(57)【要約】【課題】本発明の目的は、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者における薬剤の治療効果を、従来の予測方法と比較して、より精確に予測することのできる薬剤の治療効果予測方法を提供することである。【解決手段】前記課題は、ＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法によって、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者由来の血液のＩＬ−２８Ｂ濃度を測定する工程を含み、ＩＬ−２８Ｂ濃度の測定値によりインターフェロン治療効果を予測することを特徴とする、インターフェロン治療効果予測方法によって解決することができる。【選択図】図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法によって、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者由来の血液のＩＬ−２８Ｂ濃度を測定する工程を含み、ＩＬ−２８Ｂ濃度の測定値によりインターフェロン治療効果を予測することを特徴とする、インターフェロン治療効果予測方法。
【請求項２】
前記ＩＬ−２８Ｂ濃度が閾値濃度以下又は閾値濃度未満の場合にインターフェロン治療が有効である可能性が高いと予測する、請求項１に記載のインターフェロン治療効果予測方法。
【請求項３】
Ｃ型肝炎ウイルス感染患者の遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７と、ＩＬ−２８Ｂ濃度とを組み合わせて、インターフェロン治療効果を予測することを特徴とする、請求項１又は２に記載のインターフェロン治療効果予測方法。
【請求項４】
Ｃ型肝炎ウイルス感染患者の遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７がＴＧ又はＧＧであり、且つＩＬ−２８Ｂ濃度が閾値濃度以下又は閾値濃度未満の場合、インターフェロン治療が有効である可能性が高いと予測する請求項３に記載のインターフェロン治療効果予測方法。
【請求項５】
前記測定されたＩＬ−２８Ｂ濃度が閾値濃度以上又は閾値濃度を超えたＣ型肝炎ウイルス感染患者の遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７を決定する工程を含む、請求項３又は４に記載のインターフェロン治療効果予測方法。
【請求項６】
前記閾値濃度が、１０ｐｇ／ｍＬ〜１５ｐｇ／ｍＬのいずれかの濃度である、請求項２〜５のいずれか一項に記載のインターフェロン治療効果予測方法。
【請求項７】
配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号２で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号４〜２３で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片の、血液のＩＬ−２８Ｂを測定することによるインターフェロン治療効果予測キットの製造のための使用。
【請求項８】
配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号２で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号４〜２３で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片の、血液のＩＬ−２８Ｂを測定することによるインターフェロン治療効果予測キットの製造のための使用。
【請求項９】
前記ＩＦＮ治療効果予測方法によって、治療効果を予測されたＣ型肝炎ウイルス感染患者に対して、ＩＦＮを投与する工程を含む、Ｃ型肝炎治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インターフェロン治療効果予測方法に関する。本発明によれば、インターフェロンの治療効果を的確に予測することができる。特には、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７のアレルの組み合わせが［Ｔ／Ｇ］又は［Ｇ／Ｇ］の薬剤の治療効果が低い患者群において、高い治療効果が得られるＣ型肝炎ウイルス感染患者を正確に予測することができる。
【背景技術】
【０００２】
Ｃ型肝炎ウイルス（以下、ＨＣＶと称することがある）は、血液伝搬性のウイルスであり、ＨＣＶ感染が起こると急性の経過で治癒するものが２０〜３０％であり、７０〜８０％は持続感染へ移行する。ＨＣＶによる持続感染の多くは慢性肝炎となり、治療を行わない場合、その大部分が肝硬変、そして肝癌へと進行する（非特許文献１）。
このＣ型慢性肝炎の治療法として、１９９２年にインターフェロン（以下、ＩＦＮと称することがある）による治療が開始された。しかしながら、ＩＦＮの効果はＨＣＶの遺伝子型により異なり、遺伝子型１ｂ、且つ高ウイルス量の難治性Ｃ型慢性肝炎では、著効（SVR sustained virological response）率は、非常に低かった。その後、ＩＦＮ及びリバビリンの併用投与が認可され、更に２００４年から遺伝子型１ｂ且つ高ウイルス量の難治性Ｃ型慢性肝炎にＰＥＧ化ＩＦＮ及びリバビリンの併用投与が保険適用になり、著効率は大きく向上していった。
【０００３】
最近、田中らによりＩＬ−２８Ｂ（ＩＦＮ−λ３）の近傍に複数のＳＮＰが存在し、そのアリルの違いによって、ＰＥＧ化ＩＦＮ及びリバビリンの併用投与の治療効果が異なり（非特許文献２）、それによってＰＥＧ化ＩＦＮ及びリバビリンの併用投与の治療効果を予測することが可能であった。しかしながら、その治療効果の予測は十分なものではなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２０１３−１３６５３０号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】「ヘパトロジー・リサーチ（Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  Ｒｅｓｅａｃｈ）」（日本）２０１０年、第４０巻、ｐ．４４９−４６０
【非特許文献２】「ネイチャー・ジェネティクス（ｎａｔｕｒｅ  ｇｅｎｅｔｉｃｓ）」（英国）２００９年、第４１巻、ｐ．１１０５−１１０９
【非特許文献３】「ヘパトロジー・リサーチ（Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  Ｒｅｓｅａｃｈ）」（日本）２０１２年、第４２巻、ｐ．１０８９−１０９９
【非特許文献４】「ジャーナル・オブ・ガストロエンテロロジー（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ）」（日本）２０１３年、４月１７日オンラインパブリッシュ（http://link.springer.com/article/10.1007/s00535-013-0814-1）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
一方、前記ＩＬ−２８Ｂは、ＩＦＮ−λファミリーであるＩＬ−２８Ａと、９６％のアミノ酸の相同性を有しており、ＩＬ−２８Ｂを特異的に測定する免疫学的測定法が存在していなかったが、最近、このＩＬ−２８Ｂ（ＩＦＮ−λ３）を特異的に、且つ高感度に測定することのできる、ＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定方法が開発された（特許文献１及び非特許文献３）。村田らは、インターフェロン治療を受けるＣ型肝炎ウイルス感染患者のリンパ球をＴＬＲ７アゴニストで刺激し、その上清中のＩＬ−２８Ｂを前記ＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定方法を用いて測定した。その結果、ＩＬ−２８Ｂ（ＩＦＮ−λ３）産生の高いＣ型肝炎ウイルス感染患者が、ＰＥＧ化ＩＦＮ及びリバビリンの併用投与の治療効果が高いことを見出した（非特許文献４）。しかしながら、この方法は時間が掛かる上に煩雑で高度な技術が必要で、臨床現場に普及させるには不向きであった。
【０００７】
Ｃ型肝炎ウイルス感染患者のＩＦＮによる治療は、多額の治療費が必要である。また、ＩＦＮによる治療は、発熱及び頭痛などの軽度なものから、間質性肺炎及び神経症状などの重度な副作用が見られることがある。従って、治療効果の予測が可能であれば、治療効果が得られにくいグループについては、副作用が見られた時点で、早期に中止を判断することが可能であり、無用な副作用への対応や高額な治療費を抑えることが可能である。
従って、本発明の目的は、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者における薬剤の治療効果を、従来の予測方法と比較して、より精確に予測することのできる薬剤の治療効果予測方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者は、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者における薬剤の治療効果予測方法について、鋭意研究した結果、驚くべきことに、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者由来の血液のＩＬ−２８Ｂ濃度を測定し、ＩＬ−２８Ｂ濃度の測定値により治療効果を予測することが可能であることを見出した。具体的には、血液中のＩＬ−２８Ｂ濃度が低いＣ型肝炎ウイルス感染患者は、ＩＦＮの治療効果が高いことを見出した。
本発明は、こうした知見に基づくものである。
従って、本発明は、
［１］ＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法によって、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者由来の血液のＩＬ−２８Ｂ濃度を測定する工程を含み、ＩＬ−２８Ｂ濃度の測定値によりインターフェロン治療効果を予測することを特徴とする、インターフェロン治療効果予測方法、
［２］前記ＩＬ−２８Ｂ濃度が閾値濃度以下又は閾値濃度未満の場合にインターフェロン治療が有効である可能性が高いと予測する、［１］に記載のインターフェロン治療効果予測方法、
［３］Ｃ型肝炎ウイルス感染患者の遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７と、ＩＬ−２８Ｂ濃度とを組み合わせて、インターフェロン治療効果を予測することを特徴とする、［１］又は［２］に記載のインターフェロン治療効果予測方法、
［４］Ｃ型肝炎ウイルス感染患者の遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７がＴＧ又はＧＧであり、且つＩＬ−２８Ｂ濃度が閾値濃度以下又は閾値濃度未満の場合、インターフェロン治療が有効である可能性が高いと予測する［３］に記載のインターフェロン治療効果予測方法、
［５］前記測定されたＩＬ−２８Ｂ濃度が閾値濃度以上又は閾値濃度を超えたＣ型肝炎ウイルス感染患者の遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７を決定する工程を含む、［３］又は［４］に記載のインターフェロン治療効果予測方法、
［６］前記閾値濃度が、１０ｐｇ／ｍＬ〜１５ｐｇ／ｍＬのいずれかの濃度である、［２］〜［５］のいずれかに記載のインターフェロン治療効果予測方法、
