(57)【要約】      （修正有）【課題】特にイヌのアレルギー性疾患（特にイヌのアトピー性皮膚炎に罹患する可能性）の効果的な診断方法を提供する。【解決手段】Ｔｈｌサイトカイン，Ｔｈ２サイトカイン，及び抑制性サイトカインの発現量を測定する工程を含む，アレルギー性疾患の発症可能性を診断する方法。Ｔｈｌサイトカイン，Ｔｈ２サイトカイン及び抑制性サイトカインの例は，それぞれＩＦＮ−γ，ＩＬ−１３及びＴＧＦ−βである。被験対象の年齢に関する要素をさらに用いて，アレルギー性疾患の発症可能性を診断してもよい。アレルギー性疾患の例は，イヌアトピー性皮膚炎である。【選択図】図２
2015167546.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｔｈｌサイトカイン，Ｔｈ２サイトカイン，及び抑制性サイトカインの発現量を測定する工程を含む，
アレルギー性疾患の発症可能性を診断する方法。
【請求項２】
請求項１に記載のアレルギー性疾患の発症可能性を診断する方法であって，
前記Ｔｈ１サイトカインが，ＩＦＮ一γ又はＩＬ−１２ｐ３５であり，
前記Ｔｈ２サイトカインが，ＩＬ−１３又はＩＬ−５であり，
前記抑制性サイトカインが，ＴＧＦ−β又はＩＬ−１０である方法。
【請求項３】
請求項１に記載のアレルギー性疾患の発症可能性を診断する方法であって，
前記Ｔｈｌサイトカインが，ＩＦＮ−γであり，
前記Ｔｈ２サイトカインが，ＩＬ−１３であり，
前記抑制性サイトカインが，ＴＧＦ−βである方法。
【請求項４】
請求項１に記載のアレルギー性疾患の発症可能性を診断する方法であって，
前記Ｔｈｌサイトカイン，Ｔｈ２サイトカイン，及び抑制性サイトカインの発現量と，
被験対象の年齢に関する要素と，を含む要素を用いて，アレルギー性疾患の発症可能性を診断する方法。
【請求項５】
請求項１に記載のアレルギー性疾患の発症可能性を診断する方法であって，
前記アレルギー性疾患が，イヌアトピー性皮膚炎である方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は，アレルギー性疾患の発症可能性を診断する方法に関する。特に本発明は，特定のサイトカインの発現を測定することによるイヌのアレルギー性疾患（例えば，イヌアトピー性皮膚炎）の発症可能性を診断する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
特開２０１２−２３３７７７号公報（下記特許文献１）には，母乳中サイトカイン及びケモカイン値に基づく乳児アレルギー性疾患の発症予知方法が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２０１２−２３３７７７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
特開２０１２−２３３７７７号公報（特許文献１）は，様々なサイトカイン及びケモカインがヒト乳児アレルギー性疾患と関連する旨を開示する。しかしながら，この文献によっても，いずれのサイトカインやケモカインがアレルギー性疾患の発症に関与するのかは明確とされていない。また，どのサイトカインやケモカインの発現量を測定すれば，効果的にアレルギー性疾患の発症診断を行えるかは明確にされていない。
【０００５】
よって，本発明は，アレルギー性疾患の効果的な診断方法を提供することを目的とする。
【０００６】
イヌの約１割は，アレルギー性疾患に罹患しているといわれる。このため，イヌにおけるアレルギー性疾患を診断できれば，非常に有益である。
