(57)【要約】【課題】美白効果に優れた剤を提供する。【解決手段】メキシコの熱帯雨林を原産地とするサボテン科の常緑多肉植物である月下美人の抽出物を含有することを特徴とする美白剤である。月下美人の抽出物は、真皮線維芽細胞由来メラニン生成促進因子であるＮＲＧ１の産生を抑制し、メラニン生成関連因子の発現を抑制することにより、優れたメラニン生成抑制効果を有し、安全性においても問題なかった。従って、月下美人の抽出物を含有する美白剤は、美白目的のスキンケアに有効である。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
月下美人の抽出物を含有することを特徴とする美白剤。
【請求項２】
月下美人の抽出物を含有することを特徴とするｎｅｕｒｅｇｕｌｉｎ１（ＮＲＧ１）産生抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、シミ、ソバカスや皮膚色素沈着等の原因となるメラニンの生成を抑制することにより、美白作用を発揮できる美白剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
一般に、シミ、ソバカス、日焼け等にみられる皮膚の色素沈着は、ホルモンの異常や紫外線の刺激により、皮膚内に存在するメラニン色素生成細胞（メラノサイト）がメラニン色素を過剰に生成し、これが皮膚内に沈着することが原因と考えられている。このような色素沈着を防ぐ方法の一つに、メラニンの過剰な生成を抑制する方法が知られている。そして従来から、メラニンの過剰な生成を抑制する目的でアルブチン、ハイドロキノン、コウジ酸、トラネキサム酸及びこれらの誘導体等が用いられてきた。
【０００３】
ｎｅｕｒｅｇｕｌｉｎ１（ＮＲＧ１）は、中枢神経系において、神経細胞やグリア細胞の増殖、分化を調節している神経栄養因子であるが、近年、真皮の線維芽細胞において、その発現がみられること、又、メラノサイトに作用してメラニン生成を引き起こすことが分かってきた（非特許文献１及び２）。
【０００４】
月下美人は、メキシコの熱帯雨林を原産地とするサボテン科の常緑多肉植物であり、その抽出物は、化粧料（特許文献１）、老化防止用皮膚外用剤（特許文献２）等としての技術が開示されているが、美白効果については報告がなされていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開平５−３１０５２７
【特許文献２】特開２００３−３４２１５６
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉ．，１２３（Ｐｔ１８），３１０２−３１１１（２０１０）
【非特許文献２】Ｐｉｇｍｅｎｔ  Ｃｅｌｌ．Ｍｅｌａｎｏｍａ  Ｒｅｓ．，２５（４），４７７−４８１（２０１２）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、優れた効果を持つ美白剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
ＮＲＧ１は、真皮由来のメラニン生成促進因子であると考えられ、メラノサイトにおけるメラニンの過剰な生成を抑制するには、この真皮由来メラニン生成促進因子の制御も重要である。本発明者らは、鋭意検討した結果、月下美人の抽出物が真皮由来メラニン生成促進因子であるＮＲＧ１の産生を抑制することにより、優れたメラニン生成抑制効果を持つことを見出した。更に、月下美人の抽出物を含有する剤が美白効果に優れていることを見いだし、本発明を完成するに至った。
【０００９】
即ち、本発明は、以下の（１）、（２）からなる。
【００１０】
（１）月下美人の抽出物を含有することを特徴とする美白剤。
（２）月下美人の抽出物を含有することを特徴とするＮＲＧ１産生抑制剤。
【発明の効果】
【００１１】
本発明の月下美人の抽出物は、優れたメラニン生成抑制効果を有しており、美白の分野において貢献できるものである。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下に、本発明について詳細に述べる。
【００１３】
本発明における月下美人とは、サボテン科クジャクサボテンの原種（Ｅｐｉｐｈｙｌｌｕｍ  ｏｘｙｐｅｔａｌｕｍ  Ｈａｗ．）及びその近縁種であり、その園芸品種の全草や花の乾燥物等を利用することができる。
【００１４】
抽出部位は特に限定されず、全ての部位を用いることができ、好ましくは花が良い。抽出方法は特に限定されず、例えば、加熱抽出したものであっても良いし、常温抽出したものであっても良い。
【００１５】
抽出する溶媒としては、例えば、水、低級アルコール類（メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等）、液状多価アルコール（１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、アセトニトリル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、炭化水素類（ヘキサン、ヘプタン等）、エーテル類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエーテル等）等が挙げられる。好ましくは、水、低級アルコール等の極性溶媒が良い。これらの溶媒は、一種でも二種以上を混合して用いても良い。
【００１６】
上記抽出物は、抽出した溶液のまま用いても良く、必要に応じて、濃縮、希釈、濾過、活性炭等による脱色、脱臭、エタノール沈殿等の処理をして用いても良い。更には、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥等の処理を行い、乾燥物として用いても良い。
【００１７】
本発明における美白剤は、シミ及びソバカスを目立たなくすることを目的に用いる。
【００１８】
