(57)【要約】      （修正有）【課題】脾臓チロシンキナーゼ（ｓｙｋ）及び／又はヤヌス（ＪＡＫ）キナーゼ活性によって少なくとも部分的に媒介される疾患、例えば心血管疾患、炎症性疾患、自己免疫疾患および細胞増殖性障害、血栓症、アレルギー、喘息、関節リウマチ、白血病、又は非ホジキンリンパ腫など、を予防又は治療するための化合物、及び該化合物を含む医薬組成物の提供。【解決手段】式（Ｉ）で表される２，６−ジアミノ−ピリミジン−５−カルボキサイド化合物、又はその医薬的に許容される塩の治療上の有効量、並びに医薬的に許容される担体及び／又は希釈剤を含む医薬組成物。（Ｒ１はＨ、アルキル、アミノ、アルキル等；Ｒ２はヘテロシクリル、アルコキシ、ヘテロシクリルアミノスルホニル等；Ｄ１はアルキル、アミノ、オキソ、アルケニル等；Ｙ１はアルキル、アルコキシ、アミノカルボニル等）2015078194.tif 000398【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2015078194.tif 000361
［式中：
Ｄ１は
（ａ）Ｃ１−８アルキル、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、アリールＣ１−８アルコキシカルボニルアミノ、フェニルおよびヘテロシクリルＣ１−８アルキレンからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたＣ３−８シクロアルキル；
（ｂ）アミノ、オキソ、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ２−８アルキニル、シアノ、アミノカルボニル、Ｃ１−８ハロアルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ３−８シクロアルキル、およびフェニルからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたＣ１−８アルキル；
（ｃ）Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルキルカルボニル；Ｃ１−８アルキルスルホニル；アミノカルボニルからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたＣ１−８アルキルＣ３−８ヘテロシクリル；
（ｄ）Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、Ｃ１−８ハロアルキル、カルボキシ、アシル、アシルアミノ、シアノ、アミノ、アミノカルボニル、アミノスルホニル、スルホニル、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１−８アルコキシ、アリールオキシ、ハロ、スルホニルアミノ、Ｃ３−８シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル Ｃ１−８アルキルスルホニル、Ｃ１−８アルキルカルボニルヘテロシクリルおよびヘテロアリールからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたアリール；
（ｅ）Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−８アルコキシカルボニル、アミノ、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、アリールＣ１−８アルコキシカルボニルアミノ、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８アルキルスルホニル、オキソ、ハロ、フェニルおよびヘテロシクリルＣ１−８アルキレンからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたヘテロアリール；
（ｆ）Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシカルボニルおよびオキソからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたＣ３−８ヘテロシクリル；
からなる群から選択され
Ｒ１はＨ、Ｃ１−８アルキル、アミノ、アミノカルボニル、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８ハロアルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、オキソ、シアノ、Ｃ１−８アルコキシカルボニル、Ｃ３−８シクロアルキル、アリールおよびヘテロシクリルからなる群から選択され；かつ、各ヘテロシクリルはＣ１−８アルキル、ハロ、オキソ、アミノ、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アリールＣ１−８アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アリールＣ１−８アルキレンカルボニルおよびＣ１−８アルキルスルホニルからなる群から選択される１〜４個の置換基で任意に置換されており
Ｙ１は
（ａ）Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキル、アミノカルボニル−、ヒドロキシル、オキソ、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−８アルコキシおよびＣ１−８アルキルスルホニルからなる群から独立して選択される１〜３個の置換基Ｒ４ａで任意に置換されたアリール；
（ｂ）Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキル、アミノカルボニル−、ヒドロキシル、オキソ、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−８アルコキシおよびＣ１−８アルキルスルホニルからなる群から独立して選択される１〜３個の置換基Ｒ４ａで任意に置換されたヘテロアリール；
からなる群から選択され
Ｒ２はヘテロシクリル、ヘテロシクリルアミノスルホニル、ヘテロシクリルカルボニル、ヘテロシクリルカルボニルＣ１−８アルコキシ、ヘテロシクリルＣ１−８アルコキシ、ヘテロアリール、アミノスルホニル、Ｃ１−８アルキルスルフィニル、Ｃ１−８ハロアルコキシ、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、Ｃ１−８アルコキシアミノカルボニル、アミノカルボニルＣ１−８アルキルアミノ、アミノスルホニルヘテロシクリルおよびアルキルカルボニルヘテロシクリルからなる群から選択され；
かつ、Ｒ２はＣ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシ、ハロ、アミノカルボニル、オキソ、ヒドロキシル、アミノＣ１−８アルキレン、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキレン、Ｃ１−８アルキルカルボニル、Ｃ３−８シクロアルキルカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、Ｃ１−８アルキルカルボニルアミノ、Ｃ３−８シクロアルキルカルボニルアミノ、ヘテロシクリルカルボニルアミノ、Ｃ１−８アルキルスルホニル、Ｃ３−８シクロアルキルスルホニル、ヘテロシクリルスルホニル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ１−８アルキルシクロアルキレン、およびヘテロアリールからなる群から独立して選択される１〜２個の置換基Ｒ４ｃでさらに任意に置換されている］
を有する化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２】
Ｒ２がヘテロシクリルまたはヘテロアリールである場合、アミノＣ１−８アルキル−、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキル−、オキソ−、Ｃ１−８アルキルカルボニル、Ｃ３−８シクロアルキルカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、Ｃ１−８アルキルカルボニルアミノ、Ｃ３−８シクロアルキルカルボニルアミノ、ヘテロシクリルカルボニルアミノ、Ｃ１−８アルキルスルホニル、Ｃ３−８シクロアルキルスルホニルおよびヘテロシクリルスルホニルからなる群から選択される少なくとも１つのＲ３基で置換されている、請求項１の化合物。
【請求項３】
Ｙ１がアリールである、請求項１の化合物。
【請求項４】
Ｙ１がフェニルである、請求項１の化合物。
【請求項５】
Ｙ１がヘテロアリールである、請求項１の化合物。
【請求項６】
Ｙ１がピリジニルである、請求項１の化合物。
【請求項７】
Ｒ２がヘテロシクリルである、前述の請求項のいずれかの化合物。
【請求項８】
Ｒ２がヘテロシクリルアミノスルホニルまたはアミノスルホニルヘテロシクリルである、請求項１〜６のいずれか１項の化合物。
【請求項９】
Ｒ２がヘテロシクリルカルボニルまたはアルキルカルボニルヘテロシクリルである、請求項１〜６のいずれか１項の化合物。
【請求項１０】
Ｒ２がヘテロシクリルカルボニルＣ１−８アルコキシである、請求項１〜６のいずれか１項の化合物。
【請求項１１】
Ｒ２がヘテロアリールである、請求項１〜６のいずれか１項の化合物。
【請求項１２】
Ｒ２がアミノスルホニル、Ｃ１−８アルキルスルフィニル、Ｃ１−８ハロアルコキシ、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、Ｃ１−８アルコキシアミノカルボニル、およびアミノカルボニルＣ１−８アルキルアミノからなる群から選択される、請求項１〜６のいずれか１項の化合物。
【請求項１３】
−Ｙ１−Ｒ２部分が：
【化２】
2015078194.tif 000362
［式中：
Ｙ２はＮ、ＣＨまたはＣであり；
Ｒ４ａはＨおよびＣ１−８アルキルからなる群から選択され；
各Ｒ４ｃはＨ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキル、アミノカルボニル−、ヒドロキシル、オキソ、Ｃ１−８アルコキシおよびハロからなる群から独立して選択され；
各Ｒ４ｂはＨ、Ｃ１−８アルキル、アミノ、Ｃ１−８アルコキシおよびヘテロシクリルからなる群から独立して選択され；
Ｘはハロであり；
下付き文字ｐは０、１、２または３であり；かつ
波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択される、請求項１の化合物。
【請求項１４】
−Ｙ１−Ｒ２が：
【化３】
2015078194.tif 000363
［式中：
Ｙ２はＮまたはＣであり；
各Ｒ４ａはＨおよびハロからなる群から選択され；
各Ｒ４ｃはＨおよびＣ１−８アルキルからなる群から独立して選択され；
各Ｒ４ｂはＨおよびＣ１−８アルキルからなる群から独立して選択され；
Ｘはハロであり；かつ
下付き文字ｐは０、１、２または３であり；かつ
波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択される、請求項１３の化合物。
【請求項１５】
−Ｙ１−Ｒ２部分が：
【化４】
2015078194.tif 000364
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択される、請求項１３の化合物。
【請求項１６】
式Ｉａ：
【化５】
2015078194.tif 000365
を有する請求項１５の化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体。
【請求項１７】
式Ｉｂ：
【化６】
2015078194.tif 000366
を有する請求項１５の化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体。
【請求項１８】
式Ｉｃ：
【化７】
2015078194.tif 000367
を有する請求項１５の化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体。
【請求項１９】
式Ｉｄ：
【化８】
2015078194.tif 000368
を有する請求項１５の化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体。
【請求項２０】
式Ｉｄ１：
【化９】
2015078194.tif 000369
を有する請求項１５の化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体。
【請求項２１】
式Ｉｄ２：
【化１０】
2015078194.tif 000370
を有する請求項１５の化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体。
【請求項２２】
Ｄ１がＣ１−８アルコキシ、Ｃ２−８アルキニル、ＣＮ、アミノカルボニル、Ｃ１−８ハロアルキル、−ヒドロキシル、−Ｃ３−８シクロアルキル、−Ｃ３−８ヘテロシクリル、およびフェニルからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたＣ１−８アルキルであり；
Ｒ１がＨ、Ｃ１−８アルキル、アミノ、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８ハロアルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、オキソ、ＣＮ、Ｃ１−８アルコキシカルボニル、Ｃ３−８シクロアルキル、アリール、およびヘテロシクリルからなる群から選択され；各ヘテロシクリルがアルキル、ハロ、オキソ、アミノ、アルコキシ、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アリールＣ１−８アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−８アルキルスルホニルからなる群から選択される１〜４個の置換基で任意に置換されている、請求項１〜２０のいずれか１項の化合物。
【請求項２３】
Ｄ１がＣ１−８アルコキシ、Ｃ２−８アルキニル、ＣＮ、アミノカルボニル、Ｃ１−８ハロアルキル、−ヒドロキシル、−Ｃ３−８シクロアルキル、−Ｃ３−８ヘテロシクリル、およびフェニルからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたＣ１−８アルキルヘテロシクリルであり；
Ｒ１がＨ、Ｃ１−８アルキル、アミノ、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８ハロアルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、オキソ、ＣＮ、Ｃ１−８アルコキシカルボニル、Ｃ３−８シクロアルキル、アリール、およびヘテロシクリルからなる群から選択され；各ヘテロシクリルがアルキル、ハロ、オキソ、アミノ、アルコキシ、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アリールＣ１−８アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−８アルキルスルホニルからなる群から選択される１〜４個の置換基で任意に置換されている、請求項１〜２０のいずれか１項の化合物。
【請求項２４】
Ｄ１がＣ１−８アルキル、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、アリール Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、フェニルおよびヘテロシクリルＣ１−８アルキレンからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたシクロアルキルである、請求項１〜２０のいずれか１項の化合物。
【請求項２５】
Ｄ１がシクロプロピルである、請求項２４の化合物。
【請求項２６】
Ｄ１がシクロブチルである、請求項２４の化合物。
【請求項２７】
Ｄ１がシクロペンチルである、請求項２４の化合物。
【請求項２８】
Ｄ１がシクロヘキシルである、請求項２４の化合物。
【請求項２９】
−Ｙ１−Ｒ２部分が：
【化１１】
2015078194.tif 000371
［式中：
Ｙ２はＮまたはＣであり；
各Ｒ４ａはＨおよびＣ１−８アルキルからなる群から選択され；
各Ｒ４ｃはＨ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキル、アミノカルボニル−、ヒドロキシル、オキソ、Ｃ１−８アルコキシおよびハロからなる群から独立して選択され；
各Ｒ４ｂはＨ、Ｃ１−８アルキル、アミノ、Ｃ１−８アルコキシおよびヘテロシクリルからなる群から独立して選択され；
Ｘはハロであり；かつ
下付き文字ｐは０、１、２または３であり；かつ、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択される、請求項２４の化合物。
【請求項３０】
Ｄ１がＣ１−８アルキル、Ｃ１−８アルキルスルホニル、Ｃ１−８アルキルカルボニルヘテロシクリル、ハロ、Ｃ１−８アルキルカルボニルアミノ−およびＣ１−８アルコキシからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたフェニルである、請求項１〜２０のいずれか１項の化合物。
【請求項３１】
Ｄ１がＣ１−８アルキル、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−８アルコキシカルボニル、アミノ、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、アリールＣ１−８アルコキシカルボニルアミノ、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８アルキルスルホニル、オキソ、ハロ、フェニルおよびヘテロシクリルＣ１−８アルキレンからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたヘテロアリールである、請求項１〜２０のいずれか１項の化合物。
【請求項３２】
ヘテロアリール基が、単独またはヘテロアリール部分を含む基の一部として：
【化１２】
2015078194.tif 000372
からなる群から選択される、前述の請求項のいずれかの化合物。
【請求項３３】
Ｄ１がＣ１−８アルキル、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−８アルコキシカルボニル、アミノ、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、アリールＣ１−８アルコキシカルボニルアミノ、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８アルキルスルホニル、オキソ、ハロ、フェニルおよびヘテロシクリルＣ１−８アルキレンからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換された二環式ヘテロアリールである、請求項３１の化合物。
【請求項３４】
Ｄ１が：
【化１３】
2015078194.tif 000373
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択され、Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルキルカルボニル、Ｃ１−８アミノシクロアルキル、アミノＣ１−８アルキレンカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−８アルキレンアミノＣ１−８アルキレンカルボニル、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキレンカルボニル、ヒドロキシＣ１−８アルキレンカルボニル、ヒドロキシＣ１−８アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アミノ、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、アリール、アリールＣ１−８アルコキシカルボニルアミノ、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８アルキルスルホニル、アミノＣ１−８アルキレンスルホニル、アミノスルホニル、Ｃ１−８アルキレンアミノＣ１−８アルキレンスルホニル、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキレンスルホニル、ヒドロキシＣ１−８アルキレンスルホニル、ヒドロキシＣ１−８アルコキシスルホニル、アミノスルホニル、オキソ、ハロ、フェニルおよびＣ１−８アルキルヘテロシクリルからなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で任意に置換されている、請求項３１の化合物。
【請求項３５】
Ｄ１が：
【化１４】
2015078194.tif 000374
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択される、請求項３４の化合物。
【請求項３６】
Ｄ１が：
【化１５】
2015078194.tif 000375
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択される、請求項３５の化合物。
【請求項３７】
Ｄ１が：
【化１６】
2015078194.tif 000376
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択される、請求項３５の化合物。
【請求項３８】
Ｄ１がＣ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシカルボニルおよびオキソからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたヘテロシクリルであり；
Ｒ１がＨ、Ｃ１−８アルキル、アミノ、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８ハロアルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、オキソ、ＣＮ、Ｃ１−８アルコキシカルボニル、Ｃ３−８シクロアルキル、アリールおよびヘテロシクリルからなる群から選択され；ヘテロシクリルがアルキル、ハロ、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アリールＣ１−８アルキレンカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−８アルキルスルホニルからなる群から選択される１〜４個の置換基で任意に置換されている、請求項１〜２０のいずれか１項の化合物。
【請求項３９】
Ｄ１が：
【化１７】
2015078194.tif 000377
からなる群から選択される、請求項１〜２０のいずれか１項の化合物。
【請求項４０】
式：
【化１８】
2015078194.tif 000378
を有する化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体。
【請求項４１】
式：
【化１９】
2015078194.tif 000379
を有する化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体。
【請求項４２】
式：
【化２０】
2015078194.tif 000380
を有する化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体。
【請求項４３】
式Ｉｅ：
【化２１】
2015078194.tif 000381
［式中：
Ｄ１ａはＣ３−８シクロアルキルであり；
Ｒ１ａはＨ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−８アルキルカルボニルアミノ、アミノカルボニル、カルボニルアミノ、Ｃ３−８シクロアルキルカルボニルアミノ、Ｃ３−８シクロアルキルアミノカルボニル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヒドロキシＣ１−８アルキレンアミノカルボニルからなる群から選択され；
Ｒ２ａはＨ、ヒドロキシ、ハロ、Ｃ１−８アルキルスルホニルおよびヘテロアリールからなる群から選択され；またはＲ２ａはＲ１ａおよびそれらが結合する原子と組み合わさって＊−ＮＨ−ＣＨ＝ＣＨ−および＊−Ｎ＝ＣＨ−ＣＨ＝Ｎ−からなる群から選択されるヘテロ環部分を形成し、＊はＲ２の結合を示し；かつ、Ｒ１ａおよびＲ２ａの少なくとも１つはＨではなく；
各ヘテロアリールまたはヘテロシクリルは：
【化２２】
2015078194.tif 000382
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から独立して選択され、そのそれぞれはＣ１−８アルキル、ヒドロキシＣ１−８アルキレン、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキレン、アミノ、アミノカルボニル、Ｃ１−８アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−８アルキルカルボニル、カルボキシ、ヒドロキシ、ハロおよびＣ１−８アルキルスルホニルからなる群から独立して選択される１〜２個の置換基で任意に置換されている］
を有する化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体。
【請求項４４】
式Ｉｆ：
【化２３】
2015078194.tif 000383
［式中：
Ｄ１ｂはＣ３−８シクロアルキルであり；
Ｒ１ｂはヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルカルボニルおよびヘテロシクリルスルホニルからなる群から選択され；
Ｒ２ｂはＨまたはハロからなる群から選択され；
各ヘテロアリールまたはヘテロシクリルは：
【化２４】
2015078194.tif 000384
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から独立して選択され
そのそれぞれはヒドロキシル、ヒドロキシＣ１−８アルキレン、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキレン、Ｃ１−８アルキルカルボニル、Ｃ１−８アルキルアミノカルボニル、カルボキシおよびＣ１−８アルキルスルホニルアミノからなる群から独立して選択される１〜２個の置換基で置換されている］
を有する化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体。
【請求項４５】
式Ｉｇ：
【化２５】
2015078194.tif 000385
［式中：
Ｄ１ｃはＣ３−８シクロアルキルであり；かつ
Ｅ１ｃは：
【化２６】
2015078194.tif 000386
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択される］
を有する請求項４３の化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体。
【請求項４６】
Ｒ１ｂがＣ１−８アルキルアミノカルボニルおよびＣ１−８アルキルスルホニルからなる群から独立して選択される１〜２個の置換基で置換されたヘテロシクリルである、請求項４４の化合物。
【請求項４７】
Ｄ１ａ、Ｄ１ｂまたはＤ１ｃがシクロプロピルまたはシクロブチルである、請求項４３〜４６の化合物。
【請求項４８】
Ｄ１ａ、Ｄ１ｂまたはＤ１ｃがシクロプロピルである、請求項４３〜４６の化合物。
【請求項４９】
Ｄ１ａ、Ｄ１ｂまたはＤ１ｃがシクロブチルである、請求項４３〜４６の化合物。
【請求項５０】
式：
【化２７】
2015078194.tif 000387
を有する請求項４４の化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体。
【請求項５１】
式Ｉｄ：
【化２８】
2015078194.tif 000388
［式中：
Ｄ１はＣ３−８シクロアルキルであり；
Ｒ１はＨ、アミノ、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、Ｃ１−８アルキルカルボニルアミノ、Ｃ１−８アルコキシ、アミノカルボニル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、Ｃ１−８アルキルチオ、Ｃ１−８アルキルスルホニルおよびヘテロシクリルＣ１−８アルキレンからなる群から選択され；各ヘテロアリールまたはヘテロシクリルは：
【化２９】
2015078194.tif 000389
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から独立して選択され、そのそれぞれはＣ１−８アルキル、−ＣＯＮＨ２、ヒドロキシ、ハロ、Ｃ１−８アルキルスルホニルおよびヘテロアリールからなる群から独立して選択される１〜２個の置換基で任意に置換されており；かつ
Ｒ２はＨ、Ｃ１−８アルキル、ハロ、Ｃ１−８アルコキシおよびヘテロアリールからなる群から選択され；またはＲ２はＲ１およびそれらが結合する原子と組み合わさって−ＮＨ−Ｎ＝ＣＨ−＊、−ＣＨ＝Ｎ−ＮＨ−＊、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−＊；−ＮＨ−ＣＨ＝ＣＨ−＊、および−Ｎ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−＊からなる群から選択されるヘテロ環部分を形成し、＊はＲ２の結合を示す］
を有する化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体。
【請求項５２】
式Ｉｉ：
【化３０】
2015078194.tif 000390
［式中：
Ｄ１はＣ３−８シクロアルキルであり；
Ｅ１は：
【化３１】
2015078194.tif 000391
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択される］
を有する請求項５１の化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体。
【請求項５３】
Ｒ２がＨである、請求項５１の化合物。
【請求項５４】
Ｒ１がＣＯＮＨ２またはＣ１−８アルキルスルホニルで任意に置換された
【化３２】
2015078194.tif 000392
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
である、請求項５１の化合物。
【請求項５５】
Ｒ１がＣ１−８アルキルスルホニルである、請求項５１の化合物。
【請求項５６】
式Ｉｊ：
【化３３】
2015078194.tif 000393
［式中、Ｄ１はＣ３−８シクロアルキルである］
を有する化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体。
【請求項５７】
式：
【化３４】
2015078194.tif 000394
を有する請求項５１の化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体。
【請求項５８】
式：
【化３５】
2015078194.tif 000395
を有する請求項５１の化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体。
【請求項５９】
Ｄ１がシクロプロピルまたはシクロブチルである、請求項５１〜５６のいずれか１項の化合物。
【請求項６０】
Ｄ１がシクロプロピルである、請求項５１〜５６のいずれか１項の化合物。
【請求項６１】
Ｄ１がシクロブチルである、請求項５１〜５６のいずれか１項の化合物。
【請求項６２】
【化３６】
2015078194.tif 000396
からなる群から選択される請求項５１の化合物。
【請求項６３】
構造：
【化３７】
2015078194.tif 000397
を有する請求項５１の化合物。
【請求項６４】
実施例に示す構造を有する化合物。
【請求項６５】
表に示す構造を有する化合物。
【請求項６６】
図に示す構造を有する化合物。
【請求項６７】
医薬的に許容される担体または希釈剤と組み合わせて、前述の請求項のいずれか１項の化合物を含む組成物。
【請求項６８】
ＳｙｋまたはＪＡＫキナーゼ活性によって少なくとも部分的に媒介されるＳｙｋ、ＪＡＫキナーゼまたはシグナル伝達経路を阻害する方法であって、細胞を前述の請求項のいずれか１項の化合物と接触させるステップを含む方法。
【請求項６９】
対象のｓｙｋ活性によって少なくとも部分的に媒介される状態または障害を治療する方法であって、該治療を必要とする対象に請求項６７の組成物の治療上の有効量を投与するステップを含む方法。
【請求項７０】
該状態または障害が心血管疾患、炎症性疾患、自己免疫疾患および細胞増殖性障害からなる群から選択される、請求項６９の方法。
【請求項７１】
該心血管疾患が再狭窄、血栓症、免疫性血小板減少性紫斑病、ヘパリン起因性血小板減少症、拡張型心筋症、鎌状赤血球症、アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、血管炎症、不安定狭心症および急性冠症候群からなる群から選択される、請求項７０の方法。
【請求項７２】
該炎症性疾患がアレルギー、喘息、関節リウマチ、非ホジキンリンパ腫などのＢ細胞媒介疾患、抗リン脂質症候群、ループス、乾癬、多発性硬化症、末期腎疾患およびクローン病からなる群から選択される、請求項７０の方法。
【請求項７３】
該心血管疾患が血栓症、免疫性血小板減少性紫斑病、およびヘパリン起因性血小板減少症からなる群から選択される、請求項７０の方法。
【請求項７４】
該炎症性疾患が関節リウマチまたは非ホジキンリンパ腫である、請求項７０の方法。
【請求項７５】
該鎌状赤血球症が鎌状赤血球貧血、鎌状ヘモグロビンＣ症、鎌状β−プラスサラセミア、および鎌状β−ゼロサラセミアからなる群から選択される、請求項７２の方法。
【請求項７６】
該免疫関連疾患がＴ細胞媒介疾患、自己免疫疾患、宿主対移植片拒絶、移植片対宿主拒絶、ＩＶ型過敏反応および同種移植片拒絶からなる群から選択される、請求項７０の方法。
【請求項７７】
該自己免疫疾患が溶血性貧血、免疫性血小板減少性紫斑病、多発性硬化症、乾癬およびシェーグレン症候群からなる群から選択される、請求項７０の方法。
【請求項７８】
該細胞増殖性障害が白血病、リンパ腫、骨髄増殖性障害、血液悪性腫瘍、および慢性特発性骨髄線維症である、請求項７０の方法。
【請求項７９】
該障害が急性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病、または非ホジキンリンパ腫である、請求項７０の方法。
【請求項８０】
請求項６７の組成物、包装および使用説明書を含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願へのクロスリファレンス
本出願は２００８年１２月５日に出願した米国仮特許出願第６１／１２０，３４８号；２００８年１２月５日に出願した米国仮特許出願第６１／１２０，３４４号；２００８年４月１６日に出願した米国仮特許出願第６１／０４５，４０６号；および２００８年４月１６日に出願した米国仮特許出願第６１／０４５，４１７号の利益を主張するものであって、その全開示は参照することによって本明細書に援用される。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
発明の分野
本発明は、脾臓チロシンキナーゼ（ｓｙｋ）および／またはＪＡＫキナーゼの阻害剤として作用するピリミジン−５−カルボキサミド化合物に向けられている。本発明は、ピリミジン−５−カルボキサミド化合物を含む医薬組成物、および好ましくない血栓症によって特徴付けられる状態を治療するために化合物または組成物を使用する方法にも向けられている。本発明は、本明細書で記載する化合物を製造する方法にも向けられている。
【０００３】
当該技術分野の現状
タンパク質キナーゼは、細胞内の様々なシグナル伝達過程のコントロールに関与する構造的に関連する酵素の大きなファミリーを構成する（例えば「Hardie and Hanks, The Protein Kinase Facts Book, I and II, Academic Press, San Diego, Calif., 1995」を参照のこと）。タンパク質キナーゼは、それらの構造および触媒機能の保存のため、共通の先祖遺伝子から進化したと考えられている。ほとんど全てのキナーゼは、類似の２５０〜３００個のアミノ酸からなる触媒ドメインを含む。該キナーゼは、それらがリン酸化する基質（例えば、タンパク質−チロシン、タンパク質−セリン／スレオニン、脂質など）によってファミリーに分類することができる。これらのファミリーのそれぞれに一般的に対応して配列モチーフが同定されている（例えば「Hanks & Hunter, (1995), FASEB J. 9:576-596」；「Knighton et al., (1991), Science 253:407-414」；「Hiles et al., (1992), Cell 70:419-429」：「Kunz et al., (1993), Cell 73:585-596」：および「Garcia-Bustos et al., (1994), EMBO J. 13:2352-2361」を参照のこと）。
【０００４】
多くの疾患は、タンパク質キナーゼ媒介事象によって引き起こされる異常な細胞応答と関連する。これらの疾患は、自己免疫疾患、炎症性疾患、骨疾患、代謝疾患、神経疾患および神経変性疾患、癌、心血管疾患、アレルギー、喘息、アルツハイマー病ならびにホルモン関連疾患を含む。結果として、治療薬として使用するためのタンパク質キナーゼの阻害剤を見つけるために、医薬品化学において相当な努力がなされてきた。
【０００５】
免疫受容体チロシン活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）媒介シグナル伝達は、人体病理学に関与するシグナル伝達経路において初期事象として現れる。ＩＴＡＭ媒介シグナル伝達は、免疫細胞におけるＴ細胞受容体、Ｂ細胞受容体、およびＦｃ受容体などの古典的な免疫受容体で、ならびに血小板におけるＧＰＶＩおよびＦｃγＲＩＩａで開始され、ｓｙｋおよびＺＡＰ−７０などの下流の細胞内分子へ伝達される活性化シグナルの中継に関与する（Underhill, D.M and Goodridge, H. S., Trends Immunol., 28:66-73, 2007）。
【０００６】
リガンドのＩＴＡＭ含有受容体への結合は、Ｓｒｃファミリーと呼ばれる非受容体チロシンキナーゼのファミリーからのタンパク質の動員を可能にするシグナル伝達事象を引き起こす。これらのキナーゼは、ｓｙｋまたはＺＡＰ−７０のいずれかにあるタンデムＳＨ２ドメインと相互作用する領域であるＩＴＡＭ配列内のチロシン残基をリン酸化する。
【０００７】
Ｓｙｋは、Ｚａｐ−７０と共に、タンパク質チロシンキナーゼのｓｙｋファミリーのメンバーである。ｓｙｋまたはＺＡＰ−７０と二リン酸化ＩＴＡＭ配列との相互作用は、キナーゼ自身のチロシンリン酸化を可能にするキナーゼ内のコンフォメーション変化を誘導する。リン酸化Ｓｙｋファミリーメンバーは、７６ｋＤａの白血球特異的リン酸化タンパク質（ＳＬＰ−７６）、Ｔ細胞活性化のリンカー（ＬＡＴ）およびＰＬＣ（ホスホリパーゼＣ）γ２を含むＳｒｃホモロジー２（ＳＨ２）ドメインを有する多数の下流のシグナル伝達経路タンパク質を活性化する。
【０００８】
機能障害性ＩＴＡＭ媒介シグナル伝達に起因する人体病理学は、関節リウマチ、全身性ループス、多発性硬化症、溶血性貧血、免疫性血小板減少性紫斑病、およびヘパリン起因性血小板減少症ならびに動脈硬化症などの自己免疫疾患を含む。興味深いことに、上記の疾患の多くは、抗体によるＦｃ受容体の架橋を通じて起こり、ｓｙｋを介して、マスト細胞、好塩基球および他の免疫細胞のシグナル伝達カスケードを活性化し、炎症反応に関与する細胞のメディエーターの放出をもたらすと考えられている。ＩｇＥ刺激依存性アレルギー反応および炎症反応におけるマスト細胞および好塩基球からのメディエーターの放出およびサイトカインの産生は、ｓｙｋのチロシンキナーゼ活性を阻害することによってコントロールされうる（Rossi, A.B. et al., J Allergy Clin Immunol., 118:749-755, 2006）。免疫性血小板減少症において、抗体結合血小板はＦｃ受容体／ＩＴＡＭ／ｓｙｋ媒介過程によって脾臓により除去される（Crow, A.R. et al., Blood, 106:abstract 2165, 2005）。血小板ＦｃγＲＩＩａを活性化するヘパリン−血小板第４因子免疫複合体に起因する薬物誘導血小板減少症は、受容体会合の下流のｓｙｋシグナル伝達も関与する（Reilly, M.P., Blood, 98:2442-2447, 2001）。
【０００９】
血小板アゴニストは、インサイドアウトのインテグリンシグナル伝達を誘導し、フィブリノーゲン結合および血小板凝集をもたらす。これは、アウトサイドインのシグナル伝達を開始し、血小板のさらなる刺激を生じる。ｓｙｋは両方のインテグリンシグナル伝達の間活性化され、ｓｙｋの阻害は固定化したタンパク質への血小板粘着を阻害することがわかっている（Law, D.A. et al., Blood, 93:2645-2652, 1999）。コラーゲンによって誘導されるアラキドン酸およびセロトニンの放出ならびに血小板凝集は、ｓｙｋ欠損マウスに由来する血小板において著しく阻害される（Poole, A. et al., EMBO J., 16:2333-2341, 1997）。それゆえ、ｓｙｋ阻害剤は抗血液凝固作用も有しうる。
【００１０】
ｓｙｋがＩｇ誘導血小板活性化において果たす役割のために、ｓｙｋは動脈硬化症および再狭窄において重要であるようである。動脈硬化症は、血管の動脈壁の肥厚および硬化によって特徴付けられる疾患のクラスである。全ての血管はこの重篤な変性状態の影響を受けやすいが、心臓のために働く大動脈および冠状動脈が最も頻繁に影響される。動脈硬化症は心臓発作、心筋梗塞、脳卒中、および動脈瘤のリスクを増加させうるため、深刻な臨床上の重要性がある。
【００１１】
動脈硬化症のための伝統的な治療は、それほど重篤でない妨害物用の血管再開通手術、および主要な妨害物用の冠動脈バイパス形成手術を含む。血管内手術の重篤な欠点は、かなりの数の治療を受けた個人において、治療された血管の一部または全てが再狭窄する（すなわち、再び狭くなる）ことである。例えば、ＰＴＣＡ後のアテローム硬化性冠動脈の再狭窄はこの手術を経験する患者の１０〜５０％に生じ、その後さらなる血管形成または冠動脈バイパス移植のいずれかを必要とする。さらに、ステント留置後のアテローム硬化性冠動脈の再狭窄は、この手術を経験する患者の１０〜２０％に生じ、その後患部の動脈を流れる適切な血流を維持するため治療を繰り返す必要がある。再狭窄は一般的に比較的短い期間、例えば治療後およそ６ヶ月未満に生じる。
【００１２】
再狭窄を促進する正確なホルモン過程および細胞過程が決定されていない一方、再狭窄は部分的にはバルーンカテーテルまたは他の血管内装置に起因する血管壁に対する機械的損傷によると考えられている。例えば、ＰＴＣＡの過程は、閉塞動脈を開くことに加えて、常在性の冠動脈平滑筋細胞（ＳＭＣｓ）も損傷する。この傷害に応答して、粘着性血小板、浸潤性マクロファージ、白血球、または平滑筋細胞自身が血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）などの細胞由来増殖因子を放出し、その後、内側ＳＭＣｓが増殖し、内弾性板を通って血管内膜の領域へ遊走する。内膜ＳＭＣｓのさらなる増殖および過形成、ならびに最も有意には、３〜６ヶ月にわたる多量の細胞外マトリックスの産生は、血流を有意に妨害するのに十分な程度まで血管腔を埋め、狭くする。
【００１３】
ｓｙｋはＩｇ誘導血小板活性化において役割を果たすことに加えて、ｓｙｋはコラーゲン媒介シグナル伝達において非常に重要な役割を果たす。血小板粘着および活性化に関与する初期粘着タンパク質はコラーゲンである。コラーゲンは、プラーク破裂の間血液にさらされるアテロームの線維性キャップの中に含まれる糸状タンパク質である。コラーゲンは最初に、血小板膜にＧＰＩｂを結合することを介して血小板を繋ぎ止めるフォン・ヴィルブランド因子を結合することによって機能する。コラーゲンは、血小板上の２つのコラーゲン受容体、ＧＰＶＩおよびインテグリンα２β１を結合することによって二次的に機能する。
【００１４】
ＧＰＶＩはＦｃＲγとの複合体として血小板膜に存在するが、この相互作用はＧＰＶＩの発現に必要である。血小板上のＦｃγＲＩＩａの活性化は、血小板形態変化、分泌および血栓症をもたらす。ＧＰＶＩ／ＦｃＲγ複合体によるシグナル伝達は、ＦＣＲγのＩＴＡＭドメインのチロシンリン酸化によって開始され、次いでｓｙｋが動員される。ＧＰＶＩの活性化は、下記を含む多数の血小板機能の誘導をもたらす：堅い血小板粘着を達成するインテグリンα２β１の活性化、ならびに血小板凝集および血栓増殖を媒介するＧＰＩＩｂ−ＩＩＩａの活性化；ＣＤ４０Ｌ、ＲＡＮＴＥＳおよびＴＧＦβなどの炎症性タンパク質の血管壁への送達を可能にする血小板分泌；ならびに白血球の動員を可能にするＰ−セレクチンの発現。それゆえ、ｓｙｋ阻害剤は血小板粘着、活性化および凝集によって媒介される血栓事象を阻害しうると考えられている。
【００１５】
ＩｇＧ抗体についての受容体ＦｃγＲの刺激、およびＦｃγＲによって媒介される食作用によって誘導される細胞内タンパク質のチロシンリン酸化（活性化）は、ｓｙｋ欠損マウスに由来するマクロファージにおいてかなり阻害されると報告されている（Crowley, M.T. et al., J. Exp. Med., 186:1027-1039, 1997）。これは、ｓｙｋがマクロファージのＦｃγＲ媒介食作用において著しく重要な役割を有することを示唆する。
【００１６】
ｓｙｋのアンチセンスオリゴヌクレオチドがＧＭ−ＣＳＦによって誘導される好酸球のアポトーシス阻害を抑制することも報告されているが（Yousefi, S. et al., J. E. Med., 183:1407-1414, 1996）、これはｓｙｋがＧＭ−ＣＳＦなどに起因する好酸球の寿命延長シグナルに不可欠であることを示す。好酸球の寿命延長は喘息などのアレルギー性障害における慢性状態への疾患の変遷と緊密に関連するため、ｓｙｋ阻害剤は慢性好酸球性炎症のための治療薬としての機能も果たしうる。
【００１７】
ＳｙｋはＢ細胞抗原受容体を介したＢ細胞の活性化に重要であり、抗原受容体刺激に起因するフォスファチジルイノシトール代謝および細胞内カルシウム濃度の増加に関与する（Hutchcroft, J E. et al., J. Biol. Chem., 267:8613-8619, 1992; and Takata, M. et al., EMBO J., 13:1341-1349, 1994）。それゆえ、ｓｙｋ阻害剤はＢ細胞の機能をコントロールするために用いられ得、それゆえ、抗体関連疾患のための治療薬としての機能を果たすと期待される。
【００１８】
ＳｙｋはＴ細胞抗原受容体に結合し、受容体の架橋を通じて迅速にチロシンリン酸化を起こし、ＬｃｋなどのＳｒｃチロシンキナーゼによって媒介される細胞内シグナルに相乗的に作用する（Couture, C. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 91:5301-5305, 1994; and Couture, C. et al., Mol. Cell. Biol., 14:5249-5258, 1994）。ｓｙｋは、上皮内γδＴ細胞などの成熟Ｔ細胞集団および未成熟αβＴ細胞に存在し、ＴＣＲシグナル伝達カスケードの多数の成分をリン酸化することができると報告されている（Latour, S. et. al., Mol Cell Biol., 17:4434-4441, 1997）。結果として、ｓｙｋ阻害剤は、Ｔ細胞抗原受容体によって媒介される細胞性免疫を阻害する薬剤としての機能を果たしうる。
【００１９】
最近の比較ゲノムハイブリダイゼーション研究は、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）の発病に重要な別の遺伝子としてｓｙｋを同定した（Chen, R. et al. Journal of Clinical Oncology, 2007 ASCO Annual Meeting Proceedings (Post-Meeting Edition).Vol 25, No 18S (June 20 Supplement), 2007:8056）。ＭＣＬは全非ホジキンリンパ腫の５〜１０％を表し、治療が困難な形態のリンパ腫である。それは、Ｂ細胞リンパ腫の中で最悪の予後を有し、平均生存期間は３年である。ＭＣＬにおいてＳｙｋが過剰発現し（Rinaldi, A, et.al, Br. J. Haematol., 2006;132:303-316）、Ｓｙｋが濾胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、およびびまん性大細胞型Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫内のｍＴＯＲ（ラパマイシンの哺乳類ターゲット）生存シグナルを媒介すると報告されている（Leseux, L., et. al, Blood, 2006; 108:4156-4162）。
【００２０】
多くのＢ細胞リンパ腫がＢ細胞受容体（ＢＣＲ）媒介生存シグナルに依存することを様々な証拠が示唆している。ＢＣＲシグナル伝達は、受容体オリゴマー化ならびにＳＲＣファミリーキナーゼによるＩｇαおよびβ免疫受容体チロシンベース活性化モチーフのリン酸化を誘導する。ＩＴＡＭリン酸化は、ｓｙｋの動員および活性化をもたらし、下流の事象を開始し、最初のＢＣＲシグナルを増幅する。正常なＢ細胞における緊張性ＢＣＲシグナル伝達の役割、およびインビトロでの非ホジキンリンパ腫細胞株のｓｙｋ依存性生存（Chen, L., et.al, Blood, 2006; 108:3428-3433）を考慮すると、ｓｙｋ阻害は特定のＢ細胞リンパ腫および慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）の有望な合理的治療ターゲットである（Stefania Gobessi, Luca Laurenti, Pablo Longo, Laura Carsetti, Giuseppe Leone, Dimitar G. Efremov, Constitutive activation of the protein tyrosine kinase Syk in Chronic Lymphocytic Leukemia B-cells, Blood, 2007, 110, Abstract 1123）。最近のデータは、ｓｙｋを阻害するマルチキナーゼ阻害剤の投与が、ＣＬＬ患者に有意な臨床活性を有しうることを示している（Friedberg JW et al, Blood 2008; 112(11), Abstract 3）。
【００２１】
脾臓チロシンキナーゼ（Ｓｙｋ）の発癌可能性は、多数の異なる状況にて記載されている。臨床的には、Ｓｙｋ過剰発現はマントル細胞リンパ腫にて報告されており（Rinaldi, A, et.al, Br. J. Haematol., 2006; 132:303-316）、染色体転座（ｔ（９；１２）（ｑ２２；ｐ１２））によって発生したＴＥＬ−Ｓｙｋ融合タンパク質（転座ＥＴＳ白血病（Translocated ETS Leukemia））は、Ｓｙｋ活性の増加をもたらし、骨髄異形性症候群と関連する（Kuno, Y., et.al, Blood, 2001; 97:1050-1055）。白血病は、マウスにおいて、ヒトＴＥＬ−Ｓｙｋを発現する養子導入の骨髄細胞によって誘導される（Wossning, T., JEM, 2006; 203:2829-2840）。さらに、マウス初代骨髄細胞において、Ｓｙｋの過剰発現は培養液中でＩＬ−７非依存性増殖をもたらす（Wossning, T., et.al, JEM, 2006; 203:2829-2840）。
【００２２】
興味深いことに、Ｓｙｋシグナル伝達は、ヒトおよびマウスにおいてＢ細胞発生および生存に必要であるようである。Ｂ細胞受容体（Lam, K., et.al, Cell, 1997; 90:1073-1083）またはＩｇα（Kraus, M., et.al, Cell, 2004; 117:787-800）の誘導欠損は、マウスにおいて末梢Ｂ細胞の欠損をもたらす。Ｓｙｋ活性を負に制御することが知られているタンパク質チロシンホスファターゼＰＴＰ−ＲＯの過剰発現は、非ホジキンリンパ腫に由来する細胞株において増殖を阻害し、アポトーシスを誘導する（Chen, L., et.al, Blood, 2006; 108:3428-3433）。最終的に、Ｂ細胞リンパ腫はＢＣＲ発現の欠損をほとんど示さず、抗イディオタイプ治療はほとんど抵抗力をもたらさない（Kuppers, R. Nat Rev Cancer, 2005; 5:251-262）。
【００２３】
抗原特異的Ｂ細胞受容体（ＢＣＲ）の会合は、多数のシグナル伝達経路を活性化し、最終的に細胞活性化状態を制御し、生存およびクローン増殖を促進する。ＢＣＲを介したシグナル伝達は、各々免疫チロシンベース活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を有する２つの他の免疫グロブリンスーパーファミリーのメンバー；ＩｇαおよびＩｇβとの結合によって可能となる（Jumaa, Hendriks et al. Annu Rev Immunol 23: 415-45 (2005）。ＩＴＡＭドメインは、ＢＣＲ会合に応答してＳｒｃファミリーキナーゼによって直接的にリン酸化される。脾臓チロシンキナーゼ（Ｓｙｋ）はＩＴＡＭとドッキングし、これをリン酸化するが、これはそのキナーゼ活性を増強する過程であり、Ｓｙｋ自己リン酸化および多数の下流の基質のチロシンリン酸化をもたらす（Rolli, Gallwitz et al. Mol Cell 10(5): 1057-69 (2002)。新たに形成されたプレＢＣＲが発現している場合、このシグナル伝達経路は発生のプロＢ細胞からプレＢ細胞期への遷移の始めにＢ細胞において活性がある。実際、Ｂ細胞発生は、ＳｙｋノックアウトマウスにおけるプロＢ細胞期で停止する（Cheng, Rowley et al. 1995; Turner, Mee et al. Nature 378(6554): 303-6 (1995)。マウスにおいてＢ細胞受容体（Lam, Kuhn et al. Cell 90(6): 1073-83 (1997)またはＩｇα（Kraus, Alimzhanov et al. Cell 117(6): 787-800 (2004)の誘導欠損は、末梢Ｂ細胞の欠損をもたらす。ヒトＢ細胞は、増殖および生存にもＳｙｋを必要とするようである。Ｓｙｋ活性の負の制御因子であるタンパク質チロシンホスファターゼＰＴＰ−ＲＯの過剰発現は、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）に由来する細胞株において増殖を阻害し、アポトーシスを誘導する（Chen, Juszczynski et al. Blood 108(10): 3428-33 (2006）。ＮＨＬ株ＳＵＤＨＬ−４におけるｓｉＲＮＡによるＳｙｋのノックダウンは、細胞周期のＧ１／Ｓ遷移の遮断をもたらした（Gururajan, Dasu et al. J Immunol 178(1): 111-21 (2007)。同時に、これらのデータはＳｙｋシグナル伝達がヒトおよびマウスＢ細胞の発生、増殖、および生存にさえも必要であることを示唆する。
【００２４】
逆に、Ｓｙｋの発癌可能性は多数の異なる状況にて記載されている。臨床的には、Ｓｙｋ過剰発現はマントル細胞リンパ腫において報告されており（Rinaldi, Kwee et al. Br J Haematol 132(3): 303-16 (2006）、染色体転座（ｔ（９；１２）（ｑ２２；ｐ１２））によって発生したＴＥＬ−Ｓｙｋ融合タンパク質（転座ＥＴＳ白血病）はＳｙｋ活性の増加をもたらし、骨髄異形性症候群と関連する（Kuno, Abe et al. Blood 97(4): 1050-5 (2001)。マウスにおいて、白血病はヒトＴＥＬ−Ｓｙｋを発現する骨髄細胞の養子導入によって誘導される（Wossning, Herzog et al. J Exp Med 203(13): 2829-40 (2006）。さらに、マウス初代骨髄細胞において、Ｓｙｋの過剰発現は培養液中でＩＬ−７非依存性増殖をもたらす（Wossning, Herzog et al. 2006）。一貫して、Ｓｙｋは濾胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、およびびまん性大細胞型Ｂ細胞ＮＨＬにおいてｍＴＯＲ（ラパマイシンの哺乳類ターゲット）生存シグナルを媒介すると報告されている（Leseux, Hamdi et al. Blood 108(13): 4156-62 (2006)。さらなる最近の研究では、Ｓｙｋ依存性生存シグナルは、ＤＬＢＣＬ、マントル細胞リンパ腫および濾胞性リンパ腫を含むＢ細胞悪性腫瘍において役割を果たしうることも示唆する（Gururajan, Jennings et al. 2006; Irish, Czerwinski et al. J Immunol 176(10): 5715-9 (2006)。正常なＢ細胞における緊張性ＢＣＲシグナル伝達の役割、およびインビトロでのＮＨＬ細胞株のＳｙｋ依存性生存を考慮すると、Ｓｙｋの特異的阻害は特定のＢ細胞リンパ腫の治療に有望でありうる。
【００２５】
最近、Ｒ４０６（リゲル・ファーマシューティカルズ）が、ＦｃεＲ１およびＢＣＲ誘導Ｓｙｋ活性化を含む様々な刺激に応答してＩＴＡＭシグナル伝達を阻害することが報告されている（Braselmann, Taylor et al. J Pharmacol Exp Ther 319(3): 998-1008 (2006）。興味深いことに、このＳｙｋのＡＴＰ−競合的阻害剤は、Ｆｌｔ３、ｃＫｉｔ、およびＪＡＫキナーゼに対しても活性があったが、Ｓｒｃキナーゼに対しては活性がなかった（Braselmann, Taylor et al. 2006）。Ｆｌｔ３に対する活性化突然変異はＡＭＬと関連し、このキナーゼの阻害は現在、臨床開発されている（Burnett and Knapper Hematology Am Soc Hematol Educ Program 2007: 429-34 (2007）。チロシンキナーゼｃＫｉｔの過剰活性化も、血液悪性腫瘍、および癌治療のターゲットと関連する（Heinrich, Griffith et al. Blood 96(3): 925-32 (2000）。同様に、ＪＡＫ３シグナル伝達は、白血病およびリンパ腫に関係し、現在、可能な治療ターゲットとして開発されている（Heinrich, Griffith et al. 2000）。重要なことに、Ｒ４０６のマルチキナーゼ阻害活性は、リンパ腫細胞株および初代ヒトリンパ腫サンプルにおいてＢＣＲシグナル伝達を弱め、前者のアポトーシスをもたらす（Chen, Monti et al. Blood 111(4): 2230-7 (2008）。さらに、第ＩＩ相臨床試験は、不応性ＮＨＬおよび慢性リンパ性白血病におけるこの化合物による好ましい結果を報告している（Friedberg JW et al, Blood 2008; 112(11), Abstract 3）。Ｒ４０６の正確な作用メカニズムは不明であるが、データはリンパ球における生存シグナル伝達を媒介するキナーゼの阻害が臨床的に有益であることを示唆している。
【００２６】
さらなる最近の研究は、ｓｙｋ依存性生存シグナルがＤＬＢＣＬ、マントル細胞リンパ腫および濾胞性リンパ腫を含むＢ細胞悪性腫瘍において役割を果たしうることも示唆している（例えば、S. Linfengshen et al. Blood, Feb. 2008; 111: 2230-2237; J. M. Irish et al. Blood, 2006; 108: 3135-3142; A. Renaldi et al. Brit J. Haematology, 2006; 132: 303-316; M. Guruoajan et al. J. Immunol, 2006; 176: 5715-5719; L. Laseux et al. Blood, 2006; 108: 4156-4162を参照のこと）。
【００２７】
ＪＡＫキナーゼ（ヤヌスキナーゼ）は、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３およびＴＹＫ２を含む細胞質タンパク質チロシンキナーゼのファミリーである。ＪＡＫは、サイトカインシグナル伝達において重大な役割を果たす。多数のＪＡＫキナーゼが特定のサイトカインまたはシグナル伝達経路によって影響されうるが、ＪＡＫキナーゼはそれぞれ特定のサイトカインの受容体に選択性がある。研究は、ＪＡＫ３が様々なサイトカイン受容体の共通のサイトカイン受容体γ鎖（Ｆｃγまたはγｃ）と関連することを示唆している。ＪＡＫ３は受容体に特に選択的に結合し、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−１５およびＩＬ−２１のサイトカインシグナル伝達経路の一部であり、これらによって活性化される。ＪＡＫ１は特に、サイトカインＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−７、ＩＬ−９およびＩＬ−２１の受容体と相互作用し、一方ＪＡＫ２は特に、ＩＬ−９およびＴＮＦ−αの受容体と相互作用する。特定のサイトカインがそれらの受容体（例えば、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−１５およびＩＬ−２１）と結合すると、受容体のオリゴマー化が生じ、ＪＡＫキナーゼの細胞質尾部を近接して会合させ、該ＪＡＫキナーゼ上のチロシン残基のトランスリン酸化を促進する。このトランスリン酸化は、該ＪＡＫキナーゼの活性化をもたらす。
【００２８】
ＪＡＫファミリーキナーゼの下流の基質は、シグナル伝達性転写因子（ＳＴＡＴ）タンパク質を含む。リン酸化ＪＡＫキナーゼは様々なＳＴＡＴ（シグナル伝達性転写因子）タンパク質に結合する。チロシン残基のリン酸化によって活性化されるＤＮＡ結合タンパク質であるＳＴＡＴタンパク質は、シグナル伝達分子および転写因子の両方として機能し、最終的にサイトカイン応答遺伝子のプロモーターに存在する特異的ＤＮＡ配列と結合する（Leonard et al., (2000), J. Allergy Clin. Immunol. 105:877-888）。
【００２９】
ＪＡＫ／ＳＴＡＴシグナル伝達は、アレルギー、喘息、移植片（同種移植片）拒絶などの自己免疫疾患、関節リウマチ、筋萎縮性側索硬化症および多発性硬化症などの多くの異常な免疫応答の媒介、ならびに白血病およびリンパ腫などの固形および血液悪性腫瘍に関係する。ＪＡＫ／ＳＴＡＴ経路の薬剤介入の総説については、「Frank, (1999), Mol. Med. 5: 432:456」および「Seidel et al., (2000), Oncogene 19:2645-2656」を参照のこと。
【００３０】
ＪＡＫ３は特に、様々な生物学的過程に関係する。例えば、ＩＬ−４およびＩＬ−９によって誘導されるマウスマスト細胞の増殖および生存は、ＪＡＫ３−およびγ鎖−シグナル伝達に依存すると示されている（Suzuki et al., (2000), Blood 96:2172-2180）。ＪＡＫ３はＩｇＥ受容体媒介マスト細胞脱顆粒応答においても重大な役割を果たし（Malaviya et al., (1999), Biochem. Biophys. Res. Commun. 257:807-813）、ＪＡＫ３キナーゼの阻害は、アナフィラキシーを含むＩ型過敏反応を妨げることが示されている（Malaviya et al., (1999), J. Biol. Chem. 274:27028-27038）。ＪＡＫ３阻害は、同種移植片拒絶について免疫抑制をもたらすことも示されている（Kirken, (2001), Transpl. Proc. 33:3268-3270）。ＪＡＫ３キナーゼは、初期および後期の関節リウマチ（Muller-Ladner et al., (2000), J. Immunal. 164:3894-3901）；家族性筋萎縮性側索硬化症（Trieu et al., (2000), Biochem Biophys. Res. Commun. 267:22-25）；白血病（Sudbeck et al., (1999), Clin. Cancer Res. 5:1569-1582）；Ｔ細胞リンパ腫の１形態である菌状息肉腫（Nielsen et al., (1997), Prac. Natl. Acad. Sci. USA 94:6764-6769）；および異常細胞増殖（Yu et al., (1997), J. Immunol. 159:5206-5210;Catlett-Falcone et al., (1999), Immunity 10:105-115）に関与するメカニズムにも関係する。
【００３１】
ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、およびＴＹＫ２が遍在的に発現している一方、ＪＡＫ３は主に造血細胞に発現している。ＪＡＫ３を含むＪＡＫキナーゼは、小児癌の最も一般的な形態である急性リンパ芽球性白血病を患う小児由来の初代白血病細胞に大量に発現しており、研究では特定の細胞におけるＳＴＡＴ活性化をシグナル制御アポトーシスと関連づけている（Demoulin et al., (1996), Mol. Cell. Biol. 16:4710-6; Jurlander et al., (1997), Blood. 89:4146-52; Kaneko et al., (1997), Clin. Exp. Immun. 109:185-193; and Nakamura et al., (1996), J. Biol. Chem. 271:19483-8）。それらはリンパ球の分化、機能および生存に重要であることも知られている。ＪＡＫ−３は特に、リンパ球、マクロファージ、およびマスト細胞の機能において不可欠な役割を果たす。このＪＡＫキナーゼの重要性を考慮すると、ＪＡＫ３に選択性があるものを含むＪＡＫ経路を調節する化合物は、リンパ球、マクロファージ、またはマスト細胞の機能が関与する疾患または状態を治療するのに有用でありうる（Kudlacz et al., (2004) Am. J. Transplant 4:51-57; Changelian (2003) Science 302:875-878）。ＪＡＫ経路のターゲティングまたはＪＡＫキナーゼ、特にＪＡＫ３の調節が治療的に有用であると考えられる状態は、白血病、リンパ腫、移植拒絶（例えば、膵臓島移植拒絶、骨髄移植適用（例えば、移植片対宿主疾患）、自己免疫疾患（例えば、糖尿病、関節リウマチ、ループス、乾癬）、および炎症（例えば、喘息、アレルギー反応）を含む。ＪＡＫ３阻害から利益を受けうる状態は、下記でより詳細に議論する。ＪＡＫ阻害についての最近のデータでは、腎臓同種移植患者をＣＰ−６９０，５５０で治療したと報告し、同種免疫反応のマーカー（インターフェロンγ）が減少しうることを示している（Van Gurp EA et al (2009) Transplanatation 87:79-86）。
【００３２】
ＪＡＫ経路の調節が関与する治療によって利益を得ると考えられる多数の状態を考慮すると、ＪＡＫ経路を調節する新規な化合物およびこれらの化合物を使用する方法は、広範囲の患者に対して相当な治療効果を提供するはずであることはすぐに分かることである。本明細書で提供されるのは、ＪＡＫ経路のターゲティングまたはＪＡＫキナーゼ、特にＪＡＫ３の阻害が治療的に有用である状態の治療に使用するための新規２，４−ピリミジンジアミン化合物である。
【００３３】
ＪＡＫ経路の調節と関連する特許および特許出願は、下記を含む：米国特許第５，７２８，５３６号；第６，０８０，７４７号；第６，０８０，７４８号；第６，１３３，３０５号；第６，１７７，４３３号；第６，２１０，６５４号；第６，３１３，１３０号；第６，３１６，６３５号；第６，４３３，０１８号；第６，４８６，１８５号；第６，５０６，７６３号；第６，５２８，５０９号；第６，５９３，３５７号；第６，６０８，０４８号；第６，６１０，６８８号；第６，６３５，６５１号；第６，６７７，３６８号；第６，６８３，０８２号；第６，６９６，４４８号；第６，６９９，８６５号；第６，７７７，４１７号；第６，７８４，１９５号；第６，８２５，１９０号；第６，５０６，７６３号；第６，７８４，１９５号；第６，５２８，５０９号；第６，６０８，０４８号；第７，１０５，５２９号；第６，６９９，８６５号；第６，８２５，１９０号；第６，８１５，４３９号；第６，９４９，５８０号；第７，０５６，９４４号；第６，９９８，３９１号；第７，０７４，７９３号；第６，９６９，７６０号；米国特許出願公開第２００１／０００７０３３Ａ１号；第２００２／０１１５１７３Ａ１号；第２００２／０１３７１４１Ａ１号；第２００３／０２３６２４４Ａ１号；第２００４／０１０２４５５Ａ１号；第２００４／０１４２４０４Ａ１号；第２００４／０１４７５０７Ａ１号；および第２００４／０２１４８１７Ａ１号；ならびに国際特許出願ＷＯ９５／０３７０１Ａ１；ＷＯ９９／１５５００Ａ１；ＷＯ００／００２０２Ａ１；ＷＯ００／１０９８１Ａ１；ＷＯ００／４７５８３Ａ１；ＷＯ００／５１５８７Ａ２；ＷＯ００／５５１５９Ａ２；ＷＯ０１／４２２４６Ａ２；ＷＯ０１／４５６４１Ａ２；ＷＯ０１／５２８９２Ａ２；ＷＯ０１／５６９９３Ａ２；ＷＯ０１／５７０２２Ａ２；ＷＯ０１／７２７５８Ａ１；ＷＯ０２／００６６１Ａ１；ＷＯ０２／４３７３５Ａ１；ＷＯ０２／４８３３６Ａ２；ＷＯ０２／０６０４９２Ａ１；ＷＯ０２／０６０９２７Ａ１；ＷＯ０２／０９６９０９Ａ１；ＷＯ０２／１０２８００Ａ１；ＷＯ０３／０２０６９８Ａ２；ＷＯ０３／０４８１６２Ａ１；ＷＯ０３／１０１９８９Ａ１；ＷＯ２００４／０１６５９７Ａ２；ＷＯ２００４／０４１７８９Ａ１；ＷＯ２００４／０４１８１０Ａ１；ＷＯ２００４／０４１８１４Ａ１；ＷＯ２００４／０４６１１２Ａ２；ＷＯ２００４／０４６１２０Ａ２；ＷＯ２００４／０４７８４３Ａ１；ＷＯ２００４／０５８７４９Ａ１；ＷＯ２００４／０５８７５３Ａ１；ＷＯ２００４／０８５３８８Ａ２；ＷＯ２００４／０９２１５４Ａ１；ＷＯ２００５／００９９５７Ａ１；ＷＯ２００５／０１６３４４Ａ１；ＷＯ２００５／０２８４７５Ａ２；およびＷＯ２００５／０３３１０７Ａ１。
【００３４】
置換ピリミジンジアミン化合物を記載する特許および特許出願は下記を含む：２００３年１月３１日に出願された米国出願第１０／３５５，５４３号（ＵＳ２００４／００２９９０２Ａ１）、２００３年１月３１日に出願された国際出願ＰＣＴ／ＵＳ０３／０３０２２（ＷＯ０３／０６３７９４）、２００３年７月２９日に出願された米国出願第１０／６３１，０２９号、国際出願ＰＣＴ／ＵＳ０３／２４０８７（ＷＯ０４／０１４３８２）、２００４年７月３０日に出願された米国出願第１０／９０３，２６３号、および国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２００４／２４７１６（ＷＯ０５／０１６８９３）、その開示は参照することによって本明細書に援用される。置換ピリミジンジアミン化合物は下記の国際特許出願公開番号：ＷＯ０２／０５９１１０、ＷＯ０３／０７４５１５、ＷＯ０３／１０６４１６、ＷＯ０３／０６６６０１、ＷＯ０３／０６３７９４、ＷＯ０４／０４６１１８、ＷＯ０５／０１６８９４、ＷＯ０５／１２２２９４、ＷＯ０５／０６６１５６、ＷＯ０３／００２５４２、ＷＯ０３／０３０９０９、ＷＯ００／３９１０１、ＷＯ０５／０３７８００および米国特許公開第２００３／０１４９０６４号にも記載されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００３５】
この分野は進歩しているが、ｓｙｋおよび／またはＪＡＫキナーゼを阻害する化合物、ならびに該阻害から利益を得ることができる再狭窄、血栓症、および／または炎症などの患者の状態を治療する方法が当該分野には依然として必要である。さらに、他のキナーゼと比較してこれらのキナーゼの１つを選択的に阻害する化合物が入手できることも望まれる。本発明は、この要求および他の要求を満たすものである。
【課題を解決するための手段】
【００３６】
発明の概略
本発明は、ｓｙｋ活性の阻害剤（本明細書では「ｓｙｋ阻害剤」とも呼ぶ）および／またはＪＡＫキナーゼ活性の阻害剤（本明細書では「ＪＡＫ阻害剤」とも呼ぶ）としての活性を有する新規化合物、ならびにそれらの製造および使用の方法、ならびにそれを含む医薬組成物を提供する。該化合物は下記の構造（Ｉ）：
【化１】
2015078194.tif 000002
［式中、Ｄ１、Ｒ１、Ｙ１およびＲ２は下記で定義する通りである］を有し、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体である。
【００３７】
本発明は、式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容される塩の治療上の有効量、ならびに医薬的に許容される担体および／または希釈剤を含む医薬組成物も提供する。
【００３８】
本発明の化合物は広範な範囲にわたる治療への応用に有用性があり、男性および女性の両方、ならびに哺乳類全般（本明細書では「対象」とも呼ぶ）においてｓｙｋ活性によって少なくとも部分的に媒介される様々な状態を治療するために用いられうる。例えば、該状態は、心血管疾患、炎症性疾患または自己免疫疾患と関連する状態を含み、これらに限定されない。より具体的には、本発明の化合物は下記を含み、これらに限定されない状態または障害を治療する有用性を有する：再狭窄、血栓症、炎症、ヘパリン起因性血小板減少症、拡張型心筋症、鎌状赤血球症、アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、血管炎症、不安定狭心症、急性冠症候群、アレルギー、喘息、関節リウマチ、非ホジキンリンパ腫などのＢ細胞媒介疾患、抗リン脂質症候群、ループス、乾癬、多発性硬化症、末期腎疾患、溶血性貧血、免疫性血小板減少性紫斑病、および慢性リンパ性白血病。それゆえ、１つの実施態様では、典型的には医薬組成物の形態にある式（Ｉ）の化合物の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む方法が開示される。
【００３９】
心血管疾患と関連する状態は、急性冠症候群、心筋梗塞、不安定狭心症、不応性狭心症、血栓溶解療法後または冠動脈形成術後に生じる冠動脈内血栓性閉塞、血栓媒介性脳血管症候群、塞栓性脳卒中、血栓性脳卒中、一過性脳虚血発作、静脈血栓症、深部静脈血栓症、肺塞栓症、凝固障害、播種性血管内凝固症候群、血栓性血小板減少性紫斑病、閉塞性血栓血管炎、ヘパリン起因性血小板減少症と関連する血栓性疾患、体外循環と関連する血栓性合併症、心臓もしくは他の血管内カテーテル挿入、大動脈内バルーンポンプ、冠動脈ステントまたは心臓弁などの器具使用と関連する血栓性合併症、および人工器官を装着する必要がある状態からなる群から選択される。
【００４０】
本発明は、血液サンプルのｓｙｋ活性を阻害する方法であって、該サンプルを本発明の化合物と接触させることを含む方法も提供する。
【００４１】
本発明はさらに、精製された形態にある化合物のみならず、化学中間体を提供する。
【００４２】
本発明のこれらの態様および他の態様、目的、特徴および利点は、下記の詳細な記載および図面を参照することによって明らかになるであろう。この目的を達成するために、特定の背景情報、製造方法、化合物および／または組成物をより詳細に記載する様々な参照が本明細書で明記され、そのそれぞれは全体として参照することによって本明細書に援用される。
【図面の簡単な説明】
【００４３】
【図１】図１は、Ｓｙｋがいかにして細胞生物学および多数の疾患においてＦｃ受容体媒介シグナル伝達の重要なメディエーターとしての機能を果たすのかを示す。
【００４４】
【図２−１】図２は、動脈性血小板生物学において重要なメディエーターとしての機能を果たし、動脈血栓症を治療するための選択的ターゲットであるＳｙｋの遺伝子ターゲティングがいかにして機能するかを示す。
【００４５】
【図２−２】図２は、動脈性血小板生物学において重要なメディエーターとしての機能を果たし、動脈血栓症を治療するための選択的ターゲットであるＳｙｋの遺伝子ターゲティングがいかにして機能するかを示す。
【００４６】
【図３】図３は、本発明の化合物の一般的合成方法を示す。
【００４７】
【図４−１】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００４８】
