(57)【要約】【課題】健康食品や化粧品原料として有用なスペルミジン、スペルミンを高含有するとともに、塩の含量が低いポリアミン組成物を提供する。【解決手段】大豆胚軸を酸性水に浸漬し、ｐＨ１．０〜３．５となるよう調整し、前記大豆胚軸浸漬物から液体部分を分離し採取し、大豆胚軸由来ポリアミン組成物を製造する。【効果】スペルミジン、スペルミンを高濃度で含み、かつ塩濃度が低いポリアミン組成物を得ることができる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリアミン組成物に含まれるプトレシン、スペルミジンの合計含有量のうち、スペルミジンの占める割合が９５％（ｗ／ｗ）以上であり、固形分中の塩濃度が１９％（ｗ／ｗ）以下である、大豆胚軸由来ポリアミン組成物。
【請求項２】
下記（ａ）および（ｂ）の工程を含むことを特徴とする大豆胚軸由来ポリアミン組成物の製造方法。
（ａ）大豆胚軸を酸性水に浸漬し、ｐＨ１．０〜３．５となるよう調整する工程
（ｂ）前記の大豆胚軸浸漬物から液体部分を分離し採取する工程
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、大豆胚軸由来のポリアミン組成物およびポリアミン組成物の製造法に関する。
【背景技術】
【０００２】
アミノ基が複数結合した直鎖脂肪族炭化水素の総称であるポリアミンは、植物から動物、ウイルスに至るまで、各種生物種の生体内に含まれる。ポリアミンは、細胞の増殖や分化といった生命活動に強くかかわる物質であると考えられている。また、加齢によって体内のポリアミンが減少することが知られていることから、老化と関連づけた機能性素材としてのポリアミンの研究も盛んに行われている。
【０００３】
ポリアミンの主な機能性としては、（１）核酸との相互作用による核酸の安定化や構造変化（２）ｍＲＮＡ転写促進などの核酸合成系への促進作用（３）タンパク質合成系の活性化（４）細胞膜の安定化や物質の膜透過性の強化（５）活性酸素の消去（６）細胞増殖の促進（７）抗アレルギー作用、等が知られている（例えば、特許文献１参照。）。
【０００４】
ポリアミンと総称される化合物の中には、例えば、１，３−ジアミノプロパン、プトレシン、カダベリン、カルジン、スペルミジン、ホモスペルミジン、アミノプロピルカダベリン、テルミン、スペルミン、テルモスペルミン、カナバルミン、アミノペンチルノルスペルミジン、Ｎ，Ｎ−ビス（アミノプロピル）カダベリン、ホモスペルミン、カルドペンタミン、ホモカルドペンタミン、カルドヘキサミン、ホモカルドヘキサミンスペルミジン等が含まれる。
【０００５】
上記のようなポリアミンの各種の機能性に関する近年の研究の結果、ポリアミンのうち、特にスペルミジンとスペルミンが、生体において高い機能性を有することが明らかになってきている。例えば、スペルミジン、スペルミンは、ヒトリンパ球においてインテグリンの発現を抑制する。他方、プトレシンにはインテグリンの発現抑制効果が確認されず、このことから、スペルミジン、スペルミンが炎症の抑制に有効であるとの報告がある（例えば、非特許文献１参照。）。
【０００６】
また、別の例では、スペルミジン、スペルミンが動脈硬化の抑制に有効であることが示唆されている（例えば、非特許文献２参照。）。さらに、スペルミジン、スペルミンが、タンパク質の糖化反応を抑制することも明らかになっており、タンパク質の糖化は、皮膚の老化、糖尿病合併症、動脈硬化等の炎症に強く関連を持つことが知られている（例えば、非特許文献３参照。）。
【０００７】
他の文献では、ポリアミンが細胞間の物質移動に関与するコネキシンの発現を促進することにより細胞のギャップ結合をより強化し、細胞間の情報伝達系を活性化させることが明らかにされているが、その活性化作用はプトレシンよりスペルミジンの方が強く、コネキシンの減少による細胞間の情報伝達能低下は、皮膚老化に強く影響を持つことが知られている。これより、特にスペルミジンが皮膚の老化防止作用を有することが期待されている。このように、様々な機能性が期待される各種ポリアミンの中でも、スペルミジンとスペルミンは特に着目されており（例えば、非特許文献４参照。）、上記の知見から、生体に投与することにより各種の機能性を発揮することが期待される薬剤や化粧品等の原料として、スペルミジン、スペルミンを高濃度で含有するポリアミン組成物が求められている。
