(57)【要約】【課題】バイオフィルムの殺菌作用を有する口腔又は咽喉用組成物を提供すること。【解決手段】殺菌剤を内包するリポソームを含む口腔又は咽喉用組成物であって、前記殺菌剤がフェノール系殺菌剤であり、前記リポソームは水素添加リン脂質を含んで構成され、殺菌剤が前記口腔又は咽喉用組成物に対して１００μｇ／ｍＬ以上含まれることを特徴とする、口腔又は咽喉用組成物。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
殺菌剤を内包するリポソームを含む口腔又は咽喉用組成物であって、
前記殺菌剤がフェノール系殺菌剤であり、
前記リポソームは水素添加リン脂質を含んで構成され、
殺菌剤が前記口腔又は咽喉用組成物に対して１００μｇ／ｍＬ以上含まれることを特徴とする、
口腔又は咽喉用組成物。
【請求項２】
前記フェノール系殺菌剤は、イソプロピルメチルフェノールである、請求項１に記載の口腔又は咽喉用組成物。
【請求項３】
前記リポソームを構成するリン脂質中に、水素添加リン脂質が６０重量％以上含まれる、請求項１又は２に記載の口腔又は咽喉用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、バイオフィルムに対する殺菌効果を有する口腔又は咽喉用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来より、う蝕や歯周病、口臭、風邪等の発生の予防を目的とする組成物、所謂デンタルリンスやうがい薬等が提供されてきた。
【０００３】
こうした組成物としては、優れた殺菌効果や洗浄効果を有する成分を使用することが有効であると考えられ、このような作用を有する数多くの成分が提案されてきた。しかしある一定の効果は得られるものの、充分といえるほどの効果が発揮されない場合が多かった。
【０００４】
そして近年の研究の結果、う蝕や歯周病、口臭、風邪等の発生の予防等のためには、バイオフィルムを除去することが非常に重要であることが解明されてきた。バイオフィルムとは、自然界に広く存在する微生物の集団であり、ぬるぬるとしたムコイド状の細菌の塊で、おのおのの細菌が多糖体の衣をまとっている。具体的には下水管のぬめりや歯垢（プラーク）などがこれに該当するが、こうしたバイオフィルムは既存の抗菌剤や洗浄剤に対して極めて強い抵抗性を有する。そしてバイオフィルムが歯などの口腔内、又は咽喉内に形成されることで、う蝕や歯周病、口臭、風邪、肺炎等が引き起こされる要因となる。
【０００５】
歯に形成されるバイオフィルムであれば、ブラッシングによる除去が一番効果的である。しかし歯ブラシや歯間ブラシを使用しても、これらが届きにくい部位が存在する。このような部位に形成されるバイオフィルムの殺菌には、デンタルリンスのような、殺菌剤を含有する組成物の使用が効果的と考えられる。また咽喉内においては、ブラッシングが不可能であるため、洗口剤やスプレー剤等の使用が有用である。
【０００６】
しかしバイオフィルムは膨大数の細菌が集合して透過性が悪い上、粘着性があり剥がれにくい。そのためバイオフィルムを殺菌するのは容易ではなく、前述のように既存の殺菌剤や洗浄剤に対して極めて強い抵抗性を有する。これまで、バイオフィルムを除去するための殺菌成分（特許文献１参照。）や、洗浄成分（特許文献２参照。）に関する提案はなされてきたが、充分な効果が得られているとは言い難い。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２０１３−１５１４７４号公報
【特許文献２】特開２０１３−１８１０１１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
上記のような事情に鑑み、本発明の目的とするところは、バイオフィルムに対する優れた殺菌作用を有する口腔又は咽喉用組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、フェノール系殺菌剤を、水素添加リン脂質を含んで構成されるリポソームに内包させることで、バイオフィルム殺菌効果を有する口腔又は咽喉用組成物を提供できることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
即ち、本発明は、
〔１〕殺菌剤を内包するリポソームを含む口腔又は咽喉用組成物であって、前記殺菌剤がフェノール系殺菌剤であり、前記リポソームは水素添加リン脂質を含んで構成されることを特徴とする、口腔又は咽喉用組成物、
〔２〕前記フェノール系殺菌剤は、イソプロピルメチルフェノールである、前記〔１〕に記載の口腔又は咽喉用組成物、
〔３〕前記リポソームに内包される前記フェノール系殺菌剤が、口腔又は咽喉用組成物に対して１２５μｇ／ｍＬ以上含まれる、前記〔１〕又は〔２〕に記載の口腔又は咽喉用組成物、
〔４〕前記リポソームを構成するリン脂質中に、水素添加リン脂質が６０重量％以上含まれる、前記〔１〕〜〔３〕の何れかに記載の口腔又は咽喉用組成物、
に関する。
【発明の効果】
【００１１】
以上にしてなる本発明に係る口腔又は咽喉用組成物は、バイオフィルムに対して優れた殺菌作用を有する。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】殺菌性評価試験の結果。
