(57)【要約】【課題】低分解性でかつ膜状のフィブリンゲルを容易に製造可能な方法及び装置を提供する。【解決手段】本発明の製造方法は、フィブリンゲル内の増殖因子及び血小板の一部を除去する予備除去工程Ｓ１と、フィブリンゲルに熱を付与する加熱工程Ｓ２と、フィブリンゲルを圧延する圧延工程Ｓ３と、を含む。加熱工程Ｓ２と圧延工程Ｓ３とは同時に行われる。加熱工程Ｓ２では、８０〜１００℃の温度に維持された少なくとも一対の伝熱性部材２ａ，２ｂを用いて、フィブリンゲルが１〜１０秒間、加熱しながら均一厚さに圧延される。伝熱性部材２ａ，２ｂが金属部材で構成されていることが好ましい。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
フィブリンゲル内の増殖因子及び血小板の一部を除去する予備除去工程と、
前記フィブリンゲルに熱を付与する加熱工程と、
前記フィブリンゲルを圧延する圧延工程と、
を含み、かつ、
前記加熱工程と、前記圧延工程と、を同時に行い、
前記加熱工程では、８０〜１００℃の温度に維持された少なくとも一対の伝熱性部材を用いて、前記フィブリンゲルを１〜１０秒間、加熱しながら均一厚さに圧延することを特徴とする再生治療用低分解性フィブリンゲル膜の製造方法。
【請求項２】
前記伝熱性部材が金属部材で構成されていることを特徴とする請求項１に記載の製造方法。
【請求項３】
前記加熱工程では、前記伝熱性部材の表面の少なくとも一部をセラミックス又は生体親和性を有した油で予め被覆するか、又は、前記フィブリンゲルをフィルム状シートで予め包むことを特徴とする請求項１又は２に記載の製造方法。
【請求項４】
前記予備除去工程では、前記フィブリンゲルをガーゼで包んで予備押圧することを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の製造方法。
【請求項５】
フィブリンゲルを挟持可能な少なくとも一対の伝熱性部材と、
前記伝熱性部材を介して前記フィブリンゲルに熱を供給可能な熱源が設けられた本体と、
前記伝熱性部材の温度を検知する第１センサと、
前記第１センサから得られた情報を取得し、該情報を基に前記熱源での熱の供給を調節して、前記伝熱性部材の温度を８０〜１００℃の範囲に設定可能な制御部と、
を備えたことを特徴とする再生治療用低分解性フィブリンゲル膜の製造装置。
【請求項６】
前記伝熱性部材によって前記フィブリンゲルが挟持されているかどうかを検知する第２センサをさらに備え、かつ、前記制御部は、前記第２センサから得られた情報も取得し、該情報を基に前記フィブリンゲルの加熱時間を計算可能にすることを特徴とする請求項５に記載の製造装置。
【請求項７】
前記制御部は、前記フィブリンゲルの加熱時間を１〜１０秒間の範囲に設定可能であることを特徴とする請求項６に記載の製造装置。
【請求項８】
前記伝熱性部材は前記本体に着脱自在であることを特徴とする請求項５〜７のいずれかに記載の製造装置。
【請求項９】
前記伝熱性部材が金属部材で構成されていることを特徴とする請求項５〜８のいずれかに記載の製造装置。
【請求項１０】
前記伝熱性部材は、セラミックスで被覆された表面を含んでいることを特徴とする請求項５〜９のいずれかに記載の製造装置。
【請求項１１】
前記伝熱性部材の目標温度及び目標加熱時間の少なくとも一つを受け付けかつこれらの情報を前記制御部に伝達可能な入力装置を備えたことを特徴とする請求項５〜１０のいずれかに記載の製造装置。
【請求項１２】
前記伝熱性部材の温度及び加熱時間の少なくとも一つを表示可能な表示装置、或いは、前記伝熱性部材の温度及び加熱時間の少なくとも一つが前記制御部で決定した設定範囲に出入りする際に警報を発することが可能な警報装置、又は、該表示装置及び該警報装置をさらに備えたことを特徴とする請求項５〜１１のいずれかに記載の製造装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、再生治療に使用可能な低分解性フィブリンゲル膜の製造方法及び製造装置に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