【０００７】
よって，本発明は，イヌのアレルギー性疾患の診断方法を提供することを上記とは別の目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は，例えば，ＩＦＮ−γ（インターフェロン−ガンマ），ＩＬ−１３（インターロイキン−１３），及びＴＧＦ−β（トランスフォーミング増殖因子−ベータ）の３つのサイトカイン遺伝子の発現量を測定することで，効果的にアレルギー性疾患の発症可能性を診断できるという実施例による知見に基づくものである。
【０００９】
本発明の第１の側面は，Ｔｈ１サイトカイン，Ｔｈ２サイトカイン，及び抑制性サイトカインの発現量を測定する工程を含むアレルギー性疾患の発症可能性を診断する方法に関する。
【００１０】
この方法の好ましい例は，Ｔｈ１サイトカインが，ＩＦＮ−γ又はＩＬ−１２ｐ３５である。そして，Ｔｈ２サイトカインが，ＩＬ−１３又はＩＬ−５である。さらに，抑制性サイトカインが，ＴＧＦ−β又はＩＬ−１０である。
【００１１】
この方法の好ましい例は，Ｔｈ１サイトカインが，ＩＦＮ−γである。そして，Ｔｈ２サイトカインが，ＩＬ−１３である。さらに，抑制性サイトカインが，ＴＧＦ−βである。
【００１２】
この方法の好ましい例は，Ｔｈ１サイトカイン，Ｔｈ２サイトカイン，及び抑制性サイトカインの発現量の他に，被験対象の年齢に関する要素を含む要素を用いて，アレルギー性疾患の発症可能性を診断する方法である。
【００１３】
この方法の好ましい例は，アレルギー性疾患が，イヌアトピー性皮膚炎である。
【００１４】
この方法の好ましい例は，イヌアトピー性皮膚炎の発症可能性を診断する方法である。
【発明の効果】
【００１５】
アレルギー性疾患に関与すると考えられるサイトカインやケモカインは多数存在する。しかし，実施例により実証されたとおり，例えば，ＩＦＮ−γ，ＩＬ−１３，及びＴＧＦ−βの３つのサイトカイン遺伝子の発現量を測定することで，効果的にアレルギー性疾患（特にイヌアトピー性皮膚炎）の発症可能性を診断できる。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１Ａ】図１Ａは，ＣＡＤ（ｎ＝２０）と健康なイヌ（ｎ＝１２）のＴｈｌサイトカインの遺伝子転写量比を示す図である。
【図１Ｂ】図１Ｂは，Ｔｈ２サイトカインの遺伝子転写量比を示す図である。
【図１Ｃ】図１Ｃは，抑制性サイトカインの遺伝子転写量比を示す図である。
【図１Ｄ】図１Ｄは，炎症誘発サイトカインの遺伝子転写量比を示す図である。
【図２】図２は，ＣＡＤ（ｎ＝２０）と健康なイヌ（ｎ＝１２）のＩＦＮ−γ，ＩＬ−１３及びＴＧＦ−１３の転写プロファイルを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下，本発明を実施するための形態について説明する。本発明は，以下に説明する形態に限定されるものではなく，以下の形態から当業者が自明な範囲で適宜修正したものも含
む。
【００１８】
本発明の第１の側面は，Ｔｈ１サイトカイン，Ｔｈ２サイトカイン，及び抑制性サイトカインの発現量を測定する工程を含むアレルギー性疾患の発症可能性を診断する方法に関する。Ｔｈ１サイトカイン，Ｔｈ２サイトカイン，及び抑制性サイトカインは，いずれも公知のサイトカインである。これらに含まれる各サイトカインは，たとえば，ＮＣＢＩアクセッション番号が振られており，その配列も公知である。
【００１９】
