(57)【要約】  式(I)【化１】2008505910.tif 000156（式中、Ｘ、Ｙ、R1、R2及びR3は本明細書に定義されたとおりである）の新規化合物が開示され、これらはPKC-シータのインヒビターとして有益であり、こうしてPKC-シータの活性により媒介又は持続される種々の疾患及び障害（免疫障害及びII型糖尿病を含む）を治療するのに有益である。また、本発明はこれらの化合物を含む医薬組成物、種々の疾患及び障害の治療におけるこれらの化合物の使用方法、これらの化合物の調製方法並びにこれらの方法に有用な中間体に関する。
2008505910.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式(I)：の化合物、又はその互変異性体、医薬上許される塩、溶媒和物もしくはアミノ保護誘導体。
【化１】
2008505910.tif 000150
〔式中、
ＸはC1-6アルキルであり、そのメチレン単位の一つ又は二つが酸素原子又は硫黄原子により置換でき、かつそのC1-6アルキル基は必要により、かつ独立に
(A) オキソ、
(B) C1-6アルキル（これは必要により１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   ヒドロキシル、
(ii)  C1-3アルキルオキシ、
(iii) ハロゲン）、
(C) C1-6アルキルオキシ、
(D) C1-6アルキルチオ、
(E) アリール、
(F) -COR6（式中、R6は
(i)   C1-6アルキル、
(ii)  C1-6アルキルオキシ、
(iii) -NR7R8（式中、R7及びR8は夫々独立に
(a) 水素、
(b) C1-6アルキル、
(c) アリール、
(d) ヘテロアリール
から選ばれる）、
(iv)  -OHである）、
(G) ハロゲン、
(H) -NR9R10（式中、R9及びR10は夫々独立に
(i)   水素、
(ii)  C1-6アルキル、
(iii) C1-6アルキルカルボニル、
(iv)  C1-6アルキルスルホニル、
(v)   アリール、
(vi)  ヘテロアリールから選ばれる）
で置換されていてもよく、
Yは-NH-、-O-又は-S-であり、
R1は
(A) アリール又はヘテロアリール（夫々必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   C1-6アルキル（これは必要により１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(a) ハロゲン、
(b) NH2）
(ii)  C1-6アルコキシ（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(iii) C1-6アルキルチオ（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(iv)  C1-6アルキルスルホニル、
(v)   シアノ、
(vi)  ハロゲン、
(vii) ヒドロキシル、
(viii)ニトロ、
(ix)  -COR11（式中、R11は
(a) C1-6アルキル、
(b) C1-6アルキルオキシ、
(c) -OH、
(d) -NR12R13（式中、R12及びR13は夫々独立に
(I)   水素、
(II)  C1-6アルキル、
(III) アリール、
(IV)  ヘテロアリールから選ばれる）である）、
(x)   -NR14R15（式中、R14及びR15は夫々独立に
(a) 水素、
(b) C1-6アルキル、
(c) C1-6アルキルカルボニル、
(d) C1-6アルキルスルホニルから選ばれ、又は
R14及びR15は一緒になってアルキレンブリッジを構成し、これはそれらの間の窒素原子と一緒になって５〜７員環を形成する）、
(xi)  アリールチオ、アリールスルホニル又はアリールオキシ（夫々必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(a) C1-6アルキル、
(b) C1-6アルコキシ、
(c) C1-6アルキルチオ、
(d) C1-6アルキルスルホニル、
(e) シアノ、
(f) ハロゲン、
(g) ニトロ、
(h) -NR16R17（式中、R16及びR17は夫々独立に
(I)   水素、
(II)  C1-6アルキル、
(III) C1-6アルキルカルボニル、
(IV)  C1-6アルキルスルホニルから選ばれる））
(B) C3-6シクロアルキル（これは必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   C1-6アルキル（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(ii)  C1-6アルコキシ（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(iii) C1-6アルキルチオ（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(iv)  C1-6アルキルスルホニル、
(v)   ハロゲン、
(vi)  ヒドロキシル、
(vii) -NR18R19（式中、R18及びR19は夫々独立に
(a) 水素、
(b) C1-6アルキル、
(c) C1-6アルキルカルボニル、
(d) C1-6アルキルスルホニルから選ばれる）、
(viii) -COR20（式中、R20は
(a) C1-6アルキル、
(b) C1-6アルキルオキシ、
(c) -OH、
(d) -NR21R22（式中、R21及びR22は夫々独立に
(I) 水素、
(II)C1-6アルキルから選ばれる）である）、
(C) -COR23（式中、R23は
(i)   C1-6アルキルオキシ、
(ii)  -NR24R25（式中、R24及びR25は夫々独立に
(a) 水素、
(b) C1-6アルキルから選ばれ、又は
R24及びR25は一緒になってアルキレンブリッジを構成し、これはそれらの間の窒素原子と一緒になって４〜６員環を形成し、そのメチレン基の一つが必要により酸素、硫黄又はNH基により置換されていてもよく、かつその環が必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(a) C1-6アルキルオキシ、
(b) C1-6アルキル（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(c) ヒドロキシル、
(d) ハロゲン、
(e) -COR26（式中、R26は
(I)   C1-6アルキルオキシ、
(II)  -NR27R28（式中、R27及びR28は夫々独立に
a.  水素、
b.  C1-6アルキル、
c.  アリール、
d.  ヘテロアリールから選ばれる）である）であり、
(D) は
【化２】
2008505910.tif 000151
であり、これは必要によりハロゲンで置換されていてもよく、
(E) は下記の基から選ばれ、
【化３】
2008505910.tif 000152
R2は下記の基から選ばれ、
(A) CF3、
(B) シアノ、
(C) ハロゲン、
(D) ニトロ、
(E) C1-6アルキルアルキニル、
(F) アリールアルキニル（これは必要により１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   ハロゲン、
(ii)  C1-6アルキル（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい））
R3は下記の基から選ばれ、
【化４】
2008505910.tif 000153
R4及びR5は夫々独立に
(A) 水素、
(B) C1-6アルキル（必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   オキソ、
(ii)  C3-6シクロアルキル、
(iii) C1-6アルキルオキシ、
(iv)  C1-6アルキルチオ、
(v)   -COR29（式中、R29は
(a) C1-6アルキル、
(b) C1-6アルキルオキシ、
(c) -OHである）、
(vi)  -CONR30R31（式中、R30及びR31は夫々独立に
(a) 水素、
(b) C1-6アルキル、
(c) アリール、
(d) ヘテロアリールから選ばれる）、
(vii) ハロゲン、
(viii)ヒドロキシル、
(ix)  -NR32R33（式中、R32及びR33は夫々独立に
(a) 水素、
(b) C1-6アルキル、
(c) C1-6アルキルカルボニル、
(d) C1-6アルキルスルホニル、
(e) アリール、
(f) ヘテロアリールから選ばれる）、
(x)   アリール又はヘテロアリール（夫々必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(a) C1-6アルキル（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(b) C1-6アルコキシ（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(c) C1-6アルキルチオ（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(d) C1-6アルキルスルホニル、
(e) シアノ、
(f) ハロゲン、
(g) ニトロ、
(h) -NR34R35（式中、R34及びR35は夫々独立に
(I)   水素、
(II)  C1-6アルキル、
(III) C1-6アルキルカルボニル、
(IV)  C1-6アルキルスルホニルから選ばれる）、
(i) -COR36（式中、R36は
(I)   C1-6アルキル、
(II)  C1-6アルキルオキシ、
(III) -OHである）、
(j) -CONR37R38（式中、R37及びR38は夫々独立に
(I)   水素、
(II)  C1-6アルキル、
(III) アリール、
(IV)  ヘテロアリールから選ばれる））、
(C) C1-6アルキルスルホニル、
(D) アリールスルホニル、
(E) アリール-C1-6アルキルスルホニル、
(F) ヘテロアリールスルホニル、
(G) C1-6アルキルカルボニル、
(H) アリールカルボニル、
(I) アリール-C1-6アルキルカルボニル、
(J) ヘテロアリールカルボニル、
(K) C1-6アルキルアミノカルボニル、又は
(L) ヘテロアリールから選ばれ、或いは
R4及びR5は一緒になってアルキレンブリッジを構成し、これはそれらの間の窒素原子と一緒になって４〜７員環を形成し、そのメチレン基の一つが必要により酸素、硫黄又はNH基により置換されていてもよく、かつその環が必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよく：
(A) C1-6アルキル（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(B) C1-6アルコキシ（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(C) C1-6アルキルチオ（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(D) C1-6アルキルスルホニル、
(E) ハロゲン、
(F) -NR39R40（式中、R39及びR40は夫々独立に
(i)   水素、
(ii)  C1-6アルキル、
(iii) C1-6アルキルカルボニル、
(iv)  C1-6アルキルスルホニル、
(v)   アリールカルボニル、
(vi)  アリールスルホニル、
(vii)  ヘテロアリールカルボニル、
(viii)ヘテロアリールスルホニルから選ばれる）、
(G) -COR41（式中、R41は
(i)   C1-6アルキル、
(ii)  C1-6アルキルオキシ、
(iii) -NR42R43（式中、R42及びR43は夫々独立に
(a) 水素、
(b) C1-6アルキル、
(c) アリール、
(d) ヘテロアリールから選ばれる）、
(iv)  ヒドロキシルである）、
(H) -OR44（式中、R44は
(i)   水素、
(ii)  C1-6アルキルカルボニル、
(iii) C1-6アルキルスルホニルから選ばれる）、
(I) オキソ、或いは
NR4R5が環中に合計２個の窒素ヘテロ原子を含む５員ヘテロアリール環を構成する〕
【請求項２】
Ｘが-CH2-であり、
Ｙが-NH-であり、
R1が
(A) フェニル又はピリジル（必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   メチル、
(ii)  CF3、
(iii) OCF3、
(iv)  OCF2H、
(v)   OCH3、
(vi)  OCH(CH3)2、
(vii) SCF3、
(viii)NH2で置換されたアリールチオ、
(ix)  Ｆ又はCl、
(x)   N(CH3)2、
(xi)  OCH2CF3、
(xii) SO2CH3）
(B) ナフチルであり、
R2が
(A) シアノ、
(B) Cl、又は
(C) ニトロであり、
R3が
【化５】
2008505910.tif 000154
であり、
R4及びR5が夫々独立に
(A) 水素、
(B) C1-3アルキル（必要により１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   ヒドロキシル、
(ii)  ピリジル、
(iii) 1-メチル-1H-ピラゾール、
(iv)  1,5-ジメチル-1H-ピラゾール、
(v)   -CONH2）
から選ばれ、又は
R4及びR5が一緒になってアルキレンブリッジを構成し、これはそれらの間の窒素原子と一緒になって４員環又は５員環を形成し、夫々必要により、かつ独立に１個以上の下記の基：
(A) ヒドロキシル、
(B) アミノ、
(C) フッ素、
(D) オキソ、
(E) -NHSO2CH3、又は
(F) -NHCOCH3
で置換されていてもよい、請求項１記載の式(I)の化合物、又はその互変異性体、医薬上許される塩、溶媒和物もしくはアミノ保護誘導体。
【請求項３】
Ｘが-CH2-であり、
Ｙが-NH-であり、
R1が
(A) フェニル（必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   メチル、
(ii)  CF3、
(iii) OCF3、
(iv)  OCH3、
(v)   SCF3、
(vi)  NH2で置換されたアリールチオ、
(vii) Ｆ又はCl）
(B) ナフチルであり、
R2が
(A) シアノ、
(B) Cl、又は
(C) ニトロであり、
R3が
【化６】
2008505910.tif 000155
であり、
R4及びR5が夫々独立に
(A) 水素、
(B) C1-2アルキル（必要により１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   ヒドロキシル、
(ii)  ピリジル、
(iii) 1,5-ジメチル-1H-ピラゾール、
(iv)  -CONH2）
から選ばれ、又は
R4及びR5が一緒になってアルキレンブリッジを構成し、これはそれらの間の窒素原子と一緒になって４員環又は５員環を形成し、夫々必要により、かつ独立に１個以上のヒドロキシル又はオキソで置換されていてもよい、請求項１記載の式(I)の化合物、又はその互変異性体、医薬上許される塩、溶媒和物もしくはアミノ保護誘導体。
【請求項４】
請求項１から３のいずれか記載の化合物、及び少なくとも一種の医薬上許される担体又はアジュバントを含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項５】
薬物としての使用のための請求項１から３のいずれかに記載の化合物。
【請求項６】
PKC-シータの活性により媒介又は持続される疾患又は障害の治療のための医薬組成物の調製のための請求項１から３のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項７】
Ｔ細胞の活性化と関連する疾患又は障害の治療のための医薬組成物の調製のための請求項１から３のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項８】
免疫疾患の治療のための医薬組成物の調製のための請求項１から３のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項９】
炎症性疾患、自己免疫疾患、器官及び骨髄の移植片拒絶、急性又は慢性炎症、アレルギー、接触皮膚炎、乾癬、慢性関節リウマチ、多発性硬化症、Ｉ型糖尿病、炎症性腸疾患、ギラン・バレー症候群、クローン病、潰瘍性大腸炎、移植片対宿主疾患又はエリテマトーデスの治療のための医薬組成物の調製のための請求項１から３のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１０】
II型糖尿病の治療のための医薬組成物の調製のための請求項１から３のいずれかに記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
2004年７月８日に出願された、米国仮特許出願第60/586,289号の利益がここに主張される。
本発明はPKC-シータのインヒビターとして有益であり、こうしてPKC-シータの活性により媒介又は持続される種々の疾患及び障害（免疫疾患及びII型糖尿病を含む）を治療するのに有益である置換ピリミジン誘導体に関する。本発明はまたこれらの化合物を含む医薬組成物、種々の疾患及び障害の治療におけるこれらの化合物の使用方法、これらの化合物の調製方法並びにこれらの方法に有用な中間体に関する。
【背景技術】
【０００２】
タンパク質キナーゼＣファミリーは12種の関連イソ酵素を含むセリン／スレオニンキナーゼのグループである。これらのキナーゼは広範囲の組織及び細胞型中で発現される。その員は異なる遺伝子によりコードされ、活性化のためのそれらの要件に従って細分類される。古典的PKC酵素（cPKC）は活性化のためにジアシルグリセロール(DAG)、ホスファチジルセリン(PS)及びカルシウムを必要とする。新規PKC（nPKC）はDAG及びPSを必要とするが、カルシウム依存性ではない。非定型PKC（aPKC）はカルシウム又はDAGを必要としない。
PKC-シータはnPKCサブファミリーの一員である。それは制限された発現パターンを有し、主としてＴ細胞及び骨格筋中に見られる。Ｔ細胞活性化後に、超分子活性化複合体(SMAC)がＴ細胞と抗原提示細胞(APC)の間の接触の部位で生成する。PKC-シータはSMAC（C. Monksら, Nature, 1997, 385, 83）に局在化し、それをその他のシグナリング酵素（これらはＴ細胞活性化プロセスを媒介する）と接近して置くことが知られていた唯一のPKCイソ型である。別の研究（G. Baier-Bitterlichら, Mol. Cell. Biol., 1996, 16, 842）では、IL-2遺伝子の活性化に重要な転写因子である、AP-1の活性化におけるPKC-シータの役割が、確認された。未刺激Ｔ細胞では、構成的に活性なPKC-シータがAP-1活性を刺激し、一方、優性陰性PKC-シータを含む細胞では、AP-1活性がPMAによる活性化後に誘導されなかった。その他の研究はPKC-シータが、IκBキナーゼベータの活性化により、Ｔ細胞受容体／CD28同時刺激により誘導されたNF-κBの活性化を媒介することを示していた（N. Coudronniereら, Proc. Nat. Acad. Sci. U.S.A., 2000, 97, 3394; X. Linら, Moll. Cell. Biol., 2000, 20, 2933）。Ｔ細胞受容体(TCR)/CD28刺激に応答しての、PKC-シータノックアウトマウスからの末梢Ｔ細胞の増殖は野生型マウスからのＴ細胞と較べて大いに減少された。加えて、Ｔ細胞から放出されるIL-2の量がまた大いに減少された（Z. Sunら, Nature, 2000, 404, 402）。それ以外では、PKC-シータノックアウトマウスは正常であると考えられ、生殖能があった。
先に引用された研究及びその他の研究はＴ細胞活性化並びにその後のサイトカイン、例えば、IL-2の放出及びＴ細胞増殖におけるPKC-シータの重要な役割を確認している（A. Altmanら, Immunology Today, 2000, 21, 567）。こうして、PKC-シータのインヒビターはＴ細胞の不適当な活性化により媒介される免疫疾患及びその他の疾患を治療するのに治療上有益であろう。
Ｔ細胞は免疫応答を調節するのに重要な役割を果たすことが良く証明されていた（Powrie及びCoffman, Immunology Today, 1993, 14, 270）。実際に、Ｔ細胞の活性化はしばしば免疫疾患における開始イベントである。TCRの活性化後に、Ｔ細胞活性化に必要とされるカルシウムの内向きフラックスがある。活性化後に、Ｔ細胞がサイトカイン（IL-2を含む）を産生し、Ｔ細胞増殖、分化、及びエフェクター機能をもたらす。IL-2のインヒビターによる臨床研究はＴ細胞活性化及び増殖との干渉がin vivoの免疫応答を有効に抑制することを示していた（Waldmann, Immunology Today, 1993, 14, 264）。
それ故、Ｔリンパ球活性化及びその後のサイトカイン産生を抑制する薬剤はこのような免疫抑制を要する患者で免疫応答を選択的に抑制するのに治療上有益であり、それ故、自己免疫疾患及び炎症性疾患の如き免疫疾患を治療するのに有益である。
【０００３】
加えて、PKCシータ活性化は骨格筋中でインスリン耐性と関連していることが示されていた（M.E. Griffenら, Diabetes, 1999, 48, 1270）。それ故、PKC-シータのインヒビターはまたII型糖尿病を治療するのに有益であるかもしれない。
2002年10月16日に出願された、Dahmannらの米国特許出願第10/271,763号（現在の米国特許出願公開第2003/0171359A1号）は種々のタンパク質キナーゼ、例えば、SRCキナーゼ、PLKキナーゼそして特にサイクリン依存性キナーゼ（CDK）及びオーロラＢのインヒビターとしてのピリミジン誘導体を開示している。WO 00/75113及び米国特許第6,432,963号はSykチロシンキナーゼのインヒビターとしてのピリミジンカルボキサミドを記載している。WO 01/00213はSRCキナーゼインヒビターとしてのヘテロアリール置換ピリミジンを開示している。WO 97/19065は或る種のタンパク質キナーゼのインヒビターとしての置換2-アニリノピリミジン化合物を記載している。WO 02/096887及びWO 02/096888の両方がサイクリン依存性キナーゼのインヒビターとしての2-アニリノピリミジン誘導体を開示している。WO 03/106451はPKC-シータのインヒビターとしての或る種の置換ジアミノピリミジン化合物を開示している。
PKC-シータの強力かつ選択的インヒビターである化合物に対する絶え間ない要望が当業界にある。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
一般局面において、本発明は下記の式(I)の化合物だけでなく、それらの互変異性体、医薬上許される塩、溶媒和物、及びアミノ保護誘導体に関する。
【０００５】
【化１】
2008505910.tif 000003
【０００６】
（式中、R1、R2及びR3は本明細書に定義されるとおりである）
式(I)の化合物は有用な薬理学的性質、特にPKC-シータに対する抑制活性を有することがわかった。本発明の化合物の多くはPKC-シータの強力なインヒビターであるだけでなく、一種以上のその他のタンパク質キナーゼと較べてPKC-シータの抑制に選択的である。
別の局面において、本発明は患者に本発明の上記化合物を投与することを特徴とする患者のPKC-シータ活性の抑制方法に関する。
別の局面において、本発明はＴ細胞の活性化と関連する疾患又は障害の治療を要する患者に本発明の上記化合物を投与することを特徴とするこのような治療方法に関する。
別の局面において、本発明は免疫疾患の治療を要する患者に本発明の上記化合物を投与することを特徴とするこのような治療方法に関する。治療し得るこのような免疫疾患の例として、例えば、炎症性疾患、自己免疫疾患、器官及び骨髄の移植片拒絶並びにＴ細胞媒介免疫応答と関連するその他の疾患、例えば、急性又は慢性炎症、アレルギー、接触皮膚炎、乾癬、慢性関節リウマチ、多発性硬化症、Ｉ型糖尿病、炎症性腸疾患、ギラン・バレー症候群、クローン病、潰瘍性大腸炎、移植片対宿主疾患（及び器官又は骨髄の移植片拒絶のその他の形態）及びエリテマトーデスが挙げられる。
別の局面において、本発明はII型糖尿病の治療を要する患者に本発明の上記化合物を投与することを特徴とするこのような治療方法に関する。
更に付加的な局面において、本発明は上記化合物を含む医薬組成物、上記化合物の調製方法及びこれらの方法に使用される中間体に関する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
使用される用語及び慣例の定義
本明細書に特別に定義されない用語は開示及び状況に鑑みて当業者によりそれらに与えられる意味を与えられるべきである。しかしながら、本明細書及び特許請求の範囲に使用される、下記の用語は、その逆に明記されない限り、示される意味を有し、下記の慣例に従われる。
A.  化学命名法、用語、及び慣例
一般に、二つ以上のサブグループを含むグループについて、最後に命名された基が基結合位置であり、例えば、“アルキルアリール”は式Alk-Ar-の１価の基を意味し、一方、“アリールアルキル”は式Ar-Alk-の１価の基を意味する（式中、Alkはアルキル基であり、かつArはアリール基である）。更に、２価の基が適当である場合に１価の基を表示する用語の使用は夫々の２価の基を表示すると見なされるべきであり、その逆もまた真である。特に明記されない限り、対照及び通常の安定な原子価という用語の通常の定義が全ての式及び基で推定され、得られる。
別の化学基“で置換されている”化学基についての全ての言及は、物理的もしくは化学的に可能ではなく、又は不安定な構造もしくは化合物をもたらす置換パターンを除いて、第一の化学基が一つ以上の第二の化学基で置換し得ることを意味すると理解されるべきである。例えば、“必要によりハロゲンで置換されていてもよいC1-6アルキル”という表現は同じ又は互いに異なる一つ又は多くのハロゲン置換基を有するC1-6アルキル基を意味するべきである。
【０００８】
全てのアルキル基は特に明記されない限り分岐又は非分岐であると理解されるべきである。その他の更に特別な定義は以下のとおりである。
本明細書に使用される“ハロゲン”という用語は臭素、塩素、フッ素又はヨウ素を意味すると理解されるべきである。
“ヘテロアリール”という用語は安定な５員又は６員の単環式芳香族複素環基を表し、その複素環基は必要によりアリール、例えば、ベンゼン、又は第二の５員もしくは６員の単環式芳香族複素環に縮合されて夫々の場合に二環式ヘテロアリール基を形成してもよい。夫々の複素環は炭素原子と窒素、酸素及び硫黄から選ばれた１〜３個のヘテロ原子からなる。複素環は環のいずれかの原子により結合されてもよく、これが安定な構造の形成をもたらす。“ヘテロアリール”基の例として、ピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、チエニル、フリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、キノリニル、イソキノリニル、インドリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾピラゾリル、ベンゾチオフラニル、ベンゾチアゾリル、キナゾリニル及びインダゾリルが挙げられる。
“アリール”という用語は6-10員の単環式又は二環式芳香族炭素環を意味すると理解されるべきであり、例えば、フェニル及びナフチルが挙げられる。“アリール”を含むその他の用語はアリール成分について同じ定義を有し、これらの部分の例として、アリールアルキル、アリールオキシ又はアリールチオが挙げられる。
“オキソ”という用語は二重結合された酸素基（=O）を表す。
【０００９】
定義中の“C1-6アルキル基の夫々”、“C1-8アルキル基の夫々”もしくは“アリール基の夫々”という表現又は同様の言語は単独の場合の示された基又は別の化学基の部分としての示された基（このような組み合わされた基が定義に示されている場合）を表すことが意図されている。例えば、“C1-6アルキル基の夫々”という言語はC1-6アルキル基だけでなく、その他の基に結合されている場合のC1-6アルキル基、例えば、C1-6アルキルオキシ基又はアリール-C1-6アルキル基（このような基が定義に示されている場合）のC1-6アルキル部分を表す。
“アミノ保護誘導体”という用語はアミン基の一つ以上が好適なアミノ保護基により保護されている式(I)の化合物を意味すると理解されるべきである。使用し得るアミノ保護基として、例えば、アルコキシカルボニル基、例えば、tert-ブチルオキシカルボニル(Boc)及びエトキシカルボニル、マンニッヒ塩基、シッフ塩基並びにアミノ酸が挙げられる。当業者により理解されるように、このようなアミノ保護化合物は、例えば、以下の合成方法に記載されるような、式(I)のその他の化合物の調製において中間体として有益であるかもしれず、かつ／又はそれら自体で患者に投与されて患者のPKC-シータの抑制から予想される得られる薬理学的効果及び治療効果を有するPKC-シータインヒビターにin vivoで変換し得るプロドラッグとして有益であり得る。
【００１０】
“医薬上許される塩”という用語は医薬上許される無機及び有機の酸及び塩基から誘導されたものを含む。好適な酸の例として、塩酸、臭化水素酸、炭酸、硫酸、硝酸、過塩素酸、フマル酸、マレイン酸、リン酸、グリコール酸、乳酸、サリチル酸、コハク酸、トルエン-p-スルホン酸、酒石酸、酢酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ギ酸、安息香酸、マロン酸、ナフタレン-2-スルホン酸及びベンゼンスルホン酸が挙げられる。シュウ酸の如きその他の酸は、それら自体では医薬上許されないが、本発明の化合物及びそれらの医薬上許される酸付加塩を得る際に中間体として有用な塩の調製に使用し得る。好適な塩基から誘導された塩として、アルカリ金属（例えば、ナトリウム）塩、アルカリ土類金属（例えば、マグネシウム）塩、アンモニウム塩及びN-(C1-4アルキル)4+塩が挙げられる。
“溶媒和物”という用語は化合物と一種以上の溶媒分子の物理的会合又は溶質（例えば、式(I)の化合物）と溶媒、例えば、水、EtOH、もしくは酢酸により生成された可変の化学量論の錯体を意味する。この物理的会合は種々の程度のイオン結合及び共有結合（水素結合を含む）を伴い得る。或る場合には、例えば、一つ以上の溶媒分子が結晶性固体の結晶格子にとり込まれる場合に、溶媒和物が単離し得るであろう。一般に、選ばれる溶媒は溶質の生物学的活性を妨げない。溶媒和物は液相及び単離し得る溶媒和物の両方を含む。代表的な溶媒和物として、水和物、EtOHates、MeOHates、等が挙げられる。
“水和物”という用語は一つ以上の溶媒分子がH2Oである溶媒和物を意味する。
【００１１】
“本発明の化合物”という用語及び均等の表現は本明細書に記載された式(I)の化合物（状況が許す場合には、それらの互変異性体、医薬上許される塩、溶媒和物、及びアミノ保護誘導体を含む）を含むことを意味する。一般に、本発明の化合物及び本発明の化合物を表示する式はこれらの安定な化合物のみを含み、たとえ不安定な化合物が化合物の式により実際に含まれると考えられ得るとしても、不安定な化合物を除くことが理解される。
“安定な化合物”という用語は反応混合物からの有用な程度の純度までの単離、及び有効な治療薬への製剤化に耐えるのに充分に丈夫である化合物を意味する。例えば、“ダングリング原子価”を有する化合物は本発明により意図される化合物ではない。
本発明の特定の化合物は本明細書において化学名及び／又は化学構造により同定し得る。化学名と化学構造の間の不一致の場合、化学構造が支配するであろう。
B.  異性体という用語及び慣例
一般に、特定の立体化学又は異性体形態が化合物名又は構造に明示されない限り、全ての互変異性体形態及び異性体形態並びにこれらの混合物、例えば、個々の幾何異性体、立体異性体、鏡像体、ジアステレオマー、ラセミ体、立体異性体のラセミ又は非ラセミ混合物、ジアステレオマーの混合物、或いは化学構造又は化合物の以上の形態のいずれかの混合物が意図されている。
化合物の生物学的かつ薬理学的活性は化合物の立体化学に感受性であることが当業界で公知である。こうして、例えば、鏡像体は薬物速度論的性質（代謝、タンパク質結合、等を含む）、及び薬理学的性質（示される活性の型、活性の程度、毒性、等を含む）の相違を含む著しく異なる生物学的活性をしばしば示す。こうして、当業者は一種の鏡像体がその他の鏡像体に対して濃縮された場合又はその他の鏡像体から分離された場合に一層活性であるかもしれず、又は有益な効果を示し得ることを認めるであろう。更に、当業者はこの開示及び当業界における知識から本発明の化合物の鏡像体を分離し、濃縮し、又は選択的に調製する方法を知るであろう。
純粋な立体異性体、例えば、鏡像体及びジアステレオマー、又は所望の鏡像体過剰(ee)もしくは鏡像体純度の混合物の調製は、(a)鏡像体の分離もしくは分割、又は(b)当業者に知られているエナンチオ選択的合成、或いはこれらの組み合わせの多くの方法の一つ以上により達成される。これらの分割方法は一般にキラル認識に頼り、例えば、キラル静止相を使用するクロマトグラフィー、エナンチオ選択的ホスト-ゲスト錯生成、キラル助剤を使用する分割又は合成、エナンチオ選択的合成、酵素的及び非酵素的動的分割、又は自然エナンチオ選択的結晶化が挙げられる。このような方法が一般にChiral Separation Techniques: A Practical Approach（第２編）, G. Subramanian（編集）, Wiley-VCH, 2000; T.E. Beesley及びR.P.W. Scott, Chiral Chromatography, John Wiley & Sons, 1999;及びSatinder Ahuja, Chiral Separations by Chromatography, Am. Chem. Soc., 2000に開示されている。更に、鏡像体過剰又は純度の定量のための同等に公知の方法、例えば、GC、HPLC、CE、又はNMR、並びに絶対配置及びコンホメーションの帰属、例えば、CD ORD、Ｘ線結晶学、又はNMRがある。
【００１２】
C.  医薬投与という用語及び慣例
“患者”という用語はヒト及び非ヒト哺乳類の両方を含む。
“治療有効量”という用語は、それを要する患者に投与された場合に、これらの化合物が実用性を有する疾患状態、症状、又は障害のための治療を行なうのに充分である本発明の化合物の量を意味する。このような量は研究者又は臨床医により探求される組織、系、又は患者の生物学的応答又は医療応答を誘発するのに充分であろう。治療有効量を構成する本発明の化合物の量は化合物及びその生物学的活性、投与に使用される組成物、投与の時期、投与の経路、化合物の排泄の速度、治療の期間、治療される疾患状態又は障害の型及びその重度、本発明の化合物と組み合わせて又は同時に使用される薬物、並びに患者の年齢、体重、全般の健康、性別、及びダイエットの如き因子に応じて変化するであろう。このような治療有効量は当業者によりそれら自体の知識、技術水準、及びこの開示に関してルーチンで決められる。
“Ｔ細胞の活性化と関連する疾患又は障害”という表現及び同様の表現はＴ細胞の活性化が患者の疾患又は障害の起源又は継続に寄与する因子であることを意味する。
本発明の実施態様
その最も広い一般局面において、本発明は下記の式(I)の新規化合物、又はその互変異性体、医薬上許される塩、溶媒和物もしくはアミノ保護誘導体を提供する。
【００１３】
【化２】
2008505910.tif 000004
【００１４】
式中、
ＸはC1-6アルキルであり、そのメチレン単位の一つ又は二つが酸素原子又は硫黄原子により置換でき、かつそのC1-6アルキル基は必要により、かつ独立に
(A) オキソ、
(B) C1-6アルキル（これは必要により１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   ヒドロキシル、
(ii)  C1-3アルキルオキシ、
(iii) ハロゲン）、
(C) C1-6アルキルオキシ、
(D) C1-6アルキルチオ、
(E) アリール、
(F) -COR6（式中、R6は
(i)   C1-6アルキル、
(ii)  C1-6アルキルオキシ、
(iii) -NR7R8（式中、R7及びR8は夫々独立に
(a) 水素、
(b) C1-6アルキル、
(c) アリール、
(d) ヘテロアリール
から選ばれる）、
(iv)  -OHである）、
【００１５】
(G) ハロゲン、
(H) -NR9R10（式中、R9及びR10は夫々独立に
(i)   水素、
(ii)  C1-6アルキル、
(iii) C1-6アルキルカルボニル、
(iv)  C1-6アルキルスルホニル、
(v)   アリール、
(vi)  ヘテロアリールから選ばれる）
で置換されていてもよく、
Yは-NH-、-O-又は-S-であり、
R1は
(A) アリール又はヘテロアリール（夫々必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   C1-6アルキル（これは必要により１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(a) ハロゲン、
(b) NH2）
(ii)  C1-6アルコキシ（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(iii) C1-6アルキルチオ（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(iv)  C1-6アルキルスルホニル、
(v)   シアノ、
(vi)  ハロゲン、
(vii) ヒドロキシル、
(viii)ニトロ、
(ix)  -COR11（式中、R11は
(a) C1-6アルキル、
(b) C1-6アルキルオキシ、
(c) -OH、
(d) -NR12R13（式中、R12及びR13は夫々独立に
(I)   水素、
(II)  C1-6アルキル、
(III) アリール、
(IV)  ヘテロアリールから選ばれる）である）、
【００１６】
(x)   -NR14R15（式中、R14及びR15は夫々独立に
(a) 水素、
(b) C1-6アルキル、
(c) C1-6アルキルカルボニル、
(d) C1-6アルキルスルホニルから選ばれ、又は
R14及びR15は一緒になってアルキレンブリッジを構成し、これはそれらの間の窒素原子と一緒になって５〜７員環を形成する）、
(xi)  アリールチオ、アリールスルホニル又はアリールオキシ（夫々必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(a) C1-6アルキル、
(b) C1-6アルコキシ、
(c) C1-6アルキルチオ、
(d) C1-6アルキルスルホニル、
(e) シアノ、
(f) ハロゲン、
(g) ニトロ、
(h) -NR16R17（式中、R16及びR17は夫々独立に
(I)   水素、
(II)  C1-6アルキル、
(III) C1-6アルキルカルボニル、
(IV)  C1-6アルキルスルホニルから選ばれる））
【００１７】
(B) C3-6シクロアルキル（これは必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   C1-6アルキル（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(ii)  C1-6アルコキシ（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(iii) C1-6アルキルチオ（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(iv)  C1-6アルキルスルホニル、
(v)   ハロゲン、
(vi)  ヒドロキシル、
(vii) -NR18R19（式中、R18及びR19は夫々独立に
(a) 水素、
(b) C1-6アルキル、
(c) C1-6アルキルカルボニル、
(d) C1-6アルキルスルホニルから選ばれる）、
(viii) -COR20（式中、R20は
(a) C1-6アルキル、
(b) C1-6アルキルオキシ、
(c) -OH、
(d) -NR21R22（式中、R21及びR22は夫々独立に
(I) 水素、
(II)C1-6アルキルから選ばれる）である）、
【００１８】
(C) -COR23（式中、R23は
(i)   C1-6アルキルオキシ、
(ii)  -NR24R25（式中、R24及びR25は夫々独立に
(a) 水素、
(b) C1-6アルキルから選ばれ、又は
R24及びR25は一緒になってアルキレンブリッジを構成し、これはそれらの間の窒素原子と一緒になって４〜６員環を形成し、そのメチレン基の一つが必要により酸素、硫黄又はNH基により置換されていてもよく、かつその環が必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(a) C1-6アルキルオキシ、
(b) C1-6アルキル（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(c) ヒドロキシル、