【０００８】
なお、ラットに各種ポリアミンを経口投与した場合、プトレシンは経口投与されたもののうちの８０％以上が腸管で分解を受けるのに対し、スペルミジン、スペルミンは経口投与されたもののうちの７０−８０％が体内に吸収され、組織へと移行することが報告されている（例えば、非特許文献５参照。）。すなわち、スペルミジン、スペルミンの投与方法としては、皮膚に塗布する等の他、経口投与も有効であると考えられ、例えば健康食品、健康飲料等、経口摂取用途の原料素材としても、スペルミジンおよびスペルミンを高濃度に含有するポリアミン組成物が求められている。
【０００９】
従来、白子（例えば、特許文献２参照。）や、動物の膵臓（例えば、特許文献３参照。）、乳（例えば、特許文献４、特許文献５参照。）等を原料として、１Ｎ塩酸等の強酸を用いてポリアミンを製造する方法が知られている。さらに、近年では、機能性素材として健康食品や化粧品にポリアミン組成物を配合する場合、動物由来原料への心理的抵抗感に加え、白子、膵臓から得られたポリアミン組成物には臭いや味の問題もあり（例えば、特許文献５参照。）、微生物由来素材や植物由来素材による置き換えニーズが高まっていることを受け、各種植物体や食品素材、例えば、酵母（例えば、特許文献６、特許文献７、特許文献９参照。）、茶（例えば、特許文献８参照。）、小麦や大豆（例えば、特許文献１０参照。）等からポリアミンを抽出し、ポリアミン組成物を作製しようとする機運も高まっている。こうした動物由来素材以外の素材からポリアミン組成物を製造する方法としても、動物由来素材から抽出を行う場合と同様、１Ｎ塩酸、５％トリクロロ酢酸、５％過塩素酸等の強酸や、その中和のための強アルカリを用いて、ポリアミンを調製するのが通常である。
【００１０】
しかし、各種素材からのポリアミンまたはポリアミン組成物の調製を工業化する際に、このような強酸や強アルカリを多量に用いる方法は、作業者の安全性の面や装置の耐塩素イオンの面から問題とされている。
加えて、強酸を用いて抽出し、その後、中和工程を経ることにより、最終的に多量の塩が生じ、この塩がポリアミン組成物の中に持ち込まれるという課題も有し得る。例えば、高濃度の塩酸と高濃度の水酸化ナトリウムを用いて製造されたポリアミン組成物中には、高濃度の塩化ナトリウムが持ち込まれることとなり、その塩の量が制約となって、健康食品、食品、化粧品等への配合において、ポリアミン組成物を多量に配合できなくなる等の問題が生じる恐れがあり、それに対する方策として膜処理、電気透析等の膜処理による脱塩を行う場合には、余分な脱塩工程を加える必要を生じ、生産コストおよび生産効率の観点からの課題もある。
【００１１】
そして、従来のポリアミン製造法においては、調製後のポリアミン組成物中に持ち込まれる塩を低減しつつ、かつ、高い機能性を有するスペルミジンおよび／またはスペルミンを高濃度に含有するポリアミン組成物を簡便に調製するための手引きは全く知られていなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】特開２０１２−２５４９６５号公報
【特許文献２】特開平０８−２３８０９４号公報
【特許文献３】特開平０９−２０６０２５号公報
【特許文献４】特開２００１−９５４８３号公報
【特許文献５】特開２００１−００８６６３号公報
【特許文献６】特開平１０−０５２２９１号公報
【特許文献７】特開２０００−２４５４９３号公報
【特許文献８】特開平１０−１０１６２４号公報
【特許文献９】特開２００９−０８２１４５号公報
【特許文献１０】特開２００７−２９１０２７号公報
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７５，２３７−２４５，（２００５）
