(57)【要約】１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニルグリシニル）−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−ピペラジンＤ−酒石酸塩は、安定した結晶塩を形成し、かつ、セリンプロテアーゼ（Ｆａｃｔｏｒ  Ｘａ）の阻害剤であり、心血管疾患の治療において有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニルグリシニル）−４−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−ピペラジンＤ−酒石酸塩。
【請求項２】
結晶形態にある、１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニルグリシニル）−４−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−ピペラジンＤ−酒石酸塩。
【請求項３】
°２θ＝１１．５、１５．９、１７．４、１８．１、１８．５、及び２１．９において鋭く強いピークがあるＸ線粉末回折パターンを有する結晶形態にある、１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニルグリシニル）−４−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−ピペラジンＤ−酒石酸塩。
【請求項４】
医薬組成物であって、少なくとも１つの製薬的に許容できるキャリア又は賦形剤と共に請求項１〜３のいずれかに記載のＤ−酒石酸塩を含む医薬組成物。
【請求項５】
治療おいて使用される請求項１〜３のいずれかに記載のＤ−酒石酸塩。
【請求項６】
血栓性疾患治療用の医薬品を製造するための請求項１〜３のいずれかに記載のＤ−酒石酸塩の使用。
【請求項７】
血栓性疾患を防止するために人体又は非ヒト動物体を治療する方法であって、有効量の請求項１に記載のＤ−酒石酸塩を前記体に投与することを含む方法。
【請求項８】
血栓性疾患を防止するために人体又は非ヒト動物体を治療する方法であって、有効量の請求項２に記載のＤ−酒石酸塩を前記体に投与することを含む方法。
【請求項９】
血栓性疾患を防止するために人体又は非ヒト動物体を治療する方法であって、有効量の請求項３に記載のＤ−酒石酸塩を前記体に投与することを含む方法。
【請求項１０】
請求項１〜３のいずれかに記載のＤ−酒石酸塩を含み、血栓性疾患を防止するために使用される医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、セリンプロテアーゼ（Ｆａｃｔｏｒ  Ｘａ）の選択的阻害剤である製薬的化合物、その医薬組成物、ヒト又は動物の身体の治療におけるその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
セリンプロテアーゼは、特に反応性セリン残基を特徴とする一般的な触媒メカニズムを有する蛋白質分解酵素群である。セリンプロテアーゼの例は、トリプシン、トリプターゼ、キモトリプシン、エラスターゼ、トロンビン、プラスミン、カリクレイン、補体Ｃ１、アクロソームプロテアーゼ、リソソームプロテアーゼ、コクナーゼ、α−溶解性プロテアーゼ、プロテアーゼＡ、プロテアーゼＢ、セリンカルボキシペプチダーゼＩＩ、サブチリシン、ウロキナーゼ、Ｆａｃｔｏｒ  ＶＩＩａ、Ｆａｃｔｏｒ  ＩＸａ、及びＦａｃｔ又はＸａを含む。セリンプロテアーゼは、数十年間にわたって広く研究され、セリンプロテアーゼ阻害剤の薬効価値は周知である。従って、Ｆａｃｔｏｒ  Ｘａの抑制剤は、例えば血栓性障害の治療及び予防において、血液凝固阻止薬としての治療薬として価値がある。血液凝固阻止薬としてのＦａｃｔｏｒ  Ｘａ抑制剤を使用することは、その効果の選択性の観点から望ましい。多くの臨床的に認可された血液凝固阻止剤は、凝固カスケードにおいてのその効果が非特異的性質であることから有害事象を伴っていた。
【０００３】
国際公開第００／７６９７１号パンフレットには、化合物１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニルグリシニル）−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−ピペラジンが、特に望ましい生物学的性質を有する効力的かつ選択的なＦａｃｔｏｒ  Ｘａ阻害剤であることを開示している。従って、その化合物及びその製薬的に許容できる塩は、脳卒中における心房細動予防に含む、静脈血栓、肺動脈塞栓症、動脈血栓症、心筋の虚血状態、心筋梗塞、及び脳血栓症等の血栓性疾患の予防又は治療において効力的に有用である。また、その化合物及びその製薬的に許容できる塩は、例えば、冠状動脈又は末梢動脈の経管的冠動脈形成術又はバイパス移植術後、及び、長期の血液透析患者の血管アクセス開通性の維持において、効力的な血栓溶解療法及び再狭窄に関連する急性血管閉塞の治療において有益である。
