(57)【要約】【課題】簡易な構成で蓋機能を持つ生化学分析用フィルタホルダ及び生化学分析キット、並びにこのフィルタホルダを用いた分析方法を提供すること。【解決手段】試薬が収容された試薬カートリッジ１００におけるウェル部２４の開口端２４ａに搭載可能な円錐形の外面を有する円錐部１５と、円錐部１５と開口端２４ａとが接しているときに試薬カートリッジ１００との間に隙間を有するように円錐部１５から試薬カートリッジ１００に向かって突出した転倒防止部１６と、を備えた。【選択図】図１２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
生化学分析用のフィルタを内部に備えた生化学分析用フィルタホルダであって、
試薬が収容された試薬カートリッジにおけるウェル部の開口端に搭載可能な円錐形の外面を有する円錐部と、
前記円錐部と前記開口端とが接しているときに前記試薬カートリッジとの間に隙間を有するように前記円錐部から前記試薬カートリッジに向かって突出した転倒防止部と、
を備えた生化学分析用フィルタホルダ。
【請求項２】
請求項１に記載の生化学分析用フィルタホルダであって、
前記円錐部は、前記円錐部の中心線に直交する平面に対する前記円錐部の側面の傾斜角度が１０°以上８０°以下である生化学分析用フィルタホルダ。
【請求項３】
請求項１に記載の生化学分析用フィルタホルダであって、
生化学自動分析装置により前記生化学分析用フィルタホルダを搬送するために前記生化学自動分析装置の装置担体移動部が接触可能な移動部をさらに有する生化学分析用フィルタホルダ。
【請求項４】
請求項１に記載の生化学分析用フィルタホルダであって、
前記フィルタが核酸吸着フィルタである生化学分析用フィルタホルダ。
【請求項５】
請求項１から４のいずれか一項に記載の生化学分析用フィルタホルダと、
前記試薬カートリッジと、
前記試薬カートリッジ内に収容された分析試薬と、
を備えた生化学分析キット。
【請求項６】
請求項５に記載の生化学分析キットを用いた生化学分析方法であって、
前記ウェル部の開口端に前記円錐部を密着させて前記ウェル部の内容物を加熱する工程を有する生化学分析方法。
【請求項７】
請求項６に記載の生化学分析方法であって、
前記フィルタは核酸吸着フィルタであり、
前記内容物を加熱する工程において、生体試料から核酸を溶出させ、
前記生体試料から前記核酸を溶出させた後に前記核酸を含む溶液を前記フィルタに供給して前記核酸を前記フィルタに吸着させる工程と、
前記フィルタに吸着された前記核酸を洗浄後に溶出して回収する工程と、
を有する生化学分析方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生化学分析用フィルタホルダ、生化学分析キット、及び生化学分析方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年の遺伝子検査技術の発達により、たとえば患者から採取した生体試料などの被検体から核酸を抽出して一塩基多型のような遺伝子の差異を検出することで、医薬品に対する感受性をあらかじめ予測できる可能性が示唆されている。
生体試料には様々な形態がある。遺伝子検査の検体として用いられる生体試料として、全血や口腔粘膜細胞、がん組織が挙げられる。これらの生体試料は、ホルマリンで固定しパラフィンで固め（ＦＦＰＥ）薄くスライスしたＦＦＰＥ切片とされて検査に供される。
ＦＦＰＥ切片は、ホルマリンで脱水された後、パラフィンで固定されているため、後の反応を円滑に行うためにホルマリンによって形成された架橋を破壊する処理（脱架橋）及びパラフィンの除去が必要となる。
このような生体試料の分析に関連する技術として、特許文献１，２に開示された方法及びキットが知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特表２０１３−５３０６９７号公報
【特許文献２】特許第４９１１２６４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
