(57)【要約】  本発明は、式Ｉ：  【化１】2008505070.tif 000020の新規化合物、並びにその製造方法及び製造において使用される新規中間体、この活性化合物を含有する医薬組成物、及び治療における該活性化合物の使用を提供する。
2008505070.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
遊離塩基又は医薬として許容し得る塩としての式Ｉ：
【化１】
2008505070.tif 000018
の化合物。
式中、
Ｒ、R1及びR2は水素、ハロ、ニトロ、CHO、CN、OC1-6アルキル、C(O)C1-4アルキル、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、C2-6アルキニル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、フルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ及びトリフルオロメトキシからそれぞれ独立して選択され；
R3は水素、ハロ、C0-6アルキルNR6R7、CO2R8、CONR6R7、NR6(CO)R6、O(CO)R6、(SO2)NR6R7、アリール、又はヘテロアリールから選択され、ここで該アリール及びヘテロアリールは１又はそれ以上のＡにより置換されていてもよく；
R4及びR5は水素、OH、OC1-6アルキル、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、C2-6アルキニル、C0-6アルキルC3-6シクロアルキル、CO2R8、C0-6アルキルアリール、C0-6アルキルヘテロシクロアルキル、C1-6アルキルNR6R7及びC0-6アルキルヘテロアリールからそれぞれ独立して選択され、ここで任意のC1-6アルキル、C2-6アルケニル、C2-6アルキニル、C0-6アルキルC3-6シクロアルキル、C0-6アルキルヘテロシクロアルキル、C0-6アルキルアリール又はC0-6アルキルヘテロアリールは１又はそれ以上のＡにより置換されていてもよく；又は、ここでR4及びR5は一緒になってＮ、Ｏ又はＳから選択される１又はそれ以上のヘテロ原子を含む４−、５−、６−又は７−員複素環式環を形成してもよく、ここで、該複素環式環は場合によりＡで置換されていてもよく；
R6及びR7は水素、C1-6アルキル、(CO)OR8、C2-6アルケニル、C2-6アルキニル、C0-6アルキルC3-6シクロアルキル、C0-6アルキルアリール及びC0-6アルキルヘテロアリールからそれぞれ独立して選択されるか；又は、R6及びR7は一緒になってＮ、Ｏ又はＳから選択される１又はそれ以上のヘテロ原子を含む４−、５−、６−又は７−員複素環式環を形成してもよく、この複素環式環は場合によりＡで置換されていてもよく；
R8は水素、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、C2-6アルキニル、C0-6アルキルC3-6シクロアルキル、C0-6アルキルアリール及びC0-6アルキルヘテロアリールから選択され；
Ａはハロ、ニトロ、CHO、CN、OR6、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、C2-6アルキニル、C0-6アルキルC3-6シクロアルキル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、フルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、C0-6アルキルNR6R7、OC1-6アルキルNR6R7、C1-6(O)OR8、C1-6アルキルOR6、CONR6R7、NR6(CO)R6、O(CO)R6、COR6、SR6、(SO2)NR6R7、(SO)NR6R7、SO3R6、SO2R6又はSOR6である。
【請求項２】
Ｒ及びR1が水素である請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
R2が水素、ハロ、ニトロ、C(O)C1-4アルキル及びC1-6アルキルから選択される請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項４】
R3が水素、ハロ及びアリールから選択され、ここでアリールは１又はそれ以上のＡにより置換されていてもよい、請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項５】
R4が水素、OH、C1-6アルキル、C0-6アルキルアリール及びC0-6アルキルヘテロアリールから選択され、ここで任意のC1-6アルキル、C0-6アルキルアリール又はC0-6アルキルヘテロアリールは１又はそれ以上のＡにより置換されていてもよい、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項６】
R5が水素である請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
R4及びR5が一緒になってＮ、Ｏ又はＳから選択される１又はそれ以上のヘテロ原子を含む４−、５−、６−又は７−員複素環式環を形成しており、ここで、該複素環式環は場合によりＡで置換されていてもよい、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
Ａがハロ、OR6、C1-6アルキル及びC1-6アルキルOR6から選択され；R6は水素及び(CO)OR8から選択され；そしてR8はC1-6アルキルである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ及びR1が水素であり；R2は水素、ハロ、ニトロ、C(O)C1-4アルキル及びC1-6アルキルから選択され；R3は水素、ハロ及びアリールから選択され、ここで、該アリールは１又はそれ以上のＡにより置換されていてもよく；R4は水素、OH、C1-6アルキル、C0-6アルキルアリール及びC0-6アルキルヘテロアリールから選択され、ここで、任意のC1-6アルキル、C0-6アルキルアリール又はC0-6アルキルヘテロアリールは１又はそれ以上のＡにより置換されていてもよく；R5は水素であり；そしてＡはハロ、OR6、C1-6アルキル及びC1-6アルキルOR6から選択され；R6は水素及び(CO)OR8から選択され；そしてR8はC1-6アルキルである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
R4及びR5は一緒になって、Ｎ、Ｏ又はＳから選択される１又はそれ以上のヘテロ原子を含む４−、５−、６−又は７−員複素環式環を形成し、ここで、該複素環式環は場合によりＡで置換されていてもよく、該ＡはC1-6アルキルOR6であり；そしてR6は水素である、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
以下：
6−ニトロ−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール；
6−メチル−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール；
6−フルオロ−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール；
6−クロロ−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール；
1−(2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール−6−イル)−エタノン；
7−(4−フルオロ−フェニル)−ベンゾチアゾール；
7−(4−フルオロ−フェニル)−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール；
2−ブロモ−7−(4−フルオロ−フェニル)−ベンゾチアゾール；
4−(6−ニトロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸；
4−(6−メチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸；
4−(6−フルオロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸；
4−(6−クロロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸；
4−(6−アセチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸；
4−[7−(4−フルオロ−フェニル)−ベンゾチアゾール−2−イル]−チオフェン−2−スルホン酸；
4−(ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド；
4−(6−ニトロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド；
4−(6−メチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド；
4−(6−フルオロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド；
4−(6−クロロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド；
4−[7−(4−フルオロ−フェニル)−ベンゾチアゾール−2−イル]−チオフェン−2−スルホニルクロリド；
4−(6−アセチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド；
1−(2−アミノ−ベンゾチアゾール−6−イル)−エタノン；
2−ブロモ−6−ニトロベンゾチアゾール；
2−ブロモ−6−メチルベンゾチアゾール；
2−ブロモ−6−フルオロベンゾチアゾール；
2−ブロモ−6−クロロベンゾチアゾール；
1−(2−ブロモ−ベンゾチアゾール−6−イル)−エタノン；
2−ブロモ−7−クロロ−6−フルオロ−ベンゾチアゾール；
7−クロロ−6−フルオロ−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール；又は
7−ブロモ−ベンゾチアゾール
の化合物。
【請求項１２】
以下：
4−(ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド；
4−(6−ニトロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド；
4−(6−メチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド；
4−(6−フルオロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド；
4−(6−クロロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド；
4−(6−アセチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド；
4−[7−(4−フルオロ−フェニル)−ベンゾチアゾール−2−イル]−チオフェン−2−スルホン酸アミド；
4−(7−クロロ−6−フルオロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド；
4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホン酸(2−フルオロ−エチル)−アミド；
4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホン酸チアゾール−2−イルアミド；
4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホン酸(4,5−ジメチル−チアゾール−2−イル)−アミド；
