(57)【要約】  ＶＬＡ−４を結合するコンジュゲートが開示されている。これらコンジュゲートのいくつかは、白血球接着も阻害し、詳細にはＶＬＡ−４によって媒介される白血球接着を阻害する。そのようなコンジュゲートは、喘息やアルツハイマー病、アテローム性動脈硬化症、ＡＩＤＳ、痴呆、糖尿病、炎症性腸疾患、関節リウマチ、組織移植、腫瘍転移、及び心筋虚血など、哺乳類患者、例えばヒトの炎症性疾患の治療に有用である。コンジュゲートは、多発性硬化症などの炎症性脳疾患を治療するために投与することもできる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式Ｉのコンジュゲート
【化１】
2008505927.tif 000189
（式中、Ｂは、分枝状アームハブ分子に任意選択で共有結合した生体適合性ポリマー部分であり；
ｑは、約２から約１００までであり；
Ａは、出現するごとに独立に、式ＩＩの化合物又は医薬品として許容されるその塩であり、
【化２】
2008505927.tif 000190
上式でＪは、
ａ）下記の式（ａ）の群及び
ｂ）下記の式（ｂ）の群から選択され、
【化３】
2008505927.tif 000191
【化４】
2008505927.tif 000192
但しＲ３１は、リンカーを任意選択で含むポリマー部分との共有結合であり、又はＲ３１は、−Ｈ、Ｒ３１’、−ＮＨ２、−ＮＨＲ３１’、−Ｎ（Ｒ３１’）２、−ＮＣ３〜Ｃ６環、−ＯＲ３１’、及び−ＳＲ３１’からなる群から選択され、各Ｒ３１’は独立に、任意選択で置換された直鎖状又は分枝状Ｃ１〜Ｃ６アルキル、任意選択で置換されたＣ３〜Ｃ６シクロアルキル、任意選択で置換されたアリール、又は任意選択で置換されたヘテロアリールであり、
Ｒ３２は、リンカーを任意選択で含むポリマー部分との共有結合であり、又はＲ３２は、−Ｈ、−ＮＯ２、ハロアルキル、及び−Ｎ（ＭＲ４１）Ｒ４２からなる群から選択され、Ｍは、共有結合、−Ｃ（Ｏ）−、又は−ＳＯ２−であり、Ｒ４１は、Ｒ４１’、Ｎ（Ｒ４１’）２、又は−ＯＲ４１’であり、
各Ｒ４１’は、独立に、水素、任意選択で置換された直鎖状又は分枝状Ｃ１〜Ｃ６アルキル、任意選択で置換されたシクロアルキル、任意選択で置換されたアリール、任意選択で置換されたヘテロ環、又は任意選択で置換されたヘテロアリールであり、任意選択の置換は、ハロゲン化物、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、又は−ＯＣ１〜Ｃ６アルキルであり、
Ｒ４２は、水素、Ｒ４１’、アルキニル、又は置換されたアルキニルであり；並びに
Ｒは、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され；
Ａｒ１は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールのそれぞれは、ポリマー部分に任意選択で共有結合し、ポリマー部分は、このポリマー部分をＡｒ１に共有結合させるリンカーを任意選択で含むものであり；
Ａｒ２は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アルキル、置換アルキル、アルキルアミノ、及び置換アルキルアミノからなる群から選択され、Ａｒ２は、ポリマー部分に任意選択で共有結合し、ポリマー部分は、このポリマー部分をＡｒ２に共有結合させるリンカーを任意選択で含むものであり；
Ｘは、−ＮＲ１−、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２、及び任意選択で置換された−ＣＨ２−であってポリマー部分に任意選択で共有結合するものからなる群から選択され、それぞれの場合において、ポリマー部分は、このポリマー部分を共有結合させるリンカーを任意選択で含むものであり；
Ｒ１は、水素及びアルキルからなる群から選択され；
Ｔは、
ａ）下記の式（ｃ）の群及び
ｂ）下記の式（ｄ）の群から選択され、
【化５】
2008505927.tif 000193
【化６】
2008505927.tif 000194
但しＹは、−Ｏ−及び−ＮＲ１−からなる群から選択され、Ｒ１は、水素及びアルキルからなる群から選択され；
Ｗは、リンカーを任意選択で含むポリマー部分との共有結合及び−ＮＲ２Ｒ３からなる群から選択され、Ｒ２及びＲ３は、独立に、水素、アルキル、置換アルキルからなる群から選択され、並びにＲ２及びＲ３は、これらに結合される窒素原子と一緒になって、ヘテロ環又は置換ヘテロ環を形成し、アルキル、置換アルキル、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環のそれぞれは、リンカーをさらに任意選択で含むポリマー部分に任意選択で共有結合し；
ｍは、０、１、又は２に等しい整数であり；
ｎは、０、１、又は２に等しい整数であり；並びに
Ｇは、０から３個の窒素を含有する任意選択で置換されたアリール或いは任意選択で置換されたヘテロアリール５又は６員環であり、前記アリール又はヘテロアリールは、リンカーを任意選択で含むポリマー部分との共有結合を任意選択でさらに含み；
Ｒ６は、リンカーを任意選択で含むポリマー部分との共有結合であり、或いはＲ６は、−Ｈ、アルキル、置換アルキル、又は−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ１７であり、Ｒ１７は、−ＯＨ、−ＯＲ１８、又は−ＮＨＲ１８であり、Ｒ１８は、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、又は置換ヘテロアリールであり；
Ｒ５５は、−ＯＨ又は加水分解性エステルであり、又はＲ５５は、任意選択でリンカーを介してポリマー部分と加水分解性ポリマーエステルを形成し；
但し
Ａ．Ｊ、Ｒ５５、及びＴの少なくとも１つが、ポリマー部分との共有結合を含有し；
Ｂ．Ｘが−Ｏ−の場合、ｍは２であり；且つ
Ｃ．式Ｉのコンジュゲートが、約８０，０００以下の分子量を有することを条件とする）。
【請求項２】
Ｊ、Ｒ５５、及びＴの少なくとも１つが、ポリマー部分との共有結合を含有する、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項３】
ｎが２であり、Ｒは出現するごとにＣ１〜Ｃ３アルキルであり、いずれのＲ基も同じ炭素上にある、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項４】
ｑが２から約２０までの整数である、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項５】
ｑが２から約８までの整数である、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項６】
Ａが、出現するごとに独立に、式ＩＩａの化合物又は医薬品として許容されるその塩である、請求項１に記載のコンジュゲート。
【化７】
2008505927.tif 000195
【請求項７】
Ａが、出現するごとに独立に、式ＩＩｂの化合物又は医薬品として許容されるその塩である、請求項１に記載のコンジュゲート。
【化８】
2008505927.tif 000196
【請求項８】
Ａが、出現するごとに独立に、式ＩＩｃの化合物又は医薬品として許容されるその塩である、請求項１に記載のコンジュゲート。
【化９】
2008505927.tif 000197
【請求項９】
Ａが、出現するごとに独立に、式ＩＩｄの化合物又は医薬品として許容されるその塩である、請求項１に記載のコンジュゲート。
【化１０】
2008505927.tif 000198
【請求項１０】
Ａが、出現するごとに独立に、式ＩＩｅの化合物又は医薬品として許容されるその塩である、請求項１に記載のコンジュゲート。
【化１１】
2008505927.tif 000199
【請求項１１】
Ａが、出現するごとに独立に、式ＩＩｆの化合物又は医薬品として許容されるその塩である、請求項１に記載のコンジュゲート
【化１２】
2008505927.tif 000200
（式中、Ｒ４は、任意選択でリンカーを含むポリマー部分に共有結合し；
Ｒ５は、アルキル及び置換アルキルからなる群から選択され；並びに
Ａｒ３は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択される）。
【請求項１２】
Ａが、出現するごとに独立に、下式の化合物又は医薬品として許容されるその塩である、請求項１に記載のコンジュゲート
【化１３】
2008505927.tif 000201
（式中、Ｒ４は、任意選択でリンカーを含むポリマー部分に共有結合し；
Ｒ５は、アルキル及び置換アルキルからなる群から選択され；並びに
Ａｒ３は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され；並びに
ｎは、０、１、又は２に等しい整数である）。
【請求項１３】
Ａが、出現するごとに独立に、下記の式ＩＩｈの化合物又は医薬品として許容されるその塩である、請求項１に記載のコンジュゲート
【化１４】
2008505927.tif 000202
（式中、Ｒ４は、任意選択でリンカーを含むポリマー部分に共有結合し；
Ａｒ３は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択される）。
【請求項１４】
Ａが、出現するごとに独立に、式ＩＩｉの化合物又は医薬品として許容されるその塩である、請求項１に記載のコンジュゲート。
【化１５】
2008505927.tif 000203
【請求項１５】
ｍが１であり、ＸがＳであり、及びＲが出現するごとに独立に、ヒドロキシル、アルコキシル、アルキル、又はポリマー部分との共有結合から選択される、請求項１４に記載のコンジュゲート。
【請求項１６】
ｎが２であり、Ｒが共に出現するときにメチルである、請求項１５に記載のコンジュゲート。
【請求項１７】
Ａが、出現するごとに独立に、下記の式ＩＩｊの化合物又は医薬品として許容されるその塩である、請求項１に記載のコンジュゲート。
【化１６】
2008505927.tif 000204
【請求項１８】
Ａが、出現するごとに独立に、下記の式ＩＩｋの化合物又は医薬品として許容されるその塩である、請求項１に記載のコンジュゲート。
【化１７】
2008505927.tif 000205
【請求項１９】
Ａが、出現するごとに独立に、下記の式ＩＩＬの化合物又は医薬品として許容されるその塩である、請求項１に記載のコンジュゲート
【化１８】
2008505927.tif 000206
（式中、Ｒ４は、任意選択でリンカーを含むポリマー部分に共有結合される。）
【請求項２０】
Ｇがピリジニルであり、Ｒ３１が水素又はジアルキルアミノであり、及びＲ３２がスルホンアミド、アミド、又は尿素である、請求項１７に記載のコンジュゲート。
【請求項２１】
Ａ及びＢが、以下に示す通りである、請求項１に記載のコンジュゲート
【表１−１】
2008505927.tif 000207
【表１−２】
2008505927.tif 000208
【表１−３】
2008505927.tif 000209
（式中、Ｚは下式の通りであり、
【化１９】
2008505927.tif 000210
ＺＺは下式の通りであり、
【化２０】
2008505927.tif 000211
ＺＺＺは下式の通りであり、
【化２１】
2008505927.tif 000212
但しすべてのｐの合計は、１００から１３６０までである）。
【請求項２２】
下式の化合物及び医薬品として許容されるその塩からなる群から選択される、請求項１に記載のコンジュゲート。
【化２２−１】
2008505927.tif 000213
【化２２−２】
2008505927.tif 000214
【化２２−３】
2008505927.tif 000215
【請求項２３】
医薬品として許容される担体、及び治療上有効な量の請求項１に記載のコンジュゲート、又はこれらの混合物を含む、医薬品組成物。
【請求項２４】
医薬品として許容される担体が、非経口投与に適している、請求項２３に記載の医薬品組成物。
【請求項２５】
医薬品として許容される担体が、皮下投与に適している、請求項２３に記載の医薬品組成物。
【請求項２６】
医薬品として許容される担体が、注入による投与に適している、請求項２３に記載の医薬品組成物。
【請求項２７】
医薬品として許容される担体が、注射による投与に適している、請求項２３に記載の医薬品組成物。
【請求項２８】
医薬品として許容される担体が、経口投与に適している、請求項２３に記載の医薬品組成物。
【請求項２９】
医薬品として許容される担体が、直腸投与に適している、請求項２３に記載の医薬品組成物。
【請求項３０】
医薬品として許容される担体が、パッチを使用した投与に適している、請求項２３に記載の医薬品組成物。
【請求項３１】
医薬品として許容される担体が、吸入による投与に適している、請求項２３に記載の医薬品組成物。
【請求項３２】
少なくとも一部には、患者におけるα４インテグリン媒介型白血球結合により引き起こされ又は悪化した疾患状態を治療するための方法であって、有効量の請求項１に記載のコンジュゲートを投与することを含む方法。
【請求項３３】
阻害されるａ４結合相互作用が、ＶＣＡＭ−１によるものである、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
阻害されるａ４結合相互作用が、フィブロネクチンによるものである、請求項３２に記載の方法。
【請求項３５】
阻害されるａ４結合相互作用が、ＭａｄＣＡＭによるものである、請求項３２に記載の方法。
【請求項３６】
前記疾患状態が、自己免疫疾患状態である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３７】
請求項１に記載のコンジュゲートによる治療が、自己免疫反応によって引き起こされる炎症及び後続の組織損傷を軽減する、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記疾患状態が、多発性硬化症、髄膜炎、脳炎、卒中、及びその他の小脳性外傷である、請求項３２に記載の方法。
【請求項３９】
前記疾患状態が多発性硬化症である、請求項３２に記載の方法。
【請求項４０】
前記疾患状態が、喘息、成人呼吸困難症候群、及び急性白血球媒介型肺損傷からなる群から選択される、請求項３２に記載の方法。
【請求項４１】
前記疾患状態が喘息である、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記疾患状態が関節リウマチである、請求項３２に記載の方法。
【請求項４３】
前記疾患状態が、結節性紅斑、アレルギー性結膜炎、視神経炎、ブドウ膜炎、アレルギー性鼻炎、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、血管炎、ライター症候群、全身性エリテマトーデス、進行性全身性硬化症、多発性筋炎、皮膚筋炎、ヴェグナー肉芽腫症、大動脈炎、サルコイドーシス、リンパ球減少症、一過性動脈炎、心外膜炎、心筋炎、うっ血性心不全、結節性多発性動脈炎、過敏性症候群、アレルギー、好酸球増加症候群、チャーグ−ストラウス症候群、慢性閉塞性肺疾患、過敏性肺炎、慢性活動性肝炎、間質性膀胱炎、自己免疫内分泌不全、原発性胆汁性肝硬変、自己免疫再生不良性貧血、慢性持続性肝炎、及び甲状腺炎、ＡＩＤＳ、痴呆、糖尿病、アルツハイマー病、痴呆、アテローム性動脈硬化症、腫瘍転移、及び移植拒絶からなる群から選択される炎症性疾患状態である、請求項３２に記載の方法。
【請求項４４】
前記疾患状態が、シェーグレン病である、請求項３２に記載の方法。
【請求項４５】
前記疾患状態が、クローン病である、請求項３２に記載の方法。
【請求項４６】
前記疾患状態が、炎症性腸疾患である、請求項３２に記載の方法。
【請求項４７】
前記疾患状態が、潰瘍性大腸炎である、請求項３２に記載の方法。
【請求項４８】
前記コンジュゲートが、α４β１及びα４β７阻害剤である、請求項３２に記載の方法。
【請求項４９】
請求項１に記載のコンジュゲートを、α４β７阻害剤と組み合わせて含む、医薬品組成物。
【請求項５０】
少なくとも一部には、患者におけるα４インテグリン媒介型白血球結合により引き起こされ又は悪化した疾患状態を治療するための方法であって、有効量の請求項１に記載のコンジュゲートと、有効量のα４β７阻害剤とを同時投与することを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、参照によりその全体が本明細書に援用される２００４年７月８日出願の米国仮出願第６０／５８６９７５号の優先権を主張するものである。
【０００２】
本発明は、白血球接着、詳細には少なくとも部分的にＶＬＡ−４によって媒介される白血球接着を阻害するコンジュゲートに関する。本発明のコンジュゲートは、ポリエチレングリコールなどの生体適合性ポリマーに共有結合された、複数のＶＬＡ−４阻害化合物を含有すると見なされる。
【背景技術】
【０００３】
炎症性白血球同士、また炎症性白血球と身体のその他の細胞との物理的相互作用は、免疫及び炎症応答を調節するのに重要な役割を演ずる［Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，Ｔ．Ａ．、Ｎａｔｕｒｅ、３４６、４２５（１９９０）；Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，Ｔ．Ａ．、Ｃｅｌｌ  ７６、３０１（１９９４）］。このような相互作用の多くは、細胞接着分子と総称される特定の細胞表面分子によって媒介される。これらの接着分子は、その構造に基づいて、種々のグループに細分されている。免疫及び炎症応答を調節するのに重要な役割を演ずると考えられる接着分子の１つのファミリーは、インテグリンファミリーである。この細胞表面糖タンパク質ファミリーは、典型的な非共有結合ヘテロダイマー構造を有する。
【０００４】
問題となっている特定のインテグリンのサブグループは、ベータ１（β１）及びベータ７（β７）という２つの異なるベータ鎖と対をなすことができるアルファ４（α４）鎖を含む［Ｓｏｎｎｅｎｂｅｒｇ，Ａ．同書］。α４β１対形成は、多くの循環白血球（例えばリンパ球、単球、及び好酸球）で生ずるが、循環好中球では存在せず又は低レベルでしか存在しない。Ｈｅｌｍｅｒ及びＴａｋａｄａ１によって最初に確認されたＶＬＡ−４（最晩期抗原−４、α４β１インテグリン及びＣＤ４９ｄ／ＣＤ２９とも呼ばれる）は、細胞表面受容体のβ１インテグリンファミリーのメンバーである。ＶＬＡ−４は、α４鎖及びβ１鎖からなる。少なくとも９種のβ１インテグリンがあり、すべては同じβ１鎖を共有し、それぞれは別々のα鎖を有する。これら９種の受容体すべては、フィブロネクチン、ラミニン、及びコラーゲンなどの様々な細胞マトリックス分子の異なる補体に結合する。ＶＬＡ−４は、例えばフィブロネクチンに結合する。ＶＬＡ−４は、内皮細胞及びその他の細胞によって表される非マトリックス分子にも結合する。
【０００５】
ＶＬＡ−４（α４β１インテグリン）は、炎症部位の内皮細胞上で頻繁にアップレギュレートされる血管細胞接着分子−１（又はＶＣＡＭ−１）と呼ばれる接着分子に結合する［Ｏｓｂｏｒｎｅ，Ｌ．Ｃｅｌｌ、６２、３（１９９０）］。ＶＣＡＭ−１は、中枢神経系（ＣＮＳ）への白血球の輸送の原因と考えられる発現受容体である非マトリックス分子である。α４β１は、マトリックス分子フィブロネクチンの、少なくとも３つの部位に結合することも示されている［Ｈｕｍｐｈｒｉｅｓ，Ｍ．Ｊ．他、Ｃｉｂａ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ、１８９、１７７（１９９５）］。ＶＬＡ−４の明らかに異なるエピトープは、フィブロネクチン及びＶＣＡＭ−１の結合活性の一因であり、それぞれは独立に阻害されることが実証されている２。動物モデルのモノクローナル抗体で得られたデータに基づき、α４β１と、その他の細胞及び細胞外マトリックス上のリガンドとの相互作用は、白血球の移動及び活性化に重要な役割を演ずると考えられる［Ｙｅｄｎｏｃｋ，Ｔ．Ａ．他、Ｎａｔｕｒｅ、３６５、６３（１９９２）］。
【０００６】
α４とβ７との対形成によって生成されたインテグリンは、ＬＰＡＭ−１と呼ばれており［Ｈｏｌｔｚｍａｎｎ，Ｂ．及びＷｅｉｓｓｍａｎ，Ｉ．、ＥＭＢＯ  Ｊ．８、１７３５（１９８９）］、α４β１のように、ＶＣＡＭ−１及びフィブロネクチンに結合することができる。さらに、α４β７は、ＭＡｄＣＡＭ−１と呼ばれる粘膜組織への白血球のホーミングに関与すると考えられる、接着分子に結合する。［Ｂｅｒｌｉｎ，Ｃ．他、Ｃｅｌｌ、７４、１８５（１９９３）］また。α４β７とＭＡｄＣＡＭ−１との相互作用は、粘膜組織の外側の炎症部位で、重要になる可能性がある［Ｙａｎｇ，Ｘ−Ｄ．他、ＰＮＡＳ、９１、１２６０４（１９９４）］。
【０００７】
ＶＬＡ−４及びその他の細胞表面受容体によって媒介される細胞間接着は、いくつかの炎症応答に関連している。損傷又はその他の炎症刺激の部位では、活性化した血管内皮細胞が、白血球に対し接着性ある分子を発現させる。内皮細胞への白血球接着のメカニズムは、その１つには、白血球上の細胞表面受容体と内皮細胞上の対応する細胞表面分子の認識及び結合を含む。結合すると、白血球が血管壁を横断して損傷部位に進入し、ケミカルメディエーターを放出して、感染症と闘う。免疫系の接着受容体の概説に関しては、例えばＳｐｒｉｎｇｅｒ３及びＯｓｂｏｒｎ４を参照されたい。
【０００８】
多発性硬化症（ＭＳ）や髄膜炎、脳炎、及び実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）と呼ばれる疾患モデルなどの炎症性脳障害は、内皮／白血球接着メカニズムが通常であれば健康な脳組織に破壊をもたらす中枢神経系障害の例である。多数の白血球が、これら炎症性疾患に罹っている被験体の血液脳関門（ＢＢＢ）を横断する。白血球は、損なわれた神経伝導及び麻痺をもたらす広範な細胞損傷及び死を引き起こす毒性メディエーターを放出する。脳炎及び髄膜炎での同様の現象は、これらの疾患を適切な細胞接着阻害剤で治療できることを示している。
【０００９】
その他の器官系では、組織損傷は、白血球の移動又は活性化をもたらす接着メカニズムを介しても生ずる。例えば炎症性腸疾患１５（潰瘍性大腸炎及びクローン病を含む）は、少なくとも部分的に、腸管内皮を横断する白血球輸送によって、この組織で発現されるα４β７とＭａｄＣＡＭとの相互作用或いはα４β１とＶＣＡＭ−１との相互作用を介しても同様に引き起こされる。喘息６〜８、関節リウマチ１８〜２１、及び組織移植拒絶反応２２はすべて、α４β１とＶＣＡＭ−１及び／又はフィブロネクチン、或いはこの両方との相互作用を基にした成分を有すると考えられる。心筋（心臓組織）虚血症後の初期傷害は、損傷を受けた組織に白血球が進入してさらに別の損傷をもたらすことにより、悪化する可能性が示されている（Ｖｅｄｄｅｒ他５）。接着分子メカニズムによって媒介されるその他の炎症性又は医学的状態には、例として、アルツハイマー病、アテローム性動脈硬化症９〜１０、ＡＩＤＳ、痴呆１１、糖尿病１２〜１４（急性若年型糖尿病を含む）、腫瘍転移２３〜２８、脳卒中、及びその他の脳外傷、腎炎、網膜炎、アトピー性皮膚炎、乾癬、及び成人の呼吸困難症候群などで生ずる急性白血球媒介型肺損傷が含まれる。
【００１０】
抗炎症薬としての見込みを示すＶＬＡ−４拮抗薬の１つのグループは、例えば米国特許第６４８９３００号３１に記載されるようなスルホニル化−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ化合物の種類である。これらの化合物は、ＶＬＡ−４／ＶＣＡＭ−１結合の非常に強力な拮抗薬である。
【００１１】
初回通過肝臓代謝が高いので、これらの化合物の経口的な使用では不十分である。これらの化合物により治療可能な疾患状態の多くは慢性状態であるので、投与される化合物の血清半減期が長くなれば、哺乳類の疾患治療におけるこのような種類の化合物の有用性が増すと考えられる。
【００１２】
薬物の半減期は、正常な代謝及び排出経路を経て体内の薬物量を半分に減少させるのに要する時間の尺度である。米国特許第６４８９３００号に開示されているものを含めたＶＬＡ−４阻害剤は、医薬品製剤として静脈内投与した場合であっても、１０から２０分程度の短い半減期でしかない。適切な時間にわたって有効量の薬物を患者がその系内に維持するために、非常に大量の薬物を投与しなければならず、及び／又は薬物を１日に何回も投与しなければならない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
そのような短い半減期を有するＶＬＡ−４阻害剤は、商業的に実現可能な治療薬候補ではない。したがって、著しく高められた血清半減期、好ましくは何時間から何日間の範囲内の血清半減期を有するＶＬＡ−４阻害剤が、求められている。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明は、ＶＬＡ−４拮抗特性を示すコンジュゲートを提供する。本発明のコンジュゲートは、ポリマーに共有結合した複数のＶＬＡ−４拮抗薬を含有するとして特徴付けられる。理論に拘泥するものではないが、改善された血清半減期は、活性化合物とポリマーとの共有結合に関連すると考えられる。さらに、そのような化合物の複数のコピーとポリマーとの結合によって、生物学的効力の低下が最小限に抑えられる。
【００１５】
一態様では、本発明は、下記の式Ｉのコンジュゲートを提供する
【化１】
2008505927.tif 000002
（式中、Ｂは、分枝状アームハブ分子に任意選択で共有結合した生体適合性ポリマー部分であり；
ｑは、約２から約２０までであり；
Ａは、出現するごとに独立に、式ＩＩの化合物又は医薬品として許容されるその塩であり、
【化２】
2008505927.tif 000003
上式でＪは、
ａ）下記の式（ａ）の群及び
ｂ）下記の式（ｂ）の群から選択され、
【化３】
2008505927.tif 000004
【化４】
2008505927.tif 000005
但しＲ３１は、リンカーを任意選択で含むポリマー部分との共有結合であり、又はＲ３１は、−Ｈ、Ｒ３１’、−ＮＨ２、−ＮＨＲ３１’、−Ｎ（Ｒ３１’）２、−ＮＣ３〜Ｃ６環、−ＯＲ３１’、及び−ＳＲ３１’からなる群から選択され、各Ｒ３１’は独立に、任意選択で置換された直鎖状又は分枝状Ｃ１〜Ｃ６アルキル、任意選択で置換されたＣ３〜Ｃ６シクロアルキル、任意選択で置換されたアリール、又は任意選択で置換されたヘテロアリールであり、
Ｒ３２は、リンカーを任意選択で含むポリマー部分との共有結合であり、又はＲ３２は、−Ｈ、−ＮＯ２、ハロアルキル、及び−Ｎ（ＭＲ４１）Ｒ４２からなる群から選択され、Ｍは、共有結合、−Ｃ（Ｏ）−、又は−ＳＯ２−であり、Ｒ４１は、Ｒ４１’、Ｎ（Ｒ４１’）２、又は−ＯＲ４１’であり、
各Ｒ４１’は、独立に、水素、任意選択で置換された直鎖状又は分枝状Ｃ１〜Ｃ６アルキル、任意選択で置換されたシクロアルキル、任意選択で置換されたアリール、任意選択で置換されたヘテロ環、又は任意選択で置換されたヘテロアリールであり、任意選択の置換は、ハロゲン化物、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、又は−ＯＣ１〜Ｃ６アルキルであり、
Ｒ４２は、水素、Ｒ４１’、アルキニル、又は置換されたアルキニルであり；並びに
Ｒは、ポリマー部分との共有結合、水素、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アミノ、ヒドロキシル、置換アミノ、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、チオール、アリールチオ、ヘテロアリールチオ、ヘテロシクリルチオ、及び置換アルキルからなる群から選択され、各アミノ、置換アミノ、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールは、ポリマー部分に任意選択で共有結合し、それぞれの場合においてポリマー部分は、このポリマー部分に共有結合するリンカーを任意選択で含み；
Ａｒ１は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールのそれぞれは、ポリマー部分に任意選択で共有結合し、ポリマー部分は、このポリマー部分をＡｒ１に共有結合させるリンカーを任意選択で含むものであり；
Ａｒ２は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アルキル、置換アルキル、アルキルアミノ、及び置換アルキルアミノからなる群から選択され、Ａｒ２は、ポリマー部分に任意選択で共有結合し、ポリマー部分は、このポリマー部分をＡｒ２に共有結合させるリンカーを任意選択で含むものであり；
Ｘは、−ＮＲ１−、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２、及び任意選択で置換された−ＣＨ２−であってポリマー部分に任意選択で共有結合するものからなる群から選択され、それぞれの場合において、ポリマー部分は、このポリマー部分を共有結合させるリンカーを任意選択で含むものであり；
Ｒ１は、水素及びアルキルからなる群から選択され；
Ｔは、
ａ）下記の式（ｃ）の群及び
ｂ）下記の式（ｄ）の群から選択され、
【化５】
2008505927.tif 000006
【化６】
2008505927.tif 000007
但しＹは、−Ｏ−及び−ＮＲ１−からなる群から選択され、Ｒ１は、水素及びアルキルからなる群から選択され；
Ｗは、リンカーを任意選択で含むポリマー部分との共有結合及び−ＮＲ２Ｒ３からなる群から選択され、Ｒ２及びＲ３は、独立に、水素、アルキル、置換アルキルからなる群から選択され、並びにＲ２及びＲ３は、これらに結合される窒素原子と一緒になって、ヘテロ環又は置換ヘテロ環を形成し、アルキル、置換アルキル、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環のそれぞれは、リンカーをさらに任意選択で含むポリマー部分に任意選択で共有結合し；
ｍは、０、１、又は２に等しい整数であり；
ｎは、０、１、又は２に等しい整数であり；並びに
Ｇは、０から３個の窒素を含有する任意選択で置換されたアリール或いは任意選択で置換されたヘテロアリール５又は６員環であり、前記アリール又はヘテロアリールは、リンカーを任意選択で含むポリマー部分との共有結合を任意選択でさらに含み；
Ｒ６は、リンカーを任意選択で含むポリマー部分との共有結合であり、或いはＲ６は、−Ｈ、アルキル、置換アルキル、又は−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ１７であり、Ｒ１７は、−ＯＨ、−ＯＲ１８、又は−ＮＨＲ１８であり、Ｒ１８は、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、又は置換ヘテロアリールであり；
Ｒ５５は、−ＯＨ又は加水分解性エステルであり、又はＲ５５は、任意選択でリンカーを介してポリマー部分と加水分解性ポリマーエステルを形成し；
但し
Ａ．Ａｒ１、Ｊ、Ａｒ２、Ｒ５５、及びＴの少なくとも１つ（より好ましくはＪ及びＴの一方）が、ポリマー部分との共有結合を含有し；
Ｂ．Ｘが−Ｏ−の場合、ｍは２であり；且つ
Ｃ．式Ｉのコンジュゲートが、約８０，０００以下の分子量を有することを条件とする）。
【００１６】
本発明は、例えば、医薬品として許容される担体及び、治療上有効な量の本発明のコンジュゲート又はその混合物を含む、医薬品組成物も提供する。
【００１７】
本発明は、患者の、少なくとも部分的にＶＬＡ−４により媒介された疾患を治療するための方法も提供し、この方法は、医薬品として許容される担体と、治療上有効な量の本発明のコンジュゲート又はその混合物を含んだ医薬品組成物を投与することを含む。
【００１８】
本発明は、患者の、少なくとも部分的にＶＬＡ−４により媒介された疾患の治療に使用される薬剤を製造するための、本発明のコンジュゲート、及び医薬品として許容されるその塩の使用も含む。
【００１９】
コンジュゲート及び医薬品組成物は、少なくとも部分的にＶＬＡ−４又は白血球接着によって媒介された疾患状態を治療するのに使用することができる。そのような疾患状態には、例として、喘息、アルツハイマー病、アテローム性動脈硬化症、ＡＩＤＳ、痴呆、糖尿病（急性若年型糖尿病を含む）、炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎及びクローン病を含む）、多発性硬化症、関節リウマチ、組織移植、腫瘍転移、髄膜炎、脳炎、脳卒中、及びその他の脳外傷、腎炎、網膜炎、シェーグレン病、アトピー性皮膚炎、乾癬、心筋虚血症、及び成人の呼吸困難症候群で生じるような急性白血球媒介型肺損傷が含まれる。
【００２０】
本発明のコンジュゲート及び組成物を使用して治療することができるその他の疾患状態には、結節性紅斑、アレルギー性結膜炎、視神経炎、ブドウ膜炎、アレルギー性鼻炎、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、血管炎、ライター症候群、全身性エリテマトーデス、進行性全身性硬化症、多発性筋炎、皮膚筋炎、ヴェグナー肉芽腫症、大動脈炎、サルコイドーシス、リンパ球減少症、一過性動脈炎、心外膜炎、心筋炎、うっ血性心不全、結節性多発性動脈炎、過敏性症候群、アレルギー、好酸球増加症候群、チャーグ−ストラウス症候群、慢性閉塞性肺疾患、過敏性肺炎、慢性活動性肝炎、間質性膀胱炎、自己免疫内分泌不全、原発性胆汁性肝硬変、自己免疫再生不良性貧血、慢性持続性肝炎、及び甲状腺炎などの炎症状態が含まれるが、これらに限定するものではない。
【００２１】
好ましくは、本発明のコンジュゲート及び医薬品として許容される組成物は、喘息、関節リウマチ、及び多発性硬化症を治療するための方法で使用される。この後者の疾患に関し、本発明のコンジュゲートは、生体内投与したときに抗炎症効果を発揮するだけではなく、脱髄に関連した状態及び疾患の治療での用途がさらに見出される。
【００２２】
本発明は、本発明のコンジュゲートを調製する方法及びこの方法で使用される中間体も提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２３】
上述のように、本発明は、白血球接着、詳細には少なくとも部分的にＶＬＡ−４によって媒介された白血球接着を阻害するコンジュゲートに関する。
【００２４】
１つの好ましい実施形態では、Ａｒ１、Ｊ、Ａｒ２、及びＴの１つだけが、ポリマー部分との共有結合を含有する。
【００２５】
別の好ましい実施形態では、ポリマー部分が−ＮＲ２Ｒ３基に結合する。
【００２６】
他の好ましい実施形態では、本発明のコンジュゲート中のＸがＮＲ１である場合、ｍは２である。
【００２７】
さらに別の好ましい実施形態では、ｑは、２から約２０までの整数であり、より好ましくは２から約８である。
【００２８】
式Ｉの好ましいコンジュゲートは、下記の式Ｉａのコンジュゲート及び医薬品として許容されるその塩を含む
【化７】
2008505927.tif 000008
（式中、Ｂは、２価、３価、４価、又はより高い価数の生体適合性ポリマー部分であり、或いは任意選択で、官能基結合により又は分枝状アームハブ分子により又はその両方により共有結合して、２価、３価、４価、又はより高い価数のポリマー部分を形成する複数の生体適合性ポリマーであり；
ｑは、２から約２０までであり；
Ａは、出現するごとに独立に、式ＩＩａの化合物及び医薬品として許容されるその塩であり、
【化８】
2008505927.tif 000009
上式でＲは、ポリマー部分との共有結合、アミノ、置換アミノ、アルキル、及び置換アルキルからなる群から選択され、各アミノ、置換アミノ、アルキル、及び置換アルキルは、任意選択でポリマー部分に共有結合し、それぞれの場合において、ポリマー部分は、任意選択でこのポリマー部分を共有結合させるリンカーを含み；
Ａｒ１は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され；
Ａｒ２は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールのそれぞれは、任意選択でポリマー部分に共有結合し、ポリマー部分は、任意選択でこのポリマー部分をＡｒ２に共有結合させるリンカーを含み；
Ｘは、−ＮＲ１−、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２、及び任意選択で置換された−ＣＨ２−からなる群から選択され、Ｒ１は、水素及びアルキルからなる群から選択され；
Ｙは、−Ｏ−及び−ＮＲ１−からなる群から選択され、Ｒ１は、水素及びアルキルからなる群から選択され；
Ｗは、任意選択でリンカーを含むポリマー部分との共有結合及び−ＮＲ２Ｒ３からなる群から選択され、Ｒ２及びＲ３は、独立に、水素、アルキル、置換アルキルからなる群から選択され、並びにＲ２及びＲ３は、これらに結合する窒素原子と一緒になって、ヘテロ環又は置換ヘテロ環を形成し、アルキル、置換アルキル、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環のそれぞれは、任意選択でリンカーを介してポリマー部分に任意選択で共有結合し；
ｍは、０、１、又は２に等しい整数であり；
ｎは、０、１、又は２に等しい整数であり；
但し
Ａ．Ｒ、Ａｒ２、Ｗ、及び−ＮＲ２Ｒ３の少なくとも１つは、ポリマー部分との共有結合を含有し；