特許文献１に記載の方法は、特殊な溶媒を用いてパラフィンを除去し、熱をかけて脱架橋を行っており、熱をかけるためサンプルの飛散や蒸発防止を目的として、反応容器に蓋をすることが一般的である。しかし、蓋をする行為は人が手で行えば簡便な方法だが、自動化して装置が蓋を開け閉めする行為を実行しようとすると非常に難易度が高い。
特許文献２に記載のキットは、カートリッジを用意しそこへ試薬や核酸抽出用のフィルタをすべて搭載しているが、蓋機能を有していない。
【０００５】
本発明は、上述した事情に鑑みてなされたものであって、その目的は、簡易な構成で蓋機能を持つ生化学分析用フィルタホルダ及び生化学分析キット、並びにこのフィルタホルダを用いた分析方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の一態様は、生化学分析用のフィルタを内部に備えた生化学分析用フィルタホルダであって、試薬が収容された試薬カートリッジにおけるウェル部の開口端に搭載可能な円錐形の外面を有する円錐部と、前記円錐部と前記開口端とが接しているときに前記試薬カートリッジとの間に隙間を有するように前記円錐部から前記試薬カートリッジに向かって突出した転倒防止部と、を備えた生化学分析用フィルタホルダである。
【０００７】
前記円錐部は、前記円錐部の中心線に直交する平面に対する前記円錐部の側面の傾斜角度が１０°以上８０°以下であってもよい。
【０００８】
上記態様の生化学分析用フィルタホルダは、生化学自動分析装置により前記生化学分析用フィルタホルダを搬送するために前記生化学自動分析装置の装置担体移動部が接触可能な移動部をさらに有していてもよい。
【０００９】
前記フィルタが核酸吸着フィルタであってもよい。
【００１０】
本発明の別の態様は、上記態様の生化学分析用フィルタホルダと、前記試薬カートリッジと、前記試薬カートリッジ内に収容された分析試薬と、を備えた生化学分析キットである。
【００１１】
本発明のさらに別の態様は、上記態様の生化学分析キットを用いた生化学分析方法であって、前記ウェル部の開口端に前記円錐部を密着させて前記ウェル部の内容物を加熱する工程を有する生化学分析方法である。
【００１２】
上記態様の生化学分析方法において、前記フィルタは核酸吸着フィルタであり、前記内容物を加熱する工程において、生体試料から核酸を溶出させ、前記生体試料から前記核酸を溶出させた後に前記核酸を含む溶液を前記フィルタに供給して前記核酸を前記フィルタに吸着させる工程と、前記フィルタに吸着された前記核酸を洗浄後に溶出して回収する工程と、を有していてもよい。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、簡易な構成で蓋機能を提供できる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】本発明の一実施形態の生化学分析キットを生化学自動分析装置に搭載した状態を示す模式的な斜視図。
【図２】同実施形態のフィルタホルダを搭載した試薬カートリッジの概略図。
【図３】同フィルタホルダの正面図。
【図４】同フィルタホルダの左側面図。
【図５】同フィルタホルダの背面図。
【図６】同フィルタホルダの右側面図。
【図７】同フィルタホルダの平面図。
【図８】同フィルタホルダの底面図。
【図９】同フィルタホルダの断面図。
【図１０】同フィルタホルダの内部構造を一部断面で示す斜視図。
【図１１】同フィルタホルダの作用を説明するための図。
【図１２】図１１の拡大図。
【図１３】図１１の拡大図。
【図１４】同フィルタホルダの作用を説明するための図。
【図１５】同フィルタホルダの作用を説明するための図。
【図１６】同フィルタホルダの作用を説明するための図。
【図１７】同フィルタホルダの作用を説明するための図。
【図１８】同フィルタホルダを備えた生化学分析キットを用いた核酸抽出の方法を示すフローチャート。
【図１９】本発明の実施例における結果を示すグラフ。
【図２０】本発明の実施例における結果を示すグラフ。
【図２１】本発明の実施例における結果を示すグラフ。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明の一実施形態の生化学分析用フィルタホルダ及び生化学分析キットについて説明する。
