(57)【要約】【課題】ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物を用いた一重項酸素消去剤、糖化阻害剤、一重項酸素消去剤及び糖化阻害剤、皮膚外用剤並びに皮膚老化予防剤を提供することを課題としている。【解決手段】一重項酸素消去剤、糖化阻害剤並びに一重項酸素消去剤及び糖化阻害剤は、ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物（マンリョウ抽出物）からなるもので構成されている。マンリョウ抽出物は、優れた一重項酸素消去能及び糖化阻害効果を有することが認められる。また、皮膚外用剤及び皮膚老化予防剤はマンリョウ抽出物を含有するもので構成されている。マンリョウ抽出物を含有する皮膚外用剤及び皮膚老化予防剤は例えば皮膚の老化予防作用及び皮膚の改善作用が顕著に認められる。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物からなることを特徴とする一重項酸素消去剤。
【請求項２】
ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物からなることを特徴とする糖化阻害剤。
【請求項３】
ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物からなることを特徴とする一重項酸素消去及び糖化阻害剤。
【請求項４】
ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項５】
ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物を含有することを特徴とする皮膚老化予防剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヤブコウジ科（Ｍｙｒｓｉｎａｃｅａｅ）のヤブコウジ属マンリョウ（Ａｒｄｉｓｉａ ｃｒｅｎａｔａ Ｓｉｍｓ）抽出物を用いた一重項酸素消去剤、糖化阻害剤、一重項酸素消去剤及び糖化阻害剤、皮膚外用剤並びに皮膚老化予防剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚の老化は、種々の原因が考えられるが、その原因の一つとして活性酸素によるものが挙げられる。活性酸素としては、一重項酸素、スーパーオキサイド、ヒドロキシラジカルや過酸化水素等があるが、中でも一重項酸素は反応性が高いことから、皮膚の光老化に及ぼす影響が高い。
【０００３】
即ち、一重項酸素は、ＩＬ−１α（インターロイキン−１α）の分泌を促進し、ＩＬ−６（インターロイキン−６）の産生亢進を介してＭＭＰ−１（マトリックスメタロプロテアーゼ−１）の発現を促進することが知られている。ＭＭＰ−１の発現、増加によりコラーゲンの分解が促進し、しかも一重項酸素がコラーゲンの架橋形成を促進することなどから、シワの増加を伴う皮膚老化が進行することになる。一重項酸素の消去系は生体内に備わっていないため、このような皮膚老化を防止するためには、一重項酸素消去能を有する成分を外から取り入れる必要がある。
【０００４】
一方、皮膚老化の原因として、糖化も挙げられる。ここで糖化とは、タンパク質と、還元糖とが非酵素的に反応し、最終糖化産物を生成することをいう。皮膚においては、コラーゲンの糖化や、ケラチンの糖化が起こり、皮膚の弾力性の低下や、くすみをもたらすことになる。
【０００５】
以上のように、皮膚老化には複数の原因があることから、それぞれの原因に対応した皮膚老化の防止策をとることが必要である。
【０００６】
一重項酸素による皮膚老化に対しては、コエンザイムＱ１０を用いた一重項酸素消去剤が提供されている（例えば特許文献１）。また、糖化阻害剤としては、アミノグアニジンが知られているが、このアミノグアニジンはビタミンＢ２を捕捉する等の副作用があることから、皮膚老化の防止には使用されていない（例えば特許文献２）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００６−２１３６６０号公報
【特許文献２】特許５２０７６１１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明者は、皮膚老化の防止の観点から上述した一重項酸素消去剤及び糖化阻害剤として有効な成分を発見すべく鋭意研究を重ねた結果、ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物に一重項酸素消去剤や、糖化阻害剤として有効な効果があることを見出した。
【０００９】
本願発明は上記知見に基づきなされたものであり、ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物を用いた一重項酸素消去剤、糖化阻害剤、一重項酸素消去剤及び糖化阻害剤、皮膚外用剤並びに皮膚老化予防剤を提供することを課題としている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記課題を解決するために、請求項１に記載の発明は、一重項酸素消去剤であって、ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物からなることを特徴としている。
【００１１】
