(57)【要約】      （修正有）【課題】急性創傷、慢性創傷および／または細菌性のバイオフィルムを含む創傷若しくは上皮組織面の治療のための新規なビスマスチオール（ＢＴ）化合物を含むＢＴ組成物の提供。【解決手段】ＢＴ化合物を含む複数の微粒子を含み、実質的に全ての該微粒子が、約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有するＢＴ組成物であって、該ＢＴ化合物はビスマスまたはビスマス塩およびチオール含有化合物を含み、該チオール含有化合物は、１，２−エタンジチオール、２，３−ジメルカプトプロパノール、ピリチオン、ジチオエリスリトール、３，４−ジメルカプトトルエン、２，３−ブタンジチオール、１，３−プロパンジチオール、２−ヒドロキシプロパンチオール、１−メルカプト−２−プロパノール、ジチオエリスリトール、アルファ−リポ酸およびジチオスレイトールから選択される１種以上を含むＢＴ組成物。【選択図】図１
2015007113.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ビスマス-チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微小粒子を含み、実質的に全ての前記微小粒子が約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有し、前記ＢＴ化合物が、ビスマスまたはビスマス塩およびチオール含有化合物を含む、ビスマスチオール組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、全体が参照により本明細書に組み込まれる２００９年２月３日に提出された米国仮特許出願第６１／１４９，５９３号の、米国特許法１１９（ｅ）条に基づく利益を主張する。
【０００２】
本開示の発明の実施形態は、微生物感染の処置のための組成物および方法に関する。特に、本実施形態は、上皮組織における細菌感染（慢性創傷および急性創傷などの創傷における細菌感染を含む）を管理するための改善された処置（細菌性バイオフィルムおよび他の状態の処置を含む）に関する。
【背景技術】
【０００３】
皮膚創傷の治癒および／または上皮組織の治癒もしくは維持に寄与する複雑な一連の協調的な細胞分子相互作用は、一般に、種々の外的因子、例えば、日和見感染および院内感染（例えば、感染のリスクを増加させ得る臨床レジメン）、抗生物質の局所もしくは全身投与（細胞の成長、移動または他の機能に影響する場合があり、抗生物質耐性微生物に関して選択することもできる）、創傷の頻繁な包帯交換、治癒を促進するための創傷の外気暴露、仮の人工構造的な支持マトリックスもしくは骨格材料の使用、ならびに／または感染もしくは壊死組織を切除するための壊死組織切除および／もしくは再手術の起こり得る必要性によって悪影響を受ける場合がある。
【０００４】
したがって、創傷治癒は、世界的に、臨床開業医にとって大変な課題であり続けている。難治性創傷のための現在の処置は、実用的でない上に効果的でなく、創傷を閉鎖するための複数回の手術をしばしば必要とする。例えば、Ｒｅｇｒａｎｅｘ（登録商標）（ベカプレミン、Ｏｒｔｈｏ−ＭｃＮｅｉｌ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ、Ｉｎｃ．，Ｅｔｈｉｃｏｎ、Ｉｎｃ．から入手可能、組換え型血小板由来成長因子）は、慢性創傷のいくつかの利用可能な処置のうちの１つとして例示されているが、製造するには高価であり、限定された臨床的有用性を有する。
【０００５】
慢性および急性創傷ならびに創傷バイオフィルム
創傷は、組織内の細胞間または組織間の連続性が、例えば、物理的、機械的、生物学的、病理学的および／または化学的力（例えば、熱傷、皮膚感染、刺創、銃弾もしくは散弾による創傷、皮膚潰瘍、放射線中毒、悪性腫瘍、壊疽、自己免疫疾患、免疫不全症、吸入もしくは感染による呼吸器系の損傷、有害な摂取もしくは感染による胃腸の損傷、循環器障害および凝固欠陥を含めた血液障害）または他の外傷性損傷などによって中断されたときに起こる。
【０００６】
限定されたレベルの、創傷における細菌汚染または創傷の「コロニー形成」は、創傷治癒のプロセスを必ずしも妨害し得ないが、宿主免疫防御を制圧するのに十分な数の細菌の存在は、急性創傷もしくは慢性創傷、または細菌性バイオフィルムが存在している創傷、例えば、細菌成長が宿主の有害物まで進行している創傷感染をもたらし得る。ＢｒｙａｎｔおよびＮｉｘ、Ａｃｕｔｅ  ａｎｄ  Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｗｏｕｎｄｓ：Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  Ｃｏｎｃｅｐｔｓ、２００６  Ｍｏｓｂｙ（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ）、ＮＹ；Ｂａｒｏｎｏｓｋｉ、Ｗｏｕｎｄ  Ｃａｒｅ  Ｅｓｓｅｎｔｉａｌｓ：Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ（第２版）、２００７  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＰＡ）。例えば、このような急性創傷は、損傷、外傷、外科的介入、または他の原因から生じ、典型的には、元の健康状態の欠損がなく、迅速に治癒し得るが、感染の存在によって、そうとはなり得ない場合があり；迅速に形成する細菌性バイオフィルムが、急性創傷において記載されている（例えば、ＷＯ／２００７／０６１９４２）。慢性創傷の発達に寄与し得るさらなる因子として、可動性の損失（例えば、創傷部位に適用される継続的な圧力を生じる）、感覚または知能の欠損、創傷部位のアクセス不可能性（例えば、呼吸器または消化管における）および循環器系の欠損が挙げられる。慢性創傷部位における感染は、皮膚の発赤、浮腫、化膿および／もしくは不快臭の臨床的兆候、または他の関連する臨床的に受け入れられている基準によって検出され得る。
【０００７】
宿主の免疫系が創傷部位の細菌感染によって制圧されているとき（例えば、急性創傷）、（限定されないがヒトおよび他の哺乳動物を含めた）高等生物において、適切に治癒することができない急性創傷がしたがって存在する場合があり、これにより、慢性創傷が発達する場合があり、細菌が侵入して組織をさらに破壊する許容状態を作り出す。一般に、慢性創傷とは、３ヶ月以内に治癒しない創傷であり、細菌の浸潤が進行するにしたがい、より小さくなるのではなく、より大きく成長する傾向がある。慢性創傷は、創傷が進行するにしたがい隣接する神経が損傷されるとき（ニューロパシー）、患者に非常に苦痛かつストレスになり得る。これらの創傷は、毎年４００万人のアメリカ人を襲い、処置費用に約９０億がかかる。悩まされている個体は、大部分が、６０歳を超えている。
【０００８】
慢性創傷は、急性創傷として発生する場合があるため、例えば、銃弾または散弾による創傷、熱傷、穿刺、静脈性潰瘍、褥瘡、糖尿病性潰瘍、放射線中毒、悪性腫瘍、皮膚感染、壊疽、外科的創傷、糖尿病性足潰瘍、褥瘡性潰瘍、静脈性足潰瘍、感染したおよび／もしくはバイオフィルム含有の非治癒外科的創傷、壊疽性膿皮症、外傷性創傷、急性動脈不全、壊死性筋膜炎、骨髄炎（骨感染）、ならびに放射線傷害、例えば、放射線骨壊死および柔組織放射線壊死、または他のタイプの創傷を含み得る。静脈性潰瘍は、例えば、大部分が足において、血行不良（例えば、虚血）、正常に作動しない静脈弁、または繰り返される物理的外傷（例えば、反復的な損傷）の結果として起こる。褥瘡は、創傷部位にまたはその周囲にかけられる局所的な圧力が血圧を超えるとき存在し得、例えば、血行不良、麻痺、および／または床擦れが、慢性創傷に寄与し得るか、またはこれを悪化させ得る。糖尿病性潰瘍は、真性糖尿病を有する個体、例えば、制御されていない高い血糖が四肢の感覚の損失の一因となり得る人々において起こり得、反復的な損傷および／または個体の、損傷に伴う部分での無反応をもたらす。慢性創傷の臨床的着手および成果を困難にし得るまたはこれに影響し得る因子として、対象の免疫学的状態（例えば、免疫抑制、病理学的に（例えば、ＨＩＶ−ＡＩＤＳ）、放射線治療的にまたは薬理学的に損なわれた免疫系；年齢；ストレス）；皮膚の老化（光化学的老化を含む）、ならびに創傷内でのバイオフィルムの発達および進行が挙げられる。上皮組織の場合、呼吸器および／または消化管においては、アクセス不可能性、閉塞、上皮表面を除去する流体力の発生が困難であること、または微生物の生存につながる局所的な微環境の発達が、臨床的合併症を生じさせ得る。
【０００９】
創傷が関係する損傷は、失われたまたは損なわれた臓器機能、ショック、出血および／または血栓症、細胞死（例えば、壊死および／または細胞自然死）、ストレスおよび／または微生物感染を伴い得る。これらの事象のいずれかまたは全て、特に感染は、創傷治癒に関与する効果的な組織修復プロセスを遅らせまたは妨げ得る。したがって、可能な限り早急に、創傷が持続している個体において、壊死組織切除と称されるプロセスである、生き残れない組織を創傷部位から除去すること、さらに、創傷洗浄とも称される、任意の異物を創傷部位から除去することも重要であり得る。
【００１０】
重篤な創傷、急性創傷、慢性創傷、熱傷、および潰瘍は、細胞創傷包帯からの利益を得ることができる。いくつかの人工皮膚製品が非治癒創傷または熱傷に利用可能である。例えば：Ａｐｌｉｇｒａｆｔ（登録商標）（Ｎｏｒｖａｒｔｉｓ）、Ｄｅｍａｇｒａｆｔ（登録商標）、Ｂｉｏｂｒａｎｅ（登録商標）、Ｔｒａｎｓｃｙｔｅ（登録商標）（Ａｄｖａｎｃｅ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ）、Ｉｎｔｅｇｒａ（登録商標）Ｄｅｒｍａｌ  Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  Ｔｅｍｐｌａｔｅ（登録商標）（Ｉｎｔｅｇｒａ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ製）、およびＯｒＣｅｌ（登録商標）。しかし、これらの製品は、細菌性の組織浸潤および創傷の広がりの問題に対処するように設計されていない。
【００１１】
残念なことに、全身性抗生物質は、慢性創傷の処置に効果的でなく、急性感染でも存在しない限り一般には用いられない。慢性創傷の処置への現在のアプローチとして、局所的な抗生物質の適用が挙げられるが、このような療法は、抗生物質耐性細菌の菌株の出現を促進する場合がありおよび／または細菌性バイオフィルムに対して効果的でない場合がある。したがって、薬物耐性細菌（例えば、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌、またはＭＲＳＡ）が創傷において検出されるときには、消毒薬を用いることが特に重要になり得る。多くの消毒薬が広く用いられているが、いくつかの慢性創傷において確立されている細菌集団または亜集団がこれらの剤または任意の他の現在利用可能な処置に応答し得ないため、宿主内での感染の広がり、すなわち、感染肢または他の組織の望ましくない損失を防止するために外科的切断または切除を必要とする。さらに、多数の消毒薬は、慢性創傷部位において、確立された細菌感染に対して効果的である必要があり得る濃度で宿主細胞に対して毒性が毒性あるため、このような消毒薬は好適でない。この問題は、内部上皮表面、例えば、呼吸器（例えば、気道、鼻咽頭および咽頭経路、気管、肺、気管支、細気管支、肺胞など）もしくは消化管（例えば、口腔、食道、胃、腸、直腸、肛門など）、または他の上皮表面からの感染を一掃しようとする場合には特に深刻であり得る。
【００１２】
特に問題であるのは、細菌性バイオフィルムを含む感染であり、これは、遊離した単細胞（「プランクトン様」）細菌が細胞間接着により集合して、著しく異なる挙動パターン、遺伝子発現、および抗生物質を含めた環境因子に対する感受性を有する組織化された多細胞群生（バイオフィルム）となる、比較的最近に認識された細胞の組織化である。バイオフィルムは、プランクトン様細菌においては見られない生物学的防御機構を展開し得、この機構は、抗生物質および宿主免疫応答に対してバイオフィルム群生を保護することができる。確立されたバイオフィルムは、創傷−治癒プロセスを阻み得る。
【００１３】
慢性非治癒創傷の研究により、微生物性バイオフィルムが大部分の場合において容易に検出可能であることが実証されており、米国疾病管理センター（ＣＤＣ）は、西欧諸国における感染の最大で７０％がバイオフィルムに関連していることを報告している。バイオフィルムは、急性創傷よりも慢性創傷においてより一般的であることが報告されている（Ｊａｍｅｓら、２００８  Ｗｏｕｎｄ  Ｒｅｐ．ａｎｄ  Ｒｅｇｅｎ．１６：３７−４４）。一般的な微生物創傷の汚染物質として、ＭＲＳＡ（メチシリン耐性黄色ブドウ球菌）、腸球菌、大腸菌、緑膿菌、連鎖球菌、およびアシネトバクター・バウマンニを含めた黄色ブドウ球菌が挙げられる。これらの有機体のいくつかは、非栄養臨床表面において数ヶ月にわたって生き残る能力を示す。黄色ブドウ球菌は、乾燥ガラス上で４週間、乾血および綿花上で３〜６ヶ月にわたって生存可能であることが示されている（Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、１９９９  Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．６７：６６４−６６９）。大腸菌および緑膿菌は、いずれも、乾血および綿花上で黄色ブドウ球菌よりもさらに長く生き残ることが示されている（同書）。
【００１４】
微生物性バイオフィルムは、殺菌剤および抗生物質の両方に対する実質的に増加した耐性に関連している。バイオフィルム形態は、細菌および／または菌類が表面に吸着するときに生じる。この吸着は、変更された遺伝子転写を誘発し、結果として、微生物を保護している多糖類マトリックスを貫通するのに極めて反発しかつ困難である分泌をもたらす。バイオフィルムは、抗生物質に対する非常に大きな耐性に加えて、哺乳動物免疫系に非常に耐性がある。バイオフィルムは、一旦確立されると全滅させるのが非常に困難であるため、バイオフィルム形成の防止は、非常に重要な臨床優先性である。最近の研究では、開放創傷がバイオフィルムによって迅速に汚染され得ることが示されている。これらの微生物性バイオフィルムは、創傷治癒を遅くすると考えられ、深刻な創傷感染の確立に非常に関係していると思われる。
【００１５】
軍事創傷のケアのための現在のガイドラインには、例えば、激しく完全な灌注および壊死組織切除が明記されている（Ｂｌａｎｋｅｎｓｈｉｐ  ＣＬ、Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  ｃａｒｅ  ｏｆ  ｏｐｅｎ  ｃｏｍｂａｔ  ｃａｓｕａｌｔｙ  ｗｏｕｎｄｓ、Ｆｌｅｅｔ  Ｏｐｅｒａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｓｕｐｐｏｒｔ．Ｕ．Ｓ．Ｂｕｒｅａｕ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ａｎｄ  Ｓｕｒｇｅｒｙ）。この早期の介入は、重要であるが、感染の発達を防止するには適切でない。さらなる治療工程が壊死組織切除に続いて行われて、治癒を促進させ、微生物性バイオバーデンを低減し、これにより創傷感染および創傷バイオフィルムを確立する機会を低減する必要がある。
【００１６】
軍事外傷性創傷の複雑な性質のために、異物および他の環境汚染因子の導入を特に考慮すると、感染の可能性は大きい。軍事および臨床環境の両方（これらの環境の両方にいる人々を含む）が、特に、開放創傷および／または複雑な創傷に悩まされるものに対して、潜在的に病原性の重要な微生物源として作用する。外科的創傷および軍事創傷を含めた急性および慢性創傷は、感染に対する体の主要な防御およびバリアである皮膚を既に損なっている。したがって、創傷は、体の内部（湿潤および栄養環境）を日和見および病原性感染に曝している。これらの感染の多く、特に持続性の創傷感染は、慢性創傷によるケースであると示されているときには、バイオフィルム形成に関係していると思われる（Ｊａｍｅｓら、２００８）。病院での創傷の感染は、院内感染の最も一般的な原因の１つを構成し、軍事および自然災害環境においてもたらされた創傷は、微生物性汚染に特に感受性である。軍事創傷は、組織損傷に典型的には関連し、広く深い傾向があり、異物を導入して局所的な血液供給を妨害し得、破砕および熱傷に関連し得、ショックおよび損なわれた免疫防御をもたらし得るため、感染にかかりやすい。
【００１７】
皮膚構造および創傷治癒
無傷の機能的な皮膚および他の上皮組織（例えば、有機体とその外部環境との間にバリアを形成する概して無血管の上皮表面、例えば、皮膚において見られるもの、さらには呼吸器および消化管のライニング、腺組織などにおいても見られるもの）の維持は、ヒトおよび他の動物の健康および生存に有意である。皮膚は、ヒトおよび他の高等脊椎動物（例えば、哺乳動物）において最大の体器官であり、そのバリア機能、機械的強度および水への不浸透性を通して環境障害に対して保護している。皮膚は、有意な環境界面として、生理的平衡の維持を可能にする保護的な体被覆を提供する。
【００１８】
皮膚構造は、よく知られている。手短に言うと、表皮である皮膚外層は、角質層、表皮皮膚細胞（例えば、ケラチノサイト）の保護層および細胞外結合組織タンパク質によって被覆されている。表皮は、下層の表皮顆粒細胞、有棘細胞、および基底細胞層から押し上げられる新しい物質によって置き換えられるとき剥がれ落ちる連続プロセスを受け、ここで、連続的な細胞分裂およびタンパク質合成によって、新しい皮膚細胞および皮膚タンパク質（例えば、ケラチン、コラーゲン）が生成される。真皮は、表皮の下部にあって、集合して細胞外マトリックスとなる、結合組織タンパク質（例えば、コラーゲン、エラスチンなど）の真皮線維芽細胞、および皮膚に柔軟性、強度および弾力性を付与する線維構造による緻密さに関する部位である。真皮には、神経、血管、平滑筋細胞、毛包および皮脂腺も存在する。
【００１９】
身体防御の最前線として、皮膚は、その構造および機能を変更し得る臨床損傷、例えば、物理的、機械的、化学的および生物学的（例えば、生体異物、自己免疫）攻撃の主な標的である。皮膚はまた、有機体の免疫学的防御の重要な成分ともみなされている。皮膚において、移動かつ内在する白血球（例えば、リンパ球、マクロファージ、マスト細胞）および強力な抗原提示活性を有する表皮樹状（ランゲルハンス）細胞を見ることができ、これらは、免疫学的保護に寄与する。基底層における着色したメラニン細胞は、潜在的に有害な紫外（ＵＶ）線を吸収する。皮膚の崩壊は日和見感染、不完全もしくは不適切な組織再形成、瘢痕化、可動性の低下、疼痛および／または他の合併症に関連するリスクを含めた望ましくないリスクを対象に与える。皮膚と同様に、他の上皮表面（例えば、呼吸器、消化管および腺のライニング）は、感染または他の崩壊が深刻な健康上のリスクを与える可能性があるような健康なときに規定される構造的特質を有する。
【００２０】
損傷または破壊された皮膚は、例えば、切断、擦り傷、剥離、穿刺、熱傷（化学的熱傷を含む）、感染、最高最低気温、切開（例えば、外科的切開）、外傷および他の損傷などの創傷から生じ得る。したがって、創傷治癒を介した効率的な皮膚修復が、これらおよび類似の状況において明らかに望ましい。
【００２１】
皮膚は多くのタイプの損傷後に顕著な自己修復能力を生来示すが、皮膚治癒が十分迅速に起こらない、および／または不適切な細胞組織修復機構によって、完全性、バリア特性、機械的強度、弾力性、柔軟性、もしくは損傷していない皮膚の他の望ましい特性に結果として欠くこととなり得る不完全に再形成された皮膚を生ずる、複数の状況が依然として存在する。したがって、皮膚創傷治癒は、例えば、慢性創傷の状況において、このような関連する課題を提示する。
【００２２】
創傷治癒は、３つの活動期および重複期において起こり、フィブリン血栓の形成により開始する。血栓は、一時的な遮蔽体、および細胞を創傷内に引き付ける、成長因子のリザーバを提供する。血栓はまた、細胞が修復の間に侵入する一時的な細胞外マトリックス（ＥＣＭ）としても機能する。炎症期は、血栓形成と混同されており、早期の治癒応答を増幅する成長因子を放出しながら創傷の破片および細菌を取り除く食細胞および好中球の創傷内への浸潤によって特徴付けられる。剥離領域を回復させるプロセスは、治癒の増殖期によって開始され、免疫細胞から分泌されていて血栓内で濃縮されるケモカイン、サイトカイン、およびプロテアーゼによって駆動される。ケラチノサイトは、刺激されて増殖および遊走し、創傷を被覆する新しい上皮層を形成するが、創傷血管形成は、酸素、栄養素、および炎症細胞を創傷領域に送達する。再形成期は、創傷修復の最終期であり、結合組織収縮を促進し、創傷強度を増加し、傷跡を形成するＥＣＭを堆積する筋線維芽細胞によって実施される（Ｍａｒｔｉｎ、Ｐ．Ｗｏｕｎｄ  Ｈｅａｌｉｎｇ−Ａｉｍｉｎｇ  ｆｏｒ  Ｐｅｒｆｅｃｔ  Ｓｋｉｎ  Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ．  Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９９７；４：７５−８０）。
【００２３】
ビスマス−チオール（ＢＴ）系消毒薬
抗菌特性、特に抗細菌特性を有する多数の天然物（例えば、抗生物質）および合成化学物質が当該分野において知られており、化学的構造によって、および抗微生物効果、例えば、微生物を殺す能力（「殺生」効果、例えば、殺菌特性）、微生物成長を停止もしくは低下させる能力（「静的」効果、例えば、静菌特性）、あるいは微生物機能、例えば、部位のコロニー形成もしくは感染、エキソ多糖類の細菌性分泌および／もしくはプランクトンからバイオフィルム集団への転換、またはバイオフィルム形成の拡大を妨害する能力によって、少なくとも部分的に特徴付けられる。抗生物質、殺菌剤、消毒薬など（ビスマス−チオールまたはＢＴ化合物を含む）は、このような組成物の選択および使用に影響する因子、例えば、殺菌または静菌効能、効果的な濃度および宿主組織への毒性のリスクを含めて、例えば、米国特許第６，５８２，７１９号に議論されている。
【００２４】
Ｖ群金属であるビスマスは、（銀のように）抗微生物特性を保有する元素である。ビスマス自体は、治療的に有用であり得ず、ある不適切な特性を示し得るため、代わりに、錯化剤、担体、および／または他のビヒクルを含む送達手段によって典型的には投与され得、その最も一般的な例は、Ｐｅｐｔｏ  Ｂｉｓｍｏｌ（登録商標）であり、ビスマスが次サリチル酸塩と組み合わされている（キレート化されている）。以前の研究によって、例示的なビスマスチオール（ＢＴ）化合物を提供する、あるチオール−（−ＳＨ、スルフヒドリル）含有化合物、例えばエタンジチオールとビスマスとの組み合わせが、現在利用可能な他のビスマス調製物と比較して、ビスマスの抗微生物効能を改善することが判明している。ＢＴを生成するのに用いられ得る多くのチオール化合物が存在し（例えば、Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、２００１  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐ．４５（５）：１４１７−１４２１、Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、１９９７  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４１（８）：１６９７−１７０３において、ならびにＵＳ．ＲＥ３７，７９３号、米国特許第６，２４８，３７１号、米国特許第６，０８６，９２１号、および米国特許第６，３８０，２４８号において開示されており；例えば、米国特許第６，５８２，７１９号も参照されたい）、これらの調製物のいくつかは、バイオフィルム形成を阻害することができる。
【００２５】
ＢＴ化合物は、ＭＲＳＡ（メチシリン耐性黄色ブドウ球菌）、ＭＲＳＥ（メチシリン耐性表皮ブドウ球菌）、結核菌、トリ結核菌、薬剤耐性緑膿菌、腸管毒素原性大腸菌、腸管出血性大腸菌、肺炎桿菌、クロストリジウム・ディフィシル、ヘリコバクター・ピロリ、レジオネラ・ニューモフィラ、大便連鎖球菌、エンテロバクター・クロアカエ、ネズミチフス菌、尋常変形菌、エンテロコリチカ菌、コレラ菌、およびフレキシナ赤痢菌に対する活性が証明されている（Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、１９９７  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４１：１６９７−１７０３）。サイトメガロウイルス、単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ−１）およびＨＳＶ−２、ならびに酵母菌および真菌、例えば、カンジダ・アルビカンスに対する活性の証拠も存在する。ＢＴの役割は、細菌病原性を低減する、広範囲スペクトルの抗生物質耐性微生物（グラム陽性およびグラム陰性）を阻害するまたは殺す、バイオフィルム形成を防止する、敗血性ショックを防止する、敗血症を処置する、以前に耐性を示した抗生物質に対する細菌感受性を増加させる際にも実証されている（例えば、Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、２００１  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４５：１４１７−１４２１；Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、２０００  Ｉｎｆｅｃｔ．Ｍｅｄ．１７：１２３−１２７；Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、２００３  Ｒｅｓ．Ａｄｖ．Ｉｎ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ＆Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．３：７９−８５；Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、１９９７  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４１（８）：１６９７−１７０３；Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、１９９９  Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．６７：６６４−６６９：Ｈｕａｎｇら  １９９９  Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４４：６０１−６０５；Ｖｅｌｏｉｒａら、２００３  Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．５２：９１５−９１９；Ｗｕら、２００２  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｅｌｌ  ＭｏＩ  Ｂｉｏｌ．２６：７３１−７３８）を参照されたい）。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２６】
ＢＴ化合物の利用可能性にも関わらず、１０年以上もの間、特定の感染性疾患適応症に適切なＢＴ化合物の効果的な選択はとらえにくい目標であり続けており、特定の微生物に対する特定のＢＴの挙動が予測され得ず、特定の微生物に対する特定のＢＴと特定の抗生物質との相乗活性が予測され得ず、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでのＢＴ効果がｉｎ  ｖｉｖｏでのＢＴ効果を常に予測し得ず、プランクトン様（単細胞）微生物集団に対するＢＴ効果が、微生物群生、例えば、バイオフィルム内に組織化された細菌に対するＢＴ効果を予測し得ない。さらに、溶解性、組織透過性、生物学的利用能、生体分布などにおける制限は、いくつかのＢＴ化合物の場合において、臨床利益を安全かつ効果的に送達する能力を妨害し得る。本開示の発明の実施形態は、これらの要求に対処し、他の関係する利点を付与する。
【課題を解決するための手段】
【００２７】
本明細書において初めて開示されるように、理論によって拘束されることを望まないが、本明細書に記載されているある実施形態によると、ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物は、急性創傷、慢性創傷、および／または細菌性バイオフィルムを含有する創傷の処置での使用のための消毒剤として用いられ得、したがって、このような創傷の処置の間に発生するコストも減少させながら、このような創傷（例えば、持続性慢性創傷）によって悪影響を受ける人々の数を減少させ得る。また、ある実施形態において、急性創傷、慢性創傷、および／または細菌性バイオフィルムもしくはバイオフィルム形成に関係する細菌（例えば、バイオフィルムを形成もしくはさもなければ促進する可能性がある細菌）を含有する創傷もしくは他の上皮組織表面を処置するための局所製剤が意図され、これらの製剤は、本明細書に記載されているように、１種以上のＢＴ化合物および１種以上の抗生物質化合物を含み、ここで、非限定的な理論によると、本開示に基づいた、適宜選択されるＢＴ化合物（複数可）および抗生物質（複数可）の組み合わせは、急性創傷、慢性創傷、および／または細菌性バイオフィルムを含有する創傷の治療的に有効な処置に関して、このような製剤の抗細菌（抗バイオフィルムを含む）効果においてこれまで予測されなかった相乗効果を提供する。また、実質的に単分散の微粒子懸濁液を含む先例のないビスマス−チオール組成物、ならびにこれらの合成および使用方法も、本明細書において初めて提供される。
【００２８】
したがって、本明細書に記載されている本発明のある実施形態によると、ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含み、実質的に全ての上記微粒子が、約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有するビスマス−チオール組成物であって、ＢＴ化合物がビスマスまたはビスマス塩およびチオール含有化合物を含むビスマス−チオール組成物が提供される。別の実施形態において、ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含み、実質的に全ての上記微粒子が、約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有し、かつ（ａ）固体沈澱が実質的に遊離した溶液を得るのに十分な条件下および時間にわたって、（ｉ）ビスマスを含むビスマス塩を少なくとも５０ｍＭの濃度で含み、親水性、極性または有機溶解剤を含まない酸性水溶液を、（ｉｉ）少なくとも約５体積％、１０体積％、１５体積％、２０体積％、２５体積％または３０体積％のエタノールを含む混合物を得るのに十分な量のエタノールと混合すること；ならびに（ｂ）（ａ）の混合物を、チオール含有化合物を含むエタノール溶液に添加して反応溶液を得ることを含むプロセスによって形成される、ビスマス−チオール組成物であって、チオール含有化合物が、ＢＴ化合物を含有する微粒子を含む沈澱の形成に十分な条件下および時間にわたって、ビスマスに対して約１：３〜約３：１のモル比で反応溶液中に存在する、ビスマス−チオール組成物が提供される。ある実施形態において、ビスマス塩は、Ｂｉ（ＮＯ３）３である。ある実施形態において、酸性水溶液は、少なくとも５重量％、１０重量％、１５重量％、２０重量％、２２重量％または２２．５重量％のビスマスを含む。ある実施形態において、酸性水溶液は、少なくとも０．５重量％、１重量％、１．５重量％、２重量％、２．５重量％、３重量％、３．５重量％、４重量％、４．５重量％または５重量％の硝酸を含む。ある実施形態において、チオール含有化合物は、１，２−エタンジチオール、２，３−ジメルカプトプロパノール、ピリチオン、ジチオエリスリトール、３，４−ジメルカプトトルエン、２，３−ブタンジチオール、１，３−プロパンジチオール、２−ヒドロキシプロパンチオール、１−メルカプト−２−プロパノール、ジチオエリスリトール、アルファ−リポ酸およびジチオスレイトールから選択される１種以上の剤を含む。
