(57)【要約】  本発明は、ソフォラ属、特にＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓおよびＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓの植物の根からの抽出物と、ゲラニウム油を含む生薬組成物、並びに生薬組成物をＨ．ｐｙｌｏｒｉ感染に起因する胃潰瘍を有するヒトおよび他の哺乳動物に投与する方法に関する。該組成物は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいてＨ．ｐｙｌｏｒｉを根絶できることが示される。本発明は、また、ソフォラ植物の根からの抽出物およびシトロネロールを含む組成物に関する。本発明は、さらに、胃潰瘍を阻止するシトロネロールの使用に関する。本発明は、また、Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼの酵素活性を阻害して心筋収縮を増強し、心不全を予防するための該組成物の使用に関する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ゲラニウム油およびソフォラ植物の根からの抽出物を含む組成物を哺乳類に投与することを含む、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉに感染した哺乳類を治療する方法。
【請求項２】
哺乳類がヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
哺乳類がイヌ、サル、非げっ歯類またはげっ歯類である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
げっ歯類がマウス、ラット、ウサギ、またはハムスターである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
組成物が経口投与により投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
組成物が腹腔内投与により投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
組成物が静脈内投与により投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
組成物がオイルカプセルの形態である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
組成物が錠剤である、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
組成物が丸剤の形態である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
組成物がペーストである、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
組成物が液体である、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
組成物がシロップである、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
組成物が煎剤の形態である、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
組成物が、別個の食用可能な形態のソフォラ植物の根およびペラルゴニウム植物を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
食用可能な形態のペラルゴニウム植物が、ゲラニウム油またはペラルゴニウム植物の煎じ汁混合物である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
食用可能な形態のソフォラ植物が、粉末、ペースト、またはソフォラ植物の煎じ汁混合物である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
組成物が注射に適した形態である、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
組成物が食品添加剤である、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
組成物が栄養補助食品である、請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
組成物が健康食品の形態である、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
ゲラニウム油が、ペラルゴニウム属の１つまたはそれ以上の種から抽出される、請求項１に記載の方法。
【請求項２３】
ゲラニウム油が、ペラルゴニウム属、グラベオレンズ種の植物から抽出される、請求項１に記載の方法。
【請求項２４】
ゲラニウム油が、ペラルゴニウム属、ロゼウム種の植物から抽出される、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
ゲラニウム油が、ペラルゴニウム属、テレビンシンセウム種の植物から抽出される、請求項１に記載の方法。
【請求項２６】
ソフォラ植物の根からの抽出物が、２つ以上のソフォラ属の植物根からの抽出物である、請求項１に記載の方法。
【請求項２７】
組成物が、ゲラニウム油、マトリン、およびオキシマトリンを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２８】
組成物が、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸シトロネリル、ギ酸ゲラニル、マトリン、およびオキシマトリンを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２９】
組成物が、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸シトロネリル、ギ酸ゲラニル、並びに、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ、Ｓｈｏｐｈｏｒａ  ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｓｕｂｐｒｏｓｔｒａｔａ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ａｌｏｐｅｃｕｒｏｉｄｅｓ、Ｓｏｐｈｒａ  ｍｏｏｒｃｒｏｆｔｉａｎａおよびＥｕｃｈｒｅｓｔａ  ｓｔｒｉｇｉｌｌｏｓａを含む群から選ばれる少なくとも１つの植物の根からの抽出物、を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３０】
組成物が、ゲラニウム油、並びに、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ、Ｓｈｏｐｈｏｒａ  ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｓｕｂｐｒｏｓｔｒａｔａ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ａｌｏｐｅｃｕｒｏｉｄｅｓ、Ｓｏｐｈｒａ  ｍｏｏｒｃｒｏｆｔｉａｎａおよびＥｕｃｈｒｅｓｔａ  ｓｔｒｉｇｉｌｌｏｓａを含む群から選ばれる少なくとも１つの植物の根からの抽出物、を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３１】
組成物が、ゲラニウム油およびＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓの根の抽出物を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３２】
組成物が、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸ゲラニル、ギ酸シトロネリル、リナロール、ｔｒａｎｓ−ローズオキサイド、ｃｉｓ−ローズオキサイド、マトリン、オキシマトリン、およびソフォカーピンを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３３】
組成物がＡおよびＢを含む請求項１に記載の方法であって、
Ａが、ヘキサノール、３−ヘキセン−１−オール、α−ピネン、β−ピネン、Ｐ−シメン、リモネン、１，８−シネオール、オシメン、リナロールオキサイド、リナロール、ｔｒａｎｓ−ローズオキサイド、ｃｉｓ−ローズオキサイド、シトロネラール、メントン、イソメトン、メントール、テルピネオール、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸シトロネリル、ギ酸ゲラニル、カリオフェレン、プロピオン酸シトロネリル、ガージュネン、カジエンからなる群より選ばれ、
Ｂが、マトリン、オキシマトリン、アナジリン、メチルシチシン、シトシン、ソフォカーピン、ソフォカーピン  Ｎ−オキサイド、ソフォラミン、ソフォラノール、ソフォラノン、ソフォラジン、ソフォラノクロメン、ソフォラドクロメン、ペテロカーピン、ゲニステイン、マアクキアン、トリフォリリジン、シトステロール、ルペオール、およびアルキルアルコールエステルからなる群より選ばれる、方法。
【請求項３４】
組成物が、ゲラニウム油およびＳｏｐｈｏｒａ  ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根からの抽出物を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３５】
組成物が、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸ゲラニル、ギ酸シトロネリル、リナロール、ｔｒａｎｓ−ローズオキサイド、ｃｉｓ−ローズオキサイド、クラニノール、マトリン、オキシマトリン、およびソフォカーピンを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３６】
組成物が、ＡおよびＢを含む請求項１に記載の方法であって、
Ａが、ヘキサノール、３−ヘキセン−１−オール、α−ピネン、β−ピネン、Ｐ−シメン、リモネン、１，８−シネオール、オシメン、リナロールオキサイド、リナロール、ｔｒａｎｓ−ローズオキサイド、ｃｉｓ−ローズオキサイド、シトロネラール、メントン、イソメトン、メントール、テルピネオール、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸シトロネリル、ギ酸ゲラニル、カリオフェレン、プロピオン酸シトロネリル、ガージュネン、カジエンからなる群より選ばれ、
Ｂが、マトリン、オキシマトリン、ソフォラノール、Ｎ−メチルシチシン、アナジリン、バプチフォリン、ソフォカーピン、ソフォリジン、イソマトリン、７，１１−デヒドロマトリン、ソフォラミン、７−デヒドロソフォラミン、９α−ヒドロキシ−ソフォラミン、５α，９α−ジヒドロキシマトリン、Ｎ−オキシソフォカーピン、ソフォラノール  Ｎ−オキサイド、ロームビフォリン、ルパニン、ママニン、クララミン、イソクララミン、およびクラリノールからなる群より選ばれる、方法。
【請求項３７】
組成物が、医薬的に許容可能な溶媒を更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３８】
組成物が、約２８５ｍｇ／６０ｋｇ／日から約４，６７５ｍｇ／６０ｋｇ／日の範囲の量で投与される、請求項２に記載の方法。
【請求項３９】
組成物が、約９７％から約９９％の範囲のゲラニウム油および約３％から約０．６％の範囲のＳｏｐｈｏｒａ  ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根からの抽出物を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項４０】
組成物が、ゲラニウム油、Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根からの抽出物、および賦形剤を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４１】
