(57)【要約】      （修正有）【課題】Ｉ型・II型トポイソメラーゼの活性を抑制して、癌治療に有効な薬剤の提供。【解決手段】下式に示される、チオクロメノ[2,3-c]キノリン-12-オンの誘導体、医学的に許容できる塩、立体異性体及び鏡像異性体。2015151396.tif 000012（RはＣｌ、ヒドロキシ基、メトキシ基、ジメチルアミノ基、置換又は非置換のピペラジン−1−イル基、モルフォリノ基、チオモルフォリノ基、置換又は非置換のピペリジン−1−イル基、或いは置換アルキル基等）【選択図】図１
2015151396.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
化学式１で表される化合物であって、
【化１】
2015151396.tif 000011
式中、Rは次に掲げる置換基から成るグループからの選択となる、化合物。
i)  ハロゲノ基、アミノ基、ヒドロキシ基及びスルホ基；
ii)  NH(CH2)nHの直鎖状アルキル基で、まず分枝鎖アルキルがあり、ひとつのアミノ基が分枝アルキル基を置換し、ひとつのヒドロキシ基が分枝アルキル基を置換しており、ここにおいて、1 ≦ n ≦ 10；
iii)  O(CH2)nH、N(CH3)2、NH(CH2)nNH(CH2)nOH、ここにおいて、1 ≦ n ≦ 10；
iv)  C3−12含N環式アルキル基及び複素環基群で、O、S、Nから選んだ1個から3個のヘテロ原子を含み、オルト、メタ、パラの位置の置換基は、ヒドリル基、(CH2)nアルキル基、(CH2)nヒドロキシ基、(CH2)nC3−12環式アルキル基、(CH2)nC3−12含N環式アルキル基、(CH2)nベンゼン環、アルデヒド基及び(CH2)nCOC3−12含N環アルキル基、のいずれかから個別に選択可能であり、ここにおいて、1 ≦ n ≦ 10；
v)  NH(CH2)nR1、0 ≦ n ≦ 10、ここにおいてR1は、N(CH3)2、C(NH2)2、NH(CH2)nHの直鎖状アルキル基で、まず分枝鎖アルキルがあり、ひとつのアミノ基が分枝アルキル基を置換し、ひとつのヒドロキシ基が分枝アルキル基を置換しているものから選択可能；
vi)  NH(CH2)nR2、0 ≦ n ≦ 10、ここにおいてR2は、ベンゼン環、C3−12環式アルキル基及び複素環基群で、O、S、Nから選んだ1個から3個のヘテロ原子を含み、オルト、メタ、パラの位置の置換基は、次のいずれかから別個に選択が可能である；メトキシ基、アミノ基、ベンゼン環、置換C1−C3分枝鎖アルキル基、アミノ基、ニトロ基、ヒドロキシ基及びC3−12複素環（C3−12複素環は、O、S、Nから選んだ1個から3個のヘテロ原子を含む、医薬学的に許容できる塩、立体異性体及び鏡像異性体）。
【請求項２】
請求項1記載の化合物において、置換基i)− vi)は、塩素、ヒドロキシ基、メトキシ基、ジメチルアミノ、ピペラジン−1−イル、4−メチルピペラジン−1−イル、4−エチルピペラジン−1−イル、4−(2−ヒドロキシエチル) ピペラジン−1−イル、4−ベンジルピペラジン −1−イル、4−フェニルピペラジン −1−イル、モルフォリノ、チオモルフォリノ、ピペリジン−1−イル、4−ヒドロキシピペリジン−1−イル、4−ベンジルピペリジン−1−イル、[1,4'−ビピペリジン]−1'−イル、4−(3−(ピペリジン−4−イル)プロピル、ピロリジン−1−イル、2−オキソピペリジン −1−イル、メチルアミノ基、エチルアミノ基、プロピルアミノ基、ブチルアミノ基、イソブチルアミノ基、ペンタン−3−イル−アミノ基、(2−(ジメチルアミノ)エチル)アミノ基、(2−(ジエチルアミノ)エチル)アミノ基、エタノールアミノ基、プロパノールアミノ基、ペンタノールアミノ、(1−ヒドロキシブタン −2−イル)アミノ基、(4−メチルペンタン−2−イル)アミノ基、(2−アミノエチル)アミノ基、(2−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)エチル)アミノ基、(2−モルフォリノエチル)アミノ基、(3−(ジメチルアミノ)プロピル)アミノ基、(3−(ジエチルアミノ)プロピル)アミノ基、(3−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)プロピル)アミノ基、(2,3−ジヒドロ−1H−インデン−2−イル)アミノ基、シクロヘキシルアミノ基、(1−ベンジルピペリジン−4−イル)アミノ基、(チオフェン−2−イルメチル)アミノ基、(シクロヘキシルメチル)アミノ基、ベンジルアミノ基、(ピリジン−2−イルメチル)アミノ基、(ベンゾ[d][1,3] ジオキソール−5−イルメチル)アミノ基、(2−メトキシベンジル)アミノ基、(3,4−ジメトキシベンジル)アミノ基、フェネチルアミノ基、(4−メトキシフェネチル)アミノ基、(4−アミノフェネチル)アミノ基、グアニジン及びピペリジン−1−イル−アミノ、により構成されるグループから選択可能である、化合物。
【請求項３】
請求項1記載の化合物または医薬学的に許容可能なその塩類において、当該化合物は、
3−((4−クロロフェニル)チオ)−2−ヒドロキシキノリン−4−カルボン酸、
6,9−ジクロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−ヒドロキシ−12H−チオクロメノ[2,3−c]キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−メトキシ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−ジメチルアミノ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(ピペラジン−1−イル)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(4−メチルピペラジン−1−イル)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(4−エチルピペラジン−1−イル)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(4−(2−ヒドロキシエチル) ピペラジン−1−イル)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン12オン、
6−(4−ベンジルピペラジン−1−イル)−10−クロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(4−フェニルピペラジン−1−イル)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−モルフォリノ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−チオモルフォリノ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(ピペリジン−1−イル)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(4−ヒドロキシピペリジン−1−イル)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
6−(4−ベンジルピペリジン−1−イル)−10−クロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
6−([1,4'−ビピペリジン]−1'−イル)−10−クロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(4−(3−(ピペリジン−4−イル) プロピル) ピペリジン−1−イル−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(ピロリジン−1−イル)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(2−オキソピペリジン−1−イル)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−メチルアミノ−12H−チオクロメノ[2,3−c]キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−エチルアミノ−12H−チオクロメノ[2,3−c]キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−プロピルアミノ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
6−(ブチルアミノ)−10−クロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−イソブチルアミノ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(ペンタン−3−イル−アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((2−(ジメチルアミノ)エチル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((2−(ジエチルアミノ)エチル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(2−エタノールアミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(3−プロパノールアミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(5−ペンタノールアミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((1−ヒドロキシブタン −2−イル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((4−メチルペンタン−2−イル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
6−((2−アミノエチル)アミノ)−10−クロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((2−((2−ヒドロキシエチル)アミン)エチル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((2−モルフォリノエチル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((3−(ジメチルアミノ)プロピル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((3−(ジエチルアミノ)プロピル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((3−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)プロピル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((2,3−ジヒドロ−1H−インデン−2−イル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(シクロヘキシルアミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
6−((1−ベンジルピペリジン−4−イル)アミノ)−10−クロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((チオフェン−2−イルメチル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((シクロヘキシルメチル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
6−(ベンジルアミノ)−10−クロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((ピリジン−2−イルメチル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
6−((ベンゾ[d][1,3] ジオキソール−5−イルメチル)アミノ)−10−クロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((2−メトキシベンジル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((3,4−ジメトキシベンジル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(フェネチルアミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((4−メトキシフェネチル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
6−((4−アミノフェネチル)アミノ)−10−クロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
2−(10−クロロ−12−オキソ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−6−イル) グアニジン、
10−クロロ−6−(ピペリジン−1−イル−アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
及びそれらの塩類、というグループから選択可能である、化合物。
【請求項４】
治療効果が見込める量の請求項1の化合物であって、医薬学的に許容可能なキャリアー剤、希釈剤または賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項５】
請求項1から4における化合物のいずれかであって、Ｉ型トポイソメラーゼ活性を抑制する医薬品を製造するために用いる医薬組成物。
【請求項６】
請求項1から4における化合物のいずれかであって、II型トポイソメラーゼ活性を抑制する医薬品を製造するために用いる医薬組成物。
【請求項７】
請求項1から4における化合物のいずれかであって、癌治療薬を製造するために用いる医薬組成物。
【請求項８】
請求項7の用途で、癌の種類は、白血病、非小細胞肺癌、大腸癌、中枢神経癌、黒色腫、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、乳癌から選択される医薬組成物。
【請求項９】
請求項1記載の化合物を製造する方法であって、
(1)   isatin、2−((4−chlorophenyl)thio)acetic acid及び酢酸ナトリウムを混合し、150 ℃で1時間反応させ、完全に反応させた後の混合液を冷却後、酢酸を加えて得た沈殿物を、さらに酢酸、水、ノルマルヘキサンで洗浄し、化合物2（3−((4−クロロフェニル)チオ)−2−ヒドロキシキノリン−4−カルボン酸）を得る工程と、
(2)  化合物2（3−((4−クロロフェニル)チオ)−2−ヒドロキシキノリン−4−カルボン酸）をオキシ塩化リンに溶かして150 ℃で48時間反応させ、冷卻後に反応物を水中に入れ、濾過して得た沈殿物を10%炭酸水素ナトリウム溶液に入れて1時間攪拌し、沈殿物を収集してから水で洗い、粗生成物をジクロロメタンで結晶化させ、化合物3（6,9−ジクロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン）を得る工程と、
(3)  化合物3（6,9−ジクロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン）をDMFに溶かし、濃塩酸を加えてから12時間還流させてから、反応物を真空脱水し、水を加えて濾過した後、粗生成物をエタノールで洗浄し、化合物4（10−クロロ−6−ヒドロキシ−12H−チオクロメノ[2,3−c]キノリン−12−オン）を得る工程と、
(4)  メタノールの中に懸濁させた化合物3（6,9−ジクロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン）とメタノールメトキシドを16時間還流し、冷却後に溶剤を除去して濾過後、エタノールとノルマルヘキサンで洗浄し、化合物5（10−クロロ−6−メトキシ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン）を得る工程と、
(5)  化合物3（6,9−ジクロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン）、及び適切な第二級アミンと炭酸ナトリウムをDMSOまたはDMFに溶かし、10時間還流させ、安置してから冷却後、反応物を冷水に入れ、濾過して沈殿物を取り出し、水とメタノールで洗浄して化合物6−21：
10−クロロ−6−ジメチルアミノ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(ピペラジン−1−イル)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(4−メチルピペラジン−1−イル)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(4−エチルピペラジン−1−イル)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(4−(2−ヒドロキシエチル) ピペラジン−1−イル)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン12オン、
6−(4−ベンジルピペラジン−1−イル)−10−クロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(4−フェニルピペラジン−1−イル)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−モルフォリノ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−チオモルフォリノ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(ピペリジン−1−イル)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(4−ヒドロキシピペリジン−1−イル)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
6−(4−ベンジルピペリジン−1−イル)−10−クロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
6−([1,4'−ビピペリジン]−1'−イル)−10−クロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(4−(3−(ピペリジン−4−イル) プロピル) ピペリジン−1−イル−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン
10−クロロ−6−(ピロリジン−1−イル)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、及び
10−クロロ−6−(2−オキソピペリジン−1−イル)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
を得る工程と、
(6)  化合物3（6,9−ジクロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン）と適切な第一級アミンをDMSOに溶かし、8時間還流させてから冷却後、反応物を100 mLの水の中に入れ、濾過して沈殿物を得た後、水とメタノールで洗浄して化合物N1−N34：
10−クロロ−6−メチルアミノ−12H−チオクロメノ[2,3−c]キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−エチルアミノ−12H−チオクロメノ[2,3−c]キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−プロピルアミノ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
6−(ブチルアミノ)−10−クロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−イソブチルアミノ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(ペンタン−3−イル−アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((2−(ジメチルアミノ)エチル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((2−(ジエチルアミノ)エチル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(2−エタノールアミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(3−プロパノールアミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(5−ペンタノールアミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((1−ヒドロキシブタン −2−イル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((4−メチルペンタン−2−イル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
6−((2−アミノエチル)アミノ)−10−クロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((2−((2−ヒドロキシエチル)アミン)エチル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((2−モルフォリノエチル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((3−(ジメチルアミノ)プロピル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((3−(ジエチルアミノ)プロピル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((3−((2−ヒドロキシエチル)アミノ)プロピル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−ケトン、