4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホン酸(3−ヒドロキシ−ピリジン−2−イル)−アミド；
4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホン酸(6−モルホリン−4−イル−ピリジン−3−イル)−アミド；
4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホン酸(ピリジン−2−イルメチル)−アミド；
[1−(4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホニル)−ピロリジン−2−イル]−メタノール；
4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホン酸ヒドロキシアミド；
[2−(4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホニルアミノ)−チアゾール−4−イル]−酢酸エチルエステル；又は
4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホン酸(4−メチル−ピリジン−2−イル)−アミド
の化合物。
【請求項１３】
活性成分として治療有効量の請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物を医薬として許容し得る担体又は希釈剤と共に含有する医薬製剤。
【請求項１４】
サイクリン依存性キナーゼ５が関与する身体状態の予防及び／又は治療において使用するための請求項１３に記載の医薬製剤。
【請求項１５】
治療に使用するための請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１６】
サイクリン依存性キナーゼ５が関与する身体状態の予防及び／又は治療のための医薬の製造における請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項１７】
痴呆、アルツハイマー病、パーキンソン病、前頭側頭型認知症パーキンソン型、Guamのパーキンソン痴呆症候群、HIV痴呆、神経原線維のもつれの病状と関係がある疾患、進行性核上麻痺及びボクサー痴呆の予防及び／又は治療のための医薬の製造における請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項１８】
疾患がアルツハイマー病である請求項１７に記載の化合物の使用。
【請求項１９】
筋萎縮性側索硬化症、大脳皮質基底核変性症、ダウン症候群、ハンチントン病、脳炎後パーキンソン症候群、進行性核上麻痺、ピック病、ニーマン−ピック病、卒中、頭部外傷及び他の慢性神経変性疾患の予防及び／又は治療のための医薬の製造における請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項２０】
卒中又は慢性薬物乱用の予防及び／又は治療のための医薬の製造における請求項１〜１２のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項２１】
サイクリン依存性キナーゼ５が関与する身体状態の予防及び／又は治療の必要なヒトを含む哺乳動物に、治療有効量の請求項１〜１２のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物を投与することからなる、該身体状態を予防及び／又は治療する方法。
【請求項２２】
痴呆、アルツハイマー病、パーキンソン病、前頭側頭型認知症パーキンソン型、Guamのパーキンソン痴呆症候群、HIV痴呆、神経原線維のもつれの病状と関係がある疾患、進行性核上麻痺及びボクサー痴呆の予防及び／又は治療の必要なヒトを含む哺乳動物に、治療有効量の請求項１〜１２のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物を投与することからなる、該疾患を予防及び／又は治療する方法。
【請求項２３】
疾患がアルツハイマー病である請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
筋萎縮性側索硬化症、大脳皮質基底核変性症、ダウン症候群、ハンチントン病、脳炎後パーキンソン症候群、進行性核上麻痺、ピック病、ニーマン−ピック病、卒中、頭部外傷及び他の慢性神経変性疾患の予防及び／又は治療の必要なヒトを含む哺乳動物に、治療有効量の請求項１〜１２のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物を投与することからなる、該疾患を予防及び／又は治療する方法。
【請求項２５】
卒中又は慢性薬物乱用の予防及び／又は治療の必要なヒトを含む哺乳動物に、治療有効量の請求項１〜１２のいずれか１項に記載の式Iの化合物を投与することからなる、卒中又は慢性薬物乱用を予防及び／又は治療する方法。
【請求項２６】
式XIIIの化合物を適切な溶媒の存在下で適切なアミンを用いてアミド化し、式Ｉの化合物を得る：
【化２】
2008505070.tif 000019
（式中、Ｒ、R1、R2、R3、R4、R5は特記しない限り、請求項１の式Ｉにおいて定義されるとおりである）
ことからなる、請求項１に記載の式Ｉの化合物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、遊離塩基又は医薬として許容し得る塩としての式Ｉの新規化合物、該化合物を含有する医薬製剤、及び治療における該化合物の使用に関する。本発明は、さらに、式Ｉの化合物の製造方法及びその際に製造される新規中間体に関する。
【０００２】
本発明の目的は、治療上の使用のための式Ｉの化合物、特にヒトを含む哺乳動物において、サイクリン依存性キナーゼ５ (cdk5)が関与する身体状態の予防及び／又は治療に有用な化合物を提供することである。
【０００３】
本発明の目的はまた、経口投与後に治療効果を有する化合物を提供することである。
【背景技術】
【０００４】
サイクリン依存性キナーゼ５ (cdk5)は、プロリンを標的としたセリン／スレオニンキナーゼであり、これはp35及びp39と呼ばれる１種又は２種のその非サイクリン・パートナーにより活性化される。活性化因子の制限された局在化により、cdk5酵素活性は大部分が有糸分裂後神経細胞前駆体及び成熟神経細胞に制限される。該酵素は、CNSにおいて比較的広い基質特異性を有し、そして発達中の神経系において顕著な機能を有する。これは、タウを含むアクチン−及び微小管−関連タンパク質の幾つかとの相互作用、及びニューロフィラメント・ネットワークを介して、細胞骨格及び膜のダイナミクスの調節と関係がある(Smith & Tsai 2002, Maccioniら, 2001)。
【０００５】
アルツハイマー病(AD)痴呆及びタウパシー
ADは、認識衰退、コリン作動障害及び神経細胞死、神経原線維もつれ（neurofibrillary tangles）及びアミロイド−β沈着からなる老人斑を特徴とする。ADにおけるこれらの事象の順序は不明確であるが、関連があると考えられている。特定のキナーゼ、例えばcdk5は、AD脳で高リン酸化される部位において神経細胞の微小管結合タンパク質タウ(τ)を選択的にリン酸化することができる。高リン酸化されたタンパク質τは、微小管への親和性が低く、そして対になったらせん状フィラメント(PHF)として蓄積するが、これはAD脳における神経原線維もつれ及び神経網糸を構成する主な成分である。これが、微小管の脱重合を招き、軸策の枯死及び神経症性ジストロフィーが引き起こされる。神経原線維もつれは、AD、筋萎縮性側索硬化症、Guamのパーキンソン痴呆、大脳皮質基底核変性症、ボクサー痴呆及び頭部外傷、ダウン症候群、脳炎後パーキンソン症候群、進行性核上麻痺、ニーマン−ピック病及びピック病のような疾患で常に見られる。
【０００６】
Cdk5は、２種の明確なタウタンパク質キナーゼ(TPK)のうちの１つであり、これは本来はラット又はウシの脳抽出物中の微小管タンパク質画分において、タウをリン酸化してPHF状態にすることができるものとして同定された(Imahoriら.，1998)。これは、後に精製され、そしてTPKIIと呼ばれるようになり、GSK3βはTPKIと呼ばれるようになった (Omoriら 1991, Imahoriら.，1998)。これらの２種のキナーゼは、部分的に重なった領域でヒトAD物質中のPHFタウをリン酸化する(Hangerら，1998, Morishima−Kawashimaら 1995)。更に、cdk5免疫反応性の明らかな増加は、ADの新皮質錐体ニューロン及び大脳ニューロン(cerebrellar neurons)における高リン酸化タウの増加とオーバーラップすることが分かった。そして、免疫染色の増加は、特に、もつれる前のニューロン（pretangle neurons）において顕著であり、これは比較的早い段階で酵素が関与していることを示している(Peiら. 1998)。
【０００７】
更に、AD患者において、酵素活性の増加と同時に、活性化因子p25の大幅な増加が検出されている(Patrickら. 1999)。このことは、カルシウム依存性プロテアーゼであるカルパインの存在と関係付けられており、該カルパインは活性化因子p35のp25へのプロセシングを担うと考えられている (Leeら，2002)。p25は、安定性及び細胞内局在性の点で、p35とは異なる。p25の半減期は、p35の約５〜10倍であり、そしてこのゆっくりとした代謝回転速度が、AD脳におけるその蓄積に寄与することになりうる。また、開裂により細胞膜へのミリストイル化結合が失われ、これにより細胞質ゾル中のタウをリン酸化するのに良好な位置に酵素を移す可能性がある(Patrickら，1999)。
【０００８】
ADの発症におけるcdk5／p25の役割を指摘する更なる証拠は、誘導型p25トランスジェニックマウスに関する最近の報告である。これらの動物は、徐々に進行して神経原線維の病変に至る前脳萎縮及び高リン酸化凝集タウと共に、皮質及び海馬におけるニューロンの欠損を示す(Cruz, J.C.ら (2003) Neuron 40 471-483)。これらの発見は、異常なcdk5活性が、タウ異常調節又は突然変異の非存在下のインビボで、神経変性及びタウ線維性病変をもたらし得ることを強く示唆する。
【０００９】
筋萎縮性側索硬化症−ALS
筋萎縮性側索硬化症(ALS)は、麻痺及び３〜５年以内に死に至る運動ニューロンの選択的変性により特徴付けられる成人発症の神経障害である。
SOD1(スーパーオキシド・ジスムターゼ１)の遺伝子における特定の突然変異が家族性症例のALSの一因として同定されており、そしてこれらの突然変異の１つを発現する遺伝子導入マウスが該疾患のメカニズムを研究するために使用されている。p25／p35の比の増加に起因するcdk5の誤った局在性及び過反応が、活性cdk5によるニューロフィラメントの過剰リン酸化を引き起こすこれらの動物において観察された(Nguyen, M.D.ら (2001) Neuron 30, 135-147)。ALS患者においてリン酸化NF−Hの病的集積がcdk5の染色と部分的にオーバーラップするため、このことは、ALSにおける運動ニューロンの死と関係があるかもしれないことが示唆された(Bajai, N.P.ら 1999 Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatr. 23, 833-850)。
【００１０】
脳卒中(Stroke)
或る種のニューロン、特に海馬のCA1錐体ニューロンは、脳卒中のような虚血性傷害に対して損傷を受け易い。ラットにおいて、虚血性傷害がCA1ニューロン中のp25の集積を引き起こし、そしてこれはcdk5の長期化した活性化と関係があることが示された。このことは次いで、Ser1232における特異的リン酸化によってNMDA受容体活性の増加を引き起こし、大量のCa流入及び神経細胞死をもたらす。この影響は、cdk5の阻害により軽減することができる(Wanf, J.ら 2003 Nature Neuroscience 6 (10) 1-9)。cdk5の阻害は、したがって、心不全に起因する広範囲の虚血を治療するための治療方針を構築し得る。
