(57)【要約】【課題】ジヒドロテストステロン誘導型のインターロイキンの産生に起因する症状をより効果的に低減し得るジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン産生抑制剤を提供する。【解決手段】グリチルレチン酸を有効成分とするジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン産生抑制剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
グリチルレチン酸を有効成分とするジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン産生抑制剤。
【請求項２】
ジヒドロテストステロン誘導型インターロイキンが、インターロイキン−１α、インターロイキン−２、インターロイキン−５、インターロイキン−６、インターロイキン−７、インターロイキン−８、インターロイキン−１０、インターロイキン−１３及びインターロイキン−１５からなる群より選択される少なくとも１つである請求項１記載のジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン産生抑制剤。
【請求項３】
グリチルレチン酸を含有する油相と、水相と、を含む水中油型乳化組成物である請求項１又は請求項２に記載のジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン産生抑制剤。
【請求項４】
水中油型乳化組成物が、油相中に更にＮ−ラウロイルサルコシンイソプロピルを含有する請求項３に記載のジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン産生抑制剤。
【請求項５】
水中油型乳化組成物が、油相中に更にレシチンを含有する請求項３又は請求項４に記載のジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン産生抑制剤。
【請求項６】
ジヒドロテストステロン誘導型インターロイキンが、インターロイキン−６である請求項１〜請求項５のいずれか１項に記載のジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン産生抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン産生抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
トリテルペン化合物のうち、皮膚外用剤に配合することで抗炎症、保湿、美白、抗シワ、抗菌等の機能を発揮する植物エキスの主成分として、オレアナン系のトリテルペン化合物が知られている。中でも、５環性で且つカルボキシル基を有するオレアナン系のトリテルペン化合物として、グリチルレチン酸が知られている。グリチルレチン酸は、抗炎症効果を有する油溶性薬剤として、頭皮用組成物等の各種の組成物に広く配合されている（特許文献１及び特許文献２）。
また、グリチルレチン酸の抗炎症効果については、リポポリサッカライド（ＬＰＳ）誘導マクロファージを用いた研究から、ＮＦ−κＢ及びイノシトール３リン酸（ＰＩ３Ｋ）ｐ１１０δ及びｐ１１０γアイソフォームの活性を抑制し、次いで、ＬＰＳ誘導型腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）等の生成を減少させることが知られている（非特許文献１）。
【０００３】
ジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン−６が、ヒトにおいてマトリクス細胞の増殖を抑制することが知られている（非特許文献２）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００８−２０１７６７号公報
【特許文献２】特開平１０−２７９４３９号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ．Ｃｈｅｍ．，２０１１，Ｖｏｌ．５９（１４），ｐｐ．７７２６−７７３３
【非特許文献２】Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，２０１２，Ｖｏｌ．１３２，ｐｐ．４３−４９
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ジヒドロテストステロンによって誘導されるインターロイキンによって、外観等の点で好ましくない症状が引き起こされることがある。症状の低減のためには、ジヒドロテストステロン誘導型のサイトカイン、特にインターロイキンの影響をより効果的に抑制することが有効である。