（フィブリンゲル及びその用途）
近年、患者の血液から調製されたゲル状の多血小板フィブリン（ＰＲＦ）が、歯周病等の再生治療、人工インプラントの埋入や美容外科などの分野で、組織再生促進材料として利用されつつある。本明細書ではこのＰＲＦを「フィブリンゲル」とも呼ぶ。
【０００３】
（フィブリンゲルの長所）
フィブリンゲルは、（１）治療後の痛みを少なくしかつ傷の治りを早くする点、（２）血小板や増殖因子が豊富に含まれた血液由来の材料であるため、骨の少ない所に使用するとその再生が早くなり、ひいては、治癒期間が短縮する点といった優れた長所を有する。
【０００４】
（先行技術：フィブリンゲル圧延装置）
本発明者らは、このフィブリンゲルを、内在する増殖因子や血漿等の栄養分の喪失やその表面に付着した血小板の損傷を引き起こすことなく、フィブリンゲルを均一な厚みに圧延することができる器具を既に提案している（特許文献１を参照）。すなわち、特許文献１に開示の圧延器具は、「組織再生促進材料」としてのフィブリンゲルの本来の機能・長所を保持したままでこれをシート状に形成することを目的として創出された器具である。
【０００５】
（遮断膜の必要性）
ところで、歯周病等の外科手術後の創傷治癒においては、歯肉粘膜上皮細胞の治癒の速度が結合組織の線維芽細胞や骨芽細胞より早いので、上皮細胞の深行増殖（down growth）が起こり、骨や歯周組織の再生／新生が得られにくくなることが問題となっている。この深行増殖の問題を解決するために、歯周組織誘導再生（ＧＴＲ）法や骨組織誘導再生（ＧＢＲ）法が提案・実施されている。これらの方法は、具体的には、遮断膜（barrier membrane）を用いて上皮細胞の患部への侵入を防ぎ、線維芽細胞や骨芽細胞の誘導を助けることによって歯周組織や歯槽骨の再生／新生を図るものである（例えば、特許文献２を参照）。
【０００６】
遮断膜には、非吸収性のものと吸収性のものとに大別される。非吸収性の遮断膜には、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）膜などが挙げられるが、生体内で非吸収性のため術後に取り除く必要があり、生体組織（歯肉骨膜弁等）と癒着しないので、術後縫合部の開列が起こり易いという欠点が指摘されている。
【０００７】
一方、吸収性の遮断膜には、コラーゲン膜、ＰＬＡ／ＰＧＡ（ポリ乳酸／ポリグリコール酸共重合体）膜、等の生体分解性膜が挙げられる。しかしながら、コラーゲン等の架橋を架橋剤により化学的に行っていることから生体内でのこれらの膜の分解は遅々としたものであり、また過度の炎症を引き起こすなどの有害事象も報告されている。また、ＰＬＡ／ＰＧＡ膜は分解時に強烈な炎症を引き起こすことも報告されている。
【０００８】
このような欠点に依るのか、近年、遮断膜の市販品の入手が困難となっており、主たる需要者である開業歯科医は困惑している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特許第５０９３５４６号公報
【特許文献２】特開２００８−１４８７９０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明者らは、上記遮断膜を取り巻く事情を鑑み、患者の血液由来のフィブリンゲルを、本来の用途たる組織再生促進材料としてではなく、遮断膜としても利用できないかと思案した。
【００１１】
しかしながら、従来のフィブリンゲルは治癒期間を短縮する目的で作製されているため、数日から１０日程度の極めて短い期間で生体内に完全に分解してしまう。遮断膜として使用するには、術後、骨芽細胞が十分に生成するまで所定の空隙を確保できるように、フィブリンゲルが６〜１２週間程度は分解されずに残存する必要がある。
【００１２】
