(57)【要約】      （修正有）【課題】医薬品として有用なジヒドロ−１，３，５−トリアジンアミン誘導体を、高収率且つ高鏡像体過剰率で得る方法の提供。【解決手段】式（１）で示されるジヒドロ−１，３，５−トリアジンアミン誘導体の鏡像異性体を、特定されたキラルイオン交換体を有するクロマトグラフィによって分離する方法。2015129121.tif 000018［Ｒ１及びＲ２はＡ；Ｒ３及びＲ４はＨ；Ｒ５はＨ；Ｒ６はＡ；ＡはＣ１〜１０個の非分岐／分岐のアルキル基；該アルキル基の１〜７個のＨ原子は、Ｆで又はＣ３〜７個のを有する環状アルキルで置換／未置換。］【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（１）の化合物及びその酸付加塩の鏡像異性体をクロマトグラフィ分離する方法であって、その鏡像異性体の分離をキラルイオン交換体上で行うこと,かつ、該キラルイオン交換体が、式（２）の構造または式（３）の構造を有することまたは式（４）〜（１３）からなる群から選ばれるひとつの構造とスペーサと担体を有することを特徴とする方法：
【化１】
2015129121.tif 000014
［但し、Ｒ１及びＲ２はＡであり、Ｒ３及びＲ４はＨであり、Ｒ５はＨであり、Ｒ６はＡであって、Ａは、１〜１０個のＣ原子を有する非分岐又は分岐のアルキル基を意味し、該アルキル基の１〜７個のＨ原子は、Ｆで又は３〜７個のＣ原子を有する環状アルキルで置き換えられていてもよい。］
【化２】
2015129121.tif 000015
［但し、Ｘは、移動相中の緩衝塩の種類に依存する対イオンであり、球は担体である。］
【化３】
2015129121.tif 000016
［但し、球は担体である。］。
【表１】
2015129121.tif 000017
【請求項２】
Ｒ１、Ｒ２及びＲ６がメチルである請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記分離において溶離液が用いられ、該溶離液が
ｉ）メタノール、エタノール、プロパノール、アセトニトリル、ＴＨＦ、ジオキサン、酢酸エチル、クロロホルム、ジクロロメタン、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、ヘキサン、ヘプタン、又はこれらの溶媒の２成分、３成分、４成分の混合物（共・対イオンを添加したもの、若しくは、イオン発生用添加剤を含まないもの）の群からの有機溶媒、または
ｉｉ）水性媒体であって、緩衝剤を添加したもの又は添加しないものであり、かつ、ｉ）で規定される群からの混和性の極性有機溶媒を含むもの又は含まないもの、または
ｉｉｉ）超臨界又は臨界前のＣＯ２であって、ｉ）で規定される有機溶媒を含むもの又は含まないものであり、かつ、共・対イオンを添加したもの又はイオン発生用添加剤を含まないもの、
を含む請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式Ｉの化合物及びその酸付加塩の鏡像異性体のラセミ体及び非ラセミ体混合物をクロマトグラフィ分離する方法であって、その分離をキラルイオン交換材料上で行うことを特徴とする方法に関する。
【０００２】
【化１】
2015129121.tif 000002
【０００３】
但し、Ｒ１、Ｒ２は、各々互いに独立して、Ｈ又はＡを意味し、
Ｒ３、Ｒ４は、各々互いに独立して、Ｈ、Ａ、２〜１０個のＣ原子を有するアルケニル、２〜１０個のＣ原子を有するアルキニル、Ａｒ又はＨｅｔを意味し、
Ｒ５及びＲ６は、また、一緒になって、２、３、４又は５個のＣ原子を有するアルキレンを意味し、
Ｒ５、Ｒ６は、各々互いに独立して、Ｈ、Ａ、（ＣＨ２）ｎＡｒ、（ＣＨ２）ｍＯＡｒ、（ＣＨ２）ｍＯＡ又は（ＣＨ２）ｍＯＨを意味し、
Ｒ５及びＲ６は、また、一緒になって、２、３、４又は５個の炭素原子を有するアルキレンを意味し、ここでは、１つのＣＨ２基が、Ｏ、ＮＨ若しくはＮＡによって置き換えられていてもよく、及び／又は１つのＨ原子が、ＯＨによって置き換えられていてもよい。
【０００４】
Ａｒは、フェニル、ナフチル又はビフェニルを意味し、ただし、これらの各々は、無置換であるか、あるいはＨａｌ、Ａ、ＯＡ、ＯＨ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＡ、ＣＮ、ＮＨ２、ＮＨＡ、ＮＡ２、ＳＯ２Ａ及び／又はＣＯＡにより１置換、２置換又は３置換されている。
【０００５】
Ｈｅｔは、１〜４個のＮ原子、Ｏ原子及び／又はＳ原子を有する単環式、二環式又は三環式の不飽和又は芳香族複素環を意味し、ただし、これは、無置換でもよく、あるいはＨａｌ、Ａ、ＯＨ、ＯＡ、ＮＨ２、（ＣＨ２）ｎＡｒ、ＮＨＡ、ＮＡ２、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＡ及び／又は＝Ｏ（カルボニル酸素）により１置換、２置換又は３置換されていてもよい。