【非特許文献２】Ｉｎｄｉａｎ Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４０，１２１−１２５，（２００８）
【非特許文献３】Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，７２，２６０３−２６１６，（２００３）
【非特許文献４】Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３５７，４８９−４９５，（２００１）
【非特許文献５】Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊ．ｏｆ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，７３，８１９−８２８，（１９９５）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
本発明は、調製後のポリアミン組成物中に持ち込まれる塩を低減し、かつ、高い機能性を有するスペルミジンおよび／またはスペルミンを高濃度に含有するポリアミン組成物を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明者は、鋭意検討の結果、大豆胚軸を原料素材とし、従来用いられていた１Ｎ塩酸、５％過塩素酸、５％トリクロロ酢酸等の強酸を使うことなく、簡便な操作によって、かつ、スペルミジンおよび／またはスペルミンを高濃度に含有するポリアミン組成物を製造する方法を見出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は以下に関する。
（１）ポリアミン組成物に含まれるプトレシン、スペルミジンの合計含有量のうち、スペルミジンの占める割合が９５％（ｗ／ｗ）以上であり、固形分中の塩濃度が１９％（ｗ／ｗ）以下である、大豆胚軸由来ポリアミン組成物。
（２）（ａ）大豆胚軸を酸性水に浸漬し、ｐＨ１．０〜３．５となるよう調整する工程、および（ｂ）前記の大豆胚軸浸漬物から液体部分を分離し採取する工程、
を含むことを特徴とする大豆胚軸由来ポリアミン組成物の製造方法。
【発明の効果】
【００１６】
本発明によれば、従来のポリアミン製造法に比べて、機能性の高いポリアミンであるスペルミジンおよび／またはスペルミンの比率が高く、かつ多量の塩を含まないポリアミン組成物が得られる。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下、本発明を詳細に説明する。
（ポリアミン）
本発明においてポリアミンとは、第１級アミノ基を２つ以上もつ直鎖状脂肪族炭化水素の総称であり、植物から動物、ウイルスに至るまで、各種生物種の生体内に含まれることが知られている。例えば、ポリアミンと総称されるものの中には、１，３−ジアミノプロパン、プトレシン、カダベリン、カルジン、スペルミジン、ホモスペルミジン、アミノプロピルカダベリン、テルミン、スペルミン、テルモスペルミン、カナバルミン、アミノペンチルノルスペルミジン、Ｎ，Ｎ−ビス（アミノプロピル）カダベリン、ホモスペルミン、カルドペンタミン、ホモカルドペンタミン、カルドヘキサミン、ホモカルドヘキサミンなどが挙げられる。代表的なポリアミンの例としてはプトレシン、スペルミジン、スペルミンが挙げられ、大豆胚軸由来ポリアミンとして含有量の高いものとしては、プトレシン、カダベリン、スペルミジン、スペルミンが挙げられる。
【００１８】
（本発明のポリアミン組成物の原料素材）
本発明において、「大豆胚軸」とは大豆の「胚軸」、もしくは「胚芽」と呼ばれる部分のことをいう。また、例えば、豆乳、大豆プロテイン等の大豆製品製造において、その呈味を向上する目的で大豆胚軸を分離除去する方法が知られており、このように大豆胚軸部分を分離する目的で分離された部分も、本発明の胚軸に含まれる。上記のような目的で分離された部分には、胚軸自体の他にも、例えば大豆皮や胚乳が一部混入している場合があり得るが、こうしたものも本発明の大豆胚軸に含まれる。さらに、丸大豆、割砕大豆等の大豆胚乳部分を一部含むものや、おから等の絞り粕であっても、胚軸部分を含む素材であれば、本発明の大豆胚軸に含まれ得る。大豆胚軸として市販されている任意の原料素材を用いても良い。
