(57)【要約】【課題】本発明は、ポリコーム抑制複合体2（PRC2）タンパク質の機能を阻害するために設計された、3-デアザネプラノシンA（DZNep）コア構造に基づく一連の化合物を説明する。【解決手段】構造式Iの化合物、あるいはそのエナンチオマーまたはジアステレオマー、あるいはこれらいずれかの塩であって、(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、または(1R,2S,3R)-3-(4-アミノ-lH-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-l-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、または(±)-(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-1,2-シクロペンタンジオール塩酸塩、または3-デアザアステロマイシンでない化合物であって、少なくとも約15%のE2F1誘導性アポトーシスを活性化する活性を示す、前記化合物、エナンチオマー、ジアステレオマー、または塩。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記構造式I：
【化１】
2015007140.tif 000036
[式中、
X及びYは、いずれもCであり、
Aは、CまたはNであり；
下式：
【化２】
2015007140.tif 000037
は単結合であり；
R1及びR2は、個別に、水素、ハロゲン、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたアルキル-Z-、及び任意に置換されたアリール-Z-からなり、ここで、ZがN、O、S、またはSiである群より選択され、あるいは、R1及びR2は、共に、任意に置換された炭化水素ブリッジをXとYとの間に形成し；
R3及びR4は、個別に、水素、ヒドロキシル、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたアルキル-Z'-、及び任意に置換されたアリール-Z'-からなり、ここで、Z'がN、O、S、またはSiである群より選択され、あるいは、R3及びR4は、共に、任意に置換された炭化水素ブリッジまたは任意に置換されたα,ω-ジオキサ炭化水素ブリッジを、その結合する二つの炭素原子の間に形成し；
R5及びR6は、個別に、水素、任意に置換されたアルキル、及び任意に置換されたアリールからなる群より選択され、あるいは、R5及びR6は、その結合する窒素原子と共に、任意に置換されたアザシクロアルキル基を形成する]
の化合物、あるいはそのエナンチオマーまたはジアステレオマー、あるいはこれらいずれかの塩であって、
(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、または(1R,2S,3R)-3-(4-アミノ-lH-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-l-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、または(±)-(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-1,2-シクロペンタンジオール塩酸塩、または3-デアザアステロマイシンでない化合物であって、
少なくとも約15%のE2F1誘導性アポトーシスを活性化する活性を示す、前記化合物、エナンチオマー、ジアステレオマー、または塩。
【請求項２】
R1及びR2は、個別に、水素、ハロゲン、脂肪族、アリール脂肪族、またはヒドロカルビル基であって、1乃至8の主鎖炭素原子及び0乃至3のヘテロ原子を有し、各ヘテロ原子が、個別に、N、O、S、Siであるものであり（ここで、前記ヘテロ原子がNまたはSiである場合、これに結合する別の基は、個別に、水素、アリール、または脂肪族である)；
R3及びR4は、個別に、ヒドロキシ、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、アリールオキシ、アリールアルコキシ、またはアリールシクロアルキルオキシ基であって、0乃至3のヘテロ原子を含み、各ヘテロ原子が、個別に、N、O、S、またはSiであるものであるか（ここで、前記ヘテロ原子がNまたはSiである場合、これに結合する別の基は、個別に、水素、アリール、または脂肪族である)、あるいは、R3及びR4は、その結合する二つの炭素原子の間に、α,ω-ジオキサ炭化水素ブリッジを規定するように連結しており；更に、
R5及びR6は、個別に、水素、脂肪族、脂環族、芳香族、アリール脂肪族、またはアリール脂環族ヒドロカルビル基であって、0乃至3のヘテロ原子を含み、各ヘテロ原子が、個別に、N、O、S、またはSiである（ここで、前記ヘテロ原子がNまたはSiである場合、これに結合する別の基は、個別に、水素、アリール、または脂肪族である）、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
X及びYは、いずれもCであり；
R1及びR2は、個別に、水素またはハロゲンまたは炭素、あるいは、脂肪族、アリール脂肪族、またはヒドロカルビル基であって、1乃至8の主鎖炭素原子及び、N、O、S、Siである0乃至3のヘテロ原子を有する基であり（ここで、前記ヘテロ原子がNまたはSiである場合、これに結合する別の基は、個別に、水素、アリール、または脂肪族である)；
R3及びR4は、個別に、水素または炭素、あるいは、脂肪族、脂環族、芳香族、アリール脂環族、またはアリール脂肪族ヒドロカルビル基であるか、あるいはまた、脂肪族ヒドロカルビルブリッジを規定するように連結しており；更に、
R5及びR6は、個別に、水素、あるいは、脂肪族、脂環族、芳香族、アリール脂肪族、またはアリール脂環族ヒドロカルビル基であって、N、O、S、またはSiである0乃至3のヘテロ原子を有する基である（ここで、前記ヘテロ原子がNまたはSiである場合、これに結合する別の基は、個別に、水素、アリール、または脂肪族である）、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
R1が、Hである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
R3及びR4が、いずれもOHであるか、または共に保護された近接ジオールを形成する、請求項１乃至４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
R3及びR4が、共に-OC(Me2)O-基を形成する、請求項１乃至５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
4-OHTの存在下で少なくとも約25%のE2F1誘導性アポトーシスを活性化する活性を示す、請求項１乃至６のいずれか一項に記載の化合物、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、またはその製薬上許容される塩。
【請求項８】
ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤TSAと共に、少なくとも約40%の、大腸癌細胞におけるアポトーシス誘導を示す、請求項１乃至７のいずれか一項に記載の化合物、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、またはその製薬上許容される塩。
【請求項９】
ポリコーム抑制複合体2(PRC2)タンパク質の機能を阻害しうる、請求項１乃至８のいずれか一項に記載の化合物、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、またはその製薬上許容される塩。 
【請求項１０】
請求項１乃至９のいずれか一項に記載の化合物、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、またはその製薬上許容される塩の、治療における使用。
【請求項１１】
前記治療が、後成的治療である、請求項１０に記載の使用。
【請求項１２】
下記構造式I：
【化３】
2015007140.tif 000038
[式中、
X及びYは、いずれもCであり、
Aは、CまたはNであり；
下式：
【化４】
2015007140.tif 000039
は単結合であり；
R1及びR2は、個別に、水素、ハロゲン、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたアルキル-Z-、及び任意に置換されたアリール-Z-からなり、ここで、ZがN、O、S、またはSiである群より選択され、あるいは、R1及びR2は、共に、任意に置換された炭化水素ブリッジをXとYとの間に形成し；
R3及びR4は、個別に、水素、ヒドロキシル、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたアルキル-Z'-、及び任意に置換されたアリール-Z'-からなり、ここで、Z'がN、O、S、またはSiである群より選択され、あるいは、R3及びR4は、共に、任意に置換された炭化水素ブリッジまたは任意に置換されたα,ω-ジオキサ炭化水素ブリッジを、その結合する二つの炭素原子の間に形成し；
R5及びR6は、個別に、水素、任意に置換されたアルキル、及び任意に置換されたアリールからなる群より選択され、あるいは、R5及びR6は、その結合する窒素原子と共に、任意に置換されたアザシクロアルキル基を形成する]
の化合物、あるいはそのエナンチオマーまたはジアステレオマー、あるいはこれらいずれかの塩であって、
(1R,2S,3R)-3-(4-アミノ-lH-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-l-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、または(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)シクロペンタン-1,2-ジオールでない化合物であって、
少なくとも約15%のE2F1誘導性アポトーシスを活性化する活性を示す、前記化合物、エナンチオマー、ジアステレオマー、または製薬上許容される塩の、癌の治療のための医薬の製造のための使用。
【請求項１３】
(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル) -1,2-シクロペンタンジオール塩酸塩、あるいはそのエナンチオマーまたはジアステレオマー、あるいはこれらいずれかの塩（例えば、製薬上許容される塩）である、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
請求項１２に規定される化合物、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、または製薬上許容される塩の、癌の治療のための使用。
【請求項１５】
前記化合物が、(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-1,2-シクロペンタンジオール塩酸塩、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、またはこれらいずれかの塩（例えば、製薬上許容される塩）である、請求項１４に記載の使用。
【請求項１６】
請求項１乃至９２のいずれか一項に記載の化合物、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、またはその製薬上許容される塩を、１つもしくは複数の製薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤、またはアジュバントと共に含む、製薬組成物。
【請求項１７】
請求項１２に規定される構造式Iの化合物、またはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、またはその製薬上許容される塩、あるいは、請求項１２に規定される構造式Iの化合物、またはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、またはその製薬上許容される塩を１つもしくは複数の製薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤、またはアジュバントと共に含む製薬組成物の臨床的有効量を、癌治療を必要とする患者に投与する工程を含む、癌の治療方法。
【請求項１８】
前記化合物が、(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-1,2-シクロペンタンジオール塩酸塩、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、またはこれらいずれかの塩（例えば、製薬上許容される塩）である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
癌の治療用の、請求項１２に規定される構造(I)の化合物、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、または製薬上許容される塩。
【請求項２０】
(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、または(1R,2S,3R)-3-(4-アミノ-1H-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-l-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、あるいはその製薬上許容される塩の、ポリコーム抑制複合体2(PRC2)タンパク質の機能の阻害及びヒストンメチル化のための医薬の製造のための使用。
【請求項２１】
(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、または(1R,2S,3R)-3-(4-アミノ-1H-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-l-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、あるいはその製薬上許容される塩の、後成的治療のための医薬の製造のための使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、3-デアザネプラノシン誘導体の合成及び使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
癌の後成的制御には、DNAメチル化及びヒストン修飾、例えば、ヒストンの脱アセチル化及びメチル化等を含む、複雑な生物学的プロセスが含まれる。小分子を標的とする後成的プロセス、例えば、ヒストン脱アセチル化は、臨床研究における有望な結果を伴う新規な群の抗癌剤として出現してきた。2006年に、ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤（HDI）であるボリノスタット（Vorinostat）（SAHAとも呼称）が、皮膚T細胞リンパ腫（皮膚癌の一種）の治療向けに承認された。ヒストン脱アセチル化に加えて、ヒストンメチル化もまた、癌のエピジェネティックスにおいては重要な役割を担う。とりわけ、多数のヒトの癌において過剰発現するポリコーム群（Peg）タンパク質、例えば、EZH2によって誘発されるヒストンメチル化は、腫瘍形成を引き起こす機構の一部であると考えられ、したがって、薬剤開発のための魅力的な標的である。しかしながら、この重要な腫瘍形成情報伝達経路を阻害することがこれまでに示された小分子は、皆無である。
【０００３】
【化１】
2015007140.tif 000002
【０００４】
S-アデノシルホモシステイン（SAM）加水分解酵素阻害剤である、3-デアザネプラノシンA（DZNep）が近年発見されたが、これは、EZH2複合体及び関連するH3K27トリメチル化を有効に阻害して、癌細胞の強力なアポトーシスをもたらすことができるが、正常細胞においてはそうではない（Tan, J., Yang, X. et al. and Yu, Q. Pharmacologic disruption of olycomb repressive complex 2-mediated gene repression selectively induces apoptosis in cancer cel1S. Genes & Development, 21, 1050-1063(2007)。この発見は、EZH2の化学的阻害及び関連するヒストンのメチル化が、癌治療に向けた有望な新アプローチを代表しうるとの概念の根拠を確立するものである。さらにまた、DZNepは、ヒストン脱アセチル化酵素（HDAC）阻害剤と相乗的に作用して、悪性クロマチン修飾の効果的な逆転により癌細胞のアポトーシスを誘導する。特に、この併用療法は、大腸癌細胞におけるWnt/β-カテニン情報伝達経路の著しい阻害をもたらし、DZNepとHDAC阻害剤との併用が、ヒトの癌の有効な後成的治療を提供しうることを示唆している。
【０００５】
DZNepは、イン・ビトロ及びイン・ビボ研究の両方について、有望な結果を提供している。しかしながら、DZNep自体は、半減期が短く、生物学的利用能が低いことから、理想的な薬剤候補とはいえない。したがって、より優れた生物学的利用能をそなえた、新規なDZNep-様化合物が必要とされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】US4,613,666
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Tan, J., Yang, X. et al. and Yu, Q. Pharmacologic disruption of olycomb repressive complex 2-mediated gene repression selectively induces apoptosis in cancer cel1S. Genes & Development, 21, 1050-1063(2007)
【非特許文献２】Remington's Pharmaceutica1Science, 15th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa.
