(57)【要約】【課題】炎症型に偏ったマクロファージを抑制する、抗炎症型に偏ったマクロファージを抑制するということではなく、あくまで炎症型・抗炎症型マクロファージのバランスが重要であり、どちらかを抑制するだけでは不十分である。従って、炎症型・抗炎症型マクロファージのバランスを制御し、バランスを正常化するバランス制御剤を提供する。【解決手段】アラントイン、アラントインクロロヒドロキシアルミニウム、アラントインジヒドロキシアルミニウム、イプシロンアミノカプロン酸、トラネキサム酸及びアスコルビン酸誘導体から選ばれる１種以上を有効成分として含有する、マクロファージ炎症型・抗炎症型バランス制御剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
アラントイン、アラントインクロロヒドロキシアルミニウム、アラントインジヒドロキシアルミニウム、イプシロンアミノカプロン酸、トラネキサム酸及びアスコルビン酸誘導体から選ばれる１種以上を有効成分として含有する、マクロファージ炎症型・抗炎症型バランス制御剤。
【請求項２】
アラントイン、アラントインクロロヒドロキシアルミニウム、アラントインジヒドロキシアルミニウム、イプシロンアミノカプロン酸及びアスコルビン酸誘導体から選ばれる１種以上を有効成分として含有する、マクロファージ炎症型・抗炎症型バランス制御剤。
【請求項３】
アラントイン、アラントインクロロヒドロキシアルミニウム、アラントインジヒドロキシアルミニウム及びアスコルビン酸誘導体から選ばれる１種以上を有効成分として含有する、マクロファージ炎症型・抗炎症型バランス制御剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、マクロファージ炎症型・抗炎症型のバランスを制御するバランス制御剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
マクロファージは免疫初期に応答する免疫細胞であり、生体外分子を認識し、食作用により分解、抗原提示能をもち、それにより抗体産生を促す、炎症性サイトカインの産生により他免疫細胞の遊走を促進する機能等を有する。
【０００３】
これまでに生体内では炎症型と抗炎症型のマクロファージがバランスをとって存在しており、次のような疾患でそのバランスが崩れていることが報告されてきた。すなわち、糖尿病では炎症型マクロファージが増えることにより、インスリン抵抗性が悪化し、また腎臓での合併症も悪化していること、動脈硬化においても発症に炎症型のマクロファージの蓄積が関与している可能性があること等、一方、腫瘍や一部感染症においては抗炎症型のマクロファージが蓄積していることも示唆されている。
【０００４】
しかしながら、炎症型と抗炎症型のマクロファージの調整を可能にする成分は見出されていなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００８−６１５１３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
上述したように、炎症型に偏ったマクロファージを抑制する、抗炎症型に偏ったマクロファージを抑制するということではなく、あくまで炎症型・抗炎症型マクロファージのバランスが重要であり、どちらかを抑制するだけでは不十分である。従って、炎症型・抗炎症型マクロファージのバランスを制御し、バランスを正常化するバランス制御剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者は、上記目的を達成するため鋭意検討した結果、アラントイン、アラントインクロロヒドロキシアルミニウム、アラントインジヒドロキシアルミニウム、イプシロンアミノカプロン酸、トラネキサム酸及びアスコルビン酸誘導体が、炎症型・抗炎症型マクロファージのバランスを制御することを知見し、本発明をなすに至ったものである。
【０００８】
従って、本発明は下記クロファージ炎症型・抗炎症型バランス制御剤を提供する。
[１]．アラントイン、アラントインクロロヒドロキシアルミニウム、アラントインジヒドロキシアルミニウム、イプシロンアミノカプロン酸、トラネキサム酸及びアスコルビン酸誘導体から選ばれる１種以上を有効成分として含有する、マクロファージ炎症型・抗炎症型バランス制御剤。
[２]．アラントイン、アラントインクロロヒドロキシアルミニウム、アラントインジヒドロキシアルミニウム、イプシロンアミノカプロン酸及びアスコルビン酸誘導体から選ばれる１種以上を有効成分として含有する、マクロファージ炎症型・抗炎症型バランス制御剤。
