(57)【要約】【課題】ヒアルロン酸生成促進作用に優れた新規な外用剤又は内用剤を提供する。【解決手段】サルナシの抽出物は、優れたヒアルロン酸生成促進作用を有し、安定性にも優れていた。ヒアルロン酸は、関節にも存在しており、関節の荷重の衝撃を和らげたり、関節の動きを滑らかにしたりする機能を果たしていることが知られている。よって、サルナシの抽出物は、変形性関節症、慢性関節リウマチ、化膿性関節炎、痛風性関節炎の予防又は改善、皮膚の老化予防等といった医療分野にも利用でき、食品、化粧品、医薬部外品及び医薬品等への応用が期待される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
サルナシの抽出物を含有することを特徴とするヒアルロン酸生成促進剤。
【請求項２】
サルナシの抽出物を含有することを特徴とする、変形性関節症、慢性関節リウマチ、化膿性関節炎及び痛風性関節炎の予防又は改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒアルロン酸生成促進作用に優れた新規な外用剤又は内用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒアルロン酸は結合組織に広く分布する高分子多糖体として知られており、真皮中でゲル状の形態を呈し、肌の弾力を維持している。従って、ヒアルロン酸の変質や減少が皮膚老化において重要であると考えられている。また、ヒアルロン酸は高分子であるため、それを配合した化粧料を皮膚に直接塗布しても吸収されにくいという問題があった。そこで、これまで、線維芽細胞を活性化することで、細胞自らのヒアルロン酸の合成を促進させることができる皮膚外用剤が模索されてきた（特許文献１）。また、ヒアルロン酸は、関節にも存在しており、関節の荷重の衝撃を和らげたり、関節の動きを滑らかにしたりする機能を果たしていることが知られている。変形性関節症、慢性関節リウマチ、化膿性関節炎、痛風性関節炎等の場合は、関節液中のヒアルロン酸量が低下したり、加齢によって低下したりすることが知られている。このような疾患において、潤滑機能の改善、関節軟骨の被覆や保護、痛みの抑制及び病的関節液の改善若しくは正常化のために、関節液中のヒアルロン酸量を増加させることが考えられる。例えば、慢性関節リウマチ、外傷性関節症、骨関節炎及び変形性関節症の患者にヒアルロン酸ナトリウムの関節注入療法を行うと上記症状の改善が認められることが知られている。しかし、これらの治療は長期にわたる。従って、日常生活の中で手軽に治療できるヒアルロン酸生成促進剤を含有させた医薬品が望まれている。また、熱傷後の治癒過程で、肉芽中にヒアルロン酸が著しく増加することが知られており、熱傷の初期の治療薬としても、ヒアルロン酸生成促進剤が期待されている。
【０００３】
しかしながら、ヒアルロン酸生成促効果を有する植物由来の天然原料として、本発明に用いたサルナシは検討されていなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００７−１９２４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
安全で安定性に優れ、ヒアルロン酸生成促進作用に優れた素材が望まれているが、未だ十分満足し得るものが提供されていないのが現状である。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
このような事情により、本発明者らは鋭意検討した結果、サルナシの抽出物が優れたヒアルロン酸生成促進作用を持ち、安定性においても優れていることを見出した。さらに、その抽出物を含有する外用剤又は内用剤が、安全で安定でありヒアルロン酸生成促進作用に優れており、多機能性美容・健康用素材と成り得ることを見いだし、本発明を完成するに至った。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
本発明に用いるサルナシの抽出物とは、マタタビ科マタタビ属サルナシ（学名：Ａｃｔｉｎｉｄｉａ  ａｒｇｕｔａ）の花、枝、幹、葉、根、果実、種子等の植物体の一部及び／又は全てより抽出したものである。その抽出方法は特に限定されず、例えば、加熱抽出したものであっても良いし、常温抽出したものであっても良い。さらに、植物をそのまま抽出してもよいし、乾燥してから抽出してもよい。
【０００８】
抽出溶媒としては、例えば、水、低級アルコール類（メタノール、エタノール、１‐プロパノール、２‐プロパノール、１‐ブタノール、２‐ブタノール等）、液状多価アルコール（１，３‐ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、アセトニトリル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、炭化水素類（ヘキサン、ヘプタン、流動パラフィン等）、エーテル類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエーテル等）が挙げられる。好ましくは、水、低級アルコール及び液状多価アルコール等の極性溶媒が良く、特に好ましくは、水、エタノール、１，３‐ブチレングリコール及びプロピレングリコールが良い。これらの溶媒は一種でも二種以上を混合して用いても良い。
【０００９】
上記抽出物は、抽出した溶液のまま用いても良く、必要に応じて、濃縮、希釈及び濾過処理、活性炭等による脱色、脱臭処理等をして用いても良い。更には、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥等の処理を行い、乾燥物として用いても良い。
【００１０】
本発明のヒアルロン酸生成促進剤には、上記抽出物をそのまま使用しても良く、抽出物の効果を損なわない範囲内で、化粧品、医薬部外品、医薬品又は食品等に用いられる成分である油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、金属石鹸、ｐＨ調整剤、防腐剤、香料、保湿剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、美白剤、キレート剤、賦形剤、皮膜剤、甘味料、酸味料等の成分を配合することもできる。
【００１１】
本発明のヒアルロン酸生成促進剤は、化粧品、医薬部外品、医薬品、食品のいずれにも用いることができ、その剤形としては、例えば、化粧水、クリーム、乳液、ゲル剤、エアゾール剤、エッセンス、パック、洗浄剤、浴用剤、ファンデーション、打粉、口紅、軟膏、パップ剤、錠菓、カプセル剤、チョコレート、ガム、飴、飲料、散剤、顆粒剤、錠剤、糖衣錠剤、カプセル剤、シロップ剤、丸剤、懸濁剤、液剤、乳剤、坐剤、注射用溶液等が挙げられる。
【００１２】
本発明に用いる上記抽出物の配合量は、本発明のヒアルロン酸生成促進剤に対し、固形物に換算して０．０００１重量％以上が好ましく、０．００１〜１０重量％がより好ましい。さらに、０．０１〜５重量％が最も好ましい。０．０００１重量％未満では十分な効果は望みにくい。１０重量％を越えて配合した場合、効果の増強は認められにくく不経済である。一方、内用の場合、投与量は年齢、体重、症状、治療効果、投与方法、処理時間等により異なるが、通常、成人１人当たりの１日の量としては、５ｍｇ以上が好ましく、１０ｍｇ〜２ｇがより好ましい。さらに、２０ｍｇ〜０．５ｇが最も好ましい。
【００１３】
次に本発明を詳細に説明するため、実施例として本発明に用いる抽出物の製造例、実験例及び処方例を挙げるが、本発明はこれに限定されるものではない。製造例に示す％とは重量％を、処方例に示す配合量の部とは重量部を示す。
【実施例１】
【００１４】
製造例１  サルナシ果実の熱水抽出物
サルナシの果実の乾燥物２０ｇに精製水４００ｍＬを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してサルナシの熱水抽出物を１１．８ｇ得た。
【００１５】
製造例２  サルナシ果実の５０％エタノール抽出物