本発明の美白剤には、上記月下美人の抽出物をそのまま使用しても良く、効果を損なわない範囲内で、化粧品、医薬部外品又は医薬品等に用いられる成分である油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、金属石鹸、ｐＨ調整剤、防腐剤、香料、保湿剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、美白剤、キレート剤、賦形剤、皮膜剤等の成分を配合することもできる。
【００１９】
本発明の剤型としては、例えば、化粧水、クリーム、マッサージクリーム、乳液、ゲル剤、エアゾール剤、パック、洗浄剤、浴用剤、ファンデーション、打粉、口紅、軟膏、パップ剤、ペースト剤、プラスター剤、エッセンス等が挙げられる。
【００２０】
本発明に用いる月下美人の抽出物の配合量は、特に限定されないが、乾燥物として０．０００１〜３０重量％の範囲が好ましく、更に好ましくは０．００１〜１０重量％である。又、添加の方法については、予め加えておいても製造途中で添加しても良く、作業性を考えて適宜選択すれば良い。
【００２１】
次に本発明を詳細に説明するため、実施例として本発明に用いる抽出物の製造例、処方例及び実験例を挙げるが、本発明はこれに限定されるものではない。実施例に示す配合量の％とは重量％を示す。
【実施例１】
【００２２】
製造例１  月下美人抽出物１
月下美人の花の乾燥物１００ｇに精製水３Ｌを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した。濾過した後、濾液を減圧濃縮し、更に凍結乾燥して月下美人抽出物４８ｇを得た。
【００２３】
製造例２  月下美人抽出物２
月下美人の茎節の乾燥物１００ｇに精製水３Ｌを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した。濾過した後、濾液を減圧濃縮し、更に凍結乾燥して月下美人抽出物１１ｇを得た。
【００２４】
製造例３  月下美人抽出物３
月下美人の葉の乾燥物１００ｇに精製水３Ｌを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した。濾過した後、濾液を減圧濃縮し、更に凍結乾燥して月下美人抽出物１６ｇを得た。
【００２５】
製造例４  月下美人抽出物４
月下美人の地上部全草の乾燥物１００ｇに３０％エタノール水溶液１Ｌを加え、室温で１週間抽出した。濾過した後、濾液を減圧濃縮し、更に凍結乾燥して月下美人抽出物９ｇを得た。
【実施例２】
【００２６】
次に、本発明に係る実施例の処方を示す。
【００２７】
処方例１  クリーム
処方                                                            配合量（％）
１．月下美人抽出物１（製造例１）                                ０．１
２．スクワラン                                                  ５．５
３．オリーブ油                                                  ３．０
４．ステアリン酸                                                ２．０
５．ミツロウ                                                    ２．０
６．ミリスチン酸オクチルドデシル                                ３．５
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）            ３．０
８．ベヘニルアルコール                                          １．５
９．モノステアリン酸グリセリン                                  ２．５
１０．香料                                                        ０．１
１１．パラオキシ安息香酸メチル                                    ０．２５
１２．１，３‐ブチレングリコール                                  ８．５
１３．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分２〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１１〜１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、更に３０℃まで冷却後、製品とする。
【００２８】
比較例１  従来のクリーム１
処方例１において、月下美人抽出物１をシラカバ抽出物（一丸ファルコス）に置き換えたものを従来のクリーム１とした。  
【００２９】
比較例２  従来のクリーム２
処方例１において、月下美人抽出物１を配合しないものを従来のクリーム２とした。  
【００３０】
処方例２  化粧水
処方                                                            配合量（％）
１．月下美人抽出物２（製造例２）                                ０．００１
２．１，３‐ブチレングリコール                                  ８．０
３．グリセリン                                                  ２．０
４．キサンタンガム                                              ０．０２
５．クエン酸                                                    ０．０１
６．クエン酸ナトリウム                                          ０．１
７．エタノール                                                  ５．０
８．パラオキシ安息香酸メチル                                    ０．１