【００１９】
本発明の大豆胚軸には、ポリアミン抽出に先立ち、任意の前処理を経たものも含む。例えば、ポリアミンを抽出する前に、胚軸由来の何らかの有効成分を抽出するための有機溶剤（例えば、エタノール溶液等による）処理に供され、有効成分を抽出されたあとの大豆胚軸の抽出残渣等も、本発明の大豆胚軸に含まれる。例えば、高濃度の有機溶媒（例えば、７０％以上のエタノール含有溶媒）を用いて他の成分を除去した残渣を、本発明の大豆胚軸として、ポリアミン抽出に用いることもできる。その場合、元々の大豆胚軸に含まれる脂質等の疎水性の高い物質が有機溶媒処理によって除かれていることから、ポリアミン抽出が容易となり、その結果、最終的に得られるポリアミン組成物中のポリアミン含有量が向上することがある。また、高濃度エタノールの殺菌作用の効果で、材料由来の汚染菌のリスクを低減できる等の効果も期待される。
【００２０】
（本発明のポリアミン組成物）
本発明のポリアミン組成物は、大豆胚軸から抽出される１種以上のポリアミンからなる。本発明のポリアミン組成物中の、各種具体的な化合物の詳細な内訳は、原料とする大豆胚軸の品種、収穫時期、産地、抽出に用いる酸の種類や濃度、抽出条件等により異なり得るが、一態様において、本発明のポリアミン組成物は、ポリアミン組成物に含まれるプトレシン、スペルミジンの合計含有量のうち、スペルミジンの占める割合が９５％（ｗ／ｗ）以上であることを特徴とする。このような高い割合でスペルミジンを含有するポリアミン組成物は、高い機能性を有するポリアミン組成物として有用である。一方、原料素材中の有効成分であるスペルミジンを十分に抽出できず、スペルミジンの占める割合が低いポリアミン組成物は、その機能性を発揮する度合が相対的に低くなる。
【００２１】
一態様において、本発明のポリアミン組成物は、ポリアミン組成物に含まれるプトレシン、スペルミジン、スペルミンの合計含有量のうち、スペルミジンおよびスペルミンの占める割合が９５％（ｗ／ｗ）以上であることを特徴とする。このような高い割合でスペルミジンおよびスペルミンを含有するポリアミン組成物は、高い機能性を有するポリアミン組成物として有用である。
【００２２】
本発明のポリアミンにおける、個別の化合物の定量としては、ＨＰＬＣ法や酵素法が知られ、蛍光標識したポリアミンをＨＰＬＣにより分析し、各ポリアミン量を測定する方法等が一般的であるが、各種ポリアミンを分析できる方法であればこれに限らず使用できる。
【００２３】
具体的には、例えば、以下の方法でポリアミン分析を行うことができる。
分析を行いたい試料を、ＰＴＦＥ  ０．４５μｍフィルターで濾過し、その後、Ｎｏｖｅｌｌａ−Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ  Ｓ．  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．，４８，５１１７−５１２３（２０００）の方法に基づいて、ＨＰＬＣを用いてポリアミンを分析する［カラム：Ｎｏｖａ Ｐａｃｋ Ｃ１８, ３．９ ×１５０ ｍｍ，粒径４μｍ（Ｗａｔｅｒｓ社製）］。
【００２４】
さらに、一態様において、本発明のポリアミン組成物は、固形分中の塩濃度が１９％以下であることを特徴とする。塩濃度が１９％以下であるポリアミン組成物は、各種用途に応用する際に、持ち込まれる塩の量を少なく抑えることができる。
【００２５】
本発明のポリアミン組成物における、固形分中の塩濃度は、例えば、下記の方法により求めることができる。
塩濃度を測定したい検体を、８Ｎ水酸化ナトリウムによりｐＨ７まで中和した後、塩分計（アタゴ社製、ＳＡＬＴ ＭＥＴＥＲ ＥＳ−４２１）を用いて測定する。また、同じ検体の固形分濃度を、Ｂｒｉｘ計（アタゴ社製 デジタル屈折計ＲＸ−５０００）を用いて測定する。この結果をもとに、固形分あたりの塩濃度を算出する。