【００１１】
パーキンソン病
パーキンソン病(PD)は、振せん及び筋肉の硬直を含む、日常生活に支障を来たすような運動異常により特徴付けられる神経変性障害である。ドーパミン作動性神経伝達の機能障害は、PDの病理メカニズムの基礎をなすと考えられている。
cdk5は、２段階のドーパミン・シグナリング・カスケードで作用することが示されており、そして更に、cdk5阻害剤は、ドーパミンの放出及びドーパミンのシナプス後作用の両方を増加させることができる(Chergui, K.ら 2004 PNAS 101 2191-2196)。更に、cdk5阻害は黒質ニューロンの変性を防ぎ、そしてPDの1−メチル−4−フェニル−1,2,4,6−テトラヒドロピリジン(MPTP)マウスモデルの運動行動を改善する(Smith, P.D.ら 2003 PNAS 100 13650-13655)。これらの発見は、cdk5阻害剤が抗パーキンソン病症候群作用を有し得ることを、強く示唆している。
【００１２】
乱用(abuse)
慢性コカイン乱用は、転写因子ΔfosB、及びその下流標的であるcdk5の発現の増加をもたらすが、これは、慢性コカイン暴露を伴う安定な代償性の適応(stable compensatory adaptations)であるように思われる。この上方調節は、その後の薬剤暴露への応答を弱める恒常性維持機能として働き得、そしてcdk5の阻害はインビボでのコカインの作用を増強することが示されている(Bibb, J.A.ら 2001 Nature 410 376-380)。cdk5は、ドーパミン受容体シグナリングの調節に関与するDARPP−32 (ドーパミン及び環状AMP−調節性リンタンパク質、相対分子質量 32,000)の特異的リン酸化により作用し、そしてコカインの乱用に関係する報酬に関連した行動に潜在的に関係する。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明の目的は、サイクリン依存性キナーゼ５に対する阻害作用を有し、且つ良好な生物学的利用能を有する化合物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
したがって、本発明は、遊離塩基又は医薬として許容し得る塩としての次の式Ｉ：
【化１】
2008505070.tif 000003
の化合物を提供するもので、
式中：
Ｒ、R1及びR2は水素、ハロ、ニトロ、CHO、CN、OC1-6アルキル、C(O)C1-4アルキル、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、C2-6アルキニル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、フルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ及びトリフルオロメトキシからそれぞれ独立して選択され；
R3は水素、ハロ、C0-6アルキルNR6R7、CO2R8、CONR6R7、NR6(CO)R6、O(CO)R6、(SO2)NR6R7、アリール、又はヘテロアリールから選択され、ここで該アリール及びヘテロアリールは１又はそれ以上のＡにより置換されていてもよく；
R4及びR5は水素、OH、OC1-6アルキル、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、C2-6アルキニル、C0-6アルキルC3-6シクロアルキル、CO2R8、C0-6アルキルアリール、C0-6アルキルヘテロシクロアルキル、C1-6アルキルNR6R7及びC0-6アルキルヘテロアリールからそれぞれ独立して選択され、ここで任意のC1-6アルキル、C2-6アルケニル、C2-6アルキニル、C0-6アルキルC3-6シクロアルキル、C0-6アルキルヘテロシクロアルキル、C0-6アルキルアリール又はC0-6アルキルヘテロアリールは１又はそれ以上のＡにより置換されていてもよく；又は、ここでR4及びR5は一緒になってＮ、Ｏ又はＳから選択される１又はそれ以上のヘテロ原子を含む４−、５−、６−又は７−員複素環式環を形成してもよく、ここで、該複素環式環は場合によりＡで置換されていてもよく；
R6及びR7は水素、C1-6アルキル、(CO)OR8、C2-6アルケニル、C2-6アルキニル、C0-6アルキルC3-6シクロアルキル、C0-6アルキルアリール及びC0-6アルキルヘテロアリールからそれぞれ独立して選択されるか；又は、R6及びR7は一緒になってＮ、Ｏ又はＳから選択される１又はそれ以上のヘテロ原子を含む４−、５−、６−又は７−員複素環式環を形成してもよく、この複素環式環は場合によりＡで置換されていてもよく；
R8は水素、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、C2-6アルキニル、C0-6アルキルC3-6シクロアルキル、C0-6アルキルアリール及びC0-6アルキルヘテロアリールから選択され；
Ａはハロ、ニトロ、CHO、CN、OR6、C1-6アルキル、C2-6アルケニル、C2-6アルキニル、C0-6アルキルC3-6シクロアルキル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、フルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、C0-6アルキルNR6R7、OC1-6アルキルNR6R7、C1-6(O)OR8、C1-6アルキルOR6、CONR6R7、NR6(CO)R6、O(CO)R6、COR6、SR6、(SO2)NR6R7、(SO)NR6R7、SO3R6、SO2R6又はSOR6である。
【００１５】
本発明の別の態様において、Ｒ及びR1が水素である式Ｉの化合物が提供される。
【００１６】
本発明の別の態様において、R2が水素、ハロ、ニトロ、C(O)C1-4アルキル及びC1-6アルキルから選択される式Ｉの化合物が提供される。
【００１７】
本発明の更に別の態様において、R3が水素、ハロ及びアリールから選択され、ここで該アリールは１又はそれ以上のＡにより置換されていてもよい式Ｉの化合物が提供される。
【００１８】
本発明の更に別の態様において、R4が水素、OH、C1-6アルキル、C0-6アルキルアリール及びC0-6アルキルヘテロアリールから選択され、ここで任意のC1-6アルキル、C0-6アルキルアリール又はC0-6アルキルヘテロアリールは１又はそれ以上のＡにより置換されていてもよい式Ｉの化合物が提供される。
【００１９】
本発明の更に別の態様において、R5が水素である式Ｉの化合物が提供される。
【００２０】
本発明の更に別の態様において、R4及びR5が一緒になってＮ、Ｏ又はＳから選択される１又はそれ以上のヘテロ原子を含む４−、５−、６−又は７−員複素環式環を形成しており、ここで、該複素環式環は場合によりＡで置換されていてもよい式Ｉの化合物が提供される。
【００２１】
本発明の更に別の態様において、Ａがハロ、OR6、C1-6アルキル及びC1-6アルキルOR6から選択され；R6は水素及び(CO)OR8から選択され；そしてR8はC1-6アルキルである式Ｉの化合物が提供される。
【００２２】
本発明の更に別の態様において、Ｒ及びR1が水素であり；R2は水素、ハロ、ニトロ、C(O)C1-4アルキル及びC1-6アルキルから選択され；R3は水素、ハロ及びアリールから選択され、ここで、該アリールは１又はそれ以上のＡにより置換されていてもよく；R4は水素、OH、C1-6アルキル、C0-6アルキルアリール及びC0-6アルキルヘテロアリールから選択され、ここで、任意のC1-6アルキル、C0-6アルキルアリール又はC0-6アルキルヘテロアリールは１又はそれ以上のＡにより置換されていてもよく；R5は水素であり；そしてＡはハロ、OR6、C1-6アルキル及びC1-6アルキルOR6から選択され；R6は水素及び(CO)OR8から選択され；そしてR8はC1-6アルキルである、式Ｉの化合物が提供される。
【００２３】
本発明の更に別の態様において、Ｒ及びR1が水素であり；R2は水素、ハロ、ニトロ、C(O)C1-4アルキル及びC1-6アルキルから選択され；R3は水素、ハロ及びアリールから選択され、ここで、該アリールは１又はそれ以上のＡにより置換されていてもよく；R4及びR5は一緒になって、Ｎ、Ｏ又はＳから選択される１又はそれ以上のヘテロ原子を含む４−、５−、６−又は７−員複素環式環を形成し、ここで、該複素環式環は場合によりＡで置換されていてもよく、該ＡはC1-6アルキルOR6であり；そしてR6は水素である、式Ｉの化合物が提供される。
【００２４】
本発明の更に別の態様は、次から選択される化合物に関する：
6−ニトロ−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール；
6−メチル−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール；
6−フルオロ−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール；
6−クロロ−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール；
1−(2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール−6−イル)−エタノン；
7−(4−フルオロ−フェニル)−ベンゾチアゾール；
7−(4−フルオロ−フェニル)−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール；
2−ブロモ−7−(4−フルオロ−フェニル)−ベンゾチアゾール；
4−(6−ニトロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸；
4−(6−メチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸；
4−(6−フルオロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸；
4−(6−クロロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸；
4−(6−アセチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸；
4−[7−(4−フルオロ−フェニル)−ベンゾチアゾール−2−イル]−チオフェン−2−スルホン酸；
4−(ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド；
4−(6−ニトロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド；
4−(6−メチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド；
4−(6−フルオロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド；
4−(6−クロロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド；
4−[7−(4−フルオロ−フェニル)−ベンゾチアゾール−2−イル]−チオフェン−2−スルホニルクロリド；
4−(6−アセチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド；
1−(2−アミノ−ベンゾチアゾール−6−イル)−エタノン；
2−ブロモ−6−ニトロベンゾチアゾール；
2−ブロモ−6−メチルベンゾチアゾール；
2−ブロモ−6−フルオロベンゾチアゾール；
2−ブロモ−6−クロロベンゾチアゾール；
1−(2−ブロモ−ベンゾチアゾール−6−イル)−エタノン；
2−ブロモ−7−クロロ−6−フルオロ−ベンゾチアゾール；
7−クロロ−6−フルオロ−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール；及び