【図４−２】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００４９】
【図４−３】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００５０】
【図４−４】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００５１】
【図４−５】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００５２】
【図４−６】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００５３】
【図４−７】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００５４】
【図４−８】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００５５】
【図４−９】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００５６】
【図４−１０】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００５７】
【図４−１１】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００５８】
【図４−１２】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００５９】
【図４−１３】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００６０】
【図４−１４】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００６１】
【図４−１５】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００６２】
【図４−１６】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００６３】
【図４−１７】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００６４】
【図４−１８】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００６５】
【図４−１９】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００６６】
【図４−２０】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００６７】
【図４−２１】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００６８】
【図４−２２】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００６９】
【図４−２３】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００７０】
【図４−２４】図４は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第１表を提供する。
【００７１】
【図５−１】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００７２】
【図５−２】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００７３】
【図５−３】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００７４】
【図５−４】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００７５】
【図５−５】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００７６】
【図５−６】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００７７】
【図５−７】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００７８】
【図５−８】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００７９】
【図５−９】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００８０】
【図５−１０】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００８１】
【図５−１１】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００８２】
【図５−１２】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００８３】
【図５−１３】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００８４】
【図５−１４】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００８５】
【図５−１５】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００８６】
【図５−１６】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００８７】
【図５−１７】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００８８】
【図５−１８】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００８９】
【図５−１９】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００９０】
【図５−２０】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００９１】
【図５−２１】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００９２】
【図５−２２】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００９３】
【図５−２３】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００９４】
【図５−２４】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００９５】
【図５−２５】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００９６】
【図５−２６】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００９７】
【図５−２７】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００９８】
【図５−２８】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【００９９】
【図５−２９】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１００】
【図５−３０】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１０１】
【図５−３１】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１０２】
【図５−３２】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１０３】
【図５−３３】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１０４】
【図５−３４】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１０５】
【図５−３５】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１０６】
【図５−３６】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１０７】
【図５−３７】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１０８】
【図５−３８】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１０９】
【図５−３９】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１１０】
【図５−４０】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１１１】
【図５−４１】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１１２】
【図５−４２】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１１３】
【図５−４３】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１１４】
【図５−４４】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１１５】
【図５−４５】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１１６】
【図５−４６】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１１７】
【図５−４７】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１１８】
【図５−４８】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１１９】
【図５−４９】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１２０】
【図５−５０】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１２１】
【図５−５１】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１２２】
【図５−５２】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１２３】
【図５−５３】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１２４】
【図５−５４】図５は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第２表を提供する。
【０１２５】
【図６−１】図６は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第３表を提供する。
【０１２６】
【図６−２】図６は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第３表を提供する。
【０１２７】
【図６−３】図６は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第３表を提供する。
【０１２８】
【図６−４】図６は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第３表を提供する。
【０１２９】
【図６−５】図６は、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第３表を提供する。
【０１３０】
【図７Ａ−１】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１３１】
【図７Ａ−２】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１３２】
【図７Ａ−３】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１３３】
【図７Ａ−４】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１３４】
【図７Ａ−５】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１３５】
【図７Ａ−６】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１３６】
【図７Ａ−７】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１３７】
【図７Ａ−８】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１３８】
【図７Ａ−９】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１３９】
【図７Ａ−１０】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１４０】
【図７Ａ−１１】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１４１】
【図７Ａ−１２】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１４２】
【図７Ａ−１３】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１４３】
【図７Ａ−１４】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１４４】
【図７Ａ−１５】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１４５】
【図７Ａ−１６】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１４６】
【図７Ａ−１７】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１４７】
【図７Ａ−１８】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１４８】
【図７Ａ−１９】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１４９】
【図７Ａ−２０】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１５０】
【図７Ａ−２１】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１５１】
【図７Ｂ−１】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１５２】
【図７Ｂ−２】図７ＡおよびＢは、本発明の化合物およびｓｙｋ  ＩＣ５０を図示する第４Ａ表および第４Ｂ表を提供する。
【０１５３】
【図８−１】図８は、精製キナーゼアッセイにおいてＳｙｋを選択的に阻害するために同定された一連の化合物を示す。図８Ａ）Ｓｙｋ特異的系列（Ｐ４５９−７２およびＰ５０５−１５）およびマルチキナーゼ系列（実施例１００ｂ）からの化合物を３００ｎＭでミリポア製の精製キナーゼパネル（２７０種のキナーゼを１０μＭ  ＡＴＰで検査した）に対してスクリーニングし、効力およびＳｙｋに対する選択性を決定した。データは、下部に定義したヒートマップとして表している。図８Ｂ）３種の化合物のいずれかによって＞８０％阻害を有した精製キナーゼのサブセット。Ｐ４５９−７２はＳｙｋおよびＭＬＫ１のみを阻害した。Ｐ５０５−１５は５０ｎＭ（そのＳｙｋ  ＩＣ５０より〜１０ｘ大きい）でＳｙｋのみを阻害した。実施例１００ｂは、Ｓｙｋ、ＪＡＫ２およびＪＡＫ３を含む多数のキナーゼを阻害した。ヒートマップの左の各化合物について、Ｓｙｋ阻害のＩＣ５０を報告している。各パネルのヒートマップ内にパーセントキナーゼ阻害を示している。
【０１５４】
【図８−２】図８は、精製キナーゼアッセイにおいてＳｙｋを選択的に阻害するために同定された一連の化合物を示す。図８Ａ）Ｓｙｋ特異的系列（Ｐ４５９−７２およびＰ５０５−１５）およびマルチキナーゼ系列（実施例１００ｂ）からの化合物を３００ｎＭでミリポア製の精製キナーゼパネル（２７０種のキナーゼを１０μＭ  ＡＴＰで検査した）に対してスクリーニングし、効力およびＳｙｋに対する選択性を決定した。データは、下部に定義したヒートマップとして表している。図８Ｂ）３種の化合物のいずれかによって＞８０％阻害を有した精製キナーゼのサブセット。Ｐ４５９−７２はＳｙｋおよびＭＬＫ１のみを阻害した。Ｐ５０５−１５は５０ｎＭ（そのＳｙｋ  ＩＣ５０より〜１０ｘ大きい）でＳｙｋのみを阻害した。実施例１００ｂは、Ｓｙｋ、ＪＡＫ２およびＪＡＫ３を含む多数のキナーゼを阻害した。ヒートマップの左の各化合物について、Ｓｙｋ阻害のＩＣ５０を報告している。各パネルのヒートマップ内にパーセントキナーゼ阻害を示している。
【０１５５】
【図８−３】図８は、精製キナーゼアッセイにおいてＳｙｋを選択的に阻害するために同定された一連の化合物を示す。図８Ａ）Ｓｙｋ特異的系列（Ｐ４５９−７２およびＰ５０５−１５）およびマルチキナーゼ系列（実施例１００ｂ）からの化合物を３００ｎＭでミリポア製の精製キナーゼパネル（２７０種のキナーゼを１０μＭ  ＡＴＰで検査した）に対してスクリーニングし、効力およびＳｙｋに対する選択性を決定した。データは、下部に定義したヒートマップとして表している。図８Ｂ）３種の化合物のいずれかによって＞８０％阻害を有した精製キナーゼのサブセット。Ｐ４５９−７２はＳｙｋおよびＭＬＫ１のみを阻害した。Ｐ５０５−１５は５０ｎＭ（そのＳｙｋ  ＩＣ５０より〜１０ｘ大きい）でＳｙｋのみを阻害した。実施例１００ｂは、Ｓｙｋ、ＪＡＫ２およびＪＡＫ３を含む多数のキナーゼを阻害した。ヒートマップの左の各化合物について、Ｓｙｋ阻害のＩＣ５０を報告している。各パネルのヒートマップ内にパーセントキナーゼ阻害を示している。
【０１５６】
【図９−１】図９は、非ホジキンリンパ腫細胞株におけるＳｙｋの選択的阻害を示す。示された濃度のＳｙｋ特異的阻害剤であるＰ４５９−７２およびＰ５０５−１５（図９Ａおよび図９Ｂ）または二重Ｓｙｋ／ＪＡＫ阻害剤である実施例１００ｂ（図９Ｃ）の存在下、Ｂ細胞を抗ＢＣＲ抗体で刺激した。次いで、全細胞溶解物のウェスタンブロット分析を行い、Ｓｙｋキナーゼ活性（ｐＢＬＮＫ  Ｙ８４および全ＢＬＮＫ；上２つのゲル）ならびにＳｒｃキナーゼ活性（ｐＳｙｋ  Ｙ３５２および全Ｓｙｋ；下２つのゲル）を評価した。実験はそれぞれ２〜３回行い、棒グラフはｐＢＬＮＫ  Ｙ８４の平均値±標準偏差を表す。Ｓｙｋキナーゼ阻害のＩＣ５０の計算値を該グラフの上に示している。
【０１５７】
【図９−２】図９は、非ホジキンリンパ腫細胞株におけるＳｙｋの選択的阻害を示す。示された濃度のＳｙｋ特異的阻害剤であるＰ４５９−７２およびＰ５０５−１５（図９Ａおよび図９Ｂ）または二重Ｓｙｋ／ＪＡＫ阻害剤である実施例１００ｂ（図９Ｃ）の存在下、Ｂ細胞を抗ＢＣＲ抗体で刺激した。次いで、全細胞溶解物のウェスタンブロット分析を行い、Ｓｙｋキナーゼ活性（ｐＢＬＮＫ  Ｙ８４および全ＢＬＮＫ；上２つのゲル）ならびにＳｒｃキナーゼ活性（ｐＳｙｋ  Ｙ３５２および全Ｓｙｋ；下２つのゲル）を評価した。実験はそれぞれ２〜３回行い、棒グラフはｐＢＬＮＫ  Ｙ８４の平均値±標準偏差を表す。Ｓｙｋキナーゼ阻害のＩＣ５０の計算値を該グラフの上に示している。
【０１５８】
【図９−３】図９は、非ホジキンリンパ腫細胞株におけるＳｙｋの選択的阻害を示す。示された濃度のＳｙｋ特異的阻害剤であるＰ４５９−７２およびＰ５０５−１５（図９Ａおよび図９Ｂ）または二重Ｓｙｋ／ＪＡＫ阻害剤である実施例１００ｂ（図９Ｃ）の存在下、Ｂ細胞を抗ＢＣＲ抗体で刺激した。次いで、全細胞溶解物のウェスタンブロット分析を行い、Ｓｙｋキナーゼ活性（ｐＢＬＮＫ  Ｙ８４および全ＢＬＮＫ；上２つのゲル）ならびにＳｒｃキナーゼ活性（ｐＳｙｋ  Ｙ３５２および全Ｓｙｋ；下２つのゲル）を評価した。実験はそれぞれ２〜３回行い、棒グラフはｐＢＬＮＫ  Ｙ８４の平均値±標準偏差を表す。Ｓｙｋキナーゼ阻害のＩＣ５０の計算値を該グラフの上に示している。
【０１５９】
【図１０−１】図１０は、ＮＨＬ細胞株におけるＳｙｋ特異的阻害と二重Ｓｙｋ／ＪＡＫ阻害の比較を提供する。示された様々な濃度の各阻害剤の存在下、Ｂ細胞を抗ＢＣＲ（図１０Ａ）、またはＩＬ−４（図１０Ｂ）で１５分間刺激した。次いで、リン酸フローサイトメトリーによって、細胞のシグナル伝達経路の阻害について評価した。図１０Ａ）棒グラフ（平均値±標準偏差、ｎ＝３）は、様々な処置条件下でのＢＣＲ刺激後のＳｒｃ活性（ｐＳｙｋ  Ｙ３５２  ＭＦＩ）およびＳｙｋ活性（ｐＥＲＫ  Ｙ２０４  ＭＦＩ）を表す。図１０Ｂ）棒グラフは、示された様々な濃度の各阻害剤の存在下、ＩＬ−４で刺激後のｐＳＴＡＴ−６  Ｙ６４１  ＭＦＩ（平均値±標準偏差、ｎ＝３）を示す。
【０１６０】
【図１０−２】図１０は、ＮＨＬ細胞株におけるＳｙｋ特異的阻害と二重Ｓｙｋ／ＪＡＫ阻害の比較を提供する。示された様々な濃度の各阻害剤の存在下、Ｂ細胞を抗ＢＣＲ（図１０Ａ）、またはＩＬ−４（図１０Ｂ）で１５分間刺激した。次いで、リン酸フローサイトメトリーによって、細胞のシグナル伝達経路の阻害について評価した。図１０Ａ）棒グラフ（平均値±標準偏差、ｎ＝３）は、様々な処置条件下でのＢＣＲ刺激後のＳｒｃ活性（ｐＳｙｋ  Ｙ３５２  ＭＦＩ）およびＳｙｋ活性（ｐＥＲＫ  Ｙ２０４  ＭＦＩ）を表す。図１０Ｂ）棒グラフは、示された様々な濃度の各阻害剤の存在下、ＩＬ−４で刺激後のｐＳＴＡＴ−６  Ｙ６４１  ＭＦＩ（平均値±標準偏差、ｎ＝３）を示す。
【０１６１】
【図１１−１】図１１は、Ｓｙｋ特異的阻害剤がいかにしてＮＨＬ細胞株の増殖および生存を中断し、ＮＨＬ細胞株においてアポトーシスを誘導するのかを示す。Ｓｙｋ依存性「ＢＣＲ型」およびＳｙｋ非依存性「非ＢＣＲ型」ＮＨＬ細胞株は以前に記載されている（Polo, Juszczynski et al. Proc Natl Acad Sci U S A 104(9): 3207-12 (2007）。図１１Ａ）細胞を１および３μＭのＳｙｋ特異的阻害剤Ｐ５０５−１５で７２時間処置した。活性カスパーゼ３のＦＡＣＳ分析によってアポトーシスを決定した；データはヒストグラムとして表されている。図１１Ｂ）Ｓｙｋ特異的（Ｐ４５９−７２およびＰ５０５−１５）阻害対二重Ｓｙｋ／ＪＡＫ（実施例１００ｂ）阻害に対する感受性について、さらなる細胞株を検査した。棒グラフは、各条件後のカスパーゼ３陽性細胞のパーセントの平均値±標準偏差（ｎ＝３）を表す。
【０１６２】
【図１１−２】図１１は、Ｓｙｋ特異的阻害剤がいかにしてＮＨＬ細胞株の増殖および生存を中断し、ＮＨＬ細胞株においてアポトーシスを誘導するのかを示す。Ｓｙｋ依存性「ＢＣＲ型」およびＳｙｋ非依存性「非ＢＣＲ型」ＮＨＬ細胞株は以前に記載されている（Polo, Juszczynski et al. Proc Natl Acad Sci U S A 104(9): 3207-12 (2007）。図１１Ａ）細胞を１および３μＭのＳｙｋ特異的阻害剤Ｐ５０５−１５で７２時間処置した。活性カスパーゼ３のＦＡＣＳ分析によってアポトーシスを決定した；データはヒストグラムとして表されている。図１１Ｂ）Ｓｙｋ特異的（Ｐ４５９−７２およびＰ５０５−１５）阻害対二重Ｓｙｋ／ＪＡＫ（実施例１００ｂ）阻害に対する感受性について、さらなる細胞株を検査した。棒グラフは、各条件後のカスパーゼ３陽性細胞のパーセントの平均値±標準偏差（ｎ＝３）を表す。
【０１６３】
【図１１−３】図１１は、Ｓｙｋ特異的阻害剤がいかにしてＮＨＬ細胞株の増殖および生存を中断し、ＮＨＬ細胞株においてアポトーシスを誘導するのかを示す。Ｓｙｋ依存性「ＢＣＲ型」およびＳｙｋ非依存性「非ＢＣＲ型」ＮＨＬ細胞株は以前に記載されている（Polo, Juszczynski et al. Proc Natl Acad Sci U S A 104(9): 3207-12 (2007）。図１１Ａ）細胞を１および３μＭのＳｙｋ特異的阻害剤Ｐ５０５−１５で７２時間処置した。活性カスパーゼ３のＦＡＣＳ分析によってアポトーシスを決定した；データはヒストグラムとして表されている。図１１Ｂ）Ｓｙｋ特異的（Ｐ４５９−７２およびＰ５０５−１５）阻害対二重Ｓｙｋ／ＪＡＫ（実施例１００ｂ）阻害に対する感受性について、さらなる細胞株を検査した。棒グラフは、各条件後のカスパーゼ３陽性細胞のパーセントの平均値±標準偏差（ｎ＝３）を表す。
【発明を実施するための形態】
【０１６４】
発明の詳細な記載
本明細書で用いられている下記の用語は、特に示さない限り、下記の意味を有する：
【０１６５】
１．略語および定義
特に定義しない限り、本明細書で用いられている略語は通常の意味を有する。下記の略語が用いられる：ＡｃＯＨ＝酢酸、ＡＩＢＮ＝アゾビスイソブチロニトリル（アゾビスイソブチロニトリルとも記載される）、ａｑ．＝水溶液、Ｂｏｃ＝ｔ−ブチルカルボキシ、Ｂｚ−ベンジル、ＢＯＰ＝ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート、ＢＰＯ＝過酸化ベンゾイル、ｎＢｕＯＨ＝ｎ−ブタノール、ＣＢｒ４＝テトラブロモメタン、ｍＣＰＢＡ＝ｍ−クロロペルオキシ安息香酸、ＣＨ２Ｃｌ２またはＤＣＭ＝ジクロロメタン、Ｃｓ２ＣＯ３＝炭酸セシウム、ＣｕＣｌ２＝塩化銅；ＤＩＢＡＬ＝水素化ジイソブチルアルミニウム、ＤＩＥＡ＝ヒューニッヒ塩基またはジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＥ＝ジメチルエーテル、ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド、ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド、ＤＰＰＡ＝ジフェニルホスホリルアジド、Ｅｔ３Ｎ＝トリエチルアミン、ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル、ｇ＝グラム、ＨＡＴＵ＝２−（１Ｈ  ７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート、Ｈ２＝水素；Ｈ２Ｏ＝水；ＨＢｒ＝臭化水素；ＨＣｌ＝塩化水素、ＨＩＶ＝ヒト免疫不全ウイルス、ＨＰＬＣ＝高圧液体クロマトグラフィー、ｈ＝時間、ＩｇＥ＝免疫グロブリンＥ、ＩＣ５０＝インビトロで酵素の５０％阻害に必要な阻害剤の濃度、ＩＰＡ＝イソプロピルアルコール、ｋｇ＝キログラム、ＫＣＮ＝シアン化カリウム、ＫＯＨ＝水酸化カリウム、Ｋ２ＰＯ４＝リン酸カリウム、ＬＤＡ＝リチウムジイソプロピルアミン、ＬｉＡｌＨ４＝水素化アルミニウムリチウム＝  ＬｉＯＨ：水酸化リチウム；ＭｅＣＮ＝アセトニトリル；ＭＳ＝質量分析、ｍ／ｚ＝質量対電荷比、ＭＨｚ＝メガヘルツ、ＭｅＯＨ＝メタノール、μＭ＝マイクロモル、μＬ＝マイクロリットル、ｍｇ＝ミリグラム、ｍｍ＝ミリメートル、ｍＭ＝ミリモル、ｍｍｏｌ＝ミリモル、ｍＬ＝ミリリットル、ｍＯＤ／ｍｉｎ＝１分あたりのミリ光学濃度単位、ｍｉｎ＝分、Ｍ＝モル、Ｎａ２ＣＯ３＝炭酸ナトリウム、ｎｇ＝ナノグラム、ＮａＨＣＯ３＝炭酸水素ナトリウム；ＮａＮＯ２＝亜硝酸ナトリウム；ＮａＯＨ＝水酸化ナトリウム；Ｎａ２Ｓ２Ｏ３＝硫酸水素ナトリウム；Ｎａ２ＳＯ４＝硫酸ナトリウム；ＮＢＳ＝Ｎ−ブロモスクシンアミド；ＮＨ４Ｃｌ＝塩化アンモニウム；ＮＨ４ＯＡｃ＝酢酸アンモニウム；ＮａＳＭｅ＝ナトリウムメチルチオレート、ＮＢＳ＝Ｎ−ブロモスクシンアミド、ｎ−ＢｕＬｉ＝ｎ−ブチルリチウム、ｎｍ＝ナノメートル、ｎＭ＝ナノモル、Ｎ＝ノルマル、ＮＭＰ＝Ｎ−メチルピロリジン、ＮＭＲ＝核磁気共鳴、Ｐｄ／Ｃ＝パラジウム炭素、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４＝テトラキス−（トリフェニル−ホスフィン）−パラジウム、ｐＭ＝ピコモル、Ｐｉｎ＝ピナコラト、ＰＥＧ＝ポリエチレングリコール、ＰＰｈ３またはＰｈ３Ｐ＝トリフェニルホスフィン、ＲＬＶ＝ローシャー白血病ウイルス、Ｒａ−Ｎｉ＝レイニーニッケル、ＳＯＣｌ２＝塩化チオニル、ＲＴ＝室温、ＴＥＡ＝トリエチルアミン、ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン、ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸、ＴＬＣ＝薄層クロマトグラフィー、ＴＭＳ＝トリメチルシ���ル、Ｔｆ＝トリフルオロメチルスルホニルおよびＴＳＣ＝クエン酸三ナトリウム。
【０１６６】
ここで、文脈において明確に示さない限り、本明細書および添付の特許請求の範囲で用いられている単数形「a」、「an」、および「the」は、複数形の照応を含むことに留意すべきである。
【０１６７】
「アルキル」は、特に示さない限り、単独でまたは別の置換基の一部として、示された数の炭素原子を有する直鎖状または分枝鎖状の完全飽和脂肪族炭化水素ラジカルを意味する。例えば、「Ｃ１−８アルキル」は、親アルカンの単一の炭素原子から１個の水素原子を除去することによって得られる、１〜８個の炭素原子を含む直鎖状または分枝鎖状の炭化水素ラジカルを指す。語句「非置換アルキル」は、完全飽和脂肪族炭化水素ラジカル以外の基を含まないアルキル基を指す。それゆえ、該語句はメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、およびドデシルなどの直鎖状アルキル基を含む。該語句は、直鎖状アルキル基の分枝鎖状異性体、例えばイソプロピル、ｔ−ブチル、イソブチル、およびｓｅｃ−ブチルなども含む。代表的なアルキル基は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２個の炭素原子を有する直鎖状および分枝鎖状アルキル基を含む。さらなる代表的なアルキル基は、１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有する直鎖状および分枝鎖状アルキル基を含む。
【０１６８】
「アルケニル」は、単独でまたは別の置換基の一部として、示された数の炭素原子を有する一不飽和または多不飽和であってよい直鎖または分枝鎖を指す。例えば、「Ｃ２−Ｃ８アルケニル」は、親アルカンの単一の炭素原子から１個の水素原子を除去することによって得られる２、３、４、５、６、７または８個の原子を有するアルケニルラジカルを意味する。例として、ビニル、２−プロペニルすなわち−ＣＨ＝Ｃ（Ｈ）（ＣＨ３）、−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）＝Ｃ（Ｈ）２、−Ｃ（ＣＨ３）＝Ｃ（Ｈ）（ＣＨ３）、−Ｃ（ＣＨ２ＣＨ３）＝ＣＨ２、ブタジエニル、例えば２−（ブタジエニル）、ペンタジエニル、例えば２，４−ペンタジエニルおよび３−（１，４−ペンタジエニル）、ならびにヘキサジエニル、特に、高級同族体ならびにその立体異性体を含み、これらに限定されない。「置換」アルケニル基は、非炭素または非水素原子が別の炭素に二重結合した炭素に結合したアルケニル基、および非炭素または非水素原子の１つが別の炭素との二重結合に関与していない炭素に結合したアルケニル基を含む。不飽和の各部位は、二重結合についてのシスまたはトランス立体配置であってよい。
【０１６９】
用語「アルキニル」は、単独でまたは別の置換基の一部として、示された数の炭素原子を有する一不飽和または多不飽和であってよい直鎖状または分枝鎖状炭化水素ラジカルを意味する。例えば、「Ｃ２−Ｃ８アルキニル」は、親アルカンの単一の炭素原子から１個の水素原子を除去することによって得られる２〜８個の炭素原子を有するアルキニルラジカルを意味する。「非置換アルキニル」は、２個の炭素原子の間に少なくとも１つの三重結合が存在する以外は、例えば上記で定義した非置換アルキル基に関して記載されている直鎖状および分枝鎖状の基のような基を指す。例として、エチニル、例えば−Ｃ≡Ｃ（Ｈ）、１−プロピニル、例えば−Ｃ≡Ｃ（ＣＨ３）、−Ｃ≡Ｃ（ＣＨ２ＣＨ３）、−Ｃ（Ｈ２）Ｃ≡Ｃ（Ｈ）、−Ｃ（Ｈ）２Ｃ≡Ｃ（ＣＨ３）、および−Ｃ（Ｈ）２Ｃ≡Ｃ（ＣＨ２ＣＨ３）、特に、高級同族体ならびにその異性体を含み、これらに限定されない。「置換」アルキニル基は、非炭素または非水素原子が別の炭素に三重結合した炭素に結合したアルキニル基、および非炭素または非水素原子が別の炭素との三重結合に関与していない炭素に結合したアルキニル基を含む。
【０１７０】
「アルキレン」は、単独でまたは別の置換基の一部として、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−などのアルカンに由来する二価のラジカルを意味する。典型的には、アルキレン基は、１、２、３、４、５、６、７または８個の炭素原子を有し、親アルキルの単一炭素原子から１個の水素原子を除去することによって得られるであろう。
【０１７１】
「シクロアルキル」または「炭素環」は、特に示さない限り、単独でまたは他の用語と組み合わせて、全ての環原子が炭素である「アルキル」、「アルケニル」および「アルキニル」の環式バージョンを表す。「シクロアルキル」または「炭素環」は、単環式または多環式基を指す。本明細書で用語「多環式」は、シクロアルキル置換基に関連して用いられる場合、縮合および非縮合アルキル環式構造を指す。「シクロアルキル」または「炭素環」は、架橋環またはスピロ環を形成してよい。シクロアルキル基は、１つ以上の二重または三重結合を有してよい。用語「シクロアルケニル」は、環頂点の間に少なくとも１つのアルケニル不飽和部位を有するシクロアルキル基を指す。用語「シクロアルキニル」は、環頂点の間に少なくとも１つのアルキニル不飽和部位を有するシクロアルキル基を指す。Ｃ３−８シクロアルキルＣ３−８アルキレン−など、「シクロアルキル」が「アルキル」と組み合わせて用いられる場合、シクロアルキル部分は記載した数の炭素原子（例えば、３〜８個の炭素原子）を有し、アルキレン部分は１〜８個の炭素原子を有することを意味する。典型的なシクロアルキル置換基は、３〜８個の環原子を有する。シクロアルキルの例は、シクロペンチル、シクロヘキシル、１−シクロヘキセニル、３−シクロヘキセニル、シクロヘプチルなどを含む。
【０１７２】
「アリール」は、単独でまたは別の置換基の一部として、単環または縮合もしくは共有結合した多環（最大３環）であってよい６〜１４個の炭素原子を含む多不飽和芳香族炭化水素基を指す。それゆえ、該語句は、例としてフェニル、ビフェニル、アントラセニル、ナフチルなどの基を含み、これらに限定されない。非置換アリール基の非限定的例は、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチルおよび４−ビフェニルを含む。「置換アリール基」は、例えば、−ＣＨ２ＯＨ（１個の炭素原子および炭素原子と交換した１個のヘテロ原子）ならびに−ＣＨ２ＳＨを含む。用語「ヘテロアルキレン」は、単独でまたは別の置換基の一部として、ヘテロアルキルに由来する、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２ＣＨ２−および−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−などの二価のラジカルを意味する。ヘテロアルキレン基については、ヘテロ原子は鎖末端のいずれかまたは両方を占有していてもよい（例えば、アルキレンオキシ、アルキレンジオキシ、アルキレンアミノ、およびアルキレンジアミノなど）。さらに、アルキレンおよびヘテロアルキレン結合基については、該結合基の配向は意味しない。
【０１７３】
用語「ヘテロ環」、「ヘテロシクリル」または「ヘテロ環式」は、少なくとも１つのヘテロ原子を含む飽和または不飽和非芳香族環式基を指す。本明細書で用いられている用語「ヘテロ原子」は、酸素（Ｏ）、窒素（Ｎ）、硫黄（Ｓ）およびケイ素（Ｓｉ）を含むことを意図する。各ヘテロ環は、いずれかの利用可能な環炭素またはヘテロ原子で結合していてよい。各ヘテロ環は１つ以上の環を有してよい。複数の環が存在する場合、それらは縮合または共有結合していてよい。各ヘテロ環は典型的には、独立して選択される１、２、３、４または５個のヘテロ原子を含む。好ましくは、これらの基は１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個の炭素原子、０、１、２、３、４または５個の窒素原子、０、１または２個の硫黄原子および０、１または２個の酸素原子を含む。より好ましくは、これらの基は１、２または３個の窒素原子、０〜１個の硫黄原子および０〜１個の酸素原子を含む。ヘテロ環基の非限定的例は、モルホリン−３−オン、ピペラジン−２−オン、ピペラジン−１−オキシド、ピリジン−２−オン、ピペリジン、モルホリン、ピペラジン、イソキサゾリン、ピラゾリン、イミダゾリン、ピラゾール−５−オン、ピロリジン−２，５−ジオン、イミダゾリジン−２，４−ジオン、ピロリジン、テトラヒドロキノリニル、デカヒドロキノリニル、テトラヒドロベンゾオキサゼピニル ジヒドロジベンゾオキセピンなどを含む。
【０１７４】
「ヘテロアリール」は、Ｎ、Ｏ、およびＳから選択される１〜５個のヘテロ原子を含む環式または多環式芳香族ラジカルを指し、該窒素および硫黄原子は任意に酸化されており、該窒素原子は任意に四級化されている。ヘテロアリール基は、ヘテロ原子を通じて、または炭素原子を通じて分子の残部に結合していてよく、５〜１０個の炭素原子を含んでいてよい。ヘテロアリール基の非限定的例は、１−ピロリル、２−ピロリル、３−ピロリル、１−ピラゾリル、３−ピラゾリル、２−イミダゾリル、４−イミダゾリル、ピラジニル、２−オキサゾリル、４−オキサゾリル、５−オキサゾリル、３−イソオキサゾリル、４−イソオキサゾリル、５−イソオキサゾリル、２−チアゾリル、４−チアゾリル、５−チアゾリル、２−フリル、３−フリル、２−チエニル、３−チエニル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、２−ピリミジルおよび４−ピリミジルを含む。特に明記しない限り、上記のアリールおよびヘテロアリール環系のそれぞれについての置換基は、本明細書で記載する許容される置換基の群から選択される。「置換ヘテロアリール」は、１つ以上の環員が、例えば置換アルキル基および置換アリール基に関して上で記載したような非水素原子に結合した、上記で定義した非置換ヘテロアリール基を指す。代表的な置換基は、直鎖状および分枝鎖状アルキル基−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−ＣＨ２ＯＨ、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＯＣ２Ｈ５、−ＯＣＦ３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２ＣＨ３、−ＣＯＮＨ２、−ＮＨ２、−Ｎ（ＣＨ３）２、−ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−ＮＨＣＯＣＨ３、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ３、−ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＯ２ＮＨ２およびハロを含む。
【０１７５】
「二環式ヘテロアリール」は、Ｎ、Ｏ、およびＳから選択される１〜５個のヘテロ原子を含む二環式芳香族ラジカルを指し、該窒素および硫黄原子は任意に酸化されており、該窒素原子は任意に四級化されている。二環式ヘテロアリール基は、ヘテロ原子を通じて、または炭素原子を通じて分子の残部に結合していてよく、５〜１０個の炭素原子を含んでいてよい。二環式ヘテロアリール基の非限定的例は、５−ベンゾチアゾリル、プリニル、２−ベンズイミダゾリル、ベンゾピラゾリル、５−インドリル、アザインドール、１−イソキノリル、５−イソキノリル、２−キノキサリニル、５−キノキサリニル、３−キノリルおよび６−キノリルを含む。特に明記しない限り、上記のアリールおよびヘテロアリール環系のそれぞれについての置換基は、本明細書で記載する許容される置換基の群から選択される。
【０１７６】
原子の数を示している上記の実施態様のそれぞれにおいて、例えば「Ｃ１−８」は１つ少ない原子を有する全ての可能な実施態様を含むことを意図する。非限定的例は、Ｃ１−７、Ｃ２−８、Ｃ２−７、Ｃ３−８、およびＣ３−７などを含む。
【０１７７】
本明細書で用語（例えば、「アルキル」、「ヘテロアルキル」、「アリール」および「ヘテロアリール」）のそれぞれは、特に示さない限り、示されたラジカルの「非置換」および任意に「置換」形態の両方を含むことを意図する。特に示さない限り、典型的には、各ラジカルは０、１、２、３、４または５個の置換基で置換されている。各タイプのラジカルについての置換基の例は、下記で提供される。
【０１７８】
「置換（された）」は、炭素または水素への１つ以上の結合が非水素および非炭素原子「置換基」への結合によって交換された本明細書で定義した基を指し、ここで該置換基は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩなどのハロゲン原子；ヒドロキシル基、アルコキシ基、アリールオキシ、およびアシルオキシ基などの基内の酸素原子；チオール基、アルキルおよびアリールスルフィド基、スルホン基、スルホニル基、ならびにスルホキシド基などの基内の硫黄原子；アミノ、アルキルアミン、ジアルキルアミン、アリールアミン、アルキルアリールアミン、ジアリルアミン、アルコキシアミノ、ヒドロキシアミノ、アシルアミノ、スルホニルアミノ、Ｎ−オキシド、イミド、およびエナミンなどの基内の窒素原子；ならびに様々な他の基内の他のヘテロ原子などで、これらに限定されない。「置換基」は、炭素または水素原子への１つ以上の結合がヘテロ原子への高次結合（例えば、二重または三重結合）によって交換された基も含み、ここで該ヘテロ原子はオキソ、アシル、アミド、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、カルボキシル、およびエステル基における酸素；イミン、オキシム、ヒドラゾン、およびニトリルなどの基内の窒素などのヘテロ原子である。「置換基」はさらに、炭素または水素原子への１つ以上の結合がシクロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、およびヘテロアリール基への結合によって交換された基を含む。代表的な「置換基」は、特に、炭素または水素原子への１つ以上の結合がフルオロ、クロロ、またはブロモ基への１つ以上の結合によって交換された基を含む。別の代表的な「置換基」は、トリフルオロメチル基およびトリフルオロメチル基を含む他の基である。他の代表的な「置換基」は、炭素または水素原子への１つ以上の結合が酸素原子への結合によって交換された置換基を含み、置換アルキル基はヒドロキシル、アルコキシ、またはアリールオキシ基を含む。他の代表的な「置換基」は、アミンを有するアルキル基、もしくは置換もしくは非置換アルキルアミン、ジアルキルアミン、アリールアミン、（アルキル）（アリール）アミン、ジアリルアミン、ヘテロシクリルアミン、ジヘテロシクリルアミン、（アルキル）（ヘテロシクリル）アミン、または（アリール）（ヘテロシクリル）アミン基を含む。さらに他の代表的な「置換基」は、炭素または水素原子への１つ以上の結合がアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリル基への結合によって交換された置換基を含む。
【０１７９】
本明細書で定義する基は、当該技術分野で一般的に用いられている接頭語および／または接尾語を含んでよく、さらによく認識された置換基を作ってよい。例として、「アルキルアミノ」は、式−ＮＲａＲｂの基を指す。特に記載しない限り、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、ＲｄおよびＲｅを含む下記の基について：Ｒａ、およびＲｂはＨ、アルキル、アルコキシ、チオアルコキシ、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、もしくはヘテロシクリルから各々独立して選択され、またはＲａおよびＲｂはそれらが結合した原子と任意に一緒になって環式基を形成する。ＲａおよびＲｂが同一の窒素原子に結合している場合、それらは該窒素原子と組み合わさって５、６または７員環を形成しうる。例えば、−ＮＲａＲｂは１−ピロリジニルおよび４−モルホリニルを含むことを意図する。
【０１８０】
Ｒｃ、Ｒｄ、ＲｅおよびＲｆは本明細書で定義したアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリルまたはアルキレンアリールから各々独立して選択される。
【０１８１】
典型的には、特定のラジカルは０、１、２または３個の置換基を有し、２つ以下の置換基を有する基が本発明において好ましい。より好ましくは、ラジカルは非置換または一置換であろう。最も好ましくは、ラジカルは非置換であろう。
【０１８２】
アルキルおよびヘテロアルキルラジカル（ならびにアルキレン、アルケニル、ヘテロアルキレン、ヘテロアルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクリルと呼ばれる基）についての「置換基」は、下記から選択される様々な基であってよい：−ＯＲａ、＝Ｏ、＝ＮＲａ、＝Ｎ−ＯＲａ、−ＮＲａＲｂ、−ＳＲａ、ハロゲン、−ＳｉＲａＲｂＲｃ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒａ、−Ｃ（Ｏ）Ｒａ、−ＣＯ２Ｒａ、−ＣＯＮＲａＲｂ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）Ｒａ、−ＮＲａ−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ、−ＮＲａ−ＳＯ２ＮＲｂＲｃ、−ＮＲｂＣＯ２Ｒａ、−ＮＨ−Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＨ、−ＮＲａＣ（ＮＨ２）＝ＮＨ、−ＮＨ−Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＲａ、−Ｓ（Ｏ）Ｒａ、−ＳＯ２Ｒａ、−ＳＯ２ＮＲａＲｂ、−ＮＲｂＳＯ２Ｒ、−ＣＮおよび−ＮＯ２であって、０〜３個の範囲の置換基の数であり、０、１または２個の置換基を有する基が特に好ましい。
【０１８３】
いくつかの実施態様では、アルキルおよびヘテロアルキルラジカルについての「置換基」は下記から選択される：−ＯＲａ、＝Ｏ、−ＮＲａＲｂ、−ＳＲａ、ハロゲン、−ＳｉＲａＲｂＲｃ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒａ、−Ｃ（Ｏ）Ｒａ、−ＣＯ２Ｒａ、−ＣＯＮＲａＲｂ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）Ｒａ、−ＮＲｂＣＯ２Ｒａ、−ＮＲａ−ＳＯ２ＮＲｂＲｃ、−Ｓ（Ｏ）Ｒａ、−ＳＯ２Ｒａ、−ＳＯ２ＮＲａＲｂ、−ＮＲｃＳＯ２Ｒ、−ＣＮおよび−ＮＯ２であって、ここでＲａおよびＲｂは上記で定義した通りである。いくつかの実施態様では、置換基は下記から選択される：−ＯＲａ、＝Ｏ、−ＮＲａＲｂ、ハロゲン、−ＯＣ（Ｏ）Ｒａ、−ＣＯ２Ｒａ、−ＣＯＮＲａＲｂ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）Ｒａ、−ＮＲｂＣＯ２Ｒａ、−ＮＲａ−ＳＯ２ＮＲｂＲｃ、−ＳＯ２Ｒａ、−ＳＯ２ＮＲａＲｂ、−ＮＲ”ＳＯ２Ｒ、−ＣＮおよび−ＮＯ２。
【０１８４】
置換アルキルの例は：−（ＣＨ２）３ＮＨ２、−（ＣＨ２）３ＮＨ（ＣＨ３）、−（ＣＨ２）３ＮＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２Ｃ（＝ＣＨ２）ＣＨ２ＮＨ２、−ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨ２、−ＣＨ２Ｓ（＝Ｏ）２ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＣＨ２ＮＨ２、−ＣＯ２Ｈである。置換アルキルの置換基の例は：ＣＨ２ＯＨ、−ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＯＣ２Ｈ５、−ＯＣＦ３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ２、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２ＣＨ３、−ＣＯＮＨ２、−ＮＨ２、−Ｎ（ＣＨ３）２、−ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−ＮＨＣＯＣＨ３、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ３、−ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＳＯ２ＮＨ２、およびハロである。
【０１８５】
同様に、アリールおよびヘテロアリール基についての「置換基」は多様であり、下記から選択される：−ハロゲン、−ＯＲａ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒａ、−ＮＲａＲｂ、−ＳＲａ、−Ｒａ、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＣＯ２Ｒａ、−ＣＯＮＲａＲｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｒａ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）Ｒａ、−ＮＲｂＣ（Ｏ）２Ｒａ、−ＮＲａ−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ、−ＮＨ−Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＨ、−ＮＲａＣ（ＮＨ２）＝ＮＨ、−ＮＨ−Ｃ（ＮＨ２）＝ＮＲａ、−Ｓ（Ｏ）Ｒａ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒａ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲａＲｂ、−Ｎ３、−ＣＨ（Ｐｈ）２、パーフルオロＣ１−８アルコキシ、およびパーフルオロＣ１−８アルキルであって、０〜芳香族環系上の空の原子価の総数の範囲の数の置換基であり；ここでＲａ、ＲｂおよびＲｃは水素、Ｃ１−６アルキルおよびヘテロアルキル、非置換アリールおよびヘテロアリール、（非置換アリール）−Ｃ１−８アルキル、ならびに（非置換アリール）オキシ−Ｃ１−８アルキルから独立して選択される。
【０１８６】
アリールまたはヘテロアリール環の隣接する原子上の「置換基」の２つは、式−Ｔ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｑ−Ｕ−の置換基で任意に交換されていてよく、ここでＴおよびＵは独立して−ＮＨ−、−Ｏ−、−ＣＨ２−または単結合であり、ｑは０、１または２である。あるいは、アリールまたはヘテロアリール環の隣接する原子上の置換基の２つは、式−Ａ−（ＣＨ２）ｒ−Ｂ−の置換基で任意に交換されていてよく、ここでＡおよびＢは独立して−ＣＨ２−、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲａ−または単結合であり、ｒは１、２または３である。形成された新たな環の単結合の１つは、二重結合で任意に交換されていてよい。あるいは、アリールまたはヘテロアリール環の隣接する原子上の置換基の２つは、式−（ＣＨ２）ｓ−Ｘ−（ＣＨ２）ｔ−の置換基で任意に交換されていてよく、ここでｓおよびｔは独立して０〜３の整数であり、Ｘは−Ｏ−、−ＮＲａ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、または−Ｓ（Ｏ）２ＮＲａ−である。−ＮＲａ−および−Ｓ（Ｏ）２ＮＲａ−内の置換基Ｒａは、水素または非置換Ｃ１−６アルキルから選択される。それ以外は、Ｒ’は上記で定義した通りである。
【０１８７】
特に示さない限り、本明細書で明確に定義していない置換基の命名法は、官能基の末端部分を命名し、次いで結合点に向かって隣接する官能基を命名することによってなされる。例えば、置換基「アリールアルキルオキシカルボニル」は、（アリール）−（アルキル）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−基を指す。
【０１８８】
用語「アシル」は−Ｃ（＝Ｏ）Ｒｃ基を指し、ここでＲｃはアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクリルである。アシルは「アセチル」基−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ３を含む。
【０１８９】
「アシルアミノ−」は−ＮＲａＣ（＝Ｏ）Ｒｃ基を指し、ここでＲｃはアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクリルである。
【０１９０】
「アシルオキシ」は−ＯＣ（＝Ｏ）−Ｒｃを指し、ここでＲｃはアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリールまたはヘテロシクリルである。
【０１９１】
「アルコキシ」は−ＯＲｄを指し、ここでＲｄは本明細書で定義したアルキルである。アルコキシ基の代表例は、メトキシ、エトキシ、t−ブトキシ、およびトリフルオロメトキシなどを含む。
【０１９２】
「アルコキシアミノ」は−ＮＨＯＲｄ基を指し、ここでＲｄはアルキルである。
【０１９３】
「アルコキシカルボニル」は、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲｄを指し、ここでＲｄはアルキルである。代表的なアルコキシカルボニル基は、例えば、下記に示すものを含む。
【化２】
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有機化学および医薬品化学の分野の当業者であれば本明細書の開示と併せて理解できることであるが、これらのアルコキシカルボニル基はさらに置換されていてよい。
【０１９４】
「アルコキシカルボニルアミノ」は−ＮＲａＣ（＝Ｏ）ＯＲｄを指し、ここでＲｄはアルキルである。
【０１９５】
「アルコキシスルホニルアミノ」は−ＮＲａＳ（＝Ｏ）２−ＯＲｄ基を指し、ここでＲｄはアルキルである。
【０１９６】
「アルキルカルボニル」は−Ｃ（＝Ｏ）Ｒｃ基を指し、ここでＲｃはアルキルである。
【０１９７】
「アルキルカルボニルオキシ」は−ＯＣ（＝Ｏ）−Ｒｃを指し、ここでＲｃはアルキルである。
【０１９８】
「アルキルカルボニルアミノ」は−ＮＲａＣ（＝Ｏ）Ｒｃを指し、ここでＲｃはアルキルである。代表的なアルキルカルボニルアミノ基は、例えば、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ３、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ３、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨ（ＣＨ３）、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２、または−ＮＨＣ（＝Ｏ）（ＣＨ２）３ＯＨを含む。
【０１９９】
「アルキルスルファニル」、「アルキルチオ」、または「チオアルコキシ」はＳ−Ｒｄ基を指し、ここでＲｄはアルキルである。
【０２００】
「アルキルスルホニル」は−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒｅを指し、ここでＲｅはアルキルである。本発明の化合物に利用されるアルキルスルホニル基は典型的にはＣ１−６アルキルスルホニル基である。
【０２０１】
「アルキルスルホニルアミノ」は−ＮＲａＳ（＝Ｏ）２−Ｒｅを指し、ここでＲｅはアルキルである。
【０２０２】
「アルキニルオキシ」は−Ｏ−アルキニル基を指し、ここでアルキニルは本明細書で定義した通りである。アルキニルオキシは、例として、エチニルオキシ、およびプロピニルオキシなどを含む。
【０２０３】
「アミジノ」は、−Ｃ（＝ＮＲａ）ＮＲｂＲｃ基を指し、ここでＲｂおよびＲｃは独立して水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロアリール、ヘテロ環からなる群から選択され、ＲｂおよびＲｃはそれらに結合した窒素と任意に一緒になってヘテロ環または置換ヘテロ環基を形成する。Ｒａは水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロアリール、ヘテロ環、置換ヘテロ環、ニトロ、ニトロソ、ヒドロキシ、アルコキシ、シアノ、−Ｎ＝Ｎ−Ｎ−アルキル、−Ｎ（アルキル）ＳＯ２−アルキル、−Ｎ＝Ｎ＝Ｎ−アルキル、アシルおよび−ＳＯ２−アルキルからなる群から選択される。
【０２０４】
「アミノ」は、一価のラジカル−ＮＲａＲｂまたは二価のラジカル−ＮＲａ−を指す。用語「アルキルアミノ」は、−ＮＲａＲｂ基を指し、ここでＲａはアルキルであり、ＲｂはＨまたはアルキルである。用語「アリールアミノ」は−ＮＲａＲｂ基を指し、ここでＲａまたはＲｂの少なくとも１つはアリールである。用語「（アルキル）（アリール）アミノ」は−ＮＲａＲｂ基を指し、ここでＲａはアルキルであり、Ｒｂはアリールである。さらに、ジアルキルアミノ基について、該アルキル部分は同一または異なっていてよく、各々が結合している窒素原子と組み合わさって３〜７員環を形成してもよい。従って、−ＮＲａＲｂと表されている基は、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリニル、およびアゼチジニルなどを含むことを意図する。
【０２０５】
「アミノカルボニル」または「アミノアシル」は、アミド−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲａＲｂを指す。本明細書で用語「アルキルアミノカルボニル」は−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲａＲｂ基を指し、ここでＲａはアルキルであり、ＲｂはＨまたはアルキルである。本明細書で用語「アリールアミノカルボニル」は、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲａＲｂ基を指し、ここでＲａまたはＲｂはアリールである。代表的なアミノカルボニル基は、例えば下記で示すものを含む。有機化学および医薬品化学の分野の当業者であれば本明細書の開示と併せて理解できることであろうが、これらのアミノカルボニル基はさらに置換されていてよい。
【０２０６】
「アミノカルボニルアミノ」は−ＮＲａＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂ基を指し、ここでＲａは水素またはアルキルであり、ＲａおよびＲｂは独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロアリール、ヘテロ環からなる群から選択され、ＲａおよびＲｂはそれらに結合した窒素と任意に一緒になってヘテロ環または置換ヘテロ環基を形成する。
【０２０７】
「アミノスルホニル」は−Ｓ（Ｏ）２ＮＲａＲｂを指し、ここでＲは独立して水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、置換ヘテロ環からなる群から選択され、ＲａおよびＲｂはそれらに結合した窒素と任意に一緒になってヘテロ環または置換ヘテロ環基を形成し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環および置換ヘテロ環は本明細書で定義した通りである。
【０２０８】
「アミノスルホニルオキシ」は−Ｏ−ＳＯ２ＮＲａＲｂ基を指し、ここでＲａおよびＲｂは独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロアリールおよびヘテロ環からなる群から選択され；ＲａおよびＲｂはそれらに結合した窒素と任意に一緒になってヘテロ環または置換ヘテロ環基を形成する。
【０２０９】
「アミノスルホニルアミノ」は−ＮＲａ−ＳＯ２ＮＲｂＲｃ基を指し、ここでＲａは水素またはアルキルであり、ＲｂおよびＲｃは独立して水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、および置換ヘテロ環からなる群から選択され、ＲｂおよびＲｃはそれらに結合した窒素と任意に一緒になってヘテロ環または置換ヘテロ環基を形成し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環および置換ヘテロ環は本明細書で定義した通りである。
【０２１０】
「アミノチオカルボニル」は−Ｃ（Ｓ）ＮＲａＲｂ基を指し、ここでＲａおよびＲｂは独立して水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、および置換ヘテロ環からなる群から選択され、ＲａおよびＲｂはそれらに結合した窒素と任意に一緒になってヘテロ環または置換ヘテロ環基を形成し、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、ヘテロ環、および置換ヘテロ環は本明細書で定義した通りである。
【０２１１】
「アミノチオカルボニルアミノ」は−ＮＲａＣ（Ｓ）ＮＲａＲｂ基を指し、ここでＲａは水素またはアルキルであり、ＲｂおよびＲｃはそれらに結合した窒素と任意に一緒になってヘテロ環または置換ヘテロ環基を形成する。
【０２１２】
「アリールカルボニル」は−Ｃ（＝Ｏ）Ｒｃ基を指し、ここでＲｃはアリールである。
【０２１３】
「アリールカルボニルアミノ」は−ＮＲａＣ（＝Ｏ）Ｒｃを指し、ここでＲｃはアリールである。
【０２１４】
「アリールカルボニルオキシ」は−ＯＣ（＝Ｏ）−Ｒｃを指し、ここでＲｃはアリールである。
【０２１５】
「アリールオキシ」は−ＯＲｄを指し、ここでＲｄはアリールである。アリールオキシ基の代表例はフェノキシ、およびナフトキシなどを含む。
【０２１６】
「アリールオキシカルボニル」は−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲｄを指し、ここでＲｄはアリールである。
【０２１７】
「アリールオキシカルボニルアミノ」は−ＮＲａＣ（＝Ｏ）ＯＲｄを指し、ここでＲｄはアリールである。
【０２１８】
「アリールスルファニル」、「アリールチオ」、または「チオアリールオキシ」はＳ−Ｒｄ基を指し、ここでＲｄはアリールである。
【０２１９】
「アリールスルホニル」は−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒｅを指し、ここでＲｅはアリールである。
【０２２０】
「アリールスルホニルアミノ」は−ＮＲａＳ（＝Ｏ）２−Ｒｅを指し、ここでＲｅはアリールである。
【０２２１】
「アリールチオ」は−Ｓ−アリール基を指し、ここでアリールは本明細書で定義した通りである。他の実施態様において、硫黄は−Ｓ（Ｏ）−または−ＳＯ２−基に酸化されていてよい。スルホキシドは１つ以上の立体異性体として存在していてよい。
【０２２２】
「アジド」は−Ｎ３を指す。
【０２２３】
「結合」は、マーカッシュ群の要素として用いられている場合、対応する基が存在せず、両側の基が直接的に結合していることを意味する。
【０２２４】
「カルボニル」は、二価の基−Ｃ（＝Ｏ）−を指す。
【０２２５】
「カルボキシ」または「カルボキシル」は、−ＣＯ２Ｈ基を指す。
【０２２６】
「カルボキシルエステル」または「カルボキシエステル」は、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲｃ基を指す。
【０２２７】
「（カルボキシルエステル）アミノ」は−ＮＲａ−Ｃ（Ｏ）ＯＲｃ基を指し、ここでＲａはアルキルまたは水素である。
【０２２８】
「（カルボキシルエステル）オキシ」または「炭酸エステル」は、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲｃ基を指す。
【０２２９】
「シアノ」は、−ＣＮを指す。
【０２３０】
「シクロアルコキシ」は−ＯＲｄを指し、ここでＲｄはシクロアルキルである。
【０２３１】
「シクロアルコキシカルボニル」は−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲｄを指し、ここでＲｄはシクロアルキルである。
【０２３２】
「シクロアルコキシカルボニルアミノ」は−ＮＲａＣ（＝Ｏ）ＯＲｄを指し、ここでＲｄはシクロアルキルである。
【０２３３】
「シクロアルキルアルキレン」は−ＲｘＲｙラジカルを指し、ここでＲｘはアルキレン基であり、Ｒｙは本明細書で定義したシクロアルキル基であり、例えば、シクロプロピルメチル、シクロヘキセニルプロピル、３−シクロヘキシル−２−メチルプロピルなどである。
【０２３４】
「シクロアルキルカルボニル」は−Ｃ（＝Ｏ）Ｒｃ基を指し、ここでＲｃはシクロアルキルである。
【０２３５】
「シクロアルキルカルボニルアミノ」は−ＮＲａＣ（＝Ｏ）Ｒｃを指し、ここでＲｃはシクロアルキルである。
【０２３６】
「シクロアルキルカルボニルオキシ」は−ＯＣ（＝Ｏ）−Ｒｃを指し、ここでＲｃはシクロアルキルである。
【０２３７】
「シクロアルキルスルホニルアミノ」は−ＮＲａＳ（＝Ｏ）２−Ｒｅを指し、ここでＲｅはシクロアルキルである。
【０２３８】
「シクロアルキルチオ」は、−Ｓ−シクロアルキルを指す。他の実施態様では、硫黄は−Ｓ（Ｏ）−または−ＳＯ２−基に酸化されていてよい。スルホキシドは１つ以上の立体異性体として存在していてよい。
【０２３９】
「シクロアルケニルオキシ」は、−Ｏ−シクロアルケニルを指す。
【０２４０】
「シクロアルケニルチオ」は、−Ｓ−シクロアルケニルを指す。他の実施態様では、硫黄はスルフィニルまたはスルホニル基に酸化されていてよい。スルホキシドは１つ以上の立体異性体として存在していてよい。
【０２４１】
「エステル」は−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲｄを指し、ここでＲｄはアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリルである。
【０２４２】
「グアニジノ」は−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２基を指す。
【０２４３】
特に示さない限り、「ハロ」または「ハロゲン」は、単独でまたは別の置換基の一部として、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素原子を意味する。さらに、「ハロアルキル」などの用語は、１つ以上の水素がハロゲン原子で置換されているアルキルを含むことを意図し、ハロゲン原子は同一または異なっていてよく、１〜許容されるハロゲンの最大数までの範囲の数であり、例えばアルキルについては（２ｍ’＋１）であり、ここでｍ’はアルキル基内の炭素原子の総数である。例えば、用語「ハロＣ１−８アルキル」は、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、４−クロロブチル、および３−ブロモプロピルなどを含むことを意図する。特に示さない限り、用語「ペルハロアルキル」は、（２ｍ’＋１）個のハロゲン原子で置換されているアルキルを意味し、ここでｍ’はアルキル基内の炭素原子の総数である。例えば、用語「ペルハロＣ１−８アルキル」は、トリフルオロメチル、ペンタクロロエチル、および１，１，１−トリフルオロ−２−ブロモ−２−クロロエチルなどを含むことを意図する。さらに、用語「ハロアルコキシ」は、１つ以上のハロゲン原子で置換されているアルコキシラジカルを指す。
【０２４４】
「ヘテロアルキル」は、シアノ、−ＯＲｗ、−ＮＲｘＲｙ、および−Ｓ（Ｏ）ｎＲｚ（ここでｎは０〜２の整数である）から独立して選択される１、２または３個の置換基を有する本明細書で定義したアルキルラジカルを意味し、該ヘテロアルキルラジカルの結合点は該ヘテロアルキルラジカルの炭素原子を通じている。Ｒｗは水素、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、アリール、アラルキル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、カルボキサミド、またはモノ−もしくはジ−アルキルカルバモイルである。Ｒｘは水素、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、アリールまたはアラルキルである。Ｒｙは水素、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、アリール、アラルキル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、カルボキサミド、モノ−もしくはジ−アルキルカルバモイルまたはアルキルスルホニルである。Ｒｚは水素（ただしｎは０である）、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキル−アルキル、アリール、アラルキル、アミノ、モノ−アルキルアミノ、ジ−アルキルアミノ、またはヒドロキシアルキルである。代表例は、例えば、２−ヒドロキシエチル、２，３−ジヒドロキシプロピル、２−メトキシエチル、ベンジルオキシメチル、２−シアノエチル、および２−メチルスルホニル−エチルを含む。上記のそれぞれについて、Ｒｗ、Ｒｘ，Ｒｙ、およびＲｚはアミノ、フッ素、アルキルアミノ、ジ−アルキルアミノ、ＯＨまたはアルコキシによってさらに置換されていてよい。さらに、炭素原子の数を示す接頭語（例えば、Ｃ１−Ｃ１０）は、シアノ、−ＯＲｗ、−ＮＲｘＲｙ、または−Ｓ（Ｏ）ｎＲｚ部分を除いたヘテロアルキル基の部分の炭素原子の総数を指す。
【０２４５】
「ヘテロアリールカルボニル」は−Ｃ（＝Ｏ）Ｒｃ基を指し、ここでＲｃはヘテロアリールである。
【０２４６】
「ヘテロアリールカルボニルアミノ」は−ＮＲａＣ（＝Ｏ）Ｒｃを指し、ここでＲｃはヘテロアリールである。
【０２４７】
「ヘテロアリールカルボニルオキシ」は−ＯＣ（＝Ｏ）−Ｒｃを指し、ここでＲｃはヘテロアリールである。
【０２４８】
「ヘテロアリールオキシ」は−ＯＲｄを指し、ここでＲｄはヘテロアリールである。
【０２４９】
「ヘテロアリールオキシカルボニル」は−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲｄを指し、ここでＲｄはヘテロアリールである。
【０２５０】
「ヘテロアリールオキシカルボニルアミノ」は−ＮＲａＣ（＝Ｏ）ＯＲｄを指し、ここでＲｄはヘテロアリールである。
【０２５１】
「ヘテロアリールスルホニルアミノ」は−ＮＲａＳ（＝Ｏ）２−Ｒｅを指し、ここでＲｅはヘテロアリールである。
【０２５２】
「ヘテロアリールチオ」は、−Ｓ−ヘテロアリール基を指す。他の実施態様では、硫黄は−Ｓ（Ｏ）−または−ＳＯ２−基に酸化されていてよい。スルホキシドは１つ以上の立体異性体として存在していてよい。
【０２５３】
「ヘテロシクリルアルキル」または「シクロヘテロアルキル−アルキル」は、−ＲｘＲｙラジカルを意味し、ここでＲｘはアルキレン基であり、Ｒｙは本明細書で定義したヘテロシクリル基であり、例えば、テトラヒドロピラン−２−イルメチル、４−（４−置換−フェニル）ピペラジン−１−イルメチル、および３−ピペリジニルエチルなどである。
【０２５４】
「ヘテロシクロオキシカルボニルアミノ」は−ＮＲａＣ（＝Ｏ）ＯＲｄを指し、ここでＲｄはヘテロシクリルである。
【０２５５】
「ヘテロシクリルカルボニル」は−Ｃ（＝Ｏ）Ｒｃを指し、ここでＲｃはヘテロシクリルである。
【０２５６】
「ヘテロシクリルカルボニルアミノ」は−ＮＲａＣ（＝Ｏ）Ｒｃを指し、ここでＲｃはヘテロシクリルである。
【０２５７】
「ヘテロシクリルカルボニルオキシ」は−ＯＣ（＝Ｏ）−Ｒｃを指し、ここでＲｃはヘテロシクリルである。
【０２５８】
「ヘテロシクリルオキシ」は−ＯＲｄを指し、ここでＲｄはヘテロシクリルである。
【０２５９】
「ヘテロシクリルオキシカルボニル」は−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲｄを指し、ここでＲｄはヘテロシクリルである。
【０２６０】
「ヘテロシクリルスルホニル」は−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒｅを指し、ここでＲｅはヘテロシクリルである。
【０２６１】
「ヘテロシクリルスルホニルアミノ」は−ＮＲａＳ（＝Ｏ）２−Ｒｅを指し、ここでＲｅはヘテロシクリルである。
【０２６２】
「ヘテロシクリルチオ」は、−Ｓ−ヘテロシクリル基を指す。他の実施態様では、硫黄は−Ｓ（Ｏ）−または−ＳＯ２−基に酸化されていてよい。スルホキシドは１つ以上の立体異性体として存在していてよい。
【０２６３】
「ヒドロキシ」または「ヒドロキシル」は−ＯＨ基を指す。
【０２６４】
「ヒドロキシアミノ」は、−ＮＨＯＨ基を指す。
【０２６５】
「ニトロ」は、−ＮＯ２を指す。
【０２６６】
「ニトロソ」は、−ＮＯ基を指す。
【０２６７】
本明細書全体にわたって用いられている用語「任意の」または「任意に」は、その後記載されている事象または状況が生じてよいが生じる必要はなく、該記載が事象または状況が生じる場合および生じない場合を含むことを意味する。例えば、「アルキル基で任意に一置換または二置換されているヘテロシクロ基」は、アルキルが存在していてよいが存在する必要なはく、該記載はヘテロシクロ基がアルキル基で一置換または二置換されている状況およびヘテロシクロ基がアルキル基で置換されていない状況を含むことを意味する。
【０２６８】
「任意に置換された」は、置換基で任意に独立して置換されている環を意味する。非置換である基の部位は、水素で置換されていてよい。
【０２６９】
「オキソ」は、二価の基＝Ｏを指す。
【０２７０】
「スルファニル」は−ＳＲｆ基を指し、ここでＲｆは本明細書で定義した通りである。
【０２７１】
「スルフィニル」は−Ｓ（＝Ｏ）−Ｒｅ基を指し、ここでＲｅは本明細書で定義した通りである。
【０２７２】
「スルホン酸」は、−Ｓ（Ｏ）２−ＯＨ基を指す。
【０２７３】
「スルホニル」は−Ｓ（Ｏ）２−Ｒｅ基を指し、ここでＲｅは本明細書で定義した通りである。
【０２７４】
「スルホニルアミノ」は−ＮＲａＳ（＝Ｏ）２−Ｒｅを指し、ここでＲａは水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロアリールおよびヘテロシクリルからなる群から選択され、Ｒｅは本明細書で定義した通りである。
【０２７５】
「スルホニルオキシ」は、−ＯＳＯ２−Ｒｃ基を指す。
【０２７６】
同一の分子式を有するが、性質または空間内のそれらの原子の結合配列もしくは空間内のそれらの原子配置が異なる化合物は、「異性体」と呼ばれる。空間内のそれらの原子配置が異なる異性体は、「立体異性体」と呼ばれる。「立体異性体（Stereoisomer）」および「立体異性体（stereoisomers）」はそれらが１つ以上の不斉中心または非対称置換を有する二重結合を有する場合に異なる立体異性の形態にて存在する化合物を指し、それゆえ、個々の立体異性体または混合物として生じうる。立体異性体は、エナンチオマーおよびジアステレオマーを含む。互いに鏡像ではない立体異性体は「ジアステレオマー」と呼ばれ、互いに重ね合わせることができない鏡像である立体異性体は「エナンチオマー」と呼ばれる。化合物が不斉中心を有する場合、例えば、４つの異なる基に結合している場合、一組のエナンチオマーが可能である。エナンチオマーはその不斉中心の絶対立体配置によって特徴付けられ得、カーン（Cahn）とプレログ（Prelog）のＲ−およびＳ−順序付けルールによって記載され、または分子が偏光面を回転する様式によって記載され、右旋性または左旋性（すなわち、それぞれ（＋）または（−）−異性体）と示される。キラル化合物は、個々のエナンチオマーまたはその混合物のいずれかとして存在しうる。均等な割合のエナンチオマーを含む混合物は、「ラセミ混合物」と呼ばれる。特に示さない限り、該記載は個々の立体異性体のみならず、混合物を含むことを意図する。立体化学の決定方法および１つ以上の立体中心のキラリティーが異なる立体異性体の分離方法は、当該技術分野で周知である（「Chapter 4 of ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY, 4th edition J. March, John Wiley and Sons, New York, 1992」のディスカッションを参照のこと）。
