(57)【要約】本発明は、インスリン制御アミノペプチダーゼ（ＩＲＡＰ）のインヒビター、およびＩＲＡＰの阻害方法、並びに前記インヒビターを含む組成物に関する。特に、本発明のインヒビターは、記憶および学習機能の増強、細胞のグルコースの取り込みや恒常性の制御、分娩および乳汁分泌の誘導、並びに過度または望ましくないＩＲＡＰ活性が関わる他の障害または症状を含む治療上の適用に有用でありうる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2008512395.tif 000008
[式中、
Ａは、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、またはヘテロシクリルであり、これらの各々は適宜置換されていてもよく；
Ｘは、Ｏ、ＮＲ’またはＳであり、その中でＲ’は水素、適宜置換されたアルキル、適宜置換されたアルケニル、適宜置換されたアルキニル、適宜置換されたアリール、適宜置換されたアシル、適宜置換されたヘテロアリール、適宜置換されたカルボシクリル、または適宜置換されたヘテロシクリルであり；
Ｒ１は、ＮＲ７Ｒ８、ＮＨＣＯＲ８、Ｎ（ＣＯＲ８）２、Ｎ（ＣＯＲ７）（ＣＯＲ８）、Ｎ＝ＣＨＯＲ８またはＮ＝ＣＨＲ８であり、その中でＲ７およびＲ８は、Ｈ、適宜置換されたアルキル、適宜置換されたアリールから独立して選択されるか、あるいはＲ７およびＲ８は、それらに結合する窒素原子と共に適宜置換されていてもよい３−８員環を形成し；
Ｒ２は、ＣＮ、ＣＯ２Ｒ９、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｏ）Ｒ９、Ｃ（Ｏ）Ｒ９、またはＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１0であり、その中でＲ９およびＲ１0は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、ヘテロシクリルおよび水素から独立して選択され、水素を除くこれらの各々は適宜置換されていてもよく、あるいはＲ９およびＲ１0は、それらに結合する窒素原子と共に適宜置換されていてもよい３−８員環を形成し；
Ｒ３−Ｒ６は、水素、ハロ、ニトロ、シアノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、カルボシクリル、ヒドロキシ、アルコキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アルキニルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、アミノ、アシル、アシルオキシ、カルボキシ、カルボキシエステル、メチレンジオキシ、アミド、チオ、アルキルチオ、アルケニルチオ、アルキニルチオ、アリールチオ、ヘテロアリールチオ、ヘテロシクリルチオ、カルボシクリルチオ、アシルチオ、およびアジドから独立して選択され、これらの各々は必要に応じて適宜置換されていてもよく、あるいは隣接するＲ３−Ｒ６のいずれかの二つは、それらに結合する原子と共に適宜置換されていてもよい３−８員環を形成し；および
Ｙは、水素またはＣ１−１０アルキルである]
の化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグの阻害量をＩＲＡＰに接触させることからなるＩＲＡＰ活性の阻害方法。
【請求項２】
ＩＲＡＰが患者の体内で阻害される、請求項１の方法。
【請求項３】
式（Ｉ）：
【化２】
2008512395.tif 000009
[式中、
Ａは、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、またはヘテロシクリルであり、これらの各々は適宜置換されていてもよく；
Ｘは、Ｏ、ＮＲ’またはＳであり、その中でＲ’は水素、適宜置換されるアルキル、適宜置換されるアルケニル、適宜置換されるアルキニル、適宜置換されるアリール、適宜置換されるアシル、適宜置換されるヘテロアリール、適宜置換されるカルボシクリル、あるいは適宜置換されるヘテロシクリルであり；
Ｒ１は、ＮＲ７Ｒ８、ＮＨＣＯＲ８、Ｎ（ＣＯＲ８）２、Ｎ（ＣＯＲ７）（ＣＯＲ８）、Ｎ＝ＣＨＯＲ８、またはＮ＝ＣＨＲ８であり、その中でＲ７およびＲ８はＨ、適宜置換されたアルキル、適宜置換されたアリールから独立して選択されるか、あるいはＲ７およびＲ８は、それらに結合する窒素原子と共に適宜置換されていてもよい３−８員環を形成し；
Ｒ２は、ＣＮ、ＣＯ２Ｒ９、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｏ）Ｒ９、Ｃ（Ｏ）Ｒ９、またはＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１0であり、その中でＲ９およびＲ１0は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、ヘテロシクリルおよび水素から独立して選択され、水素を除くこれらの各々は適宜置換されていてもよく、あるいはＲ９およびＲ１0は、それらに結合する窒素原子と共に適宜置換されていてもよい３−８員環を形成し；
Ｒ３−Ｒ６は、水素、ハロ、ニトロ、シアノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、カルボシクリル、ヒドロキシ、アルコキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アルキニルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、アミノ、アシル、アシルオキシ、カルボキシ、カルボキシエステル、メチレンジオキシ、アミド、チオ、アルキルチオ、アルケニルチオ、アルキニルチオ、アリールチオ、ヘテロアリールチオ、ヘテロシクリルチオ、カルボシクリルチオ、アシルチオ、およびアジドから独立して選択され、これらの各々は必要に応じて適宜置換されていてもよく、あるいは隣接するＲ３−Ｒ６のいずれかの二つは、それらに結合する原子と共に適宜置換されていてもよい３−８員環を形成し；および
Ｙは、水素、またはＣ１−１０アルキルである]
の化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグの有効量を投与することからなる、治療が必要な患者におけるＩＲＡＰ活性が関わる疾患または症状の治療方法。
【請求項４】
疾患または障害が、グルコースの恒常性の異常または記憶喪失もしくは障害である、請求項３の方法。
【請求項５】
疾患または障害が、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、または高血糖である、請求項４の方法。
【請求項６】
Ａがアリールまたはヘテロアリールである、請求項３の方法。
【請求項７】
Ａが５−６員環である、請求項３の方法。
【請求項８】
Ａが適宜置換された５−６員環アリールまたはヘテロアリールである、請求項７の方法。
【請求項９】
Ａが適宜置換されたフェニルまたはピリジルである、請求項８の方法。
【請求項１０】
ＸがＯである、請求項３の方法。
【請求項１１】
Ｙが水素である、請求項３の方法。
【請求項１２】
Ｒ１がＮＲ７Ｒ８である、請求項３の方法。
【請求項１３】
Ｒ１がＮＨ２である、請求項１２の方法。
【請求項１４】
Ｒ２がＣＮ、ＣＯ２Ｒ９、またはＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１0、またはＣ（Ｏ）Ｒ９である、請求項３の方法。
【請求項１５】
Ｒ３−Ｒ６がＨ、ＯＨ、ＣＮ、ハロ、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ１−１０アルコキシ、フェニル、ハロフェニル、ヒドロキシフェニル、アミノフェニル、アルキルフェニル、ＮＨ２、ＮＨＣ１−１０アルキル、ＮＣ１−１０アルキルＣ１−１０アルキル、ＮＯ２、+ＮＯ２Ｈ、ハロアルキル、アシル、アシルオキシ、カルボキシエステル、ＣＯ２Ｈ、アミド、チオ、アルキルチオから選択され、隣接するＲ３−Ｒ６の２つがメチレンジオキシを形成する、請求項３の方法。
【請求項１６】
Ｒ３、Ｒ４、およびＲ６がすべて水素である、請求項３の方法。
【請求項１７】
Ｒ５がＯＨ、ＣＮ、ハロ、Ｃ１−１０アルキル、ＮＯ２、+ＮＯ２Ｈ、ＮＨ２、ＮＨＣ１−１０アルキル、ＮＣ１−１０アルキルＣ１−１０アルキルから選択される、請求項１５の方法。
【請求項１８】
式（Ｉ）：
【化３】
2008512395.tif 000010
[式中、
Ａは、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、またはヘテロシクリルであり、これらの各々は適宜置換されていてもよく；
Ｘは、Ｏ、ＮＲ’またはＳであり、その中でＲ’は水素、適宜置換されるアルキル、適宜置換されるアルケニル、適宜置換されるアルキニル、適宜置換されるアリール、適宜置換されるアシル、適宜置換されるヘテロアリール、適宜置換されるカルボシクリル、あるいは適宜置換されるヘテロシクリルであり；
Ｒ１は、ＮＲ７Ｒ８、ＮＨＣＯＲ８、Ｎ（ＣＯＲ８）２、Ｎ（ＣＯＲ７）（ＣＯＲ８）、Ｎ＝ＣＨＯＲ８、またはＮ＝ＣＨＲ８であり、その中でＲ７およびＲ８はＨ、適宜置換されたアルキル、適宜置換されたアリールから独立して選択されるか、あるいはＲ７およびＲ８は、それらに結合する窒素原子と共に適宜置換されていてもよい３−８員環を形成し；
Ｒ２は、ＣＮ、ＣＯ２Ｒ９、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｏ）Ｒ９、Ｃ（Ｏ）Ｒ９、またはＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１0であり、その中でＲ９およびＲ１0は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、ヘテロシクリルおよび水素から独立して選択され、水素を除くこれらの各々は適宜置換されていてもよく、あるいはＲ９およびＲ１0は、それらに結合する窒素原子と共に適宜置換されていてもよい３−８員環を形成し；
Ｒ３−Ｒ６は、水素、ハロ、ニトロ、シアノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、カルボシクリル、ヒドロキシ、アルコキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アルキニルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、アミノ、アシル、アシルオキシ、カルボキシ、カルボキシエステル、メチレンジオキシ、アミド、チオ、アルキルチオ、アルケニルチオ、アルキニルチオ、アリールチオ、ヘテロアリールチオ、ヘテロシクリルチオ、カルボシクリルチオ、アシルチオ、およびアジドから独立して選択され、これらの各々は必要に応じて適宜置換されていてもよく、あるいは隣接するＲ３−Ｒ６のいずれかの２つは、それらに結合する原子と共に適宜置換されていてもよい３−８員環を形成し；および
Ｙは、水素、またはＣ１−１０アルキルである]
の化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグの有効量を、患者に投与する処置からなる、患者の記憶および／または学習増強方法。
【請求項１９】
Ａがアリールまたはヘテロアリールである、請求項１８の方法。
【請求項２０】
Ａが５−６員環である、請求項１８の方法。
【請求項２１】
Ａが適宜置換された５−６員環アリールまたはヘテロアリールである、請求項２０の方法。
【請求項２２】
Ａが適宜置換されたフェニルまたはピリジルである、請求項２１の方法。
【請求項２３】
ＸがＯである、請求項１８の方法。
【請求項２４】
Ｙが水素である、請求項１８の方法。
【請求項２５】
Ｒ１がＮＲ７Ｒ８である、請求項１８の方法。
【請求項２６】
Ｒ１がＮＨ２である、請求項２５の方法。
【請求項２７】
Ｒ２がＣＮ、ＣＯ２Ｒ９、またはＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１0、またはＣ（Ｏ）Ｒ９である、請求項１８の方法。
【請求項２８】
Ｒ３−Ｒ６がＨ、ＯＨ、ＣＮ、ハロ、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ１−１０アルコキシ、フェニル、ハロフェニル、ヒドロキシフェニル、アミノフェニル、アルキルフェニル、ＮＨ２、ＮＨＣ１−１０アルキル、ＮＣ１−１０アルキルＣ１−１０アルキル、ＮＯ２、+ＮＯ２Ｈ、ハロアルキル、アシル、アシルオキシ、カルボキシエステル、ＣＯ２Ｈ、アミド、チオ、アルキルチオから選択され、隣接するＲ３−Ｒ６の２つがメチレンジオキシを形成する、請求項１８の方法。
【請求項２９】
Ｒ３、Ｒ４、およびＲ６がすべて水素である、請求項１８の方法。
