(57)【要約】本発明は、ＴＲＰＶ４チャネル受容体の活性化方法であり、ＴＲＰＶ４チャネル受容体を発現する細胞によるマトリックス分解酵素の産生および／または放出の減少、細胞外マトリックスの分解の減少に関する。また、マトリックス生成の阻害を軽減させる方法も本発明の範囲内にあると考えられる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１個の細胞をＴＲＰＶ４チャネル受容体に対するアゴニストを含む有効量の医薬組成物と接触させる工程を含む：
ＴＲＰＶ４チャネル受容体またはＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する該少なくとも１個の細胞におけるＴＲＰＶ４チャネル受容体またはＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を活性化する方法。
【請求項２】
上記の少なくとも１個の細胞がヒト由来である、請求項１記載の方法。
【請求項３】
上記の少なくとも１個の細胞が軟骨細胞である、請求項１記載の方法。
【請求項４】
上記の少なくとも１個の細胞が軟骨基質である、請求項１記載の方法。
【請求項５】
アゴニストが、上記の少なくとも１個の細胞により産生される少なくとも一種のマトリックス分解酵素の量を減少させる、請求項１記載の方法。
【請求項６】
アゴニストが、上記の少なくとも１個の細胞により放出される少なくとも一種のマトリックス分解酵素の量を減少させる、請求項１記載の方法。
【請求項７】
アゴニストが、上記の少なくとも１個の細胞により産生されるアグリカナーゼの量を減少させる、請求項１の方法。
【請求項８】
アゴニストが、上記の少なくとも１個の細胞により放出されるアグリカナーゼの量を減少させる、請求項１記載の方法。
【請求項９】
アゴニストが、上記の少なくとも１個の細胞により産生される少なくとも一種のマトリックスメタロプロテアーゼの量を減少させる、請求項１記載の方法。
【請求項１０】
アゴニストが、上記の少なくとも１個の細胞により放出される少なくとも一種のＭＭＰの量を減少させる、請求項１記載の方法。
【請求項１１】
ＭＭＰが、ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−３およびＭＭＰ−１３の群から選択される、請求項９または１０記載の方法。
【請求項１２】
アゴニストが、上記の少なくとも１個の細胞により産生される酸化窒素の量を減少させる、請求項１記載の方法。
【請求項１３】
アゴニストが、上記の少なくとも１個の細胞により放出される酸化窒素の量を減少させる、請求項１記載の方法。
【請求項１４】
アゴニストがプロテオグリカン合成の阻害を軽減させる、請求項１記載の方法。
【請求項１５】
アゴニストが、３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン、アゼピンまたは非環式１，３−ジアミンを含む、請求項１記載の方法。
【請求項１６】
アゴニストが、３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン、アゼピンおよび非環式１，３−ジアミンの群から選択される、請求項１記載の方法。
【請求項１７】
アゴニストが、４α−ホルボール−１２，１３ジデカン酸塩またはその塩もしくはエステルではない、請求項１記載の方法。
【請求項１８】
アゴニストが１，３−ジアミンを含む、請求項１記載の方法。
【請求項１９】
アゴニストが置換されていてもよいベンジルスルホンアミドを含む、請求項１記載の方法。
【請求項２０】
アゴニストが、アリールまたはヘテロアリールの群から選択される第一化学的部分およびＣＮ、ＮＯ２、ハロゲンで置換されていてもよいアリールである第二化学的部分を含み、第一および第二化学的部分が同一の化合物中に含まれる、請求項１記載の方法。
【請求項２１】
アゴニストが１，３−ジアミンをさらに含む、請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
アゴニストが、ベンゾチオフェン、インデニルまたはインドールの群から選択される第一化学的部分およびハロゲン化ベンゼンまたはシアノベンゼンの群から選択される第二化学的部分を含む、請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
アゴニストが、Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（４−フルオロフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（２−シアノフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（２−シアノフェニル）スルホニル］ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛３−［［（シアノフェニル）スルホニル］（メチル）アミノ］プロピル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド；およびＮ−｛（１Ｓ）−１−［（｛３−［［（２，４−ジクロロフェニル）スルホニル］（メチル）アミノ］プロピル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミドの群から選択される、請求項１記載の方法。
【請求項２４】
アゴニストが、約１．０μＭ未満のＴＲＰＶ４チャネル受容体に対するＥＣ５０値を有する、請求項１記載の方法。
【請求項２５】
アゴニストが、約１０ｎＭ未満のＴＲＰＶ４チャネル受容体に対するＥＣ５０値を有する、請求項１記載の方法。
【請求項２６】
アゴニストが、約１．０ｕＭ未満のＩＣ５０値で関節軟骨移植片における異化刺激により誘導されるＧＡＧ放出を阻害する、請求項１記載の方法。
【請求項２７】
単離した軟骨細胞におけるカルシウム流入を測定した場合、アゴニストが約１．０μＭ未満のＴＲＰＶ４チャネル受容体に対するＥＣ５０値を有する、請求項１記載の方法。
【請求項２８】
アゴニストが、上記のＴＲＰＶ４チャネル受容体中に流れる電流を増大させる、請求項１記載の方法。
【請求項２９】
患者のＴＲＰＶ４チャネル受容体を発現する少なくとも１個の細胞を治療上有効量のＴＲＰＶ４チャネル受容体に対するアゴニストと接触させることを含む、それを必要としている患者の治療方法。
【請求項３０】
患者が軟骨の疾患を患っている、請求項２９記載の方法。
【請求項３１】
患者が、疼痛、慢性疼痛、神経因性疼痛、術後疼痛、変形性関節症、神経痛、ニューロパシー、痛覚、神経損傷、虚血、神経変性、炎症性疾患および軟骨変性の群から選択される疾患または病態を患っている、請求項２９記載の方法。
【請求項３２】
患者が、喉頭、気管、耳管、椎間板、靱帯、腱、関節包または骨の発達に影響を及ぼす疾患を患っている、請求項２９記載の方法。
【請求項３３】
疾患が関節破壊に関連付けられる、請求項２９記載の方法。
【請求項３４】
患者が変形性関節症を患っている、請求項３３記載の方法。
【請求項３５】
患者が関節リウマチを患っている、請求項３３記載の方法。
【請求項３６】
アゴニストが、３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン、アゼピンまたは非環式１，３−ジアミンを含む、請求項２９記載の方法。
【請求項３７】
アゴニストが、３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン、アゼピンおよび非環式１，３−ジアミンの群から選択される、請求項２９記載の方法。
【請求項３８】
アゴニストが、Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（４−フルオロフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（２−シアノフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（２−シアノフェニル）スルホニル］ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛３−［［（シアノフェニル）スルホニル］（メチル）アミノ］プロピル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド；およびＮ−｛（１Ｓ）−１−［（｛３−［［（２，４−ジクロロフェニル）スルホニル］（メチル）アミノ］プロピル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミドの群から選択される、請求項２９記載の方法。
【請求項３９】
患者のアグリカン分解の量を減少させることをさらに含む、請求項２９記載の方法。
【請求項４０】
患者のコラーゲン分解の量を減少させることをさらに含む、請求項２９記載の方法。
【請求項４１】
炎症性メディエーターに関する患者の軟骨退化を軽減させることをさらに含む、請求項２９記載の方法。
【請求項４２】
損傷に関する患者の軟骨退化を軽減させることをさらに含む、請求項２９記載の方法。
【請求項４３】
患者における低下したマトリックスタンパク質生成を軽減させることをさらに含む、請求項２９記載の方法。
【請求項４４】
マトリックスタンパク質が、アグリカン、ＩＩ型コラーゲンおよびＶＩ型コラーゲンの群から選択される、請求項４３記載の方法。
【請求項４５】
増加したマトリックス分解酵素の産生を軽減させることをさらに含む、請求項２９記載の方法。
【請求項４６】
マトリックス分解酵素が、ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−９、ＭＭＰ−１３、ＡＤＡＭＴＳ４およびＡＤＡＭＴＳ５の群から選択される、請求項４５記載の方法。
【請求項４７】
マトリックス分解酵素の産生が炎症性メディエーターにより誘導される、請求項４６記載の方法。
【請求項４８】
マトリックス分解酵素の産生が損傷により誘導される、請求項４１記載の方法。
【請求項４９】
軟骨において少なくとも１個の細胞により産生される酸化窒素の量を減少させることをさらに含む、請求項２９記載の方法。
【請求項５０】
プロテオグリカン合成の阻害を軽減させることをさらに含む、請求項２９記載の方法。
【請求項５１】
ＴＲＰＶ４チャネル受容体またはＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する少なくとも１個の細胞と接触させると、ＴＲＰＶ４チャネル受容体またはＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を活性化する１，３−ジアミンを含む化合物。
【請求項５２】
置換されていてもよいベンジルスルホンアミドを含む、請求項５１記載の化合物。
【請求項５３】
アリールまたはヘテロアリールの群から選択される第一化学的部分およびＣＮ、ＮＯ２、ハロゲンで置換されていてもよいアリールである第二化学的部分を含み、第一および第二化学的部分が同一の化合物中に含まれる、請求項５１記載の化合物。
【請求項５４】
ベンゾチオフェン、インデニルまたはインドールの群から選択される第一化学的部分およびハロゲン化ベンゼンまたはシアノベンゼンの群から選択される第二化学的部分を含む、請求項５１記載の化合物。
【請求項５５】
少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体または少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する少なくとも１個の細胞と接触させると、上記の少なくとも１個の細胞により産生される少なくとも一種のマトリックス分解酵素の量を減少させる、請求項５１記載の化合物。
【請求項５６】
少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体または少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する少なくとも１個の細胞と接触させると、上記の少なくとも１個の細胞により放出される少なくとも一種のマトリックス分解酵素の量を減少させる、請求項５１記載の化合物。
【請求項５７】
少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体または少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する少なくとも１個の細胞と接触させると、上記の少なくとも１個の細胞により産生されるアグリカナーゼの量を減少させる、請求項５１記載の化合物。
【請求項５８】
少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体または少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する少なくとも１個の細胞と接触させると、上記の少なくとも１個の細胞により放出されるアグリカナーゼの量を減少させる、請求項５１記載の化合物。
【請求項５９】
少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体または少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する少なくとも１個の細胞と接触させると、上記の少なくとも１個の細胞により産生される少なくとも一種のマトリックス分解酵素の量を減少させる、請求項５１記載の化合物。
【請求項６０】
少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体または少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する少なくとも１個の細胞と接触させると、上記の少なくとも１個の細胞により放出される少なくとも一種のＭＭＰの量を減少させる、請求項５１記載の化合物。
【請求項６１】
少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体または少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する少なくとも１個の細胞と接触させると、上記の少なくとも１個の細胞により産生される酸化窒素の量を減少させる、請求項５１記載の化合物。
【請求項６２】
少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体または少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する少なくとも１個の細胞と接触させると、上記の少なくとも１個の細胞により放出される酸化窒素の量を減少させる、請求項５１記載の化合物。
【請求項６３】
少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体または少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する少なくとも１個の細胞と接触させると、プロテオグリカン合成の阻害を軽減させる、請求項５１記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＴＲＰＶ４チャネル受容体の活性化方法であり、ＴＲＰＶ４チャネル受容体を発現する細胞によるマトリックス分解酵素の産生および／または放出の減少、細胞外マトリックスの分解の減少に関する。また、細胞外マトリックスの阻害を軽減させる方法も本発明の範囲内にあると考えられる。
【背景技術】
【０００２】
軟骨は、軟骨細胞と称される特異性細胞が集合した無血管組織であり、様々な機械的および生化学的刺激に応答する。軟骨は、関節、間質結合組織および基底膜の内部に存在し、ＩＩ型コラーゲン、プロテオグリカン、フィブロネクチンおよびラミニンを含む複数のマトリックス成分からなる細胞外マトリックスで構成される。
【０００３】
正常な軟骨において、細胞外マトリックス合成は、細胞外マトリックス分解により軽減され、正常なマトリックス代謝回転をもたらす。受け取ったシグナル（複数でも可）によるが、その後の応答は、同化（マトリックスの生成および／または修復をもたらすこと）または異化（マトリックス分解、細胞外アポトーシス、機能消失および疼痛をもたらすこと）であってもよい。
【０００４】
圧迫障害への応答および／または炎症性メディエーター（例、炎症性サイトカイン）への暴露において、軟骨細胞は、マトリックス生成を減少させ、多数のマトリックス分解酵素を増加させる。マトリックス分解酵素の例として、アグリカナーゼ（ＡＤＡＭＴＳ）およびマトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）が挙げられる。かかる酵素の活性は、軟骨基質の分解をもたらす。ＭＭＰと結合するアグリカナーゼ（ＡＤＡＭＴＳ）はアグリカンを分解し、凝集プロテオグリカンは関節軟骨中に存在する。変形性関節症（ＯＡ）関節軟骨において、プロテオグリカン染色の消失は、早期ＯＡでは表面部分および中度ないし重度のＯＡでは軟骨の侵食の隣接した部分において観察される。プロテオグリカン含有量の減少は、コラゲナーゼ（例、ＭＭＰ−１３）と称される特異性ＭＭＰによるＩＩ型コラーゲンの分解の増加に付随する。コラゲナーゼは、正常コラーゲンの三重らせん内に最初に開裂すると考えられる。コラゲナーゼによるコラーゲンの最初の開裂が、他のプロテアーゼによる膠原繊維のさらなる分解を促進すると仮定される。したがって、増加したマトリックス分解酵素の産生の抑制もしくは減少および／またはマトリックス生成の阻害の軽減はまた、機能的回復を促進してもよい。
【０００５】
細胞外マトリックスの過剰分解は、疼痛、慢性疼痛、神経因性疼痛、術後疼痛、関節リウマチ、変形性関節症、神経痛、ニューロパシー、痛覚、神経損傷、虚血、神経変性、軟骨変性、脳卒中、失禁、炎症性疾患、過敏性腸症候群、歯周病、異常血管新生、腫瘍浸潤および転移、角膜潰瘍および糖尿病の合併症を含む、多数の疾患および病態の発症機序に関する。
【０００６】
ＴＲＰＶ４チャネル受容体は、過渡受容体電位チャネルのバニロイドファミリーの６の既知の群の一つであり、ＴＲＰＶ１、カプサイシン受容体とヌクレオチドレベルで５１％の同一性を有する。ヒト由来ＴＲＰＶ４チャネル受容体を含む、ヒトバニロイド受容体型をコードするポリペプチドおよびポリヌクレオチドの例は、ＥＰ  １１７０３６５ならびにＷＯ  ００／３２７６６において見出すことができる。ＴＲＰＶ４チャネル受容体のポリペプチド配列は、配列番号１（図２参照）に示され、ヒトＴＲＰＶ４受容体をコードするポリヌクレオチド配列は、本明細書の配列番号２（図３参照）に示される。他のファミリー群と同様に、ＴＲＰＶ４チャネル受容体は、Ｃａ２＋透過性、非選択性、リガンド依存性陽イオンチャネルであり、浸透圧減少、体温上昇および低分子リガンドなどの多様な刺激に応答する。例えば、Ｖｏｅｔｓ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（２００２）２７７  ３３７０４−４７０５１；Ｗａｔａｎａｂｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（２００２）２７７：４７０４４−４７０５１；Ｗａｔａｎａｂｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（２００２）２７７：１３５６９−４７０５１；Ｘｕ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（２００３）２７８：１１５２０−１１５２７参照。体内組織の画像から、ヒトＴＲＰＶ４チャネル受容体は、最も顕著に軟骨で発現される。初期およびクローン培養の画像は、軟骨細胞における重要な発現のみを示す。ホルボール１２−ミリスチン酸１３−アセテート（ＰＭＡ）および４α−ホルボール−１２，１３−ジデカン酸塩（４αＰＤＤ）は、ＴＲＰＶ４チャネル受容体（ＷＯ  ０２／３４２８０）をコードするベクターを導入した細胞において細胞内カルシウムの増加を示している。本発明は、ＴＲＰＶ４チャネル受容体の調節が、マトリックス分解酵素の生成を軽減させならびにマトリックス生成の阻害を軽減させることができると本明細書に開示している。
【０００７】
したがって、上記の異化反応の軽減をもたらすＴＲＰＶ４チャネル受容体の活性を調節する方法は、非常に必要とされ、マトリックス分解を含む疾患の治療のための新規治療手段を提供するであろう。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、少なくとも１個の細胞をＴＲＰＶ４チャネル受容体に対するアゴニストを含む有効量の医薬組成物と接触させることを含む、ＴＲＰＶ４チャネル受容体またはＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する少なくとも１個の細胞において、ＴＲＰＶ４チャネル受容体またはＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を活性化する方法を提供する。一の態様において、少なくとも１個の細胞はヒト由来である。別の態様において、少なくとも１個の細胞は軟骨細胞である。別の態様において、少なくとも１個の細胞は、軟骨基質の部分を形成する。
【０００９】
別の態様において、アゴニストは、少なくとも１個の細胞により産生されるマトリックス分解酵素の量を減少させる。別の態様において、アゴニストは、少なくとも１個の細胞により放出されるマトリックス分解酵素の量を減少させる。別の態様において、アゴニストは、少なくとも１個の細胞により産生されるアグリカナーゼの量を減少させる。別の態様において、アゴニストは、少なくとも１個の細胞により放出されるアグリカナーゼの量を減少させる。別の態様において、アゴニストは、少なくとも１個の細胞により産生されるマトリックスメタロプロテアーゼ（「ＭＭＰ」）の量を減少させる。別の態様において、アゴニストは、少なくとも１個の細胞により放出されるＭＭＰの量を減少させる。別の態様において、ＭＭＰは、ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−３およびＭＭＰ−１３の群から選択されるが、これに限定されるものではない。
【００１０】
別の態様において、アゴニストは、少なくとも１個の細胞により産生される酸化窒素の量を減少させる。別の態様において、アゴニストは、少なくとも１個の細胞により放出される酸化窒素の量を減少させる。別の態様において、アゴニストは、プロテオグリカン合成の阻害を軽減させる。別の態様において、方法は、ＴＲＰＶ４チャネル受容体中に流れる電流を増大させることを提供する。
【００１１】
