(57)【要約】      （修正有）【課題】血管拡張に影響を与えて、血圧低下に寄与する肺深部の作用部位に薬物が持続的に存在し、低用量での有効性が上昇する、トレプロスチニル製剤の提供。【解決手段】下記式で表されるトレプロスチニルＮａを含む、エアロゾル化トレプロスチニル製剤の投与によって、トレプロスチニルの肺沈着をより均一にすることができ、それにより肺深部への送達が可能となり、該エアロゾル化製剤は、１０ミクロン以下の粒子又は液滴の空気力学的直径を有し、かつ、該投与によって、該製剤の肺中枢／肺末梢沈着比が１〜２．０の範囲内となるように該トレプロスチニルが肺深部に沈着される方法。2015129177.tif 000017【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
トレプロスチニルで治療または予防が可能な疾患または状態の治療または予防方法であって、トレプロスチニルまたはその薬学的に許容される塩および肺送達に許容される担体を含んでなるエアロゾル化製剤を、それを必要としている対象に吸入によって投与することを含み、ここで、該エアロゾル化製剤は、１０ミクロン以下の粒子または液滴の空気力学的直径を有し、かつ、該投与によって、該製剤の肺中枢／肺末梢沈着比が１〜２．０の範囲内となるように該トレプロスチニルが肺深部に沈着される方法。
【請求項２】
該製剤の肺に対する該肺中枢／肺末梢沈着比が１〜１．５である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
該製剤の肺に対する該肺中枢／肺末梢沈着比が１〜１．４５である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
該対象がヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
肺高血圧症の治療に適用される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
該製剤がトレプロスチニルナトリウムを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
該空気力学的直径が２ミクロン〜１０ミクロンの範囲である、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
該空気力学的直径が５ミクロン以下である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
該製剤がリポソームを含まない製剤である、請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２００９年９月２５日に出願された米国仮特許出願第６１／１００，０１７号の優先権を主張するものであり、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本出願は、一般に治療法、特に、吸入された化合物の肺送達を含む可能性のある治療法に関する。そのような肺送達によって、服用量、副作用プロファイルおよび／または投与頻度を減少させることができる。さらに、そのような送達によって、体循環への関連する持続放出と共に、肺末梢部への沈着効果(depot effect)を提供することができる。
【背景技術】
【０００３】
一般に、ある種の注射によって多くの薬物を投与することができる。注射薬物によって複数の利点を提供ことができるが、一部の患者には、時として注射は不都合であったり痛みを伴ったりする場合がある。一般に注射によって投与される薬物の類は、プロスタサイクリンおよびトレプロスチニルなどのその類似体である。
【０００４】
トレプロスチニルは、プロスタサイクリンの合成類似体である。トレプロスチニルは、リモジュリンとして市販されている。プロスタサイクリンＰＧＩ２の類似体として、トレプロスチニルは血管拡張に影響を与え、従って血圧を低下させることができる。トレプロスチニルは、血小板凝集を阻害することもあるが、肺高血圧症に対してこの現象が担う可能性のある役割はまだ見出されていない。
【０００５】
トレプロスチニルについては、最初に米国特許第４，３０６，０７５号に記載された。米国特許第５，１５３，２２２号には、肺高血圧症の治療のためのトレプロスチニルの使用が開示されている。米国特許第５，２３４，９５３号には、トレプロスチニルによる鬱血性心不全の治療が開示されている。米国特許第６，７６５，１１７号および第６，８０９，２２３号には、トレプロスチニルの合成のための立体選択的プロセスが開示されている。米国特許第６，５２１，２１２号および第６，７５６，０３３号には、肺高血圧症、末梢血管障害および他の疾患および状態の治療のための吸入によるトレプロスチニルの投与について記載されている。米国特許第６，０５４，４８６号には、トレプロスチニルによる末梢血管障害の治療について開示されている。米国特許第６，８０３，３８６号には、肺癌、肝臓癌、脳腫瘍、膵臓癌、腎臓癌、前立腺癌、乳癌、結腸癌および頭頸部癌などの癌の治療のためのトレプロスチニルの投与が開示されている。米国特許出願公開第２００５／０１６５１１１号には、虚血性病変のトレプロスチニル治療が開示されている。米国特許第７，１９９，１５７号には、トレプロスチニル治療によって腎機能が改善されることが開示されている。米国特許出願公開第２００５／０２８２９０３号には、糖尿病による神経障害性足潰瘍のトレプロスチニル治療が開示されている。米国特許出願公開第２００８／０２８０９８６号には、トレプロスチニルによる間質性肺疾患の治療が開示されている。米国特許出願公開第２００８／０２００４４９号には、定量吸入器によるトレプロスチニルの投与が開示されている。米国特許出願公開第２００９／０１６３７３８号には、トレプロスチニルの他の調製方法が開示されている。米国特許第７，４１７，０７０号、第７，３８４，９７８号および第７，５４４，７１３号には、トレプロスチニルの経口剤型が開示されている。米国特許出願公開第２００９／００３６４６５号には、ρキナーゼ阻害剤と併用したトレプロスチニルの投与が開示されている。米国仮出願第第６１／１７６，２６８号には、トレプロスチニルの固形製剤が開示されている。
【０００６】
トレプロスチニルは、肺高血圧症、虚血性疾患（例えば、末梢動脈疾患などの末梢血管
障害、レイノー病およびレイノー症候群などのレイノー現象、全身性硬化症などの強皮症、心筋虚血、虚血性卒中、腎不全）、指潰瘍などの虚血性潰瘍、心不全（鬱血性心不全など）、血液凝固の阻止が必要な状態（例えば、心筋梗塞後、心臓手術後）、血栓性微小血管障害、体外循環、網膜中心静脈閉塞症、アテローム性動脈硬化症、炎症性疾患（例えば、ＣＯＰＤ、乾癬）、高血圧症（例えば、子癇前症）、生殖および出産、癌または無制御の細胞増殖に関わる他の状態の治療および／または予防、ならびに細胞／組織の保存、およびプロスタサイクリン治療が有益な役割を有すると思われる他の新しい治療領域において使用することができる。
【０００７】
トレプロスチニルは、患者が常に身につけていなければならない小型の注入ポンプによって投与してもよい。トレプロスチニルは、輸液セットを用いて皮下投与しても、患者が皮下投与の潜在的な痛みや不快感に耐えられない場合には、中心静脈カテーテルによって静脈内投与してもよい。
【０００８】
リモジュリンという商標を有するトレプロスチニルは、２０ｍＬのバイアルに入れて、１ｍｇ／ｍＬ、２．５ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬおよび１０ｍｇ／ｍＬの濃度範囲で提供され得る。トレプロスチニルは、提供された状態のまま皮下投与することができる。静脈内注入のために、トレプロスチニルは通常投与前に、滅菌水または０．９％塩化ナトリウム溶液のいずれかで希釈される。
【０００９】
注入速度は通常、新規の患者では１．２５ｎｇ／ｋｇ／分で開始してもよいが、通常の速度で患者に望ましくない副作用が生じた場合には０．６２５ｎｇ／ｋｇ／分に下げてもよい。トレプロスチニルの注入速度は、最初の月では１週間当たり１．２５ｎｇ／ｋｇ／分以下に、次いで、残りの注入期間では１週間当たり２．５ｎｇ／ｋｇ／分以下に上げてもよい。注入速度は、理想的には、不快な副作用を最小に抑えながら肺高血圧症の症状を改善するのに十分な速さにすべきである。
【００１０】
患者は高い割合で注入部位における痛みまたは他の反応を報告している。他の副作用としては、頭痛、下痢、悪心、発疹、顎の痛み、血管拡張、めまい、浮腫（腫脹）、そう痒（痒み）および血圧低下が挙げられる。
【００１１】
リモジュリン（登録商標）（トレプロスチニルナトリウム）注射剤は、皮下または静脈内投与用の無菌ナトリウム塩製剤とすることができる。リモジュリンは、２０ｍＬの多用途バイアルに入れて、１ｍｇ／ｍＬ、２．５ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬまたは１０ｍｇ／ｍＬのトレプロスチニルを含有する４種類の濃度で提供することができる。各ｍＬは、塩化ナトリウム５．３ｍｇ（塩化ナトリウム４．０ｍｇを含有する１０ｍｇ／ｍＬの濃度を除く）、メタクレゾール３．０ｍｇ、クエン酸ナトリウム６．３ｍｇおよび注射用蒸留水も含有する。ｐＨを６．０〜７．２に調整するために水酸化ナトリウムおよび塩酸を添加してもよい。
【００１２】
トレプロスチニルは、室温および中性のｐＨにおいてある程度の安定性を有する。
【００１３】
トレプロスチニルナトリウムは、（１Ｒ，２Ｒ，３ａＳ，９ａＳ）−［［２，３，３ａ，４，９，９ａ−ヘキサヒドロ−２−ヒドロキシル−１−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシオクチル］−１Ｈ−ベンゾ［ｆ］インデン−５−イル］オキシ］酢酸のモノナトリウム塩である。トレプロスチニルナトリウムの分子量は４１２．４９であり、分子組成はＣ２３Ｈ３３ＮａＯ５である。
【００１４】
トレプロスチニルナトリウムの構造式は、
【００１５】
【化１】
2015129177.tif 000002
【００１６】
である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
