(57)【要約】本発明は人乳強化剤並びにそのような強化剤のいくつかの使用且つ製造方法に関する。特に有益な強化剤は、非妊娠期間、妊娠期間、授乳期間且つ／又は退縮期間に、ヒトの乳腺分泌物から直接的又は間接的に得た生成物に基づいた、ヒトの成分を少なくとも1つ使用することで実現でき、早産児の栄養補給という意味において特に有益な、最適に調整された強化効果を生み出す。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
非妊娠期間、妊娠期間、授乳期間、退縮期間の内の少なくとも１つの期間に、ヒトの乳腺分泌物から直接的又は間接的に得た生成物に基づいた、ヒトの成分を少なくとも1つ含む人乳強化剤。
【請求項２】
実質的には、乾燥又は液体の、優先的選択的に濃縮された形である、請求項１に記載の強化剤。
【請求項３】
前記強化剤は、強化される人乳と同じ個人のヒト乳腺分泌物から直接的又は間接的に得た、前記いずれかの請求項に記載の強化剤。
【請求項４】
粉末状である、前記いずれかの請求項に記載の強化剤。
【請求項５】
前記ヒトの成分は、少なくとも１つの水性且つ／又は非水性の天然成分の中の、前記乳腺分泌物からもともと且つ自然に得た生成物に関して濃縮される、前記いずれかの請求項に記載の強化剤。
【請求項６】
これらの成分は、タンパク質、脂質、炭水化物、ビタミン、ミネラル、ホルモン、細胞、特にカルシウム、リン、ｓＩｇＡ、ラクトフェリン、α−ラクトアルブミン、βカゼイン、κカゼイン、ｃ３コンプリメント、ｃ４コンプリメント、亜鉛、ナトリウム、塩化物、脂肪酸、オリゴ糖、血清アルブミン、乳糖且つ／又はリゾチームから、又はこれらの組み合わせから選ばれる、請求項５に記載の強化剤。
【請求項７】
少なくとも１つの前記成分は免疫学的活性成分である、請求項５又は６に記載の強化剤。
【請求項８】
ヒト乳腺分泌物から直接的又は間接的に得た抽出物である、前記いずれかの請求項に記載の強化剤。
【請求項９】
前記ヒトの成分は、少なくとも部分的に、好ましくは全面的に熱処理され、低温殺菌且つ／又は滅菌されている、前記いずれかの請求項に記載の強化剤。
【請求項１０】
さらに、ヒト以外から得られた成分を少なくとも１つ含む、前記いずれかの請求項に記載の強化剤。
【請求項１１】
前記ヒト以外から得られた成分は、タンパク質、脂質、炭水化物、ビタミン、ミネラル、ホルモン、細胞、安定剤、乳化剤、特にカルシウム、リン、ｓＩｇＡ、カゼイン、ラクトフェリン、α−ラクトアルブミン、βカゼイン、κカゼイン、ｃ３コンプリメント、ｃ４コンプリメント、亜鉛、ナトリウム、塩化物、脂肪酸、オリゴ糖、血清アルブミン、乳糖且つ／又はリゾチームから又はこれらの組み合わせから選ばれる、請求項１０に記載の強化剤。
【請求項１２】
前記ヒト以外の成分は、ヒト以外、好ましくは牛のミルク又はミルク抽出物である、請求項１０又は１１に記載の強化剤。
【請求項１３】
前記ヒトの成分は授乳期間中の乳腺分泌物に基づき、個々の授乳開始後、個々の授乳終了時、泌乳段階等の、乳腺分泌物の特定の段階中の前記乳腺分泌物から単離される、前記いずれかの請求項に記載の強化剤。
【請求項１４】
前記いずれかの請求項に記載の強化剤を補給されたミルクサンプル。
【請求項１５】
前記ミルクは人乳である、請求項１４に記載のミルクサンプル。
【請求項１６】
前記サンプルは、強化される人乳と同じ個人のヒト乳腺分泌液から直接的又は間接的に得た強化剤で強化されている、請求項１５に記載の人乳サンプル。
【請求項１７】
前記強化されたミルクは、ヒト以外の、好ましくは牛のミルクに基づいている、請求項１４に記載のミルクサンプル。
【請求項１８】
請求項１から１３のいずれかに記載の強化剤を液体のミルクに加え、そのような強化されたミルクを乳児に与えることを含む、乳児に補助栄養素を供給する方法。
【請求項１９】
前記強化されたミルクは、人乳、好ましくは前記強化剤の調合用に使われたものと同じ個人からのミルクに基づいている、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記強化されたミルクは、ヒト以外のミルク、好ましくは牛のミルク又は市販の乳児用調合乳に基づいている、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記強化されたミルクは、早産の低出生体重児に与えられる、請求項１８から２０のいずれかに記載の方法。