【請求項３０】
Ｒ３がＯＨ、ＣＮ、ハロ、Ｃ１−１０アルキル、ＮＯ２、+ＮＯ２Ｈ、ＮＨ２、ＮＨＣ１−１０アルキル、およびＮＣ１−１０アルキルＣ１−１０アルキルから選択される、請求項２８の方法。
【請求項３１】
式（Ｉ）：
【化４】
2008512395.tif 000011
[式中、
Ａは、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、またはヘテロシクリルであり、これらの各々は適宜置換されていてもよく；
Ｘは、Ｏ、ＮＲ’またはＳであり、その中でＲ’は水素、適宜置換されるアルキル、適宜置換されるアルケニル、適宜置換されるアルキニル、適宜置換されるアリール、適宜置換されるアシル、適宜置換されるヘテロアリール、適宜置換されるカルボシクリル、あるいは適宜置換されるヘテロシクリルであり；
Ｒ１は、ＮＲ７Ｒ８、ＮＨＣＯＲ８、Ｎ（ＣＯＲ８）２、Ｎ（ＣＯＲ７）（ＣＯＲ８）、Ｎ＝ＣＨＯＲ８、またはＮ＝ＣＨＲ８であり、その中でＲ７およびＲ８はＨ、適宜置換されたアルキル、適宜置換されたアリールから独立して選択されるか、あるいはＲ７およびＲ８は、それらに結合する窒素原子と共に適宜置換されていてもよい３−８員環を形成し；
Ｒ２は、ＣＮ、ＣＯ２Ｒ９、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｏ）Ｒ９、Ｃ（Ｏ）Ｒ９、またはＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１0であり、その中でＲ９およびＲ１0は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、ヘテロシクリルおよび水素から独立して選択され、水素を除くこれらの各々は適宜置換されていてもよく、あるいはＲ９およびＲ１0は、それらに結合する窒素原子と共に適宜置換されていてもよい３−８員環を形成し；
Ｒ３−Ｒ６は、水素、ハロ、ニトロ、シアノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、カルボシクリル、ヒドロキシ、アルコキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アルキニルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、アミノ、アシル、アシルオキシ、カルボキシ、カルボキシエステル、メチレンジオキシ、アミド、チオ、アルキルチオ、アルケニルチオ、アルキニルチオ、アリールチオ、ヘテロアリールチオ、ヘテロシクリルチオ、カルボシクリルチオ、アシルチオ、およびアジドから独立して選択され、これらの各々は必要に応じて適宜置換されていてもよく、あるいは隣接するＲ３−Ｒ６のいずれかの二つは、それらに結合する原子と共に適宜置換されていてもよい３−８員環を形成し；および
Ｙは、水素、またはＣ１−１０アルキルである]
の化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグのＩＲＡＰ阻害活性の測定方法であって、
（ａ）ＩＲＡＰ、ＩＲＡＰの基質、および前記化合物のインキュベート；並びに
（ｂ）基質の切断の速度または程度の評価；
の段階からなり、対照実験との比較で、基質の切断の速度または程度の減少または阻害が、化合物のＩＲＡＰ阻害活性を示していることからなる方法。
【請求項３２】
式：
【化５】
2008512395.tif 000012
の化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグの阻害量をＩＲＡＰに接触させることからなるＩＲＡＰ活性の阻害方法。
【請求項３３】
式：
【化６】
2008512395.tif 000013
の化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグの有効量を投与することからなる、治療が必要な患者におけるＩＲＡＰ活性が関わる疾患または症状の治療方法。
【請求項３４】
式：
【化７】
2008512395.tif 000014
の化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグの有効量を患者に投与する処置からなる、患者の記憶および／または学習増強方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インスリン制御アミノペプチダーゼ（ＩＲＡＰ）のインヒビター、およびＩＲＡＰの阻害方法、並びに前記インヒビターを含む組成物に関する。特に、本発明のインヒビターは、記憶および学習機能の増強、細胞のグルコースの取り込みや恒常性の制御、分娩および乳汁分泌の誘導、並びに過度または望ましくないＩＲＡＰ活性が関わる他の障害または症状を含む治療上の適用に有用でありうる。
【背景技術】
【０００２】
本明細書中の先行技術への引例は、その先行技術がオーストラリアにおいて一般常識の一部を形成していることを認めるのでなく、または示唆するものではなく、またそのように取られるべきではない。
【０００３】
インスリン制御アミノペプチダーゼ（ＩＲＡＰ）は１６５ｋＤａの糖タンパク質であり、脂肪、筋肉、腎臓、副腎、肺、および心臓を含む多くの組織に広く分布している(Keller et al., 1995; Rogi et al., 1996; Zhang et al., 1999)。脳内では、それは１４０ｋＤａより小さなタンパク質として生じ、これはおそらく特異なグリコシル化のためである(Keller et al., 1995; Zhang et al., 1999)。これは亜鉛依存性メタロペプチダーゼのＭ１ファミリーに属するＩＩ型内在性膜タンパク質であり、触媒部位を含む大きなＣ末端細胞外尾部、一つの膜貫通型ドメイン、および、より小さなＮ末端細胞内ドメインを有する(Keller et al., 1995; Rogi et al., 1996)。当初は、このタンパク質はインスリン応答性グルコース輸送体ＧＬＵＴ４を含む分化した小胞のためのマーカータンパク質（ｖｐ１６５）として、ラット精巣上体の脂肪体ｃＤＮＡライブラリからクローン化されていたが(Keller et al., 1995)、現在では同タンパク質がヒトの胎盤のｃＤＮＡライブラリからオキシトシナーゼ(Rogi et al., 1996)、すなわちオキシトシンの分解に重要な役割を有すると考えられている酵素としてクローン化されていた。ＡＴ４受容体もまた、ウシ副腎膜から精製されたＡＴ４受容体タンパク質から生成されたトリプシンペプチドの質量スペクトル解析を通して、膜貫通型酵素のインスリン制御アミノペプチダーゼ（ＩＲＡＰ）として最近確認された(Albiston et al., 2001)。ＩＲＡＰの生化学的および薬理学的特性の解析によって、実際にＩＲＡＰがＡＴ４受容体であることが確認された(Albiston et al., 2001)。このタンパク質は３つの独立したグループによって異なる組織起源から単離され、異なる生理学的役割を果たしていると考えられたが、このタンパク質の特性および性質は一致したままである。
【０００４】
ＡＴ４リガンド、アンジオテンシンＩＶ（ＡｎｇＩＶ）、その類縁体であるＮｌｅ−ＡｎｇＩＶおよびノーロイシナールＡｎｇＩＶ、並びに構造上異なるペプチドＬＶＶ−ヘモルフィン７（ＬＶＶ−Ｈ７）は、すべてＡＴ４受容体と呼ばれる薬理学的に異なる結合部位に、高い親和性と比較的特異性をもって結合する。ＡＴ４リガンド、ＡｎｇＩＶ、Ｎｌｅ−ＡｎｇＩＶ、およびＬＶＶ−Ｈ７はすべて、合成基質のＬｅｕ−β−ナフチルアミドの切断による評価で、ＩＲＡＰのアミノペプチダーゼ活性のインヒビターであることがインビトロで明らかにされた(Albiston et al., 2001; Lew et al., 2003)。ＡｎｇＩＶとＬＶＶ−Ｈ７の両方で、ＡＴ４リガンドがＩＲＡＰの触媒部位へ結合することによってこれらの阻害効果を媒介していることを示す競合的な動態が表されている。ペプチドのＡｎｇＩＶおよびＬＶＶ−Ｈ７は触媒部位に結合するが、これらはＩＲＡＰによって切断されないことも、同システムを用いて明らかにされた(Lew et al., 2003)。
【０００５】
ペプチドのＡＴ４リガンド、ＡｎｇＩＶ、これらのより安定な類縁体、またはＬＶＶ−Ｈ７を正常動物に中枢投与することによって、受動的回避および空間学習パラダイムの両方で記憶課題の動作の改善をもたらすことが示された。最初の効果はラットの受動的回避パラダイムにおいて観察され、そこではＡｎｇＩＶを脳室内に投与（１ｎｍｏｌ）すると嫌悪刺激後に暗室に再び入り、隠れている時間が増加した(Braszko et al., 1988; Wright et al., 1993; Wright et al., 1996)。ＡｎｇＩＶ類縁体を０．１から０．５ｎｍｏｌ／時の間の投与量でラットの側脳室の中へ慢性的に注入（６日間）すると、空間記憶パラダイムである水迷路における動作が向上した。もう一つの空間学習課題であるバーンズ迷路において、ペプチドのＡＴ４リガンド、Ｎｌｅ１−ＡｎｇＩＶまたはＬＶＶ−Ｈ７の１００ｐｍｏｌまたは1ｎｍｏｌをラットに投与すると、このパラダイムにおいて学習者が基準に達するのにかかる時間が短縮した(Lee et al., 2004)。人工脳脊髄液で処置した対照動物は、学習者が基準に達するのに７日かかったのに対し、Ｎｌｅ１−ＡｎｇＩＶまたはＬＶＶ−Ｈ７で処置した動物は、１００ｐｍｏｌまたは１ｎｍｏｌのいずれかの濃度で、３−４日で学習者が基準に達した(Lee et al., 2004)。この観察によって、実験を受けた二つのペプチドは記憶を改善するだけでなく、空間学習を増強することが強く示された。
【０００６】
ペプチドのＡＴ４リガンドは、正常動物における記憶および学習を増強させるだけでなく、そのペプチドは（１）ムスカリン性のアンタゴニストによって化学的に誘導され、または（２）貫通線維路をナイフで切断し破壊することによって機械的に誘導された記憶欠損を逆行させた。より安定な類縁体のＡｎｇＩＶ、Ｎｌｅ−ＡｎｇＩＶは、側脳室の中へ急性に投与されると、空間学習パラダイムでムスカリン受容体アンタゴニストであるスコポラミンによって誘導された記憶欠損を逆行させた(Pederson et al., 1998; Pederson et al., 2001)。水迷路パラダイムにおいては、両側の貫通線維路の破壊によって誘導された記憶欠損は、もう一つのＡｎｇＩＶ類縁体であるノーロイシナールＡｎｇＩＶの急性な投与（１ｎｍｏｌ）によって逆行させることができる(Wright et al., 1999)。その他のＡＴ４リガンドであるＬＶＶ−Ｈ７は、受動的回避パラダイムにおける条件付け試行の前に急性に投与されると、スコポラミンによって誘導された記憶欠損が逆行することも明らかとなった(Albiston et al., 2004)。
【０００７】
アミノペプチダーゼのＭ１ファミリーの他のタンパク質と違って、ＩＲＡＰのＮ末端尾部はもっと長く（１１２アミノ酸）、酸性のクラスターが先に現れる二つのジロイシンモチーフを含んでいる（残基５３−５４および７６−７７）(Keller et al., 1995)。これらの特徴的なモチーフの並び方は、ＧＬＵＴ４のカルボキシ末端ドメインにおいてもまた現れ(Bryant et al., 2002)、このことはこれらの二つのタンパク質が同様の細胞内局在過程を受けることを示唆している。ＩＲＡＰのＮ末端尾部（１−１０９）またはＩＲＡＰの細胞内ドメインのより短い断片（５５−８２）を３Ｔ３−Ｌ１脂肪細胞の中へ微量注入すると、ＧＬＵＴ４小胞がＧＬＵＴ４小胞の輸送および／または保持においてＩＲＡＰの細胞内ドメインの役割を支えている原形質膜へと移行する結果となる(Waters et al., 1997)。
【０００８】
上記のように、ＩＲＡＰはＧＬＵＴ４小胞のためのマーカータンパク質（ｖｐ１６５）として知られているだけではない(Keller et al., 1995)。同タンパク質がヒト胎盤のｃＤＮＡライブラリからオキシトシナーゼ(Rogi et al., 1996)、すなわちオキシトシンの分解に重要な役割を有すると考えられる酵素として同時にクローン化された。オキシトシンおよびオキシトシン受容体は、分娩において二つの重要な役割を有する。すべての哺乳類種で明らかにされたことによって、オキシトシンは娩出段階において役割を果たし、分娩の開始の正確な時期のために重要であることが示唆されている(Imamura et al., 2000)。女性およびアカゲザルにおいては、分娩の開始は内分泌よりもむしろ傍分泌の機序を介しうる。ノックアウトマウスの研究によってもまた、オキシトシンとプロスタグランジンの間の重要な相互関係が確認されている。オキシトシンは多くの生物種、それは主に脱落膜／子宮の上皮においてプロスタグランジンの放出を刺激する。オキシトシンの効果は組織特異的オキシトシン受容体の発現を介して生じ、この発現が直ちに子宮筋における収縮および脱落膜におけるプロスタグランジン形成を導く。妊娠後期でのこれらの組織におけるオキシトシン受容体の発現は劇的に増加し、また薬理学的な阻害は分娩を遅らせるが、このことはオキシトシン受容体が正常な分娩に不可欠であることを示唆している。オキシトシン遺伝子のヌル変異を施したマウスの最近の研究によって、射乳におけるオキシトシンの重要な役割が示唆されている。