［７］配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号２で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号４〜２３で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片の、血液のＩＬ−２８Ｂを測定することによるインターフェロン治療効果予測キットの製造のための使用、
［８］配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号２で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号４〜２３で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片の、血液のＩＬ−２８Ｂを測定することによるインターフェロン治療効果予測キットの製造のための使用、
［９］前記ＩＦＮ治療効果予測方法によって、治療効果を予測されたＣ型肝炎ウイルス感染患者に対して、ＩＦＮを投与する工程を含む、Ｃ型肝炎治療方法、
［１０］前記ＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法が、
（Ａ）（１）配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号２で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号４〜２３で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体又はその抗原結合性断片；（２）配列番号２５で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１１３番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号２７で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメインを有する請のモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片；（３）配列番号２９で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１０９番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号３１で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメインを有するモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片；又は（４）前記（１）〜（３）のいずれかに記載のモノクローナル抗体が結合するエピトープに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合性断片を、ＩＬ−２８Ｂを含む可能性のある被検試料と接触させる工程、並びに
（Ｂ）ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体と被検試料とを接触させる工程を含む、［１］〜［６］のいずれかに記載のインターフェロン治療効果予測方法、
［１１］前記ＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法が、
（Ａ）（１）配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号２で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号４〜２３で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片；（２）配列番号３３で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１０６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号３５で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン；（３）配列番号３７で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１０６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号３９で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン；又は（４）配列番号４１で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１０６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号４３で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメインを有する請求項４に記載のモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片；又は（５）前記（１）〜（４）のいずれかに記載のモノクローナル抗体が結合するエピトープに結合するモノクローナル抗体又はその抗原結合性断片を、ＩＬ−２８Ｂを含む可能性のある被検試料と接触させる工程、並びに
（Ｂ）ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体と被検試料とを接触させる工程を含む、［１］〜［６］のいずれかに記載のインターフェロン治療効果予測方法、
に関する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明のインターフェロン治療効果予測方法によれば、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者に対するインターフェロンなどの薬剤の治療効果を予測することができる。具体的には、血液中のＩＬ−２８Ｂ濃度が低いＣ型肝炎ウイルス感染患者は、ＩＦＮの治療効果が高いため、それらの患者に対して、ＩＦＮの治療を推奨することができる。
更に、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７が［Ｔ／Ｇ］（以下、単に「ＴＧ」と称することがある）又は［Ｇ／Ｇ］（以下、単に「ＧＧ」と称することがある）のＣ型肝炎ウイルス感染患者において、血液中のＩＬ−２８Ｂ濃度が低いＣ型肝炎ウイルス感染患者は、ＩＦＮの治療効果が高く、血液中のＩＬ−２８Ｂ濃度が高いＣ型肝炎ウイルス感染患者は、ＩＦＮの治療効果が低い。従来、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７が［Ｔ／Ｇ］又は［Ｇ／Ｇ］のＣ型肝炎ウイルス感染患者においては、インターフェロン治療に対して、８０％程度の患者が、ウイルスが一旦検出感度以下になるVirological response（以下、ＶＲと称することがある）であり、そして２０％程度の患者が、ウイルスが継続的に検出されるNon virological response（以下、ＮＶＲと称することがある）であった。ここで、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者のＶＲ又はＮＶＲを正確に予測することはできなかったが、本発明によりＣ型肝炎ウイルス感染患者がインターフェロン治療に対して、ＶＲであるか、又はＮＶＲであるかを正確に予測することが可能となった。
従って、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７と、血液中のＩＬ−２８Ｂ濃度とを組み合わせて、以下のようにインターフェロン治療の方針を決定することができる。まず、ＩＦＮ治療を行う予定のＣ型肝炎ウイルス感染患者において、血液中のＩＬ−２８Ｂ濃度を測定し、ＩＬ−２８Ｂ濃度が低いＣ型肝炎ウイルス感染患者は、ＩＦＮの治療効果が高いため、ＩＦＮの治療を行うことを決定する。次に、血液中のＩＬ−２８Ｂ濃度が高く、且つ遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７が［Ｔ／Ｇ］又は［Ｇ／Ｇ］のＣ型肝炎ウイルス感染患者は、ＩＦＮの治療効果が低いため、ＩＦＮ治療を推奨しない。一方、ＩＬ−２８Ｂ濃度が高いＣ型肝炎ウイルス感染患者で、かつ遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７が［Ｔ／Ｔ］（以下、単に「ＴＴ」と称することがある）のＣ型肝炎ウイルス感染患者のうち、HCV RNA量が多い患者ではＩＦＮの治療効果が有効な可能性が低いため、ＩＦＮの治療は推奨しない。
ＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法は、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７の測定方法と比較して費用が安価である。従って、ＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法を先に行うことによって、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７を実施する必要のある患者数を減らすことが可能である。すなわち、ＩＦＮ治療の効果予測のための検査費用を減少させることが可能であり、更に正確なＩＦＮ治療の効果予測ができる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】メジャーＩＬ−２８Ｂ、マイナーＩＬ−２８Ｂ（Ｋ７４Ｒ）、及びＩＬ−２８Ａタンパク質のアミノ酸配列を比較した図である。
【図２】遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７のＴＴ又はｎｏｎ−ＴＴ（ＴＧ又はＧＧ）別に、血液中のＩＬ−２８Ｂ濃度と、Sustained virological response（SVR）、Transient virological response（TVR）及びNon virological response（NVR）との関連を示したグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
《インターフェロン治療効果予測方法》
本発明のインターフェロン治療効果予測方法は、ＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法によって、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者由来の血液のＩＬ−２８Ｂ濃度を測定する工程を含み、ＩＬ−２８Ｂ濃度の測定値によりインターフェロン治療効果を予測するものである。
【００１２】
（ＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法）
本発明のインターフェロン治療効果予測方法に用いるＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法は、ＩＬ−２８Ｂを特異的に測定することのできるものであれば、特に限定されるものではない。
ここで、ＩＬ−２８Ｂは、ＩＦＮ−λファミリーであるＩＬ−２８Ａと、９６％のアミノ酸の相同性を有している。従って、ＩＬ−２８Ｂに結合する抗体のほとんどが、ＩＬ−２８Ａにも結合し、ＩＬ−２８Ａに結合する抗体のほとんどが、ＩＬ−２８Ｂにも結合する。従って、従来のＩＬ−２８Ｂ免疫学的測定法は、ＩＬ−２８Ｂを特異的に測定するものではなく、ＩＬ−２８Ｂ及びＩＬ−２８Ａを測定していた。
