(57)【要約】  式（Ｉ）の新規な２，６−ジアミノピリジン−３−オン誘導体（式中、Ｒ1とＲ2は下に定義されるとおりである）が開示される。これらの化合物はサイクリン依存性キナーゼを阻害する。これらの化合物及びこれらの医薬的に許容される塩及びエステルは、抗増殖活性を有し、そして癌、特に固形腫瘍の治療又は制御に有用である。本発明はまた、このような化合物を含む医薬組成物、及び癌を治療又は制御するための方法、最も特には乳房、肺、大腸、及び前立腺腫瘍の治療又は制御するための方法に関する。また、これらの新規な２，６−ジアミノピリジン−３−オン誘導体の調製において有用な中間体も開示される。
2008505955.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式の化合物
【化１】
2008505955.tif 000076
（式中、
Ｒ1は、複素環、及び低級アルキル−複素環から成る群から選択され、ここで両方の例における複素環部分は、
（ａ）Ｈ、
（ｂ）低級アルキル、
（ｃ）オキソ、ＯＲ12、ＣＯ2Ｒ12、ＮＲ5Ｒ6、Ｓ（Ｏ）nＲ15、アリール、又はＣ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキル、
（ｄ）ＣＯ2Ｒ7、
（ｅ）ＣＯＲ12、
（ｆ）Ｃ（Ｏ）ＮＲ13Ｒ14、
（ｇ）Ｓ（Ｏ）nＲ15、
（ｈ）オキソ、
（ｉ）ＯＲ12、又は
（ｊ）ＮＲ5Ｒ6、
から成る群から独立に選択される４以下の置換基により任意的に置換されている；
Ｒ2は、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、及び複素環から成る群から選択され、ここでそれぞれは、
（ａ）低級アルキル、
（ｂ）ハロゲン又はＯＲ10により置換された低級アルキル、
（ｃ）ハロゲン、
（ｄ）ＯＲ12、
（ｅ）ＮＯ2、
（ｆ）ＣＮ
（ｇ）ＮＲ5Ｒ6、
（ｈ）Ｓ（Ｏ）n−Ｒ9、及び
（ｉ）ＳＯ2−ＮＲ16Ｒ17；
から成る群から独立に選択される４以下の置換基により任意的に置換されている。
Ｒ5及びＲ6は、
（ａ）Ｈ、
（ｂ）低級アルキル
（ｃ）オキソ、ＣＯ2Ｒ12、ＯＲ12、ＮＲ13Ｒ14、Ｃ（Ｏ）ＮＲ13Ｒ14、ＳＯ2Ｒ15、ＮＳＯ2Ｒ12、ヘテロアリール、複素環、又はオキソにより置換された複素環により置換された低級アルキル、
（ｄ）シクロアルキル、
（ｅ）ＣＯ2Ｒ12、ＯＲ12、ＮＲ13Ｒ14、Ｃ（Ｏ）ＮＲ13Ｒ14、又はＳＯ2Ｒ15により置換されたシクロアルキル、
（ｆ）アリール、
（ｇ）ＮＲ13Ｒ14、ＯＲ12、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ13Ｒ14、ＳＯ2Ｒ15、ハロゲン、低級アルキル、又はハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ13Ｒ14、又はＮＲ13Ｒ14により置換された低級アルキルにより置換されたアリール、
（ｈ）ＳＯ2Ｒ15，
（ｉ）ＣＯ2Ｒ12、
（ｊ）ＣＯＲ12、及び
（ｋ）
【化２】
2008505955.tif 000077
から成る群からそれぞれ独立に選択されており、
あるいは、−ＮＲ5Ｒ6基は、全部で３〜７つの環原子を有する環を形成することができ、当該環原子は、Ｒ5及びＲ6に結合する窒素原子のほかに、炭素原子を含んで成り、当該炭素環原子は、任意的に１又は複数の更なるＮ又はＯ環原子、あるいはＳＯ2基により任意的に置き換えられており、そして当該環原子は、ＯＨ、オキソ、ＮＲ13Ｒ14、低級アルキル、及びＯＲ12により置換された低級アルキルにより任意的に置換されている；
Ｒ7は、
（ａ）Ｈ、
（ｂ）低級アルキル、
（ｃ）ＯＲ12、ＣＯ2Ｒ12、ＮＲ5Ｒ6、又はＣ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキル、
（ｄ）ハロゲン、
（ｅ）オキソ、
（ｆ）アリール、
（ｇ）低級アルキル、ハロゲン、及びＮＲ5Ｒ6から独立に選択される３以下の置換基により置換されたアリール、
（ｈ）シクロアルキル
（ｉ）ＯＨ、オキソ、又はＮＨ2により置換されたシクロアルキル、
（ｊ）ＳＯ2Ｒ15、及び
（ｋ）ＣＯＲ12、
から成る群から選択される；
Ｒ9は、
（ａ）Ｈ、及び
（ｂ）低級アルキル
から成る群から選択される；
Ｒ10は、
（ａ）低級アルキル、
（ｂ）アリール、及び
（ｃ）ハロゲン又はＮＲ5Ｒ6により置換されたアリール
から選択される；
Ｒ11は、
（ａ）Ｈ、
（ｂ）低級アルキル、及び
（ｃ）オキソ及びハロゲンにより置換された低級アルキル
から成る群から選択される；
Ｒ12は、
（ａ）Ｈ、
（ｂ）低級アルキル、及び
（ｃ）ＮＲ5Ｒ6又はＯＲ11により置換された低級アルキル
から成る群から選択される；
Ｒ13及びＲ14は、
（ａ）Ｈ、
（ｂ）低級アルキル
（ｃ）ＣＯ2Ｒ12、ＯＲ12、ＮＲ5Ｒ6、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ15、ＮＳＯ2Ｒ12、ヘテロアリール、複素環、又はオキソにより置換された複素環により置換された低級アルキル、
（ｄ）シクロアルキル、
（ｅ）ＣＯ2Ｒ12、ＯＲ12、ＮＲ5Ｒ6、ＣＯＮＲ5Ｒ6、又はＳＯ2Ｒ15により置換されたシクロアルキル、
（ｆ）アリール、
（ｇ）ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ12、ＣＯ2Ｒ12、ＣＯＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ15、ハロゲン、低級アルキル、又はハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキルにより置換されたアリール、
（ｈ）ＳＯ2Ｒ15，
（ｉ）ＣＯ2Ｒ12、
（ｊ）ＣＯＲ12、及び
（ｋ）
【化３】
2008505955.tif 000078
から成る群から独立に選択され、
あるいは、−ＮＲ13Ｒ14基は、全部で３〜７つの環原子を有する環を形成することができ、当該環原子は、Ｒ13及びＲ14に結合する窒素原子のほかに、炭素原子を含んで成り、当該炭素環原子は、任意的に１又は複数の更なるＮ又はＯ環原子により任意的に置き換えられており、そして当該環原子は、ＯＨ、オキソ、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキル、及びＯＲ12により置換された低級アルキルにより任意的に置換されている；
Ｒ15は、
（ａ）アリール、
（ｂ）ハロゲン、ＣＯ2Ｒ12、ＳＯ2Ｒ10、ＣＯＲ12、低級アルキル、及びハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキルにより置換されたアリール、
（ｃ）ヘテロアリール、
（ｄ）ハロゲン、ＣＯ2Ｒ12、ＳＯ2Ｒ10、ＣＯＲ12、低級アルキル、及びハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキルにより置換されたヘテロアリール、
（ｅ）ＮＲ5Ｒ6、
（ｆ）低級アルキル、
（ｇ）ハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキル、
（ｈ）複素環、及び
（ｉ）ＣＯ2Ｒ12、ＣＯＲ12、ＳＯ2Ｒ12、低級アルキル、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された複素環、
から成る群から選択される；
Ｒ16及びＲ17は、それぞれ独立に、
（ａ）Ｈ、及び
（ｂ）低級アルキル
から成る群から選択され、
あるいは、−ＮＲ16Ｒ17基は、全部で３〜７つの環原子を有する環を形成することができ、当該環原子は、Ｒ16及びＲ17に結合する窒素原子のほかに、炭素原子を含んで成り、当該炭素環原子は、任意的に１又は複数の更なるＮ又はＯ環原子により任意的に置き換えられており、そして当該環原子は、低級アルキル、ＯＨ、オキソ、及びＮＨ2により任意的に置換されている；
ｎは、０、１、又は２である；）
又はその医薬的に許容される塩若しくはエステル。
【請求項２】
前記式中、Ｒ2がフェニルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記式中、Ｒ2がハロゲン又はＯＲ12により置換されたフェニルであり、そしてＲ12が低級アルキルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
ハロゲンがＦであり、そしてＲ12がメチルである、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
前記式中、Ｒ1が
【化４】
2008505955.tif 000079
から成る群から選択される、請求項１に記載の化合物
（式中、
Ｒ3は、
（ａ）Ｈ、
（ｂ）低級アルキル、
（ｃ）オキソ、ＯＲ12、ＣＯ2Ｒ12、ＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ15、アリール、又はＣ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキル、
（ｄ）ＣＯ2Ｒ7、
（ｅ）ＣＯＲ12、
（ｆ）Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、及び
（ｇ）ＳＯ2Ｒ15
から成る群から選択される；
Ｒ4は
（ａ）Ｈ、
（ｂ）ＯＲ11、
（ｃ）低級アルキル、
（ｄ）ＮＲ5Ｒ6、
（ｅ）ＮＯ2、
（ｆ）オキソ、
（ｇ）ＣＮ、及び
（ｈ）ハロゲン
からなる群から選択される；
Ｒ5とＲ6は、
（ａ）Ｈ、
（ｂ）低級アルキル、
（ｃ）オキソ、ＣＯ2Ｒ12、ＯＲ12、ＮＲ13Ｒ14、Ｃ（Ｏ）ＮＲ13Ｒ14、ＳＯ2Ｒ15、ＮＳＯ2Ｒ12、ヘテロアリール、複素環、又はオキソにより置換された複素環により置換された低級アルキル、
（ｄ）シクロアルキル、
（ｅ）ＣＯ2Ｒ12、ＯＲ12、ＮＲ13Ｒ14、Ｃ（Ｏ）ＮＲ13Ｒ14又はＳＯ2Ｒ15により置換されたシクロアルキル、
（ｆ）アリール、
（ｇ）ＮＲ13Ｒ14、ＯＲ12、ＣＯ2Ｒ12、ＣＯＮＲ13Ｒ14、ＳＯ2Ｒ15、ハロゲン、低級アルキル、及びハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、ＣＯＮＲ13Ｒ14又はＮＲ13Ｒ14により置換された低級アルキルにより置換されたアリール；
（ｈ）ＳＯ2Ｒ15、
（ｉ）ＣＯ2Ｒ12、
（ｊ）ＣＯＲ12、及び
（ｋ）
【化５】
2008505955.tif 000080
から成る群からそれぞれ独立に選択され、
あるいは、−ＮＲ5Ｒ6基は、全部で３〜７つの環原子を有する環を形成することができ、当該環原子は、Ｒ5及びＲ6に結合する窒素原子のほかに、炭素原子を含んで成り、当該炭素環原子は、任意的に１又は複数の更なるＮ又はＯ環原子、あるいはＳＯ2基により任意的に置き換えられており、そして当該環原子は、ＯＨ、オキソ、ＮＲ13Ｒ14、低級アルキル、及びＯＲ12により置換された低級アルキルにより任意的に置換されている；
Ｒ7は、
（ａ）Ｈ、
（ｂ）低級アルキル、
（ｃ）ＯＲ12、ＣＯ2Ｒ12、ＮＲ5Ｒ6、又はＣＯＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキル、
（ｄ）ハロゲン、
（ｅ）オキソ、
（ｆ）アリール、
（ｇ）低級アルキル、ハロゲン、及びＮＲ5Ｒ6から独立に選択される３以下の置換基により置換されたアリール、
（ｈ）シクロアルキル
（ｉ）ＯＨ、オキソ、又はＮＨ2、ＳＯ2Ｒ15により置換されたシクロアルキル、及び
（ｊ）ＣＯＲ12、
から成る群から選択される；
Ｒ10は、
（ａ）低級アルキル、
（ｂ）アリール、及び
（ｃ）ハロゲン又はＮＲ5Ｒ6により置換されたアリール
から成る群から選択される；
Ｒ11は、
（ａ）Ｈ、
（ｂ）低級アルキル、及び
（ｃ）オキソ及びハロゲンにより置換された低級アルキル
から成る群から選択される；
Ｒ12は、
（ａ）Ｈ、
（ｂ）低級アルキル、及び
（ｃ）ハロゲン、オキソ、ＮＲ5Ｒ6又はＯＲ11により置換された低級アルキル
から成る群から選択される；
Ｒ13とＲ14は、
（ａ）Ｈ、
（ｂ）低級アルキル
（ｃ）ＣＯ2Ｒ12、ＯＲ12、ＮＲ5Ｒ6、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ15、ＮＳＯ2Ｒ12、ヘテロアリール、複素環、又はオキソにより置換された複素環により置換された低級アルキル、
（ｄ）シクロアルキル、
（ｅ）ＣＯ2Ｒ12、ＯＲ12、ＮＲ5Ｒ6、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＳＯ2Ｒ15により置換されたシクロアルキル、
（ｆ）アリール、
（ｇ）ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ12、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ15、ハロゲン、低級アルキル、又はハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキルにより置換されたアリール、
（ｈ）ＳＯ2Ｒ15，
（ｉ）ＣＯ2Ｒ12、
（ｊ）ＣＯＲ12、及び
（ｋ）
【化６】
2008505955.tif 000081
から成る群から独立に選択され、
あるいは、−ＮＲ13Ｒ14基は、全部で３〜７つの環原子を有する環を形成することができ、当該環原子は、Ｒ13及びＲ14に結合する窒素原子のほかに、炭素原子を含んで成り、当該炭素環原子は、任意的に１又は複数の更なるＮ又はＯ環原子により任意的に置き換えられており、そして当該環原子は、ＯＨ、オキソ、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキル、及びＯＲ12により置換された低級アルキルにより任意的に置換されている；
Ｒ15は、
（ａ）アリール、
（ｂ）ハロゲン、ＣＯ2Ｒ12、ＳＯ2Ｒ10、ＣＯＲ12、低級アルキル、及びハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキルにより置換されたアリール、
（ｃ）ヘテロアリール、
（ｄ）ハロゲン、ＣＯ2Ｒ12、ＳＯ2Ｒ10、ＣＯＲ12、低級アルキル、及びハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキルにより置換されたヘテロアリール、
（ｅ）ＮＲ5Ｒ6、
（ｆ）低級アルキル、
（ｇ）ハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキル、
（ｈ）複素環、及び
（ｉ）ＣＯ2Ｒ12、ＣＯＲ12、ＳＯ2Ｒ12、低級アルキル、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された複素環、
から成る群から選択される；
Ｘは、
（ａ）Ｓ、
（ｂ）ＳＯ、
（ｃ）ＳＯ2、
（ｄ）Ｏ
から選択される；そして
ｎは、０、１、又は２である）、
又はその医薬的に許容される塩若しくはエステル。
【請求項６】
前記式中、Ｒ1が、Ｈ、低級アルキル、Ｓ（Ｏ）nＲ15、ＣＯ2Ｒ7、ＣＯＲ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ13Ｒ14から独立に選択される４以下の置換基で置換された複素環である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
前記式中、Ｒ1が、Ｈ、低級アルキル、Ｓ（Ｏ）nＲ15、ＣＯ2Ｒ7、ＣＯＲ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ13Ｒ14により置換された複素環である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
前記式中、Ｒ1が、アリールにより置換された低級アルキルにより置換された複素環である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
以下の式
【化７】
2008505955.tif 000082
を有する請求項５に記載の化合物であって、式中、Ｒ18、Ｒ19、Ｒ20、及びＲ21は、それぞれ独立に、低級アルキル、ハロゲン、及びＯＲ12から選択される、化合物。
【請求項１０】
ハロゲンがＦ又はＣｌである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
前記式中、Ｒ3が、ＣＯ2Ｒ7、ＣＯＲ12、ＳＯ2Ｒ15、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、低級アルキル、及びアリールにより置換された低級アルキルから成る群から選択される、請求項９に記載の化合物。
【請求項１２】
前記式中、アリールがフェニルである、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１３】
前記式中、Ｒ3がＳＯ2Ｒ15である、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１４】
前記式中、Ｒ15が低級アルキル又はＮＲ5Ｒ6である、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
前記式中、Ｒ4が、Ｈ、ＯＲ11、及び低級アルキルから選択される、請求項９に記載の化合物。
【請求項１６】
前記式中、Ｒ5及びＲ6は、それぞれが独立に、Ｈ及び低級アルキルから成る群から選択される、あるいは、
−ＮＲ5Ｒ6基が、全部で３〜７つの環原子を有する環を形成することができ、当該環原子は、Ｒ5及びＲ6に結合する窒素原子のほかに、炭素環原子を含んで成り、当該炭素環原子は、任意的に１又は複数の更なるＮ又はＯ環原子により任意的に置き換えられており、そして当該環原子は、ＯＨ、オキソ及びＮＨ2、低級アルキル、及びＯＲ12により置換された低級アルキルにより任意的に置換されている、請求項９に記載の化合物。
【請求項１７】
前記式中、Ｒ12が低級アルキルである、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
請求項９に記載の式Ｉａの化合物
（式中、
Ｒ3は、水素；
ベンジル；
（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；
−Ｓ（Ｏ）2−（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；
−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；
−Ｃ（Ｏ）2−（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；及び
−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；
を表す；
Ｒ4は、水素を表す；そして、
Ｒ18、Ｒ19、Ｒ20、及びＲ21は、それぞれ独立に、
（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；
−Ｏ−（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；及び
ハロゲンを表す）。
【請求項１９】