【請求項２２】
前記強化剤はミルク１ｍｌに対して０−２００ｍｇの量加えられる、請求項１８−２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
非妊娠期間、妊娠期間、授乳期間、且つ／又は退縮期間に、乳腺分泌物から直接的又は間接的に得た生成物は、個々に、又は、水性且つ／又は非水性成分に、又は水性且つ／又は非水性成分群に、少なくとも部分的に分離される、請求項１から１３のいずれか１項に記載の強化剤の製造方法。
【請求項２４】
実質的に非水性成分の分離は、前記乳腺分泌物の水性部分の除去の前あるいは後に実施される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
少なくとも１つの熱処理、低温殺菌且つ／又は滅菌ステップを含む、請求項２３又は２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記分離は、凍結乾燥、遠心分離、キレート化、膜分離、ろ過、特に成分特定ろ過、限外ろ過、逆浸透、アフィニティーカラム分離、透析又はこれらの組み合わせ等の方法を用いる、請求項２３から２５のいずれかに記載の方法。
【請求項２７】
請求項１から１３のいずれかに記載の強化剤を、乾燥又は液体の形で与えることを含む、成人に補助栄養素又は補助的な免疫学的活性成分を供給する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は人乳強化剤に関する。更にそのような強化剤の製法及びそのような強化剤の特定の使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
人乳は、その栄養組成及び免疫学的利点から乳児の最適な栄養補給として一般に知られている。更に成熟ドナーミルクは早期新生児集中治療室での早産、低出生体重児にとって望ましい栄養補給であると考えられている。しかしながら成熟ドナーミルクは急激に成長する低出生体重児が必要とする、いくつかの栄養素を十分には供給しないことが分かった。このような理由から、最近の新生児集中治療室での栄養補給には、未熟児の母親からのミルクが好まれるようになっている。
【０００３】
早産、低出生体重児にとってだけでなく、成熟ドナーミルクが必ずしも栄養素及び免疫学的成分を適切に混合して供給するとは限らないし、ある一定の条件下では、いくつかの発達段階にある満期産児も、理想的な成長及び疾病に対する最大の抵抗力等をつけるのに最適な栄養条件を確保するために、付加的又は補足的な栄養補給が必要である。
【０００４】
早産児だけでなく満期産児も、これらの乳児用に特別に配合した市販の乳児用ミルクあるいは乳児自身の母親のミルクを与えられるのが一般的である。
【０００５】
これに関し、この問題及び特にＵＳ６，２９４，２０６の背景技術に記載の、早産児に与える人乳強化剤の分野における開発の現状の、非常に包括的で詳細且つ一般的な記載について、明確に言及するべきである。
【０００６】
推定される乳児の要求に比べて、早産児人乳（ｐｒｅｔｅｒｍ  ｈｕｍａｎ  ｍｉｌｋ）はカルシウム、リン、タンパク質などいくつかの成分が明らかに欠乏している。早産児ミルクをタンパク質とエネルギーで強化すると、低出生体重児の成長は、子宮内で起こる成長に近づく。さらに、カルシウムとリンで強化すると、これらのミネラルの付着量が増加し、骨密度が改良される。従って、早産児に早産児ミルクを飲ませるときには、人乳を早産児の栄養必要量により良くマッチするように強化することが推奨されている。
【０００７】
液体及び粉末状の早産児ミルク強化剤は、この認められた必要性に応じ、国内で市販されている。市販製品には、例えば、パウダー  エンファミール（登録商標）（Ｍｅａｄ  Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌｓ、Ｅｖａｎｓｖｉｌｌｅ、Ｉｎｄ．）並びにリキッド  シィミラック  ナチュラル  ケア（登録商標）（Ｒｏｓｓ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｄｉｖｉｓｉｏｎ  ｏｆ  Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｃｈｉｃａｇｏ、ＩＬＬ．）がある。これらは、タンパク質、脂質及び炭水化物だけでなく、ミネラルやビタミンを相当量含む。これらの成分の源は、例えば、乳清濃縮物（タンパク質）、大豆又はココナッツ（脂質）及びコーンシロップ（炭水化物）であり、ミネラル及びビタミンはおそらく人工的起源である。強化剤は、それらの形、原料且つエネルギーの源、及び栄養成分が異なる。一般的に、粉末製品は母乳の希釈を最小限にするのに有利であるが、母乳の供給が限定されている場合には、人乳の供給を補足するために、液体強化剤を使用することができる。
