(57)【要約】      （修正有）【課題】感受性組織より上流の位置で、循環血液から血栓塊または塞栓を捕捉する方法を提供する。【解決手段】装置は、段差を設け若しくは傾斜をつけた分離要素を有し、この分離要素は、流体で満たすことのできる空隙の入口領域と出口領域間に介設される。前記空隙はカバー内に密閉でき、この空隙内を流れる流体は、血液試料中の細胞および血栓または塞栓を分離要素に付着させる。段差と前記カバーまたは本体との間の距離以下の特徴的寸法を有し、またはそれを有するよう変形できる粒子（例えば、血球）だけが、段差上に乗り若しくはこれを通過することができる。血球は段差上に乗り若しくはこれを通過するが血栓または塞栓は段差上に乗らず若しくはこれを通過せず、流体は装置を通過する寸法を選択することにより、血液試料から血栓または塞栓を捕捉することが可能になる。血栓は、観察し、除去し、または各々の分解または溶解がもたらされるよう処理できる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液試料中の血栓を捕捉（ｓｅｑｕｅｓｔｅｒｉｎｇ）する方法であって、
本体とカバーと分離要素とを有する装置の入口領域に前記血液試料を提供する工程であって、
前記本体および前記カバーは、入口領域と、出口領域と、表面とを有する空隙を画定し、
前記分離要素は、ｉ）前記空隙内に設けられ、ｉｉ）第１の段差を含む少なくとも１つの段差を有し、ｉｉｉ）前記入口領域および前記出口領域を流路内で流体連通させる狭い通路を画定するものであり、
前記狭い通路は、少なくとも第１の通路を含み、
前記第１の通路は、前記第１の段差および前記空隙の前記表面により流体的に境界を成し、前記第１の段差と前記空隙の前記表面との間の距離により画定される高さを有し、
前記第１の通路の高さは、集塊化していない血球が当該通路を通過するのに十分大きいものであり、かつ血栓の通過を阻止するのに十分小さいものであり、
前記流路の前記入口領域に最も近接した前記第１の段差の部分における前記狭い通路の幅は、前記第１の段差の高さより広いものである、
前記提供する工程と、
前記入口領域から前記狭い通路を通って前記出口領域に第１の流体を通過させることにより、前記第１の通路の入口側で血栓を捕捉する工程と
を有する方法。
【請求項２】
請求項１記載の方法において、前記第１の通路の幅は、当該通路の狭い寸法の少なくとも１，０００倍である方法。
【請求項３】
請求項１記載の方法において、前記第１の通路の幅は、当該通路の狭い寸法の少なくとも１，０００，０００倍である方法。
【請求項４】
請求項１記載の方法において、前記分離要素は、前記第１の段差の出口側に少なくとも１つの後続段差を有し、
これにより、前記狭い通路は、前記第１の通路および前記出口領域を流体連通させる少なくとも１つの後続順次通路（ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ  ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌ  ｐａｓｓａｇｅｗａｙ）を含み、各後続順次通路は、対応する後続段差および前記空隙の前記表面により境界を成し、前記対応する後続段差と前記空隙の前記表面との間の距離により画定される高さを有し、
各後続順次通路の高さは、それに先行する順次通路の高さより小さく、
前記流路の前記入口領域に最も近接した各後続段差の部分における前記狭い通路の幅は、前記後続順次通路の高さより広いものである方法。
【請求項５】
請求項１記載の方法において、前記空隙の表面および前記分離要素の表面のうち少なくとも１つは、それに伴う抗凝固剤を有するものである方法。
【請求項６】
請求項１記載の方法において、前記本体および前記カバーは単一体である方法。
【請求項７】
請求項６記載の方法において、前記本体は渦巻状形態に巻回され、前記空隙は前記本体の対向しあう面の間に画定されるものである方法。
【請求項８】
請求項１記載の方法において、さらに、
前記入口領域から前記狭い通路を通って前記出口領域に第２の流体を通過させる工程を有し、前記第２の流体は、血栓を分解する上で効果的な量の血栓溶解剤を有するものである方法。
【請求項９】
請求項１記載の方法において、前記第１の流体および前記血液試料は、同じ流体である方法。
【請求項１０】
請求項１記載の方法において、前記第１の流体は、前記入口領域に入る前に、実質的に細胞を含まないものである方法。
【請求項１１】
請求項１記載の方法において、前記第１の通路の高さは、少なくとも約１２〜１６マイクロメートルである方法。
【請求項１２】
請求項１記載の方法において、前記第１の通路の高さは、少なくとも約５０マイクロメートルである方法。
【請求項１３】
請求項１記載の方法において、前記血液試料は動物から採取された体循環血液（ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｂｌｏｏｄ）であり、前記出口領域に達する流体は同じ動物に投与されるものである方法。
【請求項１４】
請求項１３記載の方法において、前記動物はヒトである方法。
【請求項１５】
請求項１記載の方法において、前記動物の血管の上流部分に流入する血液のすべては、前記装置のうち少なくとも１つの前記狭い通路を通って通路誘導され、前記装置から流出する流体のすべては、前記血管の下流部分に投与されるものである方法。
【請求項１６】
請求項１５記載の方法において、前記血管は、大腿静脈と、頸動脈と、大脳動脈と、肺動脈と、冠動脈とから成る群から選択されるものである方法。
【請求項１７】
請求項１５記載の方法において、前記動物の血管の上流部分に流入する血液のすべては、並列に連結された複数の前記装置を有するユニットを通って通路誘導されるものである方法。
【請求項１８】
請求項１７記載の方法において、前記装置内の個々のユニットは、個別に交換可能である方法。
【請求項１９】
血液試料中の血栓の存在を評価する方法であって、
請求項１記載の方法に基づいて血栓を捕捉する工程と、
前記捕捉する工程の後、前記第１の段差の上流にある前記空隙の部分を観察し、その内部の血栓を検出する工程と
を有する方法。
【請求項２０】
請求項１９記載の方法において、前記空隙の前記部分は、微視的に観察されるものである方法。
【請求項２１】
請求項１９記載の方法において、前記空隙の前記部分における血栓の存在は、前記空隙の少なくとも１つの部分を通過する光の透過率を測定することにより観察されるものである方法。
【請求項２２】
血栓性障害のリスクがある患者を治療する方法であって、当該方法の改善が請求項１９記載の方法を使って当該患者の血液中の血栓の存在を評価する工程と、当該患者の血液中に血栓が検出された場合、当該患者に血栓溶解剤を投与する工程を有するものである方法。
【請求項２３】
患者が血栓性障害を患う可能性を低減する方法であって、
本体とカバーと分離要素とを有する装置を前記患者の循環内に装着する工程であって、
前記本体およびカバーは、入口領域と、出口領域と、表面とを有する空隙を画定し、