【図２】殺菌性評価試験の結果。
【図３】殺菌性評価試験の結果。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明に係る口腔又は咽喉用組成物は、殺菌剤を内包するリポソームを含み、前記殺菌剤がフェノール系殺菌剤であり、さらに前記リポソームは水素添加リン脂質を含むことを特徴とするものである。そしてこのような構成をとることにより、バイオフィルムに対する高い殺菌効果が得られる。
【００１４】
殺菌剤としてはフェノール系殺菌剤を使用する。フェノール系殺菌剤としては、公知のフェノール系殺菌剤を広く使用することができる。具体的にはイソプロピルメチルフェノール（４−Ｉｓｏｐｒｏｐｙｌ−３−ｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｏｌ、以下ＩＭＰという。）、クレゾール（メチルフェノール）、トリクロサンなどがあげられるが、これらに限定されない。しかしこれらのフェノール系殺菌剤の中でも、ＩＭＰが好ましく、特に効果的な殺菌作用を有する。
【００１５】
リポソームは、リン脂質が自己組織化によって形成した単層、または複数の層からなる脂質複合体であり、脂質二重層の数に基づいて、多重膜リポソーム（ＭＬＶ）と一枚膜リポソームの２つに分類される。一枚膜リポソームは、そのサイズに応じて、更にＳＵＶ（ｓｍａｌｌ  ｕｎｉｌａｍｅｌｌａ  ｖｅｓｉｃｌｅ）、ＬＵＶ（ｌａｒｇｅ  ｕｎｉｌａｍｅｌｌａ  ｖｅｓｉｃｌｅ）、ＧＵＶ（ｇｉａｎｔ  ｕｎｉｌａｍｅｌｌａ  ｖｅｓｉｃｌｅ）などに分類され、これらのいずれを使用してもよい。
【００１６】
前記殺菌剤を内包させるリポソームは、少なくとも水素添加処理したリン脂質を含んで構成されるリポソームであれば、特に限定はない。リポソームを形成するリン脂質の例としては、水素添加リン脂質、水素添加グリセロリン脂質、水素添加スフィンゴリン脂質、水素添加レシチン（水素添加ホスファチジルコリン：例、水素添加大豆レシチン、水素添加卵黄レシチン、水素添加コーンレシチン、水素添加綿実油レシチンなど）だけでなく、前記化合物に、水素添加していない、レシチン（大豆レシチン、コーンレシチン、綿実油レシチン、卵黄レシチン、卵白レシチン）、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジル酸などのグリセロリン脂質やスフィンゴミエリンなどのスフィンゴリン脂質、前記リン脂質にポリエチレングリコールや、アミノグリカン類を導入したリン脂質誘導体、水酸化レシチン、リゾレシチンを混合されていてもよい。好ましくは水素添加グリセロリン脂質を含有するリン脂質であり、より好ましくは水素添加レシチンを含有するリン脂質である。通常、ホスファチジルコリン含有量が５０質量％以上である水素添加リン脂質（例：水素添加大豆レシチン、水素添加大豆リン脂質、水素添加卵黄油、水素添加卵黄リン脂質、水素添加卵黄レシチンなど）を好適に使用でき、その中でも水素添加大豆リン脂質がより好適に使用でき、ホスファチジルコリン含有量が６０質量％以上のものがさらに好適に使用できる。
【００１７】
水素添加リン脂質は、たとえば、水素添加卵黄レシチンとしては、「卵黄レシチンＰＬ−１００Ｐ（ホスファチジルコリン（以下、ＰＣと略す。）含量８０％；キューピー（株）社製）が、水素添加卵黄リン脂質としては、レシノールＹ−１０Ｍ（ＰＣ６０％）、レシノールＹ−１０Ｅ（ＰＣ８５％；日光ケミカル（株）社製）が、水素添加大豆リン脂質としては、ＳＬＰ−ＰＣ７０ＨＳ（ＰＣ７０％；辻製油（株）社製）、ＬＩＰＯＩＤ  Ｐ７５−３（ＰＣ７０％）、ＬＩＰＯＩＤ  Ｐ１００−３（ＰＣ９０％；ＬＩＰＯＩＤ社製）、ＰＨＯＳＰＨＯＬＩＰＯＮ  ８０Ｈ（ＰＣ７０％）、ＰＨＯＳＰＨＯＬＩＰＯＮ  ９０Ｈ（ＰＣ９０％；ＬＩＰＯＩＤ社製）、レシノールＳ−１０Ｍ（ＰＣ６０％）、レシノールＳ−１０Ｅ（ＰＣ８０％；日光ケミカル（株）社製）、ＣＯＡＴＳＯＭＥ  ＮＣ−２１（ＰＣ９０％）、ＣＯＡＴＳＯＭＥ  ＮＣ−６１（ＰＣ６０％；日油（株）社製）などとして市場より入手することができるが、勿論これらに限定されるものではない。
【００１８】
そしてこのような水素添加リン脂質は、リポソームを構成するリン脂質中の６０重量％以上を占めることが好ましく、これにより内包される殺菌剤の殺菌力を効果的に発揮させることが可能である。
【００１９】
使用するリポソームの大きさは、平均粒子径又は平均外径（以下、平均粒子径等という。）が１０〜１０００ｎｍであるのが好ましく、１０〜６００ｎｍがより好ましく、２０〜３００ｎｍがさらに好ましい。また安定性の観点からはリポソームの平均粒子径等のバラツキは少ない方が好ましい。このため平均粒子径等の上下限値の差が１０００ｎｍ以内、より好ましくは３００ｎｍ以内の範囲におさまるリポソームの個数は、全リポソーム中の６０％以上が好ましく、８０％以上がより好ましい。
【００２０】
