(57)【要約】【課題】粒子中の疎水性金属フタロシアニンの重量割合を増加させることにより、色素の凝集を促進し、光音響イメージング法に適した波長領域に吸収を有し、かつ、粒子あたりのモル吸光係数が大きい粒子を提供すること。【解決手段】本発明の粒子は、疎水性金属フタロシアニンと、界面活性剤を有する粒子であって、疎水性金属フタロシアニンの重量割合が６%以上であることを特徴とする。【選択図】図１
2015044790.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
疎水性金属フタロシアニンと、界面活性剤を含む粒子であって、前記粒子に対する前記疎水性金属フタロシアニンの重量割合が６％以上であることを特徴とする光音響イメージング用造影剤。
【請求項２】
前記疎水性金属フタロシアニンが一般式（１）で表わされることを特徴とする請求項１に記載の光音響イメージング用造影剤。
【化１】
2015044790.tif 000013
（一般式（１）中、Ｒ２０１乃至Ｒ２１６は各々が同一でも異なっていてもよく、水素原子、ハロゲン原子、アセトキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、または、炭素数１〜１８のアルキル基若しくは芳香族基である。ここで、芳香族基は、ハロゲン原子、アセトキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、又は炭素数１〜１８のアルキル基から選択される一若しくは複数の官能基で置換されているか若しくは未置換のものを表す。
Ｍは、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｓｉの元素を示す、
Ｒ１０１、Ｒ１０２は各々が同一でも異なっていてもよく、Ｍの元素により存在しなくてもよく、あるいは、以下に示す構造を表す、
−ＯＨ、−ＯＲ１１、−ＯＣＯＲ１２、−ＯＳｉ（−Ｒ１３）（−Ｒ１４）（−Ｒ１５）、ハロゲン原子、アセトキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基または、炭素数１〜１８のアルキル基若しくは芳香族基である。芳香族基は、ハロゲン原子、アセトキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、又は炭素数１〜１８のアルキル基から選択される一若しくは複数の官能基で置換されているか若しくは未置換のものを表す、
Ｒ１１乃至Ｒ１５は、ハロゲン原子、アセトキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、又は炭素数１〜１８のアルキル基から選択される、ただし、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５は各々が同一でも異なっていてもよい。）
【請求項３】
前記疎水性金属フタロシアニンが、Ｚｉｎｃ  ２，９，１６，２３−ｔｅｔｒａ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ−２９Ｈ，３１Ｈ−ｐｈｔｈａｌｏｃｙａｎｉｎｅであることを特徴とする請求項１または２に記載の光音響イメージング用造影剤。
【請求項４】
前記界面活性剤が非イオン性界面活性剤であることを特徴とする請求項１乃至３のいずれか１項に記載の光音響イメージング用造影剤。
【請求項５】
前記界面活性剤がポリオキシエチレンソルビタン系脂肪酸エステルであることを特徴とする請求項１乃至４のいずれか１項に記載の光音響イメージング用造影剤。
【請求項６】
前記界面活性剤としてＴｗｅｅｎ２０またはＴｗｅｅｎ８０の少なくとも一方を含むことを特徴とする請求項１乃至５のいずれか１項に記載の光音響イメージング用造影剤。
【請求項７】
前記粒子がさらにマトリックス材を有することを特徴とする請求項１乃至６のいずれか１項に記載の光音響イメージング用造影剤。
【請求項８】
前記マトリックス材が疎水性のポリマーであることを特徴とする請求項７に記載の光音響イメージング用造影剤。
【請求項９】
前記粒子の粒径が２００ｎｍ以下であることを特徴とする請求項１乃至８のいずれか１項に記載の光音響イメージング用造影剤。
【請求項１０】
請求項１乃至９のいずれかに１項に記載の粒子と分散媒とを含む光音響イメージング用造影剤。
【請求項１１】
添加剤をさらに有することを特徴とする請求項１０に記載の光音響イメージング用造影剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、疎水性金属フタロシアニンを有する光音響イメージング用造影剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年、非侵襲的に診断ができるイメージング方法として、蛍光イメージング法や光音響イメージング法が注目されている。
【０００３】
蛍光イメージング法は蛍光色素に光を照射し、色素が発する蛍光を検出する方法で、広く用いられている。光音響イメージング法は、光を照射された測定対象の分子が放出する熱が起こす体積膨張により生じる音響波の強度と音響波の発生位置を検出することで、測定対象の画像を得る方法である。蛍光イメージング法や光音響イメージング法において、測定対象部位からの蛍光の大きさや音響波の強度を大きくするための造影剤として色素を用いることができる。
【０００４】
光線力学療法において、光感受性物質として、光を吸収することが知られている色素として、亜鉛フタロシアニン（以下、ＺｎＰｃと略すことがある）が用いられる。
特許文献１には、ＺｎＰｃとナノ粒子の形成に適当である薬学的に許容しうるポリマーによる粒子が開示されている。
一方、非特許文献１には、親水化させたＺｎＰｃとキヤノーラ油による粒子が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特表平１１−５１４９８６号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，１５５（３）, ｐｐ．４００−４０８
【非特許文献２】Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍ ２５（５）, ｐｐ．４４８−４５５, ２０１０
【非特許文献３】日本病院薬剤師会東海ブロック学術大会講演要旨集、１９ｔｈ、１１６
