(57)【要約】【課題】高価な装置及び充填剤を必要とせずに、ガレート基を含有する、ヒドロキシル基の数の違いが一つであるポリフェノールの混合物から、ヒドロキシル基の数が少ないポリフェノールを安価で簡便に分離する方法を提供すること。【解決手段】ガレート基を含有する、ヒドロキシル基の数の違いが一つであるポリフェノールの混合物からヒドロキシル基の数が少ないポリフェノールを選択的に分離する方法であって、水と有機溶媒とを１０／１〜５０／１の割合で含有する分離溶媒でポリフェノール混合物を２回以上分配する工程を有することを特徴とするポリフェノールの分離方法。有機溶媒は中鎖アルコール又は酢酸エチルを含む。ガレート基を含有するポリフェノールはカテキン類である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ガレート基を含有する、ヒドロキシル基の数の違いが一つであるポリフェノールの混合物からヒドロキシル基の数が少ないポリフェノールを選択的に分離する方法であって、
水と有機溶媒とを１０／１〜５０／１の割合で含有する分離溶媒でポリフェノール混合物を２回以上分配する工程を有することを特徴とするポリフェノールの分離方法。
【請求項２】
有機溶媒が中鎖アルコール又は酢酸エチルを含む請求項１記載のポリフェノールの分離方法。
【請求項３】
ポリフェノールがカテキン類である請求項１又は２記載のポリフェノールの分離方法。
【請求項４】
有機溶媒層から回収されるカテキン類がエピカテキンガレートまたはカテキンガレートである請求項３記載のポリフェノールの分離方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はポリフェノールを分離する方法に関する。更に詳しくは、ガレート基を含有する、ヒドロキシル基の数の違いが一つであるポリフェノールの混合物からヒドロキシル基の数が少ないポリフェノールを安価で簡単に分離する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、各種がんや動脈硬化が引き金となる各種生活習慣病発症と酸化ストレスとの関与が明らかになるにつれ、抗酸化性ポリフェノール含有植物素材が食品、健康食品、化粧品等の業界において高い関心を集め、「ポリフェノール」が市場における重要なキーワードとなっている。「抗酸化性ポリフェノール」は、主としてフラボノイド類、フェニルプロパノイド類、タンニン類であり、これらのポリフェノールは抗酸化効果、動脈硬化の予防効果、血管の増強効果、糖尿病やその合併症予防効果、体内の抗酸化防止効果、がん予防に関する効果、腸内環境改善効果、及び美白効果があることが認識されている（非特許文献１）。
【０００３】
植物から抽出されたポリフェノール抽出物には構造及び分子量が類似しているものが数多く存在する。各々のポリフェノールには生理活性の差があり、個々のポリフェノールを分離する必要がある。例えば、ガレート基を含有するポリフェノールとしてよく見られる茶ポリフェノールとしては、カテキン類であるエピカテキンガレート（ＥＣｇ）、カテキンガレート（Ｃｇ）、エピガロカテキンガレート（ＥＧＣｇ）、ガロカテキンガレート（ＧＣｇ）などが知られている。その中でもＥＣｇ：
【０００４】
【化１】
2015067570.tif 000002
【０００５】
とＥＧＣｇ：
【０００６】
【化２】
2015067570.tif 000003
【０００７】
が主成分であるが、両者はヒドロキシル基の数が一個異なるだけであり、物性が極めて類似しているため両者は簡単には分離できなかった。
【０００８】
従来、ポリフェノールの分離法としては液−液抽出法、カラムクロマトグラフィー法、高速向流クロマトグラフィー法などが知られている（特許文献１、２、３、４、５、６、７）。