10−クロロ−6−((2,3−ジヒドロ−1H−インデン−2−イル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(シクロヘキシルアミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
6−((1−ベンジルピペリジン−4−イル)アミノ)−10−クロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((チオフェン−2−イルメチル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((シクロヘキシルメチル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
6−(ベンジルアミノ)−10−クロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((ピリジン−2−イルメチル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
6−((ベンゾ[d][1,3] ジオキソール−5−イルメチル)アミノ)−10−クロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((2−メトキシベンジル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((3,4−ジメトキシベンジル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−(フェネチルアミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
10−クロロ−6−((4−メトキシフェネチル)アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
6−((4−アミノフェネチル)アミノ)−10−クロロ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
2−(10−クロロ−12−オキソ−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−6−イル) グアニジン、及び
10−クロロ−6−(ピペリジン−1−イル−アミノ)−12H−チオクロメノ[2,3−c] キノリン−12−オン、
を得る工程を含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗癌剤、特にチオクロメノ[2,3-c]キノリン-12-オンの誘導体、その抗癌性応用及び評価の分野に属する。
【背景技術】
【０００２】
ほとんどの生物体中において、テロメア（染色体末端）を伸長させ、維持するには、テロメラ-ゼ（telomerase）が必須である。テロメラ-ゼは一種のリボ核酸分解酵素で、RNAとタンパク質構成要素から成る複合体である。テロメラ-ゼ構成要素の重要な部分はすでに判明しており、ヒトテロメラ-ゼは、逆転写活性をもつヒトテロメラ-ゼ逆転写酵素（human telomerase reverse transcriptase, hTERT）、鋳型となるヒトテロメラ-ゼRNA構成要素（human telomerase RNA component、hTERC）、そしてテロメラ-ゼと結合するヒトテロメラ-ゼタンパク（human telomerase-associated protein）、p23、hsp90、hsp40、hsp70 などのサブユニットから構成されている。
【０００３】
多くの研究によると、ヒトテロメラ-ゼ活性は生殖細胞（germ cell）、造血細胞、一部の幹細胞（stem cell）、ほとんどの不死化細胞（immortalized cell）、ほぼすべての腫瘍細胞など、高度の増殖能力を有する細胞にのみ存在する。一般的には、体細胞はテロメラ-ゼ活性を有さないので、細胞分裂を繰り返すごとにテロメアが短縮することから、これは細胞分裂の回数を判断する細胞分裂時計（mitotic clock）となる。テロメアが一定の長さまで短縮すると、細胞分裂が停止して老化の段階に入り、この段階で一定期間を経て細胞死するが、この期間をM1期（mortality stage 1）という。もしM1期において、細胞内で腫瘍抑制遺伝子（tumor suppressor gene）が突然変異を起こすと（例：p53経路及びRb）、細胞は老化の段階を超えて細胞分裂を繰り返すことになるが、この期間をM2期（mortality stage 2）という。この時期にテロメラ-ゼ活性が存在しなければ、テロメアは染色体末端が複製されないので染色体は不安定化し、細胞は遺伝子情報を完全に伝えることができなくなり、細胞死する。よってM2 期は危険期（crisis）とも呼ばれる。ほとんどの細胞はM2期に死亡するが、テロメラ-ゼ活性が存在し続けるわずかな細胞だけは分裂を繰り返し、不死化細胞（または癌細胞）と化する。
【０００４】
一般的には、活性化したテロメラ-ゼは末端部分の複製を促してテロメア長さを維持して細胞老化を抑制する、或いはテロメラ-ゼ活性を除去、抑制すれば、癌細胞の分裂を抑えると見られ、いずれも細胞の不死化、癌化と深く関連していると考えられている。以上をまとめると、正常なヒトの細胞はテロメラ-ゼ活性を有していないので、テロメラ-ゼ活性を抑制する薬物によりテロメラ-ゼに対して抑制作用がかけられると、正常な細胞の生理状況に対する影響はないが、活性を抑制する薬剤は癌細胞の増殖能力を抑制することから、テロメラ-ゼを抗癌剤の標的とするテロメラ-ゼ活性抑制剤は癌治療薬とするための潜在的可能性を有していることになる。
【０００５】
癌の症状はDNAの異常な増殖に起因する。よって癌細胞のDNAを標的に治療を行い、正常な細胞のDNAには害を与えないことが望ましいが、正常な細胞のDNAと癌細胞のDNAを区別して治療を行うのは難しい。それゆえに、正常な細胞のDNAと癌細胞のDNAの特性の違いを踏まえ、癌細胞のDNAだけを攻撃する「標的治療」に、他の化学療法や放射線療法を結びつければ、副作用を大幅に抑え、よりよい治療効果を得ることが可能となる。これが、標的治療が癌治療研究の分野で大いに注目されているゆえんである。トポイソメラ-ゼ（topoisomerase）は、DNAの複製過程で不可欠の役割を演じていることから、最近の癌標的治療における標的となっている。
【０００６】
カンプトテシンは、Ｉ型トポイソメラ-ゼを抑制する最初の低分子医薬品であるが、欠点が多く、臨床医療で用いることができない。例えば、ラクトン環（lactone ring）は人体内部のpHでは水に溶けてヒドロキシカルボン酸（hydroxycarboxylate）に変わり、血清アルブミンと結合してＩ型トポイソメラ-ゼ抑制作用が失われる。camptothecin-Top I-DNAの三者複合体は非共有結合なので構造的に不安定である。カンプトテシンは水溶性が悪いため、生物学的利用能（bioavailability）が優れない。細胞膜上のp-glycoprotein（MDR1, ABCB1）排出ポンプが、薬物を細胞外に押し出す。そしてもっと大事なのが、腫瘍細胞がカンプトテシン及びその誘導体に対して薬剤抵抗性をもち、副作用を起こすことである。後に、カンプトテシンに較べて水溶性に優れた半合成（semi-synthetic）薬、すなわち、1996年に米国食品役物管理局（FDA）によって承認された、卵巣癌治療向けのTopotecan（Hycamtin：登録商標）、及び結腸癌治療向けのIrinotecan（Camptosar：登録商標）が発売されているが、臨床試験や治験で行き詰まっている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、癌治療薬の開発におけるトポイソメラ-ゼ活性抑制剤の重要性に鑑みて改良と研究を重ねた結果として、チオクロメノ[2,3-c]キノリン-12-オンの誘導体、その調製方法及びその応用を教示する。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の目的である化学式１の化合物において、
【０００９】
【化１】
2015151396.tif 000003
式中、Rは次に掲げる置換基から成るグル-プからの選択となる。
i)  ハロゲノ基、アミノ基、ヒドロキシ基及びスルホ基；
ii)  NH(CH2)nHの直鎖状アルキル基で、まず分枝鎖アルキルがあり、ひとつのアミノ基が分枝アルキル基を置換し、ひとつのヒドロキシ基が分枝アルキル基を置換しており、ここにおいて、1 ≦ n ≦ 10；
iii)  O(CH2)nH、N(CH3)2、NH(CH2)nNH(CH2)nOH、ここにおいて、1 ≦ n ≦ 10；
iv)  C3-12含N環式アルキル基及び複素環基群で、O、S、Nから選んだ1個から3個のヘテロ原子を含み、オルト、メタ、パラの位置の置換基は、ヒドリル基、(CH2)nアルキル基、(CH2)nヒドロキシ基、(CH2)nC3-12環式アルキル基、(CH2)nC3-12含N環式アルキル基、(CH2)nベンゼン環、アルデヒド基及び(CH2)nCOC3-12含N環アルキル基、のいずれかから個別に選択可能であり、ここにおいて、1 ≦ n ≦ 10；
v)  NH(CH2)nR1、0 ≦ n ≦ 10、ここにおいてR1は、N(CH3)2、C(NH2)2、NH(CH2)nHの直鎖状アルキル基で、まず分枝鎖アルキルがあり、ひとつのアミノ基が分枝アルキル基を置換し、ひとつのヒドロキシ基が分枝アルキル基を置換しているものから選択可能；
vi)  NH(CH2)nR2、0 ≦ n ≦ 10、ここにおいてR2は、ベンゼン環、C3-12環式アルキル基及び複素環基群で、O、S、Nから選んだ1個から3個のヘテロ原子を含み、オルト、メタ、パラの位置の置換基は、次のいずれかから別個に選択が可能である。メトキシ基、アミノ基、ベンゼン環、置換C1-C3分枝鎖アルキル基、アミノ基、ニトロ基、ヒドロキシ基及びC3-12複素環（C3-12複素環は、O、S、Nから選んだ1個から3個のヘテロ原子を含む、医薬学的に許容できる塩、立体異性体及び鏡像異性体）。
【００１０】
本発明の目的を達成するため、置換基i)- vi)は、次から選択可能である。塩素、ヒドロキシ基、メトキシ基、ジメチルアミノ、ピペラジン-1-イル、4-メチルピペラジン-1-イル、4-エチルピペラジン-1-イル、4-(2-ヒドロキシエチル) ピペラジン-1-イル、4-ベンジルピペラジン -1-イル、4-フェニルピペラジン -1-イル、モルフォリノ、チオモルフォリノ、ピペリジン-1-イル、4-ヒドロキシピペリジン-1-イル、4-ベンジルピペリジン-1-イル、[1,4'-ビピペリジン]-1'-イル、4-(3-(ピペリジン-4-イル)プロピル、ピロリジン-1-イル、2-オキソピペリジン -1-イル、メチルアミノ基、エチルアミノ基、プロピルアミノ基、ブチルアミノ基、イソブチルアミノ基、ペンタン-3-イル-アミノ基、(2-(ジメチルアミノ)エチル)アミノ基、(2-(ジエチルアミノ)エチル)アミノ基、エタノ-ルアミノ基、プロパノ-ルアミノ基、ペンタノ-ルアミノ、(1-ヒドロキシブタン -2-イル)アミノ基、(4-メチルペンタン-2-イル)アミノ基、(2-アミノエチル)アミノ基、(2-((2-ヒドロキシエチル)アミノ)エチル)アミノ基、(2-モルフォリノエチル)アミノ基、(3-(ジメチルアミノ)プロピル)アミノ基、(3-(ジエチルアミノ)プロピル)アミノ基、(3-((2-ヒドロキシエチル)アミノ)プロピル)アミノ基、(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル)アミノ基、シクロヘキシルアミノ基、(1-ベンジルピペリジン-4-イル)アミノ基、(チオフェン-2-イルメチル)アミノ基、(シクロヘキシルメチル)アミノ基、ベンジルアミノ基、(ピリジン-2-イルメチル)アミノ基、(ベンゾ[d][1,3] ジオキソ-ル-5-イルメチル)アミノ基、(2-メトキシベンジル)アミノ基、(3,4-ジメトキシベンジル)アミノ基、フェネチルアミノ基、(4-メトキシフェネチル)アミノ基、(4-アミノフェネチル)アミノ基、グアニジン及びピペリジン-1-イル-アミノ、により構成されるグル-プ。
【００１１】
本発明の目的を達成するため、当該化合物は次に掲げるグル-プ、化合物2-21及びN1-N34、から選択する。
3-((4-クロロフェニル)チオ)-2-ヒドロキシキノリン-4-カルボン酸、
6,9-ジクロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-ヒドロキシ-12H-チオクロメノ[2,3-c]キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-メトキシ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-ジメチルアミノ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(ピペラジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(4-メチルピペラジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(4-エチルピペラジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(4-(2-ヒドロキシエチル) ピペラジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン12オン、
6-(4-ベンジルピペラジン-1-イル)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(4-フェニルピペラジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-モルフォリノ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-チオモルフォリノ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(ピペリジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(4-ヒドロキシピペリジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
6-(4-ベンジルピペリジン-1-イル)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
6-([1,4'-ビピペリジン]-1'-イル)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(4-(3-(ピペリジン-4-イル) プロピル) ピペリジン-1-イル-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(ピロリジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(2-オキソピペリジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-メチルアミノ-12H-チオクロメノ[2,3-c]キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-エチルアミノ-12H-チオクロメノ[2,3-c]キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-プロピルアミノ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
6-(ブチルアミノ)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-イソブチルアミノ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(ペンタン-3-イル-アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((2-(ジメチルアミノ)エチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((2-(ジエチルアミノ)エチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(2-エタノ-ルアミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(3-プロパノ-ルアミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(5-ペンタノ-ルアミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((1-ヒドロキシブタン -2-イル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((4-メチルペンタン-2-イル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
6-((2-アミノエチル)アミノ)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((2-((2-ヒドロキシエチル)アミン)エチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((2-モルフォリノエチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((3-(ジメチルアミノ)プロピル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((3-(ジエチルアミノ)プロピル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((3-((2-ヒドロキシエチル)アミノ)プロピル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(シクロヘキシルアミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
6-((1-ベンジルピペリジン-4-イル)アミノ)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((チオフェン-2-イルメチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((シクロヘキシルメチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
6-(ベンジルアミノ)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((ピリジン-2-イルメチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
6-((ベンゾ[d][1,3] ジオキソ-ル-5-イルメチル)アミノ)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((2-メトキシベンジル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((3,4-ジメトキシベンジル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(フェネチルアミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((4-メトキシフェネチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
6-((4-アミノフェネチル)アミノ)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
2-(10-クロロ-12-オキソ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-6-イル) グアニジン、
10-クロロ-6-(ピペリジン-1-イル-アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
及びそれらの塩類。
【００１２】
本発明の別の目的として、治療効果が見込める量の上述の化合物と、医薬学的に許容可能なキャリア-剤、希釈剤または賦形剤を含む医薬組成物を提供することがある。
【００１３】
本発明の別の目的として、上述の化合物の用途を提供することがあり、その用途とは、Ｉ型トポイソメラ-ゼ活性を抑制する医薬品を製造するためである。
【００１４】
本発明の別の目的として、上述の化合物の用途を提供することがあり、その用途とは、II型トポイソメラ-ゼ活性を抑制する医薬品を製造するためである。
【００１５】
本発明の別の目的として、上述の化合物の用途を提供することがあり、その用途とは、癌治療薬を製造するためである。
【００１６】
上述の目的を達成するため、癌の種類は、白血病、非小細胞肺癌、大腸癌、中枢神経癌、黒色腫、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、乳癌から選ぶ。
【００１７】
本発明の別の目的として、次に示すごとく、「特許請求の範囲・請求項1」にいう化合物の製造方法を提供することがある。
(1)  isatin、2-((4-chlorophenyl)thio)acetic acid及び酢酸ナトリウムを混合し、150 ℃で1時間反応させ、完全に反応させた後の混合液を冷却後、酢酸を加えて得た沈殿物を、さらに酢酸、水、ノルマルヘキサンで洗浄し、化合物2（3-((4-クロロフェニル)チオ)-2-ヒドロキシキノリン-4-カルボン酸）を得る。
(2)  化合物2（3-((4-クロロフェニル)チオ)-2-ヒドロキシキノリン-4-カルボン酸）をオキシ塩化リンに溶かして150 ℃で48時間反応させ、冷卻後に反応物を水中に入れ、濾過して得た沈殿物を10%炭酸水素ナトリウム溶液に入れて1時間攪拌し、沈殿物を収集してから水で洗い、粗生成物をジクロロメタンで結晶化させ、化合物3（6,9-ジクロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン）を得る。
(3)  化合物3（6,9-ジクロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン）をDMFに溶かし、濃塩酸を加えてから12時間還流させてから、反応物を真空脱水し、水を加えて濾過した後、粗生成物をエタノ-ルで洗浄し、化合物4（10-クロロ-6-ヒドロキシ-12H-チオクロメノ[2,3-c]キノリン-12-オン）を得る。