図１は、本実施形態の生化学分析キット１０１を生化学自動分析装置に搭載した状態を示す模式的な斜視図である。図２は、フィルタホルダ１を搭載した試薬カートリッジ１００の概略図である。
【００１６】
図１に示すように、本実施形態の生化学分析キット１０１は、生化学分析用のフィルタホルダ１と、試薬カートリッジ１００と、分析試薬とを有する。生化学分析キット１０１は、装置担体移動部３１と加圧部３４と液体分注部３５とを備えた生化学自動分析装置３０に取り付けて使用されるキットである。
【００１７】
図２は、フィルタホルダ１の保存の形態を示す概略図である。図２に示すように、フィルタホルダ１は、試薬カートリッジ１００の保存部２１へ保存されている。フィルタホルタ１の使用時に、必要に応じて、保存部２１から、回収部２２、廃液部２３、ウェル部２４へフィルタホルダ１が移動される。
【００１８】
図３から図８までは、本実施形態のフィルタホルダ１の６面図である。すなわち、図３はフィルタホルダ１の正面図、図４はフィルタホルダ１の左側面図、図５はフィルタホルダ１の背面図、図６はフィルタホルダ１の右側面図、図７は、フィルタホルダ１の平面図、図８はフィルタホルダ１の底面図である。
図９は、フィルタホルダ１の断面図である。図１０は、フィルタホルダ１の内部構造を一部断面で示す斜視図である。
【００１９】
図３から図１０に示すように、フィルタホルダ１は、カートリッジ設置部１１と、移動部１２と、フィルターホールド部１３と、呼び込み部１４と、円錐部１５と、転倒防止部１６と、排出部１７と、核酸吸着フィルタ１８と、サポートフィルタ１９と、フィルタ押さえ２０とを有する。
【００２０】
図９に示すカートリッジ設置部１１は、試薬カートリッジ１００にフィルタホルダ１を設置可能とするための段部である。カートリッジ設置部１１は、廃液部２３、回収部２２、及び保存部２１に対して係合可能である。
【００２１】
移動部１２は、装置担体移動部３１によりフィルタホルダ１を移動可能にするために、フランジ状の形状を有している。移動部１２は、フィルタホルダ１において溶液を供給する開口の周縁部に配置されている。本実施形態では、装置担体移動部３１を備えた生化学自動分析装置３０は、装置担体移動部３１を移動部１２に引掛けるようにしてフィルタホルダ１を吊り下げて移動させることができる。
【００２２】
フィルターホールド部１３は、核酸吸着フィルタ１８及びサポートフィルタ１９を重ねて載置することが可能な環状の載置面である。フィルターホールド部１３には、核酸吸着フィルタ１８とサポートフィルタ１９とが重ねて取り付けられている。
【００２３】
呼び込み部１４は、廃液部２３、回収部２２、保存部２１への位置あわせを容易にするために湾曲した外面を有する。
【００２４】
円錐部１５は、ウェル部２４にフィルタホルダ１を位置あわせするために、円錐状の外面を有している。円錐部１５のうち呼び込み部１４側は、円錐部１５のうち排出部１７側よりも外径が大きい。すなわち、円錐部１５は、呼び込み部１４側から排出部１７側へ行くに従って外径が漸次小さくなる円錐状をなしている。円錐部１５のうち呼び込み部１４側の外径はウェル部２４の開口径よりも大きい。円錐部１５の側面部分は、円錐部１５の中心線に対して直交する平面に対する傾斜角度が１０°以上８０°以下の範囲にある。円錐部１５の中心線に対して直交する平面に対する傾斜角度が１０°以上８０°以下の範囲にあることによって、フィルタホルダ１の自重によってウェル部２４に対してフィルタホルダ１を好適な位置まで案内できる。
また、円錐部１５の内部には、分析対象となる試料や試薬が通る流路が形成されている。
【００２５】
転倒防止部１６は円錐部１５に配置されている。転倒防止部１６は、ウェル部２４に対して正立している場合は試薬カートリッジ１００に転倒防止部１６が接触しない高さを有するリング状部である。転倒防止部１６は、フィルタホルダ１がウェル部２４に設置される過程及びフィルタホルダ１がウェル部２４に設置された後にフィルタホルダ１の転倒を防止する。
【００２６】
