(57)【要約】【課題】リン酸化合物を可溶化する微生物の効果を継続して維持することができ、取扱い及び生産が容易で、植物の生育を促進し、土壌を改善することができる微生物資材、及び、その製造方法を提供する。【解決手段】微生物資材は、リン酸化合物を可溶化する微生物であるエンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）の培養物と、キャリアとしての軟質多孔性古代海洋腐植質とを有している。軟質多孔性古代海洋腐植質を用いることにより、エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）によるリン酸化合物を可溶化する効果を長期間にわたり継続して維持することができる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
リン酸化合物を可溶化する微生物であるエンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）の培養物と、軟質多孔性古代海洋腐植質とを有することを特徴とする微生物資材。
【請求項２】
前記軟質多孔性古代海洋腐植質を粉状又は顆粒状とし、前記培養物と混合して、製剤化したことを特徴とする請求項１記載の微生物資材。
【請求項３】
リン酸化合物を可溶化する微生物資材として、植物の育成に用いることを特徴とする請求項１又は請求項２記載の微生物資材。
【請求項４】
リン酸化合物を可溶化する微生物であるエンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）の培養物と、粉状又は顆粒状の軟質多孔性古代海洋腐植質とを混合し、製剤化することを特徴とする微生物資材の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、農産物生産圃場の土壌中に固定化され、利用不可能となっているリン酸化合物を、微生物の作用を利用して可溶化し、植物が生体内にリン酸イオンとして吸収し、生育できるようにする微生物資材及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
リン鉱石やリン酸肥料原材料は世界的に枯渇傾向にある。我が国は輸入に依存しており、その原材料の確保は極めて厳しい環境にある。今後は価格の高騰も予想され、このまま、永年に渡り、リン酸肥料原料の供給が続く保証は全くない。このような中、今日、農業全体を鑑みた有効な施策はほとんど示されていない。従って、これからは、リン酸肥料原材料の確保の検討や、土壌中の過剰なリン酸化合物の再利用など、新しい技術開発を希求していかなければならない。
【０００３】
リン酸は窒素、カリウムと並び植物成長の三大肥料の一つであり、農産物生産に欠かすことのできない物質である。一方、火山国日本の多くの土壌は酸性に偏りやすい特質があり、毎年、石灰、苦土石灰を散布しなければならない状況を生んでいる。この石灰使用の繰り返しがリン酸の効果を落とし、土壌を固化する。これらは、更に、毎年のリン酸肥料散布を必要とする環境を作っている。すなわち、過リン酸土壌を生む背景になっている。この現象は、各地で起こっており、早急に解決を図らなければ、農産物生産土壌は一層悪化してしまう。ひいては、日本の農業全体に疲弊をもたらし、その解決は極めて困難になる。
【０００４】
これからの農業生産においては、土壌中のリン酸含有量を把握していくことが重要である。リン酸は、植物が生体内に吸収するリン酸イオンの状態を維持するよりも、カルシウム、アルミニウム、鉄などと結合して化合物を作ってしまい、より安定な形を好むためである。この性質のため、リン酸肥料の繰り返しの施肥が、過リン酸土壌を作ってしまう。言い換えれば、この過リン酸状態は土壌の「老化」の進行であり、農産物生産にとって大きなマイナス要因になっている。これらの理由から、土壌中のリン酸含有量は毎年把握し、過リン酸土壌にならないように管理しなければならない。土壌が過リン酸の状態となった場合には、改善を図り、土壌を若返らせる必要がある。そのためには、土壌中のリン酸化合物を消化し、含有量を低下させる技術が必要になる。
【０００５】
