(57)【要約】【課題】湿潤療法に適して、創傷部の治癒を短期化することが可能とされ、ひいては、創傷部の瘢痕を目立たなく治癒することが可能な創傷被覆材を提供すること。【解決手段】創傷被覆材１であって、ポリグルタミン酸架橋体からなるナノファイバーを含む繊維集合体を備えていて、前記繊維集合体は、創傷部から滲出する滲出液を保持してゲル状体を形成して血漿成分を吸収するとともに血球成分の流通を抑制するように構成されていることを特徴とする。【選択図】図１
2015139603.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリグルタミン酸架橋体からなるナノファイバーを含む繊維集合体を備え、
前記繊維集合体は、創傷部から滲出する滲出液を保持してゲル状体を形成するように構成されていることを特徴とする創傷被覆材。
【請求項２】
請求項１記載の創傷被覆材であって、
前記ポリグルタミン酸架橋体は、
オキサゾリン基を有する高分子架橋剤により架橋されていることを特徴とする創傷被覆材。
【請求項３】
請求項１又は２記載の創傷被覆材であって、
前記ポリグルタミン酸架橋体は、
ポリグルタミン酸を６０重量％以上９６重量％以下含有していることを特徴とする創傷被覆材。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の創傷被覆材であって、
前記ナノファイバーは、繊維径が５０ナノメートル以上１８００ナノメートル以下であることを特徴とする創傷被覆材。
【請求項５】
請求項１から４のいずれか１項に記載の創傷被覆材であって、
前記ナノファイバーは、静電紡糸法により紡糸されたことを特徴とする創傷被覆材。
【請求項６】
創傷被覆材であって、
ポリグルタミン酸がオキサゾリン基を有する高分子架橋剤により架橋されたポリグルタミン酸架橋体のナノファイバーが堆積して形成されたシートを備えることを特徴とする創傷被覆材。
【請求項７】
ポリグルタミン酸架橋体からなるナノファイバーを含む繊維集合体を血液と接触させてゲル状体を形成し、前記ゲル状体内に前記血液の血漿成分のみを流通させて前記血液中の血球成分と血漿成分とを分離することを特徴とする血液中の血球成分と血漿成分との分離方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、本発明は、創傷被覆材及び血液中の血球成分と血漿成分との分離方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、創傷被覆材としては、綿などのガーゼが使用されてきたが、吸収した血液が凝固して止血するため、瘡蓋となり治癒が遅く、ガーゼをはがすときに痛みを伴ったり、傷跡が残ったりするという問題があった。
【０００３】
近年、湿潤療法が提案され、体内からの滲出液を保持することにより皮膚の再生が早まり、外部からの細菌や水の浸入を防ぐ創傷被覆材が好適であるとされている。このような、創傷被覆材に関しては、短期間で創傷部を治癒可能であることが好適であり、ひいては、創傷部の瘢痕が短期間で目立たないように治癒することが好ましい。
【０００４】
創傷被覆材としては、例えば、創傷治癒効果促進効果の向上のために特定の高分子化合物を用いた創傷被覆材が開示されている（例えば、特許文献１参照。）。
また、エラスチンを含むシートの表面にポリグルタミン酸を含むシートが積層された創傷被覆材が開示されている（例えば、特許文献２参照。）。また、コラーゲンを主成分とした高分子を用いた医療用材料が開示されている（例えば、特許文献３参照。）。
また、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウムを主成分とするハイドロコロイドドレッシング材を、粘着フィルムに保持させて、ハイドロコロイドドレッシング材により滲出液を吸収、保持して創傷部に湿潤状態をつくり、治癒を促進させる創傷被覆材が広く用いられている（例えば、非特許文献１参照。）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００３−０３８６３３号公報
【特許文献２】特開２００５−０４６２２８号公報
【特許文献３】特開２００４−３２１４８４号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】製品情報「テガダームＴＭ ハイドロコロイド」[平成２６年１月２９日検索]、インターネット（http://www.mmm.co.jp/hc/medical/pro/sw/tegaderm-hydrocolloid.html）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、特許文献１では治癒効果のある高分子化合物を製造したものを利用しているのでその製造が複雑であり、材料の形状がスポンジ状であるために保水性が不十分で、湿潤療法には適していない、フィット感に欠ける、という問題があった。
また、特許文献２では、シートがフィルム状に形成されており、吸水性および保水性が不十分であり、フィット感にも欠けるため、湿潤療法には適していない。
また、特許文献３に記載の繊維は、コラーゲンを主成分としているため、アレルギ等の副作用の不安があり、また吸水性および保水性が十分でなく、湿潤療法に用いるには不適当であった。
また、非特許文献１に記載された創傷被覆材は広く流通しているものの、これら創傷被覆材よりも創傷部の治癒期間をさらに短期化したいという強い要望がある。