【０００７】
従って、本発明は、ジヒドロテストステロン誘導型のインターロイキンが産生することに起因する症状をより効果的に低減し得るジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン産生抑制剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は以下のとおりである。
［１］  グリチルレチン酸を有効成分とするジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン産生抑制剤。
［２］  ジヒドロテストステロン誘導型インターロイキンが、インターロイキン−１α、インターロイキン−２、インターロイキン−５、インターロイキン−６、インターロイキン−７、インターロイキン−８、インターロイキン−１０、インターロイキン−１３及
びインターロイキン−１５からなる群より選択される少なくとも１つである［１］に記載のジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン産生抑制剤。
［３］  グリチルレチン酸を含有する油相と、水相と、を含む水中油型乳化組成物である［１］又は［２］に記載のジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン産生抑制剤。
［４］  水中油型乳化組成物が、油相中に更にＮ−ラウロイルサルコシンイソプロピルを含有する［３］に記載のジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン産生抑制剤。
［５］  水中油型乳化組成物が、油相中に更にレシチンを含有する［３］又は［４］に記載のジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン産生抑制剤。
［６］  ジヒドロテストステロン誘導型インターロイキンが、インターロイキン−６である請［１］〜［５］のいずれか１つに記載のジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン産生抑制剤。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、ジヒドロテストステロン誘導型のインターロイキンが産生することに起因する症状をより効果的に低減し得るジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン産生抑制剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】実施例２にかかるグリチルレチン酸含有試料１及びグリチルレチン酸含有試料２の浸透効果を確認したグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明のジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン産生抑制剤は、グリチルレチン酸を有効成分とする。
【００１２】
ジヒドロテストステロン（Ｄｉｈｙｄｒｏｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ：ＤＨＴ）とは、男性ホルモンであるテストステロンが還元酵素である５α−リダクターゼによって代謝されることにより得られる活性型男性ホルモンである。ＤＨＴのホルモン作用として、脱毛促進、皮脂の増加、更年期障害等が知られている。また、ＤＨＴは、その他の作用として、アンドロゲン依存症である良性前立腺過形成を強く刺激する作用を有する。また、ＤＨＴのその他の作用として、ざ瘡を進行させることが挙げられる。これらのＤＨＴの各作用には、ＤＨＴの影響を受ける部位によっても異なるが、ＤＨＴに誘導されたインターロイキンが関与している又は関与していると考えられるものが含まれる。
【００１３】
本発明は、このようなＤＨＴ誘導型インターロイキンの産生を、グリチルレチン酸によって抑制することが可能であるという新しい知見に基づくものである。即ち、本発明に係るＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤では、グリチルレチン酸によりＤＨＴ誘導型インターロイキンの産生を抑制し得るため、ＤＨＴ誘導型インターロイキンによって発症する症状を間接的に低減する他の薬剤よりも、効果的に症状を低減することができる。