(4)  メタノ-ルの中に懸濁させた化合物3（6,9-ジクロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン）とメタノ-ルメトキシドを16時間還流し、冷却後に溶剤を除去して濾過後、エタノ-ルとノルマルヘキサンで洗浄し、化合物5（10-クロロ-6-メトキシ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン）を得る。
(5)  化合物3（6,9-ジクロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン）、及び適切な第二級アミンと炭酸ナトリウムをDMSOまたはDMFに溶かし、10時間還流させ、安置してから冷却後、反応物を冷水に入れ、濾過して沈殿物を取り出し、水とメタノ-ルで洗浄して化合物6-21を得る。
10-クロロ-6-ジメチルアミノ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(ピペラジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(4-メチルピペラジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(4-エチルピペラジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(4-(2-ヒドロキシエチル) ピペラジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン12オン、
6-(4-ベンジルピペラジン-1-イル)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(4-フェニルピペラジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-モルフォリノ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-チオモルフォリノ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(ピペリジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(4-ヒドロキシピペリジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
6-(4-ベンジルピペリジン-1-イル)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
6-([1,4'-ビピペリジン]-1'-イル)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(4-(3-(ピペリジン-4-イル) プロピル) ピペリジン-1-イル-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン
10-クロロ-6-(ピロリジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、及び
10-クロロ-6-(2-オキソピペリジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン
(6)  化合物3（6,9-ジクロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン）と適切な第一級アミンをDMSOに溶かし、8時間還流させてから冷却後、反応物を100 mLの水の中に入れ、濾過して沈殿物を得た後、水とメタノ-ルで洗浄して化合物N1-N34を得る。
10-クロロ-6-メチルアミノ-12H-チオクロメノ[2,3-c]キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-エチルアミノ-12H-チオクロメノ[2,3-c]キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-プロピルアミノ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
6-(ブチルアミノ)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-イソブチルアミノ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(ペンタン-3-イル-アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((2-(ジメチルアミノ)エチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((2-(ジエチルアミノ)エチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(2-エタノ-ルアミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(3-プロパノ-ルアミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(5-ペンタノ-ルアミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((1-ヒドロキシブタン -2-イル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((4-メチルペンタン-2-イル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
6-((2-アミノエチル)アミノ)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((2-((2-ヒドロキシエチル)アミン)エチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((2-モルフォリノエチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((3-(ジメチルアミノ)プロピル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((3-(ジエチルアミノ)プロピル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((3-((2-ヒドロキシエチル)アミノ)プロピル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-ケトン
10-クロロ-6-((2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(シクロヘキシルアミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
6-((1-ベンジルピペリジン-4-イル)アミノ)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((チオフェン-2-イルメチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((シクロヘキシルメチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
6-(ベンジルアミノ)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((ピリジン-2-イルメチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
6-((ベンゾ[d][1,3] ジオキソ-ル-5-イルメチル)アミノ)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((2-メトキシベンジル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((3,4-ジメトキシベンジル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-(フェネチルアミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
10-クロロ-6-((4-メトキシフェネチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
6-((4-アミノフェネチル)アミノ)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン、
2-(10-クロロ-12-オキソ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-6-イル) グアニジン、及び
10-クロロ-6-(ピペリジン-1-イル-アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】チオクロメノ[2,3-c]キノリン-12-オンの誘導体を科学的に合成するときの反応プロセス。
【図２】化合物5、7、8、16、19とCPT（カンプトテシン）25、50 μMが、Ｉ型トポイソメラ-ゼ（TOP I）に作用したときのDNA螺旋巻き戻し効果。
【図３】化合物N2、N7、N8、N9、N14-N19、N25とCPT、50 μMが、Ｉ型トポイソメラ-ゼ（TOP I）に作用したときのDNA螺旋巻き戻し効果。，
【図４】化合物7、N7、N14、N15、N18、N19、N25とCPT、1-50 μMが、Ｉ型トポイソメラ-ゼ（TOP I）に作用したときのDNA螺旋巻き戻し効果。
【図５】化合物5、7、8、16、19とVP-16（etoposide、エトポシド、対照群として用いる）、25、50 μMが、II型トポイソメラ-ゼ（TOP II）に作用したときのDNA螺旋巻き戻し効果。
【図６】化合物N2、N7、N8、N9、N14-N19、N25とVP-16、50μMが、Ｉ型トポイソメラ-ゼ（TOP II）に作用したときのDNA螺旋巻き戻し効果。
【図７】化合物7、N7、N8、N14、N15、N18、N19とVP-16、1-50 μMが、Ｉ型トポイソメラ-ゼ（TOP II）に作用したときのDNA螺旋巻き戻し効果。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本文書に用いる技術的、科学的用語は、別途定義されている場合を除き、その用語が属する領域で通常の技能を有する者が共通して保持する認識に基づいて解釈する。
【００２０】
本文書に用いる技術的、科学的用語は、別途定義されている場合を除き、その用語が属する領域で通常の技能を有する者が共通して保持する認識に基づいて解釈する。
【００２１】
「治療」、「治療において」、及びこれらに類する言葉は、患者を煩わしている病状またはその病状によりもたらされるすべての症状を緩和、改善、減少または好転させる方法、及びその病状または現在の症状を予防する方法を指す。
【００２２】
「薬学的に許容可能」とは、物質または組成物が、調合される他の成分との間に相容性があり、患者に対し無害であることを指す。
【００２３】
本発明の組成物は、この技能に習熟した者が有している技術を用い、上述のラクトバチルス分離株と薬学的に許容可能な担体としてのキャリア-剤（pharmaceutically acceptable vehicle）を用いて、本発明組成物の剤形とする。剤形としては、液剤（solution）、乳剤（emulsion）、懸濁剤（suspension）、散剤（powder）、錠剤（tablet）、丸剤（pill）、ドロップ剤（lozenge）、トロ-チ剤（troche）、咀嚼剤（chewing gum）、カプセル剤（slurry）、及び類似の剤形または本発明に適する他の剤形が考えられるが、この限りではない。
【００２４】
そのうち、薬学的に許容可能なキャリア-剤は、液剤（solution）、乳剤（emulsion）、懸濁剤（suspension）、分解剤（decomposer）、結着剤（binding agent）、賦形剤（excipient）、安定剤（stabilizing agent）、キレ-ト剤（chelating agent）、希釈剤（diluent）、ゲル化剤（gelling agent）、防腐剤（preservative）、潤滑剤（lubricant）、表面活性剤（surfactant）、及び類似のキャリア-剤または本発明に適する他のキャリア-剤から一つ以上を選択して用いる。
【００２５】
上述の組成物においては、製剤の領域で通常使用される溶解補助剤、緩衝剤、保存剤、着色剤、香料、風味剤を、一種類以上用いてもよい。
【００２６】
「薬学的に許容可能な賦形剤」とは、重合物、樹脂、可塑剤、充填料、潤滑剤、希釈剤、結合剤、崩壊剤、溶剤、溶解共力剤、界面活性剤、防腐剤、甘味剤、調味剤、薬学クラスの染料または顏料、及び粘着剤のうち、一つ以上を指すが、この限りではない。
【００２７】
「医薬組成物」（pharmaceutical composition）とは、固体または液体の組成物で、その形式、濃度、純度が、患者（病気のヒトまたは動物）に投与するのに適合し、投与した後、生理的変化を誘発するものを指す。通常、医薬組成物は無菌及び/または非発熱性（non-pyrogenic）である。
【００２８】
以下に本発明の実施例を記述するが、これに限るものではない。本発明に用いる薬物、生物材料はいずれも市販されており、次に示す例はその代表例に過ぎない。
【００２９】
すべての反応は、シリカゲル60 F254を塗布した薄層クロマトグラフィ-（TLC）で観察する。すべての合成化合物の融解点はBuchi B-545測定装置で測定する。1H NMR：Varian GEMINI-300 (300 MHz)またはAgilent 400 MR DD2 (400 MHz)；値の単位はppmとし、テトラメチルシラン（TMS）「0 ppm」を内部基準として相対的比較を行う。Multiplicities記載は、s (singlet), d (doublet), t (triplet), q (quartet), quin (quintuplet), sext (sextet), sep (septet), m (multiplet), dd (doublet of doublet), dt (doublet of triplet), td (triplet of doublet), qd (quartet of doublet)及びbr (broadened)、とする。High resolution electrospray ionization (HRESI): Finnigan MAT 95S（計測センタ-、国立台湾大学）。単結晶X線構造解析：Bruker Enraf-Nonius APEX II diffractometer（国立台湾師範大学化学系）。以下は、代表的な実験における一般的なthiochromenoquinolones調製プロセスである（図1）。
【００３０】
化学的に合成するための手順と通則
【００３１】
合成手順A：化合物2の合成。
【００３２】
isatin (0.44 g，2.99 mmole) 、 2-((4-chlorophenyl)thio)acetic acid (0.70 g, 3.47 mmol)、sodium acetate(0.05 g)を混合し、miniclave(150℃)で1時間反応させる（thin-layer chromatography，TLC管理）。反応させた後の混合液を冷却後、acetic acid(10 mL)を加えて得た灰色の沈殿物を、酢酸、水、ノルマルヘキサンで洗浄し、紫色の化合物2を得る。
【００３３】
合成手順B：化合物3の合成。
【００３４】
化合物2をオキシ塩化リン(5 mL) に溶かして150℃で48時間反応させる。冷卻後、反応物を0℃の冷水に入れ、濾過して得た緑色の沈殿物を10% 炭酸水素ナトリウム溶液 (50 mL)に入れて1時間、強く攪拌し、収集した沈殿物を水で洗う。粗生成物をジクロロメタンで結晶化させ、黄色の化合物3を得る。
【００３５】
合成手順C：化合物4の合成。
【００３６】
化合物3 (0.32 g, 0.96 mmol)をDMF (20 mL)に溶かし、濃塩酸(3 mL)を加えてから還流(refluxed)する。六時間後、濃塩酸(6 mL)を逐次滴下させてさらに12時間還流する。反応物を真空脱水し、水20 mLを加えて濾過した後、粗生成物をエタノ-ルで洗浄し、黄色の固体化合物4を得る。
【００３７】
合成手順D：化合物5の合成。
【００３８】
メタノ-ル20 mLの中に懸濁させた化合物3 (0.33 g, 1.0 mmol)とメタノ-ルメトキシド(0.55g, 10 mmol)を16時間還流する。冷卻後、ロ-タリ-エバポレ-タ-で溶剤を除去して濾過した後、エタノ-ルとノルマルヘキサンで洗浄し、白色の固体化合物5を得る。
【００３９】
合成手順E：化合物6-21の合成。
【００４０】
化合物3 (0.33 g, 1.0 mmol)、適切な第二級アミン(1.1 mmol)、炭酸たトリウム(5 mmol)をDMSOまたはDMF (20 mL)に溶かし、10時間還流させる（TLC管理）。安置してから冷卻後、反応物を冷水に入れる。濾過して沈殿物を取り出し、水とメタノ-ルで洗浄して黄色い固体を得る。
【００４１】
合成手順F：化合物N1-34の合成。
【００４２】
化合物3 (0.33 g, 1.0 mmol)と適切な第一級アミン(1.1 mmol)をDMSO (30 mL)に溶かし、8時間還流させる（TLC管理）。冷卻後、反応物を100 mLの水の中に入れ、濾過して沈殿物を取り出し、水とメタノ-ルで洗浄して黄色い固体を得る。
【００４３】
実施例1
【００４４】
3-((4-クロロフェニル)チオ)-2-ヒドロキシキノリン-4-カルボン酸 (2)
【００４５】
3-((4-Chlorophenyl)thio)-2-hydroxyquinoline-4-carboxylic acid (TC-SCl) (2)
【００４６】
この純化合物は灰色の固体（収率86%）。(Rf = 0.5 at EA: AcOH = 20: 1). Mp 306-308 oC. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ (ppm) 7.26 (3H, t, J = 7.6 Hz, Ar-H), 7.34 (2H, d, J = 6.0 Hz, Ar-H), 7.39 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.46 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.62 (1H, t, J = 8.0 Hz, Ar-H), 12.22 (1H, s, -COOH). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6): δ (ppm) 115.58, 116.26, 120.36, 123.21, 126.21, 129.33, 130.30, 131.47, 132.54, 134.36, 140.11, 151.69, 159.37, 166.80 (CO). HRMS (ESI) calcd for C16H10NO3SCl [M]+ 331.0070; found [M+H]+ 332.0147 (100), [M+H+2]+ 334.0122 (33); found [M-H]- 330.0002.
【００４７】
実施例2
【００４８】
6,9-ジクロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (3)
【００４９】
6,9-Dichloro-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (3)
【００５０】
黄色の固体を分離（収率90%）。(Rf = 0.50 at CH2Cl2: n-hexane = 1: 1). Mp 259-261oC (CH2Cl2). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 7.71 (2H, m, Ar-H), 7.77-7.85 (2H, m, Ar-H), 8.10-8.13 (m, 1H, Ar-H), 8.60 (t, 1H, J = 1.2 Hz, Ar-H), 9.67-9.71 (1H, m, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 124.87, 126.28, 127.85, 129.17, 129.39, 129.93, 130.31, 131.20, 131.90, 133.01, 133.09, 133.38, 134.43, 145.27, 146.61, 180.64 (CO). HRMS (ESI) calcd for C16H7NOSCl2 [M]+ 330.9625; found [M+H]+ 331.9699 (100), [M+H+2]+ 333.9672 (67), [M+H+4]+ 335.9645 (11).
【００５１】
実施例3
【００５２】
10-クロロ-6-ヒドロキシ-12H-チオクロメノ[2,3-c]キノリン-12-オン (4)
【００５３】
10-Chloro-6-hydroxy-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (4)
【００５４】
黄色の固体を分離（収率95%）。(Rf = 0.40 at EA). Mp > 410 oC. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 7.35 (1H, td, J = 7.2, 1.2 Hz, Ar-H), 7.47 (1H, dd, J = 8.4, 1.2 Hz, Ar-H), 7.59 (1H, td, J = 7.2 Hz, 1.6 Hz, Ar-H), 7.89 (1H, dd, J = 8.4 Hz, 2.4 Hz, Ar-H), 8.10 (1H, d, J = 8.8 Hz, Ar-H), 8.38 (1H, d, J = 2.4 Hz, Ar-H), 9.35 (1H, dd, J = 8.4, 2.4 Hz, Ar-H), 12.73 (br, 1H, -OH). 13C NMR (75 MHz, CDCl3): δ (ppm) 116.61, 117.52, 123.65, 126.82, 128.44, 130.22, 130.49, 130.54, 132.52, 133.00, 133.42, 135.09, 136.27, 138.90, 158.70, 180.38 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C16H8NO2SCl [M]+: 312.9964, found, 314.0051.