【０００８】
一方、創傷部に限られず、皮膚にできた傷や手術等による切開部等に、癒着や肥厚性瘢痕が発生するのを抑制して安定して治癒させたいとの要請がある。
また、再生医療分野においても、滲出液を構成している血液について、血球成分と血漿成分のいずれか一方を他方から安定して分離する血球成分と血漿成分の分離方法に対する要請がある。
【０００９】
そこで、発明者らは、創傷部の治癒期間を短期化することが可能な湿潤療法に適した創傷被覆材、及び滲出液を構成している血液中の血球成分と血漿成分との分離方法について鋭意研究した結果、以下に示す知見を得た。
（１）生体適合性材料であるポリグルタミン酸を適度に架橋して形成したナノファイバーを含んだ繊維集合体により、滲出液を吸収してもナノファイバー形状が保持されて血漿成分を含んだゲル状体が形成され、このゲル状体が血球成分の滲出を抑制するとともに滲出液を保持して湿潤状態が維持されやすくなり、その結果、湿潤療法において止血、及び治癒期間の短期化が可能となる。
（２）創傷被覆材に含まれるポリグルタミン酸架橋体を、オキサゾリン基を有する高分子架橋剤により架橋されたものとすることにより、副生成物がないナノファイバーを容易に製造でき、ナノファイバー形状を安定して保持することができる。
（３）ポリグルタミン酸を適度に架橋して形成したナノファイバーを含む繊維集合体を血液と接触させてゲル状体を形成してから、さらに継続して血液を接触させてゲル状体内に血液の血漿成分のみを流通させることにより、血液中の血球成分と血漿成分とを安定的に分離することが可能である。
（４）また、上記構成の被覆材は、血球成分濃縮効果による組織再生促進効果が期待できることから癒着防止材、手術創肥厚性瘢痕抑制および止血材として適用することが可能である。
【００１０】
本発明は、このような事情を考慮してなされたものであり、湿潤療法に適し、創傷部の治癒を短期化することが可能な創傷被覆材及び血液中から血球成分と血漿成分のいずれか一方を他方から安定して分離することが可能な血液中の血球成分と血漿成分との分離方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
この発明は、上記課題を解決するため以下の手段を提案している。
請求項１に記載の発明は、創傷被覆材であって、ポリグルタミン酸架橋体からなるナノファイバーを含む繊維集合体を備え、前記繊維集合体は、創傷部から滲出する滲出液を保持してゲル状体を形成するように構成されていることを特徴とする。
【００１２】
この発明に係る創傷被覆材によれば、生体適合性材料であるポリグルタミン酸が適度に架橋されたナノファイバーを含む繊維集合体を備えているので、繊維集合体が滲出液を吸収してもナノファイバー形状が保持されて、繊維集合体と一体化されたゲル状体が形成される。
また、創傷部から滲出した滲出液の血漿成分はゲル状体に進入可能であるが、血球成分はゲル状体への進入が抑制されて創傷部における瘡蓋の成長が抑制されて、瘡蓋による創傷部と創傷被覆材との接続（一体化）が抑制される。さらに、創傷部から滲出液の滲出が停止するまで、滲出液に含まれるゲル状体に移動、吸収されて保持されるので、創傷部の湿潤状態を維持して血球成分が移動するのが抑制される。その結果、湿潤療法において、治癒期間を短期化することができる。
【００１３】
ポリグルタミン酸は、例えば、納豆の糸として古くから知られており、生分解性、生体適合性、高吸水性の天然由来性材料であり、保水性が高いので水分を吸収させると湿潤性が高まり、長時間にわたってこの湿潤性を持続することができる。一方で、水溶性であるため吸水すると溶解して、滲出液の吸収、保持性能が低下して、湿潤療法における充分な性能の確保が困難となる。
なお、ポリグルタミン酸としては、天然物由来のもの、公知の工業的方法で得られたもののいずれも用いることができる。
【００１４】
請求項２に記載の発明は、請求項１記載の創傷被覆材であって、前記ポリグルタミン酸架橋体は、オキサゾリン基を有する高分子架橋剤により架橋されていることを特徴とする。
【００１５】
この発明に係る創傷被覆材によれば、ポリグルタミン酸架橋体が、オキサゾリン基を有する高分子架橋剤により開環反応で架橋してポリグルタミン酸と同様のアミドエステル結合が形成されるので、副生成物がないナノファイバーを容易に製造でき、ナノファイバー形状が安定して維持される。
【００１６】
請求項３に記載の発明は、請求項１又は２記載の創傷被覆材であって、前記ポリグルタミン酸架橋体は、ポリグルタミン酸を６０重量％以上９６重量％以下含有していることを特徴とする。
【００１７】
この発明に係る創傷被覆材によれば、ポリグルタミン酸架橋体が、ポリグルタミン酸を６０重量％以上９６重量％以下含有しているので、滲出液を吸収してもナノファイバー形状が保持されて、繊維集合体と一体化されたゲル状体が形成され、滲出液を充分に吸収、保持するとともに血球成分の進入を抑制するので、創傷部の止血及び湿潤状態が確保されて湿潤療法に好適となる。
【００１８】
請求項４に記載の発明は、請求項１〜３のいずれか１項に記載の創傷被覆材であって、前記ナノファイバーは、繊維径が５０ナノメートル以上１８００ナノメートル以下であることを特徴とする。
【００１９】
この発明に係る創傷被覆材によれば、ナノファイバーの繊維径が５０ナノメートル以上１８００ナノメートル以下とされているので表面積が大きく傷口への密着性が高いうえ、積層（堆積）された繊維集合体がフィルターとして作用するので血球成分の移動を抑制するとともに、ナノファイバー形状を安定して保持するとともに滲出液を繊維集合体に効率的に保持することでゲル状体を安定して形成し、創傷部への密着性及び封止効果を高めて、治癒期間を短期化することができる。