別の態様において、アゴニストは、アリールまたはヘテロアリールの群から選択される第一化学的部分およびＣＮ、ＮＯ２、ハロゲンで所望により置換されていてもよいアリールである第二化学的部分を含み、第一および第二化学的部分は、同一の化合物の部分を形成し、共有結合の化学構造を介して結合される。第一化学的部分は、ベンゾチオフェン、インデニルまたはインドールの群から選択してもよく、第二化学的部分は、ハロゲン化ベンゼンまたはシアノベンゼンの群から選択してもよい。
【００１２】
別の態様において、アゴニストは、３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピンまたはアゼピンを含む。別の態様において、アゴニストは、３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピンおよびアゼピンの群から選択される。別の態様において、アゴニストは、ホルボール１２−ミリスチン酸１３−アセテート（ＰＭＡ）または４α−ホルボール−１２，１３−ジデカン酸塩（４α−ＰＤＤ）ではない。別の態様において、アゴニストは、１，３−ジアミンを含む。別の態様において、アゴニストは、所望により置換されていてもよいベンジルスルホンアミドを含む。別の態様において、アゴニストは、アリールまたはヘテロアリールの群から選択される第一化学的部分およびＣＮ、ＮＯ２、ハロゲンで所望により置換されていてもよいアリールである第二化学的部分を含み、第一および第二化学的部分は、同一の化合物の部分を形成する。アゴニストは、さらに１，３−ジアミンを含んでいてもよい。別の態様において、アゴニストは、ベンゾチオフェン、インデニルまたはインドールの群から選択される第一化学的部分およびハロゲン化ベンゼンまたはシアノベンゼンの群から選択される第二化学的部分を含む。
【００１３】
別の態様において、アゴニストは、Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（４−フルオロフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（２−シアノフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（２−シアノフェニル）スルホニル］ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛３−［［（シアノフェニル）スルホニル］（メチル）アミノ］プロピル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド；およびＮ−｛（１Ｓ）−１−［（｛３−［［（２，４−ジクロロフェニル）スルホニル］（メチル）アミノ］プロピル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミドの群から選択される。
【００１４】
別の態様において、アゴニストは、約１．０μＭ未満のＴＲＰＶ４チャネル受容体に対するＥＣ５０値を有する。別の態様において、アゴニストは、約１０ｎＭ未満のＴＲＰＶ４チャネル受容体に対するＥＣ５０値を有する。別の態様において、アゴニストは、約１．０μＭ未満のＩＣ５０値で関節軟骨移植片における異化刺激により誘導されるＧＡＧ放出を阻害する。別の態様において、単離した軟骨細胞におけるカルシウム流入を測定した場合、アゴニストは、約１．０μＭ未満のＴＲＰＶ４チャネル受容体に対するＥＣ５０値を有する。別の態様において、アゴニストは、上記のＴＲＰＶ４チャネル受容体中に流れる電流を増大させる。
【００１５】
別の実施態様において、本発明は、患者のＴＲＰＶ４チャネル受容体を発現する少なくとも１個の細胞を治療上有効量のＴＲＰＶ４チャネル受容体に対するアゴニストと接触させることを含む、それを必要とする患者を治療する方法を提供する。一の態様において、患者は、軟骨の疾患または病態を患っている。別の態様において、患者は、疼痛、慢性疼痛、神経因性疼痛、術後疼痛、変形性関節症、神経痛、ニューロパシー、神経変性、軟骨変性、歯周病、異常血管新生、角膜潰瘍および糖尿病の合併症の群から選択される疾患または病態を患っている。別の態様において、患者は、喉頭、気管、耳管、椎間板、靱帯、腱、関節包または骨の発達に影響を及ぼす疾患を患っている。別の態様において、患者は、変形性関節症を患っている。別の態様において、患者は、関節リウマチを患っている。
【００１６】
別の態様において、アゴニストは、３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン、アゼピンまたは非環式１，３−ジアミンを含む。別の態様において、アゴニストは、３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピンおよびアゼピンの群から選択される。別の態様において、アゴニストは、３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン、アゼピンおよび非環式１，３−ジアミンの群から選択される。
【００１７】
別の態様において、患者の治療は、患者のアグリカナーゼ分解の量を減少させる。別の態様において、患者の治療は、患者のコラーゲン分解を減少させる。別の態様において、患者の治療は、軟骨退化を軽減させ、炎症性メディエーターに関するものであってもよい。別の態様において、患者の軟骨退化は、損傷に関するものであってもよい。
【００１８】
別の態様において、方法は、患者における低下したマトリックスタンパク質生成を軽減させることを提供する。別の態様において、マトリックスタンパク質は、アグリカン、ＩＩ型コラーゲンおよびＶＩ型コラーゲンの群から選択される。別の態様において、方法は、増加したマトリックス分解酵素の産生を軽減させることを提供する。別の態様において、マトリックス分解酵素は、ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−９、ＭＭＰ−１３、ＡＤＡＭＴＳ４およびＡＤＡＭＴＳ５の群から選択されるが、これに限定されるものではない。別の態様において、マトリックス分解酵素の産生は、炎症性メディエーターにより誘導される。別の態様において、マトリックス分解酵素の産生は、損傷により誘導される。別の態様において、方法は、軟骨における少なくとも１個の細胞により産生される酸化窒素の量を減少させることを提供する。別の態様において、方法は、プロテオグリカン合成の阻害を軽減させることを提供する。
【００１９】
本発明の別の態様において、化合物をＴＲＰＶ４チャネル受容体またはＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する少なくとも１個の細胞と接触させると、ＴＲＰＶ４チャネル受容体またはＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を活性化する１，３−ジアミンを含む化合物を提供する。別の態様において、化合物は、所望により置換されていてもよいベンジルスルホンアミドを含む。さらに別の態様において、化合物は、アリールまたはヘテロアリールの群から選択される第一化学的部分およびＣＮ、ＮＯ２、ハロゲンで所望により置換されていてもよいアリールである第二化学的部分を含み、第一および第二化学的部分は、同一の化合物中に含まれる。別の態様において、化合物は、ベンゾチオフェン、インデニルまたはインドールの群から選択される第一化学的部分およびハロゲン化ベンゼンまたはシアノベンゼンの群から選択される第二化学的部分を含む。
【００２０】
本発明のさらに別の態様において、化合物を少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体またはＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する少なくとも１個の細胞と接触させると、上記の少なくとも１個の細胞により産生される少なくとも一種のマトリックス分解酵素の量を減少させる化合物を提供する。別の態様において、化合物は、少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体または少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する少なくとも１個の細胞により産生または放出される少なくとも一種のマトリックス分解酵素の量を減少させる。化合物はまた、少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体または少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する細胞により産生または放出されるアグリカナーゼの量を減少させてもよい。少なくとも１個の細胞により産生または放出される少なくとも一種のマトリックスメタロプロテアーゼの量を減少させる化合物も提供される。本発明の化合物はまた、少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体または少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する細胞により産生または放出される酸化窒素の量を減少させてもよい。別の態様において、本発明の化合物は、少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体または少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する細胞におけるプロテオグリカン合成の阻害を軽減させてもよい。
【００２１】
（図面の簡単な記載）
図１：一過性に５％のｈＶＲ４  ＢａｃＭａｍウイルスを導入したＨＥＫ２９３  ＭＳＲＩＩ細胞におけるＴＲＰＶ４チャネル受容体依存性電流に対する式ＩＩｄの電位および時間依存性効果を示す全細胞パッチクランプ測定結果。
図２：ヒトＴＲＰＶ４をコードするポリヌクレオチド配列。
図３：図２のポリヌクレオチド配列によりコードされるポリペプチド配列。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
一般に、「ポリヌクレオチド」は、非修飾ＲＮＡまたはＤＮＡあるいは修飾ＲＮＡまたはＤＮＡであってもよいポリリボヌクレオチドまたはポリデオキシリボヌクレオチドをいう。「ポリヌクレオチド」は、一本鎖および二本鎖ＤＮＡ、一本鎖および二本鎖領域の混合物であるＤＮＡ、一本鎖および二本鎖ＲＮＡならびに一本鎖および二本鎖領域の混合物であるＲＮＡ、一本鎖またはより典型的には、二本鎖であってもよいＤＮＡおよびＲＮＡあるいは一本鎖および二本鎖領域の混合物を含む混成分子を含むが、これに限定されるものではない。加えて、「ポリヌクレオチド」は、ＲＮＡまたはＤＮＡあるいはＲＮＡとＤＮＡの両方を含む三本鎖領域をいう。ポリヌクレオチドなる語はまた、安定性または他の理由のために修飾した骨格と１以上の修飾塩基およびＤＮＡまたはＲＮＡを含有するＤＮＡあるいはＲＮＡを含む。「修飾」塩基は、例えば、イノシンなどのトリチル化塩基および特異的な塩基を含む。多数の修飾は、ＤＮＡおよびＲＮＡに対し行われる；したがって、「ポリヌクレオチド」は、化学的、酵素的または代謝的に自然界に見出されるようなポリヌクレオチド修飾形態ならびにウイルスおよび細胞のＤＮＡおよびＲＮＡの特性の化学形態を包含する。「ポリヌクレオチド」はまた、比較的短いポリヌクレオチドを包含し、よくオリゴヌクレオチドとして称される。
【００２３】
「ポリペプチド」は、ペプチド結合または修飾ペプチド結合、すなわち、ペプチド等量式により相互に結合した２以上のアミノ酸を含むペプチドまたはタンパク質をいう。「ポリペプチド」は、一般にペプチド、オリゴペプチドまたはオリゴマーと称される短鎖および一般にタンパク質と称される長鎖をいう。ポリペプチドは、遺伝子でコードされた２０個のアミノ酸以外のアミノ酸を含んでいてもよい。「ポリペプチド」は、翻訳後プロセシングなどの自然過程または当業者に公知な化学的修飾法で修飾されるアミノ酸配列を含む。かかる修飾は、基本書によく記載されており、論文ならびに大量の研究文献に詳細に記載されている。修飾は、ペプチド骨格、アミノ酸側鎖およびアミノまたはカルボキシル末端を含有する、ポリペプチドのどこにでも生じうる。同種の修飾は、得られたポリペプチドの多数の部位で同様または様々な頻度で現れてもよいと理解されるであろう。また、得られたポリペプチドは、修飾の多数の形態を含んでいてもよい。ポリペプチドは、ユビキチン化の結果として分岐してもよく、該ポリペプチドは、分岐の有無に関係なく環状であってもよい。環状、分岐状および分岐環状ポリペプチドは、翻訳後自然過程に起因してもよく、または合成方法により生成されてもよい。修飾は、アセチル化、アシル化、ＡＤＰ−リボシル化、アミド化、フラビンの共有結合、ヘム部分の共有結合、ヌクレオチドまたはヌクレオチド誘導体の共有結合、脂質または脂質誘導体の共有結合、ホスファチジルイノシトールの共有結合、架橋結合、環化、ジスルフィド結合生成、脱メチル化、共有結合架橋生成、システイン生成、ピログルタミン酸生成、ホルミル化、ガンマ−カルボキシル化、グリコシル化、ＧＰＩアンカー生成、ヒドロキシル化、ヨウ素化、メチル化、ミリストイル化、酸化、タンパク質分解プロセシング、リン酸化、プレニル化、ラセミ化、セレノイル化、硫酸化、アルギニル化などのトランスファーＲＮＡによって介されるタンパク質へのアミノ酸付加およびユビキチン化を含む。例えば、ＰＲＯＴＥＩＮＳ−ＳＴＲＵＣＴＵＲＥ  ＡＮＤ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＰＲＯＰＥＲＴＩＥＳ，２ｎｄ  Ｅｄ．，Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９３  ａｎｄ  Ｗｏｌｄ，Ｆ．，Ｐｏｓｔｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ：Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ，ｐｇｓ．１−１２  ｉｎ  ＰＯＳＴＴＲＡＮＳＬＡＴＩＯＮＡＬ  ＣＯＶＡＬＥＮＴ  ＭＯＤＩＦＩＣＡＴＩＯＮ  ＯＦ  ＰＲＯＴＥＩＮＳ，Ｂ．Ｃ．Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｅｄ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８３；Ｓｅｉｆｔｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，「Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｆｏｒ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｎｏｎｐｒｏｔｅｉｎ  ｃｏｆａｃｔｏｒｓ」，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．（１９９０）１８２：６２６−６４６  ａｎｄ  Ｒａｔｔａｎ，ｅｔ  ａｌ．，「Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ｐｏｓｔｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ａｇｉｎｇ」，Ａｎｎ  ＮＹ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ（１９９２）６６３：４８−６２参照��
【００２４】
本明細書で用いられる語としての「変種」は、各々、関連ポリヌクレオチドまたはポリペプチドとは異なるポリヌクレオチドまたはポリペプチドであるが、本質的特性はそのままである。ポリヌクレオチドの典型的な変種は、別の関連ポリヌクレオチドのヌクレオチド配列とは異なる。変種のヌクレオチド配列における変化は、関連ポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチドのアミノ酸配列を改変してもよくしなくてもよい。下記に記載されるように、ヌクレオチドの変化は、関連配列によりコードされるポリペプチドにおいてアミノ酸置換、付加、欠損、溶解および切断をもたらしてもよい。ポリペプチドの典型的な変種は、別の関連ポリペプチドのアミノ酸配列とは異なる。一般に、差異は、関連ポリペプチドおよびその変種の配列が、全体的に極めて類似で、多数の部分は同一であるように制限される。変種および関連ポリペプチドは、１以上の置換、付加、欠損、その組み合わせによるアミノ酸配列と異なっていてもよい。置換または挿入したアミノ酸残基は、遺伝子コードによりコードされるものであってもよくなくてもよい。ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの変種は、対立遺伝子多型などの天然型であってもよく、または天然型として知られていない変種であってもよい。ポリヌクレオチドおよびポリペプチドの非天然型変種は、突然変異の技法または直接合成により作製してもよい。
【００２５】
本明細書に用いられる「ＴＲＰＶ４チャネル受容体」は、過渡受容体電位チャネルのバニロイドファミリーの６の既知の群の一つをいい、ＴＲＰＶ１、カプサイシン受容体とヌクレオチドレベルで５１％の同一性を有する。ヒト由来のＴＲＰＶ４チャネル受容体を含む、ヒトバニロイド受容体の形態をコードするポリペプチドおよびポリヌクレオチドの例は、ＥＰ  １１７０／３６５ならびにＷＯ  ００／３２７６６で見出すことができる。ＴＲＰＶ４チャネル受容体のポリペプチド配列は、配列番号１（図２参照）に示され、ヒトＴＲＰＶ４受容体をコードするポリヌクレオチド配列は、本明細書の配列番号２（図３参照）に示される。
【００２６】
本明細書に用いられる「ＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種」は、ポリヌクレオチドまたはポリペプチドをそれぞれコードするＴＲＰＶ４チャネル受容体と異なるポリヌクレオチドまたはポリペプチドをいうが、本質的特性はそのままである。ＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種は、挿入、欠損および保存的または非保存的であってもよい置換あるいはその組み合わせによるＴＲＰＶ４チャネル受容体ポリペプチドと異なっていてもよい。特に好ましい変種は、多数の、例えば、５０から３０まで、３０から２０まで、２０から１０まで、１０から５まで、５から３まで、３から２まで、２から１までまたは１のアミノ酸が、挿入、置換または欠損されるもの、その組み合わせによるものである。ＴＲＰＶ４コードポリヌクレオチドのＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種は、配列番号１と約９９％、９７％、９５％、９０％、８５％または８０％の配列同一性を有していてもよい。ＴＲＰＶ４ポリペプチドのＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種は、配列番号２と約９９％、９７％、９５％、９０％、８５％または８０％の配列同一性を有していてもよい。
【００２７】
本明細書に用いられるＴＲＰＶ４チャネル受容体に対する「アゴニスト」は、ＴＲＰＶ４チャネル受容体の生物活性を活性化するまたは高めることができる化合物を含む。
【００２８】
本明細書に用いられるＴＲＰＶ４チャネル受容体の「活性化」は、平均開口時間および／または開口の可能性を増大させ、細胞中にカルシウム（または他の一価および／または二価の陽イオン）の流入を誘導し、細胞により産生および／または放出されるＡＤＡＭＴＳの量を減少させ、細胞により産生および／または放出されるＭＭＰの量を減少させ、細胞の基礎または成長因子刺激増殖を阻害し、細胞により産生される一酸化窒素（ＮＯ）の量を減少させ、ならびにマトリックス合成の阻害を軽減させることによりＴＲＰＶ４チャネル中に流れる電流の増大のような結果を含むが、これに限定されるものではない。
【００２９】
本明細書に用いられる「炎症性メディエーター」は、炎症過程を誘発しうる化合物を含む。炎症なる語は、一般に、損傷に対する血管生体組織の反応過程をいう。かかる過程は、増大した血流、増大した血管透過性および白血球侵出を含むが、これに限定されるものではない。炎症反応中に補充される白血球は、強力な酵素および酸素フリーラジカル（すなわち、炎症性メディエーター）を放出しうるので、炎症反応は、多数の組織の損傷を介することができる。炎症性メディエーターの例として、プロスタグランジン（例、ＰＧＥ２）、ロイコトリエン（例、ＬＴＢ４）、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）、インターロイキン１（ＩＬ−１）およびインターロイキン６（ＩＬ−６）などの炎症性サイトカイン、一酸化窒素（ＮＯ）、メタロプロテイナーゼならびに熱ショックタンパク質が挙げられるが、これに限定されるものではない。
【００３０】
本明細書に用いられる「マトリックスタンパク質」は、軟骨の細胞外マトリックスを形成するための細胞から放出されるタンパク質を含む。軟骨の細胞外マトリックスは、プロテオグリカンを含み、多数の異なったプロテオグリカンファミリーに属する。これらは、パールカンおよびアグリカンおよびバーシカンなどのヒアレクタンならびにデコリン、バイグリカンおよびフィブロモジュリンを含む、プロテオグリカンのロイシンに富んだ小ファミリーを含むが、これらに限定されるものではない。細胞外マトリックスはまた、軟骨オリゴマー基質タンパク質（ＣＯＭＰ）、リンクタンパク質およびフィブロネクチンなどの付属タンパク質と共に、３個のコラーゲン異型、すなわち、ＩＩ型、ＶＩ型、ＩＸ型およびＸＩ型コラーゲンからなる合成コラーゲン繊維から構成する。軟骨はまた、ヒアレクチン（ｈｙａｌｅｃｔｉｎ）と非共有結合を形成するヒアルロニン（ｈｙａｌｕｒｏｎｉｎ）を含有する。加えて、特異的細胞周囲マトリックスは、プロテオグリカン、ＩＩ型コラーゲンおよびアンコリンなどのコラーゲン受容体タンパク質からなる軟骨細胞を取り囲む。
【００３１】
