(57)【要約】【課題】皮脂腺細胞における皮脂合成を抑制し、皮膚や頭皮における皮脂過剰状態を根本的に改善し、持続性のある効果を有する皮脂合成抑制剤を提供すること。【解決手段】ハマナスの抽出物を有効成分として含有する、皮脂合成抑制剤、および該皮脂合成抑制剤を含有する医薬品、医薬部外品、化粧品及び飲食品。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ハマナスの抽出物を有効成分として含有する、皮脂合成抑制剤。
【請求項２】
ハマナスの抽出物を有効成分として含有する、皮脂腺未分化細胞から皮脂腺細胞への分化抑制剤。
【請求項３】
請求項１または２に記載の剤を含む、皮膚外用組成物。
【請求項４】
皮膚外用組成物が医薬品または医薬部外品である、請求項３に記載の皮膚外用組成物。
【請求項５】
皮膚外用組成物が化粧品である、請求項３に記載の皮膚外用組成物。
【請求項６】
請求項１または２に記載の剤を含む、飲食品。
【請求項７】
飲食品が、健康食品、機能性食品、特定保健用食品、または栄養補助食品である、請求項６に記載の飲食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ハマナスの抽出物を有効成分として含有する皮脂合成抑制剤、ならびに該皮脂合成抑制剤を含む医薬品、医薬部外品、化粧品及び飲食品などの各種組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮脂は、皮脂腺で皮脂腺細胞により合成され、皮膚表面に分泌される。分泌された皮脂は、皮膚を覆うことで体内からの水分の蒸発を防ぐとともに、外部からの物理的・化学的刺激、あるいは病原性の強い細菌・カビなどの侵入を防ぐなど、重要な機能を果している。このため、皮膚において皮脂の分泌が欠乏すると乾燥肌やざ瘡等の皮膚トラブル及び皮脂欠乏性皮膚炎・湿疹(乾皮症)などの様々な皮膚疾患の原因となる（非特許文献１、２）。また、皮脂は、毛髪に対して必要かつ適度の油分を供給する働きもあり、毛髪のしなやかさや美しさを保つ上で有効な成分である。
【０００３】
皮脂は、上記のとおり、皮膚や毛髪にとって重要な働きをするが、皮膚においてはテカリ、べたつきや化粧くずれといった美容上好ましくない状態に、頭皮においてはフケの増加、脂漏性皮膚炎、それに伴う脱毛等の原因となる。また、過剰の皮脂は皮膚及び頭皮において、微生物や病原菌の繁殖を助けて様々な皮膚トラブルを引き起こすことが知られている。
【０００４】
このような皮脂の分泌過剰に起因する皮膚炎、皮膚トラブル、美容、化粧上の問題を解決あるいは予防する目的で、従来より石鹸等で洗浄することにより、皮脂を除去することが行われている。しかしながら、石鹸等を用いた皮膚や頭皮の洗浄による過剰皮脂の除去効果は一時的なものであり、皮脂の過剰分泌を抑えて、根本的に皮脂の分泌過剰に起因する皮膚炎、皮膚トラブル等を改善することができないという問題がある。
【０００５】
これまで、上記のような皮脂の分泌過剰に起因する皮膚炎等を改善するために、皮脂分泌抑制剤の研究が行われてきた。皮脂分泌抑制作用を有する成分としては、例えば、冬瓜抽出物（特許文献１）、バラ科植物抽出物（特許文献２、３）、カリン抽出物（特許文献４）などが報告されている。しかしながら、これらの植物抽出物は、安全性の高い天然成分であるものの、その作用が緩和であり、効果については十分に満足できるものでないため、より持続性のある皮脂合成・分泌抑制剤の開発が望まれている。
【０００６】
これまでの研究により、皮脂腺細胞は、その前駆細胞(皮脂腺未分化細胞)が分化することで生み出され、さらに皮脂腺細胞で合成された皮脂は皮脂腺細胞が破裂することで分泌されることが知られている（非特許文献３）。そのため皮脂の分泌を根本的に調節するためには、分化成熟した皮脂腺細胞の皮脂合成・分泌を制御するだけでなく、皮脂腺未分化細胞からはじまる分化過程を適切に制御する必要がある。
【０００７】
ハマナス（学名：Rosa rugosa)はバラ科バラ属に属し、日本、朝鮮半島、中国北部などに自生する落葉低木である。ハマナスは、多くの品種が存在し、観賞用のほか、染料や香料の原料として用いられており、果実はローズヒップとしてジャムなどの食用にもなる。ハマナスは、ビタミンＣが豊富であることから、これまで美肌作用や抗酸化作用のほか、テストステロン５α−リダクターゼ阻害作用（特許文献５）、脱毛防止・発毛効果等の養毛作用（特許文献６）、α−アミラーゼ活性阻害作用およびα−グルコシダーゼ活性阻害作用（特許文献７）などがあることが知られている。しかしながら、皮脂腺未分化細胞の皮脂腺細胞への分化抑制効果や皮脂腺細胞による皮脂合成抑制効果についてはこれまで何ら知られていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２００８−３７７６４
【特許文献２】特開２０１２−２２９１６７
【特許文献３】特開２０１２−２２９１６９
【特許文献４】特開２０１３−３２３３３１
【特許文献５】特開平５−１７３６５
【特許文献６】特開平７−２７７９３０
【特許文献７】特開２００５−３０６８０１
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】山本 綾子、香粧会誌、1991、1(4)、247-249
【非特許文献２】高安 進、フレグランスジャーナル、1998、92、10-13
【非特許文献３】Hinde E., Exp Dermatology, 2013, 22, 631-637
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明の目的は、皮脂腺細胞における皮脂合成を抑制し、皮膚や頭皮における皮脂過剰状態を根本的に改善し、持続性のある効果を有する皮脂合成抑制剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、ハマナスの抽出物が、皮脂腺未分化細胞から皮脂腺細胞への分化を抑制する作用とともに、皮脂腺細胞による皮脂合成を抑制する作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１２】
すなわち、本発明は以下の発明を包含する。
（１）ハマナスの抽出物を有効成分として含有する、皮脂合成抑制剤。
（２）ハマナスの抽出物を有効成分として含有する、皮脂腺未分化細胞から皮脂腺細胞への分化抑制剤。
（３）（１）または（２）に記載の剤を含む、皮膚外用組成物。
（４）皮膚外用組成物が医薬品または医薬部外品である、（３）に記載の皮膚外用組成物。
（５）皮膚外用組成物が化粧品である、（３）に記載の皮膚外用組成物。
（６）（１）または（２）に記載の剤を含む、飲食品。
