(57)【要約】【課題】これまでレスベラトロールには見られない白色脂肪細胞の褐色様脂肪細胞分化誘導作用等の新しい作用を奏しながら、安全性に優れたレスベラトロール環化反応生成物を含むレスベラトロール加熱処理組成物及びその製造方法並びに前記レスべラトロール加熱処理組成物を含む白色脂肪の褐色用脂肪細胞化誘導剤組成物及び食品、医薬品又は医薬部外品を提供すること。【解決手段】レスベラトロールをアルカリ性条件下で加熱して得られる組成物であって、３種類のレスベラトロール重合化合物を含有し、且つ固形分２０ｍｇ／ｍＬあたりのフェノール含有量が１００μｇ／ｍＬ以下であることを特徴とするレスベラトロール加熱処理組成物及びその製造方法並びに前記レスベラトロール加熱処理組成物を含む白色脂肪の褐色用脂肪細胞化誘導剤組成物及び食品、医薬品又は医薬部外品。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
レスベラトロールをアルカリ性条件下で加熱して得られる組成物であって、
式（１）：
【化１】
2015124151.tif 000009
、式（２）：
【化２】
2015124151.tif 000010
及び式（３）：
【化３】
2015124151.tif 000011
で示される３種類のレスベラトロール重合化合物を含有し、且つ固形分２０ｍｇ／ｍＬあたりのフェノール含有量が１００μｇ／ｍＬ以下であることを特徴とするレスベラトロール加熱処理組成物。
【請求項２】
レスベラトロール加熱処理組成物の製造方法であって、
（ａ）〜（ｃ）の工程：
（ａ）レスベラトロールをアルカリ性条件下で加熱して得られる溶液を固体吸着剤と接触させ、吸着成分を回収する工程、
（ｂ）レスベラトロールをアルカリ性条件下で加熱して得られる溶液をｐＨ７以下に調整、析出させ、析出物を回収する工程、
（ｃ）レスベラトロールをアルカリ性条件下で加熱して得られる溶液、又は上記（ａ）の工程で得られる組成物、又は上記（ｂ）の工程で得られる組成物を含有する水溶液を加熱する工程、
からなる群より選ばれる、一つ以上の工程により、含有するフェノールを除去する工程を有することを特徴とする、請求項１記載のレスベラトロール加熱処理組成物の製造方法。
【請求項３】
請求項１に記載のレスベラトロール加熱処理組成物を含む白色脂肪の褐色用脂肪細胞化誘導剤組成物。
【請求項４】
請求項１記載のレスベラトロール加熱処理物を含有する食品、医薬品又は医薬部外品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、非常に有用なレスベラトロールの環化反応生成物を含有するエキスを簡便な方法且つ、より安全性の高められた形で得られたレスベラトロール加熱処理組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
現在、発酵、抽出、有機合成など様々な方法を用いて数多くの化合物が取得され、食料品や医薬品などの幅広い分野に利用されている。しかし、有用性と実用性を両立させるものは数が限られている。さらに未だ報告されていない新規な化合物では合成原料のコストや単離技術の難しさから有用性と実用性を両立させることがより困難である。
【０００３】
本発明者らは、単離も容易であり、かつ簡便な方法で、さらに食品由来の成分を用いて新規な化合物を合成する画期的な方法を見出している（特許文献１）。しかし、その用途範囲は非常に狭く、見出されていない画期的な用途が数多くあるものと推察される。
【０００４】
哺乳動物の脂肪組織を構成する脂肪細胞には白色脂肪細胞と褐色脂肪細胞の二種類が存在する。白色脂肪細胞は主にトリグリセリドの形で摂取したエネルギーを蓄積する役割を持ち、他方、褐色脂肪細胞は筋芽細胞を起源に発生し、細胞内部に多数のミトコンドリアを含むことで褐色に色づき、ミトコンドリア中に発現する脱共役タンパク質（Ｕｎｃｏｕｐｌｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ  １；ＵＣＰ１）の働きにより熱産生を行い、蓄積されたエネルギーを熱へと変換する役割を持っている脂肪細胞である（非特許文献１）。褐色脂肪細胞により構成される褐色脂肪組織は、幼児期に多数見受けられ、成長するに従いその組織量が減少する。従来、褐色脂肪細胞は白色脂肪細胞とは由来する幹細胞が異なることから、白色脂肪細胞より褐色脂肪細胞へとは変化しないと考えられてきた。しかし、近年、白色脂肪組織中に褐色脂肪細胞と同様の応答を示す「褐色様脂肪細胞」の存在が明らかとなってきた（非特許文献２）。褐色様脂肪細胞は白色脂肪細胞由来ながらミトコンドリアの存在量が白色脂肪細胞と比較して格段に多く、蓄積された脂質エネルギーを効率よく熱エネルギーへと変換できる脂肪細胞である。この報告は、ヒト成人にも褐色様脂肪組織を増やすことができる可能性があることを明らかにし、白色脂肪細胞の褐色様脂肪細胞への分化誘導が、肥満症や糖尿病の新たな、そして、根本的治療方法として、急速に注目が高まってきている。
【０００５】
しかしながら、白色脂肪細胞の褐色様脂肪細胞への分化を誘導することは難しく、確認されている方法は、長期間の寒冷刺激や、アドレナリンによる刺激、ペルオキソーム増殖剤応答性受容体（ＰＰＡＲγ）アゴニストの添加（非特許文献３）などのみであり、加えて、すべて、皮下脂肪細胞のみに分化誘導効果が限定される。また、特許文献２にてヒト内臓脂肪細胞に対しＵＣＰ１遺伝子の発現増幅効果のある化合物が報告されているが、白色脂肪細胞の褐色化は見られず、且つ、作用濃度が非常に高く、生体内での有効濃度の達成が難しいなど、白色脂肪細胞の褐色化は、現状、実現には至っていない。
【０００６】