【００２６】
（酸性水）
本発明において、酸性水とは、塩酸、酢酸、硝酸、クエン酸、硫酸、リン酸、乳酸、プロピオン酸、酪酸、蓚酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、酒石酸、安息香酸、スルホサリチル酸、ギ酸、過塩素酸、トリクロロ酢酸等、ｐＨが７以下となるように調整された水である。酸性水を調製するために用いる酸は特に限定されず、酸であれば何でも使用できる。また、複数の酸を組み合わせて酸性水を調製することもできる。例えば、塩酸、クエン酸、乳酸、リンゴ酸等の酸は、食品に利用することが多い、製剤に残存しても生体に影響が少ない等の理由により、本発明のポリアミン組成物の調製に用いる酸性水を調製するために好ましく、さらに塩酸、クエン酸は、より好ましい。
【００２７】
本発明の酸性水には、水と酸以外の成分を含んでも良い。例えば、原料素材を前処理した際に用いた有機溶媒等の残留成分、緩衝液成分、その他、本発明のポリアミン組成物を調製する上で支障とならないものである限り、任意の成分を含み得る。
【００２８】
（本発明のポリアミン組成物の抽出条件）
大豆胚軸を酸性水に浸漬し、好ましくは撹拌することにより、大豆胚軸から本発明のポリアミン組成物を抽出できる。大豆胚軸を酸性水に浸漬する際、大豆胚軸を粉砕やホモジナイズ等により微細化することにより、ポリアミン組成物の抽出効率を高めることも可能である。
【００２９】
酸性水に浸漬された大豆胚軸は、酸性水の組成、浸漬時間、大豆胚軸と酸性水の比率、大豆胚軸の形状等の差異に起因して、経時的にｐＨが変動していく。発明者の検討の結果、各種ポリアミンの抽出効率は、使用する酸の種類や濃度ではなく、酸性水に大豆胚軸を浸漬する時のｐＨによって強い影響を受けることが判明した。
【００３０】
具体的には、浸漬時のｐＨが３．５以下のｐＨ条件下で抽出を行った場合には、プトレシン、スペルミジン、スペルミンは、ほぼ同程度の抽出効率となり、その含有比率にも変化がない。ところが、ｐＨ４以上の弱酸性域から中性以上のｐＨの場合には、機能性が強いことが知られているスペルミジン、スペルミンの含有比率は下がってしまい、機能性が高いとはいえないプトレシン等の含有比率が高まる。すなわち、抽出時のｐＨによって、得られるポリアミン組成物のスペルミジン比率は異なる。
【００３１】
なお、ｐＨ４以上のｐＨ条件下では、当該ｐＨで生育可能な微生物の種類も多いことから、汚染菌の繁殖の恐れもあり、ｐＨ３．５以下で抽出を行う場合と比較して、衛生管理の面からも不安要素が高まることとなる。
【００３２】
一方、ｐＨが１．０を下回るｐＨ条件下で抽出を行う場合、スペルミジン、スペルミンの含有比率は高く、また、汚染菌繁殖の懸念も少ないものの、このように極端に酸性度の高い条件下で抽出を行うには強酸を必要とし、その中和を行った結果多量の塩が生じるという点で、また、強酸や強いアルカリを用いるという点で、作業工程上、安全の観点からも、好ましくない。以上より、本発明のポリアミン組成物を調製する際には、浸漬時のｐＨが３．５以下のｐＨ条件下、より好ましくはｐＨ１．０〜３．５のｐＨ条件下で抽出を行うことが好ましい。
【００３３】
（浸漬時のｐＨの調整方法）
上述の通り、本発明のポリアミン組成物の抽出に際し、各種ポリアミンの抽出効率は、酸性水に大豆胚軸を浸漬する時のｐＨに強く依存するが、本発明において、この「浸漬時のｐＨ」とは、大豆胚軸を浸漬中の実際のｐＨである。このｐＨとは、具体的には大豆胚軸を酸性水に浸漬する際の酸性水のｐＨではなく、また、大豆胚軸を酸性水に浸漬直後のｐＨでもなく、浸漬後、一定時間を経過し、浸漬直後から起こるｐＨの変動が安定した段階でのｐＨであるという点が重要である。
【００３４】