[３]．アラントイン、アラントインクロロヒドロキシアルミニウム、アラントインジヒドロキシアルミニウム及びアスコルビン酸誘導体を有効成分として含有する、マクロファージ炎症型・抗炎症型バランス制御剤。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、炎症型・抗炎症型マクロファージのバランスを制御し、バランスを正常化する、マクロファージ炎症型・抗炎症型バランス制御剤を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
以下、本発明について詳細に説明する。本発明は、アラントイン、アラントインクロロヒドロキシアルミニウム、アラントインジヒドロキシアルミニウム、イプシロンアミノカプロン酸、トラネキサム酸及びアスコルビン酸誘導体から選ばれる１種又は２種以上を有効成分として含有する、マクロファージ炎症型・抗炎症型バランス制御剤である。アラントイン、アラントインクロロヒドロキシアルミニウム、アラントインジヒドロキシアルミニウム、イプシロンアミノカプロン酸、トラネキサム酸及びアスコルビン酸誘導体は、医薬品・医薬部外品・化粧品等に用いられる成分を用いることができる。
【００１１】
（１）アラントイン、アラントインクロロヒドロキシアルミニウム、アラントインジヒドロキシアルミニウム等のアラントイン類の配合量は、成人・１日あたり１０〜２０００ｍｇ程度摂取できるように配合すればよい。
【００１２】
（２）イプシロンアミノカプロン酸
イプシロンアミノカプロン酸の配合量は、成人・１日あたり１〜２０００ｍｇ程度摂取できるように配合すればよい。
【００１３】
（３）トラネキサム酸
トラネキサム酸の配合量は、成人・１日あたり１〜２０００ｍｇ程度摂取できるように配合すればよい。
【００１４】
（４）アスコルビン酸誘導体
アスコルビン酸誘導体としては、アスコルビン酸リン酸エステル、アスコルビン酸糖修飾物、パルミチン酸エステル等が挙げられ、１種単独で又は２種以上を適宜組み合わせて用いることができる。中でも、アスコルビルリン酸マグネシウムが好ましい。アスコルビン酸誘導体の配合量は、成人・１日あたり１〜２０００ｍｇ程度摂取できるように配合すればよい。
【００１５】
マクロファージ炎症型・抗炎症型バランス制御の確認は実施例に記載の方法である。マクロファージには炎症型と抗炎症型の二つの表現形が存在し、それぞれ炎症型マーカー（ＣＤ１１ｃ等）、抗炎症型マーカー（ＣＤ２０６等）を発現している。なお、ＣＤ１１ｃはマクロファージ上の接着因子であり、フィブリノーゲン等との相互作用を介してマクロファージの殺傷作用に関与することが示唆されている。ＣＤ２０６はマクロファージ上のマンノースレセプターであり、細菌などの認識に関与する分子である。本発明においては、これらをマーカーとして用いることにより評価を行うことができる。
【００１６】
本発明のような成分を、制御剤、正常化剤として用いることにより、炎症型・抗炎症型マクロファージのバランスを制御し、バランスを正常化することで、糖尿病、動脈硬化、腫瘍、感染症等の改善、予防が可能となり、歯周病や、歯周病との関与が指摘されている全身疾患、例えば、高脂血症、心臓血管系疾患、糖尿病、肥満、早産、呼吸器疾患等の改善、予防が可能となる。
【００１７】
上記成分を、そのままマクロファージ炎症型・抗炎症型バランス制御剤とすることもでき、上記疾患の改善・予防剤とすることもできる。また、医薬品（外用剤・内服剤）、医薬部外品、化粧品等にすることができる。
【００１８】
剤型は特に限定されず、錠剤やカプセルなどの経口固形剤、水性液剤や懸濁液剤等の内服液剤、軟膏、貼付剤、ローション、クリーム、スプレー、座剤その他の、剤型毎に当業者に広く知られ、また用いられている成分を適宜組み合わせて使用することができる。
【００１９】
組成物中の配合量は、剤型の種類によって適宜選定されるが、上述した成人・１日当たりの摂取量が確保できる量が配合されていればよく、錠剤の場合０．５〜９０質量％、錠剤以外の場合０．０１〜１０質量％の範囲で適宜選定される。
【００２０】
また、ジュースもしくは乳飲料等の飲料、ヨーグルトやアイスクリーム等の乳製品、スープ、ゼリー、ジャム、菓子、パン類等の食品の形態としてもよく、さらに、健康食品又はサプリメントの形態としてもよい。これらの場合は、適宜、賦形剤、増量剤、結合剤、増粘剤、乳化剤、着色料、香料、食品添加物、調味料等と混合し、用途に応じて、粉末、顆粒、錠剤等の形に成形することができる。この場合の配合量は、剤型の種類によって適宜選定される。
【実施例】
【００２１】
以下、実施例及び比較例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の実施例に制限されるものではない。
【００２２】
[マクロファージ炎症型・抗炎症型バランス制御試験] 
J.Am Coll Cardiol  58 p.248-255, 2011  Hirata  et al.に記載の方法を準用し、下記方法でおこなった。
