(57)【要約】【課題】包装容器の正確な微生物遮蔽性評価方法を提供する。【解決手段】微生物を含む気体に封をされた包装容器を暴露するステップＳ１０３と、包装容器の内面に培養液を接触させ、包装容器の外面から内面に進入した微生物を培養液に含ませるステップＳ１０４と、培養液に含まれた微生物を培養するステップＳ１０７と、培養液中で培養された微生物を確認するステップＳ１０８と、を含む、包装容器の微生物遮蔽性評価方法。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
微生物を含む気体に封をされた包装容器を暴露することと、
前記包装容器の内面に培養液を接触させ、前記包装容器の外面から内面に進入した前記微生物を前記培養液に含ませることと、
前記培養液に含まれた前記微生物を培養することと、
前記培養液中で培養された前記微生物を確認することと、
を含む、包装容器の微生物遮蔽性評価方法。
【請求項２】
前記封をされた包装容器が培養液容器を格納しており、
前記培養液容器が前記培養液を保管している、
請求項１に記載の包装容器の微生物遮蔽性評価方法。
【請求項３】
前記微生物を含む気体に前記封をされた包装容器を暴露することの前に、
前記培養液容器を格納している前記封をされた包装容器を滅菌することを更に含む、請求項２に記載の包装容器の微生物遮蔽性評価方法。
【請求項４】
前記微生物を含む気体に前記封をされた包装容器を暴露した後、
前記封をされた包装容器の中の前記培養液容器を開き、前記封をされた包装容器の内面に前記培養液を接触させる、
請求項２又は３に記載の包装容器の微生物遮蔽性評価方法。
【請求項５】
前記封をされた包装容器の内面に接触した前記培養液を再び前記培養液容器の中に入れることを更に含む、請求項４に記載の包装容器の微生物遮蔽性評価方法。
【請求項６】
前記封をされた包装容器の内面に接触した前記培養液を、前記封をされた包装容器の中で再び前記培養液容器の中に入れることを更に含む、請求項４に記載の包装容器の微生物遮蔽性評価方法。
【請求項７】
前記培養液が入った前記培養液容器を密閉してから、前記包装容器を開封し、前記包装容器から前記培養液容器を取り出すことを更に含む、請求項５又は６に記載の包装容器の微生物遮蔽性評価方法。
【請求項８】
前記培養液容器に入っている前記培養液に含まれた前記微生物を培養する、請求項５ないし７のいずれか１項に記載の包装容器の微生物遮蔽性評価方法。
【請求項９】
前記培養液中で前記微生物が確認された場合の前記暴露の条件を、前記包装容器を保存するときの禁忌条件とする、請求項１ないし８のいずれか１項に記載の包装容器の微生物遮蔽性評価方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は滅菌技術に関し、特に包装容器の微生物遮蔽性評価方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
医薬品、医療器具、及び食品等は、内部が無菌的な容器に梱包される（例えば、特許文献１、２、３、及び非特許文献１参照。）。内部が無菌的な容器の一例として、滅菌バッグがある。滅菌バッグは、オートクレーブによる加熱加圧滅菌法、あるいはエチレンオキシドガス等によるガス滅菌法で内部が滅菌可能であるように、望ましくは微生物が透過しない程度の通気性を有している。しかし、滅菌バッグが微生物が透過する程度の通気性を有してしまったり、不完全な封止がなされてしまったりすることにより、滅菌バッグの内部に微生物が進入してしまうことがある。また、ある条件では微生物が進入できなかった滅菌バッグの内部に、別の条件では微生物が進入できる場合もある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００６−２６３２４５号公報
【特許文献２】特表平１０−５０５０４５号公報
【特許文献３】特開平２−１６４５０号公報
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】小林ら、「滅菌バッグについて−シールバリデーション、無菌性の破綻など−」、ジャーナル・オブ・ヘルスケア−アソシエイティッド・インフェクション、２０１２年、第５巻、第１号、ｐ．２３−２６
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