(d) ハロゲン、
(e) -COR26（式中、R26は
(I)   C1-6アルキルオキシ、
(II)  -NR27R28（式中、R27及びR28は夫々独立に
a.  水素、
b.  C1-6アルキル、
c.  アリール、
d.  ヘテロアリールから選ばれる）である）であり、
(D) は
【００１９】
【化３】
2008505910.tif 000005
【００２０】
であり、これは必要によりハロゲンで置換されていてもよく、
(E) は下記の基から選ばれ、
【００２１】
【化４】
2008505910.tif 000006
【００２２】
R2は下記の基から選ばれ、
(A) CF3、
(B) シアノ、
(C) ハロゲン、
(D) ニトロ、
(E) C1-6アルキルアルキニル、
(F) アリールアルキニル（これは必要により１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   ハロゲン、
(ii)  C1-6アルキル（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい））
R3は下記の基から選ばれ、
【００２３】
【化５】
2008505910.tif 000007
【００２４】
R4及びR5は夫々独立に
(A) 水素、
(B) C1-6アルキル（必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   オキソ、
(ii)  C3-6シクロアルキル、
(iii) C1-6アルキルオキシ、
(iv)  C1-6アルキルチオ、
(v)   -COR29（式中、R29は
(a) C1-6アルキル、
(b) C1-6アルキルオキシ、
(c) -OHである）、
(vi)  -CONR30R31（式中、R30及びR31は夫々独立に
(a) 水素、
(b) C1-6アルキル、
(c) アリール、
(d) ヘテロアリールから選ばれる）、
(vii) ハロゲン、
(viii)ヒドロキシル、
(ix)  -NR32R33（式中、R32及びR33は夫々独立に
(a) 水素、
(b) C1-6アルキル、
(c) C1-6アルキルカルボニル、
(d) C1-6アルキルスルホニル、
(e) アリール、
(f) ヘテロアリールから選ばれる）、
(x)   アリール又はヘテロアリール（夫々必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
【００２５】
(a) C1-6アルキル（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(b) C1-6アルコキシ（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(c) C1-6アルキルチオ（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(d) C1-6アルキルスルホニル、
(e) シアノ、
(f) ハロゲン、
(g) ニトロ、
(h) -NR34R35（式中、R34及びR35は夫々独立に
(I)   水素、
(II)  C1-6アルキル、
(III) C1-6アルキルカルボニル、
(IV)  C1-6アルキルスルホニルから選ばれる）、
(i) -COR36（式中、R36は
(I)   C1-6アルキル、
(II)  C1-6アルキルオキシ、
(III) -OHである）、
(j) -CONR37R38（式中、R37及びR38は夫々独立に
(I)   水素、
(II)  C1-6アルキル、
(III) アリール、
(IV)  ヘテロアリールから選ばれる））、
【００２６】
(C) C1-6アルキルスルホニル、
(D) アリールスルホニル、
(E) アリール-C1-6アルキルスルホニル、
(F) ヘテロアリールスルホニル、
(G) C1-6アルキルカルボニル、
(H) アリールカルボニル、
(I) アリール-C1-6アルキルカルボニル、
(J) ヘテロアリールカルボニル、
(K) C1-6アルキルアミノカルボニル、又は
(L) ヘテロアリールから選ばれ、或いは
R4及びR5は一緒になってアルキレンブリッジを構成し、これはそれらの間の窒素原子と一緒になって４〜７員環を形成し、そのメチレン基の一つが必要により酸素、硫黄又はNH基により置換されていてもよく、かつその環が必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよく：
(A) C1-6アルキル（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(B) C1-6アルコキシ（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(C) C1-6アルキルチオ（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）、
(D) C1-6アルキルスルホニル、
(E) ハロゲン、
(F) -NR39R40（式中、R39及びR40は夫々独立に
(i)   水素、
(ii)  C1-6アルキル、
(iii) C1-6アルキルカルボニル、
(iv)  C1-6アルキルスルホニル、
(v)   アリールカルボニル、
(vi)  アリールスルホニル、
(vii)  ヘテロアリールカルボニル、
(viii)ヘテロアリールスルホニルから選ばれる）、
【００２７】
(G) -COR41（式中、R41は
(i)   C1-6アルキル、
(ii)  C1-6アルキルオキシ、
(iii) -NR42R43（式中、R42及びR43は夫々独立に
(a) 水素、
(b) C1-6アルキル、
(c) アリール、
(d) ヘテロアリールから選ばれる）、
(iv)  ヒドロキシルである）、
(H) -OR44（式中、R44は
(i)   水素、
(ii)  C1-6アルキルカルボニル、
(iii) C1-6アルキルスルホニルから選ばれる）、
(I) オキソ、或いは
NR4R5が環中に合計２個の窒素ヘテロ原子を含む５員ヘテロアリール環を構成する。
【００２８】
別の実施態様において、
ＸがC1-3アルキル（必要によりオキソで置換されていてもよい）であり、
Ｙが-NH-又は-O-であり、
R1が
(A) アリール又はヘテロアリール（夫々必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   C1-3アルキル（これは必要により、かつ独立にフッ素で置換されていてもよい）
(ii)  C1-3アルコキシ（これは必要により、かつ独立にフッ素で置換されていてもよい）、
(iii) C1-3アルキルチオ（これは必要により、かつ独立にフッ素で置換されていてもよい）、
(iv)  アリールチオ（これは必要により-NH2で置換されていてもよい）、
(v)   ハロゲン、
(vi)  ヒドロキシル、
(vii) C1-3アルキルスルホニル、
(viii)CONH2、
(ix)  -NR14R15（式中、R14及びR15は夫々独立に
(a) 水素、
(b) C1-6アルキル、
(c) C1-6アルキルカルボニル、
(d) C1-6アルキルスルホニルから選ばれ、又は
R14及びR15は一緒になってアルキレンブリッジを構成し、これはそれらの間の窒素原子と一緒になって５〜７員環を形成する））、
【００２９】
(B) シクロヘキシル（これは必要により、かつ独立に
(i)   C1-3アルキル、
(ii)  ヒドロキシルで置換されていてもよい）、
(C) -COR23（式中、R23は
(i) -NR24R25（式中、R24及びR25は夫々独立に
(a) C1-6アルキルから選ばれ、又は
R24及びR25は一緒になってアルキレンブリッジを構成し、これはそれらの間の窒素原子と一緒になって５〜６員環を形成し、そのメチレン基の一つが必要により酸素原子により置換されていてもよく、またその環が必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   ヒドロキシル、
(ii)  -CONH2）である）であり、
(D) が
【００３０】
【化６】
2008505910.tif 000008
【００３１】
（これは必要によりハロゲンで置換されていてもよい）であり、
(E) が下記の基から選ばれ、
【００３２】
【化７】
2008505910.tif 000009
【００３３】
R2が
(A) CF3、
(B) シアノ、
(C) ハロゲン、又は
(D) ニトロであり、
R3が下記の基から選ばれ、
【００３４】
【化８】
2008505910.tif 000010
【００３５】
R4及びR5が夫々独立に
(A) 水素、
(B) C1-6アルキル（これは必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   オキソ、
(ii)  C3-5シクロアルキル、
(iii) アリール又はヘテロアリール（これらの夫々が必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(a) C1-3アルキル（これは必要によりフッ素で置換されていてもよい）、
(b) -CO2H、
(c) ハロゲン）、
(iv)  NH2、
(v)   ヒドロキシル、
(vi)  -CONH2、
(vii) フッ素、
(viii)NHCOCH3）から選ばれ、又は
R4及びR5が一緒になってアルキレンブリッジを構成し、これはそれらの間の窒素原子と一緒になって４〜７員環を形成し、そのメチレン基の一つが必要によりNH又は酸素原子により置換されていてもよく、またその環が必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよく、
(A) -CONH2、
(B) NR39R40（式中、R39及びR40は必要により、かつ独立に
(i)   C1-5アルキルカルボニル
(ii)  C1-5アルキルスルホニル
(iii) アリールカルボニル
(iv)  アリールスルホニルから選ばれてもよい）
(C) -OR44（式中、R44は
(i)   水素、
(ii)  C1-5アルキルカルボニルから選ばれる）、
(D) オキソ、又は
(E) フッ素、或いは
NR4R5が環中に合計２個の窒素ヘテロ原子を含む５員ヘテロアリール環を構成する、上記式(I)の化合物、又はこれらの互変異性体、医薬上許される塩、溶媒和物もしくはアミノ保護誘導体が提供される。
【００３６】
更に別の実施態様において、
Ｘが-CH2-、-CH2CH2-又は-CH2CO-であり、
Ｙが-NH-又は-O-であり、
R1が
(A) フェニル、ピリジル、ナフチル、キノリニル又はベンゾチエニル（これらの夫々が必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   C1-3アルキル（これは必要によりフッ素で置換されていてもよい）、
(ii)  C1-3アルコキシ（これは必要によりフッ素で置換されていてもよい）、
(iii) メチルチオ（これは必要によりフッ素で置換されていてもよい）、
(iv)  アリールチオ（必要によりNH2で置換されていてもよい）、
(v)   Ｆ、Cl又はBr、
(vi)  ヒドロキシル、
(vii) NH2又はN(CH3)2、
(viii)SO2CH3）、
(B) シクロヘキシル（必要によりヒドロキシルで置換されていてもよい）であり、
R2が
(A) CF3、
(B) シアノ、
(C) Ｆ、Cl、Br又は
(D) ニトロであり、
R3が
【００３７】
【化９】
2008505910.tif 000011
【００３８】
であり、
R4、R5が夫々独立に
(A) 水素、
(B) C1-4アルキル（これは必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   オキソ、
(ii)  シクロプロピル、
(iii) フェニル、ピリジル、ピリミジル、ピラゾリル及びオキサゾリルから選ばれたアリール又はヘテロアリール（これらの夫々が必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(a) C1-2アルキル、
(b) フッ素又は塩素）、
(iv)  -CONH2、
(v)   ヒドロキシル、
(vi)  フッ素、
(vii) NHCOCH3）から選ばれ、又は
R4及びR5が一緒になってアルキレンブリッジを構成し、これはそれらの間の窒素原子と一緒になって４〜７員環を形成し、そのメチレン基の一つが必要によりNHにより置換されていてもよく、またその環が必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい、
(A) -CONH2、
(B) ヒドロキシル、
(C) C1-5アルキルカルボニルオキシ、
(D) オキソ、
(E) フッ素、
(F) NR39R40（式中、R39及びR40は必要により、かつ独立に
(i)   水素
(ii)  C1-5アルキルカルボニル
(iii) C1-5アルキルスルホニル
(iv)  フェニルカルボニル、又は
(v)   フェニルスルホニルから選ばれてもよい）、上記式(I)の化合物、又はこれらの互変異性体、医薬上許される塩、溶媒和物もしくはアミノ保護誘導体が提供される。
【００３９】
更に別の実施態様において、
Ｘが-CH2-であり、
Ｙが-NH-であり、
R1が
(A) フェニル又はピリジル（必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   メチル、
(ii)  CF3、
(iii) OCF3、
(iv)  OCF2H、
(v)   OCH3、
(vi)  OCH(CH3)2、
(vii) SCF3、
(viii)NH2で置換されたアリールチオ、
(ix)  Ｆ又はCl、
(x)   N(CH3)2、
(xi)  OCH2CF3、
(xii) SO2CH3）
(B) ナフチルであり、
R2が
(A) シアノ、
(B) Cl、又は
(C) ニトロであり、
R3が
【００４０】
【化１０】
2008505910.tif 000012
【００４１】
であり、
R4及びR5が夫々独立に
(A) 水素、
(B) C1-3アルキル（必要により１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   ヒドロキシル、
(ii)  ピリジル、
(iii) 1-メチル-1H-ピラゾール、
(iv)  1,5-ジメチル-1H-ピラゾール、
(v)   -CONH2）
から選ばれ、又は
R4及びR5が一緒になってアルキレンブリッジを構成し、これはそれらの間の窒素原子と一緒になって４員環又は５員環を形成し、夫々必要により、かつ独立に１個以上の下記の基：
(A) ヒドロキシル、
(B) アミノ、
(C) フッ素、
(D) オキソ、
(E) -NHSO2CH3、又は
(F) -NHCOCH3
で置換されていてもよい、上記式(I)の化合物、又はその互変異性体、医薬上許される塩、溶媒和物もしくはアミノ保護誘導体が提供される。
【００４２】
更に別の実施態様において、
Ｘが-CH2-であり、
Ｙが-NH-であり、
R1が
(A) フェニル（必要により、かつ独立に１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   メチル、
(ii)  CF3、
(iii) OCF3、
(iv)  OCH3、
(v)   SCF3、
(vi)  NH2で置換されたアリールチオ、
(vii) Ｆ又はCl）
(B) ナフチルであり、
R2が
(A) シアノ、
(B) Cl、又は
(C) ニトロであり、
R3が
【００４３】
【化１１】
2008505910.tif 000013
【００４４】
であり、
R4及びR5が夫々独立に
(A) 水素、
(B) C1-2アルキル（必要により１個以上の下記の基で置換されていてもよい：
(i)   ヒドロキシル、
(ii)  ピリジル、
(iii) 1,5-ジメチル-1H-ピラゾール、
(iv)  -CONH2）
から選ばれ、又は
R4及びR5が一緒になってアルキレンブリッジを構成し、これはそれらの間の窒素原子と一緒になって４員環又は５員環を形成し、夫々必要により、かつ独立に１個以上のヒドロキシル又はオキソで置換されていてもよい、上記式(I)の化合物、又はその互変異性体、医薬上許される塩、溶媒和物もしくはアミノ保護誘導体が提供される。
更に別の実施態様において、下記の化合物が提供される。
【００４５】
【化１２】
2008505910.tif 000014
【００４６】
【化１３】
2008505910.tif 000015
【００４７】
【化１４】
2008505910.tif 000016
【００４８】
【化１５】
2008505910.tif 000017
【００４９】
【化１６】
2008505910.tif 000018
【００５０】
【化１７】
2008505910.tif 000019
【００５１】
【化１８】
2008505910.tif 000020
【００５２】
【化１９】
2008505910.tif 000021
【００５３】
【化２０】
2008505910.tif 000022
【００５４】
【化２１】
2008505910.tif 000023
【００５５】
【化２２】
2008505910.tif 000024
【００５６】
【化２３】
2008505910.tif 000025
【００５７】
【化２４】
2008505910.tif 000026
【００５８】
【化２５】
2008505910.tif 000027
【００５９】
【化２６】
2008505910.tif 000028
【００６０】
【化２７】
2008505910.tif 000029
【００６１】
【化２８】
2008505910.tif 000030
【００６２】
【化２９】
2008505910.tif 000031
【００６３】
【化３０】
2008505910.tif 000032
【００６４】
【化３１】
2008505910.tif 000033
【００６５】
【化３２】
2008505910.tif 000034
【００６６】
【化３３】
2008505910.tif 000035
【００６７】
【化３４】
2008505910.tif 000036
【００６８】
【化３５】
2008505910.tif 000037
【００６９】
【化３６】
2008505910.tif 000038
【００７０】
【化３７】
2008505910.tif 000039
【００７１】
【化３８】
2008505910.tif 000040
【００７２】
【化３９】
2008505910.tif 000041
【００７３】
【化４０】
2008505910.tif 000042
【００７４】
【化４１】
2008505910.tif 000043
【００７５】
【化４２】
2008505910.tif 000044
【００７６】
【化４３】
2008505910.tif 000045
【００７７】
【化４４】
2008505910.tif 000046
【００７８】
【化４５】
2008505910.tif 000047
【００７９】
【化４６】
2008505910.tif 000048
【００８０】
【化４７】
2008505910.tif 000049
【００８１】
【化４８】
2008505910.tif 000050
【００８２】
【化４９】
2008505910.tif 000051
【００８３】
【化５０】
2008505910.tif 000052
【００８４】
【化５１】
2008505910.tif 000053
【００８５】
【化５２】
2008505910.tif 000054
【００８６】
【化５３】
2008505910.tif 000055
【００８７】
【化５４】
2008505910.tif 000056
【００８８】
【化５５】
2008505910.tif 000057
【００８９】
【化５６】
2008505910.tif 000058
【００９０】
【化５７】
2008505910.tif 000059
【００９１】
【化５８】
2008505910.tif 000060
【００９２】
【化５９】
2008505910.tif 000061
【００９３】
【化６０】
2008505910.tif 000062
【００９４】
【化６１】
2008505910.tif 000063
【００９５】
【化６２】
2008505910.tif 000064
【００９６】
【化６３】
2008505910.tif 000065
【００９７】
【化６４】
2008505910.tif 000066
【００９８】
【化６５】
2008505910.tif 000067
【００９９】
【化６６】
2008505910.tif 000068
【０１００】
【化６７】
2008505910.tif 000069
【０１０１】
【化６８】
2008505910.tif 000070
【０１０２】
【化６９】
2008505910.tif 000071
【０１０３】
【化７０】
2008505910.tif 000072
【０１０４】
【化７１】
2008505910.tif 000073
【０１０５】
【化７２】
2008505910.tif 000074
【０１０６】
【化７３】
2008505910.tif 000075
【０１０７】
更に別の実施態様において、下記の化合物が提供される。
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-[2-フルオロ-3-(トリフルオロメチル)ベンジル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-(2-クロロ-6-フルオロ-3-メチルベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-(1-ナフチルメチル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ-N2-{2-[(トリフルオロメチル)チオ]ベンジル}ピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-5-クロロ-N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン;
1-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)アゼチジン-3-オン;
N4-{[トランス-4-(3-アミノアゼチジン-1-イル)シクロヘキシル]メチル}-5-ニトロ-N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]-ピリミジン-2,4-ジアミン;
N-[1-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}-シクロヘキシル)アゼチジン-3-イル]メタンスルホンアミド;
N-[1-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}-シクロヘキシル)アゼチジン-3-イル]アセトアミド;
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ-N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン;
4-{[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]アミノ}-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル;
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-{2-[(2-アミノフェニル)チオ]ベンジル}-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン;
【０１０８】
5-ニトロ-N4-[(トランス-4-ピロリジン-1-イルシクロヘキシル)メチル]-N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン;
1-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)ピロリジン-3-オール;
N4-[(トランス-4-アゼチジン-1-イルシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ-N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-{[トランス-4-(ジメチルアミノ)シクロヘキシル]メチル}-5-ニトロ-N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン;
4-({[トランス-4-(ジメチルアミノ)シクロヘキシル]メチル}アミノ)-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル;
5-ニトロ-N4-({トランス-4-[(ピリジン-3-イルメチル)アミノ]シクロヘキシル}メチル)-N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン;
5-ニトロ-N4-({トランス-4-[(ピリジン-4-イルメチル)アミノ]シクロヘキシル}メチル)-N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン;
2-[(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)アミノ]エタノール;
1-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)アゼチジン-3-オール;
5-ニトロ-N4-({トランス-4-[(ピリジン-2-イルメチル)アミノ]シクロヘキシル}メチル)-N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン;
N2-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)グリシンアミド;
【０１０９】
N4-[(トランス-4-{[(1,5-ジメチル-1H-ピラゾール-4-イル)メチル]アミノ}シクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ-N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-[(トランス-4-{[(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)メチル]アミノ}シクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ-N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-[(2-イソプロポキシピリジン-3-イル)メチル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ-N2-{[2-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)ピリジン-3-イル]メチル}ピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-[(5-フルオロ-2-メトキシピリジン-3-イル)メチル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン;)
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-[2-(ジフルオロメトキシ)ベンジル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-(2-クロロベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-[(トランス-4-アゼチジン-1-イルシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ-N2-{[2-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)ピリジン-3-イル]メチル}ピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-{[トランス-4-(3-フルオロアゼチジン-1-イル)シクロヘキシル]メチル}-5-ニトロ-N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-{[トランス-4-(エチルアミノ)シクロヘキシル]メチル}-5-ニトロ-N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-[2-クロロ-3-(ジメチルアミノ)ベンジル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン;
1-(トランス-4-{[(2-{[2-クロロ-3-(ジメチルアミノ)ベンジル]アミノ}-5-ニトロピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)アゼチジン-3-オール;
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-(5-クロロ-2-メトキシベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン;
【０１１０】
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-(2-メトキシベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-[5-クロロ-2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン;
N2-[5-クロロ-2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]-5-ニトロ-N4-[(トランス-4-ピロリジン-1-イルシクロヘキシル)メチル]ピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-[(2-メトキシピリジン-3-イル)メチル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ-N2-{[4-(トリフルオロメチル)ピリジン-3-イル]メチル}ピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-[5-クロロ-2-(メチルスルホニル)ベンジル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-[(トランス-4-アゼチジン-1-イルシクロヘキシル)メチル]-N2-[(4-クロロピリジン-3-イル)メチル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン;
N4-[(トランス-4-アゼチジン-1-イルシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ-N2-{[4-(トリフルオロメチル)ピリジン-3-イル]メチル}ピリミジン-2,4-ジアミン;
1-[トランス-4-({[5-ニトロ-2-({[4-(トリフルオロメチル)ピリジン-3-イル]メチル}アミノ)ピリミジン-4-イル]アミノ}メチル)シクロヘキシル]アゼチジン-3-オール;
(2R)-1-[(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)アミノ]プロパン-2-オール;
(2S)-1-[(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)アミノ]プロパン-2-オール;
3-[(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)アミノ]プロパン-1-オール;
(2R)-2-[(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)アミノ]プロパン-1-オール 
(2S)-2-[(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)アミノ]プロパン-1-オール。
【０１１１】
一般合成方法
本発明の化合物は下記の方法により調製し得る。下記のスキームの夫々中で、基R1、R2及びR3は特にことわらない限り一般式Ｉについて先に定義されたとおりである。最適反応条件及び反応時間は使用される特別な反応体に応じて変化し得る。特に明記しない限り、溶媒、温度、圧力及びその他の反応条件は当業者により容易に選ばれてもよい。特別な操作が合成実施例の節に示される。典型的には、反応進行が所望により薄層クロマトグラフィー(TLC)により監視し得る。中間体及び生成物はシリカゲルによるクロマトグラフィー及び／又は再結晶により精製し得る。出発物質及び試薬は市販されており、又は化学文献に記載されている方法を使用して市販の物質から当業者により調製し得る。
式(I)の化合物はスキームＩに示され、以下に記載されるように調製し得る。
スキームＩ
【０１１２】
【化７４】
2008505910.tif 000076
【０１１３】
先に示されるように、2,4-ジハロピリミジン(II)、好ましくは2,4-ジクロロピリミジンを塩基、例えば、トリエチルアミンの存在下で、好適な溶媒、例えば、EtOH中で約１当量のアミン（R'R”NH）と反応させて、中間体IIIを得る。その反応は約０℃〜ほぼ室温で行なわれることが好ましい。次いで中間体IIIを好適な溶媒、例えば、EtOH中で第二のアミンR1XNH2と反応させて所望のＩを得る。その反応液は溶媒のほぼ還流温度に加熱されることが好ましい。NO2よりも電子吸引性ではないR2基、例えば、R2=F、Cl、CN又はCO2Etを有する中間体IIIについて、その反応はマイクロウェーブ反応器中でシールされた容器中で約140℃で行なわれることが好ましい。
R3が第二のアミン基（即ち、上記スキームＩ中でR'基及び／又はR”基中に）を含む場合、その第二のアミンは中間体IIとの反応の前に、好適なアミノ保護基、例えば、Boc-基で保護されることが好ましく、そのアミンはピリミジン中間体IIIとR1XNH2の反応後に脱保護される。例えば、スキームIIに示されるような1-アミノ4-アミノメチルシクロヘキサンの場合、モノ-Boc-保護ジアミンを上記のようにIIと反応させる。次いで得られる中間体IVを上記のようにR1XNH2と反応させ、次いでBoc-保護中間体Ｖを酸による処理により脱保護して式(I)の所望の化合物を得る。次いで遊離アミノ基を好適な試薬、例えば、アルキル化剤又は、還元条件下で、カルボニル化合物と反応させて、式(I)のN-モノアルキル化又はN-ジアルキル化生成物を得る。
スキームII
【０１１４】
【化７５】
2008505910.tif 000077
【０１１５】
スキームIIIに示される変化では、R2がNO2である場合、中間体IIをEtOHの如き好適な溶媒中で、チオシアン酸塩、例えば、チオシアン酸カリウムと反応させて、VIを生成してもよい。中間体VIをEtOHの如き好適な溶媒中で、トリエチルアミンの如き塩基の存在下でR1XNH2と反応させて、VIIを得る。次いで中間体VIIをEtOH又は塩化メチレンの如き好適な溶媒中でアミンR'R”NHと反応させて、式Ｉの所望の化合物を得てもよい。
スキームIII
【０１１６】
【化７６】
2008505910.tif 000078
【０１１７】
置換基R1、R2及びR3を当業界で知られている方法により更に修飾して式(I)の付加的な化合物を得てもよい。これらの修飾の幾つかが下記の合成実施例に示される。
Ｙ＝Ｏ又はＳを有する式(I)の化合物はVIIを水素化ナトリウムの如き好適な塩基の存在下でTHF又はDMFの如き好適な溶媒中で所望のR'OH又はR'SHと反応させてＩ（Y-R3=夫々、-OR'又は-SR'）を得ることにより調製されてもよい。
本発明が更に充分に理解されるために、下記の実施例が示される。これらの実施例は本発明の実施態様を説明する目的のためであり、本発明の範囲を限定するものと何ら見なされるべきではない。出発物質は市販されており、又は市販の物質から当業者により容易に調製される。
【実施例】
【０１１８】
実施例1.  N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-(シクロヘキシルメチル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン
【０１１９】
【化７７】
2008505910.tif 000079
【０１２０】
AcCN（75mL）及びDMF（8mL）の混合物中の2,4-ジクロロ-5-ニトロピリミジン（1.77g、9.11ミリモル）の溶液に、tert-ブチルトランス-4-アミノメチルシクロヘキシルカルバメート（2.08g、9.11ミリモル）及びジイソプロピルエチルアミン(DIPEA)（1.59mL、9.11ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で１時間撹拌した。その反応混合物をEtOAcで希釈し、水(x4)で洗浄した。有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。9:1のEtOAc:ヘキサンを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して所望の生成物2.21g（63％）を黄色の固体として得た。
CH2Cl2（0.8mL）中の上記{4-〔(2-クロロ-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（50.2mg、0.13ミリモル）の溶液に、シクロヘキシルメチルアミン（44.1mg、0.39ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で３時間撹拌し、次いで50:1のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用してシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して所望の生成物32mg（54％）を淡黄色の固体として得た。
上記(4-{〔2-(シクロヘキシルメチルアミノ)-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル（32mg、0.07ミリモル）をジオキサン（0.6mL）に溶解し、ジオキサン（0.25mL）中の4M HClで処理した。その反応混合物を真空で濃縮し、得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物9mg（35％）を得た。m/z 363.4〔M+1〕+
【０１２１】
上記と同様の操作を使用して、下記の化合物を調製した。
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-(5-フルオロ-2-メチルベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 389.4 [M + 1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-(2-メトキシベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 387.4 [M + 1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-(4-クロロ-2-メチルベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 405.4 [M + 1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-[2-フルオロ-3-(トリフルオロメチル)ベンジル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 443.6 [M + 1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-(2-クロロ-6-フルオロ-3-メチルベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 423.6 [M + 1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-(1-ナフチルメチル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 407.6 [M + 1]+ 
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ-N2-{2-[(トリフルオロメチル)チオ]ベンジル}ピリミジン-2,4-ジアミン m/z 457.6 [M + 1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-[2-(2-フルオロフェニル)エチル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン, m/z 389.8 [M+1]+.  