排出部１７は、核酸吸着フィルタ１８及びサポートフィルタ１９を通過した溶液が通過する部位である。排出部１７には、液体を排出するための孔が形成されている。
【００２７】
核酸吸着フィルタ１８は、核酸を選択的に吸着するフィルタである。吸着フィルタ１８は、サポートフィルタ１９を配することにより、腰のない（柔軟な）フィルタであってよい。
【００２８】
サポートフィルタ１９は、核酸吸着フィルタ１８を補強する。サポートフィルタ１９は、核酸吸着フィルタ１８が柔軟である場合に、核酸吸着フィルタ１８の変形を抑制する。
【００２９】
フィルタ押さえ２０は、核酸吸着フィルタ１８及びサポートフィルタ１９をフィルターホールド部１３に固定する筒状部材である。フィルタ押さえ部２０は、フィルタホルダ１の内部空間における内壁面に対して摩擦により固定されている。
【００３０】
図１に示す試薬カートリッジ１００は、保存部２１と、廃液部２３と、回収部２２と、ウェル部２４とを備える。
【００３１】
保存部２１は、フィルタホルダ１を保存するために容器状をなす凹部である。廃液部２３は、試料からサンプルを抽出する工程における排液を収容するために容器状をなす凹部である。回収部２２は、試料から抽出されたサンプルを収容するために容器状をなす凹部である。ウェル部２４は、生化学分析に必要となる各種試薬を収容したり、生化学反応の場としたりするために容器状をなす凹部である。
【００３２】
次に、本実施形態のフィルタホルダ１及び生化学分析キット１０１の作用について説明する。図１１は、フィルタホルダの作用を説明するための図である。図１２は、図１１の拡大図である。図１３は、図１１の拡大図である。図１４は、フィルタホルダの作用を説明するための図である。図１５は、フィルタホルダの作用を説明するための図である。図１６は、フィルタホルダの作用を説明するための図である。図１７は、フィルタホルダの作用を説明するための図である。
【００３３】
図１に示す生化学自動分析装置３０の装置担体移動部３１により、廃液部２３、回収部２２、ウェル部２４、保存部２１へフィルタホルダ１が移動される。また、本実施形態では、生化学自動分析装置３０は、複数の分注チップ３６を有するチップラック３７から分注チップ３６を液体分注部３５が取り出して使用することにより、試料や試薬等の分注をすることができる。
【００３４】
図１１に示すように、円錐部１５のうち呼び込み部１４側の外径がウェル部２４の開口径よりも大きいので、装置担体移動部３１によりフィルタホルダ１が移動される際に位置ズレが発生しても、ウェル部２４における適切な設置位置にフィルタホルダ１を円錐部１５が案内（呼び込み）する。
【００３５】
装置担体移動部３１によりフィルタホルダ１が移動される際に、フィルタホルダ１が傾いた状態でウェル部２４に設置される場合が考えられる。本実施形態では、円錐部１５から試薬カートリッジ１００へ向かって転倒防止部１６が突出して設けられている（図１２及び図１３参照）。転倒防止部１６と試薬カートリッジ１００との間の隙間は、円錐部１５がウェル部２４の開口端２４ａに密着している状態で試薬カートリッジ１００から僅かに離れている程度であることが好ましい。たとえば図１２に示すように転倒防止部１６が試薬カートリッジ１００に略接する程度の隙間を有していると、たとえば図１３に示すように転倒防止部１６が試薬カートリッジ１００から離間している場合と比較して、フィルタホルダ１が傾きにくい。
【００３６】
図１４及び図１５に示すように、転倒防止部１６は、試薬カートリッジ１００のウェル部２４に対してフィルタホルダ１が傾いたときに試薬カートリッジ１００に接してフィルタホルダ１がそれ以上傾かないようにフィルタホルダ１を支える。転倒防止部１６が試薬カートリッジ１００に接することでフィルタホルダ１の一定以上の傾きを防いでフィルタホルダ１の転倒を防止することができる。
【００３７】
また、図１６に示すように、フィルタホルダ１が傾いた状態でウェル部２４に設置される際に、転倒防止部１６がウェル部２４の開口端２４ａに接することで、フィルタホルダ１が倒れず、ウェル部２４内に排出部１７が挿入可能な位置に保持される。