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−メトキシ−フェニル）−メタノン；
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−フルオロ−フェニル）−メタノン；
４−［６−アミノ−５−（２−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル；
［２−アミノ−６−（１−エタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−フルオロ−フェニル）−メタノン；
１−｛４−［６−アミノ−５−（２−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−エタノン；
１−｛４−［６−アミノ−５−（２−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−プロパン−１−オン；
４−［６−アミノ−５−（２−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルアミド；
４−［６−アミノ−５−（２−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸メチルアミド；
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（３−メトキシ−フェニル）−メタノン；
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル；
から成る群から選択される、請求項５に記載の化合物。
【請求項２０】
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン；
［２−アミノ−６−（１−エタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン；
｛２−アミノ−６−［１−（プロパン−１−スルホニル）−ピペリジン−４−イルアミノ］−ピリジン−３−イル｝−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン；
｛２−アミノ−６−［１−（プロパン−２−スルホニル）−ピペリジン−４−イルアミノ］−ピリジン−３−イル｝−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン）；
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステル；
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸プロピルエステル；
［２−アミノ−６−（１−ベンジル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン；
１−｛４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−１−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−エタノン；
１−｛４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−プロパン−１−オン；
から成る群から選択される、請求項５に記載の化合物。
【請求項２１】
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸メチルアミド；
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルアミド；
［２−アミノ−６−（１−メチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン；
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（４−メトキシ−フェニル）−メタノン；
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（４−フルオロ−フェニル）−メタノン；
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−フェニル）−メタノン；
４−［６−アミノ−５−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル；
１−｛４−［６−アミノ−５−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−エタノン；
１−｛４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−４−メチル−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−エタノン；
から成る群から選択される、請求項５に記載の化合物。
【請求項２２】
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−４−メチル−フェニル）−メタノン；
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−４−メチル−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル；
１−｛４−［６−アミノ−５−（４−クロロ−５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−エタノン；
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（４−クロロ−５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン；
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−４−クロロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル；及び
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−メタノン
から成る群から選択される、請求項５に記載の化合物。
【請求項２３】
請求項１に記載の化合物、及び医薬的に許容される担体又は賦形剤を含んで成る、医薬組成物。
【請求項２４】
非経口投与に適当である、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
癌の治療のための、請求項２３又は２４に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
固形腫瘍の治療のための、請求項２３又は２４に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
乳房、肺、大腸、又は前立腺の腫瘍の治療のための、請求項２３又は２４に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
治療が必要な対象に対して、治療的有効量の少なくとも１つの請求項１に記載の化合物を投与することを含んで成る、固形の乳房又は大腸の腫瘍を治療するための方法。
【請求項２９】
癌の治療のための医薬の製造における、請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項３０】
固形腫瘍の治療のための医薬の製造における、請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項３１】
乳房、肺、大腸、又は前立腺の腫瘍の治療のための医薬の製造における、請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項３２】
治療剤としての使用のための、請求項１に記載の化合物。
【請求項３３】
抗癌剤としての使用のための、請求項１に記載の化合物。
【請求項３４】
固形腫瘍の治療のための、請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項３５】
乳房、肺、大腸、又は前立腺の腫瘍の治療のための、請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項３６】
請求項１に記載の式Ｉの化合物の調製方法であって、
ａ）式
【化８】
2008505955.tif 000083
の化合物を、式
【化９】
2008505955.tif 000084
の化合物に変換し、そして
ｂ）前記式（Ｂ）の化合物を、式
【化１０】
2008505955.tif 000085
の有機リチウム化合物の存在下において更に反応させて、式
【化１１】
2008505955.tif 000086
の化合物を与え、そして
ｃ）前記式（Ｄ）の化合物を、式
【化１２】
2008505955.tif 000087
のアミンの存在下において更に反応させ、対応する式Ｉの化合物を与え、これは、
ｄ）反応混合物から分離することができ、所望の場合には、医薬的に許容される塩又はエステルに変化させることができる；式中Ｒ1及びＲ2は請求項１に与えられた意味を有する、方法。
【請求項３７】
実質的に本明細書に記載される、新規な化合物、中間体、製剤、工程、方法、及び使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、サイクリン依存性キナーゼを阻害する新規な２，６−ジアミノピリジン−３−オン誘導体に関する。これらの化合物及びこれらの医薬的に許容される塩及びエステルは抗増殖活性を有し、そしてとりわけ、癌、特に固形腫瘍の治療又は制御において有用である。本発明はまた、このような化合物を含有する医薬組成物、及び癌を治療又は制御する方法、特に乳、肺、大腸、及び前立腺腫瘍の治療又は制御に関する。最後に、本発明はまた、本明細書に開示される新規なジアミノピリジンの調製において有用な新規な中間体化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
制御されていない細胞増殖は癌の特徴である。癌性腫瘍細胞は、典型的には細胞分裂周期を直接的に又は間接的に制御する遺伝子に対する障害のいくつかの形態を有する。
【０００３】
細胞周期の多様な期における細胞の進行は、調節タンパク質、サイクリン、及びキナーゼから成る一連の多酵素複合体により制御される。これらのキナーゼは、サイクリン依存性キナーゼ（Ｃｄｋ）と称される。Ｃｄｋは細胞周期間において発現され、一方サイクリンのレベルは細胞周期の段階に依存して変化する。
【０００４】
細胞周期制御の４つの主要な期は、Ｇ1、Ｓ、Ｇ2、及びＭとして一般的に説明される。細胞周期制御のためのいくつかの必須酵素は、サイクリンＤ／Ｃｄｋ４、サイクリンＤ／Ｃｄｋ６、サイクリンＥ／Ｃｄｋ２、サイクリンＡ／Ｃｄｋ２、及びサイクリンＢ／Ｃｄｋ１（Ｃｄｃ／サイクリンＢとしても知られる）であるとされる。サイクリンＤ／Ｃｄｋ４、サイクリンＤ／Ｃｄｋ６、及びサイクリンＥ／Ｃｄｋ２は、網膜芽細胞腫リン酸化タンパク質、ｐＲｂのリン酸化によりＧ１期及びＧ１からＳ期への移行間の継代を制御する。サイクリンＡ／Ｃｄｋ２はＳ期間の継代を制御し、そしてＢ／Ｃｄｋ１はＧ２チェックポイントを制御し、そしてＭ（有糸分裂）期への移行を調節する。
【０００５】
細胞周期の進行は、細胞が細胞質分裂に入るとき、初期Ｇ１後のＣｄｋ１（ｃｄｃ２）及びＣｄｋ２により制御される。これによりこれらのＣｄｋの薬物阻害は、細胞増殖を抑止するだけでなく、アポトーシス細胞死の引き金となるようである。一度細胞がＧ１制限点を経過してＳ期に入ると、これら連続性の細胞周期進行のための成長因子刺激と独立になる。
【０００６】
ＤＮＡ複製の完了後、細胞は、Ｍ期及び細胞質分裂の準備における細胞周期のＧ２期に入る。Ｃｄｋ１は、サイクリンＡ及びＢの両方に関係するこれらの細胞周期の後期において細胞の継代を制御することが示されている。完全なＣｄｋ１の活性化はサイクリン結合と特異的なリン酸化の両方を必要とする(Morgan, D. O., De Bondt, H. L, Curr. Opin. Cell. Biol. 1994, 6, 239-246)。一度活性化されると、Ｃｄｋ１／サイクリン複合体はＭ期における分裂のための細胞を準備する。
【０００７】
上述のＧ１期からＳ期への移行は、サイクリンＤを伴うＣｄｋ４とサイクリンＥを伴うＣｄｋ２の複合体により調製される。これら複合体は、腫瘍抑制タンパク質網膜芽細胞腫（ｐＲｂ）をリン酸化し、転写因子Ｅ２Ｆを放出し、そしてＳ期において必要とされる遺伝子の発現を許容する(Nevins, J. R. Science 1992, 258, 424-429; Lavia, P. BioEssays 1999, 21, 221-230)。Ｃｄｋ４／サイクリンＤとＣｄｋ２／サイクリンＥの複合体の活性を遮断することは、Ｇ１期の細胞周期を抑止する。例えば、ｐ１６INK4aを含むＩＮＫ４ファミリーのタンパク質、これはＣｄｋ４／サイクリンＤ複合体のキナーゼ活性を遮断する、はＧ１における抑止の原因となる(Sherr, C. J. Science 1996, 274, 1672-1677)。特異的な遮断が再調査された(Vidal, A. Gene 2000, 247, 1-15)。
【０００８】
ここ最近の実験は、サイクリンＤ３を伴うＣｄｋ４の複合体もまた、Ｇ２期において細胞周期の進行において重要な役割を果たすことを示す。ｐ１６又はドミナントネガティブＣｄｋ４の使用のいずれかによる当該複合体の阻害は、ｐＲｂを発現しない細胞のＧ２期における抑止をもたらす(Gabrielli B. G. et al. J. Biol. Chem. 1999, 274, 13961-13969)。
【０００９】
このように、細胞増殖の制御におけるｃｄｋｓの役割は、良く確立されている。例えば、上に示されるとおり、抗増殖治療剤として、Ｃｄｋ４、Ｃｄｋ２、及びＣｄｋ１経路における標的を阻害する化合物の使用を確認する広範な文献が存在する。従って、細胞増殖の阻害剤は、異常な細胞成長を有する疾患プロセス、例えば、癌及び他の細胞増殖障害、例えば、炎症（例えば、良性前立腺肥大、家族性アデノーマシス、ポリープ症、神経線維腫症、粥状動脈硬化、肺線維症、関節炎、乾癬、炎症性腸疾患、移植拒絶感染症）、ウイルス感染（例えば、制限されることなくヘルペスウイルス、ポックスウイルス、ＥＢウイルスを含む）、自己免疫疾患（例えば、ループス、関節リウマチ、乾癬、炎症性腸疾患）、神経変性障害（例えば、制限されることなくアルツハイマー病を含む）、及び神経変性疾患（例えば、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、網膜色素変性症、脊髄性筋萎縮症、及び脳変性）の治療において有用な可逆性細胞分裂阻害剤として作用する。
【００１０】
いくつかの小分子の異なるクラスは、Ｃｄｋｓの阻害剤として認識されてきた：オロモウシン（olomoucine）及び他のプリン類似体、フラボピリドール（flavopiridol）、スタウロスポリン、ＵＣＮ−０１及び他の インドロカルバゾール（indolocarbazole）、９−ヒドロキシエリプチシン, インジルビン（indirubin）、パウロン（paullones）、ジアリール尿素、キナゾリン、インドピラゾール、［２，３−ｄ］ピリドピリミジン、ファスカプリシン（fascaplysin）、アミノチアゾール、ジアミノチアゾール、ｐ−テリジノン（p-teridinones）、及びピラゾール又は他の例(Carlson et. al., Cancer Res.. 1996, 56, 2973-2978: De Azevedo et al., Eur. J. Biochem., 1997, 243, 518-526; Bridges, A.J., Exp. Opin. Ther. Patents. 1995, 5, 12451257; Reinhold et al., J. Biol. Chem. 1998, 278, 3803-3807; Kakeya, H. et. al., Cancer Res.. 1998, 58, 704-710; Harper, J.W., Cancer Surveys 1997, 29, 91-107; Harrington, E.A., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1998, 95, 11945-11950; Meijer, L., et al., Eur. J. Biochem.. 2000, 267, 1-13; Garrett, M. D. et. al., Current Opin. Genetics Develop. 1999, 9, 104-111; Mgbonyebi, O. P. et al., Cancer Res.. 1999, 59, 1903-1910; Hoessel et al., Nature Cell Biology. 1999, 1, 60-67; Zaherevitz et al., Cancer Res., 1999, 59, 2566-2569; Honma, T., et al., 221st National ACS Meeting.. 2001: Medi 136; Sielecki, T.M., et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2001, 11, 1157-1160; Nugiel, D. A., et al., J. Med. Chem., 2001, 44, 1334-1336; Fry, D. W. et al., J. Biol. Chem. 2001 , 276, 16617-15523; Soni, R., et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 2000, 275, 877; Ryu, C-K. et al., Bioorg. Med. Chem. Lett, 2000, 10, 461; Jeong, H-W., et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2000, 10, 1819; Toogood et al., J. Med. Chem., 2000, 43, 4606-4616; Chong, W., Fischer, Curr. Opin. in Drug Discov. and Develop., 2001, 4, 623-634, WO0009921845, Toogood. P., WO0119825, Toogood P., WO0138315, Reich S.H., WO0179198, Webster, K. US 6,262,096.)。
【００１１】
Ｃｄｋ４／サイクリンＤ経路を阻害する化合物をレビューするために以下を参照のこと：Harris, W. and Wilkinson, S., Emerging Drugs.. 2000, 5, 287-297; Dumas, J., Exp. Opin. Ther. Patents. 2001 , 11, 405-429; Sielecki T., et. al., J. Med. Chem.. 2000, 43, 1-18.
