(57)【要約】【課題】血液脳関門の破綻を抑制し、脳浮腫、脳内出血、脳血管障害等の血管透過性亢進に起因する病態および疾患予防または治療に有効な血管透過性亢進抑制剤を提供すること。【解決手段】ＩＰ受容体アゴニストまたはプロスタサイクリン産生促進物質を含有し、ペリサイトの細胞死を阻害する作用を有する血管透過性亢進抑制剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＩＰ受容体アゴニストまたはプロスタサイクリン産生促進物質を含有する血管透過性亢進抑制剤。
【請求項２】
ペリサイトの細胞死を阻害する作用を有する請求項１に記載の抑制剤。
【請求項３】
ＩＰ受容体アゴニストが、プロスタサイクリンもしくはその誘導体もしくはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれらの水和物もしくは溶媒和物である請求項１または２に記載の抑制剤。
【請求項４】
プロスタサイクリン誘導体が、イロプロスト、ベラプロスト、シカプロスト、エポプロステノール、トレプロスチニル、クリンプロスト、ピミルプロストまたはセレキシパグである請求項３に記載の抑制剤。
【請求項５】
プロスタサイクリン産生促進物質が、プロスタサイクリン合成酵素またはプロスタサイクリン合成酵素遺伝子である請求項１または２に記載の抑制剤。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれかに記載の抑制剤を含有する血管透過性の亢進に起因する病態および疾患の予防または治療用医薬。
【請求項７】
血管透過性の亢進に起因する病態および疾患が、脳浮腫、脳内出血、脳血管障害、多発性硬化症、急性散在性脳脊髄炎、急性・慢性脳虚血、脳感染症、脳腫瘍、脳・脊髄外傷、アルツハイマー型痴呆、パーキンソン病、側索硬化症、炎症性脱髄性多発神経炎、糖尿病性末梢神経障害（ニューロパチー）、敗血症、アナフィラキシー、播種性血管内凝固症候群または急性呼吸窮迫症候群である請求項６に記載の医薬。
【請求項８】
脳浮腫の予防または治療用である請求項６に記載の医薬。
【請求項９】
脳内出血の予防または治療用である請求項６に記載の医薬。
【請求項１０】
脳血管障害の予防または治療用である請求項６に記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＩＰ受容体アゴニストまたはプロスタサイクリン産生促進物質を含有する血管透過性亢進抑制剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
血管は、血管内皮細胞が連なって管状構造を形成している。脳や脊髄では、血管内皮細胞間が密に接着することによって、血管内の構成成分が血管外に漏れ出ることを防いでいる。血管内には、脳や脊髄の細胞を傷つける成分が豊富に含まれており、血管内皮細胞間の接着によって、脳や脊髄の細胞の生存が維持されている。このような血管内皮細胞間の密な接着構造は、血液脳関門または血液脳脊髄液関門と呼ばれている。血液脳関門または血液脳脊髄液関門における血管内皮細胞間の密な接着は、血管内皮細胞周囲のペリサイトが血管内皮細胞に働きかけることで、強められている。このため、脳および／または脊髄のペリサイトが傷害されると、血液脳関門または血液脳脊髄液関門が破綻する。その結果、血管透過性が亢進し血管内の物質が脳脊髄に漏出することで、脳脊髄の組織が傷害され細胞は死に至る。外傷等によりペリサイトが傷害される場合だけでなく、神経障害または血管障害に起因する多くの疾患の初期や、傷害を受けた部位の周囲においても、このような血管透過性の亢進がまず起こっているものと考えられる。さらには、血管透過性の亢進は脳や脊髄に限らず、全身の臓器障害をもたらす。したがって、血液脳関門または血液脳脊髄液関門の破綻を保護するような作用を有する薬剤は、血管障害に起因する多くの疾患や、外傷若しくは炎症による脳脊髄の損傷、さらには全身の臓器障害において極めて有効であると考えられる。
【０００３】
プロスタグランジン類（例えばプロスタサイクリンまたはその誘導体）は、これまでに、血小板凝集抑制、胃酸分泌抑制、平滑筋収縮、細胞保護、利尿等の多彩な活性を有することが明らかになっており、天然のプロスタグランジン類および化学的あるいは生物学的安定性を付与したその誘導体は、産婦人科領域、消化器領域、循環器領域および眼科領域において医薬品としての開発が行われてきた。プロスタサイクリンもしくはその誘導体、またはプロスタサイクリン合成酵素遺伝子もしくはプロスタサイクリン産生促進物質は、血管新生作用（特許文献１）、血流促進作用（特許文献２）、癌のリスクまたは前悪性形成異常の予防作用（特許文献３）、神経障害治療作用（特許文献４）等を有しており、医薬として好適に用いられることが知られている。また、プロスタサイクリンおよびその誘導体は、血管透過性の亢進作用や血管拡張作用が知られており、例えば、原発性肺高血圧症（ＰＰＨ）の治療薬として承認されている。
【０００４】
近年、本発明者らは、プロスタサイクリンが中枢神経回路の再生を促進することおよびプロスタサイクリンが髄鞘を再生させることを見出し、それぞれ非特許文献１および非特許文献２で報告している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２０１２−２５７５９号公報
【特許文献２】特開２００７−３９４４５号公報
【特許文献３】特表２００８−５４２３９８号公報
【特許文献４】特開平１１−２２８４１７号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Muramatsu, R., Takahashi, C., Miyake, S., Fujimura, H., Mochizuki, H. and Yamashita, T. (2012) Angiogenesis induced by CNS inflammation promotes neuronal remodeling through vessel-derived prostacyclin. Nature Medicine 18, 1658-1664.