【０００８】
早産児並びに満期産児がうまく摂取できる、粉末又は液体の人乳強化剤が必要とされ、それは、ヒトのドナーミルクに加えることが可能で、必要とされるエネルギーに関してだけでなく、乳児に有益又は欠くことのできない任意の他の栄養素に関しても、乳児にとって最適な栄養条件を提供することができる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の目的は、人乳用の改良された選択的強化剤並びにそのような強化剤の特定の使用及びそのような強化剤の製造方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
提案する改良された強化剤は、非妊娠期間、妊娠期間、授乳期間且つ／又は退縮期間に、ヒトの乳腺分泌物から直接的又は間接的に得た生成物に基づいた、少なくとも1つのヒトの成分を含む。
従って、本発明の目的は請求項１に記載の強化剤、請求項１８に記載の使用方法及び請求項２３に記載の製造方法である。
【００１１】
当該技術によると、特に早産児の栄養補給分野における強化剤は、ヒト以外のミルクすなわち通常、牛のミルクか、又は完全な人工的システム、又は植物を源とする炭水化物（特に乳糖）、脂質及びタンパク質に依存するシステムに基づいている。ビタミンやミネラルのような成分は通常人工的に作られる。しかしながら、特にタンパク質、炭水化物、脂肪、加えて、抗体等のミルクの多くの他の成分が、種に大いに依存することはよく知られている。従って、特に、免疫学的並びにホルモン的（それだけではないが）に考慮して、乳児特に早産児には、言うまでもなく母親の人乳という「自然的な」システムに出来る限り近いミルクを与え続けることが望ましい。
【００１２】
しかしながら、母親の乳腺分泌物が利用できない、又は母親の特定の乳腺分泌物が、乳児にとって理想的な栄養補給条件を可能にするのに、特定成分の最適量を示さない状況が多く、強化剤の使用はほとんど避けられない。従って、本発明の重要な特徴は、最適な栄養的条件が、少なくとも部分的に、好ましくは実質的に、人乳から直接的又は間接的に得た生成物に基づいた強化剤を提供することによって得られるという、驚くべき知見にある。このような強化剤は、当然ながら、（ほとんど）完全な種特異性組成並びに成分を有するため、乳児の理想的な成長を促進するだけでなく、完全な免疫学的及びホルモン的栄養補給をも可能にする。特に、低体重出生、早産児の場合には、これらの強化剤が非常に効果的であることが判明した。乳児の最適な栄養補給が、授乳だけによって可能であるという事実の認識の高まりにより、ミルクバンクがよりポピュラーとなり、このような強化剤の基本物質の供給がもはや問題ではなくなっている。
【００１３】
本文書にて使用される「強化剤」という用語の範囲においては、「希釈（ｄｅｒｉｃｈｅｄ）」システムも同様に理解されるべきであることを指摘しなければならない。言い換えれば、例えば、多くの早産児は乳糖に対処する能力に限界があることが一般に知られている。それ故に、本発明による強化剤はまた、乳糖のより少ない（又はない）（対応させて乳糖の量を激減させた）、液体／乾質のシステムであってもよい。母親のミルクにこのような「強化剤」を加えることにより、最終的に、強化剤を加えない組成より乳糖の量がかなり低いミルク組成に至る。このことは、乳糖に限らず、タンパク質や脂質等の他の成分にも適用でき、強化剤中の量を減らしたり、完全に排除することもできる。
【００１４】
本発明の第1の好ましい実施形態では、提案する強化剤は、乾燥又は液体状態であり、優先選択的に濃縮されている。好ましくは粉末として供給される。
【００１５】
