(57)【要約】【課題】本発明の課題は、０．０１〜０．０８％（ｗ／ｖ）の濃度のシクロスポリンＡを含有する水性眼科用組成物であって、安定であり、眼刺激が低く、その性状が澄明である組成物を提供することである。【解決手段】本発明のシクロスポリンＡ含有眼科用組成物は、ポリエトキシ化ヒマシ油誘導体およびポリエチレングリコールを含有することで澄明な水性組成物として製剤化できる上、眼科用組成物として好ましい安定性および安全性をも併せ持つ。したがって、本発明のシクロスポリンＡ含有眼科用組成物はドライアイ等の治療に好適に使用できる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
０．０１〜０．０８％（ｗ／ｖ）の濃度のシクロスポリンＡを含有する水性眼科用組成物であって、該組成物がポリエチレングリコールおよび１．０〜５．０％（ｗ／ｖ）の濃度のポリエトキシ化ヒマシ油誘導体を含有する、組成物。
【請求項２】
０．５〜５．０％（ｗ／ｖ）の濃度のポリエチレングリコールを含有する、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
１．０〜３．０％（ｗ／ｖ）の濃度のポリエトキシ化ヒマシ油誘導体を含有する、請求項１記載の組成物。
【請求項４】
２．０％（ｗ／ｖ）の濃度のポリエトキシ化ヒマシ油誘導体を含有する、請求項１記載の組成物。
【請求項５】
さらに０．００５％（ｗ／ｖ）超の濃度のベンザルコニウム塩化物を含有する、請求項１記載の組成物。
【請求項６】
ポリエチレングリコールがＰＥＧ４００である、請求項１記載の組成物。
【請求項７】
ポリエトキシ化ヒマシ油誘導体がポリオキシル３５ヒマシ油である、請求項１記載の組成物。
【請求項８】
油を実質的に含有しない、請求項１記載の組成物。
【請求項９】
エタノールを実質的に含有しない、請求項１記載の組成物。
【請求項１０】
０．０５％（ｗ／ｖ）の濃度のシクロスポリンＡを含有する水性眼科用組成物であって、該組成物が１．２５％（ｗ／ｖ）の濃度のＰＥＧ４００、２．０％（ｗ／ｖ）の濃度のポリオキシル３５ヒマシ油、および０．００５％（ｗ／ｖ）超の濃度のベンザルコニウム塩化物を含有し、油およびエタノールを実質的に含有しない、組成物。
【請求項１１】
次のステップ：
（ａ）シクロスポリンＡをポリエチレングリコールに溶解させて溶液を得るステップ；および
（ｂ）ステップ（ａ）で得られた溶液とポリエトキシ化ヒマシ油誘導体および水を混合するステップを含む、請求項１記載の水性眼科用組成物の製造方法。
【請求項１２】
該組成物中のポリエチレングリコールの濃度が０．５〜５．０％（ｗ／ｖ）である、請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
該組成物中のポリエトキシ化ヒマシ油誘導体の濃度が１．０〜３．０％（ｗ／ｖ）である、請求項１１記載の方法。
【請求項１４】
該組成物中のポリエトキシ化ヒマシ油誘導体の濃度が２．０％（ｗ／ｖ）である、請求項１１記載の方法。
【請求項１５】
次のステップ：
（ａ）シクロスポリンＡをポリエチレングリコールに溶解させて溶液を得るステップ；および
（ｂ）ステップ（ａ）で得られた溶液とポリエトキシ化ヒマシ油誘導体、水およびベンザルコニウム塩化物を混合するステップを含む、請求項５記載の水性眼科用組成物の製造方法。
【請求項１６】
ポリエチレングリコールがＰＥＧ４００である、請求項１１記載の方法。
【請求項１７】
ポリエトキシ化ヒマシ油誘導体がポリオキシル３５ヒマシ油である、請求項１１記載の方法。
【請求項１８】
水性眼科用組成物が油を含まない、請求項１１記載の方法。
【請求項１９】
水性眼科用組成物がエタノールを含まない、請求項１１記載の方法。
【請求項２０】
次のステップ：
（ａ）シクロスポリンＡをＰＥＧ４００に溶解させて溶液を得るステップ；
（ｂ）ステップ（ａ）で得られた溶液とポリオキシル３５ヒマシ油、水およびベンザルコニウム塩化物を混合するステップを含む、
