(57)【要約】【課題】カラム内における充填剤の充填状態を変えることなく目詰まりしたフィルタを交換でき、分析精度低下の問題を容易に解決可能な技術を提供する。【解決手段】本発明の液体クロマトグラフ用カラムは、カラム５の入口側に配置されるフィルタを有する。このフィルタは、分析対象となる試料の流入方向から順に外側のフィルタ５４と内側のフィルタ５３との２層構造からなり、外側のフィルタ５４は、交換可能である。内側のフィルタ５３は、カラムボディ５２に接着されている。内側のフィルタ５３は、カラム５内の充填剤を保持する役割を担い、外側のフィルタ５４は、試料中または移動相中の不純物がカラム５へ流入するのを防ぐ役割を果たす。【選択図】図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体クロマトグラフ用のカラムであって、
前記カラムの入口側に配置されるフィルタを有し、
前記フィルタは、分析対象となる試料の流入方向から順に外側のフィルタと内側のフィルタとの２層構造からなり、
前記外側のフィルタは、交換可能である、液体クロマトグラフ用カラム。
【請求項２】
請求項１記載の液体クロマトグラフ用カラムにおいて、
前記内側のフィルタは、カラムボディに接着されている、液体クロマトグラフ用カラム。
【請求項３】
請求項２記載の液体クロマトグラフ用カラムにおいて、
前記内側のフィルタは、前記カラム内の充填剤を保持する役割を担い、
前記外側のフィルタは、前記試料中または移動相中の不純物が前記カラムへ流入するのを防ぐ役割を果たす、液体クロマトグラフ用カラム。
【請求項４】
請求項３記載の液体クロマトグラフ用カラムにおいて、
前記内側のフィルタの孔径は、前記充填剤の粒子径よりも小さく、
前記外側のフィルタの孔径は、前記内側のフィルタの孔径と同等かそれよりも小さい、液体クロマトグラフ用カラム。
【請求項５】
請求項４記載の液体クロマトグラフ用カラムにおいて、
前記外側のフィルタの孔径は、前記内側のフィルタの孔径よりも小さく、
前記内側のフィルタの厚さは、前記外側のフィルタの厚さよりも薄い、液体クロマトグラフ用カラム。
【請求項６】
請求項３記載の液体クロマトグラフ用カラムにおいて、
前記カラム内に前記充填剤を充填する際は、前記移動相の流れる向きとは逆方向から前記充填剤を充填する、液体クロマトグラフ用カラム。
【請求項７】
請求項３記載の液体クロマトグラフ用カラムにおいて、
前記カラムボディの入力側にはエンドフィッティングが接合され、
前記内側のフィルタと前記エンドフィッティングとの間をシールする内側のシール部材と、
前記外側のフィルタと前記エンドフィッティングとの間をシールする外側のシール部材と、
をさらに有する、液体クロマトグラフ用カラム。
【請求項８】
液体クロマトグラフ用のカラムを備えた液体クロマトグラフ装置であって、
前記カラムは、前記カラムの入口側に配置されるフィルタを有し、
前記フィルタは、分析対象となる試料の流入方向から順に外側のフィルタと内側のフィルタとの２層構造からなり、
前記外側のフィルタは、交換可能である、液体クロマトグラフ装置。
【請求項９】
請求項８記載の液体クロマトグラフ装置において、
前記内側のフィルタは、カラムボディに接着されている、液体クロマトグラフ装置。
【請求項１０】
請求項９記載の液体クロマトグラフ装置において、
前記内側のフィルタは、前記カラム内の充填剤を保持する役割を担い、
前記外側のフィルタは、前記試料中または移動相中の不純物が前記カラムへ流入するのを防ぐ役割を果たす、液体クロマトグラフ装置。
【請求項１１】
請求項１０記載の液体クロマトグラフ装置において、
前記内側のフィルタの孔径は、前記充填剤の粒子径よりも小さく、
前記外側のフィルタの孔径は、前記内側のフィルタの孔径と同等かそれよりも小さい、液体クロマトグラフ装置。
【請求項１２】
請求項１１記載の液体クロマトグラフ装置において、
前記外側のフィルタの孔径は、前記内側のフィルタの孔径よりも小さく、
前記内側のフィルタの厚さは、前記外側のフィルタの厚さよりも薄い、液体クロマトグラフ装置。
【請求項１３】
請求項１０記載の液体クロマトグラフ装置において、