【０００４】
製剤として更なる開発候補に挙げるのであれば、化合物は、望ましい生物学的性質を有するだけではなく、医薬製品の製造使用に適合する物理的性質を有していなければならない。特に、化合物は、容易に加工及び調製することができる、安定性のある、好ましくは結晶質固体を形成する必要がある。
【０００５】
特に、１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニル−グリシニル）−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−ピペラジンの安定性のある結晶形態を見つけることは困難であることが分かっている。
【０００６】
結晶質固体を形成する１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニルグリシニル）−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−ピペラジン塩は、国際公開第０１／９６３２３号パンフレットの実施例４８ａ（塩酸塩）、及び実施例４８ｂ（ジフマル酸塩）において開示される。国際公開第０１／９６３２３号パンフレットの優先権を主張する国際公開第０２／１００８４７号パンフレットは、塩酸塩が不都合な属性を有することが見出されていることに言及し、更に、ジフマル酸塩が１種類以上の結晶形態で存在することを更に開示しており、それらの各々は、その出願において主張されている。ジフマル酸塩は、塩酸塩の結晶に対して優れた属性を有する結晶を備える。しかしながら、一層の研究によって、更なる改良した属性を有する塩の必要性が明らかとなっている。従って、形態１として国際公開第０２／１００８４７号パンフレットに開示される形態は、薄い針状で得られる。しかしながら、細い針状形態は、なかでも、クラスタリング及び低い容積密度のため、製剤上の不都合がある。更に、形態１は、極めて高い（８０％を超える）相対湿度の状態の下で、異なる（高次）水和物に転換したり、水性懸濁液中の形態２として国際公開第０２／１００８４７号パンフレットにおいて開示される形態に転換したりすることが見いだされている。なかでも、形態２として国際公開第０２／１００８４７号パンフレットに開示される形態は、とりわけ、粒度が非常に小さいという不都合があり、極めて遅い濾過となる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
従って、望ましい形態を有する結晶質固体を形成し、非常に高い相対湿度（８０％以上）の状態の下で安定性があり、かつ、大量に調整することが容易できる結晶質固体を形成する１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニルグリシニル）−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−ピペラジンの塩形態の必要性が依然として残される。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
安定性のある結晶形態において容易に調製することができる１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニルグリシニル）−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−ピペラジンが、ここに見いだされた。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
従って、一実施態様によれば、本発明は、１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニルグリシニル）−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−ピペラジンＤ−酒石酸塩に関し、これは、１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニルグリシニル）−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−ピペラジンＤ−酒石酸塩（１：１）とも称される。