従来、内部が無菌的であることが望まれる包装容器をどのような条件で微生物を含む気体に暴露したときに包装容器の内部に微生物が進入するか、正確に評価する方法がなかった。そこで、本発明は、包装容器の正確な微生物遮蔽性評価方法を提供することを目的の一つとする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の態様によれば、（ａ）微生物を含む気体に封をされた包装容器を暴露することと、（ｂ）包装容器の内面に培養液を接触させ、包装容器の外面から内面に進入した微生物を培養液に含ませることと、（ｃ）培養液に含まれた微生物を培養することと、（ｄ）培養液中で培養された微生物を確認することと、を含む、包装容器の微生物遮蔽性評価方法が提供される。
【０００７】
当該方法において、例えば、封をされた包装容器が培養液容器を格納しており、培養液容器が培養液を保管していてもよい。微生物を含む気体に封をされた包装容器を暴露することの前に、培養液容器を格納している封をされた包装容器を滅菌することを更に含んでいてもよい。微生物を含む気体に封をされた包装容器を暴露した後、封をされた包装容器の中の培養液容器を開き、封をされた包装容器の内面に培養液を接触させてもよい。封をされた包装容器の内面に接触した培養液を再び培養液容器の中に入れることを更に含んでいてもよい。封をされた包装容器の内面に接触した培養液を、封をされた包装容器の中で再び培養液容器の中に入れることを更に含んでいてもよい。培養液が入った培養液容器を密閉してから、包装容器を開封し、包装容器から培養液容器を取り出すことを更に含んでいてもよい。培養液容器に入っている培養液に含まれた微生物を培養してもよい。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によれば、包装容器の正確な微生物遮蔽性評価方法を提供可能である。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】本発明の実施の形態に係る包装容器の微生物遮蔽性評価方法のフローチャートである。
【図２】本発明の実施の形態に係る包装容器の模式図である。
【図３】本発明の実施の形態に係る培養液容器の模式図である。
【図４】本発明の実施の形態に係る包装容器に入れられた培養液容器の模式図である。
【図５】本発明の実施の形態に係る包装容器に入れられた培養液容器の模式図である。
【図６】本発明の実施の形態に係る試験室の模式図である。
【図７】本発明の実施の形態に係る微生物検出装置の模式図である。
【図８】本発明の実施の形態に係る包装容器に入れられた培養液容器の模式図である。
【図９】本発明の実施の形態に係る包装容器と培養液容器の模式図である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
以下に本発明の実施の形態を説明する。以下の図面の記載において、同一又は類似の部分には同一又は類似の符号で表している。但し、図面は模式的なものである。したがって、具体的な寸法等は以下の説明を照らし合わせて判断するべきものである。また、図面相互間においても互いの寸法の関係や比率が異なる部分が含まれていることは勿論である。
【００１１】
本発明の実施の形態に係る包装容器の微生物遮蔽性評価方法は、図１に示すように、微生物を含む気体に封をされた包装容器を暴露するステップＳ１０３と、包装容器の内面に培養液を接触させ、包装容器の外面から内面に進入した微生物を培養液に含ませるステップＳ１０４と、培養液に含まれた微生物を培養するステップＳ１０７と、培養液中で培養された微生物を確認するステップＳ１０８と、を含む。
【００１２】
ステップＳ１０１で、図２に示すようなバッグや滅菌シールパウチ等の包装容器１を用意する。ただし、包装容器の形状はこれに限定されず、ビン及びコンテナ等でもよい。包装容器１は、例えば、医薬品、医療器具、及び食品等の包装容器であり、内部が無菌的であることが望まれる容器である。この時点で、包装容器１は封をされていない。次に、図３に示すように、例えば三角フラスコ等の培養液容器２を用意し、培養液容器２に培養液３を入れ、培養液容器２の開口をシリコン栓等の栓４でふさぐ。その後、図４に示すように、包装容器１に培養液３が入った培養液容器２を入れる。なお、培養液容器２は、三角フラスコに限定されない。
【００１３】
ステップＳ１０２で、図５に示すように、包装容器１の開口部に例えばヒートシーラーを用いて熱シール１１等で封をする。これにより、封をされた包装容器１が培養液容器２を格納し、培養液容器２が培養液３を保管する。その後、オートクレーブ等を用いて、封をされた包装容器１を加熱加圧滅菌する。なお、封をされた包装容器１を滅菌する方法は、これに限定されない。例えば、エチレンオキシドガス等によるガス滅菌法で包装容器１を滅菌してもよい。