Ｔｈ１サイトカインとは、Ｔｈ１細胞〈へルパーＴ細胞タイプ１）が産生またはＴｈ１細胞を誘導・増殖し、その結果、細胞性免疫応答を誘導するサイトカインを意味する。Ｔｈ１サイトカインの例は，ＩＦＮ−γ，ＩＬ−１２ｐ３５，ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、及びＩＬ−１８である。ＩＬ−２は、Ｔｈ１細胞が産生し、リンパ球の増殖やナチュラルキラー細胞の活性化、細胞障害性Ｔ細胞とリンフォカイン活性化キラー細胞の誘導などの作用を有するサイトカインを意味する。ＩＬ−１２は、樹状細胞や単球やマクロファージなどが産生し、ナイーブＴｈ細胞からのＴｈ１細胞への分化を促進したり、Ｔ細胞やナチュラルキラー細胞からのＩＦＮ一γ産生を誘導したり、ナチュラルキラー細胞活性を増強したりする作用などを有するサイトカインを意味する。ＩＬ−１５は、単球やマクロファージ、繊維芽細胞などが産生し、Ｔ細胞の増殖やナチュラルキラー細胞の活性化、細胞障害性Ｔ細胞とリンフォカイン活性化キラー細胞の誘導などの作用を有するサイトカインを意味する。ＩＬ−１８は、単球やマクロファージなどが産生し、Ｔ細胞を増殖したり、ＩＬ−１２は別の経路によりＴｈ１細胞やナチュラルキラー細胞からのＩＦＮ一γ産生を誘導したり、ナチュラルキラー細胞活性を増強したりする作用などを有するサイトカインを意味する。これらは、哺乳動物（ヒト又はイヌなど）から単離・精製された天然品でもよいし、以上の意味を有するものである限り、遺伝子工学的手法により人工的に製造されたもの（アミノ酸の置換や欠失や付加などが施されていてもよい）でもよい。
【００２０】
本発明の好ましい例は，Ｔｈ１サイトカインが，ＩＦＮ一γ又はＩＬ−１２ｐ３５である。本発明の好ましい例は，Ｔｈ１サイトカインが，ＩＦＮ−γである。
【００２１】
Ｔｈ２サイトカインは、Ｔｈ２細胞（ヘルパーＴ細胞タイプ２）が産生し、液性免疫応答を誘導するサイトカインを意味する。Ｔｈ２サイトカインの例は、ＩＬ−１３，ＩＬ−５及びＩＬ−４である。ＩＬ−４は、Ｔｈ２細胞が産生し、Ｔｈ２細胞の誘導とＴｈｌ細胞の誘導抑制作用や、Ｂ細胞の増殖や活性化などの作用を有するサイトカインを意味する。これらは、哺乳動物（ヒトが望ましい）から単離・精製された天然品でもよいし、以上の意味を有するものである限り、遺伝子工学的手法により人工的に製造されたもの（アミノ酸の置換や欠失や付加などが施されていてもよい）でもよい。
【００２２】
本発明の好ましい例は，Ｔｈ２サイトカインがＩＬ−１３又はＩＬ−５である。本発明の好ましい例は，Ｔｈ１サイトカインが，ＩＦＮ−γである。
【００２３】
抑制性サイトカインは，抗炎症性サイトカインともよばれ，炎症症状を抑制する働きをもつサイトカインを意味する。抑制性サイトカインの例は，ＴＧＦ−β，ＩＬ−ｌ０，ＴＮＦ−ＲＩ、ＴＮＦ−ＲＩＩ、ＩＬ−ｌｒａ、ＩＬ−４、ＩＬ−１２、及びＩＬ−１３で
ある。本発明の好ましい例は，抑制性サイトカインがＴＧＦ−β又はＩＬ−１０である。
本発明の好ましい例は，抑制性サイトカインがＴＧＦ−βである。
【００２４】
サイトカインの発現量を測定する方法及び測定装置は，公知である。サイトカインの発現量を測定するためには，たとえば，国際公開ＷＯ０１／０６５２５９号パンフレット，特許第３０５８６７３号，特許第３１８３６６６号，特許第４７１７９６２号又は特許第５３１２０２５号に開示された方法及び装置を用いればよい。具体的に説明すると，以下のようにして所定のサイトカインの発現量を測定すればよい。
【００２５】