【００５５】
実施例4
【００５６】
10-クロロ-6-メトキシ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (5)
【００５７】
10-Chloro-6-methoxy-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (5)
【００５８】
灰色の固体を分離（収率91%）。(Rf = 0.52 at CH2Cl2: n-hexane = 1: 1). Mp 227-228 oC. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 4.27 (3H, s, -OCH3), 7.60 (1H, td, J = 7.6, 1.2 Hz, Ar-H), 7.37 (1H, d, J = 2.0 Hz, Ar-H), 7.70 (1H, td, J = 7.6 Hz, 1.6 Hz, Ar-H), 7.94 (1H, dd, J = 8.0 Hz, 1.2 Hz, Ar-H), 8.60 (1H, d, J = 1.6 Hz, Ar-H), 9.64 (1H, dd, J = 8.8 Hz, 1.2 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 54.83 (OCH3), 122.91, 126.23, 126.54, 126.76, 127.66, 127.95, 129.23, 129.50, 130.54, 132.49, 133.48, 133.85, 143.82, 156.06, 180.47 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C17H10NO2SCl [M]+ 327.0121; found [M+H]+ 328.0203, [M+H+2]+ 330.0172.
【００５９】
実施例5
【００６０】
10-クロロ-6-ジメチルアミノ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン  (6)
【００６１】
10-Chloro-6-dimethylamino-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (6)
【００６２】
黄色の固体を分離（収率85%）。(Rf = 0.45 at CH2Cl2: n-hexane = 1: 1). Mp 194-195 oC. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 3.06 (6H, s, -CH3), 7.59-7.67 (3H, m, Ar-H), 7.71 (1H, t, J = 7.2 Hz, Ar-H), 8.00 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 8.59 (1H,d, J = 1.2 Hz, Ar-H), 9.60 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 43.00, 123.44, 125.71, 127.22, 127.78 128.47, 129.07, 129.37, 130.59, 130.67, 132.23, 132.46, 133.61, 134.36, 144.84, 158.32, 181.52 (CO). HRMS (ESI) calcd for C18H13N2OSCl [M]+ 340.0437; found [M+H] + 341.0517 (100), [M+H+2]+ 343.0501 (33).
【００６３】
実施例6
【００６４】
10-クロロ-6-(ピペラジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (7)
【００６５】
10-Chloro-6-(piperazin-1-yl)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (7)
【００６６】
黄色の固体を分離（69%）。(Rf = 0.12 at EA: MeOH: ammonia water = 20: 5: 1). Mp 211-213 oC. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 3.20 (4H, t, J = 4.8 Hz, -CH2-), 3.36 (4H, t, J = 4.8 Hz, -CH2-), 7.60-7.66 (3H, m, Ar-H), 7.70 (1H, td, J = 8.0, 1.2 Hz, Ar-H), 7.99 (1H, dd, J = 8.4, 0.8 Hz, Ar-H), 8.56 (1H, d, J = 2.0 Hz, Ar-H), 9.60 (1H, dd, J = 8.4, 0.8 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 45.95, 52.31, 123.62, 125.81, 127.58, 127.86, 128.72, 129.10, 129.37, 130.65, 130.99, 132.17,132.47, 133.63, 134.33, 144.94, 157.61, 181.45 (CO). HRMS (ESI) calcd for C20H16N3OSCl [M]+ 381.0703; found [M+H] + 382.0783.
【００６７】
実施例7
【００６８】
10-クロロ-6-(4-メチルピペラジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (8)
【００６９】
10-Chloro-6-(4-methylpiperazin-1-yl)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (8)
【００７０】
黄色の固体を分離（収率80%）。(Rf = 0.24 at EA: methanol = 5: 1). Mp 212-214 oC. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 2.51 (3H, s, -CH3), 2.84 (4H, br, -CH2-), 3.50 (4H, t, J = 4.5 Hz, -CH2-), 7.60-7.66 (3H, m, Ar-H), 7.68-7.72 (1H, td, J = 8.1, 1.5 Hz, Ar-H), 8.01 (1H, dd, J = 8.1, 1.5 Hz, Ar-H), 8.56 (1H, d, J = 1.5 Hz, Ar-H), 9.60 (1H, dd, J = 8.4, 1.5 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 45.73, 50.31, 54.65, 123.70, 125.90, 127.60, 127.80, 128.82, 129.20, 129.39, 130.62, 130.84, 132.36, 132.47, 133.78, 134.24, 145.08, 157.18, 181.42 (CO). HRMS (ESI) calcd for C21H18N3OSCl [M]+ 395.0859; found [M+H]+ 396.0926.
【００７１】
実施例8
【００７２】
10-クロロ-6-(4-エチルピペラジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (9)
【００７３】
10-Chloro-6-(4-ethylpiperazin-1-yl)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (9)
【００７４】
黄色の固体を分離（収率74%）。(Rf = 0.48 at EA: MeOH = 10: 1). Mp 196-198 oC. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.19 (3H, t, J = 7.2 Hz, -CH3), 2.58 (2H, q, J = 7.2 Hz, -CH2-), 2.78 (4H, br, -CH2-), 3.46 (4H, t, J = 4.4 Hz, -CH2-), 7.61-7.66 (3H, m, Ar-H), 7.68-7.73 (1H, td, J = 8.4, 1.6 Hz, Ar-H), 8.01 (1H, dd, J = 8.0, 1.2 Hz, Ar-H), 8.59 (1H, d, J = 4.0 Hz, Ar-H), 9.62 (1H, dd, J = 8.4, 0.8 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 12.07, 50.88, 52.46, 52.67, 123.55, 125.77, 127.48, 127.83, 128.78, 129.12, 129.36, 130.62, 130.76, 132.21, 132.47, 133.62, 134.34, 144.97, 157.34, 181.50 (CO). HRMS (ESI) calcd for C22H20N3OSCl [M]+ 409.1016; found [M+H]+ 410.1069.
【００７５】
実施例9
【００７６】
10-クロロ-6-(4-(2-ヒドロキシエチル) ピペラジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン12オン (10)
【００７７】
10-Chloro-6-(4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12one (10)
【００７８】
黄色の固体を分離（収率60%）。(Rf = 0.37 at EA: MeOH= 2: 1). Mp 211-213 oC. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 2.74 (2H, t, J = 5.2 Hz, -CH2-), 2.87 (4H, t, J = 3.6 Hz, -CH2-), 3.45 (4H, t, J = 3.6 Hz, -CH2-), 3.72 (2H, t, J = 5.2 Hz, -CH2O-), 7.62-7.67 (3H, m, Ar-H), 7.72 (1H, td, J = 7.2, 1.6 Hz, Ar-H), 8.01 (1H, dd, J = 8.4, 1.2 Hz, Ar-H), 8.59 (1H, d, J = 0.6 Hz, Ar-H), 9.62 (1H, dd, J = 4.8, 1.2 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 50.85, 52.72, 57.74, 59.35, 123.65, 125.81, 127.66, 127.82, 128.73, 129.14, 129.44, 130.68, 130.77, 132.19, 132.51, 133.69, 134.21, 144.90, 157.26, 181.43 (CO). HRMS (ESI) calcd for C22H20N3O2SCl [M]+ 425.0965; found [M+H]+ 426.1024.
【００７９】
実施例10
【００８０】
6-(4-ベンジルピペラジン-1-イル)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (11)
【００８１】
6-(4-Benzylpiperazin-1-yl)-10-chloro-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (11)
【００８２】
黄色の固体を分離（収率81%）。(Rf = 0.43 at EA: n-hexane = 1: 4). Mp 191-193 oC. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 2.78 (4H, br, -CH2N-), 3.43 (4H, t, J = 4.85 Hz, - NCH2-), 3.68 (2H, s, -CH2-), 7.27-7.42 (5H, m, Ar’-H), 7.61-7.67 (3H, m, Ar-H), 7.71 (1H, td, J = 7.6, 1.6 Hz, Ar-H), 8.00 (1H, dd, J = 8.4, 1.2 Hz, Ar-H), 8.58 (1H, d, J = 2.0 Hz, Ar-H), 9.61 (1H, dd, J = 8.4, 1.2 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 50.94, 52.96, 63.08, 123.57, 125.78, 127.18, 127.48, 127.83, 128.33, 128.73, 129.09, 129.17, 129.34, 130.58, 130.90, 132.18, 132.44, 133.60, 134.36, 138.11, 144.95, 157.48, 181.47 (CO). HRMS (ESI) calcd for C27H22N3OSCl [M]+ 471.1172; found [M+H]+ 472.1241.
【００８３】
実施例11
【００８４】
10-クロロ-6-(4-フェニルピペラジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (12)
【００８５】
10-Chloro-6-(4-phenylpiperazin-1-yl)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (12)
【００８６】
黄色の固体を分離（収率77%）。(Rf = 0.73 at EA: n-hexane = 1: 4). Mp 236-237 oC. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 3.50-3.60 (8H, m, -CH2-), 6.94 (1H, t, J = 7.2 Hz, Ar’-H), 7.04 (2H, d, J = 8.4 Hz, Ar’-H), 7.33 (2H, t, J = 7.5 Hz, Ar’-H), 7.63-7.67 (3H, m, Ar-H), 7.71 (1H, t, J = 7.2 Hz, Ar-H), 8.02 (1H, d, J = 7.2 Hz, Ar-H), 8.58 (1H, s, Ar-H), 9.63 (1H, d, J = 8.1 Hz, Ar-H). 13C NMR (75 MHz, CDCl3): δ (ppm) 48.60, 50.33, 115.77,119.51, 123.21, 125.38, 127.14, 127.30, 128.27, 128.65, 128.71, 128.88, 130.23, 131.77, 131.97, 133.22, 133.70, 144.52, 150.90, 156.83, 159.91, 180.91 (CO). HRMS (ESI) calcd for C26H20N3OSCl [M]+ 457.1016; found [M+H]+ 458.1095.
【００８７】
実施例12
【００８８】
10-クロロ-6-モルフォリノ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (13)
【００８９】
10-Chloro-6-morpholino-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (13)
【００９０】
黄色の固体を分離（収率70%）。(Rf = 0.42 at CH2Cl2). Mp 217-218 oC. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 3.41 (4H, t, J = 4.5 Hz, -NCH2-), 4.02 (4H, t, J = 4.5 Hz, -CH2O-), 7.62-7.70 (3H, m, Ar-H), 7.73 (1H, td, J = 7.5, 1.5 Hz, Ar-H), 8.03 (1H, dd, J = 8.4, 1.5 Hz, Ar-H), 8.59 (1H, dd, J = 2.1, 0.6 Hz, Ar-H), 9.35 (1H, dd, J = 8.7, 1.8 Hz, Ar-H). 13C NMR (75 MHz, CDCl3): δ (ppm) 51.36, 66.88, 123.92, 126.06, 127.85, 127.91, 128.94, 129.34, 129.52, 130.71, 131.05, 132.50, 132.61, 133.95, 134.29, 145.23, 157.29, 181.51 (CO). HRMS (ESI) calcd for C20H15N2O2SCl [M]+ 382.8633; found [M+H]+ 383.0620.
【００９１】
実施例13
【００９２】
10-クロロ-6-チオモルフォリノ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (14)
【００９３】
10-Chloro-6-thiomorpholino-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (14)
【００９４】
黄色の固体を分離（収率86%）。(Rf = 0.77 at EA: n-hexane = 1: 4). Mp 219-220 oC. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 2.98 (4H, t, J = 4.8 Hz, -NCH2-), 3.64 (4H, t, J = 5.1 Hz, -SCH2-), 7.62-7.84 (3H, m, Ar-H), 7.73 (1H, td, J = 8.4, 1.8 Hz, Ar-H), 8.06 (1H, dd, J = 8.1, 1.5 Hz, Ar-H), 8.57 (1H, dd, J = 1.8, 0.6 Hz, Ar-H), 9.61 (1H, dd, J = 7.8, 1.2 Hz, Ar-H). 13C NMR (75 MHz, CDCl3): δ (ppm) 27.06, 52.64, 114.95, 123.23, 125.40, 127.27, 127.31, 128.30, 128.68, 128.87, 130.55, 131.81, 131.96, 133.29, 133.70, 144.93, 157.43, 180.86 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C20H15N2S2OCl+ [M]+ 398.0314, found [M+H]+ 399.0420, [M+H+2]+ 401.0394.
【００９５】
実施例14
【００９６】
10-クロロ-6-(ピペリジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (15)
【００９７】
10-Chloro-6-(piperidin-1-yl)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (15)
【００９８】
黄色の固体を分離（収率86%）。(Rf = 0.75 at EA). Mp 187-188 oC. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.71-1.74 (2H, m, -CH2-), 1.88 (4H, p, J = 4.5 Hz, -CH2-), 3.31 (4H, t, J = 4.2 Hz, -NCH2-), 7.60-7.64 (2H, m, Ar-H), 7.61 (1H, d, J = 6.3 Hz, Ar-H), 7.69 (1H, td, J = 5.1, 1.2 Hz, Ar-H), 7.99 (1H, dd, J = 5.4, 0.6 Hz, Ar-H), 8.58 (1H, d, J = 1.5 Hz, Ar-H), 9.62 (1H, dd, J = 6.3, 0.6 Hz, Ar-H) 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 24.27, 25.89, 52.33, 123.47, 125.75, 127.28, 127.85, 128.56, 129.02, 129.23, 130.48, 131.62, 132.16, 132.33, 133.46, 134.67, 144.97, 158.50, 181.51 (CO). HRMS (ESI) calcd for C21H17N2OSCl [M]+ 380.0750; found [M+H] + 381.0816.
【００９９】
実施例15
【０１００】
10-クロロ-6-(4-ヒドロキシピペリジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (16)
【０１０１】
10-Chloro-6-(4-hydroxypiperidin-1-yl)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (16)
【０１０２】
黄灰色の固体を分離（収率84%）。(Rf = 0.4 at EA: n-hexane = 1: 1). Mp 224-225 oC. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.89 (1H, td, J = 7.2, 2.7 Hz, piperidine-CHa), 1.94 (1H, td, J = 6.9, 2.7 Hz, piperidine-CHa), 2.15-2.21 (2H, m, piperidine-CHe), 3.19 (2H, td, J = 8.4, 2.1 Hz, piperidine-NCHa), 3.60-3.65 (2H, m, piperidine-NCHe), 4.01 (1H, sext, J = 3.0 Hz, piperidine-CH), 7.61-7.67 (3H, m, Ar-H), 7.71 (1H, td, J = 6.3, 1.2 Hz, Ar-H), 7.99 (1H, dd, J = 6.3, 0.6 Hz, Ar-H), 8.59 (1H, dd, J = 1.5, 0.6 Hz, Ar-H), 9.64 (1H, dd, J = 6.3, 0.6 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 34.49, 48.90, 67.80, 123.62, 125.82, 127.54, 127.88, 128.64, 129.11, 129.36, 130.61, 131.29, 132.20, 132.47, 133.63, 134.43, 144.91, 157.83, 181.47 (CO). HRMS (ESI) calcd for C21H17N2OSCl [M]+ 396.0699; found [M+H] + 397.0757.