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-[2-(3-フルオロフェニル)エチル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 389.8 [M+1]+.
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-[2-(4-フルオロフェニル)エチル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 389.8 [M+1]+.
【０１２２】
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-[2-(1H-インドール-3-イル)エチル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 408.7 [M1]+.
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ-N2-(2-ピリジン-2-イルエチル)ピリミジン-2,4-ジアミン m/z 372.8 [M+1]+.
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ-N2-(2-ピリジン-3-イルエチル)ピリミジン-2,4-ジアミン m/z 372.8 [M+1]+.
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ-N2-(2-ピリジン-4-イルエチル)ピリミジン-2,4-ジアミン m/z 372.9 [M+1]+.
N2-(4-アミノベンジル)-N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 372.9 [M+1]+.
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ-N2-(ピリジン-4-イルメチル)ピリミジン-2,4-ジアミン m/z 358.9 [M+1]+.
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ-N2-(キノリン-4-イルメチル)ピリミジン-2,4-ジアミン m/z 408.3 [M+1]+.
4-{[(4-{[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)アミノ]メチル}ベンゼン-1,2-ジオール m/z 389.6 [M+1]+.
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-(1,3-ベンゾジオキソール-5-イルメチル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 401.6 [M+1]+.
4-{[(4-{[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)アミノ]メチル}-2-メトキシフェノール m/z 403.4 [M+1]+.
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-[2-(1H-ベンゾイミダゾール-2-イル)エチル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 411.6 [M+1]+.
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-(1-ベンゾチエン-3-イルメチル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 413.3 [M+1]+.
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-[(5-クロロ-1-ベンゾチエン-3-イル)メチル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 447.3 [M+1]+.
【０１２３】
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-[4-(ジメチルアミノ)ベンジル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 398.4 [M1]+.
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-[2-(ジフルオロメトキシ)ベンジル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 423.4 [M+1]+.
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-(2-クロロベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 391.2 [M+1]+.
N2-(4-{[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)-N,N-ジメチルグリシンアミド, m/z 352.6 [M+1]+.
N2-(4-{[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)-N-メチルグリシンアミド, m/z 338.5 [M+1]+.
メチル N-(4-{[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)グリシネート, m/z 339.4 [M+1]+.
メチル N-(4-{[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)-L-アラニネート, m/z 353.4 [M+1]+.
メチル (2S)-[(4-{[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)アミノ](フェニル)アセテート, m/z 415.4 [M+1]+.
メチル (2R)-[(4-{[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)アミノ](フェニル)アセテート, m/z 415.4 [M+1]+.
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-N2-(3-ブロモベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン, m/z 435.5 [M+1]+.
N4-(4-アミノシクロヘキシルメチル)-N2-(3-ブロモ-2-メチル-ベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン, m/z 450.4 [M + 1]+
【０１２４】
N2-(5-アミノ-2-クロロベンジル)-N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン, m/z 406.4 [M+1]+
N2-(3-アミノベンジル)-N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 372.5 [M+1]+
N-(3-{[(4-{[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)アミノ]メチル}フェニル)アセトアミド m/z 414.6 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-[3-(ジメチルアミノ)ベンジル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 400.5 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-ベンジル-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 357.6 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-[2-(ジメチルアミノ)ベンジル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 371.6 [M+1]+
N-(3-{[(4-{[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)アミノ]メチル}フェニル)-N-メチルアセトアミド m/z 428.6 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-(2,3-ジヒドロ-1-ベンゾフラン-5-イルメチル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 399.5 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-[3-(メチルアミノ)ベンジル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 386.7 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-(2-メチルベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 371.6 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-(2-フルオロベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 375.6 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-(3-メチルベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 371.7 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-(3-クロロベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 390.8 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-(3-フルオロベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 375.6 [M+1]+
【０１２５】
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ- N2-[3-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン m/z 441.6 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-(2,3-ジメチルベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 385.7 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-(3-クロロ-2-メチルベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 405.6 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-(3-クロロ-2-フルオロベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 409.6 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-(2,3-ジフルオロベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 393.6 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-(5-クロロ-2-フルオロベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 410.5 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-(5-クロロ-2-メチルベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 407.2 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-(3,4-ジフルオロベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 392.9 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-(3-クロロ-4-フルオロベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 410.0 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-(3,5-ジフルオロベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 392.9 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-(2-クロロ-4-フルオロベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 410.3 [M+1]+
【０１２６】
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-(3,5-ジクロロベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z  425.5 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-(4-クロロ-2-フルオロベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 409.6 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-(4-ブロモ-2-フルオロベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 455.5 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-[4-フルオロ-2-(トリフルオロメチル)ベンジル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 443.6 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-[4-フルオロ-3-(トリフルオロメチル)ベンジル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 443.6 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-[2-クロロ-5-(ジメチルアミノ)ベンジル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 434.5 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-[2-クロロ-3-(ジメチルアミノ)ベンジル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 434.8 [M+1]+
3-{[(4-{[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)アミノ]メチル}ベンズアミド, m/z 400.4 [M+1]+ 
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ-N2-(ピリジン-3-イルメチル)ピリミジン-2,4-ジアミン m/z 358.5 [M+1]+.
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ- N2-{[6-(トリフルオロメチル)ピリジン-3-イル]メチル}ピリミジン-2,4-ジアミン m/z 426.5 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-[(3-クロロピリジン-2-イル)メチル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 392.4 [M+1]+
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-[(2-メトキシピリジン-3-イル)メチル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 388.5 [M+1]+ 
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ- N2-{[2-(トリフルオロメチル)ピリジン-3-イル]メチル}ピリミジン-2,4-ジアミン m/z 426.4 [M+1]+ 
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-[(4,5-ジクロロピリジン-3-イル)メチル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 426.5 [M+1]+ 
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]- N2-[(3-メトキシピリジン-2-イル)メチル]-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 388.7 [M+1]+ 
N4-[(トランス-4-アミノシクロヘキシル)メチル]-5-ニトロ-N2-(ピラジン-2-イルメチル)ピリミジン-2,4-ジアミン, m/z 359 [M+1]+.
(3-アミノメチル-2-クロロ-フェニル)-ジメチル-アミン中間体を下記の操作に従って合成した。
【０１２７】
【化７８】
2008505910.tif 000080
【０１２８】
100mLの丸底フラスコに2-クロロ-3-アミノ安息香酸（1.00g、5.38ミリモル）、メタノール（50mL）及び硫酸（0.1mL）を仕込んだ。その反応液を12時間にわたって加熱、還流した。その反応液を冷却し、溶媒を除去した。残留物質を酢酸エチル（35mL）に吸収させ、水（4x20mL）で洗浄した。有機物を乾燥させ（MgSO4）、濃縮し、次いでヘキサン／酢酸エチル(4:1)を使用してカラムクロマトグラフィーにより精製して2-クロロ-3-アミノ-安息香酸メチルエステル（990mg、86％）を得た。
2-クロロ-3-アミノ-安息香酸メチルエステル（1.20g、6.47ミリモル）を丸底フラスコにDMF（5mL）とともに入れ、炭酸カリウム（1.97g、14.2ミリモル）及びヨウ化メチル（0.89mL、14.22ミリモル）を添加した。還流冷却器をフィットし、その反応液を12時間にわたって60℃に加熱した。その反応液を室温に冷却し、水（20mL）で希釈し、酢酸エチル（3x20mL）で抽出した。有機物を乾燥させ（MgSO4）、濃縮し、次いでヘキサン／酢酸エチル(1:1)を使用してカラムクロマトグラフィーにより精製して2-クロロ-3-ジメチルアミノ-安息香酸メチルエステル（1.04g、75％）を得た。
2-クロロ-3-ジメチルアミノ-安息香酸メチルエステル（0.85g、3.98ミリモル）をテトラヒドロフラン（50mL）とともに丸底フラスコに入れ、０℃に冷却した。水素化リチウムアルミニウム（0.30g、7.96ミリモル）を少しづつ添加し、全てのLAHを添加した後に、その反応液を温め、室温で14時間撹拌した。その反応を氷の添加により停止し、次いで水（10mL）を添加した。有機物を酢酸エチル（3x15mL）で抽出し、乾燥させ（MgSO4）、濃縮して(2-クロロ-3-ジメチルアミノ-フェニル)-メタノールを得、これを更に精製しないで先に進めた。
【０１２９】
(2-クロロ-3-ジメチルアミノ-フェニル)-メタノール（0.50g、2.69ミリモル）をジクロロメタン（10mL）とともに丸底フラスコに入れ、０℃に冷却した。トリエチルアミン（0.68g、6.73ミリモル）、メタンスルホニルクロリド（0.23mL、2.97ミリモル）、及びジメチルアミノピリジン（0.02g）を添加し、その反応液を温め、室温で３時間撹拌した。その反応液をジクロロメタン（20mL）で希釈し、1N塩酸（10mL）、10％の重炭酸ナトリウム水溶液（10mL）、及び水（10mL）で洗浄した。有機物を乾燥させ（MgSO4）、濃縮してメタンスルホン酸2-クロロ-3-ジメチルアミノ-ベンジルエステルを得た。
メタンスルホン酸2-クロロ-3-ジメチルアミノ-ベンジルエステルをDMF（8mL）とともに丸底フラスコに入れた。ナトリウムアジド（0.35g、5.38ミリモル）を添加し、その反応液を３時間にわたって60℃に加熱した。その反応液を室温に冷却し、溶媒を真空で除去した。ヘキサン／酢酸エチル(1:1)を溶離剤として使用して残留粗物質をカラムクロマトグラフィーにより精製して(3-アジドメチル-2-クロロ-フェニル)-ジメチル-アミンを得た。
(3-アジドメチル-2-クロロ-フェニル)-ジメチル-アミン（0.25g、1.19ミリモル）をテトラヒドロフラン（25mL）とともに丸底フラスコに入れた。トリフェニルホスフィン（0.78g、2.97ミリモル）を添加し、その反応液を室温で３時間撹拌した。得られる沈殿を濾過し、取っておいた。濾液を濃縮し、次いでメタノール／塩化メチレン／水酸化アンモニウム（5:95:0.1）を使用してカラムクロマトグラフィーにより精製して所望の中間体を得た。
上記と同様の操作を使用して下記のアミン中間体を調製した。
(3-アミノメチル-4-クロロ-フェニル)-ジメチルアミン
(2-メトキシ-ピリジン-3-イル)-メチルアミン
(2-トリフルオロメチル-ピリジン-3-イル)-メチルアミン
(4,5-ジクロロ-ピリジン-3-イル)-メチルアミン
(3-メトキシ-ピリジン-2-イル)-メチルアミン
ピラジン-2-イル-メチルアミン
(2-メトキシ-ピリジン-3-イル)-メタノール中間体を下記の操作に従って調製した。
【０１３０】
【化７９】
2008505910.tif 000081
【０１３１】
-78℃のTHF（150mL）とともにTHF中1.7Mのt-ブチルリチウムの撹拌溶液（35.0mL、59.6ミリモル、2.60当量）に、2-ブロモメシチレン（4.56mL、29.8ミリモル、1.30当量）を滴下して添加した。１時間撹拌した後、2-メトキシ-ピリジン（2.5g、22.9ミリモル）を滴下して添加した。この溶液を-23℃に温め、３時間撹拌し、次いで-78℃に再度冷却した。DMF（2.66mL、34.4ミリモル、1.5当量）を添加し、その溶液を-78℃で１時間撹拌した。その反応をこの温度で食塩水（150mL）で停止し、エーテルで抽出した。合わせたエーテルをK2CO3で乾燥させ、真空で蒸発させた。残渣を50％-80％のEtOAc/ヘキサンでクロマトグラフィーにかけて2-メトキシ-ピリジン-3-カルボアルデヒド（2.34g、17.1ミリモル、74.5％）を黄色の固体として得た。
０℃に冷却したMeOH（70mL）中の2-メトキシ-ピリジン-3-カルボアルデヒド（2.05g、14.9ミリモル）の溶液に、固体としてのホウ水素化ナトリウム（670mg、17.7ミリモル、1.18当量）を一度に添加した。その反応液を室温に徐々に温め、２時間撹拌した。過剰の水素化物をH2Oの添加により消費し、その反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣を逆にEtOAcに吸収させ、H2Oで洗浄した。水相をEtOAcで逆抽出し、合わせた有機相を食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、減圧下で濃縮した。５％のMeOH/DCMを使用して粗残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、溶離剤の濃縮後に、(2-メトキシ-ピリジン-3-イル)-メタノール（1.65g、11.9ミリモル、81.3％）を白色の固体として得た。
上記と同様の操作を使用して下記の中間体をつくった。
(2-トリフルオロメチル-ピリジン-3-イル)-メタノール
(4,5-ジクロロ-ピリジン-3-イル)-メタノール
(3-メトキシ-ピリジン-2-イル)-メタノール
実施例2.  N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０１３２】
【化８０】
2008505910.tif 000082
【０１３３】
2,4-ジクロロ-5-ニトロピリミジン（12g）をAcOH（70mL）に溶解し、０℃に冷却した。チオシアン酸カリウム（6.31g）を２時間にわたってその溶液に滴下して添加した。その反応液を水で希釈し、濾過した。フィルターケーキを冷エーテルで洗浄して所望の2-クロロ-5-ニトロ-4-チオシアネートピリミジン（9.5g、71％）を得た。
DMF（5mL）中の2-クロロ-5-ニトロ-4-チオシアネートピリミジン（1g、4.6ミリモル）の溶液に、2-(トリフルオロメトキシ)ベンジルアミン（883mg、4.6ミリモル）、続いてDIPEA（804μL、4.6ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で30分間撹拌し、EtOAcで希釈した。その溶液を水(x4)で洗浄した。有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、次いで真空で濃縮した。CH2Cl2を溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して所望の生成物727mg（42％）を黄色の固体として得た。
DMF（1mL）中の上記生成物（50mg、0.135ミリモル）の溶液に、tert-ブチルトランス-4-アミノメチルシクロヘキシルカルバメート（61mg、0.27ミリモル）及びDIPEA（47mL、0.27ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で２時間撹拌した。その反応混合物をEtOAc（20mL）で希釈し、水(x3)で洗浄した。有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。95:5のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して所望の生成物71.8mg（99％）を得た。
上記置換ジアミノ生成物（70mg、0.13ミリモル）をCH2Cl2（10mL）に溶解し、TFA（0.7mL）を添加した。全ての出発物質が消費されるまで、その反応混合物を室温で40分間撹拌した。次いでその混合物をpH9-10まで飽和NaHCO3と1MのNa2CO3の混合物で処理した。その混合物をCH2Cl2(x2)で抽出した。MeOHを処理中に有機相に添加して生成物を可溶化した。合わせた有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。CH2Cl2:MeOH:NH4OH（10:1:0.1）を溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物39mg（69％）を得た。m/z 438.8〔M-1〕+
上記と同様の操作を使用して下記の化合物を調製した。
N4-〔（シス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 441.3〔M+1〕+
実施例3.  N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔(4-クロロピリジン-3-イル)メチル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン
【０１３４】
【化８１】
2008505910.tif 000083
【０１３５】
CH2Cl2（0.8mL）中の{4-〔(2-クロロ-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（48.2mg、0.13ミリモル）の溶液に、3-アミノメチル-4-クロロピリジン（53.5mg、0.38ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で３時間撹拌した。次いで50:1のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用してその混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して所望の生成物20.6mg（34％）を淡黄色の固体として得た。
上記〔4-({2-〔(4-クロロ-ピリジン-3-イルメチル)-アミノ〕-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ}-メチル)-シクロヘキシル〕-カルバミン酸tert-ブチルエステル（20.6mg、0.042ミリモル）をジオキサン（0.5mL）に溶解し、ジオキサン中の4MのHCl（200μL）をその溶液に添加した。その反応混合物を室温で４時間撹拌し、真空で濃縮した。MeOH及びCH2Cl2中の２％の2MのNH3の混合物を溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して所望の生成物5.5mg（34％）を得た。m/z 392.3〔M+1〕+
【０１３６】
3-アミノメチル-4-クロロピリジン中間体の調製
DMF（26mL）中の4-クロロ-ニコチン酸（2.5g、15.9ミリモル）の溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)（7.75g、37.5ミリモル）、4-ジメチルアミノピリジン(DMAP)（0.286g、2.1ミリモル）及びEtOH（2.6mL、46.8ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で４時間撹拌した。次いでその混合物を蒸留して（0.1mmHg）4-クロロ-ニコチン酸エチルエステル1.5g（51％）を無色の油として得た。
エーテル（15mL）中の4-クロロ-ニコチン酸エチルエステル（1.5g、8.1ミリモル）の溶液に、エーテル（10mL）中の水素化リチウムアルミニウム（0.31g、8.2ミリモル）を冷却しながら10分間にわたって添加した。その反応混合物を１時間撹拌し、水（2mL）及び15％のNaOH（0.5mL）で反応停止した。その反応混合物を濾過し、フィルター上の残渣をエーテルで洗浄した。合わせた濾液を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮して(4-クロロ-ピリジン-3-イル)-MeOH0.75gを黄色の固体として得た。
1,8-ジアザビシクロ〔5.4.0〕ウンデカ-7-エン(DBU)（0.69mL、4.5ミリモル）をトルエン（8mL）中の上記(4-クロロ-ピリジン-3-イル)-MeOH（0.51g、3.6ミリモル）及びジフェニルホスホリルアジド(DPPA)（0.92mL、4.3ミリモル）の溶液に添加した。その反応混合物を室温で３時間撹拌し、次いで真空で濃縮した。1:4のEtOAc:ヘキサンを使用して得られる残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して3-アジドメチル-4-クロロ-ピリジン0.47g（79％）を得た。
トリフェニルホスフィン（0.81g、3.1ミリモル）を０℃の無水THF（10mL）中の上記3-アジドメチル-4-クロロ-ピリジン（0.47g、3.1ミリモル）の溶液に添加した。その反応混合物を室温に温め、18時間撹拌した。次いでその反応混合物をNH4OH（3mL）で希釈し、更に３時間撹拌した。次いで3MのNaOHをその反応混合物に添加し、１時間撹拌した。4MのHCl溶液を添加することによりその混合物をpH2に酸性にした。その混合物をエーテルで希釈し、層を分離した。水層をエーテルで抽出し、次いで2MのNaOH溶液で塩基性にした。その水溶液をCH2Cl2（x3）で抽出した。合わせた有機相をMgSO4で乾燥させ、真空で濃縮して淡黄色の油状固体を得た。この生成物をエーテルで希釈し、濾過した。濾液を真空で濃縮して淡黄色の油を得た。20:1のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して3-アミノメチル-4-クロロピリジン0.21g（53％）を無色の油として得た。
上記と同様の操作を使用して下記の化合物を調製した。
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔(2-クロロピリジン-3-イル)メチル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 392.4〔M+1〕+
【０１３７】
3-アミノメチル-2-クロロピリジン中間体の調製
2-クロロニコチン酸（5.0g、31.7ミリモル）及び塩化チオニル（20mL）の混合物を1.5時間にわたって加熱、還流した。その反応混合物を真空で濃縮して過剰の塩化チオニルを除去した。得られる固体を10℃の水中のホウ水素化ナトリウム（4.3g、114ミリモル）の溶液に少しづつ添加した。その反応をNaBH4への添加中に10-15℃に維持した。次いでその反応混合物を室温に温めた。その混合物をNaClで飽和させ、エーテル（30mLx3）で抽出した。合わせた有機層をMgSO4で乾燥させ、真空で濃縮して(2-クロロ-ピリジン-3-イル)-メタノール4.1g（90％）を得た。
トルエン（30mL）中の上記(2-クロロ-ピリジン-3-イル)-メタノール（2.2g、15.1ミリモル）及びDPPA（3.9mL、18.2ミリモル）の溶液に、室温でDBU（2.9mL、18.2ミリモル）を添加し、３時間撹拌した。その反応液を3MのHCl（30mL）及びEt2O（75mL）で希釈した。層を分離し、水層をEt2O（75mL）で抽出した。合わせた有機層を水（50mL）、食塩水で洗浄し、MgSO4で乾燥させた。その溶液を濾過し、真空で濃縮して黄色の油を得た。95:5のヘキサン:EtOAcを使用してシリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけて3-アジドメチル-2-クロロ-ピリジン2.0g（77％）を無色の油として得た。
トリフェニルホスフィン（2.5g、9.5ミリモル）を０℃の無水THF（30mL）中の上記3-アジドメチル-2-クロロ-ピリジン（1.4g、8.5ミリモル）の溶液に添加した。その反応混合物を室温に温め、18時間撹拌した。その反応混合物をNH4OH（3mL）で希釈し、更に３時間撹拌した。次いでその混合物を3MのNaOHで処理し、１時間撹拌した。4MのHCl溶液を添加することによりその混合物をpH2に酸性にした。その混合物をエーテルで希釈し、層を分離した。水層をエーテルで抽出し、次いで2MのNaOH溶液で塩基性にした。その水溶液をCH2Cl2（x3）で抽出した。合わせた有機相をMgSO4で乾燥させ、真空で濃縮して淡黄色の油状の固体を得た。この生成物をエーテルで希釈し、濾過した。濾液を濃縮して淡黄色の油を得た。20:1のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して3-アミノメチル-2-クロロピリジン0.88g（73％）を無色の油として得た。
N4-〔トランス-4-アミノシクロヘキシル〕メチル〕-N2-(5-クロロ-2-メトキシベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 421.3〔M+1〕+
【０１３８】
5-クロロ-2-メトキシ-ベンジルアミン中間体の調製
MeOH中のメチル5-クロロ-2-メトキシベンゾエート（2.5g、12.5ミリモル）及び7MのNH3（25mL）の混合物をシールした管中で72時間にわたって120℃に加熱した。その反応混合物を室温に冷却し、窒素を15分間にわたってその溶液に吹き込んだ。次いでその溶液を真空で濃縮して黄褐色の固体を得た。粗生成物をMeOH（10mL）から再結晶した。結晶を濾過し、冷MeOHで洗浄して2-クロロ-2-メトキシ-ベンズアミド1.4g（60％）を得た。
無水THF（10mL）中の上記2-クロロ-2-メトキシ-ベンズアミド（1.0g、5.4ミリモル）の溶液に、０℃で1MのBH3-THF錯体（12.8mL、12.8ミリモル）を滴下して添加した。０℃で10分撹拌した後、その反応混合物を65℃で４時間加熱した。次いでMeOH（約10mL）をその冷却した混合物に０℃で添加した。その反応液を室温に温め、10分間撹拌した。その反応溶液を真空で濃縮して油状生成物を得た。生成物を50％のTHF/MeOH（10mL）に溶解し、4MのHCl（10mL）をその溶液に徐々に添加した。10分後、その混合物を水（10mL）とCH2Cl2（20mL）の間に分配した。水層をCH2Cl2（10mL）で抽出し、有機層を捨てた。水層を5MのNaOH溶液でpH9に塩基性にした。その溶液をCH2Cl2（3x20mL）で抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、MgSO4で乾燥させ、真空で濃縮して5-クロロ-2-メトキシ-ベンジルアミン0.36g（39％）を白色の固体として得た。
(1R,3S)-3-{〔(4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)アミノ〕メチル}-シクロヘキサノール、m/z 379.4〔M+1〕+
【０１３９】
シス-3-アミノメチル-シクロヘキサノール中間体の調製
ヘキサン（100mL）中の2-シクロヘキセン-1-オン（6mL、62ミリモル）の溶液に、-15℃で冷却しながらトルエン中の1MのEt2AlCN（160mL）を添加した。30分間撹拌した後、その反応混合物を氷冷2M HCl溶液に注ぎ、CH2Cl2で抽出した。抽出液を冷2M NaOH及び水で洗浄し、乾燥させ、真空で濃縮した。生成物を蒸留して3-オキソ-シクロヘキサンカルボニトリル1.7g（22％）を得た。沸点145-146℃（16mmHg）
MeOH（10mL）中の上記3-オキソ-シクロヘキサンカルボニトリル（0.31g、2.5ミリモル）の溶液に、０℃でNaBH4（0.11g、2.9ミリモル）を一度に添加した。その反応混合物を室温に徐々に温め、２時間撹拌した。過剰の水素化物をH2Oの添加により消費した。次いでその反応混合物を減圧下で濃縮した。得られる残渣をEtOAcで希釈し、その溶液を水洗した。有機相を食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、減圧下で濃縮した。EtOAcとヘキサンの0-40％勾配を溶離剤として使用して粗残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製してシス-3-ヒドロキシ-シクロヘキサンカルボニトリル0.2g（64％）を無色の油として得た。
高圧パールびん中のMeOH（15mL）中のNH3の2N溶液に、シス-3-ヒドロキシ-シクロヘキサンカルボニトリル（0.2g、1.6ミリモル）及びW-7ラネーニッケル（0.35g、6.0ミリモル）を添加した。その混合物を45psi（3.2kg/cm2）のH2のもとに入れ、15時間振とうした。圧力を開放し、反応液をケイソウ土のパッドで濾過した。そのフィルターパッドをMeOHで洗浄し、濾液を減圧下で濃縮してシス-3-アミノメチル-シクロヘキサノール0.16g（64％）を白色の固体として得た。
(1S,3S)-3-{〔(4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)アミノ〕メチル}-シクロヘキサノール、m/z 379.5〔M+1〕+
【０１４０】
トランス-3-アミノメチル-シクロヘキサノール中間体の調製
無水THF（40mL）中の安息香酸（1.1g、8.8ミリモル）及びPS-トリフェニルホスフィン（6.7g、15.5ミリモル）の溶液に、無水THF（20mL）中のシス-3-ヒドロキシ-シクロヘキサンカルボニトリル（1.1g、8.8ミリモル）を添加した。その反応混合物を冷却しながらジエチルアゾジカルボキシレート(DEAD)（1.9mL、12.3ミリモル）を３分間にわたってシリンジにより添加した。その反応液を12時間振とうした。その混合物を濾過し、樹脂をエーテルで洗浄した。濾液を真空で濃縮して油状の固体を得た。95:5のヘキサン:EtOAcを溶離剤として使用してシリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけて安息香酸トランス-3-シアノ-シクロヘキシルエステル0.29g（14％）を白色の固体として得た。
MeOH（1mL）中の上記安息香酸トランス-3-シアノ-シクロヘキシルエステル（0.29g、1.3ミリモル）及び0.5MのNaOCH3（0.13mL、0.065ミリモル）の混合物を室温で12時間撹拌した。その反応混合物を真空で濃縮し、3:2のヘキサン:EtOAcを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製してトランス-3-ヒドロキシ-シクロヘキサンカルボニトリル0.12g（78％）を無色の油として得た。
高圧パールびん中のMeOH（15mL）中のNH3の2N溶液に、トランス-3-ヒドロキシ-シクロヘキサンカルボニトリル（0.12g、1.0ミリモル）及びW-7ラネーニッケル（0.2g、3.4ミリモル）を添加した。その混合物を45psi（3.2kg/cm2）のH2のもとに入れ、15時間振とうした。圧力を開放し、反応液をケイソウ土のパッドで濾過した。そのフィルターパッドをMeOHで洗浄し、濾液を減圧下で濃縮してトランス-3-アミノメチル-シクロヘキサノール0.1g（79％）を白色の固体として得た。
2-〔(4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)アミノ〕-1-フェニルエタノン、m/z 385.3〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔5-クロロ-2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 475.5〔M+1〕+
5-クロロ-2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミン中間体の調製
【０１４１】
【化８２】
2008505910.tif 000084
【０１４２】
ニトロニウムテトラフルオロボレート（14.0g、105ミリモル）を室温のニトロメタン（30mL）中の2-トリフルオロメトキシ-ベンズアルデヒド（10.0g、52.6ミリモル）の溶液に添加した。その混合物を２時間撹拌し、次いで氷水で反応停止し、エーテル（100mL）で抽出した。有機層を分離し、水洗し、MgSO4で乾燥させ、５％のEtOAc/ヘキサンを用いてクロマトグラフィーにかけて5-ニトロ-2-トリフルオロメトキシ-ベンズアルデヒド7.52g（60.8％）を淡黄色の固体として得た。
０℃に冷却したMeOH（30mL）中の5-ニトロ-2-トリフルオロメトキシ-ベンズアルデヒド（2.33g、9.91ミリモル）の溶液に、固体としてのホウ水素化ナトリウム（440mg、11.7ミリモル）を一度に添加した。その反応液を室温に徐々に温め、２時間撹拌した。過剰の水素化物を水の添加により消費し、その反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣を逆にEtOAcに吸収させ、水洗した。水相をEtOAcで逆抽出し、合わせた有機相を食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、減圧下で濃縮した。EtOAc:ヘキサンの0-40％勾配を使用して粗残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、溶離剤の濃縮後に、(5-ニトロ-2-トリフルオロメトキシ-フェニル)-メタノール1.89g（80％）を白色の固体として得た。
(5-ニトロ-2-トリフルオロメトキシ-フェニル)-メタノール（2g、8.4ミリモル）をEtOAc（50mL）に溶解し、脱気した。次いでPd/C（200mg）を添加し、その混合物を再度脱気した。その溶液を３時間にわたってバルーンで水素化した。その反応が完結した後、その溶液をケイソウ土により濾過し、95:5のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として用いて残渣をクロマトグラフィーにかけて(5-アミノ-2-トリフルオロメトキシ-フェニル)-メタノール1.67g（96％）を黄色の固体として得た。
【０１４３】
亜硝酸t-ブチル（2.49g、24.2ミリモル）、塩化銅(II)（2.71g、20.2ミリモル）、及びアセトニトリル（100mL）を丸底フラスコに添加した。得られる混合物を０℃に冷却した。アセトニトリル（10mL）中の(5-アミノ-2-トリフルオロメトキシ-フェニル)-メタノール（1.67g、8.1ミリモル）を５分の期間にわたってその反応液に徐々に添加した。その反応液を室温に温め、一夜撹拌した。次いでその混合物を20％のHCl（100mL）に注ぎ、エーテル（100mL）で抽出した。有機層を20％のHCl（100mL）で洗浄し、MgSO4で乾燥させた。エーテルを真空で除去し、4:1のヘキサン:EtOAcを用いて残渣をクロマトグラフィーにかけて(5-クロロ-2-トリフルオロメトキシ-フェニル)-メタノール1.2g（66％）を黄色の固体として得た。
DBU（1.0mL、6.7ミリモル）を室温のトルエン（30mL）中の(5-クロロ-2-トリフルオロメトキシ-フェニル)-メタノール（1.2g、5.3ミリモル）及びDPPA（1.4mL、6.4ミリモル）の溶液に添加した。３時間後、その反応液を真空で濃縮して黄色の油を得た。95:5のヘキサン:EtOAcを使用してシリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけて2-アジドメチル-4-クロロ-1-トリフルオロメトキシ-ベンゼン0.86g（65％）を無色の油として得た。
トリフェニルホスフィン（0.99g、3.8ミリモル）を０℃のTHF（25mL）中のそのアジド（0.86g、3.4ミリモル）の溶液に添加した。５分後、その混合物を室温に温めた。18時間後、その反応液を水酸化アンモニウム（10mL）で希釈した。３時間後、その反応液を3MのNaOHで希釈し、１時間撹拌した。その反応液を4N HClでpH2に酸性にした。次いでその溶液をEt2Oで希釈し、層を分離した。水層をEt2Oで抽出し、次いで2N NaOHで塩基性にした。その塩基性水溶液をCH2Cl2（3x50mL）で抽出した。合わせた有機層をMgSO4で乾燥させ、濾過し、濃縮して油状の固体を得た。粗固体をEt2O（50mL）で希釈し、濾過した。濾液を真空で濃縮して淡黄色の油を得た。20:1のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用してシリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけて5-クロロ-2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミン0.64g（83％）を無色の油として得た。生成物は室温で安定ではなく、直ちに次の工程に使用した。
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔(4-メトキシピリジン-3-イル)メチル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 388.9〔M+1〕+
(4-メトキシ-ピリジン-3-イル)-メチルアミン中間体の調製