サルナシの果実の乾燥物２０ｇに５０％エタノール４００ｍＬを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、サルナシの５０％エタノール抽出物を７．０ｇ得た。
【００１６】
製造例３  サルナシ果実のエタノール抽出物
サルナシの果実の乾燥物４０ｇにエタノール１０００ｍＬを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、サルナシのエタノール抽出物を７．６ｇ得た。
【００１７】
製造例４  サルナシ果実の５０％１，３‐ブチレングリコール抽出物
サルナシの果実２０ｇに５０％１，３‐ブチレングリコール４００ｍＬを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、サルナシの５０％１，３‐ブチレングリコール抽出物を３８０ｇ得た。
【実施例２】
【００１８】
処方例１  化粧水
処方                                                              配合量（部）
１．サルナシ果実の熱水抽出物（製造例１）                          ２．０
２．１，３−ブチレングリコール                                    ８．０
３．グリセリン                                                    ２．０
４．キサンタンガム                                                ０．０２
５．クエン酸                                                      ０．０１
６．クエン酸ナトリウム                                            ０．１
７．エタノール                                                    ５．０
８．パラオキシ安息香酸メチル                                      ０．１
９．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（４０Ｅ．Ｏ．）                ０．１
１０．香料                                                          適量
１１．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分１〜６及び１１と、成分７〜１０をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合し濾過して製品とする。
【００１９】
比較処方例１  従来の化粧水
処方例１において、サルナシの果実の熱水抽出物（製造例１）を精製水に置き換えたものを、従来の化粧水とした。
【００２０】
処方例２  クリーム
処方                                                              配合量（部）
１．サルナシ果実の５０％エタノール抽出物（製造例２）              １．０
２．スクワラン                                                    ５．５
３．オリーブ油                                                    ３．０
４．ステアリン酸                                                  ２．０
５．ミツロウ                                                      ２．０
６．ミリスチン酸オクチルドデシル                                  ３．５
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）              ３．０
８．ベヘニルアルコール                                            １．５
９．モノステアリン酸グリセリン                                    ２．５
１０．香料                                                          ０．１
１１．パラオキシ安息香酸メチル                                      ０．２
１２．パラオキシ安息香酸エチル                                      ０．０５
１３．１，３−ブチレングリコール                                    ８．５
１４．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分２〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１１〜１４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【００２１】
処方例３  乳液
処方                                                              配合量（部）
１．サルナシ果実のエタノール抽出物（製造例３）                    ０．０１
２．スクワラン                                                    ５．０
３．オリーブ油                                                    ５．０
４．ホホバ油                                                      ５．０
５．セタノール                                                    １．５
６．モノステアリン酸グリセリン                                    ２．０
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）              ３．０
８．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート（２０Ｅ．Ｏ．）    ２．０
９．香料                                                          ０．１
１０．プロピレングリコール                                          １．０
１１．グリセリン                                                    ２．０
１２．パラオキシ安息香酸メチル                                      ０．２
１３．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分２〜８を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１０〜１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分９を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【００２２】
処方例４  ゲル剤
処方                                                              配合量（部）
１．サルナシ果実の熱水抽出物（製造例１）                          １．０