【００２９】
別の実施形態において、ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含み、実質的に全ての上記微粒子が約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有する、ビスマス−チオール組成物を調製するための方法であって、（ａ）固体沈澱が実質的に遊離した溶液を得るのに十分な条件下および時間にわたって、（ｉ）ビスマスを含むビスマス塩を少なくとも５０ｍＭの濃度で含み、親水性、極性または有機溶解剤を含まない酸性水溶液を、（ｉｉ）少なくとも約５体積％、１０体積％、１５体積％、２０体積％、２５体積％または３０体積％のエタノールを含む混合物を得るのに十分な量のエタノールと混合する工程と；（ｂ）（ａ）の混合物を、チオール含有化合物を含むエタノール溶液に添加して、反応溶液を得る工程とを含み、チオール含有化合物が、ＢＴ化合物を含む微粒子を含む沈澱の形成に十分な条件下および時間にわたって、ビスマスに対して約１：３〜約３：１のモル比で反応溶液中に存在する、方法が提供される。ある実施形態において、該方法は、沈澱を回収して不純物を除去することをさらに含む。ある実施形態において、ビスマス塩は、Ｂｉ（ＮＯ３）３である。ある実施形態において、酸性水溶液は、少なくとも５重量％、１０重量％、１５重量％、２０重量％、２２重量％または２２．５重量％のビスマスを含む。ある実施形態において、酸性水溶液は、少なくとも０．５重量％、１重量％、１．５重量％、２重量％、２．５重量％、３重量％、３．５重量％、４重量％、４．５重量％または５重量％の硝酸を含む。ある実施形態において、チオール含有化合物は、１，２−エタンジチオール、２，３−ジメルカプトプロパノール、ピリチオン、ジチオエリスリトール、３，４−ジメルカプトトルエン、２，３−ブタンジチオール、１，３−プロパンジチオール、２−ヒドロキシプロパンチオール、１−メルカプト−２−プロパノール、ジチオエリスリトール、ジチオスレイトールおよびアルファ−リポ酸からなる群から選択される１種以上の剤を含む。
【００３０】
別の実施形態において、細菌性病原体に対して上皮組織表面を保護するための方法であって、（ｉ）細菌性病原体による上皮組織表面の感染の防止、（ｉｉ）細菌性病原体の実質的に全てのプランクトン様細胞の細胞生存性または細胞成長の阻害、（ｉｉｉ）細菌性病原体によるバイオフィルム形成の阻害、および（ｉｖ）細菌性病原体の実質的に全てのバイオフィルム形態細胞のバイオフィルム生存性またはバイオフィルム成長の阻害のうちの１つ以上に十分な条件下および時間にわたって、上皮組織表面を有効量のＢＴ組成物と接触させることを含み、ＢＴ組成物は、ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含み、実質的に全ての上記微粒子が、約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有する、方法が提供される。ある実施形態において、細菌性病原体は、黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、ＭＲＳＡ（メチシリン耐性黄色ブドウ球菌）、表皮ブドウ球菌、ＭＲＳＥ（メチシリン耐性表皮ブドウ球菌）、結核菌、トリ結核菌、緑膿菌、薬剤耐性緑膿菌、大腸菌、腸管毒素原性大腸菌、腸管出血性大腸菌、肺炎桿菌、クロストリジウム・ディフィシル、ヘリコバクター・ピロリ、レジオネラ・ニューモフィラ、大便連鎖球菌、メチシリン感受性大便連鎖球菌、エンテロバクター・クロアカエ、ネズミチフス菌、尋常変形菌、エンテロコリチカ菌、ビブリオ・コレラ、フレキシナ赤痢菌、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）、セパシア菌群、野兎病菌、炭疽菌、ペスト菌、緑膿菌、バンコマイシン耐性腸球菌、およびアシネトバクター・バウマンニから選択される。ある実施形態において、細菌性病原体は、抗生物質耐性を示す。ある実施形態において、細菌性病原体は、メチシリン、バンコマイシン、ナフィシリン、ゲンタマイシン、アンピシリン、クロラムフェニコール、ドキシサイクリンおよびトブラマイシンから選択される抗生物質に耐性を示す。
【００３１】
ある実施形態において、上皮組織表面は、表皮、真皮、呼吸器、消化管および腺のライニングから選択される組織を含む。ある実施形態において、接触工程は、１回または複数回実施される。ある実施形態において、少なくとも１回の接触工程は、上皮組織表面に噴霧すること、灌注すること、浸漬することおよび塗布することの１つを含む。ある実施形態において、少なくとも１回の接触工程は、吸入、摂取および経口灌注の１つを含む。ある実施形態において、少なくとも１回の接触工程は、局所、腹腔内、経口、非経口、静脈内、動脈内、経皮、舌下、皮下、筋肉内、経口腔、鼻腔内、吸入による、眼内、耳介内、脳室内、皮下、脂肪内、関節内およびくも膜下腔内から選択される経路による投与を含む。ある実施形態において、ＢＴ組成物は、ＢｉｓＢＡＬ、ＢｉｓＥＤＴ、ビス−ジメルカプロール、Ｂｉｓ−ＤＴＴ、ビス−２−メルカプトエタノール、Ｂｉｓ−ＤＴＥ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ、Ｂｉｓ−Ｅｒｙ、Ｂｉｓ−Ｔｏｌ、Ｂｉｓ−ＢＤＴ、Ｂｉｓ−ＰＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｂａｌ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＢＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＥＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＰＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｔｏｌ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｅｒｙ、ビスマス−１−メルカプト−２−プロパノール、およびＢｉｓ−ＥＤＴ／２−ヒドロキシ−１−プロパンチオールからなる群から選択され１種以上のＢＴ化合物を含む。
【００３２】
ある実施形態において、細菌性病原体は、抗生物質耐性を示す。ある他の実施形態において、上記の方法は、上皮組織表面をＢＴ組成物と接触させる工程と同時または連続して任意の順序で、上皮組織表面を相乗作用のある抗生物質と接触させることをさらに含む。ある実施形態において、相乗作用のある抗生物質は、アミノグルコシド抗生物質、カルバペネム抗生物質、セファロスポリン抗生物質、フルオロキノロン抗生物質、グリコペプチド抗生物質、リンコサミド抗生物質、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン抗生物質、およびアミノペニシリン抗生物質から選択される抗生物質を含む。ある実施形態において、相乗作用のある抗生物質は、アミカシン、アルベカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、パロモマイシン、ロドストレプトマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシンおよびアプラマイシンから選択されるアミノグルコシド抗生物質である。
【００３３】
本明細書に記載されている本発明の他の実施形態において、抗生物質耐性細菌性病原体が存在する上皮組織表面において、抗生物質耐性を（例えば、同じ細菌種の細菌に対して抗細菌効果を有することが知られている少なくとも１種の抗生物質の少なくとも１種の抗細菌効果に耐性があり、抗生物質に対するこのような病原体感受性を付与する、細菌性病原体について）克服するための方法であって、上皮組織表面を、有効量の（１）少なくとも１種のビスマス−チオール（ＢＴ）組成物および（２）少なくとも１種のＢＴ組成物と相乗的に作用することができる少なくとも１種の抗生物質と同時または連続して任意の順序で、（ｉ）細菌性病原体による上皮組織表面の感染の防止、（ｉｉ）細菌性病原体の実質的に全てのプランクトン様細胞の細胞生存性または細胞成長の阻害、（ｉｉｉ）細菌性病原体によるバイオフィルム形成の阻害、および（ｉｖ）細菌性病原体の実質的に全てのバイオフィルム形態細胞のバイオフィルム生存性またはバイオフィルム成長の阻害の１つ以上に十分な条件下および時間にわたって接触させることを含み、ＢＴ組成物は、ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含み、実質的に全ての上記微粒子が約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有し；これにより、上皮組織表面における抗生物質耐性を克服することを含む方法が提供される。ある実施形態において、細菌性病原体は、黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、ＭＲＳＡ（メチシリン耐性黄色ブドウ球菌）、表皮ブドウ球菌、ＭＲＳＥ（メチシリン耐性表皮ブドウ球菌）、結核菌、トリ結核菌、緑膿菌、薬剤耐性緑膿菌、大腸菌、腸管毒素原性大腸菌、腸管出血性大腸菌、肺炎桿菌、クロストリジウム・ディフィシル、ヘリコバクター・ピロリ、レジオネラ・ニューモフィラ、大便連鎖球菌、メチシリン−感受性大便連鎖球菌、エンテロバクター・クロアカエ、ネズミチフス菌、尋常変形菌、エンテロコリチカ菌、ビブリオ・コレラ、フレキシナ赤痢菌、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）、セパシア菌群、野兎病菌、炭疽菌、ペスト菌、緑膿菌、バンコマイシン耐性腸球菌、およびアシネトバクター・バウマンニから選択される。
【００３４】
ある実施形態において、細菌性病原体は、メチシリン、バンコマイシン、ナフィシリン、ゲンタマイシン、アンピシリン、クロラムフェニコール、ドキシサイクリン、トブラマイシン、クリンダマイシンおよびガチフロキサシンから選択される抗生物質に耐性を示す。ある実施形態において、上皮組織表面は、表皮、真皮、呼吸器、消化管および腺のライニングからなる群から選択される組織を含む。ある実施形態において、接触工程は、１回または複数回実施される。ある実施形態において、少なくとも１回の接触工程は、上皮組織表面に噴霧すること、灌注すること、浸漬することおよび塗布することの１つを含む。ある他の実施形態において、少なくとも１回の接触工程は、吸入、摂取および経口灌注の１つを含む。ある実施形態において、少なくとも１回の接触工程は、局所、腹腔内、経口、非経口、静脈内、動脈内、経皮、舌下、皮下、筋肉内、経口腔、鼻腔内、吸入による、眼内、耳介内、脳室内、皮下、脂肪内、関節内およびくも膜下腔内から選択される経路による投与を含む。ある実施形態において、ＢＴ組成物は、ＢｉｓＢＡＬ、ＢｉｓＥＤＴ、ビス−ジメルカプロール、Ｂｉｓ−ＤＴＴ、ビス−２−メルカプトエタノール、Ｂｉｓ−ＤＴＥ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ、Ｂｉｓ−Ｅｒｙ、Ｂｉｓ−Ｔｏｌ、Ｂｉｓ−ＢＤＴ、Ｂｉｓ−ＰＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｂａｌ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＢＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＥＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＰＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｔｏｌ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｅｒｙ、ビスマス−１−メルカプト−２−プロパノール、およびＢｉｓ−ＥＤＴ／２−ヒドロキシ−１−プロパンチオールから選択される１種以上のＢＴ化合物を含む。ある実施形態において、相乗作用のある抗生物質は、クリンダマイシン、ガチフロキサシン、アミノグルコシド抗生物質、カルバペネム抗生物質、セファロスポリン抗生物質、フルオロキノロン抗生物質、グリコペプチド抗生物質、リンコサミド抗生物質、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン抗生物質、およびアミノペニシリン抗生物質から選択される抗生物質を含む。ある実施形態において、相乗作用のある抗生物質は、アミカシン、アルベカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、パロモマイシン、ロドストレプトマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシンおよびアプラマイシンから選択されるアミノグルコシド抗生物質である。
【００３５】
別の実施形態に戻って、対象における急性創傷、慢性創傷または細菌性バイオフィルムを含有する創傷もしくは上皮組織表面を処置する方法であって、対象における創傷部位または上皮組織表面に、（ａ）少なくとも１種のＢＴ化合物および（ｂ）局所使用のための薬学的に許容される賦形剤または担体を含む治療有効量の局所製剤を投与することを含む方法が提供される。別の実施形態において、対象における急性創傷、慢性創傷または細菌性バイオフィルムを含有する創傷もしくは上皮組織表面を処置する方法であって、対象における創傷部位または上皮組織表面に、（ａ）少なくとも１種のＢＴ化合物、（ｂ）ＢＴ化合物と相乗的に作用することができる少なくとも１種の抗生物質化合物、および（ｃ）局所使用のための薬学的に許容される賦形剤または担体を含む治療有効量の局所製剤を投与することを含む方法が提供される。
【００３６】
ある実施形態において、ＢＴ化合物は、ＢｉｓＢＡＬ、ＢｉｓＥＤＴ、ビス−ジメルカプロール、Ｂｉｓ−ＤＴＴ、ビス−２−メルカプトエタノール、Ｂｉｓ−ＤＴＥ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ、Ｂｉｓ−Ｅｒｙ、Ｂｉｓ−Ｔｏｌ、Ｂｉｓ−ＢＤＴ、Ｂｉｓ−ＰＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｂａｌ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＢＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＥＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＰＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｔｏｌ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｅｒｙ、ビスマス−１−メルカプト−２−プロパノール、およびＢｉｓ−ＥＤＴ／２−ヒドロキシ−１−プロパンチオールから選択される。ある実施形態において、ＢＴ組成物は、ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含み、実質的に全ての上記微粒子が約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有する。ある実施形態において、ＢＴ化合物は、ＢｉｓＥＤＴおよびＢｉｓＢＡＬから選択される。ある実施形態において、創傷は、細菌感染を含有する急性創傷または慢性創傷である。ある実施形態において、細菌感染は、グラム陽性細菌およびグラム陰性細菌のうちの１種以上を含む。ある実施形態において、細菌感染は、細菌性バイオフィルムおよびプランクトン様細菌から選択される少なくとも１つの細菌集団を含む。ある実施形態において、抗生物質化合物は、アミノグルコシド抗生物質、カルバペネム抗生物質、セファロスポリン抗生物質、フルオロキノロン抗生物質、グリコペプチド抗生物質、リンコサミド抗生物質、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン抗生物質およびアミノペニシリン抗生物質から選択される抗生物質を含む。ある実施形態において、抗生物質は、アミカシン、アルベカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、パロモマイシン、ロドストレプトマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシンおよびアプラマイシンから選択されるアミノグルコシド抗生物質である。ある実施形態において、アミノグルコシド抗生物質は、アミカシンである。
【００３７】
別の実施形態に戻って、急性創傷、慢性創傷または細菌性バイオフィルムを含有する創傷もしくは上皮組織表面を処置するための消毒剤組成物であって、（ａ）少なくとも１種のＢＴ化合物；（ｂ）ＢＴ化合物と相乗的に作用することができる少なくとも１種の抗生物質化合物；および（ｃ）局所使用のための薬学的に許容される賦形剤または担体を含む消毒剤組成物が提供される。ある実施形態において、ＢＴ化合物は、ＢｉｓＢＡＬ、ＢｉｓＥＤＴ、ビス−ジメルカプロール、Ｂｉｓ−ＤＴＴ、ビス−２−メルカプトエタノール、Ｂｉｓ−ＤＴＥ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ、Ｂｉｓ−Ｅｒｙ、Ｂｉｓ−Ｔｏｌ、Ｂｉｓ−ＢＤＴ、Ｂｉｓ−ＰＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｂａｌ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＢＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＥＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＰＤＴ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｔｏｌ、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｅｒｙ、ビスマス−１−メルカプト−２−プロパノール、およびＢｉｓ−ＥＤＴ／２−ヒドロキシ−１−プロパンチオールから選択される。ある実施形態において、ＢＴ組成物は、ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子を含み、実質的に全ての上記微粒子が約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有する。ある実施形態において、ＢＴ化合物は、ＢｉｓＥＤＴおよびＢｉｓＢＡＬから選択される。ある実施形態において、抗生物質化合物は、メチシリン、バンコマイシン、ナフィシリン、ゲンタマイシン、アンピシリン、クロラムフェニコール、ドキシサイクリン、トブラマイシン、クリンダマイシン、ガチフロキサシンおよびアミノグルコシド抗生物質から選択される抗生物質を含む。ある実施形態において、アミノグルコシド抗生物質は、アミカシン、アルベカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、パロモマイシン、ロドストレプトマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシンおよびアプラマイシンから選択される。ある実施形態において、アミノグルコシド抗生物質は、アミカシンである。
【００３８】
ある他の実施形態において、急性創傷、慢性創傷または細菌性バイオフィルムを含有する創傷もしくは上皮組織表面を処置するための方法であって、（ａ）（ｉ）グラム陽性細菌、（ｉｉ）グラム陰性細菌、ならびに（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の両方のうちのいずれかを含むとして、対象における創傷または上皮組織表面中の細菌感染を識別すること；ならびに（ｂ）１種以上のビスマスチオール（ＢＴ）組成物を含む局所製剤を創傷に投与することを含み、（ｉ）細菌感染がグラム陽性細菌を含むとき、製剤が、治療有効量の少なくとも１種のＢＴ化合物およびリファマイシンである少なくとも１種の抗生物質を含み、（ｉｉ）細菌感染がグラム陰性細菌を含むとき、製剤が、治療有効量の少なくとも１種のＢＴ化合物およびアミカシンを含み、（ｉｉｉ）細菌感染が、グラム陽性細菌およびグラム陰性細菌の両方を含むとき、製剤が、治療有効量の１種または複数種のＢＴ化合物、リファマイシンおよびアミカシンを含み、これにより、創傷または上皮組織表面を処置する方法が提供される。ある実施形態において、創傷の処置は、慢性創傷の進行から生じるニューロパシーを防止する。ある実施形態において、細菌感染は、１種または複数種の抗生物質耐性細菌を含む。ある実施形態において、創傷は、静脈性潰瘍、褥瘡、糖尿病性潰瘍、褥瘡性潰瘍、銃弾による創傷、刺創、散弾による創傷、虚血性創傷、外科的創傷、外傷性創傷、急性動脈不全、壊死性筋膜炎、骨髄炎、放射線中毒から生じる創傷、放射線骨壊死、柔組織放射線壊死、壊疽性膿皮症、壊疽創傷、熱傷、経皮感染および悪性腫瘍からなる群から選択される。ある実施形態において、創傷は、細菌性バイオフィルムを含む急性創傷または慢性創傷である。ある実施形態において、創傷の処置は：（ｉ）細菌性バイオフィルムの根絶、（ｉｉ）細菌性バイオフィルムの低減、および（ｉｉｉ）細菌性バイオフィルムの成長の低下のうち少なくとも１つを含む。ある実施形態において、ＢＴ組成物は、ビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む複数の微粒子含み、実質的に全ての上記微粒子が約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有する。
【００３９】
本明細書に記載されている発明の実施形態のこれらおよび他の態様は、以下の詳細な説明および添付の図面を参照すると明らかであろう。ＵＳ．ＲＥ３７，７９３号、米国特許第６，２４８，３７１号、米国特許第６，０８６，９２１号、および米国特許第６，３８０，２４８号を含めて、この明細書において参照されおよび／または出願データシートに列挙された米国特許、米国特許出願公報、米国特許出願、外国特許、外国特許出願および非特許公報の全ては、それぞれがあたかも個々に組み込まれているかのように、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。本発明の態様および実施形態は、必要に応じて改変されて、種々の特許、出願および公報の概念を使用して、なおさらなる実施形態を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】１０％トリプティックソイ寒天（ＴＳＡ）において３７℃で２４時間成長させた後、１８時間、表示した処置を行った緑膿菌コロニーバイオフィルムからの生存数（ｌｏｇ  ＣＦＵ；コロニー形成ユニット）を示す。表示した抗生物質処置は、ＴＯＢ、トブラマイシン１０Ｘ  ＭＩＣ；ＡＭＫ、アミカシン１００Ｘ  ＭＩＣ；ＩＰＭ、イミペネム１０Ｘ  ＭＩＣ；ＣＥＦ、セフェピム１０Ｘ  ＭＩＣ；ＣＩＰ、シプロフロキサシン１００Ｘ  ＭＩＣ；Ｃｐｄ２Ｂ、化合物２Ｂ（Ｂｉｓ−ＢＡＬ、１：１．５）である。（ＭＩＣ；最小阻害濃度、例えば、細菌成長を防止する最低濃度）
【図２】１０％トリプティックソイ寒天において２４時間成長させた後、表示した処置を行った黄色ブドウ球菌コロニーバイオフィルムからの生存数（ｌｏｇ  ＣＦＵ）を示す。表示した抗生物質処置は、リファンピシン、ＲＩＦ  １００Ｘ  ＭＩＣ；ダプトマイシン、ＤＡＰ３２０Ｘ  ＭＩＣ；ミノサイクリン、ＭＩＮ  １００Ｘ  ＭＩＣ；アンピシリン、ＡＭＣ１０Ｘ  ＭＩＣ；バンコマイシン、ＶＡＮ  １０Ｘ  ＭＩＣ；Ｃｐｄ２Ｂ、化合物２Ｂ（Ｂｉｓ−ＢＡＬ、１：１．５）、Ｃｐｄ８−２、化合物８−２（Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＢＤＴ（１：１／０．５）である。
【図３】バイオフィルムに曝したケラチノサイトの経時的な引っ掻き傷の閉鎖を示す。（＊）対照と有意に異なる（Ｐ＜０．００１）
【発明を実施するための形態】
【００４１】
本明細書に開示されている発明の特定の実施形態は、ある他のＢＴ化合物ではなく本明細書に提供されるあるビスマス−チオール（ＢＴ）化合物が、本明細書に提供されるように、急性および／もしくは慢性創傷ならびに／または細菌性バイオフィルムを含有する創傷における、ならびに／または上皮組織表面上における臨床的に有意な感染に関連する特定の細菌に対して強力な消毒活性、抗細菌活性および／または抗バイオフィルム活性を示したという驚くべき発見に基づいている。
【００４２】
意外なことに、全てのＢＴ化合物が、予測可能であるように、このような細菌に対して均一に効果的であったが、代わりに、標的の細菌種に応じて異なる効能を示した。特に、本明細書に記載されているように、あるＢＴ化合物は、グラム陰性細菌に対してより高い効能を示すことが見出された一方で、一定の他のＢＴ化合物は、グラム陽性細菌に対してより大きな効能を示すことが見出されており、これにより、非限定的な理論によると、急性創傷、慢性創傷ならびに／または細菌性バイオフィルムを含有する他の創傷に、ならびに／または上皮組織表面上に存在する細菌感染（細菌性バイオフィルム感染を含む）の管理のための臨床的に関連のある戦略を初めて付与することができるようになっている。
【００４３】
さらに、以下により詳細に記載するように、本明細書に記載されている本発明のある実施形態は、本明細書に開示されているように、（例えば、約０．４μｍ〜約５μｍの体積平均径を有する）粒子サイズに関して実質的に単分散である複数のＢＴ微粒子を含む調製物においてなされ得る、新規のビスマス−チオール（ＢＴ）組成物によって提供される驚くべき利点に関する。
【００４４】
本明細書にも開示されているように、ある実施形態に関して、このような細菌感染に対して治療効果がないことが以前に見出されているある抗生物質の抗細菌および抗バイオフィルム有効性は、選択されたＢＴ化合物に合わせて、これらの抗生物質の１種以上によって感染を処置することによって（例えば、急性もしくは慢性創傷部位上または他の上皮組織表面への直接適用によって）有意に向上（例えば、統計的に有意なように増加）され得ることが発見されている。本開示の前に予測され得たように、あるＢＴ化合物は、ある抗生物質と組み合わされて、ある細菌種または細菌の菌株に対する抗細菌および／または抗バイオフィルム活性との相乗作用のある組み合わせを提供することができる。このような組み合わせの予測されない性質は、以下により詳細に記載するように、あるＢＴ／抗生物質の組み合わせが、ある細菌に対して相乗的に作用したが、ある他のＢＴ／抗生物質の組み合わせは、相乗的な抗細菌および／または抗バイオフィルム活性を示さなかったという観察によって証明される。
【００４５】
これらおよび関係する実施形態によると、抗生物質およびＢＴ化合物は、同時または連続していずれかの順序で投与されてよく、急性または慢性創傷（例えば、グラム陰性またはグラム陽性細菌によって形成されるバイオフィルム）において見出され得るような特定の感染の処置のための、本明細書に開示されている、１種以上の抗生物質および１種以上のＢＴ化合物の特定の組み合わせが、予測可能な（例えば、単に追加の）活性を示さなかったが、代わりに、選択された抗生物質、選択されたＢＴ化合物および具体的に識別された標的の細菌の関数として、意外なことに相乗的に作用したことに注目すべきである。
【００４６】
例えば、細菌により感染した慢性創傷または他の上皮組織表面などの局所投与の文脈において、さらには、改善された実質的に単分散の微粒子ＢＴ製剤の文脈において、本明細書において初めて開示されている説明により、非限定的に、特定の抗生物質化合物および特定のＢＴ化合物のいずれかまたは両方は、特定の細菌の菌株または種に対して単独で用いられるとき限定された抗細菌効果を発揮し得るが、抗生物質化合物およびＢＴ化合物の両方の組み合わせは、同じ細菌の菌株または種に対して強力な抗細菌効果を発揮し、この効果は、単独で用いられるときの各化合物の効果の単純合計よりも（統計的有意性を有して）大きく、したがって、非限定的な理論にしたがって、抗生物質−ＢＴ相乗効果を反映すると考えられる。したがって、全てのＢＴ化合物が全ての抗生物質と相乗作用し得るということではなく、全ての抗生物質が任意のＢＴ化合物と相乗作用し得るということではないが、抗生物質−ＢＴ相乗効果は、概して予測可能でない。代わりに、本明細書に開示されているある実施形態によると、相乗作用のある抗生物質およびＢＴ化合物の特定の組み合わせは、驚くべきことに、特定の環境、例えば皮膚もしくは柔組織および／または上皮組織表面における慢性創傷において、さらにはある状況においては特定の細菌によって形成されるバイオフィルムに対する抗細菌効果を含めて、特定の細菌に対して強力な抗細菌効果を付与する。
【００４７】
すなわち、あるＢＴ−相乗作用のある抗生物質が本明細書に開示されており、本明細書に提供されている少なくとも１種のＢＴ化合物を含む少なくとも１種のＢＴ組成物と相乗的に作用することができる抗生物質を含み、このような相乗効果は、抗生物質は存在するがＢＴ化合物は存在しないとき、および／またはＢＴ化合物は存在するが抗生物質は存在しないときに検出され得る効果よりも大きい（すなわち、適切な対照条件と比較して統計的に有意なように）検出可能な効果として現れる。
【００４８】
このような検出可能な効果の例として、ある実施形態において、（ｉ）細菌性病原体による感染の防止、（ｉｉ）細菌性病原体の実質的に全てのプランクトン様細胞の細胞生存性または細胞成長の阻害、（ｉｉｉ）細菌性病原体によるバイオフィルム形成の阻害、ならびに（ｉｖ）細菌性病原体の実質的に全てのバイオフィルム形態細胞のバイオフィルム生存性またはバイオフィルム成長の阻害を挙げることができるが、本発明は、これに限定されることを意図しておらず、他の意図される実施形態において、抗生物質−ＢＴ相乗効果は、１種以上の検出可能な効果として現れ得るようになっており、該効果として、１種以上の他の臨床的に有意なパラメータの変更（例えば、統計的に有意な増加または減少）、例えば、１種以上の抗生物質または他の薬物もしくは化学剤に対する細菌性病原体の耐性または感度の程度、１種以上の化学的、物理的または機械的条件（例えば、ｐＨ、イオン強度、温度、圧力）に対する細菌性病原体の耐性または感度の程度、および／あるいは１種以上の生物学的因子（例えば、ウイルス、別の細菌、生物学的に活性なポリヌクレオチド、免疫細胞または免疫細胞生成物、例えば、抗体、サイトカイン、ケモカイン、分解酵素を含めた酵素、膜破壊タンパク質、遊離ラジカル、例えば反応性酸素種など）に対する細菌性病原体の耐性または感度の程度を挙げることができる。