本発明の別の好ましい実施形態によると、強化剤は、強化される人乳と同じ個人のヒト乳腺分泌物から直接的又は間接的に得たものである。これには、特定の母親のミルクを他の源からのいかなる成分も用いずに強化することができ、それゆえ、考えられる汚染又は免疫学的障害を減らせるため、特に有利である。
【００１６】
本発明の別の好ましい実施形態によると、人乳、すなわちヒトの成分又は強化剤が、その水性且つ／又は非水性の天然成分の少なくとも１つの中の、乳腺分泌物からもともと且つ自然に得られた生成物に関して濃縮される。言い換えれば、強化剤に対する原料物質はその自然な形及び組成で取り込まれるのではなく、タンパク質のような特定の成分又はある特定のタンパク質が濃縮されるように処理される。これらの濃縮された成分又は成分の組み合わせは、人乳中に存在しているタンパク質、脂質、炭水化物、ビタミン、ミネラル、ホルモン、酵素、サイトカイン、抗体等である。このような特定の強化剤を提供することにより、ある成分又は一群の成分を強化した特定の強化剤が、母乳中のこの成分又は一群の成分の量が十分でない状況において使用可能となる。従って、あらゆる範囲の、特定の強化剤を供給することができ、関係する乳児の、及び母親によって普通に供給されるような基礎的人乳の、特定の個々の要求（乳幼児の特定のニーズ、母乳の組成中の特定の欠乏）に応じた使用のための組み合わせが可能である。免疫学的（例えば抗体）又はホルモン的に有効な成分を濃縮した強化剤を供給することは、特に有利である。これらの特定の成分は極めて種に特異であるため、強化剤の形で供給することにより、乳児特に早産児の処置及び栄養補給の極めて新しい方法が可能となる。
【００１７】
本発明の別の好ましい実施形態によると、ヒトの成分は、少なくとも部分的又は好ましくは全面的に殺菌且つ／又は滅菌される。これにより、ドナーミルクの、考えられる細菌性、ウイルス性及び他の汚染に対する懸念を回避し、保存することができる。
【００１８】
さらなる好ましい実施形態によると、強化剤は、人のドナーミルクに基づいた上述のヒトの成分を含むだけでなく、さらに付け加えて、少なくとも１つの補足的なヒト以外の成分を含む。ヒト以外の成分は、例えば、ヒト以外好ましくは牛のミルク又はミルク抽出物である。選択的に又は付加的に、さらに、ヒト以外の、タンパク質、脂質、炭水化物等の成分を備えることが可能であり、これらのすべては、例えば、植物性であってもよい。さらに付け加えて、ビタミン、ミネラル、安定剤、乳化剤等を含むことができ、自然の又は人工的なものであってもよい。
【００１９】
強化剤の特定の構造は、基礎的な物質、すなわち人乳の特定の選択により左右される。人乳は、他の種との間だけでなく個々の女性の間でも組成が様々で、１人の女性に対してでさえ、人乳の組成は個々の栄養補給開始時に取られたのか又は栄養補給終了時に取られたのかに依存して変化することはよく知られている。
さらに、日内変動、日差変動、妊娠期間依存性があり、人乳の組成は授乳段階に依存する。すなわち早期授乳から後期授乳までの間で違いがある。この事実は、所望する強化剤に応じて、基礎的物質（人乳）を、個々の栄養補給開始後、個々の栄養補給終了時、授乳段階等、乳腺分泌物の特定の段階中に母親から採取することができる、ということに利用することができる。このように、例えば、非常に特殊な強化剤として利用するために、タンパク質と抗体が非常に多く乳糖と脂質がかなり少ない初乳ミルクを、単純乾燥させた後さらに分離させることなしに用いることができる。同じことが、例えば移行乳（産後７−２１日）又は成熟乳（産後２１日を超えたもの）を用いても可能であり、成分の特定の組み合わせを得て、濃縮等のさらなる処理なしに特殊な強化剤を得ることができる。
【００２０】
上述の強化剤は、乳児に補助栄養素を供給するために使用することができる。これは、液体の（人や牛のミルク又は市販の乳児用調合乳に基づいた代用乳）ミルク（好ましくは乳児自身の母親のミルク）に上述の強化剤を加え、このような強化された人乳を乳児に飲ませることにより可能となる。このような使用は、早産の低体重新生児の栄養摂取には特に有益である。これらの条件下では通常、このような強化剤が１ｍｌの人乳に対して０−２００ｍｇ、好ましくは０−５０ｍｇの量加えられる。実際、強化レベルは様々なパラメータに依存する。例えば、妊娠期間、乳児の体重、母親且つ／又は乳児の健康状態等である。現在行われている強化は、例えば、３０ミリリットルにつき２０カロリー又は２４カロリーというような、トータルカロリーを基礎としている。