（７）飲食品が、健康食品、機能性食品、特定保健用食品、または栄養補助食品である、（６）に記載の飲食品。
【発明の効果】
【００１３】
本発明の皮脂合成抑制剤は、皮脂腺細胞による皮脂の合成を抑制することができるので、皮脂過剰による皮膚や頭皮のべたつき、脂漏性湿疹などの皮膚疾患を予防、改善または治療することができる。また、本発明の皮脂合成抑制剤の有効成分であるハマナスの抽出物は、皮脂腺未分化細胞から皮脂腺細胞への分化を抑制する作用も有するため、皮脂合成および分泌器官である皮脂腺細胞が減少し、皮脂過剰状態を根本的に改善することができ、持続性のある効果が得られる。また本発明の皮脂合成抑制剤は、作用が緩和な植物の抽出物を有効成分とするから、副作用がなく安全性が高い。よって、化粧料、医薬品、医薬部外品、飲食品に安心して使用できる。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下に、本発明について詳細に述べる。
本発明の皮脂合成抑制剤は、ハマナスの抽出物を有効成分として含有する。本発明に用いるハマナスとしては、ハマナス（学名：Rosa rugosa Thunb.)、ヤエハマナス（学名：Rosa rugosa Thunb. var. plena)、マイカイ（学名：Rosa rugosa Thunb. var. plena Regel)等が挙げられる。
【００１５】
本発明において、ハマナスの抽出物は、植物体全体（全草）、あるいは、葉、茎、花、芽、実、種子、根等の植物体の一部またはそれらの混合物の抽出物をいうが、葉の抽出物が好ましい。また、抽出には、これらの植物体をそのまま使用してもよく、乾燥、粉砕、細切等の処理を行ってもよい。
【００１６】
抽出方法は、特に限定されないが、水もしくは熱水、または水と有機溶媒の混合溶媒を用い、攪拌またはカラム抽出する方法により行うことができる。有機溶媒としては、アルコール類、エーテル類、エステル類などを用いることができるが、エタノール、メタノール、アセトン等の水溶性有機溶媒が好ましく、これらの一種又は二種以上を用いてもよい。
特に好ましい抽出溶媒としては、水、または水−エタノール系の混合極性溶媒が挙げられる。溶媒の使用量については、特に限定はなく、例えば上記ハマナスの葉（乾燥重量）に対し、１０倍以上、好ましくは２０倍以上であればよいが、抽出後に濃縮を行なったり、単離したりする場合の操作の便宜上１００倍以下であることが好ましい。また、抽出温度や時間は、用いる溶媒の種類によるが、例えば、１０〜１００℃、好ましくは３０〜９０℃で、３０分〜２４時間、好ましくは１〜１０時間を例示することができる。また、抽出物は、抽出した溶液のまま用いてもよいが、必要に応じて、その効果に影響のない範囲で、濃縮（有機溶媒、減圧濃縮、膜濃縮などによる濃縮）、希釈、濾過、活性炭等による脱色、脱臭、エタノール沈殿等の処理を行ってから用いてもよい。さらには、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥等の処理を行い、乾燥物として用いてもよい。
【００１７】
本発明において「皮脂合成抑制」とは、皮脂腺細胞における脂肪酸グリセリンエステルを主成分とする脂質の合成抑制をいうが、皮脂腺未分化細胞から皮脂腺細胞への分化誘導抑制、および、皮脂腺細胞で合成された上記脂質の皮膚表面への分泌抑制をも包含する。従って、本発明の皮脂合成抑制剤は、皮脂腺未分化細胞から皮脂腺細胞への分化抑制剤としても用いることができる。
【００１８】
また、本発明の皮脂合成抑制剤は、皮脂腺未分化細胞の未分化状態維持のための細胞培養用添加剤、研究用試薬としても使用することができる。
【００１９】
本発明の皮脂合成抑制剤はまた、ハマナスの抽出物に加えて、ビタミンＣ、ビタミンＣ誘導体、ビタミンＥまたはビタミンＥ誘導体を含有することが好ましい。これらのビタミンを併用することで、より高い皮脂合成抑制効果が得られる。ビタミンＣ誘導体としては、アスコルビン酸のリン酸エステル、アスコルビン酸の脂肪酸エステル、アスコルビン酸グルコシド等のアスコルビン酸の配糖体及びそれらの塩等を挙げることができる。ビタミンＣまたはビタミンＣ誘導体の塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、トリエタノールアミン塩、トリエチルアミン塩等の有機アミン塩類、リジン塩、アルギニン塩等の塩基性アミノ酸塩が好ましい。本発明において好ましく用いることのできるビタミンＣ誘導体として、より具体的には、リン酸アスコルビン酸マグネシウム（APM)、パルミチン酸アスコルビルリン酸ナトリウム（APPS）、リン酸アスコルビン酸ナトリウム（APS)、リン酸アスコルビン酸アミノプロリル、アスコルビン酸グルコシド、パルミチン酸アスコルビル、ステアリン酸アスコルビル、アスコルビン酸硫酸エステルナトリウム、テトライソパルミチン酸アスコルビル（VC-IP）等が挙げられる。これらのビタミンＣ誘導体は、一種を用いてもよく、二種以上を組み合わせて用いてもよい。また、ビタミンＥ誘導体としては、α−トコフェリルリン酸ナトリウム（VEP)、酢酸トコフェロール、ニコチン酸トコフェロール、コハク酸トコフェロール、リノール酸トコフェロール、フェルラ酸トコフェロール、ビタミンＥグルコシド等が挙げられる。これらのビタミンＥ誘導体は、一種を用いてもよく、二種以上を組み合わせて用いてもよい。また、ビタミンＣ誘導体とビタミンＥ誘導体の両方を含有してもよい。
【００２０】
本発明の皮脂合成抑制剤を生体内に投与する場合は、そのまま投与することも可能であるが、本発明の効果を損なわない範囲で適当な添加物とともに皮膚外用組成物に配合して提供することが好ましい。本発明の皮膚外用組成物には、医薬品、医薬部外品、化粧品などが含まれる。
【００２１】
本発明の皮脂合成抑制剤は、皮脂腺細胞による皮脂の合成を抑制することができるので、当該剤を含む皮膚外用組成物は、皮脂分泌の亢進・過剰が原因と考えられている種々の皮膚の障害や損傷を予防、改善、および治療するのに有効である。ここで、皮脂分泌の亢進・過剰による皮膚の障害や損傷としては、限定はされないが、脂漏性湿疹、尋常性ざ瘡（にきび）、アトピー性皮膚炎、脂性肌、角栓、毛穴の開き、毛穴の黒ずみなどが挙げられ、脂性フケ、頭皮や髪のべたつき、脂漏性脱毛症などの頭皮や毛髪の障害や損傷も含まれる。
【００２２】
本発明の皮脂合成抑制剤を医薬品に配合する場合は、薬理学的及び製剤学的に許容しうる添加物と混合し、患部に適用するのに適した製剤形態の各種製剤に製剤化することができる。薬理学的及び製剤学的に許容しうる添加物としては、その剤形、用途に応じて賦形剤、増粘剤、等張化剤、ｐＨ調節剤、安定化剤、防腐剤、保存剤、分散剤、乳化剤、ゲル化剤、色素、香料等を用いることができる。本発明の医薬品に適した形態は外用製剤であり、例えば、軟膏剤、クリーム剤、ゲル剤、液剤、貼付剤などが挙げられる。軟膏剤は、均質な半固形状の外用製剤をいい、油脂性軟膏、乳剤性軟膏、水溶性軟膏を含む。ゲル剤は、水不溶性成分の抱水化合物を水性液に懸濁した外用製剤をいう。液剤は、液状の外用製剤をいい、ローション剤、懸濁剤、乳剤、リニメント剤等を含む。