組成物が、約３００ｍｇ／ｋｇ／日から約６００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲の量である、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
ゲラニウム油およびソフォラ植物の根からの抽出物を含む組成物をＨ．ｐｙｌｏｒｉに送達することを含む、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ増殖を阻害する方法。
【請求項４３】
Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ増殖がヒトで起こる、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
ゲラニウム油がペラルゴニウム属の１またはそれ以上の種から抽出される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４５】
ゲラニウム油が、ペラルゴニウム属、グラベオレンズ種の植物から抽出される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４６】
ゲラニウム油が、ペラルゴニウム属、ロゼウム種の植物から抽出される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４７】
ゲラニウム油が、ペラルゴニウム属、テレビンシンセウム種の植物から抽出される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４８】
ソフォラ植物の根からの抽出物が、１またはそれ以上のソフォラ属の植物根から抽出される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４９】
組成物が、ゲラニウム油、マトリン、およびオキシマトリンを含む、請求項４２に記載の方法。
【請求項５０】
組成物が、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸シトロネリル、ギ酸ゲラニル、マトリン、およびオキシマトリンを含む、請求項４２に記載の方法。
【請求項５１】
組成物が、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸シトロネリル、ギ酸ゲラニル、並びに、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ、Ｓｈｏｐｈｏｒａ  ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｓｕｂｐｒｏｓｔｒａｔａ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ａｌｏｐｅｃｕｒｏｉｄｅｓ、Ｓｏｐｈｒａ  ｍｏｏｒｃｒｏｆｔｉａｎａおよびＥｕｃｈｒｅｓｔａ  ｓｔｒｉｇｉｌｌｏｓａを含む群から選ばれる少なくとも１つの植物の根からの抽出物、を含む、請求項４２に記載の方法。
【請求項５２】
組成物が、ゲラニウム油、並びに、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ、Ｓｈｏｐｈｏｒａ  ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｓｕｂｐｒｏｓｔｒａｔａ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ａｌｏｐｅｃｕｒｏｉｄｅｓ、Ｓｏｐｈｒａ  ｍｏｏｒｃｒｏｆｔｉａｎａおよびＥｕｃｈｒｅｓｔａ  ｓｔｒｉｇｉｌｌｏｓａを含む群から選ばれる少なくとも１つの植物の根からの抽出物、を含む、請求項４２に記載の方法。
【請求項５３】
組成物が、ゲラニウム油およびＳｏｐｈｒａ  ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓの根からの抽出物を含む、請求項４２に記載の方法。
【請求項５４】
組成物が、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸ゲラニル、ギ酸シトロネリル、リナロール、ｔｒａｎｓ−ローズオキサイド、ｃｉｓ−ローズオキサイド、マトリン、オキシマトリン、およびソフォカーピンを含む、請求項４２に記載の方法。
【請求項５５】
組成物がＡおよびＢを含む請求項４２に記載の方法であって、
Ａが、ヘキサノール、３−ヘキセン−１−オール、α−ピネン、β−ピネン、Ｐ−シメン、リモネン、１，８−シネオール、オシメン、リナロールオキサイド、リナロール、ｔｒａｎｓ−ローズオキサイド、ｃｉｓ−ローズオキサイド、シトロネラール、メントン、イソメトン、メントール、テルピネオール、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸シトロネリル、ギ酸ゲラニル、カリオフェレン、プロピオン酸シトロネリル、ガージュネン、カジエンからなる群より選ばれ、
Ｂが、マトリン、オキシマトリン、アナジリン、メチルシチシン、シトシン、ソフォカーピン、ソフォカーピン  Ｎ−オキサイド、ソフォラミン、ソフォラノール、ソフォラノン、ソフォラジン、ソフォラノクロメン、ソフォラドクロメン、ペテロカーピン、ゲニステイン、マアクキアン、トリフォリリジン、シトステロール、ルペオール、およびアルキルアルコールエステルからなる群より選ばれる、方法。
【請求項５６】
組成物が、ゲラニウム油およびＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓの根からの抽出物を約３０：１の重量比で含む、請求項５３に記載の方法。
【請求項５７】
組成物が、約１０％のＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ粉末および約９０％のゲラニウム油粉末を含む、請求項５３に記載の方法。
【請求項５８】
組成物が、約３０％のＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ粉末および約７０％のゲラニウム油粉末を含む、請求項５３に記載の方法。
【請求項５９】
組成物が、賦形剤を含み、少なくとも約３００μｇ／ｍｌの濃度を有する、請求項５６に記載の方法。
【請求項６０】
組成物が、賦形剤を含み、約３００μｇ／ｍｌから約３０ｍｇ／ｍｌの濃度を有する、請求項５６に記載の方法。
【請求項６１】
組成物が、ゲラニウム油およびＳｏｐｈｏｒａ  ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根からの抽出物を含む、請求項４２に記載の方法。
【請求項６２】
組成物が、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸ゲラニル、ギ酸シトロネリル、リナロール、ｔｒａｎｓ−ローズオキサイド、ｃｉｓ−ローズオキサイド、クラリノール、マトリン、オキシマトリン、およびソフォカーピンを含む、請求項４２に記載の方法。
【請求項６３】
組成物がＡおよびＢを含む、請求項４２に記載の方法であって、
Ａが、ヘキサノール、３−ヘキセン−１−オール、α−ピネン、β−ピネン、Ｐ−シメン、リモネン、１，８−シネオール、オシメン、リナロールオキサイド、リナロール、ｔｒａｎｓ−ローズオキサイド、ｃｉｓ−ローズオキサイド、シトロネラール、メントン、イソメトン、メントール、テルピネオール、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸シトロネリル、ギ酸ゲラニル、カリオフェレン、プロピオン酸シトロネリル、ガージュネン、カジエンからなる群より選ばれ、
Ｂが、マトリン、オキシマトリン、ソフォラノール、Ｎ−メチルシチシン、アナジリン、バプチフォリン、ソフォカーピン、ソフォリジン、イソマトリン、７，１１−デヒドロマトリン、ソフォラミン、７−デヒドロソフォラミン、９α−ヒドロキシ−ソフォラミン、５α，９α−ジヒドロキシマトリン、Ｎ−オキシソフォカーピン、ソフォラノール  Ｎ−オキサイド、ロームビフォリン、ルパニン、ママニン、クララミン、イソクララミン、およびクラリノールからなる群より選ばれる、方法。
【請求項６４】
哺乳類に、シトロネロールを含む組成物を投与することを含む、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉに感染した哺乳類を治療する方法。
【請求項６５】
哺乳類がヒトである、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
組成物が経口投与される、請求項６４に記載の方法。
【請求項６７】
組成物が約２５ｍｇ／ｋｇの投与量である、請求項６４に記載の方法。
【請求項６８】
組成物が約１５０ｍｇ／６０ｋｇの投与量である、請求項６５に記載の方法。
【請求項６９】
投与量が、１日２回投与される、請求項６７または６８に記載の方法。
【請求項７０】
シトロネロールを含む組成物をＨ．ｐｙｌｏｒｉに送達することを含む、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ増殖を阻害する方法。
【請求項７１】
ゲラニウム油およびソフォラ植物の根からの抽出物を含む組成物を哺乳類に投与することを含む、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉに起因する胃潰瘍を予防する方法。
【請求項７２】
哺乳類がヒトである、請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
（ａ）心不全に罹患している哺乳類を同定すること、
（ｂ）哺乳類に組成物を投与する経路を決定すること、
（ｃ）哺乳類に投与される組成物の形態を決定すること、
（ｄ）ゲラニウム油およびＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根からの抽出物を含む組成物の投与量を決定すること、
（ｅ）心不全に罹患している哺乳類に、投与量の組成物を送達すること、
の各ステップを含む、組成物を投与する方法。
【請求項７４】
（ａ）心不全に罹患している哺乳類を同定すること、
（ｂ）哺乳類に組成物を投与する経路を決定すること、
（ｃ）哺乳類に投与される組成物の形態を決定すること、
（ｄ）ゲラニウム油およびＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓの根からの抽出物を含む組成物の投与量を決定すること、
（ｅ）心不全に罹患している哺乳類に、投与量の組成物を送達すること、
の各ステップを含む、組成物を投与する方法。
【請求項７５】
Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼを、ゲラニウム油およびソフォラ植物の根からの抽出物を含む組成物と接触させることを含む、Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼを阻害する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００４年７月２８日に出願された米国特許出願番号１０／９０１，６９３の優先権を主張するものであり、該出願は、参照により本明細書に取り入れられるものとする。
【０００２】
本発明は、一般的に、胃潰瘍、より具体的には、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ感染に関連した胃潰瘍を有する人への生薬組成物の使用に関連する。本発明は、また、一般的に、心不全を有する人への生薬組成物の使用に関連し、より具体的には、Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼの酵素活性を阻害することに関連する。
【背景技術】
【０００３】