加えて、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦｓ：Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒｓ）は、アミノ酸配列の相同性からヒトにおいて現在２２種類存在することが明らかにされている。ＦＧＦ‐２１は、脂肪の分解促進と蓄積の抑制、高コレステロール血症、糖尿病（高血糖、インスリン抵抗性）及び肥満の改善に関わる可能性があることが報告されている（非特許文献４）。例えば、特許文献３にはＦＧＦ‐２１の産生を促し、内臓脂肪量の減少効果のある化合物が記載されており、特許文献４にはＦＧＦ‐２１とグルカゴン様ペプチド−１受容体アゴニスト、抗糖尿病薬、ジペプチジルペプチダーゼ−４阻害剤からなる２型糖尿病治療薬が有用であることが記載されている。あるいは、特許文献５にはＦＧＦ−２１誘導体を用いＦＧＦ−２１の半減期を延長することが代謝疾患の治療に有用であることが記載されている。このような中で、近年、寒冷刺激が血中のＦＧＦ−２１濃度の上昇を促し、白色脂肪の褐色化を促す報告があり、ＦＧＦ−２１は白色脂肪の褐色化誘導因子の一つとして注目されている（非特許文献５）。しかしながら、これまでのところ、ＦＧＦ‐２１をターゲットとした報告は代謝障害の改善を目的とするもののみであり、白色脂肪細胞の褐色化への手段として具体的な提案はなされていない。
【０００７】
また、いわゆる「フレンチパラドックス」と言われる赤ワインの有用な生理効果は、レスベラトロールの抗酸化能を始めとして各種の生理活性機能が一因であるとされている。レスベラトロールはブドウ果皮やピーナッツ赤皮に多く含まれるヒドロキシスチルベン類の一種で、サーチュインを介したカロリー制限効果をはじめ、抗真菌、抗細菌、抗炎症などさまざまな活性を有する植物由来化合物として知られている（非特許文献６）。レスベラトロールには、白色脂肪細胞に特異的に発現する脱共役タンパク質ＵＣＰ２の遺伝子発現亢進効果について報告があるものの（特許文献６）、これまで、レスベラトロールについて、白色脂肪細胞から褐色様脂肪細胞への分化効果について言及されたものは一切無い。
【０００８】
このように、今日に至るまで、食欲の抑制や脂肪吸収抑制ではなく、白色脂肪細胞から褐色様脂肪細胞へと脂肪細胞そのものの性質を変化させ、代謝を変化させることでメタボリックシンドロームを予防・治療する根本的な治療・予防剤の開発が望まれてきたが、これまでのところすべての白色脂肪細胞に対して十分な効果が認められるような物質は見つかっておらず、早期の開発が望まれている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開第２０１３／０６１４５５号
【特許文献２】特開２０１１−２４１１９５号公報
【特許文献３】国際公開第２０１１／０３７２２３号
【特許文献４】特公表２０１３−５１８０３５号公報
【特許文献５】特公表２０１２−５１５７４７号公報
【特許文献６】特開２０１０−２４２０８号公報
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｓｃｉ． ２０１１ Ｏｃｔ ２８；１：３５
【非特許文献２】Ｃｅｌｌ．２０１２  Ｊｕｌ  ２０；１５０（２）：３６６−３７６
【非特許文献３】Ｎａｔ  Ｍｅｄ． ２０１３  Ｏｃｔ；１９（１０）：１２５２−６３
【非特許文献４】Ａｍ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｎｕｔｒ． ２０１０ Ｊａｎｕａｒｙ； ９１(１)： ２５４Ｓ-２５７Ｓ
【非特許文献５】Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ． ２０１２ Ｆｅｂ  １；２６(３)：２７１−８１
【非特許文献６】レスベラトロールの基礎と応用、シーエムシー出版
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明者らは、レスベラトロールの有用性に着目し、さらに有効な効果を示す成分の合成を進め、非常に有用なレスベラトロールの環化反応生成物を含有するエキスを得ることに成功し、出願している（特願２０１３−１５７６５９）。しかしながら、その製造工程にてフェノールが発生することが明らかになったため、より安全なエキスの生産方法を鋭意検討した。その結果、驚くべきことに、簡便な方法でフェノールを低減した安全なレスベラトロールの環化反応生成物を含有するエキスを得ることに成功し、くわえて、本発明の製造方法で得たエキスは、従来の製造方法により得たエキスと同等以上の効果を示すことを明らかにし、本発明を完成するに至った。
【００１２】
したがって、本発明の課題は、これまでレスベラトロールには見られない白色脂肪細胞の褐色様脂肪細胞分化誘導作用等の新しい作用を奏しながら、安全性に優れたレスベラトロール環化反応生成物を含むレスベラトロール加熱処理組成物及びその製造方法並びに前記レスベラトロール加熱処理組成物を含む白色脂肪の褐色用脂肪細胞化誘導剤組成物及び食品、医薬品又は医薬部外品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
即ち、本発明の要旨は、
〔１〕レスベラトロールをアルカリ性条件下で加熱して得られる組成物であって、
式（１）：
【００１４】
【化１】
2015124151.tif 000002
【００１５】
、式（２）：
【００１６】
【化２】
2015124151.tif 000003
【００１７】
及び式（３）：
【００１８】
【化３】
2015124151.tif 000004
【００１９】
で示される３種類のレスベラトロール重合化合物を含有し、且つ固形分２０ｍｇ／ｍＬあたりのフェノール含有量が１００μｇ／ｍＬ以下であることを特徴とするレスベラトロール加熱処理組成物、
〔２〕レスベラトロール加熱処理組成物の製造方法であって、
（ａ）〜（ｃ）の工程：
（ａ）レスベラトロールをアルカリ性条件下で加熱して得られる溶液を固体吸着剤と接触させ、吸着成分を回収する工程、
（ｂ）レスベラトロールをアルカリ性条件下で加熱して得られる溶液をｐＨ７以下に調整、析出させ、析出物を回収する工程、
（ｃ）レスベラトロールをアルカリ性条件下で加熱して得られる溶液、又は上記（ａ）の工程で得られる組成物、又は上記（ｂ）の工程で得られる組成物を含有する水溶液を加熱する工程、
からなる群より選ばれる、一つ以上の工程により、含有するフェノールを除去する工程を有することを特徴とする、請求項１記載のレスベラトロール加熱処理組成物の製造方法、
〔３〕前記〔１〕に記載のレスベラトロール加熱処理組成物を含む白色脂肪の褐色用脂肪細胞化誘導剤組成物、
