(57)【要約】【課題】簡易な機構で、高圧流路と低圧流路に分けて複数液の並列処理を高速且つ容易に行うことを可能にする。【解決手段】カラム６０と、このカラム６０に溶離液Ａを送液するメインポンプ６３と、を連通する送液流路を、溶離液Ａをメインポンプ６３からカラム６０に流通させる第一流路と、溶離液Ｂを第一保持流路からカラム６０に流通させる第二流路と、のいずれかに切り換えできるようにする。【選択図】図２
2015052592.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
検体中の分析成分を吸着する吸着部と、
溶離液で溶離された前記分析成分を分析する分析装置と、
前記分析成分を溶離する第一溶離液を前記吸着部に送液する主送液装置と、
前記主送液装置と前記吸着部とを連通する送液流路と、
前記第一溶離液とは異なる第二溶離液を保持する第一保持流路と、
前記第一保持流路に前記第二溶離液を送液する副送液装置と、
前記送液流路を、前記第一溶離液を前記主送液装置から前記吸着部に流通させる第一流路と、前記第二溶離液を前記第一保持流路から前記吸着部に流通させる第二流路と、のいずれかに切り換える第一切替装置と、
を備える液体クロマトグラフィ装置。
【請求項２】
前記第一および第二溶離液とは異なる第三溶離液を保持する第二保持流路と、
前記第二保持流路に前記第三溶離液を送液する副送液装置と、
前記送液流路を、前記第一流路と、前記第三溶離液を前記第二保持流路から前記吸着部に流通させる第三流路と、のいずれかに切り換える第二切替装置と、
を更に備える請求項１に記載の液体クロマトグラフィ装置。
【請求項３】
検体を保持する検体保持流路と、
前記検体保持流路に前記検体を送液する副送液装置と、
前記送液流路を、前記第一流路と、前記検体を前記検体保持流路から前記吸着部に流通させる第四流路と、のいずれかに切り換える第三切替装置と、
を更に備える請求項２に記載の液体クロマトグラフィ装置。
【請求項４】
前記第二溶離液を送液する副送液装置と、前記第三溶離液を送液する副送液装置とが共通である、請求項２に記載の液体クロマトグラフィ装置。
【請求項５】
前記第二溶離液を送液する副送液装置と前記第三溶離液を送液する副送液装置の少なくとも一方と、前記検体を送液する副送液装置とが共通である、請求項３に記載の液体クロマトグラフィ装置。
【請求項６】
前記第一切替装置は、前記主送液装置と前記副送液装置とを使って、気泡低減処理と他の処理を平行稼働可能とする、請求項１〜５の何れか１項に記載の液体クロマトグラフィ装置。
【請求項７】
前記分析成分を含む前記検体を希釈する液希釈装置を有し、
前記吸着部が、前記液希釈装置によって希釈された前記検体の分析成分を吸着する請求項１〜６の何れか１項に記載の液体クロマトグラフィ装置。
【請求項８】
検体中の分析成分を吸着した吸着部に、前記分析成分を溶離する第一溶離液を主送液装置で送液流路を通して送液し前記分析成分を溶離する溶離ステップと、
前記溶離ステップで溶離した前記分析成分を分析装置で分析する分析ステップと、
前記第一溶離液とは異なる第二溶離液を副送液装置で第一保持流路に送液して保持させる第一保持ステップと、
前記送液流路を、前記第一溶離液を前記主送液装置から前記吸着部に流通させる第一流路と、前記第二溶離液が保持された第一保持流路を介して前記第一溶離液を前記吸着部に流通させる第二流路と、のいずれかに切り換える第一切替ステップと、
を有する液体クロマトグラフィ分析方法。
【請求項９】
前記主送液装置を気泡低減装置として機能させるステップをさらに含む、請求項８に記載の液体クロマトグラフィ分析方法。
【請求項１０】
前記第一および第二溶離液とは異なる第三溶離液を副送液装置で第二保持流路に送液して保持させる第二保持ステップと、
前記送液流路を、前記第一流路と、前記第二保持ステップにおいて前記第三溶離液が保持された第二保持流路を介して前記第一溶離液を前記吸着部に流通させる第三流路と、のいずれかに切り換える第二切替ステップと、
を有する請求項８または請求項９に記載の液体クロマトグラフィ分析方法。
【請求項１１】
検体を副送液装置で検体保持流路に送液して保持させる検体保持ステップを有し、
前記溶離ステップは、前記送液流路を、前記第一流路から、前記検体保持ステップにおいて前記検体が保持された検体保持流路を介して前記第一溶離液を前記吸着部に流通させる第四流路に切り換える検体導入ステップを有する請求項１０に記載の液体クロマトグラフィ分析方法。
【請求項１２】
検体中の分析成分を吸着する吸着部と、
溶離液で溶離された前記分析成分を分析する分析装置と、
前記分析成分を溶離する第一溶離液を前記吸着部に送液する主送液装置と、
前記主送液装置と前記吸着部とを連通する送液流路と、
前記第一溶離液とは異なる第二溶離液を保持する第一保持流路と、
前記第一保持流路に前記第二溶離液を送液する副送液装置と、
前記送液流路を、前記第一溶離液を前記主送液装置から前記吸着部に流通させる第一流路と、前記第二溶離液を前記第一保持流路から前記吸着部に流通させる第二流路と、のいずれかに切り換える第一切替装置と、
前記主送液装置と前記分析装置と前記副送液装置と前記第一切替装置とを制御するコンピュータと、
を備える液体クロマトグラフィ装置において、
前記吸着部に前記第一溶離液を前記主送液装置で送液して前記分析成分を溶離する溶離ステップと、
前記溶離ステップで溶離した前記分析成分を前記分析装置で分析する分析ステップと、
前記第二溶離液を前記副送液装置で第一保持流路に送液して保持させる第一保持ステップと、
前記第一切替装置により、前記送液流路を前記第一流路から前記第二流路に切り換える第一切替ステップと、
を含む液体クロマトグラフィ分析プログラム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、液体クロマトグラフィ装置、液体クロマトグラフィ分析方法、及び液体クロマトグラフィ分析プログラムに関する。
【背景技術】
【０００２】