【００１０】
塩基性化合物は、ラセミ体（Ｄ／Ｌ）又はキラル体の形態において存在し、好ましいＤ−異性体は、Ｌ−異性体とのラセミ混合物、又は単独で投与してもよい。Ｄ体は、化合物が調製されるフェニルグリシンのＤ体を指す。
【００１１】
別の態様によれば、本発明は、１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニルグリシニル）−４−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−ピペラジンＤ−酒石酸塩を提供する。
【００１２】
結晶形態の塩は、安定性、高い水溶性、及び扱いやすく処理しやすいことが見出されている。
【００１３】
１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニル−グリシニル）−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−ピペラジンＤ−酒石酸塩は、水／エタノール、水／ｎ−プロパノール、及び水／イソプロパノール等の水／アセトン系及び水／（１−４Ｃ）アルカノール系を含む様々な水性有機溶媒系から結晶化することができる。特に好ましい収量は、水／アセトンを使用して得られ、特に約１５／８５（水／アセトン）の体積比で得られている。１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニル−グリシニル）−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−ピペラジンと１モル等量のＤ酒石酸を水に溶解し、次に、有機溶媒を添加することが好適である。事前に調製された少量の結晶による接種によって、結晶化の開始を促進してもよい。
【００１４】
１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニルグリシニル）−４−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）ピペラジンＤ−酒石酸塩は、非常に凝集し、改良した密度の流動粉末を形成する薄い板として結晶化されることが見出されている。
【００１５】
熱安定性及び酒石酸塩結晶の溶媒和状態は、ＴＡ同時ＴＧ／ＤＴＡユニットを使用する示差熱／熱重量分析で測定した。試料は、蓋の開いたアルミニウム製鍋において、１０℃／分で２５℃から３００℃以上まで１５０ｍＬ／分の窒素置換によって加熱した。温度は、インジウムで調整した。重量較正は、製造時の標準によって行われ、酒石酸ナトリウムの脱溶媒和に対して確認した。Ｄ酒石酸塩結晶は、溶媒（主に水）の約５〜６重量％を含み、二水和物結晶に一致することが見出された。二水和物を約５０℃以上加熱し、水を除去した。約１４５℃で残存無水固体を溶解した。再冷して、溶融体から非晶質固体を形成した。
【００１６】
また、Ｄ−酒石酸塩結晶の吸湿等温曲線は、データ収集開始前に４０℃の乾燥工程において、真空微量天秤を使用して測定した。最初の乾燥工程において、初めに６％の減量が観察され、結晶水の除去（量）に一致した。相対湿度を増加させて試料に水を再吸収させ、相対湿度が約２０％に達したときに再水化が完了した。二水和物は形成され、外気温度で湿度が５〜９５％において安定性を保ったままであった。
【００１７】
低い及び高い相対湿度における安定性は、幅広い環境において使用され、販売される製品において望ましい。
【００１８】
結晶質をＸ線粉末回折分析した。得られたＸ線粉末回折パターンには、２θ＝１１．５、１５．９、１７．４、１８．１、１８．５、及び２１．９）において鋭く強いピークを含むことが見いだされた。また、２θ＝５．２及び１２．０におけるピークは、結晶塩の形態の特性である。ピークの詳細分析は、下記の表１に示される。Ｘ線粉末回折パターンは、図１において示される。
【表１】
2008505075.tif 000002
【００１９】
Ｘ線粉末回折（ＸＲＤ）パターンを、ＣｕＫα源（λ＝１．５４０５６オングストローム）及びＫｅｖｅｘ固体Ｓｉ（Ｌｉ）検出器を備え、５０ｋＶ及び４０ｍＡで動作させたＳｉｅｍｅｎｓ  Ｄ５０００Ｘ線粉末回析計から得た。２θの３〜４０°において、ステップ幅が２θで０．０２°、走査速度が９．０秒／ステップ、及びピッチ（ｄｉｖｅｒｇｅｎｃｅ）が１ｍｍ、かつ、スリットと０．１ｍｍの検知スリットを利用（ｒｅｃｅｉｖｉｎｇ）して、試料を走査した。乾燥粉末を低バックグラウンドの試料ホルダーに漬け（ｐａｃｋｅｄ）、ガラススライドを使用して平滑面を得た。