【００２３】
本発明の皮脂合成抑制剤を医薬部外品や化粧品に配合する場合は、その剤形は、水溶液系、可溶化系、乳化系、粉末系、粉末分散系、油液系、ゲル系、軟膏系、エアゾール系、水−油二層系、または水−油−粉末三層系等のいずれでもよい。また、当該医薬部外品や化粧品は、皮脂合成抑制剤とともに、皮膚外用組成物において通常使用されている各種成分、添加剤、基剤等をその種類に応じて選択し、適宜配合し、当分野で公知の手法に従って製造することができる。その形態は、液状、乳液状、クリーム状、ゲル状、ペースト状、スプレー状等のいずれであってもよい。配合成分としては、例えば、油脂類（オリーブ油、ヤシ油、月見草油、ホホバ油、ヒマシ油、硬化ヒマシ油等）、ロウ類（ラノリン、ミツロウ、カルナウバロウ等）、炭化水素類（流動パラフィン、スクワレン、スクワラン、ワセリン等）、脂肪酸類（ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘニン酸等）、高級アルコール類（ミリスチルアルコール、セタノール、セトステアリルアルコール、ステアリルアルコール、ベヘニルアルコール等）、エステル類（ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、オクタン酸セチル、トリオクタン酸グリセリン、ミリスチン酸オクチルドデシル、ステアリン酸オクチル、ステアリン酸ステアリル等）、有機酸類（クエン酸、乳酸、α-ヒドロキシ酢酸、ピロリドンカルボン酸等）、糖類（マルチトール、ソルビトール、キシロビオース、N-アセチル-D-グルコサミン等）、蛋白質及び蛋白質の加水分解物、アミノ酸類及びその塩、ビタミン類、植物・動物抽出成分、種々の界面活性剤、保湿剤、紫外線吸収剤、抗酸化剤、安定化剤、防腐剤、殺菌剤、香料等が挙げられる。
【００２４】
医薬部外品や化粧品の種類としては、例えば、化粧水、乳液、ジェル、美容液、一般クリーム、日焼け止めクリーム、パック、マスク、洗顔料、化粧石鹸、ファンデーション、おしろい、浴用剤、ボディローション、ボディシャンプー、ヘアシャンプー、ヘアコンディショナー、頭皮用ローション、頭皮用クリーム、ヘアトニック、育毛剤等が挙げられる。
【００２５】
本発明の皮膚外用組成物における皮脂合成抑制剤の含有量は、皮脂腺未分化細胞から皮脂腺細胞への分化抑制作用とともに、皮脂腺細胞における皮脂合成抑制作用を発揮できる量である限り特に限定はされないが、例えばハマナスの抽出物の乾燥固形物重量として０．００００１〜１０重量％が好ましく、０．０００１〜０．０１重量％がより好ましい。上記の量はあくまで例示であって、組成物の種類や形態、一般的な使用量、効能・効果、及びコストなどを考慮して適宜設定・調整すればよい。
【００２６】
また、本発明の皮脂合成抑制剤は、飲食品にも配合できる。本発明において、飲食品とは、健康食品、機能性食品、栄養補助食品、または特定保健用食品を含む意味で用いられる。飲食品の形態は、食用に適した形態、例えば、固形状、液状、顆粒状、粒状、粉末状、カプセル状、クリーム状、ペースト状のいずれであってもよい。
【００２７】
飲食品の種類としては、パン類、麺類、菓子類、乳製品、水産・畜産加工食品、油脂及び油脂加工食品、調味料、各種飲料（清涼飲料、炭酸飲料、美容ドリンク、栄養飲料、果実飲料、乳飲料など）および該飲料の濃縮原液及び調整用粉末等が挙げられるが、これらに限定はされない。
【００２８】
本発明の飲食品は、その種類に応じて通常使用される添加物を適宜配合してもよい。添加物としては、食品衛生上許容されうる添加物であればいずれも使用できるが、例えば、ブドウ糖、ショ糖、果糖、異性化液糖、アスパルテーム、ステビア等の甘味料；クエン酸、リンゴ酸、酒石酸等の酸味料；デキストリン、澱粉等の賦形剤；結合剤、希釈剤、香料、着色料、緩衝剤、増粘剤、ゲル化剤、安定剤、保存剤、乳化剤、分散剤、懸濁化剤、防腐剤などが挙げられる。
【００２９】
本発明の飲食品におけるハマナスの抽出物の配合量は、皮脂腺未分化細胞から皮脂腺細胞への分化抑制作用と皮脂腺細胞における皮脂合成抑制作用を発揮できる量であればよいが、対象飲食品の一般的な摂取量、飲食品の形態、効能・効果、呈味性、嗜好性及びコストなどを考慮して適宜設定すればよい。
【実施例】
【００３０】
以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明する。但し、本発明はこれらに限定されるものではない。
［実施例１］
ハマナスの抽出物を以下のとおり製造した。
【００３１】
（製造例１）ハマナス葉の熱水抽出物の調製
ハマナス（葉の乾燥品）５０gに精製水を１Ｌ加え、９０〜１００℃で２時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃減圧縮し、凍結乾燥してハマナス葉の熱水抽出物５gを得た。
【００３２】
（製造例２）ハマナス葉の５０％エタノール抽出物の調製
ハマナス（葉の乾燥品）５０gに５０％エタノール水溶液を１Ｌ加え、室温で1週間抽出した。濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス葉の５０％エタノール抽出４．５gを得た。
【００３３】
（製造例３）ハマナス葉のエタノール抽出物の調製
ハマナス（葉の乾燥品）５０gにエタノールを１Ｌ加え、室温で1週間抽出した。濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス葉のエタノール抽出物４gを得た。
【００３４】
（製造例４）ハマナス全草の熱水抽出物の調製
ハマナス（全草の乾燥品）５０gに精製水を１Ｌ加え、９０〜１００℃で２時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してハマナス全草の熱水抽出物４．８gを得た。
【００３５】
（製造例５）ハマナス全草の５０％エタノール抽出物の調製
ハマナス（全草の乾燥品）５０gに５０％エタノール水溶液を１Ｌ加え、室温で1週間抽出した。濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス全草の５０％エタノール抽出４．３gを得た。
【００３６】
（製造例６）ハマナス全草のエタノール抽出物の調製
ハマナス（全草の乾燥品）５０gにエタノールを１Ｌ加え、室温で1週間抽出した。濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス全草のエタノール抽出物３．８gを得た。
