(57)【要約】【課題】炭水化物を蓄積するように操作されたトランスジェニック細菌、及び、光合成微生物を培養するためのフォトバイオリアクターを提供する。【解決手段】本明細書において、炭水化物、例えば二糖を蓄積するように操作されたトランスジェニック細菌が提供される。光合成微生物に栄養素および水分を提供するのに適した非ゼラチン質の固体培養担体ならびに前記培養担体の表面の少なくとも一部をおおう物理的バリアを含む、光合成微生物を培養するためのフォトバイオリアクターもまた提供される。フォトバイオリアクターを組み込んだ、光合成微生物の大規模連続培養のための装置および使用方法が開示されている。本発明のフォトバイオリアクターを用いる、光合成微生物からの発酵性糖の生産方法もまた開示されている。【選択図】図１２
2015180227.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
光合成微生物を培養するためのフォトバイオリアクターにおいて、
その表面の少なくとも一部の上にある光合成微生物に栄養素および水分を提供するのに適した非ゼラチン質の固体培養担体であって、前記表面の一部が非水平に向けられるとき、光合成微生物がそれに付着するのを可能にする形状を有する前記固体培養担体;ならびに少なくとも前記培養担体の表面の一部をおおう物理的バリアであって、前記培養担体の表面の一部への接種、このような光合成微生物の培養に適した環境の形成および維持ならびにこのような培養した光合成微生物の収穫を可能にするように構成された前記物理的バリア
を含む前記フォトバイオリアクター。
【請求項２】
前記培養担体の表面の一部の上にある付着した光合成微生物をさらに含む、請求項1記載のフォトバイオリアクター。
【請求項３】
前記培養担体の表面の一部が、1リットル相当量当たり乾燥バイオマス少なくとも約50グラムの密度で光合成微生物を培養できる、請求項1または請求項2記載のフォトバイオリアクター。
【請求項４】
培養担体が柔軟性である、請求項1〜3のいずれかに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項５】
培養担体が1以上の硬質材料を含む、請求項1〜3のいずれかに記載にフォトバイオリアクター。
【請求項６】
培養担体が少なくとも2つの層、すなわち第2層に隣接した第1層を含み、ここで少なくとも2つの層の材料が同一材料または異なる材料である、請求項1〜5のいずれか1つに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項７】
第1層が高表面積の増殖材料を含み、第2層が透過型材料を含む、請求項6記載のフォトバイオリアクター。
【請求項８】
培養担体が、可撓的に連結された硬質部分であって、1以上の硬質材料で構成される前記硬質部分を含む、請求項1〜7のいずれか1つに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項９】
物理的バリアが、固体微粒子および液体に対して少なくとも実質的に不透過性であるが、前記培養担体の表面の一部に隣接する空間を往復するガスまたは蒸気の移動を妨げないばかりでなく、前記培養担体の表面の一部の化学線照射も妨げない、請求項1〜8のいずれかに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項１０】
培養担体と物理的バリアとの間に位置する化学線源をさらに含む、請求項1〜9のいずれか1つに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項１１】
物理的バリアが、培養担体と化学線源との間にあり、このような化学線に対し十分に透明であり、培養中に光合成微生物による光合成を可能にするために十分にガス透過性である、請求項1〜9のいずれかに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項１２】
湿らせた培養担体が十分な水分を保持するように、物理的バリアが水蒸気に対して十分に不透過性であり、それにより培養中に光合成微生物が適切に水和されたままである、請求項1〜11のいずれかに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項１３】
バリアが、光合成微生物の培養の少なくとも一部分において、培養担体およびその培養担体上の任意の光合成微生物を密閉し、かつ、取り外し可能にシールされるように構成される、請求項1〜12のいずれかに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項１４】
フォトバイオリアクターが1つの培養担体を含む、請求項1〜13のいずれかに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項１５】
フォトバイオリアクターが複数の培養担体を含む、請求項1〜13のいずれかに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項１６】
物理的バリアが柔軟性である、請求項1〜15のいずれか1つに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項１７】
物理的バリアが、固体微粒子、液体、ガスおよび蒸気に対して少なくとも実質的に不透過性である第1の部分ならびに、ガスおよび蒸気に対して透過性であるが、固体微粒子および液体に対して少なくとも実質的に不透過性である第2の部分をさらに含む、請求項1〜16のいずれか1つに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項１８】
バリアの第2の部分が、少なくとも約5ガーレー秒から約10,000ガーレー秒以下までのガスまたは蒸気交換速度を有する、請求項17記載のフォトバイオリアクター。
【請求項１９】
バリアの第2の部分が、オレフィン繊維もしくはポリエチレン繊維材料、ポリテトラフルオロエチレン濾過媒体、セルロース系フィルター材料、ファイバーグラスフィルター材料、ポリエステルフィルター材料、ポリアクリラートフィルター材料、ポリスルホン膜またはナイロン膜を含む選択膜を含む、請求項17記載のフォトバイオリアクター。
【請求項２０】
第1の部分が化学線に対して少なくとも実質的に透過性であり、第2の部分が化学線に対して少なくとも実質的に透過性ではなく、第1および第2の部分の、互いに対する配置および少なくとも前記培養担体の表面の一部に対する配置が光合成微生物による光合成を維持するために十分な量の化学線およびガスが交換されるようなものである、請求項17〜19のいずれか1つに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項２１】
培養担体が布を含む、請求項1〜20のいずれか1つに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項２２】
布が天然繊維、改質天然繊維、合成繊維またはそれらの組み合わせで構成される、請求項21記載のフォトバイオリアクター。
【請求項２３】
布が織物、編物、フェルト、架橋繊維ポリマーのメッシュまたはそれらの組み合わせである、請求項21記載のフォトバイオリアクター。
【請求項２４】
天然繊維が綿、羊毛、アサ、木繊維、他のセルロース系繊維およびそれらの組み合わせからなる群から選択され;
改質天然繊維がニトロセルロース、セルロースアセタート、セルローススルホナート、架橋デンプンおよびそれらの組み合わせからなる群から選択され;
合成繊維がポリエステル、ポリアクリラート、ポリアミン、ポリアミド、ポリスルホンおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される、
請求項22記載のフォトバイオリアクター。
【請求項２５】
培養担体が吸水性ポリマーでコーティングされる、請求項1〜24のいずれかに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項２６】
布、布の繊維または両方が吸水性ポリマーでコーティングされる、請求項21〜25のいずれかに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項２７】
前記吸水性ポリマーが寒天、ポリアクリラート、ポリアミド、ポリアミン、ポリエチレングリコール、修飾デンプンおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項25〜26のいずれか1つに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項２８】
培養担体上、培養担体内または培養担体上および培養担体内に水、栄養素、またはそれらの組み合わせをさらに含む、請求項1〜27のいずれかに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項２９】
フォトバイオリアクターを構造物へ取り付けるための1以上の取り付け部分をさらに含む、請求項1〜28のいずれかに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項３０】
固体培養担体が、培養担体を取り付けるための1以上の取り付け部分をさらに含む、請求項1〜29のいずれかに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項３１】
流体供給システム、栄養供給システム、ガス供給システムおよび微生物供給システムの少なくとも1つをさらに含む、請求項1〜30のいずれか1つに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項３２】
請求項42〜55のいずれか1つに記載の細胞であって、固体培養担体に付着した前記細胞をさらに含む、請求項1〜31のいずれか1つに記載のフォトバイオリアクター。
【請求項３３】
請求項1〜32のいずれかに記載の少なくとも1つのフォトバイオリアクター;および
少なくとも1つのフォトバイオリアクターの少なくとも1つの培養担体が非水平に向いた少なくとも1つのフォトバイオリアクターが取り付けられる構造物
を含む、光合成微生物を培養するための装置。
【請求項３４】
少なくとも1つのフォトバイオリアクターが構造物から吊り下げられる、請求項33記載の装置。
【請求項３５】
構造物が物理的バリアによって実質的におおわれる、請求項33〜34のいずれか1つに記載の装置。
【請求項３６】
構造物が、コンベヤシステムの経路に沿って少なくとも1つの培養担体を運搬することができるようにコンベヤシステムまたはその構成要素を含む、請求項33〜35のいずれか1つに記載の装置。
【請求項３７】
各培養担体をコンベヤシステムの経路に沿って運搬しながら光合成微生物を接種できる接種ステーション;
各培養担体をコンベヤシステムの経路に沿って運搬しながら、接種された各培養担体上の光合成微生物を培養するための培養ステーション;および
培養した光合成微生物の少なくとも一部を各培養担体から収穫するために培養担体が運ばれる収穫ステーション
をさらに含む、請求項36記載の装置。
【請求項３８】
接種ステーションおよび収穫ステーションが、実質的に互いに隣接しているかまたは実質的に同延である、請求項37記載の装置。
【請求項３９】
各培養担体上の光合成微生物による発酵性糖の合成を誘導するための誘導ステーションをさらに含む、請求項33〜38のいずれか1つに記載の装置。
【請求項４０】
流体供給システム、栄養供給システム、ガス供給システムまたは微生物供給システムの少なくとも1つをさらに含む、請求項33〜39のいずれか1つに記載の装置。
【請求項４１】
請求項42〜55のいずれか1つに記載の細胞であって、固体培養担体に付着した前記細胞をさらに含む、請求項33〜40のいずれかに記載の装置。
【請求項４２】
転写の5’から3’の方向に作動可能に連結された構成要素として:
光合成微生物細胞において機能するプロモーター;
二糖リン酸シンターゼおよび二糖リン酸ホスファターゼからなる群から選択される、二糖生合成活性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド;ならびに
転写終結配列;
を含む人工DNA構築物を含むトランスジェニック光合成微生物細胞であって、前記DNA構築物を含まない光合成微生物細胞と比較して増加したレベルの二糖を蓄積する前記トランスジェニック光合成微生物細胞。
【請求項４３】
(i)二糖リン酸シンターゼ活性を有するポリペプチドをコードする第1ヌクレオチド配列および二糖リン酸ホスファターゼ活性を有するポリペプチドをコードする第2ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドまたは(ii)二糖リン酸シンターゼ活性および二糖リン酸ホスファターゼ活性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドを含む、請求項42記載の細胞。
【請求項４４】
二糖生合成活性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドが:
(a)スクロースリン酸シンターゼおよびスクロースリン酸ホスファターゼ(ASF)活性を有する配列番号2またはそれに95%同一の配列;
スクロースリン酸シンターゼ(SPS)活性を有する配列番号4またはそれに95%同一の配列;
スクロースリン酸ホスファターゼ(SPP)活性を有する配列番号6またはそれに95%同一の配列;
トレハロースリン酸シンターゼ(TPS)活性を有する配列番号77またはそれに95%同一の配列;
トレハロースリン酸ホスファターゼ(TPP)活性を有する配列番号79またはそれに95%同一の配列;
グルコシルグリセロールリン酸シンターゼ(GPS)活性を有する配列番号81またはそれに95%同一の配列;
グルコシルグリセロールリン酸ホスファターゼ(GPP)活性を有する配列番号83またはそれに95%同一の配列;
マンノシルフルクトースリン酸シンターゼ(MPS)活性を有する配列番号85またはそれに95%同一の配列;および
マンノシルフルクトースリン酸ホスファターゼ(MPP)活性を有する配列番号87またはそれに95%同一の配列;
からなる群から選択されるポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド、
(b)スクロースリン酸シンターゼ/スクロースリン酸ホスファターゼ(ASF)活性をコードする配列番号1またはそれに95%同一の配列;
スクロースリン酸シンターゼ(SPS)活性をコードする配列番号3またはそれに95%同一の配列;
スクロースリン酸ホスファターゼ(SPP)活性をコードする配列番号5またはそれに95%同一の配列;
トレハロースリン酸シンターゼ(TPS)活性をコードする配列番号76またはそれに95%同一の配列;
トレハロースリン酸ホスファターゼ(TPP)活性をコードする配列番号78またはそれに95%同一の配列;
グルコシルグリセロールリン酸シンターゼ(GPS)活性をコードする配列番号80またはそれに95%同一の配列;
グルコシルグリセロールリン酸ホスファターゼ(GPP)活性をコードする配列番号82またはそれに95%同一の配列;
マンノシルフルクトースリン酸シンターゼ(MPS)活性をコードする配列番号84またはそれに95%同一の配列;および
マンノシルフルクトースリン酸ホスファターゼ(MPP)活性をコードする配列番号86またはそれに95%同一の配列;
を含む単離されたポリヌクレオチド;
(c)単離されたポリヌクレオチドがASF活性を有するポリペプチドをコードする配列番号1;単離されたポリヌクレオチドがSPS活性を有するポリペプチドをコードする配列番号3;
単離されたポリヌクレオチドがSPP活性を有するポリペプチドをコードする配列番号5;
単離されたポリヌクレオチドがTPS活性を有するポリペプチドをコードする配列番号76;
単離されたポリヌクレオチドがTPP活性を有するポリペプチドをコードする配列番号78;
単離されたポリヌクレオチドがGPS活性を有するポリペプチドをコードする配列番号80;
単離されたポリヌクレオチドがGPP活性を有するポリペプチドをコードする配列番号82;
単離されたポリヌクレオチドがMPS活性を有するポリペプチドをコードする配列番号84;
単離されたポリヌクレオチドがMPP活性を有するポリペプチドをコードする配列番号86;
からなる群から選択される核酸配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ストリンジェントな条件が6X SSC(0.9M塩化ナトリウムおよび0.09Mクエン酸ナトリウム)を含む溶液中65℃でのインキュベーションを含む前記単離されたポリヌクレオチド;ならびに
(d)(a)、(b)または(c)のポリヌクレオチド配列に相補的な単離されたポリヌクレオチド
からなる群から選択される、請求項42〜43のいずれか1つに記載の細胞。
【請求項４５】
蓄積された二糖モノマーが細胞にとって内因性である、請求項42〜44のいずれか1つに記載の細胞。
【請求項４６】
細胞が、光合成細菌であるシアノバクテリア細胞;または緑藻である、請求項42〜45のいずれか1つに記載の細胞。
【請求項４７】
細胞がシアノバクテリア細胞である、請求項42〜46のいずれか1つに記載の細胞。
【請求項４８】
細胞がシネココッカスおよびシネコシスチスからなる群から選択されるシアノバクテリアである、請求項42〜47のいずれか1つに記載の細胞。
【請求項４９】
プロモーターが誘導性プロモーターである、請求項42〜48のいずれか1つに記載の細胞。
【請求項５０】
プロモーターがcarB、nirA、psbAII、dnaK、kaiAおよびλPRからなる群から選択される、請求項42〜49のいずれか1つに記載の細胞。
【請求項５１】
DNA構築物が、配列番号19(asfをコードするpLybAL11);配列番号20(asfをコードするpLybAL12);配列番号44(asfをコードするpLybAL15);配列番号45(asfをコードするpLybAL16);配列番号46(asfをコードするpLybAL17);配列番号47(asfをコードするpLybAL18);配列番号48(asfをコードするpLybAL19);配列番号49(asfをコードするpLybAL21);配列番号50(asfをコードするpLybAL22);配列番号51(asfをコードするpLybAL13f);配列番号52(asfをコードするpLyAL13r);配列番号53(asfをコードするpLybAL14f);配列番号54(asfをコードするpLybAL14r);配列番号65(asfをコードするpLybAL7f);配列番号69(asfをコードするpLybAL8f);配列番号118(tpsおよびtppをコードするpLybAL23);配列番号121(tpsおよびtppをコードするpLybAL28);配列番号122(tpsおよびtppをコードするpLybAL29);配列番号123(tpsおよびtppをコードするpLybAL30);配列番号124(tpsおよびtppをコードするpLybAL31);配列番号125(tpsおよびtppをコードするpLybAL36);配列番号126(tpsおよびtppをコードするpLybAL37);配列番号130(tpsおよびtppをコードするpLybAL24);ならびに配列番号133(tpsおよびtppをコードするpLybAL33)からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む、請求項42〜50のいずれか1つに記載の細胞。
【請求項５２】
細胞が、1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり二糖を少なくとも約0.1マイクログラム蓄積する、請求項42〜51のいずれかに記載の細胞。
【請求項５３】
細胞が、1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり二糖を少なくとも約0.1マイクログラムから最大1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり二糖を約10マイクログラムまで蓄積する、請求項42〜52のいずれか1つに記載の細胞。
【請求項５４】
以下:
配列番号70、配列番号72および配列番号74またはそれらに対する少なくとも95%の同一性およびインベルターゼ活性もしくはスクラーゼフェリドキシン活性を有するそれらのヌクレオチドバリアントからなる群から選択されるヌクレオチド配列を細胞が含まない;
配列番号71、配列番号73および配列番号75またはそれらに対する少なくとも95%の同一性およびインベルターゼ活性もしくはスクラーゼフェリドキシン活性を有するそれらのポリペプチドバリアントからなる群から選択されるポリペプチド配列を細胞が発現しない;または
配列番号70、配列番号72および配列番号74またはそれらに対する少なくとも95%の同一性およびインベルターゼ活性もしくはスクラーゼフェリドキシン活性を有するそれらのヌクレオチドバリアントからなる群から選択されるヌクレオチド配列に特異的な低分子干渉RNAを細胞が発現する
の少なくとも1つを満足させる、請求項42〜53のいずれかに記載の細胞。
【請求項５５】
活性ポリンポリペプチドをコードする配列番号94またはそれに95%同一の配列を含む単離されたポリヌクレオチド;
配列番号95またはそれに95%同一の配列を含みポリン活性を有するポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチド;または
配列番号91(ポリンをコードするpLybAL32)を含む単離されたポリヌクレオチド;
をさらに含む請求項42〜54のいずれか1つに記載の細胞であって、蓄積された二糖がスクロースであり、細胞がポリンを発現し、発現されたポリンが、蓄積されたスクロースを細胞から分泌させる前記細胞。
【請求項５６】
配列番号19(asfをコードするpLybAL11);配列番号20(asfをコードするpLybAL12);配列番号44(asfをコードするpLybAL15);配列番号45(asfをコードするpLybAL16);配列番号46(asfをコードするpLybAL17);配列番号47(asfをコードするpLybAL18);配列番号48(asfをコードするpLybAL19);配列番号49(asfをコードするpLybAL21);配列番号50(asfをコードするpLybAL22);配列番号51(asfをコードするpLybAL13f);配列番号52(asfをコードするpLyAL13r);配列番号53(asfをコードするpLybAL14f);配列番号54(asfをコードするpLybAL14r);配列番号65(asfをコードするpLybAL7f);配列番号69(asfをコードするpLybAL8f);配列番号118(tpsおよびtppをコードするpLybAL23);配列番号121(tpsおよびtppをコードするpLybAL28);配列番号122(tpsおよびtppをコードするpLybAL29);配列番号123(tpsおよびtppをコードするpLybAL30);配列番号124(tpsおよびtppをコードするpLybAL31);配列番号125(tpsおよびtppをコードするpLybAL36);配列番号126(tpsおよびtppをコードするpLybAL37);配列番号130(tpsおよびtppをコードするpLybAL24);配列番号133(tpsおよびtppをコードするpLybAL33);配列番号91(ポリンをコードするpLybAL32);配列番号102(SS-UPPをコードするpLybAL3f);配列番号103(SE-UPPをコードするpLybAL5f);配列番号106(SE-UPPをコードするpLybAL4f);配列番号107(SE-UPPをコードするpLybAL9f);配列番号109(SE-UPPをコードするpLybAL6fb);配列番号110(SE-UPPをコードするpLybAL10fb);および配列番号91(ポリンをコードするpLybAL32)からなる群から選択される少なくとも1つの配列を含む人工DNA構築物。
【請求項５７】
請求項1〜41のいずれかに記載のフォトバイオリアクターまたは装置を用いる光合成微生物の培養方法であって、
培養担体に光合成微生物を接種し;
接種された培養担体で光合成微生物を培養し;
培養担体から培養した光合成微生物の少なくとも一部を収穫すること
を含む前記方法。
【請求項５８】
物理的バリアがシールされている間、光合成微生物の培養の全部または実質的な部分が行われるように、培養担体の接種後にフォトバイオリアクターの物理的バリアをシールすることをさらに含む請求項57記載の方法。
【請求項５９】
物理的バリアが取り外し可能にシールされている、請求項58記載の方法。
【請求項６０】
接種ステーション、培養ステーションおよび収穫ステーションに各培養担体を運搬することをさらに含む、請求項57〜59のいずれか1つに記載の方法。
【請求項６１】
培養担体に流体を供給すること;培養担体に栄養素を供給すること;または培養担体にガスを供給することの少なくとも1つをさらに含む、請求項57〜60のいずれか1つに記載の方法。
【請求項６２】
光合成微生物が、1リットル相当量当たり乾燥バイオマス少なくとも約50グラムの密度まで培養される、請求項57〜61のいずれかに記載の方法。
【請求項６３】
光合成微生物が、請求項42〜55のいずれか1つに記載の細胞を含む、請求項57〜62のいずれか1つに記載の方法。
【請求項６４】
請求項1〜41記載のいずれかに記載のフォトバイオリアクターまたは装置を用いる発酵性糖の生産方法であって、
発酵性糖を蓄積できる光合成微生物を培養担体に接種し;
接種された培養担体で光合成微生物を培養し;
蓄積された発酵性糖を単離すること
を含む前記方法。
【請求項６５】
発酵性糖が光合成微生物内に蓄積する、請求項64記載の方法。
【請求項６６】
蓄積された発酵性糖の単離が、
培養担体からの、培養した光合成微生物の少なくとも一部を収穫し;
収穫物からの発酵性糖を回収すること
を含む請求項64〜65のいずれか1つに記載の方法。
【請求項６７】
蓄積された発酵性糖が、光合成微生物から分泌され、培養培地から単離される、請求項64〜66のいずれかに記載の方法。
【請求項６８】
蓄積された発酵性糖の単離が、培養培地からの蓄積された発酵性糖の単離を含む、請求項64〜67のいずれかに記載の方法。
【請求項６９】
物理的バリアがシールされている間、光合成微生物の培養の全部または実質的な部分が行われるように、培養担体の接種後にフォトバイオリアクターの物理的バリアを取り外し可能にシールすることをさらに含む、請求項64〜68のいずれか1つに記載の方法。
【請求項７０】
培養担体に流体を供給すること;培養担体に栄養素を供給すること;または培養担体にガスを供給することの少なくとも1つをさらに含む、請求項64〜69のいずれか1つに記載の方法。
【請求項７１】
培養担体を接種ステーション、培養ステーションおよび収穫ステーションの少なくとも1つに運搬することをさらに含む、請求項64〜70のいずれか1つに記載の方法。
【請求項７２】
光合成微生物による発酵性糖の合成の誘導をさらに含む、請求項64〜71のいずれか1つに記載の方法。
【請求項７３】
発酵性糖の合成の誘導が、温度、pH、代謝物、光、浸透圧剤、重金属および抗生物質からなる群から選択される誘導剤に光合成微生物を暴露することを含む、請求項72記載の方法。
【請求項７４】
発酵性糖の合成の誘導が、光合成微生物を塩化合物で処理することを含む、請求項72〜73のいずれか1つに記載の方法。
【請求項７５】
塩化合物が塩化ナトリウムである、請求項74記載の方法。
【請求項７６】
塩化合物が約0.01mM〜1.5Mまたは約0.2〜0.9Mの濃度で添加される、請求項74〜75のいずれか1つに記載の方法。
【請求項７７】
エアゾールスプレーによって増殖表面に誘導剤が塗布される、請求項73〜76のいずれか1つに記載の方法。
【請求項７８】
光合成微生物が、1リットル相当量当たり乾燥バイオマス少なくとも約50グラムの密度まで培養される、請求項64〜77のいずれかに記載の方法。
【請求項７９】
発酵性糖が、グルコース、フルクトース、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールおよびマンノシルフルクトースからなる群から選択される少なくとも1つの糖を含む、請求項64〜78のいずれかに記載の方法。
【請求項８０】
発酵性糖が、スクロースおよびトレハロースからなる群から選択される少なくとも1つの糖を含む、請求項64〜79のいずれか1つに記載の方法。
【請求項８１】
光合成微生物が天然に存在する光合成微生物を含む、請求項64〜81のいずれか1つに記載の方法。
【請求項８２】
光合成微生物が遺伝子改変光合成微生物を含む、請求項64〜81のいずれか1つに記載の方法。
【請求項８３】
光合成微生物がシアノバクテリアを含む、請求項64〜82のいずれかに記載の方法。
【請求項８４】
光合成微生物がシネココッカスまたはシネコシスチスからなる群から選択されるシアノバクテリアを含む、請求項64〜83のいずれか1つに記載の方法。
【請求項８５】
光合成微生物が請求項42〜52のいずれか1つに記載の細胞を含む、請求項64〜84のいずれか1つに記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、米国仮特許出願第61/085,797号(出願日:2008年8月1日)および米国仮特許出願第61/018,798号(出願日:2008年1月3日)に基づく優先権を主張する(そのそれぞれは、参照により本願に組み込まれる)。
【０００２】
コンピュータ読み取り可能な形式で提出された資料の参照による組み込み
本開示の一部である配列表は、本発明のヌクレオチドおよび/またはアミノ酸配列を含むコンピュータ読み取り可能な形式および書面での配列表を含む。コンピュータ読み取り可能な形式で記録された配列表情報は、書面での配列表と同一である。配列表の対象物は、参照によりその全体が本願に組み込まれる。
【０００３】
技術分野
本発明は、一般に、トランスジェニック微生物ならびにその培養方法および培養装置に関する。
【背景技術】
【０００４】
世界のエネルギー必要量の増加に取り組むために、化石燃料の使用の効率的で環境上適正な代替物が求められている。エタノールまたはバイオディーゼルなどの代替燃料は、植物バイオマスから生産できる。例えば、エタノール生産に用いられている現行プロセスの重要成分は発酵性糖と呼ばれている。ほとんどの場合、発酵性糖はスクロース、グルコースまたは高果糖コーンシロップの形態である。このようなバイオマスの生産のために現在栽培されている植物は、コーン、サトウキビ、ダイズ、カノーラ、ジャトロファなどを含む。しかしながら、発酵性糖の生産のために使用される植物バイオマスの多くは、大規模なエネルギー集約型の前処理を必要とする。さらにまた、このような植物バイオマスの使用は、土壌消耗、腐食および食料供給品の転用を引き起こす恐れがある。
【０００５】
シアノバクテリアの一部は、スクロースリン酸シンターゼおよびスクロースリン酸ホスファターゼの作用によってスクロースを生産することが知られ、これはもっぱら浸透圧保護剤として研究されてきた。耐塩性に関して、シアノバクテリアを3つのグループに分けることができる。低い耐性(700mM未満)を有する株は、スクロース(例えばシネココッカス・エロンガタス(Synechococcus elongatus)PCC 7942の場合)またはトレハロースとして知られる他の二糖のいずれかを合成する[Blumwald et al., Proc Natl Acd Sci USA (1983) 80:2599-2602 and Reed et al., FEMS Microbiol Rev (1986) 39:51-56]。中程度の耐塩性(0.7〜1.8mM)を有する株、例えばシネコシスチス(Synechocystis)種PCC 6803によりグルコシルグリセロールが生産される。高い耐塩性(〜2.5M)は、グリシンベタインまたはグルタミン酸ベタインのいずれかの蓄積の結果により生じる。しかしながら、Miaoら [FEMS Microbiol Lett (2003) 218:71-77]は、agp遺伝子の欠失によりグルコシルグリセロール生合成が阻害されるとき、シネコシスチス種PCC 6803は、その浸透圧保護剤としてスクロースを生産することを測定した。同様に、乾燥耐性シアノバクテリアは、マトリックス水ストレスに応じてスクロースおよびトレハロースを生産する[Hershkovitz et al., Appl Environ Microbiol (1991) 57:645-648]。
【０００６】
シネコシスチス種PCC 6803(ATCC 27184)およびシネココッカス・エロンガタスPCC 7942(ATCC 33912)は比較的よく研究されており、入手可能な遺伝子ツールがあり、それらのゲノム配列は既知である(例えば、Koksharova, O. A. and・Wolk, C. P. 2002. Appl Microbiol Biotechnol 58, 123-137; Ikeuchi1, M. and Satoshi Tabata, S. 2001. Photosynthesis Research 70, 73-83; Golden, S. S., Brusslan, J. and Haselkorn, R. 1987. Methods in Enzymology 153, 215-231; Friedberg, D. 1988. Methods in Enzymology 167, 736-747; Kaneko, T. et al. 1996. DNA Research 3, 109-136 を参照のこと)。
【０００７】
光合成微生物、例えば、スピルリナ・マキシマム(Spirulina maximum)、スピルリナ・プラテンシス(Spirulina platensis)、ドナリエラ・サリナ(Dunaliella salina)、ボトリオコックス・ブラウニイ(Botrycoccus braunii)、クロレラ・ブルガリス(Chlorella vulgaris)、クロレラ・ピレノイドーサ(Chlorella pyrenoidosa)、セレナストルム・カプリコミュータム(Serenastrum capricomutum)、セネデスムス・クアドリカウダ(Scenedesmus auadricauda)、ポルフィリディウム・クルエンタム(Porphyridium cruentum)、セネデスムス・アクタス(Scenedesmus acutus)、ドナリエラ(Dunaliella)種、セネデスムス・オブリカス(Scenedesmus obliquus)、アナベノプシス(Anabaenopsis)、アウロシラ(Aulosira)、キリンドロスペルムム(Cylindrospermum)、セネコッカス(Scenecoccus)種、セネシスティス(Scenecosystis)種およびトリポスリックス(Tolypothrix)の商業培養は、精製化学製品、医薬品、化粧品用顔料、脂肪酸、抗酸化剤、予防効果を有するタンパク質、増殖因子、抗生物質、ビタミンおよび多糖の生産を含む多数の用途に好ましい。藻類のバイオマスはまた、低用量で動物食品における抗生物質レベルの低下にまたはその代替として有用であることもでき、タンパク源として有用であることもできる。さらにまた、乾燥形態とは対照的に、湿潤形態で提供される藻類のバイオマスは、燃料の生産のために、培養または熱プロセスによって液化することができる。従って、このような生物の培養効率を上げる能力に大変興味が持たれる。
【０００８】
一般に、現行の光合成バイオリアクターは、バイオマスを生産するために、液相系における微生物の培養を必要とする。この系は、通例、開放型池型リアクターまたは密閉型タンク型リアクターである。しかしながら、密閉型バイオリアクターは、一般的には多くの点で池型リアクターよりも改善されていると考えられている。重要なことに、密閉系は、環境汚染に対するバリアを提供している。さらに、この系は、液体培地の温度およびガス含有量の良好な調節を可能にする。
【０００９】
それにもかかわらず、密閉型フォトバイオリアクターの使用は、光合成微生物の光要求性により限定される傾向がある(すなわち、化学線は、光合成微生物が二酸化炭素を固定して有機分子にするために必要なエネルギーを提供する)。従って、光合成微生物の十分な照射は、強固な必要条件である。それにもかかわらず、液相フォトバイオリアクターにおける細胞密度が増加するに従って、培地に達する光の能力は減少し、このことは、一般的には達成される細胞密度を限定する。さらに、微生物の好ましくない沈降を防ぐために、一般に、エネルギーの投入を必要とするプロセスである、液体培地のある種の撹拌を必要とする。
【００１０】
液相系における微生物に光をもたらす方法を発明するために、多数の試みがなされている。例えば、ある系は、透明な管を通して液体培地を循環させることを含む。他の試みは、放射線吸収を調節するために、培地内に光源を置くか、または培地に反射粒子を導入することを含む。これらの努力にもかかわらず、より高い細胞密度で液相系において微生物を培養する能力における顕著な増加はいまだに達成されていない。
【００１１】
前述の光要求性に加えて、液相フォトバイオリアクターの使用は、光合成のための十分な二酸化炭素を光合成微生物に供給することが負担となってきた。一般的には、これらの系は一般に、培地に溶存している二酸化炭素濃度を増加させるための、ある種のさらなる通気システムを組み込んでいる。通気の必要性を排除することにより、この系は著しく簡略化され、それにより操業費が抑えられると考えられる。
【００１２】
液相フォトバイオリアクターもまた、連続生産の常法には適切ではない傾向がある。一般に、大容量の液体の移動は複雑で厄介である。さらにまた、液相系は、通例循環、撹拌、通気などの仕組みを必要とするため、一般に、多数の小さな培養装置よりも、1個かまたは数個の大きな培養装置を操作するほうが、より簡単でより費用対効果が高い。従って、現在行われている方法は、比較的大規模なバッチの処理を含む(すなわち、光合成微生物のバッチを培養し、次いで得られる全バイオマスを収穫する)。
【００１３】
従って、当該技術分野において、光合成バイオリアクター設計における進歩が強く求められている。大容量の水または他の液体培地を用いず、十分な光および二酸化炭素を供給する前述の特別な手段を用いずに、合理的な費用で、比較的高密度の光合成微生物を効率的に培養し、収穫できる新しいタイプの光合成バイオリアクターを提供することは、当該技術分野での実質的進歩を意味し、産業および消費者が等しく利益を受けることになると考えられる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本明細書において、炭水化物、例えば二糖を蓄積するように操作されたトランスジェニック細菌が提供される。光合成微生物に栄養素および水分を提供するのに適した非ゼラチン質の固体培養担体ならびに前記培養担体の表面の少なくとも一部をおおう物理的バリアを含む、光合成微生物を培養するためのフォトバイオリアクターもまた提供される。フォトバイオリアクターを組み込んだ、光合成微生物の大規模連続培養のための装置および使用方法が開示されている。本発明のフォトバイオリアクターを用いる、光合成微生物からの発酵性糖の生産方法もまた開示されている。
【００１５】
一側面は、光合成微生物を培養するためのフォトバイオリアクターを提供する。フォトバイオリアクターは、その表面の少なくとも一部の上にある光合成微生物に栄養素および水分を提供するのに適した非ゼラチン質の固体培養担体であって、前記表面の一部が非水平に向けられるとき、光合成微生物がそれに付着するのを可能にする形状（topography）を有する前記固体培養担体;ならびに、少なくとも前記培養担体の表面の一部をおおう物理的バリアであって、前記培養担体の表面の一部への接種、このような光合成微生物の培養に適した環境の形成および維持ならびにこのような培養した光合成微生物の収穫を可能にするように構成された前記物理的バリアを含む。
【００１６】
いくつかの実施形態において、フォトバイオリアクターは、前記培養担体の表面の一部の上にある光合成微生物を含む。いくつかの実施形態において、フォトバイオリアクターは、以下でより詳しく説明するが、二糖を蓄積するように操作された細胞であって、固体培養担体に付着した前記細胞をさらに含む。いくつかの実施形態において、前記培養担体の表面の一部は、1リットル相当量当たり乾燥バイオマス少なくとも約50グラムの密度で光合成微生物を培養できる。
【００１７】
いくつかの実施形態において、培養担体は柔軟性（flexible）である。いくつかの実施形態において、培養担体は1以上の硬質材料を含む。いくつかの実施形態において、フォトバイオリアクターの培養担体は、少なくとも2つの層、すなわち第2層に隣接した第1層を含み、ここで少なくとも2つの層の材料は同一材料または異なる材料である。いくつかの実施形態において、第1層は高表面積の増殖材料を含み、第2層は透過型材料を含む。いくつかの実施形態において、フォトバイオリアクターの培養担体は、可撓的に連結された硬質部分であって、1以上の硬質材料で構成される前記硬質部分を含む。いくつかの実施形態において、フォトバイオリアクターは1つの培養担体を含む。いくつかの実施形態において、フォトバイオリアクターは複数の培養担体を含む。
【００１８】
いくつかの実施形態において、培養担体は布を含む。いくつかの実施形態において、布は天然繊維、改質天然繊維、合成繊維またはそれらの組み合わせで構成される。いくつかの実施形態において、布は織物、編物、フェルト、架橋繊維ポリマーのメッシュまたはそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態において、天然繊維は、綿、羊毛、アサ、木繊維、他のセルロース系繊維およびそれらの組み合わせからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、改質天然繊維は、ニトロセルロース、セルロースアセタート、セルローススルホナート、架橋デンプンおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、合成繊維はポリエステル、ポリアクリラート、ポリアミン、ポリアミド、ポリスルホンおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００１９】
いくつかの実施形態において、培養担体は吸水性ポリマー（moisuture absorbent polymer）でコーティングされる。いくつかの実施形態において、布、布の繊維または両方は吸水性ポリマーでコーティングされる。いくつかの実施形態において、吸水性ポリマーは寒天、ポリアクリラート、ポリアミド、ポリアミン、ポリエチレングリコール、修飾デンプンおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００２０】
いくつかの実施形態において、フォトバイオリアクターの物理的バリアは、固体微粒子および液体に対して少なくとも実質的に不透過性であるが、前記培養担体の表面の一部に隣接する空間を往復するガスまたは蒸気の移動を妨げないばかりでなく、前記培養担体の表面の一部の化学線照射も妨げない。いくつかの実施形態において、湿らせた培養担体が十分な水分を保持するように、物理的バリアは水蒸気に対して十分に不透過性であり、それにより培養中に光合成微生物は適切に水和されたままである。いくつかの実施形態において、バリアは、光合成微生物の培養の少なくとも一部分において、培養担体およびその培養担体上の任意の光合成微生物を密閉し、かつ、取り外し可能（releasably）にシールされるように構成される。いくつかの実施形態において、物理的バリアは柔軟性である。いくつかの実施形態において、物理的バリアは、固体微粒子、液体、ガスおよび蒸気に対して少なくとも実質的に不透過性である第1の部分ならびに、ガスおよび蒸気に対して透過性であるが、固体微粒子および液体に対して少なくとも実質的に不透過性である第2の部分をさらに含む。いくつかの実施形態において、バリアの第2の部分は、少なくとも約5ガーレー秒から約10,000ガーレー秒以下までのガスまたは蒸気交換速度を有する。いくつかの実施形態において、バリアの第2の部分は、オレフィン繊維もしくはポリエチレン繊維材料、ポリテトラフルオロエチレン濾過媒体、セルロース系フィルター材料、ファイバーグラスフィルター材料、ポリエステルフィルター材料、ポリアクリラートフィルター材料、ポリスルホン膜またはナイロン膜を含む選択膜を含む。いくつかの実施形態において、第1の部分は化学線に対して少なくとも実質的に透過性であり、第2の部分は化学線に対して少なくとも実質的に透過性ではなく、第1および第2の部分の、互いに対する配置および少なくとも前記培養担体の表面の一部に対する配置は光合成微生物による光合成を維持するために十分な量の化学線およびガスが交換されるようなものである。
【００２１】
いくつかの実施形態において、フォトバイオリアクターは、培養担体と物理的バリアとの間に位置する化学線源をさらに含む。いくつかの実施形態において、物理的バリアは、培養担体と化学線源との間にあり、このような化学線に対し十分に透明であり、培養中に光合成微生物による光合成を可能にするために十分にガス透過性である。
【００２２】
いくつかの実施形態において、フォトバイオリアクターは、培養担体上、培養担体内または培養担体上および培養担体内に水、栄養素、またはそれらの組み合わせをさらに含む。いくつかの実施形態において、フォトバイオリアクターは、フォトバイオリアクターを構造物へ取り付けるための1以上の取り付け部分をさらに含む。いくつかの実施形態において、フォトバイオリアクターは、流体供給システム、栄養供給システム、ガス供給システムおよび微生物供給システムの少なくとも1つをさらに含む
【００２３】
他の側面は、光合成微生物を培養するための装置を提供する。前記装置は、前述の少なくとも1つのフォトバイオリアクターおよび少なくとも1つのフォトバイオリアクターの少なくとも1つの培養担体が非水平に向いた少なくとも1つのフォトバイオリアクターが取り付けられる構造物を含む。いくつかの実施形態において、少なくとも1つのフォトバイオリアクターは構造物から吊り下げられる。いくつかの実施形態において、構造物は物理的バリアによって実質的におおわれる。いくつかの実施形態において、構造物は、コンベヤシステムの経路に沿って少なくとも1つの培養担体を運搬することができるようにコンベヤシステムまたはその構成要素を含む。いくつかの実施形態において、装置は、以下の1つ、2つまたは3つ:各培養担体をコンベヤシステムの経路に沿って運搬しながら光合成微生物を接種できる接種ステーション;各培養担体をコンベヤシステムの経路に沿って運搬しながら、接種された各培養担体上の光合成微生物を培養するための培養ステーション;および培養した光合成微生物の少なくとも一部を各培養担体から収穫するために培養担体が運ばれる収穫ステーションをさらに含む。いくつかの実施形態において、接種ステーションおよび収穫ステーションは、実質的に互いに隣接しているかまたは実質的に同延である。いくつかの実施形態において、装置は、各培養担体上の光合成微生物による発酵性糖の合成を誘導するための誘導ステーションをさらに含む。いくつかの実施形態において、装置は、流体供給システム、栄養供給システム、ガス供給システムまたは微生物供給システムの少なくとも1つをさらに含む。いくつかの実施形態において、装置は、固体培養担体上に付着した光合成微生物をさらに含む。いくつかの実施形態において、装置は、以下でより詳しく説明するが、二糖を蓄積するように操作された細胞であって、固体培養担体に付着した前記細胞をさらに含む。
【００２４】
他の側面は、二糖を蓄積するように操作されたトランスジェニック光合成微生物細胞を提供する。トランスジェニック光合成微生物細胞は、転写の5'から3'の方向に作動可能に連結された構成要素として:光合成微生物細胞において機能するプロモーター;二糖リン酸シンターゼおよび二糖リン酸ホスファターゼからなる群から選択される、二糖生合成活性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド;ならびに転写終結配列;を含み、ここで前記トランスジェニック光合成微生物細胞は、前記DNA構築物を含まない光合成微生物細胞と比較して増加したレベルの二糖を蓄積する。
【００２５】
いくつかの実施形態において、トランスジェニック光合成微生物細胞は、二糖リン酸シンターゼ活性を有するポリペプチドをコードする第1ヌクレオチド配列および二糖リン酸ホスファターゼ活性を有するポリペプチドをコードする第2ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態において、二糖リン酸シンターゼ活性および二糖リン酸ホスファターゼ活性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態において、二糖リン酸シンターゼ活性を有するポリペプチドをコードする第1ヌクレオチド配列;二糖リン酸ホスファターゼ活性を有するポリペプチドをコードする第2ヌクレオチド配列;ならびに二糖リン酸シンターゼ活性および二糖リン酸ホスファターゼ活性を有するポリペプチドをコードする第3ヌクレオチド配列を含む。
【００２６】
いくつかの実施形態において、トランスジェニック光合成微生物細胞のポリヌクレオチドは、(a)スクロースリン酸シンターゼおよびスクロースリン酸ホスファターゼ(ASF)活性を有する配列番号2またはそれに95%同一の配列;スクロースリン酸シンターゼ(SPS)活性を有する配列番号4またはそれに95%同一の配列;スクロースリン酸ホスファターゼ(SPP)活性を有する配列番号6またはそれに95%同一の配列;トレハロースリン酸シンターゼ(TPS)活性を有する配列番号77またはそれに95%同一の配列;トレハロースリン酸ホスファターゼ(TPP)活性を有する配列番号79またはそれに95%同一の配列;グルコシルグリセロールリン酸シンターゼ(GPS)活性を有する配列番号81またはそれに95%同一の配列;グルコシルグリセロールリン酸ホスファターゼ(GPP)活性を有する配列番号83またはそれに95%同一の配列;マンノシルフルクトースリン酸シンターゼ(MPS)活性を有する配列番号85またはそれに95%同一の配列;およびマンノシルフルクトースリン酸ホスファターゼ(MPP)活性を有する配列番号87またはそれに95%同一の配列;からなる群から選択されるポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド、
(b)スクロースリン酸シンターゼ/スクロースリン酸ホスファターゼ(ASF)活性をコードする配列番号1またはそれに95%同一の配列;スクロースリン酸シンターゼ(SPS)活性をコードする配列番号3またはそれに95%同一の配列;スクロースリン酸ホスファターゼ(SPP)活性をコードする配列番号5またはそれに95%同一の配列;トレハロースリン酸シンターゼ(TPS)活性をコードする配列番号76またはそれに95%同一の配列;トレハロースリン酸ホスファターゼ(TPP)活性をコードする配列番号78またはそれに95%同一の配列;グルコシルグリセロールリン酸シンターゼ(GPS)活性をコードする配列番号80またはそれに95%同一の配列;グルコシルグリセロールリン酸ホスファターゼ(GPP)活性をコードする配列番号82またはそれに95%同一の配列;マンノシルフルクトースリン酸シンターゼ(MPS)活性をコードする配列番号84またはそれに95%同一の配列;およびマンノシルフルクトースリン酸ホスファターゼ(MPP)活性をコードする配列番号86またはそれに95%同一の配列;を含む単離されたポリヌクレオチド;(c)単離されたポリヌクレオチドがASF活性を有するポリペプチドをコードする配列番号1;単離されたポリヌクレオチドがSPS活性を有するポリペプチドをコードする配列番号3;単離されたポリヌクレオチドがSPP活性を有するポリペプチドをコードする配列番号5;単離されたポリヌクレオチドがTPS活性を有するポリペプチドをコードする配列番号76;単離されたポリヌクレオチドがTPP活性を有するポリペプチドをコードする配列番号78;単離されたポリヌクレオチドがGPS活性を有するポリペプチドをコードする配列番号80;単離されたポリヌクレオチドがGPP活性を有するポリペプチドをコードする配列番号82;単離されたポリヌクレオチドがMPS活性を有するポリペプチドをコードする配列番号84;単離されたポリヌクレオチドがMPP活性を有するポリペプチドをコードする配列番号86;からなる群から選択される核酸配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ストリンジェントな条件が6X SSC(0.9M塩化ナトリウムおよび0.09Mクエン酸ナトリウム)を含む溶液中65℃でのインキュベーションを含む前記単離されたポリヌクレオチド;ならびに(d)(a)、(b)または(c)のポリヌクレオチド配列に相補的な単離されたポリヌクレオチドからなる群から選択される。
【００２７】
いくつかの実施形態において、蓄積された二糖モノマーは細胞にとって内因性である。いくつかの実施形態において、蓄積された二糖のモノマー(単数または複数)は細胞にとって外因性であり、細胞にこのようなモノマー(単数または複数)の発現が操作される。
【００２８】
いくつかの実施形態において、細胞は、光合成細菌であるシアノバクテリア細胞;または緑藻である。いくつかの実施形態において、細胞はシアノバクテリア細胞である。いくつかの実施形態において、細胞は、シネココッカス(Synechococcus)およびシネコシスチスからなる群から選択されるシアノバクテリアである。
【００２９】
いくつかの実施形態において、プロモーターは誘導性プロモーターである。いくつかの実施形態において、プロモーターは、温度、pH、代謝物、光、浸透圧剤、重金属および抗生物質からなる群から選択される誘導剤で誘導できる。いくつかの実施形態において、プロモーターは、carB、nirA、psbAII、dnaK、kaiAおよびλPRからなる群から選択される。
【００３０】
いくつかの実施形態において、細胞のDNA構築物は、配列番号19(asfをコードするpLybAL11);配列番号20(asfをコードするpLybAL12);配列番号44(asfをコードするpLybAL15);配列番号45(asfをコードするpLybAL16);配列番号46(asfをコードするpLybAL17);配列番号47(asfをコードするpLybAL18);配列番号48(asfをコードするpLybAL19);配列番号49(asfをコードするpLybAL21);配列番号50(asfをコードするpLybAL22);配列番号51(asfをコードするpLybAL13f);配列番号52(asfをコードするpLyAL13r);配列番号53(asfをコードするpLybAL14f);配列番号54(asfをコードするpLybAL14r);配列番号65(asfをコードするpLybAL7f);配列番号69(asfをコードするpLybAL8f);配列番号118(tpsおよびtppをコードするpLybAL23);配列番号121(tpsおよびtppをコードするpLybAL28);配列番号122(tpsおよびtppをコードするpLybAL29);配列番号123(tpsおよびtppをコードするpLybAL30);配列番号124(tpsおよびtppをコードするpLybAL31);配列番号125(tpsおよびtppをコードするpLybAL36);配列番号126(tpsおよびtppをコードするpLybAL37);配列番号130(tpsおよびtppをコードするpLybAL24);ならびに配列番号133(tpsおよびtppをコードするpLybAL33)からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む。
【００３１】
いくつかの実施形態において、細胞は、1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり二糖を少なくとも約0.1マイクログラム蓄積する。いくつかの実施形態において、細胞は、1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり二糖を少なくとも約0.1マイクログラムから最大1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり二糖を約10マイクログラムまで蓄積する。
【００３２】
いくつかの実施形態において、配列番号70、配列番号72および配列番号74またはそれらに対する少なくとも95%の同一性およびインベルターゼ活性もしくはスクラーゼフェリドキシン(sucraseferridoxin)活性を有するそれらのヌクレオチドバリアントからなる群から選択されるヌクレオチド配列を細胞は含まない。いくつかの実施形態において、配列番号71、配列番号73および配列番号75またはそれらに対する少なくとも95%の同一性およびインベルターゼ活性もしくはスクラーゼフェリドキシン活性を有するそれらのポリペプチドバリアントからなる群から選択されるポリペプチド配列を細胞は発現しない。いくつかの実施形態において、配列番号70、配列番号72および配列番号74またはそれらに対する少なくとも95%の同一性およびインベルターゼ活性もしくはスクラーゼフェリドキシン活性を有するそれらのヌクレオチドバリアントからなる群から選択されるヌクレオチド配列に特異的な低分子干渉RNAを細胞は発現する。
【００３３】
いくつかの実施形態において、細胞は、活性ポリンポリペプチドをコードする配列番号94またはそれに95%同一の配列を含む単離されたポリヌクレオチド;配列番号95またはそれに95%同一の配列を含みポリン活性を有するポリペプチドをコードする単離されたポリヌクレオチド;または配列番号91(ポリンをコードするpLybAL32)を含む単離されたポリヌクレオチド;をさらに含み、ここで蓄積された二糖はスクロースであり、細胞はポリンを発現し、発現されたポリンは、蓄積されたスクロースを細胞から分泌させる。
【００３４】
他の側面は、人工DNA構築物を提供する。いくつかの実施形態において、人工DNA構築物は、配列番号19(asfをコードするpLybAL11);配列番号20(asfをコードするpLybAL12);配列番号44(asfをコードするpLybAL15);配列番号45(asfをコードするpLybAL16);配列番号46(asfをコードするpLybAL17);配列番号47(asfをコードするpLybAL18);配列番号48(asfをコードするpLybAL19);配列番号49(asfをコードするpLybAL21);配列番号50(asfをコードするpLybAL22);配列番号51(asfをコードするpLybAL13f);配列番号52(asfをコードするpLyAL13r);配列番号53(asfをコードするpLybAL14f);配列番号54(asfをコードするpLybAL14r);配列番号65(asfをコードするpLybAL7f);配列番号69(asfをコードするpLybAL8f);配列番号118(tpsおよびtppをコードするpLybAL23);配列番号121(tpsおよびtppをコードするpLybAL28);配列番号122(tpsおよびtppをコードするpLybAL29);配列番号123(tpsおよびtppをコードするpLybAL30);配列番号124(tpsおよびtppをコードするpLybAL31);配列番号125(tpsおよびtppをコードするpLybAL36);配列番号126(tpsおよびtppをコードするpLybAL37);配列番号130(tpsおよびtppをコードするpLybAL24);配列番号133(tpsおよびtppをコードするpLybAL33);配列番号91(ポリンをコードするpLybAL32);配列番号102(SS-UPPをコードするpLybAL3f);配列番号103(SE-UPPをコードするpLybAL5f);配列番号106(SE-UPPをコードするpLybAL4f);配列番号107(SE-UPPをコードするpLybAL9f);配列番号109(SE-UPPをコードするpLybAL6fb);配列番号110(SE-UPPをコードするpLybAL10fb);および配列番号91(ポリンをコードするpLybAL32)からなる群から選択される少なくとも1つの配列を含む。
【００３５】
他の側面は、光合成微生物の培養方法を提供する。光合成微生物の培養方法は、前述のフォトバイオリアクターまたは装置のいずれかを用いることができる。前記方法は、培養担体に光合成微生物を接種し;接種された培養担体で光合成微生物を培養し;培養担体から培養した光合成微生物の少なくとも一部を収穫することを含む。いくつかの実施形態において、前記方法は、物理的バリアがシールされている間、光合成微生物の培養の全部または実質的な部分が行われるように、培養担体の接種後にフォトバイオリアクターの物理的バリアをシールすることをさらに含む。いくつかの実施形態において、物理的バリアは取り外し可能にシールされている。いくつかの実施形態において、前記方法は、接種ステーション、培養ステーションおよび収穫ステーションに各培養担体を運搬することをさらに含む。いくつかの実施形態において、前記方法は、培養担体に流体を供給すること;培養担体に栄養素を供給すること;または培養担体にガスを供給することの少なくとも1つをさらに含む。いくつかの実施形態において、光合成微生物は、1リットル相当量当たり乾燥バイオマス少なくとも約50グラムの密度まで培養される。いくつかの実施形態において、光合成微生物は、前述のように、二糖を蓄積するように操作されたトランスジェニック光合成微生物を含む。
【００３６】
他の側面は、発酵性糖の生産方法を提供する。発酵性糖の生産方法は、前述のフォトバイオリアクターまたは装置のいずれかを使用することができる。発酵性糖の生産方法は、発酵性糖を蓄積できる光合成微生物を培養担体に接種し;接種された培養担体で光合成微生物を培養し;蓄積された発酵性糖を単離することを含む。いくつかの実施形態において、発酵性糖は光合成微生物内に蓄積する。いくつかの実施形態において、蓄積された発酵性糖の単離は、培養担体からの、培養した光合成微生物の少なくとも一部を収穫し;収穫物からの発酵性糖を回収することを含む。いくつかの実施形態において、蓄積された発酵性糖は、光合成微生物から分泌され、培養培地から単離される。いくつかの実施形態において、蓄積された発酵性糖の単離は、培養培地からの蓄積された発酵性糖の単離を含む。いくつかの実施形態において、前記方法は、物理的バリアがシールされている間、光合成微生物の培養の全部または実質的な部分が行われるように、培養担体の接種後にフォトバイオリアクターの物理的バリアを取り外し可能にシールすることをさらに含む。いくつかの実施形態において、前記方法は、培養担体に流体を供給すること;培養担体に栄養素を供給すること;または培養担体にガスを供給することの少なくとも1つをさらに含む。いくつかの実施形態において、前記方法は、接種ステーション、培養ステーションおよび収穫ステーションの少なくとも1つに各培養担体を運搬することをさらに含む。
【００３７】
いくつかの実施形態において、前記方法は、光合成微生物による発酵性糖の合成の誘導をさらに含む。いくつかの実施形態において、発酵性糖の合成の誘導は、温度、pH、代謝物、光、浸透圧剤、重金属および抗生物質からなる群から選択される誘導剤に光合成微生物を暴露することを含む。いくつかの実施形態において、発酵性糖の合成の誘導は、光合成微生物を塩化合物で処理することを含む。いくつかの実施形態において、塩化合物は塩化ナトリウムである。いくつかの実施形態において、塩化合物は約0.01mM〜1.5Mまたは約0.2〜0.9Mの濃度で添加される。いくつかの実施形態において、誘導剤はエアゾールスプレーによって増殖表面に塗布される。いくつかの実施形態において、光合成微生物は、1リットル相当量当たり乾燥バイオマス少なくとも約50グラムの密度まで培養される。いくつかの実施形態において、発酵性糖は、グルコース、フルクトース、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールおよびマンノシルフルクトースからなる群から選択される少なくとも1つの糖を含む。いくつかの実施形態において、発酵性糖はスクロースおよびトレハロースからなる群から選択される少なくとも1つの糖を含む。
【００３８】
いくつかの実施形態において、光合成微生物は天然に存在する光合成微生物を含む。いくつかの実施形態において、光合成微生物は遺伝子改変光合成微生物を含む。いくつかの実施形態において、光合成微生物はシアノバクテリアを含む。いくつかの実施形態において、光合成微生物は、シネココッカスまたはシネコシスチスからなる群から選択されるシアノバクテリアを含む。いくつかの実施形態において、光合成微生物は、前述のように、二糖を蓄積するように操作されたトランスジェニック光合成微生物を含む。
【００３９】
下文において、他の対象および特徴が部分的に明らかにされ、部分的に指摘される。
【００４０】
下記の図面が単に例示を目的としたものであることは、当業者には明らかであろう。これらの図面は、本教示の範囲をなんら限定するものではない。
【図面の簡単な説明】
【００４１】
【図１】固体培養担体、透明な外部保護バリア層、選択パネル、再シール可能なクロージャーおよび装置を吊り下げるための支持要素を含む、本発明のフォトバイオリアクターの正面図である。
【図２】固体培養担体、透明な外部保護バリア層、選択パネル、再シール可能なクロージャーおよび装置を吊り下げるための支持要素を含む、本発明のフォトバイオリアクターの側面図である。
【図３】フォトバイオリアクター農場を構成するための、共通の接種および収穫センターから放射状に外に広げられた複数の閉ループコンベヤシステムに沿った本発明の複数のフォトバイオリアクターまたは培養担体の配置を示す図である。
【図４】シアノバクテリアにおけるスクロースの光合成生産を示すイラストである。
【図５】シネコシスチス種PCC 6803(Ssp6803)スクロースリン酸シンターゼ(SPS)およびスクロースリン酸ホスファターゼ(SPP)タンパク質とシネココッカス・エロンガタスPCC 7942(Selo7942)活性融合SPS/SPP(ASF)とのポリペプチド配列のアラインメントである。Ssp6803は、SPSおよびSPP活性をコードする別々の遺伝子を含む。シネコシスチス種PCC 6803からのSPSタンパク質は、活性部位残基の多くが保存されていないので、おそらく不活性なSPPドメインを含む。カノニカルHAD加水分解酵素の活性部位残基をアラインメントの上部に示し、保存されたアミノ酸には下線を施し、保存されていない残基には二重下線を施した。シネコシスチス種PCC 6803SPSの不活性なSPPドメイン内の8つのアミノ酸挿入はイタリック体で印刷されている。方法論に関するさらなる詳細は、実施例4に示されている。
【図６】pLybAL11の概略図である。pLybAL11はシアノバクテリアDNAのライブラリーの構築およびプロモーター配列の選択を可能にする。プロモーターを含有しないasf遺伝子は、二方向性ターミネーターの後ろにあり、マルチクローニング部位(MCS)によって分離されている。oriVは、大部分のグラム陰性微生物におけるプラスミドの複製を可能にする。oriTは、pRK2013ヘルパープラスミドの助けにより、選択されたシアノバクテリア(または他の微生物)への大腸菌からのプラスミドの接合伝達を可能にする。大腸菌における選択のために、β-ラクタマーゼ遺伝子(bla)が存在している。シアノバクテリアゲノムDNAをMCSにクローニングすることによって、大腸菌内でDNAライブラリーを構築することができる。次いで、接合または直接形質転換によって、シアノバクテリアにプラスミドライブラリーを導入することができる。次いで、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ遺伝子(cat)の発現によるクロラムフェニコールに関する選択によって、活性プロモーターを単離することができる。クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ活性に関するアッセイおよびスクロース生産の直接試験の両方によってプロモーターの強度を評価することができる。方法論に関するさらなる詳細は、実施例5に示されている。
【図７】pLybAL12の概略図である。pLybAL12は、asf発現を亢進するための、あらかじめ選択したプロモーターの能力の分析を可能にする。pLybAL12とpLybAL11の間の唯一の差異は、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ遺伝子(cat)の前の活性プロモーターの存在である。PCRによって増幅されたシアノバクテリア染色体DNAから単離された特定のDNA配列をMCSにクローニングすることができる。大腸菌における選択のために、クロラムフェニコールおよびアンピシリンの両方を使用することができる。次いで、接合または直接形質転換によって、プラスミドライブラリーをシアノバクテリアに導入することができる。次いで、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ遺伝子(cat)の発現によるクロラムフェニコールに関する選択によって、プラスミドを含むシアノバクテリアを単離することができる。クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ活性に関するアッセイおよびスクロース生産の直接試験の両方によってプロモーターの強度を評価することができる。方法論に関するさらなる詳細は、実施例5に示されている。
【図８】シアノバクテリアプロモーターライブラリーの構築を示すイラストである。方法論に関するさらなる詳細は、実施例8に示されている。
【図９】pSMART-LCKanを示す概略図である。方法論に関するさらなる詳細は、実施例8に示されている。
【図１０】シネココッカス・エロンガタスPCC 7942asf内の可能なプロモーターを示す配列表である。シネココッカス・エロンガタスPCC 7942からのasf遺伝子を含む増幅されたPCR産物が示されている。これは、クロラムフェニコール耐性マーカーの上流にクローニングされた。スクロースリン酸シンターゼおよびスクロースリン酸ホスファターゼポリペプチド活性をコードするasf領域は、それぞれ一重下線および二重下線が施されている。全DNA配列領域はイタリック体で示され、上にラベルされている。StartおよびStopは、それぞれ開始コドンおよび終止コドンを示す。SDはシャイン・ダルガノ配列を示す。推定上のプロモーターの-35および-10領域は、グレーで強調表示されている。方法論に関するさらなる詳細は実施例8に示されている。
【図１１】シアノバクテリアゲノムにおける遺伝子のマーカーレス欠失のための2ステッププロトコルを示す概略図である。この戦略は、使用されているシアノバクテリア株がそのupp遺伝子を欠失してしまっていることを仮定している。スクロース生合成遺伝子挿入の間に、upp遺伝子は欠失してしまっていると考えられる。欠失の標的とされた目的とする遺伝子を同定しなければならない。出発株は5-フルオロウラシルに耐性を示すが、カナマイシンに感受性を示す。カナマイシン耐性マーカーおよび活性uppを含むカセットの挿入によって遺伝子は完全にまたは部分的に欠失しており、その株はカナマイシンに耐性を示すようになるが、5-フルオロウラシルに感受性を示すようになる。次いで、uppおよびカナマイシン耐性マーカーを除去することができ、株は再度5-フルオロウラシルに耐性を示すようになるが、カナマイシンには感受性になる。方法論に関するさらなる詳細は、実施例12に示されている。
【図１２】フォトバイオリアクター実施形態の概略図である。図12Aは正面図を示し、図12Bは側面図を示す。フォトバイオリアクターは、吊り下げ要素(6);培地供給(8);ガス供給(10);増殖表面(2);外部バリア層(7);クイックコネクタ;および産物収穫ライン(9)を含む。
【図１３】1つの材料フォーマット(図13A)およびハイブリッド材料フォーマット(図13B)における増殖表面の概略図である。
【発明を実施するための形態】
【００４２】
発明の詳細な説明
本願は、発酵性糖蓄積光合成微生物、固相フォトリアクター装置およびそれぞれを用いる方法に関する。
【００４３】
発酵性糖蓄積光合成微生物においては、一般に光合成微生物に利用されず、従って培養したバイオマス中に蓄積されることができる二糖(例えば、スクロース、トレハロース)を生産することが好ましいと考えられる。いくつかの実施形態において、光合成微生物は、通常浸透圧ストレス経路に従って生産される二糖(例えば、スクロースまたはトレハロース)を合成するように遺伝子操作され、それにより、浸透圧ストレスの非存在下またはレベル低下において前記二糖が生産される。高等植物と比較して、光合成微生物の増殖は効率がよく、環境影響が少ないので、現行のバイオ燃料製造慣行と比較して、前記方法は持続可能性において重要な改良を提示する。好都合には、前述の二糖合成方法は、本発明のフォトバイオリアクター(単数または複数)内で行われるのに適合されてきた。
【００４４】
本明細書記載のフォトバイオリアクターは固体培養担体を用いる。好都合には、少なくとも一部分において、適切な光暴露を提供する困難さは軽減されている。フォトバイオリアクターにおける前述の固体培養担体を用いることにより、工業規模液相バイオリアクターの細胞密度を超える細胞密度(例えば、1リットル相当量当たり乾燥バイオマス200グラムを超える細胞密度)で光合成微生物を培養および増殖させることができる。さらに、本明細書記載のフォトバイオリアクターの種々の実施形態は、従来の工業規模液相フォトバイオリアクターと比較してより少ないエネルギーでより簡単に運転できる。
【００４５】
本明細書記載のフォトバイオリアクターの実施形態は、従来の液相フォトバイオリアクターと比較してさらなる利点を提供する。例えば、液体系は、一般的には、光合成微生物の増殖および光合成を維持するために、光合成微生物に適切な濃度/量の二酸化炭素を供給するための特別な装置を必要とする。対照的に、固体培養担体上で微生物を増殖させることによって、比較的簡単で金がかからない方法、例えば周囲の空気への暴露を用いて二酸化炭素を提供できる。さらなる二酸化炭素が所望される場合、例えば、培養担体の周囲の、またはそれに接触している大気(例えば、空気)に二酸化炭素を加えることにより容易に二酸化炭素を供給できる。他の利益は移動の容易さである。液相フォトバイオリアクターは、池(完全に不動である)またはかさのあるタンクまたは管の集合体である可能性がある。対照的に、種々の実施形態において、フォトバイオリアクターは平らで柔軟性であり、それによりそれまたはその多くを積み重ねる、巻き上げる、折りたたむ、および/または類似の方法で形成されて比較的容易に移動することができる。種々の実施形態において、フォトバイオリアクターはシステムから吊り下げられるように形成されることができ、それによりある場所から他の場所へフォトバイオリアクターの1以上のを容易に運送することが可能になる。この移動しやすさは、多数のフォトバイオリアクターの連続式での効率的な取り扱いおよび処理方法を工業規模で可能にするために利用することができる。
【００４６】
本願の一側面は、光合成微生物による発酵性糖供給原料の生産方法に関する。好ましくは、発酵性糖は発酵性二糖である。発酵性二糖の例は、限定するものではないが、スクロースおよびトレハロースを含む。発酵性糖は、一般に光合成微生物に利用されない二糖であることができる。例えば、トレハロースは、シアノバクテリアに一般に利用されず、従って、内因性代謝経路による実質的分解を受けずに、培養したバイオマス中に蓄積されることができる。発酵性糖は、光合成微生物に一般に利用される二糖であることができる。一次エネルギー源として用いられない二糖に関しては、内因性代謝経路の存在下であっても、多くの場合、二糖は十分な濃度まで蓄積されることができる。内因性分解経路が標的発酵性糖に特異的な場合、このような活性を低下させるかまたは除去するために光合成微生物を操作することができる。例えば、スクロースを蓄積するように操作されたシアノバクテリアは、スクロースインベルターゼ活性を低下させるかまたは除去するためにさらに操作されることができる。種々の実施形態において、浸透圧またはマトリックス水ストレスに応じて発酵性二糖を合成する光合成微生物株を用いることができる。他の実施形態において、浸透圧ストレスの非存在下またはレベル低下において、発酵性二糖を蓄積するように操作された光合成微生物トランスジェニック株がある。好都合には、前述の発酵性二糖合成方法は、本明細書記載のフォトバイオリアクターなしでも行われるように適合させることができる。
【００４７】
高等植物と比較して、光合成微生物の増殖は効率がよく、環境影響が少ないので、現行のバイオ燃料製造慣行と比較して、本明細書記載の組成物、装置および方法は、持続可能性において重要な改良を提示する。
【００４８】
光合成微生物
本明細書において、二糖を蓄積するように遺伝子操作された光合成微生物が提供される。光合成微生物は、例えば、シアノバクテリアなどの天然光合成微生物であることもでき、人工光合成細菌などの操作された光合成微生物であることもできる。蓄積された二糖の例は、限定するものではないが、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールおよびマンノシルフルクトースを含む。種々の実施形態において、所望の二糖の蓄積をもたらすために、宿主光合成微生物(例えば、シアノバクテリア)において、対応するリン酸化モノマーからの所望の二糖の生産に関与するタンパク質(単数または複数)をコードする1以上の遺伝子が操作される。いくつかの実施形態において、二糖を蓄積させるために、宿主光合成微生物の内因性経路が操作される。例えば、シアノバクテリアにおける浸透圧スクロース経路は、浸透圧ストレスの非存在下でスクロースを蓄積するように操作されることができる。いくつかの実施形態において、二糖を蓄積させるために、シアノバクテリアにおける外因性二糖経路が操作される。例えば、大腸菌(E.coli)由来の浸透圧トレハロース経路は、シアノバクテリアにおいてトレハロースを蓄積するように操作されることができる。
【００４９】
シンターゼおよびホスファターゼ
所望の二糖に対するシンターゼ活性およびホスファターゼ活性を有するように光合成微生物を形質転換することができる。例えば、シアノバクテリアは、スクロースリン酸シンターゼ活性およびスクロースリン酸ホスファターゼ活性を有するように操作されることができる。他の例として、シアノバクテリアは、トレハロースリン酸シンターゼ活性およびトレハロースリン酸ホスファターゼ活性を有するように操作されることができる。他の例として、シアノバクテリアは、グルコシルグリセロールリン酸シンターゼ活性およびグルコシルグリセロールリン酸ホスファターゼ活性を有するように操作されることができる。他の例として、シアノバクテリアは、マンノシルフルクトースリン酸シンターゼ活性およびマンノシルフルクトースリン酸ホスファターゼ活性を有するように操作されることができる。これらの活性は、他の光合成微生物においても同様に操作されることができると考えられる。
【００５０】
シンターゼ活性およびホスファターゼ活性は、シンターゼ活性を有するポリペプチドをコードする1つの遺伝子およびホスファターゼ活性を有するポリペプチドをコードするもう1つの遺伝子の各遺伝子を用いて、またはシンターゼ活性およびホスファターゼ活性の両方をコードする1つの遺伝子を用いて光合成微生物に操作されることができる。例えば、シンターゼ活性およびホスファターゼ活性は融合ポリペプチドに存在することができる。
【００５１】
所望の二糖の糖モノマーは、光合成微生物にとって内因性であることもでき、外因性であることもできる。所望の二糖の糖モノマーが内因性である場合、光合成微生物は増加したレベルのこのようなモノマーを生産するように操作されることができる。所望の二糖の糖モノマーが外因性である場合、光合成微生物はこのような外因性モノマーを生産するように操作されることができる。
【００５２】
光合成微生物は、ある発生状態の後に、あるいはその様に誘導された後に所望の二糖を継続的に合成し蓄積するように操作されることができる。二糖合成の誘導は、本明細書でさらに詳細に述べるように、コードされるシンターゼおよびホスファターゼと関連する誘導性プロモーターおよび誘導剤の作用に従うことができる。
【００５３】
いくつかの実施形態において、本明細書記載の形質転換シアノバクテリアは、1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり二糖(例えば、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールまたはマンノシルフルクトース)少なくとも約0.1マイクログラムを蓄積することができる。いくつかの実施形態において、形質転換シアノバクテリアは、1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり二糖(例えば、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールまたはマンノシルフルクトース)少なくとも約0.1から最大約10マイクログラムまでを蓄積することができる。例えば、形質転換シアノバクテリアは、1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり少なくとも約0.2、少なくとも約0.3、少なくとも約0.4、少なくとも約0.5、少なくとも約0.6、少なくとも約0.7、少なくとも約0.8または少なくとも約0.9マイクログラムの二糖(例えば、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールまたはマンノシルフルクトース)を蓄積することができる。他の実施形態において、種々の形質転換光合成微生物は、同様な量の二糖を蓄積する。
【００５４】
種々の実施形態は、上記の所定の範囲の値で二糖(例えば、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールまたはマンノシルフルクトース)を蓄積すると考えられる。例えば、一部の形質転換シアノバクテリアは、1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり少なくとも約0.1から最大約0.9マイクログラムまでの二糖(例えば、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールまたはマンノシルフルクトース);1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり少なくとも約0.1から最大約0.8マイクログラムまでの二糖(例えば、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールまたはマンノシルフルクトース);1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり少なくとも約0.1から最大約0.7マイクログラムまでの二糖(例えば、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールまたはマンノシルフルクトース);などを蓄積することができる。同様に、一部の形質転換シアノバクテリアは、1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり少なくとも約0.2から最大約1.0マイクログラムまでの二糖(例えば、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールまたはマンノシルフルクトース);1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり少なくとも約0.3から最大約1.0マイクログラムまでの二糖(例えば、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールまたはマンノシルフルクトース);1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり少なくとも約0.4から最大約1.0マイクログラムまでの二糖(例えば、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールまたはマンノシルフルクトース);1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり少なくとも約0.5から最大約1.0マイクログラムまでの二糖(例えば、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールまたはマンノシルフルクトース);1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり少なくとも約0.6から最大約1.0マイクログラムまでの二糖(例えば、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールまたはマンノシルフルクトース);1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり少なくとも約0.7から最大約1.0マイクログラムまでの二糖(例えば、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールまたはマンノシルフルクトース);1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり少なくとも約0.8から最大約1.0マイクログラムまでの二糖(例えば、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールまたはマンノシルフルクトース);または1分当たり乾燥バイオマス1グラム当たり少なくとも約0.9から最大約1.0マイクログラムまでの二糖(例えば、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールまたはマンノシルフルクトース)を蓄積することができる。宿主細胞における糖蓄積のアッセイ方法は当業者に公知である(例えば、実施例10参照)。