肺送達用製剤の潜在的な問題は、患者がエアロゾル化した容量を容易に吸入できるように容量を減少させるために、製剤が比較的高濃度の薬物を含み得ることかもしれない。別の潜在的な問題は、送達されるとすぐに、製剤中の全ての薬物が即座に患者に利用可能な状態となる、つまり、あまりに多くの薬物があまりに急激に利用可能な状態となる可能性があるかもしれない。さらなる問題は、吸入された製剤によって、時間をかけた薬物の持続的放出が全く得られないことかもしれない。本発明の製剤は、これらの問題の一部または全てを解決することを試みる。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
一態様では、トレプロスチニルで治療または予防が可能な疾患または状態の治療または予防方法は、トレプロスチニルまたはその薬学的に許容される塩および肺送達に許容される担体を含んでなるエアロゾル化製剤を、それを必要としている対象（ヒトであってもよい）に吸入によって投与することを含み、ここで、該エアロゾル化製剤は、１０ミクロン以下または５ミクロン以下、あるいは２〜１０ミクロンの範囲の粒子または液滴の空気力学的直径（aerodynamic diameter）を有し、かつ、該投与によって、該製剤の肺中枢／肺末梢沈着比が１〜２．０、１〜１．９、１〜１．８、１〜１．７、１〜１．６、１〜１．５、１〜１．４５または１〜１．４の範囲内となるように該トレプロスチニルが肺深部に沈着される。
【００１９】
トレプロスチニルで治療または予防が可能な疾患および状態としては、肺高血圧症、虚血性疾患（例えば、末梢動脈疾患などの末梢血管障害、レイノー病およびレイノー症候群などのレイノー現象、全身性硬化症などの強皮症、心筋虚血、虚血性卒中、腎不全）、指潰瘍などの虚血性潰瘍、糖尿病による神経障害性および神経虚血性潰瘍、心不全（鬱血性心不全など）、血液凝固の阻止が必要な状態（例えば、心筋梗塞後、心臓手術後）、血栓性微小血管障害、体外循環、網膜中心静脈閉塞症、アテローム性動脈硬化症、炎症性疾患（例えば、ＣＯＰＤ、乾癬）、高血圧症（例えば、子癇前症）、生殖および出産、癌または無制御の細胞増殖に関わる他の状態、細胞／組織の保存、ならびにプロスタサイクリン治療が有益な役割を有すると思われる他の新しい治療領域が挙げられる。
【００２０】
トレプロスチニルの生理的に許容される塩としては、塩基由来の塩が挙げられる。塩基の塩としては、アンモニウム塩（例えば、第４級アンモニウム塩）、ナトリウムおよびカリウムの塩などのアルカリ金属塩、カルシウムおよびマグネシウムの塩などのアルカリ土類金属塩、ジシクロヘキシルアミンおよびＮ−メチル−Ｄ−グルカミンなどの有機塩基との塩、およびアルギニンおよびリジンなどのアミノ酸との塩が挙げられる。
【００２１】
第４級アンモニウム塩は、例えば、塩化メチル、塩化エチル、塩化プロピルおよび塩化ブチル、臭化メチル、臭化エチル、臭化プロピルおよび臭化ブチル、ヨウ化メチル、ヨウ
化エチル、ヨウ化プロピルおよびヨウ化ブチルなどの低級ハロゲン化アルキル；硫酸ジアルキル；塩化デシル、塩化ラウリル、塩化ミリスチルおよび塩化ステアリル、臭化デシル、臭化ラウリル、臭化ミリスチルおよび臭化ステアリル、ヨウ化デシル、ヨウ化ラウリル、ヨウ化ミリスチルおよびヨウ化ステアリルなどの長鎖ハロゲン化物；ならびに臭化ベンジルおよび臭化フェネチルなどのハロゲン化アラルキルとの反応によって形成することができる。
【００２２】
該担体（１種または２種以上）は、該製剤の他の成分と適合し、かつその受容体に有害でないという意味で「許容される」ものでなければならない。該担体は、液体または固体であってもよい。
【００２３】
トレプロスチニルのエアロゾル化送達によって、肺においてトレプロスチニルをより均一に分布させることができるため、肺深部への送達が達成される。肺深部への送達によって、上気道への送達と比較して、ＴＭＡＸを増加させ、かつＣＭＡＸを減少させることができる。
【００２４】
いくつかの態様では、該製剤は、リポソームを含有しない製剤であってもよい。さらにいくつかの態様では、トレプロスチニルは、リポソームと共に投与してもよい。
【００２５】
該トレプロスチニルと共にポリマーコーティングまたはリポソームを使用することによって、ＴＭＡＸをさらに増加させ、かつＣＭＡＸをさらに減少させてもよい。ＣＭＡＸを減少させることで副作用を減少させ、かつＴＭＡＸを増加させることでより好都合な送達を達成してもよい。
【００２６】
本発明は、肺間質における封鎖、細胞、膜または受容体への結合、肺胞細胞またはマクロファージによる取り込み、あるいはいくつかの他の機構による、肺末梢部または肺胞腔からの遅延吸収を示し得る薬物の吸入送達に関するものであってもよい。特に、全身性副作用を有しかつ／または肺深部または肺胞腔において薬理活性を示す薬物、例えば、トレプロスチニルを対象とする。
【００２７】
本発明の手順によれば、肺深部の作用部位に薬物が持続的に存在することにより低用量での有効性が上昇する。
【００２８】
また、本発明によって、ＣＭＡＸよって生じる副作用が減少し、かつ体循環におけるＴＭＡＸが延長する。
【００２９】
肺深部への上述した薬物の送達を可能にし、かつ最適化する複数の方法が存在するかもしれない。例えば、エアロゾル送達システムとしては、ＤＰＩ、ＭＤＩ、噴霧器、溶液吸入器、蒸気凝縮エアロゾル発生器が挙げられる。咽頭および中枢気道における固着を減少させるために、より低密度であるか幾何学的により小さい液滴もしくは粒子を含有するエアロゾルの使用によって、あるいは、よりゆっくりとした吸入流速によって送達を達成することもできる。
【００３０】
特に、Ａｒａｄｉｇｍ社製ＡＥＲｘエッセンスシステムおよびＡＥＲｘ系の装置の使用を対象とし、これらについては、例えば、米国特許第５，４９７，７６３号および第６，１２３，０６８号ならびに関連の米国特許および非米国特許ならびに刊行物に記載されており、送達装置、薬物を保持する小包および投与方法について開示および記載するために、これらの全ての内容が参照により本明細書に組み込まれる。本ヒトＰＫおよびガンマシンチグラフィー臨床試験では、吸入トレプロスチニルナトリウムを用いて、１４人の健常な被験者において、ＡＥＲｘエッセンスシステムおよびNebu-Tec OPTINEB噴霧器をクロス
オーバー方式で比較した。該噴霧器（平均肺中枢／肺末梢（Ｃ／Ｐ）比＝３．９６）と比較して、該ＡＥＲｘシステムでは、肺深部へのより多くの送達が得られ（平面ガンマシンチグラフィーによる平均肺中枢／肺末梢比＝１．３９）、これは、該ＡＥＲｘエッセンスシステムのＴＭＡＸ（平均２１分）が該噴霧器のＴＭＡＸ（平均９分）よりも遅いことに関連していた。ＣＭＡＸについても、該ＡＥＲｘのＣＭＡＸ（平均０．６４ｎｇ／ｍＬ）は該噴霧器のＣＭＡＸ（平均０．７６２ｎｇ／ｍＬ）よりも低く、さらに、トレプロスチニル肺用量についても該ＡＥＲｘでは該噴霧器よりも２０％高く、これは、該ＡＥＲｘエッセンス吸入製品において有害事象が減少され得ることを示唆していた。
【００３１】
一般に、有害事象は、血流におけるトレプロスチニルのピーク濃度に関連しており(Voswinckel et al., "Favorable Effects of Inhaled Treprostinil in Severe Pulmonary Hypertension: Results from Randomized Controlled Pilot Studies"（重篤な肺高血圧症における吸入トレプロスチニルの好ましい効果：無作為抽出予備研究からの結果） J. Am. Coll. Cardiol., 48(8):1672-1681 (2006))、この著者らは、「全身性血漿中濃度で全
身性副作用プロファイルが決まり、局所性肺組織中濃度で肺の血管拡張作用が決まること」を示唆している。
【００３２】
Ｖｏｓｗｉｎｃｋｅｌらは、吸入イロプロストと吸入トレプロスチニルとを比較および対比して、以下のように述べている：
「トレプロスチニルの１回の吸入後の長時間の肺の血管拡張は、このプロスタノイドの安定性によって部分的に説明することができる。我々は、吸入後にトレプロスチニルが肺組織に蓄積され、これにより、肺胞被覆層または間質区画から肺血管平滑筋細胞への徐放が提供されると推測している。トレプロスチニルのピーク血漿中濃度は、吸入の１０〜１５分後に観察された。これは、吸入イロプロストと比較するとかなり遅く、イロプロストの場合、ピーク血漿中濃度は、吸入セッション完了直後に認められ、血漿中半減期は、ほんの約８分であった。これによって、高用量のトレプロスチニルの投与にも関わらず肺の血管拡張作用の開始速度が遅いこと、および全身性副作用が事実上存在しないことが説明可能かもしれない。吸入イロプロストと同様に、トレプロスチニルの血行力学的効果の持続時間は、その血漿中濃度よりも長かった。・・・プロスタグランジンＥ受容体およびプロスタグランジＩ受容体への結合特性における差異によって、吸入トレプロスチニル対イロプロストの異なる薬力学的プロファイルを得ることもできる。プロスタノイドおよびその類似体は、その７種の同族プロスタノイド受容体に選択的に結合し、それによって、該類似体の該プロスタノイド受容体特異性ならびにそれぞれの血管床における該受容体の分布に応じて血管拡張または血管収縮のいずれかを生じさせるセカンドメッセンジャーシグナル伝達が開始される。プロスタノイド受容体特異性および活性化におけるトレプロスチニルとイロプロストとの差異は、組織結合特性と共に、吸入トレプロスチニルの向上した肺選択性を説明することができる。」
上記説明では、著者らは、主として薬物に特異的な要因によりトレプロスチニルおよびイロプロストがそれらの吸収および副作用プロファイルで異なる理由について、例えば、肺および体における動態を生じさせる個々の薬物安定性プロファイルおよび／または薬物構造における差異などの多くの可能な説明を示唆している。どちらの薬物も有効であると見なされていた。しかし、著者らは、吸入様式によって、薬物動態学、薬力学および副作用プロファイルを改善できることを予想できなかった。本発明者らの臨床研究では、例えば、該ＡＥＲｘシステムを用いて、トレプロスチニルを肺により一貫的かつより深く沈着させることによって、噴霧器の２倍以上もピーク血漿中濃度をさらに遅延させた。該噴霧器治療群中に約２０分のＴｍａｘの遅延を示した被験者が１人存在し、そのガンマシンチグラフィー画像は、１．５のＣ／Ｐ比を示した。これは、典型的な噴霧器画像とは異なる肺末梢の動態を示していた。この所見は、肺深部への浸透と、体循環への吸収が減速されることの関連性を裏付けている。該噴霧器治療群中の１人の被験者におけるさらなる肺深部への浸透の達成（および関連する全身取り込みの遅延）は、その被験者の噴霧器エアロ
ゾル粒径分布における差異に起因するものではなく、吸入操作方法または気道もしくは肺の幾何学的形状における差異に起因するものであると思われる。