【００２０】
請求項５に記載の発明は、請求項１から４のいずれか１項に記載の創傷被覆材であって、前記ナノファイバーは、静電紡糸法により紡糸されたことを特徴とする。
【００２１】
この発明によれば、ナノファイバーが静電紡糸法により製造されるので、所定の繊維径のナノファイバーを効率的に製造することができる。
【００２２】
請求項６に記載の発明は、創傷被覆材であって、ポリグルタミン酸がオキサゾリン基を有する高分子架橋剤により架橋されたポリグルタミン酸架橋体のナノファイバーが堆積して形成されたシートを備えることを特徴とする。
【００２３】
この発明に係る創傷被覆材によれば、ポリグルタミン酸が適度に架橋されて、浸出液を吸収しても溶けずにナノファイバー形状が維持されて積層された繊維集合体が形成され、滲出液と繊維集合体とが一体化されたゲル状体を形成する。その結果、血球成分の移動が抑制されるとともに、血漿成分がゲル状体に吸収されて湿潤状態が維持され、創傷部に対する血球成分の封止効果及び治癒の短期化を実現することができる。
【００２４】
請求項７に記載の発明は、血液中の血球成分と血漿成分との分離方法であって、ポリグルタミン酸架橋体からなるナノファイバーを含む繊維集合体を血液と接触させてゲル状体を形成し、前記ゲル状体内に前記血液の血漿成分のみを流通させて前記血液中の血球成分と血漿成分とを分離することを特徴とする。
【００２５】
この発明に係る血液中の血球成分と血漿成分との分離方法によれば、ナノファイバー形状が保持されるとともに繊維集合体が血漿成分を吸収、保持してゲル状体が形成され、血液とゲル状体の接触部が湿潤状態に維持され、血漿成分はゲル状体に移動可能であるが、血球成分はゲル状体に阻まれて移動が抑制される。その結果、血液中の血球成分と血漿成分とを安定して分離することができる。
【発明の効果】
【００２６】
この発明に係る創傷被覆材によれば、湿潤療法において、治癒期間を短期化することができる。
この発明に係る血球成分と血漿成分の分離方法によれば、血液中の血球成分と血漿成分とを安定して分離することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】本発明の一実施形態に係る創傷被覆材の厚さ方向の概略構成を示す図である。
【図２】本発明の一実施形態に係る創傷被覆材を構成する繊維の詳細を説明する拡大写真である。
【図３】一実施形態に係るナノファイバーの製造に用いる静電紡糸装置の概略を示す斜視図である。
【図４】一実施形態に係るナノファイバーの製造に用いる静電紡糸装置の断面を示す図である。
【図５】本発明の比較例１に係る創傷被覆材の厚さ方向の概略構成を示す図である。
【図６】本発明の比較例１に係る創傷被覆材を構成する繊維の詳細を説明する拡大写真である。
【図７】本発明の効果確認実験における試料１〜３の貼付け位置を説明する図である。
【図８】本発明の効果確認実験における試料取り替え及び観察を説明する図である。
【図９】本発明の効果確認実験におけるラットの体重の推移を示す図である。
【図１０】本発明の効果確認実験における試料１〜３による創傷部の面積の推移を示す図である。
【図１１】本発明の効果確認実験における試料１〜３による創傷部の状態の変化を示す図である。
【図１２】本発明の一実施形態に係る創傷被覆材による血液中の血球成分に対するフィルター効果を説明する図であり、（Ａ）は試験方法を説明する図であり、（Ｂ）は効果を示す写真である。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
以下、図１、図２を参照して、本発明の一実施形態に係る創傷被覆材ついて説明する。
図１は、本発明の一実施形態に係る創傷被覆材の厚さ方向の概略構成を示す図であり、図２は、一実施形態に係る創傷被覆材を構成するナノファイバー（繊維）の詳細を説明する拡大写真である。図１において、符号１は、創傷被覆材を示している。
【００２９】
創傷被覆材１は、例えば、繊維径２５０ナノメートル、ポリグルタミン酸９０重量％の架橋体のナノファイバーを重畳することにより形成された目付け１３ｇ／ｍ２の繊維集合体からなるシートを備えている。また、シートは、例えば、表裏の区別がないＡ４サイズに形成されている。
【００３０】
ナノファイバーの繊維径については、５０ナノメートル以上とすると生産性を低下させることなくナノファイバーを製造できる点で好ましく、繊維径を１８００ナノメートル以下とすると、赤血球成分などの血球成分に対する流出抑制効果や血小板等に対するフィルター効果が充分に確保される点で好ましく、優れた止血性を発現することができる。
このように、ナノファイバーの繊維径を、５０ナノメートル以上、１８００ナノメートル以下とすることにより、繊維集合体としての表面積が充分大きくなり、浸出液の吸収性が高まる点で好ましい。
【００３１】
また、繊維集合体の目付けについては、０．５ｇ／ｍ２以上とするとナノファイバーを堆積させてシート（繊維集合体）を形成する際の堆積ムラが抑制されて、繊維集合体のフィルター効果が向上する点で好ましく、４．０ｇ／ｍ２以上、２０ｇ／ｍ２以下とすると、取扱いに適度な厚さとなり、生産性を低下させずに製造できる点で好ましい。したがって、０．５ｇ／ｍ２以上、好ましくは、４．０ｇ／ｍ２以上２０ｇ／ｍ２以下の範囲で適宜設定することが好適である。