検体中の成分を分析する分析装置として、検体中の成分をカラム等の吸着部に吸着させ、この吸着部へ溶離液を送液して特定の成分を脱離させた後、測定装置で溶離液中の成分を分析する液体クロマトグラフィ装置がある（例えば特許文献１）。
【０００３】
また、一の溶離液を送液する定量ポンプと、他の溶離液を導入する導入流路を備え、この導入流路に一の溶離液を導入可能とする第一切替バルブと、を備え、定量ポンプが２種類以上の溶離液を、非混合状態で第一切替バルブを介して吸着部に送液する液体クロマトグラフィ装置もある（特許文献２）。さらに、必要な液体流の切替を高圧インジェクションバルブの使用により非常に大きな圧力差間で可能にする液体クロマトグラフィ装置もある（特許文献３）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００７−２１２２７７号公報
【特許文献２】ＷＯ２０１０／０４１６３７号明細書
【特許文献３】特開２００９−１３９３７６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
液体クロマトグラフィ装置において、簡易な機構で、高圧流路と低圧流路に分けて複数液の並列処理を高速且つ容易に行うことが望まれる。
【０００６】
本発明は、簡易な機構で、高圧流路と低圧流路に分けて複数液の並列処理を高速且つ容易に行うことが可能な液体クロマトグラフィ装置、前記液体クロマトグラフィ装置を用いた液体クロマトグラフィ分析方法、及び前記液体クロマトグラフィ装置で使用するための液体クロマトグラフィ分析プログラムの提供を目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
第一態様の液体クロマトグラフィ装置は、検体中の分析成分を吸着する吸着部と、溶離液で溶離された前記分析成分を分析する分析装置と、前記分析成分を溶離する第一溶離液を前記吸着部に送液する主送液装置と、前記主送液装置と前記吸着部とを連通する送液流路と、前記第一溶離液とは異なる第二溶離液を保持する第一保持流路と、前記第一保持流路に前記第二溶離液を送液する副送液装置と、前記送液流路を、前記第一溶離液を前記主送液装置から前記吸着部に流通させる第一流路と、前記第二溶離液を前記第一保持流路から前記吸着部に流通させる第二流路と、のいずれかに切り換える第一切替装置と、を備える。
【０００８】
第一態様の液体クロマトグラフィ装置では、主送液装置により、第一溶離液が送液流路を通して、吸着部へ送液される。吸着部では、検体中の分析成分を吸着する。第一溶離液で溶離された分析成分は、分析装置により分析される。
【０００９】
また、副送液装置によって第一保持流路に第二溶離液が送液される。そして、第一切替装置により、送液流路を、第一流路から第二流路に切り換えることができる。これにより、第一保持流路に保持されていた第二溶離液が、第一保持流路に流入した第一溶離液によって、吸着部に向かって押し出される。第二溶離液で溶離された分析成分は、分析装置により分析される。このように、簡易な機構で、高圧流路と低圧流路に分けて複数液の並列処理を高速且つ容易に行うことが可能である。
【００１０】
ここで、送液流路及び第一保持流路を、溶離液同士の混合が生じない程度に細い流路とすることが可能である。これにより、第一保持流路から押し出された第二溶離液は、第一溶離液と非混合状態で吸着部に送液される。
【００１１】
第二態様では、第一態様の液体クロマトグラフィ装置において、前記第一および第二溶離液とは異なる第三溶離液を保持する第二保持流路と、前記第二保持流路に前記第三溶離液を送液する副送液装置と、前記送液流路を、前記第一流路と、前記第三溶離液を前記第二保持流路から前記吸着部に流通させる第三流路と、のいずれかに切り換える第二切替装置と、を更に備える。
【００１２】
第二態様の液体クロマトグラフィ装置においては、副送液装置によって第二保持流路に第三溶離液が送液される。そして、第二切替装置により、送液流路を、第一流路から第三流路に切り換えることができる。これにより、第二保持流路に保持されていた第三溶離液が、第二保持流路に流入した第一溶離液によって、吸着部に向かって押し出される。第三溶離液で溶離された分析成分は、分析装置により分析される。
【００１３】
ここで、送液流路及び第二保持流路を、溶離液同士の混合が生じない程度に細い流路とすることが可能である。これにより、第二保持流路から押し出された第三溶離液は、第一溶離液と非混合状態で吸着部に送液される。
【００１４】
第三態様では、第二態様の液体クロマトグラフィ装置において、検体を保持する検体保持流路と、前記検体保持流路に前記検体を送液する副送液装置と、前記送液流路を、前記第一流路と、前記検体を前記検体保持流路から前記吸着部に流通させる第四流路と、のいずれかに切り換える第三切替装置と、を更に備える。
【００１５】
第三態様の液体クロマトグラフィ装置においては、副送液装置によって検体保持流路に検体が送液される。そして、第三切替装置により、送液流路を、第一流路から第四流路に切り換えることができる。これにより、検体保持流路に保持されていた検体が、検体保持流路に流入した第一溶離液によって吸着部に向かって押し出される。
【００１６】
ここで、送液流路及び検体保持流路を、溶離液同士の混合が生じない程度に細い流路とすることが可能である。これにより、検体保持流路から押し出された検体は、第一溶離液と非混合状態で吸着部に送液される。
【００１７】
第四態様では、第二態様の液体クロマトグラフィ装置において、前記第二溶離液を送液する副送液装置と、前記第三溶離液を送液する副送液装置とが共通である。
【００１８】
第四態様の液体クロマトグラフィ装置においては、第二溶離液を送液する副送液装置と、第三溶離液を送液する副送液装置とが共通である。これにより、装置の部品点数を少なくして、効率的な動作を実行できる。
【００１９】
第五態様では、第三態様の液体クロマトグラフィ装置において、前記第二溶離液を送液する副送液装置と、前記第三溶離液を送液する副送液装置の少なくとも一方と、前記検体を送液する副送液装置とが共通である。
【００２０】
