(57)【要約】【課題】  ゴーシェ病モデルショウジョウバエおよびこれを用いた神経変性疾患治療薬のスクリーニング方法を提供すること。【解決手段】  グルコセレブロシダーゼ遺伝子の相同遺伝子に変異を有し、野生型に比較して糖脂質の蓄積を呈することを特徴とする、変異型ショウジョウバエに試験物質を投与し、投与していないときと比較して、糖脂質の蓄積の低減及び／又は寿命の延長がみられた場合に、前記試験物質を神経変性疾患治療薬の候補物質として選択することを特徴とする、神経変性疾患治療薬のスクリーニング方法。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
神経変性疾患の予防又は治療薬のスクリーニング方法であって、
グルコセレブロシダーゼ遺伝子の内在性相同遺伝子に変異を有し、糖脂質の蓄積を呈することを特徴とするショウジョウバエに試験物質を投与し、
試験物質を投与したときに、投与していないときと比較して、糖脂質の蓄積の低減及び／又は寿命の延長がみられた場合に、前記試験物質を神経変性疾患治療薬の候補物質として選択すること、を特徴とするスクリーニング方法。
【請求項２】
前記内在性相同遺伝子が、以下の１）〜３）のいずれかである、請求項１記載のスクリーニング方法：
１）配列番号２又は４で示されるアミノ酸配列をコードする遺伝子、
２）配列番号２又は４で示されるアミノ酸配列と９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列をコードする遺伝子、
３）配列番号２又は４で示されるアミノ酸配列において１又は数個のアミノ酸が欠失、置換、付加されたアミノ酸配列をコードする遺伝子。
【請求項３】
前記内在性相同遺伝子が配列番号１又は３で示される塩基配列又は前記配列と９０％以上の配列同一性を有する塩基配列を有する、請求項１記載のスクリーニング方法。
【請求項４】
野生型に比較して寿命が短いことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に記載のスクリーニング方法。
【請求項５】
相同遺伝子の変異がトランスポゾンの挿入によるものである、請求項１〜４のいずれか１項に記載のスクリーニング方法。
【請求項６】
神経変性疾患がゴーシェ病又はパーキンソン病である、請求項１〜５のいずれか１項に記載のスクリーニング方法。
【請求項７】
グルコセレブロシダーゼ遺伝子の内在性相同遺伝子に変異を有し、糖脂質の蓄積を呈することを特徴とするショウジョウバエのゴーシェ病モデルとしての使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ゴーシェ病モデルショウジョウバエ、及びこれを用いたゴーシェ病やパーキンソン病等の神経変性疾患治療薬のスクリーニング方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ゴーシェ病は、現在根本的な治療法がなく、新たな神経変性疾患薬の登場が期待されている難治性神経変性疾患である。ゴーシェ病は国の難治性疾患克服研究事業の特定疾患にも指定されている難病でもある。この病気で重度の神経症状が出る患者はほとんどの場合3歳までには死に至り、現在まったく対処できない状況にある。
【０００３】
ゴーシェ病の原因は、糖脂質を分解する酵素（glucocerebrosidase; GBA）の遺伝的変異により、酵素機能の不足や低下を生じ、その基質である糖脂質グルコセレブロシドがリソゾームに蓄積してしまうことによるものであると考えられている。300近くの変異がゴーシェ病患者のGlcCerase遺伝子（hGBA）で同定されており（非特許文献１）、R120W変異は軽度の疾患を引き起こし（非特許文献２）、これに対してL444P変異は神経学的異常と関連があり（非特許文献３〜８）、複合型対立遺伝子RecNciI（L444P+A456P+V460V）は急性の神経学的異常に関与する（非特許文献６及び８）。
【０００４】
ゴーシェ病の一般的な治療目標は、基質分解の促進又はその生成の低減のいずれかによって、グルコセレブロシド（GlcCer）基質の蓄積を低下させることである。主な治療戦略は静脈内酵素補充療法であり、これによって欠損した酵素能がある程度回復される。しかしながら、この戦略は、おそらくは関係する酵素が血液脳関門を通過できないために神経学的異常を予防又は治療することはできず、現在のところゴーシェ病に伴う神経学的異常を治療するための戦略は事実上存在しない。
【０００５】