前記カラム内に前記充填剤を充填する際は、前記移動相の流れる向きとは逆方向から前記充填剤を充填する、液体クロマトグラフ装置。
【請求項１４】
請求項１０記載の液体クロマトグラフ装置において、
前記カラムボディの入力側にはエンドフィッティングが接合され、
前記カラムは、
前記内側のフィルタと前記エンドフィッティングとの間をシールする内側のシール部材と、
前記外側のフィルタと前記エンドフィッティングとの間をシールする外側のシール部材と、
をさらに有する、液体クロマトグラフ装置。
【請求項１５】
請求項１０記載の液体クロマトグラフ装置において、
前記カラムに前記移動相と共に前記試料を導入する試料導入装置と、
前記カラム内で分離された成分を検出する検出器と、
前記検出器の検出結果に基づいて前記試料の定性・定量分析を行うデータ処理装置と、
をさらに有する、液体クロマトグラフ装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、液体クロマトグラフに使用するカラム、およびこのカラムを備えた液体クロマトグラフ装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
液体クロマトグラフは、食品、化学、製薬、臨床化学などの分野において広く利用されている分析装置である。この液体クロマトグラフでは、分析対象となる試料中の成分を分離して定性・定量分析を行うことが可能である。
【０００３】
多くの場合、分析対象となる試料は、様々な工程の前処理を経て不純物が取り除かれた後に分析を行う。しかしながら、完全に不純物を取り除くことが困難であることや、前処理が煩雑な作業であるため、分析に不慣れなオペレータなどによって、前処理が正しく行われないまま分析が開始される場合もある。
【０００４】
その結果、試料中の不純物がカラムに入ると、分析精度の低下や、カラムの目詰まりを引き起こすなどして圧力が上昇し、分析不能な状態に陥る可能性がある。
【０００５】
分析中にカラムのフィルタに埃などの異物が堆積して目詰まりを起こしてしまった場合、装置運転を止めて分析を中断しなければならないことがあった。
【０００６】
その解決策として、例えば、特許文献１には、カラムの不純物の濾過能力を高めるため、ガラスからなる第一フィルタと、金属からなる第二フィルタとを備えた構成のフィルタについて記載されている。また、例えば、特許文献２には、濾紙、１枚以上のメンブレンフィルタ、焼結フィルタを設けた構成のフィルタについて記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２０１３−３０１５号公報
【特許文献２】特開２０１１−２４２２３８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
しかしながら、前述した特許文献１に記載されたフィルタの構成においては、第一フィルタと第二フィルタとの二重のフィルタを一体として固定していることから、その取扱いが不便である。例えば、一方のフィルタの交換、洗浄の度に、常に両方のフィルタの取り外しを要することとなるため、カラム内の充填剤が開放され、充填の状態が変化してしまうおそれがある。
【０００９】
また、前述した特許文献２に記載されたフィルタの構成においては、濾紙、１枚以上のメンブレンフィルタ、焼結フィルタを設けた構成のフィルタがフィルタケースに収容され、このフィルタケースごと交換することとなる。このため、特許文献２に記載されたフィルタの構成においても、特許文献１と同様に、カラム内の充填剤が開放され、充填の状態が変化してしまうおそれがある。
【００１０】
このように、カラムの充填状態が変化すると、カラムの性能に直接影響するため、分離性能が低下することにより定量結果に悪影響を及ぼすなど、カラムの品質の信頼性の低下につながる。
【００１１】
また、埃などの異物は移動相と一緒にカラムへ流入するため、カラムの入口側のフィルタが目詰まりすることが多い。そこで、一度フィルタが目詰まりしたカラムを元の状態に戻すために、通常とは逆方向、つまり、カラムの出口側から移動相を流すことによって、カラムの入口側のフィルタに堆積した埃などの異物を押し出して洗浄する操作が為される場合がある。