〔４〕前記〔１〕に記載のレスベラトロール加熱処理物を含有する食品、医薬品又は医薬部外品
に関する。
【発明の効果】
【００２０】
本発明のレスベラトロール加熱処理組成物は、本発明者らが以前発明した、前駆物質であるレスベラトロールが持ち合わせていない、新しい作用である顕著に優れた白色脂肪細胞から褐色様脂肪細胞への分化誘導作用を有し、かつ、先願発明（特願２０１３−１５７６５９）では混入してしまうフェノールを効果的に低減したものである。また、本発明では先願発明に比べてさらに生産性がよく、より安全にレスベラトロール環化反応生成物を含むレスベラトロール加熱処理組成物を提供することが可能である。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】図１は、実施例１で実施したレスベラトロールの反応溶液のクロマトグラムを示す。
【図２】図２は、実施例２で実施した分化誘導直後の脂肪細胞中の線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ‐２１）、転写コアクチベーターであるペルオキシソーム増殖因子活性化受容体γ補助活性化因子１α（ＰＧＣ−１α）、褐色様脂肪細胞にて発現の亢進が観察される転写コアクチベーター、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体γ補助活性化因子１β（ＰＧＣ−１β）、褐色様脂肪細胞特異的に発現するＣＢＰ／ｐ３００‐インターラクティブトランスアクチベーター（ＣＩＴＥＤ１）の各遺伝子の相対発現量を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
以下、本発明について詳細に説明する。
【００２３】
本発明で原料化合物として使用されるレスベラトロールは、天然由来のものであっても、化学合成された純度の高い化成品であってもよい。天然由来の原料化合物としては、完全に精製されたものである必要はなく、他の化合物を含む混合物も使用できる。
【００２４】
ただし、加熱による反応効率を高める観点からは、前記レスベラトロールとしては、レスベラトロール換算で、合計５重量％以上含有されたものが原料として望ましい。このような原料としては、例えばブドウ果皮、ワイン、ワイン濃縮パウダー、メリンジョ、リンゴンベリー、ピーナッツ果皮、イタドリ等の原料からの抽出物や該抽出物の凍結乾燥品等を使用してもよい。さらに、より好ましくはこれら抽出物をカラム等で精製し、レスベラトロール含量を高めたものを使用することが好ましい。
【００２５】
本発明では、レスベラトロールを適切な溶媒に懸濁、溶解させる。前記溶媒としては、水、水と有機溶媒の混合液や、有機溶媒のみに溶解させることも可能である。水と有機溶媒の配合比や、有機溶媒の種類については特に制限はなく、また、レスベラトロールが十分に分散していれば、完全に溶解していなくともよい。中でも、水のみや、水とメタノール、水とエタノール等の混合液を使用することができるが、より好ましくは水のみで行うことが、安全性やコスト面から好ましい。
【００２６】
前記のようにレスベラトロールを溶媒に溶解して得られる混合溶液（以下、レスベラトロール含有溶液ともいう。）中のレスベラトロールの濃度については、特に制限はないが、レスベラトロールの濃度が高いほど、溶媒使用量が少なくてすむ等のメリットもあるため、レスベラトロールの濃度は各々の溶媒に対しレスベラトロールがそれぞれ飽和濃度以上に調整することが好ましい。
【００２７】
次に、前記レスベラトロール含有溶液のｐＨをアルカリ性となるように調整する。調整方法として、例えば、レスベラトロール含有溶液を調製した後にアルカリ化剤を添加しｐＨを調整してもよいし、前述のレスベラトロール含有溶液の調製時に前もって溶媒のｐＨを調整しておいてもよい。レスベラトロール含有溶液の加熱反応開始時のｐＨは８．０以上であれば、効率的に後述のように複数の有用なレスベラトロール重合化合物を生成する反応が進むので好ましく、ｐＨ１３．０を越えると反応と同時に、他の反応や目的化合物の分解も一方で生じるために最終的なレスベラトロール重合化合物群の回収量が低下する傾向がある。したがって、反応開始時のｐＨは８．０〜１３．０が望ましい。
【００２８】
前記アルカリ化剤としては、特に制限はないが、安全性、効率及びコスト面からは、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム等が望ましく、より好ましくは炭酸ナトリウムで行うことが安全性やコストの面から好ましい。反応時のｐＨ変化を極力抑える場合が生じた際には、緩衝溶液を用いてもよいが、必ずしも必要な手法ではない。
【００２９】
次に、アルカリ性に調整されたレスベラトロール含有溶液を加熱する。この加熱により、レスベラトロールどうしを環化反応させることで、有用なレスベラトロール環化反応生成物が生成する。このようなレスベラトロール環化反応生成物としては、式（１）：
【００３０】
【化４】
2015124151.tif 000005
【００３１】
、式（２）：
【００３２】
【化５】
2015124151.tif 000006
【００３３】
及び式（３）：
【００３４】
【化６】
2015124151.tif 000007
【００３５】
で示される３種類のレスベラトロール重合化合物が挙げられる。
【００３６】
前記レスベラトロール重合体化合物において、炭素−炭素２重結合は、トランス又はシスであ  ってよく、シス体とトランス体との混合物を含む。
【００３７】
前記レスベラトロール重合化合物としては、その薬学的に許容可能な塩であってもよい。
前記レスベラトロール重合化合物の薬学的に許容可能な塩としては、例えば、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩； マグネシウム塩、カルシウム塩、バリウム塩等のアルカリ土類金属塩； アルミニウム塩；アルミニウムヒドロキシド塩等の金属ヒドロキシド塩； アルキルアミン塩、ジアルキルアミン塩、トリアルキルアミン塩、アルキレンジアミン塩、シクロアルキルアミン塩、アリールアミン塩、アラルキルアミン塩、複素環式アミン塩等のアミン塩； α−アミノ酸塩、ω−アミノ酸塩等のアミノ酸塩；ペプチド塩又はそれらから誘導される第１級、第２級、第３級若しくは第４級アミン塩等が挙げられる。これらの薬理的に許容し得る塩は、単独で又は２種以上を混合して用いることができる。