０．０５％（ｗ／ｖ）の濃度のシクロスポリンＡを含有し、ポリオキシル３５ヒマシ油、ＰＥＧ４００およびベンザルコニウム塩化物の濃度が、それぞれ、２．０％（ｗ／ｖ）、１．２５％（ｗ／ｖ）および０．００５％（ｗ／ｖ）超である水性眼科用組成物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、０．０１〜０．０８％（ｗ／ｖ）の濃度のシクロスポリンＡを含有する水性眼科用組成物であって、該組成物がポリエチレングリコールおよび１．０〜５．０％（ｗ／ｖ）の濃度のポリエトキシ化ヒマシ油誘導体を含有する組成物（以下、「本組成物」とも言う）に関する。
【背景技術】
【０００２】
シクロスポリンＡは、細胞性免疫を抑制することから、種々の眼科疾患の治療に有効であることが知られており、特にドライアイに対して高い治療効果を有することが報告されている。
【０００３】
非特許文献１には、乾性角結膜炎（ドライアイ）を伴う眼炎症によって涙液分泌が低下した患者において、シクロスポリンＡを有効成分とする点眼液（ＲＥＳＴＡＳＩＳ（登録商標）０．０５％）が、涙液分泌を増加させることが記載されている。実際、米国においては、シクロスポリンＡを有効成分とする点眼液（ＲＥＳＴＡＳＩＳ（登録商標）０．０５％）がドライアイ治療薬として広く使用されている。
また、非特許文献１には、グリセリン、ヒマシ油、ポリソルベート８０、ｃａｒｂｏｍｅｒ ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ ｔｙｐｅ Ａ、精製水、水酸化ナトリウム（ｐＨを調製するため）が、ＲＥＳＴＡＳＩＳ（登録商標）０．０５％に添加されており、その性状はエマルジョンであることが開示されている。さらに、非特許文献１には、ＲＥＳＴＡＳＩＳ（登録商標）０．０５％の使用前に、白色、不透明の均一なエマルジョンが得られるまで、該点眼液バイアルを数回反転させる必要があることも記載されている。
【０００４】
特許文献１には、シクロスポリンの水への溶解性は極めて低く、水性媒体にシクロスポリンを溶解させた製剤を得ることは実際的には不可能であると記載されている（０００５段）。
また、特許文献１には、シクロスポリンの分離を抑制するため、注射用組成物において、ポリエトキシ化ヒマシ油などの界面活性剤（ｓｕｒｆａｃｅ  ａｃｔｉｖｅ  ａｇｅｎｔｓ）を溶解剤として使用していることが記載されているが、同時に、これが安全性上の問題を引き起こすことも示唆されている（０００７段）。
【０００５】
特許文献２には、シクロスポリンＡを含有する水性眼科用組成物が記載されており、ポリソルベート界面活性剤及び１，５−ヘキサンジオールを添加することで、シクロスポリンＡが水に可溶化することが開示されている（００７１および００７２段）。また、特許文献２記載の発明である製剤が、澄明であり、結晶や沈殿を形成しなかったことが記載されている（００７３段）。
しかしながら、特許文献２には、１，５−ヘキサンジオールに換えてＰＥＧ４００を添加した場合には、シクロスポリンＡは水に可溶化しなかったことも記載されている（００６９および００７０段）。
【０００６】
非特許文献２には、シクロスポリンＡがオリーブ油などの植物油に可溶であるが、オリーブ油を基剤とするシクロスポリンＡ溶液を点眼すると、灼熱感や結膜に対する刺激が生じること、さらに、これらの副作用が基剤の影響によるものであることなどが報告されている（非特許文献２：４頁、右欄、（ｂ））。
また、非特許文献２には、水性溶液において、ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（登録商標）が、シクロスポリンＡの角膜透過性を向上させこと、またベンザルコニウムが、０．０１％ｗ／ｖの濃度で、点眼液の保存剤として用いられることが記載されている。
【０００７】
特許文献３には、シクロスポリンＡ、無水エタノール、ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（登録商標）ＥＬおよびＰＥＧ４００からなる組成物（実施例５）、ならびにシクロスポリンＡ、ベンジルアルコール、プロピレングリコール、ＰＥＧ４００ならびにＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（登録商標）ＥＬからなる組成物（実施例１４）が開示されているが、いずれも水を含有しておらず、いわゆる水性組成物ではない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】ＵＳ ２００７／００１５６９１ Ａ１
