(57)【要約】      （修正有）【課題】非神経（即ち、末梢）細胞、体液、又は組織によって示されるアミロイドβペプチド（Ａβ）のレベルを調節するための方法及び組成物を提供並びに、γセクレターゼ活性を選択的に調節（例えば、阻害）することによるＡβレベルの調節方法の提供。【解決手段】アルツハイマー病等の脳内Ａβ疾患の症状を予防するか、治療するか、又は寛解させるために、直接的又は間接的のいずれかで非神経組織におけるγセクレターゼの調節をもたらすイマニチブ又はその薬学的に許容される塩を投与することによって、Ａβ関連疾患を含むが、これに限定されない疾患の症状を予防するか、治療するか、又は寛解させる方法。更に，脳内Ａβ疾患を治療するために有効な量の第２の治療薬（例えば，カンナビノイド、ジメボン、ブレドニゾン，イブプロフェン、ナプロキセン、インドメタシン、スタチン等）を含む方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
脳内Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の末梢組織においてＡβの産生を調節するための薬物の製造における、イマチニブまたはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項２】
脳内Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の肝臓においてＡβの産生を調節するための薬物の製造における、イマチニブまたはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項３】
前記脳内Ａβ疾患は、アルツハイマー病である、請求項１または請求項２に記載の使用。
【請求項４】
前記薬物は、経口投与のために処方される、請求項１〜３に記載の使用。
【請求項５】
前記薬物は、脳内Ａβ疾患を治療するために有効な量の第２の治療薬をさらに含む、請求項１〜４のうちのいずれかに記載の使用。
【請求項６】
前記第２の治療薬は、カンナビノイド、ジメボン、プレドニゾン、イブプロフェン、ナプロキセン、インドメタシン、スタチン、選択的エストロゲン受容体分子、降圧剤、α遮断薬、β遮断薬、αβ遮断薬、アンジオテンシン変換酵素阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、利尿薬、ＮＳＡＩＤＳ、および抗酸化剤からなる群から選択される作用物質を含む、請求項５に記載の使用。
【請求項７】
前記イマチニブは、メシラート塩の形態である、請求項１〜６のうちのいずれか１項に記載の使用。
【請求項８】
脳内Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の末梢組織におけるＡβの産生を阻害するための薬物を製造するための、ＷＧＢ−ＢＣ−１５、化合物１、化合物２、ＬＹ４５０１３９、ＧＳＩ−９５３、フロリザン、およびＥ２０１２化合物、その血液脳関門不透過性変異体、ならびに／またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択される化合物の使用。
【請求項９】
脳内Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の肝臓におけるＡβの産生を阻害するための薬物を製造するための、ＷＧＢ−ＢＣ−１５、化合物１、化合物２、ＬＹ４５０１３９、ＧＳＩ−９５３、フロリザン、およびＥ２０１２化合物、その血液脳関門不透過性変異体、ならびに／またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択される化合物の使用。
【請求項１０】
前記脳内Ａβ疾患は、アルツハイマー病である、請求項８または請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
前記薬物は、経口投与のために処方される、請求項８〜１０のうちのいずれかに記載の使用。
【請求項１２】
前記薬物は、脳内Ａβ疾患を治療するために有効な量の第２の治療薬をさらに含む、請求項８〜１１のうちのいずれかに記載の使用。
【請求項１３】
前記第２の治療薬は、カンナビノイド、ジメボン、プレドニゾン、イブプロフェン、ナプロキセン、インドメタシン、スタチン、選択的エストロゲン受容体分子、降圧剤、α遮断薬、β遮断薬、αβ遮断薬、アンジオテンシン変換酵素阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、利尿薬、ＮＳＡＩＤＳ、および抗酸化剤からなる群から選択される作用物質を含む、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
末梢組織におけるＡβの産生を調節する化合物を末梢投与することを含む、対象の脳内Ａβ疾患または脳内Ａβ疾患に対する素因を治療する方法。
【請求項１５】
前記調節は、阻害を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記化合物は、２．０未満の分配係数を有する、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記分配係数は、１．５未満である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記分配係数は、約１．０未満である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記化合物は、血液脳関門を実質的に横断しない、請求項１４に記載の方法。
【請求項２０】
対象における脳内Ａβ疾患または脳内Ａβ疾患に対する素因のために対象を治療する方法であって、対象の末梢組織における遺伝子の発現を調節する化合物を末梢投与することを含む、方法。
【請求項２１】
前記末梢組織は、肝臓である、請求項１４または２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記遺伝子は、Ｐｓｅｎ２、ＡＰＰ、Ｃｉｂ１、Ｎｇｒｎ、およびＺｆｈｘ１ｂからなる群から選択される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記Ａβ産生の調節は、プレセニリン２、カルミリン、ニューグリン（ｎｅｕｇｒｉｎ）、Ｚｆｈｘ１ｂ、もしくはＡＰＰの発現または活性のうちの１つ以上の調節を含む、請求項１４または２０に記載の方法。
【請求項２４】
プレセニリン２、カルミリン、ニューグリン、Ｚｆｈｘ１ｂ、もしくはＡＰＰの発現または活性のうちの１つ以上の前記調節は、前記発現または活性の阻害を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記Ａβ産生の調節は、前記対象の肝臓におけるプレセニリン２の発現または活性の調節を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
前記Ａβ産生の調節は、前記対象の肝臓におけるカルミリンの発現または活性の調節を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２７】
前記Ａβ産生の調節は、前記対象の肝臓におけるニューグリンの発現または活性の調節を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２８】
前記Ａβ産生の調節は、前記対象の肝臓におけるＺｆｈｘ１ｂの発現または活性の調節を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２９】
前記Ａβ産生の調節は、前記対象の肝臓におけるアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の発現または活性の調節を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項３０】
前記Ａβ産生の調節は、前記対象の肝臓におけるプレセニリン２の発現または活性の阻害を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項３１】
前記Ａβ産生の調節は、前記対象の肝臓におけるカルミリンの発現または活性の調節を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項３２】
前記Ａβ産生の調節は、前記対象の肝臓におけるニューグリンの発現または活性の刺激を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項３３】
前記Ａβ産生の調節は、前記対象の肝臓におけるニューグリンの発現または活性を減少させる因子の阻害を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項３４】
前記Ａβ産生の調節は、前記対象の肝臓におけるＺｆｈｘ１ｂの発現または活性の阻害を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項３５】
前記Ａβ産生の調節は、前記対象の肝臓におけるアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の発現または活性の阻害を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項３６】
前記Ａβの調節は、プレセニリン２、カルミリン、ニューグリン、Ｚｆｈｘ１ｂ、およびＡＰＰからなる群から選択される少なくとも２つのタンパク質の肝臓における発現または活性の調節を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項３７】
ａ）脳内Ａβ疾患の存在または脳内Ａβ疾患に対する素因について対象を評価することと、
ｂ）Ａβの産生を調節する化合物を末梢投与することであって、前記化合物は、血液脳関門を実質的に透過しない、末梢投与することと、
ｃ）脳内Ａβ疾患または脳内Ａβ疾患の進行について前記対象を評価することと、を含む、方法。
【請求項３８】
前記Ａβの産生の調節は、前記対象の肝臓におけるＡβの産生を調節することを含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記調節は、阻害を含む、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
ａ）脳内Ａβ疾患の存在または脳内Ａβ疾患に対する素因について対象を評価することと、
ｂ）Ａβの蓄積を調節する化合物を末梢投与することであって、前記化合物は、血液脳関門を実質的に透過しない、末梢投与することと、
ｃ）脳内Ａβ疾患または脳内Ａβ疾患の進行について前記対象を評価することと、を含む、方法。
【請求項４１】
前記Ａβの蓄積の調節は、前記対象の肝臓におけるＡβの蓄積を調節することを含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記調節は、前記対象の肝臓におけるＡβの蓄積を減少させることを含む、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記脳内Ａβ疾患は、アルツハイマー病である、請求項１４〜４２のうちのいずれかに記載の方法。
【請求項４４】
前記化合物は、γセクレターゼ活性の調節因子を含む、請求項１４〜４２に記載の方法。
【請求項４５】
前記化合物は、γセクレターゼではないタンパク質の調節因子である、請求項１４〜４２に記載の方法。
【請求項４６】
前記化合物は、γセクレターゼ活性の阻害剤を含む、請求項４４に記載の方法。
【請求項４７】
前記化合物は、プレセニリン２の調節因子を含む、請求項１４〜４２に記載の方法。
【請求項４８】
前記化合物は、プレセニリン２の阻害剤を含む、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記化合物は、アミロイド前駆体タンパク質の切断の調節因子を含む、請求項１４〜４２に記載の方法。
【請求項５０】
前記化合物は、アミロイド前駆体タンパク質の切断の阻害剤を含む、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記評価することは、精神状態の評価を含む、請求項１４〜４２に記載の方法。
【請求項５２】
前記評価することは、神経心理学的検査を含む、請求項３７または４０に記載の方法。
【請求項５３】
前記評価することは、脳画像診断を含む、請求項３７または４０に記載の方法。
【請求項５４】
前記化合物は、ＳＴＩ−５７１、ＷＧＢ−ＢＣ−１５、化合物１、化合物２、ＬＹ４５０１３９、ＧＳＩ−９５３、フロリザン、およびＥ２０１２化合物からなる群から選択される組成物を含む、請求項３７または４０に記載の方法。
【請求項５５】
前記化合物は、干渉オリゴヌクレオチドを含む、請求項１４〜４２に記載の方法。
【請求項５６】
前記化合物は、干渉ＲＮＡを含む、請求項１〜１４〜４２に記載の方法。
【請求項５７】
前記干渉ＲＮＡは、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、およびｍｉＲＮＡからなる群から選択される、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記干渉ＲＮＡは、アミロイド前駆体タンパク質のＲＮＡを標的とする干渉ＲＮＡを含む、請求項５６に記載の方法。
【請求項５９】
前記干渉ＲＮＡは、プレセニリン２のＲＮＡを標的とする干渉ＲＮＡを含む、請求項５６に記載の方法。
【請求項６０】
前記化合物は、脳内Ａβ関連疾患のリスクもしくは重症度を治療する、寛解させる、または低下させるための既知の治療薬をさらに含む、請求項１４〜５９に記載の方法。
【請求項６１】
前記既知の治療薬は、カンナビノイド、ジメボン、プレドニゾン、イブプロフェン、ナプロキセン、インドメタシン、スタチン、選択的エストロゲン受容体分子、降圧剤、α遮断薬、β遮断薬、αβ遮断薬、アンジオテンシン変換酵素阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、利尿薬、および抗酸化剤からなる群から選択される、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
前記末梢投与は、経口的に投与することを含む、請求項１４〜６１に記載の方法。
【請求項６３】
対象における脳内Ａβ疾患のリスクまたは存在を評価する方法であって、前記対象の末梢組織におけるＡβのレベルを判定することを含む、方法。
【請求項６４】
対象における脳内Ａβ疾患のリスクまたは存在を評価する方法であって、前記対象の末梢組織における遺伝子産物の発現または活性の分析を含む、方法。
【請求項６５】
前記遺伝子産物は、Ｐｓｅｎ２、ＡＰＰ、Ｃｉｂ１、Ｎｇｒｎ、およびＺｆｈｘ１ｂからなる群から選択される遺伝子に由来する、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
前記末梢組織は、肝臓である、請求項６３〜６５に記載の方法。
【請求項６７】
前記末梢組織は、血液である、請求項６３〜６５に記載の方法。
【請求項６８】
前記末梢組織は、血清である、請求項６３〜６５に記載の方法。
【請求項６９】
対象における脳内Ａβ疾患を監視する方法であって、前記対象の末梢組織におけるＡβのレベルを判定することを含む、方法。
【請求項７０】
対象における脳内Ａβ疾患を監視する方法であって、前記対象の末梢組織における遺伝子産物の発現または活性の分析を含む、方法。
【請求項７１】
前記遺伝子産物は、Ｐｓｅｎ２、ＡＰＰ、Ｃｉｂ１、Ｎｇｒｎ、およびＺｆｈｘ１ｂからなる群から選択される遺伝子に由来する、請求項７０に記載の方法。
【請求項７２】
前記末梢組織は、肝臓である、請求項６９〜７１に記載の方法。
【請求項７３】
前記末梢組織は、血液である、請求項６９〜７１に記載の方法。
【請求項７４】
前記末梢組織は、血清である、請求項６９〜７１に記載の方法。
【請求項７５】
前記監視することは、複数の時点で前記末梢組織におけるＡβを測定することを含む、請求項６９〜７１に記載の方法。
【請求項７６】
前記脳内Ａβ疾患は、アルツハイマー病である、請求項６３〜７５に記載の方法。
【請求項７７】
ａ）脳内Ａβ疾患の存在または脳内Ａβ疾患に対する素因について対象を評価することと、
ｂ）血液脳関門を横断する末梢Ａβの輸送を阻害する化合物を末梢投与することであって、前記化合物は抗Ａβ抗体ではない、末梢投与することと、を含む、方法。
【請求項７８】
ｃ）前記投与することの後に、脳内Ａβ疾患または脳内Ａβ疾患の進行について前記対象を評価することをさらに含む、請求項７７に記載の方法。
【請求項７９】
前記脳内Ａβ疾患は、アルツハイマー病である、請求項７７に記載の方法。
【請求項８０】
脳内Ａβ疾患の治療のための遺伝子標的を同定する方法であって、肝臓における発現レベルを有する遺伝性の遺伝子マーカーを同定するために、前記Ａβ疾患を有するかもしくはその素因がある第１の親からと、前記Ａβ疾患に対する減少した感受性を有する第２の親からとの、子孫の肝臓遺伝子発現プロファイルを比較することを含み、前記第１の親および前記第２の親の肝臓における発現レベルに対する前記子孫の肝臓における前記遺伝性の遺伝子マーカーの発現の増加または減少は、前記第２の親に由来する前記遺伝子マーカーの遺伝と相関する、方法。
【請求項８１】
Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の末梢組織におけるＡβの産生の調節において使用するための、ＳＴＩ−５７１、化合物２、ＬＹ４５０１３９、ＧＳＩ−９５３、フロリザン、およびＥ２０１２化合物、またはその血液脳関門不透過性変異体からなる群から選択される、化合物。
【請求項８２】
脳内Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の末梢組織におけるＡβの産生の調節において使用するための、ＳＴＩ−５７１、化合物２、ＬＹ４５０１３９、ＧＳＩ−９５３、フロリザン、およびＥ２０１２化合物、またはその血液脳関門不透過性変異体からなる群から選択される、化合物。
【請求項８３】
Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の肝臓におけるＡβの産生の調節において使用するための、ＳＴＩ−５７１、化合物２、ＬＹ４５０１３９、ＧＳＩ−９５３、フロリザン、およびＥ２０１２化合物、またはその血液脳関門不透過性変異体からなる群から選択される化合物。
【請求項８４】
脳内Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の肝臓におけるＡβの産生の調節において使用するための、ＳＴＩ−５７１、化合物２、ＬＹ４５０１３９、ＧＳＩ−９５３、フロリザン、およびＥ２０１２化合物、またはその血液脳関門不透過性変異体からなる群から選択される化合物。