例えば、特許文献１では、ポリフェノール化合物を含有する初期ｐＨが１０より低い水性植物抽出物を第１の有機溶媒で抽出し、有機抽出物をｐＨが１０より高い水相で抽出してポリフェノールに富む水相を得て、第２の有機溶媒で抽出する方法で純度の高いポリフェノール化合物を得ている。特許文献２、３、４、５、６では、複数のポリフェノールを含有する原料中に含まれるポリフェノールをスチレン系樹脂に吸着させ、次に脱着溶媒として吸着樹脂と特定の特性を有する一連の溶出液を組み合わせ、順次溶出させてポリフェノールを分離、精製する。特許文献７ではエーテル類、アセトニトリルまたはアルコール類、水または酸性水溶液を混合した二相溶媒系の上層または下層を固定相とし、下層または上層を移動層に用いた真の液−液分配クロマトグラフィーである高速向流クロマトグラフィーを用いて、ポリフェノールを分離している。
【０００９】
カラムクロマトグラフィー及び高速向流クロマトグラフィー法で、個々のポリフェノールを分離することは可能であるが、いずれも高額な装置やカラム用の充填剤が必要で、また、多段階のプロセスを踏まなければならず、安価で簡単な分離方法とはいえない。非特許文献２ではＥＣｇとＥＧＣｇのオクタノール／燐酸緩衝液（ｐＨ７．４）系での分配係数が其々２４と１６であることを記載して、ＥＣｇ及びＥＧＣｇと茶に含まれる他の物との分離が可能であることを示しているが、一般的に使われている有機溶媒対水の容量比が１：１の場合であれば、１０回の分離でも、オクタノール層のＥＧＣｇはＥＣｇに対して１０％ほど減少し、ＥＣｇとＥＧＣｇを完全に分離するには手間が掛かると考えられる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】特表２００５−５０４７４６号公報
【特許文献２】特開２０００−１６９５１号公報
【特許文献３】特開２００２−３３５９１１号公報
【特許文献４】特開平６−９６０７号公報
【特許文献５】特開２００６−３６６４５号公報
【特許文献６】特開２０１２−１４０４０１号公報
【特許文献７】特開２００４−２５６４８１号公報
【特許文献８】特開２００６−３６６４５号公報
【特許文献９】特開２０１２−１１１７４７号公報
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】「植物ポリフェノール含有素材の開発」（シーエムシー出版）
【非特許文献２】Ｂｉｏｓｃｉ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｖｏｌ．６３，Ｎｏ．１２，２２５２−２２５５
【非特許文献３】Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ  Ｖｏｌ．１９，Ｎｏ．１０，１７７１−１７７６
【非特許文献４】Ｃａｎｃｅｒ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  Ｖｏｌ．１２９，Ｎｏ．２，１７３−１７９
【非特許文献５】Ｃｌｉｎ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  Ｖｏｌ．９，Ｎｏ．９，３３１２−３３１９
【非特許文献６】Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈ．  Ｒｅｓ．  Ｃｏ．  Ｖｏｌ．３７４，Ｎｏ．２６，５２７−５３２
【非特許文献７】Ａｍ．  Ｊ．  Ｐａｔｈｏｌ．  Ｖｏｌ．１６５，Ｎｏ．１，２９９−３０７
【非特許文献８】Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ  Ｖｏｌ．２５，Ｎｏ．１２，２４２５−２４３２