【００３７】
（製造例７）ハマナス実の熱水抽出物の調製
ハマナス（実の乾燥品）５０gに精製水を１Ｌ加え、９０〜１００℃で２時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してハマナス実の熱水抽出物４．５gを得た。
【００３８】
（製造例８）ハマナス実の５０％エタノール抽出物の調製
ハマナス（実の乾燥品）５０gに５０％エタノール水溶液を１Ｌ加え、室温で1週間抽出した。濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス実の５０％エタノール抽出４．２gを得た。
【００３９】
（製造例９）ハマナス実のエタノール抽出物の調製
ハマナス（実の乾燥品）５０gにエタノールを１Ｌ加え、室温で1週間抽出した。濾過した後、その濾液を減圧濃縮し、凍結乾燥することによりハマナス実のエタノール抽出物３．５gを得た。
【００４０】
［実施例２］
ハマナスの抽出物の効果の評価実験を次のとおり行った。
（試験例１）皮脂腺未分化細胞から皮脂腺細胞への分化抑制効果の評価
実施例１で製造したハマナスの抽出物（製造例１〜９）の皮脂腺未分化細胞から皮脂腺細胞への分化効率に及ぼす影響を、皮脂腺細胞の特異的マーカーであるPparg（Peroxisome Proliferator-Activated Receptor γ）、Plin1（Perilipin1）、Fabp4（Fatty Acid Binding Protein 4）の発現を指標に評価した。具体的方法について以下に記載する。
【００４１】
ハムスター皮脂腺細胞増殖培地(KURABO社製)を用いて培養したハムスター皮脂腺未分化細胞(KURABO社製)を24ウェルディッシュに5x104個ずつ播種し、その後、培地を皮脂腺細胞分化誘導培地（KURABO社製）に置換することにより、分化誘導を行った。その際、実施例１で製造したハマナスの抽出物（製造例１〜９）を最終濃度が0.001%になるように添加し、６日間培養を続けた。
【００４２】
分化誘導後６日目の細胞を、PBS(-)にて2回洗浄し、RNA iso Plus （Takara社製）によって細胞からRNAを抽出した。2-STEPリアルタイムPCRキット（Applied Biosystems社製）を用いて、RNAをcDNAに逆転写後、ABI7300（Applied Biosystems）により、上記マーカー遺伝子(Pparg、Plin1、Fabp4)増幅用プライマーセットを用いてリアルタイムPCR(95℃:15秒間、60℃:30秒間、40サイクル)を実施し、各遺伝子の遺伝子発現を確認した。その他の操作は定められた方法に従って実施した。
【００４３】
（Pparg遺伝子用プライマーセット）
フォワードプライマー：5'-ATGTCTCACAATGCCATCAGGTT-3'（配列番号１）
リバースプライマー：5'-CCGCCAACAGCTTCTCCTT-3'（配列番号２）
（Plin1遺伝子用プライマーセット）
フォワードプライマー：5'-TCTGAGCTGAAAGGCACCATCT-3'（配列番号３）
リバースプライマー：5'-GATGGGCACACTGATGCTGTT-3'（配列番号４）
（Fabp4遺伝子用プライマーセット）
フォワードプライマー：5'-TGGCCAAACCCATCATGAT-3'（配列番号５）
リバースプライマー：5'-TGTGCTCTCTGTTCGGATGGT-3'（配列番号６）
（内部標準グリセルアルデヒド３リン酸デヒドロゲナーゼ（Gapdh）遺伝子用プライマーセット）
フォワードプライマー：5'-TCACATGTCGCCTGGAGAAAG-3'（配列番号７）
リバースプライマー：5'-GCCTTCGGATGCCTGCTT-3'（配列番号８）
【００４４】
各細胞の皮脂腺細胞への分化誘導効率については、ハマナスの抽出物を添加せずに分化誘導した細胞における各遺伝子mRNAの発現量を内部標準であるGapdh mRNAの発現量に対する割合として算出した各遺伝子の相対発現量（各遺伝子発現量/ Gapdh遺伝子の発現量）の値を1.0とし、これに対し、ハマナスの抽出物を添加して培養した細胞における各遺伝子の相対発現量の値を算出し、評価した。結果を表１に示す。
【００４５】
【表１】
2015124189.tif 000002
【００４６】
表１に示すとおり、ハマナスの抽出物（製造例１〜９）の全てに、顕著な皮脂腺未分化細胞から皮脂腺細胞への分化誘導抑制効果が認められた。
【００４７】
（試験例２）皮脂合成抑制効果の評価
ハムスター皮脂腺細胞増殖培地を用いて培養したハムスター皮脂腺未分化細胞を24ウェルディッシュに5x104個ずつ播種し、その後、培地を皮脂腺細胞分化誘導培地に置換することにより、分化誘導を行った。その際、実施例１で製造したハマナスの抽出物（製造例１〜９）を最終濃度が0.001%になるように添加し、12日間培養を続けた。培養12日後に細胞を回収し、PBS(-)にて2回洗浄し、脂質合成測定キット(KURABO社製)を用いて皮脂腺細胞で合成された脂質の測定を定められた方法に従って実施した。
【００４８】
皮脂合成抑制効果は、試料を添加せずに培養した細胞における脂質の合成量をコントロール（1.0)とし、試料を添加して培養した細胞における脂質の合成量のコントロールの脂質の合成量に対する割合（コントロール比）を算出した。結果を表２に示す。
【００４９】
【表２】
2015124189.tif 000003
【００５０】
表２に示すとおり、ハマナスの抽出物（製造例１〜９）の全てに、顕著な皮脂腺細胞における皮脂合成抑制効果が認められた。
【００５１】
［実施例３］製品の処方例
製造例１〜９で製造したハマナスの抽出物を配合した製品の処方例を以下に示す。
（処方例１）ローション
処方                                                          配合量(重量％）
１．ハマナスの抽出物                                              ０．０１
２．１，３−ブチレングリコール                                    ８．０
３．グリセリン                                                    ２．０
４．キサンタンガム                                                ０．０２
５．クエン酸                                                      ０．０１
６．クエン酸ナトリウム                                            ０．１