（１）マウスマクロファージ株化細胞であるＲＡＷ２６４．７（ＡＴＣＣ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ））を、ＩＦＮ−ｇａｍｍａ  １０ｎｇ／ｍＬ含有培地で２４時間培養し炎症型に誘導した。その後、培地をＩＦＮ−ｇａｍｍａ  ５ｎｇ／ｍＬ＋シーズ添加培地に置換し、２４時間培養後、ＲＮＡを抽出し、ＲＴ−ＰＣＲで各サンプルのマクロファージ表現形に与える影響を解析した。炎症型のマーカーとしてはＣＤ１１ｃを、抗炎症型のマーカーとしてはＣＤ２０６を選択して解析した。
【００２３】
サンプルは、アラントイン（パーマケムアジア社）、イプシロンアミノカプロン酸（第一化学薬品株式会社）、トラネキサム酸（第一製薬株式会社）、アスコルビルリン酸マグネシウム（和光純薬株式会社）、アスコルビン酸はナトリウム塩（和光純薬株式会社）イソプロピルメチルフェノール（住友製薬株式会社）、既知の抗炎症型誘導剤としてＩＬ−４を使用した。
【００２４】
（２）リアルタイムＰＣＲによる発現解析
調製したトータルＲＮＡについて、ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ（Ｒ）ＲＴ  ｒｅａｇｅｎｔ  Ｋｉｔ（Ｐｅｒｆｅｃｔ  Ｒｅａｌ  Ｔｉｍｅ）を用いて逆転写を行い、ｃＤＮＡを得た。その際、１０μＬの反応系に対し、１０００ｎｇとなるようにトータルＲＮＡを添加し、反応条件はＳＹＢＲ  Ｇｒｅｅｎアッセイの標準プロトコールに従って行った。
【００２５】
リアルタイムＰＣＲは、ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍ（ロシュ社製）を用いて行った。試薬は、ＳＹＢＲ（Ｒ）  Ｇｒｅｅｎ  Ｐｒｅｍｉｘ  Ｅｘ  ＴａｑＴＭ  （Ｐｅｒｆｅｃｔ  Ｒｅａｌ  Ｔｉｍｅ）（タカラ社製）を用い、１０μＬ系に対し、０．１μＬのＲＴ反応液を添加した。その他の条件については、同製品の標準プロトコールに準拠した（初期変性：９５℃−３０ｓ，合成反応：９５℃−５ｓ／６０℃−３０ｓ）。
【００２６】
ＰＣＲ用のプライマーは、ＣＤ１１ｃ遺伝子の発現量の定量には、ＣＤ１１ｃ−Ｆ（配列番号１：ＴＧＴＴＣＴＡＣＣＣＣＧＴＧＧＧＴＣＴＧＴ）及びＣＤ１１ｃ−Ｒ（配列番号２：ＣＡＴＧＡＧＧＴＧＣＡＧＧＧＡＧＴＧＣＴＧ）を使用し、ＣＤ２０６領域の発現量の定量には、ＣＤ２０６Ｆ（配列番号３：ＡＣＧＴＴＴＣＧＧＴＧＧＡＣＴＧＴＧＧＡ）及びＣＤ２０６Ｒ（配列番号４：ＧＧＣＡＡＣＡＣＡＴＣＣＣＧＣＣＴＴＴＣ）を使用した。上記プライマーを用いたＰＣＲにより作製した増幅産物を標品とする検量線を作成し、リアルタイムＰＣＲで得られたＣｔ値からその検量線に対する各培養条件での各遺伝子の発現量を求めた。さらに、各培養条件における、ＣＤ１１ｃ発現量／ＣＤ２０６発現量の比を求めた。なお、ＲＡＷ２６４．７はＡＴＣＣ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）から入手した。マウスＩＬ−４とＩＦＮはＢｉｏｌｅｇｅｎｄ社から、ＤＭＥＭ培地はｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社から入手した。
【００２７】
この時、ＩＦＮ存在下でマクロファージは炎症型に偏る結果、炎症型マーカーＣＤ１１ｃの抗炎症型マーカーＣＤ２０６に対する比（ＣＤ１１ｃ／ＣＤ２０６値）は上昇し、抗炎症型に偏らせるＩＬ−４を添加するとその値は低下した。検量線標品濃度による値のばらつきを補正するため、以下の式から、サンプル無添加のＩＦＮ  ５ｎｇ／ｍＬのみで２４時間培養した場合の値を１とするＦｏｌｄ  ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ（／ｃｏｎｔｒｏｌ）の値を計算した。
Ｆｏｌｄ  ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ（／ｃｏｎｔｒｏｌ）＝
（サンプル投与時のＣＤ１１ｃ／ＣＤ２０６発現量比）／（サンプル抜きの時のＣＤ１１ｃ／ＣＤ２０６発現量比）
【００２８】
[判定基準]
Ｆｏｌｄ  ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ（／ｃｏｎｔｒｏｌ）
×：０．９以上
○：０．８以上０．９未満
◎：０．２以上０．８未満
○：０．１以上０．２未満
×：０．１未満
Ｆｏｌ  ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  （／ｃｏｎｔｒｏｌ）の値が０．９未満０．１以上のときにマクロファージ表現形正常化効果がありと判断した。
なお、上記試験例において、Ｆｏｌｄ  ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ（／ｃｏｎｔｒｏｌ）の値が０．１以上０．９未満であることが好ましく、より好ましくは０．２以上０．８未満である。Ｆｏｌｄ  ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ（／ｃｏｎｔｒｏｌ）の値がこの範囲にある場合、過剰な炎症反応は抑制され、一方で必要な免疫反応は機能するため特定の感染症に対する感受性の亢進も見られず健康な状態である。