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかし、特許文献１に開示されたＺｎＰｃを含有する粒子は、光線力学療法に用いられることを目的としているため、粒子中に色素を分散させており、色素含有量が少なく、粒子あたりのモル吸光係数が小さいという問題がある。
【０００８】
また、非特許文献１に開示されたＺｎＰｃを含有する粒子も、光線力学療法に用いられることを目的としているため、粒子中に色素を分散させており、また、光音響イメージング法に適した波長領域に吸収を有さない。
【０００９】
そこで本発明は、粒子中の疎水性金属フタロシアニンの重量割合を増加させることにより、色素の凝集を促進し、光音響イメージング法に適した波長領域に吸収を有し、かつ、粒子あたりのモル吸光係数が大きい粒子を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、疎水性金属フタロシアニンと、界面活性剤を有する粒子であって、疎水性金属フタロシアニンの重量割合が６％以上であり、前記疎水性金属フタロシアニンが一般式（１）で表わされることを特徴とする粒子に関する。
【化１】
2015044790.tif 000003
（一般式（１）中、Ｒ２０１乃至Ｒ２１６は各々が同一でも異なっていてもよく、水素原子、ハロゲン原子、アセトキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、または、炭素数１〜１８のアルキル基若しくは芳香族基である。ここで、芳香族基は、ハロゲン原子、アセトキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、又は炭素数１〜１８のアルキル基から選択される一若しくは複数の官能基で置換されているか若しくは未置換のものを表す。
Ｍは、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｓｉの元素を示す。
Ｒ１０１、Ｒ１０２は各々が同一でも異なっていてもよく、Ｍの元素により存在しなくてもよく、あるいは、以下に示す構造を表す。
−ＯＨ、−ＯＲ１１、−ＯＣＯＲ１２、−ＯＳｉ（−Ｒ１３）（−Ｒ１４）（−Ｒ１５）、ハロゲン原子、アセトキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基または、炭素数１〜１８のアルキル基若しくは芳香族基である。芳香族基は、ハロゲン原子、アセトキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、又は炭素数１〜１８のアルキル基から選択される一若しくは複数の官能基で置換されているか若しくは未置換のものを表す。
Ｒ１１乃至Ｒ１５は、ハロゲン原子、アセトキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、又は炭素数１〜１８のアルキル基から選択される、ただし、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５は各々が同一でも異なっていてもよい。）
【発明の効果】
【００１１】
本発明は、粒子中の疎水性金属フタロシアニンの重量割合を増加させることより、光音響イメージング法に適した波長領域に吸収を有しており、かつ、粒子あたりのモル吸光係数が大きい粒子を提供することが出来る。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】本発明の実施形態１に係る粒子について説明するための図である。
【図２】本発明の実施形態２に係る粒子について説明するための図である。
【図３】本発明の実施例Ｄ５で得られた、粒子中の色素の重量割合と光音響信号強度比（１００ｎｍ換算）との関係を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下、本発明の実施形態について説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。  
【００１４】
（実施形態の構成）
本実施形態に係る粒子は、図１に示すように、疎水性金属フタロシアニン１００１、粒子表面には界面活性剤１００３を有する粒子であって、前記疎水性金属フタロシアニンが一般式（１）で示されることを特徴とする。また、本実施形態に係る粒子は、図２に示すように、疎水性金属フタロシアニン１０１、粒子表面には界面活性剤１０３を有する粒子であって、前記疎水性金属フタロシアニンを内包するマトリックス材１０２を有していてもよい。そして、粒子に対する疎水性金属フタロシアニンの重量割合が６％以上であることを特徴とする。
疎水性金属フタロシアニンの重量割合が大きい場合、疎水性金属フタロシアニン同士が凝集しやすく、吸収帯域がレッドシフトし、光音響イメージング法に適した波長領域に吸収を有するようになる。
【００１５】
本実施形態に係る疎水性金属フタロシアニンは、前述のように、疎水性が高い構造を有し、また、親水性の官能基を有していないことから、血清などの水溶液中において、粒子外に漏出しにくい。また、疎水性金属フタロシアニンは色素であるが、互いに疎水的に作用し、より、粒子から漏出しにくい。
【００１６】
なお、非特許文献２、３に開示されている通り、光線力学療法に用いる材料開発においては、色素の凝集は治療効果を損なう課題であり、本発明の目的とは反するものである。
【００１７】
（疎水性金属フタロシアニン）
疎水性金属フタロシアニンは色素である。本発明において色素とは、６００ｎｍ乃至１３００ｎｍの範囲に含まれる波長の光を吸収することのできる化合物と定義する。
【００１８】
また、本実施形態において疎水性色素とは、実施例で後述する薄層液体クロマトグラフィー（以下、ＴＬＣと略すことがある）法によって算出したＲｆ値が０以上、０．５０以下である色素と定義する。
【００１９】
本実施形態において疎水性金属フタロシアニンの構造は、下記の一般式（１）で示される。
【化２】
2015044790.tif 000004
（式中、Ｒ２０１乃至Ｒ２１６は各々が同一でも異なっていてもよく、水素原子、ハロゲン原子、アセトキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、または、炭素数１〜１８のアルキル基若しくは芳香族基である。ここで、芳香族基は、ハロゲン原子、アセトキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、又は炭素数１〜１８のアルキル基から選択される一若しくは複数の官能基で置換されているか若しくは未置換のものを表す。