本発明のインターフェロン治療効果予測方法に用いるＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法は、ＩＬ−２８Ａを実質的に測定せず、ＩＬ−２８Ｂを特異的に測定するものである。そして、ＩＬ−２８Ａを実質的に測定せず、ＩＬ−２８Ｂを特異的に測定することによって、インターフェロン治療効果を予測することが可能である。ＩＬ−２８Ａを測定するＩＬ−２８Ｂ免疫学的測定法によって得られた測定値によっては、インターフェロン治療効果を予測することはできない。
本明細書において、「ＩＬ−２８Ａを実質的に測定しない」とは、ＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法によってＩＬ−２８Ａを測定した場合、ＩＬ−２８Ｂの１／１０以下の濃度と測定されることを意味するが、好ましくは１／２０以下であり、より好ましくは１／５０以下であり、更に好ましくは１／１００以下である。ＩＬ−２８Ｂの１／１０以下の濃度と測定されることによって、インターフェロン治療効果の予測に、実質的な影響を与えないからである。
【００１３】
ＩＬ−２８Ｂをコードする遺伝子は、翻訳領域の２２１番目にＳＮＰを有しており、メジャーアレルがＡであり、マイナーアレルがＧである。そしてメジャーアレルから翻訳されるメジャーＩＬ−２８Ｂの７４番目のアミノ酸はリジン（Ｋ）であり、マイナーアレルから翻訳されるマイナーＩＬ−２８Ｂの７４番目のアミノ酸はアルギニン（Ｒ）である（図１）。本発明に用いるＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法は、メジャーＩＬ−２８Ｂ及びマイナーＩＬ−２８Ｂを測定することのできるＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法が好ましいが、メジャーＩＬ−２８Ｂのみを測定するＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法を用いることもできる。なお、本明細書において、メジャーＩＬ−２８Ｂのリジン（Ｋ）からマイナーＩＬ−２８Ｂのアルギニン（Ｒ）への置換を「Ｋ７４Ｒ」置換と称することがある。
【００１４】
本発明のインターフェロン治療効果予測方法に用いるＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法は、治療効果を判定する閾値以下の検出感度を有していれば、特に限定されるものではない。治療効果を判定する閾値以下の検出感度を有することにより、インターフェロン治療効果の予測を的確に行うことができる。なお、本明細書において、「治療効果を判定する閾値以下の検出感度」とは、治療効果を判定する閾値以下のＩＬ−２８Ｂの濃度を測定することができることを意味する。
従って、前記検出感度は、治療効果を判定する閾値によって変動してもよい。しかしながら、ＩＬ−２８Ｂの組換えタンパク質をスタンダード（標準品）として用いた場合、タンパク質濃度として、１０ｐｇ／ｍＬ〜１５ｐｇ／ｍＬの間のいずれか１つの特定の濃度以下の検出感度であることが好ましい。従って、前記検出感度として、例えば１５ｐｇ／ｍＬ以下、１４ｐｇ／ｍＬ以下、１３ｐｇ／ｍＬ以下、１２．９ｐｇ／ｍＬ以下、１２ｐｇ／ｍＬ以下、１１ｐｇ／ｍＬ以下、又は１０ｐｇ／ｍＬ以下の検出感度を挙げることができる。
【００１５】
前記治療効果を判定する閾値は、インターフェロン治療効果を予測できる限りにおいて、特に限定されるものではないが、管理された臨床試験で決定することが好ましい。
例えば、閾値は、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７がｎｏｎ−ＴＴ（ＴＧ又はＧＧ）のＣ型肝炎ウイルス感染患者において、ＮＶＲの患者と、ＶＲ（ＳＶＲ及びＴＶＲ）の患者とを完全に区別できる値が最も好ましい。しかし、分析したＮＶＲの患者及びＶＲ（ＳＶＲ及びＴＶＲ）の患者の母集団が増加することによって、ＮＶＲの患者とＶＲ（ＳＶＲ及びＴＶＲ）の患者との間の測定値が、オーバーラップした場合は、１００％のＶＲ（ＳＶＲ及びＴＶＲ）の患者が治療効果が有効の可能性が高いと判断される値を閾値として選択することが好ましいが、オーバーラップした範囲の任意の値を閾値とすることも可能である。具体的には、ＩＬ−２８Ｂの組換えタンパク質をスタンダード（標準品）として用いた場合、タンパク質濃度として、１０ｐｇ／ｍＬ〜１５ｐｇ／ｍＬの間のいずれか１つの特定の濃度を閾値として規定することが可能であり、例えば１５ｐｇ／ｍＬ、１４ｐｇ／ｍＬ、１３ｐｇ／ｍＬ、１２．９ｐｇ／ｍＬ、１２ｐｇ／ｍＬ、１１ｐｇ／ｍＬ、又は１０ｐｇ／ｍＬを閾値として規定することができる。
【００１６】
本発明のインターフェロン治療効果予測方法において、ＩＬ−２８Ｂが測定される検体は、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者の血液である。すなわち、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者由来の血液中のＩＬ−２８Ｂが測定される。本明細書において血液とは、特に限定されるものではないが、例えば全血、血清、又は血漿を含む。また、測定される血液は、ｔｏｌｌ−ｌｉｋｅ受容体アゴニスト（例えば、Ｒ−８３７）によって刺激されていないものが好ましい。Ｒ−８３７によって刺激された血液を用いた場合、本発明によるインターフェロン治療効果予測ができないと考えられる。
また、本発明のインターフェロン治療効果予測方法の対象となるＣ型肝炎ウイルス感染患者は、Ｃ型肝炎ウイルスが感染している患者である限りにおいて、特に限定されるものではないが、インターフェロン治療を行う予定の患者であることが好ましい。
【００１７】
本発明のインターフェロン治療効果予測方法におけるＩＬ−２８Ｂ測定値の値は、前記の治療効果を判定する閾値を決定できる限りにおいて、特に限定されるものではなく、例えばタンパク質量、又はユニット数などで示すことができるが、標準化されたタンパク質量で示すことが好ましい。例えば、組換えタンパク質をスタンダードとして調製し、標準曲線を作成し、それによって測定された血液中のＩＬ−２８Ｂの濃度を計算することができる。
【００１８】
（抗体）
本発明のインターフェロン治療効果予測方法において用いる抗体は、ＩＬ−２８Ｂに結合する抗体である限りにおいて限定されるものではないが、少なくとも１つの抗体は、ＩＬ−２８Ｂに結合し、ＩＬ−２８Ａに結合しないモノクローナル抗体を用いることが好ましい。
前記モノクローナル抗体として、以下の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）及び抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）を挙げることができる。
【００１９】
（抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ））
抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）は、配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号２で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号４〜２３で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体である。また、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）の抗原結合性断片も、同じように用いることができる。
【００２０】
本明細書において「ＩＬ−２８Ａに結合しない」とは、抗体として使用する場合に、ＩＬ−２８Ａへの結合が、実質的に影響しないレベルの結合であることを意味する。より具体的には、メジャーＩＬ−２８Ｂの結合に対してＩＬ−２８Ａへの結合が１／１００以下、好ましくは１／３００以下、より好ましくは１／５００以下、最も好ましくは１／１０００以下であることを意味する。また、「メジャーＩＬ−２８Ｂの結合に対してＩＬ−２８Ａへの結合が１／１００以下」であるとは、メジャーＩＬ−２８Ｂ又はＩＬ−２８Ａを固相化したＥＬＩＳＡにおいて、同じＯＤ値を得られるモノクローナル抗体の濃度がＩＬ−２８Ａに対する方が１００倍以上高いことを意味する。
【００２１】
本発明の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）の結合するエピトープ（以下、エピトープ（Ａ）と称する）は、メジャーＩＬ−２８Ｂ及びマイナーＩＬ−２８Ｂに存在し、ＩＬ−２８Ａに存在しないエピトープであり、またメジャーＩＬ−２８Ｂのアミノ酸配列（配列番号１）を基に合成した、１０アミノ酸ずつオーバーラップする２０アミノ酸の合成ポリペプチド（配列番号４〜２３）には存在しないエピトープである。すなわち、エピトープ（Ａ）は、メジャーＩＬ−２８Ｂ及びマイナーＩＬ−２８Ｂに存在し、ＩＬ−２８Ａに存在しない不連続エピトープ（立体構造エピトープ）である。
【００２２】
抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）としては、免疫原としてＩＬ−２８Ｂの２６〜２００番のアミノ酸配列の組み換えタンパク質（以下、ｒＩＬ−２８Ｂ（２６−２００）と称することがある）を用いて得られたＴＡ２６１３、及びＴＡ２６６４を挙げることができる。ＴＡ２６１３及びＴＡ２６６４はエピトープ競合試験によって、ｒＩＬ−２８Ｂ（２６−２００）への結合が、お互いにほぼ完全に阻害された。従って、モノクローナル抗体ＴＡ２６１３及びＴＡ２６６４は同じ不連続エピトープを認識しているモノクローナル抗体である。
【００２３】
（ＴＡ２６１３のＣＤＲ）
本発明のＴＡ２６１３の重鎖可変領域ドメインは、好ましくは配列番号２５で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド（SYGMS）、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド（TITGGGSYTYYPDGVKG）、９９番〜１１３番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチド（RGDYGSNYLYWYFDV）を含む重鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号２５で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。また、軽鎖可変領域ドメインは、好ましくは、配列番号２７で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド（RASKSVSTSGYSYMH）、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド（LVSNLES）、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチド（QHIRELTRS）を含む軽鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号２７で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。
【００２４】
（ＴＡ２６６４のＣＤＲ）