第五態様の液体クロマトグラフィ装置においては、第二溶離液を送液する副送液装置と、第三溶離液を送液する副送液装置の少なくとも一方と、検体を送液する副送液装置とが共通である。これにより、装置の部品点数を少なくして、効率的な動作を実行できる。
【００２１】
第六態様では、第一〜５の何れか１つの態様の液体クロマトグラフィ装置において、前記第一切替装置は、前記主送液装置と前記副送液装置とを使って、気泡低減処理と他の処理を平行稼働可能とする。
【００２２】
第六態様の液体クロマトグラフィ装置においては、第一切替装置を切り替えることにより、主送液装置の気泡低減装置による気泡の除去と、副送液装置による他の処理を平行稼働できる。
【００２３】
第七態様では、前記分析成分を含む前記検体を希釈する液希釈装置を有し、前記吸着部が、前記液希釈装置によって希釈された前記検体の分析成分を吸着する。
【００２４】
第七態様の液体クロマトグラフィ装置においては、前記検体を液希釈装置で希釈した後、吸着部で、検体の分析成分を吸着できる。
【００２５】
第八態様の液体クロマトグラフィ分析方法は、検体中の分析成分を吸着した吸着部に、前記分析成分を溶離する第一溶離液を主送液装置で送液流路を通して送液し前記分析成分を溶離する溶離ステップと、前記溶離ステップで溶離した前記分析成分を分析装置で分析する分析ステップと、前記第一溶離液とは異なる第二溶離液を副送液装置で第一保持流路に送液して保持させる第一保持ステップと、前記送液流路を、前記第一溶離液を前記主送液装置から前記吸着部に流通させる第一流路と、前記第二溶離液が保持された第一保持流路を介して前記第一溶離液を前記吸着部に流通させる第二流路と、のいずれかに切り換える第一切替ステップと、を有する。
【００２６】
第八態様の液体クロマトグラフィ分析方法では、溶離ステップにおいて、第一溶離液が送液流路を通して、検体中の分析成分を吸着する吸着部へ送液され、分析成分が溶離される。分析ステップでは、第一溶離液で溶離された分析成分が、分析装置により分析される。また、第一保持ステップでは、第一保持流路に第二溶離液が送液され保持される。そして、第一切替ステップにおいて、送液流路を第一流路から第二流路に切り換えることにより、第一保持流路に保持されていた第二溶離液が、第一保持流路に流入した第一溶離液によって吸着部に向かって押し出される。第二溶離液で溶離された分析成分は、分析装置により分析される。このため、簡易な機構で、高圧流路と低圧流路に分けて複数液の並列処理を高速且つ容易に行うことが可能である。
【００２７】
第九態様では、第八態様の液体クロマトグラフィ分析方法において、前記主送液装置を気泡低減装置として機能させるステップをさらに含む。
このステップにより、溶離液中の気泡を低減することができる。
【００２８】
第十態様では、第７または第九態様の液体クロマトグラフィ分析方法において、前記第一および第二溶離液とは異なる第三溶離液を副送液装置で第二保持流路に送液して保持させる第二保持ステップと、前記送液流路を、前記第一流路と、前記第二保持ステップにおいて前記第三溶離液が保持された第二保持流路を介して前記第一溶離液を前記吸着部に流通させる第三流路と、のいずれかに切り換える第二切替ステップと、を有する。
【００２９】
第十態様の液体クロマトグラフィ分析方法では、第二保持ステップにおいて、第一及び第二溶離液とは異なる第三溶離液が第二保持流路に送液され保持される。また、第二切替ステップにおいて、送液流路を第一流路から第三流路に切り換える。これにより、第二保持流路に保持されていた第三溶離液が、第二保持流路に流入した第一溶離液によって吸着部に向かって押し出される。第三溶離液で溶離された分析成分は、分析装置により分析される。
【００３０】
第十一態様では、第十態様の液体クロマトグラフィ分析方法において、検体を副送液装置で検体保持流路に送液して保持させる検体保持ステップを有し、前記溶離ステップは、前記送液流路を、前記第一流路から、前記検体保持ステップにおいて前記検体が保持された検体保持流路を介して前記第一溶離液を前記吸着部に流通させる第四流路に切り換える検体導入ステップを有する。
【００３１】
第十一態様の液体クロマトグラフィ分析方法においては、検体保持ステップにおいて、検体が検体保持流路に送液され保持される。また、検体導入ステップにおいて、送液流路を、第一流路から第四流路に切り換える。これにより、検体保持流路に保持されていた検体が、検体保持流路に流入した第一溶離液によって吸着部に向かって押し出される。
【００３２】
第十二態様の液体クロマトグラフィ分析プログラムは、検体中の分析成分を吸着する吸着部と、溶離液で溶離された前記分析成分を分析する分析装置と、前記分析成分を溶離する第一溶離液を前記吸着部に送液する主送液装置と、前記主送液装置と前記吸着部とを連通する送液流路と、前記第一溶離液とは異なる第二溶離液を保持する第一保持流路と、前記第一保持流路に前記第二溶離液を送液する副送液装置と、前記送液流路を、前記第一溶離液を前記主送液装置から前記吸着部に流通させる第一流路と、前記第二溶離液を前記第一保持流路から前記吸着部に流通させる第二流路と、のいずれかに切り換える第一切替装置と、前記主送液装置と前記分析装置と前記副送液装置と前記第一切替装置とを制御するコンピュータと、を備える液体クロマトグラフィ装置において、前記吸着部に前記第一溶離液を前記主送液装置で送液して前記分析成分を溶離する溶離ステップと、前記溶離ステップで溶離した前記分析成分を前記分析装置で分析する分析ステップと、前記第二溶離液を前記副送液装置で第一保持流路に送液して保持させる第一保持ステップと、前記第一切替装置により、前記送液流路を前記第一流路から前記第二流路に切り換える第一切替ステップと、を含む。
【００３３】
