(57)【要約】【課題】特に、義歯及び脊柱に関する整形外科プロテーゼ用の骨インプラント素子であって、従来のインプラント素子と比較して、速やかなオステオインテグレーション作用を発揮する骨インプラント素子及び同素子を調製するための方法を提供することを課題とする。【手段】金属質又はポリマー質のインプラント素子の表面に化学的に結合した、骨組織の成長に刺激的作用を発揮する骨接触用のヒアルロン酸層を設けた。【特許請求の範囲】
【請求項１】
金属質又はポリマー質のインプラント素子であって、その表面に化学的に結合した、骨組織の成長に刺激的作用を発揮する骨接触用のヒアルロン酸層を有するインプラント素子。
【請求項２】
前記素子が、歯科インプラント素子，脊柱又は骨格固定ネジ，椎間円板又はケージである、請求項１に記載のインプラント素子。
【請求項３】
前記ネジ及びケージが、チタン又はそれの合金から作られている、請求項２に記載のインプラント素子。
【請求項４】
前記椎間円板が、チタン又はその合金又はコバルト−クロム合金から作られている、請求項２に記載のインプラント素子。
【請求項５】
アミン基を有する基質のコーティングを有し、ヒアルロン酸が、そのヒアルロン酸のヒドロキシル基の官能基化によって、前記基質に結合されている、請求項１〜４の何れかに記載のインプラント素子。
【請求項６】
アミン基を有する前記基質が、好ましくは、ヘキシルアミン又はヘプチルアミンから選択された、アリルアミンユニット又はアルキルアミンユニットを含んでいる、請求項５に記載のインプラント素子。
【請求項７】
前記ヒアルロン酸の層が、０．５ｎｍと１００００ｎｍの間の厚さを有している、請求項５又は６に記載のインプラント素子。
【請求項８】
前記ヒアルロン酸の層が、１ｎｍと１０００ｎｍの間の厚さを有している、請求項５又は６に記載のインプラント素子。
【請求項９】
前記ヒアルロン酸の層が、１．５ｎｍと１００ｎｍの間の厚さを有している、請求項５又は６に記載のインプラント素子。
【請求項１０】
上記ヒアルロン酸の層が、Ｘ線光電子分光法によって数えられる０．６以上の分別適用範囲を有している、請求項１〜９の何れかに記載のインプラント素子。
【請求項１１】
骨の成長を促進させることのできるリリース可能な薬剤又は生体活性剤を更に含んでいる、請求項１〜１０の何れかに記載のインプラント素子。
【請求項１２】
前記薬剤又は生体活性剤が、ポリマー又はセラミック層にエングローブ，吸収又は吸着されている、請求項１１に記載のインプラント素子。
【請求項１３】
前記ヒアルロン酸が固定化された前記基質が、前記薬剤又は生体活性剤がエングローブ，吸収又は吸着されている前記ポリマー又はセラミック層に堆積されている、請求項１２に記載のインプラント素子。
【請求項１４】
前記薬剤又は前記生体活性剤が、デクサメタゾーン，デクサメタゾーン−ホスファート又はそれのアセテート可溶性態，様々な形態のビタミンＤ，生長因子，骨の形態形成プロテインとして知られているプロテイン族，ヘパリンの如きポリサッカライド型の分子，コンドロイチンサルフェイト及びヒアルロン酸から選択されている、請求項１２又は１３に記載のインプラント素子。
【請求項１５】
前記ポリマー基質が、シリコーン，オレフィン，又はアクリル型のポリマーで、好ましくは、ポリメチルジシロキサン，ポリブタジエン  ポリメチルメタアクリレート，ポリエチルメタアクリレート，ポリブチルメタクリレート，ポリウレタン，フッ化ポリマー，ポリエステル，ポリ−ヒドロキシエチルメタアクリレート又はポリ−ヒドロキシブチメタアクリレートから選択されたポリマーを含んでいる、請求項１２又は１３に記載のインプラント素子。
【請求項１６】
前記セラミック層が、アルミナ−ベース不活性セラミック，シリケート−ベース不活性セラミック，シリコ−アルミナート−ベース不活性セラミック，又はカルシウムホスファート又はヒドロキシアパタイトの如き生体活性セラミックを含んでいる、請求項１２又は１３に記載のインプラント素子。
【請求項１７】
前記セラミック層が、コンパクト形態又は多孔質形態にある、請求項１６に記載のインプラント素子。
【請求項１８】
請求項１〜１７の何れかに記載のインプラント素子を調製する方法であって、
金属又はポリマーのインプラント素子を提供する工程と、
前記インプラント素子の表面を、アミン基を有する基質で被覆する工程と、
ヒアルロン酸を、同ヒアルロン酸のヒドロキシル基の官能基化によって前記基質のアミン基に結合させる工程を有しているインプラント素子を調製する方法。
【請求項１９】
前記インプラント素子の表面を、アミン基を有する基質で被覆する工程が、プラズマ相で揮発性特性を有するアミンを選択する工程と、官能基化可能なアミン基を含む基質層を生成するようにプラズマ相のアミンを前記インプラント素子の表面に堆積させる工程とを含んでいる、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
アミンの前記プラズマ蒸着が、圧力が８０と３００ｍＴｏｒｒの間、入力パワーが５と２００Ｗの間、蒸着時間が１ｍｓと３００ｓの間という条件で実施される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記アミンのプラズマ蒸着処理が、１ｍｓと１００ｍｓとの間の活性プラズマ，不活性プラズマサイクルでのパルスプラズマ条件で実施される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記アミンのプラズマ蒸着処理に先立って、前記表面をエアー又は酸素プラズマで清浄して、前記基質に対する接着力を増加させるための処理を実施する、請求項１９〜２１の何れかに記載の方法。
【請求項２３】
前記アミンが、アリルアミン，ヘキシルアミン及びヘプチルアミンから選択される、請求項１９〜２２の何れかに記載の方法。
【請求項２４】
前記ヒアルロン酸のヒドロキシル基の官能基化によって前記基質のアミン基にヒアルロン酸を結合する工程が、前記ヒアルロン酸のアルコール基を選択的に酸化させてアルデヒド基にさせる工程と、前記ヒアルロン酸の前記アルデヒド基を還元アミノ化によって前記基質の前記アミン基に結合させる工程とを含んでいる、請求項１８〜２３の何れかに記載の方法。
【請求項２５】