本明細書に用いられる「マトリックス分解酵素」は、細胞外マトリックスタンパク質を開裂しうる酵素をいう。軟骨細胞外マトリックス代謝回転は、軟骨細胞外マトリックスタンパク質を分解するために、活性化を必要とする潜在性プロ酵素として合成されるマトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）により調節される。酵素の３つのクラスは、細胞外マトリックスタンパク質、すなわち、コラゲナーゼ（ＭＭＰ−１３を含むが、これに限定されるものではない）の代謝回転を調節すると考えられ、天然のコラーゲン繊維、プロテオグリカンおよびＩＸ型コラーゲンを分解するストロメライシン（ＭＭＰ−３を含むが、これに限定されるものでない）ならびに変性コラーゲンを分解するゼラチナーゼ（ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９を含むが、これに限定されるものでない）の分解に関与する。それらは、ディスインテグリンおよびメタロプロテイナーゼのドメインならびにそれらの構造におけるトロンボスポンジンモチーフを加工するので、ＯＡにおける軟骨退化に最も関連を示すマトリックス分解酵素群は、ＡＤＡＭＴＳと称されるメタロプロテイナーゼのサブグループを含む。ＡＤＡＭＴＳ４（アグリカナーゼ−１）は、ＯＡ関節において評価されると報告され、ＡＤＡＭＴＳ−５（アグリカナーゼ−２）と共にヒト変形性関節症軟骨にて発現されると示されている。これらの酵素は、ＭＭＰの関与なしにアグリカン分解に関与すると考えられる。したがって、活性の阻害またはこれらの酵素の発現の減少は、ＯＡ治療において有用性を有していてもよい。Ｓｔａｎｔｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ４３４：６４８−６５２（３１  Ｍａｒｃｈ  ２００５）。
【００３２】
本明細書に用いられるマトリックス分解酵素の産生を「減少させる」または「減少させること」は、細胞により産生および／または放出されるマトリックス分解酵素（複数でも可）の量の減少をいい、異化刺激に応答してマトリックス分解酵素の産生または放出の増加を示し、身体的損傷、自発性および／または浸透性ストレスあるいは炎症性メディエーターへの暴露を含んでいてもよいが、これに限定されるものではない。
【００３３】
本明細書に用いられる「軽減させる」または「軽減させること」は、異化刺激への暴露後の、細胞により産生および／または放出されるマトリックス分解酵素、炎症性メディエーターまたはマトリックスタンパク質の量の正常化（すなわち、増加または減少）をいう。例えば、ＩＬ−１軟骨細胞への暴露後、プロテオグリカンなどのマトリックスタンパク質の生成は減少するが、マトリックス分解酵素（例、ＭＭＰ−１３、ＡＤＡＭＳ４）および活性酸素種（例、ＮＯ）の生成は増加する。軽減は、異化刺激の非存在下において観察されるレベルでのこれらの多様な応答の正常化をいう。
【００３４】
本明細書に用いられ、当業者に公知である「ＥＣ５０」または「５０％有効濃度」は、アゴニストのモル濃度をいい、アゴニストに対して５０％の最大可能刺激応答を引き起こす。各アゴニストに対する最大刺激応答は、プラトーが達成されるまでアゴニストの濃度を増加させることにより誘導される好ましい生物学的反応の大きさを測定することにより実験的に決定される。
【００３５】
本明細書に用いられ、当業者に公知である「ＩＣ５０」または「５０％阻害濃度」は、化合物（例、アゴニスト、アンタゴニストまたは阻害薬）のモル濃度をいい、化合物に対して５０％の最大可能阻害応答を引き起こす。各化合物に対する最大阻害応答は、プラトーが達成されるまでアゴニストの濃度を増加させることにより誘導される好ましい生物学的反応の阻害の範囲を測定することにより実験的に決定される。
【００３６】
本明細書に用いられる「アリール」または「Ａｒ」はフェニルまたはナフチルを意味する。アリール基は、本明細書に記載の１以上の置換基で所望により置換されていてもよい。アリール基は、（Ｃ１−４）アルキルチオ；ハロ；カルボキシ（Ｃ１−４）アルキル；ハロ（Ｃ１−４）アルコキシ；ハロ（Ｃ１−４）アルキル；（Ｃ１−４）アルキル；（Ｃ２−４）アルケニル；（Ｃ１−４）アルコキシカルボニル；ホルミル；（Ｃ１−４）アルキルカルボニル；（Ｃ２−４）アルケニルオキシカルボニル；（Ｃ２−４）アルケニルカルボニル；（Ｃ１−４）アルキルカルボニルオキシ；（Ｃ１−４）アルコキシカルボニル（Ｃ１−４）アルキル；ヒドロキシ；ヒドロキシ（Ｃ１−４）アルキル；メルカプト（Ｃ１−４）アルキル；（Ｃ１−４）アルコキシ；ニトロ；シアノ；カルボキシ；アミノまたはアミノカルボニル；（Ｃ１−４）アルキルスルホニル；（Ｃ２−４）アルケニルスルホニル；あるいはアミノ基が（Ｃ１−４）アルキルまたは（Ｃ２−４）アルケニルにより所望により置換されていてもよいアミノスルホニル；フェニル、フェニル（Ｃ１−４）アルキルまたはフェニル（Ｃ１−４）アルコキシから選択される最大５個の置換基で所望により置換されていてもよい。
【００３７】
本明細書に用いられる「鏡像異性的な過剰物」は、鏡像体過剰率が０より大きい生成物をいう。例えば、鏡像異性的な過剰物は、鏡像体過剰率が、約５０％ｅｅより大きく、約７５％ｅｅより大きく、および約９０％ｅｅより大きい生成物をいう。
【００３８】
本明細書に用いられる「鏡像体過剰率」または「ｅｅ」は、百分率として表される他より多い一の鏡像異性体の過剰率である。結果として、両鏡像異性体は、ラセミ混合物中に等量で存在するので、鏡像体過剰率は、０（０％ｅｅ）である。しかしながら、一の鏡像異性体が、生成物の９５％を構成するといった過剰な状態ならば、その結果、鏡像体過剰率は９０％ｅｅであるだろう（過剰鏡像異性体の量９５％−他の鏡像異性体の量５％）。
【００３９】
本明細書に用いられる「鏡像異性的純度」は、鏡像体過剰率が１００％ｅｅである生成物をいう。
【００４０】
本明細書に用いられる「ジアステレオマー」は、少なくとも２個のキラル中心を有する化合物をいう。
【００４１】
本明細書に用いられる「ジアステレオマー過剰率」または「ｄｅ」は、百分率で表される他より多い一のジアステレオマーの過剰率である。
【００４２】
本明細書に用いられる「ジアステレオマー純度」は、ジアステレオマー過剰率が１００％である生成物をいう。
【００４３】
「ヘテロアリール」は、環の構成原子として１ないし４個のヘテロ原子を含有する芳香族環をいう。１以上のヘテロ原子を含有するヘテロアリール基は、異なるヘテロ原子を含有していてもよい。ヘテロアリール基は、本明細書に記載の１以上の置換基で所望により置換されていてもよい。ヘテロアリール基は、単環式環系であり、縮合した、スピロのまたは架橋した二環式環系である。単環式ヘテロアリール環は、５ないし７個の員原子からなる。二環式ヘテロアリール環は、フェニルおよび単環式ヘテロシクロアルキル環が、縮合した、スピロのまたは架橋した二環式環系を形成することに付随されるそれらの環ならびに単環式ヘテロアリール環および単環式シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリール環が、縮合した、スピロのまたは架橋した二環式環系を形成することに付随されるそれらの環を含む。ヘテロアリールは、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、フラニル、フラザニル、チエニル、チアゾリル、テトラヒドロフラニル、ピリジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピラジニル、トリアジニル、テトラジニル、インドリル、イソインドリル、インドリジニル、インダゾリル、プリニル、キノリニル、イソキノリニル、キノキサリニル、キナゾリニル、プテリジニル、シンノリニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾピラニル（ｂｅｎｏｐｙｒａｎｙｌ）、ベンゾオキサゾリル、ベンゾフラニル、イソベンゾフラニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、フロピリジニルおよびナフチリジニルを含むが、これに限定されるものではない。
【００４４】
本明細書に用いられる「アミノ酸」は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリンのＤ−またはＬ−異性体をいう。
【００４５】
本明細書に用いられる「アミド結合」は、カルボン酸とアミンの間に形成されるアミド結合をいう。アミド結合は、典型的には、カルボニル炭素原子と隣接窒素原子の間に約１．２３Åの距離を有する。
【００４６】
「アルキル」は、１から１２個までの構成原子を有する飽和炭化水素鎖をいう。アルキル基は、本明細書に記載の１以上の置換基で所望により置換されていてもよい。アルキルと接頭辞「Ｃｌ−ｘ」または「Ｃｌ−Ｃｘ」の使用は、１からｘ個までの構成原子を有するアルキル基をいう。例えば、Ｃｌ−６アルキルは、１から６個までの構成原子を有するアルキル基をいう。アルキル基は、真っ直ぐまたは分岐したものであってもよい。典型的な分岐したアルキル基は、１、２または３の分岐を有する。アルキルは、メチル、エチル、プロピル（ｎ−プロピルおよびイソプロピル）、ブチル（ｎ−ブチル、イソブチルおよびｔ−ブチル）、ペンチル（ｎ−ペンチル、イソペンチルおよびネオペンチル）およびヘキシルを含む。特に記載のない限り、Ｃｌ−６アルキル（または別名として（Ｃｌ−６）アルキル）なる語は、単独で用いられる場合または他の基の部分（「アルコキシ」基など）を形成する場合、１ないし６個の炭素原子を含有する置換または非置換で、真っ直ぐのまたは分岐したアルキル基を含む。
【００４７】
本明細書に用いられる「１、３−ジアミン」は、３個の所望により置換されていてもよい原子で区切られる２個の窒素原子を有する化合物をいう。より一般に、３個の所望により置換されていてもよい原子は、炭素原子である。１，３−ジアミンは環構造の部分を形成してもよく、または直線の化学鎖の部分を形成してもよい。
【００４８】
「１，３−ジアミンを含有する化合物」は、１，３−ジアミンを含む化合物をいう。アゼピン、３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピンおよび非環式１，３−ジアミンは、「１，３−ジアミンを含有する化合物」の記載に含まれる。
【００４９】
本明細書に用いられる「非環式１，３−ジアミン」は、３個の所望により置換されていてもよい原子、より一般に、３個の炭素原子で区切られる２個の窒素原子を有する化合物をいう。一例として、下記の断片：  
【化１】
2008512475.tif 000002
は、非環式１，３−ジアミンを構成する。
【００５０】
ＴＲＰＶ４チャネル受容体に対する有望なアゴニストは、３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン、アゼピンおよび非環式１，３−ジアミンのクラスに含まれる化合物を含むが、これに限定されるものではない。有望なアゴニストはまた、これらの化合物の誘導体を含む。
【００５１】
本発明の一の態様において、ＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストは、国際特許出願ＷＯ  ００／３８６８７（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ＷＯ  ０１／９５９１１およびＷＯ  ０２／１７９２４に記載されるものから選択される。加えて、アゴニストは、下記の式Ｉ：
【化２】
2008512475.tif 000003
［式中：
Ｒ１は、所望により置換されていてもよいＣ３−７シクロアルキル、所望により置換されていてもよいＣ３７シクロアルケニル、所望により置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ３−７アルキル、所望により置換されていてもよいＨｅｔ−Ｃ３−７アルケニル、所望により置換されていてもよいアリール、所望により置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、所望により置換されていてもよいヘテロアリールまたは所望により置換されていてもよいインデニルであり；
Ｒ２はＨ、所望により置換されていてもよいＣ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルまたはＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルであり；
各Ｒ３は、独立して、Ｈ、所望により置換されていてもよいＣ１−８アルキル、所望により置換されていてもよいＣ２−８アルケニル、所望により置換されていてもよいＣ２−８アルキニル、Ｈｅｔ−Ｃ１−６アルキル、所望により置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキル、所望により置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、所望により置換されていてもよいアリールまたは所望により置換されていてもよいヘテロアリールあるいは所望により置換されていてもよいＣ１−Ｃ６アルコキシであり；
Ｒ４は、Ｈまたは所望により置換されていてもよいＣ１−Ｃ４アルキルであり；
Ｒ５は、Ｈ、所望により置換されていてもよいＣ１−８アルキル、所望により置換されていてもよいＣ２−８アルケニル、所望により置換されていてもよいＣ２−８アルキニル、所望により置換されていてもよいＣ３−６シクロアルキル、所望により置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、所望により置換されていてもよいアリールまたは所望により置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ６は、ＨまたはＣ１−６アルキルであり；および
Ｘは、ＳＯ２、ＣＯ、ＣＨ２またはＣＯＮＨである］
に記載の化合物から選択してもよく、アゼピンならびにその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグとして本明細書に記載されている。
【００５２】
国際特許出願ＷＯ  ００／３８６８７は、ＴＲＰＶ４チャネル受容体に対する他の有望なアゴニストについて記載し、下記の３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン：
Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド；  
Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（４−フルオロフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド；
Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（２−シアノフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；および
Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（２−シアノフェニル）スルホニル］ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドを含むが、これに限定されるものではない。
【００５３】
上記の３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン化合物は、式（ＩＩ）：
【化３】
2008512475.tif 000004
［式中：Ｒ１は、
【化４】
2008512475.tif 000005
からなる群より選択され；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキル、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルキル、Ｒ９Ｃ（Ｏ）−、Ｒ９Ｃ（Ｓ）−、Ｒ９ＳＯ２−、Ｒ９ＯＣ（Ｏ）−、Ｒ９Ｒ１１ＮＣ（Ｏ）−、Ｒ９Ｒ１１ＮＣ（Ｓ）−、Ｒ９（Ｒ１１）ＮＳＯ２−、
【化５】
2008512475.tif 000006
およびＲ９ＳＯ２Ｒ１１ＮＣ（Ｏ）−からなる群より選択され；
Ｒ３は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ＨｅｔＣ０−６アルキルおよびＡｒＣ０−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ３およびＲ’は、ピロリジン、ピペリジンまたはモルホリン環を形成するために結合してもよく；
Ｒ４は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキル、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルキル、Ｒ５Ｃ（Ｏ）−、Ｒ５Ｃ（Ｓ）−、Ｒ５ＳＯ２−、Ｒ５ＯＣ（Ｏ）−、Ｒ５Ｒ１２ＮＣ（Ｏ）−およびＲ５Ｒ１２ＮＣ（Ｓ）−からなる群より選択され；
Ｒ５は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ６は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキル、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルキル、Ｒ１０Ｃ（Ｏ）−、Ｒ１０Ｃ（Ｓ）−、Ｒ１０ＳＯ２−、Ｒ１０ＯＣ（Ｏ）−、Ｒ１０Ｒ１３ＮＣ（Ｏ）−およびＲ１０Ｒ１３ＮＣ（Ｓ）−からなる群より選択され；
Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ＨｅｔＣ０−６アルキルおよびＡｒＣ０−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ９は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ１０は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ１１は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ１２は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ１３は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ’は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ’’は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルまたはＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ’’’は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ’’’’は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ＨｅｔＣ０−６アルキルおよびＡｒＣ０−６アルキルからなる群より選択され；
ＸはＣＨ２、ＳおよびＯからなる群より選択され；
ＺはＣ（Ｏ）およびＣＨ２からなる群より選択され；
ｎは１から５までの整数である］
の化合物またはその医薬上許容される塩もしくは溶媒和物であり、３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピンならびにその医薬上許容される塩、水和物および溶媒和物として本明細書に記載されている。
【００５４】
式ＩＩの化合物において、Ｒ１が
【化６】
2008512475.tif 000007
である場合：
Ｒ３は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルキルおよびＡｒ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択してもよく；
Ｒ３はまた、Ｈ、メチル、エチル、ｎ−プロピル、プロバ−２−イル、ｎ−ブチル、イソブチル、ブタ−２−イル、シクロプロピルメチル、シクロヘキシルメチル、２−メタンスルフィニル−エチル、１−ヒドロキシエチル、トルイル、ナフタレン−２−イルメチル、ベンジルオキシメチルおよびヒドロキシメチルからなる群より選択してもよい。
【００５５】
Ｒ３はまた、トルイル、イソブチルおよびシクロヘキシルメチルからなる群より選択してもよい。
【００５６】
Ｒ３は、オブチルであってもよい。
【００５７】
Ｒ４は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキル、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルキル、Ｒ５Ｃ（Ｏ）−、Ｒ５Ｃ（Ｓ）−、Ｒ５ＳＯ２−、Ｒ５ＯＣ（Ｏ）−、Ｒ５Ｒ１３ＮＣ（Ｏ）−およびＲ５Ｒ１３ＮＣ（Ｓ）−からなる群より選択される。
【００５８】
いくつかの実施態様において、Ｒ４は、メタンスルホニルであってもよい。
【００５９】
Ｒ５は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルまたはＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択してもよい。
【００６０】
Ｒ４がＲ５Ｃ（Ｏ）−である場合、Ｒ５は、メチル、ハロゲン化メチル、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルコキシ置換メチル、フェノキシ−メチル、４−フルオロ−フェノキシ−メチル、複素環置換メチル、２−チオフェニル−メチル；
エチル、ピペリジン−１−イル−エチル；
ブチル、アリール置換ブチル、４−（４−メトキシ）フェニル−ブチル；
イソペンチル；
シクロヘキシル；
ペンタノニル、４−ペンタノニル；
ブテニル、アリール置換ブテニル、４，４−ビス（４−メトキシフェニル）−ブタ−３−エニル；
アセチル；
フェニル、１以上のハロゲンで置換されるフェニル、３，４−ジクロロフェニルおよび４−フルオロフェニル、１以上のアリールオキシまたはＣ１−６アルコキシ基で置換されるフェニル、３，４−ジメトキシ−フェニル、３−ベンジルオキシ−４−メトキシ−フェニル、１以上のＣ１−６アルキルスルホニル基で置換されるフェニル、４−メタンスルホニル−フェニル；
ベンジル；
ナフタレニル、ナフタレン−２−イル；
ベンゾ［１，３］ジオキソリル、ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル；
フラニル、フラン−２−イル、置換フラニル、例えば、５−ニトロ−フラン−２−イル、５−（４−ニトロフェニル）−フラン−２−イル、５−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−フラン−２−イル、ハロゲン置換フラニル、５−ブロモ−フラン−２−イル、アリール置換フラニル、５−（４−クロロ−フェニル）−フラン−２−イル、Ｃ１−６アルキル置換フラニル、３−メチル−フラン−２−イル、４−メチル−フラン−２−イル、２，５−ジメチル−フラン−２−イルおよび２，４−ジメチル−フラン−３−イル；
テトラヒドロフラニル、テトラヒドロフラン−２−イル；