上記サンプルの試験結果を表１に示す。表１の各サンプルは２ｍＬ使用して評価を行った。
【００２９】
【表１】
2015000861.tif 000002
【００３０】
アラントインとイプシロンアミノカプロン酸、アスコルビン酸リン酸マグネシウム、トラネキサム酸では、Ｆｏｌ  ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  （／ｃｏｎｔｒｏｌ）の値を低下させ、ＩＬ−４添加時ほどは下げず、炎症型／抗炎症型比の正常化効果が見られた。一方、アスコルビン酸やイソプロピルメチルフェノールではＦｏｌ  ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ（／ｃｏｎｔｒｏｌ）の値を低下させなかった。
【００３１】
剤型の処方例を下記に示す。
［処方例１］錠剤
アスコルビン酸−２−リン酸エステルナトリウム        ２５０．０ｍｇ
トウモロコシデンプン                                  ２５．０
ヒドロキシプロピルセルロース                          １１．０
低置換度ヒドロキシプロピルセルロース                  １２．８
ステアリン酸マグネシウム                                １．２
合計                                                ３００．０ｍｇ
【００３２】
［処方例２］洗口剤
エタノール                                            １０．０質量％
トラネキサム酸                                          ０．０５
アスコルビン酸−２−リン酸エステルナトリウム            ０．２
ソルビトール                                            ５．０
キシリトール                                            ５．０
ポリオキシエチレン（６０）硬化ヒマシ油                  ０．５
サッカリンナトリウム                                    ０．２
香料                                                    ０．８
水                                                      バランス
合計                                                １００．０質量％
【００３３】
［処方例３］歯磨剤
リン酸カルシウム                                      ２５．０
無水ケイ酸                                              ５．０
ラウリル硫酸ナトリウム                                  １．２
キサンタンガム                                          １．０
カラゲナン                                              ０．５
アラントイン（パーマケムアジア）                        ０．１
ポリオキシエチレン（４０）硬化ヒマシ油                  １．０ 
（日光ケミカルズ、商品名ＨＣＯ−４０、ＨＬＢ値１３．３）
ソルビトール                                          １５．０
キシリトール                                          １０．０
香料                                                    １．０
水                                                      バランス
合計                                                １００．０質量％
【配列表フリーテキスト】
【００３４】
配列表の配列番号１：プライマー（ＣＤ１１ｃ−Ｆ）
配列表の配列番号２：プライマー（ＣＤ１１ｃ−Ｒ）
配列表の配列番号３：プライマー（ＣＤ２０６Ｆ）
配列表の配列番号４：プライマー（ＣＤ２０６Ｒ）
【配列表】
2015000861000001.app