【発明の開示】
【００１２】
本発明は以下の式
【化１】
2008505955.tif 000003
の新規なジアミノピリジン
（式中、
Ｒ1は、複素環、及び低級アルキル−複素環から成る群から選択され、ここで両方の例における複素環部分は、
（ａ）Ｈ、
（ｂ）低級アルキル、
（ｃ）オキソ、ＯＲ12、ＣＯ2Ｒ12、ＮＲ5Ｒ6、Ｓ（Ｏ）nＲ15、アリール、又はＣ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキル、
（ｄ）ＣＯ2Ｒ7、
（ｅ）ＣＯＲ12、
（ｆ）Ｃ（Ｏ）ＮＲ13Ｒ14、
（ｇ）Ｓ（Ｏ）nＲ15、
（ｈ）オキソ、
（ｉ）ＯＲ12、又は
（ｊ）ＮＲ5Ｒ6、
から成る群から独立に選択される４以下の置換基により任意的に置換されている；
Ｒ2は、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、及び複素環から成る群から選択され、ここでそれぞれは、
（ａ）低級アルキル、
（ｂ）ハロゲン又はＯＲ10により置換された低級アルキル、
（ｃ）ハロゲン、
（ｄ）ＯＲ12、
（ｅ）ＮＯ2、
（ｆ）ＣＮ
（ｇ）ＮＲ5Ｒ6、
（ｈ）Ｓ（Ｏ）n−Ｒ9、及び
（ｉ）ＳＯ2−ＮＲ16Ｒ17；
から成る群から独立に選択される４以下の置換基により任意的に置換されている。
Ｒ5及びＲ6は、
（ａ）Ｈ、
（ｂ）低級アルキル
（ｃ）オキソ、ＣＯ2Ｒ12、ＯＲ12、ＮＲ13Ｒ14、Ｃ（Ｏ）ＮＲ13Ｒ14、ＳＯ2Ｒ15、ＮＳＯ2Ｒ12、ヘテロアリール、複素環、又はオキソにより置換された複素環により置換された低級アルキル、
（ｄ）シクロアルキル、
（ｅ）ＣＯ2Ｒ12、ＯＲ12、ＮＲ13Ｒ14、Ｃ（Ｏ）ＮＲ13Ｒ14、又はＳＯ2Ｒ15により置換されたシクロアルキル、
（ｆ）アリール、
（ｇ）ＮＲ13Ｒ14、ＯＲ12、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ13Ｒ14、ＳＯ2Ｒ15、ハロゲン、低級アルキル、又はハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ13Ｒ14、又はＮＲ13Ｒ14により置換された低級アルキルにより置換されたアリール、
（ｈ）ＳＯ2Ｒ15，
（ｉ）ＣＯ2Ｒ12、
（ｊ）ＣＯＲ12、及び
（ｋ）
【化２】
2008505955.tif 000004
から成る群からそれぞれ独立に選択されており、
あるいは、−ＮＲ5Ｒ6基は、全部で３〜７つの環原子を有する環を形成することができ、当該環原子は、Ｒ5及びＲ6に結合する窒素原子のほかに、炭素原子を含んで成り、当該炭素環原子は、任意的に１又は複数の更なるＮ又はＯ環原子、あるいはＳＯ2基により任意的に置き換えられており、そして当該環原子は、ＯＨ、オキソ、ＮＲ13Ｒ14、低級アルキル、及びＯＲ12により置換された低級アルキルにより任意的に置換されている；
Ｒ7は、
（ａ）Ｈ、
（ｂ）低級アルキル、
（ｃ）ＯＲ12、ＣＯ2Ｒ12、ＮＲ5Ｒ6、又はＣ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキル、
（ｄ）ハロゲン、
（ｅ）オキソ、
（ｆ）アリール、
（ｇ）低級アルキル、ハロゲン、及びＮＲ5Ｒ6から独立に選択される３以下の置換基により置換されたアリール、
（ｈ）シクロアルキル
（ｉ）ＯＨ、オキソ、又はＮＨ2により置換されたシクロアルキル、
（ｊ）ＳＯ2Ｒ15、及び
（ｋ）ＣＯＲ12、
から成る群から選択される；
Ｒ9は、
（ａ）Ｈ、及び
（ｂ）低級アルキル
から成る群から選択される；
Ｒ10は、
（ａ）低級アルキル、
（ｂ）アリール、及び
（ｃ）ハロゲン又はＮＲ5Ｒ6により置換されたアリール
から選択される；
Ｒ11は、
（ａ）Ｈ、
（ｂ）低級アルキル、及び
（ｃ）オキソ及びハロゲンにより置換された低級アルキル
から成る群から選択される；
Ｒ12は、
（ａ）Ｈ、
（ｂ）低級アルキル、及び
（ｃ）ＮＲ5Ｒ6又はＯＲ11により置換された低級アルキル
から成る群から選択される；
Ｒ13及びＲ14は、
（ａ）Ｈ、
（ｂ）低級アルキル
（ｃ）ＣＯ2Ｒ12、ＯＲ12、ＮＲ5Ｒ6、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ15、ＮＳＯ2Ｒ12、ヘテロアリール、複素環、又はオキソにより置換された複素環により置換された低級アルキル、
（ｄ）シクロアルキル、
（ｅ）ＣＯ2Ｒ12、ＯＲ12、ＮＲ5Ｒ6、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＳＯ2Ｒ15により置換されたシクロアルキル、
（ｆ）アリール、
（ｇ）ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ12、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ15、ハロゲン、低級アルキル、又はハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキルにより置換されたアリール、
（ｈ）ＳＯ2Ｒ15，
（ｉ）ＣＯ2Ｒ12、
（ｊ）ＣＯＲ12、及び
（ｋ）
【化３】
2008505955.tif 000005
から成る群から独立に選択され、
あるいは、−ＮＲ13Ｒ14基は、全部で３〜７つの環原子を有する環を形成することができ、当該環原子は、Ｒ13及びＲ14に結合する窒素原子のほかに、炭素原子を含んで成り、当該炭素環原子は、任意的に１又は複数の更なるＮ又はＯ環原子により任意的に置き換えられており、そして当該環原子は、ＯＨ、オキソ、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキル、及びＯＲ12により置換された低級アルキルにより任意的に置換されている；
Ｒ15は、
（ａ）アリール、
（ｂ）ハロゲン、ＣＯ2Ｒ12、ＳＯ2Ｒ10、ＣＯＲ12、低級アルキル、及びハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキルにより置換されたアリール、
（ｃ）ヘテロアリール、
（ｄ）ハロゲン、ＣＯ2Ｒ12、ＳＯ2Ｒ10、ＣＯＲ12、低級アルキル、及びハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキルにより置換されたヘテロアリール、
（ｅ）ＮＲ5Ｒ6、
（ｆ）低級アルキル、
（ｇ）ハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキル、
（ｈ）複素環、及び
（ｉ）ＣＯ2Ｒ12、ＣＯＲ12、ＳＯ2Ｒ12、低級アルキル、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された複素環、
から成る群から選択される；
Ｒ16及びＲ17は、それぞれ独立に、
（ａ）Ｈ、及び
（ｂ）低級アルキル
から成る群から選択され、
あるいは、−ＮＲ16Ｒ17基は、全部で３〜７つの環原子を有する環を形成することができ、当該環原子は、Ｒ16及びＲ17に結合する窒素原子のほかに、炭素原子を含んで成り、当該炭素環原子は、任意的に１又は複数の更なるＮ又はＯ環原子により任意的に置き換えられており、そして当該環原子は、低級アルキル、ＯＨ、オキソ、及びＮＨ2により任意的に置換されている；
ｎは、０、１、又は２である；）
又はその医薬的に許容される塩若しくはエステル、関する。
【００１３】
これらの化合物はサイクリン依存性キナーゼを阻害する。これらの化合物、並びにこれらの医薬的に許容される塩及びエステルは抗増殖活性を有し、癌、特に固形腫瘍の治療又は制御において有用である。
【００１４】
本発明はまた、１又は複数の本発明の化合物、又はその医薬的に許容される塩若しくはエステル、及び医薬的に許容される担体又は賦形剤を含んで成る医薬組成物に関する。
【００１５】
本発明は更に、治療が必要な患者に対して治療的有効量の式Ｉの化合物、又はその医薬的に許容される塩若しくはエステルを投与することによる、癌を治療又は制御するための方法、より特には固形腫瘍の治療又は制御、最も特には乳房、肺、大腸、及び前立腺腫瘍の治療又は制御に関する。
【００１６】
最後に、本発明はまた、式Ｉの化合物の調製において有用な新規な中間体化合物に関する。
【００１７】
本明細書に使用される場合、以下の語は以下の定義を有する。
【００１８】
「アリール」は、一価の、単環式又は二環式の、芳香族炭素環式炭化水素ラジカルであって、好ましくは６〜１０員の芳香環系である。好ましいアリール基は、制限されることなく、フェニル、ナフチル、トリル、及びキシリルを含む。
【００１９】
「カルボニル」はラジカルＣ＝Ｏを意味する。
【００２０】
「シクロアルキル」は、非芳香族であり、３〜８つの原子を含む部分的又は完全に飽和した一価の環式炭化水素ラジカルである。シクロアルキル基の例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、及びシクロヘキシルを含む。
【００２１】
「有効量」は、疾患の症状を予防、軽減、又は寛解するため、あるいは治療されている対象の生存を延長するために有効な量を意味する。
【００２２】
「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素、好ましくはフッ素、又は塩素を意味する。
【００２３】
「ヘテロ原子」は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される原子を意味する。
【００２４】
「ヘテロアリール」は、２以下の環を含む芳香族複素環系を意味する。好ましいヘテロアリール基は、制限されることなく、チエニル、フリル、インドリル、ピロリル、ピリジニル、ピリジン、ピラジニル、オキサゾリル、チアキソリル、キノリニル、ピリミジニル、イミダゾール、ベンゾフラン、及びテトラゾリルを含む。
【００２５】
「複素環」又は「ヘテロシクリル」は、飽和した又は部分的に不飽和の、１〜３つの環原子が窒素、酸素、Ｓ（Ｏ）n（ここでｎは０〜２の整数である）、又はこれらの組み合わせから選択され、残りの環原子がＣである、３〜８つの環原子の非芳香環式ラジカルを意味する。好ましい複素環の例は、ピペリジン、ピペラジン、ピロリジン、モルホリン、インドリン、テトラヒドロピラニル、チオモルホリノ、ペンタメチレンスルフィド、及びペンタメチレンスルホンである。
【００２６】
「Ｋ1」は、標的タンパク質に対するリガンド／阻害剤（即ち、本発明の化合物）の熱力学的な結合の尺度を意味する。Ｋ1は、とりわけ、以下の実施例５３に記載されるとおり、測定することができる。
【００２７】
「低級アルキル」それのみ、又は他の語との組み合わせ、例えば、低級アルキル複素環は、１〜６つ、好ましくは１〜４つの炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖の飽和した脂肪族炭化水素を表す。典型的な低級アルキル基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、２−ブチル、ペンチル、ヘキシル等を含む。
【００２８】
「オキソ」は＝Ｏを意味する。
【００２９】
「医薬的に許容されるエステル」は、慣習的にエステル化された式Ｉの化合物であって、当該エステルが式Ｉの化合物の生物学的有効性及び特性を維持し、そしてin vivoにおいて（生物体内で）対応する活性なカルボン酸に切断される化合物を意味する。in vivoにおいて対応するカルボン酸（Ｒ40Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ）に切断される（この場合、加水分解される）エステル基の例は、ＮＲ41Ｒ42で置換されてもよい低級アルキル（ここでＲ41及びＲ42は低級アルキルであり、あるいはＮＲ41Ｒ42が一緒に単環式脂肪族複素環、例えば、ピロリジン、ピペリジン、モルホリン、Ｎ−メチルピペラジン等を形成する）；式Ｒ40Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨＲ43ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ44のアシルオキシアルキル（ここでＲ43は水素又はメチルであり、そしてＲ44は低級アルキル又はシクロアルキルである）；式Ｒ40Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨＲ43ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ45のカルボン酸エステル（ここでＲ43は水素又はメチルであり、そしてＲ45は低級アルキル又はシクロアルキルである）；又は式Ｒ40Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ2Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ41Ｒ42（ここでＲ41とＲ42は水素又は低級アルキルであるか、あるいはＮＲ41Ｒ42は一緒に単環式脂肪族複素環、例えば、ピロリジン、ピペリジン、モルホリン、Ｎ−メチルピペラジン等を形成する）である。本明細書に使用される、Ｒ40はＲ1と同じ定義を有する。
【００３０】
低級アルキルエステルの例は、メチル、エチル、及びｎ−プロピルエステル等である。Ｒ4１Ｒ4２で置換された低級アルキルエステルの例は、ジエチルアミノエチル、２−（４−モルホリニル）エチル、２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチルエステル等である。アシルオキシエステルの例は、ピバロキシメチル、１−アセトキシメチル、及びアセトキシメチルエステルである。カルボン酸エステルの例は、１−（エトキシカルボニルオキシ）エチル、及び１−（シクロヘキシルオキシカルボニルオキシ）メチルエステルである。アミノカルボニルメチルエステルの例は、Ｎ，Ｎ−ジメチルカルバモイルメチル、及びカルバモイルメチルエステルである。
【００３１】
医薬化合物の送達のためのエステルの例及び使用に関する更なる情報は、Design of Prodrugs. Bundgaard H ed. (Elsevier, 1985)において入手できる。またH. Ansel et. al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (6th Ed. 1995) at pp. 108-109; Krogsgaard-Larsen, et. al., Textbook of Drug Design and Development (2d Ed. 1996) at pp. 152-191も参照のこと。
【００３２】
「医薬的に許容される塩」は、式Ｉの化合物の生物学的有効性及び特性を維持し、そして適当な無毒性の有機若しくは無機酸、又は有機若しくは無機塩基から形成される慣習的な酸付加塩、又は塩基付加円を意味する。酸付加塩の例は、無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、及び硝酸に由来するもの、あるいは有機酸、例えば、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、コハク酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸等に由来するものを含む。塩基付加塩の例は、アンモニウム、カリウム、ナトリウム、及び第四級アンモニウムの水酸化物に由来するもの、例えば、水酸化テトラメチルアンモニウムを含む。
【００３３】
医薬化合物（即ち、薬物）の塩への化学修飾は、化合物の改善した物理的及び化学的安定性、吸湿性、流動性、及び溶解性を得るために医薬化学者に周知な技術である。例えば、H. Ansel et. al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (6th Ed. 1995) at pp. 196 and 1456-1457を参照のこと。
【００３４】
「医薬的に許容される」、例えば、医薬的に許容される担体、賦形剤等は、医薬的に許容され、そして実質的に特定の化合物が投与される対象に対して無毒であることを意味する。
【００３５】
「置換された」、置換されたアルキルにおけるような、は置換が１又は複数の場所において生じてもよいことを意味し、他に示されない限り、それぞれの置換における置換基は、特定された選択肢から独立に選択される。
【００３６】
「治療的有効量」は、有意に、ヒト腫瘍細胞株を含むヒト腫瘍細胞の増殖を阻害し、及び／又は分化を予防する、少なくとも１の式Ｉの化合物、又はその医薬的に許容される塩若しくは塩の量を意味する。
【００３７】
ある態様において、本発明は、式Ｉ
【化４】
2008505955.tif 000006
の化合物、又はその医薬的に許容される塩若しくはエステル（式中、Ｒ1及びＲ2は上記に定義される）に関する。
【００３８】
式Ｉの化合物の好ましい態様において、Ｒ2はフェニル、好ましくはハロゲン、最も好ましくはＦ、ＯＲ12（式中、Ｒ12は低級アルキルである）により置換されたフェニルである。最も好ましい態様において、Ｒ2は、１又は２つのＦ分枝及び１つのＯＲ12（式中、Ｒ12は低級アルキル、好ましくはメチルである）により置換されたフェニルである。
【００３９】
式Ｉの化合物の他の好ましい態様において、Ｒ1は上記に定義されたとおりであり、そしてＲ1は、
【化５】
2008505955.tif 000007
の群から選択される。
（式中、
Ｒ3は、
Ｈ、
低級アルキル、
オキソ、ＯＲ12、ＣＯ2Ｒ12、ＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ15、アリール、又はＣ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキル、
ＣＯ2Ｒ7、
ＣＯＲ12、
Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、及び
ＳＯ2Ｒ15
から成る群から選択される；
Ｒ4は
Ｈ、
ＯＲ11、
低級アルキル、
ＮＲ5Ｒ6、
ＮＯ2、
オキソ、
ＣＮ、及び
ハロゲン
から選択される；
Ｒ5とＲ6は、それぞれ独立に、
Ｈ、
低級アルキル、
オキソ、ＣＯ2Ｒ12、ＯＲ12、ＮＲ13Ｒ14、Ｃ（Ｏ）ＮＲ13Ｒ14、ＳＯ2Ｒ15、ＮＳＯ2Ｒ12、ヘテロアリール、複素環、又はオキソにより置換された複素環により置換された低級アルキル、
シクロアルキル、
ＣＯ2Ｒ12、ＯＲ12、ＮＲ13Ｒ14、Ｃ（Ｏ）ＮＲ13Ｒ14、Ｃ（Ｏ）ＮＲ14Ｒ14、又はＳＯ2Ｒ15により置換されたシクロアルキル、
アリール、
ＮＲ13Ｒ14、ＯＲ12、ＣＯ2Ｒ12、ＣＯＮＲ13Ｒ14、ＳＯ2Ｒ15、ハロゲン、低級アルキル、及びハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、ＣＯＮＲ13Ｒ14、又はＮＲ13Ｒ14により置換された低級アルキルにより置換されたアリール；
ＳＯ2Ｒ15、
ＣＯ2Ｒ12、
ＣＯＲ12、及び
【化６】
2008505955.tif 000008