ベンゾフラニル、ベンゾフラン−２−イルおよび置換ベンゾフラニル、５−（２−ピペラジン−４−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル−エトキシ）ベンゾフラン−２−イル、５−（２−モルホリノ−４−イル−エトキシ）−ベンゾフラン−２−イル、５−（２−ピペラジン−１−イル−エトキシ）ベンゾフラン−２−イル、５−（２−シクロヘキシル−エトキシ）−ベンゾフラン−２−イル；Ｃ１−６アルコキシ置換ベンゾフラニル、７−メトキシ−ベンゾフラン−２−イル、５−メトキシ−ベンゾフラン−２−イル、５，６−ジメトキシ−ベンゾフラン−２−イル、ハロゲン置換ベンゾフラニル、５−フルオロ−ベンゾフラン−２−イル、５，６−ジフルオロ−ベンゾフラン−２−イル、Ｃ１−６アルキル置換ベンゾフラニル、３−メチル−ベンゾフラン−２−イル、３，５−ジメチル−ベンゾフラン−２−イルおよび３−エチル−ベンゾフラン−２−イル；また、５−フルオロ−３−メチル−ベンゾフラン−２−イル、６−フルオロ−３−メチル−ベンゾフラン−２−イル、５−メトキシ−３−メチル−ベンゾフラン−２−イル、４−メトキシ−３−メチル−ベンゾフラン−２−イルおよび６−メトキシ−３−メチル−ベンゾフラン−２−イル；
ナフト［２，１−ｂ］−フラニル、ナフト［２，１−ｂ］−フラン−２−イル、アルキル置換ナフト［２，１−ｂ］−フラニル、１−メチル−ナフト［２，１−ｂ］−フラン−２−イル；
ベンゾ［ｂ］チオフェニル、ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル；Ｃ１−６アルコキシ置換ベンゾ［ｂ］チオフェニル、５，６−ジメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル；
キノリニル、キノリン−２−イル、キノリン−３−イル、キノリン−４−イル、キノリン−６−イルおよびキノリン−８−イル；
キノキサリニル、キノキサリン−２−イル；
１，８  ナフチリジニル、１，８  ナフチリジン−２−イル；
インドリル、インドール−２−イル、インドール−６−イル、インドール−５−イル、Ｃ１−６アルキル置換インドリル、Ｎ−メチル−インドール−２−イル；
ピリジニル、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、ピリジン−５−イル、Ｃ１−６アルキル置換ピリジニル、２−メチル−ピリジン−５−イルならびにオキシ−ピリジニル、１−オキシ−ピリジン−２−イルおよび１−オキシ−ピリジン−３−イル；
フロ［３，２−ｂ］−ピリジニル、フロ［３，２−ｂ］−ピリジン−２−イル、Ｃ１−６アルキル置換フロ［３，２−ｂ］−ピリジニル、３−メチル−フロ［３，２−ｂ］−ピリジン−２−イル；
チオフェニル、チオフェン−３−イル、また、チオフェン−２−イル、Ｃ１−６アルキル置換チオフェニル、５−メチル−チオフェン−２−イル および５−メチル−チオフェン−３−イル、ハロゲン置換チオフェニル、４，５−ジブロモ−チオフェン−２−イル；
チエノ［３，２−ｂ］チオフェン、チエノ［３，２−ｂ］チオフェン−２−イル、Ｃ１−６アルキル置換チエノ［３，２−ｂ］チオフェン−２−イル、５−ｔｅｒｔ−ブチル−３−メチル−チエノ［３，２−ｂ］チオフェン−２−イル；
イソオキサゾリル、イソオキサゾール−４−イル、Ｃ１−６アルキル置換イソオキサゾリル、３，５−ジメチル−イソオキサゾール−４−イル；
オキサゾリル、オキサゾール−４−イル、５−メチル−２−フェニル−オキサゾール−４−イル、２−フェニル−５−トリフルオロメチル−オキサゾール−４−イル；および
１Ｈ−ベンゾイミダゾリル、１Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−イルからなる群より選択してもよい。
【００６１】
Ｒ４がＲ５ＳＯ２である場合、Ｒ５は、ピリジン−２−イルまたは１−オキソ−ピリジン−２−イルであってもよい。
【００６２】
(71)  Ｒ’は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択される。
【００６３】
Ｒ’はまた、Ｈおよびナフタレン−２−イル−メチルからなる群より選択してもよい。
【００６４】
Ｒ’’は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択される。
【００６５】
Ｒ’’’は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択される。
【００６６】
Ｒ’’’はまた、Ｈ、メチルおよび６，６−ジメチルからなる群より選択してもよい。(66課か
【００６７】
式ＩＩの化合物において、Ｒ１が
【化７】
2008512475.tif 000008
である場合：
Ｒ３は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルキルおよびＡｒ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択される。
【００６８】
Ｒ３はまた、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、シクロヘキシルメチルおよびトルイルからなる群より選択してもよい。
【００６９】
Ｒ’’’’は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ＨｅｔＣ０−６アルキルおよびＡｒＣ０−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ’’’’はまた、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、イソブチルおよびｔ−ブチルからなる群より選択してもよい。
【００７０】
Ｒ’’’’は、メチルであってもよい。
【００７１】
かかる化合物において、Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’、Ｒ４およびＲ５は、置換基：
【化８】
2008512475.tif 000009
における記載と同意義である。
【００７２】
式ＩＩの化合物において、Ｒ１が、
【化９】
2008512475.tif 000010
である場合：
ｎは１から５までの整数であってもよく；および
Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’、Ｒ４およびＲ５は、Ｒ１が置換基：
【化１０】
2008512475.tif 000011
である場合の記載と同意義である。
ｎは３であってもよい。
環は置換されていなくてもよく、または１以上のＣ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ＨｅｔＣ０−６アルキル、ＡｒＣ０−６アルキルまたはハロゲンで置換されていてもよい。
環は置換されていなくてもよい。
【００７３】
式ＩＩの化合物において、Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキル、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルキル、Ｒ９Ｃ（Ｏ）−、Ｒ９Ｃ（Ｓ）−、Ｒ９ＳＯ２−、Ｒ９ＯＣ（Ｏ）−、Ｒ９Ｒ１１ＮＣ（Ｏ）−、Ｒ９Ｒ１１ＮＣ（Ｓ）−、Ｒ９Ｒ１１ＮＳＯ２−、
【化１１】
2008512475.tif 000012
およびＲ９ＳＯ２Ｒ１１ＮＣ（Ｏ）−からなる群より選択される。
【００７４】
かかる実施態様において：
Ｒ６は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルまたはＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル、Ｈからなる群より選択してもよい。
【００７５】
Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキル、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルキル、Ｒ１０Ｃ（Ｏ）−、Ｒ１０Ｃ（Ｓ）−、Ｒ１０ＳＯ２−、Ｒ１０ＯＣ（Ｏ）−、Ｒ１０Ｒ１４ＮＣ（Ｏ）−、Ｒ１０Ｒ１４ＮＣ（Ｓ）−、Ｒ７またはＲ１０ＯＣ（Ｏ）からなる群より選択される。
【００７６】
Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ＨｅｔＣ０−６アルキルおよびＡｒＣ０−６アルキル；Ｃ１−６アルキルまたはイソブチルからなる群より選択される。
【００７７】
Ｒ９は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択される。
【００７８】
Ｒ９はまた、メチル；エチル、Ｃ１−６アルキル−置換エチル、２−シクロヘキシル−エチル；
プロピル；ブチル、Ｃ１−６ブチル、３−メチルブチル；ｔｅｒｔ−ブチル
Ｒ２がＲ９ＯＣ（Ｏ）である場合；イソペンチル；
フェニル、ハロゲン置換フェニル、３，４−ジクロロフェニル、４−ブロモフェニル、２−フルオロフェニル、３−フルオロフェニル、４−フルオロフェニル、２−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、Ｃ１−６アルコキシフェニル３−メトキシフェニル、４−メトキシフェニル、３，４−ジメトキシフェニル、シアノフェニル、２−シアノフェニル；Ｃ１−６アルキル置換フェニル、４−エチル−フェニル、２−メチルフェニル、４−メチルフェニル、Ｃ１−６アルキルスルホニル置換フェニル、４−メタンスルホニルフェニルおよび２−メタンスルホニルフェニル；
トルイル、Ｈｅｔ−置換トルイル、３−（ピリジン−２−イル）トルイル；
ナフチレン、ナフチル−２−エン；
安息香酸、２−安息香酸；
ベンゾ［１，３］ジオキソリル、ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル；
ベンゾ［１，２，５］オキサジアゾリル、ベンゾ［１，２，５］オキサジアゾール−４−イル；
ピリジニル、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、１−オキシ−ピリジニル、１−オキシ−ピリジン−２−イル、１−オキシ−ピリジン−３−イル；Ｃ１−６アルキルピリジニル、３−メチル−ピリジン−２−イル、６−メチル−ピリジン−２−イル；
チオフェニル、チオフェニル−２−イル；
チアゾリル、チアゾール−２−イル；
１Ｈ−イミダゾリル、１Ｈ−イミダゾール−２−イル、１Ｈ−イミダゾール−４−イル、Ｃ１−６アルキル置換イミダゾリル、１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル、１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イルおよび１，２−ジメチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル；
トリアゾリル、１Ｈ−［１，２，４］トリアゾリル、１Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−イル、Ｃ１−６アルキル置換１Ｈ−［１，２，４］トリアゾリル、５−メチル−１Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−イル；および
イソオキサゾリル、イソオキサゾール−４−イル、Ｃ１−６アルキル置換イソオキサゾリル、３，５−ジメチル−イソオキサゾール−４−イルからなる群より選択してもよい。
【００７９】
Ｒ２がＲ９ＳＯ２である場合、Ｒ９は、ピリジン−２−イルおよび１−オキシ−ピリジン−２−イルからなる群より選択してもよい。
【００８０】
Ｒ２がＲ９ＳＯ２Ｒ１１ＮＣ（Ｏ）−である場合、Ｒ９は、Ａｒ−Ｃ０−６アルキル、Ａｒ、２−メチルフェニル、４−メチルフェニル、２−クロロフェニルおよび４−フルオロフェニルなどの置換フェニルであってもよい。
【００８１】
Ｒ２がＲ９Ｃ（Ｏ）−である場合、Ｒ９は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル、１−オキシ−ピリジン−２−イル、シクロヘキシルエチルおよび３−メチルブチルからなる群より選択してもよい。
【００８２】
Ｒ１１は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択される。
【００８３】
Ｒ２がＲ９ＳＯ２Ｒ１１ＮＣ（Ｏ）−である場合、Ｒ１１は、Ｈであってもよい。
【００８４】
Ｒ２がＡｒ−Ｃ０−６アルキルである場合、Ｒ２はフェニル、置換フェニル、ハロゲン置換フェニル、２−フルオロベンジルであってもよい。
【００８５】
Ｒ２がＣ１−６アルキルである場合、Ｒ２は、１−プロピル、１−ブチルおよび１−ペンチルから選択してもよい。
【００８６】
Ｒ２がＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルである場合、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルキルは、Ｈｅｔ−メチルであってもよく、Ｈｅｔ−メチル中のＨｅｔは、ピリジニル、ピリジン−２−イル、Ｃ１−６アルキルピリジニル、６−メチル−ピリジン−２−イル；
チオフェニル、チオフェン−２−イル、チオフェン−２−イルまたはベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル；
チアゾリル、１−（２−モルホリン−４−イル−チアゾール−４−イル）などのチアゾール−４−イルおよび１−（イソチアゾール−３−イル）；
１Ｈ−イミダゾリル、１Ｈ−イミダゾール−２−イル、１Ｈ−イミダゾール−４−イル、Ｃ１−６アルキル置換イミダゾリル、１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２イル；
チアゾリル、３Ｈ−［１，２，３］チアゾリル、３Ｈ−［１，２，３］チアゾール−４−イル、Ｃ１−６アルキル置換３Ｈ−［１，２，３］チアゾリル、３−フェニル−３Ｈ−［１，２，３］チアゾリル−４−イル；
キノリニル、キノリン−２−イル、キノリン−２−イル；
フラニル、フラン−２−イル、置換フラニル、例えば、５−エチル−フラン−２−イル；
チエノ［３，２−ｂ］チオフェン、チエノ［３，２−ｂ］チオフェン−２−イル、Ｃ１−６アルキル置換チエノ［３，２−ｂ］チオフェニル、３，４−ジメチル−チエノ［３，２−ｂ］チオフェン−２−イルからなる群より選択してもよい。
【００８７】
Ｒ２は、Ｈ；トルイル；アリール置換エチル、２−フェニルエチル、２−［３−（ピリジン−２−イル）フェニル］エチルであってもよい。
【００８８】
であってもよい式ＩＩの化合物において、式中：
Ｒ１は、
【化１２】
2008512475.tif 000013
であり；
Ｒ２は、Ａｒ−Ｃ０−６アルキル、Ｒ９Ｃ（Ｏ）−、Ｒ９ＳＯ２、Ｒ９Ｒ１１ＮＣ（Ｏ）−、および
【化１３】
2008512475.tif 000014
からなる群より選択してもよく；
Ｒ３は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキルおよびＡｒ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ４は、Ｒ５ＯＣ（Ｏ）−、Ｒ５Ｃ（Ｏ）−およびＲ５ＳＯ２−からなる群より選択され；
Ｒ５は、Ｃ１−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ６はＨであり；
Ｒ７はＲ１０ＯＣ（Ｏ）であり；
Ｒ８はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ９は、Ｃ１−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ１０は、Ｃ１−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ’はＨであり；
Ｒ’’はＨであり；
Ｒ’’’はＨであり；および
ＺはＣ（Ｏ）およびＣＨ２からなる群より選択される。
【００８９】
式ＩＩの化合物はまた、Ｒ２がＡｒ−Ｃ０−６アルキル、Ｒ９Ｃ（Ｏ）−、Ｒ９ＳＯ２からなる群より選択される化合物を含む。
【００９０】
式ＩＩの化合物はまた、
［式中：Ｒ１は
【化１４】
2008512475.tif 000015
であり；
Ｒ２は、Ａｒ−Ｃ０−６アルキル、Ｒ９Ｃ（Ｏ）−およびＲ９ＳＯ２からなる群より選択され；
Ｒ３は、Ｈ、メチル、エチル、ｎ−プロピル、プロパ−２−イル、ｎ−ブチル、イソブチル、ブタ−２−イル、シクロプロピルメチル、シクロヘキシルメチル、２−メタンスルフィニル−エチル、１−ヒドロキシエチル、トルイル、ナフタレン−２−イルメチル、ベンジルオキシメチルおよびヒドロキシメチルからなる群より選択され；
Ｒ４はＲ５Ｃ（Ｏ）−であり；
Ｒ５は、メチル、ハロゲン化メチル、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルコキシ置換メチル、フェノキシ−メチル、４−フルオロ−フェノキシ−メチル、複素環置換メチル、２−チオフェニル−メチル；
エチル、ピペリジン−１−イル−エチル；
ブチル、アリール置換ブチル、４−（４−メトキシ）フェニル−ブチル；
イソペンチル；
シクロヘキシル；
ペンタノニル、４−ペンタノニル；
ブテニル、アリール置換ブテニル、４，４−ビス（４−メトキシフェニル）−ブタ−３−エニル；
アセチル；
フェニル、１以上のハロゲンで置換されるフェニル、３，４−ジクロロフェニルおよび４−フルオロフェニル、１以上のアリールオキシまたはＣ１−６アルコキシ基で置換されるフェニル、３，４−ジメトキシ−フェニル、３−ベンジルオキシ−４−メトキシ−フェニル、１以上のＣ１−６アルキルスルホニル基で置換されるフェニル、４−メタンスルホニル−フェニル；
ベンジル；
ナフタレニル、ナフチレン−２−イル；
ベンゾ［１，３］ジオキソリル、ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル；
フラニル、フラン−２−イル、置換フラニル、例えば、５−ニトロ−フラン−２−イル、５−（４−ニトロフェニル）−フラン−２−イル、５−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−フラン−２−イル、ハロゲン置換フラニル、さらに５−ブロモ−フラン−２−イル、アリール置換フラニル、さらに５−（４−クロロ−フェニル）−フラン−２−イル、Ｃ１−６アルキル置換フラニル、さらに３−メチル−フラン−２−イル、４−メチル−フラン−２−イル、２，５−ジメチル−フラン−２−イルおよび２，４−ジメチル−フラン−３−イル；
テトラヒドロフラニル、テトラヒドロフラン−２−イル；
ベンゾフラニル、ベンゾフラン−２−イルおよび置換ベンゾフラニル、５−（２−ピペラジン−４−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル−エトキシ）ベンゾフラン−２−イル、５−（２−モルホリノ−４−イル−エトキシ）−ベンゾフラン−２−イル、５−（２−ピペラジン−１−イル−エトキシ）ベンゾフラン−２−イル、５−（２−シクロヘキシル−エトキシ）−ベンゾフラン−２−イル；Ｃ１−６アルコキシ置換ベンゾフラニル、７−メトキシ−ベンゾフラン−２−イル、５−メトキシ−ベンゾフラン−２−イル、５，６−ジメトキシ−ベンゾフラン−２−イル、ハロゲン置換ベンゾフラニル、５−フルオロ−ベンゾフラン−２−イル、５，６−ジフルオロ−ベンゾフラン−２−イル、Ｃ１−６アルキル置換ベンゾフラニル、３−メチル−ベンゾフラン−２−イル、３，５−ジメチル−ベンゾフラン−２−イルおよび３−エチル−ベンゾフラン−２−イル；また、５−フルオロ−３−メチル−ベンゾフラン−２−イル、６−フルオロ−３−メチル−ベンゾフラン−２−イル、５−メトキシ−３−メチル−ベンゾフラン−２−イル、４−メトキシ−３−メチル−ベンゾフラン−２−イルおよび６−メトキシ−３−メチル−ベンゾフラン−２−イル；
ナフト［２，１−ｂ］−フラニル、ナフト［２，１−ｂ］−フラン−２−イル、アルキル置換ナフト［２，１−ｂ］−フラニル、１−メチル−ナフト［２，１−ｂ］−フラン−２−イル；
ベンゾ［ｂ］チオフェニル、ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル；Ｃ１−６アルコキシ置換ベンゾ［ｂ］チオフェニル、５，６−ジメトキシ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル；
キノリニル、キノリン−２−イル、キノリン−３−イル、キノリン−４−イル、キノリン−６−イルおよびキノリン−８−イル；
キノキサリニル、キノキサリン−２−イル；
１，８ナフチリジニル、１，８ナフチリジン−２−イル；
インドリル、インドール−２−イル、インドール−６−イル、インドール−５−イル、Ｃ１−６アルキル置換インドリル、Ｎ−メチル−インドール−２−イル；
ピリジニル、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、ピリジン−５−イル、Ｃ１−６アルキル置換ピリジニル、２−メチル−ピリジン−５−イルおよびオキシ−ピリジニル、１−オキシ−ピリジン−２−イルおよび１−オキシ−ピリジン−３−イル；
フロ［３，２−ｂ］−ピリジニル、フロ［３，２−ｂ］−ピリジン−２−イル、Ｃ１−６アルキル置換フロ［３，２−ｂ］−ピリジニル、３−メチル−フロ［３，２−ｂ］−ピリジン−２−イル；
チオフェニル、チオフェン−３−イル、またチオフェン−２−イル、Ｃ１−６アルキル置換チオフェニル、５−メチル−チオフェン−２−イルおよび５−メチル−チオフェン−３−イル、ハロゲン置換チオフェニル、４，５−ジブロモ−チオフェン−２−イル；
チエノ［３，２−ｂ］チオフェン、チエノ［３，２−ｂ］チオフェン−２−イル、Ｃ１−６アルキル置換チエノ［３，２−ｂ］チオフェン−２−イル、５−ｔｅｒｔ−ブチル−３−メチル−チエノ［３，２−ｂ］チオフェン−２−イル；
イソオキサゾリル、イソオキサゾール−４−イル、Ｃ１−６アルキル置換イソオキサゾリル、３，５−ジメチル−イソオキサゾール−４−イル；
オキサゾリル、オキサゾール−４−イル、５−メチル−２−フェニルオキサゾール−４−イル、２−フェニル−５−トリフルオロメチル−オキサゾール−４−イル；および
１Ｈ−ベンゾイミダゾリル、１Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−イルからなる群より選択される］
化合物を含む。
【００９１】
Ｒ９は、メチル；
エチル、Ｃ１−６アルキル−置換エチル、２−シクロヘキシル−エチル；
プロピル；
ブチル、Ｃ１−６ブチル、３−メチルブチル；
ｔｅｒｔ−ブチル、特に、Ｒ２がＲ９ＯＣ（Ｏ）である場合；
イソペンチル；
フェニル、ハロゲン置換フェニル、３，４−ジクロロフェニル、４−ブロモフェニル、２−フルオロフェニル、３−フルオロフェニル、４−フルオロフェニル、２−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、Ｃ１−６アルコキシフェニル、３−メトキシフェニル、４−メトキシフェニル、３，４−ジメトキシフェニル、シアノフェニル、２−シアノフェニル；Ｃ１−６アルキル置換フェニル、４−エチル−フェニル、２−メチルフェニル、４−メチルフェニル、Ｃ１−６アルキルスルホニル置換フェニル、４−メタンスルホニルフェニルおよび２−メタンスルホニルフェニル；