前記ヒアルロン酸のアルコール基を選択的に酸化させてアルデヒド基にさせる前記工程が、過ヨウ素酸ナトリウムの存在下で実施される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
還元アミン化の反応が、ナトリウムシアノボロヒドライドの存在下で実施される、請求項２４又は２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記ヒアルロン酸を、ジメチルスルホキサイド又はそれと水との混合物，ジメチルフォルマミド又はそれと水との混合物，Ｎ−メチルピロリドン又はそれと水との混合物のような水溶液又は適切な溶媒液で結合させる、請求項２４〜２６の何れかに記載の方法。
【請求項２８】
金属又はポリマーインプラント素子を提供する工程と、
前記インプラント素子の表面をポリマー又はセラミック層でコーティングする工程と、
前記ポリマー又はセラミック層に、骨組織の成長を促進させることの可能なリリース可能な薬剤又は生体活性成分をエングローブ，吸収又は吸着させる工程と、
前記薬剤又は生体活性成分がエングローブ，吸収又は吸着された前記ポリマー又はセラミック層にアミン基を有する基質を堆積させる工程と、
ヒアルロン酸のヒドロキシル基の官能基化によってヒアルロン酸を前記基質のアミン基に結合させる工程を含んでいる、請求項１８〜２７の何れかに記載の方法。
【請求項２９】
インプラント素子の表面をポリマー又はセラミック層でコーティングする前記工程が、浸漬，従来のスプレーガンと超音波スプレーの双方，気相蒸着又はプラズマ蒸着によって、または、セラミック層の場合には、ゾルゲル技術を用いて実施される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記薬剤又は生体活性素が、普通の溶液，けん濁液又は乳濁液のスプレー又は溶液，けん濁液又は乳濁液中に浸漬させる浸漬処理によって、前記ポリマー又はセラミック層にエングローブ，吸収又は吸着させる、請求項２８又は２９に記載の方法。
【請求項３１】
薬剤又は生体活性成分をポリマー又はセラミック層にエングローブ，吸収又は吸着させる前記工程が、３０％までの化学量論的量、好ましくは、１０％までの化学量論的量の過剰な薬剤又は生体活性成分の存在下において実施される、請求項２８〜３０の何れかに記載の方法。
【請求項３２】
請求項１８〜３１の何れかに記載の方法によって得られる、請求項１〜１７の何れかに記載のインプラント素子。
【請求項３３】
骨組織と接触されるインプラント素子のオステオインテグレーションを促進させるべく、ヒアルロン酸が固定化されたインプラント素子を調製するためにヒアルロン酸を使用する方法。
【請求項３４】
前記素子が請求項１〜１７の何れかに記載の素子である、請求項３３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特に、義歯及び脊柱における外科整形プロテーゼのためのインプラント素子であって、従来のインプラント素子よりも迅速なオステオインテグレーション（ｏｓｔｅｏ−ｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ）を可能にする骨インプラント素子に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
骨組織中に永久的に移植可能な金属素子を使用することは、医療の様々な分野において広く普及している。例えば、歯科インプラント外科手術では、壊死した又は最早機能を発揮しない骨根を人工的に取り替えるために下顎骨又は上顎骨に、一般にチタンから作られたネジが用いられている。整形外科においては、骨折固定，椎骨移動を減少させるために及び脊柱外科手術のために様々な素子が、一般に骨組織中に移植される。
【０００３】
これらの分野においては、移植された素子は、新たに作られる骨組織の成長のために、その骨組織が素子と直接接触するようになるまで、移植部位に確りと固定される。オステオインテグレーションとして知られているこの現象は、広く研究され、特にチタン素子による骨移植外科手術について言及している、研究グループの技術科学文献に記載されている。線維性材料内へのエンカプセレーション（ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ）、即ち、ファイバーインテグレーション（ｆｉｂｅｒ  ｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ）を伴う、組織に異物を移植する別の方法に反して、素子と直接的に接触した骨細胞の成長は、確りとした固定源を提供し、そのことが、素子を荷重に耐えさせ且つ構造的な仕事を実施するのに好適なものにさせる。
【０００４】
オステオインテグレーションに基づく研究分野は、最近、成功を遂げて応用分野が拡大しているが、多くの問題が解決されないまま残されている。特に、オステオインテグレーションのプロセスを可能な限り加速させることにより、インプラントの挿入と実際の装填との間の時間を減少させることが重要である。例えば、歯科医療では、骨組織の治癒を可能にすると共にオステオインテグレーションを誘導するために、インプラントを通常装填せず、それにより、診察後１〜４ヶ月の期間の間、患者がインプラントによるそしゃく機能を実施することができないようにする。更に、健康な人及び若い人では骨は順当に良く治癒するが、年寄り及び骨粗しょう症の人、即ち、治療を必要とする人や損傷のため又は脊柱移動の固定のために移植手術を必要とする患者の内の多くは、骨の治癒がしばしば遅くなることがある。
【０００５】
インプラント素子の表面特性は、インプラントに対する組織の反応に基本的な役割を果たすことが一般に知られているので、移植可能な素子の表面を修正することによりオステオインテグレーションのプロセスを改善するために、非常に多くの研究が実施されている。これらの研究の詳細な臨床像が、１９９９年のプレオとナンシーとの共著「骨とバイオマテリアルとの界面（Ｔｈｅ  ｂｏｎｅ−ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌ  ｉｎｔｅｒｆａｃｅ）」、２０：２３１１−２３２１又は２０００年にトロントでイーエム  スクウエアドによって発行された、デイビス著のテキストブック骨工学において述べられている。これらの書籍を注意深く読み、市販の素子を評価することにより、表面特性が、例えば、サンドブラスト，プラズマスプレー蒸着又は酸による処理により表面を荒くする処理により頻繁に追求されていることが理解された。水酸化リン灰石又は所謂バイオガラスの如き高い骨親和力を有するセラミック材料の層の蒸着についても研究及び応用がなされている。