２．エタノール                                                    ５．０
３．パラオキシ安息香酸メチル                                      ０．１
４．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（６０Ｅ．Ｏ．）                ０．１
５．香料                                                          適量
６．１，３−ブチレングリコール                                    ５．０
７．グリセリン                                                    ５．０
８．キサンタンガム                                                ０．１
９．カルボキシビニルポリマー                                      ０．２
１０．水酸化カリウム                                                ０．２
１１．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分２〜５と、成分１及び６〜１１をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合して製品とする。
【００２３】
処方例５  パック
処方                                                                配合量（部）
１．サルナシ果実の５０％エタノール抽出物（製造例２）              １．０
２．サルナシ果実の
５０％１，３‐ブチレングリコール抽出物（製造例４）            ５．０
３．ポリビニルアルコール                                        １２．０
４．エタノール                                                    ５．０
５．１，３−ブチレングリコール                                    ８．０
６．パラオキシ安息香酸メチル                                      ０．２
７．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２０Ｅ．Ｏ．）                ０．５
８．クエン酸                                                      ０．１
９．クエン酸ナトリウム                                            ０．３
１０．香料                                                          適量
１１．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分１〜１１を均一に溶解し製品とする。
【００２４】
処方例６  ファンデーション
処方                                                              配合量（部）
１．サルナシ果実のエタノール抽出物（製造例３）                    １．０
２．ステアリン酸                                                  ２．４
３．ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート（２０Ｅ．Ｏ．）  １．０
４．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）              ２．０
５．セタノール                                                    １．０
６．液状ラノリン                                                  ２．０
７．流動パラフィン                                                ３．０
８．ミリスチン酸イソプロピル                                      ６．５
９．カルボキシメチルセルロースナトリウム                          ０．１
１０．ベントナイト                                                  ０．５
１１．プロピレングリコール                                          ４．０
１２．トリエタノールアミン                                          １．１
１３．パラオキシ安息香酸メチル                                      ０．２
１４．二酸化チタン                                                  ８．０
１５．タルク                                                        ４．０
１６．ベンガラ                                                      １．０
１７．黄酸化鉄                                                      ２．０
１８．香料                                                          適量
１９．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分２〜８を加熱溶解し、８０℃に保ち油相とする。成分１９に成分９をよく膨潤させ、続いて、成分１及び１０〜１３を加えて均一に混合する。これに粉砕機で粉砕混合した成分１４〜１７を加え、ホモミキサーで撹拌し７５℃に保ち水相とする。この油相に水相をかき混ぜながら加え、乳化する。その後、冷却し、４５℃で成分１８を加え、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
【００２５】
処方例７  浴用剤
処方                                                              配合量（部）
１．サルナシ果実の熱水抽出物（製造例１）                          １．０
２．炭酸水素ナトリウム                                          ５０．０
３．黄色２０２号（１）                                            適量
４．香料                                                          適量
５．硫酸ナトリウムにて全量を１００とする
［製造方法］成分１〜５を均一に混合し製品とする。
【００２６】
処方例８  軟膏
処方                                                              配合量（部）
１．サルナシ果実の５０％エタノール抽出物（製造例２）              １．０
２．サルナシ果実の
５０％１，３‐ブチレングリコール抽出物（製造例４）            ５．０
３．ポリオキシエチレンセチルエーテル（３０Ｅ．Ｏ．）              ２．０
４．モノステアリン酸グリセリン                                  １０．０