【００１４】
ステップＳ１０３で、包装容器１を図６に示すような試験室２０１内に配置し、試験室２０１内部で、包装容器１を微生物を含む気体に暴露する。包装容器１は、例えば、試験室２０１の天井からピンチハンガー等でつるされる。試験室２０１は、例えば、骨格をなす例えばアルミニウム製のフレームと、フレームにはめ込まれた、側壁をなすポリカーボネート製の透明パネルと、を備えるチャンバである。試験室２０１には、例えば給気装置２１１Ａ、２１１Ｂが設けられている。給気装置２１１Ａ、２１１Ｂは、ＨＥＰＡ（Ｈｉｇｈ  Ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ  Ａｉｒ  Ｆｉｌｔｅｒ）及びＵＬＰＡ（Ｕｌｔｒａ  Ｌｏｗ  Ｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎ  Ａｉｒ  Ｆｉｌｔｅｒ）等の超高性能エアフィルタを通して、試験室２０１内部に清浄な空気を送り込む。
【００１５】
試験室２０１に設けられた噴霧装置２０２から、微生物が、試験室２０１内部に放出される。微生物は、細菌等を含む。細菌の例としては、グラム陰性菌、グラム陽性菌、及びカビ胞子を含む真菌が挙げられる。グラム陰性菌の例としては、大腸菌が挙げられる。グラム陽性菌の例としては、表皮ブドウ球菌、枯草菌芽胞、マイクロコッカス、及びコリネバクテリウムが挙げられる。カビ胞子を含む真菌の例としては、アスペルギルスが挙げられる。噴霧装置２０２は、例えばジェット式ネブライザであり、所定の濃度で微生物を含む流体を保管する。噴霧装置２０２は、所定の流量で圧縮ガス等の気流を供給され、気流を、微生物を含む流体に吹きつけることによってエアロゾルを発生させ、試験室２０１内部に微生物を含む流体をミスト状にして噴霧する。なお、図６においては、噴霧装置２０２は試験室２０１内部に配置されているが、噴霧装置２０２を試験室２０１の外部に配置し、噴霧装置２０２が噴霧したエアロゾルを、配管等で試験室２０１内部に誘導してもよい。
【００１６】
噴霧される微生物の濃度は、例えば１０4ＣＦＵ／ｍ3である。なお、ＣＦＵは、Ｃｏｌｏｎｙ Ｆｏｒｍｉｎｇ Ｕｎｉｔ（コロニーフォーミングユニット）の略である。微生物の噴霧は、例えば、所定の間隔をおいて、複数回繰り返される。例えば、２４時間にわたって、３０分おきの噴霧を４８回繰り返す。
【００１７】
試験室２０１内には、攪拌装置としての攪拌ファン２１０Ａ、２１０Ｂ、２１０Ｃ、２１０Ｄが配置されている。攪拌ファン２１０Ａ−２１０Ｄは、試験室２０１内部の空気を攪拌し、試験室２０１内部に散布された微生物の自重による自然沈降を防止する。
【００１８】
また、試験室２０１内には、清浄化装置としてのエアクリーナ２０６が配置されている。エアクリーナ２０６は、試験室２０１内部の空気等の気体に含まれる微粒子や微生物を除去して、気体を清浄化する。例えば、噴霧装置２０２から試験室２０１内に微生物を含む流体を噴霧する前に、エアクリーナ２０６を運転することによって、噴霧装置２０２が噴霧する微生物以外の微粒子や微生物をあらかじめ試験室２０１内部から除去することが可能である。なお、図６においては、エアクリーナ２０６は試験室２０１内部底面に配置されているが、エアクリーナ２０６を試験室２０１の壁面または天井部に配置してもよい。
【００１９】
試験室２０１には、気体中を漂う微生物の数や濃度を計測可能な微生物検出装置２２０が配置される。微生物検出装置２２０は、例えばエアロゾル検出装置であり、図７の模式的な断面図に示すように、筐体２２１と、試験室２０１の内部から筐体２２１の内部に、空気を吸引する第１の吸引装置２２２と、を備える。第１の吸引装置２２２で吸引された空気は、筐体２２１内部のノズル２２３の先端から放出される。ノズル２２３の先端から放出された空気は、ノズル２２３の先端と対向して筐体２２１の内部に配置された第２の吸引装置２２４で吸引される。微生物検出装置２２０は、レーザ等の光源２２５をさらに備える。光源２２５は、ノズル２２３の先端から放出され、第２の吸引装置２２４で吸引される空気に向けて、レーザ光２２６を照射する。
【００２０】