７．リン酸アスコルビン酸マグネシウム（APM)                        ０．１
８．エタノール                                                    ５．０
９．パラオキシ安息香酸メチル                                      ０．１
１０．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（４０Ｅ．Ｏ．）              ０．１
１１．香料                                                        ０．１
１２．精製水                                                      残量
【００５２】
成分１〜７及び１２と、成分８〜１１をそれぞれ均一に溶解した後、両者を混合し濾過しローションを調製する。
【００５３】
（処方例２） クリーム
処方                                                          配合量(重量％）
１．ハマナスの抽出物                                              ０．１
２．スクワラン                                                    ５．５
３．オリーブ油                                                    ３．０
４．ステアリン酸                                                  ２．０
５．ミツロウ                                                      ２．０
６．ミリスチン酸オクチルドデシル                                  ３．５
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）              ３．０
８．ベヘニルアルコール                                            １．５
９．モノステアリン酸グリセリン                                    ２．５
１０．香料                                                        ０．１
１１．パラオキシ安息香酸メチル                                    ０．２
１２．パラオキシ安息香酸エチル                                    ０．０５
１３．１，３−ブチレングリコール                                  ８．５
１４．α−トコフェリルリン酸ナトリウム(VEP)                       ０．５
１５．精製水                                                      残量
【００５４】
成分２〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１１〜1５を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。次いで、油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、さらに３０℃まで冷却して製品とする。
【００５５】
（処方例３）乳液 
処方                                                          配合量(重量％）
１．ハマナスの抽出物                                              ０．０１
２．スクワラン                                                    ５．０
３．オリーブ油                                                    ５．０
４．ホホバ油                                                      ５．０
５．セタノール                                                    １．５
６．モノステアリン酸グリセリン                                    ２．０
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）              ３．０
８．ポリオキシエチレンソルビタン
モノオレエート（２０Ｅ．Ｏ．）                                ２．０
９．香料                                                          ０．１
１０．プロピレングリコール                                        １．０
１１．グリセリン                                                  ２．０
１２．パラオキシ安息香酸メチル                                    ０．２
１３．リン酸アスコルビン酸マグネシウム（APM)                      ０．１
１４．精製水                                                      残量
【００５６】
成分２〜８を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１０〜１４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分９を加え、さらに３０℃まで冷却して製品とする。
【００５７】
（処方例４）ゲル剤
処方                                                      配合量(重量％）
１．ハマナスの抽出物                                          ０．１
２．エタノール                                                ５．０
