒｏｃｈｅ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）と共にリアルタイムのＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒシステム（Ｒｏｃｈｅ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ，ＵＳＡ）を使用することで行われた。ポリ（Ａ）＋ＲＮＡ（０．５から１μｇ）は、ＡＭＶ酵素（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）及び無作為の六量体を使用することで、逆転写（ＲＴ）された。後に続くプライマーのセットは、Ｑ−ＰＣＲに使用された：ＣＹＰ２６Ａ１，上流５’−ＡＴＧ  ＡＴＴ  ＣＣＴ  ＣＧＣ  ＡＣＡ  ＡＧＣ  ＡＧ−３’（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ：５），下流５’−ＧＣＴ  ＣＣＡ  ＧＡＣ  ＡＡＣ  ＣＧＣ  ＴＣＡ  ＣＴ−３’（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ：６）；ＣＹＰ２６Ｂ１，上流５’−ＡＧＧ  ＣＣＣ  ＡＧＣ  ＧＡＣ  ＴＴＡ  ＣＣＴ  ＴＣ−３’（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ：７），下流５’−ＡＧＧ  ＧＣＧ  ＴＣＣ  ＧＡＧ  ＴＡＧ  ＴＣＴ  ＴＴ−３’（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ：８）；及びＧＡＰＤＨ，上流５’−ＴＧＡ  ＡＧＧ  ＴＣＧ  ＧＴＧ  ＴＧＡ  ＡＣＧ  ＧＡＴ  ＴＴＧ  ＧＣ−３’（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ：９），下流５’−ＣＡＴ  ＧＴＡ  ＧＧＣ  ＣＡＴ  ＧＡＧ  ＧＴＣ  ＣＡＣ  ＣＡＣ−３’（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ：１０）。ＣＹＰ２６Ａ１、ＣＹＰ２６Ｂ１、及びＧＡＰＤＨについてのプライマーのセットは、それぞれ、４０９個の塩基対を５１９個の塩基対（ｇｉ：１８４２６８２７）へ、７０８個の塩基対を９５７個の塩基対（ｇｉ：３１２２０７４８）へ、及び、８５４個の塩基対を１８３６個の塩基対（ｇｉ：３１３７７４８７）へ、増幅させる。
【０１２７】
ＭＣＦ−７のヒトの乳癌細胞の成長の阻害。ＭＣＦ−７の細胞は、Ａｍｅｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｍａｎａｓｓａｓ，Ｖｉｒｇｉｎｉａから得られた。それらは、４ｇ／Ｌのグルコース、３．７ｇ／Ｌの炭酸水素ナトリウム、及び１０％の熱で不活性化された胎児性の子ウシの血清が補充されたＤＭＥＭの培地に維持された。細胞は、１２個のウェルのプレートへと通過させられ、２４時間の間培養され、それの時間の後に、それらには、賦形剤（０．２％のエタノール）又はレチノイド類が投薬された；培地が、取替えられ、且つ、新鮮な賦形剤又はレチノイド類が、毎日追加された。細胞が、採取され、且つ、肝臓の細胞の数が、フルオレセインジアセタートを使用することで、評定されたが、それは、代謝的に活性な細胞による開裂で蛍光性の生産物を生じる。蛍光顕微鏡検査法を使用することで、少なくとも２００個の細胞／ウェルが、血球計数器で計数された。
【０１２８】
統計的な分析。腫瘍の体積、腫瘍の数、レチノール、トリグリセリドのレベル、及びＢＭＣについての記述的な統計は、検査され且つ実験の群の間で比較された。群の比較の統計的な有意性が、分散の分析（ＡＮＯＶＡ）、繰り返された尺度でのＡＮＯＶＡ、及びノンパラメトリック検定法を使用することで、得られた。値は、ｐ≦０．０５のとき、有意なものと考慮された。
【０１２９】
参考文献
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【０１４１】
１３．Ｃｈａｐｍａｎ，Ｊ．Ｓ．；Ｗｅｉｓｓ，Ｋ．Ｌ．；Ｃｕｒｌｅｙ，Ｒ．Ｗ．，Ｊｒ．；Ｈｉｇｈｌａｎｄ，Ｍ．Ａ．；Ｃｌａｇｅｔｔ−Ｄａｍｅ，Ｍ．Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２００３，４１９，２３４。
【０１４２】
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【０１５７】
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【０１５８】
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【０１６１】
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【０１６４】
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【０１６８】
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【０１７０】
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【０１７１】
４３．Ｍｅｒｒｉｌｌ，Ｒ．Ａ．；Ｐｌｕｍ，Ｌ．Ａ．；Ｋａｉｓｅｒ，Ｍ．Ｅ．；Ｃｌａｇｅｔｔ−Ｄａｍｅ，Ｍ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｄ．ＵＳＡ  ２００２，９９，３４２２。
【０１７２】
４４．Ｃｈｏｍｃｚｙｎｓｋｉ，Ｐ．；Ｓａｃｃｈｉ，Ｎ．Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９８７，１６２，１５６。
【０１７３】
４５．Ｃｕｒｌｅｙ，Ｒ．Ｗ．；Ｃａｒｓｏｎ，Ｄ．Ｌ，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓ．Ｄｅｌｉｖｅｒｙ．１９８７，１，２１９−２２４。
【図面の簡単な説明】
【０１７４】
【図１】図１は、ラットにおいてＤＭＢＡに誘発された腫瘍の体積における時間経過の変化についてのレチノイドの処置の効果を描くグラフである。
【図２Ａ】図２Ａは、血漿のトリグリセリドのレベルについてのレチノイドの処置の効果を描く棒グラフである。符号“ａ”は、対照の、４−ＨＰＲの、及び４−ＨＢＲＣＧの群に相対してｐ＜０．０５を表すものであった。
【図２Ｂ】図２Ｂは、骨の無機質の含有率についてのレチノイドの処置の効果を描く棒グラフである。値は、平均の＋ＳＥＭである。符号“ａ”は、対照の群に相対してｐ＜０．０５を表すものであった。
【図３Ａ】図３Ａは、ＲＡＲβへの［３Ｈ］の全てのトランスのＲＡの結び付きについてのレチノイド類の競合を描くグラフである。■＝４−ＨＰＲ；□＝４−ＨＢＲＧＣグルクロニド；◆＝ａｔＲＡ；Δ＝４−ＨＢＲＣグルコース。
【図３Ｂ】図３Ｂは、ＲＡＲγへの［３Ｈ］の全てのトランスのＲＡの結び付きについてのレチノイド類の競合を描くグラフである。■＝４−ＨＰＲ；□＝４−ＨＢＲＧＣグルクロニド；◆＝ａｔＲＡ；Δ＝４−ＨＢＲＣグルコース。
【図４】図４は、対照の群に相対したレチノイドが給餌された動物の肝臓におけるＣＹＰ２６Ａ１のｍＲＮＡの誘発を描く棒グラフである。値は、平均の＋ＳＥＭである。符号“ａ”は、対照の及び４−ＨＢＲＣＧの群に相対してｐ＜０．０５を表すものであった；符号“ｂ”は、ＲＡが給餌された群に相対してｐ＜０．０５を表すものであった。
【図５】図５は、賦形剤の対照の群（Ｖ）に相対して、４−ＨＰＲＣＧ又は４−ＨＢＲＣグルコースで処置されたＭＣＦ−７細胞における肝臓細胞の数における低減を描く棒グラフである。
【０１７５】
［配列表］
【表５】
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【０１７６】
【表６】
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【０１７７】
【表７】
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【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４】
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【図５】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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