から選択され、
あるいは、−ＮＲ5Ｒ6基は、全部で３〜７つの環原子を有する環を形成することができ、当該環原子は、Ｒ5及びＲ6に結合する窒素原子のほかに、炭素原子を含んで成り、当該炭素環原子は、任意的に１又は複数の更なるＮ又はＯ環原子、あるいはＳＯ2基により任意的に置き換えられており、そして当該環原子は、ＯＨ、オキソ、ＮＲ13Ｒ14、低級アルキル、及びＯＲ12により置換された低級アルキルにより任意的に置換されている；
Ｒ7は、
Ｈ、
低級アルキル、
ＯＲ12、ＣＯ2Ｒ12、ＮＲ5Ｒ6、又はＣＯＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキル、
ハロゲン、
オキソ、
アリール、
低級アルキル、ハロゲン、及びＮＲ5Ｒ6から独立に選択される３以下の置換基により置換されたアリール、
シクロアルキル
ＯＨ、オキソ、又はＮＨ2により置換されたシクロアルキル、
ＳＯ2Ｒ15、及び
ＣＯＲ12、
から成る群から選択される；
Ｒ10は、
低級アルキル、
アリール、及び
ハロゲン又はＮＲ5Ｒ6により置換されたアリール
から選択される；
Ｒ11は、
Ｈ、
低級アルキル、及び
オキソ及びハロゲンにより置換された低級アルキル
から成る群から選択される；
Ｒ12は、
Ｈ、
低級アルキル、及び
ハロゲン、オキソ、ＮＲ5Ｒ6又はＯＲ11により置換された低級アルキル
から成る群から選択される；
Ｒ13とＲ14は、
Ｈ、
低級アルキル
ＣＯ2Ｒ12、ＯＲ12、ＮＲ5Ｒ6、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ15、ＮＳＯ2Ｒ12、ヘテロアリール、複素環、又はオキソにより置換された複素環により置換された低級アルキル、
シクロアルキル、
ＣＯ2Ｒ12、ＯＲ12、ＮＲ5Ｒ6、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＳＯ2Ｒ15により置換されたシクロアルキル、
アリール、
ＮＲ5Ｒ6、ＯＲ12、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、ＳＯ2Ｒ15、ハロゲン、低級アルキル、又はハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキルにより置換されたアリール、
ＳＯ2Ｒ15，
ＣＯ2Ｒ12、
ＣＯＲ12、及び
【化７】
2008505955.tif 000009
から成る群から独立に選択され、
あるいは、−ＮＲ13Ｒ14基は、全部で３〜７つの環原子を有する環を形成することができ、当該環原子は、Ｒ13及びＲ14に結合する窒素原子のほかに、炭素原子を含んで成り、当該炭素環原子は、任意的に１又は複数の更なるＮ又はＯ環原子により任意的に置き換えられており、そして当該環原子は、ＯＨ、オキソ、ＮＲ5Ｒ6、低級アルキル、及びＯＲ12により置換された低級アルキルにより任意的に置換されている；
Ｒ15は、
アリール、
ハロゲン、ＣＯ2Ｒ12、ＳＯ2Ｒ10、ＣＯＲ12、低級アルキル、及びハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキルにより置換されたアリール、
ヘテロアリール、
ハロゲン、ＣＯ2Ｒ12、ＳＯ2Ｒ10、ＣＯＲ12、低級アルキル、及びハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキルにより置換されたヘテロアリール、
ＮＲ5Ｒ6、
低級アルキル、
ハロゲン、ＯＲ12、オキソ、ＣＯ2Ｒ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された低級アルキル、
複素環、及び
ＣＯ2Ｒ12、ＣＯＲ12、ＳＯ2Ｒ12、低級アルキル、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、又はＮＲ5Ｒ6により置換された複素環、
から成る群から選択される；
Ｘは、
Ｓ、
ＳＯ、
ＳＯ2、
Ｏ
から選択される；そして
ｎは、０、１、又は２である）、
又はその医薬的に許容される塩若しくはエステル、に関する。
【００４０】
他の態様において、Ｒ1は、Ｈ、低級アルキル、Ｓ（Ｏ）nＲ15、ＣＯ2Ｒ7、ＣＯＲ12、Ｃ（Ｏ）ＮＲ13Ｒ14で置換された複素環である。
【００４１】
他の態様において、Ｒ1は、アリールにより置換された低級アルキルにより置換された複素環である。
【００４２】
他の好ましい態様において、本発明は、以下の式
【化８】
2008505955.tif 000010
の化合物（式中、Ｒ3とＲ4は上記に定義されるとおりであり、そしてＲ18、Ｒ19、Ｒ20、及びＲ21は、それぞれ独立に、低級アルキル、ハロゲン、及びＯＲ12から選択される）に関する。
【００４３】
好ましくは、Ｒ3は、ＣＯ2Ｒ7、ＣＯＲ12、ＳＯ2Ｒ15、Ｃ（Ｏ）ＮＲ5Ｒ6、低級アルキル、及びアリール、好ましくはフェニルにより置換された低級アルキルから選択される。
【００４４】
好ましいＲ4基は、Ｈ、ＯＲ11、そして低級アルキルを含む。
【００４５】
好ましいＲ5及びＲ6基は、それぞれが独立に、Ｈ及び低級アルキルから選択される、あるいは、−ＮＲ5Ｒ6基が、全部で３〜７つの環原子を有する環を形成することができ、当該環原子は、Ｒ5及びＲ6に結合する窒素原子のほかに、炭素原子を含んで成り、当該炭素環原子は、任意的に１又は複数の更なるＮ又はＯ環原子により任意的に置き換えられており、そして当該環原子は、ＯＨ、オキソ及びＮＨ2、低級アルキル、及びＯＲ12により置換された低級アルキルにより任意的に置換されているものである。
【００４６】
好ましいＲ12は低級アルキルである。
【００４７】
更に他の好ましい態様において、式Ｉ（ａ）の化合物
（式中、
Ｒ3は、水素；
ベンジル；
（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；
−Ｓ（Ｏ）2−（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；
−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；
−Ｃ（Ｏ）2−（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；及び
−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；
を表す。
Ｒ4は、水素を表す；そして、
Ｒ18、Ｒ19、Ｒ20、及びＲ21は、それぞれ独立に、
（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；
−Ｏ−（Ｃ1−Ｃ6）アルキル；及び
ハロゲンを表す）。
【００４８】
式Ｉ（ａ）の化合物の例は以下を含む：
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例６）；
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−フルオロ−フェニル）−メタノン（実施例１０）；
４−［６−アミノ−５−（２−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル（実施例１１）；
［２−アミノ−６−（１−エタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−フルオロ−フェニル）−メタノン（実施例１２）；
１−｛４−［６−アミノ−５−（２−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−エタノン（実施例１３）；
１−｛４−［６−アミノ−５−（２−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−プロパン−１−オン（実施例１４）；
４−［６−アミノ−５−（２−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルアミド（実施例１５）；
４−［６−アミノ−５−（２−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸メチルアミド（実施例１６）；
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（３−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例１８）；
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル（実施例２０）；
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例２３）；
［２−アミノ−６−（１−エタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例２４）；
｛２−アミノ−６−［１−（プロパン−１−スルホニル）−ピペリジン−４−イルアミノ］−ピリジン−３−イル｝−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例２５）；
｛２−アミノ−６−［１−（プロパン−２−スルホニル）−ピペリジン−４−イルアミノ］−ピリジン−３−イル｝−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例２６）；
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステル（実施例２７）；
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸プロピルエステル（実施例２８）；
［２−アミノ−６−（１−ベンジル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例２９）；
１−｛４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−１−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−エタノン（実施例３０）；
１−｛４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−プロパン−１−オン（実施例３１）；
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸メチルアミド（実施例３２）；
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルアミド（実施例３３）；
［２−アミノ−６−（１−メチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例３４）；
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（４−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例３６）；
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（４−フルオロ−フェニル）−メタノン（実施例３８）；
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例４０）；
４−［６−アミノ−５−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル（実施例４１）；
１−｛４−［６−アミノ−５−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−エタノン（実施例４２）；
１−｛４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−４−メチル−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−エタノン（実施例４４）；
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−４−メチル−フェニル）−メタノン（実施例４５）；
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−４−メチル−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル（実施例４６）；
１−｛４−［６−アミノ−５−（４−クロロ−５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−エタノン（実施例４８）；
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（４−クロロ−５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例４９）；
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−４−クロロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル（実施例５０）；及び
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−メタノン（実施例５２）。
【００４９】
本明細書に開示され、上記式Ｉにより網羅される化合物は、互変異性又は構造異性を示すことができる。本発明は、これらの化合物の互変若しくは構造異性体、又はこれらの形態の混合物を包含し、そして上の式に示されたいずれか１つの互変若しくは構造異性体に制限されない。
【００５０】
本発明の化合物は、当業者に既知ないずれかの慣習的な手段により調製することができる。これらの化合物を合成するための適当な方法は、実施例において供される。一般的に、式Ｉの化合物は、スキーム１に記載される合成経路に従い調製することができ、式中、他に明示的に述べられない限り、Ｒ1とＲ2は上記に定義されるとおりである。
【００５１】
実施例１及び２における、商業的に入手可能な出発物質、２，６−ジクロロニコチン酸（Aldrichから入手)は、中間体として２−アミノ−６−クロロニコチン酸、又は２，６−ジクロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルニコチンアミドを介して、位置選択的に２−アミノ−６−クロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルニコチンアミド（実施例３）に変換することができる(F. Mutterer and C. Weis, Helvetica Chimica Acta, 59, 1976, 222-229)。Ｒ2基は、商業的に入手可能であるか、あるいは商業的に入手可能なハロゲン化物又は置換されたベンゼンから用意に調製される有機リチウム試薬との反応により導入される。本発明の最終化合物は、それから、多様な商業的に入手可能なアミン（Ｒ1ＮＨ2）による６−クロロ基の置換により得られる。商業的に入手できない場合、個々の実施例において、これらの反応物を調製するか、あるいは引用する。
【化９】
2008505955.tif 000011
【００５２】
本発明の更なる態様として、式Ｉの化合物の調製方法であって、
ａ）式
【化１０】
2008505955.tif 000012
の化合物を、式
【化１１】
2008505955.tif 000013
の化合物に変換し、そして
ｂ）前記式（Ｂ）の化合物を、式
【化１２】
2008505955.tif 000014
の有機リチウム化合物の存在下において更に反応させて、式
【化１３】
2008505955.tif 000015
の化合物を与え、そして
ｃ）前記式（Ｄ）の化合物を、式
【化１４】
2008505955.tif 000016
のアミンの存在下において更に反応させ、対応する式Ｉの化合物を与え、これは、
ｄ）反応混合物から分離することができ、所望の場合には、医薬的に許容される塩又はエステルに変化させることができ、式中Ｒ1及びＲ2は上記に与えられた意味を有する、方法を供する。
【００５３】
立体異性体の混合物の光学的に純粋な立体異性体への分離（式Ｉの化合物がキラルである場合）
式Ｉの異性体の任意的な分離は、既知の方法、例えば、分割又はキラル高速液体クロマトグラフィー（キラルＨＰＬＣとしても知られる）に従い行うことができる。分割方法は周知であり、そして"Enantiomers, Racemates, and Resolutions" (Jacques, J. et al. John Wiley and Sons, NY, 1981)において要約される。キラルＨＰＬＣの方法もまた周知であり、そして"Separation of Enantiomers by Liquid Chromatographic Methods" (Pirkle, W. H. and Finn, J. in "Asymmetric Synthesis", Vol. 1 , Morrison, J. D., Ed., Academic Press, Inc., NY 1983, pp. 87-124)において要約される。
【００５４】
塩基性窒素を有する式Ｉの化合物の医薬的に許容される酸付加塩への変換
塩基性窒素を有する式Ｉの化合物の医薬的に許容される酸付加塩への任意的な変換は、慣習的な手段により効果を及ぼすことができる。例えば、当該化合物は、無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、あるいは適当な有機酸、例えば、酢酸、クエン酸、酒石酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等で処理することができる。
【００５５】
カルボン酸基を有する式Ｉの化合物の医薬的に許容されるアルカリ金属塩への変換
カルボン酸基を有する式Ｉの化合物の医薬的に許容されるアルカリ金属塩への任意的な変換は、慣習的な手段により効果を及ぼすことができる。例えば、当該化合物は、無機塩基、例えば、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等で処理することができる。
【００５６】
カルボン酸基を有する式Ｉの化合物の医薬的に許容されるエステルへの変換