第十二態様の液体クロマトグラフィ分析プログラムにおいては、溶離ステップにおいて、主送液装置で、第一溶離液が送液流路を通して、検体中の分析成分を吸着する吸着部へ送液され分析成分が溶離される。分析ステップでは、分析装置により、第一溶離液で溶離された分析成分が分析される。また、第一保持ステップでは、第一保持流路に第二溶離液が副送液装置で送液され保持される。そして、第一切替ステップにおいて、第一切替装置で、送液流路を第一流路から第二流路に切り換える。これにより、第一保持流路に保持されていた第二溶離液が、第一保持流路に流入した第一溶離液によって吸着部に向かって押し出される。第二溶離液で溶離された分析成分は、分析装置により分析される。このため、簡易な機構で、高圧流路と低圧流路に分けて複数液の並列処理を高速且つ容易に行うことが可能である。
【発明の効果】
【００３４】
以上説明したように本発明によれば、簡易な機構で、高圧流路と低圧流路に分けて複数液の並列処理を高速且つ容易に行うことが可能である。
【図面の簡単な説明】
【００３５】
【図１】本発明の第一実施形態に係る液体クロマトグラフィ装置の外観を示す斜視図である。
【図２】本発明の第一実施形態に係る液体クロマトグラフィ装置の内部構成を示す図である。
【図３】本発明の第一実施形態に係る液体クロマトグラフィ装置において、メインポンプ中に溶離液Ａが注入されるように第一切替バルブを切り換えた状態を示す図である。
【図４】本発明の第一実施形態に係る液体クロマトグラフィ装置において、検体保持流路中の検体がカラムに送液されるように検体バルブを切り換えた状態を示す図である。
【図５】本発明の第一実施形態に係る液体クロマトグラフィ装置において、溶離液保持流路中の溶離液Ｃがカラムに送液されるように第二切替バルブを切り換えた状態を示す図である。
【図６】本発明の第一実施形態に係る液体クロマトグラフィ装置において、溶離液保持流路中の溶離液Ｂがカラムに送液されるように第一切替バルブを切り換えた状態を示す図である。
【図７】本発明の第一実施形態に係る液体クロマトグラフィ装置におけるメインポンプ、副送液装置、検体調製ユニット、検体バルブ、第一切替バルブ、第二切替バルブ、及び測光ユニットと、これらを制御するコンピュータとの関係を示すブロック図である。
【図８】本発明の第一実施形態の液体クロマトグラフィ装置の動作を示すフロー図である。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
（第一実施形態）
＜全体構成＞
本発明の液体クロマトグラフィ装置の第一実施形態について以下、図１〜図８に従って説明する。本実施形態に係るクロマトグラフィ装置１は、高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）を全自動で行う装置である。高速液体クロマトグラフィでは、分析成分を容離する液（溶離液）を用いて、たとえば、血液試料中のグリコヘモグロビン濃度を測定する。
【００３７】
図１に示すように、本実施形態に係る液体クロマトグラフィ装置１は、装置本体２を有している。装置本体２は、テーブル２０と、ホルダ部２１とを備えている。
【００３８】
テーブル２０には、ラック１０に保持された採血管１１がセットされる。ホルダ部２１には、複数の溶離液パック１２（本実施形態では、３つの溶離液パック１２Ａ、１２Ｂ、１２Ｃ）がセットされる。具体的には、溶離液パック１２Ａには、第一溶離液としての溶離液Ａが収容されている。溶離液パック１２Ｂには、第二溶離液としての溶離液Ｂが収容されている。溶離液パック１２Ｃには、第三溶離液としての溶離液Ｃが収容されている。
【００３９】
なお、各溶離液パック１２Ａ、１２Ｂ、１２Ｃに収容された溶離液Ａ、Ｂ、Ｃはそれぞれ、ｐＨや塩濃度が異なっているが、いずれも、後述するカラム６０の充填材に吸着した各々の分析成分を溶離させる。ホルダ部２１には、溶離液パック１２の他に、希釈洗浄液が収容された洗浄液ボトル１２Ｄがセットされる。
【００４０】
液体クロマトグラフィ装置１の装置本体２は、筐体３を有している。筐体３の前面には、操作パネル３０、及び表示パネル３１が設けられている。操作パネル３０は、複数の操作ボタン３２を有する。
【００４１】
なお、本実施形態では、１回の測定で１本の採血管１１内の血液試料の分析を行う構成としているが、これに限らず、複数の採血管１１を保持できるラックを用い、複数の採血管１１内の血液試料の分析を、順に行ってもよい。
【００４２】
筐体３には、図２に示す溶離液切替ユニット４、検体調製ユニット５、分離吸着ユニット６、及び測光ユニット７が内蔵されている。検体調製ユニット５は採血管１１（図１参照）中から血液試料１３を取り出して調製する。分離吸着ユニット６は、検体調製ユニット５で調製された検体（血液試料）の分析成分を吸着、溶離する。測光ユニット７は、分離吸着ユニット６で溶離された分析成分を光学的に分析する分析装置である。溶離液切替ユニット４は、分離吸着ユニット６に溶離液Ｂ及び溶離液Ｃを供給する。
【００４３】
なお、検体調製ユニット５は、後述するように、液希釈装置７０を兼ねている。
【００４４】
検体調製ユニット５は、採血管１１中の血液試料１３を吸引する試料吸引ノズル５１と、検体を調製する希釈槽５２と、を備えている。採血管１１中の血液試料１３は、試料吸引ノズル５１で吸引され、希釈槽５２に移される。希釈槽５２で希釈された血液試料１３は、適宜のタイミングで、試料吸引ノズル５１で吸引される。そして、血液試料１３は、後述するように、チューブポンプ５４の駆動により、検体調製ユニット５から、分離吸着ユニット６へ送液される。
【００４５】
分離吸着ユニット６は、カラム６０、メインポンプ６３、送液流路及び検体バルブ６１を備えている。カラム６０は、吸着部の一例であり、検体調製ユニット５で調製された検体中のグリコヘモグロビンなどの分析成分を吸着する。メインポンプ６３（図２においては符号６から離れた位置に記載）は、主送液装置の一例であり、カラム６０に向かって溶離液Ａを送液する。送液流路は、後述するように、メインポンプ６３とカラム６０とを連通する。検体バルブ６１は、第三切替装置の一例であり、検体（血液試料）を上記した送液流路に注入する。
本実施形態の送液流路は、管路６４、６５、６６、６７で構成されている。
【００４６】
管路６４（図２においては符号６から離れた位置に記載）は、メインポンプ６３と、第一切替バルブ４１と、を連通する。第一切替バルブ４１は第一切替装置の一例である。
