(57)【要約】【課題】ＤＯＴＡ（１，４，７，１０−テトラアザシクロデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸）などの配位子を含有する化合物に68Ｇａ等を配位させた後に、生体分子のアミノ基等への68Ｇａ−ＤＯＴＡ標識等を実施可能な化合物の提供を可能とする。【解決手段】下記一般式（Ｉ）で表される化合物またはその塩。【化１】2015030702.tif 000037【選択図】図３
2015030702.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）で表される化合物またはその塩。
【化２８】
2015030702.tif 000030
［式中、
Ｚは、１，４−フェニレン、１，３−フェニレンまたは１，２−フェニレンであり、
Ｒ1は、水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、１以上の置換基で置換された炭素数１〜６のアルキル基、炭素数７〜１８のアラルキル基、１以上の置換基で置換された炭素数７〜１８のアラルキル基、炭素数６〜１２のアリール基、または１以上の置換基で置換された炭素数６〜１２のアリール基であり、
Ｒ2は、−ＣＨＯ、−ＣＨ2ＯＨまたは−ＣＨ2ＯＲ10である（Ｒ10は、水酸基の保護基であり、
Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、Ｒ16、Ｒ17、およびＲ18は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、飽和もしくは不飽和の炭化水素基、アリール基、アルコキシ基、アラルキル基、アリールオキシ基、複素環基、アミノ基、ニトロ基またはシアノ基であり、
Ｌ1は、式−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）m−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、式−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ2）m−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、式−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）m−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ2）m−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−または式−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ2）m−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）m−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（前記式中、ｍは、１〜２０の整数である。）で表される基であり、
Ｌ2は、式−（ＣＨ2）n1−、式−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−、式−（ＣＨ2）n1−ＣＯＮＨ−、式−ＣＯＮＨ−（ＣＨ2）n1−、式−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−、式−ＮＨ−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−、式−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−ＮＨ−、式−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−Ｏ−（ＣＨ2）n4−、式−ＮＨ−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−Ｏ−（ＣＨ2）n4−、または、式−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−Ｏ−（ＣＨ2）n4−ＮＨ−（前記式中、ｎ１、ｎ２、ｎ３およびｎ４は、それぞれ独立して１〜２０の整数である。）で表わされる基であり、
Ａは、以下の式（ｉ）〜（ｉｉｉ）で表される基にＭが配位した基(ＭはＧａ、Ｇｄ、Ｃｕ、Ｙ、Ｉｎ、Ｌｕ、Ｔｂ、Ｅｕ、ＹｂまたはＥｒのイオンである）、または、式（ｉｖ）〜（ｘｉｉ）で表される基である。
【化２９】
2015030702.tif 000031
］
【請求項２】
HiLyte Fluoro（登録商標）750 Bis-NHSエステルまたはHiLyte Fluoro（登録商標）647-NHSエステルをアジド体に変換し、得られたアジド体と下記式（ＩＶ）の化合物とを反応させて得られる縮合体またはその塩。
【化３０】
2015030702.tif 000032
式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、Ｒ16、Ｒ17、Ｒ18、Ｌ1およびＺの定義は、請求項１に記載のとおりである。
【請求項３】
請求項１に記載の一般式（Ｉ）で表される化合物もしくはその塩および請求項２に記載の縮合体もしくはその塩の少なくとも一方を含む標識用組成物。
【請求項４】
請求項１に記載の一般式（Ｉ）で表される化合物もしくはその塩および請求項２に記載の縮合体もしくはその塩の少なくとも一方を含む検査用組成物。
【請求項５】
請求項１に記載の一般式（Ｉ）で表される化合物またはその塩の製造方法であって、
下記一般式（ＩＩ）の化合物と下記一般式（ＩＶ）の化合物とを反応させる工程を含む製造方法。
【化３１】
2015030702.tif 000033
式中、Ａ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、Ｒ16、Ｒ17、Ｒ18、Ｌ1、Ｌ2およびＺの定義は、請求項１に記載のとおりである。
【請求項６】
下記一般式（II）で表される化合物及び下記一般式(ＩＶ)で表される化合物を含む、請求項１に記載の一般式（Ｉ）で表される化合物もしくはその塩を含む請求項３に記載の標識用組成物または請求項１に記載の一般式（Ｉ）で表される化合物もしくはその塩を含む請求項４に記載の検査用組成物を合成するためのキット。
【化３２】
2015030702.tif 000034
式中、Ａ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、Ｒ16、Ｒ17、Ｒ18、Ｌ1、Ｌ2およびＺの定義は、請求項１に記載のとおりである。
【請求項７】
HiLyte Fluoro（登録商標）750 Bis-NHSエステルまたはHiLyte Fluoro（登録商標）647-NHSエステルをアジド体に変換することにより得られたアジド体と、下記一般式(ＩＶ)で表される化合物を含む、請求項２に記載の縮合体もしくはその塩を含む請求項３に記載の標識用組成物または請求項２に記載の縮合体もしくはその塩を含む請求項４に記載の検査用組成物を合成するためのキット。
【化３３】
2015030702.tif 000035
式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、Ｒ16、Ｒ17、Ｒ18、Ｌ1およびＺの定義は、請求項２に記載のとおりである。
【請求項８】
アミノ基を有する化合物又は細胞表面に、金属錯体又は蛍光化合物を導入する方法であって、請求項１に記載の一般式（Ｉ）で表される化合物もしくはその塩または請求項２に記載の縮合体もしくはその塩を、アミノ基を有する化合物又は細胞表面のタンパク質の遊離アミノ基と反応させる工程を含む、方法。
【請求項９】
請求項８に記載の方法により、金属錯体又は蛍光化合物が導入された、ペプチド、タンパク質又は細胞。
【請求項１０】
下記一般式（ＩＶ）で表される化合物またはその塩。
【化３４】
2015030702.tif 000036
［式中、
Ｚは、１，４−フェニレン、１，３−フェニレンまたは１，２−フェニレンであり、
Ｒ1は、水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、１以上の置換基で置換された炭素数１〜６のアルキル基、炭素数７〜１８のアラルキル基、１以上の置換基で置換された炭素数７〜１８のアラルキル基、炭素数６〜１２のアリール基、または１以上の置換基で置換された炭素数６〜１２のアリール基であり、
Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、Ｒ16、Ｒ17、およびＲ18は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、飽和もしくは不飽和の炭化水素基、アリール基、アルコキシ基、アラルキル基、アリールオキシ基、複素環基、アミノ基、ニトロ基またはシアノ基であり、