カルボン酸基を有する式Ｉの化合物の医薬的に許容されるエステルへの任意的な変換は、慣習的な手段により効果を及ぼすことができる。エステルの形成のための条件は、反応条件に対する分子中の他の官能基の安定性に依存するだろう。分子中の他の部分が酸性条件に対して安定である場合、エステルは、アルコール中の鉱酸（例えば、硫酸）の溶液中で加熱することにより簡便に調製することができる。分子が酸性条件に安定でない場合に都合がよい他のエステルを調製する方法は、当該化合物を、カップリング剤の存在下、及び反応を促進することができる更なる剤の任意的な存在下においてアルコールで処理することを含む。このような多くのカップリング剤は、有機化学の当業者に知られている。２つの例は、ジシクロへキシルカルボジイミド及びトリフェニルホスフィン／ジエチルアゾジカルボキシラートである。ジシクロヘキシルカルボジイミドがカップリング剤として使用される場合、当該反応は、当該酸をアルコール、ジシクロヘキシルカルボジイミド、及び任意的な触媒量（０〜１０モル％）のＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンで、不活性溶媒、例えば、ハロゲン化炭化水素（例えば、ジクロロメタン）中、約０℃〜室温において、好ましくは約室温において処理することにより簡便に行われる。トリフェニルホスフィン／ジエチルアゾジカルボキシラートがカップリング剤として使用される場合、当該反応は、当該さんを、アルコール、トリフェニルホスフィン、及びジエチルアゾジカルボキシラートで、不活性溶媒、例えば、エーテル（例えば、テトラヒドロフラン）中、約０℃〜室温において、好ましくは約０℃において処理することにより簡便に行われる。
【００５７】
他の態様において、本発明は、少なくとも１の式Ｉの化合物、又はその医薬的に許容される塩若しくはエステル、及び医薬的に許容される賦形剤及び／又は担体を含んで成る医薬組成物を含む。
【００５８】
これらの医薬組成物は、経口的に、例えば、錠剤、コート錠、糖衣錠、ハード又はソフトゼラチンカプセル、溶液、乳剤、又は懸濁剤の形態において投与することができる。これらはまた、直腸的に、例えば、座薬の形態において、あるいは非経口的に、例えば、注射溶液の形態においても投与することができる。
【００５９】
式Ｉの化合物、及び／又はその塩若しくはエステルを含んで成る本発明の医薬組成物は、当業界に知られている手段において、例えば、慣習的な混合、カプセル化、溶解、顆粒化、乳化、封入、糖衣錠形成、又は凍結乾燥処理の手段により製造することができる。これらの医薬調製物は、治療的な不活性な、無機又は有機担体で処方することができる。ラクトース、コーンスターチ又はその誘導体、タルク、ステアリン酸又はその塩は、錠剤、コート錠、糖衣錠、及びハードゼラチンカプセルのための担体として使用することができる。ソフトゼラチンカプセルのための適当な担体は、植物油、ワックス及び脂肪を含む。活性物質の性質に依存して、ソフトゼラチンカプセルの場合には一般に担体は必要とされない。溶液及びシロップの製造のための適当な担体は、水、ポリオール、サッカロース、転化糖、及びグルコースである。注射のための適当な担体は、水、アルコール、ポリオール、グリセリン、植物油、リン脂質、及び界面活性物質である。座薬のための適当な担体は、天然又は硬化油、ワックス、脂肪、及び半液体ポリオールである。
【００６０】
医薬調製物はまた、保存剤、可溶化剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、甘味剤、着色料、芳香剤、浸透圧を変化するための塩、バッファー、コート剤、又は抗酸化剤を含んでよい。これらはまた、式（Ｉ）の化合物Ｉのもの以外の更なる活性成分を含む他の医薬的に価値のある物質を含んでよい。
【００６１】
上述のとおり、式Ｉの化合物を含む本発明の化合物は、癌の化学的予防を含む、細胞増殖障害の治療又は制御において有用である。化学的予防は、変異原生事象の開始を遮断するか、又は阻害性腫瘍再発をすでに患っている前癌性細胞の進行を遮断することによる浸潤癌の発達を阻害するものとして定義される。
【００６２】
これらの化合物及び当該化合物を含む製剤は、固形腫瘍、例えば、乳房、大腸、肺、及び前立腺腫瘍の治療又は制御に有用である。更に、本発明の化合物は、癌、特に固形腫瘍、そしてより好ましくは乳房、肺、大腸、及び前立腺腫瘍の治療のための医薬の製造に有用である。
【００６３】
本発明に関する化合物の治療的有効量は、疾患の症状を予防、軽減、又は寛解するため、あるいは治療されている対象の生存を延長するために有効な量を意味する。治療的有効量の決定は当業者の範囲内である。
【００６４】
本発明に従う化合物の治療的有効量又は投与量は、広い制限において変更することができ、そして当業界に既知な手段において決定することができる。このような投与量は、投与される特定の化合物、投与経路、治療される条件、並びに治療される患者を含むそれぞれの特定の場合において個々の必要に調整されるだろう。一般に、約７０ｋｇの体重の成人の人に対する経口又は非経口投与の場合、約１０ｍｇ〜約１０，０００ｍｇ、好ましくは約２００ｍｇ〜約１０００ｍｇの一日投与量が適当であるが、必要である場合には上限を超えても良い。一日投与量は、単一用量、又は分割用量として投与することができ、あるいは非経口投与のために持続的な点滴として与えることができる。
【００６５】
本発明の化合物は、既知の抗癌処置、例えば、放射線治療で、あるいは細胞分裂停止又は細胞傷害剤、例えば、制限されることなく、ＤＮＡ相互作用剤、例えば、シスプラチン、又はドキソルビシン；トポイソメラーゼII阻害剤、例えば、エトポシド；トポイソメラーゼＩ阻害剤、例えば、ＣＰＴ−１１、又はトポテカン；ツブリン相互作用剤、例えば、パクリタキセル、ドセタキセル、又はエポチロン；ホルモン剤、例えば、タモキシフェン：チミジラエートシンターゼ阻害剤、例えば、５−フルオロウラシル；及び抗代謝産物、例えば、メトトレキサートとの組み合わせにおいて使用することができる。式Ｉの化合物はまた、ｐ５３トランス活性化の修飾因子との組み合わせにおいて有用となりうる。
【００６６】
一定用量として処方した場合、上述の併用製品は、上述の投与量範囲における本発明の化合物、及び認可された用量範囲において他の医薬活性剤又は治療剤を含む。例えば、アーリーｃｄｋ１阻害剤のオロムシンはアポトーシスの誘発において周知の細胞傷害剤と相乗的に作用することが発見されている(J. Cell ScL, 1995, 108, 2897-2904)。式Ｉの化合物はまた、併用投与又は組み合わせが不適当な場合には、既知の抗癌剤又は細胞傷害剤と連続的に投与することができる。本発明は投与の順序において制限されない：式Ｉの化合物は既知の抗癌剤又は細胞傷害剤の投与の前又は後のいずれかに投与することができる。例えば、ｃｄｋ阻害剤のフラボピリドールの細胞傷害活性は、抗癌剤での投与の順序により影響される(Cancer Research, 1997, 57, 3375)。
【００６７】
他の態様において、本発明はまた、式Ｉの化合物の調製において有用な新規な中間体に関する。これらの新規な中間体は以下の化合物を含む：
２，６−ジクロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−ニコチンアミド（実施例１）；
２−アミノ−６−クロロ−ニコチン酸（実施例２）；
２−アミノ−６−クロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−ニコチンアミド（実施例３）；
（２，６−ジクロロ−ピリジン−３−ｙｌ）−（２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例４）；
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例５）；
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（２−フルオロ−フェニル）−メタノン（実施例７）；
４−［６−アミノ−５−（２−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（実施例８）；
［２−アミノ−６−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−フルオロ−フェニル）−メタノン（実施例９）；
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（３−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例１７）；
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例１９）；
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（実施例２１）；
［４−アミノ−２−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノントリフルオロ酢酸塩（実施例２２）；
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（４−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例３５）；
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（４−フルオロ−フェニル）−メタノン（実施例３７）；
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例３９）；
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（５−フルオロ−２−メトキシ−４−メチル−フェニル）−メタノン（実施例４３）；
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（４−クロロ−５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例４７）；及び
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−メタノン（実施例５１）。
【００６８】
以下の実施例は本発明の化合物及び製剤を合成及び使用するための好ましい方法を説明する。これらの実施例及び調製物は、例示的であり、そして制限することを意図するものではない。本明細書に付随する特許請求の範囲により定義されるとおり、本発明の精神及び範囲にある他の態様も存在してよいことを理解するべきである。
【実施例】
【００６９】
実施例１
２，６−ジクロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−ニコチンアミド
【化１５】
2008505955.tif 000017
無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の２，６−ジクロロニコチン酸（５００ｍｇ，２．６３ｍｍｏｌ，Ａｌｄｒｉｃｈ９０％）にＯ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウランヘキサフルオロホスフェート（１．２８ｇ，３．３７ｍｍｏｌ，Ａｌｄｒｉｃｈ）、続いてＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．３ｇ，１０．０ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシアミンハイドロクロライド（３０６ｍｇ，３．１５ｍｍｏｌ，Ａｌｄｒｉｃｈ）を０℃で添加した。当該反応を１〜２時間撹拌し、水で処理し、そして酢酸エチルで抽出した。組み合わせた有意抽出物をブラインで洗浄し、そして濃縮した。ヘキサン／酢酸エチルによりシリカゲルにおいて粗生成物を精製し、白色の固体として、２，６−ジクロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−ニコチンアミドを与えた（３０４．５ｍｇ，収率５０％）。ＨＲＭＳ，測定値：２３３．９９６８，Ｍ+の計算値：２３３．９９６３．
【００７０】
実施例２
２−アミノ−６−クロロ−ニコチン酸
【化１６】
2008505955.tif 000018
２，６−ジクロロニコチン酸（１０ｇ，４６．９ｍｍｏｌ，Ａｌｄｒｉｃｈ９０％）の溶液を濃縮した水酸化アンモニウム（１００ｍｌ，２９．４％，Ｆｉｓｈｅｒ）に溶解し、そして真空において溶媒を除去する前に、耐圧瓶中で１３０〜１６０℃において１〜２日間加熱した。残渣を水で処理し、濃塩酸でｐＨを〜８以下にした。生じた混合物を酢酸エチルで抽出し、そして組み合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ、濃縮し、そして粗生成物を酢酸エチルから再結晶させ、白色の結晶として２−アミノ−６−クロロ−ニコチン酸を得た（２．７４ｇ，収率３４％）。ＨＲＭＳ，測定値：１７２．００４２，Ｍ+の計算値：１７２．００４０．
【００７１】
実施例３
２−アミノ−６−クロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−ニコチンアミド
方法１
【化１７】
2008505955.tif 000019
テトラヒドロフラン（２．５ｍＬ）中の２，６−ジクロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−ニコチンアミド（２０２．４ｍｇ，０．８６１０ｍｍｏｌ，実施例１）及び濃水酸化アンモニウム（１．８ｍＬ，２９．４％，Ｆｉｓｈｅｒ）をマイクロ波において１５５℃で２時間加熱した。当該反応混合物を濃縮し、そして残渣をヘキサン／酢酸エチルによりシリカゲルにおいて精製し、２−アミノ−６−クロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−ニコチンアミドを得た（１４．３ｍｇ，収率８％）。ＨＲＭＳ，測定値：２１５．０４６３，Ｍ+の計算値：２１５．０４６２．
【００７２】
方法２
【化１８】
2008505955.tif 000020
無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０ｍｌ）中の２−アミノ−６−クロロ−ニコチン酸（４．９９ｇ，２８．９６５ｍｍｏｌ，実施例２）の溶液に、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールヒドレート（６．２１ｇ，４０．５７ｍｍｏｌ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  ＣｈｅｍＴｅｃｈ）及びＯ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウランヘキサフルオロホスフェート（１５．３８ｇ，４０．５６４８ｍｍｏｌ，Ａｌｄｒｉｃｈ）を０℃で添加した。無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１５ｍＬ）中のＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシアミンハイドロクロライド（３０６ｍｇ，３．１５ｍｍｏｌ，Ａｌｄｒｉｃｈ）をＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（８．２８ｇ，６４．１ｍｍｏｌ）で処理し、反応物に直ぐに添加し、０℃で〜１０分間、それから室温で４〜５時間撹拌した。反応物を酢酸エチル（１５０ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）で希釈し、そして水層を酢酸エチル（３×１５０ｍＬ）で抽出した。併せた有機層を水（３×）及び飽和塩化ナトリウムで洗浄し、乾燥させ、そして濃縮した。粗生成物を９０／１０→７０／３０のヘキサン／酢酸エチルによりシリカゲルにおいて精製し、２−アミノ−６−クロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−ニコチンアミドを得た（４．７２ｇ，２１．９２ｍｍｏｌ，収率７５．７％）。ＨＲＭＳ，測定値：２１５．０４６３，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：２１５．０４６２．
【００７３】
実施例４
（２，６−ジクロロ−ピリジン−３−イル）−（２−メトキシ−フェニル）−メタノン
【化１９】
2008505955.tif 000021
−７８℃におけるテトラヒドロフラン（３３ｍＬ）中の２−ヨードアニソール（４．９７ｇ，２１．２４ｍｍｏｌ，Ａｌｄｒｉｃｈ９８％）の溶液に、ヘキサン（２．５Ｍ，８．５ｍＬ，２１．２５ｍｍｏｌ，Ａｌｄｒｉｃｈ）中のｎ−ブチルリチウムの溶液を添加した。当該反応物を−７８℃で０．５〜１時間撹拌し、以下の反応のための２−メトキシフェニルリチウムの溶液を得た。
【００７４】
無水テトラヒドロフラン（８ｍＬ）中の２，６−ジクロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−ニコチンアミド（５０３．３ｍｇ，２．１４１ｍｍｏｌ，実施例１）の溶液に、新しく調製した２−メトキシフェニルリチウム（３〜５当量、上記由来）の溶液を添加し、そして出発物質が完全に消費するまで反応物を−７８℃で３０〜６０分間撹拌した。生じた混合物を塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、酢酸エチルで抽出し、飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、そして真空において蒸発させた。残渣をヘキサン／酢酸エチルによりシリカゲルにおいて精製し、薄茶色の蝋様の固体を得た（３１４．３ｍｇ，収率５２％）。ＨＲＭＳ，測定値：２８１．００２３，Ｍ+の計算値：２８１．００１０．
【００７５】
実施例５
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（２−メトキシ−フェニル）−メタノン
【化２０】
2008505955.tif 000022
１，４−ジオキサン（２ｍＬ）中の（２，６−ジクロロ−ピリジン−３−イル）−（２−メトキシ−フェニル）−メタノン（５０．３ｍｇ，０．１７８ｍｍｏｌ，実施例４）の溶液を能水酸化アンモニウム（０．２４ｍＬ，２９．４％）で処理し、そしてマイクロ波において１５０℃で３時間加熱した。生じた混合物を水と酢酸エチルで処理し、飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、そして真空において蒸発させた。残渣をヘキサン／酢酸エチルによりシリカゲルにおいて精製し、オフホワイトの固体として（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（２−メトキシ−フェニル）−メタノンを得た（２３．７ｍｇ，収率５０．７％）。ＨＲＭＳ，測定値：２６２．０５０２，Ｍ+の計算値：２６２．０５０９．
【００７６】
実施例６
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−メトキシ−フェニル）−メタノン
Ａ）トリフルオロ酢酸でのメタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミンの調製
【化２１】
2008505955.tif 000023