リポソームの作製方法としては、公知の方法を広く採用することができる。リポソーム懸濁液の製造方法は特に限定されないが、（１）リン脂質、リポソームに内包する成分、その他酸化防止剤などを均質に混合した後、ｐＨ調整剤、多価アルコール、糖類などを含む水溶液で水和し、リポソームを形成させる方法、（２）リン脂質、リポソームに内包する成分、その他酸化防止剤などをアルコール、多価アルコールなどに溶解し、ｐＨ調整剤、多価アルコール、糖類などを含む水溶液で水和し、リポソームを調製する方法、（３）超音波、フレンチプレスやホモジナイザーを用いて、リン脂質、リポソームに内包する成分、その他酸化防止剤などを水中で複合化させ、リポソームを調製する方法、（４）エタノールにリン脂質、リポソームに内包する成分、その他酸化防止剤などを混合溶解し、このエタノール溶液を塩化カリウム水溶液に添加した後にエタノールを除去しリポソームを調製する方法などが利用できる。例えば、所定量の水素添加処理したリン脂質を含むリン脂質を、例えばエタノールなどの適当な有機溶媒で可溶化し、減圧下に溶媒を除去し、膜脂質を作成し、水、緩衝液、糖類含有水溶液などを添加後、例えば、１０００〜３０００ｒｐｍ程度で２〜５分間程度撹拌して、リポソーム懸濁液を調製することにより得ることができる。また、水、緩衝液、糖類含有水溶液に、例えばエタノールに溶解した所定量の前記リン脂質を添加し高圧ホモジナイザーなどにより撹拌することによっても調製することができる。
【００２１】
リポソームには、ＩＭＰのようなフェノール系殺菌剤だけでなく、それに加えて適宜、油性成分、脂質、水溶性物質、生理活性物質など、たとえば、トコフェロール、アスコルビン酸などの抗酸化剤、乳酸、クエン酸などの有機酸、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルエタノールアミンなどの脂質、キトサン、フコイダン、ヒアルロン酸などの天然高分子、ポリエチレングリコール、カルボキシビニルポリマーなどの合成高分子、トレハロース、ラクチュロース、マルチトールなどの糖質、グリセリンなどのポリオールなどを、本発明の効果を損なわない範囲で内包させて製剤化してもよい。なお、ここでいう「内包」とは、リポソームの内部に封入する場合や、リポソーム膜中に含まれる場合、リポソーム膜の外表面に付着する場合など、種々の形態ものをいう。
【００２２】
リポソームは、水などの溶媒を連続層として有するリポソーム懸濁液として作製される。得られたリポソーム懸濁液は、そのまま使用してもよいし、凍結乾燥やスプレードライによって乾燥して使用してもよい。特に乾燥させることにより、種々の剤型への展開が可能である。
【００２３】
リポソームは、安定性を向上させる等の目的のために、その外表面をコーティングしてもよい。コーティング剤としては公知のものを広く使用することができるが、例えば、硫酸基を含有する多糖類でコーティングすることがあげられる。硫酸基含有多糖類としては、分子量が５，０００〜３００，０００程度のものが好ましい。より具体的には、フコイダン、カラギーナン、寒天、ヘパリンなどのような、もともと硫酸基を含有しているような多糖類のほか、例えばコンドロイチン硫酸やデルマタン硫酸のような、もともとは硫酸基を有しない多糖類を硫酸化したものであってもよく、勿論これらに限定されない。またこれらの中でもフコイダンやカラギーナンが好ましく、フコイダンが特に好ましい。
【００２４】
コーティング剤として硫酸基含有多糖類を使用する場合、その使用量は、リポソームに含まれるホスファチジルコリン１００重量部に対して、１０〜５００重量部が好ましく、２０〜２００重量部がより好ましい。
【００２５】
コーティング剤によりリポソームをコーティングする方法としては、公知の方法を広く採用することができる。具体的には、フェノール系殺菌剤等を内包させたリポソームの懸濁液にコーティング剤を加え、１０００〜３０００ｒｐｍ程度で２〜５分間撹拌させることにより行うことができるが、これに限定されるものではない。また、一つのコーティング膜の中に複数のリポソームが含まれるような態様であってもよい。
【００２６】
リポソーム表面の電位については、Ｚｅｔａ電位がー１００〜１００ｍｅＶとなるようにするのが好ましい。
【００２７】
リポソームに内包されるフェノール系殺菌剤の、本発明に係る口腔又は咽頭用組成物全体に対して含まれる含量としては、１００〜３０００μｇ／ｍＬが好ましく、１２５〜１０００μｇ／ｍＬがより好ましい。単純にフェノール系殺菌剤を溶解させたような溶液では、通常の殺菌剤が調製される１００〜１０００μｇ／ｍＬといった濃度域中の低濃度域、つまり１００〜４００μｇ／ｍＬといった低濃度域でフェノール系殺菌剤による充分な殺菌効果が得られない。しかし本発明の構成をとることにより、こうした低濃度域においても、充分な殺菌効果を得ることが可能となる。
【００２８】
本発明の口腔又は咽喉用組成物は、口腔内又は咽喉内の消毒や洗浄用に使用され、液体、液状、ペースト状などの形態として適宜調製される。具体的には練歯磨、液体歯磨、液状歯磨、潤製歯磨等の歯磨剤、洗口剤、マウススプレー、口腔塗布剤、口腔ジェル剤、口腔軟膏、咽喉用スプレー、含嗽剤、パスタ剤、軟ペースト剤、咽喉用塗布剤、チュアブル錠、トローチ剤、ドロップ剤などの一般的なものに加え、その他にもタブレット、キャンディ、チューイングガムなどとして調製でき、これらは常法により調製することができる。
【００２９】
こうした各種の剤型に調製するためには、本発明に必須の組成に加えて、必要によりその剤型に応じた基剤成分を本発明の効果を損なわない範囲で配合することができる。具体的には、例えば、湿潤剤、香味剤、界面活性剤、甘味料、研磨剤、粘結剤、糖アルコール、防腐剤、着色剤、ｐＨ調整剤、水等の溶剤、各種有効成分、などを配合し得る。