【００３８】
本発明において前記レスベラトロール重合体化合物を形成するための環化反応とは、レスベラトロールどうしが重合反応することで６員環を形成する反応をいう。
前記環化反応を効率的に進ませるために、レスベラトロール含有溶液の加熱温度は１１０℃以上に調整することが好ましい。また、使用する溶媒の沸点から考え、加圧加熱が望ましい。例えば、開放容器にレスベラトロール含有溶液を入れ、溶媒の沸点を超える高温で前記容器を加熱する、密閉容器にレスベラトロール含有溶液を入れ、前記容器を加熱する、圧力鍋を用いて加圧加熱する、レトルト装置やオートクレーブを用いて加圧加熱する、超臨界装置やプレッシャークッカー等の装置を用い加圧加熱する等、少なくとも部分的にレスベラトロール含有溶液の温度が１１０℃以上に達するように加熱することが好ましい。前記レスベラトロール重合化合物等の回収効率面から、レスベラトロール含有溶液の温度が均一に１２０℃〜１８０℃になることが、さらに好ましい。加熱時間も加熱温度と同様に限られたものではなく、効率的に目的の反応が進行する時間条件とすればよい。特に、加熱時間は加熱温度との兼ね合いによるものであり、加熱温度に応じた加熱時間にすることが望ましい。例えば、１３０℃付近で加熱する場合は、３０分〜２７０分の加熱時間が望ましい。また、加熱は、一度でもよいし、複数回に分けて繰り返し加熱してもよい。複数回に分けて加熱する場合、溶媒を新たに追加して行うことが好ましい。
【００３９】
前記加熱による前記式（１）〜（３）で表されるレスベラトロール重合化合物等の生成反応の終了は、例えば、ＨＰＬＣによる成分分析により生成量を確認して判断すればよい。
なお、前記式（１）〜（３）で表されるレスベラトロール重合化合物の生成量は、本発明のレスベラトロール加熱処理組成物中に多いほど白色脂肪細胞の褐色様脂肪細胞への分化誘導作用等の効果が強くなるので好ましいが、具体的には、それぞれの総量が本発明のレスベラトロール加熱処理組成物中に１重量％以上であればよい。
また、式（１）、式（２）、式（３）で表されるレスベラトロール重合化合物のそれぞれの含有比率については特に限定はない。
【００４０】
本発明のレスベラトロール加熱処理組成物は、前記のようにレスベラトロールをアルカリ性条件下で加熱して得られる溶液（以下、反応液ともいう）に、以下の（ａ）〜（ｃ）の工程に記載の処理を施すことによりフェノールを除去することで得られる。
（ａ）反応液を固体吸着剤と接触させ、吸着成分を回収する工程
（ｂ）反応液をｐＨ７以下に調整、析出させ、析出物を回収する工程
（ｃ）反応液、又は上記（ａ）の工程で得られる組成物、又は上記（ｂ）の工程で得られる組成物を含有する水溶液を加熱する工程
【００４１】
前記（ａ）〜（ｃ）の工程は、反応液中のフェノールの濃度が下がればよく、一つの工程を選択してもよいし、２以上の工程を組み合わせてもよい。また、同じ工程を繰り返してもよい。
【００４２】
前記（ａ）工程において使用される固体吸着剤としては、各種の合成吸着剤やシリカゲルが挙げられる。合成樹脂としては、例えば、三菱化学株式会社製のダイヤイオン（登録商標）ＨＰシリーズ、セパビーズ（登録商標）ＳＰシリーズ等の芳香族系合成吸着剤、オルガノ株式会社製のアンバーライト（登録商標）ＸＡＤシリーズ等のスチレン系合成吸着剤、ＧＥヘルスケア・ジャパン株式会社製のＳｅｐｈａｄｅｘシリーズや、Ｓｅｐｈａｒｏｓｅシリーズ等のデキストランやアガロース等を母体としたソフトゲルが挙げられる。またシリカゲルとしては例えば、オクタデシルシリル基等で表面を修飾された化学結合型多孔性球状シリカゲル等が挙げられる。
【００４３】
これらの固体吸着剤と前記反応液とを接触させる方法としては特に限定はなく、例えばカラムに固体吸着剤を充填し前記反応液を通液する方法（以下、カラム法ともいう）、あるいはタンクに反応液と固体吸着剤とを入れ攪拌して接触させる方法（以下、タンク法ともいう）等がある。しかしながら、固体吸着剤と反応液の接触時の取り扱いの容易さからカラム法が好ましい。前記反応液と吸着剤とを接触させる場合の温度は、特に限定はないが１０〜３０℃が好ましい。反応液中に混在するフェノールは、カラム法を用いた場合、合成吸着剤を用いた場合は吸着せず通過する、また、ソフトゲルを用いた場合は前記レスベラトロール重合化合物とは異なる通過時間にて溶出される、シリカゲルを用いた場合は溶出時の溶液の組成を変更することで除去することが可能である。
【００４４】
前記固体吸着剤を用いる精製により、反応液に混入したフェノールの除去が行えるだけではなく、前記精製物を脱塩精製し、式（１）〜（３）で表されるレスベラトロール重合化合物の濃度を高めることも可能である。
【００４５】
前記（ｂ）工程において反応液をｐＨ７以下に調整する方法としては、前記反応液への酸性物質の添加等が挙げられる。前記酸性物質としては特に限定は無いが、溶液を酸性にする物質であればよく、例えば、塩酸、クエン酸等が挙げられる。
前記ｐＨ７以下に調整した反応液中でレスベラトロール重合化合物を析出させる方法としては、有機溶媒濃度が容量パーセントを１０％以下の水溶液にする方法が上げられる。有機溶媒濃度としては、好ましくは５％以下、より好ましくは水のみである。
前記析出物を回収する方法としては、特に限定は無いが、不溶物を回収できればよく、濾過や遠心分離法等が挙げられる。
【００４６】
前記（ｃ）工程において、反応液、又は上記（ａ）の工程で得られる組成物、又は上記（ｂ）の工程で得られる組成物を含有する水溶液を加熱する方法としては、蒸発した水蒸気が還流されない方法が望ましい。その方法としては特に限定は無いが、オイルバス、プレート式蒸発装置等を用いる方法が挙げられる。
また、加熱条件としては、含有する水が蒸発する条件であればよく、水溶液の液温が５０〜１３０℃に、好ましくは８０〜１００℃に、１０分〜１２時間で処理することが好ましい。
【００４７】