【非特許文献２】Takahashi, C., Muramatsu, R., Fujimura, H., Mochizuki, H. and Yamashita, T. (2013) Prostacyclin promotes oligodendrocyte precursor recruitment and remyelination after spinal cord demyelination. Cell Death Dis. 4, e795.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、血液脳関門の破綻を抑制し、脳浮腫、脳内出血、脳血管障害等の血管透過性亢進に起因する病態および疾患の予防または治療に有効な血管透過性亢進抑制剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、上記課題を解決するために、以下の各発明を包含する。
［１］ＩＰ受容体アゴニストまたはプロスタサイクリン産生促進物質を含有する血管透過性亢進抑制剤。
［２］ペリサイトの細胞死を阻害する作用を有する前記［１］に記載の抑制剤。
［３］ＩＰ受容体アゴニストが、プロスタサイクリン誘導体もしくはその薬学的に許容される塩、またはそれらの水和物もしくは溶媒和物である前記［１］または［２］に記載の抑制剤。
［４］プロスタサイクリン誘導体が、イロプロスト、ベラプロスト、シカプロスト、エポプロステノール、トレプロスチニル、クリンプロスト、ピミルプロストまたはセレキシパグである前記［３］に記載の抑制剤。
［５］プロスタサイクリン産生促進物質が、プロスタサイクリン合成酵素遺伝子である前記［１］または［２］に記載の抑制剤。
［６］前記［１］〜［５］のいずれかに記載の抑制剤を含有する血管透過性の亢進に起因する病態および疾患の予防または治療用医薬。
［７］血管透過性の亢進に起因する病態および疾患が、脳浮腫、脳内出血、脳血管障害、多発性硬化症、急性散在性脳脊髄炎、急性・慢性脳虚血、脳感染症、脳腫瘍、脳・脊髄外傷、アルツハイマー型痴呆、パーキンソン病、側索硬化症、炎症性脱髄性多発神経炎、糖尿病性末梢神経障害（ニューロパチー）、敗血症、アナフィラキシー、播種性血管内凝固症候群または急性呼吸窮迫症候群である前記［６］に記載の医薬。
［８］脳浮腫の予防または治療用である前記［６］に記載の医薬。
［９］脳内出血の予防または治療用である前記［６］に記載の医薬。
［１０］脳血管障害の予防または治療用である前記［６］に記載の医薬。
【発明の効果】
【０００９】
本発明により、新規な血管透過性亢進抑制剤を提供することができる。当該血管透過性亢進抑制剤は、ペリサイトの細胞死阻害作用に基づいて血液脳関門の破綻を抑制することにより、脳浮腫、脳内出血、脳血管障害等の血管透過性亢進に起因する病態および疾患を予防または治療することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】ペリサイトの細胞死に対するプロスタサイクリン誘導体の効果を、培養細胞を用いて検証した結果を示す図である。
【図２】プロスタサイクリン誘導体の血管透過性に対する効果を、脱髄モデルマウスを用いて検証した結果を示す図である。
【図３】神経機能障害に対するプロスタサイクリン誘導体の効果を、脱髄モデルマウスを用いて検証した結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明は、ＩＰ受容体アゴニストまたはプロスタサイクリン産生促進物質を含有する血管透過性亢進抑制剤（以下、「本発明の抑制剤」と記す。）を提供する。ＩＰ受容体は７回膜貫通構造を持つＧタンパク質共役受容体であり、プロスタサイクリン受容体とも称される。ＩＰ受容体の主な情報伝達はＧｓ型Ｇタンパク質を介するアデニル酸シクラーゼの活性化である。ＩＰ受容体アゴニストは、ＩＰ受容体を活性化させる性質を有するものであればよく、特に限定されない。ＩＰ受容体アゴニストとしては、プロスタサイクリンおよびプロスタサイクリン誘導体を好適に用いることができる。好ましくは、プロスタサイクリン誘導体もしくはその薬学的に許容される塩、またはそれらの水和物もしくは溶媒和物が挙げられる。プロスタサイクリン誘導体としては、例えば、イロプロスト、ベラプロスト、シカプロスト、エポプロステノール、トレプロスチニル、クリンプロスト、ピミルプロスト、セレキシパグ等が挙げられる。