【特許文献２】ＵＳ ２０１０／００１６２１９ Ａ１
【特許文献３】特表２００１−５１６３５１号公報
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】ＲＥＳＴＡＳＩＳ（登録商標） Ｐｒｅｓｃｒｉｂｉｎｇ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ
【非特許文献２】Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｗｏｒｌｄ Ｊｏｕｒｎａｌ， Ｖｏｌｕｍｅ ２０１２， Ａｒｔｉｃｌｅ ＩＤ １９４８４８， １１ ｐａｇｅｓ
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明の課題は、０．０１〜０．０８％（ｗ／ｖ）の濃度のシクロスポリンＡを含有する水性眼科用組成物であって、安定であり、眼刺激性が小さく、その性状が澄明である組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者等は、ポリエトキシ化ヒマシ油誘導体およびポリエチレングリコールを用いることで、０．０１〜０．０８％（ｗ／ｖ）の濃度のシクロスポリンＡを含有する澄明な水性組成物（可溶化製剤）が得られることを見出した。
【００１２】
さらに、本発明者等は、該組成物中のポリエトキシ化ヒマシ油誘導体の濃度を１．０〜５．０％（ｗ／ｖ）とした場合に、該組成物が高い熱安定性を有することをも見出し、本発明を完成させるに至った。さらに、該組成物は、従来の市販のシクロスポリン含有点眼液より眼刺激性が低いことも明らかとなった。
【００１３】
すなわち、本発明は、０．０１〜０．０８％（ｗ／ｖ）の濃度のシクロスポリンＡを含有する水性眼科用組成物であって、該組成物がポリエチレングリコールおよび１．０〜５．０％（ｗ／ｖ）の濃度のポリエトキシ化ヒマシ油誘導体を含有する組成物である。
【００１４】
また、本組成物は０．５〜５．０％（ｗ／ｖ）の濃度のポリエチレングリコールを含有することが好ましい。なお、本発明において、好ましいポリエチレングリコールは「ＰＥＧ４００」である。
【００１５】
また、本組成物は１．０〜３．０％（ｗ／ｖ）の濃度のポリエトキシ化ヒマシ油誘導体を含有することが好ましく、２．０％の濃度のポリエトキシ化ヒマシ油誘導体を含有することが特に好ましい。なお、本発明において、好ましいポリエトキシ化ヒマシ油誘導体は「ポリオキシル３５ヒマシ油」である。
【００１６】
また、本組成物は０．００５％（ｗ／ｖ）超の濃度のベンザルコニウム塩化物を含有することもでき、また上記ベンザルコニウム塩化物を唯一の防腐剤として含有することもできる。
【００１７】
本発明において、本組成物は「油」または「エタノール」を実質的に含有しないことが好ましく、さらに好ましくは、「油」および「エタノール」の両者を実質的に含有しない。
【００１８】
また、本組成物は、０．０１〜０．０８％（ｗ／ｖ）の濃度のシクロスポリンＡを含有する水性眼科用組成物であって、該組成物が１．２５％（ｗ／ｖ）の濃度のＰＥＧ４００、２．０％（ｗ／ｖ）の濃度のポリオキシル３５ヒマシ油、および０．００５％（ｗ／ｖ）超の濃度のベンザルコニウム塩化物を含有し、油とエタノールを実質的に含有しない組成物であることが特に好ましい。
【００１９】
また、本発明は、次のステップ：
（ａ）シクロスポリンＡをポリエチレングリコールに溶解させて、溶液を得るステップ；および
（ｂ）ステップ（ａ）で得られた溶液とポリエトキシ化ヒマシ油誘導体および水を混合するステップ
を含む、上記の水性眼科用組成物の製造方法も提供する。
【００２０】
本製造方法によって製造される水性眼科用組成物中のポリエチレングリコールの濃度は０．５〜５．０％（ｗ／ｖ）であることが好ましい。
【００２１】
また、本製造方法によって製造される水性眼科用組成物中のポリエトキシ化ヒマシ油誘導体の濃度は１．０〜３．０％（ｗ／ｖ）であることが好ましく、２．０％であることが特に好ましい。
【００２２】