管路６５（図２においては符号６から離れた位置に記載）は、第一切替バルブ４１と、第二切替バルブ４３と、を連通する。第二切替バルブ４３は第二切替装置の一例である。
管路６６は、第二切替バルブ４３と検体バルブ６１とを連通する。
管路６７は、検体バルブ６１とカラム６０とを連通する
なお、カラム６０の出口側には管路６８の一端が接続されている。管路６８の他端は廃液タンク１８に接続されている。管路６８上には、測光ユニット７が設けられている。
【００４７】
メインポンプ６３は、シリンダ６３Ｂ（筒部）、プランジャ６３Ａ（ロッド）、ボール螺子６３Ｄ及びステッピングモータ６３Ｃ、を有するプランジャポンプである。
【００４８】
ボール螺子６３Ｄは、螺子軸６３Ｅと、ナット６３Ｆと、を有する。ナット６３Ｆは、螺子軸６３Ｅに螺合し、且つプランジャ６３Ａの末端に固定されている。そして、ステッピングモータ６３Ｃにより、螺子軸６３Ｅが回転されると、ボール螺子６３Ｄにより、プランジャ６３Ａが往復動される。これにより、プランジャ６３Ａの先端が、シリンダ６３Ｂ内で往復動する。
【００４９】
従って、ステッピングモータ６３Ｃによってたとえば螺子軸６３Ｅが時計回り方向に回転すると、ナット６３Ｆがステッピングモータ６３Ｃから遠ざかる方向に移動する。このナット６３Ｆの移動により、プランジャ６３Ａがシリンダ６３Ｂに向かって押し出される。反対にボール螺子６３Ｄが反時計回り方向に回転すると、ナット６３Ｆがステッピングモータ６３Ｃに近づく方向に移動する。ナット６３Ｆの移動により、プランジャ６３Ａがシリンダ６３Ｂから引き下げられる。
【００５０】
本実施形態では、メインポンプ６３は、１検体について、一連の分析動作を行うのに十分な量の溶離液Ａを、プランジャ６３Ａの１回の引き動作でシリンダ６３Ｂに引き込むと共に、１回の押し動作で送液できるだけの容量を有している。
【００５１】
なお、一連の処理には、たとえば、測定開始処理（カラム６０の平衡化）、検体の分画（カラム６０に吸着した分析成分の溶離液による溶離）、測定処理、カラム６０の洗浄、及び測定後処理（洗浄後のカラム６０の平衡化）が含まれる。一連の処理には、これら以外の処理を加えてもよいし、これらのうち、不要な処理を行わないようにしてもよい。
【００５２】
ここで、メインポンプ６３の脈動が測定精度に及ぼす影響を回避し、ダンパを使わずして必要な精度を確保する観点からは、メインポンプ６３が送液する溶離液Ａの量は、１検体について、少なくとも、検体の分画及び測定処理を行うのに十分な量であればよい。さらには、検体の分画及び測定処理を行うのに十分な量に対し、測定開始処理、カラム６０の洗浄及び測定後処理の少なくとも１つの処理を行うのに必要な量を加算した量であってもよい。
【００５３】
なお、メインポンプ６３による溶離液Ａの１ストローク時の送液圧力は、好ましくは１ＭＰａであり、また、０．１５ＭＰａ〜７．５ＭＰａであってよく、また、０．２ＭＰａ〜５ＭＰａであってよく、さらに、０．５ＭＰａ〜３ＭＰａであってよい。
【００５４】
また、メインポンプ６３による溶離液Ａの１ストローク時の送液量は、複数検体の連続測定と単一検体の単一測定の場合とで異ならせることができる。すなわち、連続測定においては、メインポンプ６３は、単一測定の場合の１ストローク時の送液量の最後の何割かは送液せず、保持したまま、次の測定のための引き動作に移行するよう、メインポンプ６３を動作させることができる。ここで、メインポンプ６３による溶離液Ａの１回の測定あたりの送液量は、好ましくは０．５ｍｌ〜１０ｍｌであり、より好ましくは１ｍｌ〜８ｍｌであってよく、さらに好ましくは１ｍｌ〜６ｍｌであってよい。
【００５５】
本実施形態では、カラムの平衡化→検体分画→測定処理→カラム洗浄→測定後処理の一連の処理を経てデータ出力を完了するまでに要する測定時間として、例えば、３８秒〜１０分を実現でき、また、３８秒〜７分を実現でき、さらに３８秒〜６分を実現できる。
【００５６】
検体バルブ６１は、弁体６１Ａを有する。弁体６１Ａは、短流路６１ｈと、検体保持流路６２を有する。検体保持流路６２の流路長は、短流路６１ｈの流路長より長い。
【００５７】
弁体６１Ａは回転により、図２、３に示す状態Ａと、図４、５、６に示す状態Ｂの２状態を採り得る。状態Ａでは、短流路６１ｈが管路６６と管路６７とを連通している。また、状態Ａでは、検体保持流路６２が、管路５６と管路５５とを連通している。
【００５８】
これに対し、状態Ｂでは、検体保持流路６２が、管路６６と管路６７とを連通している。なお、状態Ｂでは、短流路６１ｈは、管路５５、５６、６６、６７のいずれも連通していない。
【００５９】
管路５６は三方弁１６に連通し、三方弁１６はチューブポンプ５４の一端５４Ａに連通している。管路５５は試料吸引ノズル５１に連通している。また、チューブポンプ５４の他端５４Ｂは管路５９を介して廃液タンク１８に連通している。
【００６０】
検体バルブ６１は、検体をカラム６０に注入しないときは、図２に示すように、状態Ａであり、短流路６１ｈが管路６６と管路６７とを連通している。また、状態Ａでは、検体保持流路６２は、送液流路から切り離されている。従って、送液流路は、検体保持流路６２とは連通しない第一流路を構成する。
【００６１】
試料吸引ノズル５１の先端を希釈槽５２の検体内に位置させ、チューブポンプ５４を駆動することによって、希釈槽５２から検体を吸引し、検体保持流路６２に保持できる。特に、チューブポンプ５４を用いているので、検体を高速で吸引することが可能である。
【００６２】
溶離液切替ユニット４は、第一切替バルブ４１と第二切替バルブ４３とを備える。
【００６３】
第一切替バルブ４１は、弁体４１Ａを有する。弁体４１Ａは、短流路４１ｈと、第一保持流路４２を有する。第一保持流路４２の流路長は、短流路４１ｈの流路長より長い。
【００６４】
弁体４１Ａは回転により、図２、３、４、５に示す状態Ａと、図６に示す状態Ｂの２状態を採り得る。状態Ａでは、短流路４１ｈが、三方弁１７を経由して、管路１４Ａ又は管路６４と、管路６５とを連通している。また、状態Ａでは、第一保持流路４２が、管路１４Ｂと管路１５Ｂとを連通している。