7−ブロモ−ベンゾチアゾール。
【００２５】
本発明の更に別の態様は、次から選択される化合物に関する：
4−(ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド；
4−(6−ニトロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド；
4−(6−メチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド；
4−(6−フルオロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド；
4−(6−クロロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド；
4−(6−アセチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド；
4−[7−(4−フルオロ−フェニル)−ベンゾチアゾール−2−イル]−チオフェン−2−スルホン酸アミド；
4−(7−クロロ−6−フルオロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド；
4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホン酸 (2−フルオロ−エチル)−アミド；
4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホン酸チアゾール−2−イルアミド；
4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホン酸 (4,5−ジメチル−チアゾール−2−イル)−アミド；
4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホン酸 (3−ヒドロキシ−ピリジン−2−イル)−アミド；
4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホン酸 (6−モルホリン−4−イル−ピリジン−3−イル)−アミド；
4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホン酸 (ピリジン−2−イルメチル)−アミド；
[1−(4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホニル)−ピロリジン−2−イル]−メタノール；
4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホン酸 ヒドロキシアミド；
[2−(4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホニルアミノ)−チアゾール−4−イル]−酢酸エチルエステル；及び
4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホン酸 (4−メチル−ピリジン−2−イル)−アミド。
【００２６】
本発明を説明するために本明細書及び特許請求の範囲において使用される種々の用語の定義を、以下に挙げる。
【００２７】
本明細書において、用語「アルキル」は、直鎖状及び分枝鎖状の両方のアルキル基を包含する。用語C1−6アルキルは、１〜６個の炭素原子を有し、そしてメチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｉ−ペンチル、ｔ−ペンチル、neo−ペンチル、ｎ−ヘキシル又はｉ−ヘキシルであってよい。用語C1-3アルキルは、１〜３個の炭素原子を有し、そしてメチル、エチル、ｎ−プロピル又はｉ−プロピルであってよい。用語C1-2アルキルは、１〜２個の炭素原子を有し、そしてメチル又はエチルでありうる。
【００２８】
同様の変換が他の基にも適用され、例えば「C0-6アルキルアリール」は１−フェニルエチル及び２−フェニルエチルを包含する。
【００２９】
下付き文字が整数０(ゼロ)である場合、その下付き文字が指す基は存在していないことを示しており、すなわち基と基の間は直接結合である。
【００３０】
用語「シクロアルキル」は、場合により置換された、飽和環式炭化水素環系を意味する。用語「C3-6シクロアルキル」は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル又はシクロヘキシルでありうる。
【００３１】
用語「アルケニル」は、直鎖状又は分枝鎖状のアルケニル基を意味する。用語C2-6アルケニルは、２〜６個の炭素原子及び１個の二重結合を有し、そしてビニル、アリル、プロペニル、ｉ−プロペニル、ブテニル、ｉ−ブテニル、クロチル、ペンテニル、ｉ−ペンテニル又はヘキセニルであってよい。用語C2-3アルケニルは２〜３個の炭素原子及び１個又は２個の二重結合を有し、そしてビニル、アリル、プロペニル又はｉ−プロペニルでありうる。
【００３２】
用語「アルキニル」は、直鎖状又は分枝鎖状のアルキニル基を意味する。用語C2-6アルキニルは２〜６個の炭素原子及び１個の三重結合を有し、そしてエチニル、プロパルギル、ブチニル、ｉ−ブチニル、ペンチニル、ｉ−ペンチニル又はヘキシニルであってよい。用語C2-3アルキニルは２〜３個の炭素原子及び１個の三重結合を有し、そしてエチニル又はプロパルギルでありうる。
【００３３】
用語「ハロ」は、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードを意味する。
【００３４】
用語「アリール」は、少なくとも１個の不飽和芳香環を含む、場合により置換された単環式又は二環式炭化水素環系を意味する。「アリール」はC5-7シクロアルキル環と縮合して、二環式炭化水素環系を形成しうる。例としては、フェニル、ナフチル、インダニル又はテトラリニルが挙げられる。
【００３５】
本明細書で使用される用語「ヘテロアリール」は、５〜14個の炭素原子を有する１又はそれ以上の芳香環であって、単環及びイミダゾピリジンのような多環式環の両方を包含し、ここで、１個又は複数の環炭素原子が酸素、窒素又は硫黄で置き換えられているものとして定義され、例えばフリル、イミダゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジル、ピロリル、チアゾリル又はチエニルである。
【００３６】
用語「ヘテロシクロアルキル」及び「Ｎ、Ｏ又はＳから選択される１又はそれ以上のヘテロ原子を含む４−、５−、６−又は７−員複素環式環」は、場合によりカルボニル官能基を含み、そして好ましくは５、６又は７員複素環式環であり、そしてイミダゾリジニル、イミダゾリニル、モルホリニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリドニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピロリジニル、ピロリニル、１−メチル−1,4−ジアゼパン、テトラヒドロピラニル、チオモルホリニルでありうる。該複素環式環がＳから選択されるヘテロ原子を含む場合、これは場合によりSO及びSO2を包含する。
【００３７】
本発明は、上述の式Ｉの化合物の使用、及びその塩に関する。医薬組成物において使用するための塩は医薬として許容し得る塩であるが、他の塩も式Ｉの化合物の製造に有用である。
【００３８】
有機及び無機酸の両方を、本発明の化合物の医薬として許容し得る非毒性塩を形成するために用いることができる。医薬として許容し得る塩としては、塩酸塩及びフマル酸塩が挙げられるがこれらに限定されない。これらの塩は当業者に既知の方法により容易に製造される。
【００３９】
或る種の式Ｉの化合物は、キラル中心及び／又は幾何異性中心(Ｅ−及びＺ−異性体)を有することができ、そして、本発明はこのような、場合により存在するジアステレオ異性体及び幾何異性体の全てを包含するものと理解されるべきである。
【００４０】
医薬組成物
本発明の１つの態様に従えば、サイクリン依存性キナーゼ５が関与する身体状態の予防及び／又は治療のための、遊離塩基又は医薬として許容し得る塩としての式Ｉの化合物を含有する医薬組成物が提供される。
【００４１】
該組成物は、例えば錠剤のような経口投与に適切な形態、無菌液剤又は懸濁剤のような注射剤に適切な形態であってよい。一般に、上記組成物は、医薬担体又は希釈剤を用いて慣用の方法で製造することができる。ヒトを含む哺乳動物の治療において適切な式Ｉの化合物の日用量は、経口投与で約0.01〜250mg／kg体重、そして非経口投与で約0.001〜250mg／kg体重である。活性成分の典型的な日用量は広い範囲で変化し、そして例えば関連する適応症、投与経路、患者の年齢、体重及び性別のような種々の因子に依存し、そして医師が決定することができる。
【００４２】
式Ｉの化合物又はその医薬として許容し得る塩はそのままで使用することができるが、通常は、式Ｉの化合物／塩(活性成分)が医薬として許容し得る希釈剤又は担体と共存している医薬組成物の形態で投与される。投与様式に応じて、医薬組成物は0.05〜99％w(質量百分率)、例えば0.10〜50％wの活性成分を含有してよく、全ての質量百分率は全組成物質量に基づく。
【００４３】
希釈剤又は担体としては、水、水性ポリエチレングリコール、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖(例えばラクトース)、ペクチン、デキストリン、デンプン、トラガカント、微結晶性セルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース・ナトリウム又はカカオ脂が挙げられる。
【００４４】
本発明の組成物は、錠剤又は注射剤形態であることができる。錠剤は更に崩壊剤を含有し得、及び／又はコーティングされていてもよい(例えば腸溶コーティング又はヒドロキシプロピルメチルセルロースのようなコーティング剤によるコーティング)。
【００４５】
本発明は更に本発明の医薬組成物の製造方法を提供し、該方法は、上述の式Ｉの化合物又はその医薬として許容し得る塩を、医薬として許容し得る希釈剤又は担体と混合することからなる。
【００４６】
本発明の医薬組成物の例は、上述の本発明の化合物又はその医薬として許容し得る塩及び滅菌水、及び必要に応じて最終の組成物のpHを約５にするための水酸化ナトリウム又は塩酸、及び場合により溶解を補助するための界面活性剤を含有する注射剤である。
【００４７】
水中に溶解した式Ｉの化合物又はその塩を含む液剤
液剤              mg／mL      
活性化合物          5.0％ w／v
純水                100％まで
【００４８】
医薬用途
驚くべきことに、遊離塩基又は医薬として許容し得る塩としての本発明において定義される化合物は、サイクリン依存性キナーゼ５の阻害に好適であることが見出された。したがって、本発明の化合物は、サイクリン依存性キナーゼ５活性が関与する身体状態の予防及び／又は治療に有用であると考えられ、すなわち、該化合物は、このような予防及び／又は治療の必要なヒトを含む哺乳動物において、サイクリン依存性キナーゼ５の阻害効果を産み出すために使用しうる。
【００４９】
サイクリン依存性キナーゼ５は、中枢及び末梢神経系並びにその他の組織で高度に発現している。したがって、本発明の化合物は、中枢及び末梢神経系におけるサイクリン依存性キナーゼ５が関与する身体状態の予防及び／又は治療に非常に適していると考えられる。殊に、本発明の化合物は、特に痴呆、アルツハイマー病、パーキンソン病、前頭側頭型認知症パーキンソン型、Guamのパーキンソン痴呆、HIV痴呆、神経原線維もつれと関係がある疾患、進行性核上麻痺及びボクサー痴呆が関与する身体状態の予防及び／又は治療に好適であると考えられる。
【００５０】
他の身体状態は、筋萎縮性側索硬化症、大脳皮質基底核変性症、ダウン症候群、ハンチントン病、脳炎後パーキンソン症候群、進行性核上麻痺、ピック病、ニーマン−ピック病、卒中、頭部外傷及び他の慢性神経変性疾患からなる群から選択される。
【００５１】
