(57)【要約】【課題】本発明の目的は、マゴジャクシの抽出物を含有することを特徴とする、免疫賦活剤を提供することである。【解決手段】マゴジャクシ抽出物は、腸管パイエル板におけるインターフェロンγの産生促進作用、パイエル板細胞やヘルパーＴ細胞の細胞数を増加させる作用及び脾臓でのインターフェロンγの産生促進作用を有することから、優れた免疫賦活作用を示した。従って、安全で優れた免疫賦活作用を有する医薬品、医薬部外品または食品として利用できる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
マゴジャクシの抽出物を含有することを特徴とする免疫賦活剤。
【請求項２】
腸管パイエル板に含まれる細胞数を増加させる請求項１記載の免疫賦活剤。
【請求項３】
腸管パイエル板に含まれるヘルパーＴ細胞数を増加させる請求項１記載の免疫賦活剤。
【請求項４】
腸管パイエル板におけるインターフェロンγの産生を促進させる請求項１記載の免疫賦活剤。
【請求項５】
脾臓におけるインターフェロンγの産生を促進させる請求項１記載の免疫賦活剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、マゴジャクシの抽出物を含有することを特徴とする、免疫賦活剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
免疫とは、体内に侵入した細菌やウィルス等による生体への攻撃から自己を防御する、生体の恒常性維持の機構である。運動不足やストレス、食生活の偏りなどにより、免疫力が低下すると、癌、感染症、アレルギー症状等の各種疾患が誘発することが知られている。免疫力を維持することは、健康を維持することと同義であるといえる。免疫賦活には、腸管の免疫系と脾臓の免疫系を活性化する必要がある。
【０００３】
腸管は、食物を消化し栄養素を体内に取り込む器官であるが、それと同時に細菌やウィルス等の侵入に絶えず曝されている器官でもある。そこで、哺乳動物は、体内への侵入を防ぐ腸管免疫という生体防御システムを発達させてきた。腸管免疫系は外敵からの最前線のバリアーとして働いており、体内の６０％以上のリンパ球や抗体が腸管に集中していることから、体内で最大の免疫系と考えられている。この腸管免疫系において中心的な役割を果たしているのが、パイエル板と呼ばれる組織である（非特許文献１）。パイエル板は、小腸の管腔側にある集合リンパ小節で多数のリンパ球が集まっている。
【０００４】
脾臓は、全身免疫を司る主要な器官である。白脾髄と赤脾髄の２種類の組織から成り、免疫機能は、リンパ球が集まっている白脾髄が担っている（非特許文献２）。脾臓は、血流を介して流入した全身由来の抗原に対する免疫応答を行っているため、脾臓が障害を受けると、全身性の様々な疾患につながる。
【０００５】
マゴジャクシ（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｎｅｏｊａｐｏｎｉｃｕｍ）は、マンネンタケ科マンネンタケ属に属するきのこである。マゴジャクシに近い種類として、赤芝（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｌｕｃｉｄｕｍ）、紫芝（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ）、松杉霊芝（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｔｓｕｇａｅ）が知られており、時として混同されることもあるが、今関六也により別種とされている（非特許文献３）。ここで、マゴジャクシは、マツ、モミなどの針葉樹に発生する針葉樹性の木材腐生菌であり日本の固有種である。それ
に対し、マンネンタケは広葉樹根株腐朽菌で北半球の温帯地域に広く分布するため、分類学上でも両者は明確に区別されている。またマゴジャクシは、古くから食経験があることも知られている（非特許文献４〜７）。
【０００６】
マゴジャクシには、虫歯や歯周病、食中毒の原因菌に対しての抗菌剤（特許文献１）、高血圧抑制剤（特許文献２）、オピオイドレセプター傷害抑制による皮膚機能改善剤（特許文献３）、エストロゲンレセプター傷害抑制による更年期障害予防剤（特許文献４）などが知られている。また、栽培方法に関する出願もされている(特許文献５)。しかしながら、先行する特許文献にはマゴジャクシの免疫賦活剤に関して、全く記載されていない。
【０００７】
また、これまでにマゴジャクシによる腸管パイエル板におけるインターフェロンγの産生促進作用、パイエル板細胞やヘルパーＴ細胞の細胞数を増加させる作用及び脾臓でのインターフェロンγの産生促進作用も報告されていない。