【００６５】
これに対し、状態Ｂでは、第一保持流路４２が、三方弁１７を経由して、管路１４Ａ又は管路６４と、管路６５とを連通している。なお、状態Ｂでは、短流路４１ｈは、管路１４Ａ、６５、１４Ｂ、１５Ｂのいずれも連通していない。
【００６６】
管路１４Ａは三方弁１７を介して、溶離液パック１２Ａ及びメインポンプ６３に連通しており、管路１４Ｂは溶離液パック１２Ｂに連通している。三方弁１７を切り替えることで、溶離液パック１２Ａ内の溶離液Ａをメインポンプ６３のシリンダ６３Ｂ内に吸引する動作（図３の矢印Ｆ１参照）と、シリンダ６３Ｂ内の溶離液Ａを第一切替バルブ４１に送液する動作（図２の矢印Ｆ４参照）とを切り替えることができる。
【００６７】
管路１５Ｂは、分岐部１５Ｄ及び三方弁１６を介してチューブポンプ５４の一端５４Ａに連通している。
【００６８】
第一切替バルブ４１は、溶離液Ｂをカラム６０に注入しないときは、図２に示すように状態Ａであり、短流路４１ｈが管路１４Ａと管路６５とを連通している。また、状態Ａでは、第一保持流路４２は、送液流路から切り離されている。従って、送液流路は、第一保持流路４２とは連通しない第一流路を構成する。
【００６９】
図２の状態でチューブポンプ５４を駆動することによって、溶離液パック１２Ｂから溶離液Ｂを吸引し、第一保持流路４２に保持できる。特に、チューブポンプ５４を用いているので、溶離液Ｂを高速で吸引できる。
【００７０】
第二切替バルブ４３は弁体４３Ａを有する。弁体４３Ａは、短流路４３ｈと、第二保持流路４４を有する。第二保持流路４４の流路長は、短流路４３ｈの流路長より長い。
【００７１】
弁体４３Ａは回転により、図２、３、４に示す状態Ａと、図５、６に示す状態Ｂの２状態を採り得る。状態Ａでは、短流路４３ｈが、管路６５と管路６６とを連通している。また、状態Ａでは、第二保持流路４４が、管路１４Ｃと管路１５Ｃとを連通している。
【００７２】
これに対し、状態Ｂでは、第二保持流路４４が、管路６５と管路６６とを連通している。なお、状態Ｂでは、短流路４３ｈは、管路６５、６６、１４Ｃ、１５Ｃのいずれも連通していない。
【００７３】
管路１４Ｃは、溶離液パック１２Ｃに連通している。管路１５Ｃは、三方弁１６を介してチューブポンプ５４の一端５４Ａに連通している。
【００７４】
第二切替バルブ４３は、溶離液Ｃをカラム６０に注入しないときは、図２に示すように状態Ａであり、短流路４３ｈが管路６５と管路６６とを連通している。また、状態Ａでは、第二保持流路４４は、送液流路から切り離されている。したがって、送液流路は、第二保持流路４４とは連通しない第一流路を構成する。
【００７５】
図２の状態でチューブポンプ５４を駆動することによって、溶離液パック１２Ｃから溶離液Ｃを吸引し、第二保持流路４４に保持できる。特に、チューブポンプ５４を用いているので、溶離液Ｃを高速で吸引できる。
【００７６】
溶離液パック１２Ａから溶離液Ａをメインポンプ６３のシリンダ６３Ｂの内部に吸引するときは、図３に示すように、三方弁１７により、管路１４Ａの溶離液パック１２Ａ側と管路６４とを連通する。プランジャ６３Ａを引くことで、溶離液Ａが溶離液パック１２Ａからシリンダ６３Ｂの内部に吸引される。なお、三方弁１７により、管路１４Ａの第一切替バルブ４１側と管路６４とを連通し、プランジャ６３Ａを押すことで、溶離液Ａをカラム６０に向かって吐出できる。
【００７７】
検体をカラム６０に注入するときは、図４に示すように、検体バルブ６１の弁体６１Ａを状態Ａとする。管路６６及び管路６７が検体保持流路６２と連通し、送液流路は第四流路を構成する。
【００７８】
溶離液Ｃをカラム６０に注入するときは、図５に示すように、第二切替バルブ４３の弁体４３Ａを状態Ｂとする。管路６５及び管路６６が第二保持流路４４と連通する。これにより、送液流路は第三流路を構成する。このため、メインポンプ６３を吐出することで、第二保持流路４４内の溶離液Ｃをカラム６０に注入可能になる。
【００７９】
溶離液Ｂをカラム６０に注入するときは、図６に示すように、第一切替バルブ４１の弁体４１Ａを状態Ｂとする。管路６４及び管路６５が第一保持流路４２と連通する。これにより、送液流路は第二流路を構成する。このため、メインポンプ６３を吐出することで、第一保持流路４２内の溶離液Ｂをカラム６０に注入可能になる。
【００８０】
液体クロマトグラフィ装置１には、希釈洗浄液Ｄが収容された洗浄液ボトル１２Ｄがセットされる。検体調製ユニット５は、液希釈装置７０を兼ねている。液希釈装置７０は、洗浄槽５３、希釈槽５２、供給装置７２及び排出装置８２を有している。
【００８１】
供給装置７２は、供給チューブポンプ７４、供給切替弁７６及び供給配管７８を有している。
【００８２】
検体調製ユニット５においては、供給切替弁７６により洗浄希釈液Ｄの供給流路を洗浄槽５３側又は希釈槽５２側に切り替えることができる。このように洗浄希釈液Ｄの供給流路を切り替えた状態で、供給チューブポンプ７４を駆動（正転）することで、洗浄希釈液Ｄを、洗浄槽５３と希釈槽５２のいずれか一方へ選択的に供給できる。
【００８３】
また、排出装置８２は、排出チューブポンプ８４、排出切替弁８６及び排出配管８８を有している。
【００８４】
排出切替弁８６により、洗浄槽５３内又は希釈槽５２内の液の排出流路を洗浄槽５３側又は希釈槽５２側に切り替えることができる。このように、液の排出流路を切り替えた状態で、排出チューブポンプ８４を駆動（正転）することで、液を洗浄槽５３と希釈槽５２のいずれか一方から選択的に排出し、廃液タンク１８に送ることができる。
【００８５】
図７に示すように、本実施形態の液体クロマトグラフィ装置１では、メインポンプ６３、チューブポンプ５４、検体バルブ６１、第一切替バルブ４１、第二切替バルブ４３、及び検体調製ユニット５はコンピュータ１００によって制御される。さらに、測光ユニット７における測定結果はコンピュータ１００に入力される。
【００８６】
＜作用＞
以下、本実施形態の液体クロマトグラフィ装置１の作用について説明する。
【００８７】