【００１４】
本明細書において「工程」との語は、独立した工程だけではなく、他の工程と明確に区別できない場合であってもその工程の所期の目的が達成されれば、本用語に含まれる。
また本明細書において「〜」を用いて示された数値範囲は、「〜」の前後に記載される数値をそれぞれ最小値及び最大値として含む範囲を示す。
さらに本明細書において組成物中の各成分の量は、組成物中に各成分に該当する物質が複数存在する場合、特に断らない限り、組成物中に存在する当該複数の物質の合計量を意味する。
以下、本発明について説明する。
【００１５】
ＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤はグリチルレチン酸を含有する。
グリチルレチン酸は、グリチルリチン酸を加水分解することで得られる、オレアナン系の５環性トリテルペン化合物の一つである。グリチルレチン酸は、化粧品分野では抗炎症作用、抗酸化作用、抗老化作用等を期待して、アンチエイジングケア等を目的とする化粧品又は医薬部外品などに配合することが可能である。
また、グリチルレチン酸は急性又は慢性の皮膚炎に対し著しい効果があるといわれ、抗炎症効果、抗アレルギー作用、細菌（黄色ブドウ菌、ジフテリア菌、サルモネラ菌等）発育阻止などの効果を有することが知られている。また、グリチルレチン酸は、皮膚の炎症緩和、皮脂の分泌抑制等の効果に優れており、多くの皮膚ケア製品又は口紅に用いられる。グリチルレチン酸は、その他、フケ又はかゆみ抑制等の効果も有するため、頭皮ケア製品にも多く使用されている。
【００１６】
グリチルレチン酸は、天然物からの抽出物又はその精製物であってもよく、公知の合成方法に準じて合成された合成品であってもよい。グリチルレチン酸は市販品としても入手可能であり、市販品の例としては、丸善製薬（株）製、アルプス薬品、金可製のβグリチルレチン酸が挙げられる。
グリチルレチン酸は、各製品を単独で用いてもよく、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００１７】
本発明のＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤は、水中油型乳化組成物に含まれることが好ましい。本発明のＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤は、グリチルレチン酸を含有する油相と、水相と、を含む水中油型乳化組成物であることがより好ましい。本発明において、ＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤を、水中油型乳化組成物とすることで、皮膚浸透性等を向上させることができる。また、本発明のＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤が水中油型乳化組成物である場合、エタノールを含有しないことがより好ましい。
【００１８】
本発明が適用される水中油型乳化組成物としては、グリチルレチン酸を含有する油相と、水相と、を含むことが好ましい。水中油型乳化組成物の油相成分として他の油性成分を含んでいてもよい。
【００１９】
本発明が適用される水中油型乳化組成物の油相は、更にＮ−ラウロイルサルコシンイソプロピルを含むことが好ましい。油相がＮ−ラウロイルサルコシンイソプロピルを含むことで、グリチルレチン酸を高濃度で水中油型乳化組成物中に配合することができる。
【００２０】
Ｎ−ラウロイルサルコシンイソプロピルとしては、合成物でも市販品でもよく、市販品としては、味の素株式会社製のＮ−ラウロイルサルコシンイソプロピル（商品名  エルデュウＳＬ−２０５）が挙げられる。
【００２１】
本発明が適用される水中油型乳化組成物の油相は、更にレシチンを含むことが好ましい。油相がレシチンを更に含むことで、グリチルレチン酸をより高濃度に水中油型乳化組成物中に配合することができる。
【００２２】
レシチンはグリセロリン脂質の一種で、自然界の動植物のすべての細胞中に存在しており、生体膜の主要構成成分である。
本発明が適用される水中油型乳化組成物に使用可能なレシチンとしては、大豆由来レシチン、卵黄由来レシチンをはじめ、動植物由来のレシチン等を挙げることができる。本発明が適用される水中油型乳化組成物で用いることのできるこれらのレシチンは、単独又は複数種の混合物の形態で用いることができる。
また、レシチンとしては、市販品を用いてもよい。市販品の例としては、ＳＬＰ−ホワイト（辻製油株式会社製）、エメルメティック９００（ルーカスマイヤー製）、フォスフォリポン５０（リポイド製）、レシオンＰ（理研ビタミン株式会社製）などが挙げられる。
