(57)【要約】【課題】従来よりも高い発毛作用を有する物質およびそれを配合した育毛剤を提供する。【解決手段】光学的に純粋な下記式（I-SR）で表される化合物またはその製薬学的に許容される塩、および当該化合物またはその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有することを特徴とする育毛剤。2015078128.tif 000028  式（I-SR）中、Ｒは−Ｃ≡ＣＨであり、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3はそれぞれ独立して水素原子、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子または炭素原子数１〜４のアルキル基である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
光学的に純粋な下記式（I-SR）で表される化合物またはその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有することを特徴とする育毛剤。
【化１】
2015078128.tif 000027
式（I-SR）中、Ｒは−Ｃ≡ＣＨであり、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3はそれぞれ独立して水素原子、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子または炭素原子数１〜４のアルキル基である。
【請求項２】
前記Ｒ1が塩素原子であり、前記Ｒ2およびＲ3が水素原子である、請求項１に記載の育毛剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ピレスロイドを有効成分とする育毛剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
除虫菊（Chrysanthemum cinerariaefolium Bocquilon）に含まれる天然ピレスロイドおよびその誘導体である合成ピレスロイドは、従来、殺虫剤として広く利用されてきたが、近年、特定の合成ピレスロイドは哺乳類に対する発毛作用を有することが明らかとなった。特許文献１には、所定の構造式で表されるピレスロイドが発毛作用を有することが記載されており、実施例では３種のピレスロイド（シペルメトリン、デルタメトリン、フェンバレート）がマウスに対する発毛作用を有することが示されている。ただし、特許文献１には、ピレスロイド中のフェノキシベンゼン部位のα炭素にシアノ基が結合した上記３種の化合物が実施例として記載されているのみであり、当該α炭素にエチニル基が結合した化合物は具体的に開示されていない。さらに、上記３種のピレスロイドについて特定の光学異性体が発毛作用を有することも実施例を通じて具体的に開示されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】米国特許第６，２８８，１１２号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、従来よりも高い発毛作用を有する物質およびそれを配合した育毛剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、下記式（I）で表されるピレスロイドのラセミ体（光学異性体混合物）が発毛作用を有することをまず見いだし、さらにこのラセミ体を構成する４種類の光学異性体のうち、Ｓ，Ｒ体が発毛作用を有する（Ｓ，Ｓ体、Ｒ，Ｒ体およびＲ，Ｓ体は発毛作用を有さない）ことを見いだし、本発明を完成させるに至った。
【０００６】
【化１】
2015078128.tif 000002
式（I）中、Ｒ、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3の定義は後述する式（I-SR）中と同じである。
【０００７】
すなわち、本発明は下記の発明を包含する。
［１］光学的に純粋な下記式（I-SR）で表される化合物またはその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有することを特徴とする育毛剤。
【０００８】
【化２】
2015078128.tif 000003
式（I-SR）中、Ｒは−Ｃ≡ＣＨであり、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3はそれぞれ独立して水素原子、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子または炭素原子数１〜４のアルキル基である。
【０００９】