【０００６】
これらの方法に加えて、インプラント素子の表面に骨の成長を促進させることを可能にする生物学的分子を導入することについてかなりの関心が持ち上がっている。研究されている殆どの分子の中で、コラーゲンが、インプラントチタンネジの表面に固定化された時に、オステオインテグレーション速度を速めることができるという報告がされている。特定のペプチド、即ち、骨細胞と特に相互作用することのできる、タンパク質分子を構成している小さな分子フラグメントが、生体内で試験した時に、効果的であることを示した。プレオとナンシーによる上述した著作は、インプラント表面の生化学的修正のために用いられる複数の分子について適切に述べている。
【０００７】
インプラント表面の生化学的修正は、非常に科学的且つ理論的な興味のある分野であるが、その実用化には可也の問題点がある。コラーゲンは、例えば、疑わしい動物源（特に、ウシ族のコラーゲン）から派生するので汚染の問題があり、また、異なった種間の不適合反応に起因する拒否反応という問題がある。上述したペプチドは高価であり、化学的見地から不安定であるので、インプラント表面の処理における当該分野の典型的な手順に頼ることは、殆ど実行不可能である。
【０００８】
ヒアルロン酸は、種のなかで何らの変異がなくて生体の全ての組織中に拡散しているグリコサミノグリカンである。それは、非常に興味ある生化学的特性及び水和特性を有し、そのため、広く研究され、生物医学分野内の様々な物において用いられている。ヒアルロン酸の応用についての徹底した概説が、例えば、ヒアルロン酸に関する主要会議の会議録を含んだ著書、例えば、１９８９年、チィチェスター，ワイリーのディ．エヴェレッドとジェイ．ウエランの編集に係る「ヒアルロナン（ｈｙａｌｕｒｏｎａｎ）の生物学」、１９９８年、ティ．シー．ローレント編集、ロンドンのポートランド  プレス  リミテッド社発行の「ヒアルロナンとそれの誘導体の化学，生物学及び医学的応用」、２０００年、ジー．アバタンゲロとピー．エッチ．バイゲルの編集、アムステルダムのエルセバイヤー社発行の「ヒアルロナンの再考察」及び２００２年、ジェイ．エフ．ケネディ，ジー．オー．フィリップス，ピー．エー．ウイリアムズ及びヴィ．ハスカルの編集、ウオッドヘッド  パブリシング  リミテッド社発行の「ヒアルロナン」に記載されている。
【０００９】
均質相中の分子としてのヒアルロン酸は、例えば、上述した、２０００年、ジー．アバタンゲロとピー．エッチ．バイゲルの編集、アムステルダムのエルセバイヤー社発行の「ヒアルロナンの再考察」書物の中で、ベルナード等によって２１５頁で述べられているように、骨の形成過程において能動的な役割を果たす。
【００１０】
その理由で、骨形態形成プロテイン又は成長因子を膨潤したヒアルロン酸基ゲルが、骨刺激試験において首尾よく用いられている。更に、造骨特性を有するデクサメタゾーン薬と随意に結合したヒアルロン酸溶液が、２００４年発行の「バイオマテリアルズ」、５３７５−５３８５，２５で、ゾウ等によって述べられているように、骨髄基質細胞の骨細胞中における分化に積極的な影響を及ぼすことが実証されている。
【００１１】
然しながら、ゲル又は溶液としてのヒアルロン酸又は組織中に存在するヒアルロン酸の興味深い骨形成の潜在性を、上述した骨組織インプラント素子において直ちに用いることはできない。つまり、ヒアルロン酸は水溶液に非常に溶け、本来の位置でのそれの永続性の時間は非常に短い。橋かけ，化学的修正又は表面固定化のような、インプラント部位におけるヒアルロン酸の永続性に有益な化学的技術は、ヒアルロン酸の構造及び分子コンフォメーションを変えて、レセプタ−リガンドの特定相互作用に悪影響を及ぼし、それにより、分子の生理活性行動を弱める。つまり、ヒアルロン酸の生理活性特性は、ＣＤ４４又はＲＨＡＭＭのような、細胞壁上に位置する特定のレセプタとの相互作用能力に由来する。２０００年９月、「ジェイ  バイオロジー  ケミカル」の１；２７５（３５）：２６９６７−７５においてジエイ．レスレル等によって記述されているように、この種の相互作用は、非常に協同的であり、効果的にするためには、ヒアルロン酸の単一のレセプタとの間での多数回繰り返される同時相互作用が要求される。その相互作用の共同的性質は、溶解した分子の典型的な移動性を意味し、従って、１９９９年、「ジャーナル  オブ  バイオマテリアル  サイエンス」ポリマー版、１０（１０）：１１０７−２４においてモラー及びカッシネリによって記述されているような、材料表面上のヒアルロン酸の不動化は、十分強力な特定の相互作用を作り出すことができないために何らかの細胞接着を許さない表面を齎す。固定化されたヒアルロン酸を有する表面に対する細胞又は分子の低減した接着は、様々な科学文献記事において実証されており、２００２年、ジェイ．エフ．ケネディ，ジー．オー．フィリップス，ピー．エー．ウイリアムズ及びヴィ．ハスカルの編集、ウオッドヘッド  パブリシング  リミテッド社発行の「ヒアルロナン」の巻２、２７頁においてウイット等によって記述されているように、外科手術の後に起こる接着現象を減少させるために用いられている。金属基質及び素子上のヒアルロン酸の固定化については、２００４年、ジャーナル  オブ  バイオメデカル  マテリアルズ  リサーチ発行の書籍「金属製面に対するヒアルロナンの付着」巻６８、９５ページにおいて、ピッツ等によって報告されている。引用した書籍における、上述したような一般的な知識によれば、固定化されたヒアルロン酸を備えた表面は、「バイオパッシブ（ｂｉｏｐａｓｓｉｖｅ）」、又は、低細胞接着なものとされている。その記事の執筆者は、固定化されたヒアルロン酸層によって発揮されている弱い生物学的接着を、非特異性接着を妨げないためにどのように使用することができるか及び特異な生物接着効果を確保するために接着ペプチドをこの非粘着性マトリックスに結合させることがどうして必要なのかについて指摘している。
【００１２】
