(57)【要約】【課題】脂質酸化が起因となる心不全による突然死または胎生致死の予防に有効な新たな成分の提供を課題とする。【解決手段】黒酢、黒酢もろみ末を新たな成分として提供することにより、以下の剤を得た。（１）心不全による突然死の予防剤。（２）胎生致死の予防剤。（３）脂質酸化が起因となる心不全による突然死または胎生致死の予防剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
黒酢および／または黒酢もろみ末を有効成分とする心不全による突然死の予防剤。
【請求項２】
黒酢および／または黒酢もろみ末を有効成分とする胎生致死の予防剤。
【請求項３】
脂質酸化が起因となる心不全による突然死または胎生致死を予防する請求項１または２に記載の予防剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は黒酢および／または黒酢もろみ末を有効成分とする心不全による突然死の提供に関する。さらに、黒酢および／または黒酢もろみ末を有効成分とする胎生致死の予防剤の提供に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、心臓において脂質酸化が亢進されると、心筋細胞死が引き起こり、心不全の成因となることが明らかとなってきた。心不全とは、心臓の血液拍出が不十分であり、全身が必要とするだけの血液の循環量を保てていない病態のことを指し、鬱血によるものや、心筋梗塞に伴う急性のもの、心筋症や弁膜症に伴う慢性のもの等が知られている。
本発明者らは、酸化を成因とする様々な疾患の研究にあたり、抗酸化酵素であるリン脂質ヒドロペルオキシドグルタチオンペルオキシダーゼ(phospholipid-hydroperoxide glutathione peroxidase；PHGPx(以下、PHGPx, GPx4と表すことがある))に着目した。PHGPxは、酸化ストレス等による生体膜の酸化により生じたリン脂質ヒドロペルオキシドをグルタチオン依存的に直接還元する主要な抗酸化酵素であり、その活性中心にセレノシステインを有することが知られている。
【０００３】
本発明者らは、このPHGPxを欠損させた心臓特異的PHGPx欠損マウスにおいて、17.5日胎児において心筋細胞死を引きおこし、18.5日胎児で浮腫が起き胎生致死となることを見いだし、酸化脂質の代謝異常が重篤な疾患を引きおこすことを確認している。
また、母親のマウスにビタミンＥ添加飼料を与えると、この心臓特異的PHGPxの胎児死が予防できること、この心臓特異的PHGPx欠損仔マウスにビタミンE添加飼料を与えると正常に生育すること、さらには、成体となった心臓特異的PHGPx欠損マウスに通常の飼料を与えると約10日で不整脈を伴う心不全により突然死を引きおこすことを確認している。
【０００４】
そこで、本発明者らは、このような性質を有する心筋特異的PHGPx欠損マウスを生体での脂質酸化の蓄積が起因となる不整脈性心不全による突然死のモデルマウスとして、脂質酸化が起因となる心筋細胞死、胎生致死または心不全による突然死の予防等に有効な、ビタミンＥに変わり得る新たな成分の検討を試みた。
本発明者らは、この新たな成分の一つとして、黒酢に着目した。黒酢は、鹿児島県の福山町を発祥の地とし、ＪＡＳ法により規定される米黒酢であり、陶器の壺に蒸し米、麹、水を入れ、この壺の中で糖化、アルコール発酵、酢酸発酵まで進行させ、さらにこれを熟成することで得られる独特の深い味わいを有する酢である。
【０００５】
黒酢は、もっぱら調味料として用いられてきたが、近年は黒酢の血圧を下げる効果や血液をサラサラにする効果が明らかとなり、さらに、脂質代謝改善作用、血糖低下作用などのエビデンスが得られ、実際に様々な生体機能調節機能を持つことが明らかにされつつある。また、ロダン鉄法やマウスの皮膚に塗布する等の試験により、抗酸化作用を有することが確認されている(例えば、特許文献１、非特許文献１)。また、黒酢の発酵過程では副産物として産生される黒酢もろみ末も、水不溶性物質であり、食物繊維、β―グルカンおよびペプチドを含有しており、近年は健康素材としても注目されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２００４−２１７５８４号公報