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明の目的は、高価な装置及び充填剤を必要とせずに、ガレート基を含有する、ヒドロキシル基の数の違いが一つであるポリフェノールの混合物から、ヒドロキシル基の数が少ないポリフェノールを安価で簡便に分離する方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明者らは、茶抽出物由来のガレート基を含有する、ヒドロキシル基の数の違いが一つであるポリフェノールを含む混合物から、ヒドロキシル基の数が少ないガレート型ポリフェノールを、有機溶媒−水との液−液分離法で容易に分離できることを見出した。更に詳細には水と有機溶媒との比率を６：１〜１：２のように調整していたこれまでの常法と比べて、水の比率を大幅に増やすという非常に異なる設定をすることにより、茶の主成分であるＥＧＣｇからＥＧＣｇより一つヒドロキシル基の数が少ないＥＣｇを分離できることを見出し、本発明を完成させた。
【００１４】
即ち、本発明の要旨は、
（１）ガレート基を含有する、ヒドロキシル基の数の違いが一つであるポリフェノールの混合物からヒドロキシル基の数が少ないポリフェノールを選択的に分離する方法であって、
水と有機溶媒とを１０／１〜５０／１の割合で含有する分離溶媒でポリフェノール混合物を２回以上分配する工程を有することを特徴とするポリフェノールの分離方法、
（２）有機溶媒が中鎖アルコール又は酢酸エチルを含む前記（１）記載のポリフェノールの分離方法、
（３）ポリフェノールがカテキン類である前記（１）又は（２）記載のポリフェノールの分離方法、
（４）有機溶媒層から回収されるカテキン類がエピカテキンガレートまたはカテキンガレートである前記（３）記載のポリフェノールの分離方法
である。
【発明の効果】
【００１５】
本発明の方法により、ガレート基を含有するポリフェノールの混合物中から、高価な装置及び充填剤を必要とせずに、従来は分離が難しいと考えられてきたヒドロキシル基が一つであるポリフェノール同士のうち、ヒドロキシル基の数が少ないポリフェノールを安価かつ簡便に分離することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明のポリフェノールの分離方法は、ガレート基を含有する、ヒドロキシル基の数の違いが一つであるポリフェノール混合物からヒドロキシル基の数が少ないポリフェノールを選択的に分離する方法であって、
水と有機溶媒とを１０／１〜５０／１の割合で含有する分離溶媒でポリフェノール混合物を２回以上分配する工程を有することを特徴とする。
【００１７】
本発明で用いるポリフェノールとは、ガレート基及びフェノール性ヒドロキシル基を持つ成分であり、代表的なポリフェノールとしては、化学構造の基本骨格としてフラボノイドを有する化合物群が挙げられる。例えば、基本骨格がフラボノイドである化合物群として、カテキン類、アントシアニン類、タンニン類、イソフラボン類等が挙げられ、カテキン類としては、さらにガロカテキンガレート（ＧＣｇ）、エピガロカテキンガレート（ＥＧＣｇ）、カテキンガレート（Ｃｇ）、エピカテキンガレート（ＥＣｇ）等が含まれる。ここで、ＣｇはＥＣｇの熱異性化体であり、ＧＣｇはＥＧＣｇの熱異性化体であることが知られている。
以上のようにポリフェノールには、基本骨格の構造が類似しているものがたくさん存在し、個々の分離が難しいことが問題であった。中でもＥＧＣｇとＥＣｇとはヒドロキシル基の数の違いが一つしかないため、特に分離が難しいことが知られていた。
これに対して、本発明の分離方法を用いることで、化学構造と分子量が非常に近く、ヒドロキシル基の数の違いが一つしかないポリフェノール同士であってもヒドロキシル基の数が少ない方のポリフェノールを分離することができる。例えば、ＥＧＣｇとＥＣｇとのポリフェノール混合物からはＥＣｇを選択的に分離することができる。
【００１８】
本発明において使用するポリフェノール混合物とは前記ポリフェノールのうち、ガレート基を含有する、ヒドロキシル基の数の違いが一つであるポリフェノール同士を含有している混合物であればよい。ガレート基を含有する、ヒドロキシル基の数の違いが一つであるポリフェノールの混合物（以下、「ポリフェノール混合物」と称する。）としては、三井農林（株）「ポリフェノン」（ポリフェノン７０Ａ）、伊藤園（株）「テアフラン」（テアフラン９０Ｓ）、太陽化学（株）「サンフェノン」（サンフェノン９０Ｓ）などの市販品がある。
【００１９】