【００５５】
宿主
二糖を蓄積するように遺伝子操作された宿主は、任意の光合成微生物であることができる。光合成微生物は、例えば、シアノバクテリアなどの天然光合成微生物であることもでき、人工光合成細菌などの操作された光合成微生物であることもできる。天然光合成微生物であるか、または操作して光合成微生物にすることができる典型的な微生物は、限定するものではないが、細菌;真菌;古細菌;原生生物;微小植物、例えば緑藻;ならびに動物、例えばプランクトン、プラナリアおよびアメーバを含む。天然に存在する光合成微生物の例は、限定するものではないが、スピルリナ・マキシマム、スピルリナ・プラテンシス、ドナリエラ・サリナ、ボトリオコックス・ブラウニイ、クロレラ・ブルガリス、クロレラ・ピレノイドーサ、セレナストルム・カプリコミュータム、セネデスムス・クアドリカウダ、ポルフィリディウム・クルエンタム、セネデスムス・アクタス、ドナリエラ種、セネデスムス・オブリカス、アナベノプシス、アウロシラ、キリンドロスペルムム、シネコッカス(Synechoccus)種、シネコシスチス種および/またはトリポスリックスを含む。
【００５６】
好ましくは、宿主光合成微生物はシアノバクテリアである。シアノバクテリア、別名藍藻は幅広い酸素発生型光合成独立栄養生物である。宿主シアノバクテリアは、藍色植物門(Cyanophyta)由来の任意の光合成微生物であることができる。宿主シアノバクテリアは、単細胞形態を有することもできるし、コロニー形態(例えば、フィラメント、シートまたはボール)を有することもできる。好ましくは、宿主シアノバクテリアは単細胞シアノバクテリアである。二糖を蓄積するように操作されることができるシアノバクテリアの例は、限定するものではないが、シネコシスチス、シネココッカス、サーモシネココッカス(Thermosynechococcus)、ノストック(Nostoc)、プロクロロコッカス(Prochlorococcu)、ミクロシスティス(Microcystis)、アナベナ(Anabaena)、スピルリナ(Spirulina)およびグロエオバクター(Gloeobacter)属を含む。好ましくは、宿主シアノバクテリアはシネコシスチス種またはシネココッカス種である。より好ましくは、宿主シアノバクテリアはシネココッカス・エロンガタスPCC 7942(ATCC33912)および/またはシネコシスチス種PCC 6803(ATCC27184)である。
【００５７】
スクロース
光合成微生物、例えばシアノバクテリアにおけるスクロースの生合成は、順次に作用するスクロースリン酸シンターゼ(sps)およびスクロースリン酸ホスファターゼ(spp)の2つの酵素活性の触媒作用によって達成できる(例えば、図4参照)。このよう活性は、浸透圧およびマトリックス水ストレスに対する順応としてシアノバクテリアの一部に存在する(例えば、Lunn, J. E. 2002. Plant Physiol 128, 1490-1500)。スクロースが蓄積されるように、これらの活性の一方または両方をシアノバクテリアに操作することができる。
【００５８】
スクロースを蓄積するように光合成微生物を操作するための特に興味がある遺伝子は、シネココッカス・エロンガタスPCC 7942からの活性融合SPS/SPP(asf)遺伝子である。asfは、spsおよびsppの両方の生合成機能を有する(例えば、実施例4)。いくつかの実施形態において、ASFをコードするヌクレオチド配列がその天然供給源(例えば、シネココッカス・エロンガタスPCC 7942)からクローニングされ、宿主シアノバクテリアに挿入される(例えば、実施例4〜9参照)。いくつかの実施形態において、形質転換宿主光合成微生物は、配列番号1のasfポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態において、光合成微生物は配列番号2のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列asfで形質転換される。さらなる実施形態において、形質転換宿主光合成微生物は、配列番号1に対して少なくとも約80%の配列同一性を有するヌクレオチド配列または、spsおよびspp活性を有し、配列番号2に対して少なくとも約80%の配列同一性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む。例として、シアノバクテリアなどの形質転換宿主光合成微生物は、配列番号1に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%または少なくとも約99%の配列同一性を有するヌクレオチド配列であって、その形質転換宿主がASF、SPSおよび/もしくはSPP活性ならびに/またはスクロースの蓄積を示す前記ヌクレオチド配列を含むことができる。例として、形質転換宿主光合成微生物は、配列番号2に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%または少なくとも約99%の配列同一性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列であって、その形質転換宿主がASF、SPSおよび/もしくはSPP活性ならびに/またはスクロースの蓄積を示す前記ヌクレオチド配列を含むことができる。他の例として、形質転換宿主光合成微生物は、配列番号1に対してストリンジェントな条件下で配列番号1の全長にわたってハイブリダイズし、活性融合SPS/SPP(ASF)ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むことができる。さらなる例として、形質転換宿主光合成微生物は、上記配列のいずれかに対する相補鎖を含むことができる。
【００５９】
いくつかの実施形態において、スクロースリン酸シンターゼ(sps)(例えば、sps遺伝子をコードする配列番号3およびSPSポリペプチドをコードする配列番号4参照)またはそのホモログが、形質転換光合成微生物において発現されるかまたは過剰発現されるように操作される。例えば、光合成微生物は、スクロースリン酸シンターゼを発現するように、配列番号3の配列を有するヌクレオチドで形質転換されることができる。他の例として、光合成微生物は、スクロースリン酸シンターゼを有するポリペプチドをコードする配列番号3に対して少なくとも約80%、少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%または少なくとも約99%の同一性パーセントを有するヌクレオチドで形質転換されることができる。他の例として、形質転換宿主光合成微生物は、配列番号4に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%または少なくとも約99%の配列同一性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列であって、その形質転換宿主がSPS活性および/またはスクロースの蓄積を示す前記ヌクレオチド配列を含むことができる。
【００６０】
いくつかの実施形態において、スクロースリン酸ホスファターゼ(spp)(例えば、spp遺伝子をコードする配列番号5およびSPPポリペプチドをコードする配列番号6を参照のこと)またはそのホモログが、形質転換光合成微生物において発現されるかまたは過剰発現されるように操作される。例えば、シアノバクテリアなどの光合成微生物は、スクロースリン酸ホスファターゼを発現するように、配列番号5の配列を有するヌクレオチドで形質転換されることができる。他の例として、光合成微生物は、スクロースリン酸ホスファターゼ活性を有するポリペプチドをコードする配列番号5に対して少なくとも約80%、少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%または少なくとも約99%同一性パーセントを有するヌクレオチドで形質転換されることができる。他の例として、形質転換宿主光合成微生物は、配列番号6に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%または少なくとも約99%の配列同一性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列であって、その形質転換宿主がSPP活性および/またはスクロースの蓄積を示す前記ヌクレオチド配列を含むことができる。
【００６１】
いくつかの実施形態において、光合成微生物はASF、SPS、および/またはSPPの1以上を発現するように操作される。例えば、シアノバクテリアなどの光合成微生物は、ASFおよびSPS;ASFおよびSPP;SPSおよびSPP;またはASF、SPSおよびSPPを発現するように操作されることができる。
【００６２】
トレハロース
トレハロースの生合成は、順次に作用するトレハロースリン酸シンターゼ(tps)およびトレハロースリン酸ホスファターゼ(tpp)の2つの酵素活性の触媒作用により達成できる。
光合成微生物において、トレハロースが蓄積されるように、これらの活性の一方または両方が操作されることができる。トレハロースの生合成は、シアノバクテリアなどの一部の光合成微生物においては天然に生じない。
【００６３】
いくつかの実施形態において、トレハロースリン酸シンターゼ(tps)(例えば、tps遺伝子をコードする配列番号76およびTPSポリペプチドをコードする配列番号77を参照のこと)またはそのホモログが、形質転換光合成微生物において発現されるかまたは過剰発現されるように操作される。例えば、シアノバクテリアなどの光合成微生物は、トレハロースリン酸シンターゼを発現するように、配列番号76の配列を有するヌクレオチドで形質転換されることができる。他の例として、光合成微生物は、トレハロースリン酸シンターゼを有するポリペプチドをコードする配列番号76に対して少なくとも約80%、少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%または少なくとも約99%の同一性パーセントを有するヌクレオチドで形質転換されることができる。他の例として、形質転換宿主光合成微生物は、配列番号77に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%または少なくとも約99%の配列同一性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列であって、その形質転換宿主がTPS活性および/またはトレハロースの蓄積を示す前記ヌクレオチド配列を含むことができる。
【００６４】
いくつかの実施形態において、トレハロースリン酸ホスファターゼ(tpp)(例えば、tpp遺伝子をコードする配列番号78およびTPPポリペプチドをコードする配列番号79を参照のこと)またはそのホモログが操作され、形質転換光合成微生物において発現されるかまたは過剰発現される。例えば、シアノバクテリアなどの光合成微生物は、トレハロースリン酸ホスファターゼを発現するように、配列番号78の配列を有するヌクレオチドで形質転換されることができる。他の例として、光合成微生物は、トレハロースリン酸ホスファターゼ活性を有するポリペプチドをコードする配列番号78に対して少なくとも約80%、少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%または少なくとも約99%の同一性パーセントを有するヌクレオチドで形質転換されることができる。他の例として、形質転換宿主光合成微生物は、配列番号79に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%または少なくとも約99%の配列同一性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列であって、その形質転換宿主がTPP活性および/またはトレハロースの蓄積を示す前記ヌクレオチド配列を含むことができる。
【００６５】
グルコシルグリセロール
いくつかの実施形態において、グルコシルグリセロールリン酸シンターゼ(gps)(例えば、gps遺伝子をコードする配列番号80およびGPSポリペプチドをコードする配列番号81を参照のこと)またはそのホモログが、形質転換光合成微生物において発現されるかまたは過剰発現されるように操作される。例えば、シアノバクテリアなどの光合成微生物は、グルコシルグリセロールリン酸シンターゼを発現するように、配列番号80の配列を有するヌクレオチドで形質転換されることができる。他の例として、光合成微生物は、グルコシルグリセロールリン酸シンターゼを有するポリペプチドをコードする配列番号80に対して、少なくとも約80%、少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%または少なくとも約99%同一性パーセントを有するヌクレオチドで形質転換されることができる。他の例として、形質転換宿主光合成微生物は、配列番号81に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%または少なくとも約99%の配列同一性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列であって、その形質転換宿主がGPS活性および/またはグルコシルグリセロールの蓄積を示す前記ヌクレオチド配列を含むことができる。
【００６６】
いくつかの実施形態において、グルコシルグリセロールリン酸ホスファターゼ(gpp)(例えば、gpp遺伝子をコードする配列番号82およびGPPポリペプチドをコードする配列番号83を参照のこと)またはそのホモログが、形質転換光合成微生物において発現されるかまたは過剰発現されるように操作される。例えば、シアノバクテリアなどの光合成微生物は、グルコシルグリセロールリン酸ホスファターゼを発現するように、配列番号82の配列を有するヌクレオチドで形質転換されることができる。他の例として、光合成微生物は、グルコシルグリセロールリン酸ホスファターゼ活性を有するポリペプチドをコードする配列番号82に対して少なくとも約80%、少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%または少なくとも約99%同一性パーセントを有するヌクレオチドで形質転換されることができる。他の例として、形質転換宿主光合成微生物は、配列番号83に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%または少なくとも約99%の配列同一性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列であって、その形質転換宿主がGPP活性および/またはグルコシルグリセロールの蓄積を示す前記ヌクレオチド配列を含むことができる。
【００６７】
マンノシルフルクトース
いくつかの実施形態において、マンノシルフルクトースリン酸シンターゼ(mps)(例えば、mps遺伝子をコードする配列番号84およびMPSポリペプチドをコードする配列番号85を参照のこと)またはそのホモログが、形質転換光合成微生物において発現されるかまたは過剰発現されるように操作される。例えば、シアノバクテリアなどの光合成微生物は、マンノシルフルクトースリン酸シンターゼを発現するように、配列番号84の配列を有するヌクレオチドで形質転換されることができる。他の例として、光合成微生物は、マンノシルフルクトースリン酸シンターゼを有するポリペプチドをコードする配列番号84に対して少なくとも約80%、少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%または少なくとも約99%の同一性パーセントを有するヌクレオチドで形質転換されることができる。他の例として、形質転換宿主光合成微生物は、配列番号85に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%または少なくとも約99%の配列同一性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列であって、その形質転換宿主がMPS活性および/またはマンノシルフルクトースの蓄積を示す前記ヌクレオチド配列を含むことができる。
【００６８】
いくつかの実施形態において、マンノシルフルクトースリン酸ホスファターゼ(mpp)(例えば、mpp遺伝子をコードする配列番号86およびMPPポリペプチドをコードする配列番号87を参照のこと)またはそのホモログが、形質転換光合成微生物において発現されるかまたは過剰発現されるように操作される。例えば、シアノバクテリアなどの光合成微生物は、マンノシルフルクトースリン酸ホスファターゼを発現するように、配列番号86の配列を有するヌクレオチドで形質転換されることができる。他の例として、光合成微生物は、マンノシルフルクトースリン酸ホスファターゼ活性を有するポリペプチドをコードする配列番号86に対して少なくとも約80%、少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%または少なくとも約99%同一性パーセントを有するヌクレオチドで形質転換されることができる。他の例として、形質転換宿主光合成微生物は、配列番号87に対して少なくとも約85%、少なくとも約90%、少なくとも約95%または少なくとも約99%の配列同一性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列であって、その形質転換宿主がMPP活性および/またはマンノシルフルクトースの蓄積を示す前記ヌクレオチド配列を含むことができる。
【００６９】
分子工学
バリアントヌクレオチドの設計、作成および試験ならびに、asf配列に対する上記の所望される同一性パーセントを有し、発現タンパク質の所望される活性および/または糖蓄積表現型を保持する、バリアントヌクレオチドによりコードされるポリペプチドは、当業者の技術の範囲内である。例えば、進化分子工学(directed evolution)および変異体の迅速な単離は、限定するものではないが、Link et al. (2007) Nature Reviews 5(9), 680-688; Sanger et al. (1991) Gene 97(1), 119-123; Ghadessy et al. (2001) Proc Natl Acad Sci USA 98(8) 4552-4557を含む参考文献に記載されている方法に従うことができる。このように、当業者は、例えば本明細書記載の参照配列に対して少なくとも95〜99%の同一性を有する多数のヌクレオチド(例えば、asf、sps、spp、tps、tpp、gps、gpp、mps、もしくはmpp)および/またはポリペプチド(例えば、ASF、SPS、SPP、TPS、TPP、GPS、GPP、MPSもしくはMPP)バリアントを作成し、当該技術分野でルーチンな方法に従って、二糖蓄積を含む表現型に関してこれらをスクリーニングすることができる。一般に、所望される活性が保持される限りは、任意の位置で同類置換を行うことができる。
【００７０】
ヌクレオチドおよび/またはアミノ酸配列の同一性パーセント(%)は、2つの配列がアラインメントされるとき、参照配列と比較して、候補配列におけるヌクレオチドまたはアミノ酸残基と同一なヌクレオチドまたはアミノ酸残基の百分率として理解される。同一性パーセントを決定するために、配列をアラインメントし、必要に応じてギャップを挿入して最大配列同一性パーセントを得る。同一性パーセントを決定するための配列のアラインメント手順は当業者に公知である。多くの場合、配列をアラインメントするために、BLAST、BLAST2、ALIGN2またはMegalign(DNASTAR)ソフトウェアなどの公表されているコンピュータソフトウェアが用いられる。当業者は、比較される配列の完全長に関する最大アラインメントを得るために必要な任意のアルゴリズムを含む、アラインメントを測定するための適切なパラメータを決定することができる。配列がアラインメントされる場合、所定の配列Bへの、との、またはに対する所定の配列Aの配列同一性パーセント(所定の配列Bへの、との、またはに対して特定の配列同一性パーセントを有するまたは含む所定の配列Aと言い換えることもできる)は、以下で算出できる:
配列同一性パーセント=X/Y100
(式中、Xは、AとBとの、配列のアラインメントプログラムまたはアルゴリズムのアラインメントにより一致としてスコアされる残基数であり、YはBにおける残基総数である)。配列Aの長さが配列Bの長さと等しくない場合、Bに対するAの配列同一性パーセントは、Aに対するBの配列同一性パーセントとは等しくない。
【００７１】
“高ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件”は、6X SSC緩衝液(すなわち、0.9M塩化ナトリウムおよび0.09Mクエン酸ナトリウム)における65℃でのハイブリダイゼーションと定義される。これらの条件が与えられれば、2つの配列間の二本鎖DNAの融解温度(Tm)を算出することにより、所定の配列の組がハイブリダイズするかどうかについて決定できる。特定の二本鎖が、6X SSCの塩条件下で65℃よりも低い融解温度を有する場合、これらの2つの配列はハイブリダイズしない。他方では、同じ塩条件下で融解温度が65℃より上の場合、これらの配列はハイブリダイズする。一般に、任意のハイブリダイズしたDNA:DNA配列の融解温度は、次式:
Tm=81.5℃+16.6(log10[Na+])+0.41(G/C含量分数)-0.63(%ホルムアミド)-(600/l)
を用いて決定できる。さらにまた、DNA:DNAハイブリッドのTmは、ヌクレオチドの同一性が1%減少するごとに1〜1.5℃減少する(例えば、Sambrook and Russel, 2006 を参照のこと)。
【００７２】
宿主細胞は、当業者に公知の種々の標準法を用いて形質転換されることができる(例えば、Sambrook and Russel (2006) Condensed Protocols from Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, ISBN-10: 0879697717; Ausubel et al. (2002) Short Protocols in Molecular Biology, 5th ed., Current Protocols, ISBN-10: 0471250929; Sambrook and Russel (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3d ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, ISBN-10: 0879695773; Elhai, J. and Wolk, C. P. 1988. Methods in Enzymology 167, 747-754 を参照のこと)。このような技術は、限定するものではないが、ウイルス感染、リン酸カルシウムトランスフェクション、リポソーム媒介トランスフェクション、マイクロプロジェクタイル送達、受容体媒介性取り込み、細胞融合、エレクトロポレーションなどを含む。トランスフェクトされた細胞を選択し、増殖させて、宿主細胞ゲノムに安定に組み込まれた発現ベクターを含む組換え宿主細胞を得ることができる。
【００７３】
プロモーター
上記したヌクレオチド配列(例えば、asf、sps、spp、tps、tpp、mps、mpp、gps、gpp)の1以上は、宿主光合成微生物において機能しうるプロモーターに作動可能に連結されることができる。宿主がシアノバクテリアの場合、プロモーターは、シアノバクテリアおよび細菌(大腸菌など)の両方において効率的に機能しうることが好ましい。プロモーターの選択により、種々の条件下で所望の遺伝子産物を発現させることが可能になる。
【００７４】
プロモーターは、ベクター構築物が挿入されるシアノバクテリアなどの光合成微生物宿主細胞において最適の機能を発揮するように選択されることができる。プロモーターは、その制御的特徴に基づいて選択されることもできる。このような特徴の例は、転写活性および誘導能の増強を含む。
【００７５】
プロモーターは、誘導性プロモーターであることができる。例えば、プロモーターは、温度、pH、ホルモン、代謝物(例えば、ラクトース、マンニトールおよびアミノ酸)、光(例えば、波長特異的)、浸透ポテンシャル(例えば、塩誘導)、重金属または抗生物質によって誘導されることができる。多数の標準的誘導性プロモーターが当業者に公知であろう。
【００７６】
いくつかの実施形態において、プロモーターは温度誘導性プロモーターである。例えば、λプロモーターは、シアノバクテリアにおいて機能しうる温度誘導性プロモーターである。驚くべきことに、λプロモーターは、大腸菌内で用いられるときとは異なる温度で機能する。大腸菌内では、λプロモーターは42℃において最も活性が高く、これはシアノバクテリアの通常の生存範囲以上の温度である。一般に、大腸菌内で、λプロモーターは、約30℃から35℃までで約5%〜10%の発現増加をしめし、約37℃においては約20%発現増加を示すが;約37℃から42℃までで約100%の発現増加を示す。シアノバクテリアにおいては、λプロモーターはおよそ30℃〜35℃で最も活性が高く、これはシアノバクテリアの理想的な増殖温度範囲であり、大腸菌内でのλプロモーターの最適発現よりもずっと低い範囲である。従って、λプロモーターは、シアノバクテリアにおいて二糖生合成活性の効果的な発現を提供する。
【００７７】
プラスミドに挿入されることができるプロモーターの例は、限定するものではないが、carB、nirA、psbAII、dnaK、kaiAおよびλPRを含む(例えば、実施例6参照)。いくつかの実施形態において、プロモーターは、シアノバクテリアおよび大腸菌の両方において効率的に機能しうる。いくつかの実施形態において、asfコード領域は、前記コード領域を含むプロモーターを含む(例えば、実施例8参照)。例えば、asfコード領域は、asfのSPPドメインの前にプロモーターを含むことができる(例えば、図10参照)。このような内部プロモーターは、asfコード領域の開始部位でのプロモーターの有り無しで存在しうる。
【００７８】
用語"キメラ"は、2以上の異なるポリヌクレオチド分子の部分の融合の産物を指すものと解される。"キメラプロモーター"は、既知のプロモーターまたは他のポリヌクレオチド分子の操作により製造されるプロモーターを指すものと解される。このようなキメラプロモーターは、例えば、第1プロモーターからの異種エンハンサードメインを、それ自身の部分的または完全な調節因子を有する第2プロモーターと融合させることにより、1以上のプロモーターまたは調節因子からの、遺伝子発現を付与または調節できるエンハンサードメインを結合することができる。従って、作動可能に連結されたポリヌクレオチド配列の発現を調節するための、本明細書に開示された方法によるキメラプロモーターの設計、構築および使用は本発明に含まれる。
【００７９】
多くの方法によって、新規キメラプロモーターを設計することもできるし、操作することもできる。例えば、キメラプロモーターは、第1プロモーターからのエンハンサードメインを第2プロモーターに融合することにより製造できる。得られたキメラプロモーターは、第1または第2プロモーターに対して新規な発現特性を有することができる。新規キメラプロモーターは、第1プロモーターからのエンハンサードメインが、第2プロモーターに対して5'末端部位、3'末端部位または任意の内部位置で融合されるように構築されることができる。
【００８０】
構築物
前述の転写可能なポリヌクレオチド分子配列のいずれも構築物で提供できる。本発明の構築物は、一般に、二糖生合成のための、転写可能なポリヌクレオチド分子に作動可能に連結された、シアノバクテリアなどの宿主光合成微生物におけるプロモーター配列(例えば、asf、sps、spp、tps、tpp、mps、mpp、gps、gpp)、例えば配列番号1、3、5、76、78、80、82、84および86ならびに上記のようなそれらのバリアントを含む。
【００８１】
典型的なプロモーターは上述した。1以上のさらなるプロモーターもまた組換え構築物で提供できる。これらのプロモーターは、前述の転写可能なポリヌクレオチド分子配列のいずれかに作動可能に連結されることができる。
【００８２】
用語"構築物"は、任意の供給源由来の、ゲノム組み込みまたは自律複製できる、1以上のポリヌクレオチド分子が機能的に連結された、すなわち作動可能に連結されたポリヌクレオチド分子を含む任意の組換えポリヌクレオチド分子、例えばプラスミド、コスミド、ウイルス、自律的に複製するポリヌクレオチド分子、ファージまたは線状もしくは環状の一本鎖もしくは二本鎖のDNAもしくはRNAポリヌクレオチド分子を指すものと解される。用語"ベクター"または"ベクター構築物"は、形質転換、すなわちシアノバクテリアなどの宿主光合成微生物への異種DNA導入の目的で使用できる任意の組換えポリヌクレオチド構築物を指すものと解される。
【００８３】
さらに、構築物は、限定するものではないが、目的とする遺伝子の非翻訳領域からのさらなるポリヌクレオチド分子を含むことができる。これらのさらなるポリヌクレオチド分子は、構築物に存在する他の配列に対して天然または異種の供給源由来であることができる。
【００８４】
プラスミド
いくつかの実施形態において、シアノバクテリアなどの宿主光合成微生物は、プラスミドベースの発現系で形質転換される(例えば、実施例5参照)。好ましくは、目的とする遺伝子をコードするプラスミドは、プロモーター、例えば上記のプロモーターの1以上を含む。プラスミドベースの形質転換については、大腸菌およびシアノバクテリアに両方において機能しうる広い宿主域のプラスミドが好ましく、それらは、よく理解された急速に増殖する便利な系(大腸菌)で働き、最終宿主(シアノバクテリア)に効率的に導入されることができる利点を提供する。いくつかの実施形態において、プラスミドベースの形質転換および染色体組み込みは組み合わせて用いられる。ここでは、遺伝子バリアントの設計および試験のためにプラスミドプロトコルが用いられ、次に、同定されたバリアントの染色体組み込みが行われる。
【００８５】
本明細書記載のアプローチに従って開発された宿主株は、当該技術分野で公知の多くの手段で評価できる(例えば、Studier (2005) Protein Expr Purif. 41(1), 207-234; Gellissen, ed. (2005) Production of Recombinant Proteins: Novel Microbial and Eukaryotic Expression Systems, Wiley-VCH, ISBN-10: 3527310363; Baneyx (2004) Protein Expression Technologies, Taylor & Francis, ISBN-10: 0954523253 を参照のこと)。
【００８６】
本明細書において、sps、sppおよび/またはasfをコードするプラスミド構築物のためのヌクレオチド配列が提供される。sps、sppおよび/またはasfをコードするプラスミド構築物の例は、限定するものではないが、pLybAL11(配列番号19)(例えば、図6参照)およびpLybAL12(配列番号20)(例えば、図7参照)を含む。本明細書において、tpsおよびtppをコードするプラスミド構築物のためのヌクレオチド配列もまた提供される。tpsおよびtppをコードするプラスミド構築物の例は、限定するものではないが、pLybAL23(配列番号118)を含む。グルコシルグリセロールおよびマンノシルフルクトースなどの他の二糖の蓄積に必要な生合成遺伝子のための同様な構築物を作成できることは、当業者には明らかであろう。
【００８７】
いくつかの実施形態において、形質転換宿主光合成微生物は、pLybAL11(配列番号19)またはpLybAL12(配列番号20)を含む。いくつかの実施形態において、形質転換宿主光合成微生物はpLybAL23(配列番号118)を含む。例えば、形質転換シアノバクテリアは、pLybAL11(配列番号19)、pLybAL12(配列番号20)またはpLybAL23(配列番号118)を含むことができる。
【００８８】
二糖生合成遺伝子(単数または複数)を含むプラスミド構築物は、プロモーターを含むこともできる。プラスミド構築物の例は、sps、sppおよび/またはasfを含み、プロモーターは、限定するものではないが、pLybAL7f(配列番号65);pLybAL8f(カナマイシン耐性を含む)(配列番号69);pLybAL13f(配列番号51)、pLyAL13r(配列番号52)、pLybAL14f(配列番号53)、pLybAL14r(配列番号54)、pLybAL15(配列番号44)、pLybAL16(配列番号45)、pLybAL17(配列番号46)、pLybAL18(配列番号47)、pLybAL19(配列番号48)、pLybAL21(配列番号49)およびpLybAL22(配列番号50)を含む。プラスミド構築物の例は、tpsおよびtppを含み、プロモーターは、限定するものではないが、pLybAL23(配列番号118)、pLybAL28(配列番号121)、pLybAL29(配列番号122)およびpLybAL30(配列番号123)を含む。グルコシルグリセロールおよびマンノシルフルクトースなどの他の二糖の蓄積に必要な、同様なプロモーターを含む生合成遺伝子のための構築物を作成できることは、当業者には明らかであろう。
【００８９】
いくつかの実施形態において、形質転換宿主シアノバクテリアは、pLybAL7f(配列番号65);pLybAL8f(配列番号69);pLybAL13f(配列番号51)、pLyAL13r(配列番号52)、pLybAL14f(配列番号53)、pLybAL14r(配列番号54)、pLybAL15(配列番号44)、pLybAL16(配列番号45)、pLybAL17(配列番号46)、pLybAL18(配列番号47)、pLybAL19(配列番号48)、pLybAL21(配列番号49)およびpLybAL22(配列番号50)を含む。いくつかの実施形態において、形質転換宿主シアノバクテリアは、pLybAL28(配列番号121)、pLybAL29(配列番号122)、pLybAL30(配列番号123)およびpLybAL23(配列番号118)を含む。
【００９０】
糖分泌
種々の実施形態において、形質転換二糖蓄積光合成微生物は、蓄積された二糖を細胞内からその増殖環境に分泌することができる。二糖の分泌は、二糖を蓄積するように形質転換した光合成微生物の固有の結果であることもできるし、光合成微生物は分泌するするようにさらに操作されることもできる。例えば、トレハロースを蓄積するように形質転換されたいくつかのシアノバクテリアは、本来細胞からトレハロースを分泌する。(例えば、実施例19〜20参照)。他の例として、スクロースを蓄積するように形質転換されたシアノバクテリアは、細胞からスクロースを分泌するようにさらに操作されることができる(例えば、実施例16参照)。
【００９１】
シアノバクテリアなどの宿主光合成微生物は、二糖を分泌するようにさらに操作されることができる。いくつかの実施形態において、形質転換宿主光合成微生物は、操作されて、蓄積された二糖に特異的なポリンを発現する。例えば、スクロースを蓄積するように操作されたシアノバクテリアは、スクロースポリンを発現するように操作されることができる(例えば、実施例16参照)。一実施形態において、形質転換二糖蓄積シアノバクテリアは、配列番号94などのscrY核酸を含む。一実施形態において、形質転換二糖蓄積シアノバクテリアは、配列番号95などのscrYポリペプチドをコードする核酸を含む。一実施形態において、形質転換二糖蓄積シアノバクテリアは、pLybAL32(配列番号91)などのscrYを含むプラスミドを含む。他の光合成微生物または他の標的二糖に、同様なアプローチを適用できることが考えられる。
【００９２】
糖分解の調節
いくつかの実施形態において、シアノバクテリアなどの宿主光合成微生物は、分解活性の調節により二糖の生産が改善されるようにさらに操作される(例えば、実施例14参照)。
いくつかの実施形態において、形質転換光合成微生物において、インベルターゼホモログはダウンレギュレートされるかまたは除去されることができる。例えば、シネコシスチス種PCC 6803(ヌクレオチド配列配列番号70;ポリペプチド配列配列番号71)からのインベルターゼホモログは、形質転換シアノバクテリアにおいてダウンレギュレートされるかまたは除去されることができる。他の例として、シネココッカス・エロンガタスPCC 7942(ヌクレオチド配列配列番号72;ポリペプチド配列配列番号73)からのインベルターゼホモログは、形質転換シアノバクテリアにおいてダウンレギュレートされるか除去されることができる。いくつかの実施形態において、スクラーゼフェレドキシン様タンパク質は、形質転換シアノバクテリアにおいてダウンレギュレートされるかまたは除去されることができる。例えば、シネコシスチス種PCC 6803からのスクラーゼフェレドキシン様タンパク質(ヌクレオチド配列配列番号74;ポリペプチド配列配列番号75)(Machray G.C. et al. 1994. FEBS Lett 354, 123-127)は、形質転換シアノバクテリアにおいて、ダウンレギュレートされるかまたは除去されることができる。これらの遺伝子は、例えば、図11(例えば、実施例12〜13参照)に記載のマーカーレス欠失プロトコルを用いて欠失させることができる。
シアノバクテリアにおいて、他の二糖が蓄積されるように操作される同様なアプローチを用いることができる。
【００９３】
上記の遺伝子のダウンレギュレーションまたはサイレンシングの他の方法は当該技術分野で公知である。例えば、二糖分解活性は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、タンパク質アプタマー、ヌクレオチドアプタマーおよびRNA干渉(RNAi)によりダウンレギュレートされるかまたは除去されることができる(例えば、低分子干渉RNA(siRNA)、短いヘアピンRNA(shRNA)およびマイクロRNA(miRNA)(例えば、Fanning and Symonds (2006) Handb Exp Pharmacol. 173, 289-303G(ハンマーヘッド型リボザイムおよび低分子ヘアピン型RNAを記載); Helene, C., et al. (1992) Ann. N.Y. Acad. Sci. 660, 27-36; Maher (1992) Bioassays 14(12): 807-15(デオキシリボヌクレオチド配列のターゲッティングを記載);Lee et al. (2006) Curr Opin Chem Biol. 10, 1-8(アプタマーを記載); Reynolds et al. (2004) Nature Biotechnology 22(3), 326 - 330(RNAiを記載); Pushparaj and Melendez (2006) Clinical and Experimental Pharmocology and Physiology 33(5-6), 504-510(RNAiを記載); Dillon et al. (2005) Annual Review of Physiology 67, 147-173(RNAiを記載); Dykxhoorn and Lieberman (2005) Annual Review of Medicine 56, 401-423(RNAiを記載)を参照のこと)。RNAi分子は、種々の供給元から市販されている(例えば,Ambion社(テキサス州);Sigma Aldrich社(ミズーリ州);Invitrogen社)。種々のアルゴリズムを用いるいくつかのsiRNA分子設計プログラムが当業者に公知である(例えば、Cenixアルゴリズム(Ambion社);BLOCK-iT(登録商標)RNAi Designer(Invitrogen社);siRNA Whitehead Institute Design Tools(Bioinofrmatics & Research Computing社)。最適のsiRNA配列を限定するのに影響のある形質は、siRNAの末端におけるG/C含量、siRNAの特定の内部ドメインのTm、siRNAの長さ、CDS(コード領域)内の標的配列の位置および3'オーバーハングのヌクレオチド含量を含む。
【００９４】
いくつかの実施形態において、宿主光合成微生物は、細胞からの二糖分泌を促進するようにさらに操作されることができる。例えば、シアノバクテリアは、細胞からのスクロース分泌を促進するようにさらに操作されることができる(例えば、実施例15〜16参照)。低い浸透圧環境においては、スクロースは、高塩環境から低塩環境に移行するとき、一部の微生物により浸透圧保護剤が処理されるように、自動的に細胞から削除されることができる(Schleyer, M., Schmidt, R. and Bakker, E. P. 1993. Arch Microbiol 160, 424-43; Koo, S. P., Higgins, C. F. and Booth, I. R. 1991. J Gen Microbiol 137, 2617-2625; Lamark, T., Styrvold, O. B. and Strgim, A. R. 1992. FEMS Microbiol. Lett 96, 149-154)。スクロースポリンは、形質転換シアノバクテリアにおいて発現されるように操作されることができる(例えば、実施例16参照)。これらの遺伝子をクローニングし、前述の技術に従ってシアノバクテリアを形質転換することができる。このようなアプローチは他の光合成微生物に適用することができる。
【００９５】
いくつかの実施形態において、宿主光合成微生物は、宿主の染色体への安定な組み込みで形質転換される。例えば、宿主シアノバクテリアは、宿主の染色体への安定な組み込みで形質転換されることができる(例えば、実施例11〜13参照)。染色体組み込みによって、プラスミドベースの遺伝子発現において時々生じる除去のリスクを冒さないで、標的遺伝子(単数または複数)を微生物に組み込むことが可能になる。染色体組み込みは、標的遺伝子を維持するための抗生物質の必要性を低下させるかまたは除去することもできる。
【００９６】
好ましくは、染色体組み込みの戦略は、染色体上のいわゆるupp遺伝子座への遺伝子挿入を標的とする(例えば、実施例11〜13参照)。この部位は、ピリミジン生合成におけるスカベンジャー酵素である酵素ウラシルホスホリボシルトランスフェラーゼ(UPRTase)をコードする。この戦略を用いることにより、非組み込み型微生物を除去できる5-フルオロウラシル(5-FU)による候補選択が可能になる。分離方法は、一般にシアノバクテリア系において用いられる。なぜなら、これらの微生物は、それらの染色体の複数コピーを含むからである(例えば、シネコシスチス種PCC 6803については最大12、シネココッカス・エロンガタスPCC 7942については最大16)。この戦略は、シアノバクテリアにとって特に魅力的である。なぜなら、このアプローチは、分離成功のために選択圧および安定な組み込みに依存する旧来の分離技術の使用を避けることができるからである。スクリーニング剤としての5-FUの使用は、より効率的であることができる。なぜなら、それは、1つの活性upp遺伝子を含む微生物であっても、増殖を阻害できるからである。このように、旧来の技術に必要とされるプロセスと比較して、より少ない世代サイクルで、完全に組み込まれた候補を迅速に選択することができる。
【００９７】
固相光合成バイオリアクター
本明細書において、光合成微生物の増殖のための固相培養担体を含む、光合成微生物を培養するためのフォトバイオリアクターが提供される。固相培養担体または固体培養担体または固体担体などは、一般に、液体でもガスでもない培養担体を意味すると解される。担体自体は固体であるが、担体構造物は、それが液体(例えば、増殖培地)、ガスまたは両方を吸収するように選択されることができる。特定の好ましい実施形態において、以下にさらに詳細に説明するように、固体担体は、培養中微生物が使用するための水分を吸収することができる。
【００９８】
本明細書記載のフォトバイオリアクター(単数または複数)の種々の実施形態は、光合成微生物の増殖を維持することができる。フォトバイオリアクター中で増殖する光合成微生物は、例えば、シアノバクテリアなどの天然光合成微生物であることもでき、人工光合成細菌などの、操作された光合成微生物であることもできる。天然光合成微生物であるか、または操作されて光合成微生物になることができる典型的な微生物は、限定するものではないが、細菌;真菌;古細菌;原生生物;微小植物、例えば緑藻;ならびに動物、例えばプランクトン、プラナリアおよびアメーバを含む。天然に存在する光合成微生物の例は、限定するものではないが、スピルリナ・マキシマム、スピルリナ・プラテンシス、ドナリエラ・サリナ、ボトリオコックス・ブラウニイ、クロレラ・ブルガリス、クロレラ・ピレノイドーサ、セレナストルム・カプリコミュータム、セネデスムス・クアドリカウダ、ポルフィリディウム・クルエンタム、セネデスムス・アクタス、ドナリエラ種、セネデスムス・オブリカス、アナベノプシス、アウロシラ、キリンドロスペルムム、シネコッカス種、シネコシスチス種および/またはトリポスリックスを含む。
【００９９】
好ましくは、バイオリアクターは、前述のように、二糖を蓄積するように形質転換されたシアノバクテリアの接種、増殖、および/または収穫を維持するように構成される。
【０１００】
以下にさらに詳細に説明するように、フォトバイオリアクターは開放系であることもできるし、閉鎖系であることもできる。種々の実施形態において、フォトバイオリアクターは、固相培養担体、保護バリア層および吊り下げ要素を含む。フォトバイオリアクターのいくつかの実施形態は、ガス、流体、栄養素、および/または光合成微生物の供給および/または除去のためのシステムを含むことができる。供給システムは、例えば標準的な配管設備であることができる。種々のラインのどれも、クイックコネクト配管設備を含むことができる。フォトバイオリアクターは、例えば、二酸化炭素または通常の大気を供給できるガス供給ラインを備えることができる。フォトバイオリアクターは流体供給ラインを備えることができる。好ましくは、流体供給ラインは、流体(例えば、水)を固相培養担体へ運搬するトリクルシステムまたは滴下システムに接続する。フォトバイオリアクターは、栄養供給ラインを備えることができる。光合成微生物の増殖および維持のための栄養組成物の配合物は、当業者に公知である。いくつかの実施形態において、栄養および流体供給ラインは、例えば流体ベースの栄養混合物を供給するために結合することができる。いくつかの実施形態において、流体供給ラインまたは栄養供給ラインは、液体培地を増殖表面に分配するためのスプレー装置であることができる。このようなスプレー装置においては、フォトバイオリアクターは、例えば外層(バリア層など)と固相培養担体との間にスプレー装置を収納するのに十分な大きさを有する。通例、栄養素は水ベース組成物で供給される。水分および栄養レベルの独立制御を提供するために、異なる水供給ライン(単数または複数)および栄養供給ライン(単数または複数)を提供するのが有利な場合がある。フォトバイオリアクターは、光合成微生物および/または液体懸濁/可溶性産物の回収を提供するための産物収穫ラインを備えることができる。フォトバイオリアクターは、光合成微生物の接種を提供するための接種ラインを備えることができる。いくつかの実施形態において、流体、栄養、および/または接種ラインを結合することができる。
【０１０１】
固相フォトバイオリアクターの一実施形態は、図1(正面図)および図2(側面図)に示されている。これらの実施形態において、固相培養担体2は保護バリア7によって密閉されている。図2は、固体培養担体が保護バリア7を含む保護バリア層3の間にあることを示している。固体培養担体2は、光合成微生物が培養される表面を提供する。保護バリア7を構成する保護バリア層3は、光合成微生物の増殖を維持するための固体培養担体2の表面に化学線を到達させるために透明である。再シール可能なクロージャー4により、保護バリア7が取り外し可能にシールされることが可能になる。ガスおよび蒸気の交換は、保護バリア7に組み込まれている材料である選択パネル5を介して行われる。フォトバイオリアクター1は、垂直または非水平配向を可能にする支持要素6によって吊り下げられることができる。
【０１０２】
固相フォトバイオリアクターの他の実施形態を、図12A(正面図)および図12B(側面図)に示す。表面および/または配管の手入れおよび潜在的汚染の最小化に役立つことができるセグメント形式でリアクター1を設計できる。各セグメントは、種々の供給および産物収穫ラインの配管(例えば、クイックコネクト型配管)を介してリアクターに接続することができる。リアクターは、吊り下げ要素6、例えばリアクター1を空間につるし、各セグメントの迅速な手入れを助けるレールによって支えられることができる。外部保護バリア7は、増殖表面2上の光合成を促進する一方で環境汚染および蒸発による水分損失を防ぐ光透過を可能にする透明な材料であることができる。増殖表面2は、水分を保持し、栄養素を供給し、産物を取り除き、および/または光合成微生物の高密度増殖を可能にする材料で構成されることができる。液体培地による表面からの連続フィード/産物収穫を提供する配管により増殖表面2を手入れすることができる。培地管8は、液体が表面2へ染み出る多孔質ホースであることができ、これは重力により増殖表面2を浸透することができる。液体は、リアクター1からの移動のために産物および過剰の液体培地を回収するための収穫管9によってリアクターの底部で収穫することができる。二酸化炭素および空気などのガスは、ガス分散管10によりリアクターに供給できる。ガス供給管10は陽圧環境を提供でき、制御された効率的な方式で増殖に必要なガスを供給することが期待される。ガス供給ライン10は、流入ガス流を加湿することにより、水分損失を最小にするのを助けることもできる。リアクターからの過剰のガスは、ガスの通過が可能であるが、環境汚染を最小化するかまたは除去するための多孔性材料である通気性パネル5(逆側、図示せず)によって排出することができる。供給ライン10によって供給される流入ガスの濾過を通じて、リアクター1の陽圧配置によって汚染が最小化されることが期待される。陽圧はまた、ガス流の内側から外側への経路を提供することによって環境からの汚染を防ぐことができる。
【０１０３】
図12Bに示す実施形態において、リアクター1の外観が増殖表面に対して1つの配向で示されている。リアクター1から過剰のガスが逃げるのを可能にする通気性パネル5は、増殖表面2を横切ってガスが移動するための経路を提供するために装置の底部の近くに位置することができる。バリア表面7の底部での通気性パネル5の設置はまた、空気に比較して高いその密度から生じる二酸化炭素の分離および蓄積の可能性を最小化または予防する。通気性パネル5の寸法は、培養表面2上の最適の増殖に必要なガス流速に基づいて決定できる。
【０１０４】
固相培養担体
本明細書記載のフォトバイオリアクターの固相培養担体は、その表面上および/または表面内部で光合成微生物が増殖できる表面を提供する。好ましくは、固相培養担体は、増殖を促進および維持するために、微生物への水分および/または栄養素の提供および/または保持を提供または促進する材料を含む。本発明の実施形態は、培養できる光合成微生物の型または株に限定されない。細胞増殖に望ましい水分量および栄養素の組成物量は、光合成微生物の型または株およびそれが増殖される用途によって異なることは当業者には明らかであろう。光合成微生物の増殖に有害な効果を有する恐れがある材料(またはこれらの材料内または材料上に含まれる物質)は、一般に避けられる。
【０１０５】
光合成微生物の1つもしくは複数の型または株を培養するために、1つのフォトバイオリアクターを用いることができる。さらにまた、固体培養担体は、培養サイクルの間の滅菌の有り無しで、1つの培養サイクルまたは複数の培養サイクルに適するような材料(単数または複数)を含むことができる。さらにまた、フォトバイオリアクターは、1つのまたは複数の固体担体上で、微生物の1つの型もしくは株または微生物の複数の型もしくは株を培養するように構成されることができる。いくつかの実施形態において、純粋培養の代わりに、種々の光合成微生物の群落または光合成および非光合成微生物の群落を、1つの培養担体上で同時に一緒に増殖させることができる。1つのフォトバイオリアクターはまた、複数の培養担体を含むこともできる。従って、他の実施形態において、1つの保護バリア内の複数の培養担体により、1以上の型または株の光合成微生物を同時に培養することができる。
【０１０６】
固体培養担体は、好ましくは、比較的多孔性の材料を含む。比較的多孔性の材料は、一般に、増加した表面積を有し、比較的非多孔性の材料よりもより水分を保持するおよび/または吸収することができる。テクスチャ加工のまたはトポグラフィックな表面(単数または複数)を有する固体培養担体もまた好ましい。テクスチャ加工のまたはトポグラフィックな表面は、比較的非テクスチャ加工のまたはなめらかな表面と比較して細胞密度を増強させることができる。担体材料および表面形状の選択は、一般的には、担体への微生物の付着を増加させるように選択されるが、微生物の除去または収穫を妨げないように、微生物があまりきつく付着しないことが一般に望ましい。いくつかの実施形態において、固体培養担体は、微生物の付着および増殖に適した材料を含む。いくつかの実施形態において、固体培養担体は、生物膜形成を低下または除去する材料を含む。
【０１０７】
本明細書記載のフォトバイオリアクターの固相担体は、当該技術分野で用いられてきた固体担体とは異なると考えられる(例えば、微生物の増殖のために最も一般に用いられる固相担体は寒天である)。寒天は、一般にペトリ皿などの硬質形に注型され、その中でその物理的完全性が維持されるように使用される。なぜなら、寒天は、最小レベルの応力、歪またはその両方を受けるとき、破裂または断裂する傾向があるからである。対照的に、培養担体の種々の実施形態は、十分に丈夫で耐久性があるため、フォトバイオリアクターに用いても、より丈夫で耐久性がある“フレーム”を必要とせずにその物理的完全性を維持することができる。別の言い方をすれば、先行技術は、複合材料が形成されるように、実質的により丈夫で、より耐久性がある材料(例えば、ペトリ皿)と接触した弱い寒天担体の十分な部分を必要とした。従って、フォトバイオリアクターの種々の実施形態の固相担体は、本質的に微生物の培養に適し、十分に丈夫で耐久性がある。
【０１０８】
固相担体の他の望ましい物理的特性および/または運転パラメータを以下に示す。例えば、担体は、比較的平たく硬質である(プレートのような)こともでき、例えば、ヒンジ、ばね、ワイヤ、糸などによって可撓的に連結された複数の平たく硬質の断片からなることもできる。適切な硬質材料は、限定するものではないが、種々の金属、ポリマー、セラミックスおよびそれらの複合材料を含む。硬質材料は、好ましくは、それに対する光合成微生物の付着を増加させる表面トポグラフィーを有する。さらにまた、硬質材料は、光合成微生物へ水分および/または栄養素を供給する能力を増すために、所望のレベルの多孔性で形成されることができる。さらにまた、硬質材料は、吸収性または高吸水性ポリマー配合物でコーティングされることができる(下記参照)。あるいは、担体は、本質的に布などの柔軟性の材料からなることができる。固相担体に使用する布は、限定するものではないが、場合により吸収性または高吸水性ポリマー配合物でコーティングされた綿、ポリエステルおよび/または綿ポリエステルブレンドを含む。貯蔵、移動または取り扱いのために、培養担体を折り重ねる、撚り合わせる、掛ける、または巻くことが可能になるため、培養担体の柔軟性は極めて有利であることができる。
【０１０９】
さらに、固相培養担体は、好ましくは、一般的にはオートクレーブ滅菌の間に遭遇する高温(例えば、約120℃以上)で構造的に安定であり、寒天のように溶融しない。従って、一実施形態において、培養担体をオートクレーブ処理で滅菌し、次いでそれを本発明の保護バリア内に入れることができる。他の実施形態において、培養担体を保護バリア内に入れ、次いで全フォトバイオリアクターをオートクレーブ処理することができる。オートクレーブ処理は滅菌のための1方法ではあるが、任意の他の適切な滅菌方法を用いうることは、当業者には明らかであろう。
【０１１０】
本発明の固体培養担体は、光合成微生物の増殖を維持するのに任意の適切な材料を含むかまたはそれからできていることができる。例えば、担体は、天然材料、改質天然材料、合成材料、またはそれらの任意の組み合わせから構成されることができる。天然材料は、限定するものではないが、綿、羊毛、加工した織り植物繊維および天然多糖(例えば、寒天、デンプン、セルロース誘導体)を含むことができる。改質天然材料は、限定するものではないが、ニトロセルロースまたはセルロースエステルなどの化学修飾した植物繊維に加えて、ポリエステルまたはポリアミド繊維を重ね織りまたはブレンドした天然繊維を含むことができる。合成材料は、限定するものではないが、ナイロン、ファイバーグラス、ポリシロキサン、ポリエステル、ポリオレフィン、ポリアミド、コポリエステルポリエチレン、ポリアクリレートまたはポリスルホナートで構成される繊維を含むことができる。固体培養担体材料のさらなる例は、ワイヤーメッシュ、ポリウレタンフォーム、ポリエチレンフォーム、ガラス状炭素発泡体、ポリエステル/ポリエチレンフォーム、ポリイミドフォーム、ポリイソシアナートフォーム、ポリスチレンフォームおよびポリエーテルフォームまたはそれらの組み合わせを含む。
【０１１１】
種々の実施形態において、固体培養担体は布である。限定するものではないが、繊維またはポリマーを織る、編む、フェルト化するまたは架橋するなどの方法によって布を形成することができる。布の構築は、ゆるいまたは目の粗いものであることができる。あるいは、布の構築は目のつんだものであることができる。とは言っても、顕著なテクスチャー、表面積、トポグラフィックな変動性、および/または粗さを有する布は、培養担体への光合成微生物の機械的結合または付着をよりもたらすことができ、従って、特に、微生物を担体に接種するプロセスならびに/または微生物を増殖および/または収穫するプロセスの間にフォトバイオリアクターが処理される、移動されるまたはそれ以外の方法で移動される実施形態において好ましい場合がある。好ましくは、大部分の適用において、担体への微生物の付着は、収穫運転中に部生物の除去を過度に妨げないようにそれほど強くないようにすべきである。さらにまた、微生物が使用するための水分および/または栄養素を保持する布の能力は、一般に、疎水性、親水性の繊維またはこのような繊維の混合物を選択することにより調節できる。これらの特性は、表面で増殖する微生物に利用可能なように、水分および/またはそれに溶解している栄養素が固体担体に保持されるおよび/または移動されることを可能にする。
【０１１２】
培養担体の特性、特に水分および/または栄養の保持は、光合成微生物の増殖を増加させるように選択された材料で担体をコーティングすることにより増加させることができる。例えば、培養担体は寒天でコーティングされることもできるし、修飾セルロースエステル、アクリラートまたはアクリラート/ポリアミンコポリマーブレンドなどの高吸水性ポリマーでコーティングされることもできる。これらのコーティング剤は、一般的には、水中において、その乾燥重量の10〜100倍を超えて吸収および保持することができる。いくつかの実施形態において、これらの材料は、イオンを含む培地成分の存在下で、その高吸収性特性を保持するように配合される。コーティング剤は、培養担体の表面をコーティングすることもできるし、布が用いられている場合はその繊維をコーティングすることもできるし、あるいはその両方をコーティングすることもできる。一実施形態において、培養担体として役立つテリークロスのスワッチが寒天でコーティングされる。固体培養担体がそのようにコーティングされる場合、培養担体の“表面”は、これに光合成微生物が付着したときのコーティングの表面を含む。培養担体を薄く、曲げやすく軽く保つためには、コーティングは、好ましくは、例えば約100ミクロン以下の薄さである。しかしながら、所望の適用または選択される固体培養担体およびコーティング剤の組み合わせに応じて、より薄いコーティングを用いることもできる。
【０１１３】
固相培養担体は複合層状構造物であることができる。固相培養担体は、隣接するように配置された少なくとも2つの層を含むことができる。固相培養担体の複数の層は、結合、縫い合わせ、接着、圧縮または任意の他の適切な手段などでつなぐことができる。異なった層は、それぞれ独立して、上記のいくつかの材料の中から選択されることができる。例えば、固相培養担体は、合成発泡体の第2材料層に結合した布の第1材料層を含むことができる。他の例において、固相培養担体は、同一または異なる密度の合成発泡体の第2材料層に結合した合成発泡体の第1材料層を含むことができる。好ましくは、固相培養担体は、少なくとも、高表面積の増殖材料で構成される第1層および透過型材料で構成される第2層を含む複合層状構造物である。
【０１１４】
水分、栄養素および付着面を供給することに加えて、培養担体は化学線を捕捉するための表面を提供できる。従って、いくつかの実施形態において、固体培養担体の寸法はシート状である。すなわち、担体の深さは、担体の長さおよび幅に対して小さい。一実施形態において、培養担体は、保護バリアのフィルム状層間のシート状層である。このような平らなバイオリアクターは、フラットパネル状にして吊り下げられることができる。他の実施形態において、培養担体は、フォトバイオリアクターの外部バリアにより密閉されたカーテンのように吊り下げられる。寒天などの旧来の固相担体の薄いシートは、引き裂かれやすく、そのように吊り下げられることができないと考えられる。従って、吊り下げられるとき、液体で浸された場合であっても、固体培養担体がその完全性が維持できることが好ましい。
【０１１５】
本明細書に記載のように、テリークロスタイプ組織を有する布は、適切な固体担体を提供できる(例えば、実施例1参照)。他の天然、修飾天然および合成材料もまた許容されることは、当業者には明らかであろう。テリークロスは、本発明の固体担体において望ましいと考えられる属性の多くを提供する。例えば、テリークロスは柔軟性であり、通常条件下(例えば、温度)、非破壊手法(例えば、曲げ、折りたたみ、ひねりまたはローリング)に従って取り扱うとき、破れる、裂ける、破断する、または割れる傾向を有さない。同様に、テリークロスは、一般的には、適度に引っ張られたとき(液体で浸されているときであっても)、破れる、裂ける、または破断する傾向を有さない。さらに、テリークロスは、多くの繊維ループで構成されているため、高度にテクスチャ加工がおこなわれている。これにより、微生物が付着するための高表面積量が提供され、それによって、任意の所定のサイズの担体上で増殖できる微生物量が増す。さらにまた、綿テリークロスは、一般的には、自身の重量の少なくとも約3倍を吸収し、それにより、担体表面上で増殖する微生物に利用可能なように、布担体に水分および水分に溶解した任意の栄養素が保持されることが可能になる。従って、種々の実施形態は、薄いかまたは寸法がシート状であり、吊り下げられるとき、自身の湿重量を支えることができ、柔軟性で、曲げやすく、吸収性で、高度にテクスチャ加工の、またはそれらの任意の組み合わせの固体培養担体を提供する。
【０１１６】
上記の担体は、繰り返して使用でき、好ましくは、多くの適用において繰り返して使用され、より好ましくは、構造的に堅固であり、単回使用後に処置された微生物の増殖を維持する適切な表面を提供する限り繰り返して使用され、それによって運転費および廃棄物を減らすことができる。とは言うものの、小有機分子または治療用タンパク質およびペプチドなどの医薬品の製造に有用な組換え光合成微生物の培養などの、単回使用担体が望ましい特定の適用が存在しうる。このような単回使用担体の費用を抑えるために、そしてこのような単回使用担体が再使用されない事実を考慮して、このような担体はそれほど耐久性がある必要はなく、従って、金がかからず、耐久性が低い方法および/または材料を用いて製造または構築されることができる。例えば、ペーパータオルの紙繊維と同様な紙繊維で構成される担体が適切な場合がある。
【０１１７】
固相培養担体のいくつかの実施形態を図13に示す。図13Aで示される固相培養担体材料は、微生物の増殖、水分および栄養素への接近、微生物付着部位ならびに/または培養産物の除去のための持続可能な表面を提供できる1つの材料を示す。この材料は、表面と微生物との間の、栄養素、水分および産物を交換する液体浸透および平衡拡散を可能にする。この構造形態のレンダリングは、高表面積材料であるが、これは寸法および形状に関して最適化できる。図13Bに示す固相培養担体材料は、それぞれが増殖表面のために特定の機能を有する複数の材料で構成されるハイブリッド材料である。基層は、栄養素および水分の供給に加えて、材料を通してパーコレートする産物の除去を効率的に可能にする多孔性材料であることができる。基材は、増殖表面のための物理的担体を提供することもできる。外層(単数または複数)は、基層に取り付けられることが期待され、微生物の付着部位を提供するために最適化されることができる。表面積および培養した微生物との親和性に関して、表層は表面増殖環境をより調節することができる。
【０１１８】
保護バリア
本明細書記載のフォトバイオリアクターは、汚染および/または水分損失から固体培養担体および増殖表面を保護するバリアを含むことができる。同時に、フォトバイオリアクターは、光合成微生物に到達する化学線(太陽光または人工光のいずれか)および二酸化炭素を提供する。種々の実施形態において、フォトバイオリアクターは、光合成微生物の培養のための少なくとも1つの固体担体および保護バリアを含む。
【０１１９】
物理的取り扱いおよび/または汚染からの保護
汚染を防ぐために、物理的保護バリアは、固体培養担体を少なくとも部分的に覆うことができる。特定の実施形態において、物理的バリアは培養担体を密閉することができる。保護バリアは、少なくとも一部分において、フォトバイオリアクター内の担体および/または大気からの、フォトバイオリアクター外の大気への水分の損失を調節することもできる。所望の本発明の実施形態に応じて複数のタイプの材料のいずれかで保護バリアが構築されることができることは、当業者には明らかであろう。
【０１２０】
保護バリアは、培養担体を完全に密閉することができる。保護バリアが永続的にシールされる場合、内部の培養担体に接近するためには、バリアは破ったり、切断したり、裂いたりしなければならない。従って、いくつかの実施形態において、培養担体および微生物が増殖している表面へ、保護バリアを介して接近される。
【０１２１】
好ましい実施形態において、保護バリアは取り外し可能にシールされる。取り外し可能なシールは、限定するものではないが、Ziploc(登録商標)保存用バッグ(SC Johnson社)において見られるようなジッパータイプのクロージャー、hook-and-loop型のファスナー(例えば、Velcro USA社)、ツイストタイ、ジップタイ、スナップ、クリップ、感圧接着剤裏打ち面およびあらゆる分野で承認されているそれらの均等物を含む、多くのクロージャータイプのいずれかであることができる。しかしながら、完全なシールは必ずしも必要ではなく、外部バリアを完全にシールしないで、培養担体への接近を容易にしたほうが、寄り効率的な場合がある。
【０１２２】
フォトバイオリアクターは、保護バリア内に1つの培養担体または複数の培養担体を含むことができる。いくつかの実施形態において、1つの保護バリア内に1つの培養担体が密閉されている。例えば、プラスチックバッグは、その中に1つの固体培養担体が密閉されている保護バリアを形成することができる(例えば、図1参照)。他の実施形態において、1つの保護バリアは、複数の固体培養担体を密閉することができる。例えば、温室タイプの構造物は、その中に複数の固体培養担体が密閉されている保護バリアを形成することができる。
【０１２３】
化学線の透過
フォトバイオリアクターは、太陽光または人工光のいずれかで、光合成微生物への化学線の透過を提供できる。しかし、本発明の保護バリアは、必ずしも光に対して透明である必要はない。もしも光合成微生物の増殖のためにその中で十分な光源が提供されれば、いくつかの実施形態は、非透明な保護バリア内に密閉された培養担体を含むことができる。例えば、光源として太陽光を用いるための透明なバリアを提供することが、望ましく、より簡単で、より経済的であるなどが考えられる。
【０１２４】
好ましい実施形態は、限定するものではないが、ガラスまたは透明なもしくは一般に可視光を透過するポリマー、例えばポリエチレン、アクリルポリマー、ポリエチレンテレフタレート、ポリスチレン、ポリテトラフルオロエチレンもしくはそれらのコポリマーまたはそれらの組み合わせのいずれかのタイプなどの材料を含む透明なバリアを提供する。透明なバリアは、耐久性があり、裂ける、破れる、割れる、擦り切れる、細断される、または他のこのような物理的損害を受ける傾向を有さない材料から選択されることができる。透明なバリア材料は、オートクレーブ滅菌または他の温度極値への暴露に耐えるその能力に関して選択されることができる。さらにまた、透明なバリア材料は、退色または劣化せずに、日光または他の放射線への長期の暴露に耐えるように選択されることができる。光酸化に抵抗する特定のコーティングまたは配合物は、特に有用であることができることは、当業者には明らかであろう。さらに、本発明のフォトバイオリアクター内の熱の蓄積を低下させるおよび/または別なふうに調節するように、赤外反射コーティングまたは吸収コーティングを選択することができる。
【０１２５】
透明なバリア材料の厚さは、スケールの機械的特性に応じて変化することは、当業者には明らかであろう。例えば、透明なバリア材料は、厚さ約10ミルの工業用/海用プラスチックのものであることもでき、およそ厚さ2ミルの家庭用プラスチックバッグに用いられるタイプのものであることもできる。一実施形態において、透明なバリア材料は薄く、柔軟性である。例えば、透明なバリア材料は約10ミル未満のものであることができる。
【０１２６】
いくつかの実施形態において、バリアは、薄く柔軟性である固体培養担体の両面をおおう保護層またはフィルムを形成する。この実施形態の組み立てられたフォトバイオリアクターは柔軟性であり、貯蔵、移動、運搬または取り扱いのために、曲げる、回転させる、折り重ねる、撚り合わせるなどのことができる。他の実施形態において、透明なバリア材料は硬質である。例えば、バリアはガラス温室であることができる。たいがいは、温室ガラスの厚さは、好ましくは、建築慣行と合致するが、それを変更することも可能である。このような実施形態のフォトバイオリアクターは、実際的には固定されていると考えられるが、1つの透明な保護バリアの範囲内で、複数の固体担体を取り扱う、移動する、運ぶなどすることができるだろう。
【０１２７】
光合成微生物の増殖のための十分な光を提供するように保護バリアが選択されることができるが、必ずしもすべてのバリアが透明である必要はない。従って、いくつかの実施形態において、バリアの一部、例えば1以上の縁は非透明な材料でできている。非透明な材料は、限定するものではないが、ポリエチレン繊維材料(Tyvek(登録商標))、ポリテトラフルオロエチレン濾過媒体、セルロース系フィルター材料、ファイバーグラスフィルター材料、ポリエステルフィルター材料およびポリアクリラートフィルター材料ならびにそれらの組み合わせを含む材料で構成されることができる。耐久性に関して非透明な材料を選択することができる。このような実施形態において、バリアの透明な部分は、さらに、耐久性がある非透明な部分によって、破れる、裂ける、擦り切れる、細断されるなどから保護されると考えられる。一実施形態において、非透明な部分は、取り付け部位または取り付け部分(例えば、孔、ループ、フック、グロメットもしくは他の分野での等価装置、開口部またはくぼみ)および/または構造物にフォトバイオリアクターを固定する仕組みをさらに含むことによってフォトバイオリアクターを吊り下げるための取り付け構造物および/または補強材を提供するまたは含む。このような任意の取り付け部位などが非透明な部分内もしくは上に位置する必要はないが、それらは、バリアの非透明な部分内もしくは上、バリアの透明な部分内もしくは上、またはバリアの非透明な部分および透明な部分内もしくは上に含まれることができる。取り付け構造物はまた、固体培養担体内もしくは上に含まれることもできるし、それを貫通することもできる。
【０１２８】
いくつかの実施形態において、装置は識別できる前側および後側を有する。この装置の前側は、光源に面することを意味し、従って前側にあるバリアの部分は好ましくは透明であり、一方、光源に面していない側の保護バリアの部分は、必ずしも透明ではない。
【０１２９】
ガス交換の提供
光合成の間、光合成微生物は二酸化炭素を消費して酸素を放出する。本明細書記載のフォトバイオリアクターは、所望の量の光合成が行われるのに十分な二酸化炭素を供給できる。フォトバイオリアクター内部に二酸化炭素を供給する1つの方法は、フォトバイオリアクターの内部の空気と周囲の空気との間で直接ガス交換させることである。このシステムが周囲の大気に開放されるように、例えば、孔、通気孔、窓または他のこのような開口部を保護バリアに提供できる。
【０１３０】
しかしながら、このような開放形状は、光合成微生物の汚染が心配される場合、望ましくない可能性がある。このような心配に取り組むために、保護バリアは、その中に密閉された固体担体(単数または複数)を外気から完全にシールすることができる。このような実施形態において、所望の濃度の二酸化炭素は、囲い内にそれを導入することにより維持できる。例えば、圧縮二酸化炭素のタンクからの配管または管により、フォトバイオリアクター内に密閉された空気に二酸化炭素を混合させることが可能になることは、当業者には明らかであろう。さらに、工場、工業プラント、発電所などからの排気を光合成微生物の二酸化炭素供給源として利用することができ、従って二酸化炭素排出量を減らすことができる。一実施形態において、ガス供給ラインにより、増殖表面局部に二酸化炭素を提供することができる。
【０１３１】
大気中の二酸化炭素を利用するために、ガス透過性の選択的バリアを提供することが、望ましく、より簡単で、より経済的であるなどが考えられる。従って、いくつかのフォトバイオリアクター実施形態は、保護バリア内に密閉された環境と周囲の空気との間のガスおよび蒸気交換を可能にするにもかかわらず、なお汚染に対するシールされた物理的バリアを提供する選択的バリアを提供する。このようなバリアは、少なくとも部分的にガス/蒸気透過性であることができ(例えば、従来の織物よりもずっと透過性は低く、プラスチックフィルムよりも高く、および/またはコーティングされた紙と同様である)、従って二酸化炭素および酸素などのガスの交換は可能であるが、さらに少なくとも部分的に、かつ好ましくは、固形物および液体に対して不透過性であると考えられる。いくつかの実施形態において、フォトバイオリアクターは、増殖表面付近の領域において上昇した二酸化炭素濃度を維持するために、半透性バリア層およびガス供給ラインを含むことができる。
【０１３２】
いくつかの実施形態において、選択的バリアは、約10マイクロメートル以下の平均孔径または直径および、少なくとも約5から約10,000ガーレー秒以下までのガス交換速度を有することができる(ガーレー秒またはガーレーは、所定の圧力差で1.0平方インチの所定の材料を100立方センチメートルのガスが通過するのに必要な秒数を記載する単位である)。従って、ガス交換を可能にすることに加えて、選択的バリアは、密閉システムからの水分の損失を防ぐことができる。
【０１３３】
保護バリアの選択的バリア部分は、スパンボンドオレフィンバリアなどの、任意の適切なポリマーベース材料で構成されることができる。種々の特性を有するスパンボンドオレフィンバリア(微細ポリエチレン繊維)は、Tyvek(登録商標)の商標名でDuPont社から容易に入手できる。このような材料は、物理的特性のその組み合わせの故に特に有利である。すなわち、これらの材料は、水などの液体の透過に抵抗する傾向があるが、それでもなお十分に高度のガス/蒸気透過性を有し;これらの材料は比較的丈夫で、水分をほとんど吸収せず、引き裂き抵抗力があり、著しい弾性を有し、高度に柔軟性である。MIT屈曲試験機(TAPPI法T-423)で試験するとき、スパンボンドオレフィンは20,000サイクルを超えることができる。さらに、スパンボンドオレフィンは大部分の酸、塩基および塩に不活性であるが、濃硝酸または過硫酸ナトリウムなどの酸化物質に対する長期の暴露は、強度の少しの低下の原因となる。スパンボンドオレフィンバリアは、一定温度、0〜100%相対湿度でシート寸法が0.01%未満の変化を示すことから、優れた寸法安定性を有する。特定の製品は、直接食品に接触する用途のためのアメリカ合衆国連邦規則集の規定21(21CFR177.1520)の必要条件を満たしている。スパンボンドオレフィンバリアはまた、優れたカビおよび糸状菌抵抗性を示し、中性のpHを有している。しかしながら、残念なことに、そのUV抵抗性は特に優れていない。とは言うものの、通例少なくとも1〜3ヶ月の有用な屋外寿命を予想することができる。さらに、そのUV抵抗性は、不透明なコーティングを用いるか、ポリマー繊維にUV阻害薬を含むことにより改善することができる。さらに、今日までに製造されたスパンボンドオレフィンは不透明であるため、このような材料を含む保護バリアの部分は、好ましくは、光合成微生物の培養を障害するように位置するおよび/または広すぎることがない。
【０１３４】
特に、スパンボンドオレフィンは、“硬質”および“軟質”構造物で製造されることができる。“硬質”面接合品であるタイプ10は、なめらかで堅い無指向性紙様形状である。タイプ14および16は、“軟質”点接合品であり、型押し模様を有し、布切れのような柔軟性の担体を提供する。例えば、バリアに耐久性および通気性が所望される場合、タイプ14スタイル(またはその等価物)を使用できる。タイプ16スタイルは、5〜20ミル(0.13〜0.51mm)の孔の穴あきであり、タイプ14スタイルと比較して非常に高い空気および水分の透過性、さらなる柔軟性ならびにより大きな可撓性およびドレープを有するが、低い引き裂き強度およびバリア特性という犠牲を払っている。従って、選択的バリアの特定の特性は、スパンボンドオレフィン製品の1以上のタイプを選択することによりカスタマイズすることができる。
【０１３５】
選択的ポリマーバリアの他の例は、限定するものではないが、ナイロン、ポリスルホン、ポリテトラフルオロエチレン、セルロース、ファイバーグラス、ポリエステルおよびポリアクリラートの膜およびフィルター材料ならびにそれらの組み合わせを含む。
【０１３６】
光合成微生物の増殖にとって十分に選択的なバリアを提供するためには、保護バリアの全体がガス透過性である必要はない。適切なガス交換を可能にするのに十分な保護バリアの一部のみが、ガス透過性である必要がある。一実施形態において、選択的部分は保護バリアのパネルである(例えば、図1参照)。微生物の培養を過度に妨げることなく、特定の適用のための所望の量のガス交換を達成するために、担体表面の領域に関する選択パネルのサイズおよび配置は変更することができる。ガス透過性選択材料で構成される外部バリアの領域の百分率は、材料のガス透過速度に左右されることは、当業者には明らかであろう。実際、ガス透過性部分は、それを通しての水蒸気の移動もまた可能なので、種々の実施形態において、保護バリアのガス透過性部分のサイズは、酸素および二酸化炭素の十分な移動を可能にすると同時に、水分の損失を最小化するように選択される。
【０１３７】
吊り下げおよび運搬システム
本明細書記載のフォトバイオリアクターは、例えば、取り扱いおよび運搬システムに組み込むことにより、大規模生産および/または収穫のために構成されることができる。図3は、多数のフォトバイオリアクターを連続工程で取り扱うための、フォトバイオリアクター農場の典型的な設計を上から見た図を示す。フォトバイオリアクターまたは培養パネル(個別には示さず)は、コンベヤシステム8に取り付けられている。コンベヤシステム8は、その経路に沿って培養パネルを移動させる。複数のコンベヤシステムは、中央に位置する接種および収穫センター9に集まる。このように、処理(例えば、採取および/または接種)可能な場合は、培養パネルを接種および収穫センター9に移動させ、次いで、接種後、バイオマスの培養期間中には、センターからパネルを離れさせる。次いで、収穫前の培養期間の後半に、センターに向けてパネルを移動させ、最終的に、バイオマスの成熟と共に収穫のためにセンターに戻される。次いで、このサイクルが繰り返される。さらなる処理のために、パイプライン10を通して収穫したバイオマスを移動させることができる。さらなるコンベヤシステムまたはさらなる接種および収穫センターを付け加えてバイオマス生産専用の隊列を形成させることにより、フォトバイオリアクター農場の能力を上げることができる。
【０１３８】
フォトバイオリアクターの吊り下げ
光合成微生物に光を供給するためのフォトバイオリアクターの好ましい実施形態は、培養担体が薄いシート状である実施形態である。水平に向けられる場合、床面積の効率的利用は低下する傾向にあり、従って、本発明の特定の実施形態において、培養担体は非水平に向けられ、好ましくは実質的に垂直に向けられ、より好ましくは垂直に向けられる。それにもかかわらず、十分な量の化学線が微生物に到達できる限りは、培養担体は、本質的に任意の向きに向けられることができる。従って、フォトバイオリアクターが、保護バリアが固体担体の周りに密接に結びつけられたフィルムまたは層を形成するタイプのものである場合、全フォトバイオリアクターの好ましい配向は垂直であるが、任意の配向が許容される。明確にするために、前述の配向(例えば、垂直、水平、実質的に垂直、非水平など)は、培養担体の下部の床または地面に対してであり、床または地面が水平であると仮定している。
【０１３９】