請求項２に記載の発明は、糖化阻害剤であって、ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物からなることを特徴としている。
【００１２】
請求項３に記載の発明は、一重項酸素消去及び糖化阻害剤であって、ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物からなることを特徴としている。
【００１３】
請求項４に記載の発明は、皮膚外用剤であって、ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物を含有することを特徴としている。
【００１４】
請求項５に記載の発明は、皮膚老化予防剤であって、ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物を含有することを特徴としている。
【発明の効果】
【００１５】
請求項１に記載の発明によれば、表１に示すように、ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物からなる一重項酸素消去剤は、優れた一重項酸素消去活性を有することが認められる。
【００１６】
請求項２に記載の発明によれば、表２に示すように、ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物からなる糖化阻害剤は、強い糖化阻害効果があることが認められる。
【００１７】
請求項３に記載の発明によれば、表１及び表２に示すように、ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物からなる一重項酸素消去剤及び糖化阻害剤は、優れた一重項酸素消去活性を有し、かつ強い糖化阻害効果を有することが認められる。
【００１８】
請求項４に記載の発明によれば、表８、図１及び図２に示すように、ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物を含有する皮膚外用剤は、当該皮膚外用剤としての効果が十分に認められる。即ち、当該マンリョウ抽出物を含有する皮膚外用剤は皮膚の老化予防作用及び皮膚の改善作用について顕著な効果が認められる。
【００１９】
請求項５に記載の発明によれば、表８、図１及び図２に示すように、ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物を含有する皮膚老化予防剤は、当該皮膚老化予防剤としての効果が十分に認められる。即ち、当該マンリョウ抽出物を含有する皮膚老化予防剤は皮膚の老化予防作用及び皮膚の改善作用について顕著な効果が認められる。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】本発明の実施例４における第２の例として示した皮膚用クリーム１のシワの改善効果を示すグラフであって、１２週間経過後における各被験者のシワスコア変化度を示すグラフである。
【図２】同実施例４における第２の例として示した皮膚用クリーム１のシワの改善効果を示すグラフであって、０週時におけるシワの体積及びシワの数に対する１２週間経過後における同シワの体積及びシワの数の変化率（％）を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明を実施するための形態を実施例に基づいて詳細に説明する。
【実施例１】
【００２２】
まず、この発明の実施例１として、ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ抽出物（以下「マンリョウ抽出物」という。）からなる一重項酸素消去剤を示す。
【００２３】
この一重項酸素消去剤は、ヤブコウジ科のヤブコウジ属マンリョウ（以下「マンリョウ」という。）の葉を水で洗浄した後、乾燥させ、この乾燥した葉を７５〜９９容積％のエタノール水溶液に浸漬して、室温１０〜３５℃で２４時間保持し、これを２回行ってから（即ち、同じ葉でエタノールによる抽出を２回行うことになる。これにより、抽出で得られるエタノール水溶液は２倍量となる。）、マンリョウの葉をろ過フィルタで除去し、この除去後のエタノール水溶液を４０〜８０℃に保持しながら真空下で当該エタノール水溶液を蒸留し、その蒸留後に得られる固形分を水に懸濁してから、これを更に酢酸エチルにより抽出することにより、その酢酸エチル抽出物として得られる固形状のマンリョウ抽出物である。
【００２４】
なお、マンリョウ抽出物は、例えばブチレングリコールやプロピレングリコールなどで溶解することにより、所定の質量％の水溶液の状態にしたものであってもよい。
【００２５】
また、上述のように、７５〜９９容積％のエタノール水溶液を用いたのは、７５容積％未満であると、エタノール水溶液へのマンリョウ抽出物の浸出量が顕著に少なくなるからであり、９９容積％超としても、エタノール水溶液へのマンリョウ抽出物の浸出量の増加が認められなくなるからである。エタノール水溶液を４０〜８０℃に保持したのは、４０℃未満とすると蒸留に多くの時間を費やすことになるからであり、８０℃超とするとエタノール水溶液に浸出した成分に影響を与えることになるからである。また、マンリョウの葉をエタノール水溶液に浸漬する量は、当該エタノール水溶液に対して１〜１０質量％とすることが好ましい。１質量％未満とすると、エタノール水溶液に浸出するマンリョウ抽出物の量が少なく、蒸留により当該マンリョウ抽出物を効率よく抽出することができなくなるからである。また、１０質量％超としても、エタノール水溶液に浸出するマンリョウ抽出物の量が増加せずほぼ飽和した状態になるからである。