そこで、本発明では、低分解性でかつ膜状（シート状或いはフィルム状）のフィブリンゲルを容易に製造可能な方法及び装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明者らは、鋭意検討の末、フィブリンゲルに所定の前処理を行い、所定の熱を付与しながら圧延することにより、遮断膜にも利用可能な低分解性のフィブリンゲル膜を見出し、本発明を完成するに至った。
【００１４】
すなわち本発明は、例えば、以下の構成・特徴を備えるものである。
（態様１）
フィブリンゲル内の増殖因子及び血小板の一部を除去する予備除去工程と、
前記フィブリンゲルに熱を付与する加熱工程と、
前記フィブリンゲルを圧延する圧延工程と、
を含み、かつ、
前記加熱工程と、前記圧延工程と、を同時に行い、
前記加熱工程では、８０〜１００℃の温度に維持された少なくとも一対の伝熱性部材を用いて、前記フィブリンゲルを１〜１０秒間、加熱しながら均一厚さに圧延することを特徴とする再生治療用低分解性フィブリンゲル膜の製造方法。
（態様２）
前記伝熱性部材が金属部材で構成されていることを特徴とする態様１に記載の製造方法。
（態様３）
前記加熱工程では、前記伝熱性部材の表面の少なくとも一部をセラミックス又は生体親和性を有した油で予め被覆するか、又は、前記フィブリンゲルをフィルム状シートで予め包むことを特徴とする態様１又は２に記載の製造方法。
（態様４）
前記予備除去工程では、前記フィブリンゲルをガーゼで包んで予備押圧することを特徴とする態様１〜３のいずれかに記載の製造方法。
（態様５）
フィブリンゲルを挟持可能な少なくとも一対の伝熱性部材と、
前記伝熱性部材を介して前記フィブリンゲルに熱を供給可能な熱源が設けられた本体と、
前記伝熱性部材の温度を検知する第１センサと、
前記第１センサから得られた情報を取得し、該情報を基に前記熱源での熱の供給を調節して、前記伝熱性部材の温度を８０〜１００℃の範囲に設定可能な制御部と、
を備えたことを特徴とする再生治療用低分解性フィブリンゲル膜の製造装置。
（態様６）
前記伝熱性部材によって前記フィブリンゲルが挟持されているかどうかを検知する第２センサをさらに備え、かつ、前記制御部は、前記第２センサから得られた情報も取得し、該情報を基に前記フィブリンゲルの加熱時間を計算可能にすることを特徴とする態様５に記載の製造装置。
（態様７）
前記制御部は、前記フィブリンゲルの加熱時間を１〜１０秒間の範囲に設定可能であることを特徴とする態様６に記載の製造装置。
（態様８）
前記伝熱性部材は前記本体に着脱自在であることを特徴とする態様５〜７のいずれかに記載の製造装置。
（態様９）
前記伝熱性部材が金属部材で構成されていることを特徴とする態様５〜８のいずれかに記載の製造装置。
（態様１０）
前記伝熱性部材は、セラミックスで被覆された表面を含んでいることを特徴とする態様５〜９のいずれかに記載の製造装置。
（態様１１）
前記伝熱性部材の目標温度及び目標加熱時間の少なくとも一つを受け付けかつこれらの情報を前記制御部に伝達可能な入力装置を備えたことを特徴とする態様５〜１０のいずれかに記載の製造装置。
（態様１２）
前記伝熱性部材の温度及び加熱時間の少なくとも一つを表示可能な表示装置、或いは、前記伝熱性部材の温度及び加熱時間の少なくとも一つが前記制御部で決定した設定範囲に出入りする際に警報を発することが可能な警報装置、又は、該表示装置及び該警報装置をさらに備えたことを特徴とする態様５〜１１のいずれかに記載の製造装置。
【発明の効果】
【００１５】
本発明によれば、生体内での分解速度（吸収速度）が低いフィブリンゲルを製造することができ、例えば、これを遮断膜として提供することができる。従来のフィブリンゲルは１０日程度で生体内に完全に吸収されるが、本発明により製造されたフィブリンゲル膜は、後述するように、分解が著しく遅延し、３〜４週間経過しても完全に吸収されることは無い。また、この遮断膜は血液由来のフィブリンゲルを利用している為、生体内での炎症を招くこともない。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】本発明の製造方法の各工程を示したフロー図である。