【００３３】
本発明は、特異的製剤を用いて、あるいは、他の送達法と組み合わせて強化することができる。単独または組み合わせのいずれかによって、例えば、様々な製剤、ポリマー、ゲル、乳濁液、微粒子または懸濁液を使用して、肺深部における持続放出プロファイルを向上させ、かつ全身吸収の遅延を大きくすることができる。放出速度は、数時間、数日または数週間にわたって投薬を行うように設計することができる。これは、例えば、該エアロゾル粒子を肺の水性環境において徐々に溶解する賦形剤（例えば、ＰＬＧＡ、ポリマーなど）でコーティングするか、あるいは該薬物分子を、該薬物を徐放する賦形剤（例えば、リポソーム、界面活性剤など）でコーティングまたは封入するなどの多くの方法で達成することができる。肺における該薬物の放出プロファイルを遅延または延長するための他の製剤法も存在する。これらのシナリオでは、なお同量の薬物を肺に送達できるにも関わらず、吸入後に血流に吸収される薬物のピーク濃度は低下し、その結果、副作用プロファイルは、減少または消失する。この送達法の潜在的なさらなる特徴は患者にとって好都合なものである。投薬頻度も減少し、それにより、治療に対する患者の利便性または遵守、従って有効性を高める可能性がある。
【００３４】
これまでのところ、トレプロスチニルによるＰＡＨ患者の治療についてのみ論じてきたが、この知的所有権の適用をＰＡＨ患者の治療のみに限定することも、薬物の選択をトレプロスチニルに限定することも意図していない。実際、この治療上の改良が有益となり得る多くの患者および適応症が存在し、肺癌、嚢胞性線維症、気管支拡張症、肺炎、ＣＯＰＤ、喘息、肺線維症および他の肺疾患などが挙げられる。ペニシリン、セファロスポリン、フルオロキノロン、テトラサイクリンまたはマクロライドなどの各種抗生物質を含む、本発明の利益を享受し得る多くの潜在的な薬物も存在する。
【００３５】
本発明のこれらおよび他の目的、利点および特徴は、以下により完全に記載されている該製剤、方法および装置の詳細を読めば当業者には明らかになるであろう。
【００３６】
本発明は、添付の図面と共に以下の詳細な説明を読めば最も良く理解される。一般の慣例に従って、図面の様々な特徴が縮尺どおりではないことを強調しておく。これに反して、様々な特徴の寸法は、明確性のために、任意に拡大または縮小される。以下の図が図面に含まれている。
【図面の簡単な説明】
【００３７】
【図１】被験者の内訳を示すブロック図である。
【図２】平均血漿内薬物濃度を示すグラフである。
【図３】平均血漿内薬物濃度を示すグラフである。
【図４】人口統計データをまとめた表である。
【図５】標識した薬物の回収率の要約を示す表である。
【図６】放出された放射線標識薬物（％）の回収率の要約を示す表である。
【図７】ＡＥＲｘによって送達された放射線標識薬物の回収率の要約を示す表である。
【図８】噴霧器によって送達された放射線標識薬物の回収率の要約である。
【図９】ＡＥＲｘによって送達された薬物の肺用量の導出の要約である。
【図１０】噴霧器によって送達された薬物の肺用量の導出の要約である。
【図１１】個別の薬物動態パラメータの要約である。
【図１２】個別の薬物用量調整薬物動態をまとめた表である。
【図１３】有害事象の要約を示す表である。
【図１４】有害事象の要約を示す２つ目の表である。
【図１５】有害事象の要約を示す３つ目の表である。
【図１６】各被験者についての異常検査値の一覧を示す表である。
【図１７】血液検査(hematology)の範囲外の結果を示す表である。
【図１８】尿検査の範囲外の結果を示す表である。
【図１９Ａ】図１９Ａは、肺機能検査の結果の要約を示す表である。
【図１９Ｂ】図１９Ｂは、肺機能検査の結果の要約を示す表である。
【図１９Ｃ】図１９Ｃは、肺機能検査の結果の要約を示す表である。
【図１９Ｄ】図１９Ｄは、肺機能検査の結果の要約を示す表である。
【図１９Ｅ】図１９Ｅは、肺機能検査の結果の要約を示す表である。
【図１９Ｆ】図１９Ｆは、肺機能検査の結果の要約を示す表である。
【図１９Ｇ】図１９Ｇは、肺機能検査の結果の要約を示す表である。
【図１９Ｈ】図１９Ｈは、肺機能検査の結果の要約を示す表である。
【発明を実施するための形態】
【００３８】
定義
ＣＭＡＸは、投薬後の体内中の薬物の最大濃度である。
【００３９】
ＴＭＡＸは、投薬後にＣＭＡＸが生じるまでの時間である。
【００４０】
本明細書で使用される略語：
ＡＥ：有害事象
ＡＬＰ：アルカリホスファターゼ
ＡＬＴ：アラニンアミノトランスフェラーゼ
ＡＮＯＶＡ：分散分析
ＡＳＴ：アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ
ＡＲＳＡＣ：放射性物質投与諮問委員会
ＡＴＳ：米国胸部学会
ＡＵＣ：血中（濃度−時間）曲線下面積
ＢＩＤ：１日２回
ＢＭＩ：肥満度指数
ＢＰ：血圧
ＢＵＮ：血液尿素窒素
Ｃ／Ｐ：中枢／末梢比
ｃＧＭＰ：医薬品適正製造基準
ＣＩ：信頼区間
Ｃｍａｘ：最大血漿中薬物濃度
ＣＰＫ：クレアチニンホスホキナーゼ
ＣＲＡ：治験モニター
ＣＲＦ：症例報告書
ＤＰＳ：壊変毎秒
ＥＣＧ：心電図
ＥＲＳ：欧州呼吸器学会
ＦＥＦ２５−７５％：ＦＶＣの２５〜７５％の努力呼気流量
ＦＥＶ１：１秒間努力呼気容量
ＦＶＣ：努力肺活量
ＧＣＰ：医薬品の臨床試験実施に関する基準(Good Clinical Practice Guidelines)
ＧＭｃ：幾何平均値（修正）
ＨｂＡ１ｃ：グリコヘモグロビン
ＨＢＶ：Ｂ型肝炎ウイルス
Ｈｃｔ：ヘマトクリット
ｈＣＧ：ヒト絨毛性ゴナドトロピン
ＨＣＶ：Ｃ型肝炎ウイルス
ＨＥＥＮＴ：頭、目、耳、鼻および喉
ＨＲ：心拍数
ＨＲＥＣ：ヒト研究倫理審査委員会（ＩＲＢ）
Ｈｇｂ：ヘモグロビン
ＨＩＶ：ヒト免疫不全ウイルス
ＩＣＦ：同意文書説明書
ＩＢ：治験薬概要書
ＩＣＨ：医薬品規制調和国際会議
ＩＮＤ：治験薬
ＩＮＲ：国際標準比
ＩＤＭＢ：独立データモニタリング委員会
ＩＲＢ：施設内治験審査委員会
ＩＴＴ：包括解析
Ｋｅｌ：排出速度定数
ＭＢｑ：メガベクレル
ＬＯＱ：定量限界
ＭＣＨ：平均赤血球ヘモグロビン量
ＭＣＶ：平均赤血球容積
ＭＣＨＣ：平均赤血球ヘモグロビン濃度
ｍＳｖ：ミリシーベルト
ＰＤ：薬力学
ＰＥＦＲ：最大呼気流量
ＰＩ：治験責任医師
ＰＫ：薬物動態
ｐＫａ：酸解離定数（Ｋａ）の負の対数
ＱＡ：品質保証
ＱＣ：品質管理
ＲＢＣ：赤血球
ＲＯＩ：対象領域
ＲＲ：呼吸速度
ＳＡＥ：重篤な有害事象
ＳＯＰ：標準操作手順
ＳＤ：標準偏差
ＳＶ：シーベルト
９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡ：ジエチレントリアミン５酢酸標識化テクネチウム
Ｔｍａｘ：最大血漿中薬物濃度までの時間
ＷＢＣ：白血球
本製剤、方法および装置について記載する前に、本発明は、記載されている特定の製剤、方法および装置に限定されず、したがって、当然ながら変更可能である。また、本明細書で使用される用語は、特定の態様のみについて記載するためのものであって、限定することを意図するものではなく、よって、本発明の範囲は添付の特許請求の範囲によってのみ限定されるものである。
【００４１】
ある範囲の数値が示されている場合、文脈上明らかに別の意であることが示されている場合を除き、その範囲の上限と下限との間にそれぞれ介在する下限の単位の１０分の１までの数値も具体的に開示されているものとする。所定の範囲内の任意の所定の数値もしくは介在する数値と、その所定の範囲内の任意の他の所定の数値もしくは介在する数値との間のより小さい各範囲も本発明に包含される。これらのより小さい範囲の上限および下限
は、独立に、その範囲に含まれていても除外されていてもよく、所定の範囲内の任意の具体的に除外される限界がある場合、いずれか一方もしくは両方の限界がより小さい範囲内に含まれているかどちらも含まれていない各範囲も本発明に包含される。所定の範囲が一方または両方の限界を含む場合、それらの含まれる限界のいずれか一方または両方を除外する範囲も本発明に含まれる。
【００４２】
別段の定めがない限り、本明細書で使用される全ての技術的および科学的用語は、本発明が属する技術分野における通常の技術を有する者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載されているものに類似するか同等の任意の方法および材料を本発明の実施または試験で使用することができるが、以下に、いくつかの潜在的かつ好ましい方法および材料について説明する。本明細書に記載の全ての刊行物は、それらと関連させて引用される方法および／または材料を開示および記載するために、参照により本明細書に組み込まれる。当然のことながら、本開示は、矛盾が生じる場合は、組み込まれる刊行物のいずれの開示にも優先する。
【００４３】
文脈上明らかに別の意であることが示されている場合を除き、本明細書および添付の特許請求の範囲に使用されている単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、複数の言及対象を含むことに留意しなければならない。従って、例えば、「１種（ａ）の薬物」という場合は、複数のそのような薬物を含み、「該（ｔｈｅ）粒子」という場合は、１種または２種以上の粒子および当業者に知られているその均等物についても述べていることになる。
【００４４】
本明細書で考察される刊行物は、本出願の出願日前のそれらの開示のみの目的で提供される。本明細書には、本発明が先願発明を理由にそのような刊行物に先行する権利がないことを認めるものとして解釈される記載はない。さらに、提供されている刊行物の日付は実際の刊行物の日付とは異なる場合があるため、独自に確認する必要があるかもしれない。
【実施例】
【００４５】
以下の実施例は、当業者に本発明の製造および使用方法についての完全な開示および記載を提供するために示されており、本発明者らが彼らの発明と見なすものの範囲を限定することは意図されておらず、また、以下の実験が全てであること、あるいは実施された実験のみであることを示すことも意図されていない。使用されている数字（例えば、量、温度など）に関する正確性を保証するための努力はなされているが、いくつかの実験誤差および偏差については説明が必要である。特に明記しない限り、部は重量部であり、分子量は、重量平均分子量であり、温度は摂氏温度であり、圧力は、大気圧または大気圧付近である。
実施例１
９．  治験の計画
９．１  治験の全体的設計および計画