【００２６】
上記マンリョウ抽出物についての一重項酸素消去能は、次に示す試験により行なった。即ち、５０％ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）リン酸緩衝液に、４４．４ｍＭ (ミリモーラー) のＴＭＰＤ（N,N,N',N'-Tetramethyl-p-phenylenediamine）、５５．５μＭ（マイクロモーラー）のリボフラビン（Ｒｉｂｏｆｌａｖｉｎｅ）及びマンリョウ抽出物を溶融した試料を作り、この試料をＥＳＲ装置にセットし、カットフィルタを使用した水銀灯を用いて２０秒間照射した上で測定を行った。この際、マンリョウ抽出物の試料全体に対する濃度を段階的に変化させることにより、ＩＣ５０（一重項酸素の消去率５０％を発揮するマンリョウ抽出物の濃度）を算出した。この試験では、ＩＣ５０の算出結果を表１に示す。
【００２７】
なお、上記ＥＳＲ装置は日本電子株式会社製ＦＡ−１００、上記カットフィルタはウシオ電機株式会社製Ｙ−４８、上記水銀灯はウシオ電機株式会社製ＳＸ−ＵＩ５０１ＨＱを使用している。
【００２８】
【表１】
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【００２９】
表１から、マンリョウ抽出物は、優れた一重項酸素消去能（一重項酸素消去活性）を有することが認められる。
【実施例２】
【００３０】
次に、実施例２として、マンリョウ抽出物からなる糖化阻害剤を示す。マンリョウ抽出物については、実施例１で示したものと同一のものである。
【００３１】
このマンリョウ抽出物についての糖化阻害剤効果は、次に示す試験により行なった。即ち、容量が１．５ｍＬ（ミリリットル）のマイクロチューブに、濃度が１００ｍｇ／ｍＬ（ミリグラム／ミリリットル）のウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）水溶液を１００μＬ（マイクロリットル）、濃度が２００ｍｇ／ｍＬのグルコース水溶液を５００μＬ、試験サンプル溶液としてのマンリョウ抽出物を２０μＬ及び濃度が（１／１５）ｍｏｌ／Ｌ（モル／リットル）のリン酸緩衝液（ｐＨ７．２）を３８０μＬ加えた試料を作り、この試料について６０℃で４８時間反応させる試験を行なった。
【００３２】
上記試験サンプル溶液としてのマンリョウ抽出物は、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７ｍｇ／ｍＬの６種類の固形分換算濃度（上記試料全体に対するマンリョウ抽出物の濃度）のものを上記各マイクロチューブを用いて上記反応試験を行い、その反応終了後に、それぞれのマイクロチューブから２０μＬを取り出して例えば９６穴マイクロプレートのそれぞれのウェルに入れ、かつ更に水を２００μＬ添加した上で、蛍光マイクロプレートリーダーで、励起波長３７０ｎｍ、蛍光波長４４０ｎｍのＡＧＥｓ（終末糖化合物）由来の蛍光強度を測定することにより、ＡＧＥｓ生産抑制率を算出した。この結果を表２に示す。
【００３３】
【表２】
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【００３４】
表２から、マンリョウ抽出物は、優れた糖化阻害剤効果を有することが認められる。即ち、マンリョウ抽出物は、糖化阻害効果が既に知られている塩酸アミノグアニジンと比較しても、強い糖化阻害効果があることが確認できる。また、上記試験により得られた結果から算出したＩＣ５０（５０％糖化阻害濃度）は０．４７ｍｇ／ｍＬであり、このＩＣ５０からも優れた糖化阻害効果を有することが認められる。
【実施例３】
【００３５】
次に、実施例３として、マンリョウ抽出物からなる一重項酸素及び糖化阻害剤を示す。マンリョウ抽出物については、実施例１及び実施例２で示したものと同一であり、実施例１からは優れた一重項酸素消去能が認められ、実施例２からは優れた糖化阻害効果が認められる。従って、マンリョウ抽出物からなる一重項酸素及び糖化阻害剤の用途発明が成立する。
【実施例４】
【００３６】
次に、実施例４として、マンリョウ抽出物を含有する皮膚外用剤を示す。まず、皮膚外用剤の第１の例としての皮膚用ゲル剤の成分を表３に示す。
【００３７】
【表３】
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【００３８】
上記表３に記載した皮膚外用剤の第１の例としての皮膚用ゲル剤は、１〜５までの成分を６の精製水に溶解した後、８の固形状のマンリョウ抽出物を７のジプロピレングリコールに溶解したものを加えて混合することにより製造する。
【００３９】
次に、皮膚外用剤の第２の例としての皮膚用クリーム１の成分を表４に示す。
【００４０】
【表４】
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【００４１】