前記（ａ）〜（ｃ）工程のような処理によりレスベラトロール加熱処理組成物からフェノールを除去することが可能であるが、さらに水蒸気蒸留やスチームストリッピング等の方法、活性炭や合成吸着剤を用いることにより、フェノールを実質上完全に除去することで、より高品質のレスベラトロール加熱処理組成物を得ることもできる。
また、必要に応じて、減圧乾燥や凍結乾燥して溶媒を除去することで、レスベラトロール加熱処理組成物を粉末状の固形物とすることもできる。
【００４８】
以上のようにして得られる本発明のレスベラトロール加熱処理組成物はフェノールの含有量を顕著に低減されたものである。具体的には、固形分２０ｍｇ／ｍＬの濃度に調整したレスベラトロール加熱処理組成物のメタノール溶液中のフェノール濃度が１００μｇ／ｍＬ以下であり、好ましくは５０μｇ／ｍＬ、より好ましくは５μｇ／ｍＬである。
【００４９】
本発明のレスベラトロール加熱処理組成物は、原料であるレスベラトロールには見られない、強力な白色脂肪細胞からの褐色様脂肪細胞への分化を誘導する作用を有しており、この褐色様脂肪細胞分化誘導作用により、メタボリックシンドロームの予防、治療を図ることができることから、本発明のレスベラトロール加熱処理組成物は、新規のメタボリックシンドローム予防剤及び／又は治療剤として有用である。
【００５０】
本発明のレスベラトロール加熱処理組成物の投与量としては、患者の性別、年齢、生理的状態、病態（肥満の進み具合等）、製剤形態、投与経路、投与回数、薬剤における有効成分濃度等に応じて広い範囲から適宜選択できるが、例えば、成人１日当たり、本発明の組成物の含有量が固形分として０．０１〜５００ｍｇ／ｋｇ程度、好ましくは０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ程度であればよい。投与は、例えば、１日当たり１回又は数回に分けてもよい。
【００５１】
また、本発明のレスベラトロール加熱処理組成物を用い、本発明の効果が損なわれない範囲内で食品、医薬品又は医薬部外品に通常用いられる成分を適宜任意に配合することができる。
【００５２】
例えば、食品の場合には、水、アルコール、澱粉質、蛋白質、繊維質、糖質、脂質、ビタミン、ミネラル、着香料、着色料、甘味料、調味料、安定剤、防腐剤のような食品に通常配合される原料又は素材と組み合わせることができる。
また、本発明のレスベラトロール加熱処理組成物を食品に添加する場合には、該食品中に、通常は固形分で０．００１〜２０重量％添加することが好ましい。
【００５３】
本発明のレスベラトロール加熱処理組成物は、医薬品として製剤化してもよい。この製剤形態としては特に限定されず、例えば、注射剤、坐剤、点眼剤、軟膏剤、エアゾール剤等の非経口剤、錠剤、被覆錠剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤、丸剤、懸濁剤、乳剤、トローチ剤、チュアブル錠、シロップ剤等の経口剤等が挙げられる。製剤化の際には、薬学的に許容される担体、賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、希釈剤、安定化剤、等張化剤、ｐＨ調整剤、緩衝剤等が用いられる。
【００５４】
担体や賦形剤としては、例えば、乳糖、ショ糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、マルトース、マンニトール、エリスリトール、キシリトール、マルチトール、イノシトール、デキストラン、ソルビトール、アルブミン、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸、メチルセルロース、グリセリン、アルギン酸ナトリウム、アラビアゴム及びこれらの混合物等が挙げられる。
【００５５】
滑沢剤としては、例えば、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ砂、ポリエチレングリコール及びこれらの混合物等が挙げられる。
結合剤としては、例えば、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、エチルセルロース、水、エタノール、リン酸カリウム及びこれらの混合物等が挙げられる。
【００５６】
崩壊剤としては、例えば、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプン、乳糖及びこれらの混合物等が挙げられる。
【００５７】
希釈剤としては、例えば、水、エチルアルコール、マクロゴール、プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類及びこれらの混合物等が挙げられる。
安定化剤としては、例えば、ピロ亜硫酸ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸、チオグリコール酸、チオ乳酸及びこれらの混合物等が挙げられる。
【００５８】
等張化剤としては、例えば、塩化ナトリウム、ホウ酸、ブドウ糖、グリセリン及びこれらの混合物等が挙げられる。
ｐＨ調整剤及び緩衝剤としては、例えば、クエン酸ナトリウム、クエン酸、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム及びこれらの混合物等が挙げられる。
【００５９】
さらに本発明のレスベラトロール加熱処理組成物は、増量剤、可溶化剤、分散剤、懸濁剤、乳化剤、抗酸化剤、細菌抑制剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を含んでいてもよい。
【００６０】
また、本発明のレスベラトロール加熱処理組成物を医薬部外品の形態に製剤化してもよい。医薬部外品としては特に限定されないが、例えば、ドリンク剤等の栄養補助医薬部外品が好ましい。この場合、有効成分であるエキスの医薬部外品における含有量は、固形分として０．００１〜３０重量％程度であればよい。
【００６１】
また、本発明のレスベラトロール加熱処理組成物は、ヒトに対してだけでなく、非ヒト動物、例えば、ラット、マウス、モルモット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ウマ、ネコ、イヌ、サル、チンパンジー等の哺乳類、鳥類、両生類、爬虫類等の治療剤又は飼料に配合してもよい。飼料としては、例えばヒツジ、ブタ、ウシ、ウマ、ニワトリ等に用いる家畜用飼料、ウサギ、ラット、マウス等に用いる小動物用飼料、ウナギ、タイ、ハマチ、エビ等に用いる魚介類用飼料、イヌ、ネコ、小鳥、リス等に用いるペットフードが挙げられる。