前記分離要素は、ｉ）前記空隙内に設けられ、ｉｉ）第１の段差を含む少なくとも１つの段差を有し、ｉｉｉ）前記入口領域および前記出口領域を流路内で流体連通させる狭い通路を画定するものであり、
前記狭い通路は、少なくとも第１の通路を含み、
前記第１の通路は、前記第１の段差および前記空隙の前記表面により流体的に境界を成し、前記第１の段差と前記空隙の前記表面との間の距離により画定される高さを有し、
前記第１の通路の高さは、集塊化していない血球が当該通路を通過するのに十分大きいものであり、かつ血栓の通過を阻止するのに十分小さいものであり、
前記流路の前記入口領域に最も近接した前記第１の段差の部分における前記狭い通路の幅は、前記第１の段差の高さより広いものであり、
前記患者からの血液は前記装置の前記入口領域に提供され、前記装置の前記出口領域に存在する流体は前記患者の血流中に投与されるものである、
前記装着する工程を有する方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
すべてとはいわずとも、大部分の動物の血液特性には、血塊または血栓を形成する能力がある。血栓とは、固体または半固体を形成する血球および細胞外物質の集塊である。一般に、血小板と液性凝固因子の特定の相互作用により形成される血栓は、その形成中、血栓のマトリックス上、またはその内部に存在する赤血球と白血球も血栓内に閉じ込める。血栓は、血小板凝集と凝固因子・血小板間の架橋結合とを助長または抑制する、よく知られた血栓調節因子および反応のカスケード（連鎖反応）により、比較的急速な形成が可能である。
【０００２】
血栓カスケード
血栓の形成（血栓症）は、血管または組織からの不適切な血流を伴う身体的損傷に対する正常で有益な反応である。外傷、例えば皮膚の切創や擦過傷の場合、血栓は、皮膚に延在する破損部をふさぐよう形成される痂皮（かさぶた）として体外から見られ、この痂皮がなければ全身の血が前記破損部から流出してしまう。血栓は、体内、例えば血管内または血管新生した組織の表面にも形成しうる。
【０００３】
血栓症は、すべて有益であるわけではなく、一部の形態は健康に有害であり、致命的となる場合もある。血管腔内に付着した血栓は血管を狭め、場合により閉塞して、血流を低下させる。また、血管内に付着した血栓は、その付着部から分離し、または血栓片を血流中に放出することがあり、分離したそれらの血栓片は、一般に塞栓と呼ばれる。塞栓は、血管内腔を十分貫流できる小さいサイズである限り、かつ、血管壁または血管内の物質（例えば、動脈プラーク）に付着しない限り、血管内を通過する。
【０００４】
塞栓が単に血管を通過するだけなら、傾向として病理性はない（塞栓が血管腔内に付着する場合を除き）。しかし、血液と同じ速さで血管を通過できない塞栓は、血管内の血流を部分的または完全に閉塞する。その閉塞状態が続くと、血栓または塞栓で閉塞した血管から栄養、酸素、またはその双方を得る組織は、栄養不良または虚血状態となってしまう。血栓溶解を誘発または加速することが知られている薬剤は存在するが、それらの薬剤を投与するまで限定的な虚血または栄養不良に耐えられる比較的短い時間（数十分から数時間、または数十時間）でさえ、感受性組織、例えば脳または心筋に深刻な病理学的障害を招き、重傷または死亡につながるおそれがある。血栓と塞栓に明確な境はなく、血栓は必ずしも自由に循環する塞栓にならず、血管に沿ってゆっくり「滑り」若しくは移動することがあり、塞栓は血管内で低速化し、または一過的に血管に付着して、徐々に若しくは急速に定位置で成長して血流とともに移動する能力を失う。
【０００５】
血栓症および／またはそれに続く塞栓形成からは、いくつかの重篤な病変が生じる。
【０００６】
脳梗塞とは、一般に、脳組織に血液を供給する血管内での血栓形成、またはそのような血管内に閉じ込められた塞栓症による前記血管の閉塞に適用される用語である。脳血管の閉塞は、その血管を閉塞する塞栓がｉｎ  ｓｉｔｕで生じる血栓に起因しうるが、その塞栓は、脳以外で生まれ、血液により前記血管へ運ばれてくるものと、脳以外で生まれ、最初は血管を閉塞するほど大きくはないが、脳血管内で成長し、および／または付着するものとがある。脳梗塞のおそれを増大させるものとしては、種々の因子（例えば、患者体内における高血圧症、アテローム性動脈硬化症または炎症疾患の発症、および習慣性喫煙）が知られている。顕著な点として、脳血管閉塞の発生から脳梗塞の発症（場合により、検出は難しいが）までの時間は、数秒、数分、または数十分と短い場合があり、発症から不可逆的な脳虚血損傷までの時間も、数時間または数十時間と短い場合がある。これらの時間が短いため、血栓溶解薬をその適用範囲の患者に十分迅速に投与して、永続的または重篤な損傷を防ぐことは困難であることが多い。
【０００７】
一過性脳虚血発作（ｔｒａｎｓｉｅｎｔ  ｉｓｃｈｅｍｉｃ  ａｔｔａｃｋｓ：ＴＩＡｓ）は、脳血管の閉塞から生じる虚血に起因した認知および／または運動機能の検出可能な低下を伴う点で、脳梗塞と同様である。ＴＩＡｓは、一般に、ＴＩＡｓが脳組織への永続的な虚血性損傷をほとんど若しくはまったく生じない点で、脳梗塞と区別される。それでも、ＴＩＡと脳梗塞の境界は明瞭ではない。少なくとも一部のＴＩＡｓは、血栓または塞栓が誘発した閉塞に起因するものと考えられている。
【０００８】
肺塞栓症（ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｅｍｂｏｌｉｓｍ：ＰＥ）は、血栓または塞栓により、肺の主要な血管の血液循環が閉塞される疾患である。ＰＥは、循環が不安定になるなど、血液の酸素化不足から（全身に無数の）影響を及ぼす。また、ＰＥは突然死の主な原因でもある。脳梗塞同様、ＰＥもｉｎ  ｓｉｔｕで成長する血栓により生じるが、（やはり脳梗塞と同様に）肺以外の組織（例えば、大腿静脈内）における塞栓形成と、その結果生じる塞栓の肺動脈への付着とから、より高い頻度で生じる。さらにこれも脳梗塞同様、ＰＥの発生から深刻な組織損傷または死亡までに経過する時間は、非常に短い場合もあり―数分または数時間―その効果的な治療を潜在的に妨げている。そのため、ＰＥの予防は、健康上の重要性において既存のＰＥ治療をはるかに上回る。
【０００９】
心原性塞栓症（ｃａｒｄｉａｃ  ｅｍｂｏｌｉｓｍ：ＣＥ）は、血栓または（それより頻繁の高い）塞栓症、例えば左心室内血栓から分離した塞栓による冠動脈の閉塞を伴う。心原性塞栓症の症状は、心筋梗塞の症状（梗塞の一部は、冠動脈内の塞栓付着により直接生じる）に類似しており、衰弱と胸痛を含む。ＰＥおよび脳梗塞と同様、ＣＥ発症から重篤または不可逆な損傷が起こるまでの遅延時間も、非常に短い場合があり、一般に、数分から数時間のタイムスケールである。
【００１０】
