(57)【要約】【化１】2008512492.tif 000025  本発明は、ａ、ｂ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４が上記で定義された通りである式Ｉに従う構造を有する新規なイミダゾリジン−２−オン誘導体、それらを含有する製薬学的組成物ならびにアンドロゲン受容体により調節される障害及び状態の処置におけるそれらの使用を目的とする。
2008512492.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2008512492.tif 000024
Ｒ１は水素及び低級アルキルより成る群から選ばれ；
Ｒ２及びＲ３は低級アルキル、ハロゲン置換された低級アルキル、−ＣＨ（ＯＨ）−（低級アルキル）、−Ｃ（Ｏ）−（低級アルキル）、−Ｃ（Ｏ）−（低級アルコキシ）、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（ＲＢ）２より成る群から独立して選ばれ、但し、Ｒ２又はＲ３の１つは低級アルキル又はハロゲン置換された低級アルキルのいずれかであり；
ここで各ＲＢは水素、低級アルキル及びアリールから独立して選ばれ、但し、もし存在するなら、１個のみのＲＢがアリールであり；
ここでアリールは場合によりハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、低級アルキル、ハロゲン置換された低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲン置換された低級アルコキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、低級アルキルアミノ又はジ（低級アルキル）アミノから独立して選ばれる１個もしくはそれより多い置換基で置換されていることができ；
Ｒ４はハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、低級アルキル、ハロゲン置換された低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲン置換された低級アルコキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ（低級アルキル）アミノ、−Ｃ（Ｏ）−（低級アルキル）、−Ｃ（Ｏ）−（低級アルコキシ）、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（ＲＡ）２、−Ｓ（Ｏ）０−２−（低級アルキル）、−ＳＯ２−Ｎ（ＲＡ）２、−Ｎ（ＲＡ）−Ｃ（Ｏ）−（低級アルキル）、−Ｎ（ＲＡ）−Ｃ（Ｏ）−（ハロゲン置換された低級アルキル）及びアリールより成る群から選ばれ；
ここで各ＲＡは水素又は低級アルキルから独立して選ばれ；
ここでアリールは場合によりハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、低級アルキル、ハロゲン置換された低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲン置換された低級アルコキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、低級アルキルアミノ又はジ（低級アルキル）アミノから独立して選ばれる１個もしくはそれより多い置換基で置換されていることができ；
ａは０〜４の整数であり；
ｂは０〜１の整数である］
の化合物又は製薬学的に許容され得るその塩。
【請求項２】
Ｒ２が低級アルキル又はハロゲン化された低級アルキルであり、Ｒ３が−ＣＨ（ＯＨ）−（低級アルキル）、−Ｃ（Ｏ）−（低級アルキル）、カルボキシ、−Ｃ（Ｏ）−（低級アルコキシ）、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（ＲＢ）２であり；
ここで各ＲＢは水素、低級アルキル及びアリールから独立して選ばれ、但し、もし存在するなら、１個のみのＲＢがアリールであり；
ここでアリールは場合によりハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、低級アルキル、ハロゲン置換された低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲン置換された低級アルコキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、低級アルキルアミノ又はジ（低級アルキル）アミノから独立して選ばれる１個もしくはそれより多い置換基で置換されていることができる
請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が水素であり、Ｒ２が低級アルキル又はハロゲン化された低級アルキルであり、Ｒ３がカルボキシ、−Ｃ（Ｏ）−（低級アルコキシ）、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（ＲＢ）２であり；
ここで各ＲＢは水素、低級アルキル及びアリールから独立して選ばれ、但し、もし存在するなら、１個のみのＲＢがアリールであり；
ここでアリールは場合によりハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、低級アルキル、ハロゲン置換された低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲン置換された低級アルコキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、低級アルキルアミノ又はジ（低級アルキル）アミノから独立して選ばれる１個もしくはそれより多い置換基で置換されていることができる
請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
４−メチル−２−オキソ−１−フェニル−イミダゾリジン−４−カルボン酸フェニルアミド；４−メチル−２−オキソ−１−フェニル−イミダゾリジン−４−カルボン酸（４−ニトロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）アミド；４−メチル−２−オキソ−１−フェニル−イミダゾリジン−４−カルボン酸（４−シアノ−３−トリフルオロメチル−フェニル）アミド；１−（４−フルオロ−ベンジル）−４−メチル−２−オキソ−イミダゾリジン−４−カルボン酸（４−シアノ−３−トリフルオロメチル−フェニル）アミド；及び１−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−オキソ−イミダゾリジン−４−カルボン酸（４−クロロ−３−トリフルオロメチル−フェニル）アミド
より成る群から選ばれる請求項１の化合物。
【請求項５】
式１−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−オキソ−イミダゾリジン−４−カルボン酸（４−シアノ−３−トリフルオロメチル−フェニル）アミドを有する請求項１の化合物。
【請求項６】
