(57)【要約】１０−デアセチル−７，１０−ビス−トリクロロアセチルバッカチンＩＩＩの精製と、それに続く７位および１０位の保護基のアルカリ加水分解とによる、９９％を超えるＨＰＬＣ純度を有し、２−デベンゾイル−２−ペンテノイルバッカチンＩＩＩを含まない１０−デアセチル−７，１０−ビス−トリクロロアセチルバッカチンＩＩＩを調製するための方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
９９％を超えるＨＰＬＣ純度を有し、２−デベンゾイル−２−ペンテノイルバッカチンＩＩＩ７，１０−ビス−トリクロロアセチル誘導体を含まない、１０−デアセチル−７，１０−ビス−トリクロロアセチルバッカチンＩＩＩ。
【請求項２】
９９％を超える純度を有し、２−デベンゾイル−２−ペンテノイルバッカチンＩＩＩを含まない、１０−デアセチルバッカチンＩＩＩ。
【請求項３】
未精製の１０−デアセチルバッカチンＩＩＩをトリクロロ酢酸活性誘導体で処理するステップと、
ジクロロメタンまたはジクロロメタン−酢酸エチル混合物によって、７，１０−ビス−トリクロロアセチル−１０−デアセチルバッカチンＩＩＩをシリカゲルクロマトグラフィーにかけ溶出するステップと、
対応する２−デベンゾイル−２−ペンテノイル不純物およびモノアシル化生成物を、アセトンまたはメタノールなどのジクロロメタンより高い極性を有する溶媒を使用して任意選択で回収するステップと
を含む、請求項１に記載の１０−デアセチル−２−デベンゾイル−２−ペンテノイル７，１０−ビス−トリクロロアセチルバッカチンＩＩＩを含まない、１０−デアセチル−７，１０−ビス−トリクロロアセチルバッカチンＩＩＩを調製する方法。
【請求項４】
第１のステップが、ピリジン中またはピリジン−ジクロロメタン混合物中において−５〜＋５℃の温度で塩化トリクロロアセチルとの反応によって行われる、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
トリクロロアセチル化生成物のクロマトグラフィーが、請求項３または４により得た未処理の７，１０−ビス−トリクロロアセチル−１０−デアセチルバッカチンＩＩＩの重量に対して１０から２０重量部のシリカゲルを使用して行われる、請求項３または４に記載の方法。
【請求項６】
請求項３に記載の１０−デアセチル−７，１０−ビス−トリクロロアセチルバッカチンＩＩＩをアルカリ処理し、続いて結晶化することによって、９９％を超える純度を有し、２−デベンゾイル−２−ペンテノイルバッカチンＩＩＩを含まない１０−デアセチルバッカチンＩＩＩを調製する方法。
【請求項７】
前記アルカリ処理が、メタノール、メタノール−ジクロロメタン混合物またはテトラヒドロフランなどの適合する溶媒中で、水酸化アンモニウムとの反応によって行われる、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
１０−デアセチルバッカチンＩＩＩの結晶化が、アセトニトリル、アセトンまたはメタノールから選択される溶媒によって行われる、請求項６または７に記載の方法。
【請求項９】
請求項６から８のいずれか一項に記載の１０−デアセチルバッカチンＩＩＩの調製、およびそのＮ−デベンゾイルパクリタキセルへの変換、それに続くベンゾイル化を含む、パクリタキセルを調製する方法。
【請求項１０】
２−デベンゾイル−２−ペンテノイル−パクリタキセルを含まない、半合成パクリタキセル。
【請求項１１】
適合する担体と混合した、請求項１０のパクリタキセルを含有する医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、１０−デアセチル−２−デベンゾイル−２−ペンテノイルバッカチンＩＩＩを含まない１０−デアセチルバッカチンＩＩＩの調製に関する。
【背景技術】
【０００２】
この不純物の除去は、１０−デアセチルバッカチンＩＩＩを、対応する７，１０−ビス−トリクロロ酢酸に変換し、次いでクロマトグラフィー精製およびヒドロキシ基のデブロッキングをすることによって行われる。この方法によって精製された１０−デアセチルバッカチンＩＩＩは、対応する２−デベンゾイル−２−ペンテノイル類似体からの厄介な精製を回避して、タキサン骨格を有する抗腫瘍薬剤の半合成のために好都合に使用することができる。
概要
１０−デアセチルバッカチンＩＩＩ（Ｉ）は、ドセタキセルおよびパクリタキセルなどの強力な抗腫瘍活性を有する薬剤の半合成のための出発生成物である。１０−デアセチルバッカチンＩＩＩは、イチイ属の植物からの抽出によって単離される。抽出生成物は、植物性の材料の由来によって決まる不定量の関連する化合物も含有する（表を参照のこと）。一般に、市販の１０−デアセチルバッカチンＩＩＩ中に含有されている不純物は、１４位または１９位にさらなるヒドロキシ基を有するか、あるいは７位および１３位に反対の配置を有する。