【０００６】
Ａは、１〜１０個のＣ原子を有する非分岐又は分岐のアルキル基を意味し、ここでは、１〜７個のＨ原子がＦ、又は３〜７個のＣ原子を有する環状アルキルで置き換えられていてもよい。
【０００７】
Ｈａｌは、Ｆ，Ｃｌ、Ｂｒ又はＩを意味し、ｍは、１、２、３、４、５又は６を意味し、ｎは、０、１又は２を意味する。
【０００８】
式Ｉの化合物は、インシュリン抵抗症候群を伴う疾患の治療に役立つ。
【０００９】
ジアステレオマー塩の塩形成及び分離によって、式Ｉの化合物のラセミ体を光学分割する方法は、ＷＯ２００４／０９８８１７により公知である。
【００１０】
驚くべきことに、ジヒドロ−１，３，５−トリアジンアミン誘導体を分離する過程の研究において、式Ｉの化合物が、従来技術と比較して、かなり高い収率かつより高い鏡像体過剰率で得られることが分かった。
【００１１】
特に、４−アミノ−３，６−ジヒドロ−２−ジメチルアミノ−６−メチル−１，３，５−トリアジン化合物は、本発明に従って調製される。
【００１２】
超臨界ＨＰＬＣを利用したキラル相上での鏡像異性体の分析分離に関するこれまでに知られた従来技術（ＷＯ２００４／０９８８１７に記載されている）と対照的に、驚くべきことに、標準ＨＰＬＣを利用した２つの鏡像異性体の測定のための分析法が意外にも見つけられた。この方法は、その分離のために特別な装置はもはや必要ないという利点を有する。
【００１３】
移動相は、典型的には、例えばメタノール、エタノール、水、イソプロパノール、及び酸性又は塩基性の緩衝塩等の極性溶媒からなる。移動相は、典型的には、０．０１％〜２％のこの酸性又は塩基性の緩衝塩を含んでいる。
【００１４】
固定相は、典型的には、シリカゲルに結合された、オリゴ糖、多糖、又は大環状糖タンパク質の群から選ばれるキラル担体である。この種の担体は、ダイセル（Ｄａｉｃｅｌ）社からＣｈｉｒａｌｃｅｌ（登録商標）、キラルセップ（Ｃｈｉｒａｌｓｅｐ）社からＣｈｉｒｏｓｅ（登録商標）、及びアステック（Ａｓｔｅｃ）社からＣｈｉｒｏｂｉｏｔｉｃ（登録商標）の商品名で市販されている。
【００１５】
上記又は下記において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ６基は、他に明示的に示さない限り、式Ｉにおいて示された意味を有する。
【００１６】
また、式Ｉは、例えば鏡像異性体のような光学活性型（立体異性体）を包含する。
【００１７】
好ましい出発原料としてのメトホルミンは、以下の構造を有する。
【００１８】
【化２】
2015129121.tif 000003
【００１９】
Ａは、非分岐状（直鎖状）又は分岐状で、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０個のＣ原子を有するアルキルを意味する。好ましくはメチルを意味し、さらには、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル又はｔｅｒｔ−ブチルを意味する。またさらに、ペンチル、１−、２−又は３−メチルブチル、１，１−、１，２−又は２，２−ジメチルプロピル、１−エチルプロピル、ヘキシル、１−、２−、３−又は４−メチルペンチル、１，１−、１，２−、１，３−、２，２−、２，３−又は３，３−ジメチルブチル、１−又は２−エチルブチル、１−エチル−１−メチルプロピル、１−エチル−２−メチルプロピル、１，１，２−又は１，２，２−トリメチルプロピルを意味し、より好ましくは、例えばトリフルオロメチルを意味する。
【００２０】
Ａは、さらにより好ましくは、１、２、３、４、５又は６個のＣ原子を有するアルキルを意味し、好ましくは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチル又は１，１，１−トリフルオロエチルを意味する。
【００２１】
さらに特に好ましくは、メチルを意味する。
【００２２】
環状アルキル（シクロアルキル）は、好ましくは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル又はシクロヘプチルを意味する。
【００２３】
アルケニルは、２、３、４、５又は６個のＣ原子を有し、好ましくは、ビニル、プロペニル又はヘキセニルを意味する。
【００２４】
アルキニルは、２、３、４、５又は６個のＣ原子を有し、好ましくは、Ｃ≡ＣＨ又はＣ≡Ｃ−ＣＨ３を意味する。
【００２５】