本来、硬い表面に固定化されたヒアルロン酸層は生物学的接着を阻止するという特性を有し、それが、インプランテーション素子上に固定化されたヒアルロン酸の生理活性作用によって得ようとすることと相容れず、骨組織に対するインプラントの特異な細胞接着がオステオインテグレーションにとって極めて重要であることが一般的に認識されている。
【００１３】
更に、骨の新らたな形成プロセスには、表面に結合するカルシウムイオンによって促進される鉱化ステップを必要とすることも認識されている。上述した文献においてベルナード等によって記述されているように、現存のヒアルロン酸は、このステップにおいて活性効果を有し、それにより、石灰化プロセスに大いに貢献する。ヒアルロン酸カルボキシレート基は、実際に、鉱化プロセスに積極的な作用を及ぼすことによりカルシウムイオンをキレート化させる。然しながら、インプラント素子表面上のヒアルロン酸の固定化は、基質上に存在するアミニック又はヒドロキシル官能基でヒアルロン酸カルボキシル基を結合させ、結合されたヒアルロン酸中において、カルシウムイオンでのキレート化のために役に立つカルボキシル基が結果的に失われることを意味する。従って、公知の方法による素子の表面上のヒアルロン酸の固定化は、オステオインテグレーションに何らの改善も齎さない。
【００１４】
一方、本願の発明者は、本願の特許請求の範囲に記載されているところに従ってインプラントネジ上に固定化されたヒアルロン酸が、更にペプチド固定化を必要とすることなく、生体内でのオステオインテグレーションに関する活性効果を有し、本発明による固定化されたヒアルロン酸の層を有する、骨組織に接触させることにより移植可能な素子の特性が、従来の素子と比較して明確に向上していることを、驚きをもって発見した。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
本発明の広範な範囲における実施形態は、表面に化学的に結合されたヒアルロン酸の層を有する金属質又はポリマー質の骨組織インプラント素子（以下、「インプラント素子」という。）であって、特許請求の範囲の請求項１に記載のインプラント素子に関するものである。その素子の形状又は性質について制限はないが、但し、それと接した骨組織の成長を齎し又は一般に骨組織の成長を刺激する応用に向けられるものであることを条件とする。
【００１６】
本発明の特に有益な実施形態においては、その素子は、好ましくはチタン又はその合金から作られた歯科インプラントネジ、又は、好ましくはチタン又はその合金から作られた、脊柱の又は骸骨の固定用ネジ、又は、好ましくはチタン，その合金，コバルト−クロム合金又はこの分野で一般に用いられている金属合金から作られた椎間円板、又は、好ましくはチタン又はその合金から作られたケージである。
【００１７】
好ましくは０．５〜１００００ｎｍ、より好ましくは１〜１０００ｎｍ、更に好ましくは１．５〜１００ｎｍのヒアルロン酸の薄層が、上述した合金の表面上に固定化されている。
【００１８】
本発明により、ヒアルロン酸をインプラント素子上に固定化させるための方法は、その素子の表面にアミン官能基を導入することと、その結果、ヒアルロン酸ヒドロキシル基の官能基化によってアミン基にヒアルロン酸を結合させることを条件としている。ヒアルロン酸は、実際に、５０，０００と８，０００，０００の間の分子量を有するムコ多糖類であり、簡単に官能基化可能な第一アルコール基を含んでいる、下記の構造の繰り返しを呈している。
【化１】
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【００１９】
従って、本発明の目的は、アミン基を有する基質コーティングを含んだインプラント素子であって、ヒアルロン酸が、ヒアルロン酸のヒドロキシル基の官能基化によって基質に結合している、インプラント素子を提供することにある。
【００２０】
アミン基を含んだ基質は、当該分野において広く知られた方法に従ってインプラント素子の表面上に置くことができる。アミン基を含んだ分子をプラズマ蒸着することにより、インプラント素子の表面上にアミン官能基を有する基質を導入する技術が特に有益である。適切に用いることのできる分子の典型的な例は、アリルアミン，アルキルアミン，ヘキシルアミン又はヘプチルアミンのようなアルキルアミン及びプラズマ相で必要な揮発特性を有するアミン官能基を備えた有機分子である。アミンのプラズマ蒸着は、圧力が８０と３００ｍＴｏｒｒの間、入力パワーが５と２００Ｗの間、蒸着時間が１ｍｓと３００ｓの間という条件で実施される。また、プラズマ蒸着は、１と１００ｍｓの間の活性不活性プラズマのサイクルで分子フラグメンテーションを最小化させ、アミン基の最大可能濃度を維持するというパルスプラズマ条件において実施することもできる。アミンのプラズマ蒸着処理に先立って、例えば、素子の表面を清浄して基質に対する接着力を増加させるためのエアー又は酸素プラズマのような、プラズマによる他の処理を実施することができる。
【００２１】
ヒアルロン酸は、ヒドロキシル基の官能基化のための及び特にヒドロキシル基をアミン型ボンドで置換するための、当業界において知られた方法によって、
ジメチルスルホキサイド（ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｐｈｏｘｉｄｅ）又はそれと水との混合物，ジメチルフォルマミド（ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ）又はそれと水との混合物，Ｎ−メチルピロリドン（Ｎ−ｍｅｔｈｙｌ  ｐｙｒｒｏｌｉｄｏｎｅ）又はそれと水との混合物のような水溶液又は適切な溶媒液で、アミン層に結合させることができる。
［化２］Ｉａｌ−ＯＨ＋Ｓｕｂ−ＮＨ２  −＞  Ｒ−ＮＨ−Ｒ´
上記式中で、Ｉａｌはヒアルロン酸の残渣であり、Ｓｕｂはアミン官能基を有する基質の残渣である。上述した内容から、本発明に係る方法が、採用される反応及び場合に応じて適用される反応条件に従ってヒアルロン酸の或る反応ヒロロキシル基のみならず、全ての反応ヒロドキシル基を官能基化させることができることを理解することできる。然しながら、ヒアルロン酸のヒドロキシル基の官能基化反応によって、アクロスティックＸＰＳ又はＥＳＣＡとして知られているＸ線光電子分光法によって数値が求められるように、０．６以上の分別適用範囲、即ち、ヒアルロン酸によって被覆された表面部分と結合したヒアルロン酸層の形成に帰着することが必要であり且つそれで十分である。その試験方法は、１９９８年に出版されたサーフェース  アンド  インターフェース  アナリイシス  マガジンの「ポリサッカライドが被覆された表面のＸＰＳ分析用の簡単なモデル」の２６，７４２−７４６でマルコ  モラとクララ  カッシネリとによって記述された記事の中で報告されている。