【００３８】
また、図１７に示すように、フィルタホルダ１が、ウェル部２４に対して正立した位置であってもウェル部２４に対してオフセットされた位置にずれてしまう場合も考えられるが、この場合には、フィルタホルダ１の円錐部１５がウェル部２４の開口端２４ａに接してフィルタホルダ１をウェル部２４内へと案内する。
【００３９】
次に、本実施形態のフィルタホルダ１及び生化学分析キット１０１を用いた核酸精製の一例を示す。図１８は、フィルタホルダを備えた生化学分析キット１０１を用いた核酸抽出の方法を示すフローチャートである。
まず、分析対象となる試料を含んだＦＦＰＥ切片をウェル部２４に入れ、さらにＦＥＰＥ溶解試薬を添加する（ステップＳ１）。
【００４０】
上記ステップＳ１の後、生化学自動分析装置３０（本例では遺伝子解析装置）に、試薬カートリッジ１００をセットする（ステップＳ２）。試薬カートリッジ１００には、本実施形態のフィルタホルダ１が取り付けられている。
【００４１】
上記ステップＳ２の後、生化学自動分析装置３０の装置担体移動部３１によって、フィルタホルダ１が試薬カートリッジ１００から取り出され、ＦＦＰＥ切片が入ったウェル部２４上へフィルタホルダ１が設置される（ステップＳ３）。フィルタホルダ１における転倒防止部１６は、フィルタホルダ１がウェル部２４に対して正立するようにフィルタホルダ１の傾きを抑える。さらに、フィルタホルダ１における円錐部１５は、フィルタホルダ１がウェル部２４に対して正立するように、ウェル部２４の開口端２４ａに接してフィルタホルダ１を案内する。
また、装置担体移動部３１は、フィルタホルダ１をウェル部２４に向かって加圧部３４により加圧する。これにより、ウェル部２４の開口端２４ａとフィルタホルダ１の円錐部１５とが密着する。
【００４２】
上記ステップＳ３の後、生化学分析装置３０に組み付けられた温調装置によって、ＦＥＰＥ切片が入ったＦＥＰＥ抽出試薬を加熱する（ステップＳ４）。本実施形態では、ＦＥＰＥ切片が入ったＦＥＰＥ抽出試薬をたとえば５６℃で６０分加熱し、さらにその後９８度で２分間加熱することにより、パラフィンを溶解すると共に細胞を溶解し、たんぱく質を分解する。
ステップＳ４において、ウェル部２４の開口端２４ａとフィルタホルダ１の円錐部１５とが密着しているので、ウェル部２４はフィルタホルダ１によって蓋がされた状態で加熱される。このため、たとえば５６℃及び９８℃で溶液が加熱されたときにおける溶液の蒸発量が、フィルタホルダ１によってウェル部２４に蓋をしない場合と比較して少ない。
【００４３】
上記ステップＳ４の後、フィルタホルダ１を装置担体移動部３１により上記ＦＦＰＥ切片が入ったウェル部２４上から、保存部２１へ移動する（ステップＳ５）。
【００４４】
上記ステップＳ５の後、核酸吸着フィルタ１８に核酸を吸着させるための溶解吸着液を、ＦＥＰＥ切片が入ったＦＥＰＥ抽出試薬にさらに加え、この混合液を攪拌する（ステップＳ６）。
【００４５】
上記ステップＳ６の後、フィルタホルダ１を装置担体移動部３１により廃液部２３へ搬送する（ステップＳ７）。
【００４６】
上記ステップＳ７の後、上記ステップＳ６で攪拌された溶液をフィルタホルダ１に供給する（ステップＳ８）。
【００４７】
上記ステップＳ８の後、フィルタホルダ１の上端に加圧部３４を密着させ、フィルタホルダ１内を与圧し、上記ステップＳ８においてフィルタホルダ１に供給された溶液を空気圧によって排出部１７から排出させる（ステップＳ９）。ステップＳ９において、フィルタホルダ１に供給された溶液は核酸吸着フィルタ１８を通過する。溶液が核酸吸着フィルタ１８を通過する過程で、溶液中の核酸は核酸吸着フィルタ１８に吸着される。核酸吸着フィルタ１８を通過した溶液は廃棄される。
【００４８】
上記ステップＳ９の後、所定の緩衝液を洗浄液としてフィルタホルダ１に供給し、上記加圧部３４を用いて洗浄液を核酸吸着フィルタ１８に通す（ステップＳ１０）。ステップＳ１０において使用される洗浄液は、核酸吸着フィルタ１８と核酸との吸着状態に影響を与えない組成の緩衝液である。
【００４９】
上記ステップＳ１０の後、フィルタホルダ１を静置してフィルタホルダ１を乾燥させる（ステップＳ１１）。