［２］前記Ｒ1が塩素原子であり、前記Ｒ2およびＲ3が水素原子である、［１］に記載の育毛剤。
【発明の効果】
【００１０】
本発明では、育毛剤の有効成分として純粋な特定の光学異性体を用いるので、ラセミ体を用いる場合よりも発毛作用に優れた、あるいは少量の添加で同等の発毛作用を有する育毛剤を調製することが可能となる。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明では、光学的に純粋な、式（I-SR）で表される化合物を育毛剤の有効成分として使用する。
【００１２】
【化３】
2015078128.tif 000004
式（I-SR）中、Ｒは−Ｃ≡ＣＨであり、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、それぞれ独立して水素原子、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子または炭素原子数１〜４のアルキル基（メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、tert-ブチル基）である。なお、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は各ベンゼン環上に１以上存在していてもよい（他の式においても同様である）。
【００１３】
このうち、Ｒ1が（４位に結合した）塩素原子であり、Ｒ2およびＲ3が水素原子である（無置換である）化合物が好ましい。
上記化合物（I-SR）は、製薬学的に許容される塩（たとえば塩酸塩、硫酸塩）を形成していてもよい。
【００１４】
化合物（I-SR）の合成方法は特に限定されるものではないが、たとえば、次のような工程を含む方法により合成することが好適である。なお、各工程の詳細は後記実施例を参照することができる。
【００１５】
［工程１］下記式（II）で表される化合物からグリニャール反応により下記式（III）で表される化合物（ラセミ体）を合成する工程。
【００１６】
【化４】
2015078128.tif 000005
式（II）および（III）中、Ｒ2およびＲ3の定義は式（I-SR）中と同じである。また、ＲＭｇＸはグリニャール試薬であり、Ｒの定義は式（I-SR）中と同様であり、Ｘはハロゲン原子を表す。
【００１７】
工程１におけるグリニャール反応は、公知の手法に準じた適切な反応条件の下、式（II）で表される化合物に、式（I-SR）中の官能基Ｒに対応した適切なグリニャール試薬を反応させることにより行うことができる。
【００１８】
［工程２］前記ラセミ体（III）から、速度論的光学分割により、下記式（III-R）で表される化合物（Ｒ体アルコール）を得る工程。
【００１９】
【化５】
2015078128.tif 000006
式（III）、（III’-R）、（III-R）および（III-S）中、Ｒ、Ｒ2およびＲ3の定義は式（I-SR）中と同じである。
【００２０】
工程２におけるアルコールの速度論的光学分割は、公知の手法に準じた適切な反応条件の下、たとえばビニル酢酸およびエステル合成酵素（リパーゼ、Novozym 435等）を用いて行うことができる。その場合、式（III'-R）で表される化合物（アセチル化したＲ体のアルコール）と、式（III-S）で表される化合物（Ｓ体のアルコール）が生成する。このうち化合物（III'-R）を、公知の手法に準じた適切な反応条件の下に脱アセチル化すれば、式（III-R）で表される化合物（Ｒ体のアルコール）を高純度で回収することができる。その他の条件についても、公知の手法に準じた適切なものとすればよい。
【００２１】
［工程３］下記式（IV）で表される化合物（ラセミ体）の光学分割により、下記式（IV-S）で表される化合物（Ｓ体カルボン酸）を得る工程。
【００２２】
【化６】
2015078128.tif 000007
式（IV）および（IV-S）中、Ｒ1の定義は式（I-SR）中と同じである。
【００２３】
工程３におけるカルボン酸の光学分割は、公知の手法に準じた適切な反応条件の下、たとえば（１−アミノエチル）ベンゼンの対応するエナンチオマーを用いた再結晶により行うことができ、カルボン酸（IV-S）を高純度で回収することができる。
【００２４】
（工程４）工程２により得られたＲ体アルコール（III-R）と、工程３により得られたＳ体カルボン酸（IV-S）とのエステル化反応により、前記化合物（I-SR）を得る工程。
【００２５】
【化７】
2015078128.tif 000008
工程４におけるエステル化は、公知の手法に準じた適切な反応条件の下、たとえばカルボン酸(IV-S)を酸塩化物に誘導した後にアルコール(III-R)と反応させることで行うことができる。
【００２６】