【００１２】
本発明の抑制剤は、ペリサイトの細胞死を阻害する作用を有することが好ましい。ペリサイトは血管周皮細胞とも称される。ペリサイトは、主に血管内皮細胞と接して存在し、血液脳関門や血液脳脊髄液関門における血管内皮細胞間の密な接着を強める働きを有している。したがって、ペリサイトの細胞死阻害は、血液脳関門および／または血液脳脊髄液関門の破壊抑制と換言することができる。すなわち、本発明の抑制剤は、血液脳関門および／または血液脳脊髄液関門の破壊を抑制する作用を有することが好ましい。このような作用を有する本発明の抑制剤は、中枢神経系の血管における血管透過性亢進の抑制に特に有効である。
【００１３】
薬学的に許容される塩は、活性成分の効能を維持し、かつ人体に対して悪影響を与えない限り特に限定されないが、例えば、無機塩として塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、臭化水素酸塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、アンモニウム塩等が挙げられる。有機塩としては、デカン酸塩、エナント酸塩、マレイン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩、トリエタノールアミン塩、ジエタノールアミン塩、アミノ酸塩等が挙げられる。溶媒和物を形成する溶媒としては、生理学的に許容される有機溶媒、例えば、メタノール、エタノール、エーテル、ジオキサン、テトラヒドロフランなどを用いることができる。また、ＩＰ受容体アゴニストが光学異性体、立体異性体、位置異性体、回転異性体等の異性体を有する場合には、いずれか一方の異性体を用いてもよく、任意の混合物を用いてもよく、ラセミ体を用いてもよい。
【００１４】
プロスタサイクリン産生促進物質としては、例えばプロスタサイクリン合成酵素、プロスタサイクリン合成酵素遺伝子などが挙げられる。プロスタサイクリン合成酵素は、プロスタサイクリン合成活性を有するタンパク質であればどのようなものでもよいが、例えば配列番号１で示されるアミノ酸配列（ACCESSION：BAA07343）からなるヒトプロスタサイクリン合成酵素またはその活性断片を好ましく用いることができる。プロスタサイクリン合成酵素遺伝子は、プロスタサイクリン合成活性を有するタンパク質をコードする遺伝子であればどのようなものでもよいが、例えば、前記ヒトプロスタサイクリン合成酵素またはその活性断片をコードするＤＮＡを好ましく用いることができる。具体的には、例えば配列番号２で示される塩基配列（ACCESSION：D38145）を含むＤＮＡまたはその一部を含むＤＮＡが挙げられるが、これに限定されない。プロスタサイクリン合成酵素遺伝子に対して改変等を施した遺伝子であっても、プロスタサイクリン合成酵素としての作用を有するタンパク質をコードする遺伝子である限り、プロスタサイクリン合成酵素遺伝子に含まれる。
【００１５】
また、公知のプロスタサイクリン産生促進物質も好適に用いることができる。例えば、チョコレートに含まれるプロアントシアニジン（Schramm DD et al., Chocolate procyanidins decrease the leukotrien-prostacyclin ratio in human aortic endothelial cells. Am J Clin Nutr., 73: 36-40, 2001）、ニシヨモギ、リュウキュウヨモギ、カワラヨモギ等のヨモギ属の抽出物、バンジロウ（グアバ、フトモモ科）抽出物、ボタンボウフウ（セリ科）抽出物、クミスクチン（シソ科）抽出物（特開２００５−３５０４３２）紅麹を主成分とする麹の発酵抽出物（特開２００６−２４８９７６）、エルダーベリーの抽出物（特許文献２）、コーヒー果実、コーヒー豆又はこれらの抽出物（特開２００８−７４０７）などが挙げられる。