【非特許文献３】Prescott, Ed., Methods in Cell Biology, Volume XIV, Academic Press, New York, N.Y.(1976), p.33 et seq.
【非特許文献４】Cho, J. H., Bernard, D.1Sidwel1R. W., Kern, E. R., Chu, C. K. Synthesis of Cyclopentenyl Carbocyclic Nucleosides as Potential Antiviral Agents Against Orthopoxviruses and SARS J MeJ. Chem., 49, 1140-1148(2006)
【非特許文献５】Yang, M., Zhou, J., Schneller, S. W. The Mitsunobu reaction in preparing 3-deazapurine carbocyclic nucleosides. Tetrahedron 63, 1295-1300(2006)
【非特許文献６】Michel, B. Y., Strazewski, P. Synthesis of(-)-neplanocin A with the highest overall yield via an Efficient Mitsunobu coupling. Tetrahedron 63, 9836-9841(2007)
【非特許文献７】Tetrahedron lett. 2006,(47) 9187-9189.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の目的は、上記の欠点の一つもしくは複数を、実質的に解消するか、または少なくとも改善することである。上述の必要性を、少なくとも部分的に満たすことが、更なる目的である。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の第一の態様においては、下記構造式I：
【化２】
2015007140.tif 000003
[式中、
X及びYは、個別に、CまたはOであり、
Aは、CまたはNであり；
下式：
【化３】
2015007140.tif 000004
は単結合または二重結合であり；
R1及びR2は、個別に、存在しないか、または、水素、ハロゲン、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたアルキル-Z-、及び任意に置換されたアリール-Z-からなり、ここで、ZがN、O、S、またはSiである群より選択され、あるいは、R1及びR2は、共に、任意に置換された炭化水素ブリッジまたは任意に置換されたα,ω-ジオキサ炭化水素ブリッジを、XとYとの間に形成し；
R3及びR4は、個別に、水素、ハロゲン、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたアルキル-Z'-、及び任意に置換されたアリール-Z'-からなり、ここで、Z'がN、O、S、またはSiである群より選択され、あるいは、R3及びR4は、共に、任意に置換された炭化水素ブリッジまたは任意に置換されたα,ω-ジオキサ炭化水素ブリッジを、その結合する二つの炭素原子の間に形成し；
R5及びR6は、個別に、水素、任意に置換されたアルキル、及び任意に置換されたアリールからなる群より選択され、あるいは、R5及びR6は、その結合する窒素原子と共に、任意に置換されたアザシクロアルキル基を形成する]
の化合物、あるいはそのエナンチオマーまたはジアステレオマー、あるいはこれらいずれかの製薬上許容される塩であって、XとYとのいずれかまたは両方がOである場合は、下式：
【化４】
2015007140.tif 000005
は単結合であって、X=Oである場合は、R2は存在せず、また、Y=Oである場合は、R1は存在しない化合物が提供される。
【００１０】
3-デアザネプラノシンAは、この態様の範囲から排除されてもよい。以下の化合物のいずれか、またはあらゆる複数、任意に全てが、この態様の範囲から排除されてもよい：アリステロマイシン、3-デアザアリステロマイシン塩酸塩、(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-(メトキシメチル)シクロペント-3-エン-1,2-ジオール塩酸塩 、(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-(フルオロメチル)シクロペント-3-エン-1,2-ジオール)塩酸塩、または(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、(1R,2S,3R)-3-(4-アミノ-lH-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-l-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-1,2-シクロペンタンジオール塩酸塩、2',3'-O-イソプロピリデン-3-デアザネプラノシンA、(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-メチルシクロペント-3-エン-1,2-ジオール塩酸塩。3-デアザネプラノシンA、アリステロマイシン、3-デアザアリステロマイシン塩酸塩、(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-(メトキシメチル)シクロペント-3-エン-1,2-ジオール塩酸塩 、(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-(フルオロメチル)シクロペント-3-エン-1,2-ジオール)塩酸塩、または(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、(1R,2S,3R)-3-(4-アミノ-lH-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-l-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、（±）-(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-1,2-シクロペンタンジオール塩酸塩、または2',3'-O-イソプロピリデン-3-デアザネプラノシンA、または(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-メチルシクロペント-3-エン-1,2-ジオール塩酸塩は、全て、この態様の範囲から排除されてもよい。
【００１１】
下記の選択肢は、個別に、またはあらゆる適切な組み合わせで、第一の態様と併せて使用してよい。
【００１２】
前記化合物は、
・X及びYは、いずれもCである；
・R1及びR2は、個別に、水素、ハロゲン、脂肪族、アリール脂肪族、またはヒドロカルビル基であって、1乃至8の主鎖炭素原子及び0乃至3のヘテロ原子を有し、各ヘテロ原子が、個別に、N、O、S、Siであるものである（ここで、前記ヘテロ原子がNまたはSiである場合、これに結合する別の基は、個別に、水素、アリール、または脂肪族である)；
・R3及びR4は、個別に、ヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシ、 シクロアルキルオキシ、アリールオキシ、アリールアルコキシ、またはアリールシクロアルキルオキシ基であって、0乃至3のヘテロ原子を含み、各ヘテロ原子が、個別に、N、O、S、またはSiであるものであるか（ここで、前記ヘテロ原子がNまたはSiである場合、これに結合する別の基は、個別に、水素、アリール、または脂肪族である)、あるいは、R3及びR4は、その結合する二つの炭素原子の間に、α,ω-ジオキサ炭化水素ブリッジを規定するように連結している；且つ
・R5及びR6は、個別に、水素、脂肪族、脂環族、芳香族、アリール脂肪族、またはアリール脂環族ヒドロカルビル基であって、0乃至3のヘテロ原子を含み、各ヘテロ原子が、個別に、N、O、S、またはSiである（ここで、前記ヘテロ原子がNまたはSiである場合、これに結合する別の基は、個別に、水素、アリール、または脂肪族である）
であるものであってよい。
【００１３】
前記化合物は、
・X及びYは、いずれもCである；
・R1及びR2は、個別に、水素またはハロゲン、あるいは脂肪族、アリール脂肪族、ヒドロカルビル基であって、1乃至8の主鎖炭素原子及び、N、O、S、Si、またはハロゲン、例えばClもしくはFであるヘテロ原子を有する基である（ここで、前記ヘテロ原子がNまたはSiである場合、これに結合する別の基は、個別に、水素、アリール、または脂肪族である)；
・R3及びR4は、個別に、水素またはハロゲンまたは炭素、あるいは、脂肪族、脂環族、芳香族、アリール脂環族、またはアリール脂肪族ヒドロカルビル基であるか、あるいはまた、脂肪族ヒドロカルビルブリッジを規定するように連結していてよい；
・R5及びR6は、個別に、水素、あるいは、脂肪族、脂環族、芳香族、アリール脂肪族、またはアリール脂環族ヒドロカルビル基であって、N、O、S、またはSiである0乃至3のヘテロ原子を有する基である（ここで、前記ヘテロ原子がNまたはSiである場合、これに結合する別の基は、個別に、水素、アリール、または脂肪族である）
であるものであってよい。
【００１４】
X及びYは、いずれもCであってよい。
R1は、Hであってよい。
【００１５】
XとYとの一方がOであり、他方がCである実施態様もある。前記化合物は、X＝C、Y＝Oであり、下式：
【化５】
2015007140.tif 000006
が単結合であり、R1が存在しないものであってよい。
R3及びR4は、いずれもOHであるか、または、共に保護された近接ジオールを形成してもよい。R3及びR4は、共に-OC(Me2)O-基を形成してよい。
【００１６】
前記化合物は、((3R,4S,5R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-4,5-ジヒドロキシシクロペント-1-エニル)メチルベンゾエート塩酸塩であってよい。
【００１７】
前記化合物は、少なくとも約15%のE2F1誘導性アポトーシスを活性化する活性を示してよい。これは、4-OHTの存在下で少なくとも約25%のE2F1誘導性アポトーシスを活性化する活性を示してよい。これは、ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤TSAと共に、少なくとも約40%の、大腸癌細胞におけるアポトーシス誘導を示してよい。これは、ポリコーム抑制複合体2(PRC2)タンパク質の機能を阻害可能であってよい。
【００１８】
本発明の一実施態様においては、構造式Iにおいて、式中、
X及びYは、いずれもCであり、
Aは、CまたはNであり；
下式：
【化６】
2015007140.tif 000007
は単結合または二重結合であり；
R1は、Hであり；
R2は、水素及び任意に置換されたアルキルからなる群より選択され、
R3及びR4は、いずれもがOHであるか、あるいは、共に、保護された近接ジオール、例えば、-OC(Me2)O-基を形成し、
R5及びR6は、いずれもHである化合物、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、またはこれらいずれかの塩（例えば、製薬上許容される塩）が提供される。
【００１９】
本発明の第二の態様においては、第一の態様に従う化合物の、癌の治療のための医薬の製造のための使用が提供される。この癌とは、EZH2（zesteホモログ2のエンハンサー）の過剰発現によって特徴づけられる癌であってよい。この遺伝子は、ポリコーム群ファミリー（PcG）の構成員をコード化するが、これらは、多量体タンパク質複合体を形成する。これらは、連続する細胞世代に亘って、細胞遺伝子の転写抑制状態の維持に貢献する。医薬によって治療しうる癌には、乳癌及び前立腺癌（特に、転移性前立腺癌）が含まれる。この化合物は、アリステロマイシン、3-デアザアリステロマイシン塩酸塩、(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-(メトキシメチル)シクロペント-3-エン-1,2-ジオール塩酸塩、(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-(フルオロメチル)シクロペント-3-エン-1,2-ジオール)塩酸塩、または(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、(1R,2S,3R)-3-(4-アミノ-lH-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-1-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-1,2-シクロペンタンジオール塩酸塩、2',3'-O-イソプロピリデン-3-デアザネプラノシンA、または(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-メチルシクロペント-3-エン-1,2-ジオール塩酸塩、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、またはこれらいずれかの塩（例えば、製薬上許容される塩）であってよい。
【００２０】
本発明の第三の実施態様においては、第一の態様に従う化合物の、治療における使用が提供される。とりわけ、第一の態様に従う化合物の、癌、例えば、乳癌及び前立腺癌（例えば、転移性前立腺癌）の治療のための使用が提供される。癌の治療における使用のためには、前記化合物は、アリステロマイシン、3-デアザアリステロマイシン塩酸塩、(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-(メトキシメチル)シクロペント-3-エン-1,2-ジオール塩酸塩、(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-(フルオロメチル)シクロペント-3-エン-1,2-ジオール)塩酸塩、または(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、(1R,2S,3R)-3-(4-アミノ-lH-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-1-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-1,2-シクロペンタンジオール塩酸塩、2',3'-O-イソプロピリデン-3-デアザネプラノシンA、または(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-メチルシクロペント-3-エン-1,2-ジオール塩酸塩、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、またはこれらいずれかの塩（例えば、製薬上許容される塩）であってよい。
【００２１】