まず，被験対象を採血する。採血した血液からＲＮＡを抽出する。抽出したＲＮＡをリアルタイムＰＣＲにより，Ｔｈ１サイトカイン（ＩＦＮ−γ），Ｔｈ２サイトカイン（ＩＬ−１３），及び抑制性サイトカイン（ＴＧＦ−β）の発現量を測定する。このようにすれば，
被験対象におけるサイトカインの遺伝子転写量を測定できる。
【００２６】
アレルギー性疾患の発症可能性とは，被験対象が将来特定のアレルギー性疾患に擢患する可能性を意味する。アレルギー性疾患に罹患する可能性が高いほど，発症可能性が高いといえる。
【００２７】
アレルギー性疾患の例は，アトピー性皮膚炎（イヌアトピー性皮膚炎）、アレルギー性鼻炎及び喘息である。
【００２８】
本発明の好ましい例は，Ｔｈ１サイトカイン，Ｔｈ２サイトカイン，及び抑制性サイトカインの発現量の他に，被験対象の年齢に関する要素を含む要素を用いて，アレルギー性疾患の発症可能性を診断する方法である。また，本発明の好ましい例は，上記に加え，被験対象の背景に関する要素をも用いてアレルギー性疾患の発症可能性を診断する。
【００２９】
具体的な評価方法の例は，以下のとおりである。コンピュータにあらかじめＴｈｌサイトカイン，Ｔｈ２サイトカイン，及び抑制性サイトカインの発現量の基準値を記憶させておく。対象におけるＴｈｌサイトカイン，Ｔｈ２サイトカイン，及び抑制性サイトカインの発現量を測定する。そして，測定されたＴｈｌサイトカイン，Ｔｈ２サイトカイン，及び抑制性サイトカインの発現量をコンピュータへ入力する。すると，コンピュータは，記憶部に記憶された各サイトカインの基準値を読み出して，測定値と比較する。そして，コンピュータは，各サイトカインの測定値の基準値との比較値を求める。そして，コンピュータは，記憶部に記憶した各サイトカインの比較値に掛け合わせる係数を読み出して，それぞれの係数をそれぞれのカイトカインの比較値と掛け合わせ，合計を求める。そして，求めた合計値を記憶部に記憶させた値と比較することで，コンピュータは，対象のアレルギー疾患の発症可能性に関する情報を得る。なお，年齢等に関する補正値を用いて，アレルギー性疾患の発症可能性（罹患可能性）を評価することもできる。その場合，年齢に関する補正値を記憶部に記憶させ，コンピュータに対象の年齢が入力された場合，記憶部からその年齢に応じた補正値を読み出して，サイトカインの比較値と係数を掛け合わせたものを合算する際に，この補正値も加える演算を行えばよい。本発明は，このようなコンピュータや，プログラム，そのようなプログラムを記憶したコンピュータが読み取ることができる情報記録媒体をも提供する。
【００３０】
以下は，その診断方法の例である。コンピュータはあらかじめ各種係数（ａ１など）や，Ｐｒｏｂ［ＡＤ］の基準値，基準となるＩＦＮ−γ，ＩＬ−１３及びＴＧＦ−βの濃度を記憶している。なお，本発明は，入力されたＩＦＮ−γ，ＩＬ−１３及びＴＧＦ−βの濃度をそのまま用いて計算してもよいし，ＩＦＮ−γ，ＩＬ−１３及びＴＧＦ−βの濃度の基準値でＩＦＮ−γ，ＩＬ−１３及びＴＧＦ−βの濃度を割ったものを［ＩＦＮ−γ］，［ＩＬ−１３］及び［ＴＧＦ−β］として用いてもよい。
【００３１】
コンピュータは，入力されたＩＦＮ−γ，ＩＬ−１３及びＴＧＦ−βの濃度を用い，適宜記憶部から係数を読み出して，以下の演算を行う。
【００３２】
ＳｑＤｉｓｔ［０］＝（ａ１×［ＩＦＮ−γ］×［ＩＦＮ−γ］）＋（ａ２×［ＩＬ−１３］×［ＩＦＮ−γ］）＋（ａ３×［ＩＬ−１３］×［ＩＬ−１３］）＋（ａ４×［ＴＧＦ−β］×［ＩＦＮ−γ］）＋（ａ５×［ＴＧＦ−β］×［ＩＬ−１３］）＋（ａ６×［ＴＧＦ−β］×［ＴＧＦ−β］）
【００３３】
ＳｑＤｉｓｔ［ＡＤ］＝ＳｑＤｉｓｔ［０］＋ｂ１×［ＩＦＮ−γ］＋ｂ２［ＩＬ−１３］×＋ｂ３［ＴＧＦ−β］＋ｂ４