培養担体または全フォトバイオリアクターを所望の配向に向けるかまたは吊り下げるために、種々の構造物、組み立て台、スタンド、ラックなどを使用できる。特に、培養担体および/または保護バリアは、固体培養担体および/またはフォトバイオリアクターを吊り下げることができる、ロープ、ライン、フック、ケーブル、トラック、レール、鎖、棚板、ポール、管、組み立て台、スタンド、梁または任意の他のこのような構造物から吊り下げられることもできるし、これらに取り付けられることもできる。複数の培養担体および/またはフォトバイオリアクターは、物干し用ロープからぶら下がっているシートのような共通の構造物から吊り下げられることができる。培養担体(単数または複数)および/またはフォトバイオリアクター(単数または複数)は、静的に吊り下げられることもできるし、その移動を可能にする方式で吊り下げられることもできる。孔、ループ、フックなどの位置は、好ましくは、培養担体および/またはフォトバイオリアクターの重量を実質的に均等に分配する。
【０１４０】
フォトバイオリアクターまたは培養担体の吊り下げは、特に垂直配向においては、空間効率が良く、取り扱い上の利点を提供できる。しかしながら、本発明のバイオリアクターまたは培養担体は、吊り下げられる必要はない。例えば、本発明の特定の実施形態において、培養担体は十分に硬質であり、非水平に、垂直にまたは実質的に垂直に向けられる場合(例えば、表面にまたはその上にその基部を固定または配置することにより;一実施形態において、担体は硬質プレート、パネル、グリッドなどのようなものである)、培養担体はその重量を支えることができ、その様に向けられ続ける。他の実施形態において、保護バリアは温室などのように独立型であり、複数の培養担体が吊り下げられるおよび/またはその中で独立している。
【０１４１】
フォトバイオリアクターおよび/または培養担体の吊り下げ、特に垂直配向における吊り下げは、空間効率がよく、取り扱い上の利点を提供できる。しかしながら、本発明のバイオリアクターまたは培養担体は吊り下げられる必要はない。例えば、本発明の特定の実施形態において、培養担体は十分に硬質であり、非水平に、垂直にまたは実質的に垂直に向けられる場合(例えば、表面にまたはその上にその基部を固定または配置することにより;一実施形態において、担体は硬質プレート、パネル、グリッドなどのようなものである)、培養担体はその重量を支えることができ、その様に向けられ続ける。他の実施形態において、保護バリアは温室などのように独立型であり、複数の培養担体が吊り下げられるおよび/またはその中で独立している。
【０１４２】
運搬
本明細書において、フォトバイオリアクター、フォトバイオリアクターの保護バリア内の培養担体またはそれらのいくつかの組み合わせをある場所から他の場所に運搬するためのシステムもまた記載されている。フォトバイオリアクターおよび/または培養担体を移動する能力は、種々の理由から有利であることができる。例えば、それは、光を受け取るためのそれらの位置(単数または複数)を最適化し、所望の温度またはガス含有量することを可能にすることができる。複数のフォトバイオリアクターまたは培養担体を、離散ステップ、例えば接種、培養、誘導および/または収穫にかける場合に、移動性は特に有利であることができる。なぜなら、定着したフォトバイオリアクターまたは培養担体に必要な材料および装置を移動させる代わりに、連続式プロセスでいくつかの割り当てられた場所にフォトバイオリアクターまたは培養担体を移動させることがより効率的と考えられる。
【０１４３】
このように、培養担体単独または保護バリアに密閉された培養担体のいずれであろうと、増殖表面は、接種後でさえ運ばれることができる。産業上の利用に頻繁に使用される多数のタイプのコンベヤシステムは、当業者には明らかであろう。運搬システムは、それが1以上のフォトバイオリアクターまたは培養担体を移動させることができる限り、特定のタイプに限定されない。フォトバイオリアクターまたは培養担体とコンベヤシステムとの間の取り付けのタイプは、用いられる運搬システムのタイプによって異なり、培養担体および/または保護バリアの一部である任意の取り付け部位と協同して働くように選択されることは、当業者には明らかであろう。1以上のモーター(例えば、鎖および歯車の働きにより)によって、機械化された方式で培養担体(単数または複数)またはフォトバイオリアクター(単数または複数)が運ばれることが考えられるが、ヒトの行動によってそれらが運ばれることも可能である(例えば、レールに取り付けられた吊り下げられたバイオリアクターを、レールに沿って滑らせるベアリング機構にそって単に押すことにより)。
【０１４４】
フォトバイオリアクター(単数または複数)および/または培養担体(単数または複数)を吊り下げるコンベヤシステムは、特に垂直配向においては空間効率がよく、取り扱い上の利点を提供できる。しかしながら、コンベヤシステムはフォトバイオリアクター(単数または複数)または培養担体(単数または複数)を吊り下げることに依存する必要はない。例えば、フォトバイオリアクターは、例えばローラーコンベヤ上を滑らすなど、コンベヤシステムの上部に沿って移動させることができる。一実施形態において、コンベヤシステムは、保護バリア内に密閉された培養担体を含むフォトバイオリアクターを移動させることができる。あるいは、フォトバイオリアクターの保護バリアは、複数の培養担体を移動させる1以上のコンベヤシステムを保護する大きな囲いであることができる。
【０１４５】
フォトバイオリアクター農場
大規模用途のためには、十分なサイズの1つの培養担体を構築することは、実際的ではない場合がある。従って、フォトバイオリアクター“農場”で光合成微生物を培養するための、2つまたはいくつかまたは数十または数百または数千またはそれ以上の培養担体の使用が提供される。これらの培養担体は、すべて1つの保護バリア内にある、すなわち1つのフォトバイオリアクターを含むこともできるし、複数の培養担体は複数のフォトバイオリアクターの一部であることもできる。いずれの場合においても、取り扱いおよび処理を容易にし効率的にするために、複数のフォトバイオリアクターまたは培養担体をフォトバイオリアクター農場内で組織化することは有益であることができる。太陽などの光源から捕捉されるエネルギー量を最大化するためにそれらの配置を組織化することもまた有益であることができる。このような組織化は、例えば、限定するものではないが、列、縦列、同心円、格子、中心点から放射状に外に広げることなどの規則的なやり方で多数のフォトバイオリアクターまたは培養担体を配置することからなることができる。
【０１４６】
種々の実施形態において、農場は、一般の構造物、例えばトラック、レール、鎖、ラインなどから吊り下げられる複数のフォトバイオリアクターまたは培養担体を含む。さらなる実施形態において、構造物はコンベヤシステムの一部であり、フォトバイオリアクターまたは培養担体は、コンベヤシステムの経路に沿ってある場所から他の場所へ移動する。
【０１４７】
フォトバイオリアクター農場は、多数のフォトバイオリアクターまたは培養担体を取り扱う複数のコンベヤシステムの1つまたは配列を含むことができる。このような配列は、2つまたはいくつかまたは数十または数百または数千またはそれ以上のフォトバイオリアクターまたは培養担体を取り扱う、2つまたはいくつかまたは数十または数百または数千またはそれ以上のコンベヤシステムを含むように拡大することができる。コンベヤシステム(単数または複数)に加えて、フォトバイオリアクター農場は、光合成微生物の接種、培養、誘導および/または収穫などのステップを行うための所定の所定の領域、ステーションまたはセンターを含むことができる。このようなセンターは、特定のステップを行うための専門装置の場所であることができる。コンベヤシステムの経路は、特定のステップが行われるこのようなセンターへフォトバイオリアクターまたは培養担体をもたらすことができる。次いで、フォトバイオリアクターまたは培養担体は、順番における次の領域またはセンターに移動されることができる。コンベヤシステムに沿った異なるフォトバイオリアクターまたは培養担体は、経路に沿った異なるセンター位置することができ、従って異なるステップに同時にかけることができる。一実施形態において、コンベヤシステムの経路はループである。フォトバイオリアクターまたは培養担体は、ひとたび培養プロセスにおけるステップの1ラウンドを完了すれば、そのプロセスを繰り返すことができる。ユニットの一部が損害を受けたり、最終的に交替を必要とする場合もあるが、本質的に、同じフォトバイオリアクターまたは固体培養担体のセットを繰り返し用いることができる。
【０１４８】
他の実施形態において、同じかまたはほぼ同じ場所で培養および収穫を行うことができる。この場所を接種および収穫センターと呼ぶ(例えば、図3参照)。フォトバイオリアクターおよび/または固体培養担体の接種は、接種および収穫センターで行われる。コンベヤシステムは、フォトバイオリアクターまたは培養担体を次に接種および収穫センターから移動させるループを形成する。次いで、フォトバイオリアクターまたは培養担体は、所望の量の細胞増殖に十分な時間、コンベヤシステムの経路に沿って移動する。次いで、コンベヤシステムは、収穫のためにフォトバイオリアクターまたは培養担体を接種および収穫センターに戻させる。複数のコンベヤシステムは、それから放射上に広がる共通の接種および収穫センターを共有できる。さらに高い能力を必要とする場合、フォトバイオリアクター農場は、複数のコンベヤシステムからのフォトバイオリアクターまたは培養担体を取り扱う複数の接種および収穫センターを含むことができる。能率の増加を実現できるとはいえ、接種および収穫の場所は、同じまたはほぼ同じ場所である必要はない。
【０１４９】
フォトバイオリアクターの使用方法
光合成微生物の培養
本明細書記載の固相フォトバイオリアクターは、光合成微生物を培養するために使用することができる。固相フォトバイオリアクターにおいて増殖できる光合成微生物は、限定するものではないが、シアノバクテリアなどの天然光合成微生物または人工光合成細菌などの操作された光合成微生物を含む。天然光合成微生物であるか、または操作して光合成微生物にすることができる典型的な微生物は、限定するものではないが、細菌;真菌;古細菌;原生生物;微小植物、例えば緑藻;ならびに動物、例えばプランクトン、プラナリアおよびアメーバを含む。バイオリアクターにおいて増殖できる天然に存在する光合成微生物の例は、限定するものではないが、スピルリナ・マキシマム、スピルリナ・プラテンシス、ドナリエラ・サリナ、ボトリオコックス・ブラウニイ、クロレラ・ブルガリス、クロレラ・ピレノイドーサ、セレナストルム・カプリコミュータム、セネデスムス・クアドリカウダ、ポルフィリディウム・クルエンタム、セネデスムス・アクタス、ドナリエラ種、セネデスムス・オブリカス、アナベノプシス、アウロシラ、キリンドロスペルムム、シネコッカス種、シネコシスチス種、および/またはトリポスリックスを含む。
【０１５０】
好ましくは、固相フォトバイオリアクターにおいて増殖する光合成微生物はシアノバクテリアを含む。バイオリアクターにおいて増殖するシアノバクテリアは、藍色植物門からの任意の光合成微生物であることができる。バイオリアクターにおいて増殖するシアノバクテリアは、単細胞形態を有することもできるし、コロニー形態(例えば、フィラメント、シートまたはボール)を有することもできる。好ましくは、バイオリアクターにおいて増殖するシアノバクテリアは単細胞シアノバクテリアである。バイオリアクターにおいて増殖できるシアノバクテリアの例は、限定するものではないが、シネコシスチス、シネココッカス、サーモシネココッカス、ノストック、プロクロロコッカス、ミクロシスティス、アナベナ、スピルリナおよびグロエオバクター属を含む。好ましくは、バイオリアクターにおいて増殖するシアノバクテリアは、シネコシスチス種またはシネココッカス種(例えば、シネココッカス・エロンガタスPCC 7942(ATCC33912)および/またはシネコシスチス種PCC 6803(ATCC27184))である。より好ましくは、バイオリアクターにおいて増殖する光合成微生物は、本明細書に記載の二糖を蓄積するように操作されたトランスジェニック光合成微生物である。
【０１５１】
フォトバイオリアクターの固体培養担体は、光合成微生物を接種することに加えて、水分および、限定するものではないが、栄養素、塩、緩衝液、金属、窒素、リン酸、硫黄などを含む他の成分の添加を行うことができる。次いで、保護バリア内の培養担体を含むフォトバイオリアクターは、取り外し可能にシールされることができる。シールされたフォトバイオリアクターは、例えば、照射および温度の調節を可能にする位置および方式で吊り下げることによって配置されることができる。配置は静的であることもできるし、1日にわたって太陽の放射線への最大暴露を確実にするために、フォトバイオリアクターを移動させることもできる。光合成微生物は、所望の時間、培養することができる。時間の長さは、微生物のタイプおよび所望の細胞増殖密度に従って変化することは、当業者には明らかであろう。例えば、シアノバクテリアの特定の株に関しては、約4〜約7日間の範囲内の培養期間によって、1リットル相当量当たり乾燥バイオマス約50〜約250グラムの範囲内の細胞収量をもたらすことができる。培養期間後、取り外し可能なシールを開けることができ、光合成微生物を収穫することができる。
【０１５２】
本明細書において、“1リットル相当量当たりの乾燥バイオマスのグラム数”は、培養表面上で増殖するバイオマス層の平均深さ(例えば、約150ミクロン)を算出し、その値に培養表面の長さおよび幅をかけ合わせることによって決定される単位である。この計算は体積を与える。次いで、培養表面から収穫したバイオマスの重量は、体積と関連づけられ、“1リットル相当量当たりの乾燥バイオマスのグラム数”として表すことができる。
【０１５３】
連続培養法
例えばアセンブリラインの様に、もし光合成微生物の培養プロセスが連続で行われれば、より高い効率が実現できるであろう。一度に大量のバイオマスを取り扱う装置および能力を必要とし、それによりバッチ間で遊休させる代わりに、連続システムは、より少ない全能力しか必要とせず、連続作業によってより効率的にその能力を用いると考えられる。培養をより小さくより多数の構成要素に分割することにより、空間的に連続した配置に構成要素を組織化することができる。次いで、全生産プロセスの異なる離散ステップを同時に行うことができる。培養構成要素をプロセスステップにかけた後、構成要素をプロセスの前方に移動させ、一方でそのステップにおいて他の構成要素と交替させる。従って、最終産物の生産は、大量バッチの成熟に限定されず、各構成要素がアセンブリライン様プロセスを完了するにつれて定期的に行うことができる。さらにまた、1ラウンドのプロセスの完了後に、構成要素は、直ちにプロセスをやり直すことができ、それが繰り返される。
【０１５４】
より具体的には、連続培養は、連続的に光合成微生物を培養するための運搬可能なフォトバイオリアクターまたは培養担体の使用方法に関する。連続または連続工程は、フォトバイオリアクターまたは固体培養担体を、培養プロセスのあるステップから他のステップに進行させることができる空間的関係として理解される。あるいは、1つの大型構造担体を連続工程に用いることが可能である。具体的には、担体は、巡回路(例えば、好ましくは垂直に配置されたコンベヤベルトのような)に沿って移動する様に作られた材料(例えば、テリークロス織物)のループであることができる。複数のフォトバイオリアクターまたは固体培養担体がそのプロセスを順次に繰り返し完了するにつれて、バイオマス生産が定期的に達成されうることが最終結果である。このタイプのプロセスは、大規模であるが、回数が少ないバッチでのバイオマス生産と比較して、効率の高い大規模用途において機会を与える。
【０１５５】
好ましい実施形態において、連続した空間的関係はコンベヤシステムの経路に沿っている。運転方法はアセンブリラインに類似している。このようなコンベヤシステムは、いくつかの方法で運転することができる。例えば、コンベヤシステムは、フォトバイオリアクターまたは培養担体をある場所から他の場所へ移動させる間、中断なしに運転することができる。このような実施形態において、フォトバイオリアクターまたは培養担体が動いている間に接種、収穫などが行われる。あるいは、実施されるステップを可能にするためにコンベヤシステムを停止させ、次いで次のステップの場所へのフォトバイオリアクターまたは培養担体の移動を再開させることができる。さらにまた、コンベヤシステムは中断なしに運転でき、フォトバイオリアクターまたは培養担体は、処理のためにコンベヤシステムの移動からはずし、次いで運搬の流れの中に再び入れるために再装着することができる。この一般テーマの他の入れ替えもまた可能であることは、当業者には明らかであろう。
【０１５６】
連続培養法の一実施形態において、コンベヤシステムに沿って、1つの場所で複数のフォトバイオリアクターが接種される。次いで、コンベヤシステムによって、光合成微生物の培養が行われる領域にフォトバイオリアクターが移動される。運搬のこの部分において、増殖および光合成を促進するための最適の照射を可能にするようにフォトバイオリアクターの位置を合わせることができる。次いで、光合成微生物を収穫できる場所にフォトバイオリアクターが到着する。次いで、このプロセスを再開するために、コンベヤシステムの経路に沿ってフォトバイオリアクターを接種地点に戻すことができる。効率を改善するために、フォトバイオリアクターが接種場所を離れ、収穫場所に到着する間の時間は、光合成微生物の所望の量の増殖が起こるのにかかる時間と一致するようにすることができる。このプロセスのステップは接種、培養および収穫に限定されない。さらなるステップは、所望産物を合成させるための細胞の誘導または滅菌を含むことができる。上記の実施形態は、運搬可能なフォトバイオリアクターシステムを説明しているが、複数の固体培養担体を運搬し処理する同じタイプの連続培養を、1つの保護バリア内で行うことができることは明らかであろう。
【０１５７】
発酵性糖の生産方法
光合成微生物をより効率的に増殖させる能力から利益を得る技術の1つは、エタノールまたはバイオディーゼルなどの代替燃料のためのバイオマスの生産である。コーン、サトウキビ、ダイズ、カノーラ、ジャトロファなどの、バイオマスを生産するために現在栽培されている植物と比較して、シアノバクテリアなどの光合成微生物は、はるかに速い速度でバイオマスを生産し、これによりはるかに大きな生産性をもたらすことができる。さらに、微生物による二糖の直接生産により、発酵性糖を生産するために植物バイオマスを用いる大規模なエネルギー集約型の前処理の多くを避けられる。さらにまた、植物の代わりに光合成独立栄養微生物を使用することにより、土壌消耗、腐食および食料供給品の転用を引き起こすことなく、高収量の発酵性糖をもたらすことができる。炭素供給源(CO2)およびエネルギー(光)が環境から供給され、はるかに低コストで生産できるため、他の微生物と比較して、光合成独立栄養微生物が好ましい。さらに、光合成独立栄養微生物は、産業プロセスからの二酸化炭素排出量を消費するために利用することができ、従って、環境に対するさらなる利点を提供する。
【０１５８】
光合成微生物からの大量の発酵性糖の生産に対する1つの障害は、光合成微生物が、一般に、生産した炭水化物を蓄積するよりもむしろ消費するからである。スクロースまたはトレハロースなどのいくつかの糖は、光合成微生物により一次炭素源として利用されないが、緩慢な同化機構が存在する。再加工機構にも関わらず、このような物質は代謝されずに蓄積されることができる。微生物を適切に操作すれば、同化機構を不活性化することができ、それにより高収量の糖の生産が可能になる。
【０１５９】
本明細書において、発酵性糖、特に二糖の光合成微生物による生産方法が提供される。発酵性糖の例は、限定するものではないが、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールおよびマンノシルフルクトースを含む。好ましくは、発酵性糖はスクロースまたはトレハロースである。本方法は、生産の費用対効果を改善するために連続的に行うのに適応することができる。
【０１６０】
本方法の種々の実施形態は、発酵性糖を合成できる光合成微生物を用いて実施できる。いくつかの実施形態は、発酵供給原料の生産のために浸透圧およびマトリックス水保護の天然現象を利用し、制御する。一実施形態において、発酵性糖の合成は誘導性である。他の実施形態において、発酵性糖の合成は、遺伝子操作により改変されて構成的に生産されることができる。
【０１６１】
発酵性糖生産性光合成微生物は、好ましくはシアノバクテリアである。いくつかの実施形態において、シアノバクテリアは、内因性誘導経路によって二糖を蓄積する。いくつかの実施形態において、トランスジェニックシアノバクテリアは、操作された外因性経路によって二糖を蓄積する。内因性および外因性経路共に、上記でさらに詳細に説明されている。
【０１６２】
好ましくは、トランスジェニック光合成微生物は、上記のトランスジェニック光合成微生物の1以上である。
【０１６３】
限定するものではないが、二糖を蓄積できるシアノバクテリア株の2例として、シネココッカス・エロンガタスPCC 7942およびシネコシスチス種PCC 6803がある。天然に存在するシネココッカス・エロンガタスPCC 7942は、その許容限界である約700mMまでの塩濃度に暴露することによりスクロースを合成する。agp遺伝子の欠失によりグルコシルグリセロールの生合成がブロックされるとき、シネコシスチス種PCC 6803は、900mMにほぼ等しいその許容限界までの塩濃度に暴露することにより、その浸透圧保護剤としてスクロースを生産する。いくつかの実施形態において、塩誘導は、エアゾール化した生理食塩水を培養表面に直接に塗布することにより達成できる。このプロセスの1つの利点は、その品種の増殖時間に応じて増殖表面に沿って制御可能に塗布することができ、それによって、バイオマスの蓄積およびスクロースなどの二糖の生産のバランスが保たれることである。
【０１６４】
発酵性糖を生産するために、固体培地上で、または液体もしくはゲル培地内で光合成微生物を培養できる。光合成微生物の培養および増殖は当該分野で公知である。従って、特記しない限り、光合成微生物の培養および増殖は、このような既知のプロセスに従って実施することができる。例えば、二糖を蓄積するように操作されたトランスジェニックシアノバクテリアは、液体培地内で培養し増殖させることができる。蓄積された糖は、細胞から放出される場合、このような液体培地から単離されることができる。蓄積された糖は、液体培地から収穫した光合成微生物から単離されることができる。一実施形態において、上記のように、トレハロースを蓄積するように操作されたトランスジェニックシアノバクテリアは液体培地内で培養され増殖される。トランスジェニックシアノバクテリアから分泌されるトレハロースは、液体培地から直接に単離されることができる。一実施形態において、上記のように、スクロースを蓄積するように操作されたトランスジェニックシアノバクテリアは、液体培地内で培養され増殖される。スクロースは、液体培地かた収穫した操作されたシアノバクテリアから直接に単離されることができる。一実施形態において、上記のように、スクロースを蓄積し分泌するように操作されたトランスジェニックシアノバクテリアは、液体培地内で培養され増殖される。トランスジェニックシアノバクテリアから分泌されるスクロースは、液体培地から直接に単離されることができる。
【０１６５】
好ましくは、光合成微生物は、誘導の前に、1リットル相当量当たり乾燥バイオマス少なくとも約50グラムの比較的高い細胞密度まで培養される。このような比較的高い細胞密度は、本明細書記載の固相フォトバイオリアクターを用いて達成できる。次いで、溶液伝導率により測定される、培地における水の活性を変えるのに有効である適切な塩化合物の所定の濃度で蓄積されたバイオマスを処理することにより、二糖(例えば、スクロース)の生産を開始/誘導できる。さらに好ましい実施形態において、塩化ナトリウムが用いられる塩である。適切な反応期間(例えば、少なくとも約1時間から約48時間以下まで)後に、生産されたスクロースを単離し回収するために、スクロースを蓄積した細胞を収穫し処理することができる。一般的には、適切な反応期間は、少なくとも約5時間から約24時間以下までの範囲内である。より一般的には、適切な反応期間は、少なくとも約10時間から約20時間以下までの範囲内である。
【０１６６】
一実施形態において、合成される二糖(例えば、スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロール、マンノシルフルクトース)の大部分は、細胞内に蓄積される。他の実施形態において、二糖は細胞によって分泌され、次いでこれはフォトバイオリアクターから回収することができる。二糖が細胞内に存在するかまたは分泌されるかにかかわらず、限定するものではないが、培養表面に塗布される水性スプレー洗浄を含む任意の適切な収穫プロセスを用いて二糖を得ることができる。二糖を単離し回収するために、細胞および/または二糖を含む洗浄液を収穫し処理することができる。
【０１６７】
本発明を詳細に説明してきたが、添付の特許請求の範囲において定義された本発明の範囲を逸脱することなく、修飾、変更および等価な実施形態が可能であることは明らかであろう。さらにまた、当然のことながら、本開示におけるすべての例は、限定するものではない例として提供される。
【０１６８】
限定するものではない以下の実施例は、本発明をさらに詳細に説明するために提供される。以下の実施例において開示された技術は、本発明の実施において十分に機能すると本発明者が見出したアプローチを示すものであり、従ってその実施のための方式の例を構成すると考えることができることは、当業者には明らかであろう。しかしながら、本開示を考慮すれば、本発明の精神および範囲から逸脱することなく、開示された特定の実施形態において多くの変更を行うことができ、なお同様で類似した結果が得られることは当業者には明らかであろう。
【実施例１】
【０１６９】
固相フォトバイオリアクター
Ziploc(登録商標)の再シール可能なクロージャーを有する2ミルポリエチレンバリア層で構成される静的な原型装置を構築した。60平方センチメートルの通気性パネルを1つの表面に組み込み、225平方センチメートルの綿織物培養担体表面を内部に入れた。この装置を70容量%の水性エタノールで処理することによって滅菌し、次いで、無菌濾過した空気流を用い、50℃で装置を乾燥した。滅菌BG-11培地30mlを培養担体上に吸収させ、次いで、エアゾールアプリケーターを用いて、シネココッカス・エロンガタスPCC 7942の前培養物を増殖表面に接種した。接種の前に、6℃で2日間、BG-11培地中で前培養物を増殖させた。33℃に維持され、白色蛍光ランプを用いて300マイクロアインシュタインで照射されているインキュベーションチャンバーにフォトバイオリアクターを入れた。2日後、リアクターは微生物の活発な増殖を示し、さらに2日間、増殖を継続させ、その後リアクターをインキュベーターからはずし、増殖表面を脱イオン水を洗浄した。蒸発によって水を除去し、乾燥重量254mgのバイオマスを得た。
【実施例２】
【０１７０】
光合成微生物によるスクロースの生産
以下は、フォトバイオリアクターと組み合わせた光合成微生物によるスクロースの生産方法を例示するための予言的実施例である。約15〜40℃の温度、約60〜300マイクロアインシュタインの照射下、約0.2〜15容量%の二酸化炭素濃度で、シネコシスチス種PCC 6803または操作されたシネコシスチス種のいずれかを用いて、おおよそ4〜7日間、少なくとも1つのフォトバイオリアクター、例えば実施例1または実施例3に記載されているような本発明のフォトバイオリアクターを運転することができる。最初の培養期間後に、エアゾールスプレーを用いて、約0.01〜1.5M、より好ましくは約0.2〜0.9Mの濃度範囲の水性塩溶液で増殖表面を処理できる。スクロースを生産させるために、おおよそさらに1日間から2日間培養を続けさせることができる。次いで、脱イオン水で表面を洗浄することによって、増殖表面を収穫することができる。他の実施形態において、洗浄水は滅菌新鮮培養培地であり、洗浄の厳密さは、約70〜90%の細胞塊が収穫される程度である。次いで、培養担体上に残っているバイオマスを、次のサイクルとして増殖を続けさせる。この培養の収量は、用いられる増殖表面材料および微生物に応じて、乾燥バイオマス約200〜600mgであることが期待される。
【実施例３】
【０１７１】
吸水性ポリマーでコーティングされた固体培養担体
BG-11培地に分散させた滅菌1.5重量パーセント寒天の加熱溶液で材料の滅菌乾燥表面をディップコーティングにより、実施例1に記載のタイプの静的なフォトバイオリアクターの増殖表面を調製した。コーティングされた増殖表面を冷却し硬化させ、次いで表面を滅菌保護バリアに挿入してフォトバイオリアクター装置を作成し、実施例1に記載の前培養で培養されているシネココッカス種を接種した。本質的に実施例1に記載されているようにして培養および収穫を行った。
【実施例４】
【０１７２】
asf遺伝子標的
スクロースリン酸シンターゼ(sps)およびスクロースリン酸ホスファターゼ(spp)活性の調節を通して、シアノバクテリアにおけるスクロースの生合成を研究した。浸透圧およびマトリックス水ストレスへの順応のために、このような活性は多くのシアノバクテリアに既に存在している(例えば、Lunn, J. E. 2002. Plant Physiol 128, 1490-1500 を参照のこと)。
【０１７３】
Lunn, J. E. (2002. Plant Physiol 128, 1490-1500)は、シネコシスチス種PCC 6803およびシネココッカス・エロンガタスPCC 7942を含むいくつかの微生物のspsおよびspp遺伝子のゲノム構造を解析した。Lunnは、シネコシスチス種PCC 6803(配列番号3)のスクロースリン酸シンターゼ(SPS)が、不活性なスクロースリン酸ホスファターゼ(SPP様)ドメインおよび別個のSPP活性を有することを提案した。SPP様ドメインはsppと高レベルの同一性を有するが、ハロ酸デハロゲナーゼ(HAD)スーパーファミリーの保存された活性部位残基の多くを欠失している。シネココッカス・エロンガタスPCC 7942に関する研究はいまだになされていないが、Lunnは、両方の活性が1つの酵素に含まれていることを提案した。これらの酵素のアラインメントを図5に示す。
【０１７４】
シネココッカス・エロンガタスPCC 7942ゲノムの研究により、染色体の他の部分では別個のsps遺伝子が明らかにならなかった。同義遺伝子発現の必要性を避けるために、シネココッカス・エロンガタスPCC 7942酵素(配列番号2)を用いた。PCC 7942からの遺伝子はspsと呼ばれているが、SPSおよびSPP活性の両方を有する1つの融合酵素であるため、活性融合SPS/SPP(配列番号1)の代わりにasfと名づけられた(別個のSPP酵素の可能な発現に関するさらなる情報については下記を参照のこと)。
【０１７５】
シネココッカス・エロンガタスPCC 7942のasf遺伝子産物(配列番号2)の発現には2つのアプローチがある。
【０１７６】
第1アプローチは、広宿主域ベクターpMMB67EH上に構築されたプラスミドベースの発現系である(Furste, J. P., Pansegrau, W., Frank, R., Blocker, H., Scholz, P., Bagdasarian, M. and Lanka, E. 1986. Gene 48, 119-131)。プラスミドpMMB67EHはRSF1010の誘導体であり、これは大部分のグラム陰性微生物において複製され、一部のグラム陽性微生物においてさえも複製されるため、大腸菌、シネコシスチス種PCC 6803、シネココッカス・エロンガタスPCC 7942および種々の他のシアノバクテリア内でのスクロース生産のプラスミドベースの解析が可能である(Kreps, S., Ferino, F., Mosrin, C., Gerits, J., Mergeay, M. and Thuriaux, P. 1990. Mol Gen Genet 221, 129-133; Marraccini, P., Bulteau, S., Cassier-Chauvat, C., Mermet-Bouvier, P. and Chauvat, F. 1993. Plant Molecular Biology 23, 905-909; Gormley, E. P. and Davies, J. 1991. J Bacteriology 173, 6705-8)。
【０１７７】
第2アプローチは、upp(ウラシルホスホリボシルトランスフェラーゼ)遺伝子座でのシネコシスチス種PCC 6803およびシネココッカス・エロンガタスPCC 7942の染色体への安定な組み込みである。upp遺伝子座は、下記の理由で選択した。
【実施例５】
【０１７８】
プラスミドベースの発現
asf遺伝子産物、pLybAL11(例えば、図6;配列番号19参照)およびpLybAL12(例えば、図7;配列番号20参照)のプラスミドベースの発現のために、2つのプラスミドを設計した。所定のプロモーターからの発現のためにプラスミドpLybAL12を構築し、無作為に選択されたプロモーターからの発現のためにpLybAL11を構築した。
【０１７９】
2つのプラスミドを以下のように構築した。鋳型として全細胞を用い、オリゴヌクレオチド5'-AGACTACAATTGGGGCGTTTTCTGTGAG-3'(MfeI制限エンドヌクレアーゼ部位はヌクレオチド位置7〜12である)(配列番号7)および5'-CTTACGTGCCGATCAACGTCTCATTCTGAAAAGGTTAAGCGATCGCCTC-3'(配列番号8)を用いるPCRによりシネココッカス・エロンガタスPCC 7942からのasf遺伝子を増幅し、配列番号1の産物を得た。
【０１８０】
上流プロモーターの有り無しでの、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼをコードする遺伝子(cat)をpBeloBAC11(GenBankアクセッション番号U51113)から増幅した。
【０１８１】
プロモーターを欠くcat遺伝子は、オリゴヌクレオチド5'-TTATCGCGATCGTCAGGAGCTAAGGAAGCTAAAATGGAG-3'(配列番号9)および5'-CGACCAATTCACGTGTTTGACAGCTTATC-3'(配列番号10)(PvuIおよびPmlI制限エンドヌクレアーゼ部位は、それぞれヌクレオチド位置4〜9および10〜15である)を用いるPCRによってpBeloBAC11から増幅し、配列番号11の産物を得た。
【０１８２】
プロモーターを含むcat遺伝子は、オリゴヌクレオチド5'-TTTTGGCGATCGTGAGACGTTGATCGGCACGTAAG-3'(配列番号12)および5'-CGACCAATTCACGTGTTTGACAGCTTATC-3'(配列番号13)(PvuIおよびPmlI制限エンドヌクレアーゼ部位は、それぞれヌクレオチド位置7〜12および10〜15である)を用いるPCRによってpBeloBAC11から増幅し、配列番号14の産物を得た。
【０１８３】
cat遺伝子を含むPCR産物をPvuIで消化し、T4 DNAポリメラーゼで末端を平滑化した。次いでこれらを、個別にasf PCR産物に連結した。得られた産物をアガロースゲル電気泳動で精製し、MfeIおよびPmlIで消化し、次いで、EcoRIおよびHpaIで消化したpMMB67EHの6.6Kbpの産物にT4 DNAリガーゼで連結した。ケミカルコンピテントNEB5α(New England Biolabs社;マサチューセッツ州イプスウィッチ)を連結産物で形質転換し、100μg/mlアンピシリンを添加したLB寒天上37℃で選択した。選択された候補をミニプレップのために100μg/mlアンピシリンを添加したLB中37℃で増殖させ、制限エンドヌクレアーゼ消化物で分析し、次いでオリゴヌクレオチド5'-GCTTCTGCGTTCTGATTTAATCTGTATCAG-3'(配列番号15)、5'-TATCACTTATTCAGGCGTAGCAACCAG-3'(配列番号16)、5'-GTCGTTAGTGACATCGACAACACACTG-3'(配列番号17)、および5'-GATCGCGATACTGATCGAGATAGGTC-3'(配列番号18)を用いる配列分析によって確認した。さらなる研究のために、候補番号5のpLybAL11(pLybAL11-5)(配列番号19)および候補番号1のpLybAL12(pLybAL12-1)(配列番号20)を選択した。
【０１８４】
ミニプレップ中のプラスミド収量に基づけば、大腸菌株NEB Turbo(New England Biolabs社;マサチューセッツ州イプスウィッチ)内で増殖させるとき、これらのプラスミドのコピー数は著しく低下していると思われるため、これらのプラスミドのための宿主株の選択における重要性が示唆される。
【実施例６】
【０１８５】
プロモーター挿入
pLybAL12-5への挿入のために、6つのプロモーターを選択した。カルバモイルリン酸シンターゼをコードするシネコシスチス種PCC 6803 carBの推定プロモーター(遺伝子pyrRのすぐ上流に存在すると考えられ、それらはオペロンとして共転写されると考えられる)を選択した。なぜなら、ピリミジンおよびアルギニン生合成の両方におけるその役割により丈夫であると考えられるからである。シネコシスチス種PCC 6803(Aichi, M., Takatani, N. and Omata, T. 2001. J Bacteriol. 183, 5840-5847)およびシネココッカス・エロンガタスPCC 7942(Maeda, S-I. et al. 1998. J Bacteriol 180, 4080-4088)の両方からの硝酸レダクターゼ(nirA)プロモーターを、窒素供給源により制御されるそれらの能力のために選択した。シネココッカス・エロンガタスPCC 7942からの光化学系II D1タンパク質(psbAII)のための丈夫な明期プロモーター(Golden, S. S., Brusslan, J. and Haselkorn, R. 1986. EMBO Journal 5, 2789-2798)およびシネコシスチス種PCC 6803からの2つの暗期プロモーター[dnaK (Aoki, S., Kondo, T. and Ishiura M. 1995. J Bacteriol 177, 5606-11)およびkaiA(Kucho, K-I. et al. 2005. J Bacteriol 187, 2190-2199)]もまた、調節型シアノバクテリア由来プロモーターとして選択した。最後に、シアノバクテリアにおいて活性であることが示されているλPR温度調節型プロモーターを選択した(Ferino, F. and Chauvat, F. 1989. Gene 84, 257-66; Mermet-Bouvier, P. and Chauvat, F. 1994. Current Microbiology 28, 145-148)。
【０１８６】
以下のオリゴヌクレオチドを用いて、鋳型として全細胞を用いるPCRによってプロモーターを増幅し、示されている産物を得た。クローニングに組み込まれている制限エンドヌクレアーゼ部位は、配列中に示されている。
【０１８７】
それぞれがヌクレオチド位置7〜12に制限エンドヌクレアーゼ部位を有するオリゴヌクレオチド5'-CGGTGTGCATGCCGTTATTGATGGAATG-3'(配列番号21)および5'-TCACTAGGTACCTAAATTACCTGGGAAGCCAG-3'(配列番号22)を用いるPCRによって、シネコシスチス種PCC 6803 pyrR(SphI/KpnI)(配列番号23)を全細胞から増幅した。
【０１８８】
それぞれがヌクレオチド位置7〜12に制限エンドヌクレアーゼ部位を有するオリゴヌクレオチド5'-CCCAAGGCATGCAGGAAAACAAGCTCAGAATGCTG-3'(配列番号24)および5'-TTTATTGGTACCAACGCTTCAAGCCAGATAACAGTAGAGATC-3'(配列番号25)を用いるPCRによって、シネコシスチス種PCC 6803 nirA(SphI/KpnI)(配列番号26)を全細胞から増幅した。
【０１８９】
オリゴヌクレオチド5'-ATCTTTGCGTTCCGTGACGGCTACTG-3'(配列番号27)および5'-GCAGATGGTACCGGTCAGCAGAGTG-3'(ヌクレオチド位置7〜12に制限エンドヌクレアーゼ部位を有する)(配列番号28)を用いるPCRによって、シネココッカス・エロンガタスPCC 7942 psbAII(SphI/KpnI)(配列番号29)を全細胞から増幅した。
【０１９０】
それぞれがヌクレオチド位置7〜12に制限エンドヌクレアーゼ部位を有するオリゴヌクレオチド5'-CAGCCAGCATGCATAAATTTCTGTTTTGACCAAACCATCC-3'(配列番号30)および5'-GTGGCTGGTACCATGGATTCATCTGCCTACAAAG-3'(配列番号31)を用いるPCRによって、シネココッカス・エロンガタスPCC 7942 nirA(SphI/KpnI)(配列番号32)を全細胞から増幅した。
【０１９１】
それぞれがヌクレオチド位置7〜12に制限エンドヌクレアーゼ部位を有するオリゴヌクレオチド5'-GTGCATTCTAGATGGCTACGAGGGCAGACAGTAAG-3'(配列番号33)および5'-TTCTGTGGTACCATATGGATCCTCCTTCTTAAGATGCAACCATTATCACC-3'(配列番号34)を用いるPCRによって、λPR(XbaI/KpnI)(配列番号35)を全細胞から増幅した。
【０１９２】
それぞれがヌクレオチド位置7〜12に制限エンドヌクレアーゼ部位を有するオリゴヌクレオチド5'-GCCCCAGCATGCACCAGTAAACATAAATCTC-3'(配列番号36)および5'-ATTGGTGGTACCGAGGTCAATCCCAACAAC-3'(配列番号37)を用いるによって、シネコシスチス種PCC 6803 dnaK(SphI/KpnI)(配列番号38)を全細胞から増幅した。
【０１９３】
それぞれがヌクレオチド位置7〜12に制限エンドヌクレアーゼ部位を有するオリゴヌクレオチド5'-GCCAGAGCATGCAAAGCTCACTAACTGG-3'(配列番号39)および5'-GGAAAAGGTACCTGAGTCTATGGGCAACGTG-3'(配列番号40)を用いるPCRによって、シネコシスチス種PCC 6803 kiaA(SphI/KpnI)(配列番号41)を全細胞から増幅した。
【０１９４】
増幅後、PCR産物を上記で示されている制限エンドヌクレアーゼで消化し、ゲル精製し、同様に消化したpLybAL12-1に連結して、それぞれプラスミドpLybAL15(配列番号44)、pLybAL16(配列番号45)、pLybAL17(配列番号46)、pLybAL18(配列番号47)、pLybAL19(配列番号48)、pLybAL21(配列番号49)、およびpLybAL21(配列番号50)を得た。エレクトロコンピテントNEB5α(New England Biolabs社;マサチューセッツ州イプスウィッチ)を連結産物で形質転換し、100μg/mlアンピシリン、34μg/mlクロラムフェニコールおよび5%スクロースを添加したLB寒天上、30℃で選択した。選択された候補をミニプレップのために100μg/mlアンピシリン34μg/mlクロラムフェニコールおよび5%スクロースを添加したLB中30℃で増殖させ、制限エンドヌクレアーゼ消化物で分析し、次いでオリゴヌクレオチド5'-GCTTCTGCGTTCTGATTTAATCTGTATCAG-3'(配列番号42)および5'-ATGGGTCTGAATGTGCAGAATGTAGAG-3'(配列番号43)を用いる配列分析によって確認した。プラスミドpLybAL15(配列番号44)、pLybAL16(配列番号45)、pLybAL17(配列番号46)、pLybAL18(配列番号47)、pLybAL19(配列番号48)、pLybAL21(配列番号49)およびpLybAL21(配列番号50)のそれぞれに対し、候補6および7(pLybAL15-6およびpLybAL15-7)、2(pLybAL16-2)、4および5(pLybAL17-4およびpLybAL17-5)、1および2(pLybAL18-1およびpLybAL18-2)、1および2(pLybAL19-1およびpLybAL19-2)、3および5(pLybAL21-3およびpLybAL21-5)ならびに4および8(pLybAL22-4およびpLybAL22-8)を選択した。
【０１９５】
スクロースおよび両抗生物質を添加したLB上でのこれらのプラスミドの選択および増殖は、クローンを得るためには大変重要であった。始めは、アンピシリンのみを添加したLB上で選択を行ったが、プロモーターを含むプラスミドは単離できなかった。単離物は、ベクターのみの再連結反応物であるか、または異なるサイズでクロラムフェニコールの存在下で増殖する能力を欠くものであった。細胞内スクロースが生産され、スクロース生産を防ぐ欠失をもたらす細胞に対する浸透圧ショックが生じたと考えられる。それに続く実験により、ひとたび単離されれば、プラスミドは、おそらくは結果として生じる浸透圧ストレス装置および/またはスクロース消費酵素の誘導により、スクロースの非存在下で安定であることができることを示している。
【実施例７】
【０１９６】
シネコシスチスおよびシネココッカスの形質転換
プロモーターを含有するプラスミド、pLybAL15(配列番号44)、pLybAL16(配列番号45)、pLybAL17(配列番号46)、pLybAL18(配列番号47)、pLybAL19(配列番号48)、pLybAL21(配列番号49)およびpLybAL21(配列番号50)に加えて、プロモーターを含有しないpLybAL12-1ベクター(配列番号20)(実施例5〜6参照)を、特記しない限り、Elhai,J.and Wolk,C.P.1988.Methods in Enzymology167,747-754に基づいて行う三親接合によって、シネコシスチス種PCC 6803およびシネココッカス・エロンガタスPCC 7942の両方に挿入した。
【０１９７】
30℃で増殖させた、カーゴ株(導入されたプラスミドを含むNEB5α)の終夜培養物に加えて、ヘルパープラスミドpRK2013(ATCC37159)を含むHB101の終夜培養物を遠心分離でペレット化し、LBで2回洗浄し、次いで元の容量の10分の1のLBに再懸濁した。おおよそ0.5のOD730への一定の照度下で、微量元素をNitsch微量元素(Nitsch, J. P. and Nitsch, C. 1956. American Journal of Botany 43, 839-851)に置き換えた以外はBG11と同じであるBG11-Aを用いて、30℃で各シアノバクテリアを増殖させた。細胞を遠心分離でペレット化し、BG11-Aで2回洗浄し、7.5倍高い濃度でBG11-Aに再懸濁した。10-5まで、BG11-Aでシアノバクテリアの一連の10倍希釈液を調製した。各希釈液において、シアノバクテリア100μlを、大腸菌のカーゴ株およびヘルパー株のそれぞれ50μlと混合した。次いで、各混合物150μlを、5%LBを添加したBG11-A寒天(1.5%)プレート上にプレーティングした。一定の照度下、26〜28℃で16〜24時間、プレートをインキュベートした。各プレート上の寒天(およそ30ml)を移動させ、100Xクロラムフェニコール溶液300μlを加えた。クロラムフェニコールの最終濃度は、シネコシスチス種PCC 6803に関して25μg/mlであり、シネココッカス・エロンガタスPCC 7942に関しては7.5μg/mlであった。インキュベーションを8〜12日間続けた。接合伝達株の各コロニーを、再度、適切な量のクロラムフェニコールを添加したBG11-A上に再ストリークすることにより汚染した大腸菌を精製除去して単離されたコロニーを得た。
【実施例８】
【０１９８】
pLybAL11-5におけるプロモーターライブラリー
以下の実施例により、pLybAL11-5(配列番号19)を用いる、プロモーター選択のためのシアノバクテリアDNAのライブラリーの構築を説明する(実施例5参照)。Wilson, K. (1997. Preparation of Genomic DNA from Bacteria. In Current Protocols in Molecular Biology. John Wiley and Sons Vol. 1, pp. 2.4.1-2.4.5)の染色体DNAの単離プロトコルの、改変されたスケールアップバージョンを用いたが、主な違いは、ずっと長いインキュベーション時間およびSDSをサルコシルで置き換えたことであった。単離されたDNAは、pLybAL11-5のBamHI部位への挿入のための部分Sau3AI消化のために十分な品質を有していた。図8に示すように、フラグメントのあるものはプロモーターを有し、他はプロモーターを有さないと考えられる。
【０１９９】
ライブラリー構築のプロセス中に、asf遺伝子内の可能なプロモーターが見出された。プロモーターとして機能するためには、クローニングベクター、プラスミドpLybAL11-5(配列番号19)は、プロモーターがasf遺伝子の前に挿入されたときにのみ、クロラムフェニコールに耐性を示すはずである。なぜならこのマーカーは、その通常のプロモーターを欠き、asfの上流のプロモーターは含まれないからである。しかしながら、構築されるやいなや、このプラスミドにより付与されるクロラムフェニコール耐性を大腸菌内で試験した。pLybAL11-5を含むNEB5αを、34μg/mlクロラムフェニコールを添加したLB寒天(1.5%)上37℃で培養したとき、増殖が観察された。しかしながら、34μg/mlクロラムフェニコールを加えた液体LB培地で培養したとき、皆無かそれに近い増殖が観察された。pLybAL12-1(配列番号20)を含むNEB5αは、クロラムフェニコールの存在下、固体および液体LB培地の両方で増殖する。
【０２００】
asf遺伝子の上流であるが、転写ターミネーターの下流であるプロモーターが欠失したものがないか確かめるために、pLybAL11を作成するためにpMMB67EHに挿入したインサートを、Lucigen大腸菌株(E. cloni 10G)コンピテント細胞を含むLucigen's CloneSmartキットを用いるLucigen社(ウィスコンシン州ミドルトン)のpSMART-LCKan平滑末端クローニングベクターにクローニングした(例えば、図9参照)。これが平滑末端化クローニングであったため、インサートはいずれかの方向でプラスミドに連結することが可能であり、pLybAL13f(配列番号51)およびpLyAL13r(配列番号52)が作成された。このベクターは、クローニング部位をターミネーターで囲うことによって、ベクターからの読み通し転写を除去するように特に設計されている。対照として、pLybAL12を構築するために用いたインサートもまたこのベクターに挿入し、pLybAL14f(配列番号53)およびpLybAL14r(配列番号54)を作成した。これらのプラスミドはアガロースゲル上で適切なサイズと思われたが、クローンの完全性を確認されるためのDNA配列決定によりインサートは確認されなかった。しかしながら、pLybAL13およびpLybAL14を含むE.cloni 10Gに関して同様な結果が見られ(fまたはr方向のいずれかに連結されたクローニングされたDNAで)、またpLybAL11(配列番号19)およびpLybAL12(配列番号20)をそれぞれ含むNEB5αに関しても見られた。このことは、このプロモーターの活性が大腸菌内では弱いことを示している。
【０２０１】
多くの大腸菌プロモーターは、シアノバクテリアでは機能しないし、逆もまた同様である。このプロモーター活性が、シネコシスチス種PCC 6803またはシネココッカス・エロンガタスPCC 7942では観察されない可能性がある。この事を確認するために、前述のように、接合によって、両方の微生物にpLybAL11-5(配列番号19)を挿入した。クロラムフェニコール(シネコシスチス種PCC 6803およびシネココッカス・エロンガタスPCC 7942に対して、それぞれ、25μg/mlおよび7.5μg/ml)を添加したBG11-A寒天(1.5%)上で増殖が観察された。
【０２０２】
クロラムフェニコールを添加した液体BG11-A上で、pLybAL11-5(配列番号19)を含むこれらの微生物の増殖を試験した。この活性は大変弱く、多重コピープラスミドで存在する場合のみ観察される可能性がある。これは大腸菌での場合であって、シアノバクテリアではそうではないと思われる。RSF1010は、比較的低コピーのプラスミドであり、大腸菌内で12コピーのみを有する(Frey, J., Bagdasarian, M. M. and Bagdasarian, M. 1992). Gene 113,101-106)。急速な分裂を行っている大腸菌は、多くてその染色体を2コピー有し、従って少なくとも6倍のコピー数増加を有する。このプラスミドに関するシアノバクテリアにおける同等のコピー数は同様である。シネコシスチス種PCC 6803およびシネココッカス・エロンガタスPCC 7942の、それぞれ10〜12および16の染色体コピー数は類似している(Labarre, J., Chauvat, F. and Thuriaux, P. 1989. J Bacteriol 171, 3449-57)。上記の結果は、シアノバクテリアのasf遺伝子内のプロモーターの存在を示唆している。
【０２０３】
図10は、asf遺伝子内のプロモーター(単数または複数)の可能な位置を示している。転写開始領域は、Curtis, S. E. [1994. The transcription apparatus and the regulation of transcription initiation. In The Molecular Biology of Cyanobacteria. Bryant, D. A. (ed). Kluwer Academic Publishers pp. 613-699] に記載されている。翻訳開始領域は、Sazuka, T. and Ohara, O. (1996. DNA Research 3, 225-232)によって定義されている。
【０２０４】
既知のSPS酵素に対するアラインメントおよびただ2コドン上流の終止コドンの存在に基づいて、asf遺伝子の翻訳開始はGTG開始コドンで開始されると予想される。ATG開始コドンが最も一般的とはいえ、GTGおよびTTGはあまり一般的ではないがまれではない。アデニンヌクレオチドが、好ましくは開始コドンの第1ヌクレオチド9〜12bp離れた16S rRNAの3'末端に相補的な典型的な大腸菌様シャイン・ダルガノ配列(GGAGまたはGAGG)もまた、少し長めのスペースではあるが存在する。この配列は、SazukaおよびOharaによって研究された遺伝子の約半分において見出されている。あまり最適ではないスペースはまれではないが、多くの場合発現のレベル低下をもたらす。シャイン・ダルガノ配列の上流であってMfeI部位の下流には、プロモーターを組み込むためには配列が少なすぎる。部分プロモーターが組み込まれることは可能ではあるが、プロモーターの残りは3つのプラスミド(pLybAL11-5(配列番号19);pLybAL13f(配列番号51);およびpLybAL13r(配列番号52))のすべてのベクター配列により産生されなけらばならず、それはありそうもない。
【０２０５】
従って、プロモーター活性はasf遺伝子内に位置すると考えられる。プロモーターがasf遺伝子内にあるとすれば、1つの可能な位置がasfのSPPドメインの前である。これは、シネコシスチス種PCC 6803からのものと同様な四次構造であるシネココッカス・エロンガタスPCC 7942のスクロース生合成酵素を与える。各微生物は、SPPと翻訳的に融合されたSPSドメインまたはSPP様ドメインおよび、互いに相互作用できる(できない)別個のSPPの2つのタンパク質を有すると考えられる。
【０２０６】
第1に、asfのSPPドメインが別々に翻訳されうるかどうか決定した。図10および表1に示すように、シャイン・ダルガノ配列に先行するSPPドメインのすぐ上流のTTG開始コドンが存在する。
【表１】
2015180227.tif 000003
【０２０７】
開始コドンの周囲の領域は、天然開始コドンとほぼ同様に、SazukaおよびOharaによって決定された72シアノバクテリア遺伝子のコンセンサスと一致する。プロモーターが大腸菌内で活性であると考えられることから、大腸菌プロモーターに関して確立されたルールに基づいてシアノバクテリアプロモーターを決定する一方で、典型的な-35および-10領域を調べた。図10に見られるように、2つの可能なプロモーターが同定された。asfの他の部分でのさらなるプロモーター(単数または複数)の可能性は残っている。
【実施例９】
【０２０８】
大腸菌からのプラスミドのシアノバクテリアへの導入
シアノバクテリアへのpMMB67EHベースプラスミドの導入のために接合を用いた。これらの微生物の形質転換のためのプロトコルは存在するが(Zang, X., Liu, B., Liu, S., Arunakumara, K. K. I. U. and Zhang, X. 2007. Journal of Microbiology 45, 241-245; Golden, S. S. and Sherman, L. A.1984. Journal of Bacteriology 158, 36-42)、天然形質転換を用いるシネコシスチス種PCC 6803およびシネココッカス・エロンガタスPCC 7942へこれらのプラスミドを挿入するこのようなアプローチは不成功に終わった。
【０２０９】
シアノバクテリアにおけるプラスミドの存在は確認した。オリゴヌクレオチド5'-AGACTACAATTGGGGCGTTTTCTGTGAG-3'(配列番号7)および5'-GGTGGTTGTGTTTGACAGCTTATC-3'(配列番号55)を用いて、asf/cat遺伝子組み合わせのPCRによってプラスミドの存在に関して接合伝達株を分析し、3.1kbの産物を得た。さらに、プラスミドを単離し、分析した。クロラムフェニコール(前述の濃度で)を添加したBG11-A中で増殖させた細胞培養物を遠心分離でペレット化し、TEに再懸濁し、熱処理し、Promega Wizard SV Plusミニプレップキットでミニプレップした。しかしながら収率が低いので、直接のプラスミド分析は困難である。それとして、単離されたDNAを大腸菌NEB5αに形質転換し、Promega Wizard SV Plusミニプレップキットを用いて再単離し、制限エンドヌクレアーゼ分析にかけた。
【実施例１０】
【０２１０】
スクロース生産アッセイおよび分析
スクロース蓄積に関して、pLybAL19またはpLybAL17を用いるシネココッカス形質転換をアッセイした(実施例7参照)。BioVision社(カリフォルニア州マウンテンビュー)のスクロースアッセイキットを用いてスクロースを用いて測定する。4時間の誘導期間(pLybAL17(配列番号46)に関する、50マイクロアインシュタインから180マイクロアインシュタインへの光の増強およびpLybAL19(配列番号48)に関する、26℃から39℃への温度の上昇)後にアッセイを行った。細胞内に存在するバックグラウンドのグルコースに関してデータを補正した。
【０２１１】
pLybAL19(配列番号48)で形質転換したシネココッカスは、乾燥バイオマス1mg当たり0.78ナノモルのスクロースを蓄積したという結果が得られた。pLybAL17(配列番号46)で形質転換したシネココッカスは、乾燥バイオマス1mg当たり0.95ナノモルのスクロースを蓄積したという結果も得られた。
【０２１２】
大腸菌、シネコシスチス種PCC 6803およびシネココッカス・エロンガタスPCC 7942におけるプラスミドベースのスクロース生産のさらなる分析を行った。細菌はスクロースを消費できるので、検出は困難な可能性がある。そのようなものとして、抑制条件下で細胞を増殖させ、誘導後直ちにアッセイした。pyrRプロモーターは、ウラシルを含む増殖により抑制され、ウラシルを欠く培地に移すことにより誘導されることができる。nirAプロモーターは、窒素源としてアンモニウムイオンを含む増殖により抑制され、窒素源として硝酸塩を含む培地に移すことにより誘導されることができる。psbAIIプロモーターは、微光から高照度へ移行させることができる。暗期プロモーターは、明から暗へ移行させることができる。そしてλPRプロモーターは、低温(25℃)から高温(39℃)へ移行させることができる。
【実施例１１】
【０２１３】
安定な染色体組み込みによる発現
スクロース生合成遺伝子の挿入は、10-16染色体の不完全分離をもたらす細胞増殖への悪影響を引き起こす恐れがある。抗生物質耐性マーカーに関する通常の選択を用いても、マーカーのさらなるコピーを有することは、抗生物質の存在下で生き残る細胞の能力に劇的な影響を与えない。従って、陰性表現型に直面する場合、抗生物質選択を用いても、染色体の完全分離を達成することは困難な恐れがある。
【０２１４】
大部分の生物において、upp遺伝子(ウラシルホスホリボシルトランスフェラーゼをコードする)の欠失は、さもなければ毒性の5-フルオロウラシルに対して耐性をもたらす。完全耐性を得るためには、upp遺伝子のすべてのコピーが欠失されなければならない。従って、シネコシスチス種PCC 6803(配列番号56)およびシネココッカス・エロンガタスPCC 7942(配列番号58)のupp遺伝子座への組み込みは、5-フルオロウラシル耐性をもたらし、陰性表現型の存在下であっても、完全分離の正の選択を可能にする。
【実施例１２】
【０２１５】
upp/カナマイシン耐性カセット
upp/カナマイシン耐性カセットを用いるゲノム操作のための一般的戦略の概略を図11に示す。遺伝子の欠失が示されているが、この戦略は、“置換”ステップにおいて挿入および変異に容易に改変できる。
【０２１６】
upp/カナマイシン耐性カセットを構築した。製造業者のプロトコルに従って、平滑末端クローニングベクターpCC1および大腸菌株EPI300を用いて、Epicentre Bioechnologies CopyControlクローニングキットでカセットを構築した。オリゴヌクレオチド5'-AAGAAGCAAGACAGCGTGTAGCTGCTCTGACTG-3'(配列番号60)および5'-TCCCGGGATTTGGTACCTTATTTTGTTCCAAACATGCGGTCACCCGCATC-3'(ヌクレオチド位置2〜7および12〜17に制限エンドヌクレアーゼ部位を有する)(配列番号61)を持ちいて、全細胞からバチルス・ズブチリス(Bacillus subtilis)168からのupp遺伝子を増幅して配列番号62の産物を得た。
【０２１７】
PCR産物をpCC1にクローニングし、Epicentre Biotechnologies社のプロトコルの記載に従って、クロラムフェニコールを添加したLB上でインサートを含むものを選択した。制限エンドヌクレアーゼ消化物によって、lacZに対して順方向をスクリーニングして、pLybAL7f(配列番号65)を得た。インサートの正確な配列を、候補3および8(pLybAL7-3およびpLybAL7-8)に関して、オリゴヌクレオチド5'-GTAATACGACTCACTATAGGGC-3'(配列番号63)および5'-CACACAGGAAACAGCTATGACCAT-3'(配列番号64)を用いるDNA配列決定によって確認した。
【０２１８】
LybradynベクターpLybAA1[そもそもはpACYC177に由来する(Rose,R.E.1988.Nucleic Acids Res.16、356]からのカナマイシン耐性マーカーを、オリゴヌクレオチド5'-GTCAGTGCACTGCTCTGCCAGTGTTACAACC-3'(ヌクレオチド位置5〜10でApaLI制限エンドヌクレアーゼ部位を有する)(配列番号66)および5'-CTCAGTGGCGCCAAAACTCACGTTAAGGGATTTTGGTC-3'(配列番号67)(ヌクレオチド位置7〜12でNarI制限エンドヌクレアーゼ部位を有する)を用いて増幅し、配列番号68の産物を得た。
【０２１９】
PCR産物をApaLIおよびNarIで消化し、同様に消化したpLybAL7fに連結して、pLybAL8f(配列番号69)を得た。50μg/mlネオマイシンを添加したLB上で適切なプラスミドを選択し、制限エンドヌクレアーゼ消化で試験した。
【実施例１３】
【０２２０】
UPP欠失
スクロース、トレハロース、グルコシルグリセロールおよびマンノシルフルクトースを含む糖の発現のための染色体インサートの分離を強いる1つの戦略は、染色体からのuppの欠失を利用して、5-フルオロウラシルへの耐性を導くことである。このことは、多くの微生物(大腸菌および枯草菌など)において確立されているが、シネコシスチス種PCC 6803およびシネココッカス・エロンガタスPCC 7942などのシアノバクテリアに関しては、以前は確立されていなかった。
【０２２１】
試験により、これらの微生物のそれぞれの増殖が、1μg/mlの5-フルオロウラシルにより完全に抑制されることが示された。シネコシスチス種PCC 6803の増殖は0.5μg/mlの5-フルオロウラシルによって完全に抑制され、0.1μg/mlの5-フルオロウラシルまで感受性を示した。
【０２２２】
オリゴヌクレオチドSspupp-F(配列番号96)およびSspupp-R(配列番号97)を用いて、両方のシネコシスチス種PCC 6803のupp遺伝子および周囲の配列を増幅した。オリゴヌクレオチドSeloupp-F(配列番号98)およびSeloupp-R(配列番号99)を用いて、シネココッカス・エロンガタスPCC 7942のupp遺伝子および周囲の配列を増幅した。次いで、PCR産物(シネコシスチス種PCC 6803のupp、配列番号100;シネココッカス・エロンガタスPCC 7942のupp、配列番号101)を、製造業者の使用説明書により、Epicentre Biotechnologies社(ウィスコンシン州マディソン)平滑クローニングベクターpCC1にクローニングした。
【０２２３】
PCR産物(配列番号100または配列番号101)は、pCC1にいずれかの方向で連結することができるが、lacプロモーターに対して順方向を選択し、それぞれ、pLybAL3f(配列番号102)(シネコシスチス種PCC 6803のuppを含む)およびpLybAL5f(配列番号103)(シネココッカス・エロンガタスPCC 7942のuppを含む)を得た。オリゴヌクレオチドT7long(配列番号104)およびM13rev(配列番号105)を用いてインサートを配列決定した。シネコシスチス種PCC 6803のuppのヌクレオチド配列は配列番号111で表され、ポリペプチド配列は配列番号112で表される。シネココッカス・エロンガタスPCC 7942のuppのヌクレオチド配列は配列番号113で表され、ポリペプチド配列は配列番号114で表される。
【０２２４】
pLybAL3f(配列番号102)からBlpIおよびApaLIフラグメントを除去し、T4 DNAポリメラーゼで平滑末端化し、次いでT4 DNAリガーゼで再環状化して、プラスミドpLybAL4f(配列番号106)を作成した。次いで、pLybAL4fをAvrIIおよびSgfIで消化することによって、シネコシスチス種PCC 6803のupp遺伝子の一部を欠失させ、T4 DNAポリメラーゼで平滑末端化し、次いでT4 DNAリガーゼで再環状化して、pLybAL9f(配列番号107)を作成した。シアノバクテリアDNAを含むSacI/SphIフラグメント(配列番号108)をpLybAL9f(配列番号107)から切除し、同様に消化したpARO180(配列は完全には知られていない; Parke, D. 1990. Construction of mobilizable vectors derived from plasmids RP4, pUC18 and pUC19. Gene 93:135-137; ATCC 77123)に連結し、pLybAL25を作成した。pLybAL5fからSapIおよびApaLIフラグメントを除去し、T4 DNAポリメラーゼで平滑末端化し、次いでT4 DNAリガーゼで再環状化して、プラスミドpLybAL6fb(配列番号109)を作成した。次いで、BssHIIおよびBsaIでpLybAL6fbを消化することによってシネココッカス・エロンガタスPCC 7942のupp遺伝子の一部を欠失させ、T4 DNAポリメラーゼで平滑末端化し、次いでT4 DNAリガーゼで再環状化してpLybAL10fb(配列番号110)を作成した。pLybAL10fbからシアノバクテリアDNAを含むSacI/SphIフラグメント(配列番号138)を切除し、同様に消化したpARO180に連結してpLybAL26を作成した。
【０２２５】
プラスミドpLybAL25およびpLybAL26を大腸菌S17-1(ATCC47055)に挿入した。プラスミドpLybAL25およびpLybAL26は、二親接合によってシネコシスチス種PCC 6803およびシネココッカス・エロンガタスPCC 7942に導入される予定である。これらのプラスミドはシアノバクテリア内で複製されないため、自殺ベクターとして機能し、染色体に乗り換え、染色体のコピーの1つにあるuppを欠失させるだろう。過剰の5-フルオロウラシルへの早期暴露による最適化されたプロトコルにより、細胞を致死させることなく分離の高速化が可能になると考えられる。
【実施例１４】
【０２２６】
スクロース分解酵素の修飾
asfで形質転換されたシアノバクテリアが、スクロース分解活性の調節によってスクロース生産が改善されるように、さらに操作される。
【０２２７】
本発明者らは、シネコシスチス種PCC 6803(ヌクレオチド配列配列番号70;ポリペプチド配列配列番号71)およびシネココッカス・エロンガタスPCC 7942(ヌクレオチド配列配列番号72;ポリペプチド配列配列番号73)の両方において、インベルターゼホモログをコードする遺伝子を同定した。シネコシスチス種PCC 6803はまた、スクラーゼフェレドキシン様タンパク質(ヌクレオチド配列配列番号74;ポリペプチド配列配列番号75)(Machray G.C. et al. 1994. FEBS Lett 354, 123-127)をコードする。
【０２２８】
これらの遺伝子は、図11に示すマーカーレス欠失プロトコルを用いて欠失される。
【実施例１５】
【０２２９】
スクロース分解酵素の修飾
asfで形質転換されたシアノバクテリアが、細胞からのスクロース分泌を促進するようにさらに操作される。
【０２３０】
高塩環境から低塩環境へ移行するときに一部の微生物によって浸透圧保護剤が処理されるのと同様に、低い浸透圧環境においては、スクロースは細胞から自動的に削除される可能性がある(Schleyer, M., Schmidt, R. and Bakker, E. P. 1993. Arch Microbiol 160, 424-43; Koo, S. P., Higgins, C. F. and Booth, I. R. 1991. J Gen Microbiol 137, 2617-2625; Lamark, T., Styrvold, O. B. and Strgim, A. R. 1992. FEMS Microbiol. Lett 96, 149-154)。シアノバクテリアの操作によってこのようなプロセスを促進させることができる。
【０２３１】
asfで形質転換されたシアノバクテリアが、スクロース透過酵素、例えば大腸菌およびサルモネラによって用いられているスクロース透過酵素または特定のシアノバクテリアの窒素固定包嚢へのスクロースの輸送におけるスクロース透過酵素を発現するようにさらに操作される(Jahreis K. et al. 2002. J Bacteriol 184, 5307-5316; Cumino, A. C. 2007. Plant Physiol 143, 1385-97)。これらの遺伝子をクローニングし、前述の技術に従ってシアノバクテリアを形質転換する。
【実施例１６】
【０２３２】
ポリンで形質転換したシアノバクテリアによるスクロース分泌
シネコシスチス種PCC 6803およびシネココッカス・エロンガタスPCC 7942からのスクロース分泌は、スクロースポリンでの形質転換によって促進させることができる。
【０２３３】
エンテロバクター・サカザキ(Enterobacter sakazakii)(ATCC BAA-894)からのスクロースポリンをコードする遺伝子(scrY)を、シネコシスチス種PCC 6803およびシネココッカス・エロンガタスPCC 7942における発現のためにクローニングした。この遺伝子の機能は、その配列およびその近傍の配列から推測されている。エンテロバクター・サカザキscrYは、オリゴヌクレオチドEsscrYBamHI-F(配列番号88)およびEsscrYSacI-R(配列番号89)を用いるPCRによって染色体DNAから増幅した。PCR産物(配列番号90)をBamHIおよびSacIで消化し、同様に消化したpLybAL19に連結し、NEB5αにクローニングし、pLybAL32(配列番号91)を作成した。次いで、オリゴヌクレオチドEsscrYmidseq-F(配列番号92)およびEsscrYmidseq-R(配列番号93)を用いてscrY遺伝子(核酸配列番号94;ポリペプチド配列、配列番号95)を配列決定した。宿主に導入されたとき、この構築物は、遺伝子scrYおよび温度誘導性プロモーターの調節下に有るasfの同時発現を可能にする。このプラスミドは、三親接合によって(前述のように)シネコシスチス種PCC 6803に導入された。スクロース分泌における有効性に関して、形質転換されたシネコシスチス種PCC 6803が試験される。シネココッカス・エロンガタスPCC 7942の同様な形質転換および試験が次に行われる。
【実施例１７】
【０２３４】
トレハロース蓄積シアノバクテリアの作成
大腸菌からのトレハロースリン酸シンターゼおよびトレハロースリン酸ホスファターゼをコードするトレハロース生合成遺伝子(それぞれotsAおよびotsB)は、2遺伝子オペロン、otsBA(配列番号115)において見出される。オリゴヌクレオチドEcotsBA-F(配列番号116)およびEcotsBA-R(配列番号117)を用いる大腸菌K12ゲノムDNAのPCR増幅によってこのオペロンをクローニングした。このPCR産物をAflIIおよびNheIで消化し、pLybAL19(配列番号48)にクローニングし、asf遺伝子の大部分を置換した。新規プラスミド、pLybAL23(配列番号118)は、温度誘導性λPRプロモーターの調節下に有るトレハロース生合成遺伝子を含んでいる。オリゴヌクレオチドEcotsBAmidseq-F(配列番号119)およびEcotsBAmidseq-R(配列番号120)を用いてこの遺伝子を配列決定し、その完全性を確認した。次いで、AflII(T4 DNAポリメラーゼで平滑末端化した)/otsBAオペロンを含むpLybAL23のNheIフラグメントをpLybAL15、pLybAL17、pLybAL21およびpLybAL22に連結し、SacI(T4 DNAポリメラーゼで平滑末端化した)およびNheIで消化し、それぞれpLybAL28(配列番号121)、pLybAL29(配列番号122)、pLybAL30(配列番号123)、およびpLybAL31(配列番号124)を作成することによって、otsBAオペロンの発現をpyrR、psbAII、dnaKおよびkiaAプロモーターの調節下においた(前述のように)。
【０２３５】
プラスミドpLybAL28(配列番号121)、pLybAL29(配列番号122)、pLybAL30(配列番号123)およびpLybAL31(配列番号124)のそれぞれを、三親接合(前述のように)によってシネコシスチス種PCC 6803に挿入した。
【０２３６】
それぞれpLybAL36(配列番号125)およびpLybAL37(配列番号126)を作成することにより、他のプロモーターに関して記載したもの同様にして、pLybAL23からのotsBAオペロンの発現を、pLybAL16およびpLybAL18におけるシネコシスチス種PCC 6803およびシネココッカス・エロンガタスPCC 7942nirAプロモーター(前述のように)の調節下においた。
【実施例１８】
【０２３７】
トレハロースアッセイ
バイオマスを、必要に応じて遠心分離により培養液を分離し、0.2ミクロンフィルターを用いる濾過により清澄化した培養液から残留バイオマスを除去した。減圧下で蒸発させることにより培養液を濃縮して残渣を得た。濃縮した培養液を脱イオン水1mlに溶解し、次いで、トレハロースアッセイにおいて溶液10マイクロリットルをサンプリングした。遠心分離によって回収したバイオマスを計量皿に移し、100℃に加熱して残った水分を除去した。乾燥バイオマスの重さを量り、次いで試料100mgを脱イオン水1mlに溶解した。次いでこの混合物を粉砕し、固形物を遠心分離で除去した。清澄化した上清試料10マイクロリットルを脱イオン水で100倍に希釈し、希釈サンプル10マイクロリットルをトレハロースに関して試験した。
【０２３８】
トレハロースアッセイには、Biovision社から入手可能な市販のスクロースアッセイキットの改変手順を用いた。標準プロトコルの改変は、キットに付属しているインベルターゼ酵素溶液のためのトレハラーゼを置き換えることであった。このキットは、トレハロースをトレハラーゼで加水分解してグルコースを放出させることを含む。グルコースはグルコースオキシダーゼで酸化されて過酸化水素を生じ、これは呈色指示薬の存在下でペルオキシダーゼの作用によって検出される。570nmにおけるその特性吸収によって呈色指示薬を定量的に測定し、もとから試料中に存在したグルコースの濃度を得る。
【０２３９】
Gutierrez C, Ardourel M, Bremer E, Middendorf A, Boos W, Ehmann U.Mol Gen Genet. 1989 Jun;217(2-3):347-54 の記載と同様な方法に従って、プラスミドに操作し、大腸菌宿主を形質転換した組換え大腸菌treA遺伝子からトレハラーゼ(トレハラーゼポリペプチド配列番号135をコードするtreA核酸配列番号134)を製造した。treAによりコードされるペリプラズムのトレハラーゼを大腸菌K12からクローニングした。treA PCR産物(配列番号127)をAflII/XbaIで消化し、次いで同様に消化したpLybCB6(強力な大腸菌trpプロモーターの構成的バージョンを含む登録商標プラスミド)に連結し、pLybAL24(配列番号130)を作成した。オリゴヌクレオチドEctreAmidseq-FおよびEctreAmidseq-Rで配列決定することによりインサートの完全性を分析した。
【０２４０】
トレハラーゼのC末端His6タグ付きバージョンを構築した。オリゴヌクレオチドEctreA-F2(配列番号131)およびEctreA-R2(配列番号132)を用いるPCRで遺伝子を増幅した。次いでPCR産物(配列番号136)をAflII/XbaIで消化し、次いで同様に消化したpLybAL24に連結してpLybAL33(配列番号133)を作成した。
【０２４１】
ペリプラズムのトレハラーゼの強力な構成発現は細胞に有害であり、37℃で強い増殖欠損を引き起こす。これは、30℃で細胞を増殖させることにより顕著に軽減させることができる。
【０２４２】
カナマイシンを含む2xYT培地中で増殖させた大腸菌BW25113内で、プラスミドpLYBAL24(配列番号130)上のタンパク質を発現させた。ペリプラズムへのタンパク質の輸送を可能にするシグナルペプチドを含むタンパク質を、Trpプロモーターを用いて構成的に産生させた。発酵およびバイオマスの収穫後、洗浄し、再懸濁した細胞ペレットを2%v/vジクロロメタン/50mMトリス緩衝液(pH8)で処理することによる選択的ペリプラズム放出によって酵素を精製した。遠心分離によって細胞の破片から溶解物を分離し、10,000ダルトンの膜を備えたAmicon社のウルトラフィルターを用いる濃縮によってさらに処理した。濃縮された溶解物をアッセイに直接に用いることもでき、酵素(配列番号137)のC末端に操作された6Xポリヒスチジンタグを用いる金属イオンアフィニティークロマトグラフィーによって酵素をさらに精製することもできる。
【実施例１９】
【０２４３】
トレハロースの固相生産
15cm x 15cmを有する増殖表面として使用される布層(DuPont社Sontara)に、培地/水分リザーバー(Foamex社Aquazone)として使用される担体フォームで構成される、固体複合布で覆われる親水性フォームを結合させた。70%エタノール水溶液に浸すことにより複合材料を滅菌し、次いで複合材料の頂部に溶液を供給するために垂直にされた垂直バイオリアクターにつるした。重力によって溶液を増殖複合材料表面に浸透させた。0.2ml/分の流速で滅菌脱イオン水を1リットル通過させることによって滅菌増殖表面から残留エタノールを除去した。0.2ml/分で、複合材料を通して10マイクログラム/mlのクロラムフェニコールを含むBG11A増殖培地0.5リットルを流すことによって、増殖表面を培地で平衡化した。
【０２４４】
平衡化した滅菌増殖表面に、プラスミドpLYBAL23によって形質転換したシネコシスチス種PCC 6803の4日間前培養物10mlを表面に注ぐことにより接種した。30分間のインキュベーション後に垂直位置にリアクターを向け、発酵を開始させた。白色LEDアレイからの80マイクロアインシュタインの光でリアクターを照射した。バイオリアクターに取り付けられた抵抗加熱装置によって温度を28℃に維持した。リアクターには、0.2L/分で0.2ミクロンのろ過空気で連続的にパージし、増殖複合材料のフォーム層を通して、6時間毎に30分間0.2ml/分の速度でポンプおよび重力浸透によって新鮮培地を供給した。リアクターを連続的に4〜7日間運転し、その間に、複合材料の増殖表面は、シアノバクテリアの密集した芝生で覆われた。最初の培養期間後にバイオリアクターの温度を40℃に上げ、この温度にさらに24時間維持した。高温期間中、使用済の培養液を回収し、トレハロース測定のために処理した。発酵運転の完了時に、トレハロースアッセイのために処理することができる脱イオン水で増殖表面をすすぐことによりバイオマスを回収した。
【０２４５】
固体表面に増殖するバイオマス中に生産され保持されるトレハロースの量は、温度誘導後にバイオリアクターから回収されるバイオマス全乾燥重量の最大2.5重量%までであった。温度誘導後の培地から、乾燥バイオマス相当量の0.8重量%のトレハロースを回収した。
【実施例２０】
【０２４６】
トレハロース生産液相
Bioflowリアクター中で、10マイクログラム/mlの濃度までクロラムフェニコールを添加した滅菌BG11A培地1リットルを調製した。次いで、プラスミドpLYBAL23で形質転換したシネコシスチス種PCC 6803の4日間前培養物を5容量%リアクターに接種した。リアクターを28℃、300RPM、0.2L/分の0.2ミクロンろ過空気パージで運転し、蛍光電球アレイを用いて80マイクロアインシュタインの光で照射した。培養を4〜7日間維持し、次いで試料200mlを取り出し、処理およびトレハロースアッセイを行った。次いで発酵温度を24時間40℃に上げた。次いで試料200mlをバイオリアクターから取り出し、処理およびトレハロースアッセイを行った。
【０２４７】
温度誘導後、乾燥バイオマスは最大3重量%までのトレハロースを産生したが、使用済の培養液は、バイオマスに対して0.3重量%トレハロース相当量を含んでいた。
【０２４８】
引用文献
本願においては、すべての公報、特許、特許出願および他の引用文献は、あたかも個別の公報、特許、特許出願または他の引用文献が、個別具体的に示されて参照によりその全体が組み込まれるのと同じ様に、その全体が参照により本願に組み込まれる。本願における引用文献の引用は、これが本発明の先行技術であるという承認ではない。
【０２４９】
SEQUENCE LISTING
<110>  Proterro, Inc.