【００２２】
ヒアルロン酸のヒドロキシル基の、基質のアミンとの官能基化反応は、（網羅的ではなく一例として挙げた）当業者に知られた後述の様々な方法に従って実施させることができる。
例えば、ヒアルロン酸を塩化メシル又は塩化トシルと反応させてメシレート，トシレート又は同様の脱離基を生成させることによりヒドロキシル基を活性化させ、その活性化したヒドロキシル基が次にアミンと反応する。
例えば、ヒアルロン酸を塩化チオニル（ｔｈｙｏｎｉｌ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ）又はカーボンテトラブロマイド（ｃａｒｂｏｎ  ｔｅｔｒａｂｒｏｍｉｄｅ）及びトリフェニルホスフィン（ｔｒｉｐｈｅｎｙｌｐｈｏｓｐｉｎｅ）と反応させてヒドロキシル基を塩素，臭素，ヨウ素のようなハロー（ｈａｌｏ）で置換し、そのハロゲンで処理されたヒアルロン酸が次にアミンと反応する。
ジエチルアザジカルボキシレート（ｄｉｅｔｈｙｌａｚａｄｉｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ）及びトリフェニルホスフィンの存在下において、ヒアルロン酸をアミンとミツノブ反応させる。
第一ヒドロキシル基を酸化させてアルデヒドにさせて、次に還元アミノ化させる。
【００２３】
上述した方法の内で、ヒアルロン酸のヒドロキシル基を酸化させてアルデヒドにして、そのようにして生成されたアルデヒドを次いで還元アミノ化させる合成方法が好ましい。
【００２４】
三酸化クロム，過ヨウ素酸ナトリウム又は過ヨウ素酸カリウムのようなアルコール基の何らかの選択的酸化剤を用いて、第一アルコール基を酸化反応させてアルデヒドにすることができる。過ヨウ素酸ナトリウムは、この反応における好ましい試薬である。
【００２５】
こうして生成されたアルデヒド基は、限定的ではなく一例として挙げられる、ラネーニッケル又はＰｔＯ２の如き適切な触媒，アルミニウム，アルミニウムアマルガム又はＡｌ／ＨｇＣｌ２，デカボラン（ｄｅｃａｂｏｒａｎｅ）のようなボラン，ナトリウムシアノボロヒドライド（ｓｏｄｉｕｍ  ｃｙａｎｏｂｏｒｏｈｙｄｒｉｄｅ）又は、例えば、ＰＳ−イソシアネート，ＰＳ−ベンズアルデヒド又はＭＰ−ＴｓＯＨのような適切なスカベンジャーの存在下におけるＭＰ−シアノボロヒドライド（ＭＰ−ｃｙａｎｏｂｏｒｏｈｙｄｒｉｄｅ），ＭＰ−トリアセトキシボロヒドリド（ＭＰ−ｔｒｉａｃｅｔｏｘｙｂｏｒｏｈｙｄｒｉｄｅ）の如き固相合成用樹脂上に固定化されたボロヒドライド（ｂｏｒｏｈｙｄｒｉｄｅ）の存在下における水素のような適切な還元剤の存在下での還元アミノ化によって、アルキルアミン又はアリルアミンのアミン基と反応する。
【００２６】
還元アミノ化のための好適な試薬は、ナトリウムシアノボロハイドライドである。
【００２７】
ヒドロキシル基を酸化させてアルデヒドにするために及びアルデヒドを還元アミノ化させるために用いられる反応条件は、後述する実験欄において例示されるような、この種の反応において普通に用いられるものである。
【００２８】
カルボキシル基に代えてヒアルロン酸のヒドロキシル基を官能基化させることの利点は、この方法が、カルボキシル基をカルシウムイオンとの相互作用に完全に役に立つ状態にさせたままにすることを可能にして、骨の鉱化を促進させるヒアルロン酸の作用を最大限にさせるという点にある。
【００２９】
本発明の好ましい実施形態によれば、インプラント素子は、結合されたヒアルロン酸層以外に、骨組織の成長を促進させることのできる解放可能な薬剤又は生体活性剤を含んでいてもよい。この実施形態においては、素子を、先ず、好ましくは、その薬剤又は生体活性剤をエングローブ（ｅｎｇｌｏｂｅ），吸収又は吸着させることの可能なポリマー又はセラミック層で被覆し、その層の上に、上述した技術に従ってヒアルロン酸を固定化させる。
【００３０】
本発明により用いられる薬剤又は生体活性素の中で、特に好適なのは、骨の成長刺激剤としての役割を果たすものである。それらの中で、デクサメタゾーン剤，デクサメタゾーン−ホスファート（ｄｅｘｍｅｔｈａｓｏｎｅ−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）又はそれのアセテート可溶性態，様々な形態のビタミンＤ，生長因子，骨の形態形成プロテインとして知られているプロテイン族，ヘパリンの如きポリサッカライド型の分子，コンドロイチンサルフェイト（ｃｏｎｄｒｏｉｔｉｎ  ｓｕｌｐｈａｔｅ）及びヒアルロン酸が特に好ましい。
【００３１】
生来的な毒性がないこと以外に、薬剤又は生体活性成分をエングローブする層の性質に化学的な制限はなく、それらの成分は、その薬剤又は生体活性素の特性及び所望の運動リリース（ｋｉｎｅｔｉｃ  ｒｅｌｅａｓｅ）に適合するようにしてもよい。網羅的でない例には、シリコーン、オレフィン、ポリメチルジシロキサン（ｐｏｌｙｍｅｔｈｙｌｄｉｓｉｌｏｘａｎｅ），ポリブタジエン  ポリメチルメタアクリレート（ｐｏｌｙｂｕｔａｄｉｅｎｅ  ｐｏｌｙｍｅｔｈｙｌｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ），ポリエチルメタアクリレート（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ），ポリブチルメタクリレート（ｐｏｌｙｂｕｔｈｙｌｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ），ポリウレタン（ｐｏｌｉｕｒｅｔａｎｅｓ），フッ化ポリマー（ｆｌｕｏｒｉｎａｔｅｄ  ｐｏｌｙｍｅｒｓ），ポリエステル，ポリ−ヒドロキシエチルメタアクリレート（ｐｏｌｙ−ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌｍｅｔａｃｒｉｌａｔｅ）又はポリ−ヒドロキシブチメタアクリレート（ｐｏｌｙ−ｈｙｄｒｏｘｙｂｕｔｙｌｍｅｔｈａｃｒｉｌａｔｅ）の如き親水性アクリレートのようアクリル型ポリマーがある。