リン酸化合物の含有量を低下させる技術としては、例えば、リン酸可溶化微生物を用いる方法がある。今日存在するリン酸可溶化微生物を用いた微生物資材は、少量生産が中心で、藁や堆肥との混合物が多い。これらは微生物の生菌数維持が比較的容易で、商品化がしやすいためである。その実例としては、水分を含む堆肥に微生物を混合したものが主である。これらは、作業性が極めて悪く、自家生産自家消費システムをとっているのが中心で、商業的価値は低いと思われる。乾燥状態を維持している商品は、その多くがカビや放線菌を利用している（例えば、特許文献１参照）。この場合、微生物は休眠状態で供給されるため、水分を補給して活性化させる必要がある。それには加温、保温といった操作が必要になり、使用可能な状態とするのにかなりの手間がかかる。また、安定したものを準備しにくく、農産物生産時の効果も一定しない。従って、広範囲の実施例は極めて少ない。
【０００６】
更に、藁や堆肥といった有機物は、生産物補助材料として、品質や状態が安定しない。また、供給の面からも困難さがある。移動、混合など作業性も簡単ではない。従って、工業化、大量生産には向いていない。肥料として使用した場合においても、微生物によるリン酸の効果は、堆肥自身の持つ二次的効果との区別が困難で判別しにくい。最大の欠点は、農産物生産で、常に安定した効果を得ることが難しいことにある。従って、地域限定、個人使用などと使用実績が乏しいのが現状である。
【０００７】
土壌中のリン酸化合物を微生物により可溶化し、リン酸肥料として利用する資料、文献は多く存在する。しかし、その広範囲な実施例は極めて少なく、かつ、維持されるものが少ない。その原因は、微生物と製品の安定した品質維持ができないことにある。また、農産物生産においての効果が不明確で、収穫量を考えると、安心して使用できないためである。農産物生産現場において使用と収穫量との間に一貫性のある効果が示されない限り、リン酸可溶化微生物を用いた微生物資材の継続使用は望めない。
【０００８】
更に、これらの微生物資材が普及しない要因の一つに、農業生産者側に立った始点で技術開発、商品開発が行われていない点がある。商品が使用者側に煩雑な微生物の生育管理を押し付けたり、使用前に多大な前処理作業を求めたりしており、使用者側に大きい負担を担わせたままの中途半端な商品が多くなっている。この点が、微生物資材の農業現場での幅広い普及を妨げている。
【０００９】
そこで、微生物資材の活用を図るためには、まず、リン酸化合物を含有する溶液中、または、水分を含有する土壌中においてリン酸化合物を可溶化する微生物を用い、かつ、その効果が継続して維持される必要がある。また、肥料という範疇から、微生物のキャリアとしては、従来通りの粉状又は造粒した顆粒状の形態を確保できるものが好ましく、従来通りの農作業、従来通りの肥料散布機械で施肥が可能で、物流、保管においても支障のないものであることが好ましい。
【００１０】
また、従来は手作業による少量での微生物資材の生産が多かったが、農業現場における肥料の使用量は、けして少量とは限らず、必要量は常時、供給可能な生産体制を確立しておかなければならない。そのためには、微生物の培養は容量調整が可能であることが求められる。更に、製剤化においても、フレキシブルなキャリアとの混合技術が必要となる。製剤化後の工程においても、袋詰め、集積と連続性のある生産システムを構築することが望まれる。すなわち、培養や製剤化の各工程で、生産量が容易に調整可能で、大量生産も考慮できる柔軟性のある生産システムの技術開発が必要となる。
【００１１】
加えて、従来の農産物生産に使用している窒素、リン酸、カリウム肥料のリン酸部分を微生物資材で代替し、施肥し、農産物生産を実施した時に、種子の発芽が著しく低下したり、幼苗期、成長期において軟弱な生体、立ち枯れといったマイナスの状況やデメリットが発生しないことも必要である。植物にとって、重要な開花、結実といった段階においても、正常な生育が維持される必要がある。農産物生産において最も重要な収穫量も現状を維持するか、現状を超える収穫量を確保することが必要である。更に、微生物資材の施肥により土壌を悪化させないことも必要である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】特開平９−１８８５８５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明は、このような問題に基づきなされたものであり、リン酸化合物を可溶化する微生物の効果を継続して維持することができ、取扱い及び生産が容易で、植物の生育を促進し、土壌を改善することができる微生物資材、及び、その製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明の微生物資材は、リン酸化合物を可溶化する微生物であるエンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）の培養物と、軟質多孔性古代海洋腐植質とを有するものである。