式１−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−オキソ−イミダゾリジン−４−カルボン酸（３，５−ビス−トリフルオロメチル−フェニル）アミドを有する請求項１の化合物。
【請求項７】
式４−メチル−２−オキソ−１−フェニル−イミダゾリジン−４−カルボン酸メチルエステルを有する請求項１の化合物。
【請求項８】
式１−（４−シアノ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−４−メチル−２−オキソ−イミダゾリジン−４−カルボン酸メチルエステルを有する請求項１の化合物。
【請求項９】
式１−（４−シアノ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−４−メチル−２−オキソ−イミダゾリジン−４−カルボン酸を有する請求項１の化合物。
【請求項１０】
製薬学的に許容され得る担体及び請求項１の化合物を含んでなる製薬学的組成物。
【請求項１１】
請求項１の化合物の治療的に有効な量を患者に投与することを含んでなる、処置の必要な患者におけるアンドロゲン受容体により媒介される障害の処置方法。
【請求項１２】
障害が前立腺ガン、良性前立腺過形成（ＢＰＨ）、多毛症（ｈｉｒｓｉｔｕｔｉｓｍ）、脱毛症、神経性食欲不振、乳ガン、アクネ、ＡＩＤＳ、悪液質、男性避妊及び男性機能より成る群から選ばれる請求項１１の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は新規なイミダゾリジン−２−オン誘導体、それらを含有する製薬学的組成物及びアンドロゲン受容体により調節される障害及び状態の処置におけるそれらの使用を目的とする。さらに特定的に、本発明の化合物は前立腺ガン（ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、良性前立腺過形成（ｂｅｎｉｇｎ  ｐｒｏｓｔａｔｉｃ  ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ）（ＢＰＨ）、多毛症（ｈｉｒｓｉｔｕｔｉｓｍ）、脱毛症（ａｌｏｐｅｃｉａ）、神経性食欲不振（ａｎｏｒｅｘｉａ  ｎｅｒｖｏｓａ）、乳ガン（ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ）、アクネ（ａｃｎｅ）、ＡＩＤＳ、悪液質（ｃａｃｈｅｘｉａ）の処置において、男性避妊薬として及び／又は男性機能増強薬として有用である。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
アンドロゲンは動物のアナボリック（ａｎａｂｏｌｉｃ）ステロイドホルモンであり、男性において筋肉及び骨格量、生殖系の成熟、二次性徴の発達及び生殖能（ｆｅｒｔｉｌｉｔｙ）の保持を制御する。女性において、テストステロンはほとんどの標的組織でエストロゲンに転換されるが、アンドロゲン自身は例えば脳で正常な女性生理において役割を果たすことができる。血清中で見出される主なアンドロゲンはテストステロンであり、これは精巣及び下垂体のような組織において有効な化合物である。前立腺及び皮膚において、テストステロンは５α−レダクターゼの作用によりジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）に転換される。ＤＨＴはテストステロンより有力なアンドロゲンであり、それはアンドロゲン受容体にそれがより強く結合するからである。
【０００３】
すべてのステロイドホルモンと同様に、アンドロゲンは標的組織の細胞内の特異的な受容体、この場合はアンドロゲン受容体に結合する。これは核受容体転写因子群のメンバーである。アンドロゲンの受容体への結合はそれを活性化し、標的遺伝子に隣接するＤＮＡ結合部位にそれを結合させる。そこからそれはコアクチベータタンパク質及び転写基本因子と相互作用し、遺伝子の発現を調節する。かくしてアンドロゲンはその受容体を介し、細胞における遺伝子発現を変化させる。これらの変化は結局、代謝排出量、細胞の分化又は増殖に結果をもたらし、それを標的組織の生理において見ることができる。
【０００４】
アンドロゲン受容体機能のモジュレーターはしばらく臨床的に用いられてきたが、ステロイド性（非特許文献１；非特許文献２）及び非−ステロイド性（非特許文献３）化合物の両方とも、女性化乳房、乳房圧痛及び肝臓毒性を含むそれらの薬理学的パラメーターに関連する有意な負担（ｌｉａｂｉｌｉｔｉｅｓ）を有する。さらに、クマリン類を用いる抗凝固治療を受けている患者において薬剤−薬剤相互作用が観察された。最後に、アニリン感受性を有する患者は非−ステロイド性抗アンドロゲン薬の代謝産物により危うくなり得た。
【０００５】
アンドロゲン受容体の非−ステロイド性アゴニスト及びアンタゴニストは、多様な障害及び疾患の処置において有用である。さらに特定的に、アンドロゲン受容体のアゴニストを前立腺ガン、良性前立腺過形成、女性における多毛症、脱毛、神経性食欲不振、乳ガン及びアクネの処置において用いることができた。アンドロゲン受容体のアンタゴニストを男性避妊、男性機能増強において、ならびにガン、ＡＩＤＳ、悪液質及び他の障害の処置において用いることができた。
【０００６】
それでもなお、アンドロゲン受容体の小分子非−ステロイド性アンタゴニストに対する必要性がある。我々は今回、アンドロゲン受容体モジュレーターとして新規な一系列のインドール誘導体を記載する。
【非特許文献１】Ｂａｓａｒｉａ，Ｓ．，Ｗａｈｌｓｔｒｏｍ，Ｊ．Ｔ．，Ｄｏｂｓ，Ａ．Ｓ．著，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ，８６，２００１年，ｐｐ５１０８−５１１７
【非特許文献２】Ｓｈａｈｉｄｉ，Ｎ．Ｔ．著，Ｃｌｉｎ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，２３，２００１年，ｐｐ１３５５−１３９０
【非特許文献３】Ｎｅｗｌｉｎｇ，Ｄ．Ｗ．著，Ｂｒ．Ｊ．Ｕｒｏｌ．，７７（６），１９９６年，ｐｐ７７６−７８４
【発明の開示】
【０００７】
発明の概略
本発明は、式（Ｉ）
【０００８】
【化１】
2008512492.tif 000003
【０００９】
［式中、
Ｒ１は水素及び低級アルキルより成る群から選ばれ；
Ｒ２及びＲ３は低級アルキル、ハロゲン置換された低級アルキル、−ＣＨ（ＯＨ）−（低級アルキル）、−Ｃ（Ｏ）−（低級アルキル）、−Ｃ（Ｏ）−（低級アルコキシ）、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（ＲＡ）２、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（ＲＢ）２より成る群から独立して選ばれ、但し、Ｒ２又はＲ３の１つは低級アルキル又はハロゲン置換された低級アルキルのいずれかであり；
ここで各ＲＡは水素又は低級アルキルから独立して選ばれ；
ここで各ＲＢは水素、低級アルキル及びアリールから独立して選ばれ、但し、もし存在するなら１個のみのＲＢがアリールであり；