ゴーシェ病の原因遺伝子に変異が存在すると、パーキンソン病発症リスクが約28倍に上昇すること（約11人に1人が発症）が報告されている（非特許文献９〜１１）。このことから、ゴーシェ病病因遺伝子の研究は、代表的認知症の１つであるパーキンソン病の分子メカニズムを解明し、その新たな治療法、早期診断、予防法の確立に繋がることが期待される。
【０００６】
これまで、GBAヌル対立遺伝子（非特許文献１２）、点変異GBA対立遺伝子（非特許文献１３）、又はGBAの条件付きノックアウト等を利用して（非特許文献１４）、ゴーシェ病モデルマウスが樹立されている（非特許文献１５）。
【０００７】
ショウジョウバエと哺乳動物の間では、正常な発達及び疾病に関与する遺伝経路のほとんどが保存されているため、ショウジョウバエは神経変性疾患の研究のためのフレキシブルかつ強力なモデルである。これまで、ショウジョウバエを用いて、いくつかの神経変性疾患（例えばパーキンソン病）モデルが作製されているが（非特許文献１６）、ゴーシェ病のモデルショウジョウバエは得られていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Hruska, K.S., et al. (2008) Hum. Mutat. 29,567-583
【非特許文献２】Wan, L., et al. (2006) Blood Cells Mol. Dis. 36,422-425
【非特許文献３】Tsuji, S., et al. (1987) N. Engl. J. Med. 316,570-575
【非特許文献４】Theophilus, B., et al. (1989) Am. J. Hum. Genet. 45,212-225.
【非特許文献５】Dahl, N., et al. (1990) Am. J. Hum. Genet. 47, 275-278
【非特許文献６】Ida, H., et al. (1999) Hum. Genet. 105,120-126
【非特許文献７】Koprivica, V., et al. (2000) Am. J. Hum. Genet. 66,1777-1786
【非特許文献８】Choy, F.Y., et al. (2007) Blood Cells Mol. Dis. 38,287-293
【非特許文献９】Neumann, J., et al. (2009) Brain 132,1783-1794
【非特許文献１０】Kalinderi, K., et al. (2009) Neurosci. Lett. 452,87-89
【非特許文献１１】Mitsui, J., et al. (2009) Arch. Neurol. 66,571-576
【非特許文献１２】Tybulewicz, V.L., et al. (1992) Nature 357,407-410
【非特許文献１３】Liu, Y., et al. (1998) Proc. Natl. Acad. Sci. U S A 95,2503-2508
【非特許文献１４】Enquist, I.B., et al. (2006) Proc. Natl. Acad. Sci. U S A
【非特許文献１５】Farfel-Becker, T., Vitner, E.B., and Futerman, A.H. (2011) Dis. Model Mech. 4,746-752
【非特許文献１６】Feany, M.B., and Bender, W.W. (2000) Nature 404,394-398
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の課題は、飼育が簡便で安価なショウジョウバエを利用したゴーシェ病モデル、及びこれを用いた神経変性疾患治療薬のスクリーニング方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記課題を解決するために鋭意検討し、発明者らは、ショウジョウバエに存在するゴーシェ病原因遺伝子（GBA）の相同遺伝子をトランスポゾン挿入により不活化した系統を用いることでゴーシェ病の様々な表現形を再現できることを見出した。
すなわち、本発明は、以下の［１］〜［６］を提供する。
［１］神経変性疾患の予防又は治療薬のスクリーニング方法であって、
グルコセレブロシダーゼ遺伝子の内在性相同遺伝子に変異を有し、糖脂質の蓄積を呈することを特徴とするショウジョウバエに試験物質を投与し、