【００４９】
当業者は、これらおよび種々の他の基準（相乗作用のある抗生物質−ＢＴの組み合わせの効果が、組み合わせの一方の成分が存在しないときに観察される効果の単なる合計を超えるときに、本明細書に提供されているように存在する抗生物質−ＢＴ相乗効果を確実にする目的で、細菌集団の構造、機能および／または活性に及ぼす特定の因子の効果を決定することができる）を認識するであろう（例えば、Ｃｏｉｃｏら（Ｅｄｓ．）、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ、２００８、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、Ｈｏｂｏｋｅｎ、ＮＪ；Ｓｃｈｗａｌｂｅら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ、２００７、ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ、Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ、ＦＬ）。
【００５０】
例えば、ある実施形態において、相乗効果は、Ｅｌｉｏｐｏｕｌｏｓら（Ｅｌｉｏｐｏｕｌｏｓ  ａｎｄ  Ｍｏｅｌｌｅｒｉｎｇ、（１９９６）Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ．Ｉｎ  Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ  ｉｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（Ｌｏｒｉａｎ、Ｖ．，Ｅｄ．）、ｐｐ．３３０−９６、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ、ＭＤ、ＵＳＡ）にしたがって、抗細菌効果、例えば種々の濃度の候補剤（例えば、個々および組み合わせのＢＴおよび抗生物質）を用いた本明細書に記載されている効果を決定して、分画阻害濃度指数（ＦＩＣＩ）および分画殺菌濃度指数（ＦＢＣＩ）を算出することによって決定され得る。相乗効果は、≦０．５のＦＩＣＩまたはＦＢＣＩ指数として定義され得、＞０．５〜４では相互作用せず、＞４では拮抗作用する（例えば、Ｏｄｄｓ、ＦＣ（２００３）Ｓｙｎｅｒｇｙ、Ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ、ａｎｄ  ｗｈａｔ  ｔｈｅ  ｃｈｅｑｕｅｒｂｏｒａｄ  ｐｕｔｓ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｔｈｅｍ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ５２：１）。相乗効果はまた、従来的には、抗生物質濃度において≧４倍減少するとして、代替的には、例えば、Ｈｏｌｌａｎｄｅｒら（１９９８  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４２：７４４）によって記載されている分画阻害濃度（ＦＩＣ）を用いても定義され得る。
【００５１】
これらおよび関係する実施形態を考慮して、急性創傷、慢性創傷、および／または細菌性バイオフィルムを含有する創傷を、１種以上のＢＴ化合物および場合により１種以上の抗生物質化合物を含む、治療有効量の局所製剤によって処置するための方法が初めて開示される。本開示に基づいて、ある抗生物質が、急性および／または慢性創傷の処置での使用のためにここで意図されており、ここでこのような抗生物質は、急性もしくは慢性創傷において見られるタイプの感染に対して効果的でないとして、および／または局所製剤、例えば、急性もしくは慢性創傷を処置するための局所製剤での投与に好適でないとして、当業者によって以前はみなされていたことが認識されよう。
【００５２】
したがって、ある実施形態は、消毒剤としての使用のための１種以上のＢＴ化合物を含む組成物を意図する。消毒剤は、微生物を殺すまたはその成長を防止する物質であり、殺菌剤と分類を区別して、生体組織に典型的に適用されてよく、無生物対象に通常は適用される（Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ「Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ」、Ｓｅｖｅｎｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｇｉｌｍａｎら、ｅｄｉｔｏｒｓ、１９８５、Ｍａｃｍｉｌｌａｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，（以下、Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ”）ｐｐ．９５９−９６０）。消毒剤の一般的な例は、エタノールおよびヨードチンキである。殺菌剤として、微生物性病原体などの微生物を殺す消毒剤を含む。
【００５３】
本明細書に記載されているある実施形態は、１種以上のＢＴ化合物および１種以上の抗生物質化合物を含む組成物を意図し得る。抗生物質は、当該分野において公知であり、別の種の微生物を殺すための１種の微生物によって生成される化合物、または同一もしくは類似の化学的構造および作用機構を有する合成生成物から作製される薬物、例えば、局所適用されるときのこのような薬物を含めた、生体有機体内またはこれにおける微生物を破壊する薬物を典型的には含む。本明細書に開示されている実施形態の中でも、抗生物質が以下の分類の１種に属し得るものである：アミノグルコシド、カルバペネム、セファロスポリン、フルオロキノロン、グリコペプチド抗生物質、リンコサミド（例えば、シリンダマイシン）、ペニシリナーゼ−耐性ペニシリン、およびアミノペニシリン。これらの一覧および他の臨床的に有用な抗生物質が利用可能であり、当業者に知られている（例えば、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｃｈｏｏｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、Ｔｈｅ  Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（３２ｎｄＥｄ．）、２００７  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＰＡ；Ｈａｕｓｅｒ、ＡＬ、Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  Ｂａｓｉｃｓ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃｉａｎｓ、２００７  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＰＡ）。
【００５４】
本明細書に開示されているある実施形態における、１種以上のＢＴ化合物との使用のための抗生物質の例示的な分類は、Ｅｄｓｏｎ  ＲＳ、Ｔｅｒｒｅｌｌ  ＣＬ  Ｔｈｅ  ａｍｉｎｏｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ．Ｍａｙｏ  Ｃｌｉｎ  Ｐｒｏｃ．１９９９  Ｍａｙ；７４（５）：５１９−２８において総説されている抗生物質のアミノグルコシド分類である。この分類の抗生物質は、細菌リボソームサブユニットの結合および不活性化を通して、細菌性タンパク質の合成を損なわせることによって細菌成長を阻害する。このような静菌特性に加えて、アミノグルコシドは、グラム陰性細菌中の細胞壁の崩壊を通して殺菌効果も示す。
【００５５】
アミノグルコシド抗生物質として、ゲンタマイシン、アミカシン、ストレプトマイシンなどが挙げられ、グラム陰性細菌、マイコバクテリアおよび他の微生物性病原体の処置において有用であると概してみなされているが、耐性菌株のケースが報告されている。アミノグルコシドは、消化管を通して吸収されないため経口製剤の影響を受けやすいとは概してみなされていない。アミカシンは、例えば、ゲンタマイシン耐性細菌の菌株に対してしばしば効果的であるが、患者に疼痛を引き起こす可能性がある静脈内または筋肉内に典型的には投与される。さらに、アミカシンなどのアミノグルコシド抗生物質に関連する毒性は、腎臓損傷および／または不可逆的な聴力低下をもたらし得る。
【００５６】
これらの特性に関わらず、本明細書に開示されているある実施形態は、消化管／消化管に沿った１箇所以上の位置での上皮組織表面の処置のための、相乗作用のあるＢＴ／抗生物質の組み合わせ（例えば、ここで、抗生物質は、アミノグルコシドに限定される必要はない）の経口投与を意図している。また、ある別の実施形態において、無生物対象の外表面上の微生物を殺すまたは成長をブロックする調製物を称する、殺菌剤としての本明細書に記載されている組成物の使用および方法が意図され得る。
【００５７】
本明細書の他の箇所にも記載のように、ＢＴ化合物は、Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、１９９７  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４１（８）：１６９７−１７０３、Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、２００１  Ａｎｔｉｍｉｃｏｂ．Ａｇｅｎｔ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４５（５）：１４１７−１４２１、ならびにＵＳ．ＲＥ３７，７９３号、米国特許第６，２４８，３７１号、米国特許第６，０８６，９２１号、および米国特許第６，３８０，２４８号において記載されているものを含めた（調製方法を含む）、ビスマスまたはビスマス塩およびチオール−（例えば、−ＳＨ、またはスルフヒドリル）含有化合物を含む組成物であり得る；例えば、米国特許第６，５８２，７１９号も参照されたい。しかし、ある実施形態は、このように限定されず、ビスマスまたはビスマス塩およびチオール含有化合物を含む他のＢＴ化合物を意図し得る。チオール含有化合物は、１、２、３、４、５、６個またはそれより多くのチオール（例えば、−ＳＨ）基を含有し得る。好ましい実施形態において、ＢＴ化合物は、イオン結合を介しておよび／または配位錯体として、チオール含有化合物に付随してビスマスを含むが、いくつかの他の実施形態においては、ビスマスは、有機金属化合物において見られ得る例えば共有結合を介してチオール含有化合物に付随し得る。しかし、ある意図される実施形態において、有機金属化合物、例えば、ビスマスが有機部分への共有結合において見られる化合物であるＢＴ化合物を明確に排除する。
【００５８】
例示的なＢＴ化合物を表１に示す。
【表１】
2015007113.tif 000003
【００５９】
ある本開示の実施形態での使用のためのＢＴ化合物は、確立された手順（例えば、Ｕ．Ｓ．ＲＥ３７．７９３、米国特許第６，２４８，３７１号、米国特許第６，０８６，９２１号、および米国特許第６，３８０，２４８号；Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、１９９７  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４１（８）：１６９７−１７０３、Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、２００１  Ａｎｔｉｍｉｃｏｂ．Ａｇｅｎｔ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４５（５）：１４１７−１４２１）にしたがって調製されてよく、ある他の実施形態において、ＢＴ化合物は、本明細書に記載されている方法にしたがって調製されてもよい。したがって、ある好ましい実施形態は、ＢＴ化合物を調製するための、特にＢＴ化合物を実質的に単分散の微粒子形態で得るための本明細書に記載されている合成方法であって、少なくとも５０ｍＭ、少なくとも１００ｍＭ、少なくとも１５０ｍＭ、少なくとも２００ｍＭ、少なくとも２５０ｍＭ、少なくとも３００ｍＭ、少なくとも３５０ｍＭ、少なくとも４００ｍＭ、少なくとも５００ｍＭ、少なくとも６００ｍＭ、少なくとも７００ｍＭ、少なくとも８００ｍＭ、少なくとも９００ｍＭまたは少なくとも１Ｍの濃度で溶解したビスマスを含有し、親水性、極性または有機溶解剤を含まない酸性ビスマス水溶液が、エタノールと混合されて第１エタノール溶液を得、これが、チオール含有化合物を含む第２エタノール溶液と反応して反応溶液を得、ここで、チオール含有化合物が、ＢＴ化合物を含む微粒子を含む沈澱の形成に十分な条件下および時間にわたって（本明細書に記載されており、本開示に基づいて当業者によって認識されるであろう、例えば、濃度、溶媒強度、温度、ｐＨ、混合および／または圧力などの条件）、ビスマスに対して約１：３〜約３：１のモル比で反応溶液中に存在する、方法を意図している。
【００６０】
したがって、例示的なＢＴとして、化合物１Ｂ−１、Ｂｉｓ−ＥＤＴ（ビスマス−１，２−エタンジチオール、１：１での反応体）；化合物１Ｂ−２、Ｂｉｓ−ＥＤＴ（１：１．５）；化合物１Ｂ−３、Ｂｉｓ−ＥＤＴ（１：１．５）；化合物１Ｃ、Ｂｉｓ−ＥＤＴ（可溶性Ｂｉ調製物、１：１．５）；化合物２Ａ、Ｂｉｓ−Ｂａｌ（ビスマス−イギリス抗ルイサイト（ビスマス−ジメルカプロール、ビスマス−２，３−ジメルカプトプロパノール）、１：１）；化合物２Ｂ、Ｂｉｓ−Ｂａｌ（１：１．５）；化合物３Ａ  Ｂｉｓ−Ｐｙｒ（ビスマス−ピリチオン、１：１．５）；化合物３Ｂ  Ｂｉｓ−Ｐｙｒ（１：３）；化合物４、Ｂｉｓ−Ｅｒｙ（ビスマス−ジチオエリスリトール、１：１．５）；化合物５、Ｂｉｓ−Ｔｏｌ（ビスマス−３，４−ジメルカプトトルエン、１：１．５）；化合物６、Ｂｉｓ−ＢＤＴ（ビスマス−２，３−ブタンジチオール、１：１．５）；化合物７、Ｂｉｓ−ＰＤＴ（ビスマス−１，３−プロパンジチオール、１：１．５）；化合物８−１  Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＢＤＴ（１：１／１）；化合物８−２、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＢＤＴ（１：１／０．５）；化合物９、ビス−２−ヒドロキシ、プロパンチオール（ビスマス−１−メルカプト−２−プロパノール、１：３）；化合物１０、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｂａｌ（１：１／０．５）；化合物１１、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＥＤＴ（１：１／０．５）；化合物１２  Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｔｏｌ（１：１／０．５）；化合物１３、Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＰＤＴ（１：１／０．５）；化合物１４  Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｅｒｙ（１：１／０．５）；化合物１５、Ｂｉｓ−ＥＤＴ／２−ヒドロキシ、プロパンチオール（１：１／１）（例えば、表１を参照されたい）が挙げられる。
【００６１】
理論によって拘束されることを望まないが、本開示の、ＢＴ化合物を調製する方法は、ある好ましい実施形態においては、ビスマスを含む酸性液体水溶液、例えば硝酸ビスマスを含む硝酸水溶液を調製するまたは得ることを含んでいてよく、ＢＴ化合物を含む組成物を望ましくは得ることができ、ここで、該組成物が、大規模生産の容易さ、生成物の改善された純度、均一性もしくは整合性（粒子サイズにおける均一性を含む）を含めた１種以上の望ましい特性、または、調製物および／もしくは本局所製剤の投与において有用な他の特性を有することが考えられる。
【００６２】
特定の実施形態において、初めて本明細書に記載した方法にしたがって調製されたＢＴ組成物は、約０．４μｍ〜約５μｍのある好ましい本実施形態にしたがった体積平均径（ＶＭＤ）をそれぞれ有する微粒子の実質的に単分散の懸濁液としての事象に関して、有利な程度の均質性を示すことが発見されている。粒子サイズの尺度は、体積平均径（ＶＭＤ）、質量中央径（ＭＭＤ）、または空気動力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）と称され得る。これらの測定は、例えば、固着（ＭＭＤおよびＭＭＡＤ）によって、またはレーザー（ＶＭＤ）特性決定によってなされ得る。液体粒子については、環境条件、例えば、標準湿度が維持されるときには、ＶＭＤ、ＭＭＤおよびＭＭＡＤは同じであり得る。しかし、湿度が維持されないときには、ＭＭＤおよびＭＭＡＤの測定は、衝撃体測定の間の脱水に起因して、ＶＭＤよりも小さくあり得る。この記載の目的で、ＶＭＤ、ＭＭＤおよびＭＭＡＤの測定は、標準条件下にあると考えられ、ＶＭＤ、ＭＭＤおよびＭＭＡＤが比較可能であるようになっている。同様に、乾燥粉末の粒子サイズのＭＭＤおよびＭＭＡＤの測定も、比較可能であると考えられる。
【００６３】
本明細書に記載されているように、好ましい実施形態は、ＢＴ含有微粒子の実質的に単分散の懸濁液に関する。限定された幾何標準偏差（ＧＳＤ）を有する規定されたＢＴ粒子サイズの生成により、例えば、ＢＴ堆積、急性創傷、慢性創傷または創傷もしくは上皮組織表面における所望の標的部位へのアクセス可能性、および／またはＢＴ微粒子が投与される対象による認容性を最適化することができる。狭いＧＳＤは、所望のＶＭＤまたはＭＭＡＤサイズ範囲の外側の粒子の数を限定する。
【００６４】
一実施形態において、本明細書に開示されている１種以上のＢＴ化合物を含有する微粒子の液体またはエアゾール懸濁液は、約０．５ミクロン〜約５ミクロンのＶＭＤを有して提供される。別の実施形態において、約０．７ミクロン〜約４．０ミクロンのＶＭＤまたはＭＭＡＤを有する液体またはエアゾール懸濁液が提供される。別の実施形態において、約１．０ミクロン〜約３．０ミクロンのＶＭＤまたはＭＭＡＤを有する液体またはエアゾール懸濁液が提供される。ある他の好ましい実施形態において、約０．１〜約５．０ミクロンのＶＭＤ、または約０．１、約０．２、約０．３、約０．４、約０．５、約０．６、約０．７、約０．８もしくは約０．９ミクロン〜約１．０、約１．５、約２．０、約２．５、約３．０、約３．５、約４．０、約４．５、約５．０、約５．５、約６．０、約６．５、約７．０、約７．５もしくは約８．０ミクロンの１種または複数種のＢＴ化合物粒子を含む液体懸濁液が提供され、該粒子は、本明細書に記載されているように調製されたＢＴ化合物を含む。
【００６５】
したがって、ある好ましい実施形態において、本明細書に初めて記載した、「実質的に」単分散であるＢＴ調製物、例えばＢＴ化合物を微粒子形態で含み、「実質的に」全ての微粒子が特定された範囲（例えば、約０．４μｍ〜約５μｍ）内の体積平均径（ＶＭＤ）を有するＢＴ組成物として、少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、または９４％、より好ましくは少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％またはこれを超える粒子が列挙したサイズ範囲内にあるＶＭＤを有する該組成物が挙げられる。
【００６６】
本明細書に記載されている合成方法にしたがって調製されたＢＴ組成物のこれらおよび関係する特性は、より低いコストおよび生産の容易さ、ならびに医薬品、処方、および薬用化粧品の規格の１つ以上にしたがった規制順守を容易にするような特性決定を可能にし得る組成内での均一性を含めた、以前に記載したＢＴに対して先例のない利点を付与する。
【００６７】
付加的にまたは代替的に、本明細書に記載されている実質的に単分散のＢＴ微粒子は、微粉化の必要がなく、すなわち、高価かつ労働力を要する粉砕も、超臨界流体処理も、微粒子を生成するのに典型的に用いられる他の装置および手順もなく、有利に生成され得る（例えば、Ｍａｒｔｉｎら  ２００８  Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．６０（３）：３３９；Ｍｏｒｉｂｅら、２００８  Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．６０（３）：３２８；Ｃａｐｅら、２００８  Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．２５（９）：１９６７；Ｒａｓｅｎａｃｋら  ２００４  Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｖ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．９（１）：１−１３）。したがって、本実施形態は、実質的に均一な微粒子調製物の有益な効果、限定されないが、向上された、実質的に均一な可溶化特性、所望の投与形態、例えば、経口、吸入または皮膚／皮膚創傷局所形態への好適さ、増加した生物学的利用能および他の有益な特性を含めた効果を付与する。
【００６８】
ＢＴ化合物微粒子懸濁液は、水性製剤として、ハロゲン化炭化水素プロペラントを含む水性および有機溶媒中の懸濁液または溶液として、乾燥粉末として、あるいは、以下に詳述する他の形態（懸濁液中に個々の微粒子を維持するための、処方の当業者に公知であり得る湿潤剤、界面活性剤、鉱物油または他の構成成分もしくは添加物を含有する調製物を含む）で投与され得る。水性製剤は、例えば、水圧噴霧化または超音波噴霧化のいずれかを使用した液体ネブライザによってエアゾール化されていてよい。プロペラントベースの系は、好適な加圧ディスペンサを用いてよい。乾燥粉末には、ＢＴ含有微粒子を効果的に分配することができる乾燥粉末分配デバイスを用いてよい。所望の粒子サイズおよび分布は、適切なデバイスを選択することによって得られ得る。
【００６９】
先にも注記したように、本明細書に提供されているある実施形態にしたがって、ＢＴ化合物を含む複数の微粒子を含むビスマス−チオール（ＢＴ）組成物を調製するための方法も提供され、このような微粒子の実質的に全てが、約０．１〜約８ミクロン、ある好ましい実施形態では約０．４ミクロン〜約５ミクロンの体積平均径（ＶＭＤ）を有する。
【００７０】
おおまかに言えば、該方法は、（ａ）固体沈澱が実質的に遊離した溶液を得るのに十分な条件下および時間にわたって、（ｉ）ビスマスを含むビスマス塩を少なくとも５０ｍＭの濃度で含み、親水性、極性または有機溶解剤を含まない酸性水溶液を、（ｉｉ）少なくとも約５体積％、１０体積％、１５体積％、２０体積％、２５体積％または３０体積％、好ましくは約２５体積％のエタノールを含む混合物を得るのに十分な量のエタノールと混合させる工程；ならびに（ｂ）（ａ）の混合物を、チオール含有化合物を含むエタノール溶液に添加して、反応溶液を得る工程を含み、ここで、チオール含有化合物は、ＢＴ化合物を含む沈澱の形成に十分な条件下および時間にわたって、ビスマスに対して約１：３〜約３：１のモル比で反応溶液中に存在する。
【００７１】
ある好ましい実施形態において、ビスマス塩は、Ｂｉ（ＮＯ３）３であってよいが、本開示にしたがって、ビスマスが、他の形態で提供されてもよいことが認識されよう。ある実施形態において、酸性水溶液中のビスマス濃度は、少なくとも１００ｍＭ、少なくとも１５０ｍＭ、少なくとも２００ｍＭ、少なくとも２５０ｍＭ、少なくとも３００ｍＭ、少なくとも３５０ｍＭ、少なくとも４００ｍＭ、少なくとも５００ｍＭ、少なくとも６００ｍＭ、少なくとも７００ｍＭ、少なくとも８００ｍＭ、少なくとも９００ｍＭまたは少なくとも１Ｍであってよい。ある実施形態において、酸性水溶液は、少なくとも５重量％、１０重量％、１５重量％、２０重量％、２２重量％または２２．５重量％のビスマスを含む。ある好ましい実施形態において、酸性水溶液は、少なくとも５重量％以上の硝酸を含んでよく、ある別の実施形態において、酸性水溶液は、少なくとも０．５重量％、少なくとも１重量％、少なくとも１．５重量％、少なくとも２重量％、少なくとも２．５重量％、少なくとも３重量％、少なくとも３．５重量％、少なくとも４重量％、少なくとも４．５重量％または少なくとも５重量％の硝酸を含んでよい。
【００７２】
チオール含有化合物は、本明細書に記載されている任意のチオール含有化合物であってよく、ある実施形態において、１，２−エタンジチオール、２，３−ジメルカプトプロパノール、ピリチオン、ジチオエリスリトール、３，４−ジメルカプトトルエン、２，３−ブタンジチオール、１，３−プロパンジチオール、２−ヒドロキシプロパンチオール、１−メルカプト−２−プロパノール、ジチオエリスリトールおよびジチオスレイトールのうちの１種以上を含んでいてよい。他の例示的なチオール含有化合物として、アルファ−リポ酸、メタンチオール（ＣＨ３ＳＨ［ｍ−メルカプタン］）、エタンチオール（Ｃ２Ｈ５ＳＨ［ｅ−メルカプタン］）、１−プロパンチオール（Ｃ３Ｈ７ＳＨ［ｎ−Ｐメルカプタン］）、２−プロパンチオール（ＣＨ３ＣＨ（ＳＨ）ＣＨ３［２Ｃ３メルカプタン］）、ブタンチオール（Ｃ４Ｈ９ＳＨ（［ｎ−ブチルメルカプタン］）、ｔｅｒｔ−ブチルメルカプタン（Ｃ（ＣＨ３）３ＳＨ［ｔ−ブチルメルカプタン］）、ペンタンチオール（Ｃ５Ｈ１１ＳＨ［ペンチルメルカプタン］）、補酵素Ａ、リポアミド、グルタチオン、システイン、シスチン、２−メルカプトエタノール、ジチオスレイトール、ジチオエリスリトール、２−メルカプトインドール、トランスグルタミナーゼ、およびＳｉｇｍａ−Ａｌｄｈｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）から入手可能な以下のチオール化合物のいずれか：（１１−メルカプトウンデシル）ヘキサ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）、（１１−メルカプトウンデシル）テトラ（エチレングリコール）官能化金ナノ粒子、１，１’，４’，１”−ターフェニル−４−チオール、１，１１−ウンデカンジチオール、１，１６−ヘキサデカンジチオール、１，２−エタンジチオール（テクニカルグレード）、１，３−プロパンジチオール、１，４−ベンゼンジメタンチオール、１，４−ブタンジチオール、１，４−ブタンジチオールジアセテート、１，５−ペンタンジチオール、１，６−ヘキサンジチオール、１，８−オクタンジチオール、１，９−ノナンジチオール、アダマンタンチオール、１−ブタンチオール、１−デカンチオール、１−ドデカンチオール、１−ヘプタンチオール、１−ヘプタンチオール（ｐｕｒｕｍ）、１−ヘキサデカンチオール、１−ヘキサンチオール、１−メルカプト−（トリエチレングリコール）、１−メルカプト−（トリエチレングリコール）メチルエーテル官能化金ナノ粒子、１−メルカプト−２−プロパノール、１−ノナンチオール、１−オクタデカンチオール、１−オクタンチオール、１−オクタンチオール、１−ペンタデカンチオール、１−ペンタンチオール、１−プロパンチオール、１−テトラデカンチオール、１−テトラデカンチオール（ｐｕｒｕｍ）、１−ウンデカンチオール、１１−（１Ｈ−ピロール−１−イル）ウンデカン−１−チオール、１１−アミノ−１−ウンデカンチオール塩酸塩、１１−ブロモ−１−ウンデカンチオール、１１−メルカプト−１−ウンデカノール、１１−メルカプト−１−ウンデカノール、１１−メルカプトウンデカン酸、１１−メルカプトウンデカン酸、１１−メルカプトウンデシルトリフルオロアセテート、１１−メルカプトウンデシルリン酸、１２−メルカプトドデカン酸、１２−メルカプトドデカン酸、１５−メルカプトペンタデカン酸、１６−メルカプトヘキサデカン酸、１６−メルカプトヘキサデカン酸、１Ｈ，１Ｈ，２Ｈ，２Ｈ−パーフルオロデカンチオール、２，２’−（エチレンジオキシ）ジエタンチオール、２，３−ブタンジチオール、２−ブタンチオール、２−エチルヘキサンチオール、２−メチル−１−プロパンチオール、２−メチル−２−プロパンチオール、２−フェニルエタンチオール、３，３，４，４，５，５，６，６，６−ノナフルオロ−１−ヘキサンチオール（ｐｕｒｕｍ）、３−（ジメトキシメチルシリル）−１−プロパンチオール、３−クロロ−１−プロパンチオール、３−メルカプト−１−プロパノール、３−メルカプト−２−ブタノール、３−メルカプト−Ｎ−ノニルプロピオンアミド、３−メルカプトプロピオン酸、３−メルカプトプロピル官能化シリカゲル、３−メチル−１−ブタンチオール、４，４’−ビス（メルカプトメチル）ビフェニル、４，４’−ジメルカプトスチルベン、４−（６−メルカプトヘキシルオキシ）ベンジルアルコール、４−シアノ−１−ブタンチオール、４−メルカプト−１−ブタノール、６−（フェロセニル）ヘキサンチオール、６−メルカプト−１−ヘキサノール、６−メルカプトヘキサン酸、８−メルカプト−１−オクタノール、８−メルカプトオクタン酸、９−メルカプト−１−ノナノール、ビフェニル−４，４’−ジチオール、ブチル３−メルカプトプロピオネート、銅（ｌ）１−ブタンチオレート、シクロヘキサンチオール、シクロペンタンチオール、デカンチオール官能化銀ナノ粒子、ドデカンチオール官能化金ナノ粒子、ドデカンチオール官能化銀ナノ粒子、ヘキサ（エチレングリコール）モノ−１１−（アセチルチオ）ウンデシルエーテル、メルカプトコハク酸、メチル３−メルカプトプロピオネート、ｎａｎｏＴｅｔｈｅｒ  ＢＰＡ−ＨＨ、ＮａｎｏＴｈｉｎｋｓ（商標）１８、ＮａｎｏＴｈｉｎｋｓ（商標）８、ＮａｎｏＴｈｉｎｋｓ（商標）ＡＣＩＤ１１、ＮａｎｏＴｈｉｎｋｓ（商標）ＡＣＩＤ１６、ＮａｎｏＴｈｉｎｋｓ（商標）ＡＬＣＯ１１、ＮａｎｏＴｈｉｎｋｓ（商標）ＴＨＩＯ８、オクタンチオール官能化金ナノ粒子、ＰＥＧジチオール（平均Ｍｎ８，０００）、ＰＥＧジチオール（平均分子量１，５００）、ＰＥＧジチオール（平均分子量３，４００）、Ｓ−（１１−ブロモウンデシル）チオアセテート、Ｓ−（４−シアノブチル）チオアセテート、チオフェノール、トリエチレングリコールモノ−１１−メルカプトウンデシルエーテル、トリメチロールプロパントリス（３−メルカプトプロピオネート）、［１１−（メチルカルボニルチオ）ウンデシル］テトラ（エチレングリコール）、ｍ−カルボラン−９−チオール、ｐ−ターフェニル−４，４”−ジチオール、ｔｅｒｔ−ドデシルメルカプタン、ｔｅｒｔ−ノニルメルカプタンが挙げられる。
【００７３】
温度、ｐＨ、反応時間、溶質を溶解するための撹拌または振とうの使用ならびに沈澱を収集および洗浄するための手順を含めた例示的な反応条件は、本明細書に記載されており、当該分野において一般に公知の技術を使用する。
【００７４】
ＢＴ化合物を生成するための以前に記載された方法とは違って、ＢＴを調製するための本方法にしたがって、ＢＴ生成物は、実質的に全ての微粒子が、ある好ましい実施形態においては約０．４〜約５ミクロン、ある別の実施形態によると概して約０．１ミクロン〜約８ミクロンのＶＭＤを有する微粒子懸濁液として提供される。さらに、以前のアプローチとは異なり、本実施形態によると、ビスマスは、ビスマス塩を少なくとも約５０ｍＭ〜約１Ｍの濃度で、硝酸を少なくとも約０．５％〜約５％（ｗ／ｗ）、好ましくは５％未満（重量／重量）の量で含み、親水性、極性または有機溶解剤を含まない酸性水溶液において提供される。
【００７５】