【００２３】
本発明が適用される水中油型乳化組成物の水相は、多価アルコール、ポリグリセリン脂肪酸エステル等の非イオン性界面活性剤、イオン性界面活性剤、水溶性の塩類、多糖類、タンパク質、ｐＨ調整剤、酸化防止剤、防腐剤、色素、香料等を含有することができる。
【００２４】
本発明が適用される水中油型乳化組成物は、グリチルレチン酸、所望により用いられる、Ｎ−ラウロイルサルコシンイソプロピル、及びレシチンを含む油相組成物と、水相組成物とを混合し、乳化すること等により製造することができる。
【００２５】
本発明におけるインターロイキンとは、リンパ球、単球、マクロファージ等の免疫担当細胞及び線維芽細胞などの産生するタンパク質性の生理活性物質であって、白血球細胞間のシグナル伝達を担う物質を意味する。
本発明におけるＤＨＴ（１７ｂｅｔａ−Ｈｙｄｒｏｘｙ−５ａｌｐｈａ−ａｎｄｒｏｓｔａｎ−３−ｏｎｅ）とは、アンドロゲンに属するステロイドホルモンの一種の物質を意味する。ＤＨＴは、テストステロンの５α−リダクターゼによる代謝を受けて、肝臓、精巣、卵巣、大腸、小腸、脾臓等の各臓器によって生成される。Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，２０１２，Ｖｏｌ．１３２，ｐｐ．４３−４９にて、毛乳頭細胞に対してインターロイキンを産生するように誘導する機能をＤＨＴが有していることが報告された。
【００２６】
ＤＨＴ誘導型インターロイキンとは、ＤＨＴの存在下で産生が誘導され得るインターロイキン（ＩＬ）を意味する。ＤＨＴ誘導型インターロイキンの産生メカニズムは、炎症やＬＰＳ刺激によりマクロファージ等から産生されるインターロイキンとは全く異なる。炎症又はＬＰＳ刺激によりマクロファージ等から産生されるインターロイキンは主に、活性酸素を引き金としＮｆ−ｋＢなどを活性化することで産生されるため、炎症又はＬＰＳ刺激によりマクロファージ等から産生されるインターロイキンの産生阻害には抗酸化剤等の利用が有効である。これに対して、ＤＨＴ誘導型インターロイキンについては、誘導メカニズムが不明なため有効な産生阻害剤が提唱されていない。
【００２７】
ＤＨＴ誘導型インターロイキンであれば限定されることはなく、例えば、好ましくは、ＩＬ−１α、ＩＬ−２、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３及びＩＬ−１５が挙げられる。これらのＤＨＴ誘導型インターロイキンは、１種単独で、又は２種以上を組み合わせて用いることができる。なかでも、毛乳頭細胞に対する作用の観点から、ＤＨＴ誘導型インターロイキンとしては、ＩＬ−２及びＩＬ−６の少なくとも一方であることが好ましく、ＩＬ−６であることが更に好ましい。
【００２８】
ＩＬ−２は、主としてＴ細胞（ＣＤ４陽性及びＣＤ８陽性）から産生され、Ｔ細胞の分化増殖、炎症性腸疾患、溶血性貧血の発生等に関与し得ることが知られているタンパク質である。ＩＬ−２のアミノ酸配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号：ＮＭ＿０００５８６．３として知られている。
【００２９】
ＩＬ−６（分子量：１２０００）は、Ｔ細胞、Ｂ細胞、マクロファージ、線維芽細胞等の種々の細胞から産生され、造血又は炎症反応等に関連し、種々の免疫異常症、炎症性疾患、リンパ球腫瘍の発症に関与しうることが知られている糖タンパク質である。ＩＬ−６のアミノ酸配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号：ＮＭ＿０００６００．３として知られている。
【００３０】
本発明のＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤は、外用剤、経口剤等の剤型にすることができ、また、剤型に応じて、医薬として許容可能な担体、剤型に応じた添加成分等と組み合わせた組成物としてもよい。このような担体の例としては、医薬製剤として適用される形態に応じた公知の担体を挙げることができ、例えば、水、生理食塩水等を挙げることができる。
【００３１】