消化性潰瘍は、食道下部、胃、十二指腸、および空腸の粘膜の浸食である。最も一般的な消化性潰瘍の形態は、十二指腸潰瘍および胃潰瘍であり、それぞれすべての消化性潰瘍の８０％および１６％を占める。消化性潰瘍の３つの主要原因は、感染、特定の型の薬剤、および胃液の過剰分泌に起因する障害である。Ｈ．ｐｙｌｏｒｉによる感染は、十二指腸潰瘍の９０％、胃潰瘍の８０％の原因であることが見出されている。
【０００４】
Ｈ．ｐｙｌｏｒｉは、消化管を覆う粘膜組織に寄生する螺旋状のグラム陰性菌である。消化性潰瘍患者の大多数は、潰瘍症状を軽減し、胃粘膜の炎症を抑えるために、Ｈ２遮蔽剤およびプロトンポンプ阻害剤が与えられ、胃酸の分泌を抑制する。しかし、細菌感染は、治療されない。消化性潰瘍の治療計画の一部として、現在、医学界では、細菌の根絶に向かいつつある。Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ感染の治療は、アモキシリン、テトラサイクリン、メトロニダゾール、またはクラリスロマイシンのような１または２つの抗生物質、加えてラニチジンクエン酸ビスマス、サブサリチル酸ビスマスのいずれか、または、胃酸の分泌を抑えるプロトンポンプ阻害剤の１〜２週間の投与からなる。このような治療計画は、抗生物質の使用に大きく依存しており、薬剤の組み合わせ投与を伴う。抗生物質の使用は、抗生物質耐性のため、一部の患者には効果がない場合がある。
【０００５】
心不全は、心臓が充分な速度でまたは充分な容積の血液を送ることができない状態であり、Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼを阻害する薬剤、即ち、クアバイン、ジタリジン、ジジヘルミン、ジゴキシン、ジジコサイド、ジジトキシン、ジジタミン、およびラナトサイドＣにより治療されてきた。Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼの阻害は、心筋細胞内部のＮａ+とＣａ+の濃度を増加させ、これにより心筋の収縮を強める。Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼは、Ｎａ+／Ｋ+ポンプに必要なエネルギーを供給するためのＡＴＰの加水分解に関与する酵素であり、ほとんどすべての真核生物細胞の原形質膜中に見出され、特に腎臓組織、脳組織、および心臓心室筋細胞に豊富にある。Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼの酵素活性を阻害することにより、Ｎａ+／Ｋａ+ポンプは、Ｎａ+イオンを送ることができなくなり、細胞内部のＣａ+イオン濃度が増加することとなる。
【０００６】
Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼを阻害する薬剤は、吐き気、頭痛、視覚障害、精神錯乱等のような種々の副作用を引き起こしうる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、胃潰瘍を引き起こすＨ．ｐｙｌｏｒｉを根絶する方法に用いられる組成物を提供する。本発明は、また、Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼの酵素活性を阻害する方法に用いられる他の組成物を提供する。本発明は、さらに、これらの組成物を投与する方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本明細書に具体的に表現され、広く記載されるように、本発明の目的を達成するために、本発明の１つ態様は、ゲラニウム油およびソフォラ植物の根からの抽出物を含む組成物を哺乳類に投与することを含む、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉに感染した哺乳類を治療する方法である。
【０００９】
本発明の方法は、さらに、経口投与、腹腔内投与、および静脈内投与の経路を提供する。本発明は、さらに、ペラルゴニウム植物およびソフォラ植物のオイルカプセル、錠剤、丸剤、液体、シロップ、煎じ汁、粉末の形態、食用可能な形態の組成物を使用し、同時にまたは個別に、注射、健康食品、食品添加剤、または栄養補助食品を摂取する方法を提供する。
【００１０】
本発明は、さらに、ゲラニウム油がＰ．ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ（グラベオレンズ）、Ｐ．ｒｏｓｅｕｍ（ロゼウム）、Ｐ．ｔｅｒｅｂｉｎｔｈｉｎｃｅｕｍ（テレビンシンセウム）またはペラルゴニウム属の１またはそれ以上の種から抽出された組成物を利用する。本発明の方法はさらに、ゲラニウム油、マトリン、およびオキシマトリンを含む組成物を利用することを含む。本発明の他の態様では、本方法は、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸シトロネリル、ギ酸ゲラニル、マトリン、およびオキシマトリンを含む組成物を利用する。
【００１１】
本発明の他の態様では、組成物は、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸シトロネリル、ギ酸ゲラニル、並びに、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ、Ｓｈｏｐｈｏｒａ  ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｓｕｂｐｒｏｓｔｒａｔａ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ａｌｏｐｅｃｕｒｏｉｄｅｓ、Ｓｏｐｈｒａ  ｍｏｏｒｃｒｏｆｔｉａｎａおよびＥｕｃｈｒｅｓｔａ  ｓｔｒｉｇｉｌｌｏｓａを含む群から選ばれる少なくとも１つの植物の根からの抽出物、を含む。本発明のさらに別の態様では、組成物は、ゲラニウム油、並びに、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ、Ｓｈｏｐｈｏｒａ  ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｓｕｂｐｒｏｓｔｒａｔａ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ａｌｏｐｅｃｕｒｏｉｄｅｓ、Ｓｏｐｈｒａ  ｍｏｏｒｃｒｏｆｔｉａｎａおよびＥｕｃｈｒｅｓｔａ  ｓｔｒｉｇｉｌｌｏｓａを含む群から選ばれる少なくとも１つの植物の根からの抽出物、を含む。
【００１２】
本発明は、また、組成物がゲラニウム油およびＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓの根からの抽出物を含む方法を利用する。本発明の他の態様では、組成物は、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸ゲラニル、ギ酸シトロネリル、リナロール、ｔｒａｎｓ−ローズオキサイド、ｃｉｓ−ローズオキサイド、マトリン、オキシマトリン、およびソフォカーピン（ｓｏｐｈｏｃａｒｐｉｎｅ）を含む。
【００１３】
本発明の方法は、ＡおよびＢを含む組成物を利用し、Ａは、ヘキサノール、３−ヘキセン−１−オール、α−ピネン、β−ピネン、Ｐ−シメン、リモネン、１，８−シネオール、オシメン、リナロールオキサイド、リナロール、ｔｒａｎｓ−ローズオキサイド、ｃｉｓ−ローズオキサイド、シトロネラール、メントン、イソメトン（ｉｓｏ−ｍｅｔｈｏｎ）、メントール、テルピネオール、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸シトロネリル、ギ酸ゲラニル、カリオフェレン（ｃａｒｙｏｐｈｅｌｌｅｎｅ）、プロピオン酸シトロネリル、ガージュネン（ｇｕｒｊｕｎｅｎｅ）、カジエン（ｃａｄｉｅｎｅ）からなる群より選ばれ、Ｂは、マトリン、オキシマトリン、アナジリン、メチルシチシン、シトシン、ソフォカーピン、ソフォカーピン  Ｎ−オキサイド、ソフォラミン（ｓｏｐｈｏｒａｍｉｎｅ）、ソフォラノール（ｓｏｐｈｏｒａｎｏｌ）、ソフォラノン（ｓｏｐｈｏｒａｎｏｎｅ）、ソフォラジン（ｓｏｐｈｏｒａｄｉｎ）、ソフォラノクロメン（ｓｏｐｈｏｒａｎｏｃｈｒｏｍｅｎｅ）、ソフォラドクロメン（ｓｏｐｈｏｒａｄｏｃｈｒｏｍｅｎｅ）、ペテロカーピン（ｐｔｅｒｏｃａｒｐｉｎｅ）、ゲニステイン（ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ）、マアクキアン（ｍａａｃｋｉａｎ）、トリフォリリジン（ｔｒｉｆｏｌｉｒｈｉｚｉｎ）、シトステロール、ルペオール（ｌｕ−ｐｅｏｌ）、およびアルキルアルコールエステルからなる群より選ばれる。
【００１４】
本発明の特別の態様では、組成物は、ゲラニウム油およびＳｏｐｈｏｒａ  ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根からの抽出物が含まれる。本発明のさらに他の態様では、組成物は、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸ゲラニル、ギ酸シトロネリル、リナロール、ｔｒａｎｓ−ローズオキサイド、ｃｉｓ−ローズオキサイド、クラリノール、マトリン、オキシマトリン、およびソフォカーピンを含む。本発明による方法は、さらに、ＡおよびＢを含む組成物を利用し、Ａは、ヘキサノール、３−ヘキセン−１−オール、α−ピネン、β−ピネン、Ｐ−シメン、リモネン、１，８−シネオール、オシメン、リナロールオキサイド、リナロール、ｔｒａｎｓ−ローズオキサイド、ｃｉｓ−ローズオキサイド、シトロネラール、メントン、イソメトン、メントール、テルピネオール、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸シトロネリル、ギ酸ゲラニル、カリオフェレン、プロピオン酸シトロネリル、ガージュネン、カジエンからなる群より選ばれ、Ｂは、マトリン、オキシマトリン、ソフォラノール、Ｎ−メチルシチシン、アナジリン、バプチフォリン（ｂａｐｔｉｆｏｌｉｎｅ）、ソフォカーピン、ソフォリジン（ｓｏｐｈｏｒｉｄｉｎｅ）、イソマトリン、７，１１−デヒドロマトリン、ソフォラミン、７−デヒドロソフォラミン、９α−ヒドロキシ−ソフォラミン、５α，９α−ジヒドロキシマトリン、Ｎ−オキシソフォカーピン、ソフォラノール  Ｎ−オキサイド、ロームビフォリン（ｒｈｏｍｂｉｆｏｌｉｎｅ）、ルパニン（ｌｕｐａｎｉｎｅ）、ママニン（ｍａｍａｎｉｎｅ）、クララミン（ｋｕｒａｒａｍｉｎｅ）、イソクララミン（ｉｓｏｋｕｒａｒａｍｉｎｅ）、およびクラリノール（ｋｕｒａｒｉｎｏｌ）からなる群より選ばれる。
【００１５】
本発明の方法は、ヒトへの有効投与量が約２８５ｍｇ／６０ｋｇ／日から約４，６７５ｍｇ／６０ｋｇ／日の範囲である組成物を利用する。本発明の他の態様では、有効投与量は、ゲラニウム油が約９７％から約９９％の範囲、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根からの抽出物が約３％から約０．６％の範囲の割合である。
【００１６】
本発明の他の態様では、ゲラニウム油、Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根からの抽出物、および賦形剤を含む組成物が、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉに感染した哺乳類を治療するために使用される。さらなる態様では、組成物は、約３００ｍｇ／ｋｇ／日から約６００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲の投与量である。
【００１７】
本発明は、ゲラニウム油およびソフォラ植物の根からの抽出物を含む組成物をＨ．ｐｙｌｏｒｉに送達することを含む、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ増殖を阻害する方法を提供する。本発明は、さらに、ヒトにおけるＨ．ｐｙｌｏｒｉの増殖部に組成物を送達することを提供する。他の態様は、ペラルゴニウム属の１またはそれ以上の種から抽出されたゲラニウム油、ペラルゴニウム属グラベオレンズ（ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓ）種の植物から抽出されたゲラニウム油、ペラルゴニウム属ロゼウム（ｒｏｓｅｕｍ）種の植物から抽出されたゲラニウム油、およびペラルゴニウム属テレビンシンセウム（ｔｅｒｅｂｉｎｔｈｉｎｃｅｕｍ）種の植物から抽出されたゲラニウム油の組成物を使用することを提供する。
