(57)【要約】      （修正有）【課題】レアメタル結合能を有する人工ペプチドを提供し、環境負荷の少ないレアメタル回収方法および簡便なレアメタル検出方法を提供する。【解決手段】以下のアミノ酸配列（１）を有し、かつアミノ酸残基数が１００以下であるペプチド、好ましくはアミノ酸配列（２）、（３）、（４）または（５）であるペプチド。（１）ＳＤＰＬＸ１ＲＲＡＳＸ２ＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＸ３（Ｘ１はＶまたはＨ、Ｘ２はＲまたはＬ、Ｘ３は任意のアミノ酸を表す。）（２）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＬＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＫ（３）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＲＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＫ（４）ＳＤＰＬＨＲＲＡＳＲＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＫ（５）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＲＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＲ【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下のアミノ酸配列（１）を有し、かつアミノ酸残基数が１００以下であるペプチド。
（１）ＳＤＰＬＸ１ＲＲＡＳＸ２ＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＸ３（配列番号１）
（Ｘ１はＶまたはＨ、Ｘ２はＲまたはＬ、Ｘ３は任意のアミノ酸を表す。）
【請求項２】
アミノ酸配列（１）が、以下のアミノ酸配列（２）、（３）、（４）または（５）である請求項１に記載のペプチド。
（２）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＬＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＫ（配列番号２）
（３）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＲＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＫ（配列番号３）
（４）ＳＤＰＬＨＲＲＡＳＲＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＫ（配列番号４）
（５）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＲＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＲ（配列番号５）
【請求項３】
請求項１または２に記載のペプチドを含有する金属吸着剤。
【請求項４】
金属がレアメタルである請求項３に記載の金属吸着剤。
【請求項５】
レアメタルが金、白金およびパラジウムから選択される１種以上である請求項４に記載の金属吸着剤。
【請求項６】
請求項３〜５のいずれかに記載の金属吸着材とレアメタルを含む金属成分を含有する水溶液とを接触させる工程を含むことを特徴とするレアメタル回収方法。
【請求項７】
レアメタルが金、白金およびパラジウムから選択される１種以上である請求項６に記載のレアメタル回収方法。
【請求項８】
請求項１または２に記載のペプチドとレアメタルを含む金属成分を含有する水溶液とを接触させ、水溶液の色調変化またはペプチドの構造変化を検出することを特徴とするレアメタル検出方法。
【請求項９】
レアメタルが金、白金およびパラジウムから選択される１種以上である請求項８に記載のレアメタル検出方法。
【請求項１０】
レアメタルが金であり、水溶液の色調変化を検出することを特徴とする請求項８に記載のレアメタル検出方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、レアメタル結合能を有する人工ペプチド、当該人工ペプチドを含有する金属吸着剤、当該金属吸着剤を用いるレアメタル回収方法、および当該人工ペプチドを用いるレアメタル検出方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
先端科学技術の発展に深く関わり、高性能化の材料となっているのがレアメタルとよばれる非鉄金属類であり、材料・触媒化学の分野において広く注目を浴びている。近年の技術革新や新興国の発展に伴い、貴金属をはじめとするレアメタルの使用量が急増しており、資源確保観点からも金属の回収法の効率化が急務の課題となっている。