【特許文献１】特開２０１２−５１８９７号公報
【特許文献２】特開２００８−２５５０４１号公報
【特許文献３】特開２００６−１８３７号公報
【特許文献４】特開２００３−１９５０９７号公報
【特許文献５】特開２０１３−２２６１３０号公報
【非特許文献１】清野宏編集、「粘膜免疫」、中山書店、２００１年、６−１２頁
【非特許文献２】Ｅｖｅｌｙｎｅ  Ｍ．Ｋｉｒｋｗｏｏｄ，Ｃａｔｒｉｏｎａ  Ｊ．Ｌｅｗｉｓ、「絵とき免疫学入門」、オーム社、１９８５年、２１頁
【非特許文献３】今関六也、本郷次雄編著「原色日本新菌類図鑑ＩＩ」、保育社、１９８９年、１７６頁
【非特許文献４】Ｉｍａｚｅｋｉ、（１９３９）Ｓｔｕｄｉｅｓ  ｏｎＧａｎｏｄｅｒｍａ  ｏｆ  Ｎｉｐｐｏｎ．  Ｂｕｌｌ．Ｔｏｋｙｏ  Ｓｃｉ．Ｍｕｓ．（１）２９−５２．
【非特許文献５】Ｈａｔｔｏｒｉ、Ｔ．；  Ｒｙｖａｒｄｅｎ、Ｌ．（１９９４） Ｔｙｐｅ  ｓｔｕｄｉｅｓ  ｉｎ ｔｈｅ  Ｐｏｌｙｐｏｒａｃｅａｅ  ２５Ｓｐｅｃｉｅｓ  ｄｅｓｃｒｉｂｅｄ  ｆｒｏｍ  Ｊａｐａｎ  ｂｙ  Ｒ．Ｉｍａｚｅｋｉ  ａｎｄ  Ａ．Ｙａｓｕｄａ．Ｌａｒｉｘ ｌｅｐｔｏｌｅｐｉｓ  Ｍｙｃｏｔａｘｏｎ（５０）２７―４６
【非特許文献６】今関六也・大谷吉雄・本郷次雄編（１９８８）山渓カラー名鑑日本のきのこ ｐ．４８５．山と渓谷社
【非特許文献７】池田良幸、（２００５）北陸のきのこ図鑑  Ｎｏ．１１８３  橋本確文堂．
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の目的は、マゴジャクシの抽出物を含有することを特徴とする免疫賦活剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、鋭意研究した結果、マゴジャクシの抽出物に免疫賦活作用があることを見出した。さらに詳しくは、マゴジャクシの抽出物に、腸管パイエル板におけるインターフェロンγの産生促進作用、パイエル板細胞やヘルパーＴ細胞の細胞数を増加させる作用及び脾臓でのインターフェロンγの産生促進作用を見出し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
本発明に用いるマゴジャクシの抽出物は、子実体、菌糸体、天産物、栽培物及び培養物などを問わず使用することができ、広く中国や日本市場などで流通しているものを用いることができる。また、必要に応じてそのままの状態、破砕物、或いは乾燥物などを適宜選択して抽出操作に付することができる。
【００１１】
本発明に用いるマゴジャクシの抽出物を得る抽出溶媒としては、例えば、水、低級アルコール類（メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノールなど）、液状多価アルコール（１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリンなど）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトンなど）、アセトニトリル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチルなど）、炭化水素類（ヘキサン、ヘプタン、石油エーテルなど）、エーテル類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエーテルなど）が挙げられる。これらの溶媒は一種でも二種以上を混合して用いても良い。
【００１２】
本発明に用いるマゴジャクシの抽出物の摂取量は、投与形態、使用目的、年齢、体重などによって異なるが、乾燥物に換算して１〜５００００ｍｇ／日、好ましくは１０〜２００００ｍｇ／日、より好ましくは１００〜１００００ｍｇ／日の範囲で１日１回から数回に分けて経口投与することができる。上記投与範囲より少ない量で十分な場合もあるし、また、範囲を超えて投与する必要がある場合もある。また、製剤化における薬効成分の添加法については、予め加えておいても、製造途中で添加しても良く、作業性を考えて適宜選択すれば良い。
【００１３】
本発明の免疫賦活剤は、食品、医薬部外品又は医薬品のいずれにも用いることができ、その剤形としては、例えば、経口用として散剤、顆粒剤、錠剤、糖衣錠剤、カプセル剤、シロップ剤、丸剤、懸濁剤、液剤、乳剤などである。非経口用として注射剤にすることが出来る。また、座剤とすることも出来る。
【００１４】