ここでアリールは場合によりハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、低級アルキル、ハロゲン置換された低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲン置換された低級アルコキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、低級アルキルアミノ又はジ（低級アルキル）アミノから独立して選ばれる１個もしくはそれより多い置換基で置換されていることができ；
Ｒ４はハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、低級アルキル、ハロゲン置換された低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲン置換された低級アルコキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ（低級アルキル）アミノ、−Ｃ（Ｏ）−（低級アルキル）、−Ｃ（Ｏ）−（低級アルコキシ）、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（ＲＡ）２、−Ｓ（Ｏ）０−２−（低級アルキル）、−ＳＯ２−Ｎ（ＲＡ）２、−Ｎ（ＲＡ）−Ｃ（Ｏ）−（低級アルキル）、−Ｎ（ＲＡ）−Ｃ（Ｏ）−（ハロゲン置換された低級アルキル）及びアリールより成る群か
ら選ばれ；
ここで各ＲＡは水素又は低級アルキルから独立して選ばれ；
ここでアリールは場合によりハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、低級アルキル、ハロゲン置換された低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲン置換された低級アルコキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、低級アルキルアミノ又はジ（低級アルキル）アミノから独立して選ばれる１個もしくはそれより多い置換基で置換されていることができ；
ａは０〜４の整数であり；
ｂは０〜１の整数である］
の化合物又は製薬学的に許容され得るその塩を目的とする。
【００１０】
１つの側面において、本発明は製薬学的に許容され得る担体及び本明細書に記載される化合物のいずれかを含んでなる製薬学的組成物に関する。他の側面において本発明は、本明細書に記載される化合物のいずれか及び製薬学的に許容され得る担体を混合することにより調製される製薬学的組成物に関する。さらに別の側面において本発明は、本明細書に記載される化合物のいずれか及び製薬学的に許容され得る担体を混合することを含んでなる製薬学的組成物の調製方法である。
【００１１】
本発明は、本明細書に記載される化合物のいずれか又は製薬学的組成物の治療的に有効な量を患者に投与することを含んでなる、処置の必要な患者におけるアンドロゲン受容体により調節される障害及び状態の処置方法も提供する。
【００１２】
好ましい態様において本発明は、本明細書に記載される化合物のいずれか又は製薬学的組成物の治療的に有効な量を患者に投与することを含んでなる、その必要のある患者における前立腺ガン、良性前立腺過形成、多毛症より成る群から選ばれるアンドロゲン受容体調節障害の処置のため、あるいは男性避妊のための方法を提供する。
【００１３】
本発明の他の例は：その必要のある患者における（ａ）前立腺ガン、（ｂ）良性前立腺過形成、（ｃ）多毛症、ｄ）脱毛、ｅ）神経性食欲不振、ｆ）乳ガン、ｇ）アクネ、ｈ）ＡＩＤＳ、ｉ）悪液質の処置のため、ｊ）男性避妊のためあるいは（ｋ）男性機能増強のための薬剤の製造における本明細書に記載される化合物のいずれかの使用である。
【００１４】
発明の詳細な記述
本発明は、式（Ｉ）
【００１５】
【化２】
2008512492.tif 000004
【００１６】
［式中、ａ、ｂ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は上記で定義された通りである］
の化合物を目的とする。本発明に従う化合物が少なくとも１個のキラル中心を有する場合、それらは従ってエナンチオマーとして存在し得る。本発明の化合物はアンドロゲン受容体のモジュレーターであり、前立腺ガン、良性前立腺過形成（ＢＰＨ）、多毛症、脱毛症、神経性食欲不振、乳ガン、アクネ、ＡＩＤＳ、悪液質の処置のために、男性避妊薬として及び／又は男性機能増強薬として有用である。
【００１７】
本発明の代表的な化合物は、表１に挙げられる通りである。
【００１８】
【表１】
2008512492.tif 000005
【００１９】
本明細書で用いられる場合他にことわらなければ、「ハロゲン」という用語は塩素、臭素、フッ素及びヨウ素を意味するものとする。
【００２０】
本明細書で用いられる場合他にことわらなければ、「アルキル」という用語は、単独で用いられても又は置換基の一部として用いられても、直鎖及び分枝鎖を含む。例えばアルキル基はメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチルなどを含む。他にことわらなければ、アルキルと一緒に用いられる場合「低級」は、１〜４個の炭素原子の炭素鎖組成を意味する。
【００２１】
本明細書で用いられる場合他にことわらなければ、「ハロゲン置換された低級アルキル」という用語は、水素原子の１個もしくはそれより多くがハロゲン原子で置き換えられた上記で定義された低級アルキル基を意味するものとする。適した例にはトリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロ−エチ−１−イル、クロロメチル、フルオロメチルなどが含まれるが、これらに限られない。類似して、「フッ素化された低級アルキル」という用語は、水素原子の１個もしくはそれより多くがフッ素原子で置き換えられた上記で定義された低級アルキル基を意味するものとする。適した例にはフルオロメチル、フルオロエチル、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロ−エチ−１−イルなどが含まれるが、これらに限られない。
【００２２】
本明細書で用いられる場合他にことわらなければ、「アルコキシ」は上記の直鎖もしくは分枝鎖アルキル基の酸素エーテル基を示すものとする。例えばメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、ｎ−ヘキシルオキシなど。
【００２３】
本明細書で用いられる場合他にことわらなければ、「シクロアルキル」という用語は、いずれかの安定な４〜８員単環式飽和環系、例えばシクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル及びシクロオクチルを意味するものとする。
【００２４】
本明細書で用いられる場合他にことわらなければ、「アリール」はフェニル、ナフチルなどのような非置換炭素環式芳香族基を指すものとする。
【００２５】