血栓症、塞栓形成、および血栓溶解に影響を及ぼす因子は、完全にはわかっていない。それでも、一定の患者は血栓症および塞栓を発症するリスクが高いことが知られている。例えば、血栓性または塞栓性の障害（例えば、脳梗塞、ＴＩＡ、ＣＥ、またはＰＥ）の既往患者は、将来、発現リスクがあることが知られている。同様に、一定の行動（例えば、喫煙、長期の不活発状態、例えば過度のベッド療養または航空便での長時間の着座）および特徴（例えば、高血圧症、急性または慢性の炎症性障害、または血管内皮障害の罹患）は、血栓および塞栓が発生する可能性を増大させることが知られている。そのような患者の場合、本明細書で説明する装置とその使用は、特に有益である可能性がある。
【００１１】
血栓が形成され塞栓形成が起こる身体部位は、一般に知られている。例えば、血栓症と塞栓形成は、太い動脈（例えば、大動脈）と、心房細動を発症した患者の左心房と、深部静脈血栓症を発症した患者の大腿（および他の）静脈とで起こることが知られている。そのため、血栓症および塞栓形成の生理学的部位は、多くの場合、所与の患者について確実に予測することはできないが、一般的に血栓および塞栓が形成される部位はわかっている。
【００１２】
血栓性障害は、患者に著しい虚血性損傷が起こる前に診断することが難しい。この難点は、一部、血栓と塞栓の見つかりづらい性質に起因する。血栓および塞栓は、患者、患者の観察者、または場合により検出を試みる研究者にも検出されることなく（好運にも、血栓または塞栓を含んだ試料が観察されない限り）、患者の血流内で形成、移動、および溶解する。個人の血液循環内で、血栓および／または塞栓に対応する生理学的損傷が起こる前に十分な猶予をもって血栓および／または塞栓を検出し、血栓または塞栓の形成を助長する障害または疾患を診断または処理することができれば、有益である。
【００１３】
いったん体内で形成された血栓または塞栓は、必ずしも永続しない。その代わり、体内に存在し、または体内で合成される自然の血栓溶解因子（特に、体液性の血栓溶解因子、例えばプラスミノーゲンおよび種々のプロテアーゼ）が血栓および塞栓の分解を促して各々のサイズを低下させ、血管を閉塞できないようにする。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
感受性組織への虚血性損傷が始まったあとで患者への迅速な血栓溶解薬投与に依存する代わりに（または、それに加えて）、感受性組織より上流の位置で、循環血液から血栓塊または塞栓を捕捉することができれば望ましい。血流から物理的に除去しない場合でも、感受性組織の上流で捕捉された塞栓または血栓は前記組織内の血管を閉塞せず、自然発生する（または投与された）血栓溶解因子の作用を受けて十分に分解し、各々の分解産物が前記組織内の血管を閉塞することはない。
【００１５】
本明細書に開示する対象は、以上に言及した問題に対処するものである。  
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明は、血液試料中の血栓を捕捉（ｓｅｑｕｅｓｔｅｒｉｎｇ）する方法に関する。この方法は、装置の入口領域に前記血液試料を提供する工程と、前記装置の入口領域から出口領域に流体を通過させる工程とを含み、血栓は前記入口および出口領域間で捕捉される。前記装置は、本体と、カバーと、分離要素とを含む。前記本体およびカバーは、入口領域と、出口領域と、表面とを有する空隙を画定する。前記本体およびカバーは、曲げて反り返らせ、または折り畳まれる別個の部材または単一体の部材とすることができる。前記分離要素は、ｉ）前記空隙内に設けられ、ｉｉ）第１の段差を含む少なくとも１つの段差を有し、ｉｉｉ）前記装置の前記入口領域および前記出口領域を流路内で流体連通させる狭い通路を画定する。前記狭い通路は、少なくとも第１の通路を含み、この第１の通路は、前記第１の段差および前記空隙の前記表面により境界を成す。
【００１７】
前記第１の通路の高さは、ｉ）前記第１の段差と前記空隙の前記表面との間の距離により画定され、ｉｉ）集塊化していない血球が当該通路を通過するのに十分大きいものであり、かつ血栓の通過を阻止するのに十分小さい。前記第１の通路の高さは、少なくとも約１２〜１６マイクロメートルであり、好ましくは少なくとも約５０マイクロメートルである。
【００１８】
前記流路の前記入口領域に最も近接した前記第１の段差の部分における前記狭い通路の幅は、前記第１の段差の高さより広い。そのため、前記流体が、前記装置の前記入口領域から前記狭い通路を通って前記出口領域に通過すると、血栓は、前記第１の通路の入口側で捕捉される。前記第１の通路の幅は、血栓が前記第１の通路の入口側で捕捉されるようにするため、前記第１の通路の狭い寸法の少なくとも１，０００または１，０００，０００倍であることが好ましい。
【００１９】
前記分離要素は、前記第１の段差の出口側に、１若しくはそれ以上の後続段差を有することができる。そのような装置では、前記狭い通路は、１若しくはそれ以上の対応する後続順次通路（ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ  ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌ  ｐａｓｓａｇｅｗａｙ）を含み、それらの後続順次通路は、前記第１の通路および前記出口領域を流体連通させる。各後続順次通路は、対応する後続段差および前記空隙の前記表面により流体的に境界を成し、前記対応する後続段差と前記空隙の前記表面との間の距離により画定される高さを有する。各後続順次通路の高さは、それに先行する順次通路の高さより小さいことが好ましい。前記流路の前記入口領域に最も近接した各後続段差の部分における前記狭い通路の幅は、前記後続順次通路の高さより広いことが好ましい（１，０００または１，０００，０００倍広いことが、より好ましい）。そのような装置では、血栓のサイズにほぼ対応するサイズの段差の上流側で種々のサイズの血栓を捕捉できる。
【００２０】
第２の流体は、前記入口領域から前記狭い通路を通って前記出口領域に通過させることができる。前記第２の流体には、前記装置内で捕捉された血栓の可視化または破壊に役立てることを目的とした薬剤、例えば血栓溶解剤を、血栓の分解に効果的な量だけ含めることができる。
【００２１】
本明細書で説明する装置および方法を使用すると、動物の血液、例えばヒトの血液から血栓を除去することができる。これを実現するには、血液試料（例えば、体循環血液（ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｂｌｏｏｄ））を動物から採取し、前記装置を通過させ、その場合、前記出口領域に達する流体は、前記試料中に有していた血栓がすでに前記装置内で捕捉され、または崩壊されている。結果的に得られる流体は、例えば同じ動物に投与し、保管し、または他の目的に使用することができる。また、前記装置の前記空隙を検査して、試料中に存在していた血栓が内部で捕捉されたかどうかを決定でき、この検査により試料中における血栓の存在を明らかにして、その血栓の追加分析または試験を容易にすることもできる。
【００２２】