【０２７７】
「チオアシル」は、Ｒａ−Ｃ（Ｓ）−基を指す。
【０２７８】
「チオール」は、−ＳＨ基を指す。
【０２７９】
「互変異性体」はプロトンの位置が異なる分子の代替形態を指し、エノール−ケトおよびイミン−エナミン互変異性体、または、ピラゾール、イミダゾール、ベンゾイミダゾール、トリアゾール、およびテトラゾールなどの−Ｎ＝Ｃ（Ｈ）−ＮＨ−環原子配置を含むヘテロアリール基の互変異性の形態などである。当業者であれば、他の互変異性の環原子配置が可能であることを認識できるであろう。
【０２８０】
上記で定義した全ての置換基において、さらなる置換基を有する置換基を定義することによって得られるポリマー（例えば、それ自身置換アリール基で置換されている置換基として置換アリール基を有する置換アリールであって、置換アリール基によってさらに置換されている置換アリールなど）は、本明細書に含まれることは意図しないと理解される。そのような場合、該置換の最大数は３である。例えば、置換アリール基の連続的な置換は、−置換アリール−（置換アリール）−置換アリールに限定される。
【０２８１】
「保護基」は、原子基であって、分子内の反応性官能基に結合した場合、該官能基の反応性を遮蔽、減少または防止する基を指す。典型的には、保護基は、所望であれば、合成過程の間に選択的に除去されてよい。保護基の例は、「Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, 3rd Ed., 1999, John Wiley & Sons, NY」および「Harrison et al., Compendium of Synthetic Organic Methods, Vols. 1-8, 1971-1996, John Wiley & Sons, NY」に見ることができる。代表的なアミノ保護基は、ホルミル、アセチル、トリフルオロアセチル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル（「ＣＢＺ」）、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（「Ｂｏｃ」）、トリメチルシリル（「ＴＭＳ」）、２−トリメチルシリル−エタンスルホニル（「ＴＥＳ」）、トリチルおよび置換トリチル基、アリルオキシカルボニル、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（「ＦＭＯＣ」）、およびニトロ−ベラトリルオキシカルボニル（「ＮＶＯＣ」）などを含み、これらに限定されない。代表的なヒドロキシ保護基は、ベンジルおよびトリチルエーテル、ならびにアルキルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテル、トリアルキルシリルエーテル（例えば、ＴＭＳまたはＴＩＰＰＳ基）およびアリルエーテルなどのヒドロキシ基がアシル化またはアルキル化された基を含み、これらに限定されない。
【０２８２】
用語「医薬的に許容される塩」は、本明細書で記載する化合物上に見られる特定の置換基に依存して、相対的に無毒性の酸または塩基で製造される、活性化合物の塩を含むことを意図する。本発明の化合物が相対的に酸性の官能基を含む場合、中性型の該化合物を十分な量の所望の塩基とそのまま、または適切な不活性溶媒中で接触させることによって、塩基付加塩が得られうる。医薬的に許容される無機塩基に由来する塩の例は、アルミニウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、銅塩、鉄（ＩＩＩ）塩、鉄（ＩＩ）塩、リチウム塩、マグネシウム塩、マンガン（ＩＩＩ）塩、マンガン（ＩＩ）塩、カリウム塩、ナトリウム塩、および亜鉛塩などを含む。医薬的に許容される有機塩基に由来する塩は、第一級、第二級および第三級アミンの塩を含み、置換アミン、環式アミン、天然に存在するアミンなど、例えばアルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなどを含む。本発明の化合物が相対的に塩基性の官能基を含む場合、中性型の該化合物を十分な量の所望の酸とそのまま、または適切な不活性溶媒中で接触させることによって、酸付加塩が得られうる。医薬的に許容される酸付加塩の例は、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、一水素炭酸、リン酸、一水素リン酸、二水素リン酸、硫酸、一水素硫酸、ヨウ化水素酸、または亜リン酸などの無機酸に由来する塩、ならびに酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマル酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トリルスルホン酸、クエン酸、酒石酸、およびメタンスルホン酸などの相対的に無毒性の有機酸に由来する塩を含む。また、アルギネートなどのアミノ酸の塩、およびグルクロン酸またはガラクツロン酸などの有機酸の塩を含む（例えば、「Berge, S.M. et al., "Pharmaceutical Salts," Journal of Pharmaceutical Science, 66:1-19, 1977」を参照のこと）。本発明の特定の化合物は、化合物を塩基付加塩または酸付加塩のいずれかに変換することを可能にする塩基性官能基および酸性官能基の両方を含む。
【０２８３】
中性型の化合物は、塩を塩基または酸と接触させ、通常の様式にて親化合物を単離することによって再生しうる。化合物の親形態は、極性溶媒への溶解度などの特定の物性において様々な塩形態と異なるが、それ以外は、該塩は本発明の目的の化合物の親形態と等価である。
【０２８４】
塩形態に加えて、本発明はプロドラッグエステル形態にある化合物を提供する。本明細書で記載する化合物の「プロドラッグ」は、生理的条件下で容易に化学変化を起こし、本発明の化合物を提供する化合物である。さらに、プロドラッグは、エクスビボの環境にて化学的または生化学的方法によって本発明の化合物に変換されうる。例えば、プロドラッグは適切な酵素または化学試薬と共に経皮パッチリザーバーに入れた場合、本発明の化合物にゆっくりと変換されうる。プロドラッグは、必ずしもそうであるとは限らないが、頻繁に、活性薬物に変換されるまで薬理学的に不活性である。プロドラッグは典型的には、部分的には活性に必要であると考えられている薬物中の官能基をプロ基（下記で定義している）で遮蔽し、特定の使用条件下で開裂などの変換を起こして官能基を放出することによって活性薬物を放出するプロ部分を形成することによって得られる。該プロ部分の開裂は、加水分解反応などによって自発的に進行し得、または別の薬剤、酵素、光、酸もしくは塩基など、もしくは、温度変化などの物理的もしくは環境的パラメーターの変化もしくはこれらへの露出によって触媒され、もしくは誘導されうる。該薬剤は、プロドラッグが投与される細胞に存在する酵素、もしくは胃の酸性状態などの使用条件に内在するものであってもよく、または外因的に提供されるものであってもよい。
【０２８５】
「プロ基」は保護基の１種を指し、活性薬物内の官能基を遮蔽するために用いられた場合にプロ部分を形成し、該薬物をプロドラッグに変換する。プロ基は、典型的には、特定の使用条件下で開裂可能な結合を介して薬物の官能基に結合している。それゆえ、プロ基は、特定の使用条件下で開裂して官能基を放出するプロ部分の部分である。具体例として、式−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３のアミドプロ部分は、プロ基−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３を含む。
【０２８６】
活性ｓｙｋおよび／またはＪＡＫ選択的阻害化合物内の官能基を遮蔽してプロドラッグを得るのに適切な広範囲のプロ基、および結果として生じるプロ部分は、当該技術分野で周知である。例えば、ヒドロキシル官能基はスルホン酸塩、エステル（酢酸エステルもしくはマレイン酸エステルなど）または炭酸塩プロ部分として遮蔽されてよく、インビボで加水分解されてヒドロキシル基を提供してよい。アミノ官能基はアミド、カルバメート、イミン、尿素、ホスフェニル、ホスホリルまたはスルフェニルプロ部分として遮蔽されてよく、インビボで加水分解されてアミノ基を提供してよい。カルボキシル基はエステル（メチル、エチル、ピバロイルオキシメチル、シリルエステルおよびチオエステルを含む）、アミドまたはヒドラジドプロ部分として遮蔽されてよく、インビボで加水分解されてカルボキシル基を提供してよい。本発明は、持続放出またはプロドラッグ製剤として使用するために、溶解度または加水分解特性を変更するための当該技術分野で周知のエステルおよびアシル基を含む。適切なプロ基およびそのそれぞれのプロ部分の他の具体例は、当業者には明らかであろう。
【０２８７】
本発明の特定の化合物は、非溶媒和形態および水和形態を含む溶媒和形態にて存在しうる。「溶媒和物」は、溶媒分子と溶質の分子またはイオンの組み合わせによって形成される複合体を指す。該溶媒は有機化合物、無機化合物、または両者の混合物であってよい。溶媒のいくつかの例は、メタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、および水を含み、これらに限定されない。一般的に、溶媒和形態は非溶媒和形態と等価であり、本発明の範囲内に含まれることを意図する。本発明の特定の化合物は、複数の結晶形態または非晶質形態にて存在してよい。一般的に、全ての物理的形態は本発明で考慮する使用について等価であり、本発明の範囲内にあることを意図する。
【０２８８】
本発明の特定の化合物は、不斉炭素原子（光学中心）または二重結合を有する；ラセミ化合物、ジアステレオマー、幾何異性体、位置異性体および個々の異性体（例えば、別々のエナンチオマー）は、全て本発明の範囲内に含まれることを意図する。これらの異性体は分離され、または通常の方法を使用して不斉合成され得、異性体を「光学的に純粋」に、すなわち、他の異性体が実質的にない状態にする。例えば、本発明の化合物の特定のエナンチオマーが所望である場合、それは不斉合成によって製造され得、またはキラル補助基での誘導によって製造され得、得られたジアステレオマー混合物は分離され、補助基は開裂し、純粋な所望のエナンチオマーを提供する。あるいは、分子がアミノなどの塩基性官能基、または、カルボキシルなどの酸性官能基を含む場合、ジアステレオマー塩は適切な光学活性酸または塩基で形成され、次いで形成されたジアステレオマーを当該技術分野で周知の分別結晶法またはクロマトグラフィー法によって分割し、その後、純粋なエナンチオマーを回収する。
【０２８９】
本発明の化合物は、該化合物を構成する１つ以上の原子で、不自然な割合の原子同位体を含んでいてよい。例えば、該化合物は、例えばトリチウム（３Ｈ）、ヨウ素−１２５（１２５Ｉ）または炭素−１４（１４Ｃ）などの放射性同位体で放射性標識されていてよい。本発明の化合物の全ての同位体バリエーションは、放射性があろうとなかろうと、本発明の範囲内に含まれることを意図する。
【０２９０】
用語「（〜を）投与（すること）」は、対象に対する経口投与、坐剤としての投与、局所接触、静脈内、腹腔内、筋肉内、病巣内、鼻腔内もしくは皮下投与、または遅延放出装置、例えば、ミニ浸透圧ポンプの埋め込みを指す。投与は、非経口および経粘膜的投与を含むいずれかの経路（例えば、頬側、舌下、口蓋、歯肉、経鼻、膣、直腸、または経皮）でなされる。非経口投与は、例えば、静脈内、筋肉内、細動脈内、皮内、皮下、腹腔内、心室内、および頭蓋内を含む。他の送達様式は、リポソーム製剤の使用、静脈内注入、経皮パッチなどを含み、これらに限定されない。
【０２９１】
「アゴニスト」または「活性剤」は、本発明の受容体に結合し、活性化または酵素活性を刺激し、増加させ、開き、活性化し、促進し、増強し、本発明の受容体の活性を感作し、または上方制御する薬剤または分子を指す。
【０２９２】
「拮抗薬」または「阻害剤」は、刺激または活性を阻害し、または結合して、部分的もしくは完全に遮断し、活性化または酵素活性を減少させ、閉じ、防止し、遅延させ、本発明の受容体の活性を不活性化し、脱感作し、または下方制御する薬剤または分子を指す。本明細書で用いられている「拮抗薬」は、リバースまたはインバースアゴニストも含む。
【０２９３】
本明細書で用いられている用語「ｓｙｋおよび／または（もしくは）ＪＡＫの調節に応答する状態または障害」ならびに関連する用語および語句は、不適切な、例えば、正常より低いまたは高いｓｙｋおよび／またはＪＡＫの活性と関連する状態または障害、ならびにｓｙｋおよび／またはＪＡＫの調節に少なくとも部分的に応答または影響される（例えば、ｓｙｋおよび／またはＪＡＫ拮抗薬またはアゴニストが少なくとも一部の患者の健康に何らかの改善をもたらす）状態または障害を指す。ｓｙｋおよび／またはＪＡＫの不適切な機能活性は、通常は受容体を発現しない細胞におけるｓｙｋおよび／もしくはＪＡＫの発現、ｓｙｋおよび／もしくはＪＡＫの正常よりも多い産生、ｓｙｋおよび／もしくはＪＡＫもしくはその活性代謝物の正常よりも遅い代謝的不活性化または排出、ｓｙｋおよび／もしくはＪＡＫの発現もしくは細胞内活性化の程度の増加（例えば、炎症および免疫関連障害および状態をもたらす）、またはｓｙｋおよび／もしくはＪＡＫの発現低下の結果として生じうる。ｓｙｋおよび／またはＪＡＫと関連する状態または障害は、「ｓｙｋおよび／またはＪＡＫ媒介状態または障害」を含んでよい。
【０２９４】
本明細書で用いられている語句「ＳｙｋまたはＪＡＫキナーゼ活性によって少なくとも部分的に媒介される状態または障害」、ならびに関連する語句および用語は、不適切な、例えば、正常よりも高いｓｙｋおよび／またはＪＡＫ活性によって特徴付けられる状態または障害を指す。不適切なｓｙｋおよび／またはＪＡＫ機能活性は、通常はｓｙｋおよび／もしくはＪＡＫを発現しない細胞におけるｓｙｋおよび／もしくはＪＡＫ発現、またはｓｙｋおよび／もしくはＪＡＫ発現もしくは細胞内活性化の程度の増加（例えば、炎症および免疫関連障害および状態をもたらす）の結果として生じうる。ＳｙｋまたはＪＡＫキナーゼ活性によって少なくとも部分的に媒介される状態または障害は、不適切なｓｙｋおよび／またはＪＡＫ機能活性によって完全にまたは部分的に媒介されうる。しかしながら、ＳｙｋまたはＪＡＫキナーゼ活性によって少なくとも部分的に媒介される状態または障害は、ｓｙｋおよび／またはＪＡＫの調節が基礎状態または障害に何らかの効果をもたらす（例えば、ｓｙｋおよび／またはＪＡＫ拮抗薬が少なくとも一部の患者の健康に何らかの改善をもたらす）状態または障害である。
【０２９５】
本明細書で用いられている用語「炎症」は、再狭窄の治療を受けた領域への白血球（white blood cells）（例えば、白血球（leukocytes）、単球など）の浸潤を指す。
【０２９６】
用語「インターベンション」は、効果を生じる行為、または疾患過程を変化させることを意図する行為を指す。例えば、「血管インターベンション」は、血管形成またはステントなどの血管内手術を使用し、閉塞血管を開くことを指す。
【０２９７】
用語「血管内装置」は、閉塞血管を通る血流を回復するための血管再開通手術に有用な装置を指す。血管内装置の例は、ステント、バルーンカテーテル、自己静脈／動脈移植片、人工静脈／動脈移植片、血管カテーテル、および血管シャントを含み、これらに限定されない。
【０２９８】
本明細書で用いられている用語「ＪＡＫ」は、インビトロまたはインビボで遺伝子発現を媒介することができるヤヌスキナーゼ（ＲｅｆＳｅｑ登録番号Ｐ−４３４０８）またはその変異体を指す。ＪＡＫ変異体は、天然ＪＡＫと実質的に相同のタンパク質、すなわち、１つ以上の天然または非天然アミノ酸の欠失、挿入または置換を有するタンパク質（例えば、ＪＡＫ誘導体、相同体および断片）を含む。ＪＡＫ変異体のアミノ酸配列は、好ましくは天然ＪＡＫと少なくとも約８０％同一、より好ましくは少なくとも約９０％同一、および最も好ましくは少なくとも約９５％同一である。
【０２９９】
用語「白血球」は、核および細胞質を有し、全血液を遠心分離した場合に薄い白色の層内に分離され、感染および疾患から体を保護する助けとなる様々な血液細胞のいずれかを指す。白血球の例は、好中球、好酸球、好塩基球、リンパ球、および単球を含み、これらに限定されない。
【０３００】
用語「哺乳類」は、ヒト、ペット（例えば、イヌまたはネコ）、家畜（ウシ、ウマ、またはブタ）、サル、ウサギ、マウス、および実験動物を含み、これらに限定されない。
【０３０１】
用語「〜を調節する」および「調節」などは、化合物がｓｙｋおよび／またはＪＡＫの機能および／または発現を増加または減少させる能力を指し、ここで該機能は転写制御活性および／またはタンパク質−結合を含んでよい。調節は、インビトロまたはインビボで生じてよい。本明細書で記載している調節は、ｓｙｋおよび／もしくはＪＡＫと関連する機能もしくは特徴を直接的もしくは間接的に阻害、拮抗、部分的拮抗、活性化、作動または部分的作動すること、ならびに／または、ｓｙｋおよび／もしくはＪＡＫの発現を直接的もしくは間接的に上方制御もしくは下方制御することを含む。好ましい実施態様では、該調節は直接的である。阻害剤または拮抗薬は、例えば、結合して、部分的または完全に刺激を遮断し、活性化を減少し、防止し、阻害し、遅延させ、シグナル伝達を不活性化し、脱感作し、または下方制御する化合物である。活性剤またはアゴニストは、例えば、結合して、活性化を刺激し、増加し、開き、活性化し、促進し、増強し、シグナル伝達を活性化し、感作し、または上方制御する化合物である。化合物がｓｙｋおよび／またはＪＡＫの機能を阻害する能力は、生化学的アッセイ、例えば、結合アッセイ、または細胞ベースアッセイ、例えば、一過性形質転換アッセイにて実証されうる。
【０３０２】
活性の「修飾因子」は、活性についてのインビトロおよびインビボアッセイを使用して同定された「リガンド」、「拮抗薬」および「アゴニスト」、ならびにそれらの相同体および模倣体を指すのに用いられる。修飾因子は天然および合成リガンド、拮抗薬、アゴニスト、および分子などを含む。拮抗薬およびアゴニストを同定するアッセイは、例えば、本発明の受容体の存在下または非存在下、想定される修飾因子化合物を細胞に適用し、次いで本発明の受容体活性に対する機能的効果を決定することを含む。有望な活性剤、阻害剤、または修飾因子で処理された本発明の受容体を含むサンプルまたはアッセイは、阻害剤、活性剤、または修飾因子のないコントロールサンプルと比較され、効果の範囲を調べる。コントロールサンプル（修飾因子で処理していない）には、相対的活性値１００％が割り当てられる。コントロールに対する本発明の受容体の活性値が約８０％、任意に５０％または２５〜１％である場合、阻害が達成されている。コントロールに対する本発明の受容体の活性値が１１０％、任意に１５０％、任意に２００〜５００％、または１０００〜３０００％以上である場合、活性化が達成されている。
【０３０３】
「患者」はヒトおよび非ヒト動物、特に哺乳類を指す。患者の例は、ヒト、ウシ、イヌ、ネコ、ヤギ、ヒツジ、ブタおよびウサギを含み、これらに限定されない。
【０３０４】
次いで、本発明の組成物について、用語「医薬的に許容される担体または賦形剤」は、一般的に安全で、無毒性で、生物学的またはその他で有害でない医薬組成物の製造に有用な担体または賦形剤を意味し、ヒト医薬用途のみならず獣医学的用途に許容される担体または賦形剤を含む。本明細書および特許請求の範囲で用いられている「医薬的に許容される担体または賦形剤」は、１つ以上の該担体または賦形剤の両方を含む。
【０３０５】
用語「医薬的に有効な量」、「治療上の有効量」または「治療的に有効な用量」は、組織、系、動物またはヒトの生物学的または医学的応答を誘発するであろう対象化合物の量を指し、研究者、獣医師、医師または他の臨床医によって見つけられる。用語「治療上の有効量」は、投与された場合に、治療される状態または障害の１つ以上の症状の発生を予防し、または症状をある程度軽減するのに十分な化合物の量を含む。治療上の有効量は、化合物、障害または状態およびその重症度、ならびに、治療される哺乳類の年齢および体重などに依存して変動するであろう。
【０３０６】
用語「血小板」は哺乳類の血漿に見られる微小で、無核で、円盤状の細胞を指し、血液凝固を促進するために機能する。
【０３０７】
本明細書で用いられている用語「〜を予防する」、「〜を予防すること」、「予防」およびその文法的なバリエーションは、障害もしくは状態および／もしくはその１つ以上の付随症状の発症もしくは再発を部分的もしくは完全に遅延もしくは防止し、対象が障害もしくは状態を発症もしくは再発することを防ぎ、または対象が障害もしくは状態もしくはその１つ以上の付随症状を発症もしくは再発するリスクを減少させる方法を指す。
【０３０８】
用語「再開通」は、血管などの体の遮断されたチャネルへの流れを回復し、または該チャネルを再結合する過程を指す。
【０３０９】
用語「再狭窄」は、血管形成またはステント手術などの治療を行った同一部位の動脈が再び狭くなること、または該動脈の妨害物を指す。
【０３１０】
語句「選択的に」または「特異的に」は、受容体への結合に言及している場合、しばしば受容体および他の生物製剤の不均一な集合における受容体の存在の決定要因である結合反応を指す。それゆえ、示された条件下で、化合物は少なくともバックグラウンドの２倍、およびより典型的にはバックグラウンドの１０〜１００倍、特定の受容体に結合する。該条件下での化合物の特異的結合は、特定の受容体に対するその特異性について選択される化合物を必要とする。例えば、低有機分子をスクリーニングし、選択された受容体に特異的または選択的に結合するが他の受容体またはタンパク質に結合しない化合物のみを得ることができる。特定の受容体に選択性がある化合物を選択するために、様々なアッセイ形式が用いられうる。例えば、特定の受容体に選択性がある化合物を選択するために、ハイスループットスクリーニングアッセイがルーチン的に用いられる。
【０３１１】
本明細書で用いられている用語「鎌状赤血球貧血」は、両方のヘモグロビンアレルが鎌状ヘモグロビン（Ｓ）タンパク質、すなわち、Ｓ／Ｓ遺伝子型をコードする赤血球の遺伝性障害を指す。異常なヘモグロビンの存在は、通常の血液循環の時間存在することができない異常な形態の細胞の産生をもたらす。それゆえ、貧血がもたらされる。「貧血」は、血液中の赤血球および／またはヘモグロビンの数の減少を指す。
【０３１２】
用語「鎌状赤血球症」は、１つのヘモグロビンアレルが鎌状ヘモグロビン（Ｓ）タンパク質をコードし、他のアレルが別の異常なヘモグロビンタンパク質、例えばヘモグロビン（Ｓ）、（Ｃ）、（Ｄ）、（Ｅ）、および（βＴｈａｌ）などをコードする赤血球の遺伝性障害を指す。鎌状赤血球症遺伝子型の例は、Ｓ／Ｓ、Ｓ／Ｃ、Ｓ／Ｄ、Ｓ／Ｅ、およびＳ／βＴｈａｌ遺伝子型を含み、これらに限定されない。最も一般的な種類の鎌状赤血球症は、鎌状赤血球貧血、鎌状ヘモグロビンＣ症、鎌状β−プラスサラセミア、および鎌状β−ゼロサラセミアを含む。
【０３１３】
本明細書で定義した「対象」は、霊長類（例えば、ヒト）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、およびマウスなどを含み、これらに限定されない哺乳類などの動物を含む。好ましい実施態様では、対象はヒトである。
【０３１４】
本明細書で用いられている用語「ｓｙｋ」は、インビトロまたはインビボでＴ細胞受容体に対する細胞応答を媒介することができる脾臓チロシンキナーゼ（ＲｅｆＳｅｑ登録番号Ｐ−０４３４０５）またはその変異体を指す。ｓｙｋ変異体は、天然ｓｙｋと実質的に相同なタンパク質、すなわち、１つ以上の天然または非天然アミノ酸の欠失、挿入または置換を有するタンパク質（例えば、ｓｙｋ誘導体、相同体および断片）を含む。ｓｙｋ変異体のアミノ酸配列は、好ましくは天然ｓｙｋに対して少なくとも約８０％同一、より好ましくは少なくとも約９０％同一、および最も好ましくは少なくとも約９５％同一である。
【０３１５】
用語「ｓｙｋ阻害剤」は、脾臓チロシンキナーゼの触媒活性を阻害するいずれかの薬剤を指す。
【０３１６】
用語「血栓症」は、細胞の凝集に起因する血管の妨害または凝固を指し、血流の妨害をもたらす。用語「血栓症」は、血管内に形成される凝血塊を指す。
【０３１７】
本明細書で用いられている用語「〜を治療する」、「〜を治療すること」、「治療」およびその文法的なバリエーションは、障害もしくは状態の１つ以上の付随症状の程度を部分的もしくは完全に遅延、軽減、緩和もしくは減少させること、および／または障害もしくは状態の１つ以上の原因を軽減、緩和もしくは妨害することを含む。本発明の治療は、予防的に（preventively）、予防的に（prophylactically）、対症的に、または治療的に適用されてよい。
【０３１８】
用語「血管」は、動脈または静脈など、液体を輸送するいずれかのチャネルを指す。例えば「血管」は、血液が循環する体内の管のいずれかを指す。血管の管腔は、血管の内部の空間または空洞を指す。
【０３１９】
２．本発明の実施態様
ａ．化合物
本発明は１つの実施態様において、式Ｉ：
【化３】
2015078194.tif 000004
［式中：
Ｄ１は
（ａ）Ｃ１−８アルキル、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、アリールＣ１−８アルコキシカルボニルアミノ、フェニルおよびヘテロシクリルＣ１−８アルキレンからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたＣ３−８シクロアルキル；
（ｂ）アミノ、オキソ、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ２−８アルキニル、シアノ、アミノカルボニル、Ｃ１−８ハロアルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ３−８シクロアルキル、およびフェニルからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたＣ１−８アルキル；
（ｃ）Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルキルカルボニル；Ｃ１−８アルキルスルホニル；アミノカルボニルからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたＣ１−８アルキルＣ３−８ヘテロシクリル；
（ｄ）Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、Ｃ１−８ハロアルキル、カルボキシ、アシル、アシルアミノ、シアノ、アミノ、アミノカルボニル、アミノスルホニル、スルホニル、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１−８アルコキシ、アリールオキシ、ハロ、スルホニルアミノ、Ｃ３−８シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル Ｃ１−８アルキルスルホニル、Ｃ１−８アルキルカルボニルヘテロシクリルおよびヘテロアリールからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたアリール；
（ｅ）Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−８アルコキシカルボニル、アミノ、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、アリールＣ１−８アルコキシカルボニルアミノ、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８アルキルスルホニル、オキソ、ハロ、フェニルおよびヘテロシクリルＣ１−８アルキレンからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたヘテロアリール；
（ｆ）Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシカルボニルおよびオキソからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたＣ３−８ヘテロシクリル；
からなる群から選択され
Ｒ１はＨ、Ｃ１−８アルキル、アミノ、アミノカルボニル、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８ハロアルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、オキソ、シアノ、Ｃ１−８アルコキシカルボニル、Ｃ３−８シクロアルキル、アリールおよびヘテロシクリルからなる群から選択され；かつ、各ヘテロシクリルはＣ１−８アルキル、ハロ、オキソ、アミノ、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アリールＣ１−８アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アリールＣ１−８アルキレンカルボニルおよびＣ１−８アルキルスルホニルからなる群から選択される１〜４個の置換基で任意に置換されており
Ｙ１は
（ａ）Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキル、アミノカルボニル−、ヒドロキシル、オキソ、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−８アルコキシおよびＣ１−８アルキルスルホニルからなる群から独立して選択される１〜３個の置換基Ｒ４ａで任意に置換されたアリール；
（ｂ）Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキル、アミノカルボニル−、ヒドロキシル、オキソ、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−８アルコキシおよびＣ１−８アルキルスルホニルからなる群から独立して選択される１〜３個の置換基Ｒ４ａで任意に置換されたヘテロアリール；
からなる群から選択され
Ｒ２はヘテロシクリル、ヘテロシクリルアミノスルホニル、ヘテロシクリルカルボニル、ヘテロシクリルカルボニルＣ１−８アルコキシ、ヘテロシクリルＣ１−８アルコキシ、ヘテロアリール、アミノスルホニル、Ｃ１−８アルキルスルフィニル、Ｃ１−８ハロアルコキシ、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、Ｃ１−８アルコキシアミノカルボニル、アミノカルボニルＣ１−８アルキルアミノ、アミノスルホニルヘテロシクリルおよびアルキルカルボニルヘテロシクリルからなる群から選択され；
かつ、Ｒ２はＣ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシ、ハロ、アミノカルボニル、オキソ、ヒドロキシル、アミノＣ１−８アルキレン、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキレン、Ｃ１−８アルキルカルボニル、Ｃ３−８シクロアルキルカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、Ｃ１−８アルキルカルボニルアミノ、Ｃ３−８シクロアルキルカルボニルアミノ、ヘテロシクリルカルボニルアミノ、Ｃ１−８アルキルスルホニル、Ｃ３−８シクロアルキルスルホニル、ヘテロシクリルスルホニル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ１−８アルキルシクロアルキレン、およびヘテロアリールからなる群から独立して選択される１〜２個の置換基Ｒ４ｃでさらに任意に置換されている］
を有する化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【０３２０】
実施態様の１つの群において、Ｙ１はアリールである。実施態様の別の群において、Ｙ１はフェニルである。実施態様の別の群において、Ｙ１はヘテロアリールである。実施態様の別の群において、Ｙ１はピリジニルである。
【０３２１】
実施態様の１つの群において、Ｙ１はアリールである。実施態様の別の群において、Ｙ１はフェニルである。実施態様の別の群において、Ｙ１はヘテロアリールである。実施態様の別の群において、Ｙ１はピリジニルである。
【０３２２】
実施態様の１つの群において、Ｒ２はヘテロシクリルである。実施態様の別の群において、Ｒ２はヘテロシクリルアミノスルホニルである。実施態様の別の群において、Ｒ２はヘテロシクリルカルボニルである。実施態様の別の群において、Ｒ２はヘテロシクリルカルボニルＣ１−８アルコキシである。実施態様の別の群において、Ｒ２はヘテロシクリルＣ１−８アルコキシである。実施態様の別の群において、Ｒ２はヘテロアリールである。実施態様の別の群において、Ｒ２はアミノスルホニルである。実施態様の別の群において、Ｒ２はＣ１−８アルキルスルフィニルである。実施態様の別の群において、Ｒ２はＣ１−８ハロアルコキシである。実施態様の別の群において、Ｒ２はＣ１−８アルコキシカルボニルアミノである。実施態様の別の群において、Ｒ２はＣ１−８アルコキシアミノカルボニルである。実施態様の別の群において、Ｒ２はアミノカルボニルＣ１−８アルキルアミノである。
【０３２３】
実施態様の１つの群において、Ｒ２がヘテロシクリルまたはヘテロアリールである場合、アミノＣ１−８アルキル−、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキル−、オキソ−、Ｃ１−８アルキルカルボニル、Ｃ３−８シクロアルキルカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、Ｃ１−８アルキルカルボニルアミノ、Ｃ３−８シクロアルキルカルボニルアミノ、ヘテロシクリルカルボニルアミノ、Ｃ１−８アルキルスルホニル、Ｃ３−８シクロアルキルスルホニルおよびヘテロシクリルスルホニルからなる群から選択される少なくとも１つのＲ３基で置換されている。
【０３２４】
実施態様の別の群において、Ｄ１はＣ１−８アルキルである。実施態様の別の群において、Ｄ１はＣ１−８アルキルＣ３−８ヘテロシクリルである。
【０３２５】
実施態様の別の群において、Ｄ１はアリールである。実施態様の別の群において、Ｄ１はフェニルである。
【０３２６】
実施態様の別の群において、Ｄ１はヘテロアリールである。
【０３２７】
本発明は実施態様の別の群において、式Ｉの化合物のヘテロアリール基が：
【化４】
2015078194.tif 000005
からなる群から選択され、そのそれぞれが：Ｃ１−８アルキル、アミノ、ヒドロキシル、オキソ、ハロ、Ｃ１−８アルコキシ、ヒドロキシＣ１−８アルキル−、アミノＣ１−８アルキル、Ｃ１−８アルキルカルボニル、ハロＣ１−８アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ１−８アミノシクロアルキル、アミノＣ１−８アルキレンカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−８アルキレンアミノＣ１−８アルキレンカルボニル、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキレンカルボニル、ヒドロキシＣ１−８アルキレンカルボニル、ヒドロキシＣ１−８アルコキシカルボニル、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、アリール、アリールＣ１−８アルコキシカルボニルアミノ、Ｃ１−８アルキルスルホニル、アミノＣ１−８アルキレンスルホニル、アミノスルホニル、Ｃ１−８アルキレンアミノＣ１−８アルキレンスルホニル、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキレンスルホニル、ヒドロキシＣ１−８アルキレンスルホニル、ヒドロキシＣ１−８アルコキシスルホニル、アミノスルホニル、およびＣ１−８アルキルヘテロシクリルからなる群から独立して選択される１〜２個の置換基で任意に置換された化合物を提供する。
【０３２８】
本発明は実施態様の別の群において、式Ｉの化合物のヘテロアリール基が：
【化５】
2015078194.tif 000006
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択される多環式ヘテロアリール基であって、Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルキルカルボニル、Ｃ１−８アミノシクロアルキル、アミノＣ１−８アルキレンカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−８アルキレンアミノＣ１−８アルキレンカルボニル、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキレンカルボニル、ヒドロキシＣ１−８アルキレンカルボニル、ヒドロキシＣ１−８アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アミノ、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、アリール、アリールＣ１−８アルコキシカルボニルアミノ、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８アルキルスルホニル、アミノＣ１−８アルキレンスルホニル、アミノスルホニル、Ｃ１−８アルキレンアミノＣ１−８アルキレンスルホニル、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキレンスルホニル、ヒドロキシＣ１−８アルキレンスルホニル、ヒドロキシＣ１−８アルコキシスルホニル、アミノスルホニル、オキソ、ハロ、フェニルおよびＣ１−８アルキルヘテロシクリルからなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で任意に置換された化合物を提供する。
【０３２９】
本発明は実施態様の別の群において、Ｄ１が二環式ヘテロアリールである化合物を提供する。実施態様の別の群において、Ｄ１は：
【化６】
2015078194.tif 000007
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択され、Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルキルカルボニル、Ｃ１−８アミノシクロアルキル、アミノＣ１−８アルキレンカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−８アルキレンアミノＣ１−８アルキレンカルボニル、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキレンカルボニル、ヒドロキシＣ１−８アルキレンカルボニル、ヒドロキシＣ１−８アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アミノ、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、アリール、アリールＣ１−８アルコキシカルボニルアミノ、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８アルキルスルホニル、アミノＣ１−８アルキレンスルホニル、アミノスルホニル、Ｃ１−８アルキレンアミノＣ１−８アルキレンスルホニル、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキレンスルホニル、ヒドロキシＣ１−８アルキレンスルホニル、ヒドロキシＣ１−８アルコキシスルホニル、アミノスルホニル、オキソ、ハロ、フェニルおよびＣ１−８アルキルヘテロシクリルからなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で任意に置換されている。
【０３３０】
本発明は実施態様の別の群において、Ｄ１がＣ３−８ヘテロシクリルである化合物を提供する。実施態様の１つの群において、式Ｉのヘテロシクリル基のいずれかは：
【化７】
2015078194.tif 000008
からなる群から選択される。
【０３３１】
実施態様の別の群において、Ｄ１は：
【化８】
2015078194.tif 000009
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択され、そのそれぞれはＣ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシカルボニルおよびオキソからなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で任意に置換されている。
【０３３２】
本発明は１つの実施態様において式Ｉ：
【化９】
2015078194.tif 000010
［式中：
Ｄ１は
（ａ）Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ２−８アルキニル、シアノ、アミノカルボニル、Ｃ１−８ハロアルキル、ヒドロキシ、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ３−８ヘテロシクリルおよびフェニルからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたＣ１−８アルキル；
（ｂ）Ｃ１−８アルキル、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、アリールＣ１−８アルコキシカルボニルアミノ、フェニルおよびヘテロシクリルＣ１−８アルキレンからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたＣ３−８シクロアルキル；
（ｃ）Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、Ｃ１−８ハロアルキル、カルボキシ、アシル、アシルアミノ、シアノ、アミノ、アミノカルボニル、アミノスルホニル、スルホニル、ニトロ、ヒドロキシ、Ｃ１−８アルコキシ、アリールオキシ、ハロ、スルホニルアミノ、Ｃ３−８シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル Ｃ１−８アルキルスルホニル、Ｃ１−８アルキルカルボニルヘテロシクリルおよびヘテロアリールからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたアリール；
（ｄ）Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−８アルコキシカルボニル、アミノ、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、アリールＣ１−８アルコキシカルボニルアミノ、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８アルキルスルホニル、オキソ、ハロ、フェニルおよびヘテロシクリルＣ１−８アルキレンからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたヘテロアリール；
（ｅ）Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシカルボニルおよびオキソからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたＣ３−８ヘテロシクリル；
からなる群から選択され
Ｒ１はＨ、Ｃ１−８アルキル、アミノ、アミノカルボニル、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８ハロアルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、オキソ、シアノ、Ｃ１−８アルコキシカルボニル、Ｃ３−８シクロアルキル、アリールおよびヘテロシクリルからなる群から選択され；かつ、各ヘテロシクリルはＣ１−８アルキル、ハロ、オキソ、アミノ、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アリールＣ１−８アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アリールＣ１−８アルキレンカルボニルおよびＣ１−８アルキルスルホニルからなる群から選択される１〜４個の置換基で任意に置換されており
Ｙ１は
（ａ）Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキル、アミノカルボニル−、ヒドロキシル、オキソ、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−８アルコキシおよびＣ１−８アルキルスルホニルからなる群から独立して選択される１〜３個の置換基Ｒ４ａで任意に置換されたアリール；
（ｂ）Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキル、アミノカルボニル−、ヒドロキシル、オキソ、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−８アルコキシおよびＣ１−８アルキルスルホニルからなる群から独立して選択される１〜３個の置換基Ｒ４ａで任意に置換されたヘテロアリール；
からなる群から選択され
Ｒ２はアミノスルホニル、Ｃ１−８アルキルスルフィニル、Ｃ１−８ハロアルコキシ、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノおよびヘテロシクリルからなる群から選択され；
Ｒ２がヘテロシクリルである場合、アミン Ｃ１−８アルキル−、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキル−、オキソ−、Ｃ１−８アルキルカルボニル、Ｃ３−８シクロアルキルカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、Ｃ１−８アルキルカルボニルアミノ、Ｃ３−８シクロアルキルカルボニルアミノ、ヘテロシクリルカルボニルアミノ、Ｃ１−８アルキルスルホニル、Ｃ３−８シクロアルキルスルホニル、ヘテロシクリルスルホニルからなる群から選択される少なくとも１つのＲ３基で置換されており；かつ、Ｒ２はＣ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシ、ハロ、アミノカルボニル、オキソ、ヒドロキシル、アミノＣ１−８アルキレン、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキレン、Ｃ１−８アルキルカルボニル、Ｃ３−８シクロアルキルカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、Ｃ１−８アルキルカルボニルアミノ、Ｃ３−８シクロアルキルカルボニルアミノ、ヘテロシクリルカルボニルアミノ、Ｃ１−８アルキルスルホニル、Ｃ３−８シクロアルキルスルホニル、ヘテロシクリルスルホニル、Ｃ３−８シクロアルキルおよびＣ１−８アルキルシクロアルキレンからなる群から独立して選択される１〜２個の置換基Ｒ４ｃでさらに任意に置換されている］
を有する化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体を提供する。
【０３３３】
本発明は別の実施態様において、−Ｙ１−Ｒ２部分が：
【化１０】
2015078194.tif 000011
Ｙ２はＮ、ＣＨまたはＣであり；
Ｒ４ａはＨおよびＣ１−８アルキルからなる群から選択され；
各Ｒ４ｃはＨ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキル、アミノカルボニル−、ヒドロキシル、オキソ、Ｃ１−８アルコキシおよびハロからなる群から独立して選択され；
各Ｒ４ｂはＨ、Ｃ１−８アルキル、アミノ、Ｃ１−８アルコキシおよびヘテロシクリルからなる群から独立して選択され；
Ｘはハロであり；
下付き文字ｐは０、１、２または３であり；かつ
波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択される化合物を提供する。
【０３３４】
本発明は別の実施態様において、−Ｙ１−Ｒ２部分が：
【化１１】
2015078194.tif 000012
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択される化合物を提供する。
【０３３５】
本発明は別の実施態様において、式Ｉａ：
【化１２】
2015078194.tif 000013
を有する化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体を提供する。
【０３３６】
本発明は別の実施態様において、式Ｉｂ：
【化１３】
2015078194.tif 000014
を有する化合物、またはその医薬的に許容される互変異性体、塩、もしくは立体異性体を提供する。
【０３３７】
本発明は別の実施態様において、式Ｉｃ：
【化１４】
2015078194.tif 000015
を有する化合物、またはその医薬的に許容される塩、立体異性体もしくはプロドラッグを提供する。
【０３３８】
本発明は別の実施態様において、式Ｉｄ：
【化１５】
2015078194.tif 000016
を有する化合物、またはその医薬的に許容される塩、立体異性体もしくはプロドラッグを提供する。
【０３３９】
本発明は別の実施態様において、式Ｉｄ１：
【化１６】
2015078194.tif 000017
を有する化合物、またはその医薬的に許容される塩、立体異性体もしくはプロドラッグを提供する。
【０３４０】
本発明は別の実施態様において、式Ｉｄ２：
【化１７】
2015078194.tif 000018
を有する化合物、またはその医薬的に許容される塩、立体異性体もしくはプロドラッグを提供する。
【０３４１】
本発明は別の実施態様において、
Ｄ１がＣ１−８アルコキシ、Ｃ２−８アルキニル、ＣＮ、アミノカルボニル、Ｃ１−８ハロアルキル、−ヒドロキシル、−Ｃ３−８シクロアルキル、−Ｃ３−８ヘテロシクリル、およびフェニルからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたＣ１−８アルキルであり；
Ｒ１がＨ、Ｃ１−８アルキル、アミノ、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８ハロアルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、オキソ、ＣＮ、Ｃ１−８アルコキシカルボニル、Ｃ３−８シクロアルキル、アリール、およびヘテロシクリルからなる群から選択され；各ヘテロシクリルがアルキル、ハロ、オキソ、アミノ、アルコキシ、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アリールＣ１−８アルコキシカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−８アルキルスルホニルからなる群から選択される１〜４個の置換基で任意に置換された化合物を提供する。
【０３４２】
本発明は別の実施態様において、Ｄ１がＣ１−８アルキル、アミノ、ヒドロキシ、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、アリールＣ１−８アルコキシカルボニルアミノ、フェニルおよびヘテロシクリルＣ１−８アルキレンからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたシクロアルキルである化合物を提供する。
【０３４３】
本発明は別の実施態様において、Ｄ１がシクロプロピルである化合物を提供する。
【０３４４】
本発明は別の実施態様において、Ｄ１がシクロブチルである化合物を提供する。
【０３４５】
本発明は別の実施態様において、Ｄ１がシクロペンチルである化合物を提供する。
【０３４６】
本発明は別の実施態様において、Ｄ１がＣ１−８アルキル、Ｃ１−８アルキルスルホニル、Ｃ１−８アルキルカルボニルヘテロシクリル、ハロ、Ｃ１−８アルキルカルボニルアミノ−およびＣ１−８アルコキシからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたフェニルである化合物を提供する。
【０３４７】
本発明は別の実施態様において、−Ｙ１−Ｒ２が：
【化１８】
2015078194.tif 000019
［式中：
Ｙ２はＮまたはＣであり；
各Ｒ４ａはＨおよびハロからなる群から選択され；
各Ｒ４ｃはＨおよびＣ１−８アルキルからなる群から独立して選択され；
各Ｒ４ｂはＨおよびＣ１−８アルキルからなる群から独立して選択され；
Ｘはハロであり；かつ
下付き文字ｐは０、１、２または３であり；かつ
波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択される化合物を提供する。
【０３４８】
本発明は別の実施態様において、−Ｙ１−Ｒ２部分が：
【化１９】
2015078194.tif 000020
［式中：
Ｙ２はＮまたはＣであり；
各Ｒ４ａはＨおよびＣ１−８アルキルからなる群から選択され；
各Ｒ４ｃはＨ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキル、アミノカルボニル−、ヒドロキシル、オキソ、Ｃ１−８アルコキシおよびハロからなる群から独立して選択され；
各Ｒ４ｂはＨ、Ｃ１−８アルキル、アミノ、Ｃ１−８アルコキシおよびヘテロシクリルからなる群から独立して選択され；
Ｘはハロであり；かつ
下付き文字ｐは０、１、２または３であり；かつ、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択される化合物を提供する。
【０３４９】
本発明は別の実施態様において、Ｄ１がＣ１−８アルキル、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−８アルコキシカルボニル、アミノ、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、アリールＣ１−８アルコキシカルボニルアミノ、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８アルキルスルホニル、オキソ、ハロ、フェニルおよびヘテロシクリルＣ１−８アルキレンからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたヘテロアリールである化合物を提供する。
【０３５０】
本発明は別の実施態様において、Ｄ１がＣ１−８アルキル、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−８アルコキシカルボニル、アミノ、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、アリールＣ１−８アルコキシカルボニルアミノ、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８アルキルスルホニル、オキソ、ハロ、フェニルおよびヘテロシクリルＣ１−８アルキレンからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換された二環式ヘテロアリールである化合物を提供する。
【０３５１】
本発明は別の実施態様において、Ｄ１が：
【化２０】
2015078194.tif 000021
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択され、そのそれぞれがＣ１−８アルキル、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アミノカルボニル、Ｃ１−８アルコキシカルボニル、アミノ、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、アリールＣ１−８アルコキシカルボニルアミノ、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８アルキルスルホニル、オキソ、ハロ、フェニルおよびヘテロシクリルＣ１−８アルキレンからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換された化合物を提供する。
【０３５２】
本発明は別の実施態様において、Ｄ１が
【化２１】
2015078194.tif 000022
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択され、そのそれぞれがＣ１−８アルキルまたはオキソで任意に置換された化合物を提供する。
【０３５３】
本発明は別の実施態様において、Ｄ１が：
【化２２】
2015078194.tif 000023
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択される化合物を提供する。
【０３５４】
本発明は別の実施態様において、Ｄ１が：
【化２３】
2015078194.tif 000024
［波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択される化合物を提供する。
【０３５５】
本発明は別の実施態様において、
Ｄ１が：
【化２４】
2015078194.tif 000025
［波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択される化合物を提供する。
【０３５６】
本発明は別の実施態様において、
Ｄ１がＣ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシカルボニルおよびオキソからなる群から独立して選択される１〜４個の置換基で任意に置換されたヘテロシクリルであり；
Ｒ１がＨ、Ｃ１−８アルキル、アミノ、ヒドロキシル、Ｃ１−８アルコキシ、Ｃ１−８ハロアルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、オキソ、ＣＮ、Ｃ１−８アルコキシカルボニル、Ｃ３−８シクロアルキル、アリールおよびヘテロシクリルからなる群から選択され；ヘテロシクリルがアルキル、ハロ、Ｃ１−８アルキルカルボニル、アリールＣ１−８アルキレンカルボニル、アミノカルボニルおよびＣ１−８アルキルスルホニルからなる群から選択される１〜４個の置換基で任意に置換された化合物を提供する。
【０３５７】
本発明は実施態様の別の群において、Ｄ１が：
【化２５】
2015078194.tif 000026
からなる群から選択される化合物を提供する。
【０３５８】
本発明は別の実施態様において、Ｄ１が
【化２６】
2015078194.tif 000027
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択され、そのそれぞれがＣ１−８アルキル、Ｃ１−８アルコキシカルボニルおよびオキソからなる群から独立して選択される１〜３個の置換基で任意に置換された化合物を提供する。
【０３５９】
本発明は別の実施態様において、式：
【化２７】
2015078194.tif 000028
を有する化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【０３６０】
本発明は別の実施態様において、式：
【化２８】
2015078194.tif 000029
を有する化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【０３６１】
本発明は１つの実施態様において、式Ｉｅ：
【化２９】
2015078194.tif 000030
［式中：
Ｄ１ａはＣ３−８シクロアルキルであり；
Ｒ１ａはＨ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−８アルキルカルボニルアミノ、アミノカルボニル、カルボニルアミノ、Ｃ３−８シクロアルキルカルボニルアミノ、Ｃ３−８シクロアルキルアミノカルボニル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヒドロキシＣ１−８アルキレンアミノカルボニルからなる群から選択され；
Ｒ２ａはＨ、ヒドロキシ、ハロ、Ｃ１−８アルキルスルホニルおよびヘテロアリールからなる群から選択され；またはＲ２ａはＲ１ａおよびそれらが結合する原子と組み合わさって＊−ＮＨ−ＣＨ＝ＣＨ−および＊−Ｎ＝ＣＨ−ＣＨ＝Ｎ−からなる群から選択されるヘテロ環部分を形成し、＊はＲ２の結合を示し；かつ、Ｒ１ａおよびＲ２ａの少なくとも１つはＨではなく；
各ヘテロアリールまたはヘテロシクリルは：
【化３０】
2015078194.tif 000031
［波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から独立して選択され、そのそれぞれはＣ１−８アルキル、ヒドロキシＣ１−８アルキレン、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキレン、アミノ、アミノカルボニル、Ｃ１−８アルキルアミノカルボニル、Ｃ１−８アルキルカルボニル、カルボキシ、ヒドロキシ、ハロおよびＣ１−８アルキルスルホニルからなる群から独立して選択される１〜２個の置換基で任意に置換されている］
を有する化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【０３６２】
本発明は別の実施態様において、式Ｉｆ：
【化３１】
2015078194.tif 000032
［式中：
Ｄ１ｂはＣ３−８シクロアルキルであり；
Ｒ１ｂはヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルカルボニルおよびヘテロシクリルスルホニルからなる群から選択され；
Ｒ２ｂはＨまたはハロからなる群から選択され；
各ヘテロアリールまたはヘテロシクリルは：
【化３２】
2015078194.tif 000033
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から独立して選択され、そのそれぞれはヒドロキシル、ヒドロキシＣ１−８アルキレン、Ｃ１−８アルコキシＣ１−８アルキレン、Ｃ１−８アルキルカルボニル、Ｃ１−８アルキルアミノカルボニル、カルボキシおよびＣ１−８アルキルスルホニルアミノからなる群から独立して選択される１〜２個の置換基で置換されている］
を有する化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【０３６３】
本発明は別の実施態様において、式Ｉｇ：
【化３３】
2015078194.tif 000034
［式中：
Ｄ１ｃはＣ３−８シクロアルキルであり；かつ
Ｅ１ｃは：
【化３４】
2015078194.tif 000035
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択される］
を有する化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【０３６４】
本発明は別の実施態様において、Ｒ１ｂが、アミノカルボニルおよびＣ１−８アルキルスルホニルからなる群から独立して選択される１〜２個の置換基で置換されたヘテロシクリルである化合物を提供する。
【０３６５】
本発明は別の実施態様において、Ｄ１ａ、Ｄ１ｂまたはＤ１ｃがシクロプロピルまたはシクロブチルである化合物を提供する。本発明は別の実施態様において、Ｄ１ａ、Ｄ１ｂまたはＤ１ｃがシクロプロピルである化合物を提供する。本発明は別の実施態様において、Ｄ１ａ、Ｄ１ｂまたはＤ１ｃがシクロブチルである化合物を提供する。
【０３６６】
本発明は別の実施態様において、式：
【化３５】
2015078194.tif 000036
を有する化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【０３６７】
本発明は１つの実施態様において、式Ｉｈ：
【化３６】
2015078194.tif 000037
［式中：
Ｄ１はＣ３−８シクロアルキルであり；
Ｒ１はＨ、アミノ、Ｃ１−８アルコキシカルボニルアミノ、Ｃ１−８アルキルカルボニルアミノ、Ｃ１−８アルコキシ、アミノカルボニル、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、Ｃ１−８アルキルチオ、Ｃ１−８アルキルスルホニルおよびヘテロシクリルＣ１−８アルキレンからなる群から選択され；各ヘテロアリールまたはヘテロシクリルは：
【化３７】
2015078194.tif 000038
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から独立して選択され、そのそれぞれはＣ１−８アルキル、−ＣＯＮＨ２、ヒドロキシ、ハロ、Ｃ１−８アルキルスルホニルおよびヘテロアリールからなる群から独立して選択される１〜２個の置換基で任意に置換されており；かつ
Ｒ２はＨ、Ｃ１−８アルキル、ハロ、Ｃ１−８アルコキシおよびヘテロアリールからなる群から選択され；または、Ｒ２はＲ１およびそれらが結合する原子と組み合わさって−ＮＨ−Ｎ＝ＣＨ−＊、−ＣＨ＝Ｎ−ＮＨ−＊、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−＊；−ＮＨ−ＣＨ＝ＣＨ−＊、および−Ｎ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−＊からなる群から選択されるヘテロ環部分を形成し、＊はＲ２の結合を示す］
を有する化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【０３６８】
本発明は別の実施態様において、式Ｉｉ：
【化３８】
2015078194.tif 000039
［式中：
Ｄ１はＣ３−８シクロアルキルであり；
Ｅ１は：
【化３９】
2015078194.tif 000040
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
からなる群から選択される］
を有する化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【０３６９】
本発明は別の実施態様において、Ｒ１がＣＯＮＨ２またはＣ１−８アルキルスルホニルで任意に置換された
【化４０】
2015078194.tif 000041
［式中、波線は分子の残りの部分との結合点を示す］
である化合物を提供する。
【０３７０】
本発明は別の実施態様において、Ｒ１がＣ１−８アルキルスルホニルである化合物を提供する。
【０３７１】
本発明は別の実施態様において、Ｒ２がＨである化合物を提供する。
【０３７２】
本発明は別の実施態様において、式Ｉｊ：
【化４１】
2015078194.tif 000042
［式中、Ｄ１はＣ３−８シクロアルキルである］
を有する化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【０３７３】
本発明は別の実施態様において、式：
【化４２】
2015078194.tif 000043
［式中、Ｄ１はＣ３−８シクロアルキルである］
を有する化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【０３７４】
本発明は別の実施態様において、式：
【化４３】
2015078194.tif 000044
［式中、Ｄ１はＣ３−８シクロアルキルである］
を有する化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【０３７５】
本発明は別の実施態様において、Ｄ１がシクロプロピルまたはシクロブチルである化合物を提供する。
【０３７６】
本発明は別の実施態様において、Ｄ１がシクロプロピルである化合物を提供する。
【０３７７】
本発明は別の実施態様において、Ｄ１がシクロブチルである化合物を提供する。
【０３７８】
本発明は別の実施態様において：
【化４４】
2015078194.tif 000045
からなる群から選択される化合物を提供する。
【０３７９】
本発明は別の実施態様において、実施例に示す化合物を提供する。
【０３８０】
本発明は別の実施態様において、表に示す構造を有する化合物を提供する。
【０３８１】
実施態様の別の群において、上記の実施態様のいずれかを本明細書に記載している他の実施態様と組み合わせて、本発明の他の実施態様を形成してもよいと理解されるだろう。
【０３８２】
ｂ．合成方法
本発明の化合物は、実施例により詳細に記載されている方法を含む既知の有機合成技術によって製造されうる。一般的に、上記の構造（Ｉ）の化合物は、下記の図３によって製造され得、ここで特に示さない限り、全ての置換基は上記で定義した通りである。
【０３８３】
式Ｉを有する化合物は、図３に従って製造されうる。カルボン酸１.１は、塩化チオニルなどの塩素化剤での処理による１ステップの製造方法を介して酸塩化物１.２に変換され、下記の条件と類似の条件を使用するエタノールなどのアルコールでのエステル化によって化合物１.３を形成する。エステル１.３はオキシ塩化リンなどの塩素化剤で二塩素化される。ジイソプロピルアミン（ＤＩＡ）の存在下などの塩基性の条件下、２，４−ジクロロピリミジンの４−クロロ基をＲ１−Ｄ１−ＮＨ２（市販され、または当業者に既知の方法を使用して合成される）などの適切なアミンと選択的に交換することにより、式１.５の化合物を提供する。続くエステルの加水分解、第２のクロロ基のＥＤＣとの交換、およびアンモニアでの処理により、化合物１.７を得る。ベンゾトリアゾリルエーテル化合物１.７は、直線的な経路によっても製造されうる。ベンゾトリアゾリルエーテル基をＲ２−Ｙ１−ＮＨ２（市販され、または当業者に既知の方法を使用して合成される）などの適切なアミンと交換することにより、所望の生成物Ｉを得、ここでＲ１およびＲ２は前記で定義した通りである。
【０３８４】
当業者であれば、Ｒ１−Ｄ１またはＲ２−Ｙ１が末端にヘテロ原子を含む構造（Ｉ）の特定の実施態様の場合、保護基戦略を用いることが有利であろうことを認識することができるであろう。該保護基は当業者に既知の方法を使用して除去され得、構造（１）の化合物を得る。
【０３８５】
本発明の化合物は一般的に、遊離塩基として利用されうる。あるいは、本発明の化合物は、下記の酸付加塩の形態にて用いられうる。
【０３８６】
ｃ．ｓｙｋおよびＪＡＫキナーゼの阻害
ＪＡＫキナーゼの阻害剤としての特定の化合物の活性は、インビトロまたはインビボで評価されうる。いくつかの実施態様では、特定の化合物の活性は、細胞アッセイにて検査されうる。選択性は、単離されたキナーゼでの生化学的アッセイにおいても確認されうる。
【０３８７】
ＪＡＫキナーゼ阻害活性を評価し、ｓｙｋキナーゼと比較した特定の化合物の選択性の程度を決定するために、類似の種類のアッセイが用いられうる。該阻害をアッセイする１つの方法は、下流の遺伝子産物の上方制御に対する本発明の化合物の効果の検出である。Ｒａｍｏｓ／ＩＬ４アッセイにおいて、Ｂ細胞はサイトカイン、インターロイキン−４（ＩＬ−４）で刺激され、ＪＡＫファミリーキナーゼ、ＪＡＫ１およびＪＡＫ３のリン酸化を通じてＪＡＫ／Ｓｔａｔ経路の活性化をもたらし、次いで転写因子Ｓｔａｔ−６をリン酸化し、活性化する。活性化されたＳｔａｔ−６によって上方制御される遺伝子の１つは、低親和性ＩｇＥ受容体、ＣＤ２３である。ＪＡＫ１およびＪＡＫ３キナーゼに対する阻害剤（例えば、本明細書で記載する２，４−置換ピリミジンジアミン化合物）の効果を研究するために、ヒトＩＬ−４でヒトＲａｍｏｓ  Ｂ細胞を刺激する。刺激から１０’後、細胞を細胞内フローサイトメトリーで分析し、ＳＴＡＴ−６リン酸化の程度を測定する。刺激から２０〜２４時間後、ＣＤ２３の上方制御のために細胞を染色し、フローサイトメトリーを使用して分析する。コントロール条件と比較したリン酸化ＳＴＡＴ−６および／または細胞表面ＣＤ２３存在量の減少は、試験化合物がＪＡＫキナーゼ経路を活発に阻害したことを示す。
【０３８８】
さらに、Ｒａｍｏｓ  Ｂ細胞のＩＬ−６刺激はＪＡＫ１、ＪＡＫ２、およびＴｙｋ２を誘導し、Ｓｔａｔ−３およびＥｒｋのリン酸化をもたらす。刺激から１０’後、細胞を細胞内フローサイトメトリーで分析し、化合物がこれらのリン酸化事象を阻害する能力を測定する。ＪＡＫ２の活性を特異的に測定するために、Ｓｔａｔ５によってコントロールされたβ−ラクタマーゼレポーター遺伝子を発現しているＣｅｌｌＳｅｎｓｏｒ  ｉｒｆ１−ｂｌａ  ＨＥＬ細胞株が用いられる（インビトロジェン、カールズバッド、カリフォルニア州）。これらの細胞は、恒常的に活性のあるＪＡＫ２変異体（ＪＡＫ２Ｖ６１７Ｆ）を発現しているが、これは天然には骨髄増殖性新生物に見られる（Constantinescu, S., et.al, Trends Biochem Sci., 2008; 33:122-31）。β−ラクタマーゼレポーター遺伝子発現量の減少は、化合物のＪＡＫ２阻害活性の測定に用いられる。
【０３８９】
本発明の化合物の活性は、Ａ５４９肺上皮細胞およびＵ９３７細胞に対する本明細書で記載する本発明の化合物の効果をアッセイすることによってさらに特徴付けられうる。Ａ５４９肺上皮細胞およびＵ９３７細胞は、様々な異なる刺激に応答してＩＣＡＭ−１（ＣＤ５４）表面発現を上方制御する。それゆえ、ＩＣＡＭ−１発現を読み出し情報として使用して、同一の細胞型における異なるシグナル伝達経路に対する試験化合物の効果が評価されうる。ＩＬ−１β受容体を通じたＩＬ−１βでの刺激は、ＴＲＡＦ６／ＮＦκＢ経路を活性化し、ＩＣＡＭ−１の上方制御をもたらす。ＩＦＮγは、ＪＡＫ１／ＪＡＫ２経路の活性化を通じてＩＣＡＭ−１上方制御を誘導する。ＩＣＡＭ−１の上方制御は、化合物用量曲線にわたるフローサイトメトリーによって定量化され得、ＥＣ５０値が計算される。
【０３９０】
本発明の化合物の活性は、Ａ５４９肺上皮細胞およびＵ９３７細胞に対する本明細書で記載する本発明の化合物の効果をアッセイすることによってさらに特徴付けられうる。Ａ５４９肺上皮細胞およびＵ９３７細胞は、様々な異なる刺激に応答してＩＣＡＭ−１（ＣＤ５４）表面発現を上方制御する。それゆえ、ＩＣＡＭ−１発現を読み出し情報として使用して、同一の細胞型における異なるシグナル伝達経路に対する試験化合物の効果が評価されうる。ＩＬ−１β受容体を通じたＩＬ−１βでの刺激は、ＴＲＡＦ６／ＮＦκＢ経路を活性化し、ＩＣＡＭ−１の上方制御をもたらす。ＩＦＮγは、ＪＡＫ１／ＪＡＫ２経路の活性化を通じてＩＣＡＭ−１上方制御を誘導する。ＩＣＡＭ−１の上方制御は、化合物用量曲線にわたるフローサイトメトリーによって定量化され得、ＥＣ５０値が計算される。この種の代表的なアッセイは、実施例にさらに詳細に記載されている。
【０３９１】
本明細書で記載している活性化合物は、一般的に、本明細書で記載するアッセイにて測定したように、約１ｍＭ以下の範囲にあるＩＣ５０でＪＡＫキナーゼ経路を阻害する。もちろん、当業者であれば、より低いＩＣ５０（例えば、およそ１００μＭ、７５μＭ、５０μＭ、４０μＭ、３０μＭ、２０μＭ、１５μＭ、１０μＭ、５μＭ、１μＭ、５００ｎＭ、１００ｎＭ、１０ｎＭ、１ｎＭ、またはさらに低い値）を示す化合物は治療への応用に特に有用でありうることを理解することができるであろう。特定の細胞型に特異的な活性が所望である場合、化合物は所望の細胞型で活性についてアッセイされ得、他の細胞型に対する活性の欠如についてカウンタースクリーニングされうる。該カウンタースクリーニングにおける「不活性」の所望の程度、または活性対不活性の所望の比は、異なる状況によって変動し得、使用者によって選択されうる。
【０３９２】
活性化合物は典型的には、約２０μＭ以下の範囲、典型的には約１０μＭ、１μＭ、５００ｎＭ、１００ｎＭ、１０ｎＭ、１ｎＭ、またはさらに低い値の範囲にあるＩＣ５０で、Ｂ細胞内のＣＤ２３のＩＬ−４刺激発現も阻害する。用いられうる適切なアッセイは、実施例に記載されているアッセイであり、「ＩＬ−４で刺激されたＲａｍｏｓ  Ｂ細胞株についてのアッセイ」である。特定の実施態様では、本発明の活性化合物は実施例に記載されているアッセイにおいて、５μＭ以下、５μＭより大きく２０μＭ未満、２０μＭより大きい、または２０μＭより大きく５０μＭ未満のＩＣ５０を有する。
【０３９３】
活性化合物は典型的には、約２０μＭ以下の範囲、典型的には約１０μＭ、１μＭ、５００ｎＭ、１００ｎＭ、１０ｎＭ、１ｎＭ、またはさらに低い値の範囲にあるＩＣ５０で、Ｕ９３７またはＡ５４９細胞内のＩＦＮγ曝露によって誘導されるＩＣＡＭ１（ＣＤ５４）の発現も阻害する。ＩＦＮγ刺激細胞内のＩＣＡＭ（ＣＤ５４）の発現に対するＩＣ５０は、単離されたＡ５４９またはＵ９３７細胞株での機能性細胞アッセイにて決定されうる。用いられうる適切なアッセイは、実施例に記載されているアッセイであり、それぞれ「ＩＦＮγで刺激されたＡ５４９上皮細胞株」および「Ｕ９３７  ＩＦＮγ  ＩＣＡＭ１  ＦＡＣＳアッセイ」である。特定の実施態様では、本発明の活性化合物は、実施例に記載されているアッセイにおいて２０μＭ以下、２０μＭより大きい、または２０μＭより大きく５０μＭ未満のＩＣ５０を有する。
【０３９４】
ｄ．組成物および投与方法