外用剤とした場合の添加成分としては、例えば、乳化剤、抗酸化剤、機能性成分、賦形剤、粘度調整剤、その他の薬効成分、ｐＨ調整剤、ｐＨ緩衝剤、紫外線吸収剤、香料、着色剤等を挙げることができる。具体的には、例えば、ポリグリセリン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、有機酸モノグリセリド、ポリグリセリン脂肪酸エーテル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリオキエチレンステロール、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル等の非イオン性界面活性剤；レシチン等のリン脂質；アスコルビン酸、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸マグネシウム、アスコルビン酸硫酸マグネシウム、アスコルビン酸硫酸ナトリウム、アスコルビン酸リン酸マグネシウム、アスコルビン酸リン酸ナトリウム、アスコルビン酸グルコシド、アスコルビン酸パルミテート等のアスコルビン酸化合物；ｄｌ−α−トコフェロール、ｄｌ−β−トコフェロール、ｄｌ−γ−トコフェロール、ｄｌ−δ−トコフェロール、酢酸ｄｌ−α−トコフェロール、ニコチン酸−ｄｌ−α−トコフェロール、リノール酸−ｄｌ−α−トコフェロール、コハク酸ｄｌ−α−トコフェロール、α−トコトリエノール、β−トコトリエノール、γ−トコトリエノール、δ−トコトリエノール等のトコフェロール化合物；カストビーンガム、グアーガム、ヒドロキシプロピルグアガム、キサンタンガム、カラヤガム、タマリンド種子多糖、アラビアガム、トラガカントガム、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、コンドロイチン硫酸ナトリウム、デキストリン等の単糖類又は多糖類；ソルビトール、マンニトール、マルチトール、ラクトース、マルトトリイトール、キシリトール等の糖アルコール；チアミン等のビタミンＢ１化合物；リボフラビン等のビタミンＢ２化合物；ニコチン酸、ニコチン酸アミド等のビタミンＢ３化合物；ナイアシン、パントテン酸、パントテニルエチルエーテル等のビタミンＢ５化合物、ピリドキシン等のビタミンＢ６化合物、ビオチン等のビタミンＢ７化合物、コバラミン等のビタミンＢ１２化合物、葉酸等のビタミンＢ群；γ−オリザノール、オロチン酸、グルクロノラクトン、グルクロン酸アミド、ヨクイニン等の水溶性ビタミン化合物；塩化ナトリウム、硫酸ナトリウム等の無機塩；カゼイン、アルブミン、メチル化コラーゲン、加水分解コラーゲン、水溶性コラーゲン、ゼラチン等の分子量５０００超のタンパク質；グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、スレオニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、シスチン、メチオニン、リジン、ヒドロキシリジン、アルギニン、ヒスチジン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、プロリン、ヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリン等のアミノ酸及びそれらの誘導体；カルボキシビニルポリマー、ポリアクリル酸ナトリウム、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール、酸化エチレン・酸化プロピレンブロック共重合体等の合成高分子；ヒドロキシエチルセルロー���、メチルセルロース等の水溶性セルロース誘導体；フラボノイド類（カテキン、アントシアニン、フラボン、イソフラボン、フラバン、フラバノン、ルチン）、フェノール酸化合物（クロロゲン酸、エラグ酸、没食子酸、没食子酸プロピル等）、リグナン化合物、クルクミン化合物、クマリン化合物、プテロスチルベン等を含むヒドロキシスチルベンなどを挙げることができる。
【００３２】
経口剤とした場合の添加成分としては、例えば、乳化剤、賦形剤、希釈剤、崩壊剤、結合剤、被覆剤、湿潤剤、滑走剤、滑沢剤、風味剤、甘味剤、可溶化剤等を挙げることができ、具体的には、例えば、ポリグリセリン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、有機酸モノグリセリド、ポリグリセリン脂肪酸エーテル、プロピレングリコール脂肪酸エ
ステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリオキエチレンステロール、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル等の非イオン性界面活性剤；レシチン等のリン脂質；アスコルビン酸、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸マグネシウム、アスコルビン酸硫酸マグネシウム、アスコルビン酸硫酸ナトリウム、アスコルビン酸リン酸マグネシウム、アスコルビン酸リン酸ナトリウム、アスコルビン酸グルコシド、アスコルビン酸パルミテート等のアスコルビン酸化合物；ｄｌ−α−トコフェロール、ｄｌ−β−トコフェロール、ｄｌ−γ−トコフェロール、ｄｌ−δ−トコフェロール、酢酸ｄｌ−α−トコフェロール、ニコチン酸−ｄｌ−α−トコフェロール、リノール酸−ｄｌ−α−トコフェロール、コハク酸ｄｌ−α−トコフェロール、α−トコトリエノール、β−トコトリエノール、γ−トコトリエノール、δ−トコトリエノール等のトコフェロール化合物；炭酸マグネシウム、二酸化チタン；ラクトース、マンニトール及びその他の糖類；タルク；ゼラチン；デンプン；セルロース及びセルロース誘導体；動物油及び植物油；ポリエチレングリコール；水；一価又は多価アルコールなどを挙げることができる。選択可能な形態としては、例えばカプセル剤、錠剤、丸剤、液剤、シロップ剤、トローチ剤、散剤、顆粒剤、輸液剤及び注射剤等が挙げられる。中でも、摂取容易性の観点から、添加成分としては、好ましくはカプセル剤、錠剤、顆粒剤又は散剤がある。
【００３３】
ＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤は、例えば、皮膚等への局所投与用途のために、水中油型乳化組成物に含まれることが好ましい。なかでも、ＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤を含有する水中油型乳化組成物は、皮膚への浸透性の観点から、ＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤を油相に含むことが好ましい。
【００３４】
ＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤の投与方法には特に制限はなく、各種製剤形態、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の種類又は疾患の程度等に応じた方法を選択することができ、経口投与及び、局所投与等の非経口投与のいずれであってもよい。
ＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤の投与量は、剤型等によって異なるが、有効成分としてのグリチルレチン酸として、一般に、１日１回として、体重１ｋｇあたり、０．００１ｍｇ〜２ｍｇ、好ましくは０．０１ｍｇ〜１ｍｇとすることができる。ＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤を含む組成物を調製し、局所投与する場合には、有効成分であるグリチルレチン酸の組成物における含有量は、組成物全質量の０．０００１質量％〜０．５質量％とすることができ、０．００１質量％〜０．３質量％が好ましく、０．００５質量％〜０．２質量％がより好ましい。
【００３５】
ＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤は、ＤＨＴ誘導型インターロイキンが産生することに起因する症状に好ましく適用される。ＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤は、ＤＨＴ誘導型インターロイキンに起因した症状の発生を抑制することができ、又はＤＨＴ誘導型インターロイキンに起因した症状の進行を抑制することができる。ＤＨＴ誘導型インターロイキンに起因した症状の発生又は進行とは、ＤＨＴ誘導型インターロイキンの産生によって蓄積したＤＨＴ誘導型インターロイキンによって引き起こされる症状の発生又は引き起こされた症状の継続を意味する。
【００３６】
ＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤の用途としては、育毛剤、外用剤、肌改善剤、更年期症状低減剤等を挙げることができる。育毛剤の用途では、ＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤による毛幹の伸長阻害又は毛胞の退縮促進が効果的に抑制され、脱毛の抑制又は発毛の促進が期待される。また肌改善剤等の用途では、ＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤による皮脂分泌が効果的に抑制され、皮脂の異常分泌による肌あれ等の軽減が期待される。さらに、ＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤の適用によって、更年期における多汗、むくみ、動悸等の改善が期待される。