大豆胚軸に徐々に酸性水が浸透し、ポリアミンが抽出されるにつれ、浸漬水のｐＨは経時的に変化していくが、このｐＨ変動の様子は、原料素材のロットごとに異なり得る。すなわち、大豆胚軸のような農産物を材料とする場合、天候、栽培方法、保存状態や品種の違いによって内容物の組成が変動するため、同じ酸を加えても、浸漬時のｐＨ変化の挙動は同一ではない。したがって、本発明のポリアミン組成物の抽出に用いる酸や酸性水の種類や組成を画一的に決定し、それを適用するだけでは、本発明のポリアミン組成物を常に調製できるとは限らない。ロット次第では、同じ組成の酸性水に浸漬しても、浸漬時間の経過に伴い、ｐＨ４〜６のような弱酸性域やそれ以上の中性域で抽出が行われるようになる恐れもあり、好適なｐＨ条件下でポリアミンを抽出できなくなることも想定される。
【００３５】
そこで、本発明においては、酸性水による大豆胚軸浸漬直後ではなく、浸漬した大豆胚軸の内容物によるｐＨの変動が落ち着くまでｐＨのモニタリングを行い、ポリアミンが効率よく抽出可能なｐＨとなっていることを確認し、必要に応じてｐＨ調整を行うことが重要である。ｐＨモニタリングの方法としては、ｐＨメーターを用いて、リアルタイムでｐＨをモニタリングする方法や、ｐＨ試験紙やｐＨメーターを用いて一定時間ごとにｐＨを確認する方法が使われる。ｐＨ測定のタイミングは浸漬開始直後ではなく、大豆胚軸の内容物との反応によるｐＨ変動の様子を見極める必要があるが、浸漬開始３０分後、１時間後、２時間後、３時間後、４時間後など一定時間後に測定することにより把握可能である。
【００３６】
本発明のポリアミン組成物の調製のためには、このような方法で浸漬時のｐＨをｐＨ３．５以下、より好ましくはｐＨ１．０〜３．５にコントロールすることが重要である。ｐＨ３．５以下であれば、用いる酸の種類、濃度は自由に設定可能である。
【００３７】
浸漬および抽出時の酸性水の温度については、作業性の観点から問題なければ、１０℃〜６０℃の範囲で実施可能である。特段の温度調整工程を必要とせず、エネルギーおよび作業効率の点からは、室温で行うことが好ましい。抽出時間の設定は、ポリアミンの抽出効率と作業工程の二つの観点から最適化されるべきであるが、例えば、３０分から６時間、好ましくは１時間以上、より好ましくは２時間以上、さらに好ましくは３〜４時間程度に設定することができる。
【００３８】
このような抽出方法を経て抽出されたポリアミン組成物中には、スペルミジン、スペルミンが高含有され、このようなポリアミン組成物は、少量の投与でもその機能を発揮することができることから、少量添加で夾雑物の影響を最低限にしつつ、必要な機能性を発揮できる機能性素材として、産業上非常に有用である。
【００３９】
（抽出後のポリアミン組成物の処理工程）
大豆胚軸を酸性水に浸漬することにより各種ポリアミンが抽出された液体部分を分離するためには、任意の分離方法を用いれば良い。具体的には、例えば、ざるによる濾過、フィルタープレス、膜ろ過、濾紙濾過、遠心分離、セライト濾過、固液分離等、公知の方法により分離が可能である。
【００４０】
各種任意の分離方法で得られたポリアミンを含有する液体部分は、公知の任意の方法により調製工程を経て、本発明のポリアミン組成物とすることができる。例えば、アルカリを添加することによる中和工程、必要な程度までの濃縮工程、膜処理、樹脂による精製、電気透析や膜処理による脱塩、凍結乾燥やスプレードライによる乾燥等の、原料素材から有効成分を抽出し組成物を調製する際に一般的に使われる方法を必要に応じて組み合わせることにより、調製することができる。
【００４１】
以下、実施例等により本発明をさらに具体的に説明する。ただし、本発明の技術的範囲は、それらの例により何ら限定されるものではない。
【実施例１】
【００４２】
（大豆胚軸からのポリアミン組成物の調製）
（１）大豆胚軸の酸性水への浸漬
大豆胚軸（キッコーマンソイフーズ社製）１０ｇに各濃度の酸性水（塩酸にて調製、添加した塩酸の濃度は表１記載の通り）５０ｍｌを添加し、室温で時々撹拌しながら４時間放置した。その間、大豆胚軸を酸性水に浸漬させた液体部分のｐＨを数回測定し、最終的には表１記載のｐＨで安定していることを確認した。
【００４３】
（２）大豆胚軸を酸性水に浸漬させた液体部分におけるポリアミン含有量の測定
以下のポリアミン分析方法に従って、大豆胚軸を酸性水に浸漬させた液体部分におけるポリアミン含有量を測定した。