【００２１】
人乳から生成した強化剤の場合、自分の母親のミルクであってもドナーマザーのミルクであっても、人乳の平均マクロ栄養素を用いると（脂質３．８ｇ／１００ｍｌ、タンパク質１ｇ／１００ｍｌ、乳糖７．０ｇ／１００ｍｌ、エネルギー２０ｃａｌ／３０ｍｌ）、乳児の体重１ｋｇに対して、水分摂取量１日１００ｍｌ／ｋｇ、タンパク質の推奨レベルは１日２．５ｇ／ｋｇである。よって、例えば、人乳から生成した乾燥タンパク質強化剤１．５ｇが、人乳１００ｍｌに加えられる必要がある。強化剤として液体濃縮物が用いられる場合も、類似の考慮がなされる。
【００２２】
母親のミルクの量が１日に３００ｍｌで、乳糖１８．５ｇ（７４ｃａｌ）、タンパク質２．４ｇ（９．６ｃａｌ）、脂質１０．８ｇ（９７ｃａｌ）を含む場合、この日の赤ん坊の摂取するトータルカロリーは１８０．６ｃａｌ又は１８．６ｃａｌ／ｏｚである。そこで、母親はこれが赤ん坊にとって充分か否か判断することができる。母親は強化剤を加えたり、ミルクを濃縮又は希釈したり、あるいはミルクをそのまま与えることができる。
【００２３】
自分の母親のミルクを、乳児の要求を満たすように調整することもできる。タンパク質濃縮ミルク、無乳糖ミルク、ｓＩｇＡ濃縮ミルク等の様々な生成物を得ることができる。
【００２４】
早産児に対して推奨されるタンパク質レベルは、例えばタンパク質１日２．５ｇ／ｋｇ、推奨される量は１日１８０ｍｌ／ｋｇ未満、推奨されるカロリーは２４ｃａｌ／ｏｚである。これは、１．７３０ｋｇの早産児に対して、タンパク質1日４．３ｇ、1日の量２９４（３００）ｍｌを意味する。
【００２５】
例えば、母親のミルクを使用できない場合、代用乳を改良するために前述の強化剤を使用することも可能である。付随して、乳児、好ましくは早産児に補助栄養素を与える、さらなる方法が提供され、液体牛乳且つ／又は市販の乳児用調合乳に強化剤を加え、こうして強化されたミルクを乳児に与えることを含む。また、母親が使用可能なミルクを過剰に有しているときに、適当にそれらを保存し、母親自身が充分な量のミルクを出すことができない（又はミルクが適切な組成でない）状況でこれらの強化剤を使用することも考えられ、母親の人乳に基づいた強化剤を製造し、これらの強化剤を使用することも考えられる。
【００２６】
本発明は、さらに、上述の強化剤の製造方法に関し、その際、非妊娠期間、妊娠期間、授乳期間且つ／又は退縮期間に、乳腺分泌物から直接的又は間接的に得た生成物を、個々の水性且つ／又は非水性成分に、あるいは一群の水性且つ／又は非水性成分に、少なくとも部分的に分離する。非水性部分の分離は、好ましくは、乳腺分泌物の水性且つ／又は非水性部分の除去前あるいは除去後に行われる。考えられる細菌性、ウイルス性、又は他の汚染についての懸念を排除するために、少なくとも１つの殺菌処理を含むことが望ましい。考えられる分離処理は、冷凍、乾燥、遠心分離、ろ過、キレート化、膜分離、限外ろ過、逆浸透、アフィニティーカラム分離、透析又はこれらの組み合わせ等の方法を含む。
【００２７】
提案する強化剤の使用は乳児にとって有益なだけでなく、成人への使用により全く新しい分野が開かれる可能性がある。従って、他の好ましい実施形態によると、上で説明した強化剤を乾燥又は液体の形で投与することを含む、成人への補助栄養素又は補助的な免疫学的有効成分を供給する方法が提案される。
【００２８】
本発明のさらなる実施形態は従属項で説明する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２９】
添付図面に、本発明の好ましい実施形態を示す。
【００３０】
添付の請求項で主張する本発明の範囲を制限することなく、人の乳腺分泌物に基づく強化剤の調合並びに使用は、以下に挙げるいくつかの実施例を用いて説明されるべきである。
【００３１】
図１に、フィルタ部材を用いての成分の分離又は濃縮のための装置を示す。そのために、サンプル１はフィルタユニット３に接続され、フィルタユニットは一方でろ液４を1つの容器に送り、浮遊物をサンプル／濃縮容器１に逆流させることが可能で、この際、ポンプ２を用いて強制的に循環させる。
【００３２】
タンパク質や、例えばカルシウムのような大きな分子に結合された成分（カルシウムは大きなタンパク質であるカゼインに結合される）を阻止し、水や乳糖等の小さい分子を通すことのできるフィルタ（膜、例えば３０キロダルトン（ｋＤ））を備えたこのようなセットアップを用い、オプションとして低温殺菌処理（６０℃、３０分）を用いると、図２−５のような結果が観察された。