【図２】本発明の製造装置の一例を示した図である。
【図３】試験管を用いたインビトロでの実証試験の結果を示した図である。（実施例１）
【図４】動物を用いたインビボでの実証試験の結果を示した図である。（実施例２）
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下、本考案を図面に示す実施の形態に基づき説明するが、本考案は、下記の具体的な
実施形態に何等限定されるものではない。
【００１８】
（実施形態１）
（再生治療用低分解性フィブリンゲル膜の製造方法）
本発明は、再生治療を目的として、患者の血液から調整されたフィブリンゲルを原料として、低分解性を有しかつフィルム状（つまり膜状）を成すフィブリンゲル（以下、単に「フィブリンゲル膜」又は「フィブリンゲル」とも呼ぶ。）を製造する方法を提供する。先ず、この製造方法について、図１を参照しながら、説明する。なお、以下詳述する各工程を実施する前に、血液由来のフィブリンゲルを調整・用意する工程Ｓ０を含むことは言うまでも無い。
【００１９】
（予備除去工程Ｓ１）
この製造方法は、フィブリンゲル内の増殖因子及び血小板の一部を除去する予備除去工程Ｓ１を含む。この予備除去工程Ｓ１は、ガーゼの利用が挙げられ、フィブリンゲルをガーゼで包んで予備押圧することが好ましい。これにより、フィブリンゲルが遮断膜として生体内に取り込まれた際に、フィブリンゲルの分解速度を高める要因となり得る増殖因子及び血小板を減らすことが可能となる。
【００２０】
また、本発明者らが既に提案しているフィブリンゲル圧延器具（特許文献１）や公知の圧延器具を用いて予備的に押圧してもよい。また、本発明の製造装置に設けられた後述する伝熱性部材（例えば、金属部材）を用いて、フィブリンゲルを加熱しない状態で予備的に押圧するようにしてもよい。以上の公知の圧延器具や本製造装置の金属部材を利用した場合は、ガーゼを利用した場合に比べ、増殖因子の数を削減しにくいものの血小板等の液体成分を迅速かつ手軽に排出することが可能となる。
【００２１】
（加熱工程Ｓ２及び圧延工程Ｓ３）
この製造方法は、さらに、フィブリンゲルに熱を付与する加熱工程Ｓ２と、このフィブリンゲルを圧延する圧延工程Ｓ３と、を含む。なお、後述する実施例のように、加熱工程Ｓ２と圧延工程Ｓ３とを同時に行うことが好ましい。
【００２２】
（加熱条件）
この加熱工程Ｓ２では、８０〜１００℃の周囲温度かつ１〜１０秒間、前記フィブリンゲルを加熱する。好ましくは、周囲温度は８０〜９０℃で、加熱時間は１〜５秒間である。要求されるフィブリンゲル膜の厚さが薄い場合には、加熱時間は１〜３秒であることが好ましい。周囲温度や加熱時間が上限を超えてしまうとフィブリンゲル内の蛋白質が過度に変性（場合によっては、フィブリンゲルの反り返り（curled）等、その形状が変形）してしまう。一方、下限を下回るとフィブリンゲルに熱を付与してもその内部のフィブリン繊維同士を効率的又は効果的に熱架橋させることができなくなる恐れがある。上記好ましい温度でフィブリンゲルを加熱できれば、フィブリン繊維間に効率的又は効果的な熱架橋が施され、生体内の分解酵素に対して抵抗性を増加させることができる。なお、一対の伝熱性部材を用いて上下（又は左右）からフィブリンゲルを短時間に加熱することにより、外側は比較的硬く、内側は比較的柔らかいフィブリンゲル膜を形成することができる。
【００２３】
（同時処理）
なお、圧延工程Ｓ３が加熱工程Ｓ２と同時に行われる場合、前述した加熱温度に維持された少なくとも一対の伝熱性部材でフィブリンゲルを加熱しながら均一厚さに圧延することが望ましい。遮断膜に利用できるよう、その厚みを０．１ｍｍ〜２ｍｍ程度に設定することが好ましい。
【００２４】
なお、伝熱性部材として、金属部材、又は、伝熱性材料で外表面を被覆した樹脂、など伝熱性を有する材料の使用が挙げられ、好ましくは、フィブリンゲルを圧延可能な面を有したシート状の金属部材であり、さらに好ましくは、後述の実施形態２に示すようにフィブリンゲルを把持・収容が可能な匙状の金属部材である。なお、樹脂を利用する場合、上述した加熱温度にも耐えられる耐熱性を有する材料を選択する必要がある。