【００１５】
本発明の微生物資材の製造方法は、リン酸化合物を可溶化する微生物であるエンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）の培養物と、粉状又は顆粒状の軟質多孔性古代海洋腐植質とを混合し、製剤化するものである。
【発明の効果】
【００１６】
本発明の微生物資材によれば、リン酸化合物を可溶化する微生物としてエンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）を用いると共に、そのキャリアとして軟質多孔性古代海洋腐植質を用いるようにしたので、リン酸化合物を可溶化する微生物の効果を長期間にわたり継続して維持することができる。また、取扱い及び生産を容易とすることができる。更に、農産物等の植物の生育を促進することができ、土壌を改善することもできる。
【００１７】
本発明の微生物資材によれば、エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）の培養物と、粉状又は顆粒状の軟質多孔性古代海洋腐植質とを混合し、製剤化するようにしたので、容易に生産することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
以下、本発明の実施の形態について詳細に説明する。
【００１９】
本実施の形態に係る微生物資材は、リン酸化合物を可溶化する微生物であるエンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）の培養物と、軟質多孔性古代海洋腐植質とを有している。リン酸化合物を可溶化する微生物は、自然界の土壌、湖沼の泥水、ミミズの腸内細菌などの広い範囲に存在しているが、その効力はまちまちで一定しない。その中で、エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）は、高く安定した効果を得ることができ、かつ、簡単な培養基で、簡単な培養システムにより生育することができ、培養期間も長期間を必要としないので好ましい。なお、エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）は、土壌や動物の腸内に分布する小桿菌であり、グラム陰性の嫌気性細菌である。
【００２０】
軟質多孔性古代海洋腐植質は、微生物のキャリアとして機能するものである。軟質多孔性古代海洋腐植質というのは、古代海中で海洋動植物が埋設堆積してできた海泥であり、例えば、福島県棚倉町の東西にのびる棚倉破砕帯で採取される。この微生物資材は、リン酸化合物を可溶化する微生物としてエンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）を用いると共に、キャリアとして軟質多孔性古代海洋腐植質を用いることにより、エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）によるリン酸化合物を可溶化する効果を長期間にわたり継続して維持することができるようになっている。また、農産物等の植物の育成を促進し、土壌を改善することも可能である。
【００２１】
なお、この微生物資材は、軟質多孔性古代海洋腐植質を粉状又は顆粒状とし、エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）の培養物と混合して、製剤化したものであることが好ましい。取り扱いを容易とすることができるからである。
【００２２】
この微生物資材は、例えば、次のようにして製造することができる。まず、例えば、エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）の菌株を培養基で培養する。培養基としては、例えば、グルコースと、硫安と、硫酸マグネシウム・７水和塩と、塩化カリウムと、塩化マグネシウム・６水和塩と、塩化ナトリウムと、リン酸化合物とを水に溶解し、ｐＨを６．８に調整したものが好ましい。エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）の培養が可能であり、かつ、炭水化物源のグルコース以外は無機物原料で構成することができ、また、これらの原料は容易に水に溶解するので、複雑な設備・工程が不要であるからである。
【００２３】