Ａｒは、例えばｏ−、ｍ−又はｐ−トリル、ｏ−、ｍ−又はｐ−エチルフェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−プロピルフェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−イソプロピルフェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−ヒドロキシフェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−アミノフェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−（Ｎ−メチルアミノ）フェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−（Ｎ−メチルアミノカルボニル）−フェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−メトキシフェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−エトキシフェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−エトキシカルボニルフェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−（Ｎ−エチルアミノ）フェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ）フェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−フルオロフェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−ブロモフェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−クロロフェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−（メチルスルホニル）フェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−シアノフェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−カルボキシフェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−メトキシカルボニルフェニル、ｏ−、ｍ−又はｐ−アセチルフェニルを意味する。さらに好ましくは、２，３−、２，４−、２，５−、２，６−、３，４−若しくは３，５−ジフルオロフェニル、２，３−、２，４−、２，５−、２，６−、３，４−若しくは３，５−ジクロロフェニル、２，３−、２，４−、２，５−、２，６−、３，４−若しくは３，５−ジブロモフェニル、２，４−若しくは２，５−ジニトロフェニル、２，５−若しくは３，４−ジメトキシフェニル、３−アミノ−４−クロロ−、２−アミノ−３−クロロ−、２−アミノ−４−クロロ−、２−アミノ−５−クロロ−若しくは２−アミノ−６−クロロフェニル、２，３−ジアミノフェニル、２，３，４−、２，３，５−、２，３，６−、２，４，６−若しくは３，４，５−トリクロロフェニル、２，４，６−トリメトキシフェニル、２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロフェニル、ｐ−ヨードフェニル、３，６−ジクロロ−４−アミノフェニル、４−フルオロ−３−クロロフェニル、２−フルオロ−４−ブロモフェニル、２，５−ジフルオロ−４−ブロモフェニル、３−ブロモ−６−メトキシフェニル、３−クロロ−６−メトキシフェニル、３−フルオロ−４−メトキシフェニル、３−アミノ−６−メチルフェニル又は２，５−ジメチル−４−クロロフェニルを意味する。
【００２６】
Ａｒは、特に好ましくは、フェニル、ヒドロキシフェニル又はメトキシフェニルを意味する。
【００２７】
Ｈｅｔは、さらなる置換基の存在に拘らず、例えば２−又は３−フリル、２−又は３−チエニル、１−、２−又は３−ピロリル、１−、２−、４−又は５−イミダゾリル、１−、３−、４−又は５−ピラゾリル、２−、４−又は５−オキサゾリル、３−、４−又は５−イソオキサゾリル、２−、４−又は５−チアゾリル、３−、４−又は５−イソチアゾリル、２−、３−又は４−ピリジル、２−、４−、５−又は６−ピリミジニルを意味する。