【００５０】
上記ステップＳ１１の後、装置担体移動部３１を用いてフィルタホルダ１を回収部２２へと移動させる（ステップＳ１２）。
【００５１】
上記ステップＳ１２の後、核酸吸着フィルタ１８と核酸との吸着状態を解消するための所定の組成を有する溶出液をフィルタホルダ１に所定量供給する（ステップＳ１３）。ステップＳ１３においては、フィルタホルダ１の核酸吸着フィルタ１８に溶出液が行き渡るように溶出液を核酸吸着フィルタ１８に染み込ませてフィルタホルダ１をたとえば室温で静置することにより、核酸吸着フィルタ１８に吸着されていた核酸が溶出液中に移行する。
【００５２】
上記ステップＳ１３の後、加圧部３４を用いてフィルタホルダ１内を与圧して、核酸を含んだ溶出液を排出部１７から排出する。排出部１７から排出された液体は回収部２２内に収容される。
【００５３】
上記のステップＳ１からステップＳ１３までの工程により、ＦＥＰＥ切片から、ＦＥＰＥ切片に含まれるゲノムＤＮＡが抽出される。
【００５４】
このように、本実施形態のフィルタホルダ１及び生化学分析キット１０１によれば、フィルタホルダ１の円錐部１５はウェル部２４の開口端２４ａに接し、フィルタホルダ１の円錐部１５とウェル部２４の開口端２４ａとが密着することによってウェル部２４内の液体の蒸発量を少なく抑えることができる。すなわち、本実施形態のフィルタホルダ１によってウェル部２４に蓋をすることが可能であり、核酸抽出等の生化学分析における収量，収率，再現性，及び精製度を従来より簡素な構成で高めることができる。
【００５５】
また、ウェル部２４に蓋をするためにフィルタホルダ１とは別に蓋部材を備えることと比較して、部品点数を削減できる。
【００５６】
また、ウェル部２４に蓋をするためにフィルタホルダ１とは別の蓋部材を取り付ける工程が不要となるので、本実施形態のフィルタホルダ１によれば生化学分析のスループットを向上させることができる。
【００５７】
また、ウェル部２４に対するフィルタホルダ１の傾きを防止する転倒防止部１６が設けられているので、ウェル部２４に対するフィルタホルダ１の位置にずれがあってもウェル部２４に対してフィルタホルダ１を正立させることができる。
【００５８】
また、ウェル部２４内に収容された溶液が蒸発によりウェル部２４の外に飛散すると、生化学自動分析装置３０内を汚染する可能性があり、次の分析時にこの飛散した溶液に由来する成分を持ち込んでしまって分析結果の信頼性が下がる可能性が考えられる。本実施形態のフィルタホルダ１によってウェル部２４に蓋がされていると、溶液の蒸発がおこっても溶液がウェル部２４の外部に飛散する可能性を低く抑えることができ、分析結果の信頼性を高く維持することができる。すなわち、本実施形態のフィルタホルダ１を使用した場合には、複数回の分析における溶液の蒸発によるコンタミネーションの可能性が低く抑えられている。
【実施例】
【００５９】
次に、本発明の実施例について説明する。図１９は、本発明の実施例１における結果を示すグラフである。図２０は、本発明の実施例２における結果を示すグラフである。図２１は、本発明の実施例３における結果を示すグラフである。
【００６０】
（実施例１）
上記実施形態のフィルタホルダ１を使用した具体的な実施例について、核酸抽出を挙げて説明する。本実施例では、上記実施形態のフィルタホルダ１による蒸発量の抑制の効果について示す。
試薬カートリッジ１００に蒸留水を１００μＬ充填し、遺伝子解析装置を用いて５２度３０分間の加熱を行った。
フィルタホルダ１の円錐部１５をウェル部２４の開口端２４ａに密着させた場合（実施例）と、ウェル部の開口端２４ａに何も設けなかった場合（比較例）とにおいて、それぞれ、加熱後の重量を測定して、加熱による蒸留水の蒸発量を比較した。フィルタホルダ１の円錐部１５をウェル部２４の開口端２４ａに密着させることでフィルタホルダ１によってウェル部２４に蓋をする実施例では、装置担体移動部３１によりフィルタホルダ１をウェル部２４まで移動させ、フィルタホルダ１をウェル部２４に対して正立した状態で設置した。