Ｌ1は、式−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）m−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、式−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ2）m−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、式−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）m−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ2）m−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−または式−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ2）m−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）m−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（前記式中、ｍは、１〜２０の整数である。）で表される基であり、
Ｒ2は、−ＣＨＯ、−ＣＨ2ＯＨまたは−ＣＨ2ＯＲ10である（Ｒ10は、水酸基の保護基である。］
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な化合物及びその利用に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
生体を非侵襲のままで診断する方法として、従来、ＰＥＴ（陽電子放射断層画像)イメージング、蛍光イメージング、ＭＲＩ（磁気共鳴映像法）等が用いられている。これらの方法では、生体内に存在する、タンパク質、抗体、ペプチド、糖鎖等の分子を標識化、例えば放射性標識を用いて標識化し、その標識を検出することにより、生体における前記分子の分布等をイメージングする。このイメージングを用いて、前記生体の疾患等を診断することが可能である。
【０００３】
68Ｇａは、ＰＥＴイメージングの標識に使用されるポジトロン放出核種である。18Ｆや11Ｃ、あるいは64Ｃｕを代表とする他のポジトロン放出核種はサイクロトロンを用いて調製されるが、68Ｇａは68Ｇｅの減衰を利用して、ジェネレーターから簡単に得られるため、次世代のＰＥＴ核種として大きな興味が持たれている。実際の標識では、生体分子のアミノ基等に対して、まずＤＯＴＡ（１，４，７，１０−テトラアザシクロデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸）などの配位子を導入した後、68Ｇａを配位させることにより68Ｇａ−ＤＯＴＡ標識が実施されている（例えば、特許文献１）。実際に、68Ｇａ−ＤＯＴＡで標識したソマトスタチン（ペプチド）の代謝安定化合物であるオクタレオチドは、アメリカでは癌の診断に用いられている。しかし、ＤＯＴＡへの68Ｇａ導入には、８０℃以上の加温が必要であり、ソマトスタチンなどの安定なペプチドにしか、この方法を適応することができず、68Ｇａ−ＤＯＴＡを用いるＰＥＴイメージングの懸案事項であった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開第２００８／０９６７６０号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
そこで、本発明は、ペプチド、タンパク質又は細胞表面に、金属錯体又は蛍光化合物を容易に導入するのに有用な化合物の提供を目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、下記一般式（Ｉ）で表される化合物またはその塩である。
【０００７】
【化１】
2015030702.tif 000003
【０００８】
式（Ｉ）中、
Ｚは、１，４−フェニレン、１，３−フェニレンまたは１，２−フェニレンであり、
Ｒ1は、水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、１以上の置換基で置換された炭素数１〜６のアルキル基、炭素数７〜１８のアラルキル基、１以上の置換基で置換された炭素数７〜１８のアラルキル基、炭素数６〜１２のアリール基、または１以上の置換基で置換された炭素数６〜１２のアリール基であり、
Ｒ2は、−ＣＨＯ、−ＣＨ2ＯＨまたは−ＣＨ2ＯＲ10である（Ｒ10は、水酸基の保護基であり、
Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、Ｒ16、Ｒ17、およびＲ18は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、飽和もしくは不飽和の炭化水素基、アリール基、アルコキシ基、アラルキル基、アリールオキシ基、複素環基、アミノ基、ニトロ基またはシアノ基であり、
Ｌ1は、式−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）m−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、式−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ2）m−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、式−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）m−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ2）m−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−または式−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ2）m−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）m−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（前記式中、ｍは、１〜２０の整数である。）で表される基であり、
Ｌ2は、式−（ＣＨ2）n1−、式−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−、式−（ＣＨ2）n1−ＣＯＮＨ−、式−ＣＯＮＨ−（ＣＨ2）n1−、式−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−、式−ＮＨ−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−、式−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−ＮＨ−、式−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−Ｏ−（ＣＨ2）n4−、式−ＮＨ−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−Ｏ−（ＣＨ2）n4−、または、式−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−Ｏ−（ＣＨ2）n4−ＮＨ−（前記式中、ｎ１、ｎ２、ｎ３およびｎ４は、それぞれ独立して１〜２０の整数である。）で表わされる基であり、
Ａは、以下の式（ｉ）〜（ｉｉｉ）で表される基にＭが配位した基(ＭはＧａ、Ｇｄ、Ｃｕ、Ｙ、Ｉｎ、Ｌｕ、Ｔｂ、Ｅｕ、ＹｂまたはＥｒのイオンである）、または、式（ｉｖ）〜（ｘｉｉ）で表される基である。
【０００９】
【化２】
2015030702.tif 000004
【発明の効果】
【００１０】
本発明の化合物は、ペプチド、タンパク質又は細胞表面に、金属錯体又は蛍光化合物を導入するのに有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】式（Ｉ−１）の化合物の精製時のＨＰＬＣチャートである。
【図２】式（Ｘ−１）の化合物の精製時のＨＰＬＣチャートである。
【図３】式（Ｉ−１）の化合物を用いたＰＥＴイメージングの画像である。
【図４】式（Ｉ−２）の化合物の精製時のＨＰＬＣチャートである。
【図５】式（Ｘ−２）の化合物の精製時のＨＰＬＣチャートである。
【図６】式（Ｉ−３）の化合物によるタンパク質の蛍光標識を示すチャートである。
【図７】式（Ｉ−４）の化合物によるタンパク質の蛍光標識を示すチャートである。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明者らは、アセチレン誘導体とアジド基とのクリック型反応を利用し、種々検討した結果、以下のような化合物が、ペプチド、タンパク質又は細胞表面に、金属錯体又は蛍光化合物を導入可能であることを見出し、本発明を完成した。前記反応を利用するため、本発明の化合物は製造が容易である。
【００１３】
本発明は、下記一般式（Ｉ）で表される化合物またはその塩である。
【００１４】
【化３】