本発明はさらに、１つ以上の式（Ｉ）の化合物またはその医薬的に許容される塩、エステルもしくはプロドラッグ、および医薬的に許容される担体または希釈剤を含む組成物を提供する。本発明の式（Ｉ）の化合物は官能基で誘導体化され得、プロドラッグ誘導体を提供し、インビボで親化合物に戻る変換をされうることが理解できるであろう。該プロドラッグの例は、生理的に許容されるが代謝的に不安定なエステル誘導体を含み、例えば化合物のヒドロキシル基に由来するメトキシメチルエステル、メチルチオメチルエステル、もしくはピバロイルオキシメチルエステルなど、または化合物のアミノ基に由来するカルバモイル基などである。さらに、式（Ｉ）の親化合物をインビボで産生することができる式（Ｉ）の化合物のいずれかの生理的に許容される均等物は、代謝的に不安定なエステルまたはカルバメートと同様に、本発明の範囲内に入る。
【０３９５】
本明細書で用いられている用語「医薬的に許容される塩」は、そのカウンターイオンが塩の医薬用量において患者に無毒であるいずれかの酸または塩基付加塩を指す。多数の医薬的に許容される塩が医薬分野で周知である。本発明の化合物の医薬的に許容される塩がこれらの組成物において利用される場合、それらの塩は好ましくは無機または有機の酸および塩基に由来する。該酸性塩の中には下記の塩が含まれる：酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、硫酸水素塩、酪酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、ルコヘプタン酸塩（lucoheptanoate）、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニル−プロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩、ウンデカン酸塩、ヒドロハロゲン化物（例えば、塩酸塩および臭化水素酸塩）、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、スルファミン酸塩、マロン酸塩、サリチル酸塩、メチレン−ビス−ｂ−ヒドロキシナフトエ酸塩、ゲンチシン酸塩、イセチオン酸塩、ジ−ｐ−トルオイル酒石酸塩、エタンスルホン酸塩、シクロヘキシルスルファミン酸塩、およびキナ酸塩など。医薬的に許容される塩基付加塩は、アルカリまたはアルカリ土類金属塩基または通常の有機塩基に由来する塩、例えばトリエチルアミン、ピリジン、ピペリジン、モルホリン、Ｎ−メチルモルホリン、アンモニウム塩、ナトリウムおよびカリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウムおよびマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンなどの有機塩基との塩、ならびにアルギニン、リジンなどのアミノ酸との塩などを含み、これらに限定されない。
【０３９６】
さらに、塩基性の窒素含有基は、メチル、エチル、プロピルおよびブチルの塩化物、臭化物およびヨウ化物などの低級アルキルハロゲン化物；ジメチル、ジエチル、ジブチルおよびジアミルの硫酸塩などのジアルキル硫酸塩、デシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリルの塩化物、臭化物およびヨウ化物などの長鎖ハロゲン化物；ベンジルおよびフェネチルの臭化物などのアラルキルハロゲン化物などの薬剤で四級化されていてもよい。それによって、水または油に溶性または分散性の生成物が得られる。
【０３９７】
本発明の組成物および方法に利用される化合物は、選択的生物学的特性を増強するために、適切な官能基を付加することによって修飾されていてもよい。該修飾は当該技術分野で周知であり、特定の生体系（例えば、血液、リンパ系、中枢神経系など）への生物学的浸透を増加させること、経口利用性を増加させること、注射による投与を可能にするために溶解度を増加させること、代謝を変化させることおよび排出速度を変化させることを含む。
【０３９８】
本発明の医薬組成物は、特に通常の顆粒化、混合、溶解、カプセル化、凍結乾燥、または乳化過程などの当該技術分野で周知の方法によって製造されうる。組成物は顆粒、沈殿、もしくは微粒子、凍結乾燥粉末、回転乾燥粉末もしくは噴霧乾燥粉末、非晶質粉末を含む粉末、錠剤、カプセル剤、シロップ、坐剤、注射、乳剤、エリキシル剤、懸濁液または溶液を含む様々な形態に製造されうる。製剤は任意に安定剤、ｐＨ修飾剤、界面活性剤、バイオアベイラビリティ修飾剤およびこれらの組み合わせを含んでよい。
【０３９９】
用語「単位用量形態」は、ヒト対象および他の哺乳類のための単一の投与量として適切な物理的に分離した単位を指し、各単位は適切な医薬賦形剤（例えば、アンプル）と共に、所望の作用発現、耐容性、および／または治療効果を生じるように計算された所定量の薬物を含む。さらに、より濃縮された組成物が製造され得、次いでそこからより希薄な単位用量組成物が生じうる。それゆえ、より濃縮された組成物は実質的に、例えば、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０回を超える、またはそれ以上の回数の量の１つ以上のｓｙｋおよび／またはＪＡＫ阻害剤を含むであろう。
【０４００】
該剤形を製造する方法は、当業者に既知である（例えば、「REMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCES, 18TH ED., Mack Publishing Co., Easton, PA (1990)」を参照のこと）。さらに、本発明のｓｙｋおよび／またはＪＡＫ阻害剤の医薬的に許容される塩（例えば、酸付加塩）が製造され得、合成有機化学の当業者に既知の標準的な製造方法を使用することによって組成物に入れることができ、例えば、「J. March, Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms and Structure, 4th Ed. (New York: Wiley-Interscience, 1992)」に記載されている。
【０４０１】
組成物は典型的には、通常の医薬担体または賦形剤を含み、さらに他の薬剤、担体、アジュバント、希釈剤、組織透過促進剤、および可溶化剤などを含んでよい。好ましくは、組成物は約０.０１％〜約９０％、好ましくは約０.１％〜約７５％、より好ましくは約０.１％〜５０％、さらに好ましくは約０.１％〜１０重量％の１つ以上のｓｙｋおよび／またはＪＡＫ阻害剤を含み、残りは適切な医薬担体および／または賦形剤からなるであろう。適切な賦形剤は特定の組成物および例えば、上記の「REMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCES」にある当該技術分野で周知の方法による投与経路に適合しうる。
【０４０２】
これらの組成物中に用いられうる医薬的に許容される担体は、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、ヒト血清アルブミンなどの血清タンパク質、リン酸塩などの緩衝物質、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸の部分的グリセリド混合物、水、塩または電解質、例えばプロタミン硫酸塩、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベース物質、ポリエチレングリコール、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂を含む。
【０４０３】
適切な賦形剤の例は、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アラビアゴム、リン酸カルシウム、アルギン酸塩、トラガカント、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水、生理食塩水、シロップ、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、およびカルボポールなどのポリアクリル酸を含み、これらに限定されない。組成物はさらに、タルク、ステアリン酸マグネシウム、および鉱油などの滑沢剤；湿潤剤；乳化剤；懸濁剤；メチル−、エチル−、およびプロピル−ヒドロキシ−ベンゾエートなどの保存剤；無機および有機の酸および塩基などのｐＨ調節剤；甘味料；ならびに香料を含んでよい。
【０４０４】
１つ以上のｓｙｋおよび／またはＪＡＫ阻害剤と、有利には１つ以上の適切な医薬賦形剤を含む組成物の投与は、許容される投与様式のいずれかを介して行われうる。それゆえ、投与は、例えば、経口的、局所的、静脈内、皮下、経皮的（transcutaneous）、経皮的（transdermal）、筋肉内、関節内（intra-joint）、非経口的、細動脈内、皮内、心室内、頭蓋内、腹腔内、病巣内、鼻腔内、直腸内、膣内、吸入により、または埋め込みリザーバーを介してなされてよい。本明細書で用いられている用語「非経口」は、皮下、静脈内、筋肉内、関節内（intra-articular）、滑膜内、胸骨内、くも膜下腔内、肝内、病巣内および頭蓋内注射または注入技術を含む。好ましくは、組成物は、経口または静脈内投与される。本発明の製剤は、短時間作用型、即時放出型、または長時間作用型として設計されてよい。さらに、化合物は全身的よりも局所的方法、例えば持続放出製剤としての投与（例えば、注射）にて投与されうる。代表的な実施態様では、本発明の組成物は、哺乳類、好ましくはヒトへの医薬投与用に製剤化される。
【０４０５】
１つ以上のｓｙｋおよび／またはＪＡＫ阻害剤を含む本発明の組成物は反復して、例えば、少なくとも２、３、４、５、６、７、８回、またはそれ以上の回数にて投与され得、または該組成物は持続注入によって投与されうる。適切な投与部位は、皮膚、気管支、胃腸、肛門、膣、眼、および耳を含み、これらに限定されない。製剤は固体、半固体、凍結乾燥粉末、または液体剤形、例えば、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、溶液、懸濁液、乳剤、坐剤、保持浣腸剤、クリーム剤、軟膏剤、ローション剤、ゲル剤、またはエアロゾルなどの形態であってよく、好ましくは正確な投与量の簡便な投与に適切な単位用量形態にあってよい。
【０４０６】
本発明の医薬組成物はいずれかの経口的に許容される剤形にあってよく、錠剤、カプセル剤、カシュ剤、乳剤、懸濁液、溶液、シロップ剤、エリキシル剤、噴霧剤、巨丸剤、トローチ剤、散剤、顆粒剤、および持続放出製剤を含む。経口投与用に適切な賦形剤は、医薬品グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルカム、セルロース、グルコース、ゼラチン、スクロース、および炭酸マグネシウムなどを含む。経口使用のための錠剤の場合、一般に用いられる担体は、ラクトースおよびトウモロコシデンプンを含む。ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤も、典型的には加えられる。カプセル形態については、ラクトースおよび乾燥トウモロコシデンプンを含む希釈剤が有用である。水溶性懸濁液が経口使用に必要である場合、活性成分は乳化剤および懸濁剤と組み合わせられる。必要であれば、特定の甘味料、香料または着色剤が加えられてもよい。
【０４０７】
いくつかの実施態様では、組成物は丸剤、錠剤、またはカプセル剤の形態をとり、それゆえ、該組成物は、１つ以上のｓｙｋおよび／またはＪＡＫ阻害剤と共に、ラクトース、スクロース、およびリン酸水素カルシウムなどの希釈剤；デンプンもしくはその誘導体などの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤；ならびに／またはデンプン、アラビアゴム、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、セルロースおよびその誘導体などの結合剤を含んでよい。錠剤は、当業者に既知のいずれかの圧縮または成形過程によって製造されうる。圧縮錠剤は、適切な装置内で、自由流動形態、例えば、散剤または顆粒剤の形態にあるｓｙｋおよび／またはＪＡＫ阻害剤を、任意に補助的な成分、例えば、結合剤、滑沢剤、希釈剤、崩壊剤、または分散剤と混合して圧縮することによって製造されうる。成形錠剤は、適切な装置内で、粉末ｓｙｋおよび／またはＪＡＫ阻害剤といずれかの適切な担体との混合物を成形することによって製造されうる。
【０４０８】
あるいは、本発明の医薬組成物は、直腸投与用の坐剤の形態にあってよい。これらは、室温で固体であるが直腸温度で液体である適切な非刺激性賦形剤と薬剤を混合することによって製造され得、それゆえ直腸内で融解して薬物を放出する。該物質はココアバター、蜜蝋、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、固い脂肪、および／または水素化ココグリセリドを含む。直腸投与に適切な組成物は、１つ以上のｓｙｋおよび／またはＪＡＫ阻害剤ならびに直腸および／または結腸に生理的に適合する医薬的に許容されるビヒクル（例えば、５０％エタノール水溶液または塩水溶液）を含む直腸浣腸単位も含んでよい。該直腸浣腸単位は、好ましくはポリエチレンからなる不活性カバーによって保護され、白色ワセリンなどの滑沢剤で潤滑され、好ましくは調剤した処方箋の逆流を防止するための一方向弁によって保護されたアプリケーターチップを含む。該直腸浣腸単位は、肛門を介して大腸に挿入するために十分な長さ、好ましくは２インチをも有する。
【０４０９】
液体組成物は、１つ以上のｓｙｋおよび／またはＪＡＫ阻害剤、ならびに任意に１つ以上の医薬的に許容されるアジュバントを、例えば、生理食塩水溶液、水溶性デキストロース、グリセロール、エタノールなどの担体中で溶解または分散し、例えば経口、局所、または静脈内投与用の溶液または懸濁液を形成することによって製造されうる。医薬製剤は油、水、アルコール、およびその組み合わせなどの滅菌液を使用して、液体懸濁液または溶液として製造されうる。経口または非経口投与用に、医薬的に適切な界面活性剤、懸濁剤または乳化剤が加えられてよい。懸濁液は、落花生油、ゴマ油、綿実油、コーン油およびオリーブ油などの油を含んでよい。懸濁製剤は、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、脂肪酸グリセリドおよびアセチル化脂肪酸グリセリドなどの脂肪酸のエステルも含んでよい。懸濁製剤は、エタノール、イソプロピルアルコール、ヘキサデシルアルコール、グリセロールおよびプロピレングリコールなどのアルコールを含んでよい。ポリ（エチレングリコール）などのエーテル、鉱油およびワセリンなどの石油炭化水素、ならびに水が、懸濁製剤中に用いられてもよい。
【０４１０】
本発明の医薬組成物は、特に治療のターゲットが眼、皮膚、または下部消化管の疾患を含む局所適用によって容易に到達できる領域または臓器を含む場合、局所形態にあってもよい。適切な局所製剤は、これらの領域または臓器のそれぞれについて容易に製造される。局所投与のために、１つ以上のｓｙｋおよび／またはＪＡＫ阻害剤を含む組成物は乳剤、ローション剤、ゲル剤、泡剤、クリーム剤、ゼリー剤、溶液、懸濁液、軟膏剤、および経皮パッチの形態にあってよい。
【０４１１】
下部消化管用の局所適用は、直腸坐剤製剤（上記参照）にて、または適切な浣腸製剤にて達成されうる。局所経皮パッチも用いられてよい。局所適用のために、医薬組成物は１つ以上の担体に懸濁または溶解した活性成分を含む適切な軟膏剤に製剤化されてよい。本発明の化合物の局所投与用の担体は、鉱油、液体ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化ワックスおよび水を含み、これらに限定されない。あるいは、該医薬組成物は１つ以上の医薬的に許容される担体に懸濁または溶解した活性成分を含む適切なローション剤またはクリーム剤に製剤化されてよい。適切な担体は鉱油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリソルベート６０、セチルエステル、ワックス、セチルアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコールおよび水を含む。
【０４１２】
本発明の医薬組成物は、経鼻エアロゾルまたは吸入によって投与されてもよい。吸入による送達用に、該組成物は噴霧器を介して乾燥粉末として、または液体形態にて送達されうる。該組成物は医薬製剤の技術分野で周知の技術に従って製造され、ベンジルアルコールもしくは他の適切な防腐剤、バイオアベイラビリティを増強する吸収促進剤、フッ化炭素および／または他の通常の可溶化剤または分散剤を使用して、生理食塩水中の溶液として製造されうる。
【０４１３】
眼使用のために、医薬組成物は塩化ベンジルアルコニウムなどの防腐剤の存在下または非存在下、等張性のｐＨ調節滅菌生理食塩水中の微粒子化懸濁液として、または好ましくは、等張性のｐＨ調節滅菌生理食塩水中の溶液として製剤化されてよい。あるいは、眼使用のために、該医薬組成物はワセリンなどの軟膏剤に製剤化されてよい。
【０４１４】
非経口投与のために、組成物は滅菌注射溶液および滅菌包装粉末の形態にあってよい。好ましくは、注射溶液はｐＨ約４.５〜約７.５で製剤化される。
【０４１５】
本発明の組成物の滅菌注射形態は、水溶性または油性の懸濁液であってよい。これらの懸濁液は、適切な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を用いて、当該技術分野で周知の技術に従って製剤化されてよい。該滅菌注射製剤は、無毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の滅菌注射溶液または懸濁液であってもよく、例えば１，３−ブタンジオール中の溶液であってよい。利用されてよい許容されるビヒクルおよび溶媒には、水、リンガー溶液および等張塩化ナトリウム溶液がある。さらに、滅菌の固定油が溶媒または懸濁化剤として通常利用される。このために、合成モノまたはジグリセリドを含むいずれかの穏やかな固定油が利用されてよい。オレイン酸およびそのグリセリド誘導体などの脂肪酸が、オリーブ油またはヒマシ油などの天然の医薬的に許容される油として、特にそれらのポリオキシエチル化バージョンにて注射剤の製造に有用である。これらの油溶液または油懸濁液は、乳剤および懸濁液を含む医薬的に許容される剤形の製剤に一般に用いられるカルボキシメチルセルロースまたは類似の分散剤などの長鎖アルコール希釈剤または分散剤も含んでよい。ツイーン（Ｔｗｅｅｎｓ）、スパン（Ｓｐａｎｓ）および他の乳化剤などの他の一般に用いられる界面活性剤、または医薬的に許容される固体、液体、もしくは他の剤形の製造に一般に用いられるバイオアベイラビリティ増強剤も製剤目的で用いられてよい。化合物は、ボーラス注射または持続注入などの注射による非経口投与用に製剤化されてよい。注射用の単位用量形態は、アンプル内または多用量容器内にあってよい。
【０４１６】
本発明の組成物は、凍結乾燥形態にて提供されてもよい。該組成物は投与前の再構成用に緩衝剤、例えば、炭酸水素塩を含んでよく、または緩衝剤は、例えば、水との再構成用に凍結乾燥組成物に含まれていてよい。該凍結乾燥組成物は、適切な血管収縮剤、例えば、エピネフリンをさらに含んでよい。該凍結乾燥組成物は、シリンジ内で提供されてよく、任意に再構成用の緩衝剤と組み合わせて包装され、再構成された組成物は患者へすぐに投与されうる。
【０４１７】
有効量を含む上記剤形のいずれかは、通常の実験の範囲内にあり、本発明の範囲内にある。治療的に有効な用量は、投与経路および剤形に依存して変動してよい。本発明の代表的な化合物は、高い治療指数を示す製剤である。治療指数は、ＬＤ５０とＥＤ５０の間の比として表されうる毒性効果と治療効果の間の用量比である。ＬＤ５０は集団の５０％を死に至らしめる用量であり、ＥＤ５０は集団の５０％に治療的に有効な用量である。ＬＤ５０およびＥＤ５０は、動物細胞培養または実験動物において標準的な医薬的製造方法によって決定される。
【０４１８】
上記の代表的な剤形に加えて、医薬的に許容される賦形剤および担体ならびに剤形が当業者に一般的に既知であり、本発明に含まれる。いずれかの特定の患者についての特異的投与量および治療計画は、利用される特異的化合物の活性、患者の年齢、体重、全体的な健康状態、性別および食事、ならびに投与期間、排出速度、薬物の組み合わせ、治療する医師の判断、ならびに治療される特定の疾患の重症度を含む様々な要因に依存するであろうと理解されるべきである。活性成分の量は、組成物中の特定の化合物および存在する場合には、他の治療薬にも依存するであろう。
【０４１９】
ｅ．使用方法
本発明は、ｓｙｋおよび／またはＪＡＫ活性を阻害または減少する方法、ならびにそれを必要とする患者（例えば、ヒトまたは非ヒト）のｓｙｋおよび／またはＪＡＫ関連の容態、症状、状態、障害または疾患を治療または改善する方法を提供する。１つの実施態様では、ｓｙｋおよび／またはＪＡＫ関連の容態、症状、状態、障害または疾患は、ｓｙｋおよび／またはＪＡＫキナーゼ活性によって少なくとも部分的に媒介される。より具体的な実施態様において、本発明は、ｓｙｋおよび／またはＪＡＫキナーゼ活性によって少なくとも部分的に媒介される状態または障害、例えば心血管疾患、炎症性疾患または自己免疫疾患を治療する方法を提供する。
【０４２０】
１つの実施態様では、本発明は好ましくない血栓症によって特徴付けられる哺乳類の状態を予防または治療する方法であって、該哺乳類に本発明の化合物の治療上の有効量を投与するステップを含む方法を提供する。該状態は、再狭窄、急性冠症候群、心筋梗塞、不安定狭心症、不応性狭心症、血栓溶解療法後または冠動脈形成術後に生じる冠動脈内血栓性閉塞、血栓媒介脳血管症候群、塞栓性脳卒中、血栓性脳卒中、一過性脳虚血発作、静脈血栓症、深部静脈血栓症、肺塞栓症、凝固障害、播種性血管内凝固症候群、血栓性血小板減少性紫斑病、閉塞性血栓血管炎、ヘパリン起因性血小板減少症と関連する血栓性疾患、体外循環と関連する血栓性合併症、心臓もしくは他の血管内カテーテル挿入、大動脈内バルーンポンプ、冠動脈ステントまたは心臓弁などの器具使用と関連する血栓性合併症、および人工器官を装着する必要がある状態などを含み、これらに限定されない。
【０４２１】
さらなる実施態様において、本発明は血栓症、免疫性血小板減少性紫斑病、ヘパリン起因性血小板減少症、拡張型心筋症、鎌状赤血球症、アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、血管炎症、不安定狭心症または急性冠症候群を治療する方法を提供する。
【０４２２】
別の実施態様において、本発明はアレルギー、喘息、関節リウマチ、非ホジキンリンパ腫などのＢ細胞媒介疾患、抗リン脂質症候群、ループス、乾癬、多発性硬化症、末期腎疾患または慢性リンパ性白血病を治療する方法も提供する。
【０４２３】
別の実施態様において、本発明は溶血性貧血または免疫性血小板減少性紫斑病を治療する方法を提供する。
【０４２４】
本明細書で記載している化合物は、ＪＡＫキナーゼの強力な、および／または選択的阻害剤でもある。この活性の結果として、該化合物はＪＡＫキナーゼ活性、ＪＡＫキナーゼが役割を果たすシグナル伝達カスケード、および該シグナル伝達カスケードによって達成される生物学的応答を制御または阻害する様々なインビトロ、インビボ、およびエクスビボの状況にて用いられうる。例えば、１つの実施態様では、化合物は、インビトロまたはインビボのいずれかで、ＪＡＫキナーゼを発現している実質的に全ての細胞型中、例えば、ＪＡＫ３を主に発現している造血細胞などの中で、ＪＡＫキナーゼを阻害するために用いられうる。それらは、ＪＡＫキナーゼ、特にＪＡＫ３が役割を果たすシグナル伝達カスケードを制御するために用いられてもよい。該ＪＡＫ依存性シグナル伝達カスケードは、共通γ鎖が関与するサイトカイン受容体のシグナル伝達カスケード、例えば、ＩＬ−４、ＩＬ−７、ＩＬ−５、ＩＬ−９、ＩＬ−１５およびＩＬ−２１、またはＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−１５、およびＩＬ−２１受容体シグナル伝達カスケードなどを含み、これらに限定されない。化合物は、インビトロまたはインビボで、該ＪＡＫ依存性シグナル伝達カスケードによって影響される細胞応答または生物学的応答を制御、特に阻害するために用いられてもよい。該細胞または生物学的応答は、ＩＬ−４／ｒａｍｏｓ  ＣＤ２３上方制御およびＩＬ−２媒介Ｔ細胞増殖を含み、これらに限定されない。重要なことに、該化合物は、ＪＡＫキナーゼ活性によって全体的または部分的に媒介される疾患（本明細書で「ＪＡＫキナーゼ媒介疾患」と呼ぶ）の治療または予防に対する治療方法として、インビボでＪＡＫキナーゼを阻害するために用いられうる。該化合物で治療または予防されうるＪＡＫキナーゼ媒介疾患の非限定的例は、下記を含み、これらに限定されない：アレルギー；喘息；移植拒絶（例えば、腎臓、心臓、肺、肝臓、膵臓、皮膚、小腸、大腸、宿主対移植片反応（ＨＶＧＲ）、および移植片対宿主反応（ＧＶＨＲ））、関節リウマチ、ならびに筋萎縮性側索硬化症などの自己免疫疾患；多発性硬化症、乾癬、およびシェーグレン症候群などのＴ細胞媒介自己免疫疾患；血管炎症（血管炎、動脈炎、アテローム性動脈硬化症、および冠動脈疾患を含む）などのＩＩ型炎症性疾患；脳卒中などの中枢神経系の疾患；閉塞性気管支炎および原発性肺高血圧症などの肺疾患；固形、遅延型ＩＶ型過敏反応；ならびに白血病およびリンパ腫などの血液悪性腫瘍。
【０４２５】
本方法によって治療または予防されうるＪＡＫキナーゼによって少なくとも部分的に媒介される疾患の例は、アレルギー、喘息、自己免疫疾患、例えば移植拒絶（例えば、腎臓、心臓、肺、肝臓、膵臓、皮膚、宿主対移植片反応（ＨＶＧＲ）など）、関節リウマチ、および筋萎縮性側索硬化症、多発性硬化症、乾癬およびシェーグレン症候群、ＩＩ型炎症性疾患、例えば血管炎症（血管炎、動脈炎、アテローム性動脈硬化症および冠動脈疾患を含む）または他の炎症性疾患、例えば骨関節炎、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、突発性炎症性腸疾患、過敏性大腸症候群、痙攣性結腸、低悪性度瘢痕（例えば、強皮症、線維増加（increased fibrosis）、ケロイド、手術後瘢痕、肺線維症、血管痙攣、片頭痛、再灌流傷害および心筋梗塞後）、ならびに乾燥複合体または症候群、中枢神経系の疾患、例えば脳卒中、肺疾患、例えば閉塞性気管支炎および原発性肺高血圧症、遅延型または細胞媒介性ＩＶ型過敏症ならびに固形および血液悪性腫瘍、例えば白血病およびリンパ腫を含み、これらに限定されない。
【０４２６】
別の実施態様において、本発明はＪＡＫキナーゼの活性を阻害する方法であって、ＪＡＫキナーゼをＪＡＫキナーゼの活性を阻害するのに有効な量の化合物と接触させることを含む方法であって、該化合物が本発明の化合物から選択される方法を提供する。本明細書で記載している方法の特定の実施態様では、該方法はインビボで行われる。
【０４２７】
別の実施態様において、本発明はＪＡＫキナーゼの活性を阻害する方法であって、インビトロでＪＡＫ３キナーゼをＪＡＫキナーゼの活性を阻害するのに有効な量の化合物と接触させることを含む方法であって、該化合物が本発明の化合物から選択される方法を提供する。
【０４２８】
具体的実施態様において、化合物は、臓器および／または組織移植患者の拒絶反応を治療および／または予防する（すなわち、同種移植片拒絶反応を治療および／または予防する）ために用いられうる。同種移植片は、ドナー細胞の膜上に提示されている移植片（組織適合性）抗原に対する移植患者の細胞媒介性または体液性免疫反応を通じて拒絶されうる。最も強い抗原は、ヒト白血球Ａ型（ＨＬＡ）抗原と呼ばれる遺伝子座の複合体によって支配される。ＡＢＯ血液型抗原と共に、それらはヒトにおいて検出できる主要な移植抗原である。
【０４２９】
移植後の拒絶反応は、一般的に３つのカテゴリーに分類されうる：移植後、数時間〜数日間で生じる超急性拒絶反応；移植後、数日間〜数ヶ月間で生じる急性拒絶反応；および移植後、数ヶ月〜数年で生じる慢性拒絶反応。
【０４３０】
超急性拒絶反応は、主に移植組織を攻撃する宿主抗体の産生に起因する。超急性拒絶反応において、抗体は移植後すぐに移植血管に観察される。その後すぐに、血管凝固が生じ、虚血をもたらし、最終的には壊死および死をもたらす。移植片梗塞（graft infarction）は、既知の免疫抑制治療に応答しない。ＨＬＡ抗原はインビトロで同定されうるため、超急性拒絶を有意に減少させるために移植前スクリーニングが用いられる。このスクリーニングの結果として、超急性拒絶は今日では比較的まれである。
【０４３１】
急性拒絶反応は、移植組織内の抗原特異的細胞の蓄積によって媒介されると考えられている。これらの抗原に対するＴ細胞媒介免疫反応（すなわち、ＨＶＧＲまたはＧＶＨＲ）は、急性拒絶反応の原理メカニズムである。これらの細胞の蓄積は、移植組織の損傷をもたらす。ＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞およびＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞は共に該過程に関与し、抗原がドナーおよび宿主樹状細胞によって提示されると考えられている。ＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞は、マクロファージおよび好酸球などの他のエフェクター細胞を移植片に補充する助けとなる。Ｔ細胞活性化シグナル伝達カスケード（例えば、ＣＤ２８、ＣＤ４０Ｌ、およびＣＤ２カスケード）に接近することも含まれる。
【０４３２】
細胞媒介急性拒絶反応は、多くの場合、免疫治療を強化することによって回復しうる。回復に成功した後、激しく損傷した移植片の要素は線維化によって治癒し、移植片の残部は正常であるようである。急性拒絶反応の回復後、免疫抑制剤の投与量は非常に低いレベルにまで減少しうる。
【０４３３】
慢性拒絶反応は、腎臓移植において特に問題であるが、免疫抑制治療の増強にもかかわらず、しばしば潜行性に進行する。それは、主に細胞媒介ＩＶ型過敏症によると考えられている。病理学的特性は、急性拒絶反応と異なる。動脈内皮は主に広範な増殖と関連があり、徐々に血管細胞内腔を閉塞し得、虚血、線維症、内膜肥厚、およびアテローム性動脈硬化をもたらす。慢性拒絶反応は主に移植片脈管構造の進行性閉塞によるものであり、ゆっくりとした脈管過程に似ている。
【０４３４】
ＩＶ型過敏症において、ＣＤ８細胞傷害性Ｔ細胞およびＣＤ４ヘルパーＴ細胞は、クラスＩまたはクラスＩＩのＭＨＣ分子とそれぞれ複合体を形成した細胞内または細胞外で合成された抗原を認識する。マクロファージは抗原提示細胞として機能し、ＩＬ−１を放出し、ヘルパーＴ細胞の増殖を促進する。ヘルパーＴ細胞はインターフェロンγおよびＩＬ−２を放出し、これらは共にマクロファージ活性化によって媒介される遅延性の過活性反応およびＴ細胞によって媒介される免疫を制御する。臓器移植の場合、細胞傷害性Ｔ細胞は接触した移植細胞を破壊する。
【０４３５】
ＪＡＫキナーゼはＴ細胞の活性化において重要な役割を果たすため、本明細書で記載している化合物は移植拒絶の多くの態様を治療および／または予防するために用いられ得、ＨＶＧＲまたはＧＶＨＲなどのＴ細胞によって少なくとも部分的に媒介される拒絶反応の治療および／または予防に特に有用である。該化合物は移植患者、特に、腎臓移植患者における慢性拒絶反応を治療および／または予防するためにも用いられうる。該化合物は、移植患者において、組織または臓器の移植に先立って組織または臓器に投与されてもよい。
【０４３６】
別の実施態様において、本発明は、Ｔ細胞媒介自己免疫疾患を治療する方法であって、該自己免疫疾患を治療するために有効な量の化合物を、該自己免疫疾患を患う患者に投与することを含む方法であって、化合物が本発明の化合物から選択される方法を提供する。該方法の特定の実施態様では、該自己免疫疾患は多発性硬化症（ＭＳ）、乾癬、またはシェーグレン症候群である。該自己免疫疾患は、単一臓器または単一細胞型の自己免疫障害として頻繁に示される自己免疫疾患、および全身性自己免疫障害に関連すると頻繁に示される自己免疫疾患を含み、これらに限定されない。単一臓器または単一細胞型の自己免疫障害として頻繁に示される疾患の非限定的例は、橋本甲状腺炎、自己免疫性溶血性貧血、悪性貧血の自己免疫性萎縮性胃炎、自己免疫性脳脊髄炎、自己免疫性精巣炎、グッドパスチャー病、自己免疫性血小板減少症、交感性眼炎、重症筋無力症、グレーブス病、原発性胆汁性肝硬変、慢性侵襲性肝炎、潰瘍性大腸炎および膜性腎症を含む。全身性自己免疫障害に関連すると頻繁に示される疾患の非限定的例は、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、シェーグレン症候群、ライター症候群、皮膚筋炎、全身性硬化症、結節性多発性動脈炎、多発性硬化症および水疱性類天疱瘡を含む。β細胞（体液性）ベースまたはＴ細胞ベースであってよいさらなる自己免疫疾患は、コーガン症候群、強直性脊椎炎、ウェゲナー肉芽腫症、自己免疫性脱毛症、Ｉ型または若年発症糖尿病、および甲状腺炎を含む。
【０４３７】
該プロドラッグで治療または予防されうる自己免疫疾患の種類は、一般的に内因性および／または外因性由来の免疫原または抗原に対する体液性および／または細胞媒介応答の結果として生じる組織傷害を含む障害を含む。該疾患は、非アナフィラキシー性（すなわち、ＩＩ型、ＩＩＩ型および／またはＩＶ型）過敏反応を伴う疾患と頻繁に呼ばれる。
【０４３８】
Ｉ型過敏反応は、特定の外因性抗原と接触した後に、マスト細胞および／または好塩基球からのヒスタミンなどの薬理活性物質の放出に一般的に起因する。上記のように、該Ｉ型反応は、アレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎などを含む多数の疾患において役割を果たす。
【０４３９】
ＩＩ型過敏反応（細胞傷害性、細胞溶解性補体依存性または細胞刺激性過敏反応とも呼ばれる）は、免疫グロブリンが細胞もしくは組織の抗原成分、または細胞もしくは組織と密接に共役している抗原もしくはハプテンと反応した場合にもたらされる。ＩＩ型過敏反応と一般に関連する疾患は、自己免疫性溶血性貧血、胎児赤芽球症およびグッドパスチャー病を含み、これらに限定されない。
【０４４０】
ＩＩＩ型過敏反応（有毒性複合体、可溶性複合体、または免疫性複合体過敏反応とも呼ばれる）は、免疫複合体沈着部位での急性炎症反応を伴う血管または組織内の可溶性循環抗原−免疫グロブリン複合体の沈着に起因する。典型的なＩＩＩ型反応疾患の非限定的例は、アルサス反応、関節リウマチ、血清病、全身性エリテマトーデス、特定の種類の糸球体腎炎、多発性硬化症および水疱性類天疱瘡を含む。
【０４４１】
ＩＶ型過敏反応（頻繁に、細胞性、細胞媒介性、遅延性、またはツベルクリン型過敏反応と呼ばれる）は、特異的抗原との接触に起因する感作Ｔリンパ球に起因する。ＩＶ型反応と関連するものとして挙げられる疾患の非限定的例は、接触皮膚炎および同種移植片拒絶である。
【０４４２】
上記の非アナフィラキシー性過敏反応のいずれかと関連する自己免疫疾患は、構造式（Ｉ）および（Ｉａ）のプロドラッグで治療または予防されうる。特に、該方法は、橋本甲状腺炎、自己免疫性溶血性貧血、悪性貧血の自己免疫性萎縮性胃炎、自己免疫性脳脊髄炎、自己免疫性精巣炎、グッドパスチャー病、自己免疫性血小板減少症、交感性眼炎、重症筋無力症、グレーブス病、原発性胆汁性肝硬変、慢性侵襲性肝炎、潰瘍性大腸炎および膜性腎症を含み、これらに限定されない単一臓器または単一細胞型自己免疫障害として頻繁に特徴付けられる自己免疫疾患、ならびに、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、関節リウマチ、シェーグレン症候群、ライター症候群、皮膚筋炎、全身性硬化症、結節性多発性動脈炎、多発性硬化症および水疱性類天疱瘡を含み、これらに限定されない全身性自己免疫障害と関連するとして頻繁に特徴付けられる自己免疫疾患を治療または予防するために用いられうる。
【０４４３】
当業者であれば、上記の自己免疫疾患の多くは、基礎自己免疫疾患が回復し得ない場合でさえその回復が有意な治療効果を提供する重篤な症状と関連すると理解できるであろう。
【０４４４】
本明細書で記載している化合物を使用する治療は単独で適用されてよく、または、例えば下記の他の通常の免疫抑制治療薬と組み合わせて、もしくは補助的に適用されてよい：メルカプトプリン；プレドニゾンなどの副腎皮質ステロイド；メチルプレドニゾロンおよびプレドニゾロン；シクロホスファミドなどのアルキル化剤；シクロスポリン、シロリムス、およびタクロリムスなどのカルシニューリン阻害剤；ミコフェノール酸、ミコフェノール酸モフェチル、およびアザチオプリンなどのイノシン一リン酸デヒドロゲナーゼ（ＩＭＰＤＨ）の阻害剤；ならびに、様々な抗体（例えば、抗リンパ球グロブリン（ＡＬＧ）、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）、モノクローナル抗Ｔ細胞抗体（ＯＫＴ３））および放射線照射などを含む、細胞性免疫を抑制する一方で移植患者の体液性免疫応答を損なわないように設計された薬剤など。これらの様々な薬剤は、該薬物の市販の形態に付属している処方情報にて指定されているようなそれらの標準的または通常の投与量に従って用いられ得（医師用卓上参考書（Ｔｈｅ  Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ）の２００６年版の処方情報も参照のこと）、その開示は参照することによって本明細書に援用される。アザチオプリンは現在、サリックス・ファーマシューティカルズ社から商標名アザサン（ＡＺＡＳＡＮ）で入手でき；メルカプトプリンは現在、ゲート・ファーマシューティカルズ社から商標名プリネトール（ＰＵＲＩＮＥＴＨＯＬ）で入手でき；プレドニゾンおよびプレドニゾロンは現在、ロクサン・ラボラトリーズ社から入手でき；メチルプレドニゾロンは現在、ファイザーから入手でき；シロリムス（ラパマイシン）は現在、ワイス−アイエルストから商標名ラパミューン（ＲＡＰＡＭＵＮＥ）で入手でき；タクロリムスは現在、藤沢から商標名プログラフ（ＰＲＯＧＲＡＦ）で入手でき；シクロスポリンは現在、ノバルティスから商標名サンディミュン（ＳＡＮＤＩＭＭＵＮＥ）で入手でき、アボットから商標名ゲングラフ（ＧＥＮＧＲＡＦ）で入手でき；ミコフェノール酸モフェチルおよびミコフェノール酸などのＩＭＰＤＨ阻害剤は現在、ロシュから商標名セルセプト（ＣＥＬＬＣＥＰＴ）で入手でき、ノバルティスから商標名ミフォルティック（ＭＹＦＯＲＴＩＣ）で入手でき；アザチオプリンは現在、グラクソ・スミス・クラインから商標名イムラン（ＩＭＵＲＡＮ）で入手でき；ならびに抗体は現在、オルト・バイオテックから商標名オルトクローン（ＯＲＴＨＯＣＬＯＮＥ）で入手でき、ノバルティスから商標名シムレクト（バシリキシマブ）（ＳＩＭＵＬＥＣＴ（ｂａｓｉｌｉｘｉｍａｂ））で入手でき、およびロシュから商標名ゼナパックス（ダクリズマブ）（（ＺＥＮＡＰＡＸ（ｄａｃｌｉｚｕｍａｂ））で入手できる。
【０４４５】
別の実施態様において、化合物はｓｙｋキナーゼの阻害剤と組み合わせて、または補助的に投与されうる。ｓｙｋキナーゼはチロシンキナーゼであり、Ｆｃｙ受容体シグナル伝達、ならびに他のシグナル伝達カスケード、例えばＢ細胞受容体シグナル伝達が関与するカスケード（Turner et al., (2000), Immunology Today 21:148-154）ならびに好中球においてインテグリンβ（１）、β（２）、およびβ（３）が関与するカスケード（Mocsai et al., (2002), Immunity 16:547-558）などにおいて重要な役割を果たすことが知られている。例えば、ｓｙｋキナーゼはマスト細胞における高親和性ＩｇＥ受容体シグナル伝達において中心的役割を果たし、多数の化学的メディエーターの活性化およびその後の放出をもたらし、アレルギー性攻撃を引き起こす。しかしながら、遅延性または細胞媒介性ＩＶ型過敏反応に関与する経路を制御する助けとなるＪＡＫキナーゼと異なり、ｓｙｋキナーゼは即時性のＩｇＥ媒介性Ｉ型過敏反応に関与する経路を制御する助けとなる。ｓｙｋ経路に影響する特定の化合物は、ＪＡＫ経路に影響していてもよく、またはしていなくてもよい。
【０４４６】
適切なｓｙｋ阻害化合物は、例えば、２００３年１月３１日に出願された第１０／３５５，５４３号（公開番号２００４／００２９９０２）；ＷＯ０３／０６３７９４；２００３年７月２９日に出願された第１０／６３１，０２９号；ＷＯ２００４／０１４３８２；２００４年７月３０日に出願された第１０／９０３，２６３号；２００４年７月３０日に出願されたＰＣＴ／ＵＳ２００４／２４７１６（ＷＯ００５／０１６８９３）；２００４年７月３０日に出願された第１０／９０３，８７０号；２００４年７月３０日に出願されたＰＣＴ／ＵＳ２００４／２４９２０；２００４年１１月２４日に出願された第６０／６３０，８０８号；２００５年１月１９日に出願された第６０／６４５，４２４号；および２００５年２月１８日に出願された第６０／６５４，６２０号に記載されており、その開示は参照することによって本明細書に援用される。本明細書で記載するｓｙｋ阻害化合物は、単独で、または上記の１つ以上の通常の移植拒絶治療薬と組み合わせて用いられうる。
【０４４７】
具体的実施態様において、該化合物はｓｙｋ阻害化合物または特定の疾患についての他の現在の治療薬の１つによる治療に対して最初に非応答性（抵抗性）であった患者、または非応答性となった患者におけるこれらの疾患を治療または予防するために用いられうる。該化合物は、ｓｙｋ化合物に抵抗性または非応答性の患者において、ｓｙｋ阻害化合物と組み合わせて用いられてもよい。該化合物と共に投与されうる適切なｓｙｋ阻害化合物は、下記で提供される。
【０４４８】
別の実施態様において、本発明は、Ｔ細胞媒介自己免疫疾患を治療する方法であって、該自己免疫疾患を治療するために有効な量の化合物を、該自己免疫疾患を患う患者に投与することを含む方法であって、該化合物が本明細書で記載している本発明の化合物から選択される方法であって、かつ、該化合物が少なくとも１０μＭの範囲にあるＩＣ５０でｓｙｋキナーゼを阻害する化合物と組み合わせて、または補助的に投与される方法を提供する。
【０４４９】
別の実施態様において、本発明は、移植患者における同種移植片拒絶を治療または予防する方法であって、該拒絶を治療または予防するために有効な量の化合物を該移植患者に投与することを含む方法であって、該化合物が本明細書で記載している本発明の化合物から選択される方法を提供する。さらなる実施態様において、該化合物は該移植患者において組織または臓器の移植に先立って組織または臓器に投与される。
【０４５０】
別の実施態様において、本発明は、移植患者における同種移植片拒絶を治療または予防する方法であって、該拒絶が急性拒絶である場合の方法であって、該拒絶を治療または予防するために有効な量の化合物を該移植患者に投与することを含む方法であって、該化合物が本発明の化合物から選択される方法を提供する。
【０４５１】
別の実施態様において、本発明は、移植患者における同種移植片拒絶を治療または予防する方法であって、該拒絶が慢性拒絶である場合の方法であって、該拒絶を治療または予防するために有効な量の化合物を該移植患者に投与することを含む方法であって、該化合物が本発明の化合物から選択される方法を提供する。
【０４５２】
別の実施態様において、本発明は、移植患者における同種移植片拒絶を治療または予防する方法であって、該拒絶がＨＶＧＲまたはＧＶＨＲによって媒介される場合の方法であって、該拒絶を治療または予防するために有効な量の化合物を該移植患者に投与することを含む方法であって、該化合物が本明細書で記載している本発明の化合物から選択される方法を提供する。
【０４５３】
別の実施態様において、本発明は、移植患者における同種移植片拒絶を治療または予防する方法であって、該同種移植片が腎臓、心臓、肝臓、および肺から選択される場合の方法であって、該拒絶を治療または予防するために有効な量の化合物を該移植患者に投与することを含む方法であって、該化合物が本明細書で記載している本発明の化合物から選択される方法を提供する。
【０４５４】
別の実施態様において、本発明は、移植患者における同種移植片拒絶を治療または予防する方法であって、該同種移植片が腎臓、心臓、肝臓、および肺から選択される場合の方法であって、該拒絶を治療または予防するために有効な量の化合物を該移植患者に投与することを含む方法であって、該化合物が本明細書で記載している本発明の化合物から選択される方法であって、該化合物が別の免疫抑制剤と組み合わせて、または補助的に投与される方法を提供する。
【０４５５】
別の実施態様において、本発明は、移植患者における同種移植片拒絶を治療または予防する方法であって、該同種移植片が腎臓、心臓、肝臓、および肺から選択される場合の方法であって、該拒絶を治療または予防するために有効な量の化合物を該移植患者に投与することを含む方法であって、該化合物が本明細書で記載している本発明の化合物から選択される方法であって、該化合物が別の免疫抑制剤と組み合わせて、または補助的に投与される方法であって、該免疫抑制剤がシクロスポリン、タクロリムス、シロリムス、ＩＭＰＤＨの阻害剤、ミコフェノール酸、ミコフェノール酸モフェチル、抗Ｔ細胞抗体、およびＯＫＴ３から選択される方法を提供する。
【０４５６】
本明細書で記載している化合物は、ＩＬ−４シグナル伝達のサイトカインモデレーターである。結果として、該化合物はＩ型過敏反応の応答を遅延させることができる。それゆえ、具体的実施態様において、該化合物は該反応を治療するために用いられ得、それゆえ、該過敏反応（例えば、アレルギー）と関連し、該過敏反応によって媒介され、または該過敏反応に起因する疾患を治療するために予防的に用いられうる。例えば、アレルギー患者は、予想されるアレルゲンへの曝露に先立って本明細書で記載しているＪＡＫ選択的化合物の１つ以上を摂取し得、アレルギー応答の発症もしくは進行を遅延させ、または完全に取り除くことができる。
【０４５７】
該疾患を治療または予防するために用いられる場合、該化合物は単独で、１つ以上の化合物の混合物として、または該疾患および／もしくは該疾患と関連する症状を治療するために有用な他の薬剤との混合物にて、もしくは組み合わせて投与されうる。化合物は、障害または疾患を治療するために有用な他の薬剤、例えば一部を挙げるとステロイド、膜安定剤、５−リポキシゲナーゼ（５ＬＯ）阻害剤、ロイコトリエン合成および受容体阻害剤、ＩｇＥアイソタイプスイッチまたはＩｇＥ合成の阻害剤、ＩｇＧアイソタイプスイッチまたはＩｇＧ合成、β−アゴニスト、トリプターゼ阻害剤、アスピリン、シクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）阻害剤、メトトレキセート、抗ＴＮＦ剤、抗ＣＤ２０抗体、ＰＤ４阻害剤、ｐ３８阻害剤、ＰＤＥ４阻害剤、ならびに抗ヒスタミンなどとの混合物にて、または組み合わせて投与されてもよい。化合物はそれ自体がプロドラッグの形態にて投与され得、または、活性化合物もしくはプロドラッグを含む医薬組成物として投与されうる。
【０４５８】
別の実施態様において、本発明は、ＩＶ型過敏反応を治療または予防する方法であって、該過敏反応を治療または予防するために有効な量の化合物を対象に投与することを含む方法であって、該化合物が本明細書で記載している本発明の化合物から選択される方法を提供する。
【０４５９】
別の実施態様において、本発明は、ＩＶ型過敏反応を治療または予防する方法であって、実際上は予防的に、該過敏反応を治療または予防するために有効な量の化合物を対象に投与することを含む方法であって、該化合物が本明細書で記載している本発明の化合物から選択される方法であって、かつ、アレルゲンに対する曝露に先立って投与される方法を提供する。
【０４６０】
別の実施態様において、本発明は、ＪＡＫ３キナーゼが役割を果たすシグナル伝達カスケードを阻害する方法であって、該シグナル伝達カスケードに関与する受容体を発現している細胞を化合物と接触させることを含む方法であって、該化合物が本明細書で記載している本発明の化合物から選択される方法を提供する。
【０４６１】
別の実施態様において、本発明は、ＪＡＫキナーゼ媒介疾患を治療または予防する方法であって、該ＪＡＫキナーゼ媒介疾患を治療または予防するために有効な量の化合物を対象に投与することを含む方法であって、該化合物が本明細書で記載している本発明の化合物から選択される方法を提供する。
【０４６２】
別の実施態様において、本発明は、ＪＡＫキナーゼ媒介疾患を治療または予防する方法であって、該ＪＡＫ媒介疾患がＨＶＧＲまたはＧＶＨＲである場合の方法であって、該ＪＡＫキナーゼ媒介疾患を治療または予防するために有効な量の化合物を対象に投与することを含む方法であって、該化合物が本明細書で記載している本発明の化合物から選択される方法を提供する。
【０４６３】
別の実施態様において、本発明は、ＪＡＫキナーゼ媒介疾患を治療または予防する方法であって、該ＪＡＫ媒介疾患が急性同種移植片拒絶である場合の方法であって、該ＪＡＫキナーゼ媒介疾患を治療または予防するために有効な量の化合物を対象に投与することを含む方法であって、該化合物が本明細書で記載している本発明の化合物から選択される方法を提供する。
【０４６４】
別の実施態様において、本発明は、ｓｙｋおよび／またはＪＡＫキナーゼ媒介疾患を治療または予防する方法であって、該ＪＡＫ媒介疾患が慢性同種移植片拒絶である場合の方法であって、該ＪＡＫキナーゼ媒介疾患を治療または予防するために有効な量の化合物を対象に投与することを含む方法であって、該化合物が本明細書で記載している本発明の化合物から選択される方法を提供する。
【０４６５】
本発明の活性化合物は、典型的には、ｓｙｋおよび／またはＪＡＫ／Ｓｔａｔ経路を阻害する。ｓｙｋおよび／またはＪＡＫキナーゼの阻害剤としての特定の化合物の活性は、インビトロまたはインビボで評価されうる。いくつかの実施態様では、特定の化合物の活性は細胞アッセイにて検査されうる。
【０４６６】
「細胞増殖性障害」は、細胞の異常な増殖によって特徴付けられる障害を指す。増殖性障害は細胞増殖の速度に関していかなる限定を意味するものではなく、単に増殖および細胞分裂に影響する正常なコントロールの喪失を示す。それゆえ、いくつかの実施態様において、増殖性障害の細胞は、正常な細胞と同一の細胞分裂速度を有しうるが、該増殖を制限するシグナルに対して応答しない。「細胞増殖性障害」の範囲内には、組織の異常な増殖である新生物または腫瘍がある。癌は、周囲の組織に侵入し、および／または新たなコロニー形成部位に転移する能力を有する細胞の増殖によって特徴付けられる様々な悪性新生物のいずれかを指す。
【０４６７】
一般的に、本明細書で開示されている化合物で治療できる細胞増殖性障害は、異常な細胞増殖によって特徴付けられるいずれかの障害に関する。これらは、良性または悪性、転移性または非転移性のものなど、様々な腫瘍および癌を含む。組織侵襲性または転移などの癌の特性は、本明細書で記載する方法を使用してターゲットとなりうる。細胞増殖性障害は様々な癌を含み、特に、卵巣癌、腎臓癌、胃腸癌、腎臓癌、膀胱癌、膵臓癌、肺扁平上皮癌、および腺癌を含む。
【０４６８】
いくつかの実施態様では、治療される細胞増殖性障害は、造血系の細胞の異常増殖である造血性新生物である。造血性悪性腫瘍の起源は、多能性（pluripotent）幹細胞、多分化能（multipotent）前駆細胞、少能性（oligopotent）の運命が決まった（committed）前駆細胞、前駆細胞、および造血に関与する最終分化細胞でありうる。一部の血液悪性腫瘍は、自己再生能力を有する造血幹細胞に由来すると考えられている。例えば、移植の際に急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の特定のサブタイプを発生させることができる細胞は（Cynthia K. Hahn, Kenneth N. Ross, Rose M. Kakoza, Steven Karr, Jinyan Du, Shao-E Ong, Todd R. Golub, Kimberly Stegmaier, Syk is a new target for AML differentiation, Blood, 2007, 110, Abstract 209）、造血幹細胞の細胞表面マーカーを示し、造血幹細胞を白血病細胞源と関係付ける。造血幹細胞の細胞マーカー特性を有さない芽細胞は、移植の際に腫瘍を作ることができないようである（Blaire et al., 1997, Blood 89:3104-3112）。特定の血液悪性腫瘍の幹細胞発生は、特定の種類の白血病と関連する特定の染色体異常が白血病芽細胞のみならず造血系の正常な細胞に見ることができるという知見によっても支持される。例えば、およそ９５％の慢性骨髄性白血病と関連する相互転座ｔ（９ｑ３４；２２ｑ１１）は、骨髄系、赤血球系、およびリンパ系の細胞に存在するようであるが、これは造血幹細胞内で染色体異常が起こっていることを示唆している。特定の種類のＣＭＬにおける細胞のサブグループは、造血幹細胞の細胞マーカー表現型を示す。
【０４６９】
造血性新生物は幹細胞からしばしば生じているが、発生系の運命が決まった（committed）前駆細胞またはさらに分化した細胞も一部の白血病の起源となりうる。例えば、通常の骨髄性前駆細胞または顆粒球／マクロファージ前駆細胞における融合タンパク質Ｂｃｒ／Ａｂｌ（慢性骨髄性白血病と関連する）の強制発現は、白血病様の状態を生じる。さらに、白血病のサブタイプと関連する一部の染色体異常は、造血幹細胞のマーカー表現型を有する細胞集合には見られないが、造血経路のより分化した状態のマーカーを示す細胞集合には見られる（Turhan et al., 1995, Blood 85:2154-2161）。それゆえ、運命が決まった（committed）前駆細胞および他の分化細胞が細胞分裂についての限定的な可能性しか有し得ない一方で、白血病細胞は無制限に増殖する能力を獲得し得、場合によっては造血幹細胞の自己再生特性を模倣する（Passegue et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2003, 100:11842-9）。
【０４７０】
いくつかの実施態様では、治療される造血性新生物はリンパ系新生物であり、異常細胞がそこから由来し、および／またはリンパ系の細胞の特徴的な表現型を示す。リンパ系新生物は、Ｂ細胞新生物、ＴおよびＮＫ細胞新生物、ならびにホジキンリンパ腫に細分化することができる。Ｂ細胞新生物は、前駆Ｂ細胞新生物および成熟／末梢Ｂ細胞新生物にさらに細分化することができる。代表的なＢ細胞新生物には前駆Ｂリンパ芽球性白血病／リンパ腫（前駆Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病）があり、一方、代表的な成熟／末梢Ｂ細胞新生物にはＢ細胞慢性リンパ性白血病／小リンパ球性リンパ腫、Ｂ細胞前リンパ性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、脾辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、有毛細胞白血病、形質細胞性骨髄腫／形質細胞腫、ＭＡＬＴ型の節外周辺帯Ｂ細胞リンパ腫、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性体液性リンパ腫、およびバーキットリンパ腫／バーキットＴ細胞白血病がある。Ｔ細胞およびＮｋ細胞新生物は、前駆Ｔ細胞新生物および成熟（末梢）Ｔ細胞新生物にさらに細分化することができる。代表的な前駆Ｔ細胞新生物には前駆Ｔリンパ芽球性リンパ腫／白血病（前駆Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病）があり、一方、代表的な成熟（末梢）Ｔ細胞新生物にはＴ細胞前リンパ性白血病、Ｔ細胞顆粒リンパ性白血病、侵襲性ＮＫ細胞白血病、成人Ｔ細胞リンパ腫／白血病（ＨＴＬＶ−１）、節外性ＮＫ／Ｔ細胞リンパ腫・鼻型、腸症型Ｔ細胞リンパ腫、肝脾γ−δＴ細胞リンパ腫、皮下脂肪織炎様Ｔ細胞リンパ腫、菌状息肉症／セザリー症候群、未分化大細胞リンパ腫、Ｔ／ヌル細胞、原発性皮膚型、末梢Ｔ細胞リンパ腫、特徴不明（not otherwise characterized）、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、Ｔ／ヌル細胞、原発性全身性型がある。リンパ系新生物の第３のメンバーは、ホジキン病とも呼ばれるホジキンリンパ腫である。該化合物で治療されうるこのクラスの代表的な診断は、特に、結節性リンパ球優位型ホジキンリンパ腫、およびホジキン病の様々な古典的な形態を含み、その代表的なメンバーには結節硬化型ホジキンリンパ腫（グレード１および２）、リンパ球豊富型古典的ホジキンリンパ腫、混合細胞型ホジキンリンパ腫、ならびにリンパ球減少型ホジキンリンパ腫がある。様々な実施態様において、異常なＪＡＫ活性と関連するどのようなリンパ系新生物であっても、ｓｙｋおよび／またはＪＡＫ阻害化合物で治療されうる。
【０４７１】
いくつかの実施態様では、治療される造血性新生物は骨髄性新生物である。このグループは、骨髄系の細胞の特徴的な表現型を含み、または示す細胞増殖性障害の大きなクラスを含む。骨髄性新生物は、骨髄増殖性疾患、骨髄異形成／骨髄増殖性疾患、骨髄異形性症候群、および急性骨髄性白血病に細分化することができる。代表的な骨髄増殖性疾患には、慢性骨髄性白血病（例えば、フィラデルフィア染色体陽性（ｔ（９；２２）（ｑｑ３４；ｑ１１））、慢性好中球性白血病、慢性好酸球性白血病／好酸球増加症候群、慢性特発性骨髄線維症、真性赤血球増加症、および本態性血小板血症がある。代表的な骨髄異形成／骨髄増殖性疾患には、慢性骨髄単球性白血病、非定型慢性骨髄性白血病、および若年性骨髄単球性白血病がある。代表的な骨髄異形性症候群には、環状鉄芽球を伴う、および環状鉄芽球を伴わない不応性貧血、多系列異形成を伴う不応性血球減少症（骨髄異形性症候群）、過剰芽細胞を伴う不応性貧血（骨髄異形性症候群）、５ｑ−症候群、および骨髄異形性症候群がある。様々な実施態様において、異常なｓｙｋおよび／またはＪＡＫ活性と関連するどのような骨髄性新生物であっても、ｓｙｋおよび／またはＪＡＫ阻害化合物で治療されうる。
【０４７２】
いくつかの実施態様では、該化合物は急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を治療するために用いられうるが、これ自体、骨髄性新生物の大きなクラスを表し、障害を細区分できる。これらの細区分は、特に、再発性の細胞遺伝学的転座を伴うＡＭＬ、多系列異形成を伴うＡＭＬ、および分類できない他のＡＭＬを含む。再発性の細胞遺伝学的転座を伴う代表的なＡＭＬは、特に、ｔ（８；２１）（ｑ２２；ｑ２２）を伴うＡＭＬ、ＡＭＬ１（ＣＢＦ−α）／ＥＴＯ、急性前骨髄球性白血病（ｔ（１５；１７）（ｑ２２；ｑ１１−１２）を伴うＡＭＬおよび変異体、ＰＭＬ／ＲＡＲ−α）、異常骨髄好酸球を伴うＡＭＬ（ｉｎｖ（１６）（ｐ１３ｑ２２）またはｔ（１６；１６）（ｐ１３；ｑ１１）、ＣＢＦｂ／ＭＹＨ１１Ｘ）、ならびに１１ｑ２３（ＭＬＬ）異常を伴うＡＭＬを含む。多系列異形成を伴う代表的なＡＭＬには、前の骨髄異形性症候群と関連し、またはしないＡＭＬがある。いずれかの定義可能なグループの範囲内に分類できない他の急性骨髄性白血病は、最小限に分化したＡＭＬ、成熟を伴わないＡＭＬ、成熟を伴うＡＭＬ、急性骨髄単球性白血病、急性単球性白血病、急性赤白血病、急性巨核球性白血病、急性好塩基球性白血病、および骨髄線維症を伴う急性汎骨髄症を含む。
【０４７３】
本発明の文脈の中における「（〜を）治療（すること）」は、障害もしくは疾患と関連する症状の軽減、それらの症状のさらなる進行もしくは悪化の停止、または該疾患もしくは障害の予防（prevention）もしくは予防（prophylaxis）を意味する。
【０４７４】
用語「哺乳類」は、ｓｙｋおよび／またはＪＡＫを発現する生物を含む。哺乳類の例は、マウス、ラット、ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ウマ、クマ、サル、イヌ、ネコおよび、好ましくは、ヒトを含む。ｓｙｋおよび／またはＪＡＫを発現する遺伝子導入生物も本定義に含まれる。
【０４７５】
本発明の方法は、本明細書で記載する化合物または組成物の有効量を哺乳類または非ヒト動物に投与することを含む。本明細書で用いられている本発明の化合物または組成物の「有効（な）量」は、ｓｙｋおよび／またはＪＡＫに拮抗し、または阻害する量を含む。ｓｙｋおよび／またはＪＡＫに拮抗し、または阻害する量は、例えば、ｓｙｋおよび／またはＪＡＫ活性を決定することができるいずれかのアッセイによって検出でき、該アッセイは説明のための試験方法として記載している下記の１つを含む。有効量は、ｓｙｋおよび／またはＪＡＫを阻害することによって治療できるｓｙｋおよび／またはＪＡＫ関連障害の症状を軽減する量も含んでよい。従って、「ｓｙｋの拮抗薬」または「ＪＡＫの拮抗薬」はそれぞれｓｙｋまたはＪＡＫと相互作用し、第２の化合物、例えば、別のｓｙｋまたはＪＡＫリガンドがそれぞれ該ｓｙｋまたはＪＡＫと相互作用する能力を調節、例えば、阻害または減少させる化合物を含む。ｓｙｋまたはＪＡＫ結合化合物は、好ましくはそれぞれｓｙｋまたはＪＡＫの拮抗薬である。用語「ｓｙｋ結合化合物」および「ＪＡＫ結合化合物」（例えば、受容体に対する結合親和性を示す）は、ｓｙｋまたはＪＡＫと相互作用してそれぞれｓｙｋまたはＪＡＫの活性の調節をもたらす化合物を含む。ｓｙｋおよび／またはＪＡＫ結合化合物は、インビトロ（例えば、細胞および非細胞ベース）またはインビボ法を使用して同定されうる。インビトロ法の記載は、下記で提供される。
【０４７６】
本明細書で記載する本方法および組成物に存在する化合物の量は、実施例に記載されているアッセイのいずれかによって測定した場合に、障害の重症度において検出可能な減少をもたらすのに十分な量であるべきである。必要なｓｙｋおよび／またはＪＡＫ修飾因子の量は、特定の細胞型についての修飾因子の有効性および障害を治療するのに必要な時間に依存するであろう。特定の実施態様では、本発明の組成物は別の治療薬をさらに含んでよい。第２の薬剤が用いられる場合、該第２の薬剤は別々の剤形として、または本発明の化合物または組成物との単一剤形の一部として投与されてよい。１つ以上の本発明の化合物は障害、疾患または症状を治療するために単独療法の適用にて用いられうる一方で、それらは併用療法においても用いられ得、本発明の化合物または組成物（治療薬）の使用が同一および／または他の種類の障害、症状および疾患を治療するための１つ以上の他の治療薬の使用と組み合わせられる。併用療法は、２つ以上の治療薬の同時または連続した投与を含む。該薬剤はどのような順序で投与されてもよい。あるいは、複数の治療薬が単一組成物に併用され得、患者に投与されうる。例えば、単一医薬組成物は式Ｉの化合物またはその医薬的に許容される塩、エステルもしくはプロドラッグ、別の治療薬（例えば、メトトレキセート）またはその医薬的に許容される塩、エステルもしくはプロドラッグ、および医薬的に許容される賦形剤または担体を含んでよい。
【０４７７】
本発明は、式Ｉを有する化合物、本発明の化合物を製造する方法、少なくとも１つの本発明の化合物および少なくとも１つの医薬的に許容される担体または賦形剤から医薬組成物を製造する方法、ならびに様々な障害、症状および疾患（例えば、炎症性、自己免疫性、神経性、神経変性、腫瘍性および心血管性）、例えばＲＡ、骨関節炎、過敏性腸疾患ＩＢＤ、喘息、慢性閉塞性肺疾患ＣＯＰＤおよびＭＳなどを治療するために１つ以上の本発明の化合物を使用する方法を含む。本発明の化合物およびそれらの医薬的に許容される塩ならびに／または中性の組成物は、医薬的に許容される賦形剤または担体と共に製剤化されてよく、得られた組成物は様々な障害、症状および疾患を治療するためにインビボで男性、女性および動物などの哺乳類に投与されてよい。さらに、本発明の化合物は、様々な障害、症状および疾患を治療するのに有用な薬物を製造するために用いられうる。
【０４７８】
本発明の化合物の全ては、ｓｙｋおよび／またはＪＡＫキナーゼの強力な阻害剤であり、それぞれのアッセイにて５μＭ未満の範囲のＩＣ５０、最も多くはナノモルの範囲のＩＣ５０、いくつかはナノモル以下の範囲のＩＣ５０を示す。いくつかの実施態様では、本発明の化合物は「二重の（dual）」ｓｙｋ／ＪＡＫ阻害剤であってよく、ｓｙｋおよびＪＡＫキナーゼの両方をある程度まで阻害しうる。他の実施態様では、本発明の化合物はｓｙｋキナーゼを選択的に阻害するが、１つ以上のＪＡＫキナーゼは検出できる程度に阻害しなくてよい。他の実施態様では、本発明の化合物はＪＡＫキナーゼを選択的に阻害するが、１つ以上のｓｙｋキナーゼは検出できる程度に阻害しなくてよい。
【０４７９】
ｆ．キット
本発明のさらに別の態様では、単一包装内に別々の容器を含むキットを提供し、本発明の医薬化合物、組成物および／またはその塩が医薬的に許容される担体と組み合わせて用いられ、ｓｙｋおよび／またはＪＡＫが役割を果たす状態、障害、症状および疾患を治療する。
【実施例】
【０４８０】
下記の実施例は特許請求された発明を説明するために提供するものであって、これを限定するためのものではない。
【０４８１】
これらの化合物の製造に用いられる出発物質および試薬は、一般的にアルドリッチ・ケミカル社などの業者から入手でき、または「Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis」; 「Wiley & Sons: New York, 1967-2004, Volumes 1-22」; 「Rodd's Chemistry of Carbon Compounds, Elsevier Science Publishers, 1989, Volumes 1-5 and Supplementals」;および「Organic Reactions, Wiley & Sons: New York, 2005, Volumes 1-65」などの参考文献に記載されている製造方法に従って、当業者に既知の方法によって製造される。
【０４８２】
合成反応スキームの出発物質および中間体は、所望の場合には、濾過、蒸留、結晶化、およびクロマトグラフィーなどを含み、これらに限定されない通常の技術を使用して単離および精製されうる。該物質は、物理定数およびスペクトルデータを含む通常の方法を使用して特徴付けられうる。
【０４８３】
反対の記載がない限り、本明細書で記載する反応は、好ましくは不活性雰囲気下、大気圧で、反応温度約−７８℃〜約１５０℃の範囲、より好ましくは約０℃〜約１２５℃、および最も好ましく、かつ好都合には室温（または周囲温度）付近、例えば、約２０℃〜約７５℃で行われる。
【０４８４】
下記の実施例を参照して、本発明の化合物は本明細書で記載する方法、または当該技術分野で周知の他の方法を使用して合成される。
【０４８５】
化合物および／または中間体は、２６９５セパレーション・モジュールを備えたＷａｔｅｒｓ  Ａｌｌｉａｎｃｅクロマトグラフィーシステム（ミルフォード、マサチューセッツ州）を使用した高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって特徴付けられうる。分析カラムは、Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ社（ダルムシュタット、ドイツ）製のＣ−１８  ＳｐｅｅｄＲＯＤ  ＲＰ−１８Ｅカラムであってよい。あるいは、特徴付けは、Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ−１８  ２.１ｍｍ  ｘ  １５ｍｍカラムを備えたＷａｔｅｒｓ  Ｕｎｉｔｙ（ＵＰＬＣ）システムを使用して行ってよい。グラジエント溶出は、典型的には５％アセトニトリル／９５％水で開始し、Ａｌｌｉａｎｃｅシステムの場合には５分、Ａｃｑｕｉｔｙシステムの場合には１分かけて９５％アセトニトリルとすることにより進行する。全ての溶媒は、０.１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を含んでよい。化合物は、２２０ｎｍまたは２５４ｎｍでの紫外線（ＵＶ）吸収によって検出されうる。ＨＰＬＣ溶媒は、ＥＭＤケミカルズ社（ギブスタウン、ニュージャージー州）から入手しうる。場合によっては、純度は、例えば、ＥＭＤシリカゲル６０  ２.５ｃｍ  ｘ  ７.５ｃｍプレートなどの背面ガラスのシリカゲルプレートを使用した薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）によって評価されうる。ＴＬＣ結果は、紫外線下で、または周知のヨウ素蒸気および他の様々な染色技術を利用することによって容易に視覚的に検出されうる。
【０４８６】
質量分析は、アセトニトリル／水を移動相として用いる２つのＡｇｉｌｅｎｔ  １１００シリーズＬＣＭＳ装置の１つで行ってよい。１つのシステムではＴＦＡを修飾因子として用いて陽イオンモード［ＭＨ＋、（Ｍ＋１）または（Ｍ＋Ｈ）＋と報告されている］にて測定してよく、他のシステムではギ酸または酢酸アンモニウムのいずれかを用いて陽イオンモード［ＭＨ＋、（Ｍ＋１）または（Ｍ＋Ｈ）＋と報告されている］および陰イオンモード［Ｍ−、（Ｍ−１）または（Ｍ−Ｈ）−と報告されている］の両方にて測定してよい。
【０４８７】
核磁気共鳴（ＮＭＲ）分析は、一部の化合物についてはＶａｒｉａｎ４００ＭＨｚ  ＮＭＲ（パロアルト、カリフォルニア州）で行ってよい。スペクトル基準は、ＴＭＳまたは溶媒の既知の化学シフトのいずれかであってよい。
【０４８８】
一部の本発明の化合物の純度は、元素分析（ロバートソン・マイクロリット、マディソン、ニュージャージー州）によって評価されうる。
【０４８９】
融点は、ラボラトリー・デバイセスのＭｅｌ−Ｔｅｍｐ装置（ホリストン、マサチューセッツ州）で決定されうる。
【０４９０】
必要に応じて、Ｓｑ１６ｘまたはＳｇ１００ｃクロマトグラフィーシステムおよびあらかじめ充填された（prepackaged）シリカゲルカラムを使用して分取的分離を行ってよいが、これらは全てテレダイン・イスコ（リンカーン、ネブラスカ州）から購入した。あるいは、化合物および中間体は、シリカゲル（２３０〜４００メッシュ）充填剤を使用したフラッシュカラムクロマトグラフィーで、またはＣ−１８逆相カラムを使用したＨＰＬＣによって精製してよい。イスコ（Ｉｓｃｏ）システムおよびフラッシュカラムクロマトグラフィーに利用される典型的な溶媒は、ジクロロメタン、メタノール、酢酸エチル、ヘキサン、アセトン、水溶性ヒドロキシアミンおよびトリエチルアミンであってよい。逆相ＨＰＬＣに利用される典型的な溶媒は、０.１％トリフルオロ酢酸を含有する様々な濃度のアセトニトリルおよび水であってよい。
【０４９１】
一般的方法
下記の合成反応スキームは単に本発明の化合物が合成されうるいくつかの方法を説明するためのものにすぎず、本出願に含まれる開示を参照した当業者であれば、これらの合成反応スキームに対して様々な修飾をなし得、それを示唆するものとなるであろう。
実施例１．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロブチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド  １
スキーム１：
【化４５】
2015078194.tif 000046
【０４９２】
ステップ１：カルボン酸１.１（８５ｇ、５４０ｍｍｏｌ）を塩化チオニル（４２５ｍＬ）に溶解した攪拌溶液に、ゆっくりとピリジン（８.５ｍＬ、０.１１ｍｍｏｌ）を加えた。該反応を７５℃で一晩攪拌し、その時点で濃縮し、減圧乾燥し、淡黄色粉末を得、すぐに次のステップに用いた。
【０４９３】
ステップ２：前のステップで得られた該黄色固形物を７５０ｍＬのエタノールでゆっくりと希釈し、一晩還流した。次の日、該反応が終了したことをＨＰＬＣによって決定し、次いで氷浴内で冷却し、固形物を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し、所望のエチルエステル（１.３）をオフホワイト粉末（９１ｇ、２ステップで８７％）として得た。ＭＳ  Ｃ７Ｈ８Ｎ２Ｏ４  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値１８５.０。
【０４９４】
ステップ３：エステル１.３（２２ｇ、１２０ｍｍｏｌ）をオキシ塩化リン（６０ｍＬ、６００ｍｍｏｌ）に溶解し、該混合物をＮ，Ｎ−ジエチルアニリン（２７ｍＬ、１６７ｍｍｏｌ）で処理し、該反応が終了したことがＨＰＬＣによって決定されるまで該混合物を１０５℃まで加熱した。次いで室温まで冷却し、１Ｌの砕いた氷にゆっくりと加えるとベージュ色の沈殿が形成され、濾過によって収集し、減圧乾燥し、所望の二塩化物（１.４）を淡黄色粉末（２２.５ｇ、８５％）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：δ９.１３（ｓ，１Ｈ），４.３７（ｑ，２Ｈ），１.３２（ｔ，３Ｈ）。
【０４９５】
ステップ４：ジクロロピリミジン１.４（５.９ｇ、２７ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（５０ｍＬ）に溶解し、ジイソプロピルアミン（５.２ｍＬ、３０ｍｍｏｌ）、次いでシクロブチルアミン（１.９ｇ、２７ｍｍｏｌ）で連続して処理し、全ての出発物質が消費されるまで室温で攪拌した。次いで、該反応混合物を水で希釈して総量１５０ｍＬとし、沈殿を濾過によって収集し、所望の生成物を淡黄色固形物（６.０２ｇ、８７％）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：δ８.６０（Ｓ，１Ｈ），８.４８（ｄ，１Ｈ），４.５２（ｍ，１Ｈ），４.２９（ｑ，２Ｈ），２.３０（ｍ，２Ｈ），２.０４（ｍ，２Ｈ），１.７３（ｍ，２Ｈ），１.３０（ｔ，３Ｈ）。
【０４９６】
ステップ５：エチルエステル１.５（６.０２ｇ、２４ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（２６ｍＬ）、次いで水酸化リチウム水溶液（１.０Ｍ、２６ｍＬ、２６ｍｍｏｌ）で希釈し、全ての出発物質がカルボン酸に変換されるまで室温で攪拌した。次いで、該反応を水で希釈して総量１００ｍＬとし、６Ｍ  ＨＣｌでｐＨ＝２まで酸性化した。次いで、得られた懸濁液を濾過し、吸引乾燥し、３.５１ｇのカルボン酸（６４％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：δ８.６４（ｄ，１Ｈ），８.７４（ｓ，１Ｈ），４.５０（ｍ，１Ｈ），２.３１（ｍ，２Ｈ），２.０３（ｍ，２Ｈ），１.７２（ｍ，２Ｈ）。
【０４９７】
ステップ６：カルボン酸１.６（３.１５ｇ、１５ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（７０ｍＬ）に溶解し、ＨＯＢｔ（３.１３ｇ、２３ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ（４.４ｇ、２３ｍｍｏｌ）で処理した。およそ２５分間攪拌後、アンモニア（１，４−ジオキサンに溶解した０.５Ｍ溶液、７２ｍＬ、３６ｍｍｏｌ）を加え、該反応を一晩攪拌した。翌朝、該反応を水で希釈して総量５００ｍＬとし、所望の生成物を濾過によって収集して３.６２ｇ（７４％）の淡いベージュ色の固形物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：δ９.３０（ｄ，１Ｈ），８.５４（ｓ，１Ｈ），８.１５（ｄ，１Ｈ），８.０９（ｓ，１Ｈ），７.７４（ｄ，１Ｈ），７.６４（ｍ，２Ｈ），７.５１（ｔ，１Ｈ），３.７７（ｍ，１Ｈ），１.７９（ｍ，２Ｈ），１.７４（ｍ，２Ｈ），１.５３（ｍ，１Ｈ），１.４１（ｍ，１Ｈ）。
【０４９８】
ステップ７：ベンゾトリアゾリルエーテル１.７（５０ｍｇ、０.１７ｍｍｏｌ）、１−（４−（４−アミノフェニル）ピペラジン−１−イル）エタノン（１−アセチルピペラジンおよび４−フルオロニトロベンゼンから２ステップで製造した）（４５ｍｇ、０.２０ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸（３０ｍｇ、０.１７ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（５ｍＬ）で希釈し、全ての出発物質が消費されるまで１２０℃で攪拌した。該反応を室温まで冷却し、水で希釈し、分取ＨＰＬＣによって直接精製し、凍結乾燥後、所望の生成物１を得た。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２７Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１０.２。
【０４９９】
実施例１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して、ステップ４のシクロブチルアミンの代わりに試薬Ａを用いて下記の化合物を製造した。
【表１−１】
2015078194.tif 000047
【表１−２】
2015078194.tif 000048
【表１−３】
2015078194.tif 000049
【表１−４】
2015078194.tif 000050
【０５００】
実施例３２．２，４−ビス（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