【００２５】
（フィブリンゲルの付着防止処理）
また、加熱工程Ｓ２では、伝熱性部材の表面の少なくとも一部をセラミックス又は生体親和性を有した油で予め被覆するか、又は、フィブリンゲルをフィルム状シートで予め包んでおくこと（図１では、付着防止処理工程Ｓ２Ａ）が好ましい。この処理工程Ｓ２Ａにより、加熱後のフィブリンゲルが、伝熱性部材の表面にこびりつかずに難無く採取することができるようになる。なお、フィルム状シートには、市販の食品包装用フィルムや公知の医療用フィルムが挙げられる。
【００２６】
（実施形態２）
（再生治療用低分解性フィブリンゲル膜の製造装置）
次に、上述した方法の加熱工程Ｓ２及び圧延工程Ｓ３を実現可能な器具（製造装置）１について、図２を参照しながら説明する。なお、上記加熱工程Ｓ２は、下記の製造装置１に限らず、他の装置を用いても実現可能であり、例えば、高温の液体や気体を収容した容器（図示せず）を用意し、フィブリンゲルを所定時間、この容器内に配置することでも達成可能であろう。
【００２７】
この製造装置１は、フィブリンゲル（図２では符号Ｘ）を挟持可能な少なくとも一対の伝熱性部材２（図２では、一対の匙状の金属部材２ａ，２ｂ）と、伝熱性部材２を介してフィブリンゲルＸに熱を供給可能な熱源３（図２では、破線で示したコイル３ａ，３ｂ）が設けられた本体４と、を少なくとも備える。この形態を有した本体４は、ヒンジ部５にて一定距離だけ回動可能に接続された一対の柄部６（６ａ，６ｂ）内に熱源３ａ，３ｂが内蔵されている。また、本体４には、熱源３ａ，３ｂに電力を供給するための電源プラグ７も設けられている。さらに、ヒンジ部５の近傍には、加熱を開始又は終了させるためのスイッチ９が設けられていても良い。
【００２８】
また、伝熱性部材２は本体４に着脱自在であることが好ましい。図２の例では、図２（Ｂ）に示すように、それぞれの伝熱性部材２ａ，２ｂには延長部２１（２１ａ，２１ｂ）が接続されている一方、それぞれの柄部６ａ，６ｂの先端には、延長部２１ａ，２１ｂを熱源３ａ，３ｂへ導くための差し込み口８（８ａ，８ｂ）が設けられている。
【００２９】
伝熱性部材２ａ，２ｂの材料として、例えば、ステンレス、チタン、アルミニウム等の金属部材が好ましい。これらの材料は、良好な伝熱特性（熱伝導率及び熱伝達率）を有する他、耐圧性、耐熱性、及び耐腐食性を有する材料でもあり、オートクレーブ滅菌処理や超音波洗浄を適用することで再利用可能となる。また、フィブリンゲルＸと直接接触し最も汚れやすい伝熱性部材２ａ，２ｂを着脱自在とすることで、この製造装置１のうち当該部材２ａ，２ｂのみを一回限りの使い捨て（ディスポーザル）とすることもできる。
【００３０】
また、伝熱性部材２ａ，２ｂは、図示しないセラミックスで被覆された表面を含んでいることがさらに好ましい。例えば、フィブリンゲルＸを収容・挟持する各面２２ａ，２２ｂにこのセラミックスコーティングが施されていることが好ましい。これにより、加熱後のフィルム状のフィブリンゲル（図示では符号Ｙ）が、伝熱性部材２ａ，２ｂの表面２２ａ，２２ｂにこびりつかずに難無く採取することができるようになる。
【００３１】
また、伝熱性部材２ａ，２ｂの形状としては、種々の形状を選択することができるが、当該金属部材が急速に加熱されて一定の温度を保持できかつフィブリンゲルＸを均一な薄い厚さで圧延できる性能が得られるようにするには、適度に薄くて扁平な板状に構成されていることが好ましい。なお、図示の例の伝熱性部材２ａ，２ｂは、フィブリンゲルＸを効率良く収容・挟持するため、匙状に形成されている。また、伝熱性部材２ａ，２ｂを最も閉じた状態では、これらの部材２ａ，２ｂの対向する面２２ａ，２２ｂが、フィブリンゲル膜Ｙの所望の厚み（０．１ｍｍ〜２ｍｍ程度）に応じた離間距離を有するように設定されていることが好ましい。
【００３２】