上記のような方法において、工程２で得られるＲ体アルコール（III-R）および工程３で得られるＳ体カルボン酸（IV-S）はそれぞれ光学純度ないしエナンチオマー過剰率（ｅｅ）が極めて高いので、工程４では、化合物（I-SR）以外の光学異性体をほとんど含有しない、高純度の化合物（I-SR）を調製することができる。
【００２７】
なお、上記のようなアルコール、カルボン酸それぞれについての光学分割を行わない場合、ラセミ体であるアルコールおよびカルボン酸を用いたエステル化により得られる化合物（I）はＳＳ体、ＳＲ体、ＲＳ体およびＲＲ体それぞれをほぼ等量か、ＳＲ体およびＲＳ体をやや多く含有するラセミ体となる。
【００２８】
本発明の育毛剤は、上記のようにして得られる、光学的に純粋な化合物（I-SR）を有効成分として含有する。
化合物（I-SR）が光学的に純粋であるとは、育毛剤中に存在する式（I）で表される化合物（ＳＲ体エステルと、不純物として混在しているＳＳ体、ＲＳ体およびＲＲ体エステルとの混合物）全体に対する、式（I-SR）で表される化合物（ＳＲ体エステルのみ）の割合（純度）が、最低でも通常のラセミ体（各光学異性体の等量混合物）についての２５％を超え、一定の高い数値となっている状態に対応する。一般的に、前述したような工程において用いられる前記Ｒ体アルコールおよびＳ体カルボン酸の光学純度を高くすれば、最終的に得られるＳＲ体エステルの光学純度（理論値としては前記Ｒ体アルコールおよびＳ体カルボン酸の光学純度の積で表すことができる。）も高くなる。ＳＲ体エステルの光学純度はなるべく高いことが望まれるが、通常８０％以上、好ましくは８５％以上、より好ましくは９０％以上である。
【００２９】
上記育毛剤は、有効量の光学的に純粋な化合物（I-SR）と、必要に応じて配合されるその他の製薬学的な成分とを含有する、医薬品ないしそれに準じた組成物として調製することができる。
【００３０】
化合物（I-SR）の有効量は、当該化合物の純度のほか、育毛剤を適用する対象の各種の要素（動物種、年齢、性別、体重、体調、適用部位およびその面積等）、育毛剤の適用方法や剤型、併用する薬剤等に応じて変動しうるので、それらを考慮しながら適切な範囲に調整すればよいが、たとえば、０．０１〜２５ｍｇ／ｋｇ体重／日とすることができる。
【００３１】
上記育毛剤は、一般的には非経口的に、好ましくは局所的な塗布に適した剤型として調製される。たとえば、必要に応じて溶解助剤等を添加した適切な水性の溶媒に化合物（I-SR）等を溶解させた、水溶液の形態の組成物とすることが挙げられる。その他、クリーム、軟膏、ジェル、ローション、シャンプー、エアゾールなど、皮膚への適用に適した公知の形態の組成物とすることもできる。これらの組成物に対する化合物（I-SR）の配合量は、前記有効量や育毛剤の態様に応じて適宜調整すればよいが、たとえば、０．０１〜５重量％とすることができる。
【実施例】
【００３２】
以下の実施例において試験した各化合物（被験物質）を下記表にまとめる。これらの被験物質は下記式に示す共通する基本骨格を有し、置換基Ｒおよび＊で示す位置における立体構造が表中に示すように相違している。
【００３３】
【表１】
2015078128.tif 000009
１．各化合物の合成
被験物質１(化合物5)は次の方法で合成した(Scheme 1)。
【００３４】
【化８】
2015078128.tif 000010
被験物質２〜５(化合物9)は光学活性なアルコールとカルボン酸を合成した後、それらをエステル化により合成した。
【００３５】
まず、アルコールの速度論的光学分割を行いS体のアルコールを得た(Scheme 2)。また、アセチル化したR体アルコールは脱アセチル化を行い、R体のアルコールを得た(Scheme 3)。なお、高速液体クロマトグラフィーを用いて化合物の絶対配置及び光学純度を決定した。
【００３６】
【化９】
2015078128.tif 000011
（参考文献  T. Sugai, S. Kuwahara, C. Hoshino, N. Matsuo, and K. Mori, Agric. Biol. Chem., 1982, 46, 2579.）
次に、カルボン酸の光学分割を行い、S体及びR体のカルボン酸を得た(Scheme 4, 5)。なお、旋光計を用いて化合物の絶対配置及び光学純度を決定した。
【００３７】
【化１０】
2015078128.tif 000012
（参考文献  G. Shan, D. W. Stoutamire, I. Wengatz, S. J. Gee, and B. D. Hammock, J. Agric. Food. Chem., 1999, 47, 2145.）
最後に、S体及びR体のカルボン酸を酸塩化物に誘導した後、S体及びR体のアルコールとのエステル化を行うことで、被験物質２-５(化合物9)を合成した(Scheme 6)。