スキーム２：
【化４６】
2015078194.tif 000051
【０５０１】
ステップ１：化合物１.４（実施例１、１.０５ｇ、４.８ｍｍｏｌ）を４０ｍＬのアセトニトリルに溶解した。そこへナトリウムチオメトキシド（０.７４ｇ、１０.５ｍｍｏｌ）を加えた。それを一晩攪拌し、酢酸エチルで希釈し、食塩水で３回洗浄し、乾燥し、減圧濃縮した。次いで、それを２０ｍＬのジオキサンと１０ｍＬの水の中へ入れた。そこへＬｉＯＨ水和物を５００ｍｇ加えた。該混合物を４時間攪拌した。ｐＨ３になるまで該混合物に１Ｎ  ＨＣｌを加えた。それを濃縮し、酢酸エチルで３回抽出した。有機相を合わせ、乾燥し、減圧濃縮し、白色の固形物を得た。次いでこの固形物を３０ｍＬの乾燥ＤＭＦに溶解した。そこへＥＤＣ塩酸塩（１.１０ｇ、５.７ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（０.７７ｇ、５.７ｍｍｏｌ）を加えた。該混合物を３０分間攪拌し、そこへアンモニア（ジオキサンに溶解した市販の０.５Ｎ溶液、２９ｍＬ、１４.５ｍｍｏｌ）を加えた。該混合物を一晩攪拌し、減圧濃縮し、酢酸エチルで希釈し、食塩水で３回洗浄し、乾燥し、減圧濃縮し、粗化合物３０.１を得た。ＭＳ  Ｃ７Ｈ９Ｎ３ＯＳ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値２１６.１。
【０５０２】
ステップ２：粗化合物３０.１（４２ｍｇ、０.２０ｍｍｏｌ）を４ｍＬのＮＭＰに溶解した。そこへＭＣＰＢＡ（１３３ｍｇ、０.５０ｍｍｏｌ）を加えた。それを室温で１時間攪拌した。次いで、そこへ１−（４−（４−アミノフェニル）ピペラジン−１−イル）エタノン（１７５ｍｇ、０.８０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１４０μＬ、０.８０ｍｍｏｌ）を加えた。次いで該混合物を１２０℃の浴槽内で９０分間攪拌した。次いで該混合物を逆相分取ＨＰＬＣにかけ、表題化合物を単離した。ＭＳ  Ｃ２９Ｈ３５Ｎ９Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値５５８.２。
【０５０３】
実施例３３．４−（１Ｈ−インダゾール−６−イルアミノ）−２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
スキーム３：
【化４７】
2015078194.tif 000052
【０５０４】
ステップ３：ジクロロピリミジン１.４（実施例１参照；１.０４ｇ、４.７ｍｍｏｌ）をＮＭＰ（３０ｍＬ）に溶解し、氷浴中で攪拌した。そこへ６−アミノインダゾール３１.１（６９０ｍｇ、５.２ｍｍｏｌ）を加え、次いでエチルジイソプロピルアミン（ＤＩＥＡ、１.６４ｍＬ、９.４ｍｍｏｌ）を滴下した。該混合物を４０分間攪拌し、そこへナトリウムチオメトキシド（６６０ｍｇ、９.４ｍｍｏｌ）を加えた。該混合物を一晩攪拌し、酢酸エチルで希釈し、食塩水で３回洗浄し、減圧濃縮し、粗化合物３１.２を淡褐色固形物として定量的収率にて得た。ＭＳ  Ｃ１５Ｈ１５Ｎ５Ｏ２Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３３０.１。
【０５０５】
ステップ４：エチルエステル３１.２（４.７ｍｍｏｌ）を６０ｍＬのＴＨＦに溶解した。そこへ水酸化リチウム水和物（２３６ｍｇ、５.６ｍｍｏｌ）および２０ｍＬの水を加えた。該混合物を一晩攪拌し、そこへｐＨ２となるまで１Ｎ  ＨＣｌ溶液を注意深く加えた。該混合物を減圧濃縮し、ＴＨＦを除去した。白色の固形物を砕き、ブフナー漏斗を使用して単離した。それを水で洗浄し、真空オーブン内で乾燥し、化合物３１.３（１.１４ｇ、８１％）を白色の固形物として得た。ＭＳ  Ｃ１３Ｈ１１Ｎ５Ｏ２Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３０２.１。
【０５０６】
ステップ５：カルボン酸３１.３（１.１４ｇ、３.８ｍｍｏｌ）を３０ｍＬのＤＭＦに溶解した。そこへＥＤＣ塩酸塩（１.０９ｇ、５.７ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ水和物（７７０ｍｇ、５.７ｍｍｏｌ）を加えた。該混合物を室温で１時間攪拌した。次いで、そこへアンモニア（ジオキサンに溶解した市販の０.５Ｎ溶液、２２ｍＬ、１１.４ｍｍｏｌ）を加えた。該混合物を２時間攪拌した。次いでそれを減圧濃縮し、水および酢酸エチルに入れた。有機相を分離し、食塩水で４回洗浄した。次いで有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、化合物３１.４を淡黄色固形物（８２０ｍｇ、７２％）として得た。ＭＳ  Ｃ１３Ｈ１２Ｎ６ＯＳ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３０１.１。
【０５０７】
ステップ６：化合物３１.４（３６ｍｇ、０.１２ｍｍｏｌ）を３ｍＬのＮＭＰに溶解した。そこへＭＣＰＢＡ（純度６５％、４８ｍｇ、０.１８ｍｍｏｌ）を加えた。それを室温で３０分間攪拌した。次いで、そこへ１−（４−（４−アミノフェニル）ピペラジン−１−イル）エタノン（５３ｍｇ、０.２４ｍｍｏｌ）およびｐＴＳＡ（２１ｍｇ、０.１２ｍｍｏｌ）を加えた。該混合物を１２０℃の浴槽で９０分間攪拌した。次いで、この混合物を分取ＨＰＬＣにかけ、表題化合物３１を単離した。ＭＳ  Ｃ２４Ｈ２５Ｎ９Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４７２.２。
【０５０８】
実施例３４．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）−３−クロロフェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化４８】
2015078194.tif 000053
上記化合物は、実施例１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して、ステップ４のシクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。クロロピペラジニルアニリンの合成は、実施例３６に記載されている様式と類似の様式にてＮＣＳを用いて合成されるニトロピペラジニル中間体を塩素化し、次いで硫化白金を使用して還元することによって達成した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２４Ｎ７Ｏ２Ｃｌ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３０.０。ＵＶ：λ＝２９０
【０５０９】
実施例３５．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）−３−クロロフェニルアミノ）−４−（シクロブチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化４９】
2015078194.tif 000054
上記化合物は、実施例３２に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２６Ｎ７Ｏ２Ｃｌ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４４４.０。ＵＶ：λ＝２１１，２９０
【０５１０】
実施例３６．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−プロピオニルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化５０】
2015078194.tif 000055
上記化合物は、実施例１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。Ｂｏｃピペラジンおよび４−フルオロニトロベンゼンからピペラジニルアニリンを合成し、次いでＨＣｌのジオキサン溶液を使用して脱保護し、塩化プロピオニルを使用してアシル化し、最後にＰｄ／Ｃを使用して水素化した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２７Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１０.３。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，４００ＭＨｚ）：δ８.２２（ｓ，１Ｈ），７.４９（ｂｒｏａｄ  ｓ，２Ｈ），７.０６（ｄ，２Ｈ），３.７３（ｍ，４Ｈ），３.２２（ｍ，４Ｈ），２.４７（ｑ，２Ｈ），３.０３（ｍ，１Ｈ），１.１２（ｔ，３Ｈ），０.９０（ｍ，２Ｈ），０.７０（ｍ，２Ｈ）。
【０５１１】
実施例３７．２−（４−（４−（シクロプロパンカルボニル）ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化５１】
2015078194.tif 000056
上記化合物は、実施例３６に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して、塩化プロピオニルの代わりに塩化シクロプロピルカルボニルを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ２２Ｈ２７Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２２.４。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，４００ＭＨｚ）：δ８.２２（ｓ，１Ｈ），７.４５（ｂｒｏａｄ  ｓ，２Ｈ），７.０８（ｄ，２Ｈ），３.９３（ｍ，４Ｈ），３.７３（ｍ，４Ｈ），３.０２（ｍ，１Ｈ），２.０１（ｍ，１Ｈ），０.８８（ｍ，６Ｈ），０.６９（ｍ，２Ｈ）。ＵＶ：λ＝２０３，２７３。
【０５１２】
実施例３８．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−（２−メトキシアセチル）ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化５２】
2015078194.tif 000057
上記化合物は、実施例３６に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して、塩化プロピオニルの代わりに塩化メトキシアセチルを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２７Ｎ７Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２６.２。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，４００ＭＨｚ）：δ８.３８（ｓ，１Ｈ），７.５５（ｂｒｏａｄ  ｓ，２Ｈ），７.０８（ｄ，２Ｈ），４.２１（ｓ，２Ｈ），３.７４（ｍ，４Ｈ），３.６４（ｍ，４Ｈ），３.４０（ｓ，３Ｈ），３.０６（ｍ，１Ｈ），０.９４（ｍ，２Ｈ），０.７１（ｍ，２Ｈ）。
【０５１３】
実施例３９．２−（４−（４−アセチル−２−オキソピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化５３】
2015078194.tif 000058
上記化合物は、実施例１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して、ステップ４のシクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。オキソピペラジニルアニリンは、ヨウ化銅／ジメチルエチレンジアミン触媒条件を用いて、４−ニトロヨードベンゼンおよび４−Ｂｏｃ−２−オキソピペリジンから合成した。次いで、ＨＣｌのジオキサン溶液を使用してＢｏｃ基を除去し、得られたアミンを、塩化アセチルを使用してアシル化し、最後に水素およびＰｄ／Ｃを使用してニトロ基を還元した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２３Ｎ７Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１０.２。ＵＶ：λ＝２７５。
【０５１４】
実施例４０．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）−３−フルオロフェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化５４】
2015078194.tif 000059
上記化合物は、実施例１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して、ステップ４のシクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。アニリンは、水／ＤＭＦ中で加熱することによって対応するカルボキシルアジドから合成した。アジドは最終的に３，４−ジフルオロ安息香酸から合成した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２４Ｎ７Ｏ２Ｆ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１４.２。ＵＶ：λ＝２９３。
【０５１５】
実施例４１．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（（１ｓ，４ｓ）−４−アミノシクロヘキシルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
スキーム４：
【化５５】
2015078194.tif 000060
【０５１６】
室温で、トランス−４−アミノシクロヘキサノール（２.０７ｇ、１３.６ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ３（３.５０ｇ、４１.７ｍｍｏｌ）のＨ２Ｏ（２０ｍＬ）中の混合物に、クロロギ酸ベンジル（１.９２ｍＬ、１３.６ｍｍｏｌ）のジオキサン（１５ｍＬ）溶液を加えた。該混合物を室温で２０時間攪拌した。白色沈殿を（１Ｒ，４Ｒ）−４−ヒドロキシシクロヘキシルカルバミン酸ベンジル（３.３７ｇ）として収集した。
【０５１７】
室温で、（１Ｒ，４Ｒ）−４−ヒドロキシシクロヘキシルカルバミン酸ベンジル（１.１４ｇ、４.５８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１.３０ｍＬ、９.３４ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）中の懸濁液に、塩化メタンスルホニル（０.４２５ｍＬ、５.４９ｍｍｏｌ）を加えた。該混合物を室温で２０時間攪拌した。さらなる塩化メタンスルホニル（０.４２５ｍＬ、５.４９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１.００ｍＬ）を加えた。攪拌を４８時間続けた。該反応溶液を５％ＮａＨＣＯ３で洗浄し、次いで１Ｎ  ＨＣｌで洗浄した。有機相を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、メタンスルホン酸（１Ｒ，４Ｒ）−４−（ベンジルオキシカルボニル）シクロヘキシルを固形物（１.１３ｇ）として得た。
【０５１８】
メタンスルホン酸（１Ｒ，４Ｒ）−４−（ベンジルオキシカルボニル）シクロヘキシル（１.１３ｇ、３.４６ｍｍｏｌ）およびＮａＮ３（０.６７４ｇ、１０.４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中の混合物を１００℃で２０時間攪拌した。水およびＥｔＯＡｃを加えた。有機相を分離し、水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、（１ｓ，４ｓ）−４−アジドシクロヘキシルカルバミン酸ベンジル（０.８１９ｇ）を得た。
【０５１９】
室温で、（１ｓ，４ｓ）−４−アジドシクロヘキシルカルバミン酸ベンジル（０.４１０ｇ、１.５０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０.１００ｍＬ、５.５６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｈ３Ｐ（０.５９０ｇ、２.２５ｍｍｏｌ）を加えた。該溶液を７０℃で２０時間攪拌した。ＥｔＯＡｃおよび１Ｎ  ＨＣｌを加えた。水相を分離し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。次いでそれを５Ｎ  ＮａＯＨでｐＨ１２まで塩基性化した。遊離アミン生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。該ＥｔＯＡｃ溶液をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、（１ｓ，４ｓ）−４−アミノシクロヘキシルカルバミン酸ベンジル（０.２７０ｇ）を得た。
【０５２０】
２，４−ジクロロピリミジン−５−カルボン酸エチル（０.２４１ｇ、１.０９ｍｍｏｌ）、（１ｓ，４ｓ）−４−アミノシクロヘキシルカルバミン酸ベンジル（０.２７０ｇ、１.０９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０.３００ｍＬ、２.１６ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（１０ｍＬ）中の混合物を、室温で２０時間攪拌した。水およびＥｔＯＡｃを加えた。有機相を分離し、１Ｎ  ＨＣｌで洗浄し、次いで５％ＮａＨＣＯ３で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、４−（（１ｓ，４ｓ）−４−（ベンジルオキシカルボニル）シクロヘキシルアミノ）−２−クロロピリミジン−５−カルボン酸エチル（０.４５８ｇ）を得た。
【０５２１】
４−（（１ｓ，４ｓ）−４−（ベンジルオキシカルボニル）シクロヘキシルアミノ）−２−クロロピリミジン−５−カルボン酸エチル（０.４５８ｇ、１.０６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液に、１Ｎ  ＬｉＯＨ水溶液（１.１６ｍＬ、１.１６ｍｍｏｌ）を加えた。３時間攪拌後、水（１０ｍＬ）を加えた。該溶液を１Ｎ  ＨＣｌ（２ｍＬ）でｐＨ１〜２まで酸性化した。生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。該ＥｔＯＡｃ溶液を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、４−（（１ｓ，４ｓ）−４−（ベンジルオキシカルボニル）シクロヘキシルアミノ）−２−クロロピリミジン−５−カルボン酸を固形物（０.４０９ｇ）として得た。
【０５２２】
４−（（１ｓ，４ｓ）−４−（ベンジルオキシカルボニル）シクロヘキシルアミノ）−２−クロロピリミジン−５−カルボン酸（０.４０９ｇ、１.０１ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（０.２３２ｇ、１.５２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、ＥＤＣ（０.２９１ｇ、１.５２ｍｍｏｌ）を加えた。２時間攪拌後、ＮＨ３（ジオキサンに溶解した０.５Ｍ溶液、６.０ｍＬ、３.００ｍｍｏｌ）を加えた。該混合物を２０時間攪拌した。水およびＥｔＯＡｃを加えた。有機相を分離し、１Ｎ  ＨＣｌで洗浄し、次いで５％ＮａＨＣＯ３で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、（１ｓ，４ｓ）−４−（２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−１−イルオキシ）−５−カルバモイルピリミジン−４−イルアミノ）シクロヘキシルカルバミン酸ベンジルを固形物（０.４４０ｇ）として得た。
【０５２３】
（１ｓ，４ｓ）−４−（２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−１−イルオキシ）−５−カルバモイルピリミジン−４−イルアミノ）シクロヘキシルカルバミン酸ベンジル（０.２２０ｇ、０.４３８ｍｍｏｌ）、１−（４−（４−アミノフェニル）ピペラジン−１−イル）エタノン（０.１９２ｇ、０.８７７ｍｍｏｌ）およびｐＴｓＯＨ一水和物（０.０８３ｇ、０.４３７ｍｍｏｌ）のジオキサン（４ｍＬ）中の混合物を１００℃で３時間攪拌した。次いで該混合物をＨＰＬＣによって精製し、（１ｓ，４ｓ）−４−（２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−５−カルバモイルピリミジン−４−イルアミノ）シクロヘキシルカルバミン酸ベンジル（０.１２３ｇ）を得た。
【０５２４】
（１ｓ，４ｓ）−４−（２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−５−カルバモイルピリミジン−４−イルアミノ）シクロヘキシルカルバミン酸ベンジル（０.１２３ｇ、０.２１ｍｍｏｌ）およびＰｄ−Ｃ（１０％、４０ｍｇ）のＭｅＯＨ（５ｍＬ、３滴の６Ｎ  ＨＣｌを含む）中の混合物を、バルーンＨ２下で４時間水素化した。セライトを通して該混合物を濾過し、濾液を減圧濃縮し、表題化合物を固形物として得た。ＭＳ  ４５３.４５（Ｍ＋Ｈ）。
【０５２５】
実施例４２．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（ピペリジン−４−イルメチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
スキーム５：
【化５６】
2015078194.tif 000061
【０５２６】
２，４−ジクロロピリミジン−５−カルボン酸エチル（０.２２１ｇ、１.００ｍｍｏｌ）、塩酸１−Ｂｏｃ−４−アミノメチルピペリジン（０.２５１ｇ、１.００ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０.５５６ｍＬ、４.００ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（１０ｍＬ）中の混合物を、室温で２０時間攪拌した。水およびＥｔＯＡｃを加えた。有機相を分離し、１Ｎ  ＨＣｌで洗浄し、次いで５％ＮａＨＣＯ３で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、４−（（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イル）メチルアミノ）−２−クロロピリミジン−５−カルボン酸エチル（０.３９０ｇ）を得た。
【０５２７】
４−（（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イル）メチルアミノ）−２−クロロピリミジン−５−カルボン酸エチル（０.３９０ｇ、０.９７９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液に、１Ｎ  ＬｉＯＨ水溶液（１.１０ｍＬ、１.１０ｍｍｏｌ）を加えた。２０時間攪拌後、水（１０ｍＬ）を加えた。該溶液を１Ｎ  ＨＣｌ（２ｍＬ）でｐＨ１〜２まで酸性化した。生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。該ＥｔＯＡｃ溶液を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、４−（（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イル）メチルアミノ）−２−クロロピリミジン−５−カルボン酸を固形物（０.３５３ｇ）として得た。
【０５２８】
４−（（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イル）メチルアミノ）−２−クロロピリミジン−５−カルボン酸（０.３５３ｇ、０.９５３ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（０.２１９ｇ、１.４３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、ＥＤＣ（０.２７４ｇ、１.４３ｍｍｏｌ）を加えた。１時間攪拌後、ＮＨ３（ジオキサンに溶解した０.５Ｍ溶液、５.５ｍＬ、２.７５ｍｍｏｌ）を加えた。該混合物を２０時間攪拌した。水およびＥｔＯＡｃを加えた。有機相を分離し、１Ｎ  ＨＣｌで洗浄し、次いで５％ＮａＨＣＯ３で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、４−（（２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−１−イルオキシ）−５−カルバモイルピリミジン−４−イルアミノ）メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルを固形物（０.４１０ｇ）として得た。
【０５２９】
４−（（２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−１−イルオキシ）−５−カルバモイルピリミジン−４−イルアミノ）メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０.２０５ｇ、０.４３８ｍｍｏｌ）、１−（４−（４−アミノフェニル）ピペラジン−１−イル）エタノン（０.１９２ｇ、０.８７７ｍｍｏｌ）およびｐＴｓＯＨ一水和物（０.１６６ｇ、０.８７４ｍｍｏｌ）のジオキサン（４ｍＬ）中の混合物を、１００℃で３時間攪拌した。次いで該混合物をＨＰＬＣによって精製し、４−（（２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−５−カルバモイルピリミジン−４−イルアミノ）メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０.１０５ｇ）を得た。
【０５３０】
４−（（２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−５−カルバモイルピリミジン−４−イルアミノ）メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０.１０５ｇ、０.１９０ｍｍｏｌ）のＴＦＡ（２ｍＬ）溶液を室温で４時間攪拌した。ＴＦＡを減圧中で除去した。残渣をＨＰＬＣによって精製し、表題化合物（９０ｍｇ）を得た。ＭＳ  ４５３.４１（Ｍ＋Ｈ）。
【０５３１】
実施例４３．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（（１−アセチルピペリジン−４−イル）メチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化５７】
2015078194.tif 000062
室温で、２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（ピペリジン−４−イルメチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド（２２ｍｇ、０.０４９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０.０４０ｍＬ、０.２９ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２ｍＬ）溶液に、無水酢酸（０.０２０ｍＬ、０.２１ｍｍｏｌ）を加えた。該溶液を室温で１時間攪拌した。次いで該混合物をＨＰＬＣによって精製し、表題化合物（８ｍｇ）を得た。ＭＳ  ４９５.４１（Ｍ＋Ｈ）。
【０５３２】
実施例４４．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（（１−（メチルスルホニル）ピペリジン−４−イル）メチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化５８】
2015078194.tif 000063
室温で、２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（ピペリジン−４−イルメチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド（２２ｍｇ、０.０４９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０.０４０ｍＬ、０.２９ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２ｍＬ）溶液に、塩化メタンスルホニル（０.０２０ｍＬ、０.２６ｍｍｏｌ）を加えた。該溶液を室温で１時間攪拌した。次いで該混合物をＨＰＬＣによって精製し、表題化合物（１４ｍｇ）を得た。ＭＳ  ５３１.３６（Ｍ＋Ｈ）。
【０５３３】
実施例４５．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（（１−メチルピペリジン−４−イル）メチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化５９】
2015078194.tif 000064
室温で、２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（ピペリジン−４−イルメチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド（２５ｍｇ、０.０５５ｍｍｏｌ）および３７％ＣＨ２Ｏ水溶液（０.０２０ｍＬ、０.２７ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（１ｍＬ）およびＣＨ３ＣＯ２Ｈ（０.１ｍＬ）に溶解した溶液に、ＮａＢＨ３ＣＮ（２３ｍｇ、０.３６ｍｍｏｌ）を加えた。該溶液を２０時間攪拌した。次いで該混合物をＨＰＬＣによって精製し、表題化合物（２０ｍｇ）を得た。ＭＳ  ４６７.４６（Ｍ＋Ｈ）。
【０５３４】
実施例４６．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（（１−カルバモイルピペリジン−４−イル）メチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化６０】
2015078194.tif 000065
２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（ピペリジン−４−イルメチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド（２５ｍｇ、０.０５５ｍｍｏｌ）およびＫＯＣＮ（２０ｍｇ、０.２５ｍｍｏｌ）の酢酸（２ｍＬ）中の混合物を、１００℃で４時間攪拌した。次いで該混合物をＨＰＬＣによって精製し、表題化合物（８ｍｇ）を得た。ＭＳ  ４９６.４５（Ｍ＋Ｈ）。
【０５３５】
実施例４７．３−（（２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−５−カルバモイルピリミジン−４−イルアミノ）メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ベンジル
【０５３６】
実施例４８．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（ピペリジン−３−イルメチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
スキーム６：
【化６１】
2015078194.tif 000066
【０５３７】
２，４−ジクロロピリミジン−５−カルボン酸エチル（０.２２１ｇ、１.００ｍｍｏｌ）、３−アミノメチル−１−Ｎ−ＣＢｚ−ピペリジン（０.２４８ｇ、１.００ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０.３００ｍＬ、２.１５ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（１０ｍＬ）中の混合物を、室温で２０時間攪拌した。水およびＥｔＯＡｃを加えた。有機相を分離し、１Ｎ  ＨＣｌで洗浄し、次いで５％ＮａＨＣＯ３で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、４−（（１−（ベンジルオキシカルボニル）ピペリジン−３−イル）メチルアミノ）−２−クロロピリミジン−５−カルボン酸エチル（０.３８２ｇ）を得た。
【０５３８】
４−（（１−（ベンジルオキシカルボニル）ピペリジン−３−イル）メチルアミノ）−２−クロロピリミジン−５−カルボン酸エチル（０.３８２ｇ、０.８８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液に、１Ｎ  ＬｉＯＨ水溶液（１.００ｍＬ、１.００ｍｍｏｌ）を加えた。２０時間攪拌後、水（１０ｍＬ）を加えた。該溶液を１Ｎ  ＨＣｌ（２ｍＬ）でｐＨ１〜２まで酸性化した。生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。該ＥｔＯＡｃ溶液を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、４−（（１−（ベンジルオキシカルボニル）ピペリジン−３−イル）メチルアミノ）−２−クロロピリミジン−５−カルボン酸（０.３５０ｇ）を得た。
【０５３９】
４−（（１−（ベンジルオキシカルボニル）ピペリジン−３−イル）メチルアミノ）−２−クロロピリミジン−５−カルボン酸（０.３５０ｇ、０.８７ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（０.２００ｇ、１.３１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、ＥＤＣ（０.２５０ｇ、１.３０ｍｍｏｌ）を加えた。１時間攪拌後、ＮＨ３（ジオキサンに溶解した０.５Ｍ溶液、６.０ｍＬ、３.０ｍｍｏｌ）を加えた。該混合物を２０時間攪拌した。水およびＥｔＯＡｃを加えた。有機相を分離し、１Ｎ  ＨＣｌで洗浄し、次いで５％ＮａＨＣＯ３で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、３−（（２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−１−イルオキシ）−５−カルバモイルピリミジン−４−イルアミノ）メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ベンジル（０.４０４ｇ）を得た。
【０５４０】
３−（（２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−１−イルオキシ）−５−カルバモイルピリミジン−４−イルアミノ）メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ベンジル（０.４０４ｇ、０.８０５ｍｍｏｌ）、１−（４−（４−アミノフェニル）ピペラジン−１−イル）エタノン（０.２２０ｇ、１.００ｍｍｏｌ）およびｐＴｓＯＨ一水和物（０.１６７ｇ、０.８７９ｍｍｏｌ）のジオキサン（８ｍＬ）中の混合物を、１００℃で３時間攪拌した。次いで該混合物をＨＰＬＣによって精製し、３−（（２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−５−カルバモイルピリミジン−４−イルアミノ）メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ベンジル４５（０.２７０ｇ）を得た。
【０５４１】
３−（（２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−５−カルバモイルピリミジン−４−イルアミノ）メチル）ピペリジン−１−カルボン酸ベンジル（９０ｍｇ、０.１５ｍｍｏｌ）およびＰｄ−Ｃ（１０％、３０ｍｇ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ、４滴の６Ｎ  ＨＣｌを含む）中の混合物を、バルーンＨ２下で４時間水素化した。セライトを通して該混合物を濾過した。濾液を減圧濃縮し、表題化合物４６（５６ｍｇ）を得た。ＭＳ  ４５３.４５（Ｍ＋Ｈ）。
【０５４２】
実施例４９．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（（１−カルバモ
【化６２】
2015078194.tif 000067
２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（ピペリジン−３−イルメチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド（２４ｍｇ、０.０５３ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（１ｍＬ）中の懸濁液に、ＫＯＣＮ（２７ｍｇ、０.３３ｍｍｏｌ）のＨ２Ｏ（１ｍＬ）溶液を加えた。該懸濁液が透明になった。７０℃で２時間攪拌した後、該混合物をＨＰＬＣによって精製し、表題化合物（１４ｍｇ）を得た。ＭＳ  ４９７（Ｍ＋Ｈ）。
【０５４３】
実施例５０．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（５−ヒドロキシペンチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化６３】
2015078194.tif 000068
上記化合物は、実施例１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して、シクロブチルアミンの代わりに５−アミノペンタノールを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２２Ｈ３１Ｎ７Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４４２.０。
【０５４４】
実施例５１．（Ｓ）−２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（１−ヒドロキシプロパン−２−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
スキーム７：
【化６４】
2015078194.tif 000069
【０５４５】
ステップ１：ジクロロピリミド１.４のチオメチル４９.１への変換は、「Synthesis and evaluation of 2-{[2-(4-hydroxyphenyl)-ethyl]amino}pyrimidine-5-carboxamide derivatives as novel STAT6 inhibitors.」（Nagashima, Shinya; Yokota, Masaki; Nakai, Ei-ichi; Kuromitsu, Sadao; Ohga, Keiko; Takeuchi, Makoto; Tsukamoto, Shin-ichi; Ohta, Mitsuaki. Institute for Drug Discovery Research, Astellas Pharm Inc., Yodogawa-ku, Osaka, Japan. Bioorganic & Medicinal Chemistry (2007), 15(2), 1044-1055）に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して達成した。
【０５４６】
ステップ２〜４は、実施例１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して達成した。
【０５４７】
ステップ５：上記化合物は、実施例２５、ステップ２に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２７Ｎ７Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１４.４。
【０５４８】
実施例５３  ２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シアノメチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化６５】
2015078194.tif 000070
上記化合物は、実施例５１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２２Ｎ８Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９５.２。ＵＶ：λ＝２０３，２７３。
【０５４９】
実施例５４  （Ｒ）−２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（１−ヒドロキシプロパン−２−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化６６】
2015078194.tif 000071
上記化合物は、実施例５１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２７Ｎ７Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１４.３。ＵＶ：λ＝２０１，２７４
【０５５０】
実施例５５  ２−（４−（４−アセチル−２−カルバモイルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化６７】
2015078194.tif 000072
上記化合物は、実施例１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用し、アセチルピペラジンの代わりにＢｏｃ保護ピペラジンカルボン酸を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２６Ｎ８Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３９.４。
【０５５１】
実施例５６．（Ｒ）−２−（４−（４−アセチル−３−メチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化６８】
2015078194.tif 000073
上記化合物は、実施例１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２７Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１０.４。
【０５５２】
実施例５７．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２−アミノ−２−オキソエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化６９】
2015078194.tif 000074
上記化合物は、実施例５１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２４Ｎ８Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１３.４。
【０５５３】
実施例５８．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（３−アミノ−３−オキソプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化７０】
2015078194.tif 000075
上記化合物は、実施例５１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２６Ｎ８Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２７.４。ＵＶ：λ＝２００，２７０。
【０５５４】
実施例５９  ２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（４−アミノ−４−オキソブチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化７１】
2015078194.tif 000076
上記化合物は、実施例５１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２８Ｎ８Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４４１.３。
【０５５５】
実施例６０．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２−シアノエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化７２】
2015078194.tif 000077
上記化合物は、実施例５１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２４Ｎ８Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４０９.３。ＵＶ：λ＝２０２，２５１。
【０５５６】
実施例６１．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（１−カルバモイルシクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化７３】
2015078194.tif 000078
上記化合物は、実施例１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２６Ｎ８Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３９.３。
【０５５７】
実施例６２．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２−モルホリノエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化７４】
2015078194.tif 000079
上記化合物は、実施例５１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２３Ｈ３２Ｎ８Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４６９.４。
【０５５８】
実施例６３．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（（１Ｒ，２Ｒ）−２−カルバモイルシクロペンチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化７５】
2015078194.tif 000080
上記化合物は、実施例５１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して、「An Efficient Route to Either Enantiomer of trans-2-Aminocyclopentanecarboxylic Acid. LePlae, P. R.; Umezawa, N.; Lee, H.-S.; Gellman, S. H. J. Org. Chem.; (Note); 2001; 66(16); 5629-5632」に記載されている製造方法を使用して製造されるアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２３Ｈ３０Ｎ８Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４６７.４。ＵＶ：λ＝２０２，２５８。
【０５５９】
実施例６４．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（−２−トランス−フェニルシクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化７６】
2015078194.tif 000081
上記化合物は、実施例５１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２６Ｈ２９Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４７２.３。
【０５６０】
実施例６５．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（３−ヒドロキシプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化７７】
2015078194.tif 000082
上記化合物は、実施例５１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２７Ｎ７Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１４.３。
【０５６１】
実施例６６．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（４−ヒドロキシブチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化７８】
2015078194.tif 000083
上記化合物は、実施例５１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２９Ｎ７Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２８.４。
【０５６２】
実施例６７．２−（４−（４−アセチル−２−（メチルカルバモイル）ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化７９】
2015078194.tif 000084
上記化合物は、実施例１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用し、アセチルピペラジンの代わりにＢｏｃ保護ピペラジンカルボン酸を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２２Ｈ２８Ｎ８Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４５３.３。
【０５６３】
実施例６９．（Ｒ）−２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２，３−ジヒドロキシプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化８０】
2015078194.tif 000085
上記化合物は、実施例５１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２７Ｎ７Ｏ４  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３０.３。
【０５６４】
実施例７０．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ）−３−カルバモイルシクロペンチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化８１】
2015078194.tif 000086
上記化合物は、実施例５１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して、Ｂｏｃ保護（１，Ｒ，３Ｒ）−３−アミノシクロペンタンカルボン酸由来のアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２３Ｈ３０Ｎ８Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４６７.４。
【０５６５】
実施例７１．４−（４−（５−カルバモイル−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−２−イルアミノ）フェニル）ピペラジン−１−カルボン酸メチル
【化８２】
2015078194.tif 000087
上記化合物は、実施例１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用し、適切なアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２５Ｎ７Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１２.３。
【０５６６】
実施例７２  ２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−６−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化８３】
2015078194.tif 000088
表題化合物は、６−アミノ−３，４−ジヒドロキノリン−２（１Ｈ）−オンを使用することによって同様に合成した。ＭＳ  ５０１.３（Ｍ＋Ｈ）；ＵＶ：λ＝２０７.８，２９３.８。
【０５６７】
実施例７３．４−（（１ｓ，４ｓ）−４−アミノシクロヘキシルアミノ）−２−（４−（ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
スキーム８：
【化８４】
2015078194.tif 000089
２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（（１ｓ，４ｓ）−４−アミノシクロヘキシルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド（５２ｍｇ、０.１２ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３ｍＬ）溶液に、３Ｍ  ＫＯＨ水溶液（１.０ｍＬ、３.０ｍｍｏｌ）を加えた。該混合物を８５℃で４時間攪拌し、次いで７０℃で２０時間攪拌した。それを減圧濃縮した。残渣を酢酸（２ｍＬ）で酸性化し、それをＨＰＬＣによって精製し、表題化合物（２５ｍｇ）を得た。ＭＳ  ４１１.４３（Ｍ＋Ｈ）；ＵＶ：λ＝２２８.５，２８５.３。
【０５６８】
実施例７４．（Ｒ）−２−（４−（４−アセチル−２−メチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化８５】
2015078194.tif 000090
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２７Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１０.４。ＵＶ：λ＝２０９，２６５。
【０５６９】
実施例７５．（Ｒ）−２−（４−（４−アセチル−２−メチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化８６】
2015078194.tif 000091
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２４Ｆ３Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４５２.４。ＵＶ：λ＝２１６，２７６。
【０５７０】
実施例７６．（Ｓ）−２−（４−（４−アセチル−２−メチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化８７】
2015078194.tif 000092
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２４Ｆ３Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４５２.４。ＵＶ：λ＝２０１，２７４。
【０５７１】
実施例７７．２−（４−（４−カルバモイルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロブチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化８８】
2015078194.tif 000093
上記化合物は、実施例１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２６Ｎ８Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１１.２。ＵＶ：λ＝２０４，２６２。
【０５７２】
実施例７８．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（４−（ジメチルカルバモイル）ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化８９】
2015078194.tif 000094
上記化合物は、実施例１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２２Ｈ３０Ｎ８Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３９.３。ＵＶ：λ＝２０６，２６３。
【０５７３】
実施例７９．２−（６−（４−アセチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化９０】
2015078194.tif 000095
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ２１Ｆ３Ｎ８Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３９.４。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，４００ＭＨｚ）：δ８.５２（ｓ，１Ｈ），８.４９（ｓ，１Ｈ），７.９８（ｄｄ，１Ｈ），７.２３（ｄ，１Ｈ），４.５２（ｑ，２Ｈ），３.７４（ｍ，６Ｈ），３.６４（ｍ，２Ｈ），２.１５（s，３Ｈ）。
【０５７４】
実施例８０．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）−２−メチルフェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化９１】
2015078194.tif 000096
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２４Ｆ３Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４５２.４。ＵＶ：λ＝２０４，２２７。
【０５７５】
実施例８１．（Ｓ）−２−（４−（４−（２−メトキシアセチル）−２−メチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化９２】
2015078194.tif 000097
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２６Ｆ３Ｎ７Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４８２.５。ＵＶ：λ＝２０２，２７４。
【０５７６】
実施例８２．４−（４−（５−カルバモイル−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−２−イルアミノ）フェニル）−３−メチルピペラジン−１−カルボン酸（Ｓ）−メチル
【化９３】
2015078194.tif 000098
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２４Ｆ３Ｎ７Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４６８.５。ＵＶ：λ＝２０２，２７４。
【０５７７】
実施例８３．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（１−メチル−１Ｈ−インダゾール−４−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化９４】
2015078194.tif 000099
上記化合物は、実施例４８に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２５Ｈ２７Ｎ９Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４８６.４。ＵＶ：λ＝２０５.８，２９９.４。
【０５７８】
実施例８４．２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（ベンゾ［ｃ］チアジアゾール−４−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化９５】
2015078194.tif 000100
上記化合物は、実施例４８に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２３Ｈ２３Ｎ９Ｏ２Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４９０.４。ＵＶ：λ＝２３６.２，２８３.４，３０５.６。
【０５７９】
実施例８５  ４−（ベンゾ［ｃ］チアジアゾール−４−イルアミノ）−２−（４−（４−プロピオニルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミド
【化９６】
2015078194.tif 000101
上記化合物は、実施例４８に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２４Ｈ２５Ｎ９Ｏ２Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値５０４.４。ＵＶ：λ＝２０２.８，２３６.２，３０１.９，３１４.９。
【０５８０】
実施例８６．４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルアミノ）−２−（４−（４−プロピオニルピペラジン−１イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化９７】
2015078194.tif 000102
表題化合物は、実施例３３に示されている合成スキームと同一の合成スキームを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２７Ｈ３０Ｎ８Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４９９.４。ＵＶ：λ＝２１９.２。
【０５８１】
実施例８７．４−（１，２−ジメチル−１Ｈ−インドール−４−イルアミノ）−２−（４−（４−プロピオニルピペラジン−１イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化９８】
2015078194.tif 000103
表題化合物は、実施例３２に示されている合成スキームと同一の合成スキームを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２８Ｈ３２Ｎ８Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値５１３.４。ＵＶ：λ＝２０８.６。
【０５８２】
実施例８８．４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルアミノ）−２−（４−（４−プロピオニルピペラジン−１イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化９９】
2015078194.tif 000104
表題化合物は、実施例３３に示されている合成スキームと同一の合成スキームを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２７Ｈ３０Ｎ８Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４９９.４。ＵＶ：λ＝２１９.２。
【０５８３】
実施例８９．４−（１，２−ジメチル−１Ｈ−インドール−４−イルアミノ）−２−（４−（４−プロピオニルピペラジン−１イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１００】
2015078194.tif 000105
表題化合物は、実施例３３に示されている合成スキームと同一の合成スキームを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２８Ｈ３２Ｎ８Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値５１３.４。ＵＶ：λ＝２０８.６。
【０５８４】
実施例９２．４−（シクロブチルアミノ）−２−（２−オキソインドリン−５−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１０１】
2015078194.tif 000106
ＭＳ  Ｃ１５Ｈ１６Ｎ５ＯＣｌ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３１８.０，３２０.０。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：δ８.３２（ｓ，１Ｈ），７.５６（ｄ，２Ｈ），７.４１（ｄ，２Ｈ），４.５１（ｍ，１Ｈ），２.４３（ｍ，２Ｈ），２.０８（ｍ，２Ｈ），１.８８（ｍ，２Ｈ）。ＵＶ：λ＝２０５，２６４。
【０５８５】
実施例９３．２−（６−（４−アセチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１０２】
2015078194.tif 000107
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法においてシクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて合成される中間体、ならびに１−（４−（５−アミノピリジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）エタノン（１−アセチルピペラジンおよび２−クロロ−５−ニトロピリジンから２ステップで製造される）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２４Ｎ８Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９７.０。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，４００ＭＨｚ）：δ８.６２（ｓ，１Ｈ），８.４１（ｓ，１Ｈ），８.０８（ｂｒｏａｄ  ｓ，１Ｈ），７.１７（ｄ，１Ｈ）  ３.６４−３.７８（ｍ，８Ｈ），２.９８（ｎ，１Ｈ），２.１５（s，３Ｈ），０.９６（ｍ，２Ｈ），０.７０（ｍ，２Ｈ）。
【０５８６】
実施例９４  （Ｒ）−２−（４−（２−メチル−４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１０３】
2015078194.tif 000108
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２４Ｆ３Ｎ７Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４８８.４。
【０５８７】
実施例９５．（Ｓ）−２−（４−（２−メチル−４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１０４】
2015078194.tif 000109
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２４Ｆ３Ｎ７Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４８８.３。ＵＶ：λ＝２０１，２７５。
【０５８８】
実施例９６．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（１−（メチルスルホニル）−１，２，３，６−テトラヒドロピリジン−４−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１０５】
2015078194.tif 000110
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２４Ｎ６Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２９.３。
【０５８９】
実施例９７．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（１−（メチルスルホニル）ピペリジン−４−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１０６】
2015078194.tif 000111
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２６Ｎ６Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３１.３。
【０５９０】
実施例９８．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−（Ｎ−メチルメチルスルホンアミド）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１０７】
2015078194.tif 000112
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびにピペリジン−４−イルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルおよび４−フルオロニトロベンゼンに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２９Ｎ７Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４６０.２。ＵＶ：λ＝２０２，２７２。
【０５９１】
実施例９９．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１０８】
2015078194.tif 000113
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２５Ｎ７Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３２.０。
【０５９２】
実施例１００ａ．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−（エチルスルホニル）ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１０９】
2015078194.tif 000114
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２７Ｎ７Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４４６.２。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，４００ＭＨｚ）：δ８.３７（ｓ，１Ｈ），７.５９（ｂｒｏａｄ  ｓ，２Ｈ），７.０９（ｄ，２Ｈ），３.４５（ｍ，４Ｈ），３.５０（ｍ，４Ｈ），３.１２（ｑ，２Ｈ），３.０７（ｍ，１Ｈ），１.３５（ｔ，３Ｈ），０.９３（ｍ，２Ｈ），０.７３（ｍ，２Ｈ）。ＵＶ：λ＝２７５。
【０５９３】
実施例１００ｂ．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１１０】
2015078194.tif 000115
上記化合物は、実施例１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２７Ｎ７Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４４６.０。
【０５９４】
実施例１００ｃ．２−（２−メチル−４−（４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１１１】
2015078194.tif 000116
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミン、および４−フルオロ−２−メチルニトロベンゼンに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２４Ｆ３Ｎ７Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４８８.４。ＵＶ：λ＝２２７。
【０５９５】
実施例１０１ａ．（Ｓ）−２−（４−（４−（エチルスルホニル）−２−メチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１１２】
2015078194.tif 000117
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２６Ｆ３Ｎ７Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値５０２.４。ＵＶ：λ＝２０３，２７４。
【０５９６】
実施例１０２．（Ｓ）−２−（４−（４−（シクロプロピルスルホニル）−２−メチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１１３】
2015078194.tif 000118
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２６Ｆ３Ｎ７Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値５１４.５。ＵＶ：λ＝２０２，２７４。
【０５９７】
実施例１０３．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−スルファモイルフェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１１４】
2015078194.tif 000119
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、４−アミノベンゼンスルホンアミドを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１５Ｈ１８Ｎ６Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６３.０。
【０５９８】
実施例１０４．４−（５−カルバモイル−４−（シクロブチルアミノ）ピリミジン−２−イルアミノ）フェニル（メチル）カルバミン酸メチル
【化１１５】
2015078194.tif 000120
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、４−アミノフェニル（メチル）カルバミン酸メチル（Ｎ−メチル  ４−ニトロアニリンから２ステップで合成される）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ２２Ｎ６Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３７１.０。ＵＶ：λ＝２０３，２６３。
【０５９９】
実施例１０５．４−（５−カルバモイル−４−（シクロブチルアミノ）ピリミジン−２−イルアミノ）フェニル（メチル）カルバミン酸イソプロピル
【化１１６】
2015078194.tif 000121
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、４−アミノフェニル（メチル）カルバミン酸イソプロピル（Ｎ−メチル  ４−ニトロアニリンから２ステップで合成される）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２６Ｎ６Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９９.０。ＵＶ：λ＝２７７。
【０６００】