本発明のＴＡ２６６４の重鎖可変領域ドメインは、好ましくは配列番号２９で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド（DYYMY）、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド（YISNGGGSTNYPDTVKG）、９９番〜１０９番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチド（PSLLRSAWFAY）を含む重鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号２９で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。また、軽鎖可変領域ドメインは、好ましくは、配列番号３１で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド（RASKSVSTSGYSYMH）、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド（LVSNLES）、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチド（QHIRELTRS）を含む軽鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号３１で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。
【００２５】
（エピトープ（Ａ）に結合するモノクローナル抗体）
本発明の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）は、前記エピトープ（Ａ）に結合するモノクローナル抗体を含む。エピトープ（Ａ）に結合するモノクローナル抗体は、配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号２で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号４〜２３で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体であり、前記ＴＡ２６１３又はＴＡ２６６４と同じ性質を有している。前記エピトープ（Ａ）に結合するため、ＴＡ２６１３又はＴＡ２６６４と同一、又は相同性の高いＣＤＲを有していることが好ましい。また、エピトープ（Ａ）に結合することができるか否かは、ＴＡ２６１３又はＴＡ２６６４のＣＤＲを有する抗体を用い、実施例に記載のエピトープ競合試験によって、決定することが可能である。
【００２６】
（抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ））
本発明の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）は、配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号２で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号８〜２６で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体である。また、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）の抗原結合性断片も、抗体と同じように用いることができる。
【００２７】
本明細書において「マイナーＩＬ−２８Ｂに結合しない」とは、抗体として使用する場合に、マイナーＩＬ−２８Ｂへの結合が、実質的に影響しないレベルの結合であることを意味する。より具体的には、メジャーＩＬ−２８Ｂの結合に対してマイナーＩＬ−２８Ｂへの結合が１／１００以下、好ましくは１／３００以下、より好ましくは１／５００以下、最も好ましくは１／１０００以下であることを意味する。また、「メジャーＩＬ−２８Ｂの結合に対してマイナーＩＬ−２８Ｂへの結合が１／１００以下」であるとは、例えば実施例に示すように、メジャーＩＬ−２８Ｂ又はマイナーＩＬ−２８Ｂを固相化したＥＬＩＳＡにおいて、同じＯＤ値を得られるモノクローナル抗体の濃度がマイナーＩＬ−２８Ｂの方が１００倍以上高いことを意味する。
【００２８】
（エピトープＢ）
本発明の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）の結合するエピトープ（以下、エピトープ（Ｂ）と称する）は、メジャーＩＬ−２８Ｂに存在し、ＩＬ−２８Ａ及びマイナーＩＬ−２８Ｂに存在しないエピトープであり、またメジャーＩＬ−２８Ｂのアミノ酸配列（配列番号１）を基に合成した、１０アミノ酸ずつオーバーラップする２０アミノ酸の合成ポリペプチド（配列番号４〜２３）には存在しないエピトープである。すなわち、エピトープ（Ｂ）は、メジャーＩＬ−２８Ｂに存在し、ＩＬ−２８Ａ及びマイナーＩＬ−２８Ｂに存在しない不連続エピトープ（立体構造エピトープ）である。
【００２９】
抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）としては、免疫原としてシグナルペプチドを含まないｒＩＬ−２８Ｂ（２６−２００）を用いて得られたＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、及びＴＡ２６０３を挙げることができる。ＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、及びＴＡ２６０３は実施例のエピトープ競合試験によって、ｒＩＬ−２８Ｂ（２６−２００）への結合が、お互いにほぼ完全に阻害された。従って、モノクローナル抗体ＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、及びＴＡ２６０３は同じ不連続エピトープを認識しているモノクローナル抗体である。
【００３０】
更に、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）と抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）とは、エピトープ競合試験において、部分的に結合が阻害された。従って、エピトープ（Ａ）とエピトープ（Ｂ）とは、関連する位置に存在していると考えられる。
【００３１】
（ＴＡ２６０１のＣＤＲ）
本発明のＴＡ２６０１の重鎖可変領域ドメインは、好ましくは配列番号３３で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド（DTYIH）、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド（RIDPANGNTKYDPKFQG）、９９番〜１０６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチド（YGYDYFDY）を含む重鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号３３で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。また、軽鎖可変領域ドメインは、好ましくは、配列番号３５で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド（RASKSVSTSGYSYMH）、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド（LVSNLES）、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチド（QHIRELTRS）を含む軽鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号３５で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。
【００３２】
（ＴＡ２６０２のＣＤＲ）
本発明のＴＡ２６０２の重鎖可変領域ドメインは、好ましくは配列番号３７で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド（DTYIH）、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド（RIDPANGNTKYDPKFQG）、９９番〜１０６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチド（YGYDYFDY）を含む重鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号３７で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。また、軽鎖可変領域ドメインは、好ましくは、配列番号３９で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド（RASKSVSTSGYSYMH）、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド（LVSNLES）、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチド（QHIRELTRS）を含む軽鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号３９で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。
【００３３】
（ＴＡ２６０３のＣＤＲ）
本発明のＴＡ２６０３の重鎖可変領域ドメインは、好ましくは配列番号４１で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド（DTYIH）、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド（RIDPANGNIKYDPKFQG）、９９番〜１０６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチド（YGYDYFDY）を含む重鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号４１で表されるアミノ酸配列からなる重鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。また、軽鎖可変領域ドメインは、好ましくは、配列番号４３で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド（RASKSVSTSGYSYMH）、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド（LVSNLES）、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチド（QHIRELTRS）を含む軽鎖可変領域ドメインであり、最も好ましくは、配列番号４３で表されるアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域ドメインのポリペプチドである。
【００３４】
（エピトープ（Ｂ）に結合するモノクローナル抗体）
本発明の抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）は、前記エピトープ（Ｂ）に結合するモノクローナル抗体を含む。エピトープ（Ｂ）に結合するモノクローナル抗体は、配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号２で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号４〜２３で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体であり、前記ＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、又はＴＡ２６０３と同じ性質を有している。前記エピトープ（Ｂ）に結合するため、ＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、又はＴＡ２６０３と同一、又は相同性の高いＣＤＲを有していることが好ましい。