【００３３】
図２に示すように、実際に濃縮物中の全タンパク質を約２倍に増加することができた。図３に見られるようにカルシウムもまた、タンパク質に結合されるため、濃縮部分中に濃縮される。一方乳糖は、図４に見られるように、膜を横切って準平衡に保たれる。
【００３４】
図５は、タンパク質含有量の長期結果を示すが、実際、９時間後には、タンパク質含有量に１０倍の増加を見ることができた。すなわち、体積を５００から５０ｍｌに減らすことができた。
【００３５】
一方、脂質部分を分離するために遠心分離を用い、他方、タンパク質又はミルクのかなり大きな分子部分に対しては上記限外ろ過を用いて、表１のような結果を得た。
【００３６】
表１（左→右、上→下へ）
濃縮
ｇ／１５０ｍｌ  遠心分離、ｇ／１５０ｍｌ  遠心分離、ｇ／６．７ｍｌ  限外ろ過、ｇ／３０ｍｌ
脂質
乳糖
タンパク質
エネルギー、Ｃａｌ／ｏｚ
【００３７】
図６−９には、母乳の分析結果を時間の関数として示す（産後日数、母親１７名）。特に、最初の２、３日中は、ほぼすべての成分に大きな変化が認められる。特にこれらの段階において強化は適切であろう。また、図９に示すように、エネルギー含量において、授乳初期（２０日を超えて）にはより大きい変化があり、その後、より安定してくる。これら１７名の母親の平均エネルギーは２２．４Ｃａｌ／ｏｚである。そこで、人乳中のエネルギー含量の現在の推定すなわち２０Ｃａｌ／ｏｚを用い、母親自身のミルクを強化することができる。特に授乳初期には、不必要な混乱に至る可能性のある、補給過剰ミルク又は補給不足ミルクがいくつか見られる。
【実施例】
【００３８】
実施例１
人乳サンプルの液体サンプル（１００ｍｌ）を取った。人乳は、産後１０日を超え９０日未満の、早産児の母親あるいは人乳ドナーから取った。ミルクサンプルは、１日にわたって胸から搾り出したミルクから取った。このミルクの主な組成は、以下のようにまとめることができる。つまり、脂質３．８％、タンパク質０．８％及び炭水化物５．２％である。ミルクの実際のエネルギー含量を測定した。遠心分離（１００００ｒｐｍ、４℃）により、ミルクの非水性（乳脂）部分を、水性部分から分離し、その最上層（乳脂）を慎重に取り除き、既知の量を母親自身のミルク１４０ｍｌに加えて、母親のミルクのエネルギー含量を特定の体重と年齢の早産児に推奨されるレベルにまで増加させた。
さらに、標準処置として、低温殺菌及び細菌評価のスタンダード・ホスピタル・グレード（ｓｔａｎｄａｒｄ  ｈｏｓｐｉｔａｌ  ｇｒａｄｅ）があってもよい。
早産児の成長は、子宮内で起こる成長と似ていることを観察できた。
【００３９】
実施例２
人乳サンプルの液体サンプル（１５０ｍｌ）を取った。人乳は、産後１０日を超え９０日未満の、特別なケアの必要な新生児（早産児又は病気の満期産児）の母親又は人乳ドナーから取った。ミルクサンプルは、一日にわたって胸から搾り出したミルクから取った。このミルクの主な組成は、以下のようにまとめることができる。つまり、脂質３．８％、タンパク質０．８％及び炭水化物５．２％である。ミルクサンプル中のタンパク質濃度を測定した。遠心分離（１０，０００ｒｐｍ、４℃）により、ミルクの非水性（乳脂）部分を、水性部分から分離し、その最上層（乳脂）を慎重に取り除いた。その水層を、ミルクのタンパク質を通さないフィルタ（ポール・コーポレーション製３０キロダルトン（Ｋｄ）オメガ限外ろ過タンジェンシャルフローフィルトレーションメンブレン；出来るだけ低温、具体的には１９℃）を通すことにより濃縮した。水性部分を５倍に濃縮（水性部分を９時間に数回フィルタを通して、概算として一時間毎に濃縮させたタンパク質量の平均レベルを得、強化ステップでそれを用いる前に真のタンパク質量を得るために、濃縮されたタンパク質つまり最終生成物を分析することにより）した時点で、濃縮されたミルクのタンパク質を既知量、母親自身のミルク１３０ｍｌに加え、ミルクのタンパク質量を特定の体重と年齢の早産児又は病気の新生児に推奨されるレベルにまで増加させた。
さらに、標準的処置として低温殺菌及び細菌評価のスタンダード・ホスピタル・グレード（ｓｔａｎｄａｒｄ  ｈｏｓｐｉｔａｌ  ｇｒａｄｅ）があってもよい。