これは、ランダム化二重交差設計を用いて単一の施設で行われる非盲検試験であった。１６人の健常な成人男性被験者が研究治療を受けるために参加することになっていた。書面による同意書を提出するとすぐに、各研究候補者は、参加資格の有無を決定するための事前調査およびスクリーニングを受けた。
【００４６】
被験者は、薬物を含有しない剤形を用いてNebu-Tec Optineb噴霧器およびＡＥＲｘエッセンスシステムの適切な使用についての指示および訓練を受けた。
【００４７】
２日間の各投薬日に、有資格被験者は、ＡＥＲｘエッセンスシステムまたはNebu-Tec Optineb噴霧器のいずれかを用いて９９ｍＴｃ標識トレプロスチニルナトリウムによる投薬
を受けた。初回の研究投薬後、被験者は、約４８時間の休薬期間後に２回目の（交差）研究投薬を完了した。
【００４８】
各研究投薬後すぐに、被験者は、トレプロスチニルの肺沈着および血漿中薬物動態に関する特性を確認するために、ガンマシンチグラフィーおよび静脈血の複数回の採取を受けた。
【００４９】
【表１】
2015129177.tif 000003
【００５０】
また、被験者は、クリプトン−８１ｍ（８１ｍＫｒ）ガス換気イメージング処置も受けた。この処置は、任意の投薬日に行うことができ、続いて、３０分間の休薬後、任意のエアロゾル投薬処置を行なった。ロジスティック／スケジューリングの問題がある場合、換気イメージングは、投薬後に行うことができた。あるいは、８１ｍＫｒ換気スキャンは、別の通院日に行うこともできた。さらに、透過画像も得られ、これは、任意の投薬日の任意のエアロゾル投薬処置の前または別の通院日に行うことができた。
【００５１】
被験者は、SAS Version 9.1.3のPROC PLAN技法を用いてSimbec Research社によって作
成されたランダム化コードに従って、以下の治療をそれぞれ受けた。
【００５２】
投薬の間は少なくとも４８時間の間隔を置いた。
【００５３】
各研究期間は１日であった。
【００５４】
研究は、完全な医療および看護管理下で、Simbec Research社の臨床施設で行われた。
９．２  対照群の選択を含む研究デザインについての考察
治験の第１の目的は、ガンマシンチグラフィーを用いて、ＡＥＲｘエッセンスシステムとNebu-Tec Optineb噴霧器によって送達された放射線標識トレプロスチニルナトリウムの放出用量、送達肺用量および肺中枢／肺末梢（ｓＣ／Ｐ）沈着を比較することであった。第２の目的は、ＡＥＲｘエッセンスシステムによって送達されたトレプロスチニルの静脈血漿中薬物動態プロファイルをNebu-Tec Optineb噴霧器と比較し、両方の試験装置による吸入トレプロスチニルナトリウムの安全性および耐性を評価し、両方の装置からの口腔咽頭領域における放射線標識トレプロスチニルナトリウムの（放出および負荷）用量（％）を比較して、両方の装置および必要に応じて関連機器（例えば、マウスピース、呼気フィルター、管）に残留する負荷用量（％）を比較することであった。
【００５５】
本治験は、ＡＥＲｘエッセンスシステムによって吸入用トレプロスチニルナトリウムが健常な志願者に投与された２回目の治験であり、従って、吸入用トレプロスチニルナトリウムの将来的開発の基礎となった。吸入用トレプロスチニルナトリウムの安全性および耐性ならびにヒトへの使用に対するその薬物動態の適切性に関するデータが得られた。
９．３  治験対象母集団の選択
９．３．１  組み入れ基準
・１回目の投薬時の年齢が１８〜５５歳の健常な男性被験者
・被験者は、研究投与期間中および研究後少なくとも３０日間、以下のような許容可能な避妊方法の使用を厭ってはならない
＊経口避妊薬＋コンドーム
＊避妊リング（ＩＵＤ）＋コンドーム
＊ペッサリーによる殺精子薬＋コンドーム
・正常な肺活量測定値（年齢、身長、性別に対して予測されるＦＶＣおよびＦＥＶ１が８０％以上；年齢、身長、性別に対して予測されるＰＥＦＲが８０％以上；ＦＥＶ１／ＦＶＣが０．７以上）
・収縮期血圧が１００ｍｍＨｇ未満であり、かつ最小血圧が６０ｍｍＨｇ未満
・スクリーニング通院前の少なくとも１２ヶ月間に喫煙していない者
・期間１における投薬前１４日以内に臨床的に有意な血清、生化学、血液学および尿検査値における異常がない
・１２誘導心電図に臨床的に有意な異常を示さない
・スクリーニング時点でアルコールおよび薬物乱用についての尿検査が陰性である
・Ｂ型肝炎表面抗原、Ｃ型肝炎抗体およびＨＩＶに対する血液検査が陰性である
・ＢＭＩが２０〜３３の範囲である
・身長が１５２ｃｍ（６０インチ）以上である
・英語の読み書きおよび会話が堪能である
・治験依頼者の指示によってＡＥＲｘエッセンスシステムを使用することができる
・治験依頼者の指示によってNebu-tec Optineb 噴霧器を使用することができる
・書面でのインフォームドコンセントを提出することができる
９．３．２  除外基準
・臨床的に有意な心血管疾患、血液学的疾患、肝疾患、腎疾患、神経学的疾患または精神疾患（これらに限定されない）の所見：
・過去１２ヵ月以内の心筋梗塞、冠状動脈バイパス手術または血管形成
・過去１２ヵ月以内の入院を要する鬱血性心不全
・コントロール不良の不整脈
・一過性脳虚血発作
・多発性硬化症の病歴
・過去１０年以内の発作または発作薬の服用
・以下（これらに限定されない）に対する臨床的に有意な臨床検査結果の所見：
・ＡＳＴ（ＳＧＯＴ）、ＡＬＴ（ＳＧＰＴ）、ＡＬＰ、ビリルビンまたはクレアチニンの上昇
・臨床的に有意であると見なされるレベルの白血球数または血小板数
・臨床的に有意であると見なされるレベルを上回るか下回るヘマトクリット
・５年以内の喘息または慢性閉塞性肺疾患の病歴。これは、経口または吸入コルチコステロイドまたは気管支拡張剤による定期的な治療を必要とする被験者を含む
・期間１の１回目の投薬前１４日以内の上気道感染症の病歴
・トレプロスチニルナトリウムまたは本製剤の任意の賦形剤に対する既知または疑わしいアレルギー
・起立性低血圧症の病歴
・９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡに対する既知または疑わしいアレルギー
・本治験の期間１の１回目の投薬前１２ヶ月以内に放射性同位体が投与された治験に参加したか、あるいは最近１２ヵ月以内に過剰な放射線（例えば、Ｘ線、放射線標識材料の取扱い）に曝露された者。過剰な放射線は、治験責任医師または被指名人によって再調査後に個別に判断される
・期間１の１回目の投薬前４ヶ月以内に新規化学物質（ＮＣＥ）の治験に参加または３ヶ
月以内に市販薬物の研究に参加
・期間１の１回目の投薬前１４日以内に処方箋または非処方箋薬物を摂取し、かつ治験責任医師または被指名人が研究結果を妨げると見なした被験者
・１回目の投薬前７日以内に１日当たり３単位以上のアルコールを消費したか、１回目の投薬前４８時間以内に任意のアルコールを消費した被験者
・治験責任医師の見解において、参加に好ましくない、あるいは治験要件を満たさない被験者
・治験責任医師の見解において、研究参加が禁止されるあらゆる他の状態
９．３．３  被験者の治療または評価の打ち切り
各被験者は、何時でも、かつ如何なる理由によっても治験から脱退する権利を有することが通知されていた。
【００５６】
治験責任医師は、被験者が治験に残ることによって被験者の健常が損なわれるか、あるいは被験者が十分に協力的でないと見なした場合には、被験者を何時でも研究から脱退させることができた。
９．４  治療法
９．４．１  実施された治療法
治験薬は、９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡを含有する製剤に入れた吸入用トレプロスチニルナトリウムであった。Ａｒａｄｉｇｍ社（Lung Rx社経由）によって、本治験で使用された「
原末」トレプロスチニルナトリウムが提供された。
【００５７】
Nebu-Tec Optineb噴霧器およびＡＥＲｘエッセンスの両方において単一の「原末」トレプロスチニルナトリウム製剤（６００μｇ／ｍＬ）を使用した。原薬溶液は、１９：１の比で９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡ（２０００ＭＢｑ／ｍＬ）を添加して希釈した。すなわち、０．０５ｍＬの９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡを０．９５０ｍＬの原薬溶液に添加した。従って、１ｍＬの放射線標識薬液は、１００ＭＢｑの９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡおよび５７０μｇのトレプロスチニルを含有していた。９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡとしての放射線標識９９ｍＴｃは、認可された供給元（すなわち、英国カーディフのヒース所在のウェールズ大学病院医学物理学学部(the Medical Physics Department, University Hospital of Wales, Heath, Cardiff)  [製造業登録番号：ＭＳ／ＩＭＰ１８５２３］）から入手した。
【００５８】
Ｏｐｔｉｎｅｂ噴霧器カップに２ｍＬの放射線標識トレプロスチニルナトリウム製剤を充填すると、噴霧器には１１４０μｇのトレプロスチニル用量が充填された。Ｏｐｔｉｎｅｂが１回の吸入当たり約４．７５μｇのトレプロスチニル肺用量を送達すると仮定すると、６回の吸入試験用量によって送達されるトレプロスチニル肺用量の推定総量は２８．５μｇであった。
【００５９】
ＡＥＲｘ製剤は、噴霧器溶液と同じ濃度の賦形剤を有していた。ＡＥＲｘエッセンスシステムでは、トレプロスチニルナトリウム製剤は５７０μｇ／ｍＬであった。ＡＥＲｘのストリップ型剤形の容積は０．０５０ｍＬであったため、充填されたトレプロスチニル用量は２８．５μｇであった。ＡＥＲｘエッセンスの研究投薬は２回の吸入で構成されており、よって、トレプロスチニル肺用量が１回の吸入当たり約１３μｇであると仮定すると、全部で約２６μｇのトレプロスチニル肺用量が送達された。薬物投与は症例報告書およびＳｉｍｂｅｃ社の薬物投与記録に文書化された。
【００６０】
投薬の間は少なくとも４８時間の間隔を置いた。
９．４．２  治験薬の同定
９．４．２．１  治験薬
治験薬は、９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡを含有する製剤に入れた吸入用トレプロスチニルナトリウムであった。Ａｒａｄｉｇｍ社（Lung Rx経由）によって、本治験で使用される「原