【０００９】
そのためＩＲＡＰは、記憶および学習を増強または改善し、高血糖および糖尿病を含むグルコースの恒常性の障害を治療し、および／または、人によっては分娩または乳汁分泌を誘導しうる薬剤の開発のための標的を提供する。したがって、ＩＲＡＰの機能の活性を破壊または妨げうるＩＲＡＰのインヒビターは、過度または望ましくないＩＲＡＰ活性が引き起こす症状および障害の治療において、有用な治療上および／または予防上の適用性を有しうる。
【００１０】
（発明の概要）
この後に続く本明細書および特許請求の範囲を通して、文脈に特に断りがなければ、語尾変化を含む用語「含む（からなる）（comprise、comprisesおよびcomprising）」は、述べられた完全体または段階あるいは完全体または段階の集まりを含むことを意味するが、その完全体または段階以外あるいはその完全体または段階の集まり以外を除外することを意味しないと理解される。
【００１１】
特定のベンゼン融合化合物がＩＲＡＰ阻害活性を有しており、そのためＩＲＡＰの阻害が望まれている治療上の適用において有用でありうることが現在明らかとなっている。
【００１２】
したがって、第一の態様において、本発明は式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグの阻害量をＩＲＡＰに接触させることからなるＩＲＡＰ活性の阻害方法を提供する。ＩＲＡＰ活性の阻害は、インビトロまたはインビボ、好ましくは患者の体内のインビボで遂行されうる。そのため、本発明は式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグの阻害有効量を治療が必要な患者に投与することからなる、該患者におけるＩＲＡＰ活性の阻害方法もまた提供する。
【００１３】
ここで記述される化合物は、過度または望ましくないＩＲＡＰ活性が役割を果たす疾患または症状の治療において有用でありうる。したがって、本発明はさらに、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグの有効量を治療が必要な患者に投与する処置からなる、該患者における、ＩＲＡＰ活性が関わる疾患または症状の治療方法を提供する。本発明はまた、ＩＲＡＰ活性が関わる疾患または症状を治療するための薬物の製造における、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグの使用を提供する。
【００１４】
上記のように、ＩＲＡＰインヒビターは記憶を改善し、空間学習並びに記憶欠損の回復を増強させることが示されている。
【００１５】
したがって、もう一つの態様において、本発明は式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグを患者に投与する処置からなる、患者における記憶および／または学習増強方法を提供する。そのため本発明はまた、患者における記憶および／または学習増強薬物の製造における、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグの使用を提供する。
【００１６】
ＩＲＡＰはＧＬＵＴ４小胞の輸送に含まれているので、ＡＴ４リガンドがＩＲＡＰへ結合することによってこの輸送経路が変わり、それによってグルコースの取り込みの調節も変わりうる。実際、ＡｎｇＩＶ(０．１および１μＭ)は基底細胞を増強することが示されており、またインスリン（０．７ｎＭ）は３Ｔ３−Ｌ１細胞へのグルコースの取り込みを刺激した。ＩＩ型またはインスリン非依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）の患者において、脂肪および筋肉細胞はインスリンに不完全に応答し、グルコースの恒常性の維持に寄与することができない。ＧＬＵＴ４小胞を原形質膜へ効率よく移動させ、またはＧＬＵＴ４を原形質膜に保持することができるＩＲＡＰインヒビターのような薬剤は、グルコースの恒常性の管理、および／または、高血糖および他の望ましくない臨床上の後遺症のようなＩＩ型糖尿病の症状の予防を含むＩＩ型糖尿病の管理に有用でありうる。
【００１７】
したがって、本発明のさらに別の態様は、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグを治療が必要な患者に投与する処置からなる、該患者における、グルコースの恒常性および／またはＩＩ型糖尿病の障害を治療する方法を提供する。そのため本発明は、グルコースの恒常性および／またはＩＩ型糖尿病の障害を治療するための薬物の製造における、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグの使用を提供する。
【００１８】
循環または局所的オキシトシン量の半減期を延長しうるＩＲＡＰインヒビターのような薬剤は、分娩の誘導または授乳中の母親における射乳の補助に有益でありうる。
【００１９】
したがって、本発明の第四の態様は、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグを治療が必要な患者に投与する処置からなる、該患者における、分娩または乳汁分泌の誘導方法、並びに患者における分娩または乳汁分泌を誘導するための薬物の製造における、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグの使用を提供する。
【００２０】
本発明のさらに別の態様は、本明細書中で定義される化合物１１、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグを用いた上記の方法および使用に対応する。
【００２１】
（発明の説明）
本発明は、ＩＲＡＰインヒビターとして使用されるための化合物を提供する。本発明によって意図される化合物は、式（Ｉ）：
【化１】
2008512395.tif 000002
[式中、
Ａは、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、またはヘテロシクリルであり、これらの各々は適宜置換されていてもよく；
Ｘは、Ｏ、ＮＲ’またはＳであり、その中でＲ’は水素、適宜置換されたアルキル、適宜置換されたアルケニル、適宜置換されたアルキニル、適宜置換されたアリール、適宜置換されたアシル、適宜置換されたヘテロアリール、適宜置換されたカルボシクリル、または適宜置換されたヘテロシクリルであり；
Ｒ１は、ＮＲ７Ｒ８、ＮＨＣＯＲ８、Ｎ（ＣＯＲ８）２、Ｎ（ＣＯＲ７）（ＣＯＲ８）、Ｎ＝ＣＨＯＲ８またはＮ＝ＣＨＲ８であり、その中でＲ７およびＲ８は、Ｈ、適宜置換されたアルキル、適宜置換されたアリールから独立して選択されるか、あるいはＲ７およびＲ８は、それらに結合する窒素原子と共に適宜置換されていてもよい３−８員環を形成し；
Ｒ２は、ＣＮ、ＣＯ２Ｒ９、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｏ）Ｒ９、Ｃ（Ｏ）Ｒ９、またはＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１0であり、その中でＲ９およびＲ１0は、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、ヘテロシクリルおよび水素から独立して選択され、水素を除くこれらの各々は適宜置換されていてもよく、あるいはＲ９およびＲ１0は、それらに結合する窒素原子と共に適宜置換されていてもよい３−８員環を形成し；
Ｒ３−Ｒ６は、水素、ハロ、ニトロ、シアノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、カルボシクリル、ヒドロキシ、アルコキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アルキニルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、アミノ、アシル、アシルオキシ、カルボキシ、カルボキシエステル、メチレンジオキシ、アミド、チオ、アルキルチオ、アルケニルチオ、アルキニルチオ、アリールチオ、ヘテロアリールチオ、ヘテロシクリルチオ、カルボシクリルチオ、アシルチオ、およびアジドから独立して選択され、これらの各々は必要に応じて適宜置換されていてもよく、あるいは隣接するＲ３−Ｒ６のいずれかの二つは、それらに結合する原子と共に適宜置換されていてもよい３−８員環を形成し；および
Ｙは、水素またはＣ１−１０アルキルである]
の化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグを含む。
【００２２】
本明細書中で用いられる、単独でまたは化合物の用語中で用いられる用語「アルキル」は、直鎖、分岐または環状アルキルを示し、好ましくはＣ１−２０アルキル、例えばＣ１−１０またはＣ１−６を示す。直鎖および分岐アルキルの例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、１，２−ジメチルプロピル、１，１−ジメチルプロピル、ヘキシル、４−メチルペンチル、１−メチルペンチル、２−メチルペンチル、３−メチルペンチル、ｌ，ｌ−ジメチルブチル、２，２−ジメチルブチル、３，３−ジメチルブチル、１，２−ジメチルブチル、１，３−ジメチルブチル、１，２，２，−トリメチルプロピル、１，１，２−トリメチルプロピル、ヘプチル、５−メチルヘキシル、１−メチルヘキシル、２，２−ジメチルペンチル、３，３−ジメチルペンチル、４，４−ジメチルペンチル、１，２−ジメチルペンチル、１，３−ジメチルペンチル、１，４−ジメチルペンチル、１，２，３−トリメチルブチル、１，１，２−トリメチルブチル、１，１，３−トリメチルブチル、オクチル、６−メチルヘプチル、１−メチルヘプチル、１，１，３，３−テトラメチルブチル、ノニル、１−、２−、３−、４−、５−、６−、または７−メチルオクチル、１−、２−、３−、４−、または５−エチルヘプチル、１−、２−、または３−プロピルヘキシル、デシル、１−、２−、３−、４−、５−、６−、７−、および８−メチルノニル、１−、２−、３−、４−、５−、または６−エチルオクチル、１−、２−、３−、または４−プロピルヘプチル、ウンデシル、１−、２−、３−、４−、５−、６−、７−、８−、または９−メチルデシル、１−、２−、３−、４−、５−、６−、または７−エチルノニル、１−、２−、３−、４−、または５−プロピルオクチル、１−、２−、または３−ブチルヘプチル、１−ペンチルヘキシル、ドデシル、１−、２−、３−、４−、５−、６−、７−、８−、９−、または１０−メチルウンデシル、１−、２−、３−、４−、５−、６−、７−、または８−エチルデシル、１−、２−、３−、４−、５−、または６−プロピルノニル、１−、２−、３−、または４−ブチルオクチル、１−２−ペンチルヘプチルなどが含まれる。環状アルキルの例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロノニル、シクロデシルなどのようなモノ−またはポリ環状アルキル基が含まれる。アルキル基が一般に「プロピル」、「ブチル」などとして言及される場合には、これは必要に応じて直鎖、分岐および環状異性体のいずれも指しうるものと理解される。アルキル基は、本明細書中で定義されたような一つまたはそれ以上の任意の置換基によって適宜置換されていてもよい。
【００２３】
本明細書中で用いられる用語「アルケニル」は、少なくとも一つの炭素−炭素二重結合を含む、直鎖、分岐または環状炭化水素残基から形成される基を示し、上記で定義されたアルキルあるいは環状アルキル基のエチレン状のモノ、ジ、またはポリ不飽和体を含み、好ましくはＣ２−２０アルケニル（例えば、Ｃ２−１０またはＣ２−６）を示す。アルケニルの例には、ビニル、アリル、１−メチルビニル、ブテニル、イソブテニル、３−メチル−２−ブテニル、１−ペンテニル、シクロペンテニル、１−メチル−シクロペンテニル、１−ヘキセニル、３−ヘキセニル、シクロヘキセニル、１−ヘプテニル、３−ヘプテニル、１−オクテニル、シクロオクテニル、１−ノネニル、２−ノネニル、３−ノネニル、１−デセニル、３−デセニル、１，３−ブタジエニル、１，４−ペンタジエニル、１，３−シクロペンタジエニル、１，３−ヘキサジエニル、１，４−ヘキサジエニル、１，３−シクロヘキサジエニル、１，４−シクロヘキサジエニル、１，３−シクロヘプタジエニル、１，３，５−シクロヘプタトリエニル、および１，３，５，７−シクロオクタテトラエニルが含まれる。アルケニル基は、本明細書中で定義されたような一つまたはそれ以上の任意の置換基によって適宜置換されていてもよい。