早産児の成長は、子宮内で起こる成長と似ていることを観察でき、（病気の）満期産児の成長はほぼ同年齢の満期産児の成長と似ていることを観察できた。
【００４０】
実施例３
人乳サンプルの液体サンプル（５００ｍｌ）を取った。人乳は、産後９０日を超える人乳ミルクドナーから取った。ミルクのサンプルは、２、３日に渡って胸から搾り出し冷凍保存したミルクからとった。このミルクの主な組成は、以下のようにまとめることができる。つまり、脂質３．８％、タンパク質０．８％及び炭水化物５．２％である。ミルクサンプル中のタンパク質濃度を測定した。遠心分離（１００００ｒｐｍ、４℃）により、ミルクの非水性（乳脂）部分を、水性部分から分離し、その最上層（乳脂）を慎重に取り除いた。その水層を、ミルクのタンパク質を通さないフィルタ（ポール・コーポレーション製３０キロダルトン（Ｋｄ）オメガ限外ろ過タンジェンシャルフローフィルトレーションメンブレン；出来るだけ低温、具体的には１９℃）を通すことにより濃縮した。（実施例２と同じ方法で）水性部分を５倍に濃縮した時点で、濃縮させた溶液を、高速（毎分２１００００回転（ｒｐｍ）、４℃）で遠心分離し、カゼイン部分を沈殿させた。カゼイン部分は、タンパク質に加え、母乳中のカルシウムとリンの大部分を含んでいる。この部分を、低温殺菌し（ホールド法  ｈｏｌｄ  ｍｅｔｈｏｄ）で、６０℃で３５分間、低温殺菌した。病院のバクテリア評価によると、用意したすべてのサンプルに陰性の結果が見られた（Ｊｓｆｆｅｒｙ  ＢＳ、Ｓｏｍａ−Ｐｉｌｌａｙ  Ｐ、Ｍａｋ（２００３）  手で搾った人の母乳のバクテリア汚染にプレトリア低温殺菌が与える影響  ４９（４）  ２４０−４  Ｊ  Ｔｒｏｐ  Ｐｅｄｉａｔｒ）。必要となるまで液体か乾燥粉末として冷凍保存した。この濃縮したタンパク質／カルシウム／リン部分を一定量、早産児又は病気の満期産児用の母親自身のミルクを強化するために使用し、それらのカルシウムとリンのバランスを回復させた。
早産児の成長は、子宮内で起こる成長と似ていることを観察でき、（病気の）満期産児の成長はほぼ同年齢の満期産児の成長と似ていることを観察できた。
【００４１】
実施例４
人乳サンプルの液体サンプル（１０００ｍｌ）を取った。人乳は、産後１０日を超え９０日未満の、早産児の母親又は人乳ドナーから取った。ミルクのサンプルは、２、３日に渡って胸から搾り出し冷凍保存したミルクからとった。このミルクの主な組成は、以下のようにまとめることができる。つまり、脂質３．８％、タンパク質０．８％及び炭水化物５．２％である。ミルクサンプル中のタンパク質濃度を測定した。遠心分離（１００００ｒｐｍ、４℃）により、ミルクの非水性（乳脂）部分を水性部分から分離し、その最上層（乳脂）を慎重に取り除いた。それから、水層を、ミルクのタンパク質を通さないフィルタを通すことにより濃縮した（ポール・コーポレーション製３０キロダルトン（Ｋｄ）オメガ限外ろ過タンジェンシャルフローフィルトレーションメンブレン；出来るだけ低温、具体的には１９℃）。（実施例２と同じ方法で）水性部分を５倍に濃縮し、その後、アフィニティカラム（ファルマシア製）に通し、ｓＩｇＡとリゾチームを分離した。ｓＩｇＡとリゾチーム溶液を（実施例３と同じホールド法（ｈｏｌｄ  ｍｅｔｈｏｄ）で）低温殺菌し、必要となるまで液体として冷凍保存した。濃縮したｓＩｇＡ又はリゾチーム溶液を一定量、ミルク中のｓＩｇＡ又はリゾチーム濃度が低い母親の母乳を強化するために使用した。
【００４２】
実施例５
人乳サンプルの液体サンプル（５０ｍｇ、５０ｍｌ）を取った。人乳は、産後約２０日の母親から取った。サンプルを、ある特定の栄養補給のはじめに取った。すなわち、サンプルの脂質はかなり低かった。このミルクの主な組成は、以下のようにまとめることができる。つまり、脂質３．８％、タンパク質１％、炭水化物７％、エネルギー６７％である。サンプルの水性部分をロータリー式蒸発器で蒸発させ、乾燥沈殿物を得ることができた。この沈殿物を強い破砕を避けて慎重に粉末に変えた。６．２ｍｇ（ミルクの８７．６％は水分である（Ｊｅｎｎｅｓｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９７０）Ｄａｉｒｙ  Ｓｃｉ．Ａｂｓｔｒ．，３２，５９９−６１２）という事実に基づき、上記処置はミルク中の水分をすべて取り除くと、マクロ栄養素すべてが乾燥した形で残る。）の乾燥強化剤が、この処置から得られた。