選択的なセラミック層は、アルミナ−ベース不活性セラミック（ａｌｕｍｉｎｅ−ｂａｓｅｄ  ｉｎｅｒｔ  ｃｅｒａｍｉｃｓ），シリケート−ベース不活性セラミック（ｓｉｌｉｃａｔｅ−ｂａｓｅｄ  ｉｎｅｒｔ  ｃｅｒａｍｉｃｓ），シリコ−アルミナート−ベース不活性セラミック（ｓｉｌｉｃｏ−ａｌｕｍｉｎａｔｅ−ｂａｓｅｄ  ｉｎｅｒｔ  ｃｅｒａｍｉｃｓ），又はカルシウムホスファート（ｃａｌｃｉｕｍ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ），ヒドロキシアパタイト（ｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅ）の如き生体活性セラミックから構成されていてもよい。この層は、リリース運動制御（ｒｅｌｅａｓｅ  ｋｉｎｅｔｉｃ  ｃｏｎｔｒｏｌ）によって要求されるところに従って、コンパクトな形態又は多孔質形態であってもよい。
【００３２】
ポリマー又はセラミック層は、浸漬，スプレー，従来のスプレーガンと超音波スプレーの双方，気相蒸着又はプラズマ蒸着による従来の方法に従って、蒸着することができる。セラミック層の場合には、ゾルゲル（ｓｏｌ−ｇｅｌ）技術を用いてもよい。
【００３３】
薬剤又は活性成分は、普通の溶液，けん濁液又は乳濁液のスプレーの如き従来の技術に従って又は溶液，けん濁液又は乳濁液中に浸漬させる普通の方法によって、支持層に堆積，支持層にエングローブ，又は吸収又は吸着させてもよい。
【００３４】
本発明の要旨の範囲内で、上述したところに従って、薬剤又は活性成分をエングローブする層を、アミン基を担持する基質を堆積させ、次にその基質にヒアルロン酸を共有結合させることにより、順に修正される。例えば、薬剤又は活性成分をエングローブする層を付加した後に、それに結合される水溶液のアリルアミン，アルキルアミン又はヒアルロン酸をプラズマ蒸着する処置を実施する。このステップにおける薬剤の随意のリリース及びロスは、ポリマー又はセラミックマトリックスに薬剤又は生体活性成分を過剰に被覆させることにより、最初に測定された過剰量までバランスさせる。この過剰量は、一般に化学量論的量の３０％まで、より好ましくは化学量論的量の１０％までである。
【００３５】
後述する実験試験から理解されるように、文献データに従って予期されるところに反して、骨に移植されるインプラント素子上に固定化されたヒアルロン酸が著しいオステオインテグレーション作用を発揮していることが驚きをもって分かる。従って、オステオインテグレーションの促進剤のようなヒアルロン酸がインプラント素子の表面に固定化された骨接触インプラント素子を調製するためにヒアルロン酸を用いることは、本発明の別の目的である。
【００３６】
［実験の欄］
［例１］
固定化されたヒアルロン酸層を備えたチタンサンプル
１ｃｍサイドスクエアー形状の三つの９９．７％チタンサンプル（シグマ−アルドリッチ社製）に、プラズマ処理用のガンベッティ  ケノロギア反応装置（Ｇａｍｂｅｔｔｉ  Ｋｅｎｏｌｏｇｉａ  ｒｅａｃｔｏｒ）を用いてアリルアミンのプラズマ蒸着処理を施す。特に、その蒸着処理は、１００ｍＴｏｒｒの圧力、１０ｍｓサイクルでパルスプラズマによって実施する。入力パワーは５０Ｗで、処理時間は３０ｓである。その処理の終わりに、そのネジを０．５％水濃度の前処理されたヒアルロン酸溶液中に浸漬させる。そのヒアルロン酸は、アメリカ合衆国、ミネソタ州，チャスカのライフコア・バイオメディカル社によって製造され、バッチ番号Ｂ２２１５７で同定されている。このヒアルロン酸水溶液は、過ヨウ素酸ナトリウム（１６ｍｇ／１００ｃｃ）を含んだ燐酸緩衝液中で１６時間前処理をし、反応時に、１ｍｇ／ｃｃのナトリウムシアノボロヒドライド（ｓｏｄｉｕｍ  ｃｙａｎｏｂｏｒｏｈｙｄｒｉｄｅ）を含んだ同じ量のアセティック緩衝液（ａｃｅｔｉｃ  ｂｕｆｆｅｒ）と混合させる。そのサンプルを夜通しその溶液中に維持させて、水で洗浄し、ラミナーフラックスフード（ｌａｍｉｎａｒ  ｆｌｕｘ  ｈｏｏｄ）下で乾燥させる。
【００３７】
［例２］
サンプルの細胞非接着性の評価
例１の三つのサンプルと同じサイズの三つの非修正チタンのサンプルに対して、ブレシア  インスティテュート  オブ  ズープロフィラキス社によって提供されている造骨細胞型（ＭＧ−６３）の細胞との細胞接着試験を実施する。従来の方法に従って培養されるその細胞を、ヒアルロン酸で修正された二つのサンプルと、非修正チタンからなる二つの対照サンプルの上にシード（ｓｅｅｄ）する。三日間培養後に、それらサンプルを燐酸緩衝液でデリケートに洗浄し、接着した細胞をトリプシンで除去して血球計で数える。以下の結果が得られる。
［表１］
2008515511.tif 000003
【００３８】
そのデータは、上記で引用した文献データに従って、ヒアルロン酸によって修正された表面上に存在する細胞の数が可也減少していることを実証している。
【００３９】
［例３］
固定化されたヒアルロン酸層を備えたチタンネジ
例１の実験を、アグリアティ  エス．アール．エル社によって製造されているチタンインプラントネジに関して繰り返し実施する。そのネジを、材料の表面層の化学的組成を約８ｎｍの深さまでテストすることのできる表面試験技術であるＸ線光電子分光法（ＸＰＳ）によってテストする。次の結果が得られる（データは、原子％で示した）。
［表２］
2008515511.tif 000004
観察された化学量、特に、窒素の存在とＣ／Ｏの割合とＣ／Ｎの割合は、結合反応の予象によって予期され及び文献的データに従って予期されるように、ヒアルロン酸の薄い表面層の存在と一貫している。
【００４０】
［例４］
改善されたオステオインテグレーション特性の体内での確認
本発明により得られたチタンインプラント素子の体内における特性を評価するために、ラビットに関して複数の試験を実施する。詳しくは、直径２ｍｍ、長さ１０ｍｍの１０個の被覆ネジと１０個の非被覆対照ネジを十匹の成長したラビットの大腿骨幹の皮質骨に移植する。四週間後、そのアニマルを犠牲にして、組織構造調査及び機械的試験用の大腿骨を調達する。詳しくは、その測定されたパラメータは、