本発明の免疫賦活剤は、上記抽出物をそのまま使用しても良く、抽出物の効果を損なわない範囲内において、他の成分を配合することもできる。他の成分としては、固体、液体、半固体でも良く、例えば、次のものが挙げられる。生薬、ビタミン、ミネラル、アミノ酸等の他に、乳糖、デンプン、セルロース、マルチトール、デキストリン等の賦形剤、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル等の界面活性剤、ゼラチン、プルラン、シェラック、ツェイン等の被膜剤、小麦胚芽油、米胚芽油、サフラワー油等の油脂類、ミツロウ、米糠ロウ、カルナウバロウ等のワックス類、ショ糖、ブドウ糖、果糖、ステビア、サッカリン、スクラロース等の甘味料、並びにクエン酸、リンゴ酸、グルコン酸等の酸味料等を適宜配合することができる。生薬としては、高麗人参、アメリカ人参、田七人参、霊芝、プロポリス、アガリクス、ブルーベリー、イチョウ葉及びその抽出物等が挙げられる。ビタミンとしては、ビタミンＡ、Ｄ、Ｅ、Ｋ等の油溶性ビタミン、ビタミンＢ１、Ｂ２、Ｂ６、Ｂ１２、Ｃ、ナイアシン、パントテン酸、葉酸、ビオチン等の水溶性ビタミンが挙げられる。
【発明の効果】
【００１５】
本発明のマゴジャクシ抽出物を含有することを特徴とする免疫賦活剤は、腸管パイエル板におけるインターフェロンγの産生促進作用、パイエル板細胞やヘルパーＴ細胞の細胞数を増加させる作用及び脾臓でのインターフェロンγの産生促進作用を有することから、免疫を賦活する作用を有する。本発明の免疫賦活剤は、食経験のある天然素材から抽出したものであるので、安全性にも優れている。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
製造例１ マゴジャクシの熱水抽出物の調製
マゴジャクシの乾燥物１００ｇに精製水２Ｌを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してマゴジャクシの熱水抽出物を５．４ｇ得た。
【００１７】
製造例２ マゴジャクシのエタノール抽出物の調製
マゴジャクシの乾燥物１００ｇに９００ｍＬのエタノールを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、マゴジャクシのエタノール抽出物を２．０ｇ得た。
【００１８】
製造例３  赤芝の熱水抽出物
赤芝の乾燥物２０ｇに４００ｍＬの精製水を加え、９５〜１００℃で２時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥して赤芝の熱水抽出物を１．４ｇ得た。
【００１９】
製造例４  赤芝のエタノール抽出物
赤芝の乾燥物１００ｇに９００ｍＬのエタノールを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、赤芝のエタノール抽出物を１．６ｇ得た。
【００２０】
製造例５  紫芝の熱水抽出物
紫芝の乾燥物２０ｇに４００ｍＬの精製水を加え、９５〜１００℃で２時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥して紫芝の熱水抽出物を１．３ｇ得た。
【００２１】
製造例６  紫芝のエタノール抽出物
紫芝の乾燥物１００ｇに９００ｍＬのエタノールを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、紫芝のエタノール抽出物を１．５ｇ得た。
【００２２】
本願発明を詳細に説明するため実施例を挙げるが、本願発明はこれに限定されない。実施例に示す％は重量％を示す。
【実施例１】
【００２３】
軟カプセル剤１
＜処方＞
成分                                                      配合量（％）
１．マゴジャクシ熱水抽出物（製造例１）                        ３０．０
２．米胚芽油                                                  ６０．０
３．ミツロウ                                                    ７．０
４．ビタミンＥ                                                  ３．０
＜製造方法＞
成分１〜４を混合し、ゼラチン、グリセリン、カラメル色素で構成される被膜に、２５０ｍｇ充填し、乾燥後、軟カプセル剤を得る。
＜用法＞
１日当り４粒摂取する。
【実施例２】
【００２４】
軟カプセル剤２
＜処方＞
成分                                                      配合量（％）