試験物質を投与したときに、投与していないときと比較して、糖脂質の蓄積の低減及び／又は寿命の延長がみられた場合に、前記試験物質を神経変性疾患治療薬の候補物質として選択すること、を特徴とするスクリーニング方法；
［２］前記内在性相同遺伝子が、以下の１）〜３）のいずれかである、請求項１記載のスクリーニング方法：
１）配列番号２又は４で示されるアミノ酸配列をコードする遺伝子、
２）配列番号２又は４で示されるアミノ酸配列と９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列をコードする遺伝子、
３）配列番号２又は４で示されるアミノ酸配列において１又は数個のアミノ酸が欠失、置換、付加されたアミノ酸配列をコードする遺伝子。
［３］前記遺伝子が配列番号１又は３で示される塩基配列又は前記配列と９０％以上の配列同一性を有する塩基配列を有する、［１］記載のスクリーニング方法；
［４］野生型に比較して寿命が短いことを特徴とする、［１］〜［３］のいずれかに記載のスクリーニング方法。
［５］相同遺伝子の変異がトランスポゾンの挿入によるものである、［１］〜［４］のいずれかに記載のスクリーニング方法；
［６］神経変性疾患がゴーシェ病又はパーキンソン病である、［１］〜［５］のいずれかに記載のスクリーニング方法；
［７］グルコセレブロシダーゼ遺伝子の内在性相同遺伝子に変異を有し、糖脂質の蓄積を呈することを特徴とする、ショウジョウバエのゴーシェ病モデルとしての使用。
【発明の効果】
【００１１】
本発明のゴーシェ病疾患モデルショウジョウバエは、ヒトゴーシェ病患者に見られる様々な表現形を再現でき、ゴーシェ病やこれに伴う神経変性症状の新たな予防及び治療方法の開発に有用である。
【００１２】
ゴーシェ病の原因遺伝子に変異が存在すると、パーキンソン病発症リスクが約28倍に上昇することが報告されており（前掲）、ゴーシェ病原因遺伝子の研究は、パーキンソン病の分子メカニズムの解明や、その新たな予防・治療法の確立に繋がることが期待される。よって、本発明のゴーシェ病モデルショウジョウバエは、パーキンソン病の新たな予防・治療方法の開発にも有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】ゴーシェ病原因遺伝子のショウジョウバエホモログCG31414とCG31148にMinosが挿入されたラインのmRNAの発現量。
【図２】Ａ：ゴーシェ病原因遺伝子のショウジョウバエホモログCG31414とCG31148にMinosが挿入されたラインの糖脂質（GlcCer）の蓄積（W[1118]はコントロール）。Ｂ：Aを数値化した棒グラフ。エラーバーはSEを、＊はコントロールと比較した有意な差異（p<0.05；スチューデントｔ-検定）をあらわす。
【図３】Ａ：ゴーシェ病原因遺伝子のショウジョウバエホモログCG31414にMinosが挿入されたラインの寿命（W[1118]はコントロール）。Ｂ：Aを数値化した棒グラフ。エラーバーはSEを、＊はコントロールと比較した有意な差異（p<0.05；スチューデントｔ-検定）をあらわす。
【図４】hGBAトランスジェニック・ハエにいおける糖脂質（GlcCer）の蓄積（W[1118]はコントロール）を数値化した棒グラフ。エラーバーはSEを、＊はコントロールと比較した有意な差異（p<0.05；スチューデントｔ-検定）をあらわす。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
ゴーシェ病
ゴーシェ病（GD）は最も一般的なリソソーム蓄積症である。グルコセレブロシダーゼ（GlcCerase）欠損によって引き起こされ、その基質であるグルコセレブロシド（GlcCer）の蓄積がGDの主因であると考えられている。
【００１５】
GDは、発症時期や神経症状から、臨床的に１型（慢性、非神経細胞障害性）、２型（急性、神経細胞障害性）、および３型（慢性、神経細胞障害性）に分類される。GDの主な症状は、肝臓・脾臓の肥大や、血小板減少に伴う貧血症状、骨髄における造血能低下、病的な骨折・骨痛・骨変形、けいれん、斜視等の各種神経障害である。
【００１６】
ゴーシェ病モデルショウジョウバエ
本発明のショウジョウバエは、GBA遺伝子の内在性相同遺伝子（ショウジョウバエホモログ）の変異により、ショウジョウバエGBAタンパク質の不活化を生じ、その結果ゴーシェ病患者に特有の糖脂質（GlcCer）の蓄積を呈する。さらに、このショウジョウバエは、野生型に比較して寿命が短く、この点でもゴーシェ病患者に類似する。それゆえ、本発明のショウジョウバエはゴーシェ病のモデルショウジョウバエとして有用である。