【０１４４】
【化８３】
2008505910.tif 000085
【０１４５】
-78℃のTHF（150mL）とともにTHF中の1.7Mのt-ブチルリチウムの撹拌溶液（35.0mL、59.6ミリモル）に、2-ブロモメシチレン（4.6mL、29.8ミリモル）を滴下して添加した。１時間撹拌した後、4-メトキシ-ピリジン（2.5g、22.9ミリモル）を滴下して添加した。この溶液を-23℃に温め、３時間撹拌し、次いで再度-78℃に冷却した。DMF（2.7mL、34.4ミリモル）を添加し、その溶液を-78℃で１時間撹拌した。その反応をこの温度で食塩水（150mL）で停止し、エーテルで抽出した。合わせたエーテルをK2CO3で乾燥させ、真空で蒸発させた。50％-80％のEtOAc/ヘキサンを用いて残渣をクロマトグラフィーにかけて4-メトキシ-ピリジン-3-カルボアルデヒド2.1g（65％）を黄色の固体として得た。
０℃に冷却したMeOH（70mL）中の4-メトキシ-ピリジン-3-カルボアルデヒド（2.1g、14.9ミリモル）の溶液に、固体としてのホウ水素化ナトリウム（0.67g、17.7ミリモル）を一度に添加した。その反応液を室温に徐々に温め、２時間撹拌した。過剰の水素化物を水の添加により消費し、その反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣を逆にEtOAcに吸収させ、水洗した。水相をEtOAcで逆抽出し、合わせた有機相を食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、減圧下で濃縮した。95:5のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して粗残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、濃縮後に、(4-メトキシ-ピリジン-3-イル)-メタノール1.1g（55％）を白色の固体として得た。
次いで(4-メトキシ-ピリジン-3-イル)-メタノールを先の化合物について記載された通常の操作によりC-(4-メトキシ-ピリジン-3-イル)-メチルアミンに変換した。
(1R,3R)-3-{〔(4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)アミノ〕メチル}-4,4-ジメチルシクロヘキサノール、m/z 407.6〔M+1〕+
【０１４６】
(1R,3R)-3-アミノメチル-4,4-ジメチル-シクロヘキサノールの調製
40℃に温めた95％のEtOH（70mL）中の4,4'-ジメチル-2-シクロヘキセン-1-オン及び酢酸の溶液に、H2O（10mL）中のシアン化カリウムの溶液を添加した。その反応液を40℃で４時間撹拌した。その反応液を室温に冷却し、シリカゲルのパッドにより濾過した。そのフィルターパッドをEtOAcで洗浄し、その混合物を減圧下で濃縮した。残渣を逆にH2Oに吸収させ、EtOAcで洗浄した。合わせた有機相を食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、減圧下で濃縮した。EtOAc対ヘキサンの0-20％勾配を使用して粗反応生成物をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、溶離剤の濃縮後に、2,2-ジメチル-5-オキソ-シクロヘキサンカルボニトリル1.03gを透明な油として得た。
０℃に冷却したMeOH（15mL）中の2,2-ジメチル-5-オキソ-シクロヘキサンカルボニトリルの溶液に、固体としてのNaBH4を一度に添加した。その反応液を室温に徐々に温め、２時間撹拌した。過剰の水素化物をH2Oの添加により消費し、その反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣を逆にEtOAcに吸収させ、H2Oで洗浄した。水相をEtOAcで逆抽出し、合わせた有機相を食塩水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、減圧下で濃縮した。Ａ（EtOAc）対Ｂ（ヘキサン）の0-40％勾配を使用して粗残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、溶離剤の濃縮後に、(1R,5R)-5-ヒドロキシ-2,2-ジメチル-シクロヘキサンカルボニトリル400mgを透明な油として得た。1H-NMRは唯一のジアステレオマーが単離されたことを示す。
高圧パールびん中のMeOH（15mL）中のNH3の2N溶液に、(1R,5R)-5-ヒドロキシ-2,2-ジメチル-シクロヘキサンカルボニトリル及びNiを添加した。その混合物を45psi（3.2kg/cm2）のH2のもとに入れ、15時間振とうした。圧力を開放し、反応液をケイソウ土のパッドにより濾過した。フィルターパッドをMeOHで洗浄し、その混合物を減圧下で濃縮して無色の油260mgを得た。1H-NMRは(1R,3R)-3-アミノメチル-4,4-ジメチル-シクロヘキサノール（主生成物）と(1R,5R)-5-ヒドロキシ-2,2-ジメチル-シクロヘキサンカルボニトリルの少量の不純物の混合物を示した。粗反応生成物を更に精製しないで使用した。
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔(5-ブロモピリジン-3-イル)メチル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 437.9〔M+1〕+
(5-ブロモ-ピリジン-3-イル)-メチルアミンの調製
【０１４７】
【化８４】
2008505910.tif 000086
【０１４８】
窒素雰囲気下の-20℃のDCM（75mL）中の(5-ブロモ-ピリジン-3-イル)-メタノール（2.75g、14.6ミリモル）及びEt3N（3.10mL、22.2ミリモル）の溶液に、メタンスルホニルクロリド（1.70mL、22.2ミリモル）を滴下して添加した。45分後に、その反応液を室温に温め、DCM（75mL）で希釈した。その反応混合物を水（75mL）、飽和NaHCO3（2x75mL）及び食塩水で洗浄し、その後にNa2SO4で乾燥させた。真空で濃縮して粗メタンスルホン酸5-ブロモ-ピリジン-3-イルメチルエステル（4.21g）を油として得た。粗物質を精製しないで次の工程で使用した。
DMF（60mL）中の粗メタンスルホン酸5-ブロモ-ピリジン-3-イルメチルエステル（4.20g）の溶液に、NaN3（10.0g、153.8ミリモル）を添加した。その混合物を窒素雰囲気下で一夜撹拌し、次いで水で希釈した。その混合物をEtOAc（2x300mL）で抽出し、合わせた有機層を水洗し、その後にNa2SO4で乾燥させた。その溶液を真空で濃縮して粗3-アジドメチル-5-ブロモ-ピリジン（2.04g）を暗褐色の油として得た。この粗物質を次の工程で直接使用した。
THF（50mL）及び水（1mL）中の粗3-アジドメチル-5-ブロモ-ピリジン（2.04g）の溶液に、トリフェニルホスフィン（5.02g、19.1ミリモル）を添加した。その混合物を窒素雰囲気下で２時間にわたって加熱、還流し、その後に室温に冷却し、真空で濃縮した。ISCO コンビ-フラッシュカートリッジ（シリカゲル、100:0→30:70のDCM/MeOH中10％のNH4OH）を使用して残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製して(5-ブロモ-ピリジン-3-イル)-メチルアミン（0.97g）を得た。
【０１４９】
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-(ピリジン-2-イルメチル)ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 358.4〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-(1,3-チアゾール-2-イルメチル)ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 364.3〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-(1,3-チアゾール-2-イルメチル)ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 347.6〔M+1〕+
(1H-イミダゾール-2-イル)-メチルアミン中間体の調製を文献（Gebert, U; Von Kerekjarto, B. Liebigs Ann. Chem. 1968 249-259; Bastiaansen, L.A.M.; Godefroi, E.F. J.Org. Chem. 1978 1603-1604）に記載されたようにして合成した。
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔(3-メチルピリジン-2-イル)メチル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 372.4〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔(6-メチルピリジン-2-イル)メチル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 372.4〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔(5-メチルピリジン-3-イル)メチル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 372.5〔M+1〕+
(5-メチル-ピリジン-2-イル)-メチルアミン中間体の調製
【０１５０】
【化８５】
2008505910.tif 000087
【０１５１】
THF（10mL）中の5-メチル-ピリジン-2-カルボニトリル（0.20g、1.69ミリモル）の溶液に、ボラン-THF溶液（THF中1.0Mの溶液、8.47mL、8.47ミリモル）を室温でシリンジにより迅速に添加した。その反応混合物を室温で15分間撹拌し、次いで3.5時間にわたって加熱、還流した。その反応混合物を０℃に冷却し、MeOH（3mL）をその反応混合物に徐々に添加した。その反応混合物を10分間撹拌した後、減圧を使用してその混合物をその後に白色の固体残渣に濃縮した。次いで残渣を1:1のTHF/MeOH5mL中で懸濁させ、4MのHCl 2mLで処理し、室温で10分間撹拌し、次いで2.5MのNaOHの添加により塩基性pHに中和した。その混合物をCH2Cl2で抽出し、合わせた有機層を食塩水で洗浄し、MgSO4で乾燥させ、濾過し、濃縮して(5-メチル-ピリジン-2-イル)-メチルアミン0.10gを無色の油として得た。粗反応生成物を更に精製しないで使用した。
上記と同様の操作を使用して下記の２種の中間体を調製した。
(6-メチル-ピリジン-3-イル)-メチルアミン
(5-メチル-ピリジン-3-イル)-メチルアミン
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔(5-クロロピリジン-2-イル)メチル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミンm/z 372.5〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔(6-メチルピリジン-3-イル)メチル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミンm/z 372.6〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔(5-メチル-1,3-オキサゾール-4-イル)メチル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミンm/z 362.3〔M+1〕+
5-クロロ-2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミンの合成に記載された方法を使用して(5-メチル-オキサゾール-4-イル)-メチルアミンを(5-メチル-オキサゾール-4-イル)-メタノールから合成した。
【０１５２】
【化８６】
2008505910.tif 000088
【０１５３】
実施例4.  N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-(2-フェニルエチル)ピリミジン-2,4-ジアミン
【０１５４】
【化８７】
2008505910.tif 000089
【０１５５】
CH2Cl2中の2-クロロ-5-ニトロ-4-チオシアネート-ピリミジン（54mg、0.25ミリモル）の溶液に2-フェネチルアミン（30mg、0.25ミリモル）及びDIPEA（130mL、0.75ミリモル）を添加した。その反応が完結するまでその反応混合物を室温で16時間撹拌した。次いでその反応混合物を精製しないで次の反応に使用した。
CH2Cl2中の上記(5-ニトロ-4-チオシアネート-ピリミジン-2-イル)-フェネチル-アミン（75mg、0.25ミリモル）の溶液に、tert-ブチルトランス-4-アミノメチルシクロヘキシルカルバメート（114mg、0.5ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で16時間撹拌し、真空で濃縮した。次いで得られる残渣をCH2Cl2（1mL）で希釈し、TFA（0.5mL）を添加した。その混合物を室温で４時間撹拌し、真空で濃縮した。得られる残渣を分取LCMSにより精製して標題化合物36mg（39％）を得た。m/z 371.6〔M+1〕+
上記と同様の操作を使用して下記の化合物を調製した。
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔2-(3-クロロフェニル)エチル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 405.6〔M+1〕+
4-{2-〔(4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル）アミノ〕エチル}フェノール、m/z 387.4〔M+1〕+
実施例5.  N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕-5-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2,4-ジアミン
【０１５６】
【化８８】
2008505910.tif 000090
【０１５７】
DMF（8mL）中の5-(トリフルオロメチル)-2,4-ジ-クロロピリミジン（0.5g、2.3ミリモル）の溶液に、-20℃でDMF（2mL）中の2-(トリフルオロメトキシ)ベンジルアミン（0.44g、2.3ミリモル）の溶液、続いてDIPEA（0.44mL、2.3ミリモル）を添加した。その反応混合物をその温度で20分間撹拌した。出発物質が全て消費された時、その混合物をEtOAcで希釈し、水(x4)で洗浄した。有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。100％のCH2Cl2を溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して(4-クロロ-5-トリフルオロメチル-ピリミジン-2-イル)-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジル)-アミン0.44g（52％）を白色のフォームとして得た。
DMF（2mL）中の上記(4-クロロ-5-トリフルオロメチル-ピリミジン-2-イル)-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジル)-アミン（80mg、0.22ミリモル）の溶液に、Boc-保護シクロヘキシルアミン（74mg、0.33ミリモル）、続いてDIPEA（37μL、0.22ミリモル）を添加した。その反応混合物を70℃で３時間撹拌した。その反応が完結した時、その反応混合物をEtOAcで希釈し、水(x4)で洗浄した。有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。95:5のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製した。次いで得られる残渣を再度CH2Cl2（10mL）に溶解し、TFA（1mL）を添加した。その反応混合物を室温で２時間撹拌し、飽和NaHCO3で処理した。生成物をCH2Cl2で抽出し、無水Na2SO4で乾燥させた。10:1:0.2のCH2Cl2:MeOH:NH4OHを溶離剤として使用してシリカゲル分取TLCにかけて標題化合物56mg（56％）を白色の固体として得た。m/z 462.4〔M-1〕+
実施例6.  N4-〔（トランス-4-ピロリジン-1-イルシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕-5-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2,4-ジアミン
【０１５８】
【化８９】
2008505910.tif 000091
【０１５９】
DMF（2mL）中のN4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕-5-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2,4-ジアミン（100mg、0.22ミリモル）の溶液に、1,4-ジブロモブタン（140mg、0.65ミリモル）及びDIPEA（113μL、0.65ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で16時間撹拌し、次いで更に２時間にわたって65℃で加熱した。次いでその反応混合物をEtOAcで希釈し、水(x4)で洗浄した。有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。10:1のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物49mgを白色の固体として得た。m/z 518.6〔M+1〕+
上記と同様の操作を使用して下記の化合物を調製した。
2,2'-（{トランス-4-〔（{2-〔(3-ブロモ-2-メチルベンジル)アミノ〕-5-ニトロピリミジン-4-イル}アミノ）メチル〕シクロヘキシル}イミノ）ジアセトアミド、m/z 565.0〔M+1〕+
N2-{トランス-4-〔（{2-〔(3-ブロモ-2-メチルベンジル)アミノ〕-5-ニトロピリミジン-4-イル}アミノ）メチル〕シクロヘキシル}グリシンアミド、m/z 508.9〔M+2〕+
N2-(3-ブロモ-2-メチルベンジル)-5-ニトロ-N4-（{トランス-4-〔(2,2,2-トリフルオロエチル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 532.9〔M+1〕+
N2-(3-ブロモ-2-メチルベンジル)-N4-（{トランス-4-〔(2,2-ジフルオロエチル)アミノ〕シクロヘキシル}-メチル）-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 514.9〔M+1〕+
N4-（{トランス-4-〔(2-フルオロエチル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 487.0〔M+1〕+
N4-（{トランス-4-〔(2,2-ジフルオロエチル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 505.0〔M+1〕+
5-ニトロ-N4-（{トランス-4-〔(2-ピリジン-3-イルエチル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 546.6〔M+1〕+
【０１６０】
3-(2-ブロモ-エチル)-ピリジンの調製
THF（2mL）中の2-(3-ピリジル)エタン-1-オール（100mg、0.79ミリモル）及びCBr4（314mg、0.95ミリモル）の溶液を０℃に冷却し、PPh3（313mg、1.18ミリモル）を滴下して添加した。氷浴を除去し、その反応混合物を室温で16時間撹拌した。その混合物を濃縮し、CH2Cl2で希釈した。飽和NaHCO3を使用してその混合物を塩基性にし、有機相を分離した。水相を再度CH2Cl2で抽出し、合わせた有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。95:5のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用してシリカゲル分取TLCにかけて3-(2-ブロモ-エチル)-ピリジンを得た。
実施例7.  5-ニトロ-N4-〔（トランス-4-ピロリジン-1-イルシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０１６１】
【化９０】
2008505910.tif 000092
【０１６２】
DMF（1mL）中のN4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕-ピリミジン-2,4-ジアミン（86mg、0.2ミリモル）の溶液に、1,4-ジブロモブタン（710μL、0.59ミリモル）及びDIPEA（103μL、0.59ミリモル）を添加した。その反応混合物を65℃で４時間撹拌した。次いでその反応混合物をEtOAcで希釈し、飽和NaHCO3及び水(x4)で洗浄した。有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。10:1:0.05のCH2Cl2:MeOH:NH4OHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物60mg（62％）をオフホワイトの固体として得た。m/z 493.3〔M-1〕+
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
1-(トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}-シクロヘキシル)ピロリジン-3-オール、m/z 509.3〔M-1〕+
N4-〔（トランス-4-モルホリン-4-イルシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 511.7〔M+1〕+
5-ニトロ-N4-〔（トランス-4-ピペリジン-1-イルシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 509.7〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アゼチジン-1-イルシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 479.5〔M-1〕+
1-(トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}-シクロヘキシル)アゼチジン-3-オール、m/z 497.6〔M+1〕+
1-(トランス-4-{〔(2-{〔2-クロロ-3-(ジメチルアミノ)ベンジル〕アミノ}-5-ニトロピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル)アゼチジン-3-オール、m/z 490.6〔M+1〕+
1-(トランス-4-{〔(2-{〔(4-クロロピリジン-3-イル)メチル〕アミノ}-5-ニトロピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル)アゼチジン-3-オール、m/z 448.5〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アゼチジン-1-イルシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔(2-メトキシピリジン-3-イル)メチル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 428.6〔M+1〕+
1-(トランス-4-{〔(2-{〔(2-メトキシピリジン-3-イル)メチル〕アミノ}-5-ニトロピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル)アゼチジン-3-オール、m/z 444.5〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アゼチジン-1-イルシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔(4-クロロピリジン-3-イル)メチル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 432.5〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アゼチジン-1-イルシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-{〔4-(トリフルオロメチル)ピリジン-3-イル〕メチル}ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 466.5〔M+1〕+
1-〔トランス-4-（{〔(5-ニトロ-2-（{〔4-(トリフルオロメチル)ピリジン-3-イル〕メチル}アミノ）ピリミジン-4-イル)〕アミノ}メチル）シクロヘキシル〕アゼチジン-3-オール、m/z 482.5〔M+1〕+
実施例8.  N4-{〔トランス-4-(ジメチルアミノ)シクロヘキシル〕メチル}-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０１６３】
【化９１】
2008505910.tif 000093
【０１６４】
ジクロロエタン（2mL）中のN4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕-ピリミジン-2,4-ジアミン（100mg、0.23ミリモル）の溶液に、37％のホルムアルデヒド（74mg、0.91ミリモル）及びトリアセトキシホウ水素化ナトリウム（144mg、0.68ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で２時間撹拌した。その反応混合物をpH9まで飽和NaHCO3と1M Na2CO3の混合物で処理し、CH2Cl2(x2)で抽出した。合わせた有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。10:1:0.2のCH2Cl2:MeOH:NH4OHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物59mgを黄色の固体として得た。m/z 469.7〔M+1〕+
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
N4-{〔トランス-4-(ジエチルアミノ)シクロヘキシル〕メチル}-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 497.8〔M+1〕+
N4-{〔トランス-4-(エチルアミノ)シクロヘキシル〕メチル}-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 469.4〔M+1〕+
実施例9.  N4-{〔トランス-4-(ベンジルアミノ)シクロヘキシル〕メチル}-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０１６５】
【化９２】
2008505910.tif 000094
【０１６６】
DMF（3mL）中のN4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン（100mg、0.23ミリモル）の溶液に、臭化ベンジル（39mg、0.23ミリモル）、続いてDIPEA（40μL、0.23ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で20時間撹拌した。その反応混合物をEtOAcで希釈し、水(x4)で洗浄した。有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。10:1のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物8mgを得た。m/z 531.6〔M+1〕+
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
5-ニトロ-N4-（{トランス-4-〔(ピリジン-4-イルメチル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 532.6〔M+1〕+
5-ニトロ-N4-（{トランス-4-〔(ピリジン-3-イルメチル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 532.4〔M+1〕+
2-〔（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}-シクロヘキシル）アミノ〕エタノール、m/z 485.7〔M+1〕+
2,2'-〔（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}-シクロヘキシル）イミノ〕ジエタノール、m/z 529.7〔M+1〕+
N4-{〔トランス-4-(ジベンジルアミノ)シクロヘキシル〕メチル}-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 621.7〔M+1〕+
N4-（{トランス-4-〔ビス(ピリジン-2-イルメチル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 623.7〔M+1〕+
N2-(トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル)グリシンアミド、m/z 496.3〔M-1〕+
N2-〔トランス-4-（{〔5-ニトロ-2-（{〔4-(トリフルオロメチル)ピリジン-3-イル〕メチル}アミノ）ピリミジン-4-イル〕アミノ}メチル）シクロヘキシル〕グリシンアミド、m/z 483.4〔M+1〕+
実施例10. 4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル
【０１６７】
【化９３】
2008505910.tif 000095
【０１６８】
無水酢酸（160mL）中のN-シアノアセチルウレタン（100g、640.5ミリモル）の混合物に、トリエチルクロロホルメート（26.6mL、160ミリモル）を添加した。その混合物を2.5時間にわたって還流して撹拌した。次いでそれを25℃に冷却し、その後に結晶が生成した。その反応混合物を濾過し、集めた固体をヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させて所望の生成物21.4g（67％）を得た。
水酸化アンモニウム（150mL）を25℃のH2O（150mL）中の上記アクリルアミド（54.5g、258.29ミリモル）に添加し、続いて10分間にわたってH2O（150mL）中のNaOH（32g）に滴下して添加した。次いでその混合物を１時間にわたって撹拌しながら70℃で加熱し、次いで25℃に冷却した。その反応混合物を塩基性である間に濾過し、次いでHClでpH4に酸性にし、濾過してウラシル25.4gを得た。
上記ウラシル（15.41g、112.5ミリモル）及びオキシ塩化リン（157.4mL、1.69モル）の混合物に、N,N-ジエチルアニリン（34.2mL、225ミリモル）を25℃で慎重に添加した。次いでその反応液を３時間にわたって115℃で加熱し、その後にその混合物を40℃に冷却し、真空で濃縮して過剰のPOCl3を除去した。残っている液体を迅速に撹拌しながら氷水に徐々に注ぎ、沈殿した生成物を濾過した。次いで水層をクロロホルムで抽出し、抽出液を1NのHClで洗浄し、その後に真空で濃縮した。この物質を既に濾過した物質と合わせて2,4-ジクロロ-ピリミジン-5-カルボニトリル（15.36g、79％）を得た。
【０１６９】
2,4-ジクロロ-ピリミジン-5-カルボニトリル（50mg、0.287ミリモル）をDMF（1mL）に溶解し、2-(トリフルオロメトキシル)ベンジルアミン（57mg、0.287ミリモル）、続いてDIPEA（51μL、0.287ミリモル）をその溶液に添加した。その反応混合物を室温で１時間撹拌した。次いでその溶液をEtOAcで希釈し、水(x4)で洗浄した。次いで有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。CH2Cl2を溶離剤として使用して残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して(4-クロロ-5-ニトリル-ピリミジン-2-イル)-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジル)-アミン51mg（54％）を白色の固体として得た。
(4-クロロ-5-シアノピリミジン-2-イル)-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジル)-アミン（50mg、0.16ミリモル）をDMF（1mL）に溶解し、tert-ブチルトランス-4-アミノメチルシクロヘキシルカルバメート（70mg、0.30ミリモル）、続いてDIPEA（53μL、0.30ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で16時間撹拌した。次いでその反応混合物をEtOAcで希釈し、水(x3)で洗浄した。有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。95:5のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して(4-{〔5-シアノ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル76mg（96％）を得た。
上記tert-ブチルエステル（75mg、0.14ミリモル）をCH2Cl2（10mL）に溶解し、TFA（0.7mL）をその溶液に添加した。その反応混合物を室温で１時間撹拌し、飽和NaHCO3で反応停止した。有機相を水相から分離し、次いでこれをCH2Cl2(x2)で再度抽出した。合わせた有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。10:1:0.1のCH2Cl2:MeOH:NH4OHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物46mg（77％）を得た。m/z 419.4 (M-1)+
上記と同様の操作を使用して下記の化合物を調製した。
4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-2-{〔(2-クロロピリジン-3-イル)メチル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル、m/z 372.8〔M+1〕+
4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-2-{〔(2-メトキシピリジン-3-イル)メチル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル、m/z 368.7〔M+1〕+
4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-2-{〔(4-メトキシピリジン-3-イル)メチル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル、m/z 368.6〔M+1〕+
実施例11. 4-（{〔トランス-4-（ジメチルアミノ）シクロヘキシル〕メチル}アミノ）-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル
【０１７０】
【化９４】
2008505910.tif 000096
【０１７１】
ジクロロエタン（2mL）中の4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル（100mg、0.24ミリモル）の溶液に、37％のホルムアルデヒド（100mg、1.2ミリモル）及びNaBH(OAc)3（151mg、0.71ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で２時間撹拌した。次いでその反応混合物を飽和NaHCO3と1M Na2CO3の混合物でpH9に塩基性にした。有機相を水(x1)で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。10:1:0.2のCH2Cl2:MeOH:NH4OHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物39mg（36％）を白色の固体として得た。m/z 449.5 (M+1)+
実施例12. 4-（{〔トランス-4-(エチルアミノ)シクロヘキシル〕メチル}アミノ）-2-{〔2-（トリフルオロメトキシ）ベンジル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル
【０１７２】
【化９５】
2008505910.tif 000097
【０１７３】
4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-2-{〔2-（トリフルオロメトキシ）ベンジル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル（150mg、0.36ミリモル）をMeOH中の１％のAcOHの溶液に溶解した。その溶液を０℃に冷却し、この冷溶液にNaBH(OAc)3及びアセトアルデヒドを添加した。その反応混合物を室温で16時間撹拌した。次いでその反応混合物を飽和NaHCO3で処理し、EtOAcで抽出した。有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。9:1:0.1のCH2Cl2:MeOH:NH4OHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して標題化合物24mg（15％）を得た。m/z 449.4 (M+1)+
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
4-（{〔トランス-4-(ジエチルアミノ)シクロヘキシル〕メチル}アミノ）-2-{〔2-（トリフルオロメトキシ）ベンジル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル m/z 477.7 (M+1)+
4-〔（{トランス-4-〔(ピリジン-2-イルメチル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）アミノ〕-2-{〔2-（トリフルオロメトキシ）ベンジル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル m/z 510.7〔M-1〕+
4-〔（{トランス-4-〔(ピリジン-3-イルメチル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）アミノ〕-2-{〔2-（トリフルオロメトキシ）ベンジル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル m/z 510.5〔M-1〕+
4-〔（{トランス-4-〔(ピリジン-4-イルメチル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）アミノ〕-2-{〔2-（トリフルオロメトキシ）ベンジル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル m/z 510.4〔M-1〕+
4-〔（{トランス-4-〔(2,2-ジメチルプロピル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）アミノ〕-2-{〔2-（トリフルオロメトキシ）ベンジル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル m/z 489.4〔M-1〕+
4-〔（{トランス-4-〔(シクロプロピルメチル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）アミノ〕-2-{〔2-（トリフルオロメトキシ）ベンジル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル m/z 475.7〔M-1〕+
4-（{〔トランス-4-(イソプロピルアミノ)シクロヘキシル〕メチル}アミノ）-2-{〔2-（トリフルオロメトキシ）ベンジル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル m/z 461.5〔M-1〕+
実施例13. 4-{〔（トランス-4-アゼチジン-1-イルシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-2-{〔2-（トリフルオロメトキシ）ベンジル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル
【０１７４】
【化９６】
2008505910.tif 000098
【０１７５】
DMF（1mL）中の4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-2-{〔2-（トリフルオロメトキシ）ベンジル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル（150mg、0.36ミリモル）の溶液に、1,3-ジブロモ-プロパン（86mg、0.43ミリモル）及びDIPEA（124μL、0.71ミリモル）を添加した。その反応混合物を50℃で24時間撹拌した。次いでその反応混合物をEtOAcで希釈し、NaHCO3(x1)及び水(x4)で洗浄した。有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。10:1:0.2のCH2Cl2:MeOH:NH4OHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物54mg（33％）を白色の固体として得た。m/z 461.6 (M+1)+
上記と同様の操作を使用して下記の化合物を調製した。
4-{〔（トランス-4-ピロリジン-1-イルシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-2-{〔2-（トリフルオロメトキシ）ベンジル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル m/z 473.4 (M-1)+
4-（{〔トランス-4-(3-ヒドロキシピロリジン-1-イル)シクロヘキシル〕メチル}アミノ）-2-{〔2-（トリフルオロメトキシ）ベンジル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル m/z 489.2 (M-1)+
4-（{〔トランス-4-(3-ヒドロキシアゼチジン-1-イル)シクロヘキシル〕メチル}アミノ）-2-{〔2-（トリフルオロメトキシ）ベンジル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル m/z 475.4〔M-1〕+
実施例14. N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-{2-〔(2-アミノフェニル)チオ〕ベンジル}-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン
【０１７６】
【化９７】
2008505910.tif 000099
【０１７７】
CH2Cl2（2mL）とDMF（1mL）の混合物中の{4-〔(2-クロロ-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（100mg、0.26ミリモル）の溶液に、2-ヨードベンジルアミン（192mg、0.82ミリモル）及びDIPEA（135μL、1.04ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で16時間撹拌し、真空で濃縮した。得られる残渣をEtOAcで希釈し、水(x3)次いで食塩水で洗浄した。有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。98:2のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して(4-{〔2-(2-ヨード-ベンジルアミノ)-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル97mg（64％）を得た。
イソプロパノール（4mL）中の上記(4-{〔2-(2-ヨード-ベンジルアミノ)-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル（95mg、0.16ミリモル）、CuI（3mg、0.016ミリモル）、K2CO3（50mg、0.36ミリモル）、エチレングリコール（27μL、0.49ミリモル）の混合物をシールした管中に入れ、マイクロウェーブ中で150℃で２時間加熱した。その反応混合物を水（6mL）で処理し、有機層を分離した。水層をEtOAc(3x)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。95:5のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して〔4-（{2-〔2-(2-アミノ-フェニルスルファニル)-ベンジルアミノ〕-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ}-メチル）-シクロヘキシル〕-カルバミン酸tert-ブチルエステル35mg（37％）を得た。
CH2Cl2（10mL）中の上記〔4-（{2-〔2-(2-アミノ-フェニルスルファニル)-ベンジルアミノ〕-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ}-メチル）-シクロヘキシル〕-カルバミン酸tert-ブチルエステル（35mg、0.06ミリモル）の溶液に、TFA（1.2mL）を添加した。その反応混合物を室温で２時間撹拌した。次いでその反応混合物を飽和NaHCO3で処理した。処理中、若干のMeOHを添加して生成物を有機相に可溶化した。次いで有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。10:1:0.1のCH2Cl2:MeOH:NH4OHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物20mg（70％）をオフホワイトの固体として得た。m/z 477.9 (M-1)+
【０１７８】
2-ヨードベンジルアミンの調製