この点において、本方法は、ビスマスは５０μＭでは水溶性でない（例えば、Ｕ．Ｓ．ＲＥ３７７９３）、ビスマスは水中で不安定であり（例えば、Ｋｕｖｓｈｉｎｏｖａら、２００９  Ｒｕｓｓ．Ｊ  Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ  ５４（１１）：１８１６）、およびビスマスは、親水性、極性または有機溶解剤が存在しないと硝酸溶液中でも不安定であるという一般に受け入れられている技術教示を考慮すると、驚くべきかつ予想されない利点を付与する。例えば、ＢＴ調製方法の明確な記載の全てにおいて（例えば、Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、１９９７  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４１：１６９７；米国特許第６，３８０，２４８号；Ｕ．Ｓ．ＲＥ３７７９３；米国特許第６，２４８，３７１号）、親水性可溶化剤であるプロピレングリコールは、硝酸ビスマスを溶解するのに必要とされ、チオールとの反応のために調製される溶液のビスマス濃度は、１５ｍＭよりはるかに低く、これにより、ＢＴ化合物に関して利用可能な生産様式を限定している。
【００７６】
対照的に、本開示によると、ビスマスを溶解するための親水性、極性または有機溶解剤を必要とせず、なおより高い濃度が驚くべきことに達成される。親水性、極性または有機溶解剤として、プロピレングリコール（ＰＧ）およびエチレングリコール（ＥＧ）が挙げられ、極性溶媒、例えば、ジオキサンおよびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ポリオール（例えば、ＰＧおよびＥＧを含み、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、ペンタエリスリトールなども含む）、多価アルコール、例えば、グリセロールおよびマンニトール、ならびに他の剤を含めた、複数の公知の溶解性向上剤を挙げることもできる。他の極性が高い水混和性有機物質として、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）およびＮＭＰ（Ｎ−メチル−２−ピロリドン）が挙げられる。
【００７７】
したがって、本明細書に提供されているように、親水性、極性または有機溶解剤として一般的に用いられている溶媒を含めた溶媒は、例えば、溶媒極性／分極率（ＳＰＰ）スケール値に基づいて、Ｃａｔａｌａｎら（例えば、１９９５  Ｌｉｅｂｉｇｓ  Ａｎｎ．２４１；Ｃａｔａｌａｎ、２００１  Ｉｎ：Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｓｏｌｖｅｎｔｓ、Ｗｙｐｙｃｈ（Ｅｄ．）、Ａｎｄｒｅｗ  Ｐｕｂｌ．，ＮＹ、およびこれにおいて引用されている文献も参照されたい）の系を用いて選択され得、これによると、例えば、水は０．９６２のＳＰＰ値、トルエンは０．６５５のＳＰＰ値、２−プロパノールは０．８４８のＳＰＰ値を有することが当業者に認識されよう。２−Ｎ，Ｎ−ジメチル−７−ニトロフルオレン／２−フルオロ−７−ニトロフルオレンのプローブ／同形対の紫外測定に基づき溶媒のＳＰＰ値を決定するための方法が、記載されている（Ｃａｔａｌａｎら、１９９５）。
【００７８】
特定のＢＴ組成物の溶解特性に基づく所望のＳＰＰ値を有する溶媒（純粋な単独成分の溶媒としてにせよ、または２種、３種、４種もしくはそれ以上の溶媒の溶媒混合物としてにせよ；溶媒混和性に関しては、例えば、Ｇｏｄｆｒｅｙ  １９７２  Ｃｈｅｍ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．２：３５９を参照されたい）は、本開示を考慮すると、当業者によって容易に識別され得るが、先に注記したように、ある好ましい実施形態によると、本明細書に記載されている合成方法の工程に関しては、ビスマスを溶解するための親水性、極性または有機溶解剤は必要とされない。
【００７９】
溶解度パラメータは、相互作用パラメータＣ、ヒルデブランド溶解度パラメータｄ、または部分（ハンセン）溶解度パラメータ：δｐ、δｈおよびδｄを含んでいてよく、溶媒の極性、水素結合ポテンシャルおよび分散力相互作用ポテンシャルをそれぞれ表している。ある実施形態において、ビスマスを含むビスマス塩が溶解し得る溶媒または共溶媒系を表している溶解度パラメータの最高値は、例えば、微粒子ＢＴ組成物を調製するための記載されている本方法によると、例えば、ビスマス塩を含む水溶液に関する限界を提供することができる。例えば、δｈ値が高いほど、水素結合能力がより大きくなるため、水などの溶媒分子への親和力がより大きくなる。したがって、溶媒について観察された最大δｈ値が高いほど、より親水性の環境が望ましい状況にとって好ましくあり得る。
【００８０】
非限定的な例によると、以下の式Ｉに示す構造を有するＢｉｓＥＤＴは、以下の反応スキームにしたがって調製され得る：
【化１】
2015007113.tif 000004
【００８１】
手短に言うと、非限定的な説明例として、過剰（１１．４Ｌ）の５％水性ＨＮＯ３に、室温において、０．３３１Ｌ（約０．５７５モル）の酸性ビスマス水溶液、例えばＢｉ（ＮＯｓ）３溶液（例えば、４３％のＢｉ（ＮＯ３）３（ｗ／ｗ）、５％の硝酸（ｗ／ｗ）、５２％の水（ｗ／ｗ）、Ｓｈｅｐｈｅｒｄ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｃｉｎｃｉｎｎａｔｉ、ＯＨから入手可能）を、撹拌しながらゆっくりと添加した後、無水エタノール（４Ｌ）をゆっくりと添加してよい。チオール化合物、例えば１，２−エタンジチオール［〜０．５５Ｍ］のエタノール溶液（１．５６Ｌ）は、１．５Ｌの無水エタノールに、７２．１９ｍＬ（０．８６３モル）の１，２−エタンジチオールを６０ｍＬのシリンジを用いて添加し、次いで５分間撹拌することによって別個で調製されてよい。１，２−エタンジチオール（ＣＡＳ  ５４０−６３−６）および他のチオールは、例えば、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯから入手可能である。ついで、チオール化合物のエタノール溶液を水性Ｂｉ（ＮＯ３）３／ＨＮＯ３溶液に一晩中撹拌しながらゆっくりと添加して、反応溶液を形成することができる。チオール含有化合物は、ある好ましい実施形態によると、ビスマスに対して約１：３〜約３：１のモル比で反応溶液中に存在し得る。形成された生成物は、本明細書に記載されているように微粒子を含む沈澱として落ち着き、次いで、濾過によって収集されて、エタノール、水およびアセトンによって順次洗浄されて、黄色の非晶質形粉末状固体としてＢｉｓＥＤＴを得る。粗生成物は、撹拌により無水エタノール中に再溶解され、次いで濾過され、エタノールで数回、続いてアセトンで数回順次洗浄されてよい。洗浄した粉末は、１ＭのＮａＯＨ（５００ｍＬ）でトリチュレートされ、濾過され、水、エタノールおよびアセトンで順次洗浄されて、精製された微粒子ＢｉｓＥＤＴを与えることができる。
【００８２】
非限定的な理論によると、ビスマスは、細胞外高分子物質（ＥＰＳ）、例えば細菌性エキソ多糖類を生成する能力を示し、この阻害により、低下したバイオフィルム形成をもたらす。細菌は、バイオフィルムの凝集に膠様のＥＰＳを使用すると考えられる。感染の性質に応じて、ＥＰＳのバイオフィルム形成および同化は、細菌病原性、例えば、創傷治癒障害に寄与し得る。しかし、ビスマスは、単独では、介入剤として治療的に有用でなく、代わりに、ＢＴなどの錯体の一部として典型的には投与される。したがって、ビスマス−チオール（ＢＴ）は、ビスマスとチオール化合物とのキレート化から生じ、ビスマスの抗微生物治療有効性において劇的な改善を示す化合物を含む組成物群である。ＢＴは、著しい抗感染効果、抗バイオフィルム効果、および免疫調節効果を示す。ビスマスチオールは、広範囲の微生物に対して効果的であり、抗生物質耐性によって典型的には影響されない。ＢＴは、著しく低い（準阻害）濃度でバイオフィルム形成を防止し、一般的な創傷病原体の多くの病原特性を同じ準阻害レベルにおいて防止し、動物モデルにおける敗血性ショックを防止することができ、多くの抗生物質と相乗作用があり得る。
【００８３】
本明細書に記載されているように、１種以上の特定された抗生物質化合物と組み合わされるときの１種以上の特定されたＢＴの抗細菌性効果におけるこのような相乗効果は、特定の細菌タイプに対する別個の抗生物質のプロファイルおよびＢＴ効果に基づいて容易に予測することができないが、驚くべきことに、グラム陰性またはグラム陽性（または両方の）細菌のいずれが存在するかの識別を含めた、特定の細菌集団を考慮した特定のＢＴ−抗生物質の組み合わせの選択から得ることができる。例えば、本明細書に開示されているように、あるＢＴと相乗作用がある抗生物質として、アミカシン、アンピシリン、セファゾリン、セフェピム、クロラムフェニコール、シプロフロキサシン、シリンダマイシン（または他のリンコサミド抗生物質）、ダプトマイシン（Ｃｕｂｉｃｉｎ（登録商標））、ドキシサイクリン、ガチフロキサシン、ゲンタマイシン、イミペネム、レボフロキサシン、リネゾリド（Ｚｙｖｏｘ（登録商標））、ミノサイクリン、ナフシリン、パロモマイシン、リファンピン、スルファメトキサゾール、トブラマイシンおよびバンコマイシンのうちの１種以上を挙げることができる。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ研究により、例えば、ゲンタマイシン、セファゾリン、セフェピム、サファメトキサゾール、イミペネムまたはレボフロキサシンの個々に対してほとんどまたは全く感受性でないＭＲＳＡが、ＢＴ化合物ＢｉｓＥＤＴの存在下で抗生物質に曝されるときに、これらの抗生物質のいずれか１種に対して際だった感度を示すことが示された。したがって、ある実施形態は、ＢＴ化合物と、アミカシン、アンピシリン、セファゾリン、セフェピム、クロラムフェニコール、シプロフロキサシン、シリンダマイシン（または別のリンコサミド抗生物質）、ダプトマイシン（Ｃｕｂｉｃｉｎ（登録商標））、ドキシサイクリン、ガチフロキサシン、ゲンタマイシン、イミペネム、レボフロキサシン、リネゾリド（Ｚｙｖｏｘ（登録商標））、ミノサイクリン、ナフシリン、パロモマイシン、リファンピン、スルファメトキサゾール、トブラマイシンおよびバンコマイシンから選択される１種以上の抗生物質との組み合わせが含まれ得る組成物および／または方法を本明細書において明確に意図する一方で、本明細書において意図されているある別の実施形態は、ＢＴ化合物と、アミカシン、アンピシリン、セファゾリン、セフェピム、クロラムフェニコール、シプロフロキサシン、シリンダマイシン（または他のリンコサミド）、ダプトマイシン（Ｃｕｂｉｃｉｎ（登録商標））、ドキシサイクリン、ガチフロキサシン、ゲンタマイシン、イミペネム、レボフロキサシン、リネゾリド（Ｚｙｖｏｘ（登録商標））、ミノサイクリン、ナフシリン、パロモマイシン、リファンピン、スルファメトキサゾール、トブラマイシンおよびバンコマイシンから選択される１種以上の抗生物質が明確に除かれ得る１種以上の抗生物質との組み合わせが含まれ得る組成物および／または方法を意図する。この文脈においては、ゲンタマイシンおよびトブラマイシンが抗生物質のアミノグリコシド分類に属することに注意されたい。Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、２００１  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４５：１４１７−１４２１；Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、２０００  Ｉｎｆｅｃｔ．Ｍｅｄ．１７：１２３−１２７；Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、２００３  Ｒｅｓ．Ａｄｖ．Ｉｎ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  ＆  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．３：７９−８５；Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、１９９７  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４１（８）：１６９７−１７０３；Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、１９９９  Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．６７：６６４−６６９：Ｈｕａｎｇら  １９９９  Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４４：６０１−６０５；Ｖｅｌｏｉｒａら、２００３  Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．５２：９１５−９１９；Ｗｕら、２００２  Ａｍ  Ｊ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．２６：７３１−７３８；Ｈａｌｗａｎｉら、２００８  Ｉｎｔ．Ｊ  Ｐｈａｒｍ．３５８：２７８）に記載されているある組成物および方法もまた、ある意図される実施形態から明確に除かれる。
【００８４】
したがって、本明細書に記載されているように、ある好ましい実施形態において、対象における急性創傷、慢性創傷、および／または細菌性バイオフィルムを含有する創傷の治癒、例えば、真皮創傷治癒を含む皮膚組織修復を促進するための組成物および方法が提供される。本明細書に記載されているように、当業者は、適切な臨床状況およびこのような皮膚組織修復が所望され得る状況、とりわけ、例えば、外科、軍人外科、皮膚科、外傷医学を含めた、医術において確立されている基準、老年疾患、心臓血管疾患、代謝疾患（例えば、糖尿病、肥満など）、感染および炎症（呼吸器もしくは消化管の上皮ライニング、または他の上皮組織表面、例えば腺組織における場合を含む）、ならびに他の関連する医療専門分野および下位専門分野を理解するであろう。したがって、本明細書に開示され当該分野において知られているように、皮膚組織修復（または他の上皮組織修復）の促進は、（ｉ）上皮細胞（例えば、ケラチノサイト）または真皮線維芽細胞の移動、（ｉｉ）上皮細胞（例えば、ケラチノサイト）または真皮線維芽細胞の成長、（ｉｉｉ）上皮細胞（例えば、ケラチノサイト）または真皮線維芽細胞のコラゲナーゼ、ゼラチナーゼまたはマトリックスメタロプロテイナーゼ活性の下方制御、（ｉｖ）真皮線維芽細胞の細胞外マトリックスタンパク質の堆積、および（ｖ）真皮血管形成の誘導または増強作用から選択される１種以上の細胞創傷修復活性を刺激または脱抑制することを含み得ることが認識されよう。このような細胞創傷修復活性を識別および特性決定するための方法は、本明細書に開示されている創傷組織修復促進化合物、例えば、本明細書に記載されているＢＴ剤を含む組成物の、これらおよび関係する活性に対する効果が、本開示に基づいて、容易に、必要以上の実験を行うことなく決定され得るように記載されている。例えば、引っ掻き傷創傷の後のケラチノサイト創傷の閉鎖に基づいた創傷修復のための当該分野で受け入れられているモデルに関する組成物および方法が本明細書に開示されている。
【００８５】
本明細書に記載されている実施形態による使用のための、創傷修復を含めた皮膚組織修復を促進するための、対象における急性創傷、慢性創傷、および／または細菌性バイオフィルムを含有する創傷を処置するための好ましい組成物は、ある実施形態においては、本明細書に記載されているビスマス−チオール（ＢＴ）化合物を含む組成物を挙げることができ、異なるが関係するある実施形態においては、当該分野において知られている他の化合物、例えば、本明細書に記載されている１種以上の抗生物質化合物を挙げることもできる。これらを作製するためのＢＴ化合物および方法は、例えば、Ｄｏｍｅｎｉｃｏら（１９９７  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４１（８）：１６９７−１７０３；２００１  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４５（５）１４１７−１４２１）において、ならびにＵ．Ｓ．ＲＥ３７，７９３、米国特許第６，２４８，３７１号、米国特許第６，０８６，９２１号、および米国特許第６，３８０，２４８号においても開示されている。先にも注記したように、ある好ましいＢＴ化合物は、チオール含有化合物とイオン結合した、またはこれとの配位錯体中のビスマスまたはビスマス塩を含有するもの、例えば、チオール含有化合物にキレート化したビスマスを含む組成物であり、ある他の好ましいＢＴ化合物は、チオール含有化合物との共有結合連結においてビスマスまたはビスマス塩を含有するものである。本明細書に記載されている実質的に単分散の微粒子ＢＴ組成物も好ましい。皮膚組織修復を含めた急性もしくは慢性創傷の治癒を促進する以前の試みからも、このような創傷治癒を促進するための組成物および方法における使用を有するとして初めて本明細書に記載した任意の化合物の他の状況における以前の特性決定からも、このような化合物を用いる本方法が、創傷治癒効果および組織修復促進効果を有し得たことを予測できなかった。
【００８６】
したがって、好ましい実施形態によると、対象における急性創傷、慢性創傷、および／または細菌性バイオフィルムを含有する創傷もしくは上皮組織表面を処置するための方法であって、対象における創傷部位または上皮組織表面に、少なくとも１種のＢＴ化合物および局所使用のための薬学的に許容される賦形剤または担体を含む、治療有効量の局所製剤を投与することを含む方法が提供される。ある実施形態において、該方法は、少なくとも１種の抗生物質化合物を同時または連続していずれかの順序で投与することをさらに含む。抗生物質化合物は、アミノグルコシド抗生物質、カルバペネム抗生物質、セファロスポリン抗生物質、フルオロキノロン抗生物質、グリコペプチド抗生物質、リンコサミド抗生物質、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン抗生物質、またはアミノペニシリン抗生物質であってよい。臨床的に有用な抗生物質は、例えば、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｃｈｏｏｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、Ｔｈｅ  Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（３２ｎｄＥｄ．）、２００７  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＰＡ；およびＨａｕｓｅｒ、ＡＬ、Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ  Ｂａｓｉｃｓ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃｉａｎｓ、２００７  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＰＡに記載されている。
【００８７】
本明細書に記載されているように、ある実施形態は、細菌感染がグラム陽性細菌を含む、本明細書に提供されているような急性もしくは慢性創傷または他の上皮組織表面（例えば、皮膚、呼吸器ライニング、消化管ライニング）について、好ましい治療的に有効な局所製剤が、ＢＴ化合物（例えば、ＢｉｓＥＤＴ、ビスマス：１，２−エタンジチオール；ＢｉｓＰｙｒ、ビスマス：ピリチオン；ＢｉｓＥＤＴ／Ｐｙｒ、ビスマス：１，２−エタンジチオール／ピリチオン）およびリファマイシン、またはＢＴ化合物およびダプトマイシン（Ｃｕｂｉｃｉｎ（登録商標）、Ｃｕｂｉｓｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、Ｌｅｘｉｎｇｔｏｎ、ＭＡ）、またはＢＴ化合物およびリネゾリド（Ｚｙｖｏｘ（登録商標）、Ｐｆｉｚｅｒ、Ｉｎｃ．，ＮＹ、ＮＹ）、またはＢＴ化合物（例えば、ＢｉｓＥＤＴ、ビスマス：１，２−エタンジチオール；ＢｉｓＰｙｒ、ビスマス：ピリチオン；ＢｉｓＥＤＴ／Ｐｙｒ、ビスマス：１，２−エタンジチオール／ピリチオン）ならびにアンピシリン、セファゾリン、セフェピム、クロラムフェニコール、シリンダマイシン（または別のリンコサミド抗生物質）、ダプトマイシン（Ｃｕｂｉｃｉｎ（登録商標））、ドキシサイクリン、ガチフロキサシン、ゲンタマイシン、イミペネム、レボフロキサシン、リネゾリド（Ｚｙｖｏｘ（登録商標））、ナフシリン、パロモマイシン、リファンピン、スルファメトキサゾール、トブラマイシンおよびバンコマイシンのうちの１種以上を含んでいてよいという予測できない発見に由来する。本明細書にも記載されているように、ある実施形態は、細菌感染がグラム陰性細菌を含む急性または慢性創傷について、好ましい治療的に有効な局所製剤が、ＢＴ化合物およびアミカシンを含んでいてよいという予測できない発見に由来する。ある関係する実施形態は、ＢＴ化合物および別の抗生物質、例えば、別のアミノグルコシド抗生物質、ある実施形態においては、ゲンタマイシンまたはトブラマイシンでない抗生物質による、グラム陰性細菌を含む急性または慢性創傷の処置を意図する。したがって、これらの実施形態を考慮すると、他の関係する実施形態は、慢性創傷部位内の１種以上の細菌集団または亜集団がグラム陽性またはグラム陰性であるかを周知の基準によって、医微生物学の分野の当業者に精通している方法にしたがって識別することを、適切な抗生物質化合物（複数可）を選択して、本方法にしたがって投与されるべき局所製剤に含ませる工程として意図する。
【００８８】
記載されている本組成物および方法により、例えば、熱傷クリームとして、本明細書に記載されているものを含めた既存の創傷の処置のための、慢性創傷の防止のための、ＭＲＳＡ皮膚感染の処置のための、および本明細書に開示されている、本開示を考慮して当業者に明らかであろう他の関係する適応症のための局所剤としての使用を含めた、急性および慢性創傷ならびに創傷バイオフィルムの処置における使用を見出すことができる。
【００８９】
本明細書に記載されている組成物および方法により有益な使用を見出すことができる細菌の非限定的な例として、本明細書に記載されているある実施形態によると、黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、ＭＲＳＡ（メチシリン耐性黄色ブドウ球菌）、表皮ブドウ球菌、ＭＲＳＥ（メチシリン耐性表皮ブドウ球菌）、結核菌、トリ結核菌、緑膿菌、薬剤耐性緑膿菌、大腸菌、腸管毒素原性大腸菌、腸管出血性大腸菌、肺炎桿菌、クロストリジウム・ディフィシル、ヘリコバクター・ピロリ、レジオネラ・ニューモフィラ、大便連鎖球菌、メチシリン−感受性大便連鎖球菌、エンテロバクター・クロアカエ、ネズミチフス菌、尋常変形菌、エンテロコリチカ菌、ビブリオ・コレラ、フレキシナ赤痢菌、バンコマイシン耐性腸球菌（ＶＲＥ）、セパシア菌群、野兎病菌、炭疽菌、ペスト菌、緑膿菌、バンコマイシン感受性・バンコマイシン耐性腸球菌（例えば、大便レンサ菌、ヘシウム菌）、メチシリン感受性・メチシリン耐性ブドウ球菌（例えば、黄色ブドウ球菌、表皮ブドウ球菌）およびアシネトバクター・バウマンニ、スタフィロコッカス・ヘモリチカス、スタフィロコッカス・ホミニス、エンテロコッカス・フェシウム、化膿連鎖球菌、ストレプトコッカス・アガラクティエ、炭疽菌、クレブシエラ肺炎桿菌、プロテウス・ミラビリス、尋常変形菌、エンテロコリチカ菌、ステノトロホモナス・マルトフィリア、ならびにエンテロバクター・クロアカエが挙げられる。
【００９０】
本発明のある実施形態の実施は、反対のことを具体的に示さない限り、当該分野の技術内である微生物学、分子生物学、生化学、細胞生物学、ウイルス学および免疫学の技術の従来の方法、ならびにいくつかが説明目的で以下になされている参照を使用する。このような技術は、文献において十分に説明されている。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ、１９８９）；Ｍａｎｉａｔｉｓら  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（１９８２）；ＤＮＡ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ、ｖｏｌ．Ｉ  ＆  ＩＩ（Ｄ．Ｇｌｏｖｅｒ、ｅｄ．）；Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｎ．  Ｇａｉｔ、ｅｄ．，１９８４）；Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ（Ｂ．Ｈａｍｅｓ  ＆  Ｓ．Ｈｉｇｇｉｎｓ、ｅｄｓ．，１９８５）；Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ（Ｂ．Ｈａｍｅｓ  ＆  Ｓ．Ｈｉｇｇｉｎｓ、ｅｄｓ．，１９８４）；Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ、ｅｄ．，１９８６）；Ｐｅｒｂａｌ、Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ（１９８４）を参照されたい。
【００９１】
文脈が別途必要としない限り、本明細書および特許請求の範囲を通して、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」およびその変形、例えば、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、オープンな、包括的な意味で、すなわち、「限定されないが、含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ、ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｌｉｍｉｔｅｄ  ｔｏ）」として解釈されるべきである。
【００９２】
本明細書を通しての「一実施形態」もしくは「実施形態」または「態様」への言及は、実施形態と関連して記載されている具体的な特徴、構造または特性が、本発明の少なくとも１つの実施形態に含まれることを意味している。したがって、本明細書の種々の場所での句「一実施形態において」または「実施形態において」の出現は、必ずしも全てが同じ実施形態を称するというわけではない。さらに、具体的な特徴、構造または特性は、１種以上の実施形態において任意の好適な様式で組み合わされてよい。
【００９３】
ある実施形態は、対象における皮膚組織修復を促進することを含んでいてよい、対象における急性もしくは慢性創傷または創傷バイオフィルムを処置するための方法、組成物およびキット、または１個の細胞もしくは複数の細胞において１種以上の細胞創傷修復活性を変更するための方法、組成物およびキットに関する。１個の細胞は、概して単細胞を示すが、複数の細胞は、１を超える細胞を示す。細胞は、組織、器官または有機体全体を含んでいてよい。さらに、１個の細胞または複数の細胞は、ｉｎ  ｖｉｖｏ、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ、またはｅｘ  ｖｉｖｏに位置していてよい。細胞、組織および器官の培養を維持することは、当業者にとって常套的な手順であり、容易に確認できる条件および媒体である（例えば、Ｆｒｅｓｈｎｅｙ、Ｃｕｌｔｕｒｅ  ｏｆ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌｓ：Ａ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｂａｓｉｃ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ、Ｗｉｌｅｙ−Ｌｉｓｓ  ５ｔｈＥｄ．（２００５）；Ｄａｖｉｓ、Ｂａｓｉｃ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ  ２ｎｄＥｄ．（２００２）を参照されたい）。
【００９４】
本明細書に開示されているように、ある実施形態は、対象における急性もしくは慢性創傷または創傷バイオフィルムを処置するための方法であって、対象に、治療有効量の、このような方法での使用のための本明細書に記載されているＢＴ化合物（例えば、複数の実質的に単分散の微粒子の形態で提供される）およびあるさらなる実施形態では、このような方法での使用のための本明細書に記載されている抗生物質化合物、例えば、ＢＴ化合物、例えば、ＢｉｓＥＤＴもしくはＢｉｓＢＡＬ、または本明細書の表１に提示した他の化合物、または任意の他のＢＴ剤、例えば、Ｄｏｍｅｎｉｃｏら（１９９７  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４１：１６９７；２００１  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．４５：１４２１）においてならびに／またはＵ．Ｓ．ＲＥ３７，７９３、米国特許第６，２４８，３７１号、米国特許第６，０８６，９２１号、および米国特許第６，３８０，２４８号に開示されているもの、ならびに／または本明細書に開示されている方法にしたがって調製されるものを場合により含む組成物を投与することを含む方法に関する。投与工程は、当該分野において知られている任意の手段、例えば、局所的に（例えば、皮膚に、あるいは腺組織または呼吸器および／もしくは消化管に存在し得る表面を含めた任意の上皮組織表面に直接投与によって）、経膣的に、腹腔内に、経口で、非経口で、静脈内に、動脈内に、経皮的に、舌下に、皮下に、筋肉内に、経口腔で、鼻腔内に、吸入により、眼内に、皮下に、脂肪内に、関節内にまたはくも膜下腔内に実施されてよい。
【００９５】
好ましい実施形態において、投与は、局所的に実施されてよく、ここで、局所使用のための薬学的賦形剤または担体は、本明細書に記載されており、当該分野において知られている。
【００９６】
先に注記したように、本明細書に記載されているある発明の実施形態は、記載されているＢＴ化合物（例えば、ＢｉｓＥＤＴおよび／またはＢｉｓＢＡＬ）の局所製剤に関し、該製剤は、あるさらなる実施形態において、本明細書に記載されている１種以上の抗生物質化合物、例えば、アミカシン、アンピシリン、セファゾリン、セフェピム、クロラムフェニコール、シプロフロキサシン、シリンダマイシン（または別のリンコサミド抗生物質）、ダプトマイシン（Ｃｕｂｉｃｉｎ（登録商標））、ドキシサイクリン、ガチフロキサシン、ゲンタマイシン、イミペネム、レボフロキサシン、リネゾリド（Ｚｙｖｏｘ（登録商標））、ミノサイクリン、ナフシリン、パロモマイシン、リファンピン、スルファメトキサゾール、トブラマイシンおよびバンコマイシン；またはカルバペネム抗生物質、セファロスポリン抗生物質、フルオロキノロン抗生物質、グリコペプチド抗生物質、リンコサミド抗生物質、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン抗生物質、および／もしくはアミノペニシリン抗生物質、ならびに／またはアミノグルコシド抗生物質、例えば、アミカシン、アルベカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、パロモマイシン、ロドストレプトマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシンもしくはアプラマイシン、および／またはリポペプチド抗生物質、例えば、ダプトマイシン（Ｃｕｂｉｃｉｎ（登録商標））、またはオキサゾリジノン抗生物質、例えば、リネゾリド（Ｚｙｖｏｘ（登録商標））を含んでいてよい。これらおよび関係する製剤は、動物に、好ましくは哺乳動物に、最も好ましくはヒトに、特に好ましくは急性または慢性創傷あるいはバイオフィルムが関係し得る細菌感染（例えば、バイオフィルム形成を促進することができる細菌が存在し得るが、バイオフィルムは、まだ検出できていない）を含有する、またはバイオフィルムもしくは他の細菌の存在などの細菌感染を含有する創傷を有するヒトに局所的に投与されるとき、本明細書に開示されている、ＢＴ化合物（複数可）（および場合により１種以上の抗生物質）を、薬学的に許容される担体、賦形剤または希釈剤中に、治療量で含んでいてよい。