【００３８】
【化１１】
2015078128.tif 000013
試薬、分析装置等
試薬：市販のものを用いた。
測定装置：核磁気共鳴スペクトル(NMR)：日本電子社製JEOL JNM-AL 400 NMR 
spectrometer system
高速液体クロマトグラフィー(HPLC)：島津社製 LD-20 AD
旋光計：日本分光社製 DIP-360型
薄層クロマトグラフィー：TLC Aluminium sheets Silica gel 60 F254
カラムクロマトグラフィー：関東化学社製(Silica gel 60 N 63-270μm)
溶媒：Diethyl ether、methanol、hexane、ethyl acetateは和光純薬社製の有機合成用反応溶媒をそのまま用いた。THF(tetrahydrofuran)、tolueneはNaを加え、２時間還流後に常圧蒸留にて精製したものを使用した。
【００３９】
1-(3-phenoxyphenyl)prop-2-yn-1-ol(4)
【００４０】
【化１２】
2015078128.tif 000014
30 mL二口フラスコに3-phenoxybenzaldehyde(0.217 g, 1.09 mmol)とTHF(1.5 mL)を入れ-78℃で撹拌した。0.5 M ethynylmagnesium bromide/THF(3 mL)をゆっくり加えて30分撹拌し、室温で22時間撹拌した。反応終了を薄層クロマトグラフィで確認し、飽和NH4Cl aq(3 mL)を加えて10分撹拌した。Diethyl etherで抽出し、飽和NaCl aqで洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧濃縮し、得られた化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離精製したところ黄色液体が得られた(hexane:EtOAc 9:1、0.237 g, 収率 93.7%)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3)：δ(ppm) =7.37-6.91(m, 9H), 5.42(d, 1H, J=2.0 Hz), 2.64(d, 1H, J =2.0 Hz), 2.42(brs, 1H)。
【００４１】
1-(3-phenoxyphenyl)prop-2-ynyl 2-(4-chlorophenyl)-3-methylbutanoate(5)
【００４２】
【化１３】
2015078128.tif 000015
30 mL二口フラスコに2-(4-chlorophenyl)-3-methylbutanoic acid(0.216 g, 1.01 mmol)、toluene(8.3 mL)、sulfuryl dichloride(5 mL)を入れ125℃で1時間還流した。減圧濃縮した反応液を、1-(3-phenoxyphenyl)prop-2-yn-1-ol(0.132 g, 0.595 mmol)、toluene(6.6 mL)、Et3N(0.229 g, 2.26 mmol)の入った50 mL二口フラスコに加え室温で24時間撹拌した。反応終了を薄層クロマトグラフィで確認した後、tolueneで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧濃縮し、得られた化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離精製したところ黄色液体が得られた(hexane:EtOAc 100:1、0.250 g, 収率 95.7%)。
(R, R)-5, (S, S)-5 1H NMR (400 MHz, CDCl3)：δ(ppm) =7.36-6.93(m, 13H), 6.35(d, 1H, J =2.0 Hz), 3.19(d, 1H, J =10.7 Hz), 2.62(d, 1H, J =2.0 Hz), 2.35-2.26(m, 1H), 1.04(d, 3H, J =6.3 Hz), 0.70(d, 3H, J =6.8 Hz)。
(S, R)-5, (R, S)-5 1H NMR (400 MHz, CDCl3)：δ(ppm) =7.36-6.93(m, 13H), 6.38(d, 1H, J =2.4 Hz), 3.17(d, 1H, J =10.7 Hz), 2.57(d, 1H, J =2.4 Hz), 2.35-2.26(m, 1H), 0.95(d, 3H, J =6.3 Hz), 0.68(d, 3H, J =6.8 Hz)。
【００４３】
Novozyme 435を用いた化合物4の光学分割