【０００３】
従来のレアメタル回収技術は、高温や強酸性など極端な条件で行われるため、環境負荷が大きく、エネルギー消費も大きい。また、特定のレアメタルのみを選択的に回収することは困難である。そこで、環境負荷の少ないレアメタル回収技術が求められており、種々の技術が提案されている（例えば、特許文献１参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００８−１２７６５１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、レアメタル結合能を有する人工ペプチドを提供し、環境負荷の少ないレアメタル回収方法および簡便なレアメタル検出方法を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、上記課題を解決するために、以下の各発明を包含する。
［１］以下のアミノ酸配列（１）を有し、かつアミノ酸残基数が１００以下であるペプチド。
（１）ＳＤＰＬＸ１ＲＲＡＳＸ２ＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＸ３（配列番号１）
（Ｘ１はＶまたはＨ、Ｘ２はＲまたはＬ、Ｘ３は任意のアミノ酸を表す。）
［２］アミノ酸配列（１）が、以下のアミノ酸配列（２）、（３）、（４）または（５）である前記［１］に記載のペプチド。
（２）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＬＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＫ（配列番号２）
（３）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＲＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＫ（配列番号３）
（４）ＳＤＰＬＨＲＲＡＳＲＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＫ（配列番号４）
（５）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＲＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＲ（配列番号５）
［３］前記［１］または［２］に記載のペプチドを含有する金属吸着剤。
［４］金属がレアメタルである前記［３］に記載の金属吸着剤。
［５］レアメタルが金、白金およびパラジウムから選択される１種以上である前記［４］に記載の金属吸着剤。
［６］前記［３］〜［５］のいずれかに記載の金属吸着材とレアメタルを含む金属成分を含有する水溶液とを接触させる工程を含むことを特徴とするレアメタル回収方法。
［７］レアメタルが金、白金およびパラジウムから選択される１種以上である前記［６］に記載のレアメタル回収方法。
［８］前記［１］または［２］に記載のペプチドとレアメタルを含む金属成分を含有する水溶液とを接触させ、水溶液の色調変化またはペプチドの構造変化を検出することを特徴とするレアメタル検出方法。
［９］レアメタルが金、白金およびパラジウムから選択される１種以上である前記［８］に記載のレアメタル検出方法。
［１０］レアメタルが金であり、水溶液の色調変化を検出することを特徴とする前記［８］に記載のレアメタル検出方法。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、レアメタル結合能を有する人工ペプチドを提供することができる。当該人工ペプチドは、金属吸着材として好適に使用することができる。当該金属吸着材を用いることにより、レアメタルを効率よく回収することができる。また、当該人工ペプチドを用いることにより、簡便にレアメタルを検出することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】本発明のペプチド（Ｍ２ＳＡＰ５）溶液に金属イオンを添加してＣＤ（円二色性）測定した結果を示す図である。
【図２】本発明のペプチド（Ｍ２ＳＡＰ５）溶液に白金イオンを添加してＣＤ（円二色性）測定した結果を示す図である。
【図３】本発明のペプチド（Ｍ２ＳＡＰ５）溶液に金イオンを添加してＣＤ（円二色性）測定した結果を示す図である。
【図４】本発明のペプチド（Ｍ２ＳＡＰ７）溶液に金属イオンを添加してＣＤ（円二色性）測定した結果を示す図である。
【図５】本発明のペプチド（Ｍ２ＳＡＰ７）溶液に（Ａ）パラジウムイオン溶液または（Ｂ）金イオン溶液を滴定してＩＴＣ測定した結果を示す図である。
【図６】本発明のペプチド（Ｍ２ＳＡＰ９）溶液に金属イオンを添加してＣＤ測定した結果を示す図である。