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃhｎｏｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２０００年，Ｖｏｌ．６４  Ｎｏ．９，  ｐｐ．１９０９−１９１４
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、脂質酸化が起因となる心不全による突然死または胎生致死の予防に有効な新たな成分の提供を課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意検討を行った結果、新たな成分の一つとして検討した黒酢および／または黒酢もろみ末が、心不全による突然死の予防または胎生致死の予防において、有効に作用することを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は以下の通りのものである。
〔１〕黒酢および／または黒酢もろみ末を有効成分とする心不全による突然死の予防剤。
〔２〕黒酢および／または黒酢もろみ末を有効成分とする胎生致死の予防剤。
〔３〕脂質酸化が起因となる心不全による突然死または胎生致死を予防する上記〔１〕または〔２〕に記載の予防剤。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の剤は、脂質酸化が起因となる心不全による突然死または胎生致死の予防に使用し得る。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】心臟特異的PHGPx欠損マウスの胎児における致死に関するデータを示した図である（実施例）。
【図２】心臟特異的PHGPx欠損マウスの胎児における致死に関するデータを示した図である（実施例）。
【図３】心臟特異的PHGPx欠損マウスを得るための交配の概要を示した図である（実施例）。
【図４】心臟特異的PHGPx欠損マウスの心不全による突然死に関するデータを示した図である（実施例）。
【図５】黒酢、黒酢もろみ末の心不全による突然死に対する予防効果を示した図である（実施例）。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明の「予防剤」とは、黒酢および／または黒酢もろみ末を有効成分とする剤であって、心不全による突然死の予防剤であれば良い。また、黒酢および／または黒酢もろみ末を有効成分とする剤であって、胎生致死の予防剤であっても良い。これらの心不全による突然死または胎生致死は、脂質酸化が起因となるものであることが好ましい。
ここで「黒酢」とは、先に述べたように、ＪＡＳ法により規定される米黒酢であり、本発明ではこのように定義される黒酢であればどのようなものでも用いることができる。本発明の黒酢は、陶器の壺に蒸し米、麹、水を入れ、糖化、アルコール発酵、酢酸発酵までを１つの壺で進行させ、さらに熟成させることで得られる独特の深い味わいを有する酢であることが特に好ましい。
また、「黒酢もろみ末」とは、壺を用いて黒酢をつくる際に生じる副産物であり、水溶性画分は黒酢となるが、不水溶性画分は圧搾、乾燥、粉末化され、黒酢もろみ末となる。本発明はこれを黒酢もろみ末として使用することができる。黒酢もろみ末は、その成分として食物繊維、β―グルカンおよびペプチドを含有するものである。
これらの「黒酢」または「黒酢もろみ末」は、本発明の作用効果を奏するものであればいずれでもよい。
【００１３】
「心不全による突然死の予防剤」とは、ヒトやマウス等において、心筋細胞が死滅する等により心不全による突然死が起こることを予防できる剤のことをいう。
また、「胎生致死の予防剤」とは、ヒトやマウス等において、心筋細胞が死滅する等により、胎生致死が起こることを予防できる剤のこという。
これらの「予防剤」は、この「予防剤」を摂取等することにより、体内や細胞内で脂質酸化が起こることによる心筋細胞の死滅を予防できる剤であることが好ましい。
【００１４】
本発明のこれらの剤の投与対象にはヒト、ヒト以外の動物が挙げられる。ヒト以外の動物としてはイヌ、ネコをはじめとするペット、ネズミ、ウサギなどの小動物、ゾウ、キリンなどの大型動物のいずれをも対象とすることができる。
【００１５】