<120>  TRANSGENIC PHOTOSYNTHETIC MICROORGANISMS AND PHOTOBIOREACTOR
<130>  X1R-1460
<140>  PCT/US2009/030162
<141>  2009-01-05
<150>  US 61/018798
<151>  2008-01-03
<150>  US 61/085797
<151>  2008-08-01
<160>  138   
<170>  PatentIn version 3.5
<210>  1
<211>  2204
<212>  DNA
<213>  Synechococcus PCC7942
<400>  1
agactacaat tggggcgttt tctgtgaggc tgactagcgc gtggcagctc aaaatctcta       60
cattctgcac attcagaccc atggtctgct gcgagggcag aacttggaac tggggcgaga      120
tgccgacacc ggcgggcaga ccaagtacgt cttagaactg gctcaagccc aagctaaatc      180
cccacaagtc caacaagtcg acatcatcac ccgccaaatc accgaccccc gcgtcagtgt      240
tggttacagt caggcgatcg aaccctttgc gcccaaaggt cggattgtcc gtttgccttt      300
tggccccaaa cgctacctcc gtaaagagct gctttggccc catctctaca cctttgcgga      360
tgcaattctc caatatctgg ctcagcaaaa gcgcaccccg acttggattc aggcccacta      420
tgctgatgct ggccaagtgg gatcactgct gagtcgctgg ttgaatgtac cgctaatttt      480
cacagggcat tctctggggc ggatcaagct aaaaaagctg ttggagcaag actggccgct      540
tgaggaaatt gaagcgcaat tcaatattca acagcgaatt gatgcggagg agatgacgct      600
cactcatgct gactggattg tcgccagcac tcagcaggaa gtggaggagc aataccgcgt      660
ttacgatcgc tacaacccag agcgcaagct tgtcattcca ccgggtgtcg ataccgatcg      720
cttcaggttt cagcccttgg gcgatcgcgg tgttgttctc caacaggaac tgagccgctt      780
tctgcgcgac ccagaaaaac ctcaaattct ctgcctctgt cgccccgcac ctcgcaaaaa      840
tgtaccggcg ctggtgcgag cctttggcga acatccttgg ctgcgcaaaa aagccaacct      900
tgtcttagta ctgggcagcc gccaagacat caaccagatg gatcgcggca gtcggcaggt      960
gttccaagag attttccatc tggtcgatcg ctacgacctc tacggcagcg tcgcctatcc     1020
caaacagcat caggctgatg atgtgccgga gttctatcgc ctagcggctc attccggcgg     1080
ggtattcgtc aatccggcgc tgaccgaacc ttttggtttg acaattttgg aggcaggaag     1140
ctgcggcgtg ccggtggtgg caacccatga tggcggcccc caggaaattc tcaaacactg     1200
tgatttcggc actttagttg atgtcagccg acccgctaat atcgcgactg cactcgccac     1260
cctgctgagc gatcgcgatc tttggcagtg ctatcaccgc aatggcattg aaaaagttcc     1320
cgcccattac agctgggatc aacatgtcaa taccctgttt gagcgcatgg aaacggtggc     1380
tttgcctcgt cgtcgtgctg tcagtttcgt acggagtcgc aaacgcttga ttgatgccaa     1440
acgccttgtc gttagtgaca tcgacaacac actgttgggc gatcgtcaag gactcgagaa     1500
tttaatgacc tatctcgatc agtatcgcga tcattttgcc tttggaattg ccacggggcg     1560
tcgcctagac tctgcccaag aagtcttgaa agagtggggc gttccttcgc caaacttctg     1620
ggtgacttcc gtcggcagcg agattcacta tggcaccgat gctgaaccgg atatcagctg     1680
ggaaaagcat atcaatcgca actggaatcc tcagcgaatt cgggcagtaa tggcacaact     1740
accctttctt gaactgcagc cggaagagga tcaaacaccc ttcaaagtca gcttctttgt     1800
ccgcgatcgc cacgagactg tgctgcgaga agtacggcaa catcttcgcc gccatcgcct     1860
gcggctgaag tcaatctatt cccatcagga gtttcttgac attctgccgc tagctgcctc     1920
gaaaggggat gcgattcgcc acctctcact ccgctggcgg attcctcttg agaacatttt     1980
ggtggcaggc gattctggta acgatgagga aatgctcaag ggccataatc tcggcgttgt     2040
agttggcaat tactcaccgg aattggagcc actgcgcagc tacgagcgcg tctattttgc     2100
tgagggccac tatgctaatg gcattctgga agccttaaaa cactatcgct tttttgaggc     2160
gatcgcttaa ccttttcaga atgagacgtt gatcggcacg taag                      2204
<210>  2
<211>  709
<212>  PRT
<213>  Synechococcus PCC7942
<400>  2
Met Ala Ala Gln Asn Leu Tyr Ile Leu His Ile Gln Thr His Gly Leu 
1               5                   10                  15      
Leu Arg Gly Gln Asn Leu Glu Leu Gly Arg Asp Ala Asp Thr Gly Gly 
20                  25                  30          
Gln Thr Lys Tyr Val Leu Glu Leu Ala Gln Ala Gln Ala Lys Ser Pro 
35                  40                  45              
Gln Val Gln Gln Val Asp Ile Ile Thr Arg Gln Ile Thr Asp Pro Arg 
50                  55                  60                  
Val Ser Val Gly Tyr Ser Gln Ala Ile Glu Pro Phe Ala Pro Lys Gly 
65                  70                  75                  80  
Arg Ile Val Arg Leu Pro Phe Gly Pro Lys Arg Tyr Leu Arg Lys Glu 
85                  90                  95      
Leu Leu Trp Pro His Leu Tyr Thr Phe Ala Asp Ala Ile Leu Gln Tyr 
100                 105                 110         
Leu Ala Gln Gln Lys Arg Thr Pro Thr Trp Ile Gln Ala His Tyr Ala 
115                 120                 125             
Asp Ala Gly Gln Val Gly Ser Leu Leu Ser Arg Trp Leu Asn Val Pro 
130                 135                 140                 
Leu Ile Phe Thr Gly His Ser Leu Gly Arg Ile Lys Leu Lys Lys Leu 
145                 150                 155                 160 
Leu Glu Gln Asp Trp Pro Leu Glu Glu Ile Glu Ala Gln Phe Asn Ile 
165                 170                 175     
Gln Gln Arg Ile Asp Ala Glu Glu Met Thr Leu Thr His Ala Asp Trp 
180                 185                 190         
Ile Val Ala Ser Thr Gln Gln Glu Val Glu Glu Gln Tyr Arg Val Tyr 
195                 200                 205             
Asp Arg Tyr Asn Pro Glu Arg Lys Leu Val Ile Pro Pro Gly Val Asp 
210                 215                 220                 
Thr Asp Arg Phe Arg Phe Gln Pro Leu Gly Asp Arg Gly Val Val Leu 
225                 230                 235                 240 
Gln Gln Glu Leu Ser Arg Phe Leu Arg Asp Pro Glu Lys Pro Gln Ile 
245                 250                 255     
Leu Cys Leu Cys Arg Pro Ala Pro Arg Lys Asn Val Pro Ala Leu Val 
260                 265                 270         
Arg Ala Phe Gly Glu His Pro Trp Leu Arg Lys Lys Ala Asn Leu Val 
275                 280                 285             
Leu Val Leu Gly Ser Arg Gln Asp Ile Asn Gln Met Asp Arg Gly Ser 
290                 295                 300                 
Arg Gln Val Phe Gln Glu Ile Phe His Leu Val Asp Arg Tyr Asp Leu 
305                 310                 315                 320 
Tyr Gly Ser Val Ala Tyr Pro Lys Gln His Gln Ala Asp Asp Val Pro 
325                 330                 335     
Glu Phe Tyr Arg Leu Ala Ala His Ser Gly Gly Val Phe Val Asn Pro 
340                 345                 350         
Ala Leu Thr Glu Pro Phe Gly Leu Thr Ile Leu Glu Ala Gly Ser Cys 
355                 360                 365             
Gly Val Pro Val Val Ala Thr His Asp Gly Gly Pro Gln Glu Ile Leu 
370                 375                 380                 
Lys His Cys Asp Phe Gly Thr Leu Val Asp Val Ser Arg Pro Ala Asn 
385                 390                 395                 400 
Ile Ala Thr Ala Leu Ala Thr Leu Leu Ser Asp Arg Asp Leu Trp Gln 
405                 410                 415     
Cys Tyr His Arg Asn Gly Ile Glu Lys Val Pro Ala His Tyr Ser Trp 
420                 425                 430         
Asp Gln His Val Asn Thr Leu Phe Glu Arg Met Glu Thr Val Ala Leu 
435                 440                 445             
Pro Arg Arg Arg Ala Val Ser Phe Val Arg Ser Arg Lys Arg Leu Ile 
450                 455                 460                 
Asp Ala Lys Arg Leu Val Val Ser Asp Ile Asp Asn Thr Leu Leu Gly 
465                 470                 475                 480 
Asp Arg Gln Gly Leu Glu Asn Leu Met Thr Tyr Leu Asp Gln Tyr Arg 
485                 490                 495     
Asp His Phe Ala Phe Gly Ile Ala Thr Gly Arg Arg Leu Asp Ser Ala 
500                 505                 510         
Gln Glu Val Leu Lys Glu Trp Gly Val Pro Ser Pro Asn Phe Trp Val 
515                 520                 525             
Thr Ser Val Gly Ser Glu Ile His Tyr Gly Thr Asp Ala Glu Pro Asp 
530                 535                 540                 
Ile Ser Trp Glu Lys His Ile Asn Arg Asn Trp Asn Pro Gln Arg Ile 
545                 550                 555                 560 
Arg Ala Val Met Ala Gln Leu Pro Phe Leu Glu Leu Gln Pro Glu Glu 
565                 570                 575     
Asp Gln Thr Pro Phe Lys Val Ser Phe Phe Val Arg Asp Arg His Glu 
580                 585                 590         
Thr Val Leu Arg Glu Val Arg Gln His Leu Arg Arg His Arg Leu Arg 
595                 600                 605             
Leu Lys Ser Ile Tyr Ser His Gln Glu Phe Leu Asp Ile Leu Pro Leu 
610                 615                 620                 
Ala Ala Ser Lys Gly Asp Ala Ile Arg His Leu Ser Leu Arg Trp Arg 
625                 630                 635                 640 
Ile Pro Leu Glu Asn Ile Leu Val Ala Gly Asp Ser Gly Asn Asp Glu 
645                 650                 655     
Glu Met Leu Lys Gly His Asn Leu Gly Val Val Val Gly Asn Tyr Ser 
660                 665                 670         
Pro Glu Leu Glu Pro Leu Arg Ser Tyr Glu Arg Val Tyr Phe Ala Glu 
675                 680                 685             
Gly His Tyr Ala Asn Gly Ile Leu Glu Ala Leu Lys His Tyr Arg Phe 
690                 695                 700                 
Phe Glu Ala Ile Ala 
705                 
<210>  3
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<212>  DNA
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gaagccatca acgctctgac ccaacagact tcagtgctga aacgtagtga tttaaagcgg     1380
cggcggactt tgtactataa cggtgccctg gttactagtt tggaccaaaa tttactgggg     1440
gcattacagg ggggattacc gggcgatcgc cagacgttgg acgaattact ggaagtgctg     1500
tatcaacatc gaaaaaatgt cggcttttgc attgccactg ggagaagatt ggattcggtg     1560
ctgaaaattt tgcgggagta tcgcattccc caaccggata tgttgatcac cagcatgggc     1620
acggaaattt attcttcccc ggatttgatc cccgaccaga gttggcgcaa tcacattgat     1680
tatttgtgga accgtaacgc cattgtgcgt attttggggg aattacccgg tttagccctc     1740
caacccaagg aagaactgag cgcctataaa attagctatt tctacgatgc ggcgatcgcc     1800
cctaacctag aagaaattcg gcaactgttg cataaagggg aacaaaccgt aaataccatc     1860
atttcctttg gtcaattttt ggatattctg cccatccgag cttccaaagg ctatgctgtg     1920
cgttggttga gccaacagtg gaatattccc ctggagcacg ttttcaccgc cggaggatcg     1980
ggagccgacg aagatatgat gcggggtaac accctttccg tcgtcgtggc taaccgtcac     2040
catgaggaac tttctaatct aggggagatc gaaccgattt atttttccga aaaacgttac     2100
gccgccggta ttctggacgg tctggcccat taccgcttct ttgagttgtt agaccccgtt     2160
taa                                                                   2163
<210>  4
<211>  720
<212>  PRT
<213>  Synechocystis PCC6803
<400>  4
Met Ser Tyr Ser Ser Lys Tyr Ile Leu Leu Ile Ser Val His Gly Leu 
1               5                   10                  15      
Ile Arg Gly Glu Asn Leu Glu Leu Gly Arg Asp Ala Asp Thr Gly Gly 
20                  25                  30          
Gln Thr Lys Tyr Val Leu Glu Leu Ala Arg Ala Leu Val Lys Asn Pro 
35                  40                  45              
Gln Val Ala Arg Val Asp Leu Leu Thr Arg Leu Ile Lys Asp Pro Lys 
50                  55                  60                  
Val Asp Ala Asp Tyr Ala Gln Pro Arg Glu Leu Ile Gly Asp Arg Ala 
65                  70                  75                  80  
Gln Ile Val Arg Ile Glu Cys Gly Pro Glu Glu Tyr Ile Ala Lys Glu 
85                  90                  95      
Met Leu Trp Asp Tyr Leu Asp Asn Phe Ala Asp His Ala Leu Asp Tyr 
100                 105                 110         
Leu Lys Glu Gln Pro Glu Leu Pro Asp Val Ile His Ser His Tyr Ala 
115                 120                 125             
Asp Ala Gly Tyr Val Gly Thr Arg Leu Ser His Gln Leu Gly Ile Pro 
130                 135                 140                 
Leu Val His Thr Gly His Ser Leu Gly Arg Ser Lys Arg Thr Arg Leu 
145                 150                 155                 160 
Leu Leu Ser Gly Ile Lys Ala Asp Glu Ile Glu Ser Arg Tyr Asn Met 
165                 170                 175     
Ala Arg Arg Ile Asn Ala Glu Glu Glu Thr Leu Gly Ser Ala Ala Arg 
180                 185                 190         
Val Ile Thr Ser Thr His Gln Glu Ile Ala Glu Gln Tyr Ala Gln Tyr 
195                 200                 205             
Asp Tyr Tyr Gln Pro Asp Gln Met Leu Val Ile Pro Pro Gly Thr Asp 
210                 215                 220                 
Leu Glu Lys Phe Tyr Pro Pro Lys Gly Asn Glu Trp Glu Thr Pro Ile 
225                 230                 235                 240 
Val Gln Glu Leu Gln Arg Phe Leu Arg His Pro Arg Lys Pro Ile Ile 
245                 250                 255     
Leu Ala Leu Ser Arg Pro Asp Pro Arg Lys Asn Ile His Lys Leu Ile 
260                 265                 270         
Ala Ala Tyr Gly Gln Ser Pro Gln Leu Gln Ala Gln Ala Asn Leu Val 
275                 280                 285             
Ile Val Ala Gly Asn Arg Asp Asp Ile Thr Asp Leu Asp Gln Gly Pro 
290                 295                 300                 
Arg Glu Val Leu Thr Asp Leu Leu Leu Thr Ile Asp Arg Tyr Asp Leu 
305                 310                 315                 320 
Tyr Gly Lys Val Ala Tyr Pro Lys Gln Asn Gln Ala Glu Asp Val Tyr 
325                 330                 335     
Ala Leu Phe Arg Leu Thr Ala Leu Ser Gln Gly Val Phe Ile Asn Pro 
340                 345                 350         
Ala Leu Thr Glu Pro Phe Gly Leu Thr Leu Ile Glu Ala Ala Ala Cys 
355                 360                 365             
Gly Val Pro Ile Val Ala Thr Glu Asp Gly Gly Pro Val Asp Ile Ile 
370                 375                 380                 
Lys Asn Cys Gln Asn Gly Tyr Leu Ile Asn Pro Leu Asp Glu Val Asp 
385                 390                 395                 400 
Ile Ala Asp Lys Leu Leu Lys Val Leu Asn Asp Lys Gln Gln Trp Gln 
405                 410                 415     
Phe Leu Ser Glu Ser Gly Leu Glu Gly Val Lys Arg His Tyr Ser Trp 
420                 425                 430         
Pro Ser His Val Glu Ser Tyr Leu Glu Ala Ile Asn Ala Leu Thr Gln 
435                 440                 445             
Gln Thr Ser Val Leu Lys Arg Ser Asp Leu Lys Arg Arg Arg Thr Leu 
450                 455                 460                 
Tyr Tyr Asn Gly Ala Leu Val Thr Ser Leu Asp Gln Asn Leu Leu Gly 
465                 470                 475                 480 
Ala Leu Gln Gly Gly Leu Pro Gly Asp Arg Gln Thr Leu Asp Glu Leu 
485                 490                 495     
Leu Glu Val Leu Tyr Gln His Arg Lys Asn Val Gly Phe Cys Ile Ala 
500                 505                 510         
Thr Gly Arg Arg Leu Asp Ser Val Leu Lys Ile Leu Arg Glu Tyr Arg 
515                 520                 525             
Ile Pro Gln Pro Asp Met Leu Ile Thr Ser Met Gly Thr Glu Ile Tyr 
530                 535                 540                 
Ser Ser Pro Asp Leu Ile Pro Asp Gln Ser Trp Arg Asn His Ile Asp 
545                 550                 555                 560 
Tyr Leu Trp Asn Arg Asn Ala Ile Val Arg Ile Leu Gly Glu Leu Pro 
565                 570                 575     
Gly Leu Ala Leu Gln Pro Lys Glu Glu Leu Ser Ala Tyr Lys Ile Ser 
580                 585                 590         
Tyr Phe Tyr Asp Ala Ala Ile Ala Pro Asn Leu Glu Glu Ile Arg Gln 
595                 600                 605             
Leu Leu His Lys Gly Glu Gln Thr Val Asn Thr Ile Ile Ser Phe Gly 
610                 615                 620                 
Gln Phe Leu Asp Ile Leu Pro Ile Arg Ala Ser Lys Gly Tyr Ala Val 
625                 630                 635                 640 
Arg Trp Leu Ser Gln Gln Trp Asn Ile Pro Leu Glu His Val Phe Thr 
645                 650                 655     
Ala Gly Gly Ser Gly Ala Asp Glu Asp Met Met Arg Gly Asn Thr Leu 
660                 665                 670         
Ser Val Val Val Ala Asn Arg His His Glu Glu Leu Ser Asn Leu Gly 
675                 680                 685             
Glu Ile Glu Pro Ile Tyr Phe Ser Glu Lys Arg Tyr Ala Ala Gly Ile 
690                 695                 700                 
Leu Asp Gly Leu Ala His Tyr Arg Phe Phe Glu Leu Leu Asp Pro Val 
705                 710                 715                 720 
<210>  5
<211>  735
<212>  DNA
<213>  Synechocystis PCC6803
<400>  5
atgcgacagt tattgctaat ttctgacctg gacaatacct gggtcggaga tcaacaagcc       60
ctggaacatt tgcaagaata tctaggcgat cgccggggaa atttttattt ggcctatgcc      120
acggggcgtt cctaccattc cgcgagggag ttgcaaaaac aggtgggact catggaaccg      180
gactattggc tcaccgcggt ggggagtgaa atttaccatc cagaaggcct ggaccaacat      240
tgggctgatt acctctctga gcattggcaa cgggatatcc tccaggcgat cgccgatggt      300
tttgaggcct taaaacccca atctcccttg gaacaaaacc catggaaaat tagctatcat      360
ctcgatcccc aggcttgccc caccgtcatc gaccaattaa cggagatgtt gaaggaaacc      420
ggcatcccgg tgcaggtgat tttcagcagt ggcaaagatg tggatttatt gccccaacgg      480
agtaacaaag gtaacgccac ccaatatctg caacaacatt tagccatgga gccgtctcaa      540
accctggtgt gtggggactc cggcaatgat attggcttat ttgaaacttc cgctcggggt      600
gtcattgtcc gtaatgccca gccggaatta ttgcactggt atgaccaatg gggggattct      660
cgtcattatc gggcccaatc gagccatgct ggcgctatcc tagaggcgat cgcccatttc      720
gattttttga gctga                                                       735
<210>  6
<211>  244
<212>  PRT
<213>  Synechocystis PCC6803
<400>  6
Met Arg Gln Leu Leu Leu Ile Ser Asp Leu Asp Asn Thr Trp Val Gly 
1               5                   10                  15      
Asp Gln Gln Ala Leu Glu His Leu Gln Glu Tyr Leu Gly Asp Arg Arg 
20                  25                  30          
Gly Asn Phe Tyr Leu Ala Tyr Ala Thr Gly Arg Ser Tyr His Ser Ala 
35                  40                  45              
Arg Glu Leu Gln Lys Gln Val Gly Leu Met Glu Pro Asp Tyr Trp Leu 
50                  55                  60                  
Thr Ala Val Gly Ser Glu Ile Tyr His Pro Glu Gly Leu Asp Gln His 
65                  70                  75                  80  
Trp Ala Asp Tyr Leu Ser Glu His Trp Gln Arg Asp Ile Leu Gln Ala 
85                  90                  95      
Ile Ala Asp Gly Phe Glu Ala Leu Lys Pro Gln Ser Pro Leu Glu Gln 
100                 105                 110         
Asn Pro Trp Lys Ile Ser Tyr His Leu Asp Pro Gln Ala Cys Pro Thr 
115                 120                 125             
Val Ile Asp Gln Leu Thr Glu Met Leu Lys Glu Thr Gly Ile Pro Val 
130                 135                 140                 
Gln Val Ile Phe Ser Ser Gly Lys Asp Val Asp Leu Leu Pro Gln Arg 
145                 150                 155                 160 
Ser Asn Lys Gly Asn Ala Thr Gln Tyr Leu Gln Gln His Leu Ala Met 
165                 170                 175     
Glu Pro Ser Gln Thr Leu Val Cys Gly Asp Ser Gly Asn Asp Ile Gly 
180                 185                 190         
Leu Phe Glu Thr Ser Ala Arg Gly Val Ile Val Arg Asn Ala Gln Pro 
195                 200                 205             
Glu Leu Leu His Trp Tyr Asp Gln Trp Gly Asp Ser Arg His Tyr Arg 
210                 215                 220                 
Ala Gln Ser Ser His Ala Gly Ala Ile Leu Glu Ala Ile Ala His Phe 
225                 230                 235                 240 
Asp Phe Leu Ser 
<210>  7
<211>  28
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplificaiton of asf
<400>  7
agactacaat tggggcgttt tctgtgag                                          28
<210>  8
<211>  49
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplificaiton of asf
<400>  8
cttacgtgcc gatcaacgtc tcattctgaa aaggttaagc gatcgcctc                   49
<210>  9
<211>  39
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  Primer for amplifying cat gene from pBeloBAC11
<400>  9
ttatcgcgat cgtcaggagc taaggaagct aaaatggag                              39
<210>  10
<211>  29
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplificaiton of cat
<400>  10
cgaccaattc acgtgtttga cagcttatc                                         29
<210>  11
<211>  811
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  cat gene amplified from pBeloBAC11
<400>  11
ttatcgcgat cgtcaggagc taaggaagct aaaatggaga aaaaaatcac tggatatacc       60
accgttgata tatcccaatg gcatcgtaaa gaacattttg aggcatttca gtcagttgct      120
caatgtacct ataaccagac cgttcagctg gatattacgg cctttttaaa gaccgtaaag      180
aaaaataagc acaagtttta tccggccttt attcacattc ttgcccgcct gatgaatgct      240
catccggaat tccgtatggc aatgaaagac ggtgagctgg tgatatggga tagtgttcac      300
ccttgttaca ccgttttcca tgagcaaact gaaacgtttt catcgctctg gagtgaatac      360
cacgacgatt tccggcagtt tctacacata tattcgcaag atgtggcgtg ttacggtgaa      420
aacctggcct atttccctaa agggtttatt gagaatatgt ttttcgtctc agccaatccc      480
tgggtgagtt tcaccagttt tgatttaaac gtggccaata tggacaactt cttcgccccc      540
gttttcacca tgggcaaata ttatacgcaa ggcgacaagg tgctgatgcc gctggcgatt      600
caggttcatc atgccgtttg tgatggcttc catgtcggca gaatgcttaa tgaattacaa      660
cagtactgcg atgagtggca gggcggggcg taattttttt aaggcagtta ttggtgccct      720
taaacgcctg gttgctacgc ctgaataagt gataataagc ggatgaatgg cagaaattcg      780
atgataagct gtcaaacacg tgaattggtc g                                     811
<210>  12
<211>  35
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying cat gene bearing the promoter from 
pBeloBAC11
<400>  12
ttttggcgat cgtgagacgt tgatcggcac gtaag                                  35
<210>  13
<211>  29
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying cat gene bearing the promoter from 
pBeloBAC11
<400>  13
cgaccaattc acgtgtttga cagcttatc                                         29
<210>  14
<211>  901
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  cat gene bearing the promoter amplified from pBeloBAC11
<400>  14
ttttggcgat cgtgagacgt tgatcggcac gtaagaggtt ccaactttca ccataatgaa       60
ataagatcac taccgggcgt attttttgag ttatcgagat tttcaggagc taaggaagct      120
aaaatggaga aaaaaatcac tggatatacc accgttgata tatcccaatg gcatcgtaaa      180
gaacattttg aggcatttca gtcagttgct caatgtacct ataaccagac cgttcagctg      240
gatattacgg cctttttaaa gaccgtaaag aaaaataagc acaagtttta tccggccttt      300
attcacattc ttgcccgcct gatgaatgct catccggaat tccgtatggc aatgaaagac      360
ggtgagctgg tgatatggga tagtgttcac ccttgttaca ccgttttcca tgagcaaact      420
gaaacgtttt catcgctctg gagtgaatac cacgacgatt tccggcagtt tctacacata      480
tattcgcaag atgtggcgtg ttacggtgaa aacctggcct atttccctaa agggtttatt      540
gagaatatgt ttttcgtctc agccaatccc tgggtgagtt tcaccagttt tgatttaaac      600
gtggccaata tggacaactt cttcgccccc gttttcacca tgggcaaata ttatacgcaa      660
ggcgacaagg tgctgatgcc gctggcgatt caggttcatc atgccgtttg tgatggcttc      720
catgtcggca gaatgcttaa tgaattacaa cagtactgcg atgagtggca gggcggggcg      780
taattttttt aaggcagtta ttggtgccct taaacgcctg gttgctacgc ctgaataagt      840
gataataagc ggatgaatgg cagaaattcg atgataagct gtcaaacacg tgaattggtc      900
g                                                                      901
<210>  15
<211>  30
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for sequence verification of cat/asf
<400>  15
gcttctgcgt tctgatttaa tctgtatcag                                        30
<210>  16
<211>  27
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for sequence verification of cat/asf
<400>  16
tatcacttat tcaggcgtag caaccag                                           27
<210>  17
<211>  27
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for sequence verification of cat/asf
<400>  17
gtcgttagtg acatcgacaa cacactg                                           27
<210>  18
<211>  26
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for sequence verification of cat/asf
<400>  18
gatcgcgata ctgatcgaga taggtc                                            26
<210>  19
<211>  10577
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  Plasmid pLybAL11 containing ASF gene from Synechococcus elongatus
PCC 7942
<400>  19
tgcatgcctg caggtcgact ctagaggatc cccgggtacc gagctcgaat tggggcgttt       60
tctgtgaggc tgactagcgc gtggcagctc aaaatctcta cattctgcac attcagaccc      120
atggtctgct gcgagggcag aacttggaac tggggcgaga tgccgacacc ggcgggcaga      180
ccaagtacgt cttagaactg gctcaagccc aagctaaatc cccacaagtc caacaagtcg      240
acatcatcac ccgccaaatc accgaccccc gcgtcagtgt tggttacagt caggcgatcg      300
aaccctttgc gcccaaaggt cggattgtcc gtttgccttt tggccccaaa cgctacctcc      360
gtaaagagct gctttggccc catctctaca cctttgcgga tgcaattctc caatatctgg      420
ctcagcaaaa gcgcaccccg acttggattc aggcccacta tgctgatgct ggccaagtgg      480
gatcactgct gagtcgctgg ttgaatgtac cgctaatttt cacagggcat tctctggggc      540
ggatcaagct aaaaaagctg ttggagcaag actggccgct tgaggaaatt gaagcgcaat      600
tcaatattca acagcgaatt gatgcggagg agatgacgct cactcatgct gactggattg      660
tcgccagcac tcagcaggaa gtggaggagc aataccgcgt ttacgatcgc tacaacccag      720
agcgcaagct tgtcattcca ccgggtgtcg ataccgatcg cttcaggttt cagcccttgg      780
gcgatcgcgg tgttgttctc caacaggaac tgagccgctt tctgcgcgac ccagaaaaac      840
ctcaaattct ctgcctctgt cgccccgcac ctcgcaaaaa tgtaccggcg ctggtgcgag      900
cctttggcga acatccttgg ctgcgcaaaa aagccaacct tgtcttagta ctgggcagcc      960
gccaagacat caaccagatg gatcgcggca gtcggcaggt gttccaagag attttccatc     1020
tggtcgatcg ctacgacctc tacggcagcg tcgcctatcc caaacagcat caggctgatg     1080
atgtgccgga gttctatcgc ctagcggctc attccggcgg ggtattcgtc aatccggcgc     1140
tgaccgaacc ttttggtttg acaattttgg aggcaggaag ctgcggcgtg ccggtggtgg     1200
caacccatga tggcggcccc caggaaattc tcaaacactg tgatttcggc actttagttg     1260
atgtcagccg acccgctaat atcgcgactg cactcgccac cctgctgagc gatcgcgatc     1320
tttggcagtg ctatcaccgc aatggcattg aaaaagttcc cgcccattac agctgggatc     1380
aacatgtcaa taccctgttt gagcgcatgg aaacggtggc tttgcctcgt cgtcgtgctg     1440
tcagtttcgt acggagtcgc aaacgcttga ttgatgccaa acgccttgtc gttagtgaca     1500
tcgacaacac actgttgggc gatcgtcaag gactcgagaa tttaatgacc tatctcgatc     1560
agtatcgcga tcattttgcc tttggaattg ccacggggcg tcgcctagac tctgcccaag     1620
aagtcttgaa agagtggggc gttccttcgc caaacttctg ggtgacttcc gtcggcagcg     1680
agattcacta tggcaccgat gctgaaccgg atatcagctg ggaaaagcat atcaatcgca     1740
actggaatcc tcagcgaatt cgggcagtaa tggcacaact accctttctt gaactgcagc     1800
cggaagagga tcaaacaccc ttcaaagtca gcttctttgt ccgcgatcgc cacgagactg     1860
tgctgcgaga agtacggcaa catcttcgcc gccatcgcct gcggctgaag tcaatctatt     1920
cccatcagga gtttcttgac attctgccgc tagctgcctc gaaaggggat gcgattcgcc     1980
acctctcact ccgctggcgg attcctcttg agaacatttt ggtggcaggc gattctggta     2040
acgatgagga aatgctcaag ggccataatc tcggcgttgt agttggcaat tactcaccgg     2100
aattggagcc actgcgcagc tacgagcgcg tctattttgc tgagggccac tatgctaatg     2160
gcattctgga agccttaaaa cactatcgct tttttgaggc gatcgcttaa ccttttcaga     2220
atgagacgtt gatcggcacg taagcgtcag gagctaagga agctaaaatg gagaaaaaaa     2280
tcactggata taccaccgtt gatatatccc aatggcatcg taaagaacat tttgaggcat     2340
ttcagtcagt tgctcaatgt acctataacc agaccgttca gctggatatt acggcctttt     2400
taaagaccgt aaagaaaaat aagcacaagt tttatccggc ctttattcac attcttgccc     2460
gcctgatgaa tgctcatccg gaattccgta tggcaatgaa agacggtgag ctggtgatat     2520
gggatagtgt tcacccttgt tacaccgttt tccatgagca aactgaaacg ttttcatcgc     2580
tctggagtga ataccacgac gatttccggc agtttctaca catatattcg caagatgtgg     2640
cgtgttacgg tgaaaacctg gcctatttcc ctaaagggtt tattgagaat atgtttttcg     2700
tctcagccaa tccctgggtg agtttcacca gttttgattt aaacgtggcc aatatggaca     2760
acttcttcgc ccccgttttc accatgggca aatattatac gcaaggcgac aaggtgctga     2820
tgccgctggc gattcaggtt catcatgccg tttgtgatgg cttccatgtc ggcagaatgc     2880
ttaatgaatt acaacagtac tgcgatgagt ggcagggcgg ggcgtaattt ttttaaggca     2940
gttattggtg cccttaaacg cctggttgct acgcctgaat aagtgataat aagcggatga     3000
atggcagaaa ttcgatgata agctgtcaaa cacaaccacc atcaaacagg attttcgcct     3060
gctggggcaa accagcgtgg accgcttgct gcaactctct cagggccagg cggtgaaggg     3120
caatcagctg ttgcccgtct cactggtgaa aagaaaaacc accctggcgc ccaatacgca     3180
aaccgcctct ccccgcgcgt tggccgattc attaatgcag ctggcacgac aggtttcccg     3240
actggaaagc gggcagtgag cgcaacgcaa ttaatgtaag ttagcgcgaa ttgcaagctg     3300
gccgacgcgc tgggctacgt cttgctggcg ttcgggagca gaagagcata catctggaag     3360
caaagccagg aaagcggcct atggagctgt gcggcagcgc tcagtaggca atttttcaaa     3420
atattgttaa gccttttctg agcatggtat ttttcatggt attaccaatt agcaggaaaa     3480
taagccattg aatataaaag ataaaaatgt cttgtttaca atagagtggg gggggtcagc     3540
ctgccgcctt gggccgggtg atgtcgtact tgcccgccgc gaactcggtt accgtccagc     3600
ccagcgcgac cagctccggc aacgcctcgc gcacccgctt gcggcgcttg cgcatggtcg     3660
aaccactggc ctctgacggc cagacatagc cgcacaaggt atctatggaa gccttgccgg     3720
ttttgccggg gtcgatccag ccacacagcc gctggtgcag caggcgggcg gtttcgctgt     3780
ccagcgcccg cacctcgtcc atgctgatgc gcacatgctg gccgccaccc atgacggcct     3840
gcgcgatcaa ggggttcagg gccacgtaca ggcgcccgtc cgcctcgtcg ctggcgtact     3900
ccgacagcag ccgaaacccc tgccgcttgc ggccattctg ggcgatgatg gataccttcc     3960
aaaggcgctc gatgcagtcc tgtatgtgct tgagcgcccc accactatcg acctctgccc     4020
cgatttcctt tgccagcgcc cgatagctac ctttgaccac atggcattca gcggtgacgg     4080
cctcccactt gggttccagg aacagccgga gctgccgtcc gccttcggtc ttgggttccg     4140
ggccaagcac taggccatta ggcccagcca tggccaccag cccttgcagg atgcgcagat     4200
catcagcgcc cagcggctcc gggccgctga actcgatccg cttgccgtcg ccgtagtcat     4260
acgtcacgtc cagcttgctg cgcttgcgct cgccccgctt gagggcacgg aacaggccgg     4320
gggccagaca gtgcgccggg tcgtgccgga cgtggctgag gctgtgcttg ttcttaggct     4380
tcaccacggg gcaccccctt gctcttgcgc tgcctctcca gcacggcggg cttgagcacc     4440
ccgccgtcat gccgcctgaa ccaccgatca gcgaacggtg cgccatagtt ggccttgctc     4500
acaccgaagc ggacgaagaa ccggcgctgg tcgtcgtcca caccccattc ctcggcctcg     4560
gcgctggtca tgctcgacag gtaggactgc cagcggatgt tatcgaccag taccgagctg     4620
ccccggctgg cctgctgctg gtcgcctgcg cccatcatgg ccgcgccctt gctggcatgg     4680
tgcaggaaca cgatagagca cccggtatcg gcggcgatgg cctccatgcg accgatgacc     4740
tgggccatgg ggccgctggc gttttcttcc tcgatgtgga accggcgcag cgtgtccagc     4800
accatcaggc ggcggccctc ggcggcgcgc ttgaggccgt cgaaccactc cggggccatg     4860
atgttgggca ggctgccgat cagcggctgg atcagcaggc cgtcagccac ggcttgccgt     4920
tcctcggcgc tgaggtgcgc cccaagggcg tgcaggcggt gatgaatggc ggtgggcggg     4980
tcttcggcgg gcaggtagat caccgggccg gtgggcagtt cgcccacctc cagcagatcc     5040
ggcccgcctg caatctgtgc ggccagttgc agggccagca tggatttacc ggcaccaccg     5100
ggcgacacca gcgccccgac cgtaccggcc accatgttgg gcaaaacgta gtccagcggt     5160
ggcggcgctg ctgcgaacgc ctccagaata ttgataggct tatgggtagc cattgattgc     5220
ctcctttgca ggcagttggt ggttaggcgc tggcggggtc actacccccg ccctgcgccg     5280
ctctgagttc ttccaggcac tcgcgcagcg cctcgtattc gtcgtcggtc agccagaact     5340
tgcgctgacg catccctttg gccttcatgc gctcggcata tcgcgcttgg cgtacagcgt     5400
cagggctggc cagcaggtcg ccggtctgct tgtccttttg gtctttcata tcagtcaccg     5460
agaaacttgc cggggccgaa aggcttgtct tcgcggaaca aggacaaggt gcagccgtca     5520
aggttaaggc tggccatatc agcgactgaa aagcggccag cctcggcctt gtttgacgta     5580
taaccaaagc caccgggcaa ccaatagccc ttgtcacttt tgatcaggta gaccgaccct     5640
gaagcgcttt tttcgtattc cataaaaccc ccttctgtgc gtgagtactc atagtataac     5700
aggcgtgagt accaacgcaa gcactacatg ctgaaatctg gcccgcccct gtccatgcct     5760
cgctggcggg gtgccggtgc ccgtgccagc tcggcccgcg caagctggac gctgggcaga     5820
cccatgacct tgctgacggt gcgctcgatg taatccgctt cgtggccggg cttgcgctct     5880
gccagcgctg ggctggcctc ggccatggcc ttgccgattt cctcggcact gcggccccgg     5940
ctggccagct tctgcgcggc gataaagtcg cacttgctga ggtcatgacc gaagcgcttg     6000
accagcccgg ccatctcgct gcggtactcg tccagcgccg tgcgccggtg gcggctaagc     6060
tgccgctcgg gcagttcgag gctggccagc ctgcgggcct tctcctgctg ccgctgggcc     6120
tgctcgatct gctggccagc ctgctgcacc agcgccgggc cagcggtggc ggtcttgccc     6180
ttggattcac gcagcagcac ccacggctga taaccggcgc gggtggtgtg cttgtccttg     6240
cggttggtga agcccgccaa gcggccatag tggcggctgt cggcgctggc cgggtcggcg     6300
tcgtactcgc tggccagcgt ccgggcaatc tgcccccgaa gttcaccgcc tgcggcgtcg     6360
gccaccttga cccatgcctg atagttcttc gggctggttt ccactaccag ggcaggctcc     6420
cggccctcgg ctttcatgtc atccaggtca aactcgctga ggtcgtccac cagcaccaga     6480
ccatgccgct cctgctcggc gggcctgata tacacgtcat tgccctgggc attcatccgc     6540
ttgagccatg gcgtgttctg gagcacttcg gcggctgacc attcccggtt catcatctgg     6600
ccggtgggtg cgtccctgac gccgatatcg aagcgctcac agcccatggc cttgagctgt     6660
cggcctatgg cctgcaaagt cctgtcgttc ttcatcgggc caccaagcgc agccagatcg     6720
agccgtcctc ggttgtcagt ggcgtcaggt cgagcaagag caacgatgcg atcagcagca     6780
ccaccgtagg catcatggaa gccagcatca cggttagcca tagcttccag tgccaccccc     6840
gcgacgcgct ccgggcgctc tgcgcggcgc tgctcacctc ggcggctacc tcccgcaact     6900
ctttggccag ctccacccat gccgcccctg tctggcgctg ggctttcagc cactccgccg     6960
cctgcgcctc gctggcctgc ttggtctggc tcatgacctg ccgggcttcg tcggccagtg     7020
tcgccatgct ctgggccagc ggttcgatct gctccgctaa ctcgttgatg cctctggatt     7080
tcttcactct gtcgattgcg ttcatggtct attgcctccc ggtattcctg taagtcgatg     7140
atctgggcgt tggcggtgtc gatgttcagg gccacgtctg cccggtcggt gcggatgccc     7200
cggccttcca tctccaccac gttcggcccc aggtgaacac cgggcaggcg ctcgatgccc     7260
tgcgcctcaa gtgttctgtg gtcaatgcgg gcgtcgtggc cagcccgctc taatgcccgg     7320
ttggcatggt cggcccatgc ctcgcgggtc tgctcaagcc atgccttggg cttgagcgct     7380
tcggtcttct gtgccccgcc cttctccggg gtcttgccgt tgtaccgctt gaaccactga     7440
gcggcgggcc gctcgatgcc gtcattgatc cgctcggaga tcatcaggtg gcagtgcggg     7500
ttctcgccgc caccggcatg gatggccagc gtatacggca ggcgctcggc accggtcagg     7560
tgctgggcga actcggacgc cagcgccttc tgctggtcga gggtcagctc gaccggcagg     7620
gcaaattcga cctccttgaa cagccgccca ttggcgcgtt catacaggtc ggcagcatcc     7680
cagtagtcgg cgggccgctc gacgaactcc ggcatgtgcc cggattcggc gtgcaagact     7740
tcatccatgt cgcgggcata cttgccttcg cgctggatgt agtcggcctt ggccctggcc     7800
gattggccgc ccgacctgct gccggttttc gccgtaaggt gataaatcgc catgctgcct     7860
cgctgttgct tttgcttttc ggctccatgc aatggccctc ggagagcgca ccgcccgaag     7920
ggtggccgtt aggccagttt ctcgaagaga aaccggtaag tgcgccctcc cctacaaagt     7980
agggtcggga ttgccgccgc tgtgcctcca tgatagccta cgagacagca cattaacaat     8040
ggggtgtcaa gatggttaag gggagcaaca aggcggcgga tcggctggcc aagctcgaag     8100
aacaacgagc gcgaatcaat gccgaaattc agcgggagcg ggcaagggaa cagcagcaag     8160
agcgcaagaa cgaaacaagg cgcaaggtgc tggtgggggc catgattttg gccaaggtga     8220
acagcagcga gtggccggag gatcggctca tggcggcaat ggatgcgtac cttgaacgcg     8280
accacgaccg cgccttgttc ggtctgccgc cacgccagaa ggatgagccg ggctgaatga     8340
tcgaccgaga caggccctgc ggggctgcac acgcgccccc acccttcggg tagggggaaa     8400
ggccgctaaa gcggctaaaa gcgctccagc gtatttctgc ggggtttggt gtggggttta     8460
gcgggctttg cccgcctttc cccctgccgc gcagcggtgg ggcggtgtgt agcctagcgc     8520
agcgaataga ccagctatcc ggcctctggc cgggcatatt gggcaagggc agcagcgccc     8580
cacaagggcg ctgataaccg cgcctagtgg attattctta gataatcatg gatggatttt     8640
tccaacaccc cgccagcccc cgcccctgct gggtttgcag gtttgggggc gtgacagtta     8700
ttgcaggggt tcgtgacagt tattgcaggg gggcgtgaca gttattgcag gggttcgtga     8760
cagttagtac gggagtgacg ggcactggct ggcaatgtct agcaacggca ggcatttcgg     8820
ctgagggtaa aagaactttc cgctaagcga tagactgtat gtaaacacag tattgcaagg     8880
acgcggaaca tgcctcatgt ggcggccagg acggccagcc gggatcggga tactggtcgt     8940
taccagagcc accgacccga gcaaaccctt ctctatcaga tcgttgacga gtattacccg     9000
gcattcgctg cgcttatggc agagcaggga aaggaattgc cgggctatgt gcaacgggaa     9060
tttgaagaat ttctccaatg cgggcggctg gagcatggct ttctacgggt tcgctgcgag     9120
tcttgccacg ccgagcacct ggtcgctttc agaaatcaat ctaaagtata tatgagtaaa     9180
cttggtctga cagttaccaa tgcttaatca gtgaggcacc tatctcagcg atctgtctat     9240
ttcgttcatc catagttgcc tgactccccg tcgtgtagat aactacgata cgggagggct     9300
taccatctgg ccccagtgct gcaatgatac cgcgagaccc acgctcaccg gctccagatt     9360
tatcagcaat aaaccagcca gccggaaggg ccgagcgcag aagtggtcct gcaactttat     9420
ccgcctccat ccagtctatt aattgttgcc gggaagctag agtaagtagt tcgccagtta     9480
atagtttgcg caacgttgtt gccattgcta caggcatcgt ggtgtcacgc tcgtcgtttg     9540
gtatggcttc attcagctcc ggttcccaac gatcaaggcg agttacatga tcccccatgt     9600
tgtgcaaaaa agcggttagc tccttcggtc ctccgatcgt tgtcagaagt aagttggccg     9660
cagtgttatc actcatggtt atggcagcac tgcataattc tcttactgtc atgccatccg     9720
taagatgctt ttctgtgact ggtgagtact caaccaagtc attctgagaa tagtgtatgc     9780
ggcgaccgag ttgctcttgc ccggcgtcaa cacgggataa taccgcgcca catagcagaa     9840
ctttaaaagt gctcatcatt ggaaaacgtt cttcggggcg aaaactctca aggatcttac     9900
cgctgttgag atccagttcg atgtaaccca ctcgtgcacc caactgatct tcagcatctt     9960
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<210>  20
<211>  10667
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  Plasmid pLybAL12 containing asf gene from Synechococcus elongatus
PCC 7942
<400>  20
tgcatgcctg caggtcgact ctagaggatc cccgggtacc gagctcgaat tggggcgttt       60
tctgtgaggc tgactagcgc gtggcagctc aaaatctcta cattctgcac attcagaccc      120
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gtaaagagct gctttggccc catctctaca cctttgcgga tgcaattctc caatatctgg      420
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agcgcaagct tgtcattcca ccgggtgtcg ataccgatcg cttcaggttt cagcccttgg      780
gcgatcgcgg tgttgttctc caacaggaac tgagccgctt tctgcgcgac ccagaaaaac      840
ctcaaattct ctgcctctgt cgccccgcac ctcgcaaaaa tgtaccggcg ctggtgcgag      900
cctttggcga acatccttgg ctgcgcaaaa aagccaacct tgtcttagta ctgggcagcc      960
gccaagacat caaccagatg gatcgcggca gtcggcaggt gttccaagag attttccatc     1020
tggtcgatcg ctacgacctc tacggcagcg tcgcctatcc caaacagcat caggctgatg     1080
atgtgccgga gttctatcgc ctagcggctc attccggcgg ggtattcgtc aatccggcgc     1140
tgaccgaacc ttttggtttg acaattttgg aggcaggaag ctgcggcgtg ccggtggtgg     1200
caacccatga tggcggcccc caggaaattc tcaaacactg tgatttcggc actttagttg     1260
atgtcagccg acccgctaat atcgcgactg cactcgccac cctgctgagc gatcgcgatc     1320
tttggcagtg ctatcaccgc aatggcattg aaaaagttcc cgcccattac agctgggatc     1380
aacatgtcaa taccctgttt gagcgcatgg aaacggtggc tttgcctcgt cgtcgtgctg     1440
tcagtttcgt acggagtcgc aaacgcttga ttgatgccaa acgccttgtc gttagtgaca     1500
tcgacaacac actgttgggc gatcgtcaag gactcgagaa tttaatgacc tatctcgatc     1560
agtatcgcga tcattttgcc tttggaattg ccacggggcg tcgcctagac tctgcccaag     1620
aagtcttgaa agagtggggc gttccttcgc caaacttctg ggtgacttcc gtcggcagcg     1680
agattcacta tggcaccgat gctgaaccgg atatcagctg ggaaaagcat atcaatcgca     1740
actggaatcc tcagcgaatt cgggcagtaa tggcacaact accctttctt gaactgcagc     1800
cggaagagga tcaaacaccc ttcaaagtca gcttctttgt ccgcgatcgc cacgagactg     1860
tgctgcgaga agtacggcaa catcttcgcc gccatcgcct gcggctgaag tcaatctatt     1920
cccatcagga gtttcttgac attctgccgc tagctgcctc gaaaggggat gcgattcgcc     1980
acctctcact ccgctggcgg attcctcttg agaacatttt ggtggcaggc gattctggta     2040
acgatgagga aatgctcaag ggccataatc tcggcgttgt agttggcaat tactcaccgg     2100
aattggagcc actgcgcagc tacgagcgcg tctattttgc tgagggccac tatgctaatg     2160
gcattctgga agccttaaaa cactatcgct tttttgaggc gatcgcttaa ccttttcaga     2220
atgagacgtt gatcggcacg taagcgtgag acgttgatcg gcacgtaaga ggttccaact     2280
ttcaccataa tgaaataaga tcactaccgg gcgtattttt tgagttatcg agattttcag     2340
gagctaagga agctaaaatg gagaaaaaaa tcactggata taccaccgtt gatatatccc     2400
aatggcatcg taaagaacat tttgaggcat ttcagtcagt tgctcaatgt acctataacc     2460
agaccgttca gctggatatt acggcctttt taaagaccgt aaagaaaaat aagcacaagt     2520
tttatccggc ctttattcac attcttgccc gcctgatgaa tgctcatccg gaattccgta     2580
tggcaatgaa agacggtgag ctggtgatat gggatagtgt tcacccttgt tacaccgttt     2640
tccatgagca aactgaaacg ttttcatcgc tctggagtga ataccacgac gatttccggc     2700
agtttctaca catatattcg caagatgtgg cgtgttacgg tgaaaacctg gcctatttcc     2760
ctaaagggtt tattgagaat atgtttttcg tctcagccaa tccctgggtg agtttcacca     2820
gttttgattt aaacgtggcc aatatggaca acttcttcgc ccccgttttc accatgggca     2880
aatattatac gcaaggcgac aaggtgctga tgccgctggc gattcaggtt catcatgccg     2940
tttgtgatgg cttccatgtc ggcagaatgc ttaatgaatt acaacagtac tgcgatgagt     3000
ggcagggcgg ggcgtaattt ttttaaggca gttattggtg cccttaaacg cctggttgct     3060
acgcctgaat aagtgataat aagcggatga atggcagaaa ttcgatgata agctgtcaaa     3120
cacaaccacc atcaaacagg attttcgcct gctggggcaa accagcgtgg accgcttgct     3180
gcaactctct cagggccagg cggtgaaggg caatcagctg ttgcccgtct cactggtgaa     3240
aagaaaaacc accctggcgc ccaatacgca aaccgcctct ccccgcgcgt tggccgattc     3300
attaatgcag ctggcacgac aggtttcccg actggaaagc gggcagtgag cgcaacgcaa     3360
ttaatgtaag ttagcgcgaa ttgcaagctg gccgacgcgc tgggctacgt cttgctggcg     3420
ttcgggagca gaagagcata catctggaag caaagccagg aaagcggcct atggagctgt     3480
gcggcagcgc tcagtaggca atttttcaaa atattgttaa gccttttctg agcatggtat     3540
ttttcatggt attaccaatt agcaggaaaa taagccattg aatataaaag ataaaaatgt     3600
cttgtttaca atagagtggg gggggtcagc ctgccgcctt gggccgggtg atgtcgtact     3660
tgcccgccgc gaactcggtt accgtccagc ccagcgcgac cagctccggc aacgcctcgc     3720
gcacccgctt gcggcgcttg cgcatggtcg aaccactggc ctctgacggc cagacatagc     3780
cgcacaaggt atctatggaa gccttgccgg ttttgccggg gtcgatccag ccacacagcc     3840
gctggtgcag caggcgggcg gtttcgctgt ccagcgcccg cacctcgtcc atgctgatgc     3900
gcacatgctg gccgccaccc atgacggcct gcgcgatcaa ggggttcagg gccacgtaca     3960
ggcgcccgtc cgcctcgtcg ctggcgtact ccgacagcag ccgaaacccc tgccgcttgc     4020
ggccattctg ggcgatgatg gataccttcc aaaggcgctc gatgcagtcc tgtatgtgct     4080
tgagcgcccc accactatcg acctctgccc cgatttcctt tgccagcgcc cgatagctac     4140
ctttgaccac atggcattca gcggtgacgg cctcccactt gggttccagg aacagccgga     4200
gctgccgtcc gccttcggtc ttgggttccg ggccaagcac taggccatta ggcccagcca     4260
tggccaccag cccttgcagg atgcgcagat catcagcgcc cagcggctcc gggccgctga     4320
actcgatccg cttgccgtcg ccgtagtcat acgtcacgtc cagcttgctg cgcttgcgct     4380
cgccccgctt gagggcacgg aacaggccgg gggccagaca gtgcgccggg tcgtgccgga     4440
cgtggctgag gctgtgcttg ttcttaggct tcaccacggg gcaccccctt gctcttgcgc     4500
tgcctctcca gcacggcggg cttgagcacc ccgccgtcat gccgcctgaa ccaccgatca     4560
gcgaacggtg cgccatagtt ggccttgctc acaccgaagc ggacgaagaa ccggcgctgg     4620
tcgtcgtcca caccccattc ctcggcctcg gcgctggtca tgctcgacag gtaggactgc     4680
cagcggatgt tatcgaccag taccgagctg ccccggctgg cctgctgctg gtcgcctgcg     4740
cccatcatgg ccgcgccctt gctggcatgg tgcaggaaca cgatagagca cccggtatcg     4800
gcggcgatgg cctccatgcg accgatgacc tgggccatgg ggccgctggc gttttcttcc     4860
tcgatgtgga accggcgcag cgtgtccagc accatcaggc ggcggccctc ggcggcgcgc     4920
ttgaggccgt cgaaccactc cggggccatg atgttgggca ggctgccgat cagcggctgg     4980
atcagcaggc cgtcagccac ggcttgccgt tcctcggcgc tgaggtgcgc cccaagggcg     5040
tgcaggcggt gatgaatggc ggtgggcggg tcttcggcgg gcaggtagat caccgggccg     5100
gtgggcagtt cgcccacctc cagcagatcc ggcccgcctg caatctgtgc ggccagttgc     5160
agggccagca tggatttacc ggcaccaccg ggcgacacca gcgccccgac cgtaccggcc     5220
accatgttgg gcaaaacgta gtccagcggt ggcggcgctg ctgcgaacgc ctccagaata     5280
ttgataggct tatgggtagc cattgattgc ctcctttgca ggcagttggt ggttaggcgc     5340
tggcggggtc actacccccg ccctgcgccg ctctgagttc ttccaggcac tcgcgcagcg     5400
cctcgtattc gtcgtcggtc agccagaact tgcgctgacg catccctttg gccttcatgc     5460
gctcggcata tcgcgcttgg cgtacagcgt cagggctggc cagcaggtcg ccggtctgct     5520
tgtccttttg gtctttcata tcagtcaccg agaaacttgc cggggccgaa aggcttgtct     5580
tcgcggaaca aggacaaggt gcagccgtca aggttaaggc tggccatatc agcgactgaa     5640
aagcggccag cctcggcctt gtttgacgta taaccaaagc caccgggcaa ccaatagccc     5700
ttgtcacttt tgatcaggta gaccgaccct gaagcgcttt tttcgtattc cataaaaccc     5760
ccttctgtgc gtgagtactc atagtataac aggcgtgagt accaacgcaa gcactacatg     5820
ctgaaatctg gcccgcccct gtccatgcct cgctggcggg gtgccggtgc ccgtgccagc     5880
tcggcccgcg caagctggac gctgggcaga cccatgacct tgctgacggt gcgctcgatg     5940
taatccgctt cgtggccggg cttgcgctct gccagcgctg ggctggcctc ggccatggcc     6000
ttgccgattt cctcggcact gcggccccgg ctggccagct tctgcgcggc gataaagtcg     6060
cacttgctga ggtcatgacc gaagcgcttg accagcccgg ccatctcgct gcggtactcg     6120
tccagcgccg tgcgccggtg gcggctaagc tgccgctcgg gcagttcgag gctggccagc     6180
ctgcgggcct tctcctgctg ccgctgggcc tgctcgatct gctggccagc ctgctgcacc     6240
agcgccgggc cagcggtggc ggtcttgccc ttggattcac gcagcagcac ccacggctga     6300
taaccggcgc gggtggtgtg cttgtccttg cggttggtga agcccgccaa gcggccatag     6360
tggcggctgt cggcgctggc cgggtcggcg tcgtactcgc tggccagcgt ccgggcaatc     6420
tgcccccgaa gttcaccgcc tgcggcgtcg gccaccttga cccatgcctg atagttcttc     6480
gggctggttt ccactaccag ggcaggctcc cggccctcgg ctttcatgtc atccaggtca     6540
aactcgctga ggtcgtccac cagcaccaga ccatgccgct cctgctcggc gggcctgata     6600
tacacgtcat tgccctgggc attcatccgc ttgagccatg gcgtgttctg gagcacttcg     6660
gcggctgacc attcccggtt catcatctgg ccggtgggtg cgtccctgac gccgatatcg     6720
aagcgctcac agcccatggc cttgagctgt cggcctatgg cctgcaaagt cctgtcgttc     6780
ttcatcgggc caccaagcgc agccagatcg agccgtcctc ggttgtcagt ggcgtcaggt     6840
cgagcaagag caacgatgcg atcagcagca ccaccgtagg catcatggaa gccagcatca     6900
cggttagcca tagcttccag tgccaccccc gcgacgcgct ccgggcgctc tgcgcggcgc     6960
tgctcacctc ggcggctacc tcccgcaact ctttggccag ctccacccat gccgcccctg     7020
tctggcgctg ggctttcagc cactccgccg cctgcgcctc gctggcctgc ttggtctggc     7080
tcatgacctg ccgggcttcg tcggccagtg tcgccatgct ctgggccagc ggttcgatct     7140
gctccgctaa ctcgttgatg cctctggatt tcttcactct gtcgattgcg ttcatggtct     7200
attgcctccc ggtattcctg taagtcgatg atctgggcgt tggcggtgtc gatgttcagg     7260
gccacgtctg cccggtcggt gcggatgccc cggccttcca tctccaccac gttcggcccc     7320
aggtgaacac cgggcaggcg ctcgatgccc tgcgcctcaa gtgttctgtg gtcaatgcgg     7380
gcgtcgtggc cagcccgctc taatgcccgg ttggcatggt cggcccatgc ctcgcgggtc     7440
tgctcaagcc atgccttggg cttgagcgct tcggtcttct gtgccccgcc cttctccggg     7500
gtcttgccgt tgtaccgctt gaaccactga gcggcgggcc gctcgatgcc gtcattgatc     7560
cgctcggaga tcatcaggtg gcagtgcggg ttctcgccgc caccggcatg gatggccagc     7620
gtatacggca ggcgctcggc accggtcagg tgctgggcga actcggacgc cagcgccttc     7680
tgctggtcga gggtcagctc gaccggcagg gcaaattcga cctccttgaa cagccgccca     7740
ttggcgcgtt catacaggtc ggcagcatcc cagtagtcgg cgggccgctc gacgaactcc     7800
ggcatgtgcc cggattcggc gtgcaagact tcatccatgt cgcgggcata cttgccttcg     7860
cgctggatgt agtcggcctt ggccctggcc gattggccgc ccgacctgct gccggttttc     7920
gccgtaaggt gataaatcgc catgctgcct cgctgttgct tttgcttttc ggctccatgc     7980
aatggccctc ggagagcgca ccgcccgaag ggtggccgtt aggccagttt ctcgaagaga     8040
aaccggtaag tgcgccctcc cctacaaagt agggtcggga ttgccgccgc tgtgcctcca     8100
tgatagccta cgagacagca cattaacaat ggggtgtcaa gatggttaag gggagcaaca     8160
aggcggcgga tcggctggcc aagctcgaag aacaacgagc gcgaatcaat gccgaaattc     8220
agcgggagcg ggcaagggaa cagcagcaag agcgcaagaa cgaaacaagg cgcaaggtgc     8280
tggtgggggc catgattttg gccaaggtga acagcagcga gtggccggag gatcggctca     8340
tggcggcaat ggatgcgtac cttgaacgcg accacgaccg cgccttgttc ggtctgccgc     8400
cacgccagaa ggatgagccg ggctgaatga tcgaccgaga caggccctgc ggggctgcac     8460
acgcgccccc acccttcggg tagggggaaa ggccgctaaa gcggctaaaa gcgctccagc     8520
gtatttctgc ggggtttggt gtggggttta gcgggctttg cccgcctttc cccctgccgc     8580
gcagcggtgg ggcggtgtgt agcctagcgc agcgaataga ccagctatcc ggcctctggc     8640
cgggcatatt gggcaagggc agcagcgccc cacaagggcg ctgataaccg cgcctagtgg     8700
attattctta gataatcatg gatggatttt tccaacaccc cgccagcccc cgcccctgct     8760
gggtttgcag gtttgggggc gtgacagtta ttgcaggggt tcgtgacagt tattgcaggg     8820
gggcgtgaca gttattgcag gggttcgtga cagttagtac gggagtgacg ggcactggct     8880
ggcaatgtct agcaacggca ggcatttcgg ctgagggtaa aagaactttc cgctaagcga     8940
tagactgtat gtaaacacag tattgcaagg acgcggaaca tgcctcatgt ggcggccagg     9000
acggccagcc gggatcggga tactggtcgt taccagagcc accgacccga gcaaaccctt     9060
ctctatcaga tcgttgacga gtattacccg gcattcgctg cgcttatggc agagcaggga     9120
aaggaattgc cgggctatgt gcaacgggaa tttgaagaat ttctccaatg cgggcggctg     9180
gagcatggct ttctacgggt tcgctgcgag tcttgccacg ccgagcacct ggtcgctttc     9240
agaaatcaat ctaaagtata tatgagtaaa cttggtctga cagttaccaa tgcttaatca     9300
gtgaggcacc tatctcagcg atctgtctat ttcgttcatc catagttgcc tgactccccg     9360
tcgtgtagat aactacgata cgggagggct taccatctgg ccccagtgct gcaatgatac     9420
cgcgagaccc acgctcaccg gctccagatt tatcagcaat aaaccagcca gccggaaggg     9480
ccgagcgcag aagtggtcct gcaactttat ccgcctccat ccagtctatt aattgttgcc     9540
gggaagctag agtaagtagt tcgccagtta atagtttgcg caacgttgtt gccattgcta     9600
caggcatcgt ggtgtcacgc tcgtcgtttg gtatggcttc attcagctcc ggttcccaac     9660
gatcaaggcg agttacatga tcccccatgt tgtgcaaaaa agcggttagc tccttcggtc     9720
ctccgatcgt tgtcagaagt aagttggccg cagtgttatc actcatggtt atggcagcac     9780
tgcataattc tcttactgtc atgccatccg taagatgctt ttctgtgact ggtgagtact     9840
caaccaagtc attctgagaa tagtgtatgc ggcgaccgag ttgctcttgc ccggcgtcaa     9900
cacgggataa taccgcgcca catagcagaa ctttaaaagt gctcatcatt ggaaaacgtt     9960
cttcggggcg aaaactctca aggatcttac cgctgttgag atccagttcg atgtaaccca    10020
ctcgtgcacc caactgatct tcagcatctt ttactttcac cagcgtttct gggtgagcaa    10080
aaacaggaag gcaaaatgcc gcaaaaaagg gaataagggc gacacggaaa tgttgaatac    10140
tcatactctt cctttttcaa tattattgaa gcatttatca gggttattgt ctcatgagcg    10200
gatacatatt tgaatgtatt tagaaaaata aacaaaagag tttgtagaaa cgcaaaaagg    10260
ccatccgtca ggatggcctt ctgcttaatt tgatgcctgg cagtttatgg cgggcgtcct    10320
gcccgccacc ctccgggccg ttgcttcgca acgttcaaat ccgctcccgg cggatttgtc    10380
ctactcagga gagcgttcac cgacaaacaa cagataaaac gaaaggccca gtctttcgac    10440
tgagcctttc gttttatttg atgcctggca gttccctact ctcgcatggg gagaccccac    10500
actaccatcg gcgctacggc gtttcacttc tgagttcggc atggggtcag gtgggaccac    10560
cgcgctactg ccgccaggca aattctgttt tatcagaccg cttctgcgtt ctgatttaat    10620
ctgtatcagg ctgaaaatct tctctcatcc gccaaaacag ccaagct                  10667
<210>  21
<211>  28
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying Synechocystis spp. PCC 6803 pyrR 
(SphI/KpnI)
<400>  21
cggtgtgcat gccgttattg atggaatg                                          28
<210>  22
<211>  32
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying Synechocystis spp. PCC 6803 pyrR 
(SphI/KpnI)
<400>  22
tcactaggta cctaaattac ctgggaagcc ag                                     32
<210>  23
<211>  474
<212>  DNA
<213>  Synechocystis PCC6803
<400>  23
cggtgtgcat gccgttattg atggaatggg aagaagcaat ggtcacaata aactggaggt       60
tatgggtatg ttttttagcc ctaatgctcc aatcgccttg attgtatcga atgatgcagt      120
ctctaaaatt gtatccgtaa aagacctctg caccgccgac gggtctggat tatgggcaat      180
aatcacagtc gagccagact acccctggag gtaaactccg gggctggagc cataaagatt      240
aggaattcat taagaaatgt aacaatcgac gttctagatc ataccacgcc cccactgtcc      300
ggcagggtga acagaggaga ctttcccctg ttacagtgtc agtgacaaaa caactttttg      360
gcatcggtgc aggtggtgag ccatggcggc ccagatcatt gaaattcttt ccccggagga      420
aatccgacgt acccttaccc gtctggcttc ccaggtaatt taggtaccta gtga            474
<210>  24
<211>  35
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying Synechocystis spp. PCC 6803 nirA 
(SphI/KpnI)
<400>  24
cccaaggcat gcaggaaaac aagctcagaa tgctg                                  35
<210>  25
<211>  42
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying Synechocystis spp. PCC 6803 nirA 
(SphI/KpnI)
<400>  25
tttattggta ccaacgcttc aagccagata acagtagaga tc                          42
<210>  26
<211>  384
<212>  DNA
<213>  Synechocystis PCC6803
<400>  26
cccaaggcat gcaggaaaac aagctcagaa tgctgcgggg agaagggcaa ctccccacca       60
gccccaaatt tttgctggcg ataaatattt ttcggtttaa ttgttcacaa agctttttga      120
atttgagttt atagaaattt attggctggt aatgcttttt tgcccccctg caggacttca      180
ttgatccttg cctataccat caatatcatt ggtcaataat gatgatgatt gactaaaaca      240
tgtttaacaa aatttaacgc atatgctaaa tgcgtaaact gcatatgcct tggctgagtg      300
taatttacgt tacaaatttt aacgaaacgg gaaccctata ttgatctcta ctgttatctg      360
gcttgaagcg ttggtaccaa taaa                                             384
<210>  27
<211>  26
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying Synechococcus elongatus PCC 7942 psbAII 
(SphI/KpnI)
<400>  27
atctttgcgt tccgtgacgg ctactg                                            26
<210>  28
<211>  25
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying Synechococcus elongatus PCC 7942 psbAII 
(SphI/KpnI)
<400>  28
gcagatggta ccggtcagca gagtg                                             25
<210>  29
<211>  676
<212>  DNA
<213>  Synechococcus PCC7942
<400>  29
atctttgcgt tccgtgacgg ctactgccag catgccgagc ctgatgtgtg acacctaaga       60
tcactccagt tctctttgga aactggctga tgagtgaaga caccatcttt ggcaagatca      120
tccggcgcga gattccagca gacattgttt atgaagatga tctctgtctg gcttttcgag      180
atgtggcacc ccaagcgccg gttcacattc tggtgattcc caagcaacca attgccaacc      240
ttttggaagc gacagcagaa catcaagcgc tgctgggtca tttgttgctg actgtaaagg      300
cgatcgcggc ccaagaagga ctcaccgagg gctaccgcac cgtgattaac acgggccctg      360
cgggtgggca aaccgtttac cacctgcata ttcacttact gggcgggcga tcgctggctt      420
ggccgcccgg ctgagaaaag tctgaaagtt ctttacaaaa ctcaatctgc ttgttagatt      480
ttactcacga ggctattaag tctcgtaaat agttcaacta aggactcatc gcaaaatgac      540
gactgcattg cagcggcgcg agagcgccag cctgtggcag cagttctgcg agtgggtaac      600
cagcaccgac aaccgcctct atgtgggttg gttcggcgtg ctgatgatcc ccactctgct      660
gaccggtacc atctgc                                                      676
<210>  30
<211>  40
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying Synechococcus elongatus PCC 7942 nirA
<400>  30
cagccagcat gcataaattt ctgttttgac caaaccatcc                             40
<210>  31
<211>  34
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying Synechococcus elongatus PCC 7942 nirA
<400>  31
gtggctggta ccatggattc atctgcctac aaag                                   34
<210>  32
<211>  579
<212>  DNA
<213>  Synechococcus PCC7942
<400>  32
cagccagcat gcataaattt ctgttttgac caaaccatcc cgacataact cggtcagggc       60
ttgcaaaaca gcggggatgc gatcgtgctg ccagagactg caaaggtgag ccaataacca      120
ctgcgtctgc cagtcatcag gtatcgcttg gcagcgctgc aacccagctt cgaggacgcg      180
aacatcaact gttttggcca gttgctgaac ctgtcgccaa caatgttcaa aatcaccgct      240
tggccagccg tcactctctg caaacgctgc atcagtcatg tgcaatcaat acaggttaaa      300
aaccatgcta atggctccac ctaagcgggc ttcagagtca aggcttgtag caattgctac      360
taaaaactgc gatcgctgct gaaatgagct ggaattctgt ccctctcagc tcaaaaagta      420
tcaatgatta cttaatgttt gttctgcgca aacttcttgc agaacatgca tgatttacaa      480
aaagttgtag tttctgttac caattgcgaa tcgagaactg cctaatctgc cgagtatgca      540
agctgctttg taggcagatg aatccatggt accagccac                             579
<210>  33
<211>  35
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying gammaPR (XbaI/KpnI)
<400>  33
gtgcattcta gatggctacg agggcagaca gtaag                                  35
<210>  34
<211>  50
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying gammaPR (XbaI/KpnI)
<400>  34
ttctgtggta ccatatggat cctccttctt aagatgcaac cattatcacc                  50
<210>  35
<211>  1186
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  gammaPR (XbaI/KpnI) promoter
<400>  35
gtgcattcta gatggctacg agggcagaca gtaagtggat ttaccataat cccttaattg       60
tacgcaccgc taaaacgcgt tcagcgcgat cacggcagca gacaggtaaa aatggcaaca      120
aaccacccta aaaactgcgc gatcgcgcct gataaatttt aaccgtatga atacctatgc      180
aaccagaggg tacaggccac attaccccca cttaatccac tgaagctgcc atttttcatg      240
gtttcaccat cccagcgaag ggccatgcat gcatcgaaat taatacgacg aaattaatac      300
gactcactat agggcaattg ttatcagcta tgcgccgacc agaacacctt gccgatcagc      360
caaacgtctc ttcaggccac tgactagcga taactttccc cacaacggaa caactctcac      420
tgcatgggat cattgggtac tgtgggttta gtggttgtaa aaacacctga ccgctatccc      480