【０００３】
他の不純物は、１３位で、そのアミン官能基がプロピオン酸、酪酸、チグリン酸または安息香酸残基に結合しているフェニルイソセリン残基によって置換される。さらに、１０−デアセチルバッカチンＩＩＩは、２位のベンゾイル官能基の代わりに、特にチグリン酸残基として同定されるペンテノイル残基を有する、さらなる代謝物（ＩＩ）を含有する（Ｂ．Ｇａｂｅｔｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．５８，１５０８，１９９５）。通常、１０−デアセチルバッカチンＩＩＩと共結晶化する傾向のために結晶化によって除去することができないこの不純物は、市販の１０−デアセチルバッカチンＩＩＩ中に０．３〜１％の量で含有される。さらに、費用のかかるクロマトグラフィー精製によっても、その含有量の部分的で満足のいかない削減のみが可能である。
【０００４】
抗腫瘍薬が、１０−デアセチルバッカチンＩＩＩから調製される場合、この不純物は１０−デアセチルバッカチンＩＩＩと同じ半合成過程を受け、対応する２−デベンゾイル−２−ペンテノイル誘導体が生じ、その除去は非常に厄介である。
【０００５】
このために、例えば、米国薬局方は半合成パクリタキセル中に適切な量（０．７％まで）の２−デベンゾイル−２−ペンテノイルパクリタキセルの存在を許容している。
【０００６】
【化１】
2008535879.tif 000002
【０００７】
表  市販の１０−デアセチルバッカチン中に含有される主要な不純物
【０００８】
【化２】
2008535879.tif 000003
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
発明の開示
本発明は、ペンテノイル残基がチグリン酸残基である１０−デアセチル−２−デベンゾイル−２−ペンテノイルバッカチンＩＩＩ（ＩＩ）から、１０−デアセチルバッカチンＩＩＩを精製するための方法に関する。したがって、本発明によって精製された１０−デアセチルバッカチンＩＩＩによって、２位にベンゾイル残基の代わりにペンテノイル残基を有する対応する不純物を含まないタキサン骨格を有する抗腫瘍薬剤を得ることができる。
【００１０】
１０−デアセチルバッカチンＩＩＩは、７，１０−ビス−トリクロロアセチル誘導体（ＩＩＩ）に容易に変換することができる。この変換は、公知のエステル化方法によるトリクロロ酢酸活性誘導体による処理によって行うことができる。（ＩＩＩ）は、約０℃、好ましくは−５〜＋５℃の温度で、ピリジンまたはピリジン−ジクロロメタン混合物を溶媒として使用して、塩化トリクロロアセチルとの反応によって得られることが好ましい。ＨＰＬＣ分析によって、（ＩＩＩ）は、
出発物質として使用される１０−デアセチルバッカチンＩＩＩ中に（ＩＩ）の不純物に比例した量で存在する、不純物（ＩＩ）７，１０−ビス−トリクロロ酢酸と同様に、約２％の対応する１０−および７−モノアシル化生成物を不純物として含有することが示される。
【００１１】
驚くべきことに、後者の不純物（ＩＩ）のビス−トリクロロアセチル誘導体は、ビス−トリクロロアセチル１０−デアセチルバッカチンＩＩＩ（ＩＩＩ）のクロマトグラフ挙動と明らかに異なるクロマトグラフ挙動を有することが、見出された。
【００１２】
実際に、トリクロロアセチル化生成物を、好ましくは１０〜２０重量部の、さらに好ましくは１５重量部の少量のシリカゲル上でカラムクロマトグラフィーにかけ、ジクロロメタンまたはジクロロメタン−酢酸エチル混合物で溶出する場合、７，１０−ビス−トリクロロアセチル１０−デアセチルバッカチンＩＩＩ（ＩＩＩ）が溶出し、一方対応する２−デベンゾイル−２−ペンテノイル類似体が、モノアシル化生成物と共に固定相上に保持される。このような不純物は、ジクロロメタンよりも高い極性を有する溶媒、例えばアセトンまたはメタノールを使用して回収することができる。
【００１３】
得られた７，１０−ビス−トリクロロアセチルバッカチンＩＩＩ（ＩＩＩ）は、適切に活性化した側鎖による１３位のエステル化によって抗腫瘍薬剤の半合成のために使用することができる。したがって、９９％を超えるクロマトグラフ純度で得られる誘導体ＩＩＩの使用は、本発明のさらなる実施形態である。実際その利点は、２−デベンゾイル−２−ペンテノイル類似体の不存在に加えて、７位および１０位の両方におけるトリクロロアセチル保護基の存在である。これによって、選択された側鎖による７位および／または１０位のさらなる望ましくないエステル化、および別の方法では容易に除去することができない不純物の形成が回避される。したがって、適切な側鎖による１３位のエステル化と、それに続く７位および１０位からの、ならびに前記側鎖からの保護基の除去によって、ジ（フェニルイソセリニル）類似体を含まないドセタキセルまたはその前駆体（適切な保護側鎖を有する）を得ることができる。