テトラヒドロフラン（４０ｍＬ）中のピペリジン−４−イル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．０ｇ，５．０ｍｍｏｌ，Ａｓｔｒａｔｅｃｈ，  Ｉｎｃ．）及びジイソプロピルエチルアミン（４ｍＬ）の溶液を＋５℃で撹拌した。これに、ボーラスにおいて塩化メタンスルホニル（１．０ｇ，８．８ｍｍｏｌ）を添加した。当該反応物を室温に１時間保ち、水に注ぎ、そして塩化メチレン（２×５０ｍＬ）に抽出した。併せた有機抽出物を５％水性炭酸水素ナトリウムで洗浄した。有機層を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、そして溶媒を真空下で除去し、そして粗固形物を得た。エーテル／ヘキサンでの研和により精製し、白色の固体として、（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを得た。質量スペクトル（ＥＳ）Ｈ+：２７８
【００７７】
塩化メチレン（１５ｍＬ）中の（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．１４ｇ，４．１ｍｍｏｌ，上記由来）の懸濁液を室温においてトリフルオロ酢酸（５．３ｍＬ）で処理した。２時間の撹拌後、全ての溶媒を除去し、そして残渣をエーテルで洗浄し、そして真空において乾燥させ、１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミンを得た；トリフルオロ酢酸を伴う化合物（１．２０ｇ，収率１００％）。ＨＲＭＳ，測定値：１７７．０６９２，Ｍ+の計算値：１７７．０６９８９．
【００７８】
Ｂ）［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−メトキシ−フェニル）−メタノンの調製
【化２２】
2008505955.tif 000024
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（２−メトキシ−フェニル）−メタノン（２４．９ｍｇ，０．０９４８ｍｍｏｌ，実施例５）、１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミン（５０．６ｍｇ，０．２８４ｍｍｏｌ，上記工程Ａ由来）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３８ｍｇ，０．２９４ｍｍｏｌ）、及びエタノール（２．７ｍＬ）の混合物を、１６０〜１８０℃において、密封した管中、マイクロ波条件下において０．５〜４時間加熱した。生じた反応混合物を真空において濃縮し、そして残渣を塩化メチレン／メタノールによりシリカゲルにおいて精製し、白色の固体として［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−メトキシ−フェニル）−メタノンを得た（２２．５ｍｇ，収率５８％）。ＨＲＭＳ，測定値：４０５．１５９４，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４０５．１５９１．
【００７９】
実施例７
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（２−フルオロ−フェニル）−メタノン
【化２３】
2008505955.tif 000025
２−アミノ−６−クロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−ニコチンアミド（５００ｍｇ，２．３２ｍｍｏｌ，実施例３）を無水テトラヒドロフラン（１４ｍＬ）に溶解し、そして−７８℃に冷却した。
【００８０】
２−フルオロフェニルリチウム溶液（４〜６当量、実施例４と同じ手順に従い新たに調製した）を添加した。当該反応物を−７８℃で１〜３時間撹拌し、そして塩化アンモニウム水溶液クエンチした。生じた混合物を酢酸エチルで抽出し、飽和した塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、そして真空において蒸発させた。それから精製物をシリカゲルにおいて精製し、白色の固体として、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（２−フルオロ−フェニル）−メタノンを得た（４４５．５ｍｇ，収率７７％）。ＨＲＭＳ，測定値：２５０．０３０６，Ｍ+の計算値：２５０．０３０９．
【００８１】
実施例８
４−［６−アミノ−５−（２−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化２４】
2008505955.tif 000026
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（２−フルオロ−フェニル）−メタノン（実施例７）及び４−アミノ−１−Ｎ−Ｂｏｃ−ピペリジン（Ａｓｔａｔｅｃｈ，＞９６％）から、実施例６の工程Ｂに記載する手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４１５．２１４３，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４１５．２１４０．
【００８２】
実施例９
［２−アミノ−６−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−フルオロ−フェニル）−メタノン
【化２５】
2008505955.tif 000027
４−［６−アミノ−５−（２−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２６９．６ｍｇ，０．６５０４ｍｍｏｌ，実施例８）をジクロロメタン（５ｍＬ）中に溶解し、０℃に冷却し、そしてトリフルオロ酢酸（２．５ｍＬ）で処理した。〜３０分間の撹拌後、反応混合物を真空において蒸発させた。それから塩を飽和した炭酸ナトリウム（〜３ｍＬ）で中和し、飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、そして真空において蒸発させ、オフホワイトの固体として［２−アミノ−６−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−フルオロ−フェニル）−メタノンを得た（２００ｍｇ，０．６３６ｍｍｏｌ，収率９８％）。
【００８３】
実施例１０
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−フルオロ−フェニル）−メタノン
【化２６】
2008505955.tif 000028
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（２−フルオロ−フェニル）−メタノン（実施例７）及び１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミン（工程Ａ，実施例６）から、実施例６の工程Ｂに記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：３９２．１３２９，Ｍ+の計算値：３９２．１３１８．
【００８４】
実施例１１
４−［６−アミノ−５−（２−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル
【化２７】
2008505955.tif 000029
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（２−フルオロ−フェニル）−メタノン（実施例７）及びエチル−４−アミノ−１−ピペリジンカルボキシラート（Ａｌｄｒｉｃｈ）から、実施例６の工程Ｂに記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：３８６．１７６２，Ｍ+の計算値：３８６．１７５４．
【００８５】
実施例１２
［２−アミノ−６−（１−エタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−フルオロ−フェニル）−メタノン
【化２８】
2008505955.tif 000030
塩化メチレン（１．５ｍＬ）中の［２−アミノ−６−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−フルオロ−フェニル）−メタノン（１９．２ｍｇ，０．０６１１ｍｍｏｌ，実施例９）溶液に、塩化メチレン（０．２ｍＬ）中のトリエチルアミン（１２．６ｍｇ，０．１２４ｍｍｏｌ，Ａｌｄｒｉｃｈ）及び塩化メチレン（０．２ｍＬ）中の塩化エタンスルホニル（８．６６ｍｇ，０．０６６ｍｍｏｌ，Ａｌｄｒｉｃｈ９９＋％）を室温で添加した。〜３０分後、反応混合物を濃縮して、実施例１１に記載されるとおり、逆相ＨＰＬＣにより精製し、［２−アミノ−６−（１−エタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−フルオロ−フェニル）−メタノンを得た（１５．１ｍｇ，収率６０％）。ＨＲＭＳ，測定値：４０７．１５３３，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４０７．１５４８．
【００８６】
実施例１３
１−｛４−［６−アミノ−５−（２−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−エタノン
【化２９】
2008505955.tif 000031
表題の化合物は、［２−アミノ−６−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−フルオロ−フェニル）−メタノン（実施例９）及び塩化アセチル（Ａｌｄｒｉｃｈ  ９８．５％）から、実施例１２に記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：３５６．１６５５，Ｍ+の計算値：３５６．１６４９．
【００８７】
実施例１４
１−｛４−［６−アミノ−５−（２−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−プロパン−１−オン
【化３０】
2008505955.tif 000032
表題の化合物は、［２−アミノ−６−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−フルオロ−フェニル）−メタノン（実施例９）及び塩化プロピオニル（Ａｌｄｒｉｃｈ  ９８％）から、実施例１２に記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：３７０．１８０７，Ｍ+の計算値：３７０．１８０５．
【００８８】
実施例１５
４−［６−アミノ−５−（２−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルアミド
【化３１】
2008505955.tif 000033
表題の化合物は、［２−アミノ−６−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−フルオロ−フェニル）−メタノン（実施例９）及びエチルイソシアネート（Ａｌｄｒｉｃｈ  ９８％）から、実施例１２に記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：３８５．１９１７，Ｍ+の計算値：３８５．１９１４．
【００８９】
実施例１６
４−［６−アミノ−５−（２−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸メチルアミド
【化３２】
2008505955.tif 000034
表題の化合物は、［２−アミノ−６−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２−フルオロ−フェニル）−メタノン（実施例９）及びメチルイソシアネート（Ａｌｄｒｉｃｈ  ９８％）から、実施例１２に記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：３７１．１７５６，Ｍ+の計算値：３７１．１７５８．
【００９０】
実施例１７
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（３−メトキシ−フェニル）−メタノン
【化３３】
2008505955.tif 000035
表題の化合物は、２−アミノ−６−クロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−ニコチンアミド（実施例３）及び３−ヨードアニソール（Ａｌｄｒｉｃｈ）から、実施例７に記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：２６２．０５１４，Ｍ+の計算値：２６２．０５０９８．
【００９１】
実施例１８
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（３−メトキシ−フェニル）−メタノン
【化３４】
2008505955.tif 000036
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（３−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例１７）及び１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミン（工程Ａ，実施例６）から、実施例６の工程Ｂに記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４０５．１５９５，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４０５．１５９１．
【００９２】
実施例１９
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン
【化３５】
2008505955.tif 000037
表題の化合物は、２−アミノ−６−クロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−ニコチンアミド（実施例３）及び２−ブロモ−４−フルオロアニソール（Ａｌｄｒｉｃｈ）から、実施例７に記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：２８０．０４１，Ｍ+の計算値：２８０．０４１５．
【００９３】
実施例２０
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル
【化３６】
2008505955.tif 000038
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例１９）及びエチル−４−アミノ−１−ピペリジンカルボキシラート（Ａｌｄｒｉｃｈ９６）から、実施例６の工程Ｂに記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４１７．１９３８，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４１７．１９３３．
【００９４】
実施例２１
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【化３７】
2008505955.tif 000039
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例１９）及び４−アミノ−１−Ｎ−Ｂｏｃ−ピペリジン（Ａｓｔａｔｅｃｈ，＞９６％）から、実施例６の工程Ｂに記載する手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４４５．２２５２，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４４５．２２４６．
【００９５】
実施例２２
［４−アミノ−２−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノントリフルオロ酢酸塩
【化３８】
2008505955.tif 000040
ジクロロメタン（５ｍＬ）中の４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２５６．１ｍｇ，０．５７６１ｍｍｏｌ，実施例２１）の溶液を０℃に冷却し、そしてトリフルオロ酢酸（２．５ｍＬ）で処理した。３０分撹拌後、反応混合物を真空において濃縮し、［４−アミノ−２−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノントリフルオロ酢酸塩を得た（５１９．８ｍｇ）。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+：３４５．
【００９６】
実施例２３
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン
【化３９】
2008505955.tif 000041
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例１９）及び１−メタンスルホニルピペリジン−４−イルアミン（工程Ａ，実施例６）から、実施例６の工程Ｂに記載する手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４２３．１５０，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４２３．１４９７．ｃｄｋ４のＫｉ＝０．０４０μＭ，ｃｄｋ２＝０．０９８μＭ，及びＨＣＴ１１６細胞株のＩＣ50＝９μＭ．
【００９７】
実施例２４
［２−アミノ−６−（１−エタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン
【化４０】
2008505955.tif 000042
塩化メチレン（（１．２５ｍＬ）中の［４−アミノ−２−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノントリフルオロ酢酸塩（０．０５８９ｍｍｏｌ，実施例２２）の溶液に、トリエチルアミン（０．０６５ｍＬ，０．４６６ｍｍｏｌ，Ａｌｄｒｉｃｈ）及び塩化メチレン（０．３３ｍＬ）中の塩化エタンスルホニル（８．１ｍｇ，０．０６２ｍｍｏｌ，Ａｌｄｒｉｃｈ  ９９＋％）の溶液を０℃で添加した。５分後、真空において濃縮する前に反応混合物を室温で１時間撹拌させた。残渣をシリカゲルにおいて吸収し、そして９９．５／０．５→９５／５の塩化メチレン／メタノールで精製し、白色の固体として［２−アミノ−６−（１−エタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノンを得た（１６．０ｍｇ，収率６３％）。ＨＲＭＳ，測定値：４３７．１６６０，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４３７．１６５４．
【００９８】
実施例２５
｛２−アミノ−６−［１−（プロパン−１−スルホニル）−ピペリジン−４−イルアミノ］−ピリジン−３−イル｝−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン
【化４１】
2008505955.tif 000043