【００２４】
本明細書中で用いられる用語「アルキニル」は、少なくとも一つの炭素−炭素三重結合を含む、直鎖、分岐または環状炭化水素残基から形成される基を示し、上記で定義されたアルキルあるいは環状アルキル基のエチレン状のモノ、ジ、またはポリ不飽和体を含む。炭素原子の数が特定されていなければ、その用語は好ましくはＣ２−２０アルキニル（例えば、Ｃ２−１０またはＣ２−６）を指す。例には、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、およびブチニル異性体、並びにペンチニル異性体が含まれる。アルキニル基は、本明細書中で定義されたような一つまたはそれ以上の任意の置換基によって適宜置換されていてもよい。
【００２５】
「［化学基］オキシ」として書かれた用語は、酸素で連結された特定の基を示し、例えば、用語「アルコキシ」、「アルケノキシ」、「アルキノキシ」および「アリールオキシ」および「アシルオキシ」はそれぞれ、酸素で連結された場合のこれまでに定義されたようなアルキル、アルケニル、アルキニル、アリールおよびアシル基を指す。「［化学基］チオ」として書かれた用語は、硫黄で連結された特定の基を指し、例えば、用語「アルキルチオ」、「アルケニルチオ」、「アルキニルチオ」および「アリールチオ」はそれぞれ、硫黄で連結された場合のこれまでに定義されたようなアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール基を示す。
【００２６】
用語「ハロゲン（ハロ）」は、フッ素（フルオロ）、塩素（クロロ）、臭素（ブロモ）、またはヨウ素（ヨード）を示す。
【００２７】
用語「アリール」は、芳香族炭化水素の環状系の単核、多核、共役複合および縮合基のいずれかを示す。アリールの例には、フェニル、ビフェニル、テルフェニル、クアテルフェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、アントラセニル、ジヒドロアントラセニル、ベンズアントラセニル、ジベンズアントラセニル、フェナントレニル、フルオレニル、ピレニル、インデニル、アズレニル、クリセニルが含まれる。好ましいアリールにはフェニルおよびナフチルが含まれる。アリール基は、本明細書中で定義されたような一つまたはそれ以上の任意の置換基によって適宜置換されていてもよい。
【００２８】
用語「カルボシクリル」は、非芳香族モノ環状、ポリ環状、縮合または共役複合炭化水素残基のいずれか、好ましくはＣ３−２０（例えばＣ３−１０またはＣ３−８）を含む。環は、例えばシクロアルキルのように飽和していてもよく、あるいは一つもしくはそれ以上の二重結合（シクロアルケニル）および／または一つもしくはそれ以上の三重結合（シクロアルキニル）を有していてもよい。特に好ましいカルボシクリルは、５−６員または９−１０員環系である。適当な例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロノニル、シクロデシル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロオクテニル、シクロペンタジエニル、シクロヘキサジエニル、シクロオクタテトラエニル、インダニル、デカリニルおよびインデニルが含まれる。
【００２９】
単独でまたは化合物の用語中で用いられるときの用語「ヘテロシクリル」または「ヘテロ環状」は、モノ環状、ポリ環状、縮合または共役複合炭化水素残基、好ましくはＣ３−２０（例えばＣ３−１０またはＣ３−８）のいずれかを含み、その中で一つまたはそれ以上の炭素原子は、非芳香族残基を与えるためにヘテロ原子によって置換される。適当なヘテロ原子には、Ｏ、Ｎ、Ｓ、ＰおよびＳｅ、特にＯ、ＮおよびＳが含まれる。二つまたはそれ以上の炭素原子が置換される場合には、これは二つまたはそれ以上の同一ヘテロ原子であっても、異なるヘテロ原子であってもよい。ヘテロシクリル基は飽和または一部不飽和、すなわち一つまたはそれ以上の二重結合を有していてもよい。特に好ましいヘテロシクリルは５−６および９−１０員環のヘテロシクリルである。ヘテロシクリル基の適当な例には、ピロリジニル、ピロリニル、ピペリジル、ピペラジニル、モルホリニル、インドリニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピラゾリジニル、チオモルホリニル、ジオキサニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロピロリニル、ピラニルおよびジヒドロピラニルが含まれうる。ヘテロシクリル基は適宜置換されうる。
【００３０】
用語「ヘテロアリール」は、モノ環状、ポリ環状、縮合または共役複合炭化水素残基のいずれかを含み、その中で一つまたはそれ以上の炭素原子は、芳香族残基を与えるためにヘテロ原子によって置換される。好ましいヘテロアリールは３−２０員環、例えば３−１０員環を有する。特に好ましいヘテロアリールは、５−６および９−１０員環系である。適当なヘテロ原子には、Ｏ、Ｎ、Ｓ、ＰおよびＳｅ、特にＯ、ＮおよびＳが含まれる。二つまたはそれ以上の炭素原子が置換される場合には、これは二つまたはそれ以上の同一ヘテロ原子であっても、異なるヘテロ原子であってもよい。ヘテロアリール基の適当な例には、ピリジル、ピロリル、チエニル、イミダゾリル、フラニル、ベンゾチエニル、イソベンゾチエニル、ベンゾフラニル、イソベンゾフラニル、インドリル、イソインドリル、ピラゾリル、ピラジリル、ピリミジニル、ピリダジニル、インドリジニル、キノリル、イソキノリル、フタラジニル、１，５−ナフチリジニル、キノザリニル、キナゾリニル、キノリニル、オキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、イソキサゾリル、トリアゾリル、オキサジアゾリル(oxadialzolyl)、オキサトリアゾリル、トリアジニル、およびフラザニルが含まれうる。ヘテロアリール基は宜置換されうる。
【００３１】
単独でまたは化合物の用語中の用語「アシル」は、Ｃ＝Ｏの部分を含む（カルボン酸、エステルまたはアミドを含まない）基を示す。好ましいアシルにはＣ（Ｏ）−Ｒが含まれ、その中でＲは水素またはアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、またはヘテロシクリル基である。アシルの例には、ホルミル；アセチル、プロパノイル、ブタノイル、２−メチルプロパノイル、ペンタノイル、２，２−ジメチルプロパノイル、ヘキサノイル、ヘプタノイル、オクタノイル、ノナノイル、デカノイル、ウンデカノイル、ドデカノイル、トリデカノイル、テトラデカノイル、ペンタデカノイル、ヘキサデカノイル、ヘプタデカノイル、オクタデカノイル、ノナデカノイルおよびアイコサノイルのような直鎖または分岐アルカノイル（例えばＣ１−２０）；シクロプロピルカルボニル、シクロブチルカルボニル、シクロペンチルカルボニルおよびシクロヘキシルカルボニルのようなシクロアルキルカルボニル；ベンゾイル、トルオイルおよびナフトイルのようなアロイル；フェニルアルカノイル（例えばフェニルアセチル、フェニルプロパノイル、フェニルブタノイル、フェニルイソブチリル、フェニルペンタノイルおよびフェニルヘキサノイル）並びにナフチルアルカノイル（例えばナフチルアセチル、ナフチルプロパノイルおよびナフチルブタノイル）のようなアラルカノイル；フェニルアルケノイル（例えばフェニルプロペノイル、フェニルブテノイル、フェニルメタクリロイル、フェニルペンテノイルおよびフェニルヘキセノイル）並びにナフチルアルケノイル（例えばナフチルプロペノイル、ナフチルブテノイルおよびナフチルペンテノイル)のようなアラルケノイル；フェノキシアセチルおよびフェノキシプロピオニルのようなアリールオキシアルカノイル；フェニルチオカルバモイルのようなアリールチオカルバモイル；フェニルグリオキシロイルおよびナフチルグリオキシロイルのようなアリールグリオキシロイル；フェニルスルホニルおよびナフチルスルホニルのようなアリールスルホニル；ヘテロ環状カルボニル；チエニルアセチル、チエニルプロパノイル、チエニルブタノイル、チエニルペンタノイル、チエニルヘキサノイル、チアゾリルアセチル、チアジアゾリルアセチルおよびテトラゾリルアセチルのようなヘテロ環状アルカノイル；ヘテロ環状プロペノイル、ヘテロ環状ブテノイル、ヘテロ環状ペンテノイルおよびヘテロ環状ヘキセノイルのようなヘテロ環状アルケノイル；およびチアゾリグリオキシロイルおよびチエニルグリオキシロイルのようなヘテロ環状グリオキシロイルが含まれる。Ｒ基は本明細書中に記載されるように適宜置換されうる。
【００３２】
用語「アミノ」は、本明細書中では技術的に理解されるような広義で用いられ、式ＮＲＡＲＢの基を含み、その中でＲＡおよびＲＢは、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、カルボシクリル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、アラルキル、およびアシルからいずれかが独立して選択されうる。ＲＡおよびＲＢはまた、それらに結合する窒素原子と共に、モノ環状、またはポリ環状環系、例えば３−１０員環、特に５−６および９−１０員環系を形成していてもよい。「アミノ」の例には、ＮＨ２、ＮＨアルキル（例えばＣ１−２０アルキル）、ＮＨアリール（例えばＮＨフェニル）、ＮＨアラルキル（例えばＮＨベンジル）、ＮＨアシル（例えばＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−２０アルキル、ＮＨＣ（Ｏ）フェニル）、Ｎアルキルアルキル（その中で各アルキル、例えばＣ１−２０は同一または異なっていてもよい）および一つまたはそれ以上の同一または異なるヘテロ原子（例えばＯ、ＮおよびＳ）を適宜含む５または６員環が含まれる。
【００３３】
用語「アミド」は、本明細書中では技術的に理解されるような広義で用いられ、式Ｃ（Ｏ）ＮＲＡＲＢを有する基を含み、その中でＲＡおよびＲＢは上記で定義されたとおりである。アミドの例には、Ｃ（Ｏ）ＮＨ２、Ｃ（Ｏ）ＮＨアルキル（例えばＣ１−２０アルキル）、Ｃ（Ｏ）ＮＨアリール（例えばＣ（Ｏ）ＮＨフェニル）、Ｃ（Ｏ）ＮＨアラルキル（例えばＣ（Ｏ）ＮＨベンジル）、Ｃ（Ｏ）ＮＨアシル（例えばＣ（Ｏ）ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−２０アルキル、Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ（Ｏ）フェニル）、Ｃ（Ｏ）Ｎアルキルアルキル（その中で各アルキル、例えばＣ１−２０は同一または異なっていてもよい）および一つまたはそれ以上の同一または異なるヘテロ原子（例えばＯ、ＮおよびＳ）を適宜含む５または６員環が含まれる。
【００３４】
用語「カルボキシエステル」は、本明細書中では技術的に理解されるような広義で用いられ、式ＣＯ２Ｒを有する基を含み、その中でＲは、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、カルボシクリル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、アラルキル、およびアシルを含む基から選択されうる。カルボキシエステルの例には、ＣＯ２Ｃ１−２０アルキル、ＣＯ２アリール（例えばＣＯ２フェニル）、ＣＯ２アラルキル（例えばＣＯ２ベンジル）が含まれる。
【００３５】