トルイル、Ｈｅｔ−置換トルイル、３−（ピリジン−２−イル）トルイル；
ナフチレン、ナフチル−２−エン；
安息香酸、２−安息香酸；
ベンゾ［１，３］ジオキソリル、ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル；
ベンゾ［１，２，５］オキサジアゾリル、ベンゾ［１，２，５］オキサジアゾール−４−イル；
ピリジニル、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、１−オキシ−ピリジニル、１−オキシ−ピリジン−２−イル、１−オキシ−ピリジン−３−イル；Ｃ１−６アルキルピリジニル、３−メチル−ピリジン−２−イル、６−メチル−ピリジン−２−イル；
チオフェニル、チオフェニル−２−イル；
チアゾリル、チアゾール−２−イル；
１Ｈ−イミダゾリル、１Ｈ−イミダゾール−２−イル、１Ｈ−イミダゾール−４−イル、Ｃ１−６アルキル置換イミダゾリル、さらに１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル、１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イルおよび１，２−ジメチル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル；
チアゾリル、１Ｈ−［１，２，４］チアゾリル、１Ｈ−［１，２，４］チアゾール−３−イル、Ｃ１−６アルキル置換１Ｈ−［１，２，４］チアゾリル、５−メチル−１Ｈ−［１，２，４］チアゾール−３−イル；および
イソオキサゾリル、イソオキサゾール−４−イル、Ｃ１−６アルキル置換イソオキサゾリル、３，５−ジメチル−イソオキサゾール−４−イルからなる群より選択される。
【００９２】
Ｒ’はＨであり；
Ｒ’’はＨであり；および
Ｒ’’’はＨである。
【００９３】
式Ｉの化合物はまた、
［式中：Ｒ１は
【化１５】
2008512475.tif 000016
であり；
Ｒ２はＲ９ＳＯ２であり；
Ｒ３はイソブチルであり；
Ｒ４はＲ５Ｃ（Ｏ）であり；
Ｒ５は、３−メチル−ベンゾフラン−２−イル、チエノ［３，２−ｂ］チオフェン−２−イル、５−メトキシベンゾフラン−２−イル、キノキサリン−２−イルおよびキノリン−２−イル、３−メチル−ベンゾフラン−２−イルからなる群より選択され；
Ｒ９は、ピリジン−２−イルおよび１−オキシ−ピリジン−２−イル、１−オキシ−ピリジン−２−イルからなる群より選択される］
化合物を含む。
【００９４】
Ｒ’はＨであり；および
Ｒ’’’はＨであり；
Ｒ５は、３−メチル−ベンゾフラン−２−イルであってもよく；および
Ｒ９は、１−オキシ−ピリジン−２−イルであってもよい。
【００９５】
式ＩＩの化合物はまた、式ＩＩａ：
【化１６】
2008512475.tif 000017
［式中：Ｒ１は
【化１７】
2008512475.tif 000018
からなる群より選択され；
Ｒ２は、Ｃ１−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキル、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルキル、Ｒ９Ｃ（Ｏ）−、Ｒ９ＳＯ２−、Ｒ９Ｒ１１ＮＣ（Ｏ）−およびＲ９ＳＯ２Ｒ１１ＮＣ（Ｏ）−からなる群より選択され；
Ｒ３は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルキルおよびＡｒ−Ｃ０−６アルキル、Ｃ１−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ３およびＲ’は、ピロリジン、ピペリジンまたはモルホリン環を形成するために結合してもよく；
Ｒ４はＲ５Ｃ（Ｏ）−であり；
Ｒ５は、Ｃ１−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ９は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択され；
Ｒ１１は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル、Ｈからなる群より選択され；
Ｒ’はＨであり；
Ｒ’’はＨであり；
Ｒ’’’は、ＨおよびＣ１−６アルキル、Ｈからなる群より選択され；
Ｒ’’’’は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキルＣ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ＨｅｔＣ０−６アルキルおよびＡｒＣ０−６アルキルからなる群より選択され；および
ｎは１から５までの整数である］
の化合物ならびにその医薬上許容される塩、水和物および溶媒和物として提供することができる。
【００９６】
式ＩＩａにおいて、Ｒ１が
【化１８】
2008512475.tif 000019
である場合：
Ｒ３はＣ１−６アルキルであってもよく；
Ｒ３は、ブタ−２−イルおよびイソブチルからなる群より選択してもよい。
Ｒ４はＲ５Ｃ（Ｏ）−である。
Ｒ５は、Ｃ１−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル、Ｈｅｔ−Ｃ１−６アルキルからなる群より選択してもよく；
Ｒ５はまた、ピペリジン−エチル、ピペリジン−１−イル−エチル；
ベンゾ［１，３］ジオキソリル、ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル；
フラニル、フラン−２−イル、アリール置換フラニル、例えば、５−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−フラン−２−イル、Ｃ１−６アルキル置換フラニル、さらに３−メチル−フラン−２−イル、４−メチル−フラン−２−イル、２，５−ジメチル−フラン−２−イルおよび２，４−ジメチル−フラン−３−イル；
ベンゾフラニル、ベンゾフラン−２−イル、Ｃ１−６アルコキシ置換ベンゾフラニル、５−メトキシ−ベンゾフラン−２−イル、ハロゲン置換ベンゾフラニル、５−フルオロ−ベンゾフラン−２−イル、Ｃ１−６アルキル置換ベンゾフラニル、３−メチル−ベンゾフラン−２−イル、３，５−ジメチル−ベンゾフラン−２−イルおよび３−エチル−ベンゾフラン−２−イル；また５−フルオロ−３−メチル−ベンゾフラン−２−イル、５−メトキシ−３−メチル−ベンゾフラン−２−イル、４−メトキシ−３−メチル−ベンゾフラン−２−イルおよび６−メトキシ−３−メチル−ベンゾフラン−２−イル；
ナフト［２，１−ｂ］−フラニル、ナフト［２，１−ｂ］−フラン−２−イル、Ｃ１−６アルキル置換ナフト［２，１−ｂ］−フラニル、１−メチル−ナフト［２，１−ｂ］−フラン−２−イル；
ベンゾ［ｂ］チオフェニル、ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル；
キノリニル、キノリン−２−イル；
キノキサリニル、キノキサリン−２−イル；
ピリジニル、ピリジン−２−イル、ピリジン−３−イル、ピリジン−５−イルおよびオキシ−ピリジニル、１−オキシ−ピリジン−２−イルおよび１−オキシ−ピリジン−３−イル；
フロ［３，２−ｂ］−ピリジニル、フロ［３，２−ｂ］−ピリジン−２−イル、Ｃ１−６アルキル置換フロ［３，２−ｂ］−ピリジン−２−イル、３−メチル−フロ［３，２−ｂ］−ピリジン−２−イル；
チオフェニル、チオフェン−３−イルおよびチオフェン−２−イル、Ｃ１−６アルキル置換チオフェニル、５−メチル−チオフェン−２−イル および５−メチル−チオフェン−３−イル；ならびに
チエノ［３，２−ｂ］チオフェン、チエノ［３，２−ｂ］チオフェン−２−イル；ならびに
１Ｈ−ベンゾイミダゾリル、１Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−イルからなる群より選択してもよい。
Ｒ５は、３−メチル−ベンゾフラン−２−イル、チエノ［３，２−ｂ］チオフェン−２−イル、５−メトキシベンゾフラン−２−イル、キノキサリン−２−イルおよびキノリン−２−イルからなる群より選択してもよい。
【００９７】
式ＩＩａにおいて、Ｒ１が
【化１９】
2008512475.tif 000020
である場合：
Ｒ３は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルキルおよびＡｒ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択してもよい。
Ｒ３はまた、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、シクロヘキシルメチルおよびトルイルからなる群より選択してもよい。
Ｒ’’’’は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ＨｅｔＣ０−６アルキルおよびＡｒＣ０−６アルキルからなる群より選択してもよく；
Ｒ’’’’はまた、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、イソブチルおよびｔ−ブチルからなる群より選択してもよい。
Ｒ’’’’はメチルであってもよい。
【００９８】
かかる化合物において、Ｒ’およびＲ４は、置換基：
【化２０】
2008512475.tif 000021
における記載と同意義である。
【００９９】
式ＩＩａにおいて、Ｒ１が
【化２１】
2008512475.tif 000022
である場合：
ｎは１から５までの整数であってもよく；および
Ｒ’およびＲ４は、置換基：
【化２２】
2008512475.tif 000023
における記載と同意義である。
【０１００】
サイクリック環は、置換されていなくてもよく、または１以上のＣ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ＨｅｔＣ０−６アルキル、ＡｒＣ０−６アルキルまたはハロゲンで置換されていてもよい。
【０１０１】
式ＩＩａにおいて、Ｒ２は、Ｃ１−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキル、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルキル、Ｒ９Ｃ（Ｏ）−、Ｒ９ＳＯ２−、Ｒ９Ｒ１１ＮＣ（Ｏ）−およびＲ９ＳＯ２Ｒ１１ＮＣ（Ｏ）−からなる群より選択してもよい。
【０１０２】
かかる実施態様において：
Ｒ９は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択してもよい。
Ｒ９はまた、エチル、Ｃ１−６アルキル−置換エチル、２−シクロヘキシル−エチル；
プロピル、プロパ−１−イル；
イソペンチル；
ブチル、ブタ−１−イル；
フェニル、ハロゲン置換フェニル、３−フルオロフェニル、４−フルオロフェニル、２−クロロフェニル；Ｃ１−６アルキル置換フェニル、４−エチル−フェニル、２−メチルフェニル、４−メチルフェニル、Ｃ１−６アルキルスルホニル置換フェニル、４−メタンスルホニルフェニルおよび２−メタンスルホニルフェニル；
ピリジニル、ピリジン−２−イル、(１−オキシ−ピリジニル、１−オキシ−ピリジン−２−イル；
１Ｈ−イミダゾリル、１Ｈ−イミダゾール−２−イル  Ｃ１−６アルキル置換イミダゾリル、１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル；および
イソオキサゾリル、イソオキサゾール−４−イル、Ｃ１−６アルキル置換イソオキサゾリル、’３，５−ジメチル−イソオキサゾール−４−イルからなる群より選択してもよい。
【０１０３】
Ｒ２がＲ９ＳＯ２である場合、Ｒ９は、ピリジン−２−イルおよび１−オキシ−ピリジン−２−イルからなる群より選択してもよい。
【０１０４】
Ｒ２がＲ９ＳＯ２Ｒ１１ＮＣ（Ｏ）−である場合、Ｒ９は、Ａｒ−Ｃ０−６アルキル、Ａｒ、２−メチルフェニル、４−メチルフェニル、２−クロロフェニル、４−フルオロフェニルなどの置換フェニルであってもよい。
【０１０５】
Ｒ２がＲ９Ｃ（Ｏ）−である場合、Ｒ９は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル、１−オキシ−ピリジン−２−イル、２−シクロヘキシルエチルおよびイソペンチルからなる群より選択してもよい。
【０１０６】
Ｒ２がＲ９ＳＯ２Ｒ１１ＮＣ（Ｏ）−である場合、Ｒ１１は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択される。かかる実施態様において、Ｒ１１はＨであってもよい。
【０１０７】
Ｒ２は、適当に、Ｃ１−６アルキル、Ａｒ−Ｃ０−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキル、Ｃ１−６アルキルおよびＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルからなる群より選択してもよい。
【０１０８】
Ｒ２がＡｒ−Ｃ０−６アルキルである場合、Ｒ２はフェニル、置換フェニル、ハロゲン置換フェニル、２−フルオロベンジルであってもよい。
【０１０９】
Ｒ２がＣ１−６アルキルである場合、Ｒ２は１−プロピル、１−ブチルおよび１−ペンチルから選択してもよい。
【０１１０】
Ｒ２がＨｅｔ−Ｃ０−６アルキルである場合、Ｈｅｔ−Ｃ０−６アルキルはＨｅｔ−メチルであってもよく、Ｈｅｔ−メチル中のＨｅｔは、ピリジニル、ピリジン−２−イル(28)、Ｃ１−６アルキルピリジニル、６−メチル−ピリジン−２−イル；
チオフェニル、チオフェン−２−イル；
ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル；
チアゾリル、イソチアゾール−３−イルなどのチアゾール−４−イル；
１Ｈ−イミダゾリル、１Ｈ−イミダゾール−２−イル、Ｃ１−６アルキル置換イミダゾリル、１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２イル；
チアゾリル、３Ｈ−［１，２，３］チアゾリル、３Ｈ−［１，２，３］チアゾール−４−イル、Ｃ１−６アルキル置換３Ｈ−［１，２，３］チアゾリル、３−フェニル−３Ｈ−［１，２，３］チアゾリル−４−イル；
キノリニル、キノリン−２−イル、キノリン−２−イル；
フラニル、フラン−２−イル、置換フラニル、例えば、５−エチル−フラン−２−イル；
チエノ［３，２−ｂ］チオフェン、チエノ［３，２−ｂ］チオフェン−２−イル、Ｃ１−６アルキル置換チエノ［３，２−ｂ］チオフェン−２−イル、３，４−ジメチル−チエノ［３，２−ｂ］チオフェン−２−イルからなる群より選択してもよい。
【０１１１】
本発明の他の化合物は、下記の式ＩＩＩ：
【化２３】
2008512475.tif 000024
［式中：Ｒ１は、フェニル、チエニル、フラニル、ベンゾオキサジアゾリル、イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾリル、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル−Ｃ１−Ｃ４アルキレニル、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキルオキシ−Ｃ１−Ｃ４アルキレニルまたはＮ−エテニル−テトラヒドロインドリルであって、Ｒ１は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルホニル、［（メチルアミノ）カルボニル］アミノ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、カルボＣ１Ｃ６アルキルオキシおよびハロからなる群より選択される１以上の置換基で所望により置換されていてもよく；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ハロＣ１−Ｃ６アルキル、ジＣ１−Ｃ６アルキルアミノ−Ｃ１−Ｃ６アルキレニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルオキシＣ１−Ｃ６アルキレニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルオキシ、ピリジニル−Ｃ１−Ｃ６アルキレニル、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキルまたはテトラヒドロピラニルであり；
Ｒ３は、Ｈ、ヒドロキシ、−Ｏ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＳＨ、−Ｓ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、アミノ、Ｃ１−Ｃ４アルキルアミノ、プロペニルオキシまたはハロであり；
Ｒ３’はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり、あるいはＲ３と一緒になってＲ３’はオキソ基を形成し；
Ｒ４はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ５は、イソ−ブチル、３，３−ジメチルブチル、チアゾリルメチレニル、ヒドロキシエチレニル、ジクロロエチル、ピペリジニルメチレニル、テトラヒドロピラニルメチレニル、シクロプロピルメチレニル、シクロヘキシルメチレニルまたはシクロペンチルメチレニルであり；
Ｒ６は、フェニル、フェニル−Ｃ１−Ｃ４−アルキレニル、チエニル、ベンゾ［ｂ］チエニル、ベンゾ［ｂ］フラニル、チエノ［２，３−ｂ］ピリジニル、チエノ［３，２−ｂ］チエニル、フロ［３，２−ｂ］ピリジニル、ベンゾジアジニル、イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジニル、インドリル、チエニル−Ｃ１−Ｃ４−カルキレニル、シクロペンタ［ｂ］チエニル、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル−Ｃ１−Ｃ４アルキレニル、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキルオキシ−Ｃ１−Ｃ４アルキレニル、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−アルキルアミノ、Ｃ１−Ｃ６−ジアルキルアミノ、Ｎ−エテニル−テトラヒドロインドリル、テトラヒドロイソキノリニル、フェニルメチルテトラヒドロイソキノリニル、フェニルカルボニルテトラヒドロイソキノリニルまたは１，１−ジメチルエチルジヒドロイソキノリンカルバン酸−イル、ビシクロ［２．２．１］ヘプタ−２−イル−Ｃ１−Ｃ４アルキレニルであって、Ｒ６は、ハロ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、フェニル、ハロフェニルおよびアミノからなる群より選択される１以上の置換基で所望により置換されていてもよく；
Ｒ７はＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルであり；および
Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ＣＯＯＨ、アセチルアミノ−Ｃ１−Ｃ４アルキレニルまたはヒドロキシメチルである］
の化合物またはその医薬上許容される塩もしくはその溶媒和物あるいはその組み合わせを含み、また非環式１，３−ジアミンとして本明細書に記載されている。
【０１１２】
したがって、本発明は、少なくとも１個の細胞をＴＲＰＶ４チャネル受容体に対するアゴニストを含む有効量の医薬組成物と接触させることを含む、ＴＲＰＶ４チャネル受容体を発現する少なくとも１個の細胞におけるＴＲＰＶ４チャネル受容体を活性化する方法を提供する。一の態様において、少なくとも１個の細胞はヒト由来である。別の態様において、少なくとも１個の細胞は軟骨細胞である。別の態様において、少なくとも１個の細胞は軟骨基質の部分である。
【０１１３】
別の態様において、アゴニストは、少なくとも１個の細胞により産生されるマトリックス分解酵素の量を減少させる。別の態様において、アゴニストは、少なくとも１個の細胞により放出されるマトリックス分解酵素の量を減少させる。別の態様において、アゴニストは、少なくとも１個の細胞により産生されるアグリカナーゼの量を減少させる。別の態様において、アゴニストは、少なくとも１個の細胞により放出されるアグリカナーゼの量を減少させる。別の態様において、アゴニストは、少なくとも１個の細胞により産生されるマトリックスメタロプロテアーゼ（「ＭＭＰ」）の量を減少させる。別の態様において、アゴニストは、少なくとも１個の細胞により放出されるＭＭＰの量を減少させる。別の態様において、ＭＭＰはＭＭＰ−１、ＭＭＰ−３およびＭＭＰ−１３の群から選択されるが、これに限定されるものではない。
【０１１４】
別の態様において、アゴニストは、少なくとも１個の細胞により産生される酸化窒素の量を減少させる。別の態様において、アゴニストは、少なくとも１個の細胞により放出される酸化窒素の量を減少させる。別の態様において、アゴニストは、プロテオグリカン合成の阻害を軽減させる。別の態様において、本発明は、ＴＲＰＶ４チャネル受容体中に流れる電流を増大させる方法を提供する。
【０１１５】
別の態様において、アゴニストは、３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン、アゼピンまたは非環式１，３−ジアミンを含む。別の態様において、アゴニストは、３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン、アゼピンおよび非環式１，３−ジアミンの群から選択される。本発明の別の態様において、アゴニストは、ホルボール１２−ミリスチン酸１３−アセテート（ＰＭＡ）および４α−ホルボール−１２，１３−ジデカン酸塩ではない。４α−ホルボール−１２，１３−ジデカン酸塩は、ＴＲＰＶ４チャネル受容体の活性を示している。しかしながら、４α−ホルボール−１２，１３−ジデカン酸塩を軟骨移植片と接触させると、ＴＲＰＶ４チャネル受容体の活性化における４α−ホルボール−１２，１３−ジデカン酸塩の有効性および効果は、４α−ホルボール−１２，１３−ジデカン酸塩と軟骨基質から抽出される軟骨細胞との接触の効果および有効性と比較して、著しく軽減される。ヒト、ラット、ウサギ、マウス、イヌ、サルまたはウシの軟骨細胞を含む軟骨移植片と接触させると、本発明の化合物は、ＴＲＰＶ４チャネル受容体の活性化における有効性および効果を示す。
【０１１６】