本発明の第四の態様においては、第一の態様に従う化合物、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、またはその製薬上許容される塩を、１つもしくは複数の製薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤、またはアジュバントと共に含む、製薬組成物が提供される。この組成物は、癌、例えば、乳癌及び前立腺癌（例えば、転移性前立腺癌）の治療のために適切であってよい。この組成物が、癌の治療に適切である場合、この化合物は、アリステロマイシン、3-デアザアリステロマイシン塩酸塩、(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-(メトキシメチル)シクロペント-3-エン-1,2-ジオール塩酸塩、(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-(フルオロメチル)シクロペント-3-エン-1,2-ジオール)塩酸塩、または(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、(1R,2S,3R)-3-(4-アミノ-lH-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-1-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-1,2-シクロペンタンジオール塩酸塩、2',3'-O-イソプロピリデン-3-デアザネプラノシンA、または(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-メチルシクロペント-3-エン-1,2-ジオール塩酸塩、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、またはこれらいずれかの塩（例えば、製薬上許容される塩）であってよい。
【００２２】
本発明の第五の態様においては、第一の態様に従う化合物、またはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、またはその製薬上許容される塩、あるいは、第四の態様に従う組成物の臨床的有効量を、癌、例えば、乳癌及び前立腺癌（特に、転移性前立腺癌）の治療を必要とする患者に投与する工程を含む、癌の治療方法が提供される。この化合物は、アリステロマイシン、3-デアザアリステロマイシン塩酸塩、(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-(メトキシメチル)シクロペント-3-エン-1,2-ジオール塩酸塩、(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-(フルオロメチル)シクロペント-3-エン-1,2-ジオール)塩酸塩、または(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、(1R,2S,3R)-3-(4-アミノ-lH-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-1-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール、(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-1,2-シクロペンタンジオール塩酸塩、2',3'-O-イソプロピリデン-3-デアザネプラノシンA、または(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-メチルシクロペント-3-エン-1,2-ジオール塩酸塩、あるいはそのエナンチオマー、ジアステレオマー、またはこれらいずれかの塩（例えば、製薬上許容される塩）であってよい。
【００２３】
本発明の好ましい実施態様を、ここに、例示のみを目的として、添付される下記の図面を参照に説明する。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】図１は、4-OHTの存在下及び非存在下での、様々な化合物についてのアポトーシス（%）を示す棒グラフである。
【図２】図２は、コントロールグループと化合物D3を投与したグループについて、体重変化を示す。
【図３】図３は、コントロールグループと化合物D3を投与したグループについて、腫瘍体積変化を示す。
【図４】図４は、化合物D3を投与したグループについて、成長阻害（%）を示す。
【図５】図５は、化合物I3を投与した際の腫瘍体積変化を示す。
【図６】図６は、化合物I3を投与したグループについて、体重変化を示す。
【図７】図７は、化合物I3を投与したグループについて、腫瘍体積成長を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
本明細書中では、記載の化合物における原子の番号は、以下に示すとおりである。
【化７】
2015007140.tif 000008
【００２６】
上記構造式中の原子の一つが、別の原子で置き換えられている場合は（例えば、N3が炭素原子で置き換えられている場合は）、これはC3と呼称してよく、あるいは3位にあると言及してよい。特定の置換基が明確に記載または表示されていない場合は、これは、一般的には、文脈にそぐわない場合以外は水素である。
【００２７】
本発明は、一般構造式Iの化合物、及びそのエナンチオマーまたはジアステレオマー、及びこれらのあらゆる塩に関する。
【００２８】
構造式I中のX及びYは、個別にCまたはOである。これらは一般的にはいずれもCである。特に、X-Y結合が二重結合である場合は、C2’上の置換基（すなわち、XがCである場合のX）はHであってよく、あるいはX-Y結合が単結合である場合は、C2’上の置換基はいずれもHであってよい。X-Y結合が単結合である場合は、C2’上の置換基のいずれか（例えば、R1）は上向きであり、他方は下向きであってよく、C3’上の置換基のいずれか（例えば、R2）は上向きであり、他方は下向きであってよい。XとYとのいずれか（または両方）がOである場合もある。とりわけ、一方はCであってよく、他方はOであってよい。特段の場合には、XはCであり、YはOである。こうした場合において、これらの間の結合は単結合であり、X及びYのいずれでも、Oである方には置換基は存在しない。
【００２９】
Aは、CまたはNであってよい。AがCである場合は、これは、3-デアザネプラシンAと同様の環構造を表わす（X及びYがいずれもCであって、二重結合によって結合している場合）。AがCである場合は、A上の置換基はHであってよく、あるいは別の置換基、例えば、アルキル基またはアリール基（以下に定義される通り）であってよい。
【００３０】
本明細書中に記載されるアルキル基は、C1乃至C12、C1乃至C8、 C1乃至C6、またはC1乃至C4アルキル基であってよい。これらは、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル（n、s、またはt）等であってよい。これらは、直鎖状であってよく、あるいは、（C1及びC2について以外は、）分枝状または環状のアルキルであってよい。これらは、任意に、1つもしくは複数の二重または三重結合を含んで良い（すなわち、これらは、アルケニル及び／またはアルキニルであってよい）。これらは、任意に1つもしくは複数の置換基で置換されていてよい。アルキル基上の各置換基は、個別に、R-B-（ここで、Rは水素であるか、または上述のアルキル基または以下に記載のアリール基であり、いずれも任意に置換されており、Bは、O、S、N、またはSiである）またはハロゲン（例えば、F、Cl、Br、またはI）である。Bが、NまたはSiである場合、B上の他方の（すなわち、これまでに定義していない）位置は、（それぞれ個別に）本明細書中に記載されるアルキルまたはアリール基を有する。このアルキル基は、アリールアルキル基であってよい。これらは、アリールシクロアルキル基であってよい。これらは、アルコキシアルキル、またはアリールオキシアルキル、またはアルキルアミノアルキル（例えば、モノ-またはジ-アルキルアミノアルキル）基、あるいはアリールアミノアルキル基、あるいはアルカンチオアルキル基、またはアリールチオアルキル基、またはアルキルシリルアルキル（例えば、トリアルキルシリルアルキル）基、またはアリールシリルアルキル基（例えば、トリアルキル-、アリールジアルキル-、またはジアリールアルキル-シリルアルキル基）を表してよい。これらは、オリゴエーテル基（例えば、H(CH2CH2O)nCH2CH2-)、またはオリゴアミノ基（例えば、H(CH2CH2NH)nCH2CH2-)であって、ここでn=l乃至約6であるものを表してよい。前記アルキル基の主鎖中の原子の総数（水素以外、但し、ヘテロ原子を含む）は、3乃至20、または3乃至12、または3乃至8であってよい。 
【００３１】
記載のアリール基とは、単環式芳香族基であってよく、あるいは、二環式、三環式、またはオリゴ環式であってよい。これらは（単環式の場合を除き）、縮合環芳香族基であってよい。これらは、炭素環式であるか、またはヘテロ環式であってよい。これらは、例えば、フェニル、ナフチル、アントラシル、ピリジル、フリル、ピロリル、チオフリル、イミダゾリル、インドリル、キノリニル、ナフチリジル等であってよい。これらは、任意に、1つもしくは複数の置換基で置換されていてよい。アリール基上の各置換基は、個別にR-B-であってよく、ここで、R及びBは「アルキル基」について上述される通りである。これらは、例えば、アルキルアリール基、またはジ-、トリ-、テトラ-、もしくはペンタ-アルキルアリール基であってよく、あるいはまた、アルコキシアリール基またはアルコキシアルコキシアリール基であってよい。これらはハロアリール基であってよい。
【００３２】
R1及びR2は、水素、ハロゲン、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたアルキル-Z-、または任意に置換されたアリール-Z-であってよく、ここで、Zは、N、O、S、またはSiである。Zが、NまたはSiである場合は、Z上の他方の（すなわちこれまでに定義していない）位置には、水素、上述のアルキル基またはアリール基が存在してよい。R1及びR2は、共に、任意に置換された炭化水素ブリッジまたは任意に置換されたα,ω-ジオキサ炭化水素ブリッジを、XとYとの間に形成してよい。置換基は、上述される、アルキル、アリール、R-B-、またはハロゲンであってよい。前記炭化水素ブリッジは、式-(CH2)n-を有してよく、ここで、nは整数であり、nは、1乃至6、または2乃至6、3乃至6、4乃至6、または3乃至5、例えば、1、2、3、4、5、または6であってよい。前記ブリッジは、上述の置換基を有していてよい場合がある。これらの置換基自体が環を形成して、これにより、環系のN9上の置換基が、縮合三環系となってもよい。多数の実施態様においてR1は水素であり、R1及びR2のいずれもが水素である実施態様もある。R2が酸素置換（例えば、ヒドロキシル、アルコキシ、またはアリールオキシ）を有するアルキル基である実施態様もある。 
【００３３】
R3及びR4は、個別に、水素、ハロゲン（例えば、塩素、臭素、ヨウ素、またはフッ素）、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたアルキル-Z'-、または任意に置換されたアリール-Z'-であってよく、ここで、Z'がN、O、S、またはSiである。Z’が、NまたはSiである場合は、Z’上の他方の（すなわちこれまでに定義していない）位置には、水素、上述のようなアルキル基またはアリール基が存在してよい。R3及びR4は、共に、任意に置換された炭化水素ブリッジまたは任意に置換されたα,ω-ジオキサ炭化水素ブリッジを、その結合する二つの炭素原子の間に形成してよい。R3及びR4の選択肢の選択は、上記のR1及びR2についてのものとほぼ同様である。R3及びR4は、いずれもアルコキシ、アリールオキシであるか、あるいは、α,ω-ジオキサ炭化水素ブリッジを共に形成する。適切なブリッジには、近接ジオールのための典型的な保護基、例えば、メチレンアセタール、エチリデンアセタール、またはイソプロピリデンアセタール（アセトニド：-OC(Me2)O-）が含まれる。
【００３４】
R5及びR6は、水素、任意に置換されたアルキル、または任意に置換されたアリールであってよい。R5及びR6は、その結合する窒素原子と共に、任意に置換されたアザシクロアルキル基を形成してよい。アザシクロアルキル基の環は、約3乃至およそ環の員数、もしくは4乃至8、5乃至8、または5乃至7員を有してよい。多数の実施態様において、R5及びR6は、いずれも水素であり、これによりN6は第一級アミノ基を表す。別の実施態様では、N6は第二級または第三級アミノ基を表す。R5及びR6の選択肢の選択は、これらがハロゲンにはならず、α,ω-ジオキサ炭化水素ブリッジを形成もしない点以外は、上記のR1及びR2についてのものとほぼ同様である。
【００３５】
本発明はまた、上述の化合物のエナンチオマー及びジアステレオマーを更に包含する。これはまた、前記化合物及びこれらのエナンチオマー及びジアステレオマーの溶媒和物、例えば、水和物を包含する。これはまた、上述の化合物、並びにそのエナンチオマー及びジアステレオマーの塩を更に包含する。この塩とは、臨床的に許容される塩であってよい。これらは、製薬上許容されるものであってよい。これらは、例えば、塩化物、臭化物、硫酸塩、リン酸塩、または別の適切な塩であってよい。
【００３６】
本発明は、その範囲から、3-デアザネプラノシンA及びアリステロマイシンを含む、これまでに既知の化合物を排除する。
【００３７】
この化合物は、少なくとも約15%、または少なくとも約20もしくは25％、または約15乃至25％、15乃至30％、15乃至20％、または20乃至25％の、E2F1誘導性アポトーシスを活性化する活性を示してよい。これに関連して、腫瘍抑制タンパク質の作用に関与する転写因子E2F1を、ER受容体リガンド結合領域で改変した。（ER受容体は、細胞内エストロゲン受容体の核内ホルモンタイプである。）この化合物は、4-OHTの存在下で少なくとも約25%、または少なくとも約30、40、50、60、70、または80%、あるいは約25乃至約80%、または約30乃至80、50乃至80、60乃至80、または50乃至70%、例えば、約25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、または85%の、E2F1誘導性アポトーシスを活性化する活性を示してよい。4-OHTとは、4-ヒドロキシタモキシフェンであり、タモキシフェンそのものよりもエストロゲン受容体との親和性が格段に高い、タモキシフェンの抗エストロゲン代謝物である。この化合物は、ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤TSA（トリコスタチンA）と共に、少なくとも約40%、または、少なくとも約50、60、70、もしくは80%の、または約40乃至約90%、または約50乃至90、70乃至90、40乃至60、または50乃至80%、例えば、約40、50、60、70、80、または90%の、大腸癌細胞におけるアポトーシス誘導を示してよい。これは、ポリコーム抑制複合体2(PRC2)タンパク質の機能を阻害可能であってよい。このことに関して、活性（％）は、48時間に亘る、DZNepアナログとTSAとの併用療法の下で、アポトーシス（細胞死）を経る細胞のパーセンテージを意味する。
【００３８】
本発明は、更に、前記化合物の治療のための使用、特に、様々な癌の治療のため、並びにこうした使用のための医薬及び組成物の調製のための治療のための使用を提供する。こうした応用における患者は、ヒトまたはヒト以外であってよい。患者は、ヒト以外の哺乳類、または鳥であってよい。患者は、霊長類、例えば、ヒト以外の霊長類であってよい。これは、飼い慣らした動物であってよい。これは家畜であってよい。これは野生動物であってよい。本発明はまた、本発明の化合物の非治療的な使用をも包含する。
【００３９】
あらゆる特定の患者についての治療的に有効な用量レベルは、治療しようとする疾患及びこの疾患の重篤度；使用する化合物または作用剤の活性；使用する組成物；患者の年齢、体重、総体的な健康度、性別、及び食生活；投与の時間；投与の経路；作用剤または化合物の封鎖の速度；治療の継続期間；治療と組合せてまたは同時に使用される薬剤と、更に医療において周知の他の関連要因を含む様々な要因に依存する。
【００４０】
当業者であれば、ルーチン実験によって、適用可能な疾患の治療に要するであろう作用剤または化合物の、有効且つ無毒性の量を決定することができよう。
【００４１】