Ｍは、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｓｉ等の元素を示す。
Ｒ１０１、Ｒ１０２は各々が同一でも異なっていてもよく、Ｍの元素により存在しなくてもよく、あるいは、以下に示す構造を表す。
−ＯＨ、−ＯＲ１１、−ＯＣＯＲ１２、−ＯＳｉ（−Ｒ１３）（−Ｒ１４）（−Ｒ１５）、ハロゲン原子、アセトキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基または、炭素数１〜１８のアルキル基若しくは芳香族基である。芳香族基は、ハロゲン原子、アセトキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、又は炭素数１〜１８のアルキル基から選択される一若しくは複数の官能基で置換されているか若しくは未置換のものを表す。
Ｒ１１乃至Ｒ１５は、ハロゲン原子、アセトキシ基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、又は炭素数１〜１８のアルキル基から選択される、ただし、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５は各々が同一でも異なっていてもよい。）
【００２０】
本実施形態に係る疎水性金属フタロシアニンは、共役二重結合を有するため、特定の波長の光を吸収することができ、光音響イメージングや蛍光イメージングに用いることが可能である。
【００２１】
また、本実施形態に係る疎水性金属フタロシアニンは、６００ｎｍ乃至１３００ｎｍの範囲から選択される少なくとも１つの波長におけるモル吸光係数が１０６Ｍ−１ｃｍ−１以上であることが好ましい。
【００２２】
さらには、粒子中における疎水性の色素重量割合は、６％以上であることが好ましい。
【００２３】
前記疎水性金属フタロシアニン色素としては、例えば、Ｚｉｎｃ  ２，９，１６，２３−ｔｅｔｒａ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ−２９Ｈ，３１Ｈ−ｐｈｔｈａｌｏｃｙａｎｉｎｅ、Ｃｏｐｐｅｒ（ＩＩ）  ２，９，１６，２３−ｔｅｔｒａ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ−２９Ｈ，３１Ｈ−ｐｈｔｈａｌｏｃｙａｎｉｎｅ、Ｃｏｂａｌｔ  ２，９，１６，２３−ｔｅｔｒａ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ−２９Ｈ，３１Ｈ−ｐｈｔｈａｌｏｃｙａｎｉｎｅ、Ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ  ｓｉｌｉｃｏｎ−［ｂｉｓ  ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｓｉｌｏｘｙ］−ｐｈｔｈａｌｏｃｙａｎｉｎｅを挙げることが出来る。
【００２４】
Ｚｉｎｃ  ２，９，１６，２３−ｔｅｔｒａ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ−２９Ｈ，３１Ｈ−ｐｈｔｈａｌｏｃｙａｎｉｎｅは以下の式で示される。
【化３】
2015044790.tif 000005
【００２５】
Ｃｏｐｐｅｒ（ＩＩ）  ２，９，１６，２３−ｔｅｔｒａ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ−２９Ｈ，３１Ｈ−ｐｈｔｈａｌｏｃｙａｎｉｎｅは以下の式で示される。
【化４】
2015044790.tif 000006
【００２６】
Ｃｏｂａｌｔ  ２，９，１６，２３−ｔｅｔｒａ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ−２９Ｈ，３１Ｈ−ｐｈｔｈａｌｏｃｙａｎｉｎｅは以下の式で示される。
【化５】
2015044790.tif 000007
【００２７】
（界面活性剤）
本実施形態に係る粒子は、界面活性剤を有している。本実施形態における界面活性剤としては、特に限定されることはなく、粒子を形成することができればいかなるものでもよい。例えば非イオン性界面活性剤、アニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、高分子界面活性剤又はリン脂質等を使用することができる。これらの界面活性剤は、１種類のみを用いてもよいし、２種類以上を用いてもよい。
【００２８】
前記非イオン性界面活性剤としては、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）４０、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）６０、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０及びＴｗｅｅｎ（登録商標）８５等のポリオキシエチレンソルビタン系脂肪酸エステル、Ｂｒｉｊ（登録商標）３５、Ｂｒｉｊ（登録商標）５８、Ｂｒｉｊ（登録商標）７６、Ｂｒｉｊ（登録商標）９８、Ｔｒｉｔｏｎ（登録商標）Ｘ−１００、Ｔｒｉｔｏｎ（登録商標）Ｘ−１１４、Ｔｒｉｔｏｎ（登録商標）Ｘ−３０５、Ｔｒｉｔｏｎ（登録商標）Ｎ−１０１、Ｎｏｎｉｄｅｔ（登録商標）Ｐ−４０、ＩＧＥＰＡＬ（登録商標）ＣＯ５３０、ＩＧＥＰＡＬ（登録商標）ＣＯ６３０、ＩＧＥＰＡＬ（登録商標）ＣＯ７２０並びにＩＧＥＰＡＬ（登録商標）ＣＯ７３０等を挙げることができる。これらの非イオン性界面活性剤のうち、Ｔｗｅｅｎ２０またはＴｗｅｅｎ８０の少なくとも一方を用いることが好ましい。
【００２９】
また、前記アニオン性界面活性剤としては、ドデシル硫酸ナトリウム、ドデシルベンゼンスルホネート、デシルベンゼンスルホネート、ウンデシルベンゼンスルホネート、トリデシルベンゼンスルホネート、ノニルベンゼンスルホネート並びにこれらのナトリウム、カリウム及びアンモニウム塩等を挙げることができる。
【００３０】