【００１４】
他方、２−デベンゾイル−２−ペンテノイル類似体および他の不純物を含まない１０−デアセチルバッカチンＩＩＩは、アルカリ処理によって、好ましくはメタノールまたはメタノール−ジクロロメタン混合物またはテトラヒドロフランなどの適切な溶媒中における水酸化アンモニウムとの反応によって、（上記のように精製された）生成物（ＩＩＩ）から再生することができる。アセトニトリル、アセトンまたはメタノールなどの適合する溶媒からの結晶化によって、１０−デアセチルバッカチンＩＩＩが、９９％を超えるクロマトグラフ純度で得られ、化合物（ＩＩ）を不純物として含まない。
【００１５】
したがって、生成した得られる１０−デアセチルバッカチンＩＩＩは、２−デベンゾイル−２−ペンテノイル−パクリタキセルを含まない半合成パクリタキセルの調製に好都合に使用することができる。パクリタキセルは、１０−デアセチルバッカチンＩＩＩのＮ−デベンゾイルパクリタキセルへの変換と、それに続くベンゾイル化を可能にする任意の方法によって得ることができる。Ｎ−デベンゾイルパクリタキセルの調製のための好都合な方法は、例えばＵＳ２００５００４９２９７に開示されている。
【００１６】
したがって、本発明の他の目的は、２−デベンゾイル−２−ペンテノイル−パクリタキセルを含まない半合成パクリタキセル、およびそれを含有する医薬組成物である。
【００１７】
本発明を、下記に報告する実施例においてより詳細に例示する。
【００１８】
実施例１  １０−デアセチル−７，１０−ビストリクロロアセチルバッカチンＩＩＩ（ＩＩＩ）
０．４％の２−デベンゾイル−２−ペンテノイル類似体を不純物として含有する１０−デアセチルバッカチンＩＩＩ（１５ｇ）を、ピリジン６０ｍｌ中の塩化トリクロロアセチル６．６ｍｌで撹拌しながら０〜５℃で１時間処理する。この混合物を、塩化メチレン１００ｍｌおよび４Ｎ塩酸１００ｍｌで希釈する。相を分離し、有機相を４Ｎ塩酸１００ｍｌ、次いで塩化ナトリウムで飽和した水５００ｍｌで洗浄する。有機相を濃縮乾燥し、残基をトルエン１００ｍｌで除去する。固体（２４．９ｇ）を濾過により回収し、塩化メチレン１２５ｍｌ中で再溶解し、カラムクロマトグラフィーにより塩化メチレンで溶出しながら３７５ｇのＫｉｅｓｅｌｇｅｌ６０Ｍｅｒｃｋ上で精製する。ＩＩＩを含有する画分を回収し、トルエンを添加し、得られた沈殿物を濾過し、真空下５０℃で乾燥し、９９％を超えるＨＰＬＣ純度を有するＩＩＩ１７．８ｇを得る。ＨＰＬＣ−ＭＳ分析では、（ＩＩ）ビス−トリクロロ酢酸の存在を示さない。
【００１９】
実施例２  ２−デベンゾイル−２−ペンテノイル類似体を含まない１０−デアセチルバッカチンＩＩＩ
実施例１で記載した通りに得た１０−デアセチル−７，１０−ビス−トリクロロアセチルバッカチンＩＩＩ（１７．８ｇ）を、不活性雰囲気下でテトラヒドロフラン３６ｍｌ中に溶解し、濃水酸化アンモニウム３．９ｍｌと共に３０分間撹拌しながら処理する。この溶液を、アセトニトリルで希釈し、次いで初期結晶化となるまで濃縮し、その後生成物を濾過し、アセトンから再結晶させ、９９％を超えるＨＰＬＣ純度で２−デベンゾイル−２−ペンテノイルバッカチンＩＩＩを含まない１０−デアセチルバッカチンＩＩＩ１０ｇを得る。
【００２０】
実施例３  ２−デベンゾイル−２−ペンテノイル類似体を含まないパクリタキセル
上記の実施例２により精製した１０−ＤＡＢＩＩＩ（したがって２−デベンゾイル−２−ペンテノイル類似体を含まない）から出発して、Ｎ−デベンゾイルパクリタキセル（７００ｇ）を、ＵＳ２００５／００４９２９７Ａ１の実施例Ｖ〜ＶＩＩに記載の通り調製し、その後アセトニトリル１４中で溶解し、トリエチルアミン１２０ｍｌを添加し、および塩化ベンゾイル１０７ｍｌで処理する。
【００２１】
この反応混合物を、室温で３０分間撹拌し、０．１％酢酸を含有する水２１ｌで希釈する。
【００２２】
固形物を濾過し、３：２の水−アセトニトリル混合物３ｌで洗浄し、真空下５０℃で乾燥する。約７００ｇの乾燥固形物が得られ、これから２：１のシクロヘキサン−アセトンからの結晶化と、真空下で乾燥することによって、２−デベンゾイル−２−ペンテノイルパクリタキセルを含まないパクリタキセル６００ｇを得る。
【国際調査報告】
2008535879.tif 000004
2008535879.tif 000005
2008535879.tif 000006
2008535879.tif 000007