一般的に、有効な投与量は、24時間毎に、体重1kgあたり約0.0001mg乃至約1000mg；典型的には、24時間毎に、体重1kgあたり約0.00lmg乃至約750mg；24時間毎に、体重1kgあたり約0.0lmg乃至約500mg；24時間毎に、体重1kgあたり約0.lmg乃至約500mg；24時間毎に、体重1kgあたり約0.lmg乃至約250mg；24時間毎に、体重1kgあたり約1.0mg乃至約250mgの範囲内であることが予期される。より典型的には、有効な投与量は、24時間毎に、体重1kgあたり約1.0mg乃至約200mg；24時間毎に、体重1kgあたり約1.0mg乃至約100mg；24時間毎に、体重1kgあたり約1.0mg乃至約50mg；24時間毎に、体重1kgあたり約1.0mg乃至約25mg；24時間毎に、体重1kgあたり約5.0mg乃至約50mg；24時間毎に、体重1kgあたり約5.0mg乃至約20mg；24時間毎に、体重1kgあたり約5.0mg乃至約15mgの範囲内であることが予期される。 
【００４２】
あるいはまた、有効な投与量は、上限を約500mg/m2としてよい。一般的には、有効な投与量は、約25乃至約500mg/m2、好ましくは、約25乃至約350mg/m2、更に好ましくは、約25乃至約300mg/m2、更にいっそう好ましくは、約25乃至約250mg/m2、更にいっそう好ましくは、約50乃至約250mg/m2、更にいっそう好ましくは、約75乃至約150mg/m2の範囲内であってよい。
【００４３】
典型的には、治療向け応用においては、この治療は、疾患状態の継続時間に亘る。
【００４４】
更にまた、当業者には、個々の投与の最適な量及び間隔が、治療しようとする疾患状態の性質及び程度、投与の形態、経路、及び部位、並びに治療しようとする特定の個人の体質によって決定されることが、明確であろう。更に、こうした最適な条件は、従来の技術によって決定することができる。
【００４５】
当業者には、治療の最適な方針、例えば、規定日数に亘って1日あたりに投与される組成物の投薬数が、従来の治療方針決定試験を用いて、当業者によって確定可能なこともまた、明確であろう。
【００４６】
一般的に、適切な組成物は、当業者に既知の方法に従って調製してよく、したがって、製薬上許容される担体、希釈剤、及び／またはアジュバントを含んで良い。
【００４７】
これらの組成物は、標準経路によって投与することができる。一般的に、こうした組成物は、非経口（例えば、静脈内、髄腔内、皮下、または筋内）、経口、または局所経路によって投与してよい。より好ましくは、投与は、非経口経路による。
【００４８】
前記担体、希釈剤、及びアジュバントは、前記組成物の別の成分との適合性の観点から、「許容される」ものでなければならず、その受容者に有害であってはならない。
【００４９】
製薬上許容される担体または希釈剤の例は、脱塩水または蒸留水；食塩水；植物ベースの油、例えば、ピーナッツオイル、紅花油、オリーブオイル、綿実油、トウモロコシオイル、ゴマ油、落花生油、またはココナッツオイル；ポリシロキサン、例えば、メチルポリシロキサン、フェニルポリシロキサン、及びメチルフェニルポリシロキサン（methylphenyl polysolpoxane）を含むシリコーンオイル；揮発性シリコーン；鉱物油、例えば、流動パラフィン、軟質パラフィン、またはスクアラン；セルロース誘導体、例えば、メチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、またはヒドロキシプロピルメチルセルロース；低級アルカノール、例えば、エタノールまたはイソ-プロパノール；低級アラルカノール；低級ポリアルキレングリコール、または低級アルキレングリコール、例えば、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、1,3-ブチレングリコール、またはグリセリン；脂肪酸エステル、例えば、イソプロピルパルミテート、イソプロピルミリステート、またはエチルオレエート；ポリビニルピリドン；寒天；カラギーナン；トラガカントゴムまたはアカシアゴム、並びにワセリンである。典型的には、こうした担体は、前記組成物の重量の10乃至99.9質量%を成す。
【００５０】
本発明の組成物は、注射による投与に適した形態、経口摂取に適した製剤の形態（例えば、カプセル、錠剤、カプレット、エリキシル剤等）、吸入、例えば、経鼻吸入または経口吸入による投与に適したエアロゾル形態、非経口投与、すなわち、皮下、筋内、または静脈注射に適した形態であってよい。
【００５１】
注射可能な溶液または懸濁液としての投与のためには、無毒性の非経口向けに許容される希釈剤または担体は、リンガー溶液、等張食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、エタノール、及び1,2-プロピレングリコールを含むことができる。
【００５２】
経口用途のための適切な担体、希釈剤、賦形剤、及びアジュバントの例には、ピーナッツオイル、流動パラフィン、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ナトリウムアルギネート、アカシアゴム、トラガカントゴム、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、ゼラチン、及びレシチンが含まれる。更に、これらの経口製剤は、適切な風味剤及び着色剤を含んで良い。カプセル形態で使用される場合は、こうしたカプセルは、消化を遅延させるグリセリルモノステアレートまたはグリセリルジステアレート等の化合物で被覆されていてよい。
【００５３】
アジュバントには、典型的には、乳化剤、保存料、殺菌剤、及び緩衝剤が含まれる。
【００５４】
経口投与のための固形形態は、ヒト及び獣医用の薬務において許容される結合剤、甘味料、崩壊剤、希釈剤、風味剤、被覆剤、保存料、滑剤、及び／または時間遅延剤を含んで良い。適切な結合剤には、アカシアゴム、ゼラチン、コーンスターチ、トラガカントゴム、ナトリウムアルギネート、カルボキシメチルセルロース、またはプロピレングリコールが含まれる。適切な甘味料には、スクロース、ラクトース、グルコース、アスパルテーム、またはサッカリンが含まれる。適切な崩壊剤には、コーンスターチ、メチルセルロース、ポリビニルピリドン、グアーガム、キサンタンガム、ベントナイト、アルギン酸、またはアガーが含まれる。適切な希釈剤には、ラクトース、ソルビトール、マンニトール、デキストロース、カオリン、セルロース、炭酸カルシウム、ケイ酸カルシウム、または第二リン酸カルシウムが含まれる。適切な風味剤には、ペパーミントオイル、ウィンターグリーンのオイル、チェリー、オレンジ、またはラズベリーの風味剤が含まれる。適切な被覆剤には、アクリル酸及び／またはメタクリル酸及び／またはこれらのエステルのポリマーまたはコポリマー、ワックス、脂肪アルコール、ゼイン、シェラック、またはグルテンが含まれる。適切な保存料には、安息香酸ナトリウム、ビタミンE、α-トコフェロール、アスコルビン酸、メチルパラベン、プロピルパラベン、または亜硫酸水素ナトリウムが含まれる。適切な滑剤には、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、オレイン酸ナトリウム、塩化ナトリウム、またはタルクが含まれる。適切な遅延剤には、グリセリルモノステアレートまたはグリセリルジステアレートが含まれる。
【００５５】
経口投与のための液体形態は、上記の作用剤に加えて、液体担体を含んで良い。適切な液体担体には、水、オイル、例えば、オリーブオイル、ピーナッツオイル、ゴマ油、ヒマワリ油、紅花油、落花生油、ココナッツオイル、流動パラフィン、エチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、グリセロール、脂肪アルコール、トリグリセリド、またはこれらの混合物が含まれる。
【００５６】
経口投与のための懸濁液は、分散剤及び／または懸濁剤を更に含んで良い。適切な懸濁剤には、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ナトリウムアルギネート、またはアセチルアルコールが含まれる。適切な分散剤には、レシチン、脂肪酸、例えば、ステアリン酸等の、ポリオキシエチレンエステル、ポリオキシエチレンソルビトールモノ-もしくはジ-オレエート、-ステアレート、または-ラウレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノ-もしくはジ-ステアレート、または-ラウレート等が含まれる。
【００５７】
経口投与のためのエマルションは、1つもしくは複数の乳化剤を更に含んで良い。適切な乳化剤には、以上に例示した分散剤、または天然ゴム、例えば、グアーガム、アカシアゴム、またはトラガカントゴムが含まれる。
【００５８】
非経口投与可能な組成物の調製方法は、当業者には明かであり、例えば、参照のためにここに援用することとする、Remington's Pharmaceutica1Science, 15th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa.により詳細に説明されている。
【００５９】
前記組成物には、あらゆる適切な界面活性剤、例えば、アニオン性、カチオン性、または非イオン性界面活性剤、例えば、ソルビタンエステル、またはそのポリオキシエチレン誘導体を導入してよい。懸濁剤、例えば、天然ゴム、セルロース誘導体、または無機材料、例えば、ケイ質シリカ（silicaceous silica）、及び別の成分、例えば、ラノリンもまた含まれてよい。
【００６０】
前記組成物はまた、リポソームの形態で投与してよい。リポソームは、一般的に、リン脂質または別の脂質物質から誘導され、水性媒質中に分散した単層もしくは多層ラメラ水和液晶により形成される。無毒性の、生理学的に許容され、且つ代謝可能な、リポソームを形成しうるあらゆる脂質を使用することができる。リポソーム形態の組成物は、安定化剤、保存料、賦形剤などを含んで良い。好ましい脂質は、リン脂質及びホスファチジルコリン（レシチン）の、天然及び合成のものである。リポソームの形成方法は当該分野では既知であり、この点について、特に、参照のために個々に援用することとする、Prescott, Ed., Methods in Cell Biology, Volume XIV, Academic Press, New York, N.Y.(1976), p.33 et seq.が参照される。
【００６１】
したがって、本発明は、3-デアザネプラノシンA（DZNep）誘導体及び／またはアナログに関する。適切で治療上魅力的な実施例は、ヒストンメチル化及びPRC2複合体を標的としており、然るに、癌治療に有用でありうる。本明細書は、潜在的に生物学的活性をもつ前記化合物の、化学合成及び生物学的試験を説明する。
【００６２】
本研究の目的は、
i)  3-デアザネプラノシンA（DZNep）コア構造に基づく一連の化合物を開発して、ポリコーム抑制複合体2（PRC2）タンパク質を阻害すること、及び
ii)  これらの化合物の生物学的活性をスクリーニングすること
である。したがって、本発明は、概して、3-デアザネプラノシンA（DZNep）のコア構造（構造式１及び２）に基づく化合物及びこれらそれぞれの生物学的活性に関する。
【００６３】
【化８】
2015007140.tif 000009
【００６４】
構造式１について：
Aは、炭素または窒素であってよく；
X及びYは炭素であってよく；
XとYとの間の結合は、飽和でも不飽和でもよく；
R1及びR2は、個別に、水素、またはハロゲン（例えば、Cl、F）、あるいは脂肪族、アリール脂肪族、ヒドロカルビル基であって、1乃至8の主鎖炭素原子及び0乃至3のヘテロ原子を有し、各ヘテロ原子が、個別に、N、O、S、Siであるものであり（ここで、前記ヘテロ原子がNまたはSiである場合、これに結合する別の基は、個別に、水素、アリール、または脂肪族である)；
R3、R4、R5、及びR6は、個別に、水素、脂肪族、脂環族、芳香族、アリール脂肪族、またはアリール脂環族ヒドロカルビル基であって、0乃至3のヘテロ原子を含み、各ヘテロ原子が、個別に、N、O、S、またはSiであってよく（ここで、前記ヘテロ原子がNまたはSiである場合、これに結合する別の基は、個別に、水素、アリール、または脂肪族である）、ここで、R3及びR4は、任意に連結して脂肪族ヒドロカルビルブリッジを規定してよい。
【００６５】
構造式２について：
Aは、炭素または窒素であってよく；
X及びYは炭素であってよく；
R1及びR2は、個別に、水素、またはハロゲン、あるいは脂肪族、アリール脂肪族、ヒドロカルビル基であって、1乃至8の主鎖炭素原子及び0乃至3のヘテロ原子を有し、各ヘテロ原子が、個別に、N、O、S、Siであるものであり（ここで、前記ヘテロ原子がNまたはSiである場合、これに結合する別の基は、個別に、水素、アリール、または脂肪族である)；
R3及びR4は、個別に、水素またはハロゲンまたは脂肪族、脂環族、芳香族、アリール脂環族、またはアリール脂肪族ヒドロカルビル基であるか、あるいはまた、脂肪族ヒドロカルビルブリッジを規定するように連結していてよく；
R5及びR6は、個別に、水素、あるいは、脂肪族、脂環族、芳香族、アリール脂肪族、またはアリール脂環族ヒドロカルビル基であって、0乃至3のヘテロ原子を有し、各ヘテロ原子が、個別に、N、O、S、またはSiであってよい（ここで、前記ヘテロ原子がNまたはSiである場合、これに結合する別の基は、個別に、水素、アリール、または脂肪族である）。
【００６６】
リード化合物である、3-デアザネプラノシンA（DZNep）に基づく様々な複素環を有する２１の化合物のライブラリを合成して精製した。更に、シクロペンテン環及び側鎖、すなわち、シクロペンテン（もしくはシクロペンタン）環のC3に結合した基の修飾を更に調査した。生物学的試験の結果を表１にまとめる。
【００６７】
構造−活性関係の分析のためのアポトーシスアッセイ
誘導アポトーシスにおける化合物の活性を測定するために二つのアッセイを用いた。第一のアッセイは、E2F1誘導性アポトーシスを活性化するための、化合物の活性を測定する。このアッセイでは、転写因子E2F1を、ER受容体リガンド結合領域で改変した。4-OHTの添加により、ER-E2F1複合体活性を活性化することができよう。DZNepは、E2F1誘導性アポトーシスを誘導することが判明しているため、このアッセイを用いて、新たに誘導した化合物とDZNepとを、この細胞系においてアポトーシスを誘導する性能について比較した。
【００６８】
第二のアッセイは、大腸癌細胞におけるアポトーシス誘導についての、新規な化合物とヒストン脱アセチル化酵素阻害剤TSAとの相乗効果を測定するために設計された。DZNepは、TSAと相乗作用して、大腸癌細胞において強力なアポトーシスを誘導することが知られている((Jiang et al., Cancer Cell, 13, 529-541, 2008)。ここでも、TSAとのアポトーシス誘導に関して、新規化合物とDZNepとを比較した。アッセイは、上記のJiangらの文献にしたがって行った。 
【００６９】
【表１Ａ】
2015007140.tif 000010
【表１Ｂ】
2015007140.tif 000011
【表１Ｃ】
2015007140.tif 000012
【表１Ｄ】
2015007140.tif 000013
【表１Ｅ】
2015007140.tif 000014
【表１Ｆ】
2015007140.tif 000015
【００７０】
a) Cho, J. H., Bernard, D.1Sidwel1R. W., Kern, E. R., Chu, C. K. Synthesis of 
Cyclopentenyl Carbocyclic Nucleosides as Potential Antiviral Agents Against Orthopoxviruses and SARS J MeJ. Chem., 49, 1140-1148(2006). 