Ｂ．Ｒがポリマー部分に共有結合する場合、ｎは１であり、及びＸは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、又は−ＳＯ２−ではなく；
Ｃ．Ｘが−Ｏ−又は−ＮＲ１−である場合、ｍは２であり；かつ
Ｄ．式Ｉａのコンジュゲートは、６０，０００以下の分子量を有することを条件とする）。
【００２９】
式Ｉの好ましいコンジュゲートは、下記の式Ｉｂのコンジュゲートを含む
【化９】
2008505927.tif 000010
（式中、各Ａは独立に、下記の式ＩＩｂの化合物であり、
【化１０】
2008505927.tif 000011
ｑは、２から約２０であり；
Ｂは、上記定義した通りであり；
上式でＡｒ１は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され；
Ａｒ２は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールのそれぞれは、任意選択でポリマー部分に共有結合し、ポリマー部分は、任意選択でこのポリマー部分をＡｒ２に共有結合させるリンカーを含み；
Ｙは、−Ｏ−、及び−ＮＲ１−からなる群から選択され、Ｒ１は、水素及びアルキルからなる群から選択され；
Ｗは、任意選択でリンカーを含むポリマー部分との共有結合及び−ＮＲ２Ｒ３からなる群から選択され、Ｒ２及びＲ３は、独立に、水素、アルキル、置換アルキルからなる群から選択され、並びにＲ２及びＲ３は、これらに結合する窒素原子と一緒になって、ヘテロ環又は置換ヘテロ環を形成し、アルキル、置換アルキル、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環のそれぞれは、任意選択でリンカーをさらに含むポリマー部分に任意選択で共有結合し；
但し、Ａｒ２、Ｗ、及び−ＮＲ２Ｒ３の少なくとも１つは、任意選択でリンカーを含むポリマー部分に共有結合することを条件とし；
さらに式Ｉｂのコンジュゲートは、６０，０００以下の分子量を有することを条件とする）。
【００３０】
式Ｉの好ましいコンジュゲートは、下記の式Ｉｃのコンジュゲートを含む
【化１１】
2008505927.tif 000012
（式中、各Ａは独立に、下記の式ＩＩｃの化合物、及び医薬品として許容されるその塩であり、
【化１２】
2008505927.tif 000013
ｑは２から約２０であり；
Ｂは上記定義した通りであり；
上式でＲは、ポリマー部分との共有結合、アミノ、置換アミノ、アルキル、及び置換アルキルからなる群から選択され、各アミノ、置換アミノ、アルキル、及び置換アルキルは、任意選択でポリマー部分に共有結合し、それぞれの場合において、ポリマー部分は、任意選択でこのポリマー部分を共有結合させるリンカーを含み；
Ａｒ１は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され；
Ａｒ２は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールのそれぞれは、任意選択でポリマー部分に共有結合し、ポリマー部分は、任意選択でこのポリマー部分をＡｒ２に共有結合させるリンカーを含み；
Ｙは、−Ｏ−及び−ＮＲ１−からなる群から選択され、Ｒ１は、水素及びアルキルからなる群から選択され；
Ｗは、任意選択でリンカーを含むポリマー部分との共有結合及び−ＮＲ２Ｒ３からなる群から選択され、Ｒ２及びＲ３は独立に、水素、アルキル、置換アルキルからなる群から選択され、並びにＲ２及びＲ３は、これらに結合する窒素原子と一緒になって、ヘテロ環又は置換ヘテロ環を形成し、アルキル、置換アルキル、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環のそれぞれは、任意選択でリンカーをさらに含むポリマー部分に任意選択で共有結合し；
ｎは、０、１、又は２に等しい整数であり；
但し、Ｒ、Ａｒ２、Ｗ、及び−ＮＲ２Ｒ３の少なくとも１つは、任意選択でリンカーを含むポリマー部分に共有結合することを条件とし；
さらに式Ｉｃのコンジュゲートは、６０，０００以下の分子量を有することを条件とする）。
【００３１】
式Ｉの好ましいコンジュゲートは、下記の式Ｉｄのコンジュゲートを含む
【化１３】
2008505927.tif 000014
（式中、各Ａは独立に、下記の式ＩＩｄの化合物、及び医薬品として許容されるその塩であり、
【化１４】
2008505927.tif 000015
ｑは２から約２０であり；
Ｂは上記定義した通りであり；
上式でＲは、ポリマー部分との共有結合、アミノ、置換アミノ、アルキル、及び置換アルキルからなる群から選択され、各アミノ、置換アミノ、アルキル、及び置換アルキルは、任意選択でポリマー部分に共有結合し、それぞれの場合において、ポリマー部分は、任意選択でこのポリマー部分を共有結合させるリンカーを含み；
Ａｒ１は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され；
Ａｒ２は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールのそれぞれは、任意選択でポリマー部分に共有結合し、ポリマー部分は、任意選択でこのポリマー部分をＡｒ２に共有結合させるリンカーを含み；
Ｒ２及びＲ３は独立に、水素、アルキル、置換アルキルからなる群から選択され、並びにＲ２及びＲ３は、これらに結合する窒素原子と一緒になって、ヘテロ環又は置換ヘテロ環を形成し、アルキル、置換アルキル、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環のそれぞれは、任意選択でリンカーをさらに含むポリマー部分に任意選択で共有結合し；
ｎは、０、１、又は２に等しい整数であり；
但し、Ｒ、Ａｒ２、及び−ＮＲ２Ｒ３の少なくとも１つは、任意選択でリンカーを含むポリマーに共有結合することを条件とし；
さらに式Ｉｄのコンジュゲートは、８０，０００以下の分子量を有することを条件とする）。
【００３２】
式Ｉの好ましいコンジュゲートは、下記の式Ｉｅのコンジュゲートを含む
【化１５】
2008505927.tif 000016
（式中、各Ａは独立に、下記の式ＩＩｅの化合物、及び医薬品として許容されるその塩であり、
【化１６】
2008505927.tif 000017
ｑは２から約２０であり；
Ｂは上記定義した通りであり；
上式でＡｒ１は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され；
Ａｒ２は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールのそれぞれは、任意選択でポリマー部分に共有結合し、ポリマー部分は、任意選択でこのポリマー部分をＡｒ２に共有結合させるリンカーを含み；
Ｒ２及びＲ３は独立に、水素、アルキル、置換アルキルからなる群から選択され、並びにＲ２及びＲ３は、これらに結合する窒素原子と一緒になって、ヘテロ環又は置換ヘテロ環を形成し、アルキル、置換アルキル、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環のそれぞれは、任意選択でリンカーをさらに含むポリマー部分に任意選択で共有結合し；
但し、Ａｒ２及び−ＮＲ２Ｒ３の少なくとも一方は、任意選択でリンカーを含むポリマー部分に共有結合することを条件とし；
さらに式Ｉｅのコンジュゲートは、６０，０００以下の分子量を有することを条件とする）。
【００３３】
式Ｉの好ましいコンジュゲートは、下記の式Ｉｆのコンジュゲートを含む
【化１７】
2008505927.tif 000018
（式中、各Ａは独立に、下記の式ＩＩｆの化合物、及び医薬品として許容されるその塩であり、
【化１８】
2008505927.tif 000019
ｑは２から約２０であり；
Ｂは上記定義した通りであり；
上式でＲ４は、任意選択でリンカーを含むポリマー部分に共有結合し；
Ｒ５は、アルキル及び置換アルキルからなる群から選択され；
Ａｒ３は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され、；
Ｘは、−ＮＲ１−、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２、及び任意選択で置換された−ＣＨ２−からなる群から選択され、Ｒ１は、水素及びアルキルからなる群から選択され；
ｍは、０、１、又は２に等しい整数であり；
ｎは、０、１、又は２に等しい整数であり；
但し
Ａ．Ｒがポリマー部分に共有結合する場合、ｎは１であり、及びＸは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、又は−ＳＯ２−ではなく；
Ｂ．Ｘが−Ｏ−又は−ＮＲ１−である場合、ｍは２であり；かつ
Ｃ．式Ｉｆのコンジュゲートは、６０，０００以下の分子量を有することを条件とする）。
【００３４】
式Ｉの好ましいコンジュゲートは、下記の式Ｉｇのコンジュゲートを含む
【化１９】
2008505927.tif 000020
（式中、各Ａは独立に、下記の式ＩＩｇの化合物、及び医薬品として許容されるその塩であり、
【化２０】
2008505927.tif 000021
ｑは２から約２０であり；
Ｂは上記定義した通りであり；
上式でＲ４は、任意選択でリンカーを含むポリマー部分に共有結合し；
Ｒ５は、アルキル及び置換アルキルからなる群から選択され；
Ａｒ３は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され、；
ｎは、０、１、又は２に等しい整数であり；
但し、式Ｉｇのコンジュゲートは、６０，０００以下の分子量を有することを条件とする）。
【００３５】
式Ｉの好ましいコンジュゲートは、下記の式Ｉｈのコンジュゲートを含む
【化２１】
2008505927.tif 000022
（式中、各Ａは独立に、下記の式ＩＩｈの化合物、及び医薬品として許容されるその塩であり、
【化２２】
2008505927.tif 000023
ｑは２から約２０であり；
上式でＲ４は、任意選択でリンカーを含むポリマー部分に共有結合し；
Ａｒ３は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され；
但し、式Ｉｈのコンジュゲートは、６０，０００以下の分子量を有することを条件とする）。
【００３６】
式Ｉの好ましいコンジュゲートは、下記の式Ｉｉのコンジュゲートを含む
【化２３】
2008505927.tif 000024
（式中、各Ａは独立に、下記の式ＩＩｉの化合物、又は医薬品として許容されるその塩であり、
【化２４】
2008505927.tif 000025
ｑは２から約２０であり；
但し、式Ｉｉのコンジュゲートは、６０，０００以下の分子量を有することを条件とする）。
【００３７】
式Ｉの好ましいコンジュゲートは、下記の式Ｉｊのコンジュゲートを含む
【化２５】
2008505927.tif 000026
（式中、各Ａは独立に、下記の式ＩＩｊの化合物、又は医薬品として許容されるその塩であり、
【化２６】
2008505927.tif 000027
ｑは約２から約２０であり；
但し、式Ｉｊのコンジュゲートは、約８０，０００以下の分子量を有することを条件とする）。
【００３８】
式Ｉの好ましいコンジュゲートは、下記の式Ｉｋのコンジュゲートを含む
【化２７】
2008505927.tif 000028
（式中、各Ａは独立に、下記の式ＩＩｋの化合物、又は医薬品として許容されるその塩である
【化２８】
2008505927.tif 000029
）。
【００３９】
式Ｉの好ましいコンジュゲートは、下記の式ＩＬのコンジュゲートを含む
【化２９】
2008505927.tif 000030
（式中、各Ａは独立に、下記の式ＩＩＬの化合物、又は医薬品として許容されるその塩であり、
【化３０】
2008505927.tif 000031
上式で、Ｒ４は、任意選択でリンカーを含むポリマー部分に共有結合する）。
【００４０】
式ＩＩａ〜ＩＩｅ中のＡｒ１、及び式ＩＩｆ〜ＩＩｈ中のＡｒ３は、独立に、
フェニル、
４−メチルフェニル、
４−ｔ−ブチルフェニル、
２，４，６−トリメチルフェニル、
２−フルオロフェニル、
３−フルオロフェニル、
４−フルオロフェニル、
２，４−ジフルオロフェニル、
３，４−ジフルオロフェニル、
３，５−ジフルオロフェニル、
２−クロロフェニル、
３−クロロフェニル、
４−クロロフェニル、
３，４−ジクロロフェニル、
３，５−ジクロロフェニル、
３−クロロ−４−フルオロフェニル、
４−ブロモフェニル、
２−メトキシフェニル、
３−メトキシフェニル、
４−メトキシフェニル、
３，４−ジメトキシフェニル、
４−ｔ−ブトキシフェニル、
４−（３’−ジメチルアミノ−ｎ−プロポキシ）−フェニル、
２−カルボキシフェニル、
２−（メトキシカルボニル）フェニル、
４−（Ｈ２ＮＣ（Ｏ）−）フェニル、
４−（Ｈ２ＮＣ（Ｓ）−）フェニル、
４−シアノフェニル、
４−トリフルオロメチルフェニル、
４−トリフルオロメトキシフェニル、
３，５−ジ−（トリフルオロメチル）フェニル、
４−ニトロフェニル、
４−アミノフェニル、
４−（ＣＨ３Ｃ（Ｏ）ＮＨ−）フェニル、
４−（フェニルＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−）フェニル、
４−アミジノフェニル、
４−メチルアミジノフェニル、
４−［ＣＨ３ＳＣ（＝ＮＨ）−］フェニル、
４−クロロ−３−［Ｈ２ＮＳ（Ｏ）２−］フェニル、
１−ナフチル、
２−ナフチル、
ピリジン−２−イル、
ピリジン−３−イル、
ピリジン−４−イル、
ピリミジン−２−イル、
キノリン−８−イル、
２−（トリフルオロアセチル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−７−イル、
２−チエニル、
５−クロロ−２−チエニル、
２，５−ジクロロ−４−チエニル、
１−Ｎ−メチルイミダゾール−４−イル、
１−Ｎ−メチルピラゾール−３−イル、
１−Ｎ−メチルピラゾール−４−イル、
１−Ｎ−ブチルピラゾール−４−イル、
１−Ｎ−メチル−３−メチル−５−クロロピラゾール−４−イル、
１−Ｎ−メチル−５−メチル−３−クロロピラゾール−４−イル、
２−チアゾリル、及び
５−メチル−１，３，４−チアジアゾール−２−イル
からなる群から選択することが好ましい。
【００４１】
好ましくは、Ａが式ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩｃ、ＩＩｄ、及びＩＩｅの化合物であり且つＡｒ１がポリマー部分に結合している場合、Ａｒ１は下式の基である
−Ａｒ１−Ｚ−（ＣＨ２ＣＨＲ７Ｏ）ｐＲ８
（式中、Ａｒ１は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され、
Ｚは、共有結合、１から４０個の原子の結合基、−Ｏ−、及び−ＮＲ９−からなる群から選択され、Ｒ９は、水素及びアルキルからなる群から選択され、
Ｒ７は、水素及びメチルからなる群から選択され、
Ｒ８は、ｐが約３００よりも大きい場合の−（Ｌ）ｗ−Ａと、（Ｌ）−Ｂ−（Ａ）ｑ−１とからなる群から選択され、Ａは、上述の式ＩＩａからＩＩｈまでのいずれかによって表され、Ｌは、１から４０個の原子の結合基であり、及びｗは０又は１であり：並びに
ｐは、約２００から１３６０までの整数である）。
【００４２】
Ａが、式ＩＩａ又はＩＩｆの化合物であり、且つＲがポリマー部分に結合していない場合、置換基は下式の通りである
【化３１】
2008505927.tif 000032
（式中、Ｒ５、Ｘ、ｍ、及びｎは、上記定義した通りであり、アゼチジニル、チアゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリノ、チオモルホリニル、ピロリジニル、４−ヒドロキシピロリジニル、４−オキソピロリジニル、４−フルオロピロリジニル、４，４−ジフルオロピロリジニル、４−（チオモルホリン−４−イルＣ（Ｏ）Ｏ−）ピロリジニル、４−［ＣＨ３Ｓ（Ｏ）２Ｏ−］ピロリジニル、３−フェニルピロリジニル、３−チオフェニルピロリジニル、４−アミノ−ピロリジニル、３−メトキシピロリジニル、４，４−ジメチルピロリジニル、４−Ｎ−Ｃｂｚ−ピペラジニル、４−［ＣＨ３Ｓ（Ｏ）２−］ピペラジニル、５，５−ジメチルチアゾリンジン−４−イル、１，１−ジオキソ−チアゾリジニル、１，１−ジオキソ−５，５−ジメチルチアゾリジン−２−イル、及び１，１−ジオキソチオモルホリニルからなる群から選択されることが好ましい）。
【００４３】
好ましくは、Ａが式ＩＩａの化合物であり、且つ下式の置換基がポリマー部分に結合される場合、
【化３２】
2008505927.tif 000033
置換基は、下式の置換基であることが好ましい
【化３３】
2008505927.tif 000034
（式中、ｍは、０、１、又は２に等しい整数であり；
Ｚは、共有結合、１から４０個の原子の結合基、−Ｏ−、−ＮＲ９−からなる群から選択され、Ｒ９は、水素及びアルキルからなる群から選択され、
Ｒ７は、水素及びメチルからなる群から選択され；
ｐは、０から約１３６０までの整数であり；
Ｒ５は、−Ｂ−（Ａ）ｑ−１、及びｐが約３００よりも大きい場合のＡからなる群から選択され、Ａは、上述の式ＩＩａから式ＩＩｈまでのいずれかによって表される）。
【００４４】
Ａが、式ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩｃ、ＩＩｄ、ＩＩｅの化合物である場合、及びＡｒ２がポリマー部分に結合していない場合、Ａｒ２は、フェニル、置換フェニル、２−ピリジニル、３−ピリジニル、４−ピリジニル、及び４−ピリジン−２−オニルからなる群から選択されることが好ましい。
【００４５】
Ａが、式ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩｃ、ＩＩｄ、ＩＩｅの化合物である場合、及びＡｒ２がポリマー部分に結合される場合、Ａｒ２は、好ましくは下式によって表される
【化３４】
2008505927.tif 000035
（式中、Ａｒ２は、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｚは、共有結合、１から４０個の原子の結合基、−Ｏ−、−ＮＲ９−、アミド、カルバメート、及び尿素からなる群から選択され、Ｒ９は、水素及びアルキルからなる群から選択され；
Ｒ７は、水素及びメチルからなる群から選択され；
ｐは、０から約１３６０までの整数であり；
Ｒ８は、−Ｂ−（Ａ）ｑ−１、及びｐが約３００よりも大きい場合のＡからなる群から選択され、Ａは、上述の式ＩＩａからＩＩｈまでのいずれかによって表される）。
【００４６】
１つの好ましい実施形態では、−ＹＣ（Ｏ）Ｗが−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ２Ｒ３である。
【００４７】
Ａが、式ＩＩａ、ＩＩｂ、又はＩＩｃの化合物であり、−ＹＣ（Ｏ）Ｗが−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ２Ｒ３であり、且つＲ２もＲ３もポリマー部分に結合していない場合、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ２Ｒ３は、
（ＣＨ３）２ＮＣ（Ｏ）Ｏ−、
（ピペリジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（ピペリジン−４−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（１−メチルピペリジン−４−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−ホルミルオキシピペリジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−エトキシカルボニルピペリジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−カルボキシルピペリジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（３−ヒドロキシメチルピペリジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−ヒドロキシメチルピペリジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−フェニル−１−Ｂｏｃ−ピペリジン−４−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−ピペリドン−１−イルエチレンケタール）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（ピペラジン−４−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（１−Ｂｏｃ−ピペラジン−４−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−メチルピペラジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−メチルホモピペラジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−フェニルピペラジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−（ピリジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−（４−トリフルオロメチルピリジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−（ピリミジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−アセチルピペラジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−（フェニル−Ｃ（Ｏ）−）ピペラジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−（ピリジン−４’−イル−Ｃ（Ｏ）−）ピペラジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−（フェニル−ＮＨＣ（Ｏ）−）ピペラジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−（フェニル−ＮＨＣ（Ｓ）−）ピペラジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−メタンスルホニルピペラジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（４−トリフルオロメタンスルホニルピペラジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（モルホリン−４−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（チオモルホリン−４−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（チオモルホリン−４’−イルスルホン）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（ピロリジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（２−メチルピロリジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（２−（メトキシカルボニル）ピロリジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（２−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−イル）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）エチル）（ＣＨ３）ＮＣ（Ｏ）Ｏ−、
（２−（Ｎ−メチル−Ｎ−トルエン−４−スルホニルアミノ）エチル）（ＣＨ３）Ｎ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、
（２−（モルホリン−４−イル）エチル）（ＣＨ３）ＮＣ（Ｏ）Ｏ−、
（２−（ヒドロキシ）エチル）（ＣＨ３）ＮＣ（Ｏ）Ｏ−、
ビス（２−（ヒドロキシ）エチル）ＮＣ（Ｏ）Ｏ−、
（２−（ホルミルオキシ）エチル）（ＣＨ３）ＮＣ（Ｏ）Ｏ−、
（ＣＨ３ＯＣ（Ｏ）ＣＨ２）ＨＮＣ（Ｏ）Ｏ−、及び
［２−（フェニルＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−）エチル−］ＨＮＣ（Ｏ）Ｏ−
からなる群から選択されることが好ましい。
【００４８】
Ａが、式ＩＩａ、ＩＩｂ、又はＩＩｃの化合物であり、−ＹＣ（Ｏ）Ｗが−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ２Ｒ３であり、且つＲ２及び／又はＲ３がポリマー部分に結合される場合、ポリマー部分は、好ましくは下式によって表される
−Ｚ’−（ＣＨ２ＣＨＲ７Ｏ）ｐＲ８
（式中、Ｚは、共有結合、１から４０個の原子の結合基、−Ｏ−、−ＮＲ９−、アミド、カルバメート、及び尿素からなる群から選択され、Ｒ９は、水素及びアルキルからなる群から選択され、
Ｒ７は、水素及びメチルからなる群から選択され；
ｐは、０から約１３６０までの整数であり；
Ｒ８は、−Ｂ−（Ａ）ｑ−１、及びｐが約３００よりも大きい場合のＡからなる群から選択され、並びにＡは、上述の式ＩＩａからＩＩｈまでのいずれかによって表される）。
【００４９】
式ＩＩｉ及びＩＩｊの化合物では、下式の基は、
【化３５】
2008505927.tif 000036
下式に示す通りであることが好ましい
【化３６】
2008505927.tif 000037
（式中、Ｒ６６は、任意選択でリンカーを含むポリマー部分との共有結合であり、或いはＲ６６は、水素、又は直鎖状又は分枝状Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり；Ｒ７７は、任意選択でリンカーを含むポリマー部分との共有結合であり、或いはＲ７７は、水素、ハロゲン、又は直鎖状又は分枝状Ｃ１〜Ｃ６アルコキシであり；Ｒ８８は、任意選択でリンカーを含むポリマー部分との共有結合であり、或いはＲ８８は、水素、又は直鎖状又は分枝状Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｒ６６、Ｒ７７、及びＲ８８の１つは、任意選択でリンカーを含むポリマー部分との共有結合であることが好ましい）。
【００５０】
式ＩＩｉの好ましい化合物は、下記の式ＩＩｉ−ａの化合物、及び医薬品として許容されるその塩でもある
【化３７】
2008505927.tif 000038
（式中、Ａｒ１は、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロ環、置換ヘテロ環、ヘテロアリール、及び置換ヘテロアリールからなる群から選択され；並びに
Ｒ６は、任意選択でリンカーを含むポリマー部分との共有結合である）。
【００５１】
式ＩＩｉ−ａの好ましい化合物は、Ａｒ１が、フェニル或いは少なくとも１個の窒素原子を有する５又は６員ヘテロアリール基であって、このそれぞれが任意選択で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ニトロ、トリフルオロメチル、アミノ、モノ−又はジ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルアミノ、アミノ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アシル、Ｃ２〜Ｃ６アシルアミノ、又はアミノ（Ｃ１〜Ｃ６）アシルで置換される。Ａｒ１は、任意選択でハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ニトロ、トリフルオロメチル、アミノ、モノ−又はジ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルアミノ、アミノ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アシル、Ｃ２〜Ｃ６アシルアミノ、又はアミノ（Ｃ１〜Ｃ６）アシルで置換されたピリジルである。式ＩＩｉ−ａの特に好ましい化合物には、Ａｒ１が、任意選択でＣ１〜Ｃ６アルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ニトロ、トリフルオロメチル、アミノ、或いはモノ−又はジ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルアミノで置換されたピリジルである化合物が含まれる。
【００５２】
式ＩＩｊの好ましい化合物は、下記の式ＩＩｊ−ａの化合物、及び医薬品として許容されるその塩でもある
【化３８】
2008505927.tif 000039
（式中、Ｒ６は、任意選択でリンカーを含むポリマー部分との共有結合である）。
【００５３】
式ＩＩｊ−ａの好ましい化合物には、Ｒ３１が、アミノ或いはモノ−又はジ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルアミノであり；Ｒ３２が、−Ｈ、−ＮＯ２、又はハロアルキル、であり、より好ましくはトリフルオロメチルメチルである化合物が含まれる。
【００５４】
式ＩＩｊ−ａの、さらにその他の好ましい化合物は、
Ｒ３１が、アミノ、或いはモノ−又はジ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルアミノであり；
Ｒ３２が、−Ｎ（ＭＲ４１）Ｒ４２であり；但しＭは、−ＳＯ２−又は−ＣＯ−であり；
Ｒ４１は、任意選択で、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、アミノ、或いはモノ−又はジ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルアミノで置換されるＣ１〜Ｃ６アルキルであり；或いはフェニル、又は少なくとも１個の窒素を含有する５又は６員ヘテロアリールであって、このそれぞれが、任意選択でハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、アミノ、ニトロ、トリフルオロメチル、或いはモノ−又はジ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルアミノで置換されるものであり；及び
Ｒ４２は、水素、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、又はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルである化合物である。
【００５５】
式ＩＩｊ−ａのさらに好ましい化合物には、
式ＩＩｊ−ａ内のＲ４１基が、任意選択でハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、アミノ、或いはモノ−又はジ（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルアミノで置換されるＣ１〜Ｃ４アルキルであり；或いは、ピリジル又はピリミジニルであって、このそれぞれが任意選択でハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、アミノ、或いはモノ−又はジ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルアミノで置換され；及び
Ｒ４２が、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、又はＣ３〜Ｃ７シクロアルキルである化合物が含まれる。
【００５６】
一実施例では、本発明のコンジュゲートは２価であり、下記の式ＩＩＩによって表される
【化３９】
2008505927.tif 000040
（式中、各Ａは独立に、上記定義した通りであり、Ｂ’は、−Ｚ’−（ＣＨ２ＣＨＲ７Ｏ）ｐ−Ｚ’−であり、各Ｚ’は独立に、共有結合又は結合基であり、Ｒ７は、水素又はメチルであり、及びｐは、約１００から１３６０までの整数である）。
【００５７】
別の実施例では、本発明のコンジュゲートは、３価から１０価であり、好ましくは下記の式ＩＶによって表される
【化４０】
2008505927.tif 000041
（式中、各Ａは独立に、上記定義した通りであり、ｔは、３から１０までの整数である）。
【００５８】
定義
本明細書で使用する「アルキル」という用語は、１から５個の炭素原子、より好ましくは１から３個の炭素原子を有する１価の飽和脂肪族ヒドロカルビル基を指す。この用語は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチルなどの基によって例示される。
【００５９】
「置換アルキル」は、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、カルボキシル、カルボキシルエステル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、スピロシクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環からなる群から選択された、１から３個、好ましくは１から２個の置換基を有するアルキル基を指す。
【００６０】
「任意選択で置換されたアルキル」は、上記定義したような「アルキル」及び「置換アルキル」を包含する。
【００６１】
「任意選択で置換された−ＣＨ２−」は、置換されておらず、或いはアルコキシ、置換アルコキシ、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、スルフヒドリル、ニトロ、カルボキシル、カルボキシルエステル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、スピロシクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環からなる群から選択された１又は２個の置換基で置換された基を指す。「任意選択で置換された−ＣＨ２−」上の好ましい置換基は、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、スルフヒドリル、チオアルコキシ、及びハロゲン（好ましくはＦ）である。「任意選択で置換された−ＣＨ２−」が置換される場合、１個の基で置換されることが好ましい。
【００６２】
「アルキレン」は、直鎖状又は分枝鎖状である、好ましくは１から５個、より好ましくは１から３個の炭素原子を有する２価の飽和脂肪族ヒドロカルビル基を指す。この用語は、メチレン（−ＣＨ２−）、エチレン（−ＣＨ２ＣＨ２−）、ｎ−プロピレン（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、イソ−プロピレン（−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−）などの基によって例示される。
【００６３】
「アルコキシ」は、例としてメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｎ−ペントキシなどが含まれる、基「アルキル−Ｏ−」を指す。
【００６４】
「置換アルコキシ」は、基「置換アルキル−Ｏ−」を指す。
【００６５】
「アシル」は、基Ｈ−Ｃ（Ｏ）−、アルキル−Ｃ（Ｏ）−、置換アルキル−Ｃ（Ｏ）−、アルケニル−Ｃ（Ｏ）−、置換アルケニル−Ｃ（Ｏ）−、アルキニル−Ｃ（Ｏ）−、置換アルキニル−Ｃ（Ｏ）−、シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）−、置換シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）−、アリール−Ｃ（Ｏ）−、置換アリール−Ｃ（Ｏ）−、ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）−、置換ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）−、ヘテロ環−Ｃ（Ｏ）−、及び置換ヘテロ環−Ｃ（Ｏ）−を指し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環は、本明細書で定義した通りである。
【００６６】
「アミノアシル」は、基−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０Ｒ１０を指し、各Ｒ１０は独立に、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、置換ヘテロ環からなる群から選択され、各Ｒ１０は窒素原子と一緒になって、ヘテロ環又は置換ヘテロ環を形成し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環は、本明細書で定義した通りである。
【００６７】