リン酸化合物としては、例えば、リン酸アルミニウム、リン酸カルシウム、又は、リン酸鉄が挙げられ、これらの１種又は２種以上を用いてもよい。培養基の原料の割合としては、例えば、グルコースを０．３質量部から１．５質量部、硫安を０．３質量部から１．０質量部、硫酸マグネシウム・７水和塩を０．１質量部から０．５質量部、塩化カリウムを０．１質量部から０．５質量部、塩化マグネシウム・６水和塩を０．１質量部から０．５質量部、塩化ナトリウムを０．１質量部から０．５質量部、リン酸化合物を０．１質量部から０．５質量部とし、これらを水に溶解して全量を１０００質量部とすることが好ましい。ｐＨの調整には例えば苛性ソーダを用い、培養基の原料を水に溶解して１０００質量部としたのちに、苛性ソーダを添加してｐＨを調整する。このようにして調整した培養基は、例えば、加熱殺菌したのち冷却して用いる。
【００２４】
培養容器は、試験管、コルベン、又は、タンクなどどのような容器でもよい。容量５ｍＬから３０００ｍＬの種菌製造から、１００００Ｌを超える容量のタンクであっても、安定して培養することが可能である。なお、種菌製造時の培養容器の容量は、例えば、マザー・スターターで５０ｍＬ、プレスターターで３００ｍＬ、スターターは３０００ｍＬとし、生産量が大量となる時は、スターターの量を調整する。培養は、例えば、２５℃から３７℃の温度で、２４時間から４８時間、振盪又は撹拌しながら行うことが好ましい。培養基のｐＨが例えば３．６以下に低下し、生菌数が増加し、安定期に達したら、冷却して培養を停止する。種菌製造は、例えば、５０ｍＬ、３００ｍＬ、３０００ｍＬの容量で、順次、スケールアップして連続して培養することが好ましい。最低でも３代は連続継代培養を行うことが好ましく、接種量は０．５％から２．０％として、各ステージに応じて調整することが好ましい。
【００２５】
次いで、培養により得られた培養物である培養菌液と、軟質多孔性古代海洋腐植質とを混合する。軟質多孔性古代海洋腐植質は、例えば、粉状に粉砕し、大きさの大きい固形物を除去して均質化し、乾燥させたものを用いることが好ましい。又は、例えば、顆粒状に造粒し、粒径を５ｍｍから１０ｍｍに揃え、乾燥させたものを用いることが好ましい。混合工程は、例えば、ベルトコンベア上に軟質多孔性古代海洋腐植質を散布し、ベルトコンベアを一定の速度で移動させて、移動する軟質多孔性古代海洋腐植質の上に培養物である培養菌液を自動噴霧したのち、ミキサーにより撹拌、混合する。培養物と軟質多孔性古代海洋腐植質との割合は、培養物１質量部に対して、軟質多孔性古代海洋腐植質２質量部から６質量部とすることが好ましい。
【００２６】
培養物と軟質多孔性古代海洋腐植質とを混合したのち、この混合物を製剤化する。このように、軟質多孔性古代海洋腐植質は、容易に粉状又は顆粒状とすることができるので、混合、製剤化を容易に行うことができ、また、その後の袋詰め、集積と連続性のある生産システムを構築することが可能である。なお、袋詰めに用いる袋の材質は、水分透過性の少ないものを用いることが好ましい。
【００２７】
このように本実施の形態によれば、リン酸化合物を可溶化する微生物としてエンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）を用いると共に、そのキャリアとして軟質多孔性古代海洋腐植質を用いるようにしたので、リン酸化合物を可溶化する効果が高く安定しており、かつ、長期間にわたり継続して維持することができる。よって、農産物等の植物の育成に用いれば、植物の育成を促進することができると共に、土壌を改善することができる。
【００２８】
また、エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）は、簡単な培養基で、簡単な培養システムにより生育することができるので、容易に生産することができる。更に、エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）は、培養容器の容量が小さくても大きくても安定して培養することができるので、生産量を容易に調整することもできる。
【００２９】
加えて、軟質多孔性古代海洋腐植質は、容易に粉状又は顆粒状とすることができるので、エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）との混合、製剤化を容易に行うことができ、また、その後の袋詰め、集積と連続性のある生産システムを構築することができる。更にまた、農産物等の植物の育成に用いる際に、施肥及び保管等の取り扱いを容易とすることができる。
【実施例】
【００３０】
（微生物の採取）