３．パラオキシ安息香酸メチル                                  ０．１
４．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油                            ０．１
５．香料                                                      適量
６．１，３−ブチレングリコール                                ５．０
７．グリセリン                                                ５．０
８．キサンタンガム                                            ０．１
９．カルボキシビニルポリマー                                  ０．２
１０．水酸化カリウム                                          ０．２
１１．精製水                                                  残量
【００５８】
成分２〜５と、成分１及び６〜１１をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合して製品とする。
【００５９】
（処方例５）ニキビ治療用軟膏
処方                                                        配合量(重量％）
１．ハマナスの抽出物                                            ２．０
２．ポリオキシエチレンセチルエーテル（３０Ｅ．Ｏ．）            ２．０
３．モノステアリン酸グリセリン                                １０．０
４．流動パラフィン                                              ５．０
５．セタノール                                                  ６．０
６．パラオキシ安息香酸メチル                                    ０．１
７．プロピレングリコール                                      １０．０
８．精製水                                                      残量
【００６０】
成分２〜５を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び６〜８を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化し、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
【００６１】
（処方例６）パック 
処方                                                          配合量(重量％）
１．ハマナスの抽出物                                              ０．１
２．ポリビニルアルコール                                        １２．０
３．エタノール                                                    ５．０
４．１，３−ブチレングリコール                                    ８．０
５．パラオキシ安息香酸メチル                                      ０．２
６．パラオキシエチレン硬化ヒマシ油（２０Ｅ．Ｏ．）                ０．５
７．クエン酸                                                      ０．１
８．クエン酸ナトリウム                                            ０．３
９．香料                                                          適量
１０．精製水                                                      残量
成分１〜１０を均一に溶解し製品とする。
【００６２】
（処方例７）ファンデーション
処方                                                          配合量(重量％）
１．ハマナスの抽出物                                              １．０
２．ステアリン酸                                                  ２．４
３．ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート（２０Ｅ．Ｏ．）  １．０
４．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）              ２．０
５．セタノール                                                    １．０
６．液状ラノリン                                                  ２．０
７．流動パラフィン                                                ３．０
８．ミリスチン酸イソプロピル                                      ６．５
９．パラオキシ安息香酸ブチル                                      ０．１
１０．カルボキシメチルセルロースナトリウム                        ０．１
１１．ベントナイト                                                ０．５
１２．プロピレングリコール                                        ４．０
１３．トリエタノールアミン                                        １．１
１４．パラオキシ安息香酸メチル                                    ０．２