表題の化合物は、［４−アミノ−２−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノントリフルオロ酢酸塩（実施例２２）及び塩化１−プロパンスルホニル（Ａｌｄｒｉｃｈ  ９７％）から、実施例２４に記載する手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４５１．１８１７，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４５１．１８１０．
【００９９】
実施例２６
｛２−アミノ−６−［１−（プロパン−２−スルホニル）−ピペリジン−４−イルアミノ］−ピリジン−３−イル｝−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン
【化４２】
2008505955.tif 000044
表題の化合物は、［４−アミノ−２−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノントリフルオロ酢酸塩（実施例２２）及び塩化イソプロピルスルホニル（Ａｌｄｒｉｃｈ  ９７％）から、実施例２４に記載する手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４５１．１８１４，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４５１．１８１０．
【０１００】
実施例２７
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸メチルエステル
【化４３】
2008505955.tif 000045
表題の化合物は、［４−アミノ−２−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノントリフルオロ酢酸塩（実施例２２）及びメチルクロロホルマート（Ａｌｄｒｉｃｈ  ９７％）から、実施例２４に記載する手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４０３．１７８１，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４０３．１７７６．
【０１０１】
実施例２８
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸プロピルエステル
【化４４】
2008505955.tif 000046
表題の化合物は、［４−アミノ−２−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノントリフルオロ酢酸塩（実施例２２）及び１−プロピルクロロホルマート（Ａｌｄｒｉｃｈ  ９８％）から、実施例２４に記載する手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４３１．２０９５，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４３１．２０８９．
【０１０２】
実施例２９
［２−アミノ−６−（１−ベンジル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン
【化４５】
2008505955.tif 000047
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例１９）及び４−アミノ−１−ベンジルピペリジン（Ａｌｄｒｉｃｈ）から、実施例６の工程Ｂに記載する手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４３５．２１９６，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４３５．２１９１．
【０１０３】
実施例３０
１−｛４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−１−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−エタノン
【化４６】
2008505955.tif 000048
表題の化合物は、［４−アミノ−２−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノントリフルオロ酢酸塩（実施例２２）及び塩化アセチル（Ａｌｄｒｉｃｈ  ９８．５％）から、実施例２４に記載する手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：３８７．１８３３，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：３８７．１８２７．
【０１０４】
実施例３１
１−｛４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−プロパン−１−オン
【化４７】
2008505955.tif 000049
表題の化合物は、［４−アミノ−２−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノントリフルオロ酢酸塩（実施例２２）及び塩化プロピオニル（Ａｌｄｒｉｃｈ  ９８％）から、実施例２４に記載する手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４０１．１９８８，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４０１．１９８．
【０１０５】
実施例３２
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸メチルアミド
【化４８】
2008505955.tif 000050
表題の化合物は、［４−アミノ−２−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノントリフルオロ酢酸塩（実施例２２）及びメチルイソシアネート（Ａｌｄｒｉｃｈ  ９８％）から、実施例２４に記載する手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４０２．１９４０，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４０２．１９３６．
【０１０６】
実施例３３
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルアミド
【化４９】
2008505955.tif 000051
表題の化合物は、［４−アミノ−２−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノントリフルオロ酢酸塩（実施例２２）及びエチルイソシアネート（Ａｌｄｒｉｃｈ  ９８％）から、実施例２４に記載する手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４１６．２０９７，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４１６．２０９３．
【０１０７】
実施例３４
［２−アミノ−６−（１−メチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン
【化５０】
2008505955.tif 000052
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．５ｍＬ）中の［４−アミノ−２−（ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノントリフルオロ酢酸塩（０．０５７５ｍｍｏｌ，実施例２２）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．３５ｍＬ）中の炭酸カリウム（５５．６ｍｇ，０．４０２４ｍｍｏｌ，Ａｌｄｒｉｃｈ）及びヨードメタン（１４．８ｍｇ，０．１０４ｍｍｏｌ，Ａｌｄｒｉｃｈ  ９９．５％）を添加した。当該反応物を０℃で４時間撹拌した。生じた混合物を酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、そして真空で蒸発させた。残渣を逆相ＨＰＬＣにおいて精製し、白色の固体として［２−アミノ−６−（１−メチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノンを得た（４．８ｍｇ，収率２４％）。ＨＲＭＳ，測定値：３５８．１８１０，Ｍ+の計算値：３５８．１８０５．
【０１０８】
実施例３５
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（４−メトキシ−フェニル）−メタノン
【化５１】
2008505955.tif 000053
表題の化合物は、２−アミノ−６−クロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−ニコチンアミド（実施例３）及び４−ヨードアニソール（Ａｌｄｒｉｃｈ）から新しく調製した４−メトキシフェニルリチウムから、実施例７に記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：２６２．０５１２，Ｍ+の計算値：２６２．０５０９．
【０１０９】
実施例３６
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（４−メトキシ−フェニル）−メタノン
【化５２】
2008505955.tif 000054
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（４−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例３５）及び１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミン（工程Ａ，実施例６）から、実施例６の工程Ｂに記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４０５．１５９５，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４０５．１５９１．
【０１１０】
実施例３７
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（４−フルオロ−フェニル）−メタノン
【化５３】
2008505955.tif 000055
表題の化合物は、２−アミノ−６−クロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−ニコチンアミド（実施例３）及び１−フルオロ−４−ヨードベンゼン（Ａｌｄｒｉｃｈ  ９９％）から、実施例７に記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：２５０．０３１４，Ｍ+の計算値：２５０．０３０９．
【０１１１】
実施例３８
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（４−フルオロ−フェニル）−メタノン
【化５４】
2008505955.tif 000056
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（４−フルオロフェニル）−メタノン（実施例３７）及び１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミン（工程Ａ，実施例６）から、実施例６の工程Ｂに記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：３９３．１３９１，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：３９３．１３９１．
【０１１２】
実施例３９
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−フェニル）−メタノン
【化５５】
2008505955.tif 000057
表題の化合物は、２−アミノ−６−クロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−ニコチンアミド（実施例３）及び２−ブロモ−４，５−ジフルオロアニソール（Ａｐｏｌｌｏ）から、実施例７に記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：２９８．０３１８，Ｍ+の計算値：２９８．０３２１．
【０１１３】
実施例４０
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−フェニル）−メタノン
【化５６】
2008505955.tif 000058
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例３９）及び１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミン（工程Ａ，実施例６）から、実施例６の工程Ｂに記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４４１．１４０７，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４４１．１４０３．ｃｄｋ４のＫｉ＝０．０１７μＭ，ｃｄｋ１＝０．０６０μＭ，ｃｄｋ２＝０．０５４μＭ，及びＨＣＴ１１６細胞株のＩＣ50＝２．６μＭ．
【０１１４】
実施例４１
４−［６−アミノ−５−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル
【化５７】
2008505955.tif 000059
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例３９）及びエチル−４−アミノ−１−ピペリジンカルボキシラート（Ａｌｄｒｉｃｈ  ９６％）から、実施例６の工程Ｂに記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４３５．１８４１，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４３５．１８３９．
【０１１５】
実施例４２
１−｛４−［６−アミノ−５−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−エタノン
【化５８】
2008505955.tif 000060
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（２，３−ジフルオロ−６−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例３９）及び１−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−エタノン（Manetti et ai, Biorg. Med. Chem. Lett., 13 (2003), 2303-2306に記載されるとおり調製した）から、実施例６の工程Ｂに記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４０５．１７３４，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４０５．１７３３．
【０１１６】
実施例４３
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（５−フルオロ−２−メトキシ−４−メチル−フェニル）−メタノン
【化５９】
2008505955.tif 000061
−７８℃の無水テトラヒドロフラン（５ｍＬ）中の４−フルオロ−３−メチルアニソール（０．７５ｍＬ，８０２ｍｇ，５．５５ｍｍｏｌ，Ａｌｄｒｉｃｈ  ９７％）の溶液に、ヘキサン（２．５Ｍ，２．２２ｍＬ，５．５５ｍｍｏｌ，Ａｌｄｒｉｃｈ）中のｎ−ブチルリチウムをゆっくり添加した。−２５〜０℃に温め、そして１．５時間撹拌する前に、反応物を−７８℃で１０分間撹拌した。生じたアリールリチウム試薬を−７８℃に再度冷却し、そして実施例７に記載されるとおり、２−アミノ−６−クロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−ニコチンアミドと反応させ、オフホワイトの固体として（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（５−フルオロ−２−メトキシ−４−メチル−フェニル）−メタノンを得た。ＨＲＭＳ，測定値：２９５．０６４５，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：２９５．０６４４．
【０１１７】
実施例４４
１−｛４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−４−メチル−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−エタノン
【化６０】
2008505955.tif 000062
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（５−フルオロ−２−メトキシ−４−メチル−フェニル）−メタノン（実施例４３）及び１−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−エタノン（Manetti et ai, Biorg. Med. Chem. Lett., 13 (2003), 2303-2306に記載されるとおり調製した）から、実施例６の工程Ｂに記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４０１．１０８４，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４０１．１０８４．
【０１１８】
実施例４５
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（５−フルオロ−２−メトキシ−４−メチル−フェニル）−メタノン
【化６１】
2008505955.tif 000063
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（５−フルオロ−２−メトキシ−４−メチル−フェニル）−メタノン（実施例４３）及び１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミン（工程Ａ，実施例６）から、実施例６の工程Ｂに記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４３７．１６５３，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４３７．１６５４．
【０１１９】
実施例４６