また、エピトープ（Ａ）に結合することができるか否かは、ＴＡ２６０１、ＴＡ２６０２、及びＴＡ２６０３のＣＤＲを有する抗体を用い、実施例に記載のエピトープ競合試験によって、決定することが可能である。
本発明のエピトープ（Ｂ）に結合するモノクローナル抗体は、前記メジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ特異的分析方法（Ｂ）に用いることができる。
【００３５】
（ＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法の実施態様）
本発明に用いるＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法は、前記のようにＩＬ−２８Ｂを特異的に測定することのできるものであれば、特に限定されるものではなく、例えば酵素免疫測定法、ラテックス凝集免疫測定法、化学発光免疫測定法、又は放射免疫測定法を挙げることができるが、２種類以上の抗体を用いるサンドイッチ式の酵素免疫測定法、又は化学発光免疫測定法が好ましい。また、前記のようにメジャーＩＬ−２８Ｂ及びマイナーＩＬ−２８Ｂを測定できる免疫学的測定法でもよく、メジャーＩＬ−２８Ｂのみを特異的に測定できる免疫学的測定法でもよい。具体的な実施態様の例を以下に記載する。
【００３６】
ＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法として、（Ａ）前記抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）又はその抗原結合性断片を、ＩＬ−２８Ｂを含む可能性のある被検試料と接触させる工程；を含むことを特徴とする、メジャー及びマイナーＩＬ−２８Ｂ分析方法（ＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ａ））、及び（Ｂ）前記抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）又はその抗原結合性断片を、ＩＬ−２８Ｂを含む可能性のある被検試料と接触させる工程；を含むことを特徴とする、メジャーＩＬ−２８Ｂ分析方法（ＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ｂ））を挙げることができる。
【００３７】
前記ＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ａ）は、前記抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）を用いることが好ましい。ＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ａ）は、限定されるものではないが、好ましくは（１）前記抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）又はその抗原結合性断片を、ＩＬ−２８Ｂを含む可能性のある被検試料と接触させる工程；及び（２）ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体と被検試料とを接触させる工程；を含む。
ＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ａ）において、第二抗体は、ＩＬ−２８Ｂに結合するものであれば限定されないが、好ましくは配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ、配列番号２で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ、及び配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合する、モノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片が好ましい。
【００３８】
前記ＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ｂ）は、前記抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）を用いることが好ましい。ＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ｂ）は、限定されるものではないが、好ましくは、（１）前記抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）又はその抗原結合性断片を、ＩＬ−２８Ｂを含む可能性のある被検試料と接触させる工程；及び（２）ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体と被検試料とを接触させる工程；を含む。
ＩＬ−２８Ｂ分析方法（Ｂ）において、第二抗体は、ＩＬ−２８Ｂに結合するものであれば限定されないが、好ましくは第二抗体が、（１）前記抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）又はその抗原結合性断片であるか、又は（２）配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ、配列番号２で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ、及び配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合する、モノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片が好ましい。
【００３９】
（ＩＬ−２８Ｂ濃度による治療効果予測）
本発明のＩＬ−２８Ｂ特異的免疫学的測定法においては、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者の血液中のＩＬ−２８Ｂ濃度の測定値によりインターフェロン治療効果を予測する。具体的には、血液中のＩＬ−２８Ｂ濃度が低い患者は、インターフェロン治療が有効である可能性が高いことを予測することができる。より好ましくは、ＩＬ−２８Ｂ濃度が閾値濃度以下又は閾値濃度未満の場合にインターフェロン治療が有効である可能性が高いと予測する。図２に示すように、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７がＴＴであっても、ｎｏｎ−ＴＴ（ＴＧ及びＧＧ）であっても、ＩＬ−２８Ｂ濃度が閾値濃度以下又は閾値濃度未満の場合、Virological response（ＶＲ）であると予測することが可能である。本発明者らが、調べた限りにおいては、ＩＬ−２８Ｂ濃度が閾値濃度を超えたＣ型肝炎ウイルス感染患者は、Non virological response（ＮＶＲ）であったからである。
【００４０】
閾値は、前記のように管理された臨床試験で決定することが好ましい。
例えば、閾値は、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７がｎｏｎ−ＴＴ（ＴＧ又はＧＧ）のＣ型肝炎ウイルス感染患者において、ＮＶＲの患者と、ＶＲ（ＳＶＲ及びＴＶＲ）の患者とを完全に区別できる値が最も好ましい。
【００４１】
本発明の治療効果予測方法により、治療効果の判定が可能なインターフェロンは、ＨＣＶの治療に用いられるインターフェロンであれば、特に限定されることはなく、例えば、インターフェロン−α、ＰＥＧ化インターフェロン−α、インターフェロンβ、又はインターフェロンλを挙げることができる。更に、本発明におけるインターフェロン治療には、インターフェロンの単独投与（例えば、インターフェロン−α単独投与、インターフェロンβ単独投与、ＰＥＧ化インターフェロン−α単独投与又はインターフェロンλ単独投与）のみでなく、インターフェロンと他の薬剤の２剤投与（例えば、ＰＥＧ化インターフェロン−α及びリバビリンの２剤投与）、インターフェロンと他の２つの薬剤の３剤投与（例えば、ＰＥＧ化インターフェロン−α、リバビリン及びプロテアーゼ阻害剤の３剤投与）、インターフェロンと他の３つの薬剤の４剤投与（例えば、ＰＥＧ化インターフェロン−α、リバビリン、プロテアーゼ阻害剤、及びＲＮＡポリメラーゼ阻害剤の４剤投与）を挙げることができる。他の薬剤としては、リバビリン、プロテアーゼ阻害剤（例えば、テラプレビル（Telaprevir）、シルプレビル（Ciluprevir）、ボセプレビル（Boceprevir）、ＴＭＣ４３５３５０、Ｒ７２２７／ＩＴＭＮ−１９１、ＭＫ−７００９、ＢＩ２０１３３５、ナルラプレビル（Narlaprevir）、ＢＭＳ−６５００３２、ＰＨＸ１７６６、又はＡＣＨ−１６２５）、ＲＮＡポリメラーゼ阻害剤（例えば、バロピシタビン（Valopicitabine）、Ｒ７１２８、Ｒ１６２６、ＰＳＩ−７８５１、ＩＤＸ１８４、ＢＩＬＢ  １９４１、ＢＩ２０７１２７、ＭＫ−３２８１、フィリブビル（Filibuvir）、ＶＣＨ７５９、ＶＣＨ９１６、ＶＣＨ２２２、ＡＮＡ５９８、ＨＣＶ−７９６、ＧＳ−９１９０、ＧＳ−９１９０、又はＡＢＴ−３３３）、ＮＳ５Ａ阻害剤（例えば、ＢＭＳ−７９００５２）、Ｄｅｂｉｏ０２５、ＮＩＭ８１１、ＳＣＹ−６３５、ニタゾキサニド（Nitazoxanide）、セルゴシビル（Celgosivir）又はそれらの２つ以上の組み合わせの薬剤を挙げることができる。
【００４２】
（遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７）
遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７は、ヒトの遺伝子の第１９番染色体のＩＬ２８Ｂ（ＩＦＮ−λ３）遺伝子の５’上流７ｋｂ付近に存在している。日本人におけるｒｓ８０９９９１７のマイナーアリルであるＧの頻度は約９．３％である。従って、マイナーアリルのホモ接合である［Ｇ／Ｇ］の頻度は約０．９％、メジャーアリルのホモ接合である［Ｔ／Ｔ］の頻度は約８２．２％、マイナーアリル及びメジャーアリルのヘテロ接合である［Ｔ／Ｇ］の頻度は約１６．９％である。
Ｃ型肝炎ウイルス感染患者において、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７が［Ｔ／Ｔ］の場合、ＰＥＧ化ＩＦＮ及びリバビリンの併用投与に対して、８０％の著効率（ＳＶＲ）を示す。一方、マイナーアリルを含む［Ｔ／Ｇ］及び［Ｇ／Ｇ］の場合、２０％程度の著効率（ＳＶＲ）である。
【００４３】
（遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７と連鎖不平衡にある遺伝子多型）
本発明の薬剤の治療効果予測方法において用いることのできる遺伝子多型は、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７に限らず、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７と連鎖不平衡にある遺伝子多型を用いることができる。本明細書において、「連鎖不平衡にある」とは、例えば遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７に対してＲ２が０．８以上の遺伝子多型を意味し、０．８５以上の遺伝子多型が好ましく、０．９以上の遺伝子多型がより好ましい。または、「連鎖不平衡にある」とは、例えば遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７に対してＤ’が０．８以上の遺伝子多型を意味し、０．８５以上の遺伝子多型が好ましく、０．９以上の遺伝子多型がより好ましい。
遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７と連鎖不平衡にある遺伝子多型は、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７と同じように、治療効果予測方法に用いることができ、例えばＨａｐｌｏｖｉｅｗソフトウエアを用いて、公知の方法により探索することできる。
【００４４】
（遺伝子多型の分析方法）
遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７の分析方法としては、特に限定されるものではないが、一塩基の変異（ＳＮＰ）を分析することのできる方法が好ましい。一塩基の変異（ＳＮＰ）を分析することのできる方法としては、ダイレクトシークエンス法、ＰＣＲ−ＲＥＬＰ法、ＴａｑＭａｎ法、ＤｉｇｉＴａｇ法、ＤｉｇｉＴａｇ２法、シングルヌクレオチドプライマー伸長法、ＳｎａＰｓｈｏｔ法、ＡＳＰ−ＰＣＲ法，ＰＣＲ−ＳＳＯ法、ＰＣＲ−ＳＳＰ法、ＰＣＲ−ＳＳＣＰ法、ＤＮＡチップ若しくはＤＮＡマイクロアレイを用いた核酸ハイブリダイゼーション法、インベーダー法、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ／ＭＳ法、モレキュラー・ビーコン法、ＲＣＡ法、ＵＣＡＮ法、対立遺伝子特異的ＰＣＲ、ミニシーケンシング、パイロシーケンシング、ＡＲＭＳ法、対立遺伝子特異的オリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）分析、又は変性／温度勾配ゲル電気泳動（ＤＧＧＥ／ＴＧＧＥ）を挙げることができる。
【００４５】
前記遺伝子多型の分析方法としてＤｉｇｉＴａｇ２法、ＭＧＢプローブを用いたＴａｑＭａｎ法、インベーダー法及びマイクロサテライト多型解析法について記載する。
ＤｉｇｉＴａｇ２法は、解析対象となるＳＮＰ毎にＳＮＰ特異的なｃｏｍｍｏｎ  ｐｒｏｂｅと、アリル特異的なｑｕｅｒｙ  ｐｒｏｂｅを用いて、一度に複数か所のＳＮＰについて遺伝子型を決定することのできるマルチプレックスＳＮＰタイピング法である。ＳＮＰ特異的なｃｏｍｍｏｎ  ｐｒｏｂｅは、ＳＮＰの位置に隣接して下流に存在する３’側プローブであり、アリル特異的なｑｕｅｒｙ  ｐｒｏｂｅは、ＳＮＰを３’末端に含む上流に存在する５’側プローブである。
ｑｕｅｒｙ  ｐｒｏｂｅは、ＳＮＰ毎にアリルに対応した２種類を用意する。ｑｕｅｒｙ  ｐｒｏｂｅ  の３’末端に対応するＳＮＰの遺伝子型に応じて、それと相補的な塩基を持つｑｕｅｒｙ  ｐｒｏｂｅだけが、３’側に隣接して存在するｃｏｍｍｏｎ  ｐｒｏｂｅと結合することができる。更に、検出のために各ｑｕｅｒｙ  ｐｒｏｂｅの５’末端にはアリルに対応して２種類のｑｕｅｒｙ  ｔａｇが連結されており、またｃｏｍｍｏｎ  ｐｒｏｂｅの３’末端にはＳＮＰごとに異なるｃｏｍｍｏｎ  ｔａｇが連結されている。検出は、ｃｏｍｍｏｎ  ｐｒｏｂｅに連結されたｃｏｍｍｏｎ  ｔａｇと相補的な塩基配列を持つオリゴＤＮＡを固定したＤＮＡチップを用いて検出を行う。
【００４６】
ＭＧＢプローブを用いたＴａｑＭａｎ法は、フォワードプライマー及びリバースプライマーからなるプライマーセットと、５’末端をレポーター色素（ＦＡＭ）及びＭＧＢ（MGB（Minor Groove Binder）でラベルし、３’末端をクエンチャー色素（Eclipse Dark Quencher）で修飾したＭＧＢプローブとをＰＣＲの反応系に加えることにより行うことができる。このようなＭＧＢプローブを用いたＴａｑＭａｎ自体は周知であり、そのためのキット及び装置も市販されているので、ＳＮＰの領域にＭＧＢプローブを設定することにより、市販のキット及び装置を用いて実施することができる。
【００４７】
前記フォワードプライマー及びリバースプライマー、並びにＭＧＢプローブは、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７のそれぞれのアリルの塩基配列に基づいて作成することができる。具体的には、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７のフォワードプライマー及びリバースプライマー、並びにプローブは、配列番号４４で表される遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７を含むＤＮＡの塩基配列から、作製することができる。具体的にはプライマーは、ｒｓ８０９９９１７のアレルである「Ｔ」又は「Ｇ」を挟むように、任意の位置に設定することが可能であり、また、プローブはｒｓ８０９９９１７のアレルである「Ｔ」又は「Ｇ」を含む領域に設定することができる。例えばＭＧＢプローブは、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７のメジャーアレルＴ又はマイナーアレルＧを含むＤＮＡの塩基配列領域に設定することが可能である。
【００４８】
インベーダー法は、３’側には標的ＤＮＡに特異的な塩基配列を有し変異部位の塩基の５’側に標的ＤＮＡと相補性のない配列（フラップ）を有するアレルプローブ；標的ＤＮＡの変異部位の３’側に特異的な相補配列を有するプローブ（インベーダープローブ）；及び５’側がヘアピン構造をとり得る配列を有し、ヘアピン構造を形成した際に５’末端の塩基と対をなす塩基から３’側に連続する配列がアレルプローブのフラップと相補的な配列であるＦＲＥＴプローブとを用いる方法である。
具体的には、標的ＤＮＡ、アレルプローブおよびインベーダープローブを反応させると、それらの相補結合した変異部位にインベーダープローブの３’末端が侵入する。この変異部位の構造を認識する酵素（ｃｌｅａｖａｓｅ）を用いてアレルプローブの一本鎖部分（すなわち、フラップ部分）が切り出される。切り出されたフラップはＦＲＥＴプローブと相補的に結合し、フラップの変異部位がＦＲＥＴプローブのヘアピン構造に侵入する。この構造を、更にｃｌｅａｖａｓｅが認識して切断することにより、ＦＲＥＴプローブの末端標識された蛍光色素が遊離し、クエンチャーの影響を受けなくなるために、蛍光が検出される。なお、通常、標的ＤＮＡはＳＮＰを含む領域をフォワードプライマーとリバースプライマーを用いたＰＣＲにより増幅しておくことが好ましい。
【００４９】
例えば、ｒｓ８０９９９１７のＳＮＰタイピングにおいて、前記アレルプローブ、及びインベーダープローブは、ｒｓ８０９９９１７のアレルである「Ｔ」又は「Ｇ」を含む配列に基づいて、設定することができる。また、ＰＣＲのためのフォワードプライマー及びリバースプライマーは、ｒｓ８０９９９１７のアレルである「Ｔ」又は「Ｇ」を挟むように、任意の位置に設定することが可能である。具体的には、アレルプローブとして、メジャーアレル「Ｔ」を検出するＰｒｏｂｅ１：５’−ａｔｇａｃｇｔｇｇｃａｇａｃＡＡＴＴＧＣＴＣＡＣＡＧＡＡＡＧＧＡＡ−３’（配列番号４５）、又はマイナーアレル「Ｇ」を検出するＰｒｏｂｅ２：５’−ｃｇｃｇｃｃｇａｇｇＣＡＴＴＧＣＴＣＡＣＡＧＡＡＡＧＧＡ−３’（配列番号４６）を挙げることができ、インベーダープローブとして、Ｉｎｖａｄｅｒ：５’−ＧＣＴＡＣＣＡＡＡＣＴＧＴＡＴＡＣＡＧＣＡＴＧＧＴＴＣＣＡＡＴＴＴＧＧＧＴＧＡｔ−３’（配列番号４７）を挙げることができる。更に、ＰＣＲのためのフォワードプライマー及びリバースプライマーとして、ＩｎｖａｄｅｒＦ：５’−ＴＣＡＴＣＣＣＴＣＡＴＣＣＣＡＣＴＴＣＴＧＧＡＡＣＡ−３’（配列番号４８）及びＩｎｖａｄｅｒＲ：５’−ＣＧＧＧＣＣＡＴＣＴＧＴＴＴＣＣＴＧＣＴＧ−３’（配列番号４９）を挙げることができる。
【００５０】
（遺伝子多型及びＩＬ−２８Ｂ濃度による治療効果予測）
本発明のインターフェロン治療効果予測方法においては、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７と、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者由来の血液のＩＬ２８Ｂ濃度とを組み合わせて、インターフェロンの治療効果の予測をすることができる。
遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７の遺伝子型と、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者由来の血液のＩＬ−２８Ｂ濃度の測定工程との組み合わせは、限定されるものではなく、例えば、既に遺伝子型の決定されたＣ型肝炎ウイルス感染患者由来の血液のＩＬ−２８Ｂ濃度を測定してもよく、遺伝子型の決定工程を、ＩＬ−２８Ｂ濃度測定工程の前、又は後に行ってもよい。
【００５１】
遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７と、ＩＬ−２８Ｂ濃度とを組み合わせる予測方法は、例えば以下のように行うことができる。
Ｃ型肝炎ウイルス感染患者の遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７がＴＧ又はＧＧであり、且つＩＬ−２８Ｂ濃度が閾値濃度以下又は閾値濃度未満の場合、インターフェロン治療が有効である可能性が高いと予測することができる。一方、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者の遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７がＴＧ又はＧＧであり、且つＩＬ−２８Ｂ濃度が閾値濃度以上又は閾値濃度を超えた場合、インターフェロン治療が無効である可能性が高いと予測することができる。ＩＬ−２８Ｂ濃度の測定は、既に遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７が決定されたＣ型肝炎ウイルス感染患者の検体を用いてもよい。また、ＩＬ−２８Ｂ濃度の測定工程の、前後に遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７を決定する工程を行ってもよい。遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７がＴＧ又はＧＧである場合の、ＩＬ−２８Ｂ濃度の測定値と組み合わせた治療予測の正確性は非常に高いものであるが、この場合、すべてのＣ型肝炎ウイルス感染患者について遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７を決定することが好ましい。
【００５２】
更に、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７と、ＩＬ−２８Ｂ濃度とを組み合わせる予測方法として、次のようなステップで行うこともできる。
まず、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者由来の血液のＩＬ−２８Ｂ濃度を測定する。そして、ＩＬ−２８Ｂ濃度が閾値以上のＣ型肝炎ウイルス感染患者について、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７の決定を行う。この場合、最初のＩＬ−２８Ｂ濃度の測定によって、ＩＬ−２８Ｂ濃度が閾値濃度以下又は閾値濃度未満の患者には、インターフェロン治療が有効であることを予測できる。従って、これらの患者には、インターフェロン治療を推奨する。一方、ＩＬ−２８Ｂ濃度が閾値濃度以上又は閾値濃度を超える患者については、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７を決定する。そして、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７がＴＧ又はＧＧの患者は、インターフェロン治療が無効である可能性が高いと予測できる。また、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７がＴＴの患者は、インターフェロン治療が有効である可能性が高い。従って、これらの患者には、インターフェロン治療を推奨する。