別の態様において、アゴニストは、１，３−ジアミンを含む。別の態様において、アゴニストは、所望により置換されていてもよいベンジルスルホンアミドを含む。別の態様において、アリールまたはヘテロアリールの群から選択される第一化学的部分およびＣＮ、ＮＯ２、ハロゲンで所望により置換されていてもよいアリールである第二化学的部分を含み、第一および第二化学的部分は同一の化合物の部分を形成する。アゴニストは、１，３−ジアミンをさらに含んでいてもよい。別の態様において、アゴニストは、ベンゾチオフェン、インデニルまたはインドールの群から選択される第一化学的部分およびハロゲン化ベンゼン又はシアノベンゼンの群から選択される第二化学的部分を含む。別の態様において、アゴニストは、Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（４−フルオロフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（２−シアノフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（２−シアノフェニル）スルホニル］ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛３−［［（シアノフェニル）スルホニル］（メチル）アミノ］プロピル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド；およびＮ−｛（１Ｓ）−１−［（｛３−［［（２，４−ジクロロフェニル）スルホニル］（メチル）アミノ］プロピル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミドの群から選択される。
【０１１７】
別の態様において、アゴニストは、約１．０μＭ未満のＴＲＰＶ４チャネル受容体に対するＥＣ５０値を有する。別の態様において、約１０ｎＭ未満のＴＲＰＶ４チャネル受容体に対するＥＣ５０値を有する。別の態様において、アゴニストは、約１．０μＭ未満のＩＣ５０値で関節軟骨移植片における異化刺激により誘導されるＧＡＧ放出を阻害する。別の態様において、単離した軟骨細胞中のカルシウム流入を測定した場合、アゴニストは、約１．０μＭ未満のＴＲＰＶ４チャネル受容体に対するＥＣ５０値を有する。別の態様において、アゴニストは、上記のＴＲＰＶ４チャネル受容体中に流れる電流を増大させる。
【０１１８】
別の態様において、本発明は、患者のＴＲＰＶ４チャネル受容体を発現する少なくとも１個の細胞を治療上有効量のＴＲＰＶ４チャネル受容体に対するアゴニストと接触させることを含む、それを必要とする患者を治療する方法を提供する。
【０１１９】
一の態様において、患者は軟骨の疾患を患っている。別の態様において、患者は、疼痛、慢性疼痛、神経因性疼痛、術後疼痛、関節リウマチ、変形性関節症、神経痛、ニューロパシー、痛覚、神経損傷、虚血、神経変性、軟骨変性、脳卒中、失禁、炎症性疾患、過敏性腸症候群、肥満、歯周病、異常血管新生、腫瘍浸潤および転移、角膜潰瘍ならびに糖尿病の合併症の群から選択される疾患または病態を患っている。別の態様において、疾患は関節破壊に関連付けられる。別の態様において、患者は変形性関節症を患っている。
【０１２０】
別の態様において、アゴニストは、３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン、アゼピンまたは非環式１、３−ジアミンを含む。別の態様において、アゴニストは、３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン、アゼピンおよび非環式１，３−ジアミンの群から選択される。別の態様において、アゴニストは、Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（４−フルオロフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（２−シアノフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（２−シアノフェニル）スルホニル］ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛３−［［（シアノフェニル）スルホニル］（メチル）アミノ］プロピル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド；およびＮ−｛（１Ｓ）−１−［（｛３−［［（２，４−ジクロロフェニル）スルホニル］（メチル）アミノ］プロピル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミドの群から選択される。
【０１２１】
本発明の別の態様において、化合物をＴＲＰＶ４チャネル受容体またはＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する少なくとも１個の細胞と接触させると、ＴＲＰＶ４チャネル受容体またはＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を活性化する１，３−ジアミンを含む化合物を提供する。別の態様において、化合物は、所望により置換されていてもよいベンジルスルホンアミドを含む。さらに別の態様において、化合物は、アリールまたはヘテロアリールの群から選択される第一化学的部分およびＣＮ、ＮＯ２、ハロゲンで所望により置換されていてもよいアリールである第二化学的部分を含み、第一および第二化学的部分は、同一の化合物中に含まれる。別の態様において、化合物は、ベンゾチオフェン、インデニルまたはインドールの群から選択される第一化学的部分およびハロゲン化ベンゼンまたはシアノベンゼンの群から選択される第二化学的部分を含む。
【０１２２】
本発明のさらに別の態様において、化合物を少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体または少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する少なくとも１個の細胞と接触させると、該少なくとも１個の細胞により産生されるマトリックス分解酵素の少なくとも一種の量を減少させる化合物を提供する。別の態様において、化合物は、少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体または少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する少なくとも１個の細胞により産生または放出されるマトリックス分解酵素の少なくとも一種の量を減少させる。該化合物はまた、少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体または少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する細胞により産生または放出されるアグリカナーゼの量を減少させる。また、上記の少なくとも１個の細胞により産生または放出されるマトリックスメタロプロテアーゼの少なくとも一種の量を減少させる化合物を提供する。本発明の化合物はまた、少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体または少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する細胞により産生または放出される酸化窒素の量を減少させてもよい。別の態様において、本発明の化合物は、少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体または少なくとも１個のＴＲＰＶ４チャネル受容体の変種を発現する細胞におけるプロテオグリカン合成の阻害を軽減させてもよい。
【０１２３】
別の態様において、患者の治療は、患者のアグリカン分解の量を減少させる。別の態様において、患者の治療は、患者のコラーゲン分解の量を減少させる。別の態様において、患者の治療は、軟骨退化を軽減させ、炎症性メディエーターに関するものであってもよい。別の態様において、患者の軟骨退化は、損傷に関するものであってもよい。
【０１２４】
別の態様において、方法は、患者におけるマトリックスタンパク質生成の減少を軽減させることを提供する。別の態様において、マトリックスタンパク質は、アグリカンおよびＩＩ型コラーゲンの群から選択される。別の態様において、方法は、マトリックス分解酵素の増加を軽減させることを提供する。別の態様において、マトリックス分解酵素は、ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−９、ＭＭＰ−１３、ＡＤＡＭＴＳ４およびＡＤＡＭＴＳ５から選択されるが、これに限定されるものではない。別の態様において、マトリックス分解酵素の産生は、炎症性メディエーターにより誘導される。別の態様において、マトリックス分解酵素の産生は、損傷により誘導される。別の態様において、方法は、軟骨における少なくとも１個の細胞により産生される酸化窒素の量を減少させることを提供する。別の態様において、方法は、プロテオグリカン合成の阻害を軽減させることを提供する。
【０１２５】
本発明のＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストは、適当な経路で投与してもよい。適当な経路は、経口、直腸、鼻腔、局所（口腔および舌下を含むが、これに限定されるものではない）、膣内および非経口（皮下、筋肉内、静脈内、皮内、髄腔内および硬膜外を含むが、これに限定されるものではない）を含むが、これに限定されるものではない。投与経路は、例えば、移植患者の病態によって変化させてもよいことが分かるであろう。
【０１２６】
経口投与に適合させる医薬製剤は、特に、カプセルまたは錠剤；散剤または顆粒剤；水性または非水性液体における液剤または懸濁液；食用発泡体またはホイップ；チュアブルガム；あるいは水中油型乳濁液または油中水型乳濁液などの不連続単位として存在してもよい。
【０１２７】
例えば、錠剤またはカプセルの剤形での経口投与用活性薬物成分は、例えば、エタノール、グリセロール、水などの経口の、無毒性の医薬上許容される不活性担体と合わせてもよい。散剤は、化合物を適当な細かい大きさに細かく砕き、食用炭水化物、例えば、澱粉またはマンニトールなどの均一に磨砕医薬担体と合わせることにより調製してもよい。香味料、保存料、分散剤および着色剤も提供してもよい。
【０１２８】
カプセルは、例えば、上記の粉末混合物を調製し、成形ゼラチン状シースに充填することにより製造してもよい。コロイド状シリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたは固体ポリエチレングリコールなどの流動促進剤および潤滑剤は、充填工程前に粉末混合物に添加してもよい。寒天、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウムなどの崩壊剤または可溶化剤もまた、カプセルを服用した場合の薬剤の有効性を改善させるために添加してもよい。
【０１２９】
さらに、好ましくまたは必要である場合、適当な結合剤、潤滑剤、崩壊剤および着色剤はまた、混合物中に加えてもよい。適当な結合剤は、澱粉、ゼラチン、グルコースまたはβ−ラクトースなどの天然糖、コーンシロップ、アカシアなどの天然および合成ゴム、トラガカントまたはアルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックスなどを含んでいてもよいが、これに限定されるものではない。これらの剤形において用いられる潤滑剤は、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩酸ナトリウムなどを含んでいてもよいが、これに限定されるものではない。崩壊剤は、澱粉、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンゴムなどを含んでもよいが、これに限定されない。錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、整粒しまたは破砕し、潤滑剤および崩壊剤を加えならびに錠剤中に圧縮することにより製剤化してもよい。粉末混合物は、適当に破砕した化合物と上記に記載の希釈剤または塩基、所望により特に、カルボキシメチルセルロースなどの結合剤、アルギン酸塩、ゼラチンまたはポリビニルピロリドン、パラフィンなどの溶液遅延剤、第四級塩などの吸収促進剤および／またはベントナイト、カオリンまたはリン酸ジカルシウムなどの吸収剤などと合わせることにより調製してもよい。粉末混合物は、例えば、シロップ、澱粉ペースト、アカディア粘液などの結合剤あるいはセルロース性またはポリマー物質の溶液で湿らせ、ふるいを強行することにより粒状にしてもよい。整粒の代わりとして、粉末混合物は、顆粒を粒子状にした不十分な成形のスラッグを形成する錠剤機に通してもよい。顆粒は、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルクまたは鉱油の添加を用いて錠剤を象る型に貼り付くことを防ぐために潤滑させてもよい。続いて、潤滑混合物は、錠剤中に圧縮してもよい。本発明の化合物はまた、例えば、自由流動性不活性担体と合わせ、整粒または充填する段階を経ることなく直接錠剤中に圧縮してもよい。例えば、セラックの密封膜、糖またはポリマー物質の被覆およびワックスのポリッシュコーティングからなる透明または不透明な防護被膜を提供してもよい。染料または他の化合物は、異なった一回量を区別するためにこれらの被膜に添加してもよい。
【０１３０】
液剤、シロップおよびエリキシル剤などの口腔液は、一定量中に一定量の化合物を含むように剤形装置で調製してもよい。シロップは、適当な風味の水性液剤中に化合物を溶解することにより調製してもよく、一方、エリキシル剤は、無毒アルコール性ビヒクルを用いることで調製される。懸濁液は、無毒性ビヒクル中に化合物を溶解することにより製剤化してもよい。可溶化剤およびエトキシ化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエステルなどの乳化剤、保存料、ハッカ油などの香味用添加物あるいは天然甘味料もしくはサッカリンまたは別の人工甘味料なども添加してもよい。
【０１３１】
必要に応じて、経口投与用単回量製剤をマイクロカプセル化してもよい。製剤をまた、例えば、ポリマー、ワックスなどの粒状物質をコーティングまたは埋め込むことにより遊離を遅らせるかまたは遊離を維持するように調製してもよい。加えて、経口製剤はチュアブルガムの形であってもよい。
【０１３２】
経皮投与に適合する医薬製剤は、長期間移植患者の表皮との密接な接触を保持するように意図した個々のパッチとして提供してもよい。例えば、活性成分は、一般にＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、３（６）、３１８（１９８６）に記載のイオンフォレーシスによりパッチから送達してもよい。
【０１３３】
直腸投与に適合する医薬製剤は、特に、坐薬としてまたは浣腸として提供してもよい。
【０１３４】
非経口投与に適合する医薬製剤は、水性および非水性滅菌注射液剤  抗酸化剤、緩衝液、静菌薬および所定の移植患者の血液と等張の製剤を提供する溶質ならびに懸濁剤および増粘剤を含んでいてもよい水性および非水性無菌懸濁液を含んでいてもよいが、これに限定されるものではない。製剤は、一回量または数回量の容器、例えば、密封アンプルおよびバイアルにて提供してもよく、無菌液体担体、例えば、使用直前の注射用水の添加のみを必要とする凍結乾燥した（凍結乾燥）状態において保存してもよい。一時的な注射液および懸濁液は、滅菌の粉末、顆粒および錠剤から調製してもよい。
【０１３５】
特に、上記に記載の成分に加えて、製剤は、問題となっている製剤の種類を考慮して当業者に既知の他の薬剤を含んでもよいが、これに限定されるものではないことを理解すべきである。
【０１３６】
「医薬上許容される塩」なる語に含まれる塩は、例えば、遊離塩基を適当な有機または無機酸と反応させ、あるいは酸を適当な有機または無機塩基と反応させることにより調製される本発明の化合物の無毒性塩をいう。
【０１３７】
典型的には、本発明のＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストの治療上有効量は、例えば、哺乳類の年齢および体重、少なくとも一の治療を必要とする明確な病態、病態の重症度、製剤の性質および投与経路を含む多数の要因次第であろう。最終的には、治療上有効量は、かかりつけ医または獣医の判断であろう。
【実施例】
【０１３８】
下記の例は、本発明の様々な態様を説明する。これらの例は、添付の特許請求の範囲に記載の本発明の範囲を限定するものではない。
【０１３９】
実施例１−ＴＲＰＶ４チャネル受容体は、軟骨および軟骨細胞において発現する。
ヒトＴＲＰＶ４チャネル受容体の組織および細胞の発現を、製造上の注意にしたがってＴａｑＭａｎ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）定量ＲＴ−ＰＣＲ（Ｇｉｂｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６）を用いて研究した。ＴａｑＭａｎ反応は、ヒトＧＡＰＤＨ、シクロフィリンおよびヒトＴＲＰＶ４チャネル受容体に対するプローブを用いて実施した。ヒトＴＲＰＶ４チャネル受容体プローブは：
５’−ＡＴＧＡＧＧＡＣＣＡＧＡＣＣＡＡＣＴＧＣＡ（配列番号３）；および
５’−ＧＧＡＧＧＡＡＧＧＴＧＣＴＧＡＡＧＧＴＣＴＣ（配列番号４）フランキングプライマーおよび
５’−ＣＡＣＴＴＡＣＣＣＣＴＣＧＴＧＣＣＧＴＧＡＣＡＧ（配列番号５）蛍光プローブからなった。データは、ＡＢＩ  ＰｒｉｓｍＴＭ  ７７００にともなうＰｏｗｅｒ  Ｍａｃｉｎｔｏｓｈソフトウェアを用いて解析した。
【０１４０】
表１に示される、体内組織の画像から得たデータは、ヒトＴＲＰＶ４チャネル受容体が軟骨において最も顕著に発現することを示す。第一およびクローン培養の画像は、軟骨細胞のみにおいて重要な発現を示す。
【表１】
2008512475.tif 000025
【０１４１】
結果は、軟骨組織（Ｔ：Ｒ）および第一ヒト軟骨細胞（Ｃ：Ｒ）における高水準の発現を示す。
【０１４２】
実施例２−ＴＲＰＶ４は４α−ホルボール−１２，１３ジデカン酸塩（４α−ＰＤＤ）により活性化する。
ＴＲＰＶ４チャネル受容体ｃＤＮＡを、発現ベクターｐｃＤＮＡ３．１  Ｖ５−Ｈｉｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）中に導入した。野生型ＨＥＫ２９３細胞またはＨＥＫ２９３細胞を、ヒトＴＲＰＶ４チャネル受容体にトランスフェクトし：ｐｃＤＮＡ３．１  Ｖ５−Ｈｉｓコンストラクトまたは偽のトランスフェクトした細胞あるいはウシ軟骨細胞を、２５，０００細胞／ウェルで９６ウェルマイクロタイタープレート中に蒔き、一晩培養した。続いて、細胞を、暗闇の中室温で２時間、４μＭのＦｌｕｏ−３（Ｆｌｕｏ−３：分子プローブ（Ｅｕｇｅｎｅ、ＯＲ））で培養した。染料負荷細胞を、０．２％ＢＳＡも含むがプロベネシドは含まないタイロード緩衝液：（ＮａＣｌ、１４５ｍＭ；ＫＣｌ、２．５ｍＭ；Ｈｅｐｅｓ、１０ｍＭ；グルコース、１０ｍＭ；ＭｇＣｌ２、１．２ｍＭ；ＣａＣｌ２、１．５ｍＭ）で４回洗浄した。アゴニストおよびアンタゴニストをまた、タイロード緩衝液で調製した。細胞を、アンタゴニストまたは緩衝液と３０分間前処理して培養した。アゴニスト添加および細胞質カルシウム濃度の測定を、ＦＬＩＰＲで行った（Ｓｍａｒｔ、ｅｔ  ａｌ．、（２０００）Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１２９，２２７−２３０）。
【０１４３】
ホルボール１２−ミリスチン酸１３−アセテート（ＰＭＡ）も４α−ホルボール−１２，１３−ジデカン酸塩（４αＰＤＤ）も、ＨＥＫ２９３−ＴＲＰＶ４チャネル受容体細胞（表２）における細胞内カルシウムを増大させたが、野生型ＨＥＫ２９３細胞または空ベクターにインフェクトした細胞において効果はなかった。ＰＭＡはまた、ＶＲ１を活性化したが、カプサイシンおよびＲＴＸに比べて部分的アゴニスト（Ｅｍａｘ  ０．４６）のみであった。４αＰＤＤは、ＶＲ１（表２）を活性化しなかった。結論として、４αＰＤＤはＴＲＰＶ４チャネル受容体選択的アゴニストとして作用する。
【表２】
2008512475.tif 000026
【０１４４】
ウシ関節軟骨細胞は、トランスフェクトしたＨＥＫ２９３細胞と同様の量に依存して４α−ＰＤＤに応答した。４α−ＰＤＤに対する応答は、ＨＥＫ２９３細胞において発現される組み換えＴＲＰＶ４チャネル受容体に見られる、同様の統計データおよび濃度依存性を有していた。応答は、細胞外カルシウムイオンに依存し、チャネル阻害薬、ルテニウムレッドにより阻害された。これらのデータは、４α−ＰＤＤに対する応答が、軟骨細胞により内因的に発現されるＴＲＰＶ４チャネル受容体によるものであったと示唆する。
【０１４５】
実施例３：初期軟骨細胞（ヒト、ウシ、ラット）におけるＣａ２＋流動
ＴＲＰＶ４チャネル受容体は、Ｃａ２＋透過性、非選択性、リガンド開口陽イオンチャネルである。ＴＲＰＶ４チャネル受容体を経て介在したＣａ２＋流入を、当業者において一般的方法（例、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ（Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ、ＣＡ）製ＦｌｅｘＳｔａｔｉｏｎの使用）を用いてヒト、ラットおよびウシの軟骨細胞において測定した。４α−ＰＤＤは、ＴＲＰＶ４チャネル受容体に対する既知のアゴニストであり、全三種から得た軟骨細胞においてＣａ２＋流入を刺激し、一方、ＰＭＡおよびカプサイシンは、ＶＲ１に対する既知のアゴニストであり、Ｃａ２＋流入に対して変化をもたらさなかった。さらに、４α−ＰＤＤの既知の阻害薬ルテニウムレッドが、全種から得た軟骨細胞上の４α−ＰＤＤの効果を無効にし、基準値に至るまでＣａ２＋流入を減少させることを見出した（Ｗａｔａｎａｂｅ、ｅｔ  ａｌ．（２００２）．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７（１６）：１３５６９−４７０５１．）。
【０１４６】
実施例４：Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（２−シアノフェニル）スルホニル］ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−メチル−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの調製−（式Ｉｂ）
【化２４】
2008512475.tif 000027
【０１４７】
式Ｉｂは、以下のとおり調製した：