末」トレプロスチニルナトリウムが提供される。
９．４．２．２  放射線標識法および製剤
放射線標識プロセスは、複数の過去の治験５，６においてＡｒａｄｉｇｍ社が使用した確立されている方法に従った。ガンマを放射する放射性医薬品溶液、９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡ（放射性同位体ｔ1/2＝６時間）を、各トレプロスチニルナトリウム製剤に添加して、
エアロゾル化製品の沈着を定量化した。
【００６１】
両方の装置における１μｇの薬物当たりの比放射能は０．１８ＭＢｑ／μｇであった。
【００６２】
５０μＬのＡＥＲｘ剤形中の９９ｍＴｃＤＴＰＡの放射能は５ＭＢｑであった。この数は、５％（ｖ／ｖ）以下の２０００ＭＢｑ／ｍＬ９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡ溶液の添加に基づいていた。次いで、５０％の送達効率のために、ＡＥＲｘエッセンスシステムによって肺に５ＭＢｑ（すなわち、２×２．５ＭＢｑ）を送達する。
【００６３】
Ｏｐｔｉｎｅｂ噴霧器カップを２ｍＬの９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡトレプロスチニル溶液、すなわち、２００ＭＢｑの９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡおよび１１４０μｇの薬物で充填した。噴霧器からの各放出用量（吸入）で、１１μＬ、すなわち、１．１ＭＢｑの９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡが送達され、各投薬で６回の吸入が行われた。放出用量の７６％のみが肺に到達すると予測されたため、約５．０ＭＢｑの９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡが肺に沈着した。
【００６４】
臨床試験前に、適当なアッセイを用いてトレプロスチニルナトリウムおよび代用放射線標識の完全性を生体外で試験した（ＳＥＣおよびIEC HPLCによってトレプロスチニルナトリウムを試験し、ガンマカメラおよびガンマ計測によって９９ｍＴｃを試験した）。トレプロスチニルナトリウムおよび９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡを用いる各送達システムについて、生体外でのエアロゾル放出用量および粒径分布を評価して、その標識が高い忠実度で活性化合物に追従することを確認した。さらなる確認実験を行なって、放出されたトレプロスチニルナトリウムエアロゾルの量および質が、標識および非標識製剤（製剤に組み込まれた９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡの量は最小であり、かつ５％ｖ／ｖトレプロスチニルナトリウム製剤よりも少なかった）と同じであることを実証した。生体外での放射線標識の確認試験後、９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡとトレプロスチニルナトリウム製剤との混合および各投薬日のSimbec Research社でのＡＥＲｘ剤形の手動充填が可能になるように製造指図書原本を作
成した。
９．４．２．３  放射線量測定
被験者に投与された最大放射線量は、エアロゾル曝露および８１ｍＫｒ吸入の両方において０．２５４ミリシーベルト（ｍＳｖ）であり、これは２ヶ月のバックグラウンド放射線照射に相当する。被験者への放射線照射は、実効線量（ＥＤ）に換算して表した。これは、実際の（不均一な）線量分布と同じ危険性を含む仮定的な均一全身線量当量を特定化する一桁の数字である。
【００６５】
線量当量は、シーベルト（Ｓｖ）の単位で表し、生物組織によって吸収されるエネルギー（すなわち、Ｊｋｇ−１（グレイ））の尺度であり、また、線質係数を計算に入れる。ガンマ放射線の場合、線質係数は１である。従って、線量当量は吸収線量に等しい。実効線量当量は、加重臓器線量当量の合計である。荷重係数７は、様々な臓器および組織の異なる放射線感受性を反映している。
【００６６】
現在の治験では、ＥＤの算出は、診断、治療または研究目的のための人への放射性物質の投与に関するガイダンスノート（３）および国際放射線防護委員会（ＩＣＲＰ）の紀要１９９８（８）中のデータに基づいていた。これらの文書によって、特定の投与経路による所与の最大投与線量によって生じるＥＤに関する情報が得られた。投与線量は、ＭＢｑ（すなわち、１ベクレル＝１壊変毎秒（ＤＰＳ）、１ＭＢｑ＝１０６ＤＰＳ）に換算して
定義される。従って、８１ｍＫｒ換気イメージングのＥＤ（０．０２ｍＳｖ）は、この診断法に関する特定のデータから得られたものであった。９９ｍＴｃ投与に関するＥＤは、肺換気イメージングに関するデータから推定された。
【００６７】
比較のために、一般的な診断法であるＸ線および核医学試験９に関連するＥＤは以下のとおりである：
【００６８】
【表２】
2015129177.tif 000004
【００６９】
９．４．２．４  治験薬の在庫管理および保管
治験薬は、Simbec Research施設内の室温（＋１５℃〜＋３０℃）で安全かつ乾燥環境
下に保管された。
【００７０】
治験責任医師は、全ての薬物供給の調剤、在庫管理および説明責任を担っていた。全ての薬物供給の配置の正確な記録は、治験薬使用記録に管理した。治験中または治験完了もしくは終了時に、治験責任医師は、全ての未使用薬物供給および治験薬使用記録をＡｒａｄｉｇｍ社に戻すことになっている。
【００７１】
各投薬日に各被検者に投与された薬物の日付および量は、被検者のＣＲＦに記録された。
９．４．４  治験における用量の選択
治験における用量の選択は、吸入用トレプロスチニルナトリウムによる過去の健常な志願者の治験データに基づいていた。
【００７２】
Ｏｐｔｉｎｅｂ噴霧器カップに２ｍＬの放射線標識トレプロスチニルナトリウム製剤を充填すると、噴霧器には１１４０μｇのトレプロスチニル用量が充填された。Ｏｐｔｉｎｅｂが１回の吸入当たり約４．７５μｇのトレプロスチニル肺用量を送達すると仮定すると、６回の吸入試験用量によって送達されるトレプロスチニル肺用量の推定総量は２８．５μｇであった。
【００７３】
ＡＥＲｘ製剤は、噴霧器溶液と同じ濃度の賦形剤を有していた。ＡＥＲｘエッセンスシステムでは、トレプロスチニルナトリウム製剤は５７０μｇ／ｍＬであった。ＡＥＲｘのストリップ型剤形の容積は０．０５０ｍＬであったため、充填されたトレプロスチニル用量は２８．５μｇであった。ＡＥＲｘエッセンスの研究投薬は２回の吸入で構成されてお
り、トレプロスチニル肺用量が１回の吸入当たり約１３μｇであると仮定すると、全部で約２６μｇのトレプロスチニル肺用量が送達された。
【００７４】
臨床試験前に、適当なアッセイを用いてトレプロスチニルナトリウムおよび代用放射線標識の完全性を生体外で試験した（ＳＥＣおよびIEC HPLCによってトレプロスチニルナトリウムを試験し、ガンマカメラおよびガンマ計測によって９９ｍＴｃを試験した）。トレプロスチニルナトリウムおよび９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡを用いる各送達システムについて、生体外でのエアロゾル放出用量および粒径分布を評価して、その標識が高い忠実度で活性化合物に追従することを確認した。
９．４．５  各被験者の用量の選択および投与時期
投薬は、およそ午前１１時００分に開始して約４５分間隔で行われた。投薬後の処置のために、投薬は毎日約５時間続いた。
【００７５】
投薬日に、被験者には軽い朝食および軽い昼食が与えられた。食べ物は、投薬の前後２時間には摂取されなかった。流体物の摂取も投薬の前後２時間には控えられた。投薬の直後に、被験者は水で口をすすぎ、回収のために洗浄水を吐き出して、一切れのパンを飲み込んだ。
９．４．６．  盲検化
これは非盲検試験であった。
９．４．７  前治療および併用療法
治験中に被験者が摂取した全ての薬物がＣＲＦに記録された。被験者は、治験実施計画書のセクション３．２．２のリストに記載されているような排他的な病状を治療するために薬物を服用した場合には治験から脱退させられた。
【００７６】
短時間作用性β２吸入器は標準的な応急用具の一部であり、緊急の気管支痙攣の場合に常に使用可能な状態であった。
【００７７】
期間１の１回目の投薬前１４日以内に処方箋または非処方箋薬物を服用し、かつ治験責任医師または被指名人が治験結果を妨げると見なした被験者は治験から除外された。
９．４．８  治療方法の遵守
投薬は管理下で行われた。
９．５  有効性および安全性の項目
９．５．１  有効性および安全性の評価測定項目およびフローチャート
９．５．１．１  有効性
本治験では、ガンマを用いて放射線標識トレプロスチニルナトリウム製剤の投与後に得られた放射線標識マーカー（９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡ）沈着プロファイルを評価して、２種類の送達システムの性能を評価した。ガンマシンチグラフィーによって、口腔咽頭および肺における吸入放射線標識エアロゾルの沈着を精密かつ正確に評価する方法が提供される。
９．５．１．２  安全性の測定項目
本治験の安全性エンドポイントとしては以下が挙げられる：
・ＦＥＶ１、ＦＶＣおよびＰＥＦＲ値
・バイタルサイン
・ＥＣＧ
・有害事象
・安全性検査結果
９．５．１．３  薬力学
該当なし
【００７８】
【表３】
2015129177.tif 000005
【００７９】
９．５．２  測定項目の適切性
本治験で実施された全ての測定項目は標準的なものであった。
９．５．３  有効性の主要評価項目
ＡＥＲｘエッセンスシステムとNebu-Tec Optineb噴霧器によって送達された放射線標識トレプロスチニルナトリウムの放出用量、送達肺用量、肺中枢／肺末梢（ｓＣ／Ｐ）沈着を比較するために、ガンマシンチグラフィーを使用した。
【００８０】
さらに、以下の有効性の副次的評価項目を測定した：肺に沈着したトレプロスチニルの用量（μｇ）、両方の装置から口腔咽頭領域への放射線標識トレプロスチニルナトリウムの（放出および負荷）用量（％）、両方の装置および関連機器（例えば、マウスピース）に残留した負荷用量（％）。
９．５．４  薬物濃度の測定
トレプロスチニル血漿中薬物動態を評価するために、各試験投薬（すなわち、エッセン