本明細書中で、「適宜置換される」とは、アルキル、アルケニル、アルキニル、カルボシクリル、アリール、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、アシル、アラルキル、アルカリール、アルクヘテロシクリル(alkheterocyclyl)、アルクヘテロアリール(alkheteroaryl)、アルクカルボシクリル(alkcarbocyclyl)、ハロ、ハロアルキル、ハロアルケニル、ハロアルキニル、ハロアリール、ハロカルボシクリル、ハロヘテロシクリル、ハロヘテロアリール、ハロアシル、ハロアリールアルキル(haloaryalkyl)、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシアルケニル、ヒドロキシアルキニル、ヒドロキシカルボシクリル、ヒドロキシアリール、ヒドロキシヘテロシクリル、ヒドロキシヘテロアリール、ヒドロキシアシル、ヒドロキシアラルキル、アルコキシアルキル、アルコキシアルケニル、アルコキシアルキニル、アルコキシカルボシクリル、アルコキシアリール、アルコキシヘテロシクリル、アルコキシヘテロアリール、アルコキシアシル、アルコキシアラルキル、アルコキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アリールオキシ、カルボシクリルオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、アシルオキシ、ハロアルコキシ、ハロアルケニルオキシ、ハロアルキニルオキシ、ハロアリールオキシ、ハロカルボシクリルオキシ、ハロアラルキルオキシ、ハロヘテロアリールオキシ、ハロヘテロシクリルオキシ、ハロアシルオキシ、ニトロ、ニトロアルキル、ニトロアルケニル、ニトロアルキニル、ニトロアリール、ニトロヘテロシクリル、ニトロヘテロアリール、ニトロカルボシクリル、ニトロアシル、ニトロアラルキル、アミノ（ＮＨ２）、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルケニルアミノ、アルキニルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、アラルキルアミノ、ジアラルキルアミノ、アシルアミノ、ジアシルアミノ、ヘテロシクルアミノ、ヘテロアリールアミノ、カルボキシ、カルボキシエステル、アミド、アルキルスルホニルオキシ、アリールスルフェニルオキシ、アルキルスルフェニル、アリールスルフェニル、メチレンジオキシ、チオ、アルキルチオ、アルケニルチオ、アルキニルチオ、アリールチオ、アラルキルチオ、カルボシクリルチオ、ヘテロシクリルチオ、ヘテロアリールチオ、アシルチオ、シアノ、硫酸およびリン酸基から選択されたものを含む、一つ、二つ、三つまたはそれ以上の有機および無機基でさらに置換または縮合（縮合ポリ環状基を形成するために）されていてもよく、またはされていなくてもよい基であることを意味するものと取られる。任意の置換はまた、鎖または環におけるＣＨ２基がカルボニル基（Ｃ＝Ｏ）によって置換されていることを指すものと取られてもよい。
【００３６】
好ましい任意の置換には、アルキル、（例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルまたはシクロヘキシルのようなＣ１−６アルキル）、ヒドロキシアルキル（例えばヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピル）、アルコキシアルキル（例えばメトキシメチル、メトキシエチル、メトキシプロピル、エトキシメチル、エトキシエチル、エトキシプロピルなど）アルコキシ（例えばメトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、シクロプロポキシ、シクロブトキシのようなＣ１−６アルコキシ）、ハロ、トリフルオロメチル、トリクロロメチル、トリブロモメチル、ヒドロキシ、フェニル（例えばＣ１−６アルキル、ハロ、ヒドロキシ、ヒドロキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロＣ１−６アルキル、シアノ、ニトロ、ＯＣ（Ｏ）Ｃ１−６アルキル、およびアミノによって、それ自身さらに置換されていてもよい）、ベンジル（その中でベンジル自身は、例えばＣ１−６アルキル、ハロ、ヒドロキシ、ヒドロキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロＣ１−６アルキル、シアノ、ニトロ、ＯＣ（Ｏ）Ｃ１−６アルキル、およびアミノによって、さらに置換されていてもよい）、フェノキシ（その中でフェニル自身は、例えばＣ１−６アルキル、ハロ、ヒドロキシ、ヒドロキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロＣ１−６アルキル、シアノ、ニトロ、ＯＣ（Ｏ）Ｃ１−６アルキル、およびアミノによって、さらに置換されていてもよい）、ベンジルオキシ（その中でベンジル自身は、例えばＣ１−６アルキル、ハロ、ヒドロキシ、ヒドロキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロＣ１−６アルキル、シアノ、ニトロ、ＯＣ（Ｏ）Ｃ１−６アルキル、およびアミノによって、さらに置換されていてもよい）、アミノ、アルキルアミノ（例えばメチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノなどのようなＣ１−６アルキル）、ジアルキルアミノ（例えばジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジプロピルアミノのようなＣ１−６アルキル）、アシルアミノ（例えばＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ３）、フェニルアミノ（その中でフェニル自身は、例えばＣ１−６アルキル、ハロ、ヒドロキシ、ヒドロキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロＣ１−６アルキル、シアノ、ニトロ、ＯＣ（Ｏ）Ｃ１−６アルキル、およびアミノによって、さらに置換されていてもよい）、ニトロ、ホルミル、−Ｃ（Ｏ）−アルキル（例えばアセチルのようなＣ１−６アルキル）、Ｏ−Ｃ（Ｏ）−アルキル（例えばアセチルオキシのようなＣ１−６アルキル）、ベンゾイル（その中でフェニル基自身は、例えばＣ１−６アルキル、ハロ、ヒドロキシ、ヒドロキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロＣ１−６アルキル、シアノ、ニトロ、ＯＣ（Ｏ）Ｃ１−６アルキル、およびアミノによって、さらに置換されていてもよい）、ＣＨ２をＣ＝Ｏ、ＣＯ２Ｈ、ＣＯ２アルキルに置換（例えばメチルエステル、エチルエステル、プロピルエステル、ブチルエステルのようなＣ１−６アルキル）、ＣＯ２フェニル（その中でフェニル自身は、例えばＣ１−６アルキル、ハロ、ヒドロキシ、ヒドロキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロＣ１−６アルキル、シアノ、ニトロ、ＯＣ（Ｏ）Ｃ１−６アルキル、およびアミノによって、さらに置換されていてもよい）、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨフェニル（その中でフェニル自身は、例えばＣ１−６アルキル、ハロ、ヒドロキシ、ヒドロキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロＣ１−６アルキル、シアノ、ニトロ、ＯＣ（Ｏ）Ｃ１−６アルキル、およびアミノによって、さらに置換されていてもよい）、ＣＯＮＨベンジル（その中でベンジル自身は、例えばＣ１−６アルキル、ハロ、ヒドロキシ、ヒドロキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロＣ１−６アルキル、シアノ、ニトロ、ＯＣ（Ｏ）Ｃ１−６アルキル、およびアミノによって、さらに置換されていてもよい）、ＣＯＮＨアルキル（例えばメチルエステル、エチルエステル、プロピルエステル、ブチルアミドのようなＣ１−６アルキル）およびＣＯＮＨジアルキル（例えばＣ１−６アルキル)が含まれる。
【００３７】
式（Ｉ）の好ましいＡには、適宜置換された５−６員環アリール、ヘテロアリール、カルボシクリル、およびヘテロシクリルが含まれ、それは例えばフェニル、ピリジル（Ｃ２、Ｃ３またはＣ４に付加）、ピラジリル、ピリミジニル（Ｃ２、Ｃ４またはＣ５に付加）、ピリダジニル（Ｃ３またはＣ４に付加）、ｓ−トリアジニル（Ｃ２、Ｃ４またはＣ６に付加）、ａｓ−トリアジニル（Ｃ３、Ｃ５またはＣ６に付加）、ｖ−トリアジニル（Ｃ４、Ｃ５またはＣ６に付加）、フラニル（Ｃ２またはＣ３に付加）、ピロリル（Ｃ２またはＣ３に付加）、チエニル（Ｃ２またはＣ３に付加）、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロペンタジエニル、シクロヘキサジエニル、ピラニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、ピロリジニルおよびピロリニルである。好ましい態様において、Ａは適宜置換された５−６員環アリールまたは適宜置換されたヘテロアリール、特に適宜置換されたフェニルまたは適宜置換されたピリジルである。
【００３８】
Ａの特に好ましい置換には、アルキル、ハロアルキル（例えばモノ、ジまたはトリフルオロメチル、モノ、ジまたはトリクロロメチルおよびモノ、ジ、トリ、テトラ、ペンタまたはヘキサフルオロエチルおよびモノ、ジ、トリ、テトラ、ペンタまたはヘキサクロロエチル）、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、チオアルキル、アリールアルキル（例えばベンジルおよびフェニルエチル）、アルコキシ、ハロアルコキシ、ヒドロキシアルコキシル、アミノアルコキシ、アルキチオ、ハロアルキルチオ(haloalkythio)、ヒドロキシアルキルチオ、アミノアルキルチオ、チオアルキチオ、アミノ、Ｃ（Ｏ）アルキル、ＯＣ（Ｏ）アルキル、アリール（例えばフェニル）、カルボキシ、カルボキシエステル（例えばＣＯ２アルキル、ＣＯ２アリール）、Ｃ（Ｏ）アリール、ＯＣ（Ｏ）アリール、ニトロ、シアノ、ヘテロアリール（例えばピリジル）、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヒドロキシ、チオ、メチレンジオキシ、ハロ（例えばＣｌ、Ｂｒ）およびアミドが含まれる。そのような置換が「アルキル」部分を含む場合に、好ましいアルキルはＣ１−１０アルキル、特にメチル、エチル、ｉ−プロピル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチルまたはｔ−ブチルのようなＣ１−６アルキルである。
【００３９】
一つの態様において、ＸはＯである。別の態様において、ＸはＮＲ’である。さらに別の態様において、ＸはＳである。特に好ましいＸはＯである。ＸがＮＲ’である場合に、Ｒ’の好ましい例の中には、水素、Ｃ１−１０アルキル、ベンジル、フェニルエチル、ＯＣ（Ｏ）Ｃ１−１０アルキルおよびＯＣ（Ｏ）フェニルが含まれる。
【００４０】
特に好ましい態様において、Ｙは水素である。
【００４１】
好ましいＲ７およびＲ８には、水素、Ｃ１−１０アルキル、およびフェニルが含まれ、その中でＣ１−１０アルキルおよびフェニルは適宜置換されていてもよい。
【００４２】
Ｒ７およびＲ８（上記のような好ましいＲ７およびＲ８を含む）のために特に好ましい置換には、アルキル、ハロアルキル（例えばモノ、ジまたはトリフルオロメチル、モノ、ジまたはトリクロロメチルおよびモノ、ジ、トリ、テトラ、ペンタまたはヘキサフルオロエチルおよびモノ、ジ、トリ、テトラ、ペンタまたはヘキサクロロエチル）、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、チオアルキル、アリールアルキル（例えばベンジルおよびフェニルエチル）、アルコキシ、ハロアルコキシ、ヒドロキシアルコキシル、アミノアルコキシ、アルキチオ、ハロアルキルチオ(haloalkythio)、ヒドロキシアルキルチオ、アミノアルキルチオ、チオアルキチオ、アミノ、Ｃ（Ｏ）アルキル、ＯＣ（Ｏ）アルキル、アリール（例えばフェニル）、カルボキシ、カルボキシエステル、Ｃ（Ｏ）アリール、ＯＣ（Ｏ）アリール、ニトロ、シアノ、ヘテロアリール（例えばピリジル）、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヒドロキシ、チオ、メチレンジオキシ、ハロ（例えばＣｌ、Ｂｒ）およびアミドが含まれ、または一緒に５−６員環（例えばピペリジル、モルホリニル）を形成する。そのような置換が「アルキル」部分を含む場合に、好ましいアルキルはＣ１−１０アルキル、特にＣ１−６アルキルである。特に好ましいＲ１には、ＮＨ２、ＮＨＣ１−６アルキル、Ｎ（Ｃ１−６アルキル）（Ｃ１−６アルキル）およびＮＨＣ（Ｏ）Ｃ１−６アルキルが含まれ、最も好ましいのはＮＨ２である。
【００４３】
Ｒ２に関して、好ましいＲ９およびＲ１0には、水素、Ｃ１−１０アルキル、アリール（例えばフェニル）、ヘテロアリール（例えばピリジル）が含まれる。特に好ましいＲ２の一つはシアノ（ＣＮ）である。他の好ましいＲ２は、ＣＯ２Ｃ１−１０アルキル、（例えばＣＯ２Ｍｅ、ＣＯ２Ｅｔ、ＣＯ２Ｐｒ、ＣＯ２Ｂｕなど）およびアミド、例えばＣＯＮＨ２である。
【００４４】
適当なＲ３−Ｒ６の例には、水素、クロロ、ブロモ、Ｃ１−１０アルキル（シクロアルキルを含む）、Ｃ２−１０アルケニル（シクロアルケニルを含む）、Ｃ２−１０アルキニル（シクロアルキニルを含む）、Ｃ１−１０アルコキシ（例えばメトキシ、エトキシ、ｎ−およびｉ−プロポキシ並びにｎ−、ｓｅｃ−およびｔ−ブトキシ）、フェニル、ハロフェニル、ヒドロキシフェニル、アミノフェニル、アルキルフェニル、ヒドロキシ、ＮＨ２、ＮＨＣ１−１０アルキル、ＮＣ１−１０アルキルＣ１−１０アルキル（その中で各アルキルは同一または異なっていてもよい）、ニトロ、ハロアルキル（トリフルオロメチル、トリクロロメチルを含む）、アシル（例えばＣ（Ｏ）Ｃ１−１０アルキル）、アシルオキシ（例えばＯＣ（Ｏ）Ｃ１−１０アルキルまたはＯＣ（Ｏ）フェニルのようなＯＣ（Ｏ）アリール）、カルボキシエステル（例えばＣＯ２Ｃ１−１０アルキルおよびＣＯ２フェニル）、ＣＯ２Ｈ、アミド（例えばＣＯＮＨＣ１−１０アルキル）、ニトロ、シアノ、チオ、アルキルチオ（例えばＳＣ１−１０アルキル）が含まれ、および隣接するＲ３−Ｒ６の２つはメチレンジオキシを形成する。Ｒ３−Ｒ６のいずれも水素でなく、または一つ、二つ、三つもしくは四つが水素でもよい。一つの好ましい形において、Ｒ３−Ｒ６の２つまたは３つまたは４つは水素である。ある特定の態様において、Ｒ３、Ｒ４およびＲ６はすべてＨである。