30 mL二口フラスコにNovozym 435(0.186 g)、vinyl acetate(21 mL)、1-(3-phenoxyphenyl)prop-2-yn-1-ol(0.958 g, 4.27 mmol)を入れ、40℃で22時間撹拌した。反応終了を薄層クロマトグラフィで確認した後反応液をろ過し、溶媒を減圧濃縮した。得られた化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(hexane:EtOAc 30:1)で分離精製したところ、化合物4(0.151 g, 収率 44%）と化合物6(0.191 g, 収率46%)を得た。
【００４４】
(S)-1-(3-phenoxyphenyl)prop-2-yn-1-ol(4)
【００４５】
【化１４】
2015078128.tif 000016
[α]23D=23.1(c 1.16, EtOH)、文献値[α]23D=11.4(c 1.17, EtOH), 51.8% ee。
1H NMR (400 MHz, CDCl3)：δ(ppm) =7.36-6.94(m, 9H), 5.42(d, 1H, J=2.4 Hz), 2.34(d, 1H, J =2.4 Hz), 2.37(s, 1H)。
HPLC(Chiralpak IA, 2-propanol 5% in hexane, Flow 0.7 mL / min, 25.8 min(major), 24.4(minor), 97.3% ee)。
【００４６】
(R)-1-(3-phenoxyphenyl)prop-2-ynyl acetate(6)
【００４７】
【化１５】
2015078128.tif 000017
1H NMR (400 MHz, CDCl3)：δ(ppm) =7.35-6.97(m, 9H), 6.41(s, 1H), 2.64(s, 1H), 2.11(s, 3H)。
【００４８】
(R)-1-(3-phenoxyphenyl)prop-2-yn-1-ol(4)
【００４９】
【化１６】
2015078128.tif 000018
50 mLナスフラスコにK2CO3(0.103 g, 0.744 mmol)、H2O(3.5 mL)、(S)-1-(3-phenoxyphenyl)prop-2-ynyl acetate(0.191 g, 0.717 mmol)、MeOH(3.5 mL)を入れ、室温で22時間撹拌した。反応終了を薄層クロマトグラフィで確認した後、飽和NaCl aqを加えEtOAcで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧濃縮し、得られた化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離精製をしたところ薄黄色液体が得られた(hexane:EtOAc 20:1 300 mL、hexane:EtOAc 9:1、0.156 g, 収率 99.2%)。
[α]23D=-20.1(c 1.16, EtOH)、文献値[α]23D=-11.4(c 1.17, EtOH), 51.8% ee。
1H NMR (400 MHz, CDCl3)：δ(ppm) =7.28-6.87(m, 9H), 5.34(d, 1H, J=2.0 Hz), 2.57(d, 1H, J =2.0 Hz), 2.31(s, 1H)。
HPLC(Chiralpak IA, 2-propanol 5% in hexane, Flow 0.7 mL / min, 19.0 min(major), 20.4(minor), 94.8% ee)。
【００５０】
(S)-2-(4-chlorophenyl)-3-methylbutanoic acid(7)
【００５１】
【化１７】
2015078128.tif 000019
100 mL三口フラスコに2-(4-chlorophenyl)-3-methylbutanoic acid(10.640 g, 50.02 mmol )、MeOH(26.7 mL)、toluene(18.2 mL)を入れ70℃で撹拌した。(S)-(−)-α Methylbenzylamine(3.789 g, 31.27 mmol)を15分かけてゆっくり加えた後室温で1.25 時間静置し、生じた白色固体をMeOHとtolueneの混合溶液を用いてろ別した。100 mL二口フラスコに移し、MeOH(33.3 mL)を加えて1時間還流し、室温で1.25 時間静置させた後、固体をMeOHでろ別した。さらに、hot MeOH(200 mL)から再結晶を行った。得られた結晶を3N HCl(70 mL)で処理した後、diethyl etherで抽出し、1N HClとH2Oで洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧濃縮し、hexaneから再結晶を行ったところ、白色固体を得た(1.02 g, 収率 10%)。