本発明の製造装置１は、さらに、伝熱性部材２ａ，２ｂの温度を検知する第１センサ（温度センサ）３０と、第１センサ３０から得られた情報を取得し、当該情報を基に熱源３ａ，３ｂでの熱の供給を調節して伝熱性部材２ａ，２ｂの温度を８０〜１００℃の範囲に設定可能な制御部４０と、を備える。これらの構成要素３０，４０を設けることにより、伝熱性部材２ａ，２ｂの表面の現在温度を実測し、その実測値に応じて熱源での熱の供給量を制御すること（場合によっては供給を遮断すること）によって、フィブリンゲルＸにおける繊維間の熱架橋を行うのに適切な熱量を伝熱性部材２ａ，２ｂに供給し、伝熱性部材２ａ，２ｂを所望の温度に維持することができるようになる。
【００３３】
この製造装置１は、さらに、伝熱性部材２ａ，２ｂによってフィブリンゲルＸが挟持されているかどうか（つまり、挟持の有無）を検知する第２センサ（接触検知センサ）５０を備え、かつ、制御部４０は、第２センサ５０から得られた情報も取得し、当該情報を基にフィブリンゲルＸの加熱時間を計算可能にすることが好ましい。
【００３４】
また、この製造装置１は、伝熱性部材２ａ，２ｂの目標温度及び目標加熱時間を受け付けかつこれらの情報を制御部４０に伝達可能な入力装置６１をさらに備えることが好ましい。このような入力装置６１を設けることで、目標とする温度や加熱時間を任意に設定したり、微調整したりすることが可能となる。
【００３５】
また、この製造装置１は、第１センサ３０で実測された温度、制御部４０で計算された加熱時間、及び、入力装置６１で受け付けられた目標温度若しくは目標時間の少なくとも一つを表示する表示装置６２や、伝熱性部材２ａ，２ｂの温度及び加熱時間が制御部４０で決定した設定範囲に出入りする際に警報を発する警報装置６３をさらに備えることが好ましい。このような表示装置６２や警報装置６３を設けることで、適切な加熱条件を順守したままフィブリンゲルＸを加熱及び圧延することができるため、熟練した者で無くともこの製造装置１を難なく適切に操作することが可能となる。
【００３６】
なお、上述の制御部４０、入力装置６１、表示装置６２、及び警報装置６３の少なくとも一つは、公知のパーソナルコンピュータ６０を利用することができる。
【００３７】
また、本発明の製造装置１には種々の変形・改良が可能である。例えば、図２において本発明の製造装置１の外部に現われている構成要素（例えば、第１センサ３０、制御部４０、入力装置６１、表示装置６２、及び警報装置６３）は、この製造装置１に一体となるよう内蔵されていてもよい。また、図２に示す製造装置１では電源プラグ７が設けられているが、これに代えて、例えば、使い捨て電池や充電式電池等を利用してもよい。
【実施例１】
【００３８】
（試験管を用いたインビトロでの実証試験）
健康な成人の新鮮な血液（末梢血）を遠心操作して調整し、ＰＢＳ液で洗浄したフィブリンゲルＸを用意した。これを乾いたガーゼで軽く押し潰して、内部の増殖因子及び血小板の一部を除去した（予備除去工程Ｓ１）。
【００３９】
次に、伝熱性部材２ａ，２ｂを加熱してこれを約１００℃の温度に保たれるようにした。実証実験では、伝熱性部材２ａ，２ｂ及び熱源３ａ，３ｂとして毛髪用アイロン（テスコム電機株式会社製）と、伝熱性部材２ａ，２ｂの温度を検知する第１センサ３０やこの温度を表示する表示装置６２として放射温度計（株式会社エー・アンド・デイ製）とを用いて、フィブリンゲルＸの加熱工程Ｓ２及び圧延工程Ｓ３を同時に実行した。加熱時間は約１０秒間とした。なお、加熱・圧延工程Ｓ２，Ｓ３の前に、フィブリンゲルＸを食品包装用フィルムで包んでおいた（付着防止処理工程Ｓ２Ａ）。具体的には、食品包装用フィルムの表面をエタノールで拭いて紫外線（ＵＶ）で滅菌した後、フィブリンゲルＸを包むようにした。これにより、フィブリンゲルＸを無菌的に操作できただけでなく、伝熱性部材２ａ，２ｂの加熱面へのフィブリンゲルＸのこびりつきを防止することができた。
【００４０】
その後、加熱・圧延されたフィブリンゲル膜Ｙにパンチ器具を押し当てパンチして、直径８ｍｍの円盤状の試験片を作製した（実施例１）。なお、予備除去工程Ｓ１のみを実行したフィブリンゲルＸを用いて同一寸法・形状の試験片を作製し、これを比較例１とした。
