(57)【要約】【課題】容器の内面に細胞が接着することを抑制できるとともに、このような細胞に対する非接着性を安定的に維持できる細胞容器を提供する。【解決手段】細胞を含む細胞含有保存液が充填された細胞容器であって、前記細胞容器の内面には、微細突起が形成されており、前記微細突起の配置ピッチは、６０ｎｍ以上かつ前記細胞の平均径以下であり、前記微細突起の高さは、前記細胞の平均径×１／２以上であり、前記微細突起の頂部の短辺の長さは、前記細胞の平均径×１／４０以下であることを特徴とする細胞収納装置である。【選択図】図２
2015226497.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞を含む細胞含有保存液が充填された細胞容器であって、
前記細胞容器の内面には、微細突起が形成されており、
前記微細突起の配置ピッチは、６０ｎｍ以上かつ前記細胞の平均径以下であり、
前記微細突起の高さは、前記細胞の平均径×１／２以上であり、
前記微細突起の頂部の短辺の長さは、前記細胞の平均径×１／４０以下である
ことを特徴とする細胞容器。
【請求項２】
前記微細突起間の隙間に空気が存在する
ことを特徴とする請求項１に記載の細胞容器。
【請求項３】
前記細胞含有保存液は、注射用保存液である
ことを特徴とする請求項１または２に記載の細胞容器。
【請求項４】
細胞を含む細胞含有保存液が充填された細胞容器と、
前記細胞容器を収納する外装体と、
を備え、
前記細胞容器の内面には、微細突起が形成されており、
前記微細突起の配置ピッチは、６０ｎｍ以上かつ前記細胞の平均径以下であり、
前記微細突起の高さは、前記細胞の平均径×１／２以上であり、
前記微細突起の頂部の短辺の長さは、前記細胞の平均径×１／４０以下である
ことを特徴とする細胞収納装置。
【請求項５】
細胞を含む細胞含有保存液が充填された細胞容器と、前記細胞容器を収納する外装体と、を備え、前記細胞容器の内面には、微細突起が形成されており、前記微細突起の配置ピッチは、６０ｎｍ以上かつ前記細胞の平均径以下であり、前記微細突起の高さは、前記細胞の平均径×１／２以上であり、前記微細突起の頂部の短辺の長さは、前記細胞の平均径×１／４０以下である、という細胞収納装置に用いられる外装体であって、
前記細胞容器の一端側を押し挟むニップ部と、
前記細胞容器に対して前記ニップ部とは反対側に設けられた注射針挿入用孔と、
を備えたことを特徴とする外装体。
【請求項６】
細胞容器と外装体とを備えた細胞収納装置の使用方法であって、
細胞を含む細胞含有保存液が充填された前記細胞容器を準備する工程と、
前記細胞容器を前記外装体内に収納する工程と、
前記外装体の外方から注射針を前記細胞容器に突き刺して前記細胞含有保存液を吸引する工程と、
を備え、
前記細胞容器の内面には、微細突起が形成されており、
前記微細突起の配置ピッチは、６０ｎｍ以上かつ前記細胞の平均径以下であり、
前記微細突起の高さは、前記細胞の平均径×１／２以上であり、
前記微細突起の頂部の短辺の長さは、前記細胞の平均径×１／４０以下である
ことを特徴とする使用方法。
【請求項７】
前記細胞容器を冷却して前記細胞を凍結保存する工程
を更に備えたことを特徴とする請求項６に記載の使用方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞容器、細胞収納装置、細胞収納装置の外装体、細胞収納装置の使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、細胞の保存や輸送に用いる容器として、ポリスチレン（ＰＳ）製容器、ポリプロピレン（ＰＰ）製容器、またはガラス製容器が用いられている。しかしながら、これらの容器では、接着性の高い特殊な細胞においては、保存または輸送中に容器の内面に細胞が接着してしまうという問題がある。細胞が接着することを抑制できる容器は、現在存在しておらず、開発が求められている。
【０００３】
特許文献１には、プラスチック製のチューブの内面に物質が吸着することを抑制するために、チューブの内面に親水性ポリマーを含む親水性層を形成することが開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００９−１３７６５３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