本発明においては、本製造方法のステップ（ｂ）において、ステップ（ａ）で得られた溶液とポリエトキシ化ヒマシ油誘導体、水およびベンザルコニウム塩化物を混合することができ、この時、本製造方法によって製造される水性眼科用組成物中のベンザルコニウム塩化物の濃度は０．００５％（ｗ／ｖ）超であることが好ましい。
【００２３】
本製造方法は「シクロスポリンＡと油を混合するステップ」または「シクロスポリンＡとエタノールを混合するステップ」を含まないことが好ましく、さらに好ましくは、「シクロスポリンＡと油を混合するステップ」および「シクロスポリンＡとエタノールを混合するステップ」の両者を含まない。
【００２４】
また、本発明は、次のステップ：
（ａ）シクロスポリンＡをＰＥＧ４００に溶解させて、溶液を得るステップ；
（ｂ）ステップ（ａ）で得られた溶液とポリオキシル３５ヒマシ油、水およびベンザルコニウム塩化物を混合するステップを含む、
０．０５％（ｗ／ｖ）の濃度のシクロスポリンＡを含有し、ポリオキシル３５ヒマシ油、ＰＥＧ４００およびベンザルコニウム塩化物の濃度が、それぞれ、２．０％（ｗ／ｖ）、１．２５％（ｗ／ｖ）および０．００５％（ｗ／ｖ）超である上記の水性眼科用組成物の製造方法も提供する。
【発明の効果】
【００２５】
本発明によれば、ＲＥＳＴＡＳＩＳ（登録商標）０．０５％点眼液などの従来のシクロスポリンＡ製剤とは異なり、澄明な水性眼科用組成物であって、眼刺激性が小さく、組成物中のシクロスポリンＡの熱安定性が優れた組成物を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
シクロスポリンＡは、下記式（１）で示される化合物である。
【化１】
2015034160.tif 000002
【００２７】
シクロスポリンＡは、有機合成化学分野における通常の方法に従って製造することができ、またＳＩＧＭＡ−ＡＬＤＲＩＣＨ社などにより市販されている。また、米国においては、シクロスポリンＡを有効成分として含有する点眼液（ＲＥＳＴＡＳＩＳ（登録商標）点眼液）が市販されている。
【００２８】
本組成物は、０．０１〜０．０８％（ｗ／ｖ）、好ましくは０．０３〜０．０６％（ｗ／ｖ）、さらに好ましくは０．０５％（ｗ／ｖ）の濃度のシクロスポリンＡを含有する。本組成物は、当該濃度のシクロスポリンＡを唯一の有効成分として含有し、他の有効成分を含有しないことが好ましい。
【００２９】
本発明において、「澄明」とは、対象となる組成物をガラス製容器（ガラスバイアル、ガラスアンプルなど）に充填し、目視で確認した際に、該組成物が透明、好ましくは、無色かつ透明であることを意味する。シクロスポリンＡが可溶化されたおよび／または溶解した組成物は、「澄明な」組成物に含まれる。
【００３０】
本発明において、「眼科用組成物」とは、眼局所投与に用いられる組成物を意味する。本発明において、好ましい「眼科用組成物」は点眼剤である。
【００３１】
本発明において、「水性眼科用組成物」とは水を基剤とする眼科用組成物を意味する。本発明の「水性眼科用組成物」においては、好ましくは該組成物の８０％（ｗ／ｖ）超が水であり、さらに好ましくは該組成物の９０％（ｗ／ｖ）超が水である。さらに、本発明において、「水性眼科用組成物」は、好ましくは、後述する「油」及び「エタノール」を実質的に含まない。
【００３２】
ポリエチレングリコールは、ＨＯ−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−Ｈの一般式（ｎは１以上の整数である）で示される化合物である。
【００３３】
本発明の「ポリエチレングリコール」として好ましいのは、平均分子量が２００〜１０００のポリエチレングリコールである。本発明の「ポリエチレングリコール」の好ましい例としては、ポリエチレングリコール２００（ＰＥＧ２００）、ポリエチレングリコール３００（ＰＥＧ３００）、ポリエチレングリコール４００（ＰＥＧ４００）、ポリエチレングリコール６００（ＰＥＧ６００）、ポリエチレングリコール１０００（ＰＥＧ１０００）などを挙げることができるが、本発明の「ポリエチレングリコール」の最も好ましい例はＰＥＧ４００である。
【００３４】
本組成物中のポリエチレングリコール濃度については、特に限定はされないが、好ましくは０．５〜５．０（ｗ／ｖ）であり、さらに好ましくは０．５〜３．０（ｗ／ｖ）であり、１．２５％（ｗ／ｖ）であることが特に好ましい。
【００３５】