本発明のこれらの剤をヒトまたはヒト以外の動物に投与する方法は、経口投与が望ましい。製剤化したものを経口投与してもよいし、飲食物・飼料として摂取することも可能である。
経口投与する場合の摂取量は、本発明の作用効果がみられる量であればよく、たとえば、黒酢(黒酢10倍濃縮液)としては１日に8.3〜83mg/kg体重が好ましく、黒酢もろみ末としては、1日に5〜100mg/kg体重が好ましい。
【００１６】
飲食物としては、チューインガム，キャンディ，錠菓，グミゼリー，チョコレート，ビスケットまたはスナック等の菓子、アイスクリーム，シャーベットまたは氷菓等の冷菓、飲料、プリン、ジャム、乳製品、調味料等が挙げられる。本発明の剤を添加したこれらの飲食物を日常的に摂取することで、心筋細胞死の予防等の効果が得られる。飲食物における本発明の剤の含有量は当該飲食物の嗜好品としての味・風味等を損なわない範囲内で含まれていればよく、飲食品の種類および形態によってそれぞれ異なる。また、飼料としては通常与える飼料に混合して投与することができる。なお、本発明の黒酢は、薬物相互作用を調べた結果、薬物代謝に関連する遺伝子・タンパク質の発現に影響を及ぼさないことが判明したため、他の薬を併用した場合であっても副作用がなく、安全に摂取することが可能である。
【００１７】
以下に実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明がこれらに限定されないことは言うまでもない。
【実施例】
【００１８】
Ｉ．試料の調製
本発明の実施例では、特に断りがない限り以下の試料を使用した。
１．黒酢の調製
１）黒酢10倍濃縮液
黒酢(坂元醸造株式会社製、坂元のくろず(製品名))1000mlを凍結乾燥し粉末化した。これに蒸留水を加え、再び凍結乾燥を行った。この作業を4回繰り返し、黒酢中の酢酸を完全に除去した。得られた粉末を蒸留水100mlに溶解したものを黒酢10倍濃縮液とした。
２）黒酢もろみ末
壺造り米黒酢の発酵残渣(黒酢もろみ)をろ過圧搾機で圧搾し、搾り液と搾り粕に分離後、その搾り粕を真空乾燥機にて110℃、6.5時間乾燥した。これをさらに148℃、0.2MPa、4〜5秒殺菌して得たものを黒酢もろみ末とした。
【００１９】
２．飼料
上記１．にて調製した黒酢を用い日本クレア株式会社に特別注文して製造された飼料、または市販の飼料を使用した。
１）CLEA Rodent Diet CE-2(日本クレア社)(栄養成分およびカロリー(飼料100g中の含有量)を下記に示した)をコントロール飼料とした(以下、CE-2と示す場合がある)。飼料は、蒸気打ちによりペレット化した後、100℃で乾燥し、30kGy放射線滅菌したものを与えた。
２）CE-2 100gに対してビタミンE 100mgを添加した(0.1w/w%)後、蒸気打ちによりペレット化し、100℃で乾燥し、30kGy滅菌照射を行ったものをポジティブコントロール飼料とした(以下、CE-2+VEと示す場合がある)。
３）CE-2 100gに対して黒酢10倍濃縮液0.5gを添加した(0.5 w/w%)後、蒸気打ちによりペレット化し、70℃で乾燥し、30kGy滅菌照射を行わず、黒酢10倍濃縮液添加飼料とした(以下、CE-2+黒酢と示す場合がある)。
４）CE-2 100gに対して黒酢もろみ末0.5gを添加した(0.5w/w%)後、蒸気打ちによりペレット化し、７0℃で乾燥し、30kGy滅菌照射を行わず、黒酢もろみ末添加飼料とした(以下、CE-2+黒酢もろみ末と示す場合がある)。
【００２０】
＜CE-2の栄養成分およびカロリー(飼料100g中の含有量)＞
Moisture (%) 9.3
Crude protein (%) 25.1
Crude fat (%) 4.8
Crude fiber (%) 4.2
Crude ash (%) 6.7
NFE (%) 50.0
Energy (kcal) 343.1
硬度(kg/cm2) 27.1
【００２１】
３．マウス
１）TG KOマウス(TG+/+, PHGPx-/-)
参考文献１の記載に基づき、次のような手順により本発明者が樹立したマウスを用いた。