【０１０３】
実施例16
【０１０４】
6-(4-ベンジルピペリジン-1-イル)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (17)
【０１０５】
6-(4-Benzylpiperidin-1-yl)-10-chloro-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (17)
【０１０６】
黄色の固体を分離（収率90%）。(Rf = 0.57 at CH2Cl2: n-hexane = 2: 1). Mp 184-185 oC. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.67 (2H, td, J = 9.3, 3.0 Hz, -CH2-), 1.79-1.89 (1H, m, -CH-), 1.88 (2H, d, J = 6.9 Hz, piperidine-CH2), 2.71 (2H, d, J = 5.1 Hz, piperidine-CH2), 3.00 (2H, td, J = 9.3, 1.2 Hz, -NCH2-), 3.65 (2H, d, J = 9.3 Hz, -NCH2-), 7.20-7.25 (3H, m, Ar-H), 7.31-7.33 (2H, m, Ar-H), 7.60-7.72 (4H, m, Ar-H), 7.98 (1H, dd, J = 6.3, 0.6 Hz, Ar-H), 8.59 (1H, d, J = 1.8 Hz, Ar-H), 9.62 (1H, dd, J = 6.6, 0.6 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 32.21, 37.88, 43.30, 51.64, 123.52, 125.79, 125.99, 127.36, 127.87, 128.61, 129.09, 129.17, 129.29, 130.55, 131.49, 132.22, 132.41, 133.54, 134.62, 140.46, 144.98, 147.04, 158.25, 181.55 (CO). HRMS (ESI) calcd for C28H23N2OSCl [M]+ 471.0130; found [M+H] + 471.1276.
【０１０７】
実施例17
【０１０８】
6-([1,4'-ビピペリジン]-1'-イル)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (18)
【０１０９】
6-([1,4'-Bipiperidin]-1'-yl)-10-chloro-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (18)
【０１１０】
黄色の固体を分離（収率92%）。(Rf = 0.15 at EA: MeOH= 5: 1). Mp 187-189 oC. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.50-1.52 (2H, m, piperidine-H), 1.66-1.67 (3H, m, piperidine-H), 1.86-1.98 (2H, qd, J = 12.4, 2.8 Hz, piperidine-H), 2.06 (2H, d, J = 11.6 Hz, piperidine-H), 2.54 (1H, t, J = 10.8 Hz, piperidine-H), 2.65 (3H, br, piperidine-H), 3.05 (2H, t, J = 12 Hz, piperidine-H), 3.73 (2H, d, J = 12.8 Hz, piperidine-H), 7.60-7.66 (3H, m, Ar-H), 7.70 (1H, td, J = 8.0, 1.2 Hz, Ar-H), 7.98 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H), 8.58 (1H, s, Ar-H), 9.62 (1H, d, J = 8.8 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 24.79, 26.36, 28.24, 50.45, 51.16, 62.40, 123.57, 125.80, 127.42, 127.86, 128.61, 129.08, 129.30, 130.52, 131.41, 132.18, 132.43, 133.56, 134.54, 144.92, 157.92, 181.47 (CO). HRMS (ESI) calcd for C26H26N3OSCl [M]+ 463.1485; found [M+H] + 464.1593.
【０１１１】
実施例18
【０１１２】
10-クロロ-6-(4-(3-(ピペリジン-4-イル) プロピル) ピペリジン-1-イル-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (19)
【０１１３】
10-Chloro-6-(4-(3-(piperidin-4-yl)propyl)piperidin-1-yl)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (19)
【０１１４】
黄色の固体を分離（収率76%）。(Rf = 0.13 at CH2Cl2). Mp 164-165 oC. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.16 (2H, qd, J = 11.6, 3.2 Hz, -CH2-), 1.20-1.28 (2H, m, -CH2-), 1.36-1.39 (4H, m, -CH2-), 1.51-1.58 (4H, m, -CH2-), 1.70 (2H, d, J = 13.6 Hz, -CH2-), 1.87 (2H, d, J = 9.6 Hz, -CH2-), 2.43 (1H, br, -NH), 2.60 (2H, td, J = 12.0, 2.0 Hz, -CH2-), 2.99 (2H, t, J = 11.2 Hz, -CH2-), 3.10 (2H, d, J = 12 Hz, -CH2-), 3.64 (2H, d, J = 12.4 Hz, -CH2-), 7.59-7.65 (3H, m, Ar-H), 7.68 (1H, td, J = 8.0, 1.2 Hz, Ar-H), 8.00 (1H, dd, J = 11.2, 1.2 Hz, Ar-H), 8.57 (1H, d, J = 1.6 Hz, Ar-H), 9.61 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 23.66, 32.40, 33.24, 35.73, 36.08, 36.86, 37.38, 46.58, 51.76, 123.49, 125.79, 127.30, 127.84, 128.57, 129.05, 129.26, 130.49, 131.55, 132.17, 132.36, 133.50, 134.64, 144.98, 158.34, 181.50 (CO). HRMS (ESI) calcd for C29H32N3OSCl [M]+ 505.1955; found [M+H] + 506.2004.
【０１１５】
実施例19
【０１１６】
10-クロロ-6-(ピロリジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (20)
【０１１７】
10-Chloro-6-(pyrrolidin-1-yl)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (20)
【０１１８】
黄色の固体を分離（収率86%）。(Rf = 0.56 at CH2Cl2: n-hexane = 1: 1). Mp 170-171 oC. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) 2.05 (4H, quin, J = 3.6 Hz, -CH2-), 3.76 (4H, t, J = 6.9 Hz, -NCH2-), 7.50(1H, td, J = 7.2, 1.5 Hz, Ar-H), 7.61 (1H, d, J = 1.5 Hz, Ar-H11), 7.65 (1H, td, J = 7.5, 1.5 Hz, Ar-H), 7.88 (1H, dd, J = 8.4, 1.5 Hz, Ar-H), 8.54 (1H, t, J = 1.5 Hz, Ar-H), 9.44 (1H, dd, J = 8.7, 1.5 Hz, Ar-H). 13C NMR (75 MHz, CDCl3): δ (ppm) 24.89, 50.52, 121.90, 124.97, 125.17, 126.92, 127.33, 128.42, 128.84, 130.09, 131.77, 131.92, 133.10, 133.32, 144.73, 154.62, 159.91, 181.07 (CO). HRMS (ESI) calcd for C20H15N2OSCl [M]+ 366.0594; found [M+H] + 367.0659.
【０１１９】
実施例20
【０１２０】
10-クロロ-6-(2-オキソピペリジン-1-イル)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (21)
【０１２１】
10-Chloro-6-(2-oxopiperidin-1-yl)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (21)
【０１２２】
化合物3 (0.33 g, 1.0 mmol)、piperidin-2-one(5.55 mmol)、炭酸ナトリウム(5 mmol)をDMF (15 mL)に溶かし、10時間還流させる（TLC管理）。10分間安置してから冷卻後、反応物を100 mLの冷水の中に入れる。濾過して得た沈殿物を水とメタノ-ルで洗浄し、黄色い固体を得る。黄色の固体を分離（収率89%）。Mp: 258-261 oC. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm. 1.25 (1H, d, J = 4.8 Hz, piperidone-H), 2.44 (2H, quin, -CH2-), 2.61 (1H, s, piperidone-H), 2.75 (2H, t, J = 8.4 Hz, -CH2-), 4.11-4.14 (2H, m, -CH2-), 7.60-7.67 (2H, m, Ar-H), 7.78-7.81 (2H, m, Ar-H), 8.09-8.12 (1H, m, Ar-H), 8.60 (1H, d, J = 2.0 Hz, Ar-H), 9.72-9.75 (1H, m, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ ppm. 19.37, 31.47, 41.05, 49.14, 125.25, 126.08, 127.65, 129.29, 129.51, 129.80, 129.88, 130.74, 131.96, 132.26, 132.74, 133.47, 133.91, 145.05, 148.08, 176.14, 181.01.
【０１２３】
実施例21
【０１２４】
10-クロロ-6-メチルアミノ-12H-チオクロメノ[2,3-c]キノリン-12-オン (N1)
【０１２５】
10-Chloro-6-methylamino-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N1)
【０１２６】
黄色の固体を分離（収率92%）。(Rf = 0.65 at CH2Cl2). Mp 237-238 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 3.26 (3H, d, J = 4.8 Hz, -CH3), 4.92 (1H, d, J = 4.8 Hz, -NH-), 7.45 (1H, td, J = 11.2, 1.6 Hz, Ar-H), 7.58 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 7.69-7.65 (2H, m, Ar-H), 7.86 (1H, dd, J = 8.4, 0.8 Hz, Ar-H), 8.56 (1H,d, J = 1.6 Hz, Ar-H), 9.45 (1H, dd, J = 8.4, 1.2 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 29.38, 120.73, 123.68, 124.65, 125.87, 127.18, 127.49, 129.38, 129.51, 129.62, 131.04, 132.50, 132.53, 134.14, 145.64, 151.21, 180.96 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C17H11N2OSCl [M]+: 326.0281, found [M+H]+: 327.0356.
【０１２７】
実施例22
【０１２８】
10-クロロ-6-エチルアミノ-12H-チオクロメノ[2,3-c]キノリン-12-オン (N2)
【０１２９】
10-Chloro-6-ethylamino-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N2)
【０１３０】
黄色の固体を分離（収率91%）。(Rf = 0.75 at CH2Cl2). Mp 204-205 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.41 (3H, t, J = 7.2 Hz, -CH3), 3.75 (2H, q, J = 1.6 Hz, -CH2-), 4.81 (1H, br, -NH-), 7.44 (1H, td, J = 8.4, 1.6 Hz, Ar-H), 7.58-7.64 (3H, m, Ar-H), 7.83 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 8.56 (1H, d, J = 1.6 Hz, Ar-H), 9.44 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 14.79, 37.28, 120.70, 123.50, 124.58, 125.84, 127.18, 127.47, 129.39, 129.47, 129.66, 131.08, 132.50, 132.53, 134.12, 145.67, 150.55, 181.00 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C18H13N2OSCl [M]+: 340.0437, found [M+H]+: 341.0493.
【０１３１】
実施例23
【０１３２】
10-クロロ-6-プロピルアミノ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N3)
【０１３３】
10-Chloro-6-propylamino-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N3)
【０１３４】
黄色の固体を分離（収率85%）。(Rf = 0.82 at CH2Cl2). Mp 178-179 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.09 (3H, t, J = 7.2 Hz, -CH3), 1.81 (2H, sext, J = 7.2 Hz, -CH2-), 3.69 (2H, q, J = 7.2 Hz, -NCH2-), 4.87 (1H, br, -NH-), 7.44 (1H, td, J = 8.0, 1.2 Hz, Ar-H), 7.58-7.64 (3H,m, Ar-H), 7.82 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H), 8.56 (1H,d, J = 1.2 Hz, Ar-H), 9.44 (1H, d, J = 8.8 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 11.68, 22.64, 44.13, 120.67, 123.53, 124.53, 125.82, 127.15, 127.46, 129.38, 129.46, 129.65, 131.05, 132.49, 134.10, 145.66, 150.62, 181.02 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C19H15N2OSCl [M]+: 354.0594, found [M+H]+: 355.0651.
【０１３５】
実施例24
【０１３６】
6-(ブチルアミノ)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N4)
【０１３７】
6-(Butylamino)-10-chloro-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N4)
【０１３８】
黄色の固体を分離（収率91%）。(Rf = 0.85 at CH2Cl2). Mp 147-149 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.03 (3H, t, J = 7.2 Hz,-CH3), 1.53 (2H, sext, J = 7.2 Hz, -CH2-), 1.76 (2H, quin, J = 7.2 Hz, -CH2- ), 3.71 (2H, q, J = 6.8 Hz, -NCH2-), 4.83 (1H, br, -NH-), 7.43 (1H, td, J = 7.6, 1.2 Hz, Ar-H), 7.57-7.64 (3H, m, Ar-H), 7.82 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 8.55 (1H, d, J = 1.6 Hz, Ar-H), 9.43 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 13.97, 20.36, 31.54, 42.12, 120.67, 123.53, 124.52, 125.84, 127.16, 127.46, 129.38, 129.46, 129.65, 131.05, 132.48, 132.52, 134.11, 145.68, 150.62, 181.00 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C20H17N2OSCl [M]+: 368.0750, found [M+H]+: 369.0846.
【０１３９】
実施例25
【０１４０】
10-クロロ-6-イソブチルアミノ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N5)
【０１４１】
10-Chloro-6-isobutylamino-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N5)
【０１４２】
黄色の固体を分離（収率61%）。(Rf = 0.85 at CH2Cl2). Mp 159-160 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.08 (6H, d, J = 6.8 Hz,-CH3), 2.10 (1H, sep, J = 6.8 Hz,-CH-), 3.56 (2H, t, J = 6.4 Hz, -CH2-), 4.94 (1H, br, -NH), 7.44(1H, t, J = 7.2 Hz, Ar-H), 7.59-7.64 (3H, m, Ar-H), 7.82 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 8.57 (1H, dd, J = 2.0, 0.8 Hz, Ar-H), 9.43 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 20.50, 28.16, 49.72, 120.67, 123.54, 124.51, 125.82, 127.13, 127.47, 129.39, 129.47, 129.69, 131.02, 132.50, 134.11, 138.34, 145.62, 150.68, 181.02 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C20H17N2OSCl [M]+: 368.0750, found [M+H]+: 369.0825.
【０１４３】
実施例26
【０１４４】
10-クロロ-6-(ペンタン-3-イル-アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N6)
【０１４５】
10-Chloro-6-(pentan-3-ylamino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N6)
【０１４６】
黄色の固体を分離（65%）。(Rf = 0.87 at CH2Cl2). Mp 160-161 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 0.92 (6H, t, J = 7.6 Hz, -CH3), 1.69 (4H, quin, J = 6.0 Hz, -CH2-), 4.34 (1H, sext, J = 7.2 Hz, -CH-), 6.58 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.36(1H, t, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.58 (1H, t, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.65 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.90 (1H, dd, J = 8.4, 2.4 Hz, Ar-H), 8.01 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 8.40 (1H, d, J = 2.4 Hz, Ar-H), 9.34 (1H, d, J = 8.8 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 11.21, 26.86, 54.41, 120.16, 123.92, 125.13, 125.81, 127.05, 128.49, 129.02, 129.37, 129.73, 132.17, 132.55, 133.22, 133.29, 145.69, 151.64, 180.85 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C21H19N2OSCl [M]+: 382.0907, found [M+H]+: 383.0994, [M-H]-:381.0851.