tgatcagttt cttgaaggta aactcatcac ccccaagtct ggctatgcag aaatcacctg      540
gctcaacagc ctgctcaggg tcaacgagaa ttaacattcc gtcaggaaag cttggcttgg      600
agcctgttgg tgcggtcatg gaattacctt caacctcaag ccagaatgca gaatcactgg      660
ctttcttggt tgtgcttacc catctctccg catcaccttt ggtaaaggtt ctaagcttag      720
gtgagaacat ccctgcctga acatgagaaa aaacagggta ctcatactca cttctaagtg      780
acggctgcat actaaccgct tcatacatct cgtagatttc tctggcgatt gaagggctaa      840
attcttcaac gctaactttg agaatttttg taagcaatgc ggcgttataa gcatttaatg      900
cattgatgcc attaaataaa gcaccaacgc ctgactgccc catccccatc ttgtctgcga      960
cagattcctg ggataagcca agttcatttt tctttttttc ataaattgct ttaaggcgac     1020
gtgcgtcctc aagctgctct tgtgttaatg gtttcttttt tgtgctcata cgttaaatct     1080
atcaccgcaa gggataaata tctaacaccg tgcgtgttga ctattttacc tctggcggtg     1140
ataatggttg catcttaaga aggaggatcc atatggtacc acagaa                    1186
<210>  36
<211>  31
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying Synechocystis spp. PCC 6803 dnaK 
(SphI/KpnI)
<400>  36
gccccagcat gcaccagtaa acataaatct c                                      31
<210>  37
<211>  30
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying Synechocystis spp. PCC 6803 dnaK 
(SphI/KpnI)
<400>  37
attggtggta ccgaggtcaa tcccaacaac                                        30
<210>  38
<211>  895
<212>  DNA
<213>  Synechocystis PCC6803
<400>  38
gccccagcat gcaccagtaa acataaatct ccccggcgac gcaaaaaacg ggtgaccatc       60
aagccggtgc gcttcggcat ttttctgctt tgcctagcag gcattgtggg gggggcaact      120
gccctaatta tcaatcgtac tggcgatccc ctaggtgggt tgctagaaga ccccctagat      180
gttttcctgg accaaccttc agaatttatc cccgatgaag ccacgagccg gaatttgatt      240
ctcagtcaac ccaacttcaa tcagcaagtg ggtcagatgg tagtacaagg ctggcttgat      300
agtaaaaagt tagcctttgg ccaaaactac gatgtcgggg cattgcagag tgttttagcc      360
cccaatctcc ttgcccaaca acggggtcgg gcccaacggg atcaagccca aaaggtctat      420
caccaatacg aacacaagtt gcagatttta gcctatcaag ttaaccccca agaccccaac      480
cgagccaccg ttactgcccg ggtagaagaa attagccagc cctttaccct aggtaatcaa      540
cagcagaagg gctccgccac caaagatgac ttgactgtgc gctatcagct agtacgacac      600
caaggggttt ggaaaattga ccaaatacaa gtggtaaatg gcccccgtta gtgcgtggcg      660
ttaactcccc ttttgaccaa tggcatacgg ctagatgccc ccataggtac ggaaacctgc      720
acttccgaga actaagcccc taccgtcact ataagagtgt gaacgtgtcg gccccaggca      780
atggattgga accatggctt ttcggcccat cgttgtgtct tatattctta cttgttaacg      840
ggagttaatt aaaattatgg gaaaagttgt tgggattgac ctcggtacca ccaat           895
<210>  39
<211>  28
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying Synechocystis spp. PCC 6803 kiaA 
(SphI/KpnI)
<400>  39
gccagagcat gcaaagctca ctaactgg                                          28
<210>  40
<211>  31
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying Synechocystis spp. PCC 6803 kiaA 
(SphI/KpnI)
<400>  40
ggaaaaggta cctgagtcta tgggcaacgt g                                      31
<210>  41
<211>  603
<212>  DNA
<213>  Synechocystis PCC6803
<400>  41
gccagagcat gcaaagctca ctaactgggc gggattttcc gggtccggtt gctgacggta       60
atagtcgtct aaaagtttgg ccacatccaa aaggctgtcg gcggggggat gctggccggc      120
gaggggatta attctgcttg tcatatacaa aaattgtaaa aaatggaggg cggcgatcag      180
gggcttagac acccaaatcc tagccaaaaa gggttaacta gccaagggct atccatgggc      240
aaagagataa aagaaaaagt ctccaaatcc ctggtcatag agaaaaaatt gccaaagtta      300
ccccaggcca tacacggccc agcgccaaga tggggagcac aaattcaaac tttgtaaaca      360
ggccggaagc tatccggcca aggagcactc agattgtgtt aacgttcagg ggagttgctt      420
aacacaattt tccaattaat agtattaata ttttcttaac ttgcaccgta ccatggtgag      480
aaagcctatc tgagccctta tttgattaac cttcgactga ttattgatcc cctgtgcagt      540
ctcccctctc cctctgtctt tttgctcccg aacacgttgc ccatagactc aggtaccttt      600
tcc                                                                    603
<210>  42
<211>  30
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for sequence analysis of pLybAL
<400>  42
gcttctgcgt tctgatttaa tctgtatcag                                        30
<210>  43
<211>  27
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for sequence analysis of pLybAL
<400>  43
atgggtctga atgtgcagaa tgtagag                                           27
<210>  44
<211>  11090
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  plasmid pLybAL15
<400>  44
tgcatgccgt tattgatgga atgggaagaa gcaatggtca caataaactg gaggttatgg       60
gtatgttttt tagccctaat gctccaatcg ccttgattgt atcgaatgat gcagtctcta      120
aaattgtatc cgtaaaagac ctctgcaccg ccgacgggtc tggattatgg gcaataatca      180
cagtcgagcc agactacccc tggaggtaaa ctccggggct ggagccataa agattaggaa      240
ttcattaaga aatgtaacaa tcgacgttct agatcatacc acgcccccac tgtccggcag      300
ggtgaacaga ggagactttc ccctgttaca gtgtcagtga caaaacaact ttttggcatc      360
ggtgcaggtg gtgagccatg gcggcccaga tcattgaaat tctttccccg gaggaaatcc      420
gacgtaccct tacccgtctg gcttcccagg taatttaggt accgagctcg aattggggcg      480
ttttctgtga ggctgactag cgcgtggcag ctcaaaatct ctacattctg cacattcaga      540
cccatggtct gctgcgaggg cagaacttgg aactggggcg agatgccgac accggcgggc      600
agaccaagta cgtcttagaa ctggctcaag cccaagctaa atccccacaa gtccaacaag      660
tcgacatcat cacccgccaa atcaccgacc cccgcgtcag tgttggttac agtcaggcga      720
tcgaaccctt tgcgcccaaa ggtcggattg tccgtttgcc ttttggcccc aaacgctacc      780
tccgtaaaga gctgctttgg ccccatctct acacctttgc ggatgcaatt ctccaatatc      840
tggctcagca aaagcgcacc ccgacttgga ttcaggccca ctatgctgat gctggccaag      900
tgggatcact gctgagtcgc tggttgaatg taccgctaat tttcacaggg cattctctgg      960
ggcggatcaa gctaaaaaag ctgttggagc aagactggcc gcttgaggaa attgaagcgc     1020
aattcaatat tcaacagcga attgatgcgg aggagatgac gctcactcat gctgactgga     1080
ttgtcgccag cactcagcag gaagtggagg agcaataccg cgtttacgat cgctacaacc     1140
cagagcgcaa gcttgtcatt ccaccgggtg tcgataccga tcgcttcagg tttcagccct     1200
tgggcgatcg cggtgttgtt ctccaacagg aactgagccg ctttctgcgc gacccagaaa     1260
aacctcaaat tctctgcctc tgtcgccccg cacctcgcaa aaatgtaccg gcgctggtgc     1320
gagcctttgg cgaacatcct tggctgcgca aaaaagccaa ccttgtctta gtactgggca     1380
gccgccaaga catcaaccag atggatcgcg gcagtcggca ggtgttccaa gagattttcc     1440
atctggtcga tcgctacgac ctctacggca gcgtcgccta tcccaaacag catcaggctg     1500
atgatgtgcc ggagttctat cgcctagcgg ctcattccgg cggggtattc gtcaatccgg     1560
cgctgaccga accttttggt ttgacaattt tggaggcagg aagctgcggc gtgccggtgg     1620
tggcaaccca tgatggcggc ccccaggaaa ttctcaaaca ctgtgatttc ggcactttag     1680
ttgatgtcag ccgacccgct aatatcgcga ctgcactcgc caccctgctg agcgatcgcg     1740
atctttggca gtgctatcac cgcaatggca ttgaaaaagt tcccgcccat tacagctggg     1800
atcaacatgt caataccctg tttgagcgca tggaaacggt ggctttgcct cgtcgtcgtg     1860
ctgtcagttt cgtacggagt cgcaaacgct tgattgatgc caaacgcctt gtcgttagtg     1920
acatcgacaa cacactgttg ggcgatcgtc aaggactcga gaatttaatg acctatctcg     1980
atcagtatcg cgatcatttt gcctttggaa ttgccacggg gcgtcgccta gactctgccc     2040
aagaagtctt gaaagagtgg ggcgttcctt cgccaaactt ctgggtgact tccgtcggca     2100
gcgagattca ctatggcacc gatgctgaac cggatatcag ctgggaaaag catatcaatc     2160
gcaactggaa tcctcagcga attcgggcag taatggcaca actacccttt cttgaactgc     2220
agccggaaga ggatcaaaca cccttcaaag tcagcttctt tgtccgcgat cgccacgaga     2280
ctgtgctgcg agaagtacgg caacatcttc gccgccatcg cctgcggctg aagtcaatct     2340
attcccatca ggagtttctt gacattctgc cgctagctgc ctcgaaaggg gatgcgattc     2400
gccacctctc actccgctgg cggattcctc ttgagaacat tttggtggca ggcgattctg     2460
gtaacgatga ggaaatgctc aagggccata atctcggcgt tgtagttggc aattactcac     2520
cggaattgga gccactgcgc agctacgagc gcgtctattt tgctgagggc cactatgcta     2580
atggcattct ggaagcctta aaacactatc gcttttttga ggcgatcgct taaccttttc     2640
agaatgagac gttgatcggc acgtaagcgt gagacgttga tcggcacgta agaggttcca     2700
actttcacca taatgaaata agatcactac cgggcgtatt ttttgagtta tcgagatttt     2760
caggagctaa ggaagctaaa atggagaaaa aaatcactgg atataccacc gttgatatat     2820
cccaatggca tcgtaaagaa cattttgagg catttcagtc agttgctcaa tgtacctata     2880
accagaccgt tcagctggat attacggcct ttttaaagac cgtaaagaaa aataagcaca     2940
agttttatcc ggcctttatt cacattcttg cccgcctgat gaatgctcat ccggaattcc     3000
gtatggcaat gaaagacggt gagctggtga tatgggatag tgttcaccct tgttacaccg     3060
ttttccatga gcaaactgaa acgttttcat cgctctggag tgaataccac gacgatttcc     3120
ggcagtttct acacatatat tcgcaagatg tggcgtgtta cggtgaaaac ctggcctatt     3180
tccctaaagg gtttattgag aatatgtttt tcgtctcagc caatccctgg gtgagtttca     3240
ccagttttga tttaaacgtg gccaatatgg acaacttctt cgcccccgtt ttcaccatgg     3300
gcaaatatta tacgcaaggc gacaaggtgc tgatgccgct ggcgattcag gttcatcatg     3360
ccgtttgtga tggcttccat gtcggcagaa tgcttaatga attacaacag tactgcgatg     3420
agtggcaggg cggggcgtaa tttttttaag gcagttattg gtgcccttaa acgcctggtt     3480
gctacgcctg aataagtgat aataagcgga tgaatggcag aaattcgatg ataagctgtc     3540
aaacacaacc accatcaaac aggattttcg cctgctgggg caaaccagcg tggaccgctt     3600
gctgcaactc tctcagggcc aggcggtgaa gggcaatcag ctgttgcccg tctcactggt     3660
gaaaagaaaa accaccctgg cgcccaatac gcaaaccgcc tctccccgcg cgttggccga     3720
ttcattaatg cagctggcac gacaggtttc ccgactggaa agcgggcagt gagcgcaacg     3780
caattaatgt aagttagcgc gaattgcaag ctggccgacg cgctgggcta cgtcttgctg     3840
gcgttcggga gcagaagagc atacatctgg aagcaaagcc aggaaagcgg cctatggagc     3900
tgtgcggcag cgctcagtag gcaatttttc aaaatattgt taagcctttt ctgagcatgg     3960
tatttttcat ggtattacca attagcagga aaataagcca ttgaatataa aagataaaaa     4020
tgtcttgttt acaatagagt ggggggggtc agcctgccgc cttgggccgg gtgatgtcgt     4080
acttgcccgc cgcgaactcg gttaccgtcc agcccagcgc gaccagctcc ggcaacgcct     4140
cgcgcacccg cttgcggcgc ttgcgcatgg tcgaaccact ggcctctgac ggccagacat     4200
agccgcacaa ggtatctatg gaagccttgc cggttttgcc ggggtcgatc cagccacaca     4260
gccgctggtg cagcaggcgg gcggtttcgc tgtccagcgc ccgcacctcg tccatgctga     4320
tgcgcacatg ctggccgcca cccatgacgg cctgcgcgat caaggggttc agggccacgt     4380
acaggcgccc gtccgcctcg tcgctggcgt actccgacag cagccgaaac ccctgccgct     4440
tgcggccatt ctgggcgatg atggatacct tccaaaggcg ctcgatgcag tcctgtatgt     4500
gcttgagcgc cccaccacta tcgacctctg ccccgatttc ctttgccagc gcccgatagc     4560
tacctttgac cacatggcat tcagcggtga cggcctccca cttgggttcc aggaacagcc     4620
ggagctgccg tccgccttcg gtcttgggtt ccgggccaag cactaggcca ttaggcccag     4680
ccatggccac cagcccttgc aggatgcgca gatcatcagc gcccagcggc tccgggccgc     4740
tgaactcgat ccgcttgccg tcgccgtagt catacgtcac gtccagcttg ctgcgcttgc     4800
gctcgccccg cttgagggca cggaacaggc cgggggccag acagtgcgcc gggtcgtgcc     4860
ggacgtggct gaggctgtgc ttgttcttag gcttcaccac ggggcacccc cttgctcttg     4920
cgctgcctct ccagcacggc gggcttgagc accccgccgt catgccgcct gaaccaccga     4980
tcagcgaacg gtgcgccata gttggccttg ctcacaccga agcggacgaa gaaccggcgc     5040
tggtcgtcgt ccacacccca ttcctcggcc tcggcgctgg tcatgctcga caggtaggac     5100
tgccagcgga tgttatcgac cagtaccgag ctgccccggc tggcctgctg ctggtcgcct     5160
gcgcccatca tggccgcgcc cttgctggca tggtgcagga acacgataga gcacccggta     5220
tcggcggcga tggcctccat gcgaccgatg acctgggcca tggggccgct ggcgttttct     5280
tcctcgatgt ggaaccggcg cagcgtgtcc agcaccatca ggcggcggcc ctcggcggcg     5340
cgcttgaggc cgtcgaacca ctccggggcc atgatgttgg gcaggctgcc gatcagcggc     5400
tggatcagca ggccgtcagc cacggcttgc cgttcctcgg cgctgaggtg cgccccaagg     5460
gcgtgcaggc ggtgatgaat ggcggtgggc gggtcttcgg cgggcaggta gatcaccggg     5520
ccggtgggca gttcgcccac ctccagcaga tccggcccgc ctgcaatctg tgcggccagt     5580
tgcagggcca gcatggattt accggcacca ccgggcgaca ccagcgcccc gaccgtaccg     5640
gccaccatgt tgggcaaaac gtagtccagc ggtggcggcg ctgctgcgaa cgcctccaga     5700
atattgatag gcttatgggt agccattgat tgcctccttt gcaggcagtt ggtggttagg     5760
cgctggcggg gtcactaccc ccgccctgcg ccgctctgag ttcttccagg cactcgcgca     5820
gcgcctcgta ttcgtcgtcg gtcagccaga acttgcgctg acgcatccct ttggccttca     5880
tgcgctcggc atatcgcgct tggcgtacag cgtcagggct ggccagcagg tcgccggtct     5940
gcttgtcctt ttggtctttc atatcagtca ccgagaaact tgccggggcc gaaaggcttg     6000
tcttcgcgga acaaggacaa ggtgcagccg tcaaggttaa ggctggccat atcagcgact     6060
gaaaagcggc cagcctcggc cttgtttgac gtataaccaa agccaccggg caaccaatag     6120
cccttgtcac ttttgatcag gtagaccgac cctgaagcgc ttttttcgta ttccataaaa     6180
cccccttctg tgcgtgagta ctcatagtat aacaggcgtg agtaccaacg caagcactac     6240
atgctgaaat ctggcccgcc cctgtccatg cctcgctggc ggggtgccgg tgcccgtgcc     6300
agctcggccc gcgcaagctg gacgctgggc agacccatga ccttgctgac ggtgcgctcg     6360
atgtaatccg cttcgtggcc gggcttgcgc tctgccagcg ctgggctggc ctcggccatg     6420
gccttgccga tttcctcggc actgcggccc cggctggcca gcttctgcgc ggcgataaag     6480
tcgcacttgc tgaggtcatg accgaagcgc ttgaccagcc cggccatctc gctgcggtac     6540
tcgtccagcg ccgtgcgccg gtggcggcta agctgccgct cgggcagttc gaggctggcc     6600
agcctgcggg ccttctcctg ctgccgctgg gcctgctcga tctgctggcc agcctgctgc     6660
accagcgccg ggccagcggt ggcggtcttg cccttggatt cacgcagcag cacccacggc     6720
tgataaccgg cgcgggtggt gtgcttgtcc ttgcggttgg tgaagcccgc caagcggcca     6780
tagtggcggc tgtcggcgct ggccgggtcg gcgtcgtact cgctggccag cgtccgggca     6840
atctgccccc gaagttcacc gcctgcggcg tcggccacct tgacccatgc ctgatagttc     6900
ttcgggctgg tttccactac cagggcaggc tcccggccct cggctttcat gtcatccagg     6960
tcaaactcgc tgaggtcgtc caccagcacc agaccatgcc gctcctgctc ggcgggcctg     7020
atatacacgt cattgccctg ggcattcatc cgcttgagcc atggcgtgtt ctggagcact     7080
tcggcggctg accattcccg gttcatcatc tggccggtgg gtgcgtccct gacgccgata     7140
tcgaagcgct cacagcccat ggccttgagc tgtcggccta tggcctgcaa agtcctgtcg     7200
ttcttcatcg ggccaccaag cgcagccaga tcgagccgtc ctcggttgtc agtggcgtca     7260
ggtcgagcaa gagcaacgat gcgatcagca gcaccaccgt aggcatcatg gaagccagca     7320
tcacggttag ccatagcttc cagtgccacc cccgcgacgc gctccgggcg ctctgcgcgg     7380
cgctgctcac ctcggcggct acctcccgca actctttggc cagctccacc catgccgccc     7440
ctgtctggcg ctgggctttc agccactccg ccgcctgcgc ctcgctggcc tgcttggtct     7500
ggctcatgac ctgccgggct tcgtcggcca gtgtcgccat gctctgggcc agcggttcga     7560
tctgctccgc taactcgttg atgcctctgg atttcttcac tctgtcgatt gcgttcatgg     7620
tctattgcct cccggtattc ctgtaagtcg atgatctggg cgttggcggt gtcgatgttc     7680
agggccacgt ctgcccggtc ggtgcggatg ccccggcctt ccatctccac cacgttcggc     7740
cccaggtgaa caccgggcag gcgctcgatg ccctgcgcct caagtgttct gtggtcaatg     7800
cgggcgtcgt ggccagcccg ctctaatgcc cggttggcat ggtcggccca tgcctcgcgg     7860
gtctgctcaa gccatgcctt gggcttgagc gcttcggtct tctgtgcccc gcccttctcc     7920
ggggtcttgc cgttgtaccg cttgaaccac tgagcggcgg gccgctcgat gccgtcattg     7980
atccgctcgg agatcatcag gtggcagtgc gggttctcgc cgccaccggc atggatggcc     8040
agcgtatacg gcaggcgctc ggcaccggtc aggtgctggg cgaactcgga cgccagcgcc     8100
ttctgctggt cgagggtcag ctcgaccggc agggcaaatt cgacctcctt gaacagccgc     8160
ccattggcgc gttcatacag gtcggcagca tcccagtagt cggcgggccg ctcgacgaac     8220
tccggcatgt gcccggattc ggcgtgcaag acttcatcca tgtcgcgggc atacttgcct     8280
tcgcgctgga tgtagtcggc cttggccctg gccgattggc cgcccgacct gctgccggtt     8340
ttcgccgtaa ggtgataaat cgccatgctg cctcgctgtt gcttttgctt ttcggctcca     8400
tgcaatggcc ctcggagagc gcaccgcccg aagggtggcc gttaggccag tttctcgaag     8460
agaaaccggt aagtgcgccc tcccctacaa agtagggtcg ggattgccgc cgctgtgcct     8520
ccatgatagc ctacgagaca gcacattaac aatggggtgt caagatggtt aaggggagca     8580
acaaggcggc ggatcggctg gccaagctcg aagaacaacg agcgcgaatc aatgccgaaa     8640
ttcagcggga gcgggcaagg gaacagcagc aagagcgcaa gaacgaaaca aggcgcaagg     8700
tgctggtggg ggccatgatt ttggccaagg tgaacagcag cgagtggccg gaggatcggc     8760
tcatggcggc aatggatgcg taccttgaac gcgaccacga ccgcgccttg ttcggtctgc     8820
cgccacgcca gaaggatgag ccgggctgaa tgatcgaccg agacaggccc tgcggggctg     8880
cacacgcgcc cccacccttc gggtaggggg aaaggccgct aaagcggcta aaagcgctcc     8940
agcgtatttc tgcggggttt ggtgtggggt ttagcgggct ttgcccgcct ttccccctgc     9000
cgcgcagcgg tggggcggtg tgtagcctag cgcagcgaat agaccagcta tccggcctct     9060
ggccgggcat attgggcaag ggcagcagcg ccccacaagg gcgctgataa ccgcgcctag     9120
tggattattc ttagataatc atggatggat ttttccaaca ccccgccagc ccccgcccct     9180
gctgggtttg caggtttggg ggcgtgacag ttattgcagg ggttcgtgac agttattgca     9240
ggggggcgtg acagttattg caggggttcg tgacagttag tacgggagtg acgggcactg     9300
gctggcaatg tctagcaacg gcaggcattt cggctgaggg taaaagaact ttccgctaag     9360
cgatagactg tatgtaaaca cagtattgca aggacgcgga acatgcctca tgtggcggcc     9420
aggacggcca gccgggatcg ggatactggt cgttaccaga gccaccgacc cgagcaaacc     9480
cttctctatc agatcgttga cgagtattac ccggcattcg ctgcgcttat ggcagagcag     9540
ggaaaggaat tgccgggcta tgtgcaacgg gaatttgaag aatttctcca atgcgggcgg     9600
ctggagcatg gctttctacg ggttcgctgc gagtcttgcc acgccgagca cctggtcgct     9660
ttcagaaatc aatctaaagt atatatgagt aaacttggtc tgacagttac caatgcttaa     9720
tcagtgaggc acctatctca gcgatctgtc tatttcgttc atccatagtt gcctgactcc     9780
ccgtcgtgta gataactacg atacgggagg gcttaccatc tggccccagt gctgcaatga     9840
taccgcgaga cccacgctca ccggctccag atttatcagc aataaaccag ccagccggaa     9900
gggccgagcg cagaagtggt cctgcaactt tatccgcctc catccagtct attaattgtt     9960
gccgggaagc tagagtaagt agttcgccag ttaatagttt gcgcaacgtt gttgccattg    10020
ctacaggcat cgtggtgtca cgctcgtcgt ttggtatggc ttcattcagc tccggttccc    10080
aacgatcaag gcgagttaca tgatccccca tgttgtgcaa aaaagcggtt agctccttcg    10140
gtcctccgat cgttgtcaga agtaagttgg ccgcagtgtt atcactcatg gttatggcag    10200
cactgcataa ttctcttact gtcatgccat ccgtaagatg cttttctgtg actggtgagt    10260
actcaaccaa gtcattctga gaatagtgta tgcggcgacc gagttgctct tgcccggcgt    10320
caacacggga taataccgcg ccacatagca gaactttaaa agtgctcatc attggaaaac    10380
gttcttcggg gcgaaaactc tcaaggatct taccgctgtt gagatccagt tcgatgtaac    10440
ccactcgtgc acccaactga tcttcagcat cttttacttt caccagcgtt tctgggtgag    10500
caaaaacagg aaggcaaaat gccgcaaaaa agggaataag ggcgacacgg aaatgttgaa    10560
tactcatact cttccttttt caatattatt gaagcattta tcagggttat tgtctcatga    10620
gcggatacat atttgaatgt atttagaaaa ataaacaaaa gagtttgtag aaacgcaaaa    10680
aggccatccg tcaggatggc cttctgctta atttgatgcc tggcagttta tggcgggcgt    10740
cctgcccgcc accctccggg ccgttgcttc gcaacgttca aatccgctcc cggcggattt    10800
gtcctactca ggagagcgtt caccgacaaa caacagataa aacgaaaggc ccagtctttc    10860
gactgagcct ttcgttttat ttgatgcctg gcagttccct actctcgcat ggggagaccc    10920
cacactacca tcggcgctac ggcgtttcac ttctgagttc ggcatggggt caggtgggac    10980
caccgcgcta ctgccgccag gcaaattctg ttttatcaga ccgcttctgc gttctgattt    11040
aatctgtatc aggctgaaaa tcttctctca tccgccaaaa cagccaagct               11090
<210>  45
<211>  11000
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  plasmid pLybAL16
<400>  45
tgcatgcagg aaaacaagct cagaatgctg cggggagaag ggcaactccc caccagcccc       60
aaatttttgc tggcgataaa tatttttcgg tttaattgtt cacaaagctt tttgaatttg      120
agtttataga aatttattgg ctggtaatgc ttttttgccc ccctgcagga cttcattgat      180
ccttgcctat accatcaata tcattggtca ataatgatga tgattgacta aaacatgttt      240
aacaaaattt aacgcatatg ctaaatgcgt aaactgcata tgccttggct gagtgtaatt      300
tacgttacaa attttaacga aacgggaacc ctatattgat ctctactgtt atctggcttg      360
aagcgttggt accgagctcg aattggggcg ttttctgtga ggctgactag cgcgtggcag      420
ctcaaaatct ctacattctg cacattcaga cccatggtct gctgcgaggg cagaacttgg      480
aactggggcg agatgccgac accggcgggc agaccaagta cgtcttagaa ctggctcaag      540
cccaagctaa atccccacaa gtccaacaag tcgacatcat cacccgccaa atcaccgacc      600
cccgcgtcag tgttggttac agtcaggcga tcgaaccctt tgcgcccaaa ggtcggattg      660
tccgtttgcc ttttggcccc aaacgctacc tccgtaaaga gctgctttgg ccccatctct      720
acacctttgc ggatgcaatt ctccaatatc tggctcagca aaagcgcacc ccgacttgga      780
ttcaggccca ctatgctgat gctggccaag tgggatcact gctgagtcgc tggttgaatg      840
taccgctaat tttcacaggg cattctctgg ggcggatcaa gctaaaaaag ctgttggagc      900
aagactggcc gcttgaggaa attgaagcgc aattcaatat tcaacagcga attgatgcgg      960
aggagatgac gctcactcat gctgactgga ttgtcgccag cactcagcag gaagtggagg     1020
agcaataccg cgtttacgat cgctacaacc cagagcgcaa gcttgtcatt ccaccgggtg     1080
tcgataccga tcgcttcagg tttcagccct tgggcgatcg cggtgttgtt ctccaacagg     1140
aactgagccg ctttctgcgc gacccagaaa aacctcaaat tctctgcctc tgtcgccccg     1200
cacctcgcaa aaatgtaccg gcgctggtgc gagcctttgg cgaacatcct tggctgcgca     1260
aaaaagccaa ccttgtctta gtactgggca gccgccaaga catcaaccag atggatcgcg     1320
gcagtcggca ggtgttccaa gagattttcc atctggtcga tcgctacgac ctctacggca     1380
gcgtcgccta tcccaaacag catcaggctg atgatgtgcc ggagttctat cgcctagcgg     1440
ctcattccgg cggggtattc gtcaatccgg cgctgaccga accttttggt ttgacaattt     1500
tggaggcagg aagctgcggc gtgccggtgg tggcaaccca tgatggcggc ccccaggaaa     1560
ttctcaaaca ctgtgatttc ggcactttag ttgatgtcag ccgacccgct aatatcgcga     1620
ctgcactcgc caccctgctg agcgatcgcg atctttggca gtgctatcac cgcaatggca     1680
ttgaaaaagt tcccgcccat tacagctggg atcaacatgt caataccctg tttgagcgca     1740
tggaaacggt ggctttgcct cgtcgtcgtg ctgtcagttt cgtacggagt cgcaaacgct     1800
tgattgatgc caaacgcctt gtcgttagtg acatcgacaa cacactgttg ggcgatcgtc     1860
aaggactcga gaatttaatg acctatctcg atcagtatcg cgatcatttt gcctttggaa     1920
ttgccacggg gcgtcgccta gactctgccc aagaagtctt gaaagagtgg ggcgttcctt     1980
cgccaaactt ctgggtgact tccgtcggca gcgagattca ctatggcacc gatgctgaac     2040
cggatatcag ctgggaaaag catatcaatc gcaactggaa tcctcagcga attcgggcag     2100
taatggcaca actacccttt cttgaactgc agccggaaga ggatcaaaca cccttcaaag     2160
tcagcttctt tgtccgcgat cgccacgaga ctgtgctgcg agaagtacgg caacatcttc     2220
gccgccatcg cctgcggctg aagtcaatct attcccatca ggagtttctt gacattctgc     2280
cgctagctgc ctcgaaaggg gatgcgattc gccacctctc actccgctgg cggattcctc     2340
ttgagaacat tttggtggca ggcgattctg gtaacgatga ggaaatgctc aagggccata     2400
atctcggcgt tgtagttggc aattactcac cggaattgga gccactgcgc agctacgagc     2460
gcgtctattt tgctgagggc cactatgcta atggcattct ggaagcctta aaacactatc     2520
gcttttttga ggcgatcgct taaccttttc agaatgagac gttgatcggc acgtaagcgt     2580
gagacgttga tcggcacgta agaggttcca actttcacca taatgaaata agatcactac     2640
cgggcgtatt ttttgagtta tcgagatttt caggagctaa ggaagctaaa atggagaaaa     2700
aaatcactgg atataccacc gttgatatat cccaatggca tcgtaaagaa cattttgagg     2760
catttcagtc agttgctcaa tgtacctata accagaccgt tcagctggat attacggcct     2820
ttttaaagac cgtaaagaaa aataagcaca agttttatcc ggcctttatt cacattcttg     2880
cccgcctgat gaatgctcat ccggaattcc gtatggcaat gaaagacggt gagctggtga     2940
tatgggatag tgttcaccct tgttacaccg ttttccatga gcaaactgaa acgttttcat     3000
cgctctggag tgaataccac gacgatttcc ggcagtttct acacatatat tcgcaagatg     3060
tggcgtgtta cggtgaaaac ctggcctatt tccctaaagg gtttattgag aatatgtttt     3120
tcgtctcagc caatccctgg gtgagtttca ccagttttga tttaaacgtg gccaatatgg     3180
acaacttctt cgcccccgtt ttcaccatgg gcaaatatta tacgcaaggc gacaaggtgc     3240
tgatgccgct ggcgattcag gttcatcatg ccgtttgtga tggcttccat gtcggcagaa     3300
tgcttaatga attacaacag tactgcgatg agtggcaggg cggggcgtaa tttttttaag     3360
gcagttattg gtgcccttaa acgcctggtt gctacgcctg aataagtgat aataagcgga     3420
tgaatggcag aaattcgatg ataagctgtc aaacacaacc accatcaaac aggattttcg     3480
cctgctgggg caaaccagcg tggaccgctt gctgcaactc tctcagggcc aggcggtgaa     3540
gggcaatcag ctgttgcccg tctcactggt gaaaagaaaa accaccctgg cgcccaatac     3600
gcaaaccgcc tctccccgcg cgttggccga ttcattaatg cagctggcac gacaggtttc     3660
ccgactggaa agcgggcagt gagcgcaacg caattaatgt aagttagcgc gaattgcaag     3720
ctggccgacg cgctgggcta cgtcttgctg gcgttcggga gcagaagagc atacatctgg     3780
aagcaaagcc aggaaagcgg cctatggagc tgtgcggcag cgctcagtag gcaatttttc     3840
aaaatattgt taagcctttt ctgagcatgg tatttttcat ggtattacca attagcagga     3900
aaataagcca ttgaatataa aagataaaaa tgtcttgttt acaatagagt ggggggggtc     3960
agcctgccgc cttgggccgg gtgatgtcgt acttgcccgc cgcgaactcg gttaccgtcc     4020
agcccagcgc gaccagctcc ggcaacgcct cgcgcacccg cttgcggcgc ttgcgcatgg     4080
tcgaaccact ggcctctgac ggccagacat agccgcacaa ggtatctatg gaagccttgc     4140
cggttttgcc ggggtcgatc cagccacaca gccgctggtg cagcaggcgg gcggtttcgc     4200
tgtccagcgc ccgcacctcg tccatgctga tgcgcacatg ctggccgcca cccatgacgg     4260
cctgcgcgat caaggggttc agggccacgt acaggcgccc gtccgcctcg tcgctggcgt     4320
actccgacag cagccgaaac ccctgccgct tgcggccatt ctgggcgatg atggatacct     4380
tccaaaggcg ctcgatgcag tcctgtatgt gcttgagcgc cccaccacta tcgacctctg     4440
ccccgatttc ctttgccagc gcccgatagc tacctttgac cacatggcat tcagcggtga     4500
cggcctccca cttgggttcc aggaacagcc ggagctgccg tccgccttcg gtcttgggtt     4560
ccgggccaag cactaggcca ttaggcccag ccatggccac cagcccttgc aggatgcgca     4620
gatcatcagc gcccagcggc tccgggccgc tgaactcgat ccgcttgccg tcgccgtagt     4680
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cgggggccag acagtgcgcc gggtcgtgcc ggacgtggct gaggctgtgc ttgttcttag     4800
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accccgccgt catgccgcct gaaccaccga tcagcgaacg gtgcgccata gttggccttg     4920
ctcacaccga agcggacgaa gaaccggcgc tggtcgtcgt ccacacccca ttcctcggcc     4980
tcggcgctgg tcatgctcga caggtaggac tgccagcgga tgttatcgac cagtaccgag     5040
ctgccccggc tggcctgctg ctggtcgcct gcgcccatca tggccgcgcc cttgctggca     5100
tggtgcagga acacgataga gcacccggta tcggcggcga tggcctccat gcgaccgatg     5160
acctgggcca tggggccgct ggcgttttct tcctcgatgt ggaaccggcg cagcgtgtcc     5220
agcaccatca ggcggcggcc ctcggcggcg cgcttgaggc cgtcgaacca ctccggggcc     5280
atgatgttgg gcaggctgcc gatcagcggc tggatcagca ggccgtcagc cacggcttgc     5340
cgttcctcgg cgctgaggtg cgccccaagg gcgtgcaggc ggtgatgaat ggcggtgggc     5400
gggtcttcgg cgggcaggta gatcaccggg ccggtgggca gttcgcccac ctccagcaga     5460
tccggcccgc ctgcaatctg tgcggccagt tgcagggcca gcatggattt accggcacca     5520
ccgggcgaca ccagcgcccc gaccgtaccg gccaccatgt tgggcaaaac gtagtccagc     5580
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tgcctccttt gcaggcagtt ggtggttagg cgctggcggg gtcactaccc ccgccctgcg     5700
ccgctctgag ttcttccagg cactcgcgca gcgcctcgta ttcgtcgtcg gtcagccaga     5760
acttgcgctg acgcatccct ttggccttca tgcgctcggc atatcgcgct tggcgtacag     5820
cgtcagggct ggccagcagg tcgccggtct gcttgtcctt ttggtctttc atatcagtca     5880
ccgagaaact tgccggggcc gaaaggcttg tcttcgcgga acaaggacaa ggtgcagccg     5940
tcaaggttaa ggctggccat atcagcgact gaaaagcggc cagcctcggc cttgtttgac     6000
gtataaccaa agccaccggg caaccaatag cccttgtcac ttttgatcag gtagaccgac     6060
cctgaagcgc ttttttcgta ttccataaaa cccccttctg tgcgtgagta ctcatagtat     6120
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tcccggccct cggctttcat gtcatccagg tcaaactcgc tgaggtcgtc caccagcacc     6900
agaccatgcc gctcctgctc ggcgggcctg atatacacgt cattgccctg ggcattcatc     6960
cgcttgagcc atggcgtgtt ctggagcact tcggcggctg accattcccg gttcatcatc     7020
tggccggtgg gtgcgtccct gacgccgata tcgaagcgct cacagcccat ggccttgagc     7080
tgtcggccta tggcctgcaa agtcctgtcg ttcttcatcg ggccaccaag cgcagccaga     7140
tcgagccgtc ctcggttgtc agtggcgtca ggtcgagcaa gagcaacgat gcgatcagca     7200
gcaccaccgt aggcatcatg gaagccagca tcacggttag ccatagcttc cagtgccacc     7260
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actctttggc cagctccacc catgccgccc ctgtctggcg ctgggctttc agccactccg     7380
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cggctgaggg taaaagaact ttccgctaag cgatagactg tatgtaaaca cagtattgca     9300
aggacgcgga acatgcctca tgtggcggcc aggacggcca gccgggatcg ggatactggt     9360
cgttaccaga gccaccgacc cgagcaaacc cttctctatc agatcgttga cgagtattac     9420
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gaagcattta tcagggttat tgtctcatga gcggatacat atttgaatgt atttagaaaa    10560
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<212>  DNA
<213>  Artificial
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tgcatgccga gcctgatgtg tgacacctaa gatcactcca gttctctttg gaaactggct       60
gatgagtgaa gacaccatct ttggcaagat catccggcgc gagattccag cagacattgt      120
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gggcgatcgc ggtgttgttc tccaacagga actgagccgc tttctgcgcg acccagaaaa     1440
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cagcgaacgg tgcgccatag ttggccttgc tcacaccgaa gcggacgaag aaccggcgct     5220
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caaactcgct gaggtcgtcc accagcacca gaccatgccg ctcctgctcg gcgggcctga     7200
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tctgctcaag ccatgccttg ggcttgagcg cttcggtctt ctgtgccccg cccttctccg     8100
gggtcttgcc gttgtaccgc ttgaaccact gagcggcggg ccgctcgatg ccgtcattga     8160
tccgctcgga gatcatcagg tggcagtgcg ggttctcgcc gccaccggca tggatggcca     8220
gcgtatacgg caggcgctcg gcaccggtca ggtgctgggc gaactcggac gccagcgcct     8280
tctgctggtc gagggtcagc tcgaccggca gggcaaattc gacctccttg aacagccgcc     8340
cattggcgcg ttcatacagg tcggcagcat cccagtagtc ggcgggccgc tcgacgaact     8400
ccggcatgtg cccggattcg gcgtgcaaga cttcatccat gtcgcgggca tacttgcctt     8460
cgcgctggat gtagtcggcc ttggccctgg ccgattggcc gcccgacctg ctgccggttt     8520
tcgccgtaag gtgataaatc gccatgctgc ctcgctgttg cttttgcttt tcggctccat     8580
gcaatggccc tcggagagcg caccgcccga agggtggccg ttaggccagt ttctcgaaga     8640
gaaaccggta agtgcgccct cccctacaaa gtagggtcgg gattgccgcc gctgtgcctc     8700
catgatagcc tacgagacag cacattaaca atggggtgtc aagatggtta aggggagcaa     8760
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gccgggcata ttgggcaagg gcagcagcgc cccacaaggg cgctgataac cgcgcctagt     9300
ggattattct tagataatca tggatggatt tttccaacac cccgccagcc cccgcccctg     9360
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ggacggccag ccgggatcgg gatactggtc gttaccagag ccaccgaccc gagcaaaccc     9660
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tggagcatgg ctttctacgg gttcgctgcg agtcttgcca cgccgagcac ctggtcgctt     9840
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cagtgaggca cctatctcag cgatctgtct atttcgttca tccatagttg cctgactccc     9960
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ggccgagcgc agaagtggtc ctgcaacttt atccgcctcc atccagtcta ttaattgttg    10140
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tcctccgatc gttgtcagaa gtaagttggc cgcagtgtta tcactcatgg ttatggcagc    10380
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ctcaaccaag tcattctgag aatagtgtat gcggcgaccg agttgctctt gcccggcgtc    10500
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ttcttcgggg cgaaaactct caaggatctt accgctgttg agatccagtt cgatgtaacc    10620
cactcgtgca cccaactgat cttcagcatc ttttactttc accagcgttt ctgggtgagc    10680
aaaaacagga aggcaaaatg ccgcaaaaaa gggaataagg gcgacacgga aatgttgaat    10740
actcatactc ttcctttttc aatattattg aagcatttat cagggttatt gtctcatgag    10800
cggatacata tttgaatgta tttagaaaaa taaacaaaag agtttgtaga aacgcaaaaa    10860
ggccatccgt caggatggcc ttctgcttaa tttgatgcct ggcagtttat ggcgggcgtc    10920
ctgcccgcca ccctccgggc cgttgcttcg caacgttcaa atccgctccc ggcggatttg    10980
tcctactcag gagagcgttc accgacaaac aacagataaa acgaaaggcc cagtctttcg    11040
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acactaccat cggcgctacg gcgtttcact tctgagttcg gcatggggtc aggtgggacc    11160
accgcgctac tgccgccagg caaattctgt tttatcagac cgcttctgcg ttctgattta    11220
atctgtatca ggctgaaaat cttctctcat ccgccaaaac agccaagct                11269
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<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
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<400>  47
tgcatgcata aatttctgtt ttgaccaaac catcccgaca taactcggtc agggcttgca       60
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agccgtcact ctctgcaaac gctgcatcag tcatgtgcaa tcaatacagg ttaaaaacca      300
tgctaatggc tccacctaag cgggcttcag agtcaaggct tgtagcaatt gctactaaaa      360
actgcgatcg ctgctgaaat gagctggaat tctgtccctc tcagctcaaa aagtatcaat      420
gattacttaa tgtttgttct gcgcaaactt cttgcagaac atgcatgatt tacaaaaagt      480
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tgctcaaggg ccataatctc ggcgttgtag ttggcaatta ctcaccggaa ttggagccac     2640
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ccttaaaaca ctatcgcttt tttgaggcga tcgcttaacc ttttcagaat gagacgttga     2760
tcggcacgta agcgtgagac gttgatcggc acgtaagagg ttccaacttt caccataatg     2820
aaataagatc actaccgggc gtattttttg agttatcgag attttcagga gctaaggaag     2880
ctaaaatgga gaaaaaaatc actggatata ccaccgttga tatatcccaa tggcatcgta     2940
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tggatattac ggccttttta aagaccgtaa agaaaaataa gcacaagttt tatccggcct     3060
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tatattcgca agatgtggcg tgttacggtg aaaacctggc ctatttccct aaagggttta     3300
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cgtaattttt ttaaggcagt tattggtgcc cttaaacgcc tggttgctac gcctgaataa     3600
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taccgcttga accactgagc ggcgggccgc tcgatgccgt cattgatccg ctcggagatc     8100
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gattcggcgt gcaagacttc atccatgtcg cgggcatact tgccttcgcg ctggatgtag     8400
tcggccttgg ccctggccga ttggccgccc gacctgctgc cggttttcgc cgtaaggtga     8460
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atgagccggg ctgaatgatc gaccgagaca ggccctgcgg ggctgcacac gcgcccccac     9000
ccttcgggta gggggaaagg ccgctaaagc ggctaaaagc gctccagcgt atttctgcgg     9060
ggtttggtgt ggggtttagc gggctttgcc cgcctttccc cctgccgcgc agcggtgggg     9120
cggtgtgtag cctagcgcag cgaatagacc agctatccgg cctctggccg ggcatattgg     9180
gcaagggcag cagcgcccca caagggcgct gataaccgcg cctagtggat tattcttaga     9240
taatcatgga tggatttttc caacaccccg ccagcccccg cccctgctgg gtttgcaggt     9300
ttgggggcgt gacagttatt gcaggggttc gtgacagtta ttgcaggggg gcgtgacagt     9360
tattgcaggg gttcgtgaca gttagtacgg gagtgacggg cactggctgg caatgtctag     9420
caacggcagg catttcggct gagggtaaaa gaactttccg ctaagcgata gactgtatgt     9480
aaacacagta ttgcaaggac gcggaacatg cctcatgtgg cggccaggac ggccagccgg     9540
gatcgggata ctggtcgtta ccagagccac cgacccgagc aaacccttct ctatcagatc     9600
gttgacgagt attacccggc attcgctgcg cttatggcag agcagggaaa ggaattgccg     9660
ggctatgtgc aacgggaatt tgaagaattt ctccaatgcg ggcggctgga gcatggcttt     9720
ctacgggttc gctgcgagtc ttgccacgcc gagcacctgg tcgctttcag aaatcaatct     9780
aaagtatata tgagtaaact tggtctgaca gttaccaatg cttaatcagt gaggcaccta     9840
tctcagcgat ctgtctattt cgttcatcca tagttgcctg actccccgtc gtgtagataa     9900
ctacgatacg ggagggctta ccatctggcc ccagtgctgc aatgataccg cgagacccac     9960
gctcaccggc tccagattta tcagcaataa accagccagc cggaagggcc gagcgcagaa    10020
gtggtcctgc aactttatcc gcctccatcc agtctattaa ttgttgccgg gaagctagag    10080
taagtagttc gccagttaat agtttgcgca acgttgttgc cattgctaca ggcatcgtgg    10140
tgtcacgctc gtcgtttggt atggcttcat tcagctccgg ttcccaacga tcaaggcgag    10200
ttacatgatc ccccatgttg tgcaaaaaag cggttagctc cttcggtcct ccgatcgttg    10260
tcagaagtaa gttggccgca gtgttatcac tcatggttat ggcagcactg cataattctc    10320
ttactgtcat gccatccgta agatgctttt ctgtgactgg tgagtactca accaagtcat    10380
tctgagaata gtgtatgcgg cgaccgagtt gctcttgccc ggcgtcaaca cgggataata    10440
ccgcgccaca tagcagaact ttaaaagtgc tcatcattgg aaaacgttct tcggggcgaa    10500
aactctcaag gatcttaccg ctgttgagat ccagttcgat gtaacccact cgtgcaccca    10560
actgatcttc agcatctttt actttcacca gcgtttctgg gtgagcaaaa acaggaaggc    10620
aaaatgccgc aaaaaaggga ataagggcga cacggaaatg ttgaatactc atactcttcc    10680
tttttcaata ttattgaagc atttatcagg gttattgtct catgagcgga tacatatttg    10740
aatgtattta gaaaaataaa caaaagagtt tgtagaaacg caaaaaggcc atccgtcagg    10800
atggccttct gcttaatttg atgcctggca gtttatggcg ggcgtcctgc ccgccaccct    10860
ccgggccgtt gcttcgcaac gttcaaatcc gctcccggcg gatttgtcct actcaggaga    10920
gcgttcaccg acaaacaaca gataaaacga aaggcccagt ctttcgactg agcctttcgt    10980
tttatttgat gcctggcagt tccctactct cgcatgggga gaccccacac taccatcggc    11040
gctacggcgt ttcacttctg agttcggcat ggggtcaggt gggaccaccg cgctactgcc    11100
gccaggcaaa ttctgtttta tcagaccgct tctgcgttct gatttaatct gtatcaggct    11160
gaaaatcttc tctcatccgc caaaacagcc aagct                               11195
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<211>  11820
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  plasmid pLybAL19
<400>  48
tgcatgcctg caggtcgact ctagatggct acgagggcag acagtaagtg gatttaccat       60
aatcccttaa ttgtacgcac cgctaaaacg cgttcagcgc gatcacggca gcagacaggt      120
aaaaatggca acaaaccacc ctaaaaactg cgcgatcgcg cctgataaat tttaaccgta      180
tgaataccta tgcaaccaga gggtacaggc cacattaccc ccacttaatc cactgaagct      240
gccatttttc atggtttcac catcccagcg aagggccatg catgcatcga aattaatacg      300
acgaaattaa tacgactcac tatagggcaa ttgttatcag ctatgcgccg accagaacac      360
cttgccgatc agccaaacgt ctcttcaggc cactgactag cgataacttt ccccacaacg      420
gaacaactct cactgcatgg gatcattggg tactgtgggt ttagtggttg taaaaacacc      480
tgaccgctat ccctgatcag tttcttgaag gtaaactcat cacccccaag tctggctatg      540
cagaaatcac ctggctcaac agcctgctca gggtcaacga gaattaacat tccgtcagga      600
aagcttggct tggagcctgt tggtgcggtc atggaattac cttcaacctc aagccagaat      660
gcagaatcac tggctttctt ggttgtgctt acccatctct ccgcatcacc tttggtaaag      720
gttctaagct taggtgagaa catccctgcc tgaacatgag aaaaaacagg gtactcatac      780
tcacttctaa gtgacggctg catactaacc gcttcataca tctcgtagat ttctctggcg      840
attgaagggc taaattcttc aacgctaact ttgagaattt ttgtaagcaa tgcggcgtta      900
taagcattta atgcattgat gccattaaat aaagcaccaa cgcctgactg ccccatcccc      960
atcttgtctg cgacagattc ctgggataag ccaagttcat ttttcttttt ttcataaatt     1020
gctttaaggc gacgtgcgtc ctcaagctgc tcttgtgtta atggtttctt ttttgtgctc     1080
atacgttaaa tctatcaccg caagggataa atatctaaca ccgtgcgtgt tgactatttt     1140
acctctggcg gtgataatgg ttgcatctta agaaggagga tccatatggt accgagctcg     1200
aattggggcg ttttctgtga ggctgactag cgcgtggcag ctcaaaatct ctacattctg     1260
cacattcaga cccatggtct gctgcgaggg cagaacttgg aactggggcg agatgccgac     1320
accggcgggc agaccaagta cgtcttagaa ctggctcaag cccaagctaa atccccacaa     1380
gtccaacaag tcgacatcat cacccgccaa atcaccgacc cccgcgtcag tgttggttac     1440
agtcaggcga tcgaaccctt tgcgcccaaa ggtcggattg tccgtttgcc ttttggcccc     1500
aaacgctacc tccgtaaaga gctgctttgg ccccatctct acacctttgc ggatgcaatt     1560
ctccaatatc tggctcagca aaagcgcacc ccgacttgga ttcaggccca ctatgctgat     1620
gctggccaag tgggatcact gctgagtcgc tggttgaatg taccgctaat tttcacaggg     1680
cattctctgg ggcggatcaa gctaaaaaag ctgttggagc aagactggcc gcttgaggaa     1740
attgaagcgc aattcaatat tcaacagcga attgatgcgg aggagatgac gctcactcat     1800
gctgactgga ttgtcgccag cactcagcag gaagtggagg agcaataccg cgtttacgat     1860
cgctacaacc cagagcgcaa gcttgtcatt ccaccgggtg tcgataccga tcgcttcagg     1920
tttcagccct tgggcgatcg cggtgttgtt ctccaacagg aactgagccg ctttctgcgc     1980
gacccagaaa aacctcaaat tctctgcctc tgtcgccccg cacctcgcaa aaatgtaccg     2040
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gtactgggca gccgccaaga catcaaccag atggatcgcg gcagtcggca ggtgttccaa     2160
gagattttcc atctggtcga tcgctacgac ctctacggca gcgtcgccta tcccaaacag     2220
catcaggctg atgatgtgcc ggagttctat cgcctagcgg ctcattccgg cggggtattc     2280
gtcaatccgg cgctgaccga accttttggt ttgacaattt tggaggcagg aagctgcggc     2340
gtgccggtgg tggcaaccca tgatggcggc ccccaggaaa ttctcaaaca ctgtgatttc     2400
ggcactttag ttgatgtcag ccgacccgct aatatcgcga ctgcactcgc caccctgctg     2460
agcgatcgcg atctttggca gtgctatcac cgcaatggca ttgaaaaagt tcccgcccat     2520
tacagctggg atcaacatgt caataccctg tttgagcgca tggaaacggt ggctttgcct     2580
cgtcgtcgtg ctgtcagttt cgtacggagt cgcaaacgct tgattgatgc caaacgcctt     2640
gtcgttagtg acatcgacaa cacactgttg ggcgatcgtc aaggactcga gaatttaatg     2700
acctatctcg atcagtatcg cgatcatttt gcctttggaa ttgccacggg gcgtcgccta     2760
gactctgccc aagaagtctt gaaagagtgg ggcgttcctt cgccaaactt ctgggtgact     2820
tccgtcggca gcgagattca ctatggcacc gatgctgaac cggatatcag ctgggaaaag     2880
catatcaatc gcaactggaa tcctcagcga attcgggcag taatggcaca actacccttt     2940
cttgaactgc agccggaaga ggatcaaaca cccttcaaag tcagcttctt tgtccgcgat     3000
cgccacgaga ctgtgctgcg agaagtacgg caacatcttc gccgccatcg cctgcggctg     3060
aagtcaatct attcccatca ggagtttctt gacattctgc cgctagctgc ctcgaaaggg     3120
gatgcgattc gccacctctc actccgctgg cggattcctc ttgagaacat tttggtggca     3180
ggcgattctg gtaacgatga ggaaatgctc aagggccata atctcggcgt tgtagttggc     3240
aattactcac cggaattgga gccactgcgc agctacgagc gcgtctattt tgctgagggc     3300
cactatgcta atggcattct ggaagcctta aaacactatc gcttttttga ggcgatcgct     3360
taaccttttc agaatgagac gttgatcggc acgtaagcgt gagacgttga tcggcacgta     3420
agaggttcca actttcacca taatgaaata agatcactac cgggcgtatt ttttgagtta     3480
tcgagatttt caggagctaa ggaagctaaa atggagaaaa aaatcactgg atataccacc     3540
gttgatatat cccaatggca tcgtaaagaa cattttgagg catttcagtc agttgctcaa     3600
tgtacctata accagaccgt tcagctggat attacggcct ttttaaagac cgtaaagaaa     3660
aataagcaca agttttatcc ggcctttatt cacattcttg cccgcctgat gaatgctcat     3720
ccggaattcc gtatggcaat gaaagacggt gagctggtga tatgggatag tgttcaccct     3780
tgttacaccg ttttccatga gcaaactgaa acgttttcat cgctctggag tgaataccac     3840
gacgatttcc ggcagtttct acacatatat tcgcaagatg tggcgtgtta cggtgaaaac     3900
ctggcctatt tccctaaagg gtttattgag aatatgtttt tcgtctcagc caatccctgg     3960
gtgagtttca ccagttttga tttaaacgtg gccaatatgg acaacttctt cgcccccgtt     4020
ttcaccatgg gcaaatatta tacgcaaggc gacaaggtgc tgatgccgct ggcgattcag     4080
gttcatcatg ccgtttgtga tggcttccat gtcggcagaa tgcttaatga attacaacag     4140
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ataagctgtc aaacacaacc accatcaaac aggattttcg cctgctgggg caaaccagcg     4320
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cgttggccga ttcattaatg cagctggcac gacaggtttc ccgactggaa agcgggcagt     4500
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cctatggagc tgtgcggcag cgctcagtag gcaatttttc aaaatattgt taagcctttt     4680
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gtgatgtcgt acttgcccgc cgcgaactcg gttaccgtcc agcccagcgc gaccagctcc     4860
ggcaacgcct cgcgcacccg cttgcggcgc ttgcgcatgg tcgaaccact ggcctctgac     4920
ggccagacat agccgcacaa ggtatctatg gaagccttgc cggttttgcc ggggtcgatc     4980
cagccacaca gccgctggtg cagcaggcgg gcggtttcgc tgtccagcgc ccgcacctcg     5040
tccatgctga tgcgcacatg ctggccgcca cccatgacgg cctgcgcgat caaggggttc     5100
agggccacgt acaggcgccc gtccgcctcg tcgctggcgt actccgacag cagccgaaac     5160
ccctgccgct tgcggccatt ctgggcgatg atggatacct tccaaaggcg ctcgatgcag     5220
tcctgtatgt gcttgagcgc cccaccacta tcgacctctg ccccgatttc ctttgccagc     5280
gcccgatagc tacctttgac cacatggcat tcagcggtga cggcctccca cttgggttcc     5340
aggaacagcc ggagctgccg tccgccttcg gtcttgggtt ccgggccaag cactaggcca     5400
ttaggcccag ccatggccac cagcccttgc aggatgcgca gatcatcagc gcccagcggc     5460
tccgggccgc tgaactcgat ccgcttgccg tcgccgtagt catacgtcac gtccagcttg     5520
ctgcgcttgc gctcgccccg cttgagggca cggaacaggc cgggggccag acagtgcgcc     5580
gggtcgtgcc ggacgtggct gaggctgtgc ttgttcttag gcttcaccac ggggcacccc     5640
cttgctcttg cgctgcctct ccagcacggc gggcttgagc accccgccgt catgccgcct     5700
gaaccaccga tcagcgaacg gtgcgccata gttggccttg ctcacaccga agcggacgaa     5760
gaaccggcgc tggtcgtcgt ccacacccca ttcctcggcc tcggcgctgg tcatgctcga     5820
caggtaggac tgccagcgga tgttatcgac cagtaccgag ctgccccggc tggcctgctg     5880
ctggtcgcct gcgcccatca tggccgcgcc cttgctggca tggtgcagga acacgataga     5940
gcacccggta tcggcggcga tggcctccat gcgaccgatg acctgggcca tggggccgct     6000
ggcgttttct tcctcgatgt ggaaccggcg cagcgtgtcc agcaccatca ggcggcggcc     6060
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gatcaccggg ccggtgggca gttcgcccac ctccagcaga tccggcccgc ctgcaatctg     6300
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gaccgtaccg gccaccatgt tgggcaaaac gtagtccagc ggtggcggcg ctgctgcgaa     6420
cgcctccaga atattgatag gcttatgggt agccattgat tgcctccttt gcaggcagtt     6480
ggtggttagg cgctggcggg gtcactaccc ccgccctgcg ccgctctgag ttcttccagg     6540
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gaaaggcttg tcttcgcgga acaaggacaa ggtgcagccg tcaaggttaa ggctggccat     6780
atcagcgact gaaaagcggc cagcctcggc cttgtttgac gtataaccaa agccaccggg     6840
caaccaatag cccttgtcac ttttgatcag gtagaccgac cctgaagcgc ttttttcgta     6900
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caagcactac atgctgaaat ctggcccgcc cctgtccatg cctcgctggc ggggtgccgg     7020
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ggtgcgctcg atgtaatccg cttcgtggcc gggcttgcgc tctgccagcg ctgggctggc     7140
ctcggccatg gccttgccga tttcctcggc actgcggccc cggctggcca gcttctgcgc     7200
ggcgataaag tcgcacttgc tgaggtcatg accgaagcgc ttgaccagcc cggccatctc     7260
gctgcggtac tcgtccagcg ccgtgcgccg gtggcggcta agctgccgct cgggcagttc     7320
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caagcggcca tagtggcggc tgtcggcgct ggccgggtcg gcgtcgtact cgctggccag     7560
cgtccgggca atctgccccc gaagttcacc gcctgcggcg tcggccacct tgacccatgc     7620
ctgatagttc ttcgggctgg tttccactac cagggcaggc tcccggccct cggctttcat     7680
gtcatccagg tcaaactcgc tgaggtcgtc caccagcacc agaccatgcc gctcctgctc     7740
ggcgggcctg atatacacgt cattgccctg ggcattcatc cgcttgagcc atggcgtgtt     7800
ctggagcact tcggcggctg accattcccg gttcatcatc tggccggtgg gtgcgtccct     7860
gacgccgata tcgaagcgct cacagcccat ggccttgagc tgtcggccta tggcctgcaa     7920
agtcctgtcg ttcttcatcg ggccaccaag cgcagccaga tcgagccgtc ctcggttgtc     7980
agtggcgtca ggtcgagcaa gagcaacgat gcgatcagca gcaccaccgt aggcatcatg     8040
gaagccagca tcacggttag ccatagcttc cagtgccacc cccgcgacgc gctccgggcg     8100
ctctgcgcgg cgctgctcac ctcggcggct acctcccgca actctttggc cagctccacc     8160
catgccgccc ctgtctggcg ctgggctttc agccactccg ccgcctgcgc ctcgctggcc     8220
tgcttggtct ggctcatgac ctgccgggct tcgtcggcca gtgtcgccat gctctgggcc     8280
agcggttcga tctgctccgc taactcgttg atgcctctgg atttcttcac tctgtcgatt     8340
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gtcgatgttc agggccacgt ctgcccggtc ggtgcggatg ccccggcctt ccatctccac     8460
cacgttcggc cccaggtgaa caccgggcag gcgctcgatg ccctgcgcct caagtgttct     8520
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cgccagcgcc ttctgctggt cgagggtcag ctcgaccggc agggcaaatt cgacctcctt     8880
gaacagccgc ccattggcgc gttcatacag gtcggcagca tcccagtagt cggcgggccg     8940
ctcgacgaac tccggcatgt gcccggattc ggcgtgcaag acttcatcca tgtcgcgggc     9000
atacttgcct tcgcgctgga tgtagtcggc cttggccctg gccgattggc cgcccgacct     9060
gctgccggtt ttcgccgtaa ggtgataaat cgccatgctg cctcgctgtt gcttttgctt     9120
ttcggctcca tgcaatggcc ctcggagagc gcaccgcccg aagggtggcc gttaggccag     9180
tttctcgaag agaaaccggt aagtgcgccc tcccctacaa agtagggtcg ggattgccgc     9240
cgctgtgcct ccatgatagc ctacgagaca gcacattaac aatggggtgt caagatggtt     9300
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agttattgca ggggggcgtg acagttattg caggggttcg tgacagttag tacgggagtg    10020
acgggcactg gctggcaatg tctagcaacg gcaggcattt cggctgaggg taaaagaact    10080
ttccgctaag cgatagactg tatgtaaaca cagtattgca aggacgcgga acatgcctca    10140
tgtggcggcc aggacggcca gccgggatcg ggatactggt cgttaccaga gccaccgacc    10200
cgagcaaacc cttctctatc agatcgttga cgagtattac ccggcattcg ctgcgcttat    10260
ggcagagcag ggaaaggaat tgccgggcta tgtgcaacgg gaatttgaag aatttctcca    10320
atgcgggcgg ctggagcatg gctttctacg ggttcgctgc gagtcttgcc acgccgagca    10380
cctggtcgct ttcagaaatc aatctaaagt atatatgagt aaacttggtc tgacagttac    10440
caatgcttaa tcagtgaggc acctatctca gcgatctgtc tatttcgttc atccatagtt    10500
gcctgactcc ccgtcgtgta gataactacg atacgggagg gcttaccatc tggccccagt    10560
gctgcaatga taccgcgaga cccacgctca ccggctccag atttatcagc aataaaccag    10620
ccagccggaa gggccgagcg cagaagtggt cctgcaactt tatccgcctc catccagtct    10680
attaattgtt gccgggaagc tagagtaagt agttcgccag ttaatagttt gcgcaacgtt    10740
gttgccattg ctacaggcat cgtggtgtca cgctcgtcgt ttggtatggc ttcattcagc    10800
tccggttccc aacgatcaag gcgagttaca tgatccccca tgttgtgcaa aaaagcggtt    10860
agctccttcg gtcctccgat cgttgtcaga agtaagttgg ccgcagtgtt atcactcatg    10920
gttatggcag cactgcataa ttctcttact gtcatgccat ccgtaagatg cttttctgtg    10980
actggtgagt actcaaccaa gtcattctga gaatagtgta tgcggcgacc gagttgctct    11040
tgcccggcgt caacacggga taataccgcg ccacatagca gaactttaaa agtgctcatc    11100
attggaaaac gttcttcggg gcgaaaactc tcaaggatct taccgctgtt gagatccagt    11160
tcgatgtaac ccactcgtgc acccaactga tcttcagcat cttttacttt caccagcgtt    11220
tctgggtgag caaaaacagg aaggcaaaat gccgcaaaaa agggaataag ggcgacacgg    11280
aaatgttgaa tactcatact cttccttttt caatattatt gaagcattta tcagggttat    11340
tgtctcatga gcggatacat atttgaatgt atttagaaaa ataaacaaaa gagtttgtag    11400
aaacgcaaaa aggccatccg tcaggatggc cttctgctta atttgatgcc tggcagttta    11460
tggcgggcgt cctgcccgcc accctccggg ccgttgcttc gcaacgttca aatccgctcc    11520
cggcggattt gtcctactca ggagagcgtt caccgacaaa caacagataa aacgaaaggc    11580
ccagtctttc gactgagcct ttcgttttat ttgatgcctg gcagttccct actctcgcat    11640
ggggagaccc cacactacca tcggcgctac ggcgtttcac ttctgagttc ggcatggggt    11700
caggtgggac caccgcgcta ctgccgccag gcaaattctg ttttatcaga ccgcttctgc    11760
gttctgattt aatctgtatc aggctgaaaa tcttctctca tccgccaaaa cagccaagct    11820
<210>  49
<211>  11511
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  plasmid pLybAL21
<400>  49
tgcatgcacc agtaaacata aatctccccg gcgacgcaaa aaacgggtga ccatcaagcc       60
ggtgcgcttc ggcatttttc tgctttgcct agcaggcatt gtgggggggg caactgccct      120
aattatcaat cgtactggcg atcccctagg tgggttgcta gaagaccccc tagatgtttt      180
cctggaccaa ccttcagaat ttatccccga tgaagccacg agccggaatt tgattctcag      240
tcaacccaac ttcaatcagc aagtgggtca gatggtagta caaggctggc ttgatagtaa      300
aaagttagcc tttggccaaa actacgatgt cggggcattg cagagtgttt tagcccccaa      360
tctccttgcc caacaacggg gtcgggccca acgggatcaa gcccaaaagg tctatcacca      420
atacgaacac aagttgcaga ttttagccta tcaagttaac ccccaagacc ccaaccgagc      480
caccgttact gcccgggtag aagaaattag ccagcccttt accctaggta atcaacagca      540
gaagggctcc gccaccaaag atgacttgac tgtgcgctat cagctagtac gacaccaagg      600
ggtttggaaa attgaccaaa tacaagtggt aaatggcccc cgttagtgcg tggcgttaac      660
tccccttttg accaatggca tacggctaga tgcccccata ggtacggaaa cctgcacttc      720
cgagaactaa gcccctaccg tcactataag agtgtgaacg tgtcggcccc aggcaatgga      780
ttggaaccat ggcttttcgg cccatcgttg tgtcttatat tcttacttgt taacgggagt      840
taattaaaat tatgggaaaa gttgttggga ttgacctcgg taccgagctc gaattggggc      900
gttttctgtg aggctgacta gcgcgtggca gctcaaaatc tctacattct gcacattcag      960
acccatggtc tgctgcgagg gcagaacttg gaactggggc gagatgccga caccggcggg     1020
cagaccaagt acgtcttaga actggctcaa gcccaagcta aatccccaca agtccaacaa     1080
gtcgacatca tcacccgcca aatcaccgac ccccgcgtca gtgttggtta cagtcaggcg     1140
atcgaaccct ttgcgcccaa aggtcggatt gtccgtttgc cttttggccc caaacgctac     1200
ctccgtaaag agctgctttg gccccatctc tacacctttg cggatgcaat tctccaatat     1260
ctggctcagc aaaagcgcac cccgacttgg attcaggccc actatgctga tgctggccaa     1320
gtgggatcac tgctgagtcg ctggttgaat gtaccgctaa ttttcacagg gcattctctg     1380
gggcggatca agctaaaaaa gctgttggag caagactggc cgcttgagga aattgaagcg     1440
caattcaata ttcaacagcg aattgatgcg gaggagatga cgctcactca tgctgactgg     1500
attgtcgcca gcactcagca ggaagtggag gagcaatacc gcgtttacga tcgctacaac     1560
ccagagcgca agcttgtcat tccaccgggt gtcgataccg atcgcttcag gtttcagccc     1620
ttgggcgatc gcggtgttgt tctccaacag gaactgagcc gctttctgcg cgacccagaa     1680
aaacctcaaa ttctctgcct ctgtcgcccc gcacctcgca aaaatgtacc ggcgctggtg     1740
cgagcctttg gcgaacatcc ttggctgcgc aaaaaagcca accttgtctt agtactgggc     1800
agccgccaag acatcaacca gatggatcgc ggcagtcggc aggtgttcca agagattttc     1860
catctggtcg atcgctacga cctctacggc agcgtcgcct atcccaaaca gcatcaggct     1920
gatgatgtgc cggagttcta tcgcctagcg gctcattccg gcggggtatt cgtcaatccg     1980
gcgctgaccg aaccttttgg tttgacaatt ttggaggcag gaagctgcgg cgtgccggtg     2040
gtggcaaccc atgatggcgg cccccaggaa attctcaaac actgtgattt cggcacttta     2100
gttgatgtca gccgacccgc taatatcgcg actgcactcg ccaccctgct gagcgatcgc     2160
gatctttggc agtgctatca ccgcaatggc attgaaaaag ttcccgccca ttacagctgg     2220
gatcaacatg tcaataccct gtttgagcgc atggaaacgg tggctttgcc tcgtcgtcgt     2280
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gacatcgaca acacactgtt gggcgatcgt caaggactcg agaatttaat gacctatctc     2400
gatcagtatc gcgatcattt tgcctttgga attgccacgg ggcgtcgcct agactctgcc     2460
caagaagtct tgaaagagtg gggcgttcct tcgccaaact tctgggtgac ttccgtcggc     2520
agcgagattc actatggcac cgatgctgaa ccggatatca gctgggaaaa gcatatcaat     2580
cgcaactgga atcctcagcg aattcgggca gtaatggcac aactaccctt tcttgaactg     2640
cagccggaag aggatcaaac acccttcaaa gtcagcttct ttgtccgcga tcgccacgag     2700
actgtgctgc gagaagtacg gcaacatctt cgccgccatc gcctgcggct gaagtcaatc     2760
tattcccatc aggagtttct tgacattctg ccgctagctg cctcgaaagg ggatgcgatt     2820
cgccacctct cactccgctg gcggattcct cttgagaaca ttttggtggc aggcgattct     2880
ggtaacgatg aggaaatgct caagggccat aatctcggcg ttgtagttgg caattactca     2940
ccggaattgg agccactgcg cagctacgag cgcgtctatt ttgctgaggg ccactatgct     3000
aatggcattc tggaagcctt aaaacactat cgcttttttg aggcgatcgc ttaacctttt     3060
cagaatgaga cgttgatcgg cacgtaagcg tgagacgttg atcggcacgt aagaggttcc     3120
aactttcacc ataatgaaat aagatcacta ccgggcgtat tttttgagtt atcgagattt     3180
tcaggagcta aggaagctaa aatggagaaa aaaatcactg gatataccac cgttgatata     3240
tcccaatggc atcgtaaaga acattttgag gcatttcagt cagttgctca atgtacctat     3300
aaccagaccg ttcagctgga tattacggcc tttttaaaga ccgtaaagaa aaataagcac     3360
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cgtatggcaa tgaaagacgg tgagctggtg atatgggata gtgttcaccc ttgttacacc     3480
gttttccatg agcaaactga aacgttttca tcgctctgga gtgaatacca cgacgatttc     3540
cggcagtttc tacacatata ttcgcaagat gtggcgtgtt acggtgaaaa cctggcctat     3600
ttccctaaag ggtttattga gaatatgttt ttcgtctcag ccaatccctg ggtgagtttc     3660
accagttttg atttaaacgt ggccaatatg gacaacttct tcgcccccgt tttcaccatg     3720
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tgctacgcct gaataagtga taataagcgg atgaatggca gaaattcgat gataagctgt     3960
caaacacaac caccatcaaa caggattttc gcctgctggg gcaaaccagc gtggaccgct     4020
tgctgcaact ctctcagggc caggcggtga agggcaatca gctgttgccc gtctcactgg     4080
tgaaaagaaa aaccaccctg gcgcccaata cgcaaaccgc ctctccccgc gcgttggccg     4140
attcattaat gcagctggca cgacaggttt cccgactgga aagcgggcag tgagcgcaac     4200
gcaattaatg taagttagcg cgaattgcaa gctggccgac gcgctgggct acgtcttgct     4260
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ctgtgcggca gcgctcagta ggcaattttt caaaatattg ttaagccttt tctgagcatg     4380
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atgtcttgtt tacaatagag tggggggggt cagcctgccg ccttgggccg ggtgatgtcg     4500
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tagccgcaca aggtatctat ggaagccttg ccggttttgc cggggtcgat ccagccacac     4680
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cgctcgcccc gcttgagggc acggaacagg ccgggggcca gacagtgcgc cgggtcgtgc     5280
cggacgtggc tgaggctgtg cttgttctta ggcttcacca cggggcaccc ccttgctctt     5340
gcgctgcctc tccagcacgg cgggcttgag caccccgccg tcatgccgcc tgaaccaccg     5400
atcagcgaac ggtgcgccat agttggcctt gctcacaccg aagcggacga agaaccggcg     5460
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ggccaccatg ttgggcaaaa cgtagtccag cggtggcggc gctgctgcga acgcctccag     6120
aatattgata ggcttatggg tagccattga ttgcctcctt tgcaggcagt tggtggttag     6180
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gcccttgtca cttttgatca ggtagaccga ccctgaagcg cttttttcgt attccataaa     6600