2015030702.tif 000005
【００１５】
式（Ｉ）中、
Ｚは、１，４−フェニレン、１，３−フェニレンまたは１，２−フェニレンであり、
Ｒ1は、水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、１以上の置換基で置換された炭素数１〜６のアルキル基、炭素数７〜１８のアラルキル基、１以上の置換基で置換された炭素数７〜１８のアラルキル基、炭素数６〜１２のアリール基、または１以上の置換基で置換された炭素数６〜１２のアリール基であり、
Ｒ2は、−ＣＨＯ、−ＣＨ2ＯＨまたは−ＣＨ2ＯＲ10である（Ｒ10は、水酸基の保護基であり、
Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、Ｒ16、Ｒ17、およびＲ18は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、飽和もしくは不飽和の炭化水素基、アリール基、アルコキシ基、アラルキル基、アリールオキシ基、複素環基、アミノ基、ニトロ基またはシアノ基であり、
Ｌ1は、式−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）m−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、式−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ2）m−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、式−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）m−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ2）m−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−または式−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ2）m−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）m−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（前記式中、ｍは、１〜２０の整数であり、好ましくは１〜１０の整数であり、より好ましくは１〜５の整数であり、さらに好ましくは１〜２の整数である。）で表される基であり、
Ｌ2は、式−（ＣＨ2）n1−、式−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−、式−（ＣＨ2）n1−ＣＯＮＨ−、式−ＣＯＮＨ−（ＣＨ2）n1−、式−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−、式−ＮＨ−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−、式−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−ＮＨ−、式−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−Ｏ−（ＣＨ2）n4−、式−ＮＨ−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−Ｏ−（ＣＨ2）n4−、または、式−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−Ｏ−（ＣＨ2）n4−ＮＨ−（前記式中、ｎ１、ｎ２、ｎ３およびｎ４は、それぞれ独立して１〜２０の整数であり、好ましくは１〜１０の整数であり、より好ましくは１〜５の整数であり、さらに好ましくは１〜２の整数である。）で表わされる基であり、
Ａは、以下の式（ｉ）〜（ｉｉｉ）で表される基にＭが配位した基(ＭはＧａ、Ｇｄ、Ｃｕ、Ｙ、Ｉｎ、Ｌｕ、Ｔｂ、Ｅｕ、ＹｂまたはＥｒのイオンである）、または、式（ｉｖ）〜（ｘｉｉ）で表される基である。
【００１６】
【化４】
2015030702.tif 000006
【００１７】
前記一般式（Ｉ）で表される化合物またはその塩は、式中、Ｒ1は、水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、または１以上の置換基で置換された炭素数１〜６のアルキル基であり、
Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、Ｒ16、Ｒ17、およびＲ18は、水素原子であり、
Ｌ1は、式−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）m−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、式−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ2）m−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−で表される基であり（前記式中、ｍは、１〜１０の整数である。）、
Ｌ2は、式−ＮＨ−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−Ｏ−（ＣＨ2）n4−、または、式−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−Ｏ−（ＣＨ2）n4−ＮＨ−（前記式中、ｎ１、ｎ２、ｎ３およびｎ４は、それぞれ独立して１〜１０の整数である。）で表わされる基であり、
Ａは、式（ｉ）で表される基にＭが配位した基(ＭはＧａ、Ｇｄ、Ｃｕ、Ｙ、Ｉｎ、Ｌｕ、Ｔｂ、Ｅｕ、ＹｂまたはＥｒのイオンである）または式（ｉｘ）もしくは式（ｖ）で表される基であるのが好ましい。
【００１８】
前記一般式（Ｉ）で表される化合物またはその塩は、式中、Ｒ1は、水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、または１以上の置換基で置換された炭素数１〜６のアルキル基であり、
Ｒ2が−ＣＨＯであり、
Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、Ｒ16、Ｒ17、およびＲ18は、水素原子であり、
Ｌ1は、式−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）m−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、式−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ2）m−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−で表される基であり（前記式中、ｍは、１〜５の整数である。）、
Ｌ2は、式−ＮＨ−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−Ｏ−（ＣＨ2）n4−、または、式−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−Ｏ−（ＣＨ2）n4−ＮＨ−（前記式中、ｎ１、ｎ２、ｎ３およびｎ４は、それぞれ独立して１〜２の整数である。）で表わされる基であり、
Ａは、式（ｉ）で表される基にＭが配位した基(ＭはＧａ、Ｇｄ、Ｃｕ、Ｙ、Ｉｎ、Ｌｕ、Ｔｂ、Ｅｕ、ＹｂまたはＥｒのイオンである）または式（ｉｘ）もしくは式（ｖ）で表される基であるのがより好ましい。
【００１９】
本願明細書において用いる種々の用語の定義およびその例示は以下のとおりである。
【００２０】
本発明において、「低級」は、特に指示がなければ、炭素原子１〜６個、好ましくは炭素原子１〜４個を意味する。
【００２１】
本発明において、化合物の塩は、好ましくは無毒性で医薬として許容しうる慣用の塩であり、例えばナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属との塩、カルシウム、マグネシウムなどのアルカリ土類金属との塩、アンモニウム塩などの無機塩基との塩、及びトリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンアミンなどの有機アミンとの塩、及び塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸などの無機酸との塩、及びギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、酒石酸などの有機カルボン酸との塩、及びメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸などのスルホン酸の付加塩、及びアルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸などの塩基性又は酸性アミノ酸といった塩基との塩又は酸付加塩が挙げられる。