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−４−メチル−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル
【化６２】
2008505955.tif 000064
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（５−フルオロ−２−メトキシ−４−メチル−フェニル）−メタノン（実施例４３）及びエチル−４−アミノ−ピペリジンカルボキシラート（Ａｌｄｒｉｃｈ  ９６％）から、実施例６の工程Ｂに記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４３１．２０９０，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４３１．２０８９．
【０１２０】
実施例４７
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（４−クロロ−５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン
Ａ）５−クロロ−４−フルオロ−２−ヨードアニソールの調製
【化６３】
2008505955.tif 000065
クロロホルム（２５０ｍＬ）中の３−クロロ−４−フルオロアニソール（４．６９ｇ  Ｌａｎｃａｓｔｅｒ）の溶液にトリフルオロ酢酸銀（２３．２ｇ  Ａｌｄｒｉｃｈ）、続いてヨウ素（１５．８ｇ  Ａｌｄｒｉｃｈ）をいくつかに分けて添加した。反応混合物を２時間撹拌し、そしてセリットを通して濾過した。濾液を水、ブラインで洗浄し、乾燥させ、そして濃縮した。粗生成物をエーテル／石油エーテルからの結晶化により精製し、５−クロロ−４−フルオロ−２−ヨードアニソール（５．０ｇ）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）+，２８５．
【０１２１】
Ｂ）（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（４−クロロ−５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノンの調製
【化６４】
2008505955.tif 000066
表題の化合物は、２−アミノ−６−クロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−ニコチンアミド（実施例３）及び５−クロロ−４−フルオロ−２−ヨードアニソール（上記工程Ａに記載されるとおり調製した）から、実施例７に記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：３１２．９９４３，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：３１２．９９４７．
【０１２２】
実施例４８
１−｛４−［６−アミノ−５−（４−クロロ−５−フルオロ−２−メトキシ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−イル｝−エタノン
【化６５】
2008505955.tif 000067
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（４−クロロ−５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例４７）及び１−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−エタノン（Manetti et ai, Biorg. Med. Chem. Lett., 13 (2003), 2303-2306に記載されるとおり調製した）から、実施例６の工程Ｂに記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４２１．１４３９，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４２１．１４３７．
【０１２３】
実施例４９
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（４−クロロ−５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン
【化６６】
2008505955.tif 000068
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（４−クロロ−５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例４７）及び１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミン（工程Ａ，実施例６）から、実施例６の工程Ｂに記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４５７．１１０６，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４５７．１１０７．ｃｄｋ４のＫｉ＝０．００８μＭ，ｃｄｋ１＝０．１５４μＭ，ｃｄｋ２＝０．０３９μＭ，及びＨＣＴ１１６細胞株のＩＣ50＝３．０μＭ．
【０１２４】
実施例５０
４−［６−アミノ−５−（５−フルオロ−２−メトキシ−４−クロロ−ベンゾイル）−ピリジン−２−イルアミノ］−ピペリジン−１−カルボン酸エチルエステル
【化６７】
2008505955.tif 000069
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（４−クロロ−５−フルオロ−２−メトキシ−フェニル）−メタノン（実施例４７）及びエチル−４−アミノ−ピペリジンカルボキシラート（Ａｌｄｒｉｃｈ  ９６％）から、実施例６の工程Ｂに記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４５１．１５４５，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４５１．１５４３．
【０１２５】
実施例５１
（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−メタノン
【化６８】
2008505955.tif 000070
表題の化合物は、２−アミノ−６−クロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−ニコチンアミド（実施例３）及び２−ブロモ−１，３−ジフルオロベンゼン（Ａｌｄｒｉｃｈ）から、実施例７に記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：２６８．０２１７，Ｍ+の計算値：２６８．０２１５．
【０１２６】
実施例５２
［２−アミノ−６−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリジン−３−イル］−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−メタノン
【化６９】
2008505955.tif 000071
表題の化合物は、（２−アミノ−６−クロロ−ピリジン−３−イル）−（２，６−ジフルオロ−フェニル）−メタノン（実施例５１）及び１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イルアミン（工程Ａ，実施例６）から、実施例６の工程Ｂに記載される手順を使用して調製した。ＨＲＭＳ，測定値：４１１．１２９８，（Ｍ＋Ｈ）+の計算値：４１１．１２９７．
【０１２７】
本発明の化合物の薬理学的特性は、いくつかの薬理アッセイにより確認することができる。例示される薬理アッセイは本発明の化合物及びこれらの塩で行われた。本発明の化合物は、３．０μＭ以下のＫｉ値を伴うｃｄｋ４／サイクリンＤ活性；８．０μＭ以下のＫｉ値を伴うｃｄｋ１及びｃｄｋ２活性を示した。更に、本発明の同じ化合物の抗増殖能は、３５μＭ以下、好ましくは５μＭ以下のＭＴＴアッセイから報告されたＩＣ50値を伴うヒト大腸腫瘍細胞株ＨＴＣ１１６において試験された。
【０１２８】
実施例５３
キナーゼアッセイ
Ｋｉ：測定
組換えヒトサイクリンＢ−ＣＤＫ１、ヒトサイクリンＥ−ＣＤＫ２、又はヒトサイクリンＤ１−ＣＤＫ４複合体を使用した。バキュロウイルスベクター中の、ＧＳＴ−サイクリンＥ（ＧＳＴ−ｃｙｃＥ）、ＣＤＫ２、ＧＳＴ−サイクリンＢ（ＧＳＴ−ｃｙｃＢ）、ＣＤＫ１、ＧＳＴ−ＣＤＫ４、及びサイクリンＤ１（ｃｙｃＤ１）ｃＤＮＡクローンは、the Baylor College of Medicine, Houston, TXのDr. W. Harper より提供された。タンパク質は、High FiveTM昆虫細胞中で同時発現され、そして当該複合体は、先に記載さたとおり(Harper, J. W. et al. Cell 1993, 75, 805-816)、グルタチオンセファロース樹脂(Pharmacia, Piscataway, NJ)において精製された。網膜芽細胞腫（Ｒｂ）タンパク質の６ｘ−ヒスチジンタグ化切断型（アミノ酸３８６〜９２８）は、ｃｙｃＤ１−ＣＤＫ４、ｃｙｃＢ−ＣＤＫ１、及びｃｙｃＥ−ＣＤＫ２アッセイのための基質として使用した（発現プラスミドはDr. Veronica Sullivan, Department of Molecular Virology, Roche Research Centre, Welwyn Garden City, United Kingdomにより提供された）。Ｒｂタンパク質は、ＣＤＫ４、ＣＤＫ２、及びＣＤＫ１によるリン酸化のための天然基質である（Herwig and Strauss Eur. J. Biochem. Vol. 246 (1997) pp.581-601及びそこに引用される参考文献を参照のこと）。
【０１２９】
６２Ｋｄタンパク質の発現は、Ｍ１５大腸菌(E． coli)株中のＩＰＴＧ誘導性プロモーターの制御下におかれた。細胞をソニケーションにより溶解し、そしてｐＨ８．０の溶菌液を、１ｍＭのイミダゾールで前処理したＮｉ−キレート化アガロースカラムに結合させることにより精製を行った。それから、樹脂を、ｐＨ６．０に徐々に減少するｐＨバッファーで数回洗浄し、そして５００ｍＭのイミダゾールで溶出した。溶出タンパク質を、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．５、３０％グリセロール、２００ｍＭのＮａＣｌ、及び１ｍＭのＤＴＴに透析した。精製したＲｂ融合タンパク質ストックをタンパク質濃度のために定量化し、等分し、そして−７０℃で保管した。
【０１３０】
上述のタンパク質コンストラクトを使用して、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、及びＣＤＫ４ＨＴＲＦアッセイを開始した。これらは９６ウェル型中で行い、そして３４８ウェルプレート型で判断した。
【０１３１】
ＣＤＫ４アッセイにおいて、試験化合物は、２５ｍＭのＨｅｐｅｓ、ｐＨ７．０、６．２５ｍＭのＭｇＣｌ2、１．５ｍＭのＤＴＴ、１３５μＭのＡＴＰにおける最終濃度の３倍に希釈した。ＤＭＳＯ濃度は４．７６％以上ではなかった。２０マイクロリットルを９６ウェルプレートのウェルに添加した。キナーゼ反応は、２５ｍＭのＨｅｐｅｓ，ｐＨ７．０、６．２５ｍＭのＭｇＣｌ2、０．００３％Ｔｗｅｅｎ−２０、０．３ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ、１．５ｍＭのＤＴＴ中に０．１８５μＭのＲｂ及び２．２５μｇ／ｍｌのＣＤＫ４を含有する４０μｌ／ウェルの溶液を添加することにより開始した。ＣＤＫ４を有さないブランクウェルを含めた。プレートを振盪しながら３７℃で３０分間インキュベートした。キナーゼ反応は、２５ｍＭのＨｅｐｅｓ，ｐＨ７．０、２４ｍＭのＥＤＴＡ、０．２ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ中の１５μｌ／ウェルの１．６μＭの抗ホスホＲｂ（ＳｅＲ7８０）抗体(Cell Signaling Inc.)の添加により終了した。３７℃で３０分後、２５ｍＭのＨｅｐｅｓ，ｐＨ７．０、０．５ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ中の１５μｌ／ウェルの３ｎＭのＬａｎｃｅ−Ｅｕ−Ｗ１０２４ラベル化抗ウサギＩｇＧ及び６０ｎＭのアロフィコシアニン接合抗Ｈｉｓ６(PerkinElmer Life Sciences)を添加した。３７℃で１時間のインキュベーション後、二組の３５μｌの各ウェルを、３８４ウェルブラックプレートに移した。３４０ｎｍの励起波長及び６１５ｎｍと６６５ｎｍの２つの放射波長を用いたViewLux又はVictor V リーダー(PerkinElmer Life Sciences)のいずれかを使用して当該プレートを読んだ。ＩＣ５０値（５０％のアッセイコントロール蛍光読み出しを低下する試験化合物の濃度）は、６６５ｎｍのネットリーディングから最初に計算し、６１５ｎｍにおけるユーロピウムの読み（測定値）のために基準化した。ＡＴＰ競合性阻害因子のために、Ｋｉ値は以下の方程式に従い計算した：
Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋Ｓ／Ｋｍ）
式中、Ｓは基質濃度（ＡＴＰ）を表し、そしてＫｍはＡＴＰのミカエリスメンテン定数を表す。
【０１３２】
ＣＤＫ１及びＣＤＫ２アッセイは、試薬及びタンパク質濃度における微差を除き同様に行われた：
【０１３３】
両アッセイのための化合物及び酵素バッファーは、１０ｍＭのＭｇＣｌ2を含んだ。ＣＤＫ１及びＣＤＫ２のために、それぞれの試薬ＡＴＰ濃度は、１６２μＭ及び９０μＭであった。０．１５ｎｇ／μｌの試薬濃度におけるＣＤＫ１及び０．１６ｎｇ／μｌの試薬濃度におけるＣＤＫ２を使用した。シグナル対バックグランド比が少なくとも１０対１を与えるように、検出試薬の試薬濃度は、３〜１２ｎＭのＥｕ−Ａｂ及び６０〜９０ｎＭのＡＰＣ−抗Ｈｉｓ６に調整した。
【０１３４】
実施例５４
細胞に基づくアッセイ（テトラゾリウム染色増殖アッセイ）（「ＭＴＴアッセイ」）
増殖は、DenizotとLang の手順(Denizot, F. and Lang, R. J Immunol Methods 1986, 89, 271-277)に従い、テトラゾリウム染色アッセイにより評価した。使用した細胞株はAmerican Type Cell Culture Collection (ATCC; Rockville, MD)から得られた直腸結腸癌細胞株のＨＣＴ１１６とした。当該細胞は１０％ＦＣＳ及びＬ−グルタミンで補充したＭｃＣｏｙ’ｓ  ５Ａ培地中で成長させた。
【０１３５】
９６ウェル組織培養プレートにおけるアッセイの過程にわたり対数的な成長を与えるように細胞を適当な播種密度で置いた。５％ＣＯ2を伴う加湿したインキュベーター中で、プレートを３７℃で一晩インキュベートした。翌日、試験化合物を、１．２％ＤＮＳＯを含有する適当な培地において最終濃度の４倍に連続希釈した。四分の一の最終容積の各希釈を、二組において、細胞を含むプレートに添加した。各ウェル中にＤＭＳＯの最終濃度が０．３％となるように、培地中の同量の１．２％ＤＭＳＯを「コントロールウェル」の列に添加した。細胞が添加されないウェルは「ブランク」とした。阻害剤が添加されないウェルは「無阻害剤コントロール」とした。プレートをインキュベーターに戻し、そして設定時間（これらの成長曲線により決定した）において、以下に記載するとおりプレートを分析した。
【０１３６】
１ｍｇ／ｍｌの最終濃度となるように、３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムブロミド（チアゾリルブルー；ＭＴＴ；Ｓｉｇｍａ）を各ウェルに添加した。プレートを３７℃において２．５〜３時間インキュベーターに戻した。ＭＴＴ含有培地を除去し、そして生じたホルマザン代謝産物を、室温で１５分間振盪しながら１００％エタノールに溶解させた。吸光度の読みは、５７０ｎｍの波長において６５０ｎｍ基準と共に、マイクロタイタープレートリーダーにおいて行った(DynatechとMolecular Devices プレートリーダーを互換的に使用した)。パーセント阻害（％ＩＮＨ）は、全てのウェルからブランクウェルの吸光度を引き、それから１．００からコントロールの平均（ＣAVE）に対する各試験の二組の平均吸光度（ＳAVE）の比を引くことにより計算される。それから最後の数に１００を掛ける（％ＩＮＨ＝（１．００−ＳAVE／ＣAVE）×１００）。細胞増殖の９０％の阻害が得られる場合（ＩＣ90）の濃度は、濃度対パーセント阻害の対数プロットの直線回帰から決定される。
【０１３７】
実施例５５
【表１】
2008505955.tif 000072
【０１３８】
製造手順：
１．適当なミキサーにおいて、項目１、２、及び３を１５分間混合する。
２．工程１由来の粉末混合物を、２０％ポビドンＫ３０溶液（項目４）と共に顆粒化する。
３．工程２由来の顆粒を５０℃で乾燥させる。
４．工程３由来の顆粒を適当な製粉装置に通過させる。
５．項目５を工程４の製粉した顆粒に添加し、そして３分間混合する。
６．工程５由来の顆粒を適当なプレスにおいて加圧する。
【０１３９】
【表２】
2008505955.tif 000073
【０１４０】
製造手順：
１．適当なミキサーにおいて、項目１、２、及び３を１５分間混合する。
２．項目４及び５を加え、そして３分間混合する。
３．適当なカプセルに充填する。
【０１４１】
【表３】
2008505955.tif 000074
【０１４２】
製造手順：
１．項目１を項目２に溶解させる。
２．項目３、４、及び５を項目６に添加し、そして分散するまで混合し、それからホモジナイズする。
３．工程１由来の溶液を工程２由来の混合物に添加し、そして分散系が透明になるまでホモジナイズする。
４．０．２μｍの無菌フィルターを通し、そしてバイアルに充填する。
【０１４３】
【表４】
2008505955.tif 000075
製造手順：
１．項目１を項目２に溶解させる。
２．項目３、４、及び５を項目６に添加し、そして分散するまで混合し、それからホモジナイズする。
３．工程１由来の溶液を工程２由来の混合物に添加し、そして分散系が透明になるまでホモジナイズする。
４．０．２μｍの無菌フィルターを通し、そしてバイアルに充填する。
【０１４４】
本発明は、特定且つ好ましい態様に対する参考により説明されているが、当業者は、変更及び改変が、本発明の慣習的な実験及び実施を通して行うことができることを理解するだろう。従って、本発明は、先の説明により制限されず、付随する特許請求の範囲及びそれに相等するものにより定義されることを意図する。
【国際調査報告】
2008505955.tif 000088
2008505955.tif 000089
2008505955.tif 000090
2008505955.tif 000091
2008505955.tif 000092