【００３２】
創傷被覆材１を構成するナノファイバーは、ポリグルタミン酸を含む溶液を静電紡糸法により紡糸して、ポリグルタミン酸をオキサゾリン基を有する高分子架橋剤により開環反応させて繊維を生成して、この繊維の堆積させた繊維集合体を、例えば熱架橋処理することによりナノファイバーを含む繊維集合体が製造される。そして、ナノファイバーを含む繊維集合体によって創傷被覆材１が構成されている。
【００３３】
以下、図３、図４を参照して、一実施形態に係る創傷被覆材１の製造方法の一例について説明する。
（１）紡糸
（１−１）溶液の調整
（１−１−１）ポリグルタミン酸
ポリグルタミン酸は、天然物由来のもの、公知の製法で得られたもので、特にナトリウム塩を使用することが好ましい。ポリグルタミン酸の分子量は、静電紡糸する際に繊維とする紡糸しやすさや、シート状にした場合の吸水性及び保水性を確保する観点から、重量平均分子量で２０万以上とすることが好適である。
【００３４】
高分子架橋剤の配合量は、ポリグルタミン酸に対して固形分比で０．１質量％以上５０質量％以下であることが好ましく、４質量％以上４０質量％以下であることがより好ましい。高分子架橋剤の配合量が０．１質量％未満であると架橋が不十分となり、形成された繊維架橋体は水に溶解してしまうおそれがある。また、高分子架橋剤の配合量が５０質量％を超えるとポリグルタミン酸ナトリウムの特性（生分解性、生体適合性、吸湿・吸水性、保水性）が損なわれるおそれがある。また、架橋が進みやすいため静電紡糸が困難となる。
【００３５】
（架橋剤）
高分子架橋剤は、ポリグルタミン酸のカルボキシル基と架橋可能な高分子として、オキサゾリン基を有する高分子架橋剤を用いることができる。
オキサゾリン基を有する高分子架橋剤としては、下式一般式（１）で表される２−オキサゾリン基を有するビニルモノマーと必要に応じて１種以上の他のビニルモノマーを重合して得られるものを挙げることができる。
【００３６】
【化１】
2015139603.tif 000003
【００３７】
上式中、Ｘは水素原子またはメチル基を表し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４はそれぞれ独立に水素原子、アルキル基、フェニル基、置換フェニル基またはハロゲン基を表す。
２−オキサゾリン基を有するビニルモノマーの具体例としては、２−ビニル−２−オキサゾリン、２−ビニル−４−メチル−２−オキサゾリン、２−ビニル−５−メチル−２−オキサゾリン、２−イソプロペニル−２−オキサゾリン、２−イソプロペニル−４−メチル−２−オキサゾリン、２−イソプロペニル−５−メチル−２−オキサゾリンなどが挙げられる。中でも２−イソプロペニル−２−オキサゾリンが工業的にも入手しやすく好適である。
【００３８】
２−オキサゾリン基を有するビニルモノマーと共重合する他のビニルモノマーとしては、２−オキサゾリン基と反応しない、共重合可能なビニルモノマーであれば特に限定はない。
例えば、（メタ）アクリル酸メチル、（メタ）アクリル酸ブチル、（メタ）アクリル酸２−エチルヘキシル、（メタ）アクリル酸メトキシポリエチレングリコール、（メタ）アクリル酸２−ヒドロキシエチル、（メタ）アクリル酸２−アミノエチルおよびその塩類などの（メタ）アクリル酸エステル類、（メタ）アクリロニトリルなどの不飽和ニトリル類、（メタ）アクリルアミド、Ｎ−メチロール（メタ）アクリルアミド、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）（メタ）アクリルアミドなどの不飽和アミド類、酢酸ビニル、プロピオン酸ビニルなどのビニルエステル類、メチルビニルエーテル、エチルビニルエーテルなどのビニルエーテル類、エチレン、プロピレンなどのα−オレフィン類、塩化ビニル、塩化ビニリデン、フッ化ビニルなどの含ハロゲンモノマー、スチレン、α−メチルスチレン、スチレンスルホン酸ナトリウムなどの芳香族官能基含有モノマーなどが挙げられ、これらの１種以上の混合物を使用することができる。
オキサゾリン基を有する重合体の重合方法については特に制限はなく、乳化重合、溶液重合、塊状重合、懸濁重合などの各種の重合法が任意に選択できる。
【００３９】
一実施形態において、バインダーとして、例えば、ポリ乳酸、ポリビニルアルコール、ポリ酢酸ビニル、ポリプロリレンオキサイド、ポリエチレンイミド、ポリアニリン、ポリメタクリル酸メチル、ポリアクリロニトリル、ポリウレタン、シリコーン、ポリフッ化ビニリデン、ポリ塩化ビニル、ポリ塩化ビニリデン、ポリエチレン、ポリプロピレン、ナイロン、ポリエチレンサルファイド、ポリスチレン、ポリブタジエン、ポリエチレンテルフタレートなど、溶媒に溶解可能な周知の合成高分子を必要に応じて配合してもよい。
また、コラーゲン、ゼラチン、デンプン、セルロース、キチン、キトサン、セリシン、フィブロイン、核酸、ヒアルロン酸、エラスチン、ヘパリン、カテキンなどの天然高分子や、オルガノシリカやオルガノチタンなどのゾル溶液をバインダーとして配合してもよい。
【００４０】
（１−１−２）溶媒
ポリグルタミン酸を溶解させる溶媒として、特にポリグルタミン酸ナトリウムを溶解する溶媒として、水と水溶性有機溶媒を用いることができる。水と水溶性有機溶媒を用いるのは、安価で、安全であるとともに、ポリグルタミン酸の静電紡糸をおこないやすくするためである。