本発明の「ポリエトキシ化ヒマシ油誘導体」は、ヒマシ油に酸化エチレンを付加重合させて得られた化合物を意味し、ヒマシ油は水素添加されていないもの、例えば「ポリオキシルヒマシ油」でよく、またはヒマシ油は水素添加されたもの、例えば「ポリオキシル硬化油ヒマシ」でもよい。なお、「ポリオキシルヒマシ油」は、「ポリオキシエチレンヒマシ油」、「ポリエトキシ化ヒマシ油」とも呼ばれ、「ポリオキシル硬化ヒマシ油」は、「ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油」、「ポリエトキシ化硬化ヒマシ油」とも呼ばれる。
本発明の「ポリオキシルヒマシ油」の例は、酸化エチレンの平均付加モル数が約３５である「ポリオキシル３５ヒマシ油」、または酸化エチレンの平均付加モル数が約４０である「ポリオキシル４０ヒマシ油」、あるいはそれらの混合物が挙げられ、「ポリオキシル３５ヒマシ油」が好ましい。
なお、「ポリオキシル３５ヒマシ油」は、ポリオキシルヒマシ油、ＰＥＧ−３５ヒマシ油、リシノール酸マクロゴグリセロールとも呼ばれ、また、「Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＥＬ」の商品名で市販されている。「ポリオキシル４０ヒマシ油」は、「Ｅｕｍｕｌｇｉｎ（登録商標）ＲＯ４０」、「Ｅｍｕｌｐｈｏｒ（登録商標）ＥＬ−７１９」の商品名で市販されている。
本発明の「ポリオキシル硬化ヒマシ油」の例は、酸化エチレンの平均付加モル数が約３０である「ポリオキシル３０硬化ヒマシ油」、酸化エチレンの平均付加モル数が約４０である「ポリオキシル４０硬化ヒマシ油」、酸化エチレンの平均付加モル数が約５０である「ポリオキシル５０硬化ヒマシ油」、または酸化エチレンの平均付加モル数が約６０である「ポリオキシル６０硬化ヒマシ油」、あるいはそれらの混合物が挙げられる。
なお、「ポリオキシル３０硬化ヒマシ油」は、「Ｎｉｋｋｏｌ（登録商標）ＨＣＯ−３０」の商品名で、「ポリオキシル４０硬化ヒマシ油」は、「Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＲＨ４０」、「Ｎｉｋｋｏｌ（登録商標）ＨＣ−４０」の商品名で、「ポリオキシル５０硬化ヒマシ油」は、「Ｎｉｋｋｏｌ（登録商標）ＨＣ−５０」の商品名で、「ポリオキシル６０硬化ヒマシ油」は、「Ｎｉｋｋｏｌ（登録商標）ＨＣ−６０」の商品名で市販されている。
【００３６】
本組成物中のポリエトキシ化ヒマシ油誘導体濃度は１．０〜５．０％（ｗ／ｖ）であり、好ましくは１．０〜３．０（ｗ／ｖ）であり、２．０％（ｗ／ｖ）であることが最も好ましい。
【００３７】
ベンザルコニウム塩化物は、下記一般式（２）で示される化合物である。
【化２】
2015034160.tif 000003
［式中、ＲはＣ８Ｈ１７〜Ｃ１８Ｈ３７で表されるアルキル基を示す。］
【００３８】
本発明の「ベンザルコニウム塩化物」として好ましいのは、上記一般式（２）においてＲが「Ｃ１２Ｈ２５」を示すもの（以下、「ベンザルコニウム塩化物（Ｃ１２）」ともいう）である。
【００３９】
本組成物にベンザルコニウム塩化物を添加する場合、該ベンザルコニウム塩化物の濃度は０．００５％（ｖ／ｗ）超であり、好ましくは０．００５〜０．１％（ｖ／ｗ）、より好ましくは０．００７５〜０．０５％（ｖ／ｗ）、さらに好ましくは０．００７５〜０．０２％（ｖ／ｗ）である。本組成物中のベンザルコニウム塩化物濃度としては、０．０１％（ｖ／ｗ）が特に好ましい。
【００４０】
本発明において、「０．００５％（ｗ／ｖ）超の濃度のベンザルコニウム塩化物を防腐剤として含有する」とは、本組成物が当該濃度の「ベンザルコニウム塩化物」に加え、「ベンザルコニウム塩化物以外の防腐剤」をも含有することをも意味するが、好ましくは、「ベンザルコニウム塩化物」を唯一の防腐剤として含有し、「ベンザルコニウム塩化物以外の防腐剤」を含有しないことを意味する。なお、該「ベンザルコニウム塩化物以外の防腐剤」としては、ベンゼトニウム塩化物、クロルヘキシジングルコン酸塩、パラベン類、ソルビン酸およびその塩、クロロブタノール、ホウ酸、ホウ砂、亜塩素酸塩などを挙げることができる。
【００４１】