【００２２】
「炭素数１〜６のアルキル基」および「炭素数７〜１８のアラルキル基」における「アルキル」部分としては、炭素数１〜６のアルキル基、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、ネオペンチル、ヘキシル等のような直鎖状もしくは分岐鎖状の炭素数１〜６のアルカンの残基を意味する。前記アルキル基および前記アルキル部分の好ましい例としては、炭素数１〜５のアルキルが挙げられる。好ましい炭素数１〜５のアルキルとしては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、ネオペンチル等が挙げられる。
【００２３】
「アリール基」としては、フェニル、ナフチル、インデニル、アントリル、フェナントレニル、ピレニルなどのアリール基が挙げられる。好ましくは、炭素数６〜２２のアリール基、より好ましくは前記炭素数６〜１２のアリール基が挙げられる。
【００２４】
また、「炭素数６〜１２のアリール基」および「炭素数７〜１８のアラルキル基」における「アル」部分としては、フェニル、ナフチル、ジヒドロナフチル（例えば１，２−ジヒドロナフチル、１，４−ジヒドロナフチルなど）、テトラヒドロナフチル（例えば１，２，３，４−テトラヒドロナフチルなど）、インデニル、アントリルなどの炭素数６〜１２のアリール基が挙げられる。中でも、アリール基およびアル部分として好ましいのは、炭素数６〜１０のアリールであり、より好ましいのはフェニル、ナフチルである。
【００２５】
また、「アラルキル基」は、前記アルキルの任意の炭素原子に、前記アリール基が結合したものを意味する。前記アラルキル基の例としては、炭素数１〜６のアルキルに炭素数６〜１２のアリールが結合したものが挙げられる。前記炭素数１〜６のアルキルに炭素数６〜１２のアリールが結合したものの例としては、ベンジル、フェネチル、３−フェニルプロピル、ベンズヒドリル、トリチル等が挙げられる。前記アラルキル基は、好ましくはベンジル、トリチル等である。
【００２６】
「１以上の置換基で置換されたアルキル基」、「１以上の置換基で置換されたアラルキル基」および「１以上の置換基で置換されたアリール基」における置換基としては、イミノ基、アミノ基、保護されたアミノ基、モノ（またはジ）低級アルキルアミノ基、Ｎ−低級アルキル−保護されたアミノ基、低級アルキル、ヒドロキシ基、保護されたヒドロキシ基、アシルオキシ基、低級アルコキシ基、アシル基、アミノ（低級）アルキル基、保護されたアミノ（低級）アルキル基、ヘテロアリール基、ヒドロキシ基を有するアリール基、カルボキシ基、保護されたカルボキシ基、スルファニル基、保護されたスルファニル基等が挙げられる。
【００２７】
「ハロゲン原子」は、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、またはヨウ素原子である。
「飽和もしくは不飽和の炭化水素基」としては、アルキル基、アルケニル基または、アルキニル基が挙げられる。アルキル基としては、炭素数１〜２０のアルキル基が挙げられ、炭素数１〜１５のアルキル基が好ましい。アルケニル基としては、炭素数２〜２０のアルケニル基が挙げられ、炭素数２〜１５のアルケニル基が好ましい。アルキニル基としては、炭素数２〜２０のアルキニル基が挙げられ、炭素数２〜１５のアルキニル基が好ましい。
【００２８】
「アルコキシ基」としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、第三級ブトキシ、ペンチルオキシ、第三級ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ等が挙げられる。
【００２９】
「アリールオキシ基」としては、アリールにエーテル結合が結合したものが挙げられる。前記アリールにエーテル結合が結合したものの例としては、フェノキシ、ナフチルオキシ、インデニルオキシ、アントリルオキシ、フェナントレニルオキシ、ピレニルオキシ等が挙げられる。前記アリールオキシ基は、好ましくはフェノキシである。
【００３０】
「複素環基」としては、窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選択される１種以上の原子を１つ以上有する、３〜８員、好ましくは５または６員の複素単環または縮合複素環が挙げられる。
【００３１】
一般式（Ｉ）で表される化合物またはその塩は、例えば、以下の方法により製造することができる。
【００３２】
本発明は、下記一般式（ＩＩ）の化合物と下記一般式（ＩＶ）の化合物とを反応させる工程を含む製造方法である。
【００３３】
【化５】
2015030702.tif 000007
【００３４】
前記式(ＩＩ)および（ＩＶ）中、Ａ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、Ｒ16、Ｒ17、Ｒ18、Ｌ1、Ｌ2およびＺの定義は、前記の式（Ｉ）におけるＡ、Ｒ1、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、Ｒ16、Ｒ17、Ｒ18、Ｌ1、Ｌ2およびＺの定義と同様である。
【００３５】
前記一般式（ＩＩ）の化合物と前記一般式（ＩＶ）の化合物とを反応させる工程は、例えば２５〜２００℃、好ましくは７０〜１２０℃で行うことができる。また、前記反応は、極性溶媒、例えばジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アルコール(メタノール、エタノール等）、ジクロロメタン、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）等中で行うことできる。
【００３６】
得られた一般式（Ｉ）の化合物は、ＨＰＬＣ等で精製してもよいし、そのまま、次の反応に用いてもよい。
【００３７】
なお、前記式（ＩＩ）で表わされる化合物は、市販で入手してもよいし、公知文献を利用して自家製造してもよい。
【００３８】
一例として、式（ＩＩ）の化合物は、以下のようにして製造することができる。Ａが式（ｉ）で表される基にＭが配位した基(ＭはＧａ、Ｇｄ、Ｃｕ、Ｙ、Ｉｎ、Ｌｕ、Ｔｂ、Ｅｕ、ＹｂまたはＥｒのイオンである）である式（ＩＩ）の化合物（下記式（ＩＩ−１））は、一般式（ＩＩＩ−１）の化合物にＭを反応させて、得ることができる。なお、下記式（ＩＩ−１）は、Ｍが配位数４の場合を例示している。
【００３９】
【化６】
2015030702.tif 000008
【００４０】
一般式（ＩＩＩ−１）の化合物にＭを反応させる工程は、例えば、一般式（ＩＩＩ−１）の化合物に金属クロリド（ＭＣｌｘ）、または相当する金属塩を反応させることにより、行うことができる。前記式中、ｘは、Ｍの配位数を表す。
【００４１】
得られた一般式（ＩＩ−１）の化合物は、ＨＰＬＣ等で精製してもよいし、そのまま、次の反応に用いてもよい。この場合、Ａが式（ｉ）で表される基にＭが配位した基である式（ＩＩ）の化合物を原料に、Ａが式（ｉ）で表される基にＭが配位した基である式（Ｉ）の化合物を製造することができるため、このような式（Ｉ）の化合物を容易に製造できるという利点がある。
【００４２】
別の一例として、Ａが式（ｉｘ）で表される基であり、Ｌ2が式−ＮＨ−（ＣＨ2）n1−Ｏ−（ＣＨ2）n2−Ｏ−（ＣＨ2）n3−Ｏ−（ＣＨ2）n4−で表される基である式（ＩＩ）の化合物（下記式（ＩＩ−２））は、一般式（Ｖ）の化合物に式（ＶＩ）の化合物を反応させて、得ることができる。
【００４３】
【化７】
2015030702.tif 000009
【００４４】
また、本発明は、下記一般式（ＩＶ）で表される化合物またはその塩である。
【００４５】
【化８】
2015030702.tif 000010
【００４６】
式（ＩＶ）中、
Ｚは、１，４−フェニレン、１，３−フェニレンまたは１，２−フェニレンであり、
Ｒ1は、水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、１以上の置換基で置換された炭素数１〜６のアルキル基、炭素数７〜１８のアラルキル基、１以上の置換基で置換された炭素数７〜１８のアラルキル基、炭素数６〜１２のアリール基、または１以上の置換基で置換された炭素数６〜１２のアリール基であり、
Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、Ｒ16、Ｒ17、およびＲ18は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、飽和もしくは不飽和の炭化水素基、アリール基、アルコキシ基、アラルキル基、アリールオキシ基、複素環基、アミノ基、ニトロ基またはシアノ基であり、