トルエン（65mL）中の2-ヨードベンジルアルコール（6.0g、25.4ミリモル）及びDPPA（6.8mL、30.5ミリモル）の溶液に、DBU（5.0mL、33.0ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で16時間撹拌した。次いでその反応混合物を3M HCl（60mL）及びエーテル（150mL）で希釈した。有機相を分離し、水相をエーテル(x3)で抽出した。合わせた有機抽出液を水(x2)次いで食塩水で洗浄した。その溶液を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。95:5のヘキサン:EtOAcを使用してシリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけて1-アジドメチル-2-ヨード-ベンゼン6.1g（93％）を得た。
無水THF（100mL）中の1-アジドメチル-2-ヨード-ベンゼン（6.1g、23.4ミリモル）の溶液に、０℃でトリフェニルホスフィン（6.8g、25.7ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温に徐々に温め、16時間撹拌した。その混合物を水酸化アンモニウム（20mL）で希釈し、３時間撹拌した。次いでその混合物を2M NaOH（30mL）で処理し、１時間撹拌した。3M HClを添加することによりその反応混合物をpH2に酸性にした。その混合物をエーテルで希釈し、層を分離した。2M NaOHを添加することにより水層をpH9に塩基性にし、次いでCH2Cl2(x3)で抽出した。合わせた有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮して油状残渣を得た。得られる残渣をエーテルで処理し、濾過した。95:5のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して濾液をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して2-ヨードベンジルアミン5.4g（80％）を得た。
実施例15. N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-クロロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０１７９】
【化９８】
2008505910.tif 000100
【０１８０】
POCl3（50mL、326.1ミリモル）中の5-クロロウラシル（15.0g、102.4ミリモル）の懸濁液に、N,N-ジエチルアニリン（7.5mL）を添加した。その反応混合物を110℃で24時間加熱した。その反応混合物を室温に冷却し、真空で約25mLに濃縮した。次いで得られる残渣を氷に注ぎ、全ての氷が融解するまで撹拌した。水層をエーテル(x3)で抽出した。合わせた有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。得られる残渣を真空下で約90℃で蒸留して5-クロロ-2,4-ジクロロピリミジン12.5g（81％）を得た。
EtOH（2mL）中の上記5-クロロ-2,4-ジクロロピリミジン（73mg、0.4ミリモル）の溶液に、tert-ブチルトランス-4-アミノメチルシクロヘキシルカルバメート（100mg、0.44ミリモル）及びDIPEA（77μL、0.44ミリモル）を添加した。その反応混合物を40℃で１時間加熱した。その反応混合物を真空で濃縮し、得られる残渣をEtOAcで希釈した。その溶液を食塩水で洗浄した。水層をEtOAc(x2)で再度抽出した。合わせた有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮して{4-〔(2,5-ジクロロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル148mg（99％）を得た。
上記{4-〔(2,5-ジクロロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（97mg、0.26ミリモル）を2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミン（2.5mL）に溶解し、その混合物を20分間にわたって180℃に加熱した。その反応混合物をEtOAcで希釈し、1N HCl溶液に注いだ。水層を分離し、EtOAc(x2)で抽出した。合わせた有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。得られる残渣をCH2Cl2（2.5mL）に溶解し、TFA（2.5mL）を添加した。その反応混合物を室温で１時間撹拌した。次いでその混合物を10％のNaHCO3に注ぎ、水層をEtOAc(x2)で抽出した。合わせた有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。9:1:0.1のCH2Cl2:MeOH:NH4OHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物97mg（87％）を得た。m/z 430.5 (M+1)+
上記と同様の操作を使用して下記の化合物を調製した。
N4-〔（シス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-クロロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 430.2 (M+1)+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-ベンジル-5-クロロピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 346.5 (M+1)+
実施例16. N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-フルオロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０１８１】
【化９９】
2008505910.tif 000101
【０１８２】
五塩化リン（8.0g、38.4ミリモル）を5-フルオロウラシル（10.0g、76.9ミリモル）及びオキシ塩化リン（30mL）の混合物に添加した。その反応混合物を14時間にわたって窒素雰囲気下で加熱、還流した。その反応混合物を室温に冷却し、次いで氷に注いだ。フラスコからの残っている残渣を飽和Na2CO3に溶解し、氷混合物に注いだ。その混合物をEtOAc(x3)で抽出し、有機相を無水Na2SO4で乾燥させた。その溶液を真空で濃縮して5-フルオロ-2,4-ジクロロピリジン9.1g（71％）を淡黄色の油として得た。
EtOH（2mL）中の上記5-フルオロ-2,4-ジクロロピリジン（67mg、0.4ミリモル）の溶液に、tert-ブチルトランス-4-アミノメチルシクロヘキシルカルバメート（100mg、0.44ミリモル）及びDIPEA（77μL、0.44ミリモル）を添加した。その反応混合物を40℃で１時間加熱した。その混合物を真空で濃縮し、得られる残渣をEtOAcに溶解し、食塩水で洗浄した。水層をEtOAc(x2)で再度抽出した。合わせた有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮して{4-〔(2-クロロ-5-フルオロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル127mg（89％）を得た。
{4-〔(2-クロロ-5-フルオロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（127mg、0.35ミリモル）を2-トリフルオロメトキシベンジルアミン（2.5mL）に溶解し、180℃で20分間加熱した。その反応混合物をEtOAcで希釈し、1N HClに注いだ。水層を分離し、EtOAc(x2)で抽出した。合わせた有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。得られる残渣をCH2Cl2（2.5mL）に溶解し、TFA（2.5mL）を添加した。その反応混合物を室温で１時間撹拌した。その反応混合物を真空で濃縮し、得られる残渣をEtOAcで希釈した。その溶液を10％のNaHCO3に注ぎ、水層をEtOAcで再度抽出した。合わせた有機相を無水Na2SO4で乾燥させ、真空で濃縮した。9:1:0.1のCH2Cl2:MeOH:NH4OHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物22mg（15％）を得た。m/z 414.6 (M+1)+
実施例17. N4-〔（トランス-4-{〔(1,5-ジメチル-1H-ピラゾール-4-イル)メチル〕アミノ}シクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０１８３】
【化１００】
2008505910.tif 000102
【０１８４】
CH2Cl2（15mL）中のN4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン（100mg、0.23ミリモル）及び1,5-ジメチル-1H-ピラゾール-4-カルボアルデヒド（23mg、0.19ミリモル）の混合物を室温で１時間撹拌した。次いでNaBH(OAc)3（200mg、0.95ミリモル）をその反応混合物に添加し、更に16時間撹拌した。その反応混合物を1M Na2CO3でpH9-10に希釈し、有機相を分離した。水相をCH2Cl2で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。98:2のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物54mg（52％）を淡黄色のフォームとして得た。m/z 549.7〔M+1〕+
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
N4-〔（トランス-4-{〔(3,5-ジメチルイソオキサゾール-4-イル)メチル〕アミノ}シクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 550.6〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-{〔(4-クロロ-1-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)メチル〕アミノ}シクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 569.6〔M+1〕+
5-ニトロ-N4-（{トランス-4-〔(ピリミジン-5-イルメチル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 533.6〔M+1〕+
【０１８５】
N4-〔（トランス-4-{〔(1,2-ジエチル-1H-イミダゾール-4-イル)メチル〕アミノ}シクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 575.6〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-{〔(3,5-ジクロロピリジン-4-イル)メチル〕アミノ}シクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 600.6〔M+1〕+
5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕-N4-{〔トランス-4-（{〔6-(トリフルオロメチル)ピリジン-3-イル〕メチル}アミノ）シクロヘキシル〕メチル}ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 600.7〔M+1〕+
5-ニトロ-N4-（{トランス-4-〔(キノリン-3-イルメチル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 582.5〔M+1〕+
5-ニトロ-N4-（{トランス-4-〔(ピリジン-2-イルメチル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 532.6〔M+1〕+
N4-（{トランス-4-〔(2-フルオロベンジル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 549.5〔M+1〕+
N4-（{トランス-4-〔(3-フルオロベンジル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 549.6〔M+1〕+
N4-（{トランス-4-〔(4-フルオロベンジル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 549.6〔M+1〕+
【０１８６】
5-ニトロ-N4-（{トランス-4-〔(キノリン-4-イルメチル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 582.6〔M+1〕+
5-ニトロ-N4-（{トランス-4-〔(2-フェニルエチル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 545.6〔M+1〕+
2-〔（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アミノ〕プロパン-1,3-ジオール、m/z 515.8〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-{〔(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)メチル〕アミノ}シクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 535.6〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-{〔(1,3-ジメチル-1H-ピラゾール-4-イル)メチル〕アミノ}シクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 549.6〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-{〔(1,3-ジメチル-1H-ピラゾール-5-イル)メチル〕アミノ}シクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 549.6〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-{〔(1,5-ジメチル-1H-ピラゾール-4-イル)メチル〕アミノ}シクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-{〔4-(トリフルオロメチル)ピリジン-3-イル〕メチル}ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 534.5〔M+1〕+
2-{〔（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アミノ〕メチル}安息香酸、(BI0061120)m/z 575〔M+1〕+
実施例18. N4-〔（トランス-4-アゼチジン-1-イルシクロヘキシル）メチル〕-5-クロロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０１８７】
【化１０１】
2008505910.tif 000103
【０１８８】
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-クロロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン（178mg、0.41ミリモル）をDMA（5mL）に溶解した。この溶液に、1,3-ジブロモプロパン（208μL、2.01ミリモル）及びNaCO3（217mg、2.01ミリモル）を添加した。その反応液をマイクロウェーブ中で100℃で５分間加熱した。揮発物を除去し、その反応液をEtOAcで希釈し、H2Oに注いだ。水相を分離し、EtOAcでもう２回抽出した。有機層を合わせ、乾燥させ（Na2SO4）、デカントし、濃縮した。粗生成物を2000ミクロンのSiO2分取TLCプレートで精製し、10:1のCH2Cl2:MeOH（１％のNH4OH）で溶離して標題化合物102mg（53％）を得た。m/z 470.5〔M+1〕+
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
5-クロロ-N4-〔（トランス-4-ピロリジン-1-イルシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 484.6〔M+1〕+
1-(トランス-4-{〔(5-クロロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル)アゼチジン-3-オール、m/z 486.6〔M+1〕+
実施例19. 5-フルオロ-N4-〔（トランス-4-ピロリジン-1-イルシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０１８９】
【化１０２】
2008505910.tif 000104
【０１９０】
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-フルオロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン（71mg、0.17ミリモル）をDMA（2mL）に溶解した。この溶液に1,4-ジブロモブタン（81μL、0.68ミリモル）及びNaCO3（72mg、0.68ミリモル）を添加した。その反応液をマイクロウェーブ中で100℃で20分間加熱した。揮発物を除去し、その反応液をEtOAcで希釈し、H2Oに注いだ。水相を分離し、EtOAcでもう２回抽出した。有機層を合わせ、乾燥させ（Na2SO4）、デカントし、濃縮した。粗生成物を1000ミクロンのSiO2分取TLCに２回流すことにより精製し、10:1のCH2Cl2:MeOH（１％のNH4OH）で溶離して標題化合物36mg（45％）を得た。m/z 468.6〔M+1〕+
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
N4-〔（トランス-4-アゼチジン-1-イルシクロヘキシル）メチル〕-5-フルオロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 454.5〔M+1〕+
1-(トランス-4-{〔(5-フルオロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル)アゼチジン-3-オール、m/z 470.5〔M+1〕+
1-〔トランス-4-（{〔5-ニトロ-2-（{〔2-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)ピリジン-3-イル〕メチル}アミノ）ピリミジン-4-イル〕アミノ}メチル）シクロヘキシル〕アゼチジン-3-オール、m/z 512.5〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アゼチジン-1-イルシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-{〔2-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)ピリジン-3-イル〕メチル}ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 496.5〔M+1〕+
実施例20. N2-〔5-クロロ-2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕-5-ニトロ-N4-〔（トランス-4-ピロリジン-1-イルシクロヘキシル）メチル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０１９１】
【化１０３】
2008505910.tif 000105
【０１９２】
DMF（0.5mL）中のN4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔5-クロロ-2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン（51mg、0.1ミリモル）の溶液に、1,4-ジブロモブタン（36μL、0.3ミリモル）及びDIPEA（104μL、0.6ミリモル）を添加した。その反応混合物を50℃で24時間次いで室温で72時間撹拌した。次いでその反応混合物をEtOAc（20mL）と飽和NaHCO3（1mL以下）の間に分配した。有機相を水(2x2mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥させた。得られる残渣を分取HPLCにより精製して標題化合物13mg（25％）を黄色の油状固体として得た。m/z 529.3〔M+1〕+
実施例21. N2-（トランス-4-{〔(5-シアノ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）グリシンアミド
【０１９３】
【化１０４】
2008505910.tif 000106
【０１９４】
DMF（1mL）中の2-ブロモアセトアミド（30mg、0.21ミリモル）、4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-5-カルボニトリル（117mg、0.28ミリモル）及びDIPEA（74mL、0.43ミリモル）の混合物を50℃で４時間撹拌した。次いでその反応混合物をEtOAc（30mL）で希釈し、水(3x3mL)及び食塩水で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。10:1:0.05のCH2Cl2:MeOH:NH4OHを溶離剤として使用して粗生成物をシリカゲル分取TLCにかけて標題化合物28mg（27％）を白色の固体として得た。m/z 476.5〔M-1〕+
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
N2-(2-アミノ-2-オキソエチル)-N2-(トランス-4-{〔(5-シアノ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル)グリシンアミド、m/z 533.5〔M-1〕+
実施例22. 1-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アゼチジン-3-オン
【０１９５】
【化１０５】
2008505910.tif 000107
【０１９６】
DMSO（170μL、2.4ミリモル）をドライアイス／アセトン浴中で冷却した乾燥CH2Cl2（10mL）中の塩化オキサリル（105μL、1.2ミリモル）の溶液に滴下して添加した。その反応混合物を冷却しながら30分間撹拌した。乾燥CH2Cl2中の1-(トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル)アゼチジン-3-オール（200mg、0.4ミリモル）の溶液を滴下して添加し、その反応液を２時間撹拌した。次いでEt3N（501μL、3.6ミリモル）を添加し、その反応混合物を16時間撹拌し、室温に徐々に温めた。その混合物をCH2Cl2で希釈し、飽和Na2SO4水溶液に注いだ。水相を分離し、CH2Cl2(x2)で抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥させ、デカントし、濃縮した。粗生成物を120gのSiO2カラムによるフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、溶離剤としての90:9:1のCH2Cl2:MeOH:NH4OHで溶離して標題化合物147mg（74％）を得た。m/z 495.6〔M+1〕+
実施例23. 1-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アゼチジン-3-イルアセテート
【０１９７】
【化１０６】
2008505910.tif 000108
【０１９８】
1-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アゼチジン-3-オール（25mg、0.05ミリモル）をピリジン（12μL、0.15ミリモル）に溶解し、無水酢酸（14μL、0.15ミリモル）をその溶液に添加した。その反応液を20℃で18時間撹拌した。揮発物を真空で除去し、粗生成物を12gのSiO2カラムによるフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、溶離剤としての90:9:1のCH2Cl2:MeOH:NH4OHで溶離して標題化合物5mgを得た。m/z 539.6〔M+1〕+
実施例24. 2-メチル-1-〔（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アミノ〕プロパン-2-オール
【０１９９】
【化１０７】
2008505910.tif 000109
【０２００】
エタノール（1mL）中のN4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン（50mg、0.11ミリモル）及び1,2-エポキシ-2-メチルプロパノール（500μL）の反応混合物をマイクロウェーブ中で１時間にわたって100℃に加熱した。その反応混合物を濃縮し、10:1のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物28mg（47％）を白色の固体として得た。m/z 513.5〔M+1〕+
実施例25. 1-(トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル)アゼチジン-2-カルボキサミド
【０２０１】
【化１０８】
2008505910.tif 000110
【０２０２】
DMF（3mL）中のN4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン（300mg、0.69ミリモル）の溶液に、t-ブチル2,4-ジブロモブチレート（322μL、1.5ミリモル）及びDIPEA（297μL、1.7ミリモル）を添加した。その反応混合物を60℃で９時間撹拌した。次いでその反応混合物をEtOAcで希釈し、1M Na2CO3、水(x4)及び食塩水で洗浄した。次いで有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。98:2のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して1-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アゼチジン-2-カルボン酸tert-ブチルエステル116mgを得た。
CH2Cl2（5mL）中の1-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アゼチジン-2-カルボン酸tert-ブチルエステル（110mg、0.19ミリモル）の溶液にTFA（3mL）を添加した。その反応混合物を室温で16時間撹拌した。その混合物を濃縮し、4:1のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製してその酸を得た。
DMF（1.5mL）中の1-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アゼチジン-2-カルボン酸（170mg、0.27ミリモル）の溶液に、塩化アンモニウム（170mg、3.2ミリモル）、HATU（303mg、0.80ミリモル）及びDIPEA（370μL、2.1ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で16時間撹拌した。その反応混合物をEtOAcで希釈し、飽和NaHCO3、水(x3)及び食塩水で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。95:5のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物7mgを得た。m/z 522.6〔M-1〕+
実施例26. 4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メトキシ〕-5-ニトロ-N-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2-アミン
【０２０３】
【化１０９】
2008505910.tif 000111
【０２０４】
０℃のTHF（2mL）中のNaH（7mg、0.18ミリモル、ヘキサンですり砕くことにより鉱油を除去した）の懸濁液に、THF（1mL）中のそのアルコール（37mg、0.16ミリモル）の溶液をシリンジにより滴下して添加した。その濁った反応混合物を15分間撹拌し、イソシアネート（51mg、0.14ミリモル）をTHF溶液としてシリンジにより滴下して添加した。得られる透明なオレンジ色の反応混合物を０℃で２時間撹拌し、次いで室温に温め、更に18時間撹拌した。その反応混合物をEtOAc（30mL）と水（10mL）の間に分配し、若干のNH4Clを添加した。有機相を食塩水（10mL）で洗浄し、Na2SO4で乾燥させ、濾過し、濃縮した。得られるオレンジ色の油をフラッシュクロマトグラフィー（12gのシリカゲル）により精製し、5-20％のEtOAc/ヘキサンで溶離して生成物20mg（27％）を黄色の油として得た。
上記生成物をCH2Cl2（2mL）に溶解し、TFA（150μL）を添加した。その反応混合物を室温で２時間撹拌し、濃縮した。9:1:0.1のCH2Cl2:MeOH:NH4OHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物5mg（31％）を得た。m/z 442.6〔M+H〕+
実施例27. N-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）-2-ピリジン-4-イルアセトアミド
【０２０５】
【化１１０】
2008505910.tif 000112
【０２０６】
CH2Cl2（1mL）とDMF（0.1mL）の混合物中のN4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン（50mg、0.11ミリモル）、4-ピリジル酢酸塩酸塩（30mg、0.17ミリモル）、TBTU（56mg、0.17ミリモル）、及びDIPEA（69μL、0.40ミリモル）の混合物を室温で16時間撹拌した。次いでその反応混合物をCH2Cl2で希釈し、1M Na2CO3及び水で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。得られた生成物をジエチルエーテルで洗浄した後に95:5のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物35mg（55％）を得た。m/z 558.4〔M-1〕+
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
N-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）-2-ピリジン-3-イルアセトアミド、m/z 558.6〔M-1〕+
N-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）-2-ピリジン-2-イルアセトアミド、m/z 558.4〔M-1〕+
N-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）-2-フェニルアセトアミド、m/z 559.5〔M+1〕+
N-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アセトアミド、m/z 481.3〔M-1〕+
2-ヒドロキシ-N-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アセトアミド、m/z 497.7〔M-1〕+
N-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）ベンズアミド、m/z 545.6〔M+1〕+
N-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）ニコチンアミド、m/z 544.5〔M-1〕+
N-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）イソニコチンアミド、m/z 544.5〔M-1〕+
N-（4-{〔2-(3-ブロモ-2-メチル-ベンジルアミノ)-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ〕メチル}シクロヘキシル）アセトアミド、m/z 492.4〔M+1〕+
実施例28. N-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）メタンスルホンアミド
【０２０７】
【化１１１】
2008505910.tif 000113
【０２０８】
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン（50mg、0.11ミリモル）の溶液に、メタンスルホニルクロリド（18μL、0.23ミリモル）及びCH2Cl2（2mL）中のDIPEA（59μL、0.34ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で15分間撹拌し、CH2Cl2で希釈した。次いで有機相を1M Na2CO3及び水で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。98:2のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物28mg（47％）を得た。m/z 517.7〔M-1〕+
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
N-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）-1-フェニルメタンスルホンアミド、m/z 596.0〔M+1〕+
N-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）ベンゼンスルホンアミド、m/z 579.5〔M-1〕+
N-〔1-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アゼチジン-3-イル〕メタンスルホンアミド、m/z 574.3〔M+1〕+
N-{1-〔トランス-4-（{〔5-ニトロ-2-（{〔4-(トリフルオロメチル)ピリジン-3-イル〕メチル}アミノ）ピリミジン-4-イル〕アミノ}メチル）シクロヘキシル〕アゼチジン-3-イル}メタンスルホンアミド、m/z 559.63（M+1）+
N-〔1-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アゼチジン-3-イル〕ベンゼンスルホンアミド、m/z 636.37（M+1）+
実施例29. N-エチル-N'-(トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル)尿素
【０２０９】
【化１１２】
2008505910.tif 000114
【０２１０】
DMF（2mL）中のN4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン（100mg、0.23ミリモル）の溶液に、エチルイソシアネート（65mg、0.91ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で16時間撹拌した。得られる沈殿を濾過し、MeOH中ですり砕いた。固体を真空オーブン中で乾燥させて標題化合物47mg（41％）を得た。m/z 512.7〔M+1〕+
実施例30. N-(4-{〔(4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)アミノ〕メチル}フェニル)アセトアミド
【０２１１】
【化１１３】
2008505910.tif 000115
【０２１２】
CH2Cl2（5mL）中の{4-〔(2-(4-アミノベンジル)-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（100mg、0.21ミリモル）の溶液を０℃に冷却した。この溶液に塩化アセチル（18mg、0.23ミリモル）及びジイソプロピルエチルアミン（0.55mL、0.32ミリモル）を添加した。その反応混合物を０℃で10分間撹拌し、氷浴を除去した。その反応混合物を更に30分間撹拌した。次いでその反応混合物を飽和NaHCO3で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。95:5のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して(4-{〔2-(4-アセチルアミノ-ベンジルアミノ)-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステルを得た。この生成物をCH2Cl2（5mL）に溶解し、TFA（1mL）を添加した。その反応混合物を室温で２時間撹拌し、次いで1M Na2CO3で処理した。次いでその混合物をCH2Cl2で抽出した。MeOHを抽出中にその混合物に添加して生成物を有機相に可溶化した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。10:1:0.2のCH2Cl2:MeOH:NH4OHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物20mgを淡黄色の固体として得た（20％）。m/z 414.5〔M+1〕+
実施例31. N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔(2-イソプロポキシピリジン-3-イル)メチル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン
【０２１３】
【化１１４】
2008505910.tif 000116
【０２１４】
トルエン（30mL）中の2-クロロニコチノニトリル（1.0g、7.2ミリモル）、2-プロパノール（0.87g、14.4ミリモル）、KOH（0.81g、14.4ミリモル）及び18-クラウン-6（1.8g、2.89ミリモル）の混合物を60℃で16時間撹拌した。その反応混合物を水で反応停止し、有機相を分離し、次いで水(x5)で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮して粗2-イソプロポキシ-ニコチノニトリル（1.1g、94％）を得、これを更に精製しないで使用した。
先に得られた2-イソプロポキシ-ニコチノニトリル（200mg、1.2ミリモル）をMeOH（5mL）に溶解し、MeOH中のPd/C（湿潤、50％の含水量、200mg）のスラリーをその溶液に添加した。インハウス真空を使用してその反応混合物を脱気し、H2バルーンで飽和した。その反応混合物を室温で６時間撹拌した。次いでその混合物をセライトのパッドで濾過し、MeOHですすいだ。濾液を濃縮して粗(2-イソプロポキシ-ピリジン-3-イル)-メチルアミンを得、これを更に精製しないで次の反応に使用した（180mg、88％）。
【０２１５】
DMF（1mL）中の{4-〔(2-クロロ-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（150mg、0.39ミリモル）の溶液に、DMF（1mL）中の先に得られた(2-イソプロポキシ-ピリジン-3-イル)-メチルアミン（180mg、1.1ミリモル）の溶液、続いてDIPEA（135μL、0.78ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で30分間撹拌した。その反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和NaHCO3及び水(x4)で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。95:5のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して〔4-（{2-〔(2-イソプロポキシ-ピリジン-3-イルメチル)-アミノ〕-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ}-メチル）-シクロヘキシル〕-カルバミン酸tert-ブチルエステルを得、これをCH2Cl2に溶解し、TFAを添加した。その反応混合物を室温で２時間撹拌した。次いでその混合物を1M Na2CO3で処理し、CH2Cl2で抽出した。MeOHを抽出中にその混合物に添加して生成物を有機相に可溶化した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。10:1:0.2のCH2Cl2:MeOH:NH4OHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物75mgを淡黄色の固体として得た（46％）。m/z 416.4〔M+1〕+
上記と同様の操作を使用して下記の化合物を調製した。
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔(2-エトキシピリジン-3-イル)メチル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 400.2〔M-1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-{〔2-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)ピリジン-3-イル〕メチル}ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 456.4〔M+1〕+
実施例32. N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔(5-フルオロ-2-メトキシピリジン-3-イル)メチル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン
【０２１６】
【化１１５】
2008505910.tif 000117
【０２１７】
1,8-ジアザビシクロ〔5.4.0〕ウンデカ-7-エン（630mg、4.1ミリモル）を室温のトルエン（10mL）中の5-フルオロ-3-ヒドロキシメチル-2-メトキシピリジン（500mg、3.2ミリモル）及びジフェニルホスホリルアジド（1050mg、3.8ミリモル）の溶液に添加した。その反応混合物を室温で３時間撹拌した。次いでその反応混合物を1M HCl及びエーテルで希釈した。層を分離し、水層をエーテル(x2)で抽出した。合わせた有機相を水、食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥させた。CH2Cl2を溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して3-アジドメチル-5-フルオロ-2-メトキシ-ピリジン320mgを無色の油として得た（55％）。
MeOH（8mL）中の3-アジドメチル-5-フルオロ-2-メトキシ-ピリジン（320mg、1.8ミリモル）の溶液にMeOH（2mL）中のPd/C（湿潤、50％の含水量、100mg）のスラリーを添加した。インハウス真空を使用してその反応混合物を脱気し、次いでH2バルーンを反応フラスコに取り付けた。その反応混合物を室温で２時間撹拌した。次いでその混合物をセライトのパッドで濾過し、濾液を濃縮して(5-フルオロ-2-メトキシ-ピリジン-3-イル)-メチルアミン280mg（100％）を得た。この生成物を更に精製しないで次の反応に使用した。
DMF（2mL）中の{4-〔(2-クロロ-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}カルバミン酸tert-ブチルエステル（200mg、0.52ミリモル）の溶液に、DMF（1mL）中の(5-フルオロ-2-メトキシ-ピリジン-3-イル)-メチルアミン（120mg、0.78ミリモル）の溶液、続いてジイソプロピルエチルアミン（181μL、1.04ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で30分間撹拌した。その反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和NaHCO3及び水(x4)で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、濃縮した。95:5のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して〔4-({2-〔(5-フルオロ-2-メトキシ-ピリジン-3-イルメチル)-アミノ〕-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ}-メチル)-シクロヘキシル〕-カルバミン酸tert-ブチルエステルを得、次いでこれをCH2Cl2（5mL）に溶解し、TFA（1mL）を添加した。その反応混合物を室温で２時間撹拌した。次いでその混合物を1M Na2CO3で処理し、CH2Cl2で抽出した。MeOHを抽出中にその混合物に添加して生成物を有機相に可溶化した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。10:1:0.2のCH2Cl2:MeOH:NH4OHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物156mgを淡黄色の固体として得た（74％）。m/z 406.4〔M+1〕+
実施例33. N4-{〔トランス-4-(3-フルオロアゼチジン-1-イル)シクロヘキシル〕メチル}-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０２１８】
【化１１６】
2008505910.tif 000118
【０２１９】
CH2Cl2（25mL）中の1-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アゼチジン-3-オール（100mg、0.20ミリモル）の溶液に、室温のCH2Cl2（0.5mL）中のジエチルアミノ硫黄トリフルオリド（32μL、0.24ミリモル）の溶液を15分の期間にわたって滴下して添加した。その反応が完結した時、その混合物を飽和NaHCO3で処理し、５分間撹拌した。有機相を分離し、水洗した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。95:5のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物26mgを淡黄色の固体として得た（26％）。m/z 499.1〔M+1〕+
実施例34. 5-ニトロ-N4-（{トランス-4-〔(2,2,2-トリフルオロエチル)アミノ〕シクロヘキシル}メチル）-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０２２０】
【化１１７】
2008505910.tif 000119
【０２２１】