９．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（４０Ｅ．Ｏ．）              ０．１
１０．香料                                                        ０．１
１１．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分１〜６及び１１と、成分７〜１０をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合し濾過して製品とする。
【００３１】
処方例３  乳液
処方                                                            配合量（％）
１．月下美人抽出物３（製造例３）                                ０．０１
２．スクワラン                                                  ５．０
３．オリーブ油                                                  ５．０
４．ホホバ油                                                    ５．０
５．セタノール                                                  １．５
６．モノステアリン酸グリセリン                                  ２．０
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）            ３．０
８．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート（２０Ｅ．Ｏ．）  ２．０
９．香料                                                        ０．１
１０．プロピレングリコール                                        １．０
１１．グリセリン                                                  ２．０
１２．パラオキシ安息香酸メチル                                    ０．２
１３．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分２〜８を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１０〜１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分９を加え、更に３０℃まで冷却後、製品とする。
【００３２】
処方例４  パック
処方                                                            配合量（％）
１．月下美人抽出物４（製造例４）                                ０．００１
２．ポリビニルアルコール                                      １２．０
３．エタノール                                                  ５．０
４．１，３‐ブチレングリコール                                  ８．０
５．パラオキシ安息香酸メチル                                    ０．２
６．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２０Ｅ．Ｏ．）              ０．５
７．クエン酸                                                    ０．１
８．クエン酸ナトリウム                                          ０．３
９．香料                                                        ０．１
１０．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分１〜１０を均一に溶解し製品とする。
【００３３】
処方例５  ファンデーション
処方                                                            配合量（％）
１．月下美人抽出物１（製造例１）                                ０．００１
２．ステアリン酸                                                ２．４
３．ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート（２０Ｅ．Ｏ．）１．０
４．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）            ２．０
５．セタノール                                                  １．０
６．液状ラノリン                                                ２．０
７．流動パラフィン                                              ３．０
８．ミリスチン酸イソプロピル                                    ６．５
９．カルボキシメチルセルロースナトリウム                        ０．１
１０．ベントナイト                                                ０．５