b) Yang, M., Zhou, J., Schneller, S. W. The Mitsunobu reaction in preparing 3-deazapurine carbocyclic nucleosides. Tetrahedron 63, 1295-1300(2006).
c) Michel, B. Y., Strazewski, P. Synthesis of(-)-neplanocin A with the highest overall yield via an Efficient Mitsunobu coupling. Tetrahedron 63, 9836-9841(2007).
d) US4,613,666. 
【実施例】
【００７１】
実施例１：2',3'-0-イソプロピリデン-3-デアザネプラノシンA 
3-デアザネプラノシンA塩酸塩（DZnep）（20mg、0.067mmol）、0.5mLのDMF、及びジエチルエーテル中1MのHClを1mLの、5mLのアセトン中の混合物を、室温にて18時間に亘って撹拌した後、トリエチルアミン（TEA）で中和した。溶媒を減圧下で除去した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーで精製し（シリカゲル、MeOH/TEA/DCM=10:10:80）、18mg(89%)の標題化合物を得た。
1H NMR(MeOD, 400MHz): δ 8.175(s, 1H), 7.68(d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.12(d, J= 6.4 Hz, 1H), 5.55(s, 1H), 5.36(d, J = 6.0 Hz, 1H), 4.68(d, J = 6.0 Hz, 1H), 4.365(s, 2H), 1.48(s, 3H), 1.35(s, 3H)；C15H18N4O3についてのESI MS m/z 理論値：302.14、実測値：303.13(M+H)+
【００７２】
実施例２：3-デアザアリステロマイシン塩酸塩（D2） 
3-デアザネプラノシンA塩酸塩（DZnep）（15mg、0.05mmol）の2mLのMeOH中の溶液に、10mgの10%活性炭担持パラジウムを加えた。懸濁液を、水素雰囲気下で18時間に亘って室温にて撹拌した。この混合物を、セライトのパッドで濾過してパラジウムを除去した。生成物を分取LCMSで収率50%に精製した（二つのジアステレオマーの割合= 1:1）。C12H16N4O3についてのESI MS m/z 理論値：264.12, 実測値：265.11(M+H) +
【００７３】
実施例３：(1R,4R,5S)-9-N-[3-(ヒドロキシメチル)-4,5-O,O-イソプロピリデン-2-シクロペンテン-L-イル]- N6,N6-ビス-(tert-ブトキシカルボニル)アデニン
【化９】
2015007140.tif 000016
20mLのアセトン中の(1R,4R,5S)-9-N-[3-(トリチロキシメチル)-4,5-O,O-イソプロピリデン-2-シクロペンテン-L-イル]-N6,N6-ビス-(tert-ブトキシカルボニル)アデニン[Tetrahedron lett. 2006,(47) 9187-9189.]に、2,2-ジメトキシプロパン（20mL）及びp-トルエンスルホン酸一水和物（42.8mg、0.225mmol）を、室温にて加えた。この酸性溶液を、18時間に亘って室温にて撹拌した。反応混合物を、300mgの固形重炭酸ナトリウムでクエンチした。溶媒を真空中で蒸発させ、残渣を水（20mL）及びDCM（20mL）に加えた。二相を分離した。水性相をDCMで抽出した（3×20mL）。混合有機相をMgSO4で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣を、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製し（石油エーテル/EtOAc = 2:1乃至1:2）、標題化合物を175mg（75%）得た。1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.87(s, 1H), 7.99(s, 1H), 5.81(bs, 1H), 5.65(bs, 1H), 5.41(d, 1H, J=5.1Hz), 4.75(d, 1H, J=5.1Hz), 4.47(dt, 2H, J=15.4, 2.2Hz), 1.49(s, 3H), 1.45(s, 18H), 1.36(s, 3H); C24H32N5O7についてのHR-MS(ESI-) m/z 理論値：502.2307, 実測値： 502.2299(M-H)−
【００７４】
実施例４：(1R,4R,5S)-9-N-[3-(メトキシメチル)-4,5-O,O-イソプロピリデン-2-シクロペンテン-L-イル]-N6,N6-ビス-(tert-ブトキシカルボニル)アデニン 
【化１０】
2015007140.tif 000017
20mLの無水DMF中の水素化ナトリウム（60%w/w, 27mg, 0.675mmol）の撹拌懸濁液に、5mlの無水DMF中の(1R,4R,5S)-9-N-[3-(ヒドロキシメチル)-4,5-O,O-イソプロピリデン-2-シクロペンテン-L-イル]-N6,N6-ビス-(tert-ブトキシカルボニル)アデニン(320mg, 0.62mmol)の溶液を、0℃にてアルゴン下で滴下した。生じる黄色混合物を、0℃にて20分間に亘って撹拌し、室温にまで1時間かけて加温した。この反応混合物を再度0℃に冷却し、ヨウ化メチル（180mg, 1.2mmol）の無水DMF溶液5mlを添加した。室温にて1時間後、反応物を0℃に冷却し、5mlの飽和塩化アンモニウム溶液でクエンチした。水性相をジエチルエーテルで抽出した（3×20mL）。混合有機相を水で洗浄し（20mL）、MgSO4で乾燥させ、真空中で濃縮した。残渣を、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製し（ジエチルエーテル/ペンタン = 1:10乃至2:1）、標題化合物を160mg(54%)得た。1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.77(s, 1H), 7.98(s, 1H), 5.83(bs, 1H), 5.66(bs, 1H), 5.40(d, 1H, J=5.2Hz), 4.83(dd, 2H, J=28.0,及び14.4Hz,) 4.70(d, lH, J=5.6Hz,), 3.49(s, 3H), 1.48(bs, 21H), 1.35(s, 3H)
【００７５】
実施例５：(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-(メトキシメチル)シクロペント-3-エン-1,2-ジオール塩酸塩(D3)
1mLのMeOH中の(1R,4R,5S)-9-N-[3-(メトキシメチル)-4,5-O,O-イソプロピリデン-2-シクロペンテン-L-イル]-N6,N6-ビス-tert-ブトキシカルボニル)アデニン（16.7mg, 0.032mmol)の溶液に、ジエチルエーテル中の1M HClを1mL加えた。この混合物を、室温にて、18時間に亘って撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。残渣を、DCMで洗浄し、8mgの標題化合物を得た（80%）。1H NMR(MeOD, 400MHz): δ 8.33(s, 1H), 8.23(s, 1H), 5.90(s, 1H), 5.49(s, 1H), 4.62(d, J= 5.6 Hz, 1H), 4.37(t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.32(s, 2H), 3.31(s, 3H); C12H16N5O3についてのHR-MS(ESI+) m/z 理論値：278.1248, 実測値：278.1234(M+H) +、C12H15N5NaO3については、理論値：300.1067, 実測値：300.1053(M+Na) +
【００７６】
実施例６：9-((3aS,4R,6aR)-2,2,6-トリメチル-4,6a-ジヒドロ-3aH-シクロペンタ[d][1,3]ジオキソール-4-いる)-9H-プリン-6-アミン
【化１１】
2015007140.tif 000018
2mLのDCM中の(1R,4R,5S)-9-N-[3-(ヒドロキシメチル)-4,5-O,O-イソプロピリデン-2-シクロペンテン-L-イル]-N6,N6-ビス-(tert-ブトキシカルボニル)アデニン(26mg, 0.05mmol)に、チオカルボニルジイミダゾール(15mg, 0.075mmol)を加えた。反応混合物を、周囲温度で18時間に亘って撹拌し、真空中で蒸発させた。残渣をトルエンに溶解させた。Bu3SnH（44mg, 0.15mmol）及び触媒量のAIBN（1mg）をこの溶液に加え、8時間に亘って加熱還流させた。反応物を室温に冷却した。混合物を、真空中で蒸発させ、残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製し（MeOH/DCM = 0:100乃至10:90）、標題化合物を68％の収率で得た（9.8mg）。 
【００７７】
実施例７：(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-メチルシクロペント-3-エン-1,2-ジオール塩酸塩 
実施例5で用いたものと同様の実験操作。化合物9-((3aS,4R,6aR)-2,2,6-トリメチル-4,6a-ジヒドロ-3aH-シクロペンタ[d][1,3]ジオキソール-4-イル)-9H-プリン-6-アミン（9.8mg, 0.02mmol)を加水分解して、5.2mg(92%)の標題化合物を得た。1H NMR(MeOD, 400MHz): δ 8.34(s, 1H), 8.27(s, 1H), 5.66(s, 1H), 5.54(s, 1H), 4.48(m, 1H), 4.32(m, 1H), 1.90(s, 3H); C11H13N5NaO2についてのHR-MS(ESI+) m/z 理論値：270.0962, 実測値：270.0966(M+Na)+
【００７８】
実施例８：(1R,4R,5S)-9-N-[3-(ベンゾイルオキシメチル)-4,5-O,O-イソプロピリデン-2-シクロペンテン-L-イル]-N6,N6-ビス-(tert-ブトキシカルボニル)アデニン 
【化１２】
2015007140.tif 000019
5mLのDCM中の(1R,4R,5S)-9-N-[3-(ヒドロキシメチル)-4,5-O,O-イソプロピリデン-2-シクロペンテン-L-イル]-N6,N6-ビス-(tert-ブトキシカルボニル)アデニン（10mg, 0.02mmol)の溶液に、0.1mLのTEA、1mgのDMAP、及び2.5μLの塩化ベンゾイル（0.022mmol）を加えた。生じた混合物を、アルゴン雰囲気下、室温にて18時間に亘って撹拌した。溶媒を真空中で濃縮した後、生成物をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製した（石油エーテル/ジエチルエーテル=1:1）。生成物は、白色固体として12mg（98%）得られた。
【００７９】
実施例９：((3R,4S,5R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-4,5-ジヒドロキシシクロペント-l-エニル)メチルベンゾエート塩酸塩 
実施例5で用いたものと同様の実験操作。10mg(0.016mmol)の(1R,4R,5S)-9-N-[3-(ベンゾイルオキシメチル)-4,5-O,O-イソプロピリデン-2-シクロペンテン-L-イル]-N6,N6-ビス-(tert-ブトキシカルボニル)アデニンから、5mg(78%)の標題生成物を得た。1H NMR(MeOD, 400MHz): δ 8.34(s, 2H), 8.07(d, J= 7.6 Hz, 2H), 7.62(t, J= 7.2 Hz, 1H), 7.49(t, J= 7.6Hz, 2H), 6.065(s, 1H), 5.64(s, 1H), 5.09(s, 2H), 4.76(d, J= 5.2Hz, 1H), 4.45(t, J = 5.2Hz, 1H); C18H18N5O4についてHR-MS(ESI+) m/z 理論値：368.1353, 実測値：368.1336(M+H) +、C18H17N5NaO4について 理論値：390.1173, 実測値：390.1155(M+Na) +
【００８０】
実施例１０：(±)-9-(シクロペント-2-エニル)-9H-プリン-6-アミン 