本明細書で用いられる場合他にことわらなければ、「ヘテロアリール」は、Ｏ、Ｎ及びＳより成る群から選ばれる少なくとも１個のヘテロ原子を含有し、場合によりＯ、Ｎ及びＳより成る群から独立して選ばれる１〜３個の追加のヘテロ原子を含有することができる５もしくは６員単環式芳香族環構造；あるいはＯ、Ｎ及びＳより成る群から選ばれる少なくとも１個のヘテロ原子を含有し、場合によりＯ、Ｎ及びＳより成る群から独立して選ばれる１〜４個の追加のヘテロ原子を含有することができる９もしくは１０員二環式芳香族環構造を示すものとする。ヘテロアリール基は、結果が安定な構造であるように、環のいずれのヘテロ原子又は炭素原子において結合することもできる。
【００２６】
適したヘテロアリール基の例にはピロリル、フリル、チエニル、オキサゾリル、イミダゾリル、プラゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピラニル、フラザニル、インドリジニル、インドリル、イソインドリニル、インダゾリル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル、ベンズイミダゾリル、ベンズチアゾリル、プリニル、キノリジニル、キノリニル、イソキノリニル、イソチアゾリル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、プテリジニルなどが含まれるが、これらに限られない。
【００２７】
本明細書で用いられる場合、“＊”という表示は、ステレオジェン中心の存在を示すものとする。
【００２８】
特定の基が「置換されている」場合（例えばシクロアルキル、アリール、ヘテロアリールなど）、その基は、置換基のリストから独立して選ばれる１個もしくはそれより多い置換基、好ましくは１〜５個の置換基、より好ましくは１〜３個の置換基、最も好ましくは
１〜２個の置換基を有することができる。
【００２９】
置換基に関し、「独立して」という用語は、１個より多いそのような置換基が可能な場合、そのような置換基が同じであるか、又は互いに異なることができることを意味する。
【００３０】
本開示を通じて用いられる標準的な命名法の下に、指定される側鎖の末端位置を最初に記載し、結合の点に向かって隣接する官能基が続く。かくして例えば「フェニル−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）−アミノカルボニル−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）」置換基は式
【００３１】
【化３】
2008512492.tif 000006
【００３２】
の基を指す。
【００３３】
明細書、特にスキーム及び実施例で用いられる略語は以下の通りである：
【００３４】
【表２】
2008512492.tif 000007
【００３５】
本明細書で用いられる場合「患者」という用語は、処置、観察又は実験の目的であった動物、好ましくは哺乳類、最も好ましくは人間を指す。
【００３６】
本明細書で用いられる場合「治療的な有効な量」という用語は、組織系、動物又は人間において、研究者、獣医師、医師あるいは他の臨床医が求めている生物学的もしくは医学的反応を引き出す活性化合物又は製薬学的薬剤の量を意味し、反応には処置されている疾患もしくは障害の症状の軽減が含まれるがこれらに限られない。
【００３７】
本明細書で用いられる場合「組成物」という用語は、特定の量における特定の成分ならびに特定の量における特定の成分の組み合わせから直接もしくは間接に生ずる生成物を含んでなる製品（ｐｒｏｄｕｃｔｓ）を包含することが意図されている。
【００３８】
本発明に従う化合物が少なくとも１個のキラル中心を有する場合、それらは従ってエナンチオマーとして存在することができる。化合物が２個もしくはそれより多いキラル中心を有する場合、それらはさらにジアステレオマーとして存在することができる。そのような異性体のすべて及びその混合物が本発明の範囲内に包含されることが理解されるべきである。さらに、化合物に関する結晶形のいくつかは多形相として存在し得、そのまま本発
明中に含まれることが意図されている。さらに、化合物のいくつかは水（すなわち水和物）又は通常の有機溶媒と溶媒和物を形成することができ、そのような溶媒和物も本発明の範囲内に包含されることが意図されている。
【００３９】
本発明に従う化合物の製造方法が立体異性体の混合物を生ずる場合、これらの異性体を通常の方法、例えば調製的クロマトグラフィーにより分離することができる。化合物をラセミ形において製造することができるか、あるいはエナンチオ特異的合成又は分割により個々のエナンチオマーを製造することができる。例えば光学的に活性な酸、例えば（−）−ジ−ｐ−トルオイル−Ｄ−酒石酸及び／又は（＋）−ジ−ｐ−トルオイル−Ｌ−酒石酸との塩形成によるジアステレオマー対の形成ならびに続く分別結晶化及び遊離の塩基の再生のような標準的な方法により、化合物をそれらの成分エナンチオマーに分割することができる。ジアステレオマーエステルもしくはアミドの形成ならびに続くクロマトグラフィー分離及びキラル助剤の除去によって化合物を分割することもできる。あるいはまた、キラルＨＰＬＣカラムを用いて化合物を分割することができる。
【００４０】
本発明の化合物のいずれかの製造方法の間に、関連する分子のいずれかの上の敏感なもしくは反応性の基を保護するのが必要であるか及び／又は望ましいかも知れない。これは、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｅｄ．Ｊ．Ｆ．Ｗ．ＭｃＯｍｉｅ，Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ，１９７３；及びＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ＆  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９１に記載されているもののような、通常の保護基により達成され得る。保護基はその後の簡便な段階に、当該技術分野から既知の方法を用いて除去され得る。
【００４１】
本発明は、本発明の化合物のプロドラッグをその範囲内に含む。一般にそのようなプロドラッグは化合物の官能基誘導体であり、それは生体内で必要な化合物に容易に転換可能である。かくして本発明の処置方法において、「投与する」という用語は、特定的に開示される化合物あるいは特定的に開示されないかも知れないが、患者への投与の後に生体内で特定の化合物に転換される化合物を用いる、記載される種々の障害の処置を包含するものとする。適したプロドラッグ誘導体の選択及び製造のための通常の方法は、例えばＤｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，ｅｄ．Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８５に記載されている。
【００４２】