【００３４】
ＳｑＤｉｓｔ［ＣＯＮＴ］＝ＳｑＤｉｓｔ［０］＋ｃ１×［ＩＦＮ−γ］＋ｃ２［ＩＬ−１３］×＋ｃ３［ＴＧＦ−β］＋ｃ４
【００３５】
Ｐｒｏｂ［０］＝Ｅｘｐ（ｄ１×ＳｑＤｉｓｔ［ＡＤ］）＋Ｅｘｐ（ｄ２×ＳｑＤｉｓｔ［ＣＯＮＴ］）
【００３６】
Ｐｒｏｂ［ＡＤ］＝Ｅｘｐ（ｅ１×ＳｑＤｉｓｔ［ＡＤ］）／Ｐｒｏｂ［０］
【００３７】
そして，コンピュータは，Ｐｒｏｂ［ＡＤ］を用いて，アレルギー性疾患の発症可能性を診断する。この場合，コンピュータは，記憶部から基準となるＰｒｏｂ［ＡＤ］の値を読み出し，それと演算により得られたＰｒｏｂ［ＡＤ］との値を比較する。そのようにして，対象のアトピー性皮膚炎の発症可能性を診断する。ＩＦＮ−γ，ＩＬ−１３及びＴＧＦ−βの濃度は，それぞれＴｈ１サイトカイン，Ｔｈ２サイトカイン及び抑制性サイトカインの濃度と読み替えることができる。
【００３８】
この方法の好ましい例は，アレルギー性疾患が，アトピー性皮膚炎（イヌアトピー性皮膚炎）である。
【００３９】
この方法の好ましい例は，イヌアトピー性皮膚炎の発症可能性を診断する方法である。
【００４０】
本発明の方法は，健常人（健常動物）におけるＴｈｌサイトカイン，Ｔｈ２サイトカイン，及び抑制性サイトカインの発現量をあらかじめ測定し，それを標準とする。そして，被験対象のＴｈ１サイトカイン，Ｔｈ２サイトカイン，及び抑制性サイトカインと，健常動物における標準との差（又は比）を数値として求める。このようにして，各サイトカインの相対定量値を求めることができる。その上で，Ｔｈ１サイトカイン，Ｔｈ２サイトカイン，及び抑制性サイトカインの発現量に所定の係数をかける。このようにして，発症可能性に関する数値を求めることができる。この係数や補正値を求める際に，被験対象の年齢に関する要素や，被験対象の背景に関する要素をあわせて用いてもよい。サイトカインの測定値に基づいて，発症可能性に関する数値を求める際には，サイトカインの測定値を入力として受け取るコンピュータを用いればよい。
【実施例１】
【００４１】
検体
検体として，ＣＡＤ（アトピー性皮膚炎）の犬と健康なイヌを用いた。
ＣＡＤの診断は，Ｆａｖｒｏｔらの基準に基づいて行った。Ｆａｖｒｏｔらの基準は，除去食を与えたり，掻痒性皮膚炎（寄生性あるいは感染性の病気）の他の原因を除去したことに対する負の応答である。もし二次皮膚感染（例えば，表在性膿皮症やマラセチア）があった場合には，この研究に用いる前に適切に処置した。
【００４２】
健康な犬として，岐阜大学で実験用に飼育されている犬を用いた。この研究に用いるため，犬には病歴が無いこと，皮膚や全身性罹患が無いことを確認した。すべての手順は，本学の動物管理使用委員会によって承認された。
【００４３】
除外基準は，以下のとおりとした。
全ての犬に対し，グルココルチコイド，抗ヒスタミン，または免疫抑制剤を２週間以内に投与した，またはｄｅｐｏｔ  グルココルチコイドを６週間以内に投与した場合には，その犬は除外した。
ＣＡＤの犬に対し，合併症を患っている場合や，アレルゲン特異的ＩｇＥテストに陰性だった場合には，その犬は除外した。
【００４４】
血液のサンプリングとＲＮＡの抽出を以下のように行った。