【００１６】
ＩＰ受容体アゴニストまたはプロスタサイクリン産生促進物質を含有する本発明の抑制剤は、低毒性で、かつ優れた血管透過性亢進抑制作用を有し、動物とりわけ哺乳動物（例えばヒト、サル、ブタ、イヌ、ネコ、ウサギ、モルモット、ラット、マウス等）に対して、安全に使用することができる。
【００１７】
本発明の抑制剤は、血管透過性の亢進に起因する各種病態および疾患の予防または治療に有用である。血管透過性の亢進に起因する病態または疾患としては、例えば、脳浮腫、脳内出血、脳血管障害、多発性硬化症、急性散在性脳脊髄炎、急性・慢性脳虚血、脳感染症、脳腫瘍、脳・脊髄外傷、アルツハイマー型痴呆、パーキンソン病、側索硬化症、炎症性脱髄性多発神経炎、糖尿病性末梢神経障害（ニューロパチー）、敗血症、アナフィラキシー、播種性血管内凝固症候群、急性呼吸窮迫症候群などが挙げられる。なかでも、本発明の抑制剤は、脳浮腫や脳内出血の予防または治療、脳血管障害の予防または治療、偏頭痛の予防または治療などに有用であり、とりわけ脳浮腫や脳内出血の再発の予防に有用である。本発明の抑制剤は、例えば、髄膜炎、脳炎、脳膿瘍、脳症、神経上皮組織性腫瘍、神経鞘性腫瘍、髄膜性腫瘍、悪性リンパ腫、血管起源腫瘍、胚細胞性腫瘍、先天性腫瘍、下垂体腺腫、転移性腫瘍、脳梗塞、脳内出血、クモ膜下出血、脳挫傷、硬膜外血腫、硬膜下血腫、脳内血腫、びまん性軸索損傷、一過性脳虚血、脳卒中などの疾患における脳血管障害の予防または治療に有用であり、これらの疾患における脳血管障害に起因して生じる脳浮腫や脳内出血の予防または治療に有用である。また、本発明の抑制剤は、頭部外傷による脳血管障害の治療に有用であり、頭部外傷による脳血管障害に起因して生じる脳浮腫や脳内出血の予防または治療に有用である。さらに、本発明の抑制剤は、前記疾患や頭部外傷によって惹起される情緒障害（うつ、不安、睡眠障害など）、知的障害（健忘症、痴呆など）、精神障害（てんかん、精神分裂症など）、感覚機能障害、運動機能障害等の寛解にも有用である。
【００１８】
本発明の抑制剤を医薬として用いる場合、当該抑制剤自体または薬学的に許容される担体、さらに添加剤を適宜配合して製剤化することができる。具体的には錠剤、被覆錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤、懸濁剤、乳剤等の経口剤、注射剤、輸液、坐剤、軟膏、パッチ剤等の非経口剤とすることができる。担体または添加剤の配合割合については、医薬品分野において通常採用されている範囲に基づいて適宜設定すればよい。配合できる担体または添加剤は特に制限されないが、例えば、水、生理食塩水、その他の水性溶媒、水性または油性基剤等の各種担体、賦形剤、結合剤、ｐＨ調整剤、崩壊剤、吸収促進剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、香料等の各種添加剤が挙げられる。
【００１９】
錠剤、カプセル剤などに混和することができる添加剤としては、例えば、ゼラチン、コーンスターチ、トラガント、アラビアゴムのような結合剤、結晶性セルロースのような賦形剤、コーンスターチ、ゼラチン、アルギン酸などのような膨化剤、ステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤、ショ糖、乳糖またはサッカリンのような甘味剤、ペパーミント、アカモノ油またはチェリーのような香味剤などが用いられる。調剤単位形態がカプセルである場合には、上記タイプの材料にさらに油脂のような液状担体を含有することができる。注射のための無菌組成物は通常の製剤業務（例えば有効成分を注射用水、天然植物油等の溶媒に溶解または懸濁させる等）に従って調製することができる。注射用の水性液としては、例えば、生理食塩水、ブドウ糖やその他の補助薬を含む等張液（例えば、Ｄ−ソルビトール、Ｄ−マンニトール、塩化ナトリウムなど）などが用いられ、適当な溶解補助剤、例えば、アルコール（例、エタノール）、ポリアルコール（例、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール）、非イオン性界面活性剤（例、ポリソルベート８０ＴＭ、ＨＣＯ−５０）などと併用してもよい。