図８に示すように、測定開始時には、溶離液吸引ステップＳ２が実行される。まず、三方弁１７により、管路１４Ａの溶離液パック１２Ａ側とメインポンプ６３とが連通される。そして、メインポンプ６３においては、プランジャ６３Ａがシリンダ６３Ｂに対して引き下げられる。これにより、測定開始処理、検体の分画、測定処理、カラム６０の洗浄、及び測定後処理からなる一連の分析動作を行うのに十分な量の溶離液Ａが、溶離液パック１２Ａからシリンダ６３Ｂの内部に吸引される。
【００８８】
次に、第一切替バルブ４１、第二切替バルブ４３、及び検体バルブ６１の何れも、状態Ａとされる。これにより、管路６４から、管路１４Ａの第一切替バルブ４１側、管路６５、管路６６を経て管路６７に至る送液流路が構成される。この状態では、第一保持流路４２、第二保持流路４４、及び検体保持流路６２の何れも送液流路から切り離されている。
【００８９】
同時に、検体調製ユニット５においては、検体調製ステップＳ４が実行される。すなわち、希釈槽５２で血液試料１３が洗浄希釈液Ｄで希釈され、検体として調製される。
【００９０】
検体が調製されたら、検体保持ステップＳ６が実行される。試料吸引ノズル５１の先端が希釈槽５２の検体内に位置される。さらに、三方弁１６を管路５６側に切り替えると共に、チューブポンプ５４を駆動する。管路５５、検体保持流路６２、及び管路５６の内部の液体がチューブポンプ５４によって吸引される。これにより、検体保持流路６２に希釈槽５２中の検体が充填される。このとき、チューブポンプ５４を用いているので、液体を高速で吸引することが可能である。
【００９１】
次に、溶離液保持ステップＳ８が実行される。三方弁１６を管路１５Ｂ、１５Ｃ側に切り替えると共に、チューブポンプ５４を駆動する。図２に矢印Ｆ２で示すように、管路１４Ｂ、第一保持流路４２、及び管路１５Ｂ内部の液体がチューブポンプ５４によって吸引され、第一保持流路４２に溶離液Ｂが充填される。
【００９２】
また、図２に矢印Ｆ３で示すように、管路１４Ｃ、第二保持流路４４、及び管路１５Ｃ内部の溶液がチューブポンプ５４によって吸引され、第二保持流路４４に溶離液Ｃが充填される。
【００９３】
検体保持ステップＳ６及び溶離液保持ステップＳ８では、チューブポンプ５４を用いているので、液体を高速で吸引することが可能である。
【００９４】
検体保持流路６２、第一保持流路４２、及び第二保持流路４４が夫々検体、溶離液Ｂ、溶離液Ｃで充填されたら、図２に矢印Ｆ４で示すように、メインポンプ６３のプランジャ６３Ａを一定の速度でシリンダ６３Ｂに押し出し、溶離液Ａの送液を開始する。メインポンプ６３から送出された溶離液Ａは、管路６４、管路６５、管路６６、管路６７を経由してカラム６０に送液され、カラム６０が平衡化される。
【００９５】
カラム６０が平衡化されたら、溶離ステップＳ１０が以下の手順で実行される。
【００９６】
先ず、図４に示すように、検体バルブ６１を状態Ｂとし、送液流路を、第一流路から第四流路に切り換える。検体保持流路６２の内部に保持されていた検体は、管路６６を通過してきた溶離液Ａによって管路６７に向かって押し出され、カラム６０に送液される。本実施形態では、管路６６と検体保持流路６２と管路６７の内径が複数種類の液が互いに混合することなく通過する程度に細い。このため、管路６６、検体保持流路６２及び管路６７における液体の混合が抑制される。そして、カラム６０では、検体中の分析成分が吸着される。
【００９７】
検体保持流路６２に保持されていた検体がカラム６０に向かって押し出された後、溶離液Ａは、検体保持流路６２を通ってカラム６０に送液される。これにより、カラム６０において吸着された分析成分が溶離液Ａで溶離される。そして、分析ステップＳ１２が実行され、溶離液Ａで溶離された分析成分が測光ユニット７において検出される。
【００９８】
溶離液Ａによる分析成分の溶離が終了したら、第二切替ステップＳ１４が実行される。即ち、図５に示すように、第二切替バルブ４３を状態Ｂとし、送液流路を、第四流路から第三流路に切り換える。第二保持流路４４に保持されていた溶離液Ｃは、管路６６、検体保持流路６２、及び管路６７を経由してカラム６０に送液される。本実施形態では、管路６６もまた、複数種類の液が互いに混合することなく通過する程度に内径が細い。このため、管路６６、検体保持流路６２、及び管路６７における液体の混合が抑制される。
【００９９】
溶離液Ｃがカラム６０に送液されると、カラム６０において吸着していた分析成分のうち、溶離液Ａで溶離されなかったものが、溶離液Ｃで溶離され、測光ユニット７で検出される。
【０１００】
溶離液Ｃによる分析成分の溶離が終了したら、第一切替ステップＳ１６が実行される。図６に示すように、第一切替バルブ４１を状態Ｂとし、送液流路を、第三流路から第二流路に切り換える。第一保持流路４２に保持されていた溶離液Ｂは、管路６５、管路６６、検体保持流路６２、及び管路６７を経由してカラム６０に送液される。管路６５もまた、前述のように複数種類の液体が互いに混合することなく通過する程度に内径が細い。このため、管路６５、管路６６、検体保持流路６２、及び管路６７における液体の混合が抑制される。
【０１０１】
溶離液Ｂがカラム６０に送液されると、カラム６０において吸着していた分析成分のうち、溶離液Ａ及び溶離液Ｃで溶離されなかった成分が、溶離液Ｂで溶離され、測光ユニット７で検出される。なお、溶離液Ｃ及び溶離液Ｂで溶離された分析成分が測定の対象とされていない場合、溶離液Ｃ及び溶離液Ｂによる溶離により、カラム６０が洗浄される。
【０１０２】
溶離液Ｂによる分析成分の溶離が終了したら、検体バルブ６１、第一切替バルブ４１、及び第二切替バルブ４３を図６に示す状態Ｂに保持したまま、溶離液Ａの送液を継続する。これにより、測定後処理（洗浄後のカラム６０の平衡化）が行われる。
【０１０３】
＜液体クロマトグラフィ分析プログラム＞
コンピュータ１００には、図８に示すように、溶離液吸引ステップＳ２、検体調製ステップＳ４、検体保持ステップＳ６、溶離液保持ステップＳ８、溶離ステップＳ１０、分析ステップＳ１２、第二切替ステップＳ１４、及び第一切替ステップＳ１６、を含む処理をコンピュータ１００に実行させるための液体クロマトグラフィ分析プログラムがインストールされている。