図１９において、横軸は、本実施例におけるフィルタホルダ１による蓋がない場合の比較例、フィルタホルダ１により蓋を設けた２つの実施例をそれぞれ示している。また、図１９において、縦軸は、加熱前後の蒸留水の容量の差を蒸発量として示している。
図１９に示すように、蓋なしの蒸発量は19μｌに対し、蓋ありは平均9.5μｌであった。本実施例では、フィルタホルダ１による蓋がない比較例に対して、フィルタホルダ１による蓋がある実施例では、蒸留水の蒸発量が少ないことが確認できた。
【００６１】
（実施例２）
次に、上記実施形態のフィルタホルダ１を用いてＦＦＰＥ切片からゲノムＤＮＡを抽出した時のゲノムＤＮＡの濃度に関する実施例について図２０を参照して示す。
本実施例では、公知のゲノムＤＮＡ抽出キットと公知のゲノムＤＮＡ精製キットとを使用し、ゲノムＤＮＡの精製を行うためのフィルタとして上記実施形態のフィルタホルダ１を使用した。
図２０に示すサンプルＡ，Ｂ，Ｃは、それぞれ、互いに異なる検体に由来するＦＦＰＥ切片を用いた場合のゲノムＤＮＡの濃度を示している。
また、図２０において、縦軸は、本実施例において抽出及び精製された後に溶出液に含まれていたゲノムＤＮＡの濃度を示している。
本実施例に示すように、フィルタホルダ１を用いてゲノムＤＮＡの抽出及び精製を行うことにより、由来の異なる検体を用いてもゲノムＤＮＡの抽出及び精製が好適に可能であった。
【００６２】
（実施例３）
次に、フィルタホルダ１の有無と核酸の収量との関係について実施例について図２１を参照して示す。
２つのウェル部２４に、ＦＦＰＥ切片と１００μｌのＦＦＰＥ抽出試薬を分注し、２つのウェル部２４の一方はフィルタホルダ１を用いて蓋をし、他方は開放した状態とした。この２つのウェル部２４に対して、それぞれ、上記の核酸抽出の場合と同様に熱処理（５６℃６０分の加熱の後に９８℃１０分の加熱）を行った。
【００６３】
熱処理後の残った液量と、これらの溶液を用いて核酸を抽出したときのゲノムＤＮＡの濃度とを測定した。なお、ＦＦＰＥ切片からの核酸の抽出は、上記のステップＳ１からステップＳ１３までの工程により行った。また、溶出液量は各サンプルにおいて互いに等量である。
【００６４】
図２１において、横軸は、熱処理後に残った液量を示している。また、図２１において、縦軸は、熱処理後に精製を行って溶出液により溶出されたゲノムＤＮＡの収量を示している。
図２１に示すように、フィルタホルダ１を用いて蓋がされている場合には、蓋がされていない場合と比較して、蒸発量が少なく、さらにゲノムＤＮＡの収量も多いことが確認できた。本実施例における開始時液量は100μｌであり、フィルタホルダ１を用いて蓋をした場合におけるゲノム収量はそれぞれ2486ng、2536ng、2222ngであった。それに対し、蓋をしなかったものは液量が82μｌ、78μｌ、78μｌに減少しゲノム収量はそれぞれ1900ng、1699ng、1908ngであった。蒸発の有無とゲノム収量との間には相関があり、蒸発が起こると試薬濃度が変化し収量が低下しているものと考えられる。
【００６５】
以上、本発明の実施形態及び実施例について図面を参照して詳述したが、具体的な構成はこの実施形態に限られるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲の設計変更等も含まれる。
【符号の説明】
【００６６】
１  生化学分析用フィルタホルダ
１１  カートリッジ設置部
１２  移動部
１３  フィルターホールド部
１４  呼び込み部
１５  円錐部
１６  転倒防止部
１８  核酸吸着フィルタ
１９  サポートフィルタ
２０  フィルタ押さえ部
２１  保存部
２２  回収部
２３  廃液部
２４  ウェル部
２４ａ  開口端
３０  化学自動分析装置
３１  装置担体移動部
３４  加圧部
３５  液体分注部
３６  分注チップ
３７  チップラック
１００  試薬カートリッジ
１０１  生化学分析キット
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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