実施例１０６．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルスルファモイル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１１７】
2015078194.tif 000122
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、４−アミノ−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンゼンスルホンアミド（４−ニトロベンゼンスルホン酸塩化物およびジメチルアミンから製造したものを、次いで還元することにより製造される）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ２２Ｎ６Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９１.０。ＵＶ：λ＝２１３，２８８。
【０６０１】
実施例１０７．４−（５−カルバモイル−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−２−イルアミノ）フェニル（メチル）カルバミン酸メチル
【化１１８】
2015078194.tif 000123
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、スキーム１に記載されている製造方法においてシクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて合成される中間体、および４−アミノフェニル（メチル）カルバミン酸メチル（Ｎ−メチル  ４−ニトロアニリンから２ステップで合成される）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ２０Ｎ６Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３５７.０。ＵＶ：λ＝２０４，２７３。
【０６０２】
実施例１０８．４−（５−カルバモイル−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−２−イルアミノ）フェニル（メチル）カルバミン酸イソプロピル
【化１１９】
2015078194.tif 000124
上記化合物は、スキーム１においてステップ４のシクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて合成される中間体、および４−アミノフェニル（メチル）カルバミン酸イソプロピル（Ｎ−メチル  ４−ニトロアニリンから２ステップで合成される）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２４Ｎ６Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３８５.０。ＵＶ：λ＝２０１，２７６。
【０６０３】
実施例１０９．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−スルファモイルフェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１２０】
2015078194.tif 000125
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法においてシクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて合成される中間体、および４−アミノベンゼンスルホンアミドを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１４Ｈ１６Ｎ６Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３４９.０。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：δ８.３８（ｓ，１Ｈ），７.９３（ｄ，２Ｈ），７.７３（ｄ，２Ｈ），４.７６（ｍ，１Ｈ），２.４７（ｍ，２Ｈ），２.０８（ｍ，２Ｈ），１.８７（ｍ，２Ｈ）。ＵＶ：λ＝２８５。
【０６０４】
実施例１１０．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（１−メチルウレイド）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１２１】
2015078194.tif 000126
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、および保護Ｎ’Ｂｏｃ−Ｎ−メチルフェニレンジアミンから２ステップで製造されるアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１９Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３４２.０。ＵＶ：λ＝２０５，２７２。
【０６０５】
実施例１１１．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（メチルスルフィニル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１２２】
2015078194.tif 000127
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用し、４−チオメチルアニリンを使用し、次いでｍＣＰＢＡを使用して酸化することにより製造した。ＭＳ  Ｃ１５Ｈ１７Ｎ５Ｏ２Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３３２.１。
【０６０６】
実施例１１２  ２−（４−（４−アセチルピペラジン−１−カルボニル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１２３】
2015078194.tif 000128
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに塩化４−ニトロベンゾイルおよびＮ−アセチルピペラジンから２ステップで製造されるアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２５Ｎ７Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２４.１。
【０６０７】
実施例１１３．２−（４−（１−アセチルピペリジン−４−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１２４】
2015078194.tif 000129
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２６Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９５.３。
【０６０８】
実施例１１４．（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−（ピロリジン−１−カルボニル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１２５】
2015078194.tif 000130
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに４−フルオロニトロベンゼンおよびイソニペコチン酸エチルに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２４Ｈ３１Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４５０.３。ＵＶ：λ＝２７１。
【０６０９】
実施例１１５．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−（ピペリジン−１−カルボニル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１２６】
2015078194.tif 000131
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに４−フルオロニトロベンゼンおよびイソニペコチン酸エチルに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２５Ｈ３３Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４６４.３。ＵＶ：λ＝２０１，２７１。
【０６１０】
実施例１１６．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−（モルホリン−４−カルボニル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１２７】
2015078194.tif 000132
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに４−フルオロニトロベンゼンおよびイソニペコチン酸エチルに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２４Ｈ３１Ｎ７Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４６６.３。ＵＶ：λ＝２０１，２３０，２８５。
【０６１１】
実施例１１７．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−（シクロプロピルスルホニル）ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１２８】
2015078194.tif 000133
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２７Ｎ７Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４５８.２。ＵＶ：λ＝２０１，２３１，２８２。
【０６１２】
実施例１１８．２−（４−（４−アセチル−１，４−ジアゼパン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１２９】
2015078194.tif 000134
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２７Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１０.２。ＵＶ：λ＝２３４，２５８。
【０６１３】
実施例１１９．２−（４−（４−アセトアミドピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１３０】
2015078194.tif 000135
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、４−Ｂｏｃアミノピペリジンおよび４−フルオロニトロベンゼンに由来するアニリンであって、Ｂｏｃ脱保護の後にアセチルに変換し、次いで水素化を使用してニトロ基をアニリンに還元することにより製造されるアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２７Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１０.２。
【０６１４】
実施例１２０．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１３１】
2015078194.tif 000136
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、４−ヨードアニリンおよび２−ヒドロキシピリジンを、ＣｕＩおよび適切なリガンドを使用してカップリングすることに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２７Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６３.２。ＵＶ：λ＝２０１，２７４。
【０６１５】
実施例１２１．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−ジオキソチオモルホリノフェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１３２】
2015078194.tif 000137
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ２２Ｎ６Ｏ２Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４０３.２。
【０６１６】
実施例１２２．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−（２−メトキシエチル）ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１３３】
2015078194.tif 000138
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに４−フルオロニトロベンゼンおよび１−メトキシエチルピペラジンから２ステップで製造されることに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２９Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１２.０。
【０６１７】
実施例１２３．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−（１−メチルシクロプロピル）ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１３４】
2015078194.tif 000139
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２２Ｈ２９Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４０８.３。
【０６１８】
実施例１２４．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−（Ｎ−メチルアセトアミド）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１３５】
2015078194.tif 000140
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、およびＮ−アセチル基のメチル化（ＣＨ３I、Ｃｓ２ＣＯ３、ＤＭＦ）を行った後にニトロ還元ステップを行うことにより製造される前記のアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２２Ｈ２９Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２４.２。
【０６１９】
実施例１２５．２−（４−（Ｎ−シクロブチルスルファモイル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１３６】
2015078194.tif 000141
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに塩化４−ニトロベンゼンスルホニルおよびシクロブチルアミンに由来するアニリンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ２２Ｎ６Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４０３.０。
【０６２０】
実施例１２６．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（Ｎ−シクロプロピルスルファモイル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１３７】
2015078194.tif 000142
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、および前記と類似のアニリンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ２０Ｎ６Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３８９.０。
【０６２１】
実施例１２７．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（Ｎ−（２−メトキシエチル）スルファモイル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１３８】
2015078194.tif 000143
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、および前記と類似のアニリンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ２２Ｎ６Ｏ４Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４０７.０。
【０６２２】
実施例１２８．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）スルファモイル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１３９】
2015078194.tif 000144
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、および前記と類似のアニリンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ２０Ｎ６Ｏ４Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９３.０。
【０６２３】
実施例１２９．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（メチルスルホニル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１４０】
2015078194.tif 000145
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１９Ｎ５Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６２.１。ＵＶ：λ＝２９２。
【０６２４】
実施例１３０．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１４１】
2015078194.tif 000146
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２５Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６８.３。ＵＶ：λ＝２０３，２２９，２５６，２８８。
【０６２５】
実施例１３１．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−（ピリジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１４２】
2015078194.tif 000147
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ２３Ｈ２６Ｎ８Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３１.４。
【０６２６】
実施例１３２．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（メチルスルホニル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１４３】
2015078194.tif 000148
上記化合物は、実施例１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１９Ｎ５Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６２.１。
【０６２７】
実施例１３３．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１４４】
2015078194.tif 000149
上記化合物は、実施例１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２５Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６８.３。
【０６２８】
実施例１３４．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−（ピリジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１４５】
2015078194.tif 000150
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ２３Ｈ２６Ｎ８Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３１.４。
【０６２９】
実施例１３５．２−（４−（４−（アミノメチル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１４６】
2015078194.tif 000151
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２７Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３８２.５。
【０６３０】
実施例１３６．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（Ｎ−ピリミジン−２−イルスルファモイル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１４７】
2015078194.tif 000152
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ１８Ｎ８Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２７.０。
【０６３１】
実施例１３７．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（Ｎ−チアゾール−２−イルスルファモイル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１４８】
2015078194.tif 000153
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ１７Ｎ７Ｏ３Ｓ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３２.０。
【０６３２】
実施例１３８．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（Ｎ−（５−メチルイソキサゾール−３−イル）スルファモイル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１４９】
2015078194.tif 000154
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ１９Ｎ７Ｏ４Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３０.０。
【０６３３】
実施例１３９．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（Ｎ−（２，６−ジメチルピリミジン−４−イル）スルファモイル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１５０】
2015078194.tif 000155
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２２Ｎ８Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４５５.０。
【０６３４】
実施例１４０．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（１−メチルウレイド）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１５１】
2015078194.tif 000156
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ２１Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３５６.３。ＵＶ：λ＝２０２，２６３。
【０６３５】
実施例１４１．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１５２】
2015078194.tif 000157
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１６Ｎ５Ｏ２Ｆ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６８.０。
【０６３６】
実施例１４３．２−（４−（２−モルホリノ−２−オキソエトキシ）フェニルアミノ）−４−（ｍ−トリルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１５３】
2015078194.tif 000158
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにメタ−トルイジンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ２４Ｈ２６Ｎ６Ｏ４  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４６３.３。ＵＶ：λ＝２８２。
【０６３７】
実施例１４５．２−（４−（２−モルホリノエトキシ）フェニルアミノ）−４−（ｍ−トリルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１５４】
2015078194.tif 000159
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにメタ−トルイジンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ２４Ｈ２８Ｎ６Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４４９.３。ＵＶ：λ＝２８１。
【０６３８】
実施例１４７．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（イソキサゾール−３−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１５５】
2015078194.tif 000160
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ１６Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３３７.３。ＵＶ：λ＝２９８.５。
【０６３９】
実施例１４８．（Ｓ）−２−（４−（１−アミノ−３−メチル−１−オキソブタン−２−イルアミノ）フェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１５６】
2015078194.tif 000161
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミン、ならびに（Ｓ）−バリンおよび４−フルオロニトロベンゼンに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ２２Ｆ３Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２６.４。ＵＶ：λ＝２２５，２９４。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，４００ＭＨｚ）：δ８.３２（ｓ，１Ｈ），７.１９（ｂｒｏａｄ  ｓ，２Ｈ），６.７６（ｄ，２Ｈ），４.３５（ｂｒｏａｄ  ｓ，２Ｈ），３.５８（ｄ，１Ｈ），２.１１（ｍ，１Ｈ），１.１０（ｄｄ，６Ｈ）。
【０６４０】
実施例１４９．（Ｓ）−２−（４−（１−アミノ−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルアミノ）フェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１５７】
2015078194.tif 000162
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミン、および前記と類似のアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２４Ｆ３Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４４０.４。ＵＶ：λ＝２２６，３０３。
【０６４１】
実施例１５１．４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルアミノ）−２−（４−（２−（ピロリジン−１−イル）エトキシ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１５８】
2015078194.tif 000163
スキーム９：
【化１５９】
2015078194.tif 000164
ステップ１：室温で、２，４−ジクロロピリミジン−５−カルボン酸エチル（３２８ｍｇ、１.４８ｍｍｏｌ）および１−メチル−１Ｈ−インドール−４−アミン（２６０ｍｇ、１.７８ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（６ｍＬ）溶液に、ＤＩＥＡ（０.４ｍＬ、２.２２ｍｍｏｌ）を加えた。該混合物を室温で２４時間攪拌した。水（１５ｍＬ）を加えて沈殿を誘導した。該沈殿を収集し、真空乾燥し、２−クロロ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボン酸エチルを固形物として得た。
ステップ２：２−クロロ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボン酸エチル（ステップ１から得られた粗生成物）のＴＨＦ（４ｍＬ）溶液に、１Ｎ  ＬｉＯＨ水溶液（２.２５ｍＬ、２.２５ｍｍｏｌ）を加えた。該混合物を室温で一晩攪拌した。１Ｎ  ＨＣｌで該混合物を酸性化すると、白色の固形物が沈殿し、これを収集し、真空乾燥し、２−クロロ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボン酸（３２５ｍｇ）を得た。ＭＳ  ３０３.３，３０５.３（Ｍ＋Ｈ，Ｃｌパターン）
ステップ３：２−クロロ−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボン酸（３２５ｍｇ、１.０８ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１９８ｍｇ、１.２９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４ｍＬ）溶液に、ＥＤＣ（２４８ｍｇ、１.２９ｍｍｏｌ）を加えた。該混合物を室温で１.５時間攪拌した。アンモニア（ジオキサンに溶解した０.５Ｍ溶液、８.００ｍＬ、４.００ｍｍｏｌ）を加えた。それを室温で一晩攪拌した。水およびＥｔＯＡｃを加えた。有機相を分離し、１Ｎ  ＨＣｌで洗浄し、次いで５％ＮａＨＣＯ３で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−１−イルオキシ）−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド（３７８ｍｇ）を得た。ＭＳ  ４０１.４（Ｍ＋Ｈ）
ステップ４：２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−１−イルオキシ）−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド（６２ｍｇ、０.１５ｍｍｏｌ）のＮＭＰ（１ｍｌ）溶液に、４−（２−（ピロリジン−１−イル）エトキシ）アニリン（３１ｍｇ、０.１５ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸水和物（２８ｍｇ、０.１５ｍｍｏｌ）を加えた。それを１００℃で４時間加熱し、分取ＨＰＬＣによって精製し、４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−４−イルアミノ）−２−（４−（２−（ピロリジン−１−イル）エトキシ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド（３２ｍｇ）を得た。ＭＳ  Ｃ２６Ｈ２９Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４７２.４。ＵＶ：λ＝２１６.９，２５７.０。
【０６４２】
実施例１５２．４−（１Ｈ−インドール−４−イルアミノ）−２−（４−（２−（ピロリジン−１−イル）エトキシ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１６０】
2015078194.tif 000165
上記化合物は、実施例１５１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２５Ｈ２７Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４５８.４。ＵＶ：λ＝２１４.５，２４９.９，２８０.７。
【０６４３】
実施例１５３．４−（２−メチル−２Ｈ−インダゾール−７−イルアミノ）−２−（４−（２−（ピロリジン−１−イル）エトキシ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１６１】
2015078194.tif 000166
上記化合物は、実施例１５１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２５Ｈ２８Ｎ８Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４７３.４。ＵＶ：λ＝２１１.０，２７５.９。
【０６４４】
実施例１５４．４−（１−メチル−１Ｈ−インダゾール−７−イルアミノ）−２−（４−（２−（ピロリジン−１−イル）エトキシ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１６２】
2015078194.tif 000167
上記化合物は、実施例１５１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２５Ｈ２８Ｎ８Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４７３.４。ＵＶ：λ＝２０８.６，２８６.６。
【０６４５】
実施例１５５．２−（４−（１Ｈ−イミダゾール−１−イルフェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１６３】
2015078194.tif 000168
上記化合物は、上記と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ１７Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３３６.３。ＵＶ：λ＝２４５.２，３２１.１。
【０６４６】
実施例１５６．２−（４−（２−（ピロリジン−１−イル）エトキシ）フェニルアミノ）−４−（ｍ−トリルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１６４】
2015078194.tif 000169
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにメタ−アニシジンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２４Ｈ２８Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３３.３。ＵＶ：λ＝２８３。
【０６４７】
実施例１５７．４−（３，５−ジメチルフェニルアミノ）−２−（４−（２−（ピロリジン−１−イル）エトキシ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１６５】
2015078194.tif 000170
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりに３，５−ジメチルアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２５Ｈ３０Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４４７.３。ＵＶ：λ＝２８３。
【０６４８】
実施例１５８．４−（３−メトキシフェニルアミノ）−２−（４−（２−（ピロリジン−１−イル）エトキシ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１６６】
2015078194.tif 000171
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにメタ−アニシジンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２４Ｈ２８Ｎ６Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４４９.３。ＵＶ：λ＝２８２。
【０６４９】
実施例１６１．２−（４−（２−ヒドロキシエチルカルバモイル）フェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１６７】
2015078194.tif 000172
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１７Ｆ３Ｎ６Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９９.３。
【０６５０】
実施例１６２．４−（４−（２−モルホリノエトキシ）フェニルアミノ）−２−（４−（２−（ピロリジン−１−イル）エトキシ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１６８】
2015078194.tif 000173
上記化合物は、スキーム２に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２９Ｈ３７Ｎ７Ｏ４  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値５４８.３。ＵＶ：λ＝２８３。
【０６５１】
実施例１６３．２−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェニルアミノ）−４−（ｍ−トリルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１６９】
2015078194.tif 000174
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにメタ−トルイジンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２５Ｈ３０Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４４７.３。
【０６５２】
実施例１６５．２−（４−（２−メトキシエトキシ）フェニルアミノ）−４−（ｍ−トリルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１７０】
2015078194.tif 000175
ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２３Ｎ５Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９４.３。ＵＶ：λ＝２８５。
【０６５３】
実施例１６６．２−（４−（３−ヒドロキシプロピルカルバモイル）フェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１７１】
2015078194.tif 000176
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ１９Ｆ３Ｎ６Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１３.４。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，４００ＭＨｚ）：δ８.５９（ｓ，１Ｈ），７.８８（ｄ，２Ｈ），７.７７（ｄ，２Ｈ），４.４２（ｑ，２Ｈ），３.６４（ｔ，２Ｈ），３.４９（ｔ，２Ｈ），１.８３（ｍ，２Ｈ）。
【０６５４】
実施例１６７．２−（４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−１，３−オキサジン−２−イル）フェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１７２】
2015078194.tif 000177
上記化合物は、実施例１６６を三フッ化ジエチルアミノ硫黄およびＤＩＰＥＡのジクロロメタン溶液で処理することによって製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ１７Ｆ３Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９５.２。ＵＶ：λ＝２２１，３１０。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，４００ＭＨｚ）：δ８.６０（ｓ，１Ｈ），７.９７（ｄｄ，２Ｈ），７.９３（ｄｄ，２Ｈ），４.３３（ｑ，２Ｈ），３.７３（ｔ，２Ｈ），２５３（ｍ，２Ｈ），１.２１（ｔ，２Ｈ）。
【０６５５】
実施例１６８．４−（シクロブチルアミノ）−２−（ｐ−トリルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１７３】
2015078194.tif 000178
上記化合物は、パラ−トルイジンおよびスキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１９Ｎ５Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値２９８.０。
【０６５６】
実施例１６９．２−（４−カルバモイルフェニルアミノ）−４−（シクロブチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１７４】
2015078194.tif 000179
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、４−アミノベンズアミドを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１８Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３２７.０。
【０６５７】
実施例１７０．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（Ｎ−メチルシクロプロパンカルボキサミド）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１７５】
2015078194.tif 000180
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、Ｎ−（４−アミノフェニル）−Ｎ−メチルシクロプロパンカルボキサミド（Ｎ−メチル  ４−ニトロアニリンから２ステップで合成される）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２４Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３８１.０。
【０６５８】
実施例１７１．２−（３−クロロ−４−（Ｎ−メチルアセトアミド）フェニルアミノ）−４−（シクロブチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１７６】
2015078194.tif 000181
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、Ｎ−（４−アミノ−２−クロロフェニル）−Ｎ−メチルアセトアミド（２−クロロ−４−ニトロアニリンから３ステップで製造される）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ１９ＣｌＮ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３７５.０，３７７.０。
【０６５９】
実施例１７２．２−（３−クロロ−４−（Ｎ−メチルアセトアミド）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１７７】
2015078194.tif 000182
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、スキーム１においてステップ４のシクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて合成される中間体、およびＮ−（４−アミノ−２−クロロフェニル）−Ｎ−メチルアセトアミド（２−クロロ−４−ニトロアニリンから３ステップで製造される）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ１９ＣｌＮ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３７５.０，３７７.０。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，４００ＭＨｚ）：δ８.４３（ｄ，１Ｈ），８.２０（ｓ，１Ｈ），７.６１（ｄｄ，１Ｈ），７.４３（ｄ，１Ｈ），３.１８（s，３Ｈ），２.９８（ｍ，１Ｈ），１.８２（s，３Ｈ），１.０１（ｍ，２Ｈ），０.７３（ｍ，２Ｈ）。
【０６６０】
実施例１７３．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（Ｎ−メチルシクロプロパンカルボキサミド）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１７８】
2015078194.tif 000183
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、ステップ４のシクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて合成される実施例１３９に記載されている中間体、およびＮ−（４−アミノフェニル）−Ｎ−メチルシクロプロパンカルボキサミド（Ｎ−メチル  ４−ニトロアニリンから２ステップで合成される）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２２Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６７.１。
【０６６１】
実施例１７４．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１７９】
2015078194.tif 000184
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２７Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９８.３。
【０６６２】
実施例１７５．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−（メチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１８０】
2015078194.tif 000185
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに４−フルオロニトロベンゼンおよびイソニペコチン酸エチルに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２７Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１０.０。
【０６６３】
実施例１７６．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−（ジメチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１８１】
2015078194.tif 000186
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに４−フルオロニトロベンゼンおよびイソニペコチン酸エチルに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２２Ｈ２９Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２４.０。
【０６６４】
実施例１７７．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−（ジメチルカルバモイル）ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１８２】
2015078194.tif 000187
上記化合物は、４−（４−ニトロフェニル）ピペラジン−１−カルボキサミドを水素化ナトリウムおよびヨウ化メチルで処理し、次いで水素化を使用して該ニトロを還元し、次いで該アニリンをスキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用してシクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いてカップリングすることによって製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２８Ｎ８Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２５.２。
【０６６５】
実施例１７８．２−（３−クロロ−４−モルホリノフェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１８３】
2015078194.tif 000188
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ２１Ｎ６Ｏ２Ｃｌ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３８９.０，３９１.０。
【０６６６】
実施例１７９  ４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１８４】
2015078194.tif 000189
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに３，３−ジフルオロピロリジンおよび４−フルオロニトロベンゼンから２ステップで合成されるアニリンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ２０Ｎ６ＯＦ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３７５.０。
【０６６７】
実施例１８０．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（メチルカルバモイル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１８５】
2015078194.tif 000190
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに塩化４−ニトロベンゾイルおよびメチルアミンに由来するアニリンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１８Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３２７.０。
【０６６８】
実施例１８１．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（ジメチルカルバモイル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１８６】
2015078194.tif 000191
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに塩化４−ニトロベンゾイルおよびジメチルアミンに由来するアニリンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ２０Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３４１.０。
【０６６９】
実施例１８２．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−カルボニル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１８７】
2015078194.tif 000192
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、および塩化４−ニトロベンゾイルに由来するアニリンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２５Ｎ７Ｏ４Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４６０.１。
【０６７０】
実施例１８３．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（チアゾール−４−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１８８】
2015078194.tif 000193
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ１６Ｎ６ＯＳ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３５３.２。
【０６７１】
実施例１８４．２−（４−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１８９】
2015078194.tif 000194
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ１７Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３３６.３。
【０６７２】
実施例１８５．２−（４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１９０】
2015078194.tif 000195
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１５Ｈ１５Ｎ９Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３３８.２。
【０６７３】
実施例１８６．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（チオフェン−２−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１９１】
2015078194.tif 000196
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ１７Ｎ５ＯＳ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３５２.２。
【０６７４】
実施例１８７．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−ホルムアミド−３−ヒドロキシフェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１９２】
2015078194.tif 000197
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造し、６−アミノベンゾオキサゾールを使用し、その後精製の間に加水分解し、表題化合物を得た。ＭＳ  Ｃ１５Ｈ１６Ｎ６Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３２９.２。
【０６７５】
実施例１８８．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（ピリジン−２−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１９３】
2015078194.tif 000198
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ１８Ｎ６Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３４７.３。
【０６７６】
実施例１８９．２−（４−（１−アセチル−１，２，３，６−テトラヒドロピリジン−４−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１９４】
2015078194.tif 000199
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２４Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９３.３。
【０６７７】
実施例１９０．（Ｒ）−４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（２−（メトキシメチル）ピロリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１９５】
2015078194.tif 000200
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用い、４−フルオロニトロベンゼンおよび（Ｒ）−２−メトキシメチルピロリジンから２ステップで製造されるアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２６Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３８３.３。
【０６７８】
実施例１９１．（Ｓ）−４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（２−（メトキシメチル）ピロリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１９６】
2015078194.tif 000201
上記化合物は、実施例１９０に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、（Ｒ）−異性体の代わりに（Ｓ）−２−メトキシメチルピロリジンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２６Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３８３.３。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，４００ＭＨｚ）：δ８.２１（ｓ，１Ｈ），７.３８（ｂｒｏａｄ  ｓ，２Ｈ），６.７８（ｄ，２Ｈ），３.８９（ｍ，１Ｈ），３.４９（ｍ，２Ｈ），３.３３（s，３Ｈ），３.１８（ｍ，２Ｈ），３.０３（ｍ，１Ｈ），２.０３（ｍ，４Ｈ），０.９３（ｍ，２Ｈ），０.７２（ｍ，２Ｈ）。
【０６７９】
実施例１９２．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（ピリジン−３−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１９７】
2015078194.tif 000202
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ１８Ｎ６Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３４７.３。
【０６８０】
実施例１９３．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（エチルスルホニル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１９８】
2015078194.tif 000203
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１９Ｎ５Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６２.１。
【０６８１】
実施例１９４．２−（１Ｈ−インドール−６−イルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化１９９】
2015078194.tif 000204
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１６Ｎ６Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３０９.２。
【０６８２】
実施例１９５．１−（４−（５−カルバモイル−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−２−イルアミノ）フェニル）ピペリジン−４−カルボン酸
【化２００】
2015078194.tif 000205
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびにイソニペコチン酸エチルおよび４−フルオロニトロベンゼンに由来するアニリンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２４Ｎ６Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９７.２。
【０６８３】
実施例１９６  ４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−（メチルスルホニル）−１，４−ジアゼパン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２０１】
2015078194.tif 000206
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびにＢｏｃ保護ホモピペラジンおよび４−フルオロニトロベンゼンに由来するアニリンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２７Ｎ７Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４４６.２。
【０６８４】
実施例１９７．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２０２】
2015078194.tif 000207
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２１Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６４.２。
【０６８５】
実施例１９８．（Ｓ）−２−（４−（２−カルバモイルピロリジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２０３】
2015078194.tif 000208
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに（Ｓ）−プロリンアミドおよび４−フルオロニトロベンゼンに由来するアニリンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２３Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３８２.０。
【０６８６】
実施例１９９．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（シクロプロピルカルバモイル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２０４】
2015078194.tif 000209
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用い、塩化４−ニトロベンゾイルから２ステップで製造されるアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ２０Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３５３.０。
【０６８７】
実施例２００．２−（４−（シクロブチルカルバモイル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２０５】
2015078194.tif 000210
上記化合物は、実施例１９９に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２２Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６７.３。
【０６８８】
実施例２０１．（Ｓ）−４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（２−（メチルカルバモイル）ピロリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２０６】
2015078194.tif 000211
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに（Ｓ）−プロリンおよび４−フルオロニトロベンゼンに由来するアニリンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２５Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９６.０。
【０６８９】
実施例２０２．（Ｓ）−４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（２−（ジメチルカルバモイル）ピロリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２０７】
2015078194.tif 000212
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２７Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１０.０。
【０６９０】
実施例２０３．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（２−ヒドロキシエチルカルバモイル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２０８】
2015078194.tif 000213
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに塩化４−ニトロベンゾイルおよびエタノールアミンに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ２０Ｎ６Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３５７.０。
【０６９１】
実施例２０４．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（３−ヒドロキシプロピルカルバモイル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２０９】
2015078194.tif 000214
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに塩化４−ニトロベンゾイルおよびプロパノールアミンに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ２２Ｎ６Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３７１.０。
【０６９２】
実施例２０５．（Ｒ）−４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（３−（メチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２１０】
2015078194.tif 000215
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２７Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１０.０。
【０６９３】
実施例２０６．（Ｒ）−４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（３−（ジメチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２１１】
2015078194.tif 000216
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２２Ｈ２９Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２４.０。
【０６９４】
実施例２０７．（Ｓ）−４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（３−（メチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２１２】
2015078194.tif 000217
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２７Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１０.２。
【０６９５】
実施例２０８．（Ｓ）−４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（３−（ジメチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２１３】
2015078194.tif 000218
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２２Ｈ２９Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２４.２。
【０６９６】
実施例２０９．（Ｓ）−４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（２−（メチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２１４】
2015078194.tif 000219
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２７Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１０.２。
【０６９７】
実施例２１０．（Ｓ）−４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（２−（ジメチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２１５】
2015078194.tif 000220
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２２Ｈ２９Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２４.２。
【０６９８】
実施例２１１．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（キノキサリン−６−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２１６】
2015078194.tif 000221
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１５Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３２２.１。
【０６９９】
実施例２１２．（Ｓ）−２−（４−（２−カルバモイルアゼチジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２１７】
2015078194.tif 000222
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ２１Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６８.１。
【０７００】
実施例２１３．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イルスルホニル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２１８】
2015078194.tif 000223
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに塩化４−ニトロベンゼンスルホニルおよび４−ヒドロキシピペリジンから製造されるアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２４Ｎ６Ｏ４Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３３.０。
【０７０１】
実施例２１４．２−（４−（シクロプロピル（メチル）カルバモイル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２１９】
2015078194.tif 000224
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２２Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６７.０。
【０７０２】
実施例２１５．２−（４−（シクロブチル（メチル）カルバモイル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２２０】