このようなステップで、インターフェロン治療効果予測を行った場合、ＩＬ−２８Ｂが閾値濃度以下又は閾値濃度未満のＣ型肝炎ウイルス感染患者（約６０％）は、インターフェロンの治療が有効であるため、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７の決定を行わなくてもよい。従って、遺伝子型検査費用の削減の効果が得られる。
【００５３】
本発明のインターフェロン治療効果予測方法は、ヒトの生体由来の血液を分離し、それ用いてｉｎ  ｖｉｔｒｏで、ＩＬ−２８Ｂの濃度を測定することによって行われるものである。
本発明のインターフェロン治療効果予測方法は、インターフェロンの治療効果を予測する場合の、インターフェロン治療効果予測の補助方法として用いることができる。また、本発明のインターフェロン治療効果予測方法を用いて、インターフェロン治療の方針を決定することができる。すなわち、本発明のインターフェロン治療効果予測方法は、インターフェロン治療の方針決定方法として用いることができる。
【００５４】
《抗体の使用》
前記抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）又は抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）は、インターフェロン治療効果予測キットの製造に用いることができる。これらのモノクローナル抗体を用いたインターフェロン治療効果予測キットにより、本発明のインターフェロン治療効果予測方法を実施することが可能である。
【００５５】
具体的には、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）の使用に関しては、以下の態様を挙げることができる。
すなわち、本発明は、
［１］配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号２で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号４〜２３で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片の、血液のＩＬ−２８Ｂを測定することによるインターフェロン治療効果予測キットの製造のための使用；
［２］（１）配列番号２５で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１１３番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号２７で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン；又は
（２）配列番号２９で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１０９番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号３１で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン
を有する［１］に記載のモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片の、血液のＩＬ−２８Ｂを測定することによるインターフェロン治療効果予測キットの製造のための使用；又は
［３］［２］に記載のモノクローナル抗体が結合するエピトープに結合する、［１］に記載の、モノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片の、血液のＩＬ−２８Ｂを測定することによるインターフェロン治療効果予測キットの製造のための使用、
に関する。
【００５６】
更に、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）の使用に関しては、以下の態様を挙げることができる。
すなわち、本発明は、
［４］配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂに結合し、配列番号２で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ及び配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合せず、そして配列番号４〜２３で表されるアミノ酸配列からなるペプチド断片に結合しない、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片の、血液のＩＬ−２８Ｂを測定することによるインターフェロン治療効果予測キットの製造のための使用；
［５］（１）配列番号３３で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１０６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号３５で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン；
（２）配列番号３７で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１０６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号３９で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン；又は
（３）配列番号４１で表されるアミノ酸配列における３１番〜３５番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５０番〜６６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９９番〜１０６番のアミノ酸からなる重鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む重鎖可変領域ドメイン、並びに配列番号４３で表されるアミノ酸配列における２４番〜３８番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域１のポリペプチド、５４番〜６０番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域２のポリペプチド、９３番〜１０１番のアミノ酸からなる軽鎖相補性決定領域３のポリペプチドを含む軽鎖可変領域ドメイン
を有する［４］に記載のモノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片の、血液のＩＬ−２８Ｂを測定することによるインターフェロン治療効果予測キットの製造のための使用；
［６］［５］に記載のモノクローナル抗体が結合するエピトープに結合する、［４］に記載の、モノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片の、血液のＩＬ−２８Ｂを測定することによるインターフェロン治療効果予測キットの製造のための使用、
に関する。
【００５７】
《インターフェロン治療効果予測用ＩＬ−２８Ｂ測定キット》
インターフェロン治療効果予測用ＩＬ−２８Ｂ測定キットは、ＩＬ−２８Ｂ特異的抗体を含む限りにおいて、特に限定されるものではないが、好ましくは前記抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）又は抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）を含むものである。インターフェロン治療効果予測用ＩＬ−２８Ｂ測定キットにより、本発明のインターフェロン治療効果予測方法を実施することが可能である。
【００５８】
具体的には、インターフェロン治療効果予測用ＩＬ−２８Ｂ測定キットに関しては、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）を含むものとして、以下の態様を挙げることができる。
本発発明のインターフェロン治療効果予測用ＩＬ−２８Ｂ測定キットは、（ａ）抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）又はその抗原結合性断片、及び（ｂ）ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体を含む。ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体としては、限定されるものではないが、（ｂ）配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ、配列番号２で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ、及び配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合する、モノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片、を挙げることができる。
【００５９】
更に、インターフェロン治療効果予測用ＩＬ−２８Ｂ測定キットに関しては、抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）を含むものとして、以下の態様を挙げることができる。
本発発明のインターフェロン治療効果予測用ＩＬ−２８Ｂ測定キットは、（ａ）前記ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）、又はその抗原結合性断片、及び（ｂ）ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体を含む。ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体としては、限定されるものではないが、（ｂ）配列番号１で表されるアミノ酸配列からなるメジャーＩＬ−２８Ｂ、配列番号２で表されるアミノ酸配列からなるマイナーＩＬ−２８Ｂ、及び配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるＩＬ−２８Ａに結合する、モノクローナル抗体、又はその抗原結合性断片、を挙げることができる。
【００６０】
更に、本発明は、（ａ）抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ａ）又はその抗原結合性断片、及び（ｂ）ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体、又はその抗原結合性断片、を含む、血液のＩＬ２８Ｂを測定するインターフェロン治療効果予測用ＩＬ−２８Ｂ測定キットの使用に関する。
また、本発明は、（ａ）抗ＩＬ−２８Ｂモノクローナル抗体（Ｂ）又はその抗原結合性断片、及び（ｂ）ＩＬ−２８Ｂに結合する第二抗体、又はその抗原結合性断片、を含む、血液のＩＬ２８Ｂを測定するインターフェロン治療効果予測用ＩＬ−２８Ｂ測定キットの使用に関する。
本発明の血液のＩＬ２８Ｂを測定するインターフェロン治療効果予測キットの使用によって、インターフェロン治療効果を的確に予測することができる。
【００６１】
《インターフェロン治療予測用遺伝子タイピングキット》