【００６２】
次に、本発明を実施例に基づいて詳細に説明するが、本発明はかかる実施例にのみ限定されるものではない。
【実施例】
【００６３】
（実施例１：レスベラトロール重合化合物を含有する組成物の作製及び精製）
レスベラトロール重合化合物を含有する組成物の作製、及び精製を以下の手順で行った。トランス−レスベラトロール（（株）ＴＥＣＮＯ  ＳＣＩＥＮＣＥ社製）４０ｇに、１０％炭酸ナトリウム（和光純薬工業（株）社製）水溶液を４００ｍＬ加えて、レスベラトロール含有水溶液（ｐＨ９．９）を得た。このレスベラトロール含有溶液を圧力鍋（ゼロ活力なべ、アサヒ軽金属工業株式会社製）にて１２８℃、１２０分間加熱し、レスベラトロール重合化合物含有溶液を作製した（比較品１）。
【００６４】
次いで、比較品１から以下のように試作品１〜４を調製した。
比較品１を、４．０ｋｇの合成吸着剤ダイヤイオン（登録商標）ＨＰ−２０（三菱化学株式会社製）に全量供した。蒸留水２４Ｌで洗浄後、１００％エタノール１６Ｌで溶出させた。減圧乾燥にて溶媒を除去し、レスベラトロール重合化合物含有組成物（以下、誘導体含有組成物という。）２２ｇを得た（試作品１）。
また、比較品１に対し濃塩酸（和光純薬工業（株）社製）を適当量加え、ｐＨ試験紙にて確認しながら溶液をｐＨ７以下に調整、水に不溶な成分を濾過回収し、３０ｇを得た（試作品２）。
さらに、比較品１に対し濃塩酸を適当量加え、ｐＨ試験紙にて確認しながら溶液をｐＨ７以下に調整を行ったうえ、調整産物を３Ｌの蒸留水に懸濁、オイルバス（アズワン社製）を用い、誘導体含有組成物を８５℃に２時間維持することを２回繰り返し、誘導体組成物得た（試作品３）。
加えて、試作品１を３Ｌの蒸留水に懸濁し、オイルバスを用い、誘導体含有組成物を８５℃に２時間維持することを２回繰り返し、誘導体組成物得た（試作品４）。
【００６５】
得られた比較品１、試作品１〜４を２ｍｇ／ｍＬの濃度でメタノールに溶解させ、そのうち１０μＬをＨＰＬＣにより分析した。
【００６６】
ＨＰＬＣ分析は下記の条件にて行った。
カラム：ＣＡＰＣＥＬＬ  ＰＡＫ  ＵＧ８０カラム（４．６ｍｍＩ．Ｄ.×２５０ｍｍ、資生堂株式会社製）
移動相Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、和光純薬株式会社製）／Ｈ2Ｏ
移動相Ｂ：０．１％ＴＦＡ／アセトニトリル（和光純薬株式会社製）
勾配（容量％）：１００％Ａ／０％Ｂから０％Ａ／１００％Ｂまで３３分、０％Ａ／１００％Ｂを７分（すべて直線）
【００６７】
得られたクロマトグラムのうち、代表例として試作品４のチャートを図１に示す。得られた反応溶液をＨＰＬＣで分析したところ、レスべラトロールのピークとは異なる複数のピークが検出できたことから、生成された複数の化合物を含む組成物が取得できた。
【００６８】
次に、得られた反応物のうち、図１の（１）、（２）、（３）に示されるピークに含まれる化合物を分取ＨＰＬＣにより単離し、常法により乾燥したところ、（１）、（２）に示されるピークに含まれる化合物は淡褐色粉末状の物質、式（３）に示されるピークに含まれる化合物は褐色粉末状の物質となった。
【００６９】
次いで、前記３種類の化合物の分子量を、特開２０１１−２５１９１４号公報の実施例２に記載の方法に従って、高分解能Ｎｅｇａｔｉｖｅ−ＦＡＢ−ＭＳ（高速原子衝撃質量分析）にて測定し、核磁気共鳴（ＮＭＲ）測定を行った結果、（１）のピークに含まれる化合物は、前記式（１）で表される化合物（以下、ＵＨＡ４００２という。）、（２）のピークに含まれる化合物は前記式（２）で表される化合物（以下、ＵＨＡ４００３という。）（３）のピークに含まれる化合物は前記式（３）で表される化合物（以下ＵＨＡ４０２２という。）であることがわかった。
【００７０】
（試験例１：レスベラトロール重合化合物を含有する組成物中のフェノール濃度の測定）
実施例１にて作成した比較品１、及び試作品１〜４に含まれるフェノールの濃度を、ガスクロマトグラフ質量分析計を用いて測定した。比較品１、及び試作品１〜４をそれぞれ２０ｍｇ／ｍＬの濃度でメタノールに溶解させ、そのうち１ｍＬをガスクロマトグラフ質量分析計（ＪＭＳ−Ｑ１０００ＭＣ，日本電子株式会社製）により含有フェノール濃度を比較、分析した。
【００７１】
ガスクロマトグラフ質量分析は次の条件にて行った。使用機器は、Ｒｔｘ（登録商標）−２００ＭＳ（０．２５ｍｍｉｄ×３０ｍ、膜厚０．２５μｍ、ＲＥＳＴＥＫ社製）、ＳＰＭＥファイバー（５０／３０μｍ、ＤＶＢ／ＣＡＲ／ＰＤＭＳ、スペルコ社製）、ＧＣ−ＭＳは、ＪＭＳ−Ｑ１０００ＧＣ  Ｋ９（日本電子社製）を用いた。ＳＰＭＥファイバーの条件は、前加熱（６５℃、１分）、吸着時間（３０分）、脱着時間（１０分）、注入口温度（２５０℃）で行った。また、ＧＣの条件は、温度条件（５０℃で１０分→３２０℃まで１０℃／分→３２０℃で１０分）、スプリット（比：２０）、キャリアガス（ヘリウム）で行った。
フェノール（和光純薬社製）を用い検量線を作成し、各試作品及び比較品のフェノール濃度を測定し、固形分２０．０ｍｇ／ｍＬあたりのフェノール含有量を測定した。測定結果を表１に示す。
【００７２】
【表１】
2015124151.tif 000008
【００７３】
測定の結果、圧力鍋による生産直後で得られる比較品１と比較して各試作品はフェノール濃度が２０分の１以下、中でも、工程を２つ実施した試作品４は１５００分の１以下に減少した。したがって、試作品１〜４等の本発明品は従来品では混入が見過ごされていた発明品に含まれるフェノールが、極めて微小な量に減少させた製品であることが明らかとなった。
【００７４】
（実施例２：誘導体含有組成物の白色脂肪細胞の褐色様脂肪細胞分化誘導作用指標遺伝子発現の検証）