本発明では前記ポリフェノール混合物を、水と有機溶媒との分離溶媒を用いた液−液分離法により分配する。
【００２０】
本発明に用いる水としては、化合物の分離・精製に使用される程度の純度を有するものであればよい。
【００２１】
本発明で使用する有機溶媒としては、中鎖アルコール、酢酸エチル、ベンゾ二トリル、ニトロベンゼンなどが挙げられる。
中でも、原料の価格、及び工業への応用の観点から、中鎖アルコールおよび酢酸エチルが好ましい。
中鎖アルコールは常温で液体のものであればよく、例えばブタノール、ペンタノール、ヘキサノール、ヘプタノール、オクタノールなどが挙げられる。その中でも、特に分離効果に優れたオクタノールがより好ましい。また、応用範囲が広まる酢酸エチルを用いる態様はより好ましいものである。更にこれらの有機溶媒の混合物を用いてもよい。
【００２２】
本発明においては、分離溶媒における水と有機溶媒との比（容量比）を１０／１〜５０／１に調整する点に一つの特徴がある。通常、カテキン類などのポリフェノールの分配では、水と有機溶媒との比を６：１〜１：２に調整することが常法となっている（例えば、特許文献１、８など参照）。しかしながら、水と有機溶媒との比が１０／１より小さいと、ＥＣｇとＥＧＣｇの分離効果が悪く、また、前記比が５０／１を超えると、ヒドロキシル基の数が少ないポリフェノールの抽出効率が悪くなる。前記水と有機溶媒との比は、好ましくは２０／１〜５０／１、より好ましくは２０／１〜３０／１である。
【００２３】
本発明では、前記ポリフェノール混合物を、前記分離溶媒に添加、混合した後、水層と有機溶媒層の２層に分配する。水層は下層、有機溶媒層は上層になる。分配する際の条件としては、特に限定はないが、効率よくポリフェノールの分離を行うことができる観点から、室温で行うことが好ましい。
【００２４】
水層と有機溶媒層との分配手法は、水層と有機溶媒層を、分液ロートで完全に分離するまで静止した後、有機溶媒層を回収してもいいし、容器に入れ遠心分離した後、有機溶媒層を回収してもいい。水と有機溶媒の比を１０／１〜５０／１にした分離溶媒中において、ヒドロキシル基の数が少ないポリフェノールは、ヒドロキシル基の数が多いポリフェノールに比べて有機溶媒層に移動しやすいため、有機溶媒層を回収することにより、ヒドロキシル基の数が少ないポリフェノールの比率を選択的に高めることができる。
例えば、ＥＣｇとＥＧＣｇとを含むポリフェノール混合物を前記分配手法に供する場合、ヒドロキシル基の数が１つ少ないＥＣｇはＥＧＣｇに比べ、有機溶媒層に移動しやすいため、有機溶媒層を回収することにより、ＥＣｇの比率を高めることができる。同様に、ＣｇとＧＣｇとのポリフェノール混合物を前記分配手法に供する場合、ヒドロキシル基の数が１つ少ないＣｇはＧＣｇに比べ、有機溶媒層に移動しやすいため、有機溶媒層を回収することにより、Ｃｇの比率を高めることができる。
【００２５】
前記分配を行う回数としては、２回以上繰り返すことでヒドロキシル基の数が少ないポリフェノールの比率をさらに高めることができ、有機溶媒層中に最終的にヒドロキシル基の数が少ないポリフェノールを選択的に分離することができる。
なお、前記分配を行う回数が１回では十分な目的のポリフェノールを十分に分離できているとはいえない。また、前記分配の回数の上限については特に限定はないが、作業上手間を抑え、産業化し易い観点から４回以内であることが好ましい。
【００２６】
ＥＣｇとＥＧＣｇとの場合のようにヒドロキシル基の数が１つしか違わないガレート基を含有するポリフェノールを分離することができる本発明の方法は、次のような仮説に基づいている。即ち、有機溶媒の比を１０／１〜５０／１にした混合溶媒中では、ヒドロキシル基が多いほど水中での安定性が増すので、その差を前記のような有機溶媒と水との比にした分離溶媒を用いることにより分離効率が増すことが考えられる。
【００２７】
更に、本発明の有用性についてＥＣｇを例にして以下説明する。茶ポリフェノールの有用性は数多くの論文に記載されてきたが（非特許文献３，４，５）、これらの殆どはＥＧＣｇを主とするものである。