また、前記カチオン性界面活性剤としては、セチルトリメチルアンモニウムブロミド、塩化ヘキサデシルピリジニウム、塩化ドデシルトリメチルアンモニウム及び塩化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム等を挙げることができる。
【００３１】
また、前記高分子界面活性剤としては、ポリビニルアルコール、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール等を挙げることができる。ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコールの市販品としては、プルロニックＦ６８（ＢＡＳＦ社製）、プルロニックＦ１２７（ＢＡＳＦ社製）等を挙げることができる。
【００３２】
前記リン脂質としては、アミノ基、ＮＨＳ基、マレイミド又はメトキシ基のいずれかの官能基とＰＥＧ鎖を有するホスファチジル系リン脂質を挙げることができる。
【００３３】
ホスファチジル系リン脂質としては、３−（Ｎ−ｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｙｌｏｘｙｇｌｕｔａｒｙｌ）  ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌ，  ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ−ｃａｒｂａｍｙｌ  ｄｉｓｔｅａｒｏｙｌｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌ−ｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−ＮＨＳ）、Ｎ−（３−ｍａｌｅｉｍｉｄｅ−１−ｏｘｏｐｒｏｐｙｌ）  ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌ  ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ−ｃａｒｂａｍｙｌ  ｄｉｓｔｅａｒｏｙｌｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌ−ｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−ＭＡＬ）、Ｎ−（ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌ  ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ）−ｃａｒｂａｍｙｌ  ｄｉｓｔｅａｒｏｙｌｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌ−ｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−ＮＨ２）、Ｎ−（Ｃａｒｂｏｎｙｌ−ｍｅｔｈｏｘｙｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ  ２０００）−１，２−ｄｉｓｔｅａｒｏｙｌ−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ｐｈｏｓｐｈｏｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ，  ｓｏｄｉｕｍ  ｓａｌｔ（ＳＵＮＢＲＩＧＨＴ  ＤＳＰＥ−０２０ＣＮ）、Ｎ−（Ｃａｒｂｏｎｙｌ−ｍｅｔｈｏｘｙｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌ  ５０００）−１，２−ｄｉｓｔｅａｒｏｙｌ−ｓｎ−ｇｌｙｃｅｒｏ−３−ｐｈｏｓｐｈｏｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ，  ｓｏｄｉｕｍ  ｓａｌｔ（ＳＵＮＢＲＩＧＨＴ  ＤＳＰＥ−０５０ＣＮ）等を挙げることができる。
【００３４】
（マトリックス材）
上記のマトリックス材とは、上記疎水性金属フタロシアニン色素を内包できるものであればどのようなものでもよいが、疎水性の色素と疎水性相互作用が大きくなり、色素の漏出をより効率的に防げるため、疎水性のポリマーを用いることが好ましい。
【００３５】
（疎水性のポリマー）
本実施形態における疎水性のポリマーの例としては、ヒドロキシカルボン酸を有する炭素数６以下のモノマーからなるホモポリマー又は２種類以上の前記モノマーからなるコポリマーなどが挙げられる。
【００３６】
本実施形態に係る造影剤を生体内に投与する場合、長期にわたって造影剤が生体内に残らないように、疎水性ポリマーとしては、ヒドロキシカルボン酸を有する炭素数６以下のモノマーからなるポリマーを用いることが好ましい。これは、ヒドロキシカルボン酸を有する炭素数６以下のモノマーからなるポリマーは、生体内の酵素によって切断されるエステル結合を有するからである。エステル結合を切断されたポリマーは代謝させやすいため、生体内に残りにくい。
【００３７】
ヒドロキシカルボン酸を有する炭素数６以下のモノマーからなるポリマーとしては、ポリ乳酸（ｐｏｌｙｌａｃｔｉｃ  ａｃｉｄ：ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（Ｐｏｌｙｇｌｙｃｏｌｉｃ  ａｃｉｄ：ＰＧＡ）、ポリ乳酸−グリコール酸共重合体（ｐｏｌｙ（ｌａｃｔｉｄｅ−ｃｏ−ｇｌｙｃｏｌｉｄｅ）  ｃｏｐｏｌｙｍｅｒｓ：ＰＬＧＡ）などが挙げられる。
【００３８】
疎水性のポリマーは、親水性の部分を有していてもよい。このようなポリマーとしては、ポリメタクリル酸メチル、ポリメタクリル酸エチル、ポリメタクリル酸ブチル、ポリメタクリル酸イソブチルなどが挙げられる。
【００３９】
上記疎水性のポリマーの重量平均分子量は２０００乃至１００００００であることが好ましく、１００００乃至６０００００であることがさらに好ましい。
【００４０】
本実施形態に係る粒子におけるマトリックス材として特に好ましいのは、ＰＬＧＡである。ＰＬＧＡは加水分解を受けやすいため、イメージング後に体外へ排出されやすく、生体内に蓄積しにくいと期待される。ＰＬＧＡの乳酸：グリコール酸組成比は、特に限定されることはなく、任意の割合のＰＬＧＡを使用することができるが、例えば、乳酸：グリコール酸組成比が２５：７５、５０：５０及び７５：２５のＰＬＧＡを好ましい一例として挙げることができる。ＰＬＧＡを構成する乳酸は、Ｄ−体、Ｌ−体、ラセミ体等のこれらの混合体のいずれのものも使用することができる。