【化２５】
2008512475.tif 000028
【０１４８】
４−アミノアゼピン５（１．０３ｇ、４．８ｍｍｏｌ）および（（Ｓ）−４−メチル−２−｛［１−（１−メチル−１  Ｈ−インドール−２−イル）−メタノイル］−アミノ｝−ペンタン酸１１（１．５２ｇ、５．２９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍＬ、０．２Ｍ）溶液に、ＥＤＣ  ＨＣｌ（１．１１ｇ、５．７８ｍｍｏｌ）、３−ヒドロキシ−１，２，３−ベンゾトリアジン−４（３Ｈ）−オン（ＨＯＯＢｔ；０．１６ｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）およびＮ−メチル−モルホリン（ＮＭＭ；０．５８ｍＬ、５．２９ｍｍｏｌ）を添加した。該溶液を、室温で一晩攪拌しておいた。反応混合物は、１ＮのＨＣｌおよびブリンで洗浄し、有機部分をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過および濃縮し、２，５ｇの黄色固体を得た。該物質を、先の反応から得た物質と合わせ（合わせた重さ３．５ｇ）、ＦＣＣ（ＳｉＯ２、２％のＣＨ３ＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製した。標記化合物は、黄色固体として得た（３ｇ）。
【０１４９】
先の実施例から得たＢｏｃ−保護アミン１２（１．５ｇ、３．１ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（１５０ｍＬ、０．０２Ｍ）に、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ、６．５ｍｍｏｌ）を添加し、溶液を室温で１時間攪拌した。続いて、反応混合物を減圧下で濃縮し、ＣＨ３ＣＮ（５０ｍＬ）中に再溶解し、再度濃縮した。続いて、残渣をＣＨ２Ｃｌ２中に溶解し、５％のＮａＨＣＯ３の一部で洗浄した。残存有機層を（ＭｇＳＯ４）乾燥させ、濾過し、濃縮し、標記化合物として黄色固体を得た。該物質を、さらに精製することなく次の反応に移した。
【０１５０】
遊離アミン１３（０．３０ｇ、０．７８ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（５ｍＬ、０．１５Ｍ）に、塩化２−シアノベンゼンスルホニル（０．１６ｇ、１．５６ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．３３ｍＬ、２．３４ｍｍｏｌ）を添加した。最終的に褐色溶液となる混合物を、室温で３時間攪拌した。反応混合物を、ＦＣＣ（ＳｉＯ２）により直接精製し、２０％のＣＨ２Ｃｌ２／酢酸エチルで希釈し、０．２９ｇの黄色固体を提供した（６８％）。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）（２個のジアステレオマーの混合物）：δ  ８．０５（ｍ、１Ｈ）；７．８５（ｍ、１Ｈ）；７．７２−７．６０（ｍ、３Ｈ）；７．３８−７．３０（ｍ、２Ｈ）；７．１５（ｍ、１Ｈ）、６．８４（ｍ、１Ｈ）；６．６０（ｍ、１Ｈ）；４．６５（ｍ、１Ｈ）；４．１４（ｍ、１Ｈ）、４．０３（ｍ、３Ｈ）；３．７５−３．６１（ｍ、２Ｈ）；３．２７（ｍ、１Ｈ）；３．２０−３．０４（ｍ、１Ｈ）；２．１４−１．６９（ｍ、９Ｈ）、１．０１（ｍ、６Ｈ）。
ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５５０。
【０１５１】
ジアステレオマー性純生成物を、下記の方法を用いて得た：
各Ｃ４ジアステレオマーを、溶離液（アイソクラチック、１５ｍＬ／分の流速）として２０％のエタノール／ヘキサンで１０ｕ  Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＤカラム（２０ｘ２５０ｍｍ）（Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ、Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ、ＮＪ）に付して高圧液体クロマトグラフィーにより分離した。単離におけるそれぞれの類似体の立体化学を、赤外円二色性（ＶＣＤ）と低分子Ｘ線結晶学の連携により決定した。
【０１５２】
実施例５：Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（４−フルオロフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミドの調製（式ＩＩｂ）
【化２６】
2008512475.tif 000029
式ＩＩｂを以下のとおりに調製した：
ａ．）｛（Ｓ）−１−［３−ヒドロキシ−１−（４−フルオロベンゼンスルホニル）−アゼパン−４−イルカルバモイル］−３−メチル−ブチル｝−カルバミン酸−ｔｅｒｔ−ブチルエステル
｛（Ｓ）−１−［３−ヒドロキシ−１−（−（４−フルオロベンゼンスルホニル）−アゼパン−４−イルカルバモイル］−３−メチル−ブチル｝−カルバミン酸−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．８ｇ、２．３３ｍｍｏｌ）を、１，２−ジクロロエタン（ＤＣＥ、２０ｍｌ）中で溶解した。続いて、モルホリンメチルポリスチレン樹脂ビーズ（１．２６ｇ、３．７ｍｍｏｌ／ｇ、Ｎｏｖａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ａｌｂｅｒｔａ、Ｃａｎａｄａ））を添加し、溶液を５分間振盪した。続いて、ｐ−フルオロベンゼンスルホニル（０．４８ｇ、２．３３ｍｍｏｌ）をＤＣＥ（１０ｍｌ）中に溶解し、この溶液を反応混合物に添加した。反応混合物を一晩振盪し、濾過し、ＤＣＥ（２ｘ１０ｍｌ）で、次いでＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機物を減圧下で濃縮し、さらに精製することなく次の反応にて使用した。Ｍ＋Ｈ＋＝５１４．２。
ｂ．）（Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−ペンタン酸［３−ヒドロキシ−１−（４−フルオロベンゼンスルホニル）−アゼパン−４−イル］−アミド−ＨＣｌ塩
｛（Ｓ）−１−［３−ヒドロキシ−１−（−（４−フルオロベンゼンスルホニル）−アゼパン−４−イルカルバモイル］−３−メチル−ブチル｝−カルバミン酸−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．５９ｇ、１．１５ｍｍｏｌ）を、ＣＨ２Ｃｌ２（８ｍｌ）中で溶解し、次いで、ジオキサン（８ｍｌ）中４ＭのＨＣｌ溶液を添加し、反応物を室温で４時間攪拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、減圧下でトルエンから２回（１０ｍｌ）共沸し、さらに精製することなく次の反応にて使用した。Ｍ＋Ｈ＋＝４１３．８。
ｃ．）（Ｓ）−２−（２−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸）−４−メチル−ペンタン酸［３−ヒドロキシ−１−（−（４−フルオロベンゼンスルホニル）−アゼパン−４−イル］−アミド
（Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−ペンタン酸［３−ヒドロキシ−１−（４−フルオロベンゼンスルホニル）−アゼパン−４−イル］−アミド−ＨＣｌ塩を、ＭｅＯＨ（１０ｍｌ）中に溶解し、炭酸塩−ポリスチレン樹脂ビーズ（１．７５ｇ、２．６３ｍｍｏｌ／ｇ、４．６ｍｍｏｌ）で処理し、２時間振盪し、濾過し、ＭｅＯＨ（１０ｍｌ）で洗浄し、合わせた有機物を減圧下で濃縮した。続いて、生成物をＤＣＥ（２ｍｌ）中で溶解し、モルホリンメチルポリスチレン樹脂ビーズ（０．２５ｇ、３．７７ｍｍｏｌ／ｇ、０．９１ｍｍｏｌ、Ｎｏｖａ）を添加し、反応物を５分間振盪した。続いて、塩化ベンゾ［ｂ］チオフェンカルボニル（０．４４ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を一晩振盪した。続いて、トリスアミンポリスチレンビーズ（０．１ｇ、３．６６ｍｍｏｌ／ｇ、０．３６６ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を１，５時間振盪した。続いて、反応混合物を濾過し、ＤＣＥ（２ｘ１０ｍｌ）およびＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍｌ）で洗浄し、合わせた有機物を減圧下で濃縮した。粗生成物を、さらに精製することなく次の反応にて使用した：Ｍ＋Ｈ＋＝５６２．２。
ｄ．）Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（４−フルオロフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド
（Ｓ）−２−（２−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸）−４−メチル−ペンタン酸［３−ヒドロキシ−１−（４−フルオロベンゼンスルホニル）−アゼパン−４−イル］−アミド（０．２４ｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を、ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍｌ）中に溶解し、次いで、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペルヨージナン（０．３ｇ、０．７ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を３０分間攪拌した。反応物を、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍｌ）で希釈し、次いで、１０％の水性Ｎａ２Ｓ２Ｏ５（１０ｍｌ）、次いで、１０％の水性ＮａＨＣＯ３（１０ｍｌ）、水（１０ｍｌ）、ブリン（１０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機物を減圧下で濃縮した。
残渣をＨＰＬＣで精製した。最初に溶出したジアステレオマー：ｍｓ  ５６０．２（Ｍ＋Ｈ＋）。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：δ  ７．８０−７．７２（ｍ、５ｈ）、７．３７−７．３４（ｍ、２ｈ）、７．３３−７．１５（ｍ、４ｈ）、２．４３（ｔ、１ｈ）、０．９６（ｄ、６ｈ）。２番目に溶出したジアステレオマー：ｍｓ  ５６０．２（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０１５３】
実施例６：Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミドの調製（式ＩＩｃ）
【化２７】
2008512475.tif 000030
式ＩＩｃを以下のとおりに調製した：
ａ．）｛（Ｓ）−１−［１−（３−クロロ−ベンゼンスルホニル）−３−ヒドロキシ−アゼピン−４−イルカルバモイル］−３−メチル−ブチル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ＤＣＥ（１００ｍｌ）中、［（Ｓ）−１−（３−ヒドロキシ−アゼパン−４−イルカルバモイル）−３−メチル−ブチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ  ブチルエステル（２．５０ｇ、７．２９ｍｍｏｌ）化合物の溶液にＰ−ＮＭＭ（４．０ｇ）および塩化４−クロロベンゼンスルホニル（１．８５ｇ、８．７５ｍｍｏｌ）を添加した。室温で一晩振盪した後、溶液を濾過した。濾液を濃縮し、標記化合物として白色固体を得た（３．１３ｇ、８３．３％）：ＭＳ：５３９．７８（Ｍ＋Ｎａ）＋。
ｂ．）（Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−ペンタン酸［１−（３−クロロ−ベンゼンスルホニル）−３−ヒドロキシ−アゼパン−４−イル］−アミド
メタノール中（１０ｍｌ）、実施例６ａの化合物（１．０ｇ、１．９３ｍｍｏｌ）の攪拌溶液にＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ）（１０ｍｌ）を添加した。室温で３時間攪拌した後、溶液を濃縮し、白色固体を得た。メタノール（３７ｍｌ）中、白色固体の溶液（０．６８ｇ、１．５０ｍｍｏｌ、７８％）にＰ−ＣＯ３（２．８５ｇ、２．６３ｍｍｏｌ／ｇ）を添加した。２時間振盪した後、溶液を濾過および濃縮し、標記化合物として白色固体を得た（０．５９ｇ、１．４２ｍｍｏｌ、９５％）：ＭＳ：４１７．８６（Ｍ＋Ｈ）＋。
ｃ．）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸−｛（Ｓ）−１−［１−（４−クロロ−ベンゼンスルホニル）−３−ヒドロキシ−アゼパン−４−イルカルバモイル］−３−メチル−ブチル｝−アミド
ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）中、実施例６ｂの化合物（０．１４ｇ、０．３３５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中、ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸（０．８１、０．５０ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾチアゾール（０．７７ｇ、０．５６９ｍｍｏｌ）およびＰ−ＥＤＣ（０．６７ｇ、１ｍｍｏｌ／ｇ）を添加した。室温で一晩攪拌した後、溶液をトリスアミン（０．４４６ｇ、３．７５ｍｍｏｌ／ｇ）で処理した。さらに２時間振盪した後、溶液を濾過および濃縮し、標記化合物として白色固体を得た（１２２．２ｍｇ、６５％）。ＭＳ（ＥＳＩ）：５６２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
ｄ．）Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛（４Ｒ）−１−［（４−クロロフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド
ジクロロメタン（４ｍＬ）中、実施例６ｃの化合物（１２２．２ｍｇ、０．２１７ｍｍｏｌ）の攪拌溶液にＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ試薬（１８４．８ｍｇ、０．４３６ｍｍｏｌ）を添加した。室温で２時間攪拌した後、チオ硫酸ナトリウム（水中、１０％、２ｍＬ）および飽和水性重炭酸ナトリウム（２ｍＬ）の溶液を、かかる溶液に同時に添加した。水層をジクロロメタンで抽出した（２ｘ）。有機層を合わせ、飽和ブリンで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過および濃縮した。残渣をＨＰＬＣに付して精製し、最初に溶出したジアステレオマーとして白色固体（４１ｍｇ、３３％）：ＭＳ（ＥＳＩ）５７６．２（Ｍ＋Ｈ）＋および２番目に溶出したジアステレオマーとして白色固体（３２．６ｍｇ、２６％）：ＭＳ（ＥＳＩ）５７６．２（Ｍ＋Ｈ）＋を得た。
【０１５４】
実施例７：Ｎ−｛（１ｓ）−１−［（｛（４ｒ）−１−［（２−シアノフェニル）スルホニル］−３−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−４−イル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミドの調製−式ＩＩｄ
【化２８】
2008512475.tif 000031
式ＩＩｄは、工程６ａにおける塩化４−クロロベンゼンスルホニルを塩化２−シアノベンゼンスルホニルに代用すること以外は詳細に実施例６に沿って調製した。
【０１５５】
実施例８：Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛３−［［（シアノフェニル）スルホニル］（メチル）アミノ］プロピル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミドの調製−式ＩＩＩｂ
【化２９】
2008512475.tif 000032
式ＩＩＩｂを以下のとおり調製した：
ａ．Ｎ−（３−アミノプロピル）−２−シアノ−Ｎ−メチルベンゼンスルホンアミド
ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中、Ｎ−メチルエチレンジアミン（１００ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）および塩化２−シアノベンゼンスルホニル（２５０ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ２存在下、０℃でＥｔ３Ｎ（０．１９ｍＬ、１．３５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温まで加温し一晩攪拌した。さらにＣＨ２Ｃｌ２を混合物に添加した。該混合物をブリンで洗浄した。ＭｇＳＯ４での乾燥、濾過および減圧下での抽出後、粗物質を得た（２２６ｍｇ）。
ｂ．１−［（１−ベンゾチエン−２−イルカルボニル）オキシ］−２，５−ピロリジンジオン
乾燥１．０Ｌの丸底フラスコは、塩化メチレン（２８１ｍＬ）、１−ベンゾチオフェン−２−カルボン酸（１０ｇ、５６．１８ｍｍｏｌ）、Ｎヒドロキシスクシンイミド（７．１１ｇ、６１．８ｍｍｏｌ）および塩酸１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−３−エチルカルボジイミド（１２．９２ｇ、６７．４０ｍｍｏｌ）で満たし、反応混合物を、窒素存在下、室温（ＲＴ）で４時間攪拌した。溶媒を、一部減圧下で除去し、残渣をブリンで洗浄した（２ｘ）。有機溶液をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。得られた白色固体生成物（１５．４ｇ）を、さらに精製することなく次の工程に移した。
ｃ．Ｎ−（１−ベンゾチエン−２−イルカルボニル）−Ｌ−ロイシン
乾燥１．０Ｌ丸底フラスコは、１−［（１−ベンゾチエン−２−イルカルボニル）オキシ］−２，５−ピロリジンジオン（１５．４ｇ、５６．１８ｍｍｏｌ）、Ｌ−ロイシン（７．６６ｇ、５８．４３ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（１４０ｍＬ）、塩化メチレン（８５ｍＬ）および脱イオン水（５５ｍＬ）で満たした。トリエチルアミン（９．４ｍＬ、６７．４２ｍｍｏｌ）をゆっくり添加し、すぐに反応混合物を氷水浴で５−１０℃に冷却した。氷水浴を除去し、混合物を常温で一晩攪拌した。翌朝、混合物を５０ｍＬの水で希釈し、水層のｐＨを６ＮのＨＣｌで１に合わせた。続いて、混合物を、塩化メチレンで抽出し（２ｘ）、有機層を、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、生成物として白色固体（１６．４ｇ）を得た。
ｄ．Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛３−［［（２−シアノフェニル）スルホニル］（メチル）アミノ］−プロピル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド
ＣＨ２Ｃｌ２中、Ｎ−（３−アミノプロピル）−２−シアノ−Ｎ−メチルベンゼンスルホンアミド（１２４ｍｇ、０．４８８ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−（１−ベンゾチエン−２−イルカルボニル）−Ｌ−ロイシン（１４２ｍｇ、０．４８８ｍｍｏｌ）、次いで、ＨＯＯＢｔ（２．０ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃に冷却し、Ｎメチルモルホリン（０．０８１ｍＬ、０．７３２ｍｍｏｌ）を添加した。ＥＤＣ  ＨＣｌ（１０３ｍｇ、０．５３７ｍｍｏｌ）を添加し、すぐに混合物を数分攪拌した。その状態をさらに３時間維持し、混合物を室温に加温していた。続いて、混合物を、１０％クエン酸水性溶液、飽和ＮａＨＣＯ３およびブリンで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。残渣をｂｉｏｔａｇｅクロマトグラフィー（０％ないし６％のＴＨＦ／ＤＣＭ）に付して精製し、１３３ｍｇの標記化合物を得た（５２％）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ８．０１−８．０８（ｄ、１Ｈ）、７．６５−７．９０（ｍ、６Ｈ）、７．３５−７．４８（ｍ、２Ｈ）、６．７６−６．９０（ｍ、２Ｈ）、４．６４−４．７５（ｍ、１Ｈ）、３．５１−３．６２（ｍ、１Ｈ）、３．２８−３．４６（ｍ、２Ｈ）、３．１０−３．１６（ｍ、１Ｈ）、２．８９（ｓ、３Ｈ）、１．６８−１．９５（ｍ、５Ｈ）、１．００（ｄ、６Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：５２７．４（Ｍ＋Ｈ）。
【０１５６】
実施例９：Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛３−［［（２，４−ジクロロフェニル）スルホニル］（メチル）アミノ］プロピル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミドの調製−式ＩＩＩｃ
【化３０】
2008512475.tif 000033
式ＩＩＩｃを以下のとおり調製した：
ａ．Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−メチル−２−ニトロベンゼンスルホンアミド
Ｎ−メチル−１，３−プロパンジアミン（２．５４ｇ、２８．８ｍｍｏｌ）および塩化２−ニトロベンゼンスルホニル（４．２６ｇ、１９．２ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（ＴＥＡ、５．３５ｍＬ、３８．４ｍｍｏｌ）を添加し；反応混合物を室温で３時間攪拌した。溶媒を除去し、ｐＨを６ＮのＨＣｌにより２．０−２．５に合わせ；有機物質をジクロロメタン（ＤＣＭ）で２回抽出し、続いて、水層をｐＨ〜１０に合わせた。水層をＣＨＣｌ３で５回抽出した。抽出した物質を含有する収集した溶媒を乾燥させ、濾過および濃縮し、４．６ｇの帯黄色油を得た。粗物質を、さらに精製することなく次の工程で直接用いた。