白色脂肪細胞の褐色様脂肪細胞分化誘導作用を評価するために、３Ｔ３−Ｌ１細胞（マウス由来前駆脂肪細胞）を用いて評価を行った。３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞は通常、分化誘導過程を経て、白色脂肪細胞へと分化、成熟する。しかし、褐色様脂肪細胞へと分化誘導されることで白色脂肪細胞ではほとんど観察されない細胞死誘導ＤＦＦＡ様エフェクターａ（Ｃｉｄｅａ）遺伝子や褐色様脂肪細胞特異的に発現するＣＩＴＥＤ１遺伝子の発現亢進、褐色脂肪細胞及び褐色様脂肪細胞にて発現が亢進する転写コアクチベーターＰＧＣ−１β、ミトコンドリアに発現するシトクロムｃオキシダーゼポリペプチド７Ａ１（Ｃｏｘ７ａ１）遺伝子の発現量の増加、及び脱共役タンパク質（ＵＣＰ１）遺伝子の発現亢進が観察されるようになる。加えて、非特許文献５（Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ． ２０１２ Ｆｅｂ  １；２６(３)：２７１−８１）に言及があるように、褐色様脂肪細胞への分化を促す因子の一つとしてＦＧＦ−２１が知られており、ＦＧＦ−２１の発現亢進がもたらすいくつかの効果の一つとして、ＰＧＣ−１αの発現亢進を促し、白色脂肪細胞が褐色用脂肪細胞へと誘導されると考えられている。そこで、ＦＧＦ−２１、ＰＧＣ−１α及びＰＧＣ−１β、ＣＩＴＥＤ１の各遺伝子の発現量を指標に、白色脂肪細胞の褐色様脂肪細胞への分化誘導を確認した。
【００７５】
試料にはＰＰＡＲγの合成アゴニストであるロシグリタゾン（Ｒｏｓｉｇｌｉｔａｚｏｎｅ）及び実施例１にて得られた試作品４の２種類を用いた。各試料をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ、和光純薬工業（株）社製）に０．２ｍＭ、２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解させて試験に使用した。
【００７６】
培養は、１０％ウシ胎児血清（Ｆｏｅｔａｌ  Ｂｏｖｉｎｅ  Ｓｅｒｕｍ：ＦＢＳ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ社製）、１％アンチバイオティック−アンチマイコティック（「Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ−Ａｎｔｉｍｙｃｏｔｉｃ」、ギブコ（ＧＩＢＣＯ）社製）を含む「Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ  ｍｅｄｉｕｍ」（ＤＭＥＭ、商品名、Ｓｉｇｍａ社製）を用いていった。試験に使用する脂肪細胞は定法に従って調製した。
【００７７】
試験は以下のように行った。細胞培養用１２ｗｅｌｌディッシュ（コーニング社製）に３Ｔ３−Ｌ１細胞を５×１０4ｃｅｌｌｓ／ｍＬの濃度で１ｍＬ播種して３７℃、５％ＣＯ2条件下で２４時間培養した。２４時間後、ＤＭＥＭ培地を組成物濃度が終濃度２０μｇ／ｍＬ、又はロシグリタゾンが終濃度１μＭとなるように調整したＤＭＥＭ培地に交換し培養を続け、１００％コンフルエントとし、さらに４８時間培養した。次に、培地を「ＡｄｉｐｏＩｎｄｕｃｅｒ  Ｒｅａｇｅｎｔ」（商品名、タカラバイオ（株）社製）付属のインスリン、デキサメタゾン、イソブチルメチルキサンチンをそれぞれ１％、０．５％、０．１％添加した分化用ＤＭＥＭ１ｍＬに、各試料を終濃度２０μｇ／ｍＬ、１μＭとなるように添加、交換し、３７℃、５％ＣＯ2条件下で４８時間分化誘導した。なお、溶媒であるＤＭＳＯのみを０．５％添加したものをコントロールとした。
【００７８】
培養終了後、細胞よりＲＮＡ抽出キット（商品名：ＴＲＩｚｏｌ（登録商標）、ｌｉｆｅ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製）を用いて全量ＲＮＡを抽出・精製した。得られたＲＮＡを２ステップリアルタイムＲＴ−ＰＣＲ用逆転写試薬（商品名：ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ（登録商標）ＲＴＭａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ、タカラバイオ（株）製）の取扱説明書に準じて逆転写反応を行った。
【００７９】
つまり５×（Ｐｒｉｍｅｓｃｒｉｐｔ  ＲＴ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ）２μＬ及び全量ＲＮＡ  ５００ｎｇを混合し、ＲＮａｓｅ  Ｆｒｅｅ  ｄＨ2Ｏで全量を１０μＬにした。ＰＣＲ用サーマルサイクラー（商品名：ＧｅｎｅＡｍｐ（登録商標）ＰＣＲ  Ｓｙｓｔｅｍ  ９７００、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍ社製）を使用して１サイクルが「３７℃×１５分→８５℃×５秒」であるプログラムにて逆転写反応を行った。逆転写反応液をリアルタイムＲＴ−ＰＣＲ用希釈試薬（商品名：ＥＡＳＹ  Ｄｉｌｕｔｉｏｎ、タカラバイオ（株）製）にて５倍希釈した希釈液をリアルタイムＲＴ−ＰＣＲ解析に使用した。
【００８０】
リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ解析は定法に従って行った。解析には、「ＥＣＯ  Ｒｅａｌｔｉｍｅ  ＲＴ―ＰＣＲ  ｓｙｓｔｅｍ」（商品名、イルミナ（株）製）を使用した。プライマーには、ＦＧＦ−２１フォワードプライマー（プライマーＩＤ：ＭＡ−１２６８８６−Ｆ）、ＦＧＦ−２１リバースプライマー（プライマーＩＤ：ＭＡ−１２６８８６−Ｒ）、ＰＧＣ−１αフォワードプライマー（プライマーＩＤ：ＭＡ−１１４５０９−Ｆ）、ＰＧＣ−１αリバースプライマー（プライマーＩＤ：ＭＡ−１１４５０９−Ｒ）、ＰＧＣ−１βフォワードプライマー（プライマーＩＤ：ＭＡ１２５５０５−Ｆ）、ＰＧＣ−１βリバースプライマー（プライマーＩＤ：ＭＡ１２５５０５−Ｒ）、ＣＩＴＥＤ１フォワードプライマー（プライマーＩＤ：ＭＡ１０４７４８−Ｆ）、ＣＩＴＥＤ１リバースプライマー（プライマーＩＤ：ＭＡ１０４７４８−Ｒ）を使用した。細胞内遺伝子の内部標準はβ−アクチンとし、そのプライマーとして、ＡＣＴＢフォワードプライマー（プライマーＩＤ：ＭＡ０５０３６８−Ｆ）及びＡＣＴＢリバースプライマー（プライマーＩＤ：ＭＡ０５０３６８−Ｒ）（前記８種のプライマーはいずれもタカラバイオ（株）製）を使用した。