さらにより好ましくは、１，２，３−トリアゾール−１−、−４−又は−５−イル、１，２，４−トリアゾール−１−、−３−又は５−イル、１−又は５−テトラゾリル、１，２，３−オキサジアゾール−４−又は−５−イル、１，２，４−オキサジアゾール−３−又は−５−イル、１，３，４−チアジアゾール−２−又は−５−イル、１，２，４−チアジアゾール−３−又は−５−イル、１，２，３−チアジアゾール−４−又は−５−イル、３−又は４−ピリダジニル、ピラジニル、１−、２−、３−、４−、５−、６−又は７−インドリル、４−又は５−イソインドリル、インダゾリル、１−、２−、４−又は５−ベンズイミダゾリル、１−、３−、４−、５−、６−又は７−ベンゾピラゾリル、２−、４−、５−、６−又は７−ベンズオキサゾリル、３−、４−、５−、６−又は７−ベンズイソオキサゾリル、２−、４−、５−、６−又は７−ベンゾチアゾリル、２−、４−、５−、６−又は７−ベンズイソチアゾリル、４−、５−、６−又は７−ベンズ−２，１，３−オキサジアゾリル、２−、３−、４−、５−、６−、７−又は８−キノリル、１−、３−、４−、５−、６−、７−又は８−イソキノリル、３−、４−、５−、６−、７−又は８−シンノリニル、２−、４−、５−、６−、７−又は８−キナゾリニル、５−又は６−キノキサリニル、２−、３−、５−、６−、７−又は８−２Ｈ−ベンゾ−１，４−オキサジニルを意味する。さらに好ましくは、１，３−ベンゾジオキソール−５−イル、１，４−ベンゾジオキサン−６−イル、２，１，３−ベンゾチアジアゾール−４−若しくは−５−イル、２，１，３−ベンゾオキサジアゾール−５−イル又はジベンゾフラニルを意味する。
【００２８】
複素環基は、部分的に又は完全に水素化されていてもよい。したがって、Ｈｅｔはまた、さらなる置換基の存在に拘らず、例えば２，３−ジヒドロ−２−、−３−、−４−又は−５−フリル、２，５−ジヒドロ−２−、−３−、−４−又は５−フリル、テトラヒドロ−２−又は−３−フリル、１，３−ジオキソラン−４−イル、テトラヒドロ−２−又は−３−チエニル、２，３−ジヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−又は−５−ピロリル、２，５−ジヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−又は−５−ピロリル、１−、２−又は３−ピロリジニル、テトラヒドロ−１−、−２−又は−４−イミダゾリル、２，３−ジヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−又は−５−ピラゾリル、テトラヒドロ−１−、−３−又は−４−ピラゾリル、１，４−ジヒドロ−１−、−２−、−３−又は−４−ピリジル、１，２，３，４−テトラヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−、−５−又は−６−ピリジル、１−、２−、３−又は４−ピペリジニル、２−、３−又は４−モルホリニル、テトラヒドロ−２−、−３−又は−４−ピラニル、１，４−ジオキサニル、１，３−ジオキサン−２−、−４−又は−５−イル、ヘキサヒドロ−１−、−３−又は−４−ピリダジニル、ヘキサヒドロ−１−、−２−、−４−又は−５−ピリミジニル、１−、２−又は３−ピペラジニル、１，２，３，４−テトラヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−、−５−、−６−、−７−又は−８−キノリル、１，２，３，４−テトラヒドロ−１−、−２−、−３−、−４−、−５−、−６−、−７−又は−８−イソキノリル、２−、３−、５−、６−、７−又は８−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ−１，４−オキサジニルを意味する。さらに好ましくは、２，３−メチレンジオキシフェニル、３，４−メチレンジオキシフェニル、２，３−エチレンジオキシフェニル、３，４−エチレンジオキシフェニル、３，４−（ジフルオロメチレンジオキシ）フェニル、２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−若しくは６−イル、２，３−（２−オキソメチレンジオキシ）フェニル、又は３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，５−ベンゾジオキセピン−６−若しくは−７−イルを意味する。さらに好ましくは、２，３−ジヒドロベンゾフラニル、２，３−ジヒドロ−２−オキソフラニル、３，４−ジヒドロ−２−オキソ−１Ｈ−キナゾリニル、２，３−ジヒドロベンゾキサゾリル、２−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾキサゾリル、２，３−ジヒドロベンズイミダゾリル、１，３−ジヒドロインドール、２−オキソ−１，３−ジヒドロインドール、又は２−オキソ−２，３−ジヒドロベンズイミダゾリルを意味する。
【００２９】