2.0mLの無水THF中のシクロペンテノール（84mg, 1mmol)、アデニン(202mg, 1.5mmol)、及びPh3P（524mg, 2mmol)の溶液に、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（DIAD, 393μL, 2mmol)を0℃にてアルゴン雰囲気下で加え、この混合物を18時間に亘って室温にて撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーで精製して(シリカゲル, MeOH/DCM=10:90)、120mg(60%)の該当化合物が得られた。1H NMR(CDCl3, 400MHz): δ 8.32(s, 1H), 7.73(s, 1H), 6.59(s, 1H), 6.25(2d, J = 2.0Hz, 5.6Hz, 1H), 5.86(dd, J = 2.4, 5.6Hz, 1H), 5.69(m, 1H), 2.43-2.65(m, 3H), 1.89(m, 1H); C10H11N5についてのESI MS m/z 理論値：201.10, 実測値：202.05(M+H) +
【００８１】
実施例１１：(±)-9-(2,2-ジメチル-テトラヒドロ-3aH-シクロペンタ[d][1,3]ジオキソール-4-イル)-9H-プリン-6-アミン
アセトン-水(2mL-1mL)中の9-(シクロペント-2-エニル)-9H-プリン-6-アミン（36mg, 0.18mmol)の溶液に、N-メチルモルホリン-N-オキシド（NMO）（42mg, 0.36mmol)を加え、次いでOsO4水溶液(0.1mL, 0.008mmol)を加えた。この混合物を室温にて18時間に亘って撹拌した。反応を、20%のNa2S2O5溶液(1mL)でクエンチした。溶媒を減圧下で除去した。残渣をMeOHで処理してセライトのパッドで濾過した。
濾過及び濃縮の後、残渣を8mLのアセトンに溶解させ、次いで4mLの2,2-ジメトキシプロパン及び触媒量の濃H2SO4を加えた。反応物を、室温にて18時間撹拌した。反応を、TEAでクエンチした。溶媒を減圧下で除去した。粗製生成物をシリカゲルの分取TLCで精製して（EtOAc/石油エーテル=90:10で溶離）、10mg(0.036mmol)の(3aS,4R,6aR)-異性体及び8mg(0.029)の(3aR,4R,6aS)-異性体を得た。
(3aS,4R,6aR)-異性体
1H NMR(CDCl3, 400MHz): δ 8.35(s, 1H), 7.83(s, 1H), 6.67(brs, 2H), 4.96(s, 2H), 4.86(dd, J = 7.6Hz, 4.4Hz, 1H), 2.53(m, 1H), 2.13(m, 3H), 1.53(s, 3H), 1.34(s, 3H); C13H18N5O2についてのHR-MS(ESI+) m/z 理論値：276.1455, 実測値：276.1444(M+H) +
(3aR,4R,6aS)-異性体
1H NMR(CDCl3, 400MHz): δ 8.31(s, 1H), 8.25(s, 1H), 4.81(m, 2H), 4.69(t, J = 5.2Hz, 1H), 2.39-2.28(m, 1H), 2.17-2.07(m, 2H),1.53(s, 3H), 1.29(s, 3H); C13H18N5O2についてのHR-MS(ESI+) m/z 理論値：276.1455, 実測値：276.1442(M+H) +
【００８２】
実施例１２：(±)-(1R,2S,3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-1,2-シクロペンタンジオール 塩酸塩 
実施例5で用いたものと同様の実験操作。9-((3aS,4R,6aR)-2,2-ジメチル-テトラヒドロ-3aH-シクロペンタ[d][1,3]ジオキソール-4-イル)-9H-プリン-6-アミンから、90%の収率で対応する生成物を得た。1H NMR(MeOD, 400MHz): δ 8.425(s, 1H), 8.36(s, 1H), 4.51(m, 1H), 4.18(s, 1H), 2.50-2.40(m, 1H), 2.35-2.26(m, 1H), 2.18-2.09(m, 1H), 1.88-1.80(m, 1H); C10H14N5O2についてのHR-MS(ESI+) m/z 理論値：236.1142, 実測値：236.1134(M+H)+; C10H13N5NaO2については、理論値：258.0962, 実測値：258.0955(M+Na)+
【００８３】
実施例１３：(±)-(1R,2S,3S)-3-(6-アミノ-9-H-プリン-9-イル)-1,2-シクロペンタンジオール塩酸塩
実施例5で用いたものと同様の実験操作。9-((3aR,4R,6aS)-2,2-ジメチル-テトラヒドロ-3aH-シクロペンタ[d][1,3]ジオキソール-4-イル)-9H-プリン-6-アミンから、88%の収率で対応する生成物を得た。1H NMR(MeOD, 400MHz): δ 8.57(s, 1H), 8.39(s, 1H), 5.13(dd, J=14.8Hz, 8.8Hz, 1H), 4.26(dd, J=9.5Hz, 5.1Hz, 1H), 4.17(t, J= 4.8Hz, 1H), 2.35(dd, J = 16.4Hz, 6.8 Hz, 2H), 2.04-1.93(m, 2H); C10H14N5O2についてのHR-MS(ESI+) m/z 理論値：236.1142, 実測値：236.1132(M+H)+; C10H13N5NaO2については理論値：258.0962,実測値：258.0949(M+Na)+
【００８４】
生物学的研究により、DZNepの修飾が、EZH2複合体の小分子調節因子及び関連するH3K27のトリメチル化とほぼ同等に有効な化合物をもたらすことが示唆される。
したがって、3-デアザネプラノシンA（DZNep）コア構造に基づく化合物は、ポリコーム抑制複合体2（PRC2）タンパク質を標的とする、より強力な抗癌化合物の開発のための、価値あるリード化合物である。これらの化合物は、リード化合物であるDZNepがヒストン脱アセチル化酵素20（HDAC）阻害剤と相乗的に作用して、悪性クロマチン修飾の効果的な逆転により癌細胞のアポトーシスを誘導することが判明していることから、それ自体が薬剤として、あるいは併用治療薬として、重要でありうる。この併用療法は、大腸癌細胞におけるWnt/β-カテニン情報伝達経路の著しい阻害をもたらし、DZNepとHDAC阻害剤との併用が、ヒトの癌の有効な後成的治療を提供しうることを示唆している。
【００８５】
【表２Ａ】
2015007140.tif 000020
【表２Ｂ】
2015007140.tif 000021
【００８６】
化合物の合成
実施例１４：アリステロマイシン（F3） 
実施例２に使用されるものと同様の実験操作により、20mg（0.08mmol）のネプラノシンAから、4mg（収率20%）の標題生成物（二つのジアステレオマーの割合＝2:1）を得た。標題化合物を分取LCMSにより精製した。C11H15N5O3についてのESI MS m/z 理論値：265.12, 実測値：288.07(M+Na)+
【００８７】
実施例１５：(1R,4R,5S)-9-N-[3-(フルオロメチル)-4,5-O,O-イソプロピリデン-2-シクロペンテン-L-イル]-N6,N6-ビス-(tert-ブトキシカルボニル)アデニン 
【化１３】
2015007140.tif 000022
1mlのDCM中の(1R,4R,5S)-9-N-[3-(ヒドロキシメチル)-4,5-O,O-イソプロピリデン-2-シクロペンテン-L-イル]- N6,N6-ビス-(tert-ブトキシカルボニル)アデニン（20mg, 0.02mmol)の溶液に、8μLのジエチルアミノサルファトリフルオライド(DAST)を、アルゴン雰囲気下、0℃にてゆっくりと加えた。生じる混合物を、室温にて3時間に亘って撹拌した。その後、反応を、1mLのメタノールでクエンチした。溶媒を蒸発させ、生成物をフラッシュクロマトグラフィーで精製した（溶離剤：DCM中、1％のメタノール)。最後に、14mg（収率70%）の白色泡沫が得られた。1H NMR(CDCl3, 400MHz): δ 8.89(s, 1H), 8.07(s, 1H), 5.59(s, 1H), 5.68(s, 1H), 5.45(d, J = 5.6Hz, 1H), 5.24(s, 1H), 5.125(s, 1H), 4.80(d, J= 5.2Hz, 1H),1.51(s, 3H), 1.47(s, 18H), 1.375(s, 3H)
【００８８】
実施例１６：(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)-3-(フルオロメチル)シクロペント-3-エン-1,2-ジオール塩酸塩(G1) 
実施例5で用いたものと同様の実験操作。tert-ブチル-9-((3aS,4R,6aR)-4,6a-ジヒドロ-2,2-ジメチル-6-((トリチルオキシ)メチル)-3aH-シクロペンタ[d][1,3]ジオキソール-4-イル)-9H-プリン-6-イルカルバメートから、95%の収率で対応する生成物が得られた。1H NMR(MeOD, 400MHz): δ 8.38(s, 1H), 8.36(s, 1H), 6.04(s, 1H), 5.62(s, 1H), 5.20-5.07(m, 2H), 4.68(s, 1H), 4.43(s, 1H); C11H12FN5O2についてのESI MS m/z 理論値：265.10, 実測値：266.06(M+H)+
【００８９】
実施例１７：((3aR,4R,6aR)-2,2-ジエチル-6-メトキシテトラヒドロフロ[3,4-d][1,3]ジオキソール-4-イル)メタノール
【化１４】
2015007140.tif 000023
濃塩酸(3.5mL)を、3-ペンタノン（140mL）及びメタノール（140mL）中のD-リボース(35g, 233mmol)の懸濁液に室温にて加えた。混合物を6時間に亘って還流させ、室温に冷却し、飽和NaHCO3溶液で中和し、水（350mL）とジエチルエーテル（100mL）で分取した。分離した水性相をジエチルエーテルで抽出し（2×100mL）、酢酸エチルで抽出した（3×100mL）。混合有機相を水で洗浄し、塩水で洗浄し、MgSO4で乾燥させた。減圧下で溶媒を除去して標題化合物を得た(37.9g, 70%)。1H NMR(CDCl3, 400 MHz): δ 4.96(s, 1H), 4.80(d, 1H, J = 6.0Hz), 4.57(d, 1H, J = 6.0Hz), 4.42(dd, 1H, J = 3.2, 2.8Hz), 3.62(m, 2H), 3.40(s, 3H), 3.27(dd, 1H, J = 10.8, 2.8Hz), 1.68(q, 2H, J = 7.6Hz), 1.55(q, 2H, J = 7.6Hz), 0.90(t, 3H, J = 7.6Hz), 0.85(t, 3H, J = 7.6Hz); C11H20NaO5についてのHR-MS(ESI+) m/z 理論値：255.1208, 実測値：255.1194(M+Na)+
【００９０】
実施例１８：(3aS,4S,6aR)-2,2-ジエチル-4-(ヨードメチル)-6-メトキシテトラヒドロフロ[3,4-d][1,3]ジオキソール
【化１５】
2015007140.tif 000024
トルエン(250mL)及びアセトニトリル(50mL)中の、((3aR,4R,6aR)-2,2-ジエチル-6-メトキシテトラヒドロフロ[3,4-d][1,3]ジオキソール-4-イル)メタノール(15.0g, 64.6mmol)、イミダゾール(6.59g, 96.9mmol)、及びトリフェニルホスフィン(20.3g, 77.5mmol)の溶液を、少量ずつヨード(19.7g, 77.5mmol)で処理し、15分間還流させ、室温に冷却した。反応混合物が濃褐色の色を留めるまで、更なるヨードをおよそ100mgの分量ずつ加えた。ジエチルエーテルでの希釈及び、有機抽出物の10%チオ硫酸ナトリウム溶液、水、塩水での反復洗浄の後に、この溶液をMgSO4で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルのショートパッドで濾過して（溶離は95:5のヘプタン-酢酸エチルによる)、標題化合物(20.1g, 91%)を無色オイルとして得た。1H NMR(CDCl3, 400 MHz): δ 5.06(s, 1H), 4.76(d, 1H, J= 6.0Hz), 4.63(d, 1H, J= 6.0Hz), 4.46(dd, 1H, J= 10.0, 6.4 Hz), 3.38(s, 3H), 3.28(dd, 1H, J= 10.0, 6.4Hz), 3.17(t, 1H, J= 10.0Hz), 1.70(q, 2H, J= 7.6Hz), 1.58(q, 2H, J= 7.6Hz), 0.91(t, 3H, J= 7.6Hz), 0.88(t, 3H, J= 7.6 Hz); C11H19INaO4についてのHR-MS(ESI+) m/z 理論値：365.0226, 実測値：365.0213(M+Na)+