本発明において、「油」とは、眼科用途に使用可能な「油」であれば特に制限はないが、例えば、ヒマシ油、オリーブ油、オレンジ油、ダイズ油、ツバキ油、ナタネ油、ヤシ油（ココナッツ油）、ユーカリ油、トウモロコシ油、サフラワー油、エゴマ油、綿実油、小麦胚芽油、ペパーミント油、ヒマワリ油、ゴマ油、コーン油、ラッカセイ油、ピーナッツ油、アーモンド油、ホホバ油、ツバキ油等の液体植物油；ラノリン、スクワラン等の動物油；魚油；流動パラフィン、軽質流動パラフィン等の鉱物油；中鎖脂肪酸トリグリセリドなどを挙げることができる。なお、前記「ポリエトキシ化ヒマシ油誘導体」は本発明の「油」には含まれない。
【００４２】
本組成物は、「油」または「エタノール」を実質的に含有しないことが好ましく、さらに好ましくは、「油」および「エタノール」の両者を実質的に含有しない。
【００４３】
本発明において、「油を実質的に含まない」および／または「エタノールを実質的に含まない」とは、本組成物の性状（澄明であるか否かなど）や安定性などの物性に影響を与える濃度の「油」および／または「エタノール」が本組成物には含有されていないことを意味する。
【００４４】
本組成物には、前記「ポリエチレングリコール」、「ポリエトキシ化ヒマシ油誘導体」および「ベンザルコニウム塩化物」以外の添加剤を配合することもできる。該添加剤としては、グリセリン、塩化ナトリウム、塩化カリウムなどの等張化剤；リン酸水素二ナトリウム（リン酸水素二ナトリウム十二水和物）、リン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、イプシロン−アミノカプロン酸などの緩衝化剤；エデト酸ナトリウム（エデト酸一ナトリウム、エデト酸二ナトリウム、エデト酸三ナトリウム、エデト酸四ナトリウムおよびこれらの水和物を含む）、クエン酸ナトリウムなどの安定化剤等を挙げることができる。
【００４５】
本組成物のｐＨは眼科製剤として許容される範囲内にあればよいが、通常４〜８の範囲内が好ましい。
【００４６】
本組成物は、一回使い切りの「ユニットドーズ製剤」として製剤化することもできるし、ベンザルコニウム塩化物を添加することで、繰り返し使用可能な「マルチドーズ製剤」として製剤化することもできる。
【００４７】
本組成物は、ドライアイ（眼球乾燥症候群）のみならず、シェーグレン症候群、スティーブンス・ジョンソン症候群などの内因性疾患に伴う角結膜上皮障害の治療にも用いることができる。
【００４８】
本製造方法は、シクロスポリンＡをポリエチレングリコールに溶解させて、溶液を得るステップ（ａ）、およびステップ（ａ）で得られた溶液とポリエトキシ化ヒマシ油誘導体および水を混合するステップ（ｂ）を含むが、ステップ（ｂ）において、ステップ（ａ）で得られた溶液をポリエトキシ化ヒマシ油誘導体、水およびベンザルコニウム塩化物と混合することもできる。
【００４９】
本製造方法においては、ステップ（ｂ）において、ステップ（ａ）で得られた溶液、ポリエトキシ化ヒマシ油誘導体、水、ベンザルコニウム塩化物に加えて、前記添加剤の一部または全部を混合することもできる。
【００５０】
本製造方法によって得られる水性眼科用組成物中のシクロスポリンＡ濃度は０．０１〜０．０８％（ｗ／ｖ）、好ましくは０．０３〜０．０６％（ｗ／ｖ）、さらに好ましくは０．０５％（ｗ／ｖ）である。したがって、前記ステップ（ａ）では、同濃度が０．０１〜０．０８％（ｗ／ｖ）、好ましくは０．０３〜０．０６％（ｗ／ｖ）、さらに好ましくは０．０５％（ｗ／ｖ）となる量のシクロスポリンＡとポリエチレングリコールを混合する。
【００５１】
本製造方法によって得られる水性眼科用組成物中のポリエチレングリコールの濃度は特に限定はされないが、好ましくは０．５〜５．０（ｗ／ｖ）であり、さらに好ましくは０．５〜３．０（ｗ／ｖ）であり、最も好ましくは１．２５％（ｗ／ｖ）である。
すなわち、前記ステップ（ａ）では、同濃度が好ましくは０．５〜５．０（ｗ／ｖ）であり、さらに好ましくは０．５〜３．０（ｗ／ｖ）、最も好ましくは１．２５％（ｗ／ｖ）となる量のポリエチレングリコールとシクロスポリンＡを混合する。
【００５２】