【００１２】
この対策方法は、フィルタの目詰まりの程度が軽度である場合は有効であるが、そうでない場合は根本的な解決策にはならず、結局はカラムの通液性が元の状態に戻らない。このように、逆方向からカラムに移動相を流しても元に戻らない場合、フィルタを交換するか、または、カラムそのものを交換することを余儀なくされる。
【００１３】
そこで、本発明は上記のような課題に鑑みてなされたものであり、その代表的な目的は、カラム内における充填剤の充填状態を変えることなく目詰まりしたフィルタを交換でき、分析精度低下の問題を容易に解決可能な技術を提供することにある。
【００１４】
本発明の前記ならびにその他の目的と新規な特徴は、本明細書の記述および添付図面から明らかになるであろう。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本願において開示される発明のうち、代表的なものの概要を簡単に説明すれば、次のとおりである。
【００１６】
すなわち、代表的な液体クロマトグラフ用カラムは、液体クロマトグラフ用のカラムであって、前記カラムの入口側に配置されるフィルタを有する。前記フィルタは、分析対象となる試料の流入方向から順に外側のフィルタと内側のフィルタとの２層構造からなり、前記外側のフィルタは、交換可能である。
【００１７】
より好ましくは、前記内側のフィルタは、カラムボディに接着されている。
【００１８】
より好ましくは、前記内側のフィルタは、前記カラム内の充填剤を保持する役割を担い、前記外側のフィルタは、前記試料中または移動相中の不純物が前記カラムへ流入するのを防ぐ役割を果たす。
【００１９】
また、前記液体クロマトグラフ用カラムを備えた液体クロマトグラフ装置にも適用するものである。
【発明の効果】
【００２０】
本願において開示される発明のうち、代表的なものによって得られる効果を簡単に説明すれば以下のとおりである。
【００２１】
すなわち、代表的な効果は、カラム内における充填剤の充填状態を変えることなく目詰まりしたフィルタを交換でき、分析精度低下の問題を容易に解決することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】本発明の一実施の形態における液体クロマトグラフ装置の概要の一例を示す構成図である。
【図２】図１に示した液体クロマトグラフ装置において、液体クロマトグラフ用カラムの一例の一部分を示す断面図である。
【図３】図２に示した液体クロマトグラフ用カラムにおいて、外側のフィルタを取り外した状態の一例を示す断面図である。
【図４】図２に示した本実施の形態のカラムと従来技術のカラムとを用いた分析実験において、試料の分析回数に対する圧力の推移の一例を示す説明図である。
【図５】図４に示した分析実験を行った際の成分ピークに関する面積値再現性の一例を示す説明図である。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
以下の実施の形態においては、便宜上その必要があるときは、複数のセクションまたは実施の形態に分割して説明するが、特に明示した場合を除き、それらは互いに無関係なものではなく、一方は他方の一部または全部の変形例、詳細、補足説明等の関係にある。また、以下の実施の形態において、要素の数等（個数、数値、量、範囲等を含む）に言及する場合、特に明示した場合および原理的に明らかに特定の数に限定される場合等を除き、その特定の数に限定されるものではなく、特定の数以上でも以下でもよい。
【００２４】
さらに、以下の実施の形態において、その構成要素（要素ステップ等も含む）は、特に明示した場合および原理的に明らかに必須であると考えられる場合等を除き、必ずしも必須のものではないことは言うまでもない。同様に、以下の実施の形態において、構成要素等の形状、位置関係等に言及するときは、特に明示した場合および原理的に明らかにそうでないと考えられる場合等を除き、実質的にその形状等に近似または類似するもの等を含むものとする。このことは、上記数値および範囲についても同様である。
【００２５】