Ｌ1は、式−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）m−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−、式−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ2）m−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、式−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）m−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ2）m−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−または式−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ2）m−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ2）m−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（前記式中、ｍは、１〜２０の整数である。）で表される基であり、
Ｒ2は、−ＣＨＯ、−ＣＨ2ＯＨまたは−ＣＨ2ＯＲ10である（Ｒ10は、水酸基の保護基である。
【００４７】
Ｒ2がＣＨＯである前記式（ＩＶ）の化合物は、例えば、以下のスキームに従い、Ｒ2が−ＣＨ2ＯＲ10または−ＣＨ2ＯＨである前記式（ＩＶ）の化合物から得ることができる。
【００４８】
【化９】
2015030702.tif 000011
【００４９】
Ｒ2が−ＣＨ2ＯＲ10である前記式（ＩＶ）で表される化合物は、予め、Ｒ10を脱離（すなわち、脱保護）させて、Ｒ2が−ＣＨ2ＯＨである前記式（ＩＶ）で表される化合物を得るのが好ましい。Ｒ2が−ＣＨ2ＯＨである前記式（ＩＶ）で表される化合物を酸化することにより、Ｒ2が−ＣＨＯである前記式（ＩＶ）で表される化合物、すなわち、式（ＩＶ）で表される化合物を得ることができる。
【００５０】
また、本発明は、HiLyte Fluoro（登録商標）750 Bis-NHSエステルまたはHiLyte Fluoro（登録商標）647-NHSエステルをアジド体に変換し、得られたアジド体と下記式（ＩＶ）の化合物とを反応させて得られる縮合体またはその塩である。
【００５１】
【化１０】
2015030702.tif 000012
【００５２】
式（ＩＶ）中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、Ｒ16、Ｒ17、Ｒ18、Ｌ1およびＺの定義は、式（Ｉ）に記載のとおりである。
【００５３】
また、本発明は、HiLyte Fluoro（登録商標）750 Bis-NHSエステルまたはHiLyte Fluoro（登録商標）647-NHSエステルをアジド体に変換し、得られたアジド体と前記式（ＩＶ）の化合物とを反応させる工程を含む、前記縮合体またはその塩の製造方法である。
【００５４】
また、本発明は、一般式（Ｉ）で表される化合物もしくはその塩または前記縮合体もしくはその塩を含む標識用組成物である。
【００５５】
また、本発明は、アミノ基を有する化合物又は細胞表面に、金属錯体又は蛍光化合物を導入する方法であって、前記一般式（Ｉ）で表される化合物もしくはその塩または前記縮合体もしくはその塩を、アミノ基を有する化合物又は細胞表面のタンパク質の遊離アミノ基と反応させる工程を含む方法である。前記反応させる工程は、例えば、一般式（Ｉ）で表される化合物もしくはその塩または前記縮合体もしくはその塩と、アミノ基を有する化合物（具体的には、ペプチド、タンパク質、アミノ基を有する核酸誘導体等）又は細胞（スキーム中、式（ＩＸ）で示す）とを溶液（例えば水、緩衝液の溶液）中で例えば室温で混合することにより、前記一般式（Ｉ）で表される化合物もしくはその塩または前記縮合体もしくはその塩と、前記アミノ基を有する化合物又は細胞とを反応させ、前記アミノ基を有する化合物又は細胞に前記一般式（Ｉ）で表される化合物もしくはその塩または前記縮合体もしくはその塩を導入することができる。
【００５６】
以下のスキームは、Ｚが１，４−フェニレン、Ｒ11〜Ｒ18が水素原子、Ｒ2が−ＣＨＯである一般式（Ｉ）（スキーム中、式（Ｉ’）で表す）で表される化合物の場合の反応を例示した。
【００５７】
【化１１】
2015030702.tif 000013
【００５８】
前記導入方法において、前記アミノ基を有する化合物としてはペプチド、タンパク質が好ましい。ペプチド、タンパク質又は細胞におけるアミノ基は、好ましくはアミノ酸残基の遊離アミノ基、より好ましくはリジン残基の遊離アミノ基である。
【００５９】
前記導入方法において、前記タンパク質としては限定されないが、例えば、サイトカイン、糖タンパク質、膜レセプター等が挙げられる。前記タンパク質の導入方法において、前記タンパク質はアミノ基を含有するタンパク質であるのが好ましく、リジン残基のアミノ基を含有するタンパク質であるのがより好ましい。前記タンパク質としては、限定されないが、血清タンパク質、膜タンパク質、抗体、抗体を生物工学的に修飾した部分構造が挙げられる。前記ペプチドとしては、限定されないが、癌細胞を検出するペプチド（例えばサイクリックＲＧＫ）、ＲＧＤ誘導体、ソマトスタチンまたはその誘導体（例えばオクトレオチド）、ボンベシン誘導体、インスリン等が挙げられる。前記細胞としては、限定されないが、例えば、癌免疫療法に使用されるＮＫ、ＬＡＫ、ＴＬ、ＣＴＬやＴＩＬ細胞など各種のＴ−細胞やＢ−細胞、またはマクロファージ、樹状細胞、リンパ球、さらにはがん細胞や、細胞移植において重要となるＥＳ細胞やｉＰＳ細胞などが挙げられる。
【００６０】
なお、前記ペプチドとして、癌細胞を検出するペプチド、例えば、サイクリックＲＧＫを用いて得られる化合物（ＸＡ）を用いる場合、検体動物（人間を含む）に注入し、ＰＥＴ（陽電子放射断層画像)イメージングにより、体内の癌細胞を検出することができる。
【００６１】
また、本発明は、前記導入方法により、金属錯体又は蛍光化合物が導入された、ペプチド、タンパク質又は細胞である。
【００６２】
また、本発明は、一般式（Ｉ）で表される化合物もしくはその塩または前記縮合体もしくはその塩を含む検査用組成物である。
【００６３】
前記検査用組成物は、ＰＥＴ（陽電子放射断層画像)イメージング、蛍光イメージング、核磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、単一光子放射型コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）またはオートラジオグラフィーにより行われる検査用であるのが好ましい。前記検査であれば、簡便および高速に生体高分子などの分子のアミノ基を標識化可能であり、イメージングに適当だからである。
【００６４】
また、本発明は、下記一般式（ＩＩ）で表される化合物及び下記一般式（ＩＶ）で表される化合物を含む、前記一般式（Ｉ）で表される化合物もしくはその塩を含む前記標識用組成物または前記一般式（Ｉ）で表される化合物もしくはその塩を含む前記検査用組成物を合成するためのキットである。
【００６５】
【化１２】
2015030702.tif 000014
【００６６】
式（ＩＩ）および（ＩＶ）中、Ａ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、Ｒ16、Ｒ17、Ｒ18、Ｌ1、Ｌ2およびＺの定義は、一般式（Ｉ）に記載のとおりである。
【００６７】
また、本発明は、HiLyte Fluoro（登録商標）750 Bis-NHSエステルまたはHiLyte Fluoro（登録商標）647-NHSエステルをアジド体に変換することにより得られたアジド体と、下記一般式(ＩＶ)で表される化合物を含む、前記縮合体もしくはその塩を含む前記標識用組成物または前記縮合体もしくはその塩を含む前記検査用組成物を合成するためのキットである。
【００６８】
【化１３】
2015030702.tif 000015
【００６９】
式（ＩＶ）中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13、Ｒ14、Ｒ15、Ｒ16、Ｒ17、Ｒ18、およびＬ1の定義は、一般式（Ｉ）に記載のとおりである。
【００７０】
本明細書中、以下の略語を使用することがある。
ＨＥＰＥＳ：４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＴＨＰ：２−テトラヒドロピラニル基
Ｂｏｃ：ｔ−ブトキシカルボニル
【実施例】
【００７１】
＜式（Ｉ−１）の化合物の製造＞
（１）工程１−１：式（ＩＩＩ−１ａ）の化合物の製造
【００７２】
【化１４】
2015030702.tif 000016
【００７３】
ＤＯＴＡ−ＮＨＳ（３．０ｍｇ、６μｍｏｌ）／ＤＭＦ溶液１００μＬに対して、１の化合物を（１．３ｍｇ，  ６μｍｏｌ）作用させ、一晩室温で反応させた。反応後、減圧濃縮してＤＭＦを除去し、これをＨＰＬＣ（カラム：５Ｃ１８−ＡＲ−３００，ナカライテスク株式会社製、４．６ｘ２５０ｍｍ、溶離液Ａ：Ｈ2Ｏ、溶離液Ｂ：アセトニトリル、３０分間にわたってＢ０〜８０％、１ｍＬ／分、式（ＩＩＩ−１ａ）の化合物の保持時間：１３．０分）で精製することにより式（ＩＩＩ−１ａ）の化合物を得た。
MALDI-TOF-MS m/z calcd for C24H45N8O10+ (M+H)+ 605.33, found 605.91.