ポリアミン量を測定したい試料を、全てＰＴＦＥ  ０．４５μｍフィルターで濾過した。その後、Ｎｏｖｅｌｌａ−Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ  Ｓ．  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．，４８，５１１７−５１２３（２０００）の方法に基づいて、ＨＰＬＣを用いてポリアミンを分析した［カラム：Ｎｏｖａ Ｐａｃｋ Ｃ１８, ３．９ ×１５０ ｍｍ，粒径４μｍ（Ｗａｔｅｒｓ社製）］。得られたスペルミジン比率およびポリアミン回収率を表１に示す。
【００４４】
「スペルミジン比率」は、大豆胚軸中で含有量の多いプトレシンを機能性が低いポリアミンとし、スペルミジンを機能性が高いポリアミンとして、ポリアミン組成物に含まれるプトレシン、スペルミジンの合計含有量のうち、スペルミジンの占める割合比率（スペルミジン／（プトレシン＋スペルミジン）×１００）として定義した。スペルミジン比率および、１Ｎ塩酸で抽出した際のポリアミン量を１００％とするポリアミン回収率を表１に示す。
【００４５】
（３）塩濃度の測定
また、塩濃度を測定したいポリアミン抽出液検体を、８Ｎ水酸化ナトリウムによりｐＨ７まで中和した後、塩分計（アタゴ社製、ＳＡＬＴ ＭＥＴＥＲ ＥＳ−４２１）を用いて塩濃度を測定した。さらに、Ｂｒｉｘ計（アタゴ社製 デジタル屈折計ＲＸ−５０００）を用いて固形分濃度を測定し、これらの結果をもとに算出した固形分あたりの塩濃度（％）を表１に示す。
【００４６】
【表１】
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【００４７】
表１の通り、添加した塩酸の濃度によって、浸漬開始４時間後の浸漬液のｐＨは０．１〜４．９までの幅を有し、このｐＨによって、スペルミジン比率は異なっていた。すなわち、浸漬液のｐＨが３．５以下である場合、スペルミジン比率は９５％以上という高い抽出効率を示した。これに対し、浸漬液のｐＨが３．５を上回るｐＨ条件で抽出を行った場合、スペルミジン比率は低下してしまうことがわかった。
【００４８】
また、浸漬液のｐＨが３．５を上回る度合が高いほど、１Ｎ塩酸で抽出した際のポリアミン量を１００％としたポリアミン回収率は低下することがわかった。例えば、ｐＨ３．８ではポリアミン回収率は５９％に低下し、ｐＨ４．２ではポリアミン回収率は４４％に低下し、ｐＨ４．９では、ポリアミン回収率は２６％にまで低下する。これに対し、ｐＨ３．５以下のｐＨ条件下では、ポリアミン回収率は７５％を上回り、特に、ｐＨ３．０以下では、ポリアミン回収率は９０％を超え、ｐＨ２．０以下ではポリアミン回収率は１００％であった。
【００４９】
さらに、抽出されるポリアミン組成物中の塩濃度について比較を行うと、１．０Ｎの塩酸で抽出を行った場合、得られるポリアミン組成物中の塩濃度が５．２０％（固形分あたり４６％）であったのに対し、ｐＨ１．０を超えるｐＨ条件下で抽出したものは塩濃度が１．５６％（固形分あたり１９％）以下となり、ｐＨ１．０以上で抽出することにより含有する塩濃度を低く抑えることができることがわかった。
【００５０】
以上より、スペルミジン比率が高く、かつ、ポリアミン回収率も高く、しかも、塩濃度／固形分が低いという点で、好ましい組成のポリアミン組成物が得られるｐＨ条件範囲はｐＨ１．０〜３．５であることがわかった。
【実施例２】
【００５１】
（大豆胚軸からのポリアミン組成物の調製：クエン酸による抽出例）
大豆胚軸（キッコーマンソイフーズ製）１０ｇに７０％エタノール５０ｍｌを添加し、一晩室温で放置したのち、液体部分を除去した。残った残渣に各濃度の酸性水（クエン酸にて調製、添加したクエン酸の濃度は表２記載の通り）５０ｍｌを添加し、実施例１同様、室温で時々撹拌しながら４時間放置した。その後、ｐＨを確認後、８Ｎの水酸化ナトリウムを用いてｐＨ７．０に調整した。実施例１同様に、大豆胚軸を酸性水に浸漬させた液体部分におけるポリアミン含有量、スペルミジン比率、ポリアミン回収率、塩濃度を表２に示した。さらに、ポリアミン組成物に含まれるプトレシン、スペルミジン、スペルミンの合計含有量のうち、スペルミジンおよびスペルミンの占める割合を表す「スペルミジン＋スペルミン比率」（（スペルミジン＋スペルミン）／（プトレシン＋スペルミジン＋スペルミン）×１００）を求めた。それぞれの数値を表２に示す。