【０１４７】
実施例27
【０１４８】
10-クロロ-6-((2-(ジメチルアミノ)エチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N7)
【０１４９】
10-Chloro-6-((2-(dimethylamino)ethyl)amino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N7)
【０１５０】
黄色の固体を分離（収率76%）。(Rf = 0.82 at EA: MeOH: ammonia water= 10:5:1). Mp 156-157 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 2.36 (6H, s, -N(CH3)2), 2.69 (2H, t, J = 6.0 Hz, -CH2N-), 3.57 (2H, q, J = 5.6 Hz, -NCH2-), 5.86 (1H, br, -NH), 7.44 (1H, td, J = 8.0, 1.6 Hz, Ar-H), 7.62 (2H, td, J = 7.6, 1.6 Hz, Ar-H), 7.65 (1H, dd, J = 8.0, 0.8 Hz, Ar-H), 7.82 (1H, dd, J = 8.4, 1.2 Hz, Ar-H), 8.58 (1H, dd, J = 1.6, 0.4 Hz, Ar-H), 9.46 (1H, dd, J = 8.8, 1.2 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 39.53, 45.28, 57.57, 120.71, 123.46, 125.90, 127.02, 127.27, 127.57, 129.35, 129.43, 129.56, 131.46, 132.43, 132.56, 134.02, 145.72, 150.90, 181.05. (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C20H18N3OSCl [M]+: 383.0859, found [M+H]+: 384.0925.
【０１５１】
実施例28
【０１５２】
10-クロロ-6-((2-(ジエチルアミノ)エチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N8)
【０１５３】
10-Chloro-6-((2-(diethylamino)ethyl)amino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N8)
【０１５４】
黄色の固体を分離（収率86%）。(Rf = 0.8 at EA: MeOH: ammonia water= 10:5:1). Mp 152-153 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.13 (6H, t, J = 7.2 Hz,-CH3), 2.64 (4H, q, J = 6.8 Hz,-NCH2-), 2.82 (2H, t, J = 6.0 Hz,-CH2N-), 3.70 (2H, q, J = 5.2 Hz, -NCH2-), 6.08 (1H, br, -NH-), 7.43(1H, t, J = 7.2 Hz, Ar-H), 7.59-7.64 (3H, m, Ar-H), 7.81 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 8.57 (1H, d, J = 1.2 Hz, Ar-H), 9.45 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 12.34, 39.52, 46.81, 50.89, 120.64, 124.25, 124.34, 125.89, 126.96, 127.63, 129.32, 129.41, 129.53, 131.49, 132.37, 132.55, 133.98, 145.79, 150.96, 181.06 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C22H22N3OSCl [M]+: 411.1172, found [M+H]+: 412.1262.
【０１５５】
実施例29
【０１５６】
10-クロロ-6-(2-エタノ-ルアミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N9)
【０１５７】
10-Chloro-6-(2-ethanolamino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N9)
【０１５８】
黄色の固体を分離（収率77%）。(Rf = 0.65 at EA). Mp 190-192 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 3.93 (2H, q, J = 4.4 Hz, -NCH2-), 4.00 (2H, t, J = 4.4 Hz, -CH2O-), 4.23 (1H, br, -OH), 5.45 (1H, br, -NH), 7.48 (1H, td, J = 8.0, 1.6 Hz, Ar-H), 7.62-7.68 (3H, m, Ar-H),7.81 (1H, dd, J =7.6, 0.8 Hz, Ar-H), 8.58 (1H, dd, J = 1.6, 0.4 Hz, Ar-H), 9.45 (1H, dd, J = 8.4, 0.8 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 45.88, 63.59, 120.97, 123.67, 125.12, 125.92, 126.60, 127.50, 129.48, 129.83, 130.15, 130.91, 132.55, 132.69, 134.35, 144.65, 151.32, 180.87 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C18H13N2O2SCl [M]+: 356.8260, found [M+H]+: 357.0476, [M+H+2]+: 359.0455.
【０１５９】
実施例30
【０１６０】
10-クロロ-6-(3-プロパノ-ルアミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N10)
【０１６１】
10-Chloro-6-(3-propanolamino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N10)
【０１６２】
黄色の固体を分離（収率94%）。(Rf = 0.66 at EA). Mp 201-202 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.94 (2H, p, J = 6.0 Hz, -CH2-), 3.72 (2H, t, J = 5.2 Hz, -NCH2-), 3.93 (2H, q, J = 6.0 Hz, -CH2O-), 4.41 (1H, br, -OH), 5.38 (1H, t, J = 5.2 Hz, -NH-), 7.45 (1H, td, J = 7.6, 1.2 Hz, Ar-H), 7.58-7.65 (3H, m, Ar-H), 7.78 (1H, dd, J = 8.4, 0.8 Hz, Ar-H), 8.56 (1H, dd, J = 2.0, 0.4 Hz, Ar-H), 9.42 (1H, dd, J = 8.4, 1.2 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 33.23, 38.94, 59.25, 120.72, 123.44, 124.84, 125.94, 126.32, 127.45, 129.44, 129.92, 130.11, 130.84, 132.49, 132.64, 134.31, 144.83, 151.33, 180.88 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C19H15N2O2SCl [M]+: 370.0543, found [M+H]+: 371.0622.
【０１６３】
実施例31
【０１６４】
10-クロロ-6-(5-ペンタノ-ルアミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N11)
【０１６５】
10-Chloro-6-(5-pentanolamino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N11)
【０１６６】
黄色の固体を分離（収率91%）。(Rf = 0.7 at EA). Mp 158-160 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.40 (1H, br, -OH),1.49-1.62 (2H, m, -CH2-), 1.71 (2H, quin, -CH2-), 1.83 (2H, quin, -CH2-), 3.74 (4H, quin, -CH2-), 4.91 (1H, br, -NH), 7.45(1H, td, J = 7.6, 1.2 Hz, Ar-H), 7. 59 (3H, m, Ar-H), 7.83 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 8.57 (1H, d, J = 1.2 Hz, Ar-H), 9.44 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 23.39, 29.17, 32.40, 42.24, 62.83, 120.69, 123.53, 124.60, 125.84, 127.11, 127.48, 129.40, 129.51, 129.71, 131.02, 131.79, 132.53, 134.14, 145.60, 150.58, 181.02 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C21H19N2O2SCl [M]+: 398.0856, found [M+H]+: 399.0914.
【０１６７】
実施例32
【０１６８】
10-クロロ-6-((1-ヒドロキシブタン -2-イル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N12)
【０１６９】
10-Chloro-6-((1-hydroxybutan-2-yl)amino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N12)
【０１７０】
黄色の固体を分離（94%）。(Rf = 0.8 at EA). Mp 203-204 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.21 (3H, t, J = 7.6 Hz, -CH3), 1.71-1.88 (2H, m, -CH2-), 3.79 (1H, dd, J =11.2, 1.6 Hz, -CH2-), 3.99 (1H, dd, J = 11.2, 2.8 Hz, -CH2-), 4.34 (1H, quin, J = 11.2 Hz, -NCH-), 4.59 (1H, br, -OH), 5.02 (1H, d, J = 6.0 Hz, -NH-), 7.44(1H, td, J = 8.0, 1.2 Hz, Ar-H), 7.56 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 7.59 (1H, td, J = 7.6, 1.2 Hz, Ar-H), 7.61 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 7.74 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 8.52 (1H, d, J = 2.0 Hz, Ar-H), 9.40 (1H, dd, J = 7.6, 1.2 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 10.95, 24.95, 56.89, 67.08, 120.83, 123.68, 124.98, 125.88, 126.51, 127.40, 129.39, 129.75, 130.02, 130.81, 132.38, 132.62, 134.28, 144.53, 151.09, 180.75 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C20H17N2O2SCl [M]+: 384.0699, found [M+H]+: 385.0790.
【０１７１】
実施例33
【０１７２】
10-クロロ-6-((4-メチルペンタン-2-イル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N13)
【０１７３】
10-Chloro-6-((4-methylpentan-2-yl)amino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N13)
【０１７４】
黄色の固体を分離（収率94%）。(Rf = 0.9 at CH2Cl2). Mp 176-177 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 0.98 (3H, d, J = 6.8 Hz, -CH3), 1.03 (3H, d, J = 6.8 Hz, -CH3), 1.35 (3H, d, J = 6.4 Hz, -CH3), 1.45 (1H, quin, J = 6.4 Hz, -CH2-), 1.66 (1H, quin, J = 6.8 Hz, -CH2-), 1.80 (1H, sep, J = 6.8 Hz, -CH-), 4.63 (1H, br, -NH), 4.63-4.66 (1H, m, -CH-), 7.43 (1H, td, J = 7.6, 1.2 Hz, Ar-H), 7.58-7.63 (3H, m, Ar-H), 7.81 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 8.56 (1H, d, J = 1.2 Hz, Ar-H), 9.43 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 21.38, 22.87, 22.92, 25.40, 45.73, 46.80, 120.55, 123.42, 124.36, 125.80, 127.21, 127.44, 129.38, 129.71, 131.08, 132.47, 132.52, 134.07, 145.76, 150.01, 181.05 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C22H19N2OSCl [M]+: 396.1063, found [M+H]+: 397.1142.
【０１７５】
実施例34
【０１７６】
6-((2-アミノエチル)アミノ)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N14)
【０１７７】
6-((2-Aminoethyl)amino)-10-chloro-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N14)
【０１７８】
黄色の固体を分離（収率90%）。(Rf = 0.6 at EA: MeOH: ammonia water = 10: 5: 1). Mp 193-194 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ (ppm) 2.90 (2H, t, J = 6.0 Hz, -CH2-), 3.59 (2H, t, J = 6.0 Hz, -CH2-), 7.36 (1H, t, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.59(1H, t, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.66 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.85 (1H, d, J = 7.2 Hz, Ar-H), 7.96 (1H, d, J = 8.8 Hz, Ar-H), 8.35 (1H, br, Ar-H), 9.32 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6): δ (ppm) 40.79, 45.06, 120.24, 124.08, 125.31, 125.84, 127.00, 128.39, 128.83, 129.32, 129.69, 132.06, 132.33, 133.12, 133.26, 145.58, 151.52, 180.65 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C18H14N3OSCl [M]+: 355.0546, found [M+H]+: 356.0641.
【０１７９】
実施例35
【０１８０】
10-クロロ-6-((2-((2-ヒドロキシエチル)アミノ)エチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N15)
【０１８１】
10-Chloro-6-((2-((2-hydroxyethyl)amino)ethyl)amino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N15)
【０１８２】
黄色の固体を分離（収率58%）。(Rf = 0.63 at EA: MeOH: ammonia water = 10: 5: 1). Mp 141-143 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ (ppm) 2.69 (2H, t, J = 5.6 Hz, -CH2-), 2.90 (2H, t, J = 6.0 Hz, -CH2-), 3.51 (2H, t, J = 5.6 Hz, -CH2-), 3.65 (2H, t, J = 6.0 Hz, -CH2-), 7.10 (1H, br, -NH-), 7.32 (1H, t, J = 7.2 Hz, Ar-H), 7.55 (1H, t, J = 7.2 Hz, Ar-H), 7.62 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 7.76 (1H, t, J = 7.2 Hz, Ar-H), 7.86 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 8.25 (1H, d, J = 2.0 Hz, Ar-H), 9.26 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6): δ (ppm) 41.90, 48.16, 51.80, 60.72, 120.13, 123.96, 125.14, 125.81, 126.94, 128.26, 128.65, 129.16, 129.60, 131.82, 132.11, 132.96, 133.19, 145.50, 151.35, 180.45 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C20H18N3O2SCl [M]+: 399.8938, found [M+H]+: 400.0880.
【０１８３】
実施例36
【０１８４】
10-クロロ-6-((2-モルフォリノエチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N16)
【０１８５】
10-Chloro-6-((2-morpholinoethyl)amino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N16)
【０１８６】
黄色の固体を分離（収率87%）。(Rf = 0.48 at EA). Mp 189-190 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 2.63 (4H, br, -CH2-), 2.81 (2H, br, -CH2-), 3.81 (6H, br, -CH2-), 5.92 (1H, br, -NH-), 6.70 (2H, d, J = 8.4 Hz, Ar’-H), 7.45 (1H, td, J = 7.8, 1.6 Hz, Ar-H), 7.60-7.64 (3H, m, Ar-H), 7.81 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 8.57 (1H, s, Ar-H), 9.46 (1H, dd, J = 8.8, 1.2 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 38.28, 53.31, 56.52, 67.13, 120.73, 123.94, 124.58, 125.91, 127.01, 127.56, 129.37, 129.49, 129.64, 131.27, 132.47, 132.54, 134.10, 145.66, 150.76, 180.99 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C22H20N3O2SCl [M]+: 425.0965, found [M+H]+: 426.1058, [M-H]-: 424.0885.
【０１８７】
実施例37
【０１８８】
10-クロロ-6-((3-(ジメチルアミノ)プロピル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N17)
【０１８９】
10-Chloro-6-((3-(dimethylamino)propyl)amino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N17)
【０１９０】
黄色の固体を分離（収率43%）。(Rf = 0.71 at EA: MeOH: ammonia water = 10: 5: 1). Mp 194-195 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.92 (2H, quin, J =6.0 Hz, -CH2-), 2.41 (6H, s, -N(CH3)2), 2.60 (2H, t, J = 5.6 Hz, -CH2N-), 3.81 (2H, q, J = 5.6 Hz, -NCH2-), 7.95 (1H, br, -NH), 7.40 (1H, td, J = 7.6, 1.6 Hz, Ar-H), 7.56-7.63 (4H, m, Ar-H), 7.80 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 8.57 (1H, d, J = 2.4 Hz, Ar-H), 9.44 (1H, dd, J = 7.6, 0.8 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 24.83, 43.64, 45.68, 59.72, 120.46, 123.97, 124.56, 125.84, 126.83, 127.54, 129.32, 129.48, 131.84, 132.29, 132.56, 133.86, 146.01, 151.27, 181.14 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C21H20N3OSCl [M]+: 397.1016, found [M+H]+: 398.1072.