親和性指数、即ち、線維組織の介入のない界面と直接的に相対する骨長さとその界面の全長とに１００を掛けた割合と、
骨の成長、即ち、組織構造調査において観察されるような、骨充填領域と、ネジとスパイア（ｓｐｉｒｅ）の頂点との間に囲まれている総領域との百分率比である。
【００４１】
更に、骨からネジを引き出すのに必要とされる最大の力（プルアウトフォース）をプルアウトテストマシーン（ｐｕｌｌ  ｏｕｔ  ｔｅｓｔ  ｍａｃｈｉｎｅ）によって測定する。以下の結果が得られる。
［表３］
2008515511.tif 000005
【００４２】
組織測定データと機械的試験の双方共、ヒアルロン酸で被覆された、骨に移植のネジが、固定化されたヒアルロン酸に関する現在の知識に従って予期されるようなバイオパッシブ（ｂｉｏ−ｐａｓｓｉｖｅ）及び反接着性効果を発揮しないが、被覆されていないネジと比較して改善されたオステオインテグレーションを明らかに有していることを、明確に示している。
【００４３】
［例５］
ヒアルロン酸の薬剤リリース及び固定化用の層を備えたチタンネジ
例１において述べた反応装置を用いて、複数のチタンネジに先ずプロペンのプラズマ蒸着処理を施す。次に、それらネジを、薄いポリマー層で被覆し、アセトンとメチルアルコールとの５０：５０の混合液中に０．５％のポリブチルメタクリレートと０．１％のデクサメタゾーン（双方ともシグマ−アルドリッチ社によって供給される）が含められた溶液が充填されたスプレーガン（コンラッド−バルトリ社）を用いてデクサメタゾーンで被覆する。
【００４４】
こうして得られたネジに例１及び例３で述べた処理を施すことにより、骨の成長促進薬剤を解放させる特性とヒアルロン酸で被覆された生体活性表面を兼ね備えたチタンネジが得られる。
【００４５】
［例６］
ヒアルロン酸の固定化された層を備えたチタン素子からのデクサメタゾーンのリリース
例５において述べたようにして得られるネジを、２ｃｃの塩類中に浸し、３７℃の定温器中に維持させる。一定の時期に、その溶液を取り除いて、ＵＶ−Ｖｉｓ吸収スペクトルを、デクサメタゾーンの最大吸収波長である２４２．４ｎｍにおいて測定する。図１に示したように、リリース曲線が、時間の関数として得られる。
【００４６】
このようにして得られる骨組織インプラント素子は、骨の形成プロセスに影響を及ぼす薬剤のリリースを、上述したヒアルロン酸で被覆された表面の生体活性作用と結びつけることを可能にする。
【００４７】
本発明の趣旨を逸脱しない範囲において実施可能なインプラント素子の様々な変形例の中には、チタン，その合金又は、例えば、普通のステンレス鋼のようなコバルト−クロム以外の材料から作られたインプラント素子がある。これは、本発明の素子で得ることの可能な特異なオステオインテグレーション効果によって許容される。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１】リリース曲線を示した図である。
【図１】
2008515511.tif 000006
【手続補正書】
【提出日】平成19年10月4日(2007.10.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
金属質又はポリマー質のインプラント素子であって、その表面に化学的に結合した、骨組織の成長に刺激的作用を発揮する骨接触用のヒアルロン酸層を有するインプラント素子。
【請求項２】
前記素子が、歯科インプラントネジ，脊柱又は骨格固定ネジ，椎間円板又はケージである、請求項１に記載のインプラント素子。
【請求項３】
前記ネジ及びケージが、チタン又はそれの合金から作られている、請求項２に記載のインプラント素子。
【請求項４】
前記椎間円板が、チタン又はその合金又はコバルト−クロム合金から作られている、請求項２に記載のインプラント素子。
【請求項５】
表面が、サンドブラスト，酸エッチング又は電気化学的処理により荒く処理されている、請求項４に記載のインプラント素子。
【請求項６】
アミン基を有する基質のコーティングを有し、ヒアルロン酸が、そのヒアルロン酸のヒドロキシル基の官能基化によって、前記基質に結合されている、請求項１〜５の何れかに記載のインプラント素子。
【請求項７】
アミン基を有する前記基質が、好ましくは、ヘキシルアミン又はヘプチルアミンから選択された、アリルアミンユニット又はアルキルアミンユニットを含んでいる、請求項６に記載のインプラント素子。
【請求項８】
前記ヒアルロン酸の層が、０．５ｎｍと１００００ｎｍの間の厚さを有している、請求項６又は７に記載のインプラント素子。
【請求項９】
前記ヒアルロン酸の層が、１ｎｍと１０００ｎｍの間の厚さを有している、請求項６又は７に記載のインプラント素子。
【請求項１０】
前記ヒアルロン酸の層が、１．５ｎｍと１００ｎｍの間の厚さを有している、請求項６又は７に記載のインプラント素子。
【請求項１１】
上記ヒアルロン酸の層が、Ｘ線光電子分光法によって数えられる０．６以上の分別適用範囲を有している、請求項１〜１０の何れかに記載のインプラント素子。
【請求項１２】
骨の成長を促進させることのできるリリース可能な薬剤又は生体活性剤を更に含んでいる、請求項１〜１１の何れかに記載のインプラント素子。
【請求項１３】
前記薬剤又は生体活性剤が、生物分解性又は水溶性層にエングローブ，吸収又は吸着されている、請求項１２に記載のインプラント素子。
【請求項１４】
前記生物分解性層が、ヒアルロン酸，橋かけされたヒアルロン酸又は全ヒアルロン酸エステルの如きヒアルロン酸誘導体から作られている、請求項１３に記載のインプラント素子。
【請求項１５】
前記薬剤又は生体活性剤が、ポリマー又はセラミック層にエングローブ，吸収又は吸着されている、請求項１２に記載のインプラント素子。
【請求項１６】
前記ヒアルロン酸が固定化された前記基質が、前記薬剤又は生体活性剤がエングローブ，吸収又は吸着されている前記ポリマー又はセラミック層に蒸着されている、請求項１５に記載のインプラント素子。
【請求項１７】
前記薬剤又は前記生体活性剤が、デクサメタゾーン，デクサメタゾーン−ホスファート又はそれのアセテート可溶性態，様々な形態のビタミンＤ，生長因子，骨の形態形成プロテインとして知られているプロテイン族，ヘパリンの如きポリサッカライド型の分子，コンドロイチンサルフェイト及びヒアルロン酸から選択されている、請求項１２又は１３に記載のインプラント素子。