水溶性有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノールなどのアルコール類や、アセトン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド等を適宜選択することができる。これらのうち、炭素数１〜３の脂肪族低級アルコールであるメタノール、エタノール、プロパノールは、肌への刺激が小さく生体への影響が小さい点で好適である。これらは一種を単独で用いてもよいし、二種以上を組み合わせて使用してもよい。
【００４１】
（１−１−３）各種添加剤
また、必要に応じて、界面活性剤、金属塩、増粘剤、色剤、防腐剤、各種安定剤を適宜使用してもよい。
【００４２】
界面活性剤として、例えば、アニオン界面活性剤、カチオン界面活性剤、ノニオン界面活性剤、両性界面活性剤といった公知の界面活性剤を使用することができ、例えば、ｐ−ノニルベンゼンスルホン酸ナトリウム、ラウリルオキシスルホン酸ナトリウム、ラウリルオキシリン酸二ナトリウム等のアニオン界面活性剤や、ラウリルトリメチルアンモニウムクロリド、セチルピリジニウムクロリド等のカチオン界面活性剤や、ステアリン酸ポリエチレングリコール、ペンタエリスリットステアリン酸モノエステル等のノニオン界面活性剤や、ラウリルジメチルペタイン等の両性界面活性剤が挙げられる。これらは一種を単独で用いてもよいし、二種以上を組み合わせて使用してもよい。
【００４３】
また、金属塩としては、塩化物、臭化物、ヨウ化物などの金属塩が挙げられる。
また、増粘剤としては、例えば、メチルセルロースやヒドロキシエチルセルロース等のセルロース誘導体、各種ガム類やペクチン、アルギン酸ソーダ、デキストリン、寒天、ゼラチン等の天然高分子増粘剤が挙げられる。
【００４４】
（１−２）紡糸装置
図３、図４は、静電紡糸法（エレクトロスピニング法）によりナノファイバーを紡糸する際に用いる静電紡糸装置を説明する図であり、図３は、一実施形態に係る静電紡糸装置の概略構成を示す斜視図を、図４は図３に示す静電紡糸装置の断面の概略を示す図である。
【００４５】
一実施形態に係る静電紡糸装置は、例えば、ポリグルタミン酸を保持した溶解液浸漬槽１０の中に電圧印加ロール２０が回転可能に設置されていて、電圧印加ロール２０は少なくとも周面部が金属で形成されている。
【００４６】
溶解液浸漬槽１０には、高電圧発生装置（電源）２１が接続されていて、高電圧発生装置２１から電圧が印加されると、ポリグルタミン酸溶液はプラスに帯電して、電圧印加ロール２０に電荷が集中するようになっている。電圧印加ロール２０は、図示しない回転駆動機構と連結されている。
【００４７】
電圧印加ロール２０と対向する位置には、集積コンベア３０が集積面３０Ａを電圧印加ロール２０側に向けて配置されている。また、集積コンベア３０を挟んで電圧印加ロール２０と対向する位置には金属製ブロック３１が配置され、この金属製ブロック３１は高電圧発生装置２１に接続され、マイナスに帯電している。
【００４８】
集積コンベア３０は、導電性のある素材、例えば、アルミニウム等から形成された帯状部材、または金属製ブロック３１の導電性を妨げない紙もしくは合成繊維から成る不織布からなり、図示しない繰り出しロールから繰り出されるとともに図示しない巻き取りロールで巻き取られるようになっている。
【００４９】
金属製ブロック３１の集積コンベア３０の流れ方向の前後にはガイドロール３２がそれぞれ配置されている。
電圧印加ロール２０と集積コンベア３０の集積面３０Ａとの距離は、溶媒が気化しやすいように、糸の堆積状態に応じて任意に設定可能である。
【００５０】
また、印加電圧は、溶液の性状、堆積量に応じて設定可能であり、電圧が高いほど多量の繊維が得やすい。従って、電圧印加ロール２０と金属製ブロック３１が一対の電極となり、電圧印加ロール２０と金属製ブロック３１の間に静電場が形成される。電圧印加ロール２０に付着した液体表面には電荷が蓄積され、この電荷が液体の表面張力以上に高まると、電圧印加ロール２０の表面から金属製ブロック３１に向かってナノファイバー（開環反応した糸状のポリグルタミン酸）が引き出され、集積面３０Ａに堆積する。
【００５１】
（１−３）紡糸方法
次に、図３、図４を参照して、繊維（ナノファイバー）の製造方法について説明する。
本実施形態のナノファイバーは、静電紡糸装置を用いた静電紡糸法により製造されている。
図３は、一実施形態に係るナノファイバーの製造に用いる静電紡糸装置の概略を示す斜視図であり、図４は静電紡糸装置の断面を示す図である。
【００５２】
まず、溶解液浸漬槽１０の内部にポリグルタミン酸溶液を収容して、集積コンベア３０を駆動する。
集積コンベア３０には、高電圧発生装置２１に接続された金属製ブロック３１が近接配置されているため、高電圧をかけると、溶液表面に電荷が誘発、蓄積され、静電引力を発生させる。
この静電引力は、ポリグルタミン酸溶液の表面張力に対抗し、電場力が臨界値を超えると、静電引力が表面張力を超えて荷電した溶液のジェットが噴射される。
噴射されたジェットは、体積に対して表面積が大きいため、溶媒が効率よく蒸発し、また体積の減少により電荷密度が高くなるため、さらに細いジェットになる。
溶液がジェット噴射されると、金属製ブロック３１側に自発的に牽引されることで紡糸がなされる。
紡糸されたポリグルタミン酸の繊維は、集積コンベア３０の集積面３０Ａに堆積され、集積コンベア３０が回転しているので、集積面３０Ａに堆積されたポリグルタミン酸が開環反応した状態の繊維はコンベアの長さ方向に亘って所定厚さとなる。集積されたポリグルタミン酸が開環反応した状態の繊維は繊維集合体となり、図示しない装置によって集積コンベア３０から剥離される。