また、本製造方法によって得られる水性眼科用組成物中のポリエトキシ化ヒマシ油誘導体の濃度は１．０〜５．０％（ｗ／ｖ）であり、好ましくは１．０〜３．０（ｗ／ｖ）であり、最も好ましくは２．０％（ｗ／ｖ）である。すなわち、前記ステップ（ｂ）では、同濃度が１．０〜５．０％（ｗ／ｖ）であり、好ましくは１．０〜３．０（ｗ／ｖ）であり、最も好ましくは２．０％（ｗ／ｖ）となる量のポリエトキシ化ヒマシ油誘導体と、前記ステップ（ａ）で得られた溶液および水を混合することが好ましい。
【００５３】
前記ステップ（ｂ）において、前記ステップ（ａ）で得られた溶液をポリエトキシ化ヒマシ油誘導体、水およびベンザルコニウム塩化物と混合する場合、本製造方法によって得られる水性眼科用組成物中のベンザルコニウム塩化物の濃度は０．００５％（ｖ／ｗ）超であり、好ましくは０．００５〜０．１％（ｖ／ｗ）、より好ましくは０．００７５〜０．０５％（ｖ／ｗ）、さらに好ましくは０．００７５〜０．０２％（ｖ／ｗ）、特に好ましくは０．０１％（ｖ／ｗ）である。すなわち、前記ステップ（ｂ）では、同濃度が０．００５％（ｖ／ｗ）超であり、好ましくは０．００５〜０．１％（ｖ／ｗ）、より好ましくは０．００７５〜０．０５％（ｖ／ｗ）、さらに好ましくは０．００７５〜０．０２％（ｖ／ｗ）、特に好ましくは０．０１％（ｖ／ｗ）となる量のベンザルコニウム塩化物と、前記ステップ（ａ）で得られた溶液、ポリエトキシ化ヒマシ油誘導体とおよび水を混合することが好ましい。
【００５４】
また、本方法は、前記ステップ（ａ）および（ｂ）以外の一または複数のステップを含んでいても良いが、好ましくは、「シクロスポリンＡと油を混合するステップ」または「シクロスポリンＡとエタノールを混合するステップ」を含まず、さらに好ましくは、「シクロスポリンＡと油を混合するステップ」および「シクロスポリンＡとエタノールを混合するステップ」の両者を含まない。
【００５５】
以下に、性状確認試験、熱安定性試験、保存効力試験および安定性試験の結果を示すが、これらの例は本発明をよりよく理解するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。
【実施例】
【００５６】
［性状確認試験］
【００５７】
（試験方法および結果）
シクロスポリンＡ ０．０５ｇをＰＥＧ４００ １．２５ｇに溶解させた後、得られた溶解液とＣｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＥＬ ０．０５ｇ、ベンザルコニウム塩化物 ０．００５ｇ、グリセリン １．２５ｇ、リン酸水素二ナトリウム十二水和物 ０．６ｇおよび精製水を混合し、０．０５％（ｗ／ｖ）の濃度のＣｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＥＬを含有する試料（１００ｍＬ）を得た。該試料の外観は、４時間撹拌後においても非澄明（白色）であった。一方、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＥＬをさらに添加し、前記試料中のＣｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＥＬ濃度を０．４％（ｗ／ｖ）まで上昇させた後、該試料をガラスアンプルに充填し、目視で確認したところ、試料の性状は澄明であった。
【００５８】
（考察）
澄明なシクロスポリン含有水性組成物を得るには、ポリエチレングリコールおよび０．４％（ｗ／ｖ）以上の濃度のポリエトキシ化ヒマシ油誘導体を併用することが必要であることが示された。
【００５９】
［熱安定性試験］
【００６０】
（試料調製）
処方１
シクロスポリンＡ ０．０５ｇをＰＥＧ４００ １．２５ｇに溶解させた後、得られた溶解液とＣｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＥＬ ２ｇ、ベンザルコニウム塩化物 ０．０１ｇ、エデト酸ナトリウム ０．１ｇ、リン酸水素二ナトリウム十二水和物 ０．６ｇおよび精製水を混合した。希塩酸および／または水酸化ナトリウムを添加してｐＨ７．０とした後、精製水を加えて１００ｍＬとした。
【００６１】
比較処方１
シクロスポリンＡ ０．０５ｇをＰＥＧ４００ １．２５ｇに溶解させた後、得られた溶解液とＣｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＥＬ ０．５ｇ、ベンザルコニウム塩化物（Ｃ１２） ０．０１ｇ、グリセリン １．２ｇ、リン酸水素二ナトリウム十二水和物 ０．６ｇおよび精製水を混合した。希塩酸および／または水酸化ナトリウムを添加してｐＨ７．０とした後、精製水を加えて１００ｍＬとした。