【００１７】
本発明のショウジョウバエは、公知の方法により、GBA遺伝子の相同遺伝子（ショウジョウバエホモログ）上に部位特異的変異を導入するか、あるいはランダム変異を誘発して、当該遺伝子上に変異が導入された変異型ショウジョウバエを作製し、その糖脂質の蓄積を確認することにより、得ることができる。
【００１８】
具体的には、例えば、GBA遺伝子のショウジョウバエホモログ遺伝子上にMinos等のトランスポゾンを挿入して変異型ショウジョウバエを作製する。MinosはDrosophila hydeiから見つかったTc/mariner属のトランスポゾンで、両末端に254bpの逆位末端配列を有し（全体の大きさ約1.8Kbp）、ショウジョウバエやカでベクターとして機能することが知られている。次いで、このショウジョウバエの頭部のグルコセレブロシド量を測定し、野生型と比較してグルコセレブロシドの蓄積を呈するショウジョウバエを本発明のショウジョウバエとして選択する。
【００１９】
目的とするGBA遺伝子のショウジョウバエホモログが特定できれば、当該遺伝子にMinosが挿入されたショウジョウバエ系統は、公的ストック機関（Bloomington Drosophila Stock Center）から入手することもできる。
【００２０】
本発明に係る「相同性遺伝子（ホモログ）」は、同種内・同染色体上に於ける、共通の起源をもつ同一性および相同性の高い遺伝子を意味する。同一性および相同性は、周知のアルゴリズム、例えばNeedleman-Wunsch、Smith-Waterman、BLAST又はFASTAを使用して算出され得る。相同性は、核酸又はアミノ酸のレベルで決定され得る。好ましくは、本発明の範囲内のホモログは、BLASTプログラム（Atschul et al，J．Molec．Biol．，1990；215：403−410）をデフォルト条件で使用して算出した場合、アミノ酸又は核酸レベルで50％以上、好ましくは60％以上、70％以上、80％以上、より好ましくは90％以上、さらに好ましくは95％以上の相同性を有する。
【００２１】
GBA遺伝子のショウジョウバエホモログは、ヒトGBA遺伝子の配列を基に、ショウジョウバエのゲノムデータを上述した方法を用いて検索することにより特定することができる。一例として、ショウジョウバエホモログCG31414及びCG31148の塩基配列をそれぞれ配列番号１及び３に、その翻訳産物であるGBAタンパクのアミノ酸配列を配列番号２及び４に示すが、本発明に係るGBA遺伝子ショウジョウバエホモログはこれらの配列に限定されるものではない。
【００２２】
本発明のGBA遺伝子ショウジョウバエホモログには、それが所望の効果を奏する限りにおいて、配列番号１又は３で示される塩基配列と90％以上の配列同一性を有する塩基配列を有する遺伝子も含まれる。
【００２３】
また、本発明のGBA遺伝子ショウジョウバエホモログには、それが所望の効果を奏する限りにおいて、配列番号２又は４に表されるアミノ酸配列と、BLAST等を用いて計算したときに（例えば、BLASTのデフォルトすなわち初期条件のパラメーターを用いた場合に）、少なくとも70％以上、好ましくは80％以上、より好ましくは90％以上、さらに好ましくは95％以上の相同性（同一性）を有するタンパク質をコードする遺伝子も含まれる。また、所望の効果を奏する限りにおいて、配列番号２又は４に示されるアミノ酸配列において１又は数個のアミノ酸が欠失、置換あるいは付加した配列をコードする遺伝子も含まれる。なお、「数個」とは、好ましくは２〜７個、より好ましくは２〜５個、最も好ましくは２〜３個のアミノ酸を意味する。
【００２４】
本発明のショウジョウバエは糖脂質の蓄積や寿命の短縮といったゴーシェ病に特有の表現形質を有するため、ゴーシェ病モデルショウジョウバエとして有用である。発明者らは、すでにヒト変異型GBA遺伝子導入ゴーシェ病モデルショウジョウバエの作製に成功し、これを用いてゴーシェ病の新たな原因として、小胞体ストレスが関与することを明らかにしている（特願２０１２‐２０３０７０号）。しかし、このヒト変異型GBA遺伝子導入ゴーシェ病モデルショウジョウバエは、本発明のショウジョウバエのような糖脂質の蓄積は示さない。
【００２５】
本発明のモデルショウジョウバエは、マウスモデルと比較して、飼育が容易でありコストが安い、卵の状態で保存できる、世代交代が早いために研究の効率化を図ることができる、という利点を有する。