容器の内面に細胞が接着することを抑制する方法として、容器の内面に親水性ポリマー（例えば、ＭＰＣポリマー）をコーティングする方法が考えられる。しかしながら、細胞の保存や輸送に用いる容器では、保存または輸送中に振動や衝撃を受けることが多いため、親水性ポリマーが容器の内面から剥がれ落ちる可能性がある。
【０００６】
本発明は、以上のような問題点に着目し、これを有効に解決すべく創案されたものである。本発明の目的は、容器の内面に細胞が接着することを抑制できるとともに、このような細胞に対する非接着性を安定的に維持できる細胞容器を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、細胞を含む細胞含有保存液が充填された細胞容器であって、前記細胞容器の内面には、微細突起が形成されており、前記微細突起の配置ピッチは、６０ｎｍ以上かつ前記細胞の平均径以下であり、前記微細突起の高さは、前記細胞の平均径×１／２以上であり、前記微細突起の頂部の短辺の長さは、前記細胞の平均径×１／４０以下であることを特徴とする細胞容器である。
【０００８】
好ましくは、前記微細突起間の隙間に空気が存在する。
【０００９】
具体的には、例えば、前記細胞含有保存液は、注射用保存液である。
【００１０】
また、本発明は、細胞を含む細胞含有保存液が充填された細胞容器と、前記細胞容器を収納する外装体と、を備え、前記細胞容器の内面には、微細突起が形成されており、前記微細突起の配置ピッチは、６０ｎｍ以上かつ前記細胞の平均径以下であり、前記微細突起の高さは、前記細胞の平均径×１／２以上であり、前記微細突起の頂部の短辺の長さは、前記細胞の平均径×１／４０以下であることを特徴とする細胞収納装置である。
【００１１】
また、本発明は、細胞を含む細胞含有保存液が充填された細胞容器と、前記細胞容器を収納する外装体と、を備え、前記細胞容器の内面には、微細突起が形成されており、前記微細突起の配置ピッチは、６０ｎｍ以上かつ前記細胞の平均径以下であり、前記微細突起の高さは、前記細胞の平均径×１／２以上であり、前記微細突起の頂部の短辺の長さは、前記細胞の平均径×１／４０以下である、という細胞収納装置に用いられる外装体であって、前記細胞容器の一端側を押し挟むニップ部と、前記細胞容器に対して前記ニップ部とは反対側に設けられた貫通孔と、を備えたことを特徴とする外装体である。
【００１２】
また、本発明は、細胞容器と外装体とを備えた細胞収納装置の使用方法であって、細胞を含む細胞含有保存液が充填された前記細胞容器を準備する工程と、前記細胞容器を前記外装体内に収納する工程と、前記外装体の外方から注射針を前記細胞容器に突き刺して前記細胞含有保存液を吸引する工程と、を備え、前記細胞容器の内面には、微細突起が形成されており、前記微細突起の配置ピッチは、６０ｎｍ以上かつ前記細胞の平均径以下であり、前記微細突起の高さは、前記細胞の平均径×１／２以上であり、前記微細突起の頂部の短辺の長さは、前記細胞の平均径×１／４０以下であることを特徴とする使用方法である。
【００１３】
好ましくは、前記細胞容器を冷却して前記細胞を凍結保存する工程を更に備える。
【発明の効果】
【００１４】
本発明によれば、容器の内面に細胞が接着することを抑制できるとともに、このような細胞に対する非接着性を安定的に維持できる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】図１は、本発明の第１の実施の形態による細胞容器を備えた細胞収納装置を示す斜視図である。
【図２】図２は、図１の細胞収納装置の側面視断面図である。
【図３】図３は、図１の細胞収納装置における細胞容器を示す平面図である。
【図４】図４は、図３の細胞容器のＡ−Ａ線切断断面図である。
【図５】図５は、図３の細胞容器の内面に形成された微細突起を拡大して示す側面視断面図である。
【図６】図６は、図５の微細突起の平面図である。
【図７】図７（ａ）〜図７（ｃ）は、図５の微細突起の頂面を拡大して示す平面図である。
【図８】図８は、図１の細胞収納装置における外装体を示す側面視断面図である。
【図９】図９は、図５の微細突起上に細胞が配置された状態を示す模式図である。
【図１０】図１０は、比較例による微細突起上に細胞が配置された状態を示す模式図である。
【図１１】図１１は、図１の細胞収納装置の使用方法を示すフローチャートである。