１．マゴジャクシ熱水抽出物（製造例１）                          ３．０
２．赤芝熱水抽出物（製造例３）                                ２７．０
３．米胚芽油                                                  ６０．０
４．ミツロウ                                                    ７．０
５．ビタミンＥ                                                  ３．０
＜製造方法＞
成分１〜５を混合し、ゼラチン、グリセリン、カラメル色素で構成される被膜に、２５０ｍｇ充填し、乾燥後、軟カプセル剤を得る。
＜用法＞
１日当り４粒摂取する。
【実施例３】
【００２５】
軟カプセル剤３
＜処方＞
成分                                                      配合量（％）
１．マゴジャクシ熱水抽出物（製造例１）                          ３．０
２．紫芝熱水抽出物（製造例５）                                  ３．０
３．赤芝熱水抽出物（製造例３）                                ２４．０
４．米胚芽油                                                  ６０．０
５．ミツロウ                                                    ７．０
６．ビタミンＥ                                                  ３．０
＜製造方法＞
成分１〜６を混合し、ゼラチン、グリセリン、カラメル色素で構成される被膜に、２５０ｍｇ充填し、乾燥後、軟カプセル剤を得る。
【実施例４】
【００２６】
硬カプセル剤
＜処方＞
成分                                                      配合量（％）
１．マゴジャクシ熱水抽出物（製造例１）                          １．０
２．赤芝熱水抽出物（製造例３）                                ４４．０
３．コーンスターチ                                            ５２．０
４．ショ糖脂肪酸エステル                                        ３．０
＜製造方法＞
成分１〜４を混合し、２号硬カプセルに２５０ｍｇ充填してカプセル剤を得る。
＜用法＞
１日当り４粒摂取する。
【実施例５】
【００２７】
飲料
＜処方＞
成分                                                      配合量（％）
１．マゴジャクシ熱水抽出物（製造例１）                          １．０
２．クエン酸                                                    ６．０
３．ショ糖                                                    １０．０
４．香料                                                        １．０
５．水                                                        ８２．０
＜製造方法＞
成分１〜４を成分５の一部の水に撹拌溶解する。次いで、成分５の残りの水を加えて混合する。
＜用法＞
１日当り５０ｍｌ摂取する。
【実施例６】
【００２８】
顆粒剤
＜処方＞
成分                                                      配合量（％）
１．マゴジャクシエタノール抽出物（製造例２）                  １５．０
２．乳糖                                                      ８０．０
３．セルロース                                                  ５．０
＜製造方法＞
成分１〜３を乾式法により造粒し、顆粒剤を得る。
＜用法＞
１日当り１ｇ摂取する。
【実施例７】