【００９７】
純粋な形態または適切な医薬組成物での、本明細書に記載されているＢＴ化合物またはその薬学的に許容される塩の局所投与は、類似の効用を供給する薬剤の局所投与の受け入れられている様式によって実施され得る。組成物の局所適用または投与として、好ましい実施形態において、組成物（例えば、局所製剤）を、処置を受けている対象の皮膚および／または別の上皮組織表面（例えば、呼吸器、消化管および／または腺の上皮ライニング）に直接接触させることが挙げられ、これらは、１箇所以上の局部的なまたは広く分布された皮膚および／または他の上皮組織表面部位にあってよく、局所製剤を無傷の角質層または表皮によって囲まれる急性または慢性創傷部位と接触させることを概して称し得るが、これに限定される必要はない；例えば、ある実施形態は、局所適用として、本明細書に記載されている局所製剤の、負傷した、擦りむいた、もしくは損傷した皮膚、または手術を受けている対象の皮膚への投与を意図しており、その結果、局所製剤の接触は、例えば、あるタイプの創傷修復もしくは創傷治癒または他の皮膚組織再形成が伴い得るように、角質層または表皮とだけでなく、皮膚顆粒細胞、有棘細胞、および／もしくは基底細胞層と、ならびに／または真皮もしくは下層組織とによって起こる。
【００９８】
したがって、このような皮膚組織修復は、ある好ましい実施形態において、例えば、急性慢性創傷もしくは創傷バイオフィルムを防止もしくは改善する際に、または別の例として、皮膚創傷離開を防止または改善する際に、あるいは急性もしくは慢性創傷および／または皮膚創傷離開が存在し得るとき真皮創傷治癒を改善、加速、または向上する際に望ましくあり得るような真皮創傷治癒を含んでいてよい。呼吸器、消化管および／または腺のライニングに存在する上皮組織表面への局所投与を意図するある別の実施形態は、本明細書に提供されている局所用調製物を、呼吸器（例えば、気道、鼻咽頭および咽頭経路、気管、肺、気管支、細気管支、肺胞など）および／もしくは消化管（例えば、口腔、食道、胃、腸、直腸、肛門など）、ならびに／または他の上皮表面に存在する１箇所以上の上皮組織表面に送達するための、当該分野において知られているような適切な経路による局所製剤の投与を同様に含んでいてよい。
【００９９】
ある意図される実施形態によると、局所投与は、開放創傷内への直接投与を含んでいてよい。例えば、開放割れ目または他の開放創傷として、さらなる下層組織を微生物感染に対して感受性となるように該組織を外部環境に曝し得る皮膚における破壊を挙げることができる。このような状況は、例えば、タイプＩＩＩ（重篤な）の開放割れ目を含めたあるタイプの急性外傷的軍事創傷には一般的ではない。これらおよび関係する実施形態にしたがって、局所投与は、本明細書に記載されているＢＴ組成物と、このような損傷した皮膚および／もしくは別の上皮表面との、ならびに／または例えば、神経組織と関連する筋肉、靱帯、腱、骨、血管などの循環器組織を含めた結合組織などの他の組織、およびこのような開放創傷で曝され得る任意の他の器官との直接接触によるものであってよい。曝され得る、したがってこのような直接接触が意図される他の組織の例として、腎臓、膀胱、肝臓、膵臓、および開放創傷に関係する日和見感染にあまりに有害に曝され得る任意の他の組織または器官が挙げられる。
【０１００】
局所製剤（例えば、薬学的組成物）は、記載されているＢＴ化合物（例えば、Ｕ．Ｓ．ＲＥ３７，７９３、米国特許第６，２４８，３７１号、米国特許第６，０８６，９２１号および／または米国特許第６，３８０，２４８号に記載されていて、そして／または本開示にしたがって調製される化合物、例えば、本明細書に記載されている微粒子ＢＴ懸濁液）を組み合わせることによって、ある関係する実施形態においては、１種以上の所望の抗生物質（例えば、アミノグルコシド抗生物質、例えば、アミカシン）をＢＴ化合物と別個にまたは一緒に、局所製剤調製物での使用のための適切な薬学的に許容される担体、希釈剤または賦形剤と組み合わせることによって調製されてよく、固体、半固体、ゲル、クリーム、コロイド、懸濁液もしくは液体または他の局所適用形態、例えば粉末、顆粒、軟膏、溶液、洗浄液、ゲル、ペースト、膏薬、塗料、生体接着剤、ミクロスフェア懸濁液、およびエアゾールスプレーにおいて調製物に製剤化されてよい。
【０１０１】
これらおよび関係する実施形態の医薬組成物は、活性成分が含有されるように製剤化され、特に好ましい実施形態においては、同時または連続していずれかの順序で適用されてよい本明細書に記載されているＢＴ化合物（複数可）が、単独で、または１種以上の所望の抗生物質（例えば、カルバペネム抗生物質、セファロスポリン抗生物質、フルオロキノロン抗生物質、グリコペプチド抗生物質、リンコサミド抗生物質、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン抗生物質、およびアミノペニシリン抗生物質、またはアミノグルコシド抗生物質、例えば、アミカシンもしくはリファマイシン）と組み合わされて、ＢＴ化合物（複数可）および／または抗生物質組成物（複数可）を含有する製剤を、急性または慢性創傷に、場合によっては、対象、例えば、ヒトを含む哺乳動物、ある好ましい実施形態においては、急性もしくは慢性創傷を有するか、あるいは急性もしくは慢性創傷または創傷バイオフィルムもしくは創傷離開を有するリスクが高いヒト患者（例えば、肥満および／または糖尿病個体）の皮膚の周囲に投与する際に生物学的に利用可能であるように製剤化される。本明細書に開示されているある実施形態は、同時または連続していずれかの順序であってよい投与を含めた、ＢＴおよび抗生物質の局所投与を意図するが、本発明はこれに限定されるものではなく、別の実施形態において、抗生物質の投与経路とは異なったＢＴ化合物の投与経路を明確に意図する。したがって、抗生物質は、経口で、静脈内に、または本明細書に記載されている任意の他の投与経路によって投与されてよいが、ＢＴ化合物は、抗生物質に用いられる経路とは独立した経路によって投与されてよい。非限定的な説明例として、ＢＴ化合物は、本明細書に提供されているように局所的に投与されてよいが、抗生物質は、異なる経路、例えば、経口、静脈内、経皮、皮下、筋肉内によって、および／または任意の他の投与経路によって同時または連続して（任意の順序で）投与されてよい。
【０１０２】
本明細書に記載されている局所製剤は、治療有効量の消毒剤または創傷治癒剤（複数可）（および場合により抗生物質（複数可））を創傷部位に、例えば、真皮線維芽細胞などの皮膚細胞に送達する。好ましい製剤は、所望の部位、例えば、局所創傷部位、慢性創傷、上皮組織表面、または噴霧、灌注、浸漬および／もしくは塗布による投与の他の目的とされる部位と接触されてよく；したがって、このような製剤は、薬剤組成物の皮膚透過性を試験するための当該分野において知られている多数の確立された方法（例えば、Ｗａｇｎｅｒら、２００２  Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１１８：５４０、およびこれに列挙されている文献；Ｂｒｏｎａｕｇｈら、１９８５  Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．７４：６４；Ｂｏｓｍａｎら、１９９８  Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ａｎａｌ．１７：４９３−４９９；Ｂｏｓｍａｎら、１９９６  Ｊ．Ｐｈａｒｍ  Ｂｉｏｍｅｄ  Ａｎａｌ．１９９６  １４：１０１５−２３；Ｂｏｎｆｅｒｏｎｉら、１９９９  Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｖ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．４：４５−５３；Ｆｒａｎｔｚ、Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ  ｆｏｒ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｓｋｉｎ  ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ  Ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ  ｆｏｒ  ｓｋｉｎ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ．Ｉｎ：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｓｋｉｎ  Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ（Ｋｅｍｐｐａｉｎｅｎ  ＆  Ｒｅｉｆｅｎｒａｔｈ、Ｅｄｓ）、ＣＲＣＰｒｅｓｓ、Ｆｌｏｒｉｄａ、１９９０、ｐｐ．３５−５９；Ｔｏｊｏ、Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ  ａｐｐａｒａｔｕｓ．Ｉｎ：Ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｓｙｓｔｅｍｉｃ  Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｃｈｉｅｎ  ＹＷ、Ｅｄ）、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９８７、１２７−１５８；Ｂａｒｒｙ、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  ｓｔｕｄｙｉｎｇ  ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ．Ｉｎ：Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ：Ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９８３、２３４−２９５を参照されたい）のいずれかにしたがって測定され得るように、皮膚内への素早い透過性を示し得る。
【０１０３】
対象または患者の皮膚に投与される組成物およびこのような組成物を含む製剤は、ある実施形態において、１種以上の投薬単位の形態をとってよく、ここで、例えば、液体が充填されたカプセルまたはアンプルは、単一の投薬単位を含有していてよく、エアゾール形態の本明細書に記載されている局所製剤の容器は、複数の投薬単位を保持していてよい。このような投薬形態を調製する実際の方法は、当業者に知られており、または明らかである；例えば、Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、２０ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ  Ｃｏｌｌｅｇｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ａｎｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、２０００）を参照されたい。投与される組成物または製剤は、いずれの事象においても、本教示にしたがって、治療有効量の、本明細書に提供されている消毒剤および／もしくは創傷治癒促進化合物（例えば、ＢＴ化合物）またはその薬学的に許容される塩を含有する。
【０１０４】
先に注記したように、本局所製剤は、広範な様々な形態のうちのいずれかをとり得、例えば、クリーム、ローション、溶液、スプレー、ゲル、軟膏、ペーストなどを含み、そして／または、リポソーム、ミセル、および／またはミクロスフェアを含有するように調製されてよい。例えば、米国特許第７，２０５，００３号を参照されたい。例えば、クリームは、医薬製剤および薬用化粧品製剤の技術分野においてよく知られているように、粘性液体、または水中油もしくは油中水のいずれかの半固体エマルションである。クリーム基剤は水洗可能であり、油相、乳化剤、および水相を含有する。「内側の」相とも呼ばれる油相は、石油および脂肪アルコール、例えばセチルまたはステアリルアルコールから一般に構成される。水相は、必須ではないが、通常、油相の体積を超えており、保湿剤を一般に含有する。クリーム製剤中の乳化剤は、一般に非イオン性、アニオン性、カチオン性または両性界面活性剤である。
【０１０５】
ローションは、化粧剤の送達に好ましく、摩擦なしに皮膚表面に適用される調製物であり、活性剤を含めた固体粒子が、水またはアルコール基剤中に存在する、典型的には液体または半液体調製物である。ローションは、通常、固体の懸濁液であり、水中油型の液体油性エマルションを好ましくは含む。ローションは、より流動性の組成物を適用する容易さのために、本明細書において、大きな体の領域を処置するのに好ましい製剤である。ローション中の不溶分が微細に分割されることが概して好ましい。ローションは、より良好な分散を引き起こすために懸濁剤を、ならびに活性剤を皮膚と接触させて局在化および保持するのに有用な化合物、例えば、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムなどを典型的には含有する。
【０１０６】
溶液は、溶解された物質の分子が溶媒の分子の間に分散するように、１種以上の化学物質（溶質）を液体に溶解させることによって調製される均一な混合物である。溶液は、他の薬学的に許容されるおよび／または薬用化粧品として許容される化学物質を含有して、溶質を緩衝化、安定化または保存し得る。溶液を調製するのに用いられる溶媒の一般的な例は、エタノール、水、プロピレングリコールまたは任意の他の薬学的に許容されるおよび／または薬用化粧品として許容されるビヒクルである。
【０１０７】
ゲルは、半固体の懸濁液タイプの系である。単一相のゲルは、典型的には水性であるだけでなく、好ましくは、アルコール、場合により油を含有する担体液体を通して実質的に均一に分散した有機高分子を含有する。好ましい「有機高分子」、すなわち、ゲル化剤は、化学的に架橋したポリマー、例えば、架橋したアクリル酸ポリマー、例えば、「カルボマー」群のポリマー、例えば、商標Ｃａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）で商業的に得られ得る、カルボキシポリアルキレンであってよい。好ましいある実施形態において、親水性ポリマー、例えば、ポリエチレンオキサイド、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマーおよびポリビニルアルコール；セルロースポリマー、例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、およびメチルセルロース；ゴム、例えば、トラガカントおよびキサンタンガム；アルギン酸ナトリウム；ならびにゼラチンであってもよい。均一なゲルを調製するために、アルコールまたはグリセリンなどの分散剤を添加してもよく、あるいはゲル化剤をトリチュレーション、機械的混合もしくは撹拌、またはこれらの組み合わせによって分散させてもよい。
【０１０８】
軟膏は、当該分野においてもよく知られているように、石油または他の石油誘導体を典型的にはベースとする半固体調製物である。用いられる具体的な軟膏基剤は、当業者に認識されているように、例えば、軟化性などの複数の特性を提供できるものである。他の担体またはビヒクルと同様に、軟膏基剤は、不活性、安定、非刺激性および非感作性であるべきである。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、１９ｔｈ  Ｅｄ．（Ｅａｓｔｏｎ、Ｐａ．：Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，１９９５）、１３９９−１４０４頁に説明されているように、軟膏基剤は、４分類にグループ化され得る：油質基剤；乳化性基剤；エマルション基剤；および水溶性基剤。油質軟膏基剤として、例えば、植物油、動物から得られる脂肪、および石油から得られる半固体炭化水素が挙げられる。乳化性軟膏基剤は、吸収性軟膏基剤としても知られており、水をほとんどまたは全く含有せず、例えば、硫酸ヒドロキシステアリン、無水ラノリン、および親水性石油が挙げられる。エマルション軟膏基剤は、油中水（Ｗ／Ｏ）エマルションまたは水中油（Ｏ／Ｗ）エマルションのいずれかであり、例えば、セチルアルコール、モノステアリン酸グリセリル、ラノリンおよびステアリン酸が挙げられる。好ましい水溶性軟膏基剤は、種々の分子量のポリエチレングリコールから調製される（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ、Ｉｄ．を参照されたい）。
【０１０９】
ペーストは、活性剤が好適な基剤中に懸濁されている半固体の投薬形態である。ペーストは、基剤の性質に応じて、脂肪ペーストまたは単一相の水性ゲルから作製されるものの間で分割される。脂肪ペースト中の基剤は、概して、石油または親水性石油などである。単一相の水性ゲルから作製されるペーストは、カルボキシメチルセルロースなどを基剤として一般に組み込む。
【０１１０】
製剤は、リポソーム、ミセル、およびミクロスフェアによって調製されてもよい。リポソームは、脂質二重層を含む、１個（単層）または複数個（多層）の脂質壁を有する微小ベシクルであり、本文脈において、本明細書に記載されている局所製剤、例えば、消毒剤、創傷治癒／皮膚組織／上皮組織修復促進化合物（例えば、１種以上の抗生物質を場合により伴う微粒子ＢＴ化合物）のうちの１種以上の成分、またはある担体もしくは賦形剤をカプセル化してよく、そして／またはこれを脂質膜表面に吸収させている。本明細書におけるリポソーム調製物として、カチオン性（正に帯電）、アニオン性（負に帯電）、および中性調製物が挙げられる。カチオン性リポソームは、容易に入手可能である。例えば、Ｎ［１−２，３−ジオレイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリエチルアンモニウム（ＤＯＴＭＡ）リポソームは、商品名Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ（登録商標）（ＧＩＢＣＯ  ＢＲＬ、Ｇｒａｎｄ  Ｉｓｌａｎｄ、Ｎ．Ｙ．）で入手可能である。同様に、アニオン性および中性リポソームも例えば、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ（Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ、ＡＬ）から容易に入手可能であり、または容易に入手可能な材料を用いて容易に調製され得る。このような材料として、中でも、ホスファチジルコリン、コレステロール、ホスファチジルエタノールアミン、ジオレイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジオレイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、およびジオレイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）が挙げられる。これらの材料は、適切な比でＤＯＴＭＡと混合されてもよい。これらの材料を用いてリポソームを作製するための方法は、当該分野においてよく知られている。
【０１１１】
ミセルは、極性頭部基が外側の球形シェルを形成するように配置された界面活性剤分子から構成されていることが当該分野において知られているが、疎水性炭化水素鎖は、球の中心に向かって配向されており、コアを形成している。ミセルは、ミセルが自然に生じるのに十分高い濃度で界面活性剤を含有する水溶液中で形成される。ミセルを形成するのに有用な界面活性剤として、限定されないが、ラウリン酸カリウム、オクタンスルホン酸ナトリウム、デカンスルホン酸ナトリウム、ドデカンスルホン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ドキュセートナトリウム、臭化デシルトリメチルアンモニウム、臭化ドデシルトリメチルアンモニウム、臭化テトラデシルトリメチルアンモニウム、塩化テトラデシルトリメチルアンモニウム、塩化ドデシルアンモニウム、ポリオキシル−８ドデシルエーテル、ポリオキシル−１２ドデシルエーテル、ノノキシノール１０、およびノノキシノール３０が挙げられる。
【０１１２】
ミクロスフェアは、同様に、現在記載されている局所製剤内に組み込まれていてよい。リポソームおよびミセルのように、ミクロスフェアは、本製剤の１種以上の成分を本質的にカプセル化する。これらは、必須ではないが、脂質、好ましくは帯電脂質、例えばリン脂質から概して形成される。脂質ミクロスフェアの調製は、当該分野においてよく知られている。
【０１１３】
当業者に知られている種々の添加物もまた、局所製剤に含まれていてよい。例えば、比較的少量のアルコールを含む溶媒が用いられて、ある製剤成分を可溶化させることができる。ある局所製剤に関して、あるいは特に重篤な皮膚損傷、例えば、手術後の急性もしくは慢性創傷または手術後の真皮創傷離開の場合には、局所製剤中に、製剤中に添加された皮膚透過促進剤を含むことが望ましい場合がある。好適な促進剤の例として、限定されないが、エーテル、例えば、ジエチレングリコールモノエチルエーテル（Ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ（登録商標）として商業的に入手可能）およびジエチレングリコールモノメチルエーテル；界面活性剤、例えば、ラウリン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ（登録商標）（２３１、１８２、１８４）、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）（２０、４０、６０、８０）、およびレシチン（米国特許第４，７８３，４５０号）；アルコール、例えば、エタノール、プロパノール、オクタノール、ベンジルアルコールなど；ポリエチレングリコールおよびそのエステル、例えば、ポリエチレングリコールモノラウレート（ＰＥＧＭＬ；例えば、米国特許第４，５６８，３４３号を参照されたい）；アミドおよび他の窒素化合物、例えば、尿素、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、２−ピロリドン、１−メチル−２−ピロリドン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、およびトリエタノールアミン；テルペン；アルカノン；ならびに有機酸、特に、クエン酸およびコハク酸が挙げられる。Ａｚｏｎｅ（登録商標）およびスルホキシド、例えば、ＤＭＳＯおよびＣ１０ＭＳＯが用いられてもよいが、あまり好ましくない。
【０１１４】
最も好ましい皮膚透過促進剤は、「可塑化」促進剤と典型的には称される親油性共促進剤、すなわち、約１５０〜１０００ダルトンの範囲の分子量、約１重量％未満、好ましくは約０．５重量％未満、最も好ましくは約０．２重量％未満の水溶解度を有する促進剤である。可塑化促進剤のヒルデブランド溶解度パラメータは、約２．５〜約１０の範囲内、好ましくは約５〜約１０の範囲内である。好ましい親油性促進剤は、脂肪エステル、脂肪アルコール、および脂肪エーテルである。特定の最も好ましい脂肪酸エステルの例として、ラウリン酸メチル、オレイン酸エチル、プロピレングリコールモノラウレート、プロピレングリセロールジラウレート、グリセロールモノラウレート、グリセロールモノオレエート、ｎ−ドデカン酸イソプロピルおよびドデシルミリスチン酸オクチルが挙げられる。脂肪アルコールとして、例えば、ステアリルアルコールおよびオレイルアルコールが挙げられるが、脂肪エーテルとして、ジオールまたはトリオール、好ましくはＣ２〜Ｃ４アルカンジオールまたはトリオールが１または２個の脂肪エーテル置換基によって置換されている化合物が挙げられる。さらなる皮膚透過促進剤が局所薬物送達の当業者に知られており、そして／または関連する文献に記載されている。例えば、Ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ  Ｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎ  Ｅｎｈａｎｃｅｒｓ、ｅｄｓ．Ｓｍｉｔｈら（ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ、Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ、ＦＬ、１９９５）を参照されたい。
【０１１５】
種々の他の添加物が、上記した添加物に加えて、本発明のある実施形態による局所製剤に含まれていてよい。これらとして、限定されないが、抗酸化剤、収瞼剤、香料、保存料、軟化剤、顔料、染料、保湿剤、プロペラント、および日焼け防止剤、ならびにその存在が化粧品として、医学的に、または別の場合に望ましくあり得る他の分類の材料が挙げられる。本発明のある実施形態による製剤に含まれる場合による添加物の典型的な例は、以下の通りである：保存料、例えば、ソルベート；溶媒、例えば、イソプロパノールおよびプロピレングリコール；収瞼剤、例えば、メタノールおよびエタノール；軟化剤、例えば、ポリアルキレンメチルグルコシド；保湿剤、例えば、グリセリン；乳化剤、例えば、グリセロールステアレート、ＰＥＧ−１００ステアレート、ポリグリセリル−３ヒドロキシラウリルエーテル、およびポリソルベート６０；ソルビトールおよび他のポリヒドロキシアルコール、例えば、ポリエチレングリコール；日焼け防止剤、例えば、オクチルメトキシルシンナメート（Ｐａｒｓｏｌ  ＭＣＸとして商業的に入手可能）およびブチルメトキシベンジルメタン（商品名Ｐａｒｓｏｌ  １７８９で入手可能）；抗酸化剤、例えば、アスコルビン酸（ビタミンＣ）、α−トコフェロール（ビタミンＥ）、β−トコフェロール、γ−トコフェロール、δ−トコフェロール、ε−トコフェロール、ζ１−トコフェロール、ζ２−トコフェロール、η−トコフェロール、およびレチノール（ビタミンＡ）；精油、セラミド、必須脂肪酸、鉱物油、湿潤剤ならびに他の界面活性剤、例えば、ＢＡＳＦ（Ｍｔ．Ｏｌｉｖｅ、ＮＪ）から入手可能なＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）シリーズの親水性ポリマー、植物油（例えば、大豆油、パーム油、シアバターの液体画分、ヒマワリ油）、動物油（例えば、パーヒドロスクアレン）、鉱物油、合成油、シリコーン油または蝋（例えば、シクロメチコンおよびジメチコン）、フッ素系油（一般に、ペルフルオロポリエーテル）、脂肪アルコール（例えば、セチルアルコール）、および蝋（例えば、蜜蝋、カルナウバ蝋、およびパラフィン蝋）；皮膚感触改良剤；ならびに増粘剤および構造要素、例えば、膨潤粘土および商標Ｃａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）で商業的に得られ得る架橋カルボキシポリアルキレンが挙げられる。
【０１１６】
他の添加物として、有益な剤、例えば、皮膚（特に、角質層における皮膚の上層）をコンディショニングし、ならびに、皮膚をその含水量の減少を遅延させることによって柔らかく保ちおよび／または皮膚を保護する材料が挙げられる。このようなコンディショニング剤および湿潤剤として、例として、ピロリジンカルボン酸およびアミノ酸；有機抗微生物剤、例えば、２，４，４’−トリクロロ２−ヒドロキシジフェニルエーテル（トリクロサン）および安息香酸；抗炎症剤、例えば、アセチルサリチル酸およびグリシルレチン酸；抗脂漏剤、例えば、レチノイン酸；血管拡張剤、例えば、ニコチン酸；メラニン形成阻害剤、例えば、コウジ酸；ならびにこれらの混合物が挙げられる。他の有利に含まれる薬用化粧品的活性剤として、例えば、α−ヒドロキシ酸、α−ケト酸、ポリマーヒドロキシ酸、湿潤剤、コラーゲン、海洋抽出物、および抗酸化剤、例えば、アスコルビン酸（ビタミンＣ）、α−トコフェロール（ビタミンＥ）もしくは他のトコフェロール、例えば、先に記載されているもの、およびレチノール（ビタミンＡ）、ならびに／または化粧品として許容される塩、エステル、アミド、またはそれらの他の誘導体が存在していてよい。さらなる化粧剤として、例えば、ＷＯ９４／０００９８およびＷＯ９４／００１０９に記載されているような、皮膚組織における酸素供給を改善することができるものが挙げられる。日焼け防止剤が含まれていてもよい。
【０１１７】
他の実施形態として、本発明のある実施形態の製剤による処置を容易にする種々の非発がん性、非刺激性の治癒材料を挙げることができる。このような治癒材料として、栄養素、ミネラル、ビタミン、電解質、酵素、ハーブ、植物抽出物、ハチミツ、腺もしくは動物抽出物、または製剤に添加されて真皮治癒を容易にすることができる安全な治療剤を挙げることができる。これらの種々の添加物の量は、化粧品分野において従来的に用いられている量であり、例えば、局所製剤の全重量の約０．０１％〜約２０％の範囲である。
【０１１８】
本発明のある実施形態の製剤として、従来の添加物、例えば、乳白剤、芳香剤、着色剤、ゲル化剤、増粘剤、安定剤、界面活性剤などを挙げることもできる。他の薬剤、例えば、抗微生物剤が添加されて、保存の際の腐敗を防止する、すなわち、微生物、例えば、酵母菌およびカビの成長を阻害することもできる。好適な抗微生物剤は、ｐ−ヒドロキシ安息香酸のメチルおよびプロピルエステル（例えば、メチルおよびプロピルパラベン）、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、イミド尿素、ならびにこれらの組み合わせから典型的には選択される。製剤は、刺激軽減添加物を含有して、抗感染性の急性もしくは慢性創傷治癒および投与される皮膚組織修復促進化合物から、または組成物の他の成分から生じる皮膚刺激または皮膚損傷の可能性を最小限にまたは排除することもできる。好適な刺激軽減添加物として、例えば：α−トコフェロール；モノアミンオキシダーゼ阻害剤、特に、フェニルアルコール、例えば、２−フェニル−１−エタノール；グリセリン；サリチレート；アスコルベート；イオノフォア、例えば、モネンシン；両親媒性アミン；塩化アンモニウム；Ｎ−アセチルシステイン；カプサイシン；およびクロロキンが挙げられる。刺激軽減添加物は、存在するとき、刺激または皮膚損傷を軽減するのに効果的な濃度で局所製剤内に組み込まれていてよく、典型的には製剤の約２０重量％以下、より典型的には約５重量％以下を表している。
【０１１９】
局所製剤はまた、消毒剤／創傷治癒／抗バイオフィルム／皮膚組織修復促進化合物（例えば、ＢＴ化合物、本明細書に提供されているように好ましくは実質的に均一な微粒子として、本明細書に記載されている１種以上の相乗作用のある抗生物質と場合により組み合わせて）に加えて、治療有効量の局所投与に好適な１種以上のさらなる薬理学的活性剤を含有していてもよい。このような薬剤として、リン脂質および酸素担持フッ化炭素またはフッ化炭素化合物混合物からなる非対称集合体を挙げることができ、例えば、国際特許出願第ＷＯ９４／０００９８号および同第ＷＯ９４／００１０９号に記載されているように、皮膚組織において酸素供給を改善することができる。