【００５３】
（２）架橋
静電紡糸法によって得られた繊維集合体（シート）は、熱架橋、電子線などの放射線架橋、紫外線架橋、グルタルアルデヒドなどを用いた化学架橋など、公知の架橋処理により架橋させて、ポリグルタミン酸架橋体の繊維集合体を得ることができる。
また、創傷部に添付する前にリン酸緩衝溶液、生理食塩水あるいは蒸留水に浸してゲル状体を形成してから創傷部に貼付することもできる。
【００５４】
（３）効果
一実施形態に係る創傷被覆材１によれば、次の作用、効果を奏することができる。
創傷被覆材１によれば、生体適合性材料であるポリグルタミン酸が適度に架橋されたナノファイバーを含む繊維集合体を備えているので、繊維集合体が滲出液の血漿成分を吸収して繊維集合体と一体化されたゲル状体となって、創傷部にナノファイバーが嵌入することが抑制される。
【００５５】
また、繊維集合体と一体化されたゲル状体は、創傷部から滲出した滲出液のうち血漿成分は進入可能であるが血球成分は進入が抑制されるので、創傷部における瘡蓋の成長が抑制されて創傷部と創傷被覆材が瘡蓋により接続されるのが抑制される。さらに、創傷部における滲出液の滲出が停止するまでは、滲出液に含まれる血漿成分が繊維集合体に移動してゲル状体を維持するので、創傷部の湿潤状態を保って血球成分が滲出するのを抑制することができる。その結果、湿潤療法における治癒期間を短期化することができ、さらに治癒後に瘢痕（傷跡）を残らなくすることができる場合がある。
【００５６】
また、創傷被覆材１によれば、ナノファイバーの繊維径が２５０ナノメートルとされているので表面積が大きく傷口への密着性が高いうえ、創傷部材が滲出液を吸収した状態において、ナノファイバー形状を安定して保持し、血球成分の封止、繊維表面をゲル状体とするために創傷部への密着性及び封止効果を高めて、治癒期間を短期化することができる。
【００５７】
また、創傷被覆材１によれば、静電紡糸法により紡糸されるので、電荷の高まりが糸の細化を促進し、細化に伴い溶媒の揮散が進むため、ナノファイバーの繊維および繊維集合体を効率的に製造することができる。また、分子量（重量平均分子量）２０万以上のポリグルタミン酸を用いたので、繊維径が２５０ナノメータのナノファイバーを安定して紡糸することができる。
【００５８】
なお、本発明は、上記実施形態に限定されるものではなく、発明の趣旨を逸脱しない範囲で種々に変更することが可能である。
例えば、上記実施の形態においては、創傷被覆材１が、ポリグルタミン酸が架橋されたナノファイバーを含む場合について説明したが、創傷被覆材１がナノファイバーをどの程度含むかどうかは任意に設定することができる。
【００５９】
また、上記実施の形態においては、創傷被覆材を構成するシートが、繊維径２５０ナノメートル、ポリグルタミン酸９０重量％の架橋体のナノファイバーを重畳して形成した目付け１３ｇ／ｍ２の繊維集合体である場合について説明したが、ナノファイバーの繊維径、ポリグルタミン酸の重量含有％及びシートの目付けについては状況に応じて任意に設定することができる。
【００６０】
例えば、ナノファイバーの繊維径を、例えば、５０ナノメートル以下とし、又は１８００ナノメートル以上に設定してもよい。
また、繊維集合体の目付けを０．５ｇ／ｍ２以下とし、又は２０ｇ／ｍ２以上に設定してもよい。
【００６１】
また、上記実施の形態においては、静電紡糸装置の静電場が、電圧印加ロール２０と金属製ブロック３１とからなる一対の電極間に形成される場合について説明したが、複数の電極間、溶解液浸漬槽で形成するものでもよい。この場合、複数の電圧印加ロール２０は、異なる電圧値であってもよい。また、上記実施形態では、ロール式の静電紡糸装置を使用したが、ノズル式の静電紡糸装置を用いてもよい。
【００６２】
また、上記実施の形態においては、創傷被覆材１がシート状に形成されている場合について説明したが、シート以外の形態で用いることもできる。
【００６３】
また、上記実施の形態においては、本発明を創傷被覆材１に適用する場合について説明したが、本発明を、ポリグルタミン酸架橋体からなるナノファイバーを含む繊維集合体を血液と接触させてゲル状体を形成し、ゲル状体内に血液の血漿成分のみを流通させて、血液中の血球成分と血漿成分とを分離する血球成分と血漿成分の分離方法として用いてもよい。この場合、繊維集合体として、上述のものが使用可能である。
【００６４】
また、上記実施の形態においては、本発明を創傷被覆材１に適用する場合について説明したが、本発明を、創傷部にポリグルタミン酸を適度に架橋したナノファイバーを含んだ繊維集合体を配置して、創傷部の浸出液を繊維集合体に吸収、保持させてゲル状体を形成し、創傷部における滲出が継続される間、このゲル状体により滲出液を吸収、保持させて湿潤状態を維持するとともに、ゲル状体により創傷部からの血球成分の移動を抑制することにより、創傷部の治癒に係る治療方法として適用してもよい。この場合、繊維集合体として、上述のものが使用可能である。
【００６５】
また、上記実施の形態においては、創傷部を被覆する創傷被覆材に適用する場合について説明したが、血球成分濃縮効果による組織再生促進効果を利用することにより、癒着防止用被覆材、手術創肥厚性瘢痕抑制用被覆材、止血用被覆材として適用してもよい。
【実施例】
【００６６】
以下、本発明に係る創傷被覆材の効果を、実施例１及び比較例１、比較例２に基づいて説明する。