油性液としては、例えば、ゴマ油、大豆油などが用いられ、溶解補助剤である安息香酸ベンジル、ベンジルアルコールなどと併用してもよい。また、緩衝剤（例えば、リン酸塩緩衝液、酢酸ナトリウム緩衝液）、無痛化剤（例えば、塩化ベンザルコニウム、塩酸プロカインなど）、安定剤（例えば、ヒト血清アルブミン、ポリエチレングリコールなど）、保存剤（例えば、ベンジルアルコール、フェノールなど）、酸化防止剤などと配合してもよい。
【００２０】
本発明の抑制剤がプロスタサイクリン合成酵素遺伝子を含有する場合、配列番号２で示される塩基配列または公知のデータベース（GeneBank等）に登録されているプロスタサイクリン合成酵素遺伝子の塩基配列に基づいて、当業者ならば容易にクローニングすることができ、またその改変等も容易に行うことができる。プロスタサイクリン合成酵素遺伝子は、非ウイルスベクターまたはウイルスベクターの形態で投与することができる。
【００２１】
非ウイルスベクターを用いる場合は、慣用の遺伝子発現ベクターに目的とする遺伝子が組み込まれた組換え発現ベクターを用いて、以下のような手法により目的遺伝子を細胞や組織に導入することができる。すなわち、細胞への遺伝子導入法としては、リン酸−カルシウム共沈法や、微小ガラス管を用いたＤＮＡの直接注入法などが挙げられる。また、組織への遺伝子導入法としては、内包型リポソーム（internal type liposome）による遺伝子導入法、静電気型リポソーム（electrostatic type liposome）による遺伝子導入法、ＨＶＪ−リポソーム法、改良型ＨＶＪ−リポソーム法（HVJ-AVEリポソーム法）、レセプター介在性遺伝子導入法、パーティクル銃で担体（金属粒子）とともにＤＮＡ分子を細胞に移入する方法、ｎａｋｅｄ−ＤＮＡの直接導入法、正電荷ポリマーによる導入法等により、発現ベクターを細胞内に取り込ませることが可能である。発現ベクターとしては、生体内で目的遺伝子を発現させることのできるベクターであれば如何なる発現ベクターであっても良いが、例えばｐＣＡＧＧＳ（Gene108,193-200(1991)）や、ｐＢＫ−ＣＭＶ、ｐｃＤＮＡ３．１、ｐＺｅｏＳＶ等の市販のベクターなどが挙げられる。
【００２２】
ウイルスベクターを用いる場合、例えば、無毒化したレトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス、ワクシニアウイルス、ポックスウイルス、ポリオウイルス、シンビスウイルス、センダイウイルス、SV40、免疫不全症ウイルス（HIV）等のＤＮＡウイルスまたはＲＮＡウイルスに目的とする遺伝子を導入し、細胞に組換えウイルスを感染させることによって、細胞内に遺伝子を導入することが可能である。
【００２３】
非ウイルスベクターおよびウイルスベクターのいずれを用いる場合でも、ベクターを直接生体に導入してもよく、生体から細胞を取り出して体外で細胞にベクターを導入し、その後細胞を生体に戻してもよい。製剤形態としては、上記の各投与形態に合った種々の製剤形態（例えば液剤など）をとり得る。例えばプロスタサイクリン合成酵素遺伝子を含有する注射剤とする場合、当該注射剤は常法により調製することができ、例えば適切な溶剤（ＰＢＳ等の緩衝液、生理食塩水、滅菌水等）に溶解した後、必要に応じてフィルター等で濾過滅菌し、次いで無菌的な容器に充填することにより調製することができる。当該注射剤には必要に応じて慣用の担体等を加えても良い。また、ＨＶＪ−リポソーム等のリポソームにおいては、懸濁剤、凍結剤、遠心分離濃縮凍結剤などのリポソーム製剤の形態とすることができる。
【００２４】