【図１２】図１２は、本発明の第２の実施の形態による細胞容器を示す側面視断面図である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下に、添付の図面を参照して、本発明の実施の形態を詳細に説明する。なお、本明細書に添付する図面においては、図示の理解のしやすさの便宜上、適宜縮尺および縦横の寸法比等を、実物のそれらから変更し誇張してある。
【００１７】
図１は、本発明の第１の実施の形態による細胞容器を備えた細胞収納装置を示す斜視図である。図２は、図１の細胞収納装置の側面視断面図である。
【００１８】
図１および図２に示すように、本実施の形態による細胞収納装置１０は、細胞を含む細胞含有保存液２０が充填された細胞容器１１と、細胞容器１１を収納する外装体１２と、を備えている。
【００１９】
まず、細胞容器１１の構造を説明する。図３は、細胞容器１１を示す平面図である。図４は、図３の細胞容器１１のＡ−Ａ線切断断面図である。
【００２０】
図３および図４に示すように、細胞容器１１は、長方形状のフィルム１８が２つ折りにされ、折り部（図３における右端部）以外の三方がヒートシールされて密封された、いわゆる三方シール袋の形状を有している。細胞容器１１の各辺の長さは、例えば１０ｍｍ〜１００ｍｍである。フィルム１８は、例えばポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリエチレン（ＰＥ）、ＰＥＴ／ＰＥ、ＰＥＴ／ナイロン（Ｎｙ）、Ｎｙ／ＰＥ等の合成樹脂からなり、フィルム１８の厚みは、例えば１５μｍ〜１００μｍである。細胞容器１１の内部には、例えば１ｍｌ〜５０ｍｌの細胞含有保存液２０が充填され得る。細胞含有保存液２０は、例えば、注射用保存液である。
【００２１】
このような細胞容器１１は、例えば、それ自体は公知の三方シール製袋充填包装機を使用することで、後述するフィルム１８から容易に製造され得る。
【００２２】
図４に示すように、細胞容器１１の内面には、複数の微細突起１７が形成されている。
【００２３】
図５は、細胞容器１１の内面に形成された微細突起１７を拡大して示す側面視断面図である。図６は、微細突起１７の平面図である。
【００２４】
図５および図６に示すように、微細突起１７の配置ピッチは、６０ｎｍ以上かつ細胞含有保存液２０に含まれる細胞の平均径以下であり、微細突起１７の高さは、前記細胞の平均径×１／２以上であり、微細突起１７の頂部の短辺の長さは、前記細胞の平均径×１／４０以下である。
【００２５】
ここで、細胞の平均径とは、ＪＩＳ  Ｚ８８２５の規定に準じる測定装置を用いてレーザー回折・散乱法により球相当径として測定された、細胞含有保存液２０に含まれる細胞の平均粒子径を意味する。細胞の平均径は、細胞の種類により異なるが、通常、１０μｍ〜１００μｍの範囲にある。細胞含有保存液２０に含まれる細胞としては、例えば、樹状細胞が挙げられる。
【００２６】
また、微細突起１７の配置ピッチとは、微細突起１７が形成された面の側からフィルム１８を平面視した際の微細突起１７の形状（図６のように見える状態）における、隣り合う２つの微細突起１７の中心間の距離Ｌをいう。ここで「中心」とは、微細突起１７が形成された面の側からフィルム１８を平面視した際の微細突起１７の形状（図６のように見える状態）が点対称である場合、当該形状の対称点を意味し、この場合、当該形状の重心と一致する。一方、微細突起１７が形成された面の側からフィルム１８を平面視した際の微細突起１７の形状（図６のように見える状態）が点対称では無い場合、当該形状の重心を意味する。
【００２７】
また、微細突起１７の高さとは、フィルム１８の裏面、すなわち微細突起１７が形成された面とは逆の面と平行に微細突起１７を側面視した際の微細突起１７の形状（図５のように見える状態）における、微細突起１７の底部と頂部との間の距離Ｈをいう。
【００２８】