【００１８】
他の態様では、本方法は、ゲラニウム油、マトリン、およびオキシマトリンを含む組成物を使用する。本発明の方法は、さらに、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸シトロネリル、ギ酸ゲラニル、マトリン、およびオキシマトリンを含む組成物を利用する。本発明の方法は、さらに、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸シトロネリル、ギ酸ゲラニル、並びに、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ、Ｓｈｏｐｈｏｒａ  ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｓｕｂｐｒｏｓｔｒａｔａ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ａｌｏｐｅｃｕｒｏｉｄｅｓ、Ｓｏｐｈｒａ  ｍｏｏｒｃｒｏｆｔｉａｎａおよびＥｕｃｈｒｅｓｔａ  ｓｔｒｉｇｉｌｌｏｓａを含む群から選ばれる少なくとも１つの植物の根からの抽出物、を含む組成物を利用する。
【００１９】
あるいは、本方法は、ゲラニウム油、並びに、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ、Ｓｈｏｐｈｏｒａ  ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｓｕｂｐｒｏｓｔｒａｔａ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ａｌｏｐｅｃｕｒｏｉｄｅｓ、Ｓｏｐｈｒａ  ｍｏｏｒｃｒｏｆｔｉａｎａおよびＥｕｃｈｒｅｓｔａ  ｓｔｒｉｇｉｌｌｏｓａを含む群から選ばれる少なくとも１つの植物の根からの抽出物、を含む組成物を使用する。本発明の方法は、さらに、ゲラニウム油およびＳｏｐｈｒａ  ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓの根からの抽出物を含む組成物を使用する。本発明の他の態様では、組成物は、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸ゲラニル、ギ酸シトロネリル、リナロール、ｔｒａｎｓ−ローズオキサイド、ｃｉｓ−ローズオキサイド、マトリン、オキシマトリン、およびソフォカーピンを含む。本発明の方法では、組成物はＡおよびＢを含み、ここで、Ａは、ヘキサノール、３−ヘキセン−１−オール、α−ピネン、β−ピネン、Ｐ−シメン、リモネン、１，８−シネオール、オシメン、リナロールオキサイド、リナロール、ｔｒａｎｓ−ローズオキサイド、ｃｉｓ−ローズオキサイド、シトロネラール、メントン、イソメトン、メントール、テルピネオール、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸シトロネリル、ギ酸ゲラニル、カリオフェレン、プロピオン酸シトロネリル、ガージュネン、カジエンからなる群より選ばれ、Ｂは、マトリン、オキシマトリン、アナジリン、メチルシチシン、シトシン、ソフォカーピン、ソフォカーピン  Ｎ−オキサイド、ソフォラミン、ソフォラノール、ソフォラノン、ソフォラジン、ソフォラノクロメン、ソフォラドクロメン、ペテロカーピン、ゲニステイン、マアクキアン、トリフォリリジン、シトステロール、ルペオール、およびアルキルアルコールエステルからなる群より選ばれる。
【００２０】
本発明の他の態様では、組成物は、ゲラニウム油およびＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓの根からの抽出物を約３０：１の重量比で含む。本発明の方法は、さらに、約１０％のＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ粉末および約９０％のゲラニウム油粉末を含む組成物を含む。本発明の方法は、約３０％のＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ粉末および約７０％のゲラニウム油粉末を含む組成物を利用する。本発明のさらに他の態様では、濃度は、賦形剤の重量を含んで、少なくとも約３００μｇ／ｍｌである。本発明の他の態様では、濃度は、賦形剤の重量を含んで、約３００μｇ／ｍｌから約３０ｍｇ／ｍｌである。
【００２１】
本発明の方法は、ゲラニウム油およびＳｏｐｈｏｒａ  ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根からの抽出物を含む組成物を利用する。本発明の方法で使用される組成物は、さらに、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸ゲラニル、ギ酸シトロネリル、リナロール、ｔｒａｎｓ−ローズオキサイド、ｃｉｓ−ローズオキサイド、クラリノール、マトリン、オキシマトリン、およびソフォカーピンを含む。本発明の方法は、ＡおよびＢを含む組成物を利用し、ここで、Ａは、ヘキサノール、３−ヘキセン−１−オール、α−ピネン、β−ピネン、Ｐ−シメン、リモネン、１，８−シネオール、オシメン、リナロールオキサイド、リナロール、ｔｒａｎｓ−ローズオキサイド、ｃｉｓ−ローズオキサイド、シトロネラール、メントン、イソメトン、メントール、テルピネオール、シトロネロール、ゲラニオール、ギ酸シトロネリル、ギ酸ゲラニル、カリオフェレン、プロピオン酸シトロネリル、ガージュネン、カジエンからなる群より選ばれ、Ｂは、マトリン、オキシマトリン、ソフォラノール、Ｎ−メチルシチシン、アナジリン、バプチフォリン、ソフォカーピン、ソフォリジン、イソマトリン、７，１１−デヒドロマトリン、ソフォラミン、７−デヒドロソフォラミン、９α−ヒドロキシ−ソフォラミン、５α，９α−ジヒドロキシマトリン、Ｎ−オキシソフォカーピン、ソフォラノール  Ｎ−オキサイド、ロームビフォリン、ルパニン、ママニン、クララミン、イソクララミン、およびクラリノールからなる群より選ばれる。
【００２２】
本発明は、また、哺乳類に、シトロネロールを含む組成物を投与することを含む、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉに感染した哺乳類を治療する方法を提供する。より具体的には、哺乳類は、ヒトである。１つの特定の態様では、組成物は、経口投与される。他の態様では、使用される投与量は、約２５ｍｇ／ｋｇであり、より具体的には、組成物は、１日２回投与される。他の態様では、ヒトへの投与量は、１５０ｍｇ／６０ｋｇである（２５ｍｇ／ｋｇの６０倍を１０で割った計算に基づいており、これは、当該分野で周知のヒトへの投与量変換である）。
【００２３】
本発明は、シトロネロールを含む組成物をＨ．ｐｙｌｏｒｉに送達することを含む、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ増殖を阻害する方法を提供する。
【００２４】
本発明は、また、ゲラニウム油およびソフォラ植物の根からの抽出物を含む組成物を哺乳類に投与することを含む、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉに起因する胃潰瘍を予防する方法を提供する。
【００２５】
本発明は、さらに、心不全に罹患している哺乳類を同定すること、哺乳類に組成物を投与する経路を決定すること、哺乳類に投与される組成物の形態を決定すること、ゲラニウム油およびＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根からの抽出物を含む組成物の投与量を決定すること、心不全に罹患している哺乳類に、投与量の組成物を送達すること、の各ステップを含む、組成物を投与する方法を提供する。
【００２６】
本発明の他の態様では、組成物を投与する方法が、心不全に罹患している哺乳類を同定すること、哺乳類に組成物を投与する経路を決定すること、哺乳類に投与される組成物の形態を決定すること、ゲラニウム油およびＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓの根からの抽出物を含む組成物の投与量を決定すること、心不全に罹患している哺乳類に、投与量の組成物を送達すること、の各ステップを含む。
【００２７】
本発明の他の態様は、Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼを、ゲラニウム油およびソフォラ植物の根からの抽出物を含む組成物と接触させることを含む、Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼを阻害する方法を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２８】
本発明は、ゲラニウム油およびソフォラ植物、好ましくは、Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓまたはＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓの根からの抽出物から製造される生薬組成物を使用して、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ感染に関連した胃潰瘍を治療することに関する。さらに、本発明は、胃潰瘍を治療するためのシトロネロールの使用に関する。シトロネロールは、多くの植物に見出され、ゲラニウム油の主成分である。シトロネロールは、また、合成により製造されうる。
【００２９】
本発明は、また、ゲラニウム油およびソフォラ植物の根からの抽出物から製造される生薬組成物を用いて、心不全の治療におけるＮａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼを阻害する方法に関する。
【００３０】
１．ゲラニウム油
ゲラニウム油は、マグノリオフィタ（Ｍａｇｎｏｌｉｏｐｈｙｔａ）門、マグノリオプシダ（Ｍａｇｎｏｌｉｏｐｓｉｄａ）網、ゲラニアレス（Ｇｅｒａｎｉａｌｅｓ）目、ゲラニアシアエ（Ｇｅｒａｎｉａｃｅａｅ）科、ペラルゴニウム（Ｐｅｌａｒｇｏｎｉｕｍ）属の植物の幹および葉の水蒸気蒸留により採取できる。ペラルゴニウムは、南アフリカ原生で、交配園芸種を含めて、今日百種以上ある。ペラルゴニウムは、主に、アルジェリア、エジプト、モロッコ、ブルボン、中国、およびオーストラリアにて生育して、ゲラニウム油が生成される。本発明は、好ましくは、中国雲南省昆明市において生成するＰｅｌａｒｇｏｎｉｕｍ  ｇｒａｖｅｏｌｅｎｓまたはＰｅｌａｒｇｏｎｉｕｍ  ｒｏｓｅｕｍおよびＰｅｌａｒｇｏｎｉｕｍ  ｔｅｒｅｂｉｎｔｈｉｎｃｅｕｍから抽出されたゲラニウム油を用いる。図１は、昆明で製造されたゲラニウム油のガスクロマトグラフィー／質量分析計（ＧＣ−ＭＳ）分析を示し、シトロネロールを含む構成成分の相対量を示す（図１参照）。一般的に知られたゲラニウム油の主成分は、シトロネロール、ギ酸ゲラニル、ギ酸シトロネリル、リナロール、ｔｒａｎｓ−ローズオキサイド、およびｃｉｓ−ローズオキサイドである。
【００３１】
ゲラニウム油の特定の規格は、中華人民共和国規格ＧＢ１１９５９−８９に記載されており、これは、すべての図面を含めて参照により本明細書に取り込まれる。この規格は、また、参照により取り込まれるゲラニウム油の国際規格のＩＳＯ４７３１：１９７８（ゲラニウム油規格）にも適合する。ゲラニウム油規格は、ゲラニウム油の大まかな特徴を特定し、即ち、ゲラニウム油は、黄、緑、または琥珀色の独特の臭いを有する透明液状油である。同様の基準により、ゲラニウム油は、相対密度０．８８１〜０．９００ｇ／ｃｍ3、旋光度−６°〜−１４°、屈折率１．４５９〜１．４６６により特定される。さらに、アシル化およびケン化を用いて、前記ゲラニウム油基準は、ゲラニウム油の全アルコール含量を測定する方法を記載している。ゲラニウム油基準に記された方法のよって測定される全アルコール含量は、少なくとも６５％である（６５％アルコール含量は、ゲラニオールとして計算される）。
【００３２】
２．ソフォラ根