【００４５】
隣接するＲ３−Ｒ６のいずれかの二つが、それらに結合する原子と共に３−８員環を形成する場合、その環は炭素環（飽和または一部不飽和）、ヘテロ環、アリール、またはヘテロアリールでありうる。いずれかの好ましい態様において、形成された環は５−６員環を有する。本態様の特に好ましい形は、Ｒ５およびＲ６が環を形成する場合である。隣接するＲ３−Ｒ６のいずれかの二つがつながる例には、−（ＣＨ２）ｎ−（ｎが１−７、好ましくは１−４、特に３または４）、−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ、−ＣＨ＝ＣＨ２−ＣＨ２＝ＣＨ−、−ＣＨ２−ＮＨＣＨ２−、−（ＣＨ２）２−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−（ＣＨ２）２−、−（ＣＨ２）２−ＮＨ−、−ＮＨ−（ＣＨ２）２−、−ＮＨ−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＮＨ−、−Ｏ−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｏ−、−Ｓ−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｓ−、−Ｎ＝ＣＨ−ＣＨ＝Ｎ−Ｏ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−、および−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−Ｏ−が含まれる。必要に応じて、このような環の中のＮ原子は、アルキル（例えばＣ１−１０）、アリール（例えばフェニル）、アリールアルキル（例えばベンジルまたはフェニルエチル）、アシル（例えばＣ（Ｏ）Ｃ１−１０アルキル）ヒドロキシアルキル（例えばＣ１−１０）、ハロアルキル（例えばＣ１−１０）、カルボシクリルアルキル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクリルアルキル、カルボシクリル、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルでさらに置換されていてもよい。
【００４６】
本発明に従ってＩＲＡＰインヒビターおよび／または治療剤として有用性を有しうる他の化合物は、ＷＯ０２／０９２５９４においてさらに記載および／または例示されており、その全体の内容は全目的について本明細書中に引用される。
【００４７】
本発明で用いられる化合物は商業的供給源を通して取得され、また、例えばＷＯ０２／０９２５９４で参照される合成有機化学の技術において公知の方法によって製造されうる。
【００４８】
したがって、ＸがＯである化合物を製造するために、適当に置換されたフェノール化合物は、ピペリジンまたはＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンのような塩基の存在下、以下の一般化された反応式１に従って適当なアルデヒドおよびマロノニトリルと反応しうる。
【化２】
2008512395.tif 000003
もう一つ方法として、アルデヒドは塩基の存在下マロノニトリルと反応し、生じたアリーリデン中間体は適当なフェノールと反応しうる。
【００４９】
もう一つの方法において、適当に置換されたオルト−アロイルフェノール、アニリン、またはベンゼンチオールは、以下の反応式２（必要に応じて、ＰはＨまたは保護基である）のように、マロノニトリル（または適当なシアノ酢酸化合物、シアノアセトアミド、もしくはアシルアセトニトリル）と反応し、対応する４Ｈ−クロメン、１，４−ジヒドロキノリン、または４Ｈ−チオクロメンに達しうる。
【化３】
2008512395.tif 000004
適当なジヒドロキノリン化合物はまた、適当に置換され、または保護されたキノリンの還元によっても製造されうる。
【００５０】
Ｒ１がＮＨ２以外である場合の式（Ｉ）の化合物は、例えばComprehensive Organic Transformation, A Guide to Functional Group Preparations, R. C. Larock, VCH, 1989、およびAdvanced Organic Chemistry, Reactions, Mechanisms and Structure, J. March, 3rd Edition, 1985または4th Edition, 1992（その全体の内容は本明細書中に引用される）に記載されているような当該技術分野で公知の化学変換を用いて、そのアミンを目的の基へと変換することによって製造されうる。したがって、適当な塩基または触媒の存在下、そのアミン（ＮＨ２）をカルボン酸、酸無水物または塩化物のような適当なアシル化剤で処理することによって、Ｒ１がＮＨＣＯＲ８である場合の式（Ｉ）の化合物に達しうる。アルキルおよびアリールアミンは、ＮＨ２を適当なアルキルハライドまたはアリールハライドで処理することによって製造されうる。イミンは、技術的に公知の方法に従って、そのアミノ基（ＮＨ２）をアルデヒドまたはケトンのような適当なカルボニルを含む化合物で処理することによって形成されうる。
【００５１】
同様に、Ｒ２がＣＮ以外、すなわちカルボン酸、エステル、アミド、酸無水物、およびケトンである場合の化合物は、特にLarock, supra, Chapter 9, pp 963-995で参照される当該技術分野で公知の変換によって製造されうる。もう一つの方法として、適当なフェノール、アルデヒド、および適当なシアノ酢酸化合物、シアノアセトアミドまたはアシルアセトニトリルの反応によって、Ｒ２がＣＯ２Ｒ９、Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１0、Ｃ（Ｏ）Ｒ９、およびＣ（Ｏ）Ｏ（Ｏ）Ｒ９である場合の化合物に達しうる。Ｙがアルキルである場合の化合物は、ベンゾピランをＤＤＱで処理し、その結果生じた中間体をＣｕＢｒ・ＤＭＳおよびアルキルリチウム化合物で処理することによって製造されうる。
【００５２】
本発明によって意図されている化合物を製造するための過程において、行われている反応または変換条件に対して反応性が高く、または敏感でありうる特定の官能基（例えばＯＨ、ＮＨ２、ＣＯ２Ｈ、ＳＨ、Ｃ＝Ｏ）を保護することが必要または望ましいということが認識されうる。このような官能基のための適当な保護基は技術的に知られており、標準的なプラクティスに従って用いられうる。このような保護基、並びにその導入およびその後の適当な段階での除去方法は、Protective Groups in Organic Chemistry, 3rd Edition, T.W.Greene and P. G. Wutz, John Wiley and Sons, 1999に記載されており、その全体の内容は本明細書中に引用される。
【００５３】
本明細書中で開示される化合物のＩＲＡＰ阻害活性の程度は、Ｌｅｕ−β−ナフチルアミドまたはＬｅｕ−４−メチルクマリル−７−アミドのようなＩＲＡＰアミノペプチダーゼ基質の開裂または分解の速度または程度を評価することによって、ＩＲＡＰのアミノペプチダーゼ活性を阻害するための試験化合物の能力を測定するインビトロアッセイでまず決定されうる。次いで対照アッセイと比較し、それによりその化合物の非存在下での開裂の速度または程度が決定されうる。化合物の存在下における基質の開裂の速度または程度の相対的な減少は、化合物の阻害効果の尺度であるとみなされうる。
【００５４】
したがって、化合物のＩＲＡＰ阻害活性の測定方法であって、
（ａ）ＩＲＡＰ、ＩＲＡＰの基質、および本明細書中に記載された化合物のインキュベート；並びに
（ｂ）該基質の開裂の速度または程度の評価；
からなり、その中で、対照実験と比較されたときの基質の開裂の速度または程度における減少または阻害は、化合物のＩＲＡＰ阻害活性を示している方法もまた提供される。
【００５５】
望ましくない、または過度のＩＲＡＰアミノペプチダーゼ活性が関わる、または含まれる障害または症状には、アルツハイマー病および他の型の認知症および記憶喪失（頭部の外傷、低酸素性障害、手術、脳梗塞、または神経毒のような化学的手段を通じて誘導された加齢によるもの）に関連する記憶または学習障害が含まれうる。本発明の化合物が、正常な個体、すなわち上記のような認知症状を患っていない個体においてもまた、記憶または学習を増強または改善することに有用でありうることは高く評価されるべきである。
【００５６】
記憶または学習（例えば空間学習）の増強とは、患者が情報を記憶または学習する能力における改善を指し、十分に確立された試験によって測定されうる。化合物を投与する前に得られたスコア／結果と比較して、このような試験で得られた「スコア」または結果における改善が肯定的であることは、適切に記憶または学習が増強したものとみなされる。
【００５７】
多くの周知および確立された試験が実験動物のために存在し、ラットおよびマウスは、バーンズ迷路パラダイム(Greferath et al., 2000)、バーンズ環状迷路試験(Lee et al., 2004)またはその改良、Ｙ迷路試験、並びに受動的回避試験を含む方法を用いて試験されうる。これらについて以下に簡潔に概要を述べる。
【００５８】
１．バーンズ迷路
正常なオスのＳＤ(Sprague-Dawley)ラットは、側脳室にカニューレを埋め込まれ、少なくとも三日間は回復させる。バーンズ環状迷路試験について、その迷路は、周縁部に均等に隔てた１８個の穴（直径０．０９ｍ）とともに、直径１．２ｍの高くした回転できる白い円形の台からなる。幅０．１６ｍの内径、長さ０．２９ｍ、深さ０．０９ｍの黒い箱からなる避難トンネルが周縁部の穴の直下に位置している。視覚的な手がかりが迷路の周りの様々な位置に置かれている。
【００５９】
各試行について、台の中央に置かれた開始点の円筒形の容器の下に、動物が迷路の台の上に置かれ、２０秒間放置される。２０秒の失見当識時間に続いて、その容器が持ち上げられる。その動物は、次いで避難トンネルを見つけて利用するための２４０秒が与えられる。各ラットは十日間に渡って一日につき３回の連続した試行を受ける。試験期間の第一日目には、各ラットは２分間の慣れ親しむ間、避難トンネルの中へ直接置かれる。そのラットは次いでおよそ一分間そのケージの中へ置かれ、その後試験化合物または人工脳脊髄液のいずれかを注入され、次いでさらに５分間そのケージの中へ置かれる。３回の連続した試行が次いで各試行間の２分間のそのホームケージの中での回復期間を伴って実行される。その後数日（２日から８日）は、３回の試行の前の慣れ親しむ時間は手順から除かれる。
【００６０】
動物は、慢性的に留置しているカニューレを通して脳室内（ｉｃｖ）にＩＲＡＰインヒビターが投与されうる。これらの化合物は、試験の初日の最初の試行の５分前に与えられる。
【００６１】
２．Ｙ迷路
Ｙ迷路試験は、空間記憶行動を測定するもう一つの行動性パラダイムであり、新規の環境を探索するための齧歯類の自然の本能を利用する。Ｙ迷路は、１２０度の角度で分かれた三つのアームがある三つの同一の小道（長さ３０ｃｍ、幅１０ｃｍ、高さ１７ｃｍ）からなる。ストレスを最小化するため、迷路はほの暗い照明の下、音を和らげた部屋に位置しており、迷路の床はおがくずで覆われている。各試行の後、嗅覚の手がかりを除去するため、おがくずは混合される。空間的な方向づけのため、試験部屋の壁に視覚的な手がかりが掛けられている。
【００６２】
試験は二つの試行からなり、試行間の間隔として知られる合間によって分離されている。獲得試行の間、一つのアームの末端に動物が置かれ、その頭部は迷路の中央から離れた位置に向けられる。動物は３分間、迷路のうち二つだけ入ることができるアームに入ることが許される。獲得試行の終わりに、動物は試行間の合間にそのケージの中に置かれる。保持試行の間、動物は５分間すべての三つのアームに入ることができる。最初に入ったアーム（新規アーム対慣れ親しんだアーム）、入った回数および新規アームで過ごした継続時間が記録される。
【００６３】
獲得段階を保持段階から分離する試行間の間隔が短いと（２時間）、記憶を失う効果を検出することができる。対照動物はまだ新規アームの位置を覚えており、より多くの時間（全時間の４５−５０％）そのアームで優先的に過ごす。試行間の間隔が長いと（例えば６時間）、その動物が新規アームの位置を覚えておらず、そのためすべての三つのアームで等しい量の時間を過ごすことになる。