【０１２０】
本局所製剤に組み込まれて局所的に適用され得る好適な薬理学的活性剤として、限定されないが、以下を挙げることができる：色素沈着したまたは色素沈着していないしみ、角質繊維、およびしわを改善または根絶する薬剤；抗微生物剤；抗細菌剤；かゆみ止めおよび抗乾燥剤；抗炎症剤；局所麻酔薬および鎮痛剤；コルチコレステロイド；レチノイド（例えば、レチノイン酸；ビタミン；ホルモン；ならびに代謝拮抗薬。局所的な薬理学的活性剤のいくつかの例として、アシクロビル、アンフォテリシン、クロルヘキシジン、クロトリマゾール、ケトコナゾール、エコナゾール、ミコナゾール、メトロニダゾール、ミノサイクリン、ナイスタチン、ネオマイシン、カナマイシン、フェニトイン、パラアミノ安息香酸エステル、オクチルメトキシシンナメート、オクチルサリチレート、オキシベンゾン、ジオキシベンゾン、トコフェロール、トコフェリルアセテート、硫化セレン、亜鉛ピリチオン、ジフェンヒドラミン、プラモキシン、リドカイン、プロカイン、エリスロマイシン、テトラサイクリン、シリンダマイシン、クロタミトン、ヒドロキノンおよびそのモノメチルおよびベンジルエーテル、ナプロキセン、イブプロフェン、クロモリン、レチノイン酸、レチノール、レチニルパルミテート、レチニルアセテート、コールタール、グリセオフルビン、エストラジオール、ヒドロコルチゾン、ヒドロコルチゾン２１−アセテート、ヒドロコルチゾン１７−バレレート、ヒドロコルチゾン１７−ブチレート、プロゲステロン、ベタメタゾンバレレート、ベタメタゾンジプロピオネート、トリアムシノロンアセトニド、フルオシノニド、プロピオン酸クロベタゾール、ミノキシジル、ジピリダモール、ジフェニルヒダントイン、ベンジルペルオキシド、ならびに５−フルオロウラシルが挙げられる。先にも注記したように、ある実施形態は、抗生物質の製剤に、例えば、カルバペネム抗生物質、セファロスポリン抗生物質、フルオロキノロン抗生物質、グリコペプチド抗生物質、リンコサミド抗生物質、ペニシリナーゼ耐性ペニシリン抗生物質、アミノペニシリン抗生物質、またはアミノグルコシド抗生物質、例えば、アミカシンを含むことを意図する。
【０１２１】
薬理学的に許容される担体は、ある本実施形態の局所製剤に組み込まれていてもよく、当該分野において従来的に用いられている任意の担体であってよい。例として、水、低級アルコール、高級アルコール、ハチミツ、多価アルコール、単糖類、二糖類、多糖類、糖アルコール、例えば、グリコール（２−炭素）、グリセロール（３−炭素）、エリスリトールおよびトレイトール（４−炭素）、アラビトール、キシリトールおよびリビトール（５−炭素）、マンニトール、ソルビトール、ダルシトールおよびイジトール（６−炭素）、イソマルトール、マルチトール、ラクチトールおよびポリグリシトール、炭化水素油、油脂および油、蝋、脂肪酸、シリコーン油、非イオン性界面活性剤、イオン性界面活性剤、シリコーン界面活性剤、ならびにこのような担体の水系混合物およびエマルション系混合物が挙げられる。
【０１２２】
本発明の局所製剤の実施形態は、急性または慢性のいずれの創傷部位（例えば、創傷自体、および、感染によって悪影響を受けないと思われる周囲組織または正常なもしくは健康な組織を含めた周囲の組織）もしくは皮膚領域、または頻繁に処置を必要とする他の上皮組織表面（例えば、消化管、呼吸器、腺組織）に、所望の結果を達成するのに必要な量で定期的に適用されてよい。処置の頻度は、皮膚（または他の上皮組織）状態（例えば、急性もしくは慢性創傷または他の皮膚創傷、例えば、外科的切開から生じる離開、または他のタイプの皮膚創傷において見られ得るもの）の性質、損傷の程度、または皮膚（または他の組織）の劣化、使用者の皮膚（または他の組織）の応答、特定の実施形態では活性成分（例えば、本明細書に記載されている創傷治癒／消毒剤／抗バイオフィルム／皮膚組織修復促進化合物、例えば、ＢＴ化合物および場合によっては、１種以上のさらなる薬学的活性成分、例えば、抗生物質、例えば、アミカシンまたは他の抗生物質）の量、皮膚（または他の上皮表面含有組織）の適切な層内に活性成分を送達するのに用いられるビヒクルの有効性、救急絆もしくは他の包帯または衣類との物理的接触による、処方物の除去され易さ、あるいは汗または他の内在もしくは外在流体による処方物の除去、ならびに対象または患者の活動レベルもしくは生活スタイルに対する利便性に依存する。
【０１２３】
活性物質、例えば、本明細書に記載されているＢＴ化合物消毒剤／抗バイオフィルム／創傷治癒／皮膚組織修復促進組成物の典型的な濃度は、例えば、組成物の全重量を基準にして、約０．００１〜３０％から約０．０１〜５．０％、より好ましくは約０．１〜２．０％の範囲であり得る。一代表例として、本発明のこれらの実施形態の組成物は、急性もしくは慢性創傷および／または皮膚に、皮膚の約１．０ｍｇ／ｃｍ２〜皮膚の約２０．０ｍｇ／ｃｍ２に等しい割合で適用され得る。局所製剤の代表的な例として、限定されないが、エアゾール、アルコール、無水基剤（例えば、口紅および粉末）、水溶液、クリーム、エマルション（油中水または水中油のいずれかのエマルションを含む）、油脂、フォーム、ゲル、ヒドロアルコール溶液、リポソーム、ローション、マイクロエマルション、軟膏、油、有機溶媒、ポリオール、ポリマー、粉末、塩、シリコーン誘導体、および蝋が挙げられる。局所製剤として、例えば、キレート化剤、コンディショニング剤、軟化剤、賦形剤、保湿剤、保護剤、増粘剤、またはＵＶ吸収剤を挙げることができる。当業者は、列挙した以外の製剤が本発明の実施形態において用いられ得ることを認識するであろう。
【０１２４】
キレート化剤は、局所製剤に場合により含まれていてよく、化粧品組成物での使用に好適である任意の剤から選択されてよく、二価のカチオン性金属、例えば、Ｃａ２＋、Ｍｎ２＋、またはＭｇ２＋を結合する能力を有する任意の天然または合成化学物質を含んでいてよい。キレート化剤の例として、限定されないが、ＥＤＴＡ、二ナトリウムＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、クエン酸、およびジカルボン酸が挙げられる。
【０１２５】
コンディショニング剤もまた、局所製剤に場合により含まれていてよい。皮膚コンディショニング剤の例として、限定されないが、アセチルシステイン、Ｎ−アセチルジヒドロスフィンゴシン、アクリレート／ベヘニルアクリレート／ジメチコンアクリレートコポリマー、アデノシン、アデノシン環状リン酸、アデンソシンリン酸、アデノシン三リン酸、アラニン、卵白、藻類抽出物、アラントインおよび誘導体、アロエ・バルバデンシス抽出物、アルミニウムＰＣＡ、アミログルコシダーゼ、アルブチン、アルギニン、アズレン、ブロメライン、バターミルク粉末、ブチレングリコール、カフェイン、グルコン酸カルシウム、カプサイシン、カルボシステイン、カルノシン、ベータ−カロテン、カゼイン、カタラーゼ、セファリン、セラミド、カモミラ・レクティタ（マトリカリア）花抽出物、コレカルシフェロール、コレステリルエステル、ココベタイン、補酵素Ａ、コーンスターチ改質、クリスタリン、シクロエトキシメチコン、システインＤＮＡ、シトクロムＣ、ダルトシド、硫酸デキストラン、ジメチコンコポリオール、ヒアルロン酸ジメチルシラノール、ＤＮＡ、エラスチン、エラスチンアミノ酸、表皮成長因子、エルゴカルシフェロール、エルゴステロール、エチルヘキシルＰＣＡ、フィブロネクチン、葉酸、ゼラチン、グリアジン、ベータ−グルカン、グルコース、グリシン、グリコーゲン、糖脂質、糖タンパク質、グルコサミノグリカン、スフィンゴ糖脂質、セイヨウワサビペルオキシダーゼ、水素化タンパク質、加水分解タンパク質、ホホバ油、ケラチン、ケラチンアミノ酸、およびキネチン、ラクトフェリン、ラノステロール、ラウリルＰＣＡ、レシチン、リノール酸、リノレン酸、リパーゼ、リシン、リゾチーム、麦芽抽出物、マルトデキストリン、メラニン、メチオニン、ミネラル塩、ナイアシン、ナイアシンアミド、オートアミノ酸、オリザノール、パルミトイル加水分解タンパク質、パンクレアチン、パパイン、ＰＥＧ、ペプシン、リン脂質、フィトステロール、胎盤酵素、胎盤脂質、ピリドキサール５−リン酸、ケルセチン、酢酸レゾルシノール、リボフラビン、ＲＮＡ、サッカロミセス溶解質抽出物、シルクアミノ酸、スフィンゴ脂質、ステアラミドプロピルベタイン、パルミチン酸ステアリル、トコフェロール、トコフェリルアセテート、リノール酸トコフェリル、ユビキノン、ベニフェラ種（グレープ）シード油、小麦アミノ酸、キサンタンガム、ならびにグルコン酸亜鉛が挙げられる。先に列挙した以外の皮膚コンディショニング剤が、当業者によって容易に認識され得るように、開示されている組成物またはこれにより提供される調製物と組み合わされてよい。
【０１２６】
局所製剤は、１種以上の軟化剤も場合により含んでいてよく、その例として、限定されないが、アセチル化ラノリン、アセチル化ラノリンアルコール、アクリレート／Ｃ１０〜３０アルキルアクリレートクロスポリマー、アクリレートコポリマー、アラニン、藻類抽出物、アロエ・バルバデンシス抽出物もしくはゲル、ウスベニタチアオイ抽出物、オクテニルコハク酸トウモロコシデンプンエステルアルミニウム、ステアリン酸アルミニウム、アプリコット（アンズ）核油、アルギニン、アスパラギン酸アルギニン、アルニカ・モンタナ抽出物、アスコルビン酸、パルミチン酸アスコルビル、アスパラギン酸、アボカド（ペルセア・グラティッシマ）油、硫酸バリウム、バリアのスフィンゴ脂質、ブチルアルコール、蜜蝋、ベヘニルアルコール、ベータ−シトステロール、ＢＨＴ、カバノキ（シラカバ）樹皮抽出物、ルリヂサ（ボリジ）抽出物、２−ブロモ−２−ニトロプロパン−１，３−ジオール、ナギイカダ（ルスカス）抽出物、ブチレングリコール、キンセンカ抽出物、キンセンカ油、カンデリラ（トウダイグサ）蝋、キャノーラ油、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、ショウズク（カルダモン）油、カルナウバ（ブラジルロウヤシ）蝋、カラギーナン（アイリッスモス）、ニンジン（ニンジン）油、ヒマシ（トウゴマ）油、セラミド、セレシン、セテアレス−５、セテアレス−１２、セテアレス−２０、オクタン酸セテアリル、セテス−２０、セテス−２４、セチルアセテート、オクタン酸セチル、パルミチン酸セチル、カモミール（ローマカツミレ）油、コレステロール、コレステロールエステル、コレステリルヒドロキシステアレート、クエン酸、サルビア（オニサルビア）油、ココア（カカオノキ）バター、ココカプリル酸／カプリン酸、ココナツ（ココヤシ）油、コラーゲン、コラーゲンアミノ酸、コーン（トウモロコシ）油、脂肪酸、オレイン酸デシル、デキストリン、ジアゾリジニル尿素、ジメチコンコポリオール、ジメチコノール、アジピン酸ジオクチル、コハク酸ジオクチル、ジペンタエリスリトリルヘキサカプリル酸／ヘキサカプリン酸、ＤＭＤＭヒダントイン、ＤＮＡ、エリスリトール、エトキシジグリコール、リノール酸エチル、グロブルスユーカリ油、マツヨイグサ（メマツヨイグサ）油、脂肪酸、果糖、ゼラチン、ゼラニウム油、グルコサミン、グルタミン酸グルコース、グルタミン酸、グリセレス−２６、グリセリン、グリセロール、グリセリルジステアレート、ヒドロキシステアリン酸グリセリル、ラウリン酸グリセリル、リノール酸グリセリル、ミリスチン酸グリセリル、オレイン酸グリセリル、ステアリン酸グリセリル、ステアリン酸グリセリルＳＥ、グリシン、ステアリン酸グリコール、ステアリン酸グリコールＳＥ、グルコサミノグリカン、グレープ（ベニフェラ種）シード油、ハシバミ（カリカルパ・アメリカーナ）ナッツ油、ハシバミ（セイヨウハシバミ）ナッツ油、ヘキシレングリコール、ハチミツ、ヒアルロン酸、ハイブリッドサフラワー（ベニバナ）油、水添ヒマシ油、水添ココグリセリル、水添ココナツ油、水添ラノリン、水添レシチン、水添パームグリセリド、水添パーム核油、水添大豆油、水添タロウグリセリド、水添植物油、加水分解コラーゲン、加水分解エラスチン、加水分解グルコサミノグリカン、加水分解ケラチン、加水分解大豆タンパク質、水添ラノリン、ヒドロキシプロリン、イミダゾリジニル尿素、ヨードプロピニルブチルカルバメート、ステアリン酸イソセチル、イソセチルステアロイルステアレート、イソオレイン酸デシル、イソステアリン酸イソプロピル、ラノリン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸イソプロピル、イソステアラミドＤＥＡ、イソステアリン酸、乳酸イソステアリル、ネオペンタン酸イソステアリル、ジャスミン（真正ジャスミン）油、ホホバ（ブクサス・チネシス）油、昆布、ククイノキ（ククイナッツ）ナッツ油、ラクタミドＭＥＡ、ラネス−１６、ラネス−１０アセテート、ラノリン、ラノリン酸、ラノリンアルコール、ラノリン油、ラノリン蝋、ラベンダー（真正ラベンダー）油、レシチン、レモン（シトラス・メディカ・リモニウム）油、リノール酸、リノレン酸、マカデミアナッツ油、ステアリン酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、マルチトール、マトリカリア（カモミラ・レクティタ）油、メチルグルコースセスキステアリン酸、メチルシラノールＰＣＡ、微結晶蝋、鉱物油、ミルク油、クサレケカビ油、乳酸ミリスチル、ミリスチン酸ミリスチル、プロピオン酸ミリスチル、ネオペンチルグリコールジカプリル酸／ジカプリン酸、オクチルドデカノール、オクチルドデシルミリスチン酸塩、オクチルドデシルステアロイルステアレート、ヒドロキシステアリン酸オクチル、パルミチン酸オクチル、サリチル酸オクチル、ステアリン酸オクチル、オレイン酸、オリーブ（オレア・エウロパエア）油、オレンジ（シトラス・オーランティアム・ダルシス）油、パーム（アブラヤシ）油、パルミチン酸、パンテチン、パンテノール、パンテニルエチルエーテル、パラフィン、ＰＣＡ、モモ（ハナモモ）核油、ピーナッツ（ラッカセイ）油、ＰＥＧ−８Ｃ１２  １８エステル、ＰＥＧ−１５コカミン、ＰＥＧ−１５０ジステアレート、ＰＥＧ−６０グリセリルイソステアレート、ＰＥＧ−５グリセリルステアレート、ＰＥＧ−３０グリセリルステアレート、ＰＥＧ−７水添ヒマシ油、ＰＥＧ−４０水添ヒマシ油、ＰＥＧ−６０水添ヒマシ油、ＰＥＧ−２０メチルグルコースセスキステアリン酸、ＰＥＧ−４０ソルビタンペルオレエート、ＰＥＧ−５大豆ステロール、ＰＥＧ−１０大豆ステロール、ＰＥＧ−２ステアレート、ＰＥＧ−８ステアレート、ＰＥＧ−２０ステアレート、ＰＥＧ−３２ステアレート、ＰＥＧ−４０ステアレート、ＰＥＧ−５０ステアレート、ＰＥＧ−１００ステアレート、ＰＥＧ−１５０ステアレート、ペンタデカラクトン、ペパーミント（セイヨウハッカ）油、石油、リン脂質、ポリアミノ糖縮合物、ポリグリセリル−３ジイソステアレート、ポリクオタニウム−２４、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０、ポリソルベート８５、ミリスチン酸カリウム、パルミチン酸カリウム、ソルビン酸カリウム、ステアリン酸カリウム、プロピレングリコール、プロピレングリコールジカプリル酸／ジカプリン酸、ジオクタン酸プロピレングリコール、ジノナン酸プロピレングリコール、ラウリン酸プロピレングリコール���ステアリン酸プロピレングリコール、ステアリン酸プロピレングリコールＳＥ、ＰＶＰ、ジパルミチン酸ピリドキシン、クオタニウム−１５、クオタニウム−１８ヘクトライト、クオタニウム−２２、レチノール、レチニルパルミテート、米（イネ）ぬか油、ＲＮＡ、ローズマリー（ロスマリヌス・オフィシナリス）油、バラ油、サフラワー（ベニバナ）油、セージ（サルビア・オフィシナリス）油、サリチル酸、サンダルウッド（ビャクダン）油、セリン、血清タンパク質、ゴマ（セサマム・インディカム）油、シアバター（シアバターノキ）、シルク粉末、コンドロイチン硫酸エステルナトリウム、ナトリウムＤＮＡ、ヒアルロン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム、ナトリウムＰＣＡ、ポリグルタミン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、可溶性コラーゲン、ソルビン酸、ラウリン酸ソルビタン、オレイン酸ソルビタン、パルミチン酸ソルビタン、セスキオレイン酸ソルビタン、ステアリン酸ソルビタン、ソルビトール、大豆（ツルマメ）油、スフィンゴ脂質、スクアラン、スクアレン、ステラミドＭＥＡ−ステアレート、ステアリン酸、ステアロキシジメチコン、ステアロキシトリメチルシラン、ステアリルアルコール、グリチルレチン酸ステアリル、ヘプタン酸ステアリル、ステアリン酸ステアリル、ヒマワリ（ヘリアントゥス・アンヌウス）種子油、スイートアーモンド（プルヌス・アミグダルス・ドゥルキス）油、合成蜜蝋、トコフェロール、トコフェリルアセテート、リノール酸トコフェリル、トリベヘニン、ネオペンタン酸トリデシル、ステアリン酸トリデシル、トリエタノールアミン、トリステアリン、尿素、植物油、水、蝋、小麦（デュラム小麦）胚芽油、ならびにイランイラン（イランイランノキ）油が挙げられる。
【０１２７】
いくつかの実施形態において、局所製剤は、好適な賦形剤を含有していてよく、賦形剤は、典型的には、皮膚に対して高い親和性を有し、よく認容され、安定であり、利用を容易にする整合性を与えるべきである。好適な局所賦形剤およびビヒクルは、当業者によって特定の使用に関して、当該分野において標準的な多くのテキストの１つ、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｖｏｌ．１８、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ、Ｐａ．（１９９０）、特に第８７章を特に参照して、常套的に選択され得る。場合によっては、１種以上の保湿剤も局所製剤に含まれる。保湿剤の例として、限定されないが、アミノ酸、硫酸コンドロイチン、ジグリセリン、エリスリトール、フルクトース、グルコース、グリセリン、グリセロール、グリコール、１，２，６−ヘキサントリオール、ハチミツ、ヒアルロン酸、水添ハチミツ、水素化デンプン加水分解物、イノシトール、ラクチトール、マルチトール、マルトース、マンニトール、天然の湿潤因子、ＰＥＧ−１５ブタンジオール、ポリグリセリルソルビトール、ピロリドンカルボン酸の塩、カリウムＰＣＡ、プロピレングリコール、グルクロン酸ナトリウム、ナトリウムＰＣＡ、ソルビトール、スクロース、トレハロース、尿素、およびキシリトールが挙げられる。
【０１２８】
ある実施形態は、１種以上のさらなる皮膚保護剤を含有する局所製剤を意図する。皮膚保護剤の例として、限定されないが、藻類抽出物、アラントイン、水酸化アルミニウム、硫酸アルミニウム、ベタイン、カメリアシネンシスの葉の抽出物、セレブロシド、ジメチコン、グルクロノラクトン、グリセリン、カオリン、ラノリン、麦芽抽出物、鉱物油、石油、グルコン酸カリウム、およびタルクを挙げることができる。当業者は、先に列挙した以外の皮膚保護剤が、開示されている組成物またはこれにより提供される調製物と組み合わされてよいことを容易に認識するであろう。
【０１２９】
界面活性剤は、本明細書で意図されているある局所製剤に望ましくは含まれていてもよく、化粧品組成物における使用に好適な任意の天然または合成界面活性剤、例えば、カチオン性、アニオン性、両性イオン界面活性剤、またはこれらの混合物から選択され得る（Ｒｏｓｅｎ、Ｍ．、「Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓ  ａｎｄ  ｌｎｔｅｒｆａｃｉａｌ  Ｐｈｅｎｏｍｅｎａ」、Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９８８、第１章、ｐａｇｅｓ  ４  ３１を参照されたい）。カチオン性界面活性剤の例として、限定されないが、ＤＭＤＡＯまたは他のアミンオキサイド、長鎖第１級アミン、ジアミン、およびポリアミンならびにこれらの塩、第４級アンモニウム塩、ポリオキシエチレン化長鎖アミン、ならびに第４級化ポリオキシエチレン化長鎖アミンを挙げることができる。アニオン性界面活性剤の例として、限定されないが、ＳＤＳ；カルボン酸の塩（例えば、石鹸）；スルホン酸の塩、硫酸の塩、リン酸およびポリリン酸エステル；アルキルホスフェート；モノアルキルホスフェート（ＭＡＰ）；ならびにパーフルオロカルボン酸の塩を挙げることができる。両性イオン界面活性剤の例として、限定されないが、ココアミドプロピルヒドロキシスルテイン（ＣＡＰＨＳ）およびｐＨ−感受性であって処方物の適切なｐＨを設計する際に特別な注意を必要とする他のもの（すなわち、アルキルアミノプロピオン酸、イミダゾリンカルボキシレート、およびベタイン）またはｐＨ−感受性でないもの（例えば、スルホベタイン、スルテイン）を挙げることができる。非イオン性界面活性剤の例として、限定されないが、アルキルフェノールエトキシレート、アルコールエトキシレート、ポリオキシエチレン化ポリオキシプロピレングリコール、ポリオキシエチレン化メルカプタン、長鎖カルボン酸エステル、アルコノールアミド、第３級アセチレングリコール、ポリオキシエチレン化シリコーン、Ｎ−アルキルピロリドン、およびアルキルポリグルコシダーゼを挙げることができる。湿潤剤、鉱物油または他の界面活性剤、例えば、非イオン性洗剤、または剤、例えば、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（登録商標）シリーズ（ＢＡＳＦ、Ｍｔ．Ｏｌｉｖｅ、ＮＪ）のうちの１種以上のメンバーも含まれていてよく、例えば、非限定的な理論によると、微粒子懸濁液内でのＢＴ微粒子の凝集を阻止することができる。界面活性剤の任意の組み合わせが許容される。ある実施形態は、相溶性である、すなわち、混合されたときに目に見えて沈澱する錯体を形成しない少なくとも１種のアニオン性および１種のカチオン性界面活性剤または少なくとも１種のカチオン性および１種の両性イオン界面活性剤を含んでいてよい。
【０１３０】
ある局所製剤において存在していてもよい増粘剤の例として、限定されないが、アクリルアミドコポリマー、アガロース、アミロペクチン、ベントナイト、アルギン酸カルシウム、カルシウムカルボキシメチルセルロース、カルボマー、カルボキシメチルキチン、セルロースガム、デキストリン、ゼラチン、水添タロウ、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキプロピルデンプン、アルギン酸マグネシウム、メチルセルロース、微結晶セルロース、ペクチン、種々のＰＥＧ、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリビニルアルコール、種々のＰＰＧ、アクリル酸ナトリウムコポリマー、ナトリウムカラギーナン、キサンタンガム、および酵母ベータ−グルカンが挙げられる。先に列挙した以外の増粘剤も、本発明の実施形態において用いられてよい。
【０１３１】
本明細書で意図されているある実施形態によると、局所製剤は、１種以上の日焼け防止剤またはＵＶ吸収剤を含んでいてよい。紫外線（ＵＶＡおよびＵＶＢ）吸収特性が望まれるとき、このような剤として、例えば、ベンゾフェノン、ベンゾフェノン−１、ベンゾフェノン−２、ベンゾフェノン−３、ベンゾフェノン−４、ベンゾフェノン−５、ベンゾフェノン−６、ベンゾフェノン−７、ベンゾフェノン−８、ベンゾフェノン−９、ベンゾフェノン−１０、ベンゾフェノン−１１、ベンゾフェノン−１２、サリチル酸ベンジル、ブチルＰＡＢＡ、シンナメートエステル、シノキセート、ＤＥＡ−メトキシシンナメート、ジイソプロピルメチルシンナメート、エチルジヒドロキシプロピルＰＡＢＡ、エチルジイソプロピルシンナメート、エチルメトキシシンナメート、エチルＰＡＢＡ、ウロカニン酸エチル、グリセリルオクタノエートジメトキシシンナメート、グリセリルＰＡＢＡ、サリチル酸グリコール、ホモサレート、イソアミルｐ−メトキシシンナメート、チタン、亜鉛、ジルコニウム、ケイ素、マンガン、およびセリウムの酸化物、ＰＡＢＡ、ＰＡＢＡエステル、Ｐａｒｓｏｌ  １７８９、およびイソプロピルベンジルサリチレート、ならびにこれらの混合物を挙げることができる。当業者は、列挙した以外の日焼け防止剤およびＵＶ吸収剤または保護剤が本発明のある実施形態において用いられ得ることを認識するであろう。
【０１３２】
本明細書に開示されている局所製剤は、典型的には約２．５〜約１０．０の間のｐＨ値で効果的である。好ましくは、組成物のｐＨは、以下のｐＨ範囲内、またはその付近である：約ｐＨ５．５〜約ｐＨ８．５、約ｐＨ５〜約ｐＨ１０、約ｐＨ５〜約ｐＨ９、約ｐＨ５〜約ｐＨ８、約ｐＨ３〜約ｐＨ１０、約ｐＨ３〜約ｐＨ９、約ｐＨ３〜約ｐＨ８、および約ｐＨ３〜約ｐＨ８．５。最も好ましくは、ｐＨは、約ｐＨ７〜約ｐＨ８である。当業者は、適切なｐＨ調整成分を本発明の組成物に添加して、ｐＨを許容される範囲に調整することができる。「約」特定されたｐＨとは、実際に測定されたｐＨが、いつでも、０．７、０．６、０．５、０．４、０．３、０．２または０．１ｐＨ単位以下だけ特定された値よりも小さいまたは大きくてよい製剤を含むことが当業者によって理解され、ここで、製剤組成物および貯蔵条件により、元の値からのｐＨのずれを生じ得ることが認識される。
【０１３３】
クリーム、ローション、ゲル、軟膏、ペーストなどは、影響を受けた表面において広がっていてよく、穏やかにすり込まれてよい。溶液は、同じように適用されてよいが、より典型的には、ドロッパ、スワブなどによって適用されて、影響を受けた領域に注意深く適用され得る。適用レジメンは、容易に決定され得る多数の因子、例えば、創傷の重篤度および最初の処置への創傷の応答に依存し得るが、継続的に１日あたり１回以上の適用を通常は含み得る。当業者は、投与される製剤の最適量、投与方法および繰り返し数を容易に決定することができる。一般に、本発明のこれらおよび関係する実施形態は、１週間に１回または２回から、最大で１日に１回、２回、３回、４回またはそれより多くの範囲内で適用されてよいことが意図されている。
【０１３４】
先にも議論したように、本明細書において有用な局所製剤は、したがって、任意の好適な希釈剤または賦形剤を含めた薬学的に許容される担体も含有し、これは、自身が組成物を受容する対象に有害でなく、必要以上の毒性なしに投与され得る任意の医薬品を含む。薬学的に許容される担体として、限定されないが、液体、例えば、水、食塩水、グリセロールおよびエタノールなどが挙げられ、粘度向上剤（例えば、バルサムファー樹脂）またはフィルム形成剤、例えば、コロイジオンまたはニトロセルロース溶液を挙げることもできる。薬学的に許容される担体、希釈剤、および他の賦形剤の徹底的な議論は、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’Ｓ  ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ  ＳＣＩＥＮＣＥＳ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂ．Ｃｏ．、Ｎ．Ｊ．ｃｕｒｒｅｎｔ  ｅｄｉｔｉｏｎ）に提示されている。
【０１３５】
局所製剤がゲル−または液体−充填カプセル、例えば、ゼラチンカプセルの形態であるとき、該製剤は、上記のタイプの材料に加えて、液体担体、例えば、ポリエチレングリコールまたは油を含有していてよい。本発明のある実施形態の液体医薬組成物は、溶液であろうと、懸濁液であろうと、他の同様の形態であろうと、以下のうちの１種以上を含み得る：滅菌希釈剤、例えば、注射用水、食塩水溶液、好ましくは生理食塩水、リンゲル溶液、等張塩化ナトリウム、固定油、例えば、溶媒もしくは懸濁媒体として機能し得る合成モノもしくはジグリセリド、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の溶媒；抗細菌剤、例えば、ベンジルアルコールまたはメチルパラベン；さらなる抗酸化剤、例えば、アスコルビン酸または亜硫酸ナトリウム；キレート化剤、例えば、エチレンジアミンテトラ酢酸（ＥＤＴＡ）；緩衝剤、例えば、アセテート、シトレートまたはホスフェート、および等張性の調整のための剤、例えば、塩化ナトリウムまたはデキストロース。
【０１３６】
局所投与のために、担体は、溶液、エマルション、軟膏またはゲル基剤を好適に含み得る。基剤は、例えば、以下のうちの１種以上を含み得る：石油、ラノリン、ポリエチレングリコール、蜜蝋、鉱物油、希釈剤、例えば、水およびアルコール、ならびに乳化剤および安定剤。増粘剤は、局所投与用の医薬組成物または薬用化粧品組成物に存在し得る。経皮投与が意図されるとき、組成物は、経皮パッチまたはイオン泳動デバイスを含み得る。局所製剤は、約０．１〜約１０％ｗ／ｖ（単位体積あたりの重量）のある濃度の、本発明のある実施形態の化合物を含有し得る。局所製剤は、クリーム、ローション、溶液、スプレー、ゲル、軟膏、ペーストなどの形態で提供されてよく、そして／あるいはリポソーム、ミセル、ミクロスフェアおよび／または他の微粒子もしくはナノ粒子送達要素を含有していてよい。局所製剤はまた、創傷部位に直接投与することができる、徐放性のまたは持続放出性の粒子またはペレット、例えば、遅効性のエチレンビニルアセテートポリマー（例えば、Ｅｌｖａｘ（登録商標）４０、Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ、Ｗｌ）ペレットの形態で提供されてもよい。
【０１３７】
局所製剤は、皮膚組織修復促進化合物と結合することにより、皮膚上皮細胞（例えば、ケラチノサイト）および／または線維芽細胞へのその送達を助ける薬剤を含んでいてよい。この能力で作用し得る好適な薬剤として、包接化剤、例えば、シクロデキストリンが挙げられ；他の薬剤として、タンパク質またはリポソームを挙げることができる。
【０１３８】
本発明のある実施形態の局所製剤はまた、エアゾールとして投与され得る投薬単位の形態で提供されてもよい。用語エアゾールは、コロイド性質のものから、加圧パッケージからなる系まで、種々の系を表すのに用いられる。送達は、液化または圧縮ガスによってでも、活性成分を分配する好適なポンプ系によってでもよい。本発明のある実施形態の化合物のエアゾールは、活性成分（複数可）を送達するように、単相、二相または三相系で送達されてよい。エアゾールの送達は、必要な容器、賦活剤、バルブ、サブ容器などを含み、これらは、一緒になってキットを形成することができる。当業者は、必要以上の実験を行うことなく、皮膚にまたは創傷部位に局所製剤を送達するのに好ましいエアゾールを決定することができる。
【０１３９】
局所製剤は、医薬品分野においてよく知られている方法によって調製されてよい。例えば、創傷部位にまたは皮膚に、スプレー、洗浄液または濯ぎ液として投与されることが意図されている医薬組成物は、本明細書に記載されているＢＴ消毒剤／創傷治癒／抗バイオフィルム／皮膚組織修復促進化合物を、滅菌蒸留水と組み合わせることによって調製されて、溶液を形成することができる。界面活性剤が添加されて、均一な溶液または懸濁液の形成を容易にすることができる。界面活性剤は、抗酸化剤である活性化合物と非共有結合的に相互作用して、水性送達系における化合物の溶解または均一な懸濁を容易にするような化合物である。
【０１４０】
局所製剤での使用のためのＢＴ消毒剤／創傷治癒／抗バイオフィルム／皮膚組織修復促進化合物、またはこれらの薬学的に許容される塩は、治療有効量において決定され、該量は、創傷部位の性質（関連する場合）、使用される具体的なＢＴ化合物の活性（抗生物質、例えば、アミノグルコシド抗生物質、例えば、アミカシンの製剤が含まれているとき、またはこれが存在しないときを含む）；化合物の代謝安定性および作用の長さ；対象の年齢、体重、全体的な健康、性別、皮膚のタイプ、免疫状態、および食事；投与様式および時間；分泌速度；薬物の組み合わせ；皮膚組織修復が望まれる特定の皮膚創傷の重篤度；ならびに対象が受けている治療を含めた種々の因子に応じて変動し得る。一般に、１日の治療有効用量は、（７０ｋｇの哺乳動物にとって）約０．００１ｍｇ／ｋｇ（すなわち、０．０７ｍｇ）〜約１００ｍｇ／ｋｇ（すなわち、７．０ｇ）；好ましくは、治療有効用量は、（７０ｋｇの哺乳動物にとって）約０．０１ｍｇ／ｋｇ（すなわち、７ｍｇ）〜約５０ｍｇ／ｋｇ（すなわち、３．５ｇ）；より好ましくは、治療有効用量は、（７０ｋｇの哺乳動物にとって）約１ｍｇ／ｋｇ（すなわち、７０ｍｇ）〜約２５ｍｇ／ｋｇ（すなわち、１．７５ｇ）である。