土壌、湖沼泥水、ミミズ腸内細菌などを検索源とし、培養基で培養した。培養基には、グルコース０．３質量部から１．５質量部と、硫安０．３質量部から１．０質量部と、硫酸マグネシウム・７水和塩０．１質量部から０．５質量部と、塩化カリウム０．１質量部から０．５質量部と、塩化マグネシウム・６水和塩０．１質量部から０．５質量部と、塩化ナトリウム０．１質量部から０．５質量部と、リン酸アルミニウム０．１質量部から０．５質量部と、指示薬ブロモフェノールブルー液適量を水に溶解して１０００質量部とし、苛性ソーダによりｐＨを６．８に調整したのち、加熱殺菌して冷却したものを用いた。
【００３１】
この培養基に試料を個別に加え、３７℃で数日間にわたり振盪培養した。数日後、可視又は分光光度計で吸光度を観察した。変化のある試料については、繰り返し同じ操作を行い、継代での消長を確認した。このスクリーニングを経て、得た複数の微生物群の試料の中から、リン酸アルミニウム可溶化能の強いものを選択した。更に、これらの試料を培養した上記培養基に１．５％の寒天を加えた培地を使用し、試料を適宜希釈して、３７℃で平板培養を行った。出現したコロニーを観察し、コロニー・アップ操作を数回繰り返した。この操作で微生物の単離を行った。再度、液体の培養基に戻して、３７℃で振盪培養を繰り返し、選択した微生物にリン酸化合物可溶化能があるか否かを確認した。これにより、グラム陰性で、１μｍの小桿菌のエンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）に属する微生物が獲得された。この微生物は、ミミズ腸管から採取したものであり、１６ＳｒＲＮＡ領域をシークエンスし、その塩基配列をＢＬＡＳＴ検索することにより特定した。
【００３２】
（エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）の培養）
得られたエンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）を培養基で培養した。培養基には、グルコース０．３質量部から１．５質量部と、硫安０．３質量部から１．０質量部と、硫酸マグネシウム・７水和塩０．１質量部から０．５質量部と、塩化カリウム０．１質量部から０．５質量部と、塩化マグネシウム・６水和塩０．１質量部から０．５質量部と、塩化ナトリウム０．１質量部から０．５質量部と、リン酸化合物０．１質量部から０．５質量部とを水に溶解して全量を１０００質量部とし、苛性ソーダによりｐＨを６．８に調整したのち、加熱殺菌して冷却したものを用いた。その際、リン酸化合物にはリン酸アルミニウム、リン酸カルシウム、又は、リン酸鉄を個別に用い、リン酸化合物の種類が異なる３種類の培養基を用意した。
【００３３】
これら３種類の培養基にエンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）をそれぞれ添加し、２５℃から３７℃の温度で振盪培養又は撹拌培養したところ、いずれについても十分に増殖することが確認された。この時、ｐＨはいずれも２日後に３．６に低下した。このｐＨの低下の主要因は、グルコン酸産生によるものであった。生菌数はいずれも２４時間以降に安定期に入り、１ｍＬ当たり１×１０９個以上に達した。リン酸イオンの溶出は、リン酸アルミニウムの培養基で１３０μＭから３８０μＭで平均２５０μＭ、リン酸カルシウムの培養基で２ｍＭから５ｍＭで平均４ｍＭ、リン酸鉄の培養基で３２０μＭから３８０μＭで平均３６０μＭであった。その後、経日的に増加し、６日以降の溶出は緩やかになった。これにより、エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）は、リン酸化合物であるリン酸アルミニウム、リン酸カルシウム、リン酸鉄を十分に可溶化することが確認された。
【００３４】
（微生物資材の作製、及び性能評価）
エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）を培養基で培養した。培養基には、グルコース１０ｇ、硫安４ｇ、硫酸マグネシウム・７水和塩１ｇ、塩化カリウム１ｇ、塩化マグネシウム・６水和塩１ｇ、塩化ナトリウム１ｇ、リン酸アルミニウム０．５ｇを１Ｌの水に溶解し、苛性ソーダによりｐＨを６．８に調整したのち、３００ｍＬのコルベンに２００ｍＬ分注し、１２１℃で２０分間の加熱殺菌をして冷却したものを用いた。培養は、３０℃で、２４時間にわたり撹拌しながら行った。これにより培養物である培養菌液を得た。
【００３５】