実施例１、比較例１及び比較例２の創傷被覆材を用いて、（１）一般的状態、（２）体重測定、（３）創傷皮膚の状況を観察し、治癒効果を評価した。
【００６７】
〔実施例１〕
試料１は、一実施形態に係る創傷被覆材１と対応するものであり、ポリグルタミン酸架橋体が９０重量％、繊維径２５０ナノメートル、目付け１３ｇ／ｍ２のナノファイバーを含む繊維集合体からなり、表裏の区別がないシートを用いた。
【００６８】
まず、ポリグルタミン酸として、分子量１５０万の和光純薬工業株式会社製ポリ−γ−グルタミン酸ナトリウム（平均分子量１５０万〜２５０万）を使用し、水／エタノール／１Ｎ−ＨＣｌ水溶液／ポリグルタミン酸／オキサゾリン基含有高分子架橋剤＝４５（６０）質量％／２７（２５）質量％／２０（１５）質量％／７．２質量％／０．８質量％の配合比で混合して、攪拌溶解して溶液を調製した。
次に、この溶液を、エレクトロスピニング装置（エルマルコ社製、製品名「ＮＳ−ＬＡＢ２００Ｓ」）を用いて、電圧６５〜７８ｋＶ、電極間距離１００〜１１０ｍｍ、電荷ロール８〜４ｒｐｍで紡糸してナノファイバーを製造した。
そして、このナノファイバーを、ライン速度４〜１０ｃｍ／分で、ポリプロピレン製不織布に繰り返し堆積させることによって、正味目付け１３ｇ／ｍ２のシート状の繊維集合体を形成した。
【００６９】
次いで、このシート状の繊維集合体を、真空オーブンにより、１２０℃で１時間加熱することによりナノファイバーを熱架橋して創傷被覆材とした。
【００７０】
実施例１に係る創傷被覆材は、図１、図２の拡大写真（倍率１０００倍）に示すとおりであり、サンユー電子社製「ＳＣ−７０１ ＧＵＩＣＫＣＯＡＴＥＲ」で金蒸着して、キーエンス社製の３Ｄリアルサーフェイスビュー顕微鏡「ＶＥ−８８００」にて観察したものである。
【００７１】
なお、分子量（重量平均分子量）は、ポリグルタミン酸５ｍｌを水１ｍｌに溶解し、ゲル浸透クロマトグラフ測定（島津製作所製「ＬＣ−１０ＡＤｖｐシステム」、カラム：昭和電工製「ＳＨＯＤＥＸ ＡＳＡＨＩＰＡＫ ＧＳ−７１０＋ＧＳ−３１０ ７Ｇ」、室温、移動相：（５０ｍｍｏｌ／ｌリン酸緩衝液）＋（０．３ｍｏｌ／ｌＮａＣｌ水溶液）、０．７ｍｌ／ｍｉｎ、検出器：示差屈折率検出器）により測定した。
【００７２】
なお、実施例１に示した創傷被覆材は、吸湿、伸縮しやすいことから、例えば、４０％ＲＨ以下の乾燥した環境で取り扱うことが好適であり、被覆試験時に、シャーレ等に適量採取した燐酸緩衝生理食塩水１×[ＢＰＳ（−）]に約３時間浸漬させたものを創傷部に乗せて、カバーフィルムで貼り付けた。
【００７３】
〔比較例１〕
試料２は、図５、図６の拡大写真（倍率１０倍）に示すとおりであり、一実施形態に係る試料１に対する比較例をなすものであり、例えば、ポリグルコール酸の７０デニール／２８フィラメントの糸をよこ編みのシートをポリグルタミン酸の７．５重量％水溶液に浸漬した後、６０μｍＰＥＴ不フィルムに挟み、ＮＨＶコーポレーション社製ＥＢＣ８００−３５にて電子線照射１２０ｋＧｙ照射することによりポリグルタミン酸を架橋し、繊維シートを芯とするポリグルタミン酸のゲル状体シートを得た。
【００７４】
〔比較例２〕
試料３は、比較例２であり、３Ｍ社製の「テガダームＴＭ  ハイドロコロイド」（商品名）を用いた。「テガダームＴＭ  ハイドロコロイド」（商品名）は、カリボキシメチルセルロースナトリウムを主成分とするハイドロコロイドドレッシング材を、粘着フィルムに保持させたものであり、ハイドロコロイドドレッシング材により滲出液を吸収、保持して創傷部に湿潤状態を形成するものである。
【００７５】
〔実験方法〕
ラット３匹の背部皮膚を剃毛して、イソフラル麻酔下で背部皮膚にφ８ｍｍの生検トレパン（ＢＰ−８０Ｆ；貝印株式会社製）を用いて、背部正中より左側（Ｌ）と、右側（Ｒ）に、全層欠損皮膚剥離創からなる創傷部を２０ｍｍ間隔で６ヶ所（Ｌ１〜Ｌ３、Ｒ１〜Ｒ３）形成し、図７に示すように、創傷部に試料１〜３を１試料につき２ヶ所ずつ貼付けた。
試料１、試料２の上には不織布を１枚載せて、さらにカバーフィルムを貼り、その上から粘着性伸縮包帯を巻きつけ、試料３は貼り付けてそのままとした。また、首にはラット用エリザベスカラーをつけて創傷部を保護した。
【００７６】
以下、図８を参照して、実験内容について説明する。
図８に示すように試験期間は１４日とし、三匹のラットに対して試料１〜試料３を貼付して行った。試料１〜試料３は、各ラットの背部正中より左側（Ｌ１〜Ｌ３）を３、７日張替群都し、右側（Ｒ１〜Ｒ３）を１４日間貼付け群とした。
【００７７】
まず、各ラットに処置を施して試料１〜試料３を貼付した日をＤａｙ０とした。
そして、３、７日張替群は、３日目（Ｄａｙ３）、７日目（Ｄａｙ７）の張替時及び１４日目（Ｄａｙ１４）に試料を取除いた時に、発赤、炎症、滲出液の状態を観察し、１４日間貼付け群は、１４日目（Ｄａｙ１４）に取除いた時に、発赤、炎症、滲出液の状態を観察した。
なお、３種類の試料が同じ位置に貼付されて、観察結果が試料１〜試料３に拠らずに、試料貼付位置に影響されることがないように、試料１〜試料３を動物番号１〜３ごとに異なる位置（Ｌ１〜Ｌ３、Ｒ１〜Ｒ３）に貼り付けるように考慮した。また、試験期間中は、治療薬、治癒促進剤は使用しなかった。
【００７８】
以下、図９〜図１１、表１、表２を参照して、試料１〜試料３に関する（１）一般的状態、（２）体重測定、（３）創傷皮膚の状況を観察した評価について説明する。
〔一般的状況観察〕
試験期間中、被験物質貼付けによると考えられる異常は見られなかった。