【００４１】
（粒子の製造方法）  
本発明の粒子の製造方法としては、公知の方法を利用することができ、例えば、Ｎａｎｏｅｍｕｌｓｉｏｎ法、Ｎａｎｏｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ法等を利用することが出来る。
【００４２】
本製造方法で用いる溶媒としては、ヘキサン、シクロへキサン、ヘプタン等の炭化水素類、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン等のエーテル類、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、ジクロロエタン、トリクロロエタン等のハロゲン化炭化水素類、ベンゼン、トルエン等の芳香族炭化水素、酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル類、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒類、及びピリジン誘導体を挙げることが出来る。これらの溶媒は、単独で使用してもよく、任意に混合して使用してもよい。
【００４３】
Ｎａｎｏｅｍｕｌｓｉｏｎ法とは、従来公知の、乳化手法によってエマルションを調製して粒子を作製する方法である。例えば、断続振とう法、プロペラ型攪拌機、タービン型攪拌機等のミキサーを利用する攪拌法、コロイドミル法、ホモジナイザー法、超音波照射法等がある。これらの方法は、単独で用いることも、あるいは複数を組み合わせて用いることも可能である。また、エマルションは１段階の乳化によって調製しても良いし、多段階の乳化によって調製しても良い。但し、乳化手法は、本発明の目的を達成できる範囲において上記手法に限定されない。
【００４４】
Ｎａｎｏｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ法とは、従来公知の、界面活性剤分散水溶液に有機溶媒分散液を混合し撹拌して粒子を得る方法、あるいは、有機溶媒分散液に界面活性剤分散水溶液を混合し撹拌して粒子を得る方法である。
【００４５】
（疎水性金属フタロシアニン色素を含む材料を溶解させた有機溶媒分散液）
Ｎａｎｏｅｍｕｌｓｉｏｎ法における、使用する界面活性剤分散水溶液と有機溶媒分散液の重量比としては、水中油（Ｏ／Ｗ）型のエマルションを形成することができれば特に限定はない。好ましくは、有機溶媒分散液と界面活性剤分散水溶液の重量比が、１：２〜１：１０００となる範囲である。
Ｎａｎｏｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ法における、使用する界面活性剤分散水溶液と有機溶媒分散液の重量比としては、粒子を回収することが出来れば特に限定はない。好ましくは、有機溶媒分散液と水溶液の重量比が、１：１〜１：１０００となる範囲である。
【００４６】
（疎水性金属フタロシアニン色素を含む材料を溶解させた有機溶媒分散液中の材料濃度）  有機溶媒分散液中における疎水性金属フタロシアニン色素の濃度はこれらが溶解する範囲であれば特に限定されない。好ましい濃度として、０．０００５〜３００ｍｇ／ｍｌとすることができる。
有機溶媒分散液中におけるポリマー及び疎水性金属フタロシアニン色素の濃度はこれらが溶解する範囲であれば特に限定されない。好ましい濃度として、ポリマーについては０．３〜１００ｍｇ／ｍｌとすることができる。また、有機溶媒分散液中における疎水性金属フタロシアニン色素とポリマーの重量比は、好ましくは、１００：１〜１：１０００の範囲である。
【００４７】
（粒子分散液中からの有機溶媒留去）
留去は、従来知られる何れの方法でも実施可能であるが、加熱によって除去する方法、あるいはエバポレーター等の減圧装置を利用した方法を挙げることができる。
Ｎａｎｏｅｍｕｌｓｉｏｎ法において、加熱による除去の場合の加熱温度は、Ｏ／Ｗ型のエマルションを維持できれば特に限定されないが、好ましい温度は０℃から８０℃の範囲である。
Ｎａｎｏｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ法において、加熱による除去の場合の加熱温度は、粒子の収率が低下する高次凝集が防げれば特に限定されないが、好ましい温度は０℃から８０℃の範囲である。
但し、留去は、本発明の目的を達成できる範囲において上記手法に限定されない。
【００４８】
（粒子分散液の精製）
作製した粒子分散液の精製は、従来知られる何れの方法でも実施可能である。例えば、サイズ排除カラムクロマトグラフィー法、限外濾過法、透析法、遠心分離法を挙げることが出来る。
但し、精製方法は、本発明の目的を達成できる範囲において上記手法に限定されない。
【００４９】
（粒子）
本実施形態に係る粒子は、上記の疎水性金属フタロシアニン色素を有した粒子であればどのような形状でもよく、真球状、楕円状、平面状、一次元のひも状などのいずれでもよい。本実施形態に係る粒子のサイズ（粒径）は特に制限されないが、粒径が１ｎｍ以上２００ｎｍ以下であることが好ましい。
【００５０】
（造影剤）
本実施形態に係る造影剤は、上記の本実施形態に係る粒子と、分散媒を有する。上記の分散媒は、液状の物質であり、例えば生理食塩水、注射用蒸留水、リン酸緩衝生理食塩水（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ｂｕｆｆｅｒｅｄ  ｓａｌｉｎｅ、以下ＰＢＳと略すことがある）などが挙げられる。また本実施形態に係る造影剤は、必要に応じて薬理上許容できる添加物を有していても良い。
本実施形態に係る造影剤は、上記粒子を分散媒に予め分散させておいてもよいし、本実施形態に係る粒子と分散媒とをキットにしておき、生体内に投与する前に粒子を分散媒に分散させて使用してもよい。
本実施形態に係る粒子は、疎水性色素が漏出しにくいため、粒子内に疎水性色素が多く含まれる。含まれる色素が多いほど光吸収量が増加するため、本実施形態に係る粒子は、後述するように、光音響イメージング用途、あるいは、蛍光イメージング用途として好適である。なお、濃度消光が生じるほどの多くの量の疎水性色素が含まれる場合は、本実施形態に係る粒子は、光音響イメージング用途としてさらに好適である。