【００９１】
実施例１９：(4R,5R)-2,2-ジエチル-5-ビニル-1,3-ジオキソラン-4-カルバルデヒド 
【化１６】
2015007140.tif 000025
粉末金属亜鉛(16g, 245.5mmol)を、メタノール(100mL)中の(3aS,4S,6aR)-2,2-ジエチル-4-(ヨードメチル)-6-メトキシテトラヒドロフロ[3,4-d][1,3]ジオキソール(16.8g, 49.1mmol)の溶液に加え、この混合物を1時間に亘って還流させ、冷却し、濾過した。濾液を、減圧下、30℃にて濃縮し、残渣をシリカゲルカラムで迅速に精製して（4:1のヘプタン-酢酸エチルで溶離）、標題化合物(7.24g, 80%)を均一な無色オイルとして得た。1H NMR(CDCl3, 400 MHz): δ 9.55(d, 1H, J= 3.2Hz), 5.74(ddd, 1H5 J= 17.2, 10.4, 6.8Hz), 5.45(dt, 1H, J=17.2, 1.2 Hz), 5.30(dt, 1H, J=10.4, 1.2Hz), 4.87(dd, 1H, J=8.0, 6.8Hz), 4.41(dd, 1H, J=8.0, 3.2Hz), 1.84(q, 2H, J= 7.6Hz), 1.69(q, 2H, J= 7.6Hz), 1.02(t, 3H, J= 7.6Hz), 0.94(t, 3H, J = 7.6Hz); C10H16NaO3についてのHR-MS(ESI+) m/z 理論値：207.0997, 実測値：207.0985(M+Na)+
【００９２】
実施例２０：(3aR,6aR)-2,2-ジエチル-3aH-シクロペンタ[d][1,3]ジオキソール-4(6aH)-オン 
【化１７】
2015007140.tif 000026
無水DCM（75mL）中の(4R,5R)-2,2-ジエチル-5-ビニル-1,3-ジオキソラン-4-カルバルデヒド（4.0g, 21.71mmol）の溶液に、ヨウ化ビニルマグネシウムの溶液（THF中0.7M、37.2mL）を0℃にて滴下した。反応物を室温に加温して18時間に亘って撹拌した。飽和NH4Cl(20mL)を加えて、前記反応をクエンチした。有機相を分離し、塩水で洗浄し、MgSO4で乾燥させ、濾過した。溶媒を減圧下で除去して粗製残渣を得て、これを無水DCM（100mL）中に再溶解させた。この溶液に、Hoveyda-Grubbs第二世代触媒（150mg, 0.24mmol)を加え、反応混合物をアルゴン雰囲気下で3時間に亘って撹拌した。その後、クロロクロム酸ピリジニウム(PCC)(9.36g, 43.42mmol)を加えた。反応混合物を更に3時間に亘って撹拌した後、セライト/フロリシルのショートパッドで濾過した（酢酸エチルで溶離）。混合有機相を蒸発乾固させた後、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製して（9:1のヘプタン-酢酸エチルで溶離）、標題化合物（2.15g, 3工程連続で54%）を白色アモルファス固体として得た。1H NMR(CDCl3, 400MHz): δ 7.58(dd, 1H, J = 6.0, 1.6Hz), 6.19(d, 1H, J = 6.0Hz), 5.27(dd, 1H, J = 4.8, 1.6Hz), 1.66(q, 2H, J= 7.6Hz), 1.61(q, 2H, J= 7.6Hz), 0.91(t, 3H, J= 7.6Hz), 0.80(t, 3H, J= 7.6Hz); C10H14NaO3についてのHR-MS(ESI+) m/z 理論値：205.0841, 実測値：205.0832（M+Na)+
【００９３】
実施例２１：(3aS,4S,6aR)-2,2-ジエチル-4,6a-ジヒドロ-3aH-シクロペンタ[d][1,3]ジオキソール-4-オール 
【化１８】
2015007140.tif 000027
(3aR,6aR)-2,2-ジエチル-3aH-シクロペンタ[d][1,3]ジオキソール-4(6aH)-オン(2.0g, 10.98mmol)及びCeCl3・H2O(4.1g, 10.98mmol)を、0℃に冷却したMeOH(100mL)に加えた後、NaBH4(0.42g, 12.6mmol)を少量ずつ加えた。混合物をこの温度で20分間に亘って撹拌した後、水(100mL)でクエンチした。この混合物を、DCMで抽出し(3×100mL)、その後混合有機相を塩水で洗浄した。MgSO4での乾燥及び濾過の後、溶媒を減圧下で除去した。シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（9:1のヘプタン-酢酸エチルで溶離)により、標題化合物(1.92g, 95%)を無色液体として得た。1H NMR(CDCl3, 400MHz): δ 5.87(s, 2H), 5.03(d, 1H, J = 5.6Hz), 4.74(t, 1H, J = 5.6Hz), 4.55(dd, 1H, J = 10.0, 5.6Hz), 2,78(d, 1H, J= 10Hz), 1.67(m, 4H), 0.92(t, 3H, J= 7.6Hz), 0.87(t, 3H, J = 7.6Hz); C10H16NaO3についてのHR-MS(ESI+) m/z 理論値：207.0997, 実測値：207.0982(M+Na)+
【００９４】
実施例２２：(3aR,4S,6aR)-2,2-ジエチル-4,6a-ジヒドロ-3aH-シクロペンタ[d][1,3]ジオキソール-4-イル 4-メチルベンゼンスルホネート 
【化１９】
2015007140.tif 000028
DCM(30mL)中の、(3aS,4S,6aR)-2,2-ジエチル-4,6a-ジヒドロ-3aH-シクロペンタ[d][1,3]ジオキソール-4-オール(1.50g, 8.14mmol)及びp-トルエンスルホニルクロライド(3.1g, 16.28mmol)の溶液に、Et3N（0.46g, 4.5mL, 32.56mmol)を加えた。この混合物を、アルゴン雰囲気下、室温にて、24時間に亘って撹拌した。混合物を、H2O(10mL)及び塩水(10mL)で抽出した。有機相をMgSO4で乾燥させ、濾過し、濃縮乾固させた。シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製して（4:1のヘプタン-酢酸エチルで溶離）、標題化合物（2.26g, 82%）を白色アモルファス固体として得た。1H NMR(CDCl3, 400 MHz): δ 7.87(d, 2H, J = 8.4Hz), 7.33(d, 2H, J = 8.4Hz), 6.01(m, 1H), 5.77(m, 1H), 5.22(m, 1H), 4.95(d, 1H, J = 5.6Hz), 4.83(t, 1H, J = 5.6Hz), 2.45(s, 3H), 1.55(m, 4H), 0.78(m, 6H); C17H22NaO5SについてのHR-MS(ESI+) m/z 理論値：361.1086, 実測値：361.1078(M+Na)+
【００９５】
実施例１２：(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)シクロペント-3-エン-1,2-ジオール 
【化２０】
2015007140.tif 000029
無水THF(3mL)中の(3aS,4S,6aR)-2,2-ジエチル-4,6a-ジヒドロ-3aH-シクロペンタ[d][1,3]ジオキソール-4-オール(110mg, 0.597mmol)、N6,N6-ビス-(tert-ブトキシカルボニルl)アデニン(239mg, 0.716mmol, Tetrahedron 2007, 63, 9836-9841にしたがって調製)、及びトリフェニルホスフィン(266mg, 1.015mmol)の溶液に、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート(DIAD, 181mg, 0.896mmol)を0℃にて滴下した。反応物を、18時間に亘って室温にて撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー（DCM中、2％のメタノールで溶離）を使用する、粗製物の部分的な精製により、想定されるミツノブ付加物がヒドラジンと共に得られ（DIADより誘導）、これを合成の次の工程に用いた。この混合物に、MeOH(1mL)及び10%の塩酸溶液(1mL)を加えた。生じた混合物を、室温にて、2時間に亘って撹拌した。その後、反応物を水(5mL)で希釈した。水性相をDCMで洗浄し(3×2mL)、減圧下で蒸発乾固させた。残渣をMeOH(3mL)中に再溶解させた。固体NaHCO3(100mg)を加え、室温にて5分間に亘って撹拌した。濾過の後、濾液にシリカゲル(300mg)を加え、減圧下で蒸発させた。粗製物をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製して（DCM中10％のメタノールで溶離)、標題化合物(84mg, 2工程に亘って60%)を白色アモルファス固体として得た。1H NMR(CD3OD, 400MHz): δ 8.21(s, 1H), 8.14(s, 1H), 6.28(m, 1H), 6.14(dd, 1H, J = 6.4, 1.5Hz), 5.56(m, 1H), 4.72(m, 1H), 4.41(t, 1H, J = 5.6Hz) ppm; C10H12N5O2としてのHR-MS(ESI+) m/z 理論値：234.0991, 実測値：234.0980(M+H)+, C10H11N5NaO2としては、理論値：256.0810, 実測値：256.0780(M+Na)+
【００９６】
実施例２４：(1R,2S3R)-3-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)シクロペンタン-1,2-ジオール(I3) 
【化２１】
2015007140.tif 000030
MeOH(1mL)中の(1S,2R,5R)-5-(6-アミノ-9H-プリン-9-イル)シクロペント-3-エン-1,2-ジオール(30mg, 0.129mmol)の溶液を、活性炭担持パラジウム(10%, 5mg)を入れた丸底フラスコに加えた。この懸濁液を、水素雰囲気下で18時間に亘って撹拌した後、濾過した。得られた溶液に、シリカゲル(40mg)を加え、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製して（DCN中、10%のMeOHで溶離）、標題化合物(20mg, 75%)を白色アモルファス固体として得た。1H NMR(CD3OD, 400 MHz): δ 8.23(s, 1H), 8.20(s, 1H), 4.85(m, 1H), 4.55(dd, 1H, J= 9.2, 4.4Hz), 4.21(td, 1H, J= 4.8, 2.0Hz), 2.42(m, 1H), 2.32(m, 1H), 2.16(m, 1H), 1.84(m, 1H) ppm; C10H14N5O2についてのHR-MS(ESI+) m/z 理論値：236.1147, 実測値：236.1135(M+H) +, C10H13N5NaO2については、理論値：258.0967, 実測値：258.0951(M+Na)+
【００９７】
実施例２５：l-((3aS,4R,6aR)-2,2-ジエチル-4,6a-ジヒドロ-3aH-シクロペンタ[d][1,3]ジオキソール-4-イル)-1H-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-4-アミン 
【化２２】
2015007140.tif 000031
無水DMF(3mL)中の3-デアザアデニン(59.5mg, 0.443mmol, 文献Bioorg. Med. Chem. 2006, 14, 1935-1941に記載の手順で調製) の0℃の溶液に、水素化ナトリウム（60%, 17.8mg, 0.443mmol) を加えた。混合物を5分間に亘って室温にて撹拌した後、無水DMF(1mL)中の(3aR,4S,6aR)-2,2-ジエチル-4,6a-ジヒドロ-3aH-シクロペンタ[d][1,3]ジオキソール-4-イル 4-メチルベンゼンスルホネート(100mg, 0.295mmol)の溶液を加えた。反応混合物を55℃にて36時間に亘り撹拌した後、溶媒を減圧下で除去した。DCM(15mL)を加えて混合物を5分間に亘って超音波撹拌し、濾過して、減圧下で蒸発させた。シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー(DCM中、5%のMeOHで溶離)により、標題化合物(49.7mg, 56%)を白色アモルファス固体として得た。1H NMR(CDCl3, 400MHz): δ 7.88(d, 1H, J= 5.6Hz), 7.66(s, 1H), 6.81(d, 1H, J= 5.6Hz), 6.37(d, 1H, J= 5Hz), 6.07(d, 1H, J= 5Hz), 5.43(m, 1H), 5.37(s, 1H), 5.30(bs, 2H), 4.58(d, 1H, J = 5.2Hz), 1.71(q, 2H, J= 7.6Hz), 1.61(q, 2H, J= 7.6Hz), 0.92(t, 3H, J= 7.6Hz), 0.88(t, 3H, J = 7.6Hz); C16H21N4O2についてのHR-MS(ESI+) m/z 理論値：301.1665, 実測値：301.1657(M+H) +, C16H20N4NaO2については、理論値：323.1484, 実測値：323.1496(M+Na)+