【００７４】
（２）工程１−２：式（ＩＶ−１）の化合物の製造
【００７５】
【化１５】
2015030702.tif 000017
【００７６】
化合物２に対して６Ｍ  ＨＣｌを室温で２時間作用させてＴＨＰ基とＢｏｃ基を同時に脱保護した得た化合物３（２４．９ｍｇ，８２μｍｏｌ）のＤＭＦ（８００μＬ）中溶液に対して、化合物４（２５．２ｍｇ、６６μｍｏｌ）を作用させ、一晩室温で反応させた。反応液を減圧濃縮してＤＭＦを除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ2：９．０ｇ、ＣＨＣｌ3：ＭｅＯＨ＝４０：１）で精製することにより化合物（ＩＶ−２）を得た（２４．４ｍｇ、６８％）。化合物（ＩＶ−２）（２．２２ｍｇ、４μｍｏｌ）のＣＨ2Ｃｌ2（５００μＬ）中溶液に対して、Dess-Martin periodinane（ＤＭＰ）（５．１ｍｇ、１２μｍｏｌ）を作用させ、室温で２０分間反応させることにより、定量的に目的の化合物（ＩＶ−１）を得た（シリカゲルカラムクロマトグラフィー：ＳｉＯ2  ２．０ｇ、ヘキサン：ＡｃＯＥｔ＝１：１）。なお、化合物２はＷＯ２００８／０９６７６０に記載の方法により製造することができる。
【００７７】
化合物（ＩＶ−２）：
(E,E)-4-hydroxy-2-[4-(5,6-dihydro-11,12-didehydro-dibenzo[a,e]cyclooctenyl-5-oxcarbonylaminoacetamide)styryl]but-2-enoate
1H NMR (500MHz, CDCl3) δ= 8.29 (s, 1H), 7.49-7.24 (m, 12H), 6.82 (t, 1H, J=6.2 Hz), 6.79 (d, 1H, J=16.7 Hz), 6.74 (d, 1H, J=16.3 Hz), 5.96 (s, 1H), 5.55 (m, 1H), 4.55 (d, 2H, J=4.3 Hz), 4.29 (q, 2H, J=7.1 Hz), 4.02 (d, 2H, J=4.9 Hz), 3.20 (d, 1H, J=14.9 Hz), 2.92 (dd, 1H, J=15.1, 3.8 Hz), 1.35 (t, 3H, J=7.1 Hz); 
13C NMR (125MHz, CDCl3)（回転異性体の多重シグナルのため、代表的なシグナルを示す）δ= 166.9, 151.4, 150.8, 140.3, 134.4, 131.0, 129.9, 128.14, 128.11, 127.27, 127.23, 126.4, 126.1, 123.8, 123.6, 121.2, 120.1, 119.9, 113.1, 109.9, 77.9, 77.2, 61.1, 59.9, 46.0, 45.5, 14.3; 
HRESI-MS m/z calcd for C33H30N2O6Na+ (M+Na)+ 573.1997, found 573.1995。
【００７８】
化合物（ＩＶ−１）：
(E,E)-4-oxo-2-[4-(5,6-dihydro-11,12-didehydro-dibenzo[a,e]cyclooctenyl-5-oxcarbonylaminoacetamide)styryl]but-2-enoate
1H NMR (500MHz, CDCl3) δ= 10.16 (d, 1H, J = 7.0 Hz), 8.35 (s, 1H), 7.54-7.26 (m, 13H), 7.06 (d, 1H, J = 16.7 Hz), 6.67 (d, 1H, J = 7.1 Hz), 5.93 (s, 1H), 5.56 (m, 1H), 4.37 (q, 2H, J = 7.1 Hz), 4.05 (d, 2H, J = 3.9 Hz), 3.21 (d, 1H, J = 15.0 Hz), 2.94 (dd, 1H, J = 16.0, 4.0 Hz), 1.39 (t, 3H, J = 7.2 Hz); 
13C NMR (125MHz, CDCl3)（回転異性体の多重シグナルのため、代表的なシグナルを示す） δ= 191.3, 167.0, 156.1, 151.4, 150.7, 141.0, 133.3, 131.0, 129.9, 128.5, 128.1, 127.4, 127.3, 126.4, 126.1, 123.8, 123.6, 121.2, 119.9, 113.1, 109.9, 78.0, 77.2, 62.1, 46.1, 45.7, 11.0;
HRESI-MS m/z calcd for C33H28N2O6Na+ (M+Na)+ 571.1845, found 571.1834。
【００７９】
（３）工程２：式（ＩＩ−１ａ）の化合物の製造
【００８０】
【化１６】
2015030702.tif 000018
【００８１】
Ｇｅ／Ｇａジェネレーターから溶出されるＧａＣｌ3溶液１ｍＬ（Ｇａ：５ｎｍｏｌ，ＧａＣｌ3／９０％アセトン溶液，０．１Ｍ  ＨＣｌ、10 mCi, Eckert & Ziegler Eurotope, Berlin, Germany製）に対して、アルゴンガスを１０分間吹きかけることにより、溶液を１００μＬまで濃縮した（ｐＨ＜１．０）。前記工程１で得た式（ＩＩ−１ａ）の化合物の溶液（１：１０ｎｍｏｌ，１．０Ｍ  ＨＥＰＥＳ緩衝溶液（ｐＨ＝７．２，１５０μＬ）を作用させ（ｐＨ＝３．５）、マイクロウェーブ照射下で１２０℃に加温し１０分間反応させた。このようにして得られた全溶液量をＨＰＬＣにより精製することにより（カラム：５Ｃ１８−ＡＲ−３００，ナカライテスク株式会社製、４．６ｘ２５０ｍｍ、溶離液Ａ：Ｈ2Ｏ、溶離液Ｂ：アセトニトリル、１０分間にわたってＢ１０〜１００％、１ｍＬ／分、式（ＩＩ−１ａ）の化合物の保持時間：７．８分）で精製することにより、式（ＩＩ−１ａ）の化合物の溶液を得た。
MALDI-TOF-MS：m/z calcd for C24H43N8O10Ga (M+H)+ 672.2, found 672.8.
【００８２】
（４）工程３：式（Ｉ−１）の化合物の製造
【００８３】
【化１７】
2015030702.tif 000019
【００８４】
得られた式（ＩＩ−１ａ）の化合物の溶液を８０℃に加温しながらアルゴンガスを吹きかけることにより、溶媒が無くなるまで濃縮した。式（ＩＩ−１ａ）の化合物をジメチルスルホキシド（２μＬ）に溶解し、前記工程１−２において得られた式（ＩＶ−１）の化合物（化合物名：Dibenzocyclooctyne-(E)-3-alkoxycarbonyl-5-phenyl-2,4-dienal）の溶液（１０μＬのアセトニトリル中５ｎｍｏｌ）を室温で作用させ、その後、７５℃で加温することによってアセトニトリルを蒸発させながら１５分間反応させることにより、定量的に式（Ｉ−１）の化合物を得た（式（Ｉ−１）の化合物の保持時間：１１．２分。ＨＰＬＣ条件：カラム：５Ｃ１８−ＡＲ−３００，ナカライテスク株式会社製、４．６ｘ２５０ｍｍ、溶離液Ａ：Ｈ2Ｏ，溶離液Ｂ：アセトニトリル、１０分間にわたってＢ：１０〜１００％、１ｍＬ／分、ＵＶ検出：２４５ｎｍ）。分析時のHPLC分析を図１に示す。
MALDI-TOF-MS：m/z calcd for C57H71N10O16Ga (M+H)+ 1220.4, found 1220.5.
【００８５】
＜式（Ｉ−１）の化合物とペプチドとの結合＞
【００８６】
【化１８】
2015030702.tif 000020
【００８７】
式（Ｉ−１）の化合物の溶液にcyclic Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lysペプチドの溶液（２μｌのジメチルスルホキシド中、5nmol）を37℃で25分間作用させることにより、式（Ｘ−１）の化合物を得た(式（Ｘ−１）の化合物の保持時間１０．０分。ＨＰＬＣ条件：カラム:５Ｃ１８−ＡＲ−３００，ナカライテスク株式会社製、4.6×250mm;溶離液Ａ：Ｈ2Ｏ，溶離液Ｂ：アセトニトリル、１０分間にわたってＢ：１０〜１００％、1mL/分、UV検出：245nm)。分析時のHPLC分析を図２に示す。
MALDI-TOF-MS：m/z calcd for C84H110N19O23Ga (M+H)+ 1821.7, found 1821.9.