更なる身体状態は、卒中及び慢性薬物乱用の群から選択される。
【００５２】
本発明の一つの実施態様は、痴呆及びアルツハイマー病の予防及び／又は治療に関する。
【００５３】
特定の疾患の治療的又は予防的処置に必要な容量は、治療される対象、投与経路及び治療する病気の重篤度に依存して、必然的に変化する。
【００５４】
本発明はまた、サイクリン依存性キナーゼ５が関与する身体状態の予防及び／又は治療のための医薬の製造における、上述の式Ｉの化合物の使用に関する。
【００５５】
本明細書において、用語「治療」は、それと反対の特定の指示がない限り「予防」も包含する。用語「治療上の」及び「治療的」は同様に解釈される。
【００５６】
本発明はまた、治療及び／又は予防の必要なヒトを含む哺乳動物に、治療有効量の上述の式Ｉの化合物を投与することを含むcdk−5が関与する身体状態の治療方法及び／又は予防方法を提供する。
【００５７】
非治療用途
治療薬における用途に加えて、遊離塩基又は医薬として許容し得る塩としての式Iの化合物はまた、新規治療薬の探索の一部として、ネコ、イヌ、ウサギ、サル、ラット及びマウスのような実験室動物におけるサイクリン依存性キナーゼ５関連活性の阻害剤の効果を評価するためのインビトロ及びインビボ試験系の開発及び標準化において、薬理学的ツールとして有用である。
【００５８】
製造方法
本発明の別の態様は、遊離塩基又はその医薬として許容し得る塩としての式Ｉの化合物の製造方法を提供する。
このような方法についての以下の記載をとおして、当然ながら、適切であれば、有機合成の当業者に容易に理解され得るやり方で種々の反応物質及び中間体に適切な保護基を加え、次いで除去されるものとする。
このような保護基を用いる慣用の方法、及び適切な保護基の例は、例えば「Protective Group in Organic Synthesis」 T.W. Green, P.G.M. Wuts, Wiley−Interscience, New York, 1999に記載されている。
【００５９】
中間体の製造方法
中間体（ここで、Ｒ、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7及びR8は、特に記載のない限り式Ｉにおいて定義されたとおりである）の製造方法は次のものからなる：
【００６０】
【化２】
2008505070.tif 000004
(ｉ) 式IIIの化合物は、適切なアニリンIIを臭素及びチオシアン酸カリウム又はチオシアン酸アンモニウムと反応させることにより得ることができる。この反応は、酢酸のような適切な溶媒中、周囲温度で行うことができる。
【００６１】
【化３】
2008505070.tif 000005
(ii) 式IVの化合物を得るための式IIIの化合物のハロ脱ジアゾニウム化は、式IIIの化合物のジアゾニウム塩の形成、次いで形成されたジアゾニウム塩を適切なハロゲン化銅又は銅及びHBr又はHClのような試薬で処理することにより実施することができる。ジアゾニウム塩は、アセトニトリル−ポリエチレングリコールのような適切な溶媒中で亜硝酸イソアミル又は亜硝酸を用いて得ることができる。
【００６２】
【化４】
2008505070.tif 000006
(iii) 式IVの化合物と３−チエニルボロン酸との反応によって式Ｖの化合物が得られる。この反応は、適切なパラジウム触媒、例えばPd(PPh3)4、Pd(dppf)Cl2又はPd(OAc)2を、適切なリガンド、例えばP(tert−ブチル)3又は２−(ジシクロヘキシルホスフィノ)ビフェニルと共に用いるか、又はニッケル触媒、例えばチャコール上ニッケル又はNi(dppe)Cl2を、Zn及びナトリウムトリフェニルホスフィントリメタスルホネートと共に用いて行うことができる。アルキルアミン、例えばトリエチルアミン又は炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウム又はフッ化セシウムのような適切な塩基を該反応に用いることができ、この反応は、トルエン、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン／水又はN,N−ジメチルホルムアミドのような適切な溶媒又は溶媒混合物中で、油浴又はマイクロ波オーブンを用いて、＋20℃〜＋160℃の温度範囲で実施される。
【００６３】
【化５】
2008505070.tif 000007
(iv) 式Ｖの化合物はまた、適切なアニリノチオールVIを適切な溶媒、例えばポリリン酸又はキシレン中で、＋70℃〜＋230℃の温度でチオフェン−３−カルボン酸と反応させることにより得ることができる。
【００６４】
【化６】
2008505070.tif 000008
(ｖ) 式VIIIの化合物を得るための式VIIの化合物（式中、R3は水素である）のハロゲン化は、適切なハロゲン化試薬、例えばヨウ素、臭素、塩素、ハロゲン化塩、例えばICl、BrCl若しくはHOCl又は他の適切なハロゲン化試薬、例えばＮ−ブロモスクシンイミド若しくは三臭化リンを用いて行うことができる。この反応は、金属又は酸、例えばFe、Cu−塩、酢酸又は硫酸を触媒とするか、又は酸化剤、例えば硝酸、過酸化水素又は三酸化硫黄の助けによって行うことができる。この反応は、適切な溶媒、例えば水、酢酸又はクロロホルム中で、−70℃〜＋100℃の範囲の温度で行うことができる。
【００６５】
【化７】
2008505070.tif 000009
(vi) 式VIIIの化合物のジアゾニウム塩の脱ジアゾニウム化により、式IXの化合物を得る。ジアゾニウム塩の形成は、亜硝酸イソアミル又は亜硝酸を用い、次いで適切な試薬、例えば次亜リン酸、水素化ホウ素ナトリウム又はエタノールによりジアゾニウム基を還元することにより行うことができる。
【００６６】
【化８】
2008505070.tif 000010
(vii) 式IXの化合物と適切なアリールボロン酸又はボロン酸エステルとのカップリングにより、式Ｘの化合物が得られる。この反応は、適切なリガンド、例えばP(tert−ブチル)3又は2−(ジシクロヘキシルホスフィノ)ビフェニルと共に適切なパラジウム触媒、例えばPd(PPh3)4、Pd(dppf)Cl2又はPd(OAc)2を用いて、又はニッケル触媒、例えばチャコール上ニッケル又はZn及びナトリウムトリフェニルホスフィントリメタスルホネートと共にNi(dppe)Cl2を用いて行うことができる。適切な塩基、例えばアルキルアミン、例えばトリエチルアミン、又は炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウム又はフッ化セシウムをこの反応に用いることができ、これは油浴を用いるか又はマイクロ波オーブン中＋20℃〜＋160℃の範囲の温度で、適切な溶媒又は溶媒混合物、例えばトルエン、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン／水又はN,N−ジメチルホルムアミド中で行われる；
【００６７】
【化９】
2008505070.tif 000011
(viii) 式Ｘの化合物を適切な塩基、例えばブチルリチウムと反応させ、次いで適切なハロゲン化試薬、例えば四臭化炭素でハロゲン化し、次いで３−チエニルボロン酸とカップリングして式XIの化合物を得る。このカップリングは、適切なリガンド、例えばＰ(tert−ブチル)3又は２−(ジシクロヘキシルホスフィノ)ビフェニルと共に適切なパラジウム触媒、例えばPd(PPh3)4、Pd(dppf)Cl2又はPd(OAc)2を用いて、又はニッケル触媒、例えばチャコール上ニッケル又はZn及びナトリウムトリフェニルホスフィントリメタスルホネートと共にNi(dppe)Cl2を用いて行うことができる。適切な塩基、例えばアルキルアミン、例えばトリエチルアミン、又は炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウム又はフッ化セシウムを反応において使用することができ、この反応は油浴を用いるか又はマイクロ波オーブン中で＋20℃〜＋160℃の範囲の温度で、適切な溶媒又は溶媒混合物、例えばトルエン、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン／水又はN,N−ジメチルホルムアミド中で行うことができる；
【００６８】
【化１０】
2008505070.tif 000012
(ix) 式XIIのスルホン酸の形成は、式XIの化合物を、適切な試薬、例えばクロロスルホン酸、硫酸又は三酸化硫黄を用いて、適切な溶媒中、例えばクロロホルム、ジクロロメタン、1,2−ジクロロエタン又は四塩化炭素中で又は溶媒なし（neat）で、−15℃〜＋50℃の温度で処理することにより行うことができる；
【００６９】
【化１１】
2008505070.tif 000013
(ｘ) 式XIIIの化合物を得るための式XIIの化合物のハロゲン化は、式XIIの化合物を、ハロゲン化試薬、例えばPCl5、PCl3、塩化チオニル又は塩化オキサリルで処理することにより行うことができる。この反応は、溶媒なしで、又は適切な溶媒中、例えばPOCl3、ジクロロメタン、トルエン、テトラヒドロフラン、ジオキサン又はN,N−ジメチルホルムアミド中で、−20℃〜＋140℃の範囲の温度で行うことができる。
【００７０】
目的生成物の製造方法
本発明の別の目的は、式Ｉの化合物（ここで、Ｒ、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7及びR8は、特に記載のない限り式Ｉで定義されたとおりである）の製造方法であり、これは以下の工程からなる：
【化１２】
2008505070.tif 000014
【００７１】
式Ｉの化合物を得るための式XIIIの化合物のアミド化は、式XIIIの化合物を適切なアミンと反応させることにより行うことができる。ピリジンのような適切な塩基 (これは溶媒として使用することもできる）を反応に使用することができる。反応は適切な溶媒、例えばテトラヒドロフラン、ジクロロメタン、ジオキサン又はN,N−ジメチルホルムアミド中で、０度〜＋100℃の温度で行うことができる。R4及びR5がＨと定義される場合、メタノールのような適切な溶媒中でアンモニアが周囲温度で用いる。
【００７２】
したがって、１つの態様において、請求項１に記載の式Ｉの化合物（ここで、Ｒ、R1、R2、R3、R4、R5は、特に記載のない限り、請求項１の式Ｉにおいて定義されたとおりである）の製造方法であって、式XIIIの化合物を、適切な溶媒の存在下で適切なアミンを用いてアミド化し、式Ｉの化合物を得ることからなる方法が提供される。
【化１３】
2008505070.tif 000015
【００７３】
〔実施例〕
以下の実施例は、以下の非限定的実施例により詳細に説明される。
略語
GC−MS    ガスクロマトグラフィー質量分析
HPLC      高速液体クロマトグラフィー
LC−MS    液体クロマトグラフィー質量分析
NMR       核磁気共鳴
δ        化学シフト(ppm)
br        ブロード
ｄ        二重項
ｍ        多重項
ｑ        四重項
ｓ        一重項
ｔ        三重項
【００７４】
一般的方法
全ての出発物質は、市販されていて入手可能であるか又は先行文献に記載されている。
1H NMRスペクトルは、Brucker 400を用いて400MHzで、又はBruker Avanceを用いて300MHzで記録した。化学シフトはppmで記載される。
質量スペクトルは、サーモスプレー(Finnigan MAT SSQ 7000)、バッファー：CH3CN：H2O；３：７中50nM NH4OAc、電子衝撃 (Finnigan MAT SSQ 710)又はエレクトロスプレー(LC−MS；LC：水 2790又はLC−MS、水 2690、カラムXTerra MS C8 2.5μm 2.1×30mm、バッファーグラジエントH2O＋0.1％ TFA：CH3CN＋0.04％ TFA、MS：マイクロマスZMDイオン化技術を用いて記録した。
GC−MSは、Agilent 6890N GC Systemで、5973N Mass Selective Detectorを用いて行った。