【００２９】
錠剤
＜処方＞
成分                                                      配合量（％）
１．マゴジャクシエタノール抽出物（製造例２）                  １１．０
２．乳糖                                                      ６０．０
３．還元麦芽糖水飴                                            ２５．０
４．ショ糖脂肪酸エステル                                        ４．０
＜製造方法＞
成分１〜４を混合して打錠成型し、０．５ｇの錠剤を得る。
＜用法＞
１日当り２粒摂取する。
【００３０】
実験例１  腸管パイエル板に含まれる細胞数の増加作用
ＢＡＬＢ／ｃ系マウスに、マゴジャクシ抽出物を４％混餌した粉末飼料を１０日間自由摂餌させた後に、小腸よりパイエル板を摘出し、細胞数を計測した。また、製造例３にある赤芝抽出物も同様の試験系で試験を実施した。
【００３１】
結果を表１に示した。表１より、マゴジャクシ抽出物を摂取させると、腸管パイエル板に含まれる細胞数が増加した。
【００３２】
【表１】
2015113300.tif 000002
【００３３】
実験例２  腸管パイエル板に含まれるヘルパーＴ細胞数の増加作用
実験例１の手法によりパイエル板から得られた細胞を１×１０７個／ｍＬとなるように０．１％ＢＳＡ含有ＰＢＢＳに浮遊させ、その１００μＬをエッペンチューブに添加し、ヘルパーＴ細胞の細胞表面抗原であるＣＤ４を添加して、４℃、３０分間反応させた。氷冷した０．１％ＢＳＡ含有ＰＢＢＳを添加することにより、反応を停止し、遠心処理した後に、上清を吸引除去し、得られた細胞ペレットに０．１％ＢＳＡ含有ＰＢＢＳを添加した。再度遠心処理後に上清を吸引除去し、得られた細胞ペレットに０．１％ＢＳＡ含有ＰＢＢＳを添加して、細胞浮遊液を調製した。フローサイトメトリーにて、細胞浮遊液中のヘルパーＴ細胞数を計測した。
【００３４】
結果を表２に示した。表２より、マゴジャクシ抽出物を摂取させると、腸管パイエル板に含まれるヘルパーＴ細胞数が増加した。
【００３５】
【表２】
2015113300.tif 000003
【００３６】
実験例３  腸管パイエル板におけるインターフェロンγの産生促進作用
実験例１の手法によりパイエル板から得られた細胞を１×１０６個で播種し、０．５μｇ／ｍＬとなるようにＣｏｎＡ（Ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ  Ａ）とメルカプトエタノール５０μＭを含有する牛胎児血清含有ＲＰＭＩ１６４０培地中で、５日間培養した。培養上清を回収し、上清中に含まれるインターフェロンγについて、ＥＬＩＳＡ法により測定した。
【００３７】
結果を表３に示した。表３より、マゴジャクシ抽出物を摂取させると、腸管パイエル板におけるインターフェロンγの産生が促進された。
【００３８】
【表３】
2015113300.tif 000004
【００３９】
実験例４  脾臓におけるインターフェロンγの産生促進作用
ＢＡＬＢ／ｃ系マウスに、マゴジャクシ抽出物を４％混餌した粉末飼料を１０日間自由摂餌させた後に脾臓を摘出し、得られた脾臓細胞を１×１０６個で播種し、０．５μｇ／ｍＬとなるようにＣｏｎＡ（Ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ  Ａ）とメルカプトエタノール５０μＭを含有する牛胎児血清含有ＲＰＭＩ１６４０培地中で、４時間培養した。培養上清を回収し、上清中に含まれるインターフェロンγについて、ＥＬＩＳＡ法により測定した。
【００４０】
結果を表４に示した。表４より、マゴジャクシ抽出物を摂取させると、脾臓におけるインターフェロンγの産生が促進された。
【００４１】
【表４】
2015113300.tif 000005
【００４２】
以上の結果より、マゴジャクシ抽出物は、腸管パイエル板におけるインターフェロンγの産生促進作用、パイエル板細胞やヘルパーＴ細胞の細胞数を増加させる作用及び脾臓でのインターフェロンγの産生促進作用を有することから、免疫を賦活する作用を持つことが示された。
【００４３】
また、マゴジャクシ抽出物は、脾臓におけるイムノグロブリンＡの産生を促進する作用を持つことも確認した。
【産業上の利用可能性】
【００４４】
本発明の免疫賦活剤は、優れた免疫賦活作用を示した。従って、安全で優れた免疫賦活作用を有する医薬品、医薬部外品または食品としての利用に有用である。