【００６２】
比較処方２
エデト酸ナトリウム ０．１ｇを添加したことを除き、比較処方１と同様の方法で調製した。
【００６３】
（試験方法）
それぞれ５ｍＬの処方１ならびに比較処方１および２を、タイプ６（ポリエチレン）チップおよびタイプ６（ポリプロピレン）キャップを有するタイプ６（低密度ポリエチレン）ボトル（５ｃｃ）に充填し、それぞれについて６０℃で４週間保存した。その後、シクロスポリンＡの含有量を高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いて定量し、残存率を求めた。
【００６４】
（結果）
試験結果を表１に示す。なお、処方１ならびに比較処方１および２の性状は澄明であった。
【００６５】
【表１】
2015034160.tif 000004
【００６６】
（考察）
安定なシクロスポリン製剤を得るためには、ポリエトキシ化ヒマシ油誘導体の濃度が重要であることが示された。
【００６７】
［眼刺激性試験］
【００６８】
（試料調製）
処方２
エデト酸ナトリウムの代わりにグリセリン １．８ｇを添加したことを除き、前記熱安定性試験で用いた処方１と同様の方法で調製した。
【００６９】
比較処方３（処方２の基剤）
シクロスポリンＡを添加しないことを除き、処方２と同様の方法で調製した。
【００７０】
比較処方４（ＲＥＳＴＡＳＩＳ（登録商標）０．０５％点眼液）
市販のＲＥＳＴＡＳＩＳ（登録商標）０．０５％点眼液を用いた。
【００７１】
（試験方法）
処方２および比較処方３点眼群
【００７２】
処方２（５０μＬ）をピペットマンで日本白色ウサギの左眼に９０分間隔で６回点眼し、点眼１および６回目直後の１分間の瞬目回数を計測した。また、当該ウサギの対側眼には、比較処方３（５０μＬ）を９０分間隔で６回点眼し、同じく点眼１および６回目直後の１分間の瞬目回数を計測した。
【００７３】
比較処方４点眼群
比較処方４（５０μＬ）をピペットマンで日本白色ウサギの左眼に９０分間隔で６回点眼し、点眼１および６回目直後の１分間の瞬目回数を計測した。対側眼は無処置とした。
【００７４】
（試験結果）
試験結果を表２に示す。処方２点眼眼の瞬目回数は、比較処方４（ＲＥＳＴＡＳＩＳ（登録商標）０．０５％点眼液）点眼眼のそれよりも少ないことが示された。
【００７５】
【表２】
2015034160.tif 000005
【００７６】
（考察）
本組成物の眼刺激性は、市販のシクロスポリンＡ製剤（ＲＥＳＴＡＳＩＳ（登録商標）０．０５％点眼液）よりも低いことが示された。
【００７７】
［保存効力試験］
【００７８】
（試料調製）
処方１
前記熱安定性試験と同様の方法で調製した。
【００７９】
比較処方５
ベンザルコニウム塩化物の添加量が０．００５ｇであることを除き、前記熱安定試験で用いた比較処方１と同様の操作を行い、比較処方５を得た。
【００８０】
（試験方法）
保存効力試験は、第十五改正日本薬局方（以下、単に「日本薬局方」ともいう）の保存効力試験法に準拠して行った。本試験では、試験菌として、Ｅｓｈｅｒｉｃｈｉａ  Ｃｏｌｉ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）およびＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）を用いた。
【００８１】
（試験結果）
試験結果を表３に示す。
【００８２】
【表３】
2015034160.tif 000006
【００８３】
（考察）
本組成物に０．００５％（ｗ／ｖ）超の濃度のベンザルコニウム塩化物を添加することで、日本および米国薬局方の基準に適合する程度の保存効力が得られることが示された。
【産業上の利用可能性】
【００８４】
本発明のシクロスポリン含有眼科用組成物は、ＲＥＳＴＡＳＩＳ（登録商標）０．０５％点眼液などの従来のシクロスポリンＡ製剤とは異なり澄明な水性組成物である上、眼科用組成物としても好ましい安定性および安全性をも併せ持つ。したがって、本発明のシクロスポリン含有眼科用組成物はドライアイ等の治療に好適に使用できる。