「アシルオキシ」は、基アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、アルケニル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換アルケニル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、アルキニル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換アルキニル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、アリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換アリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、置換ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、ヘテロ環−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、及び置換ヘテロ環−Ｃ（Ｏ）Ｏ−を指し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環は、本明細書で定義した通りである。
【００６８】
「アルケニル」は、２から６個の炭素原子、好ましくは２から４個の炭素原子を有し、且つ少なくとも１つ、好ましくは１から２つのアルケニル不飽和部位を有するアルケニル基を指す。そのような基は、ビニル、アリル、ブト−３−エン−１−イルなどによって例示される。
【００６９】
「置換アルケニル」は、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、カルボキシル、カルボキシルエステル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環からなる群から選択された１から３個の置換基、好ましくは１から２個の置換基を有するアルケニル基を指し、但しいかなるヒドロキシル置換もビニル（不飽和）炭素原子に結合していないことを条件とする。
【００７０】
「アルキニル」は、２から６個の炭素原子、好ましくは２から３個の炭素原子を有し、且つ少なくとも１つ、好ましくは１から２つのアルキニル不飽和部位を有するアルキニル基を指す。
【００７１】
「置換アルキニル」は、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、カルボキシル、カルボキシルエステル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環からなる群から選択された１から３個の置換基、好ましくは１から２個の置換基を有するアルキニル基を指す。
【００７２】
「アミノ」は、基−ＮＨ２を指す。
【００７３】
「シアノ」は、基−ＣＮを指す。
【００７４】
「置換アミノ」は、基−ＮＲ’Ｒ”を指し、この式で、Ｒ’及びＲ”は独立に、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環からなる群から選択され、Ｒ’及びＲ”は、Ｒ’及びＲ”が共に水素ではないことを条件に、これらに結合する窒素と共に結合してヘテロ環又は置換ヘテロ環基を形成する。Ｒ’が水素であり、Ｒ”がアルキルである場合、置換アミノ基を、本明細書ではときどきアルキルアミノと呼ぶ。Ｒ’及びＲ”がアルキルである場合、置換アミノ基を、本明細書ではときどきジアルキルアミノと呼ぶ。一置換アミノについて言う場合、Ｒ’又はＲ”の両方ではなくどちらかが水素であることを意味する。二置換アミノについて言う場合、Ｒ’又はＲ”のどちらも水素ではないことを意味する。
【００７５】
「ニトロ」は、基−ＮＯ２を指す。
【００７６】
「アリール」又は「Ａｒ」は、単環（例えばフェニル）又は多重縮合環（例えばナフチル又はアントリル）であって、この縮合環が芳香族でも芳香族でなくてもよいもの（例えば、２−ベンゾキサゾリノン、２Ｈ−１，４−ベンゾキサジン−３（４Ｈ）−オン−７−イルなど）を有する炭素原子が６から１４個の１価の芳香族炭素環基を指すが、但しこのとき結合点は、芳香族炭素原子にあることを条件とする。好ましいアリールには、フェニル及びナフチルが含まれる。
【００７７】
「置換アリール」は、ヒドロキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、カルボキシル、カルボキシルエステル、シアノ、チオール、チオアルキル、置換チオアルキル、チオアリール、置換チオアリール、チオヘテロアリール、置換チオヘテロアリール、チオシクロアルキル、置換チオシクロアルキル、チオヘテロ環、置換チオヘテロ環、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ハロ、ニトロ、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、置換ヘテロ環、ヘテロアリールオキシ、置換ヘテロアリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、置換ヘテロシクリルオキシ、アミノスルホニル（ＮＨ２−ＳＯ２−）、及び置換アミノスルホニルからなる群から選択された１から３個の置換基、好ましくは１から２個の置換基で置換されるアリール基を指す。
【００７８】
「アリールオキシ」は、例として、フェノキシ、ナフトキシなどを含む基アリール−Ｏ−を指す。
【００７９】
「置換アリールオキシ」は、置換アリール−Ｏ−基を指す。
【００８０】
「カルボキシル」は、−ＣＯＯＨ又はその塩を指す。
【００８１】
「カルボキシルエステル」は、基−Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキル、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換アルキル、−Ｃ（Ｏ）−アリール、及び−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換アリールを指し、アルキル、置換アルキル、アリール及び置換アリールは、本明細書で定義した通りである。
【００８２】
「シクロアルキル」は、単環式又は多環式環を有する炭素原子が３から１０個の環状アルキル基を指し、例として、アダマンチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチルなどが含まれる。
【００８３】
「シクロアルケニル」は、単環式又は多環式環を有し、さらに少なくとも１つ、好ましくは１から２つのエチレン又はビニル（＞Ｃ＝Ｃ＜）不飽和の内部部位を有する、炭素原子が４から１０個の環状アルケニル基を指す。
【００８４】
「置換シクロアルキル」及び「置換シクロアルケニル」は、オキソ（＝Ｏ）、チオキソ（＝Ｓ）、アルコキシ、置換アルコキシ、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アリール、置換アリール、アリールオキシ、置換アリールオキシ、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ニトロ、カルボキシル、カルボキシルエステル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環からなる群から選択された１から５個の置換基を有するシクロアルキル又はシクロアルケニル基を指す。
【００８５】
「シクロアルコキシ」は、−Ｏ−シクロアルキル基を指す。
【００８６】
「置換シクロアルコキシ」は、−Ｏ−置換シクロアルキル基を指す。
【００８７】
「ハロ」又は「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、及びヨードを指し、好ましくはフルオロ又はクロロである。
【００８８】
「ヒドロキシ」は、基−ＯＨを指す。
【００８９】
「ヘテロアリール」は、環内の炭素原子が１から１０個であり、且つ酸素、窒素、及び硫黄からなる群から選択されたヘテロ原子が１から４個である、芳香族基を指す。そのようなヘテロアリール基は、単環（例えばピリジニル又はフリル）又は多重縮合環（例えばインドリジニル又はベンゾチエニル）を有することができ、この縮合環は、芳香族であってもなくてもよく、及び／又はヘテロ原子を含有することができ、但し結合点は、芳香族ヘテロアリール基の原子を介するものとする。好ましいヘテロアリールには、ピリジニル、ピロリル、インドリル、チオフェニル及びフラニルが含まれる。
【００９０】
「置換ヘテロアリール」は、置換アリールに関して定義された置換基と同じ群の置換基から選択された、１から３個の置換基で置換されたヘテロアリール基を指す。
【００９１】
「ヘテロアリールオキシ」は、基−Ｏ−ヘテロアリールを指し、「置換ヘテロアリールオキシ」は、基−Ｏ−置換ヘテロアリールを指す。
【００９２】
「ヘテロ環」又は「ヘテロ環式」又は「ヘテロシクロアルキル」又は「ヘテロシクリル」は、炭素原子が１から１０個の単環又は多重縮合環と、窒素、硫黄、又は酸素からなる群から選択された１から４個のヘテロ原子とを有する飽和又は不飽和基を指し、この縮合環系において、１つ又は複数の環を、シクロアルキル、アリール、又はヘテロアリールにすることができ、但し結合点は、ヘテロ環を介するものとする。
【００９３】
「置換ヘテロ環」又は「置換ヘテロシクロアルキル」又は「置換ヘテロシクリル」は、置換シクロアルキルに関して定義されたものと同じ置換基１から３個で置換された、ヘテロシクリル基を指す。
【００９４】
ヘテロシクリル及びヘテロアリールの例には、アゼチジン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン、イソインドール、インドール、ジヒドロインドール、インダゾール、プリン、キノリジン、イソキノリン、キノリン、フタラジン、ナフチルピリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、プテリジン、カルバゾール、カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、フェナントロリン、イソチアゾール、フェナジン、イソキサゾール、フェノキサジン、フェノチアジン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドリン、フタルイミド、１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン、４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン、チアゾール、チアゾリジン、トロフェン、ベンゾ［ｂ］チオフェン、モルホリニル、チオモルホリニル（チアモルホリニルとも呼ぶ）、ピペリジニル、ピロリジン、テトラヒドロフラニルなどが含まれるが、これらに限定するものではない。
【００９５】
「チオール」は、基−ＳＨを指す
【００９６】
「チオアルキル」又は「アルキルチオエーテル」又は「チオアルコキシ」は、基−Ｓ−アルキルを指す。
【００９７】
「置換チオアルキル」又は「置換アルキルチオエーテル」又は「置換チオアルコキシ」は、基−Ｓ−置換アルキルを指す。
【００９８】
「チオアリール」は、基−Ｓ−アリールを指し、アリールは、上記定義した通りである。
【００９９】
「置換チオアリール」は、基−Ｓ−置換アリールを指し、置換アリールは、上記定義した通りである。
【０１００】
「チオヘテロアリール」は、基−Ｓ−ヘテロアリールを指し、ヘテロアリールは、上記定義した通りである。
【０１０１】
「置換チオヘテロアリール」は、基−Ｓ−置換ヘテロアリールを指し、置換チオヘテロアリールは、上記定義した通りである。
【０１０２】
「チオヘテロ環」は、基−Ｓ−ヘテロ環を指し、「置換チオヘテロ環」は、基−Ｓ−置換ヘテロ環を指し、ヘテロ環及び置換ヘテロ環は、上記定義した通りである。
【０１０３】
「ヘテロシクリルオキシ」は、基ヘテロシクリル−Ｏ−を指し、「置換ヘテロシクリル−Ｏ−」は、基置換ヘテロシクリル−Ｏ−を指し、ヘテロシクリル及び置換ヘテロシクリルは、上記定義した通りである。
【０１０４】
「チオシクロアルキル」は、基−Ｓ−シクロアルキルを指し、「置換チオシクロアルキル」は、基−Ｓ−置換シクロアルキルを指し、シクロアルキル及び置換シクロアルキルは、上記定義した通りである。
【０１０５】
「加水分解性エステル」は、生体内で加水分解して親酸を生成する基を指す。そのような基の例には、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルコキシ、置換シクロアルコキシ、アリールオキシ、及び置換アリールオキシが含まれる。好ましい加水分解性エステルは、アルコキシである。
【０１０６】
「加水分解性ポリマーエステル」は、生体内で加水分解して親酸を生成する生体適合性ポリマーを指す。好ましい加水分解性ポリマーエステルは、ＰＥＧである。
【０１０７】
「化合物」及び「活性化合物」という用語は、本発明のコンジュゲートのＶＬＡ−４拮抗薬部分、又は、ポリマーに結合する前に存在するＶＬＡ−４拮抗薬を指すのに使用する。
【０１０８】
「リンカー」、「結合基」、又は「１から４０個の原子のリンカー」という用語は、（１）ポリマーと活性化合物とを共有結合し、及び／又は（２）ポリマー部分を含むポリマー、オリゴマー、及び／又はモノマー部分を互いに共有結合する、１つ又は複数の基を指し、後者の非限定的な例には、ポリマー−リンカー−ポリマー、オリゴマー−リンカー−オリゴマー、モノマー−リンカー−モノマー、オリゴマー−リンカー−オリゴマー−リンカーなどが含まれる。任意の特定のコンジュゲートの中で、ポリマー、オリゴマー、及び／又はポリマー部分のモノマー部分を一緒に接続するリンカー並びにポリマー部分を活性化合物に結合するリンカーは、同じでも異なってもよい（即ち、同じか又は異なる化学構造を有してよい）。
【０１０９】
ポリマー部分の、ポリアルキレンオキシド部分のようなポリマー、オリゴマー、及び／又はモノマー部分を互いに共有結合するリンカーを、「分枝状アームハブ」又は「分枝状アームハブ分子」とも呼ぶ。分枝状アームハブは、ここに３つ以上のポリマー、オリゴマー、及び／又はモノマー部分を共有結合させる分子であり、活性化合物との結合のために３価又はより高い価数のポリマー部分を提供する。そのようなハブ分子の非限定的な例は、グリセロール（１，２，３−プロパントリオール）、ペンタエリトリトール、リシン、１，２，４−ベンゼントリオール、グルコース（そのピラノース形態で）、エチレンジアミン四酢酸、アミノ酸、３−又は４−アミノサリチル酸、１，３−ジアミノ−２−ヒドロキシプロパン、グルコサミン、及びシアル酸である。
【０１１０】
代表的な官能基結合、即ちその１つ又は複数を有することができる結合基は、アミド（−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−）、エーテル（−Ｏ−）、チオエーテル（−Ｓ−）、カルバメート（−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ３−）、チオカルバメート（−ＯＣ（Ｓ）ＮＲ３−）、尿素（−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−）、チオ尿素（−ＮＲ３Ｃ（Ｓ）ＮＲ３−）、アミノ基（−ＮＲ３−）、カルボニル基（−Ｃ（Ｏ）−）、アルコキシ基（−Ｏ−アルキレン−）などである。リンカーは、その原子の内容が、均一でも不均一でもよい（例えば、炭素原子のみ含有するリンカー、或いは、炭素原子を含有すると共に１個又は複数のヘテロ原子がリンカー上に存在するリンカー）。好ましくはリンカーは、１から２５個の炭素原子及び酸素、ＮＲ３、硫黄、−Ｓ（Ｏ）−、及び−Ｓ（Ｏ）２−であってＲ３が水素、アルキル、又は置換アルキルであるものから選択された０から１５個のヘテロ原子とを含有する。リンカーは、キラル又はアキラル、直鎖状、分枝状、又は環状であってもよい。
【０１１１】
リンカー内の官能基のリンケージ又は結合の間に介在するため、リンカーは、アルキル、置換アルキル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、置換ヘテロ環、及びこれらの組合せから選択されたスペーサーを含むがこれらに限定することのないスペーサー基をさらに含有することができる。スペーサーは、その原子の内容が均一でも不均一でもよい（例えば、炭素原子のみ含有するスペーサー、或いは、炭素原子を含有すると共に１個又は複数のヘテロ原子がスペーサー上に存在するスペーサー）。好ましくはスペーサーは、１から２５個の炭素原子と、酸素、ＮＲ３、硫黄、−Ｓ（Ｏ）−、及び−Ｓ（Ｏ）２−であってＲ３が上記定義した通りであるものから選択された０から１５個のヘテロ原子とを含有する。スペーサーは、キラル又はアキラル、直鎖状、分枝状、又は環状であってもよい。
【０１１２】
スペーサーの非限定的な例は、直鎖状又は分枝状のアルキレン鎖、フェニレン、ビフェニレンなどの環であり、これらすべては、活性化合物と結合を形成することが可能な１個又は複数の官能基及び１個又は複数のポリアルキレンオキシド部分とを持つことが可能なものである。多官能性リンカー−スペーサー基の１つの特定の例は、Ｃ４アルキレン鎖上で置換された２個のアミノ基を介して活性化合物のいずれかと２つのポリマー部分とを結合することができるリシンである。その他の非限定的な例には、結合形成にそれぞれ利用可能な２個及び３個の官能基を有するｐ−アミノ安息香酸及び３，５−ジアミノ安息香酸が含まれる。そのようなその他の多官能性結合とスペーサー基を合わせたものは、当業者なら容易に考えることができる。
【０１１３】
「ポリマー」及び「ポリマー部分」という用語は、式ＩＩの複数のＶＬＡ−４拮抗薬に結合することが可能な、生体適合性であり水溶性であり実質的に非免疫原性であるポリマーを指す。ポリマーは、使用される分子量及び投薬量で毒性がないことにより測定されるように、非イオン性及び生体適合性であることが好ましい。これらの用語は、上記にて論じたように、３つ以上のポリマーが分枝状アームハブ分子に接続している分子も包含する。これらの用語はさらに、ポリマー、オリゴマー、及び／又はそのモノマー部分が１つ又は複数のリンカーによって接続される分子を包含する。
【０１１４】
適切なポリマーの例には、ポリオキシアルキレンポリマー、例えばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリアクリルアミド（ＰＡＡｍ）、ポリジメチルアクリルアミド（ＰＤＡＡｍ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、デキストラン、ポリ（Ｌ−グルタミン酸）（ＰＧＡ）、スチレン無水マレイン酸（ＳＭＡ）、ポリ−Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）、ポリジビニルエーテル無水マレイン酸（ＤＩＶＥＭＡ）などが含まれるが、これらに限定するものではない（Ｋａｍｅｄａ，Ｙ．他、Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  ２５：３２５９〜３２６６、２００４；Ｔｈａｎｏｕ，Ｍ．他、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌ  Ｄｒｕｇｓ  ４（６）：７０１〜７０９、２００３；Ｖｅｒｏｎｅｓｅ，Ｆ．Ｍ．他、ＩＩ  Ｆａｒｍａｃｏ  ５４：４９７〜５１６、１９９９）。
【０１１５】
好ましいポリマーは、ポリオキシアルキレンである。「ポリオキシアルキレン」とは、１つ又は複数の追加のポリアルキレンオキシドと任意選択で共有結合する少なくとも１つのポリアルキレンオキシド部分を含む高分子を意味し、これらのポリアルキレンオキシドは、同じか又は異なったものである。非限定的な例には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、ポリイソプロピレングリコール（ＰＩＰＧ）、ＰＥＧ−ＰＥＧ、ＰＥＧ−ＰＰＧ、ＰＰＧ−ＰＩＰＧなどが含まれる。ポリオキシアルキレンの定義の範囲内には、ポリアルキレンオキシド部分が任意選択でリンカーによって互いに接続している高分子も含まれる。例示的な例は、ＰＥＧ−リンカー−ＰＥＧ、ＰＥＧ−リンカー−ＰＩＰＧなどである。より具体的な例には、市販のポリ［ジ（エチレングリコール）アジペート、ポリ［ジ（エチレングリコール）フタレートジオールなどが含まれる。その他の例は、オキシアルキレン、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、及びポリオキシエチレン化ポリオール単位のブロックコポリマーである。
【０１１６】
ポリマーは、その末端の少なくとも１つが、ポリマーと式ＩＩの非ポリマー置換化合物とを共有結合するための従来の化学的技法を使用して、任意選択でリンカーを介して式ＩＩの非ポリマー置換化合物に共有結合している。
【０１１７】
リンカーを用いる場合、リンカーは、通常であれば式ＩＩの非ポリマー置換化合物に共有結合するポリマー末端の少なくとも１つに、共有結合される。そのような結合をもたらす反応の化学的性質は、当技術分野で周知である。そのような反応の化学的性質は、リンカー上の相補的官能基、式ＩＩの非ポリマー置換化合物、及びポリマーの使用を含む。好ましくは、リンカー上の相補的官能基は、結合のためにポリマー上で利用可能であり又は結合のためにポリマー上に導入することができる官能基に対して選択される。やはり、そのような相補的官能基は、当技術分野で周知である。例えば、適切な周知の活性化剤の存在下での、リンカー又はポリマーいずれかのカルボン酸とポリマー又はリンカーの第１級又は第２級アミンとの反応は、ポリマー部分とリンカーとを共有結合するアミド結合の形成をもたらし；リンカー又はポリマー基いずれかのアミン基とポリマー又はリンカーのハロゲン化スルホニルとの反応は、ポリマー部分とリンカーとを共有結合するスルホンアミド結合の形成をもたらし；リンカー又はポリマーいずれかのアルコール又はフェノール基とポリマー又はリンカーのアルキル又はハロゲン化アリールとの反応は、ポリマー基とリンカーとを共有結合するエーテル結合の形成をもたらす。
【０１１８】
当然ながら、適切な置換基が式ＩＩの非ポリマー置換化合物中に見出される場合、ポリマーと式ＩＩの非ポリマー置換化合物とは直接結合することができるので、任意選択のリンカーを必要としなくてよいことが理解される。
【０１１９】
下記の表Ｉは、非常に数多くの相補的反応基と、それらの間の反応によって形成された、結果的に得られる結合とを例示する。当業者なら、これらの結合をもたらすのに適切な溶媒及び反応条件を選択することができる。
【０１２０】
【表１】
2008505927.tif 000042
【０１２１】
好ましいリンカーには、例として、以下の−Ｏ−、−ＮＲ３−、−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ３−、−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−、−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−、−アルキレン−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−アルキレン−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−、−アルキレン−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ３−、−アルキレン−ＮＲ３−、−アルキレン−Ｏ−、−アルキレン−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）−、−アルキレン−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−、−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキレン−、−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−アルキレン−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ３−アルキレン−、−ＮＲ３−アルキレン−、−Ｏ−アルキレン−、−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）−アルキレン−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−アルキレン−、−アルキレン−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキレン−、−アルキレン−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−アルキレン−、−アルキレン−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ３−アルキレン−、−アルキレン−ＮＲ３−アルキレン−、−アルキレン−Ｏ−アルキレン−、−アルキレン−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）−アルキレン−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−アルキレン−、−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキレンオキシ−、−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−アルキレンオキシ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ３−アルキレンオキシ−、−ＮＲ３−アルキレンオキシ−、−Ｏ−アルキレンオキシ−、−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）−アルキレンオキシ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−アルキレンオキシ−、−アルキレンオキシ−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキレンオキシ−であって、Ｒ３が上記定義した通りであるもの、及び下式の基が含まれ、
【化４１】
2008505927.tif 000043
但し上式の
【化４２】
2008505927.tif 000044
は、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、及び置換ヘテロ環からなる群から選択され、並びにＤ及びＥは、独立に、結合、−Ｏ−、ＣＯ、−ＮＲ３−、−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ３−、−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−、−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−、−アルキレン−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−アルキレン−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−、−アルキレン−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ３−、−アルキレン−ＮＲ３−、−アルキレン−Ｏ−、−アルキレン−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）−、−アルキレン−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−、−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキレン−、−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−アルキレン−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ３−アルキレン−、−ＮＲ３−アルキレン−、−Ｏ−アルキレン−、−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）−アルキレン−、−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキレンオキシ−、−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−アルキレンオキシ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ３−アルキレンオキシ−、−ＮＲ３−アルキレンオキシ−、−Ｏ−アルキレンオキシ−、−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）−アルキレンオキシ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−アルキレンオキシ−、−アルキレンオキシ−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキレンオキシ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−アルキレン−、−アルキレン−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキレン−、−アルキレン−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−アルキレン−、−アルキレン−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ３−アルキレン−、−アルキレン−ＮＲ３−アルキレン−、アルキレン−Ｏ−アルキレン、−アルキレン−ＮＲ３Ｃ（Ｏ）−アルキレン、及び−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３−アルキレン−であって、Ｒ３が上記定義した通りのものからなる群から選択されるものである。
【０１２２】
上記リンカー中の好ましいアルキレン基には、Ｃ１〜Ｃ１５アルキレン基、より好ましくはＣ１〜Ｃ６アルキレン基、最も好ましくはＣ１〜Ｃ３アルキレン基が含まれる。好ましいヘテロ環基には、ピペラジニル、ピペリジニル、ホモピペラジニル、ホモピペリジニル、ピロリジニル、及びイミダゾリジニルが含まれる。好ましいアルコキシ基は、−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）１〜１５である。
【０１２３】
「オキシアルキレン」という用語は、−ＯＣＨ２ＣＨＲｄ−（式中、Ｒｄはアルキルである）を指す。重合オキシアルキレンは、ポリオキシアルキレン、ポリアルキレンオキシド、又はポリアルキレングリコールと呼ばれ、その非限定的な例には、ＰＥＧ、ポリプロピレングリコール、ポリブチレングリコール、ポリイソプロピレングリコールなどが含まれる。
【０１２４】
そのようなポリマーは、好ましくは上述のアルキル、アリール、置換アルキル、置換アリール、及び分枝状アームハブ分子から選択される置換基で、任意選択でモノキャップされる。そのようなポリマーには、当技術分野でＪｅｆｆａｍｉｎｅｓ（登録商標）として知られるジアミノキャップ型ポリオキシアルキレンポリマーが含まれる。一般に、Ｊｅｆｆａｍｉｎｅｓ（登録商標）（Ｈｕｎｔｓｍａｎ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、Ｔｈｅ  Ｗｏｏｄｌａｎｄｓ、Ｔｅｘａｓから入手可能）は、ポリエーテル主鎖の末端に結合した第１級アミノ基を含有する。したがってこれらは、「ポリエーテルアミン」である。ポリエーテル主鎖は、プロピレンオキシド（ＰＯ）、エチレンオキシド（ＥＯ）、又は混合型ＥＯ／ＰＯ、或いはその他の主鎖セグメントのいずれかをベースにしている。Ｊｅｆｆａｍｉｎｅｓ（登録商標）は、モノアミン、ジアミン、及びトリアミンでよく、最高で約５，０００に及ぶ様々な分子量で入手可能である。
【０１２５】
さらに、重合オキシアルキレンは、市販のポリ［ジ（エチレングリコール）アジペート、ポリ［ジ（エチレングリコール）フタレートジオールなどの、１つ又は複数の非オキシアルキレン単位を、任意選択で含有することができる。オキシアルキレン、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、及びポリオキシエチレン化ポリオール単位のブロックコポリマーも含まれる。
【０１２６】
ＰＥＧなどのポリオキシアルキレンは、通常、水溶性の蝋状固体として提供される。一般に、ポリマーの分子量が増加するにつれ、その粘度及び凝固点も高くなる。商用の製剤は、通常、成分ポリマーの「平均分子量」によって特徴付けられる。
【０１２７】
典型的な場合、本発明のコンジュゲートの単一又は複数のポリマー部分から生ずるポリマーの総量の平均分子量は、約１００から１００，０００；好ましくは約２０，０００から６０，０００；より好ましくは約３０，０００から約５０，０００の間である。このタイプのポリマーは多分散系になることが、当業者には明らかである。多分散性は、ポリマー分子が、例え同じタイプのものであっても種々のサイズ（直鎖状又はマルチアームポリマーに関しては、鎖長）になるという事実を指す。したがって平均分子量は、平均化する方法に左右されることになる。多分散性の指標、即ち分子量のばらつきに関する一般的尺度は、重量平均分子量と数平均分子量との比である。これは、１バッチ分のポリマーの個々の分子量の分布を示す。数平均分子量は、ポリマーの分子量を決定する１つの方法である。数平均分子量は、個々のポリマーの分子量を普通に平均したものである。これは、ｎ個のポリマー分子の分子量を測定し、その分子量を合計し、ｎで割ることによって決定される。ポリマーの数平均分子量は、浸透圧測定、末端滴定、及び束一性によって決定することができる。
【０１２８】
重量平均分子量は、光散乱、小角中性子散乱（ＳＡＮＳ）、Ｘ線散乱、及び沈降速度によって決定することができる。重量平均と数平均との比を、多分散性インデックスと呼ぶ。分散性を持たないポリマーの理論上のサンプルは、多分散性インデックスが１になる。本発明に関する多分散性インデックスの好ましい範囲は、約１．１０から約１．０５である。約１．０５から、商用として実現可能な合成の上限、即ちこれまでのところ約１．０２までの範囲がより好ましい。
【０１２９】
ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）やポリアクリルアミド（ＰＡＡｍ）、ポリジメチルアクリルアミド（ＰＤＡＡｍ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、デキストラン、ポリ（Ｌ−グルタミン酸）（ＰＧＡ）、スチレン無水マレイン酸（ＳＭＡ）、ポリ−Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）、ポリジビニルエーテル無水マレイン酸（ＤＩＶＥＭＡ）などのその他の適切なポリマーが、当技術分野で周知であり、約１００から１００，０００、好ましくは約１０，０００から８０，０００、より好ましくは約２０，０００から約７０，０００の分子量を有する。
【０１３０】
本発明で使用することができるＰＥＧの非限定的な例には、下記の物質が含まれ、
【表２】
2008505927.tif 000045
但しｐｐ及びアルキレンは、本明細書で定義される通りであり、Ｒｂｂは、好ましくはアルキル、置換アルキル、アリール、及び置換アリールからなる群から選択される。
【０１３１】
様々なＰＥＧの例を、以下に示す。
【化４３】
2008505927.tif 000046
【化４４】
2008505927.tif 000047
【化４５】
2008505927.tif 000048
【０１３２】
分枝状ＰＥＧ：
ＮＯＦから入手可能なＰＥＧ試薬（２０ｋＤａ  ４アーム）
【化４６】
2008505927.tif 000049
Ｎｅｋｔａｒから入手可能なＰＥＧ試薬（４０ｋＤａ  ８アーム）
【化４７】
2008505927.tif 000050
【０１３３】
デンドリマーＰＥＧ：
ＮＯＦから入手可能なＰＥＧ試薬（４０ｋＤａ  ４アーム）
【化４８】
2008505927.tif 000051
ＮＯＦから入手可能なＰＥＧ試薬（４０ｋＤａ  ３アーム）
【化４９】
2008505927.tif 000052
ＳｕｎＢｉｏから入手可能なＰＥＧ試薬（４０及び２０ｋＤａ）
【化５０】
2008505927.tif 000053
ソルビトール６アーム系列で利用可能なより低い分子量には、１０、１５、及び２０ｋＤａが含まれる。アルコール以外の誘導体は、６アームアミンを含む。
例えば、１０ｋＤａの６アームアミン（ｃａｔ＃  Ｐ６ＡＭ−１０）を４０ｋＤａの６アームヘキサアミンに変換し（Ｎｅｋｔａｒｓ  ５ｋＤａ  ＢｏｃＮＨ−ＰＥＧ−ＮＨＳエステルで）、次いで小分子に結合することができる。
【０１３４】
これらのＰＥＧポリマーは、適切なリンカー、例えばカルバメート（ウレタン）又は尿素を介してＰＥＧジアミンで鎖を伸長することにより、さらに修飾することができる。