好ましくは、Ｈｅｔは、ピペリジニル、ピペラジニル、ピロリジニル、モルホリニル、フリル、チエニル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソキザゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、ピリジル、ピリミジニル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、ピリダジニル、ピラジニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、インドリル、ベンゾ−１，３−ジオキソリル、インダゾリル又はベンゾ−２，１，３−チアジアゾリルを意味する。これらは、無置換であるか、Ａ、ＣＯＯＡ、Ｈａｌ及び／又は＝Ｏ（カルボニル酸素）で１置換、２置換又は３置換されている。
【００３０】
Ｒ１、Ｒ２は、好ましくは、Ａを意味し、Ｒ３、Ｒ４は、好ましくはＨを意味し、Ｒ５は、好ましくはＨを意味し、Ｒ６は、好ましくはＡを意味する。
【００３１】
さらに特に好ましくは、Ｒ１、Ｒ２はメチルを意味し、Ｒ３、Ｒ４はＨを意味し、Ｒ５はＨを意味し、Ｒ５はメチルを意味する。
【００３２】
式Ｉの塩基は、酸を用いて、例えばエタノール等の不活性溶媒中で塩基と酸との等量反応及びその後のエバポレーションにより、対応する酸−付加塩に変換することができる。特に、この反応に適している酸は、生理的に受け入れられる塩を生成するものである。したがって、無機酸、例えば硫酸、硝酸、塩化水素酸又は臭化水素酸等のハロゲン化水素酸、オルトリン酸等のリン酸、スルファミン酸を用いることができる。さらには有機酸、特に脂肪族、脂環式、芳香脂肪族、芳香族又は複素環の、一又は多塩基の、カルボン酸、スルホン酸又は硫酸を用いることができる。例えばギ酸、酢酸、プロピオン酸、ピバリン酸、ジエチル酢酸、マロン酸、コハク酸、ピメリン酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、グルコン酸、アスコルビン酸、ニコチン酸、イソニコチン酸、メタン−又はエタン−スルホン酸、エタンジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンモノ−及びジスルホン酸、ラウリル硫酸を用いることができる。生理的に受け入れられない酸の塩、例えばピクリン酸塩は、式Ｉの化合物の単離及び／又は精製のために用いることができる。
【００３３】
原理的には、鏡像異性体は、キラル吸着剤上で分離することができる。多数のキラル吸着剤が当業者に知られており、例えば光学活性側鎖を有する、セルロース誘導体、シクロデキストリン又はポリ（メタ）アクリルアミド誘導体がある。この種のキラル吸着剤及びその使用は、例えば「液体クロマトグラフィによる鏡像異性体分離の最近の動向
(Recent developments in liquid chromatographic enantioseparation),M.Lammerhofer,W.Lindner,Handbook of analytical separations(Vol.1):Separation methods in drug synthesis and purification(K.Valko,Editor),Elsevier,NL,2000」、又は「鏡像異性体分離(Enantiomer Separation),M.Lammerhofer,N.M.Maier,W.Lindner,in:L.R.Snyder,J.J.Kirkland,J.W.Dolan(Editors),Introduction to Modern Liquid Chromatography,3rd edition,John Wiley,Hoboken,NJ,USA,2009」に開示されている。
【００３４】
しかしながら、驚くべきことに、この種類の化合物の分離が、イオン交換材料の上でも可能であることが分かった。
【００３５】
エナンチオ選択的分離のためのこの種の交換材料は、例えばＷＯ０３／０６８３９７Ａ１に記載されている。
【００３６】
本発明に係る課題を解決するエナンチオ選択性イオン交換材料の特徴について、以下説明する。使用されるイオン交換材料は、実質的に、ｉ）陰イオン性又は両イオン性のキラルセレクタ、ｉｉ）担体、及びｉｉｉ）キラルセレクタを担体に結合させるリンカーから構成される。
【００３７】
陰イオン性又は両イオン性のキラルセレクタは、少なくとも一つの酸機能を有する鏡像異性的に純粋な形態でのキラル骨格からなり、ここでの酸機能は、カルボン酸基、スルホン酸基、スルフィン酸基、リン酸基、ホスホン酸基、又はホスフィン酸基である。この酸基は、キラルセレクタ又はイオン交換材料と、分離される式Ｉの化合物とのイオン相互作用を引き起こす。キラル骨格は、キラル中心、キラル軸、キラル平面、及びキラル螺旋の群からの少なくとも１つのキラル要素を含んでいる。また、キラル骨格は、明確な立体異性体の形態で適用され、ここでのキラル骨格の立体化学的純度は、できる限り高くすべきである。キラルセレクタは、しばしば、複数のキラル中心の結合により形成され、それによって多くの明確な立体異性体が生じる。骨格中のキラル要素やキラル要素の組合せは、エナンチオ選択性イオン交換材料のキラル認識能の基礎となる。キラルイオン交換骨格は、好ましくは、天然又は合成の、環状又は非環状の、アミノ酸、ヒドロキシカルボン酸、アミノスルホン酸、アミノホスホン酸、アミノホスフィン酸、アミノスルフィン酸、ヒドロキシホスホン酸、ヒドロキシホスフィン酸、ケトスルホン酸、酒石酸、カンファースルホン酸、マンデル酸、硫酸化合物、ペプチド又はスルホペプチドの群からの低分子量化合物である。