2015078194.tif 000225
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２４Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３８１.０。
【０７０３】
実施例２１６．２−（４−（２−アミノピリジン−４−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２２１】
2015078194.tif 000226
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ１９Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６２.４。
【０７０４】
実施例２１７．（Ｒ）−４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（２−（メチルカルバモイル）ピロリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２２２】
2015078194.tif 000227
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２５Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９６.０。
【０７０５】
実施例２１８．（Ｒ）−４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（２−（ジメチルカルバモイル）ピロリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２２３】
2015078194.tif 000228
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２７Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１０.０。
【０７０６】
実施例２１９．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（３−（メチルカルバモイル）ピロリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２２４】
2015078194.tif 000229
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２５Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９６.５。
【０７０７】
実施例２２０．２−（４−（（２Ｓ，４Ｓ）−２−カルバモイル−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２２５】
2015078194.tif 000230
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２３Ｎ７Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９８.５。
【０７０８】
実施例２２１．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（（２Ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシ−２−（メチルカルバモイル）ピロリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２２６】
2015078194.tif 000231
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２５Ｎ７Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１２.５。
【０７０９】
実施例２２２．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（ジメチルアミノ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２２７】
2015078194.tif 000232
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、Ｎ，Ｎ−ジメチルベンゼン−１，４−ジアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ２２Ｎ６Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３２７.０。
【０７１０】
実施例２２３．２−（４−アセトアミドフェニルアミノ）−４−（シクロブチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２２８】
2015078194.tif 000233
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、Ｎ−（４−アミノフェニル）アセトアミドを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ２０Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３４１.０。
【０７１１】
実施例２２４．２−（１Ｈ−インダゾール−５−イルアミノ）−４−（シクロブチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド  １６。
【化２２９】
2015078194.tif 000234
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、１Ｈ−インダゾール−５−アミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１７Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３２４.０。
【０７１２】
実施例２２５．２−（１Ｈ−インダゾール−６−イルアミノ）−４−（シクロブチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２３０】
2015078194.tif 000235
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、１Ｈ−インダゾール−６−アミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１７Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３２４.０。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，４００ＭＨｚ）：δ８.４４（ｓ，１Ｈ），８.１３（ｓ，１Ｈ），７.９９（ｓ，１Ｈ），７.８８（ｄ，１Ｈ），７.２７（ｍ，２Ｈ），４.６３（ｍ，１Ｈ），２.４８（ｍ，２Ｈ），２.１３（ｍ，２Ｈ），１.９２（ｍ，２Ｈ）
【０７１３】
実施例２２６．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−メトキシフェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２３１】
2015078194.tif 000236
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、ｐ−アニシジンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１９Ｎ５Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３１４.０。
【０７１４】
実施例２２７．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（ジエチルアミノ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２３２】
2015078194.tif 000237
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、Ｎ，Ｎ−ジエチルフェニレンジアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２６Ｎ６Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３５５.２。
【０７１５】
実施例２２８．４−（シクロブチルアミノ）−２−（フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド。
【化２３３】
2015078194.tif 000238
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、アニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１５Ｈ１７Ｎ５Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値２８４.０。
【０７１６】
実施例２２９．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（Ｎ−メチルプロピオンアミド）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２３４】
2015078194.tif 000239
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、Ｎ−（４−アミノフェニル）−Ｎ−メチルプロピオンアミド（Ｎ−メチル  ４−ニトロアニリンから２ステップで合成される）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２４Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６９.０。
【０７１７】
実施例２３０．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（Ｎ−メチルプロピオンアミド）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２３５】
2015078194.tif 000240
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法においてシクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて合成される中間体、およびＮ−（４−アミノフェニル）−Ｎ−メチルプロピオンアミド（Ｎ−メチル  ４−ニトロアニリンから２ステップで合成される）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ２２Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３５５.０。
【０７１８】
実施例２３１．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（Ｎ−メチルアセトアミド）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２３６】
2015078194.tif 000241
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法においてシクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて合成される中間体、およびＮ−（４−アミノフェニル）−Ｎ−メチルアセトアミド（Ｎ−メチル  ４−ニトロアニリンから２ステップで製造される）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ２０Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３４１.０。
【０７１９】
実施例２３２．４−（５−カルバモイル−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−２−イルアミノ）フェニル（メチル）カルバミン酸イソプロピル
【化２３７】
2015078194.tif 000242
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法においてシクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて合成される中間体、および４−アミノフェニル（メチル）カルバミン酸イソプロピル（Ｎ−メチル  ４−ニトロアニリンから２ステップで合成される）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２４Ｎ６Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３８５.０。
【０７２０】
実施例２３３．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン−６−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２３８】
2015078194.tif 000243
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１７Ｎ５Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３２８.２。
【０７２１】
実施例２３４．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−モルホリノフェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２３９】
2015078194.tif 000244
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ２２Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３５５.０。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：δ８.２４（ｓ，１Ｈ），７.５０（ｂｒｏａｄ  ｓ，２Ｈ），７.０６（ｄ，２Ｈ），３.８４（ｍ，４Ｈ），３.２１（ｍ，４Ｈ），０.９２（ｍ，２Ｈ），０.７１（ｍ，２Ｈ）。
【０７２２】
実施例２３５．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２４０】
2015078194.tif 000245
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２４Ｎｘ６Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３５３.２。
【０７２３】
実施例２３６．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２４１】
2015078194.tif 000246
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに４−フルオロニトロベンゼンおよび４−ヒドロキシピペリジンに由来するアニリンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２４Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６９.０。
【０７２４】
実施例２３７．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−フルオロピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２４２】
2015078194.tif 000247
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに４−フルオロニトロベンゼンおよび４−フルオロピペリジンに由来するアニリンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２３Ｎ６ＯＦ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３７１.０。
【０７２５】
実施例２３８．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２４３】
2015078194.tif 000248
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに４−フルオロニトロベンゼンおよび１−メチルピペラジンに由来するアニリンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２５Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６８.３。
【０７２６】
実施例２３９．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（３，３−ジフルオロピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２４４】
2015078194.tif 000249
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに４−フルオロニトロベンゼンおよび３，３−ジフルオロピペリジンに由来するアニリンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２２Ｎ６ＯＦ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３８９.０。
【０７２７】
実施例２４０．２−（４−（４−カルバモイルピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２４５】
2015078194.tif 000250
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに４−フルオロニトロベンゼンおよびイソニペコタミドから製造されるアニリンであって、水素およびＰｄ／Ｃのメタノール溶液を使用して還元することにより製造されるアニリンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２５Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９６.２。
【０７２８】
実施例２４１．２−（４−（４−カルバモイルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２４６】
2015078194.tif 000251
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、４−ピペラジニルニトロベンゼンから２ステップで製造されるアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２４Ｎ８Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９７.２。
【０７２９】
実施例２４２．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（４，４−ジフルオロピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２４７】
2015078194.tif 000252
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに４−フルオロニトロベンゼンおよび４，４−ジフルオロピペリジンに由来するアニリンを用いて製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２２Ｎ６ＯＦ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３８９.０。
【０７３０】
実施例２４４．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（メチルスルホニル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２４８】
2015078194.tif 000253
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１５Ｈ１７Ｎ５Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３４８.１。
【０７３１】
実施例２４５．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（メチルチオ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２４９】
2015078194.tif 000254
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１５Ｈ１７Ｎ５ＯＳ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３１６.１。
【０７３２】
実施例２４６．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（（４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル）メチル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２５０】
2015078194.tif 000255
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２７Ｎ７Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４４６.３。
【０７３３】
実施例２４７．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２５１】
2015078194.tif 000256
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ２３Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３５４.２。
【０７３４】
実施例２４８．２−（４−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２５２】
2015078194.tif 000257
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１６Ｎ８Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３５２.２。
【０７３５】
実施例２４９．２−（１Ｈ−インドール−５−イルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２５３】
2015078194.tif 000258
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１６Ｎ６Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３０９.２。
【０７３６】
実施例２５０．２−（１Ｈ−インダゾール−５−イルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２５４】
2015078194.tif 000259
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１５Ｈ１５Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３１０.２。
【０７３７】
実施例２５１．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（オキサゾール−５−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２５５】
2015078194.tif 000260
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ１６Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３３７.１。
【０７３８】
実施例２５２．２−（１Ｈ−インダゾール−６−イルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２５６】
2015078194.tif 000261
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１５Ｈ１５Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３１０.２。
【０７３９】
実施例２５３．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（キノリン−６−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２５７】
2015078194.tif 000262
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ１６Ｎ６Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３２１.２。
【０７４０】
実施例２５４．（Ｒ）−２−（４−（３−カルバモイルピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２５８】
2015078194.tif 000263
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２５Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９６.０。
【０７４１】
実施例２５５．（Ｓ）−２−（４−（３−カルバモイルピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２５９】
2015078194.tif 000264
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２５Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９６.２。
【０７４２】
実施例２５６．４−（シクロブチルアミノ）−２−（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン−６−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２６０】
2015078194.tif 000265
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ１９Ｎ５Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３４２.２。
【０７４３】
実施例２５７．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２６１】
2015078194.tif 000266
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびにピペリジンおよび４−フルオロニトロベンゼンに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２６Ｎ６Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６７.３。
【０７４４】
実施例２５８．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（４−ヒドロキシピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２６２】
2015078194.tif 000267
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに４−ヒドロキシピペリジンおよび４−フルオロニトロベンゼンに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２６Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３８３.３。
【０７４５】
実施例２５９．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（４−フルオロピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２６３】
2015078194.tif 000268
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに４−フルオロピペリジンおよび４−フルオロニトロベンゼンに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２５Ｎ６ＯＦ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３８５.０。
【０７４６】
実施例２６０．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−モルホリノフェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２６４】
2015078194.tif 000269
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに４−モルホリンおよび４−フルオロニトロベンゼンに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２４Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６９.０。
【０７４７】
実施例２６１．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（４−メチルピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２６５】
2015078194.tif 000270
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに１−メチルピペラジンおよび４−フルオロニトロベンゼンに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２７Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３８２.３。
【０７４８】
実施例２６２．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（３，３−ジフルオロピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２６６】
2015078194.tif 000271
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに３，３−ジフルオロピペリジンおよび４−フルオロニトロベンゼンに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２４Ｎ６ＯＦ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４０３.０。
【０７４９】
実施例２６３．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（４，４−ジフルオロピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２６７】
2015078194.tif 000272
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミン、ならびに４，４−ジフルオロピペリジンおよび４−フルオロニトロベンゼンに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２４Ｎ６ＯＦ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４０３.０。
【０７５０】
実施例２６４．（Ｒ）−２−（４−（２−カルバモイルピロリジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２６８】
2015078194.tif 000273
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２３Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３８２.０。
【０７５１】
実施例２６５．２−（４−（（２Ｓ，４Ｒ）−２−カルバモイル−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２６９】
2015078194.tif 000274
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。
【０７５２】
実施例２６６．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（メチルカルバモイル）ピロリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２７０】
2015078194.tif 000275
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２５Ｎ７Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１２.５。
【０７５３】
実施例２６７．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（（２Ｓ，４Ｒ）−２−（ジメチルカルバモイル）−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２７１】
2015078194.tif 000276
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２７Ｎ７Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２６.５。
【０７５４】
実施例２６８．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（４−（メチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２７２】
2015078194.tif 000277
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、イソニペコチン酸エチルおよび４−フルオロニトロベンゼンに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２２Ｈ２９Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２４.０。
【０７５５】
実施例２６９．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（４−（ジメチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２７３】
2015078194.tif 000278
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、イソニペコチン酸エチルおよび４−フルオロニトロベンゼンに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２３Ｈ３１Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３８.３。
【０７５６】
実施例２７０．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２７４】
2015078194.tif 000279
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、１−ヒドロキシエチルピペラジンおよび４−フルオロニトロベンゼンに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２９Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１２.３。
【０７５７】
実施例２７１．２−（３−クロロ−４−モルホリノフェニルアミノ）−４−（シクロブチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２７５】
2015078194.tif 000280
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２３Ｎｘ６Ｏ２Ｃｌ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４０３.０，４０５.０。
【０７５８】
実施例２７２．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（３，３−ジフルオロピロリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２７６】
2015078194.tif 000281
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、３，３−ジフルオロピロリジンおよび４−フルオロニトロベンゼンに由来するアニリンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２２Ｎ６ＯＦ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３８９.０。
【０７５９】
実施例２７３．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（メチルカルバモイル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２７７】
2015078194.tif 000282
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ２０Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３４１.０。
【０７６０】
実施例２７４．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−（ジメチルカルバモイル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２７８】
2015078194.tif 000283
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ２２Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３５５.２。
実施例２７５．（Ｓ）−４−（メチルアミノ）−２−（４−（２−（メチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２７９】
2015078194.tif 000284
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、スキーム１に記載されている出発物質の合成においてシクロブチルアミンの代わりにメチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２５Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３８４.３。ＵＶ：λ＝２０８，２７６。
【０７６１】
実施例２７６．（Ｓ）−４−（エチルアミノ）−２−（４−（２−（メチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２８０】
2015078194.tif 000285
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、スキーム１に記載されている出発物質の合成においてシクロブチルアミンの代わりにエチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２７Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９８.３。ＵＶ：λ＝２０３，２７２。
【０７６２】
実施例２７７．（Ｓ）−２−（４−（２−（メチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（プロプ−２−イニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２８１】
2015078194.tif 000286
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、スキーム１に記載されている出発物質の合成においてシクロブチルアミンの代わりにプロパルギルアミンを使用し、メチルアミンの代わりにプロパルギルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２５Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４０８.３。ＵＶ：λ＝２０７，２７３。
【０７６３】
実施例２７８．（Ｓ）−４−（シクロプロピルメチルアミノ）−２−（４−（２−（メチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２８２】
2015078194.tif 000287
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、スキーム１に記載されている出発物質の合成においてシクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルメチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２２Ｈ２９Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２４.４。ＵＶ：λ＝２０４，２６０。
【０７６４】
実施例２７９．（Ｒ）−２−（４−（３−カルバモイルピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２８３】
2015078194.tif 000288
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、スキーム１に記載されている出発物質の合成においてシクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２２Ｆ３Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３８.３。
【０７６５】
実施例２８０．（Ｒ）−２−（４−（３−（メチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２８４】
2015078194.tif 000289
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、スキーム１に記載されている出発物質の合成においてシクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２４Ｆ３Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４５２.３。
【０７６６】
実施例２８１．（Ｓ）−２−（４−（２−カルバモイルピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２８５】
2015078194.tif 000290
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、スキーム１に記載されている出発物質の合成においてシクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２２Ｆ３Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３８.３。
【０７６７】
実施例２８２．（Ｓ）−２−（４−（２−（ジメチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２８６】
2015078194.tif 000291
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、スキーム１に記載されている出発物質の合成においてシクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２６Ｆ３Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４６６.４。
【０７６８】
実施例２８３．２−（４−メトキシフェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２８７】
2015078194.tif 000292
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミンを使用し、最後のステップにおいてパラ−アニシジンを使用することによって製造した。ＭＳ  Ｃ１４Ｈ１４Ｆ３Ｎ５Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３４２.２。ＵＶ：λ＝２１７。
【０７６９】
実施例２８４．２−（４−カルバモイルフェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２８８】
2015078194.tif 000293
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミンを使用し、最後のステップにおいて４−アミノベンズアミドを使用することによって製造した。ＭＳ  Ｃ１４Ｈ１３Ｆ３Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３５５.２。ＵＶ：λ＝２００，２９０。
【０７７０】
実施例２８５．（Ｓ）−４−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−２−（４−（２−（メチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２８９】
2015078194.tif 000294
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、スキーム１に記載されている出発物質の合成においてシクロブチルアミンの代わりにｔｅｒｔ−ブチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２２Ｈ３１Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２６.３。
【０７７１】
実施例２８６．（Ｓ）−４−（２−メトキシエチルアミノ）−２−（４−（２−（メチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２９０】
2015078194.tif 000295
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、スキーム１に記載されている出発物質の合成においてシクロブチルアミンの代わりに２−メトキシエチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２９Ｎ７Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２８.３。ＵＶ：λ＝２０２，２６８。
【０７７２】
実施例２８７．（Ｓ）−４−（シクロペンチルアミノ）−２−（４−（２−（メチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２９１】
2015078194.tif 000296
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、スキーム１に記載されている出発物質の合成においてシクロブチルアミンの代わりにシクロペンチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２３Ｈ３１Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３８.３。ＵＶ：λ＝２０３，２６２。
【０７７３】
実施例２８８：４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−エトキシフェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２９２】
2015078194.tif 000297
【化２９３】
2015078194.tif 000298
中間体３６１.１を、４−エトキシアニリン３６１.２［ＣＡＳ１５６−４３−４］およびｐＴＳＡのＮＭＰ溶液と共に攪拌した。封管内で反応を１２０℃で２時間加熱した。該反応を冷却し、ＴＦＡ水溶液でわずかに酸性にし、逆相分取ＨＰＬＣによって精製することにより表題化合物を得た。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１９Ｎ５Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３１４.３。λ=２７５ｎｍ。
【０７７４】
実施例２８９：４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−フェノキシフェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２９４】
2015078194.tif 000299
実施例２８８に記載されているように、中間体３６１.１を、４−フェノキシアニリン［ＣＡＳ１３９−５９−３］およびｐＴＳＡのＮＭＰ溶液と共に攪拌した。逆相分取ＨＰＬＣによって表題化合物を得た。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ１９Ｎ５Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６２.２。ＵＶ  λ＝２７７ｎｍ。
【０７７５】
実施例２９０：４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（トリフルオロメトキシ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２９５】
2015078194.tif 000300
実施例２８８に記載されているように、中間体３６１.１を、４−（トリフルオロメトキシ）アニリン［ＣＡＳ４６１−８２−５］およびｐＴＳＡのＮＭＰ溶液と共に攪拌した。逆相分取ＨＰＬＣによって表題化合物を得た。ＭＳ  Ｃ１５Ｈ１４Ｆ３Ｎ５Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３５４.２。ＵＶ  λ＝２６５ｎｍ。
【０７７６】
実施例２９１：４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（ピリジン−３−イルオキシ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２９６】
2015078194.tif 000301
実施例２８８に記載されているように、中間体３６１.１を、４−（３−ピリジルオキシ）アニリン［ＣＡＳ８０６５０−４５−９］およびｐＴＳＡのＮＭＰ溶液と共に攪拌した。逆相分取ＨＰＬＣによって表題化合物を得た。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ１８Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６３.３。ＵＶ  λ＝２０５，２６７ｎｍ。
【０７７７】
実施例２９２：２−（４−（２−シアノエチルスルホニル）フェニルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２９７】
2015078194.tif 000302
実施例２８８に記載されているように、中間体３６１.１を、３−（４−アミノフェニル）スルホニルプロパンニトリル［ＣＡＳ８４３６２−２７−６］およびｐＴＳＡのＮＭＰ溶液と共に攪拌した。逆相分取ＨＰＬＣによって表題化合物を得た。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ１８Ｎ６Ｏ３Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３８７.２。ＵＶ  λ＝２９０ｎｍ。
【０７７８】
実施例２９３：４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−イソブトキシフェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２９８】
2015078194.tif 000303
実施例２８８に記載されているように、中間体３６１.１を、４−（２−メチルプロポキシ）アニリン塩酸塩［ＣＡＳ１０５０１６１−２６−６］およびｐＴＳＡのＮＭＰ溶液と共に攪拌した。逆相分取ＨＰＬＣによって表題化合物を得た。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ２３Ｎ５Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３４２.４。ＵＶ  λ＝２８０ｎｍ。
実施例２９４：４−（シクロプロピルアミノ）−２−（４−（チアゾール−４−イルメチルスルホニル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化２９９】
2015078194.tif 000304
実施例２８８に記載されているように、中間体３６１.１を、４−（チアゾール−４−イルメチルスルホニル）アニリンおよびｐＴＳＡのＮＭＰ溶液と共に攪拌した。逆相分取ＨＰＬＣによって表題化合物を得た。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ１８Ｎ６Ｏ３Ｓ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３１.２。ＵＶ  λ＝２９１ｎｍ。
【０７７９】
実施例２９５．（Ｓ）−４−（ベンジルアミノ）−２−（４−（２−（メチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３００】
2015078194.tif 000305
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、スキーム１に記載されている出発物質の合成においてシクロブチルアミンの代わりにベンジルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２５Ｈ２９Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４６０.３。ＵＶ：λ＝２０８，２６１。
【０７８０】
実施例２９６．（Ｓ）−４−（イソプロピルアミノ）−２−（４−（２−（メチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３０１】
2015078194.tif 000306
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、スキーム１に記載されている出発物質の合成においてシクロブチルアミンの代わりにイソプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２１Ｈ２９Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４１２.４。ＵＶ：λ＝２０２，２７１。
【０７８１】
実施例２９７．（Ｓ）−２−（４−（２−（メチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２，３，６−トリフルオロベンジルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３０２】
2015078194.tif 000307
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、スキーム１に記載されている出発物質の合成においてシクロブチルアミンの代わりに２，３，６−トリフルオロベンジルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２５Ｈ２６Ｆ３Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値５１４.４。
【０７８２】
実施例２９８．（Ｓ）−４−（２−メトキシエチルアミノ）−２−（４−（２−（メチルカルバモイル）ピペリジン−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３０３】
2015078194.tif 000308
上記化合物は、実施例２０１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、スキーム１に記載されている出発物質の合成においてシクロブチルアミンの代わりに２−メトキシエチルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２２Ｈ３１Ｎ７Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４４２.４。ＵＶ：λ＝２０３，２７３。
【０７８３】
実施例２９９．４−（１−メチル−１Ｈ−インダゾール−４−イルアミノ）−２−（４−（２−（ピロリジン−１−イル）エトキシ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３０４】
2015078194.tif 000309
上記化合物は、実施例１５１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２５Ｈ２８Ｎ８Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４７３.４。ＵＶ：λ＝２１２.２，２８５.４。
【０７８４】
実施例３００．４−（１，２−ジメチル−１Ｈ−インドール−４−イルアミノ）−２−（４−（２−（ピロリジン−１−イル）エトキシ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３０５】
2015078194.tif 000310
上記化合物は、実施例４８に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２７Ｈ３１Ｎ７Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４８６.５。ＵＶ：λ＝２１８.６，２５８.９。
【０７８５】
実施例３０１．４−（４−クロロナフタレン−１−イルアミノ）−２−（４−（２−（ピロリジン−１−イル）エトキシ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３０６】
2015078194.tif 000311
上記化合物は、実施例４８に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２７Ｈ２７ＣｌＮ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値５０３.４，５０５，４（Ｃｌパターン）。ＵＶ：λ＝２２２.８，２８４.２。
【０７８６】
実施例３０２．４−（３−メチルシンノリン−５−イルアミノ）−２−（４−（２−（ピロリジン−１−イル）エトキシ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３０７】
2015078194.tif 000312
上記化合物は、実施例４８に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２６Ｈ２８Ｎ８Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４８５.４。ＵＶ：λ＝２７６.１。
【０７８７】
実施例３０３．４−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−７−イルアミノ）−２−（４−（２−（ピロリジン−１−イル）エトキシ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３０８】
2015078194.tif 000313
上記化合物は、実施例４８に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２４Ｈ２５Ｎ７Ｏ２Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４７６.４。ＵＶ：λ＝２１６.９，２８１.９。
【０７８８】
実施例３０４．４−（ナフタレン−１−イルアミノ）−２−（４−（２−（ピロリジン−１−イル）エトキシ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３０９】
2015078194.tif 000314
上記化合物は、実施例４８に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２７Ｈ２８Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４６９.４。ＵＶ：λ＝２１９.２，２８０.７。
【０７８９】
実施例３０５．４−（４−（メチルスルホニル）フェニルアミノ）−２−（４−（２−（ピロリジン−１−イル）エトキシ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３１０】
2015078194.tif 000315
上記化合物は、実施例４８に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２４Ｈ２８Ｎ６Ｏ４Ｓ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４９７.４。ＵＶ：λ＝２９２。
【０７９０】
実施例３０６：２−（４−（２−（ピロリジン−１−イル）エトキシ）フェニルアミノ）−４−（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３１１】
2015078194.tif 000316
本化合物は、スキーム１に記載されている化学合成法を利用して、シクロブチルアミンの代わりにトリフルオロエチルアミンを用いて合成した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２３Ｆ３Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４２５.３。ＵＶ  λ＝２１５，２４５，２７５ｎｍ。
【０７９１】
実施例３０７：４−（ベンジルアミノ）−２−（４−（２−（ピロリジン−１−イル）エトキシ）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３１２】
2015078194.tif 000317
本化合物は、スキーム１に記載されている化学合成法を利用して、シクロブチルアミンの代わりにベンジルアミンを用いて合成した。ＭＳ  Ｃ２４Ｈ２８Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値４３３.４。ＵＶ  λ＝２５１ｎｍ。
【０７９２】
実施例３０９．４−（シクロブチルアミノ）−２−（２−オキソインドリン−５−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３１３】
2015078194.tif 000318
上記化合物は、５−アミノインドリン−２−オンおよびスキーム１に記載されている製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ１８Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３３９.０。
【０７９３】
実施例３１０．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−メチル−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン−７−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３１４】
2015078194.tif 000319
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、Ｎ７−アミノ−４−メチル−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オン（２−アミノ−５−ニトロフェノールおよびブロモ酢酸エチルから３ステップで合成した）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ２０Ｎ６Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６９.０。
【０７９４】
実施例３１１．４−（シクロブチルアミノ）−２−（２−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−６−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３１５】
2015078194.tif 000320
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、６−アミノ−３，４−ジヒドロキノリン−２（１Ｈ）−オン（３，４−ジヒドロキノリン−２（１Ｈ）−オンをニトロ化し、次いで鉄粉で還元することによって製造される）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ２０Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３５３.０
【０７９５】
実施例３１２．４−（シクロブチルアミノ）−２−（２，２，４−トリメチル−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン−７−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３１６】
2015078194.tif 000321
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、Ｎ７−アミノ−４−メチル−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オン（２−アミノ−５−ニトロフェノールおよび２−ブロモ−２−メチルプロピオン酸エチルから３ステップで合成される）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ２０Ｈ２４Ｎ６Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３９７.０。
【０７９６】
実施例３１３．４−（シクロブチルアミノ）−２−（１−メチル−２−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−６−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３１７】
2015078194.tif 000322
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、６−アミノ−１−メチル−３，４−ジヒドロキノリン−２（１Ｈ）−オン（３，４−ジヒドロキノリン−２（１Ｈ）−オンをニトロ化し、次いでメチル化し、その後、鉄粉で還元することによって製造される）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１９Ｈ２２Ｎ６Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６７.０。
【０７９７】
実施例３１４．４−（シクロブチルアミノ）−２−（４−メチル−３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン−６−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３１８】
2015078194.tif 000323
【０７９８】
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、６−アミノ−４−メチル−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オン（２−アミノ−４−ニトロフェノールおよびブロモ酢酸エチルから３ステップで合成される）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１８Ｈ２０Ｎ６Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６９.０。
【０７９９】
実施例３１５．４−（シクロブチルアミノ）−２−（３−オキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン−６−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３１９】
2015078194.tif 000324
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、６−アミノ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オン（２−アミノ−４−ニトロフェノールおよびブロモ酢酸エチルから２ステップで合成される）を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ１８Ｎ６Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３５５.０。
【０８００】
実施例３１６．２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−６−イルアミノ）−４−（シクロブチルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３２０】
2015078194.tif 000325
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−６−アミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１５Ｈ１６Ｎ８Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３２５.０。
【０８０１】
実施例３１７．４−（シクロブチルアミノ）−２−（２−オキソ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３２１】
2015078194.tif 000326
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、５−アミノベンゾフラン−２（３Ｈ）−オンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ１７Ｎ５Ｏ３  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３４０.０。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，４００ＭＨｚ）：δ８.４１（ｓ，１Ｈ），８.０５（ｓ，１Ｈ）７.８８（ｄ，１Ｈ）７.７８（ｄ，１Ｈ），４.５９（ｍ，１Ｈ），２.４７（ｍ，２Ｈ），２.０９（ｍ，２Ｈ），１.９０（ｍ，２Ｈ）。
【０８０２】
実施例３１８．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３２２】
2015078194.tif 000327
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１５Ｈ１３Ｎ５Ｏ３Ｆ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３５０.１。
【０８０３】
実施例３１９．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（２−メチルベンゾ［ｄ］チアゾール−５−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３２３】
2015078194.tif 000328
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１６Ｎ６ＯＳ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３４１.０。
【０８０４】
実施例３２０．２−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−５−イルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３２４】
2015078194.tif 000329
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１５Ｈ１４Ｎ６ＯＳ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３２７.１。
【０８０５】
実施例３２１．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（イミダゾ［１，２−a］ピリジン−６−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３２５】
2015078194.tif 000330
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１５Ｈ１５Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３１０.２。
【０８０６】
実施例３２２．２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−６−イルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３２６】
2015078194.tif 000331
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１５Ｈ１５Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３１０.１。