【０１９１】
実施例38
【０１９２】
10-クロロ-6-((3-(ジエチルアミノ)プロピル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N18)
【０１９３】
10-Chloro-6-((3-(diethylamino)propyl)amino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N18)
【０１９４】
黄色の固体を分離（収率70%）。(Rf = 0.68 at EA: MeOH: ammonia water = 10: 5: 1). Mp 142-143 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.15 (6H, t, J = 6.8 Hz, -CH3), 1.91 (2H, quin, J = 6.0 Hz, -CH2-), 2.66-2.72 (6H, m, -NCH2-), 3.81 (2H, q, J = 4.8 Hz, -NCH2-), 7.40 (1H, td, J = 7.2, 1.2 Hz, Ar-H), 7.55-7.58 (1H, dd, J = 8.4, 3.6 Hz, Ar-H), 7.60-7.64 (2H, m, Ar-H), 7.81 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.93 (1H, br, Ar-H), 8.58 (1H,t, J = 2.0 Hz, Ar-H), 9.45 (1H, dd, J = 8.4, 0.8 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 11.44, 24.71, 44.25, 47.09, 53.57, 120.45, 123.99, 124.50, 125.86, 126.87, 127.46, 129.34, 129.43, 131.85, 132.32, 132.57, 133.88, 146.04, 151.30, 181.15 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C23H24N3SOCl [M]+: 425.1329, found [M+H]+: 426.1396, [M-H]-: 424.1284.
【０１９５】
実施例39
【０１９６】
10-クロロ-6-((3-((2-ヒドロキシエチル)アミノ)プロピル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N19)
【０１９７】
10-Chloro-6-((3-((2-hydroxyethyl)amino)propyl)amino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N19)
【０１９８】
黄褐色の固体を分離（収率75%）。(Rf = 0.65 at EA: MeOH: ammonia water = 10: 5: 1). Mp 65-67 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.89 (2H, quin, J = 6.0 Hz, -CH2-), 2.15 (2H, br, -OH & -NH-), 2.85 (4H, quin, -CH2-), 3.74 (2H, t, J = 6.0 Hz, -CH2-), 3.80 (2H, t, J = 5.2 Hz, -CH2-), 6.53 (1H, br, -NH-), 7.39 (1H, td, J = 7.6, 0.8 Hz, Ar-H), 7.44 (1H, d, J = 8.8 Hz, Ar-H), 7.50 (1H, dd, J = 8.4, 2.4 Hz, Ar-H), 7.58 (1H, td, J = 7.2, 1.2 Hz, Ar-H), 7.76 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H), 8.46 (1H, d, J = 2.0 Hz, Ar-H), 9.39 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 28.37, 42.23, 48.74, 51.65, 61.42, 120.48, 123.99, 124.22, 125.85, 126.88, 127.42, 129.13, 129.33, 129.38, 131.23, 132.21, 132.33, 133.95, 145.69, 150.82, 180.92 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C21H20N3O2SCl [M]+: 413.0965, found [M+H]+: 414.1053, [M+H+2]+: 416.1037.
【０１９９】
実施例40
【０２００】
10-クロロ-6-((2,3-ジヒドロ-1H-インデン-2-イル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N20)
【０２０１】
10-Chloro-6-((2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)amino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N20)
【０２０２】
黄褐色の固体を分離（収率65%）。(Rf = 0.7 at CH2Cl2: n-hexane= 2: 1). Mp 251-252 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 3.02 (1H, d, J = 5.2 Hz, indane-H), 3.06 (1H, d, J = 5.2 Hz, indane-H), 3.59 (1H, d, J = 7.2 Hz, indane-H), 3.63 (1H, d, J = 7.2 Hz, indane-H), 5.10 (1H, d, J = 6.8 Hz, -NH), 5.23 (1H, q, J = 5.2 Hz, indane-H), 7.21-7.25 (2H, m, Ar’-H), 7.28-7.31 (2H, m, Ar’-H), 7.47 (1H, td, J = 6.8, 1.2 Hz, Ar-H), 7.58 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 7.61-7.67 (1H, td, J = 6.8, 1.2 Hz, Ar-H), 7.87 (1H, d, J = 7.6 Hz, Ar-H), 8.57 (1H, d, J = 2.0 Hz, Ar-H), 9.46 (1H, dd, J = 8.8, 0.8 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 40.41, 53.27, 120.79, 123.60, 124.81, 124.93, 125.84, 126.76, 127.37, 127.46, 129.38, 129.51, 129.71, 131.02, 132.50, 132.54, 134.12, 141.29, 145.56, 150.20, 181.00 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C25H17N2OSCl [M]+: 428.0750; found [M+H]+: 429.0822.
【０２０３】
実施例41
【０２０４】
10-クロロ-6-(シクロヘキシルアミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N21)
【０２０５】
10-Chloro-6-(cyclohexylamino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N21)
【０２０６】
黄褐色の固体を分離（収率91%）。(Rf = 0.7 at CH2Cl2: n-hexane= 2: 1). Mp 196-197 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.25-1.40 (4H, m, cyclohexylamine-CH2), 1.49-1.60 (2H, m, cyclohexylamine-CH2), 1.70-1.74 (2H, m, cyclohexylamine-CH2), 1.79-1.84 (2H, m, cyclohexylamine-CH2), 2.21 (2H, dd, J = 8.8, 3.2 Hz, cyclohexylamine-CH2), 4.30 (1H, sep, J = 3.6 Hz, cyclohexylamine-CH), 4.72 (1H, d, J = 6.8 Hz, -NH-), 7.41(1H, t, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.51-62 (3H, m, Ar-H), 7.79 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H), 8.51 (1H, d, J = 1.6 Hz, Ar-H), 9.41 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 24.94, 25.92, 33.10, 50.26, 120.51, 123.50, 124.34, 125.77, 127.11, 127.37, 129.27, 129.35, 129.60, 131.01, 132.37, 132.41, 134.00, 145.66, 149.75, 180.95 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C22H19N2OSCl [M]+: 394.0907; found [M+H]+: 395.0991.
【０２０７】
実施例42
【０２０８】
6-((1-ベンジルピペリジン-4-イル)アミノ)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N22)
【０２０９】
6-((1-Benzylpiperidin-4-yl)amino)-10-chloro-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N22)
【０２１０】
黄褐色の固体を分離（収率62%）。(Rf = 0.77 at EA). Mp 194-196 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.62-1.72 (2H, m, piperidine-H), 2.24 (2H, d, J = 13.2 Hz, piperidine-H), 2.32 (2H, t, J = 11.2 Hz, piperidine-H), 2.92 (2H, d, J = 11.6 Hz, piperidine-H), 3.59 (2H, s, -CH2-), 4.35 (1H, sext, J = 6.4 Hz, piperidine-CH), 4.75 (1H, d, J = 7.2 Hz, -NH), 7.26-7.30 (1H, m, Ar’-H), 7.36-7.38 (4H, m, Ar’-H), 7.44 (1H, td, J = 7.6, 0.8 Hz, Ar-H), 7.59-7.64 (3H, m, Ar-H), 7.80 (1H, d, J = 7.6 Hz, Ar-H), 8.56 (1H, d, J = 1.6 Hz, Ar-H), 9.43 (1H, d, J =8.8 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 32.26, 48.63, 52.35, 63.22, 120.63, 123.47, 124.57, 125.81, 127.07, 127.12, 127.47, 128.25, 129.21, 129.35, 129.44, 129.74, 130.99, 132.46, 132.52, 134.10, 138.37, 145.57, 149.76, 181.00 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C28H24N3OSCl [M]+: 485.1329; found [M+H]+: 486.1379.
【０２１１】
実施例43
【０２１２】
10-クロロ-6-((チオフェン-2-イルメチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N23)
【０２１３】
10-Chloro-6-((thiophen-2-ylmethyl)amino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N23)
【０２１４】
黄褐色の固体を分離（収率78%）。(Rf = 0.7 at CH2Cl2: n-hexane = 2: 1). Mp 178-180 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 5.07 (1H, d, J = 5.2 Hz, -NCH2-), 5.17 (1H, br, -NH-),7.00 (1H, t, J = 4.4 Hz, thiophene-H), 7.16 (1H, d, J = 3.2 Hz, thiophene-H), 7.25 (1H, d, J = 0.8 Hz, thiophene-H), 7.47(1H, t, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.52 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 7.58 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 7.65 (1H, t, J = 7.6 Hz, Ar-H), 7.89 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H), 8.53 (1H, s, Ar-H), 9.46 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 41.14, 121.06, 123.58, 125.05, 125.47, 125.89, 126.47, 126.73, 127.29, 127.45, 129.33, 129.57, 129.71, 130.94, 132.39, 132.51, 134.12, 141.36, 145.20, 149.82, 180.80 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C21H13N2OS2Cl [M]+: 408.0158; found [M+H]+: 409.0251, [M-H]-: 407.0085.
【０２１５】
実施例44
【０２１６】
10-クロロ-6-((シクロヘキシルメチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N24)
【０２１７】
10-Chloro-6-((cyclohexylmethyl)amino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N24)
【０２１８】
黄褐色の固体を分離（収率79%）。(Rf = 0.7 at CH2Cl2: n-hexane = 2: 1). Mp 165-166 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 1.07 (1H, d, J = 11.2 Hz, cyclohexyl-CH2), 1.30 (1H, d, J = 11.2 Hz, cyclohexyl-CH2), 1.23 (2H, q, J = 11.6 Hz, cyclohexyl-CH2), 1.31 (2H, q, J = 11.6 Hz, cyclohexyl-CH2), 1.78-1.81 (4H, m, cyclohexyl-CH2), 1.90 (2H, d, J = 12.4 Hz, cyclohexyl-CH2), 3.53 (2H, t, J = 6.0 Hz, -NCH2-), 4.85 (1H, br, -NH-), 7.40 (1H, t, J = 7.2 Hz, Ar-H), 7.51 (1H, d, J = 8.8 Hz, Ar-H), 7.55 (1H, d, J = 1.6 Hz, Ar-H), 7.60 (1H, t, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.79 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H), 8.50 (1H, d, J = 1.2 Hz, Ar-H), 9.41 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 25.97, 26.52, 31.23, 37.63, 48.50, 120.59, 123.57, 124.41, 125.80, 127.10, 127.38, 129.26, 129.38, 129.45, 130.95, 132.33, 132.41, 134.02, 145.58, 150.64, 180.87 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C23H21N2OCl [M]+: 408.1063; found [M+H]+: 409.1115.
【０２１９】
実施例45
【０２２０】
6-(ベンジルアミノ)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N25)
【０２２１】
6-(Benzylamino)-10-chloro-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N25)
【０２２２】
黄褐色の固体を分離（収率93%）。(Rf = 0.67 at CH2Cl2: n-hexane = 2: 1). Mp 194-195 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 4.94 (2H, d, J = 5.2 Hz, -CH2-), 5.16 (1H, br, -NH-), 7.33-7.51 (6H, m, Ar-H), 7.58-7.67 (3H, m, Ar-H), 7.87 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H), 8.59 (1H, d, J = 2.0 Hz, Ar-H), 9.47 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 37.63, 120.98, 123.54, 124.89, 125.87, 127.26, 127.50, 127.63, 128.24, 128.79, 129.43, 129.57, 129.85, 131.02, 132.58, 134.18, 138.82, 145.48, 150.33, 181.00 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C23H15N2OSCl [M]+: 402.0594; found [M+H]+: 403.0692.
【０２２３】
実施例46
【０２２４】
10-クロロ-6-((ピリジン-2-イルメチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N26)
【０２２５】
10-Chloro-6-((pyridin-2-ylmethyl)amino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N26)
【０２２６】
黄褐色の固体を分離（収率93%）。(Rf = 0.25 at EA). Mp 187-189 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 5.01 (2H, d, J = 4.0 Hz, -CH2-), 6.79 (1H, br, -NH-), 7.24-7.28 (1H, m, Ar’-H), 7.45 (2H, t, J = 7.2 Hz, Ar’-H & Ar-H), 7.61-7.67 (3H, m, Ar-H), 7.73 (1H, td, J = 7.6, 1.6 Hz, Ar-H), 7.86 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 8.58 (1H, d, J = 2.0 Hz, Ar-H), 8.67 (1H, d, J = 4.8 Hz, Ar’-H), 9.47 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 46.74, 120.81, 122.37, 124.19, 124.61, 125.93, 127.04, 127.60, 129.33, 129.44, 129.60, 131.40, 132.46, 132.52, 134.03, 136.94, 145.62, 148.94, 150.43, 156.58, 181.00 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C22H14N3OSCl [M]+: 403.0546; found [M+H]+: 404.0615.
【０２２７】
実施例47
【０２２８】
6-((ベンゾ[d][1,3]ジオキソ-ル-5-イルメチル)アミノ)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N27)
【０２２９】
6-((Benzo[d][1,3]dioxol-5-ylmethyl)amino)-10-chloro-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N27)
【０２３０】
黄褐色の固体を分離（収率90%）。(Rf = 0.88 at EA). Mp 205-206 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 4.82 (2H, t, J = 5.2 Hz, -NCH2-), 5.08 (1H, br, -NH-), 5.97 (2H, s, -OCH2O-), 6.82 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar’-H), 6.96 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar’-H), 7.00 (1H, d, J = 1.2 Hz, Ar’-H), 7.47 (1H, td, J = 8.0, 1.2 Hz, Ar-H), 7.57 (1H, d, J = 8.8 Hz, Ar-H), 7.60-7.66 (2H, m, Ar-H), 7.86 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H), 8.62 (1H, d, J = 2.0 Hz, Ar-H), 9.46 (1H, d, J = 8.8 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 46.30, 101.10, 108.40, 108.85, 120.95, 121.58, 123.52, 124.88, 125.86, 127.23, 127.46, 129.39, 129.56, 129.76, 130.98, 132.48, 132.55, 132.61, 134.15, 145.42, 147.07, 147.92, 150.21, 180.93 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C24H15N2O3SCl [M]+: 446.0492; found [M+H]+: 447.0586, [M-H]-: 445.0440.
【０２３１】
実施例48
【０２３２】
10-クロロ-6-((2-メトキシベンジル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N28)
【０２３３】
10-Chloro-6-((2-methoxybenzyl)amino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N28)
【０２３４】
黄褐色の固体を分離（収率82%）。(Rf = 0.65 at CH2Cl2: n-hexane = 2: 1). Mp 223-224 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 3.95 (3H, s, -OCH3), 4.93 (2H, d, J = 5.6 Hz, -NCH2-), 5.57 (1H, t, J = 5.6 Hz, -NH-), 5.97 (2H, s, -OCH2O-), 6.94-7.00 (2H, m, Ar’-H), 7.30 (1H, td, J = 8.0, 2.0 Hz, Ar’-H), 7.45 (1H, td, J = 8.0, 1.6 Hz, Ar’-H), 7.51 (1H, d, J = 7.2 Hz, Ar’-H), 7.59-7.66 (3H, m, Ar-H), 7.89 (1H, dd, J = 8.4, 1.2 Hz, Ar-H), 8.57 (1H, dd, J = 2.0, 0.8 Hz, Ar-H), 9.45 (1H, dd, J = 8.4, 0.8 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 42.33, 55.49, 110.47, 120.68, 120.81, 123.90, 124.59, 125.82, 126.68, 127.20, 127.52, 128.88, 129.38, 129.44, 129.71, 130.49, 131.23, 132.46, 132.54, 134.04, 145.59, 150.62, 157.89, 181.04 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C24H17N2O2SCl [M]+: 432.0699; found [M+H]+: 433.0783.