前記装置は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで使用するほか、前記動物の血管の上流部分に入る血液の一部または全部を、前記装置の前記狭い通路を通じて（または並列に連結された複数の装置を通じて）経路誘導し、前記装置から出てきた流体を同じ血管の下流部分に戻し、または投与するようにもできる。この動作モードにおいて、前記装置は、本質的に「血栓フィルター」として作用でき、血管を通過する血栓を捕捉する。前記血管は、血栓が健康に有害な影響を及ぼすことが知られており、またはそのように考えられるもの、例えば大腿静脈、頸動脈、大脳動脈、肺動脈、および冠動脈である可能性がある。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
以上の要約および以下の本発明の好適な実施形態に関する詳細な説明は、添付の図面を参照して読むことで、より適切に理解されるであろう。本発明を例示するため、現時点で好適な実施形態が図面で示されている。ただし、本発明は、示されている厳密な構成および手段に限定されるものではない。
【図１】図１は、本明細書で説明する装置の一部の断面積であり、分離要素の段状構造を示している。数字は、前記分離要素（１６）と、カバー（１２）または本体（１０）との間の相対距離を示している。
【図２】図２は、本明細書で説明する組み立て済み装置の一例の断面積であり、前記分離要素（１６）は前記本体（１０）に当接し、前記出口領域（ＯＲ）と反対側の前記入口領域（ＩＲ）に対向する面上に種々の高さの段差を有する。狭い通路（１８）は、最も高い段差と前記カバー（１２）との間に存在する。入口ポート（２０）および出口ポート（２２）が示されている。
【図３Ａ】図３は図３Ａ、３Ｂ、および３Ｃから成り、これらはそれぞれ図２に例示したような分離要素（１６）の上面図、側面図、および直交図（ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ  ｖｉｅｗ）であるが、単に２つの段差、第１の段差（１０）および第２の段差（１１）から成る。バルク流体の流れ（ｂｕｌｋ  ｆｌｕｉｄ  ｆｌｏｗ：ＢＦＦ、すなわち前記入口領域から前記分離要素へ向かう）方向を図３Ｃに示す。前記第１の段差の上流面は、この実施形態において実質的に平面状であるが、前記第２の段差の上流面は波状の構成を有し、その結果、前記第１および第２の段差は幅（Ｗ）の均一な単一の通路内に設置できるが、前記第２の段差の上流面および前縁は、それぞれ前記第１の段差の上流面の長さより実質的に長くなっている。
【図３Ｂ】図３は図３Ａ、３Ｂ、および３Ｃから成り、これらはそれぞれ図２に例示したような分離要素（１６）の上面図、側面図、および直交図（ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ  ｖｉｅｗ）であるが、単に２つの段差、第１の段差（１０）および第２の段差（１１）から成る。バルク流体の流れ（ｂｕｌｋ  ｆｌｕｉｄ  ｆｌｏｗ：ＢＦＦ、すなわち前記入口領域から前記分離要素へ向かう）方向を図３Ｃに示す。前記第１の段差の上流面は、この実施形態において実質的に平面状であるが、前記第２の段差の上流面は波状の構成を有し、その結果、前記第１および第２の段差は幅（Ｗ）の均一な単一の通路内に設置できるが、前記第２の段差の上流面および前縁は、それぞれ前記第１の段差の上流面の長さより実質的に長くなっている。
【図３Ｃ】図３は図３Ａ、３Ｂ、および３Ｃから成り、これらはそれぞれ図２に例示したような分離要素（１６）の上面図、側面図、および直交図（ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ  ｖｉｅｗ）であるが、単に２つの段差、第１の段差（１０）および第２の段差（１１）から成る。バルク流体の流れ（ｂｕｌｋ  ｆｌｕｉｄ  ｆｌｏｗ：ＢＦＦ、すなわち前記入口領域から前記分離要素へ向かう）方向を図３Ｃに示す。前記第１の段差の上流面は、この実施形態において実質的に平面状であるが、前記第２の段差の上流面は波状の構成を有し、その結果、前記第１および第２の段差は幅（Ｗ）の均一な単一の通路内に設置できるが、前記第２の段差の上流面および前縁は、それぞれ前記第１の段差の上流面の長さより実質的に長くなっている。
【図４Ａ】図４は図４Ａ、４Ｂ、および４Ｃから成り、これらはそれぞれ本明細書で説明する血栓捕捉装置を例示しており、この血栓捕捉装置は、入口マニホールド（ＩＭ）および出口マニホールド（ＯＭ）と流体連通している。バルク流体の流れ方向は、ＩＭとＯＭ間に延在する破線で示されている。図４Ａに例示した装置は、単一の本体（１０）に対して固定されたカバー（１２）から成り、前記単一の本体（１０）は、ＩＭとＯＭ間で前記本体（１０）とカバー（１２）間に形成された空隙内に介設されて、狭い通路を形成する一体型の分離要素（１６）を有する。
【図４Ｂ】図４Ｂに例示した装置は、図４Ａに示した構成要素を含み、本体（１０）の一部に対して固定された第２の本体（１０'）も含み、これにより第２の狭い通路を有した第２の並列流路を形成している。ＩＭとＯＭ間を通過する流体は、どちらの狭い通路を貫流することもできる。
【図４Ｃ】図４Ｃに例示した装置は、図４Ｂに示した構成要素を含み、本体（１０'）の一部に対して固定された第３の本体（１０''）と、本体（１０''）の一部に対して固定された第４の本体（１０'''）とも含み、これにより第３および第４の狭い通路を有した第３および第４の並列流路を形成している。ＩＭとＯＭ間を通過する流体は、４つの狭い通路のいずれを貫流することもできる。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本発明は、血液試料に存在する血栓および塞栓を捕捉する装置の使用に関する。特に、架橋結合した血小板、細胞外の体液凝固因子、他の細胞、およびこれらの組み合わせで形成された血栓および塞栓の捕捉は、当該装置内の狭い通路の「上流」（すなわち、入口）側で血栓および塞栓を捕捉するため、血液試料に前記通路を通過させるとともに、血液の他成分の一部または全部に前記狭い通路を通過させることで実現可能である。
【００２５】
塞栓は、血栓の全部または一部がその付着点から分離し、循環中へと自由に浮遊する際に形成される。血栓は、動物の循環系で形成された場合、傾向として特定の位置で固定された状態を保つが、分離し、血流方向の「下流」へ移動して血管内で移動し、血管壁に再度付着する可能性がある。本開示では、以降、文脈により明らかに別段の要求がなされる場合を除き、塞栓と血栓との動きを区別せず、用語「血栓」とその派生語を使って血栓および塞栓の双方を包含する。
【００２６】