［実施の形態の概要］
まず、実施の形態の概要について説明する。本実施の形態の概要では、一例として、括弧内に実施の形態の対応する構成要素の符号等を付して説明する。
【００２６】
本実施の形態の代表的な液体クロマトグラフ用カラムは、液体クロマトグラフ用のカラムであって、前記カラムの入口側に配置されるフィルタを有する。前記フィルタは、分析対象となる試料の流入方向から順に外側のフィルタ（外側のフィルタ５４）と内側のフィルタ（内側のフィルタ５３）との２層構造からなり、前記外側のフィルタは、交換可能である。
【００２７】
より好ましくは、前記内側のフィルタは、カラムボディ（カラムボディ５２）に接着されている。
【００２８】
より好ましくは、前記内側のフィルタは、前記カラム内の充填剤を保持する役割を担い、前記外側のフィルタは、前記試料中または移動相中の不純物が前記カラムへ流入するのを防ぐ役割を果たす。
【００２９】
また、前記液体クロマトグラフ用カラムを備えた液体クロマトグラフ装置にも適用するものである。
【００３０】
以下、上述した実施の形態の概要に基づいた実施の形態を図面に基づいて詳細に説明する。なお、実施の形態を説明するための全図において、同一の機能を有する部材には原則として同一の符号を付し、その繰り返しの説明は省略する。また、実施の形態では、特に必要なとき以外は同一または同様な部分の説明を原則として繰り返さない。
【００３１】
また、実施の形態で用いる図面においては、断面図であっても図面を見易くするためにハッチングを省略する場合もある。また、平面図であっても図面を見易くするためにハッチングを付す場合もある。
【００３２】
［一実施の形態］
本実施の形態における液体クロマトグラフ用カラム、およびこのカラムを備えた液体クロマトグラフ装置について、図１〜図５を用いて説明する。但し、以下の実施の形態は本発明を実現するための単なる例に過ぎず、これに限定されるものではない。
【００３３】
〈液体クロマトグラフ装置〉
図１は、本実施の形態における液体クロマトグラフ装置の概要の一例を示す構成図である。
【００３４】
本実施の形態における液体クロマトグラフ装置は、移動相１Ａ，１Ｂ、電磁弁２Ａ，２Ｂ、ポンプ３、試料導入装置４、カラム５、検出器６、データ処理装置７などから構成されている。この液体クロマトグラフ装置において、各構成機器の制御は、図示しない制御装置により行われるようになっている。
【００３５】
移動相１Ａ，１Ｂは、複数の溶離液などの移動相である。ここでは、移動相１Ａ，１Ｂとして、グラジェント溶出が可能なように２種類の例を示している。移動相１Ａ，１Ｂとは、カラム５に流す液体であり、この液体を流すことによって試料に含まれていた混合物がカラム５内で分離されて順番にカラム５から排出される。
【００３６】
電磁弁２Ａ，２Ｂは、各移動相１Ａ，１Ｂに対応して設けられ、各移動相１Ａ，１Ｂの供給を選択的に切り替えるための電磁弁である。
【００３７】
ポンプ３は、各電磁弁２Ａ，２Ｂの切り替えにより選択された移動相１Ａ，１Ｂを一定の流量およびカラム圧でカラム５に向けて供給するためのポンプである。
【００３８】
試料導入装置４は、分析対象となる試料を導入し、この試料を移動相１Ａ，１Ｂと共にカラム５に供給するための試料導入装置である。
【００３９】
カラム５は、充填剤が充填されており、試料導入装置４から移動相１Ａ，１Ｂと共に導入される試料を成分毎に分離し、検出器６に順に排出するためのカラムである。また、カラム５の入力側には、詳細は後述するが、移動相１Ａ，１Ｂと共に導入される試料の流入方向に積層された２層構造のフィルタが配置されている。
【００４０】
検出器６は、カラム５から排出される分離された成分を検出するための検出器である。
【００４１】
データ処理装置７は、検出器６で検出された成分の検出結果に基づいて、試料の定性・定量分析を行うためのデータ処理装置である。
【００４２】
以上のような液体クロマトグラフ装置において、分析対象となる試料中の成分を分離して定性・定量分析を行う動作は、以下のようになる。この定性・定量分析を行う動作は、各構成機器の制御を行う制御装置により実行される。この制御装置には、例えばコンピュータシステムなどが用いられ、分析プログラムの実行によって動作の各工程は自動的に行われる。