【００２６】
スクリーニング方法
本発明は、多様な試験物質から、神経変性疾患治療薬の候補物質をスクリーニングする方法を提供する。この方法は、本発明のモデルショウジョウバエに試験物質を投与し、その糖脂質の蓄積及び／又は寿命を測定することにより評価することができる。試験物質を本発明のモデルショウジョウバエに投与したときに、投与していないときと比較して、糖脂質の蓄積の低減及び／又は寿命の延長がみられていれば、その試験物質は神経変性疾患治療薬の候補物質であると考えられる。
【００２７】
試験物質は、種々の合成又は天然の化合物ライブラリー、コンビナトリアルライブラリー、オリゴヌクレオチドライブラリー、ペプチドライブラリー等のライブラリーから得ることができる。また、細菌、真菌類、藻類、植物、動物等の天然物からの抽出物やその部分精製物を試験物質として用いてもよい。
【００２８】
試験物質をモデルショウジョウバエに投与するには、種々の濃度の試験物質又は対照物質を培養基に加えてハエに摂取させればよい。
【００２９】
試験物質が糖脂質の蓄積を低減させるか否かは、ショウジョウバエの頭部を回収し、薄層クロマトグラフィー等により、グルコセレブロシドの量を測定することにより、容易に判定することができる。
【００３０】
本発明のスクリーニング方法により選択された物質は、ゴーシェ病治療薬の候補物質として有用である。これをリード物質として、さらに効力の高い治療薬を開発することも可能である。
【実施例】
【００３１】
以下に実施例により本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例により限定されるものではない。
【００３２】
＜材料及び方法＞
（１）GBA遺伝子ショウジョウバエホモログCG31414及びCG31148
BLAST検索により、ショウジョウバエにおける推定グルコセレブロシド（GBA）ホモログ遺伝子としてCG31414及びCG31148を特定した。CG31414及びCG31148  の配列情報は、それぞれ、公共のデータベースであるFlybaseにおいて公開されている（CG31414: http://flybase.org/reports/FBgn0051414.html、CG31148： http://flybase.org/reports/FBgn0051148.html）
CG31414及びCG31148遺伝子の塩基配列と対応するタンパクのアミノ酸配列を、それぞれ配列番号１及び２（CG31414）、配列番号３及び４（CG31148）に示す。また、ヒトGBA遺伝子の塩基配列とGBAタンパクのアミノ酸配列をそれぞれ配列番号５及び６に示す。
【００３３】
（２）Minos挿入系統
公的ストック機関（Bloomington Drosophila Stock Center）からCG31414及びCG31148にMinosが挿入されたショウジョウバエ系統を取り寄せた。
【００３４】
（３）mRNAの単離および定量RT-PCR
ハエを２５℃、LD（明：暗＝１２：１２時間）下で同調させた後、３日齢のオス頭部を分析した。本実施例では、通常、オスのハエを２５℃、LD下で同調させ、継続的に毎日２回（９ａｍおよび９ｐｍ）、３７℃で０．５時間熱処理を行った。最終処理の３時間後、全てのオスを回収した。ハエ頭部およびハエ全体をTRIzol試薬（Invitrogen社、カリフォルニア州カールスバッド）中でホモジナイズし、２５％クロロホルムと混合した後、12,000 x g、１５分間、４℃で遠心分離を行った。上清を等量の２-プロパノールと混合し、12,000 x g、１０分間、４℃で遠心分離を行った後、ペレットを７０％エタノールと混合し、7500 x g、５分間、４℃で遠心分離を行った。ペレットをdH2Oと混合した。相補的DNAの合成を、Prime Script RT Reagent Kit（Takara Bio社、日本  大津市)を製造者のプロトコルに従って使用して行った。cDNAレベルの測定は、定量RT-PCRにより、LightCycler（Roche Applied Science社）をSYBR Premix Ex Taq（Takara Bio社、日本  大津市)と共に用いて行った。
【００３５】
（４）薄層クロマトグラフィー