【００８８】
前記反応により、本発明の式（Ｉ）の化合物は、ペプチドを速やかに標識可能であることが確認できた。
【００８９】
＜式（Ｉ−１）の化合物のＰＥＴイメージング＞
式（１−１）の化合物をラット（ウィスターラット８Ｗ、オス、２５ｇ）に注射した（10MBq）。ラットの尾の静脈にプロフォールを４０ｍｇ／ｋｇの速度で投与し続けて鎮静されておき、ＰＥＴトレーサーを前記ラットの尾の静脈に投与した。そのラットのＰＥＴ画像を図３に示す。
【００９０】
図３に示すように、式（１−１）の化合物は、ラットの腫瘍を標識することが可能であることが、確認できた。
【００９１】
＜式（Ｉ−２）の化合物の製造＞
（１）工程１：式（ＩＩ−１ｂ）の化合物の製造
【００９２】
【化１９】
2015030702.tif 000021
【００９３】
ＧｄＣｌ3（６Ｈ2Ｏ）／１Ｍ  ＨＣｌ（１ｍｇ／ｍＬ）溶液（キシダ化学株式会社製）１５μＬ（Ｇｄ：４０ｎｍｏｌ）に対して、＜式（Ｉ−１）の化合物の製造＞の工程１−１において得られた式（ＩＩＩ−１ａ）の化合物の溶液（１：４０ｎｍｏｌ、０．５Ｍ  ＨＥＰＥＳ緩衝溶液（ｐＨ＝７．２、８０μＬ）を作用させ（ｐＨ＝３．５）、８０℃で４０分間反応させた。このようにして得られた全溶液量をＨＰＬＣ（カラム：５Ｃ１８−ＡＲ−３００，ナカライテスク株式会社製、４．６ｘ２５０ｍｍ、溶離液Ａ：Ｈ2Ｏ，溶離液Ｂ：アセトニトリル、１０分間にわたってＢ：１０〜１００％、１ｍＬ／分、式（ＩＩ−１ｂ）の化合物の保持時間：７．４分）、で精製することにより、式（ＩＩ−１ｂ）の化合物の溶液を得た。
【００９４】
（２）工程２：式（Ｉ−２）の化合物の製造
【００９５】
【化２０】
2015030702.tif 000022
【００９６】
得られた式（ＩＩ−１ｂ）の化合物の溶液を８０℃に加温しながらアルゴンガスを吹きかけることにより、溶媒が無くなるまで濃縮した。式（ＩＩ−１ｂ）の化合物をジメチルスルホキシド（２μＬ）に溶解し、＜式（Ｉ−１）の化合物の製造＞の工程１−２において得られた式（ＩＶ−１）の化合物（化合物：Dibenzocyclooctyne-(E)-3-alkoxycarbonyl-5-phenyl-2,4-dienal）の溶液（８μＬのアセトニトリル中４０ｎｍｏｌ）を室温で作用させ、その後、７０℃で加温することによってアセトニトリルを蒸発させながら１５分間反応させることにより、定量的に式（Ｉ−２）の化合物を得た（式（Ｉ−２）の化合物の保持時間：１１．２分。ＨＰＬＣ条件：カラム：５Ｃ１８−ＡＲ−３００，ナカライテスク株式会社製、４．６ｘ２５０ｍｍ、溶離液Ａ：Ｈ2Ｏ，溶離液Ｂ：アセトニトリル、１０分間にわたってＢ：１０〜１００％、１ｍＬ／分、ＵＶ検出：２４５ｎｍ）。分析時のHPLC分析を図４に示す。
MALDI-TOF-MS：m/z calcd for C57H71N10O16Gd (M+H)+ 1309.4, found 1309.6.
【００９７】
＜式（Ｉ−２）の化合物とペプチドとの結合＞
【００９８】
【化２１】
2015030702.tif 000023
【００９９】
式（Ｉ−２）の化合物の溶液にcyclic Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lysペプチドの溶液（９μｌのジメチルスルホキシド中、45nmol）を37℃で25分間作用させることにより、式（Ｘ−２）の化合物を得た(式（Ｘ−２）の化合物の保持時間１０．３分、ＨＰＬＣ条件：カラム：５Ｃ１８−ＡＲ−３００，ナカライテスク株式会社製、４．６ｘ２５０ｍｍ、溶離液Ａ：Ｈ2Ｏ，溶離液Ｂ：アセトニトリル、１０分間にわたってＢ：１０〜１００％、１ｍＬ／分、ＵＶ検出：２４５ｎｍ)。分析時のHPLC分析を図５に示す。
MALDI-TOF-MS：m/z calcd for C84H110N19O23Gd (M+H)+ 1910.7, found 1910.1。
【０１００】
前記反応により、本発明の式（Ｉ）の化合物は、ペプチドを速やかに標識可能であることが確認できた。
【０１０１】
＜式（Ｉ−３）の化合物の製造＞
（１）工程１：式（ＩＩ−２ａ）の化合物の製造
【０１０２】
【化２２】
2015030702.tif 000024
【０１０３】
式（Ｖ）の化合物（１０μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１５０μＬ）に対して、式（ＶＩ−１）の化合物（１０μｍｏｌ）を作用させ、一晩室温で反応させた。反応液を減圧濃縮してＤＭＦを除去し、残渣を３０％ＭｅＣＮ溶液に溶解させたものをＨＰＬＣで精製することにより（ＨＰＬＣ条件：カラム：５Ｃ１８−ＡＲ−３００，ナカライテスク株式会社製、４．６ｘ２５０ｍｍ、溶離液Ａ：Ｈ2Ｏ，溶離液Ｂ：アセトニトリル、１５分間にわたってＢ：３０〜１００％、１ｍＬ／分、ＵＶ検出：２４５ｎｍ、式（ＩＩ−２ａ）の化合物の保持時間：１０．０分。）、式（ＩＩ−２ａ）の化合物を得た。
MALDI-TOF-MS：m/z calcd for C29H29N4O9+ (M+H)+ 577.6、found 578.1。
【０１０４】
（２）工程２：式（Ｉ−３）の化合物の製造
【０１０５】
【化２３】
2015030702.tif 000025
【０１０６】
式（ＩＩ−２ａ）の化合物（６０ｎｍｏｌ）の溶液（６μＬのＤＭＳＯ）に対して、式（ＩＶ−１）の化合物（５４ｍｍｏｌ）の溶液（１２μＬ  ＣＨ3ＣＮ）を作用させ、７０℃で加温することによってＣＨ3ＣＮを蒸発させながら１５分間反応させることにより、定量的に式（Ｉ−３）の化合物を得た（ＨＰＬＣ条件：カラム：５Ｃ１８−ＡＲ−３００，ナカライテスク株式会社製、４．６ｘ２５０ｍｍ、溶離液Ａ：Ｈ2Ｏ，溶離液Ｂ：アセトニトリル、１５分間にわたってＢ：３０〜１００％、１ｍＬ／分、ＵＶ検出：２４５ｎｍ、式（Ｉ−３）の化合物の保持時間：１１．８分。）。
MALDI-TOF-MS：m/z calcd for C62H56N6O15Na+ (M+Na)+1148.1、found 1148.5。
【０１０７】
＜式（Ｉ−３）の化合物とペプチドとの結合＞
【０１０８】
【化２４】
2015030702.tif 000026
【０１０９】