【０１０４】
なお、溶離液保持ステップＳ８は、第一保持流路４２を溶離液Ｂで充填する第一保持ステップ、及び第二保持流路４４を溶離液Ｃで充填する第二保持ステップを包含する。また、前記液体クロマトグラフィ分析プログラムは、第一保持ステップと第二保持ステップとの何れを先に実施するものであってもよい。
【０１０５】
なお、コンピュータ１００にインストールされる液体クロマトグラフィ分析プログラムは、前述の液体クロマトグラフィ分析プログラムよりも簡略化されたプログラムであってもよい。
【０１０６】
また、前記液体クロマトグラフィ分析プログラムは、検体調製ステップＳ４及び検体保持ステップＳ６を省略したプログラムであってもよい。
【０１０７】
更に、前記液体クロマトグラフィ分析プログラムは、溶離ステップＳ１０及び分析ステップＳ１２を含む処理をコンピュータ１００に実行させるためのプログラムであってもよい。
【０１０８】
また、コンピュータ１００は、制御部を有し、この制御部が、装置全体を制御するＣＰＵ、プログラム等を記憶したＲＯＭ、測定結果を一次的に格納するＲＡＭ、及び入出力ポートを含んだ構造とすることが可能である。この構造のコンピュータ１００では、例えば、操作ボタンやキーボードから入力された命令に基づいて、液体クロマトグラフィ装置１を制御することができる。
【０１０９】
以上説明したように、本実施形態の液体クロマトグラフィ装置１では、簡易な機構で、高圧流路と低圧流路に分けて複数種の液の並列処理を高速且つ容易に行うことが可能である。
【０１１０】
（その他の実施形態）
以上に於いては、本発明を特定の実施形態について詳細に説明したが、本発明は上記実施形態に限定されるものではなく、本発明の範囲内にて他の種々の実施形態が可能である。例えば、第一切替バルブ４１、第二切替バルブ４３、検体バルブ６１に、大気開放用のポートを形成した８方弁としてもよい。大気開放用のポートを用いて、液体流路を大気に開放すると共に、メインポンプ６３とチューブポンプ５４とを適宜に駆動することで、液体流路から気泡を大気に逃がす処理（気泡低減処理）を行うことができる。そして、この気泡低減処理とチューブポンプ５４の駆動による他の処理を平行稼働することも可能である。この結果、簡易な機構で、高圧流路と低圧流路に分けて複数液の並列処理を高速且つ容易に行うことが可能である。
【０１１１】
さらには、メインポンプ６３は気泡低減装置として動作できる。この構成における気泡低減処理では、まず、第一切替バルブ４１の大気開放ポートからメインポンプ６３内に空気を導入して空気層を形成する。そして、この空気層を液体流路で移動させることで、液体流路内の気泡を空気層に取り込み、空気層と共に気泡を排出する。この場合、メインポンプ６３の駆動による気泡の導入およびそれに続く排気処理と、チューブポンプ５４の駆動による他の処理を平行稼働できる。この結果、簡易な機構で、高圧流路と低圧流路に分けて複数液の並列処理を高速且つ容易に行うことが可能である。
【０１１２】
そして、前記実施形態によれば、このような気泡低減処理を実行しつつ、例えば、他方では、溶離液パック１２Ｂから第一保持流路４２への溶離液の充填操作を並行して行うことができる。
【０１１３】
なお、メインポンプ６３へ外部から気体を導入する装置は、そのような導入が可能なあらゆる装置でよい。このような気体導入装置としては、例えば、大気開放用のポートや大気開放弁のほかに、各種切替バルブを用いて、メインポンプ６３に空気を直接導入可能としてもよい。
【０１１４】
また、上記各実施形態における溶離液Ｂ及び溶離液Ｃの組成によっては、第一切替バルブ４１を切り換えて溶離液Ｂをカラム６０に送液した後に、第二切替バルブ４３を切り換えて溶離液Ｃをカラム６０に送液する構成としてもよい。また、クロマトグラフィ測定の原理上、１検体について実施される一連の分析動作について、当該一連の分析動作に含まれる個々の処理は、その前後の処理と明確に区別できない場合がある。即ち、例えば、測定処理の最後に使用する液とカラム６０の洗浄に使用する液が重複する場合は、どの時点までが測定処理に当たるのか、区別できない。他の処理間においても同様の事情がある。即ち、このようなことから、本実施態様は、上記記載の分析動作態様に限定されるものではない。
【０１１５】
また、上記実施形態では、検体調製ユニット５、測光ユニット７、分離吸着ユニット６が１つの筐体３の内部に収容された構成とされているが、これらのユニットの１つ又は複数が他のユニットと別体で構成され、これらを連結したシステムであってもよい。
【０１１６】
また、上記実施形態では、副送液装置としてチューブポンプ５４を使用したが、副送液装置はチューブポンプ５４に限定されない。
【符号の説明】
【０１１７】
１     液体クロマトグラフィ装置
４     溶離液切替ユニット
５     検体調製ユニット（液希釈装置）
６     分離吸着ユニット
７     測光ユニット
１３   血液試料
４１   第一切替バルブ（第一切替装置）
４１ｈ 短流路
４２   第一保持流路
４３   第二切替バルブ（第二切替装置）
４３ｈ 短流路
４４   第二保持流路
５１   試料吸引ノズル
５２   希釈槽
５３   洗浄槽
５４   チューブポンプ（副送液装置）
６０   カラム（吸着部）
６１   検体バルブ（第三切替装置）
６１ｈ 短流路
６２   検体保持流路
６３   メインポンプ（主送液装置）
７０   液希釈装置
８０   気泡導入装置
１００ コンピュータ
【図１】
2015052592.tif 000003
【図２】
2015052592.tif 000004
【図３】
2015052592.tif 000005
【図４】
2015052592.tif 000006
【図５】
2015052592.tif 000007
【図６】
2015052592.tif 000008
【図７】
2015052592.tif 000009
【図８】
2015052592.tif 000010