ａ．    Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ
Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓは、典型的には、長さ約１０〜３０ｃｍ、直径１〜２ｃｍで、一般的に灰茶色、または灰黄色である。根は、好ましくは穏やかな香りと極度の苦みを有する。これは、主に、中国、韓国および日本に生育する。現在、Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根で同定されたアルカロイドは、マトリン、オキシマトリン、ソフォラノール、Ｎ−メチルシチジン、アナジリン、バプチフォリン、ソフォカーピン、ソフォリジン、イソマトリン、７，１１−デヒドロマトリン、ソフォラミン、７−デヒドロソフォラミン、９α−ヒドロキシソフォラミン、５α，９α−ジヒドロキシマトリン、Ｎ−オキシソフォカーピン、ソフォラノール  Ｎ−オキサイド、ロムビフォリン、ルパニン、ママニン、クララミン、イソクララミン、クラリノールである。既知の主要成分は、マトリン、オキシマトリンである。Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの重要な構成成分は、また、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｓｕｂｐｒｏｓｔｒａｔａ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ａｌｏｐｅｃｕｒｏｉｄｅｓ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｍｏｏｒｃｒｏｆｔｉａｎａおよびＥｕｃｈｒｅｓｔａ  ｓｔｒｉｇｉｌｌｏｓａ中にも見出される。
【００３３】
使用されるＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの品質を確保するために、好ましくは、根は、その外観についてまず検査される。好ましくは、薄層クロマトグラフィー試験も、マトリン、オキシマトリンおよびソフォカーピンの存在を測定するために、中華人民共和国薬局方追補ＶＩＢ（すべての図面を含めて、その全体が参照により本明細書に取り込まれる）に発布されたＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの同定方法に従って、適用される。Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根の全アルカロイド含量を測定するために、中華人民共和国薬局方に記載された滴定方法を、適用する場合がある。全アルカロイド含量は、好ましくは２％以上である。本発明で好ましく用いられるＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根は、約２．７４％〜３．０３％の全アルカロイド含量を有する。
【００３４】
ｂ．    Ｓ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ
Ｓ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓの根は、枝のある長い湾曲したチューブ状であり、典型的には直径約０．３〜１．５センチメートルである。根は、硬く、割りにくい。その表面の色は、灰茶色から焦げ茶色で、長軸方向にしわと穴がある。根は、豆の香りと極度の苦みがある。主として中国の一部で生育し、即ち、広東省、広西省、貴州省、雲南省、および江西省である。
【００３５】
根は、０．９３％のアルカロイドを含み、そのうちの０．５２％はマトリン、０．３５％はオキシマトリンである。Ｓｏｐｈｏｒａ  ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓの根で同定された他のアルカロイドは、アナジリン、メチルシチジン、シトシン、ソフォカーピン、ソフォカーピン  Ｎ−オキサイド、ソフォラミンおよびソフォラノールである。根で同定されたフラボノ化合物は、ソフォラノン、ソフォラジン、ソフォラノクロメン、ソフォラドクロメン、ペテロカーピン、ジェニステイン、マアキアン、トリフリリジン、シトステロール、ルペオール、およびアルキルアルコールエステルの群である。
【００３６】
Ｓｏｐｈｏｒａ  ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓの重要なアルカロイド成分は、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ａｌｏｐｅｃｕｒｏｉｄｅｓ、Ｓｏｐｈｏｒａ  ｍｏｏｒｃｒｏｆｔｉａｎａおよびＥｕｃｈｒｅｓｔａ  ｓｔｒｉｇｉｌｌｏｓａでも見出される。
【００３７】
３．  組成物
ゲラニウム油とソフォラ植物の根の同時使用は、いずれかを単独で用いた場合より良い効果が達成される。
【００３８】
薬理動態研究の結果は、ソフォラ植物の根からの抽出物の重要な成分であるマトリンやオキシマトリンにゲラニウム油を添加すると、静脈注射において、それぞれの化合物の吸収と代謝が増加しうることを示す（図２および図３は、マウスにおける時間経過によるマトリンおよびマトリン＋ゲラニウム油のＨＰＬＣピーク面積の変化を示す）。
【００３９】
図４は、Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ根の抽出物とゲラニウム油の同時の摂取が、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉに起因する胃障害に対して、ゲラニウム油を単独で用いた場合と同様の保護活性を誘導する結果を示している。Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ抽出物の追加により、同じ結果をもたらすのに使用されるもとのゲラニウム油の半分以下のゲラニウム油の使用に削減できる。ゲラニウム油の価格がＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根の価格の２倍以上であるので、使用されるゲラニウム油量の削減の実用的な利点の一つは、同じ結果をもたらす一方で植物製品の価格を下げることである。さらに、使用されるゲラニウム油の投与量を許容可能な最大投与量より非常に少なくできるので、ゲラニウム油の削減は、植物製品をより安全にすることとなる。
【００４０】
シトロネロール単独でも、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉに起因する胃障害を阻害する作用を有する。単体の化合物の治療への使用は、組成物を用いる場合より価格と労力を大きく減らすこととなる。シトロネロールは、ゲラニウム油の主成分であり、ゲラニウム油そのものより容易且つ安価に得られる。シトロネロールは、他の多くの植物に存在しており、化学合成によっても製造できる。食品医薬品基準のもとで、食品添加剤として用いることができるので、規制に関する懸念が少ない。
【００４１】
ａ．  カプセル
上述した規格に適合したゲラニウム油およびＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ根の試験の後、以下の好ましい手順を通じて、オイルカプセルに組成物を製造できる。以下に示す原料の量から約１０００個のカプセルを製造できる。３００から４００グラムのＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根を、Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根が１／１０の重量になるように完全にエタノールと混合し、混合物を約１２〜１５時間密封する。そして、Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根を低温で乾燥させる。その後、乾燥したＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根を粉末にすりつぶし、４０メッシュの篩いにかける。篩を通ったＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根の粉末に、篩を通ったＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根の粉末の１０倍の重量の７０〜８０％エタノールを加える。混合物を水蒸気蒸留容器に入れ、２〜４時間加熱還流させる。溶液を濾過によって取り除き、別に取っておく。篩を通ったＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根の粉末の重量の６倍のエタノールを、Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根の粉末の入った水蒸気蒸留容器に加え、さらに２〜４時間もう一度加熱還流させる。溶液を濾過し、２つの濾液を併せてエタノール採取器に加えて濃縮し、エタノールを集め、Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓのペーストを得る（ペーストは、茶黄色で極度の苦みがある）。
【００４２】
Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓのペーストは、好ましは黒龍江省医薬品基準（すべての図面を含めて、参照により本明細書に取り込まれる）に特定されたＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ抽出物含量決定方法を用いて、その全アルカロイド含量を試験すべきである。全アルカロイド含量は、約７０％〜７３％である（オキシマトリンとして計算）。そして、ペーストを蒸留水に溶解し、５〜７グラムのグリセリン、２５０〜２７０グラムのゼラチンを加える（混合物）。Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓペースト、グリセリン、ゼラチンの混合物を完全に溶解した後、真空るつぼに入れ、空気の泡と水分を取り除き、約３０〜５０ｐａ．ｓ．の粘度にする。Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓペースト、グリセリン、ゼラチンの混合物と、３５０〜４５０グラムのゲラニウム油とを別々にカプセル製造装置に挿入する。これにより、Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓペースト、グリセリン、ゼラチンの混合物がカプセルの殻を形成し、組成物カプセルの内部がゲラニウム油で満たされる。その後、カプセルは３５℃〜４５℃で１０〜１５時間乾燥させる。中華人民共和国医薬辞典追補ＶＡ（参照により本明細書に取り込まれる）の分光測光方によりカプセル殻の分析から測定すると、カプセル全体における全アルカロイド含量は、約２％〜１０％全アルカロイド／カプセルである。
【００４３】
Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓペーストは、大豆レシチングリセロールと混合した後、ゲラニウム油と混合して経口摂取用のエマルジョンの形態に製造してもよいし、あるいは、組成物のペースト状のものを製造してもよい。シクロデキストリンを用いて、組成物を含んだ錠剤や丸剤を製造してもよい。組成物を、栄養補助食品、健康食品（機能性食品）、および食品添加剤として製造してもよい。ペラルゴニウム植物およびＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根を煎じて、液剤として直接経口摂取するための液状の組成物を得ることや、シロップ、または他の液状組成物を製造することもできる。Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根およびペラルゴニウム植物は、摂食可能な性状で時間間隔をおいて別個に経口摂取することもできる。
【００４４】
ｂ．  注射剤