【００６４】
動物は背部の第三の脳室に注入カニューレを外科的に埋め込まれる。各動物は二度試験され、試験化合物の記憶増強特性を試験するために、６時間よりも長い試行間の間隔が採用されうる。動物は、慢性的に留置しているカニューレを通して脳室内にＩＲＡＰインヒビターを投与される。これらの化合物は、最初の獲得試行の５分前に与えられる。その動物は、次いで少なくとも６時間はそのホームケージの中に戻され、次いで再び試験される。新規アームで過ごす時間は、試験化合物の記憶増強特性の尺度である。
【００６５】
３．受動的回避
受動的回避試行は、記憶喪失動物における嫌悪条件付け行動についてのＩＲＡＰインヒビターの効果の試験に用いられうる。受動的回避課題には、記憶保持および回復の促進を測定するために嫌悪条件付け行動が含まれる。試験は、ギロチンドアによって隔てられた明室と暗室からなる装置において遂行されうる。暗室の床には、帯電させた格子が含まれている。受動的回避課題は、２４−４８時間の試行間の間隔によって隔てられた二つの試行に分割される。獲得試行として知られる第一の試行の間、その動物は明室に置かれ、一度でもその動物が暗室に入るとギロチンドアが閉まる。暗室の内部で、その動物は格子の床を通して低レベルの電気ショック（２秒間に０．５ｍＡ）を受ける。その動物は、次いで試験される前に２４または４８時間そのホームケージへ戻される。暗室に再び入るまで隠れている時間は、動物が嫌悪刺激を覚えている能力の尺度とみなされる。
【００６６】
動物は背部の第三の脳室に注入カニューレを外科的に埋め込まれることになる。各動物は二度試験され、試験化合物の記憶増強特性を試験するために、２４および４８時間の試行間の間隔が採用されうる。動物は、慢性的に留置しているカニューレを通して脳室内に新規ＩＲＡＰインヒビターを投与される。これらの化合物は、獲得試行の５分前に与えられる。その動物は、次いで２４または４８時間はそのホームケージの中に戻され、次いで再び試験される。暗室に入るまで隠れている時間は、試験化合物の記憶増強特性の尺度である。
【００６７】
４．加齢誘導記憶欠損モデル
高齢のラットにおける空間学習機能障害は十分立証され、この欠損はバーンズ迷路パラダイムにおいて検出されうる(Greferath et al., 2000)。加齢で誘導された学習欠損についてのＩＲＡＰインヒビターの効果は、バーンズ迷路パラダイムにおいて試験されうる。
【００６８】
薬物処置のため、その動物は、試験化合物を慢性的に脳室の中へ運搬するアルツェット(Alzet)ミニポンプ（頸部の皮下に固定される）が埋め込まれる。
【００６９】
記憶および学習は、カリフォルニア言語学習検査(California Verbal Learning Test)、ウェクスラー記憶検査−ＩＩＩ(Wechsler Memory Scale-III)、ホプキンズ言語学習検査−改訂版(Hopkins Verbal Learning Test-Revised)（登録商標）、レイ聴覚言語学習検査(Rey Auditory Verbal Learning Test)、およびレイ−オステライト複雑図形検査(Rey-Osterrieth Complex Figure Design Test)のように十分確立された神経心理学的な検査のうちいずれか一つによって、ヒトにおいて試験されうる。
【００７０】
他の障害および症状には、分娩の遅延並びに乳汁分泌の遅延および／または減少並びに高血糖および糖尿病を含むグルコースの恒常性の障害が含まれる。グルコースの取り込みまたは恒常性を制御する能力は、広範囲の症状の治療に利用しうる。グルコースの取り込みまたは恒常性の制御不能を導くインスリン抵抗性は、糖尿病、高血圧およびＡＩＤＳにおいて起こりうるし、また本明細書中で意図される化合物は、特に糖尿病性網膜症、肥満症、腎疾患、循環器の問題並びに代謝および心臓疾患のような糖尿病に関連した臨床の後遺症の治療において有用でありうる。
【００７１】
インスリン応答性３Ｔ３脂肪細胞におけるグルコースの取り込みは測定することができ、そのためその方法は周知である。簡潔に言えば、細胞は、インスリンの増加量の不存在および存在下において（０−１００ｎｍｏｌ）、化合物と共にインキュベートされる。インキュベーション培養液もまた、５０μＭの２−デオキシ−Ｄ−［２，６−３Ｈ］グルコースを含み、インキュベーションは２０−６０分間、３７度で行われる。インキュベーション時間の最後に、細胞は洗浄および溶解され、並びに細胞によって取り込まれた２−デオキシ−Ｄ−［２，６−３Ｈ］グルコースの量が液体シンチレーション分析器を用いて測定される。
【００７２】
抗糖尿病活性もまた、動物モデルにおいて測定されうる。
【００７３】
（ｉ）２型糖尿病
ズッカー糖尿病肥満ラット（ＺＤＦ）およびｏｂ／ｏｂマウスを含む２型糖尿病の動物モデルは、グルコースの恒常性を促進する能力について化合物を試験するために用いられうる。動物は餌を与えられ、または絶食させられ、化合物の腹腔内の（ＩＰ）注入を受ける。血液試料は尾の採血によって集められ、グルコースの量が様々な時間間隔で測定される。
【００７４】
２型糖尿病の動物モデルにおいて、グルコースの恒常性についてのＩＲＡＰインヒビターの慢性的な処置の効果は、血清中のヘモグロビンおよびフルクトサミンを含む特定糖化タンパク質の量を測定することによって調査されうる。ＩＲＡＰインヒビターの長期の運搬は浸透圧のミニポンプ（０−１ｍｏｌの用量）によってなされ、血液試料は尾の採血によって集められ、グルコースの量が測定される。屠殺時に、グリコシル化されたヘモグロビンおよびフルクトサミンの量が標準的な手順を用いて測定される。
【００７５】
（ｉｉ）１型糖尿病
ストレプトゾトシン（ＳＴＺ）を処置された動物は１型糖尿病のモデルである。血液試料は尾の採血によって集められ、グルコースの量が様々な時間間隔で測定される。
【００７６】
ＳＴＺラットにおいて、グルコースの恒常性についてのＩＲＡＰインヒビターの慢性的な処置の効果は、血清中のヘモグロビンおよびフルクトサミンを含む特定糖化タンパク質の量を測定することによって調査される。ＩＲＡＰインヒビターの長期の運搬は浸透圧のミニポンプによってなされ、血液試料は０−１６週間の尾の採血によって集められ、グルコースの量が測定される。屠殺時に、グリコシル化されたヘモグロビンおよびフルクトサミンの量が標準的な手順を用いて決定される。
【００７７】
他の障害には、運動ニューロン疾患、進行性の脊髄性筋萎縮症のような他の神経変性の障害、特に運動および感覚ニューロンを含む中枢神経系の障害または打撃もしくは外傷による中枢神経系の障害、心肥大、うっ血性心不全、高血圧症、およびアテローム性動脈硬化症を含む心血管系の障害、発達および／または成長の障害、生殖系の障害あるいは分娩の遅延および／または乳汁分泌の減少を含む妊娠に関連する障害、並びに癌が含まれる。
【００７８】
処置されるべき対象には、哺乳類の対象：ヒト、非霊長類、家畜動物（牛、馬、羊、豚およびヤギを含む）、コンパニオンアニマル（犬、猫、ウサギ、モルモットを含む）、および捕獲された野生動物が含まれる。ウサギ、マウス、ラット、モルモット、およびハムスターのような実験動物はまた、便利な試験系を提供しうると考えられる。鳥、両生類、および魚のような非哺乳類種もまた、本発明の特定の態様において考慮される。本発明の化合物は、ＩＲＡＰ阻害有効量、または治療有効量で患者に投与される。ＩＲＡＰ阻害量は、少なくとも部分的にＩＲＡＰと相互作用し、またはＩＲＡＰ活性を破壊する量である。本明細書中で用いられるＩＲＡＰ活性には、内在性リガンドとのＩＲＡＰの機能的相互作用が含まれ、特にこの場合、機能的相互作用は記憶および／または学習喪失を直接または間接的に促進し、グルコースの恒常性を破壊し、あるいは患者における分娩または乳汁分泌を遅延させる。治療上の有効量は、目的の投与計画に従って投与される際に、その治療される特定の障害または病状の症状の緩和、その発病の予防または遅延、その病気の進行の阻害、あるいはその発病または進行の部分的または完全な停止または逆行についての、その一つまたはそれ以上の目的の治療または予防の効果に、少なくとも部分的に達する量を含むことを意図している。
【００７９】
適当な投与量および投与計画は、主治医によって決定され、治療を受けている特定の症状、症状の重症度、並びに患者の一般的な年齢、健康、および体重に依存しうる。
【００８０】
活性成分は、単一用量または連続用量で投与されうる。活性成分は単独で投与されることも可能であるが、組成物として、好ましくは医薬組成物として、一つまたはそれ以上の医薬的に許容される添加剤とともに活性成分が存在することが好ましい。したがって、本発明はまた、患者におけるＩＲＡＰ活性を阻害するための薬物の製造において、式（Ｉ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩もしくはプロドラッグの使用に関する。
【００８１】
このような組成物の製剤は、例えば書籍(Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition, Mack Publishing, 1990)に参照される当該技術分野の当業者に周知である。その組成物には、いずれの適当な担体、希釈剤、または賦形剤も含まれうる。これらには、すべての通常の溶媒、分散媒、充填剤、固体担体、被覆、抗真菌剤および抗菌剤、皮膚透過剤、界面活性剤、等張剤、吸収剤などが含まれる。本発明の組成物にはまた、他の補充性の生理活性剤が含まれうることも理解されうる。
【００８２】
担体は、組成物の他の成分と作用せず、患者に対して有害でないという意味で医薬的に許容されていなければならない。組成物には、経口、直腸、経鼻、外用（皮膚、バッカル、および舌下を含む）、膣または非経口（皮下、筋肉内、静脈内、および皮内を含む）投与に適したものが含まれる。組成物は便利なように単位製剤で提供され、また薬学の技術分野において周知ないずれの方法によっても製造されうる。このような方法には、活性成分を一つまたはそれ以上の補助成分を構成する担体に会合させる段階が含まれる。一般的に組成物は、活性成分を液体担体または細粒固体担体あるいはその両方に均一および密接に会合させ、次いで必要であれば製品を成形することによって製造される。
【００８３】
経口投与に適した本発明の組成物は、活性成分の所定の量をそれぞれ含む、カプセル、サシェット（小袋）、または錠剤のような分離した単位、すなわち粉末または顆粒として、水性または非水液体における溶液または懸濁液として、あるいは水中油型乳濁液または油中水型乳濁液として存在しうる。
【００８４】
錠剤は、適宜一つまたはそれ以上の補助成分とともに、圧縮または成形によって作られうる。圧縮錠剤は、結合剤（例えば不活性希釈剤）、保存剤、崩壊剤（例えばグリコール酸ナトリウムでんぷん、架橋ポリビニルピロリドン、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム）界面活性または分散剤を適宜混合した粉末または顆粒のような自由流動性形態の活性成分を適当な機械で圧縮することによって製造されうる。成形錠剤は、不活性液体希釈液に浸した粉末の化合物の混合物を、適当な機械で成形することによって製造されうる。錠剤は、適宜コーティングまたは割線を入れ、例えば、目的の放出特性を与えるために様々な割合で混合したヒドロキシプロピルメチルセルロースを用いて、その中にある活性成分をゆっくりまたは制御して放出させるように製剤化されうる。錠剤は、胃以外の腸の部分に放出させるため、適宜腸溶コーティングが施されうる。
【００８５】
口内の局所投与に適した組成物には、通常ショ糖およびアカシアゴムまたはトラガントゴムの風味を基礎とする活性成分を含むトローチ；ゼラチンおよびグリセリンのような不活性基礎原料、またはショ糖およびアカシアゴム中に活性成分を含むトローチ；並びに適当な液体担体中に活性成分を含むうがい薬が含まれる。
【００８６】
皮膚への局所投与に適した組成物には、いずれかの適当な担体または基礎原料の中で溶解され、または懸濁された化合物が含まれ、ローション、ゲル、クリーム、ペースト、軟膏などの型の中に含まれうる。適当な担体には、鉱油、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン、乳化ろう、ソルビタンモノステアレート、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリルアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコール、および水が含まれる。経皮貼布もまた、本発明の化合物の投与のために用いられうる。
【００８７】
直腸投与のための組成物は、例えばカカオバター、グリセリン、ゼラチン、またはポリエチレングリコールを含む適当な基礎原料とともに坐薬として提供されうる。