acccccttct gtgcgtgagt actcatagta taacaggcgt gagtaccaac gcaagcacta     6660
catgctgaaa tctggcccgc ccctgtccat gcctcgctgg cggggtgccg gtgcccgtgc     6720
cagctcggcc cgcgcaagct ggacgctggg cagacccatg accttgctga cggtgcgctc     6780
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ggccttgccg atttcctcgg cactgcggcc ccggctggcc agcttctgcg cggcgataaa     6900
gtcgcacttg ctgaggtcat gaccgaagcg cttgaccagc ccggccatct cgctgcggta     6960
ctcgtccagc gccgtgcgcc ggtggcggct aagctgccgc tcgggcagtt cgaggctggc     7020
cagcctgcgg gccttctcct gctgccgctg ggcctgctcg atctgctggc cagcctgctg     7080
caccagcgcc gggccagcgg tggcggtctt gcccttggat tcacgcagca gcacccacgg     7140
ctgataaccg gcgcgggtgg tgtgcttgtc cttgcggttg gtgaagcccg ccaagcggcc     7200
atagtggcgg ctgtcggcgc tggccgggtc ggcgtcgtac tcgctggcca gcgtccgggc     7260
aatctgcccc cgaagttcac cgcctgcggc gtcggccacc ttgacccatg cctgatagtt     7320
cttcgggctg gtttccacta ccagggcagg ctcccggccc tcggctttca tgtcatccag     7380
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gttcttcatc gggccaccaa gcgcagccag atcgagccgt cctcggttgt cagtggcgtc     7680
aggtcgagca agagcaacga tgcgatcagc agcaccaccg taggcatcat ggaagccagc     7740
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gcgctgctca cctcggcggc tacctcccgc aactctttgg ccagctccac ccatgccgcc     7860
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tggctcatga cctgccgggc ttcgtcggcc agtgtcgcca tgctctgggc cagcggttcg     7980
atctgctccg ctaactcgtt gatgcctctg gatttcttca ctctgtcgat tgcgttcatg     8040
gtctattgcc tcccggtatt cctgtaagtc gatgatctgg gcgttggcgg tgtcgatgtt     8100
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ccccaggtga acaccgggca ggcgctcgat gccctgcgcc tcaagtgttc tgtggtcaat     8220
gcgggcgtcg tggccagccc gctctaatgc ccggttggca tggtcggccc atgcctcgcg     8280
ggtctgctca agccatgcct tgggcttgag cgcttcggtc ttctgtgccc cgcccttctc     8340
cggggtcttg ccgttgtacc gcttgaacca ctgagcggcg ggccgctcga tgccgtcatt     8400
gatccgctcg gagatcatca ggtggcagtg cgggttctcg ccgccaccgg catggatggc     8460
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cttctgctgg tcgagggtca gctcgaccgg cagggcaaat tcgacctcct tgaacagccg     8580
cccattggcg cgttcataca ggtcggcagc atcccagtag tcggcgggcc gctcgacgaa     8640
ctccggcatg tgcccggatt cggcgtgcaa gacttcatcc atgtcgcggg catacttgcc     8700
ttcgcgctgg atgtagtcgg ccttggccct ggccgattgg ccgcccgacc tgctgccggt     8760
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atgcaatggc cctcggagag cgcaccgccc gaagggtggc cgttaggcca gtttctcgaa     8880
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tccatgatag cctacgagac agcacattaa caatggggtg tcaagatggt taaggggagc     9000
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gtgctggtgg gggccatgat tttggccaag gtgaacagca gcgagtggcc ggaggatcgg     9180
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gcacacgcgc ccccaccctt cgggtagggg gaaaggccgc taaagcggct aaaagcgctc     9360
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gctacaggca tcgtggtgtc acgctcgtcg tttggtatgg cttcattcag ctccggttcc    10500
caacgatcaa ggcgagttac atgatccccc atgttgtgca aaaaagcggt tagctccttc    10560
ggtcctccga tcgttgtcag aagtaagttg gccgcagtgt tatcactcat ggttatggca    10620
gcactgcata attctcttac tgtcatgcca tccgtaagat gcttttctgt gactggtgag    10680
tactcaacca agtcattctg agaatagtgt atgcggcgac cgagttgctc ttgcccggcg    10740
tcaacacggg ataataccgc gccacatagc agaactttaa aagtgctcat cattggaaaa    10800
cgttcttcgg ggcgaaaact ctcaaggatc ttaccgctgt tgagatccag ttcgatgtaa    10860
cccactcgtg cacccaactg atcttcagca tcttttactt tcaccagcgt ttctgggtga    10920
gcaaaaacag gaaggcaaaa tgccgcaaaa aagggaataa gggcgacacg gaaatgttga    10980
atactcatac tcttcctttt tcaatattat tgaagcattt atcagggtta ttgtctcatg    11040
agcggataca tatttgaatg tatttagaaa aataaacaaa agagtttgta gaaacgcaaa    11100
aaggccatcc gtcaggatgg ccttctgctt aatttgatgc ctggcagttt atggcgggcg    11160
tcctgcccgc caccctccgg gccgttgctt cgcaacgttc aaatccgctc ccggcggatt    11220
tgtcctactc aggagagcgt tcaccgacaa acaacagata aaacgaaagg cccagtcttt    11280
cgactgagcc tttcgtttta tttgatgcct ggcagttccc tactctcgca tggggagacc    11340
ccacactacc atcggcgcta cggcgtttca cttctgagtt cggcatgggg tcaggtggga    11400
ccaccgcgct actgccgcca ggcaaattct gttttatcag accgcttctg cgttctgatt    11460
taatctgtat caggctgaaa atcttctctc atccgccaaa acagccaagc t             11511
<210>  50
<211>  11219
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  plasmid pLybAL22
<400>  50
tgcatgcaaa gctcactaac tgggcgggat tttccgggtc cggttgctga cggtaatagt       60
cgtctaaaag tttggccaca tccaaaaggc tgtcggcggg gggatgctgg ccggcgaggg      120
gattaattct gcttgtcata tacaaaaatt gtaaaaaatg gagggcggcg atcaggggct      180
tagacaccca aatcctagcc aaaaagggtt aactagccaa gggctatcca tgggcaaaga      240
gataaaagaa aaagtctcca aatccctggt catagagaaa aaattgccaa agttacccca      300
ggccatacac ggcccagcgc caagatgggg agcacaaatt caaactttgt aaacaggccg      360
gaagctatcc ggccaaggag cactcagatt gtgttaacgt tcaggggagt tgcttaacac      420
aattttccaa ttaatagtat taatattttc ttaacttgca ccgtaccatg gtgagaaagc      480
ctatctgagc ccttatttga ttaaccttcg actgattatt gatcccctgt gcagtctccc      540
ctctccctct gtctttttgc tcccgaacac gttgcccata gactcaggta ccgagctcga      600
attggggcgt tttctgtgag gctgactagc gcgtggcagc tcaaaatctc tacattctgc      660
acattcagac ccatggtctg ctgcgagggc agaacttgga actggggcga gatgccgaca      720
ccggcgggca gaccaagtac gtcttagaac tggctcaagc ccaagctaaa tccccacaag      780
tccaacaagt cgacatcatc acccgccaaa tcaccgaccc ccgcgtcagt gttggttaca      840
gtcaggcgat cgaacccttt gcgcccaaag gtcggattgt ccgtttgcct tttggcccca      900
aacgctacct ccgtaaagag ctgctttggc cccatctcta cacctttgcg gatgcaattc      960
tccaatatct ggctcagcaa aagcgcaccc cgacttggat tcaggcccac tatgctgatg     1020
ctggccaagt gggatcactg ctgagtcgct ggttgaatgt accgctaatt ttcacagggc     1080
attctctggg gcggatcaag ctaaaaaagc tgttggagca agactggccg cttgaggaaa     1140
ttgaagcgca attcaatatt caacagcgaa ttgatgcgga ggagatgacg ctcactcatg     1200
ctgactggat tgtcgccagc actcagcagg aagtggagga gcaataccgc gtttacgatc     1260
gctacaaccc agagcgcaag cttgtcattc caccgggtgt cgataccgat cgcttcaggt     1320
ttcagccctt gggcgatcgc ggtgttgttc tccaacagga actgagccgc tttctgcgcg     1380
acccagaaaa acctcaaatt ctctgcctct gtcgccccgc acctcgcaaa aatgtaccgg     1440
cgctggtgcg agcctttggc gaacatcctt ggctgcgcaa aaaagccaac cttgtcttag     1500
tactgggcag ccgccaagac atcaaccaga tggatcgcgg cagtcggcag gtgttccaag     1560
agattttcca tctggtcgat cgctacgacc tctacggcag cgtcgcctat cccaaacagc     1620
atcaggctga tgatgtgccg gagttctatc gcctagcggc tcattccggc ggggtattcg     1680
tcaatccggc gctgaccgaa ccttttggtt tgacaatttt ggaggcagga agctgcggcg     1740
tgccggtggt ggcaacccat gatggcggcc cccaggaaat tctcaaacac tgtgatttcg     1800
gcactttagt tgatgtcagc cgacccgcta atatcgcgac tgcactcgcc accctgctga     1860
gcgatcgcga tctttggcag tgctatcacc gcaatggcat tgaaaaagtt cccgcccatt     1920
acagctggga tcaacatgtc aataccctgt ttgagcgcat ggaaacggtg gctttgcctc     1980
gtcgtcgtgc tgtcagtttc gtacggagtc gcaaacgctt gattgatgcc aaacgccttg     2040
tcgttagtga catcgacaac acactgttgg gcgatcgtca aggactcgag aatttaatga     2100
cctatctcga tcagtatcgc gatcattttg cctttggaat tgccacgggg cgtcgcctag     2160
actctgccca agaagtcttg aaagagtggg gcgttccttc gccaaacttc tgggtgactt     2220
ccgtcggcag cgagattcac tatggcaccg atgctgaacc ggatatcagc tgggaaaagc     2280
atatcaatcg caactggaat cctcagcgaa ttcgggcagt aatggcacaa ctaccctttc     2340
ttgaactgca gccggaagag gatcaaacac ccttcaaagt cagcttcttt gtccgcgatc     2400
gccacgagac tgtgctgcga gaagtacggc aacatcttcg ccgccatcgc ctgcggctga     2460
agtcaatcta ttcccatcag gagtttcttg acattctgcc gctagctgcc tcgaaagggg     2520
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gcgattctgg taacgatgag gaaatgctca agggccataa tctcggcgtt gtagttggca     2640
attactcacc ggaattggag ccactgcgca gctacgagcg cgtctatttt gctgagggcc     2700
actatgctaa tggcattctg gaagccttaa aacactatcg cttttttgag gcgatcgctt     2760
aaccttttca gaatgagacg ttgatcggca cgtaagcgtg agacgttgat cggcacgtaa     2820
gaggttccaa ctttcaccat aatgaaataa gatcactacc gggcgtattt tttgagttat     2880
cgagattttc aggagctaag gaagctaaaa tggagaaaaa aatcactgga tataccaccg     2940
ttgatatatc ccaatggcat cgtaaagaac attttgaggc atttcagtca gttgctcaat     3000
gtacctataa ccagaccgtt cagctggata ttacggcctt tttaaagacc gtaaagaaaa     3060
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cggaattccg tatggcaatg aaagacggtg agctggtgat atgggatagt gttcaccctt     3180
gttacaccgt tttccatgag caaactgaaa cgttttcatc gctctggagt gaataccacg     3240
acgatttccg gcagtttcta cacatatatt cgcaagatgt ggcgtgttac ggtgaaaacc     3300
tggcctattt ccctaaaggg tttattgaga atatgttttt cgtctcagcc aatccctggg     3360
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cgcctggttg ctacgcctga ataagtgata ataagcggat gaatggcaga aattcgatga     3660
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cctgtatgtg cttgagcgcc ccaccactat cgacctctgc cccgatttcc tttgccagcg     4680
cccgatagct acctttgacc acatggcatt cagcggtgac ggcctcccac ttgggttcca     4740
ggaacagccg gagctgccgt ccgccttcgg tcttgggttc cgggccaagc actaggccat     4800
taggcccagc catggccacc agcccttgca ggatgcgcag atcatcagcg cccagcggct     4860
ccgggccgct gaactcgatc cgcttgccgt cgccgtagtc atacgtcacg tccagcttgc     4920
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ggtcgtgccg gacgtggctg aggctgtgct tgttcttagg cttcaccacg gggcaccccc     5040
ttgctcttgc gctgcctctc cagcacggcg ggcttgagca ccccgccgtc atgccgcctg     5100
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aaccggcgct ggtcgtcgtc cacaccccat tcctcggcct cggcgctggt catgctcgac     5220
aggtaggact gccagcggat gttatcgacc agtaccgagc tgccccggct ggcctgctgc     5280
tggtcgcctg cgcccatcat ggccgcgccc ttgctggcat ggtgcaggaa cacgatagag     5340
cacccggtat cggcggcgat ggcctccatg cgaccgatga cctgggccat ggggccgctg     5400
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gccccaaggg cgtgcaggcg gtgatgaatg gcggtgggcg ggtcttcggc gggcaggtag     5640
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gcctccagaa tattgatagg cttatgggta gccattgatt gcctcctttg caggcagttg     5880
gtggttaggc gctggcgggg tcactacccc cgccctgcgc cgctctgagt tcttccaggc     5940
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tggccttcat gcgctcggca tatcgcgctt ggcgtacagc gtcagggctg gccagcaggt     6060
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cgttcatggt ctattgcctc ccggtattcc tgtaagtcga tgatctgggc gttggcggtg     7800
tcgatgttca gggccacgtc tgcccggtcg gtgcggatgc cccggccttc catctccacc     7860
acgttcggcc ccaggtgaac accgggcagg cgctcgatgc cctgcgcctc aagtgttctg     7920
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tcgacgaact ccggcatgtg cccggattcg gcgtgcaaga cttcatccat gtcgcgggca     8400
tacttgcctt cgcgctggat gtagtcggcc ttggccctgg ccgattggcc gcccgacctg     8460
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tcggctccat gcaatggccc tcggagagcg caccgcccga agggtggccg ttaggccagt     8580
ttctcgaaga gaaaccggta agtgcgccct cccctacaaa gtagggtcgg gattgccgcc     8640
gctgtgcctc catgatagcc tacgagacag cacattaaca atggggtgtc aagatggtta     8700
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cctgactccc cgtcgtgtag ataactacga tacgggaggg cttaccatct ggccccagtg     9960
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ccggttccca acgatcaagg cgagttacat gatcccccat gttgtgcaaa aaagcggtta    10260
gctccttcgg tcctccgatc gttgtcagaa gtaagttggc cgcagtgtta tcactcatgg    10320
ttatggcagc actgcataat tctcttactg tcatgccatc cgtaagatgc ttttctgtga    10380
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ttggaaaacg ttcttcgggg cgaaaactct caaggatctt accgctgttg agatccagtt    10560
cgatgtaacc cactcgtgca cccaactgat cttcagcatc ttttactttc accagcgttt    10620
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gtctcatgag cggatacata tttgaatgta tttagaaaaa taaacaaaag agtttgtaga    10800
aacgcaaaaa ggccatccgt caggatggcc ttctgcttaa tttgatgcct ggcagtttat    10860
ggcgggcgtc ctgcccgcca ccctccgggc cgttgcttcg caacgttcaa atccgctccc    10920
ggcggatttg tcctactcag gagagcgttc accgacaaac aacagataaa acgaaaggcc    10980
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gggagacccc acactaccat cggcgctacg gcgtttcact tctgagttcg gcatggggtc    11100
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<213>  Artificial
<220>
<223>  plasmid pLybAL13f
<400>  51
cgaccaattc acgtgtttga cagcttatca tcgaatttct gccattcatc cgcttattat       60
cacttattca ggcgtagcaa ccaggcgttt aagggcacca ataactgcct taaaaaaatt      120
acgccccgcc ctgccactca tcgcagtact gttgtaattc attaagcatt ctgccgacat      180
ggaagccatc acaaacggca tgatgaacct gaatcgccag cggcatcagc accttgtcgc      240
cttgcgtata atatttgccc atggtgaaaa cgggggcgaa gaagttgtcc atattggcca      300
cgtttaaatc aaaactggtg aaactcaccc agggattggc tgagacgaaa aacatattct      360
caataaaccc tttagggaaa taggccaggt tttcaccgta acacgccaca tcttgcgaat      420
atatgtgtag aaactgccgg aaatcgtcgt ggtattcact ccagagcgat gaaaacgttt      480
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<210>  52
<211>  4962
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  plasmid pLybAL13r
<400>  52
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tgaaacctga agcgatcggt atcgacaccc ggtggaatga caagcttgcg ctctgggttg     2400
tagcgatcgt aaacgcggta ttgctcctcc acttcctgct gagtgctggc gacaatccag     2460
tcagcatgag tgagcgtcat ctcctccgca tcaattcgct gttgaatatt gaattgcgct     2520
tcaatttcct caagcggcca gtcttgctcc aacagctttt ttagcttgat ccgccccaga     2580
gaatgccctg tgaaaattag cggtacattc aaccagcgac tcagcagtga tcccacttgg     2640
ccagcatcag catagtgggc ctgaatccaa gtcggggtgc gcttttgctg agccagatat     2700
tggagaattg catccgcaaa ggtgtagaga tggggccaaa gcagctcttt acggaggtag     2760
cgtttggggc caaaaggcaa acggacaatc cgacctttgg gcgcaaaggg ttcgatcgcc     2820
tgactgtaac caacactgac gcgggggtcg gtgatttggc gggtgatgat gtcgacttgt     2880
tggacttgtg gggatttagc ttgggcttga gccagttcta agacgtactt ggtctgcccg     2940
ccggtgtcgg catctcgccc cagttccaag ttctgccctc gcagcagacc atgggtctga     3000
atgtgcagaa tgtagagatt ttgagctgcc acgcgctagt cagcctcaca gaaaacgccc     3060
caattgtagt ctaacgaatt caagcttgat atcattcagg acgagcctca gactccagcg     3120
taactggact gcaatcaact cactggctca ccttcacggg tgggcctttc ttcggtagaa     3180
aatcaaagga tcttcttgag atcctttttt tctgcgcgta atctgctgct tgcaaacaaa     3240
aaaaccaccg ctaccagcgg tggtttgttt gccggatcaa gagctaccaa ctctttttcc     3300
gaggtaactg gcttcagcag agcgcagata ccaaatactg ttcttctagt gtagccgtag     3360
ttaggccacc acttcaagaa ctctgtagca ccgcctacat acctcgctct gctaatcctg     3420
ttaccagtgg ctgctgccag tggcgataag tcgtgtctta ccgggttgga ctcaagacga     3480
tagttaccgg ataaggcgca gcggtcgggc tgaacggggg gttcgtgcac acagcccagc     3540
ttggagcgaa cgacctacac cgaactgaga tacctacagc gtgagctatg agaaagcgcc     3600
acgcttcccg aagggagaaa ggcggacagg tatccggtaa gcggcagggt cggaacagga     3660
gagcgcacga gggagcttcc agggggaaac gcctggtatc tttatagtcc tgtcgggttt     3720
cgccacctct gacttgagca tcgatttttg tgatgctcgt caggggggcg gagcctatgg     3780
aaaaacgcca gcaacgcaga aaggcccacc cgaaggtgag ccaggtgatt acatttgggc     3840
cctcatcaga ggttttcacc gtcatcaccg aaacgcgcga ggcagctgcg gtaaagctca     3900
tcagcgtggt cgtgaagcga ttcacagatg tctgcctgtt catccgcgtc cagctcgttg     3960
agtttctcca gaagcgttaa tgtctggctt ctgataaagc gggccatgtt aagggcggtt     4020
ttttcctgtt tggtcattta gaaaaactca tcgagcatca agtgaaactg caatttattc     4080
atatcaggat tatcaatacc atatttttga aaaagccgtt tctgtaatga aggagaaaac     4140
tcaccgaggc agttccatag gatggcaaga tcctggtatc ggtctgcgat tccgactcgt     4200
ccaacatcaa tacaacctat taatttcccc tcgtcaaaaa taaggttatc aagtgagaaa     4260
tcaccatgag tgacgactga atccggtgag aatggcaaaa gcttatgcat ttctttccag     4320
acttgttcaa caggccagcc attacgctcg tcatcaaaat cactcgcacc aaccaaaccg     4380
ttattcattc gtgattgcgc ctgagcgaga cgaaatacgc gatcgccgtt aaaaggacaa     4440
ttacaaacag gaatcgaatg caaccggcgc aggaacactg ccagcgcatc aacaatattt     4500
tcacctgaat caggatattc ttctaatacc tggaatgctg ttttccctgg gatcgcagtg     4560
gtgagtaacc atgcatcatc aggagtacgg ataaaatgct tgatggtcgg aagaggcata     4620
aattccgtca gccagtttag cctgaccatc tcatctgtaa catcattggc aacgctacct     4680
ttgccatgtt tcagaaacaa ctctggcgca tcgggcttcc catacaatcg atagattgtc     4740
gcacctgatt gcccgacatt atcgcgagcc catttatacc catataaatc agcatccatg     4800
ttggaattta atcgcggcct cgagcaagac gtttcccgtt gaatatggct cattttagct     4860
tccttagctc ctgaaaatct cgataactca aaaaatacgc ccggtagtga tcttatttca     4920
ttatggtgaa agttggaacc tcttacgtgc cgatcaagtc aaaagcctcc ggtcggaggc     4980
ttttgacttt ctgctatgga ggtcaggtat gatttaaatg gtcagtattg agcgatatct     5040
agagaattcg tc                                                         5052
<210>  54
<211>  5052
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  plasmid pLybAL14r
<400>  54
agactacaat tggggcgttt tctgtgaggc tgactagcgc gtggcagctc aaaatctcta       60
cattctgcac attcagaccc atggtctgct gcgagggcag aacttggaac tggggcgaga      120
tgccgacacc ggcgggcaga ccaagtacgt cttagaactg gctcaagccc aagctaaatc      180
cccacaagtc caacaagtcg acatcatcac ccgccaaatc accgaccccc gcgtcagtgt      240
tggttacagt caggcgatcg aaccctttgc gcccaaaggt cggattgtcc gtttgccttt      300
tggccccaaa cgctacctcc gtaaagagct gctttggccc catctctaca cctttgcgga      360
tgcaattctc caatatctgg ctcagcaaaa gcgcaccccg acttggattc aggcccacta      420
tgctgatgct ggccaagtgg gatcactgct gagtcgctgg ttgaatgtac cgctaatttt      480
cacagggcat tctctggggc ggatcaagct aaaaaagctg ttggagcaag actggccgct      540
tgaggaaatt gaagcgcaat tcaatattca acagcgaatt gatgcggagg agatgacgct      600
cactcatgct gactggattg tcgccagcac tcagcaggaa gtggaggagc aataccgcgt      660
ttacgatcgc tacaacccag agcgcaagct tgtcattcca ccgggtgtcg ataccgatcg      720
cttcaggttt cagcccttgg gcgatcgcgg tgttgttctc caacaggaac tgagccgctt      780
tctgcgcgac ccagaaaaac ctcaaattct ctgcctctgt cgccccgcac ctcgcaaaaa      840
tgtaccggcg ctggtgcgag cctttggcga acatccttgg ctgcgcaaaa aagccaacct      900
tgtcttagta ctgggcagcc gccaagacat caaccagatg gatcgcggca gtcggcaggt      960
gttccaagag attttccatc tggtcgatcg ctacgacctc tacggcagcg tcgcctatcc     1020
caaacagcat caggctgatg atgtgccgga gttctatcgc ctagcggctc attccggcgg     1080
ggtattcgtc aatccggcgc tgaccgaacc ttttggtttg acaattttgg aggcaggaag     1140
ctgcggcgtg ccggtggtgg caacccatga tggcggcccc caggaaattc tcaaacactg     1200
tgatttcggc actttagttg atgtcagccg acccgctaat atcgcgactg cactcgccac     1260
cctgctgagc gatcgcgatc tttggcagtg ctatcaccgc aatggcattg aaaaagttcc     1320
cgcccattac agctgggatc aacatgtcaa taccctgttt gagcgcatgg aaacggtggc     1380
tttgcctcgt cgtcgtgctg tcagtttcgt acggagtcgc aaacgcttga ttgatgccaa     1440
acgccttgtc gttagtgaca tcgacaacac actgttgggc gatcgtcaag gactcgagaa     1500
tttaatgacc tatctcgatc agtatcgcga tcattttgcc tttggaattg ccacggggcg     1560
tcgcctagac tctgcccaag aagtcttgaa agagtggggc gttccttcgc caaacttctg     1620
ggtgacttcc gtcggcagcg agattcacta tggcaccgat gctgaaccgg atatcagctg     1680
ggaaaagcat atcaatcgca actggaatcc tcagcgaatt cgggcagtaa tggcacaact     1740
accctttctt gaactgcagc cggaagagga tcaaacaccc ttcaaagtca gcttctttgt     1800
ccgcgatcgc cacgagactg tgctgcgaga agtacggcaa catcttcgcc gccatcgcct     1860
gcggctgaag tcaatctatt cccatcagga gtttcttgac attctgccgc tagctgcctc     1920
gaaaggggat gcgattcgcc acctctcact ccgctggcgg attcctcttg agaacatttt     1980
ggtggcaggc gattctggta acgatgagga aatgctcaag ggccataatc tcggcgttgt     2040
agttggcaat tactcaccgg aattggagcc actgcgcagc tacgagcgcg tctattttgc     2100
tgagggccac tatgctaatg gcattctgga agccttaaaa cactatcgct tttttgaggc     2160
gatcgcttaa ccttttcaga acgtgagacg ttgatcggca cgtaagaggt tccaactttc     2220
accataatga aataagatca ctaccgggcg tattttttga gttatcgaga ttttcaggag     2280
ctaaggaagc taaaatggag aaaaaaatca ctggatatac caccgttgat atatcccaat     2340
ggcatcgtaa agaacatttt gaggcatttc agtcagttgc tcaatgtacc tataaccaga     2400
ccgttcagct ggatattacg gcctttttaa agaccgtaaa gaaaaataag cacaagtttt     2460
atccggcctt tattcacatt cttgcccgcc tgatgaatgc tcatccggaa ttccgtatgg     2520
caatgaaaga cggtgagctg gtgatatggg atagtgttca cccttgttac accgttttcc     2580
atgagcaaac tgaaacgttt tcatcgctct ggagtgaata ccacgacgat ttccggcagt     2640
ttctacacat atattcgcaa gatgtggcgt gttacggtga aaacctggcc tatttcccta     2700
aagggtttat tgagaatatg tttttcgtct cagccaatcc ctgggtgagt ttcaccagtt     2760
ttgatttaaa cgtggccaat atggacaact tcttcgcccc cgttttcacc atgggcaaat     2820
attatacgca aggcgacaag gtgctgatgc cgctggcgat tcaggttcat catgccgttt     2880
gtgatggctt ccatgtcggc agaatgctta atgaattaca acagtactgc gatgagtggc     2940
agggcggggc gtaatttttt taaggcagtt attggtgccc ttaaacgcct ggttgctacg     3000
cctgaataag tgataataag cggatgaatg gcagaaattc gatgataagc tgtcaaacac     3060
gtgaattggt cgaacgaatt caagcttgat atcattcagg acgagcctca gactccagcg     3120
taactggact gcaatcaact cactggctca ccttcacggg tgggcctttc ttcggtagaa     3180
aatcaaagga tcttcttgag atcctttttt tctgcgcgta atctgctgct tgcaaacaaa     3240
aaaaccaccg ctaccagcgg tggtttgttt gccggatcaa gagctaccaa ctctttttcc     3300
gaggtaactg gcttcagcag agcgcagata ccaaatactg ttcttctagt gtagccgtag     3360
ttaggccacc acttcaagaa ctctgtagca ccgcctacat acctcgctct gctaatcctg     3420
ttaccagtgg ctgctgccag tggcgataag tcgtgtctta ccgggttgga ctcaagacga     3480
tagttaccgg ataaggcgca gcggtcgggc tgaacggggg gttcgtgcac acagcccagc     3540
ttggagcgaa cgacctacac cgaactgaga tacctacagc gtgagctatg agaaagcgcc     3600
acgcttcccg aagggagaaa ggcggacagg tatccggtaa gcggcagggt cggaacagga     3660
gagcgcacga gggagcttcc agggggaaac gcctggtatc tttatagtcc tgtcgggttt     3720
cgccacctct gacttgagca tcgatttttg tgatgctcgt caggggggcg gagcctatgg     3780
aaaaacgcca gcaacgcaga aaggcccacc cgaaggtgag ccaggtgatt acatttgggc     3840
cctcatcaga ggttttcacc gtcatcaccg aaacgcgcga ggcagctgcg gtaaagctca     3900
tcagcgtggt cgtgaagcga ttcacagatg tctgcctgtt catccgcgtc cagctcgttg     3960
agtttctcca gaagcgttaa tgtctggctt ctgataaagc gggccatgtt aagggcggtt     4020
ttttcctgtt tggtcattta gaaaaactca tcgagcatca agtgaaactg caatttattc     4080
atatcaggat tatcaatacc atatttttga aaaagccgtt tctgtaatga aggagaaaac     4140
tcaccgaggc agttccatag gatggcaaga tcctggtatc ggtctgcgat tccgactcgt     4200
ccaacatcaa tacaacctat taatttcccc tcgtcaaaaa taaggttatc aagtgagaaa     4260
tcaccatgag tgacgactga atccggtgag aatggcaaaa gcttatgcat ttctttccag     4320
acttgttcaa caggccagcc attacgctcg tcatcaaaat cactcgcacc aaccaaaccg     4380
ttattcattc gtgattgcgc ctgagcgaga cgaaatacgc gatcgccgtt aaaaggacaa     4440
ttacaaacag gaatcgaatg caaccggcgc aggaacactg ccagcgcatc aacaatattt     4500
tcacctgaat caggatattc ttctaatacc tggaatgctg ttttccctgg gatcgcagtg     4560
gtgagtaacc atgcatcatc aggagtacgg ataaaatgct tgatggtcgg aagaggcata     4620
aattccgtca gccagtttag cctgaccatc tcatctgtaa catcattggc aacgctacct     4680
ttgccatgtt tcagaaacaa ctctggcgca tcgggcttcc catacaatcg atagattgtc     4740
gcacctgatt gcccgacatt atcgcgagcc catttatacc catataaatc agcatccatg     4800
ttggaattta atcgcggcct cgagcaagac gtttcccgtt gaatatggct cattttagct     4860
tccttagctc ctgaaaatct cgataactca aaaaatacgc ccggtagtga tcttatttca     4920
ttatggtgaa agttggaacc tcttacgtgc cgatcaagtc aaaagcctcc ggtcggaggc     4980
ttttgacttt ctgctatgga ggtcaggtat gatttaaatg gtcagtattg agcgatatct     5040
agagaattcg tc                                                         5052
<210>  55
<211>  24
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for detection of plasmid in cyanobacteria
<400>  55
ggtggttgtg tttgacagct tatc                                              24
<210>  56
<211>  651
<212>  DNA
<213>  Synechocystis PCC6803
<400>  56
atggcttctc aattacgtgt ttatgtgccg gagcatcctc taattaagca ttggttgggg       60
gtagctaggg atgaaaacac gccgccggtt ttgtttaaaa ctgccatggg ggaattggga      120
cgttggttga cctatgaggc cgctcgttat tggttgccga cggtggatac ggaagtgaaa      180
actcccctgg cgatcgccaa ggccagtctt attgaccccc aaacgccctt tgtcattgtg      240
cccattttgc gggcggggtt ggctctggtg gaaggggccc aggggttgtt gcccctggca      300
aaaatttacc atctgggttt agtgcgcaat gaaactaccc tggaacctag tctgtatctg      360
aacaagttgc cggagcggtt tgcccccggt acccatcttt tgttgctaga tcccatgttg      420
gctacgggta ataccatcat ggctgctttg gatttgctga tggcccggga cattgatgcc      480
aatttaatcc gtttggtctc cgtggtggcc gcccccactg ccctgcaaaa attaagtaat      540
gcccatccca atttgaccat ctacaccgcc atgattgacg aacaactcaa tgaccggggt      600
tacattgtgc ccggcctagg ggatgcaggc gatcgttgct ttggtacttg a               651
<210>  57
<211>  216
<212>  PRT
<213>  Synechocystis PCC6803
<400>  57
Met Ala Ser Gln Leu Arg Val Tyr Val Pro Glu His Pro Leu Ile Lys 
1               5                   10                  15      
His Trp Leu Gly Val Ala Arg Asp Glu Asn Thr Pro Pro Val Leu Phe 
20                  25                  30          
Lys Thr Ala Met Gly Glu Leu Gly Arg Trp Leu Thr Tyr Glu Ala Ala 
35                  40                  45              
Arg Tyr Trp Leu Pro Thr Val Asp Thr Glu Val Lys Thr Pro Leu Ala 
50                  55                  60                  
Ile Ala Lys Ala Ser Leu Ile Asp Pro Gln Thr Pro Phe Val Ile Val 
65                  70                  75                  80  
Pro Ile Leu Arg Ala Gly Leu Ala Leu Val Glu Gly Ala Gln Gly Leu 
85                  90                  95      
Leu Pro Leu Ala Lys Ile Tyr His Leu Gly Leu Val Arg Asn Glu Thr 
100                 105                 110         
Thr Leu Glu Pro Ser Leu Tyr Leu Asn Lys Leu Pro Glu Arg Phe Ala 
115                 120                 125             
Pro Gly Thr His Leu Leu Leu Leu Asp Pro Met Leu Ala Thr Gly Asn 
130                 135                 140                 
Thr Ile Met Ala Ala Leu Asp Leu Leu Met Ala Arg Asp Ile Asp Ala 
145                 150                 155                 160 
Asn Leu Ile Arg Leu Val Ser Val Val Ala Ala Pro Thr Ala Leu Gln 
165                 170                 175     
Lys Leu Ser Asn Ala His Pro Asn Leu Thr Ile Tyr Thr Ala Met Ile 
180                 185                 190         
Asp Glu Gln Leu Asn Asp Arg Gly Tyr Ile Val Pro Gly Leu Gly Asp 
195                 200                 205             
Ala Gly Asp Arg Cys Phe Gly Thr 
210                 215     
<210>  58
<211>  654
<212>  DNA
<213>  Synechococcus PCC7942
<400>  58
atggctcctc aactgcgtat cttcgtgccg ccccatccct taattcggca ctggctgggc       60
attgcccgcg atcgccagac gccgacgcct ctgtttcgca ccgcgatcgc agagctgggc      120
cgctggctcg cctatgaggc tgtgcgggaa tggctaccaa cgattccagc ggcggtgcaa      180
actcctcttg cagaaacccc agcggagttc gtcgattttt cgcaaccctt ggcgatcgtg      240
ccgattctgc gcgcaggtct gggtttagtg gagtctgtcc aacaggtttt gccgactgcc      300
cgcatttttc acgtgggtct caagcgggat gaagtcagtc ttgaaccgcg ctgctacctc      360
aatcacctgc cagagcaact tgaagtgaac agtcgcgttc tggttctcga cccgatgctg      420
gcgacaggtg gctcgctgct ctataccctt gatttgctgc gcgatcgcgg tgtctctgct      480
gagcaagtgc gggtgctttc aattgtggct gccccgccag cgctacaaaa actcagtcaa      540
gcctacccgg cgttgacgat ttacagcgcc atcattgatg agcagctgaa cgacaaaggc      600
tttatcgtgc cggggctggg ggatgctggc gatcgcctgt ttggtactcc ttga            654
<210>  59
<211>  217
<212>  PRT
<213>  Synechococcus PCC7942
<400>  59
Met Ala Pro Gln Leu Arg Ile Phe Val Pro Pro His Pro Leu Ile Arg 
1               5                   10                  15      
His Trp Leu Gly Ile Ala Arg Asp Arg Gln Thr Pro Thr Pro Leu Phe 
20                  25                  30          
Arg Thr Ala Ile Ala Glu Leu Gly Arg Trp Leu Ala Tyr Glu Ala Val 
35                  40                  45              
Arg Glu Trp Leu Pro Thr Ile Pro Ala Ala Val Gln Thr Pro Leu Ala 
50                  55                  60                  
Glu Thr Pro Ala Glu Phe Val Asp Phe Ser Gln Pro Leu Ala Ile Val 
65                  70                  75                  80  
Pro Ile Leu Arg Ala Gly Leu Gly Leu Val Glu Ser Val Gln Gln Val 
85                  90                  95      
Leu Pro Thr Ala Arg Ile Phe His Val Gly Leu Lys Arg Asp Glu Val 
100                 105                 110         
Ser Leu Glu Pro Arg Cys Tyr Leu Asn His Leu Pro Glu Gln Leu Glu 
115                 120                 125             
Val Asn Ser Arg Val Leu Val Leu Asp Pro Met Leu Ala Thr Gly Gly 
130                 135                 140                 
Ser Leu Leu Tyr Thr Leu Asp Leu Leu Arg Asp Arg Gly Val Ser Ala 
145                 150                 155                 160 
Glu Gln Val Arg Val Leu Ser Ile Val Ala Ala Pro Pro Ala Leu Gln 
165                 170                 175     
Lys Leu Ser Gln Ala Tyr Pro Ala Leu Thr Ile Tyr Ser Ala Ile Ile 
180                 185                 190         
Asp Glu Gln Leu Asn Asp Lys Gly Phe Ile Val Pro Gly Leu Gly Asp 
195                 200                 205             
Ala Gly Asp Arg Leu Phe Gly Thr Pro 
210                 215         
<210>  60
<211>  33
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying upp gene from Bacillus subtilis 168
<400>  60
aagaagcaag acagcgtgta gctgctctga ctg                                    33
<210>  61
<211>  50
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying upp gene from Bacillus subtilis 168
<400>  61
tcccgggatt tggtacctta ttttgttcca aacatgcggt cacccgcatc                  50
<210>  62
<211>  849
<212>  DNA
<213>  Bacillus subtilis
<400>  62
aagaagcaag acagcgtgta gctgctctga ctgataaatt tcctttatat aaagaattag       60
attattaaga tcctaaaacc cgcttgggct tatgcccggc gggttttttg acgatgttct      120
tgaaactcaa tgtctttttt tgtagaatca atagaagtgt gtaattgttg atgggacaat      180
aaaaaaggag ctgaaacaca gtatgggaaa ggtttatgta tttgatcatc ctttaattca      240
gcacaagctg acatatatac ggaatgaaaa tacaggtacg aaggatttta gagagttagt      300
agatgaagtg gctacactca tggcatttga aattacccgc gatcttcctc tggaagaagt      360
ggatatcaat acaccggttc aggctgcgaa atcgaaagtc atctcaggga aaaaactcgg      420
agtggttcct atcctcagag caggattggg aatggttgac ggcattttaa agctgattcc      480
tgcggcaaaa gtgggacatg tcggccttta ccgtgatcca gaaaccttaa aacccgtgga      540
atactatgtc aagcttcctt ctgatgtgga agagcgtgaa ttcatcgtgg ttgacccgat      600
gctcgctaca ggcggttccg cagttgaagc cattcacagc cttaaaaaac gcggtgcgaa      660
aaatatccgt ttcatgtgtc ttgtagcagc gccggagggt gtggaagaat tgcagaagca      720
tcattcggac gttgatattt acattgcggc gctagatgaa aaattaaatg aaaaaggata      780
tattgttcca ggtctcggag atgcgggtga ccgcatgttt ggaacaaaat aaggtaccaa      840
atcccggga                                                              849
<210>  63
<211>  22
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for sequence verification of pLybAL7f
<400>  63
gtaatacgac tcactatagg gc                                                22
<210>  64
<211>  24
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for sequence verification of pLybAL7f
<400>  64
cacacaggaa acagctatga ccat                                              24
<210>  65
<211>  8988
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  plasmid pLybAL7f
<400>  65
gcggccgcaa ggggttcgcg tcagcgggtg ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg       60
cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc accatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat      120
gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgcc attcgccatt cagctgcgca actgttggga      180
agggcgatcg gtgcgggcct cttcgctatt acgccagctg gcgaaagggg gatgtgctgc      240
aaggcgatta agttgggtaa cgccagggtt ttcccagtca cgacgttgta aaacgacggc      300
cagtgaattg taatacgact cactataggg cgaattcgag ctcggtaccc ggggatccca      360
ctcccgggat ttggtacctt attttgttcc aaacatgcgg tcacccgcat ctccgagacc      420
tggaacaata tatccttttt catttaattt ttcatctagc gccgcaatgt aaatatcaac      480
gtccgaatga tgcttctgca attcttccac accctccggc gctgctacaa gacacatgaa      540
acggatattt ttcgcaccgc gttttttaag gctgtgaatg gcttcaactg cggaaccgcc      600
tgtagcgagc atcgggtcaa ccacgatgaa ttcacgctct tccacatcag aaggaagctt      660
gacatagtat tccacgggtt ttaaggtttc tggatcacgg taaaggccga catgtcccac      720
ttttgccgca ggaatcagct ttaaaatgcc gtcaaccatt cccaatcctg ctctgaggat      780
aggaaccact ccgagttttt tccctgagat gactttcgat ttcgcagcct gaaccggtgt      840
attgatatcc acttcttcca gaggaagatc gcgggtaatt tcaaatgcca tgagtgtagc      900
cacttcatct actaactctc taaaatcctt cgtacctgta ttttcattcc gtatatatgt      960
cagcttgtgc tgaattaaag gatgatcaaa tacataaacc tttcccatac tgtgtttcag     1020
ctcctttttt attgtcccat caacaattac acacttctat tgattctaca aaaaaagaca     1080
ttgagtttca agaacatcgt caaaaaaccc gccgggcata agcccaagcg ggttttagga     1140
tcttaataat ctaattcttt atataaagga aatttatcag tcagagcagc tacacgctgt     1200
cttgcttctt gtgggatcct ctagagtcga cctgcaggca tgcaagcttg agtattctat     1260
agtctcacct aaatagcttg gcgtaatcat ggtcatagct gtttcctgtg tgaaattgtt     1320
atccgctcac aattccacac aacatacgag ccggaagcat aaagtgtaaa gcctggggtg     1380
cctaatgagt gagctaactc acattaattg cgttgcgctc actgcccgct ttccagtcgg     1440
gaaacctgtc gtgccagctg cattaatgaa tcggccaacg cgaacccctt gcggccgccc     1500
gggccgtcga ccaattctca tgtttgacag cttatcatcg aatttctgcc attcatccgc     1560
ttattatcac ttattcaggc gtagcaacca ggcgtttaag ggcaccaata actgccttaa     1620
aaaaattacg ccccgccctg ccactcatcg cagtactgtt gtaattcatt aagcattctg     1680
ccgacatgga agccatcaca aacggcatga tgaacctgaa tcgccagcgg catcagcacc     1740
ttgtcgcctt gcgtataata tttgcccatg gtgaaaacgg gggcgaagaa gttgtccata     1800
ttggccacgt ttaaatcaaa actggtgaaa ctcacccagg gattggctga gacgaaaaac     1860
atattctcaa taaacccttt agggaaatag gccaggtttt caccgtaaca cgccacatct     1920
tgcgaatata tgtgtagaaa ctgccggaaa tcgtcgtggt attcactcca gagcgatgaa     1980
aacgtttcag tttgctcatg gaaaacggtg taacaagggt gaacactatc ccatatcacc     2040
agctcaccgt ctttcattgc catacgaaat tccggatgag cattcatcag gcgggcaaga     2100
atgtgaataa aggccggata aaacttgtgc ttatttttct ttacggtctt taaaaaggcc     2160
gtaatatcca gctgaacggt ctggttatag gtacattgag caactgactg aaatgcctca     2220
aaatgttctt tacgatgcca ttgggatata tcaacggtgg tatatccagt gatttttttc     2280
tccattttag cttccttagc tcctgaaaat ctcgataact caaaaaatac gcccggtagt     2340
gatcttattt cattatggtg aaagttggaa cctcttacgt gccgatcaac gtctcatttt     2400
cgccaaaagt tggcccaggg cttcccggta tcaacaggga caccaggatt tatttattct     2460
gcgaagtgat cttccgtcac aggtatttat tcgcgataag ctcatggagc ggcgtaaccg     2520
tcgcacagga aggacagaga aagcgcggat ctgggaagtg acggacagaa cggtcaggac     2580
ctggattggg gaggcggttg ccgccgctgc tgctgacggt gtgacgttct ctgttccggt     2640
cacaccacat acgttccgcc attcctatgc gatgcacatg ctgtatgccg gtataccgct     2700
gaaagttctg caaagcctga tgggacataa gtccatcagt tcaacggaag tctacacgaa     2760
ggtttttgcg ctggatgtgg ctgcccggca ccgggtgcag tttgcgatgc cggagtctga     2820
tgcggttgcg atgctgaaac aattatcctg agaataaatg ccttggcctt tatatggaaa     2880
tgtggaactg agtggatatg ctgtttttgt ctgttaaaca gagaagctgg ctgttatcca     2940
ctgagaagcg aacgaaacag tcgggaaaat ctcccattat cgtagagatc cgcattatta     3000
atctcaggag cctgtgtagc gtttatagga agtagtgttc tgtcatgatg cctgcaagcg     3060
gtaacgaaaa cgatttgaat atgccttcag gaacaataga aatcttcgtg cggtgttacg     3120
ttgaagtgga gcggattatg tcagcaatgg acagaacaac ctaatgaaca cagaaccatg     3180
atgtggtctg tccttttaca gccagtagtg ctcgccgcag tcgagcgaca gggcgaagcc     3240
ctcggctggt tgccctcgcc gctgggctgg cggccgtcta tggccctgca aacgcgccag     3300
aaacgccgtc gaagccgtgt gcgagacacc gcggccggcc gccggcgttg tggatacctc     3360
gcggaaaact tggccctcac tgacagatga ggggcggacg ttgacacttg aggggccgac     3420
tcacccggcg cggcgttgac agatgagggg caggctcgat ttcggccggc gacgtggagc     3480
tggccagcct cgcaaatcgg cgaaaacgcc tgattttacg cgagtttccc acagatgatg     3540
tggacaagcc tggggataag tgccctgcgg tattgacact tgaggggcgc gactactgac     3600
agatgagggg cgcgatcctt gacacttgag gggcagagtg ctgacagatg aggggcgcac     3660
ctattgacat ttgaggggct gtccacaggc agaaaatcca gcatttgcaa gggtttccgc     3720
ccgtttttcg gccaccgcta acctgtcttt taacctgctt ttaaaccaat atttataaac     3780
cttgttttta accagggctg cgccctgtgc gcgtgaccgc gcacgccgaa ggggggtgcc     3840
cccccttctc gaaccctccc ggtcgagtga gcgaggaagc accagggaac agcacttata     3900
tattctgctt acacacgatg cctgaaaaaa cttcccttgg ggttatccac ttatccacgg     3960
ggatattttt ataattattt tttttatagt ttttagatct tcttttttag agcgccttgt     4020
aggcctttat ccatgctggt tctagagaag gtgttgtgac aaattgccct ttcagtgtga     4080
caaatcaccc tcaaatgaca gtcctgtctg tgacaaattg cccttaaccc tgtgacaaat     4140
tgccctcaga agaagctgtt ttttcacaaa gttatccctg cttattgact cttttttatt     4200
tagtgtgaca atctaaaaac ttgtcacact tcacatggat ctgtcatggc ggaaacagcg     4260
gttatcaatc acaagaaacg taaaaatagc ccgcgaatcg tccagtcaaa cgacctcact     4320
gaggcggcat atagtctctc ccgggatcaa aaacgtatgc tgtatctgtt cgttgaccag     4380
atcagaaaat ctgatggcac cctacaggaa catgacggta tctgcgagat ccatgttgct     4440
aaatatgctg aaatattcgg attgacctct gcggaagcca gtaaggatat acggcaggca     4500
ttgaagagtt tcgcggggaa ggaagtggtt ttttatcgcc ctgaagagga tgccggcgat     4560
gaaaaaggct atgaatcttt tccttggttt atcaaacgtg cgcacagtcc atccagaggg     4620
ctttacagtg tacatatcaa cccatatctc attcccttct ttatcgggtt acagaaccgg     4680
tttacgcagt ttcggcttag tgaaacaaaa gaaatcacca atccgtatgc catgcgttta     4740
tacgaatccc tgtgtcagta tcgtaagccg gatggctcag gcatcgtctc tctgaaaatc     4800
gactggatca tagagcgtta ccagctgcct caaagttacc agcgtatgcc tgacttccgc     4860
cgccgcttcc tgcaggtctg tgttaatgag atcaacagca gaactccaat gcgcctctca     4920
tacattgaga aaaagaaagg ccgccagacg actcatatcg tattttcctt ccgcgatatc     4980
acttccatga cgacaggata gtctgagggt tatctgtcac agatttgagg gtggttcgtc     5040
acatttgttc tgacctactg agggtaattt gtcacagttt tgctgtttcc ttcagcctgc     5100
atggattttc tcatactttt tgaactgtaa tttttaagga agccaaattt gagggcagtt     5160
tgtcacagtt gatttccttc tctttccctt cgtcatgtga cctgatatcg ggggttagtt     5220
cgtcatcatt gatgagggtt gattatcaca gtttattact ctgaattggc tatccgcgtg     5280
tgtacctcta cctggagttt ttcccacggt ggatatttct tcttgcgctg agcgtaagag     5340
ctatctgaca gaacagttct tctttgcttc ctcgccagtt cgctcgctat gctcggttac     5400
acggctgcgg cgagcgctag tgataataag tgactgaggt atgtgctctt cttatctcct     5460
tttgtagtgt tgctcttatt ttaaacaact ttgcggtttt ttgatgactt tgcgattttg     5520
ttgttgcttt gcagtaaatt gcaagattta ataaaaaaac gcaaagcaat gattaaagga     5580
tgttcagaat gaaactcatg gaaacactta accagtgcat aaacgctggt catgaaatga     5640
cgaaggctat cgccattgca cagtttaatg atgacagccc ggaagcgagg aaaataaccc     5700
ggcgctggag aataggtgaa gcagcggatt tagttggggt ttcttctcag gctatcagag     5760
atgccgagaa agcagggcga ctaccgcacc cggatatgga aattcgagga cgggttgagc     5820
aacgtgttgg ttatacaatt gaacaaatta atcatatgcg tgatgtgttt ggtacgcgat     5880
tgcgacgtgc tgaagacgta tttccaccgg tgatcggggt tgctgcccat aaaggtggcg     5940
tttacaaaac ctcagtttct gttcatcttg ctcaggatct ggctctgaag gggctacgtg     6000
ttttgctcgt ggaaggtaac gacccccagg gaacagcctc aatgtatcac ggatgggtac     6060
cagatcttca tattcatgca gaagacactc tcctgccttt ctatcttggg gaaaaggacg     6120
atgtcactta tgcaataaag cccacttgct ggccggggct tgacattatt ccttcctgtc     6180
tggctctgca ccgtattgaa actgagttaa tgggcaaatt tgatgaaggt aaactgccca     6240
ccgatccaca cctgatgctc cgactggcca ttgaaactgt tgctcatgac tatgatgtca     6300
tagttattga cagcgcgcct aacctgggta tcggcacgat taatgtcgta tgtgctgctg     6360
atgtgctgat tgttcccacg cctgctgagt tgtttgacta cacctccgca ctgcagtttt     6420
tcgatatgct tcgtgatctg ctcaagaacg ttgatcttaa agggttcgag cctgatgtac     6480
gtattttgct taccaaatac agcaatagta atggctctca gtccccgtgg atggaggagc     6540
aaattcggga tgcctgggga agcatggttc taaaaaatgt tgtacgtgaa acggatgaag     6600
ttggtaaagg tcagatccgg atgagaactg tttttgaaca ggccattgat caacgctctt     6660
caactggtgc ctggagaaat gctctttcta tttgggaacc tgtctgcaat gaaattttcg     6720
atcgtctgat taaaccacgc tgggagatta gataatgaag cgtgcgcctg ttattccaaa     6780
acatacgctc aatactcaac cggttgaaga tacttcgtta tcgacaccag ctgccccgat     6840
ggtggattcg ttaattgcgc gcgtaggagt aatggctcgc ggtaatgcca ttactttgcc     6900
tgtatgtggt cgggatgtga agtttactct tgaagtgctc cggggtgata gtgttgagaa     6960
gacctctcgg gtatggtcag gtaatgaacg tgaccaggag ctgcttactg aggacgcact     7020
ggatgatctc atcccttctt ttctactgac tggtcaacag acaccggcgt tcggtcgaag     7080
agtatctggt gtcatagaaa ttgccgatgg gagtcgccgt cgtaaagctg ctgcacttac     7140
cgaaagtgat tatcgtgttc tggttggcga gctggatgat gagcagatgg ctgcattatc     7200
cagattgggt aacgattatc gcccaacaag tgcttatgaa cgtggtcagc gttatgcaag     7260
ccgattgcag aatgaatttg ctggaaatat ttctgcgctg gctgatgcgg aaaatatttc     7320
acgtaagatt attacccgct gtatcaacac cgccaaattg cctaaatcag ttgttgctct     7380
tttttctcac cccggtgaac tatctgcccg gtcaggtgat gcacttcaaa aagcctttac     7440
agataaagag gaattactta agcagcaggc atctaacctt catgagcaga aaaaagctgg     7500
ggtgatattt gaagctgaag aagttatcac tcttttaact tctgtgctta aaacgtcatc     7560
tgcatcaaga actagtttaa gctcacgaca tcagtttgct cctggagcga cagtattgta     7620
taagggcgat aaaatggtgc ttaacctgga caggtctcgt gttccaactg agtgtataga     7680
gaaaattgag gccattctta aggaacttga aaagccagca ccctgatgcg accacgtttt     7740
agtctacgtt tatctgtctt tacttaatgt cctttgttac aggccagaaa gcataactgg     7800
cctgaatatt ctctctgggc ccactgttcc acttgtatcg tcggtctgat aatcagactg     7860
ggaccacggt cccactcgta tcgtcggtct gattattagt ctgggaccac ggtcccactc     7920
gtatcgtcgg tctgattatt agtctgggac cacggtccca ctcgtatcgt cggtctgata     7980
atcagactgg gaccacggtc ccactcgtat cgtcggtctg attattagtc tgggaccatg     8040
gtcccactcg tatcgtcggt ctgattatta gtctgggacc acggtcccac tcgtatcgtc     8100
ggtctgatta ttagtctgga accacggtcc cactcgtatc gtcggtctga ttattagtct     8160
gggaccacgg tcccactcgt atcgtcggtc tgattattag tctgggacca cgatcccact     8220
cgtgttgtcg gtctgattat cggtctggga ccacggtccc acttgtattg tcgatcagac     8280
tatcagcgtg agactacgat tccatcaatg cctgtcaagg gcaagtattg acatgtcgtc     8340
gtaacctgta gaacggagta acctcggtgt gcggttgtat gcctgctgtg gattgctgct     8400
gtgtcctgct tatccacaac attttgcgca cggttatgtg gacaaaatac ctggttaccc     8460
aggccgtgcc ggcacgttaa ccgggctgca tccgatgcaa gtgtgtcgct gtcgacgagc     8520
tcgcgagctc ggacatgagg ttgccccgta ttcagtgtcg ctgatttgta ttgtctgaag     8580
ttgtttttac gttaagttga tgcagatcaa ttaatacgat acctgcgtca taattgatta     8640
tttgacgtgg tttgatggcc tccacgcacg ttgtgatatg tagatgataa tcattatcac     8700
tttacgggtc ctttccggtg atccgacagg ttacggggcg gcgacctcgc gggttttcgc     8760
tatttatgaa aattttccgg tttaaggcgt ttccgttctt cttcgtcata acttaatgtt     8820
tttatttaaa ataccctctg aaaagaaagg aaacgacagg tgctgaaagc gagctttttg     8880
gcctctgtcg tttcctttct ctgtttttgt ccgtggaatg aacaatggaa gtccgagctc     8940
atcgctaata acttcgtata gcatacatta tacgaagtta tattcgat                  8988
<210>  66
<211>  31
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying kanamycin resistance marker vector pLybAA1
<400>  66
gtcagtgcac tgctctgcca gtgttacaac c                                      31
<210>  67
<211>  38
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  primer for amplifying kanamycin resistance marker vector pLybAA1
<400>  67
ctcagtggcg ccaaaactca cgttaaggga ttttggtc                               38
<210>  68
<211>  950
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  kanamycin resistance marker from vector pLybAA1, originally 
derived from pACYC177
<400>  68
gtcagtgcac tgctctgcca gtgttacaac caattaacca attctgatta gaaaaactca       60
tcgagcatca aatgaaactg caatttattc atatcaggat tatcaatacc atatttttga      120
aaaagccgtt tctgtaatga aggagaaaac tcaccgaggc agttccatag gatggcaaga      180
tcctggtatc ggtctgcgat tccgactcgt ccaacatcaa tacaacctat taatttcccc      240
tcgtcaaaaa taaggttatc aagtgagaaa tcaccatgag tgacgactga atccggtgag      300
aatggcaaaa gcttatgcat ttctttccag acttgttcaa caggccagcc attacgctcg      360
tcatcaaaat cactcgcatc aaccaaaccg ttattcattc gtgattgcgc ctgagcgaga      420
cgaaatacgc gatcgctgtt aaaaggacaa ttacaaacag gaatcgaatg caaccggcgc      480
aggaacactg ccagcgcatc aacaatattt tcacctgaat caggatattc ttctaatacc      540
tggaatgctg ttttcccggg gatcgcagtg gtgagtaacc atgcatcatc aggagtacgg      600
ataaaatgct tgatggtcgg aagaggcata aattccgtca gccagtttag tctgaccatc      660
tcatctgtaa catcattggc aacgctacct ttgccatgtt tcagaaacaa ctctggcgca      720
tcgggcttcc catacaatcg atagattgtc gcacctgatt gcccgacatt atcgcgagcc      780
catttatacc catataaatc agcatccatg ttggaattta atcgcggcct cgagcaagac      840
gtttcccgtt gaatatggct cataacaccc cttgtattac tgtttatgta agcagacagt      900
tttattgttc atgaccaaaa tcccttaacg tgagttttgg cgccactgag                 950
<210>  69
<211>  9864
<212>  DNA
<213>  Artificial
<220>
<223>  plasmid pLybAL8f (kanamycin resistance marker plus pLybAL7f)
<400>  69
gcggccgcaa ggggttcgcg tcagcgggtg ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg       60
cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc actgctctgc cagtgttaca accaattaac      120
caattctgat tagaaaaact catcgagcat caaatgaaac tgcaatttat tcatatcagg      180
attatcaata ccatattttt gaaaaagccg tttctgtaat gaaggagaaa actcaccgag      240
gcagttccat aggatggcaa gatcctggta tcggtctgcg attccgactc gtccaacatc      300
aatacaacct attaatttcc cctcgtcaaa aataaggtta tcaagtgaga aatcaccatg      360
agtgacgact gaatccggtg agaatggcaa aagcttatgc atttctttcc agacttgttc      420
aacaggccag ccattacgct cgtcatcaaa atcactcgca tcaaccaaac cgttattcat      480
tcgtgattgc gcctgagcga gacgaaatac gcgatcgctg ttaaaaggac aattacaaac      540
aggaatcgaa tgcaaccggc gcaggaacac tgccagcgca tcaacaatat tttcacctga      600
atcaggatat tcttctaata cctggaatgc tgttttcccg gggatcgcag tggtgagtaa      660
ccatgcatca tcaggagtac ggataaaatg cttgatggtc ggaagaggca taaattccgt      720
cagccagttt agtctgacca tctcatctgt aacatcattg gcaacgctac ctttgccatg      780
tttcagaaac aactctggcg catcgggctt cccatacaat cgatagattg tcgcacctga      840
ttgcccgaca ttatcgcgag cccatttata cccatataaa tcagcatcca tgttggaatt      900
taatcgcggc ctcgagcaag acgtttcccg ttgaatatgg ctcataacac cccttgtatt      960
actgtttatg taagcagaca gttttattgt tcatgaccaa aatcccttaa cgtgagtttt     1020
ggcgccattc gccattcagc tgcgcaactg ttgggaaggg cgatcggtgc gggcctcttc     1080
gctattacgc cagctggcga aagggggatg tgctgcaagg cgattaagtt gggtaacgcc     1140
agggttttcc cagtcacgac gttgtaaaac gacggccagt gaattgtaat acgactcact     1200
atagggcgaa ttcgagctcg gtacccgggg atcccactcc cgggatttgg taccttattt     1260
tgttccaaac atgcggtcac ccgcatctcc gagacctgga acaatatatc ctttttcatt     1320
taatttttca tctagcgccg caatgtaaat atcaacgtcc gaatgatgct tctgcaattc     1380
ttccacaccc tccggcgctg ctacaagaca catgaaacgg atatttttcg caccgcgttt     1440
tttaaggctg tgaatggctt caactgcgga accgcctgta gcgagcatcg ggtcaaccac     1500
gatgaattca cgctcttcca catcagaagg aagcttgaca tagtattcca cgggttttaa     1560
ggtttctgga tcacggtaaa ggccgacatg tcccactttt gccgcaggaa tcagctttaa     1620
aatgccgtca accattccca atcctgctct gaggatagga accactccga gttttttccc     1680
tgagatgact ttcgatttcg cagcctgaac cggtgtattg atatccactt cttccagagg     1740
aagatcgcgg gtaatttcaa atgccatgag tgtagccact tcatctacta actctctaaa     1800
atccttcgta cctgtatttt cattccgtat atatgtcagc ttgtgctgaa ttaaaggatg     1860
atcaaataca taaacctttc ccatactgtg tttcagctcc ttttttattg tcccatcaac     1920
aattacacac ttctattgat tctacaaaaa aagacattga gtttcaagaa catcgtcaaa     1980
aaacccgccg ggcataagcc caagcgggtt ttaggatctt aataatctaa ttctttatat     2040
aaaggaaatt tatcagtcag agcagctaca cgctgtcttg cttcttgtgg gatcctctag     2100
agtcgacctg caggcatgca agcttgagta ttctatagtc tcacctaaat agcttggcgt     2160
aatcatggtc atagctgttt cctgtgtgaa attgttatcc gctcacaatt ccacacaaca     2220
tacgagccgg aagcataaag tgtaaagcct ggggtgccta atgagtgagc taactcacat     2280
taattgcgtt gcgctcactg cccgctttcc agtcgggaaa cctgtcgtgc cagctgcatt     2340
aatgaatcgg ccaacgcgaa ccccttgcgg ccgcccgggc cgtcgaccaa ttctcatgtt     2400
tgacagctta tcatcgaatt tctgccattc atccgcttat tatcacttat tcaggcgtag     2460
caaccaggcg tttaagggca ccaataactg ccttaaaaaa attacgcccc gccctgccac     2520
tcatcgcagt actgttgtaa ttcattaagc attctgccga catggaagcc atcacaaacg     2580
gcatgatgaa cctgaatcgc cagcggcatc agcaccttgt cgccttgcgt ataatatttg     2640
cccatggtga aaacgggggc gaagaagttg tccatattgg ccacgtttaa atcaaaactg     2700
gtgaaactca cccagggatt ggctgagacg aaaaacatat tctcaataaa ccctttaggg     2760
aaataggcca ggttttcacc gtaacacgcc acatcttgcg aatatatgtg tagaaactgc     2820
cggaaatcgt cgtggtattc actccagagc gatgaaaacg tttcagtttg ctcatggaaa     2880
acggtgtaac aagggtgaac actatcccat atcaccagct caccgtcttt cattgccata     2940
cgaaattccg gatgagcatt catcaggcgg gcaagaatgt gaataaaggc cggataaaac     3000
ttgtgcttat ttttctttac ggtctttaaa aaggccgtaa tatccagctg aacggtctgg     3060
ttataggtac attgagcaac tgactgaaat gcctcaaaat gttctttacg atgccattgg     3120
gatatatcaa cggtggtata tccagtgatt tttttctcca ttttagcttc cttagctcct     3180
gaaaatctcg ataactcaaa aaatacgccc ggtagtgatc ttatttcatt atggtgaaag     3240
ttggaacctc ttacgtgccg atcaacgtct cattttcgcc aaaagttggc ccagggcttc     3300
ccggtatcaa cagggacacc aggatttatt tattctgcga agtgatcttc cgtcacaggt     3360
atttattcgc gataagctca tggagcggcg taaccgtcgc acaggaagga cagagaaagc     3420
gcggatctgg gaagtgacgg acagaacggt caggacctgg attggggagg cggttgccgc     3480
cgctgctgct gacggtgtga cgttctctgt tccggtcaca ccacatacgt tccgccattc     3540
ctatgcgatg cacatgctgt atgccggtat accgctgaaa gttctgcaaa gcctgatggg     3600
acataagtcc atcagttcaa cggaagtcta cacgaaggtt tttgcgctgg atgtggctgc     3660
ccggcaccgg gtgcagtttg cgatgccgga gtctgatgcg gttgcgatgc tgaaacaatt     3720
atcctgagaa taaatgcctt ggcctttata tggaaatgtg gaactgagtg gatatgctgt     3780
ttttgtctgt taaacagaga agctggctgt tatccactga gaagcgaacg aaacagtcgg     3840
gaaaatctcc cattatcgta gagatccgca ttattaatct caggagcctg tgtagcgttt     3900
ataggaagta gtgttctgtc atgatgcctg caagcggtaa cgaaaacgat ttgaatatgc     3960
cttcaggaac aatagaaatc ttcgtgcggt gttacgttga agtggagcgg attatgtcag     4020
caatggacag aacaacctaa tgaacacaga accatgatgt ggtctgtcct tttacagcca     4080
gtagtgctcg ccgcagtcga gcgacagggc gaagccctcg gctggttgcc ctcgccgctg     4140
ggctggcggc cgtctatggc cctgcaaacg cgccagaaac gccgtcgaag ccgtgtgcga     4200
gacaccgcgg ccggccgccg gcgttgtgga tacctcgcgg aaaacttggc cctcactgac     4260
agatgagggg cggacgttga cacttgaggg gccgactcac ccggcgcggc gttgacagat     4320
gaggggcagg ctcgatttcg gccggcgacg tggagctggc cagcctcgca aatcggcgaa     4380
aacgcctgat tttacgcgag tttcccacag atgatgtgga caagcctggg gataagtgcc     4440
ctgcggtatt gacacttgag gggcgcgact actgacagat gaggggcgcg atccttgaca     4500
cttgaggggc agagtgctga cagatgaggg gcgcacctat tgacatttga ggggctgtcc     4560
acaggcagaa aatccagcat ttgcaagggt ttccgcccgt ttttcggcca ccgctaacct     4620
gtcttttaac ctgcttttaa accaatattt ataaaccttg tttttaacca gggctgcgcc     4680
ctgtgcgcgt gaccgcgcac gccgaagggg ggtgcccccc cttctcgaac cctcccggtc     4740
gagtgagcga ggaagcacca gggaacagca cttatatatt ctgcttacac acgatgcctg     4800
aaaaaacttc ccttggggtt atccacttat ccacggggat atttttataa ttattttttt     4860
tatagttttt agatcttctt ttttagagcg ccttgtaggc ctttatccat gctggttcta     4920
gagaaggtgt tgtgacaaat tgccctttca gtgtgacaaa tcaccctcaa atgacagtcc     4980
tgtctgtgac aaattgccct taaccctgtg acaaattgcc ctcagaagaa gctgtttttt     5040
cacaaagtta tccctgctta ttgactcttt tttatttagt gtgacaatct aaaaacttgt     5100
cacacttcac atggatctgt catggcggaa acagcggtta tcaatcacaa gaaacgtaaa     5160
aatagcccgc gaatcgtcca gtcaaacgac ctcactgagg cggcatatag tctctcccgg     5220
gatcaaaaac gtatgctgta tctgttcgtt gaccagatca gaaaatctga tggcacccta     5280
caggaacatg acggtatctg cgagatccat gttgctaaat atgctgaaat attcggattg     5340
acctctgcgg aagccagtaa ggatatacgg caggcattga agagtttcgc ggggaaggaa     5400
gtggtttttt atcgccctga agaggatgcc ggcgatgaaa aaggctatga atcttttcct     5460
tggtttatca aacgtgcgca cagtccatcc agagggcttt acagtgtaca tatcaaccca     5520
tatctcattc ccttctttat cgggttacag aaccggttta cgcagtttcg gcttagtgaa     5580
acaaaagaaa tcaccaatcc gtatgccatg cgtttatacg aatccctgtg tcagtatcgt     5640
aagccggatg gctcaggcat cgtctctctg aaaatcgact ggatcataga gcgttaccag     5700
ctgcctcaaa gttaccagcg tatgcctgac ttccgccgcc gcttcctgca ggtctgtgtt     5760
aatgagatca acagcagaac tccaatgcgc ctctcataca ttgagaaaaa gaaaggccgc     5820
cagacgactc atatcgtatt ttccttccgc gatatcactt ccatgacgac aggatagtct     5880
gagggttatc tgtcacagat ttgagggtgg ttcgtcacat ttgttctgac ctactgaggg     5940
taatttgtca cagttttgct gtttccttca gcctgcatgg attttctcat actttttgaa     6000
ctgtaatttt taaggaagcc aaatttgagg gcagtttgtc acagttgatt tccttctctt     6060
tcccttcgtc atgtgacctg atatcggggg ttagttcgtc atcattgatg agggttgatt     6120
atcacagttt attactctga attggctatc cgcgtgtgta cctctacctg gagtttttcc     6180
cacggtggat atttcttctt gcgctgagcg taagagctat ctgacagaac agttcttctt     6240
tgcttcctcg ccagttcgct cgctatgctc ggttacacgg ctgcggcgag cgctagtgat     6300
aataagtgac tgaggtatgt gctcttctta tctccttttg tagtgttgct cttattttaa     6360
acaactttgc ggttttttga tgactttgcg attttgttgt tgctttgcag taaattgcaa     6420
gatttaataa aaaaacgcaa agcaatgatt aaaggatgtt cagaatgaaa ctcatggaaa     6480
cacttaacca gtgcataaac gctggtcatg aaatgacgaa ggctatcgcc attgcacagt     6540
ttaatgatga cagcccggaa gcgaggaaaa taacccggcg ctggagaata ggtgaagcag     6600
cggatttagt tggggtttct tctcaggcta tcagagatgc cgagaaagca gggcgactac     6660
cgcacccgga tatggaaatt cgaggacggg ttgagcaacg tgttggttat acaattgaac     6720
aaattaatca tatgcgtgat gtgtttggta cgcgattgcg acgtgctgaa gacgtatttc     6780
caccggtgat cggggttgct gcccataaag gtggcgttta caaaacctca gtttctgttc     6840
atcttgctca ggatctggct ctgaaggggc tacgtgtttt gctcgtggaa ggtaacgacc     6900
cccagggaac agcctcaatg tatcacggat gggtaccaga tcttcatatt catgcagaag     6960
acactctcct gcctttctat cttggggaaa aggacgatgt cacttatgca ataaagccca     7020
cttgctggcc ggggcttgac attattcctt cctgtctggc tctgcaccgt attgaaactg     7080
agttaatggg caaatttgat gaaggtaaac tgcccaccga tccacacctg atgctccgac     7140
tggccattga aactgttgct catgactatg atgtcatagt tattgacagc gcgcctaacc     7200
tgggtatcgg cacgattaat gtcgtatgtg ctgctgatgt gctgattgtt cccacgcctg     7260
ctgagttgtt tgactacacc tccgcactgc agtttttcga tatgcttcgt gatctgctca     7320
agaacgttga tcttaaaggg ttcgagcctg atgtacgtat tttgcttacc aaatacagca     7380
atagtaatgg ctctcagtcc ccgtggatgg aggagcaaat tcgggatgcc tggggaagca     7440
tggttctaaa aaatgttgta cgtgaaacgg atgaagttgg taaaggtcag atccggatga     7500
gaactgtttt tgaacaggcc attgatcaac gctcttcaac tggtgcctgg agaaatgctc     7560
tttctatttg ggaacctgtc tgcaatgaaa ttttcgatcg tctgattaaa ccacgctggg     7620
agattagata atgaagcgtg cgcctgttat tccaaaacat acgctcaata ctcaaccggt     7680
tgaagatact tcgttatcga caccagctgc cccgatggtg gattcgttaa ttgcgcgcgt     7740
aggagtaatg gctcgcggta atgccattac tttgcctgta tgtggtcggg atgtgaagtt     7800
tactcttgaa gtgctccggg gtgatagtgt tgagaagacc tctcgggtat ggtcaggtaa     7860
tgaacgtgac caggagctgc ttactgagga cgcactggat gatctcatcc cttcttttct     7920
actgactggt caacagacac cggcgttcgg tcgaagagta tctggtgtca tagaaattgc     7980
cgatgggagt cgccgtcgta aagctgctgc acttaccgaa agtgattatc gtgttctggt     8040
tggcgagctg gatgatgagc agatggctgc attatccaga ttgggtaacg attatcgccc     8100
aacaagtgct tatgaacgtg gtcagcgtta tgcaagccga ttgcagaatg aatttgctgg     8160
aaatatttct gcgctggctg atgcggaaaa tatttcacgt aagattatta cccgctgtat     8220
caacaccgcc aaattgccta aatcagttgt tgctcttttt tctcaccccg gtgaactatc     8280
tgcccggtca ggtgatgcac ttcaaaaagc ctttacagat aaagaggaat tacttaagca     8340
gcaggcatct aaccttcatg agcagaaaaa agctggggtg atatttgaag ctgaagaagt     8400
tatcactctt ttaacttctg tgcttaaaac gtcatctgca tcaagaacta gtttaagctc     8460