スおよびＯｐｔｉｎｅｂ）後に１６個の静脈血試料を７．５ｍｌＥＤＴＡカリウムモノヴェット（ｍｏｎｏｖｅｔｔｅ）管に採取した。試料採取は、投薬前の約１時間ならびに各試験投薬の開始の＋２、＋３、＋５、＋７、＋１０、＋１５、＋２０、＋３０、＋６０、＋９０、＋１２０、＋１８０、＋２４０、＋３００および＋３６０分後に行った。従って、薬物動態の評価のために２回の投薬日にわたって計３２個の血液試料（約２５０ｍＬ）を回収した。試料採取直後に、試料は、治験番号、被験者番号、試料採取時刻、試料の種類および固有の９桁の識別番号の詳細を記したバーコード化ラベルによっって識別された。試料は、１５００×ｇおよび４℃で１０分間遠心分離した。血漿／血清の２つの等しい分割量を、元の血液試料と同様にラベルを付けた２つのポリプロピレン管に移し、分析まで約−２０℃で保管した。試料を採取し、分離室(separating room)に入れ、かつ冷凍庫
に置いた時間を治験文書に記録した。
９．６  データの品質保証
治験の開始時に、治験依頼者の代表は、治験責任医師およびスタッフと共に、最終的な実験計画書およびＣＲＦを入念に見直した。治験の過程において、モニターは定期的に治験施設を訪問して、被検者記録の完全性、ＣＲＦへの記入事項の正確性、最終的な実験計画書およびＩＣＨ医薬品の臨床試験実施に関する基準への厳守および参加登録の進捗を確認し、さらに、治験薬が仕様書に従って保管、投与および説明されているかを確認した。治験責任医師および主要な治験職員は、これらの訪問時にモニターを補佐する準備が整っていた。
【００８１】
治験責任医師は、モニターが関連のカルテを閲覧できるようにし、それらとＣＲＦの記入事項との整合性を確認した。これらの記録における被験者の身元に関する情報は治験施設には残されなかった。治験依頼者は全ての被験者の記録に関する秘密を保持していた。
【００８２】
治験データは、Simbec Research社の品質保証部門による独立した審査を受けた。
９．７  治験実施計画書で計画された統計手法および症例数の決定
９．７．１  統計および解析計画
Ｓｉｍｂｅｃ社が統計解析を行なった。データベースをロックする前でありかつ治験データのその後の解析前に確定された承認済み統計解析計画書内にデータの統計解析の完全な詳細を文書化した。
【００８３】
本治験のためのランダム化、症例数の算出および統計解析は、Simbec Research社によ
って実施された。主要な解析は、実験計画書に従って全ての研究治療および評価を完了した被検者からのデータに基づいていた。副次的解析は、治験薬の少なくとも１回の用量を投与された被検者を含む「包括解析」集団を使用した。
【００８４】
主要な解析は、ＡＥＲｘエッセンスシステムとNebu-Tec Optineb噴霧器との肺用量等量を比較することであった。副次的解析は、肺における沈着の中枢／末梢の比を評価して、ＡＥＲｘエッセンスシステムおよびNebu-Tec Optineb噴霧器間で薬物の総口腔咽頭沈着を比較した。
１０．  治験被験者
１０．１  被験者の内訳
治験のために２２人の志願者をスクリーニングした。１４人の被験者に治験薬が投与された。計１４人の被験者が実験計画書に従って無事に治験を完了した。
【００８５】
全被験者の内訳の要約を図１に示す。
１０．２  治験実施計画書からの逸脱
複数のＣＲＦの覚書(file note)が記録された。これらを以下にまとめる：
治験実施計画書には、１６人の志願者をランダム化して研究するという指示がなされていた。志願者の募集問題のために、治験の臨床段階では、１４人の被験者のみがランダム
化された。治験依頼者は、１４人のランダム化された志願者が分析に適しているという決定を下した。実験計画書に記載されていた症例数は統計学的に無意味(not powered)であ
り、従って、試験の完全性に及ぼす影響はなかった（参照：１０ＡＰＲ０８／ＡＪ／０２）。
【００８６】
−１日目に繰り返し血圧を測定し、追加したＣＲＦの覚書の頁に書き留められた。治験の除外基準の一つは『起立性低血圧症の病歴』である。これが志願者マスターファイル（ＶＭＦ）に文書化されていない場合、志願者が質問を受けた際に治験医師に対してこの情報を提供する可能性は低いと考えられた。起立性低血圧症の所見がないことを確認するために、Ｓｉｍｂｅｃ社に到着後すぐに仰臥位ならびに立位での血圧測定を行うことが決められていた。
１１．  有効性／薬物動態学的／薬力学的評価
１１．１  解析したデータセット
従って、スクリーニング時に適格性があり、１回目の投薬日にランダム化され、かつ１回分の治験薬を投与された１４人の被験者全員が安全性解析対象集団に組み入れられた。
【００８７】
１４人の被験者全員が２回の研究期間を完了し、十分な血液試料が採取されて時間プロファイルによる血漿中濃度が得られたため、薬物動態解析対象集団およびガンマシンチグラフィー解析対象集団に組み入れられた。
１１．２  人口統計特性および他の基準値の特性
治験前の被験者の平均年齢は３８．０歳（ＳＤ＝１３．０）、平均体重は８５．７ｋｇ（ＳＤ＝１３．１）、平均身長は１７７．７１ｃｍ（ＳＤ＝７．８５）であった。
１１．３  治療の遵守状況の測定
全てのパッチを、治験医師が投与および除去し、第２群のスタッフがチェックした。臨床スタッフが７２時間にわたってにパッチを定期的にチェックし、被験者が治療に遵守していることを確認した。
１１．４  有効性および薬物動態学的結果ならびに個々の被験者データの一覧表
１１．４．１  有効性（放射線標識分布）および薬物動態の解析
１１．４．１．１  有効性（放射線標識分布）
【００８８】
【表４】
2015129177.tif 000006
【００８９】
放出用量（％ＥＤ）、すなわち、ＡＥＲｘまたはＯｐｔｉｎｅｂのマウスピースから排出された放射線標識エアロゾルの割合としての沈着した放射能の平均回収率を表１１．４
．１．１．１に示す。個々のデータをセクション１４．２、表１４．２．１．１および１４．２．１．２に示す。両方の装置において、放出エアロゾルの大部分が肺に沈着した。その平均値は、ＡＥＲｘでは９１．６４％（±７．８９％）、Ｏｐｔｉｎｅｂでは７９．４２％（±９．５７％）であった。分散分析（ＡＮＯＶＡ）を行い、最小自乗（ＬＳ）平均（９５％信頼区間（ＣＩ）間の差は１２．２２％（５．２９〜１９．１５％）（表１１．４．１．１．４）であり、ＡＥＲｘ投与後に肺に沈着した割合がＯｐｔｉｎｅｂ投与後よりも統計学的に有意に高いことを示した。Ｏｐｔｉｎｅｂの場合の１２．０５％と比較して、ＡＥＲｘの肺沈着に関連する変動係数（ＣＶ）は８．６１％であった。
【００９０】
口腔咽頭における全沈着（すなわち、洗口剤、口腔、咽頭および胃の合計）の平均は、ＡＥＲｘでは８．３６％（±７．８９％）、Ｏｐｔｉｎｅｂでは２０．５８５（±９．５７％）であった。ＬＳ平均値の差（表１１．４．１．１．４）は、−１２．２２（−１９．１５〜−５．２９）であり、ＡＥＲｘ投与後と比較して、Ｏｐｔｉｎｅｂ投与後に統計学的に有意に高い割合の沈着が口腔咽頭領域に生じたことを示した。
【００９１】
各装置のマウスピース上の放射能の保持率を負荷用量（放射能）（％）に換算して表した。ＡＥＲｘにおける平均値（表１１．４．１．１．２）は２．３５％（±０．９１％）であり、Ｏｐｔｉｎｅｂ（表１１．４．１．１．３）では７．１９％（±９．３１％）であった。ＬＳ平均値の差（表１１．４．１．１．４）は、−４．８４％（−９．９２〜０．２３％）であり、これらの装置間に統計学的に有意な差がないことを示した。しかし、ＣＶ値は、この位置における沈着がＡＥＲｘでの３８．７８％であるのと比較して、Ｏｐｔｉｎｅｂ（ＣＶ＝１２９．５２）ではより変動的であることを示した。
【００９２】
肺における放射線標識分布パターンを、クリプトン−８１ｍガス分布に対して正規化した中枢／末梢比（ｓＣ／Ｐ）に換算して記載した。ｓＣ／Ｐ平均値は、ＡＥＲｘでは１．３９（±０．２９）であり、Ｏｐｔｉｎｅｂでは３．９６（±３．０３）（表１１．４．１．１．１）であった。ＬＳ平均値間の差（表１１．４．１．１．４）は、−２．５７（−４．３７〜−０．７８）であり、２種類の装置間の差は統計学的に有意に異なること、すなわち、肺における放射線標識分布はＯｐｔｉｎｅｂと比較してＡＥＲｘ投与後はより均一であることを示した。ＡＥＲｘのｓＣ／Ｐに関連する変動係数は２０．６８％であり、対照的に、ＯｐｔｉｎｅｂのＣＶは７６．５１％（表１１．４．１．１．１）であった。
【００９３】
表１１．４．１．１．１に報告されている質量収支データは、個々の透過画像から導き出された組織減衰補正係数が正確であることを示した。ＡＥＲｘ投与後に回収された総放射能についての平均質量収支値は９９．７６％（±４．０５％）であり、Ｏｐｔｉｎｅｂ送達後は８９．３７％（±１５．６５％）であった。
【００９４】
【表５】
2015129177.tif 000007
【００９５】
【表６】
2015129177.tif 000008
【００９６】
肺への用量は、各装置内の用量保持および投薬溶液の測定濃度に対する肺に送達された割合の調整後に、トレプロスチニル（μｇ）に換算して算出した。肺への算出平均用量は、ＡＥＲｘではトレプロスチニル２６．０７μｇ（±５．３３μｇ）（表１１．４．１．１．２）であり、Ｏｐｔｉｎｅｂ投与後では１９．５８μｇ（±５．４７μｇ）（表１１．４．１．１．３）であった。
【００９７】
【表７】
2015129177.tif 000009
【００９８】
【表８】
2015129177.tif 000010
【００９９】
導き出された薬物動態パラメータを表１１．４．１．２．１に示す。ＡＥＲｘ治療での平均Ｃｍａｘ（ｎｇ／ｍＬ）は０．６４０ｎｇ／ｍＬ（±０．２９２ｎｇ／ｍＬ）であり、Ｏｐｔｉｎｅｂでの対応する値は０．７６２（±０．３１９ｎｇ／ｍＬ）であった。幾何ＬＳ平均値（９０％ＣＩ）の比は８２．８８（６８．９９〜９９．５６）（表１１．４．１．２．２）であり、２つの治療におけるＣｍａｘ値間に統計学的に有意な差が存在することを示した。
【０１００】
ＡＥＲｘおよびＯｐｔｉｎｅｂにおける平均Ｔｍａｘ値（時間）はそれぞれ、０．３４３時間（±０．１７４時間）および０．１４９（±０．０６２時間）であった（表１１．４．１．２．１）。Ｔｍａｘの中央値（９５％ＣＩ）における差（表１１．４．１．２．２）は１１．５分（５．０〜２０．０）であった。ｐ値は０．００４６であり、ＡＥＲｘおよびＯｐｔｉｎｅｂ投与間に統計学的に有意な差が存在することを示した。
【０１０１】