【図７】本発明のペプチド（Ｍ２ＳＡＰ７）溶液に金イオン溶液を添加して、溶液の着色を目視により観察した結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
Ｍ２タンパク質はＡ型インフルエンザウイルスのエンベロープ内に存在する膜タンパク質である。Ｍ２タンパク質は、９７残基のアミノ酸（配列番号６）からなる１回膜貫通タンパク質であり、天然状態ではヘリックス構造をとっておりテトラマーを構成している。さらに、その４本膜貫通ヘリックスはｐＨ依存性のプロトンチャネルを形成しており、その中に含むＨｉｓ３７はｐＨセンサーであり、Ｔｒｐ４１はゲートの役割を担っている（Jasen R. Schnell et al., Nature 451 591-595 2008. 、Stouffer AL et al., Nature 451 596-599 2008.）。また、Ｍ２タンパク質は銅イオンと選択的に結合する能力を保有していることが知られている（Chris S. Gandhi et al., J Biol Chem 274(9) 5474-82 1999）。
そこで、本発明者らは、Ｍ２タンパク質の膜貫通ドメインを含むＳｅｒ２３からＬｅｕ４６までのアミノ酸配列からなるペプチドは疎水性が高く水に不溶であったためアミノ酸配列を改変することで水溶性を獲得させ、さらに新たな金属結合能を付与するべくペプチド分子を設計し、種々の性質について検討を行った。その結果、レアメタル結合能を有する水溶性アナログを見出し、本発明を完成させるに至った。
【００１０】
〔ペプチド〕
本発明は、以下のアミノ酸配列（１）を有し、かつアミノ酸残基数が１００以下であるペプチドを提供する。
（１）ＳＤＰＬＸ１ＲＲＡＳＸ２ＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＸ３（配列番号１）
（Ｘ１はＶまたはＨ、Ｘ２はＲまたはＬ、Ｘ３は任意のアミノ酸を表す。）
本発明のペプチドは、水溶性かつレアメタル結合能を有しているペプチドであればよい。本発明のペプチドは、上記アミノ酸配列（１）を含むものであればよく、それ以外の部分のアミノ酸配列は、水溶性およびレアメタル結合能の少なくとも一方を損なわない限り特に限定されない。なお、本明細書において、「ペプチド」は２個以上のアミノ酸がペプチド結合によって結合したものを意味し、結合するアミノ酸の数は問わない。すなわち、本発明における「ペプチド」にはポリペプチドが含まれる。
【００１１】
Ｘ１はバリンまたはヒスチジンである。Ｘ２はアルギニンまたはロイシンである。Ｘ３のアミノ酸は特に限定されず、いずれのアミノ酸でもよい。好ましくは、リジン、アルギニン、ロイシン、グリシンであり、より好ましくは、リジンまたはアルギニンである。
【００１２】
上記アミノ酸配列（１）は、以下のアミノ酸配列（２）、（３）、（４）または（５）であることが好ましい。
（２）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＬＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＫ（配列番号２）
（３）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＲＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＫ（配列番号３）
（４）ＳＤＰＬＨＲＲＡＳＲＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＫ（配列番号４）
（５）ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＲＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＲ（配列番号５）
【００１３】
本発明のペプチドのアミノ酸残基数は、２４残基以上１００残基以下であれば特に限定されない。取り扱いの簡便さ、製造効率等の観点から、アミノ酸残基数の上限は約８０残基が好ましく、より好ましくは約５０残基、さらに好ましくは約４０残基、特に好ましくは約３０残基である。
【００１４】
本発明のペプチドの具体例としては、例えば、配列表の配列番号６のアミノ酸配列からなるＭ２タンパク質のＳｅｒ２３からＬｅｕ４６を、上記アミノ酸配列（１）で置換したペプチドを含むペプチドを好適に用いることができる。また、上記アミノ酸配列（１）を２〜４回繰り返した配列を含むペプチドを好適に用いることができる。上記アミノ酸配列（１）を２〜４回繰り返した配列としては、具体的には、例えば、上記アミノ酸配列（２）〜（５）のいずれか１種を２〜４回繰り返した配列、上記アミノ酸配列（２）〜（５）の２〜４種を適宜組み合わせて結合した配列などが挙げられる。好ましくは上記アミノ酸配列（２）〜（５）のいずれか１種からなるペプチドであり、より好ましくは上記アミノ酸配列（２）、（３）または（５）からなるペプチドであり、さらに好ましくは上記アミノ酸配列（２）または（３）からなるペプチドである。