【請求項８５】
前記化合物は、２．０未満の分配係数を有する、請求項８１〜８４のうちのいずれかに記載の化合物。
【請求項８６】
前記分配係数は、１．５未満である、請求項８１〜８４のうちのいずれかに記載の化合物。
【請求項８７】
前記分配係数は、約１．０未満である、請求項８１〜８４のうちのいずれかに記載の化合物。
【請求項８８】
前記化合物は、血液脳関門を実質的に横断しない、請求項８１〜８４のうちのいずれかに記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００８年１１月１３日に出願された米国特許仮出願第６１／１１４，４５９号、および２００９年８月３日に出願された第６１／２３０，９２６号の優先権を主張するものであり、それらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
〔技術分野〕
本発明は、非神経（すなわち、末梢）細胞、体液、または組織によって示されるアミロイドβペプチド（Ａβ）のレベルを調節するための方法および組成物に関する。本発明はまた、末梢組織中のγセクレターゼ活性を選択的に調節（例えば、阻害）することによる、脳内Ａβレベルの調節にも関する。本発明はさらに、直接的または間接的のいずれかでγセクレターゼの調節をもたらす化合物を末梢投与することによって、これに限定されないが、神経Ａβ関連疾患を含む疾患の症状を予防するか、治療するか、または寛解させる方法に関する。本発明はまた、アルツハイマー病の症状を予防するか、治療するか、または寛解させるための、末梢投与によるγセクレターゼ活性の調節因子の使用にも関連する。
【背景技術】
【０００３】
アミロイドβ（Ａβ）ペプチドは、アルツハイマー病に関連する前駆体タンパク質であるβアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の代謝物であり、アルツハイマー病（ＡＤ）の主要な病原性決定因子であると考えられている。ＡＤは、脳の脆弱な領域内、特に前頭皮質および海馬における、加齢によるＡβの蓄積によって特徴付けられる神経変性疾患である（Ｔｅｒｒｙ  ＲＤ．Ｊ  Ｇｅｒｉａｔｒ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  Ｎｅｕｒｏｌ  １９：１２５−１２８，２００６）。Ａβは、高次および基本的な神経プロセスの両方を統合する脳領域の能力低下の原因となる、進行性の神経細胞脱落をもたらす病原性作用を有する。低下が進行するにつれ、罹患した個人は認知症および生活の質の悪化に直面し、最終的に致死的な状態となる（Ｂｒｏｏｋｍｅｙｅｒ  Ｒ，Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｅ，Ｚｉｅｇｌｅｒ−Ｇｒａｈａｍ  Ｋ，Ａｒｒｉｇｈｉ  ＨＭ．Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  Ｄｅｍｅｎｔ  ３：１８６−１９１，２００７、Ｐｏｗｅｒｓ  ＪＭ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ  Ａｇｉｎｇ  １８：Ｓ５３−Ｓ５４，１９９７）。
【０００４】
ＡＤの発症は、加齢に関連する自然な生化学的プロセスの結果であり、人が十分に長く生きれば、最終的にはほぼ全ての個人に該疾病の症状が現れると考えられている。加齢は、８５歳以上の人々の２５〜５０％に見られるＡＤの最も大きな既知のリスク因子である（Ｇｉａｃｏｂｉｎｉ  Ｅ．Ａｎｎ  ＮＹ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ９２０：３２１−３２７，２０００）。所与の個人にとって、疾患が現れる時期は付加的な一連のリスク因子の結果であり、それらのうちのいくつかは環境的原因に起因する可能性があるが、それらの多くは個人の遺伝的に受け継がれた特質に起因するものであり、個人の遺伝子の構造および活性における自然の変動により、相互作用が複雑に交錯するタンパク質集団が形成され、程度の差こそあるものの、その個人をＡＤに罹り易くする。タンパク質産物がＡＤのリスクに影響を及ぼす遺伝子のうちのいくつかは同定されている。例えば、血清タンパク質であるアポリポタンパク質Ｅをコードする、ｅ２、ｅ３、およびｅ４と称される遺伝子の共通する３つの変異体が存在する。ｅ４をコードする対立遺伝子を受け継いだ個人は、ＡＤのリスクが平均よりも高く、ｅ４対立遺伝子を持たない個人よりも早期に発症する傾向にある。両方の両親からｅ４対立遺伝子を受け継いだ個人は、早期発症型ＡＤのリスクがさらに高く、一方、ｅ２対立遺伝子を持つ個人はリスクが非常に低く、例え発症するとしても、平均よりも遅くに該疾病を発症する（Ｃｅｄａｚｏ−Ｍｉｎｇｕｅｚ  Ａ．Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ．１１：１２２７−３８，２００７）。また、外傷性脳損傷および反復性頭部外傷も、脳内Ａβの沈着および認知障害を加速することが分かっている（Ｕｒｙｕ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２２（２）：４４６（２００２）。
【０００５】
全部ではないがほとんどのＡＤは、各個人のリスク閾値に関連するある程度の遺伝的要素を有すると考えられる。しかしながら、ヒトＡＤのうちのいくつかの形態は、特に高度に遺伝的である。これらの遺伝的形態は、この神経変性疾患と関連し、該疾患のプロセスを開始する中心的な役割を果たすタンパク質をコードする単一遺伝子における、稀な突然変異に起因する。これらの遺伝子における突然変異は、遺伝性であり得るか、または散発的に発生し得る。
【０００６】
これらの遺伝子のうちの１つは、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）をコードする（Ｔａｎｚｉ  ＲＥ．Ａｎｎ  Ｍｅｄ．２１：９１−９４，１９８９）。ＡＰＰは膜タンパク質であり、その生化学的機能は現在のところ不明である。ＡＰＰは、いくつかの内因性プロテアーゼによるタンパク質分解の基質であり、タンパク質分解は、種々の構造を有する断片を遊離させることが分かっている。プロテアーゼ活性のうちの２つは、βセクレターゼおよびγセクレターゼと称される。βセクレターゼによるＡＰＰのタンパク質分解は、後に複数部位でγセクレターゼによって切断され、Ａβペプチドを産生することが可能な断片を生成する。γセクレターゼは、いくつかのタンパク質の複合体であり（プレセニリン１およびプレセニリン２を含む）、γセクレターゼによるＡＰＰの切断は、３７〜４３個のアミノ酸残基に及ぶ複数のＡβアイソフォームを産生する（例えば、Ｓｔｅｉｎｅｒ  Ｈ，Ｆｌｕｈｒｅｒ  Ｒ，Ｈａａｓｓ  Ｃ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２００８  Ｊｕｌ２３を参照のこと）。４２残基形態のＡβが最も病原性が高いと考えられている（Ｗｏｌｆｅ  ＭＳ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４５：７９３１−７９３９，２００６）。４２残基のＡβ断片は、ＡＤに罹患した脳内に沈着するプラークの形成に加えて、認知障害を引き起こすと考えられるオリゴマー構造を形成する（Ｂａｒｔｅｎ  ＤＭ，Ａｌｂｒｉｇｈｔ  ＣＦ．Ｍｏｌ  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ  ３７：１７１−１８６，２００８）。
【０００７】
タンパク質切断部位近くのＡＤクラスタの素因となるＡＰＰにおける変異が、病原性Ａβ断片が生成される速度、それらの安定性、およびオリゴマーを形成するそれらの能力に影響を及ぼす（Ｓｅｌｋｏｅ  ＤＪ．Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｒｅｖ  ８１：７４１−７６６，２００１）。そのようなＡＰＰの変異を受け継いだ個人は、通常５０代でＡＤの兆候を示すのに対し、散発性ＡＤは個人が７０代に達するまで一般的ではない（Ｗａｒｉｎｇ  ＳＣ，Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ  ＲＮ．Ａｒｃｈ  Ｎｅｕｒｏｌ．６５：３２９−３４，２００８）。
【０００８】
γセクレターゼ酵素の完全な分子同定はいまだに不明である。γセクレターゼ活性には、プレセニリン１または密接に関連するプレセニリン２が必要である。プレセニリン１が遺伝的に欠失している胚に由来する培養細胞では、γセクレターゼ活性が８０％減少する。プレセニリン１およびプレセニリン２の両方を持たない細胞では、γセクレターゼ活性が全て失われる。γセクレターゼ活性のペプチド模倣阻害剤はプレセニリン１および２と架橋させることができ、これらのタンパク質が切断の触媒サブユニットであることを示唆している。しかしながら、大きな複合体として細胞クロマトグラフから単離されたγセクレターゼ活性は、１Ｍダルトンより大きい。最近の遺伝子研究により、γセクレターゼ活性に必要とされるさらに３つのタンパク質、ニカストリン、ａｐｈ−１、およびｐｅｎ−１が同定された（Ｆｒａｎｃｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ  Ｃｅｌｌ  ３（１）：８５−９７、Ｓｔｅｉｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：２７７（４２）：３９０６２３９０６５、およびＬｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．８２（６）：１５４０−１５４８）。高分子量複合体におけるプレセニリンの蓄積は、これらのタンパク質を持たない細胞内で改変される。γセクレターゼのプレセニリン１およびプレセニリン２成分をコードする遺伝子における稀な変異もまた、早期発症型ＡＤの高いリスクを付与する（Ｗａｒｉｎｇ  ＳＣ，Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ  ＲＮ．Ａｒｃｈ  Ｎｅｕｒｏｌ．６５：３２９−３４，２００８）。
【０００９】
第３の酵素であるαセクレターゼは、β部位とγ部位との間の前駆体タンパク質を切断し、Ａβの産生を妨げ、非病理学的なＰ３として知られる約３ｋＤａのペプチドを放出する。βおよびαセクレターゼの両方による切断もまた、それぞれ、ｓＡＰＰβおよびｓＡＰＰαとして知られる、可溶性のＡＰＰの分泌型断片を生じさせる。ｓＡＰＰαの断片は、神経保護性であることが示されている。
【００１０】
これらの遺伝学的観察ならびに豊富な生化学的および神経解剖学的な実験の結果として、Ａβ、具体的にはＡβ−４２の産生および蓄積を増加させる生化学的事象がＡＤの発症および進行を加速させる、というモデルが出現した。したがって、治療および予防プログラムは、Ａβの産生を減少させること、またはその蓄積を低下させることを目的としている。
【００１１】
現在のＡＤ治療は、脳内におけるＡβの産生および／または蓄積を減少させることに重点を置いている。いくつかのアプローチが目下のところ開発中である（Ｒｏｊａｓ−Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ  ＣＨ，Ｃｈｅｎ  Ｍ，Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ  ＨＬ．Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ  ２２：１５４７−１５６３，２００２；Ｈａｒｄｙ  Ｊ，Ｓｅｌｋｏｅ  ＤＪ．Ｓｃｉｅｎｃｅ．２９７：３５３−３５６，２００２）。ＡＤの素因となるＡＰＰを導入され、さらに不活性化ノックアウト突然変異をβセクレターゼ遺伝子中に担持するマウスが、脳内においてほぼ完全なＡβの減少を示した（Ｌｕｏ  Ｙ，Ｂｏｌｏｎ  Ｂ，Ｋａｈｎ  Ｓ，Ｂｅｎｎｅｔｔ  ＢＤ，Ｂａｂｕ−Ｋｈａｎ  Ｓ，Ｄｅｎｉｓ  Ｐ，Ｆａｎ  Ｗ，Ｋｈａ  Ｈ，Ｚｈａｎｇ  Ｊ，Ｇｏｎｇ  Ｙ，Ｍａｒｔｉｎ  Ｌ，Ｌｏｕｉｓ  ＪＣ，Ｙａｎ  Ｑ，Ｒｉｃｈａｒｄｓ  ＷＧ，Ｃｉｔｒｏｎ  Ｍ，Ｖａｓｓａｒ  Ｒ．Ｎａｔ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  ４：２３１−２３２，２００１）。しかしながら、それにもかかわらず、そのようなマウスが、認知障害、早死、およびミエリン形成不全を示すことが証明された（Ｏｈｎｏ  Ｍ，Ｃｈａｎｇ  Ｌ，Ｔｓｅｎｇ  Ｗ，Ｏａｋｌｅｙ  Ｈ，Ｃｉｔｒｏｎ  Ｍ，Ｋｌｅｉｎ  ＷＬ，Ｖａｓｓａｒ  Ｒ，Ｄｉｓｔｅｒｈｏｆｔ  ＪＦ．Ｅｕｒ  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  ２３：２５１−２６０，２００６、Ｏｈｎｏ  Ｍ，Ｓａｍｅｔｓｋｙ  ＥＡ，Ｙｏｕｎｋｉｎ  ＬＨ，Ｏａｋｌｅｙ  Ｈ，Ｙｏｕｎｋｉｎ  ＳＧ，Ｃｉｔｒｏｎ  Ｍ，Ｖａｓｓａｒ  Ｒ，Ｄｉｓｔｅｒｈｏｆｔ  ＪＦ．Ｎｅｕｒｏｎ  ４１：２７−３３，２００４、Ｌａｉｒｄ  ＦＭ，Ｃａｉ  Ｈ，Ｓａｖｏｎｅｎｋｏ  ＡＶ，Ｆａｒａｈ  ＭＨ，Ｈｅ  Ｋ，Ｍｅｌｎｉｋｏｖａ  Ｔ，Ｗｅｎ  Ｈ，Ｃｈｉａｎｇ  Ｈ−Ｃ，Ｘｕ  Ｇ，Ｋｏｌｉａｔｓｏｓ  ＶＥ，Ｂｏｒｃｈｅｌｔ  ＤＲ，Ｐｒｉｃｅ  ＤＬ，Ｌｅｅ  Ｈ−Ｋ，Ｗｏｎｇ  ＰＣ．Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  ２５：１１６９３−１１７０９，２００５、Ｄｏｍｉｎｇｕｅｚ  Ｄ，Ｔｏｕｒｎｏｙ  Ｊ，Ｈａｒｔｍａｎｎ  Ｄ，Ｈｕｔｈ  Ｔ，Ｃｒｙｎｓ  Ｋ，Ｄｅｆｏｒｃｅ  Ｓ，Ｓｅｒｎｅｅｌｓ  Ｌ，Ｃａｍａｃｈｏ  ＩＥ，Ｍａｒｊａｕｘ  Ｅ，Ｃｒａｅｓｓａｅｒｔｓ  Ｋ，Ｒｏｅｂｒｏｅｋ  ＡＪ，Ｓｃｈｗａｋｅ  Ｍ，Ｄ’Ｈｏｏｇｅ  Ｒ，Ｂａｃｈ  Ｐ，Ｋａｌｉｎｋｅ  Ｕ，Ｍｏｅｃｈａｒｓ  Ｄ，Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ  Ｃ，Ｒｅｉｓｓ  Ｋ，Ｓａｆｔｉｇ  Ｐ，Ｄｅ  Ｓｔｒｏｏｐｅｒ  Ｂ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２８０：３０７９７−３０８０６，２００５、Ｈｕ  Ｘ，Ｈｉｃｋｓ  ＣＷ，Ｈｅ  Ｗ，Ｗｏｎｇ  Ｐ，Ｍａｃｋｌｉｎ  ＷＢ，Ｔｒａｐｐ  ＢＤ，Ｙａｎ  Ｒ．Ｎａｔ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  ９：１５２０−１５２５，２００６）。このことから、正常な神経機能のためには脳内におけるβセクレターゼの活性が必要であり、βセクレターゼの脳内活性を低下させる治療剤は有害な副作用を有する可能性があるという結論に至る。また、強力な脳透過性のβセクレターゼ阻害剤を設計することは困難であり（Ｂａｒｔｅｎ  ＤＭ，Ａｌｂｒｉｇｈｔ  ＣＦ．Ｍｏｌ  Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ３７：１７１−１８６，２００８）、ＡＤの薬物療法に関する研究を行う者の目標となっている。
【００１２】
γセクレターゼ阻害剤が脳内Ａβを減少させる効果についても研究されている。脳透過性のγセクレターゼ阻害剤が、Ａβの合成を低下させ、ＡＤのマウスモデルにおいて認知障害を減少させることが分かっている（Ｂａｒｔｅｎ  ＤＭ，Ｍｅｒｅｄｉｔｈ  ＪＥ  Ｊｒ，Ｚａｃｚｅｋ  Ｒ，Ｈｏｕｓｔｏｎ  ＪＧ，Ａｌｂｒｉｇｈｔ  ＣＦ．Ｄｒｕｇｓ  Ｒ  Ｄ  ７：８７−９７，２００６）。しかしながら、γセクレターゼはＡＰＰの他にも標的を有し（Ｐｏｌｌａｃｋ  ＳＪ，Ｌｅｗｉｓ  Ｈ．Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ  Ｄｒｕｇｓ  ６：３５−４７，２００５）、そのうちの１つが膜貫通型受容体のノッチファミリーである。γセクレターゼ阻害剤の慢性投与によるノッチシグナル伝達の阻害は、消化管、脾臓、および胸腺において、研究された化合物を使用してインビボで達成可能であるＡβ阻害の程度を制限する変化を引き起こす（Ｓｅａｒｆｏｓｓ  ＧＨ，Ｊｏｒｄａｎ  ＷＨ，Ｃａｌｌｉｇａｒｏ  ＤＯ，Ｇａｌｂｒｅａｔｈ  ＥＪ，Ｓｃｈｉｒｔｚｉｎｇｅｒ  ＬＭ，Ｂｅｒｒｉｄｇｅ  ＢＲ，Ｇａｏ  Ｈ，Ｈｉｇｇｉｎｓ  ＭＡ，Ｍａｙ  ＰＣ，Ｒｙａｎ  ＴＰ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７８：４６１０７−４６１１６，２００３、Ｗｏｎｇ  ＧＴ，Ｍａｎｆｒａ  Ｄ，Ｐｏｕｌｅｔ  ＦＭ，Ｚｈａｎｇ  Ｑ，Ｊｏｓｉｅｎ  Ｈ，Ｂａｒａ  Ｔ，Ｅｎｇｓｔｒｏｍ  Ｌ，Ｐｉｎｚｏｎ−Ｏｒｔｉｚ  Ｍ，Ｆｉｎｅ  ＪＳ，Ｌｅｅ  ＨＪ，Ｚｈａｎｇ  Ｌ，Ｈｉｇｇｉｎｓ  ＧＡ，Ｐａｒｋｅｒ  ＥＭ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７９：１２８７６−１２８８２，２００４、Ｍｉｌａｎｏ  Ｊ，ＭｃＫａｙ  Ｊ，Ｄａｇｅｎａｉｓ  Ｃ，Ｆｏｓｔｅｒ−Ｂｒｏｗｎ  Ｌ，Ｐｏｇｎａｎ  Ｆ，Ｇａｄｉｅｎｔ  Ｒ，Ｊａｃｏｂｓ  ＲＴ，Ｚａｃｃｏ  Ａ，Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ  Ｂ，Ｃｉａｃｃｉｏ  ＰＪ．Ｔｏｘｉｃｏｌ  Ｓｃｉ  ８２：３４１−３５８，２００４）。
【００１３】
米国特許出願第２００２０１２８３１９  Ａｌ号は、特定の非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤＳ）が、ＡＰＰの切断に由来するＡβ４０およびＡβ４２を発現する細胞培養物におけるＡβ４２の産生および／またはレベルを減少させると述べている。高レベルのＡβ４２がＡＤの主要リスク因子であるという確かな証拠が存在するため、そのような薬剤は、ＡＤの予防、遅延、または進行の逆転に有用である可能性がある。しかしながら、そのような薬剤を使用することの欠点は、Ａβ４２を著しく減少させるにはＮＳＡＩＤＳの大量摂取が必要であり、出血性潰瘍を含む著しい消化器系の副作用が、長期にわたる高用量のＮＳＡＩＤＳ使用と関連していることである（Ｌａｎｇｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｌａｎｃｅｔ  ３４３：１０７５−１０７８）。また、Ａβ４０、およびＡβ４２低下薬による影響を受けない他の形態からのアミロイド形成に起因するアルツハイマー病の未知のリスクが依然として存在する。したがって、当該技術分野において、Ａβの産生の制御に関連する疾病または疾患の治療薬を開発する必要性がある。
【００１４】