【００５２】
【表２】
2015000019.tif 000003
【００５３】
表２より、スペルミジン比率および／またはスペルミジン＋スペルミン比率が９５％以上、かつ、ポリアミン回収率も８０％以上となる、好ましい組成のポリアミン組成物が得られるｐＨ条件は、ｐＨ３．５以下であることがわかった。なお、大豆胚軸由来ポリアミンの場合、スペルミン含有率は少ないため、スペルミジンとスペルミンを合計した含有比率（スペルミジン+スペルミン比率）とスペルミジンのみで計算したスペルミジン比率に大きな数値の差はなかった。
【００５４】
さらに、塩分計で数値化される塩分濃度の観点からは、従来の強酸で調製した場合と比較して、本発明のｐＨ条件で調整することにより、得られるポリアミン組成物中に持ち込まれる塩分を好ましく低減できることがわかった。
【００５５】
また、１Ｎ塩酸で抽出した際のポリアミン量を１００％として、ポリアミン回収率を示した。表２に示すとおり、ｐＨが４．２以上のｐＨ条件下で調製を行った場合には、ポリアミン回収率は５４％以下に留まった。これに対し、ｐＨ３．５以下のｐＨ条件下で調製を行った場合には、ポリアミン回収率は８０％以上となり、良好な回収率で調製を行えることがわかった。
【実施例３】
【００５６】
（ｐＨ３で抽出を行うことによるポリアミン組成物の調製）
１００ｇの大豆胚軸（キッコーマンソイフーズ社製）を、７０％エタノール５００ｍｌに浸漬し、４時間室温で放置した。その後、エタノールを除去した残渣に、さらに７０％エタノール５００ｍｌを添加し、一晩室温で放置した。その後、エタノールを除去した残渣に、０．２Ｎ塩酸水５００ｍｌを添加し、一晩室温で放置した。放置後のｐＨはｐＨ３．０となった。
【００５７】
前記浸漬物から液体部分を回収し、８Ｎ水酸化ナトリウムを用いてｐＨ４．０まで中和した後、ＵＦ膜（ペンシルモジュールＡＩＰ−００１３、旭化成）を透過させ、通過液を凍結乾燥により粉体化した。
【００５８】
次いで、得られたポリアミン組成物を０．１Ｎ塩酸に再溶解し、実施例１に従ってポリアミン含有量を測定し、プトレシンとスペルミジンの含有量を確認した。その結果、上記の方法で調製したポリアミン組成物におけるスペルミジン比率は９５％であった。また、同様の工程で１Ｎ塩酸水を用いて抽出を行った場合（一晩放置後のｐＨは０であった）に得られるポリアミン量を１００％とした場合のポリアミン回収率は、９８％であった。上記の方法で調製したポリアミン組成物の乾燥前の抽出液の塩濃度は０．３９％（固形分あたり０．２０％）であった。
【００５９】
これより、ｐＨ３．０となる酸性水で抽出することにより、機能性が高いスペルミジンを高含有し、かつ低塩濃度のポリアミン組成物を効率よく製造可能であることがわかった。
【実施例４】
【００６０】
（大豆胚軸を高濃度酸性水で浸漬した際のｐＨ）
大豆胚軸（キッコーマンソイフーズ製）１０ｇを、実施例３と同様にエタノール処理し、酸性水として、１Ｎ塩酸、５％トリクロロ酢酸、５％過塩素酸を、それぞれ５０ｍｌを添加し、４時間後の各浸漬液のｐＨを測定した。その結果、各酸性水を用いた浸漬液全てにおいて、ｐＨ０以下（ｐＨメーターが０まで振り切れ測定不可能な状態）であることを確認した。これより、ポリアミン抽出に従来利用されてきた各種酸性水を用いた場合の浸漬液のｐＨは、本発明のポリアミン組成物を調製するために好適なｐＨ範囲外であることがわかった。
【産業上の利用可能性】
【００６１】
本発明のポリアミン組成物は、スペルミジンおよび／またはスペルミンの含有比率が高く、かつ、塩濃度が低く特別な脱塩工程を必要としないいため、高機能ポリアミン組成物として、健康食品、サプリメント、化粧品等に好適に用いることができ、有用である。