【００３８】
低分子量イオン交換セレクタは、使用条件下で少なくとも１つの帯電した酸性基を運ぶ両性化合物でもよい。さらに、式Ｉの目的化合物の鏡像異性分離のための効果的なキラルイオン交換セレクタを区別する典型的な構造要素は、追加的な水素ドナ−アクセプタ基（例えばアミド、カルバミン酸塩、スルホンアミド、尿素、カルボニル、セミカルバジド、ヒドラジド、若しくはスルホンイミド基、又は他の水素ドナ−アクセプタ系）、π−π相互作用点（すなわち、好ましくは電子吸引性又は電子供与性の官能基を有する芳香族基）、及び任意成分である立体相互作用又はファンデルワールス相互作用のための嵩高い基である。これらの二次的な相互作用力は、しばしば立体選択的であると言われ、分離される目的化合物の二つの鏡像異性体に異なる親和力を引き起こす。
【００３９】
多くの適用において、キラルイオン交換セレクタは、固体又は場合によっては液体の担体上に固定化されなければならない。好適な担体は、無機、有機、又は無機／有機ハイブリッド材料である。担体は、微粒子又はモノリス材料の群から製造され、その材料としては、シリカゲル（ＳｉＯ２）、アルミナ（Ａｌ２Ｏ３）、ジルコニア（ＺｒＯ２）、チタニア（ＴｉＯ２）、他のゾル−ゲル材料、有機／無機−炭素／シリコン含有ハイブリッド材料が挙げられ、場合によっては架橋ポリシロキサン、場合によってはポリ（メタ）アクリルレートの群からの架橋有機ポリマー、ポリ（メタ）アクリルアミド、ポリスチレン、「開環メタセシス」ポリマー、これらの有機ポリマーの混合物、多糖、アガロース及びセラミック材料が挙げられる。担体は、６０Å〜１０００Åの平均細孔幅を有する多孔質材料が好ましいが、１０００Åより大きい細孔幅を有する非多孔質又は超多孔質の材料もまた好ましい。
【００４０】
リンカーは、セレクタを担体の表面に固定し、セレクタを目的化合物と相互作用しやすい状態にする機能を有する。リンカーは、通常、キラルの認識及び分離に間接的にのみ関与しているので、リンカーは長さも化学構造も両方とも可変である。幾つかの場合、すなわち、単量体または重合体の状態のイオン交換セレクタが担体の表面上へ直接被覆される場合には、リンカーは不要である。従来の固相リンカーの考え方は全て用いることができる。典型的な固定化方法では二官能性リンカーを用い、先ず初めにリンカーを１つの官能基によって担体に固定し、第２段階でその変性担体の反応性固定基を介してキラルイオン交換セレクタと化学的に反応させることで、リンカーは担体上に固定される。したがって、二重結合を有するイオン交換セレクタは、例えばチオール変性シリカゲルに共有結合することができる。
【００４１】
その後に行われる担体の表面へのブラシ状固定の他に、グラフト重合び同様の重合固定法等の考え方もあり得る。キラルイオン交換セレクタは、インサイチュー共重合によって担体中に組み込み、固定できる。
【００４２】
結果として生じる被覆密度は、好ましくは、１００〜１０００μｍｏｌ（イオン交換セレクタ）／ｇ（固定相）である。
【００４３】
使用される溶離液としては、次のものが好ましい。
ｉ）メタノール、エタノール、プロパノール、アセトニトリル、ＴＨＦ、ジオキサン、酢酸エチル、クロロホルム、ジクロロメタン、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、ヘキサン、ヘプタン、又はこれらの溶媒の２成分、３成分、４成分の混合物（共・対イオンを添加したもの、若しくは、イオン発生用添加剤（ionogenic additives）を含まないもの）の群からの有機溶媒、
ｉｉ）水性媒体であって、緩衝剤を添加したもの又は添加しないものであり、かつ、ｉ）で規定される群からの混和性の極性有機溶媒を含むもの又は含まないもの、
ｉｉｉ）超臨界又は臨界前のＣＯ２であって、ｉ）で規定される有機溶媒を含むもの又は含まないものであり、かつ、共・対イオンを添加したもの又はイオン発生用添加剤を含まないもの。
【００４４】
用いられる添加剤は、揮発性であることが好ましい。成分の溶出は、好ましくは一定組成モードで行われるが、勾配−溶出モードで行うこともできる。
【００４５】
分離は、バッチモードでのリサイクルクロマトグラフィによる不連続な試料注入と連続的な溶出を伴う従来のゾーン−溶出クロマトグラフィ法、又は連続クロマトグラフィ法（例えば疑似移動床ＳＭＢ技術）により行うことができる。
【００４６】