ｂ．Ｎ−（（１Ｓ）−３−メチル−１−｛［（３−｛メチル［（２−ニトロフェニル）スルホニル］アミノ｝プロピル）−アミノ］カルボニル｝ブチル）−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド
ＣＨ２Ｃｌ２中、実施例２ａのＮ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−メチル−２−ニトロベンゼン−スルホンアミド（１．８４ｇ、６．７４ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−（１−ベンゾチエン−２−イルカルボニル）−Ｌ−ロイシン（１．９６ｇ、６．７４ｍｍｏｌ）、次いで、ＨＯＯＢｔ（２７．５ｍｇ、０．１６８ｍｍｏｌ）を添加した。Ｎ−メチルモルホリン（１．４８ｍＬ、１３．４６ｍｍｏｌ）を添加してすぐに、混合物を０℃に冷却した。ＥＤＣ．ＨＣｌ（１．２９ｇ、６．７３ｍｍｏｌ）を添加してすぐに、混合物を数分攪拌した。その状態をさらに３時間維持し、混合物を室温に加温していた。続いて、混合物を１０％のクエン酸水性溶液、飽和ＮａＨＣＯ３およびブリンで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。ｂｉｏｔａｇｅクロマトグラフィー（０％−１０％のＴＨＦ／ＤＣＭ）により残渣を精製し、１．４９ｇの標記化合物を得た（４０．５％）。
ｃ．Ｎ−［（１Ｓ）−３−メチル−１−（｛［３−（メチルアミノ）プロピル］アミノ｝カルボニル）ブチル］−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド
ＤＭＦ中、実施例９ｂの化合物（８３４ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）の溶液に、ベンゼンチオール（０．２３５ｍＬ、２．２９ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（６３３ｍｇ、４．５８ｍｍｏｌ）を添加した。溶媒を除去し、残渣を３ｍＬで希釈し、１ＮのＨＣｌでｐＨ１．５に酸性化してすぐに、反応混合物を室温で４時間攪拌した。混合物を、ジクロロメタンで抽出し、合わせた有機層を１ＮのＨＣｌで５回洗浄した。水層を合わせ、ｐＨ１２．５に調整し、次いで、Ｋ２ＣＯ３で乾燥させ、濾過し、回転式蒸発により濃縮し、４２０ｍｇの標記化合物を得た。
ｄ．Ｎ−｛（１Ｓ）−１−［（｛３−［［（２，４−ジクロロフェニル）スルホニル］（メチル）アミノ］−プロピル｝アミノ）カルボニル］−３−メチルブチル｝−１−ベンゾチオフェン−２−カルボキサミド
ジクロロメタン中、実施例９ｃの化合物（５０ｍｇ、０．１３９ｍｍｏｌ）の溶液にトリエチルアミン（０．０４２ｍＬ、０．３０５ｍｍｏｌ）および塩化２，４−ジクロロベンゼンスルホニル（３７．３ｍｇ、０．１５２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２時間攪拌し、次いで、１０％の水性クエン酸で洗浄し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ３およびブリンで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。ｂｉｏｔａｇｅクロマトグラフィー（０％ないし８．０％のＴＨＦ／ＤＣＭ）により残渣を精製し、７１ｍｇの標記化合物を得た（８９％）；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ７．２１−７．９８（ｍ、８Ｈ）、６．７２−６．８９（ｍ、１Ｈ）、６．６２−６．６８（ｍ、１Ｈ）、４．６５−４．７５（ｍ、１Ｈ）、３．２５−３．４６（ｍ、４Ｈ）、２．８６（ｓ、３Ｈ）、１．６８−１．９５（ｍ、５Ｈ）、１．０６（ｄ、６Ｈ）；ＭＳ（ｍ／ｚ）：５７１．２（Ｍ＋Ｈ）。
【０１５７】
実施例１０：軟骨細胞におけるＩＬ−１誘導ＭＭＰ産生の減少
ＩＬ−１は、軟骨細胞を刺激するために用いられうるサイトカインである。ＩＬ−１に対する軟骨細胞への暴露は、ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−９およびＭＭＰ−１３を含む、マトリックスメタロプロテイナーゼの産生を増加させる。
濃度依存による阻害は、ヒト軟骨細胞からのＭＭＰ−３およびＭＭＰ−１３産生を誘導するＩＬ−１に対する式ＩＩｂを観察した。ヒト軟骨細胞を、ＭＭＰ−３およびＭＭＰ−１３産生を誘導するＩＬ−１（１０  ｎｇ／ｍＬ）に曝した。ＭＭＰ−３およびＭＭＰ−１３産生の増加を、ノーザンブロット（ｍＲＮＡ）とＥＬＩＳＡ分析（タンパク質）の両方により検証した。細胞を０．１μＭから１０μＭまでの範囲の濃度で式ＩＩｂに曝した。表３に示すように、式ＩＩｂは、ＩＬ−１に曝した軟骨細胞により産生されるＭＭＰ−３およびＭＭＰ−１３の量を減少させた。同様の結果をＥＬＩＳＡ試験により確認した。ＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストは、ＩＬ−１誘導ＭＭＰ−３およびＭＭＰ−１３産生を阻害する。
表３は、アゴニストの存在下および非存在下におけるＭＭＰ−３およびＭＭＰ−１３のＩＬ−１誘導ｍＲＮＡ（平均±ＳＥ）産生を示す。
【表３】
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【０１５８】
実施例１１：ウシ関節軟骨細胞によるＩＬ−１誘導アグリカナーゼ産生の減少
アグリカナーゼ（ＡＤＡＭＴＳ）は、ＭＭＰと結合し、関節軟骨における重要なマトリックス成分の一つ、アグリカンを分解する。軟骨移植片培養において、ＩＬ−１は、アグリカナーゼ産生および活性を誘導することが知られており、細胞外マトリックスの加速分解をもたらす  ［Ａｒｎｅ、ｅｔ  ａｌ．、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ  １９９９；２７４（１０）：６５９４−６６０１］。アグリカナーゼ産生はまた、ＩＬ−１への暴露により軟骨細胞培養において誘導され、得られたアグリカナーゼの誘導を、軟骨細胞に基づくアグリカナーゼペプチド開裂試験を用いて測定した［Ｐｒａｔｔａ  ｅｔ  ａｌ；Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ．２００３；４８（１）：１１９−１３３］。培養２４時間後、ＩＬ−１は、ウシ関節軟骨細胞培養におけるアグリカナーゼ活性を著しく誘導した。式ＩＩｂと結合したＩＬ−１と軟骨細胞の培養は、表４に示すように測定アグリカナーゼ活性の濃度依存による阻害をもたらした。
可溶性ＡＤＡＭＴＳ−４（アグリカナーゼ−１）によるペプチド基質の開裂には効果がなかったので、式ＩＩｂが、酵素活性を直接抑制してペプチド開裂を阻害するとは考えなかった。
表４は、ウシ関節軟骨細胞におけるアグリカナーゼ産生を誘導するＩＬ−１の減少（平均±ＳＥ）に対するＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストの効果を示す。
【表４】
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【０１５９】
実施例１２：関節軟骨におけるＩＬ−１誘導アグリカン分解の減少
食肉処理の新生子牛から単離した関節軟骨移植片を培養液に入れ、アグリカン分解はＩＬ−１の刺激により開始された。本モデルにおけるアグリカン分解は、アグリカナーゼにより調節されると考えられるので、軟骨細胞に基づくアグリカナーゼペプチド分析（実施例１１）において活性化するＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストはまた、軟骨移植片試験において有効な阻害薬であってもよく、これらの組織においてアグリカナーゼ産生を阻害すると推定される。
ウシ関節軟骨移植片を、３日間、単独のおよび式ＩＩｃと結合したＩＬ−１に曝した。培養期間の終わりに、アグリカン分解の測定として、馴化培地を、比色分析（ＤＭＭＢ）によりグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）濃度を分析した。ウシ移植片において、ＩＬ−１は、３日間の培養の間、培地中に放出されるＧＡＧの量の増加を著しく誘導した。軟骨を、式ＩＩｃと結合したＩＬ−１で処理した場合、表５に示すようにＧＡＧ放出において濃度依存による減少があった。
ＩＬ−１への暴露の３日後、式ＩＩｃによりアグリカンを顕著に保護した。式ＩＩｃによる顕著な阻害を、ＩＬ−１刺激の１２または２１日後でさえ観察した。
表５は、関節軟骨におけるＩＬ−１誘導ＧＡＧ放出（平均±ＳＥＭ）の減少に対するＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストの効果を示す。
【表５】
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【０１６０】
実施例１３：ヒト軟骨移植片におけるアグリカン分解の減少
ヒト軟骨においてアグリカン分解の阻害に対するＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストの有効性を検証するために、移植片を３２歳の提供者から得た正常な関節軟骨から調製し、式ＩＩｄおよび式Ｉｂを含む多数のＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストの効果を、ＩＬ−１誘導アグリカン分解を阻害する能力として試験した。ヒト軟骨におけるＩＬ−１に関するアグリカン分解の進行は、ウシ軟骨より遅いので、培地を除去し、約３週間２−３日ごとに新しい処理を施した。各設定時間に、ＧＡＧ濃度を、ＤＭＭＢ試験により測定し、全３週の培養期間をかけて収集した蓄積データを計算した。
他の種から得た軟骨移植片とは異なり、ヒト軟骨は、恐らく診断未確定の関節炎状態による軟骨破壊により、ＩＬ−１刺激の非存在下で、タンパク質分解駆動によるアグリカン分解を受ける。対照培養における異化刺激の同一性は、知られていないが、内在性活性化因子は、インビボで軟骨破壊の誘導に極めて重要な役割を果たしていてもよい。かかる実施例は、非刺激のヒト軟骨移植片のアグリカン分解を、選択的アグリカナーゼ阻害薬であるＳＢ７０３７０４［Ｙａｏ、ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４４，３３４７−３３５０］により阻害することができ、アグリカナーゼの寄与を示唆することを検証する。
ＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストが、非刺激およびＩＬ−１刺激のヒト軟骨において、アグリカン分解を阻害する効果を同様に有するどうかを解決するために、化合物を、ＩＬ−１の非存在および存在の両方において、３カ所の濃度反応を用いて評価した。表６は、他のＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストの典型的な観察は試験したので、アグリカン分解における式ＩＩｄの効果を示す。データは、培養２１日後の度重なるアグリカン分解を表す。ＩＬ−１非存在下にて、式ＩＩｄならびに他のＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストは、アグリカン分解を阻害する効果があり、ＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストが  ヒト軟骨中に存在する内因性異化刺激により誘導される分解を阻害するのに効果的であることを示唆する。加えて、式ＩＩｄは、ＩＬ−１誘導アグリカン分解の濃度依存による減少をもたらした。対照軟骨における内因性活性化因子ならびにＩＬ−１刺激性分解の両方により誘導されるアグリカン分解を阻害するのに効果的であるＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストと一致すると、式ＩＩｄの最大濃度の阻害レベルは、１００％より高かった。
表７に示される予測ＩＣ５０は、ＩＬ−１刺激ウシ軟骨から計算したＩＣ５０に非常に類似している。ヒトとウシのＴＲＰＶ４チャネル受容体の間の高度の相同性（〜９５％）および多数の鍵となるＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストが、ウシおよびヒトの軟骨移植片において誘導されるアグリカン分解を阻害するのに同様に強力であることに基づき、これらのデータは、ウシ軟骨が、ヒト軟骨におけるＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニスト活性の有効性を予測するために用いる適当な組織であるという仮説を裏付ける。
さらに、ＩＬ−１誘導アグリカン分解を阻害する式ＩＩｄの効果的濃度は、電気生理学によるカルシウム流入を示すために用いられる化合物の濃度に類似し、カルシウム流入の誘導とアグリカン分解の阻害に対する式ＩＩｄによる活性化の間に存在する相互関係を示す。
【表６】
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【表７】
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【０１６１】
さらなる研究により、マトリックス分解を盛んに受ける軟骨移植片におけるさらなるＧＡＧ放出を阻止する上記に記載のＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストの有効性を検証する。
【０１６２】
実施例１４：ＩＬ−１誘導性コラーゲン分解の減少（ウシ関節軟骨移植片）
ＩＬ−１への暴露の延長（〜２−３週間）後、ＩＬ−１は、ウシ関節軟骨移植片におけるコラーゲン分解を刺激する。コラーゲン分解は、加水分解コラーゲン繊維の主成分であり、当業者に公知な比色分析に用いられる、ヒドロキシプロリンの濃度を測定することにより評価された。ウシ関節軟骨は、式Ｉｂまたは式ＩＩｄの非存在下または存在下において（両方で１ｕＭ）、１８日間ＩＬ−１に刺激された。培地を除去し、１８日を通して２−３日ごとに新しいＩＬ−１および化合物と取り換えた。上記に記載されているように、アグリカン分解は、ＩＬ−１刺激性ウシ軟骨移植片におけるコラーゲン分解の前に行う。アグリカンの枯渇が１０日で達するとすぐに、培地を、比色分析を用いてコラーゲン分解について分析した。１４−１８日で作製される馴化培地におけるコラーゲン分解を、評価し、表８で表す。ＩＬ−１は、高水準のコラーゲン分解をもたらし、この効果は、式Ｉｂ（１ｕＭ）により完全に阻害され、式ＩＩｄにより部分的だが効果的に阻害された。別の研究において、広域スペクトルＭＭＰ阻害薬（例えば、ＣＧＳ−２７０２３Ａ−Ｇａｎｕ、ｅｔ  ａｌ．、Ａｎｎ  Ｎ  Ｙ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ．１９９９；８７８：６０７−１１）は、ＩＬ−１誘導性コラーゲン分解を完全に阻害し、ＭＭＰ阻害薬が本モデルにおけるコラーゲン分解に寄与するという仮説を支持した。同時に、これらのデータは、コラーゲン分解に寄与するＩＬ−１により誘導される、ＭＭＰ−１３を含む、メタロプロテイナーゼの産生を阻害するＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストと一致する。これらのデータはまた、ＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストが、軟骨基質の主成分である、アグリカンおよびＩＩ型コラーゲンを保護することを裏付ける。
【表８】
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【０１６３】
実施例１５：ＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストが一酸化窒素濃度を減少させる。
一酸化窒素（ＮＯ）は、変形性関節症における組織破壊に寄与すると考えられるフリーラジカルである。軟骨基質損傷における直接的効果を有するが、ＮＯはまた、組織破壊の増大をもたらす潜在的プロテアーゼの活性化に寄与しうる。ＮＯ産生におけるＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストの効果を評価するために、ＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストの非存在下または存在下において、ウシ関節軟骨細胞を、Ｈａｕｓｅｌｍａｎｎ，ｅｔ  ａｌ．（１９９２）Ｍａｔｒｉｘ  １２：１１６−１２９に記載のアルギン酸ビーズに組み込み、ＮＯ濃度を、Ｇｒｅｉｓｓ反応（Ｂａｄｇｅｒ  ＡＭ，ｅｔ  ａｌ．（１９９８）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６１：４６７−４７３）、次いで、ＩＬ−１刺激による馴化培地にて決定した。ＩＬ−１は、軟骨細胞においてＮＯ産生を誘導すると見られており、式ＩＩｂは、表９に示すようにＩＬ−１誘導性ＮＯ産生において濃度依存による減少をもたらした。
【表９】
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【０１６４】
実施例１６：プロテオグリカン合成のＩＬ−１誘導阻害の軽減
軟骨退化は変形性関節症の特徴であるけれども、損傷基質を再合成する軟骨細胞の能力における減少でもある。ＩＬ−１を含むサイトカインが、コラーゲンおよびプロテオグリカン（ＰＧ）合成において大幅な減少をもたらすことを観察される。マトリックス合成における効果は、これらのサイトカインによるマトリックス分解の刺激と組み合わさり、軟骨基質の全体的な正味の欠損をもたらす。プロテオグリカンの合成におけるＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストの効果は、アルギン酸ビーズに組み込まれるウシ関節軟骨細胞における［３５Ｓ］結合により測定した。ＩＬ−１は、高分子量のプロテオグリカンモノマー中の［３５Ｓ］結合の阻害をもたらし、式ＩＩｂは、表１０に示されるようにＰＧ合成のＩＬ−１介在阻害の濃度依存による拮抗をもたらした。これらのデータは、ＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストが、ＯＡにおいて観察されるマトリックス合成の阻害を軽減できることを示唆する。
【表１０】
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【０１６５】
実施例１７：ＴＲＰＶ４チャネル受容体電気病理学
現在、ＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストの活性を評価するために利用される機能的、細胞に基づく試験（例、ＦＬＩＰＲ）は、チャネル活性または阻害の間接的な、下流の測定を提供する。ＴＲＰＶ４チャネル受容体における化合物の効果をより直接的に評価するために、ＴＲＰＶ４チャネル中に流れる電流を電気生理学的に記録する手順が確立される。これらの手順は、一過性に５％のヒトＴＲＰＶ４  ＢａｃＭａｍウイルスを導入したＨＥＫ２９３  ＭＳＲＩＩ細胞、標準細胞外生理食塩水溶液および固定したウェル、カリウムチャネルブロッキング電極（内部）溶液を利用する（Ｖｒｉｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．、ＰＮＡＳ、２００４）。標準全細胞パッチクランプ法を、５秒ごとの−１００ｍＶないし＋１００ｍＶのランププロトコルで、２００ミリ秒の導入の間に０ｍＶの保持電位で細胞を維持するために用いた。ＴＲＰＶ４チャネル受容体アゴニストである式ＩＩｄの効果の典型的な例は、図１に示される。図１の差し込み図は、１００ｎＭの式ＩＩｄの投与前（基準値）と投与中の各ランププロトコルの間の−１００ｍＶおよび＋１００ｍＶでの内部および外部の各電流振幅を表す。図１の本体は、差し込み図中に分類した５つの特定の時間での−１００ｍＶないし＋１００ｍＶランプに関する記録した電流の流れを図解する。式ＩＩｄは、全ての場合においてではないが、初期活性化相、急速脱感作および二次活性化／感作相を伴った複雑な手法においてヒトＴＲＰＶ４チャネル受容体を活性化した。１０ｎＭより低い濃度でもヒトＴＲＰＶ４チャネル受容体の活性化を観察される。別の実験において、３μＭの式ＩＩｄは、図１に示されるように、５％のＢａｃＭａｍウイルス単独で（すなわち、ヒトＴＲＰＶ４ベクターなしで）曝されるＨＥＫ２９３  ＭＳＲＩＩ細胞において膜電流の測定可能な効果を有しなかった。
【０１６６】
実施例１８：非環式１，３−ジアミンに対するヒト（ＨＡＣ）、ウシ（ＢＡＣ）およびラット（ＲＡＣ）関節軟骨細胞のＥＣ５０値
式ＩＩＩｂおよび式ＩＩＩｃの化合物のＥＣ５０値は、ウシ、ラットおよびヒト関節軟骨細胞におけるＣａ２＋流入に対しＦＬＩＰＲ試験およびＦｌｅｘＳｔａｔｉｏｎ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ製（Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ））を用いて決定した。加えて、ＩＣ５０値は、上記の実施例１１および１３に記載の方法を用いてアグリカナーゼ産生試験を用いてこれらの分子を決定した。化合物ＩＩＩｂおよびＩＩＩｃのＥＣ５０およびＩＣ５０値は、以下の表１１に示される。
【表１１】
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【０１６７】
上記の記載は、本発明をどのように実施し、用いるかを十分に開示するものである。しかしながら、本発明は、上記の特定の実施態様に限定されるものではなく、添付の特許請求の範囲およびその同等物の範囲内におけるその全ての修復を含むものである。当業者は、本発明の範囲を逸脱することなく、種々の変更および修飾を行うことができると日々の実験により分かるであろう。
【図面の簡単な説明】
【０１６８】
【図１】一過性に５％のｈＶＲ４  ＢａｃＭａｍウイルスを導入したＨＥＫ２９３  ＭＳＲＩＩ細胞におけるＴＲＰＶ４チャネル受容体依存性電流に対する式ＩＩｄの電位および時間依存性効果を示す全細胞パッチクランプ測定結果を示す。
【図２】ヒトＴＲＰＶ４をコードするポリヌクレオチド配列を示す。
【図３】図２のポリヌクレオチド配列によりコードされるポリペプチド配列を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【配列表】
2008512475000001.xml
【手続補正書】
【提出日】平成19年5月9日(2007.5.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】変更
【補正の内容】
【配列表】
2008512475000001.app
【国際調査報告】
2008512475.tif 000053
2008512475.tif 000054