空気中に微生物が含まれる場合、レーザ光２２６を照射された微生物のそれぞれが、蛍光を発する。微生物検出装置２２０は、蛍光検出器２２７をさらに備える。蛍光検出器２２７は、微生物が発した蛍光を検出し、蛍光強度を計測する。蛍光を検出した回数に基づき、図６に示す試験室２０１内の気体の微生物濃度をリアルタイムで算出することが可能である。試験室２０１内の気体の微生物濃度が所定より低くなった場合、噴霧装置２０２から微生物を放出して、試験室２０１内の気体の微生物濃度を一定に保ってもよい。また、試験室２０１内の気体の微生物濃度が所定より高くなった場合、給気装置２１１Ａ、２１１Ｂから清浄な空気を試験室２０１内に供給したり、エアクリーナ２０６を稼働させたりすることによって、試験室２０１内の気体の微生物濃度を一定に保ってもよい（例えば、特開２０１２−２６６２５号参照。）。微生物のある時点での瞬時濃度、暴露時間、及び積算暴露濃度等の条件は、任意に設定可能である。
【００２１】
所定の時間、微生物を含む気体に封をされた包装容器１を暴露した後、試験室２０１から包装容器１を取り出す。次に、図１のステップＳ１０４で、図８に示すように、包装容器１の封をしたまま、包装容器１の中の培養液容器２の栓４を開き、封をされた包装容器１の中に培養液３をこぼして、包装容器１の内面に培養液３を接触させる。培養液３が包装容器１の内面に複数回接触するよう、包装容器１を振とうしてもよい。包装容器１を微生物を含む気体に暴露している間に、包装容器１の中に微生物が進入した場合、微生物は、培養液３中に取り込まれる。
【００２２】
図１のステップＳ１０５で、包装容器１の内面に接触した培養液３を、包装容器１に封をしたまま、包装容器１の中で再び培養液容器２の中に入れ、培養液３が入った培養液容器２を栓４で閉じて密閉する。次に、ステップＳ１０６で、図９に示すように、包装容器１を開封し、包装容器１から培養液容器２を取り出す。その後、微生物を含む培養液３が入った培養液容器２を恒温漕等に移動して、ステップＳ１０７で所定の期間、所定の温度で微生物を培養し、ステップＳ１０８で培養された微生物を確認する。例えば、培養液の濁度から、微生物の濃度を確認する。あるいは、微生物のコロニーの数を計測してもよい。培養液中の微生物の数は、包装容器１を微生物を含む気体に暴露した際に、包装容器１内部に進入した微生物の数に依存する。したがって、培養液中の微生物の数が多ければ、暴露中に多くの微生物が包装容器１内部に進入したと評価することが可能である。
【００２３】
以上示した、本発明の実施の形態に係る包装容器の微生物遮蔽性評価方法によれば、微生物を含む気体に包装容器を暴露する際の微生物の濃度、暴露時間、及び積算暴露濃度等の条件をふることにより、包装容器内部に微生物が混入する条件の閾値を求めることが可能となる。あるいは、暴露の条件を一定にし、包装容器の封止の条件、及び包装容器の材料の条件等をふることにより、所定の暴露条件において、微生物が内部に混入しない包装容器を特定することも可能である。また、培養液中で微生物が確認された場合の暴露の条件を、包装容器を保存するときの禁忌条件とすることにより、包装容器の保存条件を適切に管理することが可能となる。
【００２４】
（その他の実施の形態）
上記のように本発明を実施の形態によって記載したが、この開示の一部をなす記述及び図面はこの発明を限定するものであると理解するべきではない。この開示から当業者には様々な代替実施の形態、実施例及び運用技術が明らかになるはずである。例えば、包装容器を微生物を含む気体に暴露する際に、気体中の微生物の濃度を高く設定し、暴露時間を短く設定してもよい。また、図７を用いて、微生物検出装置が光学式のエアロゾル検出装置である例を説明したが、微生物検出装置は、エアサンプラー等、微生物の数又は濃度を検出可能な装置であれば、様々な装置が使用可能である。このように、本発明はここでは記載していない様々な実施の形態等を包含するということを理解すべきである。
【符号の説明】
【００２５】
１      包装容器
２      培養液容器
３      培養液
４      栓
１１    熱シール
２０１  試験室
２０２  噴霧装置
２０６  エアクリーナ
２１０Ａ、２１０Ｂ、２１０Ｃ、２１０Ｄ  攪拌ファン
２１１Ａ、２１１Ｂ      給気装置
２２０  微生物検出装置
２２１  筐体
２２２  第１の吸引装置
２２３  ノズル
２２４  第２の吸引装置
２２５  光源
２２６  レーザ光
２２７  蛍光検出器
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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