あるクラスの化合物が、ノッチシグナル伝達に影響を与えずにＡβの産生を減少させることが分かっている。この化合物のクラスは、阻害剤２と称される、チロシンキナーゼ阻害剤イマチニブメシラート（ＳＴＩ−５７１、商標名ＧＬＥＥＶＥＣ）および関連化合物、６−（２，６−ジクロロフェニル）−８−メチル−２−（メチルスルファニルフェニル−アミノ）−８Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−オンを含む（Ｎｅｔｚｅｒ  ＷＪ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．１００：１２４４４−１２４４９，２００３）。また、各々、参照により本明細書に組み込まれる米国特許公開第２００４／００２８６７３号およびＰＣＴ特許公開第ＷＯ２００４／０３２９２５号も参照のこと。現在、ＳＴＩ−５７１は、骨髄性白血病および消化管間葉性腫瘍の治療のために承認されている。ＳＴＩ−５７１は、白血病細胞におけるこの薬剤の重要な標的のうちの１つであるＡｂｌチロシンキナーゼを必要としない機構を介して、ＡＰＰでトランスフェクトされた神経芽細胞腫細胞およびトランスフェクトされた細胞の無細胞抽出液の両方におけるＡβの産生を強力に減少させる（Ｎｅｔｚｅｒ、上記参照）。「阻害剤２」と称されるＳＴＩ−５７１および関連化合物は、胎齢１８日のラットの大脳皮質から調製した一次ニューロンの培養物においてＡβの産生を減少させることが分かっており（Ｎｅｔｚｅｒ、上記参照）、これらの薬剤が、内因性遺伝子およびトランスフェクトされたＡＰＰ遺伝子の両方に由来するタンパク質のタンパク質分解処理に影響を与えることを示唆している。
【００１５】
ＧＬＥＥＶＥＣの商品パンフレットによると、ＳＴＩ−５７１は経口的に投与される。該薬剤は、脳内におけるＡβの蓄積に与える影響について調査されており、該薬剤は、血液脳関門の透過性が不良であることが分かっている。ＳＴＩ−５７１を投与された白血病患者において、該薬剤の脳脊髄液（ＣＳＦ）レベルは血中レベルよりも９２倍低かった（Ｔａｋａｙａｍａ  Ｎ，Ｓａｔｏ  Ｎ，Ｏ’Ｂｒｉｅｎ  ＳＧ，Ｉｋｅｄａ  Ｙ，Ｏｋａｍｏｔｏ  Ｓ．Ｂｒ  Ｊ  Ｈａｅｍａｔｏｌ．１１９：１０６−１０８，２００２）。したがって、ＡＤの潜在的治療薬として、該薬剤を非修飾形態において利用することは却下された（Ｎｅｔｚｅｒ、上記参照）。
【００１６】
血液脳関門の透過性不良を考慮して、ＳＴＩ−５７１が脳内Ａβに与える影響を調査している研究者達は、ＳＴＩ−５７１または阻害剤２をモルモットの脳の髄腔内に送達するために、移植された浸透圧性の小型ポンプを使用した（Ｎｅｔｚｅｒ、上記参照）。Ｎｅｔｚｅｒらは、脳内におけるＡβの蓄積の減少を観察したが、それにもかかわらず、「Ｇｌｅｅｖｅｃおよび関連薬剤の場合において、治療効果の可能性を向上させるためには、高い血液脳関門透過性を達成するための能力が必要である」と結論付けた（Ｎｅｔｚｅｒ、上記参照）。
【００１７】
脳内におけるＡβのレベルを効果的に減少させる治療薬の必要性が依然として存在する。
【発明の概要】
【００１８】
本発明は、末梢（非脳、非ＣＮＳ）組織を検査および／または治療することによって、脳内Ａβ疾患を治療、予防、または監視する方法に関する。いくつかの好ましい実施形態において、末梢組織は肝臓を含み、他の実施形態において、末梢組織は血液および／または血清を含む。いくつかの実施形態において、本発明は、ＡＤの存在またはＡＤに対する素因について対象を評価することと、Ａβの蓄積または産生を調節する化合物を末梢投与することと、ＡＤまたはＡＤの進行について上記対象を評価することと、を含む。
【００１９】
本発明は、対象の肝臓を治療することによる、ＡＤの治療または予防に関連する方法、組成物、およびプロセスを提供する。具体的には、本発明は、産生の直接的な阻害によって（例えば、ＡＰＰの発現の阻害によって）、または、肝臓におけるＡβの産生、プロセシング、蓄積、もしくは輸送を調節する因子を調節することによって、同じく対象の肝臓におけるＡβの産生、プロセシング、蓄積、または輸送を改変することに関する。そのような因子は、γセクレターゼ、プレセニリン１、プレセニリン２、ＡｐｏＥ、カルミリン、ニューグリン（ｎｅｕｇｒｉｎ）、イノシトール１，４，５−三リン酸受容体（ＩｎｓＰ３Ｒ）またはＳｍａｄ相互作用タンパク質−１（ＳＩＰ１、Ｚｆｈｘ１ｂによってコードされる）、クラスタリン（ＣＬＵによってコードされ、ＡｐｏＪとしても知られる）、ホスホイノシトール結合クラスリン集合タンパク質（ＰＩＣＡＬＭによってコードされる）、補体成分受容体１（ＣＲ１によってコードされる）、およびその調節因子を含むが、これらに限定されない。本発明は、調節されると、直接的（例えば、ＡＰＰの産生もしくはプロセシングに作用することによって）または間接的（例えば、ＡＰＰに作用する因子に作用する因子に同じく作用することによって）のいずれかで、対象の肝臓におけるＡβの産生に影響を与える任意の因子を調節することによる、ＡＤの治療または予防を包含する。本発明は、調節の性質によって、または対象の肝臓におけるＡβを調節するために作用する因子の同一性もしくは数によって限定されない。
【００２０】
いくつかの実施形態において、本発明は、脳内Ａβ疾患を有するかまたは脳内Ａβ疾患の素因があると診断された対象を治療する方法であって、末梢組織におけるＡβの産生を調節する化合物を末梢投与することを含む、方法を提供する。いくつかの好ましい実施形態において、化合物はＡβの産生を阻害する。特に好ましい実施形態において、末梢投与される化合物は、２．０未満、より好ましくは１．５未満、さらにより好ましくは約１．０未満の分配係数を有する。特に好ましい実施形態において、化合物は、血液脳関門を実質的に横断しない。
【００２１】
いくつかの実施形態において、本発明は、対象における脳内Ａβ疾患または脳内Ａβ疾患に対する素因のために対象を治療する方法であって、上記対象の末梢組織における遺伝子の発現を調節する化合物を末梢投与することを含む、方法を提供する。好ましい実施形態において、上記遺伝子の上記発現の調節は、上記末梢組織におけるＡβの産生または蓄積の調節をもたらす。特定の好ましい実施形態において、末梢組織は対象の肝臓である。
【００２２】
本発明は、ＡＰＰの発現および／またはプロセシングを改変することを含むが、これに限定されない、肝臓におけるＡβの産生に影響を与える任意の方法を包含する。いくつかの実施形態において、本発明は、Ｐｓｅｎ１、ＡｐｏＥ、ＩｎｓＰ３Ｒ、Ｐｓｅｎ２、ＡＰＰ、Ｃｉｂ１、Ｎｇｒｎ、Ｚｆｈｘ１ｂ、ＣＬＵ（ＡｐｏＪとしても知られる）、ＰＩＣＡＬＭ、およびＣＲ１遺伝子のうちの１つ以上の発現を調節する化合物を末梢投与することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態において、本発明の方法は、プレセニリン２、カルミリン、ニューグリン、Ｚｆｈｘ１ｂ、クラスタリン、ホスホイノシトール結合クラスリン集合タンパク質、補体成分受容体１のうちの１つ以上の活性、またはＡＰＰの発現もしくは活性を調節する化合物を末梢投与することを含む。いくつかの実施形態において、これらの遺伝子または活性のうちの１つ以上は、対象の肝臓において調節される。いくつかの実施形態において、調節は、発現または活性の阻害を含み、いくつかの実施形態において、調節は、発現または活性の刺激を含む。
【００２３】
いくつかの実施形態において、本発明は、例えば、脳内Ａβ疾患を治療する方法であって、脳内Ａβ疾患の存在または脳内Ａβ疾患に対する素因について対象を評価するステップと、Ａβの産生を調節する化合物を末梢投与するステップであって、化合物は、血液脳関門を実質的に透過しない、末梢投与するステップと、脳内Ａβ疾患または脳内Ａβ疾患の進行について対象を評価するステップと、を含む、方法を含む。いくつかの実施形態において、例えば、脳内Ａβ疾患の状態に対する治療の効果を判定するために（例えば、疾病の発症または発生の速度または軽減に与える影響を判定するため）、治療の前および後の評価結果を比較することがさらに企図される。Ａβの産生の調節は、いずれか特定の調節の手段または経路に限定されない。産生の調節は、例えば、ＡＰＰの発現の改変（例えば、減少）、またはＡＰＰをプロセシングしてＡβにすることの改変を含んでもよい。
【００２４】
いくつかの実施形態において、本発明は、脳内Ａβ疾患の存在または脳内Ａβ疾患に対する素因について対象を評価するステップと、Ａβの蓄積を調節する化合物を末梢投与するステップであって、化合物は、血液脳関門を実質的に透過しない、末梢投与するステップと、脳内Ａβ疾患または脳内Ａβ疾患の進行について対象を評価するステップと、を含む。Ａβの蓄積の調節は、いずれか特定の手段に限定されない。蓄積の調節は、例えば、Ａβの産生を減少させることおよび／もしくはＡβの分解もしくはクリアランスを増加させること、または異なる特性を有する修飾形態（例えば、非病原性形態）を産生するためのＡβの改変を含んでもよい。
【００２５】
本発明のいくつかの実施形態、Ａβの産生および／または蓄積の調節において、投与される化合物はγセクレターゼ活性の調節因子を含み、いくつかの好ましい実施形態において、化合物はγセクレターゼ活性の阻害剤を含むことが企図される。
【００２６】
本発明のいくつかの実施形態、Ａβの産生および／または蓄積の調節において、投与される化合物はプレセニリン２の調節因子を含むことがさらに企図される。いくつかの好ましい実施形態において、化合物はプレセニリン２の阻害剤を含む。いくつかの実施形態において、化合物はアミロイド前駆体タンパク質の切断の調節因子を含み、いくつかの実施形態において、化合物はアミロイド前駆体タンパク質の切断の阻害剤を含む。
【００２７】
いくつかの実施形態において、化合物は、ＳＴＩ−５７１、化合物１、化合物２、ＬＹ４５０１３９、ＧＳＩ−９５３、フロリザン、およびＥ２０１２（Ｅｉｓｅｉ）化合物、またはその血液脳関門不透過性変異体からなる群から選択される組成物を含む。特に好ましい実施形態において、組成物は、２．０未満、より好ましくは１．５未満、さらにより好ましくは約１．０未満の分配係数（例えば、オクタノール／水系において）を有する。特に好ましい実施形態において、化合物は、血液脳関門を実質的に横断しない。
【００２８】
いくつかの実施形態において、化合物は干渉オリゴヌクレオチドを含み、好ましい実施形態において、化合物は干渉ＲＮＡを含む。さらにより好ましい実施形態において、干渉ＲＮＡは、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、およびｍｉＲＮＡからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、干渉ＲＮＡは、アミロイド前駆体タンパク質のＲＮＡを標的とする干渉ＲＮＡを含み、他の実施形態において、干渉ＲＮＡは、プレセニリン２のＲＮＡを標的とする干渉ＲＮＡを含む。
【００２９】
いくつかの実施形態において、化合物は、脳内Ａβ関連疾患のリスクもしくは重症度を治療する、寛解させる、または低下させるための既知の治療薬をさらに含むことが企図される。特定の好ましい実施形態において、既知の治療薬は、カンナビノイド、ジメボン、プレドニゾン、イブプロフェン、ナプロキセン、インドメタシン、スタチン、選択的エストロゲン受容体分子、降圧剤、α遮断薬、β遮断薬、αβ遮断薬、アンジオテンシン変換酵素阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、利尿薬、および抗酸化剤からなる群から選択される。
【００３０】
本発明の方法における上記化合物の末梢投与は、いずれか特定の経路に限定されない。投与経路は、目（点眼）、口（経口）、皮膚（経皮）、鼻（経鼻）、肺（吸入）、口腔粘膜（頬側）、耳から、注射（例えば、静脈内、皮下、腹腔内等）等を含むが、これらに限定されない。特定の好ましい実施形態において、末梢投与することは、経口投与することを含む。
【００３１】
本発明の方法のいくつかの実施形態において、評価することは、精神状態の評価を含む。いくつかの好ましい実施形態において、評価することは、神経心理学的検査および脳画像診断のうちの１つ以上を含む。
【００３２】
いくつかの実施形態において、本発明は、対象における脳内Ａβ疾患のリスクまたは存在を評価する方法であって、上記患者の末梢組織におけるＡβのレベルを判定することを含む、方法を提供することが企図される。いくつかの他の実施形態において、本発明は、対象における脳内Ａβ疾患を監視する方法であって、上記患者の末梢組織におけるＡβのレベルを判定することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態において、末梢組織は血液であり、いくつかの実施形態において、末梢組織は血清である。いくつかの特に好ましい実施形態において、監視することは、複数の時点で上記末梢組織におけるＡβを測定することを含む。
【００３３】
これまで開示した方法の好ましい実施形態において、脳内Ａβ疾患はアルツハイマー病である。
【００３４】
いくつかの実施形態において、本発明は、対象における脳内Ａβ疾患を監視する方法であって、上記対象の末梢組織における遺伝子産物の発現または活性の分析を含む、方法を提供する。特定の好ましい実施形態において、遺伝子産物は、Ｐｓｅｎ２、ＡＰＰ、Ｃｉｂ１、Ｎｇｒｎ、およびＺｆｈｘ１ｂからなる群から選択される遺伝子に由来する。
【００３５】
いくつかの実施形態において、本発明は、脳内Ａβ疾患の存在または脳内Ａβ疾患に対する素因について対象を評価するステップと、血液脳関門を横断する末梢Ａβの輸送を阻害する化合物を末梢投与するステップであって、上記化合物は抗Ａβ抗体ではない、末梢投与するステップと、を含む、方法を提供する。好ましい実施形態において、本発明は、脳内Ａβ疾患または脳内Ａβ疾患の進行について上記対象を評価することをさらに含む。特に好ましい実施形態において、脳内Ａβ疾患はアルツハイマー病である。
【００３６】
いくつかの実施形態において、本発明は、脳内Ａβ疾患の治療のための遺伝子標的を同定する方法であって、肝臓における発現レベルを有する遺伝性の遺伝子マーカーを同定するために、上記Ａβ疾患を有するかもしくはその素因がある第１の親からと、上記Ａβ疾患に対する減少した感受性を有する第２の親からとの、子孫の肝臓遺伝子発現プロファイルを比較することを含み、上記第１の親の肝臓における発現レベルに対する上記子孫の肝臓における上記遺伝性の遺伝子マーカーの発現の増加または減少は、上記第２の親に由来する上記遺伝子マーカーの遺伝と相関する、方法を提供する。
【００３７】
いくつかの実施形態において、本発明は、Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の末梢組織におけるＡβの産生の調節において使用するための、ＳＴＩ−５７１、化合物１、化合物２、ＬＹ４５０１３９、ＧＳＩ−９５３、フロリザン、およびＥ２０１２化合物、またはその血液脳関門不透過性変異体からなる群から選択される、化合物を含む。いくつかの実施形態において、Ａβ疾患は脳内Ａβ疾患である。特に好ましい実施形態において、化合物は、２．０未満、より好ましくは１．５未満、さらにより好ましくは約１．０未満の分配係数を有する。特に好ましい実施形態において、化合物は、血液脳関門を実質的に横断しない。
【００３８】
いくつかの実施形態において、本発明は、Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の肝臓におけるＡβの産生の調節（例えば、阻害）において使用するための、ＳＴＩ−５７１、化合物１、化合物２、ＬＹ４５０１３９、ＧＳＩ−９５３、フロリザン、およびＥ２０１２化合物、またはその血液脳関門不透過性変異体からなる群から選択される、化合物を提供する。いくつかの実施形態において、Ａβ疾患は脳内Ａβ疾患である。特に好ましい実施形態において、化合物は、２．０未満、より好ましくは１．５未満、さらにより好ましくは約１．０未満の分配係数を有する。特に好ましい実施形態において、化合物は、血液脳関門を実質的に横断しない。
【００３９】
いくつかの実施形態において、本発明は、脳内Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の末梢組織においてＡβの産生を調節するための薬物を製造するための、イマチニブ（ＳＴＩ−５７１）、ＷＧＢ−ＢＣ−１５、化合物１、化合物２、ＬＹ４５０１３９、ＧＳＩ−９５３、フロリザン、およびＥ２０１２化合物、その血液脳関門不透過性変異体、ならびに／またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択される化合物の使用に関する。好ましい実施形態において、薬物は経口投与のために処方される。特に好ましい実施形態において、末梢組織は肝臓を含む。さらにより得に好ましい実施形態において、化合物は、２．０未満、好ましくは１．５未満、さらにより好ましくは約１．０未満の分配係数を有する。特に好ましい実施形態において、化合物は、血液脳関門を実質的に横断しない。いくつかの好ましい実施形態において、本発明は、脳内Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の肝臓においてＡβの産生を阻害するための薬物の製造における、イマチニブまたはその薬学的に許容される塩の使用に関する。
【００４０】
本発明はまた、脳内Ａβ疾患の治療のための第２の治療薬を含む薬物を製造するための上記化合物の使用も提供する。いくつかの実施形態において、第２の治療薬は、イマチニブ（ＳＴＩ−５７１）、ＷＧＢ−ＢＣ−１５、化合物１、化合物２、ＬＹ４５０１３９、ＧＳＩ−９５３、フロリザン、およびＥ２０１２化合物、その血液脳関門不透過性変異体、ならびに／またはその薬学的に許容される塩から選択される。特定の好ましい実施形態において、第２の治療薬は、カンナビノイド、ジメボン、プレドニゾン、イブプロフェン、ナプロキセン、インドメタシン、スタチン、選択的エストロゲン受容体分子、降圧剤、α遮断薬、β遮断薬、αβ遮断薬、アンジオテンシン変換酵素阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、利尿薬、および抗酸化剤からなる群から選択される１つ以上の作用物質を含む。上記方法および組成物の特定の特に好ましい実施形態において、化合物は、メシラート塩の形態でイマチニブを含む。
【図面の簡単な説明】
【００４１】
【図１Ａ】Ｐｓｅｎ２座位でマウスの遺伝子型と比較した、被験マウス由来の肝臓試料におけるＰｓｅｎ２のｍＲＮＡ量を比較するグラフを示す。
【図１Ｂ】Ｐｓｅｎ２座位の遺伝子型（Ｂ６／Ｂ６またはＤ２／Ｄ２）を、最大８９個の組換え自殖（ＲＩ）系統由来の６個の組織（任意の単位）におけるＰｓｅｎ２のｍＲＮＡ濃度にプロットしたグラフを示す。