また、キャリアとして、軟質多孔性古代海洋腐植質を用意し、２００℃で１５分間の加熱殺菌をしたのち、十分乾燥させ、乳鉢で細かく粉砕し、５０メッシュの篩を通過させた。この軟質多孔性古代海洋腐植質と、エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）を培養した培養物とを、軟質多孔性古代海洋腐植質４質量部に対して、培養物１質量部の割合で混合した。この混合物について、希釈平板法により生菌数を経時的に計測した。生菌数検出培地には、エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）の培養に使用した培養基に、１Ｌ当たり寒天を１５ｇ加え、殺菌したものを用いた。プレーティング後、約３０℃で３０時間から４８時間後の検出コロニー数で判定した。その結果を表１に示す。
【００３６】
本実施例に対する比較例として、キャリアを軟質多孔性古代海洋腐植質に代えて、大谷石、白河石、芦川石、軽石、ゼオライト、富士砂、桐生砂、蝦夷砂、矢作砂、鹿沼土、赤玉土、荒木田土、日向土、パーライト、貝殻焼成物、木炭、竹炭、又は、おがくずとしたことを除き、他は本実施例と同様にして、希釈平板法により経時的に生菌数を計測した。その結果を表１に合わせて示す。なお、木炭及び竹炭は、粉砕および混合の際に、浮遊物が飛散し、製造が難しかった。また、おがくずは５０メッシュの篩を全量通すことができず、培養物との混合においても均一に混合することができなかった。更に、生菌数測定時においては、カビや雑菌が多く発生し、生菌数の測定ができなかった。
【００３７】
【表１】
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【００３８】
表１に示したように、大谷石、白河石、芦川石、軽石、及び、ゼオライトの石類は、比重が高く、保水性に乏しいため、全般的に悪い結果であった。石類の中では、軽石が最も良好であったが、１か月しか維持できず、他は２週間以下であった。富士砂、桐生砂、蝦夷砂、及び、矢作砂の砂類も、同様に悪い結果であった。桐生砂は柔らかい土質分を含み、少しは生菌数維持力を示したが、２か月までは維持できなかった。鹿沼土、赤玉土、荒木田土、及び、日向土の土類では、鹿沼土が多少の生菌数位磁力を示したが、混合時から生菌数がやや低く、１ｇ当たり１０万個台で、目的とする生菌数に達しておらず、他も鹿沼土と同様かそれよりも悪い結果であった。パーライトは１か月までは良好な生菌維持力を示したが、２か月目以降は暫時減少していった。貝殻焼成物は、測定できなかったおがくずを除くと、比較例の中で最も悪かった。また、石炭及び竹炭は比較的良好な結果を示したが、取り扱いが難しく、生産が難しかった。
【００３９】
これに対して、軟質多孔性古代海洋腐植質は、最も高い生菌数維持力を示した。また、取り扱いも容易で、容易に生産することもできた。なお、軟質多孔性古代海洋腐植質については、別途、エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）の培養物と混合し、製剤化したのち、長期保存における生菌数変化を調べた。その結果、数か月にわたり１ｇ当たり１０００万個の生菌数を維持することができ、目標とする１００万個を約２年間にわたり維持することができた。更に、軟質多孔性古代海洋腐植質は、製剤化において、造粒加工が可能であり、顆粒化することもできた。
【００４０】
すなわち、軟質多孔性古代海洋腐植質をキャリアとして用いれば、エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）のリン酸化合物可溶化能を長期間にわたり継続して維持することができることが分かった。また、エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）との混合、製剤化を容易に行うことができ、容易に製造できることが分かった。
【００４１】
（植物の生育試験１）
エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）の培養物と、軟質多孔性古代海洋腐植質とを混合し、製剤化した微生物資材を施肥した土壌において、小松菜を生育し、幼苗期における小松菜の生体のリン酸含有量を測定した。なお、用いた微生物資材は、上述した方法により作製したものである。その結果、小松菜のリン酸含有量は、１６０±１５ｍｇであった。また、本実施例の微生物資材を施肥しない土壌において育成した小松菜について、幼苗期における小松菜の生体のリン酸含有量を測定したところ、リン酸含有量は、７９±２０ｍｇであった。すなわち、危険率５％水準の有意差があり、本実施例の微生物資材を用いて育成した小松菜にリン酸が多く含まれていた。なお、危険率５％の有意差というのは、９５％以上の確率で効果が認められるという意味である。また、植物生体の実観察においても、正常な生育が認められた。植物の生育初期には、リン酸の生体取り込みが十分でないことが多く、窒素過多となり軟弱な発芽状況になったり、軟弱な幼苗になってしまうことが多くみられるが、本実施例の微生物資材を用いれば、幼苗期の植物生体を強健にすることができることが分かった。