即ち、内在性のPHGPxゲノム遺伝子をNeo遺伝子に置き換えたPHGPxヘテロマウス(PHGPx+/-)は本発明者が常法に従い作成したマウスを用いた(参考論文２)。本マウス同士を交配してもPHGPx欠損マウスは7.5日で胚致死となり生まれてこない。そこで組織特異的PHGPx欠損マウスを作成するために、Cre遺伝子の発現によりLoxP配列で挟まれたゲノム遺伝子が破壊できる方法が利用できるTG KOマウスを作成した。参考論文１で示す様に、マウスPHGPxゲノム遺伝子の約5kbpのプロモーター領域及び第一エクソン後及び第７エクソン後にLoxP配列を導入し、その後にスクリーニング用の配列を導入したトランスジェニック遺伝子PHGPx-LoxP TG遺伝子を導入したトランスジェニックPHGPxマウス(TG+/-, PHGPx+/+)を作成し、このマウスと参考論文２で作成した内在性PHGPxヘテロマウスを交配し、TG  PHGPxヘテロマウス(TG+/-, PHGPx+/-)を得た。さらにTG  PHGPxヘテロマウス(TG+/-, PHGPx+/-)同士を交配することにより、本来致死となるPHGPx欠損マウス(PHGPx-/-)をトランスジェニックPHGPx遺伝子によりレスキューしたマウスTG KOマウス(TG+/-, PHGPx-/-)を得た後、TG KOマウス(TG+/-, PHGPx-/-)を同士を交配し続けることにより、TG遺伝子をホモ体で有するTG KOマウス(TG+/+, PHGPx-/-)を樹立した。本マウスは組織特異的Cre発現マウスと交配することにより、その組織でPHGPx欠損マウスを作成することができる。
参考文献１：J. Biol. Chem 284 32522-32532
参考文献２：Biochem. Biophys.Res.Commun 305, 278-286 305
【００２２】
２）心臟特異的Cre発現マウス(MCK-Creマウス)(Cre+/-, PHGPx+/+)
東京都健康長寿医療センター研究所(東京都老人総合研究所)から譲渡を受けた心臟特異的Cre発現マウス(muscle creatine kinase-Cre transgenic mice) MCK-Creマウス(Cre+/+, PHGPx+/+)を使用した(参考文献３)。
参考論文３：J. Biol. Chem. 281;33789-33801, 2006
３）心臟特異的Cre,PHGPxヘテロマウス(Cre+/+, PHGPx+/-)
次のような手順により取得した。
すなわち、MCK-Creマウス(Cre+/+, PHGPx+/+)を参考論文２で得たPHGPxヘテロマウス(Cre-/-,PHGPx+/-)と交配することにより、まず心臟特異的Cre,PHGPxヘテロマウス(Cre+/-, PHGPx+/-)を得た。さらにこのマウス同士を交配することによりCre遺伝子をホモ体で有する心臟特異的Cre,PHGPxヘテロマウス(Cre+/+, PHGPx+/-)を得た。
４）心臟特異的PHGPx欠損マウス
上記１）のTG KOマウス(TG+/+, PHGPx-/-)と上記３)の心臟特異的Cre,PHGPxヘテロマウス(Cre+/+, PHGPx+/-)を交配し、心臓特異的PHGPx欠損マウス(Cre TG KOマウス；Cre+/-, TG+/-,PHGPx-/-)の取得を試みた。心臟特異的PHGPx欠損マウスは、以下、KOマウスと示す場合がある。
【００２３】
ＩＩ．心臟特異的PHGPx欠損マウスの胎児における致死の抑制効果の検討
１．検討目的
図１の写真で示すように、心臓特異的PHGPx欠損マウスは、17.5日胎児で心室においてTUNEL陽性の心筋細胞死が起こり、18.5日胎児で浮腫を引きおこし、出生前で致死となる。
図２、Ｂは母マウスに通常食(CE-2等)を摂取させた場合、胎児である心臓特異的PHGPx欠損マウスにおいて心筋細胞死が起き、胎生致死が起こることを示している。これに対し、図２、Ｃでは母マウスにビタミンEを添加した飼料(CE-2+VE等)を与えると胎児である心臓特異的PHGPx欠損マウスにおいて心筋細胞死が起きず、図２、Ａに示されるコントロールと同様に、心筋細胞死が起こらないことを示している。さらに、母マウスにビタミンEを添加した飼料(CE-2+VE等)を与えると胎児の心臓におけるビタミンE量が増加され、胎児致死が抑制されて心臓特異的PHGPx欠損マウスが正常に産まれることを本発明者らは確認している。
本試験では、図３に示すように、CE-2を飼料として飼育したTG KOマウス(TG+/+, PHGPx-/-)と心臟特異的Creマウス, MCK-Creヘテロマウス(Cre+/+, PHGPx+/-)とを交配した後、CE-2に黒酢10倍濃縮液、または黒酢もろみ末を添加した飼料で雌マウスを飼育した。