【図２】ＳＴＩ−５７１、メシラート塩ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）、ＳＴＩ−５７１変異体（「ＷＧＢ−ＢＣ−１５」）、化合物１（ＰＤ１７３９５５，Ｍｏａｓｓｅｒ  ｅｔ  ａＩ．，１９９９，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５９：６１４５−６１５２、Ｗｉｓｎｉｅｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２００２，６２（１５）：４２４４−５５）、および化合物２（ＰＤ１６６３２６；Ｗｉｓｎｉｅｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２００２，６２（１５）：４２４４−５５）の化学構造を示す図である。
【図３Ａ】生理食塩水ビヒクル（レーン１、２、９、および１０）または３用量のＳＴＩ−５７１で処理した幼若Ｄ２マウス由来の血漿におけるＡβ六量体のレベルを示すウエスタンブロットであり、レーン３、４、１１、および１２は１ｍｇ／ｋｇを用いた結果を示す。
【図３Ｂ】図３Ａのウエスタンブロット像を棒グラフで定量化したものである。
【図３Ｃ】生理食塩水ビヒクルまたは２０ｍｇ／ｋｇのＳＴＩ−５７１で処理した幼若Ｂ６マウス由来の脳抽出物におけるＡβ六量体のレベルを示すウエスタンブロットである。
【図３Ｄ】図３Ｃのウエスタンブロット像を棒グラフで定量化したものである。
【図３Ｅ】生理食塩水ビヒクルまたは２０ｍｇ／ｋｇのＳＴＩ−５７１で処理した老Ｂ６マウスの脳抽出物中のＡβ六量体のレベルを示す棒グラフである。
【図３Ｆ】生理食塩水ビヒクルまたは２０ｍｇ／ｋｇのＳＴＩ−５７１で処理した老Ｂ６マウスの血漿中のＡβ六量体のレベルを示す棒グラフである。
【図４】被験マウス由来の肝臓試料におけるＮｇｒｎのｍＲＮＡ量を、Ｎｇｒｎ座位でのマウスの遺伝子型と比較するグラフを示す。
【図５Ａ】図１Ｂに示す４０個の組換え自殖系統のＣｉｂ１遺伝子型（Ｂ６／Ｂ６、Ｂ６／Ｄ２、またはＤ２／Ｄ２）対カルミリンの肝臓におけるｍＲＮＡ濃度（任意の単位）をプロットするグラフを示す。
【図５Ｂ】図１Ｂに示す４０個の組換え自殖系統のＺｆｈｘ１ｂ遺伝子型（Ｂ６／Ｂ６、Ｂ６／Ｄ２、またはＤ２／Ｄ２）対Ｚｆｈｘ１ｂの肝臓におけるｍＲＮＡ濃度（任意の単位）をプロットするグラフを示す。
【発明を実施するための形態】
【００４２】
〔図面の簡単な説明〕
（図１Ａ）Ｐｓｅｎ２座位でマウスの遺伝子型と比較した、被験マウス由来の肝臓試料におけるＰｓｅｎ２のｍＲＮＡ量を比較するグラフを示す。
【００４３】
（図１Ｂ）Ｐｓｅｎ２座位の遺伝子型（Ｂ６／Ｂ６またはＤ２／Ｄ２）を、最大８９個の組換え自殖（ＲＩ）系統由来の６個の組織（任意の単位）におけるＰｓｅｎ２のｍＲＮＡ濃度にプロットしたグラフを示す。親のＣ５７およびＤＢＡ値は、ＲＩ株の値の隣にプロットされている。いくつかの組織は、Ｐｓｅｎ２座位でヘテロ接合性である単一ＲＩ株からのデータを有し、それらはＢ６／Ｄ２としてプロットに表される。データは、ＧｅｎｅＮｅｔｗｏｒｋ．ｏｒｇより取得した（Ｊ．Ｗａｎｇ，Ｒ．Ｗ．Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｋ．Ｆ．Ｍａｎｌｙ  ＫＦ，Ｎｅｕｒｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  １，２９９（２００３））。肝臓は、各プローブについて、最初に発現データを肝臓の蛍光シグナル対基準ｍＲＮＡ試料によって生成される蛍光シグナルの比率として表した。２つのチャネルにおけるシグナルの非直線性に合わせて調整する、ロバストなＬＯＷＥＳＳ平滑化法を用いてデータを正規化した。次いで、これらの比率のログベース２（中央値）を計算した。値−１は、肝臓における発現が、対照における発現のおよそ１／２であることを意味し、値−２は、肝臓における発現が、対照における発現のおよそ１／４であることを意味する等。反対に、値＋２は、肝臓における発現が、肝臓において４倍大きいことを意味する。肝臓データセットは、Ｄ．Ｇａｔｔｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ４６，５４８（２００７）に記載される４０個の組換え自殖系統に由来する。他の組織については、発現値および代替の正規化法は示される通りであった（Ｗａｎｇ、上記参照）。
【００４４】
（図２）ＳＴＩ−５７１、メシラート塩ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）、ＳＴＩ−５７１変異体（「ＷＧＢ−ＢＣ−１５」）、化合物１（ＰＤ１７３９５５，Ｍｏａｓｓｅｒ  ｅｔ  ａＩ．，１９９９，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５９：６１４５−６１５２、Ｗｉｓｎｉｅｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２００２，６２（１５）：４２４４−５５）、および化合物２（ＰＤ１６６３２６；Ｗｉｓｎｉｅｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２００２，６２（１５）：４２４４−５５）の化学構造を示す図である。
【００４５】
（図３Ａ〜Ｆ）末梢投与されたＳＴＩ−５７１が血漿および全脳のＡβレベルに与える影響を示す。野生型Ｂ６およびＤ２マウス（８〜１２週齢［Ａ〜Ｆ］または１５〜１８月齢［Ｇ、Ｈ］）に腹腔内注射によって薬剤またはビヒクルを１日２回７日間投与した。図３Ａは、生理食塩水ビヒクル（レーン１、２、９、および１０）または３用量のＳＴＩ−５７１で処理した幼若Ｄ２マウス由来の血漿におけるＡβ六量体のレベルを示すウエスタンブロットであり、レーン３、４、１１、および１２は１ｍｇ／ｋｇを用いた結果を示し、レーン５、６、１３、および１４は１０ｍｇ／ｋｇを用いた結果を示し、レーン７、８、１５、および１６は１００ｍｇ／ｋｇを用いた結果を示す（ｎ＝群当たり４匹）。図３Ｂは、図３Ａのウエスタンブロット像を棒グラフで定量化したものである。図３Ｃは、生理食塩水ビヒクルまたは２０ｍｇ／ｋｇのＳＴＩ−５７１で処理した幼若Ｂ６マウス由来の脳抽出物におけるＡβ六量体のレベルを示すウエスタンブロットである（ｎ＝群当たり合計１０匹、ｎ＝５のみをウエスタンブロットに示す）。図３Ｄは、図３Ｃのウエスタンブロット像を棒グラフで定量化したものである。図３Ｅおよび３Ｆは、生理食塩水ビヒクルまたは２０ｍｇ／ｋｇのＳＴＩ−５７１で処理した老Ｂ６マウスの脳抽出物（Ｅ）または血漿（Ｆ）中のＡβ六量体のレベルを示す棒グラフである（ｎ＝群当たり４匹）。
【００４６】
（図４）被験マウス由来の肝臓試料におけるＮｇｒｎのｍＲＮＡ量を、Ｎｇｒｎ座位でのマウスの遺伝子型と比較するグラフを示す。
【００４７】
（図５）図１Ｂに示す４０個の組換え自殖系統のＣｉｂ１（図５Ａ）またはＺｆｈｘ１ｂ（図５Ｂ）遺伝子型（Ｂ６／Ｂ６、Ｂ６／Ｄ２、またはＤ２／Ｄ２）対カルミリン（図５Ａ）またはＺｆｈｘ１ｂ（図５Ｂ）の肝臓におけるｍＲＮＡ濃度（任意の単位）をプロットするグラフを示す。データはＧｅｎｅＮｅｔｗｏｒｋ．ｏｒｇより取得し（Ｗａｎｇ、上記参照）、肝臓データセットは、Ｇａｔｔｉ、上記参照によって記載される。
【００４８】
〔定義〕
本明細書で使用される場合、用語「対象」および「患者」は、交換可能に使用される。本明細書で使用される場合、用語「対象（単数）」および「対象（複数）」は、動物、好ましくは、非霊長類（例えば、ウシ、ブタ、ウマ、ロバ、ヤギ、ラクダ、ネコ、イヌ、モルモット、ラット、マウス、ヒツジ）および霊長類（例えば、カニクイザル等のサル、ゴリラ、チンパンジー、およびヒト）を含む哺乳類であり、好ましくはヒトを指す。一実施形態において、対象は、アルツハイマー病（ＡＤ）に罹患する対象である。
【００４９】
本明細書で使用される場合、用語「Ａβ関連疾患」または「Ａβ疾患」は、Ａβレベルの異常または調節不全を伴う疾病（例えば、アルツハイマー病）または状態（例えば、老人性認知症）である。Ａβ関連疾患は、ＡＤ、頭部外傷関連アミロイド疾患、ダウン症候群、および封入体筋炎を含むが、これらに限定されない。
【００５０】
本明細書で使用される場合、用語「疾病のリスクがある」は、特定の疾病を経験する素因がある対象（例えば、ヒト）を指す。この素因は、遺伝的（例えば、遺伝性疾病等の疾病を経験する特定の遺伝的傾向）であってもよいか、または他の因子（例えば、年齢、体重、環境条件、環境中に存在する有害な化合物に対する曝露等．）に起因するものであってもよい。よって、本発明は、いずれか特定のリスクに限定されることを意図せず、また、本発明は、いずれか特定の疾病に限定されることも意図しない。
【００５１】
本明細書で使用される場合、用語「疾病に罹患する」は、特定の疾病を経験しているか、または特定の疾病を有すると診断された対象（例えば、ヒト）を指す。本発明は、いずれか特定の兆候もしくは症状、または疾病に限定されることを意図しない。よって、本発明は、対象が特定の疾病に関連する指標（例えば、兆候および症状）のうちの少なくともいくつかを示し、任意の範囲の疾病（例えば、亜臨床症状から進行した疾病まで）を経験する対象を包含することが意図される。
【００５２】
本明細書で使用される場合、用語「疾病」および「病的状態」は、正常な機能の遂行を妨害または変更する、生きている動物またはその器官もしくは組織のうちのいずれかの正常な状態の任意の障害に関連し、また、環境因子（心的外傷、身体外傷、栄養不良、産業災害、または気候等）、特定の感染体（寄生虫、細菌、またはウイルス等）、生物に固有の欠陥（種々の遺伝的異常）、またはこれらおよび他の因子の組み合わせに対する反応であるかもしれない、状態、兆候、および／または症状を説明するために交換可能に使用される。
【００５３】
本明細書で使用される場合、用語「ＡＤを有する対象」または「ＡＤを示唆する兆候、症状、病態のうちいずれかを呈する対象」または「ＡＤを示唆する兆候、症状、病態のうちいずれかを呈することが疑われる対象」は、周知のＡＤの兆候、症状および病態に基づいて、ＡＤを有するかまたは有する可能性があると同定または診断された対象を指す。
【００５４】
本明細書で使用される場合、用語「ＡＤを示唆する病態を呈するリスクがある対象」および「ＡＤのリスクがある対象」は、ＡＤを発症するリスクがあると同定された対象を指す。
【００５５】
本明細書で使用される場合、用語「ＡＤ治療薬」とは、ＡＤを治療または予防するために使用される作用物質を指す。そのような作用物質は、これらに限定されないが、小分子、薬剤、抗体、医薬品等を含む。
【００５６】
本明細書で使用される場合、用語「認知機能」は、考える、判断する、集中する、または記憶する能力を一般的に指す。したがって、用語「認知機能の低下」は、考える、判断する、集中する、または記憶する能力の低下または欠如を指す。
【００５７】
本明細書で使用される場合、用語「調節する（ｍｏｄｕｌａｔｅ）」、「調節する（ｍｏｄｕｌａｔｅｓ）」、「調節された」、または「調節」は、それらの通常の意味を有するものとし、「増強する」、「促進する」、「増加させる」、「刺激する」、「阻害する」、「減少させる」、または「拮抗する」という言葉の意味を包含するものとする。例えば、γセクレターゼ活性等の酵素活性の調節因子は、直接的に、すなわち、調節されるべき活性を有する酵素との直接的な相互作用によって作用してもよいか、または、間接的に、すなわち、酵素との直接的な相互作用はないが、活性の調節をもたらす経路を介して作用してもよい。
【００５８】
本明細書で使用される場合、用語「ＡＤについて対象を評価する」は、例えば、対象におけるＡＤの存在もしくは進行、または対象におけるＡＤを発症するリスクを判定するために、１つ以上の検査を行うことを指す。ＡＤについて対象を評価することおよび／またはアルツハイマー病を記憶障害の他の原因と区別することは、以下のうちの１つ以上を評価することを含んでもよい。
１．対象の総体的な健康および過去の医学的問題、対象が日常活動を遂行する上で抱える可能性のある問題を評価することを含む、病歴
２．例えば、甲状腺疾患またはビタミン欠乏症等、認知症の他の潜在的原因を除外するための血液検査を含む、基本的な医学的検査
３．例えば、記憶力、問題解決能力、注意持続時間、数を数える能力、および言語のスクリーニング等の、精神状態の評価
４．記憶力、問題解決能力、注意持続時間、数を数える能力、および言語についてのより詳細な評価を含む、神経心理学的検査
５．目に見える異常を探すための、例えば、コンピュータ断層撮影（ＣＴ）、磁気共鳴画像（ＭＲＩ）、および陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）を使用した脳のスキャンまたは画像診断。
【００５９】
本明細書で使用される場合、「アゴニスト」は、薬理学的作用をもたらすために、間接的または直接的に分子に作用する任意の化合物であり、一方、「アンタゴニスト」は、薬理学的作用を低下させるために、間接的または直接的に分子に作用する任意の化合物である。
【００６０】
用語「試料」および「検体」は、それらの最も広義において使用され、任意の源から得られる試料または検体を包含する。本明細書で使用される場合、用語「試料」は、（ヒトを含む）動物から得られる生物学的試料を指して使用され、液体、固体、組織、および気体を包含する。本発明のいくつかの実施形態において、生物学的試料は、神経組織（例えば、脳組織）、脳脊髄液（ＣＳＦ）、漿液、尿、唾液、血液、および血漿、血清等の血液製剤を含む。しかしながら、これらの例は、本発明とともに使用される試料の種類を限定すると捉えられるべきではない。
【００６１】
本明細書で使用される場合、用語「血液脳関門」は、血流と神経組織との間の種々の化学物質および微視的物体（例えば、細菌）の経路を制限する中枢神経系（ＣＮＳ）における構造を指す。血液脳関門の「内側」および「外側」を方向的に言及する場合、それぞれ、血液脳関門の脳／神経組織側、または血液脳関門の非脳／神経側にあるものを指す。
【００６２】
本明細書で使用される場合、物質または化合物（例えば、薬剤）を参照して使用される用語「血液脳関門不透過性変異体」とは、例えば、変異体が投与された対象の血液脳関門を該変異体が実質的に透過しないように、対象に末梢投与されたときに、親または基準化合物の透過性と比較して血液脳関門を透過する能力が低い化合物の変異体を指す。後に記載するように、血液脳関門を横断する化合物の能力は、血液脳関門の透過率に関連する特徴（例えば、サイズ、電荷等）に関する当該技術分野で既知である多数の方法のうちのいずれかによって、例えば、インビボもしくはインビトロでの検査によって、計算モデル化によって、または化合物の性質決定によって（例えば、物理的検査もしくは計算モデル化によって）、特徴付けられてもよい。
【００６３】
脳／ＣＮＳによる薬剤の取り込みを判定または推定する方法は、インビボ方法（例えば、静脈内または頚動脈注射、その後に脳の試料採取または画像診断）、例えば、単離された脳の毛細血管または細胞培養モデルを使用するインビトロ方法、ならびに、通常、分子量および親油性等の因子に基づく（コンピュータによる）計算予測法を含む。血液脳関門を横断する薬剤の輸送を測定する方法の検討および比較については、例えば、参照により本明細書に組み込まれるＵ．Ｂｉｃｋｅｌ，ＮｅｕｒｏＲｘ．２００５  Ｊａｎｕａｒｙ；２（１）：１５−２６を参照のこと。
【００６４】
化合物の親油性／親水性は、一般に、化合物が脳に進入する速度および程度に関連する。薬剤の親油性／親水性は、非混和性の有機／水性溶媒系において分配されるときの薬剤の挙動を表す分配係数として表されることが多い。化合物が血液脳関門を横断する能力を評価するのに１−オクタノール／水分配系が広く使用されてきた。１−オクタノール／水分配係数「ｌｏｇＰ」は、親油性の記述子として長期にわたって使用されており、ＣｌｏｇＰおよびＭｌｏｇＰ等の算出されたｌｏｇＰ値を提供するコンピュータアルゴリズムは、実験的に測定された値に厳密に（約０．３ｌｏｇ単位で）合致することが多い（Ｂｉｃｋｅｌ、上記参照）。イオン性分子には、分配係数、すなわち、所定のｐＨ（通常、ｐＨ７．４の生理的血漿）のｌｏｇＰ値が使用される。ｌｏｇＰおよびｐＫａが分かっている場合は、ヘンダーソン・ハッセルバルヒの式を用いてｌｏｇＤ（ログ分配係数）が得られてもよい。ｐＨ７．４のｌｏｇＤは、血漿のｐＨで薬剤の親油性を示すとされることが多い。
【００６５】
Ｈａｎｓｃｈおよび共同研究者は、約２のｌｏｇＰを有する薬剤が、概して中枢神経系に迅速に進入し（Ｈａｎｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，１９８７，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．７６（９）：６６３−６８７、参照により本明細書に組み込まれる）、親水性がより高く、そのために低いｌｏｇＰ値（例えば、約１）を有する薬剤が、概してＣＮＳに進入する能力が低いことを断定した。この観察は、例えば、ＣＮＳ毒性または副作用を制御する手段として、ＣＮＳ透過性を低下させるための薬剤の修飾に適用されてきた。例えば、心臓病薬ＡＲＬ−５７のＣＮＳ透過性である。この薬剤は優れた強心剤であると考えられたが、ヒトにおいて「鮮烈に明るい色覚」をもたらすため、患者に使用することができなかった。ＡＲＬ−５７は、ｐＨ８でｌｏｇＰ＝２．５９を有する。同物質のより親水性の高い変異体であるＡＲＬ１１５（スルマゾール、ｐＨ８でｌｏｇＰ＝１．１７、計算値１．８２）が作製されて、ＣＮＳへの副作用がないことが分かり、親油性／親水性の修飾は、薬剤の血液脳関門透過性を改変する（例えば、減少させる）手段として使用できることを実証した（Ｈａｎｓｃｈ，ｅｔ  ａｌ．、上記参照）。
【００６６】
イマチニブメシラートの分配係数（ｌｏｇＰ）は、２５℃および３７℃で、それぞれ１．１９８および１．２６７であると計算されている（Ｖｅｌｐａｎｄｉａｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  Ｂ，８０４（２）：４３１−４３４（２００４））。このｌｏｇＰ値は、イマチニブが血液脳関門を実質的に透過しないことを示すデータと一致している。
【００６７】
用語「末梢（単数）」および「末梢（複数）」は、対象の組織内もしくは組織上の場所、または組織について言及する場合、血液脳関門の外側である対象の全ての場所および組織を指す。
【００６８】
本明細書で使用される場合、句「血液脳関門を実質的に横断しない」または「血液脳関門を実質的に透過しない」は、末梢組織に投与されるかまたは経口摂取された場合に、ＣＮＳ試料（例えば、脳組織、脳脊髄液中）中に全く見られないままであるか、または末梢組織に見られる濃度より低い割合で、例えば、末梢組織に見られる濃度の約１０％未満、好ましくは約５％未満、より好ましくは約２％未満で、ＣＮＳ試料中に存在するか、のいずれかである物質または化合物、例えば、ＧＬＥＥＶＥＣイマチニブメシラート（ＳＴＩ−５７１）に関連する。例えば、ＳＴＩ−５７１を投与された白血病患者において、該薬剤の脳脊髄液（ＣＳＦ）レベルが血中レベルよりも９２倍低かったことに示されるように、ＧＬＥＥＶＥＣ／ＳＴＩ−５７１は血液脳関門の透過性が不良である（Ｔａｋａｙａｍａ  Ｎ，Ｓａｔｏ  Ｎ，Ｏ’Ｂｒｉｅｎ  ＳＧ，Ｉｋｅｄａ  Ｙ，Ｏｋａｍｏｔｏ  Ｓ．Ｂｒ  Ｊ  Ｈａｅｍａｔｏｌ．１１９：１０６−１０８，２００２）。よって、ＧＬＥＥＶＥＣ／ＳＴＩ−５７１イマチニブメシラートは、血液脳関門を実質的に透過しない。