ＡＥＲｘおよびＯｐｔｉｎｅｂにおける平均ＡＵＣＴ値（ｎｇ．ｈ／ｍＬ、±ＳＤ）はそれぞれ、０．７４２ｎｇ．ｈ／ｍＬ（０．２２０ｎｇ．ｈ／ｍＬ）および０．５３１ｎｇ．ｈ／ｍＬ（０．１５５ｎｇ．ｈ／ｍＬ）であった。ＡＥＲｘおよびＯｐｔｉｎｅｂに
おける平均ＡＵＣＩ値（ｎｇ．ｈ／ｍＬ、±ＳＤ）はそれぞれ、０．７６２ｎｇ．ｈ／ｍＬ（０．２１８ｎｇ．ｈ／ｍＬ）および０．５５３ｎｇ．ｈ／ｍＬ（０．１５４ｎｇ．ｈ／ｍＬ）（表１１．４．１．２．１）だった。
【０１０２】
ＡＵＣＴの幾何ＬＳ平均値（９０％ＣＩ）の比は１３９．１１（１１６．９０〜１６５．５４）であり、このＡＵＣパラメータは、Ｏｐｔｉｎｅｂ投与後よりもＡＥＲｘ投与後の方が統計学的に有意に高いことを示した。ＡＵＣＩについても同様の結果が観察され、幾何ＬＳ平均値の比は、１３７．１５（１１７．０２〜１６０．７５）（表１１．４．１．２．２）であった。
【０１０３】
ＡＥＲｘ投与後のトレプロスチニルの平均（±ＳＤ）排出速度定数（時間）は０．９７０時間（±０．３２６時間）であり、Ｏｐｔｉｎｅｂでは１．１２３時間（±０．３１７時間）であった。ＡＥＲｘおよびＯｐｔｉｎｅｂにおけるトレプロスチニルの平均（±ＳＤ）排出半減期（時間）はそれぞれ、０．８７０時間（±０．５７７時間）および０．６６９時間（±０．２０５時間）（表１１．４．１．２．１）であった。
【０１０４】
トレプロスチニルの分布容積（Ｖｄ）を表１１．４．１．２．１に示す。平均Ｖｄ（ｍＬ±ＳＤ）は、ＡＥＲｘ投与後では４４０１８．２８１ｍＬ（±２９１２２．９７５ｍＬ）、Ｏｐｔｉｎｅｂ投与後は３５９８８．１３４ｍＬ（±１８６６６．９５２ｍＬ）であった（表１１．４．１．２．１）。
【０１０５】
【表９】
2015129177.tif 000011
【０１０６】
【表１０】
2015129177.tif 000012
【０１０７】
薬物動態パラメータＣｍａｘ、ＡＵＣＴおよびＡＵＣＩを、シンチグラフィーデータから決定される肺への送達用量に対して正規化した（表１４．２．１．５および１４．２．１．６）。
【０１０８】
ＡＥＲｘおよびＯｐｔｉｎｅｂにおける平均用量正規化Ｃｍａｘ（ｎｇ／ｍＬ／μｇ）値はそれぞれ、０．０２４（±０．０８）および０．０４１（±０．０１６）であった（表１１．４．１．２．３）。用量正規化Ｃｍａｘの幾何ＬＳ平均値の比（表１１．４．１．２．４）は６１．５１（５２．５３〜７２．０２）であり、この値がＯｐｔｉｎｅｂよりもＡＥＲｘ投与後の方が統計学的に有意に低いことを示した。
【０１０９】
ＡＥＲｘおよびＯｐｔｉｎｅｂにおける平均用量正規化ＡＵＣＴ（ｈｒ．ｎｇ／ｍＬ／μｇ）値（±ＳＤ）はそれぞれ、０．０２８（０．００５）および０．０２９（０．０１２）であった（表１１．４．１．２．３）。ＡＥＲｘおよびＯｐｔｉｎｅｂにおける平均用量正規化ＡＵＣＩ（ｈｒ．ｎｇ／ｍＬ／μｇ）値（±ＳＤ）はそれぞれ、０．０２９（０．００５）および０．０３０（０．０１２）であった（表１１．４．１．２．３）。
【０１１０】
用量正規化ＡＵＣＴの幾何ＬＳ平均値の比（９０％ＣＩ）（表１１．４．１．２．４）は１０３．２４（９０．６３〜１１７．６１）であり、肺に送達された用量に対する正規化後にこれらの治療間に統計学的に有意な差が存在しないことを示した。ＡＵＣＩについても同様の観察がなされ、幾何ＬＳ平均値の比（９０％ＣＩ）は１０１．７９（９０．０４〜１１５．０７）であること、すなわち、これらの２種類の治療に関する値には統計学的に有意な差が存在しないことを示した。
【０１１１】
【表１１】
2015129177.tif 000013
【０１１２】
結論
１１．４．７．１  有効性（放射線標識分布）
両方の装置において、放出されたエアロゾルの大部分が肺に沈着されたが、ＡＥＲｘにおける平均値（９１．６４％±７．８９％）は、Ｏｐｔｉｎｅｂの平均値（７９．４２％±９．５７％）よりも統計学的に有意に高かった。ＡＥＲｘによる肺沈着に関連する変動係数（ＣＶ）はＯｐｔｉｎｅｂにおける１２．０５％と比較して８．６１％であり、肺に送達された用量における変動が小さいことを示した。
【０１１３】
総口腔咽頭沈着の平均値は、Ｏｐｔｉｎｅｂ投与後（２０．５８５％、±９．５７％）と比較してＡＥＲｘ投与後（８．３６％、±７．８９％）に統計学的に有意に低かった。
【０１１４】
各装置のマウスピース上の放射能の保持率（負荷用量（％））には統計学的に有意な差は存在しなかった。ＡＥＲｘおよびＯｐｔｉｎｅｂにおける平均値はそれぞれ、２．３５％（±０．９１％）および７．１９％（±９．３１％）であった。
【０１１５】
肺における放射線標識分布のパターン（ｓＣ／Ｐ）は、中枢気道に多量に沈着したＯｐｔｉｎｅｂ（３．９６、±３．０３）よりもＡＥＲｘ（１．３９、±０．２９）の方がより均一であることが分かった。２種類の治療における差は統計学的に有意であった。
【０１１６】
質量収支データは、個々の透過画像から導き出された組織減衰補正係数が正確であることを示した。ＡＥＲｘ投与後に回収された総放射能の平均質量収支値は、９９．７６％（±４．０５％）であり、Ｏｐｔｉｎｅｂ送達後は８９．３７％（±１５．８５％）であった。
１１．４．７．２  薬物動態
ＡＥＲｘ投与後の平均Ｃｍａｘ（ｎｇ／ｍＬ）（０．６４０ｎｇ／ｍＬ、±０．２９２ｎｇ／ｍＬ）は、Ｏｐｔｉｎｅｂ投与後（０．７６２ｎｇ／ｍＬ、±０．３１９ｎｇ／ｍＬ）よりも統計学的に有意に低かった。
【０１１７】
２種類の治療におけるＣｍａｘまでの時間、すなわちＴｍａｘも統計学的に有意に異なっており、ＡＥＲｘにおける平均値（０．３４３時間、±０．１７４時間）は、Ｏｐｔｉｎｅｂの平均値（０．１４９時間、±０．０６２時間）よりも有意に長かった。
【０１１８】
ＡＥＲｘにおける平均ＡＵＣＴおよびＡＵＣＩ値（ｎｇ．ｈ／ｍＬ）は、Ｏｐｔｉｎｅｂについて算出された値よりも統計学的に有意に低かった。ＡＥＲｘおよびＯｐｔｉｎｅｂにおける平均ＡＵＣＴ（ｎｇ／ｍＬ．ｈ）値はそれぞれ、０．７４２ｎｇ／ｍＬ．ｈ（±０．２２０ｎｇ／ｍＬ．ｈ）および０．５３１ｎｇ／ｍＬ．ｈ（±０．１５５ｎｇ／ｍＬ．ｈ）であった。ＡＥＲｘおよびＯｐｔｉｎｅｂの平均ＡＵＣＩ値（ｎｇ．ｈ／ｍＬ）
はそれぞれ、０．７６２ｎｇ／ｍＬ．ｈ（±０．２１８ｎｇ／ｍＬ．ｈ）および０．５５３ｎｇ／ｍＬ．ｈ（±０．１５４ｎｇ／ｍＬ．ｈ）であった。
１１．４．７．３  有効性（放射線標識分布）および薬物動態を統合した結論
肺における薬物沈着パターンの差異はトレプロスチニルの吸収に影響を与えたと結論づけることができる。
【０１１９】
より均一なＡＥＲｘ沈着の平均Ｔｍａｘ（０．３４３時間）は、より中枢に沈着したＯｐｔｉｎｅｂ沈着の平均Ｔｍａｘ（０．１４９時間）よりも有意に長かった。
【０１２０】
用量調整したＣｍａｘ（幾何ＬＳ平均値）の比は６１．５１％であり、用量調整していない比は８２．８８％であった。従って、ＡＥＲｘによって肺により多くの用量が送達されるにも関わらず、その後のピーク血漿中濃度はＯｐｔｉｎｅｂ投与後に観察された濃度よりも低かった。
【０１２１】
用量調整したＡＵＣパラメータの統計解析、すなわち、ＡＵＣＴおよびＡＵＣＩは、用量調整していないパラメータに対する所見とは対照的に、これらの治療には統計学的に有意な差が存在しないことを示した。この所見は、Ｏｐｔｉｎｅｂ投与後に肺に送達される用量が少ないにも関わらず、より中枢への沈着による薬物吸収度は、ＡＥＲｘ沈着後のより末梢に分布する場合よりも高いことを示している。
１２．  安全性の評価
１２．１  曝露の程度
計１４人の被験者が２回の機会にトレプロスチニルナトリウムに曝露された。
１２．２  有害事象（ＡＥ）
１２．２．１  有害事象の簡潔な要約
治験薬による投薬前に報告された有害事象はなかった。治験の間、重篤な有害事象（ＳＡＥ）または疑わしい予期せぬ重篤な副作用（ＳＵＳＡＲ）は全く報告されなかった。
【０１２２】
治験の間、治療中に発生した計２７件の有害事象が９人の被験者によって報告された。ＡＥＲｘエッセンスシステムによるトレプロスチニルナトリウムの投与後に１５件の有害事象が記録された。Nebu-Tec Optinebによるトレプロスチニルナトリウムの投与後に１２件の有害事象が記録された。
１２．２．２  有害事象の表示
臓器系ごとの有害事象を経験した被験者数を含む臓器系および基本語ごとの有害事象の要約を表１２．２−１に示す。関連性ごとの有害事象の要約を表１２．２−２に示す。
【０１２３】
【表１２】
2015129177.tif 000014
【０１２４】
【表１３】
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【０１２５】
１２．２．３  有害事象の分析
治療中に発生した計２７件の有害事象が９人の被験者によって報告された。ＡＥＲｘエッセンスシステムによるトレプロスチニルナトリウムの投与後に１５件の有害事象が記録された。Nebu-Tec Optinebによるトレプロスチニルナトリウムの投与後に１２件の有害事象が記録された。１件の有害事象は治験薬との関連がおそらくないと見なされ、１５件の
有害事象は治験薬との関連があると見なされ、１１件は、治験薬との関連がおそらくあると見なされた。２３件の有害事象の強さは軽度であると記録され、４件の有害事象の強さは中度であると記録された。
【０１２６】
ＡＥＲｘエッセンスシステムによるトレプロスチニルナトリウムの投与後に被験者０７によって１件の孤立性血管迷走神経発作が報告された。これは、治験薬投与の２２分後に生じ、１４分間続いた。この有害事象は、治験薬との関連があると見なされ、強さは中度であった。
【０１２７】
トレプロスチニルナトリウムの投与後に最も多く記録された有害事象は、咳（湿性咳嗽および乾性咳嗽）、頭痛、胸部絞扼感および胸痛、ふらつきならびに喉の乾燥および痛みであった。
１２．４．１  被験者ごとの個々の臨床検査測定および異常な検査値の一覧表
スクリーニングおよび試験後評価時に、臨床検査室評価（生化学、血液学および尿検査）を行なった。スクリーニング時および−１日目に、アルコールを含む薬物乱用評価を行なった。治験の間、正常な範囲外の各臨床検査項目の臨床的有意性が治験責任医師によって決定された。
１２．４．２  各臨床検査項目の評価
治験の間、臨床検査項目における臨床的に有意な変化は観察されなかった。
【０１２８】
治験医師の見解では、範囲外の数値は臨床的に有意だとは見なされなかった。
１２．５  バイタルサイン、身体的所見および安全性に関連する他の観察項目
１２．５．１  バイタルサイン
治験の間、バイタルサイン（血圧、脈拍および口腔温）における臨床的に有意な変化は観察されなかった。