１５．リン酸アスコルビン酸マグネシウム（APM)                      １．０
１６．二酸化チタン                                                ８．０
１７．タルク                                                      ４．０
１８．ベンガラ                                                    １．０
１９．黄酸化鉄                                                    ２．０
２０．香料                                                        適量
２１．精製水                                                      残量
【００６３】
成分２〜９を加熱溶解し、８０℃に保ち油相とする。成分２１に成分１０をよく膨潤させ、続いて、成分１及び１１〜１５を加えて均一に混合する。これに粉砕機で粉砕混合した成分１６〜１９を加え、水相とする。水相を８０℃に昇温し、油相に水相を徐々に加え乳化する。その後、撹拌しながら冷却し、４５℃で成分２０を加え、３０℃まで冷却して製品とする。
【００６４】
（処方例８）固形石鹸
処方                                                          配合量(重量％）
１．ハマナスの抽出物                                              ０．１
２．石鹸素地（＊）                                              ８０．０
３．グリセリン                                                  １０．０
４．ソルビトール                                                  １．０
５．エデト酸                                                      ０．１
６．酸化チタン                                                    ０．１
７、香料                                                          適量
８．精製水                                                        残量
（＊）ラウリン酸ナトリウム、ミリスチン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、オレイン酸ナトリウムを含む高級脂肪酸ナトリウム混合物
【００６５】
全成分を混合して、ミキサー及びローラーで混練し、プロッダーで圧縮することによって棒状の成型物に型打ちし、次いで、成形物を冷却し、乾燥することによって、製品を得る。
【００６６】
（処方例９）ボディ用洗浄料
処方                                                        配合量(重量％）
１．ハマナスの抽出物                                              ０．００５
２．ステアリン酸                                                １０．０
３．パルミチン酸                                                  ８．０
４．ミリスチン酸                                                １２．０
５．ラウリン酸                                                    ４．０
６．オレイルアルコール                                            １．５
７．精製ラノリン                                                  １．０
８．ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド                                １．０
９．グリセリン                                                  １０．０
１０．水酸化カリウム                                              ６．０
１１．香料                                                        適量
１２．防腐剤                                                      適量
１３．金属イオン封鎖剤                                            適量
１４．精製水                                                      残量
【００６７】
成分２〜５を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１４の適量に成分１０を溶解し、油相に添加しケン化を行う。続いて、成分６〜９をケン化物に添加し、室温でさらに成分１、１１〜１３及び残りの成分１４を添加する。
【００６８】
（処方例１０）
ヘアローション
処方                                                        配合量(重量％）
１．ハマナスの抽出物                                            ０．２
２．ステアリン酸                                                ５．０
３．セチルアルコール                                            ５．０
４．流動パラフィン                                              ２．０
５．グリセリンモノステアレート                                  １．３
６．ソルビタンモノオレート                                      １．５
７．ポリオキシエチレン（１０）ソルビタンモノオレート            ０．８