【００４３】
まず、複数の移動相１Ａ，１Ｂの中から、電磁弁２Ａ，２Ｂによっていずれかの移動相が選択される。例えば、電磁弁２Ａによって移動相１Ａが選択された場合、この選択された移動相１Ａは、ポンプ３によって試料導入装置４に向かって一定の流量およびカラム圧で供給される。また、試料導入装置４内には分析対象の試料が導入される。
【００４４】
そして、試料導入装置４から、移動相１Ａと共に試料がカラム５に導入される。このカラム５においては、移動相１Ａ中およびこの移動相１Ａと共に導入された試料中の不純物がフィルタで濾過され、カラム５の内部に導入される。カラム５の内部に導入された試料は、移動相１Ａの流動に伴ってカラム５内を移動することにより、成分毎に分離され、カラム５から順に排出される。
【００４５】
さらに、カラム５から排出された各成分は、検出器６で順に検出される。そして、データ処理装置７において、検出器６による検出結果に基づいて、試料の定性・定量分析を行う。
【００４６】
また、電磁弁２Ｂによって移動相１Ｂが選択された場合も同様に、この選択された移動相１Ｂと共に試料がカラム５に導入され、成分毎に分離されて順に排出され、各成分は検出器６で検出される。
【００４７】
このように、液体クロマトグラフ装置では、移動相１Ａ，１Ｂと共に試料をカラム５内で流動させることにより、この試料を成分毎に分離し、検出器６によってこれら成分を検出し、この検出結果に基づいて定性・定量分析を行うことが可能となっている。
【００４８】
〈液体クロマトグラフ用カラム〉
図２は、図１に示した液体クロマトグラフ装置において、液体クロマトグラフ用カラムの一例の一部分を示す断面図である。図３は、図２に示した液体クロマトグラフ用カラムにおいて、外側のフィルタを取り外した状態の一例を示す断面図である。
【００４９】
本実施の形態における液体クロマトグラフ用カラム５は、エンドフィッティング５１、カラムボディ５２、内側のフィルタ５３、外側のフィルタ５４、内側のパッキン５５、外側のパッキン５６、充填剤５９などから構成されている。図２では、出力側のエンドフィッティングを省略しているが、エンドフィッティングはカラムボディ５２の入力側と出力側との両端部に接合されている。カラム５は、管状のカラムボディ５２の入力側にエンドフィッティング５１が接合され、カラムボディ５２の出力側に図示しないエンドフィッティングが接合されている。
【００５０】
エンドフィッティング５１とカラムボディ５２との接合部分には、内側のフィルタ５３と外側のフィルタ５４との２層構造からなるフィルタが配置されている。この２層構造のフィルタは、それぞれ独立した内側のフィルタ５３と外側のフィルタ５４とから構成されていて、試料および移動相の流入方向に積層された構造を採る。これら２層構造を採るフィルタについて、流入方向の上流側のフィルタを外側のフィルタ５４、下流側のフィルタを内側のフィルタ５３と呼ぶことにする。
【００５１】
内側のフィルタ５３はカラム５内の充填剤５９を保持する役割を担い、外側のフィルタ５４は不純物がカラム５へ流入するのを防ぐ役割を果たす。内側のフィルタ５３は、何らかの手段によってカラムボディ５２に接着されている。具体的な接着手段としては、接着剤、溶接などによって接着することが可能であるが、液体クロマトグラフ用カラム５としての機能を損なうことがなければ、これらの手段に限らない。一方、外側のフィルタ５４は、自由に取り外すことができ、かつ、容易に交換可能となるような構造体で保持されている。この外側のフィルタ５４を保持する構造体として、エンドフィッティング５１が接合されている。図３は、エンドフィッティング５１を取り外して、外側のフィルタ５４を取り外した状態を示している。
【００５２】