【化５１】
2008505927.tif 000054
【化５２】
2008505927.tif 000055
【０１３５】
「医薬品として許容される塩」は、本発明の化合物の生物学的効果及び性質を維持し、且つ生物学的に又はその他の理由により望ましくないものではない塩を指す。多くの場合、本発明の化合物は、アミノ及び／又はカルボキシル基又はこれと同様の基を存在させることによって、酸及び／又は塩基を形成することが可能である。
【０１３６】
医薬品として許容される塩基付加塩は、無機及び有機塩基から調製することができる。無機塩基から得られる塩には、単なる例として、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、及びマグネシウム塩が含まれる。有機塩基から得られる塩には、第１級、第２級、及び第３級アミンの塩、例えばアルキルアミン、ジアルキルアミン、トリアルキルアミン、置換アルキルアミン、ジ（置換アルキル）アミン、トリ（置換アルキル）アミン、アルケニルアミン、ジアルケニルアミン、トリアルケニルアミン、置換アルケニルアミン、ジ（置換アルケニル）アミン、トリ（置換アルケニル）アミン、シクロアルキルアミン、ジ（シクロアルキル）アミン、トリ（シクロアルキル）アミン、置換シクロアルキルアミン、二置換シクロアルキルアミン、三置換シクロアルキルアミン、シクロアルケニルアミン、ジ（シクロアルケニル）アミン、トリ（シクロアルケニル）アミン、置換シクロアルケニルアミン、二置換シクロアルケニルアミン、三置換シクロアルケニルアミン、アリールアミン、ジアリールアミン、トリアリールアミン、ヘテロアリールアミン、ジヘテロアリールアミン、トリヘテロアリールアミン、ヘテロ環式アミン、ジヘテロ環式アミン、トリヘテロ環式アミン、混合型ジ−及びトリ−アミンなどの塩であって、アミン上の置換基の少なくとも２つが異なっており、且つアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロ環などからなる群から選択される塩が含まれるが、これらに限定するものではない。２個又は３個の置換基が、アミノ窒素と一緒になってヘテロ環又はヘテロアリール基を形成するアミンも含まれる。
【０１３７】
適切なアミンの例には、単なる例として、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリ（イソプロピル）アミン、トリ（ｎ−プロピル）アミン、エタノールアミン、２−ジメチルアミノエタノール、トロメタミン、リシン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、Ｎ−アルキルグルカミン、テオブロミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、モルホリン、Ｎ−エチルピペリジンなどが含まれる。また、その他のカルボン酸誘導体、例えばカルボキサミド、低級アルキルカルボキサミド、ジアルキルカルボキサミドを含めたカルボン酸アミドも、本発明の実施に有用であることを理解すべきである。
【０１３８】
医薬品として許容される酸付加塩は、無機及び有機塩から調製することができる。無機酸から得られる塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などが含まれる。有機酸から得られる塩には、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエン−スルホン酸、サリチル酸などが含まれる。
【０１３９】
「医薬品として許容されるカチオン」という用語は、医薬品として許容される塩のカチオンを指す。
【０１４０】
本明細書で定義されるすべての置換された基において、置換基を、これらに対する別の置換基で定義することにより得られたポリマーは（例えば置換アリールは、それ自体が置換アリール基などで置換された置換基として置換アリール基を有する）、本明細書に含まれないものとすることが理解される。そのような場合、そのような置換基の最大数は、３である。即ち、上記定義のそれぞれは、例えば置換アリール基が、−置換アリール−（置換アリール）−（置換アリール）に限定されるという制約に拘束される。
【０１４１】
同様に、上記定義は、容認できない置換パターン（例えばメチルが、５個のフルオロ基又は１個のヒドロキシル基αで置換されて、エテニル系又はアセチレン系不飽和になる）を含むものではないことが理解される。そのような容認できない置換パターンは、当業者に周知である。
【０１４２】
化合物の調製
本発明のコンジュゲートは、下記の一般的方法及び手順を使用して、容易に入手可能な出発材料から調製することができる。典型的な又は好ましいプロセス条件（即ち反応温度、時間、反応物質のモル比、溶媒、圧力など）が与えられる場合、他に特に指定しない限りその他のプロセス条件も使用できることが理解されよう。最適な反応条件は、使用される特定の反応物質又は溶媒に応じて変えることができるが、そのような条件は、日常的な最適化手順によって当業者が決定することができる。
【０１４３】
さらに、当業者に明らかにされるように、従来の保護基は、ある官能基が望ましくない反応を受けないようにするために必要である可能性がある。様々な官能基に適切な保護基、並びに特定の官能基を保護し且つ脱保護するのに適切な条件は、当技術分野で周知である。例えば、非常に数多くの保護基が、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ及びＧ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第２版、Ｗｉｌｅｙ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９１と、そこに引用される参考文献に記載されている。
【０１４４】
さらに、本発明の化合物は、典型的には１つ又は複数のキラル中心を含有することになる。したがって、望む場合には、そのような化合物を調製することができ、又は純粋な立体異性体として、即ち個々の鏡像異性体又はジアステレオマーとして、或いは立体異性体に富む混合物として単離することができる。そのようなすべての立体異性体（及び濃度が高められた混合物）は、他に特に指示しない限り本発明の範囲内に含まれる。純粋な立体異性体（又は濃度が高められた混合物）は、例えば光学活性な出発材料又は当技術分野で周知の立体選択的試薬を使用して、調製することができる。或いは、そのような化合物のラセミ混合物は、例えばキラルカラムクロマトグラフィー、キラル分割剤などを使用して分離することができる。
【０１４５】
本発明のコンジュゲートは、２から約２０個の式ＩＩの置換基を含有する、ポリマー部分／任意選択の分枝状アームハブ分子を含むことが好ましい。
【化５３】
2008505927.tif 000056
【０１４６】
具体的には、ポリマー分子は、共有結合を介してＡｒ１置換基、Ｊ置換基、Ａｒ２置換基、及び／又はＴ置換基に結合することができ、ポリマー部分は直接結合しており、又はリンカーを介して結合している。またポリマー部分は、任意選択で分枝状アームハブ分子に結合することができる。
【０１４７】
その最も単純な形態では、本発明の化合物は、両末端に結合した式ＩＩの２個の置換基を有する単一のポリマー部分を含んだ２価構造である。カルボニル結合基によって式ＩＩの化合物に結合されたＰＥＧから得られるポリマー部分であって、式ＩＩの化合物が下式で表されるものを使用する代表的なケースでは、
【化５４】
2008505927.tif 000057
得られるコンジュゲートを、下式により表すことができる
【化５５】
2008505927.tif 000058
（式中、ｐは、約１００から１３６０の整数であることが好ましい）。
【０１４８】
４価の形態の一例では、コンジュゲートが、４つのポリマー部分を含む。代表的なケースでは、各ポリマー部分の一方の端部が共通の分枝状アームハブ分子に結合しているのに対し、他方の端部は、任意選択でリンカーを介して式ＩＩの化合物に結合している。さらに且つ同様に例示の目的で、各ポリマー部分をＰＥＧから得、また共通の分枝状アームハブ分子はペンタエリトリトールである。この例示では、ＰＥＧ部分の他方の端部が、カルボニル結合基を介して式ＩＩの化合物に結合しており、この式ＩＩの化合物は、下式によって表され、
【化５６】
2008505927.tif 000059
得られるコンジュゲートは、下式によって表すことができる
【化５７】
2008505927.tif 000060
（式中、４つのｐの総計は、好ましくは約１００から１３６０までの整数である）。
【０１４９】
式Ｉのコンジュゲートを形成するための合成プロトコルは、ポリマー部分の官能基と結合基との反応又は式ＩＩの化合物との直接的な反応を必要とし、それによって、ポリマー部分と式ＩＩの化合物とが共有結合する。
【０１５０】
初めに、式ＩＩｂ〜ＩＩｈの非ＰＥＧ置換化合物は、当技術分野で周知であり、参照により共にその全体が本明細書に援用される米国特許第６４８９３００号及び第６４３６９０４号を含むがこれらに限定することのない、いくつかの発行された特許に例示されている。式ＩＩの化合物の非ポリマー変種には、相補的官能基、或いはＡｒ１、Ｒ、Ａｒ２、及びＴ部分の１つ又は複数の相補的官能基に誘導体化可能な基を有するものを含む。例示の目的で、Ａｒ２部分（例えばチロシン）に相補的官能基（−ＯＨ）を有する化合物を、ポリマー部分を分子に直接又はリンカーを介して付加するための適切な開始点として、以下に列挙する。
【０１５１】
そのような化合物は、まず、下記のスキーム１に例示されるように、ヘテロ環式アミノ酸１を適切なアリールスルホニル塩化物にまず最初に結合することによって、調製することができる
【化５８】
2008505927.tif 000061
（式中、Ｒ、Ａｒ１、Ｘ、ｍ、及びｎは、上記定義した通りである）。
【０１５２】
特に、上記スキーム１では、ジクロロメタンなどの適切な不活性希釈液中で、ヘテロ環式アミノ酸１を、化学量論的に等量の又は過剰な量（好ましくは約１．１から約２等量）のアリールスルホニルハロゲン化物２と組み合わせる。一般に、反応は、この反応が実質的に終了するまで、即ち典型的には１から２４時間以内で終了するまで、約−７０℃から約４０℃に及ぶ温度で実施する。反応は、この反応中に発生する酸を一掃するのに適した塩基の存在下で、実施することが好ましい。適切な塩基には、例として、トリエチルアミンやジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチル−モルホリンなどの第３級アミンが含まれる。或いは反応は、ｐＨ７．４に平衡させた水酸化ナトリウムの水溶液やリン酸水溶液などのアルカリ水溶液を使用して、Ｓｃｈｏｔｔｅｎ−Ｂａｕｍａｎｎ型条件下で実施することができる。得られる生成物３は、クロマトグラフィー、濾過、蒸発、結晶化などの従来の方法によって回収することができ、或いは精製及び／又は単離なしで次のステップで使用することができる。
【０１５３】
上記反応で用いられるヘテロ環式アミノ酸１は、既知の化合物であり、又は従来の合成手順によって既知の化合物から調製することができる化合物である。この反応で使用するのに適切なアミノ酸の例には、Ｌ−プロリン、トランス−４−ヒドロキシル−Ｌ−プロリン、シス−４−ヒドロキシル−Ｌ−プロリン、トランス−３−フェニル−Ｌ−プロリン、シス−３−フェニル−Ｌ−プロリン、Ｌ−（２−メチル）プロリン、Ｌ−ピペコリン酸、Ｌ−アゼチジン−２−カルボン酸、Ｌ−チアゾリジン−４−カルボン酸、Ｌ−（５，５−ジメチル）チアゾリジン−４−カルボン酸、Ｌ−チアモルホリン−３−カルボン酸が含まれるが、これらに限定するものではない。望むなら、メチルエステルやエチルエステル、ｔ−ブチルエステルなど、アミノ酸１に対応するカルボン酸エステルを、アリールスルホニル塩化物との上記反応に用いることができる。次いで後続の、従来の試薬及び条件を使用したエステル基からカルボン酸への加水分解、即ちメタノール／水などの不活性希釈液中でのアルカリ金属水酸化物による処理は、Ｎ−スルホニルアミノ酸３を提供する。
【０１５４】
同様に、上記反応で用いられるアリールスルホニル塩化物２は、既知の化合物であり、又は従来の合成手順によって既知の化合物から調製することができる化合物である。そのような化合物は、三塩化リン及び五塩化リンを使用して、典型的には対応するスルホン酸から、即ち式Ａｒ１ＳＯ３Ｈの化合物（但しＡｒ１は上記定義した通りである）から調製される。この反応は、一般に、スルホン酸と約２から５モル当量の三塩化リン及び五塩化リンとを、そのまま又はジクロロメタンなどの不活性溶媒中で、約０℃から約８０℃の範囲の温度で約１から約４８時間接触させ、それによって塩化スルホニルをもたらすことによって実施される。或いは、アリールスルホニル塩化物２は、対応するチオール成分から、即ちＡｒ１−ＳＨの化合物（Ａｒ１は、本明細書で定義した通りである）から、このチオールを従来の反応条件下で塩素（Ｃｌ２）及び水で処理することにより、調製することができる。
【０１５５】
或いは、上記反応で用いたアリールスルホニル塩化物２は、Ｃｌ−ＳＯ３Ｈを使用した置換ベンゼン又はヘテロシクロアルキル基のクロロスルホニル化によって、調製することができる。
【０１５６】
本発明での使用に適したアリールスルホニル塩化物の例には、塩化ベンゼンスルホニル、塩化１−ナフタレンスルホニル、塩化２−ナフタレンスルホニル、塩化ｐ−トルエンスルホニル、塩化ｏ−トルエンスルホニル、塩化４−アセトアミドベンゼンスルホニル、塩化４−ｔｅｒｔ−ブチルベンゼンスルホニル、塩化４−ブロモベンゼンスルホニル、塩化２−カルボキシベンゼンスルホニル、塩化４−シアノベンゼンスルホニル、塩化３，４−ジクロロベンゼンスルホニル、塩化３，５−ジクロロベンゼンスルホニル、塩化３，４−ジメトキシベンゼンスルホニル、塩化３，５−ジトリフルオロメチルベンゼンスルホニル、塩化４−フルオロベンゼンスルホニル、塩化４−メトキシベンゼンスルホニル、塩化２−メトキシカルボニルベンゼンスルホニル、塩化４−メチルアミド−ベンゼンスルホニル、塩化４−ニトロベンゼンスルホニル、塩化４−トリフルオロメチル−ベンゼンスルホニル、塩化４−トリフルオロメトキシベンゼンスルホニル、塩化２，４，６−トリメチルベンゼンスルホニル、塩化２−チオフェンスルホニル、塩化５−クロロ−２−チオフェンスルホニル、塩化２，５−ジクロロ−チオフェンスルホニル、塩化２−チアゾールスルホニル、塩化２−メチル−４−チアゾールスルホニル、塩化１−メチル−４−イミダゾールスルホニル、塩化１−メチル−４−ピラゾールスルホニル、塩化５−クロロ−１，３−ジメチル−４−ピラゾールスルホニル、塩化３−ピリジンスルホニル、塩化２−ピリミジンスルホニルなどが含まれるが、これらに限定するものではない。望む場合には、フッ化スルホニル、臭化スルホニル、又はスルホン酸無水物を、上記反応で塩化スルホニルの代わりに使用して、Ｎ−スルホニルアミノ酸３を形成することができる。
【０１５７】
次いでＮ−アリールスルホニルアミノ酸３を、下記のスキーム２に示すように、市販のチロシンエステルに結合する
【化５９】
2008505927.tif 000062
（式中、Ｒ、Ａｒ１、Ｘ、ｍ、及びｎは、上記定義した通りであり、Ｒａは、水素又はアルキルであるが、好ましくはｔ−ブチルなどのアルキル基であり、Ｚは、アリール環状の任意選択の置換を表し、ｏは、０、１、又は２である）。
【０１５８】
このカップリング反応は、典型的にはカルボジイミドやＢＯＰ試薬（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロホルホネート）などの周知のカップリング試薬を使用して実施する。適切なカルボジイミドには、例として、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣ）などが含まれる。望む場合には、例えばＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、３４（４８）、７８８５（１９９３）に記載されているものも含めたカルボジイミドカップリング試薬のポリマー支持形態を使用してもよい。さらに、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドや１−ヒドロキシベンゾトリアゾールなど、周知のカップリング促進剤を使用して、カップリング反応を促進させることができる。
【０１５９】
このカップリング反応は、典型的にはＮ−スルホニルアミド３と、約１から約２当量のカップリング剤及び少なくとも１当量の、好ましくは約１から約１．２当量のチロシン誘導体４とを、ジクロロメタンやクロロホルム、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドなどの不活性希釈液中で接触させることによって実施される。一般にこの反応は、約０℃から約３７℃に及ぶ温度で、約１２から約２４時間実施される。反応が終了したら、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などを含めた従来の方法によって、化合物５を回収する。
【０１６０】
或いは、Ｎ−スルホニルアミノ酸３を、酸ハロゲン化物に変換し、次いでこれを化合物４に結合して、化合物５を得ることができる。酸ハロゲン化物は、化合物３と、塩化チオニルや三塩化リン、三臭化リン、五塩化リンなどの無機酸ハロゲン化物とを、又は好ましくは塩化オキサリルとを、従来の条件下で接触させることによって、調製することができる。一般にこの反応は、約１から５モル当量の無機酸ハロゲン化物又は塩化オキサリルを、そのまま又はジクロロメタンや四塩化炭素などの不活性溶媒中で使用して、約０℃から約８０℃の範囲の温度で約１から４８時間実施する。ＤＭＦなどの触媒を、この反応で使用してもよい。
【０１６１】
次いでＮ−スルホニルアミノ酸３の酸ハロゲン化物と、少なくとも１当量の、好ましくは約１．１から約１．５当量のチロシン誘導体４とを、ジクロロメタンなどの不活性希釈液中で、約−７０℃から約４０℃に及ぶ温度で約１から約２４時間接触させる。この反応は、反応中に発生する酸を一掃するのに適切な塩基の存在下で実施することが好ましい。適切な塩基には、例として、トリエチルアミンやジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリノなどの第３級アミンが含まれる。或いは反応は、水酸化ナトリウムなどのアルカリ水溶液を使用して、Ｓｃｈｏｔｔｅｎ−Ｂａｕｍｅｎ型条件下で実施することができる。反応が終了したら、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などを含めた従来の方法によって、化合物５を回収する。
【０１６２】
或いは化合物５は、下記のスキーム３に示されるように、まずジアミノ酸誘導体を形成し、次いでこのジアミノ酸をアリールスルホニルハロゲン化物２にカップリングすることによって、調製することができる
【化６０】
2008505927.tif 000063
（式中、Ｒ、Ｒａ、Ａｒ１、Ｘ、Ｚ、ｍ、ｎ、及びｏは、上記定義した通りである）。
【０１６３】
ジアミノ酸６は、既に記述したように、従来のアミノ酸カップリング技法、及びカルボジイミドやＢＯＰ試薬などの試薬を使用して、アミノ酸１をアミノ酸４にカップリングすることにより容易に調製することができる。次いでジアミノ酸６を、塩化スルホニル２を使用して且つ上述の合成手順を使用して、スルホン化することができ、それによって化合物７が得られる。
【０１６４】
上記反応に用いられるチロシン誘導体４は、既知の化合物であり、又は従来の合成手順により既知の化合物から調製することができる化合物である。例えば、上記反応で使用するのに適したチロシン誘導体４には、Ｌ−チロシンメチルエステル、Ｌ−チロシンｔ−ブチルエステル、Ｌ−３，５−ジヨードチロシンメチルエステル、Ｌ−３−ヨードチロシンメチルエステル、β−（４−ヒドロキシ−ナフチル−１−イル）−Ｌ−アラニンメチルエステル、β−（６−ヒドロキシ−ナフチル−２−イル）−Ｌ−アラニンメチルエステルなどが含まれるが、これらの限定するものではない。望む場合には、当然ながら、上述の化合物のその他のエステル又はアミドを用いてもよい。
【０１６５】
Ｎ−アリールスルホニル−ヘテロ環式アミノ酸−チロシン誘導体７は、下記のスキーム４〜１４に示されるカップリング反応によりＡｒ２基でポリマー部分を結合する開始点として使用することができるが、これらのカップリング反応は、ポリマー部分をどのように導入することができるかを実証する際の、単なる例示にすぎない。これらのスキームでは、単なる例示を目的に、ＰＥＧをポリマー部分として使用する。その他の適切なポリマーをＰＥＧの代わりに使用することができ、また当業者なら、そのようなその他のポリマーを組み込むために下記の反応スキームを容易に修正できることが理解される。場合によっては、ＰＥＧ部分をフェノキシ基に直接導入することができ、その他の場合には、ＰＥＧ部分を、リンカー部分を介した結合によって導入することができる。
【０１６６】
具体的には、スキーム４は、下記の内容を示す
【化６１】
2008505927.tif 000064
（式中、Ａｒ１、Ｒ、Ｒａ、ｍ、ｎ、ｏ、Ｘ、及びＺは上記定義した通りであり、Ｐｇは、好ましくはＲａカルボキシル保護基よりも直交的に除去可能なＣＢＺやＢｏｃなどのアミン保護基であり、ｐは、約１００から１３６０までの整数である）。
【０１６７】
具体的には、スキーム４では、上述のように調製した化合物７と、少なくとも１当量の、好ましくは過剰なクロロギ酸４−ニトロフェニル８とを、塩化メチレンやクロロホルムなどの適切な溶媒中で、好ましくは不活性雰囲気中で結合させる。反応は、約−４０℃から約０℃の温度で、発生した酸を一掃するのに適切な塩基の存在下で実施することが好ましい。適切な塩基には、例として、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンなどが含まれる。中間体である混合カーボネート（図示せず）の形成後、少なくともほぼ当モル量のＮ−Ｐｇピペラジン８ａを、反応溶液に添加する。この反応は、室温で約１から２４時間続けることができる。反応が終了したら、化合物９を、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などを含めた従来の方法によって回収し、或いは精製及び／又は単離を行わずに次の反応に使用する。
【０１６８】
保護基の従来通りの除去では、遊離ピペラジン誘導体１０が得られる。除去は、用いられたブロック基に応じて実現される。例えば、トリフルオロメチルカルボニル保護基は、炭酸カリウムの水溶液を介して容易に除去される。さらに、様々な官能基に適切な保護基、並びに保護及び脱保護の特定の官能基に適切な条件は、当技術分野で周知である。例えば、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ及びＧ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第２版、Ｗｉｌｅｙ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９１及びこれに引用される参考文献を参照されたい。
【０１６９】
次いで遊離ピペラジン誘導体１０と、α，ω−ジクロロホルメートポリオキシエチレン、化合物１１とを、塩化メチレンやクロロホルムなどの適切な不活性希釈液中で、好ましくは不活性雰囲気中で混ぜ合わせる。典型的な場合、クロロホルメート成分に対して少なくとも２当量、好ましくは約２．５から１０当量の化合物１０を、化合物１１と組み合わせて用いる。反応は、任意選択で、触媒量のＤＭＡＰと、この反応中に発生する酸を一掃するための塩基との存在下で実施する。反応が実質的に終了するまで、即ち典型的には４から２４時間以内で終了するまで、周囲条件下で反応を継続させる。Ｒａがアルキルである場合、その後に行われるエステル誘導体の加水分解により、遊離カルボキシル基又はその塩が得られる。得られるダイマー１２を、中和や蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などの従来の手順により回収する。
【０１７０】
α，ω−ジクロロホルメートポリオキシエチレン、化合物１１は、塩化メチレンやクロロホルムなどの適切な不活性溶媒中での、過剰なホスゲンとの反応によって、即ち典型的には少なくとも２から約２０当量のホスゲンとの反応によって、市販のポリオキシエチレンから容易に調製される。この反応は、反応が実質的に終了するまで、即ち典型的には約２から２４時間以内に終了するまで、周囲条件の不活性雰囲気中で実施することが好ましい。その後、得られたα，ω−ジクロロホルメートポリオキシエチレン、化合物１１を、中和や蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などの従来の手順によって回収する。
【０１７１】
ピペラジン誘導体２８が形成されるまでの、この反応スキームの特定の例を、下記のスキーム５に示す。
【化６２】
2008505927.tif 000065
【０１７２】
具体的には、市販の３−ピリジンスルホン酸２１を、当技術分野で周知の条件を使用してＰＯＣｌ３／ＰＣｌ５に接触させることにより、従来の条件下で、対応する塩化スルホニル２２へと変換する。塩化スルホニル２２と、市販のＳ−５，５−ジメチルチアゾリジン−４−カルボン酸２３との結合は、過剰な塩化スルホニルを使用して、好ましくはリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）の存在下、従来の条件下で実現させる。この反応は、好ましくは反応が実質的に終了するまで、即ち典型的には０．５から５時間以内に終了するまで、約−１０から２０℃の温度で実施する。得られた生成物２４は、クロマトグラフィーや濾過、蒸発、結晶化などの従来の方法によって回収することができ、或いは、精製及び／又は単離を行うことなく次のステップで使用することができる。
【０１７３】
次にＮ−ピジリニルスルホニル−５，５−ジメチルチアゾリジン−４−カルボン酸、化合物２３を、従来のアミノ酸カップリング条件を使用してｔ−ブチルチロシンにカップリングする。具体的には、このカップリング反応は、カップリング反応を促進させるために、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣ）、１−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、Ｎ−メチルモルホリンなどの周知のカップリング試薬を使用して実施する。
【０１７４】
このカップリング反応は、典型的にはＮ−スルホニルアミノ酸２３と、約１から約２当量のカップリング試薬、及び少なくとも１当量の、好ましくは約１から約１．２当量のチロシンｔ−ブチルエステルとを、ジクロロメタンやクロロホルム、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドなどの不活性希釈液中で接触させることにより実施する。一般にこの反応は、約０℃から約２２℃に及ぶ温度で、約１２から約２４時間実施する。反応が終了したら、化合物２４を、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などを含めた従来の方法により回収し、或いは、精製及び／又は単離を行うことなく次のステップで用いる。
【０１７５】
これとは別に、モノ−Ｎ−Ｂｏｃ−ピペラジン２５を、上述の手法によりホスゲンと反応させることによって、対応する塩化カルバミル２６に変換する。反応が終了したら、化合物２６を、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などを含めた従来の方法により回収し、或いは、精製及び／又は単離を行うことなく次のステップに用いる。
【０１７６】
化合物２７を得るための化合物２４と化合物２６とのカップリングは、ジクロロメタンなどの不活性希釈液中、触媒量のＤＭＡＰと共に、好ましくは酸の生成を一掃する塩基の存在下、従来の条件下で進行させる。この反応は、約−２０から約２２℃の温度で約２から約２４時間実行する。反応が終了したら、化合物２７を、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などを含めた従来の方法により回収し、或いは、精製及び／又は単離を行うことなく次のステップで用いる。
【０１７７】
アミノＢｏｃ保護基とｔ−ブチルエステルとの両方の除去は、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などを含めた従来の方法により回収することができる化合物２８を得るために、トリフルオロ酢酸の存在下で進める。
【０１７８】
下記のスキーム６は、カップリングの後、カルボキシル保護基の場合とは異なる状態でピペラジン保護基を除去することができるように、フェニルアラニン化合物で見られるカルボキシル保護基に対してアミン基の１つで直交的に保護されるピペラジン化合物の調製を示す。そのような直交的保護は、得られる化合物の後続の反応において、カルボキシル保護基が望ましくない副反応を受けないようにする必要がある場合に求められる。
【化６３】
2008505927.tif 000066
【０１７９】
具体的には、スキーム６では、化合物２４を上述の手法で調製する。Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−ピペラジン２５と、過剰なトリフルオロ酢酸無水物とを、ジクロロメタンなどの適切な溶媒中で反応を実施している間に発生する酸を一掃するために、トリエチルアミンなどの適切なアミンの存在下で接触させることによって、Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−Ｎ’−トリフルオロメチル−カルボニルピペラジン２９に従来通り変換する。一般に、この反応は、約−２０℃から約２２℃に及ぶ温度で、約１から約２４時間実施する。反応が終了したら、化合物２９を、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などを含めた従来の方法により回収することができ、或いは、精製及び／又は単離を行うことなく次のステップで用いる。
【０１８０】
次に、Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−Ｎ’−トリフルオロメチル−カルボニルピペラジン２９のｔ−Ｂｏｃ保護基の除去を、周囲条件下、塩化メチレンやＥｔＯＡｃ、ＥｔＯ２などの不活性溶媒を通してバブリングした気状ＨＣｌを使用して、従来の条件下で進行させ、それによって、Ｎ’−トリフルオロメチルカルボニルピペラジン３０の塩酸塩を得る。一般にこの反応は、約−２０℃から約２２℃に及ぶ温度で、約０．５から約４時間実施する。反応が終了したら、化合物３０を、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などを含めた従来の方法により回収することができ、或いは、また好ましくは、精製及び／又は単離を行うことなく次のステップで用いる。
【０１８１】
Ｎ’−トリフルオロメチルカルボニルピペラジン３０から塩化Ｎ−カルバミル誘導体３１への変換は、上述のようにホスゲンに接触させることによって、従来通り進行させる。反応が終了したら、化合物３１を、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などを含めた従来の方法により回収することができ、或いは、また好ましくは、精製及び／又は単離を行うことなく次のステップで用いる。
【０１８２】
化合物３１及び２４を、上述と同様の条件下で結合することにより、ピペラジン基のアミノ部分並びにフェニルアラニン基のカルボキシル基で直交的に保護される化合物３２が得られる。トリフルオロメチルカルボニルアミノ保護基の選択的除去を、炭酸カリウムの水溶液を使用した従来の条件下で進めて、化合物３３を得る。
【０１８３】
下記のスキーム７は、式ＩＩの化合物を共有結合する前の、ポリマー部分の修飾を示す。単なる例示のため、ポリマー部分は、ペンタエリトリトールに結合した４価のＰＥＧである。スキーム７は、ポリマー部分の長さを従来の化学的性質により容易に調節して、最適な長さを得ることができることを示している
【化６４】
2008505927.tif 000067
（式中、４個のｒ及びｓの総計は、好ましくは約１００から１３６０の整数である）。
【０１８４】
具体的には、市販のテトラペグ化ペンタエリトリトール、化合物３４（例えば、全分子量が約２０ｋＤであり、且つカタログＮｏ．Ｐ４０Ｈ−２０としてＳｕｎ  Ｂｉｏ、Ｏｒｉｎｄａ、ＣＡ、ＵＳＡから入手可能な化合物）と、典型的には少なくとも４から約４０当量の過剰なホスゲンとを、塩化メチレンやクロロホルムなどの適切な不活性溶媒中で反応させる。反応は、実質的にこの反応が終了するまで、即ち典型的には約２から２４時間以内に終了するまで、周囲条件の不活性雰囲気中で実施することが好ましい。その後、得られたテトラクロロホルメートポリオキシエチレン、化合物３５を、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などの従来の手順により回収し、或いは精製及び／又は単離を行うことなく次の反応で使用する。
【０１８５】
次いでテトラクロロホルメート、化合物３５と、過剰な（典型的にはクロロホルメート成分当たり２．５から１０当量）α，ω−ジアミノポリオキシエチレン化合物（例えば、分子量が約６ｋＤであり、且つカタログＮｏ．Ｐ２ＡＭ−６としてＳｕｎ  Ｂｉｏから入手可能な化合物）とを、ジクロロメタンなどの不活性希釈液中、任意選択で触媒量のＤＭＡＰ及び酸の発生を一掃する塩基の存在下、従来の条件下で混ぜ合わせる。反応は、典型的には約−２０から約２２℃の温度で約２から約２４時間、又は反応が実質的に終了するまで実施する。終了したら、化合物３６を、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などを含めた従来の方法によって回収し、或いは、精製及び／又は単離を行うことなく次の反応で用いる。
【０１８６】
Ｓｕｎ  Ｂｉｏからの特定のテトラペグ化ペンタエリトリトール、及びＳｕｎ  Ｂｉｏからのジアミンを用いる場合、得られる生成物、化合物３６は、約４５ｋＤの分子量を有する。α，ω−ジアミノポリオキシエチレンは、商標Ｊｅｆｆａｍｉｎｅｓ（登録商標）で市販されており、典型的には最高で１０，０００又はそれ以上の分子量を有する。
【０１８７】
モノアミノ型α，ω−ジアミノポリオキシエチレンは、架橋並びに環化を最小限に抑えるために、スキーム７で使用できることが理解される。反応が終了したら、モノアミノ保護基を、当技術分野で周知の従来の手段によって除去する。
【０１８８】
スキーム８は、ポリマー置換が得られるように誘導体化するための、第２の経路を示す。このスキームでは、ピペラジン基のアミノ部分を、α，ω−ジカルボン酸ポリマーのｉｎ  ｓｉｔｕ形成型活性化カルボキシル基に対する相補的官能基として用いる。この場合も単なる例示のため、α，ω−ジカルボン酸ポリマーは、α，ωジカルボン酸ポリオキシエチレンである。この実施形態では、ジカルボキシル−ＰＥＧ化合物を、式ＨＯＯＣＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＣＨ２ＣＯＯＨによって表し、但しｐは上記定義した通りであり、ＰＥＧに対して得られたリンカーは、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−によって表す。
【化６５】
2008505927.tif 000068
【０１８９】
具体的には、スキーム８において、上述のように調製された過剰な化合物３３（例えば、カルボキシル基当たり２．５から１０当量の化合物３３）を、ジカルボキシル−ＰＥＧ化合物に添加し、これを、トリエチルアミンなどの適切なアミンの存在下、少なくとも２当量の、好ましくは過剰なＨＡＴＵ［Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート］に接触させることによって、そのまま活性化エステルに変換する（図示せず）。ジカルボキシル−ＰＥＧ化合物と化合物３３とのカップリングは、約０から約２２℃の温度で約２から約２４時間進行させる。反応が終了したら、化合物３９を、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などを含めた従来の方法によって回収し、或いは、精製及び／又は単離を行うことなく次の反応で用いる。
【０１９０】
過剰なギ酸によるｔ−ブチルカルボキシル保護基の従来通りの除去によって、本発明の式ＩＡの化合物が得られる。
【０１９１】
スキーム９は、化合物Ａに対するポリマー付加が得られるように誘導体化するための、さらに別の経路を示す。このスキームでは、ピペラジン基のアミノ部分を、α，ω−ジオールを含むポリマーのｉｎ  ｓｉｔｕ形成型クロロホルメートに対する相補的官能基として用いる。この場合も単なる例示のため、α，ω−ジオールを含むポリマーは、式ＨＯＣＨ２ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＯＨによって表されるＰＥＧであり、但しｐは上記定義した通りであり、得られるリンカーは、−Ｃ（Ｏ）−によって表される。
【化６６】
2008505927.tif 000069
【０１９２】