本明細書で説明する装置を使用すると、対象、例えばヒトまたは他の動物から採取された血液を含む試料中に存在する血栓を捕捉することができる。その捕捉は、血栓を含有した血液が当該装置内の段状分離要素を通過する際、血栓が前記段状分離要素を越えて移動できない結果起こる。血栓は、前記分離要素の流通路の最も狭い部分を十分通過できる小さい破片に分かれるまで、かつ、それが起こらない限り、前記分離要素の上流側に保持される。前記分離要素の上流側では複数の血栓が捕捉でき、上限は前記分離要素の上流縁部（すなわち前縁）の幅により決まる。前記分離要素の前記前縁に隣接した部分で前記流通路が血栓により完全に閉塞されない限り、流体は前記装置を流通し続けることができ、前記分離要素の前記前縁における前記流通路の未閉塞部分で付加的な血栓を捕捉することができる。結果的に、前記流通路の幅（すなわち、前記流通路の高さに垂直でバルク流体の流れ方向に垂直な寸法）を増加させると、傾向として、前記装置が血栓を捕捉する容量も増加する。波状の若しくは蛇行した構成を有する分離要素、例えば同時係属米国特許出願第１４／077,811号に説明されているものは、前記狭い通路の幅より著しく長い（例えば、１０２〜１０６倍大きい）前縁を有することができる。そのような分離要素は、より入り組んでいない前縁を有する分離要素よりも、目詰まりすることなく、前記狭い通路を通過できない血栓を保持する容量を呈する。同様に、らせん状立体構造の（任意選択的に、前記らせん状の縁部に沿って波状または正弦波形状を有する）分離要素を構成すると、傾向として前記装置の容量が増加する。
【００２７】
本開示に示す装置の図およびいくらかの説明と、本明細書で参照する文書とにおいて、当該装置は、平面状装置、例えばスライドガラスおよびカバースリップ、例えば前記分離要素を含む空隙を内部に有したスライドを伴う顕微鏡と併用される可能性のあるものに関して説明しており、前記狭い通路は、前記分離要素と１若しくは前記スライドおよびスリップのうち１若しくはそれ以上との間に形成される。そのような装置は、既知の技術を使って容易に製作でき、比較的小型でないという欠点を有する。
【００２８】
前記装置の小型化は、湾曲させ若しくは巻いた材料を使って当該装置を構築することにより改善でき、同時に、本明細書で説明する関連性の高い寸法および比率も維持できる。例として、比較的小型でない装置は、３インチ×１インチの標準的顕微鏡スライド上に装置を置くことにより作製でき、前記装置中では、非常に入り組んだ分離要素が前記スライドの入口と出口領域とを分離する。前記スライドとそれに対応するカバースリップが非常に薄い場合であっても、この非小型装置は、３×１インチの長方形領域を占める。ただし、前記スライドおよびスリップ（そのうちの１つに、前記分離要素および流通路がエッチングされている）を柔軟な材料で作製すると、組み立て済みの装置をその長（３インチ）軸に沿って巻くことにより、高さ約１インチで、直径が前記スライドおよびスリップの厚さにより決まる円筒形を形成して、比較的小型な装置を得ることができる。その小型装置の厚さは、前記スリップを省くことにより、かつ、前記分離要素および流通路が前記カバースリップの代わりにエッチングされて前記狭い通路の境界を形成する面と反対側のスリップ面を使用することにより、さらに薄くできる（前記分離要素が反対側の境界を形成する）。そのような方法において、巻いた、畳み込んだ、しわが寄るよう丸めた、または他の非平面状構成を有する装置は、前記分離要素の血栓隔離能力と、前記狭い通路の流量とが保たれる限り、本明細書の説明どおりに作用可能である。同様に、略平面状の構成を有する装置は、積み重ねることができる（すなわち、１つの装置の平面が、第２の当該装置の前記分離要素および流通路を有する表面のカバーとして作用して、例えば図４に示すように、積み重ねた個々の装置の能力合計と等しい流通能力を有する要素の障害部を提供する。）。組み立て中に折り畳みまたは曲げを要する装置は、必要とされる柔軟性を有する材料を使って作製しなければならないが、硬質材料を使っても、折り畳まず、屈曲させず、または曲げない装置構成要素を作製することはできる。
【００２９】
血栓の崩壊は、単に、捕捉された血栓を内部に有する分離装置に血液を通過させることにより生じる。血栓の崩壊が起こる機序は完全に理解されておらず、血栓が血流中で自然に崩壊する機序に対応する可能性が高い。血栓の分解は、前記分離装置の内腔に抗凝固剤（例えば、ヘパリンまたはワルファリン）、血栓溶解剤、または有効な凝固因子を含まない流体（例えば、血液または生理食塩水）を提供すると加速される。また、崩壊は、前記装置内の流体の流れを調節する（例えば、脈動態様で変化するバルク流体の流量を適用する）ことによっても早めることができる。捕捉された後、前記分離装置により崩壊しない血栓は、傾向としてその分離要素の上流縁部またはその付近で保持される。血栓が当該装置による捕捉後、崩壊しない場合も、当該装置内で血栓が保持され、通常であれば血栓が誘発するであろう虚血状態に当該装置の下流にある組織が陥らないよう前記組織を有利に保護する。
【００３０】
前記分離装置の流体処理能力が十分大きい場合、当該装置は、血流内で直列に維持される。そのような実施形態において、前記装置の血栓捕捉能力は、その装置内に血栓が蓄積することによって、挿入部位で、通常の血液体積流量未満に処理能力が低下しないよう選択すべきである。血管を流れる血液は、その全部または一部のみをシャントで直列装置へ流すことができる。
【００３１】
患者血流中に血栓捕捉装置を直列挿入すると、血栓の形成が妥当に予測される状況において、血栓感受性組織を保護する上で有用な可能性がある。一定の患者は、循環器系内で血栓を発症するリスクが他の患者より大きいことが知られており、本明細書で説明する装置は、そのような患者の体内に、血栓の形成が確認される前または後、装着または留置することができる。血栓による血管閉塞に起因する合併症は、血管内の血栓生成部位と感受性部位間に血栓捕捉装置を装着することにより、緩和または予防できる。その例：
脳梗塞およびＴＩＡｓの多くは、脈管系内の血栓移動（および特に既存血栓からの塞栓分離）により、内腔が小さすぎて通過できない脳血管へ血栓が移動することに起因すると考えられている。そのような脳血管の閉塞が生じた時点で、その血管から血液の供給を受ける脳組織に虚血状態が発生し、一時的（ＴＩＡｓの場合）または永続的（脳梗塞の場合）な病理学的神経症状に至るおそれがある。脳血管の閉塞が起こる前に血栓を捕捉すると、これらの病状を予防することができる。捕捉された血栓が分解または崩壊するに伴い、それらの構成要素部分は、本明細書で説明する装置の前記狭い通路の高さを脳血管の内径に相関させて選択した場合（または前記狭い通路の高さを前記内径より小さくなるよう選択した場合）、脳血管を通過できる。脳に供給される多量の血液は頸動脈を通過するため、本明細書で説明したように１若しくはそれ以上の頚動脈と直列または並列に装置を留置すると、通常であれば脳梗塞またはＴＩＡｓを起こすおそれのある血栓を捕捉できる。１若しくはそれ以上の装置を頸動脈と直列に装着する場合、前記装置の流体処理能力は、その装置が予測可能な数の血栓を捕捉した場合も、通常の脳機能に必要な血流量に容易に対応できるよう選択すべきである。その代替態様または追加態様として、前記装置が目詰まりした場合、血流にその装置を回避させる開閉可能なシャントを装着することができる。さらに別の代替または追加態様として、本明細書で説明する分離装置は、前記狭い通路の１つで捕捉された血栓がその狭い通路の大部分または全部を十分閉塞する血栓症を助長してしまった場合も貫流が継続できるよう、並列に連結された複数の不連続な狭い通路を有することができる（または複数の前記装置を並列に連結してもよい）。これは、留置装置、あるいは数分、数時間、または数日の期間だけ血管と連結して維持管理される装置で、特に重要である。