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン（200mg、0.45ミリモル）をCH3CN（4mL）中で懸濁させ、０℃に冷却した。CH3CN（1mL）中の2,2,2-トリフルオロエチルトリクロロメタンスルホネート（66mg、0.23ミリモル）をその反応混合物に滴下して添加し、その反応混合物を５時間にわたって90℃に加熱した。その反応混合物を濃縮し、得られる残渣を酢酸エチルで希釈した。その溶液を1M Na2CO3で処理し、有機相を分離した。水相をCH2Cl2で再度抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。98:2のCH2Cl2:MeOH、次いで7:3のヘキサン：酢酸エチルを使用してシリカゲル分取TLCにかけて標題化合物74mgを得た。m/z 523.0〔M+1〕+
実施例35. (1S)-2-〔（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アミノ〕-1-ピリジン-3-イルエタノール
【０２２２】
【化１１８】
2008505910.tif 000120
【０２２３】
THF（11mL）中の(S)-2-メチル-CBS-オキサザボロリジン（トルエン中1M、189μL、0.18ミリモル）及びボラン-メチルジスルフィド錯体（トルエン中2M、100μL）を室温で10分間撹拌した。次いで、BH3-S(CH3)2の残り（トルエン中2M、1.33mL、2.85ミリモル）、続いてTHF（11mL）中の3-(ブロモアセチル)ピリジン塩酸塩（0.5g、1.78ミリモル）の懸濁液をその反応溶液に添加した。その不均一反応混合物を室温で16時間撹拌した。次いでその反応混合物を０℃に冷却し、MeOH（1.5mL）で反応停止した。５分の撹拌後に、溶媒を除去し、得られる残渣をCH2Cl2で希釈した。その溶液を飽和NaHCO3で処理し、有機相を分離した。水相をCH2Cl2で再度抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。95:5のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して(S)-2-ブロモ-1-ピリジン-3-イル-エタノール0.24gを無色の油として得た（66％）。
THF（10mL）中の(S)-2-ブロモ-1-ピリジン-3-イル-エタノール（134mg、0.66ミリモル）の溶液に、4N NaOH溶液（8.3mL）を添加した。その反応混合物を室温で１時間撹拌した。有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濃縮した。99:1のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにかけて(S)-3-オキシラニル-ピリジン34mgを無色の油として得た（42％）。
CH3CN中のN4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン（124mg、0.28ミリモル）、(S)-3-オキシラニル-ピリジン（34mg、0.28ミリモル）及び過塩素酸リチウム（60mg、0.56ミリモル）の混合物をシールした管中で100℃に加熱し、１時間撹拌した。その反応混合物を濃縮し、酢酸エチルで希釈した。次いでその溶液を1M Na2CO3で処理し、有機相を分離した。水相を酢酸エチル(x2)で再度抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。10:1:0.05のCH2Cl2:MeOH:NH4OHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物15mgをオフホワイトの固体として得た（10％）。m/z 562.7〔M+1〕+
実施例36. 5-ニトロ-N4-{〔トランス-4-(ピリジン-2-イルアミノ)シクロヘキシル〕メチル}-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０２２４】
【化１１９】
2008505910.tif 000121
【０２２５】
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン（100mg、0.23ミリモル）、2-フルオロピリジン（0.5mL）及びジイソプロピルエチル（0.2mL）の混合物をマイクロウェーブ管に入れ、パーソナル・ケミストリィ・マイクロウェーブ中で１時間にわたって150℃に、１時間にわたって165℃に、次いで更に２時間にわたって185℃に加熱した。その反応混合物を濃縮し、得られる残渣を酢酸エチルで希釈した。有機相を10％のクエン酸及び食塩水で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。98:2のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物29mgを得た。m/z 518.9〔M+1〕+
実施例37. N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-(イソキノリン-1-イルメチル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン
【０２２６】
【化１２０】
2008505910.tif 000122
【０２２７】
1-イソキノリンカルボニトリル（2.0g、12.8ミリモル）をMeOH（160mL）に溶解した。この溶液に、水中のラネーニッケル懸濁液で満たした６パスツールピペット分を添加した。その反応フラスコを脱気し、N2で２回バックフラッシした。N2バルーンをH2バルーンと交換し、N2の排気後にフラスコをH2で充満した。その反応混合物を５時間撹拌し、次いでN2の流れのもとにセライトのパッドで濾過した。セライトパッドをMeOHでフラッシした。合わせた有機溶液を濃縮してイソキノリン-1-イル-メチルアミン1.32gを褐色の油として得た（65％）。
DMF（20mL）中のイソキノリン-1-イル-メチルアミン（1.32g、8.35ミリモル）及びジイソプロピルエチルアミン（2.7mL、15.5ミリモル）の溶液に、{4-〔(2-クロロ-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（1.5g、3.89ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で10分間撹拌した。溶媒を除去し、得られる残渣を酢酸エチル（350mL）とCH2Cl2（100mL）の混合物で希釈した。次いでその溶液を1M Na2CO3及び水で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。得られる固体を酢酸エチルで処理し（酢酸エチル中の生成物の不十分な溶解性）、未溶解固体をブフナーロートで濾過した。白色の固体を真空で乾燥させて〔4-（{2-〔（イソキノリン-1-イルメチル）-アミノ〕-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ}-メチル）-シクロヘキシル〕-カルバミン酸tert-ブチルエステル1.64gを得た。
〔4-（{2-〔（イソキノリン-1-イルメチル）-アミノ〕-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ}-メチル）-シクロヘキシル〕-カルバミン酸tert-ブチルエステル（1.64g、3.24ミリモル）をCH2Cl2（50mL）に溶解し、TFA（15mL）を添加した。その反応混合物を室温で30分間撹拌した。その反応混合物を1M Na2CO3で処理し、有機相を分離した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。CH2Cl2:MeOH:NH4OHの混合物を使用してシリカゲルで精製して標題化合物1.1g（84％）を得た。m/z 406.2 (M-1)+
上記と同様の操作を使用して下記の化合物を調製した。
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-{〔4-(トリフルオロメチル)ピリジン-3-イル〕メチル}ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 426.4 (M+1)+
実施例38. N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-(キノリン-5-イルメチル)ピリミジン-2,4-ジアミン
【０２２８】
【化１２１】
2008505910.tif 000123
【０２２９】
THF（10mL）中のキノリン-5-カルボン酸（500mg、2.83ミリモル）の溶液に、０℃でLiAlH4（1.0M、THF）を徐々に添加した。得られる残渣を３時間にわたって70℃に加熱し、室温で16時間撹拌した。その反応混合物を０℃に冷却し、水（1mL）及び10％のNaOH（1.5mL）溶液で反応停止した。その反応混合物を１時間撹拌した。その溶液をセライトのパッドで濾過し、THFですすいだ。濾液を濃縮し、95:5のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製してキノリン-5-イル-メタノール218mg（48％）を得た。
トルエン（2mL）中のキノリン-5-イル-メタノール（96mg、0.60ミリモル）及びDPPA（202μL、0.91ミリモル）の溶液に、DBU（166μL、1.09ミリモル）を室温で添加した。その反応混合物を室温で16時間撹拌した。その反応混合物を3M HCl（1.7mL）及び酢酸エチル（5mL）で希釈した。有機相を分離し、水相を酢酸エチル(x2)で再度抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。98:2のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して5-アジドメチル-キノリンを明褐色の油49mg（44％）として得た。
トリフェニルホスフィン（172mg、0.65ミリモル）を０℃のTHF（3mL）中の5-アジドメチル-キノリン（109mg、0.59ミリモル）の溶液に添加した。５分間の撹拌後に、その反応混合物を室温に温め、その温度で16時間撹拌した。その反応混合物を水酸化アンモニウム（0.55mL）で希釈し、３時間撹拌した。次いでその混合物を2M NaOH（0.8mL）で処理し、更に１時間撹拌した。その溶液を酢酸エチルで希釈し、有機相を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濃縮した。10:1:0.3のCH2Cl2:MeOH:Et3Nを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製してキノリン-5-イル-メチルアミン105mgを無色の固体として得た。
【０２３０】
DMF（2mL）とアセトニトリル（2mL）の混合物中のキノリン-5-イル-メチルアミン（100mg、0.39ミリモル）及びジイソプロピルエチルアミン（140μL、0.78ミリモル）の溶液に、{4-〔(2-クロロ-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（150mg、0.39ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で16時間撹拌した。その反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水(x2)で洗浄した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。95:5のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して〔4-（{5-ニトロ-2-〔（キノリン-5-イルメチル）-アミノ〕-ピリミジン-4-イルアミノ}-メチル）-シクロヘキシル〕-カルバミン酸tert-ブチルエステル197mgを明黄色の固体として得た（100％）。
〔4-（{5-ニトロ-2-〔（キノリン-5-イルメチル）-アミノ〕-ピリミジン-4-イルアミノ}-メチル）-シクロヘキシル〕-カルバミン酸tert-ブチルエステル（197mg、0.39ミリモル）をCH2Cl2（10mL）に溶解し、TFA（2mL）を添加した。その反応混合物を室温で１時間撹拌した。その反応混合物を3M Na2CO3で処理し、有機相を分離した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。10:1:0.3のCH2Cl2:MeOH:Et3Nの混合物を使用してシリカゲルで精製して標題化合物120mgを明黄色の固体として得た（79％）。m/z 406.4〔M-1〕+
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔(3-クロロピリジン-4-イル)メチル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 392.5〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔(2-メチルピリジン-3-イル)メチル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン m/z 372.6〔M+1〕+
実施例39. N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イルエチル)ピリミジン-2,4-ジアミン
【０２３１】
【化１２２】
2008505910.tif 000124
【０２３２】
CH2Cl2（10mL）とDMF（1mL）の混合物中のN-(tert-ブトキシカルボニル)グリシン（500mg、2.8ミリモル）、ピペリジン（0.6mL、5.6ミリモル）の溶液に、TBTU（1.4g、4.2ミリモル）及びジイソプロピルエチルアミン（970μL）を添加した。その反応混合物を室温で16時間撹拌した。その反応混合物を濃縮し、得られる残渣を酢酸エチルで希釈した。有機相を水(x3)及び食塩水で洗浄した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。98:2のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用してシリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけて(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イル-エチル)-カルバミン酸tert-ブチル590mgを無色の固体として得た（87％）。
(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イル-エチル)-カルバミン酸tert-ブチルをCH2Cl2（10mL）に溶解し、TFA（3mL）をその溶液に添加した。その反応混合物を室温で16時間撹拌した。その混合物を濃縮し、2-アミノ-1-ピペリジン-1-イル-エタノンの得られる残渣を更に精製しないでトリフルオロ酢酸塩として次の反応に使用した。
DMF（3mL）中の{4-〔(2-クロロ-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（100mg、0.26ミリモル）の溶液に、2-アミノ-1-ピペリジン-1-イル-エタノントリフルオロ酢酸塩（200mg、0.78ミリモル）及びジイソプロピルエチルアミン（272μL、1.6ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で48時間撹拌した。その混合物を酢酸エチルで希釈し、水(x3)で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。95:5のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して(4-{〔5-ニトロ-2-(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イル-エチルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル36mgをオフホワイトの固体として得た（28％）。
(4-{〔5-ニトロ-2-(2-オキソ-2-ピペリジン-1-イル-エチルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル（36mg、0.07ミリモル）をCH2Cl2（10mL）に溶解し、TFA（1mL）をその溶液に添加した。その反応混合物を室温で16時間撹拌した。その溶液を3M Na2CO3で処理してpH9にし、有機相を分離した。水相をCH2Cl2で抽出し、合わせた有機相をNa2SO4で乾燥させ、次いで濃縮した。10:1:0.3のCH2Cl2:MeOH:Et3Nを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物27mgを黄色の固体として得た（93％）。m/z 392.6〔M+1〕+
上記と同様の操作を使用して下記の化合物を調製した。
(3R)-1-〔N-(4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)グリシル〕ピペリジン-3-オール、m/z 406.4〔M-1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-(2-モルホリン-4-イル-2-オキソエチル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 394.5〔M+1〕+
実施例40. N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-(2-オキソ-2-ピロリジン-1-イルエチル)ピリミジン-2,4-ジアミン
【０２３３】
【化１２３】
2008505910.tif 000125
【０２３４】
MeOH（90mL）と水（30mL）の混合物中の{4-〔(4-tert-ブトキシカルボニルアミノ-シクロヘキシルメチル)-アミノ〕-5-ニトロピリミジン-2-イルアミノ}-酢酸メチルエステル（845mg、1.9ミリモル）の懸濁液に、水酸化リチウム一水和物（404mg、9.6ミリモル）を添加した。その不均一混合物を室温で１時間撹拌した。その混合物を濃縮し、1M HClを使用して得られる残渣をpH5に酸性にした。酢酸エチル(x3)を使用して生成物を抽出した。合わせた有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮して粗{4-〔(4-tert-ブトキシカルボニルアミノ-シクロヘキシルメチル)-アミノ〕-5-ニトロ-ピリミジン-2-イルアミノ}-酢酸1.0gを白色の固体として得た。この生成物を更に精製しないで次の反応に使用した。
DMF（1.5mL）中の{4-〔(4-tert-ブトキシカルボニルアミノ-シクロヘキシルメチル)-アミノ〕-5-ニトロ-ピリミジン-2-イルアミノ}-酢酸（120mg、0.28ミリモル）に、ピロリジン（48μL、0.57ミリモル）、TBTU（141mg、0.43ミリモル）、及びジイソプロピルエチルアミン（99μL、0.57ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で16時間撹拌した。その混合物を酢酸エチルで希釈し、水(x2)及び食塩水で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。95:5のCH2Cl2:MeOHを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して(4-{〔5-ニトロ-2-(2-オキソ-2-ピロリジン-1-イル-エチルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル19mgを明褐色の固体として得た。
【０２３５】
(4-{〔5-ニトロ-2-(2-オキソ-2-ピロリジン-1-イル-エチルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル（19mg、0.04ミリモル）をCH2Cl2（5mL）に溶解し、TFA（1mL）を添加した。その反応混合物を室温で１時間撹拌した。その溶液を飽和NaHCO3で処理し、有機相を分離した。水相をCH2Cl2で抽出し、合わせた有機相をNa2SO4で乾燥させ、濃縮した。10:1:0.3のCH2Cl2:MeOH:Et3Nを溶離剤として使用して得られる残渣をシリカゲル分取TLCにより精製して標題化合物13mgを明黄色の固体として得た（83％）。m/z 376.3〔M-1〕+
上記と同様の操作を使用して下記の化合物を調製した。
1-〔N-(4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)グリシル〕ピペリジン-4-オール、m/z 408.6〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-(2-オキソ-2-ピペラジン-1-イルエチル)ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 393.6〔M+1〕+
(3R)-1-〔N-(4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)グリシル〕ピロリジン-3-オール、m/z 394.6〔M+1〕+
1-〔N-(4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)グリシル〕ピペリジン-4-カルボキサミド、m/z 433.3〔M-1〕+
(3S)-1-〔N-(4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)グリシル〕ピロリジン-3-オール、m/z 392.3〔M-1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-(2-アゼチジン-1-イル-2-オキソエチル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 364.6〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔(1S)-2-オキソ-1-フェニル-2-ピペリジン-1-イルエチル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 468.5〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔(1R)-2-オキソ-1-フェニル-2-ピペリジン-1-イルエチル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 468.5〔M+1〕+
実施例41. N4-{〔トランス-4-(3-アミノアゼチジン-1-イル)シクロヘキシル〕メチル}-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０２３６】
【化１２４】
2008505910.tif 000126
【０２３７】
1-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}-シクロヘキシル）アゼチジン-3-オール（111mg、0.22ミリモル、実施例７を参照のこと）、フタルイミド（50mg、0.33ミリモル）及びPPh3（127mg、0.48ミリモル）をTHF（5mL）中で合わせた。この混合物にDEAD（61mg、0.35ミリモル）を添加し、その反応液を25℃で18時間撹拌した。その反応液をEtOAcで希釈し、10％のNaHCO3水溶液に注いだ。水相を分離し、EtOAcでもう２回抽出した。有機層を合わせ、乾燥させ（Na2SO4）、デカントし、濃縮した。その粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（SiO2、1:9:90のNH4OH:CH3OH:CH2Cl2）により精製して2-〔1-(4-{〔5-ニトロ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-アゼチジン-3-イル〕-イソインドール-1,3-ジオン92mg（67％）を得た。
2-〔1-(4-{〔5-ニトロ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-アゼチジン-3-イル〕-イソインドール-1,3-ジオン（92mg、0.15ミリモル）をEtOH-CH2Cl2（3mL、2:1）に溶解した。撹拌しながら、ヒドラジン一水和物（11.3mg、0.23ミリモル）を添加し、その反応液を25℃で３時間撹拌した。揮発物を真空で除去し、粗残渣をフラッシュクロマトグラフィー（SiO2、1:9:90のNH4OH:CH3OH:CH2Cl2）により精製して目標化合物46mg（62％）を得た。m/z 496.35〔M+1〕+
実施例42. N-〔1-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アゼチジン-3-イル〕アセトアミド
【０２３８】
【化１２５】
2008505910.tif 000127
【０２３９】
N4-{〔トランス-4-(3-アミノアゼチジン-1-イル)シクロヘキシル〕メチル}-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン（20mg、0.04ミリモル）をCH2Cl2（1.0mL）に溶解した。この溶液に無水酢酸（0.057mL、0.06ミリモル）、続いてトリエチルアミン（0.084mL、0.06ミリモル）を添加した。その反応液を25℃で18時間撹拌した。揮発物を除去し、粗生成物をCH2Cl2に再度溶解し、10％のNaHCO3水溶液で抽出した。水相を分離し、CH2Cl2でもう２回抽出した。有機層を合わせ、乾燥させ（Na2SO4）、デカントし、濃縮した。得られる残渣をフラッシュクロマトグラフィー（SiO2、10-30％の（2:18:80のNH4OH:CH3OH:CH2Cl2）-CH2Cl2）により精製して目標化合物16mg（74％）を得た。m/z 538.46 (M+1)+
実施例43. N-〔1-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アゼチジン-3-イル〕ベンズアミド
【０２４０】
【化１２６】
2008505910.tif 000128
【０２４１】
N4-{〔トランス-4-(3-アミノアゼチジン-1-イル)シクロヘキシル〕メチル}-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン（20mg、0.04ミリモル）をTHF（1.0mL）に溶解した。この溶液に安息香酸（7.3mg、0.06ミリモル）、ポリスチレン結合カルボジイミド(PS-CDI)（47mg、0.06ミリモル）、続いてトリエチルアミン（0.084mL、0.06ミリモル）を添加した。その反応液を25℃で18時間撹拌した。その反応液を濾過してPS-CDIを除去し、揮発物を真空で除去した。粗生成物をCH2Cl2に再度溶解し、10％のNaHCO3水溶液で抽出した。水相を分離し、CH2Cl2でもう２回抽出した。有機層を合わせ、乾燥させ（Na2SO4）、デカントし、濃縮した。得られる残渣をフラッシュクロマトグラフィー（SiO2、10-30％の（2:18:80のNH4OH:CH3OH:CH2Cl2）-CH2Cl2）により精製して目標化合物18mg（74％）を得た。m/z 600.34 (M+1)+
実施例44. N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔(1-オキシドピリジン-2-イル)メチル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０２４２】
【化１２７】
2008505910.tif 000129
【０２４３】
3-アミノメチルピリジン（2.5g、23ミリモル）、ジ-tert-ブチルジカーボネート（7.72g、35.4ミリモル）及びジイソプロピルエチルアミン（6.2mL、35.4ミリモル）をCH2Cl2（50mL）中で合わせた。その反応液を18時間撹拌した。その反応液を真空での溶媒の除去により処理した。得られる残渣をEtOAcに溶解し、10％のNaHCO3水溶液に注いだ。水相を分離し、EtOAcでもう２回抽出した。有機層を合わせ、乾燥させ（Na2SO4）、デカントし、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（SiO2、2-5％のMeOH-CH2Cl2）により精製してピリジン-3-イルメチル-カルバミン酸tert-ブチルエステル3.9g（81％）を得た。
EtOH（50mL）に溶解したピリジン-3-イルメチル-カルバミン酸tert-ブチルエステル（3.89g、18.7ミリモル）に、3-クロロペルオキシ安息香酸（4.7g、27.4ミリモル）を添加した。４時間後に、揮発物を真空で除去し、粗生成物をCH2Cl2（25mL）に再度溶解した。この溶液にTFA（25mL）を添加し、その反応液を25℃で２時間撹拌し、次いで揮発物を真空で除去した。粗生成物をCH2Cl2に再度溶解し、蒸発させた。この操作をもう２回行なった。(1-オキシ-ピリジン-3-イル)-メチルアミンを3-クロロ安息香酸の汚染とともに得たが、更に精製しないで先に運んだ（2.74g）。
【０２４４】
{トランス-4-〔(2-クロロ-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（105mg、0.27ミリモル）をDMA（5mL）に溶解した。この溶液に(1-オキシ-ピリジン-3-イル)-メチルアミン（98mg、0.79ミリモル）、続いてDIEA（0.14mL、0.79ミリモル）を添加した。その反応液を25℃で18時間撹拌した。揮発物を真空で除去し、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（SiO2、2-8％のMeOH-CH2Cl2）により精製した。〔4-（{5-ニトロ-2-〔(1-オキシ-ピリジン-3-イルメチル)-アミノ〕-ピリミジン-4-イルアミノ}-メチル）-シクロヘキシル〕-カルバミン酸tert-ブチルエステルを純粋で得、CH2Cl2（2.5mL）中で再度懸濁させた。この懸濁液にTFA（2.5mL）を添加し、その反応液を２時間撹拌した。揮発物を真空で除去し、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（SiO2、25-100％の（2:18:80-NH4OH:MeOH:CH2Cl2）-CH2Cl2）により精製して目標化合物107mg（36％）を得た。m/z 374.41〔M+1〕+
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔(1-オキシドピリジン-2-イル)メチル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 374.59〔M+1〕+
実施例45. N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ブロモ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０２４５】
【化１２８】
2008505910.tif 000130
【０２４６】
5-ブロモ-2,4-ジクロロピリミジン（1.1g、4.83ミリモル）をDMA（25mL）に溶解した。この溶液にtert-ブチル-トランス-4-アミノメチルシクロヘキシルカルバメート塩酸塩（1.54g、5.80ミリモル）、続いてDIEA（1.98mL、11.4ミリモル）を添加した。その反応液を25℃で18時間撹拌した。その反応液を真空で揮発物の除去により処理した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（SiO2、10-25％のEtOAc-ヘキサン）により精製して{4-〔(5-ブロモ-2-クロロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル1.32g（65％）を得た。
{4-〔(2-クロロ-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（1.32g、3.14ミリモル）を2-トリフルオロメトキシベンジルアミン（4.0g、20.9ミリモル）に溶解した。その反応液をスミス・シンセサイザー・マイクロウェーブ・リアクター中で10分間にわたって、二つの別々の反復で、加熱した。反応液をCH2Cl2で希釈し、1MのHCl水溶液に注いだ。水相を分離し、CH2Cl2でもう２回抽出した。有機層を合わせ、乾燥させ（Na2SO4）、デカントし、濃縮した。粗生成物を最小量のTHF:MeOH:ヘキサン:EtOAc（25:1:49:25）で希釈し、フラッシュクロマトグラフィー（SiO2、15-25％のEtOAc-ヘキサン）により精製して(4-{〔5-ブロモ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル103g（57％）を得た。
(4-{〔5-ブロモ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル（75mg、0.13ミリモル）をCH2Cl2（2mL）に溶解した。この溶液にTFA（2mL）を添加し、その反応液を25℃で１時間撹拌した。揮発物を真空で除去した。粗生成物をCH2Cl2に再度溶解し、10％のNaHCO3水溶液に注いだ。水相を分離し、CH2Cl2でもう２回抽出した。有機層を合わせ、乾燥させ（Na2SO4）、デカントし、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（SiO2、2-10％の(NH4OH:CH3OH:CH2Cl2-CH2Cl2)）により精製して目標化合物45mg（73％）を得た。m/z 474.38〔M+1〕+
実施例46. N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-(フェニルエチニル)-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０２４７】
【化１２９】
2008505910.tif 000131
【０２４８】
（トランス-4-{〔5-ブロモ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル）-カルバミン酸tert-ブチルエステル（100mg、0.174ミリモル）、CuI（0.97mg、0.005ミリモル）、及びPd(PhCN)2Cl2（1.96mg、0.005ミリモル）を脱気したジオキサン（0.5ミリモル）に溶解した。この溶液にトリ-(tert)-ブチルホスフィンテトラフルオロボレート（2.4mg、0.010ミリモル）、続いてジイソプロピルアミン（0.029mL、0.2ミリモル）及びフェニルアセチレン（0.022mL、0.2ミリモル）を添加した。その反応液を25℃で18時間撹拌した。その反応液をEtOAcの添加により処理し、SiO2のプラグにより濾過した。濾液を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（SiO2、25％のEtOAc-ヘキサン）により精製して(4-{〔5-フェニルエチニル-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステルを得た。(4-{〔5-フェニルエチニル-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステルをCH2Cl2（0.5mL）に溶解し、TFA（0.5mL）を添加した。その溶液を２時間撹拌し、揮発物を除去し、粗残渣を分取薄層クロマトグラフィー（SiO2、厚さ2000ミクロン、1:9:90のNH4OH:CH3OH:CH2Cl2）により精製してN4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-(フェニルエチニル)-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン49mg（57％）を得た。m/z 496.58〔M+1〕+
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ペント-1-イン-1-イル-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 462.39〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕-5-{〔3-(トリフルオロメチル)フェニル〕エチニル}ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 564.59〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-〔(2-フルオロフェニル)エチニル〕-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 513.91〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕-5-{〔2-(トリフルオロメチル)フェニル〕エチニル}ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 564.62〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-〔(3-メチルフェニル)エチニル〕-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 510.04〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-〔(4-メチルフェニル)エチニル〕-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 510.03〔M+1〕+
実施例47. N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-(3-ピペリジン-1-イルベンジル)ピリミジン-2,4-ジアミン
【０２４９】
【化１３０】
2008505910.tif 000132
【０２５０】
酢酸パラジウム(II)（12.3mg、0.055ミリモル）及び4,5-ビス（ジフェニルホスフィノ）-9,9-ジメチルキサンテン（47.7mg、0.082ミリモル、キサントフォス）を合わせ、フラスコを排気し、N2で３回フラッシした。脱気したPhCH3（25mL）を添加し、その溶液を５分間撹拌した。3-ブロモベンゾニトリル（1.0g、5.49ミリモル）及びピペリジン（561mg、6.59ミリモル）を添加し、その反応液を更に５分間撹拌した。Cs2CO3（2.15g、6.59ミリモル）を添加し、フラスコを１分間にわたってN2でフラッシし、次いで48時間にわたって70℃に加熱した。揮発物を除去し、粗3-ピペリジン-1-イル-ベンゾニトリル（965mg）を精製しないで更に進めた。
3-ピペリジン-1-イル-ベンゾニトリル（965mg、5.18ミリモル）をMeOH（125mL）に溶解した。この溶液にH2O中のラネーニッケル懸濁液約1.5mLを添加した。フラスコを排気し、N2でバックフラッシした。バルーンをH2で充満し、反応フラスコを排気し、H2で充満し、大気圧下で維持した。その反応液を２時間にわたって激しく撹拌し、次いでN2の流れの下で厚さ2cmのセライトのパッドで濾過した。揮発物を除去し、所望の3-ピペリジン-1-イル-ベンジルアミン（993mg）を精製しないで更に進めた。
【０２５１】
{トランス-4-〔(2-クロロ-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（200mg、0.52ミリモル）をCH2Cl2（10mL）に溶解し、Et3N（0.289mL、2.07ミリモル）を添加した。3-ピペリジン-1-イル-ベンジルアミン（197mg、1.04ミリモル）をDMA:EtOH（2mL、1:1）に溶解し、反応溶液に添加した。反応液を室温で18時間撹拌した。揮発物を真空で除去し、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（SiO2、25-50％のEtOAc:ヘキサン次いで５％のMeOH:CH2Cl2）により精製して(4-{〔5-ニトロ-2-(3-ピペリジン-1-イル-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル176mg（63％）を得た。
(4-{〔5-ニトロ-2-(3-ピペリジン-1-イル-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル（176mg、0.33ミリモル）をCH2Cl2（6mL）に溶解した。この溶液にTFA（3mL）を添加し、その反応液を１時間撹拌した。揮発物を除去し、粗生成物を90:9:1の（CH2Cl2:CH3OH:NH4OH）に再度溶解し、次いで再度濃縮して固体を得た。得られた固体をフラッシュクロマトグラフィー（SiO2、10-75％のCH2Cl2-(90:9:1のCH2Cl2:CH3OH:NH4OH)）により精製して目標化合物131mg（91％）を得た。m/z 440.72〔M+1〕+
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-(3-ピロリジン-1-イルベンジル)ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 426.68〔M+1〕+
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-(3-アゼパン-1-イルベンジル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 454.72〔M+1〕+
実施例48. N-(4-{〔2-(3-ブロモ-2-メチル-ベンジルアミノ)-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-2,2,2-トリフルオロ-アセトアミド
【０２５２】
【化１３１】
2008505910.tif 000133
【０２５３】
ジクロロメタン（1.5mL）中のN4-（4-アミノ-シクロヘキシルメチル）-N2-(3-ブロモ-2-メチル-ベンジル)-5-ニトロ-ピリミジン-2,4-ジアミンビス-トリフルオロ酢酸塩（185mg、0.273ミリモル）の溶液に、メタンスルホニルクロリド（43μL、0.546ミリモル）及びジイソプロピルエチルアミン（143μL、0.819ミリモル）を添加し、その溶液を１時間撹拌した。その反応混合物をジクロロメタン（2mL）で希釈し、飽和NaHCO3水溶液（2mL）を添加した。相を分離し、水相をジクロロメタン（3mL）で抽出した。有機相を合わせ、Na2SO4で乾燥させ、濃縮して目標化合物87.2mg（59％）を得た。m/z 546.4〔M+1〕+
実施例49. 3-{〔(4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)アミノ〕メチル}ピリジン-2(1H)-オン
【０２５４】
【化１３２】
2008505910.tif 000134
【０２５５】
〔トランス-4-（{2-〔(2-メトキシ-ピリジン-3-イルメチル)-アミノ〕-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ}-メチル）-シクロヘキシル〕-カルバミン酸tert-ブチルエステル（100mg、0.205ミリモル）をジオキサン（2mL）に溶解し、ジオキサン中のHCl（0.85mL、４ミリモル/mL、3.40ミリモル）で処理した。一夜撹拌した後、油が溶液の底部に見られた。溶媒を取り出し、残渣を乾燥させて油状固体を得た。粗固体を分取TLC（1:9:90のNH3:MeOH:DCM）で精製して標題生成物（20.5mg、0.055ミリモル、26.8％）を黄色の固体として得た。m/z 374.5 (M+1)+
実施例50. N-メチル-N-〔1-(トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル)ピロリジン-3-イル〕アセトアミド
【０２５６】
【化１３３】
2008505910.tif 000135
【０２５７】
シス-4-ヒドロキシ-シクロヘキサンカルボニトリルを文献の操作（Noyce, D.S.ら, J. Org. Chem., 1969, 34, 1247）に従ってつくった。
高圧オートクレーブ中のMeOH（40mL）中のNH3の2N溶液にシス-4-ヒドロキシ-シクロヘキサンカルボニトリル（6.6g、52.7ミリモル）及びラネーニッケル（1.0g、17ミリモル、0.3当量）を添加した。その混合物を45psi（3.2kg/cm2）のH2のもとに置き、一夜振とうした。圧力を開放し、反応液をセライトのパッドで濾過した。そのフィルターパッドをEtOAcで洗浄し、その混合物を減圧下で濃縮して黄色の油をシス-4-アミノメチル-シクロヘキサノール（6.35g、49.1ミリモル、93.2％）として得た。
(5-ニトロ-4-チオシアネート-ピリミジン-2-イル)-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジル)-アミン（10g、26.9ミリモル）をDCM（100ml）に溶解した。シス-4-アミノメチル-シクロヘキサノール（3.48g、26.9ミリモル）及びジイソプロピルエチルアミン（10mL、53.8ミリモル）をその溶液に添加し、一夜撹拌した。その反応混合物を真空で蒸発させ、カラムクロマトグラフィー（１％のMeOH／99％のCH2Cl2）により精製した。得られる固体を冷メタノールで洗浄して淡黄色の固体をシス-4-{〔5-ニトロ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキサノール（11.3g、25.6ミリモル、95.1％）として得た。
シス-4-{〔5-ニトロ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキサノール（3.6g、8.16ミリモル）を乾燥DCM（150mL）に溶解し、５℃に冷却した。メタンスルホニルクロリド（0.94ml、12.2ミリモル）及びジイソプロピルエチルアミン（4.26ml、24.4ミリモル）を連続して添加した。２時間後、その反応を冷水（10mL）で停止し、室温に温めた。その溶液をDCM（100mL）と水（50mL）の間に分配した。層を分離し、水層をDCM（2x100mL）で抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、MgSO4で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮して黄色の固体を得た。次いで残渣をクロマトグラフィー（シリカ、100:1のDCM/MeOH）にかけ、冷メタノールで洗浄して淡黄色の固体をメタンスルホン酸シス-4-{〔5-ニトロ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシルエステル（3.90g、7.50ミリモル、92％）として得た。
メタンスルホン酸4-{〔5-ニトロ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシルエステル（100mg、0.19ミリモル）及びN-メチル-N-ピロリジン-3-イル-アセトアミド（137mg、0.96ミリモル）をDMA（0.4mL）と合わせ、100℃で一夜加熱した。次いでその反応混合物をメタノールに溶解し、分取HPLCにより精製した。純粋なHPLC画分を凍結乾燥して標題化合物（30mg、28％）を得た。m/z 566.6〔M+1〕+
【０２５８】
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
N4-{[トランス-4-(1,1-ジオキシドチオモルホリン-4-イル)シクロヘキシル]メチル}-5-ニトロ-N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン, (BI00612608) m/z 559.2 [M+1]+.