カラムクロマトグラフィーはMerckシリカゲル60 (40〜63μm)を用いた。
精製は、XTerra ５μm C18 100mm×19mmカラムを備えた、質量トリガードフラクションコレクター、Shimadzu QP 8000で、半分取HPLCにより、又はAce C8 ５μm 100mm×21.2mmカラムを備えた質量トリガードフラクションコレクターで、Waters FractionLynx HPLCにより行った。
【００７５】
実施例１：6−ニトロ−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール
3−チオフェンボロン酸 (1.3ｇ、10.1mmol)及び炭酸ナトリウム飽和水溶液(12mL)を、トルエン／エタノール (29mL、9：2)中の2−ブロモ−6−ニトロベンゾチアゾール (2.0ｇ、7.72mmol、Lopes−Calahorraら.，Tetrahedron, 2004, 60, 285-289に記載)の溶液に添加し、次いで［1,1'−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン］パラジウム(II)クロリド (0.254ｇ、0.35mmol)を添加し、そして反応混合物を窒素雰囲気下、80℃で、９時間撹拌した。ジクロロメタン及び水を加え、そして層を分離した。水相をジクロロメタン(２×15mL)で抽出し、そして合一した有機層を水及びブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、そして溶媒を蒸発させた。ｎ−ヘプタン／酢酸エチル(100〜90：10)を用いて、シリカ上のカラムクロマトグラフィーにより残留物を精製し、溶離液として表題化合物0.301ｇ (収率15％)を得た：1H NMR (CDCl3, 300 MHz)δ8.82 (d, 1H), 8.36 (dd, 1H), 8.11 (m, 2H), 7.73 (dd, 1H), 7.49 (m, 1H)。
【００７６】
以下の実施例２〜７は、実施例１について記載したように合成した。
実施例２：6−メチル−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール
出発物質：2−ブロモ−6−メチルベンゾチアゾール、収率20％：1H NMR (CDCl3, 300 MHz)δ7.98 (dd, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.69 (dd, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.29
(dd, 1H)及び2.53 (s, 3H)。
実施例３：6−フルオロ−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール
出発物質：2−ブロモ−6−フルオロベンゾチアゾール、収率33％：1H NMR (DMSO−d6, 300 MHz)δ8.38 (d, 1H), 8.05 (m, 2H), 7.79 (m, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.40 (dt, 1H)。
実施例４：6−クロロ−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール
出発物質：2−ブロモ−6−クロロベンゾチアゾール、収率23％：LC−MS (ES) m／z 252 (M++1)。
実施例５：1−(2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール−6−イル)−エタノン
出発物質：1−(2−ブロモ−ベンゾチアゾール−6−イル)−エタノン、収率66％：LC−MS (ES) m／z 260 (M++1)。
実施例６：7−(4−フルオロ−フェニル)−ベンゾチアゾール
出発物質：7−ブロモ−ベンゾチアゾール及び4−フルオロフェニルボロン酸、収率48％：
LC−MS (ES) m／z 230 (M++1)。
実施例７：7−(4−フルオロ−フェニル)−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール
出発物質：2−ブロモ−7−(4−フルオロ−フェニル)−ベンゾチアゾール、収率69％：LC−MS (ES) m／z 312 (M++1)。
【００７７】
実施例８：2−ブロモ−7−(4−フルオロ−フェニル)−ベンゾチアゾール
ｎ−ブチルリチウム(0.2mL、ヘキサン中2.5M、0.5mmol)を、乾燥テトラヒドロフラン (10mL)中の7−(4−フルオロ−フェニル)−ベンゾチアゾール (0.100ｇ、0.44mmol)の冷溶液(−78℃) に加えた。得られた混合物を−78℃で１時間撹拌し、そして四臭化炭素 (0.138ｇ、0.42mmol)を加え、冷却を止め、そして混合物を室温に温まるにまかせた。塩化アンモニウムの飽和水溶液を加え、そして混合物を酢酸エチルで希釈した。有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、そして溶媒を真空下で除去した。残留物を分取HPLCにより精製して、白色固体として表題生成物45mg (収率39％)を得た：LC−MS (ES) m／z 308 (M++1)。
【００７８】
実施例９：4−(6−ニトロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸
クロロスルホン酸 (1.15mL)を、窒素雰囲気下で、クロロホルム(0.7mL)中の6−ニトロ−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール (0.301ｇ、1.15mmol)の冷懸濁液(０℃）に滴下して加え、そして混合物を周囲温度に達するまで5時間放置した。反応混合物を氷上に注ぎ、そして沈殿した生成物を濾過し、水及びジエチルエーテルで洗浄し、そして真空下で乾燥させて表題化合物0.320ｇ(90％収率)を得、これを更に精製することなく次の工程に使用した。
【００７９】
以下の実施例10〜14は、実施例９について記載したようにして合成した：
実施例10：4−(6−メチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸
出発物質：6−メチル−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール、収率81％。
実施例11：4−(6−フルオロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸出発物質：6−フルオロ−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール、収率87％。
実施例12：4−(6−クロロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸
出発物質：6−クロロ−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール、収率38％：LC−MS (ES) m／z 332 (M++1)。
実施例13：4−(6−アセチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸出発物質：1−(2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール−6−イル)−エタノン、収率96％：LC−MS (ES) m／z 340 (M++1)。
実施例14：4−[7−(4−フルオロ−フェニル)−ベンゾチアゾール−2−イル]−チオフェン−2−スルホン酸
出発物質：7−(4−フルオロ−フェニル)−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール、収率63％：LC−MS (ES) m／z 392 (M++1)。
【００８０】
実施例15：4−(ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド
五塩化リン(0.581ｇ、2.79mmol)を、オキシ塩化リン(3.5mL)中の4−(ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸 (0.554ｇ、1.86mmol、Vattoly, J. M.ら，Tetrahedron Lett. 2003, 44, 8535-8537に記載)の懸濁液に加えた。混合物を、窒素雰囲気下で100℃で２時間加熱した。反応混合物を濃縮し、酢酸エチル及び氷水で希釈し、そして相を分離した。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、そして溶媒を蒸発させて、白色固体として表題化合物0.533ｇ (収率91％)を得、これを更に精製することなく次の工程に使用した。
【００８１】
以下の実施例16〜20は、実施例15について記載したようにして合成した：
実施例16：4−(6−ニトロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド
出発物質：4−(6−ニトロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸、収率96％。
実施例17：4−(6−メチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド
出発物質：4−(6−メチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸、収率100％。
実施例18：4−(6−フルオロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド
出発物質：4−(6−フルオロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸、収率33％。
実施例19：4−(6−クロロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド
出発物質：4−(6−クロロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸、収率81％。
実施例20：4−[7−(4−フルオロ−フェニル)−ベンゾチアゾール−2−イル]−チオフェン−2−スルホニルクロリド
出発物質：4−[7−(4−フルオロ−フェニル)−ベンゾチアゾール−2−イル]−チオフェン−2−スルホン酸、生成物は単離されなかった。
【００８２】
実施例21：4−(6−アセチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド
オキシ塩化リン (0.8mL、8.8mmol)中の4−(6−アセチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸 (0.10ｇ、0.30mmol)の懸濁液に、五塩化リン(0.1ｇ、0.5mmol)を加えた。反応混合物を周囲温度で一晩撹拌し、そして溶媒真空下で蒸発させて、粗製物質として表題化合物0.070ｇ (収率66％)を得、これを更に精製することなく次の工程に使用した。
【００８３】
実施例22：1−(2−アミノ−ベンゾチアゾール−6−イル)−エタノン
酢酸(50mL)中の臭素 (3.79mL、74.0mmol)の溶液を、4−アセチルアニリン(10ｇ、74.0mmol)、ナトリウムチオシアネート(9.0ｇ、111mmol)及び酢酸(250mL)の混合物に10℃で、３時間かけて滴下して加えた。得られた混合物を50℃で２時間加熱した。反応混合物を周囲温度に冷却した後、形成された固体を濾去し、温水中に懸濁し、そして水酸化ナトリウム (粒状)でpH９〜10に塩基性化した。生成物を濾過により除き、水で洗浄し、そして真空下、五酸化リン上で乾燥させて、黄色固体として表題生成物5.86ｇ (収率41％)を得た：LC−MS (ES) m／z 193 (M++1).