内側のフィルタ５３とエンドフィッティング５１との間には、内側のシール部材であるパッキン５５が配置されている。外側のフィルタ５４とエンドフィッティング５１との間には、外側のシール部材であるパッキン５６が配置されている。これらの内側および外側のパッキン５５，５６によって、カラム５の入力側から導入される試料および移動相の漏れ防止が可能となっている。図３に示すように、エンドフィッティング５１を取り外した状態では、外側のフィルタ５４に加えて、内側および外側のパッキン５５，５６も取り外すことができる。なお、パッキンは、必ずしも２つに分ける必要はなく、１つでもよい。また、外側のパッキン５６のみ、あるいは内側のパッキン５５のみでもよい。
【００５３】
エンドフィッティング５１とカラムボディ５２とは、例えば、ねじ込み方式で接合されている。エンドフィッティング５１とカラムボディ５２とのねじ部５７には、カラムボディ５２に雄ねじが切ってあり、エンドフィッティング５１に切られた雌ねじと直接的に接合している。また、エンドフィッティング５１には、カラムボディ５２との反対側に、配管に接続するためのねじ部５８としての雌ねじが切られている。
【００５４】
なお、カラムボディ５２と出力側のエンドフィッティングとの接合部分にも出口側のフィルタが配置されるが、この出口側のフィルタは、従来技術の範疇を超えた構造、機能を備えている必要性はない。すなわち、出口側のフィルタでは、カラム５内の充填剤５９を保持する役割を果たせばよい。
【００５５】
このように、カラム５は、管状のカラムボディ５２の内部に充填剤５９が充填され、両端部を入力側のフィルタと出力側のフィルタとで封止したものである。また、入力側および出力側のフィルタの周囲はパッキンで押さえて漏れ防止をすると共に、入力側および出力側のエンドフィッティングをカラムボディ５２にねじ込むことで、入力側および出力側のフィルタを充填剤５９に押し付けて封止するようにしている。
【００５６】
図２において、矢印は、本実施の形態のカラム５を液体クロマトグラフ装置に取り付けて使用したときの移動相が流れる向きを示している。分析対象となる試料中または移動相中の異物は、外側のフィルタ５４に蓄積する。内側のフィルタ５３は、充填剤５９をカラム５内に保持するためのフィルタである。内側のフィルタ５３の孔径は、充填剤５９の粒子径よりも小さいものが望ましい。内側のフィルタ５３の材質は、例えばステンレス鋼のＳＵＳ３１６製であるが、これに限ったものではない。外側のフィルタ５４の孔径は、内側のフィルタ５３の孔径と同等かそれよりも小さいものが望ましい。外側のフィルタ５４の材質は、例えばメンブレンフィルタであるが、これに限ったものではない。
【００５７】
内側のフィルタ５３とカラムボディ５２とは、接着剤、溶接などによって接着している。エンドフィッティング５１を取り外すと、これとともに外側のフィルタ５４およびパッキン５５，５６が外れるが、内側のフィルタ５３はカラムボディ５２に接着した状態を保つため、充填剤５９が漏れ出すことはない。また、外側のフィルタ５４は、エンドフィッティング５１を取り外すことで、容易に取り外して交換することができる。
【００５８】
また、従来、カラムに充填剤を充填するときは、出口側にフィルタとエンドフィッティングを取り付けて、分析を実行するときと同じ向き、つまり、移動相の流れる向きと同じ向きから充填剤を充填していた。そのため、従来は、予め入口側のフィルタをカラムボディに接着させると、カラムへの充填ができなかった。
【００５９】
本実施の形態では、２層構造のフィルタにおいて、敢えて内側のフィルタ５３とカラムボディ５２とが接着した構造を採用し、移動相の流れる向きとは逆方向（カラム５の出口側）からカラム５への充填を行う方法を採用している。すなわち、本実施の形態では、カラム５に充填剤５９を充填するときは、カラム５の入口側に２層構造のフィルタとエンドフィッティング５１を取り付けた後、カラム５の出口側から充填剤５９を充填する。そして、カラム５の出口側に、フィルタとエンドフィッティングを取り付けて充填剤５９を封止する。
【００６０】
〈試料の分析回数に対する圧力の推移〉
図４は、図２に示した本実施の形態のカラムと従来技術のカラムとを用いた分析実験において、試料の分析回数に対する圧力の推移の一例を示す説明図である。図４において、横軸は分析回数を示し、縦軸は圧力を示し、試料を複数回測定したときの圧力の推移を示している。この圧力は、フィルタの目詰まりがひどくなるほど上昇する。この分析実験では、一例として、管理血清をトリクロロ酢酸処理によってタンパク質を変性させた後に遠心分離し、この上澄みを試料とした。