【００８８】
膣の投与のために適当な組成物は、活性成分に加え、適した技術分野で知られているような担体を含むペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、気泡、またはスプレーの剤形として提供されうる。
【００８９】
非経口投与（例えば、皮下、筋肉内、静脈内、または脳室内）に適した組成物には、抗酸化剤、緩衝剤、殺菌剤を含みうる水性および非水性の等張性無菌注射液、および組成物を対象とする患者の血液に等張にする溶質；並びに懸濁剤および増粘剤を含みうる水性および非水性無菌懸濁液が含まれる。組成物は、例えばアンプルおよびバイアルの容器に密封された単位用量または複数用量で提供され、例えば使用直前に注射用水のような無菌液体担体の添加だけを必要とする凍結乾燥(lyophilised)条件において保管されうる。即座の注射溶液および懸濁液は、前述の種類の無菌粉末、顆粒、および錠剤から製造されうる。
【００９０】
好ましい単位服用組成物は、活性成分の１日用量または１日単位、本明細書中で上述したようなサブ用量、あるいは適当なそれの画分を含む組成物である。
【００９１】
特に上述した活性成分に加えて、本発明の組成物には、問題となっている組成物の種類を考慮した当該技術分野における通常の他の薬剤が含まれていてもよく、例えば、経口投与に適した組成物には、結合剤、甘味料、増粘剤、香料、崩壊剤、コーディング剤、防腐剤、滑沢剤、および／または時間遅延剤のような追加の薬剤が含まれていてもよいことは理解されるべきである。適当な甘味料には、ショ糖、乳糖、グルコース、アスパルテーム、またはサッカリンが含まれる。適当な崩壊剤には、コーンスターチ、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、キサンタンゴム、ベントナイト、アルギン酸、または寒天が含まれる。適当な香料には、ペパーミント油、ウィンターグリーン油、チェリー、オレンジ、またはラズベリーの風味が含まれる。適当なコーディング剤には、アクリル酸および／またはメタクリル酸の重合体または共重合体、並びに／あるいはそのエステル、ワックス、脂肪アルコール、ゼイン、セラック、またはグルテンが含まれる。適当な防腐剤には、安息香酸ナトリウム、ビタミンＥ、アルファ−トコフェロール、アスコルビン酸、メチルパラベン、プロピルパラベン、または亜硫酸水素ナトリウムが含まれる。適当な滑沢剤には、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、オレイン酸ナトリウム、塩化ナトリウム、またはタルクが含まれる。適当な時間遅延剤には、モノステアリン酸グルセリン、またはジステアリン酸グリセリンが含まれる。
【００９２】
本発明はまた、本明細書中で述べた化合物のプロドラッグに関する。本明細書中で述べた化合物のプロドラッグであるいずれの化合物も、本発明の範囲内および精神である。用語「プロドラッグ」は広義で用いられ、酵素的または加水分解的にインビボで本発明の化合物に変換されるその誘導体を含む。そのような誘導体は、当業者が容易に想到しうるものであり、例えば、遊離チオールまたはヒドロキシ基が酢酸エステルのようなエステルに変換されている化合物、あるいは遊離アミノ基がアミドに変換されている化合物を含む。本発明の化合物のアシル化のための手順、例えばエステルおよびアミドプロドラッグを製造するための手順は当該技術分野で周知であり、適当な触媒または塩基の存在下、その化合物を適当なカルボン酸、酸無水物、または塩化物で処理することを含みうる。適当なプロドラッグの選択および製造のための他の通常の手順は当該技術分野で公知であり、例えば、WO 00/23419, Design of Prodrugs, Hans Bundgaard, Ed., Elsevier Science Publishers, 1985、および、The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action, Chapter 8, pp352-401, Academic press, Inc., 1992に記載されており、その内容は本明細書に引用される。
【００９３】
式（Ｉ）の化合物の適当な医薬的に許容される塩には、塩酸、硫酸、リン酸、硝酸、炭酸、ホウ酸、スルファミン酸、および臭化水素酸のような医薬的に許容される無機酸の塩、または酢酸、プロピオン酸、酪酸、酒石酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フマル酸、マレイン酸、クエン酸、乳酸、粘液酸、グルコン酸、安息香酸、コハク酸、シュウ酸、フェニル酢酸、メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、サリチル酸、スルファニル酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、エデト酸、ステアリン酸、パルミチン酸、オレイン酸、ラウリン酸、パントテン酸、タンニン酸、アスコルビン酸、および吉草酸のような医薬的に許容される有機酸の塩が含まれるが、それらに限定されない。塩基塩には、ナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、およびアルキルアンモニウムのような医薬的に許容される陽イオンとともに形成されるものが含まれるが、それらに限定されない。塩基性含窒素基は、塩化、臭化、およびヨウ化物のメチル、エチル、プロピル、およびブチルのようなハロゲン化低級アルキル；硫酸ジメチルおよび硫酸ジエチルのような硫酸ジアルキル；などで四級化されうる。
【００９４】
本発明の化合物は、遊離化合物または溶媒和物（例えば、水の溶媒和物、すなわち水和物、またはアルコールのような通常の有機溶媒の溶媒和物）として結晶性形状であってもよく、両形態は本発明の範囲内であると意図している。溶媒和の方法は、当該技術分野の中で一般に知られている。
【００９５】
ケト−エノール互変異性体のような、本明細書中に記載された化合物の互変異性の型もまた、必要に応じて本発明の一部として意図される。
【００９６】
本発明で用いる特定の化合物は不斉中心を有し、そのため一つ以上の立体異性体で存在しうることもまた認識されうる。化合物が少なくとも２つのキラル中心を有する場合には、ジアステレオ異性体として存在しうる。そのため本発明はまた、一つまたはそれ以上の不斉中心で実質的に純粋な異性体としての化合物、例えば、約９５％もしくは９７％ｅｅまたは９９％ｅｅ以上のような約９０％ｅｅ以上のエナンチオマー、並びにそのラセミ混合物を含む混合物に関する。このような異性体は、例えばキラル中間体を用いた不斉合成によって製造され、また混合物は、例えばクロマトグラフィーのような通常の方法、もしくは分割剤の使用によって分割されうる。
【００９７】
本発明の化合物はまた、ヒト以外の対象を治療するためにも用いられ、そのため獣医学の組成物として提供されうる。これらは当該技術分野で公知のいずれの適当な方法によっても製造されうる。このような組成物の例には、
（ａ）経口投与、外用（例えば水性および非水性溶液または懸濁液を含む水薬）、錠剤、ボーラス、粉末、顆粒、飼料に混ぜるためのペレット、舌に塗るためのペースト；
（ｂ）非経口投与、例えば無菌溶液または懸濁液としての、皮下、筋肉内、静脈内、または脳室内注入；
（ｃ）局所投与、例えばクリーム、軟膏、ゲル、ローションなど
に適応されるものが含まれる。
【００９８】
当業者は、本明細書中に記載された発明が、明確に記載された以外の変化および修飾を受けうることを認識している。当然のことながら、本発明にはその精神および範囲に入るすべてのこのような変化および修飾が含まれる。本発明にはまた、本明細書中で個別または総合的に言及または示されたすべての段階、特徴、組成物、および化合物、並びにいずれか二つまたはそれ以上の前記段階または特徴のいずれかおよび全組合せが含まれる。
【００９９】
以下の例は、本発明の特定の態様を説明するために提供されるものであり、これまでに述べた概論を制限する意図はない。
【０１００】
実施例
実施例１：ＩＲＡＰのインヒビターをスクリーニングするためのインビトロアッセイ
ＩＲＡＰ活性を阻害する化合物をスクリーニングするため、インビトロ酵素アッセイが用いられた。本アッセイは、アミノペプチダーゼ基質（ロイシン４−メチルクマリル−７−アミド）、ＩＲＡＰを含む物質の原料、および候補インヒビターを用いた。
【０１０１】
１．ＩＲＡＰを含む物質の原料
ＩＲＡＰ含有物質の原料として可能なものには、組み換えＩＲＡＰの適当量を発現する細胞株または生物組織が含まれる。ＩＲＡＰをコードする移入遺伝子を発現する原核または真核細胞は、組み換え原料を表している。
【０１０２】
２．試験化合物
試験化合物は、Specs, Delftechpark 30, 2628 XH Delft, The Netherlandsから入手した。化合物１もまた、本明細書中に記載された方法に従って、レゾルシノール、ピリジン３−カルボキシアルデヒドおよびシアノ酢酸エチルから製造された。
【０１０３】
３．試験物質の存在下におけるＩＲＡＰ酵素活性のモニタリング
ＩＲＡＰ含有物質は、Ｌｅｕ−ＭＣＡ（ロイシン４−メチルクマリル−７−アミド）のような合成アミノペプチダーゼ基質、および試験物質でインキュベートされた。合成基質の分解速度の阻害は、試験物質の阻害効果の尺度とみなされた。
【０１０４】
組み換えＩＲＡＰの原料として、完全長ヒトＩＲＡＰをコードするｃＤＮＡを含む真核細胞発現ベクターｐｃＤＮＡ−３がトランスフェクトされたＨＥＫ２９３細胞が利用された。本アッセイ系には、ＩＲＡＰによるＬｅｕ−ＭＣＡの加水分解速度の測定が含まれる。蛍光生成物の放出によって定量化されたＬｅｕ−ＭＣＡの加水分解の速度は、目的に合うように設計された蛍光光度計を用いて蛍光（３７０ｎｍで励起、４６０ｎｍで発光）の増加を記録することによってモニターされた。候補の試験化合物はアッセイ系に加えられ、Ｌｅｕ−ＭＣＡの加水分解の効果は、ＩＲＡＰ活性を阻害する試験化合物の能力の直接的な指標とみなされた。その結果は表１に表示される。
表１ 
【表１】
2008512395.tif 000005
【表２】
2008512395.tif 000006
【表３】
2008512395.tif 000007
【０１０５】
実施例２：健忘症の動物モデルにおいて抗健忘特性を持つ化合物をスクリーニングするためのインビボアッセイ
１．スコポラミン誘導記憶欠失モデル
ムスカリン受容体アンタゴニストであるスコポラミンは、ラットとマウスの両方において健忘症を誘導するために用いられており、多くの記憶および学習の行動パラダイムにおいて実施されてきている。本化合物は短期記憶を害することが示されている。スコポラミン誘導健忘症についてのＩＲＡＰインヒビター化合物１の効果は、抑制回避パラダイムにおいて試験された。
【０１０６】
抑制回避ボックスは小さい明室および大きい暗室の二つの部屋でできており、試験は二つの試行を含む。最初の訓練試行には、壁に面した明室にラットを置くことが含まれ、ラットが暗室の端へ走っていき、向きを変えるとすぐに０．６ｍＡの電気ショックが２秒間与えられ、ラットは自分のホームケージに戻される前に全体で１５秒間、暗室の中に置かれる。２４時間の合間の後、その動物は次いで再び試験され、暗室に入るまで隠れている時間はその動物が嫌悪刺激を覚えている能力の尺度である。ＩＲＡＰインヒビターの効果の試験をするために、ラットは行動経験の１週間前に、側脳室の中へ慢性的に留置するカニューレを埋め込まれた。試験の当日の訓練試行の１５分前に、ラットは訓練試行のための抑制回避ボックスに置かれる前、２μｌの０．９％生理食塩水に溶かされた７０ｎｍｏｌの臭化水素酸スコポラミンまたは０．９％生理食塩水のいずれかを注入された。訓練試行の直後、ラットは２μｌの１０％ＤＭＳＯに溶かされた０．２または２ｎｍｏｌのいずれかの化合物１（実施例１より）、または対照溶媒を注入された。ラットは次いで自分のホームケージに戻され、２４時間後に回復試行の試験をされた。スコポラミン処置の後に０．２または２ｎｍｏｌのいずれかの化合物１を与えられたラットは、スコポラミンの後に対照溶媒を処置されたラット群と比較して、暗室に入るまで隠れている時間の増加を示した（図１）。化合物１の二種類の投与はいずれも、スコポラミン処置によって誘導された記憶欠損を減弱させ、その記憶を対照試験の水準まで回復させた（図１）。
【０１０７】
文献
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【図面の簡単な説明】
【０１０８】
【図１】図１には、スコポラミンによって誘導される記憶欠損についての化合物１の効果が図示されている。
【図１】
2008512395.tif 000015
【国際調査報告】
2008512395.tif 000016
2008512395.tif 000017