薬剤中での使用のために、本発明の化合物の塩は「製薬学的に許容され得る塩」を指す。しかしながら他の塩は、本発明に従う化合物又はそれらの製薬学的に許容され得る塩の製造において有用であり得る。化合物の適した製薬学的に許容され得る塩には酸付加塩が含まれ、それらは例えば化合物の溶液を製薬学的に許容され得る酸、例えば塩酸、硫酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酢酸、安息香酸、クエン酸、酒石酸、炭酸又はリン酸の溶液と混合することにより製造することができる。さらに、本発明の化合物が酸性部分を有する場合、その適した製薬学的に許容され得る塩はアルカリ金属塩、例えばナトリウムもしくはカリウム塩；アルカリ土類金属塩、例えばカルシウムもしくはマグネシウム塩；ならびに適した有機リガンドと形成される塩、例えば第４級アンモニウム塩を含むことができる。代表的な製薬学的に許容され得る塩には以下が含まれる：
酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物、カルシウムエデテート、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物、クラブラン酸塩、クエン酸塩、ジヒドロクロリド、エデト酸塩、エジシレート（ｅｄｉｓｙｌａｔｅ）、エストレート（ｅｓｔｏｌａｔｅ）、エシレート（ｅｓｙｌａｔｅ）、フマル酸塩、グルセプテート（ｇｌｕｃｅｐｔａｔｅ）、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸、ヘキシルレゾルシネート、ヒドラバミン、ヒドロブロミド、ヒドロクロリド、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イソチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオネート（ｌａｃ
ｔｏｂｉｏｎａｔｅ）、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシレート、メチルブロミド、メチルナイトレート、メチルサルフェート、ムコ酸塩、ナプシレート（ｎａｐｓｙｌａｔｅ）、硝酸塩、Ｎ−メチルグルカミンアンモニウム塩、オレイン酸塩、パモ酸塩（エンボネート）、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、硫酸塩、スバセテート（ｓｕｂａｃｅｔａｔｅ）、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクレート（ｔｅｏｃｌａｔｅ）、トシレート、トリエチオダイド（ｔｒｉｅｔｈｉｏｄｉｄｅ）及び吉草酸塩。
【００４３】
製薬学的に許容され得る塩の製造において用いられ得る代表的な酸及び塩基には以下が含まれる：
酢酸、２，２−ジクロロ乳酸、アシル化アミノ酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、Ｌ−アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、４−アセトアミド安息香酸、（＋）−ショウノウ酸、ショウノウスルホン酸、（＋）−（１Ｓ）−ショウノウ−１０−スルホン酸、カプリン酸、カプロン酸、カプリル酸、桂皮酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデシルスルホン酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタール酸、ゲンチシン酸、グルコヘプトン酸、Ｄ−グルコン酸、Ｄ−グルコロン酸、Ｌ−グルタミン酸、α−オキソ−グルタル酸、グリコール酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩酸、（＋）−Ｌ−乳酸、（±）−ＤＬ−乳酸、ラクトビオン酸（ｌａｃｔｏｂｉｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）、マレイン酸、（−）−Ｌ−リンゴ酸、マロン酸、（±）−ＤＬ−マンデル酸、メタンスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、ニコチン酸、硝酸、オレイン酸、オロト酸、シュウ酸、パルミトリン酸、パモ酸、リン酸、Ｌ−ピログルタミン酸、サリチル酸、４−アミノ−サリチル酸、セバシン酸（ｓｅｂａｉｃ  ａｃｉｄ）、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、タンニン酸、（＋）−Ｌ−酒石酸、チオシアン酸、ｐ−トルエンスルホン酸及びウンデシレン酸を含む酸；ならびに
アンモニア、Ｌ−アルギニン、ベネタミン、ベンザチン、水酸化カルシウム、コリン、デアノール（ｄｅａｎｏｌ）、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、２−（ジエチルアミノ）−エタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−メチル−グルカミン、ヒドラバミン、１Ｈ−イミダゾール、Ｌ−リシン、水酸化マグネシウム、４−（２−ヒドロキシエチル）−モルホリン、ピペラジン、水酸化カリウム、１−（２−ヒドロキシエチル）−ピロリジン、第２級アミン、水酸化ナトリウム、トリエタノールアミン、トロメタミン及び水酸化亜鉛を含む塩基。
【００４４】
式（Ｉ）の化合物を下記のスキーム１に概述される方法に従って製造することができる。
【００４５】
【化４】
2008512492.tif 000008
【００４６】
従って、ベンゼン、トルエン、キシレンなどのような有機溶媒又はそれらの混合物中で、場合によりトルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、硫酸などのような触媒の存在下に、既知化合物又は既知の方法により製造される化合物である適切に置換された式（ＩＩ）の化合物を第１級ベンジル（ｂ＝１）又はアリール（ｂ＝０）アミンと、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ条件下で加熱して反応させ、対応する式（ＩＩＩ）の化合物を与える。あるいはまた、ＴＨＦ、メタノール、エタノールなどのような有機溶媒中の式（ＩＩ）の化合物と対応する第１級ベンジル（ｂ＝１）又はアリール（ｂ＝０）アミンの混合物を、ナトリウムシアノボロハイドライド、ナトリウムトリアセトキシボロハイドライドなどのような還元剤と反応させ、対応する式（ＩＶ）の化合物を直接与える。
【００４７】
式（ＩＩＩ）の化合物を水素ガス（パラジウム触媒の存在下における）、水素化ホウ素ナトリウム、ナトリウムシアノボロハイドライドなどのような還元剤と、メタノール、エタノール、ＴＨＦなどのような有機溶媒中で反応させ、対応する式（ＩＶ）の化合物を与える。
【００４８】
式（ＩＶ）の化合物を既知の方法に従って、例えば有機溶媒又はそれらの混合物、例えばメタノール／水、エタノール／水、ＴＨＦなどの中でトリフルオロメタンスルホン酸、ＨＣｌ、トリフルオロ酢酸などのような酸と反応させることにより脱−保護し、対応する
式（Ｖ）の化合物を与える。
【００４９】