具体的には、スキーム９において、市販のジヒドロキシＰＥＧ  ４２のヒドロキシル基が、ジクロロメタン中、トルエン（Ｆｌｕｋａ）中のホスゲンと反応することにより、対応するクロロホルメート３７に変換される。生成物を、蒸発によって単離し、さらに精製を行うことなく次のステップで用いる。
【０１９３】
過剰な化合物３３（例えば、クロロホルメート成分当たり２．５から１０当量の化合物３３）と、上述のように調製されたジクロロホルメート、化合物４３とを、酸の発生を一掃するトリメチルアミンなどの適切な塩基の存在下で接触させる。ジクロロホルメート−ＰＥＧ化合物と、化合物３３とのカップリングは、約０から約２２℃の温度で約２から約４時間進行させることが好ましい。反応が終了したら、化合物４４を、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などを含めた従来の方法によって回収し、或いは、精製及び／又は単離を行うことなく次の反応で用いる。
【０１９４】
過剰なギ酸によるｔ−ブチルカルボキシル保護基の従来通りの除去によって、本発明の式Ｉの化合物が得られる。
【０１９５】
スキーム８及び９に示される反応は、ジカルボン酸（スキーム８）又はジクロロホルメート（スキーム９）の端部で同時に実施され、それによって、ホモマーである２価又はそれ以上の多価コンジュゲートのワンポット合成がもたらされる。しかしこれらの反応は、保護基の使用によって逐次実施できることが理解される。
【０１９６】
ジカルボン酸の場合、カルボキシル基の１つを保護することができるが、その他は、ピペラジンのアミノ基とのカップリングを受ける。終了したら、保護基を除去し、次いで同じか又は好ましくは異なる化合物Ａと反応させて、ヘテロ２価構造を得ることができる。さらに、ヘテロ３価、ヘテロ４価、及びそれ以上のヘテロ多価構造を、カルボキシル官能基の直交的保護基を使用することによって調製することができる。ジオールの場合（スキーム９）、ヒドロキシル基の１つを保護することができるが、その他のはホスゲンとの反応を受けてクロロホルメートを形成し、これが、後でピペラジンのアミノ基への付加に供される。終了したら、保護基を除去し、次いでホスゲンと反応させ、引き続き、同じか又は好ましくは異なる化合物Ａと反応させて、ヘテロ２価構造を得ることができる。さらに、ヘテロ３価、ヘテロ４価、及びそれ以上のヘテロ多価構造を、アルコール官能基の直交的保護基を使用することによって調製することができる。
【０１９７】
スキーム１０は、後で行われるポリマー付加に有用な、塩化Ｎ−カルバミル及びイソシアネート中間体の合成を示す。このスキームでは、ピペラジン基のアミノ部分を誘導体化して、その後のポリマー付加に供する。
【化６７】
2008505927.tif 000070
【０１９８】
具体的には、スキーム１０では、化合物３３のピペラジン基のアミノ部分から、対応する塩化Ｎ−カルバミル、化合物３３ａへの変換を、反応中に発生する酸を一掃するための炭酸水素ナトリウムなどの適切な塩基の存在下で、過剰なホスゲンに接触させることにより進行させる。反応が終了したら、化合物３３ａを、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などの従来の方法によって回収することができ、或いは、また好ましくは、精製及び／又は単離を行うことなく次（スキーム１１に示す）で用いられる。
【０１９９】
或いは、化合物３３のピペラジン基のアミノ部分を、反応中に発生する酸を一掃するピリジン（溶媒として働くこともできる）などの塩基の存在下で、少なくとも１当量の、好ましくは過剰な塩化４−ニトロベンゾイルと反応させることにより、対応するアミド、化合物４５に変換することができる。反応は、約０から約２２℃の温度で、約１から約２４時間進行させることが好ましい。反応が終了したら、化合物４５を、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などを含めた従来の方法によって回収することができ、或いは、精製及び／又は単離を行うことなく次のステップで用いる。
【０２００】
後続の、フェニル基のパラ−ニトロ置換基の還元は、化合物４６にアミン置換基をもたらす。還元は、メタノールなどの適切な希釈液中、典型的には高圧の水素雰囲気中でパラジウム／炭素を使用して、従来通り実施する。反応は、典型的には約２４から約７２時間以内にもたらされる実質的な終了まで、進行させる。反応中、追加の触媒を望みに応じて添加して、反応を終了させる。反応が終了したら、化合物４６を、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などを含めた従来の方法によって回収し、或いは、精製及び／又は単離を行うことなく次のステップで用いる。
【０２０１】
化合物４６のフェニル基のパラ−アミノ置換基から、対応するイソシアネート４７への変換は、発生した酸を一掃する炭酸水素ナトリウムなどの適切な塩基の存在下、過剰なホスゲンと反応させることによってもたらされる。反応は、約０℃から約２２℃で、典型的には約０．５から約５時間以内にもたらされる、実質的な終了まで進行させる。反応が終了したら、化合物４７を、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などを含めた従来の方法によって回収し、或いは、精製及び／又は単離を行うことなく次のステップで用いる。
【０２０２】
スキーム１１は、ポリマー置換が得られるように誘導体化するための、他の経路をさらに示す。このスキームでは、化合物３３ａのピペラジン基の塩化カルバモイル部分を相補的官能基として用いて、カルバメート又は尿素結合を形成する。単なる例示のため、用いられるポリマーはＰＥＧのα，ω−ジオール又はジアミンであり、式ＨＱＣＨ２ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＱＨ（但しＱはＮＨ又はＯである）によって表される。
【化６８】
2008505927.tif 000071
【０２０３】
具体的には、スキーム１１では、過剰な（各ＨＱ部分当たり２．５から１０当量の塩化カルバミル）化合物３３ａと、適切なジヒドロキシ−又はジアミノ−ＰＥＧ化合物とを、好ましくはトリエチルアミン及び／又は触媒量の４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）などの適切な塩基の存在下、ジクロロメタンなどの不活性溶媒中で接触させる。反応は、典型的には約４から約４８時間以内にもたらされる実質的な終了まで進行させる。反応が終了したら、化合物４８を、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などを含めた従来の方法によって回収し、或いは、精製及び／又は単離を行うことなく次のステップで用いる。
【０２０４】
Ｑがヒドロキシル基である場合、生成物は、−Ｃ（Ｏ）−によって表されるリンカーを介してＰＥＧ基をＶＬＡ−４拮抗薬に共有結合させる、カルバメート官能基を含有する。Ｑがアミノ基である場合、生成物は、−Ｃ（Ｏ）−によって表されるリンカーを介してＰＥＧ基をＶＬＡ−４拮抗薬に共有結合させる、尿素官能基を含有する。過剰なギ酸によるｔ−ブチルカルボキシル基の従来通りの除去によって、本発明の化合物が得られる。
【０２０５】
スキーム１２は、ポリマー置換が得られるように誘導体化するための、さらに別の経路を示す。このスキームでは、化合物４７のイソシアネートを相補的官能基として用いて、カルバメート又は尿素結合を形成する。単なる例示のため、用いられるポリマーはＰＥＧのα，ω−ジオール又はジアミンであり、式ＨＱＣＨ２ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐＱＨ（但しＱはＮＨ又はＯである）によって表される。
【化６９】
2008505927.tif 000072
【０２０６】
具体的には、スキーム１２では、過剰なイソシアネート４７（例えば、各ＨＱ部分当たり２．５から１０当量のイソシアネート４７）を、ジクロロメタンやトルエンなどの適切な不活性希釈液中で、適切なジヒドロキシ−又はジアミノ−ＰＥＧ化合物に接触させる。反応は、典型的には約１から約２４時間以内にもたらされる実質的な終了まで、約０℃から約１０５℃の温度で維持することが好ましい。反応が終了したら、化合物４９を、中和、蒸発、抽出、沈殿、クロマトグラフィー、濾過などを含めた従来の方法によって回収し、或いは、精製及び／又は単離を行うことなく次のステップで用いる。
【０２０７】
Ｑがヒドロキシル基である場合、得られる生成物は、−Ｃ（Ｏ）−結合基を介してＰＥＧ基をＶＬＡ−４拮抗薬に共有結合させる、カルバメート官能基を含有する。Ｑがアミノ基である場合、得られる生成物は、−Ｃ（Ｏ）−結合基を介してＰＥＧ基をＶＬＡ−４拮抗薬に共有結合させる、尿素官能基を含有する。
【０２０８】
過剰なギ酸によるｔ−ブチルカルボキシル保護基の従来通りの除去によって、本発明の式Ｉのモノ−ＰＥＧ化合物４７が得られる。
【０２０９】
スキーム１１及び１２に示される反応は、ポリマー（ダイマー形成用）の両端で同時に実施され、それによって、ホモマーである２価又はそれ以上の多価コンジュゲートのワンポット合成がもたらされる。しかしこれらの反応は、保護基の使用によって逐次実施できることが理解される。
【０２１０】
ジアミンの場合、アミン基の１つを保護することができるが、その他は、化合物３３ａの塩化カルバミル又は化合物４７のイソシアネートとのカップリングを受ける。終了したら、保護基を除去し、次いで同じか又は好ましくは異なる化合物Ａと反応させて、ヘテロ２価構造を得ることができる。さらに、ヘテロ３価、ヘテロ４価、及びそれ以上のヘテロ多価構造を、アミン官能基の１つ又は複数の直交的保護基を使用することによって調製することができる。
【０２１１】
ジオールの場合、ヒドロキシル基の１つを保護することができるが、その他のは、化合物３３ａの塩化カルバミル又は化合物４７のイソシアネートとのカップリングを受ける。終了したら、保護基を除去し、次いで同じか又は好ましくは異なる化合物Ａと反応させて、ヘテロ２価構造を得ることができる。さらに、ヘテロ３価、ヘテロ４価、及びそれ以上のヘテロ多価構造を、ヒドロキシル官能基の１つ又は複数の直交的保護基を使用することによって調製することができる。
【０２１２】
上記スキームでは、分子のその他の部分に位置付けられているアミン部分を上述のように用いて、ポリマー基と分子とを共有結合することができる。例えば、ヘテロ環式アミノ酸のＡｒ１上、又はＡｒ２上に位置付けられたアミンは、ＰＥＧ置換が得られるように同じように誘導体化することができる。アミン部分は、合成中にこれらの置換基に含めることができ、必要に応じて適切に保護することができる。或いは、アミン前駆体を用いることができる。例えば、スキーム１０に示すように、ニトロ基の還元によって、対応するアミンが得られる。同様に、シアノ基の還元は、Ｈ２Ｎ−ＣＨ２−基を提供する。ニトロ及びシアノで置換されたＡｒ１基は、アミノ置換されたＡｒ１基のように、米国特許第６４８９３００号に示されている。
【０２１３】
さらに、アミノ置換を、ヘテロ環式アミノ酸官能基に組み込み、次いで誘導体化して、ポリマー部分を含むようにすることができる。例えばヘテロ環式アミノ酸官能基は、米国特許第６４８９３００号に示される２−カルボキシルピペラジンでよい。或いは、市販の３−又は４−ヒドロキシプロリンを、対応するケトンに酸化し、次いでシアノ水素化ホウ素ナトリウムの存在下、アンモニアで還元的にアミノ化して、対応するアミン部分を形成することができる。さらに、４−シアノプロリンを還元して、アミンを介して誘導体化することができる式−ＣＨ２ＮＨ２の置換アルキル基を得ることができる。
【０２１４】
さらに、アミン部分をＡｒ２官能基に組み込むことができる。アミン部分は、Ａｒ２に結合されるニトロ又はシアノ基などのアミン前駆体として存在することが好ましい。
【０２１５】
上記スキームでは、カルボキシル又はヒドロキシル基が式ＩＩ（いかなるポリマー置換基も存在しない）のＶＬＡ−拮抗薬上にあるように、且つアミン基がポリマー部分の一部になるように、アミンと相補的官能基との反応を逆にすることができる。そのような場合、好ましくはポリマー部分で終結するアミノ基を、ホスゲン及びＥｔ３Ｎを使用してイソシアネートに変換し、ヒドロキシル基と反応させて、下記のスキーム１３に示すようにカルバメートを形成することができる。
【化７０】
2008505927.tif 000073
【０２１６】
具体的には、米国特許第６４８９３００号に記載されている過剰な化合物５０を上述のように接触させて、対応するカルバメート５１を得ることができる。好ましくは、各イソシアネート部分当たり約２．５から１０当量の化合物５０を用いる。次いで上述のように、脱保護によって、対応する二酸が得られる（図示せず）。
【０２１７】
或いは、スキーム１３では、ヒドロキシル官能基をホスゲンと反応させて、クロロカルボニルオキシ誘導体を提供し、これをジアミン化合物のアミン基と反応さることにより、カルバメートが得られる。
【０２１８】
例えばＡｒ１部分のカルボキシル官能基は、スキーム８で既に述べたようにジ−又はそれ以上のアミノポリマーと反応させることによって、対応するアミドに変換することができる。或いは、下記のスキーム１４は、Ａｒ１部分の対応するシアノ基からアミン官能基を生成するための１つの方法を示す。
【化７１】
2008505927.tif 000074
【０２１９】
具体的には、スキーム１４では、米国特許第６４８９３００号に記載されている既知の化合物５２は、従来の条件下で保護されたｔ−ブチルであり、それによってシアノ化合物５３が得られ、これを従来の条件下で水素化することにより、アミノメチル化合物５４が得られる。化合物５４のアミノメチル基は、上述のスキームの１つ又はいずれかにより、そこにポリマー部分を結合することが可能になる。
【０２２０】
下記のスキーム１５は、上述のスキームのいずれか１つによりそこにポリマー部分を結合するのに有用な、３−アミノピロリジニル誘導体の代替の合成を示す。
【化７２】
2008505927.tif 000075
【０２２１】
従来の方法を使用して、市販のシス−４−ヒドロキシＬ−プロリン５７を、還流下でメタノール系塩化水素で数時間処理し、その後、蒸発させ、そのようにして生成された塩酸メチルエステルを、ピリジンに溶かした過剰な塩化トシルで、室温で２日間処理することにより、生成物５８が得られる。化合物５８は、弱酸水溶液を使用してピリジンを中和し、ＥｔＯＡｃなどの有機溶媒で生成物を抽出することによって単離する。生成物５８は、結晶化、フラッシュクロマトグラフィーで精製することができ、或いはより好ましくは、精製を行うことなく後続のステップで使用することができる。
【０２２２】
５８と、ＤＭＦに溶かした過剰なアジ化ナトリウムの飽和溶液とを、室温で１５日間反応させることにより、化合物５９が得られる。化合物５９は、水との反応混合物の希釈によって、次いでＥｔＯＡｃなどの有機溶媒での抽出によって、単離される。生成物５９は、結晶化、フラッシュクロマトグラフィーで精製することができ、或いはより好ましくは、精製を行うことなく後続のステップで使用することができる。
【０２２３】
化合物５９は、水とメタノールとの混合物中、水酸化ナトリウムで処理し、それによってメチルエステルを加水分解し、カルボン酸を生成し、これを、酸化及びＥｔＯＡｃなどの有機溶媒での抽出によって単離する。カルボン酸は、Ｌ−チロシンｔ−ブチルエステル［Ｈ−Ｔｙｒ（Ｈ）−ＯｔＢｕ］、ＥＤＡＣ、ＨＯＢｔ、及びＥｔ３ＮでＤＭＦ中で処理し、ジペプチドを生成し、これを、水による希釈及びＥｔＯＡｃなどの有機溶媒での抽出によって単離する。ジペプチドは、ＤＣＭ中、ＣｌＣＯＮＭｅ２、Ｅｔ３Ｎ、及びＤＭＡＰで、２４時間還流下で処理し、カルバメート６０を生成し、これを、ＥｔＯＡｃで希釈し、弱酸及び弱塩基の水溶液で逐次洗浄し、次いで蒸発させる。化合物６０を、フラッシュクロマトグラフィーで厳密に精製する。
【０２２４】
最後に化合物６１は、Ｐｄ／Ｃ触媒を含んだ６０のメタノール溶液を、水素雰囲気中で振盪させることによって調製する。生成物６１は、濾過及び蒸発による除去によって単離する。
【０２２５】
式ＩＩの化合物とポリマー（任意選択で分枝状アームハブ分子に結合される）とを結合するその他の方法は、当技術分野で周知である。
【０２２６】
式ＩＩの化合物を結合するのに適切なその他のポリマーには、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリアクリルアミド（ＰＡＡｍ）、ポリジメチルアクリルアミド（ＰＤＡＡｍ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、デキストラン、ポリ（Ｌ−グルタミン酸）（ＰＧＡ）、スチレンマレイン酸無水物（ＳＭＡ）、ポリ−Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）、ポリジビニルエーテルマレイン酸無水物（ＤＩＶＥＭＡ）が含まれるが、これらに限定するものではない。例として、ＰＶＰ、ＰＡＡｍ、及びＰＤＡＡｍは、ラジカル重合中にコモノマーを導入することによって、官能化することができる。ＰＶＡ及びデキストランは、それぞれ、結合に適切な第１級ヒドロキシル（ＯＨ）基を含有する。これらの生体ポリマーを合成し、またこれらを結合して生物学的材料にするための方法は、当技術分野で周知である（例えば、公開された米国特許出願第２００４００４３０３０号；米国特許第５１７７０５９号；米国特許第６７１６８２１号；米国特許第５８２４７０１号；米国特許第６６６４３３１号；米国特許第５８８０１３１号；Ｋａｍｅｄａ，Ｙ．他、Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  ２５：３２５９〜３２６６、２００４；Ｔｈａｎｏｕ，Ｍ．他、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌ  Ｄｒｕｇｓ  ４（６）：７０１〜７０９、２００３；Ｖｅｒｏｎｅｓｅ，Ｆ．Ｍ．他、ＩＩ  Ｆａｒｍａｃｏ  ５４：４９７〜５１６、１９９９（これらすべては、その全体が本明細書に援用される）参照）。
【０２２７】
医薬品製剤
医薬品として用いる場合、本発明のコンジュゲートは、通常、医薬品組成物の形で投与される。これらのコンジュゲートは、経口、直腸、経皮、皮下、静脈内、筋肉内、舌下、眼、或いは鼻又は経口吸入による投与を含めた吸入を含む、様々な経路によって投与することができる。好ましい投与経路には、皮下、静脈内、及び吸入が含まれる。そのような組成物は、医薬品の分野で周知の手法により調製され、少なくとも１種のコンジュゲートを含む。
【０２２８】
本発明は、本発明によるコンジュゲート、例えば式Ｉのコンジュゲートを、α４β７阻害剤である別の化合物と併せて含んだ医薬品組成物も提供する。そのような組成物は、医薬品として許容される担体又は賦形剤も含み、本明細書の他の部分で論じられるように投与することができる。
【０２２９】
本発明は、活性成分としての式Ｉのコンジュゲートの１種又は複数を、医薬品として許容される担体と共に含有する医薬品組成物も含む。本発明の組成物を作製する際、活性成分は通常、賦形剤と混合され、賦形剤により希釈され、又は滅菌注射液及び滅菌パッケージ粉末に有る担体に封入される。皮下投与では、単一の担体が、水、Ｎａ２ＨＰＯ４、ＮａＨ２ＰＯ４、及びＮａＣｌの滅菌溶液を、等張性があり生理的に許容されるｐＨをもたらす割合で含むことができ、これをＰＢＳ又はリン酸緩衝整理食塩液と呼ぶ。別の選択肢は、必要に応じて生理学的ｐＨに調節された、滅菌等張生理食塩液に溶かした化合物を投与することである。その他の選択肢は、当業者に知られており、吸収速度及び全曝露量に影響を及ぼすことができる混合溶媒系を含む。これらの選択肢は、グリセリン、ポリエチレングリコール４００、及び綿実油を含有する混合溶媒系を含む。浸透性の強化及び高浸透性を操作するのにすべて使用することができる、エタノール、Ｎ，Ｎ’−ジメチルアセトアミド、プロピレングリコール、及びベンジルアルコールの使用も可能である。
【０２３０】
製剤の調製では、その他の成分と合わせる設前に適切な粒径を得るために、活性化合物のミリングが必要である可能性がある。活性化合物画実質的に不溶性である場合、通常、２００メッシュ未満の粒径までミリングする。活性化合物が実質的に水溶性である場合、粒径は通常、製剤において実質的に均一な分布が得られるように、例えば、約４０メッシュになるように、ミリングによって調節する。
【０２３１】
適切な賦形剤のいくつかの例には、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アカシアガム、リン酸カルシウム、アルギネート、トラガカント、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶質セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水、シロップ、及びメチルセルロースが含まれる。製剤はさらに、タルクやステアリン酸マグネシウム、鉱油などの潤滑剤；湿潤剤；乳化及び懸濁剤；メチル−及びプロピルヒドロキシ−ベンゾエートなどの保存剤；甘味剤；及び着香剤を含むことができる。本発明の組成物は、当技術分野で知られる手順を用いて患者に投与した後に、活性成分の急速、持続、又は遅延放出が生ずるように配合することができる。
【０２３２】
皮下又は静脈内製剤による治療薬の投与は、医薬品産業で周知である。皮下又は静脈内製剤は、単に治療薬が可溶性の組成物であるだけではなく、ある特定の品質を持つべきである。例えば製剤は、活性成分全体の安定性を促進させるべきであり、また製剤の製造は、費用効果があるべきである。これらの要素すべてが、最終的には静脈内製剤の全体の成功率及び有用性を決定する。
【０２３３】
本発明の化合物の医薬品製剤に含めることができる、その他の補助的な添加物は、下記の通りである：溶媒：エタノール、グリセロール、プロピレングリコール；安定剤：ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）、クエン酸；抗菌保存剤：ベンジルアルコール、メチルパラベン、プロピルパラベン；緩衝剤：クエン酸／クエン酸ナトリウム、酒石酸水素カリウム、酒石酸水素ナトリウム、酢酸／酢酸ナトリウム、マレイン酸／マレイン酸ナトリウム、フタル酸水素ナトリウム、リン酸／リン酸二水素カリウム、リン酸／リン酸水素二ナトリウム；及び等張性調節剤：塩化ナトリウム、マンニトール、デキストロース。
【０２３４】
緩衝剤の存在は、水性ｐＨを約４から約８の範囲に、より好ましくは約４から約６の範囲に維持するのに必要である。緩衝系は、一般に、弱酸とその可溶性塩との混合物、例えばクエン酸ナトリウム／クエン酸であり；或いは、二塩基酸のモノカチオン又はジカチオンの塩、例えば酒石酸水素カリウム；酒石酸水素ナトリウム、リン酸／リン酸二水素カリウム、及びリン酸／リン酸水素二ナトリウムである。
【０２３５】
使用される緩衝系の量は、（１）所望のｐＨ、及び（２）薬物の量に左右される。一般に、使用される緩衝液の量は、ｐＨを４から８の範囲内に維持するために、製剤の緩衝液：アレンドロネートが０．５：１から５０：１のモル比であり（緩衝液のモル数は、緩衝成分、例えばクエン酸ナトリウムとクエン酸とを合わせたモル数と解釈する）、一般には緩衝液（合わせたもの）と存在する薬物とが１：１から１０：１のモル比であるものを使用する。
【０２３６】
本発明で有用な緩衝液は、組成物の水性ｐＨを４〜６に維持するのに十分な、クエン酸ナトリウムがｍｌ当たり５から５０ｍｇの範囲であり、クエン酸がｍｌ当たり１から１５ｍｇの範囲である、クエン酸ナトリウム／クエン酸である。
【０２３７】
緩衝剤は、ガラス容器又はゴム栓から浸出し或いは通常の水道水に存在する可能性のある、例えばＣａ、Ｍｇ、Ｆｅ、Ａｌ、Ｂａなどの溶解した金属イオンと共に、可溶性金属錯体を形成することによって薬物が沈殿するのを防止するために存在してもよい。この緩衝剤は、薬物と共に競合錯化剤として働く可能性があり、可溶性金属錯体を生成し、その結果、望ましくない微粒子が存在するようになる。
【０２３８】
さらに、等張度をヒトの血液と同じ値に調節するための薬剤の存在、例えば約１〜８ｍｇ／ｍｌの量の塩化ナトリウムは、吐気や下痢などの望ましくない副作用及びおそらくは関連する血液障害をもたらす静脈内製剤投与後の赤血球の膨潤又は収縮を回避するために、必要になる可能性がある。一般に、製剤の等張度はヒトの血液に一致し、２８２から２８８ｍＯｓｍ／ｋｇの範囲内であり、一般には２８５ｍＯｓｍ／ｋｇであり、これは、塩化ナトリウムの０．９％溶液に相当する浸透圧と同等である。
【０２３９】
静脈内製剤は、直接静脈内注射、静脈内ボーラスによって投与することができ、或いは、０．９％塩化ナトリウム注射液やその他の適合性ある輸液など、適切な輸液への添加による注入によって投与することができる。
【０２４０】
組成物は、単回剤形で配合することができ、各投薬量は、約５から約１００ｍｇ、より通常には約１０から約３０ｍｇの活性成分を含有する。「単回剤形」という用語は、ヒト被験体及びその他の哺乳類への単位分の投薬量として適切な、物理的に切り離された単位を指し、各単位は、適切な医薬品賦形剤と関連して所望の治療効果を発揮するように計算された、所定量の活性材料を含有する。
【０２４１】
コンジュゲートは、広い投薬範囲全体にわたり効果的であり、一般に医薬品として有効な量で投与される。しかし、実際に投与されるコンジュゲートの量は、治療すべき状態、選択された投与経路、投与される実際の化合物、年齢、体重、及び個々の患者の応答、患者の症状の重症度なども含めた関連ある状況に照らして、医師により決定されることが理解されよう。
【０２４２】
錠剤などの固体組成物の調製では、主要活性成分を医薬品賦形剤と混合して、本発明の化合物の均質な混合物を含有する固体予備配合組成物を形成する。これらの予備配合組成物が均質であるとする場合、活性成分は、この組成物が錠剤や丸薬、カプセルなどの等しく効果的な単位剤形に容易に細分できるように、組成物全体に均一に分散していることを意味する。次いでこの固体予備配合物を、例えば本発明の活性成分を０．１から約５００ｍｇ含有する上述のタイプの単位剤形に細分する。
【０２４３】
本発明の錠剤又は丸薬は、被覆することができ、又はその他の方法で配合して、長期間作用するという利点をもたらす剤形を提供することができる。例えば、錠剤又は丸薬は、内部投薬及び外部投薬成分を含むことができ、この後者の外部投薬成分は、前者の内部投薬成分を包み込む形をとる。２つの成分は、胃の中で崩壊しないように、且つ内部成分をそのまま十二指腸に通し又は放出を遅延させるように働く腸溶層によって、分離することができる。そのような腸溶層又はコーティングには、いくつかのポリマー酸や、ポリマー酸とシェラックやセチルアルコール、酢酸セルロースなどの材料との混合物を含めた材料など、様々な材料を使用することができる。
【０２４４】
本発明の新規な組成物を、経口的に又は注射によって投与するために組み込むことができる液体形態には、水溶液、適切なものとして着香シロップ、水性又は油性懸濁液、及び着香エマルジョンであって、綿実油やゴマ油、ココナツ油、又はピーナツ油などの食用油を含むもの、並びにエリキシル、及び同様の医薬品ビヒクルががまれる。
【０２４５】
吸入又はガス注入用の組成物は、医薬品として許容される水性又は有機溶媒に溶かした溶液及び懸濁液、或いはこれらの混合物、及び粉末を含む。液体又は固体組成物は、上述の、適切な医薬品として許容される賦形剤を含有することができる。組成物は、局所的又は全身的な効果のために、経口又は鼻呼吸器経路により投与することが好ましい。好ましくは医薬品として許容される溶媒中の組成物は、不活性ガスを使用して噴霧することができる。噴霧された溶液は、噴霧器から直接呼吸することができ、或いはこの噴霧器は、フェースマスクテント、又は断続的な正圧呼吸機に取着することができる。溶液、懸濁液、又は粉末組成物は、適切な手法で製剤を送達する機器から、好ましくは経口的又は経鼻的に投与することができる。吸入又はガス注入投与では、コンジュゲートの全分子量が約１０，０００ダルトンから７０，０００ダルトンの間であることが好ましく、より好ましくは約２０，０００ダルトンから４５，０００ダルトンの間である。
【０２４６】
ポリマーコンジュゲート
処方され投与されたときの本発明の化合物は、ポリマーコンジュゲートである。ポリマーコンジュゲートは、改善された溶解性や生体内安定性など、非結合ポリマーにも勝る利益をもたらすことが期待される。
【０２４７】
したがって単一のポリマー分子は、本発明の化合物との結合に用いることができるが、複数のポリマー分子も担体を介して結合できると考えられる。本発明の結合化合物は、生体内並びに非生体内での適用において、有用性を見出すことができる。さらに、結合ポリマーは、任意のその他の基、部分、又はその他の結合種を、必要に応じて最終用途で利用できることが理解されよう。例として、いくつかの適用例では、ポリマーの反応性を高め且つ式ＩＩの化合物に結合させることができるように且つ結合材料全体の様々な性質又は特徴を高めることができるように、ポリマーを官能化することが有利である可能性がある。したがってポリマーは、その意図する目的のために本発明の結合化合物の効力を排除することのない、任意の官能基、反復基、結合、又はその他の成分構造を含有することができる。
【０２４８】
これらの望ましい特徴を実現するために、有効に用いられる例示的なポリマーは、上記の文献、並びに参照によりその全体が本明細書に援用されるＰＣＴ  ＷＯ０１／５４６９０（Ｚｈｅｎｇ他）に記載されている。ポリマーは、本発明の化合物に結合させて（好ましくはリンカー部分を介して）、ヒト酵素により著しく切断されない安定な結合を形成することができる。一般に、「著しく」切断されない結合では、高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を含むがこれに限定することのない当技術分野で標準的な技法により測定した場合、ポリマーとこのポリマーが結合する本発明の化合物とを接続する結合の約２０％以下が、２４時間以内に切断される必要がある。
【０２４９】
一般に、本発明の化合物は、ポリマーに結合する式ＩＩの化合物を、少なくとも２種程度含有する。最終的な量は、生成物の非特異的な修飾を最小限に抑えながら、反応の程度を最大限にしたものと、同時に本発明の化合物の半減期を最適化しながら同時に最適な活性を維持することになる化学的性質を定めたものとのバランスである。本発明の化合物の生物活性の、少なくとも約５０％が維持されることが好ましく、より好ましくは１００％が維持される。
【０２５０】
上述のように、本発明の好ましい実施では、Ｃ２〜Ｃ４アルキルポリアルキレングリコールのポリアルキレングリコール残基、好ましくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、又はそのようなグリコールのポリ（オキシ）アルキレングリコール残基が、問題となるポリマー系に有利に組み込まれる。したがって、本発明の化合物が結合するポリマーは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）のホモポリマーでよく、又はポリオキシエチル化ポリオールであるが、但しすべての場合において、ポリマーが室温で水中に可溶であることを条件とする。そのようなポリマーの非限定的な例には、ＰＥＧやポリプロピレングリコール、ポリオキシエチレングリコールなどのポリアルキレンオキシドホモポリマー、これらのコポリマー、及びこれらのブロックコポリマーが含まれ、但しブロックコポリマーの水溶性は維持されることを条件とする。
【０２５１】
ポリオキシエチル化ポリオールの例には、ポリオキシエチル化グリセロール、ポリオキシエチル化ソルビトール、ポリオキシエチル化グルコースなどが含まれるが、これらに限定するものではない。ポリオキシエチル化グリセロールのグリセロース主鎖は、例えば、モノ−、ジ−、及びトリグリセリドとして動物及びヒトで自然に生ずるものと同じ主鎖である。したがってこの分枝は、必ずしも体内の外来物質として見られない。
【０２５２】
当業者なら、前述のリストが単なる例示であり、本明細書に記載される品質を有するすべてのポリマー材料が考えられることが理解されよう。ポリマーは、任意の特定の分子量を有する必要がないが、分子量は、約１００から１００，０００の間であることが好ましく、好ましくは約１０，０００から約８０，０００であり、より好ましくは約２０，０００から約７０，０００である。特に、腎臓での濾過に起因する生成物の損失を防止するには、２０，０００以上のサイズが最も効果的である。
【０２５３】
ＰＥＧ誘導体とは、ポリエチレングリコールそのものに見出される末端ヒドロキシル基の一方又は両方が修飾されている、ポリエチレングリコールポリマーを意味する。適切な修飾の例には、一方又は両方のヒドロキシル基を、低分子量リガンドを有し或いは別の高分子又はポリマーを有する、保護されてもされなくてもよい代替の官能基に代えることが含まれる。ポリエチレングリコールの末端ヒドロキシル基の修飾は、ポリエチレングリコールを、ポリエチレングリコールのヒドロキシ基との反応を受けることができる官能基を含めた相補的反応性官能基を含む化合物とを反応させることによって実現できる。本発明のＰＥＧ誘導体は、そこに結合基によって共有結合した１つ又は複数のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）置換基を含有することができる。
【０２５４】
以下の製剤の例は、本発明の医薬品組成物を例示する。
【０２５５】
（製剤実施例１）
以下の成分を含有する硬質ゼラチンカプセルを、調製する。
成分                        量（ｍｇ／カプセル）
活性成分                    ３０．０
デンプン                    ３０５．０
ステアリン酸マグネシウム    ５．０
【０２５６】
上記成分を混合し、３４０ｍｇの量を硬質ゼラチンカプセルに充填する。
【０２５７】
（製剤実施例２）
錠剤を、下記の成分を使用して調製する。
成分                        量（ｍｇ／錠剤）
活性成分                    ２５．０
セルロース、微結晶質        ２００．０
コロイド状二酸化ケイ素      １０．０
ステアリン酸                ５．０
【０２５８】
成分をブレンドし、圧縮して、それぞれ２４０ｍｇの重量の錠剤を形成する。
【０２５９】
（製剤実施例３）
下記の成分を含有する乾燥粉末吸入製剤を調製する。
成分                        重量％
活性成分                    ５
ラクトース                  ９５
【０２６０】
活性成分をラクトースと混合し、混合物を、乾燥粉末吸入機器に添加する。
【０２６１】
（製剤実施例４）
それぞれ活性成分３０ｍｇを含有する錠剤を、下記の通り調製する。
成分                                                  量（ｍｇ／錠剤）
活性成分                                              ３０．０ｍｇ
デンプン                                              ４５．０ｍｇ
微結晶質セルロース                                    ３５．０ｍｇ
ポリビニルピロリドン（滅菌水中１０％の溶液として）    ４．０ｍｇ
デンプンカルボキシメチルナトリウム                    ４．５ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム                              ０．５ｍｇ
タルク                                                １．０ｍｇ
合計                                                  １２０ｍｇ
【０２６２】
活性成分、デンプン、及びセルロースを、Ｎｏ．２０メッシュＵ．Ｓ．シーブに通し、完全に混合する。ポリビニルピロリドンの溶液を、得られた粉末と混合し、次いでこれを１６メッシュＵ．Ｓ．シーブに通す。このように生成された顆粒を、５０℃から６０℃で乾燥し、１６メッシュＵ．Ｓ．シーブに通す。デンプンカルボキシメチルナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、及びタルクを、前もってＮｏ．３０メッシュＵ．Ｓ．シーブに通し、次いで顆粒に添加し、混合した後、錠剤成型機で圧縮することにより、それぞれ１２０ｍｇの重量の錠剤が得られる。
【０２６３】
（製剤実施例５）
それぞれ４０ｍｇの薬剤を含有するカプセルを、下記の通り作製する。
成分                        量（ｍｇ／カプセル）
活性成分                    ４０．０ｍｇ
デンプン                    １０９．０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム    １．０ｍｇ
合計                        １５０．０ｍｇ
【０２６４】
活性成分、デンプン、及びステアリン酸マグネシウムをブレンドし、Ｎｏ．２０メッシュＵ．Ｓ．シーブに通し、１５０ｍｇの量を硬質ゼラチンカプセルに充填する。
【０２６５】
（製剤実施例６）