N4-{[トランス-4-(3,3-ジフルオロピロリジン-1-イル)シクロヘキシル]メチル}-5-ニトロ- N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン, m/z 531.1 [M+1]+
4-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)ピペラジン-2-オン, m/z 524.1 [M+1]+
N4-({トランス-4-[4-(メチルスルホニル)ピペラジン-1-イル]シクロヘキシル}メチル)-5-ニトロ- N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン, m/z 588.1 [M+1]+
N4-{[トランス-4-(4-アセチルピペラジン-1-イル)シクロヘキシル]メチル}-5-ニトロ- N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン, m/z 552.1 [M+1]+
N4-({トランス-4-[3-(メチルスルホニル)ピロリジン-1-イル]シクロヘキシル}メチル)-5-ニトロ- N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン, m/z 573.1 [M+1]+
1-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)-1,4-ジアゼパン-5-オン, m/z 538.1 [M+1]+
N-[(3S)-1-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)ピロリジン-3-イル]アセトアミド, m/z 552.2 [M+1]+
【０２５９】
N-[(3R)-1-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)ピロリジン-3-イル]アセトアミド, m/z 552.2 [M+1]+
N4-({トランス-4-[(3R)-3-(ジメチルアミノ)ピロリジン-1-イル]シクロヘキシル}メチル)-5-ニトロ-N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン, m/z 538.2 [M+1]+
1-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)-L-プロリンアミド, m/z 538.2 [M+1]+
1-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)-D-プロリンアミド, m/z 538.1 [M+1]+
1-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)ピペリジン-3-カルボキサミド, m/z 552.2 [M+1]+
1-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)ピペリジン-3-オール, m/z 525.1 [M+1]+
1-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)ピペリジン-4-オール, m/z 525.2 [M+1]+
5-ニトロ- N4-[(トランス-4-ピペラジン-1-イルシクロヘキシル)メチル]- N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン m/z 510.6 [M+1]+
N4-{[トランス-4-(4-メチルピペラジン-1-イル)シクロヘキシル]メチル}-5-ニトロ- N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン, m/z 524.6 [M+1]+
エチル 4-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)ピペラジン-1-カルボキシレート, m/z 582.6 [M+1]+
2-[メチル(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)アミノ]エタノール, m/z 499.6 [M+1]+
N-{2-[(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)アミノ]エチル}アセトアミド, m/z 526.6 [M+1]+
【０２６０】
N4-{[トランス-4-(1,4-ジアゼパン-1-イル)シクロヘキシル]メチル}-5-ニトロ- N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン, m/z 524.7 [M+1]+
N4-{[トランス-4-(4-メチル-1,4-ジアゼパン-1-イル)シクロヘキシル]メチル}-5-ニトロ- N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン, m/z 538.6 [M+1]+
N4-{[トランス-4-(4-アセチル-1,4-ジアゼパン-1-イル)シクロヘキシル]メチル}-5-ニトロ- N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン, m/z 566.6 [M+1]+
N4-{[トランス-4-(3-フルオロピロリジン-1-イル)シクロヘキシル]メチル}-5-ニトロ- N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン, m/z 513.1 [M+1]+
N,N-ジメチル-4-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)ピペラジン-1-カルボキサミド, m/z 581.2 [M+1]+
(2R)-1-[(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)アミノ]プロパン-2-オール, m/z 499.6 [M+1]+
(2S)-1-[(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)アミノ]プロパン-2-オール, m/z 499.6 [M+1]+
3-[(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)アミノ]プロパン-1-オール, m/z 499.2 [M+1]+
N4-({トランス-4-[(3-アミノプロピル)アミノ]シクロヘキシル}メチル)-5-ニトロ- N2-[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]ピリミジン-2,4-ジアミン, m/z 498.1 [M+1]+
(2R)-2-[(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)アミノ]プロパン-1-オール, m/z 499.1 [M+1]+
【０２６１】
(2S)-2-[(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)アミノ]プロパン-1-オール, m/z 499.1 [M+1]+
(2R)-2-[(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)アミノ]-3-フェニルプロパン-1-オール, m/z 575.6[M+1]+
(2S)-2-[(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)アミノ]-3-フェニルプロパン-1-オール, m/z 575.6 [M+1]+
Nα-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)-L-フェニルアラニンアミド, m/z 588.6 [M+1]+
Nα-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)-D-フェニルアラニンアミド, m/z 588.6 [M+1]+
N,N-ジメチル-1-(トランス-4-{[(5-ニトロ-2-{[2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル]アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ]メチル}シクロヘキシル)-L-プロリンアミド, m/z 566.1 [M+1]+
実施例51. N4-{〔トランス-4-(1H-イミダゾール-1-イル)シクロヘキシル〕メチル}-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０２６２】
【化１３４】
2008505910.tif 000136
【０２６３】
ジオキサン（1mL）及び水（2.5mL）中の(4-アミノ-シクロヘキシルメチル)-カルバミン酸ベンジルエステル（285mg、1.09ミリモル）の撹拌混合物を二三滴のリン酸で酸性にした（pH1-2）。パラホルムアルデヒド（34mg）及び40％のグリオキサール水溶液（150μL、1.09ミリモル）を添加し、その後に80℃で20分間加熱した。次いでNH4Cl（58mg、1.09ミリモル）を添加し、その混合物を100℃で更に３時間加熱した。室温に冷却した後、その反応混合物がpH12に達するまで2N NaOHを添加した。水相をEtOAc（2x20mL）で抽出し、合わせた抽出液をNa2SO4で乾燥させ、その後に真空で濃縮した。12gのISCOコンビ-フラッシュカートリッジ（シリカゲル、95:4.75:0.25のDCM/MeOH/NH4OH）を使用して残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製して(4-イミダゾール-1-イル-シクロヘキシルメチル)-カルバミン酸ベンジルエステル（60mg、17％）を無色の油（これは放置すると固化した）として得た。
窒素雰囲気下のEtOH（4mL）中の(4-イミダゾール-1-イル-シクロヘキシルメチル)-カルバミン酸ベンジルエステル（57mg、0.18ミリモル）の溶液に10％のPd/C（200mg）を添加した。その反応フラスコをバルーンによりH2でフラッシし、室温で４時間撹拌し、その後にTLC分析（95:4.75:0.25のDCM/MeOH/NH4OH）が出発物質の完全な消費を示した。その反応混合物をセライトのプラグで濾過し、濾液を真空で濃縮して粗(4-イミダゾール-1-イル-シクロヘキシル)-メチルアミン（32mg、95％）を得た。この物質を次の反応に直接使用した。
EtOH（1mL）中の(4-イミダゾール-1-イル-シクロヘキシル)-メチルアミン（32mg、0.18ミリモル）及びEt3N（76μL、0.54ミリモル）の溶液に、(5-ニトロ-4-チオシアネート-ピリミジン-2-イル)-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジル)-アミン（71mg、0.19ミリモル）を添加した。その混合物を室温で14時間撹拌し、その後に真空で濃縮した。12gのISCOコンビ-フラッシュカートリッジ（シリカゲル、95:4.75:0.25のDCM/MeOH/NH4OH）を使用して残渣をカラムクロマトグラフィーにより部分精製し、次いで半分取HPLCにより再度精製した。単離したTFA塩を飽和NaHCO3とEtOAcの間に分配することにより遊離塩基に変換した。有機層を真空で濃縮して標題化合物29mgをオフホワイトの固体として得た。m/z 492〔M+1〕+
実施例52. N2-〔3-(アミノメチル)ベンジル〕-5-ニトロ-N4-〔（トランス-4-ピロリジン-1-イルシクロヘキシル）メチル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０２６４】
【化１３５】
2008505910.tif 000137
【０２６５】
MeOH（65mL）中のm-キシリレンジアミン（5.00g、36.70ミリモル）の溶液に、MeOH（35mL）中のBoc2O（2.00g、9.16ミリモル）の溶液を45分間にわたって滴下して添加した。その反応混合物を室温で一夜撹拌し、その後に真空で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、DCM→80:19:1のDCM/MeOH/NH4OH）により精製して(3-アミノメチル-ベンジル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル（1.43g、67％）を得た。
０℃のEtOH（10mL）中の2-クロロ-5-ニトロ-4-チオシアネート-ピリミジン（1.31g、6.05ミリモル）の溶液に、(3-アミノメチル-ベンジル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル（1.43g、6.05ミリモル）の溶液を45分間にわたって滴下して添加した。その反応液を室温で一夜撹拌し、得られる沈殿を濾過し、EtOHで洗浄した。その粗物質をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、10:90→12:88のEtOAc/ヘキサン）により精製して{3-〔(5-ニトロ-4-チオシアネート-ピリミジン-2-イルアミノ)-メチル〕-ベンジル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（1.43g、56％）を黄色の固体として得た。
【０２６６】
EtOH（2mL）中の(4-ピロリジン-1-イル-シクロヘキシル)-メチルアミン（32mg、0.18ミリモル）及びEt3N（26μL、0.18ミリモル）の溶液に、{3-〔(5-ニトロ-4-チオシアネート-ピリミジン-2-イルアミノ)-メチル〕-ベンジル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（74mg、0.18ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で一夜撹拌し、その後に真空で濃縮した。ISCOコンビ-フラッシュカートリッジ（シリカゲル、50:50→0:100のDCM/80:18:2のDCM/MeOH/NH4OH）を使用して残渣をクロマトグラフィーにより精製して不純な〔3-（{5-ニトロ-4-〔(4-ピロリジン-1-イル-シクロヘキシルメチル)-アミノ〕-ピリミジン-2-イルアミノ}-メチル）-ベンジル〕-カルバミン酸tert-ブチルエステル（132mg）を得た。m/z 540 (M+1)+
DCM（1mL）中の〔3-（{5-ニトロ-4-〔(4-ピロリジン-1-イル-シクロヘキシルメチル)-アミノ〕-ピリミジン-2-イルアミノ}-メチル）-ベンジル〕-カルバミン酸tert-ブチルエステル（132mg、0.25ミリモル）の溶液にTFA（2mL）を添加した。20分後に、その反応混合物を真空で濃縮し、得られる油をEtOAcに吸収させ、その溶液を飽和NaHCO3で洗浄した。次いで水層を90:10のCHCl3/i-PrOHで抽出した。合わせた有機層を真空で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、96:4→93:7のDCM/MeOH中10％のNH4OH）により精製して標題化合物（25mg）を得た。m/z 440 (M+1)+
(4-ピロリジン-1-イル-シクロヘキシル)-メチルアミンの調製
【０２６７】
【化１３６】
2008505910.tif 000138
【０２６８】
窒素雰囲気下の０℃のDCM（8mL）中の(4-アミノメチル-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル（500mg、2.19ミリモル）及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン（382μL、2.63ミリモル）の撹拌スラリーに、ベンジルクロロホルメート（311μL、2.41ミリモル）をシリンジにより滴下して添加した。30分後、その反応液を室温に温め、更に２時間撹拌し、その後にDCM（50mL）で希釈した。その溶液を1N HCl、飽和NaHCO3、及び食塩水で連続して洗浄し、その後にNa2SO4で乾燥させた。12gのISCOコンビ-フラッシュカートリッジを使用するクロマトグラフィー（シリカゲル、90:10→50:50のヘキサン/EtOAc）により残留クロロホルメートを除去してジ-保護中間体を得、これをDCM（2mL）及びTFA（2mL）で直接処理した。１時間後に、揮発物を真空で除去し、残渣を飽和NaHCO3とEtOAcの間に分配した。有機層を真空で濃縮して(4-アミノ-シクロヘキシルメチル)-カルバミン酸ベンジルエステル（517mg、90％）を白色の固体として得た。
DMF（5mL）中の(4-アミノ-シクロヘキシルメチル)-カルバミン酸ベンジルエステル（350mg、1.34ミリモル）の溶液に、K2CO3（924mg、6.70ミリモル）及び1,4-ジブロモブタン（160mL、1.34ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温で14時間撹拌し、その後にEtOAc（100mL）で希釈した。その反応溶液を水（2x100mL）及び食塩水で洗浄し、その後に真空で濃縮した。12gのISCOコンビ-フラッシュカートリッジを使用するクロマトグラフィー（シリカゲル、95:4.75:0.25のDCM/MeOH/NH4OH）により残渣を精製して(4-ピロリジン-1-イル-シクロヘキシルメチル)-カルバミン酸ベンジルエステル（351mg、83％）をオフホワイトの固体として得た。
MeOH（5mL）中の(4-ピロリジン-1-イル-シクロヘキシルメチル)-カルバミン酸ベンジルエステル（292mg、0.92ミリモル）の溶液に、ギ酸アンモニウム（0.58g、9.20ミリモル）を添加した。その反応フラスコを10％のPd/C（300mg）の添加の前にN2でフラッシした。その混合物を65℃で２時間加熱し、その後にTLC分析（シリカゲル、95:4.75:0.25のDCM/MeOH/NH4OH）が57の完全な消費を示した。室温に冷却した後、そのPd触媒を除去するためにその反応混合物をセライトのプラグにより濾過した。濾液が(4-ピロリジン-1-イル-シクロヘキシル)-メチルアミンを含み、これを更に精製しないで次の工程で使用した。
実施例53. 3-{〔（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アミノ〕メチル}安息香酸
【０２６９】
【化１３７】
2008505910.tif 000139
【０２７０】
DCM（1mL）中のN4-(4-アミノ-シクロヘキシルメチル)-5-ニトロ-N2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジル)-ピリミジン-2,4-ジアミン（100mg、0.23ミリモル）及び3-ホルミル-安息香酸メチルエステル（41mg、0.25ミリモル）の混合物に、トリアセトキシホウ水素化ナトリウム（58mg、0.27ミリモル）を添加した。その混合物を室温で18時間撹拌し、次いで過剰の水で反応停止した。その混合物をDCMで希釈し、有機層を分離し、Na2SO4で乾燥させた。溶媒を真空で除去し、ISCOコンビ-カートリッジを使用するカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、DCM/MeOH）により残渣を精製して3-〔(4-{〔5-ニトロ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシルアミノ)-メチル〕-安息香酸メチルエステル（76mg、57％）を得た。m/z 589 (M+1)+
MeOH（2mL）中の3-〔(4-{〔5-ニトロ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシルアミノ)-メチル〕-安息香酸メチルエステル（75mg、0.13ミリモル）、LiOH（30mg、1.29ミリモル）及び水（３滴）の混合物を50℃で18時間加熱した。その反応混合物を真空で濃縮し、次いで水及びEtOAcに吸収させた。水相がpH6に達するまで希薄なHClを添加した。沈殿した固体を濾過により単離して目標化合物（20mg、30％）を白色の固体として得た。m/z 575 (M+1)+
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
4-{〔（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アミノ〕メチル}安息香酸、m/z 575 (M+1)+
実施例54. N-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）グリシン
【０２７１】
【化１３８】
2008505910.tif 000140
【０２７２】
2:1のDMF/DMSO（0.6mL）中のN4-(4-アミノ-シクロヘキシルメチル)-5-ニトロ-N2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジル)-ピリミジン-2,4-ジアミン（88mg、0.20ミリモル）の溶液にN,N-ジイソプロピルエチルアミン（35μL、0.30ミリモル）、続いてtert-ブチルブロモアセテート（22μL、0.15ミリモル）を添加した。その混合物を室温で一夜撹拌し、続いてEtOAc（15mL）と水（5mL）の間に分配した。層を分離し、有機物を水（2x5mL）及び食塩水で洗浄した。真空での濃縮後に、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、97:3のDCM/MeOH）により精製して(4-{〔5-ニトロ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシルアミノ)-酢酸tert-ブチルエステル（51mg、61％）を無色の油として得た。m/z 555〔M+1〕+
DCM（1mL）中の(4-{〔5-ニトロ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシルアミノ)-酢酸tert-ブチルエステル（60mg、0.108ミリモル）の溶液にTFA（1mL）を添加した。その溶液を室温で16時間放置し、その後に溶媒を真空で除去した。残渣を水（1mL）に吸収させ、その混合物がpH5に達するまで2N NaOHを添加した。その混合物を水（3mL）で希釈し、濾過した。濾過した固体を水及びEt2Oで洗浄し、その後に真空で乾燥させて目標化合物（46mg、85％）を白色の固体として得た。m/z 499〔M+1〕+
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
N-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）-ベータ-アラニン、m/z 513 (M+1)+
実施例55. N-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アミノ〕ブタン酸
【０２７３】
【化１３９】
2008505910.tif 000141
【０２７４】
2:1のDMF/DMSO（0.6mL）中のN4-(4-アミノ-シクロヘキシルメチル)-5-ニトロ-N2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジル)-ピリミジン-2,4-ジアミン（80mg、0.182ミリモル）の溶液にN,N-ジイソプロピルエチルアミン（32μL、0.272ミリモル）、続いてメチル-4-ヨードブチレート（19μL、0.136ミリモル）を添加した。その混合物を室温で一夜撹拌し、続いてEtOAc（15mL）と水（10mL）の間に分配した。層を分離し、有機物をNa2SO4で乾燥させた。真空での濃縮後に、12gのISCOコンビ-フラッシュカートリッジを使用するカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、100:0→90:10のDCM/MeOH）により残渣を精製して4-(4-{〔5-ニトロ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシルアミノ)-酪酸メチルエステル（39mg、53％）を白色の固体として得た。m/z 541〔M+1〕+
6:1のMeOH／水（0.7mL）中の4-(4-{〔5-ニトロ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシルアミノ)-酪酸メチルエステル（39mg、0.072ミリモル）の溶液にLiOH（9mg、0.375ミリモル）を添加し、その混合物を室温で一夜撹拌した。得られる懸濁液をMeOH（1mL）で希釈し、室温で更に２時間撹拌した。その反応混合物を真空で濃縮し、その混合物がpH5-6に達するまで残っている水性残渣を2N HClで処理した。得られる固体を濾過し、水洗した。その物質を半分取にかけて標題化合物〔7mg、13％、m/z 527 (M+1)+〕及び1-（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）ピロリジン-2-オン〔15mg、41％、m/z 509 (M+1)+〕を分離した。
実施例56. 4-{〔(4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)アミノ〕メチル}-5-クロロピリジン-2(1H)-オン
【０２７５】
【化１４０】
2008505910.tif 000142
【０２７６】
1:1のAc2O/AcOH（60mL）中の3,6-ジクロロ-4-シアノピリジン（WO 9633975に従って調製した）（3.40g、19.65ミリモル）及びPtO2（0.40g）の混合物をパール水素化装置中で30psi（2.1kg/cm2）のH2で６時間振とうした。その反応混合物をセライトのパッドで濾過し、濾過した固体をEtOAcで洗浄した。合わせた濾液及び洗浄液を真空で濃縮し、得られる白色の固体を120gのコンビ-フラッシュカートリッジによるカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、20:80→100:0のEtOAc/ヘキサン）により精製してN-(2,5-ジクロロ-ピリジン-4-イルメチル)-アセトアミド（1.73g、40％）を白色の固体として得た。
化合物N-(2,5-ジクロロ-ピリジン-4-イルメチル)-アセトアミド（250mg、1.14ミリモル）を33％のH2SO4（3mL）に添加し、その混合物をCEMマイクロウェーブ反応器中で200℃で30分間加熱した。室温に冷却した後、その反応混合物を水（20mL）で希釈し、過剰の濃NH4OHで塩基性にした。次いでドライアイス／アセトン浴を使用してその反応混合物を凍結し、凍結乾燥装置中で真空で一夜蒸発、乾燥した。12gのISCOコンビ-フラッシュカラム及び乾燥装填カートリッジを使用するカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、100:0→50:50のDCM:DCM/MeOH/NH4OH(6:3:1)）により固体を精製してN-(5-クロロ-2-オキソ-1,2-ジヒドロ-ピリジン-4-イルメチル)-アセトアミド（246mg、定量的）をオフホワイトの固体として得た。この物質を次の工程で直接使用した。
i-PrOH（2mL）中のN-(5-クロロ-2-オキソ-1,2-ジヒドロ-ピリジン-4-イルメチル)-アセトアミド（100mg、0.62ミリモル）、{4-〔(2-クロロ-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（146mg、0.38ミリモル）及びジイソプロピルエチルアミン（188μL、1.14ミリモル）の混合物をCEMマイクロウェーブ反応器中で120℃で30分間加熱した。冷却後、その反応混合物を真空で濃縮し、残渣をTFA（10mL）で処理した。30分後に、その溶液を真空で濃縮し、過剰の6:3:1のDCM/MeOH/NH4OHで塩基性にした。真空で濃縮して残渣を得、12gのISCOコンビ-フラッシュカートリッジを使用するカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、50:50→0:100のDCM/(6:3:1のDCM/MeOH/NH4OH)）によりこれを精製した。クロマトグラフィー後に得られた物質をその後にEtOAc（20mL）中で懸濁させ、フラスコを超音波浴に５分間入れた。不溶性物質を濾過により除去し、濾液を真空で濃縮して目標化合物（148mg、96％）を白色の固体として得た。m/z 408〔M+1〕+
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
4-{〔(4-{〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕アミノ}-5-ニトロピリミジン-2-イル)アミノ〕メチル}ピリジン-2(1H)-オン、m/z 374〔M+1〕+
実施例57. (1S)-2-〔（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アミノ〕-1-フェニルエタノール及び(2R)-2-〔（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アミノ〕-2-フェニルエタノール
【０２７７】
【化１４１】
2008505910.tif 000143
【０２７８】
EtOH（5mL）中のN4-トランス-(4-アミノ-シクロヘキシルメチル)-5-ニトロ-N2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジル)-ピリミジン-2,4-ジアミン（400mg、0.91ミリモル）及び(S)-スチレンオキサイド（109mg、0.91ミリモル）の溶液を80℃で72時間撹拌した。真空での濃縮後に、残渣を分取TLC（シリカゲル、90:10のDCM/MeOH）により精製して(1S)-2-〔（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アミノ〕-1-フェニルエタノール〔52mg、m/z 562 (M+1)+〕及び(2R)-2-〔（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アミノ〕-2-フェニルエタノール〔6mg、m/z 561 (M+1)+〕をオフホワイトの固体として得た。
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
(1R)-2-〔（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アミノ〕-1-フェニルエタノール、m/z 562〔M+1〕+
(2S)-2-〔（トランス-4-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキシル）アミノ〕-2-フェニルエタノール、m/z 562〔M+1〕+
実施例58. N4-〔（トランス-4-アミノ-4-メチルシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕ピリミジン-2,4-ジアミン
【０２７９】
【化１４２】
2008505910.tif 000144
【０２８０】
０℃に冷却したMeOH（100mL）中のトランス-4-アミノメチル-シクロヘキサンカルボン酸（5.00g、31.8ミリモル）及びK2CO3（4.40g、127.2ミリモル）の撹拌スラリーに臭化ベンジル（7.94mL、66.8ミリモル）を添加した。その反応混合物を室温に温め、一夜撹拌した。揮発物の殆どを水（100mL）の添加の前に真空で除去した。その水性混合物をEt2O（2x200mL）で抽出し、その後に2N HClの添加によりpH5-6に調節した。水相をDCM（3x200mL）で抽出し、合わせたDCMをNa2SO4で乾燥させ、その後に真空で濃縮してトランス-4-〔（ジベンジルアミノ）-メチル〕-シクロヘキサンカルボン酸（3.22g、43％）をオフホワイトの固体として得た。m/z 338〔M+1〕+
窒素雰囲気下の-78℃のTHF（40mL）中のジイソプロピルアミン（0.95g、9.4ミリモル）の溶液にn-BuLi（ヘキサン中の2.5Mの溶液3.75mL、9.38ミリモル）をシリンジにより滴下して添加した。20分後に、THF（10mL）中のトランス-4-〔（ジベンジルアミノ）-メチル〕-シクロヘキサンカルボン酸（1.58g、4.7ミリモル）の溶液を滴下して添加した。その反応混合物を-78℃で更に20分間撹拌し、その後にそれを室温に温め、更に３時間撹拌した。その反応混合物を-78℃に冷却し、ヨウ化メチル（0.32mL、5.2ミリモル）を滴下して添加した。次いでその反応液を室温に徐々に温め、一夜撹拌し、その後に水（10mL）で反応停止した。その混合物がpH6に達するまでそれを6N HClで処理し、次いで真空で濃縮してTHFの殆どを除去した。水相をEtOAc（2x60mL）で抽出し、合わせた抽出液を食塩水で洗浄し、乾燥させ（Na2SO4）、真空で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、1:1のヘキサン/Et2O）により精製してトランス-4-〔（ジベンジルアミノ）-メチル〕-1-メチル-シクロヘキサンカルボン酸（375mg、23％）を得た。m/z 352 (M+1)+
【０２８１】
窒素雰囲気下のトルエン（3.6mL）中のトランス-4-〔（ジベンジルアミノ）-メチル〕-1-メチル-シクロヘキサンカルボン酸（375mg、1.07ミリモル）及びEt3N（317μL、2.28ミリモル）の溶液にジフェニルホスホリルアジド（250μL、1.16ミリモル）を添加した。その反応液を室温で１時間撹拌し、その後に100℃で４時間加熱した。その反応混合物を約半分の容積に濃縮し、次いでTHF（4mL）中のBoc2O（0.70g、3.20ミリモル）の溶液、続いてEt3N（0.60mL、4.30ミリモル）及び水（0.2mL）を添加した。室温で２時間撹拌した後、反応が殆ど又は全く観察されず、中間体イソシアネートが変化しないで残った。溶媒を真空で蒸発させ、その後に残渣を1:1のTHF/6N HCl（4mL）に溶解し、室温で一夜撹拌した。反応混合物がpH11に達するまでNaOHペレットを添加し、Boc2O（0.70g、3.20ミリモル）を添加した。室温で３時間撹拌した後、その反応混合物をEtOAc（2x30mL）で抽出し、合わせた抽出液をNa2SO4で乾燥させた。真空での濃縮後に、12gのISCOコンビ-フラッシュカートリッジを使用するカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、90:10→50:50のヘキサン/EtOAc）により残渣を精製してトランス-{4-〔（ジベンジルアミノ）-メチル〕-1-メチル-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（221mg、50％）を無色の油として得た。m/z 423〔M+1〕+
窒素雰囲気下のMeOH（5mL）中のトランス-{4-〔（ジベンジルアミノ）-メチル〕-1-メチル-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（221mg、0.52ミリモル）及びギ酸アンモニウム（330mg、5.23ミリモル）の混合物に10％のパラジウム／木炭（300mg）を添加した。その反応液を60℃で１時間加熱し、室温に冷却し、その後にセライトで濾過した。真空で濃縮してトランス-(4-アミノメチル-1-メチル-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル（126mg、100％）を無色の油として得た。m/z 243〔M+1〕+