組成物は、以下の好ましい手順を通して注射剤として調製することもできる。Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根およびゲラニウム油は、上述した規格に適合して試験されるべきである。Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根は、粗い粉末にすりつぶされる。３００グラムのＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根の粉末は、２０００ｍｌのガラス加熱管中で、１２００ｍｌのゲラニウム油を添加され、１１５℃で６時間加熱還流された後、液体を濾過して８００ｍｌの暗黄透明液状油が得られる。油液は、乳鉢に入れられ、すりつぶしながら５％デキストロース中Ｔｗｅｅｎ８０（登録商標）を乳鉢に、油液が透明になり、そのｐＨが６．７〜７．０になるまでゆっくりと注入される。溶液を濾過し、濾液を２ｍｌのアンプルに入れる。アンプルを密封し、１１０℃で殺菌する。組成物は、静脈または腹膜を通した注射により送達できる。
【００４５】
ｃ．  粉末
組成物は、以下の手順を通じて粉末（粉末組成物）の性状にできる。まず、ゲラニウム油およびＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓまたはＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根が、個別に準備される。β−シクロデキストリンをゲラニウム油に添加して蒸発を防ぎ、続いて賦形剤が添加され、ゲラニウム油粉末が形成される。ゲラニウム油および賦形剤は、重量でそれぞれゲラニウム油粉末の約３１％および６９％である。次に、Ｓ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓまたはＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根を薄く切り、すりつぶす。約２５０グラムのすりつぶされたＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓまたはＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根を、すりつぶされた根の約１２倍の重さの３０００ｍｌの水と混合する。混合物は、水蒸気蒸留容器で煮詰められ、約１時間加熱還流される。その後、液体表面のスカムを取り除き、液体は１００メッシュのスクリーンで濾過される。濾液を濃縮し、約６６グラムのＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓまたはＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの固体抽出物が得られる。
【００４６】
賦形剤を固体抽出物に加え、Ｓ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓまたはＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根の粉末を形成する。Ｓ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓまたはＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの抽出物および賦形剤は、それぞれ全粉末の約６０％と４０％である。続いて、ゲラニウム油粉末およびＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓまたはＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根の粉末を他の賦形剤と伴に混合し、本発明の組成物を粉末状に形成し、即ち粉末組成物とし、ここで、ゲラニウム油粉末、Ｓ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓまたはＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根の粉末、および賦形剤は、粉末組成物の重量でそれぞれ約５６％、１％、および４３％である。組成物中のゲラニウム油およびＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓまたはＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ抽出物の重量比は、約３０：１である。粉末を形成する過程で用いられる賦形剤は、スターチ、砂糖、フルクトース、ソルビトール等および当業者に一般的に使用されている他の医薬賦形剤でもよい。あるいは、ゲラニウム油およびＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ粉末は単純に一緒に混合し、Ｓ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ粉末とゲラニウム油粉末がそれぞれ約１０％と９０％、または、それぞれ３０％と７０％である粉末混合物を形成する。
【００４７】
あるいは、ゲラニウム油粉末およびＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓまたはＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根の粉末は、グリセリンおよびゼラチンと混合してカプセルを形成してもよい。組成物は、栄養補助食品、健康食品（機能性食品）、食品添加剤として製造してもよい。ペラルゴニウム植物およびＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓまたはＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根を煎じて、液剤として直接経口摂取するための液状の組成物を得ることや、シロップ、または他の液状組成物を製造することもできる。Ｓ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓまたはＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの根およびペラルゴニウム植物は、摂食可能な性状で時間間隔をおいて別個に経口摂取することもできる。
【００４８】
ここで用いられる賦形剤の語は、いずれの方法によっても摂取される組成物の形成に利用される薬学的に不活性な物質を広く指す。
【００４９】
４．  単一化合物
使用されるシトロネロール化合物は、ＳｕｎＴｅｎ  Ｐｈｙｔｏｔｅｃｈ  Ｃｏ．，  Ｌｔｄ．（台湾、台北市）から購入する。
【００５０】
５．  胃潰瘍の予防およびＮａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼ阻害
ゲラニウム油およびソフォラ植物の根を組み合わせて、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉに起因する胃潰瘍の治療に用いることができる。あるいは、シトロネロールの単一化合物を用いて、胃潰瘍を阻止することができる。
【００５１】
ゲラニウム油およびソフォラ植物の根の組成物は、Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼの酵素活性を阻害する能力を有することも発見され、心筋細胞内のＣａ+を増加させ、これにより心臓収縮を増強することとなる。
【００５２】
本発明の他の態様は、明細書およびここに開示された発明の実施を考慮して、当業者に明らかである。明細書および実施例は例示に過ぎないと見なすべきであり、本発明の真の範囲および精神は、添付の特許請求の範囲によって示されるべきである。
【００５３】
他に定義する場合を除き、本明細書で使用される技術および科学用語は、この発明が属する当業者によって一般的に理解されるものを意味する。当業者は、本明細書に記載されたものと同様または均等なすべての方法および物質を用いて、本発明を実施または試験することができることを認識するであろう。さらに、本明細書で言及したすべての刊行物は、参照により取り込まれるものとする。
【００５４】
さらに、明細書および特許請求の範囲で使用される原料、反応、条件、％純度等の数量を表すすべての数は、他に断る場合を除いて「約」の語により修飾される。従って、明細書および特許請求の範囲に記載された数値パラメータは、本発明の望まれる性質に依存して変化しうる近似値である。それにもかかわらず、特定の実施例に記載された数値は、可能な限り正確に報告される。しかしながら、すべての数値は、その実験的測定方法の標準偏差からの一定の誤差を内在的に含んでいる。
【００５５】
明細書や添付の特許請求の範囲に使用される単数形の「ａ」、「ｏｒ」、「ｔｈｅ」は、文脈から明らかに示される場合を除いて、複数形も含むものと理解すべきである。
【００５６】
以下の実施例により本発明をさらに例示する。これらは単に本発明を例示するためのものであり、本発明の特定の態様の種々の有利な特徴を開示するものである。以下の実施例は、本発明を限定するものとして解釈してはならない。
実施例
【００５７】
本発明の実施は、他に示す場合を除いて、生物学および中国医薬の従来技術を利用し、これは、当業者の範囲に属するものである。このような技術は、文献に完全に説明されている。
【００５８】
以下の実施例は、ゲラニウム油およびソフォラ植物の根からの抽出物の組成物並びにシトロネロール化合物単独の胃潰瘍阻害作用を例示する。以下の実施例は、ゲラニウム油およびソフォラ植物の根の抽出物の組成物のＡＴＰアーゼ阻害作用も例示する。
【実施例１】
【００５９】
ＭＩＣ−３  ｉｎ  ｖｉｖｏ実験
ＩＣＲ由来の２２±２グラムのオスのマウス５匹の５つのグループを、一晩１８時間絶食させる。そして、すべてのマウスは、３．０×１０9ＣＦＵ／０．４ｍｌ／マウスで懸濁液によりＨ．ｐｙｌｏｒｉの胃内接種を受ける。試験物質のＭＩＣ−３、ゲラニウム油およびＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓの抽出物、を含むカプセルをコーン油に溶解し、最終濃度３０ｍｇ／ｍｌ、１５ｍｇ／ｍｌ、および５ｍｇ／ｍｌに調整する。ＭＩＣ−３（５０、１５０および３００ｍｇ／ｍｌ）、ビヒクル対照（コーン油１０ｍｌ／ｋｇ）または陽性対照（オメプラゾール１ｍｇ／ｋｇ＋クラリスロマイシン１０ｍｇ／ｋｇ）を、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ接種１時間後に試験動物に経口投与し、１日２回７日間連続投与する。感染８日後、すべての動物を一晩絶食させて犠牲死させ、大弯に沿って胃を切除した。胃潰瘍を検査し、出血と潰瘍性障害の重篤度の増加度合いにより４段階にスコアを付ける：０＝健常の外観、１＝弱い赤斑、２＝中程度の赤斑および／または出血斑、３＝強い出血斑。同時に起こるビヒクル対照値の差し引きで、５０％以上（≧５０％）を有意と見なす。結果を以下の表に示す。
【００６０】
【表１】
2008508282.tif 000002
【００６１】
Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ感染からの胃潰瘍の有意な減少は、ＭＩＣ−３の１５０ｍｇ／ｋｇを１日２回または３００ｍｇ／ｋｇを１日２回の投与量においてである。ビヒクル対照、ＭＩＣ−３を５０ｍｇ／ｋｇ、１５０ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇおよび陽性対照をそれぞれ投与されたマウスの胃粘膜の出血および障害の重篤度は、様々な度合いである。
【００６２】
経口投与によるＬＤ50動物実験
中国四川省のアンチバクテリアルインダストリアルリサーチインスティテゥートの動物研究所から提供された体重１８〜２２グラムの雌雄半分ずつの５０匹のＩＣＲ由来マウスを試験動物として用いた。試験溶液は、ゲラニウム油およびソフォラの根からの抽出物を含むカプセルを崩壊させるために０．５％のＣＭＣを用い、懸濁溶液を加えて必要とする濃度を得た。５０匹のマウスは、各群１０匹ずつ（雌雄半々）の５群にわけた。５群のマウスに、それぞれ４．０００ｇ／ｋｇ，３．２００ｇ／ｋｇ、２．５６０ｇ／ｋｇ、２．０４８ｇ／ｋｇおよび１．６３８ｇ／ｋｇの種々の投与量で経口により組成物を与えた。各群間の投与量は、１：０．８の比である。薬剤をすべてのマウスに一度に投与し、１４日間に亘って死亡の有無を観察した。薬剤投与後３日目に数匹のマウスが死に始め、死ぬ前に痙攣、短い呼吸、食物摂取の中止があった。図５に、実験結果を示す。その結果によると、試験されたマウスの半分は、２．３５ｇ／ｋｇの組成物カプセルの投与量で死亡し、マウスの最大許容量である１．６３８ｇ／ｋｇの投与量では試験されたマウスはまったく死亡しない。ＬＤ50量は、２．１０から２．６２ｇ／ｋｇの範囲で２．３５ｇ／ｋｇである（Ｐ＝０．９５）。