また、微細突起１７の頂部の短辺の長さとは、微細突起１７が形成された面の側からフィルム１８を平面視した際に、微細突起１７の頂部が、図７（ａ）に示すように正方形状を有する場合、その短辺の長さをいい、長方形状を有する場合、その一辺の長さをいう。また、微細突起１７が形成された面の側からフィルム１８を平面視した際に、微細突起１７の頂部が、図７（ｂ）に示すように円形状を有する場合、その直径の長さをいい、楕円形状を有する場合、その短径の長さをいう。また、微細突起１７が形成された面の側からフィルム１８を平面視した際に、微細突起１７の頂部が、図７（ｃ）に示すように全体的かつ大局的に見た場合に長手方向、すなわち図７（ｃ）における上下方向と、短手方向、すなわち図７（ｃ）における左右方向と、を有する場合、その短手方向の長さをそのばらつきの全体的な傾向を反映し得ると期待される複数の箇所にて測定し、測定された短手方向の長さの平均値として特定される。具体的には、例えば、長手方向に沿った仮想線分上に位置する４つの中間点Ｐであって、当該仮想線分を５等分する中間点を特定し、特定された４つの中間点のそれぞれについて、各中間点での短手方向の長さを測定する。そして、合計４つの短手方向の長さを平均した値を、微細突起１７の頂部の短辺の長さとする。また、フィルム１８の裏面と平行に微細突起１７を側面視した際の微細突起１７の頂部が鋭く尖っている場合、頂部の短辺の長さをゼロとする。
【００２９】
なお、微細突起１７に関する各種寸法及び形状は、原子間力顕微鏡（Ａｔｏｍｉｃ  Ｆｏｒｃｅ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ；ＡＦＭ）または走査型電子顕微鏡（Ｓｃａｎｎｉｎｇ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ；ＳＥＭ）を用いて、特定することができる。ただし、微細突起１７の各寸法は、対象となるフィルム１８の全領域を調べてその平均値を算出して特定する必要はなく、実際的には、調査すべき対象、すなわち微細突起１７の配置ピッチ、高さ、頂面の短辺の長さ等の全体的な傾向を反映し得ると期待される面積を持つ一区画内において、調査すべき対象のばらつきの程度を考慮して適当と考えられる数を調べてその平均値を算出することによって特定することができる。例えば、３０ｍｍ×３０ｍｍの領域内に含まれる３０箇所を電子顕微鏡により測定して平均を算出することにより、微細突起１７に関する各寸法、例えば微細突起１７の配置ピッチ、高さ、頂面の短辺の長さ等を、特定することができる。
【００３０】
図示された例では、微細突起１７は、フィルム１８上において規則的なパターンで形成されているが、これに限定されず、フィルム１８上において不規則に形成されていてもよい。
【００３１】
微細突起１７をフィルム１８上に規則的なパターンで形成する方法の一例を説明する。まず、銅、アルミニウム、ステンレス鋼等の金属シートの表面に微細突起１７のネガ形に対応する凹凸形状をエッチングまたは切削加工により形成し、当該金属シートを加熱ロールの表面に巻き付ける。そして、互いに逆向きに回転する加熱ロールと圧ロールとの間を通るようにフィルム１８を搬送させながら、加熱ロールと圧ロールとを所定の圧力で接近させ、適度に溶かされたフィルム１８の表面に金属シート表面の凹凸形状を転写させる。これにより、フィルム１８上に微細突起１７が規則的なパターンで形成される。
【００３２】
次に、微細突起１７をフィルム１８上に不規則に形成する方法の一例を説明する。まず、ＰＥＴ、ＰＥ、ＰＥＴ／ＰＥ、ＰＥＴ／Ｎｙ、Ｎｙ／ＰＥ等の合成樹脂シートの表面に不規則な凹凸形状（梨地形状）をサンドブラストにより形成し、当該合成樹脂シートを回転可能な加熱ロールの表面に巻き付ける。そして、互いに逆向きに回転する加熱ロールと圧ロールとの間を通るようにフィルム１８を搬送させながら、加熱ロールと圧ロールとを所定の圧力で接近させ、適度に溶かされた合成樹脂シートの表面の凹凸形状をフィルム１８の表面に熱転写させる。すなわち、適度に溶かされた合成樹脂シートの表面の凹凸形状の頂部の樹脂をフィルム１８の表面に付着させる。これにより、フィルム１８上に微細突起１７が不規則に形成される。
【００３３】
次に、微細突起１７をフィルム１８上に不規則に形成する方法の別例を説明する。まず、表面に不規則な凹凸形状を有する紙（例えば上質紙）を回転可能な加熱ロールの表面に巻き付ける。そして、互いに逆向きに回転する加熱ロールと圧ロールとの間を通るようにフィルム１８を搬送させながら、加熱ロールと圧ロールとを所定の圧力で接近させ、適度に溶かされたフィルム１８の表面に紙の表面の凹凸形状を転写させる（賦形させる）。これにより、フィルム１８上に微細突起１７が不規則に形成される。ここで、紙の代わりに、分散メッキあるいはサンドブラストにより表面に不規則な凹凸形状が形成された金属シート、または、サンドブラストにより表面に不規則な凹凸形状が形成された合成樹脂シートを用いてもよい。