【００３０】
例えば液体歯磨剤として使用する場合には、上述したようなフェノール系殺菌剤を内包するリポソームに加えて、液体歯磨剤全体に対して湿潤剤が０．１〜２０重量％、香味剤が０〜３重量％、界面活性剤が０．５〜５重量％配合すればよいが、特にこれに限定されない。
【００３１】
また、例えば洗口剤として使用する場合には、同様に洗口剤全体に対して湿潤剤が１〜３０重量％、香味剤が０〜１重量％、界面活性剤が０．００１〜５重量％となるように配合すればよいが、これに限定されるものではない。
【００３２】
湿潤剤としては、公知のものを広く使用することができる。具体的には、ソルビット、グリセリン、エチレングリコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、キシリット、マルチット、ラクチット等の多価アルコール等を単独で又は２種以上を組み合わせて使用することができるがこれらに限定されるものではない。
【００３３】
香味剤としても、公知のものを広く使用することができる。具体的には、メントール、アネトール、カルボン、オイゲノール、リモネン、ペパーミントオイル、スペアミントオイル、ウインターグリーン、サリチル酸メチル、シオネール、チモール、丁字油、ユーカリ油、ローズマリー油、セージ油、レモン油、オレンジ油、オシメン油、シトロネロール、メチルオイゲノール等が挙げられる。これらの香味剤は、単独または２種以上を組み合わせて配合することができる。
【００３４】
界面活性剤としても、公知のものを広く使用することができる。具体的には、ラウリル硫酸ナトリウム、ミリスチル硫酸ナトリウム等のアルキル硫酸ナトリウム、Ｎ−パルミトイルグルタミン酸ナトリウム等のＮ−アシルグルタミン酸塩、ショ糖脂肪酸エステル、マルトース脂肪酸エステル、ラクトース脂肪酸エステル等の糖脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル類、アルキルグルコシド類、脂肪酸アルカノールアミド類、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート等のポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ソルビタン脂肪酸エステル、脂肪酸モノグリセライド、Ｎ−ラウリルジアミノエチルグリシン、Ｎ−ミリスチルジエチルグリシン等のＮ−アルキルジアミノエチルグリシン、Ｎ−アルキル−Ｎ−カルボキシメチルアンモニウムベタイン、ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン等の界面活性剤が挙げられるがこれらに限定されない。これらの界面活性剤は、単独または２種以上を組み合わせて配合できる。
【００３５】
甘味料としても、公知のものを広く使用することができる。具体的には、サッカリンナトリウム、アセスルファームカリウム、ステビオサイド、ネオヘスペリジルジヒドロカルコン、グリチルリチン、ペリラルチン、タウマチン、アスパラチルフェニルアラニルメチルエステル、α−メトキシシンナミックアルデヒド、キシリット、スクロース、スクラロース、パラチノース、パラチニット、エリスリトール、マルチトール等を配合することができる。これらの甘味剤は、単独または２種以上を組み合わせて配合することができるがこれらに限定されるものではない。
【００３６】
研磨剤としても公知のものを広く使用することができる。例えば、結晶性シリカ、非晶性シリカ、シリカゲル、アルミノシリケート等のシリカ系研磨剤、ゼオライト、リン酸水素カルシウム無水和物、リン酸水素カルシウム２水和物、ピロリン酸カルシウム、炭酸カルシウム、水酸化アルミニウム、アルミナ、炭酸マグネシウム、第３リン酸マグネシウム、ケイ酸ジルコニウム、第３リン酸カルシウム、ハイドロキシアパタイト、第４リン酸カルシウム、合成樹脂系研磨剤等を単独で又は２種以上を組み合わせて使用することができ、これらに限定されない。
【００３７】
粘結剤としても、公知のものを広く使用することができる。具体的には、プルラン、ゼラチン、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カラギーナン、アルギン酸ナトリウム、キサンタンガム、ポリアクリル酸ナトリウム、アラビアガム、グアーガム、ローカストビーンガム、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン等を単独で又は２種以上を組み合わせて使用することができるが、これらに限定されない。
【００３８】
糖アルコールとしても、公知のものを広く使用することができる。例えばエリスリトール、キシリトール、ソルビトール、マンニトール等を単独で又は２種以上を組み合わせて使用でき、これらに限定されない。
【００３９】
防腐剤としても、公知のものを広く使用することができる。具体的にはメチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン等のパラベン類、安息香酸ナトリウム、フェノキシエタノール、塩酸アルキルジアミノエチルグリシン等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４０】