【０２３５】
実施例49
【０２３６】
10-クロロ-6-((3,4-ジメトキシベンジル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N29)
【０２３７】
10-Chloro-6-((3,4-dimethoxybenzyl)amino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N29)
【０２３８】
黄褐色の固体を分離（収率84%）。(Rf = 0.66 at CH2Cl2: n-hexane = 2: 1). Mp 251-252 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 3.89 (3H, s, -OCH3), 3.90 (3H, s, -OCH3), 4.86 (2H, d, J = 4.8 Hz, -NCH2-), 5.11 (1H, t, J = 5.2 Hz, -NH-), 6.89 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar’-H), 7.05 (1H, dd, J = 8.0, 2.0 Hz, Ar’-H), 7.08 (1H, d, J = 2.0 Hz, Ar’-H), 7.48 (1H, td, J = 7.6, 1.2 Hz, Ar-H), 7.60 (1H, dd, J = 8.4, 0.4 Hz, Ar-H), 7.65 (1H, dd, J = 8.4, 1.5 Hz, Ar-H), 7.66 (1H, td, J = 8.0, 1.2 Hz, Ar-H), 7.88 (1H, dd, J = 8.4, 0.8 Hz, Ar-H), 8.59 (1H, dd, J = 1.5, 0.4 Hz, Ar-H), 9.48 (1H, dd, J = 8.4, 1.2 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 46.45, 55.96, 55.99, 111.31, 111.82, 120.59, 120.99, 123.56, 124.88, 125.91, 127.20, 127.50, 129.45, 129.60, 129.88, 131.04, 131.34, 132.59, 134.21, 145.52, 148.63, 149.20, 150.34, 181.01 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C25H19N2O3SCl [M]+: 462.0805; found [M+H]+: 463.0900, [M-H]-: 461.0754.
【０２３９】
実施例50
【０２４０】
10-クロロ-6-(フェネチルアミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N30)
【０２４１】
10-Chloro-6-(phenethylamino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N30)
【０２４２】
黄褐色の固体を分離（収率94%）。(Rf = 0.52 at CH2Cl2: n-hexane= 2: 1). Mp 151-152 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 3.10 (2H, t, J = 6.8 Hz, -CH2-), 3.98 (2H, q, J = 6.4 Hz, -NCH2-),4.91 (1H, t, J = 4.8 Hz, -NH-), 7.27-7.39 (5H, m, Ar’-H), 7.45 (1H, t, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.54 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 7.59 (1H, d, J = 1.2 Hz, Ar-H), 7.63 (1H, t, J = 7.6 Hz, Ar-H), 7.85 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 8.54 (1H, d, J = 1.6 Hz, Ar-H), 9.44 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 35.33, 43.52, 120.77, 123.66, 124.69, 125.85, 126.56, 127.23, 127.50, 128.73, 128.94, 129.33, 129.48, 129.50, 131.03, 132.54, 134.08, 139.30, 145.57, 150.36, 180.94 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C24H17N2OSCl [M]+: 416.9226; found [M+H]+: 417.0857, [M+H+2]+: 419.0834.
【０２４３】
実施例51
【０２４４】
10-クロロ-6-((4-メトキシフェネチル)アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N31)
【０２４５】
10-Chloro-6-((4-methoxyphenethyl)amino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N31)
【０２４６】
黄色の固体を分離（収率95%）。(Rf = 0.89 at CH2Cl2). Mp 214-215 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 3.03 (2H, t, J = 6.8 Hz, -CH2-), 3.81 (3H, s, -OCH3), 3.94 (2H, q, J = 6.4 Hz, -NCH2-), 4.90 (1H, t, J = 4.8 Hz, -NH-), 6.90 (2H, d, J = 8.4 Hz, Ar’-H), 7.23 (2H, d, J = 8.4 Hz, Ar’-H), 7.45 (1H, t, J = 7.6 Hz, Ar-H), 7.55 (1H, d, J = 8.8 Hz, Ar-H), 7.59 (1H, d, J = 2.0 Hz, Ar-H), 7.63 (1H, t, J = 7.6 Hz, Ar-H), 7.85 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H), 8.54 (1H, d, J = 2.0 Hz, Ar-H), 9.44 (1H, d, J = 8.8 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 34.39, 43.68, 55.31, 114.13, 120.76, 123.67, 124.67, 125.85, 127.22, 127.52, 129.36, 129.49, 129.68, 129.87, 131.05, 131.24, 132.48, 134.09, 145.59, 150.41, 158.31, 180.99 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C25H19N2O2SCl [M]+: 446.0856; found [M+H]+: 447.0938.
【０２４７】
実施例52
【０２４８】
6-((4-アミノフェネチル)アミノ)-10-クロロ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N32)
【０２４９】
6-((4-Aminophenethyl)amino)-10-chloro-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N32)
【０２５０】
黄色の固体を分離（収率82%）。(Rf = 0.52 at CH2Cl2). Mp 208-210 oC (MeOH). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (ppm) 2.97 (2H, t, J = 6.8 Hz, -CH2-), 3.63 (2H, br, -NH2), 3.91 (2H, q, J = 6.4 Hz, -NCH2-),4.91 (1H, t, J = 4.8 Hz, -NH-), 6.70 (2H, d, J = 8.4 Hz, Ar’-H), 7.09 (2H, d, J = 8.0 Hz, Ar’-H), 7.44 (1H, t, J = 7.6 Hz, Ar-H), 7.55 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.60 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H), 7.63 (1H, t, J = 7.6 Hz, Ar-H), 7.84 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H), 8.54 (1H, d, J = 2.0 Hz, Ar-H), 9.44 (1H, d, J = 8.4 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ (ppm) 34.37, 43.70, 115.52, 120.72, 123.73, 124.59, 125.83, 127.19, 127.51, 129.06, 129.31, 129.45, 129.59, 129.75, 131.09, 132.42, 134.04, 144.89, 145.60, 150.45, 180.96 (CO). HRMS (ESI) m/z calcd for C24H16N3OSCl [M]+: 431.0859; found [M+H]+: 432.0950.
【０２５１】
実施例53
【０２５２】
2-(10-クロロ-12-オキソ-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-6-イル) グアニジン  (N33)
【０２５３】
2-(10-Chloro-12-oxo-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-6-yl)guanidine (N33)
【０２５４】
黄色の固体を分離（収率85%）。Mp: 370 oC. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm. 7.40 (3H, td, J = 8.4, 1.2 Hz, Ar-H & -NH2), 7.59 (1H, td, J = 8.7, 1.2 Hz, Ar-H), 7.59 (1H, dd, J = 8.4, 0.8 Hz, Ar-H), 7.83 (1H, dd, J = 8.4, 2.0 Hz, Ar-H), 7.95 (1H, d, J = 8.8 Hz, Ar-H), 8.40 (1H, d, J = 2.4 Hz, Ar-H), 9.49 (1H, dd, J = 8.4, 0.8 Hz, Ar-H). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6): δ ppm. 120.77, 124.49,125.86, 126.82, 128.11, 128.60, 129.21, 129.85, 132.13, 132.52, 132.68, 136.17, 136.80, 144.49, 159.19, 181.16. HRMS (ESI) calcd for C17H11N4OSCl [M]+ 354.0342; found [M+H] + 355.0438.
【０２５５】
実施例54
【０２５６】
10-クロロ-6-(ピペリジン-1-イル-アミノ)-12H-チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン (N34)
【０２５７】
10-Chloro-6-(piperidin-1-ylamino)-12H-thiochromeno[2,3-c]quinolin-12-one (N34)
【０２５８】
黄色の固体を分離（収率60%）。Mp: 180-181 oC.1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 1.72-1.74 (2H, m, -CH2-), 1.89 (4H, quin, J= 5.2 Hz, -CH2-), 3.32 (4H, J = 4.8 Hz, -CH2-), 7.36(1H, tt, J = 8.7, 2.1 Hz, Ar-H10), 7.47 (1H, dd, J = 8.4, 2.7 Hz, Ar-H8), 7.61-7.73 (3H, m, Ar-H), 8.00 (1H, d, J = 8.0 Hz, Ar-H), 8.59 (1H,d, J = 2.0 Hz, Ar-H), 9.63 (1H, d, J = 8.8 Hz, Ar-H).13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ ppm, 24.28, 25.91, 52.36, 123.49, 125.77, 127.32, 127.90, 128.59, 129.06, 129.27, 130.51, 131.66, 132.18, 132.39, 133.49, 134.70, 144.98, 158.53, 181.58.
【０２５９】
薬理活性実験
【０２６０】
薬理試験については、科学的に合成した化合物 2-21及びN-1からN-34（合計54種類の薬物）に対して、次の五つの薬理活性実験を行う。一、細胞増殖分析（MTT assay）試験；二、Ｉ型・II型トポイソメラ-ゼ活性試験；三、細胞周期阻害チェック；四、アポト-シス関連のタンパク質定量；五、米国国立癌研究所（NCI）が選んだ26種類の化合物と、60種類の癌細胞株の間における細胞毒性試験。
【０２６１】
実施例55 細胞増殖分析（MTT assay）試験
【０２６２】
すべての合成化合物に対してMTT比色定量法を用い、PC-3 (BCRC 60122, Taiwan)とDU-145(HTB-81ＴＭ, ATCC, Rockville, MD)に対する化合物の細胞毒性を分析する。上記の細胞を、RPMI-1640、5% FBS (v/v)、100 U/mL ペニシリン、及び50 mg/mLストレプトマイシンで培養する。96ウェル培養プレ-ト、5% CO2 、37 oC で、24時間、約2 x 103個の細胞を培養する。対外細胞に対する毒性を定量化するため、化合物は実験前にDMSOに溶かし、あらかじめ同じ細胞培養液と混合しておき、五種類の化合物濃度を（0.15、0.5、1.5、5、15 μＭ）を用意して三重重複実験する。化合物を加えてから72時間後、100 μLのMTT（1 mg/mL）をひとつひとつのウェルに加え、37 oCで 4時間培養する。MTT溶液を除去した後、100 μLのDMSOをそれぞれのウェルに加え、37 oC で20分培養する。ELISAリ-ダ-で波長560 nmの吸光度を測定する。結果は三重重複の平均値を採用し、表1にIC50の数値をまとめた。
【０２６３】
表1、チオクロメノ[2,3-c] キノリン-12-オン誘導体の細胞毒性MTT分析
【０２６４】
【表１−１】
2015151396.tif 000004
【０２６５】
【表１−２】
2015151396.tif 000005
【０２６６】
【表１−３】
2015151396.tif 000006
a SD：標準差、すべての実験は三重重複以上。
【０２６７】
このほか、単一のヒドロキシ基、アルキル基、芳香核しかもたない場合と較べて、化合物N7、N8、N14、N15、N17、N18は一個以上のN原子を側鎖に有しているため、優れた細胞毒性活性を示す。化合物5、7、8、16、19、N2、N7、N8、N9、N14、N15、N16、N17、N18、N19、N25を選んで、トポイソメラ-ゼ活性試験を実施した。
【０２６８】
実施例56、Ｉ型・II型トポイソメラ-ゼ活性試験
【０２６９】
化合物5、7、8、16、19、N2、N7、N8、N9、N14、N15、N16、N17、N18、N19、N25について、25 μＭまたは50 μＭでトポイソメラ-ゼ活性試験を行った（図2-4）。
【０２７０】
Ｉ型トポイソメラ-ゼ活性試験において、化合物7、N7、N14、N15、N17、N18、N25はカンプトテシン抑制効果に優れており、さらに一歩進めて、五種類の異なる濃度で実験を行った（図4a-d）。化合物7、N7、N14、N15、N17、N18、N25のIC50値は、それぞれ10、10、1、5、25、5、25、1 μＭ（TopoGEN TG2005H、TG-2000H-1の場合）。
【０２７１】
II型トポイソメラ-ゼ活性試験（図5-7）において、化合物7、N7、N8、N14、N15、N18、N19はカンプトテシン抑制効果に優れており、さらに一歩進めて、五種類の異なる濃度で実験を行った（図7a-d）。化合物7、N7、N8、N14、N15、N18、N19のIC50値は、それぞれ10、10、1、10、5、1、1 μＭ（TopoGEN TG2005H、TG-2000H-1の場合）。
【０２７２】
実施例57   米国国立癌研究所（NCI）の選択による実験
【０２７３】
米国国立癌研究所（NCI）が選んだ26個の化合物（2、3、4、5、6、8、10、11、12、13、N1、N2、N6、N7、N9、N12、N13、N14、N16、N17、N19、N21、N25、N27、N30、N31）について、60種類の癌細胞株に対する傷害性の実験を行った。第一段階は26個の化合物10 μMが60種類の癌細胞株に及ぼす毒性試験であり、48時間作用させてから細胞増殖試験（Sulforhodamine B，SRB）を行った。結果は表2-表4であり、生長率（growth percent）で現している。
【０２７４】
その後、潜在的毒性に優れた5個の化合物N2、N7、N14、N19、N25について、五種類の濃度（0.01、0.1、1、10、100 μM）で第二段階の毒性試験を実施した。（表5）。
【０２７５】
以上の効能、効果は、新規性、進歩性という発明特許の要件を満たしていると思われることから、ここに特許を出願する。
【０２７６】
表2、化合物2、3、4、5、6、8、10、11、12、13のNCIデ-タ
【０２７７】
【表２】
2015151396.tif 000007
a NCI 60に対する体外薬物選択、化合物濃度：10-5M。
b N.T. = No test。
【０２７８】
表3、化合物N1、N2、N6、N7、N9、N12、N13、N14のNCIデ-タ
【０２７９】
【表３】
2015151396.tif 000008
a NCI 60に対する体外薬物選択、化合物濃度：10-5M。
b N.T. = No test。
【０２８０】
表4、化合物N16、N17、N19、N21、N25、N27、N30、N31のNCIデ-タ
【０２８１】
【表４】
2015151396.tif 000009
a NCI 60に対する体外薬物選択、化合物濃度：10-5M。
b N.T. = No test。
【０２８２】
表5、N2、N7、N14、N19、N25 NCIのGI50、TGI、LC50デ-タ
【０２８３】
【表５】
2015151396.tif 000010
【図１】
2015151396.tif 000013
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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