それぞれ２５ｍｇの活性成分を含有する坐薬を、下記の通り作製する。
成分                        量
活性成分                    ２５ｍｇ
飽和脂肪酸グリセリド        加えて２０００ｍｇになる量
【０２６６】
活性成分をＮｏ．６０メッシュＵ．Ｓ．シーブに通し、必要とされる最小限の熱を使用して前もって融解させた飽和脂肪酸グリセリドに懸濁する。次いで混合物を、名目上２．０ｇ容積の坐薬の型に注ぎ、冷却させる。
【０２６７】
（製剤実施例７）
５．０ｍｌ用量当たり薬剤を５０ｍｇ含有する懸濁液を、下記の通り作製する。
成分                                          量
活性成分                                      ５０．０ｍｇ
キサンタンガム                                ４．０ｍｇ
ナトリウムカルボキシメチルイセルロース
（１１％）
微結晶質セルロース（８９％）                  ５０．０ｍｇ
スクロース                                    １．７５ｇ
安息香酸ナトリウム                            １０．０ｍｇ
フレーバー及び色                              任意
精製水                                        加えて５．０ｍｌになる量
【０２６８】
活性成分、スクロース、及びキサンタンガムをブレンドし、Ｎｏ．１０メッシュＵ．Ｓ．シーブに通し、次いで前もって作製した微結晶質セルロース及びナトリウムカルボキシメチルセルロースの水溶液と混合する。安息香酸ナトリウム、フレーバー、及び色を、若干の水で希釈し、攪拌しながら添加する。次いで十分な水を添加して、必要とされる体積を生成する。
【０２６９】
（製剤実施例８）
成分                        量（ｍｇ／カプセル）
活性成分                    １５．０ｍｇ
デンプン                    ４０７．０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム    ３．０ｍｇ
合計                        ４２５．０ｍｇ
【０２７０】
活性成分、デンプン、及びステアリン酸マグネシウムをブレンドし、Ｎｏ．２０メッシュＵ．Ｓ．シーブに通し、４２５．０ｍｇの量で硬質ゼラチンカプセルに充填する。
【０２７１】
（製剤実施例９）
皮下製剤は、下記の通り調製することができる。
成分                        量
活性成分                    ５０ｍｇ．ｍＬ．ｍｇ
リン酸緩衝生理食塩液        １．０ｍｌ
【０２７２】
（製剤実施例１０）
局所製剤は、下記の通り調製することができる。
成分                        量
活性成分                    １〜１０ｇ
乳化蝋                      ３０ｇ
液体パラフィン              ２０ｇ
白色の軟質パラフィン        加えて１００ｇにする
【０２７３】
白色の軟質パラフィンを、融解するまで加熱する。液体パラフィン及び乳化蝋を混合し、溶解するまで攪拌する。活性成分を添加し、分散するまで攪拌を続ける。次いで混合物を、固体になるまで冷却する。
【０２７４】
（製剤実施例１１）
静脈内製剤は、下記の通り調製することができる。
成分                        量
活性成分                    ２５０ｍｇ
等張性生理食塩液            １００ｍｌ
【０２７５】
本発明の方法で用いられる別の好ましい製剤は、経皮送達器具（「パッチ」）を用いる。そのようなパッチは、本発明の化合物を、制御された量で継続的に又は断続的に注入するのに使用することができる。薬剤を送達するための経皮パッチの構成及び使用は、当技術分野で周知である。例えば、参照により本明細書に援用される１９９１年６月１１日発行の米国特許第５０２３２５２号を参照されたい。そのようなパッチは、薬剤の連続的、拍動的、又はオンデマンド的送達用に構成することができる。
【０２７６】
しばしば、医薬品組成物を脳に直接又は間接的に導入することが望ましく、又は必要とされる。直接的な技法では、通常、薬物送達カテーテルを宿主の脳室系に留置して、血液脳関門を迂回する。そのような、身体の特定の解剖学的領域に生物学的要素を輸送するのに使用される埋込み可能な送達系は、参照により本明細書に援用される米国特許第５０１１４７２号に記載されている。
【０２７７】
一般に好ましい間接的な技法では、通常、親水性薬物から脂溶性薬物への変換によって薬物潜伏期間をもたらすための、組成物を配合する。潜伏期間は一般に、薬物上に存在するヒドロキシ、カルボニル、スルフェート、及び第１級アミン基を遮断して、この薬物をより脂溶性にし、血液脳関門を横断する輸送を容易にすることによって実現される。或いは、親水性薬物の送達は、血液脳関門を一時的に開くことができる高張液の動脈内注入によって、高めることができる。
【０２７８】
本発明での使用に適切なその他の製剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＰＡ．第１７版（１９８５）に見出すことができる。
【０２７９】
上述のように、本明細書に記載される化合物は、上述の様々な薬物送達系で使用するのに適している。さらに、投与される化合物の生体内血清半減期を高めるために、化合物をカプセル封入し、リポソームの管腔に導入し、コロイドとして調製することができ、又は、化合物の血清半減期を延ばすことができるその他の従来の技法を用いることができる。リポソームを調製するための様々な方法は、例えば参照によりそれぞれ本明細書に援用されるＳｚｏｋａ他の米国特許第４２３５８７１号、第４５０１７２８号、及び第４８３７０２８号に記載されるように利用可能である。
【０２８０】
有用性
本発明のコンジュゲートは、α４β１（ＶＫＡ−４）拮抗薬である。一部は、α４β７インテグリンに対して少なくとも部分的な親和性を有し、α４インテグリンの混合型阻害剤にする。コンジュゲートは、非結合化合物に比べて生体内保持率が高められている。体内でのコンジュゲートの保持率が改善された結果、必要とされる薬物の投薬量が少なくなり、その結果、副作用がほとんどなくなって毒性の可能性も低下する。さらに薬物製剤は、患者にそれほど頻繁に投与しなくてよく、それにもかかわらず、同様の又は改善された治療効果が実現される。
【０２８１】
本発明のコンジュゲートは、ＶＣＡＭ−１やフィブロネクチン、ＭａｄＣＡＭなどの細胞受容体に結合するα４β１又はα４β７の阻害によって媒介される、内皮細胞との白血球の、生体内での阻害が改善されている。好ましくは本発明のコンジュゲートは、α４β１及び／又はα４β７によって、又は一般的な用語では白血球接着によって媒介される疾患を治療するために、例えば注入によって、或いは皮下注射又は経口投与によって使用することができる。本発明のコンジュゲートは、様々な炎症性脳障害、特に、内皮／白血球接着のメカニズムが通常であれば健康な脳組織に破壊をもたらす中枢神経系障害を治療するのに使用することができる。したがて本発明のコンジュゲートは、例えば実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）、多発性硬化症（ＭＳ）、髄膜炎、及び脳炎の治療に使用することができる。
【０２８２】
本発明のコンジュゲートは、その他の器官系の組織損傷に起因する障害及び疾患、即ち組織損傷が接着メカニズムを介しても生じ、その結果、白血球の移動又は活性化をもたらす障害及び疾患の治療にも使用することができる。哺乳類患者のそのような疾患の例は、喘息やアルツハイマー病、アテローム性動脈硬化症、ＡＩＤＳ、痴呆、糖尿病（急性若年型糖尿病を含む）、炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎及びクローン病を含む）、関節リウマチ、組織移植、腫瘍転移、脳卒中、及びその他の脳外傷、腎炎、網膜炎、アトピー性皮膚炎、乾癬、心筋虚血症、及び成人の呼吸困難症候群で生じるような急性白血球媒介型肺損傷などの炎症性疾患である。
【０２８３】
本発明のコンジュゲートを使用して治療することができる、さらにその他の疾患状態には、結節性紅斑、アレルギー性結膜炎、視神経炎、ブドウ膜炎、アレルギー性鼻炎、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、血管炎、ライター症候群、全身性エリテマトーデス、進行性全身性硬化症、多発性筋炎、皮膚筋炎、ヴェグナー肉芽腫症、大動脈炎、サルコイドーシス、リンパ球減少症、一過性動脈炎、心外膜炎、心筋炎、うっ血性心不全、結節性多発性動脈炎、過敏性症候群、アレルギー、好酸球増加症候群、チャーグ−ストラウス症候群、慢性閉塞性肺疾患、過敏性肺炎、慢性活動性肝炎、間質性膀胱炎、自己免疫内分泌不全、原発性胆汁性肝硬変、自己免疫再生不良性貧血、慢性持続性肝炎、及び甲状腺炎が含まれる。
【０２８４】
本発明は、一部には患者におけるα４インテグリン媒介型白血球結合によって引き起こされ又は悪化した疾患状態を治療するための方法も提供し、この方法は、有効量の本発明のコンジュゲート、例えば式Ｉのコンジュゲートと、α４β７阻害剤である有効量の別の化合物との同時投与を含むものである。同時投与は、同時に又は逐次実施することができる。例えば本発明のコンジュゲートの投与は、α４β７阻害剤の投与よりも何分か又は何時間か先に行うことができる。或いは、α４β７阻害剤を、本発明のコンジュゲートの前に投与することができる。
【０２８５】
炎症性応答の治療で効力を実証するのに適切な生体内モデルには、マウス、ラット、ギニアピッグ、又は霊長類のＥＡＥ（実験的自己免疫性脳脊髄炎）、並びにα４インテグリンに依存するその他の炎症性モデルが含まれる。
【０２８６】
炎症性腸疾患は、クローン病及び潰瘍性大腸炎という２つの類似した疾患を総称した名前である。クローン病は、肉芽性炎症反応によりはっきりと区切られ且つ典型的には腸壁の全層の経壁的関与を特徴とする、特発性の慢性潰瘍収縮性炎症性疾患である。口から肛門までの胃腸管の任意のセグメントが関係する可能性があるが、この疾患は、最も一般的な場合、末端回腸及び／又は結腸に影響を及ぼす。潰瘍性大腸炎は、結腸粘膜及び粘膜下組織に大きく限定される炎症応答である。リンパ球及びマクロファージは、炎症性腸疾患の病巣に非常に数多く存在し、炎症性損傷に寄与する可能性がある。
【０２８７】
喘息は、気管支気道の発作性収縮を増強する様々な刺激に対する気管気管支樹の応答性の増大を特徴とする疾患である。刺激は、ヒスタミン、好酸球及び好中球化学走性因子、ロイコトリエン、プロスタグランジン、及び血漿活性化因子を含めたＩｇＥ被覆肥満細胞からの炎症の様々な媒介物の放出を引き起こす。これらの因子の放出は、好塩基球、好酸球、及び好中球を補充し、それによって炎症性損傷が生ずる。
【０２８８】
アテローム性動脈硬化症は、動脈（例えば冠動脈、頚動脈、大動脈、及び腸骨動脈）の疾患である。基本的な病巣、アテロームは、脈管内膜内で増加した限局性プラークからなり、脂質の核及び被覆線維キャップを有する。アテロームは、動脈血流を損ない、影響を受けた動脈を弱める。心筋及び脳梗塞は、この疾患の主な結果である。マクロファージ及び白血球がアテロームに補充され、炎症性損傷に寄与する。
【０２８９】
関節リウマチは、関節の機能障害及び破壊を引き起こす、慢性の再発性炎症性疾患である。関節リウマチは、通常、まず手及び足の小関節に影響を及ぼすが、次いで腕、肘、踵、及び膝に関与する可能性がある。関節炎は、滑膜細胞と、循環系から関節の滑膜細胞に浸潤する白血球との相互作用によって生ずる。例えば、Ｐａｕｌ、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（第３版、Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ、１９９３）を参照されたい。
【０２９０】
本発明のコンジュゲートに関するその他の指標は、ＶＬＡ−４によって媒介される器官又は移植片拒絶の治療にある。ここ数年、皮膚や腎臓、肝臓、心臓、肺、膵臓、及び骨髄などの組織及び器官を移植するための手術技法の有効性に、著しい改善がなされてきた。おそらく主な目立った問題は、移植される同種移植片又は器官に対し、レシピエントの免疫トレランスを誘発させるのに満足のいく薬剤がないことである。同種細胞又は器官を宿主に移植する場合（即ちドナーとドニーは、同じ種からの異なる個体である）、宿主の免疫系は、移植片中の外来抗原に対する免疫応答を蓄積し易く（宿主対移植片疾患）、その結果、移植された組織に破壊が生ずる。ＣＤ８＋細胞、ＣＤ４細胞、及び単球は、すべて、移植片組織の拒絶に関与する。α−４インテグリンに結合する本発明のコンジュゲートは、とりわけドニーの同種抗原誘発性免疫応答を遮断するのに有用であり、それによって、そのような細胞が、移植された組織又は器官の破壊に寄与しないようになる。例えば、Ｐａｕｌ他、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ９、４２０〜４２５（１９９６）；Ｇｅｏｒｃｚｙｎｓｋｉ他、Ｉｍｍｕｎｏｌｉｇｙ  ８７、５７３〜５８０（１９９６）；Ｇｅｏｒｃｙｚｎｓｋｉ他、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３、５５〜６１（１９９５）；Ｙａｎｇ他、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ６０、７１〜７６（１９９５）；Ａｎｄｅｒｓｏｎ他、ＡＰＭＩＳ  １０２、２３〜２７（１９９４）を参照されたい。
【０２９１】
ＶＬＡ−４に結合する本発明のコンジュゲートに関連した使用は、「移植片対宿主」疾患（ＧＶＨＤ）に関与する免疫応答の調節にある。例えば、Ｓｃｈｌｅｇｅｌ他、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５、３８５６〜３８６５（１９９５）を参照されたい。ＧＶＨＤは、免疫適格細胞が同種レシピエントに移される場合に引き起こされる、潜在的に致命的な疾患である。この状態では、ドナーの免疫担当細胞が、レシピエントの組織を攻撃する可能性がある。皮膚、腸上皮、及び肝臓の組織はしばしば標的になり、ＧＶＨＤの過程で破壊される可能性がある。この疾患は、免疫組織を骨髄移植などのように移植する場合、特に難しい問題をもたらすが、心臓及び肝臓移植を含めたその他のケースでは、ＧＶＨＤがそれほど重篤ではないことが報告されている。本発明の治療薬は、とりわけドナーのＴ細胞の活性化を阻止するのに使用され、それによって、標的細胞を宿主内で溶解する能力が妨げられる。
【０２９２】
本発明の製剤は、多発性硬化症、関節リウマチ、及び喘息の治療に特に有用である。
【０２９３】
本発明のコンジュゲートの別の使用は、腫瘍転移の阻害である。いくつかの腫瘍細胞は、ＶＬＡ−４と、内皮細胞に対して腫瘍細胞のＶＬＡ−４遮断接着を結合する化合物を発現することが報告されている。Ｓｔｅｉｎｂａｃｋ他、Ｕｒｏｌ．Ｒｅｓ．２３、１７５〜８３（１９９５）；Ｏｒｏｓｚ他、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ６０、８６７〜７１（１９９５）；Ｆｒｅｅｄｍａｎ他、Ｌｅｕｋ．Ｌｙｍｐｈｏｍａ  １３、４７〜５２（１９９４）；Ｏｋａｈａｒａ他、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５４、３２３３〜６（１９９４）。
【０２９４】
所望の生物活性を有する化合物は、改善された薬理学的性質（例えば生体内安定性、生物学的利用能）や診断の適用例で検出される能力など、所望の性質を得るために、必要に応じて修飾することができる。安定性については、ペプチダーゼ又はヒト血漿又は血清とのインキュベーション中の、タンパク質の半減期を測定するなど、様々な方法でアッセイを行うことができる。そのようなタンパク質安定性に関するアッセイのいくつかが、記載されている（例えば、Ｖｅｒｈｏｅｆ他、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ．、１９９０、１５（２）：８３〜９３参照）。
【０２９５】
本発明のコンジュゲートの別の使用は、多発性硬化症の治療にある。多発性硬化症は、米国では、推定で２５０，０００人から３５０，０００人に影響を及ぼす進行性の神経性自己免疫疾患である。多発性硬化症は、神経線維を覆う絶縁性の鞘であるミエリンを、ある特定の白血球が攻撃し且つ破壊を開始する、特異的自己免疫反応の結果であると考えられる。多発性硬化症の動物モデルでは、ＶＬＡ−４を対象とするマウスモノクローナル抗体が、白血球と内皮との接着を阻止することが示され、したがって、動物１６の中枢神経系の炎症及び後続の運動麻痺が予防される。
【０２９６】
本発明の医薬品組成物は、様々な薬物送達系で使用するのに適している。本発明での使用に適切な製剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＰＡ、第１７版（１９８５）に見出される。
【０２９７】
患者に投与される量は、投与する物質、予防や治療など投与する目的、患者の状態、投与方法などに応じて様々に変わる。治療の適用例では、既に罹患している患者に対し、疾患及びその合併症の症状を治癒させ又は少なくとも部分的に抑止するのに十分な量を投与する。これを実現するのに適切な量を、「治療上有効な用量」と定義する。この使用に有効な量は、治療される疾患状態、並びに炎症の重症度や年齢、体重、及び患者の全身状態などの因子による主治医である臨床医の判断に応じて、様々に変わることになる。
【０２９８】
患者に投与される組成物は、上述の医薬品組成物の形をとる。これらの組成物は、従来の滅菌技法によって滅菌することができ、又は滅菌濾過することができる。得られる水溶液は、そのまま使用するために包装することができ、又は凍結乾燥することができ、この凍結乾燥した製剤を、投与前に滅菌水性担体と合わせることができる。
【０２９９】
本発明のコンジュゲートの治療投薬量は、例えば、治療を行う特定の用途、コンジュゲートの投与方法、患者の健康及び状態、処方医の判断に応じて変わることになる。例えば静脈内投与では、その用量は、典型的には体重１ｋｇ当たり約２０μｇから約２０００μｇの範囲内であり、好ましくは約２０μｇから約５００μｇ、より好ましくは体重１ｋｇ当たり約１００μｇから約３００μｇの範囲内である。鼻内投与に適切な投薬量は、一般に体重１ｋｇ当たり約０．１ｐｇから１ｍｇである。有効用量は、生体外又は動物モデル試験系から得られた用量反応曲線から外挿することができる。
【０３００】
本発明のコンジュゲートは、α６β１、α９β１、α４β７、αｄβ２、αｅβ７インテグリンの作用を結合し又は拮抗することも可能である（しかしα４β１及びα９β１が、本発明では好ましい）。したがって本発明のコンジュゲートは、これらインテグリンをそれぞれのリガンドに結合することによって誘発される症状、障害、又は疾患を予防し、又は後退させるのにも有用である。
【０３０１】
例えば、１９９８年１２月３日に公開された国際公開番号ＷＯ９８／５３８１７（その開示の全体を、参照により本明細書に援用する）及びそこに引用される参考文献は、α４β７によって媒介される障害について述べている。この参考文献は、ＶＣＡＭ−Ｉｇ融合タンパク質に対するα４β７依存性結合の拮抗性を決定するためのアッセイについても述べている。
【０３０２】
さらに、αｄβ２及びαｅβ７インテグリンを結合する化合物は、喘息及び関連する肺疾患の治療に特に有用である。例えば、Ｍ．Ｈ．Ｇｒａｙｓｏｎ他、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９９８、１８８（１１）２１８７〜２１９１を参照されたい。αｅβ７インテグリンを結合する化合物は、全身性エリテマトーデス（例えば、Ｍ．Ｐａｎｇ他、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ．１９９８、４１（８）、１４５６〜１４６３参照）；クローン病、潰瘍性大腸炎、及び炎症性腸疾患（ＩＢＤ）（例えば、Ｄ．Ｅｌｅｗａｕｔ他、Ｓｃａｎｄ  Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  １９９８、３３（７）７４３〜７４８参照）；シェーグレン症候群（例えば、Ｕ．Ｋｒｏｎｅｌｄ他、Ｓｃａｎｄ  Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  １９９８、２７（３）、２１５〜２１８参照）；及び関節リウマチ（例えば、Ｓｃａｎｄ  Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  １９９６、４４（３）、２９３〜２９８参照）の治療にも有用である。またα６β１に結合する化合物は、受精を予防するのに有用である可能性がある（例えば、Ｈ．Ｃｈｅｎ他、Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．１９９９、６、１〜１０参照）。
【０３０３】
本発明の別の態様では、本明細書に記述されるコンジュゲート及び組成物を使用して、免疫細胞が、血流から例えば多発性硬化症の場合には中枢神経系へと移動し、又はミエリンの炎症誘発性破壊をもたらす領域へと移動するのを阻害することができる。これらの試薬は、脱髄を阻害するように、また再び有髄化するのを促すことができるように、免疫細胞の移動を阻害することが好ましい。これらの試薬は、主にＣＮＳにおいて浸潤免疫細胞がミエリン鞘の発生に影響を及ぼす先天的代謝障害で、中枢神経系の脱髄を予防し、再度有髄化するのを促進させることもできる。試薬は、脱髄疾患又は状態によって誘発された麻痺に罹っている被験体に投与したときに、その麻痺も低減させることが好ましい。
【０３０４】
本明細書に開示される組成物、コンジュゲート、及び方法による治療のために含まれる炎症性疾患には、一般に脱髄に関連した状態が含まれる。組織学的に、ミエリンの異常は、脱髄又は髄鞘発育不全である。脱髄は、ミエリンの破壊を意味する。髄鞘発育不全は、寡突起膠細胞の不全から生ずるミエリンの不完全な形成又は維持を指す。本明細書に開示される組成物及び方法は、脱髄に関係した疾患及び状態を治療し、髄鞘形成を再び支援することが考えられることが好ましい。治療が考えられる別の疾患又は状態には、髄膜炎、脳炎、及び脊髄損傷と、一般に炎症応答の結果として脱髄を誘発する状態が含まれる。本明細書に開示されるコンジュゲート、組成物、及び方法は、例えば、髄鞘形成不全などの不適正なミエリン形成をもたらす遺伝子欠陥がある、疾患及び状態を対象とするものではない。
【０３０５】
本明細書に開示される組成物、コンジュゲート、及びカクテルは、脱髄に関連した状態及び疾患の治療での使用が考えられる。脱髄に関わる疾患及び状態には、多発性硬化症、先天性代謝障害（例えば、フェニルケトン尿症、テイ−サックス病、ニーマン−ピック病、ゴシェ病、フルラー症候群、クラッベ病、及びその他の白質ジストロフィー）、髄鞘形成異常を伴うニューロパシー（例えば、ギヤン−バレー、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパシー（ＣＩＤＰ）、多病巣性ＣＩＤＰ、抗ＭＡＧ症候群、ＧＡＬＯＰ症候群、抗スルファチド抗体症候群、抗ＧＭ２抗体症候群、ＰＯＥＭＳ症候群、神経周膜炎、ＩｇＭ抗ＧＤ１ｂ抗体症候群）、薬物関連脱髄（例えば、クロロキン、ＦＫ５０６、ペルヘキシリン、プロカインアミド、及びジメルジンの投与によって引き起こされる）、その他の遺伝性脱髄状態（例えば、炭水化物欠損糖タンパク質、コケーン症候群、先天性ミエリン形成減少症、先天性筋肉ジストロフィー、ファーバー病、マリネスコ−シェーグレン症候群、異染色性白質ジストロフィー、ペリツェーウス−メルツバッヒャー病、レフサム病、プリオン関連状態、及びサラ病）、及びその他の脱髄状態（例えば、髄膜炎、脳炎、又は脊髄損傷）又は疾患が含まれるが、これらに限定するものではない。
【０３０６】
生体内でこれらの疾患を研究するのに使用することができる、様々な疾患モデルがある。例えば、動物モデルには下記のものが含まれるが、これらに限定するものではない。
【表３】
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【０３０７】
多発性硬化症
最も一般的な脱髄疾患は、多発性硬化症であるが、多くのその他の代謝及び炎症性障害が、髄鞘形成の不全又は異常をもたらす。ＭＳは、成年早期に現れ且つほとんどの場合に著しい障害へと進行する慢性神経疾患である。米国だけで、約３５０，０００のＭＳ症例がある。外傷の他に、ＭＳは、成年早期から中期における神経障害の最も頻度の高い原因である。
【０３０８】
ＭＳの原因は、まだ決定されていない。ＭＳは、慢性炎症、脱髄、及びグリオーシス（瘢痕）を特徴とする。脱髄は、軸索伝導に負の又は正の影響を及ぼす可能性がある。正の伝導異常には、遅くなった軸索伝導、即ち低いのではなく高い頻度で流れるインパルス又は完全伝導ブロックの存在下で生ずる、可変伝導ブロックが含まれる。正伝導異常には、異所性インパルス発生、自発的な又は追随する機械的ストレス、脱髄エキソン間の異常「クロストーク」が含まれる。
【０３０９】
ミエリンタンパク質、ミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）又はミエリンタンパク脂質（ＰＬＰ）に対するＴ細胞反応性は、実験的アレルギー性脳脊髄炎でＣＮＳ炎症を媒介することが観察されている。患者は、高レベルのＣＮＳ免疫グロブリン（Ｉｇ）を有することも観察されている。さらにＭＳで観察される組織損傷の一部は、活性化Ｔ細胞、マクロファージ、又は星状細胞のサイトカイン産物によって媒介されることも可能である。
【０３１０】
現在、ＭＳであると診断された８０％の患者は、疾病の発症後、２０年生存する。ＭＳを管理するための療法は、（１）急性憎悪の治療を含めた疾患経過の変化を狙い、且つ疾患の長期抑制を目標にした治療、（２）ＭＳの症状の治療、（３）医学的合併症の予防及び治療、及び（４）二次的な個人的及び社会的問題の管理を含む。
【０３１１】
ＭＳの発症は、劇的である可能性があり、又は患者が医学的関心を持たないという意味で非常に緩慢である可能性がある。最も一般的な症状には、１つ又は複数の手足の衰弱、視神経炎に起因する目のかすみ、感覚障害、複視、及び運動失調が含まれる。疾患の過程は、３つの概略的カテゴリー、即ち（１）ＭＳの再発、（２）慢性進行性のＭＳ、及び（３）不活性ＭＳに分類することができる。再発性ＭＳは、神経機能不全の再発性発作を特徴とする。ＭＳ発作は、一般に、数日から数週間にわたって生じ、その後、完全な回復、又は部分的な回復になり、或いは回復がない。発作からの回復は、一般に症状のピークから、数週間から数カ月以内に生ずるが、まれに一部の回復は、２年以上続く。
【０３１２】
慢性進行性ＭＳは、安定期又は寛解期なしで、徐々に悪化が進む。この形態は、前に再発性ＭＳに罹ったことのある患者で生ずるが、患者の２０％では、再発を見出すことはできない。急性再発も、進行の過程で生ずる可能性がある。
【０３１３】
第３の形態は、不活性ＭＳである。不活性ＭＳは、様々な大きさの固定された神経欠陥を特徴とする。不活性ＭＳに罹っているほとんどの患者は、初期に再発性ＭＳに罹った経験がある。
【０３１４】
疾患の過程は、患者の年齢に依存する。例えば、好ましい予後因子には、初期発症（子供時代を除く）、再発経過、また発症後５年間は障害がほとんど残らないことが含まれる。対照的に、不十分な予後は、後年期の発症（例えば４０歳以上）及び進行性の経過に関連している。慢性進行性ＭＳは、ＭＳを再発させる後年期に始まり易いので、上述の変数は相互に依存し合う。慢性進行性ＭＳによる障害は、通常、患者の進行性麻痺又は四肢麻痺（完全麻痺）に起因する。本発明の一態様では、患者は、疾患の再発段階にあるときよりも寛解状態にあるときに治療することが好ましい。
【０３１５】
副腎皮質ホルモン又は経口コルチコステロイド（例えば経口プレドニゾン又は静脈内メチルプレドニソロン）の短期使用は、ＭＳの急性憎悪に罹っている患者を治療するための、唯一の特定の療法手段である。
【０３１６】
ＭＳのより新しい療法は、インターフェロンβ−１ｂ、インターフェロンβ１−ａ、及びＣｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）（以前はコポリマー１として知られる）で患者を治療することを含む。これら３種の薬物は、疾患の再発速度を著しく低下させることが示されている。これらの薬物は、筋肉内又は皮下から自己投与する。
【０３１７】
しかし現行の治療様式で、脱髄を阻害するものはなく、まして自発的な髄鞘形成を再び促進させ又は可能にするものもなく、或いは麻痺を低減させるものもない。本発明の一態様は、本明細書に開示された薬剤を、単独で又はその他の標準的な治療様式と併せて使用することにより、ＭＳを治療することを目的とする。
【０３１８】
先天性代謝障害
先天性代謝障害には、フェニルケトン尿症（ＰＫＵ）及びその他のアミン酸尿症、テイ−サックス病、ニーマン−ピック病、ゴシェ病、フルラー症候群、クラッベ病、及び以下により詳細に記述される鞘の発生に影響を及ぼすその他の白質ジストロフィーが含まれる。
【０３１９】
ＰＫＵは、酵素フェニルアラニンヒドロキシラーゼの欠損によって引き起こされた、代謝の遺伝的な誤りである。この酵素が失われると、精神の遅延、器官損傷、異常な体位が生じ、母系ＰＫＵの場合は、妊娠を著しく困難にする可能性がある。ＰＫＵを研究するためのモデルは、マウスで発見されている。ＰＫＵであることが明らかにされた幼児は、フェニルアラニンを含まないか又は低下させた食事で栄養を維持する。本発明の態様は、そのような食事と本明細書に開示されたコンジュゲート及び組成物とを組み合わせて、脱髄を予防し且つＰＫＵによって損傷を受けた細胞を再びミエリン化することである。
【０３２０】
古典的なテイ−サックス病は、約６月齢の被験者で生じ、最終的に被験者は５歳までに死亡する。この疾患は、脳及び神経細胞中のある特定の脂肪物質を分解するのに必要な酵素、ヘキソアミニダーゼＡ（ｈｅｘ  Ａ）の欠乏が原因である。酵素が存在しない状態ではこの物質が蓄積され、神経細胞の破壊に至る。ｈｅｘ  Ａ酵素欠損の別の形態は、人生の後期に生じ、これを若年性、慢性、及び成人で発症する形態のｈｅｘ  Ａ欠損と呼ぶ。症状は、典型的なテイ−サックス病を特徴付けるものと同様である。成人発症形態の酵素欠損もある。現在、この疾患／欠損の治癒又は治療はなく、疾患に関する胎児のｉｎ  ｕｔｅｒｏ試験という予防的手段だけである。したがって、本明細書に開示されるコンジュゲート及び組成物は、そのような患者の神経細胞の破壊を寛解し又は予防するのに役立つ可能性がある。
【０３２１】
ニーマン−ピック病は、３つのカテゴリーに分かれ、即ち急性乳児形態であり、タイプＢは、それほど一般的ではない慢性の非神経形態でありタイプＣは、生化学的及び遺伝的にまったく異なる形態の疾患である。正常な個体では、細胞コレステロールをリソソームに引き入れて処理し、その後、放出する。ニーマン−ピック病に罹っている被験者から採取した細胞は、リソソームからコレステロールを放出する際、欠陥があることが示された。このため、リソソーム内には過剰なコレステロールの蓄積が生じ、処理に過誤が生ずる。ＮＰＣ１は、他のタンパク質の場合と同様の既知のステロール感知領域を有することが分かったが、これは、コレステロールの往来を調節する役割を演ずることを示唆している。タイプＡ及びＣの形のニーマン−ピック病に関しては、首尾よくなされる療法が明らかにされていない。タイプＣの場合、患者は低コレステロールの食事に従うことが推奨される。したがって、本明細書に開示されるコンジュゲート及び組成物は、細胞の破壊を寛解し又は予防するのに役立てることができる。
【０３２２】
ゴーシェ病は、遺伝子変異によって引き起こされる遺伝的疾病である。通常この遺伝子は、身体が、脂肪、即ちグルコセレブロシドを破壊するのに必要な、グルコセレブロシダーゼと呼ばれる酵素に関与する。ゴシェ病に罹っている患者では、身体がこの酵素を適正に産生することができず、脂肪を破壊することができない。テイ−サックス病のように、ゴシェ病は、東ヨーロッパのユダヤ人（アシュケナージ）の子孫でかなり一般的であるが、任意の人種群からの個体も影響を受ける可能性がある。アシュケナージのユダヤ人の集団の中で、ゴーシェ病は、最も一般的な遺伝的障害であり、４５０人中約１人の発症率である。一般の集団では、ゴーシェ病は、１００，０００人中約１人に影響を及ぼす。
【０３２３】
１９９１年に、酵素代替療法が、ゴーシェ病に対する最初の効果的な治療として利用可能になった。この治療は、静脈内から与えられたグルコセレブロシダーゼ酵素の修飾形態からなる。本明細書に開示された組成物及びコンジュゲートは、罹患している被験者の疾患を治療するために、単独で又はグリコセレブロシダーゼ投与と併せて使用することができると考えられる。
【０３２４】
ムコ多糖症１型とも呼ばれるフルラー症候群は、重複疾患のクラスである。これらの遺伝的疾患は、一般に、線維芽細胞中のムコ多糖類の細胞蓄積を共有する。これらの疾患は、遺伝的に区別可能である。線維芽細胞及び骨髄移植は助けにならないように見え、したがって、疾患の重症度及び進行を寛解するのに有用なコンジュゲート及び組成物が求められている。本明細書に開示されたコンジュゲート及び組成物は、疾患の進行及び／又は重症度を寛解するために、被験者に投与することができる。
【０３２５】
クラッベ病（球様細胞白質萎縮症とも呼ぶ）は、ガラクトシルセラミダーゼ（又はガラクトセレブロシダーゼ）欠損、即ちミエリンの主な脂質成分を異化代謝するリソソーム酵素の欠損から生ずる常染色体劣性状態である。フランスでの発症率は、推定で１：１５０，０００の出生とされる。この疾患は、中枢及び抹消神経系の脱髄に至る。発症は、一般に生後１年の間に生じ、その状態は急速に進行するが、若年期、青年期、又は成年期の発症形態も報告されており、その進行速度はより様々である。診断は、酵素アッセイから確立される（ガラクトシルセラミダーゼ欠損）。これらは、いくつかの天然の動物（マウス、イヌ、サル）モデルである。クラッベ病は、すべての白質ジストロフィーのように、知られている治癒又は効果的な治療がない。本発明の一実施形態は、クラッベ病及びその他の白質ジストロフィーを治療し又は寛解させるために、本明細書に開示される組成物及びコンジュゲートを使用することである。
【０３２６】
白質ジストロフィーは、脳、脊髄、及び抹消神経に影響を及ぼす、遺伝的に決定された進行性障害のグループである。これらには、副腎脳白質ジストロフィー（ＡＬＤ）、副腎脊髄神経障害（ＡＭＮ）、エカルディ−グティエ症候群、アレキサンダー病、ＣＡＣＨ（即ち、子供時代の運動失調、中枢神経系のミエリン形成減少を伴うもの、又は白質疾患の消滅）ＣＡＤＡＳＩＬ（即ち、脳常染色体優性動脈症、皮質下梗塞及び白質脳症を伴うもの）、キャナバン病（海綿状変性）、脳腱黄色腫症（ＣＴＸ）、クラッベ病（上記論じたもの）、異染性白質萎縮症（ＭＬＤ）、新生児副腎脳白質ジストロフィー、卵巣白質ジストロフィー症候群、ペリツェーウス−メルツバッヒャー病（Ｘ結合痙攣性パラグレギア）、レフサム病、ファンデルクナープ症候群（皮質下嚢胞を伴う白質ジストロフィー）、及びツェルヴェーガー症候群が含まれる。これらの疾患には、有効な治療も治癒もない。その結果、本明細書に開示される組成物及びコンジュゲートを使用するなど、疾患の症状を治療し又は寛解させる手段が求められている。
【０３２７】
ミエリン化異常を伴うニューロパシー
様々な慢性免疫多発性ニューロパシーが存在し、その結果、患者に脱髄が生じる。その状態の発症年齢は、状態に応じて様々である。これらの疾患の標準的な治療が存在し、本明細書に開示される組成物及びコンジュゲートと併用することができる。或いは、開示される組成物及びコンジュゲートを、単独で使用することができる。既存の標準的な療法は、下記の内容を含む。
【表４】
2008505927.tif 000077
【０３２８】
薬物及び放射線で誘発された脱髄
ある特定の薬物及び放射線は、被験者に脱髄を引き起こす可能性がある。脱髄に関与する薬物には、クロロキン、ＦＫ５０６、ペルヘキシリン、プロカインアミド、及びジメルジンが含まれるが、これらに限定するものではない。
【０３２９】
放射線も、脱髄を誘発させる可能性がある。放射線による中枢神経系（ＣＮＳ）の毒性は、（１）脈管構造の損傷、（２）寡突起膠細胞−２  星状細胞の先祖、及び成熟寡突起膠細胞の欠失、（３）海馬、小脳、及び皮質における神経幹細胞集団の欠失、サイトカイン発現の一般化された変化によって引き起こされると考えられる。ほとんどの放射線損傷は、ある癌の治療中に投与された放射線の療法から生ずる。その概略に関しては、Ｂｅｌｋａ他、２００１  Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ８５：１２３３〜９を参照されたい。しかし放射線曝露は、宇宙飛行士にとって（Ｈｏｐｅｗｅｌｌ、１９９４  Ａｄｖ．Ｓｐａｃｅ  Ｒｅｓ．１４：４３３〜４２）並びに放射能物質に曝露された場合に問題となり得る。
【０３３０】
薬物を与えられ、或いは偶然に又は意図的に放射線に曝露された患者は、脱髄を予防し又は再ミエリン化を促進させるために、本明細書に開示されたコンジュゲート又は組成物の投与された１つによって、利益を受けることができる。