acgacatcag tttgctcctg gagcgacagt attgtataag ggcgataaaa tggtgcttaa     8520
cctggacagg tctcgtgttc caactgagtg tatagagaaa attgaggcca ttcttaagga     8580
acttgaaaag ccagcaccct gatgcgacca cgttttagtc tacgtttatc tgtctttact     8640
taatgtcctt tgttacaggc cagaaagcat aactggcctg aatattctct ctgggcccac     8700
tgttccactt gtatcgtcgg tctgataatc agactgggac cacggtccca ctcgtatcgt     8760
cggtctgatt attagtctgg gaccacggtc ccactcgtat cgtcggtctg attattagtc     8820
tgggaccacg gtcccactcg tatcgtcggt ctgataatca gactgggacc acggtcccac     8880
tcgtatcgtc ggtctgatta ttagtctggg accatggtcc cactcgtatc gtcggtctga     8940
ttattagtct gggaccacgg tcccactcgt atcgtcggtc tgattattag tctggaacca     9000
cggtcccact cgtatcgtcg gtctgattat tagtctggga ccacggtccc actcgtatcg     9060
tcggtctgat tattagtctg ggaccacgat cccactcgtg ttgtcggtct gattatcggt     9120
ctgggaccac ggtcccactt gtattgtcga tcagactatc agcgtgagac tacgattcca     9180
tcaatgcctg tcaagggcaa gtattgacat gtcgtcgtaa cctgtagaac ggagtaacct     9240
cggtgtgcgg ttgtatgcct gctgtggatt gctgctgtgt cctgcttatc cacaacattt     9300
tgcgcacggt tatgtggaca aaatacctgg ttacccaggc cgtgccggca cgttaaccgg     9360
gctgcatccg atgcaagtgt gtcgctgtcg acgagctcgc gagctcggac atgaggttgc     9420
cccgtattca gtgtcgctga tttgtattgt ctgaagttgt ttttacgtta agttgatgca     9480
gatcaattaa tacgatacct gcgtcataat tgattatttg acgtggtttg atggcctcca     9540
cgcacgttgt gatatgtaga tgataatcat tatcacttta cgggtccttt ccggtgatcc     9600
gacaggttac ggggcggcga cctcgcgggt tttcgctatt tatgaaaatt ttccggttta     9660
aggcgtttcc gttcttcttc gtcataactt aatgttttta tttaaaatac cctctgaaaa     9720
gaaaggaaac gacaggtgct gaaagcgagc tttttggcct ctgtcgtttc ctttctctgt     9780
ttttgtccgt ggaatgaaca atggaagtcc gagctcatcg ctaataactt cgtatagcat     9840
acattatacg aagttatatt cgat                                            9864
<210>  70
<211>  1470
<212>  DNA
<213>  Synechocystis PCC6803
<400>  70
atgaaatccc cccaggctca acaaatccta gaccaggccc gccgtttgct ctacgaaaaa       60
gccatggtca aaatcaatgg gcaatacgtg gggacggtgg cggccattcc ccaatcggat      120
caccatgatt tgaactatac ggaagttttc attcgggaca atgtgccggt gatgatcttc      180
ttgttactgc aaaatgaaac ggaaattgtc caaaactttt tggaaatttg cctcaccctc      240
caaagtaagg gctttcccac ctacggcatt tttcccacta gttttgtgga aacggaaaac      300
catgaactca aggcagacta tggccaacgg gcgatcggtc gagtttgctc ggtggatgcg      360
tccctctggt ggcctatttt ggcctattac tacgtgcaaa gaaccggcaa tgaagcctgg      420
gctagacaaa cccatgtgca attggggcta caaaagtttt taaacctcat tctccatcca      480
gtctttcggg atgcacccac tttgtttgtg cccgacgggg cctttatgat tgaccgcccc      540
atggatgtgt ggggagcgcc gttggaaatc caaaccctgc tctacggagc cctgaaaagt      600
gcggcggggt tactgttaat cgacctcaag gcgaagggtt attgcagcaa taaagaccat      660
ccttttgaca gcttcacgat ggagcagagt catcaattta acctgagtgt ggattggctc      720
aaaaaactcc gcacctatct gctcaagcat tattggatta attgcaatat tgtccaagct      780
ctccgccgcc gtcccacgga acagtacggt gaagaagcca gcaacgaaca taatgtccac      840
acagaaacca ttcccaactg gctccaggat tggctcggcg atcggggagg ctatttaatc      900
ggcaatatcc gcacgggtcg ccccgatttt cgctttttct ccctgggtaa ttgcttgggg      960
gcaattttcg atgtcactag cttggcccag caacgttcct ttttccgttt ggtattaaat     1020
aatcagcggg agttatgtgc ccaaatgccc ctgaggattt gccatccccc cctcaaagat     1080
gacgattggc gcagtaaaac cggctttgac cgcaaaaatt taccctggtg ctaccacaac     1140
gccggccatt ggccctgttt attttggttt ctggtggtgg cggtgctccg ccatagctgc     1200
cattccaact acggcacggt ggagtatgcg gaaatgggga acctaattcg caataactat     1260
gaggtgcttt tgcgccgttt gcccaagcat aaatgggctg aatattttga tggccccacg     1320
ggcttttggg tcgggcaaca atcccgttcc taccaaacct ggaccattgt gggcctattg     1380
ctagtacacc atttcacaga agttaacccc gacgatgctt tgatgttcga tttgcctagt     1440
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<210>  71
<211>  489
<212>  PRT
<213>  Synechocystis PCC6803
<400>  71
Met Lys Ser Pro Gln Ala Gln Gln Ile Leu Asp Gln Ala Arg Arg Leu 
1               5                   10                  15      
Leu Tyr Glu Lys Ala Met Val Lys Ile Asn Gly Gln Tyr Val Gly Thr 
20                  25                  30          
Val Ala Ala Ile Pro Gln Ser Asp His His Asp Leu Asn Tyr Thr Glu 
35                  40                  45              
Val Phe Ile Arg Asp Asn Val Pro Val Met Ile Phe Leu Leu Leu Gln 
50                  55                  60                  
Asn Glu Thr Glu Ile Val Gln Asn Phe Leu Glu Ile Cys Leu Thr Leu 
65                  70                  75                  80  
Gln Ser Lys Gly Phe Pro Thr Tyr Gly Ile Phe Pro Thr Ser Phe Val 
85                  90                  95      
Glu Thr Glu Asn His Glu Leu Lys Ala Asp Tyr Gly Gln Arg Ala Ile 
100                 105                 110         
Gly Arg Val Cys Ser Val Asp Ala Ser Leu Trp Trp Pro Ile Leu Ala 
115                 120                 125             
Tyr Tyr Tyr Val Gln Arg Thr Gly Asn Glu Ala Trp Ala Arg Gln Thr 
130                 135                 140                 
His Val Gln Leu Gly Leu Gln Lys Phe Leu Asn Leu Ile Leu His Pro 
145                 150                 155                 160 
Val Phe Arg Asp Ala Pro Thr Leu Phe Val Pro Asp Gly Ala Phe Met 
165                 170                 175     
Ile Asp Arg Pro Met Asp Val Trp Gly Ala Pro Leu Glu Ile Gln Thr 
180                 185                 190         
Leu Leu Tyr Gly Ala Leu Lys Ser Ala Ala Gly Leu Leu Leu Ile Asp 
195                 200                 205             
Leu Lys Ala Lys Gly Tyr Cys Ser Asn Lys Asp His Pro Phe Asp Ser 
210                 215                 220                 
Phe Thr Met Glu Gln Ser His Gln Phe Asn Leu Ser Val Asp Trp Leu 
225                 230                 235                 240 
Lys Lys Leu Arg Thr Tyr Leu Leu Lys His Tyr Trp Ile Asn Cys Asn 
245                 250                 255     
Ile Val Gln Ala Leu Arg Arg Arg Pro Thr Glu Gln Tyr Gly Glu Glu 
260                 265                 270         
Ala Ser Asn Glu His Asn Val His Thr Glu Thr Ile Pro Asn Trp Leu 
275                 280                 285             
Gln Asp Trp Leu Gly Asp Arg Gly Gly Tyr Leu Ile Gly Asn Ile Arg 
290                 295                 300                 
Thr Gly Arg Pro Asp Phe Arg Phe Phe Ser Leu Gly Asn Cys Leu Gly 
305                 310                 315                 320 
Ala Ile Phe Asp Val Thr Ser Leu Ala Gln Gln Arg Ser Phe Phe Arg 
325                 330                 335     
Leu Val Leu Asn Asn Gln Arg Glu Leu Cys Ala Gln Met Pro Leu Arg 
340                 345                 350         
Ile Cys His Pro Pro Leu Lys Asp Asp Asp Trp Arg Ser Lys Thr Gly 
355                 360                 365             
Phe Asp Arg Lys Asn Leu Pro Trp Cys Tyr His Asn Ala Gly His Trp 
370                 375                 380                 
Pro Cys Leu Phe Trp Phe Leu Val Val Ala Val Leu Arg His Ser Cys 
385                 390                 395                 400 
His Ser Asn Tyr Gly Thr Val Glu Tyr Ala Glu Met Gly Asn Leu Ile 
405                 410                 415     
Arg Asn Asn Tyr Glu Val Leu Leu Arg Arg Leu Pro Lys His Lys Trp 
420                 425                 430         
Ala Glu Tyr Phe Asp Gly Pro Thr Gly Phe Trp Val Gly Gln Gln Ser 
435                 440                 445             
Arg Ser Tyr Gln Thr Trp Thr Ile Val Gly Leu Leu Leu Val His His 
450                 455                 460                 
Phe Thr Glu Val Asn Pro Asp Asp Ala Leu Met Phe Asp Leu Pro Ser 
465                 470                 475                 480 
Leu Lys Ser Leu His Gln Ala Leu His 
485                 
<210>  72
<211>  1392
<212>  DNA
<213>  Synechococcus PCC7942
<400>  72
atgcccgatt ctgttgtgct gcccgctacg ctgcagaccg cgctgcaaac agcggagcag       60
ttactttggg atcgggcctt ggttcgctat cacgatcagt gggcgggggc gatcgcggca      120
ctgcctgaag atcaggagtt ggcggcagcg aactaccgcg aaatctttat tcgcgacaac      180
gtgccggtga tgctctacct gctgttgcag ggcaaaactg acgttgtccg cgacttcttg      240
caactgtcgc tttctctcca gagccaggca ctgcaaacct atggcattct gccgaccagt      300
ttcgtctgtg aggaaaccca ctgcgttgct gactatggtc agcgggcgat cgggcgggtg      360
gtttctgctg accctagcct ttggtggccg gtgctgctac aggcctatcg gcgggcctcc      420
catgatgatg cctttgtcca cagtccgact gttcagcagg ggttacagcg gttgctggct      480
ttcctgctgc gtccggtttt caaccaaaac ccactgctcg aggtgcccga tggggccttc      540
atggtcgatc gtcccttgga tgtggcgggc gcacctttag aaattcaagt cctgctctac      600
ggggcactgc gggcttgtgg gcagttgctg caatacaccg aagcggccaa tgctgcccat      660
gtgcaagccc gtcgcctgcg gcagtatctc tgctggcact actgggtgac gcccgatcgc      720
ctgcgacgct ggcagcagtg gcccaccgaa gaatttggcg atcgcagcca taacccctac      780
aacattcagc cgatcgccat ccctgactgg gttgaacctt ggctgggtga gtcgggtggc      840
tacttcctag ggaacatacg ggcaggacgt cctgacttcc gcttttttag ccttggcaat      900
ttgctggcga tcgttttcga tgtgcttccg ctcaatcagc agggtgcgat tctgcgcttg      960
attttgcaga acgaagccca gattttgggc caagtgccgt tgcggctctg ctatcccgct     1020
ttaaccggat cggcgtggaa aatcctgacg ggttgcgatc ctaaaaatca gccttggtcc     1080
tatcacaacg gtggtagttg gccatccctg ctttggtatc tcagtgcggc ggtcttgcac     1140
taccaacagc ggggaggcga tcgcaatctc tgtcaggtct ggctgaataa gcttcagcac     1200
taccacactc agcagtgcga gcaactccct ggcgatgagt ggccagagta ctacgagggt     1260
caggactcgg tccagattgc tactcgcgcc tgccgttatc agacttggac gtttacggga     1320
ttgctgctga atcacgcact gctctcgcag ccccagggca ttcaactgct gagtctgcgg     1380
ggcttaccct aa                                                         1392
<210>  73
<211>  463
<212>  PRT
<213>  Synechococcus PCC7942
<400>  73
Met Pro Asp Ser Val Val Leu Pro Ala Thr Leu Gln Thr Ala Leu Gln 
1               5                   10                  15      
Thr Ala Glu Gln Leu Leu Trp Asp Arg Ala Leu Val Arg Tyr His Asp 
20                  25                  30          
Gln Trp Ala Gly Ala Ile Ala Ala Leu Pro Glu Asp Gln Glu Leu Ala 
35                  40                  45              
Ala Ala Asn Tyr Arg Glu Ile Phe Ile Arg Asp Asn Val Pro Val Met 
50                  55                  60                  
Leu Tyr Leu Leu Leu Gln Gly Lys Thr Asp Val Val Arg Asp Phe Leu 
65                  70                  75                  80  
Gln Leu Ser Leu Ser Leu Gln Ser Gln Ala Leu Gln Thr Tyr Gly Ile 
85                  90                  95      
Leu Pro Thr Ser Phe Val Cys Glu Glu Thr His Cys Val Ala Asp Tyr 
100                 105                 110         
Gly Gln Arg Ala Ile Gly Arg Val Val Ser Ala Asp Pro Ser Leu Trp 
115                 120                 125             
Trp Pro Val Leu Leu Gln Ala Tyr Arg Arg Ala Ser His Asp Asp Ala 
130                 135                 140                 
Phe Val His Ser Pro Thr Val Gln Gln Gly Leu Gln Arg Leu Leu Ala 
145                 150                 155                 160 
Phe Leu Leu Arg Pro Val Phe Asn Gln Asn Pro Leu Leu Glu Val Pro 
165                 170                 175     
Asp Gly Ala Phe Met Val Asp Arg Pro Leu Asp Val Ala Gly Ala Pro 
180                 185                 190         
Leu Glu Ile Gln Val Leu Leu Tyr Gly Ala Leu Arg Ala Cys Gly Gln 
195                 200                 205             
Leu Leu Gln Tyr Thr Glu Ala Ala Asn Ala Ala His Val Gln Ala Arg 
210                 215                 220                 
Arg Leu Arg Gln Tyr Leu Cys Trp His Tyr Trp Val Thr Pro Asp Arg 
225                 230                 235                 240 
Leu Arg Arg Trp Gln Gln Trp Pro Thr Glu Glu Phe Gly Asp Arg Ser 
245                 250                 255     
His Asn Pro Tyr Asn Ile Gln Pro Ile Ala Ile Pro Asp Trp Val Glu 
260                 265                 270         
Pro Trp Leu Gly Glu Ser Gly Gly Tyr Phe Leu Gly Asn Ile Arg Ala 
275                 280                 285             
Gly Arg Pro Asp Phe Arg Phe Phe Ser Leu Gly Asn Leu Leu Ala Ile 
290                 295                 300                 
Val Phe Asp Val Leu Pro Leu Asn Gln Gln Gly Ala Ile Leu Arg Leu 
305                 310                 315                 320 
Ile Leu Gln Asn Glu Ala Gln Ile Leu Gly Gln Val Pro Leu Arg Leu 
325                 330                 335     
Cys Tyr Pro Ala Leu Thr Gly Ser Ala Trp Lys Ile Leu Thr Gly Cys 
340                 345                 350         
Asp Pro Lys Asn Gln Pro Trp Ser Tyr His Asn Gly Gly Ser Trp Pro 
355                 360                 365             
Ser Leu Leu Trp Tyr Leu Ser Ala Ala Val Leu His Tyr Gln Gln Arg 
370                 375                 380                 
Gly Gly Asp Arg Asn Leu Cys Gln Val Trp Leu Asn Lys Leu Gln His 
385                 390                 395                 400 
Tyr His Thr Gln Gln Cys Glu Gln Leu Pro Gly Asp Glu Trp Pro Glu 
405                 410                 415     
Tyr Tyr Glu Gly Gln Asp Ser Val Gln Ile Ala Thr Arg Ala Cys Arg 
420                 425                 430         
Tyr Gln Thr Trp Thr Phe Thr Gly Leu Leu Leu Asn His Ala Leu Leu 
435                 440                 445             
Ser Gln Pro Gln Gly Ile Gln Leu Leu Ser Leu Arg Gly Leu Pro 
450                 455                 460             
<210>  74
<211>  966
<212>  DNA
<213>  Synechocystis PCC6803
<400>  74
atgattaatt gtcaattttg ttccgttatt tccaaatcta acggggaaga tcctatcggc       60
acagcaaatt caagtgatcg ttggttaatt atggaattac cccaaccttg gacagaggaa      120
cgctttcatc atgaccccat tcttaaacca attcatgatc tttttcatca actttctgat      180
caaggagtta aagtatctcc aatggcgatc gcctcagatc acgagtattc tcaatcagga      240
tttagtcgta ttattcacta ccaaaagttt aatttgctct tttccagttt tataaaagaa      300
gaatatttag ttcctgatga tcaaaggtgg gatcttatca aaaatttatg ttatcaatct      360
ccagagttag aaaattttcg taactataaa ctgtcagatg ttgttgatcg agatatgatg      420
gtatgtactc atggaaacat tgatgtggct tgttcgagat ttggttatcc tatttataaa      480
caattacgac aaaaatatgc atcaaaaaat ttaagaatat ggcgctgctc tcattttggg      540
ggacatcagt ttgctccgac tttaattgat tttccaaatg ggcaagtttg gggacatctt      600
gagtctgaag ttttagataa tctggtaagg caagaaggtc aagttaaaca actttataaa      660
ttttatcgag gttgggtagg cgtaacaaaa tttgcccaga ttgttgagcg tgaaatttgg      720
actcaacgag gttggcaatg gttaaattat caaaaatcag ctcaaatatt gaacatggat      780
gataatcagc atgatcccaa ttgggtagag gttcaatttg attttatttc tcccgataaa      840
gttaaaggag cttattttgc aagagttgaa gtcaatgggt cagtgatgac tgctagaaat      900
tcaggagatg aacttatttc tgtcaagcag tatagtgtca gctacttaaa agaaattgat      960
aaataa                                                                 966
<210>  75
<211>  321
<212>  PRT
<213>  Synechocystis PCC6803
<400>  75
Met Ile Asn Cys Gln Phe Cys Ser Val Ile Ser Lys Ser Asn Gly Glu 
1               5                   10                  15      
Asp Pro Ile Gly Thr Ala Asn Ser Ser Asp Arg Trp Leu Ile Met Glu 
20                  25                  30          
Leu Pro Gln Pro Trp Thr Glu Glu Arg Phe His His Asp Pro Ile Leu 
35                  40                  45              
Lys Pro Ile His Asp Leu Phe His Gln Leu Ser Asp Gln Gly Val Lys 
50                  55                  60                  
Val Ser Pro Met Ala Ile Ala Ser Asp His Glu Tyr Ser Gln Ser Gly 
65                  70                  75                  80  
Phe Ser Arg Ile Ile His Tyr Gln Lys Phe Asn Leu Leu Phe Ser Ser 
85                  90                  95      
Phe Ile Lys Glu Glu Tyr Leu Val Pro Asp Asp Gln Arg Trp Asp Leu 
100                 105                 110         
Ile Lys Asn Leu Cys Tyr Gln Ser Pro Glu Leu Glu Asn Phe Arg Asn 
115                 120                 125             
Tyr Lys Leu Ser Asp Val Val Asp Arg Asp Met Met Val Cys Thr His 
130                 135                 140                 
Gly Asn Ile Asp Val Ala Cys Ser Arg Phe Gly Tyr Pro Ile Tyr Lys 
145                 150                 155                 160 
Gln Leu Arg Gln Lys Tyr Ala Ser Lys Asn Leu Arg Ile Trp Arg Cys 
165                 170                 175     
Ser His Phe Gly Gly His Gln Phe Ala Pro Thr Leu Ile Asp Phe Pro 
180                 185                 190         
Asn Gly Gln Val Trp Gly His Leu Glu Ser Glu Val Leu Asp Asn Leu 
195                 200                 205             
Val Arg Gln Glu Gly Gln Val Lys Gln Leu Tyr Lys Phe Tyr Arg Gly 
210                 215                 220                 
Trp Val Gly Val Thr Lys Phe Ala Gln Ile Val Glu Arg Glu Ile Trp 
225                 230                 235                 240 
Thr Gln Arg Gly Trp Gln Trp Leu Asn Tyr Gln Lys Ser Ala Gln Ile 
245                 250                 255     
Leu Asn Met Asp Asp Asn Gln His Asp Pro Asn Trp Val Glu Val Gln 
260                 265                 270         
Phe Asp Phe Ile Ser Pro Asp Lys Val Lys Gly Ala Tyr Phe Ala Arg 
275                 280                 285             
Val Glu Val Asn Gly Ser Val Met Thr Ala Arg Asn Ser Gly Asp Glu 
290                 295                 300                 
Leu Ile Ser Val Lys Gln Tyr Ser Val Ser Tyr Leu Lys Glu Ile Asp 
305                 310                 315                 320 
Lys 
<210>  76
<211>  1425
<212>  DNA
<213>  Escherichia coli
<400>  76
atgagtcgtt tagtcgtagt atctaaccgg attgcaccac cagacgagca cgccgccagt       60
gccggtggcc ttgccgttgg catactgggg gcactgaaag ccgcaggcgg actgtggttt      120
ggctggagtg gtgaaacagg gaatgaggat cagccgctaa aaaaggtgaa aaaaggtaac      180
attacgtggg cctcttttaa cctcagcgaa caggaccttg acgaatacta caaccaattc      240
tccaatgccg ttctctggcc cgcttttcat tatcggctcg atctggtgca atttcagcgt      300
cctgcctggg acggctatct acgcgtaaat gcgttgctgg cagataaatt actgccgctg      360
ttgcaagacg atgacattat ctggatccac gattatcacc tgttgccatt tgcgcatgaa      420
ttacgcaaac ggggagtgaa taatcgcatt ggtttctttc tgcatattcc tttcccgaca      480
ccggaaatct tcaacgcgct gccgacatat gacaccttgc ttgaacagct ttgtgattat      540
gatttgctgg gtttccagac agaaaacgat cgtctggcgt tcctggattg tctttctaac      600
ctgacccgcg tcacgacacg tagcgcaaaa agccatacag cctggggcaa agcatttcga      660
acagaagtct acccgatcgg cattgaaccg aaagaaatag ccaaacaggc tgccgggcca      720
ctgccgccaa aactggcgca acttaaagcg gaactgaaaa acgtacaaaa tatcttttct      780
gtcgaacggc tggattattc caaaggtttg ccagagcgtt ttctcgccta tgaagcgttg      840
ctggaaaaat atccgcagca tcatggtaaa attcgttata cccagattgc accaacgtcg      900
cgtggtgatg tgcaagccta tcaggatatt cgtcatcagc tcgaaaatga agctggacga      960
attaatggta aatacgggca attaggctgg acgccgcttt attatttgaa tcagcatttt     1020
gaccgtaaat tactgatgaa aatattccgc tactctgacg tgggcttagt gacgccactg     1080
cgtgacggga tgaacctggt agcaaaagag tatgttgctg ctcaggaccc agccaatccg     1140
ggcgttcttg ttctttcgca atttgcggga gcggcaaacg agttaacgtc ggcgttaatt     1200
gttaacccct acgatcgtga cgaagttgca gctgcgctgg atcgtgcatt gactatgtcg     1260
ctggcggaac gtatttcccg tcatgcagaa atgctggacg ttatcgtgaa aaacgatatt     1320
aaccactggc aggagtgctt cattagcgac ctaaagcaga tagttccgcg aagcgcggaa     1380
agccagcagc gcgataaagt tgctaccttt ccaaagcttg cgtag                     1425
<210>  77
<211>  474
<212>  PRT
<213>  Escherichia coli
<400>  77
Met Ser Arg Leu Val Val Val Ser Asn Arg Ile Ala Pro Pro Asp Glu 
1               5                   10                  15      
His Ala Ala Ser Ala Gly Gly Leu Ala Val Gly Ile Leu Gly Ala Leu 
20                  25                  30          
Lys Ala Ala Gly Gly Leu Trp Phe Gly Trp Ser Gly Glu Thr Gly Asn 
35                  40                  45              
Glu Asp Gln Pro Leu Lys Lys Val Lys Lys Gly Asn Ile Thr Trp Ala 
50                  55                  60                  
Ser Phe Asn Leu Ser Glu Gln Asp Leu Asp Glu Tyr Tyr Asn Gln Phe 
65                  70                  75                  80  
Ser Asn Ala Val Leu Trp Pro Ala Phe His Tyr Arg Leu Asp Leu Val 
85                  90                  95      
Gln Phe Gln Arg Pro Ala Trp Asp Gly Tyr Leu Arg Val Asn Ala Leu 
100                 105                 110         
Leu Ala Asp Lys Leu Leu Pro Leu Leu Gln Asp Asp Asp Ile Ile Trp 
115                 120                 125             
Ile His Asp Tyr His Leu Leu Pro Phe Ala His Glu Leu Arg Lys Arg 
130                 135                 140                 
Gly Val Asn Asn Arg Ile Gly Phe Phe Leu His Ile Pro Phe Pro Thr 
145                 150                 155                 160 
Pro Glu Ile Phe Asn Ala Leu Pro Thr Tyr Asp Thr Leu Leu Glu Gln 
165                 170                 175     
Leu Cys Asp Tyr Asp Leu Leu Gly Phe Gln Thr Glu Asn Asp Arg Leu 
180                 185                 190         
Ala Phe Leu Asp Cys Leu Ser Asn Leu Thr Arg Val Thr Thr Arg Ser 
195                 200                 205             
Ala Lys Ser His Thr Ala Trp Gly Lys Ala Phe Arg Thr Glu Val Tyr 
210                 215                 220                 
Pro Ile Gly Ile Glu Pro Lys Glu Ile Ala Lys Gln Ala Ala Gly Pro 
225                 230                 235                 240 
Leu Pro Pro Lys Leu Ala Gln Leu Lys Ala Glu Leu Lys Asn Val Gln 
245                 250                 255     
Asn Ile Phe Ser Val Glu Arg Leu Asp Tyr Ser Lys Gly Leu Pro Glu 
260                 265                 270         
Arg Phe Leu Ala Tyr Glu Ala Leu Leu Glu Lys Tyr Pro Gln His His 
275                 280                 285             
Gly Lys Ile Arg Tyr Thr Gln Ile Ala Pro Thr Ser Arg Gly Asp Val 
290                 295                 300                 
Gln Ala Tyr Gln Asp Ile Arg His Gln Leu Glu Asn Glu Ala Gly Arg 
305                 310                 315                 320 
Ile Asn Gly Lys Tyr Gly Gln Leu Gly Trp Thr Pro Leu Tyr Tyr Leu 
325                 330                 335     
Asn Gln His Phe Asp Arg Lys Leu Leu Met Lys Ile Phe Arg Tyr Ser 
340                 345                 350         
Asp Val Gly Leu Val Thr Pro Leu Arg Asp Gly Met Asn Leu Val Ala 
355                 360                 365             
Lys Glu Tyr Val Ala Ala Gln Asp Pro Ala Asn Pro Gly Val Leu Val 
370                 375                 380                 
Leu Ser Gln Phe Ala Gly Ala Ala Asn Glu Leu Thr Ser Ala Leu Ile 
385                 390                 395                 400 
Val Asn Pro Tyr Asp Arg Asp Glu Val Ala Ala Ala Leu Asp Arg Ala 
405                 410                 415     
Leu Thr Met Ser Leu Ala Glu Arg Ile Ser Arg His Ala Glu Met Leu 
420                 425                 430         
Asp Val Ile Val Lys Asn Asp Ile Asn His Trp Gln Glu Cys Phe Ile 
435                 440                 445             
Ser Asp Leu Lys Gln Ile Val Pro Arg Ser Ala Glu Ser Gln Gln Arg 
450                 455                 460                 
Asp Lys Val Ala Thr Phe Pro Lys Leu Ala 
465                 470                 
<210>  78
<211>  746
<212>  DNA
<213>  Escherichia coli
<400>  78
atgatcttga tggaacgctg gcggaaatca aaccgcatcc cgatcaggtc gtcgtgcctg       60
acaatattct gcaaggacta cagctactgg caaccgcaag tgatggtgca ttggcattga      120
tatcagggcg ctcaatggtg gagcttgacg cactggcaaa accttatcgc ttcccgttag      180
cgggcgtgca tggggcggag cgccgtgaca tcaatggtaa aacacatatc gttcatctgc      240
cggatgcgat tgcgcgtgat attagcgtgc aactgcatac agtcatcgct cagtatcccg      300
gcgcggagct ggaggcgaaa gggatggctt ttgcgctgca ttatcgtcag gctccgcagc      360
atgaagacgc attaatgaca ttagcgcaac gtattactca gatctggcca caaatggcgt      420
tacagcaggg aaagtgtgtt gtcgagatca aaccgagagg taccagtaaa ggtgaggcaa      480
ttgcagcttt tatgcaggaa gctcccttta tcgggcgaac gcccgtattt ctgggcgatg      540
atttaaccga tgaatctggc ttcgcagtcg ttaaccgact gggcggaatg tcagtaaaaa      600
ttggcacagg tgcaactcag gcatcatggc gactggcggg tgtgccggat gtctggagct      660
ggcttgaaat gataaccacc gcattacaac aaaaaagaga aaataacagg agtgatgact      720
atgagtcgtt tagtcgtagt atctaa                                           746
<210>  79
<211>  266
<212>  PRT
<213>  Escherichia coli
<400>  79
Met Thr Glu Pro Leu Thr Glu Thr Pro Glu Leu Ser Ala Lys Tyr Ala 
1               5                   10                  15      
Trp Phe Phe Asp Leu Asp Gly Thr Leu Ala Glu Ile Lys Pro His Pro 
20                  25                  30          
Asp Gln Val Val Val Pro Asp Asn Ile Leu Gln Gly Leu Gln Leu Leu 
35                  40                  45              
Ala Thr Ala Ser Asp Gly Ala Leu Ala Leu Ile Ser Gly Arg Ser Met 
50                  55                  60                  
Val Glu Leu Asp Ala Leu Ala Lys Pro Tyr Arg Phe Pro Leu Ala Gly 
65                  70                  75                  80  
Val His Gly Ala Glu Arg Arg Asp Ile Asn Gly Lys Thr His Ile Val 
85                  90                  95      
His Leu Pro Asp Ala Ile Ala Arg Asp Ile Ser Val Gln Leu His Thr 
100                 105                 110         
Val Ile Ala Gln Tyr Pro Gly Ala Glu Leu Glu Ala Lys Gly Met Ala 
115                 120                 125             
Phe Ala Leu His Tyr Arg Gln Ala Pro Gln His Glu Asp Ala Leu Met 
130                 135                 140                 
Thr Leu Ala Gln Arg Ile Thr Gln Ile Trp Pro Gln Met Ala Leu Gln 
145                 150                 155                 160 
Gln Gly Lys Cys Val Val Glu Ile Lys Pro Arg Gly Thr Ser Lys Gly 
165                 170                 175     
Glu Ala Ile Ala Ala Phe Met Gln Glu Ala Pro Phe Ile Gly Arg Thr 
180                 185                 190         
Pro Val Phe Leu Gly Asp Asp Leu Thr Asp Glu Ser Gly Phe Ala Val 
195                 200                 205             
Val Asn Arg Leu Gly Gly Met Ser Val Lys Ile Gly Thr Gly Ala Thr 
210                 215                 220                 
Gln Ala Ser Trp Arg Leu Ala Gly Val Pro Asp Val Trp Ser Trp Leu 
225                 230                 235                 240 
Glu Met Ile Thr Thr Ala Leu Gln Gln Lys Arg Glu Asn Asn Arg Ser 
245                 250                 255     
Asp Asp Tyr Glu Ser Phe Ser Arg Ser Ile 
260                 265     
<210>  80
<211>  1500
<212>  DNA
<213>  Synechocystis PCC6803
<400>  80
atgaattcat cccttgtgat cctttaccac cgtgagccct acgacgaagt tagggaaaat       60
ggcaaaacgg tgtatcgaga gaaaaagagt cccaacggga ttttgcccac cctcaaaagt      120
ttttttgccg atgcggaaca gagcacctgg gtcgcatgga aacaggtttc gccgaagcaa      180
aaggatgatt ttcaggcgga tatgtccatt gaaggccttg gcgatcgttg tacggtgcgc      240
cgggtgcccc tgacggcgga gcaggtaaaa aacttctatc acatcacttc caaggaagcc      300
ttttggccca ttctccactc tttcccctgg cagttcacct acgattcttc tgattgggat      360
aattttcagc acattaaccg cttatttgcc gaggcggcct gtgccgatgc cgatgacaat      420
gcattgtttt gggtccacga ctataacctc tggttagcgc ccctttacat tcgtcagctc      480
aagcccaacg ccaagattgc ctttttccac cacaccccct tccccagcgt tgatattttc      540
aatattttgc cctggcggga ggcgatcgta gaaagcttgc tggcctgtga tctctgtggt      600
tttcatattc cccgctacgt agaaaatttt gtcgccgtgg cccgtagtct caagccggtg      660
gaaatcacca gacgggttgt ggtagaccaa gcctttaccc cctacggtac ggccctggcg      720
gaaccggaac tcaccaccca gttgcgttat ggcgatcgcc tcattaacct cgatgcgttt      780
cccgtgggca ccaatccggc aaatatccgg gcgatcgtgg ccaaagaaag tgtgcaacaa      840
aaagttgctg aaattaaaca agatttaggc ggtaagaggc taattgtttc cgctgggcgg      900
gtggattacg tgaagggcac caaggaaatg ttgatgtgct atgaacgtct actggagcgt      960
cgccccgaat tgcaggggga aattagcctg gtagtccccg tagccaaggc cgctgaggga     1020
atgcgtattt atcgcaacgc ccaaaacgaa attgaacgac tggcagggaa aattaacggt     1080
cgctttgcca aactgtcctg gacaccagtg atgctgttca cctctccttt agcctatgag     1140
gagctcattg ccctgttctg tgccgccgac attgcctgga tcactcccct gcgggatggg     1200
ctaaacctgg tggctaagga gtatgtggtg gctaaaaatg gcgaagaagg agttctgatc     1260
ctctcggaat ttgccggttg tgcggtggaa ctacccgatg cggtgttgac taacccctac     1320
gcttccagcc gtatggacga atccattgac caggccctgg ccatggacaa agacgaacag     1380
aaaaaacgca tggggagaat gtacgccgcc attaagcgtt acgacgttca acaatgggcc     1440
aatcacctac tgcgggaagc ctacgccgat gtggtactgg gagagccccc ccaaatgtag     1500
<210>  81
<211>  499
<212>  PRT
<213>  Synechocystis PCC6803
<400>  81
Met Asn Ser Ser Leu Val Ile Leu Tyr His Arg Glu Pro Tyr Asp Glu 
1               5                   10                  15      
Val Arg Glu Asn Gly Lys Thr Val Tyr Arg Glu Lys Lys Ser Pro Asn 
20                  25                  30          
Gly Ile Leu Pro Thr Leu Lys Ser Phe Phe Ala Asp Ala Glu Gln Ser 
35                  40                  45              
Thr Trp Val Ala Trp Lys Gln Val Ser Pro Lys Gln Lys Asp Asp Phe 
50                  55                  60                  
Gln Ala Asp Met Ser Ile Glu Gly Leu Gly Asp Arg Cys Thr Val Arg 
65                  70                  75                  80  
Arg Val Pro Leu Thr Ala Glu Gln Val Lys Asn Phe Tyr His Ile Thr 
85                  90                  95      
Ser Lys Glu Ala Phe Trp Pro Ile Leu His Ser Phe Pro Trp Gln Phe 
100                 105                 110         
Thr Tyr Asp Ser Ser Asp Trp Asp Asn Phe Gln His Ile Asn Arg Leu 
115                 120                 125             
Phe Ala Glu Ala Ala Cys Ala Asp Ala Asp Asp Asn Ala Leu Phe Trp 
130                 135                 140                 
Val His Asp Tyr Asn Leu Trp Leu Ala Pro Leu Tyr Ile Arg Gln Leu 
145                 150                 155                 160 
Lys Pro Asn Ala Lys Ile Ala Phe Phe His His Thr Pro Phe Pro Ser 
165                 170                 175     
Val Asp Ile Phe Asn Ile Leu Pro Trp Arg Glu Ala Ile Val Glu Ser 
180                 185                 190         
Leu Leu Ala Cys Asp Leu Cys Gly Phe His Ile Pro Arg Tyr Val Glu 
195                 200                 205             
Asn Phe Val Ala Val Ala Arg Ser Leu Lys Pro Val Glu Ile Thr Arg 
210                 215                 220                 
Arg Val Val Val Asp Gln Ala Phe Thr Pro Tyr Gly Thr Ala Leu Ala 
225                 230                 235                 240 
Glu Pro Glu Leu Thr Thr Gln Leu Arg Tyr Gly Asp Arg Leu Ile Asn 
245                 250                 255     
Leu Asp Ala Phe Pro Val Gly Thr Asn Pro Ala Asn Ile Arg Ala Ile 
260                 265                 270         
Val Ala Lys Glu Ser Val Gln Gln Lys Val Ala Glu Ile Lys Gln Asp 
275                 280                 285             
Leu Gly Gly Lys Arg Leu Ile Val Ser Ala Gly Arg Val Asp Tyr Val 
290                 295                 300                 
Lys Gly Thr Lys Glu Met Leu Met Cys Tyr Glu Arg Leu Leu Glu Arg 
305                 310                 315                 320 
Arg Pro Glu Leu Gln Gly Glu Ile Ser Leu Val Val Pro Val Ala Lys 
325                 330                 335     
Ala Ala Glu Gly Met Arg Ile Tyr Arg Asn Ala Gln Asn Glu Ile Glu 
340                 345                 350         
Arg Leu Ala Gly Lys Ile Asn Gly Arg Phe Ala Lys Leu Ser Trp Thr 
355                 360                 365             
Pro Val Met Leu Phe Thr Ser Pro Leu Ala Tyr Glu Glu Leu Ile Ala 
370                 375                 380                 
Leu Phe Cys Ala Ala Asp Ile Ala Trp Ile Thr Pro Leu Arg Asp Gly 
385                 390                 395                 400 
Leu Asn Leu Val Ala Lys Glu Tyr Val Val Ala Lys Asn Gly Glu Glu 
405                 410                 415     
Gly Val Leu Ile Leu Ser Glu Phe Ala Gly Cys Ala Val Glu Leu Pro 
420                 425                 430         
Asp Ala Val Leu Thr Asn Pro Tyr Ala Ser Ser Arg Met Asp Glu Ser 
435                 440                 445             
Ile Asp Gln Ala Leu Ala Met Asp Lys Asp Glu Gln Lys Lys Arg Met 
450                 455                 460                 
Gly Arg Met Tyr Ala Ala Ile Lys Arg Tyr Asp Val Gln Gln Trp Ala 
465                 470                 475                 480 
Asn His Leu Leu Arg Glu Ala Tyr Ala Asp Val Val Leu Gly Glu Pro 
485                 490                 495     
Pro Gln Met 
<210>  82
<211>  1269
<212>  DNA
<213>  Synechocystis PCC6803
<400>  82
atggtattac accaacaacg tttctccctc gaccatggag ctttttgtca aaccttagcc       60
caaactgaaa atttactcat tgtccaagac ttggatgggg tctgcatgga attagtgcaa      120
gatcccctca gtcgccgcct ggatgccgat tatgtccggg ccaccaccct gtttgctgaa      180
catttttacg tgttgaccaa tggggagcac gtgggaaaaa gaggagtaca gggcattgtg      240
gaacaatcct ttggggatgc ttcctttgtg caacaggaag gcctatattt gcccggtttg      300
gcggccgggg gagtgcagtg gcaggatcgc catggcaaag taagtcatcc tggagtgggg      360
caaacggagc tggagttttt agcggcggtg cccgaaaaaa tcactaattg tttaaaaacc      420
ttttttggcg atcgccccca ttccctatcc ccagagcaat tacaaacggg cattgaagct      480
tcggttttag ataatgtggc ttcccccacc gccaatttaa ataccttggc caatctgtta      540
caagactttc cgcaaattta ccgagatttg caggaaacca tggctcaatt attggatcag      600
ttgatggcgg aagccgttgc ccagggtttg gggaatagtt tttttgtcca ctatgctccc      660
aatttaggta gggatgaacg aggtaaggaa attattcgtt gggccaaagc tggggattcc      720
ggcaccaccg attttcaatt tatgttgcgg ggtggggtca aagaagccgg ggttttggct      780
ttgctaaatc gttactatca caatcggaca gggcaatatc ctctgggaga aagttttagt      840
gctcgccaag cgcccccatc ccaccaggac ttgttgcatt tggtgaaagc gcaatttgat      900
ccggccttga tgccgctgat cattggagtt ggggatacgg tcaccagtca ggtggatgaa      960
gctaccgggg aaattcgacg tggcgggagc gatcgccaat ttttgcaatt aatccaagat     1020
ttgggggatt ggggaaatca cggtaactta gtggtgtatg tggacagttc ccagggggag     1080
gtgaaaaatc gccaacctct acaactagaa accgtggcgg ggcaaaccca agtggtggct     1140
ggccctgggg atatgcggga cagggaagag ccattgaaga tcaatgtggc ttttcctggt     1200
ggccatgacc aatatgtagc ggcgtttaag caggcggccc agcgccgaag agtccatttt     1260
tcccagtag                                                             1269
<210>  83
<211>  422
<212>  PRT
<213>  Synechocystis PCC6803
<400>  83
Met Val Leu His Gln Gln Arg Phe Ser Leu Asp His Gly Ala Phe Cys 
1               5                   10                  15      
Gln Thr Leu Ala Gln Thr Glu Asn Leu Leu Ile Val Gln Asp Leu Asp 
20                  25                  30          
Gly Val Cys Met Glu Leu Val Gln Asp Pro Leu Ser Arg Arg Leu Asp 
35                  40                  45              
Ala Asp Tyr Val Arg Ala Thr Thr Leu Phe Ala Glu His Phe Tyr Val 
50                  55                  60                  
Leu Thr Asn Gly Glu His Val Gly Lys Arg Gly Val Gln Gly Ile Val 
65                  70                  75                  80  
Glu Gln Ser Phe Gly Asp Ala Ser Phe Val Gln Gln Glu Gly Leu Tyr 
85                  90                  95      
Leu Pro Gly Leu Ala Ala Gly Gly Val Gln Trp Gln Asp Arg His Gly 
100                 105                 110         
Lys Val Ser His Pro Gly Val Gly Gln Thr Glu Leu Glu Phe Leu Ala 
115                 120                 125             
Ala Val Pro Glu Lys Ile Thr Asn Cys Leu Lys Thr Phe Phe Gly Asp 
130                 135                 140                 
Arg Pro His Ser Leu Ser Pro Glu Gln Leu Gln Thr Gly Ile Glu Ala 
145                 150                 155                 160 
Ser Val Leu Asp Asn Val Ala Ser Pro Thr Ala Asn Leu Asn Thr Leu 
165                 170                 175     
Ala Asn Leu Leu Gln Asp Phe Pro Gln Ile Tyr Arg Asp Leu Gln Glu 
180                 185                 190         
Thr Met Ala Gln Leu Leu Asp Gln Leu Met Ala Glu Ala Val Ala Gln 
195                 200                 205             
Gly Leu Gly Asn Ser Phe Phe Val His Tyr Ala Pro Asn Leu Gly Arg 
210                 215                 220                 
Asp Glu Arg Gly Lys Glu Ile Ile Arg Trp Ala Lys Ala Gly Asp Ser 
225                 230                 235                 240 
Gly Thr Thr Asp Phe Gln Phe Met Leu Arg Gly Gly Val Lys Glu Ala 
245                 250                 255     
Gly Val Leu Ala Leu Leu Asn Arg Tyr Tyr His Asn Arg Thr Gly Gln 
260                 265                 270         
Tyr Pro Leu Gly Glu Ser Phe Ser Ala Arg Gln Ala Pro Pro Ser His 
275                 280                 285             
Gln Asp Leu Leu His Leu Val Lys Ala Gln Phe Asp Pro Ala Leu Met 
290                 295                 300                 
Pro Leu Ile Ile Gly Val Gly Asp Thr Val Thr Ser Gln Val Asp Glu 
305                 310                 315                 320 
Ala Thr Gly Glu Ile Arg Arg Gly Gly Ser Asp Arg Gln Phe Leu Gln 
325                 330                 335     
Leu Ile Gln Asp Leu Gly Asp Trp Gly Asn His Gly Asn Leu Val Val 
340                 345                 350         
Tyr Val Asp Ser Ser Gln Gly Glu Val Lys Asn Arg Gln Pro Leu Gln 
355                 360                 365             
Leu Glu Thr Val Ala Gly Gln Thr Gln Val Val Ala Gly Pro Gly Asp 
370                 375                 380                 
Met Arg Asp Arg Glu Glu Pro Leu Lys Ile Asn Val Ala Phe Pro Gly 
385                 390                 395                 400 
Gly His Asp Gln Tyr Val Ala Ala Phe Lys Gln Ala Ala Gln Arg Arg 
405                 410                 415     
Arg Val His Phe Ser Gln 
420         
<210>  84
<211>  1365
<212>  DNA
<213>  Agrobacterium tumefaciens
<400>  84
ttggaaaaat ttaccaagat gggacccatg acaaccacga gcgaaactga acgctatccg       60
cggatagctc tcatatcgac gcatggctat gtcgccgcac acccgcccct gggcgctgcc      120
gataccgggg ggcaggtggt ttatgtgctt gagcttgcac gaaaactcgg ccaactcggt      180
tataccgtcg atctttacac ccgacgcttc gaagaccagc cggaattcga cgaggtcgat      240
gagcgcgtcc gtgtggtgcg cattccctgc ggcgggcgcg atttcattcc caaggaatat      300
ctgcaccggc acctgatgga atggtgcgag aacgcgctac gcttcatcaa aaaaaacgac      360
ctcaattact ccttcatcaa cagccactac tgggatgccg gcgtggccgg gcagcggctc      420
tccgaagcac tgaaaatccc ccatctgcac acgccgcact cgctcggcat ctggaagaag      480
cgccagatgg agaccgatta tccggaaaag gccgatacgt tcgagcttga gttcaacttc      540
aaggagcgca tccagcacga gctgatcatc tatcgcagct gcgacatggt gatcgccacc      600
acgccggtgc agctggacgt gctgatcgaa gattatggcc tgaagcgcaa acatatccac      660
atgatcccgc cgggttatga cgacaaccgc ttcttccccg tctcggatgc gacgcgtcag      720
atgatccggc agcgtttcgg ttttgaaggc aaagtggtgc tggcactcgg tcggctcgcc      780
accaacaagg gctacgacct gctgatcgac ggcttttccg tgcttgccga gcgcgagccg      840
gaagcccgcc tgcatctggc cgtcggcggc gagaatatgg acgagcagga aaccaccatt      900
ctcaaccagc tgaaggagcg ggtgaaatcg ctcgggctgg aagacaaggt ggctttctct      960
ggttatgtcg cggacgagga tttgccggat atctatcggg ctgccgatct cttcgtgctt     1020
tccagccgct acgagccctt cggcatgacc gccatcgagg ccatggcgag cggcacgccg     1080
accgtcgtca ccatccatgg cgggctgttc cgcgccatca gctatgggcg acatgcgctg     1140
tttgccgatc ctttcgacaa ggaagatctc ggcattacca tgatgaagcc gttcaagcat     1200
gaacggctct acgggcggct ttcgcgcatg ggagcccaca aggcacgcag cctgttcaca     1260
tggaccggaa ttgcccagca acttctcgcg ctcgtggaag gcaggaccat gatgccggtt     1320
ctggaagaag ccgactgggc cgaaccatgg aatgacggcg attga                     1365
<210>  85
<211>  454
<212>  PRT
<213>  Agrobacterium tumefaciens
<400>  85
Met Glu Lys Phe Thr Lys Met Gly Pro Met Thr Thr Thr Ser Glu Thr 
1               5                   10                  15      
Glu Arg Tyr Pro Arg Ile Ala Leu Ile Ser Thr His Gly Tyr Val Ala 
20                  25                  30          
Ala His Pro Pro Leu Gly Ala Ala Asp Thr Gly Gly Gln Val Val Tyr 
35                  40                  45              
Val Leu Glu Leu Ala Arg Lys Leu Gly Gln Leu Gly Tyr Thr Val Asp 
50                  55                  60                  
Leu Tyr Thr Arg Arg Phe Glu Asp Gln Pro Glu Phe Asp Glu Val Asp 
65                  70                  75                  80  
Glu Arg Val Arg Val Val Arg Ile Pro Cys Gly Gly Arg Asp Phe Ile 
85                  90                  95      
Pro Lys Glu Tyr Leu His Arg His Leu Met Glu Trp Cys Glu Asn Ala 
100                 105                 110         
Leu Arg Phe Ile Lys Lys Asn Asp Leu Asn Tyr Ser Phe Ile Asn Ser 
115                 120                 125             
His Tyr Trp Asp Ala Gly Val Ala Gly Gln Arg Leu Ser Glu Ala Leu 
130                 135                 140                 
Lys Ile Pro His Leu His Thr Pro His Ser Leu Gly Ile Trp Lys Lys 
145                 150                 155                 160 
Arg Gln Met Glu Thr Asp Tyr Pro Glu Lys Ala Asp Thr Phe Glu Leu 
165                 170                 175     
Glu Phe Asn Phe Lys Glu Arg Ile Gln His Glu Leu Ile Ile Tyr Arg 
180                 185                 190         
Ser Cys Asp Met Val Ile Ala Thr Thr Pro Val Gln Leu Asp Val Leu 
195                 200                 205             
Ile Glu Asp Tyr Gly Leu Lys Arg Lys His Ile His Met Ile Pro Pro 
210                 215                 220                 
Gly Tyr Asp Asp Asn Arg Phe Phe Pro Val Ser Asp Ala Thr Arg Gln 
225                 230                 235                 240 
Met Ile Arg Gln Arg Phe Gly Phe Glu Gly Lys Val Val Leu Ala Leu 
245                 250                 255     
Gly Arg Leu Ala Thr Asn Lys Gly Tyr Asp Leu Leu Ile Asp Gly Phe 
260                 265                 270         
Ser Val Leu Ala Glu Arg Glu Pro Glu Ala Arg Leu His Leu Ala Val 
275                 280                 285             
Gly Gly Glu Asn Met Asp Glu Gln Glu Thr Thr Ile Leu Asn Gln Leu 
290                 295                 300                 
Lys Glu Arg Val Lys Ser Leu Gly Leu Glu Asp Lys Val Ala Phe Ser 
305                 310                 315                 320 
Gly Tyr Val Ala Asp Glu Asp Leu Pro Asp Ile Tyr Arg Ala Ala Asp 
325                 330                 335     
Leu Phe Val Leu Ser Ser Arg Tyr Glu Pro Phe Gly Met Thr Ala Ile 
340                 345                 350         
Glu Ala Met Ala Ser Gly Thr Pro Thr Val Val Thr Ile His Gly Gly 
355                 360                 365             
Leu Phe Arg Ala Ile Ser Tyr Gly Arg His Ala Leu Phe Ala Asp Pro 
370                 375                 380                 
Phe Asp Lys Glu Asp Leu Gly Ile Thr Met Met Lys Pro Phe Lys His 
385                 390                 395                 400 
Glu Arg Leu Tyr Gly Arg Leu Ser Arg Met Gly Ala His Lys Ala Arg 
405                 410                 415     
Ser Leu Phe Thr Trp Thr Gly Ile Ala Gln Gln Leu Leu Ala Leu Val 
420                 425                 430         
Glu Gly Arg Thr Met Met Pro Val Leu Glu Glu Ala Asp Trp Ala Glu 
435                 440                 445             
Pro Trp Asn Asp Gly Asp 
450                 
<210>  86
<211>  747
<212>  DNA
<213>  Agrobacterium tumefaciens
<400>  86
ttgaaaccgc ttcgtcttct ttccaccgat cttgacggaa ccgtcgtcgg cgataatgac       60
gccacgcggc ggttccgcga tttctggcac gcactgccgg atgatcttcg cccggttctg      120
gtcttcaaca gcggccggtt gatcgacgat cagcttgccc ttttggaaga ggtgccgctg      180
ccgcagccgg actacatcat cggcggtgtc ggcaccatgc tgcatgcaaa aaaacgcagc      240
gaactggaaa ccgcctatac acagtcgctc ggcaccggtt ttgacccgcg gaagattgcc      300
gatgtcatga accgcattgc gggcgtgacg atgcaggagg agcgttatca gcacggcctg      360
aaatcgagct ggttcctgca tgacgccgat gccgccgcgc tcggcgagat cgaggccgcg      420
cttctggccg ccgatattga cgctcgtatc gtttattcca gcgatcgcga cctcgacata      480
ttgccgaagg ccgccgacaa aggcgcggca cttgcatggt tgtgtggaca attgcgcatc      540
ggcctcgacg aatcagtggt ctcgggtgat actggcaatg accgtgcgat gtttgagttg      600
aagactatcc gcggcgtgat cgtgggcaat gccctgcctg agcttgtctc gctggcgcat      660
caggacaatc gcttttttca ctcgaccgcg aaagaagcgg atggcgtgat cgaaggcctg      720
cggcactggg gactgaaccc ccgctaa                                          747
<210>  87
<211>  248
<212>  PRT
<213>  Agrobacterium tumefaciens
<400>  87
Met Lys Pro Leu Arg Leu Leu Ser Thr Asp Leu Asp Gly Thr Val Val 
1               5                   10                  15      
Gly Asp Asn Asp Ala Thr Arg Arg Phe Arg Asp Phe Trp His Ala Leu 
20                  25                  30          
Pro Asp Asp Leu Arg Pro Val Leu Val Phe Asn Ser Gly Arg Leu Ile 
35                  40                  45              
Asp Asp Gln Leu Ala Leu Leu Glu Glu Val Pro Leu Pro Gln Pro Asp 
50                  55                  60                  
Tyr Ile Ile Gly Gly Val Gly Thr Met Leu His Ala Lys Lys Arg Ser 
65                  70                  75                  80  
Glu Leu Glu Thr Ala Tyr Thr Gln Ser Leu Gly Thr Gly Phe Asp Pro 
85                  90                  95      
Arg Lys Ile Ala Asp Val Met Asn Arg Ile Ala Gly Val Thr Met Gln 
100                 105                 110         
Glu Glu Arg Tyr Gln His Gly Leu Lys Ser Ser Trp Phe Leu His Asp 
115                 120                 125             
Ala Asp Ala Ala Ala Leu Gly Glu Ile Glu Ala Ala Leu Leu Ala Ala 
130                 135                 140                 
Asp Ile Asp Ala Arg Ile Val Tyr Ser Ser Asp Arg Asp Leu Asp Ile 
145                 150                 155                 160 
Leu Pro Lys Ala Ala Asp Lys Gly Ala Ala Leu Ala Trp Leu Cys Gly 
165                 170                 175     
Gln Leu Arg Ile Gly Leu Asp Glu Ser Val Val Ser Gly Asp Thr Gly 
180                 185                 190         
Asn Asp Arg Ala Met Phe Glu Leu Lys Thr Ile Arg Gly Val Ile Val 
195                 200                 205             
Gly Asn Ala Leu Pro Glu Leu Val Ser Leu Ala His Gln Asp Asn Arg 
210                 215                 220                 
Phe Phe His Ser Thr Ala Lys Glu Ala Asp Gly Val Ile Glu Gly Leu 
225                 230                 235                 240 
Arg His Trp Gly Leu Asn Pro Arg 
245             
<210>  88
<211>  35
<212>  DNA
<213>  Artificial Sequence
<220>
<223>  PCR primer
<220>
<221>  misc_feature
<222>  (7)..(12)
<223>  BamHI restriction site
<400>  88
tctcagggat cccataccat gattaaaaaa agtac                                  35
<210>  89
<211>  26
<212>  DNA
<213>  Artificial Sequence
<220>
<223>  PCR primer
<220>
<221>  misc_feature
<222>  (7)..(12)
<223>  SacI restriction site
<400>  89
ggccgtgagc tcagaaccag gtttcc                                            26
<210>  90
<211>  1546
<212>  DNA
<213>  Artificial Sequence
<220>
<223>  PCR product
<220>
<221>  misc_feature
<222>  (7)..(12)
<223>  BamHI restriction site
<220>
<221>  misc_feature
<222>  (1535)..(1540)
<223>  SacI restriction site
<400>  90
tctcagggat cccataccat gattaaaaaa agtacgcttg cccttaccct tggcttaatg       60
gccggtactc ccgccgcctt tgccgacagc aatatgtcca gcattgaggc gcgtctcgcc      120
gcgctggaac aacgtcttca ggcggctgaa cagcgcgcca gcgcggcgga aacccgcgct      180
gaagccgcag agcgtcaggc acaggcgctt gccgcgcaac aaaaagcgca gccgccggtt      240
cagcctgtcg ccgcgcaacc tgcgccgcag cccgccacgc aaacggcgga taacagcggg      300
tttgaattcc acggctacgc ccgctcgggc ctgctgatga acgattccgc cgcgaaaacg      360
cagggcggcc cgtccttcac gccagcgggt gaaaccggcg gtcacgtcgg gcgtctcggc      420
aatgagccgg acacttacct tgaaatgaac ctagagcaca aacagacgct cgcgaacggc      480
gccaccacgc gctttaaagt gatggtcgct gacggtcagc gcagctataa cgactggacg      540
gcctccacca gcgatctcaa cgtgcgccag gcgtttaccg aactcggcca cctgccgacc      600
ttcatcggcg cgtttaaaga tgccaccgtc tgggccggta aacgcttcga tcgtgataac      660
ttcgatatcc actggattga ctccgacgtg gtgttcctcg ccggtacggg tgcgggtatc      720
tacgacatgc gctggagcga taacgcccgc agtaacttct cgctgtatgg ccgcaccttc      780
ggcgatatcg aaaacagcga aaacaccgcc cagaactata tccttacgct taataactac      840
gtcgggccgg tacagctgat ggtgagcggg atgcgcgcca aagataacga agaccgcgtg      900
gatatcgagg gtaaccgcgt gaaaaaagac gcggcggaag atggcgtgca tgcgctgctc      960
ggcctgcata acgacagctt ctacggtctg agcgacggct cctcgaaaac cgcactgctg     1020
tatggacatg gcctgggcgc ggaagtgaaa tccatcggct ccgatggcgc gctgctgccg     1080
caggccgata cctggcgtct cgcgacctac ggcatgacac cgctcggcgg cggctggcat     1140
atcgcaccgg cggtgctggc gcagagcagt aaagatcgct acgtcaaagg cgacagctac     1200
cagtgggcga ccgccaacct gcgcctcatt caggagatta accagaactt tgagctgcag     1260
tatgagggca gctatcagta catggatctg cgcccgaaag gttacaacga ccgcaacgcg     1320
gtcagcggca acttctataa gctgaccttt gcgccgacgc tgaaagcggg cgacgtgggc     1380
gaattcctca agcgtcctga actgcgcctg ttcgccacct ggatggactg ggatcatcgc     1440
ctggataact acgccagcaa tgatgccttt ggcagcaccg gctttaccgc cggcggtgaa     1500
tggaacttcg gcgtacagat ggaaacctgg ttctgagctc acggcc                    1546
<210>  91
<211>  13332
<212>  DNA
<213>  Artificial Sequence
<220>
<223>  artifical plasmid pLybAL32 containing scrY
<400>  91
aggcccagtc tttcgactga gcctttcgtt ttatttgatg cctggcagtt ccctactctc       60
gcatggggag accccacact accatcggcg ctacggcgtt tcacttctga gttcggcatg      120
gggtcaggtg ggaccaccgc gctactgccg ccaggcaaat tctgttttat cagaccgctt      180
ctgcgttctg atttaatctg tatcaggctg aaaatcttct ctcatccgcc aaaacagcca      240
agcttgcatg cctgcaggtc gactctagat ggctacgagg gcagacagta agtggattta      300
ccataatccc ttaattgtac gcaccgctaa aacgcgttca gcgcgatcac ggcagcagac      360
aggtaaaaat ggcaacaaac caccctaaaa actgcgcgat cgcgcctgat aaattttaac      420
cgtatgaata cctatgcaac cagagggtac aggccacatt acccccactt aatccactga      480
agctgccatt tttcatggtt tcaccatccc agcgaagggc catgcatgca tcgaaattaa      540
tacgacgaaa ttaatacgac tcactatagg gcaattgtta tcagctatgc gccgaccaga      600
acaccttgcc gatcagccaa acgtctcttc aggccactga ctagcgataa ctttccccac      660
aacggaacaa ctctcactgc atgggatcat tgggtactgt gggtttagtg gttgtaaaaa      720
cacctgaccg ctatccctga tcagtttctt gaaggtaaac tcatcacccc caagtctggc      780
tatgcagaaa tcacctggct caacagcctg ctcagggtca acgagaatta acattccgtc      840
aggaaagctt ggcttggagc ctgttggtgc ggtcatggaa ttaccttcaa cctcaagcca      900
gaatgcagaa tcactggctt tcttggttgt gcttacccat ctctccgcat cacctttggt      960
aaaggttcta agcttaggtg agaacatccc tgcctgaaca tgagaaaaaa cagggtactc     1020
atactcactt ctaagtgacg gctgcatact aaccgcttca tacatctcgt agatttctct     1080
ggcgattgaa gggctaaatt cttcaacgct aactttgaga atttttgtaa gcaatgcggc     1140
gttataagca tttaatgcat tgatgccatt aaataaagca ccaacgcctg actgccccat     1200
ccccatcttg tctgcgacag attcctggga taagccaagt tcatttttct ttttttcata     1260
aattgcttta aggcgacgtg cgtcctcaag ctgctcttgt gttaatggtt tcttttttgt     1320
gctcatacgt taaatctatc accgcaaggg ataaatatct aacaccgtgc gtgttgacta     1380
ttttacctct ggcggtgata atggttgcat cttaagaagg aggatcccat accatgatta     1440
aaaaaagtac gcttgccctt acccttggct taatggccgg tactcccgcc gcctttgccg     1500
acagcaatat gtccagcatt gaggcgcgtc tcgccgcgct ggaacaacgt cttcaggcgg     1560
ctgaacagcg cgccagcgcg gcggaaaccc gcgctgaagc cgcagagcgt caggcacagg     1620
cgcttgccgc gcaacaaaaa gcgcagccgc cggttcagcc tgtcgccgcg caacctgcgc     1680
cgcagcccgc cacgcaaacg gcggataaca gcgggtttga attccacggc tacgcccgct     1740
cgggcctgct gatgaacgat tccgccgcga aaacgcaggg cggcccgtcc ttcacgccag     1800
cgggtgaaac cggcggtcac gtcgggcgtc tcggcaatga gccggacact taccttgaaa     1860
tgaacctaga gcacaaacag acgctcgcga acggcgccac cacgcgcttt aaagtgatgg     1920
tcgctgacgg tcagcgcagc tataacgact ggacggcctc caccagcgat ctcaacgtgc     1980
gccaggcgtt taccgaactc ggccacctgc cgaccttcat cggcgcgttt aaagatgcca     2040
ccgtctgggc cggtaaacgc ttcgatcgtg ataacttcga tatccactgg attgactccg     2100
acgtggtgtt cctcgccggt acgggtgcgg gtatctacga catgcgctgg agcgataacg     2160
cccgcagtaa cttctcgctg tatggccgca ccttcggcga tatcgaaaac agcgaaaaca     2220
ccgcccagaa ctatatcctt acgcttaata actacgtcgg gccggtacag ctgatggtga     2280
gcgggatgcg cgccaaagat aacgaagacc gcgtggatat cgagggtaac cgcgtgaaaa     2340
aagacgcggc ggaagatggc gtgcatgcgc tgctcggcct gcataacgac agcttctacg     2400
gtctgagcga cggctcctcg aaaaccgcac tgctgtatgg acatggcctg ggcgcggaag     2460
tgaaatccat cggctccgat ggcgcgctgc tgccgcaggc cgatacctgg cgtctcgcga     2520
cctacggcat gacaccgctc ggcggcggct ggcatatcgc accggcggtg ctggcgcaga     2580
gcagtaaaga tcgctacgtc aaaggcgaca gctaccagtg ggcgaccgcc aacctgcgcc     2640
tcattcagga gattaaccag aactttgagc tgcagtatga gggcagctat cagtacatgg     2700
atctgcgccc gaaaggttac aacgaccgca acgcggtcag cggcaacttc tataagctga     2760
cctttgcgcc gacgctgaaa gcgggcgacg tgggcgaatt cctcaagcgt cctgaactgc     2820
gcctgttcgc cacctggatg gactgggatc atcgcctgga taactacgcc agcaatgatg     2880
cctttggcag caccggcttt accgccggcg gtgaatggaa cttcggcgta cagatggaaa     2940
cctggttctg agctcgaatt ggggcgtttt ctgtgaggct gactagcgcg tggcagctca     3000
aaatctctac attctgcaca ttcagaccca tggtctgctg cgagggcaga acttggaact     3060
ggggcgagat gccgacaccg gcgggcagac caagtacgtc ttagaactgg ctcaagccca     3120
agctaaatcc ccacaagtcc aacaagtcga catcatcacc cgccaaatca ccgacccccg     3180
cgtcagtgtt ggttacagtc aggcgatcga accctttgcg cccaaaggtc ggattgtccg     3240
tttgcctttt ggccccaaac gctacctccg taaagagctg ctttggcccc atctctacac     3300
ctttgcggat gcaattctcc aatatctggc tcagcaaaag cgcaccccga cttggattca     3360
ggcccactat gctgatgctg gccaagtggg atcactgctg agtcgctggt tgaatgtacc     3420
gctaattttc acagggcatt ctctggggcg gatcaagcta aaaaagctgt tggagcaaga     3480
ctggccgctt gaggaaattg aagcgcaatt caatattcaa cagcgaattg atgcggagga     3540
gatgacgctc actcatgctg actggattgt cgccagcact cagcaggaag tggaggagca     3600
ataccgcgtt tacgatcgct acaacccaga gcgcaagctt gtcattccac cgggtgtcga     3660
taccgatcgc ttcaggtttc agcccttggg cgatcgcggt gttgttctcc aacaggaact     3720
gagccgcttt ctgcgcgacc cagaaaaacc tcaaattctc tgcctctgtc gccccgcacc     3780
tcgcaaaaat gtaccggcgc tggtgcgagc ctttggcgaa catccttggc tgcgcaaaaa     3840
agccaacctt gtcttagtac tgggcagccg ccaagacatc aaccagatgg atcgcggcag     3900
tcggcaggtg ttccaagaga ttttccatct ggtcgatcgc tacgacctct acggcagcgt     3960
cgcctatccc aaacagcatc aggctgatga tgtgccggag ttctatcgcc tagcggctca     4020
ttccggcggg gtattcgtca atccggcgct gaccgaacct tttggtttga caattttgga     4080
ggcaggaagc tgcggcgtgc cggtggtggc aacccatgat ggcggccccc aggaaattct     4140
caaacactgt gatttcggca ctttagttga tgtcagccga cccgctaata tcgcgactgc     4200
actcgccacc ctgctgagcg atcgcgatct ttggcagtgc tatcaccgca atggcattga     4260
aaaagttccc gcccattaca gctgggatca acatgtcaat accctgtttg agcgcatgga     4320
aacggtggct ttgcctcgtc gtcgtgctgt cagtttcgta cggagtcgca aacgcttgat     4380
tgatgccaaa cgccttgtcg ttagtgacat cgacaacaca ctgttgggcg atcgtcaagg     4440
actcgagaat ttaatgacct atctcgatca gtatcgcgat cattttgcct ttggaattgc     4500
cacggggcgt cgcctagact ctgcccaaga agtcttgaaa gagtggggcg ttccttcgcc     4560
aaacttctgg gtgacttccg tcggcagcga gattcactat ggcaccgatg ctgaaccgga     4620
tatcagctgg gaaaagcata tcaatcgcaa ctggaatcct cagcgaattc gggcagtaat     4680
ggcacaacta ccctttcttg aactgcagcc ggaagaggat caaacaccct tcaaagtcag     4740
cttctttgtc cgcgatcgcc acgagactgt gctgcgagaa gtacggcaac atcttcgccg     4800
ccatcgcctg cggctgaagt caatctattc ccatcaggag tttcttgaca ttctgccgct     4860
agctgcctcg aaaggggatg cgattcgcca cctctcactc cgctggcgga ttcctcttga     4920
gaacattttg gtggcaggcg attctggtaa cgatgaggaa atgctcaagg gccataatct     4980
cggcgttgta gttggcaatt actcaccgga attggagcca ctgcgcagct acgagcgcgt     5040
ctattttgct gagggccact atgctaatgg cattctggaa gccttaaaac actatcgctt     5100
ttttgaggcg atcgcttaac cttttcagaa tgagacgttg atcggcacgt aagcgtgaga     5160
cgttgatcgg cacgtaagag gttccaactt tcaccataat gaaataagat cactaccggg     5220
cgtatttttt gagttatcga gattttcagg agctaaggaa gctaaaatgg agaaaaaaat     5280
cactggatat accaccgttg atatatccca atggcatcgt aaagaacatt ttgaggcatt     5340