【０１４１】
本明細書に提供されている有効用量の範囲は、限定的であることは意図されておらず、好ましい用量範囲を表している。しかし、最も好ましい投薬量は、当業者によって理解され、決定可能であるように、個々の対象に適合され得る（例えば、Ｂｅｒｋｏｗら、ｅｄｓ．，Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ、１６ｔｈｅｄｉｔｉｏｎ、Ｍｅｒｃｋ  ａｎｄ  Ｃｏ．，Ｒａｈｗａｙ、Ｎ．Ｊ．，１９９２；Ｇｏｏｄｍａｎら、ｅｄｓ．，Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、１０ｔｈｅｄｉｔｉｏｎ、Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、Ｉｎｃ．，Ｅｌｍｓｆｏｒｄ、Ｎ．Ｙ．，（２００１）；Ａｖｅｒｙ’ｓ  Ｄｒｕｇ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ、ＡＤＩＳ  Ｐｒｅｓｓ、Ｌｔｄ．，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ、ＭＤ．（１９８７）；Ｅｂａｄｉ、Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、Ｌｉｔｔｌｅ、Ｂｒｏｗｎ  ａｎｄ  Ｃｏ．，Ｂｏｓｔｏｎ、（１９８５）；Ｏｓｏｌｃｉ  ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１８ｔｈｅｄｉｔｉｏｎ、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ（１９９０）；Ｋａｔｚｕｎｇ、Ｂａｓｉｃ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、Ａｐｐｌｅｔｏｎ  ａｎｄ  Ｌａｎｇｅ、Ｎｏｒｗａｌｋ、ＣＴ（１９９２）を参照されたい）。
【０１４２】
各処置に必要とされる全用量は、所望により、１日を通して複数回で投与されても単回で投与されてもよい。ある好ましい実施形態は、１日あたり、局所製剤の単回適用を意図しており、別の実施形態では、処置が、化合物の最適用量未満であるより少ない投薬量で開始されてよい。その後、投薬量は、この条件下で最適な効果に到達するまで、少しずつ増やされる。
【０１４３】
局所製剤は、単独で、あるいは、皮膚創傷を対象とする、または他の関連する症状もしくは病因因子を対象とする他の処置および／または医薬品と併せて投与されてよい。例えば、先にも注記したように、局所製剤は、レチノイン酸をさらに含んでいてよい。別の例として、局所製剤は、本明細書に記載されている１種以上の皮膚組織修復促進化合物を含んでいてよく、または、異なる細胞創傷修復活性を有する２種以上のこのような化合物を含んでいてよい。
【０１４４】
本明細書に記載されている局所製剤の受容体は、任意の脊椎動物、例えば、哺乳動物であってよい。哺乳動物の中でも、好ましい受容体は、霊長目（ヒト、サル（ａｐｅ）およびサル（ｍｏｎｋｅｙ）を含む）、偶蹄類（ウマ、ヤギ、ウシ、ヒツジ、ブタを含む）、齧歯類（マウス、ラット、ウサギ、およびハムスターを含む）および食肉類（ネコおよびイヌを含む）の哺乳動物である。鳥類の中で、好ましい受容体は、シチメンチョウ、ニワトリおよび同様の他のメンバーである。最も好ましい受容体はヒトであり、特に好ましくは、１種以上の急性もしくは慢性創傷またはバイオフィルムを含有する創傷を有するヒトである。
【０１４５】
局所適用に関して、本明細書に記載されているＢＴ化合物消毒剤／創傷治癒／抗バイオフィルム／皮膚組織修復促進化合物を含む、有効量の医薬組成物を、標的領域、例えば、皮膚創傷、例えば、急性もしくは慢性創傷、および／または皮膚の潜在的に危険な領域（例えば、創傷離開のため）などに投与することが好ましい。この量は、処置される領域、創傷（またはこれまでのもしくは意図されている外科的切開）の重篤度、および使用される局所ビヒクルの性質に応じて、１回の適用あたり本発明のある実施形態化合物が一般に０．０００１ｍｇ〜約１ｇの範囲であり得る。好ましい局所調製物は、軟膏または遅効性のペレットであり、ここで、軟膏基剤またはペレット懸濁液１ｃｃあたり約０．００１〜約５０ｍｇの活性成分が用いられる。医薬組成物は、経皮組成物または経皮送達デバイス（「パッチ」）として製剤化され得る。このような組成物として、例えば、裏当て、活性化合物リザーバ、制御膜、ライナーおよび接触接着剤が挙げられる。このような経皮パッチを用いて、所望に応じた本発明の化合物の連続的なパルス送達または要望に応じた送達を提供することができる。
【０１４６】
ある実施形態の組成物は、当該分野において知られている手順を使用することによって、患者への投与後に、迅速な、持続性の、または遅延性の放出を提供するように製剤化され得る。制御放出による薬物送達系として、浸透圧ポンプ系、およびポリマーコートされたリザーバまたは薬物ポリマーマトリックス製剤を含有する溶解系が挙げられる。制御放出系の例は、米国特許第３，８４５，７７０号および同第４，３２６，５２５号、ならびにＰ．Ｊ．Ｋｕｚｍａら、Ｒｅｇｉｏｎａｌ  Ａｎｅｓｔｈｅｓｉａ  ２２（６）：５４３−５５１（１９９７）に付与されており、これらの全ては、参照により本明細書に組み込まれる。
【０１４７】
最も好適な経路は、処置される状態の性質および重篤度に依存し得る。当業者は、局所投与方法（スプレー、クリーム、開放適用、閉鎖包帯、浸漬液、洗浄液など）、投薬形態、好適な薬学的賦形剤および必要とする対象への化合物の送達に関連する他の事項を決定することにも精通している。
【０１４８】
本明細書を通して、文脈が別途必要としない限り、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、記述した工程もしくは要素または工程群もしくは要素群を含むが、任意の他の工程もしくは要素または工程群もしくは要素群を排除しないことを示唆していることが理解されよう。「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」により、句「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」に続くものはいずれも含み、これに限定されることが意味される。したがって、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」は、列挙した要素が必要とされまたは必須であること、および他の要素が存在し得ないことを示している。「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」により、句の後に列挙されているいずれの要素も含み、列挙した要素に関する開示において特定された活性または作用を妨害しないまたはそれに寄与しない他の要素に限定されることを意味している。したがって、句「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」は、列挙した要素が必要とされまたは必須であるが、他の要素が必要でないこと、およびこれらが列挙した要素の活性または作用に影響するか否かに応じて存在し得るまたは存在し得ないことを示している。
【０１４９】
本明細書および添付の特許請求の範囲において、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈が別途明確に指示しない限り、複数の言及を含む。本明細書において、特に実施形態において用いられるとき、用語「約（ａｂｏｕｔ）」または「約（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）」は、数値に先行するとき、その値±５％、±６％、±７％、±８％または±９％の範囲内であることを示している。別の実施形態において、用語「約（ａｂｏｕｔ）」または「約（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）」は、数値に先行するとき、その値±１０％、±１１％、±１２％、±１３％または±１４％の範囲内であることを示している。なお別の実施形態において、用語「約（ａｂｏｕｔ）」または「約（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）」は、数値に先行するとき、その値±１５％、±１６％、±１７％、±１８％、±１９％または±２０％の範囲内であることを示している。
【０１５０】
以下の実施例は、実例として提示されており、限定ではない。
実施例
【０１５１】
実施例１
ＢＴ化合物の調製
以下のＢＴ化合物を、Ｄｏｍｅｎｉｃｏらの方法（米国再発行特許番号第３７，７９３号、米国特許番号第６，２４８，３７１号、米国特許番号第６，０８６，９２１号、米国特許番号第６，３８０，２４８号）によって、もしくはＢｉｓＥＤＴについて後述する合成プロトコルに従う微小粒子として調製した。使用する反応剤と、含硫化合物を有する三価の複合体を形成するビスマスの周知の傾向の化学量論的比に基づいて、単一のビスマス原子と関連する原子比を比較のために示す。括弧内の数は、ビスマスと１つの（または１より大きい）チオール薬剤との比である（例えば、Ｂｉ：チオール１／チオール２；表１参照）。
１）ＣＰＤ １ Ｂ−１ Ｂｉｓ−ＥＤＴ（１：１）ＢｉＣ２Ｈ４Ｓ２
２）ＣＰＤ １ Ｂ−２ Ｂｉｓ−ＥＤＴ（１：１．５）ＢｉＣ３Ｈ６Ｓ３ 
３）ＣＰＤ １ Ｂ−３ Ｂｉｓ−ＥＤＴ（１：１．５）ＢｉＣ３Ｈ６Ｓ３
４）ＣＰＤ １ Ｃ Ｂｉｓ−ＥＤＴ（可溶なＢｉ調製）（１：１．５）ＢｉＣ３Ｈ６Ｓ３ 
５）ＣＰＤ ２Ａ Ｂｉｓ−Ｂａｌ（１：１）ＢｉＣ３Ｈ６Ｓ２Ｏ
６）ＣＰＤ ２Ｂ Ｂｉｓ−Ｂａｌ（１：１．５）ＢｉＣ４.５Ｈ９Ｏ１．５Ｓ３
７）ＣＰＤ ３Ａ Ｂｉｓ−Ｐｙｒ（１：１．５）ＢｉＣ７.５Ｈ６Ｎ１．５Ｏ１．５Ｓ１．５ 
８）ＣＰＤ ３Ｂ Ｂｉｓ−Ｐｙｒ（１：３）ＢｉＣ１５Ｈ１２Ｎ３Ｏ３Ｓ３ 
９）ＣＰＤ ４ Ｂｉｓ−Ｅｒｙ（１：１．５）ＢｉＣ６Ｈ１２Ｏ３Ｓ３ 
１０）ＣＰＤ ５ Ｂｉｓ−Ｔｏｌ（１：１．５）ＢｉＣ１０.５Ｈ９Ｓ３
１１）ＣＰＤ ６ Ｂｉｓ−ＢＤＴ（１：１．５）ＢｉＣ６Ｈ１２Ｓ３ 
１２）ＣＰＤ ７ Ｂｉｓ−ＰＤＴ（１：１．５）ＢｉＣ４.５Ｈ９Ｓ３ 
１３）ＣＰＤ ８−１ Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＢＤＴ（１：１／１）
１４）ＣＰＤ ８−２ Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＢＤＴ （１：１／０．５）  
１５）ＣＰＤ ９ Ｂｉｓ−２ヒドロキシ、プロパンチオール（１：３）
１６）ＣＰＤ １０ Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｂａｌ（１：１／０．５）
１７）ＣＰＤ １１ Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＥＤＴ（１：１／０．５）  
１８）ＣＰＤ １２ Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｔｏｌ（１：１／０．５）
１９）ＣＰＤ １３ Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／ＰＤＴ（１：１／０．５）
２０）ＣＰＤ １４ Ｂｉｓ−Ｐｙｒ／Ｅｒｙ（１：１／０．５）  
２１）ＣＰＤ １５ Ｂｉｓ−ＥＤＴ／２ヒドロキシ、プロパンチオール（１：１／１）
【０１５２】
微粒子ビスマス−１,２−エタンジチオール（Ｂｉｓ−ＥＤＴ、可溶なビスマス調製）を、次のように調製した。
【０１５３】
１５Ｌポリプロピレンカーボーイ中の５％ＨＮＯ３過剰（１１．４Ｌ）水溶液に、室温にて０．３３１Ｌ（〜０．５７５モル）のＢｉ（ＮＯ３）３水溶液（４３％Ｂｉ（ＮＯ３）３（ｗ／ｗ）、５％硝酸（ｗ／ｗ）、５２％水（ｗ/ｗ）、Ｓｈｅｐｈｅｒｄ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ社、Ｃｉｎｃｉｎｎａｔｉ, ＯＨ、（製品番号２３６２；δ〜１．６ ｇ／ｍＬ）を撹拌しながら液滴状にゆっくり添加し、続いて無水エタノール（４Ｌ）を徐々に添加した。若干の白色沈殿物が形成したが、撹拌の続行によって溶解した。１．５Ｌの無水エタノールと７２．１９ｍＬ（０．８６３モル）の１，２−エタンジチオールを６０ｍＬシリンジを使用して加え、５分間撹拌して１，２−エタンジチオール（ＣＡＳ ５４０−６３−６）のエタノール溶液（〜１．５６ Ｌ, 〜０．５５ Ｍ）を別途調製した。Ｂｉ（ＮＯ３）３／ＨＮＯ３水溶液に、５時間かけて１，２−エタンジチオール／ＥｔＯＨ試薬を滴状にゆっくり添加し、一晩撹拌し続けた。形成した生成物をほぼ１５分間かけて沈殿物とし、その後、蠕動ポンプを使用して濾液を３００ｍＬ／分で除去した。生成物は次いで濾過によって直径１５ｃｍのブフナー漏斗の微細なろ紙上に集められ、エタノール、ＵＳＰ水およびアセトンの各体積５００ｍＬの３種で順次洗浄されて黄色のアモルファス粉末固形物としてＢｉｓＥＤＴ（６９４．５１ｇｍ／モル）を得た。生成物を５００ｍＬの琥珀色ガラス瓶に入れ、高真空下４８時間ＣａＣｌ２上で乾燥させた。回収した材料（収量〜２００ｇ）は、チオール特有の臭気を放った。粗生成物を７５０ｍＬの無水エタノールに再溶解させ、３０分間撹拌し、次いで濾過し、３×５０ｍＬのエタノール、２×５０ｍＬのアセトンで順次洗浄し、５００ｍＬのアセトンで再び洗浄した。再洗浄した粉末を１ＭのＮａＯＨ（５００ｍＬ）で混練し、濾過し、３×２２０ｍＬの水、２×５０ｍＬのエタノールおよび１×４００ｍＬのアセトンによって洗浄し、１５６．７４ｇｍの精製ＢｉｓＥＤＴを産出した。本質的に同様な次のバッチによって約７８〜９１%の収率が得られた。
【０１５４】
生成物は、１Ｈおよび１３Ｃ核磁気共鳴（ＮＭＲ）、赤外線分光計（ＩＲ）、紫外線分光計（ＵＶ）、質量分析計（ＭＳ）および元素分析からのデータ解析によって上記化学式Ｉで示される構造を有することを特徴とする。ＨＰＬＣ方法はＢｉｓＥＤＴの化学的純度を決定するために開発され、サンプルはＤＭＳＯ（０．５ｍｇ/ｍＬ）内で調製された。λｍａｘは、１９０〜６００ｎｍ間のＤＭＳＯ中のＢｉｓＥＤＴの溶液を走査することによって決定された。均一濃度の移動相を１ｍＬ/ｍｉｎで流したＨＰＬＣ溶出は、周囲環境で実行された。移動相は、０．１％ギ酸を含むアセトニトリル：水（９：１）とした。ＨＰＬＣは、Ｗａｔｅｒｓ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社、Ｍｉｌｆｏｒｄ、ＭＡ）モデル２６９５クロマトグラフを使用した。ＵＶ検出器は２６５ｎｍ（λｍａｘ）でモニタリングした。注入量は２μＬとした。分析カラムは、ＹＭＣＰａｃｋＰＶＣＳｉｌＮＰ（５μｍ、内径２５０×４．６ｍｍ）（Ｗａｔｅｒｓ）を使用した。上記ＨＰＬＣ溶出により、１００±０．１％の化学純度を示す単一ピークが検出された。元素分析の結果は、化学式（Ｉ）の構造と整合した。
【０１５５】
乾燥した粒子状物質の粒度特性を査定するために特徴づけを行った。簡潔に記載すると、微小粒子は２％Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標） Ｆ−６８（ＢＡＳＦ、Ｍｔ. Ｏｌｉｖｅ、ＮＪ） 中で再懸濁され、懸濁液は製造業者の推奨に従いＮａｎｏｓｉｚｅｒ／Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ−Ｓ粒子アナライザ（型ＺＥＮ１６００（ゼータ電位測定能力無し）、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｗｏｒｃｅｓｔｅｒｓｈｉｒｅ、英国）を使用した分析に先立ち、基準セッティングにて水槽超音波発生装置で１０分間、音波破砕された。２つの測定のコンパイルされたデータから、微小粒子は体積平均径（ＶＭＤ）約０．６ミクロンと４ミクロンとの間の全ての検出可能結果で単峰形分布を呈し、約１．３ミクロンにてピークＶＭＤを持った。対照的に、ＢｉｓＥＤＴを従来の方法（Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、１９９７ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ. Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ、４１（８）：１６９７−１７０３）で調製すると、大多数の粒子は異種分散的であり極端に大きな寸法の粒子であって、ＶＭＤを基礎としたそれらの特性を排除するものとなった。
【０１５６】
実施例２
慢性創傷感染のコロニーバイオフィルムモデル：ＢＴ化合物による阻害
慢性創傷の中に存在する細菌がバイオフィルム生活様式を採用するので、ＢＴは記載されている方法に主として従って調製されたバイオフィルムを使用している細菌性の細胞生存に対する影響のためのバイオフィルムに対して検査された（Ａｎｄｅｒｌら、２００３ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ ４７：１２５１−５６;Ｗａｌｔｅｒｓら，２００３  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ４７：３１７；Ｗｅｎｔｌａｎｄら、１９９６ Ｂｉｏｔｃｈｎｏｌ.Ｐｒｏｇ. １２：３１６；Ｚｈｅｎｇら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ ４６：９００）。
簡潔に記すと、１０％トリプシン性大豆寒天上でコロニーバイオフィルムを２４時間成長させ、処理を含めてミュラーヒントンプレートへ移した。処理の後、バイオフィルムは２％ｗ／ｖグルタチオン（ＢＴを中和）を含むペプトン水へ分散され、計数用のプレートの上に点状に配置される前にペプトン水で順次希釈された。慢性創傷から分離された２つの細菌が、検定用のコロニーバイオフィルムの生成において分離して使用された。これらはグラム陰性菌株の緑膿菌、およびグラム陽性のメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）である。
【０１５７】
主として記載されているように、寒天平板上に安置する微細多孔膜上で細菌性バイオフィルムコロニーを成長させた（Ａｎｄｅｒｌら、２００３ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ ４７：１２５１−５６；Ｗａｌｔｅｒｓら，２００３  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  ４７：３１７；Ｗｅｎｔｌａｎｄら、１９９６ Ｂｉｏｔｃｈｎｏｌ．Ｐｒｏｇ. １２：３１６；Ｚｈｅｎｇら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ ４６：９００）。コロニーバイオフィルムは他のバイオフィルムモデルの多くのよく知られている特徴を呈した。例えば、それらは高度に水和したマトリックスにおいて高密度に凝集した細胞から構成された。他者によって報告されているように、（Ｂｒｏｗｎ ら、Ｊ Ｓｕｒｇ Ｒｅｓ ５６：５６２；Ｍｉｌｌｗａｒｄら、１９８９ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｓ ５８：１５５； Ｓｕｔｃｈら、１９９５ Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ ４７：１０９４； Ｔｈｒｏｗｅｒら、１９９７ Ｊ Ｍｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ ４６：４２５） コロニーバイオフィルムの細菌がより複雑化したｉｎ  ｖｉｔｒｏバイオフィルム反応器において定量されたと同一の非常に低減した抗菌感受性を呈することが観察された。コロニーバイオフィルムは直ちに、そして再現性良くに多数生成された。非極限理論によれば、このコロニーバイオフィルムモデルは感染創傷のいくつかの特徴を共有した：細菌は、バイオフィルムの下から、かつ、最小の流動から供給される栄養素を有する空気界面で成長した。様々な栄養素源はコロニーバイオフィルムを培養するために用いられ、血液寒天培地を含み、ｉｎ  ｖｉｖｏの栄養素状態を模倣すると信じられている。
コロニーバイオフィルムは、直径２５ｍｍのポリカーボネートフィルタ皮膜の上へ、プランクトンの細菌性液体培養の５μＬ点に接種することによって調製された。皮膜は、一面につき１０分間の紫外線に曝すことによって、接種前に殺菌した。接種材料は、細菌性の培地内で３７℃にて一晩成長し、皮膜上への析出の前に新しい培地において希釈され６００ｎｍで０．１の光学濃度となった。皮膜は、次いで増殖培地を含む寒天プレートに静置された。次いで、寒天プレートは３７℃のインキュベータにおいて、カバーされ、静置され、そして倒置された。２４時間毎に、皮膜およびコロニーバイオフィルムは殺菌鉗子を使用して新しいプレートに移された。コロニーバイオフィルムは４８時間の成長の後、概して実験のために使われ、その時には、一皮膜につきほぼ１０９の細菌があった。コロニーバイオフィルム方法は、多種多様な単一種および混合種のバイオフィルムを培養するために成功的に採用された。
【０１５８】
抗菌剤（例えばＢＴ化合物の組み合わせを含むＢＴ化合物；抗生物質；およびＢＴ化合物−抗生物質の組み合わせ）に対する感受性を測定するために、コロニーバイオフィルムは抗菌治療剤候補物質（複数可）を補充した寒天プレートへ移された。抗菌治療に対する露出の持続期間が２４時間を越えた所で、コロニーバイオフィルムは毎日新しい処理プレートへ移した。治療期間の終わりに、コロニーバイオフィルムは、１０ｍｌの緩衝剤を含む管内に置かれ、１〜２分間ボルテックスしてバイオフィルムを分散させた。幾つかの場合では、簡潔に組織ホモジナイザでサンプルを処理して細胞凝集体を分解することが必要であった。結果として得られた細胞懸濁液は次いで連続的に希釈され、生存細菌を数え上げるために蒔き、単位面積当たりのコロニー形成単位（ＣＦＵ）として報告された。生存データは、ｌｏｇ１０変換を使用して分析された。
【０１５９】
細菌性バイオフィルムコロニー培養の各タイプのための（緑膿菌、ＰＡ； メチシリン耐性黄色ブドウ球菌、ＭＲＳＡまたはＳＡ）について、５種類の抗生物質および１３種類のＢＴ化合物を検査した。ＰＡに対して検査した抗菌剤には、本願明細書においてＢｉｓＥＤＴとして言及したＢＴと化合物２Ｂ、４、５、６、８−２、９、１０、１１および１５（表１参照）および抗生物質トブラマイシン、アミカシン、 イミペネム、セファゾリンおよびシプロフロキサシンが含まれた。ＳＡに対して検査した抗菌剤には、本願明細書においてＢｉｓＥＤＴとして言及したＢＴと化合物２Ｂ、４、５、６、８−２、９、１０、１１および１５（表１参照）および抗生物質リファンピシン、ダプトマイシン、ミノサイクリン、アンピシリンおよびバンコマイシンが含まれた。「図面の簡単な説明」に記載の確立した微生物学的な方法論に従って抗生物質は最小成長阻止濃度（ＭＩＣ）のおよそ１０〜４００倍の濃度で検査された。
【０１６０】
７種のＢＴ化合物は、検査した濃度での生存ＰＡ細菌に対して明確な効能を呈し、そして、２種類のＢＴ化合物は検査した濃度で生存ＭＲＳＡに対して明確な効能を呈した；代表的な結果では生存細菌に対するＢＴ効果が図１においてＢｉｓＥＤＴおよびＢＴ化合物２Ｂ（ＰＡに対する検査）に関して示され、かつ、図２においてＢＴ化合物２Ｂおよび８−２（ＳＡに対する検査）に関して示され、両方の場合において指示した抗生物質の効能と関連する。図１および図２においても示される通り、示した抗生物質と組み合わせた指示したＢＴ化合物の包含は相乗効果に帰結し、生存細菌を減縮させる力は抗生物質単独かＢＴ化合物単独かどちらかの抗菌効能と関連して強化された。ＰＡ生存分析では、８０μｇ／ｍＬ濃度での化合物１５（Ｂｉｓ−ＥＤＴ／２ヒドロキシ、プロパンチオール（１：１/１））は、１６００μｇ／ｍＬ ＡＭＫ＋８０μｇ／ｍＬ ＢｉｓＥＤＴ（図１）の組み合わせを使用して得られた効果と同等の効能（図示せず）を呈した。
【０１６１】
実施例３
慢性創傷感染の滴状流れバイオフィルムモデル：ＢＴ化合物による阻害
滴状流れバイオフィルムは細菌性バイオフィルムに対する候補抗菌化合物を形成して効能を検査するための技術を受け入れた標準モデルを表わす。滴状流れバイオフィルムは、滴状流れ反応器のチャネルに置かれるクーポン（基板）に生成する。凍結したガラス製の顕微鏡スライドを含む多くの異なるタイプの材料が細菌性バイオフィルム形成のための基板として使用される。栄養豊富な液状の媒体は滴状流れバイオリアクタ細胞チャンバーに入り、最上部の近くの細胞チャンバーに滴下し、次いで１０℃の傾斜のクーポンの長さを流下する。
【０１６２】
バイオフィルムは滴状流れバイオリアクタにおいて成長し、ＢＴ化合物の個々に若しくは組み合わせおよび／または抗生物質化合物の個々に若しくはＢＴ化合物を含む他の抗菌剤との組み合わせ、或いは他の慢性創傷用の従来のまたは候補治療に供される。ＢＴ化合物は、このように滴状流れ反応器内の細菌性バイオフィルムに対するそれらの効果のために特徴づけられる。滴状流れ反応器内のバイオフィルムは、確立した方法論（例えばＳｔｅｗａｒｔら、２００１  Ｊ Ａｐｐｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ. ９１：５２５； Ｘｕら、１９９８ Ａｐｐｌ. Ｅｎｖｉｒｏｎ. Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ. ６４：４０３５）によって調製される。この設計は、蓋をした細菌チャンバーの傾斜したポリスチレンクーポン上でバイオフィルムを培養することを含む。典型的な培地は、1ｇ／ｌのグルコース、０．５ｇ／ｌのＮＨ４ＮＯ３、０．２５ｇ／ｌのＫＣＩ、０．２５ｇ／ｌのＫＨ２ＰＯ４、０．２５ｇ／ｌのＭｇＳＯ４−７Ｈ２Ｏを含み、慢性創傷においてｉｎ  ｖｉｖｏバイオフィルム成長条件と同様に血清蛋白質の豊富な、鉄限定条件を模倣するｖ／ｖ成育ドナー牛の血清（ｐｈ ６．８）で補充される。この媒体は別離している４つの平行チャンバー内に含まれる４枚のクーポン上を滴状に（５０ｍＬ／時間）流れ、各平行チャンバーは１０ｃｍ×１．９ｃｍ、深さ１．９ｃｍである。チャンバー内の反応器は、ポリスルホンプラスチック製である。各チャンバーは、堅く封止できる個々に脱離可能なプラスチックの蓋を装着している。バイオフィルム反応器は３７℃にてインキュベータに収容され、かつ、細菌性細胞培地はインキュベータ内に保持されたアルミニウム放熱板を通過することによって暖められる。この方法は、特定のバイオフィルムにおいて観察される耐抗生物質の表現型を再生し、栄養素の継続的な補充を提供しつつ低流体せん断環境および慢性創傷の空気界面特性に対する接近を模倣し、かつ、導入した候補抗菌療法の効果を特性化し、監視することに関して多くの分析法と互換性を持つ。滴状流れ反応器は、多種多様な純粋および混合種のバイオフィルムを培養するために成功的に採用された。バイオフィルムは、抗菌剤の適用に先立ち典型的に２〜５日間成長させる。
【０１６３】
滴状流れ反応器において成長したバイオフィルムに対する抗バイオフィルム剤の効能を測定するために、バイオフィルム上を通過する液体流れは所望の処理処方で改められるかまたは補充を受ける（例えば１つ以上のＢＴ化合物および／または１つ以上の抗生物質またはコントロールおよび／または他の候補薬剤）。流れは、特定の処理期間続けられる。処理されたバイオフィルムクーポンは次いで簡潔に反応器から除去され、バイオフィルムは掻き落とされて１０ｍＬの緩衝液を含むビーカーに入れられる。このサンプルは組織ホモジナイザによって簡潔に処理され（概して３０秒〜１分）、細菌性凝集体を分散させる。懸濁液は連続的に希釈され、標準的な微生物学的方法論に従って生存雑菌を数え上げるために蒔かれる。
【０１６４】
実施例４
ケラチノサイト引っ掻き傷修復の創傷バイオフィルム阻害：ＢＴ化合物によるバイオフィルム抑制
本実施例は、創傷治癒の確立したｉｎ  ｖｉｔｒｏケラチノサイト引っ掻き傷モデルの改善を記載し、バイオフィルム提携の創傷病理学および創傷治癒及び特に急性もしくは慢性の創傷、或いは本願明細書において記載されているバイオフィルムを含む創傷治癒に関連性を有するモデルに到達する。慢性創傷バイオフィルムの効能のケラチノサイトひっかき傷モデルによれば、哺乳類（例えば、ヒト）のケラチノサイトの培養および細菌性バイオフィルム集団は、互いに液体接触している分離したチャンバーへ進み、ケラチノサイト創傷治癒事項での、バイオフィルムによって念入りに作られる可溶成分の、効果に影響する条件の効能の事前評価を許可する。
【０１６５】
新生児の包皮細胞を処理されたプラスチック皿で単層として培養し、この単層内で管理された「創傷」または引っ掻き傷を機械的な手段によって形成した（例えば、単層を、殺菌したメス、カミソリ、細胞摩擦片、鉗子または他の道具の如き適切な道具によって単層の領域間の本質的に線形の無細胞地帯を擦ることによる物理的破壊によって）。ｉｎ  ｖｉｔｒｏケラチノサイト単層モデル系では、ｉｎ  ｖｉｖｏに創傷治癒をシミュレーションする方法において、傷をつける出来事に応答して細胞の構造上かつ機能上の工程を経ることが公知である。本願明細書において開示された実施形態によれば、この種の工程上の細菌性バイオフィルムの存在の影響、例えば、引っ掻き傷の治癒時の影響が観察され、これらおよび関連した実施形態において、選択された候補抗菌物質（例えば抗菌剤および抗バイオフィルム）治療の存在について効果がまた評価される。
【０１６６】
バイオフィルムの存在中で培養された創傷ケラチノサイト単層は、形態学的、生化学的、分子遺伝学的、細胞生理学的並びに他のパラメータに従って精査され、ＢＴ化合物の導入がバイオフィルムの損傷効果を（例えば、適切なコントロールと関連して増加するか減少するかを統計学的に有意な方式で）変えるかどうかを決定する。創傷治癒処理モデル方向でのバイオフィルム影響上のこの種の治療の効果を評価するに先立って各ＢＴ化合物治療の毒性を検査するために、創傷は最初に単独で各ＢＴ化合物に曝され、そしてＢＴ化合物の意図した組み合わせに曝される。
【０１６７】
代表的な実施形態において、皮膜上で３日バイオフィルムが培養され（例えば、ＴｒａｎｓＷｅｌｌ皮膜挿入等）、それは上の組織培養穴において維持され、そして、創傷治癒処理を開始するために引っ掻かれるケラチノサイト単層と流体交流を行う。真生で急性若しくは慢性の創傷から培養されるバイオフィルムが、これら並びに関連する実施形態で使用するために熟慮された。
【０１６８】