クロマトグラフィ分離は、ＨＰＬＣ、ＵＰＬＣ、ＳＦＣ技術によって行うことができる。
【００４７】
本発明に係る方法では、分離に用いられたラセミ体混合物に基づいて、ｅｅ＞９８％でほぼ５０％の収率が得られる。
【実施例】
【００４８】
〔実施例１〕
本発明に係る方法では、例えば担体材料としてのシリカゲルに担持された、以下の化学構造を有するキラルイオン交換材料を用いることができる。カチオン交換サイトにおける対イオンＸ−の種類は、移動相中の緩衝塩の種類に依存する。
【００４９】
【化３】
2015129121.tif 000004
【００５０】
このイオン交換材料を用いることで、式Ｉの化合物のラセミ体について以下のクロマトグラフィ分離を行うことができる。
但し、Ｒ１、Ｒ２は、メチルを意味し、Ｒ３、Ｒ４は、Ｈを意味し、Ｒ５は、Ｈを意味し、Ｒ６は、メチルを意味する。
【００５１】
実験条件：
カラム寸法：１５０×４ｍｍＩ．Ｄ．、粒径：５μｍ、温度：２５℃、流量：１．０ｍｌ／ｍｉｎ、検出：２４０ｎｍ、移動相：アセトニトリル／メタノールの９／１（ｖ／ｖ）中における５０ｍＭのギ酸及び２５ｍＭのジエチルアミン。
【００５２】
【化４】
2015129121.tif 000005
【００５３】
溶出の順序は、絶対鏡像異性配置を有するイオン交換材料に換えることによって逆にすることができる。
【００５４】
【化５】
2015129121.tif 000006
【００５５】
左：上記（１Ｒ，２Ｒ）−構造を有するイオン交換材料、
右：上記（１Ｓ，２Ｓ）−構造を有するイオン交換材料、
実線：ラセミ体の分離、破線：個々の鏡像異性体の溶出。
【００５６】
実験条件：
カラム寸法：１００×４ｍｍＩ．Ｄ．、粒径：５μｍ、温度：２５℃、流量：１．０ｍｌ／ｍｉｎ、検出：２４０ｎｍ、移動相：メタノール中における１０ｍＭのＮＨ４Ｃｌ。
【００５７】
〔実施例２〕
式Ｉの化合物のラセミ体の分離のために、上述のイオン交換材料を用いた本発明に係る方法のさらなる実施例である。
【００５８】
但し、ａ）において、Ｒ１は、アリルを意味し、Ｒ２は、メチルを意味し、Ｒ３、Ｒ４は、Ｈを意味し、Ｒ５は、Ｈを意味し、Ｒ６は、メチルを意味する。
【００５９】
ｂ）において、Ｒ１、Ｒ２は、メチルを意味し、Ｒ３は、アリルを意味し、Ｒ４は、Ｈを意味し、Ｒ５は、Ｈを意味し、Ｒ６は、メチルを意味する。
【００６０】
【化６】
2015129121.tif 000007
【００６１】
実験条件：
カラム寸法：１５０×４ｍｍＩ．Ｄ．、粒径：５μｍ、温度：２５℃、流量：１．０ｍｌ／ｍｉｎ、検出：２４０ｎｍ、移動相：メタノール中における５０ｍＭのギ酸及び２５ｍＭのジエチルアミン。
【００６２】
〔実施例３〕
式Ｉの化合物のラセミ体の分離のために、以下の化学構造を有する両イオン性のイオン交換材料を用いた本発明に係る方法のさらなる実施例である。
【００６３】
但し、ａ）において、Ｒ１、Ｒ２は、メチルを意味し、Ｒ３、Ｒ４は、Ｈを意味し、Ｒ５は、Ｈを意味し、Ｒ６は、メチルを意味する。
【００６４】
ｂ）において、Ｒ１、Ｒ２は、メチルを意味し、Ｒ３は、アリルを意味し、Ｒ４は、Ｈを意味し、Ｒ５は、Ｈを意味し、Ｒ６は、メチルを意味する。
【００６５】
【化７】
2015129121.tif 000008
【００６６】
【化８】
2015129121.tif 000009
【００６７】
実験条件：
カラム寸法：１５０×４ｍｍＩ．Ｄ．、粒径：５μｍ、温度：２５℃、流量：１．０ｍｌ／ｍｉｎ、検出：２４０ｎｍ、移動相：メタノール中における５０ｍＭのギ酸及び２５ｍＭのアンモニア。
【００６８】
〔実施例４〕
式Ｉの化合物のラセミ体の予備的な分離のために、担体材料としてのシリカゲルに担持された、以下の化学構造のキラルイオン交換材料を用いた本発明に係る方法の実施例である。カチオン交換サイトにおける対イオンＸ−の種類は、移動相中の緩衝塩の種類に依存する。
【００６９】
但し、Ｒ１は、アリルを意味し、Ｒ２は、メチルを意味し、Ｒ３、Ｒ４は、Ｈを意味し、Ｒ５は、Ｈを意味し、Ｒ６は、メチルを意味する。
【００７０】
【化９】
2015129121.tif 000010
【００７１】
以下のクロマトグラムの実験条件：
カラム寸法：１５０×４ｍｍＩ．Ｄ．、粒径：５μｍ、温度：２５℃、流量：１．０ｍｌ／ｍｉｎ、検出：２５４ｎｍ（実線）、２８０ｎｍ（破線）、移動相：アセトニトリル／メタノールの４／１（ｖ／ｖ）中における５０ｍＭの酢酸及び２５ｍＭのアンモニア、サンプル濃度：１１３ｍｇ／ｍｌ、注入量：２６．５μｌ。
【００７２】
【化１０】
2015129121.tif 000011
【００７３】
最初に溶出された鏡像異性体の収集留分（１２．２０〜１３．８５ｍｉｎ）は、縦点線で示されている。
【００７４】
収集留分の鏡像異性体純度は、キラルイオン交換材料の分析によって測定することができる。
【００７５】