式（Ｖ）の化合物をトリエチルアミン、ピリジンなどのような塩基の存在下に、ＴＨＦ、ジクロロメタンなどのような有機溶媒中でカルボニルジイミダゾール、ｐ−ニトロフェニルクロロホルメート、トリホスゲン、ホスゲンなどのような試薬と反応させ、対応する式Ｉａの化合物を与える。あるいはまた、式（Ｉａ）の化合物を有機溶媒又はそれらの混合物、例えばメタノール／水、エタノール／水、ＴＨＦなどの中で水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどのような塩基と反応させ、対応する式（Ｉｂ）の化合物を与える。あるいはまた、式（Ｉｂ）の化合物をジクロロメタン、ジクロロエタンなどのような溶媒中で、場合により触媒量のＤＭＦの存在下に、塩化オキサリルと反応させ、中間酸塩化物を形成し、それを適切に置換された第１級アミンと反応させ、対応する式（Ｉｃ）の化合物を与える。
【００５０】
以下の実施例は本発明の理解を助けるために示され、前記の請求項に示された本発明をいかようにも制限する意図はなく、そのようにみなされるべきではない。
【実施例１】
【００５１】
２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−２−メチル−プロピオン酸メチルエステル（１ａ）
【００５２】
【化５】
2008512492.tif 000009
【００５３】
メタノール（２５ｍＬ）中の２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−３−オキソ−プロピオン酸メチルエステル（２．３５ｇ，６．７１ミリモル）の溶液に、４−フルオロアニリン（０．５３ｍＬ，５．５９ミリモル）及び酢酸（０．１６ｍＬ，２．８０ミリモル）を加えた。メタノール（２５ｍＬ）中のナトリウムシアノボロハイドライド（１８８ｍｇ，２．９９ミリモル）の溶液を滴下し、滴下後に反応混合物を室温で３時間攪拌した。真空中で溶媒を除去し、残留物をＤＣＭ（５０ｍＬ）中に溶解した。有機溶液を炭酸ナトリウム水溶液（２０ｍＬ，１Ｎ）で処理し、２０分間攪拌し、水層を除去した。有機層の濃縮及び続く残留物のフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２，ＤＣＭ）を用いる精製は、表題化合物を黄色の油として与えた（９７０ｍｇ，５３％）。
ＭＳ（ｍ／Ｚ）＝３２５（Ｍ−Ｈ）
【００５４】
【表３】
2008512492.tif 000010
【実施例２】
【００５５】
２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（４−メトキシ−フェニルアミノ）−２−メチル−プロピオン酸メチルエステル（２ａ）
【００５６】
【化６】
2008512492.tif 000011
【００５７】
トルエン（７０ｍＬ）中の２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−メチル−３−オキソ−プロピオン酸メチルエステル（１．４０ｇ，６．０６ミリモル）の溶液に、４−メトキシベンジルアミン（０．８０ｍＬ，６．１２ミリモル）及びｐ−トルエンスルホン酸（約１０ｍｇ）を加えた。フラスコにＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋトラップ及び還流コンデンサーを取り付け、窒素下で２時間加熱還流した。真空中で溶媒を除去し、イミンを黄色の油として与え、それはさらなる使用に適した純度のものであった。
【００５８】
この残留物をメタノール（３０ｍＬ）中に溶解した。メタノール（１５ｍＬ）中の水素化ホウ素ナトリウム（３１０ｍｇ，８．１７ミリモル）の溶液を滴下し、滴下の後、反応混合物を室温で３時間攪拌した。真空中で溶媒を除去し、残留物をＤＣＭ（５０ｍＬ）中に溶解した。有機溶液を炭酸ナトリウム水溶液（２０ｍＬ，１Ｎ）で処理し、２０分間攪拌し、水層を除去した。有機層の濃縮及び続く残留物のフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２，ＤＣＭ）を用いる精製は、表題化合物を黄色の油として与えた（１．８５ｇ，９９％）。
ＭＳ（ｍ／Ｚ）＝３５３（ＭＨ＋）
【００５９】
【表４】
2008512492.tif 000012
【実施例３】
【００６０】
２−アミノ−３−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−２−メチル−プロピオン酸メチルエステル（３ａ）
【００６１】
【化７】
2008512492.tif 000013
【００６２】
メタノール（１０ｍＬ）中の２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−２−メチル−プロピオン酸メチルエステル（９５４ｍｇ，２．９２ミリモル）の溶液に、ＨＣｌ（３ｍＬ，１２Ｎ）を加えた。出発材料が残っていないことをＭＳが示すまで、混合物を５５℃に加熱した。周囲温度に冷却した後、溶液をＮａＯＨ水溶液（４０ｍＬ，１Ｎ）で処理し、ＤＣＭで数回抽出した。合わせた抽出物を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２，５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製し、表題化合物を黄色の油として与えた（３０５ｍｇ，４６％）。
ＭＳ（ｍ／Ｚ）＝２２７（ＭＨ＋）
【００６３】
【表５】
2008512492.tif 000014
【実施例４】
【００６４】
１−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−オキソ−イミダゾリジン−４−カルボン酸メチルエステル（４ａ）
【００６５】
【化８】
2008512492.tif 000015
【００６６】
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の２−アミノ−３−（４−フルオロ−フェニルアミノ）−２−メチル−プロピオン酸メチルエステル（２８２ｍｇ，１．２５ミリモル）の溶液をトリエチルアミン（２．００ｍＬ，１４．３ミリモル）で処理し、アルゴン下で０℃に冷却した。トリホスゲン（２１１ｍｇ，０．７１ミリモル）の溶液を反応物に滴下し、混合物が室温
に達するのを許した。１時間後、混合物をＤＣＭで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌで洗浄し、有機層を真空中で濃縮した。得られる残留物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、生成物を与えた（２６０ｍｇ，８２％）。
ＭＳ（ｍ／Ｚ）＝２５１（Ｍ−Ｈ）
【００６７】
【表６】
2008512492.tif 000016
【実施例５】
【００６８】
１−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−オキソ−イミダゾリジン−４−カルボン酸（５ａ）
【００６９】
【化９】
2008512492.tif 000017
【００７０】
メタノール（１５ｍＬ）中の１−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−オキソ−イミダゾリジン−４−カルボン酸メチルエステル（２４７ｍｇ，０．９８ミリモル）の溶液をＮａＯＨ水溶液（１．５０ｍＬ，６．３８ミリモル）で処理した。室温で１時間攪拌した後、混合物を１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ１まで処理し、得られる白色の沈殿を濾過により集めた（１３５ｍｇ，５８％）。