【００３７】
本発明は、ＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤を対象へ投与することを含む各種の症状の予防方法又は緩和方法も包含する。例えば、本発明に係る肌あれ予防又は改善方法は、ＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤を、肌あれの予防又は改善を必要とする対象へ投与することを含む。また、本発明に係る更年期症状低減方法は、ＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤を、多汗、むくみ、動悸等の低減を必要とする対象へ投与することを含む。
【００３８】
本発明は、育毛剤、外用剤、更年期による肌改善剤、更年期症状低減剤等の各用途におけるＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤の使用を包含する。また、本発明は、育毛剤、外用剤、更年期による肌改善剤、更年期症状低減剤等の各薬剤の製造におけるＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤の使用を包含する。
【実施例】
【００３９】
以下、本発明を実施例にて詳細に説明する。しかしながら、本発明は実施例に何ら限定されるものではない。
なお、細胞培養には、特に断らない限り、毛乳頭細胞増殖培地（東洋紡株式会社）に１００Ｕ／ｍｌのペニシリン及び１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシンを補填した培地を使用した（以下、単に培地ということがある）。
また、細胞培養用６穴シャーレ（日本ＢＤ）には、取り扱い説明書に従いコラーゲンコート溶液（東洋紡株式会社）を事前に塗布し、培養に用いた。
【００４０】
［実施例１］
＜ＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制効果＞
上記培地にて培養した新生児ヒト由来毛乳頭細胞（ＨＦＤＰＣ、東洋紡株式会社）に、ＤＨＴ（東京化成工業株式会社）をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解したＤＨＴ試料を調製し、１０μＭの最終濃度となるように培地に添加して、３７℃、５％（ｖ／ｖ）ＣＯ２の環境下で２４時間培養し、ＤＨＴによる誘導を行った。
グリチルレチン酸（ＧＡ）（和光純薬工業株式会社）を、１０ｍＭの最終濃度となるようにＤＭＳＯで溶解し、培養培地に添加してＧＡ含有試料液を調製した。調製されたＧＡ含有試料液を、ＧＡの最終濃度が細胞傷害性のない濃度である１０μＭとなるように、ＤＨＴ誘導同時に毛乳頭細胞を培養する培地へ添加し、３７℃、５％（ｖ／ｖ）ＣＯ２の環境下で、培養を行った。比較対照（コントロール：ｃｔｒ）としては、ＤＭＳＯのみの試料液（ＧＡ：０μＭ）を用い、同様にこの溶液をＤＨＴ誘導後の毛乳頭細胞を含む培地に添加し、培養を行った。
【００４１】
６時間後に、各試料を添加したＤＨＴ誘導後の毛乳頭細胞の上清を回収し、１２，０００ｇで５分間遠心した後、上澄みを、各種インターロイキン抗体を固定化したタンパク質アレイ（ＲａｙＢｉｏ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ａｒｒａｙ５、ＲａｙＢｉｏｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．）を使用し解析した。
【００４２】
取扱説明書の記載に従って、上記で得られた各試料由来の各種タンパク質アレイを用いて、ＤＨＴ誘導後の毛乳頭細胞中の各インターロイキンの存在量を測定し、比較対照における各インターロイキンの存在量（Ａ）とＤＨＴ誘導後の毛乳頭細胞における各インターロイキンの存在量（Ｂ）とから、以下の式（Ｉ）に基づいて、ＧＡによるインターロイキン産生の抑制率を求め、以下の指標に基づき、各インターロイキン産生に対するＧＡを評価した。結果を表１に示す。
抑制率（％）＝［（Ａ）−（Ｂ）］／（Ａ）・・・（Ｉ）
＋＋＋＋：ＩＬの産生あり、ＧＡによる産生抑制率３０％以上
＋＋＋：ＩＬの産生あり、ＧＡによる抑制率２０％以上３０％未満
＋＋：ＩＬの産生あり、ＧＡによる抑制率１０％以上２０％未満
＋：ＩＬの産生あり、ＧＡによる抑制率５％以上１０％未満
−：ＧＡにより抑制率が５％未満であり、検出感度以下
【００４３】
【表１】
2015028007.tif 000002