【００３４】
本実施の形態では、図９に示すように、微細突起１７の配置ピッチが６０ｎｍ以上かつ細胞２１の平均径以下であることで、細胞２１が微細突起１７の頂部にのみ接触し、微細突起１７の側面には接触しにくくなる。これにより、細胞２１の足場が小さくなり、細胞２１の接着が抑制される。
【００３５】
一方、図１０（ａ）に示す比較例のように、微細突起１１７の配置ピッチが細胞２１の平均径より大きい場合、細胞２１が微細突起１１７の側面に接触し、そこを足場として細胞２１の接着が生じる可能性がある。
【００３６】
また、図１０（ｂ）に示す比較例のように、微細突起１７の配置ピッチが６０ｎｍ以下の場合、微細突起１７が細胞にとって凹凸では無く平面として認識され、細胞の非接着性が得られないことが、Elisabetta Ada Cavalcanti-Adam, et al., "Cell Spreading and Focal Adhesion Dynamics Are Regulated by Spacing of Integrin Ligands", Biophysical Journal, Volume 9, April 2007, p.2964-2974（以下、非特許文献１という）に記載されている。ただし、非特許文献１は、微細突起により細胞の非接着性が得られることを確認するに留まっており、細胞含有保存液が充填された細胞容器に応用することまでは記載も示唆もされていない。本発明においては、細胞含有保存液が充填された細胞容器の内面に微細突起を形成し、当該微細突起の配置ピッチを６０ｎｍ以上かつ細胞２１の平均径以下とすることにより、容器の内面に細胞が接着することを抑制できるとともに、このような細胞に対する非接着性を安定的に維持できる、という非特許文献１からは予想外の効果を奏するのである。
【００３７】
また、図１０（ｃ）に示す比較例のように、微細突起１１７の高さが（細胞２１の平均径×１／２）未満の場合、たとえ微細突起１１７の配置ピッチが細胞２１の平均径以下であっても、細胞２１が微細突起１１７の側面に接触し、そこを足場として細胞２１の接着が生じる可能性がある。
【００３８】
したがって、本実施の形態では、微細突起１７の高さを細胞２１の平均径×１／２とすることで、細胞２１に対する非接着性を一層確実に保証している。
【００３９】
また、経験則上、図１０（ｄ）に示す比較例のように、微細突起１１７の頂部の短辺の長さが細胞２１の平均径×１／４０より大きい場合、細胞２１が微細突起１１７の頂部を足場として利用して接着する可能性がある。例えば、北森武彦、“ナノ構造を利用した細胞パターン制御”、[online]、［平成２６年５月７日検索］、インターネット(URL:http://park.itc.u-tokyo.ac.jp/kitamori/research/nanopattern/nanopattern.html)（以下、非特許文献２という）には、２５０ｎｍより大きい幅の微細突起には細胞が吸着できるが、２５０ｎｍ以下の幅の微細突起には細胞が吸着できないことが記載されている。この２５０ｎｍという値を、最も小さい平均径１０μｍの細胞に換算すると、細胞の平均径×１／４０という値になる。
【００４０】
したがって、本実施の形態では、微細突起１７の頂部の短辺の長さが細胞２１の平均径×１／４０以下とすることで、細胞２１に対する非接着性を一層確実に保証している。ここで、微細突起１７の頂部の短辺の長さが細胞の平均径×１／４０以下であれば、頂部の平面形状は特に限定されない。例えば、図７（ａ）に示すように正方形であって、その１辺が細胞の平均径×１／４０以下となっていてもよいし、図７（ｂ）に示すように円形であって、その直径が細胞の平均径×１／４０以下となっていてもよい。あるいは、図７（ｃ）に示すように円形部分の上端及び下端にそれぞれ四角形部分が接続された形状であって、短手方向（左右方向）の長さが細胞の平均径×１／４０となっていてもよい。
【００４１】
また、必ずしも必須ではないが、微細突起１７間の隙間には、空気が存在することが好ましい。この場合、微細突起１７間の隙間に細胞２１が入り込むことが空気により妨げられ、細胞２１に対する非接着性が一層向上する。
【００４２】
次に、外装体１２の構造を説明する。図８は、外装体１２を示す側面視断面図である。
【００４３】