上記表４に記載した皮膚外用剤の第２の例としての皮膚用クリーム１は、１〜９までの油相成分を混合したものを８０℃にて加熱溶解する。一方、１０〜１４の水相成分を混合したものを８０℃にて加熱溶解する。そして、上記加熱溶解した水相成分に上記加熱溶解した油相成分を撹拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。乳化終了後、冷却を開始し、この乳化したものに、１６の固形状のマンリョウ抽出物を１５のジプロピレングリコールに溶解したものを加えて更に混合することにより製造する。
【００４２】
次に、皮膚外用剤の第３の例としての皮膚用クリーム２の成分を表５に示す。
【００４３】
【表５】
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上記表５に記載した皮膚外用剤の第３の例としての皮膚用クリーム２は、１〜６までの油相成分を混合したものを８０℃にて加熱溶解する。一方、７〜１２の水相成分を混合したものを８０℃にて加熱溶解する。そして、上記加熱溶解した水相成分に上記加熱溶解した油相成分を撹拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。乳化終了後、冷却することにより製造する。
【００４４】
次に、皮膚外用剤の第４の例としての化粧水の成分を表６に示す。
【００４５】
【表６】
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【００４６】
上記表６に記載した皮膚外用剤の第４の例としての化粧水は、１の固形状のマンリョウ抽出物を２のジプロピレングリコールに溶解したものに、３〜６の各成分を順次添加して、十分に攪拌し混合することにより製造する。
【００４７】
次に、上記実施例４における皮膚外用剤の第２の例として示した皮膚用クリーム１（表４）について使用試験を行い、シワの予防効果を評価した。また、比較例１として、表４のマンリョウ抽出物に相当する質量％を精製水に置き換えたものについても使用試験を行った。具体的には以下に示す。
【００４８】
シワの予防効果を評価するため、何もしなければ悪化するであろう、水分量の少ない冬期に実施した。表４において、マンリョウ抽出物以外の成分の効果が出ないように、保湿剤はほとんど入れないようにした。２０〜５０代の男女８名の被験者を対象とし、ハーフフェイスの左右何れか一方の群には実施例４の第２の例を、他方の群には比較例１をそれぞれ１日２回ずつ１２週間使用させ、４週後、８週後、１２週後の目尻のシワの状況を観察し、使用前（０週）の値と比較した。シワの症状は表７の判定基準に示すグレードに従って評価した。グレードは０から７の８段階のスコアに基づいて数値化して評価することとし、特定のスコアに当て嵌まらない場合は、その中間値をスコアとした。なお、本試験は、ブラインド方式とし、被験者には本試験に用いる皮膚用クリームの成分が分からないようにした。
【００４９】
４週後、８週後、１２週後のそれぞれにおけるシワの症状について、その４週後、８週後、１２週後におけるスコアと０週におけるスコアとの差について８人の平均値を求め、これをシワスコア変化度として表８に記載した。また、１２週後の各群における８名の各被験者のシワスコア変化度を図１にまとめた。
【００５０】
一方、シリコーンレプリカ（Ｓｉｌｆｌｏ，ＦＬＥＸＩＣＯ ＤＥ ＶＥＬＯＰＭＥＮＴＳ社製）で目尻のレプリカを採取して、シワの体積、シワの数を測定し、これらのシワの体積、シワの数について、０週に対する１２週後の変化率（％）（即ち、（（１２週後−０週）／０週）×１００（%））を表９及び図２にまとめた。
【００５１】
【表７】
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【００５２】
【表８】
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【００５３】
【表９】
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【００５４】
表８より、実施例４における皮膚外用剤の第２の例として示した皮膚用クリーム１は、４週後、８週後、１２週後のそれぞれにおいて、８人の平均で示すシワスコア変化度が−０．３〜−０．５となった。また、図１より、１２週後の８人の各被験者のシワスコア変化度は、０〜−１．５となった。マンリョウ抽出物を配合した皮膚用クリーム１は、皮膚老化の予防作用及び皮膚の改善作用に極めて効果があることが確認できた。また、皮膚トラブルもなく、安全であった。
【００５５】
一方、図２より、シワ体積についての０週に対する１２週後の変化率は、実施例４の第２の例が２３．２％、比較例１が４４．３％となっている。また、シワの数についての０週に対する１２週後の変化率は、実施例４の第２の例が４．４％、比較例１が３０．１％となっている。即ち、マンリョウ抽出物を配合した皮膚用クリーム１は、シワ体積及びシワの数を低減する効果が比較例１に比べて著しく高く、皮膚老化の予防作用及び皮膚の改善作用に極めて効果があることが確認できた。
【００５６】
なお、皮膚老化予防剤についても、上記実施例４で示した第１〜第４の例で示した皮膚外用剤と同様の成分のもので構成することにより、皮膚老化予防効果及び皮膚の改善効果を奏する。
【図１】
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【図２】
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