【００４１】
次に、２４−ｗｅｌｌ  ｐｌａｔｅに上記試験片を挿入し、プラスミンを２μｇ／ｍＬ濃度で注入したハンクス液（ＨＢＳＳ）で充たし、ＣＯ２インキュベータ内で培養した。なお、ＨＢＳＳは２日おきに新しいものに取り換えた。
【００４２】
（試験管での結果）
図３に、試験片の分解の経時変化を示す。上段は比較例１の試験片（図中、符号Ｘを参照）の外観を示す一方、下段は実施例１の試験片（図中、符号Ｙを参照）の外観を示す。この図３からも分かるように、ガーゼで押しつぶしただけでの比較例１の試験片Ｘでは１０日程度でほぼ分解されてしまうのが観察された。一方、実施例１の試験片Ｙでは、僅かな分解は確認されたが、１０日経過してもほぼ分解されずに残存していることが観察された。なお、別の成人の血液から調整したフィブリンゲルを用いて同様の方法で試験を何度か行ったが、同様の結果を得た。
【実施例２】
【００４３】
（動物を用いたインビトロでの実証試験）
動物実験のサンプルとして生後６週間の雄のネズミを複数調達し、本試験前に試験場所で１週間以上保管・生育した。また、この動物実験に供するフィブリンゲルＸも、上述の試験管試験の実施例１及び比較例１の場合と同様に調整し、実施例２及び比較例２として用意した。
【００４４】
これらの動物サンプルの背部を消毒した後、正中線皮膚切開を実施し、その皮下組織に、実施例２或いは比較例２の試験片を移植して、その後の試験片の分解・吸収の様子を観察した。試験片とこの周辺の結合組織は、これらをヘマトキシリン、エオシン、又はマッソン・トリクロームを用いて染色することで可視化された。
【００４５】
（動物実験の結果）
図４の各図に、上記動物実験の結果、具体的には、ヘマトキシリンで染色された試験片及びその周辺の結合組織の切断画像を示す。図４の（Ａ）及び（Ｂ）は、移植後１週間目及び２週間目の比較例２の試験片（図中の破線及び符号Ｘを参照）の状態を示す。一方、図４（Ｃ）、（Ｄ）及び（Ｅ）は、移植後１週間目、２週間目、及び３週間目の実施例２の試験片（図中の破線及び符号Ｙを参照）の状態を示す。なお、各画像の倍率・縮尺は同様である。
【００４６】
これらの画像からも明らかなように、比較例２の試験片Ｘは、２週間を経過すると非常に薄くなっていることが観察される。なお、３週間目では完全に無くなってしまったため、図示していない。
【００４７】
一方、この図４（Ｃ）、（Ｄ）及び（Ｅ）の各画像からも明らかなように、実施例２の試験片Ｙは、時間の経過とともに、縮小しているが、３週間を経過しても、確実に残存していることが観察された。
【００４８】
以上のように、試験管を用いた試験及び動物実験を用いた試験においても、実施例１，２及び比較例１，２において、生体分解酵素に対する分解速度において有意な差が観察された。
【産業上の利用可能性】
【００４９】
上述したように、歯周病等の再生医療などの分野にて有害物質を含まない安全な遮断膜の需要が高いだけで無く、開業歯科医等が自ら手軽に遮断膜を作製したいとの要望も高い。従って、本発明は、これらの需要に応え、安心・安全な治療の発展に寄与するものであり、産業上の利用価値及び利用可能性は非常に高い。
【符号の説明】
【００５０】
Ｓ１    予備除去工程
Ｓ２    加熱工程
Ｓ２Ａ    付着防止処理工程
Ｓ３    圧延工程
１    再生治療用低分解性フィブリンゲル膜の製造装置
２（２ａ，２ｂ）    伝熱性部材（一対の金属部材）
３（３ａ，３ｂ）    熱源（一対の熱源）
４    製造装置の本体
３０    第１センサ（温度センサ）
４０    制御部
５０    第２センサ（接触検知センサ）
６１    入力装置
６２    表示装置
６３    警報装置
Ｘ    フィブリンゲル
Ｙ    フィブリンゲル膜
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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