血液サンプルは，ＣＡＤの犬（ｎ＝２０，年齢＝６．２１土３．３４）と同年齢の健康な犬（ｎ＝１２，年齢＝６．７４土２．３）より得た。すべての犬の飼い主には，この研究の目的を説明し，血液の採取について同意を得た。血液サンプルは，速やかにＰＡＸｇｅｎｅ  Ｂｌｏｏｄ  ＲＮＡ  Ｔｕｂｅ（ＰｒｅＡｎａｌｙｔｉＸ社，Ｈｏｍｂｒｅｃｈｔｉｋｏｎ，Ｓｗｉｔｚｅｒ１ａｎｄ）に入れ，解析に用いるまで−２０℃にて保存した。ＰＡＸｇｅｎｅ  Ｂｌｏｏｄ  ＲＮＡ  Ｋｉｔ（ＰｒｅＡｎａｌｙｔｉＸ杜）を用いてＴｏｔａｌ  ＲＮＡを抽出した後，ＴＵＲＢＯ  ＤＮＡ−ｆｒｅｅ  Ｋｉｔ（Ａｐｐｌｉｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍ杜，Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡ，ＵＳＡ）を用いてゲノミックＤＮＡを消化した。
【００４５】
ｃＤＮＡ合成と定量的リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ
ｍＲＮＡの転写量は，Ｔｈｅｒｍａｌ  ｃｙｃｌｅｒ  Ｄｉｃｅ  Ｒｅａｌ−ＴｉｍｅＳｙｓｔｅｍ  ＴＰ８００（タカラバイオ社，滋賀，日本）を用いて，２ステップＲＴ−ＰＣＲにて定量した。Ｔｏｔａｌ  ＲＮＡは，ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔTM  ＲＴ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｋｉｔ（タカラバイオ社）を用いてｃＤＮＡに逆転写した。定量的リアルタイムＲＴ−ＰＣＲは，ＳＹＢＲ  Ｐｒｅｍｉｘ  Ｅｘ  ＴａｑＴＭ（タカラバイオ社）を用いて行った。正確な定量をするために，３種の参照遺伝子：ＳＤＮＡ，ＣＧ１４９８０，ＴＢＰを選んだ。この研究に用いたプライマーの組み合わせを，表１に記載した。増幅は，活性化（９５℃  １０秒），ＰＣＲの４０サイクル（９５℃  ５秒，６０℃  ３０秒），解離（９５℃  １５秒，６０℃３０秒，９５℃１５秒）にて行った。Ｃｔ値は，ソフトウェア（Ｔｈｅｒｍａｌ  Ｃｙｃｌｅｒ  Ｄｉｃｅ  Ｒｅａｌ  Ｔｉｍｅ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｍｕｌｔｉｐ１ａｔｅ  ＲＱ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ３．００：タカラバイオ社）を用いて決定した。全てのサンプルは２連で解析し，ΔＣｔ値の平均値を計算した。各ｍＲＮＡの転写量（相対定量値）は，３種の参照遺伝子の平均値と比較してｎ倍の差異があるとのサンプルの評価で得られた２−ΔＣｔを用いて計算した。
【００４６】
【表１】
2015167546.tif 000003
【００４７】
統計解析
ＣＡＤの犬と健康な犬のサイトカイン遺伝子の転写量の比較をするために，Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ  Ｕ  テストを行った。ＣＡＤの犬と健康な犬を最も判別することができる変数の組み合わせを決定するために，判別分析を使用した。変数選択にはｆｏｒｗａｒｄ  ｓｔｅｐｗｉｓｅ  ｓｅ１ｅｃｔｉｏｎを用いた。さらに，各ステップにおいて，全ての変数を，グループ間で最も判別できるかを決めるために検討し，それぞれのＦ値が２以上であった場合には採用した。最終的な方程式の判別ポテンシャルは，主成分分析を用いて３次元プロットにて図示した。全ての統計解析は，ソフトウェア（ＪＭＰ  ７．０．２，ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｃａｒｙ，ＮＣ，ＵＳＡ）を用いて行った。
【００４８】