【００１５】
本発明のペプチドは、公知の一般的なペプチド合成のプロトコールに従って、固相合成法（Ｆｍｏｃ法、Ｂｏｃ法）または液相合成法により製造することができる。また、本発明のペプチドをコードするＤＮＡを含有する発現ベクターを導入した形質転換体を用いる方法や、ｉｎ ｖｉｔｒｏ転写・翻訳系を用いる方法により製造することができる。
【００１６】
本発明のペプチドは、Ｃ末端がカルボキシル基（−ＣＯＯＨ）、カルボキシレート(−ＣＯＯ−)、アミド（−ＣＯＮＨ２）またはエステル（−ＣＯＯＲ）の何れであってもよい。エステルにおけるＲとしては、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピルもしくはｎ−ブチルなどのＣ１−６アルキル基、例えば、シクロペンチル、シクロヘキシルなどのＣ３−８シクロアルキル基、例えば、フェニル、α−ナフチルなどのＣ６−１２アリール基、例えば、ベンジル、フェネチルなどのフェニル−Ｃ１−２アルキル基もしくはα−ナフチルメチルなどのα−ナフチル−Ｃ１−２アルキル基などのＣ７−１４アラルキル基のほか、経口用エステルとして汎用されるピバロイルオキシメチル基などが挙げられる。本発明のペプチドがＣ末端以外にカルボキシル基またはカルボキシレートを有している場合、それらの基がアミド化またはエステル化されているものも本発明のペプチドに含まれる。
【００１７】
本発明のペプチドを構成するアミノ酸は、側鎖が任意の置換基で修飾されたものでもよい。置換基は特に限定されないが、例えば、フッ素原子、塩素原子、シアノ基、水酸基、ニトロ基、アルキル基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アミノ基などが挙げられる。  さらに、本発明のペプチドには、Ｎ末端のメチオニン残基のアミノ基が保護基（例えば、ホルミル基、アセチルなどのＣ２−６アルカノイル基などのＣ１−６アシル基など）で保護されているもの、Ｎ末端側が生体内で切断され生成したグルタミル基がピログルタミン酸化したもの、分子内のアミノ酸の側鎖上の置換基（例えば、−ＯＨ、−ＳＨ、アミノ基、イミダゾール基、インドール基、グアニジノ基など）が適当な保護基（例えば、ホルミル基、アセチルなどのＣ２−６アルカノイル基などのＣ１−６アシル基など）で保護されているものも含まれる。
【００１８】
本発明のペプチドは塩を形成していてもよく、その塩としては、例えば、塩酸、硫酸、燐酸、乳酸、酒石酸、マレイン酸、フマル酸、シュウ酸、リンゴ酸、クエン酸、オレイン酸、パルミチン酸などの酸との塩；ナトリウム、カリウム、カルシウムなどのアルカリ金属もしくはアルカリ土類金属の、またはアルミニウムの水酸化物または炭酸塩との塩；トリエチルアミン、ベンジルアミン、ジエタノールアミン、ｔ−ブチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、アルギニンなどとの塩などが挙げられる。
【００１９】
〔金属吸着剤およびレアメタル回収方法〕
本発明のペプチドは金属（金属イオン）と結合できる性質を有するため、金属吸着剤として好適に用いることができる。本発明の金属吸着剤の吸着対象金属は、本発明のペプチドに特異的（選択的）に結合可能な金属に限定されず、非特異的に結合可能な金属であってもよい。本発明の金属吸着剤の吸着対象金属としては、例えば、金、銀、銅、亜鉛、白金、パラジウム、コバルト、クロム、マンガン、ニッケルなどが挙げられる。
【００２０】
本発明のペプチドは選択的レアメタル結合能を有しているので、レアメタル吸着剤として有用である。レアメタルとしては、例えば、白金、パラジウム、ロジウム、イリジウム、ルテニウム、オスミウム、金、銀、コバルト、クロム、マンガン、ニッケルなどが挙げられる。好ましくは金、白金およびパラジウムから選択される１種以上である。
【００２１】
本発明の金属吸着剤は、本発明のペプチドのみからなるものでもよいが、本発明のペプチド以外のものを含んでもよい。好ましくは、本発明のペプチドが適当な担体に担持された形態の金属吸着剤である。担体は、本発明のペプチドを担持可能なものであれば特に限定されず、公知のペプチド担体から適宜選択して用いることができる。担体の材質は特に限定されず、例えば、紙、木材、プラスチック等が挙げられる。担体の形状は特に限定されず、平板状、球状、糸状等が挙げられる。
【００２２】