これらの飼料を摂取させることにより、雌マウス胎内における心臟特異的PHGPｘ欠損マウスの胎生致死が抑制できるか否かを、心臟特異的PHGPｘ欠損マウスの出生の有無を調べることにより検討した。
【００２４】
２．交配
TG KOマウス(Cre-/-:TG+/+: PHGPx-/-)と心臟特異的Cre,PHGPxヘテロマウス(Cre+/+,PHGPx+/-)を交配し、心臓特異的PHGPx欠損マウス(Cre TG KOマウス)を産仔として得ることを試みた。
図３で示すようにTG KOマウス(Cre-/-:TG+/+: PHGPx-/-)はPHGPx-loxP TG遺伝子がホモであるため、産仔のジェノタイプは、 理論上Cre TG KO(Cre+/-:TG+/-: PHGPx-/-)、CRE TG ヘテロ(Cre+/-:TG+/-: PHGPx+/-)の2種類となる。しかし心臟特異的PHGPx欠損マウスCre TG KO(Cre+/-:TG+/-: PHGPx-/-)は図２、Ｂで示した様に通常は胚致死となり生まれてこない。一方、TG KOマウス(TG+/+,PHGPx-/-) と心臟特異的Cre,PHGPxヘテロマウス(Cre+/+,PHGPx+/-)を、CE-2+VE食で交配、飼育すると、心臟特異的PHGPx欠損マウス(Cre+/-:TG+/-: PHGPx-/-)の胎児の致死が起きず、これらのマウスが理論上1：1の割合で生まれることになる。
交配には、雄は生後8週間以上、雌は生後6週間以上のマウスを使用した。いずれのマウスも交配前はCE-2を飼料とした。交配後に、上記Ｉ、２．１）〜４）の飼料にてそれぞれ飼育した。
【００２５】
３．マウスのジェノタイプの判定
上記交配により得られた産仔のジェノタイプを判定し、心臓特異的PHGPx欠損マウス(Cre TG KOマウス)の出生の有無を調べた。
１）マウスの尾からのゲノム抽出
出生直後のマウスの尾0.5〜1cmを切断した。食殺された場合は死骸の皮膚の断片を採取した。
これらを1.5mLチューブに入れ50mM NaOHを180μl加え、95℃で10分間インキュベートした。その後、1M Tris-HCl(pH8.0)を20μl加え、12000rpm、10分間、室温で遠心した。上清をサンプルゲノムDNAとした。
【００２６】
２）ジェノタイピング
上記１）にて調製したサンプルゲノムDNAを鋳型として、増幅の対象となる遺伝子に応じたプライマー(primer)を用い、PCRによりジェノタイピングを行った。増幅の対象となる遺伝子に応じたprimerは以下の通りである。
＜primer＞
（１）内在性PHGPx遺伝子のWTを対象とする場合
primer S 103(配列表配列番号１)及びprimer AS G2R(配列表配列番号３)を用い、1.4kbpのバンドが増幅される。
（２）内在性PHGPx遺伝子のKOを対象とする場合
primer S NeoF3(配列表配列番号２)及びprimer AS G2R(配列表配列番号３)を用い、1.6kbpのバンドが増幅される。
（３）TG遺伝子を対象とする場合
Primer S PHGP BAMS(配列表配列番号４)とPrimer AS Lox ＊SCR-AS(配列表配列番号５)を用い、1.7kbpのバンドが増幅される。
（４）Cre遺伝子を対象とする場合
Primer S Cre5F(配列表配列番号６)とPrimer AS Cre3R(配列表配列番号７)を用い、約600bpのバンドが増幅される。
【００２７】
＜PCR＞
チューブにサンプルゲノムDNA 1μl、2×PCR buffer for KOD-FX 10μl、2mM dNTPs 4μl、Primer S 0.4μL、Primer AS 0.8μL 、KOD -FX DNA Polymerase(TOYOBO) 0.4μL、PCR用滅菌水をそれぞれ加え、全量を20μL とした。
PCR反応は94℃でホットスタートし、94℃ 2分の後、98℃ 10秒、68℃ 1分50秒を30サイクル行い、4℃で保存した。5μLの5×dyeを加え、1.5%アガロースゲルにアプライし電気泳動(100V)を行った。この時分子量マーカーとしてλ／HindIIIdigest(TOYOBO)、φX174／HincIIdigest(TOYOBO)も同時に流した。