着色剤としても、公知のものを広く使用することができる。具体的には、青色１号、黄色４号、赤色２０２号、緑３号等の法定色素、群青、強化群青、紺青等の鉱物系色素、酸化チタン等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４１】
また、ｐＨ調整剤としても公知のものを広く使用することができる。具体的には、クエン酸、リン酸、リンゴ酸、ピロリン酸、乳酸、酒石酸、グリセロリン酸、酢酸、硝酸、またはこれらの化学的に可能な塩や水酸化ナトリウム等が挙げられ、これらは、組成物のｐＨが５〜８の範囲となるよう、単独または２種以上を組み合わせて配合することができる。
【００４２】
溶剤としても、前記した水以外にも、公知のものを広く使用することができ、特に限定はない。
【００４３】
薬剤成分としても、必要に応じて公知のものを広く使用することができる。具体的には、他の薬効剤としては、フッ化ナトリウム、モノフルオロリン酸ナトリウム、フッ化第一錫等のフッ素化合物；デキストラナーゼ、ムタナーゼ、アミラーゼ、プロテアーゼ、溶菌酵素（リテックエンザイム）等の酵素；トラネキサム酸、ε−アミノカプロン酸、アルミニウムクロルヒドロキシアラントイン、アラントイン、ジヒドロコレステロール、グリチルリチン酸類、グリチルレチン酸、ビサボロール、イソプロピルメチルフェノール、グリセロリン酸、クロロフィル、グルコン酸銅、塩化ナトリウム、水溶性無機リン酸化合物、クロルヘキシジン塩類、トリクロサン、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム；酢酸−ｄｌ−α−トコフェロール、酢酸ピリドキシン、アスコルビン酸またはその塩等のビタミン類；タイム、オウゴン等の植物抽出物等があげられ、特に限定はない。これらは単独で使用しても良く、２種以上を組み合わせて使用することもできる。
【００４４】
また、その他の基剤成分として、必要に応じてアルコール類、シリコン、アパタイト、白色ワセリン、パラフィン、流動パラフィン、マイクロクリスタリンワックス、スクワラン等を添加することも可能である。
【００４５】
以上、本発明の実施形態について説明したが、本発明はこうした例に何ら限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲において種々なる形態で実施し得ることは勿論である。
【実施例】
【００４６】
以下、実施例に基づき、本発明の実施形態をより具体的に説明するが、本発明がこれらに限定されるものではない。
【００４７】
（実施例１）
殺菌剤としてＩＭＰと水素添加リン脂質（日油製、商品名：コートソームＮＣ−６１）を、ブタノール１６．７重量％、スクロース８．３重量％を水に溶解させた混合溶媒に添加した後、高圧微粒化装置を用いてリポソームに内包させ、限外ろ過により殺菌剤を内包するリポソームを抽出し、調製液とした。得られた調製液中のＩＭＰ及び水素添加リン脂質はそれぞれ０．１０５及び１．０２重量％であった。そして前記調製液を、水による２倍希釈をおこなった後、前記混合溶媒を水で２倍希釈したもの（以下、２倍希釈混合溶媒という。）で濃度調製を行い、ＩＭＰがリポソーム懸濁液全体に対して５２５μｇ／ｍＬとなるようにした。その後更に、２倍希釈混合溶媒で２倍に段階希釈をおこない、ＩＭＰがリポソーム懸濁液全体に対して５２５、２６２．５、１３１．３、６５．６、３２．８、１６．４、８．２μｇ／ｍＬとなる、ＩＭＰを内包するリポソーム懸濁液を得た。
【００４８】
（比較例１）
ＩＭＰを２倍希釈混合溶媒で段階希釈をおこない、５００、２５０、１２５、６２．５、３１．３、１５．６、７．８μｇ／ｍＬの各ＩＭＰ濃度の溶液を得た。
【００４９】
（比較例２）
リポソームを構成するリン脂質として水素未添加リン脂質（長瀬産業製、商品名：ＰＩＰＳナガセ）のみを使用し、限外ろ過によって得られた調製液中のＩＭＰ及び水素未添加リン脂質の濃度がそれぞれ０．９５及び０．６７重量％であり、ＩＭＰのリポソーム懸濁液全体に対する濃度を４７５、２３７．５、１１８．８、５９．４、２９．７、１４．８、７．４μｇ／ｍＬとした以外は実施例１と同じ操作を行い、前記各濃度のＩＭＰを内包するリポソーム懸濁液を得た。
【００５０】
（比較例３）
ＩＭＰの替わりにヒノキチオール（Ｈｉｎｏｋｉｔｉｏｌ）を用い、限外ろ過によって得られた調製液中のヒノキチオール及び水素添加リン脂質の濃度がそれぞれ０．０７１及び０．２８重量％であり、ヒノキチオールのリポソーム懸濁液全体に対する濃度を３５５、１７７．５、８８．８、４４．４、２２．２、１１．１、５．５μｇ／ｍLとした以外は実施例１と同じ操作をおこない、前記各濃度のヒノキチオールを内包するリポソーム懸濁液を得た。
【００５１】
（比較例４）
ヒノキチオールを２倍希釈混合溶媒で段階希釈をおこない、３５０、１７５、８７．５、４３．８、２１．９、１０．９、５．５μｇ／ｍLの各濃度の溶液を得た。
【００５２】
（比較例５）