【００２０】
２θ（又は対応するＤ間隔（ｄ−ｓｐａｃｉｎｇ））を測定する正確な値は、特定の分析試料、装置、及び特定の分析手順によるということが、Ｘ線粉末回折分析の当業者によって認識される。±０．１°２θの誤差は一般的である。
【００２１】
また、Ｄ−酒石酸塩の結晶を、固体１３Ｃ核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法によって分析した。固体状態１３Ｃ化学シフトは、結晶における分子の分子構造及び電子環境を反映する。結晶のスペクトルは、以下の化学シフトにおいて薬剤の陽イオン、及び酒石酸塩の陰イオンのための等方性ピークからなる。
２５．３、２６．２、４２．６、４５．８、４６．２、４７．１、４８．３、５０．３、５２．１、５４．０、５５．５、５７．１、６１．８、７３．４、７４．２、７６．４、１０１．５、１０２．２、１１２．９、１１４．９、１１７．３、１１８．２、１１９．６、１２１．１、１２５．６、１２６．２、１２７．４、１２８．５、１２９．５、１３０．６、１３２．２、１３６．７、１３９．５、１６７．６、１６９．０、１７０．４、１７４．９、１７５．８、１７８．６、及び１７９．２ｐｐｍ。
【００２２】
炭素振動数１００．５７３ＭＨｚで動作し、完全固体アクセサリー及びＣｈｅｍａｇｎｅｔｉｃｓ  ４．０ｍｍ  Ｔ３プローブ（ｐｒｏｂｅ）を備えた、Ｖａｒｉａｎ  Ｕｎｉｔｙ  Ｉｎｏｖａ  ４００ＭＨｚ  ＮＭＲ分光計作動を使用して、１３Ｃクロス偏光／マジック角回転（ＣＰ／ＭＡＳ）ＮＭＲ（固体状態ＮＭＲ又はＳＳＮＭＲ）スペクトルを得た。６２ｋＨｚの傾斜振幅（ｒａｍｐｅｄ−ａｍｐｌｉｔｕｄｅ）の交差分極（ＲＡＭＰ−ＣＰ）、及び７０ｋＨｚのＴＰＰＭデカップリングを使用した。取得パラメータは、以下：９０プロトンｒ．ｆ．パルス幅４．０μｓ、接触時間３．０ｍｓ、パルス繰り返し時間１０ｓ、ＭＡＳ振動数１０．０ｋＨｚ、スペクトル幅５０ｋＨｚ、及び取得時間５０ｍｓ、の通りであった。化学シフトは、試料置換によってヘキサメチルベンゼン（δ＝１７．３ｐｐｍ）のメチル基を基準にした。
【００２３】
水及び０．０１Ｍの塩酸において、Ｄ−酒石酸塩結晶の平衡溶解度を２５℃で測定し、それぞれ１２５ｍｇ／ｍＬ以上及び１２６ｍｇ／ｍＬ以上であった（遊離塩基として測定）。
【００２４】
従って、Ｄ−酒石酸塩は、優れた処理属性及び高い水溶性を有する、安定した結晶質として得られる。
【００２５】
本発明によるＤ−酒石酸塩は、溶媒和化合物（例えば二水和物）の形で分離し、かつ、このような全ての溶媒和化合物が本発明の範囲内に含まれると理解される。溶媒和化合物が生理的に許容できるだけではなく、製剤生成物の製造、例えば、精製工程において有用であることはいうまでもない。
【００２６】
本発明のＤ−酒石酸塩は、任意の好都合な経路、例えば、消化管（直腸又は経口）、鼻、肺、筋肉組織、又は血管又は経皮に投与される。Ｄ−酒石酸塩は、あらゆる好都合な投与形態、例えば、錠剤、粉末、カプセル、溶液、分散液、懸濁液、シロップ剤、スプレー、座薬、ゲル、乳濁液、貼付剤等において投与される。このような組成物には、薬剤、例えば希釈剤、キャリア、ｐＨ調節剤、甘味料、充填剤、及び更なる活性薬剤において、従来の成分を含んでもよい。注射又は注入のため、組成物は無菌であり、かつ適切な溶液又は懸濁液の形態であるのが好ましい。このような組成物は、本発明の更なる実施形態を形成する。
【００２７】
本実施態様において、本発明は、少なくとも１つの製薬的に許容できるキャリア又は賦形剤と共に本発明によるＤ−酒石酸塩を含む医薬組成物を提供する。また、医薬組成物は、少なくとも１つの更なる抗血栓薬又は血栓溶解薬を選択的に含んでもよい。利点を有する化合物は、異なる作用機序を有する血液凝固阻止薬又は血栓溶解薬によって、複合治療の一部を形成してもよい。
【００２８】
更なる実施態様において、本発明は、人体又は非ヒト動物体の治療方法（例えば、感染を受けやすい種における哺乳類の身体）において使用される医薬品の製造における、本発明によるＤ−酒石酸塩の使用を提供し、前記阻害剤に応答して症状（例えば、上記のように血栓性疾患）を防止（すなわち、治療又は予防）する。
【００２９】
更なる態様において、本発明は、Ｆａｃｔｏｒ  Ｘａ阻害剤に応答する症状（例えば、上記の血栓性疾患）を防止するために人体又は非ヒト動物体（例えば、環境に敏感な種の哺乳類の身体）を治療する方法を提供し、前記方法は、前記身体に有効量の本発明によるＤ−酒石酸塩を投与することを含む。
【００３０】