【００２８】
【表１】
2015093858.tif 000002
【００２９】
４.結果
マウスのジェノタイプの判定結果を表１に示した。
表１に示すように、交配後CE-2(通常食)を摂取させた場合、心臓特異的PHGPx欠損マウス(KOマウス)は、17.5日で致死となり産仔は１匹も得られなかった。一方、ポジティブコントロールであるCE-2+VEを摂取させた場合、理論上と同様に心臟特異的PHGPx欠損マウス(KOマウス)が、ヘテロマウスと１：１の割合で得られた。
CE-2+黒酢またはCE-2+黒酢もろみ末を摂取させた場合もKOマウスが得られた。CE-2+黒酢を摂取させた場合のKOマウスの出生率は35％、CE-2+黒酢もろみ末を摂取させた場合は13.3%と、CE-2+VEを摂取させた場合(50%)に比べると低いが、CE-2ではKOマウスが全く生まれなかったことから、CE-2に黒酢および／または黒酢もろみ末を添加することにより、心臟特異的PHGPx欠損マウスの胎児段階での致死が抑制されることが示された。
【００３０】
ＩＩＩ．成体における心不全による突然死の予防効果
１．検討目的
本発明者らは、母マウスにビタミンEを添加した飼料(CE-2+VE等)を与えることで胎児致死が抑制されて心臓特異的PHGPx欠損マウスが正常に産まれること、ビタミンEを添加した飼料で心臓特異的PHGPx欠損マウスを飼育すると正常な生育が可能であることを確認している。また、本発明者らは図４示すように、3-4週齢まで正常に生育した心臓特異的PHGPx欠損マウスの飼料を通常食(CE-2)に変えると心臓でのビタミンE量が低下し、飼料を変えてから約10日で80%の心臓特異的PHGPx欠損マウスが不整脈を伴った突然死を引き起こすことも確認している。
このような性質を有する心臓特異的PHGPx欠損マウスは生体での脂質酸化の蓄積が起因となる不整脈性心不全による突然死のモデルマウスとなり得る。本試験では、このマウスをモデルとして、黒酢10倍濃縮液、黒酢もろみ末を添加した飼料で飼育した場合に、突然死の予防や延命効果が得られるか否かを検討した。
【００３１】
２．CE-2+VEで飼育した心臟特異的PHGPx欠損マウスの調整
上記ＩＩ．と同様の方法で交配し、ジェノタイプを判定した心臓特異的PHGPx欠損マウス(CRE TG KO；Cre+/-:TG+/-: PHGPx-/-)の雄を選別し、3-4週齢の離乳時期になるまで母マウスと同居でCE-2+VEにて飼育した。
【００３２】
３．不整脈性心不全による突然死の予防、延命効果の検討
上記２．により、3-4週齢の離乳時期となった心臓特異的PHGPx欠損マウス(CRE TG KO；Cre+/-:TG+/-: PHGPx-/-)の雄マウスに対し、CE-2に黒酢10倍濃縮液、または、黒酢もろみ末を添加した飼料による飼育を行い、CE-2による飼育を行った場合と比較して突然死となる日数が延長するか否かを調べた。
【００３３】
４．結果
成体におけるビタミンE低下が引き起こす心不全による突然死の予防効果を図５に示した。
図４及び図５に示すように3-4週齢まで正常に生育した心臓特異的PHGPx欠損マウスの飼料をCE-2に変えた群(n=34)では約10日(生存期間中央値(Median Survival Time；MST))で突然死を引きおこした。
図５に示すようにCE-2+黒酢に変えた群(n=5)では約15日(MST)(ｔ検定 p<0.001)、CE-2+黒酢もろみ末に変えた群(n=6)では約14.5日(MST)(ｔ検定 p<0.005)で突然死を引き起こした。
従って、この結果より、CE-2に黒酢および／または黒酢もろみ末を添加することにより、ビタミンE低下が引き起こす心不全による突然死の完全な抑制はできないが、有意な延命効果を示すことが確認できた。
上記Ｉ〜ＩＩＩの結果より、黒酢、黒酢もろみ末は、胎生致死や、成体の心不全による突然死を抑制できることが明らかとなった。
【産業上の利用可能性】
【００３４】
本発明の剤は、脂質酸化が起因となる心不全による突然死または胎生致死の予防のために使用し得る。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【配列表】
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