【００４３】
この粉末を、早産児の母親から得た人乳用の強化剤として使用した。６．２ｍｇの強化剤を、母親からのミルク５０ｍｇに加え、早産児に与えた。早産児の成長は、子宮内で起こる成長と似ていることを観察できた。
【００４４】
実施例６
実施例１の強化剤を、得られたカルシウムのレベルが１２３−１８５／１００ｋｃａｌ、葉酸のレベルが３０−４５μｇ／１００ｋｃａｌ、リボフラビンのレベルが８０−６２０μｇ／１００ｋｃａｌ、ビタミンＢのレベルが１３０―２５０μｇ／１００ｋｃａｌ、及びビタミンＣのレベルが８．３−３７ｍｇ／１００ｋｃａｌとなるように、付加的に補った。（Ｋｌｅｉｎ  Ｊ．Ｃ．（２００２）早産児の調合乳に対する栄養必要量、Ｊ．Ｎｕｔｒ．１３２，１３９５ｓ−１５７７ｓ）
【００４５】
この粉末を、早産児の母親から得た人乳用強化剤として使用した。６．２ｍｇの強化剤を母親からのミルク５０ｍｇに加え、早産児に与えた。早産児の成長は、子宮内で起こる成長に近づくことを観察できた。
【００４６】
実施例７
人乳の液体サンプル（５０ｍｇ）を取った。人乳は産後１日の母親からとった。サンプルは、ある特定の栄養補給の終わり頃に取った。すなわち、サンプルの脂質は相対的に高い。このミルクの主な組成は、以下のようにまとめることができる。つまり、脂質３．８％、タンパク質１％、炭水化物７％、エネルギー６７％である。サンプルの水性部分を、ロータリー式蒸発器を用いて蒸発させ、乾燥沈殿物を得ることができた。この沈殿物をすり鉢で強い破砕を避けて慎重に粉末に変えた。６．２ｍｇの乾燥強化剤が、この処置から得られた。
【００４７】
この粉末を、早産児の母親から得た人乳用の強化剤として使用した。６．２ｍｇの強化剤を、母親からのミルク５０ｍｇに加え、早産児に与えた。早産児の成長は、子宮内で起こる成長と似ていることを観察できた。
【００４８】
母親自身のミルク（ＥＢＭ）１５０ｍｌ中には、乳糖９．２ｇ、タンパク質１．２ｇ、脂質５．４４ｇがある。一連の計算の後、乳脂（又は脂質）１１ｇを母親のミルクに加えた。限外ろ過で濃縮されたこのタンパク質は、溶液の形で存在し、１５０ｍｌ中に３．０８５ｇのタンパク質がある。以下（表）は強化された母親自身のミルク３００ｍｌ中のマクロ栄養素のトータル量と、それぞれの栄養素からのカロリーであり、１オンス（ｏｚ）２４カロリーで変換した。この方法を用いて、いかなる人工強化剤をも用いず、いわゆる「真の人乳強化剤」すなわちドナーマザー又は同じ母親に基づいた強化剤を用いるだけで、早産児の栄養素とエネルギー量にマッチするような、母親自身のミルクを強化するための正確な処置を得ることができる。
【００４９】
表２に、実施例の状況を示す。
【００５０】
表２（左→右、上→下へ）
真の人乳強化剤、強化された母親自身のミルク
栄養素、ＥＢＭ（１５０ｍｌ）、乳脂（ｇ）、濃縮物（ｇ／１５０ｍｌ）、３００ｍｌ、Ｃａｌ／３００ｍｌ
乳糖
タンパク質
脂質
【図面の簡単な説明】
【００５１】
【図１】フィルタユニットを使用した成分の分離又は濃縮のための装置の図である。
【図２】低温殺菌前（黒点）と低温殺菌後（白丸）における全タンパク質含有量を限外ろ過時間の関数として示した図である。
【図３】図２と同様に、カルシウム含有量を限外ろ過時間の関数として示した図である。
【図４】図２と同様に、乳糖含有量を限外ろ過時間の関数として示した図である。
【図５】図２と同様に、タンパク質含有量を限外ろ過時間の関数として９時間分示した図である。
【図６−９】母乳の分析結果を時間（産後日数）の関数として示した図である。
【図６】異なる母親に対して、産後１０から６０日の母乳の平均脂質含有量を示した図である。
【図７】異なる母親に対して、産後１０から６０日の母乳の平均タンパク質含有量を示した図である。
【図８】異なる母親に対して、産後１０から６０日の母乳の平均乳糖含有量を示した図である。
【図９】異なる母親に対して、産後１０から６０日の母乳の平均エネルギー含量を示した図である。
【符号の説明】
【００５２】
１  サンプル
２  ポンプ
３  フィルタユニット
４  ろ液
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【国際調査報告】
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