全ての系統を25℃、LD下で同調させた後、３日齢オスから頭部を回収した。クロロホルム／メタノール（２：１、v/v）を用いて抽出した総脂質を標準物質、GlcCer（Funakoshi社、日本  東京）と共にシリカゲル６０  HPTLCプレート（Merck社、ドイツ  ダルムシュタット）に手作業でスポットした（５ｍｍ幅）。クロロホルム／メタノール／0.02% CaCl2（１２０:７０:１６、v/v/v）を用いてスポット中の脂質を展開させた後、プレートにプリムリン試薬（Tokyo Chemical Industry社、日本  東京）をスプレーして浸漬し、風乾した。紫外線（３６６ｎｍ）で脂質のバンドを可視化した。ImageJを使用してバンドを定量した。
【００３６】
（５）統計的解析
単眼のサイズの差異は分散分析（Levene検定）を用いて検証した。定量RT-PCRの結果はスチューデントT-検定を用いて解析した。
【００３７】
［実施例１］GBAの内在性相同遺伝子にMinosが挿入されたハエ
GBAのショウジョウバエホモログCG31414及びCG31148にMinosが挿入されたMinos挿入系統（CG31414[Mi]）及び（CG31148 [Mi]）について、そのmRNAの発現量、GlcCerの蓄積、寿命を調べた。
【００３８】
（１）mRNAの発現量
野生型とMinos挿入系統（CG31414[Mi]）及び（CG31148 [Mi]）におけるCG31414及びCG31148のmRNAの発現量を測定した。その結果、CG31414[Mi]においてのみCG31414mRNA発現量の有意な減少が確認された（図１）。
【００３９】
（２）GlcCerの蓄積
GD患者における神経学的異常を含む多くの異常は、グルコセレブロシド（GlcCer）の蓄積によって起こると考えられている。そこで、薄層クロマトグラフィー法を用いてトランスポゾンMinosを挿入したCG31414遺伝子（CG31414[Mi]）およびCG31148遺伝子（CG31148[Mi]）を保有するハエ系統におけるGlcCer含量を定量した。それぞれの系統毎に1,000検体のハエ頭部中のGlcCerの量を薄層クロマトグラフィーで測定した。
【００４０】
CG31414[Mi]では、人のゴーシェ病患者に見られる糖脂質の蓄積が見られた。一方もう一つのMinos挿入系統CG31148[Mi]では糖脂質の蓄積が見られなかった（図２）。
【００４１】
（３）寿命
Minos挿入系統CG31414[Mi]の寿命を野生型と比較したところ、CG31414[Mi]では、オス、メスいずれにおいても、野生型に比較して有意に寿命が短縮していた（図３）。
【００４２】
なお、CG31148[Mi]で機能変化がみられないのは、Minos挿入位置の問題で、もう少し上流に挿入されれば、機能変化が生じる可能性がある。
【００４３】
以上の結果から、ショウジョウバエに存在するゴーシェ病原因遺伝子（GBA）の相同遺伝子をトランスポゾン挿入により不活化した系統は、ゴーシェ病の様々な表現形を再現できることが確認された。
【００４４】
hGBAのヘテロ接合病原性変異株はパーキンソン病の発症リスクを高めることが知られている（前掲）。それゆえ、本発明のショウジョウバエは、GDモデルショウジョウバエのみならず、パーキンソン病をはじめとする種々の神経変性疾患の分子機構を研究するための強力な手段となりうる。
【００４５】
［参考例］ヒトGBAトランスジェニック・ハエはGlcCerを蓄積しない
野生型hGBA（hGBAWT）、並びに、R120WおよびRecNciI変異を有するhGBA（それぞれhGBAR120WおよびhGBARecNciI）をショウジョウバエに導入し、GDモデルを作製した（特願２０１２‐２０３０７０号参照）。薄層クロマトグラフィー法を用いてトランスジェニック・ハエ中のGlcCer含量を定量した。
【００４６】
その結果、いずれのトランスジェニック・ハエにおいてもGlcCerは蓄積されていなかった（図４）。むしろ、GlcCerの蓄積はhGBARecNciI L01およびhGBARecNciI L04以外の全てのトランスジェニック系統で低下していた。これらの知見は、hGBAの酵素活性がトランスジェニック・ハエの頭部において作用することを示唆している。
【産業上の利用可能性】
【００４７】
本発明のゴーシェ病モデルショウジョウバエは、ゴーシェ病やパーキンソン病等の神経変性疾患の分子機構の研究および神経変性疾患治療薬のスクリーニングに有用である。
【図１】
2015172543.tif 000002
【図２】
2015172543.tif 000003
【図３】
2015172543.tif 000004
【図４】
2015172543.tif 000005
【配列表】
2015172543000001.app