【００６１】
従来技術のカラムでは、７００回目の分析時に装置の運転可能な上限圧力２５ＭＰａを超えた。上限圧力を超えると装置が停止するように設計されているため、連続分析を終了させた。
【００６２】
一方、本実施の形態のカラム５を用いて連続分析したときは、６４０回目の分析時に上限圧力２５ＭＰａを超えた。一度装置を停止して、このカラム５の外側のフィルタ５４を新しいものに交換した後、再度分析を再開した。すると、最初の分析時と同等の値まで圧力が下がり、その後は６００回目の分析までと類似した圧力上昇が起きた。
【００６３】
〈成分ピークに関する面積値再現性〉
図５は、図４に示した分析実験を行った際の成分ピークに関する面積値再現性の一例を示す説明図である。図５では、一例として、試料中に含まれるアスパラギン酸の成分ピークに関する面積値再現性を示している。
【００６４】
図５中の１〜５回目の列は、分析開始時の初期の面積値再現性を示し、６００〜６０４回目の列は、６００〜６０４回目の面積値再現性を示す。これは、前述の本実施の形態のカラム５を用いた分析実験における、外側のフィルタ５４を交換する直前の数値となる。従来技術のカラム、本実施の形態のカラム５の両方において、６００回に達した時の分析精度は初期の分析精度と比較して１０倍程度悪化しているのが分かる。図５の例では、従来技術のカラムにおいては０．４％から９．５％に悪化し、本実施の形態のカラム５においては０．３％から５．７％に悪化している。
【００６５】
さらに、図５中の７００〜７０４回目の列は、７００〜７０４回目の面積値再現性を示している。従来技術のカラムについては、７００回目で実験を取り止めたために結果を示していない。本実施の形態のカラム５では、この時点での面積値再現性が０．３％であった。これは、６００〜６０４回目での面積値再現性の数値（５．７％）よりも１桁低い値を示しており、また、分析開始時の面積値再現性と同等の値（０．３％）である。これは、外側のフィルタ５４を交換したことによって、圧力が元の値まで下がったことによる効果であると考えられる。
【００６６】
〈実施の形態の効果〉
以上説明したように、本実施の形態における液体クロマトグラフ用カラム５、およびこのカラム５を備えた液体クロマトグラフ装置によれば、代表的には、カラム５内における充填剤５９の充填状態を変えることなく目詰まりした外側のフィルタ５４を交換でき、分析精度低下の問題を容易に解決することが可能となる。
【００６７】
すなわち、本実施の形態では、カラム５のフィルタが目詰まりしたときに分析精度が低下してしまう問題を容易に解決することができる。従来、カラムのフィルタが目詰まりしてしまったときは、（１）逆方向から移動相を流してカラムの洗浄を行う、（２）入口側のエンドフィッティングを外してフィルタを交換する、（３）カラムを再充填する、のような対策がなされてきた。
【００６８】
しかし、（１）についてはフィルタの目詰まりの程度によっては改善しない、（２）については充填剤の充填状態が変わってしまうために分析の精度が低下する、（３）についてはカラムの充填作業が通常２〜３時間程度を要して手間・労力を要する、といった問題があった。
【００６９】
そこで、本実施の形態では、外側のフィルタ５４と内側のフィルタ５３との２層構造からなるカラム５の入力側のフィルタにおいて、外側のフィルタ５４を交換可能とすることで、外側のフィルタ５４が目詰まりした際には、この外側のフィルタ５４を容易に交換することができる。また、内側のフィルタ５３はカラムボディ５２に接着されていることで、この内側のフィルタ５３によってカラム５内における充填剤５９の充填状態は変わることがない。
【００７０】
このようにして、内側のフィルタ５３は、カラム５内の充填剤５９を保持する役割を担うことができる。また、外側のフィルタ５４は、試料中または移動相中の不純物がカラム５へ流入するのを防ぐ役割を果たすことができる。
【００７１】