【００３２】
ＰＥｓの多くは、脈管系内の血栓移動（および特に既存血栓からの塞栓分離）により、内腔が小さすぎて通過できない肺血管（主に肺動脈とその各支流、ならびに肺内の細動脈）へ血栓が移動することに起因すると考えられている。そのような肺血管の閉塞が生じた時点で、その血管から血液の供給を受ける肺組織内で通常の血液ガス交換が阻害され若しくは妨げられされ、わずらわしく若しくは不快な（例えば、息切れ）、または重篤な（例えば、失神または突然死）病理学的神経症状に至るおそれがある。肺血管を閉塞するおそれのある血栓は身体の多くの部位で生じうるが、その形成と、脚の静脈からの分離とは、特に深部静脈血栓症の発症がわかっている患者において、一般的な肺塞栓源であることが知られている。本明細書で説明する装置を、脚および体幹の１若しくはそれ以上の静脈（例えば、大腿静脈）と直列または並列に留置すると、通常であればＰＥを起こすおそれのある血栓を捕捉することができる。１若しくはそれ以上の装置を大腿動脈または他の動脈と直列に装着する場合、前記装置の流体処理能力は、その装置が予測可能な数の血栓を捕捉した場合も、通常の静脈血圧における静脈血流量に容易に対応できるよう選択すべきである。その代替態様または追加態様として、前記装置が血栓で目詰まりした場合、血流にその装置を回避させる開閉可能なシャントを装着することができる。
【００３３】
ＣＥｓの多くは、脈管系内の血栓移動（および特に既存血栓からの塞栓分離）により、内腔が小さすぎて通過できない心血管へ血栓が移動することに起因すると考えられている。そのような心血管の閉塞が生じた時点で、心筋および神経組織への酸素供給が阻害され若しくは妨げられされ、わずらわしく若しくは不快な（例えば、胸痛、息切れ、または疲労）、または重篤な（例えば、失神、不整脈、または心停止）病理学的症状に至るおそれがある。冠動脈を閉塞するおそれのある血栓は身体の多くの部位で生じうるが、左心室における血栓形成と血栓性プラークからの分離とは、特に心臓病変、例えば心房細動の発症がわかっている患者において、一般的な心原性塞栓症源であることが知られている。本明細書で説明する装置を、１若しくはそれ以上の冠動脈と直列または並列に留置すると、通常であればＣＥを起こすおそれのある血栓を捕捉することができる。１若しくはそれ以上の装置を冠動脈と直列に装着する場合、前記装置の流体処理能力は、その装置が予測可能な数の血栓を捕捉した場合も、予測可能な高心拍数での心血流量に容易に対応できるよう選択しなければならない。その代替態様または追加態様として、前記装置が血栓で目詰まりした場合、血流にその装置を回避させる開閉可能なシャントを装着することができる。
【００３４】
装置
用語「デバイス（ｄｅｖｉｃｅ）」および「装置（ａｐｐａｒａｔｕｓ）」は、本開示において同義的に使用する。
【００３５】
前記装置は、内部に空隙を有した本体を有する。前記空隙は、入口領域および出口領域を有し、流体で満たすことができる。分離要素は、前記空隙の前記入口および出口領域を分離し、特徴的な高さを伴った少なくとも１つの段差を有する。高さの異なる複数の段差を含める（すなわち、流体が流れる経路に沿って狭い通路の高さを減少させることに対応する）と、当該装置の血栓捕捉能力を高めることができ、これはおそらくサイズの異なる血栓を当該装置の異なる部分で隔離できるためである。カバーは、前記空隙全体にわたり設置されて当該空隙の少なくとも一部を覆って、前記分離要素の最も高い部分を画定する。このカバーは、それに対応する前記本体の部分に永続的または非永続的に当接する（すなわち、それに接着または融合され、またはそれに対して着脱可能に付勢される）。当該装置内の流体流れは、前記入口領域から、前記分離要素を越え、前記出口領域へと通過する。前記分離要素の前記段差とそれに対向する本体またはカバーの部分とにより画定される前記狭い通路の寸法より大きいサイズの粒子、例えば血栓は、前記狭い通路を通過できず、少なくとも小さい破片へと崩壊して前記狭い通路を通過できるようになるまで、かつ、そうならない限り、当該装置の内腔内で隔離または捕捉される。
【００３６】
非常に小さい装置、例えばマイクロ電子装置を製造する方法の開発により、ナノメートルスケール寸法の特徴を有した装置を作製することが精確かつ良好な再現性で可能になった。マイクロメートル〜数十または数百マイクロメートル範囲（すなわち、個々のヒト細胞および細胞集塊のサイズの全長にわたるサイズ範囲）の最小限寸法を伴った構造的要素を有する装置は、例えば米国特許第７，９９３，９０８号、米国特許公開第２０１１／００６５１８１号、および米国特許出願第１４／０７７，８１１号に説明されている。これらの方法等を使用すると、本明細書で説明する装置を作製できる。
【００３７】
一実施形態において、前記カバーは、実質的に前記空隙の領域全体にわたり設けられて、閉じた流体システムをもたらす。このカバー、前記本体、またはその双方は、入口および出口ポートを有することができる。それらのポートは、前記カバーまたは本体を貫通する単純な穴であってよく、またはそれに伴って、ポート付き流体取り扱い装置の連結を容易にする固定具（刻み目、リング、ハブ、または他のフィッティング）を有することができる。これらのポートは、流体の追加および回収を容易にし、前記装置への血液通過または血栓を除去した血液の通過を容易にする。
【００３８】
前記本体の形状、材料、および構造は最重要事項ではないが、当該本体の前記空隙は、その全体をカバーで覆って、当該本体の前記空隙の縁部周囲で液密シールを形成できるよう、成形または機械加工すべきである。前記空隙は前記本体の平坦な部分に形成し、前記空隙を完全に覆う十分なサイズおよび形状を有する平坦なカバーを使用することが好ましい。
【００３９】
同様に、前記カバーの形状、材料、および構造は最重要事項ではないが、当該カバーは、前記空隙の縁部において前記本体とともに液密シールを形成すべきであり、また前記空隙の縁部の１つにおいて、前記分離要素の最も高い部分に沿って、前記空隙を横切り、前記本体の前記空隙の別の縁部まで、前記本体から延長することにより、（前記分離要素とともに）狭い通路を画定すべきであり、液体は、前記空隙の前記入口領域から前記出口領域まで通過するため前記狭い通路を流通しなければならない。
【００４０】