以下のクロマトグラムの実験条件：
イオン交換材料の絶対配置：（１Ｓ，２Ｓ）、カラム寸法：１５０×４ｍｍＩ．Ｄ．、粒径：５μｍ、温度：２５℃、流量：１．０ｍｌ／ｍｉｎ、検出：２５４ｎｍ、移動相：メタノール中における５０ｍＭの酢酸及び２５ｍＭのアンモニア。
【００７６】
実線：鏡像異性体基準で、収率＞８０％、＞９８％ｅｅの収集留分の分析、
破線：比較のための対応ラセミ体の分離。
【００７７】
【化１１】
2015129121.tif 000012
【００７８】
〔実施例５〕
例えばキャピラリー電気泳動のバックグラウンド電解質への添加剤として溶解された状態の、式Ｉの化合物のラセミ体の分離を実現するキラル化合物の例としては、以下の構造を有することができる。
【００７９】
【表１】
2015129121.tif 000013
【００８０】
レシプロカル（reciprocal）ＣＥ実験の実験条件：
バックグラウンド電解質：エタノール中における５０ｍＭのギ酸＋２５ｍＭのトリエチルアミン＋５０ｍＭの４−アミノ−３，６−ジヒドロ−２−ジメチルアミノ−６−メチル−１，３，５−トリアジン（鏡像異性的に純粋）、Ｔ＝２５℃、注入：５０ｍｂａｒ／５ｓ、試料：ラセミ状態の表の化合物（電解質中１〜１０ｍｇ／ｍｌ）、溶融シリカキャピラリー：内径５０μｍ、全長＝５０ｃｍ、検出器に対する有効な長さ＝４１．５ｃｍ、電圧＝−２５ｋＶ、３０分後、キャピラリーから非溶出の化合物を除去するために、２０ｍｂａｒの圧力が注入器側に印加される。
【００８１】
これらの化合物を、例えば粒子状若しくはモノリスのシリカゲル、又は粒子状又はモノリスの有機ポリマー等の担体に適切に固定した後、式Ｉのキラル化合物をその鏡像異性体に分離可能なイオン交換体が得られる。
【００８２】
本発明の態様は以下のとおりである。
〔態様１〕
式Ｉの化合物及びその酸付加塩をクロマトグラフィ分離する方法であって、その分離をキラルイオン交換体上で行うことを特徴とする方法。
〔態様２〕
前記式Ｉの鏡像異性体の分離を、陰イオン性の交換材料上で陽イオン交換の過程において行うことを特徴とする態様１に記載の方法。
〔態様３〕
前記式Ｉの鏡像異性体が、両イオン性のキラル固定相上で分離されることを特徴とする態様１又は２に記載の方法。
〔態様４〕
前記式Ｉの鏡像異性体が、水素結合により担持されたイオン相互作用を有する固定相上で分離されることを特徴とする態様１〜３のいずれかに記載の方法。
〔態様５〕
前記式Ｉの鏡像異性体が分離されることを特徴とする態様１〜４のいずれかに記載の方法［但し、Ｒ１、Ｒ２はＡを意味する。］。
〔態様６〕
前記式Ｉの鏡像異性体が分離されることを特徴とする態様１〜５のいずれかに記載の方法［但し、Ｒ３、Ｒ４はＨを意味する。］。
〔態様７〕
前記式Ｉの鏡像異性体が分離されることを特徴とする態様１〜６のいずれかに記載の方法［但し、Ｒ５はＨを意味し、Ｒ６はＡを意味する。］。
〔態様８〕
前記式Ｉの鏡像異性体が分離されることを特徴とする態様１〜７のいずれかに記載の方法［但し、Ｒ１、Ｒ２はメチルを意味し、Ｒ３、Ｒ４はＨを意味し、Ｒ５はＨを意味し、Ｒ６はメチルを意味する。］。
〔態様９〕
前記式Ｉの鏡像異性体が分離されることを特徴とする態様１〜８のいずれかに記載の方法［但し、Ｒ１、Ｒ２はメチルを意味し、Ｒ３、Ｒ４はＨを意味し、Ｒ５はＨを意味し、Ｒ６はメチルを意味する。］。
〔態様１０〕
前記イオン交換材料が、キラル要素及び少なくとも一つのイオン交換基を有するキラルセレクタと、スペーサと、担体とを含むことを特徴とする態様１〜９のいずれかに記載の方法。
〔態様１１〕
前記キラル要素が１０００未満の分子量を有し、前記陽イオン交換基がｐＫａ＜４．０の酸基であることを特徴とする態様１〜１０のいずれかに記載の方法。
〔態様１２〕
前記酸基が、カルボン酸基、スルホン酸基、スルフィン酸基、リン酸基、ホスホン酸基、又はホスフィン酸基であることを特徴とする態様１１に記載の方法。
〔態様１３〕
ｉ）メタノール、エタノール、プロパノール、アセトニトリル、ＴＨＦ、ジオキサン、酢酸エチル、クロロホルム、ジクロロメタン、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、ヘキサン、ヘプタン、又はこれらの溶媒の２成分、３成分、４成分の混合物（共・対イオンを添加したもの、若しくは、イオン発生用添加剤を含まないもの）の群からの有機溶媒、
ｉｉ）水性媒体であって、緩衝剤を添加したもの又は添加しないものであり、かつ、ｉ）で規定される群からの混和性の極性有機溶媒を含むもの又は含まないもの、
ｉｉｉ）超臨界又は臨界前のＣＯ２であって、ｉ）で規定される有機溶媒を含むもの又は含まないものであり、かつ、共・対イオンを添加したもの又はイオン発生用添加剤を含まないもの、
を含む溶離液が用いられることを特徴とする態様１〜１２のいずれかに記載の方法。