ＩＭＰの替わりに塩化セチルピリジニウム（Ｃｅｔｙｌｐｙｒｉｄｉｎｉｕｍ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ、以下、ＣＰＣという。）を用い、限外ろ過によって得られた調製液中のＣＰＣ及び水素添加リン脂質の濃度がそれぞれ０．１１６及び０．８８重量％であり、ＣＰＣのリポソーム懸濁液全体に対する濃度を５８０、２９０、１４５、７３、３６．３、１８．１、９．１μｇ／ｍＬとした以外は実施例１と同じ操作をおこない、前記各濃度のＣＰＣを内包するリポソーム懸濁液を得た。
【００５３】
（比較例６）
ＣＰＣを２倍希釈混合溶媒で段階希釈をおこない、６００、３００、１５０、７５、３７．５、１８．８、９．４μｇ／ｍＬの各濃度の溶液を得た。
【００５４】
（比較例７）
ブタノール１６．７重量％、スクロース８．３重量％を水に溶解させた混合溶媒に、ＩＭＰ及び水素添加リン脂質をそれぞれ０．１０５及び１．０２重量％で添加し、溶解させた。得られた溶液を、前記混合溶媒を水で２倍希釈した２倍希釈混合溶媒にて段階希釈をおこない、ＩＭＰが溶液全体に対して５２５、２６２．５、１３１．３、６５．６、３２．８、１６．４、８．２μｇ／ｍＬとなる溶液を得た。
【００５５】
（比較例８）
ＩＭＰを全く加えなかった以外は比較例７と同じ操作を行い、溶液を得た。
【００５６】
（殺菌性評価方法）
Streptococcus mutans ATCC25715をＢＨＩ液体培地で３７℃、１８時間培養した。その後ＢＨＩにスクロース５％を溶解した液体培地を用いて、菌液をＯ．Ｄ660＝１．０に調整した。得られた菌液を９６ウェルプレートに１００μL／ウェルでアプライし、３７℃、嫌気的条件下で２４時間培養をおこない、各ウェルの底面にバイオフィルムを形成させた。バイオフィルムを形成させるウェル数としては、実施例及び比較例のそれぞれにつき３ウェルずつ、更にコントロール群としての２倍希釈混合溶媒用に６ウェルを準備した。
その後各ウェルから培地を除去し、ＰＢＳで洗浄後、実施例、比較例及びコントロール群としての２倍希釈混合溶媒をそれぞれ１００μLずつアプライして１５分間、３７℃下で静置した後、ＰＢＳで３回洗浄した。洗浄したＰＢＳを除去した後、ＰＢＳにより１０倍希釈したＡｌａｍａｒＢｌｕｅ（登録商標）溶液を各ウェルに１００μLずつ添加し、暗所下３７℃で１２０分間、静置した。その後、蛍光プレートリーダーにより、励起波長５６０ｎｍ、蛍光波長５９０ｎｍの条件で蛍光強度を測定し、実施例及び比較例の生存菌率を算出した。生存菌率は、実施例及び比較例の各ウェルの蛍光強度の、コントロール群として準備した６ウェルの蛍光強度の平均値に対する百分率で算出した。データ集計に際しては、実施例及び比較例の各３ウェルの平均値±標準偏差で集計した。
【００５７】
（リポソームへの内包化、及びリポソームを構成するリン脂質についての検討）
実施例１、比較例１及び比較例２の各濃度の溶液を使用し、それぞれの殺菌性評価をおこなった。比較例１については、実施例１及び比較例２の双方との比較のため、２群用意した。また有意差検定を、実施例１と比較例１について、及び比較例１と比較例２について、それぞれ対応する同濃度間で、Ｓｔｕｄｅｎｔ  ｔ検定により実施し、ｐ値＜０．０５で有意差ありとした。ここで、実施例１及び比較例１、２それぞれの比較において、評価試験をおこなったＩＭＰ濃度は正確には異なる。しかし３例ともに５００、２５０、１２５、６２．５、３１．３、１５．６、７．８μｇ／ｍLに近い濃度域での評価をおこなっているため、それぞれ高濃度側から５００、２５０、１２５、６２．５、３１．３、１５．６、７．８μｇ／ｍLの濃度で評価試験をおこなったとみなして有意差検定をおこない、図１のグラフに表示した。その結果、実施例１と比較例１との比較では、１２５μｇ／ｍLの濃度域において、生存菌率に有意差が確認できた。この結果、ＩＭＰを水素添加リン脂質で形成されたリポソームに内包させることにより、１２５μｇ／ｍL以上の濃度域において効果的な殺菌作用を発揮させることが確認できた。一方、ＩＭＰを水素未添加リン脂質により形成されたリポソームに内包させた比較例２においては、ＩＭＰをリポソームに内包させない場合と比べて有意な殺菌効果の違いは確認できなかった。
【００５８】
（殺菌剤検討）
比較例３〜６の各濃度の溶液を使用し、それぞれの殺菌性評価をおこない、前記実施例１及び比較例１の結果と比較した。ここで、比較例３と４、並びに比較例５と６の比較において、評価試験をおこなったヒノキチオール並びにＣＰＣとの濃度は、わずかに異なっている。しかし比較例３は比較例４での評価試験をおこなった濃度、比較例５は比較例６で評価試験をおこなった濃度に近い濃度域で評価試験をおこなっているため、比較例３は比較例４と、比較例５は比較例６と同じ濃度で評価試験をおこなったものとみなして比較を行い、図２のグラフに表示した。その結果、図２に示されるように、ヒノキチオールやＣＰＣを水素添加リン脂質を含んで構成されるリポソームに内包させたことによる殺菌効果の有意な向上は確認できなかった。
【００５９】
（水素添加リン脂質とＩＭＰとの関係についての検討）