前記分離要素は、少なくとも２つの段差を伴う「段状」（ｓｔｅｐｐｅｄ）構造である。前記段差の１つは最も高さがある。前記分離要素は、前記本体または前記カバーのどちらかに装着（またはこれと一体化）でき、あるいは前記本体および前記カバーに挟持された別個の材料片とすることができる。当該装置が組み立てられた状態で、前記分離要素の前記段差は、前記分離要素と、前記本体（前記本体内の前記空隙の表面）または前記カバーのどちらかとの間に、選択された距離を画定する。前記空隙の前記入口領域から当該空隙の前記出口領域へ向かう方向に評価した場合、前記段差と、前記本体またはカバーとの間の距離は減少する。そのため、粒子、例えば組み立てられた前記装置を流通する流体（例えば、血液）中に浮遊する血栓の動きは、血栓の寸法の特徴を伴う段差において阻害または停止される。前記段差と、前記カバーまたは本体との間の距離は、その位置における前記装置の前記狭い通路の高さを画定する。段差の面は、その段差の幅全体にわたり前記狭い通路の高さが実質的に一定になるよう、前記本体またはカバーの面と実質的に平行にできる。あるいは、段差の面は、その段差の幅全体にわたり前記狭い通路の高さが変化するよう、前記本体またはカバーの面と非平行にできる。そのような段差は、その幅にわたって異なるサイズの粒子を通過させることができ、その段差で捕捉された血栓により目詰まりしにくい。
【００４１】
実質的に、前記段差と前記カバーまたは本体間の距離と同程度の特徴的寸法を有するいかなる粒子も、前記装置を使って捕捉することができる。血栓捕捉用途では、前記装置が、血液の非凝固成分（すなわち、全種の個々の血球）を実質的にすべて通過させる狭い通路を有しながら、多細胞粒子、例えば血栓を捕捉する十分な低さを有することが望ましい。選択される厳密な高さは、前記装置の下流にある血管の内径に応じて異なる（それらの血管の閉塞を回避することが望ましいため）。一般的に言って、前記高さは、血管を閉塞する上で、またはそのような血管から血液の供給を受ける組織に虚血性損傷を誘発する上で十分なサイズを有する血栓を捕捉するよう十分小さくすべきである。その例として、狭い通路の高さが１０〜２０マイクロメートル範囲の装置は、前記装置において通常の血球を通過させながら血栓の通過を阻む上で効果的であると考えられる。狭い通路の高さが１６〜２０マイクロメートルであっても適切である。流路全体にわたり狭い通路の高さが約５０または１００マイクロメートルより大きい装置は、毛細血管床の閉塞に起因する虚血性損傷を誘発する可能性が高い血栓を通過させてしまう点で望ましくない。一般的に言って、複数の段差がある装置においても、前記最も幅狭の狭い通路の高さは、通常の血液成分を十分通過させるものにすべきであり、既知の若しくは予測されるサイズの血栓を当該装置内で捕捉するための段差が含まれるべきである。種々の高さの狭い通路を画定する複数の段差を備えた装置は、例えば当該装置内の異なる領域で様々なサイズの血栓を捕捉するために使用できる（例えば、上流領域でミリメートルオーダーの寸法を有する血栓を捕捉するとともに、下流領域で数十マイクロメートルオーダーの寸法を有する血栓を捕捉する）。
【００４２】
前記分離要素の段差は、不連続な段差とすることができる。あるいは、前記段差のうち１若しくはそれ以上に傾斜をつけて、それらの段差が、前記入口領域から前記出口領域へ向かう方向に延在する平坦な部分により互いに分離されるようにもできる。前記平坦な部分の長さ（流体の流れる方向の）は、重要ではない。異なる段差の前記平坦な部分は、同じ長さを有しても、異なる長さを有してもよい。
【００４３】
前記本体、前記カバー、またはその双方は、その内部または表面上の、選択された段差または段差領域に対応する位置に構成された（例えば、エッチング、成膜、または他の知られた技術により）光学、電気、または光学電気装置を有することができる。そのような装置を使用すると、血栓を検出し（例えば、前記段差の表面と前記カバーまたは本体間で流体を透過する光または他の輻射の減少を検出する検出器を使って）、または前記段差で捕捉された血栓を操作することができる。
【００４４】
選択された段差（または複数の選択された段差）への流体提供は、前記装置内に流路を形成し、その段差に流体を追加して行うことができる。そのような方法では、抗血栓、抗凝固、染料、または血栓と相互作用できる別の薬剤を含む流体を、前記装置により捕捉された血栓と接触させることができる。
【００４５】
前記装置に流体が満たされると、その流体は、前記入口および出口領域を含む前記空隙を満たし、前記分離要素を完全に覆う。必要に応じ、前記装置を若干操作し（例えば、傾斜または反転させ）、または前記流体に加圧すると、前記空隙のすべての部分が確実に前記流体で満たされるようにできる。必要に応じ、気泡が存在する場合は、前記入口、前記出口、または入口および出口に加圧流体を注入して前記気泡を全般的に除去でき、加圧流体は、任意選択的に脈動的な態様で注入できる。また、そのような気泡は、前記空隙に流体（例えば、脱気流体）を提供し、その流体に気体を溶解させて、または気体に対し溶解限度の高い流体（例えば、大気圧の気泡に対してはエタノールと水の混合物）を通過させて、除去することができる。特に、前記装置を動物の体内に留置する場合は、留置前に当該装置から気泡を除去すべきである。
【００４６】
前記本体、カバー、および分離要素は、実質的に、本明細書で説明する装置の使用中に形状を保つ任意の材料で構築できる。ただし、少なくとも、構成要素を互いに対して積み重ね、または対向させて組み立てる装置の場合は、硬質の材料が好ましい。適切な材料の例としては、種々のガラス、固体高分子、および結晶鉱物などがある。シリコンは、十分開発された技術があり、精確で効率的な製作が可能なことから、好適な基板材料であるが、種々のガラス、ならびに鋳造、成形、または機械加工されたポリテトラフルオロエチレンなどのポリマーを含む他の材料を使うこともできる。前記入口および出口ポート、前記分離要素、および前記本体内の前記空隙を画定する表面は、当業者に知られた種々のマイクロマシニング方法のうち、いずれによってもシリコン基板から安価に大量製作できる。利用可能なマイクロマシニング方法としては、成膜工程、例えばスピンコーティングおよび化学気相成長法、レーザー加工またはフォトリソグラフィ技術、例えばＵＶまたはＸ線工程、精密機械加工法、または湿式化学工程またはプラズマ工程のどちらかで行えるエッチング法などがある（例えば、Ｍａｎｚら、１９９１年、Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１０：１４４−１４９を参照）。当該装置の表面は、通常であれば血液が前記表面と接触した時点で誘発される血栓症を抑制または予防するため、抗凝固剤（例えば、ヘパリン）で処理できる。
【００４７】
段差は、試料中の細胞を分離するよう、種々の幅および高さのものをマイクロスケールの寸法で製作できる。製作された段差を含むシリコン基板は、薄いガラスまたはプラスチックのカバーで覆って封止する（例えば、陽極接合して）ことができる。その他の透明または不透明なカバー材料を使用してもよい。あるいは、２枚のガラスカバーで２枚のシリコン基板を挟持し、または１枚のシリコン基板を挟持することもできる。前記本体と前記カバーの少なくとも一方が透明であることが好ましい。透明な材料を使うと、当該装置の内容物が動的に見やすくなり、前記装置内の流体の流れを目視または機械のどちらかでプロービングすることができる。他の製作アプローチも使用できる。