[α]23D=46.6(c 1.02, CHCl3)、文献値[α]23D=46.8(c 1.0, CHCl3), 99.6% ee。
1H NMR (400 MHz, CDCl3)：δ(ppm) =7.30-7.25(m, 4H), 3.12(d, 1H, J=10.7 Hz), 2.33-2.24(m, 1H), 1.07(d, 3H, J =6.8 Hz), 0.70(d, 3H, J =6.8 Hz)。
【００５２】
(R)-2-(4-chlorophenyl)-3-methylbutanoic acid(7)
【００５３】
【化１８】
2015078128.tif 000020
化合物(R)-7は(R)-(＋)-α-methylbenzylamineを用いて化合物(S)-9と同様に分割した。
[α]23D=-45.1(c 1.0, CHCl3)、文献値[α]23D=-46.8(c 1.0, CHCl3), 96.4% ee
1H NMR (400 MHz, CDCl3)：δ(ppm) =7.30-7.24(m, 4H), 3.11(d, 1H, J=10.7 Hz), 2.32-2.23(m, 1H), 1.06(d, 1H, J =6.8 Hz), 0.70(d, 1H, J =6.8 Hz)。
【００５４】
(S)-((S)-1-(3-phenoxyphenyl)prop-2-ynyl) 2-(4-chlorophenyl)-3-methylbutanoate(9)
【００５５】
【化１９】
2015078128.tif 000021
30 mL二口フラスコに(S)-2-(4-chlorophenyl)-3-methylbutanoic acid (0.216 g, 1.01 mmol)、toluene(8.3 mL)、sulfuryl dichloride(5 mL)を入れ125℃で1時間還流した。減圧濃縮した反応液を、(S)-1-(3-phenoxyphenyl)prop-2-yn-1-ol(0.132 g, 0.595 mmol)、toluene(6.6 mL)、Et3N(0.229 g, 2.26 mmol)の入った50 mL二口フラスコに加え、室温で24時間撹拌した。反応の終了を薄層クロマトグラフィで確認した後、tolueneで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧濃縮し、得られた化合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離精製したところ黄色液体が得られた(hexane:EtOAc 100:1、0.250 g, 収率 95.7%)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3)：δ(ppm) =7.36-6.92(m, 13H), 6.35(d, 1H, J=2.4 Hz), 3.19(d, 1H, J =10.7 Hz), 2.62(d, 1H, J =2.4 Hz), 2.36-2.27(m, 1H), 1.04(d, 3H, J =6.8 Hz), 0.70(d, 3H, J =6.8 Hz)。
【００５６】
(R)-((R)-1-(3-phenoxyphenyl)prop-2-ynyl) 2-(4-chlorophenyl)-3-methylbutanoate(9)
【００５７】
【化２０】
2015078128.tif 000022
化合物(R, R)-9は対応するカルボン酸(R)-7とアルコール(R)-4を用いて化合物(S, S)-9と同様に合成した。
1H NMR (400 MHz, CDCl3)：δ(ppm) =7.36-6.92(m, 13H), 6.36(d, 1H, J=2.0 Hz), 3.19(d, 1H, J =10.2 Hz), 2.62(d, 1H, J =2.0 Hz), 2.36-2.27(m, 1H), 1.04(d, 3H, J =6.8 Hz), 0.70(d, 3H, J =6.8 Hz)。
【００５８】
(S)-((R)-1-(3-phenoxyphenyl)prop-2-ynyl) 2-(4-chlorophenyl)-3-methylbutanoate(9)
【００５９】
【化２１】
2015078128.tif 000023
化合物(S, R)-9は対応するカルボン酸(S)-7とアルコール(R)-4を用いて化合物(S, S)-9と同様に合成した。