【００６９】
本明細書で使用される場合、用語「有効量」は、選択された効果をもたらすのに十分な（例えば、本発明のγセクレターゼ活性の調節因子を含む組成物の）量を指す。有効量は、１回以上の投与、適用、または投薬において投与することができ、特定の処方または投与経路に限定されることを意図しない。
【００７０】
本明細書で使用される場合、化合物の「十分な量」、または「〜するのに十分な化合物の量」は、意図される結果を達成するために必要な少なくとも最小限の量を含有する量を指す。そのような量は、本明細書に開示されるような分析方法を用いた研究によるデータに基づいて、当業者によって日常的に決定されてもよい。
【００７１】
本明細書で使用される場合、用語「約」は、１０〜１５％以内、好ましくは５〜１０％以内を意味する。
【００７２】
本明細書で使用される場合、用語「管理する」、「管理すること」、および「管理」は、細胞または組織によって示されるＡβレベルを減少させる化合物等の化合物から対象が得る有益な効果（疾病の治癒にはつながらない）を指す。特定の実施形態において、対象は、疾患を「管理する」ために１つ以上のそのような作用物質を投与され、該疾患の進行もしくは悪化を予防するかまたは遅延させる。
【００７３】
本明細書で使用される場合、用語「予防する」、「予防すること」、および「予防」は、患者におけるＡβ関連疾患の再発もしくは発症、またはＡβ関連疾患の１つ以上の症状の妨害を指す。
【００７４】
本明細書で使用される場合、「プロトコル」は、投与スケジュールおよび投与計画を含む。本明細書で言うプロトコルとは、使用方法であり、予防および治療プロトコルを含む。
【００７５】
本明細書で使用される場合、用語「投与」および「投与すること」は、薬剤、プロドラッグ、もしくは他の作用物質、または治療的処置（例えば、本発明の組成物）を対象（例えば、対象、またはインビボ、インビトロ、もしくはエクスビボ細胞、組織、および器官）に与える行為を指す。ヒトの身体への投与経路の例は、目（点眼）、口（経口）、皮膚（局所または経皮）、鼻（経鼻）、肺（吸入）、口腔粘膜（頬側）、耳、直腸、膣から、注射（例えば、静脈内、皮下、腫瘍内、腹腔内等）等であってもよい。「末梢投与」は、血液脳関門の外側で投与される任意の投与経路を指す。
【００７６】
本明細書で使用される場合、用語「併用投与」および「併用投与すること」は、対象に対する少なくとも２つの作用物質（複数可）（例えば、ＳＴＩ−５７１を含む組成物および１つ以上の他の作用物質（例えば、Ａβ関連疾病の治療薬））または療法の投与を指す。いくつかの実施形態において、２つ以上の作用物質または療法の併用投与は同時である。他の実施形態において、第１の作用物質／療法は、第２の作用物質／療法の前に投与される。当業者は、使用される種々の作用物質または療法の剤形および／または経路は異なり得ることを理解する。併用投与のための適切な投与量は、当業者によって容易に決定され得る。いくつかの実施形態において、作用物質または療法が併用投与される場合、それぞれの作用物質または療法は、それらの単独投与に適切な量よりも少ない投与量で投与される。よって、作用物質もしくは療法の併用投与が、潜在的に危険な（例えば、毒性の）作用物質（複数可）の必要投与量を低下させる、および／または、２つ以上の作用物質の併用投与が、一方の作用物質の併用投与によって、作用物質のうちの他方の有益な効果に対する対象の感作をもたらす実施形態において、併用投与が特に望ましい。
【００７７】
本明細書で使用される場合、用語「治療する」および「治療すること」は、特定の疾患、疾病、損傷、または状態に関連する症状を予防、治癒、または軽減／予防するための投与療法を含む。
【００７８】
本明細書で使用される場合、用語「治療」または文法上の均等物は、疾病（例えば、アルツハイマー病等のＡβ関連疾病）の症状の向上および／または逆転を包含する。したがって、本発明のスクリーニング法において使用される場合に疾病と関連する任意のパラメータにおける向上の原因となる化合物が、治療的化合物として同定されてもよい。用語「治療」は、治療的処置および予防的もしくは予防性手段の両方を指す。例えば、本発明の組成物および方法を用いた治療の恩恵を受ける可能性がある人々は、疾病および／または疾患（例えば、Ａβ関連疾病、またはＡβ関連疾病に合致する症状もしくは病態）に既に罹患している人々、ならびに（例えば、本発明の予防的処置を用いて）疾病および／または疾患が予防される人々を含む。
【００７９】
用語「化合物」は、疾病、病気、病的状態、もしくは身体機能障害を治療または予防するために使用することができる任意の化学物質、医薬品、薬剤等を指す。本明細書で使用される場合、化合物は、単一組成物（例えば、化学物質の純粋な調製物）であってもよいか、または、複数の化学物質（例えば、１つ以上の有効な作用物質および１つ以上の不活性な作用物質）を含む組成物であってもよい。化合物は、既知の治療的化合物および潜在的な治療的化合物の両方を含んでもよい。化合物は、本発明のスクリーニング法を使用したスクリーニングによって、治療的であると決定することができる。
【００８０】
「既知の治療的」化合物または作用物質は、（例えば、動物実験を通して、またはヒトに対する投与を伴うそれまでの経験を通して）治療において治療的効果を有することが分かっている治療的化合物を含む。しかしながら、既知の治療的化合物は、疾病（例えば、Ａβ関連疾病）の治療または予防において特定のレベルの有効性を有する化合物に限定されるものではなく、例えば、データが、ある程度の有益な効果があり、悪影響がほとんどないかまたは全くないことを示唆する化合物（例えば、食用エキスおよび栄養補給用化合物等の、一般的に安全であると認識されている化合物）を含む。単独で使用された場合または他の化合物もしくは療法と併用されたときに、Ａβ関連疾病（例えば、アルツハイマー病）のリスクまたは重症度を治療する、寛解させる、または低下させるための既知の治療薬の例は、カンナビノイド（例えば、Ｒａｍｉｒｅｚ，ｅｔ  ａｌ，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，Ｆｅｂｒｕａｒｙ  ２３，２００５，２５（８）：１９０４−１９１３を参照のこと）；ジメボン（例えば、ＲＳ  Ｄｏｏｄｙ，ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｅ  Ｌａｎｃｅｔ３７２：２０７−２１５（２００８）を参照のこと）；プレドニゾン（ステロイド）、およびイブプロフェン、ナプロキセン、インドメタシンを含むがこれに限定されない非ステロイド系抗炎症性薬剤（ＮＳＡＩＤ）等の抗炎症性剤；スタチン、例えば、アトルバスタチン（ＬＩＰＩＴＯＲ（登録商標））、セリバスタチン（ＢＡＹＣＯＬ（登録商標））、フルバスタチン（例えば、ＬＥＳＣＯＬ（登録商標））、メバスタチン、ピタバスタチン（例えば、ＬＩＶＡＬＯ（登録商標））、プラバスタチン（例えば、ＰＲＡＶＡＣＨＯＬ（登録商標））、ロスバスタチン（例えば、ＣＲＥＳＴＯＲ（登録商標））、およびシンバスタチン（例えば、ＺＯＣＯＲ（登録商標）等のコレステロール降下剤および／または心保護剤；選択的エストロゲン受容体分子（ＳＥＲＭ）、例えば、ラロキシフェン（ＥＶＩＳＴＡ（登録商標））；α遮断薬、β遮断薬、αβ遮断薬、アンジオテンシン変換酵素阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬（バルサルタン（例えば、ＤＩＯＶＡＮ（登録商標））等のＡＲＢ）、カルシウムチャネル遮断薬、および利尿薬（例えば、Ｉ  Ｈａｊｊａｒ，ｅｔ  ａｌ，Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌｓ  ｏｆ  Ｇｅｒｏｎｔｏｌｏｇｙ  Ｓｅｒｉｅｓ  Ａ：Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ６０：６７−７３（２００５）を参照のこと）を含む降圧剤、ならびにニンニクエキス、クルクミン、メラトニン、レスベラトロール、イチョウエキス、緑茶、ビタミンＣ、およびビタミンＥ等の抗酸化剤（例えば、Ｂ  Ｆｒａｎｋ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ  Ｃｌｉｎ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ１７（４）：２６９−８６（２００５）を参照のこと）を含むが、これらに限定されない。
【００８１】
本明細書で使用される場合、用語「小分子」は、天然または合成の有機もしくは無機化合物、ペプチド、（ポリ）ヌクレオチド、（オリゴ）糖等を含むが、これらに限定されない、分子量約１０ｋＤａ未満の分子を一般的に指す。小分子は、小さい非ポリマー（すなわち、ペプチドまたはポリペプチドではない）の有機および無機分子を特異的に特に含む。
【００８２】
本明細書で使用される場合、用語「抽出する」および類似した用語は、１つ以上の成分をそれらの天然の源から分離および／もしくは精製するプロセスを指すか、または名詞として使用される場合は、そのようなプロセスによって産生される組成物を指す。
【００８３】
本明細書で使用される場合、用語「キット」は、物質を送達するための任意の送達系を指す。キナーゼの活性または阻害アッセイについての文脈において、そのような送達系は、反応試薬および／または補助材料（例えば、緩衝剤、アッセイを行うための指示書等）をある場所から別の場所に保存、輸送、もしくは送達することを可能にするシステムを含む。例えば、キットは、関連する反応試薬および／または補助材料を含有する１つ以上の同封物（例えば、箱）を含む。本明細書で使用される場合、用語「分割キット」は、各々がキットの全構成要素のサブ部分を含有する２つ以上の別個の容器を備える送達系を指す。容器は、意図する受容者に一緒にまたは別々に送達されてもよい。例えば、第１の容器は、アッセイにおいて使用するための酵素を含有してもよく、第２の容器は、試験化合物の比較のための基準物質を含有する。用語「分割キット」は、連邦食品医薬品化粧品法の５２０（ｅ）項に規定される分析物特異試薬（ＡＳＲ）を含有するキットを包含することが意図されるが、それに限定されない。実際には、各々がキットの全構成要素のサブ部分を含有する２つ以上の別個の容器を備える任意の送達系が、「分割キット」という用語に含まれる。対照的に、「複合キット」は、反応アッセイの構成要素の全てを単一容器（例えば、所望の構成要素の各々を収容する単一の箱）に含有する送達系を指す。用語「キット」は、分割および複合キットの両方を含む。
【００８４】
本明細書で使用される場合、用語「毒性」は、その毒物を投与する前の同じ細胞または組織と比較して、対象、細胞、または組織に対する任意の有害または危険な影響を指す。
【００８５】
本明細書で使用される場合、用語「薬学的に精製された」は、薬学的使用のための調製物の十分な純度または品質を有する組成物を指す。
【００８６】
本明細書で使用される場合、用語「精製された」は、出発組成物において、除去された成分に対する精製された成分の比率が高くなるように、少なくとも１つの他の成分（例えば、出発組成物（例えば、植物もしくは動物の組織、環境試料等）、混入物質、合成前駆体、または副産物等からの別の成分）を除去するための出発組成物の処理を指す。
【００８７】
本明細書で使用される場合、用語「薬学的組成物」は、その組成物をインビボ、インビトロ、もしくはエクスビボでの診断的または治療的使用のために特に好適にする、活性剤（例えば、γセクレターゼ活性の調節因子を含む組成物）と不活性または活性担体との組み合わせを指す。
【００８８】
用語「薬学的に許容される」または「薬理学的に許容される」は、本明細書で使用される場合、対象に投与されたときに、例えば、毒性、アレルギー性、または免疫学的な反応を実質的に引き起こさない組成物を指す。
【００８９】
本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容される担体」は、リン酸緩衝生理食塩水、水、エマルジョン（例えば、油／水または水／油エマルジョン等）、および種々の種類の湿潤剤、あらゆる溶媒、分散媒、コーティング、ラウリル硫酸ナトリウム、等張遅延剤および吸収遅延在、崩壊剤（例えば、ジャガイモデンプンまたはグリコール酸ナトリウムデンプン）等を含むが、これらに限定されない、標準的な薬学的担体のうちのいずれかを指す。また、組成物は、安定剤および防腐剤を含むことができる。担体、安定剤、および補助剤の例については、例えば、参照により本明細書に組み込まれるＭａｒｔｉｎ，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１５ｔｈ  Ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌ．Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．（１９７５）を参照のこと。
【００９０】
本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容される塩」は、対象被験体（例えば、哺乳類被験体、および／あるいはインビボもしくはエクスビボでの細胞、組織、または器官）において生理学的に耐性である（例えば、酸または塩基との反応によって得られる）本発明の化合物の任意の塩を指す。本発明の化合物の「塩」は、無機または有機の酸および塩基に由来してもよい。酸の例は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、過塩素酸、フマル酸、マレイン酸、リン酸、グリコール酸、乳酸、サリチル酸、コハク酸、トルエン‐ｐ‐スルホン酸、酒石酸、酢酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ギ酸、安息香酸、マロン酸、スルホン酸、ネフタレン‐２‐スルホン酸、ベンゼンスルホン酸等を含むが、これらに限定されない。シュウ酸等の他の酸は、それ自体は薬学的に許容されないが、本発明の化合物およびそれらの薬学的に許容される酸付加塩を得る際に、中間物として有用な塩の調製において利用されてもよい。
【００９１】
塩基の例は、アルカリ金属（例えば、ナトリウム）水酸化物、アルカリ土類金属（例えば、マグネシウム）水酸化物、アンモニア、および式ＮＷ4+（式中、Ｗは、Ｃ1-4アルキルである。）の化合物等を含むが、それらに限定されない。
【００９２】
塩の例は、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、ショウノウ酸塩、ショウノウスルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、フルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、２‐ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２‐ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、パルモエート、ペクチン酸塩、過硫酸塩、フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩、ウンデカンサン酸塩等を含むが、これらに限定されない。塩の他の例は、例えば、Ｎａ+、ＮＨ4+、およびＮＷ4+（式中、Ｗは、Ｃ1-4アルキル基である）等の好適なカチオンと化合される、本発明の化合物のアニオンを含む。本発明の化合物の塩は、治療的使用に薬学的に許容されることが企図される。しかしながら、薬学的に許容されない酸および塩基の塩もまた、例えば、薬学的に許容される化合物の調製または精製において使用されてもよい。
【００９３】
本発明の化合物の塩は、治療的使用に薬学的に許容されることが企図される。しかしながら、薬学的に許容されない酸および塩基の塩もまた、例えば、薬学的に許容される化合物の調製または精製において使用されてもよい。本発明のいくつかの実施形態において、薬物の組成は、粉末、液体、エマルジョン、ミセル、リポソームゲル、およびペーストの形態からなる群から選択される形態を含む。いくつかの実施形態において、薬物の組成は錠剤または充填カプセル剤を含み、上記錠剤または充填カプセル剤は、任意で腸溶コーティング物質を含む。
【００９４】
本明細書で使用される場合、用語「賦形剤」は、活性成分の調製物に添加される不活性成分（すなわち、薬学的に活性ではない）を指す。
【００９５】
用語「遺伝子」は、ポリペプチド、前駆体、またはＲＮＡ（例えば、ｒＲＮＡ、ｔＲＮＡ）の産生に必要なコード配列を含む核酸（例えば、ＤＮＡ）配列を指す。ポリペプチドは、全長または断片の所望の活性または機能特性（例えば、酵素活性、リガンド結合、シグナル伝達、免疫原性等）が保持される限り、全長コード配列によって、またはコード配列の任意の部分によってコードされてもよい。この用語はまた、構造遺伝子のコード領域と、遺伝子が全長ｍＲＮＡの長さに対応するように、いずれの末端においても約１ｋｂ以上の距離の間、５’末端および３’末端の両方でコード領域に隣接して位置する配列と、を包含する。コード領域の５’側に位置し、かつｍＲＮＡ上に存在する配列は、５’非翻訳配列と称される。コード領域の３’側または下流に位置し、かつｍＲＮＡ上に存在する配列は、３’非翻訳配列と称される。用語「遺伝子」は、遺伝子のｃＤＮＡ型およびゲノム型の両方を包含する。遺伝子のゲノム型またはクローンは、「イントロン」、「介在領域」、「介在配列」のうちのいずれかと称される非コード配列で中断されたコード領域を含有する。イントロンは、核ＲＮＡ（ｈｎＲＮＡ）に転写される遺伝子のセグメントであり、イントロンは、エンハンサー等の制御要素を含有してもよい。イントロンは、核または一次転写産物から除去されるかまたは「スプライシングにより出される」ため、イントロンは、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）転写産物には存在しない。ｍＲＮＡは、新生ポリペプチドにおいてアミノ酸の配列または順序を特定するように翻訳中に機能する。
【００９６】
本明細書で使用される場合、用語「遺伝子発現」および「発現」は、遺伝子中でコードされた遺伝情報を、遺伝子の「転写」により（すなわち、ＲＮＡポリメラーゼの酵素反応を介して）ＲＮＡ（例えば、ｍＲＮＡ、ｒＲＮＡ、ｔＲＮＡ、またはｓｎＲＮＡ）に、またタンパク質をコードする遺伝子については、ｍＲＮＡの「翻訳」によりタンパク質に、変換するプロセスを指す。遺伝子発現は、このプロセスにおける多くの段階で調節することができる。「上方制御」または「活性化」は、遺伝子発現産物（例えば、ＲＮＡまたはタンパク質）の産生を増加させるおよび／または強化する調節を指し、一方、「下方制御」または「抑制」は、産生を減少させる調節を指す。上方制御または下方制御に関与する分子（例えば、転写因子）は、それぞれ「活性化因子」および「抑制因子」と称されることが多い。