【００５１】
（添加剤）
本実施形態に係る造影剤は、凍結乾燥時に使用する添加剤を含んでいてもよい。添加剤の一例としてグルコース、ラクトース、マンニトール、ポリエチレングリコール、グリシン、塩化ナトリウム、リン酸水素ナトリウムが挙げられる。添加剤は１種類のみを用いても、複数種類を併用してもよい。
【００５２】
（光音響イメージング法）
本実施形態に係る造影剤は、光音響イメージング法に用いることができる。なお、本明細書において、光音響イメージングは、光音響トモグラフィー（断層撮影法）を含む概念である。本実施形態に係る造影剤を用いた光音響イメージング法は、本実施形態に係る造影剤を検体もしくは前記検体から得られる試料に投与する工程と、前記検体もしくは前記検体から得られる試料にパルス光を照射する工程と、前記検体内もしくは前記検体から得られる試料内に存在する前記粒子由来物質の光音響信号を測定する工程と、を少なくとも有することを特徴とする。
【００５３】
本実施形態に係る造影剤を用いた光音響イメージング法の一例は以下の通りである。すなわち、本実施形態に係る造影剤を検体に投与し、あるいは前記検体より得られた臓器等の試料に添加する。なお、前記検体とは、ヒト、実験動物やペット等、その他、特に限定されることなく、あらゆる生物を指し、前記検体中もしくは検体より得られた試料としては、臓器、組織、組織切片、細胞、細胞溶解物などを挙げることができる。前記粒子の投与あるいは添加後、前記検体等に対し近赤外波長域のレーザーパルス光を照射する。
【００５４】
本実施形態に係る光音響イメージング法において、照射される光の波長は使用するレーザー光源により選択することが可能である。本実施形態に係る光音響イメージング法においては、効率良く音響信号を取得するために、生体内における光の吸収、拡散の影響が少ない「生体の窓」と呼ばれる６００ｎｍ乃至１３００ｎｍの、近赤外光領域の波長の光を照射することが好ましい。
【００５５】
本実施形態に係る造影剤からの光音響信号（音響波）を、音響波検出器、例えば圧電トランスデューサで検出し、電気信号に変換する。この音響波検出器より得られた電気信号に基づき、前記検体等内での吸収体の位置や大きさ、あるいはモル吸光係数などの光学特性値分布を計算することができる。例えば、造影剤が基準とする閾値以上で検出されれば、その検体に前記粒子由来物質が存在すると推定され、又は、前記検体より得られた試料に前記粒子由来の物質が存在すると推定することができる。
【００５６】
本発明では、色素の漏出を抑制することで、色素の集積による消光を起こさせ、照射されたパルス光のエネルギーが蛍光発光に用いられることを防ぎ、より多くの熱エネルギーに変換することができる。そのため、より効率的に音響信号を取得することが可能となる。
【００５７】
本実施形態に係る光音響イメージング法において、照射される光の波長は使用するレーザー光源により選択することが可能である。本実施形態に係る蛍光イメージング法においては、効率良く音響信号を取得するために、生体内における光の吸収、拡散の影響が少ない「生体の窓」と呼ばれる６００ｎｍ乃至１３００ｎｍの、近赤外光領域の波長の光を照射することが好ましい。
【００５８】
本実施形態に係る造影剤からの蛍光を蛍光検出器で検出し、電気信号に変換する。この蛍光検出器より得られた電気信号に基づき、前記検体等の内の吸収体の位置や大きさを計算することができる。例えば、造影剤が基準とする閾値以上で検出されれば、その検体に前記粒子由来物質が存在すると推定され、又は、前記検体より得られた試料に前記粒子由来の物質が存在すると推定することができる。
【実施例】
【００５９】
以下に、本発明の特徴をさらに明らかにするために実施例に沿って本発明を説明するが、本発明は、これらの実施例に限定されるものではなく、材料、組成条件、反応条件等は、同様な機能、効果を有する造影剤が得られる範囲で自由に変えることが出来る。
【００６０】
実施例で行ったそれぞれの手法について、記述する。
【００６１】
（回収方法）
遠心分離操作は、微量高速冷却遠心機（株式会社トミー精工製、ＭＸ−３００）を用いて行った。超遠心分離操作は、小形超遠心機（日立工機株式会社製、ＣＳ１５０ＧＸＬ）を用いて行った。
【００６２】
（分析方法）
粒径測定は、動的光散乱解析装置（大塚電子製、ＥＬＳＺ−２）を用いて行った。
光源として半導体レーザーを用いて測定を行い、キュムラント径の値を粒径として採用した。
吸光度測定は、ＵＶ−ＶＩＳ−ＮＩＲ測定装置（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ社製、 Ｌａｍｂｄａ Ｂｉｏ ４０）を用いて行った。
【００６３】
（光音響特性評価方法）
光音響信号の計測は、パルスレーザー光をサンプルに照射し、サンプルからの光音響信号を、圧電素子を用いて検出し、高速プリアンプで増幅後、デジタルオシロスコープで取得した。具体的な条件は以下の通りである。光源として、チタンサファイアレーザ（Ｌｏｔｉｓ製）を用いた。波長は７９０ｎｍ、エネルギー密度は１２ｍＪ／ｃｍ２、パルス幅は２０ナノ秒、パルス繰返しは１０Ｈｚの条件とした。超音波トランスデューサとしては、型式Ｖ３０３（Ｐａｎａｍｅｔｒｉｃｓ−ＮＤＴ製）を用いた。中心帯域は１ＭＨｚ、エレメントサイズはφ０．５、測定距離は２５ｍｍ（Ｎｏｎ−ｆｏｃｕｓ）、アンプは＋３０ｄＢ（超音波プリアンプ Ｍｏｄｅｌ ５６８２  オリンパス製）の条件である。測定容器としては、ポリスチレン製キュベットで、光路長０．１ｃｍ、サンプル容量は約２００μｌであった。計測器は、ＤＰＯ４１０４（テクトロニクス製）を用いて、トリガー：光音響光をフォトダイオードで検出、Ｄａｔａ ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ: １２８回（１２８パルス）平均の条件で測定を行った。
【００６４】
（粒子当たりのモル吸光係数算出方法）
粒子分散液を凍結乾燥することにより、分散液中に含まれる固体成分の重量濃度を算出した。・・・（Ａ）
各構成材料の密度を１（ｇ／ｃｍ３）と仮定し、各粒子の粒径から１粒子当たりの重量を算出した。・・・（Ｂ）
（Ａ）で求めた重量濃度を（Ｂ）で求めた１粒子当たりの重量で除算して、粒子分散液中の粒子濃度を算出した。・・・（Ｃ）
吸光度測定の結果と、（Ｃ）の結果より、粒子当たりのモル吸光係数を算出した。
【００６５】
（疎水性金属フタロシアニン色素の疎水性度評価方法）