水素添加リン脂質に内包させることによるＩＭＰの殺菌効果の増強が、水素添加リン脂質を含むリポソームにＩＭＰを内包させたことによるのではなく、単に水素添加リン脂質と共存しているために発生している可能性も考えられたため、実施例１、比較例１、比較例７、及び比較例８の各濃度溶液を使用して殺菌性評価をおこなった。尚、実施例１、比較例７及び比較例８においては５２５、２６２．５、１３１．３、６５．６、３２．８、１６．４、８．２μｇ／ｍＬの濃度域で評価試験をおこなったが、これらの濃度は比較例１で設定した５００、２５０、１２５、６２．５、３１．３、１５．６、７．８μｇ／ｍＬという濃度域に近い。そこで本評価試験における全ての実施例及び比較例において、高濃度側より５００、２５０、１２５、６２．５、３１．３、１５．６、７．８μｇ／ｍＬの濃度で評価試験をおこなったものとみなし、データの集計をおこなった。その結果、図３に示すように実施例１のみが顕著な殺菌効果を有しており、水素添加リン脂質とＩＭＰを混合させた比較例７は、実施例１はおろか比較例１よりも殺菌効果が弱いことが確認できた。以上より、ＩＭＰは水素添加リン脂質を含んで構成されたリポソームに内包されることにより、優れた殺菌効果を発揮することが確認された。
【００６０】
以下、製造例を挙げる。各製造例は常法により製造される。特に断らない限り、各製造例中の数値は「重量％」を示す。なお、本発明はこれら製造例に限定されるものではない。
【００６１】
（製造例１）  洗口剤
成分                                  配合量
リポソーム懸濁液Ａ                    １２．５
グリセリン                            １０
プロピレングリコール                  ５
クエン酸                              ０．０１
クエン酸３ナトリウム                  ０．１
パラオキシ安息香酸メチル              ０．１
香料                                  ０．０５
サッカリンナトリウム                  ０．０２
精製水                                残部
合計                                  １００
リポソーム懸濁液Ａ
ＩＭＰ                                ０．１
水素添加大豆リン脂質（ＬＩＰＯＩＤ  Ｐ−７５−３（ＬＩＰＯＩＤ社製））０．５
エチルアルコール                      ５
精製水                                ９４．４
【００６２】
（製造例２）  洗口剤
成分                                  配合量
リポソーム懸濁液Ｂ                    ５
グリセリン                            １０
プロピレングリコール                  ５
キシリトール                          ２
水酸化ナトリウム                      ０．２
香料                                  ０．１
パラオキシ安息香酸メチル              ０．１
白色セラック                          ０．１
エデト酸二ナトリウム                  ０．０５
グリチルリチン酸ジカリウム            ０．０５
炭酸水素ナトリウム                    ０．０３
サッカリンナトリウム                  ０．０１
青色１号                              ０．０００２
精製水                                残部
合計                                  １００
リポソーム懸濁液Ｂ
ＩＭＰ                                ２
水素添加大豆リン脂質（レシノールＳ−１０Ｅ（日光ケミカル社製））    ５
キサンタンガム                        ０．１
コンドロイチン硫酸                    ０．０５
水溶性コラーゲン                      ０．０５
精製水                                ９２．８
【００６３】
（製造例３）  口腔用ジェル剤
成分                                  配合量
リポソーム懸濁液Ｃ                    ２
アルギン酸ナトリウム                  ３
ヒアルロン酸ナトリウム                ２
グリセリン                            １０
プロピレングリコール                  ５
クエン酸                              ０．０１
クエン酸３ナトリウム                  ０．１
パラオキシ安息香酸メチル              ０．１
香料                                  ０．０５
サッカリンナトリウム                  ０．０２
精製水                                残部