【００９７】
イントロンを含有することに加えて、ゲノム形態の遺伝子はまた、ＲＮＡ転写物に存在する配列の５’末端および３’末端の両方に位置する配列を含んでもよい。これらの配列は、「フランキング」配列または「フランキング」領域と称される（これらのフランキング配列は、ｍＲＮＡ転写物に存在する非翻訳配列の５’側または３’側に位置する）。５’フランキング領域は、遺伝子の転写を制御するか、またはそれに影響を与える、プロモーターおよびエンハンサー等の調節配列を含有してもよい。３’フランキング領域は、転写終結、転写後切断、およびポリアデニル化を指示する配列を含有してもよい。
【００９８】
用語「野生型」は、天然に存在する源から単離された遺伝子または遺伝子産物を指す。野性型遺伝子は、集団において最も頻繁に観察される遺伝子であり、よって、任意に設計される遺伝子の「正常」または「野生型」の形態である。対照的に、用語「修飾された」または「変異の」は、野生型の遺伝子または遺伝子産物と比較した場合に、配列および／または機能特性における修飾（すなわち、改変された特徴）を示す遺伝子または遺伝子産物を指す。天然に存在する変異体が単離されてもよいことに留意されたく、これらは、野生型の遺伝子または遺伝子産物と比較して、（核酸配列の改変を含む）改変された特徴を有するという事実によって同定される。
【００９９】
本明細書で使用される場合、用語「〜をコードする核酸分子」、「〜をコードするＤＮＡ配列」、および「〜をコードするＤＮＡ」は、デオキシリボ核酸の鎖に沿ったデオキシリボヌクレオチドの順序または配列を指す。これらのデオキシリボヌクレオチドの順序は、ポリペプチド（タンパク質）鎖に沿ったアミノ酸の順序を決定する。よって、ＤＮＡ配列は、アミノ酸配列をコードする。
【０１００】
本明細書で使用される場合、用語「真核生物」は、「原核生物」と識別可能な生物を指す。染色体が存在する核膜によって結合される真核の存在、膜結合小器官の存在、真核生物において一般的に観察されるほかの特徴等の、真核生物の一般的な特徴を呈する細胞を持つ生物を包含することが意図される。よって、この用語は、菌類、原生動物、および動物（例えば、ヒト）等の生物を含むが、これらに限定されない。
【０１０１】
本明細書で使用される場合、用語「インビトロ」は、人工的環境、および人工的環境内で生じるプロセスまたは反応を指す。インビトロ環境は、試験管および細胞培養から構成され得るが、これらに限定されない。用語「インビボ」は、自然環境（例えば、動物または細胞）および自然環境内で生じるプロセスまたは反応を指す。
【０１０２】
用語「試験化合物」および「候補化合物」は、疾病、病気、病的状態、もしくは身体機能障害（例えば、認知機能、アミロイド関連疾患、循環器、高血圧、心疾患等）を治療または予防するために使用される候補である任意の化学物質、医薬品、薬剤等を指す。試験化合物は、既知の治療的化合物および潜在的な治療的化合物の両方を含む。試験化合物は、本発明のスクリーニング法を使用したスクリーニングによって、治療的であると決定することができる。
【０１０３】
本明細書で使用される場合、「機能」分子は、それが特徴付けられる特性を呈する形態の分子である。例として、機能酵素は、その酵素が特徴付けられる特徴的な触媒活性を呈する機能分子である。
【０１０４】
本明細書で使用される場合、用語「アンチセンスオリゴヌクレオチド」は、標的ＲＮＡ（またはその断片）の配列に相補的である核酸、例えばＲＮＡまたはＤＮＡセグメントを指す。通常、標的ＲＮＡは、細胞によって発現されるｍＲＮＡである。
【０１０５】
本明細書で使用される場合、用語「干渉オリゴヌクレオチド」は、阻害機構にかかわらず、標的遺伝子産物の機能を阻害する能力を持つオリゴヌクレオチドを指す。本明細書で使用される場合、干渉オリゴヌクレオチドは、アンチセンスオリゴヌクレオチド、アプタマー、ミクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、短い干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）および短いヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）を含むが、これらに限定されない。短い干渉ＲＮＡは、通常、概して１９〜２２ｎｔである二本鎖ＲＮＡ分子から構成され、短いヘアピンＲＮＡは、概して１９〜２９ｎｔであるループ配列によって接続されるパリンドローム配列から構成される。干渉オリゴヌクレオチドを産生する方法は当業者に周知であり、化学合成、組換えＤＮＡ技術、または酵素切断（例えば、ダイサー酵素による）を用いた大きな前駆体分子からの生成を含むが、これらに限定されない。
【０１０６】
本明細書で使用される場合、用語「抗体」は、抗原認識部位を含む免疫グロブリンまたは免疫グロブリン由来タンパク質を指す。抗体は、２本の重鎖および２本の軽鎖を含む天然または組み替え免疫グロブリン、ならびに、例えば、異なる組み合わせの重鎖および軽鎖の部分を含む断片抗体および単鎖抗体を含む修飾形態を含むが、これらに限定されない。この用語は、ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体を包含する。
【０１０７】
〔発明を実施するための形態〕
本発明の具体的な実施形態が、この発明を実施するための形態および発明の概要において説明される（参照によって本明細書に組み込まれる）。本発明を特定の実施形態に関連して記載してきたが、特許請求の範囲に記載されるような本発明は、そのような特定の実施形態に過度に限定されるべきではないことを理解されたい。例えば、本発明の方法および組成物は、γセクレターゼ活性の特定の調節因子（例えば、ＧＬＥＥＶＥＣ（ＳＴＩ−５７１）イマチニブメシラート）および特定の脳内アミロイド疾患（例えば、アルツハイマー病）に関連して記載されている。本発明は、イマチニブメシラートを使用するもしくは含む方法または組成物、あるいはＡＤに限定されるものではないことを理解されたい。
【０１０８】
本発明は、末梢組織、例えば肝臓におけるＡβの発現または蓄積の調節が、Ａβに関連する脳の疾病、例えばアルツハイマー病において治療効果を提供するという出願者の意外な発見に一部基づくものである。したがって、本発明は、非神経（すなわち、末梢）細胞、体液、および／または組織におけるＡβの産生および／または蓄積を調節する化合物の投与を介して、ＡＤ等の脳内Ａβ関連疾患を予防または治療するための方法および組成物に一般に関する。
【０１０９】
上述したように、アミロイド−β（Ａβ）ペプチドは、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の代謝物であり、アルツハイマー病（ＡＤ）の主要な病原性決定因子であると考えられている。ＡＰＰは、βおよびγセクレターゼによってタンパク質分解され、Ａβペプチドを産生する（４２残基形態のＡβが最も病原性が高いと考えられている）。βセクレターゼは、脳が正常に機能するために必要であり、よって、Ａβを減少させる手段としての阻害の候補にはふさわしくない。多数の脳透過性γセクレターゼ阻害剤、特に、膜貫通型受容体のノッチファミリーが、他の標的上でγセクレターゼの作用を妨害した結果として、望ましくない副作用を示している。あるクラスの化合物が、ノッチシグナル伝達に影響を与えずにＡβの産生を減少させることが分かっている。この化合物のクラスは、阻害剤２と称される、チロシンキナーゼ阻害剤イマチニブメシラート（ＳＴＩ−５７１、商標名ＧＬＥＥＶＥＣ）および関連化合物、６−（２，６−ジクロロフェニル）−８−メチル−２−（メチルスルファニルフェニル−アミノ）−８Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−オンを含む（Ｎｅｔｚｅｒ  ＷＪ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ．１００：１２４４４−１２４４９，２００３）。しかしながら、このクラスの化合物は、血液脳関門を透過せず、よって、脳組織への送達が極めて困難であるため、脳内Ａβ疾患の治療薬として却下された。
【０１１０】
上述したように、我々は、末梢組織、例えば肝臓におけるＡβの産生または蓄積の調節が、Ａβに関連する脳の疾病、例えばアルツハイマー病において治療効果を提供することを発見した。本発明は、対象の肝臓を治療することによる、ＡＤの治療または予防に関連する方法、組成物、およびプロセスを提供する。具体的には、本発明は、産生の直接的な阻害によって（例えば、ＡＰＰの発現の阻害によって）、または、肝臓におけるＡβの産生、プロセシング、蓄積、もしくは輸送を調節する因子を調節することによって、同じく対象の肝臓におけるＡβの産生、プロセシング、蓄積、または輸送を改変することに関する。好ましい実施形態において、阻害は、血液脳関門を実質的に横断しない化合物の使用による。特に好ましい実施形態において、治療のための組成物および方法は、末梢投与、例えば経口投与される、ＳＴＩ−５７１またはその薬学的に許容される塩の使用を含む。
【０１１１】
（薬物の製造における組成物の使用）
イマチニブは、以下の式Ｉの化合物４−（４−メチルピペラジン−ｌ−イルメチル）−Ｎ−［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル）ピリミジン−２−イルアミノ）フェニル］−ベンズアミドの一般的な名称［国際一般名］である。
【０１１２】
【化１】
2015172061.tif 000002
【０１１３】
ＳＴＩ−５７１は、イマチニブのメシラート塩を一般的に指し、慢性骨髄性白血病および消化管間葉性腫瘍の治療のために承認されている。乳癌の治療におけるイマチニブの使用については、第ＷＯ２００４／０３２９２５号に記載されている。イマチニブの製造、その薬学的に許容される塩（例えば、酸付加塩）、およびそのタンパク質キナーゼ阻害特性は、参照によって本明細書に組み込まれる米国特許第５，５２１，１８４号に記載される。「イマチニブ」は、遊離塩基またはメシラート塩のいずれかとして、４−（４−メチルピペラジン−ｌ−イルメチル）−Ｎ［４−メチル−３−（４−ピリジン−３−イル）ピリミジン−２−イルアミノ）フェニル］−ベンズアミドに対応する。イマチニブの調製およびその使用は、参照によって本明細書に組み込まれる欧州特許出願第ＥＰ−Ａ−Ｏ５６４４０９号の実施例２１に記載される。
【０１１４】
末梢投与は、いずれか特定の投与経路に限定されないが、いくつかの好ましい実施形態において、投与は経口的である。よって、いくつかの好ましい実施形態において、本発明は、脳内Ａβ疾患の治療または予防のための、経口投与される薬物の調製におけるＳＴＩ−５７１の使用を含む。いくつかの実施形態において、経口投与形態は錠剤を含み、いくつかの実施形態において、経口投与形態はカプセル剤を含む。
【０１１５】
好ましい実施形態において、本発明は、脳内のＡβレベルを減少させるために有効な量のイマチニブを含む錠剤またはカプセル剤の調製を含む。例えば、カプセル剤または錠剤は、１００〜１０００ｍｇの活性剤（例えば、イマチニブまたはその誘導体）を含んでもよい。例えば、錠剤またはカプセル剤は、１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、もしくは１０００ｍｇ、またはその間の（例えば、１２５ｍｇ、１５０ｍｇ、１７５ｍｇ、２２５ｍｇ、２５０ｍｇ、〜９７５ｍｇ等）の任意の都合のよい投与量を含んでもよい。いくつかの実施形態において、錠剤またはカプセル剤は、より少ない有効量のイマチニブ、例えば、１〜５ｍｇ（例えば、１、２、３、４、もしくは５ｍｇ、またはその都合のよい分割量）、６〜１０ｍｇ、１１〜１５ｍｇ等を含有するように構成される。
【０１１６】
経口投与のための組成および剤形は、例えば、散剤または顆粒剤、水または非水性媒体中の懸濁剤もしくは溶液、カプセル剤、分包剤、オブラート剤、溶解可能なストリップ、および錠剤を含む。増粘剤、香味剤、希釈剤、乳化剤、分散補助剤、または結合剤が所望であり得る。好ましい実施形態において、錠剤もしくはカプセル剤（または末梢投与の他の形態）は、１用量、または１〜１０００ｍｇの任意の整数ｍｇの量（例えば、１、２、３、４、５等）、もしくは１〜１０００ｍｇの任意の分数ｍｇの量に相当する量を送達するように構成される。特定の実施形態において、製剤は、例えば、以下の組成物の混合物で充填されたカプセル剤を含んでもよい。
【０１１７】
【表１】
2015172061.tif 000003
【０１１８】
いくつかの実施形態において、カプセル剤または錠剤は、腸溶コーティングを含む。「腸溶」とは小腸を指し、したがって、「腸溶コーティング」は、小腸に到達する前に薬物が放出されるのを実質的に防ぐコーティングを一般的に指す。本発明をいずれか特定の作用機序に限定するわけではないが、大抵の腸溶コーティングは、酸性のｐＨでは安定するが、それよりも高いｐＨでは迅速に分解する表面を持つことによって作用することを理解されたい。
【０１１９】
非経口投与のための組成および剤形は、緩衝剤、希釈剤、ならびに担体化合物および他の薬学的に許容される担体または賦形剤を含むがこれらに限定されない、他の好適な添加剤をさらに含有する無菌水溶液を含んでもよい。
【０１２０】
単一剤形として都合よく提供され得る本発明の医薬品製剤は、製薬産業において周知の従来技術にしたがって調製されてもよい。そのような技術は、活性成分を薬学的担体（複数可）または賦形剤（複数可）と会合させるステップを含む。一般に、製剤は、活性成分を液体担体または微粉化固体担体またはその両方と均一かつ密接に会合させ、次いで、必要に応じて、産物を成形することによって調製される。
【０１２１】
イマチニブメシラート（ＧＬＥＥＶＥＣ）の薬物動態を、健常な対象における試験および母集団薬物動態試験において評価した。イマチニブは、経口投与後、良好に吸収され、投与後２〜４時間以内にＣmaxに達する。平均絶対バイオアベイラビリティは９８％である。健常ボランティアにおける経口投与後のイマチニブおよびその主要活性代謝物であるＮ−脱メチル誘導体の排出半減期は、それぞれ約１８および４０時間である。イマチニブの平均ＡＵＣ（薬物血中濃度時間曲線）は、２５ｍｇ〜１０００ｍｇの範囲で増加する用量と比例して増加する。反復投与した場合にもイマチニブの薬物動態に有意な変化は見られず、１日１回投与された場合の蓄積は、定常状態で１．５〜２．５倍である。イマチニブの臨床的に意義のある濃度では、インビトロ実験における血漿タンパク質との結合は約９５％であり、その大部分はアルブミンおよびα１−酸糖タンパク質である。例えば、「Ｇｌｅｅｖｅｃ  Ｐｒｅｓｃｒｉｂｉｎｇ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ」２００３年改訂版Ｔ２００３−０９、（米国にて印刷）８９０１９００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）を参照のこと。
【０１２２】
ＣＹＰ３Ａ４は、イマチニブの代謝を担う主な酵素である。ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｄ６、ＣＹＰ２Ｃ９、およびＣＹＰ２Ｃ１９等の他のチトクロムＰ４５０酵素は、その代謝において重要な役割は果たさない。ヒトにおける活性な主要循環代謝物は、主としてＣＹＰ３Ａ４によって形成されるＮ−脱メチル化ピペラジン誘導体である。該誘導体は、親イマチニブと同様のインビトロでの効力を示す。この代謝物の血漿ＡＵＣは、イマチニブのＡＵＣの約１５％である。
【０１２３】
ほとんどが代謝物として、主に糞便中に排出される。１４Ｃ標識したイマチニブの経口投与後の化合物（複数可）の回収率によると、用量の約８１％が、７日以内に糞便中（用量の６８％）および尿中（用量の１３％）に排出された。未変化のイマチニブが用量の２５％を占め（尿５％、糞便２０％）、残りは代謝物であった。
【０１２４】
通常、体重５０ｋｇの５０歳の患者におけるイマチニブのクリアランスは８Ｌ／時間であると予想されるが、体重１００ｋｇの５０歳の患者では、クリアランスは１４Ｌ／時間に増加する。しかしながら、患者間のクリアランスにおける４０％の可変性は、体重および／または年齢に基づく初期用量の調整を正当化するものではなく、むしろ治療に関連する毒性について注意深く監視する必要性を提案するものである。
【０１２５】
成人患者と同様に、報告によると、イマチニブは、小児患者における経口投与後Ｃｍａｘ２〜４時間で迅速に吸収された。見かけ上の経口クリアランスは成人の値に類似しており（子供では１１．０Ｌ／時間／ｍ２、成人では１０．０Ｌ／時間／ｍ２）、半減期も同様であった（子供では１４．８時間、成人では１７．１時間）。子供における２６０ｍｇ／ｍ２および３４０ｍｇ／ｍ２の両方の投薬により、成人の４００ｍｇ用量と同様のＡＵＣを達成した。２６０ｍｇ／ｍ２および３４０ｍｇ／ｍ２の用量レベルで８日目と１日目のＡＵＣ（０〜２４）を比較したところ、１日１回の反復投与後、それぞれ１．５倍および２．２倍の薬剤の蓄積が明らかになった。イマチニブの平均ＡＵＣは、用量増加に比例して増加しなかった。「Ｇｌｅｅｖｅｃ  Ｐｒｅｓｃｒｉｂｉｎｇ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ」２００３  ｒｅｖｉｓｉｏｎ  Ｔ２００３−０９；  Ｐｒｉｎｔｅｄ  ｉｎ  Ｕ．Ｓ．Ａ．８９０１９００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）。
【０１２６】
上記では、イマチニブを用いた治療による肝臓におけるＡβ産生の調節を例として用いたが、本発明は、この化合物を用いた肝臓の治療に限定されるものではなく、対象における脳内Ａβ疾患または脳内Ａβ疾患に対する素因のために対象を治療する一般的な方法であって、上記対象の末梢組織の遺伝子の発現を調節する化合物を末梢投与することを含む方法を提供する。好ましい実施形態において、上記遺伝子の上記発現の調節は、上記末梢組織におけるＡβの産生または蓄積の調節をもたらす。特定の好ましい実施形態において、末梢組織は対象の肝臓である。
【０１２７】
本発明は、ＡＰＰの発現および／またはプロセシングを改変することを含むが、これに限定されない、肝臓におけるＡβの産生に影響を与える任意の方法を包含する。いくつかの実施形態において、本発明は、Ｐｓｅｎ１、ＡｐｏＥ、ＩｎｓＰ３Ｒ、Ｐｓｅｎ２、ＡＰＰ、Ｃｉｂ１、Ｎｇｒｎ、Ｚｆｈｘ１ｂ、ＣＬＵ（ＡｐｏＪとしても知られる）、ＰＩＣＡＬＭ、およびＣＲ１遺伝子のうちの１つ以上の発現を調節する化合物を末梢投与することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態において、本発明の方法は、プレセニリン２、カルミリン、ニューグリン、Ｚｆｈｘ１ｂ、クラスタリン、ホスホイノシトール結合クラスリン集合タンパク質、補体成分受容体１のうちの１つ以上の活性、またはＡＰＰの発現もしくは活性を調節する化合物を末梢投与することを含む。いくつかの実施形態において、これらの遺伝子または活性のうちの１つ以上は、対象の肝臓において調節される。いくつかの実施形態において、調節は、発現または活性の阻害を含み、いくつかの実施形態において、調節は、発現または活性の刺激を含む。