1H NMR (400 MHz, CDCl3)：δ(ppm) =7.36-6.97(m, 13H), 6.38(d, 1H, J=2.4 Hz), 3.18(d, 1H, J =10.2 Hz), 2.57(d, 1H, J =2.4 Hz), 2.33-2.27(m, 1H), 0.95(d, 3H, J =6.8 Hz), 0.68(d, 3H, J =6.8 Hz)。
【００６０】
(R)-((S)-1-(3-phenoxyphenyl)prop-2-ynyl) 2-(4-chlorophenyl)-3-methylbutanoate(9)
【００６１】
【化２２】
2015078128.tif 000024
化合物(R, S)-9は対応するカルボン酸(R)-7とアルコール(S)-4を用いて化合物(S, S)-9と同様に合成した。
1H NMR (400 MHz, CDCl3)：δ(ppm) =7.36-6.97(m, 13H), 6.38(d, 1H, J=2.4 Hz), 3.18(d, 1H, J =10.2 Hz), 2.57(d, 1H, J =2.4 Hz), 2.33-2.27(m, 1H), 0.95(d, 3H, J =6.8 Hz), 0.68(d, 3H, J =6.8 Hz)。
【００６２】
２．皮膚刺激性試験
手法：マウス（C3H/HeNCrl/Crlj、♀、9.5週齢、n=5/グループ）の背部左右２〜３か所ずつ計４〜６か所を電気バリカンにて剪毛する（直径約1cm）。ここに被験物質１〜５（1%, 0.1%エタノール溶液）及びエタノールを１日１回、5μｌを５日間連続塗布する。塗布開始24、48、72、96、120時間後の皮膚反応を評価する。なお被験物質１、３に関しては0.01M, 0.001Mエタノール溶液でも検討した。
【００６３】
皮膚反応の評価基準:
紅斑    紅斑なし・・・・・・・・・０
わずかな紅斑・・・・・・・１
明らかな紅斑・・・・・・・２
中等度〜高度な紅斑・・・・３
高度の紅斑〜痂皮を伴う・・４
評点    紅斑のスコアの合計 / 用いたマウス数
結果：24〜120時間後のいずれの判定時間においても、被験物質１〜５の1%, 0.1%エタノール溶液及びエタノール、さらに被験物質１、３の0.01M, 0.001Mエタノール溶液及びエタノールに紅斑は認められず、いずれも評点は０であった。
【００６４】
３．発毛試験
手法：マウス(C3H/HeNCrl/Crlj、♀、9.5週齢、n=5 or 6/グループ）の背部左右２〜３か所ずつ計４〜６か所を電気バリカンにて剪毛する（直径約1cm）。ここに被験物質１〜５（1%, 0.1%エタノール溶液）及びエタノールを１日１回、5μｌ、週５日、計６週間連続塗布する。これらの部位の発毛程度を毎週観察する。なお、被験物質１、３に関しては0.01M, 0.001Mエタノール溶液でも検討した。
【００６５】
発毛の評価基準：発毛の有無を肉眼的に観察した（皮膚色が黒くなり、数日内には発毛が期待できる場合は発毛ありと判断した）。
被験物質の発毛の判断：エタノール塗布部に比べ被験物質塗布部の発毛が明らかな場合に被験物質に発毛ありと判断し、そのような発毛を認めたマウス数を計測した。
【００６６】
結果：
被験物質１〜５の発毛試験結果を表２に示す。被験物質１は1%濃度において塗布２週時点で１０匹中２匹に、５週時点で１０匹全てに、0.1%濃度において４週時点で１０匹中１匹に、６週時点で５匹に発毛を認めた。被験物質２、４、５は1%及び0.1%濃度において塗布６週時点でも発毛は認めなかった。被験物質３は1%濃度において塗布２週時点で１０匹中３匹に、５週時点で１０匹全てに、0.1%濃度において塗布２週時点で１０匹中１匹に、６週時点で１０匹全てに発毛を認めた。ラセミ体を構成する４種の物質のうちＳＲ体が発毛作用に関与していることを確認した。両物質の発毛作用は1%濃度ではほぼ同程度であったが、0.1%濃度ではＳＲ体がラセミ体より強かった。
【００６７】
【表２】
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被験物質１（Ｒ：−Ｃ≡ＣＨ、ラセミ体）および被験物質３（Ｒ：−Ｃ≡ＣＨ、ＳＲ体）の発毛作用について、0.01M，0.001Mエタノール溶液を用いて追加検討した。結果を表３に示す。ラセミ体とＳＲ体の発毛作用は、0.01M(0.4189%)濃度においては塗布２週時点でラセミ体は１１匹中３匹、ＳＲ体は１１匹中６匹と差を認めたが、４週時点からは両物質間で差を認めなかった。0.001M(0.04189%)濃度においては、ラセミ体は塗布４週時点で１１匹中１匹に、６週時点で１１匹中７匹に、ＳＲ体は塗布２週時点で１１匹中１匹に、５週時点で１１匹全てに発毛を認めた。発毛作用はＳＲ体がラセミ体より強いことを再確認した。
【００６８】
【表３】
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