本発明の抑制剤の投与量は、投与対象、投与対象の年齢および体重、症状、投与時間、投与方法、剤型などにより、適宜選択することができる。ある特定の患者の投与量は、年令、体重、一般的健康状態、性別、食事、投与時間、投与方法、排泄速度、薬物の組み合わせ、患者のその時に治療を行っている病状の程度に応じ、それらあるいはその他の要因を考慮して決められるが、例えば、成人（体重約６０ｋｇ）に経口投与する場合、通常１回量として、約０.１ないし約２０mg／kg、好ましくは約０.５ないし約１０mg／kgであり、これらの服用量を症状に応じて１日約１ないし約３回程度投与するのが望ましい。
【００２５】
本発明の医薬は、他の医薬と併用することができる。他の医薬としては、例えば、抗炎症剤、抗がん剤、リンパ球の浸潤抑制剤、脳保護剤、神経再生剤などが挙げられる。本発明の医薬を他の医薬と併用することにより、中枢神経系疾患、中枢神経障害に起因する全身症状等の予防または治療に有用となる。本発明の医薬と他の医薬とを併用する場合、これらを投与対象に対し、同時に投与してもよいし、時間差をおいて投与してもよい。併用薬剤の投与量は、臨床上用いられている投与量に準ずればよく、投与対象、投与対象の年齢および体重、症状、投与時間、剤形、投与方法、組み合わせ等により適宜選択することができる。
【００２６】
また、本発明の医薬は、幹細胞移植等の再生医療と併用することができる。本発明の医薬を幹細胞移植等の再生医療と併用することにより、血管透過性の亢進に起因する病態および疾患に対してより高い治療効果を得ることができる。
【００２７】
本発明の抑制剤は、血管透過性の亢進を抑制するためのサプリメントとして実施することができる。サプリメントは、例えば錠剤、顆粒剤、散剤、ドリンク剤等の形態で提供することができる。また、本発明の抑制剤は、血管透過性の亢進を抑制するための飲食品として実施することができる。飲食品には、健康食品、機能性食品、特定保健用食品、栄養補助食品、病者用食品が含まれ、例えば錠剤、顆粒剤、散剤、ドリンク剤等の形態で提供することができる。
【００２８】
なお、本発明には以下の各発明が含まれる。
（ａ）哺乳動物に対して、ＩＰ受容体アゴニストまたはプロスタサイクリン産生促進物質の有効量を投与することを特徴とする血管透過性亢進抑制方法。
（ｂ）哺乳動物に対して、ＩＰ受容体アゴニストまたはプロスタサイクリン産生促進物質の有効量を投与することを特徴とする血管透過性の亢進に起因する病態および疾患の予防または治療方法。
（ｃ）血管透過性亢進抑制剤を製造するための、ＩＰ受容体アゴニストまたはプロスタサイクリン産生促進物質の使用。
（ｄ）血管透過性の亢進に起因する病態および疾患の予防または治療用医薬を製造するための、ＩＰ受容体アゴニストまたはプロスタサイクリン産生促進物質の使用。
（ｅ）血管透過性亢進抑制に使用するための、ＩＰ受容体アゴニストまたはプロスタサイクリン産生促進物質。
（ｆ）血管透過性の亢進に起因する病態および疾患の予防または治療に使用するための、ＩＰ受容体アゴニストまたはプロスタサイクリン産生促進物質。
【実施例】
【００２９】
以下、実施例により本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００３０】
〔実施例１：ペリサイトの細胞死に対する効果の検討〕
ペリサイトの細胞死に対するプロスタサイクリン誘導体の効果を、培養細胞を用いて検証した。
（１）材料および方法
イロプロスト（ケイマン社製）を使用直前に生理食塩水で希釈して、１００μＭのイロプロスト溶液を調製して実験に使用した。対照群には、生理食塩水を使用した。ペリサイトは、Ｗｉｓｔａｒラット（メス、３週齢）の脳から採取した。単離した皮質を断片化し、ＤＭＥＭ中においてコラゲナーゼ／ディスパーゼ（ロシュ社製）およびＤＮａｓｅＩ（シグマ社製）で３７℃、９０分消化した。得られた懸濁物をＤＭＥＭ中コラゲナーゼタイプＩＩで３７℃、４５分消化した。細胞を、ＩＶ型コラーゲン（シグマ社製）およびフィブロネクチン（シグマ社製）を被覆したプラスチック組織培養皿に播種し、３日間培養（３７℃、５％ＣＯ２）して増殖させた。続いて、トリプシン−ＥＤＴＡ（ギブコ社製）を用いて継代し、コンフルエントまで生育させた。