しかし、本発明者らが先に見出したＬＯＸ−１アンタゴニスト剤としての有効性は、ＥＣｇの方がＥＧＣｇより高いものである（特許文献９）。また、それ以外にもＥＣｇがＥＧＣｇより高い機能性を示す文献がある（非特許文献６，７）。
ところが、ＥＣｇを安価に多量に得られない為に、動物実験など更に研究を高等化する研究開発が停止を余儀なくされているのが現状である。本発明は、こうした状況をブレークスルーする契機となることが期待できる。
【実施例】
【００２８】
実施例１
「ＥＣｇとＥＧＣｇの水とオクタノールによる分離」
茶抽出物（太陽化学株式会社製）２０ｇを２Ｌの水に溶かし、０．４５μｍのフィルターで濾過した後、６６．７ｍＬのオクタノールと分液ロートで分配を行った（水と有機溶媒との容量比＝３０：１）。二層に完全に分離するまで一晩静置し、オクタノール層のみを取った。上記の分離したオクタノール相と２Ｌの水を混ぜて（水と有機溶媒との容量比＝３０：１）、分液ロート中で一晩静置し、オクタノール相のみを取った。上記の分離したオクタノール層をナスフラスコに移動し、真空エバポレーター、及び真空ポンプにより、オクタノールを完全に除去した。乾燥したパウダーを３０％メタノール水溶液に溶かし、高速液体クロマトグラフィーにより、ＥＣｇ及びＥＧＣｇの量を決定した。各抽出段階でのＥＣｇ及びＥＧＣｇの比を表１に示す。
なお、高速液体クロマトグラフィーの条件は以下のとおり。
【００２９】
「高速液体クロマトグラフィーの条件」
カラム：ＣＯＳＭＯＳＩＬ（Ｃｏｄｅ  ０５９７７−５１）  Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒ  ４．６ＩＤ×２５０ｍｍ（（株）ナカライテスク製）
移動Ａ相液：０．１％トリフルオロ酢酸水溶液
移動Ｂ相液：０．１％トリフルオロ酢酸アセトニトリル溶液
検出：２８０ｎｍ
カラム温度：３５℃
サンプル温度：室温
サンプル量：１０μＬ
流速：１ｍＬ／ｍｉｎ
グラジェント公配（容量％）：９５％Ａ／５％Ｂから７０％Ａ／３０％Ｂまで２５分間、７０％Ａ／３０％Ｂから１００％Ｂまで２分間、１００％Ｂで８分間（全て直線）
【００３０】
【表１】
2015067570.tif 000004
【００３１】
なお、ＥＧＣｇに対するＥＣｇの比率が６倍以上となった場合、ＥＣｇはＥＧＣｇから分離したと判断した（以下の実施例、比較例も同じ）。
【００３２】
実施例２
「ＥＣｇとＥＧＣｇの水とヘキサノールによる分離」
茶抽出物（太陽化学株式会社製）２０ｇを２Ｌのヘキサノール飽和水に溶かし、０．４５μｍのフィルターで濾過した後、６６．７ｍＬの水飽和ヘキサノールと分液ロートで分配を行った（水と有機溶媒との容量比＝３０：１）。二層に完全に分離するまで一晩静置し、ヘキサノール層のみを取った。上記の分離したヘキサノール相と２Ｌのヘキサノール飽和水を混ぜて（水と有機溶媒との容量比＝３０：１）、分液ロート中で一晩静置し、ヘキサノール相のみを取った。上記の分離したヘキサノール相と２Ｌのヘキサノール飽和水を混ぜて（水と有機溶媒との容量比＝３０：１）、分液ロート中で一晩静置し、ヘキサノール相のみを取った。上記の分離したヘキサノール層をナスフラスコに移動し、真空エバポレーター、及び真空ポンプにより、ヘキサノールを完全に除去した。乾燥したパウダーを３０％メタノール水溶液に溶かし、高速液体クロマトグラフィーにより、ＥＣｇ及びＥＧＣｇの量を決定した。各抽出段階でのＥＣｇ及びＥＧＣｇの比を表２に示す。
【表２】
2015067570.tif 000005
【００３３】
実施例３
「ＥＣｇとＥＧＣｇの水とブタノールによる分離」