【００９８】
実施例２６：(1S,2R,5R)-5-(4-アミノ-lH-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-l-イル)シクロペント-3-エン-1,2-ジオール 
【化２３】
2015007140.tif 000032
MeOH(1mL)中のl-((3aS,4R,6aR)-2,2-ジエチル-4,6a-ジヒドロ-3aH-シクロペンタ[d][1,3]ジオキソール-4-イル)-lH-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-4-アミン(45mg, 0.150mmol)の溶液に、塩酸水溶液(10%, 1mL)を加えた。混合物を、室温にて2時間に亘って撹拌した後、水(5mL)を加えた。この水性相を、CH2C12で3回洗浄した後、減圧下で蒸発乾固させた。得られた残渣をMeOH(2mL)に溶解させ、固体NaHCO3(50mg)を加えた。混合物を、室温にて5分間に亘って撹拌し、濾過した。この溶液に、シリカゲル(60mg)を加え、減圧下で溶媒を除去した。残渣を、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製して（DCM中、10%のMeOHで溶離）、標題化合物(33mg, 95%)を白色アモルファス固体として得た。1H NMR(CD3OD, 400MHz): δ 8.13(s, 1H), 7.66(d, 1H, J = 6.4Hz), 6.99(d, 1H, J = 6.4Hz), 6.34(m, 1H), 6.20(dd, 1H, J= 6.4, 1.6Hz), 5.44(dd, 1H, J= 3.6, 1.5Hz), 4.67(m, 1H), 4.22(t, 1H, J = 5.6Hz); C11H13N4O2についてのHR-MS(ESI+) m/z 理論値：233.1039, 実測値：233.1033(M+H)+
【００９９】
実施例２７：(1R,2S,3R)-3-(4-アミノ-lH-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-l-イル)^シクロペンタン-1,2-ジオール（J3） 
【化２４】
2015007140.tif 000033
MeOH(1mL)中の(1S,2R,5R)-5-(4-アミノ-lH-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-l-イル)シクロペント-3-エン-1,2-ジオール(30mg, 0.129mmol)の溶液を、活性炭担持パラジウム(10%, 5mg)を入れた丸底フラスコに加えた。この懸濁液を、水素雰囲気下で18時間に亘って撹拌した後、濾過した。得られた溶液に、シリカゲル(40mg)を加え、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーで精製して（DCN中、10%のMeOHで溶離）、標題化合物(20mg, 66%)を白色アモルファス固体として得た。1H NMR(CD3OD, 400 MHz): δ 8.35(s, 1H), 7.67(d, 1H, J= 6.8Hz), 7.08(d, 1H, J= 6.8Hz), 4.80(q, 1H, J = 9.2Hz), 4.35(dd, 1H, J = 9.2, 4.4Hz), 4.19(td, 1H, J = 4.8, 2.0Hz), 2.48(m, 1H), 2.31(m, 1H), 2.04(m, 1H), 1.86(m, 1H); C11H15N4O2についてのHR-MS(ESI+) m/z 理論値：235.1195, 実測値：235.1190(M+H) +、C11H14N4NaO2については、理論値：257.1014、 実測値：257.1006(M+Na)+
【０１００】
新規な抗腫瘍薬剤としてのDZNep様化合物のイン・ビボ及びイン・ビトロ研究
フローサイトメトリーとしても既知の蛍光活性化細胞分取(FACS)は、この一連の実験においてアポトーシスを測定するために使用された技術である。アポトーシスは、subG1範囲のDNA含量を有する細胞集団によって表示される。これらの化合物の活性を測定するために、発明者は、E2F1依存性アポトーシスの誘発における化合物の活性を測定するために、HCTl 15 ER-E2F1細胞を使用した。このアッセイでは、4-OHTリガンドの添加により、E2F1が活性化される。DZNepは、この系においてOHT-誘導性アポトーシスを活性化することが、これまでに判明している。
【０１０１】
結果 
得られた予備段階の結果から、6つの候補化合物、D2、D3、F3、G1、I3、及びJ3が、DZNepと類似の活性を示すこと、すなわち、これらが、OHT処理の際にE2F1依存性アポトーシスを誘導できることが確認された。D3は、E2F1依存性アポトーシスの誘発において、DZNepと同程度に有効にアポトーシスを引き起こす性能を示す。イン・ビボ実験により、D3が、DZNepよりも高い最大耐用量(MTD)を有することが示される。結果を図１に図示する。
【０１０２】
イン・ビボ腫瘍異種移植片実験を、前記化合物の1つであるD3の抗腫瘍活性を測定するために行われた。結果は、図２乃至４に示され、体重変化、腫瘍体積変化、及び成長阻害をそれぞれ示す。
【０１０３】
マウスHCT-116直腸結腸癌異種移植片モデルにおけるD3のイン・ビボ有効性
D3のイン・ビボ有効性及び毒性を、マウスHCT-116直腸結腸癌異種移植片モデルにおいて評価した。
雌の無胸腺B ALB/cヌードマウス(ARC、West Australia)であって、18-20週齢のものに、滅菌水道水、及び19%のタンパク質、5%の脂肪、及び5%の繊維からなる標準的な齧歯動物の食餌を与えた（不断給水した）。前記マウスを、12時間のライトサイクルの、21-22℃及び湿度40-60%の個別の通気換気ケージに収容する。Biologica1Resource Centre, Biopolis(BRC)は、拘束、管理、外科的処置、給餌及び給水調節、及び獣医医療に関する実験動物の世話及び使用のための指針の勧告を遵守している。BRCでの動物の世話及び使用のプログラム（#070276）は、Institutional Animal Care and Use Committee(IACUC)に正式認可を受けている。
D3は粉末形体で提供され、滅菌1×PBS中10％のDMSO中に溶解させ、−20℃で貯蔵した。全てのマウスが、体重1kgあたり30-60mgの投薬を、腹腔内注射（ip）によって受ける。
【０１０４】
腫瘍移植
マウスの左脇腹に、5×106のHCT-116ヒト結腸癌の親細胞を皮下移植した。腫瘍を8日間に亘って成長させた後、キャリパーで2、3日に1回モニターした。 
【０１０５】
治療計画
第一日目に、ヌードマウスを、各グループに腫瘍体積が確かに均等に分布するように、二つのグループに腫瘍体積によって分けた。各グループには7匹の動物が含まれていた。薬剤治療を第一日目に開始した。D3を、7日間に亘って30mg/kgの投与量で、次の5日間に亘っては一日一回を原則として60mg/kgの投与量でip投与した。別のグループのマウスは、ip経路により媒体のみの投与を受けた。I3が、それぞれ、30mg/kg及び60mg/kgで与えられた。実験を第１４日目に終了した。
推定腫瘍体積は、下式：
腫瘍体積（mm3）＝（w2×l）/2
を用いて算出されたが、式中、w及びlは、それぞれ、HCT-116癌の幅(mm)及び長さ(mm)である。 
【０１０６】
有効性評価
化合物の有効性を、治療グループの腫瘍体積を媒体コントロールと比較する、腫瘍成長阻害(TGI)法によって検定した。腫瘍成長阻害％(%TGI)は、以下のように算出される。
%TGI =(Cday a − T day a)(Cday a − Cday 1)×100
式中、
Cday 1 ＝第一日目のコントロールグループ（媒体）の平均腫瘍体積
Cday a ＝第ａ日目のコントロールグループ（媒体）の平均腫瘍体積
Tday a ＝第ａ日目の治療グループの平均腫瘍体積
NTRD（非治療関連死）と分類された動物は、TGI算出から除外された。 
【０１０７】
毒性及び評価項目
動物は、第一日目から毎日計量した。マウスを、活動（不活発/活動過多）、皮膚のうるおい/乾燥（hydration/dehydration）、姿勢（例えば円背）、歩行、計量計に乗せられた際の痙攣、体温（例えば触って冷たい）、及び発声を含む、あらゆる不都合な薬剤関連副作用の臨床兆候の有無について、頻繁に検査した。
【０１０８】
統計的分析
２標本T検定を用いて、グループ間の体重変化及び腫瘍体積の統計的優位性を決定した。統計的分析は、0.05のpレベルで行った。SPSSを、全ての統計的分析及び図示に用いた。  
【０１０９】
結果及び考察 
D3：全処置期間中、明かな体重減少は観察されず（当初の体重の95%超）、D3グループの腫瘍体積は、媒体グループのものよりも統計的に著しく小さかった(p=0.033)。腫瘍成長阻害に関しては、第7、9、12日の時点及び第14日の終了時点では、腫瘍成長阻害は、それぞれ約49%、56%、54%、及び54%である。図２乃至４を参照のこと。
I3：全処置期間中、明かな体重減少は観察されず（当初の体重の95%超）、I3の30mg/kgグループ及び60mg/kgグループの腫瘍体積は、媒体グループのものよりも統計的に著しく小さかった(それぞれ、p=0.037及びp=0.000)。投与量30mg/kgでのI3についての腫瘍成長阻害に関しては、第6、8、10、13日の時点及び第14日の終了時点では、腫瘍成長阻害は、それぞれ約40%、43%、31%、35%、及び34%である。投与量60mg/kgでのI3についての腫瘍成長阻害に関しては、第6、8、10、13日の時点及び第14日の終了時点では、腫瘍成長阻害は、それぞれ約50%、65%、60%、68%、及び63%である。図５乃至７を参照のこと。
【０１１０】
したがって、本発明は、下式の構造：
【化２５】
2015007140.tif 000034
を有する、ポリコーム抑制複合体2(PRC2)タンパク質の機能を阻害するための抗癌化合物に関する。
【０１１１】
前記化合物の特定の実施態様では、Aは個別に炭素または窒素であり；X及びYは個別に炭素であり、XとYとの間の結合は、飽和または不飽和であってよく；R1及びR2は、個別に、水素またはハロゲンまたは脂肪族、アリール脂肪族、ヒドロカルビル基であって、1乃至8の主鎖炭素原子並びに、N、O、S、Si、またはハロゲン、例えばClもしくはFである、0乃至3のヘテロ原子を有し；R3、R4、R5、及びR6は、個別に、水素、または脂肪族、脂環族、芳香族、アリール脂肪族、またはアリール脂環族ヒドロカルビル基であって、N、O、S、またはSiである0乃至3のヘテロ原子を含み；R3及びR4は、任意に、脂肪族ヒドロカルビル基を規定するように連結してよい。
【０１１２】
本発明は、また、下式の構造：
【化２６】
2015007140.tif 000035
を有する、ポリコーム抑制複合体2(PRC2)タンパク質の機能を阻害するための抗癌化合物に関する。
【０１１３】
前記化合物の特定の実施態様では、Aは個別に炭素または窒素であり；X及びYは個別に炭素であり、XとYとの間の結合は、飽和または不飽和であってよく；R1及びR2は、個別に、水素またはハロゲンまたは脂肪族、アリール脂肪族、ヒドロカルビル基であって、1乃至8の主鎖炭素原子並びに、N、O、S、Si、またはハロゲン、例えばClもしくはFである、0乃至3のヘテロ原子を有し；R3及びR4は、個別に、水素またはハロゲンまたは炭素、あるいは、脂肪族、脂環族、芳香族、アリール脂環族、またはアリール脂肪族ヒドロカルビル基であり；R5及びR6は、個別に、水素、または脂肪族、脂環族、芳香族、アリール脂肪族、またはアリール脂環族ヒドロカルビル基であって、N、O、S、またはSiである0乃至3のヘテロ原子を含む。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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