疎水性金属フタロシアニン色素の疎水性度を比較するために、薄層液体クロマトグラフィー（以下、ＴＬＣと略すことがある）法を用いて評価を行った。
展開用プレートとしてＴＬＣガラスプレート ＲＰ−１８（メルク社製）、展開溶媒としてリチウムクロライドを１重量パーセント含有したメタノール溶液を用いた。  
定法に従って、色素溶液を原線上にスポットし、相対移動距離（以下、Ｒｆ値と略すことがある）を以下の式に基づいて算出した。
Ｒｆ値＝原線から成分のスポット中心までの距離／原線から溶媒先端までの距離
【００６６】
（１００ｎｍ換算粒子当たりのモル吸光係数、１００ｎｍ換算粒子当たりの光音響信号  算出方法）
それぞれ、実際の粒径データを用いて、粒子当たりのモル吸光係数、粒子当たりの光音響信号を算出した。その後、同一組成で１００ｎｍ粒子が存在した場合に、それぞれの値は、体積比に応じて比例すると仮定して、算出した。
【００６７】
実施例１
（実験例Ａ１）
色素として、Ｚｉｎｃ  ２，９，１６，２３−ｔｅｔｒａ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ−２９Ｈ，３１Ｈ−ｐｈｔｈａｌｏｃｙａｎｉｎｅ８．８ｍｇをクロロホルム  １６．０ｍＬに溶解させた。
界面活性剤として、Ｔｗｅｅｎ２０（和光純薬製）１８００ｍｇを、超純水２００ｍＬに添加し、界面活性剤分散水溶液を調製した。
界面活性剤分散水溶液を撹拌しながら、有機溶媒分散液を滴下して、エマルション準備液を調製した。
エマルション準備液を、超音波分散装置（トミー製、ＵＤ−２００）を用いて、強度目盛１０、１分３０秒間超音波照射をすることにより、エマルションを作製した。
エマルション中のクロロホルムを取り除くために、４０℃で４時間加熱撹拌を行い、粒子分散液を作製した。
回収した粒子分散液を、孔径０．２０マイクロメートルのフィルターでろ過して、粒子（Ａ−１）を得た。
【００６８】
（実験例Ａ２）
色素を、Ｃｏｐｐｅｒ（ＩＩ）  ２，９，１６，２３−ｔｅｔｒａ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ−２９Ｈ，３１Ｈ−ｐｈｔｈａｌｏｃｙａｎｉｎｅに変更した以外は、実験例Ａ１と同様に合成し、粒子（Ａ−２）を得た。
【００６９】
（実験例Ａ３）
色素を、Ｃｏｂａｌｔ  ２，９，１６，２３−ｔｅｔｒａ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ−２９Ｈ，３１Ｈ−ｐｈｔｈａｌｏｃｙａｎｉｎｅに変更した以外は、実施例１と同様に合成し、粒子（Ａ−３）を得た。
【００７０】
（実験例Ａ４）
色素を、Ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ  ｓｉｌｉｃｏｎ−［ｂｉｓ  ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｓｉｌｏｘｙ］−ｐｈｔｈａｌｏｃｙａｎｉｎｅに変更した以外は、実施例１と同様に合成し、粒子（Ａ−４）を得た。
【００７１】
（比較例Ｂ１）
色素として、Ｚｉｎｃ  ２，９，１６，２３−ｔｅｔｒａ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ−２９Ｈ，３１Ｈ−ｐｈｔｈａｌｏｃｙａｎｉｎｅ１１．５ｍｇをクロロホルム  ２０．９ｍＬに溶解させ、色素溶液を調製した。
この色素溶液のうち０．８ｍＬを、クロロホルム０．８ｍＬで希釈して、色素濃度を０．２８ｍｇ／ｍＬの溶液を作製し、次に用いた。
マトリックス材として、ＰＬＧＡ（和光純薬工業（株）製）  ５ｍｇを添加した後、有機溶媒分散液を調製した。
界面活性剤として、Ｔｗｅｅｎ２０（和光純薬製）１８０ｍｇを、超純水２０ｍＬに添加し、界面活性剤分散水溶液を調製した。
界面活性剤分散水溶液を撹拌しながら、有機溶媒分散液を滴下して、エマルション準備液を調製した。
エマルション準備液を、超音波分散装置（トミー製、ＵＤ−２００）を用いて、強度目盛４、１分３０秒間超音波照射をすることにより、エマルションを作製した。
エマルション中のクロロホルムを取り除くために、４０℃で２時間加熱撹拌を行い、粒子分散液を作製した。
得られた粒子分散液を、４℃、２００００Ｇ、４５分間遠心分離することにより回収した。
回収した粒子を、超純水を用いて洗浄を行った。その後、４℃、２００００Ｇ、４５分間遠心分離することにより回収した。
回収した粒子分散液を、孔径０．２０マイクロメートルのフィルターでろ過して、粒子（Ｂ−１）を得た。
【００７２】
（実験例Ｂ２）
色素濃度を０．５５ｍｇ／ｍｌに変更した以外は、比較例Ｂ１と同様に合成し、粒子（Ｂ−２）を得た。
【００７３】
（実験例Ｂ３）
色素濃度を２．７５ｍｇ／ｍＬに変更し、マトリックス材を使用しない以外は、比較例Ｂ１と同様に合成し、粒子（Ｂ−３）を得た。
【００７４】
表１に、上記で得られた粒子（Ａ−１）〜（Ａ−４）における、粒径、単位色素当たりの光音響信号強度（波長７５０ｎｍ）を示す。単位色素当たりの光音響信号強度は、粒径が１００ｎｍと仮定し換算して比較した。
また、用いた色素の疎水性色素の疎水性度評価結果（Ｒｆ値）も示す。
【００７５】
【表１】
2015044790.tif 000008
【００７６】
表１より、本実施例で作製した粒子（Ａ−１）〜（Ａ−４）は単位色素当たりの光音響信号強度（波長７５０ｎｍ）が高かった。
したがって、本実施例に係る粒子は、蛍光イメージング用又は光音響イメージング用の造影剤として好適である。
【００７７】
表２に、上記で得られた粒子（Ｂ−１）〜（Ｂ−３）における、粒径、粒子中の色素重量割合、粒子当たりのモル吸光係数（波長７５０ｎｍ）、粒子当たりの光音響信号強度（波長７５０ｎｍ）を示す。粒子当たりのモル吸光係数、粒子当たりの光音響信号強度は、粒径が１００ｎｍと仮定し換算して比較した。
【００７８】
【表２】
2015044790.tif 000009
【００７９】
表２より、粒子に対する色素（疎水性金属フタロシアニン）の重量割合が６％以上であることで、７９０ｎｍの波長に光を吸収し、高いモル吸光係数、および高い光音響信号を得られている。したがって、本実施例における光音響イメージング用造影剤は、光音響イメージング法に適した波長領域に吸収を有するようになることが示された。  