【０１２８】
（末梢治療中の脳内Ａβ疾患の評価および監視）
本発明は、対象の末梢（すなわち、非脳）組織の検査および該組織への投与によって、ＡＤおよびＡＤのリスクを検査および治療することに関する。後述するように、本試験は、肝臓および／または１つ以上の末梢組織におけるプレセニリン２の発現がＡβの蓄積を変更し、末梢におけるＡβの減少が、脳におけるその沈着を変更するのに十分であることを実証する。よって、それと矛盾する文献における広い教示に反して、Ａβの蓄積を減少させるＡＤの有効な治療的または予防的な治療薬は、血液脳関門を横断して脳に進入する必要はない。中枢神経系の外側（すなわち、血液脳関門の外側）における、他の手段によるＰｓｅｎ２もしくはγセクレターゼの活性の阻害、またはＡβの産生もしくは蓄積の減少は、Ａβ関連病態から脳を保護するのに応用される。末梢組織の治療は、治療薬が脳に進入する場所で生じ得る任意の副作用から脳を保護するという付加的な利益を有する。
【０１２９】
いくつかの実施形態において、本発明は、治療を対象または患者の生化学的状態に合わせる方法を提供する。末梢組織におけるＡβの調節のために選択される化合物のうちの１つ以上の有効量の特性は、他の薬剤または薬物の存在（例えば、Ａβ疾患もしくは無関係の状態の治療のため）、あるいは他の状況によって引き起こされる生化学的変化を含むが、これらに限定されない、対象または患者の特定の生化学的状況によって影響を受ける可能性があることが企図される。本発明は、例えば、肝臓における、Ａβの産生を調節する化合物を投与する前および後に、脳内Ａβ疾患または脳内Ａβ疾患の進行について上記対象を評価することによって、対象を監視することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態において、脳内Ａβ疾患のための療法は、それに応じて、選択、調整、または改変される。
【実施例】
【０１３０】
以下の実施例は、本発明の特定の好ましい実施形態および態様を実証し、さらに例示するために提供されるのであって、その範囲を限定すると捉えられるべきではない。
【０１３１】
〔実施例１〕
（実施例１：ＡＤ様病態発症の修飾因子の同定）
ヒトアルツハイマー病の決定的特徴を再現するトランスジェニックマウスモデルを開発した。ヒトにおけるＡＤの素因となる変異のうちのいくつかを担持するＡＰＰ遺伝子を種々の転写プロモーターに加え、マウスの生殖系列に導入した（Ｇａｍｅｓ  Ｄ，Ａｄａｍｓ  Ｄ，Ａｌｅｓｓａｎｄｒｉｎｉ  Ｒ，Ｂａｒｂｏｕｒ  Ｒ，Ｂｅｒｔｈｅｌｅｔｔｅ  Ｐ，Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ  Ｃ，Ｃａｒｒ  Ｔ，Ｃｌｅｍｅｎｓ  Ｊ，Ｄｏｎａｌｄｓｏｎ  Ｔ，Ｇｉｌｌｅｓｐｉｅ  Ｆ，ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ３７３：５２３−５２７、Ｈｓｉａ  ＡＹ，Ｍａｓｌｉａｈ  Ｅ，ＭｃＣｏｎｌｏｇｕｅ  Ｌ，Ｙｕ  ＧＱ，Ｔａｔｓｕｎｏ  Ｇ，Ｈｕ  Ｋ，Ｋｈｏｌｏｄｅｎｋｏ  Ｄ，Ｍａｌｅｎｋａ  ＲＣ，Ｎｉｃｏｌｌ  ＲＡ，Ｍｕｃｋｅ  Ｌ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．９６：３２２８−３２３３，１９９９、  Ｈｓｉａｏ  Ｋ，Ｃｈａｐｍａｎ  Ｐ，Ｎｉｌｓｅｎ  Ｓ，Ｅｃｋｍａｎ  Ｃ，Ｈａｒｉｇａｙａ  Ｙ，Ｙｏｕｎｋｉｎ  Ｓ，Ｙａｎｇ  Ｆ，Ｃｏｌｅ  Ｇ．Ｓｃｉｅｎｃｅ２７４：９９−１０２，１９９６、Ｓｔｕｒｃｈｌｅｒ−Ｐｉｅｒｒａｔ  Ｃ，Ａｂｒａｍｏｗｓｋｉ  Ｄ，Ｄｕｋｅ  Ｍ，Ｗｉｅｄｅｒｈｏｌｄ  ＫＨ，Ｍｉｓｔｌ  Ｃ，Ｒｏｔｈａｃｈｅｒ  Ｓ，Ｌｅｄｅｒｍａｎｎ  Ｂ，Ｂｕｒｋｉ  Ｋ，Ｆｒｅｙ  Ｐ，Ｐａｇａｎｅｔｔｉ  ＰＡ，Ｗａｒｉｄｅｌ  Ｃ，Ｃａｌｈｏｕｎ  ＭＥ，Ｊｕｃｋｅｒ  Ｍ，Ｐｒｏｂｓｔ  Ａ，Ｓｔａｕｆｅｎｂｉｅｌ  Ｍ，Ｓｏｍｍｅｒ  Ｂ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ  ９４：１３２８７−１３２９２，１９９７、Ｍｏｅｃｈａｒｓ  Ｄ，Ｄｅｗａｃｈｔｅｒ  Ｉ，Ｌｏｒｅｎｔ  Ｋ，Ｒｅｖｅｒｓｅ  Ｄ，Ｂａｅｋｅｌａｎｄｔ  Ｖ，Ｎａｉｄｕ  Ａ，Ｔｅｓｓｅｕｒ  Ｉ，Ｓｐｉｔｔａｅｌｓ  Ｋ，Ｈａｕｔｅ  ＣＶ，Ｃｈｅｃｌｅｒ  Ｆ，Ｇｏｄａｕｘ  Ｅ，Ｃｏｒｄｅｌｌ  Ｂ，Ｖａｎ  Ｌｅｕｖｅｎ  Ｆ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２７４：６４８３−６４９２，１９９９、Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ  ＪＣ，Ｋｅｎｄａｌ  ＣＥ，Ａｎｄｅｒｓｏｎ  Ｒ，Ｐｒｉｅｓｔ  Ｆ，Ｇｏｗｅｒ  Ｅ，Ｓｏｄｅｎ  Ｐ，Ｇｒａｙ  Ｒ，Ｔｏｐｐｓ  Ｓ，Ｈｏｗｌｅｔｔ  ＤＲ，Ｌａｖｅｎｄｅｒ  Ｄ，Ｃｌａｒｋｅ  ＮＪ，Ｂａｒｎｅｓ  ＪＣ，Ｈａｗｏｒｔｈ  Ｒ，Ｓｔｅｗａｒｔ  ＭＧ，Ｒｕｐｎｉａｋ  ＨＴ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ１２２：２１３−２２８，２００３、Ｂｕｔｔｉｎｉ  Ｍ，Ｙｕ  ＧＱ，Ｓｈｏｃｋｌｅｙ  Ｋ，Ｈｕａｎｇ  Ｙ，Ｊｏｎｅｓ  Ｂ，Ｍａｓｌｉａｈ  Ｅ，Ｍａｌｌｏｒｙ  Ｍ，Ｙｅｏ  Ｔ，Ｌｏｎｇｏ  ＦＭ，Ｍｕｃｋｅ  Ｌ．Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２２：１０５３９−１０５４８，２００２）。得られたトランスジェニックマウスはＡβ沈着物を生じたが、そのタイミングは月齢３ヶ月から１５ヶ月まで様々であった。これらの月齢における違いを引き起こす可変因子は、選択された特定の転写プロモーター、ＡＰＰ遺伝子における特定のＡＤの素因となる突然変異、導入遺伝子組み込みの染色体上の部位、および導入遺伝子を継承させたマウスの背景の系統を含む（Ｂｌｏｏｍ  ＦＥ，Ｒｅｉｌｌｙ  ＪＦ，Ｒｅｄｗｉｎｅ  ＪＭ，Ｗｕ  ＣＣ，Ｙｏｕｎｇ  ＷＧ，Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  ＪＨ．Ａｒｃｈ  Ｎｅｕｒｏｌ．６２：１８５−１８７��２００５において検討される）。
【０１３２】
ある報告書（Ｋｕｌｎａｎｅ  ＬＳ，Ｌａｍｂ  ＢＴ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ  Ｄｉｓ．８：９８２−９９２，２００１）は、いわゆるスウェーデン変異を担持するヒトＡＰＰ導入遺伝子Ｒ１．４０（Ｋ６７０Ｎ、Ｍ６７１Ｌ、この突然変異遺伝子を受け継いだヒトが早期発症型ＡＤを発症する素因となる変種）を、Ｃ５７Ｂｌ／６ｘ１２９／Ｓｖ混合マウスの遺伝子背景に導入している。Ｒ１．４０導入遺伝子の発現は、天然のヒトＡＰＰプロモーターによって促進した。１４〜１６ヶ月で、これらのマウスの脳におけるＡβ沈着物が最初に検出可能であった。続いて、Ｒ１．４０導入遺伝子を、その初期背景からＣ５７Ｂｌ／６（Ｂ６）、ＤＢＡ／２（Ｄ２）、および１２９／Ｓｖの背景に別個に交配した。次いで、一様ではあるが異なる３つのトランスジェニック系統が作製されるように、これらの３系統の各々を類遺伝子性（ｃｏｎｇｅｎｅｉｔｙ）になるよう育種し、同じ背景において１０回以上戻し交配を行った（Ｌｅｈｍａｎ  ＥＪ，Ｋｕｌｎａｎｅ  ＬＳ，Ｇａｏ  Ｙ，  Ｐｅｔｒｉｅｌｌｏ  ＭＣ，Ｐｉｍｐｉｓ  ＫＭ，Ｙｏｕｎｋｉｎ  Ｌ，Ｄｏｌｉｏｓ  Ｇ，Ｗａｎｇ  Ｒ，Ｙｏｕｎｋｉｎ  ＳＧ，Ｌａｍｂ  ＢＴ．Ｈｕｍ  Ｍｏｌ  Ｇｅｎｅｔ．１２：２９４９−２９５６，２００３）。３つ全てのトランスジェニック系統が同じ量のＡＰＰ前駆体を産生したが（３系統の背景において同程度の導入遺伝子が発現されたことを示唆している）、２１および６０日目に脳ホモジネートおよび血漿のＥＬＩＳＡによって測定したところ、Ｂ６が他の２系統よりも多くのＡβ（ＡＰＰの病原性断片）を蓄積し、１３．５ヶ月でヒトＡＤの特徴であるアミロイド沈着物を生じたのに対し、Ｄ２は保護されていた（２年でも沈着物は見られなかった）。よって、このことは、Ｂ６およびＤ２マウスを識別し、ＡＤ様病態の発症を修飾する遺伝子が存在し、それらが病原物質Ａβの蓄積に関与している可能性が高いことを示唆している（Ｌｅｈｍａｎ  ＥＪ，Ｋｕｌｎａｎｅ  ＬＳ，Ｇａｏ  Ｙ，Ｐｅｔｒｉｅｌｌｏ  ＭＣ，Ｐｉｍｐｉｓ  ＫＭ，Ｙｏｕｎｋｉｎ  Ｌ，Ｄｏｌｉｏｓ  Ｇ，Ｗａｎｇ  Ｒ，Ｙｏｕｎｋｉｎ  ＳＧ，Ｌａｍｂ  ＢＴ．Ｈｕｍ  Ｍｏｌ  Ｇｅｎｅｔ．１２：２９４９−２９５６，２００３）。変更遺伝子の同一性は、修飾因子の効果を模倣し、ＡＤの病態出現を遅延もしくは予防する治療または予防モダリティを暗示する可能性がある。
【０１３３】
変更遺伝子を染色体区間に割り当てるために、Ｒｙｍａｎおよび共同研究者は（Ｒｙｍａｎ  Ｄ，Ｇａｏ  Ｙ，Ｌａｍｂ  ＢＴ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ  Ａｇｉｎｇ  ２９：１１９０−１１９８，２００８）、メスのＢ６  Ｒ１．４０マウス（導入遺伝子にとってホモ接合である）をオスのＤ２  Ｒ１．４０マウス（同じく導入遺伝子にとってホモ接合である）と交配させ、次いで、それらのＦ１子孫（それらの全てがＲ１．４０導入遺伝子のコピーを２つ有する）を非トランスジェニックＢ６×Ｄ２のＦ１子孫と交配させて、各々が単一の導入遺伝子を担持する５１６匹のＦ２マウスを作製した。これらは、９０９ＳＮＰを有する遺伝子型である。５１６匹のマウス由来の脳ホモジネートにおいてＥＬＩＳＡによりＡβを測定した。Ａβの蓄積量を５１６匹のマウスの遺伝子型と相関させる回帰分析により、３つの修飾遺伝子座を次の位置に集中する広い領域に割り当てることができた：第１染色体（１８２．０４９３７４メガベース（Ｍｂ））、第２染色体（４１．２１６３１５Ｍｂ）、第７染色体（６３．６８０９２２Ｍｂ）。
【０１３４】
変更遺伝子の同定
プレセニリン２をコードするマウス遺伝子であるＰｓｅｎ２は、形質遺伝子座区間の中央である第１染色体上の１８２．０６３７１メガベースに位置しており、それがＡβの蓄積および沈着を変更するための候補であることを示唆している。これは、γセクレターゼの成分としてのその機能と一致する。より低いγセクレターゼ活性がＡＤにおいて保護的であることが予想されるため、Ｐｓｅｎ２がＲｙｍａｎおよび共同研究者によって第１染色体にマッピングされた実際の修飾因子であるためには、その活性がＢ６マウス系統とＤ２マウス系統との間で遺伝的に（メンデルの法則に従った方式で）異なっていなければならず、Ｐｓｅｎ２の活性はＢ６マウスにおいてＤ２マウスよりも高くなければならない。我々は、Ｂ６およびＤ２マウス系統、ならびにＢ６およびＤ２マウスを交配させ、その子孫を類遺伝子性になるよう育種することよって作製される組換え自殖マウス最大８９系統の、種々の組織におけるＰｓｅｎ２遺伝子から蓄積するｍＲＮＡの量を判定することによって、この問題を調査した。Ｂ６およびＤ２マウス系統ならびに８９個の組換え自殖マウス系統の１０個の組織（脳、小脳、肝臓、線条体、腎臓、海馬、目、前頭前野、側坐核、および新皮質）における２０，０００個を超えるｍＲＮＡの各々の濃度は、http://www.GeneNetwork.orgにコンパイルされた公共データベースにて入手可能である。８９個の組換え自殖マウス系統の各々については、その系統がＢ６またはＤ２の親からそのゲノムの各区間を受け継いだかどうか、遺伝子型を同定することによって判定した。
【０１３５】
プローブｒｓ１３４７６２６７は、第１染色体上の１８２．１２０４５４Ｍｂに位置する。公共サイトであるワールドワイドウェブｇｅｎｅｎｅｔｗｏｒｋ．ｏｒｇ／ｗｅｂｑｔｌ／ＷｅｂＱＴＬ．ｐｙ上のソフトウェアを使用して、ｒｓ１３４７６２６７区間の遺伝子型と、最大８９個の組換え自殖マウスにおける１０個の組織の各々に蓄積するＰｓｅｎ２のｍＲＮＡ量との間の形質相関を行い、ピアソンの積率相関係数を算出した。値は以下の通りであった。
【０１３６】
【表２】
2015172061.tif 000004
【０１３７】
脳に由来する組織試料のうちのいずれも高い遺伝率（│ｒ│＞０．９）でのＰｓｅｎ２発現を示さず、中間的な遺伝率でＰｓｅｎ２のｍＲＮＡ発現を示した２つの脳領域である小脳および側坐核では、Ｂ６遺伝子型よりも多くのＰｓｅｎ２のｍＲＮＡがＤ２遺伝子型と相関していた。よって、脳内のＰｓｅｎ２発現は、Ａβ蓄積の修飾因子ではない。しかしながら、肝臓において、Ｐｓｅｎ２のｍＲＮＡ量は、Ｐｓｅｎ２座位の遺伝子型と高度に相関していた（図１Ａ）。さらに、Ｂ６マウスは、Ｄ２マウスよりも多くのＰｓｅｎ２のｍＲＮＡを発現する。
【０１３８】
このデータは、肝臓または１つ以上の末梢組織におけるＰｓｅｎ２発現がＡβの蓄積を変更し、末梢におけるＡβの減少が脳内におけるその沈着を変更するのに十分であることを実証している。よって、それと異なる文献における広い教示に反して、脳の疾病は脳内で生じる事象によって引き起こされるという自然な仮説に少なくとも一部基づいて、Ａβの蓄積を減少させるＡＤのための有効な治療的または予防的治療薬は、血液脳関門を横断して脳に進入する必要はない。中枢神経系の外側における、他の手段によるＰｓｅｎ２もしくはγセクレターゼの活性の阻害、またはＡβの産生もしくは蓄積の減少は、治療薬が脳に進入する場所で生じ得る副作用から脳を保護する一方で、Ａβの沈着から脳を保護するのに十分である。末梢におけるＡβの蓄積の治療は、経口投与等の、（例えば、ＣＳＦ送達による）ＣＮＳへの直接的な適用を含まない薬剤送達経路を使用して達成することができる。
【０１３９】
〔実施例２〕
（実施例２：脳内のＡβを減少させるためのＳＴＩ−５７１イマチニブメシラートの末梢投与）
マッピング試験からのデータおよび我々のさらなる考察により、肝臓におけるＡβ産生の調節に基づいてＡＤ（その開始、進行、または重症度）を治療するための新規治療経路が提案された。新しい治療ストラテジーの基本は、（肝臓におけるＡβの産生を阻害することにより）定常状態の血中Ａβレベルを低下させる薬剤は、脳内のＡβ濃度を低下させるというものである。
【０１４０】
実験は、ＳＴＩ−５７１イマチニブメシラートの投与が２系統のマウスの脳および血液組織におけるＡβタンパク質レベルに与える影響を検査するように設計された。１週間にわたって、ＩＰ注射によりマウスにＳＴＩ−５７１イマチニブメシラートを投与し、脳および組織試料を除去し、ＥＬＩＳＡまたはウエスタンブロットを用いてＡβタンパク質レベルを測定した。
【０１４１】
野生型Ｃ５７Ｂｌ／６およびＤＢＡ／２Ｊマウスのオス（８〜１２週齢）に、腹腔内注射によって薬剤またはビヒクルを１日２回７日間投与した。ビヒクル群（ｎ＝系統当たり４匹の動物）に１００ｕｌの生理食塩水を注射し、薬剤治療群（ｎ＝４）には１、１０、または１００ｍｇ／ｋｇのＳＴＩ−５７１（ＧＬＥＥＶＥＣイマチニブ、メタンスルホン酸塩、カタログ番号Ｉ−５５０８、ＬＣ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｗｏｂｕｒｎ，ＭＡ）を投与した。ヒト癌患者に処方されるＳＴＩ−５７１の用量は１００ｍｇ〜１０００ｍｇである。例えば、参照により本明細書に組み込まれるＧｌｅｅｖｅｃ  Ｐｒｅｓｃｒｉｂｉｎｇ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ２００３  ｒｅｖｉｓｉｏｎ  Ｔ２００３−０９；  Ｐｒｉｎｔｅｄ  ｉｎ  Ｕ．Ｓ．Ａ．８９０１９００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）を参照のこと。
【０１４２】
最後の注射から１２時間後に動物を屠殺した。個々のマウスをイソフルランで麻酔し、ヘパリン処理した注射器を用いて心穿刺により血液試料（１００−３００ｕｌ）を採取した。ＥＤＴＡの存在下で試料を３０分間氷上に維持し、次いで、４℃で２０分間１６，０００ｘｇで遠心分離した。血漿画分を除去し、−８０℃で保存した。脳を除去してドライアイス上で急速冷凍し、−８０℃で保存した。
【０１４３】
市販のイムノアッセイキット（Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ  ｍｏｕｓｅ  Ａβ1-40、カタログ番号ＫＭＢ３４８１、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）またはウエスタンブロットを使用して、脳および血液試料中のマウスＡβ1-40の検出を行った。アッセイのプロトコルに記載されるように、５ＭグアニジンＨＣｌおよび５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ＨＣｌ（ｐＨ８．０）の存在下において、ポリトロン中で脳組織を均質化することによってマウスの脳試料を調製した（例えば、Ｍａｓｌｉａｈ，Ｅ．，ｅｔ  ａｌ．，（２００１）β  ａｍｙｌｏｉｄ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｅｎｈａｎｃｅ  α−ｓｙｎｕｃｌｅｉｎ  ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｄｅｆｉｃｉｔｓ  ｉｎ  ａ  ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ  ｍｏｕｓｅ  ｍｏｄｅｌ  ｌｉｎｋｉｎｇ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ．ＰＮＡＳ  ９８：１２２４５−１２２５０、Ｊｏｈｎｓｏｎ−Ｗｏｏｄ，Ｋ，ｅｔ  ａｌ．（１９９７）Ａｍｙｌｏｉｄ  ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  ａｎｄ  Ａ  ｂｅｔａ４２  ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ  ｉｎ  ａ  ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ  ｍｏｕｓｅ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ  ｄｉｓｅａｓｅ  ＰＮＡＳ  ９４：１５５０−１５５５、およびＣｈｉｓｈｔｉ，Ｍ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．（２００１）；Ｅａｒｌｙ−ｏｎｓｅｔ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  ｄｅｆｅｃｔｓ  ｉｎ  ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ  ｍｉｃｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ  ａ  ｄｏｕｂｌｅ  ｍｕｔａｎｔ  ｆｏｒｍ  ｏｆ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ６９５．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：２１５６２−２１５７０を参照のこと）。