合計                                  １００
リポソーム懸濁液Ｃ
ＩＭＰ                                ２．５
水素添加大豆リン脂質（コートソームＮＣ−６１（日油社製））  １５
水溶性コラーゲンペプチド              ０．５
コンドロイチン硫酸                    ０．１
１，３−ブチレングリコール            １０
精製水                                ７１．９
【００６４】
（製造例４）  口腔用ジェル剤
成分                                  配合量
リポソーム懸濁液Ｄ                    ２
グリセリン                            ２５
水添澱粉分解物                        １０
プロピレングリコール                  ２
ポリアクリル酸ナトリウム              １．５
安息香酸メチル                        ０．１
精製水                                残部
合計                                  １００
リポソーム懸濁液Ｄ
ＩＭＰ                                １
水素添加卵黄リン脂質（レシノールＹ−１０Ｅ（日光ケミカル社製））  ７
エタノール                            ７
精製水                                ８５
【００６５】
（製造例５）  チュアブル錠、１錠（５００ｍｇ）中の成分
成分                                  配合量
粉末化リポソーム（※１）                ５ｍｇ
キシリトール                          １５０ｍｇ
ヒドロキシプロピルセルロース          ２０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム              ２ｍｇ
マンニトール                          残部
（※１）粉末化リポソームは、ＩＭＰが５％、水素添加大豆リン脂質が５０％、結晶セルロースが４５％という組成である。
【００６６】
（製造例６）  咽喉用スプレー剤（５０ｍＬ中の成分）
成分                                  配合量
リポソーム懸濁液Ｅ                    ５ｍｇ
果糖ぶどう糖液糖                      １０００ｍｇ
スクラロース                          １０ｍｇ
クエン酸                              ４００ｍｇ
クエン酸ナトリウム                    ２００ｍｇ
香料                                  微量
安息香酸ナトリウム                    ５０ｍｇ
精製水                                残部
リポソーム懸濁液Ｅ
水素添加大豆リン脂質（ＰＨＯＳＰＨＯＬＩＰＯＮ９０Ｈ（ＬＩＰＯＩＤ社製））３
ＩＭＰ                                ０.５
水溶性コラーゲンペプチド              ５
植物性セラミド                        １
１，３−ブチレングリコール            ５
グリセリン                            １０
精製水                                残部
【００６７】
（製造例７）  フィルム製剤
成分                                  配合量
粉末化リポソーム（※２）              ５
ヒドロキシプロピルメチルセルロース    １６
でんぷん                              ２５
結晶セルロース                        １．５
プルラン                              １．５
ショ糖脂肪酸エステル                  １．５
アスパルテーム                        １
香料                                  １
グリセリン                            ２
マルチトール                          １４
乳糖                                  残部
合計                                  １００
（※２）粉末化リポソームは、ＩＭＰが５％、水素添加大豆リン脂質が５０％、結晶セルロースが４５％という組成である。
【図１】
2015124154.tif 000003
【図２】
2015124154.tif 000004
【図３】
2015124154.tif 000005