また、表２より、本実施例で作製した粒子（Ｂ−２）、（Ｂ−３）は、比較例１で作製した粒子（Ｂ−１）に比較して、単位色素当たりのモル吸光係数（波長７５０ｎｍ）、単位色素当たりの光音響信号強度（波長７５０ｎｍ）が高かった。
【００８０】
したがって、本実施例に係る粒子は、蛍光イメージング用又は光音響イメージング用の造影剤として好適である。
【００８１】
実施例２
粒子を使用した血中濃度定量実験
雌の非近交系ＢＡＬＢ／ｃ  Ｓｌｃ−ｎｕ／ｎｕマウス（購入時６週齢）（日本エスエルシー株式会社）を用いた。マウスに投与前の１週間、標準的な食餌、寝床を用い、自由に食餌および飲料水を摂取できる環境下でマウスを順応させた。順応させたマウスに粒子溶液を、０．２ｍＬを静脈注射した。
【００８２】
粒子溶液を投与した担癌マウスは、投与後いかなる視覚的問題も無いことから、全注射が良好に耐容されたと判断した。
【００８３】
投与１時間後、２４時間後に、血液を採取した。採取した血液をプラスチックチューブに移し、血液の体積に対し４．５倍量の１％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００水溶液を添加した。次いで、血液の体積の４．５倍量を加えて、血液溶解液を作製した。ＩＶＩＳ（登録商標）Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍ  ２００  Ｓｅｒｉｅｓ（ＸＥＮＯＧＥＮ）を用いて、プラスチックチューブの状態で、血液溶解液の蛍光強度を測定した。
【００８４】
また、既知の濃度の粒子溶液を、１％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００水溶液で種々の濃度に希釈した。希釈した粒子溶液と、同量の未投与マウスから採取した血液とを混合した。次いで、血液の体積に対し、前述の希釈した粒子溶液と合わせて４．５倍量となるよう１％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００水溶液を添加した。次いで、血液の体積の４．５倍量のテトラヒドロフランを添加して検量線用血液粒子溶液を作製した。採取した血液サンプルと同様に、蛍光強度を測定し、検量線を作成した。
【００８５】
次に、血液溶解液の蛍光強度、作成した検量線を用いて、血中濃度を算出した。
算出されたそれぞれの血中濃度を全投与量で除することで、投与量あたりの血液中の存在量の割合（％ＩＤ）を算出した。
表３に、上記で得られた粒子（Ａ−１）、（Ａ−４）について、粒子を使用した血中濃度定量実験を行った結果を示す。
【００８６】
実施例１で作製した粒子（Ａ−１）、（Ａ−４）は、投与量あたりの血液中の存在量の割合が高かった。
そのため、生体に投与した時に腫瘍集積性が高いと考えられる。
【００８７】
【表３】
2015044790.tif 000010
【００８８】
実施例３
粒子を使用した腫瘍集積性確認実験
雌の非近交系ＢＡＬＢ／ｃ  Ｓｌｃ−ｎｕ／ｎｕマウス（購入時６週齢）（日本エスエルシー株式会社）を用いた。マウスに担癌させる前の１週間、標準的な食餌、寝床を用い、自由に食餌および飲料水を摂取できる環境下でマウスを順応させた。ｃｏｌｏｎ２６（マウス大腸癌細胞）を、マウスに皮下注射した。実験時までに、腫瘍は全て定着しており、マウスの体重は１７〜２２ｇであった。担癌させたマウスのマウス尾部に粒子（あるいは色素）を、１００μＬ（色素として１３ｎｍｏｌ）を静脈注射した。
次に上記マウスを投与２４時間後に安楽死させた後、ｃｏｌｏｎ２６腫瘍を摘出した。腫瘍組織をプラスチックチューブに移し、腫瘍組織の重量に対し１．２５倍量の１％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００水溶液を添加し、ホモジネートした。次いで、腫瘍組織重量の２０．２５倍量のテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）を加えた。Ｏｄｙｓｓｅｙ（登録商標）ＣＬｘ Ｉｎｆｒａｒｅｄ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍを用いて、ホモジネート溶液の蛍光強度を測定し腫瘍組織中の色素量を定量した。
【００８９】
表４に、上記で得られた粒子（Ａ−１）、また、比較例として、非特許文献１に記載された親水化させたＺｎＰｃの腫瘍集積量を用いた結果を示す。
【００９０】
【表４】
2015044790.tif 000011
【００９１】
したがって、親水化させたＺｎＰｃと比較して、本実施例に係る光音響イメージング用造影剤は、腫瘍集積性が良好であり、腫瘍描出能が高い造影剤として好適である。
【００９２】
実施例４
（実験例Ｄ３）
色素濃度を２．２０ｍｇ／ｍｌに変更し、マトリックス材として、ＰＬＧＡ（和光純薬工業（株）製）  ２０ｍｇを使用した以外は、比較例Ｂ１と同様に合成し、粒子（Ｄ−３）を得た。
（実験例Ｄ４）
色素濃度を２．２０ｍｇ／ｍｌに変更し、マトリックス材として、ＰＬＧＡ（和光純薬工業（株）製）  １０ｍｇを使用した以外は、比較例Ｂ１と同様に合成し、粒子（Ｄ−４）を得た。
（実験例Ｄ５）
色素濃度を２．２０ｍｇ／ｍｌに変更し、マトリックス材として、ＰＬＧＡ（和光純薬工業（株）製）  ５ｍｇを使用した以外は、比較例Ｂ１と同様に合成し、粒子（Ｄ−５）を得た。
【００９３】
表５に、上記で得られた粒子（Ｂ−１）、（Ｂ−２）、（Ｄ−３）〜（Ｄ−５）における、粒子中の色素重量割合、粒子（Ｂ−２）を基準とした際の粒子当たりの光音響信号強度（波長７５０ｎｍ）の比を示す。粒子当たりの光音響信号強度は、粒径が１００ｎｍと仮定し換算して比較した。
また、その結果をプロットしたもの、図３に示す。
【００９４】
以上の結果から、粒子中の色素重量割合が６％以上において、光音響信号強度が高かった。したがって、本実施例に係る色素重量割合が６％以上の粒子は、光音響イメージング用の造影剤として好適である。
【００９５】
【表５】
2015044790.tif 000012
【図１】
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【図２】
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【図３】
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