【００６３】
組成物を経口投与されたマウスのＬＤ50（５０％致死率）実験結果により、安全な投与量範囲についての指標が提供される。ゲラニウム油およびＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ抽出物の賦形剤無しの単独の投与量が計算される。比が得られ、即ち、６９８ｇ（カプセル全体の重量）にゲラニウム油（約３２２ｇ）、さらにＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ抽出物（約１０ｇ）、または、６９８ｇに３３２ｇを加える。３３２／６９８の比に全カプセルの元のＬＤ５０量を掛けると、ゲラニウム油にＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓのみを加えた投与量が得られる。図６参照。
【実施例２】
【００６４】
ＭＩＣ−１  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験
寒天希釈法により最小阻害濃度を測定する。２ｍｇの試験物質、即ち注射用に調製されたゲラニウム油およびＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ抽出物の組成物（ＭＩＣ−１）を溶解し、希望するストック濃度に溶媒（蒸留水）に連続的に希釈する。試験するそれぞれの濃度で、１０μｌのアリコートを、７％脱繊維素ウサギ血で補給された０．９９ｍｌのコロンビア寒天ベースを含む４８ウェルプレートに添加する。Ｈ．ｐｙｌｏｒｉの接種原（ＡＴＣＣ４３５０４）を、脳心臓輸液ブロスに懸濁して５×１０8ＣＦＵ／ｍｌの密度に調製する。マルチプロングインキュベーション装置を用いて、薬剤媒体をその上に含むスポット毎に約５×１０5ＣＦＵ／ｍｌ添加する。従って、蒸留水の最終最大濃度は１％であり、初期の試験物質濃度は１００μｇ／ｍｌである。プレートは、微好気性条件（Ｎ2８５％、ＣＯ2１０％およびＯ2５％の混合ガス）下、３７℃で７２時間インキュベートされ、視覚的に試験され、コロニー増殖の阻害／根絶について陽性（＋）、コロニー増殖対して効果なしを陰性（−）としてスコアをとった。ビヒクル対照、蒸留水および０．３μｇ／ｍｌの活性対照剤としてゲンタマイシンをそれぞれブランクおよび陽性対照として用いる。それぞれの濃度について、２回評価する。
実験結果を以下の表に示す。
【００６５】
【表２】
2008508282.tif 000003
【００６６】
３０μｇ／ｍｌ以上の濃度で、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ増殖の阻害／根絶の結果が達成される。
【実施例３】
【００６７】
ＭＩＣ−９  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験
寒天希釈法により最小阻害濃度を測定する。２ｍｇの試験物質、即ちＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓに対するゲラニウム油の重量比が３０：１のゲラニウム油およびＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ抽出物の粉末組成物（ＭＩＣ−９）を溶解し、希望するストック濃度に溶媒（１００％ＤＭＳＯ）に連続的に希釈する。試験するそれぞれの濃度で、１０μｌのアリコートを、７％脱繊維素ウサギ血で補給された０．９９ｍｌのコロンビア寒天ベースを含む４８ウェルプレートに添加する。Ｈ．ｐｙｌｏｒｉの接種原（ＡＴＣＣ４３５０４）を、脳心臓輸液ブロスに懸濁して５×１０8ＣＦＵ／ｍｌの密度に調製する。マルチプロングインキュベーション装置を用いて、薬剤媒体をその上に含むスポット毎に約５×１０5ＣＦＵ／ｍｌ添加する。従って、ＤＭＳＯの最終最大濃度は、１％であり、初期の試験物質濃度は、１００μｇ／ｍｌである。プレートは、微好気性条件（Ｎ2８５％、ＣＯ2１０％およびＯ2５％の混合ガス）下、３７℃で７２時間インキュベートされ、視覚的に試験され、コロニー増殖の阻害／根絶について陽性（＋）、コロニー増殖対して効果なしを陰性（−）としてスコアをとった。ビヒクル対照、１００％ＤＭＳＯおよび０．３μｇ／ｍｌの活性対照剤としてゲンタマイシンをそれぞれブランクおよび陽性対照として用いる。それぞれの濃度について、２回評価する。
実験結果を以下の表に示す。
【００６８】
【表３】
2008508282.tif 000004
【００６９】
３００μｇ／ｍｌ以上の濃度で、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ増殖の阻害／根絶の結果が達成される。
【実施例４】
【００７０】
ＭＩＣ−１０  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験
寒天希釈法により最小阻害濃度を測定する。２ｍｇの試験物質、即ちＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓに対するゲラニウム油の重量比が３０：１のゲラニウム油およびＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ抽出物の粉末組成物（ＭＩＣ−１０）を溶解し、希望するストック濃度に溶媒（１００％ＤＭＳＯ）に連続的に希釈する。試験するそれぞれの濃度で、１０μｌのアリコートを、７％脱繊維素ウサギ血で補給された０．９９ｍｌのコロンビア寒天ベースを含む４８ウェルプレートに添加する。Ｈ．ｐｙｌｏｒｉの接種原（ＡＴＣＣ４３５０４）を、脳心臓輸液ブロスに懸濁して５×１０8ＣＦＵ／ｍｌの密度に調製する。マルチプロングインキュベーション装置を用いて、薬剤媒体をその上に含むスポット毎に約５×１０5ＣＦＵ／ｍｌ添加する。従って、ＤＭＳＯの最終最大濃度は、１％であり、初期の試験物質濃度は、１００μｇ／ｍｌである。プレートは、微好気性条件（Ｎ2８５％、ＣＯ2１０％およびＯ2５％の混合ガス）下、３７℃で７２時間インキュベートされ、視覚的に試験され、コロニー増殖の阻害／根絶について陽性（＋）、コロニー増殖対して効果なしを陰性（−）としてスコアをとった。ビヒクル対照、１００％ＤＭＳＯおよび０．３μｇ／ｍｌの活性対照剤としてゲンタマイシンをそれぞれブランクおよび陽性対照として用いる。それぞれの濃度について、２回評価する。
実験結果を以下の表に示す。
【００７１】
【表４】
2008508282.tif 000005
【００７２】
３００μｇ／ｍｌ以上の濃度で、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ増殖の阻害／根絶の結果が達成される。
【実施例５】
【００７３】
ＭＩＣ−１１  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験
寒天希釈法により最小阻害濃度を測定する。２ｍｇの試験物質、即ち１０％のＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ粉末および９０％のゲラニウム油粉末の粉末混合物（ＭＩＣ−１１）を溶解し、希望するストック濃度に溶媒（１００％ＤＭＳＯ）に連続的に希釈する。試験するそれぞれの濃度で、１０μｌのアリコートを、７％脱繊維素ウサギ血で補給された０．９９ｍｌのコロンビア寒天ベースを含む４８ウェルプレートに添加する。Ｈ．ｐｙｌｏｒｉの接種原（ＡＴＣＣ４３５０４）を、脳心臓輸液ブロスに懸濁して５×１０8ＣＦＵ／ｍｌの密度に調製する。マルチプロングインキュベーション装置を用いて、薬剤媒体をその上に含むスポット毎に約５×１０5ＣＦＵ／ｍｌ添加する。従って、ＤＭＳＯの最終最大濃度は、１％であり、初期の試験物質濃度は、１００μｇ／ｍｌである。プレートは、微好気性条件（Ｎ2８５％、ＣＯ2１０％およびＯ2５％の混合ガス）下、３７℃で７２時間インキュベートされ、視覚的に試験され、コロニー増殖の阻害／根絶について陽性（＋）、コロニー増殖対して効果なしを陰性（−）としてスコアをとった。ビヒクル対照、１００％ＤＭＳＯおよび０．３μｇ／ｍｌの活性対照剤としてゲンタマイシンをそれぞれブランクおよび陽性対照として用いる。それぞれの濃度について、２回評価する。
実験結果を以下の表に示す。
【００７４】
【表５】
2008508282.tif 000006
【００７５】
３００μｇ／ｍｌ以上の濃度で、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ増殖の阻害／根絶の結果が達成される。
【実施例６】
【００７６】
ＭＩＣ−１２  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験
寒天希釈法により最小阻害濃度を測定する。２ｍｇの試験物質、即ち３０％のＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ粉末および７０％のゲラニウム油粉末の粉末混合物（ＭＩＣ−１２）を溶解し、希望するストック濃度に溶媒（１００％ＤＭＳＯ）に連続的に希釈する。試験するそれぞれの濃度で、１０μｌのアリコートを、７％脱繊維素ウサギ血で補給された０．９９ｍｌのコロンビア寒天ベースを含む４８ウェルプレートに添加する。Ｈ．ｐｙｌｏｒｉの接種原（ＡＴＣＣ４３５０４）を、脳心臓輸液ブロスに懸濁して５×１０8ＣＦＵ／ｍｌの密度に調製する。マルチプロングインキュベーション装置を用いて、薬剤媒体をその上に含むスポット毎に約５×１０5ＣＦＵ／ｍｌ添加する。従って、ＤＭＳＯの最終最大濃度は、１％であり、初期の試験物質濃度は、１００μｇ／ｍｌである。プレートは、微好気性条件（Ｎ2８５％、ＣＯ2１０％およびＯ2５％の混合ガス）下、３７℃で７２時間インキュベートされ、視覚的に試験され、コロニー増殖の阻害／根絶について陽性（＋）、コロニー増殖対して効果なしを陰性（−）としてスコアをとった。ビヒクル対照、１００％ＤＭＳＯおよび０．３μｇ／ｍｌの活性対照剤としてゲンタマイシンをそれぞれブランクおよび陽性対照として用いる。それぞれの濃度について、２回評価する。
実験結果を以下の表に示す。
【００７７】
【表６】
2008508282.tif 000007
【００７８】
３００μｇ／ｍｌ以上の濃度で、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ増殖の阻害／根絶の結果が達成される。
【００７９】
Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ増殖は、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉのコロニーまたはＣＦＵ、並びにｉｎ  ｖｉｖｏで発見されたＨ．ｐｙｌｏｒｉ細胞の両方を指す。いくつかの方法を用いて、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ感染によるｉｎ  ｖｉｖｏでのＨ．ｐｙｌｏｒｉ増殖を診断できる。特定のＨ．ｐｙｌｏｒｉ  ＩｇＧ抗体を測定する血清試験により、個体が感染しているかどうかを測定できる。これらのアッセイの感度と特異性は、使用されるアッセイに応じて８０％から９５％の範囲となる。他の診断方法としては、患者に13Ｃまたは14Ｃラベル化尿素を飲ませる呼吸試験がある。Ｈ．ｐｙｌｏｒｉは尿素を急速に代謝し、ラベル化された炭素が吸収される。このラベル化炭素は、患者の吐息中のＣＯ2として測定され、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉが存在することを測定できる。呼吸試験の感度と特異性は、９４％から９８％の範囲である。上部の食道胃十二指腸内視鏡も、利用できる。内視鏡検査の間、胃と十二指腸の生検標本を得て、いくつかの方法によりＨ．ｐｙｌｏｒｉの診断ができる。１つの方法としては、生検ウレアーゼ試験であり、ウレアーゼを産生するＨ．ｐｙｌｏｒｉの能力に基づいた色素試験である。また、生物体は、組織学的に同定してもよい。最終的には、生検は、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉについて培養できる。アッセイによってｉｎ  ｖｉｖｏでＨ．ｐｙｌｏｒｉ増殖があったところに、本発明の組成物を宿主に投与してＨ．ｐｙｌｏｒｉ増殖部に送達できる。