【００８４】
実施例23：2−ブロモ−6−ニトロベンゾチアゾール
アセトニトリル (169mL)及びポリエチレングリコール (5.5ｇ)中の2−アミノ−6−ニトロベンゾチアゾール(2.2ｇ、11.2mmol)の溶液を、アセトニトリル (55mL)及びポリエチレングリコール (5.5ｇ)中の乾燥臭化銅(II)(6.05ｇ、27mmol)及び亜硝酸イソアミル (2.2mL、16.8mmol)の混合物に、窒素雰囲気下で滴下して加えた。混合物を超音波処理し、そして50℃で３時間撹拌した。混合物を冷却し(０℃)、臭化水素(10％、500mL)中に注ぎ、そしてジエチルエーテル (２×200mL)で抽出した。合一した有機相を臭化水素(10％)で洗浄し、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液及びブラインで中和し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、そして溶媒を蒸発させて、黄色固体として表題化合物2.08ｇ (収率71％)を得た：1H NMR (DMSO−d6, 300 MHz)δ9.20 (d, 1H), 8.36 (dd, 1H), 8.20 (d, 1H)。
【００８５】
以下の実施例24〜27は、実施例23について記載したようにして合成した：
実施例24：2−ブロモ−6−メチルベンゾチアゾール
出発物質：2−アミノ−6−メチルベンゾチアゾール、収率91％：1H NMR (DMSO−d6, 300 MHz) δ 7.88 (m, 2H), 7.35 (dd, 1H), 2.43 (s, 3H)。
実施例25：2−ブロモ−6−フルオロベンゾチアゾール
出発物質：2−アミノ−6−フルオロベンゾチアゾール、収率92％：1H NMR (DMSO−d6, 300 MHz)δ 8.04 (m, 2H), 7.43 (m, 1H)。
実施例26：2−ブロモ−6−クロロベンゾチアゾール
出発物質：2−アミノ−6−クロロベンゾチアゾール、収率89％：LC−MS (ES) m／z 250 (M++1)。
実施例27：1−(2−ブロモ−ベンゾチアゾール−6−イル)−エタノン
出発物質：1−(2−アミノ−ベンゾチアゾール−6−イル)−エタノン、収率75％：LC−MS (ES) m／z 256 (M++1)。
【００８６】
実施例28：2−ブロモ−7−クロロ−6−フルオロ−ベンゾチアゾール、2−ブロモ−5−クロロ−6−フルオロ−ベンゾチアゾール
臭化銅(II)(2.75ｇ、12.3mmol)を真空下、110℃で１時間乾燥させた。フラスコが周囲温度に達した後、アセトニトリル (90mL)及びポリエチレングリコール 200(３ｇ)を加え、次いで亜硝酸イソアミル (1.05mL、7.70mmol)を加えた。この混合物に、アセトニトリル (30mL)及びポリエチレングリコール 200(３ｇ)中の7−クロロ−6−フルオロ−ベンゾチアゾール−2−イルアミン及び5−クロロ−6−フルオロ−ベンゾチアゾール−2−イルアミンの異性体混合物(1.04ｇ、比率3：7、Cecchetti、V. J. Med. Chem. 1987、30、467-473に記載)の溶液を、20分かけて滴下して加えた。反応混合物を、50℃で４時間、窒素雰囲気下で撹拌した。周囲温度に冷却した後、反応混合物を冷却した(０℃)10％ 臭化水素(400mL)中に注ぎ、そしてジエチルエーテル (３×) で抽出した。合一した有機相を10％ 臭化水素、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液及びブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、そして真空下で濃縮した。粗製物質をｎ−ヘプタン中に懸濁し、そして濾過した。回収した固体は目的のものではない方の純粋な異性体であった (0.738ｇ、収率54％)。濾液を濃縮し、そして真空下で乾燥させて、GCにより調べたところ70％の所望の立体異性体(2−ブロモ−7−クロロ−6−フルオロ−ベンゾチアゾール)及び30％の目的のものではない方の異性体の異性体混合物0.481ｇ (収率35％)を得た。この混合物を、分離せずに次の工程に用いた：GC−MS (EI) m／z 267 (M+)。
【００８７】
実施例29：7−クロロ−6−フルオロ−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール
チオフェン−3−ボロン酸 (0.255ｇ、1.97mmol)、[1,1'−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]パラジウム(II)クロリド (0.066ｇ、0.09mmol)及び炭酸水素ナトリウム飽和水溶液 (５mL)を、トルエン／エタノール (10：1)中の2−ブロモ−7−クロロ−6−フルオロ−ベンゾチアゾール及び2−ブロモ−5−クロロ−6−フルオロ−ベンゾチアゾールの異性体混合物の溶液に加え、そして反応混合物を窒素雰囲気下で、80℃で6.5時間撹拌した。GC−MSにより調べたところ、反応は完了していなかった。反応混合物を周囲温度で18時間放置し、次いでチオフェン−3−ボロン酸 (0.070ｇ、0.541mmol)及び[1,1'−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]パラジウム(II)クロリド (0.066ｇ、0.09mmol)を更に加え、そして反応混合物を窒素雰囲気下で、80℃で５時間撹拌した。ジクロロメタン及び水を加え、層を分離し、そして水相をジクロロメタン(３×) で抽出した。合一した有機相を水及びブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、そして真空下で濃縮した。粗製物質を溶離液としてｎ−ヘプタン／酢酸エチル(95：5)を用いてシリカ上のカラムクロマトグラフィーにより精製し、白色固体として所望の立体異性体(7−クロロ−6−フルオロ−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール) 0.196ｇ (収率40％)を得た：1H NMR (CDCl3, 400 MHz)δ8.03 (m, 1H), 7.89 (dd, 1H), 7.68 (d, 1H), 7.46 (m, 1H), 7.31 (t, 1H)；GC−MS (EI) m／z 269 (M+)。
【００８８】
実施例30：7−ブロモ−ベンゾチアゾール
亜硝酸ナトリウム(0.229ｇ、3.3mmol)を硫酸 (10mL)中の7−ブロモ−ベンゾチアゾール−6−イルアミン (0.380ｇ、1.66mmol、WO 97／31636に記載)の溶液に加え、そして得られた混合物を室温で20分間撹拌した。次亜リン酸 (10mL) を加え、そして混合物を50℃で一晩加熱した。炭酸ナトリウムを添加してpHを９〜10に調整し、そして粗製生成物を濾過により除き、そして水で洗浄した。分取HPLCにより精製して、白色固体として表題化合物0.265ｇ (収率75％)を得た：LC−MS (EI) m／z 213 (M++1)。
【００８９】
実施例31：4−(ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド
メタノール中のアンモニア(1.2mL、７M)を、粗製4−(ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド (0.060ｇ、0.21mmol)に加え、そして得られた混合物を周囲温度で一晩撹拌した。溶媒を蒸発させ、そして分取HPLCにより残留物を精製して、白色固体として表題化合物0.030ｇ (収率48％)を得た：1H NMR (DMSO−d6, 400 MHz)δ 8.54 (d, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.08 (d, 1H), 7.97 (d, 1H), 7.82 (br s, 2H), 7.50 (t, 1H), 7.42 (t, 1H)。
【００９０】
以下の実施例32〜37は、実施例31について記載したようにして合成した：
実施例32：4−(6−ニトロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド
出発物質：4−(6−ニトロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド、収率10％：1H NMR (DMSO−d6, 300 MHz)δ9.25 (d, 1H), 8.77 (d, 1H), 8.40 (m, 2H), 8.22 (d, 1H), 8.15 (d, 1H), 7.91 (br s, 2H)。
実施例33：4−(6−メチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド
出発物質：4−(6−メチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド、収率25％：1H NMR (DMSO−d6, 300 MHz)δ8.55 (d, 1H), 8.08 (d, 1H), 7.93 (m, 2H), 7.38 (d, 1H), 2.44 (s, 3H)。
実施例34：4−(6−フルオロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド
出発物質：4−(6−フルオロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド、収率11％：1H NMR (DMSO−d6, 300 MHz)δ8.60 (d, 1H), 8.03−8.12 (m, 2H)及び7.23−7.59 (m, 4H)。
実施例35：4−(6−クロロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド
出発物質：4−(6−クロロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド、収率63％：1H NMR (DMSO−d6, 400 MHz)δ8.62 (s, 1H), 8.33 (d, 1H), 8.10 (s, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.86 (br s, 2H), 7.58 (dd, 1H)；MS (TSP) m／z 331 (M++1)。実施例36：4−(6−アセチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド
出発物質：4−(6−アセチル−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド、収率6％：1H NMR (DMSO−d6, 400 MHz)δ 8.86 (s, 1H), 8.70 (1H), 8.11 (m, 3H), 7.84 (br s 2H), 3.30 (s, 3H)；LC−MS (ES) m／z 339 (M++1)。
実施例37：4−[7−(4−フルオロ−フェニル)−ベンゾチアゾール−2−イル]−チオフェン−2−スルホン酸アミド
出発物質：4−[7−(4−フルオロ−フェニル)−ベンゾチアゾール−2−イル]−チオフェン−2−スルホニルクロリド、収率63 ％：1H NMR (DMSO−d6, 400 MHz)δ8.63 (d, 1H), 8.14 (d, 1H), 8.10 (dd, 1H), 7.89 (br s, 2H), 7.81 (m, 2H), 7.69 (t, 1H), 7.58 (dd, 1H), 7.42 (t, 2H)；LC−MS (ES) m／z 391 (M++1)。
【００９１】
実施例38：4−(7−クロロ−6−フルオロ−ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホン酸アミド
クロロスルホン酸 (2.0mL)を、クロロホルム(0.70mL)中の7−クロロ−6−フルオロ−2−チオフェン−3−イル−ベンゾチアゾール (0.192ｇ、0.712mmol)の冷懸濁液(０℃）に、窒素雰囲気下で滴下して加えた。混合物を周囲温度に達するまで放置し、そして5.5時間撹拌した。反応混合物を氷上に注ぎ、沈殿した生成物を濾別し、水及びジエチルエーテルで洗浄し、そして五酸化リン上で乾燥させて、所望のスルホン酸及び幾らかのスルホニルクロリド0.225ｇを得た。この物質をオキシ塩化リン (2.0mL) 中に懸濁し、五塩化リン(0.214ｇ) を加え、そして混合物を、窒素雰囲気下、100℃で２時間加熱した。反応混合物を濃縮し、そして真空下で乾燥させた。粗製混合物に、アンモニア(メタノール中７M、2.5mL)を滴下して加え、そして反応混合物を19時間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、そして分取HPLCにより精製し、白色固体として表題化合物0.042ｇ (３工程行い、収率17％)を得た：1H NMR (DMSO−d6, 400 MHz)δ8.70 (d, 1H), 8.10 (m, 2H), 7.90 (br s, 2H), 7.67 (t, 1H)；LC−MS (ES) m／z 346.9 (M--1)。
【００９２】
実施例39：4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホン酸 (2−フルオロ−エチル)−アミド
2−フルオロエチルアミン塩酸塩 (0.039ｇ、0.35mmol)を、ピリジン (2mL)中の4−(ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド (0.092ｇ、0.29mmol)の溶液に加え、そして得られた混合物を、窒素雰囲気下、50℃で20時間撹拌した。混合物を冷ました後、水及びジクロロメタンを加え、そして層を分離した。水相をジクロロメタン (３×) で抽出し、そして合一した有機相を水、炭酸水素ナトリウム飽和水溶液及びブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、そして蒸発させて、分取HPLCにより精製した後で表題化合物0.030ｇ (収率30％)を得た：1H NMR (DMSO−d6, 300 MHz)δ8.67 (d, 1H), 8.16 (d, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.06 (d, 1H), 7.57, (m, 1H), 7.48 (m, 1H), 4.53 (t, 1H), 4.37 (t, 2H), 3.28 (t, 1H), 3.19 (t, 1H)。
【００９３】
実施例40〜43：
一般的方法MPS：
4−(ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド (0.5mmol)及び適切なアミノ複素環(２当量)の混合物をピリジン (１mL) 中に溶解し、そして得られた混合物を100℃で一晩加熱した。溶媒を蒸発させ、そして残留物を、溶離剤として酢酸エチル／ジクロロメタン (０〜100％ 酢酸エチル)を用いて、シリカ上のカラムクロマトグラフィーにより精製した。
【表１】
2008505070.tif 000016
【００９４】
実施例44〜46：
一般的方法MPS：
実施例40〜43について記載した方法と同様の方法を用いたが、ただし50℃で加熱した。
【表２】
2008505070.tif 000017
【００９５】
実施例47：[2−(4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホニルアミノ)−チアゾール−4−イル]−酢酸エチルエステル
ピリジン (0.75mL)を4−(ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド (0.3mmol)及び(2−アミノ−チアゾール−4−イル)−酢酸エチルエステル (２当量)の混合物に加え、そして得られた混合物を50℃で一晩加熱した。溶媒を蒸発させ、そして残留物を、溶離液として酢酸エチル／ジクロロメタン (０〜60％ 酢酸エチル)を用いてシリカ上のカラムクロマトグラフィーにより精製し、固体として表題化合物0.043ｇ (収率30％)を得た：1H NMR (DMSO−d6, 400 MHz)：δ 13.06 (br s, 1H), 8.60 (d, 1H), 8.17 (d, 1H), 8.07 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.57 (dd, 1H), 7.49 (dd, 1H), 6.75 (s, 1H), 4.11 (q, 2H), 3.68 (s, 2H), 1.19 (t, 3H)；MS (ES) m／z 465.0 (M++1)。
【００９６】
実施例48：4−ベンゾチアゾール−2−イル−チオフェン−2−スルホン酸 (4−メチル−ピリジン−2−イル)−アミド
ピリジン (0.75mL)を、4−(ベンゾチアゾール−2−イル)−チオフェン−2−スルホニルクロリド (0.3mmol)及び4−メチル−ピリジン−2−イルアミン (２当量)の混合物に加え、そして混合物を100℃で一晩加熱した。溶媒を蒸発させ、そして残留物を、溶離液として酢酸エチル／ジクロロメタン (０〜60％ 酢酸エチル)を用いてシリカ上のカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物0.041ｇ (収率40％)を得た：1H NMR (DMSO−d6, 400 MHz)：δ 13.27 (br s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.17 (d, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.57 (dd, 1H), 7.49 (dd, 1H), 7.22 (br s, 1H), 6.75 (d, 1H), 2.33 (s, 3H)；MS (ES) m／z 387.9 (M++1)。
【００９７】
薬理学
シンチレーション近似アッセイにおけるCdk5／p25タンパク質キナーゼの阻害の測定
cdk5／p25シンチレーション近似アッセイ
このアッセイ実験は、底が透明な384−ウェルマイクロタイタープレート(Corning, US,
商品番号3706)において10種の異なる濃度の阻害剤を使用して二重に行なった。
組み換えヒトCdk5／p25 (サイクリン依存性キナーゼ５) (AstraZeneca Biotech Laboratory、Soedertaelje、Sweden)を、23.3mM ヒドロキシエチルピペラジンエタンスルホン酸 (HEPES)、pH7.35、0.2mM エチレンジニトロテトラ酢酸(EDTA)、12.5mM KCl、10mM β−グリセロホスフェート、0.02％ β−メルカプトエタノール、0.007％ Brij 35、0.8％ グリセロール及び0.05％ ウシ血清アルブミンを含むアッセイバッファー中に、3.3nMの終濃度で加えた。15分間インキュベート後、終アッセイ体積21μL中のビオチン化ペプチド基質であるビオチン−Ala−Lys−Lys−Pro−Lys−Thr−Pro−Lys−Lys−Ala−Lys−Lys−Leu−OH (Bachem、スイス)、0.07μCi [γ33P]ATP (Amersham、UK)、２μM 非標識ATP及び10mM MgCl2を終濃度2.95μMで添加することにより反応を開始した。室温で40分間インキュベート後、24mM EDTA、2.2mM ATP及び0.225mg ストレプトアビジン被覆シンチレーション近似アッセイ(SPA)ビーズ(Amersham、UK)を含む停止溶液30μLを添加することにより各反応を終了させた。マイクロタイタープレートを200ｇで２分間遠心分離し、そして放射活性を液体シンチレーションカウンター (1450 MicroBeta Trilux、Wallac、フィンランド)で測定した。XL−fitを用いて、非線形回帰により阻害曲線を分析した。種々の化合物の阻害定数(Ki)を計算するために使用されるCdk5／p25に対するATPのKm値は10μMであった。
結果
本発明の化合物の典型的なKi値は、約275nM〜10000nMの範囲である。
【国際調査報告】
2008505070.tif 000021
2008505070.tif 000022
2008505070.tif 000023
2008505070.tif 000024
2008505070.tif 000025