【０３３１】
脱髄に関わる状態
脱髄をもたらす別の遺伝的症候群／疾患には、コケーン症候群、先天性ミエリン減少症、ファーバー病、異染性白質萎縮症、ペリツェーウス−メルツバッヒャー病、レフサム、プリオン関連状態、及びサラ病が含まれる。
【０３３２】
コケーン症候群（ＣＳ）は、人が日光に敏感になり、身長が低く、早期に老化した外観を見せる、まれな遺伝的障害である。典型的な形のコケーン症候群（Ｉ型）では、その症状が進行し、典型的には生後１年で明らかになる。早期発症又は先天的形態のコケーン症候群（ＩＩ型）は、出生時に明らかである。興味深いことに、その他のＤＮＡ修復疾患とは異なって、コケーン症候群は癌に繋がっていない。ＣＳは、身体及び脳に多大な成長不全を引き起こし、進行性悪液質、網膜、蝸牛、及び神経変性を引き起こし、それと共に白質ジストロフィー及び脱髄ニューロパシーを伴い、癌の増加は存在しない、多系障害である。ＵＶ（例えば日光）に曝露した後、コケーン症候群に罹患している被験者は、もはや転写−結合修復を行うことができない。コケーン症候群で失われている２つの遺伝子、ＣＳＡ及びＣＳＢが、これまで明らかにされている。ＣＳＡ遺伝子は、染色体５に見出される。どちらの遺伝子も、転写機構の成分及びＤＮＡ修復タンパク質と相互に作用するタンパク質をコードする。
【０３３３】
現在まで、この疾患に罹っている患者の治癒又は有効な治療は明らかにされていない。したがって、本発明の一態様は、本明細書に開示されるコンジュゲート及び組成物で、この疾患を治療することである。
【０３３４】
先天性ミエリン減少症には、先天性脱髄ニューロパシー、先天性ミエリン減少多発性ニューロパシー、先天性ミエリン減少（Ｏｎｉｏｎ  Ｂｕｌｂ）多発性ニューロパシー、先天性ミエリン減少ニューロパシー、ミエリン減少によって引き起こされた先天性ニューロパシー、ミエリン減少ニューロパシー、及びＣＨＮを含めたいくつかの名称がある。ヒトにおいて最も一般的な遺伝的障害の中で、遺伝的抹消ニューロパシーは、複雑な臨床的及び遺伝的に異質な群の障害であり、抹消神経の進行的変性をもたらすものである。先天性ミエリン減少症は、ある障害群の１つである。この群には、圧迫性麻痺になり易い遺伝的ニューロパシー、シャルコー−マリー−ツース病、デジェリーヌ−ソッタ症候群、及び先天性ミエリン減少性ニューロパシーが含まれる。これらには、これら障害のいずれかに対して知られている治癒又は有効な治療がない。
【０３３５】
ファーバー病には、ファーバー脂肪肉芽腫症、セレミダーゼ欠損、酸セレミダーゼ欠損、ＡＣ欠損、Ｎ−ラウリルスフィンゴシンデアシラーゼ欠損、及びＮ−アシルスフィンゴシンアミドヒドロラーゼを含めたいくつかの名称がある。ある特定の名称で明らかなように、疾患は、酸セラミダーゼの欠損によって生ずる（Ｎ−アシルスフィンゴシンアミドヒドロラーゼ、ＡＳＡＨとも呼ばれる）。酵素が欠けている結果、非スルホン化酸ムコ多糖類がニューロン及びグリア細胞に蓄積する。この疾患に罹っている患者は、通常、２歳になる前に死亡する。
【０３３６】
異染性白質萎縮症（ＭＬＤ）は、酵素アリールスルファターゼＡの欠損によって生じる遺伝的障害である。これは、ミエリン鞘の成長に影響を及ぼす白質ジストロフィーと呼ばれる遺伝的障害群の１つである。３つの形のＭＬＤがあり、後期乳児型、若年型、及び成年型である。最も一般的な後期乳児型形態では、症状の発症が６月齢から２歳の間に始まる。乳児は通常、出生時には正常であるが、最終的に、予め得られた能力は失われる。症状には、等張低下（筋肉の緊張の低下）、話し方の異常、精神能力の損失、盲目、硬直性（即ち、制御できない筋肉の緊張）、痙攣、不完全な嚥下、麻痺、及び痴呆が含まれる。若年形態の症状は、４歳から１４歳の間に始まり、学校生活が送れず、精神的悪化、運動失調、発作、及び痴呆が含まれる。成年形態では、１６歳以降に始まる症状に、集中力欠如、うつ病、精神障害、運動失調、震え、及び痴呆が含まれる可能性がある。発作は成年形態で生じる可能性があるが、その他の形態の場合ほど一般的ではない。３つの形態すべてにおいて、精神の衰退は、通常は最初の兆候である。
【０３３７】
ペリツェーウス−メルツバッヒャー病（周産期スダン好性白質ジストロフィーとも呼ぶ）は、タンパク脂質タンパク質の異常を引き起こす、Ｘ結合遺伝障害である。この異常の結果、乳児は典型的な１歳になる前に死亡する。この疾患に関する治療又は治癒は知られてない。
【０３３８】
レフサム病（フィタン酸オキシダーゼ欠損、遺伝性多発性神経炎性失調、又は遺伝性運動及び感覚ニューロパシーＩＶ、ＨＭＳＮ  ＩＶとも呼ぶ）は、フィタノイル−ＣｏＡヒドロキシラーゼ（ＰＡＨＸ又はＰＨＹＨ）をコード化する遺伝子の変異によって引き起こされる。主な臨床上の特徴は、色素性網膜炎、慢性多発性ニューロパシー、及び小脳徴候である。フィタン酸、異常な分枝鎖脂肪酸（３，７，１１，１５−テトラメチル−ヘキサデカン酸）は、疾患に罹っている患者の組織及び体内に蓄積され、ＰＡＨＸの欠如により代謝することができない。月に１回又は２回行われる血漿瀉血は、身体から酸を効果的に除去し、フィタン酸摂取を制限する食事制限から解放する。
【０３３９】
プリオン関連状態には、ゲルストマン−シュトラウスラー病（ＧＳＤ）、クロイツフェルト−ヤコブ病（ＣＪＤ）、家族性致死性不眠症が含まれ、プリオンタンパク質の異常なアイソフォームは、これらの障害並びにクル及びスクラピー（ヒツジに見られる疾患）の感染性物質として働く可能性がある。プリオンという用語は、「タンパク質感染性物質」に由来する（Ｐｒｕｓｉｎｅｒ、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２１６：１３６〜４４、１９８２）。プリオン関連タンパク質（ＰＲＰ）のタンパク質分解性切断があり、これが、不溶性線維にポリメラーゼするアミロイド原性ペプチドをもたらす。
【０３４０】
サラ病及びその他のタイプの唾液分泌は、シアリン酸貯蔵に関する問題に関係する疾患である。これらは、重篤な乳児形態（即ちＩＳＳＤ）として、又はフィンランドで広まっているゆっくりと進行する成人形態（即ちサラ病）として存在する可能性のある、常染色体劣性神経変性障害である。主な症状は、緊張低下、小脳性運動失調、及び精神遅滞である。これらの状態及び疾患も、緩和し又は寛解する治療を目的とする。
【０３４１】
脱髄をもたらすその他の状態には、感染後脳脊髄炎（急性散在性脳脊髄炎、ＡＤＥＭとも呼ぶ）、髄膜炎、及び脊髄の損傷が含まれる。本明細書に開示される組成物及びコンジュゲートは、これらのその他の脱髄状態を治療するのに使用することも考えられる。
【０３４２】
下記の合成及び生物学的実施例は、本発明を例示するために提供するものであり、本発明の範囲をいかなる方法によっても限定するものではないと解釈されたい。他に特に指示しない限り、すべての温度は摂氏を単位とする。
【実施例】
【０３４３】
以下の実施例において、以下の略号は、以下の意味を有する。略号が定義されていない場合、それは、一般的に受け入れられた意味を有する。
【０３４４】
ＡＣＮ＝アセトニトリル
ｂｓ＝ブロード一重項
ｄ＝二重項
ｄｄ＝二重項の二重項
Ｅｔ３Ｎ＝トリエチルアミン
ｇ＝グラム
ｈ及びｈｒ＝時間
ＨＰＬＣ＝高速（又は圧）液体クロマトグラフィー
ｋｇ＝キログラム
ｋＤａ＝キロダルトン
Ｌ＝リットル
ｍ＝多重項
Ｍ＝モル濃度
ｍｇ＝ミリグラム
ｍｉｎ＝分
ｍＬ＝ミリリットル
ｍｍ＝ミリメートル
ｍＭ＝ミリモル濃度
ｍｍｏｌ＝ミリモル
ｓ＝一重項
ｓａｔ．＝飽和した
ｔ＝三重項
ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸
ＴＬＣ又はｔｌｃ＝薄層クロマトグラフィー
Ｔｓ＝トシル
μＬ＝マイクロリットル
μｇ＝マイクログラム
μｍ＝ミクロン又はマイクロメーター
【０３４５】
一般法：Ｇｅｍｉｎｉ  ２０００又はＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ３００分光計を用いて、プロトン（１Ｈ）及びカーボン（１３Ｃ）核磁気共鳴スペクトル（ＮＭＲ）を得た。ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）プロトンの存在は、３．６ｐｐｍでの大きくブロードな一重項により検出できる。このシグナルの積分は、ＰＥＧ部分の大きさに依存して変化できる。コンジュゲートしたＶＬＡ−４拮抗薬の存在は、コンジュゲートの１Ｈ  ＮＭＲスペクトルでも検出できる。薄層クロマトグラフィーは、シリカ６０  Ｆ２５４（ＥＭＤ  １５３４１−１）の事前塗布シート又は事前塗布ＭＫＣ１８Ｆシリカ６０Ａ（Ｗｈａｔｍａｎ  ４８０３−１１０）上で行った。質量分析は、陽イオン単一４倍モードでＡｇｉｌｅｎｔ質量分析（ＬＣ／ＭＳＤ  ＶＬ）を用いて行った。
【０３４６】
ＰＥＧ生成物及びＰＥＧコンジュゲートのためのＨＰＬＣ方法：
分取逆相ＨＰＬＣは、２１０ｎｍでセットしたＶａｒｉａｎ  ＵＶ検出器を装備したＶａｒｉａｎ  Ｐｒｅｐ  Ｓｔａｒ（モデルＳＤ−１）モジュールを用いて行った。方法Ａ：２０ｍＬ／分で１００分内に３５〜５０％ＡＣＮ＋０．１％ＴＦＡの濃度勾配を通常用いる、Ｖｙｄａｃ  Ｃ１８、３００Å孔径カラム（２５０ｍｍ×２１．２ｍｍ）上での逆相ＨＰＬＣを用いて、ＰＥＧ生成物及びＰＥＧコンジュゲートの試料を精製した。方法Ｂ：６０ｍＬ／分で１００分内に３５〜５０％ＡＣＮ＋０．１％ＴＦＡの濃度勾配を通常用いる、Ｖｙｄａｃ  Ｃ１８、３００Å孔径カラム（２５０ｍｍ×５０ｍｍ）上での逆相ＨＰＬＣを用いて、ＰＥＧ生成物及びコンジュゲートの試料を精製した。
【０３４７】
方法Ｃ：１．５ｍＬ／分の流速で０．１％ＴＦＡを含む４０〜５０％ＡＣＮの濃度勾配を用いる、Ｗａｔｅｒｓ  Ｓｙｍｍｅｔｒｙ  ３００Å孔径、３．５μ  Ｃ１８カラム（１５０ｍｍ×４．６ｍｍ）を装備し、並びに２１０ｎｍでセットされたＡｇｉｌｅｎｔ  １１００可変波長検出器及びＳｅｄｅｘ７５蒸発光散乱検出器（４０℃、ゲイン＝５）と連結させたＡｇｉｌｅｎｔ  Ｓｅｒｉｅｓ  １１００  Ｑｕａｔｅｒｎａｒｙシステムを用いた逆相分析ＨＰＬＣにより、ＰＥＧ生成物及びコンジュゲートの純度を確認した。
【０３４８】
ＰＥＧ試薬：日本油脂株式会社（恵比寿ガーデンプレイスタワー、２０−３恵比寿４丁目、渋谷区、東京、１５０−６０１９）又はＮｅｋｔａｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（１５０  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｒｏａｄ、Ｓａｎ  Ｃａｒｌｏｓ、ＣＡ９４０７０）より、以下の通りにＰＥＧ出発物を入手した：３０ｋＤａのＰＥＧジアミン（日本油脂カタログＳｕｎｂｒｉｇｈｔ  ＤＥ−３００ＰＡ）、５ｋＤａのＢｏｃ−ＮＨ−ＰＥＧ−ＮＨＳエステル（Ｎａｋｔａｒカタログ４Ｍ５３０Ｈ０２）、２０ｋＤａのテトラ−アミン（日本油脂カタログＳｕｎｂｒｉｇｈｔ  ＰＴＥ−２００ＰＡ）、４０ｋＤａの４−アームＰＥＧアルコール（日本油脂カタログＳｕｎｂｒｉｇｈｔ  ＰＴＥ−４００００）、４０ｋＤａの３−アームＰＥＧアルコール（日本油脂カタログＳｕｎｂｒｉｇｈｔ  ＧＬ−４００）。
【０３４９】
（実施例１）
【化７３】
2008505927.tif 000078
水酸化ナトリウム（１０ｇ、０．２５ｍ）を水（３００ｍｌ）に溶解する。この溶液に４−ニトロフェニルアラニン（５０．３ｇ、０．２２ｍ）を加え、完全に溶解するまで攪拌する。得られた溶液に炭酸ナトリウム（２８．８ｇ、０．２６ｍ）を加え、攪拌懸濁液を氷浴中で＋８℃に冷却する。クロロギ酸ベンジル（４４．７ｇ、０．２６ｍ）を激しく攪拌しながら、＋６℃から＋９℃の範囲に内温を維持しつつ滴下添加する。混合物を＋６℃でさらに１時間攪拌し、分液ロートに移し、エーテル（２×１５０ｍｌ）で洗浄する。水相を大きな三角フラスコ（２Ｌ）に仕込み、希薄ＨＣｌ水溶液を用いてｐＨ＝２に注意深く酸性化し、酢酸エチル（４×５００ｍｌ）で抽出する。合わせた抽出物を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させる。溶液を濾過し、濾液を蒸発させ、残渣を酢酸エチル（１５０ｍｌ）に溶解し、ヘキサン（５００ｍｌ）で希釈する。結晶物を濾別し、冷溶媒ですすぎ、空気乾燥させると、Ｃｂｚ−４−ニトロフェニルアラニン７５ｇ（９９．５％収率）が得られる。
【化７４】
2008505927.tif 000079
【０３５０】
Ｃｂｚ−４−ニトロフェニルアラニン（７５ｇ、０．２２ｍ）をジオキサン（３００ｍｌ）に溶解する。得られた攪拌溶液をドライアイス浴中で−２０℃（内温）に冷却する。液化イソブチレン（およそ２９０ｍｌ）を加え、続いて濃硫酸（３５ｍｌ）を等量に３分割し、３０分間隔で加える。酸の添加は極めて大きな発熱工程であり、相当程度の重合を伴う。効率的な機械攪拌がこの段階で重要である。得られた混合物を２０時間攪拌し、周囲温度に加温し、次いで飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２Ｌ）に注意深く注ぎ入れ、酢酸エチル（６００ｍｌ）で希釈する。有機層を分離し、水層を酢酸エチル（２×２００ｍｌ）で抽出する。合わせた抽出物を水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させる。溶液を濾過し、蒸発乾固する。残渣を酢酸エチル／ヘキサン混合物（５００ｍｌ、１：１）に溶解し、シリカゲルのプラグ（約２×２ｉｎ）を通して濾過する。シリカをさらなる量の同一溶媒（合計２Ｌ）ですすぎ、濾液を蒸発させると、完全に保護された４−ニトロフェニルアラニン７３ｇ（２ステップ後８３％）が粘稠性油として得られる。
【化７５】
2008505927.tif 000080
【０３５１】
保護化４−ニトロフェニルアラニン（７３ｇ、０．１８ｍ）をエタノール（５００ｍｌ）に溶解し、酸化白金触媒（１．５ｇ）を加える。得られた溶液を水素雰囲気（５０〜６０ｐｓｉ）下周囲温度で、さらなる水素吸収がなくなるまで（３時間）激しく攪拌する。触媒を濾別し、濾液を蒸発乾固させ、残渣を酢酸エチル（２００ｍｌ）に溶解し、酢酸エチル−ヘキサン混合物（３：２、２Ｌ）を用いるシリカゲルのプラグ（２×２ｉｎ）を通して濾過し、シリカをすすぐ。濾液を濃縮しておよそ２００ｍｌにし、ヘキサン（５００ｍｌ）を加える。結晶性生成物を濾別し、冷溶媒ですすぎ、空気乾燥させる。
【化７６】
2008505927.tif 000081
【０３５２】
（実施例２）
【化７７】
2008505927.tif 000082
実施例１の生成物である１，４−アミノフェニルアラニン（２０ｇ、０．０５４ｍ）をエタノール（２００ｍｌ）に溶解し、ヒューニッヒ塩基（２１ｇ、０．１６２ｍ、３当量）及び２−クロロ−３−ニトロピリジン（１０．３ｇ、０．６５ｍ、１．２当量）で処理した。得られた溶液を窒素雰囲気下に攪拌し、２４時間加熱還流させた。ＬＣ分析は少量の未反応アミンの存在を示した。さらに少量のクロロニトロピリジン（１．１ｇ、０．１３当量）を加え、さらに２４時間還流を続けた。反応混合物を冷却し、蒸発乾固させた。残渣を酢酸エチル（６００ｍｌ）に溶解し、得られた溶液を水（１×２００ｍｌ）、希薄クエン酸水溶液（０．２Ｎ、２×２００ｍｌ）、ブライン（１×２００ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。固体を濾別し、濾液を蒸発させると、深紅色の油３７ｇが得られ、これは過剰のクロロニトロピリジンで汚染された期待する生成物を含んでいた。酢酸エチル：ヘキサン（３：１７）混合物で溶離するフラッシュクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ  ７５Ｌシステム）により、不純な生成物を精製した。純粋な生成物を含むフラクションを合わせ、蒸発させると、深紅色の粘稠性油２６ｇ（９９％）が得られた。
【化７８】
2008505927.tif 000083
【０３５３】
赤色のニトロ化合物（２６ｇ、０．０５４ｍ）をＴＨＦ（３５０ｍｌ）に溶解し、酸化白金触媒（１．３５ｇ）を加えた。得られた混合物を水素雰囲気（５０〜６０ｐｓｉ）下、水素吸収がなくなるまで（２時間）激しく攪拌した。触媒を濾別し、濾液を蒸発乾固させた。残渣を酢酸エチル（１００ｍｌ）に溶解し、結晶化が始まるまでヘキサン（５０ｍｌ）で希釈した。混合物を酢酸エチル／ヘキサン（１：１）混合物（３００ｍｌ）でさらに希釈し、冷蔵庫中で３時間放置した。結晶性固体を濾別し、冷溶媒ですすぎ、空気乾燥させると、生成物２３ｇ、９４％が得られた。
【化７９】
2008505927.tif 000084
【０３５４】
アミノピリジン（１９ｇ、０．０４１ｍ）をジクロロメタン（２００ｍｌ）に懸濁させ、ＣＤＩ（１２ｇ、０．０７４ｍ、１．８当量）を加えた。得られた混合物を周囲温度で２０時間攪拌した。反応混合物を飽和炭酸水素塩水溶液（２×１００ｍｌ）、ブライン（１×１００ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。固体を濾別し、濾液を蒸発乾固させた。残渣を酢酸エチル（熱、３００ｍｌ）に溶解し、結晶化させた。結晶性生成物を濾別し、冷酢酸エチルですすぎ、空気乾燥させると、イミダゾロン１９．９ｇ、８１％が得られた。
【化８０】
2008505927.tif 000085
【０３５５】
（実施例３）
【化８１】
2008505927.tif 000086
実施例２の生成物（４．０ｇ、８．１９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４０ｍｌ）溶液に、粉砕した炭酸カリウム（１．５８ｇ、１１．４７ｍｍｏｌ）を加え、続いてブロモ酢酸メチル（１．０ｍｌ、１１．４７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を窒素下室温で終夜攪拌した。反応混合物を真空下に濃縮し、残渣を酢酸エチル（１００ｍｌ）に溶解した。有機相をＨ２Ｏ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下に濃縮した。粗製物をカラムクロマトグラフィー（１００％酢酸エチル）により精製すると、表題化合物４．５ｇ（１００％）が白色の発泡体として得られた。
【化８２】
2008505927.tif 000087
【０３５６】
（実施例４）
【化８３】
2008505927.tif 000088
実施例３の生成物（２．２５ｇ、４．０１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２０ｍｌ）溶液をＤｅｇｕｓｓａ  Ｐｄ／Ｃ触媒（１１３ｍｇ）と共に、Ｈ２（５５ｐｓｉ）下で終夜置いた。セライトを通して反応混合物を濾過し、真空下に濃縮すると、表題化合物１．６５ｇ（９７％）が茶褐色の油として得られた。Ｒｆ＝０．３２（５％  ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２），ＭＳ  ｍ／Ｚ＝４４９，（Ｍ＋Ｎａ）＋
【化８４】
2008505927.tif 000089
【０３５７】
（実施例５）
【化８５】
2008505927.tif 000090
ピリジン−３−スルホン酸（１２５ｇ、０．７８ｍ）を、機械攪拌機、還流冷却管、温度計及び窒素注入口を装備した１Ｌの３ッ口フラスコに仕込んだ。次に、５塩化リン（２５０ｇ、１．１９ｍ、１．５当量）を加え、続いて直ちにオキシ塩化リン（３３０ｍｌ、３．８ｍ、４．５当量）を加えた。フラスコ内容物を最初に周囲温度で３０分間攪拌し、次いで穏やかに還流するまで（初期温度およそ１１０℃）さらに１時間かけてゆっくり加温し、この温度でおよそ３．５時間維持し、次いでさらに１２時間かけて周囲温度まで再度冷却した。この時間中気体発生が観察された。揮発物を減圧下に（１２ｍｍＨｇ／４０℃で）ストリップし、黄色の半固体残渣をＤＣＭ（１Ｌ）で希釈した。スラリー液を、ｐＨ＝７に維持しながら、攪拌した氷冷飽和炭酸水素塩水溶液にゆっくり注ぎ入れた。気体の発生が観察された。有機層を分離し、水層をＤＣＭで逆抽出した。合わせた抽出物を冷飽和炭酸水素塩水溶液、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。固体を濾別し、濾液を蒸発させると、ピリジン−３−スルホニルクロリドが淡黄色の油状液として得られた、１２３ｇ（９３％純度、８８％理論）。
【化８６】
2008505927.tif 000091
【０３５８】
Ｌ−ペニシラミン（１５０ｇ、１．０ｍ）を、攪拌しながら純水（１５００ｍｌ）に溶解し、氷浴中＋８℃に冷却し、ホルマリン（１５０ｍｌ、３７％水溶液）で処理した。反応混合物を＋８℃で２時間攪拌し、次いで冷却浴を除去し、１２時間攪拌を続けた。透明溶液を減圧下に（１４ｍｍＨｇ／５０゜）濃縮すると白色の残渣が得られた。固体を再度懸濁させ、次いで熱ＭｅＯＨ（２５００ｍｌ）に溶解し、周囲温度で１２時間放置した。白色のフワフワした沈殿物を濾別し、冷メタノールですすいだ。濾液を濃縮し、再び結晶化させた。採取した沈殿物を最初のクロップと合わせ、真空乾燥器中４５ｍｍＨｇにて５５℃で２４時間乾燥させた。（Ｒ）−５，５−ジメチルチアゾリジン−４−カルボン酸の収量は１３８ｇ（＞９９％純度、８６％理論）であった。
【化８７】
2008505927.tif 000092
【０３５９】
機械攪拌機及び温度計を装備した４Ｌ反応器中で、純水（２Ｌ）中リン酸二水素カリウム（４３ｇ、０．３１ｍ）及びリン酸水素二カリウム（１８８．７ｇ、１．０８ｍ）から、緩衝溶液を調製した。（Ｒ）−５，５−ジメチルチアゾリジン−４−カルボン酸（１０７ｇ、０．６７５ｍ）を加え、完全に溶解するまで攪拌した。溶液を氷浴中＋８℃に冷却した。別途調製したピリジン−３−スルホニルクロリド（１２４ｇ、０．６９５ｍ）のＤＣＭ（１２５ｍｌ）溶液を、激しく攪拌しながら１時間かけて反応器に滴下添加した。反応混合物のｐＨを監視し、４時間後ｐＨ＝５であることが分かり、固体の炭酸水素塩を加えることによりｐＨ＝６に合わせた。混合物を１８時間かけて周囲温度に加温した。希薄硫酸水溶液でｐＨを２に合わせ、１時間攪拌し、沈殿した黄色の固体を濾別し、水ですすいで中性にした。固体のケーキを２Ｌ三角フラスコに移し、５分間時々攪拌しながらＤＣＭ（５００ｍｌ）に懸濁させ、再び濾別した。濾過ケーキをＤＣＭで洗浄し、空気乾燥させた。表題化合物である（Ｒ）−５，５−ジメチル−３−（ピリジン−３−イルスルホニル）チアゾリジン−４−カルボン酸の収量は、１４８．９ｇ（９８％純度、７３％理論）であった。
【化８８】
2008505927.tif 000093
【０３６０】
（実施例６）
【化８９】
2008505927.tif 000094
実施例４の生成物（１．６５ｇ、３．８８ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（３５ｍｌ）溶液に、実施例５の生成物（１．０６ｇ、３．５３ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１．７５ｇ、３．８８ｍｍｏｌ）、及びトリエチルアミン（５．３ｍｌ）を加えた。均一の茶褐色の溶液を窒素下７２時間攪拌した。有機反応混合物を真空下に濃縮し、酢酸エチル（４０ｍｌ）に溶解し、１ＮのＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ３、及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下に濃縮すると、オレンジ色の発泡体として３が２．６７ｇ（９７％）得られた。
【化９０】
2008505927.tif 000095
【０３６１】
（実施例７）
【化９１】
2008505927.tif 000096
実施例６の生成物（２．６７ｇ、３．７５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１２ｍｌ）溶液に、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（２４５ｍｇ、５．９７ｍｍｏｌ）のＨ２Ｏ（３ｍｌ）溶液を加えた。反応混合物を窒素下室温で終夜攪拌した。完了時、反応混合物を真空下に濃縮し、Ｈ２Ｏ（１００ｍｌ）に溶解し、１ＭのＨＣｌ溶液でｐＨ４に酸性化した。所望の生成物が白色の固体として沈殿し、濾過し、Ｈ２Ｏですすぐと、表題化合物１．８７ｇ（７２％）が得られた。
【化９２】
2008505927.tif 000097
【０３６２】
（実施例８）
【化９３】
2008505927.tif 000098
実施例２の生成物（５２ｇ、０．１０６ｍ）をＭｅＯＨ（４５０ｍｌ）にスラリー化し、水素化触媒（８．７ｇ、５％Ｐｄ／Ｃ、Ｄｅｇｕｓｓａ）を加え、さらなる吸収がなくなるまで（約２時間）混合物を水素雰囲気下（６０ｐｓｉ）に攪拌した。沈殿した固体を溶解するためにＴＨＦ（１５０ｍｌ）を加え、セライトのプラグを通して溶液を濾過し、ＤＣＭを用いて濾過材をすすいだ。濾液を蒸発乾固させ、ＤＣＭ（３００ｍｌ）に再溶解し、再度ストリップした。この操作を２回繰り返した。発泡性固体を高真空下に３時間保持した。表題化合物の収量は３８．３ｇ（理論の１０１％）であった。
【化９４】
2008505927.tif 000099
【０３６３】
（実施例９）
【化９５】
2008505927.tif 000100
実施例８の生成物（３８．３ｇ、０．１０６ｍと仮定）をＤＣＭ（５００ｍｌ）に溶解し、Ｎ−メチルモルホリン（２７ｇ、３０ｍｌ、０．２６６ｍ、２．５当量）、ＨＯＢｔ（１７．３ｇ、０．１２８ｍ、１．２当量）、及び実施例５の生成物（３３．８ｇ、０．１１２ｍ、１．０６当量）で順次処理した。得られた非均一溶液を氷浴中で＋４℃に冷却し、ＥＤＣ（２２．５ｇ、０．１１７ｍ、１．１当量）で一度に処理した。反応混合物を攪拌し、次の４時間をかけて、次いでさらに１８時間周囲温度に加温した。溶媒をストリップし、残渣を酢酸エチル（１．２Ｌ）に溶解し、飽和炭酸水素塩水溶液（２×２５０ｍｌ）、水（２５０ｍｌ）、ブライン（３００ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶液を濾過し、蒸発乾固させると、薄オレンジ色の粘稠性油７６ｇ（＞＞１００％）が得られた。粗製の生成物をシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（Ｂｉｏｔａｇｅ  ７５Ｌ、酢酸エチル／メタノール（３％）混合物中）により精製した。純粋な生成物を含むフラクションを合わせ、蒸発させると、表題化合物５４ｇ（８３％収率）が得られた。
【化９６】
2008505927.tif 000101
【０３６４】
（実施例１０）
【化９７】
2008505927.tif 000102
ＴＨＦ（２００ｍＬ）中トリフルオロ酪酸エチル（１５ｇ、８９ｍｍｏｌ）及びギ酸エチル（３６ｍＬ、４４４ｍｍｏｌ）の氷冷溶液に、Ｎ２下ＴＨＦ中１ＭのＫＯｔＢｕ溶液（１０７ｍｍｏｌ、１０７ｍＬ）を２５分かけて加えた。１５分後、氷浴を除去し、反応混合物を室温で１時間攪拌した。次いでさらにギ酸エチル（１８ｍＬ、２２２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を終夜攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を冷エーテル（１００ｍＬ）と冷水（３００ｍＬ）との間で分配した。濃ＨＣｌを用いて水相のｐＨを２に合わせた。生成物をジクロロメタン（１×１００ｍＬ、４５×７５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物をブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、濃縮すると、表題化合物が濃厚油として得られ、これは放置すると固化した、１０．２ｇ（５８．５％）。
【化９８】
2008505927.tif 000103
【０３６５】
（実施例１１）
【化９９】
2008505927.tif 000104
実施例１０の生成物（１０ｇ、５１ｍｍｏｌ）及びジエチルグアニジンスルフェート（８．３ｇ、２５．２ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（６０ｍＬ）溶液にＮ２下、ＥｔＯＨ中ＮａＯＥｔの２１％溶液（２０．７ｍＬ、５５．５ｍｍｏｌ）を１０分間かけて加えた。次いで反応混合物を５時間加熱還流させた。不均一溶液を冷却し、冷水（１００ｍＬ）に注ぎ入れると、均一溶液が得られた。濃ＨＣｌ及び１ＮのＨＣｌを用いて溶液のｐＨをおよそ３．５に合わせた。固体が溶液から沈殿し、これを濾取した。薄黄褐色の固体を水で洗浄し、空気乾燥させると、表題化合物２．９ｇ（２３％）が得られた。
【化１００】
2008505927.tif 000105
【０３６６】
（実施例１２）
【化１０１】
2008505927.tif 000106
実施例１１の生成物（２．０ｇ、８．０２ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（１．５ｍＬ、８．８３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（．９８ｇ、０．８ｍｍｏｌ）、及びジクロロメタン（３０ｍＬ）をフラスコに仕込んだ。混合物を０℃に冷却し、無水トリフルオロ酢酸（１．５ｍＬ、８．８３ｍｍｏｌ）を加えた。反応物は均一になり、０℃で３時間攪拌した。混合物を飽和ＮａＨＣＯ３でクエンチし、ジクロロメタンで抽出した。有機相を０．２Ｎクエン酸で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下に濃縮すると、表題化合物２．８７ｇ（９４％）が茶褐色の固体として得られた。
【化１０２】
2008505927.tif 000107
【０３６７】
（実施例１３）
【化１０３】
2008505927.tif 000108
実施例１２の生成物（１．３ｇ、３．５ｍｍｏｌ）、Ｈ−Ｐｈｅ（ｐ−ＮＯ２）ＯｔＢｕ（１．１ｇ、４．２ｍｍｏｌ）、及びＤＩＥＡ（０．９ｍＬ、５．３ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（１４ｍＬ）溶液を、Ｎ２下終夜加熱還流させた。翌日さらにＨ−Ｐｈｅ（ｐ−ＮＯ２）ＯｔＢｕ（０．８ｇ、３ｍｍｏｌ）を加え、３日間還流を続けた。次いで反応混合物を冷却し、濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）に溶解し、有機部分を０．５ＮのＫＨＳＯ４（３×５０ｍＬ）、水（１×５０ｍＬ）、ブライン（１×１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、濃縮すると、茶褐色のゴムが得られた。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（５：１ヘキサン類／ＥｔＯＡｃ）により精製すると、表題化合物６４０ｍｇ（３８％）が金色のゴムとして得られた。
【化１０４】
2008505927.tif 000109
【０３６８】
（実施例１４）
【化１０５】
2008505927.tif 000110
実施例１３の生成物（６３５ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）を無水ＥｔＯＨ（５ｍＬ）に溶解し、これにＰｄ／Ｃ（１０重量％、３５ｍｇ）を加えた。反応物を水素化（４５ｐｓｉのＨ２）に２．５時間供し、その時点でＰｄ／Ｃ（１０重量％、５０ｍｇ）を加え、反応混合物を再度水素化（４５ｐｓｉのＨ２）に終夜供した。セライトのパッドを通して反応混合物を濾過し、濾液を濃縮すると、表題化合物４５２ｍｇ（７６％）が得られた。
【化１０６】
2008505927.tif 000111
【０３６９】
（実施例１５）
【化１０７】
2008505927.tif 000112
実施例１４の生成物（５９８ｍｇ、１．２８ｍｍｏｌ）、２−クロロ−３−ニトロピリジン（２４３ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）、及びＤＩＥＡ（０．６７ｍＬ、３．８３ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（５ｍＬ）溶液をＮ２下加熱還流させた。翌日反応物を冷却し、さらに２−クロロ−３−ニトロピリジン（４０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（０．１１ｍＬ、０．６０ｍｍｏｌ）を加え、反応物を１日間加熱還流させた。次いで反応混合物を濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）に溶解した。有機相を水（２×２０ｍＬ）で洗浄した。合わせた水洗液をＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）で逆抽出した。合わせた有機抽出物を０．２Ｎクエン酸（３×２０ｍＬ）、水（１×１０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（３×２０ｍＬ）、ブライン（１×１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、ストリップするとオレンジ色のゴムが得られた。４：１ヘキサン類／ＥｔＯＡｃで溶離するフラッシュクロマトグラフィー（Ｒｆ＝０．１４）により粗製の生成物を精製すると、表題化合物６１０ｍｇ（８１％）が赤色の油として得られた。
【化１０８】
2008505927.tif 000113
【０３７０】
（実施例１６）
【化１０９】
2008505927.tif 000114
実施例１５の生成物（６１０ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）の無水ＥｔＯＨ（５ｍＬ）溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０重量％、６０ｍｇ）を加えた。混合物を水素化（４５ｐｓｉのＨ２）に終夜供した。翌日、セライトを通して反応混合物を濾過し、濾液を濃縮すると、表題化合物５００ｍｇ（８７％）が得られた。
【化１１０】
2008505927.tif 000115
【０３７１】
（実施例１７）
【化１１１】
2008505927.tif 000116
実施例１６の生成物（１４１ｍｇ、０．２５０ｍｍｏｌ）及びＣＤＩ（６２ｍｇ、０．３７８ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ）溶液を終夜攪拌した。翌日、さらにＣＤＩ（３０ｍｇ、０．１８５ｍｍｏｌ）を加え、反応物をさらに１日攪拌した。次いで反応混合物を濃縮し、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）に溶解し、有機部分を０．２Ｎクエン酸（３×５ｍＬ）、水（１×５ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（３×５ｍＬ）、ブライン（１×５ｍＬ）で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、濃縮すると、表題化合物６９ｍｇ（４７％）が発泡体として得られ、これをさらには精製せずに使用した。
【化１１２】
2008505927.tif 000117
【０３７２】
（実施例１８）
【化１１３】
2008505927.tif 000118
４，６−ジクロロ−５−アミノピリミジン（５．０ｇ、３０．７ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（３０ｍＬ）溶液に、Ｎａ２Ｓ・９Ｈ２Ｏ（７．４ｇ、３０．８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜攪拌した。次いで水（４０ｍＬ）を混合物に加え、溶液を減圧下に蒸発させておよそ６ｍＬにした。この溶液に濃ＨＣｌ（０．５ｍＬ）及び水を加えると、生成物が沈殿した。溶液を濾過し、オレンジ色の固体を水で洗浄し、乾燥させると、表題化合物４．３ｇ（８６％）が得られた。
【化１１４】
2008505927.tif 000119
【０３７３】
（実施例１９）
【化１１５】
2008505927.tif 000120
濃ＮＨ４ＯＨ（４ｍＬ）に溶解した実施例１８の生成物（４．３ｇ、２６ｍｍｏｌ）に、ＥｔＯＨ（４０ｍＬ）を加えた。この溶液に、ラネーニッケル（過剰）を一部ずつ加えた。反応物を室温で終夜攪拌し、次いで８０℃で２時間加熱した。セライトを通して混合物を濾過し、濾液を濃縮した。ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類を用いるシリカ上でのフラッシュクロマトグラフィーにより粗製の生成物を精製すると、表題化合物１．６ｇ（４７％）が黄色の固体として得られた。
【化１１６】
2008505927.tif 000121
【０３７４】
（実施例２０）
【化１１７】
2008505927.tif 000122
ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）及びＨＯＡｃ（０．５ｍＬ）中の実施例１９の生成物（０．５１ｇ、３．９ｍｍｏｌ）に、ＣＨ３ＣＨＯ（０．５２ｍＬ、９．２ｍｍｏｌ）を加えた。次いでＮａＢＨ３ＣＮ（５９０ｍｇ、９．２ｍｍｏｌ）を一度に加えた。反応物を室温で終夜攪拌し、さらにＨＯＡｃ、ＣＨ３ＣＨＯ、及びＮａＢＨ３ＣＮを加えた。反応物を終夜攪拌し、濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃ及び飽和ＮａＨＣＯ３に溶解した。分離した水層をＥｔＯＡｃで逆抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、濃縮して残渣を得た。残渣をＭｅＯＨに溶解し、上述の通りにＨＯＡｃ、ＣＨ３ＣＨＯ及びＮａＢＨ３ＣＮで処理した。上記した手順を行った後、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類を用いるシリカ上でのフラッシュクロマトグラフィーにより粗製の生成物を精製すると、表題化合物０．３５ｇ（５７％）が黄色の油として得られた。
【化１１８】
2008505927.tif 000123
【０３７５】
（実施例２１）
【化１１９】
2008505927.tif 000124
ＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解した実施例２０の生成物（７０ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）に、ＴＥＡ（９３μＬ）及びイソニコチノイルクロリド（０．１２ｇ、０．６７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２日間攪拌し、次いでＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯ３との間で分配した。分離した水層をＥｔＯＡｃで逆抽出した。合わせた有機層を乾燥させ、濃縮すると、表題化合物６７ｍｇ（５７％）が得られ、これをさらには精製せずに使用した。
【化１２０】
2008505927.tif 000125
注意：１Ｈ  ＮＭＲは、すべてのピークが幅広であることが証明するように、回転異性体の証拠を示す。ＭＳ（ｍ／ｚ）：ＭＨ＋＝２６３。
【０３７６】
（実施例２２）
【化１２１】
2008505927.tif 000126
実施例２１の生成物（０．１１ｇ、０．４２ｍｍｏｌ）及び実施例８の生成物（０．１３５ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）のＩＰＡ（２．５ｍｌ）溶液に、ＤＩＥＡ（０．３５ｍｌ、１．９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を封管中１３０℃で２日間攪拌した。粗製の混合物を濃縮し、ＣＨ２Ｃｌ２中０〜１０％ＭｅＯＨの溶媒濃度勾配でフラッシュカラムクロマトグラフィーにより油を精製すると、表題化合物が油として得られた。
【化１２２】
2008505927.tif 000127
【０３７７】
（実施例２３）
【化１２３】
2008505927.tif 000128
ＭｅＯＨ（７ｍＬ）中の２，４−ジクロロ−５−ニトロピリミジン（２．０ｇ、１０．３ｍｍｏｌ）に、Ｎ２下０℃でＮａＯＭｅ（ＭｅＯＨ中０．５Ｍ、２５ｍＬ）を滴下添加した。添加完結後、反応混合物を０℃で１５分間攪拌した。次いでジエチルアミン（５ｍＬ）を加え、混合物を室温で終夜攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃとＨ２Ｏとの間で分配した。有機層を乾燥させ、濃縮すると残渣が得られ、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類を用いるシリカ上でのフラッシュクロマトグラフィーによりこれを精製すると、表題化合物が灰白色の固体として得られた（１．１ｇ、４．９ｍｍｏｌ、４７％収率）。
【化１２４】
2008505927.tif 000129
【０３７８】
（実施例２４）
【化１２５】
2008505927.tif 000130
ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ（１：１、２０ｍＬ）中の実施例２３の生成物（１．１ｇ、４．９ｍｍｏｌ）に、パール振盪器中Ｐｄ／Ｃ（５％  ｄｅｇｕｓｓａ、０．５ｇ）及びＨ２（５０ｐｓｉ）で終夜還元した。反応混合物を濾過し、濾液を減圧下に濃縮すると、表題化合物が固体として得られた（０．８５ｇ、４．３ｍｍｏｌ、８８．５％収率）。
【化１２６】
2008505927.tif 000131
【０３７９】
（実施例２５）
【化１２７】
2008505927.tif 000132
ＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）及びＴＥＡ（１．４ｍＬ、１０ｍｍｏｌ）中の実施例２４の生成物（０．８５ｇ、４．３ｍｍｏｌ）に、イソニコチニルクロリドＨＣｌ塩（１．１３ｇ、６．３ｍｍｏｌ）を加えた。１５分後、ＴＬＣは出発物を示さなかった。混合物をＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯ３との間で抽出した。水層をＥｔＯＡｃで２回洗浄した。合わせた有機層を飽和ＮａＨＣＯ３及びブラインで洗浄した。ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮すると、表題化合物が茶褐色の固体として得られた（１．３ｇ、４．３ｍｍｏｌ、１００％収率）。
【化１２８】
2008505927.tif 000133
【０３８０】
（実施例２６）
【化１２９】
2008505927.tif 000134
ＴＨＦ（１ｍＬ）中の実施例２５の生成物（１００ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）に、ＫＯｔＢｕ（ＴＨＦ中１Ｍ、０．５ｍＬ）を、続いてＥｔＩ（４０μＬ、０．５ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。反応混合物を室温で終夜攪拌した。ＴＬＣは、出発物が消失したことを示した。混合物をＥｔＯＡｃとＨ２Ｏとの間で分配した。水層をＥｔＯＡｃで洗浄した。合わせた有機層を飽和ＮａＨＣＯ３及びブラインで洗浄した。乾燥させ、濃縮すると、表題化合物（９０ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ、８３％）が得られ、これをさらには精製せずに使用した。
【化１３０】
2008505927.tif 000135
【０３８１】
（実施例２７）
【化１３１】
2008505927.tif 000136
ＤＭＦ（４ｍＬ）中の実施例２６の生成物（２００ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）に、ＥｔＳＮａ（６６ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１００℃で１時間加熱した。ＬＣ／ＭＳは、出発物がまだ存在することを示した。さらにＮａＳＥｔ（６６ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）を加え、反応物をさらに２時間加熱した。ＬＣ／ＭＳは、生成物のみ示した。ＤＭＦを減圧下に除去し、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）を、続いて濃ＨＣｌ（０．１３２ｍＬ）を加えた。溶媒を蒸発させると残渣が得られた。ＥｔＯＨに溶解し、濾過した。濾液を濃縮すると、表題化合物（１９０ｍｇ、１００％）が得られ、これをさらには精製せずに使用した。
【化１３２】
2008505927.tif 000137
【０３８２】
（実施例２８）
【化１３３】
2008505927.tif 000138
ＰＯＣｌ３（３ｍＬ）中の実施例２７の生成物（７０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）に、室温でジエチルアニリン（３０μＬ）を加えた。反応混合物を１００℃に３０分間加熱した。次いで濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃとＨ２Ｏとの間で分配した。有機層をＨ２Ｏで２回洗浄した。次いで乾燥させ、濃縮すると、表題化合物（５０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、６８％）が得られ、さらには精製せずに次の反応に使用した。
【化１３４】
2008505927.tif 000139
【０３８３】
（実施例２９）
【化１３５】
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実施例２８の生成物（５０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）及び実施例８の生成物（６０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）のＩＰＡ（０．７５ｍｌ）溶液に、ＤＩＥＡ（０．１５ｍＬ、０．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を封管中１３０℃で７日間攪拌した。粗製の混合物を濃縮し、分取ＨＰＬＣ及びシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーにより残渣を精製すると、灰白色の固体（１０ｍｇ）が得られた。
【化１３６】
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【０３８４】
（実施例３０）
【化１３７】
2008505927.tif 000142
化合物２５（２０ｇ、０．１１ｍｏｌ）をＮ２下ＣＨ２Ｃｌ２（５００ｍＬ）に溶解した。反応混合物を０℃に冷却した。トリエチルアミン（１８．１２ｍＬ、０．１３ｍｏｌ）を加え、続いて無水トリフルオロ酢酸（１８．１４ｍＬ、０．１３ｍｏｌ）を一部ずつ加えた。反応物を室温に終夜加温した。反応混合物を真空下に濃縮し、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に溶解した。有機相をＨ２Ｏ、飽和ＮａＨＣＯ３、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下に濃縮すると、２９が黄色の固体として２９．７ｇ（９６％）得られた。
【化１３８】
2008505927.tif 000143
【０３８５】
化合物２９（２９．２６ｇ、０．１０ｍｏｌ）を、４Ｎ  ＨＣＬのジオキサン溶液（２００ｍＬ）を含む５００ｍＬフラスコに、０℃で一部ずつ加えた。反応物を氷浴中４時間攪拌し、その際ＴＬＣ（３：１ヘキサン類：酢酸エチル）は１００％生成物に転換していることを示した。反応混合物を真空下に濃縮し、酢酸エチル（５００ｍＬ）で処理した。生成物を濾過し、乾燥させると、３０が白色のモノ塩酸塩として２２．５ｇ（９９％）得られた。
【化１３９】
2008505927.tif 000144
【０３８６】
２５０ｍＬフラスコに、３０（１．０ｇ、４．６ｍｍｏｌ）、ＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）、及び飽和ＮａＨＣＯ３（４０ｍＬ）を仕込んだ。反応混合物を０℃で１５分間激しく攪拌した。攪拌を止め、層を分離させた。２．０Ｍホスゲンのトルエン溶液（９ｍＬ、１８ｍｍｏｌ）を反応混合物に加え、温度を０℃に維持しながらこれを３０分間激しく攪拌した。層を分離し、水相をＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下に濃縮した。残渣をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、真空下に再度濃縮すると、３１が白色の固体として１．０ｇ（９２％）得られた。
【化１４０】
2008505927.tif 000145
【０３８７】
２５ｍＬフラスコに、２４（５．９７ｇ、０．０１１ｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１．３４ｇ、０．０１１ｍｏｌ）、及びＣＨ２Ｃｌ２（２２ｍＬ）を仕込んだ。トリエチルアミン（２．４ｍＬ、０．０１７ｍｏｌ）を、続いて３１（４．２ｇ、０．０１７ｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２０時間加熱還流させた。反応混合物を真空下に濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶解した。有機相を飽和ＮａＨＣＯ３、Ｈ２Ｏ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下に濃縮すると、淡紅色の発泡体９．３ｇが得られた。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（５０％酢酸エチル／ヘキサン類から７５％酢酸エチル／ヘキサン類の濃度勾配）により精製すると、３２が薄淡紅色の発泡体として６．１ｇ（７６％）得られた。
【化１４１】
2008505927.tif 000146
【０３８８】
ＭｅＯＨ（９０ｍＬ）に溶解した３２（６．１１ｇ、８．４ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸カリウム（５．７９ｇ、４２ｍｍｏｌ）のＨ２Ｏ（１０ｍＬ）溶液を加えた。反応物を室温で１５分間攪拌し、次いで真空下に濃縮した。残渣を濾過し、多量のＨ２Ｏで洗浄すると、３３が白色の固体として４．６５ｇ（８８％）得られた。
【化１４２】
2008505927.tif 000147
【０３８９】
２５０ｍＬフラスコに３３（２．５ｇ、３．９ｍｍｏｌ）、ＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）、及び飽和ＮａＨＣＯ３（４０ｍＬ）を仕込んだ。反応混合物を０℃で１５分間激しく攪拌した。攪拌を止め、層を分離させた。２．０Ｍホスゲンのトルエン溶液（７．９ｍＬ、１６ｍｍｏｌ）を反応混合物に素早く加え、温度を０℃に維持しながらこれを６０分間激しく攪拌した。層を分離し、水相をＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層を０．２Ｎクエン酸、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下に濃縮すると、２．８ｇ（１００％）の白色の発泡体が得られた。１００％酢酸エチルで溶離するシリカプラグを通して粗製物を精製すると、４０が白色の発泡体として２．２ｇ（７８％）得られた。
【化１４３】
2008505927.tif 000148
【０３９０】
（実施例３１）
Ａ．カルバメート連結ビス−ＰＥＧコンジュゲートｔ−ブチルエステルの合成
【化１４４】
2008505927.tif 000149
国際公開特許第９２／１６５５５号を修飾した方法を元にカルバメート連結コンジュゲートを調製し、これは参照により本明細書に援用される。それゆえ、６ｋＤａのＰＥＧ−ジオール（５００ｍｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）を最小量のＣＨ２Ｃｌ２（０．１ｍＬ）に溶解した。これに２．０Ｍホスゲンのトルエン溶液（０．６ｍＬ、１．２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で１８時間攪拌し、次いで真空下に濃縮すると、６ｋＤａのＰＥＧビス−クロロホルメート５００ｍｇ（１００％）が白色の固体として得られた。
【０３９１】
３３（２１１ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ）溶液（実施例３０参照）を、ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）に溶解した６ｋＤａのＰＥＧビス−クロロホルメート（５００ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）に加えた。トリエチルアミン（１１μＬ、０．０８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１８時間攪拌した。反応混合物を真空下に濃縮し、残渣をＭｅＯＨ（１０ｍＬ）に溶解した。２％架橋ポリスチレンスルホン酸樹脂（４１０ｍｇ）を加え、反応容器を２時間攪拌した。混合物を濾過し、濾液を真空下に濃縮すると、白色の固体が５００ｍｇ（８７％）得られた。一部の物質（２４６ｍｇ）をＨＰＬＣにより精製すると、６ｋＤａのＰＥＧビス−コンジュゲートｔ−ブチルエステル１５６ｍｇが白色の固体として得られた。ＨＰＬＣは、コンジュゲートが＞９９％純度であると判定した（保持時間＝９．６５５分）。
【化１４５】
2008505927.tif 000150
【０３９２】
Ｂ．カルバメート連結ビス−ＰＥＧコンジュゲートの合成
精製した６ｋＤａのカルバメート連結ビス−ＰＥＧコンジュゲートｔ−ブチルエステル（１００ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）をギ酸（５ｍＬ）に溶解し、４０℃で２４時間加熱した。反応物を真空下に濃縮した。残渣を水に溶解し、真空下に濃縮し、再度水に溶解し、凍結乾燥させると、６ｋＤａのカルバメート連結ビス−ＰＥＧコンジュゲートカルボン酸１００ｍｇ（１００％）が白色の粉体として得られた。ＨＰＬＣは、コンジュゲートが＞９９％純度であると判定した（保持時間＝７．６３分）。
【化１４６】
2008505927.tif 000151
【０３９３】
（実施例３２）
Ａ．カルバメート連結オクタ−ＰＥＧコンジュゲートｔ−ブチルエステルの合成
【化１４７】
2008505927.tif 000152
【０３９４】
上記実施例３１に使用した手順に従い、オクタ−ペグ化ハブ分子を用いることにより、表題化合物を調製した。
【０３９５】
（実施例３３）
【化１４８】
2008505927.tif 000153
【０３９６】
ニトロ−フェニルエステル（１０１）
【化１４９】
2008505927.tif 000154
１００（１００ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）及び４−ニトロフェノール（２４ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（０．７ｍＬ）溶液を氷浴中冷却した。ＥＤＣ（３３ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（０．７ｍＬ）懸濁液を加え、反応物を０℃で４時間攪拌した。反応物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、０．２Ｎクエン酸で洗浄した。有機層を１０％Ｋ２ＣＯ３、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下に濃縮すると、１０１が９０ｍｇ（９６％）得られ、これを直ちに使用した。
【化１５０】
2008505927.tif 000155
【化１５１】
2008505927.tif 000156
【０３９７】
４０ｋＤａのＢｏｃ−保護化ＰＥＧジアミン
３０ｋＤａのＰＥＧジアミン（１ｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）及び５ｋＤａのＢｏｃ−ＮＨ−ＰＥＧ−ＮＨＳエステル（０．６７ｇ、０．１３ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）に溶解した。ジイソプロピルエチルアミン（０．１１６ｍＬ、０．６７ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で１８時間攪拌した。反応物を真空下に濃縮すると、粗製の生成物が得られた。ＨＰＬＣ方法Ｂに従い残渣を精製すると、４０ｋＤａのＢｏｃ−保護化ＰＥＧジアミン０．４６ｇが白色の固体として得られた。ＨＰＬＣ方法Ｃは、生成物が＞９６％純度であると判定した（保持時間＝７．６分）。
【化１５２】
2008505927.tif 000157
【化１５３】
2008505927.tif 000158
【０３９８】
４０ｋＤａのＰＥＧジアミン
４０ｋＤａのＢｏｃ−保護化ＰＥＧジアミン（０．２ｇ、０．００５ｍｍｏｌ）をＴＦＡ（４ｍＬ）に溶解し、室温で２時間攪拌した。反応物を真空下に濃縮すると、粗製の４０ｋＤａのＰＥＧジアミン２００ｍｇ（１００％）がベージュ色の残渣として得られた。ＨＰＬＣ方法Ｃは、生成物が＞９６％純度であると判定した（保持時間＝６．５分）。
【化１５４】
2008505927.tif 000159
【０３９９】
ｔ−ブチルエステル（１０２）
４０ｋＤａのＰＥＧジアミン（０．２ｇ、０．００５ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）に溶解した。ジイソプロピルエチルアミン（１７μＬ、０．１ｍｍｏｌ）を加え、続いて化合物１０１（０．０８２ｇ、０．１ｍｍｏｌ）を加えた。さらにジイソプロピルエチルアミン（１７μＬ）を加え、反応物を室温で１８時間攪拌した。反応物を真空下に濃縮すると、粗製の１０２が白色の固体として３００ｍｇ（１５０％）得られた。ＨＰＬＣ方法Ｃは、生成物が＞７０％純度であると判定した（保持時間＝８．９分）。粗製の生成物をそのまま使用した。
【０４００】
コンジュゲート１０３
１０２（０．３ｇ、０．００７ｍｍｏｌ）をギ酸（５ｍＬ）に溶解し、４０℃で２４時間加熱した。反応物を真空下に濃縮し、ＨＰＬＣ方法Ａに従い精製すると、１０３が白色の固体として０．１４ｇ（６８％）得られた。ＨＰＬＣ方法Ｃは、コンジュゲートが＞９９％純度であると判定した（保持時間＝７．３分）。
【化１５５】
2008505927.tif 000160
【０４０１】
（実施例３４）
【化１５６】
2008505927.tif 000161
【０４０２】
ポリマーの合成
【化１５７】
2008505927.tif 000162
【０４０３】
４０ｋＤａのＢｏｃ−保護化ＰＥＧテトラ−アミン
２０ｋＤａのＰＥＧテトラ−アミン（０．５ｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）及び５ｋＤａのＢｏｃ−ＮＨ−ＰＥＧ−ＮＨＳエステル（１ｇ、０．２ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に溶解した。ジイソプロピルエチルアミン（０．０８７ｍＬ、０．５ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で１８時間攪拌した。反応物を真空下に濃縮し、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）に溶解した。２％架橋ポリスチレンスルホン酸樹脂（１．１７ｇ）を加え、反応容器を２時間攪拌した。混合物を濾過し、真空下に濃縮すると、粗製の生成物１．４ｇがベージュ色の固体として得られた。ＨＰＬＣ方法Ｂに従い残渣を精製すると、４０ｋＤａのＢｏｃ−保護化ＰＥＧテトラ−アミン０．４４ｇ（４４％）が白色の固体として得られた。ＨＰＬＣ方法Ｃは、生成物が＞９６％純度であると判定した（保持時間＝８．４分）。
【化１５８】
2008505927.tif 000163
【０４０４】
４０ｋＤａのＰＥＧテトラ−アミン
４０ｋＤａのＢｏｃ−保護化ＰＥＧテトラ−アミン（０．１ｇ、０．００２５ｍｍｏｌ）をＴＦＡ（４ｍＬ）に溶解し、室温で１．５時間攪拌した。反応物を真空下に濃縮すると、４０ｋＤａのＰＥＧテトラ−アミン１２０ｍｇが透明な残渣として得られた。ＨＰＬＣ方法Ｃは、生成物が＞９６％純度であると判定した（保持時間＝６．２分）。
【化１５９】
2008505927.tif 000164
【０４０５】
ｔ−ブチルエステル（１０４）
４０ｋＤａのＰＥＧテトラ−アミン（０．１ｇ、０．００２５ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）に溶解した。ジイソプロピルエチルアミン（９μＬ、０．０５ｍｍｏｌ）を加え、続いて化合物１０１（８２ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を加えた。さらにジイソプロピルエチルアミン（９μＬ）を加え、反応物を室温で４８時間攪拌した。反応物を真空下に濃縮すると、粗製の１０４が白色の固体として１１０ｍｇ得られた。ＨＰＬＣ方法Ｃは、生成物が＞８０％純度であると判定した（保持時間＝１０．９分）。
【０４０６】
コンジュゲート１０５
１０４（０．１ｇ、０．００２４ｍｍｏｌ）をギ酸（５ｍＬ）に溶解し、４０℃で２４時間加熱した。反応物を真空下に濃縮し、ＨＰＬＣ方法Ａに従い精製すると、１０５が白色の固体として０．０５ｇ（４８％）得られた。ＨＰＬＣ方法Ｃは、コンジュゲートが＞９９％純度であると判定した（保持時間＝７．６分）。
【化１６０】
2008505927.tif 000165
【０４０７】
（実施例３５）
【化１６１】
2008505927.tif 000166
【０４０８】
ｔ−ブチルエステル（１０６）
４０ｋＤａのＰＥＧテトラ−アミン（３７ｍｇ、０．０００９２５ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（０．５ｍｇ、０．００３７ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（０．５ｍＬ）に溶解した。トリエチルアミン（３μＬ、０．０１９ｍｍｏｌ）を加え、続いて４０（２６ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）を加えた。さらにトリエチルアミン（３μＬ）を加え、反応物を室温で１８時間攪拌した。反応物を真空下に濃縮すると、粗製の１０６が白色の固体として３４ｍｇ得られた。ＨＰＬＣ方法Ｃは、生成物が＞８０％純度であると判定した（保持時間＝１０．９分）。
【０４０９】
コンジュゲート１０７
１０６（３４ｍｇ、０．０００８ｍｍｏｌ）をギ酸（４ｍＬ）に溶解し、４０℃で２４時間加熱した。反応物を真空下に濃縮し、ＨＰＬＣ方法Ａに従い精製すると、１０７が白色の固体として１７ｍｇ（５０％）得られた。ＨＰＬＣ方法Ｃは、コンジュゲートが＞９９％純度であると判定した（保持時間＝７．６分）。
【化１６２】
2008505927.tif 000167
【０４１０】
（実施例３６）
【化１６３】
2008505927.tif 000168
【０４１１】
４０ｋＤａのＰＥＧテトラ−クロロホルメート
４０ｋＤａの４−アームＰＥＧアルコール（０．２ｇ、０．００５ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）に溶解した。これに２．０Ｍホスゲンのトルエン溶液（０．１５ｍＬ、０．３ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で１８時間攪拌した。反応物を真空下に濃縮すると、４０ｋＤａのＰＥＧテトラ−クロロホルメート２００ｍｇが白色の固体として得られた。
【０４１２】
ｔ−ブチルエステル（１０８）
４０ｋＤａのＰＥＧテトラ−クロロホルメート（０．２ｇ、０．００５ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）に溶解した。これに３３（６３ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を加え、続いてトリエチルアミン（３．５μＬ、０．０２５ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で７２時間攪拌した。反応物を真空下に濃縮すると、１０８が白色の固体として２７０ｍｇ得られた。
【０４１３】
コンジュゲート１０９
１０８（０．２６ｇ、０．００６ｍｍｏｌ）をギ酸（５ｍＬ）に溶解し、４０℃で２４時間加熱した。反応物を真空下に濃縮し、ＨＰＬＣ方法Ａに従い精製すると、１０９が白色の固体として０．１０５ｇ（４２％）得られた。ＨＰＬＣ方法Ｃは、コンジュゲートが＞９９％純度であると判定した（保持時間＝８．３分）。
【化１６４】
2008505927.tif 000169
【０４１４】
（実施例３７）
【化１６５】
2008505927.tif 000170
【０４１５】
ｔ−ブチルエステル（１１１）
４０ｋＤａの３−アームＰＥＧアルコール（０．２５ｇ、０．００６２５ｍｍｏｌ）、１１０（０．０４ｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）、及びトリフェニルホスフィン（０．０２５ｇ、０．０９４ｍｍｏｌ）を、トルエン（５ｍＬ）からの共沸蒸留により乾燥させた。容量の半量を留去（２．５ｍＬ）し、混合物を室温に冷却した。ＣＨ２Ｃｌ２（０．５ｍＬ）を加えて、反応物を均一にした。ジエチルアゾジカルボキシレート（０．０１５ｍＬ、０．０９４ｍｍｏｌ）を滴下添加し、反応物を４８時間攪拌した。ＨＰＬＣ方法Ｃは、出発のＰＥＧアルコールが完全に消失していることを示した。反応物を真空下に濃縮すると、ｔ−ブチルエステル１１１が白色の固体として得られた。
【０４１６】
コンジュゲート１１２
１１１（０．２ｇ、０．００５ｍｍｏｌ）をギ酸（３ｍＬ）に溶解し、４０℃で２４時間加熱した。反応物を真空下に濃縮し、ＨＰＬＣ方法Ａに従い精製すると、１１２が白色の固体として０．１ｇ（４８％）得られた。ＨＰＬＣ方法Ｃは、コンジュゲートが＞９９％純度であると判定した（保持時間＝８．１分）。
【化１６６】
2008505927.tif 000171
【０４１７】
以下のコンジュゲートを合成するために同様の方法を用いた。
（実施例３８）
【化１６７】
2008505927.tif 000172
１１２と同様の方法を用いて、４０ｋＤａの４−アームＰＥＧアルコールを１１０にカップリングさせ、脱保護すると、最終生成物が得られた。ＨＰＬＣ方法Ａに従い生成物を精製した。ＨＰＬＣ方法Ｃは、コンジュゲートが＞９５％純度であると判定した（保持時間＝７．５〜８．１分）。
【化１６８】
2008505927.tif 000173
【０４１８】
（実施例３９）
【化１６９】
2008505927.tif 000174
１１２と同様の方法を用いて、４０ｋＤａの３−アームＰＥＧアルコールをｔ−ブチルエステル１１４（下記に示す）にカップリングさせ、脱保護すると、最終生成物が得られた。ＨＰＬＣ方法Ａに従い生成物を精製した。ＨＰＬＣ方法Ｃは、コンジュゲートが＞９５％純度であると判定した（保持時間＝７．３分）。
【化１７０】
2008505927.tif 000175
【化１７１】
2008505927.tif 000176
【０４１９】
（実施例４０）
【化１７２】
2008505927.tif 000177
【０４２０】
ｔ−ブチルエステル（１１７）
４０ｋＤａの３−アームＰＥＧアルコール（０．００６２５ｍｍｏｌ）、１１６（０．０５６ｍｍｏｌ）、及びトリフェニルホスフィン（０．０９４ｍｍｏｌ）を、トルエン（５ｍＬ）からの共沸蒸留により乾燥させた。容量の半量を留去（２．５ｍＬ）し、混合物を室温に冷却した。ＣＨ２Ｃｌ２（０．５ｍＬ）を加えて、反応物を均一にした。ジエチルアゾジカルボキシレート（０．０９４ｍｍｏｌ）を滴下添加し、反応物を４８時間攪拌した。反応物を真空下に濃縮すると、ｔ−ブチルエステル１１１が得られた。
【０４２１】
コンジュゲート１１８
１１８（０．００５ｍｍｏｌ）をギ酸（３ｍＬ）に溶解し、４０℃で２４時間加熱した。反応物を真空下に濃縮し、ＨＰＬＣ方法Ａに従い精製すると、１１２が得られた。
【０４２２】
（実施例４１）
実施例２９の生成物並びに実施例３８及び３９に使用したＰＥＧポリマーを用いて、以下のコンジュゲートを調製した。
【表５】
2008505927.tif 000178
【０４２３】
本明細書に記載した実施例及びスキームに従い、表Ｖ及びＶＩにおける以下のコンジュゲートを調製する。
【０４２４】
【化１７３】
2008505927.tif 000179
【表６−１】
2008505927.tif 000180
【表６−２】
2008505927.tif 000181
Ｚ＝
【化１７４】
2008505927.tif 000182
式中、それぞれの構造において、すべてのｐの合計は２００から１３６０である。
【０４２５】
【化１７５】
2008505927.tif 000183
【表７−１】
2008505927.tif 000184
【表７−２】
2008505927.tif 000185
ＺＺ＝
【化１７６】
2008505927.tif 000186
ＺＺＺ＝
【化１７７】
2008505927.tif 000187
【０４２６】
生物学的実施例
（実施例Ａ）
候補化合物の有効性を決定するための生体外アッセイ：
Ｊｕｒｋａｔ  ＴＭにおける１５／７エピトープ誘発（１５／７  ＬＩＢＳ）
以下の条件下９６ウェルのフレキシプレート中で、対数期Ｊｕｒｋａｔ  ＴＭ細胞をインキュベートする：アッセイ緩衝液（２０ｍＭのＨｅｐｅｓ、１４０ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＣａＣｌ２、１ｍＭのＭｇＣｌ２及び０．３％ＢＳＡ）中１０５細胞／１００μｌ／ウェル、１０μｇ／ｍｌの１５／７（Ｅｌａｎ）、及び濃度範囲での化合物。室温で３０分間インキュベーションを行う。次いで細胞をアッセイ緩衝液で２回洗浄し、暗闇で氷上３０分間アッセイ緩衝液中１：２００でＧｏａｔ  Ｆａｂ’２抗Ｍｓ  ＩｇＧ（Ｆｃ）−ＰＥ（Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈカタログ番号ＰＮ  ＩＭ０５５１）を用いてインキュベートする。次いで細胞を１度洗浄し、ＦＡＣＳ分析（Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）のために３００μｌの冷アッセイ緩衝液中に再懸濁させる。
【０４２７】
多価リガンド競合アッセイ（ＭＶＣＯＭＰ）
方法
インテグリン受容体は、接着基質内に多重リガンド分子を同時に束縛する多重インテグリン受容体であり、これらの特異なリガンドとの多価相互作用を通して細胞接着を媒介する。高感度で定量的なアッセイにおいてこの生理学的相互作用をシミュレーションするために、リンパ球表面上のａ４インテグリンに特異的に結合する多価リガンドプローブを開発した。プローブは、６〜１０モル倍過剰（６〜１０の小分子：１のＩｇＧ）なマウスＩｇＧ担体分子にコンジュゲートした、ａ４インテグリンのための小分子リガンドである化合物２００（構造を下記に示した）からなる。この結合は、２１／６、及びａ４に対する抗体により阻害される。細胞表面に一旦結合すると、ＦＡＣＳ分析によりマウスＩｇＧに対して蛍光標識二次抗体を用いてコンジュゲートを測定できる。このアッセイにおいて、２つの異なるマウス単クローン性ＩｇＧ担体分子であるＴＭ２ａ及び２７／１を使用してきており、これらはａ４リガンドとコンジュゲートしない限り、そのどちらもヒトリンパ球に結合しない。
【化１７８】
2008505927.tif 000188
【０４２８】
小分子−抗体試薬コンジュゲーション
およそ１ｍｇのＴＭ２ａ又は２７／１（Ｅｌａｎ）抗体を、攪拌しながら室温で６０分間全用量１．０ｍｌにて、５０モル倍過剰での［ビス（スルホサクシンイミジル）スベリン酸塩］（Ｐｉｅｒｃｅ）の存在下、１：６又は１：１０過剰モルの化合物２００を用いてインキュベートした。次いで、アミン含有緩衝液ＴＲＩＳ−Ｃｌを用いてｐＨ７．５で２０分間、反応物をクエンチした。結合していない小分子及び連結試薬を除去するために、１０ｋＤのＭＷカットオフ膜カセット中、４℃で４，０００容量のＰＢＳに対して、生成物を２４時間２回透析した。
【０４２９】
競合結合アッセイ
室温で３０分間、アッセイ緩衝液中１：１００で希釈したＴＭ２ａ又は２７／１コンジュゲートの存在下、種々の試験化合物を滴定して、Ｊｕｒｋａｔ細胞（亜系統ＴＭ、サブクローン＃１５、Ｅｌａｎ）をインキュベートした。次いで、５分間３００ｘｇでのＢｅｃｋｍａｎ卓上遠心分離器中にて細胞をペレット化し、次いで新鮮な緩衝液中で再懸濁させるという、数回の洗浄ステップにより、結合していない試薬を除去した。４℃で３０分間、Ｇｏａｔ  Ｆ（ａｂ）’２抗マウスＩｇＧ（Ｆｃ）−フィコエリトリン（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ）を用いて細胞をインキュベートし、続いて洗浄し、ＦＡＣＳ分析することにより、残っている結合した抗体コンジュゲートを検出した。
【０４３０】
８８６６細胞における２Ｇ３エピトープ誘発（２Ｇ３リガンド誘発結合部位）
以下の条件下９６ウェルのフレキシプレート中で、対数期８８６６細胞をインキュベートする：アッセイ緩衝液（ＰＢＳ、１ｍＭのＣａＣｌ２、１ｍＭのＭｇＣｌ２、５％ＦＢＳ）中１０５細胞／１００μｌ／ウェル、１０μｇ／ｍｌの２Ｇ３（Ｅｌａｎ）、及び濃度範囲での化合物。室温で３０分間インキュベーションを行う。次いで細胞をアッセイ緩衝液で２回洗浄し、暗闇で氷上３０分間アッセイ緩衝液中１：２００でＧｏａｔ  Ｆａｂ’２抗Ｍｓ  ＩｇＧ（Ｆｃ）−ＰＥ（Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈカタログ番号ＰＮ  ＩＭ０５５１）を用いてインキュベートする。次いで細胞を１度洗浄し、ＦＡＣＳ分析（Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）のために３００μｌの冷アッセイ緩衝液中に再懸濁させる。
【国際調査報告】
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