本発明の金属吸着剤を、金属成分を含有する水溶液と接触させることにより、本発明のペプチドが水溶液中の金属イオンと結合し、結合した金属を回収することができる。したがって、本発明は、上記本発明の金属吸着剤と金属成分を含有する水溶液とを接触させる工程を含む金属回収方法を提供する。また、本発明のペプチドは、レアメタルと特異的（選択的）に結合することができるので、回収対象金属をレアメタルとすることが好ましい。レアメタルを回収する場合は、本発明の金属吸着剤とレアメタルを含む金属成分を含有する水溶液とを接触させればよい。回収対象のレアメタルとしては、上記に例示したものが好ましい。
【００２３】
本発明のレアメタル回収方法では、本発明の金属吸着剤とレアメタルを含む金属成分を含有する水溶液とを接触させた後、例えば、遠心分離、ろ過、ｐＨの変化などによりレアメタルが結合した本発明の金属吸着剤を回収し、酵素による加水分解や燃焼によって金属吸着剤を分解消滅させることなどにより本発明の金属吸着剤からレアメタルを分離すればよい。
【００２４】
〔レアメタル検出方法〕
本発明者らは、後の実施例で示すように、本発明のペプチドが特定のレアメタルと結合することにより構造変化することを見出した。また、滴定型の熱測定を行うことで、結合を直接検出し、結合力の強さを求めることができた。さらに、本発明者らは、後の実施例で示すように、本発明のペプチドと特定のレアメタルを水溶液中で混合することにより、溶液が着色することを見出した。したがって、本発明は、本発明のペプチドを用いるレアメタル検出方法を提供することができる。すなわち、本発明のレアメタル検出方法は、本発明のペプチドと目的のレアメタルを含有する可能性のある水溶液とを接触させ、水溶液の色調変化、ペプチドの構造変化または結合による物性変化を検出するものであればよい。
【００２５】
水溶液の色調変化を検出する場合、水溶液の色調の変化は目視で検出することができる。水溶液の色調変化を検出する場合、検出対象のレアメタルとしては金が好ましく、金と結合するペプチド（例えば、アミノ酸配列（２）、（３）または（４）を有するペプチド）を好適に用いることができる。具体的には、本発明のペプチド水溶液と検出対象レアメタルを含有する可能性のある水溶液とを混合し、室温で数日間、好ましくは４〜１０日間放置すればよい。水溶液の色調変化を検出するレアメタル検出方法は、機器を使用せずに目視により検出できる点で非常に簡便である。また、着色水溶液中において、金属は金属ナノ粒子を形成しペプチドは金属から遊離しているので、遠心分離等により金属ナノ粒子を沈殿させた上清はペプチド水溶液である。それゆえ、上清のペプチド水溶液を回収すれば、本発明のレアメタル検出方法に再利用することができる。すなわち、水溶液の色調変化を検出するレアメタル検出方法は、簡便かつ低コストのレアメタル検出方法である。
【００２６】
ペプチドの構造変化を検出する場合、ペプチドの構造変化を検出する手段としては、特に限定されないが、例えば、円二色性（ＣＤ）測定、赤外分光（ＩＲ）測定、核磁気共鳴（ＮＭＲ）測定などが挙げられる。ペプチドの構造変化を検出する場合、本発明のペプチドは、上記本発明の金属吸着剤の形態で使用することが好ましい。
【００２７】
〔レアメタルセンサー〕
本発明のペプチドは特定のレアメタルと結合することにより構造変化するので、特定のレアメタルに対するセンシング素子として用いることができる。本発明のペプチドを用いるセンシング素子と特定のレアメタルの結合に伴うペプチドの構造変化を他の信号に変換する手段とを組み合わせることにより、特定のレアメタルに対するセンサー（検出器）を提供することができる。
また、本発明のペプチド水溶液は、ペプチドが特定のレアメタルと結合することにより色調が変化するので、本発明のペプチド水溶液の色調変化を認識する手段とを組み合わせることにより、特定のレアメタルに対するセンサー（検出器）を提供することができる。
【実施例】
【００２８】
以下、実施例により本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００２９】
〔実施例１：人工ペプチドの金属イオン結合能の検討〕
（１）ペプチドの合成
以下の４種類のペプチドを、ペプチド合成機（Pioneer, Peptide synthesis System; Applied Biosystems社製）を用いて、Ｆ−ｍｏｃ固相法により合成した。
Ｍ２ＳＡＰ５：ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＬＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＫ（配列番号２）
Ｍ２ＳＡＰ７：ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＲＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＫ（配列番号３）
Ｍ２ＳＡＰ８：ＳＤＰＬＨＲＲＡＳＲＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＫ（配列番号４）
Ｍ２ＳＡＰ９：ＳＤＰＬＶＲＲＡＳＲＩＧＬＬＨＬＬＬＷＫＬＥＲＲ（配列番号５）