図８に示すように、本実施の形態の外装体１２は、細胞容器１１の一端側を押し挟むニップ部１３ａ、１３ｂと、細胞容器１１に対してニップ部１３ａ、１３ｂとは反対側に設けられた注射針挿入用孔１４と、を有している。
【００４４】
図示された例では、外装体１２は、一対の部分外装体１２ａ、１２ｂを有している。
【００４５】
各部分外装体１２ａ、１２ｂは、それぞれ、四角形状の底板部と、底板部の縁部に沿って立設された四角筒状の側壁部と、を有している。一方の部分外装体１２ａの側壁部の頂部と他方の部分外装体１２ｂの側壁部の頂部とが向かい合うように当接されることで、外装体１２の内部に細胞容器１１を収容するための空間が形成されるようになっている。
【００４６】
図８に示すように、ニップ部１３ａ、１３ｂは、各部分外装体１２ａ、１２ｂの一端側、すなわち図８における左端側にそれぞれ設けられている。一対の部分外装体１２ａ、１２ｂの間に細胞容器１１が配置された状態で、一方の部分外装体１２ａの側壁部の頂部と他方の部分外装体１２ｂの側壁部の頂部とが向かい合うように当接される時、図２に示すように、細胞容器１１の一端側が一対のニップ部１３ａ、１３ｂによって上下に押し挟まれる。これにより、細胞容器１１の一端側に位置する細胞含有保存液２０は、細胞容器１１の他端側に押しやられ、細胞容器１１の他端側が膨らむようになっている。
【００４７】
細胞容器１１に対してニップ部１３ａ、１３ｂとは反対側に、注射針挿入用孔１４が設けられている。注射針挿入用孔１４により注射針の挿入位置および方向が規制されることで、細胞容器１１の他端側の膨らみに対して正確に注射針を挿入することができる。
【００４８】
なお、図示されていないが、注射針挿入用孔１４の周囲には外装体１２から外向きに突き出すようにストッパーが設けられていることが好ましい。この場合、外装体１２の外方から注射針挿入用孔１４に注射針が挿入される際に、ストッパーが注射器のシリンジに当接して、注射針の更なる挿入が規制され、注射針が細胞容器１１の裏面まで突き破ることを防止できる。
【００４９】
次に、図１１を参照して、本実施の形態による細胞収納装置１０の使用方法を説明する。
【００５０】
まず、細胞を含む細胞含有保存液２０が充填された細胞容器１１を準備する（ステップＳ１）。本実施の形態では、細胞容器１１の内面に前述のような微細突起１７が形成されているため、細胞含有保存液２０に含まれる細胞が細胞容器１１の内面に接着することが抑制される。
【００５１】
次に、必ずしも必須ではないが、細胞容器１１を冷却して細胞を凍結保存することが好ましい（ステップＳ２）。これにより、細胞の成長や増殖を停止させた状態で細胞を長期間保存することが可能となる。本実施の形態では、細胞容器１１自体の内面形状により細胞に対する非接着性を実現しているため、凍結保存の前後で細胞に対する非接着性が劣化することがない。その後、次工程の前に細胞を適宜解凍する。
【００５２】
次に、細胞容器１１を外装体１２内に収納する（ステップＳ３）。より詳しくは、図２に示すように、細胞容器１１の折り部側が注射針挿入用孔１４と向かい合うような向きで、一対の部分外装体１２ａ、１２ｂの間に細胞容器１１が配置される。そして、一方の部分外装体１２ａの側壁部の頂部と他方の部分外装体１２ｂの側壁部の頂部とが向かい合うように接近されて当接される。この時、細胞容器１１の一端側が一対のニップ部１３ａ、１３ｂによって上下に押し挟まれる。これにより、細胞容器１１の一端側に位置する細胞含有保存液２０は、細胞容器１１の他端側である折り部側に押しやられ、細胞容器１１の他端側である折り部側が膨らむ。
【００５３】
次に、外装体１２の外方から注射針を細胞容器１１に突き刺して細胞含有保存液２０を吸引する（ステップＳ４）。注射針挿入用孔１４により注射針の挿入位置および方向が規制されることで、細胞容器１１の他端側である折り部側の膨らみに対して正確に注射針を突き刺すことができる。これにより、細胞含有保存液２０が注射針により安定的に吸引され得る。
【００５４】
以上のような本実施の形態によれば、細胞容器１１の内面に前述のような微細突起１７が形成されているため、細胞含有保存液２０に含まれる細胞と細胞容器１１の内面との間の接触面積が顕著に低減され、細胞容器１１の内面に細胞が接着することが効果的に抑制される。
【００５５】