式（Ｉ−３）の化合物の溶液にcyclic Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lysペプチドの溶液（５μｌのジメチルスルホキシド中、60nmol）を37℃で25分間作用させることにより、式（Ｘ−３）の化合物を得た(式（Ｘ−３）の化合物の保持時間１０．０分、ＨＰＬＣ条件：カラム：５Ｃ１８−ＡＲ−３００，ナカライテスク株式会社製、４．６ｘ２５０ｍｍ、溶離液Ａ：Ｈ2Ｏ，溶離液Ｂ：アセトニトリル、１０分間にわたってＢ：３０〜１００％、１ｍＬ／分、ＵＶ検出：２４５ｎｍ)。
MALDI-TOF-MS：m/z calcd for C89H96N15O22+ (M+H)+ 1727.8, found 1727.2
【０１１０】
前記反応により、本発明の式（Ｉ）の化合物は、ペプチドを速やかに標識可能であることが確認できた。
【０１１１】
＜式（Ｉ−３）の化合物とタンパク質との結合＞
【０１１２】
式（Ｉ−３）の化合物（約５０ｎｍｏｌ）の５μLのＤＭＳＯ溶液に、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ、分子量６６，５００、０．４５ｎｍｏｌ）の水（４５μｌ）溶液を３７℃で３０分間反応させた。得られた生成物の分子量を図６に示す。図６中、「ＨＳＡ」はヒト血清アルブミンの質量分析であり、「（Ｉ−３）＋ＨＳＡ」は、得られた生成物の質量分析である。「（Ｉ−３）＋ＨＳＡ」のピークと「ＨＳＡ」のピークは、質量８，５００の差がある。この差は、ＨＳＡへ式（Ｉ−３）の化合物が７〜８個、標識したためと考えられる。
【０１１３】
前記反応により、本発明の式（Ｉ）の化合物は、タンパク質を速やかに標識可能であることが確認できた。
【０１１４】
＜式（Ｉ−４）の化合物の製造＞
（１）工程１：式（ＩＩ−３）の化合物の製造
【０１１５】
【化２５】
2015030702.tif 000027
【０１１６】
化合物５（８．８μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１００μＬ）に対して、化合物１（８．８μｍｏｌ）を作用させ、一晩室温で反応させた。反応液を減圧濃縮してＤＭＦを除去し、残渣を３０％ＭｅＣＮ溶液に溶解させたものをＨＰＬＣで精製することにより（式（ＩＩ−３）の化合物の保持時間９．９分、ＨＰＬＣ条件：カラム：５Ｃ１８−ＡＲ−３００，ナカライテスク株式会社製、４．６ｘ２５０ｍｍ、溶離液Ａ：Ｈ2Ｏ，溶離液Ｂ：アセトニトリル、１０分間にわたってＢ：１０〜１００％、１ｍＬ／分、ＵＶ検出：２４５ｎｍ）、式（ＩＩ−３）の化合物を得た。
MALDI-TOF-MS：m/z calcd for C18H32N6O5SNa+ (M+H)+ 467.2、found 467.9。
【０１１７】
（２）化合物（Ｉ−４）の製造
【０１１８】
【化２６】
2015030702.tif 000028
【０１１９】
式（ＩＩ−３）の化合物（５０ｎｍｏｌ）の溶液（３μＬ  ＤＭＳＯ）に対して、式（ＩＶ−１）の化合物（４０ｎｍｏｌ）の溶液（８μＬ  ＣＨ3ＣＮ）を作用させ、７０℃で加温することによってＣＨ3ＣＮを蒸発させながら１５分間反応させることにより、定量的に式（Ｉ−４）の化合物を得た（式（Ｉ−４）の化合物の保持時間１１．８分、ＨＰＬＣ条件：カラム：５Ｃ１８−ＡＲ−３００，ナカライテスク株式会社製、４．６ｘ２５０ｍｍ、溶離液Ａ：Ｈ2Ｏ，溶離液Ｂ：アセトニトリル、１０分間にわたってＢ：２０〜１００％、１ｍＬ／分、ＵＶ検出：２４５ｎｍ。
MALDI-TOF-MS：m/z calcd for C51H60N8O11SNa+ (M+H)+ 1015.4、found 1016.0。
【０１２０】
＜式（Ｉ−４）の化合物とペプチドとの結合＞
【０１２１】
【化２７】
2015030702.tif 000029
【０１２２】
式（Ｉ−４）の化合物の溶液にcyclic Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lysペプチドの溶液（５μｌのジメチルスルホキシド中、60nmol）を37℃で25分間作用させることにより、式（Ｘ−４）の化合物を得た(式（Ｘ−４）の化合物の保持時間９．９分、ＨＰＬＣ条件：カラム：５Ｃ１８−ＡＲ−３００，ナカライテスク株式会社製、４．６ｘ２５０ｍｍ、溶離液Ａ：Ｈ2Ｏ，溶離液Ｂ：アセトニトリル、
１０分間にわたってＢ：２０〜１００％、１ｍＬ／分、ＵＶ検出：２４５ｎｍ)。
MALDI-TOF-MS：m/z calcd for C78H100N17O18S+ (M+H)+ 1594.7, found 1594.7。
【０１２３】
前記反応により、本発明の式（Ｉ）の化合物は、ペプチドを速やかに標識可能であることが確認できた。
【０１２４】
＜式（Ｉ−４）の化合物とタンパク質との結合＞
【０１２５】
式（Ｉ−４）の化合物（約５０ｎｍｏｌ）のＤＭＳＯ溶液（３μｌ）に、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ、分子量６６，５００、０．４７ｎｍｏｌ）の水（４５μｌ）溶液を３７℃で３０分間反応させた。得られた生成物の分子量を図７に示す。図７中、「ＨＳＡ」はヒト血清アルブミンの質量分析であり、「（Ｉ−４）＋ＨＳＡ」は、得られた生成物の質量分析である。「（Ｉ−４）＋ＨＳＡ」のピークと「ＨＳＡ」のピークは、質量４，５００の差がある。この差は、ＨＳＡへ式（Ｉ−４）の化合物が４〜５個、標識したためと考えられる。
【０１２６】
前記反応により、本発明の式（Ｉ）の化合物は、タンパク質を速やかに標識可能であることが確認できた。
【産業上の利用可能性】
【０１２７】
本発明の化合物は、アミノ基の標識に利用可能であり、ＰＥＴイメージング用途にも適用できる。
【図１】
2015030702.tif 000038
【図２】
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【図４】
2015030702.tif 000040
【図５】
2015030702.tif 000041
【図６】
2015030702.tif 000042
【図７】
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【図３】
2015030702.tif 000044