５．流動パラフィン                                                ５．０
６．セタノール                                                    ６．０
７．パラオキシ安息香酸メチル                                      ０．１
８．プロピレングリコール                                        １０．０
９．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分３〜６を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１、２及び７〜９を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
【００２７】
処方例９  散剤
処方                                                              配合量（部）
１．サルナシ果実の熱水抽出物（製造例１）                          １．０
２．乾燥コーンスターチ                                          ３９．０
３．微結晶セルロース                                            ６０．０
［製造方法］成分１〜３を混合し、散剤とする。
【００２８】
処方例１０  錠剤
処方                                                              配合量（部）
１．サルナシ果実のエタノール抽出物（製造例３）                    ５．０
２．乾燥コーンスターチ                                          ２５．０
３．カルボキシメチルセルロースカルシウム                        ２０．０
４．微結晶セルロース                                            ４０．０
５．ポリビニルピロリドン                                          ７．０
６．タルク                                                        ３．０
［製造方法］成分１〜４を混合し、次いで成分５の水溶液を結合剤として加えて顆粒成型する。成型した顆粒に成分６を加えて打錠する。１錠０．５２ｇとする。
【００２９】
処方例１１  錠菓
処方                                                              配合量（部）
１．サルナシ果実の５０％エタノール抽出物（製造例２）              ２．０
２．乾燥コーンスターチ                                          ４９．８
３．エリスリトール                                              ４０．０
４．クエン酸                                                      ５．０
５．ショ糖脂肪酸エステル                                          ３．０
６．香料                                                          ０．１
７．精製水                                                        ０．１
［製造方法］成分１〜４及び７を混合し、顆粒成型する。成型した顆粒に成分５及び６を加えて打錠する。１粒１．０ｇとする。
【００３０】
処方例１２  飲料
処方                                                              配合量（部）
１．サルナシ果実の熱水抽出物（製造例１）                          ０．０５
２．ステビア                                                      ０．０５
３．リンゴ酸                                                      ５．０
４．香料                                                          ０．１
５．精製水                                                      ９４．８
［製造方法］成分２及び３を少量の水に溶解する。次いで、成分１、４及び５を加えて混合する。
【００３１】
次に、本発明の効果を詳細に説明するため、実験例を挙げる。
【実施例３】
【００３２】
実験例１  ヒアルロン酸合成酵素２（ＨＡＳ２）の測定
ヒト線維芽細胞ＮＢ１ＲＧＢを６０ｍｍ  ｄｉｓｈに１×１０５個播種し、コンフルエントになった時点で、終濃度が１又は１０μｇ／ｍＬになるように試料を添加した。コントロールには、試料を希釈した溶媒を添加した。２４時間培養後、総ＲＮＡの抽出を行った。細胞からの総ＲＮＡの抽出はＴＲＩＺＯＬ  Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて行い、総ＲＮＡ量は分光光度計（ＮａｎｏＤｒｏｐ）を用いて２６０ｎｍにおける吸光度により求めた。ｍＲＮＡ発現量の測定は、細胞から抽出した総ＲＮＡを基にしてリアルタイムＲＴ−ＰＣＲ法により行った。リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ法には、ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔＩＩＩ  Ｐｌａｔｉｎｕｍ  Ｔｗｏ−Ｓｔｅｐ  ｑＲＴ−ＰＣＲ  Ｋｉｔ  ｗｉｔｈ  ＳＹＢＲ  Ｇｒｅｅｎ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いた。すなわち、５００ｎｇの総ＲＮＡを逆転写反応後、ＰＣＲ反応（９５℃：１５秒間、６０℃：３０秒間、４０ｃｙｃｌｅｓ）を行った。その他の操作は定められた方法に従い、ＨＡＳ２の発現量を、内部標準であるβ―ａｃｔｉｎ  ｍＲＮＡの発現量に対する割合として求めた。ＨＡＳ２発現率は、コントロールのＨＡＳ２  ｍＲＮＡの発現量に対する試料添加群のＨＡＳ２  ｍＲＮＡの発現量の比率として算出した。尚、各遺伝子の発現量の測定に使用したプライマーは次の通りである。
【００３３】
ＨＡＳ２用のプライマーセット
ＴＧＧＡＴＧＡＣＣＴＡＣＧＡＡＧＣＧＡＴＴＡ（配列番号１）
ＧＣＴＧＧＡＴＴＡＣＴＧＴＧＧＣＡＡＴＧＡＧ（配列番号２）
β―Ａｃｔｉｎ用のプライマーセット
ＣＡＣＴＣＴＴＣＣＡＧＣＣＴＴＣＣＴＴＣＣ（配列番号３）
ＧＴＧＴＴＧＧＣＧＴＡＣＡＧＧＴＣＴＴＴＧ（配列番号４）
【００３４】
実験結果を表１に示した。その結果、本発明のサルナシの熱水抽出物及び５０％エタノール抽出物は、優れたヒアルロン酸合成促進作用を示した。
【表１】
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【産業上の利用可能性】
【００３５】
以上のことから、本発明のサルナシの抽出物は、優れたヒアルロン酸生成促進作用を有し、安定性にも優れていた。よって、本発明のサルナシの抽出物は、変形性関節症、慢性関節リウマチ、化膿性関節炎、痛風性関節炎の予防又は改善、皮膚の老化予防等といった医療分野にも利用でき、化粧品、医薬部外品、医薬品、食品等への応用が期待される。
【配列表】
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