トランス-{4-〔（ジベンジルアミノ）-メチル〕-1-メチル-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（62mg、0.26ミリモル）の溶液、続いてEt3N（143μL、1.03ミリモル）を(5-ニトロ-4-チオシアネート-ピリミジン-2-イル)-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジル)-アミン（95mg、0.26ミリモル）に添加した。その混合物を室温で３時間撹拌し、次いで真空で濃縮した。12gのISCOコンビ-フラッシュカートリッジを使用するカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、90:10→70:30のヘキサン/EtOAc）により残渣を精製してトランス-(1-メチル-4-{〔5-ニトロ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル（111mg、79％）をオフホワイトの固体として得た。m/z 555〔M+1〕+
室温のDCM（2mL）中のトランス-(1-メチル-4-{〔5-ニトロ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル（110mg、0.20ミリモル）の溶液にTFA（2mL）を添加した。１時間後に、その反応混合物を真空で濃縮し、飽和NaHCO3（5mL）で処理し、その後にEtOAc（2x25mL）で抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（Na2SO4）、真空で濃縮して標題化合物（83mg、92％）をオフホワイトの固体として得た。m/z 455〔M+1〕+
実施例59. N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-(1,2-ジフェニルエチル)-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン
【０２８２】
【化１４３】
2008505910.tif 000145
【０２８３】
トランス-{4-〔(2-クロロ-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（100mg、0.26ミリモル）をDCM（5mL）に溶解した。1,2-ジフェニルエチルアミン（154mg、0.78ミリモル）を一度に添加した。18時間後に、その溶液をDCM（15mL）と２％のAcOH（水溶液；10mL）の間に分配した。層を分離し、水層をDCM（20mL）で抽出した。合わせた有機画分を飽和炭酸ナトリウム（10mL）及び水で洗浄し、MgSO4で乾燥させ、濾過し、濃縮して淡黄色の固体を得た。クロマトグラフィー（シリカ、10％-50％のヘキサン/EtOAc）にかけて(4-{〔2-(1,2-ジフェニル-エチルアミノ)-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル110mgを淡黄色の固体として得た。m/z 547.4〔M+1〕+
(4-{〔2-(1,2-ジフェニル-エチルアミノ)-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル（105mg、0.19ミリモル）をジオキサン（5mL）に溶解した。HCl溶液（4M溶液2mL）を添加した。18時間後に、油が溶媒から分離した。溶媒をデカントし、その油を水に溶解し、凍結乾燥して標題化合物57mgを淡黄色の固体として得た。m/z 447.3〔M+1〕+
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-5-ニトロ-N2-(2-ピペリジン-1-イルベンジル)ピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 440.6〔M+1〕+
実施例60. N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔2-(メチルスルホニル)ベンジル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン
【０２８４】
【化１４４】
2008505910.tif 000146
【０２８５】
{4-〔(2-クロロ-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ)-メチル〕-シクロヘキシル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル（100mg、0.26ミリモル）をDMF（3mL）に溶解した。2-メタンスルホニル-ベンジルアミン塩酸塩（115mg、0.52ミリモル）及びジイソプロピルエチルアミン（0.14mL、0.78ミリモル）を連続して添加した。24時間後に、その反応液を水（10mL）とDCM（10mL）の間に分配した。有機層を５％のAcOH（水溶液）、飽和Na2CO3及び水で洗浄し、MgSO4で乾燥させ、濾過し、濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ、DCM中0-15％のMeOH；Rf=0.3（DCM中10％のMeOH））にかけて(4-{〔2-(2-メタンスルホニル-ベンジルアミノ)-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル96mgを淡黄色の固体として得た。m/z 535.7〔M+1〕+
(4-{〔2-(2-メタンスルホニル-ベンジルアミノ)-5-ニトロ-ピリミジン-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル（96mg、0.18ミリモル）を温かいジオキサン（5mL）に溶解した。ジオキサン中のHCl（4M、1.5mL、6.0ミリモル）を添加した。18時間後に、その不均一混合物をデカントし、固体をジオキサンで洗浄し、真空で乾燥させて標題化合物76mgを白色の固体として得た。m/z 435.5〔M+1〕+
2-メタンスルホニル-ベンジルアミン中間体の調製
【０２８６】
【化１４５】
2008505910.tif 000147
【０２８７】
2-(メチルチオ)ベンジルアミン（3g、19.6ミリモル）をDCM（100mL）に溶解した。ジ-tert-ブチルジカーボネート（4.27g、19.6ミリモル）を少しづつ添加した。８時間後に、その反応液を濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン/EtOAc 2％-15％）にかけて(2-メチルスルファニル-ベンジル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル4.5gを無色の油として得た。m/z 254.4〔M+1〕+
MCPBA（60％、5.82g、20.2ミリモル）をDCM（100mL）（これを前もって０℃に冷却した）中の(2-メチルスルファニル-ベンジル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル（2.5g、9.87ミリモル）の溶液に添加した。５時間後に、亜硫酸ナトリウム（Na2SO3）の10％の水溶液100mlをその反応液に添加し、有機層を集め、飽和炭酸ナトリウム水溶液（50mL）で洗浄し、MgSO4で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。クロマトグラフィー（シリカ、DCM中0-15％のMeOH）にかけて(2-メタンスルホニル-ベンジル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル1.885gをオフホワイトの固体として得た。
(2-メタンスルホニル-ベンジル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル（1.55g、5.43ミリモル）を温かいジオキサン（50mL）に溶解し、室温に冷却した。HCl溶液（ジオキサン中4Mの溶液、20ml、80ミリモル）を添加した。20時間後に、白色の沈殿が生成した。その反応液をCHCl3（50mL）で希釈し、濾過した。白色の固体をCHCl3で洗浄し、真空で乾燥させて2-メタンスルホニル-ベンジルアミン塩酸塩1.075gをオフホワイトの固体として得た。m/z 186.6 (M+1)+
上記と同様の操作に従って下記の化合物を調製した。
N4-〔（トランス-4-アミノシクロヘキシル）メチル〕-N2-〔5-クロロ-2-(メチルスルホニル)ベンジル〕-5-ニトロピリミジン-2,4-ジアミン、m/z 469.6 (M+1)+
2-メタンスルホニル-ベンジルアミンについて上記されたのと同様の操作に従って下記の中間体を調製した。
5-クロロ-2-メタンスルホニル-ベンジルアミン、m/z 220.5 (M+1)+
5-クロロ-2-メチルスルファニル-ベンジルアミン中間体の調製
【０２８８】
【化１４６】
2008505910.tif 000148
【０２８９】
5-クロロ-2-フルオロベンゾニトリル（9.0g、57.9ミリモル）をDMF（200mL）に溶解した。ナトリウムメタンチオレート（4.86g、69.4ミリモル）を一度に添加し、その反応液を80℃に加熱した。72時間後に、その反応液を室温に冷却し、EtOAc（250mL）とH2O（250mL）の間に分配した。層を分離し、水層をEtOAc（150mL）で抽出した。合わせた有機層を水（3x250mL）及び食塩水（50mL）で洗浄し、MgSO4で乾燥させ、濾過し、濃縮して黄色の固体11gを得た。EtOHから再結晶して5-クロロ-2-メチルスルファニル-ベンゾニトリル7.5g（２バッチ）を淡黄色の結晶として得た。
5-クロロ-2-メチルスルファニル-ベンゾニトリル（3.9g、21.2ミリモル）をTHF（42mL）に溶解し、０℃に冷却した。ボラン-THF錯体（1MのTHF溶液50mL）を滴下して添加した。０℃で10分後に、その反応液を４時間にわたって65℃に温めた。メタノール（約30mL）を０℃でその反応液に添加した。反応液を室温に温め、10分間撹拌した。その反応溶液を真空で濃縮して濃厚な油を得、これを50％のTHF/MeOH（30mL）に溶解した。4M HCl（30mL）を徐々に添加した。10分後に、その溶液を水（10mL）とDCM（20mL）の間に分配した。水層をDCM（30mL）で抽出し、有機層を捨てた。水層を5M NaOHでpH9に中和した。その溶液をDCM（3x70mL）で抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、MgSO4で乾燥させ、濾過し、濃縮して5-クロロ-2-メチルスルファニル-ベンジルアミン2.9gを淡黄色の油として得た。1H NMR 400MHz (CDCl3)δ7.33(d, 1H, J=2.4Hz), 7.22(dd, 1H, J=2.4, 8.4Hz), 7.13(d, 1H, J=8.4Hz), 3.89(s, 2H), 2.48(s, 3H)
実施例61. シス-2-アミノ-トランス-5-{〔(5-ニトロ-2-{〔2-(トリフルオロメトキシ)ベンジル〕アミノ}ピリミジン-4-イル)アミノ〕メチル}シクロヘキサノール
【０２９０】
【化１４７】
2008505910.tif 000149
【０２９１】
トランス-4-アジド-シス-3-ヒドロキシ-シクロヘキサンカルボン酸メチルエステル（8.66g、43.5ミリモル）をPPh3（13.7g、52.2ミリモル）及び安息香酸（6.4g、52.2ミリモル）と合わせ、THF（150mL）に溶解した。その溶液を０℃に冷却し、DEAD（8.2mL、52.2ミリモル）を20分間にわたって滴下して添加した。その反応液を０℃で24時間撹拌した。次いでその反応液を室温に温めた。室温で６時間後に、その反応液を飽和NaHCO3（100mL）とEt2O（300mL）の間に分配した。層を分離し、水層をEt2O（2x250mL）で抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、MgSO4で乾燥させ、濾過し、濃縮して無色の油を得た。油をEt2O（約200mL）に溶解し、その不均一溶液を濾過し、白色の固体をEt2O（75mL）で洗浄した。濾液を真空で濃縮した。次いでその油を30分間にわたってヘキサン（500mL）中５％のEtOAcとともに撹拌した。その不均一溶液を濾過し、濾液を真空で濃縮した。クロマトグラフィー（コンビフラッシュ、120gのシリカ、ヘキサン中0-30％のEtOAc；Rf=0.4（ヘキサン中25％のEtOAc））にかけて安息香酸-シス-2-アジド-トランス-5-メトキシカルボニル-シクロヘキシルエステル7.6gを無色の油として得た。先のヘキサン/EtOAc濾過からの不純な固体をヘキサン中10％のEtOAcと混合し、加熱、還流した。その不均一溶液を室温に冷却し、濾液を真空で濃縮して淡黄色の油5gを得た。クロマトグラフィー（コンビフラッシュ、120gのシリカ、ヘキサン中0-30％のEtOAc；Rf=0.4（ヘキサン中25％のEtOAc））にかけて安息香酸-シス-2-アジド-トランス-5-メトキシカルボニル-シクロヘキシルエステル更に1.2gを淡黄色の油（合計8.8g、67％）として得た。
【０２９２】
安息香酸-シス-2-アジド-トランス-5-メトキシカルボニル-シクロヘキシルエステル（4.0g、13.2ミリモル）をMeOH（50mL）に溶解した。25％のナトリウムメトキシド溶液（1.51mL、6.6ミリモル）を５分間にわたって滴下して添加した。３時間後に、アンバーライトIRC-50（8g、弱酸性イオン交換樹脂）を添加し、その溶液を室温で振とうした。４時間後に、その不均一溶液を濾過し、樹脂をMeOH（2x40mL）で洗浄した。合わせた濾液を真空で乾燥させた。クロマトグラフィー（コンビフラッシュ、120gのシリカ、ヘキサン中5-50％のEtOAc）にかけてトランス-4-アジド-トランス-3-ヒドロキシ-シクロヘキサン-カルボン酸メチルエステル2.3gを無色の油として得た。1H NMR 400MHz (CDCl3)δ4.05 (brs, 1H), 3.68 (s, 3H), 3.49 (m, 1H), 2.76 (m, 1H), 2.14 (m, 1H), 2.05 (m, 1H), 1.96 (brs, 1H), 1.88 (m, 2H), 1.48-1.72 (m, 2H)
トランス-4-アジド-トランス-3-ヒドロキシシクロヘキサン-カルボン酸メチルエステル（2.75g、13.8ミリモル）をMeOH（70mL）に溶解し、Arでフラッシした。10％のPd/C（0.37g、0.34ミリモル）を添加し、そのフラスコをH2でフラッシした。18時間後に、その反応液を濾過し、触媒をMeOH（2x10mL）で洗浄した。濾液を濃縮し、淡黄色の固体を得、これをDCM（60mL）に溶解し、iPr2NEt（2.65mL、15.2ミリモル）で希釈した。Boc2O（3.32g、15.2ミリモル）を一度に添加した。８時間後に、その反応液を真空で濃縮した。クロマトグラフィー（コンビフラッシュ、120gのシリカ、DCM中0-10％のMeOH；Rf=0.4（DCM中５％のMeOH））にかけてトランス-4-tert-ブトキシカルボニルアミノ-トランス-3-ヒドロキシ-シクロヘキサンカルボン酸メチルエステル3.75gを白色の固体として得た。1H NMR 400MHz (CDCl3)δ4.82 (brs, 1H), 4.11H), 3.67 (s, 3H), 3.51 (brs, 1H), 2.70 (m, 1H), 2.10 (ddd, 1H, J=3.6, 6.2及び14.1Hz), 2.00 (m, 1H), 1.48-1.80 (m, 5H), 1.45 (s, 9H)
【０２９３】
トランス-4-tert-ブトキシカルボニルアミノ-トランス-3-ヒドロキシ-シクロヘキサンカルボン酸メチルエステル（3.75g、13.7ミリモル）をDMF（20mL）に溶解し、TBSCl（2.481g、16.44ミリモル）、イミダゾール（2.8g、41.1ミリモル）及びDMAP（5.02g、41.1ミリモル）を連続して添加した。18時間後に、TBSClの別の部分（1.24g、8.25ミリモル）を添加した。72時間後に、その反応液をEt2O（150mL）と水（100mL）の間に分配した。層を分離し、水層をEt2O（2x100mL）で抽出した。合わせた有機層を水（3x100mL）及び食塩水（50mL）で洗浄し、MgSO4で乾燥させ、濾過し、濃縮して淡褐色の油5.6gを得た。クロマトグラフィー（コンビフラッシュ、120gのシリカ、ヘキサン中3-15％のEtOAc；Rf0.5（ヘキサン中10％のEtOAc））にかけてトランス-4-tert-ブトキシカルボニルアミノ-トランス-3-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-シクロヘキサンカルボン酸メチルエステル3.44gを無色の油（これは徐々に固化した）として得た。
トランス-4-tert-ブトキシカルボニルアミノ-トランス-3-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-シクロヘキサンカルボン酸メチルエステル（3.44g、8.88ミリモル）をEtOH（60mL）に溶解し、その溶液を０℃に冷却した。ホウ水素化ナトリウム（336mg、8.88ミリモル）を一度に添加した。その反応液を一夜にわたって室温に徐々に温めた。18時間後に、更なるホウ水素化ナトリウム（100mg、2.64ミリモル）を添加し、その反応液を40℃に温めた。更に18時間後に、その反応液をEt2O（200mL）と水（100mL）の間に分配した。層を分離し、水層をEt2O（2x150mL）で抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、MgSO4で乾燥させ、濾過し、濃縮して無色の油を得た。クロマトグラフィー（コンビフラッシュ、シリカ、ヘキサン中３％-50％のEtOAc）にかけて〔シス-2-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-トランス-4-ヒドロキシメチル-シクロヘキシル〕-カルバミン酸tert-ブチルエステル1.2gを無色の油（これは固化する）として得た。1H NMR 400MHz (CDCl3)δ4.55 (d, 1H, J=9.2Hz), 3.98 (s, 1H), 3.39 (m, 3H), 1.68-1.85 (m, 3H), 1.44-1.62 (m, 3H), 1.37 (s, 9H), 1.12 (ddd, 1H, J=1.8, 13, 13Hz), 0.97 (m, 1H), 0.85 (s, 9H), 0.00 (s, 6H)
【０２９４】
〔シス-2-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-トランス-4-ヒドロキシメチル-シクロヘキシル〕-カルバミン酸tert-ブチルエステル（1.33g、3.7ミリモル）を乾燥DCM（20mL）に溶解し、５℃に冷却した。ジイソプロピルエチルアミン（0.97mL、5.55ミリモル）及びメタンスルホニルクロリド（0.344mL、4.44ミリモル）を連続して添加した。２時間後に、その反応を冷水（10mL）で停止し、室温に温めた。その溶液をDCM（100mL）と水（50mL）の間に分配した。層を分離し、水層をDCM（2x100mL）で抽出した。合わせた有機層を食塩水で洗浄し、MgSO4で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮してメタンスルホン酸トランス-4-tert-ブトキシカルボニルアミノ-トランス-3-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-シクロヘキシルメチルエステル1.6g（99％）を淡黄色の油として得た。その物質を更に精製しないで使用した。
メタンスルホン酸トランス-4-tert-ブトキシカルボニルアミノ-トランス-3-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-シクロヘキシルメチルエステル（1.6g、3.66ミリモル）を乾燥DMFに溶解し、ナトリウムアジド（475mg、7.31ミリモル）を添加した。その反応液を55℃に加熱した。８時間後に、その反応液を室温に冷却し、ナトリウムアジドの別の部分（119mg、1.83ミリモル）を添加した。72時間後に、その反応液をEtOAc（100mL）と水（50mL）の間に分配した。層を分離し、水層をEtOAc（2x50mL）で抽出した。合わせた有機層を水（3x75mL）及び食塩水（15mL）で洗浄し、MgSO4で乾燥させ、濾過し、濃縮して無色の油を得た。クロマトグラフィー（コンビフラッシュ、40gのシリカ、ヘキサン中3-50％のEtOAc）にかけてトランス-4-アジドメチル-シス-2-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-シクロヘキシル〕-カルバミン酸tert-ブチルエステル1.34g（95％）を無色の油として得た。
【０２９５】
トランス-4-アジドメチル-シス-2-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-シクロヘキシル〕-カルバミン酸tert-ブチルエステル（1.1g、2.86ミリモル）をMeOH（50mL）に溶解し、Arでフラッシした。10％のPd/C（200mg、0.18ミリモル）を添加し、その反応液をH2でフラッシした。18時間後に、その反応液をArでフラッシし、その不均一溶液を濾過した。触媒をMeOH（2x5mL）で洗浄し、溶媒を真空で除去して〔トランス-4-アミノメチル-シス-2-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-シクロヘキシル〕-カルバミン酸tert-ブチルエステル（純度約80％）900mgを得た。m/z 359.6〔M+1〕+。生成物を更に精製しないでその後の工程で使用した。
ジイソプロピルエチルアミン（0.07mL、0.4ミリモル）及び〔トランス-4-アミノメチル-シス-2-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-シクロヘキシル〕-カルバミン酸tert-ブチルエステル（290mg、0.81ミリモル）の溶液をDCM（2mL）に溶解し、(5-ニトロ-4-チオシアネート-ピリミジン-2-イル)-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジル)-アミンの溶液（DCM3mL中）に添加した。18時間後に、その反応液をDCM（10mL）と水（5mL）の間に分配した。層を分離し、水層をDCM（2x5mL）で抽出した。合わせた有機層を水（5mL）及び食塩水（5mL）で洗浄し、MgSO4で乾燥させ、濾過し、濃縮して無色の油を得た。クロマトグラフィー（コンビフラッシュ、12gのシリカ、ヘキサン中５％-40％のEtOAc；Rf（ヘキサン中20％のEtOAc中の生成物）0.3）にかけて（シス-2-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-4-{〔5-ニトロ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-トランス-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル）-カルバミン酸tert-ブチルエステル226mgを淡黄色のフォームとして得た。m/z 671.7〔M+1〕+
（シス-2-(tert-ブチル-ジメチル-シラニルオキシ)-4-{〔5-ニトロ-2-(2-トリフルオロメトキシ-ベンジルアミノ)-ピリミジン-トランス-4-イルアミノ〕-メチル}-シクロヘキシル）-カルバミン酸tert-ブチルエステル（116mg、0.17ミリモル）をジオキサン（2mL）/MeOH（1mL）に溶解し、4M HCl溶液（1.5mL、10ミリモル）を滴下して添加した。18時間後に、MeOHの別の部分（1mL）及び4M HCl溶液（1mL、４ミリモル）を添加した。合計48時間後に、その反応液を濃縮し、残渣をDCMですり砕いた。残渣をクロマトグラフィー（シリカ、12g、9:1:2％のDCM:MeOH:NH4OH）にかけて標題化合物48mg（79％）を淡黄色の固体として得た。m/z 457.5〔M+1〕+
トランス-4-アジド-シス-3-ヒドロキシ-シクロヘキサンカルボン酸メチルエステルを既に記載されたようにして合成した（Krzysztof, K., Tett. Asym., 2001, 12, 455）。
【０２９６】
生物学的活性の評価
PKC-シータ抑制アッセイ
キナーゼGloアッセイを使用してPKC-シータのキナーゼ活性を抑制する化合物の能力を測定した。このアッセイはホタルルシフェラーゼ試薬（キナーゼ-Glo-プロメガ#V6714）を使用してATP及びそのアクセプター基質、〔Ser25〕-タンパク質キナーゼＣ(19-31)（アナスペック#23020）と一緒の酵素のインキュベーション後に残っているATPレベルを検出するタンパク質キナーゼC-シータの酵素活性を検出する。簡単に言えば、化合物を100％のDMSO中で最終の所望のアッセイ濃度の100倍に希釈する。続いて化合物を完全アッセイ緩衝液（50mM HEPES/KOH, pH 7.5; 10mM MgCl2; 50mM KCl; 0.01%CHAPS; 0.1%BSA; 200μM TCEP）中で1:25に希釈する。4Xの４％DMSO原液10μlを384ウェル白色ポリスチレンプレート（グレイナー#781075）に移す。4nM PKC-シータ10μl、続いて10μMペプチド基質及び２μM ATPを含む混合物20μlを化合物に添加する。ブランクウェルをPKC-シータに代えて等容積のアッセイ緩衝液の添加により形成する。完全反応液を室温で90分間インキュベートする。このインキュベーション期間後に、反応をキナーゼ-Glo試薬40μlの添加により停止する。この状態を15分間インキュベートし、その後にLJLアナリストを使用してルミネセンスを定量する。
上記合成実施例及び表中の全ての化合物を上記PKC-シータアッセイで評価し、１μＭ未満のIC50を有することがわかった。好ましい化合物は0.01μＭ以下のIC50を有していた。
上記合成実施例及び表中の化合物の多くをまたSyk、Lyn、Veg-f及びインスリン受容体キナーゼに対して試験してPKC-シータ抑制についての選択性を評価した。幾つかの化合物をまたCDK-2及びPLKを含むその他のキナーゼに対して試験した。化合物の多くが試験した一種以上のその他のキナーゼと較べてPKC-シータの抑制について選択性を示した。
その他のキナーゼに対して試験するためのアッセイ条件は一般に当業界で知られている。使用し得る好適なアッセイの例を以下に記載する。
【０２９７】
SYKキナーゼアッセイ
SykをGST-融合タンパク質として精製する。ユーロピウムキレート標識抗ホスホチロシン抗体を利用してランダムポリマー、ポリGlu4:Tyr1(PGTYR)へのホスフェート移入を検出するDELFIA（解離増進ランタニドフルオロイムノアッセイ）を使用してキナーゼ活性を測定する。
そのキナーゼアッセイをキナーゼアッセイ緩衝液（50mM HEPES, pH 7.0, 25mM MgCl2, 5mM MnCl2, 50mM KCl, 100μM Na3VO4, 0.2% BSA, 0.01% CHAPS, 200μM TCEP）中で行なう。初期に5mg/mLでDMSOに溶解した試験化合物を、96ウェルのポリプロピレンミクロタイタプレート中でアッセイ緩衝液で用量応答（濃度10μＭ（又は５μg/mL）で開始、１〜３回の連続希釈、10の用量）のために予備希釈する。キナーゼ緩衝液中の希釈酵素（最終濃度0.5nM）40μＬの容積及び希釈化合物のアリコート20μＬをニュートラビジン被覆96ウェル白色プレート（ピアス）に連続して添加した。キナーゼ反応をキナーゼ緩衝液中に0.75μM ATP＋4.5ng/μLのPGTYR-ビオチン（CISバイオインターナショナル）を含む基質の混合物40μLの容積で開始する。バックグラウンドウェルをキナーゼ＋緩衝液とともにインキュベートし、基準インヒビターウェルをその化合物に代えて25μM ADP 20μLとともにインキュベートする。アッセイプレートを室温で30分間インキュベートする。インキュベーション後に、アッセイプレートを洗浄緩衝液（50mM Tris-HCl, pH 7.4, 150mM NaCl, 0.05% トゥイーン20, 0.2% BSA）250μLで３回洗浄する。50mM Tris-HCl, pH 7.8, 150mM NaCl, 10μM DTPA, 0.05% トゥイーン40, 0.2% BSA, 0.05% BGG中で希釈したユーロピウム標識抗ホスホチロシン（Eu3+-PT66, ワラックCR04-100）（最終濃度1nM）のアリコート100μＬを夫々のウェルに添加し、室温で30分間インキュベートする。インキュベーションの完結後に、プレートを洗浄緩衝液250μＬで４回洗浄し、DELFIA増進溶液（ワラック）100μＬを夫々のウェルに添加する。15分以上の後に、時間分解蛍光を250μ秒の遅延時間後にLJLアナリスト（360nmで励起、620nmで発光、EU 400ダイクロイックミラー）で測定する。
【０２９８】
LYNキナーゼアッセイ
Lyn(Kd)をGST-融合タンパク質として精製する。ユーロピウムキレート標識抗ホスホチロシン抗体を利用してランダムポリマー、ポリGlu4:Tyr1(PGTYR)へのホスフェート移入を検出するDELFIA（解離増進ランタニドフルオロイムノアッセイ）を使用してキナーゼ活性を測定する。
そのキナーゼアッセイをキナーゼアッセイ緩衝液（50mM HEPES, pH 7.0, 25mM MgCl2, 5mM MnCl2, 50mM KCl, 100μM Na3VO4, 0.2% BSA, 0.01% CHAPS, 200μM TCEP）中で行なう。初期に5mg/mLでDMSOに溶解した試験化合物を、96ウェルのポリプロピレンミクロタイタプレート中でアッセイ緩衝液で用量応答（濃度10μＭ（又は５μg/mL）で開始、１〜３回の連続希釈、10の用量）のために予備希釈する。キナーゼ緩衝液中の希釈酵素（最終濃度0.7nM）40μＬの容積及び希釈化合物のアリコート20μＬをニュートラビジン被覆96ウェル白色プレート（ピアス）に連続して添加した。キナーゼ反応をキナーゼ緩衝液中に1.25μM ATP＋4.5ng/μLのPGTYR-ビオチン（CISバイオインターナショナル）を含む基質の混合物40μLの容積で開始する。バックグラウンドウェルをキナーゼ＋緩衝液とともにインキュベートし、基準インヒビターウェルをその化合物に代えて25μM ADP 20μLとともにインキュベートする。アッセイプレートを室温で30分間インキュベートする。インキュベーション後に、アッセイプレートを洗浄緩衝液（50mM Tris-HCl, pH 7.4, 150mM NaCl, 0.05% トゥイーン20, 0.2% BSA）250μLで３回洗浄する。50mM Tris-HCl, pH 7.8, 150mM NaCl, 10μM DTPA, 0.05% トゥイーン40, 0.2% BSA, 0.05% BGG中で希釈したユーロピウム標識抗ホスホチロシン（Eu3+-PT66, ワラックCR04-100）（最終濃度1nM）のアリコート100μＬを夫々のウェルに添加し、室温で30分間インキュベートする。インキュベーションの完結後に、プレートを洗浄緩衝液250μＬで４回洗浄し、DELFIA増進溶液（ワラック）100μＬを夫々のウェルに添加する。15分以上の後に、時間分解蛍光を250μ秒の遅延時間後にLJLアナリスト（360nmで励起、620nmで発光、EU 400ダイクロイックミラー）で測定する。
【０２９９】
治療上の使用の方法
本発明の化合物はPKC-シータ活性の有効なインヒビターであり、それ故、患者のPKC-シータ活性を抑制し、PKC-シータの活性により媒介又は持続される種々の疾患及び障害を治療するのに有益である。
理論により束縛されたくないが、本発明の化合物はPKC-シータの有効な抑制によりＴ細胞活性化を抑制すると予想され、それ故、Ｔ細胞活性化と関連する疾患及び障害を治療するのに有益である。例えば、Ｔ細胞活性化の抑制は免疫機能を選択的に抑制するのに治療上有益である。こうして、本発明の化合物によるPKC-シータの抑制は炎症性疾患、自己免疫疾患、臓器及び骨髄の移植片拒絶並びにＴ細胞媒介免疫応答と関連するその他の障害を含む、種々の免疫障害を治療するのに魅力的な手段である。特に、本発明の化合物は急性又は慢性の炎症、アレルギー、接触皮膚炎、乾癬、慢性関節リウマチ、多発性硬化症、Ｉ型糖尿病、炎症性腸疾患、ギラン-バレー症候群、クローン病、潰瘍性大腸炎、移植片対宿主病（及び臓器又は骨髄移植片拒絶のその他の形態）及びエリテマトーデスを治療するのに使用し得る。Ｔ細胞媒介免疫応答と関連するその他の障害は当業者に明らかであり、また本発明の化合物及び組成物で治療し得る。
【０３００】
加えて、PKCシータ活性化は骨格筋におけるインスリン耐性と関連することが示されていた。それ故、本発明の化合物によるPKC-シータの抑制はまたII型糖尿病を治療するのに魅力的な手段である。
治療上の使用のために、本発明の化合物はあらゆる通常の様式であらゆる医薬投薬形態の医薬組成物により投与し得る。通常の投薬形態は典型的には選ばれた特別な投薬形態に好適な医薬上許される担体を含む。投与の経路として、静脈内、筋肉内、皮下、滑液包内、注入、舌下、経皮、経口、局所又は吸入が挙げられるが、これらに限定されない。投与の好ましい様式は経口及び静脈内である。
本発明の化合物は単独で投与されてもよく、又はインヒビターの安定性を高め、或る実施態様ではそれらを含む医薬組成物の投与を促進し、増大された溶解又は分散を与え、抑制活性を増大し、補助治療を与える等のアジュバント（その他の活性成分を含む）と組み合わせて投与されてもよい。一つの実施態様において、例えば、本発明の多種の化合物が投与し得る。有利には、このような組み合わせ治療は一層低い用量の通常の治療薬を利用し、こうしてこれらの薬剤が単一治療薬として使用される場合に誘発される可能な毒性及び不利な副作用を回避する。本発明の化合物は単一医薬組成物へと通常の治療薬又はその他のアジュバントと物理的に合わされてもよい。有利には、化合物はその後に単一投薬形態で一緒に投与し得る。或る実施態様において、化合物のこのような組み合わせを含む医薬組成物は少なくとも約５％(w/w)、更に好ましくは少なくとも約20％(w/w)の式(I)の化合物又はその組み合わせを含む。本発明の化合物の最適％(w/w)は変化してもよく、当業者の範囲内である。また、本発明の化合物及び通常の治療薬又はその他のアジュバントは別々に投与されてもよい（連続に、又は平行に）。別々の投薬は投薬養生法の一層大きい融通性を可能にする。
【０３０１】
上記のように、本発明の化合物の投薬形態は当業者に知られており、かつ投薬形態に好適な医薬上許される担体及びアジュバントを含んでもよい。これらの担体及びアジュバントとして、例えば、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質、緩衝剤物質、水、塩又は電解質及びセルロース系物質が挙げられる。好ましい投薬形態として、錠剤、カプセル、カプレット、液体、溶液、懸濁液、エマルション、ロゼンジ、シロップ、再生可能な粉末、顆粒、座薬及び経皮パッチが挙げられる。このような投薬形態の調製方法が知られている（例えば、H.C. Ansel及びN.G. Popovish, Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 第５編, Lea and Febiger (1990)を参照のこと）。本発明の化合物についての用量レベル及び要件は特別な患者に適した利用できる方法及び技術から当業者により選ばれてもよい。或る実施態様において、用量レベルは70kgの患者について約1-1000mg/投薬の範囲である。毎日１回の投薬が充分であるかもしれないが、毎日５回までの投薬が施されてもよい。経口用量について、2000mg/日までが必要とされるかもしれない。当業者が認めるように、一層低い又は一層高い用量が特別な因子に応じて必要とされるかもしれない。例えば、特別な用量及び治療養生法は患者の全般の健康プロフィール、患者の障害の重度及び経過又はその気質、並びに治療医師の判断の如き因子に依存するであろう。
【国際調査報告】
2008505910.tif 000157
2008505910.tif 000158