特に、内側のフィルタ５３の孔径は、充填剤５９の粒子径よりも小さくすることで、カラム５内の充填剤５９を保持する効果は、より一層顕著となる。また、外側のフィルタ５４の孔径は、内側のフィルタ５３の孔径と同等かそれよりも小さくすることで、試料中または移動相中の不純物がカラム５へ流入するのを防ぐ効果は、より一層顕著となる。
【００７２】
また、カラム５の入力側において、内側のフィルタ５３がカラムボディ５２に接着されていても、カラム５内に充填剤５９を充填する際は、移動相の流れる向きとは逆方向の出口側から充填剤５９を充填することができる。
【００７３】
また、内側のフィルタ５３とエンドフィッティング５１との間、外側のフィルタ５４とエンドフィッティング５１との間はそれぞれ、内側のパッキン５５または外側のパッキン５６でシールすることができるので、カラム５に導入される試料および移動相の漏れを防止することが可能となる。
【００７４】
〈２層構造からなるフィルタの変形例〉
前述した実施の形態においては、外側のフィルタ５４の孔径は、内側のフィルタ５３の孔径と同等かそれよりも小さいものが望ましい、例を説明したが、例えば以下のような変形例も考えられる。
【００７５】
例えば、フィルタの厚さに着目した場合に、外側のフィルタ５４の孔径は、内側のフィルタ５３の孔径よりも小さくすることで、内側のフィルタ５３の厚さは、外側のフィルタ５４の厚さよりも薄くすることができる。その理由は、外側のフィルタ５４の孔径を小さくすると、試料中および移動相中の異物をトラップする能力が向上するため、その分、内側のフィルタ５３の異物をトラップする能力を弱められるためである。
【００７６】
このように、内側のフィルタ５３の厚さを薄くしたときのメリットは、デッドボリュームの低減によるカラム５の理論段数の向上（カラムの性能向上）がある。つまり、より高精度の分析を行うことができるようになる。なお、デッドボリュームとは、液体クロマトグラフ装置の分析対象の試料が流れる部分のうち、その試料中の成分の分離に関与しない部分（分離に関与する部分は図２の充填剤５９）の体積を言う。
【００７７】
これにより、内側のフィルタ５３の厚さを薄くすることで、デッドボリュームを低減することができる。この結果、カラム５の性能向上が可能となり、より高精度の分析を行うことができる。
【００７８】
また、この変形例以外に、外側のフィルタ５４と内側のフィルタ５３との間では、各フィルタの孔径、各フィルタの厚さ、各フィルタの材質などの関係からも、最適な孔径、厚さ、および、材質などを選択することが望ましい。さらに、各フィルタの孔径や厚さは、各フィルタの体積にも影響するので、この各フィルタの体積に着目して規定することも可能である。例えば、フィルタの体積を小さくした場合には、厚さを薄くした場合と同様に、デッドボリュームを低減できることにつながる。
【００７９】
以上、本発明者によってなされた発明を実施の形態に基づき具体的に説明したが、本発明は前記実施の形態に限定されるものではなく、その要旨を逸脱しない範囲で種々変更可能であることは言うまでもない。例えば、上記した実施の形態は、本発明を分かり易く説明するために詳細に説明したものであり、必ずしも説明した全ての構成を備えるものに限定されるものではない。また、実施の形態の構成の一部について、他の構成の追加・削除・置換をすることが可能である。
【００８０】
例えば、液体クロマトグラフ装置としては、図１のような構成に限らず、さらに複数（３種類以上）の移動相を有する構成、１種類の移動相を有する構成、分析カラムの他に反応カラムを有する構成など、種々変更可能であることは言うまでもない。本発明は、分析カラムを備えた液体クロマトグラフ装置全般に広く適用できるものである。
【符号の説明】
【００８１】
１Ａ，１Ｂ：移動相
２Ａ，２Ｂ：電磁弁
３：ポンプ
４：試料導入装置
５：カラム
６：検出器
７：データ処理装置
５１：エンドフィッティング
５２：カラムボディ
５３：内側のフィルタ
５４：外側のフィルタ
５５：内側のパッキン
５６：外側のパッキン
５７：ねじ部
５８：ねじ部
５９：充填剤
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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