１１．プロピレングリコール                                        ４．０
１２．トリエタノールアミン                                        １．１
１３．パラオキシ安息香酸メチル                                    ０．２
１４．二酸化チタン                                                ８．０
１５．タルク                                                      ４．０
１６．ベンガラ                                                    １．０
１７．黄酸化鉄                                                    ２．０
１８．香料                                                        ０．１
１９．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分２〜８を加熱溶解し、８０℃に保ち油相とする。成分１９に成分９をよく膨潤させ、続いて、成分１及び１０〜１３を加えて均一に混合する。これに粉砕機で粉砕混合した成分１４〜１７を加え、ホモミキサーで撹拌し７５℃に保ち水相とする。この油相に水相をかき混ぜながら加え、乳化する。その後かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１８を加え、更に３０℃まで冷却後、製品とする。
【００３４】
処方例６  浴用剤
処方                                                            配合量（％）
１．月下美人抽出物２（製造例２）                                ０．００１
２．炭酸水素ナトリウム                                        ５０．０
３．黄色２０２号（１）                                          ０．０５
４．香料                                                        ０．１
５．硫酸ナトリウムにて全量を１００とする
［製造方法］成分１〜５を均一に混合し製品とする。
【００３５】
処方例７  ゲル剤
処方                                                            配合量（％）
１．月下美人抽出物３（製造例３）                                ０．００１
２．エタノール                                                  ５．０
３．パラオキシ安息香酸メチル                                    ０．１
４．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（６０Ｅ．Ｏ．）              ０．１
５．香料                                                        ０．１
６．１，３‐ブチレングリコール                                  ５．０
７．グリセリン                                                  ５．０
８．キサンタンガム                                              ０．１
９．カルボキシビニルポリマー                                    ０．２
１０．水酸化カリウム                                              ０．２
１１．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分２〜５と、成分１及び６〜１１をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合して製品とする。
【００３６】
処方例８  軟膏
処方                                                            配合量（％）
１．月下美人抽出物４（製造例４）                                １．０
２．ポリオキシエチレンセチルエーテル（３０Ｅ．Ｏ．）            ２．０
３．モノステアリン酸グリセリン                                １０．０
４．流動パラフィン                                              ５．０
５．セタノール                                                  ６．０
６．パラオキシ安息香酸メチル                                    ０．１
７．プロピレングリコール                                      １０．０
８．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分２〜５を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び６〜８を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら３０℃まで冷却後、製品とする。
【実施例３】
【００３７】
次に、本発明の効果を詳細に説明するため、実験例を挙げる。
【００３８】
実験例１  ＮＲＧ１のメラニン生成促進効果