このように、ヒトケラチノサイトの遊走および増殖に対する可溶なバイオフィルム成分の効果を評価するためにｉｎ  ｖｉｔｒｏシステムが開発された。このシステムは、透析膜を使用してバイオフィルムおよびケラチノサイトを分離する。ケラチノサイトは前述の通り新生児の包皮から培養され（Ｆｌｅｃｋｍａｎら、１９９７  Ｊ Ｉｎｖｅｓｔ. Ｄｅｒｍａｔｏｌ、１０９：３６； Ｐｉｅｐｋｏｒｎら、Ｉｎｖｅｓｔ. Ｄｅｒｍａｔｏｌ. ８８：２１５−２１９）、ガラスカバー片上の集蜜的な単一層として成長する。ケラチノサイト単層は次いで引っ掻かれて均一幅の「創傷」を生じ、次に細胞修復処理の監視を受けた（例えばＴａｏら、２００７ ＰＬｏＳ ＯＮＥ ２：ｅ６９７； Ｂｕｔｈら２００７ Ｅｕｒ. Ｊ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ. ８６：７４７; Ｐｈａｎら  ２０００Ａｎｎ、Ａｃａｄ. Ｍｅｄ.Ｓｉｎｇａｐｏｒｅ、２９：２７）。人工的な創傷は次いで殺菌した両面チャンバーの底に置かれ、両面チャンバーは無菌技術を使用して組み立てられる。チャンバーの両側は、抗生物質および／またはビスマスチオールの有無にかかわらずケラチノサイト増殖培地（ＥｐｉＬｉｆｅ）で満たされる。無接種システムがコントロールとして使われる。
【０１６９】
このシステムは、創傷を分離した細菌を接種されて、静的な条件で２時間インキュベートし、上側のチャンバーの表面に細菌の吸着を可能にした。吸着期間に続いて、上側のチャンバーにおいて液体培地流れが始まり、非吸着の細胞を除去する。培地の流れは次いで上側のチャンバー内でのプランクトン様細胞の成長を最小にする速度で続けられる。６〜４８時間に亘るインキュベーション期間の後、システム（カバーガラス片上のケラチノサイト単層および皮膜基質上の細菌性バイオフィルム）は分解され、カバー片を除去して分析される。関連した実施形態において、成熟したバイオフィルムはチャンバーを組み立てる前に上側のチャンバー内で生育される。他の関連した実施形態において、バイオフィルムおよび引っ掻き傷ケラチノサイト単層の分離共培養を１つ以上のＢＴ化合物の存在並びに不存在でＢＴ化合物、或いは潜在的に相乗作用しているＢＴ化合物プラス抗菌剤の組み合わせ（例えば、微粒子形態で提供されるＢＴの如き本願明細書において提供されるＢＴ化合物、および、１つ以上のアミカシン、アンピシリン、セファゾリン、セフェピム、クロラムフェニコール、シプロフロキサシン、クリンダマイシン（または他のリンコサミド抗菌剤）、ダプトマイシン（Ｃｕｂｉｃｉｎ（登録商標））、ドキシサイクリン、ガチフロキサシン、ゲンタマイシン、イミペネム、レボフロキサシン、リネゾリド（Ｚｙｖｏｘ（登録商標））、ミノサイクリン、ナフシリン、パロモマイシン、リファンピン、スルファメトキサゾール、トブラマイシンおよびバンコマイシン）の候補薬剤の効能を決定するために実施し、オプションとして１つ以上の抗生物質の包含または排除でも実施した。この実施形態は引っ掻き傷のケラチノサイト修復に関して、例えば、引っ掻き傷創傷治癒の少なくとも１つの起こり得る創傷修復のために経過する時間または他の創傷修復兆候の如き指標を変える（例えば、適切なコントロ−ルと関連して統計学的に有意な方法で増加するか減少するか）薬剤または薬剤の組み合わせを識別するためのものである（例えばＴａｏら、２００７ ＰＬｏＳ ＯＮＥ ２：ｅ６９７； Ｂｕｔｈら、２００７ Ｅｕｒ. Ｊ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ. ８６：７４７； Ｐｈａｎら、２０００ Ａｎｎ. Ａｃａｄ. Ｍｅｄ. Ｓｉｎｇａｐｏｒｅ ２９：２７）。
【０１７０】
実施例５
ケラチノサイト引っ掻き傷修復の創傷バイオフィルム阻害
単離したヒトケラチノサイトをガラスカバー片上で培養し、実施例４に記載した方法論に従って引っ掻き傷を付けた。創傷培養は、単独で或いはケラチノサイト培養と流体伝搬する皮膜支持体上で共培養されたバイオフィルムが存在する培養状態の下で維持された。この間にケラチノサイト細胞増殖および／または遊走によって引っ掻き傷帯域上のケラチノサイト単層が復旧する引っ掻き傷閉止時間間隔が次いで決定された。図３は、バイオフィルムの流体伝搬（ただし、直接接触なし）の存在が引っ掻かれたケラチノサイト単層の治癒時間に与えた効果を例示する。
【０１７１】
したがって、或る実施形態において、慢性創傷を治療するための薬剤を識別する方法で、引っ掻き傷細胞（例えば、ケラチノサイトまたは線維芽細胞）単層を候補抗バイオフィルム薬剤の存在の有無に拘わらず細菌性バイオフィルムの存在で培養することを含み；候補抗バイオフィルム薬剤の存在または不在で引っ掻き傷細胞単層を治癒する指標を査定することが考慮され、ここでは、少なくとも１つの治癒の指標を促進するある薬剤（例えば、本願明細書において記載する実質的に均散のＢＴ微小粒子懸濁液の如きＢＴ化合物を単独で若しくは１つ以上のアミカシン、アンピシリン、セファゾリン、セフェピム、クロラムフェニコール、シプロフロキサシン、クリンダマイシン、ダプトマイシン（Ｃｕｂｉｃｉｎ（登録商標））、ドキシサイクリン、ガチフロキサシン、ゲンタマイシン、イミペネム、レボフロキサシン、リネゾリド（Ｚｙｖｏｘ（登録商標））、ミノサイクリン、ナフシリン、パロモマイシン、リファンピン、スルファメトキサゾール、トブラマイシンおよびバンコマイシンの如き抗生剤と相乗的に組み合わせて）が急性或いは慢性の創傷若しくはバイオフィルムを含む創傷を治療するために適切な薬剤であると識別される。
【０１７２】
実施例６
ビスマスチオール（ＢＴ）−抗生物質の組合せ相乗効果
この実施例は様々な細菌性種および幾つかの抗菌耐性菌を含む菌株に対して１つ以上のビスマス-チオール化合物および１つ以上の抗生物質の組み合わせによって示された相乗効果の例を示す。
【０１７３】
材料及び方法。
感受性研究は、ＮＣＣＬＳプロトコル（臨床検査標準（１９９７）のための国家委員会）に従って９６穴組織培養プレート（Ｎａｌｇｅ Ｎｕｎｃ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ, Ｄｅｎｍａｒｋ）のブロス希釈によって実行された。好気的に成長する細菌のための希釈抗菌感受性検査方法：Ａｐｐｒｏｖｅｄ Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｍ７−Ａ２ ａｎｄ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ Ｍ１００−Ｓ１０. ＮＣＣＬＳ, Ｗａｙｎｅ, ＰＡ, ＵＳＡ）。
【０１７４】
簡潔に記載すると、一晩培養した細菌性の培養液は、０.５ＭｃＦａｒｌａｎｄ標準懸濁液を調製するために使用し、更に陽イオンを調整したミュラーヒントンブロス培地（ＢＢＬ、Ｃｏｃｋｅｙｓｖｉｌｌｅ、ＭＤ、ＵＳＡ）で１：５０（〜２×１０６ｃｆｕ／ｍＬ）に希釈した。ＢＴ（上記の通りに調製）および抗菌剤は徐々に増加する濃度で添加され、最終的な体積定数を０．２ｍＬに保った。培養物は３７℃にて２４時間インキュベートされ、濁度は製造業者の推奨に従ってＥＬＩＳＡプレートリーダー（Ｂｉｏｔｅｋ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｗｉｎｏｏｓｋｉ、ＶＴ、ＵＳＡ）を使用して６３０ｎｍでの吸収によって評価された。最小阻止濃度（ＭＩＣ）は、２４時間成長を抑制している最も低い薬剤濃度として表した。生菌数（ｃｆｕ／ｍＬ）は、栄養寒天上の標準プレーティングによって決定した。最小殺菌濃度（ＭＢＣ）は、２４時間のインキュベーションで９９．９％の初期生存力を減らした薬剤の濃度として表した。
【０１７５】
抗菌剤の組み合わせの活性を評価するためにチェッカーボード方法を用いた。分画阻害濃度指数（ＦＩＣＩ）および分画殺菌濃度指数（ＦＢＣＩ）は、Ｅｌｉｏｐｏｕｌｏｓらによって算出された。（Ｅｌｉｏｐｏｕｌｏｓ及びＭｏｅｌｌｅｒｉｎｇ、（１９９６）Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ 、Ｉｎ  Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ  Lａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（Ｌｏｒｉａｎ、Ｖ.Ｅｄ.）、ｐｐ. ３３０−９６、Ｗｉｌｌｉａｍｓ ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ, Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ, ＭＤ, ＵＳＡ）。相乗作用はＦＩＣＩ又はＦＢＣＩ指数で≦０．５、相互作用なしは＞０．５−４、拮抗作用は＞４と定義される（Ｏｄｄｓ、ＦＣ（２００３）Ｓｙｎｅｒｇｙ、ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ, ａｎｄ ｗｈａｔ ｔｈｅ ｃｈｅｑｕｅｒｂｏａｒｄ ｐｕｔｓ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅｍ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ５２：１）。相乗作用は、従来は＞抗生物質濃度の≧４倍減少としても定義された。
結果は、表２〜１７において示される。
【０１７６】
【表２】
2015007113.tif 000005
ＢＥ＝０．２μｇ／ｍＬ ＢｉｓＥＤＴ； 菌株は、ウィンスロップ大学病院、Ｍｉｎｅｏｌａ、ＮＹの臨床微生物研究室から得られた。ナフシリンは、Ｓｉｇｍａ（Ｓｔ. Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）から得られた。
【０１７７】
【表３】
2015007113.tif 000006
ＢＥ＝０．２μｇ／ｍＬ ＢｉｓＥＤＴ； 菌株は、ウィンスロップ大学病院、Ｍｉｎｅｏｌａ、ＮＹの臨床微生物研究室から得られた。ナフシリンは、Ｓｉｇｍａから得られた。
【０１７８】
【表４】
2015007113.tif 000007
ＢＥ＝０．２μｇ／ｍＬ ＢｉｓＥＤＴ；菌株Ｓ２４４６−３は、ウィンスロップ大学病院、Ｍｉｎｅｏｌａ、ＮＹの臨床微生物研究室から得られた。抗生物質はＳｉｇｍａから得られた。
【０１７９】
【表５】
2015007113.tif 000008
ＧＭ ＝ゲンタマイシン；菌株Ｓ２４００−１は、ウィンスロップ大学病院、
Ｍｉｎｅｏｌａ、ＮＹの臨床微生物研究室から得られた。ゲンタマイシンは、
ウィンスロップの病院薬局から得られた； 相乗作用は太字
【０１８０】
【表６】
2015007113.tif 000009
データの単位はμｇ／ｍＬ；菌株Ｓ２４００−１は、ウィンスロップ大学病院、Ｍｉｎｅｏｌａ、ＮＹの臨床微生物研究室から得られ    た。抗生物質はウィンスロップの病院薬局から得られた。
【０１８１】
【表７】
2015007113.tif 000010
データの単位はμｇ／ｍＬ；菌株Ｓ２４００−１は、ウィンスロップ大学病院、Ｍｉｎｅｏｌａ、ＮＹの臨床微生物研究室から得られた。抗生物質はウィンスロップの病院薬局から得られた。
【０１８２】
【表８】
2015007113.tif 000011
データの単位はμｇ／ｍＬ；菌株Ｓ２４００−１は、
ウィンスロップ大学病院、Ｍｉｎｅｏｌａ、ＮＹの臨床微生物研究室から得られ        た。抗生物質はウィンスロップの病院薬局から得られた。
【０１８３】
【表９】
2015007113.tif 000012
データの単位はμｇ／ｍＬ；抗生物質は、
ウィンスロップ大学病院、Ｍｉｎｅｏｌａ、ＮＹの病院薬局から得られた。
【０１８４】
【表１０】
2015007113.tif 000013
ＡＢ＝抗生物質； ＣＭ ＝クロラムフェニコール；ＡＭ ＝アンピシリン；  
ＢＥ ＝ ０．３ｖ／ｍＬでのＢｉｓＥＤＴ； 菌株は、
Ｄｒ. ＭＪ Ｃａｓａｄａｂａｎの研究室、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ 
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ、シカゴ      大学、シカゴ、ＩＬから得られた。抗生物質は、ウィンスロップ大学病院、
Ｍｉｎｅｏｌａ、ＮＹの病院薬局から得られた。
【０１８５】
【表１１】
2015007113.tif 000014
ＤＯＸ ＝ドキシサイクリン;  ＢＥ ＝ ０．３μｇ／ｍＬでのＢｉｓＥＤＴ； 菌株は、Ｄｒ. Ｉ Ｃｈｏｐｒａの研究室、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ、ブリストル大学、ブリストル、英国から得られた。抗生物質は、ウィンスロップ大学病院、Ｍｉｎｅｏｌａ、ＮＹの病院薬局から得られた。
【０１８６】
【表１２】
2015007113.tif 000015
Ａｇｒ ＝アミノグリコシド耐性； ＮＮ ＝トブラマイシン；ＰＡ ＝緑膿菌；
ＢＥ ＝ ＢｉｓＥＤＴ、０．３μｇ／ｍＬ；  菌株は、Ｄｒ. Ｋ. Ｐｏｏｌｅの研究室、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、クイーンズ大学、オンタリオ、ＣＮから得られた。
トブラマイシンは、ウィンスロップ大学病院、Ｍｉｎｅｏｌａ、ＮＹの病院薬局から得られた。
【０１８７】
【表１３】
2015007113.tif 000016
ＮＮ ＝トブラマイシン；ＢＥ ＝ ＢｉｓＥＤＴ、０．４μｇ／ｍＬ；  菌株は、Ｄｒ. Ｊ.Ｊ.ＬｉＰｕｍａの研究室、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ ａｎｄ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｂｌｅ Ｄｉｓｅａｓｅｓ、ミシガン大学、Ａｎｎ Ａｒｂｏｒ、Ｍｌから得られた。また、Ｖｅｌｏｉｒａら２００３。トブラマイシンは、ウィンスロップ大学病院、Ｍｉｎｅｏｌａ、ＮＹの病院薬局から得られた。
【０１８８】
【表１４】
2015007113.tif 000017
ＮＮ ＝トブラマイシン；ＢＥ ＝ ＢｉｓＥＤＴ、０．４μｇ／ｍＬ； 菌株は、Ｄｒ. Ｊ.Ｊ.ＬｉＰｕｍａの研究室、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ ａｎｄ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｂｌｅ Ｄｉｓｅａｓｅｓ、ミシガン大学、Ａｎｎ Ａｒｂｏｒ、Ｍｌから得られた。また、Ｖｅｌｏｉｒａら２００３。トブラマイシンは、ウィンスロップ大学病院、Ｍｉｎｅｏｌａ、ＮＹの病院薬局から得られた。
【０１８９】
【表１５】
2015007113.tif 000018
ＮＮ ＝トブラマイシン；ＢＥ ＝ ＢｉｓＥＤＴ、０．８μｇ／ｍＬ； Ｌｉｐｏ−ＢＥ−ＮＮ ＝リポソーマルＢＥ−ＮＮ；菌株は、Ｄｒ. Ａ. Ｏｍｒｉの研究室、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｌａｕｒｅｎｔｉａｎ大学、オンタリオ、ＣＮから得られた。
（Ｍ菌株は、類粘液セパシア菌である;ＰＡ＝緑膿菌； ＳＡ＝黄色ブドウ球菌）。
トブラマイシンは、ウィンスロップ大学病院、Ｍｉｎｅｏｌａ、ＮＹの病院薬局から得られた。
【０１９０】
【表１６】
2015007113.tif 000019
ＮＮ ＝トブラマイシン；ＢＥ ＝ ＢｉｓＥＤＴ、０．８μｇ／ｍＬ；Ｌｉｐｏ−ＢＥ−ＮＮ ＝リポソーマルＢＥ−ＮＮ；菌株は、Ｄｒ. Ａ. Ｏｍｒｉの研究室、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｌａｕｒｅｎｔｉａｎ大学、オンタリオ、ＣＮから得られた。
（Ｍ菌株は、類粘液セパシア菌である;ＰＡ＝緑膿菌； ＳＡ＝黄色ブドウ球菌）。
トブラマイシンは、ウィンスロップ大学病院、Ｍｉｎｅｏｌａ、ＮＹの病院薬局から得られた。
【０１９１】
【表１７】
2015007113.tif 000020
ＢＥ＝ ＢｉｓＥＤＴ；ＮａＰＹＲ ＝ピリチオンナトリウム；
化学薬品はＳｉｇｍａ−ＡＩｄｒｉｃｈから得られた； 相乗作用は太字
指示された菌株は、アメリカ培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ、
Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ）からであった。
【０１９２】
実施例７
抗生物質耐性のある菌株を含むグラム陽性およびグラム陰性菌に対する比較ビスマスチオール（ＢＴ）および抗生物質効果
本実施例では、ＢｉｓＥＤＴおよびコンパレータ薬剤のｉｎ  ｖｉｔｒｏ活性を皮膚および軟組織感染の原因となるグラム陽性およびグラム陰性菌の多発性臨床分離株に対して評価した。
【０１９３】
材料および方法。
検査化合物および検査濃度域は、次の通りであった：ＢｉｓＥＤＴ（Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、１９９７； Ｄｏｍｅｎｉｃｏら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ.Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ. ４５（５）：１４１７−１４２１。および、実施例１）１６〜０．０１５μｇ／ｍＬ； リネゾリド（ＣｈｅｍＰａｃｉｆｉｃａ社、＃３５７１０）、６４〜０．０６μｇ／ｍＬ；ダプトマイシン（Ｃｕｂｉｓｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ＃ＭＣＢ２００７）、３２〜０．０３μｇ／ｍＬおよび１６〜０．０１５μｇ／ｍＬ； バンコマイシン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ, Ｓｔ. Ｌｏｕｉｓ, ＭＯ、＃ Ｖ２００２）６４〜０．０６μｇ／ｍＬ； セフタジジム（Ｓｉｇｍａ ＃Ｃ３８０９）６４〜０．０６μｇ／ｍＬおよび３２〜０．０３μｇ／ｍＬ；イミペネム（米国薬局方、ＮＪ、＃１３３７８０９）１６〜０．０１５μｇ／ｍＬおよび８〜０．００８μｇ／ｍＬ； シプロフロキサシン（米国薬局方、＃ ＩＯＣ２６５）、３２〜０．０３μｇ／ｍＬおよび４〜０．００４μｇ／ｍＬ； ゲンタマイシン （Ｓｉｇｍａ ＃Ｇ３６３２）３２〜０．０３μｇ／ｍＬおよび１６〜０．０１５μｇ／ｍＬ。 ゲンタマイシンを除いて、全ての検査物はＤＭＳＯに溶解させた。ゲンタマイシンは水に溶解させた。原液は、試験プレートにおける最も高い濃度の４０倍で調製した。検査系においてＤＭＳＯの最終濃度は２．５％とした。
【０１９４】
微生物。
検査微生物は次のように臨床検査室から得られた：ＣＨＰ、Ｃｌａｒｉａｎ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、ＩＮ；ＵＣＬＡ、カリフォルニアロサンゼルス大学医療センター、Ｌｏｓ Ａｎｇｅｌｅｓ、ＣＡ；ＧＲ Ｍｉｃｒｏ、Ｌｏｎｄｏｎ, ＵＫ；ＰＨＲＩ ＴＢセンター、公共健康研究大学結核センター、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ, ＮＹ；ＡＴＣＣ、アメリカ合衆国培養細胞系統保存機関、Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ；Ｍｔ Ｓｉｎａｉ Ｈｏｓｐ、シナイ山病院、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ, ＮＹ；ＵＣＳＦ、カリフォルニア大学サンフランシスコ総合病院、Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ, ＣＡ；Ｂｒｏｎｓｏｎ Ｈｏｓｐｉｔａｌ、ブロンソン・メソジスト・ホスピタル、Ｋａｌａｍａｚｏｏ, Ｍｌ；品質管理分離集団は、アメリカ合衆国培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ、Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ）からであった。微生物には、各微生物にとって適切な寒天培地上に分離のための縞状のすじをつけた。コロニーは分離プレートから綿棒によってつまみ上げられ、凍結保護物質を含む適切なブロスの懸濁液に入れられた。懸濁液は低温貯蔵バイアルに等分され、−８０℃にて維持された。略語は、以下の通りである：ＢｉｓＥＤＴ、ビスマス−１,２−エタンジチオール； ＬＺＤ、リネゾリド；ＤＡＰ、ダプトマイシン；ＶＡ、バンコマイシン；ＣＡＺ、セフタジジム；ＩＰＭ、イミペネム；ＣＩＰ、シプロフロキサシン；ＧＭ、ゲンタマイシン；  
ＭＳＳＡ、メチシリン感受性黄色ブドウ球菌；ＣＬＳＩ ＱＣ、臨床検査標準委員会品質管理菌株；ＭＲＳＡ、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌；ＣＡ−ＭＲＳＡ、共同体獲得性のメチシリン耐性黄色ブドウ球菌；ＭＳＳＥ、メチシリン感受性表皮ブドウ球菌；ＭＲＳＥ、メチシリン耐性表皮ブドウ球菌；ＶＳＥ、バンコマイシン感受性腸球菌。
【０１９５】
分離した微生物は縞状にすじをつけられ、凍結バイアルから適当な培地上へ移された：大部分の微生物にはトリプチケースソイ寒天培地（Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ, Ｓｐａｒｋｓ, ＭＤ）、または連鎖球菌にはトリプチケースソイ寒天培地と５％羊血液（Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ, Ｂａｔｈ, ＯＨ）。分離プレートを３５℃にて一晩インキュベートした。品質管理微生物も含まれた。ＭＩＣ分析評価のために採用された培地は、大部分の微生物のためのミュラーヒントンＩＩブロス培地  （ＭＨＢ ＩＩ− Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ, ＃ ２１２３２２）であった。ＭＨＢ ＩＩには、化膿性連鎖球菌およびストレプトコッカス・アガラクチアの成長に適応させるために２％の溶解した馬の血液（Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｌｏｔ ＃ Ｈ１３９１３）を補充した。媒体は、微量希釈パネルの各穴に５μＬ薬液を添加して生成した希釈液を相殺するために１０２．５％の正常重量で調製された。更に、ダプトマイシンによる検査のために培地は追加の２５ｍｇ／Ｌ Ｃａ２＋で補完した。
【０１９６】
ＭＩＣ分析方法は、臨床検査標準委員会（臨床検査標準委員会。好気的に成長する細菌のための希釈抗菌感受性検査のための方法； 承認された規準（第７版）。臨床検査標準委員会文献Ｍ７−Ａ７ ［ ＩＳＢＮ １−５６２３８−５８７−９ ］。臨床検査標準委員会、９４０ Ｗｅｓｔ Ｖａｌｌｅｙ Ｒｏａｄ、Ｓｕｉｔｅ １４００、Ｗａｙｎｅ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ １９０８７−１８９８ ＵＳＡ, ２００６）によって記載されている手順に従って、一連の希釈および液体移動を行うために自動液体ハンドラを使用した。 自動液体ハンドラには、Ｍｕｌｔｉｄｒｏｐ ３８４（Ｌａｂｓｙｓｔｅｍｓ, Ｈｅｌｓｉｎｋｉ, Ｆｉｎｌａｎｄ）、Ｂｉｏｍｅｋ ２０００およびＭｕｌｔｉｍｅｋ ９６（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ, Ｆｕｌｌｅｒｔｏｎ ＣＡ）が含まれていた。標準９６穴微量希釈プレート（Ｆａｌｃｏｎ ３９１８）の列２〜１２の穴は、Ｍｕｌｔｉｄｒｏｐ ３８４上のゲンタマイシン用に１５０μＬのＤＭＳＯまたは水で満たされた。薬剤（３００μＬ）がこれらのプレートの適当な並びの第１列に分配された。これらは、検査プレート（娘プレート）を調製する母プレートになる。Ｂｉｏｍｅｋ ２０００は、母プレートの第１１列を経た一連の移動を完了した。第１２列の穴は薬剤を含まず、娘プレートの微生物成長制御穴であった。娘プレートには、Ｍｕｌｔｉｄｒｏｐ ３８４を使用している適当な検査媒体（上記した）の１８５μＬが積載されていた。娘プレートはＭｕｌｔｉｍｅｋ ９６器具に調製されており、器具は母プレートの各穴から娘プレートのそれぞれの対応する穴へ５μＬの薬液を単一工程で移動した。
【０１９７】
各微生物の標準化接種材料をＣＬＳＩ法（ＩＳＢＮ １−５６２３８−５８７−９（以前に引用））につき調製した。懸濁液をＭＨＢ内で０．５ＭｃＦａｒｌａｎｄ標準の濁度に等しく調製した。懸濁液を、微生物に適切なブロスによって１：９に希釈した。各微生物用の接種材料を長さ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ）分割した殺菌貯蔵容器に分配し、プレートに接種をするためにＢｉｏｍｅｋ ２０００を用いた。作業面を逆転させたＢｉｏｍｅｋ ２０００に娘プレートを配置し、接種は低薬剤濃度から高薬剤濃度の順に行った。Ｂｉｏｍｅｋ ２０００は各穴に１０μＬの標準化接種材料を配分した。これにより、娘プレートにほぼ５ｘ１０５コロニー形成単位／ｍＬの最終的な細胞濃度を齎した。こうして、娘プレートの穴には最終的に１８５μＬのブロス、５μＬの薬液、および１０μＬの細菌性接種材料が含有された。プレートは３枚高に積み重ねられ、天板上を蓋でおおわれ、プラスチックの袋に入れられ、３５℃にてほぼ１８時間大部分の分離物用にインキュベートされた。２０時間のインキュベーションの後、連鎖球菌プレートが読み取られた。プレートビューアを使用してマイクロプレートを底から観察した。各検査媒体について、非接種溶解度制御プレートを薬剤沈降の証明用に観察した。微生物の可視的成長を阻害した薬剤の最低濃度としてＭＩＣを読み取り、記録した。
【０１９８】
結果。
両媒体における全ての検査濃度において、全市販薬剤は可溶であった。ＢｉｓＥＤＴは３２μｇ／ｍＬの微量沈殿物を示したが、検査した全微生物の阻害濃度はその濃度より充分低かったので、ＭＩＣ読み取りは影響を受けなかった。各分析日に、適当な品質管理菌株がＭＩＣ分析に含まれていた。これらの菌株用に誘導されるＭＩＣ値は、各薬剤用に公開された品質管理範囲（臨床検査標準委員会。抗菌感受性検査のための性能規準； 第１８  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ。ＣＬＳＩ文献Ｍ１００−Ｓ１８ ［ ＩＳＢＮ １−５６２３８−６５３−０ ］。臨床検査標準委員会、９４０ Ｗｅｓｔ Ｖａｌｌｅｙ Ｒｏａｄ、Ｓｕｉｔｅ １４００、Ｗａｙｎｅ, Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ  １９０８７−１８９８ ＵＳＡ、２００８） と比較して適切とされた。
【０１９９】
各分析日に、適当な品質管理菌株がＭＩＣ分析評価に含まれていた。これらの菌株用に誘導されるＭＩＣ値は、各薬剤用に公開された品質管理範囲（臨床検査標準委員会。抗菌感受性検査のための性能規準； 第１８  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ。ＣＬＳＩ文献Ｍ１００−Ｓ１８ ［ ＩＳＢＮ １−５６２３８−６５３−０ ］。） と比較して適切とされた。品質管理範囲が公開される品質管理菌株の１４１の値の中で、１４０（９９．３％）の値が特定の範囲内であった。１つの例外は、イミペネム対黄色ブドウ球菌２９２１３であり、単一の検査で１つの値（≦ ０．００８μｇ／ｍＬ）を示し、公開されたＱＣ範囲より１希釈下回った。その検査での他の全品質管理結果は、特定の品質管理範囲内であった。
【０２００】
ＢｉｓＥＤＴは、メチシリン感受性黄色ブドウ球菌（ＭＳＳＡ）とメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）の両方および共同体獲得メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＣＡ−ＭＲＳＡ）に対して強力な活性を示し、三つの微生物群全てに対して０．５μｇ／ｍＬのＭＩＣ９０値で１μｇ／ｍＬ以下で検査した全菌株を阻害した。ＢｉｓＥＤＴは、リネゾリドおよびバンコマイシンより大きく、ダプトマイシンと等しい活性を呈した。イミペネムは、ＭＳＳＡ（ＭＩＣ９０ ＝ ０．０３μｇ／ｍＬ）に対してＢｉｓＥＤＴより有力であった。しかしながら、ＭＲＳＡとＣＡＭＲＳＡはイミペネム耐性であり、一方ＢｉｓＥＤＴはＭＳＳＡに対してと等価の活性を顕示した。ＢｉｓＥＤＴはメチシリン感受性およびメチシリン耐性表皮ブドウ球菌（ＭＳＳＥおよびＭＲＳＥ）に対して高活性で、ＭＩＣ９０値でそれぞれ０．１２および０．２５μｇ／ｍＬであった。ＢｉｓＥＤＴは検査した他のイミペネムを除くどの薬剤よりもＭＳＳＥに対して活性であった。ＢｉｓＥＤＴは、ＭＲＳＥに対して検査した最も活性な薬剤であった。ＢｉｓＥＤＴは、２μｇ／ｍＬのＭＩＣ９０値を有するバンコマイシン感受性フェカーリス菌（ＶＳＥｆｃ）に対して、ダプトマイシン、バンコマイシンおよびイミペネムと等価の活性を顕示した。重要なことに、ＢｉｓＥＤＴは１μｇ／ｍＬのＭＩＣ９０値を有するバンコマイシン耐性フェカーリス菌（ＶＲＥｆｃ）に対して検査した最も活性な薬剤であった。
【０２０１】
ＢｉｓＥＤＴは、２μｇ／ｍＬのＭＩＣ９０値を有するバンコマイシン感受性フェシウム菌（ＶＳＥｆｍ）に対して、非常に活性であり； その活性は、ダプトマイシンと等価物または同様であり、バンコマイシンより１希釈高い活性であった。ＢｉｓＥＤＴおよびリネゾリドはバンコマイシン耐性フェシウム菌（ＶＲＥｆｍ）に対して検査した最も活性な薬剤であり、それぞれ２μｇ／ｍＬのＭＩＣ９０値を顕示した。化膿性連鎖球菌（０．５μｇ／ｍＬのＭＩＣ９０値）に対するＢｉｓＥＤＴの活性は、バンコマイシンと等価で、リネゾリドより大きく、ダプトマイシンおよびセフタジジムより僅かに小さかった。化合物は、０．５μｇ／ｍＬ以下で検査された全菌株を阻害した。これらの研究において、ＢｉｓＥＤＴに最少感度の種は、観察されたＭＩＣ９０値が１６μｇ／ｍＬのストレプトコッカス・アガラクチアであった。ＢｉｓＥＤＴは検査したゲンタマイシンを除く全薬剤よりも小活性であった。
【０２０２】
要約すると、ＢｉｓＥＤＴは多重種を代表する多発性臨床分離株に対して広域スペクトル能力を示し、ヒトにおける急性および慢性の皮膚並びに皮膚構造感染に共通に関係している種を含んでいる。ＢｉｓＥＤＴおよび重要なコンパレータ薬剤の活性を、グラム陽性およびグラム陰性菌の７２３臨床分離株に対して評価した。ＢＴ化合物は広域スペクトル活性を顕示し、この研究における多くの検査微生物に対して、ＢｉｓＥＤＴは抗菌活性に関して検査された最も活性の高い化合物であった。ＢｉｓＥＤＴはＭＳＳＡ、ＭＲＳＡ、ＣＡ−ＭＲＳＡ、ＭＳＳＥ、ＭＲＳＥおよび化膿性連鎖球菌に対して最も活性が高く、ここで、ＭＩＣ９０値は０．５μｇ／ｍＬ以下であった。強力活性は、また、ＶＳＥｆｃ、ＶＲＥｆｃ、ＶＳＥｆｍ、ＶＲＥｆｍ、アシネトバクター・バウマンニ、大腸菌および緑膿菌に対して顕示され、ＭＩＣ９０値は１〜４μｇ／ｍＬの範囲内であった。観察されたＭＩＣ９０値は対肺炎桿菌（ＭＩＣ９０＝８μｇ／ｍＬ）および対Ｂ群連鎖球菌（ＭＩＣ９０＝１６μｇ／ｍＬ）であった。
【０２０３】
上記した様々な実施形態は、組み合わせて更なる実施形態を提供できる。本明細書において言及したおよび／または出願データシートにおいて一覧を示す米国特許、米国特許出願公開、米国特許出願、外国特許、外国特許出願および未公開特許は全て参照文献として本願明細書に引用されるものとする。さらに他の実施形態を提供するために必要に応じて様々な特許、出願および公開の概念を採用するために、実施形態の態様を改良することができる。これら並びに他の変更は上記の詳細な説明を考慮して実施形態に適用できる。一般に以下の請求範囲において、使用する用語は、明細書と請求項に開示された特定の実施形態を制限するべく解釈されてはならず、むしろこの種の請求項が権利を与えられる均等物の全範囲と共に、全ての可能な実施形態を含むものと解釈されなければならない。したがって、請求の範囲は開示によって制限されない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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