ＭＳ（ｍ／Ｚ）＝２３７（Ｍ−Ｈ）
【００７１】
【表７】
2008512492.tif 000018
【実施例６】
【００７２】
１−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−オキソ−イミダゾリジン−４−カルボン酸（４−シアノ−３−トリフルオロメチル−フェニル）−アミド（６ａ）
【００７３】
【化１０】
2008512492.tif 000019
【００７４】
ＤＣＭ（１５ｍＬ）中の１−（４−フルオロ−フェニル）−４−メチル−２−オキソ−イミダゾリジン−４−カルボン酸（１２０ｍｇ，０．５０ミリモル）の溶液を塩化オキサリル（０．０９ｍＬ，１．０３ミリモル）及び１滴の乾燥ＤＭＦで処理した。室温で１時間攪拌した後、真空中で溶媒を除去した。この残留物に乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の４−アミノ−２−（トリフルオロメチル）ベンゾニトリル（２７７ｍｇ，１．４９ミリモル）及びトリエチルアミン（０．２８ｍＬ，２．０１ミリモル）の溶液を加えた。室温で終夜攪拌した後、混合物を真空中で濃縮し、残留物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物を淡褐色の固体として与えた（１１０ｍｇ，５４％）。
ＭＳ（ｍ／Ｚ）＝４０５（Ｍ−Ｈ）
【００７５】
【表８】
2008512492.tif 000020
【実施例７】
【００７６】
ラット腹側前立腺（ｖｅｎｔｒａｌ  ｐｒｏｓｔａｔｅ）サイトゾルを用いるアンドロゲン受容体結合
ラット前立腺サイトゾル調製：
各調製に雄のＳｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ又はＷｉｓｔａｒラット（Ｃｈａｒｌｅｓ
Ｒｉｖｅｒ，２００〜３００ｇ）を用いた。サイトゾルの調製の前日、標準的な手術法を用いてラットを去勢した。
【００７７】
二酸化炭素窒息によりラットを安楽死させた。ラット前立腺を迅速に取り出し、予備−冷却され、予備−秤量された５０ｍＬプラスチック管中の氷の上に置いた。１個の管中に５個以下の前立腺を置いた。次いで管を秤量し、前立腺組織の湿潤重量を計算した。冷却された前立腺組織に、次いで組織のｍｇ当たり１ｍＬの冷却された均質化緩衝液を加えた。均質化緩衝液は、１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ．ＨＣｌ，ｐＨ７．４、１ｍＭ  モリブデン酸ナトリウム、１．５ｍＭ  ＥＤＴＡ、１ｍＭ  ジチオトレイトール、１０％（ｖ／ｖ）  グリセロール及び１％  プロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｓｉｇｍａ  Ｐ  ８３４０）を混合することにより新しく調製された。
【００７８】
予備−冷却されたＰｏｌｙｔｒｏｎ  ＰＴ３０００ホモジナイザー（Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ）を用い、冷室中で前立腺組織を均質化した。２０の速度設定、１０秒間の３回のバースト（ｂｕｒｓｔｓ）において均質化を行なった。均質化の間、前立腺組織を含有する管を氷上に保った。破裂の間に２０秒間、ホモジネートを氷上で休ませた。次いでホモジネ
ートを予備−冷却された３ｍＬのポリカーボネート超遠心管中に入れ、ＴＬ−１００超遠心機のＴＬＡ−１００ローター中で、４℃において１００，０００ｒｐｍで１２分間遠心した。得られる上澄み液を１ｍＬのアリコートにおいて、必要になるまで−８０℃で保存した。
【００７９】
上記で調製されたラットサイトゾルを用い、実施例８６に記載される案に従ってアンドロゲン受容体への結合を決定した。結合アッセイにおいて試験化合物の希釈液（通常は二重の１０μＭ）を試験することにより、％阻害を決定した。ウェル当たりのカウントを測定し、阻害のパーセントを決定した。結合アッセイにおいて試験化合物の連続希釈液（通常は１０μＭで始まる二重の１０回の半−対数希釈）を試験することにより、アンドロゲン受容体結合ＩＣ５０ｓを決定した。ウェル当たりのカウントを測定し、線形回帰によりＩＣ５０ｓを決定した。
【００８０】
本発明の代表的な化合物を上記の方法に従ってアンドロゲン受容体への結合に関して試験し、表Ｂに挙げられる結果を得た。１回より多く試験された化合物に関して、それぞれの結果を下記の表２に別々に挙げる。
【００８１】
【表９】
2008512492.tif 000021
【実施例８】
【００８２】
ＣＯＳ−７全細胞アンドロゲン受容体結合アッセイ，アデノウイルス形質導入
第１日：
ＣＯＳ−７細胞を、１０％（ｖ／ｖ）  木炭−処理胎児ウシ血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ）を含有し、フェノールレッドを含まないＤＭＥＭ／Ｆ−１２（ＧＩＢＣＯ）の溶液中で、ウェル当たり２０，０００個の細胞において９６−ウェルプレート中でプレート化した。次いで細胞を５％（ｖ／ｖ）加湿ＣＯ２中で３７℃において終夜インキュベーションした。
【００８３】
第２日：
必要なら１００％（ｖ／ｖ）ＤＭＳＯ中で試験化合物を希釈することにより、試験化合物溶液を調製した。各希釈は、６２５Ｘ最終的な所望の試験濃度である溶液を与えた。
【００８４】
次にフェノールレッドを含まない１ｍＬのＤＭＥＭ／Ｆ１２を、２−ｍＬ  ９６−ウェルアッセイブロックの各ウェル中にピペットで入れた。次いで４μＬの６２５Ｘ試験化合物希釈液をアッセイブロックの各ウェル中にピペットで入れた。ピペットによりウェルを注意深く混合した。
【００８５】
１５ｍＬ又は５０ｍＬの無菌遠心管中で、フェノールレッドを含まないＤＭＥＭ／Ｆ１２中のトリチウム化メチル−トリエノロンの２．５ｎＭ希釈液（［３Ｈ］Ｒ１８８１；Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ）を調製した。
【００８６】
１５ｍＬ又は５０ｍＬの無菌遠心管中で、ＤＭＥＭ／Ｆ１２中のアデノウイルスＡｄＥａｓｙ＋ｒＡＲのウェル当たり１：５０のｍｏｉにおける（ａｔ  ａ  ｍｏｉ  ｏｆ）希釈液を調製した。反転させることにより９６−ウェルプレートから培地を除去し、プレートを非常に短時間乾燥し、無菌のタオルの上に反転させた。培地の除去から可能な限りすぐ後に、４０μＬの希釈された試験化合物を二重に各ウェルに加えた。次いで各ウェルに４０μＬの２．５ｎＭ［３Ｈ］Ｒ１８８１及び２０μＬの希釈されたアデノウイルスを加えた。次いでプレートを５％（ｖ／ｖ）加湿ＣＯ２中で３７℃において４８時間インキュベーションした。
【００８７】
第４日：