【００４４】
表１に示されるように、ＩＬ−１α、ＩＬ−２、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３及びＩＬ−１５は、ＤＨＴ誘導型インターロイキンであり、ＧＡの添加によって産生が抑制されることがわかった。中でも、ＤＨＴ誘導後の毛乳頭細胞においてＧＡによるＩＬの産生抑制効果は、ＩＬ−２及びＩＬ−６、特にＩＬ−６に対して顕著であることがわかった。
【００４５】
これらのことから、ＧＡを有効成分とするＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤は、ＤＨＴ誘導型インターロイキンの産生を抑制することができ、これにより、ＤＨＴ誘導型インターロイキンが産生されることによって生じる各種症状を改善又は緩和し得ることがわかる。
【００４６】
［実施例２］
＜浸透評価＞
（１）ＧＡ含有試料１の調製
以下のようにして、エタノールを含有するＧＡ含有試料１を調製した。
βグリチルレチン酸（丸善製薬株式会社）５．４ｇ量り取り、１００％エタノール５００ｇに完全に溶解した後、精製水で１ｋｇになるように調整した。
これにより、エタノールを含有するＧＡ含有試料１を得た。
【００４７】
（２）ＧＡ含有試料２（乳化物）の調製
以下のようにして、エタノールを含有しない乳化物としてのＧＡ含有試料２を調製した。
βグリチルレチン酸（丸善製薬株式会社）０．５４ｇをラウロイルサルコシンイソプロ
ピル（味の素ヘルシーサプライ株式会社；エルデュウ（登録商標）ＳＬ−２０５）１１ｇ、オレイルアルコール（高級アルコール工業株式会社）３．７ｇ、デシルテトラデカノール（高級アルコール工業株式会社）１．８、粉末レシチン（辻製油株式会社；ＳＬＰホワイト）２ｇを混合し、７０℃にて撹拌しながら溶解し、これを油性組成物Ａとした。
一方、イソステアリン酸ポリグリセリル−１０（日光ケミカルズ株式会社；Ｄｅｃａｇｌｙｎ  １−ＩＳＶ、ＨＬＢ＝１２）６．２ｇを、ミリＱ水７３ｇの混合液中に７０℃にて溶解させたものを水性組成物Ａとした。
上記により調製した水性組成物Ａ及び油性組成物Ａを、ＴＫホモミキサー（プライミクス株式会社）で６０℃にて、５００ｒｐｍの回転数で１５分間粗乳化した。この粗乳化物を、超高圧分散装置であるスターバーストミニ機（株式会社スギノマシン）で、６０℃に保ちながら、圧力２００ＭＰａで４回通過させて微細乳化物（水中油型乳化物）を調製した。
これにより、ＧＡを油相に含む水中油型乳化組成物としてのＧＡ含有試料２を得た。
【００４８】
（３）浸透試験
上記で得られたＧＡ含有試料１及びＧＡ含有試料２について、以下のようにして浸透試験を行った。
表皮モデル（Ｌａｂｃｙｔｅ  ＥＰＩ−ＭＯＤＥＬ、株式会社ジャパン・ティッシュ・エンジニアリング）を、内径５ｍｍのフランツセル（キーストンサイエンティフィック株式会社）に挟んだ。３０％（ｖ／ｖ）エタノール含有ＰＢＳ緩衝液をレセプター側に添加し、表皮モデルとの隙間に気泡が入らないように、フランツセルに付属の製品取扱説明書にしたがって設置した、表皮モデル表面が充分に乾燥していることを確認し、角質層側に２．５μｌのＧＡ含有試料１又はＧＡ含有試料２を添加し、２２時間後に透過した液を回収した。回収した液中のＧＡ量を高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により定量した。ＨＰＬＣの測定条件は以下のとおりであった。結果を図１に示す。
（ＨＰＬＣ測定条件）
カラム    ：Ｉｍａｔａｋｔ  Ｃａｄｅｎｚａ  ＣＤ−Ｃ１８
流量      ：１ｍｌ／ｍｉｎ
カラム温度：４０℃
検出波長  ：２５０ｎｍ
展開液    ：ＭｅＯＨ／水＝９０／１０（容量比；なお、リン酸０．１容量（体積）％を含む）
【００４９】
図１に示されるように、エタノールを含有するＧＡ含有試料１及びエタノールを含有しない乳化物としてのＧＡ含有試料２は共に、表皮モデルへの透過量が０．０００５質量％以上であり、ＧＡによるＤＨＴ誘導型インターロイキン産生抑制剤の効果が充分に期待できることがわかる。特に、ＧＡを油相に含む水中油型乳化組成物であるＧＡ含有試料２では、０．００１質量％を超える高い透過液量を示し、より好ましいことがわかる。
【００５０】
従って、本発明によれば、ジヒドロテストステロン誘導型のインターロイキンの産生に起因する症状をより効果的に低減し得るジヒドロテストステロン誘導型インターロイキン産生抑制剤を提供することができる。
【図１】
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