メラニン生成においては、チロシナーゼ（ＴＹＲ）、チロシナーゼ関連タンパク質１（ＴＲＰ１）及びチロシナーゼ関連タンパク質２（ＴＲＰ２）が主要な酵素として関与し、これら酵素の発現制御には小眼球症関連転写因子（ＭＩＴＦ）が重要な役割を担っている。そこで、これらメラニン生成関連因子の発現を指標にＮＲＧ１のメラニン生成に及ぼす影響を検討した。即ち、コンフルエントな状態のヒト正常メラノサイト（ＮＨＥＭ）に最終濃度が１００及び２００ｎｇ／ｍＬになるように調製したＮＲＧ１（ＰＲＯＳＰＥＣ）を添加して２４時間培養後、ＲＮＡｉｓｏ  ｐｌｕｓ（ＴＡＫＡＲＡ）を用いて総ＲＮＡの抽出を行った。総ＲＮＡを基に、リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ法により、ＴＹＲ、ＴＲＰ１、ＴＲＰ２及びＭＩＴＦ  ｍＲＮＡ発現量の測定を行った。リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ法にはＳＹＢＲ  Ｓｅｌｅｃｔ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ（ライフテクノロジーズ）を用い、ＴＹＲ、ＴＲＰ１、ＴＲＰ２及びＭＩＴＦ用のプライマーは以下に示すものを用いた。内部標準として、β−アクチンを用いた。リアルタイムＲＴ−ＰＣＲの操作は定められた方法に従い、ＴＹＲ、ＴＲＰ１、ＴＲＰ２及びＭＩＴＦ  ｍＲＮＡの発現量を内部標準であるβ−アクチン  ｍＲＮＡの発現量に対する割合として求めた。ＴＹＲ、ＴＲＰ１、ＴＲＰ２及びＭＩＴＦの発現率は、未添加コントロールのｍＲＮＡ発現量に対するＮＲＧ１添加群のｍＲＮＡ発現量の比率として算出した。
【００３９】
ＴＹＲ用のプライマーセット
ＴＧＣＧＧＴＧＧＧＡＡＣＡＡＧＡＡＡＴＣ（配列番号１）
ＧＡＡＧＡＡＴＧＡＴＧＣＴＧＧＧＣＴＧＡＧＴ（配列番号２）
ＴＲＰ１用のプライマーセット
ＣＧＡＡＡＣＡＣＡＧＴＧＧＡＡＧＧＴＴＡＣＡＧＴ（配列番号３）
ＣＴＣＣＴＣＡＧＣＣＡＴＴＣＡＴＣＡＡＡＧＡＣＴ（配列番号４）
ＴＲＰ２用のプライマーセット
ＧＧＡＡＴＧＣＴＴＴＧＧＡＡＧＧＧＴＴＴＧ（配列番号５）
ＡＡＡＧＣＧＴＴＴＧＴＣＣＣＧＴＴＣＡＧ（配列番号６）
ＭＩＴＦ用のプライマーセット
ＧＡＧＧＣＡＧＴＧＧＴＴＴＧＧＧＣＴＴ（配列番号７）
ＡＡＴＴＣＴＧＣＡＣＣＣＧＧＧＡＡＴＣ（配列番号８）
β―アクチン用のプライマーセット
ＣＡＣＴＣＴＴＣＣＡＧＣＣＴＴＣＣＴＴＣＣ（配列番号９）
ＧＴＧＴＴＧＧＣＧＴＡＣＡＧＧＴＣＴＴＴＧ（配列番号１０）
【００４０】
実験結果を表１に示した。その結果、ＮＲＧ１は、ＴＹＲ、ＴＲＰ１、ＴＲＰ２及びＭＩＴＦの発現を促進した。従って、真皮線維芽細胞において生成されたＮＲＧ1は、メラノサイトにおけるメラニン生成関連因子の発現を高め、メラニン生成を促進することが示された。
【００４１】
【表１】
2015205833.tif 000002
【００４２】
実験例２  ＮＲＧ１生成抑制効果
コンフルエントな状態のヒト皮膚線維芽細胞（ＮＢ１ＲＧＢ）に、最終濃度が５０、１００及び２００μｇ／ｍＬになるように調製した月下美人抽出物１〜４（製造例１〜４）及びメラニン生成抑制効果を有することが知られているシラカバ抽出物（比較例３、一丸ファルコス）を添加した。２４時間培養後、ＲＮＡｉｓｏ  ｐｌｕｓ（ＴＡＫＡＲＡ）を用いて総ＲＮＡの抽出を行った。総ＲＮＡを基に、リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ法により、ＮＲＧ１  ｍＲＮＡ発現量の測定を行った。リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ法にはＳＹＢＲ  Ｓｅｌｅｃｔ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ（ライフテクノロジーズ）を用い、ＮＲＧ１用のプライマーは以下に示すものを用いた。内部標準として、β−アクチンを用いた。リアルタイムＲＴ−ＰＣＲの操作は定められた方法に従い、ＮＲＧ１  ｍＲＮＡの発現量を内部標準であるβ−アクチン  ｍＲＮＡの発現量に対する割合として求めた。ＮＲＧ１の発現率は、未添加コントロールのＮＲＧ１  ｍＲＮＡの発現量に対する試料添加群のＮＲＧ１  ｍＲＮＡの発現量の比率として算出した。
【００４３】
ＮＲＧ１用のプライマーセット
ＧＣＣＣＡＴＣＡＣＴＣＣＡＣＴＡＣＴＧＴＣＡ（配列番号１１）
ＧＣＴＴＴＣＡＧＴＧＴＧＴＣＣＧＴＴＧＣＴ（配列番号１２）
【００４４】
実験結果を表２に示した。その結果、比較例３のシラカバ抽出物は、ＮＲＧ１の発現に影響を及ぼさなかった。一方、本発明の月下美人抽出物は、濃度依存的にＮＲＧ１の発現を抑制し、真皮由来因子によるメラニン生成に対し、優れた抑制効果を示した。
【００４５】
【表２】
2015205833.tif 000003
【００４６】
実験例３  使用試験
処方例１のクリーム、比較例１の従来のクリーム１及び比較例２の従来のクリーム２を用いて、各々女性３０人（２０〜４５歳）を対象に３カ月間の使用試験を行った。使用後、シミ及びソバカスの改善についてのアンケート調査を行って、美白効果を判定した。アンケートの評価基準は、有効なものを「優」、やや有効なものを「良」、わずかに有効なものを「可」、無効なものを「不可」として評価した。
【００４７】
これらの結果を表３に示した。処方例１の月下美人の抽出物を含有するクリームは優れた美白効果を示した。尚、試験期間中皮膚トラブルは一人もなく、安全性においても問題なかった。
【００４８】
【表３】
2015205833.tif 000004
【００４９】
処方例２の化粧水、処方例３の乳液、処方例４のパック、処方例５のファンデーション、処方例６の浴用剤、処方例７のゲル剤、処方例８の軟膏の使用試験を行ったところ、いずれも安全で優れた美白効果を示した。
【産業上の利用可能性】
【００５０】
以上のことから、本発明の月下美人の抽出物は、真皮線維芽細胞由来のメラニン生成促進因子であるＮＲＧ1の生成を抑えることにより、優れたメラニン生成抑制効果を有し、安全性にも優れていた。従って、本発明の月下美人の抽出物を含有する美白剤は、美白目的のスキンケアに有効である。
【配列表】
2015205833000001.app