反転させることにより上記のインキュベーションされたプレートから培地を除去し、乾燥した。次いで各ウェルを０．３５ｍＬの１ＸＰＢＳで洗浄した。次いで反転させることによりプレートからＰＢＳを除去し、プレートを乾燥した。次いで各ウェルに１ＸＰＢＳ中の０．５％（ｖ／ｖ）Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００（Ｓｉｇｍａ）の５０μＬを加え、プレートを回転振盪機上に５分間置いた。次いで各ウェルの内容物をＯｐｔｉＰｌａｔｅ−９６（Ｐａｃｋａｒｄ）シンチレーションプレートに移した。次いで各ウェルに０．２ｍＬのＭｉｃｒｏｓｃｉｎｔ−２０（Ｐａｃｋａｒｄ）を加え、ＴｏｐＣｏｕｎｔ（Ｐａｃｋａｒｄ）上でウェルをカウントした。
【００８８】
結合アッセイにおいて試験化合物の希釈液（通常は二重の１０μＭ）を試験することにより、パーセント阻害を決定した。ウェル当たりのカウントを測定し、阻害のパーセントを決定した。結合アッセイにおいて試験化合物の連続希釈液（通常は１０μＭで始まる二重の１０回の半−対数希釈）を試験することにより、アンドロゲン受容体結合ＩＣ５０ｓを決定した。ウェル当たりのカウントを測定し、線形回帰によりＩＣ５０ｓを決定した。
【００８９】
上記の方法に従い、本発明の体表的な化合物をアンドロゲン受容体への結合に関して試験し、表Ｃに挙げられる結果を得た。他にことわらなければ、３０００ｎＭの濃度を用いてＣＯＳ結合％阻害を決定した、１回より多く試験された化合物に関し、下記の表３にそれぞれの結果を別々に挙げる。
【００９０】
【表１０】
2008512492.tif 000022
【実施例９】
【００９１】
Ｌ９２９アンドロゲン受容体機能アッセイ，アデノウイルス形質導入
第１日：
Ｌ９２９細胞を、１０％（ｖ／ｖ）木炭−処理胎児ウシ血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ）を含有し、フェノールレッドを含まないＤＭＥＭ／Ｆ１２（ＧＩＢＣＯ）の溶液中で、ウェル当たり２０，０００個の細胞において９６−ウェルプレート中でプレート化した。次いでプレートを５％（ｖ／ｖ）加湿ＣＯ２中で３７℃において終夜インキュベーションした。
【００９２】
第２日：
必要なら１００％（ｖ／ｖ）ＤＭＳＯ中で試験化合物希釈液を調製した。各希釈は、１２５０Ｘ最終的な所望のアッセイ濃度まで成された。
【００９３】
最初にフェノールレッドを含まない２ｍＬのＤＭＥＭ／Ｆ１２を、２−ｍＬ  ９６−ウェルアッセイブロックのウェル中にピペットで入れた。次に４μＬの１２５０Ｘ試験化合物希釈液をアッセイブロックの各ウェル中にピペットで入れた。次いでピペットによりウェル中の混合物を注意深く混合した。
【００９４】
１５ｍＬ又は５０ｍＬの無菌遠心管中で、フェノールレッドを含まないＤＭＥＭ／Ｆ１２中のＲ１８８１（メチル−トリエノロン）の２．５ｎＭ（２．５Ｘ）希釈液を調製した。第２の１５ｍＬ又は５０ｍＬの遠心管中で、第１のものに等しい体積のＤＭＥＭ及び第１の管中で用いられるＲ１８８１の体積に等しい体積の１００％（ｖ／ｖ）ＤＭＳＯを含有する溶液を調製した。
【００９５】
１５ｍＬ又は５０ｍＬの無菌遠心管中で、ＤＭＥＭ／Ｆ１２中のアデノウイルスＡｄＥａｓｙ＋ｒＡＲのウェル当たり１：５００のｍｏｉにおける希釈液を調製した。反転させることにより９６−ウェルプレートから培地を除去し、非常に短時間乾燥し、反転させた。培地の除去から可能な限りすぐ後に、４０μＬの希釈された非標識試験化合物を二重に各ウェルに加えた。アンタゴニスト試験のために指定された各ウェルに、４０μＬの２．５ｎＭのＲ１８８１希釈液をアンタゴニスト試験のためのウェルに加えた。アゴニスト試験のために指定された各ウェルに４０μＬのＤＭＳＯ希釈液を加えた。次いで２０μＬの希釈されたアデノウイルスをすべてのウェルに加えた。プレートを５％（ｖ／ｖ）加湿ＣＯ２中で３７℃において４８時間インキュベーションした。
【００９６】
第４日：
各ウェルに１００μＬのＳｔｅａｄｙＧｌｏルシフェラーゼアッセイ基質（Ｐｒｏｍｅｇａ）を加え、プレートを回転振盪機上に１分間置いた。次いでプレートを暗所で室温において１時間インキュベーションした。次いで各ウェルの内容物を白色マイクロタイタープレート（Ｐａｃｋａｒｄ）に移し、Ｌｕｍｉｎｏｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｌａｂ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）上で読み取った。
【００９７】
他にことわらなければ、３０００ｎＭの濃度を用いて試験化合物の希釈液を試験することにより、Ｌ９２９ＡＲパーセント活性を決定した。３０００ｎＭの濃度を用いて試験化合物の希釈液を試験することにより、Ｌ９２９パーセント阻害を決定した。試験化合物の連続希釈液（通常は１０μＭで始まる二重の１０回の半−対数希釈）を試験することにより、ＥＣ５０ｓ及びＩＣ５０ｓを決定した。ウェル当たりのルシフェラーゼ活性を測定し、線形回帰によりＥＣ５０ｓ及びＩＣ５０ｓを決定した。
【００９８】
上記の方法に従い、アンドロゲン受容体における機能的活性に関して本発明の代表的な化合物を試験し、表４に挙げられる結果を得た。
【００９９】
【表１１】
2008512492.tif 000023
【実施例１０】
【０１００】
腹側前立腺及び精嚢重量生体内アッセイ
未成熟（約５０ｇ）の去勢された雄のＳｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラット（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ）を試験化合物（通常は４０ｍｇ／ｋｇで、３０％シクロデキストリン又は０．５％メチルセルロースビヒクル中で０．３ｍＬの体積において経口的に与えられる）及びテストステロンプロピオネート（２ｍｇ／ｋｇで、ゴマ油中で０．１ｍＬの体積において、首のうなじにおける注入により皮下的に与えられる）で１日１回、５日間処
置した。第６日に、二酸化炭素中の窒息によりラットを安楽死させた。腹側前立腺及び精嚢を取り出し、それらの湿潤重量を決定した。ビヒクルで処置された標準群をゼロパーセントに設定し、テストステロンのみで処置された標準群を１００％に設定して、試験化合物活性をテストステロン−増強組織重量のパーセント阻害として決定した。
【０１０１】
重量調整されない前立腺の重量が≦６０ｍｇ又は≧８４ｍｇであったら、試験化合物は「活性」であるとされた。
【０１０２】
化合物６ａ、４ｂ、６ｈ、４ｅ及び５ｅを上記の方法に従って試験し、「活性」であると決定した。
【０１０３】
化合物６ｅ、６ｊ、５ａ、４ａ、６ｇ、４ｄ、５ｄ、４ｃ、５ｃ、６ｃ、５ｂ、６ｂ、６ｄ及び６ｅを上記の方法に従って試験し、「不活性」であると決定した。これらの化合物のあるものは前立腺及び／又は精嚢（ｖｅｓｉｃａｌ）重量に影響を示したかも知れないし、又は示さなかったかも知れないが、それらは上記で定義した特定的基準を満たさなかったので、それらは本明細書で「不活性」として挙げられることに注意されたい。
【０１０４】
前記の明細書は本発明の原理を記載しており、例示の目的で実施例が示されているが、本発明の実施は、前記の請求項及びそれらの同等事項の範囲内に含まれる通常の変動、応用及び／又は修正のすべてを包含することが理解されるであろう。
【国際調査報告】
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