【００４２】
（植物の生育試験２）
本実施例の微生物資材を使用した使用区と、使用しない未使用区とに区分し、ホウレンソウ及び小松菜の種を圃場に機械蒔きした。この圃場の中に試験区をランダムに選定し、１ｍ２当たりの種の発芽後の幼苗数を計測した。その結果、ホウレンソウ及び小松菜の発芽幼苗数において、共に、危険率５％水準の有意差をもって、本実施例の微生物資材の使用区の方が優れていた。すなわち、本実施例の微生物資材を用いれば、種子の発芽に関しても高い効果を得られることが分かった。
【００４３】
（植物の生育試験３）
ホウレンソウ、小松菜、白菜などの葉採類について、従来の窒素、リン酸、カリウムの三大肥料を使用した場合と、リン酸の代わりに本実施例の微生物資材を使用した場合とで、幼苗期、成長期、及び、収穫期における根の状態を観察した。その結果、本実施例の微生物資材を使用した方が、いずれも場合も、毛細根を含む根の量が明確に多かった。すなわち、植物全体を食用とする葉採類において、収穫量が多くなる要因であることが推察された。
【００４４】
（植物の生育試験４）
ホウレンソウ、ニンジン、サツマイモ、キュウリ、トマト、ルッコラ、ネギ苗、バジル、オクラ、サトイモ、ジャガイモ、ナス、インゲン、小松菜、ラディシュ、ソラマメ、大根、稲、白菜、ピーマン、及び、キャベツについて、従来の窒素、リン酸、カリウムの三大肥料を使用した場合と、リン酸の代わりに本実施例の微生物資材を使用した場合とで、農作物栽培後の収穫量を比較した。その結果を表２に示す。なお、葉採類、根菜類は植物体の全重量、イモ類は可食部の重量、豆類は実の重量で比較した。また、サツマイモの栽培では、窒素及びカリウムの肥料は使用せず、使用区では本実施例の微生物資材のみを用い、未使用区では肥料を何も使用しなかった。また、本実施例の微生物資材は、製剤化において顆粒化し、従来から使用されている肥料散布機で散布した。
【００４５】
【表２】
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【００４６】
表２に示したように、本実施例の微生物資材を使用した方が、ホウレンソウ、ニンジン、サツマイモ、キュウリ、トマト、ルッコラ、ネギ苗、及び、バジルについては、有意に収穫量が優れていた。なお、危険率１％の有意差というのは、９９％の確率で効果が認められるという意味であり、危険率５％の有意差というのは、９５％以上の確率で効果が認められるという意味である。また、有意差はないが、キャベツ、ナス、インゲン、及び、ソラマメについては、収量が良かった。更に、通常よりも収穫量の少ないものや、悪いものはなかった。すなわち、本実施例の微生物資材を用いれば、施肥が容易で、収穫量を増大させることができることが分かった。
【００４７】
（植物の生育試験５）
過リン酸状態の土壌において、本実施例の微生物資材を施肥してホウレンソウを栽培し、栽培前の土壌中のリン酸化合物の含有量と、栽培後のリン酸化合物の含有量を比較した。その結果、栽培前のリン酸化合物含有量は、１３３±２５ｍｇ／１００ｇであったのに対して、栽培後のリン酸化合物含有量は、６８±１８ｍｇ／１００ｇと明確に減少していた。これは、植物が土壌中のリン酸化合物を利用していることを示しており、土壌の改善が進んでいると考えられる。
【００４８】
（まとめ）
本実施例の微生物資材は、土壌中に存在するリン酸化合物を可溶化し、リン酸イオンとして植物生体内に取り込まれ、活用されることが示された。すなわち、リン酸肥料の代替が確認できた。また、農産物の生産において、収穫量は増収することはあっても、減収することはなかった。更に、土壌中のリン酸化合物を消化し、土壌の改善が図られることも確認できた。この時、土壌へのマイナスの影響は見られなかった。すなわち、エンテロバクター  アエロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）の培養物と、軟質多孔性古代海洋腐植質とを有する微生物資材は、土壌中のリン酸化合物を有効活用する微生物資材として、利用することができることが分かった。
【００４９】
以上、実施の形態を挙げて本発明を説明したが、本発明は上記実施の形態に限定されるものではなく、種々変形可能である。
【産業上の利用可能性】
【００５０】
植物の育成に用いることができる。