【００３０】
（２）実験方法
（２−１）ＣＤ（円二色性）測定
合成した各ペプチドを酢酸バッファー（ｐＨ５．５）にそれぞれ溶解して、３００μＭのペプチド溶液を調製した。このペプチド溶液にコバルト、銅、鉄、ニッケル、亜鉛、パラジウム、白金または金を含む溶液を添加し、それぞれＣＤを測定した。対照として、ペプチド溶液のみ（金属非添加）についてもＣＤを測定した。測定には、Ｊａｓｃｏ Ｊ−７２０ ｓｐｅｃｔｒｏ−ｐｏｌａｒｒｉｍｅｔｅｒ（日本分光社製）を使用し、光路長０．１ｍｍのタイコセルを用いて２００μＬのペプチド溶液について測定した。測定条件は、温度２５℃、走査波長２５０ｎｍ〜１９０ｎｍ、データ間隔０．２ｎｍ、走査速度１００ｎｍ／ｍｉｎ、レスポンス２ｓｅｃ、 バンド幅１ｎｍ、 感度１０ｍｄｅｇ、積算回数８回とした。
【００３１】
（２−２）ＩＴＣ測定（等温滴定熱測定）
Ｍ２ＳＡＰ７を酢酸バッファー（ｐＨ５．５）に溶解して、３００μＭのペプチド溶液を調製した。測定には、ＶＰ−ＩＴＣ Ｍｉｃｒｏ Ｃａｌｏｒｉｍｅｔｅｒ（MicroCal社製）を使用した。セルに１．５ｍＬのペプチド溶液を入れ、撹拌しながらパラジウムイオン溶液または金イオン溶液を滴定した。得られた発熱量の変化を解析して結合定数を算出した。
【００３２】
（３）結果
（３−１）Ｍ２ＳＡＰ５
Ｍ２ＳＡＰ５のＣＤ測定の結果を図１、図２および図３に示した。図１から、Ｍ２ＳＡＰ５はパラジウムと結合してα−へリックスに構造変化することが示された。一方、コバルト、銅、鉄、ニッケルまたは亜鉛を添加した場合は構造変化が生じないことが示された。図２から、Ｍ２ＳＡＰ５は白金と結合してα−へリックスに構造変化することが示された。図３から、Ｍ２ＳＡＰ５は金と結合してα−へリックスに構造変化することが示された。この結果から、Ｍ２ＳＡＰ５は、パラジウム、白金および金と選択的に結合することが明らかとなった。
【００３３】
（３−２）Ｍ２ＳＡＰ７
Ｍ２ＳＡＰ７のＣＤ測定の結果を図４に、ＩＴＣ測定の結果を図５（Ａ）および（Ｂ）に示した。図４から、Ｍ２ＳＡＰ７は、金またはパラジウムと結合してα−へリックスに構造変化することが示された。一方、コバルト、銅、鉄、ニッケル、白金または亜鉛を添加した場合は構造変化が生じないことが示された。この結果から、Ｍ２ＳＡＰ７は、金およびパラジウムと選択的に結合することが明らかとなった。図５（Ａ）および（Ｂ）に示した発熱量の変化に基づいて得られた結合のエンタルピー変化（ΔＨ）、結合定数（Ｋａ）および結合比（ｎ）を表１に示した。Ｍ２ＳＡＰ７はパラジウムに対する結合能より金に対する結合能の方が高いことが示された。
【００３４】
【表１】
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【００３５】
（３−３）Ｍ２ＳＡＰ９
Ｍ２ＳＡＰ９のＣＤ測定の結果を図６に示した。図６から、Ｍ２ＳＡＰ９は、白金と結合してα−へリックスに構造変化することが示された。一方、コバルト、銅、鉄、ニッケル、金または亜鉛を添加した場合は構造変化が生じないことが示された。この結果から、Ｍ２ＳＡＰ９は、白金と選択的に結合することが明らかとなった。
【００３６】
〔実施例２：金のセンシング〕
Ｍ２ＳＡＰ７を酢酸バッファー（ｐＨ５．５）に溶解して、３００μＭのペプチド溶液を調製した。このペプチド溶液に金を含む溶液を添加し、金のセンシングを行った。
結果を図７に示した。（１）はペプチド溶液に金を含む溶液を添加し１週間室温で放置した結果である。一方、（４）は金を含む溶液のみを１週間室温で放置した結果である。ペプチド溶液は金イオンが存在することにより溶液が着色し、目視で金のセンシングが可能であることが示された。この色調変化した溶液を遠心分離すると着色層が沈殿した（２）。この上清を採取し金を含む溶液を添加して１週間室温で放置すると、再度溶液が着色した（３）。
【００３７】
この結果から、本発明のペプチドは、金イオンと結合して凝集し、金ナノ粒子を形成させる作用を有することが示された。さらに、ペプチドは金ナノ粒子から遊離し、遊離したペプチドを含む遠心後の上清にはペプチドが再溶解していることから、金のセンシングに再利用できることが示された。
【００３８】
なお本発明は上述した各実施形態および実施例に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、異なる実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。また、本明細書中に記載された学術文献および特許文献の全てが、本明細書中において参考として援用される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【配列表】
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