【００７９】
〔体重の推移〕
図９は、試験期間中におけるラットの体重の推移を示す図である。
図９に示すように、試験期間中にいずれかのラット（動物番号１〜３）が、他のラットに比較して体重が大きく変化することはなかった。
【００８０】
〔創傷皮膚及び試料の観察〕
表１は、３、７日張替群の創傷部の観察結果を示しており、表２は、１４日間貼付け群の創傷部の観察結果を示している。
表１、表２において、動物番号１〜３は、３匹のラットの個体識別を示しており、Ｄａｙ３、Ｄａｙ７、Ｄａｙ１４は、３日目、７日目の張替時及び１４日目に試料を取り除いた際の状態を示している。
なお、（−）は創傷部位の発赤、創傷部位の炎症、滲出液の染み出しがないことを、（＋）は若干の創傷部位の発赤、創傷部位の炎症、滲出液の染み出しが認められたことを、（＋＋）は創傷部位の発赤、創傷部位の炎症、滲出液の染み出しが認められたことを示している。
〔創傷部及び試料の状態〕
創傷部位は、Ｄａｙ３（３日目）、及びＤａｙ７（７日目）の張替時には、いずれの創傷皮膚にも化膿、腫脹、発熱は見られなかった。
しかし、表１に示すように、試料２及び試料３は、Ｄａｙ３（３日目）に若干の発赤及び滲出液が見られ、Ｄａｙ７（７日目）にも若干の滲出液が見られた。
また、試料１〜３のいずれについても、Ｄａｙ３（３日目）には滲出液と血液が交じり合い暗赤色を呈して試料表面の状態は判断できなかった。
試料１〜３のいずれについても、Ｄａｙ７（７日目）には、滲出液と血液により創傷部位と完全に接着していた。また、Ｄａｙ１４（１４日目）には、被毛が伸びて試料が浮き上がり試料の状態は判断できなかった。
【００８１】
【表１】
2015139603.tif 000004
【００８２】
【表２】
2015139603.tif 000005
【００８３】
〔創傷部の面積〕
図１０は、創傷部の面積を示す図である。
Ｄａｙ３の試料張り替え時における創傷部の面積は、図１０に示すように、試料１、試料２ともにほぼ同じであったが、試料３が張付けられた創傷部は、穴の中に試料の一部が膨張、嵌入し、試料１、試料２と比較して明らかに大きかった。
Ｄａｙ７の試料張り替え時には、図１０に示すように、試料１〜３のいずれが張付けられた創傷部も小さくなって回復傾向を示したが、試料１に比較して試料例２、３が張付けられた創傷部は若干大きかった。
観察１４日後には、Ｄａｙ３、７張替群及び１４日間貼付け群のいずれの創傷部も瘢痕組織としてほぼ治癒回復したが、試料３においては、試料１、試料２に比較して瘢痕組織の面積が広い傾向が見られた。
【００８４】
〔創傷皮膚の状況〕
図１２は、創傷皮膚の状況を示す写真であり、ラットの背中に形成した創傷部に、試料１〜３を張付けて実験開始した時、試料１〜３を張付けてから３日目（Ｄａｙ３）、７日目（Ｄａｙ７）に張り替えた際の状態、及び１４日目（Ｄａｙ１４）に試料１〜３を取り除いた際の状態を示している。
図１２に示すように、試料１、試料２では、試料３に比較して、瘢痕がほとんど目立たなくなっていることが確認できた。
【００８５】
以下、本発明に係る血液中の血球成分と血漿成分との分離方法に関して、創傷被覆材１の血球成分に対するフィルター効果により説明する。
【００８６】
〔血球成分と血漿成分の分離〕
図１２は、一実施形態に係る創傷被覆材１の血球成分に対するフィルター効果を説明する図であり、図１２（Ａ）は試料に対する血液のしみ込み程度の試験方法を説明する図であり、図１２（Ｂ）は一実施形態に係る創傷被覆材におけるフィルター効果を示す図である。
【００８７】
試料に対する血液のしみ込み程度の試験は、図１２（Ａ）に示すように、牛血をしみ込ませた脱脂綿の上に試料とキッチンペーパーとを重ねて配置し、キッチンペーパーの上から２０ｇの重錘の自重により１０分間加圧し、キッチンぺーパーに対する牛血のしみ込み状態を観察した。試料としては、上記実施例１と同様の創傷被覆材（ナノファイバーを塗布したポリプロピレン不織布）と、ナノファイバーを塗布していないポリプロピレン不織布とを用いた。
【００８８】
その結果、図１２（Ａ）、図１２（Ｂ）に示すように、一実施形態に係る創傷被覆材では、キッチンペーパーに牛血のしみ込みは見られなかったが、ナノファイバーを塗布していないポリプロピレン不織布では牛血のしみ込みがかなり認められた。
以上のように、一実施形態に係る創傷被覆材では、血球成分に対する充分なフィルター効果があり、血液中の血球成分と血漿成分とを安定して分離可能であることが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００８９】
本発明に係る創傷被覆材によれば、創傷部の治癒期間を短期化することができるので、産業上利用可能である。
【符号の説明】
【００９０】
１  創傷被覆材
【図３】
2015139603.tif 000006
【図４】
2015139603.tif 000007
【図７】
2015139603.tif 000008
【図８】
2015139603.tif 000009
【図９】
2015139603.tif 000010
【図１０】
2015139603.tif 000011
【図１】
2015139603.tif 000012
【図２】
2015139603.tif 000013
【図５】
2015139603.tif 000014
【図６】
2015139603.tif 000015
【図１１】
2015139603.tif 000016
【図１２】
2015139603.tif 000017