【００４８】
前記装置の表面は、前記カバー、本体、または障害物用に選択された材料との細胞の凝集を抑制または促進する既知の各種材料のいずれでも化学的に処理またはコーティングできる。その例として、細胞表面の抗原と特異的に結合する抗体を、各種タンパク質アンカリング化学反応のいずれかを使って前記空隙の表面、前記段差の表面、または前記カバーの表面に付着させ、前記抗原を呈する細胞が前記表面を通過しないようにできる（例えば、サイズが同様でもタイプが異なる細胞を分別するため）。また、前記装置の表面は、知られている任意の各種試剤（例えば、酸素プラズマ）で化学的に処理またはコーティングして、前記表面の親水性を高めることもできる。この処理により、前記装置に流体媒体を導入する際の充填の速度と完全性を改善でき、また個々の血球が前記装置に付着し若しくはその表面上で凝固する可能性を低減できる。
【００４９】
本明細書で説明する装置の利点の１つは、前記装置の使用目的に応じ、多種多様なサイズおよび幾何学的構成で製造できることである。また、材料の一体成形体、例えば単一体のシリコンまたはプラスチックブロック、あるいは顕微鏡スライドで複数の装置を製造することもできる。さらに、スライド上で複数の装置を直列、並列、またはその双方で連結することもできる。その例として、比較的高さ寸法の小さい（例えば、２マイクロメートル）狭い通路を有するいくつかの装置を単一の材料ブロック上に構築し、試料（例えば、血液）をそれら各装置の前記入口領域に送ることができる。前記装置に流体を送ると、血球が当該装置を通過するに伴い、血栓および他の大きな粒子を前記試料から除去することができる。
【００５０】
血栓が除去されたら前記装置内の流れを反転させ、保持された血栓を必要に応じて回収できる。
【００５１】
前記カバー、本体、および分離要素（まだ前記カバーと本体の１つに連結されていない場合）は、利用者が組み立てる（例えば、前記本体の前記空隙に流体媒体を加えた後で）キットの形態で提供できる。そのキットには、前記装置、またはそれと併用する試剤の使用説明書を含むことができる。前記装置は、流体を充填済みの状態で供給できる。
【００５２】
前記装置は、前記分離要素に関連して定位置に伴う指標を有することができる。前記指標は、選択された特徴（例えば、サイズ、または前記装置の表面に固定された抗体に結合する能力）を有する血栓が前記装置内に保持されているかどうかの評価に使用できる。前記指標は、当該指標および前記装置内の血栓を利用者が同時に観察できるよう、前記本体または前記カバーの、好ましくは透明な構成要素の表面に、印刷、塗布、スタンピング、エングレービング、エッチングできる。この指標は、付随する流路の形状、直径、または平滑度を変化させないことが好ましい。例えば、この指標は、流路が存在する透明な材料の表面上、またはその反対面に設けることができる。あるいは、この指標は、前記流路に当接する別の面を有した透明な材料面（例えば、前記カバーの外面）に設けることができる。
【００５３】
前記装置は、以下の方法で血液試料から血栓を除去するため使用される。前記装置の前記入口領域に、血液試料が提供される。その後、当該装置内の流体流が開始または継続される。前記分離要素における前記狭い通路の高さは、集塊化していない血球にその中を通過させる上で十分大きく、集塊化した、すなわち凝集した血球、例えば血栓の通過を阻む上で十分小さい。集塊化した血球は、前記狭い通路を通過できないため（少なくとも集塊のサイズが前記狭い通路の高さを超える場合）、前記分離要素またはその入口側で捕捉される。通過を阻まれた集塊を含まない血液は、前記装置の前記出口領域に到達して、そこから流出し、そこから吸引され、または後方からの流体流によりそこから排出される。
【００５４】
前記分離要素の部分であって、前記流路の前記入口領域に最も近い部分における前記狭い通路の幅は、単一血栓の捕捉により前記狭い通路内の流体流が滞らないよう、前記狭い通路の高さより広くすべきである。ただし、前記装置内に多数の狭い通路が並列に構成される場合は、狭い通路の１つまたはいくつかが閉塞しても他の狭い通路の継続使用は妨げられないため、それぞれの狭い通路の幅はさほど重要ではなくなる。前記狭い通路の幅は、少なくとも第１の通路の高さ（すなわち、狭いほうの寸法）の１，０００倍、１０，０００倍、１００，０００倍、または１，０００，０００倍であることが好ましい。
【００５５】
本明細書で説明する装置を使用すると、多数の目的で、動物から採取された血液（例えば、ヒトの血液試料）から血栓を除去することができる。血栓は、前記血液を同じ動物または異なる動物（同じ種であることが好ましい。例えば、一般に医療処置で使用される保管されたヒトの血液ユニット）に戻す前に除去できる。あるいは、通過する血液から実質的にすべての血栓を除去しながら、捕捉された血栓が崩壊した場合はその断片を血中に戻すことを目的として、前記装置を動物の血管内に直列に装着し、その血管内を流れる全血流がその装置を通過するようにできる。さらに別の代替形態では、前記装置は、血管を通過する血液の一部だけに当該装置を通過させて（そこから血栓を除去して）から、その血液部分を前記血管に戻すよう、動物の血管と並列に装着される。
【００５６】
前記装置は、診断目的でも使用できる。すなわち、前記装置を使用すると、血栓を除去した血液が元の動物に戻されるかどうかにかかわらず、血栓の存在を識別する目的で、血栓を血液試料から分離することができる。そのような診断方法は、本明細書の説明と実質的に同じ方法で行われる。血液試料に前記装置を通過させ、その装置の前記狭い通路を通過できない血栓が前記装置内で捕捉される。前記装置は、その後、検査され、捕捉された血栓の存在が確認される。そのような検査は、前記装置を分解して、その透明な部分を目視することにより、付属の検出器を操作する（本明細書で説明したとおり）ことにより、または捕捉された血栓の存在を検出できる他の任意の態様で行われる。
【００５７】
当業者であれば、上述した諸実施形態の要旨を変更しない範囲でこれらの実施形態を変更できることが理解されるであろう。従って、本発明は開示した特定の実施形態に限定されず、添付の請求項により定義される本発明の要旨に含まれる変更形態を包含するものと理解すべきである。
【図１】
2015200627.tif 000002
【図２】
2015200627.tif 000003
【図３Ａ】
2015200627.tif 000004
【図３Ｂ】
2015200627.tif 000005
【図３Ｃ】
2015200627.tif 000006
【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
2015200627.tif 000008
【図４Ｃ】
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【外国語明細書】
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