８．グリセリン                                                  ６．０
９．α−トコフェリルリン酸ナトリウム(VEP)                       ０．５
１０．防腐剤                                                    適量
１１．精製水                                                    残量
【００６９】
成分２〜７を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とした。成分１および８〜１1を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とした。油相に水相を加えて乳化し、かき混ぜながら冷却して製品とした。
【００７０】
（処方例１１）ヘアトニック
処方                                                          配合量(重量％）
１．ハマナスの抽出物                                              ２．０
２．９５％エタノール                                            ６０．０
３．グリセリン                                                    ２．０
４．精製水                                                        残量
成分１を２に溶解し、成分３及び４を加え、十分撹拌混合し、製品とする。
【００７１】
（処方例１２）シャンプー
処方                                                          配合量(重量％）
１．ハマナスの抽出物                                              ０．１
２．アルキル硫酸トリエタノールアミン                            １８．０
３．ラウリン酸ジエタノールアミド                                  ３．０
４．メチルセルロース                                              ０．５
５．香料                                                          適量
６．精製水                                                        残量
【００７２】
成分６に成分４を均一に溶解した後、  成分１及び２を加え、７０〜７５℃で加熱溶解した後、成分３を加え、冷却途中に成分５を加え３０℃まで冷却し製品とした。
【００７３】
（処方例１３）浴用剤
処方                                                          配合量(重量％）
１．ハマナスの抽出物                                              ５．０
２．炭酸水素ナトリウム                                          ５０．０
３．α−トコフェリルリン酸ナトリウム                               ２．０
４．黄色２０２号                                                  適量
５．香料                                                          適量
６．無水硫酸ナトリウム                                            残量
成分１〜６を均一に混合し製品とする。
【００７４】
（処方例１４）錠剤
処方                                                         配合量(重量％）
１．ハマナスの抽出物                                            １．０
２．乾燥コーンスターチ                                        ２５．０
３．カルボキシメチルセルロースカルシウム                      ２０．０
４．微結晶セルロース                                          ４０．０
５．ポリビニルピロリドン                                        ７．０
６．タルク                                                      ３．０
【００７５】
成分１〜５を混合し、次いで１０％の水を結合剤として加えて、押出し造粒後乾燥する。成形した顆粒に成分６を加えて混合し打錠する。１錠０．５２ｇとする。
【００７６】
（処方例１５）飲料
処方                                                          配合量(重量％）
１．ハマナスの抽出物                                              ０．１
２．ステビア                                                      ０．０５
３．リンゴ酸                                                      ５．０
４．アスコルビン酸ナトリウム                                      １．０
５．香料                                                          ０．１
６．精製水                                                        残量
【００７７】
成分１〜５を成分６の一部の精製水に撹拌溶解する。次いで、成分６の残りの精製水を加えて混合し、９０℃に加熱して５０ｍＬのガラス瓶に充填する。
【産業上の利用可能性】
【００７８】
本発明は、皮脂分泌の亢進・過剰が原因となる脂漏性湿疹、尋常性ざ瘡（にきび）、脂漏性脱毛症などの種々の皮膚および毛髪の障害や損傷の予防、改善、および治療を目的とした医薬品、医薬部外品、化粧品、および飲食品の製造分野において利用できる。
【配列表】
2015124189000001.app