【０１２９】
−１日目の夕方に、起立性低血圧症を除外するために、反復血圧測定として立位での血圧測定を行なった（ＣＲＦの覚書を参照：１７ＡＰＲ０８／ＡＪ／０３）。治験医師の見解では、範囲外の数値はいずれも臨床的に有意だとは見なされなかった。
１２．５．４  呼吸器の機能
全てのスクリーニングの結果は、治験への参加のために実験計画書によって求められている予測値の８０％を超えていた。
１２．５．５  併用薬物
治験の間、併用薬物は服用されなかった。
１２．５．６  薬物／アルコールおよびＨＩＶ／肝炎のスクリーニング
全被験者の各投薬前の薬物乱用についての結果は陰性だった。
１２．６  安全性の結論
治療の間、計２７件の有害事象が１４人の被験者によって報告された。Nebu-Tec Optinebによるトレプロスチニルナトリウムの投与後に１２件の有害事象が記録された。１件の有害事象は治験薬との関連がおそらくないと見なされ、１５件の有害事象は治験薬との関連があると見なされ、１１件は、治験薬との関連がおそらくあると見なされた。２３件の有害事象の強さは軽度であると記録され、４件の有害事象の強さは中度であると記録された。
【０１３０】
ＡＥＲｘエッセンスシステムによるトレプロスチニルナトリウムの投与後に被験者０７によって１件の孤立性血管迷走神経発作が報告された。これは、治験薬投与の２２分後に生じ、１４分間続いた。この有害事象は、治験薬との関連があると見なされ、強さは中度であった。
【０１３１】
治験の間、重篤な有害事象（ＳＡＥ）または疑わしい予期せぬ重篤な副作用（ＳＵＳＡ
Ｒ）の報告はなかった。
【０１３２】
治験の間、臨床検査項目、身体検査、バイタルサイン、呼吸器の機能またはＥＣＧにおける臨床的に有意な変化はなかった。
【０１３３】
結論として、本治験では健常な被験者において吸入用トレプロスチニルナトリウムは十分な耐性を有すると見なされた。
１３．  考察と全般的結論
治験の間、重篤な有害事象（ＳＡＥ）または疑わしい予期せぬ重篤な副作用（ＳＵＳＡＲ）の報告はなかった。
【０１３４】
治験の間、臨床検査項目、身体検査、バイタルサイン、呼吸器の機能またはＥＣＧにおける臨床的に有意な変化はなかった。
【０１３５】
結論として、本治験では健常な被験者において吸入用トレプロスチニルナトリウムは十分な耐性を有すると見なされた。
【０１３６】
シンチグラフィー分析は、両方の装置において、放出用量の大部分が肺に沈着したことを示した（表１１．４．１．１．１）。但し、ＡＥＲｘによる肺沈着は、Ｏｐｔｉｎｅｂ装置による沈着よりも統計学的に有意に多かった。余分な肺沈着はＯｐｔｉｎｅｂにおいて統計学的により多かったが、両方の装置において少なかった（表１１．４．１．１．４）。
【０１３７】
シンチグラフィーデータを肺に送達された負荷用量の割合を測定するために使用し、次いで、トレプロスチニル（μｇ）に換算した肺用量を推定するために利用した。ＡＥＲｘについての肺用量の算出は、投薬後、すなわち装置および剤形中に保持された負荷用量の割合（％）に対して肺への放出用量を正規化することによって導き出された。ＡＥＲｘストリップ内の実際の用量（１回の用量は２本のストリップで構成されていた）は、各投薬日に放射線標識薬物の貯蔵溶液のＨＰＬＣアッセイによって測定された実際の濃度に対して調整されたトレプロスチニルの名目濃度から算出された（表１４．２．１．５を参照）。
【０１３８】
ＡＥＲｘからの１回の投与によって、投薬後の装置内に異常に高い放射能が保持された（被験者００４、表１４．２．１．１を参照）。結果として、この被験者についての肺への算出用量は、他の被験者について観察された用量よりも少なかった。この被験者のガンマシンチグラフィー画像の検査によって、ＡＥＲｘのストリップの１本の層が投薬中に剥離し、それにより装置内に異常に高い放射能の保持が生じたことを確認した。この事象によって、ＡＥＲｘの性能の全体的な変動が上昇したが、この被験者のデータは統計解析から除外されなかった。
【０１３９】
Ｏｐｔｉｎｅｂ装置は、各用量（ばらばらの６吹き）を計量する薬物貯蔵部（噴霧器カップ）を含んでいた。被験者が利用可能な用量を測定するために、被験者への投薬後に、各装置における１回の放出用量（ＥＤ）を回収するための生体外試験を行なった。この試験中に回収された薬物の量を、ＨＰＬＣ分析を用いて定量化した。ＥＤをマウスピース滞留量に対して補正し、肺への用量（表１４．２．１．６を参照）を、肺における放出用量（％）とＥＤ（マウスピース滞留量に対して補正）との積として算出した。
【０１４０】
肺における放射線標識の分布のパターン（ｓＣ／Ｐ）（表１１．４．１．１．１）の解析は、ＡＥＲｘによる沈着が統計学的により均一であったこと、すなわちＯｐｔｉｎｅｂ投薬後に主に中枢気道に沈着するのと比較して、末梢気道に浸透したこと（表１１．４．
１．１．５）を示した。
【０１４１】
ＰＫデータの解析は、２種類の治療間のいくつかの統計学的に有意な差を示し、Ｏｐｔｉｎｅｂと比較してＡＥＲｘにおけるＣｍａｘはより低く、かつＴｍａｘはより長い（表１１．４．１．２．２）。ＡＵＣＴおよびＡＵＣＩパラメータの解析は、両方の値がＯｐｔｉｎｅｂと比較してＡＥＲｘ投与後に統計学的に有意に高いことを示した（表１１．４．１．２．２）。
【０１４２】
しかし、主要なＰＫパラメータも、肺に送達されたトレプロスチニルの用量に対して正規化された後に算出された（表１１．４．１．２．３に解析され、かつ表１４．２．１．５および表１４．２．１．６の一覧に記載されている）。用量正規化Ｃｍａｘの統計解析は、ＡＥＲｘがＯｐｔｉｎｅｂ後の約６０％であることを示した（表１１．４．１．２．４）。用量正規化ＡＵＣパラメータの統計解析は、肺への用量はＡＥＲｘ投与後により多くなるが、これらの治療間に統計学的に有意な差がないことを示した（表１１．４．１．２．４）。
【０１４３】
従って、肺におけるトレプロスチニルの沈着パターンが（ＣｍａｘおよびＴｍａｘによって測定される）全身アベイラビリティの割合に影響を与えたが、（用量正規化ＡＵＣＴおよびＡＵＣＩによって測定される）吸収の相対的程度には影響を与えなかったと推測できる。
【０１４４】
上記は単に本発明の原理を示すものである。当業者であれば、本明細書に明確に記載または図示されていないが、本発明の原理を具現化し、かつ本発明の精神および範囲に含まれる様々な構成を考案できることが理解されるであろう。さらに、本明細書に記載されている全ての実施例および条件付きの言葉は、読者が本発明の原理および本発明者らが寄与する当該技術の促進に対する概念の理解を助けることを主に意図するものであり、そのような具体的に記載された実施例および条件に限定するものとして解釈されるべきではない。加えて、本発明の原理、側面および態様ならびに具体的なその実施例を詳述する本明細書中の全ての記載は、その構造的および機能的均等物の両方を包含することを意図するものである。さらに、そのような均等物は、現在知られている均等物および今後開発される均等物、すなわち、構造に関わらず同じ機能を実行するあらゆる開発される要素の両方を含むことが意図されている。従って、本発明の範囲は、本明細書に図示および記載されている典型的な態様に限定されることは意図されていない。むしろ、本発明の範囲および精神は、添付の請求の範囲によって具現化されている。
参考文献一覧
【０１４５】
【表１４】
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【０１４６】
上記は特定の好ましい態様について述べているが、本発明はそれらに限定されないことが理解されるであろう。当業者には、開示されている態様に対する様々な修正が可能であり、かつそのような修正が本発明の範囲に含まれる意図であることが分かるであろう。
【０１４７】
本明細書で引用されている全ての刊行物、特許出願および特許は、全ての内容が参照により本明細書に組み込まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９Ａ】
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【図１９Ｂ】
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【図１９Ｃ】
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【図１９Ｄ】
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【図１９Ｅ】
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【図１９Ｆ】
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【図１９Ｇ】
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【図１９Ｈ】
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【手続補正書】
【提出日】平成27年4月3日(2015.4.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
トレプロスチニルまたはその薬学的に許容される塩を含む、トレプロスチニルで治療または予防が可能な疾患または状態を治療または予防するためのエアロゾル化製剤であって、ここで、該エアロゾル化製剤は、１０ミクロン以下の粒子または液滴の空気力学的直径を有し、それを必要としている対象に吸入によって投与され、かつ、該投与によって、該製剤の肺中枢／肺末梢沈着比が１〜２．０の範囲内となるように該トレプロスチニルが肺深部に沈着される製剤。
【請求項２】
該製剤の肺に対する該肺中枢／肺末梢沈着比が１〜１．５である、請求項１に記載の製剤。
【請求項３】
該製剤の肺に対する該肺中枢／肺末梢沈着比が１〜１．４５である、請求項１に記載の製剤。
【請求項４】
該対象がヒトである、請求項１に記載の製剤。
【請求項５】
肺高血圧症の治療に適用される、請求項１に記載の製剤。
【請求項６】
トレプロスチニルナトリウムを含む、請求項１に記載の製剤。
【請求項７】
該空気力学的直径が２ミクロン〜１０ミクロンの範囲である、請求項１に記載の製剤。
【請求項８】
該空気力学的直径が５ミクロン以下である、請求項１に記載の製剤。
【請求項９】
リポソームを含まない製剤である、請求項１に記載の製剤。
【外国語明細書】
2015129177000001.pdf