本発明の化合物の投薬量は、治療する症状の性質及び重症度、投与経路、並びに患者の大きさ及び種に依存する。しかしながら一般的に、０．０１〜１００μｍｏｌ／ｋｇ体重の用量が投与される。
【００３１】
本願明細書において言及される全ての文献は、本願明細書に引用される。
【００３２】
本発明は、以下の非制限の実施例に関して更に記述される。
【００３３】
＜実験＞
１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニルグリシニル）−４−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−ピペラジンは、例えば、国際公開第０１／９６３２３号パンフレットにおいて記述される以下の方法で得てもよい。
【実施例】
【００３４】
＜実施例１＞
１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニルグリシニル）−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−ピペラジンＤ−酒石酸二水和物の調製
１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニルグリシニル）−４−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−ピペラジン（５０ｍｇ）及びＤ−酒石酸（０．５モル等量、約８．３ｍｇ）を、穏やかに加熱して無水エタノール（１ｍＬ）に溶解した。冷却後、細かい固体／不透明部分が観察された。２、３滴の水を添加し、透明溶液を室温で撹拌した。４日後に、形成して生じた沈殿物を吸引濾過で分離して、標記生成物（一般的に３０ｍｇ）を白色粉体として得た。
【００３５】
また、１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニルグリシニル）−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−ピペラジン（２００ｍｇ）及びＤ−酒石酸（１モル等量、６５ｍｇ）を、室温で水（２ｍＬ）に溶解した。溶液の不透明（ｈａｚｉｎｅｓｓ）部分を、重力濾過によって除去した。不透明部分が残存するまで、イソプロパノール（８ｍＬ）を透明な溶液に添加した。約１５〜２０分後に、白いスラリーの二次形成によって、粘着性ある固体部分が観察された。スラリーが厚くなった後、イソプロパノール（２ｍＬ）を更に添加し、スラリーを室温で一晩維持した。固体の沈殿物を吸引濾過して分離してから７０℃で熱対流炉において１時間乾燥し、イソプロパノールで洗浄して標記生成物（典型的な収量、１９０ｍｇ）を得た。
【００３６】
＜実施例２＞
１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニルグリシニル）−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−ピペラジンＤ−酒石酸二水和物の調製
１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニルグリシニル）−４−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−ピペラジン（４６．０ｇ，０．１ｍｏｌ）及びＤ−酒石酸（１５．０ｇ，０．１ｍｏｌ，Ａｌｄｒｉｃｈ  ９９％  ｅｅ）を水（２３０ｍＬ）及びアセトン（８００ｍＬ）に添加した。混合物を１５分間室温で撹拌し、物質を溶かして透明な溶液を得た。本溶液に、１−（インドール−６−カルボニル−Ｄ−フェニルグリシニル）−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−ピペラジン酒石酸塩二水和物（１００ｍｇ）の一部を添加した。本スラリーに、第２の部分の逆溶媒アセトン（８００ｍＬ）を、非常にゆっくりした速さ（６０〜１００ｍＬ／時間）で添加した。添加が完了した後、懸濁液を４時間室温で撹拌し、次いで氷水浴でさらに２時間５℃まで冷却した。
【００３７】
結晶を収集し、冷たいアセトン（１００ｍＬ）で洗浄した。結晶を減圧下（約１５ｍｍ、２ｋＰａ）において４０℃で２４時間乾燥し、標記塩（５５．７ｇ、８６．８％）を得た。又は、結晶を窒素でブロー乾燥し、生成物の水和水の除去を防いだ。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
（原文に記載なし）
【図１】
2008505075.tif 000003
【国際調査報告】
2008505075.tif 000004
2008505075.tif 000005