【０１４４】
アッセイのために、プロテアーゼ阻害剤カクテル（カタログ番号５３９１３１、ＥＭＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｌａ  Ｊｏｌｌａ，ＣＡ）を添加した、５％ＢＳＡおよび０．０３％Ｔｗｅｅｎ−２０を含むダルベッコリン酸緩衝生理食塩水を含有する反応緩衝液中で、脳ホモジネートを１：１０で希釈した。標準的な希釈緩衝液中で血液試料を１：５で希釈した。試料を２回検定し、Ｔｅｃａｎインフィニット２０００プレートリーダーでＯＤ４５０を測定した。
【０１４５】
基本的には記載されるようにオリゴマーＡβをＳＤＳ画分中に抽出した（Ｔ．Ｋａｗａｒａｂａｙａｓｈｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  ２１，３７２（２００１））。ウエスタンブロットのために、試料をＰＡＧＥ分析に供し、ＰＶＤＦ膜に写し、マウスのＡβを標的とするモノクローナル抗体４Ｇ８（１：１，０００、Ｃｏｖａｎｃｅ）を使用して、製造者の推奨プロトコルを用いてＡβ六量体を可視化した。濃度測定によりブロットを走査し、次いで、ローディングコントロールおよび転写コントロールとして、ヒストンＨ３に対する抗体（１：５０，０００、Ａｂｃａｍ）で再プローブした。データを正規化光学濃度として表した。
【０１４６】
検査した２系統のマウス（Ｃ５７Ｂｌ／６およびＤＢＡ／２Ｊ）において、脳と血液の両方でＡβのレベルが異なっていた。以前に示されたように、Ｃ５７Ｂｌ／６マウス由来の脳および血液試料の両方において、ビヒクルで処理した対照群のＤＢＡ／２Ｊと比較してＡβのレベルが高かった。
【０１４７】
図３は、末梢投与されたＳＴＩ−５７１が血漿および脳のＡβレベルに与える影響を示す。図３Ａは、生理食塩水ビヒクル（レーン１、２、９、および１０）または３用量のＳＴＩ−５７１で処理した幼若Ｄ２マウス由来の血漿におけるＡβ六量体のレベルを示すウエスタンブロットであり、レーン３、４、１１、および１２は１ｍｇ／ｋｇを用いた結果を示し、レーン５、６、１３、および１４は１０ｍｇ／ｋｇを用いた結果を示し、レーン７、８、１５、および１６は１００ｍｇ／ｋｇを用いた結果を示す（ｎ＝群当たり４匹）。図３Ｂは、図３Ａのウエスタンブロット像を棒グラフで定量化したものである。図３Ｃは、生理食塩水ビヒクルまたは２０ｍｇ／ｋｇのＳＴＩ−５７１で処理した幼若Ｂ６マウスから抽出した脳におけるＡβ六量体のレベルを示すウエスタンブロットである（ｎ＝群当たり合計１０匹、ｎ＝５のみをウエスタンブロットに示す）。図３Ｄは、図３Ｃのウエスタンブロット像を棒グラフで定量化したものである。図３Ｅおよび３Ｆは、生理食塩水ビヒクルまたは２０ｍｇ／ｋｇのＳＴＩ−５７１で処理した老Ｂ６マウスの脳抽出物（Ｅ）または血漿（Ｆ）中のＡβ六量体のレベルを示す棒グラフである（ｎ＝群当たり４匹）。
【０１４８】
血漿Ａβにおける用量依存的減少が観察され（図３Ａ〜Ｂ）、最も高い用量は循環Ａβを約７５％減少させた。中間的な用量である２０ｍｇ／ｋｇが脳への影響の試験のために選択された。この用量は、幼若および老Ｂマウスにおける脳および血漿のＡβレベルを約５０％減少させた（図３Ｂおよび３Ｃ）。これらのＡβレベルは、Ｒ１．４０マウスモデルにおいて保護的であると観察された（Ｅ．Ｊ．Ｌｅｈｍａｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｈｕｍ  Ｍｏｌ  Ｇｅｎｅｔ  １２，２９４９（２００３））。
【０１４９】
これらの結果は、短期間（１週間）のＳＴＩ−５７１イマチニブメシラートによる治療が、血液および脳におけるＡβレベルを有意に減少させることを示すものである。さらに、この試験で用いた用量では、感知できるほどには薬剤が血液脳関門を横断しないため、Ａβの産生を末梢で調節することにより、ＳＴＩ−５７１イマチニブメシラートは脳内Ａβレベルを間接的に改変できることを示唆している。
【０１５０】
〔実施例３〕
（実施例３：第２および第７候補染色体の変更遺伝子の同定）
上記試験は、病原性Ａβが肝臓に由来する可能性が高いことを示している。上記と同じデータベースおよび方法を用いて、我々はまた、第２および第７染色体の区間に位置する遺伝子、およびＢ６マウス系統とＤ２マウス系統とで遺伝的に異なる肝臓におけるそれらの活性についても探索した。
【０１５１】
マーカーｒｓ４２２６７１５は、第７染色体上の修飾遺伝子座内で、その染色体の８０．１３８６１６Ｍｂに位置する。この区間からの２個の遺伝子であるＮｇｒｎ遺伝子およびＣｉｂ１遺伝子が、肝臓内で非常に遺伝率の高い発現を示した。Ｎｇｒｎ遺伝子は、広く発現される未知の機能を持つタンパク質であり、その発現はいくつかの癌において増加し、神経芽細胞腫の分化と関連してきたニューグリンをコードし（Ｓ．Ｉｓｈｉｇａｋｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ  ２７９，５２６（２００２），Ｓ．Ｒ．Ｈｕｓｔｉｎｘ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ  Ｔｈｅｒ  ３，１２５４（２００４））、Ｃｉｂ１遺伝子は、ＨｅＬａ細胞中のプレセニリン２との優先的相互作用のために最初に発見された、ミリストイル化カルシウムおよびインテグリン結合膜タンパク質であるカルミリンをコードする（Ｓ．Ｍ．Ｓｔａｂｌｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  １４，１４５，１２７７（１９９９））。これらの遺伝子は最も高い相関性を示し、ピアソンの値はそれぞれｒ＝０．９４５、およびｒ＝−０．９１３であり、両方ともｐ＜４．９９ｅ−３９であった（それぞれ図５および図４）。Ｎｇｒｎは第７染色体上の８０．１３８７３６Ｍｂに、またＣｉｂ１は８０．１０１５０７に位置し、両方ともマッピングされた修飾遺伝子座と一致する。
【０１５２】
上述したように、カルミリンはプレセニリン２との実証された相互作用を有する。しかしながら、脳内におけるカルミリンの分布は、脳内のプレセニリン分布またはＡＤの病態の影響を最も受けやすい領域のどちらとも十分に相関性を示さないため、従来の試験は、前脳におけるＡβの産生への寄与におけるその潜在的な役割を考慮したものの、そのような役割の可能性は低いと判断した（Ｍ．Ｂｌａｚｅｊｃｚｙｋ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ  １７６２，６６（２００６））。しかしながら、カルミリンは肝臓によって高度に発現される（Ｓ．Ｍ．Ｓｔａｂｌｅｒ、上記参照）。ある者は、イノシトール１，４，５−三リン酸受容体Ｃａ（２＋）放出チャネルのタンパク質リガンドとしてのカルミリンの活性を提案しており（Ｃ．Ｗｈｉｔｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２８１，２０８２５（２００６））、突然変異プレセニリン遺伝子でトランスフェクトしたニワトリ細胞における、カルミリンの関門作用は異常である（Ｋ．Ｈ．Ｃｈｅｕｎｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｎ  ５８，８７１（２００８））。
【０１５３】
肝臓カルミリンのｍＲＮＡ発現の遺伝率は非常に高い。Ｂ６親からそのＣｉｂ１遺伝子を受け継いだ全ての系統において、Ｄ２親からそれらのＣｉｂ１遺伝子を受け継いだ遺伝子系統において観察される量よりも、カルミリンのｍＲＮＡ量が多かった（図５Ａ）。１つの系統（株７３）はプローブでヘテロ接合性であるように見えるが、Ｄ２と同等量のカルミリンｍＲＮＡを発現する。このことは、肝臓におけるカルミリンの低発現が、脳におけるＡβの蓄積を減少させ、その副作用からマウスを保護することを示唆している。
【０１５４】
カルミリンのＡβ増強作用を減少させる化合物を用いた治療は、Ｄ２遺伝子型の低発現を模倣するはずであり、したがって保護的である。
【０１５５】
ニューグリンは、逆相関性を有する（図４）。肝臓における大量のニューグリンは、Ａβの蓄積が少ないことと相関しており、ニューグリンを増加させる化合物を用いた治療は保護的であるはずであることを示唆している。
【０１５６】
マーカーｒｓ３６６９９８１は、第２染色体上のかなり広い修飾遺伝子座内で、その染色体の４４．９４３０２９Ｍｂに位置する。亜鉛フィンガーホメオボックス１ｂのタンパク質をコードするＺｆｈｘ１ｂ遺伝子（４４．８１０５５７Ｍｂ）は、最も高い相関性を示し、ｒ＝−０．９１９、ｐ＝４．９９、ｅ−３９であった（図５Ｂ）。Ｚｆｈｘｂ１タンパク質は、Ｗｎｔおよびヘッジホッグシグナル伝達に関与するＳｍａｄと相互作用する転写コリプレッサーである（Ｇ．Ｂａｓｓｅｚ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ  Ｄｉｓ  １５，２４０（２００４）、Ｇ．Ｖｅｒｓｔａｐｐｅｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｈｕｍ  Ｍｏｌ  Ｇｅｎｅｔ  １７，１１７５（２００８）、Ｎ．Ｉｓｏｈａｔａ，ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ  １２５，１２１２（２００９））。遺伝子の有害な変異体は、精神遅延を含む複数の先天性疾患を呈する発達障害であるモワットウィルソン症候群を引き起こす（Ｃ．Ｚｗｅｉｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｍｅｄ  Ｇｅｎｅｔ  １０８，１７７（２００２））。Ｚｆｈｘ１ｂのｍＲＮＡは、発達中、特に神経系において広く発現されるが、成体マウスでは肝臓において最も多く発現される（Ｇ．Ｂａｓｓｅｚ、上記参照）。Ｚｆｈｘ１ｂ遺伝子は、第２染色体の４４．８１０５５７Ｍｂに位置し、マッピングされた修飾遺伝子座と一致する。肝臓ｍＲＮＡ発現の遺伝率は、この遺伝子では極めて高かった。Ｂ６親からそのＺｆｈｘ１ｂ遺伝子を受け継いだほぼ全ての系統において、Ｄ２親からそれらのＺｆｈｘ１ｂ遺伝子を受け継いだ系統よりもＺｆｈｘ１ｂのｍＲＮＡ量が多かった（図５Ｂ）。系統１２および３６は、プローブでの遺伝子型は異なっていたが、同様のｍＲＮＡレベルを有した。これらのデータは、肝臓におけるＺｆｈｘ１ｂの低発現が、脳におけるＡβの蓄積を減少させ、その副作用からマウスを保護することを示唆している。Ｚｆｈｘ１ｂの活性を阻害する化合物を用いた治療は、Ｄ２遺伝子型の低発現を模倣するはずであり、したがって保護的である。
【０１５７】
上記明細書に記載した全ての刊行物および特許は、参照により本明細書に組み込まれる。また、米国仮出願番号第６１１１４４５９号は、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。記載される本発明の組成物および方法の種々の修正および変形は、本発明の範囲および主旨から逸脱することなく当業者には明白である。本発明を特定の好ましい実施形態に関連して記載してきたが、特許請求の範囲に記載されるような本発明は、そのような特定の実施形態に過度に限定されるべきではないことを理解されたい。実際には、関連分野における当業者には明白である、本発明を実行するために記載した様式の種々の修正は、本発明の範囲内であることが企図される。
【図１Ａ】
2015172061.tif 000005
【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図３Ｅ】
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【図３Ｆ】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【手続補正書】
【提出日】平成27年6月12日(2015.6.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
脳内Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の末梢組織においてＡβの産生を調節するための、経口投与のために処方されている薬物の製造における、イマチニブまたはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項２】
脳内Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の肝臓においてＡβの産生を調節するための、経口投与のために処方されている薬物の製造における、イマチニブまたはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項３】
前記脳内Ａβ疾患は、アルツハイマー病である、請求項１または請求項２に記載の使用。
【請求項４】
前記薬物は、脳内Ａβ疾患を治療するために有効な量の第２の治療薬をさらに含む、請求項１〜３のうちのいずれかに記載の使用。
【請求項５】
前記第２の治療薬は、カンナビノイド、ジメボン、プレドニゾン、イブプロフェン、ナプロキセン、インドメタシン、スタチン、選択的エストロゲン受容体分子、降圧剤、α遮断薬、β遮断薬、αβ遮断薬、アンジオテンシン変換酵素阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、利尿薬、ＮＳＡＩＤＳ、および抗酸化剤からなる群から選択される作用物質を含む、請求項４に記載の使用。
【請求項６】
前記イマチニブは、メシラート塩の形態である、請求項１〜５のうちのいずれか１項に記載の使用。
【請求項７】
脳内Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の末梢組織におけるＡβの産生を阻害するための、経口投与のために処方されている薬物を製造するための、ＷＧＢ−ＢＣ−１５、ＬＹ４５０１３９、ＧＳＩ−９５３、フロリザン、Ｅ２０１２化合物、化合物２、
【化１】
2015172061.tif 000017
その血液脳関門不透過性変異体、および／またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択される化合物の使用。
【請求項８】
脳内Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の肝臓におけるＡβの産生を阻害するための、経口投与のために処方されている薬物を製造するための、ＷＧＢ−ＢＣ−１５、ＬＹ４５０１３９、ＧＳＩ−９５３、フロリザン、Ｅ２０１２化合物、化合物２、
【化２】
2015172061.tif 000018
その血液脳関門不透過性変異体、および／またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択される化合物の使用。
【請求項９】
前記脳内Ａβ疾患は、アルツハイマー病である、請求項７または請求項８に記載の使用。
【請求項１０】
前記薬物は、脳内Ａβ疾患を治療するために有効な量の第２の治療薬をさらに含む、請求項７〜９のうちのいずれかに記載の使用。
【請求項１１】
前記第２の治療薬は、カンナビノイド、ジメボン、プレドニゾン、イブプロフェン、ナプロキセン、インドメタシン、スタチン、選択的エストロゲン受容体分子、降圧剤、α遮断薬、β遮断薬、αβ遮断薬、アンジオテンシン変換酵素阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、利尿薬、ＮＳＡＩＤＳ、および抗酸化剤からなる群から選択される作用物質を含む、請求項１０に記載の使用。
【請求項１２】
Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の末梢組織におけるＡβの産生の調節において使用するための、イマチニブ（ＳＴＩ−５７１）、ＬＹ４５０１３９、ＧＳＩ−９５３、フロリザン、Ｅ２０１２化合物、および化合物２
【化３】
2015172061.tif 000019
、またはその血液脳関門不透過性変異体からなる群から選択され、経口投与のために処方されている、化合物。
【請求項１３】
脳内Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の末梢組織におけるＡβの産生の調節において使用するための、イマチニブ（ＳＴＩ−５７１）、ＬＹ４５０１３９、ＧＳＩ−９５３、フロリザン、Ｅ２０１２化合物、および化合物２
【化４】
2015172061.tif 000020
、またはその血液脳関門不透過性変異体からなる群から選択され、経口投与のために処方されている、化合物。
【請求項１４】
Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の肝臓におけるＡβの産生の調節において使用するための、イマチニブ（ＳＴＩ−５７１）、ＬＹ４５０１３９、ＧＳＩ−９５３、フロリザン、Ｅ２０１２化合物、および化合物２
【化５】
2015172061.tif 000021
、またはその血液脳関門不透過性変異体からなる群から選択され、経口投与のために処方されている、化合物。
【請求項１５】
脳内Ａβ疾患を有するかまたは発症する素因がある対象の肝臓におけるＡβの産生の調節において使用するための、イマチニブ（ＳＴＩ−５７１）、ＬＹ４５０１３９、ＧＳＩ−９５３、フロリザン、Ｅ２０１２化合物、化合物２
【化６】
2015172061.tif 000022
、またはその血液脳関門不透過性変異体からなる群から選択され、経口投与のために処方されている、化合物。
【請求項１６】
前記化合物は、１−オクタノール／水系における２．０未満の分配係数（ｌｏｇＰ）を有する、請求項１２〜１５のうちのいずれかに記載の化合物。
【請求項１７】
前記分配係数は、１．５未満である、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
前記分配係数は、約１．０未満である、請求項１７に記載の化合物。
【請求項１９】
前記化合物は、血液脳関門を実質的に横断しない、請求項１２〜１５のうちのいずれかに記載の化合物。