ＳｑＤｉｓｔ［０］＝（ａ１×［ＩＦＮ−γ］×［ＩＦＮ−γ］）＋（ａ２×［ＩＬ−１３］×［ＩＦＮ−γ］）＋（ａ３×［ＩＬ−１３］×［ＩＬ−１３］）＋（ａ４×［ＴＧＦ−β］×［ＩＦＮ−γ］）＋（ａ５×［ＴＧＦ−β］×［ＩＬ−１３］）＋（ａ６×［ＴＧＦ−β］×［ＴＧＦ−β］）
ａ１＝６２６９１４．４７１６０７８０１
ａ２＝−４７５７５５．７１０４１７６７５
ａ３＝７１８０７４６．４７５８５６３５
ａ４＝−２５３．２０３２８０１８６７３６
ａ５＝１３１５．７１１３７１１１７９
ａ６＝２．４９５９６９８５９８７４１２
【００４９】
ＳｑＤｉｓｔ［ＡＤ］＝ＳｑＤｉｓｔ［０］＋ｂ１×［ＩＦＮ−γ］＋ｂ２［ＩＬ−１３］×＋ｂ３［ＴＧＦ−β］＋ｂ４
ｂ１＝１０５．２６４９１２６７５８５９
ｂ２＝−１１０５１．３３８８６１７８８８
ｂ３＝−７．８１９８０８３９１２２８３６
ｂ４＝９．１３３１５３６１４６８７８２
【００５０】
ＳｑＤｉｓｔ［ＣＯＮＴ］＝ＳｑＤｉｓｔ［０］＋ｃ１×［ＩＦＮ−γ］＋ｃ２［ＩＬ−１３］×＋ｃ３［ＴＧＦ−β］＋ｃ４
ｃ１＝−２２８１．８８８９５７８７２２５
ｃ２＝−４５１６．６２９１１４２４５４８
ｃ３＝−１２．１５５２９９４２２２９４２
ｃ４＝１８．３６９０９５７６０９４９４
【００５１】
Ｐｒｏｂ［０］＝Ｅｘｐ（ｄ１×ＳｑＤｉｓｔ［ＡＤ］）＋Ｅｘｐ（ｄ２×ＳｑＤｉｓｔ［ＣＯＮＴ］）
ｄ１＝−０．５
ｄ２＝−０．５
【００５２】
Ｐｒｏｂ［ＡＤ］＝Ｅｘｐ（ｅ１×ＳｑＤｉｓｔ［ＡＤ］）／Ｐｒｏｂ［０］
ｅ１＝−０．５
【００５３】
Ｐｒｏｂ［ＡＤ］を用いて，イヌアトピー性皮膚炎の発症可能性を診断した。
【００５４】
図１Ａは，ＣＡＤ（ｎ＝２０）と健康なイヌ（ｎ＝１２）のＴｈｌサイトカインの遺伝子転写量比を示す図である。図１Ｂは，Ｔｈ２サイトカインの遺伝子転写量比を示す図である。図１Ｃは，抑制性サイトカインの遺伝子転写量比を示す図である。図１Ｄは，炎症誘発サイトカインの遺伝子転写量比を示す図である。★Ｐ<０．０５，★★Ｐ<０．０１，★★★Ｐ<０．００１である。
【００５５】
図２は，ＣＡＤ（ｎ＝２０）と健康なイヌ（ｎ＝１２）の［ＩＦＮ−γ］，［ＩＬ−１３］及びＴＧＦ−１３の転写プロファイルを示す。
【産業上の利用可能性】
【００５６】
本発明は，顧客に対する，アトピー性皮膚炎などのアレルギー疾患の発症可能性を測定する方法として，例えば美容業において利用されうる。
【００５７】
本発明は，イヌなどのヒト以外の動物に対するアトピー性皮膚炎などのアレルギー疾患の発症可能性を測定する方法として，獣医業において利用されうる。
【配列表フリーテキスト】
【００５８】
配列番号１：プライマー
配列番号２：プライマー
配列番号３：プライマー
配列番号４：プライマー
配列番号５：プライマー
配列番号６：プライマー
配列番号７：プライマー
配列番号８：プライマー
配列番号９：プライマー
配列番号１０：プライマー
配列番号１１：プライマー
配列番号１２：プライマー
配列番号１３：プライマー
配列番号１４：プライマー
配列番号１５：プライマー
配列番号１６：プライマー
配列番号１７：プライマー
配列番号１８：プライマー
配列番号１９：プライマー
配列番号２０：プライマー
【図１Ａ】
2015167546.tif 000004
【図１Ｂ】
2015167546.tif 000005
【図１Ｃ】
2015167546.tif 000006
【図１Ｄ】
2015167546.tif 000007
【図２】
2015167546.tif 000008
【配列表】
2015167546000001.app