茶抽出物（太陽化学株式会社製）２０ｇを２Ｌのブタノール飽和水に溶かし、０．４５μｍのフィルターで濾過した後、６６．７ｍＬの水飽和ブタノールと分液ロートで分配を行った（水と有機溶媒との容量比＝３０：１）。二層に完全に分離するまで一晩静置し、ブタノール層のみを取った。上記の分離したブタノール相と２Ｌのブタノール飽和水を混ぜて（水と有機溶媒との容量比＝３０：１）、分液ロート中で一晩静置し、ブタノール相のみを取った。上記の分離したブタノール相と２Ｌのブタノール飽和水を混ぜて（水と有機溶媒との容量比＝３０：１）、分液ロート中で一晩静置し、ブタノール相のみを取った。上記の分離したブタノール層をナスフラスコに移動し、真空エバポレーター、及び真空ポンプにより、ブタノールを完全に除去した。乾燥したパウダーを３０％メタノール水溶液に溶かし、高速液体クロマトグラフィーにより、ＥＣｇ及びＥＧＣｇの量を決定した。各抽出段階でのＥＣｇ及びＥＧＣｇの比を表３に示す。
【００３４】
【表３】
2015067570.tif 000006
【００３５】
実施例４
「ＥＣｇとＥＧＣｇの水と酢酸エチルによる分離」
茶抽出物（太陽化学株式会社製）２０ｇを２Ｌの酢酸エチル飽和水に溶かし、０．４５μｍのフィルターで濾過した後、６６．７ｍＬの水飽和酢酸エチルと分液ロートで分配を行った（水と有機溶媒との容量比＝３０：１）。二層に完全に分離するまで一晩静置し、酢酸エチル層のみを取った。上記の分離した酢酸エチル相と２Ｌの酢酸エチル飽和水を混ぜて（水と有機溶媒との容量比＝３０：１）、分液ロート中で一晩静置し、酢酸エチル相のみを取った。上記の分離した酢酸エチル相と２Ｌの酢酸エチル飽和水を混ぜて（水と有機溶媒との容量比＝３０：１）、分液ロート中で一晩静置し、酢酸エチル相のみを取った。上記の分離した酢酸エチル層をナスフラスコに移動し、真空エバポレーター、及び真空ポンプにより、酢酸エチルを完全に除去した。乾燥したパウダーを３０％メタノール水溶液に溶かし、高速液体クロマトグラフィーにより、ＥＣｇ及びＥＧＣｇの量を決定した。各抽出段階でのＥＣｇ及びＥＧＣｇの比を表４に示す。
【００３６】
【表４】
2015067570.tif 000007
【００３７】
実施例５
水飽和酢酸エチルの量を１００ｍＬとし（水と有機溶媒との容量比＝５０：１）、他の条件は実施例４と同様である。各抽出段階でのＥＣｇ及びＥＧＣｇの比を表５に示す。
【００３８】
【表５】
2015067570.tif 000008
【００３９】
実施例６
水飽和酢酸エチルの量を１００ｍＬとし（水と有機溶媒との容量比＝４０：１）、他の条件は実施例４と同様である。各抽出段階でのＥＣｇ及びＥＧＣｇの比を表６に示す。
【００４０】
【表６】
2015067570.tif 000009
【００４１】
実施例７
水飽和酢酸エチルの量を１００ｍＬとし（水と有機溶媒との容量比＝２０：１）、他の条件は実施例４と同様である。各抽出段階でのＥＣｇ及びＥＧＣｇの比を表７に示す。
【００４２】
【表７】
2015067570.tif 000010
【００４３】
実施例８
水飽和酢酸エチルの量を２００ｍＬとし（水と有機溶媒との容量比＝１０：１）、他の条件は実施例４と同様である。各抽出段階でのＥＣｇ及びＥＧＣｇの比を表８に示す。
【００４４】
【表８】
2015067570.tif 000011
【００４５】
比較例１
水飽和酢酸エチルの量を４００ｍＬとし（水と有機溶媒との容量比＝５：１）、他の条件は実施例４と同様である。各抽出段階でのＥＣｇ及びＥＧＣｇの比を表９に示す。
【００４６】
【表９】
2015067570.tif 000012
【００４７】
比較例２
水飽和酢酸エチルの量を２Ｌとし（水と有機溶媒との容量比＝１：１）、他の条件は実施例４と同様である。各抽出段階でのＥＣｇ及びＥＧＣｇの比を表１０に示す。
【００４８】
【表１０】
2015067570.tif 000013
【００４９】
実施例１、２、３、４の結果から、本発明の方法によって、ＥＣｇ及びＥＧＣｇは水と中鎖アルコール、または酢酸エチルに安価で効率よく分離することができることがわかる。
また、実施例４、５、６、７、８比較例１、２の結果から、本発明の方法では、分配に用いる分離溶媒中の水と有機溶媒との比が１０／１〜５０／１の範囲内に調整されていれば、ＥＣｇをＥＧＣｇから効率よく分離することができることがわかる。