【実施例７】
【００８０】
ＭＩＣ−９  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験
Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼをイヌの腎臓から得る。試験化合物、即ちＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓに対するゲラニウム油の重量比が３０：１のゲラニウム油およびＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ抽出物粉末組成物（ＭＩＣ−９）を、１６０ｍＭ  ＮａＣｌ、２５ｍＭ  ＫＣｌ、５．３ｍＭ  ＭｇＣｌ2、１．３ｍＭ  ＥＤＴＡおよび酵素（０．０２単位）を含むｐＨ７．４の８０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌバッファーで、３７℃で２０分間プレインキュベートする。ＡＴＰの添加（最終２ｍＭ）により反応を開始し、更に１５分間インキュベートしたのち、２．５Ｎ  ＨＣｌＯ4の添加により反応を終了させる。反応生成物の無機リン酸を、Ｆｉｓｋｅ−Ｓｕｂｂａｒｏｗ試薬を加え、６６０ｎｍで分光光度計を読むことにより測定する。化合物は、１０μＭでスクリーニングされる。各々の濃度は、２回評価される。
【００８１】
【表７】
2008508282.tif 000008
【００８２】
３０２μｇ／ｍｌ以上の濃度で、Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼの酵素活性の半分を阻害できる。
【実施例８】
【００８３】
ＭＩＣ−１０  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験
Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼをイヌの腎臓から得る。試験化合物、即ちＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓに対するゲラニウム油の重量比が３０：１のゲラニウム油およびＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ抽出物粉末組成物（ＭＩＣ−１０）を、１６０ｍＭ  ＮａＣｌ、２５ｍＭ  ＫＣｌ、５．３ｍＭ  ＭｇＣｌ2、１．３ｍＭ  ＥＤＴＡおよび酵素（０．０２単位）を含むｐＨ７．４の８０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌバッファーで、３７℃で２０分間プレインキュベートする。ＡＴＰの添加（最終２ｍＭ）により反応を開始し、更に１５分間インキュベートしたのち、２．５Ｎ  ＨＣｌＯ4の添加により反応を終了させる。反応生成物の無機リン酸を、Ｆｉｓｋｅ−Ｓｕｂｂａｒｏｗ試薬を加え、６６０ｎｍで分光光度計を読むことにより測定する。化合物は、１０μＭでスクリーニングされる。各々の濃度は、２回評価される。
【００８４】
【表８】
2008508282.tif 000009
【００８５】
３６０μｇ／ｍｌ以上の濃度で、Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼの酵素活性の半分を阻害できる。
【実施例９】
【００８６】
ＭＩＣ−１１  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験
Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼをイヌの腎臓から得る。試験化合物、即ち１０％のＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ粉末および９０％のゲラニウム油粉末の粉末混合物（ＭＩＣ−１１）を、１６０ｍＭ  ＮａＣｌ、２５ｍＭ  ＫＣｌ、５．３ｍＭ  ＭｇＣｌ2、１．３ｍＭ  ＥＤＴＡおよび酵素（０．０２単位）を含むｐＨ７．４の８０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌバッファーで、３７℃で２０分間プレインキュベートする。ＡＴＰの添加（最終２ｍＭ）により反応を開始し、更に１５分間インキュベートしたのち、２．５Ｎ  ＨＣｌＯ4の添加により反応を終了させる。反応生成物の無機リン酸を、Ｆｉｓｋｅ−Ｓｕｂｂａｒｏｗ試薬を加え、６６０ｎｍで分光光度計を読むことにより測定する。化合物は、１０μＭでスクリーニングされる。各々の濃度は、２回評価される。
【００８７】
【表９】
2008508282.tif 000010
【００８８】
１３０μｇ／ｍｌ以上の濃度で、Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼの酵素活性の半分を阻害できる。
【実施例１０】
【００８９】
ＭＩＣ−１２  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験
Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼをイヌの腎臓から得る。試験化合物、即ち３０％のＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ粉末および７０％のゲラニウム油粉末の粉末混合物（ＭＩＣ−１２）を、１６０ｍＭ  ＮａＣｌ、２５ｍＭ  ＫＣｌ、５．３ｍＭ  ＭｇＣｌ2、１．３ｍＭ  ＥＤＴＡおよび酵素（０．０２単位）を含むｐＨ７．４の８０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌバッファーで、３７℃で２０分間プレインキュベートする。ＡＴＰ（最終２ｍＭ）の添加により反応を開始し、更に１５分間インキュベートしたのち、２．５Ｎ  ＨＣｌＯ4の添加により反応を終了させる。反応生成物の無機リン酸を、Ｆｉｓｋｅ−Ｓｕｂｂａｒｏｗ試薬を加え、６６０ｎｍで分光光度計を読むことにより測定する。化合物は、１０μＭでスクリーニングされる。各々の濃度は、２回評価される。
【００９０】
【表１０】
2008508282.tif 000011
【００９１】
２３４μｇ／ｍｌ以上の濃度で、Ｎａ+／Ｋ+−ＡＴＰアーゼの酵素活性の半分を阻害できる。
【実施例１１】
【００９２】
ＭＣ−２０  ｉｎ  ｖｉｖｏ実験
体重２４±２グラムのＩＣＲ由来のオスのマウス５匹からなる７群を１８時間絶食させた後、１．５×１０9ＣＦＵ／０．４ｍｌ／マウスでＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ（臨床単離株）の懸濁液による胃内接種をした。
【００９３】
ＭＩＣ−１７（ゲラニウム油５０ｍｇ／ｋｇおよび１００ｍｇ／ｋｇ）およびＭＩＣ−２０（シトロネロール２４．５ｍｇ／ｋｇ）を０．９％ＮａＣｌ溶液中２％ＴＷＥＥＮ８０（登録商標）に溶解して作用溶液とし、ＭＩＣ−１７の５０ｍｇ／ｋｇおよび１００ｍｇ／ｋｇについて、それぞれ８９８および４４９ｍｇ／ｋｇ、ＭＩＣ−２０について、８５８ｍｇ／ｋｇの最終濃度に調整した。
【００９４】
ＭＩＣ−１７を１００および５０ｍｇ／ｋｇの投与量、ＭＩＣ−２０を２４．５ｍｇ／ｋｇの投与量、液状のＭＩＣ−１８を６１．７７μｌ／ｋｇ（５０ｍｇ／ｋｇのゲラニウム油および０．０５８ｍｇ／ｋｇのマトリンを含むＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ抽出物と等価の投与量）、液状のＭＩＣ−１９を１１６．５８μｌ／ｋｇ（５０ｍｇ／ｋｇのゲラニウム油および０．５８ｍｇ／ｋｇのマトリンを含むＳ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ抽出物と等価の投与量）、陰性対照としてビヒクル（０．９％ＮａＣｌ溶液中２％ＴＷＥＥＮ８０（登録商標））を１０ｍｌ／ｋｇで、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ接種１時間後に試験動物に経口投与し、７時間後に再び投与した。その後、試験物質とビヒクルをそれぞれ１日２回（午前９：００と午後１６：００に）６日連続で経口投与した。オメプラゾール１ｍｇ／ｋｇとクラリスロマイシン１０ｍｇ／ｋｇを組み合わせて陽性対照物質として用い、試験動物に１日１回（午前９：００に）７日間連続して経口投与した。
【００９５】
感染７日後、８日目に、一晩絶食させたすべての動物を犠牲死させ、胃を大弯に沿って切除した。胃潰瘍を出血と潰瘍性障害の重篤度に従って、４段階にスコアをつけた：０＝健常の外観、１＝弱い赤斑、２＝中程度の赤斑および／または出血斑、３＝強い出血斑。同時に起こるビヒクル対照値の差し引きで、５０％以上（≧５０％）を有意と見なす。
【００９６】
それぞれ、ＭＩＣ−１７は１００ｍｇ／ｋｇ、ＭＩＣ−１８は６１．７７μｌ／ｋｇ、ＭＩＣ−１９は１１６．５８μｌ／ｋｇ、ＭＩＣ−２０は２４．５ｍｇ／ｋｇで、ビヒクル対照値に比べて胃潰瘍が有意に減少（≧５０％）した。ＭＩＣ−１７が５０ｍｇ／ｋｇで中程度に関連するが（３６％）、ビヒクル対照群と比べて潰瘍の有意な減少はなかった。クラリスロマイシン（１０ｍｇ／ｋｇ）と組み合わせたオメプラゾール（１ｍｇ／ｋｇ）の陽性対照は、ビヒクル処理群と比べて潰瘍スコアに有意な減少が生じた（７３％）。
【００９７】
【表１１】
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【００９８】
試験物質およびビヒクル対照（０．９％ＮａＣｌ溶液中２％ＴＷＥＥＮ８０（登録商標））を、１日２回７日間連続して試験動物にそれぞれ経口投与した。Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ（１．５×１０9ＣＦＵ／０．４ｍｌ／マウス）接種を、１日目の最初の投与の１時間前に行った。一晩絶食させたすべてのマウスを８日目（感染から７日後）に犠牲死させ、胃を大弯に沿って切除した。同時に起こるビヒクル対照のスコア値の差し引きで、５０％以上（≧５０％）を有意と見なす。
【００９９】
シトロネロール単独、ＭＩＣ−２０も、ＭＩＣ−１７、ＭＩＣ−１９並びに陽性対照のオメプラゾールおよびクラリスロマイシンと同様に強い潰瘍阻害作用を有する。
【図面の簡単な説明】
【０１００】
【図１】図１は、中国昆明で製造されたゲラニウム油中のガスクロマトグラフィー／質量分析の方法により同定された化合物およびそれらの相対含量を示す。
【図２】図２は、マウスにおけるマトリン単独およびゲラニウム油を添加したマトリンの静脈注射の薬物動態試験の結果を示す。
【図３】図３は、マウスにおけるオキシマトリン単独およびゲラニウム油を添加したオキシマトリンの静脈注射の薬物動態試験の結果を示す。
【図４】図４は、Ｓ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓからの抽出物を加えた場合に、使用されるゲラニウム油量の減少を示す。
【図５】図５は、本発明の組成物カプセル（３００〜４００グラムのＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓ根抽出物および３５０〜４５０グラムのゲラニウム油）の、カプセル形態によるマウスへの経口投与に関するＬＤ50実験の結果を示す。
【図６】図６は、ゲラニウム油およびＳ．ｆｌａｖｅｓｃｅｎｅｓからの抽出物単独で、賦形剤を含まない投与量の計算を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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