【００８１】
反応にはリアルタイムＲＴ−ＰＣＲ試薬（商品名：ＳＹＢＲ（登録商標）Ｓｅｌｅｃｔ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ、ｌｉｆｅ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製）を使用した。反応液は４８ウェルＰＣＲプレート（イルミナ（株）製）中に、２×（ＳＹＢＲ  Ｓｅｌｅｃｔ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ）５μＬ、フォワードプライマー（５０μＭ）０．０８μＬ、リバースプライマー（５０μＭ）０．０８μＬ、逆転写反応液２μＬ及びｄＨ2Ｏ  ２．８４μＬ（総量１０μＬ）を混合して『５０℃×２分→９５℃×２分→「９５℃×１５秒→６０℃×１分」×４０サイクル→９５℃×１５秒→５５℃×１５秒→９５℃×１５秒』のプログラムにてＰＣＲ反応を行った。
【００８２】
得られた各細胞中のβ−アクチンとＦＧＦ−２１、ＰＧＣ−１α、ＰＧＣ−１β及びＣＩＴＥＤ１のＣｔ値（Ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ  Ｃｙｃｌｅ：一定の増幅量（閾値）に達するサイクル数）からＦＧＦ−２１、ＰＧＣ−１αＰＧＣ−１β、ＣＩＴＥＤ１の各遺伝子発現量の相対値を算出した。結果を図２に示した。
【００８３】
その結果、ロシグリタゾン添加時と同様に、褐色様脂肪細胞の誘導因子の一つであるＦＧＦ−２１遺伝子の発現量（左上図）、及びＦＧＦ−２１遺伝子の発現に伴いＰＧＣ−１α遺伝子の発現量（右上図）が誘導体含有組成物添加時に有意に増大していることが見いだされ、さらに、褐色様脂肪細胞のマーカー遺伝子であるＣｉｔｅｄ１の発現量（右下図）や、ＰＧＣ−１βの発現量（左下図）が有意に増大していることが明らかになった。ロシグリタゾンは合成アゴニストであり、その効果は誘導体含有組成物と比較すると強い。しかし、ロシグリタゾンを始めとするチアゾリジン系化合物はヒトに対して浮腫・心不全等の副作用が強く、安全性に問題のある化合物である。これに対し、誘導体含有組成物は遥かに簡便な方法で得られるメリットのある組成物であり、且つ、その前駆化合物であるレスベラトロールは自然界に広く分布し、安全性の極めて高い化合物である上、レスベラトロールを始めとするヒドロキシスチルベン類は重合物を含め自然界に広く分布していることから食経験も豊富な化合物である。故に、本発明品は安全性が高い上に、ロシグリタゾン同様極めて強い白色脂肪細胞の褐色様脂肪細胞への分化誘導作用を有する可能性が高い、有用な組成物であることが示された。
【００８４】
以上の実施例２の結果から、誘導体含有組成物を添加することで、細胞内のミトコンドリア量が有意に増加し、白色脂肪細胞からの褐色様脂肪細胞への分化が顕著に誘導されていることから、誘導体含有組成物は、褐色様脂肪細胞への分化誘導効果が優れていることが示された。
また、誘導体含有組成物は、製造コストがかかる合成アゴニストであるロシグリタゾンと比べて、ワンステップで、食品成分から安価に調製することが可能である点でも優れていることがわかる。
【００８５】
なお、誘導体含有組成物中に含まれるＵＨＡ４００２については、本発明者らはこれまでに抗癌、抗菌作用（特開２０１１−２５１９１４号公報）、サーチュイン発現促進作用（特開２０１２−２４６２４２号公報）、ＡＰＭＫ活性阻害活性（特開２０１３−１１２６５６号公報）、糖吸収抑制作用（特開２０１３−１３６５４７号公報）、ＡｐｏＢ分泌抑制作用（特願２０１２−２５６３６９号）、ＬＤＬコレステロール代謝促進作用（特願２０１２−２５６３７８号公報）を、ＵＨＡ４００３について、これまでに抗癌作用（特開２０１１−２５１９１４号公報）、レプチン抵抗性改善作用（特開２０１３−２８５６０）、成熟脂肪細胞肥大化抑制作用（特開２０１３−９５６９３号公報）、抗炎症作用（特開２０１３−１７７３４０号公報）、成熟脂肪細胞のＵＣＰ−２発現促進作用（特願２０１２−２１８６１９）等を有することを確認しているが、白色脂肪細胞より褐色様脂肪細胞への分化誘導に対する効果については、一般的にも未だ知られていない。
【００８６】
（実施例３：本発明の組成物を含有する医薬品）
実施例１と同様にして得られた誘導体含有組成物１ｇをエタノールに溶解し、得られた溶液を微結晶セルロースに吸着させて、減圧乾燥した。本発明品吸着体１０部、コーンスターチ２３部、乳糖１２部、カルボキシメチルセルロース８部、微結晶セルロース３２部、ポリビニルピロリドン４部、ステアリン酸マグネシウム３部、タルク８部を混合し打錠することで、本発明品を含む打錠剤を得た。
【００８７】
（実施例４：本発明の組成物を含有する医薬部外品）
実施例１と同様にして得られた誘導体含有組成物１．２ｇをエタノールに溶解させて得られたエタノール溶液１０ｍＬ、タウリン２０ｇ、ビタミンＢ１硝酸塩０．１２ｇ、安息香酸ナトリウム０．６ｇ、クエン酸４ｇ、砂糖６０ｇ及びポリビニルピロリドン１０ｇを精製水に溶解し、全量を１０００ｍＬにメスアップした。なお、ｐＨは、希塩酸を用いて３．２に調整した。得られた溶液１０００ｍＬのうち５０ｍＬをガラス瓶に充填し、８０℃で３０分間滅菌して、医薬部外品であるドリンク剤を得た。
【００８８】
（実施例５：本発明の組成物を含有する食品）
実施例１と同様にして得られた誘導体含有組成物１ｇをあらかじめ１００ｍＬのエタノールに溶解させ、これに砂糖５００ｇ、水飴４００ｇを混合溶解し、生クリーム１００ｇ、バター２０ｇ、練乳７０ｇ、乳化剤１．０ｇを混合した後、真空釜にて−５５０ｍｍＨｇ減圧させ、１１５℃の条件下で濃縮し、水分値３．０重量％のミルクハードキャンディを得た。このミルクハードキャンディは、菓子として食べ易いものであることはもちろん、前駆脂肪細胞より成熟脂肪細胞への分化を低減し、肥満の予防を期待した機能性食品としても利用できる。
【図１】
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【図２】
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