細胞に、リゾホスファチジルコリン（シグマ社製）（１０μＭ）の存在下において、イロプロスト（１μＭ）または生理食塩水を加え、それぞれリゾホスファチジルコリン＋イロプロスト群およびリゾホスファチジルコリン群とした。リゾホスファチジルコリン非存在下で培養した細胞をコントロール群とした。各群ともｎ＝５とした。
培養２４時間後に細胞をトリプシン−ＥＤＴＡを用いてプラスチック組織培養皿から剥がし、細胞数を計測した。
【００３１】
（２）結果
各群の平均値±標準誤差を図１に示した。また、分散分析により統計解析を行った。リゾホスファチジルコリン群で死細胞数が増加し、リゾホスファチジルコリン＋イロプロスト群では細胞死が抑制された。両群間には有意な差（ｐ＜０．０１）が認められた。
【００３２】
〔実施例２：脱髄モデルマウスの血管透過性に対する効果の検討〕
プロスタサイクリン誘導体の血管透過性に対する効果を、脱髄モデルマウスを用いて検証した。
（１）材料および方法
Ｃ５７ｂｌ／６ｊマウス（メス、７週齢）のに脊髄内にリゾホスファチジルコリンを局所投与し、脱髄モデルマウスを作製した。リゾホスファチジルコリンは生理食塩水で希釈して１％（ｗ／ｖ）とし、これをマウス１匹当たり２μｌ投与した。イロプロストまたは生理食塩水を浸透圧ポンプ（アルゼット社製）に充填し、ポンプの先端にカニューレを装着し、先端をリゾホスファチジルコリン投与部位に添えた。続いて、エバンスブルー（シグマ社製）を生理食塩水で希釈して２％溶液を調製し、これを４ｍｌ／ｋｇで静脈内投与した。一日後、マウスを麻酔し生理食塩水を経心的に還流して脊髄組織を採取した。脊髄組織に含まれるエバンスブルー色素をホルマリン溶液中で溶出し、吸光度を測定した。
コントロール（正常マウス）群、リゾホスファチジルコリン群およびリゾホスファチジルコリン＋イロプロスト群の３群を設け、各群５匹で実験を行った。
【００３３】
（２）結果
各群の平均値±標準誤差を図２に示した。また、分散分析により統計解析を行った。図２からわかるように、リゾホスファチジルコリン群ではエバンスブルー色素が脊髄内に著しく漏出した。一方、リゾホスファチジルコリン＋イロプロスト群ではエバンスブルーの漏出がほとんど検出されず、イロプロストが血管透過性亢進を抑制したことが示された。両群間には有意な差（ｐ＜０．０１）が認められた。
【００３４】
〔実施例３：脱髄モデルマウスの神経機能障害に対する効果の検討〕
神経機能障害に対するプロスタサイクリン誘導体の効果を、脱髄モデルマウスを用いて検証した。
（１）材料および方法
Ｃ５７ｂｌ／６ｊマウス（メス、７週齢）のに脊髄内にリゾホスファチジルコリンを局所投与し、脱髄モデルマウスを作製した。リゾホスファチジルコリンは生理食塩水で希釈して１％（ｗ／ｖ）とし、これをマウス１匹当たり２μｌ投与した。イロプロストまたは生理食塩水を浸透圧ポンプ（アルゼット社製）に充填し、ポンプの先端にカニューレを装着し、先端をリゾホスファチジルコリン投与部位に添えた。リゾホスファチジルコリン群、リゾホスファチジルコリン＋イロプロスト群およびＳｈａｍ群について、肢神経麻痺スコアを評価した。肢神経麻痺スコアは以下の基準で評価し、５０歩分の合計を１日のデータとして扱った。
＜肢神経麻痺スコア＞
０：異常なし
１：軽い麻痺
２：重篤な麻痺
【００３５】
（２）結果
結果を図３に示した。リゾホスファチジルコリン群では術後１日で著しい肢神経麻痺が認められた。一方、リゾホスファチジルコリン＋イロプロスト投与群では肢神経麻痺はわずかであり、有意な差が認められた。この差は術後１４日まで続いた。
【００３６】
なお本発明は上述した各実施形態および実施例に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、異なる実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。また、本明細書中に記載された学術文献および特許文献の全てが、本明細書中において参考として援用される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【配列表】
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