また、本実施の形態によれば、細胞容器１１の内面に非接着性の有機物等をコーティングするのではなく、細胞容器１１自体の内面形状により非接着性を実現しているため、保存中に受ける振動や衝撃によりコーティングされた有機物等が剥がれるという問題が無く、細胞に対する非接着性を安定的に維持できる。また、剥がれた有機物等により細胞含有保存液が汚染されるという問題も起こらず、安全性が高い。
【００５６】
なお、細胞容器１１のフィルム１８には、無延伸ナイロンが積層されていることが好ましい。この場合、細胞容器１１に注射針を突き刺した際に、注射針の周辺部におけるフィルム１８の引き裂きが抑制される。これにより、細胞含有保存液２０を注射針により吸引する際に、細胞容器１１内に空気が入ることが無く、細胞含有保存液２０を最後まで吸引することができる。
【００５７】
なお、本実施の形態における細胞容器１１は、図３および図４に示すように、長方形状のフィルム１８が２つ折りにされ、折り部、すなわち図３における右端部以外の三方がヒートシールされて密封された、いわゆる三方シール袋の形状を有していたが、このような態様に限定されない。
【００５８】
図１２は、第２の実施の形態による細胞容器３１を示す側面視断面図である。
【００５９】
図１２に示すように、第２の実施の形態による細胞容器３１は、図３および図４に示す第１の実施の形態と比べて、長方形状のパネル３４が複数組み合わされてなる箱形状を有している点で異なっている。パネル３４は、例えばＰＥＴ、ポリプロピレン（ＰＰ）、高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）、ポリカーボネイト（ＰＣ）、ポリスチレン（ＰＳ）等の合成樹脂からなり、パネル３４の厚みは、例えば０．５ｍｍ〜３ｍｍである。
【００６０】
図１２に示すように、細胞容器３１の内面には、複数の微細突起１７が形成されている。微細突起１７は、各パネル３４上において規則的なパターンで形成されていてもよいし、不規則に形成されていてもよい。このような微細突起１７が形成されたパネル３４は、例えば、切削加工、サンドブラスト、または分散メッキにより表面に凹凸形状が形成された金型を用いて射出成形により形成され得る。あるいは、パネル３４の表面を切削加工またはエッチングすることにより微細突起１７を直接形成してもよい。
【００６１】
細胞容器３１の一端部のパネル３４には、貫通孔３２が開けられている。貫通孔３２から細胞容器３１の内部に細胞含有保存液が充填された後、貫通孔３２が外方からシール３３が貼られて密封されるようになっている。
【００６２】
図１２において、図３および図４に示す第１の実施の形態と同一の部分には同一の符号を付して詳細な説明は省略する。
【００６３】
このような第２の実施の形態によっても、第１の実施の形態と同様の作用効果が得られる。
【００６４】
また、本実施の形態によれば、細胞容器３１の形状がパネル３４の剛性によって維持されるため、外装体１２を用いることなく、細胞容器３１に注射針を安定的に突き刺すことができる。また、注射針をシール３３の部分から突き刺す場合、注射針は貫通孔３２を通って細胞容器３１の内部に挿入されるため、注射針によってパネル３４が傷つくことがない。そのため、シール３３を交換すれば、細胞容器３１を再利用することが可能である。
【符号の説明】
【００６５】
１０    細胞収納装置
１１    細胞容器
１２    外装体
１２ａ  部分外装体
１２ｂ  部分外装体
１３ａ  ニップ部
１３ｂ  ニップ部
１４    注射針挿入用孔
１７    微細突起
１８    フィルム
２０    細胞含有保存液
２１    細胞
３１    細胞容器
３２    貫通孔
３３    シール
３４    パネル
１１７  比較例における微細突起
【図１】
2015226497.tif 000003
【図２】
2015226497.tif 000004
【図３】
2015226497.tif 000005
【図４】
2015226497.tif 000006
【図５】
2015226497.tif 000007
【図６】
2015226497.tif 000008
【図７】
2015226497.tif 000009
【図８】
2015226497.tif 000010
【図９】
2015226497.tif 000011
【図１０】
2015226497.tif 000012
【図１１】
2015226497.tif 000013
【図１２】
2015226497.tif 000014