【０８０７】
実施例３２３．２−（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−６−イルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３２７】
2015078194.tif 000332
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１４Ｈ１４Ｎ８Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３１１.２。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，４００ＭＨｚ）：δ８.６３（ｓ，１Ｈ），８.４２（ｓ，１Ｈ），７.９２（ｄ，１Ｈ），７.５８（ｄ，１Ｈ），３.０４（ｍ，１Ｈ），１.０３（ｍ，２Ｈ），０.８７（ｍ，２Ｈ）。
【０８０８】
実施例３２４．４−（シクロプロピルアミノ）−２−（３−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３２８】
2015078194.tif 000333
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１７Ｎ７Ｏ１  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３２４。
【０８０９】
実施例３２５．２−（ベンゾ［ｃ］［１，２，５］チアジアゾール−５−イルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３２９】
2015078194.tif 000334
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１４Ｈ１３Ｎ７ＯＳ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３２８.２。
【０８１０】
実施例３２６．２−（７−クロロ−１Ｈ−インダゾール−６−イルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３３０】
2015078194.tif 000335
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、Ｎ−クロロコハク酸イミドを使用して６−アミノインダゾール環を塩素化した後、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１５Ｈ１７Ｎ７ＯＣｌ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３４４.２，３４６.２。
【０８１１】
実施例３２７．２−（３−クロロ−１Ｈ−インダゾール−５−イルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３３１】
2015078194.tif 000336
上記化合物は、実施例３２６に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１５Ｈ１７Ｎ７ＯＣｌ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３４４.２，３４６.２。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ，４００ＭＨｚ）：δ８.２４（ｓ，１Ｈ），８.１８（ｓ，１Ｈ），７.５９（ｍ，２Ｈ），２.９７（ｍ，１Ｈ），０.８０（ｍ，２Ｈ），０.６４（ｍ，２Ｈ）。
【０８１２】
実施例３２８．２−（１−（２−アミノ−２−オキソエチル）−１Ｈ−インダゾール−６−イルアミノ）−４−（シクロプロピルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３３２】
2015078194.tif 000337
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用し、シクロブチルアミンの代わりにシクロプロピルアミンを使用し、６−ニトロインダゾールおよびブロモ酢酸エチルに由来する中間体を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ１８Ｎ８Ｏ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６７.２。
【０８１３】
実施例３２９．４−（シクロブチルアミノ）−２−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３３３】
2015078194.tif 000338
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１５Ｎ５Ｏ３Ｆ２  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３６４.１。
【０８１４】
実施例３３０．４−（シクロブチルアミノ）−２−（イミダゾ［１，２−a］ピリジン−６−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３３４】
2015078194.tif 000339
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１６Ｈ１７Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３２４.２。
【０８１５】
実施例３３１．４−（シクロブチルアミノ）−２−（３−メチル−１Ｈ−インダゾール−６−イルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３３５】
2015078194.tif 000340
上記化合物は、スキーム１に記載されている製造方法と類似の製造方法を使用して製造した。ＭＳ  Ｃ１７Ｈ１９Ｎ７Ｏ  （Ｍ＋Ｈ）＋  実測値３３８.０。
【０８１６】
実施例３３２
本実施例は、下記のアッセイについて得られた結果に従って本発明の化合物を評価する方法を説明するものである。本発明の化合物のインビトロおよびインビボのヒトｓｙｋ活性は、それらがヒト血漿ｓｙｋの活性を阻害する能力の検査などの当該技術分野で周知の様々な手順によって決定されうる。本発明の化合物が示すヒトｓｙｋを阻害するための強力な親和性は、ＩＣ５０値（ｎＭにて）によって測定しうる。該ＩＣ５０値は、ヒトｓｙｋタンパク質分解活性の５０％阻害を提供するのに必要な化合物の濃度（ｎＭにて）である。ＩＣ５０値が小さいほど、化合物がｓｙｋ活性を阻害する活性が高い（強力である）。
【０８１７】
ｓｙｋに対する阻害活性を検出および測定するインビトロアッセイは下記の通りである：
【０８１８】
ｓｙｋチロシンリン酸化活性の阻害
候補分子がｓｙｋチロシンリン酸化活性を阻害する効力は、試験化合物がｓｙｋ特異的基質のｓｙｋ媒介チロシンリン酸化を阻害する能力を測定することによって評価される。
【０８１９】
ＳＹＫチロシンリン酸化活性は、パーキン・エルマー・ライフ・アンド・アナリティカル・サイエンシズ社（ボストン、マサチューセッツ州）が開発したＬＡＮＣＥ（登録商標）テクノロジーを使用して測定される。ＬＡＮＣＥ（登録商標）は、時間分解蛍光共鳴エネルギー転移アッセイ（ＴＲ−ＦＲＥＴ）などの技術を使用する均一な時間分解蛍光光度法アプリケーションを指す（手順については一般的に「Perkin Elmer Application Note- How to Optimize a Tyrosine Kinase Assay Using Time Resolved Fluorescence-Based LANCE Detection、wwww.perkinelmer.com／lifesciences」を参照のこと）。アッセイ原理は、リン酸化部位特異的ユーロピウム標識抗体から受容体としてのストレプトアビジン−アロフィコシアニンへのエネルギー転移を使用したリン酸化基質の検出を含む。
【０８２０】
候補分子がＳＹＫチロシンリン酸化活性を阻害する能力を検査するために、分子を３０％ＤＭＳＯ中で再構成し、候補分子の非存在下でＤＭＳＯを含む最終希釈で１：３に連続的に希釈する。アッセイ中の最終ＤＭＳＯ濃度は３％である。キナーゼアッセイは２つの部分の反応によって行われる。第一の反応はキナーゼ反応であり、候補分子、全長の活性組換えＳＹＫ酵素（ミリポア社、カリフォルニア州）およびビオチン標識ＳＹＫ特異的基質、ビオチン−ＤＥＥＤＹＥＳＰ−ＯＨを含む。第２の反応は、キナーゼ反応の終結、ならびに検出試薬−ユーロピウム標識抗リン酸化チロシン試薬（Ｅｕ−Ｗ１０２４−ＰＹ１００、パーキン・エルマー社、ボストン、マサチューセッツ州）およびストレプトアビジン−アロフィコシアニン検出試薬（ＳＡ−ＡＰＣ、プロザイム社、カリフォルニア州）の同時付加を含む。該キナーゼ反応は、ブラックＵ底９６ウェルマイクロタイタープレート内で行う。最終反応容量は５０μＬであり、終濃度１ｎＭの活性ＳＹＫ酵素、５５０ｎＭ  ＳＹＫ−基質、ならびに１００μＭ  ＡＴＰ（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ７.５、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、および１ｍＭ  ＤＴＴを含む緩衝液中で希釈した）を含む。該反応を室温で１時間進める。クエンチ緩衝液は、１００ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ７.５、３００ｍＭ  ＮａＣｌ２、２０ｍＭ  ＥＤＴＡ、０.０２％Ｂｒｉｊ３５、および０.５％ＢＳＡを含む。Ｅｕ−Ｗ１０２４−ＰＹ１００については１：５００、およびＳＡ−ＡＰＣについては１：２５０に希釈した後、検出試薬を該反応混合物に加える。該キナーゼ反応は、該検出試薬を含む５０μＬのクエンチ緩衝液を加えることによって終結する。検出を室温で１時間進める。阻害剤の非存在下および存在下でのリン酸化基質の検出は、ＴＲ−ＦＲＥＴ装置、Ａｎａｌｙｓｔ  ＨＴ（モレキュラー・プローブス社、サニーベール、カリフォルニア州）にて測定し、測定条件はＣｒｉｔｅｒｉｏｎＨｏｓｔ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ２.０（モレキュラー・プローブス社、サニーベール、カリフォルニア州）を使用して設定する。用いる設定は下記の通りである：励起３６０ｎｍ、発光６６５−７.５ｎｍ、ビームスプリッター３５０ｎｍ  ５０／５０、フラッシュ１００パルス、遅延６０ｕｓ、積分４００ｕｓ、ｚ高さ２ｍｍ。ＳＹＫ−チロシンキナーゼ活性の阻害は、阻害剤の非存在下と比較した、阻害剤の存在下で観察される最大応答として計算される。ＩＣ５０は非線形回帰分析によって得られた。
【０８２１】
無傷の非ホジキンリンパ腫細胞株ＲａｍｏｓおよびＳＵＤＨＬ−６中でＳｙｋ活性の化合物阻害を検査するために、細胞内リン酸フローサイトメトリーを用いた。対数期増殖にある１０ｘ１０６個の細胞を等分した；Ｓｙｋキナーゼは、細胞を３μｇ／ｍｌのＢ細胞受容体に特異的な抗体と１０分間インキュベートすることによって活性化される。その直後、室温で５分間、１％パラホルムアルデヒド中で細胞を固定し、リン酸緩衝生理食塩水中で洗浄し、次いで氷冷メタノール中で２時間インキュベートすることによって透過処理する。細胞を再びリン酸緩衝生理食塩水中で洗浄し、次いでＳｙｋキナーゼ活性の指示薬であるリン酸化Ｅｒｋ（Ｙ２０４）およびＢＬＮＫ（Ｙ８４）に特異的な抗体、ならびにＳｒｃファミリーキナーゼ活性の尺度であるリン酸化Ｓｙｋ（Ｙ３５２）に特異的な抗体と共に３０分間インキュベートする。用いる全ての抗体は、ＢＤファルミンゲン社（サンホセ、カリフォルニア州）から購入する。抗体とのインキュベーション後、細胞を再び洗浄し、フローサイトメトリーで分析する。化合物によるＢ細胞受容体シグナル伝達の阻害を詳述する代表的なデータは、第１表にＩＣ５０範囲として示している。
【０８２２】
非ホジキンリンパ腫Ｂ細胞株ＳＵＤＨＬ−４、ＳＵＤＨＬ−６、およびＴｏｌｅｄｏに対する化合物の抗増殖効果も評価した。ＳＵＤＨＬ−４およびＳＵＤＨＬ−６が増殖および生存にＢ細胞受容体シグナル伝達を必要とする一方、Ｔｏｌｅｄｏ細胞株（ここでは負のコントロールとしての役割を果たす）は必要としなかった。９６ウェルプレートの各ウェルに細胞を等分し、徐々に濃度を増加させた化合物と共に７２時間インキュベートし、その後ＭＴＴアッセイ（ケミコン・インターナショナル社、テメキュラ、カリフォルニア州）を使用し、製造業者が提供するプロトコールに従って、細胞の生存および増殖を決定した。データは、５または６回の独立実験から得られたＩＣ５０値±標準偏差として第２表に詳述している。
【０８２３】
非ホジキンリンパ腫Ｂ細胞株ＳＵＤＨＬ−４、ＳＵＤＨＬ−６、およびＴｏｌｅｄｏにおけるアポトーシスの誘導は、アポトーシスマーカー、カスパーゼ３を測定することによって評価した。細胞を１、３、または１０μＭの化合物と共に２４、４８、および７２時間インキュベートした。各時点の終わりに、細胞を処理し、モノクローナルウサギ抗活性カスパーゼ−３抗体キットおよび関連プロトコール（ＢＤファルミンゲン社）を使用してフローサイトメトリー分析した。２つの独立実験から得られたデータを第３Ａ表および第３Ｂ表に示しているが、これらは示された条件下で化合物と共にインキュベートした後にアポトーシスを起こした全細胞のパーセントを表している。
【０８２４】
Ｓｙｋ活性はＢ細胞シグナル伝達、増殖、および生存に必要であるのみならず、示しているように、Ｂ細胞受容体の架橋による細胞活性化においても重要である。Ｂ細胞活性化は、細胞シグナル伝達、抗原提示、および接着に関与する数種のタンパク質の細胞表面発現の増加をもたらす。これらの中で、ＣＤ８０、ＣＤ８６、およびＣＤ６９は、一般にＢ細胞活性化状態を決定するために測定した。それゆえ、脾臓から単離した初代マウスＢ細胞を等分し、ヤギ抗マウスＩｇＤ（イーバイオサイエンシズ社、サンディエゴ、カリフォルニア州）の存在下、徐々に濃度を増加させた化合物（０.０５〜２μＭ）と共に２０時間インキュベートし、Ｂ細胞受容体を架橋した。次いで、細胞を洗浄し、ＣＤ８０、ＣＤ８６、およびＣＤ６９Ｂ細胞活性化マーカーに特異的な抗体と共に氷上で３０分間インキュベートした。Ｂ細胞マーカーＣＤ４５ＲＯで染色することによって、プールした集合からＢ細胞を同定した。全ての抗体はＢＤファルミンゲン社から購入した。第４表は、これらの化合物がＢ細胞受容体誘導性のマウス初代Ｂ細胞の活性化を阻害するＩＣ５０範囲を示している。
【０８２５】
下記の表において、Ｓｙｋおよび／またはＪａｋアッセイの活性は以下のように提供されている：＋＋＋＋＋＝ＩＣ５０＜０.００１０μＭ；＋＋＋＋＝０.００１０μＭ＜ＩＣ５０＜０.０１０μＭ、＋＋＋＝０.０１０μＭ＜ＩＣ５０＜０.１０μＭ、＋＋＝０.１０μＭ＜ＩＣ５０＜１μＭ、＋＝ＩＣ５０＞１μＭ。
【表２−１】
2015078194.tif 000341
【表２−２】
2015078194.tif 000342
【表２−３】
2015078194.tif 000343
【表２−４】
2015078194.tif 000344
【表２−５】
2015078194.tif 000345
【表２−６】
2015078194.tif 000346
【表２−７】
2015078194.tif 000347
【表２−８】
2015078194.tif 000348
【表２−９】
2015078194.tif 000349
【表２−１０】
2015078194.tif 000350
【表２−１１】
2015078194.tif 000351
【０８２６】
インビトロでのＧＰＶＩ媒介血小板機能の阻害
候補分子がｓｙｋ媒介血小板機能を阻害する能力は、ＧＰＶＩ特異的アゴニストのコンバルキシン誘導ヒト血小板カルシウム動員または凝集の阻害を測定することによって検査する。カルシウム動員は９６ウェルマイクロタイターフォーマット内のヒト洗浄血小板にて評価される。凝集は、９６ウェルマイクロタイターアッセイ（一般的に「Jantzen, H. M. et al. (1999) Thromb. Hemost. 81:111-117」の手順を参照のこと）またはヒト多血小板血漿（ＰＲＰ）を使用した標準キュベット光透過凝集測定法にて評価される。
【０８２７】
インビトロでのコンバルキシン媒介血小板カルシウム動員の阻害
コンバルキシン誘導カルシウム動員の阻害は、ＦＬＩＲＰカルシウム３アッセイキット（モレキュラー・デバイセズ社、サニーベール、カリフォルニア州）を使用したヒト洗浄血小板にて決定した。洗浄血小板の製造のために、健康で薬物を使用していない志願者からヒト静脈血を収集し、ＰＧＩ２を含むＡＣＤ（８５ｍＭクエン酸ナトリウム、１１１ｍＭグルコース、７１.４ｍＭクエン酸）（最終的に０.２μＭ  ＰＧＩ２を含む１.２５ｍＬ  ＡＣＤ；ＰＧＩ２はシグマ社（セントルイス、ミズーリ州）から購入した）に保存する。多血小板血漿（ＰＲＰ）は、１６０Ｘｇにて室温で２０分間遠心分離することによって製造する。洗浄血小板は、ＰＲＰを７３０ｇで１０分間遠心分離し、血小板ペレットをＣＧＳ（１３ｍＭクエン酸ナトリウム、３０ｍＭグルコース、１２０ｍＭ  ＮａＣｌ；２ｍＬ  ＣＧＳ／最初の血液量１０ｍＬ）中で再懸濁することによって製造する。３７℃で１５分間インキュベートした後、７３０ｇで１０分間遠心分離することによって血小板を収集し、Ｈｅｐｅｓ−タイロード緩衝液（１０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ、１３８ｍＭ  ＮａＣｌ、５.５ｍＭグルコース、２.９ｍＭ  ＫＣｌ、１２ｍＭ  ＮａＨＣＯ３、ｐＨ７.４）中、濃度３Ｘ１０８血小板／ｍｌで再懸濁する。この血小板懸濁液をカルシウム動員アッセイにて用いる前に、室温で４５分以上保存する。
【０８２８】
９６ウェルプレートカルシウム動員実験のために、等量の３Ｘ１０８洗浄血小板／ｍｌを１Ｘハンクス平衡塩類溶液、ｐＨ７.４、２０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ緩衝液中に再懸濁した等量のカルシウム−３アッセイ試薬Ａと共にインキュベートした。全反応容量０.２ｍｌ／ウェルは、１.５ｘ１０８／ｍｌ洗浄血小板／カルシウム−３アッセイ試薬Ａミックス、１０μＭエプチフィバチド（ミレニアム・ファーマシューティカルズ社、ケンブリッジ、マサチューセッツ州）、試験化合物の０.７５％ＤＭＳＯ中の連続希釈液（１：３）を含む。各８セットの１ウェルにＤＭＳＯのみを加え、最大のカルシウム動員読み取りを可能にする。室温で２０分間プレインキュベートした後、９６ウェルマイクロプレートリーダーをＦｌｅｘＳｔａｔｉｏｎ（モレキュラー・デバイセズ社、サニーベール、カリフォルニア州）に搭載する。カルシウム動員を測定するためのＦｌｅｘＳｔａｔｉｏｎ実験条件は、ＳＯＦＴＭａｘ  Ｐｒｏを使用して設定する。用いる設定は下記で詳述している。蛍光パラメーターズ−アッセイモード：フレックス、励起４８５ｎＭ、５２５ｎＭ  カットオフ５１５ｎＭ；パラメーターズ−ＰＭＴ感受性−６、ピペット高さ２３０μｌ、読み取り時間２分および４０秒、読み取り間隔２秒、温度−２３〜２５℃。ベースライン読み取りの１８秒後、コンバルキシンを終濃度１２５ｎｇ／ｍｌまで加えることによってカルシウム動員を開始する。カルシウム動員の阻害は、阻害剤の非存在下と比較した、阻害剤の存在下で観察される最大応答として計算した。ＩＣ５０は非線形回帰分析によって得た。
【０８２９】
インビトロでのコンバルキシン媒介血小板凝集の阻害
凝集アッセイのためのヒト多血小板血漿の製造のために、健康で薬物を使用していない志願者からヒト静脈血を収集し、０.３８％クエン酸ナトリウム（０.０１３Ｍ、最終ｐＨ７.０）に保存した。多血小板血漿（ＰＲＰ）は全血を１６０ｘｇにて室温で２０分間遠心分離することによって製造する。ＰＲＰ層を除去し、新たなチューブに移し、血小板数を調整し、有利な場合には、乏血小板血漿（ＰＰＰ）を使用して血小板濃度〜３ｘ１０８血小板／ｍｌを達成する。ＰＰＰは、残りの血液サンプル（ＰＲＰの除去後）を８００ｘｇで２０分間遠心分離することによって製造する。このＰＲＰの製造はその後、９６ウェルプレートまたは標準キュベット凝集測定法のいずれかにて凝集アッセイのために用いられうる。
【０８３０】
コンバルキシン誘導凝集の阻害は、フランタントーニら（Frantantoni et al.）が「Am. J. Clin. Pathol. 94, 613 (1990)」に記載しいる手順と類似の手順に従い、マイクロタイタープレートシェーカーおよびプレートリーダーを使用して、９６ウェル平底マイクロタイタープレート内で決定される。全てのステップは室温で行う。多血小板血漿（ＰＲＰ）を使用した９６ウェルプレート凝集のために、全反応容量０.２ｍｌ／ウェルは、１９０μｌのＰＲＰ（〜３ｘ１０８血小板／ｍｌ、上記参照）、および５μｌの３０％ＤＭＳＯ中の試験化合物の連続希釈液または緩衝液（コントロールウェル用）を含む。室温で２０分間プレインキュベートした後、５μｌの３２０ｎｇ／ｍｌのコンバルキシンアゴニスト溶液を各ウェルに加え、終濃度８ｎｇ／ｍｌのコンバルキシンを得る。次いで該プレートをマイクロタイタープレートシェーカー上で５分間攪拌し、５分間の読み取りはマイクロタイタープレートリーダー（Ｓｏｆｔｍａｘ、モレキュラー・デバイセズ社、メンロパーク、カリフォルニア州）にて行う。凝集はｔ＝５分でのＯＤ６５０ｎｍの減少から計算する。ＩＣ５０は非線形回帰分析によって得た。
【０８３１】
コンバルキシン誘導凝集の阻害もキュベット光透過凝集アッセイによって決定し、試験化合物の連続希釈液（１：２）は９６ウェルＶ底プレート内の３０％ＤＭＳＯ中にて製造した（キュベット内のＤＭＳＯ終濃度は０.３％であった）。凝集反応の開始に先立って試験化合物（ＤＭＳＯ中の５μｌの連続希釈）をＰＲＰと共に２０分間プレインキュベートしたが、これは経時的血小板凝集計内にて、３７℃で４９５μＬのＰＲＰにアゴニスト（１２５〜２５０ｎｇ／ｍｌのコンバルキシン）を加えることによって行う。凝集反応は４分間記録し、４分間のアッセイの間に生じる最大凝集と比較したベースラインでの凝集の範囲の差異によって凝集の最大範囲を決定する。凝集の阻害は、阻害剤の非存在下と比較した、阻害剤の存在下で観察される最大凝集として計算した。ＩＣ５０は非線形回帰分析によって得た。
【０８３２】
化合物の例、ならびにそれらのｓｙｋおよびＰＲＰ  ＩＣ５０値は第１〜５表に示している。
【０８３３】
ＢＣＲ架橋によって誘導されるＲａｍｏｓ細胞内のカルシウム流動アッセイ
実験より前に、Ｒａｍｏｓ細胞（２Ｇ６.４Ｃ１０、バーキットリンパ腫、ＡＴＣＣ登録番号：ＣＲＬ−１９２３）を新鮮培地中、５ｘ１０５細胞／ｍｌで３または４日間継代培養する。細胞を収集し、色素添加前に、新鮮培地中、８ｘ１０６細胞／ｍｌで再懸濁する。等量のカルシウム３添加色素（モレキュラー・デバイス社）を加え、細胞懸濁液へ混合する。色素添加細胞を９６ウェルプレート内で分注し、３０分間インキュベートする。次いで化合物を該色素添加細胞に加え、さらに３０分間インキュベートする。ＦｌｅｘＳｔａｔｉｏｎにて蛍光測定する前に、細胞を１０００ｒｐｍで３分間沈降させる。ＢＣＲ刺激は５μｇ／ｍｌの抗体（アフィニピュアＦ（ａｂ’）２断片ロバ抗ヒトＩｇＭ、ジャクソン・イムノリサーチ・ラボラトリーズ）を加えることによって行う。
【０８３４】
ＴＣＲ架橋によって誘導されるＪｕｒｋａｔ細胞内のカルシウム流動アッセイ
本プロトコールは、前のセクションに記載されているＢ細胞カルシウム流動と非常に類似している。唯一の差異は、Ｔ細胞（クローンＥ６−１、急性Ｔ細胞白血病、ＡＴＣＣ登録番号：Ｔｉｂ−１５２）および抗ヒトＣＤ３（機能グレード精製抗ヒトＣＤ３、クローンＯＫＴ３、イーバイオサイエンス社、第１６−００３７号）をＢ細胞および抗ヒトＩｇＭと交換していることである。細胞密度は同一に維持するが、抗体は濃度１００ｎｇ／ｍｌで用いる。
【０８３５】
ＴＣＲ架橋によって誘導されるＪｕｒｋａｔ細胞内のＩＬ−２分泌
Ｊｕｒｋａｔ細胞増殖および化合物インキュベーション手順は、前のセクションのＪｕｒｋａｔカルシウム流動アッセイに記載されている手順と同一である。抗体（抗ＣＤ３、ＯＫＴ３）を新鮮なプレート（細胞がない）上に１００ｎｇ／ウェルでコーティングする。細胞を８ｘ１０６細胞／ｍｌで懸濁し、別のプレート内で化合物と共に３０分間インキュベートする。インキュベーションの終わりに、細胞を抗体コーティングプレートに移し、１６時間インキュベートする。インキュベーション後の１００μｌの細胞培地を、インキュベーション後にＩＬ−２測定用に用いる。ＩＬ−２レベルはＩＬ−２  ＥＬＩＳＡキット（ヒトＩＬ−２  ＥＬＩＳＡキットＩＩ、ＢＤバイオサイエンス社、第５５０６１１号）を使用して決定する。
【０８３６】
実施例３３３  ミリポア・アップステートＫｉｎａｓｅＰｒｏｆｉｌｅｒ（登録商標）スクリーニング
本アッセイは、ＪＡＫ３の触媒活性に対する化合物の効果の直接測定法である。精製ヒトＪＡＫ３（ジェンバンクＡＦ５１３８６０）配列（残基７８１−Ｃ末端）は、昆虫細胞から得た。ＡＴＰの触媒的加水分解は放射性フィルター結合法を使用して測定する。キナーゼを３３［Ｐ］ＡＴＰおよび基質と共にインキュベートすると、３３［Ｐ］の該基質への取り込みをもたらし、次いで濾過によって他の反応成分から分離することができる。アッセイは１０μＭ  ＡＴＰを使用し、１、０.３、または０.１μＭの化合物の非存在下または存在下で行った。活性はコントロールの阻害の％として表した。
【表３】
2015078194.tif 000352
【０８３７】
実施例３３４  アンビットＫｉｎｏｍｅＳｃａｎスクリーニング
本アッセイは、対象とするヒトキナーゼが専用のタグ（Ｔ７バクテリオファージ）と縮合したＡＴＰ部位依存性競合結合アッセイである。固定化した、活性部位指向性リガンドと結合したキナーゼの量は、試験化合物の存在下および非存在下で測定する。アンビットのＪＡＫアッセイはキナーゼドメインを用い、全長のタンパク質を用いない。ＪＡＫ１結合用に用いられるドメインは擬キナーゼドメインであるが、一方、ＪＡＫ３結合用に用いられるドメインは触媒ドメインである（Mazen W Karaman, Sanna Herrgard, Daniel K Treiber, et. al. A Quantitative analysis of kinase inhibitor selectivity. Nature Biotechnology, 2008, Volume 26, No. 1, Page 127-132）。
【表４】
2015078194.tif 000353
【表５】
2015078194.tif 000354
【表６】
2015078194.tif 000355
【０８３８】
実施例３３５  ＪＡＫ３／ＳＴＡＴ６細胞アッセイ
インターロイキン４（ＩＬ４）によるＲａｍｏｓ  Ｂ細胞の刺激は、ＪＡＫ１／ＪＡＫ３を通じてシグナル伝達をもたらし、ＳＴＡＴ６（シグナル伝達物質および転写活性化因子）のリン酸化をもたらす。ＪＡＫ３および／またはＪＡＫ１の阻害に対する化合物の効果は、リン酸化ＳＴＡＴ６の量を測定することによって評価することができる。これは、特異的リン酸化ＳＴＡＴ６抗体を使用したウェスタンブロッティングによって行う。
【０８３９】
Ｒａｍｏｓ  Ｂ細胞を１０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ緩衝ＲＰＭＩ培地中で懸濁した（２ｘ１０７細胞／ｍｌ）。細胞（９０μｌ）を１０μｌの３.３μｇ／ｍｌのインターロイキン４（Ｒ＆Ｄシステムズ社、カタログ番号２０４−ＩＬ；終濃度：０.３３μｇ／ｍｌ）と共にインキュベートした。インキュベーションは、３０％ＤＭＳＯ中で希釈した２μｌの化合物の非存在下または存在下、３７℃で１０分間行った。等量の２ｘ溶解緩衝液（１００ｍＭ  ＴＲＩＳ−ＨＣｌ  ｐＨ８.０、２％トリトン−Ｘ−１００、５ｍＭ  ＥＤＴＡ、２５０ｍＭ  ＮａＣｌ、２０％グリセロール、１.２５ｍＭ  ＰＭＳＦ、５ｍＭ  オルトバナジン酸ナトリウム、５ｍＭ  β−グリセロリン酸塩、ミニコンプリートＥＤＴＡプロテアーゼ阻害剤カクテル（シグマ））を加えることによって反応を終結させた。
【０８４０】
サンプルを１μｌのヌクレアーゼ、ベンゾナーゼ（ノバジェン、カタログ番号７１２０５−３）と共に室温で１時間インキュベートし、次いで５０μｌの５ｘ添加用緩衝液（３３０ｍＭ  ＴＲＩＳ  ｐＨ６.８、９.５％ＳＤＳ、３４％グリセロール、０.０１％ブロモフェノールブルー、１０％β−メルカプトエタノール）を加えた。
【０８４１】
細胞溶解物（１５μＬ）を還元条件下、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ（Ｎｏｖｅｘ４〜１２％ＴＲＩＳ−グリシンゲル、インビトロジェン）で分析し、次いでエレクトロブロットをニトロセルロース膜に移した。次いで膜をザイムドのブロッキング緩衝液（インビトロジェン）中に室温（ＲＴ）で１時間インキュベートし、次いでザイムドのブロッキング緩衝液中で１：５００の抗リン酸化チロシン−ＳＴＡＴ６（セル・シグナリング・テクノロジー社、カタログ番号９３６４）一次抗体と共に４℃で一晩インキュベートした。Ｔｒｉｓ緩衝生理食塩水、０.２５％ＮＰ４０（ＴＢＳＮ）で５ｘ１０分洗浄した後、ブロットをザイムドのブロッキング緩衝液中で１：１０，０００のＨＲＰ−結合型ロバ抗ウサギ二次抗体（アマシャム・バイオサイエンシズ、カタログ番号ＮＡ９３４Ｖ）の存在下、室温で１時間インキュベートした。４ｘ１０分のＴＢＳＮ洗浄後、ブロットをＥＣＬ（ピアース・ウェスタン・ライトニング、パーキン・エルマー、カタログ番号ＮＥＬ１０１）によって可視化した。全β３含有量を決定するために、ブロットを取り除き、ＴＢＳＮで４回洗浄し、ブロッキング緩衝液中、４℃で一晩、１：２０００のＣ３Ａ抗体で再検出した。４ｘ１０分間のＴＢＳＮ洗浄後、ブロットをブロッキング緩衝液中で１：１０，０００のヤギ抗マウス二次抗体と共にインキュベートし、ＴＢＳＮでさらに４回洗浄し、ウェスタン・ライトニング試薬にさらした。バックグラウンドに対する化合物の刺激のレベルおよび阻害の範囲は濃度測定によって決定する。
【０８４２】
実施例３３６  ＩＬ−４で刺激されたＲａｍｏｓ  Ｂ細胞株についてのＪＡＫキナーゼ活性の阻害アッセイ
これらの実施例は、本発明の化合物のインビトロおよびインビボのヒトＪＡＫキナーゼ活性を評価する方法を説明し、それらがヒト血漿ＪＡＫキナーゼの活性を阻害する能力についての検査などの当該技術分野で周知の様々な手順によって決定されうる。本発明の化合物が示すヒトＪＡＫキナーゼ阻害のための強力な親和性は、ＩＣ５０値（ｎＭにて）によって測定することができる。該ＩＣ５０値は、ヒトＪＡＫキナーゼ活性の５０％阻害を提供するために必要な化合物の濃度（ｎＭにて）である。ＩＣ５０値が小さいほど、化合物がＪＡＫキナーゼ活性を阻害する活性が高い（強力である）。
【０８４３】
ＪＡＫキナーゼに対する阻害活性を検出および測定するインビトロアッセイは下記の通りである：
【０８４４】
ＪＡＫキナーゼについての化合物の活性は、ＪＡＫ阻害の検査用に設計された細胞アッセイにて確認する。要約すると、ＪＡＫ阻害はサイトカイン、インターロイキン−４（ＩＬ−４）で活性化したヒトＲａｍｏｓ  Ｂ細胞中で検査する。刺激後２０〜２４時間で、細胞をＣＤ２３の上方制御について染色し、ＦＡＣＳによって分析する。ＩＬ−４でのＢ細胞の刺激はＪＡＫキナーゼ、ＪＡＫ１およびＪＡＫ３のリン酸化を通じてＪＡＫ／ＳＴＡＴ経路の活性化をもたらし、次いで因子ＳＴＡＴ−５およびＳＴＡＴ−６をリン酸化し、転写を活性化する。低親和性ＩｇＥ受容体（ＣＤ２３）は活性化ＳＴＡＴ−５によって上方制御される。
【０８４５】
アッセイのために、細胞に付属する増殖プロトコールに従って、ヒトＲａｍｏｓ  Ｂ細胞（ＡＴＣＣ、カタログ番号ＣＲＬ−１５９６）を、１０％ウシ胎児血清（ＪＲＨ、カタログ番号１２１０６−５００Ｍ）を含むＲＰＭＩ  １６４０培地（セルグロ、カタログ番号１０−０４０−ＣＭ）中で培養し、密度およそ３.５Ｘ１０５細胞／ｍｌに維持する。アッセイの前日に、細胞を３.５Ｘ１０５細胞／ｍｌまで希釈し、それらが対数増殖期にあるようにする。細胞を沈降させ、５〜１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を含むＲＰＭＩ  １６４０培地（セルグロ、メディアテック社、ハーンドン、バージニア州、カタログ番号１０−０４０−ＣＭ）中に懸濁し、ＡＴＣＣ増殖プロトコールに従って熱失活する（ＪＲＨバイオサイエンシズ社、レネクサ、カンザス州、カタログ番号１２１０６−５００Ｍ）。細胞を密度３.５Ｘ１０４〜５細胞／ｍｌに維持する。実験の前日に、Ｒａｍｏｓ  Ｂ細胞を３.５Ｘ１０５細胞／ｍＬまで希釈してそれらが対数増殖期にあるようにし、一定分量を９６ウェル組織培養プレートに分注する。細胞を試験化合物（ＤＭＳＯに溶解した）またはＤＭＳＯ（コントロール）と共に３７℃で１時間インキュベートし、次いでＩＬ−４（ペプロテック、カタログ番号２００−０４）で２０〜２４時間刺激する（終濃度は５０ユニット／ｍｌ）。
【０８４６】
細胞を沈降させ、ＲＰＭＩ中で５％血清と共に懸濁する。９６ウェル組織培養プレート内のポイントあたり５Ｘ１０４個の細胞を用いる。細胞を化合物またはＤＭＳＯ（シグマ−アルドリッチ社、セントルイス、ミズーリ州、カタログ番号Ｄ２６５０）ビヒクルコントロールと共に、３７℃のインキュベーター内で１時間プレインキュベートする。次いで細胞をＩＬ−４（ペプロテック社、ロッキーヒル、ニュージャージー州、カタログ番号２００−０４）で、終濃度５０ユニット／ｍＬで、２０〜２４時間刺激する。次いで細胞を沈降させ、抗ＣＤ２３−ＰＥ（ＢＤファルミンゲン社、サンディエゴ、カリフォルニア州、カタログ番号５５５７１１）で染色し、ＦＡＣＳによって分析する。検出は、ベクトン・ディキンソン・バイオサイエンシズ（サンホセ、カリフォルニア州）から購入したＢＤ  ＬＳＲ  Ｉシステム・フローサイトメーターを使用して行う。
【０８４７】
増殖はＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ．ＲＴＭ．発光細胞生死判別アッセイ（プロメガ）を使用して測定し、代謝活性細胞の指示薬としてのＡＴＰ存在量の定量化に基づいて培養液中の生存細胞の数を決定する。基質を解凍し、室温になるまで放置する。Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ−Ｇｌｏ試薬と希釈剤を混合後、１００μＬを各ウェルに加える。プレートをオービタルシェーカー上で２分間混合して溶解を誘導し、室温でさらに１０分間インキュベートしてシグナルを平衡化する。検出はパーキン・エルマー社（シェルトン、コネチカット州）から購入したＷａｌｌａｃ  Ｖｉｃｔｏｒ２  １４２０マルチラベルカウンターを使用して行う。
【０８４８】
２日目に、Ａ５４９細胞を２，４−ピリミジンジアミン試験化合物またはＤＭＳＯ（コントロール）（シグマ−アルドリッチ社、セントルイス、ミズーリ州、カタログ番号Ｄ２６５０）と共に１時間プレインキュベートする。次いで細胞をＩＦＮγ（７５ｎｇ／ｍＬ）（ペプロテック社、ロッキーヒル、ニュージャージー州、カタログ番号３００−０２）で刺激し、２４時間インキュベートする。最終的な試験化合物の用量範囲は５％ＦＢＳ、０.３％ＤＭＳＯを含む２００μＬのＦ１２Ｋ培地中で３０μＭ〜１４ｎＭである。
【０８４９】
３日目に、細胞培地を除去し、細胞を２００μＬのＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水）で洗浄する。各ウェルをトリプシン処理して細胞を解離し、次いで２００μＬの完全Ｆ１２Ｋ培地を加えることによって中和する。細胞をペレット状にし、ＡＰＣ結合型マウス抗ヒトＩＣＡＭ−１（ＣＤ５４）（ＢＤファルミンゲン社、サンディエゴ、カリフォルニア州、カタログ番号５５９７７１）抗体で、４℃で２０分間染色する。細胞を氷冷ＦＡＣＳ緩衝液（ＰＢＳ＋２％ＦＢＳ）で洗浄し、表面ＩＣＡＭ−１発現をフローサイトメトリーによって分析する。検出はＢＤバイオサイエンシズ（サンホセ、カリフォルニア州）から購入したＢＤ  ＬＳＲ  Ｉシステム・フローサイトメーターを使用して行う。ライブ・スキャッター（live scatter）用に事象をゲートし、幾何平均を計算する（ベクトン−ディキンソン  ＣｅｌｌＱｕｅｓｔソフトウェアバージョン３.３、フランクリン・レイクス、ニュージャージー州）。化合物濃度に対して幾何平均をプロットし、用量反応曲線を作成する。
【０８５０】
実施例３３７：非ホジキンリンパ腫細胞株におけるＢ細胞受容体を介したＳｙｋ媒介シグナル伝達の阻害。
細胞を化合物（０.０２〜２ｕＭ）で１時間処理し、または処理せず、その後細胞を３μｇ／ｍｌの抗μ抗体と共に３７℃で１０分間インキュベートすることによってＢ細胞受容体シグナル伝達を刺激する。Ｃａ２＋流動は、カルシウム３添加色素およびＦｌｅｘＳｔａｔｉｏｎ（モレキュラー・デバイス）を使用して測定した。Ｂ細胞受容体シグナル伝達は、ＢＤファルミンゲン社（サンホセ、カリフォルニア州）に提供されたプロトコールに従って、細胞内リン酸化フローサイトメトリーによってアッセイした。Ｓｙｋ活性化は、アミノ酸位置８４でのＢＬＮＫチロシンリン酸化の誘導（ｐＢＬＮＫ  Ｙ８４）およびアミノ酸位置２０４でのＥＲＫ１／２チロシンリン酸化の誘導（ｐＥＲＫ  Ｙ２０４）によって測定した。ＳｒｃファミリーメンバーＬｙｎの活性化は、アミノ酸位置３５２でのＳｙｋチロシンリン酸化の誘導（ｐＳｙｋ  Ｙ３５２）によって測定した。データはＩＣ５０（μＭ）として示している。各化合物はＢ細胞受容体誘導Ｃａ２＋流動およびＳｙｋの活性化を有効に阻害したが、ＳｒｃファミリーメンバーＬｙｎは阻害しなかった。
【０８５１】
実施例３３８：Ｓｙｋ阻害は非ホジキンリンパ腫細胞株に対して抗増殖効果を発揮する。
徐々に濃度を増加させた各化合物と共に細胞をインキュベートし、次いで製造業者に提供されたプロトコールに従って、７２時間でＭＴＴアッセイ（社名、市名、州名）を使用して増殖の程度を評価した。データはＩＣ５０（μＭ）値として示しており、５または６回の独立実験から得られた平均値±標準偏差を表している。各化合物は、生存および増殖シグナルについてＳｙｋに依存するＳＵＤＨＬ−４および−６細胞株の増殖を低μＭ範囲にて阻害した。Ｓｙｋを必要としないＴｏｌｅｄｏ細胞は、Ｓｙｋ阻害の抗増殖効果に対して著しく感受性が低かった。
【０８５２】
実施例３３９：Ｓｙｋ阻害は非ホジキンリンパ腫細胞株においてアポトーシスを誘導する。
データは、ＳｙｋおよびＳｙｋ／ＪＡＫ阻害の、びまん性大細胞型非ホジキンリンパ腫Ｂ細胞株の生存に対する効果を評価するための、２つの独立した実験を表す。ＳＵＤＨＬ−４およびＳＵＤＨＬ−６細胞株は生存についてＳｙｋ媒介Ｂ細胞受容体シグナル伝達に依存するが、一方、Ｔｏｌｅｄｏ細胞は依存しない。示された濃度および時間にて細胞を化合物と共にインキュベートした；アポトーシスの誘導はカスパーゼ３検出キット（シグマ−アルドリッチ社、セントルイス、ミズーリ州）を使用したフローサイトメトリーによって測定した。データは、アポトーシスマーカー、カスパーゼ３について陽性の全細胞のパーセントとして示している。予想されたように、Ｓｙｋ阻害はＳＵＤＨＬ−４および−６細胞株においてアポトーシスの誘導をもたらしたが、Ｔｏｌｅｄｏ細胞株においてはもたらさなかった。
【０８５３】
実施例３４０：Ｓｙｋ阻害剤によるマウス初代Ｂ細胞活性化の阻害
徐々に濃度を増加させた各化合物（０.０５〜２μＭ）でマウス初代脾細胞を１時間前処理し、その後コントロールまたはヤギ抗マウスＩｇＤ血清を加えた。抗ＩｇＤ誘導Ｂ細胞活性化は、１６時間後にフローサイトメトリーによって測定し、活性化マーカーＣＤ８０／８６およびＣＤ６９について染色した。
【０８５４】
実施例３４１：免疫媒介血小板減少症のマウスモデル
免疫媒介血小板減少症は、血小板表面糖タンパク質に対する抗体、血小板表面上の薬物含有複合体に対する抗体、または血小板表面と相互作用する抗体被覆細胞もしくは免疫複合体に起因する。選択化合物について、それらが抗体媒介血小板減少症のマウスモデルにおいて血小板クリアランスを阻害する能力を評価した。このモデルにおいて、循環血小板の迅速クリアランス（およそ５０％）は、ラット抗マウスＧＰＩＩｂ（クローンＭＷＲｅｇ３０）抗体（ＢＤバイオサイエンシズ、ファルミンゲン）の静脈内投与に起因する。血小板クリアランスの阻害についての能力を評価するために、化合物を０.５％メチルセルロース水溶液に懸濁し、強制経口を介して一度に投与し（１００ｕｌ／マウス）、その後、化合物が最大血漿濃度を達成するであろう時点で（個々の化合物についての別々の薬物動態実験に基づいて、典型的には１〜２時間）抗体を注射する。抗体の注射後４および８時間で、ビヒクル群および検査物質で処置したマウス（ｎ＝５〜１０マウス／群）から心穿刺によって末梢血液サンプルを得た。クエン酸三ナトリウムまたはＥＤＴＡを使用して血液を抗凝固処理した。全血液サンプルについて、血液分析器（Ｈｅｍａｖｅｔ、ドリュー・サイエンティフィック）を用いて血小板数を測定した。残りの血液を血漿用に処理し、質量分析によって化合物濃度を測定した。
【０８５５】
血小板クリアランスは、平均の非抗体処置群とラット抗マウスＧＰＩＩｂ抗体を投与された動物との間の血小板数の差異を測定することによって決定した。血小板クリアランスの阻害は、ビヒクルと化合物処置動物との間の血小板クリアランスの差異を比較することによって決定した。
【０８５６】
実施例３４２：コラーゲン抗体誘導関節炎のマウスモデル
選択化合物の阻害活性は、コラーゲン抗体誘導関節炎（ＣＡＩＡ）のマウスモデルにて調べた。コラーゲン誘導関節炎はＩＩ型コラーゲンおよび補体に対する自己抗体によって媒介され、それゆえ関節炎はＩＩ型コラーゲンに対するポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体の混合物の投与によって誘導されうる。ＣＡＩＡモデル（コンドレックス社、レドモンド、ワシントン州）は、ＩＩ型コラーゲンの８３アミノ酸のペプチド断片内でクラスター化した個々のエピトープを認識する４種のクローンの混合物を使用する。これらのエピトープは、ニワトリ、マウス、ラット、ウシ、ブタ、サルおよびヒトを含む多くの異なる種のＩＩ型コラーゲンと共通のアミノ酸配列を有している。該モデルはモノクローナル抗体カクテルを利用し、次いで細菌のリポ多糖（ＬＰＳ）を利用し、マウスにおいて７日以内に重症型の共通した関節炎を誘導する。このモデルは、消化管を通じて吸収される細菌毒素はＩＩ型コラーゲンに対する自己抗体と共に関節リウマチを患う患者に関節炎を引き起こす際に相乗的かつ病理学的役割を果たすという仮説に基づいて開発された。
【０８５７】
これらの実験のために、８週齢のメスＢａｌｂ／Ｃマウス（チャールズ・リバー社）に、モノクローナル抗体カクテル（ロット番号ＯＣ−７０８）を、０日目に用量４ｍｇ／マウス（４０ｍｇ／ｍｌ）で尾静脈を介して静脈内注射し、次いで生理食塩水中に希釈したＬＰＳを用量２５ｕｇ／マウスで腹腔内注射した。検査物質の投薬は、抗体カクテルのＩＶ注射の直前または直後に開始した。化合物を０.５％メチルセルロース水溶液に懸濁し、７〜１０日の研究の間、強制経口によって毎日投与した（１００ｕｌ／マウス）。臨床的炎症スコアを毎日得た。臨床的炎症の阻害スコアは、実験の終わりにビヒクルと検査物質処置マウスとの間の差異に基づいて決定した。血漿濃度は、研究終了日の最後の投薬の１時間後でピーク濃度を示す。
【０８５８】
実施例３４３：Ｒａｍｏｓ  Ｂ細胞におけるＩＬ−４誘導ＪＡＫ１／３のＳｔａｔ−６リン酸化の阻害
示されたように、ＩＬ−４の添加に先立ってＲａｍｏｓ  Ｂ細胞を徐々に濃度を増加させた化合物で１時間前処理した。細胞をＩＬ−４と共に１０分間インキュベートし、次いで細胞内フローサイトメトリーで分析し、ＩＬ−４誘導Ｓｔａｔ−６のパーセント阻害を測定した。
【０８５９】
実施例３４４：Ｒａｍｏｓ  Ｂ細胞におけるＩＬ−４誘導ＪＡＫ１／３のＳｔａｔ−６リン酸化の阻害
示されたように、ＩＬ−４の添加に先立ってＲａｍｏｓ  Ｂ細胞を徐々に濃度を増加させた化合物で１時間前処理した。細胞をＩＬ−４と共に１０分間インキュベートし、次いで細胞内フローサイトメトリーで分析し、ＩＬ−４誘導Ｓｔａｔ−６のパーセント阻害を測定した。
【０８６０】
実施例３４５：ＩＬ−２で刺激された初代ヒトＴ−細胞増殖アッセイ
末梢血液に由来し、Ｔ細胞受容体およびＣＤ２８の刺激を通じて予備活性化された初代ヒトＴ細胞は、サイトカイン、インターロイキン−２（ＩＬ−２）に応答してインビトロで増殖する。この増殖応答は、転写因子Ｓｔａｔ−５をリン酸化および活性化するＪＡＫ−１およびＪＡＫ−３チロシンキナーゼの活性化に依存する。
【０８６１】
ヒト初代Ｔ細胞は下記のように製造する。全血は健康な志願者から得、ＰＢＳと１：１で混合し、フィコール・ハイパック（アマシャム・ファルマシア・バイオテック、ピスカタウェイ、ニュージャージー州、カタログ番号１７−１４４０−０３）上に２：１の血／ＰＢＳ：フィコール比にて層状にし、４℃で３０分間、１７５０ｒｐｍで遠心分離する。血清：フィコール界面のリンパ球を回収し、５容量のＰＢＳで２回洗浄する。細胞を４０Ｕ／ｍＬの組換えＩＬ２（ＲアンドＤシステムズ、ミネアポリス、ミネソタ州、カタログ番号２０２−ＩＬ（２０μｇ））を含むＹｓｓｅｌ培地（ジェミニ・バイオ−プロダクツ、ウッドランド、カリフォルニア州、カタログ番号４００−１０３）に再懸濁し、１μｇ／ｍＬの抗ＣＤ３（ＢＤファルミンゲン社、サンディエゴ、カリフォルニア州、カタログ番号５５５３３６）および５μｇ／ｍＬの抗ＣＤ２８（イムノテック、ベックマン・コールター、ブレア、カリフォルニア州、カタログ番号ＩＭ１３７６）で予備コーティングしたフラスコに播種する。初代Ｔ細胞を３〜４日間刺激し、次いで新鮮なフラスコに移し、１０％ＦＢＳおよび４０Ｕ／ｍＬのＩＬ−２を含むＲＰＭＩ中に維持する。
【０８６２】
初代Ｔ細胞をＰＢＳで２回洗浄してＩＬ−２を除去し、２Ｘ１０６細胞／ｍＬでＹｓｓｅｌ培地に再懸濁する。８０Ｕ／ｍＬのＩＬ−２を含む５０μＬの細胞懸濁液を、平底９６ウェルブラックプレートの各ウェルに加える。非刺激コントロール用に、ＩＬ−２をプレート上の最後のカラムから取り除く。化合物をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ、純度９９.７％、ｃｅｌｌ  ｃｕｌｔｕｒｅ  ｔｅｓｔｅｄ、シグマ−アルドリッチ社、セントルイス、ミズーリ州、カタログ番号Ｄ２６５０）中で３倍希釈の５ｍＭから連続的に希釈し、次いでＹｓｓｅｌ培地中で１：２５０に希釈する。５０μＬの２Ｘ化合物をウェル当たり繰り返して加え、細胞を３７℃で７２時間増殖させる。
【０８６３】
ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ．ＲＴＭ．発光細胞生死判別アッセイ（プロメガ）を使用して増殖を測定し、代謝活性細胞の指示薬としてのＡＴＰ存在量の定量化に基づいて培養液中の生存細胞の数を決定する。基質を解凍して室温になるまで放置する。Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ−Ｇｌｏ試薬と希釈剤を混合後、１００μＬを各ウェルに加える。プレートをオービタルシェーカー上で２分間混合して溶解を誘導し、室温でさらに１０分間インキュベートしてシグナルを平衡化する。検出はパーキン・エルマー社（シェルトン、コネチカット州）から購入したＷａｌｌａｃ  Ｖｉｃｔｏｒ２  １４２０マルチラベルカウンターを使用して行う。
【０８６４】
実施例３４６．ＩＦＮγで刺激されたＡ５４９上皮細胞株
Ａ５４９肺上皮細胞は、様々な異なる刺激に応答して、ＩＣＡＭ−１（ＣＤ５４）表面発現を上方制御する。それゆえ、ＩＣＡＭ−１発現を読み出し情報として使用して、同一の細胞型において異なるシグナル伝達経路に対する化合物の効果を評価することができる。ＩＦＮγは、ＪＡＫ／Ｓｔａｔ経路の活性化を通じてＩＣＡＭ−１を上方制御する。この実施例において、ＩＦＮγによるＩＣＡＭ−１の上方制御を評価する。
【０８６５】
Ａ５４９肺上皮癌細胞株は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクションから入手した。ルーチン培養は、１０％ウシ胎児血清、１００Ｉ．Ｕ．のペニシリンおよび１００ｎｇ／ｍＬのストレプトマイシンを含むＦ１２Ｋ培地（完全Ｆ１２ｋ培地）（メディアテック社、レネクサ、カンザス州、カタログ番号１０−０２５−ＣＶ）で行う。細胞を３７℃で５％ＣＯ２の加湿雰囲気中インキュベートする。アッセイに用いる前に、Ａ５４９細胞をＰＢＳで洗浄し、トリプシン処理（メディアテック社、カタログ番号２５−０５２−ＣＩ）して細胞を持ち上げる。トリプシン細胞懸濁液を完全Ｆ１２Ｋ培地で中和し、遠心分離して細胞をペレットにする。該細胞ペレットを完全Ｆ１２Ｋ培地に濃度２.０Ｘ１０５／ｍＬで再懸濁する。細胞をウェルあたり２０，０００個、総量１００μＬで平底組織培養プレートに播種し、一晩接着させる。
【０８６６】
２日目に、Ａ５４９細胞を２，４−ピリミジンジアミン試験化合物またはＤＭＳＯ（コントロール）（シグマ−アルドリッチ社、セントルイス、ミズーリ州、カタログ番号Ｄ２６５０）と共に１時間プレインキュベートする。次いで細胞をＩＦＮγ（７５ｎｇ／ｍＬ）（ペプロテック社、ロッキーヒル、ニュージャージー州、カタログ番号３００−０２）で刺激し、２４時間インキュベートする。最終的な試験化合物の用量範囲は５％ＦＢＳ、０.３％ＤＭＳＯを含む２００μＬのＦ１２Ｋ培地中で３０μＭ〜１４ｎＭである。
【０８６７】
３日目に、細胞培地を除去し、細胞を２００μＬのＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水）で洗浄する。各ウェルをトリプシン処理して細胞を解離し、次いで２００μＬの完全Ｆ１２Ｋ培地を加えることによって中和する。細胞をペレット状にし、ＡＰＣ結合型マウス抗ヒトＩＣＡＭ−１（ＣＤ５４）（ＢＤファルミンゲン社、サンディエゴ、カリフォルニア州、カタログ番号５５９７７１）抗体で、４℃で２０分間染色する。細胞を氷冷ＦＡＣＳ緩衝液（ＰＢＳ＋２％ＦＢＳ）で洗浄し、表面ＩＣＡＭ−１発現をフローサイトメトリーによって分析する。検出はＢＤバイオサイエンシズ（サンホセ、カリフォルニア州）から購入したＢＤ  ＬＳＲ  Ｉシステム・フローサイトメーターを使用して行う。ライブ・スキャッター（live scatter）用に事象をゲートし、幾何平均を計算する（ベクトン−ディキンソン  ＣｅｌｌＱｕｅｓｔソフトウェアバージョン３.３、フランクリン・レイクス、ニュージャージー州）。化合物濃度に対して幾何平均をプロットし、用量反応曲線を作成する。
【０８６８】
実施例３４７．Ｕ９３７  ＩＦＮγ  ＩＣＡＭ１  ＦＡＣＳアッセイ
Ｕ９３７ヒト単球細胞は、様々な異なる刺激に応答して、ＩＣＡＭ−１（ＣＤ５４）表面発現を上方制御する。それゆえ、ＩＣＡＭ−１発現を読み出し情報として使用して、同一の細胞型において異なるシグナル伝達経路に対する化合物の効果を評価することができる。ＩＦＮγは、ＪＡＫ／Ｓｔａｔ経路の活性化を通じてＩＣＡＭ−１を上方制御する。この実施例において、ＩＦＮγによるＩＣＡＭ−１の上方制御を評価する。
【０８６９】
Ｕ９３７ヒト単球細胞株はＡＴＣＣ（ロックビル、メリーランド州、カタログ番号ＣＲＬ−１５９３.２）から入手し、１０％（ｖ／ｖ）ＦＣＳを含むＲＰＭＩ−１６４０培地中で培養する。１０％ＲＰＭＩ中でＵ９３７細胞を増殖させる。次いで、９６ウェル平底プレート中に１６０μＬあたり１００，０００細胞の濃度で細胞をプレートに蒔く。次いで、試験化合物を次のように希釈する：１０ｍＭの試験化合物をＤＭＳＯ中で１：５に希釈し（３μＬの１０ｍＭ試験化合物を１２μＬのＤＭＳＯに溶解する）、次いで試験化合物をＤＭＳＯ中で１：３に連続希釈する（６μＬの試験化合物を１２μＬのＤＭＳＯ中に連続希釈し、３倍希釈を得る）。次いで、４μＬの試験化合物を７６μＬの１０％ＲＰＭＩに移し、１０Ｘ溶液を得る（１００μＭの試験化合物、５％ＤＭＳＯ）。コントロールウェル用に、４μＬのＤＭＳＯを７６μＬの１０％ＲＰＭＩ中に希釈する。
【０８７０】
該アッセイを８つの点で繰り返して行い（１０μＬからの８通りの３倍希釈濃度）、４つのウェルは刺激条件下のＤＭＳＯのみ（コントロールウェル）であり、４つのウェルは非刺激条件下のＤＭＳＯのみである。
【０８７１】
希釈化合物プレートをマルチメク（ベックマン・コールター、ブレア、カリフォルニア州）を使用して２回混合し、次いで２０μＬの希釈化合物を、１６０μＬの細胞を含む９６ウェルプレートに移し、次いで低速で再び２回混合する。次いで、細胞および化合物を５％ＣＯ２と共に３７℃で３０分間プレインキュベートする。
【０８７２】
１０Ｘ刺激混合物は、１０％ＲＰＭＩ中でヒトＩＦＮγの１００ｎｇ／ｍＬ溶液を製造することによって作成する。次いで、細胞および化合物を２０μＬのＩＦＮγ刺激混合物で刺激し、終濃度１０ｎｇ／ｍＬのＩＦＮγ、１０μＭの試験化合物、および０.５％ＤＭＳＯを得る。細胞を３７℃で５％ＣＯ２と共に１８〜２４時間、刺激条件下に維持する。
【０８７３】
染色のために細胞を９６ウェル丸底プレートに移し、次いで染色工程の間、氷上に維持する。細胞を４℃で５分間、１０００ｒｐｍで沈降させ、その後上清を除去する。上清の除去後、ＦＡＣＳ緩衝液１００μＬあたり１μＬのＡＰＣ結合型マウス抗ヒトＩＣＡＭ−１抗体を加える。次いで細胞を氷上で暗中、３０分間インキュベートする。インキュベーション後、１５０μＬのＦＡＣＳ緩衝液を加え、細胞を４℃で５分間、１０００ｒｐｍで遠心分離し、その後、上清を除去する。上清の除去後、２００μＬのＦＡＣＳ緩衝液を加え、細胞を再懸濁する。懸濁後、細胞を４℃で５分間、１０００ｒｐｍで遠心分離する。次いで上清を除去し、その後１５０μＬのＦＡＣＳ緩衝液中に細胞を再懸濁する。
【０８７４】
検出はＢＤバイオサイエンシズ（サンホセ、カリフォルニア州）から購入したＢＤ  ＬＳＲ  Ｉシステム・フローサイトメーターを使用して行う。ライブ・スキャッター（live scatter）用に生細胞をゲートし、ＩＣＡＭ−ＡＰＣの幾何平均を測定する（ベクトン−ディキンソンＣｅｌｌＱｕｅｓｔソフトウェアバージョン３.３、フランクリン・レイクス、ニュージャージー州）。％生細胞およびＩＣＡＭ−１発現の両方を分析する。試験化合物のアッセイは、既知の活性を有するコントロール化合物と平行して行う。コントロール化合物のＥＣ５０は、典型的には４０〜１００ｎＭである。
【０８７５】
実施例３４８．Ｂ細胞シグナル伝達の分析：
ヒト非ホジキンリンパ腫Ｂ細胞株ＳＵＤＨＬ−４（＃ＡＣＣ４９５）、ＳＵＤＨＬ−６（＃ＡＣＣ５７２）、およびＫａｒｐａｓ−４２２（＃ＡＣＣ３２）は、ＤＳＭＺ（ブラウンシュワイク、ドイツ）から入手した；Ｔｏｌｅｄｏ（＃ＣＲＬ−２６３１）およびＲａｍｏｓ（＃ＣＲＬ−１５９６）は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ＡＴＣＣ；マナッサス、バージニア州）から入手した。全ての細胞を１０％ウシ胎児血清（ＡＴＣＣ）およびペニシリン／ストレプトマイシン（インビトロジェン）を補充したＲＰＭＩ培地（インビトロジェン、カールズバッド、カリフォルニア州）中に維持し、３７℃の加湿組織培養インキュベーター内に維持した。これらの研究に用いられる抗体は、ポリクローナルヤギＦ（ａｂ）’２抗ヒトＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）および抗ヒトＩｇＭ（バイオソース、カマリロ、カリフォルニア州）を含む；ウサギ抗ヒトＳｙｋ、ウサギ抗ヒトリン酸化Ｓｙｋ（Ｙ５２５／５２６）、ウサギ抗ヒトリン酸化Ｓｙｋ（Ｙ３５２）、抗ヒトＢＬＮＫ、抗ヒトリン酸化ＢＬＮＫ（Ｙ８４）は、セル・シグナリング・テクノロジーズ社（ダンバーズ、マサチューセッツ州）から入手した。リン酸フローサイトメトリー用に、下記の抗体をベクトン・ディケンソン（サンホセ、カリフォルニア州）から入手した：Ａｌｅｘａ  ｆｌｕｏｒ４８８結合型マウス抗ヒトリン酸化ＳＴＡＴ６（Ｙ６４１）、フィコエリトリン（ＰＥ）結合型マウス抗ヒトリン酸化Ｚａｐ７０（Ｙ３１９）／Ｓｙｋ（Ｙ３５２）、およびフルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）結合型マウス抗ヒトリン酸化ＥＲＫ１／２（Ｔ２０２／Ｙ２０４）。
【０８７６】
リン酸フローサイトメトリーは、基本的に、文献に記載されている通りに行った（Irish, Czerwinski et al. Blood 108(9): 3135-42 (2006）。増殖培地中の０.５ｘ１０６個の細胞を１μｇ／ｍｌの抗μまたは抗γ抗体で１０分間刺激した。誘導されたシグナル伝達は、パラホルムアルデヒド（エレクトロン・マイクロスコピー・サイエンシズ、ハットフィールド、ペンシルベニア州）を終濃度１％で加えることによって、示された時間後すぐに終結した。細胞をパラホルムアルデヒドと共に室温で５分間インキュベートし、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で１回洗浄し、次いで再懸濁し、予備冷却したメタノール（−８０℃）（社名、住所）中、４℃で一晩インキュベートした。固定し、透過処理した細胞をその後ＰＢＳ中で１回洗浄し、２回目は１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）（シグマ−アルドリッチ社、セントルイス、ミズーリ州）を含むＰＢＳ中で洗浄し、次いでＰＢＳ＋１％ＢＳＡ中で１：２０に希釈した示された抗体で染色した。３０分後、細胞をＰＢＳ中で１回洗浄し、ＦＡＣＳ  Ｃａｌｉｂｕｒ（ベクトン・ディケンソン）を使用してフローサイトメトリーで分析した。ウェスタンブロット分析用に、１０６個の細胞を２μｇ／ｍｌの示されたＢＣＲ特異的抗体で３０分間刺激した。シグナル伝達は溶解緩衝液中に細胞を再懸濁することによって終結し、氷上で１時間インキュベートした。細胞残屑を遠心分離によって除去し、透明なタンパク質溶解物を１０％ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって分離し、製造業者の推奨に従って、示された抗体で調べた。示されたところでは、細胞を数種の濃度のＳｙｋ阻害剤またはビヒクルコントロール（０.５％ＤＭＳＯ）で、３７℃で１時間前処理し、その後抗ＢＣＲ抗体で刺激する。
【０８７７】
実施例３４９．Ｓｙｋ活性の選択的阻害。
精製されたＳｙｋを化合物が阻害する能力を検査した。Ｐ４５９−７２およびＰ５０５−１５（２つの化合物は第９ｂ表に示しているＳｙｋ特異的系列から得た）ならびに実施例１００ｂ（ＳｙｋおよびＪＡＫ二重阻害活性を有する系列から得た）は、Ｓｙｋキナーゼ活性をそれぞれ４３ｎＭ、６ｎＭ、および３１ｎＭのＩＣ５０で抑制することが分かった。Ｓｙｋについてのこれらの化合物の選択性は、それぞれを２７０種の独立した３００ｎＭの精製キナーゼのパネル（ミリポア）に対してスクリーニングすることによって決定した。ビヒクルコントロールに対するパーセント阻害を計算し、数値をヒートマップに変換した；阻害がない場合は緑色で表され、赤色の割合が増加するとパーセント阻害の増加を示し、黄色は５０％阻害を表し、赤色は１００％阻害を表している（図８）。図８Ａに示しているように、Ｐ４５９−７２およびＰ５０５−１５は非常にＳｙｋ特異的であり（それぞれ第１および第２列）、一方、実施例１００ｂは複数のキナーゼを阻害した（第３列）。３つの化合物のいずれかによって８０％以上阻害されたキナーゼのサブセットは、図８Ｂに示している。実施例１００ｂはＳｙｋおよびＭＬＫ−１を阻害した（第１列）。Ｐ５０５−１５は３００ｎＭで１０種の異なるキナーゼを阻害した（第２列）。しかしながら、５０ｎＭ（そのＳｙｋ  ＩＣ５０値の６ｎＭよりおよそ１０ｘ大きい）で再検査すると、阻害されたままのキナーゼはＳｙｋのみであった（第３列）。Ｐ４２０−８９は数種の他のキナーゼと共に、Ｓｙｋ、ＪＡＫ２およびＪＡＫ３を阻害した（第４列）。
【０８７８】
ミリポアの精製キナーゼパネルを利用すると、Ｐ５０５−１５（ＩＣ５０＝１ｎＭ）は９８％の精製Ｓｙｋキナーゼ活性を５０ｎＭで阻害した。ミリポアキナーゼパネルにて３００ｎＭで８０％以上阻害されたキナーゼについてＩＣ５０値を決定した。
【表７】
2015078194.tif 000356
【０８７９】
対照的に、マルチキナーゼ阻害剤Ｐ４２０−８９は、リゲルのＲ７８８により類似している。Ｐ４２０−８９は３００ｎＭでＳｙｋを８８％阻害し、３２種のさらなるキナーゼを８０％以上阻害した。これらの中にはＪＡＫ２および３（それぞれ９３％および８５％阻害された）、Ｆｌｔ−３（８３〜９２％阻害された）、ならびにｃＫｉｔ（９５〜９７％阻害された）があり、全てリンパ球機能の治療操作のためのターゲットである。
【０８８０】
実施例３５０．非ホジキンリンパ腫Ｂ細胞株におけるカルシウム流動アッセイおよびＳｙｋの選択的阻害。
実験より前に、Ｒａｍｏｓ細胞を増殖培地中、３〜４日間培養した（およそ０.５ｘ１０６細胞／ｍｌに維持した）。色素添加前に細胞を収集し、新鮮培地中に８ｘ１０６細胞／ｍｌで再懸濁した。等量のカルシウム３添加色素（モレキュラー・デバイス、サニーベール、カリフォルニア州）を細胞懸濁液に加えた。添加細胞を９６ウェルプレートに分注し、２０分間インキュベートした。次いで、Ｓｙｋ阻害剤を該添加細胞に加え、さらに３０分間インキュベートした。Ｂ細胞を５μｇ／ｍｌの抗μ抗体で刺激した。ＦｌｅｘＳＴＡＴｉｏｎ（モレキュラー・デバイセズ社、サニーベール、カリフォルニア州）を使用して細胞内Ｃａ２＋濃度の変化を測定した。
【０８８１】
Ｂ細胞におけるＳｙｋ阻害の選択性および効力を最初にウェスタンブロットによって調べ、共にＳｙｋキナーゼ活性の尺度であるｐＳｙｋ  Ｙ５２５／５２６およびｐＢＬＮＫ  Ｙ８４のＢＣＲ媒介誘導、ならびにＳｒｃキナーゼ活性の尺度であるｐＳｙｋ  Ｙ３５２の誘導を測定した。ＳＵＤＨＬ−６  Ｂ細胞を、各Ｓｙｋ阻害剤またはビヒクルコントロールの存在下または非存在下で、抗ＢＣＲ特異的抗体で３０分間刺激した。濃度測定によって見積もると、０.１６または１μＭの各化合物で処理した場合、ＢＣＲ誘導Ｓｙｋ自己リン酸化（Ｙ５２５／５２６）をそれぞれおよそ４０％および６０％減少させた（データは示していない）。さらにＢＣＲ誘導ＳｙｋおよびＳｒｃキナーゼ活性に対するこれらの化合物の効果を評価するために、広範な濃度を用いた。図９Ａ〜Ｃに示しているように、各化合物はＳｙｋ活性（ｐＢＬＮＫ  Ｙ８４）を０.１６〜１μＭの範囲のＩＣ５０値で阻害したが、一方、２.５μＭまで増加させるとＳｒｃ活性（ｐＳｙｋ  Ｙ３５２）に対する効果は観察されなかった。
【０８８２】
各化合物がＢＣＲのより遠位にあるシグナル伝達事象を抑制する能力も測定した。様々な濃度の各Ｓｙｋ阻害剤の存在下または非存在下、細胞を再び抗ＢＣＲ抗体によって刺激した。ｐＳｙｋ  Ｙ３５２の誘導は特異性コントロールとして測定し、一方、ｐＥＲＫ１／２  Ｔ２０２／Ｙ２０４の誘導はより遠位のＳｙｋ依存性シグナル伝達の尺度として用いた（Jiang, Craxton et al. J Exp Med 188(7): 1297-306 (1998）。図１２Ｃは、代表的なＦＡＣＳプロットを示し、３つの中で最も特異的かつ強力なＳｙｋ阻害剤であるＰ５０５−１５のＢＣＲシグナル伝達に対する効果を示している。１２５ｎＭで、ＥＲＫ１／２活性化は完全に抑制されたが、一方で、Ｓｙｋ  Ｙ３５２について、刺激細胞はなおも陽性に染色された。この実験を繰り返し、全３つの化合物のＳｒｃおよびＳｙｋ活性に対する効果を決定した（図１０Ａ）。１２５ｎＭ未満の濃度は、ＥＲＫ１／２へのＢＣＲ誘導Ｓｙｋシグナル伝達を抑制するのに十分であった。対照的に、Ｓｒｃ活性の中程度の抑制をもたらすにはこれよりもずっと高い濃度が必要であった；ウェスタンブロットによって観察されなかったＳｒｃに対する効果である（図９Ａ〜Ｃ）。これらのＳｙｋ阻害剤のいずれもＰＭＡ誘導ＥＲＫ１／２チロシンリン酸化を抑制しなかったが、これは、これらの化合物がＰＫＣの下流のシグナル伝達事象を阻害しないことを実証するものである。
【０８８３】
精製および細胞アッセイにおいてＰ４５９−７２およびＰ５０５−１５がＳｙｋを特異的に阻害した一方、実施例１００ｂは精製ＪＡＫキナーゼに対してさらに活性を示した。Ｂ細胞内におけるＪＡＫ１／３を介したＳＴＡＴ−６へのＩＬ−４シグナル伝達の阻害についてこれらの化合物を検査したが、これはＳｙｋを必要としないシグナル伝達経路である。Ｓｙｋ特異的化合物は、濃度を２μＭまで上げるとＩＬ４シグナル伝達を抑制しなかった。逆に、実施例１００ｂは、約１２５ｎＭのＩＣ５０でＩＬ４シグナル伝達を抑制した（図１０Ｂ）。
【０８８４】
これは、Ｓｙｋの選択的阻害がＢ細胞内におけるＢＣＲ誘導Ｃａ２＋流動を約１００ｎＭのＩＣ５０値で抑制したことを示すものである。これは、Ｓｙｋを阻害することによって、これらの化合物がシグナル伝達経路を抑制し、細胞応答を遮断することを示唆するものである。
【０８８５】
Ｓｙｋの選択的阻害は、Ｓｒｃ（図１１および１２）またはＪＡＫ（図１０Ｂ）に影響することなくＢＣＲシグナル伝達を抑制するのに十分である。さらに、Ｐ５０５−１５および実施例１００ｂはこれらの細胞内で同様にアポトーシスを誘導した（図１１Ｂ）。このデータは、ＮＨＬ細胞株の生存におけるＳｙｋシグナル伝達の役割を実証し、Ｓｙｋ以外のキナーゼの阻害はこの効果を達成するのに必要ではないことを実証するものである。
【０８８６】
実施例３５１．カスパーゼ３および増殖アッセイ：Ｓｙｋ阻害は非ホジキンリンパ腫Ｂ細胞株の増殖および生存を妨害する。
アポトーシスの誘導は、ＰＥ結合型モノクローナル活性カスパーゼ−３抗体アポトーシスキット（ベクトン・ディケンソン）を使用し、提供されたプロトコールに従って測定した。ＦＡＣＳ分析に先立って、細胞を増殖培地中で懸濁し（０.５ｘ１０６細胞／ｍｌ）、示された濃度の各Ｓｙｋ阻害剤またはビヒクルコントロールで２４、４８、または７２時間処理した。細胞生存率および増殖の尺度として、ＭＴＴ（３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド、テトラゾール）アッセイ（社名）を製造業者によって提供されたプロトコールに従って用いた。細胞を示された濃度の各Ｓｙｋ阻害剤またはビヒクルコントロールで７２時間処理した。
【０８８７】
ＳＵＤＨＬ−４およびＳＵＤＨＬ−６細胞は以前「ＢＣＲ型」として分類され（Monti, Savage et al. Blood 105(5): 1851-61 (2005); Polo, Juszczynski et al. Proc Natl Acad Sci U S A 104(9): 3207-12 (2007）、Ｒ４０６によるＳｙｋ阻害に感受性があった（Chen, Monti et al. 2008）。それぞれＢＣＲおよびＢＬＮＫ発現を欠損したＴｏｌｅｄｏおよびＫａｒｐａｓ−４２２細胞株は（Gabay, Ben-Bassat et al. Eur J Haematol 63(3): 180-91 (1999); Sprangers, Feldhahn et al. Oncogene 25(36): 5056-62(2006）、それゆえＢＣＲシグナルから独立して生存するよう適応しているが、これらはＲ４０６に非感受性であった（Chen, Monti et al. 2008）。様々な濃度の各Ｓｙｋ阻害剤の存在下または非存在下で７２時間培養した場合のこれらの細胞株の増殖を検査した。
【０８８８】
Ｓｙｋの選択的阻害は、「ＢＣＲ型」ＮＨＬ細胞株においてアポトーシスを誘導するのに十分であった。細胞を１または３μＭの阻害剤と共に７２時間インキュベートした。図１１Ａに示されているように、ＳＵＤＨＬ−４および−６細胞はそれぞれアポトーシスを起こしたが、一方、ＴｏｌｅｄｏおよびＫａｒｐａｓ−４２２細胞は起こさなかった（図１１Ａ）。繰り返しの実験において、Ｐ４５９−７２およびＰ５０５−１５によるＳｙｋの特異的阻害は、ＳＵＤＨＬおよびＲａｍｏｓ細胞株においてのみアポトーシスを誘導した。一方、ＳｙｋおよびＪＡＫキナーゼを強力に阻害する実施例１００ｂは、ＢＣＲ、およびＢＬＮＫ発現を欠損している多発性骨髄腫細胞株Ｋａｒｐａｓ−４２２およびＪＪＮ−３のみならず、全ての「ＢＣＲ型」細胞株でアポトーシスを誘導した（Sprangers, Feldhahn et al. Oncogene 25(36): 5056-62 (2006)。Ｔｏｌｅｄｏ細胞は、全３つの化合物に非感受性のままであった（図１１Ｂ）。別々の実験において、ＳＵＤＨＬ−６およびＴｏｌｅｄｏ細胞は、１μＭのＰＭＡで７２時間処理することによるアポトーシスの誘導に、同様に感受性があることが分かった。これらのデータは、特定のＮＨＬ細胞株の生存におけるＳｙｋの特異的要求を実証するものである。
【０８８９】
実施例３５２．異種移植研究ならびに腫瘍および血漿濃度分析。
Ｓｙｋ阻害は、異種移植マウスモデルにおいて腫瘍形成を予防する。マウスは（社名）から入手し、使用に先立って少なくとも３日間室内に順化させた。Ｒａｍｏｓ細胞（３ｘ１０６）を、意識のあるマウスの後側腹部領域に０.５ｍｌ未満の注射容量にて２７ゲージ針を使用して皮下注射した。注射後、マウスをランダムに処置群（ｎ＝１５）に分け、ビヒクルまたは１０、１５、もしくは２０ｍｇ／ｋｇの阻害剤を強制経口によって１日２回投薬した。少なくとも１週間に１回体重を測定し、明白な腫瘍が形成されてから研究の終わりまで１週間に２回、腫瘍のキャリパー測定を決定した。式［最大長さｘ幅ｘ高さｘπ／６］を使用して、キャリパー測定によって腫瘍量を評価した。ビヒクルまたは阻害剤の１日２回の投薬は、ビヒクルまたはいずれかの処置群が大きさ１.５グラムを超える腫瘍を示すまで続けた。終結時（Ｒａｍｏｓ接種後５週間）に、ケタミンカクテルでマウスに麻酔をかけた。ＣＢＣ用に血液サンプルを得、心穿刺によって血漿濃度を決定し、頸椎脱臼によってマウスを安楽死させた。次いで腫瘍を切除し、秤量した。腫瘍の半分を腫瘍組織中の阻害剤の濃度決定用に液体窒素中で急速凍結し、残りの半分を組織学的調査用に１０％緩衝ホルマリン中に置いた。
【０８９０】
異種移植マウスモデル内のＲａｍｏｓ腫瘍形成に対するＳｙｋ阻害の効果を評価した。腫瘍細胞接種の日の始めに、マウスに１０、１５、もしくは２０ｍｇ／ｋｇのＰ５０５−１５またはビヒクルコントロールを１日２回投薬した。腫瘍が形成され始める腫瘍接種後およそ３週間後にキャリパー測定を開始し、研究の終結まで３日ごとに繰り返した。腫瘍重量がおよそ１.５ｍｇに達し始めたときに研究を終結し、その時点で腫瘍を切除し、秤量した。腫瘍および血漿サンプルを薬物動態分析にかけた。
【０８９１】
Ｋｏｎｔｅｓ（登録商標）Ｍｉｃｒｏｔｕｂｅ  Ｐｅｌｌｅｔ  Ｐｅｓｔｌｅ（登録商標）Ｒｏｄｓ  ａｎｄ  Ｍｏｔｏｒ（キンブル・チェース、バインランド、ニュージャージー州）を使用して、各腫瘍サンプルを腫瘍１グラムあたり３ｍｌの生理食塩水中にホモジナイズした。液体クロマトグラフィータンデム質量分析計（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）を使用してＰ５０５−１５濃度用に血漿および腫瘍サンプルを分析した。要約すると、血漿および腫瘍サンプルを９６ウェルＣａｐｔｉｖａ（登録商標）フィルタープレート（０.２μｍ、バリアン社、パロアルト、カリフォルニア州）中で処理した。一定分量の血漿およびホモジナイズした腫瘍サンプルを、内部標準として２００ｎｇ／ｍＬの：
【化３３６】
2015078194.tif 000357
を含むアセトニトリルで沈殿させた。該混合物をボルテックスし、４℃で３０分間冷蔵し、タンパク質を完全に沈殿させた。該混合物を９６ウェルコレクションプレートに濾過した。ターボイオンスプレー源を備えたＳｃｉｅｘ  ＡＰＩ３０００  ＬＣ／ＭＳ／ＭＳに濾液を注入した。Ｐ５０５−１５および化合物ＡをＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ５μ  ＨＩＬＩＣカラム（４.６ｘ１００ｍｍ、５ｍｍ；フェノメネックス、トランス、カリフォルニア州）で分離した。移動相グラジエントは、１０％移動相Ａ（０.１％ギ酸水溶液）および９０％移動相Ｂ（０.１％ギ酸の９０％アセトニトリルおよび１０％水の溶液）の混合物を１.１分かけて６５％移動相Ｂになるようにプログラムし、次いで、０.０１分かけて移動相Ｂを６５％から９０％のグラジエントになるようにプログラムする。陽イオンモードにて、Ｐ５０５−１５のｍ／ｚ３９４／３６０生成物イオンのピーク領域を、化合物Ａ（内部標準）のｍ／ｚ３５７／２９５生成物イオンのピーク領域に対して測定した。分析範囲は２〜５０００ｎｇ／ｍｌであった。
【０８９２】
薬物動態分析から、定常状態で濃度−時間プロファイルに従うＰ５０５−１５の腫瘍濃度は血漿で１０、１５、および２０ｍｇ／ｋｇの用量群に見られることが明らかになった。用量が増加するに従ってＣｍａｘ、ＡＵＣ（０−８）、および腫瘍Ｃｍｉｎの非線形増加が観察されたが、血漿Ｃｍｉｎの用量に比例した増加があった。調べた全ての用量について、血漿における平均ＣｍａｘおよびＡＵＣ（０−８）は、腫瘍における値よりも少なくとも２倍大きかった；しかしながら、平均最低濃度（Ｃｍｉｎ）は血漿における値よりも腫瘍における値の方が高く（第１１Ａ表）、これは腫瘍コンパートメントにおけるＰ５０５−１５の蓄積を示すものである。
【表８−１】
2015078194.tif 000358
【表８−２】
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【表９】
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Ｃｍｉｎから決定された腫瘍／血漿比の増加によって示されているように、血漿および腫瘍Ｃｍｉｎの間の差異は、用量を増加させるにつれてより顕著になった（第１１Ｂ表）。ＣｍａｘおよびＡＵＣ（０−８）から決定された腫瘍／血漿比は、様々な用量群にわたって類似していた。Ｐ５０５−１５のそれぞれ１０、１５、および２０ｍｇ／ｋｇについて、定常状態で全投薬間隔にわたり腫瘍濃度が６０、１７０、および６４０ｎＭ以上に維持された。
【０８９３】
全３つの濃度のＰ５０５−１５を投薬されたマウスは、インビボでＲａｍｏｓ腫瘍増殖から保護された。これは第一に、Ｓｙｋ阻害剤の存在下で腫瘍増殖の速度が減少したことを明らかにしたキャリパー測定（データは示していない）から明らかであった。研究が終了すると、マウスを安楽死させ、腫瘍を切除し、秤量した。キャリパー測定と一致して、全ての投与群においてビヒクルコントロールと比較した平均腫瘍重量の統計的に有意な減少が達成された。
【０８９４】
Ｒａｍｏｓ腫瘍マウス異種移植モデルにおける活性について、Ｓｙｋ特異的阻害剤Ｐ５０５−１５も検査した。Ｐ５０５−１５をＢＩＤにて投与されたマウスにおいて、検査した全ての濃度で腫瘍増殖の統計的に有意な減少が観察された。検査した最も低い濃度は１０ｍｇ／ｋｇで、１日にわたって６４〜１４０ｎＭの範囲の腫瘍濃度を達成した。インビボにおけるこれらの濃度での腫瘍増殖の抑制は、濃度１２５ｎＭ未満と一致し、ＢＣＲ誘導Ｃａ２＋流動およびｐＥＲＫ  Ｙ２０４への遠位のＢＣＲシグナル伝達を抑制することが分かった（図１２）。Ｓｙｋの選択的な薬理学的阻害は、ＮＨＬ細胞株の増殖および生存に対する効果をもたらす。これらのデータは、Ｓｙｋの選択的ターゲティングが様々なＢ細胞増殖性障害において同様に臨床的有用性を有しうることを示唆するものである。
【０８９５】
本明細書で詳述しているように、ＳｙｋはＢ細胞発生、増殖、および生存に実験的に関係していた。さらに、Ｓｙｋは癌遺伝子として関係づけられる。養子導入骨髄細胞における常時活性型Ｓｙｋの発現はマウスにおいて白血病を誘導し、Ｓｙｋの過活性はヒトにおいて様々なリンパ腫と関連する。Ｂ細胞生物学におけるＳｙｋの役割を考えると、その選択的阻害はＢ細胞増殖性障害において臨床的有用性を提供するのに十分でありうるが、一方で他のターゲット外キナーゼの抑制のために生じうる毒性を減少させる。
【０８９６】
本発明は多数の実施態様を提供する。実施例は本発明の他の実施態様を提供するように変化してよいことは明らかである。それゆえ、本発明の範囲は、例として表されている特定の実施態様よりもむしろ添付の特許請求の範囲によって定義されることが理解されるであろう。
【０８９７】
本明細書にて参照され、および／または出願データシートに列挙されている上記米国特許、米国特許出願公報、米国特許出願、外国特許、外国特許出願および非特許文献の全ては、全体として参照することによって本明細書に援用される。前述の記載より、本発明の特定の実施態様が説明目的で本明細書に記載されているが、本発明の精神および範囲から逸脱することなく様々な修飾がなされてよいことが理解されるであろう。従って、本発明は添付の特許請求の範囲による場合をのぞいて限定されない。
【図１】
2015078194.tif 000399
【図２−１】
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【図２−２】
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【図３】
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【図４−１】
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【図４−２】
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【図４−３】
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【図４−４】
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