【請求項１８】
前記ポリマー基質が、シリコーン，オレフィン，又はアクリル型のポリマーで、好ましくは、ポリメチルジシロキサン，ポリブタジエン，ポリメチルメタアクリレート，ポリエチルメタアクリレート，ポリブチルメタクリレート，ポリウレタン，フッ化ポリマー，ポリエステル，好ましくはポリ−ヒドロキシエチルメタアクリレート又はポリ−ヒドロキシブチメタアクリレートから選択された親水性ポリアクリラートから選択されたポリマーを含んでいる、請求項１２又は１６に記載のインプラント素子。
【請求項１９】
前記セラミック層が、アルミナ−ベース不活性セラミック，シリケート−ベース不活性セラミック，シリコ−アルミナート−ベース不活性セラミック，又はカルシウムホスファート又はヒドロキシアパタイトの如き生体活性セラミックを含んでいる、請求項１２又は１５に記載のインプラント素子。
【請求項２０】
前記セラミック層が、コンパクト形態又は多孔質形態にある、請求項１９に記載のインプラント素子。
【請求項２１】
請求項１〜２０の何れかに記載のインプラント素子を調製する方法であって、
金属又はポリマーのインプラント素子を提供する工程と、
前記インプラント素子の表面を、アミン基を有する基質で被覆する工程と、
ヒアルロン酸を、同ヒアルロン酸のヒドロキシル基の官能基化によって前記基質のアミン基に結合させる工程を有しているインプラント素子を調製する方法。
【請求項２２】
前記インプラント素子の表面を、アミン基を有する基質で被覆する工程が、プラズマ相で揮発性特性を有するアミンを選択する工程と、官能基化可能なアミン基を含む基質層を生成するようにプラズマ相のアミンを前記インプラント素子の表面に蒸着させる工程とを含んでいる、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
アミンの前記プラズマ蒸着が、圧力が８０と３００ｍＴｏｒｒの間、入力パワーが５と２００Ｗの間、蒸着時間が１ｍｓと３００ｓの間という条件で実施される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２４】
前記アミンのプラズマ蒸着処理が、１ｍｓと１００ｍｓとの間の活性プラズマ，不活性プラズマサイクルでのパルスプラズマ条件で実施される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記アミンのプラズマ蒸着処理に先立って、前記表面をエアー又は酸素プラズマで清浄して、前記基質に対する接着力を増加させるための処理を実施する、請求項２１〜２４の何れかに記載の方法。
【請求項２６】
前記アミンが、アリルアミン，ヘキシルアミン及びヘプチルアミンから選択される、請求項２１〜２５の何れかに記載の方法。
【請求項２７】
前記ヒアルロン酸のヒドロキシル基の官能基化によって前記基質のアミン基にヒアルロン酸を結合する前記工程が、前記ヒアルロン酸のアルコール基を選択的に酸化させてアルデヒド基にさせる工程と、前記ヒアルロン酸の前記アルデヒド基を還元アミノ化によって前記基質の前記アミン基に結合させる工程とを含んでいる、請求項２１〜２６の何れかに記載の方法。
【請求項２８】
前記ヒアルロン酸のアルコール基を選択的に酸化させてアルデヒド基にさせる前記工程が、過ヨウ素酸ナトリウムの存在下で実施される、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
還元アミン化の反応が、ナトリウムシアノボロヒドライドの存在下で実施される、請求項２７又は２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記ヒアルロン酸を、ジメチルスルホキサイド又はそれと水との混合物，ジメチルフォルマミド又はそれと水との混合物，Ｎ−メチルピロリドン又はそれと水との混合物のような水溶液又は適切な溶媒液で結合させる、請求項２７〜２９の何れかに記載の方法。
【請求項３１】
金属又はポリマーインプラント素子を提供する工程と、
前記インプラント素子の表面をポリマー又はセラミック層でコーティングする工程と、
前記ポリマー又はセラミック層に、骨組織の成長を促進させることの可能なリリース可能な薬剤又は生体活性成分をエングローブ，吸収又は吸着させる工程と、
前記薬剤又は生体活性成分がエングローブ，吸収又は吸着された前記ポリマー又はセラミック層にアミン基を有する基質を堆積させる工程と、
ヒアルロン酸のヒドロキシル基の官能基化によってヒアルロン酸を前記基質のアミン基に結合させる工程を含んでいる、請求項２１〜３０の何れかに記載の方法。
【請求項３２】
インプラント素子の表面をポリマー又はセラミック層でコーティングする前記工程が、浸漬，スプレーガンと超音波スプレーの双方，気相蒸着又はプラズマ蒸着によって、または、セラミック層の場合には、ゾルゲル技術を用いて実施される、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記薬剤又は生体活性素を、共通の溶液，けん濁液又は乳濁液のスプレーによって又は共通の溶液，けん濁液又は乳濁液中に浸漬させる浸漬処理によって、前記ポリマー又はセラミック層にエングローブ，吸収又は吸着させる、請求項３１又は３２に記載の方法。
【請求項３４】
薬剤又は生体活性成分をポリマー又はセラミック層にエングローブ，吸収又は吸着させる前記工程が、３０％までの化学量論的量、好ましくは、１０％までの化学量論的量の過剰な薬剤又は生体活性成分の存在下において実施される、請求項３１〜３３の何れかに記載の方法。
【請求項３５】
請求項２１〜３４の何れかに記載の方法によって得られる、請求項１〜２０の何れかに記載のインプラント素子。
【請求項３６】
インプラント素子を調整するためにヒアルロン酸を使用する方法であって、骨組織と接触されるインプラント素子のオステオインテグレーションを促進させるべくヒアルロン酸を固定化させる、インプラント素子を調製するためにヒアルロン酸を使用する方法。
【請求項３７】
前記素子が請求項１〜２０の何れかに記載の素子である、請求項３６に記載の方法。
【国際調査報告】
2008515511.tif 000007
2008515511.tif 000008
2008515511.tif 000009