本発明のインターフェロン治療予測用遺伝子タイピングキットは、（１）配列番号４４で表されるオリゴヌクレオチドの第５５１番の遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７のＴ又はＧを含むオリゴヌクレオチド又はその相補鎖に結合することができる、Ｃ型肝炎患者の経過予測用オリゴヌクレオチドプローブ及び／又は配列番号４４で表されるオリゴヌクレオチドの第５５１番の遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７を含む二本鎖ＤＮＡ断片を増幅することのできる、フォワードプライマー及びリバースプライマーからなるＣ型肝炎患者の経過予測用プライマーセットを含む。
なお、配列番号４４で表される塩基配列においては、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７のメジャーアレルＴ及びマイナーアレルＧは、Ｔ又はＧを意味する「Ｋ」で表されている。
【００６２】
本発明のインターフェロン治療予測用遺伝子タイピングキットは、前記インターフェロン治療予測方法に用いるものことができるものである。すなわち、本発明のインターフェロン治療予測用遺伝子タイピングキットは、例えば、ダイレクトシークエンス法、ＰＣＲ−ＲＥＬＰ法、ＴａｑＭａｎ法、ＤｉｇｉＴａｇ法、ＤｉｇｉＴａｇ２法、シングルヌクレオチドプライマー伸長法、ＳｎａＰｓｈｏｔ法、ＡＳＰ−ＰＣＲ法，ＰＣＲ−ＳＳＯ法、ＰＣＲ−ＳＳＰ法、ＰＣＲ−ＳＳＣＰ）法、ＤＮＡチップ若しくはＤＮＡマイクロアレイを用いた核酸ハイブリダイゼーション法、インベーダー法、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ／ＭＳ法、モレキュラー・ビーコン法、ＲＣＡ法、ＵＣＡＮ法、対立遺伝子特異的ＰＣＲ、ミニシーケンシング、パイロシーケンシング、ＡＲＭＳ法、対立遺伝子特異的オリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）分析、変性／温度勾配ゲル電気泳動（ＤＧＧＥ／ＴＧＧＥ）用、ＳＴＲ（Short Tandem Repeat）法、ＳＬＰ（Single Locus Probe）法、又はマイクロサテライト多型解析法のキットである。
【００６３】
本発明のインターフェロン治療効果予測用ＩＬ−２８Ｂ測定キット、及びインターフェロン治療予測用遺伝子タイピングキットを用いて、インターフェロン治療効果予測が可能である。従って、本発明は、インターフェロン治療効果予測用ＩＬ−２８Ｂ測定キット、及びインターフェロン治療予測用遺伝子タイピングキットの使用に関する。
更に、インターフェロン治療効果予測用ＩＬ−２８Ｂ測定キット、及びインターフェロン治療予測用遺伝子タイピングキットは、インターフェロンの治療効果予測マーカーとして使用することができる。
【００６４】
《Ｃ型肝炎ウイルス感染患者の治療方法》
本発明のインターフェロン治療効果予測方法の後に、インターフェロン治療を行うことができる。すなわち、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者の治療方法として、前記インターフェロン治療予測方法に加えて、インターフェロン治療工程を含むことができる。
治療に用いるインターフェロンは、特に限定されるものではなく、インターフェロン−α、ＰＥＧ化インターフェロン−α、インターフェロンβ、又はインターフェロンλを挙げることができる。更に、本発明におけるインターフェロン治療には、インターフェロンの単独投与（例えば、インターフェロン−α単独投与、インターフェロンβ単独投与、ＰＥＧ化インターフェロン−α単独投与又はインターフェロンλ単独投与）のみでなく、インターフェロンと他の薬剤の２剤投与（例えば、ＰＥＧ化インターフェロン−α及びリバビリンの２剤投与）、インターフェロンと他の２つの薬剤の３剤投与（例えば、ＰＥＧ化インターフェロン−α、リバビリン及びプロテアーゼ阻害剤の３剤投与）、インターフェロンと他の３つの薬剤の４剤投与（例えば、ＰＥＧ化インターフェロン−α、リバビリン、プロテアーゼ阻害剤、及びＲＮＡポリメラーゼ阻害剤の４剤投与）を挙げることができる。他の薬剤としては、リバビリン、プロテアーゼ阻害剤（例えば、テラプレビル（Telaprevir）、シルプレビル（Ciluprevir）、ボセプレビル（Boceprevir）、ＴＭＣ４３５３５０、Ｒ７２２７／ＩＴＭＮ−１９１、ＭＫ−７００９、ＢＩ２０１３３５、ナルラプレビル（Narlaprevir）、ＢＭＳ−６５００３２、ＰＨＸ１７６６、又はＡＣＨ−１６２５）、ＲＮＡポリメラーゼ阻害剤（例えば、バロピシタビン（Valopicitabine）、Ｒ７１２８、Ｒ１６２６、ＰＳＩ−７８５１、ＩＤＸ１８４、ＢＩＬＢ  １９４１、ＢＩ２０７１２７、ＭＫ−３２８１、フィリブビル（Filibuvir）、ＶＣＨ７５９、ＶＣＨ９１６、ＶＣＨ２２２、ＡＮＡ５９８、ＨＣＶ−７９６、ＧＳ−９１９０、ＧＳ−９１９０、又はＡＢＴ−３３３）、ＮＳ５Ａ阻害剤（例えば、ＢＭＳ−７９００５２）、Ｄｅｂｉｏ０２５、ＮＩＭ８１１、ＳＣＹ−６３５、ニタゾキサニド（Nitazoxanide）、セルゴシビル（Celgosivir）又はそれらの２つ以上の組み合わせの薬剤を挙げることができる。
【００６５】
インターフェロン治療のプロトコールは、特に限定されるものではないが、例えばペグインターフェロン及びリバビリン併用療法として、以下の投与プロトコールを挙げることができる。Ｐｅｇ−ＩＦＮ−α２ａ（１８０μｇ）又はＰｅｇ−ＩＦＮ−α２ｂ（体重換算量）を週１回、皮下注射により投与、及びリバビリン（体重換算量）の１日２回の内服を４８週行う。ＨＣＶ  ＲＮＡの検出を行い、ＨＣＶ  ＲＮＡが検出感度以下になるのが遅い場合（投与開始より１２週間以降）は、全投与期間を７２週間に延長することもある。
【実施例】
【００６６】
以下、実施例によって本発明を具体的に説明するが、これらは本発明の範囲を限定するものではない。
【００６７】
《実施例１》
本実施例では、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者１５０名の血清中のＩＬ−２８Ｂ濃度の測定を行った。
モノクローナル抗体ＴＡ２６５０を終濃度が２μｇ／ｍＬになるように１５０ｍＭ  ＮａＣｌを含む１０ｍＭＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．４：以下、ＨＢＳ緩衝液と称する）で希釈し、９６ウェルマイクロプレート（ヌンク社製）１ウェルにつき１００μＬずつ分注した。４℃で一晩静置後、ＨＢＳ緩衝液４００μＬを用いて２回洗浄し、０．１％カゼイン−Ｎａを含むＨＢＳ緩衝液（以下、ブロッキング液と称する）、４００μＬを添加し、更に室温で３０分静置した。
ブロッキング液除去後、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＨＢＳ緩衝液（以下、洗浄液と称する）４００μＬを用いて２回洗浄した。０．１％カゼイン−Ｎａ、１％マウス血清、１％ＢＳＡ、及び０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含むＨＢＳ緩衝液（以下、希釈バッファーと称する）５０μＬに、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者血清を５０μＬずつウェルに加え、室温で１時間、攪拌しながら反応させた。洗浄液４００μＬで３回洗浄し、更にアルカリフォスファターゼ（ＡＰ）標識したモノクローナル抗体ＴＡ２６６４Ｆａｂ’フラグメントを、希釈バッファーで３０ｎｇ／ｍＬに希釈し、１００μＬずつ、各ウェルに添加し、室温で１時間攪拌しながら反応させた。反応後、前記洗浄液４００μＬで５回洗浄し、基質（CDP-star with Sappire II）溶液５０μＬを加え、室温、暗所で、２０分間反応させた後、発光をSpectraMaxプレートリーダーで測定した。
スタンダードとして、リコンビナントＩＬ−２８Ｂを使用して、標準曲線を作成し、その標準曲線から血清中のＩＬ−２８Ｂの濃度を計算した。
【００６８】
《実施例２》
本実施例では、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者１５０名について、ｒｓ８０９９９１７のＳＮＰタイピングを行った。
ｒｓ８０９９９１７のＳＮＰタイピングは、インベーダー法によって行った。フォワードプライマーＩｎｖａｄｅｒＦ：５’−ＴＣＡＴＣＣＣＴＣＡＴＣＣＣＡＣＴＴＣＴＧＧＡＡＣＡ−３’（配列番号４８）、及びＩｎｖａｄｅｒＲ：５’−ＣＧＧＧＣＣＡＴＣＴＧＴＴＴＣＣＴＧＣＴＧ−３’（配列番号４９）を用いてＰＣＲを行った。メジャーアレル「Ｔ」を検出するＰｒｏｂｅ１：５’−ａｔｇａｃｇｔｇｇｃａｇａｃＡＡＴＴＧＣＴＣＡＣＡＧＡＡＡＧＧＡＡ−３’（配列番号４５）、又はマイナーアレル「Ｇ」を検出するＰｒｏｂｅ２：５’−ｃｇｃｇｃｃｇａｇｇＣＡＴＴＧＣＴＣＡＣＡＧＡＡＡＧＧＡ−３’（配列番号４６）を挙げることができ、インベーダープローブとして、Ｉｎｖａｄｅｒ：５’−ＧＣＴＡＣＣＡＡＡＣＴＧＴＡＴＡＣＡＧＣＡＴＧＧＴＴＣＣＡＡＴＴＴＧＧＧＴＧＡｔ−３’（配列番号４７）を用い、メーカーのプロトコールに従ってインベーダー法によりＳＮＰを解析した。
【００６９】
《実施例３》
本実施例では、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者１５０名について、ＰＥＧインターフェロン−α及びバビリンの併用投与の治療を行った。投与プロトコールは以下のとおりである。
Ｐｅｇ−ＩＦＮ−α２ａ（１８０μｇ）又はＰｅｇ−ＩＦＮ−α２ｂ（体重換算量）を週１回、皮下注射により４８週間投与した。並行して、リバビリン（体重換算量）の１日２回の内服を４８週継続した。ＨＣＶ  ＲＮＡの検出を行い、ＨＣＶ  ＲＮＡが検出感度以下になるのが遅い場合（投与開始より１２週間以降）は、全投与期間を７２週間に延長することがあった。
治療終了２４週後において、ＨＣＶ−ＲＮＡが陰性化した患者をＳＶＲ（Sustained virological response）、治療中に一旦ＨＣＶ−ＲＮＡが検出感度以下になるが、治療中又は治療終了後に採用添加する患者をＴＶＲ（Transient virological response）、及び治療中及び治療後にＨＣＶ−ＲＮＡが検出される患者をＮＶＲ（Non virological response）と判定した。
【００７０】
前記実施例１〜３の結果を図２にまとめた。治療効果判定の閾値は、１２．９ｐｇ／ｍＬとした。遺伝子型ｎｏｎ−ＴＴ（ＴＧ及びＧＧ）の患者においては、ＶＲ（ＳＶＲ及びＴＶＲ）と、ＮＶＲの患者を治療効果判定の閾値によって、２つの群に分けることが可能であった。
また、１２．９ｐｇ／ｍＬ以下のＩＬ−２８Ｂ濃度のＣ型肝炎ウイルス感染患者は、ＶＲ（ＳＶＲ及びＴＶＲ）であった。従って、ＩＬ−２８Ｂの濃度が１２．９ｐｇ／ｍＬ以下のＣ型肝炎ウイルス感染患者に、インターフェロン治療を推奨することが可能である。また、ＩＬ−２８Ｂの濃度が１２．９ｐｇ／ｍＬ以上の患者は、ＶＲ及びＮＶＲの患者が存在するが、ＩＬ−２８Ｂの濃度が１２．９ｐｇ／ｍＬ以上であり、且つ遺伝子型ｎｏｎ−ＴＴ（ＴＧ及びＧＧ）の患者は、インターフェロンの治療が有効でなないため、インターフェロン治療を推奨しない方が好ましいと考えられる。
【産業上の利用可能性】
【００７１】
本発明のインターフェロン治療効果予測方法は、Ｃ型肝炎ウイルス感染患者のインターフェロン治療効果を予測することができ、その予測は、遺伝子型による予測と比較して、正確である。従って、インターフェロンによる治療費の削減効果が期待できる。また、遺伝子多型ｒｓ８０９９９１７との組み合わせにより、インターフェロン治療の方針を的確に決定することが可能であり、検査費用の削減効果も期待できる。
【図１】
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【図２】
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【配列表】
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