tcagtcagtt gctcaatgta cctataacca gaccgttcag ctggatatta cggccttttt     5400
aaagaccgta aagaaaaata agcacaagtt ttatccggcc tttattcaca ttcttgcccg     5460
cctgatgaat gctcatccgg aattccgtat ggcaatgaaa gacggtgagc tggtgatatg     5520
ggatagtgtt cacccttgtt acaccgtttt ccatgagcaa actgaaacgt tttcatcgct     5580
ctggagtgaa taccacgacg atttccggca gtttctacac atatattcgc aagatgtggc     5640
gtgttacggt gaaaacctgg cctatttccc taaagggttt attgagaata tgtttttcgt     5700
ctcagccaat ccctgggtga gtttcaccag ttttgattta aacgtggcca atatggacaa     5760
cttcttcgcc cccgttttca ccatgggcaa atattatacg caaggcgaca aggtgctgat     5820
gccgctggcg attcaggttc atcatgccgt ttgtgatggc ttccatgtcg gcagaatgct     5880
taatgaatta caacagtact gcgatgagtg gcagggcggg gcgtaatttt tttaaggcag     5940
ttattggtgc ccttaaacgc ctggttgcta cgcctgaata agtgataata agcggatgaa     6000
tggcagaaat tcgatgataa gctgtcaaac acaaccacca tcaaacagga ttttcgcctg     6060
ctggggcaaa ccagcgtgga ccgcttgctg caactctctc agggccaggc ggtgaagggc     6120
aatcagctgt tgcccgtctc actggtgaaa agaaaaacca ccctggcgcc caatacgcaa     6180
accgcctctc cccgcgcgtt ggccgattca ttaatgcagc tggcacgaca ggtttcccga     6240
ctggaaagcg ggcagtgagc gcaacgcaat taatgtaagt tagcgcgaat tgcaagctgg     6300
ccgacgcgct gggctacgtc ttgctggcgt tcgggagcag aagagcatac atctggaagc     6360
aaagccagga aagcggccta tggagctgtg cggcagcgct cagtaggcaa tttttcaaaa     6420
tattgttaag ccttttctga gcatggtatt tttcatggta ttaccaatta gcaggaaaat     6480
aagccattga atataaaaga taaaaatgtc ttgtttacaa tagagtgggg ggggtcagcc     6540
tgccgccttg ggccgggtga tgtcgtactt gcccgccgcg aactcggtta ccgtccagcc     6600
cagcgcgacc agctccggca acgcctcgcg cacccgcttg cggcgcttgc gcatggtcga     6660
accactggcc tctgacggcc agacatagcc gcacaaggta tctatggaag ccttgccggt     6720
tttgccgggg tcgatccagc cacacagccg ctggtgcagc aggcgggcgg tttcgctgtc     6780
cagcgcccgc acctcgtcca tgctgatgcg cacatgctgg ccgccaccca tgacggcctg     6840
cgcgatcaag gggttcaggg ccacgtacag gcgcccgtcc gcctcgtcgc tggcgtactc     6900
cgacagcagc cgaaacccct gccgcttgcg gccattctgg gcgatgatgg ataccttcca     6960
aaggcgctcg atgcagtcct gtatgtgctt gagcgcccca ccactatcga cctctgcccc     7020
gatttccttt gccagcgccc gatagctacc tttgaccaca tggcattcag cggtgacggc     7080
ctcccacttg ggttccagga acagccggag ctgccgtccg ccttcggtct tgggttccgg     7140
gccaagcact aggccattag gcccagccat ggccaccagc ccttgcagga tgcgcagatc     7200
atcagcgccc agcggctccg ggccgctgaa ctcgatccgc ttgccgtcgc cgtagtcata     7260
cgtcacgtcc agcttgctgc gcttgcgctc gccccgcttg agggcacgga acaggccggg     7320
ggccagacag tgcgccgggt cgtgccggac gtggctgagg ctgtgcttgt tcttaggctt     7380
caccacgggg cacccccttg ctcttgcgct gcctctccag cacggcgggc ttgagcaccc     7440
cgccgtcatg ccgcctgaac caccgatcag cgaacggtgc gccatagttg gccttgctca     7500
caccgaagcg gacgaagaac cggcgctggt cgtcgtccac accccattcc tcggcctcgg     7560
cgctggtcat gctcgacagg taggactgcc agcggatgtt atcgaccagt accgagctgc     7620
cccggctggc ctgctgctgg tcgcctgcgc ccatcatggc cgcgcccttg ctggcatggt     7680
gcaggaacac gatagagcac ccggtatcgg cggcgatggc ctccatgcga ccgatgacct     7740
gggccatggg gccgctggcg ttttcttcct cgatgtggaa ccggcgcagc gtgtccagca     7800
ccatcaggcg gcggccctcg gcggcgcgct tgaggccgtc gaaccactcc ggggccatga     7860
tgttgggcag gctgccgatc agcggctgga tcagcaggcc gtcagccacg gcttgccgtt     7920
cctcggcgct gaggtgcgcc ccaagggcgt gcaggcggtg atgaatggcg gtgggcgggt     7980
cttcggcggg caggtagatc accgggccgg tgggcagttc gcccacctcc agcagatccg     8040
gcccgcctgc aatctgtgcg gccagttgca gggccagcat ggatttaccg gcaccaccgg     8100
gcgacaccag cgccccgacc gtaccggcca ccatgttggg caaaacgtag tccagcggtg     8160
gcggcgctgc tgcgaacgcc tccagaatat tgataggctt atgggtagcc attgattgcc     8220
tcctttgcag gcagttggtg gttaggcgct ggcggggtca ctacccccgc cctgcgccgc     8280
tctgagttct tccaggcact cgcgcagcgc ctcgtattcg tcgtcggtca gccagaactt     8340
gcgctgacgc atccctttgg ccttcatgcg ctcggcatat cgcgcttggc gtacagcgtc     8400
agggctggcc agcaggtcgc cggtctgctt gtccttttgg tctttcatat cagtcaccga     8460
gaaacttgcc ggggccgaaa ggcttgtctt cgcggaacaa ggacaaggtg cagccgtcaa     8520
ggttaaggct ggccatatca gcgactgaaa agcggccagc ctcggccttg tttgacgtat     8580
aaccaaagcc accgggcaac caatagccct tgtcactttt gatcaggtag accgaccctg     8640
aagcgctttt ttcgtattcc ataaaacccc cttctgtgcg tgagtactca tagtataaca     8700
ggcgtgagta ccaacgcaag cactacatgc tgaaatctgg cccgcccctg tccatgcctc     8760
gctggcgggg tgccggtgcc cgtgccagct cggcccgcgc aagctggacg ctgggcagac     8820
ccatgacctt gctgacggtg cgctcgatgt aatccgcttc gtggccgggc ttgcgctctg     8880
ccagcgctgg gctggcctcg gccatggcct tgccgatttc ctcggcactg cggccccggc     8940
tggccagctt ctgcgcggcg ataaagtcgc acttgctgag gtcatgaccg aagcgcttga     9000
ccagcccggc catctcgctg cggtactcgt ccagcgccgt gcgccggtgg cggctaagct     9060
gccgctcggg cagttcgagg ctggccagcc tgcgggcctt ctcctgctgc cgctgggcct     9120
gctcgatctg ctggccagcc tgctgcacca gcgccgggcc agcggtggcg gtcttgccct     9180
tggattcacg cagcagcacc cacggctgat aaccggcgcg ggtggtgtgc ttgtccttgc     9240
ggttggtgaa gcccgccaag cggccatagt ggcggctgtc ggcgctggcc gggtcggcgt     9300
cgtactcgct ggccagcgtc cgggcaatct gcccccgaag ttcaccgcct gcggcgtcgg     9360
ccaccttgac ccatgcctga tagttcttcg ggctggtttc cactaccagg gcaggctccc     9420
ggccctcggc tttcatgtca tccaggtcaa actcgctgag gtcgtccacc agcaccagac     9480
catgccgctc ctgctcggcg ggcctgatat acacgtcatt gccctgggca ttcatccgct     9540
tgagccatgg cgtgttctgg agcacttcgg cggctgacca ttcccggttc atcatctggc     9600
cggtgggtgc gtccctgacg ccgatatcga agcgctcaca gcccatggcc ttgagctgtc     9660
ggcctatggc ctgcaaagtc ctgtcgttct tcatcgggcc accaagcgca gccagatcga     9720
gccgtcctcg gttgtcagtg gcgtcaggtc gagcaagagc aacgatgcga tcagcagcac     9780
caccgtaggc atcatggaag ccagcatcac ggttagccat agcttccagt gccacccccg     9840
cgacgcgctc cgggcgctct gcgcggcgct gctcacctcg gcggctacct cccgcaactc     9900
tttggccagc tccacccatg ccgcccctgt ctggcgctgg gctttcagcc actccgccgc     9960
ctgcgcctcg ctggcctgct tggtctggct catgacctgc cgggcttcgt cggccagtgt    10020
cgccatgctc tgggccagcg gttcgatctg ctccgctaac tcgttgatgc ctctggattt    10080
cttcactctg tcgattgcgt tcatggtcta ttgcctcccg gtattcctgt aagtcgatga    10140
tctgggcgtt ggcggtgtcg atgttcaggg ccacgtctgc ccggtcggtg cggatgcccc    10200
ggccttccat ctccaccacg ttcggcccca ggtgaacacc gggcaggcgc tcgatgccct    10260
gcgcctcaag tgttctgtgg tcaatgcggg cgtcgtggcc agcccgctct aatgcccggt    10320
tggcatggtc ggcccatgcc tcgcgggtct gctcaagcca tgccttgggc ttgagcgctt    10380
cggtcttctg tgccccgccc ttctccgggg tcttgccgtt gtaccgcttg aaccactgag    10440
cggcgggccg ctcgatgccg tcattgatcc gctcggagat catcaggtgg cagtgcgggt    10500
tctcgccgcc accggcatgg atggccagcg tatacggcag gcgctcggca ccggtcaggt    10560
gctgggcgaa ctcggacgcc agcgccttct gctggtcgag ggtcagctcg accggcaggg    10620
caaattcgac ctccttgaac agccgcccat tggcgcgttc atacaggtcg gcagcatccc    10680
agtagtcggc gggccgctcg acgaactccg gcatgtgccc ggattcggcg tgcaagactt    10740
catccatgtc gcgggcatac ttgccttcgc gctggatgta gtcggccttg gccctggccg    10800
attggccgcc cgacctgctg ccggttttcg ccgtaaggtg ataaatcgcc atgctgcctc    10860
gctgttgctt ttgcttttcg gctccatgca atggccctcg gagagcgcac cgcccgaagg    10920
gtggccgtta ggccagtttc tcgaagagaa accggtaagt gcgccctccc ctacaaagta    10980
gggtcgggat tgccgccgct gtgcctccat gatagcctac gagacagcac attaacaatg    11040
gggtgtcaag atggttaagg ggagcaacaa ggcggcggat cggctggcca agctcgaaga    11100
acaacgagcg cgaatcaatg ccgaaattca gcgggagcgg gcaagggaac agcagcaaga    11160
gcgcaagaac gaaacaaggc gcaaggtgct ggtgggggcc atgattttgg ccaaggtgaa    11220
cagcagcgag tggccggagg atcggctcat ggcggcaatg gatgcgtacc ttgaacgcga    11280
ccacgaccgc gccttgttcg gtctgccgcc acgccagaag gatgagccgg gctgaatgat    11340
cgaccgagac aggccctgcg gggctgcaca cgcgccccca cccttcgggt agggggaaag    11400
gccgctaaag cggctaaaag cgctccagcg tatttctgcg gggtttggtg tggggtttag    11460
cgggctttgc ccgcctttcc ccctgccgcg cagcggtggg gcggtgtgta gcctagcgca    11520
gcgaatagac cagctatccg gcctctggcc gggcatattg ggcaagggca gcagcgcccc    11580
acaagggcgc tgataaccgc gcctagtgga ttattcttag ataatcatgg atggattttt    11640
ccaacacccc gccagccccc gcccctgctg ggtttgcagg tttgggggcg tgacagttat    11700
tgcaggggtt cgtgacagtt attgcagggg ggcgtgacag ttattgcagg ggttcgtgac    11760
agttagtacg ggagtgacgg gcactggctg gcaatgtcta gcaacggcag gcatttcggc    11820
tgagggtaaa agaactttcc gctaagcgat agactgtatg taaacacagt attgcaagga    11880
cgcggaacat gcctcatgtg gcggccagga cggccagccg ggatcgggat actggtcgtt    11940
accagagcca ccgacccgag caaacccttc tctatcagat cgttgacgag tattacccgg    12000
cattcgctgc gcttatggca gagcagggaa aggaattgcc gggctatgtg caacgggaat    12060
ttgaagaatt tctccaatgc gggcggctgg agcatggctt tctacgggtt cgctgcgagt    12120
cttgccacgc cgagcacctg gtcgctttca gaaatcaatc taaagtatat atgagtaaac    12180
ttggtctgac agttaccaat gcttaatcag tgaggcacct atctcagcga tctgtctatt    12240
tcgttcatcc atagttgcct gactccccgt cgtgtagata actacgatac gggagggctt    12300
accatctggc cccagtgctg caatgatacc gcgagaccca cgctcaccgg ctccagattt    12360
atcagcaata aaccagccag ccggaagggc cgagcgcaga agtggtcctg caactttatc    12420
cgcctccatc cagtctatta attgttgccg ggaagctaga gtaagtagtt cgccagttaa    12480
tagtttgcgc aacgttgttg ccattgctac aggcatcgtg gtgtcacgct cgtcgtttgg    12540
tatggcttca ttcagctccg gttcccaacg atcaaggcga gttacatgat cccccatgtt    12600
gtgcaaaaaa gcggttagct ccttcggtcc tccgatcgtt gtcagaagta agttggccgc    12660
agtgttatca ctcatggtta tggcagcact gcataattct cttactgtca tgccatccgt    12720
aagatgcttt tctgtgactg gtgagtactc aaccaagtca ttctgagaat agtgtatgcg    12780
gcgaccgagt tgctcttgcc cggcgtcaac acgggataat accgcgccac atagcagaac    12840
tttaaaagtg ctcatcattg gaaaacgttc ttcggggcga aaactctcaa ggatcttacc    12900
gctgttgaga tccagttcga tgtaacccac tcgtgcaccc aactgatctt cagcatcttt    12960
tactttcacc agcgtttctg ggtgagcaaa aacaggaagg caaaatgccg caaaaaaggg    13020
aataagggcg acacggaaat gttgaatact catactcttc ctttttcaat attattgaag    13080
catttatcag ggttattgtc tcatgagcgg atacatattt gaatgtattt agaaaaataa    13140
acaaaagagt ttgtagaaac gcaaaaaggc catccgtcag gatggccttc tgcttaattt    13200
gatgcctggc agtttatggc gggcgtcctg cccgccaccc tccgggccgt tgcttcgcaa    13260
cgttcaaatc cgctcccggc ggatttgtcc tactcaggag agcgttcacc gacaaacaac    13320
agataaaacg aa                                                        13332
<210>  92
<211>  21
<212>  DNA
<213>  Artificial Sequence
<220>
<223>  PCR primer
<400>  92
gcagtaactt ctcgctgtat g                                                 21
<210>  93
<211>  23
<212>  DNA
<213>  Artificial Sequence
<220>
<223>  PCR primer
<400>  93
gtgttttcgc tgttttcgat atc                                               23
<210>  94
<211>  1518
<212>  DNA
<213>  Enterobacter sakazakii
<400>  94
atgattaaaa aaagtacgct tgcccttacc cttggcttaa tggccggtac tcccgccgcc       60
tttgccgaca gcaatatgtc cagcattgag gcgcgtctcg ccgcgctgga acaacgtctt      120
caggcggctg aacagcgcgc cagcgcggcg gaaacccgcg ctgaagccgc agagcgtcag      180
gcacaggcgc ttgccgcgca acaaaaagcg cagccgccgg ttcagcctgt cgccgcgcaa      240
cctgcgccgc agcccgccac gcaaacggcg gataacagcg ggtttgaatt ccacggctac      300
gcccgctcgg gcctgctgat gaacgattcc gccgcgaaaa cgcagggcgg cccgtccttc      360
acgccagcgg gtgaaaccgg cggtcacgtc gggcgtctcg gcaatgagcc ggacacttac      420
cttgaaatga acctagagca caaacagacg ctcgcgaacg gcgccaccac gcgctttaaa      480
gtgatggtcg ctgacggtca gcgcagctat aacgactgga cggcctccac cagcgatctc      540
aacgtgcgcc aggcgtttac cgaactcggc cacctgccga ccttcatcgg cgcgtttaaa      600
gatgccaccg tctgggccgg taaacgcttc gatcgtgata acttcgatat ccactggatt      660
gactccgacg tggtgttcct cgccggtacg ggtgcgggta tctacgacat gcgctggagc      720
gataacgccc gcagtaactt ctcgctgtat ggccgcacct tcggcgatat cgaaaacagc      780
gaaaacaccg cccagaacta tatccttacg cttaataact acgtcgggcc ggtacagctg      840
atggtgagcg ggatgcgcgc caaagataac gaagaccgcg tggatatcga gggtaaccgc      900
gtgaaaaaag acgcggcgga agatggcgtg catgcgctgc tcggcctgca taacgacagc      960
ttctacggtc tgagcgacgg ctcctcgaaa accgcactgc tgtatggaca tggcctgggc     1020
gcggaagtga aatccatcgg ctccgatggc gcgctgctgc cgcaggccga tacctggcgt     1080
ctcgcgacct acggcatgac accgctcggc ggcggctggc atatcgcacc ggcggtgctg     1140
gcgcagagca gtaaagatcg ctacgtcaaa ggcgacagct accagtgggc gaccgccaac     1200
ctgcgcctca ttcaggagat taaccagaac tttgagctgc agtatgaggg cagctatcag     1260
tacatggatc tgcgcccgaa aggttacaac gaccgcaacg cggtcagcgg caacttctat     1320
aagctgacct ttgcgccgac gctgaaagcg ggcgacgtgg gcgaattcct caagcgtcct     1380
gaactgcgcc tgttcgccac ctggatggac tgggatcatc gcctggataa ctacgccagc     1440
aatgatgcct ttggcagcac cggctttacc gccggcggtg aatggaactt cggcgtacag     1500
atggaaacct ggttctga                                                   1518
<210>  95
<211>  505
<212>  PRT
<213>  Enterobacter sakazakii
<400>  95
Met Ile Lys Lys Ser Thr Leu Ala Leu Thr Leu Gly Leu Met Ala Gly 
1               5                   10                  15      
Thr Pro Ala Ala Phe Ala Asp Ser Asn Met Ser Ser Ile Glu Ala Arg 
20                  25                  30          
Leu Ala Ala Leu Glu Gln Arg Leu Gln Ala Ala Glu Gln Arg Ala Ser 
35                  40                  45              
Ala Ala Glu Thr Arg Ala Glu Ala Ala Glu Arg Gln Ala Gln Ala Leu 
50                  55                  60                  
Ala Ala Gln Gln Lys Ala Gln Pro Pro Val Gln Pro Val Ala Ala Gln 
65                  70                  75                  80  
Pro Ala Pro Gln Pro Ala Thr Gln Thr Ala Asp Asn Ser Gly Phe Glu 
85                  90                  95      
Phe His Gly Tyr Ala Arg Ser Gly Leu Leu Met Asn Asp Ser Ala Ala 
100                 105                 110         
Lys Thr Gln Gly Gly Pro Ser Phe Thr Pro Ala Gly Glu Thr Gly Gly 
115                 120                 125             
His Val Gly Arg Leu Gly Asn Glu Pro Asp Thr Tyr Leu Glu Met Asn 
130                 135                 140                 
Leu Glu His Lys Gln Thr Leu Ala Asn Gly Ala Thr Thr Arg Phe Lys 
145                 150                 155                 160 
Val Met Val Ala Asp Gly Gln Arg Ser Tyr Asn Asp Trp Thr Ala Ser 
165                 170                 175     
Thr Ser Asp Leu Asn Val Arg Gln Ala Phe Thr Glu Leu Gly His Leu 
180                 185                 190         
Pro Thr Phe Ile Gly Ala Phe Lys Asp Ala Thr Val Trp Ala Gly Lys 
195                 200                 205             
Arg Phe Asp Arg Asp Asn Phe Asp Ile His Trp Ile Asp Ser Asp Val 
210                 215                 220                 
Val Phe Leu Ala Gly Thr Gly Ala Gly Ile Tyr Asp Met Arg Trp Ser 
225                 230                 235                 240 
Asp Asn Ala Arg Ser Asn Phe Ser Leu Tyr Gly Arg Thr Phe Gly Asp 
245                 250                 255     
Ile Glu Asn Ser Glu Asn Thr Ala Gln Asn Tyr Ile Leu Thr Leu Asn 
260                 265                 270         
Asn Tyr Val Gly Pro Val Gln Leu Met Val Ser Gly Met Arg Ala Lys 
275                 280                 285             
Asp Asn Glu Asp Arg Val Asp Ile Glu Gly Asn Arg Val Lys Lys Asp 
290                 295                 300                 
Ala Ala Glu Asp Gly Val His Ala Leu Leu Gly Leu His Asn Asp Ser 
305                 310                 315                 320 
Phe Tyr Gly Leu Ser Asp Gly Ser Ser Lys Thr Ala Leu Leu Tyr Gly 
325                 330                 335     
His Gly Leu Gly Ala Glu Val Lys Ser Ile Gly Ser Asp Gly Ala Leu 
340                 345                 350         
Leu Pro Gln Ala Asp Thr Trp Arg Leu Ala Thr Tyr Gly Met Thr Pro 
355                 360                 365             
Leu Gly Gly Gly Trp His Ile Ala Pro Ala Val Leu Ala Gln Ser Ser 
370                 375                 380                 
Lys Asp Arg Tyr Val Lys Gly Asp Ser Tyr Gln Trp Ala Thr Ala Asn 
385                 390                 395                 400 
Leu Arg Leu Ile Gln Glu Ile Asn Gln Asn Phe Glu Leu Gln Tyr Glu 
405                 410                 415     
Gly Ser Tyr Gln Tyr Met Asp Leu Arg Pro Lys Gly Tyr Asn Asp Arg 
420                 425                 430         
Asn Ala Val Ser Gly Asn Phe Tyr Lys Leu Thr Phe Ala Pro Thr Leu 
435                 440                 445             
Lys Ala Gly Asp Val Gly Glu Phe Leu Lys Arg Pro Glu Leu Arg Leu 
450                 455                 460                 
Phe Ala Thr Trp Met Asp Trp Asp His Arg Leu Asp Asn Tyr Ala Ser 
465                 470                 475                 480 
Asn Asp Ala Phe Gly Ser Thr Gly Phe Thr Ala Gly Gly Glu Trp Asn 
485                 490                 495     
Phe Gly Val Gln Met Glu Thr Trp Phe 
500                 505 
<210>  96
<211>  30
<212>  DNA
<213>  Artificial Sequence
<220>
<223>  PCR primer
<400>  96
ccacaatgga ctgccagccg tcaaaggatg                                        30
<210>  97
<211>  30
<212>  DNA
<213>  Artificial Sequence
<220>
<223>  PCR primer
<400>  97
gcccaactgg tcacggacat cgtcgataac                                        30
<210>  98
<211>  29
<212>  DNA
<213>  Artificial Sequence
<220>
<223>  PCR primer
<400>  98
tgcaatggct ccaggaagcc cgatcgatg                                         29
<210>  99
<211>  30
<212>  DNA
<213>  Artificial Sequence
<220>
<223>  PCR primer
<400>  99
ggcagcatta cggctcagac cttggtcatg                                        30
<210>  100
<211>  1246
<212>  DNA
<213>  Synechocystis PCC6803
<400>  100
ccacaatgga ctgccagccg tcaaaggatg gttgtttgct cataatgctt gcctgtctgt       60
cgttgaactt gggggaaatc cctgcccaaa gtatggcaga aaacctttcc cttcccaatg      120
ccccaacttc cggtaacccg atctgagcta cagtggagtt ccgcggtgaa ttgttaccga      180
cggtgagacc acgtcctaac ttttagccca tttttcggtt ccccaacggc caagattaac      240
aaaattaaat tttagatatt aacttttaag ttttcccatg gcttctcaat tacgtgttta      300
tgtgccggag catcctctaa ttaagcattg gttgggggta gctagggatg aaaacacgcc      360
gccggttttg tttaaaactg ccatggggga attgggacgt tggttgacct atgaggccgc      420
tcgttattgg ttgccgacgg tggatacgga agtgaaaact cccctggcga tcgccaaggc      480
cagtcttatt gacccccaaa cgccctttgt cattgtgccc attttgcggg cggggttggc      540
tctggtggaa ggggcccagg ggttgttgcc cctggcaaaa atttaccatc tgggtttagt      600
gcgcaatgaa actaccctgg aacctagtct gtatctgaac aagttgccgg agcggtttgc      660
ccccggtacc catcttttgt tgctagatcc catgttggct acgggtaata ccatcatggc      720
tgctttggat ttgctgatgg cccgggacat tgatgccaat ttaatccgtt tggtctccgt      780
ggtggccgcc cccactgccc tgcaaaaatt aagtaatgcc catcccaatt tgaccatcta      840
caccgccatg attgacgaac aactcaatga ccggggttac attgtgcccg gcctagggga      900
tgcaggcgat cgttgctttg gtacttgata acaccattaa actagtgatc aaataattac      960
aaattcaccc ccaaacgtta acaacaggag taaagtcatg gctcaaaaag ataacttcgc     1020
cggaggattt ttattaggta cggtcattgg tggcgtagtg gggggaattt tgggttctgt     1080
cctggccaat cgagctgcta cccaaagccc cgaccgggaa aaattagaca ctgagggggt     1140
aggaaatctc gatagtgagg aaaatattga gttggctcgc cgtcgcctgg aagacaaaat     1200
tgcccaactt aatttggtta tcgacgatgt ccgtgaccag ttgggc                    1246
<210>  101
<211>  1281
<212>  DNA
<213>  Synechococcus PCC7942
<400>  101
tgcaatggct ccaggaagcc cgatcgatgg gatttcaagt cgctttagat gattttggga       60
cgggttattc cagccttggt tacctcaagc gtttgcccat caatgctctc aaaattgatc      120
gcagctttat tcgcgatctg ccgcacgacc atgacgatca agcgatcgtg caggcgattg      180
ttgcaatggc caaggtcttg aaacttcgca cgatcgcaga aggcgtagaa cgcctcgagc      240
aagccgcctt cttagaagcg attggttgtg atgctgtgca agggttcttc tatggcccac      300
cactgcccga agcagaagcg cttgccttcc tgcaccgttc cgcttcccct ggggtctgaa      360
cgttaaaatc aggagctgtc ttctgctgat tggcatggct cctcaactgc gtatcttcgt      420
gccgccccat cccttaattc ggcactggct gggcattgcc cgcgatcgcc agacgccgac      480
gcctctgttt cgcaccgcga tcgcagagct gggccgctgg ctcgcctatg aggctgtgcg      540
ggaatggcta ccaacgattc cagcggcggt gcaaactcct cttgcagaaa ccccagcgga      600
gttcgtcgat ttttcgcaac ccttggcgat cgtgccgatt ctgcgcgcag gtctgggttt      660
agtggagtct gtccaacagg ttttgccgac tgcccgcatt tttcacgtgg gtctcaagcg      720
ggatgaagtc agtcttgaac cgcgctgcta cctcaatcac ctgccagagc aacttgaagt      780
gaacagtcgc gttctggttc tcgacccgat gctggcgaca ggtggctcgc tgctctatac      840
ccttgatttg ctgcgcgatc gcggtgtctc tgctgagcaa gtgcgggtgc tttcaattgt      900
ggctgccccg ccagcgctac aaaaactcag tcaagcctac ccggcgttga cgatttacag      960
cgccatcatt gatgagcagc tgaacgacaa aggctttatc gtgccggggc tgggggatgc     1020
tggcgatcgc ctgtttggta ctccttgatc tgctgactga attcgctagg cttcagcgtt     1080
gagcaaagcc tgaacggcct gccgaatgaa gctttcatcc tgcggatttt ggctggggtt     1140
gcccgcgcgg tgaccccaga tcgagggaat tgggcaatag tgcgccttag gaatcaactg     1200
cgcttcggcc tcacaatcct ctggggtgaa gtagagatct gttgtcgagg gcatgaccaa     1260
ggtctgagcc gtaatgctgc c                                               1281
<210>  102
<211>  9385
<212>  DNA
<213>  Artificial Sequence
<220>
<223>  plasmid pLybAL3f containing Synechocystis upp gene
<400>  102
gcggccgcaa ggggttcgcg tcagcgggtg ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg       60
cggcatcaga gcagattgta ctgagagtgc accatatgcg gtgtgaaata ccgcacagat      120
gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgcc attcgccatt cagctgcgca actgttggga      180
agggcgatcg gtgcgggcct cttcgctatt acgccagctg gcgaaagggg gatgtgctgc      240
aaggcgatta agttgggtaa cgccagggtt ttcccagtca cgacgttgta aaacgacggc      300
cagtgaattg taatacgact cactataggg cgaattcgag ctcggtaccc ggggatccca      360
cgcccaactg gtcacggaca tcgtcgataa ccaaattaag ttgggcaatt ttgtcttcca      420
ggcgacggcg agccaactca atattttcct cactatcgag atttcctacc ccctcagtgt      480
ctaatttttc ccggtcgggg ctttgggtag cagctcgatt ggccaggaca gaacccaaaa      540
ttccccccac tacgccacca atgaccgtac ctaataaaaa tcctccggcg aagttatctt      600
tttgagccat gactttactc ctgttgttaa cgtttggggg tgaatttgta attatttgat      660
cactagttta atggtgttat caagtaccaa agcaacgatc gcctgcatcc cctaggccgg      720
gcacaatgta accccggtca ttgagttgtt cgtcaatcat ggcggtgtag atggtcaaat      780
tgggatgggc attacttaat ttttgcaggg cagtgggggc ggccaccacg gagaccaaac      840
ggattaaatt ggcatcaatg tcccgggcca tcagcaaatc caaagcagcc atgatggtat      900
tacccgtagc caacatggga tctagcaaca aaagatgggt accgggggca aaccgctccg      960
gcaacttgtt cagatacaga ctaggttcca gggtagtttc attgcgcact aaacccagat     1020
ggtaaatttt tgccaggggc aacaacccct gggccccttc caccagagcc aaccccgccc     1080
gcaaaatggg cacaatgaca aagggcgttt gggggtcaat aagactggcc ttggcgatcg     1140
ccaggggagt tttcacttcc gtatccaccg tcggcaacca ataacgagcg gcctcatagg     1200
tcaaccaacg tcccaattcc cccatggcag ttttaaacaa aaccggcggc gtgttttcat     1260
ccctagctac ccccaaccaa tgcttaatta gaggatgctc cggcacataa acacgtaatt     1320
gagaagccat gggaaaactt aaaagttaat atctaaaatt taattttgtt aatcttggcc     1380
gttggggaac cgaaaaatgg gctaaaagtt aggacgtggt ctcaccgtcg gtaacaattc     1440
accgcggaac tccactgtag ctcagatcgg gttaccggaa gttggggcat tgggaaggga     1500
aaggttttct gccatacttt gggcagggat ttcccccaag ttcaacgaca gacaggcaag     1560
cattatgagc aaacaaccat cctttgacgg ctggcagtcc attgtgggtg ggatcctcta     1620
gagtcgacct gcaggcatgc aagcttgagt attctatagt ctcacctaaa tagcttggcg     1680
taatcatggt catagctgtt tcctgtgtga aattgttatc cgctcacaat tccacacaac     1740
atacgagccg gaagcataaa gtgtaaagcc tggggtgcct aatgagtgag ctaactcaca     1800
ttaattgcgt tgcgctcact gcccgctttc cagtcgggaa acctgtcgtg ccagctgcat     1860
taatgaatcg gccaacgcga accccttgcg gccgcccggg ccgtcgacca attctcatgt     1920
ttgacagctt atcatcgaat ttctgccatt catccgctta ttatcactta ttcaggcgta     1980
gcaaccaggc gtttaagggc accaataact gccttaaaaa aattacgccc cgccctgcca     2040
ctcatcgcag tactgttgta attcattaag cattctgccg acatggaagc catcacaaac     2100
ggcatgatga acctgaatcg ccagcggcat cagcaccttg tcgccttgcg tataatattt     2160
gcccatggtg aaaacggggg cgaagaagtt gtccatattg gccacgttta aatcaaaact     2220
ggtgaaactc acccagggat tggctgagac gaaaaacata ttctcaataa accctttagg     2280
gaaataggcc aggttttcac cgtaacacgc cacatcttgc gaatatatgt gtagaaactg     2340
ccggaaatcg tcgtggtatt cactccagag cgatgaaaac gtttcagttt gctcatggaa     2400
aacggtgtaa caagggtgaa cactatccca tatcaccagc tcaccgtctt tcattgccat     2460
acgaaattcc ggatgagcat tcatcaggcg ggcaagaatg tgaataaagg ccggataaaa     2520
cttgtgctta tttttcttta cggtctttaa aaaggccgta atatccagct gaacggtctg     2580
gttataggta cattgagcaa ctgactgaaa tgcctcaaaa tgttctttac gatgccattg     2640
ggatatatca acggtggtat atccagtgat ttttttctcc attttagctt ccttagctcc     2700
tgaaaatctc gataactcaa aaaatacgcc cggtagtgat cttatttcat tatggtgaaa     2760
gttggaacct cttacgtgcc gatcaacgtc tcattttcgc caaaagttgg cccagggctt     2820
cccggtatca acagggacac caggatttat ttattctgcg aagtgatctt ccgtcacagg     2880
tatttattcg cgataagctc atggagcggc gtaaccgtcg cacaggaagg acagagaaag     2940
cgcggatctg ggaagtgacg gacagaacgg tcaggacctg gattggggag gcggttgccg     3000
ccgctgctgc tgacggtgtg acgttctctg ttccggtcac accacatacg ttccgccatt     3060
cctatgcgat gcacatgctg tatgccggta taccgctgaa agttctgcaa agcctgatgg     3120
gacataagtc catcagttca acggaagtct acacgaaggt ttttgcgctg gatgtggctg     3180
cccggcaccg ggtgcagttt gcgatgccgg agtctgatgc ggttgcgatg ctgaaacaat     3240
tatcctgaga ataaatgcct tggcctttat atggaaatgt ggaactgagt ggatatgctg     3300
tttttgtctg ttaaacagag aagctggctg ttatccactg agaagcgaac gaaacagtcg     3360
ggaaaatctc ccattatcgt agagatccgc attattaatc tcaggagcct gtgtagcgtt     3420
tataggaagt agtgttctgt catgatgcct gcaagcggta acgaaaacga tttgaatatg     3480
ccttcaggaa caatagaaat cttcgtgcgg tgttacgttg aagtggagcg gattatgtca     3540
gcaatggaca gaacaaccta atgaacacag aaccatgatg tggtctgtcc ttttacagcc     3600
agtagtgctc gccgcagtcg agcgacaggg cgaagccctc ggctggttgc cctcgccgct     3660
gggctggcgg ccgtctatgg ccctgcaaac gcgccagaaa cgccgtcgaa gccgtgtgcg     3720
agacaccgcg gccggccgcc ggcgttgtgg atacctcgcg gaaaacttgg ccctcactga     3780
cagatgaggg gcggacgttg acacttgagg ggccgactca cccggcgcgg cgttgacaga     3840
tgaggggcag gctcgatttc ggccggcgac gtggagctgg ccagcctcgc aaatcggcga     3900
aaacgcctga ttttacgcga gtttcccaca gatgatgtgg acaagcctgg ggataagtgc     3960
cctgcggtat tgacacttga ggggcgcgac tactgacaga tgaggggcgc gatccttgac     4020
acttgagggg cagagtgctg acagatgagg ggcgcaccta ttgacatttg aggggctgtc     4080
cacaggcaga aaatccagca tttgcaaggg tttccgcccg tttttcggcc accgctaacc     4140
tgtcttttaa cctgctttta aaccaatatt tataaacctt gtttttaacc agggctgcgc     4200
cctgtgcgcg tgaccgcgca cgccgaaggg gggtgccccc ccttctcgaa ccctcccggt     4260
cgagtgagcg aggaagcacc agggaacagc acttatatat tctgcttaca cacgatgcct     4320
gaaaaaactt cccttggggt tatccactta tccacgggga tatttttata attatttttt     4380
ttatagtttt tagatcttct tttttagagc gccttgtagg cctttatcca tgctggttct     4440
agagaaggtg ttgtgacaaa ttgccctttc agtgtgacaa atcaccctca aatgacagtc     4500
ctgtctgtga caaattgccc ttaaccctgt gacaaattgc cctcagaaga agctgttttt     4560
tcacaaagtt atccctgctt attgactctt ttttatttag tgtgacaatc taaaaacttg     4620
tcacacttca catggatctg tcatggcgga aacagcggtt atcaatcaca agaaacgtaa     4680
aaatagcccg cgaatcgtcc agtcaaacga cctcactgag gcggcatata gtctctcccg     4740
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acaggaacat gacggtatct gcgagatcca tgttgctaaa tatgctgaaa tattcggatt     4860
gacctctgcg gaagccagta aggatatacg gcaggcattg aagagtttcg cggggaagga     4920
agtggttttt tatcgccctg aagaggatgc cggcgatgaa aaaggctatg aatcttttcc     4980
ttggtttatc aaacgtgcgc acagtccatc cagagggctt tacagtgtac atatcaaccc     5040
atatctcatt cccttcttta tcgggttaca gaaccggttt acgcagtttc ggcttagtga     5100
aacaaaagaa atcaccaatc cgtatgccat gcgtttatac gaatccctgt gtcagtatcg     5160
taagccggat ggctcaggca tcgtctctct gaaaatcgac tggatcatag agcgttacca     5220
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taatgagatc aacagcagaa ctccaatgcg cctctcatac attgagaaaa agaaaggccg     5340
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ttcccttcgt catgtgacct gatatcgggg gttagttcgt catcattgat gagggttgat     5640
tatcacagtt tattactctg aattggctat ccgcgtgtgt acctctacct ggagtttttc     5700
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ttgcttcctc gccagttcgc tcgctatgct cggttacacg gctgcggcga gcgctagtga     5820
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acacttaacc agtgcataaa cgctggtcat gaaatgacga aggctatcgc cattgcacag     6060
tttaatgatg acagcccgga agcgaggaaa ataacccggc gctggagaat aggtgaagca     6120
gcggatttag ttggggtttc ttctcaggct atcagagatg ccgagaaagc agggcgacta     6180
ccgcacccgg atatggaaat tcgaggacgg gttgagcaac gtgttggtta tacaattgaa     6240
caaattaatc atatgcgtga tgtgtttggt acgcgattgc gacgtgctga agacgtattt     6300
ccaccggtga tcggggttgc tgcccataaa ggtggcgttt acaaaacctc agtttctgtt     6360
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ccccagggaa cagcctcaat gtatcacgga tgggtaccag atcttcatat tcatgcagaa     6480
gacactctcc tgcctttcta tcttggggaa aaggacgatg tcacttatgc aataaagccc     6540
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gagttaatgg gcaaatttga tgaaggtaaa ctgcccaccg atccacacct gatgctccga     6660
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gctgagttgt ttgactacac ctccgcactg cagtttttcg atatgcttcg tgatctgctc     6840
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aatagtaatg gctctcagtc cccgtggatg gaggagcaaa ttcgggatgc ctggggaagc     6960
atggttctaa aaaatgttgt acgtgaaacg gatgaagttg gtaaaggtca gatccggatg     7020
agaactgttt ttgaacaggc cattgatcaa cgctcttcaa ctggtgcctg gagaaatgct     7080
ctttctattt gggaacctgt ctgcaatgaa attttcgatc gtctgattaa accacgctgg     7140
gagattagat aatgaagcgt gcgcctgtta ttccaaaaca tacgctcaat actcaaccgg     7200
ttgaagatac ttcgttatcg acaccagctg ccccgatggt ggattcgtta attgcgcgcg     7260
taggagtaat ggctcgcggt aatgccatta ctttgcctgt atgtggtcgg gatgtgaagt     7320
ttactcttga agtgctccgg ggtgatagtg ttgagaagac ctctcgggta tggtcaggta     7380
atgaacgtga ccaggagctg cttactgagg acgcactgga tgatctcatc ccttcttttc     7440
tactgactgg tcaacagaca ccggcgttcg gtcgaagagt atctggtgtc atagaaattg     7500
ccgatgggag tcgccgtcgt aaagctgctg cacttaccga aagtgattat cgtgttctgg     7560
ttggcgagct ggatgatgag cagatggctg cattatccag attgggtaac gattatcgcc     7620
caacaagtgc ttatgaacgt ggtcagcgtt atgcaagccg attgcagaat gaatttgctg     7680
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tcaacaccgc caaattgcct aaatcagttg ttgctctttt ttctcacccc ggtgaactat     7800
ctgcccggtc aggtgatgca cttcaaaaag cctttacaga taaagaggaa ttacttaagc     7860
agcaggcatc taaccttcat gagcagaaaa aagctggggt gatatttgaa gctgaagaag     7920
ttatcactct tttaacttct gtgcttaaaa cgtcatctgc atcaagaact agtttaagct     7980
cacgacatca gtttgctcct ggagcgacag tattgtataa gggcgataaa atggtgctta     8040
acctggacag gtctcgtgtt ccaactgagt gtatagagaa aattgaggcc attcttaagg     8100
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ggctgcatcc gatgcaagtg tgtcgctgtc gacgagctcg cgagctcgga catgaggttg     8940
ccccgtattc agtgtcgctg atttgtattg tctgaagttg tttttacgtt aagttgatgc     9000
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<210>  103
<211>  9420
<212>  DNA
<213>  Artificial Sequence
<220>
<223>  plasmid pLybAL5f containing Synechococcus upp gene
<400>  103
gcggccgcaa ggggttcgcg tcagcgggtg ttggcgggtg tcggggctgg cttaactatg       60
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ccgaattaag ggatggggcg gcacgaagat acgcagttga ggagccatgc caatcagcag     1260
aagacagctc ctgattttaa cgttcagacc ccaggggaag cggaacggtg caggaaggca     1320
agcgcttctg cttcgggcag tggtgggcca tagaagaacc cttgcacagc atcacaacca     1380
atcgcttcta agaaggcggc ttgctcgagg cgttctacgc cttctgcgat cgtgcgaagt     1440
ttcaagacct tggccattgc aacaatcgcc tgcacgatcg cttgatcgtc atggtcgtgc     1500
ggcagatcgc gaataaagct gcgatcaatt ttgagagcat tgatgggcaa acgcttgagg     1560
taaccaaggc tggaataacc cgtcccaaaa tcatctaaag cgacttgaaa tcccatcgat     1620
cgggcttcct ggagccattg cagtgggatc ctctagagtc gacctgcagg catgcaagct     1680
tgagtattct atagtctcac ctaaatagct tggcgtaatc atggtcatag ctgtttcctg     1740
tgtgaaattg ttatccgctc acaattccac acaacatacg agccggaagc ataaagtgta     1800
aagcctgggg tgcctaatga gtgagctaac tcacattaat tgcgttgcgc tcactgcccg     1860
ctttccagtc gggaaacctg tcgtgccagc tgcattaatg aatcggccaa cgcgaacccc     1920
ttgcggccgc ccgggccgtc gaccaattct catgtttgac agcttatcat cgaatttctg     1980
ccattcatcc gcttattatc acttattcag gcgtagcaac caggcgttta agggcaccaa     2040
taactgcctt aaaaaaatta cgccccgccc tgccactcat cgcagtactg ttgtaattca     2100
ttaagcattc tgccgacatg gaagccatca caaacggcat gatgaacctg aatcgccagc     2160
ggcatcagca ccttgtcgcc ttgcgtataa tatttgccca tggtgaaaac gggggcgaag     2220
aagttgtcca tattggccac gtttaaatca aaactggtga aactcaccca gggattggct     2280
gagacgaaaa acatattctc aataaaccct ttagggaaat aggccaggtt ttcaccgtaa     2340
cacgccacat cttgcgaata tatgtgtaga aactgccgga aatcgtcgtg gtattcactc     2400
cagagcgatg aaaacgtttc agtttgctca tggaaaacgg tgtaacaagg gtgaacacta     2460
tcccatatca ccagctcacc gtctttcatt gccatacgaa attccggatg agcattcatc     2520
aggcgggcaa gaatgtgaat aaaggccgga taaaacttgt gcttattttt ctttacggtc     2580
tttaaaaagg ccgtaatatc cagctgaacg gtctggttat aggtacattg agcaactgac     2640
tgaaatgcct caaaatgttc tttacgatgc cattgggata tatcaacggt ggtatatcca     2700
gtgatttttt tctccatttt agcttcctta gctcctgaaa atctcgataa ctcaaaaaat     2760
acgcccggta gtgatcttat ttcattatgg tgaaagttgg aacctcttac gtgccgatca     2820
acgtctcatt ttcgccaaaa gttggcccag ggcttcccgg tatcaacagg gacaccagga     2880
tttatttatt ctgcgaagtg atcttccgtc acaggtattt attcgcgata agctcatgga     2940
gcggcgtaac cgtcgcacag gaaggacaga gaaagcgcgg atctgggaag tgacggacag     3000
aacggtcagg acctggattg gggaggcggt tgccgccgct gctgctgacg gtgtgacgtt     3060
ctctgttccg gtcacaccac atacgttccg ccattcctat gcgatgcaca tgctgtatgc     3120
cggtataccg ctgaaagttc tgcaaagcct gatgggacat aagtccatca gttcaacgga     3180
agtctacacg aaggtttttg cgctggatgt ggctgcccgg caccgggtgc agtttgcgat     3240
gccggagtct gatgcggttg cgatgctgaa acaattatcc tgagaataaa tgccttggcc     3300
tttatatgga aatgtggaac tgagtggata tgctgttttt gtctgttaaa cagagaagct     3360
ggctgttatc cactgagaag cgaacgaaac agtcgggaaa atctcccatt atcgtagaga     3420
tccgcattat taatctcagg agcctgtgta gcgtttatag gaagtagtgt tctgtcatga     3480
tgcctgcaag cggtaacgaa aacgatttga atatgccttc aggaacaata gaaatcttcg     3540
tgcggtgtta cgttgaagtg gagcggatta tgtcagcaat ggacagaaca acctaatgaa     3600
cacagaacca tgatgtggtc tgtcctttta cagccagtag tgctcgccgc agtcgagcga     3660
cagggcgaag ccctcggctg gttgccctcg ccgctgggct ggcggccgtc tatggccctg     3720
caaacgcgcc agaaacgccg tcgaagccgt gtgcgagaca ccgcggccgg ccgccggcgt     3780
tgtggatacc tcgcggaaaa cttggccctc actgacagat gaggggcgga cgttgacact     3840
tgaggggccg actcacccgg cgcggcgttg acagatgagg ggcaggctcg atttcggccg     3900
gcgacgtgga gctggccagc ctcgcaaatc ggcgaaaacg cctgatttta cgcgagtttc     3960
ccacagatga tgtggacaag cctggggata agtgccctgc ggtattgaca cttgaggggc     4020
gcgactactg acagatgagg ggcgcgatcc ttgacacttg aggggcagag tgctgacaga     4080
tgaggggcgc acctattgac atttgagggg ctgtccacag gcagaaaatc cagcatttgc     4140
aagggtttcc gcccgttttt cggccaccgc taacctgtct tttaacctgc ttttaaacca     4200
atatttataa accttgtttt taaccagggc tgcgccctgt gcgcgtgacc gcgcacgccg     4260
aaggggggtg cccccccttc tcgaaccctc ccggtcgagt gagcgaggaa gcaccaggga     4320
acagcactta tatattctgc ttacacacga tgcctgaaaa aacttccctt ggggttatcc     4380
acttatccac ggggatattt ttataattat tttttttata gtttttagat cttctttttt     4440
agagcgcctt gtaggccttt atccatgctg gttctagaga aggtgttgtg acaaattgcc     4500
ctttcagtgt gacaaatcac cctcaaatga cagtcctgtc tgtgacaaat tgcccttaac     4560
cctgtgacaa attgccctca gaagaagctg ttttttcaca aagttatccc tgcttattga     4620
ctctttttta tttagtgtga caatctaaaa acttgtcaca cttcacatgg atctgtcatg     4680
gcggaaacag cggttatcaa tcacaagaaa cgtaaaaata gcccgcgaat cgtccagtca     4740
aacgacctca ctgaggcggc atatagtctc tcccgggatc aaaaacgtat gctgtatctg     4800
ttcgttgacc agatcagaaa atctgatggc accctacagg aacatgacgg tatctgcgag     4860
atccatgttg ctaaatatgc tgaaatattc ggattgacct ctgcggaagc cagtaaggat     4920
atacggcagg cattgaagag tttcgcgggg aaggaagtgg ttttttatcg ccctgaagag     4980
gatgccggcg atgaaaaagg ctatgaatct tttccttggt ttatcaaacg tgcgcacagt     5040
ccatccagag ggctttacag tgtacatatc aacccatatc tcattccctt ctttatcggg     5100
ttacagaacc ggtttacgca gtttcggctt agtgaaacaa aagaaatcac caatccgtat     5160
gccatgcgtt tatacgaatc cctgtgtcag tatcgtaagc cggatggctc aggcatcgtc     5220
tctctgaaaa tcgactggat catagagcgt taccagctgc ctcaaagtta ccagcgtatg     5280
cctgacttcc gccgccgctt cctgcaggtc tgtgttaatg agatcaacag cagaactcca     5340
atgcgcctct catacattga gaaaaagaaa ggccgccaga cgactcatat cgtattttcc     5400
ttccgcgata tcacttccat gacgacagga tagtctgagg gttatctgtc acagatttga     5460
gggtggttcg tcacatttgt tctgacctac tgagggtaat ttgtcacagt tttgctgttt     5520
ccttcagcct gcatggattt tctcatactt tttgaactgt aatttttaag gaagccaaat     5580
ttgagggcag tttgtcacag ttgatttcct tctctttccc ttcgtcatgt gacctgatat     5640
cgggggttag ttcgtcatca ttgatgaggg ttgattatca cagtttatta ctctgaattg     5700
gctatccgcg tgtgtacctc tacctggagt ttttcccacg gtggatattt cttcttgcgc     5760
tgagcgtaag agctatctga cagaacagtt cttctttgct tcctcgccag ttcgctcgct     5820
atgctcggtt acacggctgc ggcgagcgct agtgataata agtgactgag gtatgtgctc     5880
ttcttatctc cttttgtagt gttgctctta ttttaaacaa ctttgcggtt ttttgatgac     5940
tttgcgattt tgttgttgct ttgcagtaaa ttgcaagatt taataaaaaa acgcaaagca     6000
atgattaaag gatgttcaga atgaaactca tggaaacact taaccagtgc ataaacgctg     6060
gtcatgaaat gacgaaggct atcgccattg cacagtttaa tgatgacagc ccggaagcga     6120
ggaaaataac ccggcgctgg agaataggtg aagcagcgga tttagttggg gtttcttctc     6180
aggctatcag agatgccgag aaagcagggc gactaccgca cccggatatg gaaattcgag     6240
gacgggttga gcaacgtgtt ggttatacaa ttgaacaaat taatcatatg cgtgatgtgt     6300
ttggtacgcg attgcgacgt gctgaagacg tatttccacc ggtgatcggg gttgctgccc     6360
ataaaggtgg cgtttacaaa acctcagttt ctgttcatct tgctcaggat ctggctctga     6420
aggggctacg tgttttgctc gtggaaggta acgaccccca gggaacagcc tcaatgtatc     6480
acggatgggt accagatctt catattcatg cagaagacac tctcctgcct ttctatcttg     6540
gggaaaagga cgatgtcact tatgcaataa agcccacttg ctggccgggg cttgacatta     6600
ttccttcctg tctggctctg caccgtattg aaactgagtt aatgggcaaa tttgatgaag     6660
gtaaactgcc caccgatcca cacctgatgc tccgactggc cattgaaact gttgctcatg     6720
actatgatgt catagttatt gacagcgcgc ctaacctggg tatcggcacg attaatgtcg     6780
tatgtgctgc tgatgtgctg attgttccca cgcctgctga gttgtttgac tacacctccg     6840
cactgcagtt tttcgatatg cttcgtgatc tgctcaagaa cgttgatctt aaagggttcg     6900
agcctgatgt acgtattttg cttaccaaat acagcaatag taatggctct cagtccccgt     6960
ggatggagga gcaaattcgg gatgcctggg gaagcatggt tctaaaaaat gttgtacgtg     7020
aaacggatga agttggtaaa ggtcagatcc ggatgagaac tgtttttgaa caggccattg     7080
atcaacgctc ttcaactggt gcctggagaa atgctctttc tatttgggaa cctgtctgca     7140
atgaaatttt cgatcgtctg attaaaccac gctgggagat tagataatga agcgtgcgcc     7200
tgttattcca aaacatacgc tcaatactca accggttgaa gatacttcgt tatcgacacc     7260
agctgccccg atggtggatt cgttaattgc gcgcgtagga gtaatggctc gcggtaatgc     7320
cattactttg cctgtatgtg gtcgggatgt gaagtttact cttgaagtgc tccggggtga     7380
tagtgttgag aagacctctc gggtatggtc aggtaatgaa cgtgaccagg agctgcttac     7440
tgaggacgca ctggatgatc tcatcccttc ttttctactg actggtcaac agacaccggc     7500
gttcggtcga agagtatctg gtgtcataga aattgccgat gggagtcgcc gtcgtaaagc     7560
tgctgcactt accgaaagtg attatcgtgt tctggttggc gagctggatg atgagcagat     7620
ggctgcatta tccagattgg gtaacgatta tcgcccaaca agtgcttatg aacgtggtca     7680
gcgttatgca agccgattgc agaatgaatt tgctggaaat atttctgcgc tggctgatgc     7740
ggaaaatatt tcacgtaaga ttattacccg ctgtatcaac accgccaaat tgcctaaatc     7800
agttgttgct cttttttctc accccggtga actatctgcc cggtcaggtg atgcacttca     7860
aaaagccttt acagataaag aggaattact taagcagcag gcatctaacc ttcatgagca     7920
gaaaaaagct ggggtgatat ttgaagctga agaagttatc actcttttaa cttctgtgct     7980
taaaacgtca tctgcatcaa gaactagttt aagctcacga catcagtttg ctcctggagc     8040
gacagtattg tataagggcg ataaaatggt gcttaacctg gacaggtctc gtgttccaac     8100
tgagtgtata gagaaaattg aggccattct taaggaactt gaaaagccag caccctgatg     8160
cgaccacgtt ttagtctacg tttatctgtc tttacttaat gtcctttgtt acaggccaga     8220
aagcataact ggcctgaata ttctctctgg gcccactgtt ccacttgtat cgtcggtctg     8280
ataatcagac tgggaccacg gtcccactcg tatcgtcggt ctgattatta gtctgggacc     8340
acggtcccac tcgtatcgtc ggtctgatta ttagtctggg accacggtcc cactcgtatc     8400
gtcggtctga taatcagact gggaccacgg tcccactcgt atcgtcggtc tgattattag     8460
tctgggacca tggtcccact cgtatcgtcg gtctgattat tagtctggga ccacggtccc     8520
actcgtatcg tcggtctgat tattagtctg gaaccacggt cccactcgta tcgtcggtct     8580
gattattagt ctgggaccac ggtcccactc gtatcgtcgg tctgattatt agtctgggac     8640
cacgatccca ctcgtgttgt cggtctgatt atcggtctgg gaccacggtc ccacttgtat     8700
tgtcgatcag actatcagcg tgagactacg attccatcaa tgcctgtcaa gggcaagtat     8760
tgacatgtcg tcgtaacctg tagaacggag taacctcggt gtgcggttgt atgcctgctg     8820
tggattgctg ctgtgtcctg cttatccaca acattttgcg cacggttatg tggacaaaat     8880
acctggttac ccaggccgtg ccggcacgtt aaccgggctg catccgatgc aagtgtgtcg     8940
ctgtcgacga gctcgcgagc tcggacatga ggttgccccg tattcagtgt cgctgatttg     9000
tattgtctga agttgttttt acgttaagtt gatgcagatc aattaatacg atacctgcgt     9060
cataattgat tatttgacgt ggtttgatgg cctccacgca cgttgtgata tgtagatgat     9120
aatcattatc actttacggg tcctttccgg tgatccgaca ggttacgggg cggcgacctc     9180
gcgggttttc gctatttatg aaaattttcc ggtttaaggc gtttccgttc ttcttcgtca     9240
taacttaatg tttttattta aaataccctc tgaaaagaaa ggaaacgaca ggtgctgaaa     9300
gcgagctttt tggcctctgt cgtttccttt ctctgttttt gtccgtggaa tgaacaatgg     9360
aagtccgagc tcatcgctaa taacttcgta tagcatacat tatacgaagt tatattcgat     9420
<210>  104
<211>  22
<212>  DNA
<213>  Artificial Sequence
<220>
<223>  PCR primer
<400>  104
gtaatacgac tcactatagg gc                                                22
<210>  105
<211>  24
<212>  DNA
<213>  Artificial Sequence
<220>
<223>  PCR primer
<400>  105
cacacaggaa acagctatga ccat                                              24
<210>  106
<211>  5641
<212>  DNA
<213>  Artificial Sequence
<220>
<223>  plasmid pLybAL4f containing Synechocystis upp gene
<400>  106
tgcaccatat gcggtgtgaa ataccgcaca gatgcgtaag gagaaaatac cgcatcaggc       60
gccattcgcc attcagctgc gcaactgttg ggaagggcga tcggtgcggg cctcttcgct      120
attacgccag ctggcgaaag ggggatgtgc tgcaaggcga ttaagttggg taacgccagg      180
gttttcccag tcacgacgtt gtaaaacgac ggccagtgaa ttgtaatacg actcactata      240
gggcgaattc gagctcggta cccggggatc ccacgcccaa ctggtcacgg acatcgtcga      300
taaccaaatt aagttgggca attttgtctt ccaggcgacg gcgagccaac tcaatatttt      360
cctcactatc gagatttcct accccctcag tgtctaattt ttcccggtcg gggctttggg      420
tagcagctcg attggccagg acagaaccca aaattccccc cactacgcca ccaatgaccg      480
tacctaataa aaatcctccg gcgaagttat ctttttgagc catgacttta ctcctgttgt      540
taacgtttgg gggtgaattt gtaattattt gatcactagt ttaatggtgt tatcaagtac      600
caaagcaacg atcgcctgca tcccctaggc cgggcacaat gtaaccccgg tcattgagtt      660
gttcgtcaat catggcggtg tagatggtca aattgggatg ggcattactt aatttttgca      720
gggcagtggg ggcggccacc acggagacca aacggattaa attggcatca atgtcccggg      780
ccatcagcaa atccaaagca gccatgatgg tattacccgt agccaacatg ggatctagca      840
acaaaagatg ggtaccgggg gcaaaccgct ccggcaactt gttcagatac agactaggtt      900
ccagggtagt ttcattgcgc actaaaccca gatggtaaat ttttgccagg ggcaacaacc      960
cctgggcccc ttccaccaga gccaaccccg cccgcaaaat gggcacaatg acaaagggcg     1020
tttgggggtc aataagactg gccttggcga tcgccagggg agttttcact tccgtatcca     1080
ccgtcggcaa ccaataacga gcggcctcat aggtcaacca acgtcccaat tcccccatgg     1140
cagttttaaa caaaaccggc ggcgtgtttt catccctagc tacccccaac caatgcttaa     1200
ttagaggatg ctccggcaca taaacacgta attgagaagc catgggaaaa cttaaaagtt     1260
aatatctaaa atttaatttt gttaatcttg gccgttgggg aaccgaaaaa tgggctaaaa     1320
gttaggacgt ggtctcaccg tcggtaacaa ttcaccgcgg aactccactg tagctcagat     1380
cgggttaccg gaagttgggg cattgggaag ggaaaggttt tctgccatac tttgggcagg     1440
gatttccccc aagttcaacg acagacaggc aagcattatg agcaaacaac catcctttga     1500
cggctggcag tccattgtgg gtgggatcct ctagagtcga cctgcaggca tgcaagcttg     1560
agtattctat agtctcacct aaatagcttg gcgtaatcat ggtcatagct gtttcctgtg     1620
tgaaattgtt atccgctcac aattccacac aacatacgag ccggaagcat aaagtgtaaa     1680
gcctggggtg cctaatgagt gagctaactc acattaattg cgttgcgctc actgcccgct     1740
ttccagtcgg gaaacctgtc gtgccagctg cattaatgaa tcggccaacg cgaacccctt     1800
gcggccgccc gggccgtcga ccaattctca tgtttgacag cttatcatcg aatttctgcc     1860
attcatccgc ttattatcac ttattcaggc gtagcaacca ggcgtttaag ggcaccaata     1920
actgccttaa aaaaattacg ccccgccctg ccactcatcg cagtactgtt gtaattcatt     1980
aagcattctg ccgacatgga agccatcaca aacggcatga tgaacctgaa tcgccagcgg     2040
catcagcacc ttgtcgcctt gcgtataata tttgcccatg gtgaaaacgg gggcgaagaa     2100
gttgtccata ttggccacgt ttaaatcaaa actggtgaaa ctcacccagg gattggctga     2160
gacgaaaaac atattctcaa taaacccttt agggaaatag gccaggtttt caccgtaaca     2220
cgccacatct tgcgaatata tgtgtagaaa ctgccggaaa tcgtcgtggt attcactcca     2280
gagcgatgaa aacgtttcag tttgctcatg gaaaacggtg taacaagggt gaacactatc     2340
ccatatcacc agctcaccgt ctttcattgc catacgaaat tccggatgag cattcatcag     2400
gcgggcaaga atgtgaataa aggccggata aaacttgtgc ttatttttct ttacggtctt     2460
taaaaaggcc gtaatatcca gctgaacggt ctggttatag gtacattgag caactgactg     2520
aaatgcctca aaatgttctt tacgatgcca ttgggatata tcaacggtgg tatatccagt     2580
gatttttttc tccattttag cttccttagc tcctgaaaat ctcgataact caaaaaatac     2640
gcccggtagt gatcttattt cattatggtg aaagttggaa cctcttacgt gccgatcaac     2700
gtctcatttt cgccaaaagt tggcccaggg cttcccggta tcaacaggga caccaggatt     2760
tatttattct gcgaagtgat cttccgtcac aggtatttat tcgcgataag ctcatggagc     2820
ggcgtaaccg tcgcacagga aggacagaga aagcgcggat ctgggaagtg acggacagaa     2880
cggtcaggac ctggattggg gaggcggttg ccgccgctgc tgctgacggt gtgacgttct     2940
ctgttccggt cacaccacat acgttccgcc attcctatgc gatgcacatg ctgtatgccg     3000
gtataccgct gaaagttctg caaagcctga tgggacataa gtccatcagt tcaacggaag     3060
tctacacgaa ggtttttgcg ctggatgtgg ctgcccggca ccgggtgcag tttgcgatgc     3120
cggagtctga tgcggttgcg atgctgaaac aattatcctg agaataaatg ccttggcctt     3180
tatatggaaa tgtggaactg agtggatatg ctgtttttgt ctgttaaaca gagaagctgg     3240
ctgttatcca ctgagaagcg aacgaaacag tcgggaaaat ctcccattat cgtagagatc     3300
cgcattatta atctcaggag cctgtgtagc gtttatagga agtagtgttc tgtcatgatg     3360
cctgcaagcg gtaacgaaaa cgatttgaat atgccttcag gaacaataga aatcttcgtg     3420
cggtgttacg ttgaagtgga gcggattatg tcagcaatgg acagaacaac ctaatgaaca     3480
cagaaccatg atgtggtctg tccttttaca gccagtagtg ctcgccgcag tcgagcgaca     3540
gggcgaagcc ctcggctggt tgccctcgcc gctgggctgg cggccgtcta tggccctgca     3600
aacgcgccag aaacgccgtc gaagccgtgt gcgagacacc gcggccggcc gccggcgttg     3660
tggatacctc gcggaaaact tggccctcac tgacagatga ggggcggacg ttgacacttg     3720
aggggccgac tcacccggcg cggcgttgac agatgagggg caggctcgat ttcggccggc     3780
gacgtggagc tggccagcct cgcaaatcgg cgaaaacgcc tgattttacg cgagtttccc     3840
acagatgatg tggacaagcc tggggataag tgccctgcgg tattgacact tgaggggcgc     3900
gactactgac agatgagggg cgcgatcctt gacacttgag gggcagagtg ctgacagatg     3960
aggggcgcac ctattgacat ttgaggggct gtccacaggc agaaaatcca gcatttgcaa     4020
gggtttccgc ccgtttttcg gccaccgcta acctgtcttt taacctgctt ttaaaccaat     4080
atttataaac cttgttttta accagggctg cgccctgtgc gcgtgaccgc gcacgccgaa     4140
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agcacttata tattctgctt acacacgatg cctgaaaaaa cttcccttgg ggttatccac     4260
ttatccacgg ggatattttt ataattattt tttttatagt ttttagatct tcttttttag     4320
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a                                                                     5641
<210>  107
<211>  5218
<212>  DNA
<213>  Artificial Sequence
<220>
<223>  plasmid pLybAL9f containing partially deleted Synechocystis upp 
gene
<400>  107
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<213>  Artificial Sequence
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tgcaccatat gcggtgtgaa ataccgcaca gatgcgtaag gagaaaatac cgcatcaggc       60
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ctggttctag agaaggtgtt gtgacaaatt gccctttcag tgtgacaaat caccctcaaa     4440
tgacagtcct gtctgtgaca aattgccctt aaccctgtga caaattgccc tcagaagaag     4500
ctgttttttc acaaagttat ccctgcttat tgactctttt ttatttagtg tgacaatcta     4560
aaaacttgtc acacttcaca tggatctgtc atggcggaaa cagcggttat caatcacaag     4620
aaacgtaaaa atagcccgcg aatcgtccag tcaaacgacc tcactgaggc ggcatatagt     4680
ctctcccggg atcaaaaacg tatgctgtat ctgttcgttg accagatcag aaaatctgat     4740
ggcaccctac aggaacatga cggtatctgc gagatccatg ttgctaaata tgctgaaata     4800
ttcggattga cctctgcgga agccagtaag gatatacggc aggcattgaa gagtttcgcg     4860
gggaaggaag tggtttttta tcgccctgaa gaggatgccg gcgatgaaaa aggctatgaa     4920
tcttttcctt ggtttatcaa acgtgcgcac agtccatcca gagggcttta cagtgtacat     4980
atcaacccat atctcattcc cttctttatc gggttacaga accggtttac gcagtttcgg     5040
cttagtgaaa caaaagaaat caccaatccg tatgccatgc gtttatacga atccctgtgt     5100
cagtatcgta agccggatgg ctcaggcatc gtctctctga aaatcgactg gatcatagag     5160
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gtctgtgtta atgagatcaa cagcagaact ccaatgcgcc tctcatacat tgagaaaaag     5280
aaaggccgcc agacgactca tatcgtattt tccttccgcg atatcacttc catgacgaca     5340
ggatagtctg agggttatct gtcacagatt tgagggtggt tcgtcacatt tgttctgacc     5400
tactgagggt aatttgtcac agttttgctg tttccttcag cctgcatgga ttttctcata     5460
ctttttgaac tgtaattttt aaggaagcca aatttgaggg cagtttgtca cagttgattt     5520
ccttctcttt cccttcgtca tgtgacctga tatcgggggt tagttcgtca tcattgatga     5580
gggttgatta tcacagttta ttactctgaa ttggctatcc gcgtgtgtac ctctacctgg     5640
agtttttccc acggtggata tttcttcttg cgctgagcgt aagagctatc tgacagaaca     5700
gttcttcttt gcttcctcgc cagttcgctc gctatgctcg gttacacggc tgcggcgagc     5760
gctagtgata ataagtgact gaggtatgtg ctcttcttat                           5800
<210>  110
<211>  5731
<212>  DNA
<213>  Artificial Sequence
<220>
<223>  plasmid pLybAL10fb containing partially deleted Synechococcus upp
gene
<400>  110
tgcaccatat gcggtgtgaa ataccgcaca gatgcgtaag gagaaaatac cgcatcaggc       60
gccattcgcc attcagctgc gcaactgttg ggaagggcga tcggtgcggg cctcttcgct      120
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gggcgaattc gagctcggta cccggggatc ccacggcagc attacggctc agaccttggt      300
catgccctcg acaacagatc tctacttcac cccagaggat tgtgaggccg aagcgcagtt      360
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cagccaaaat ccgcaggatg aaagcttcat tcggcaggcc gttcaggctt tgctcaacgc      480
tgaagcctag cgaattcagt cagcagatca aggagtacca aacaggcgat cgccagcatc      540
ccccagcccc ggcacgataa agcctttgtc gttcagctgc tcatcaatga tggcgctgta      600
aatcgtcaac gccgggtagg cttgactgag tttttgtagc gctggcgggg cagccacaat      660
tgaaagcacc cgcacttgct cagcagagac accgcgatcg cgcagcaaat caagggtata      720
gagcagcgag ccacctgtcg ccagcatcgg gtcgagaacc agaacgcgac tgttcacttc      780
aagttgctct ggcaggtgat tgaggtagca gcgcggttca agactgactt catcccgctc      840
gcgcagaatc ggcacgatcg ccaagggttg cgaaaaatcg acgaactccg ctggggtttc      900
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ggcgagccag cggcccagct ctgcgatcgc ggtgcgaaac agaggcgtcg gcgtctggcg     1020
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aatcatggtc atagctgttt cctgtgtgaa attgttatcc gctcacaatt ccacacaaca     1620
tacgagccgg aagcataaag tgtaaagcct ggggtgccta atgagtgagc taactcacat     1680
taattgcgtt gcgctcactg cccgctttcc agtcgggaaa cctgtcgtgc cagctgcatt     1740
aatgaatcgg ccaacgcgaa ccccttgcgg ccgcccgggc cgtcgaccaa ttctcatgtt     1800
tgacagctta tcatcgaatt tctgccattc atccgcttat tatcacttat tcaggcgtag     1860
caaccaggcg tttaagggca ccaataactg ccttaaaaaa attacgcccc gccctgccac     1920
tcatcgcagt actgttgtaa ttcattaagc attctgccga catggaagcc atcacaaacg     1980
gcatgatgaa cctgaatcgc cagcggcatc agcaccttgt cgccttgcgt ataatatttg     2040
cccatggtga aaacgggggc gaagaagttg tccatattgg ccacgtttaa atcaaaactg     2100
gtgaaactca cccagggatt ggctgagacg aaaaacatat tctcaataaa ccctttaggg     2160
aaataggcca ggttttcacc gtaacacgcc acatcttgcg aatatatgtg tagaaactgc     2220
cggaaatcgt cgtggtattc actccagagc gatgaaaacg tttcagtttg ctcatggaaa     2280
acggtgtaac aagggtgaac actatcccat atcaccagct caccgtcttt cattgccata     2340
cgaaattccg gatgagcatt catcaggcgg gcaagaatgt gaataaaggc cggataaaac     2400
ttgtgcttat ttttctttac ggtctttaaa aaggccgtaa tatccagctg aacggtctgg     2460
ttataggtac attgagcaac tgactgaaat gcctcaaaat gttctttacg atgccattgg     2520
gatatatcaa cggtggtata tccagtgatt tttttctcca ttttagcttc cttagctcct     2580
gaaaatctcg ataactcaaa aaatacgccc ggtagtgatc ttatttcatt atggtgaaag     2640
ttggaacctc ttacgtgccg atcaacgtct cattttcgcc aaaagttggc ccagggcttc     2700
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ctatgcgatg cacatgctgt atgccggtat accgctgaaa gttctgcaaa gcctgatggg     3000
acataagtcc atcagttcaa cggaagtcta cacgaaggtt tttgcgctgg atgtggctgc     3060
ccggcaccgg gtgcagtttg cgatgccgga gtctgatgcg gttgcgatgc tgaaacaatt     3120
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gaaaatctcc cattatcgta gagatccgca ttattaatct caggagcctg tgtagcgttt     3300
ataggaagta gtgttctgtc atgatgcctg caagcggtaa cgaaaacgat ttgaatatgc     3360
cttcaggaac aatagaaatc ttcgtgcggt gttacgttga agtggagcgg attatgtcag     3420
caatggacag aacaacctaa tgaacacaga accatgatgt ggtctgtcct tttacagcca     3480
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gagtgagcga ggaagcacca gggaacagca cttatatatt ctgcttacac acgatgcctg     4200
aaaaaacttc ccttggggtt atccacttat ccacggggat atttttataa ttattttttt     4260
tatagttttt agatcttctt ttttagagcg ccttgtaggc ctttatccat gctggttcta     4320
gagaaggtgt tgtgacaaat tgccctttca gtgtgacaaa tcaccctcaa atgacagtcc     4380
tgtctgtgac aaattgccct taaccctgtg acaaattgcc ctcagaagaa gctgtttttt     4440
cacaaagtta tccctgctta ttgactcttt tttatttagt gtgacaatct aaaaacttgt     4500
cacacttcac atggatctgt catggcggaa acagcggtta tcaatcacaa gaaacgtaaa     4560
aatagcccgc gaatcgtcca gtcaaacgac ctcactgagg cggcatatag tctctcccgg     4620
gatcaaaaac gtatgctgta tctgttcgtt gaccagatca gaaaatctga tggcacccta     4680
caggaacatg acggtatctg cgagatccat gttgctaaat atgctgaaat attcggattg     4740
acctctgcgg aagccagtaa ggatatacgg caggcattga agagtttcgc ggggaaggaa     4800
gtggtttttt atcgccctga agaggatgcc ggcgatgaaa aaggctatga atcttttcct     4860
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tatctcattc ccttctttat cgggttacag aaccggttta cgcagtttcg gcttagtgaa     4980
acaaaagaaa tcaccaatcc gtatgccatg cgtttatacg aatccctgtg tcagtatcgt     5040
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aatgagatca acagcagaac tccaatgcgc ctctcataca ttgagaaaaa gaaaggccgc     5220
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taatttgtca cagttttgct gtttccttca gcctgcatgg attttctcat actttttgaa     5400
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cccattttgc gggcggggtt ggctctggtg gaaggggccc aggggttgtt gcccctggca      300
aaaatttacc atctgggttt agtgcgcaat gaaactaccc tggaacctag tctgtatctg      360
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His Trp Leu Gly Val Ala Arg Asp Glu Asn Thr Pro Pro Val Leu Phe 
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Lys Thr Ala Met Gly Glu Leu Gly Arg Trp Leu Thr Tyr Glu Ala Ala 
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愊捧杴捣瑡⁴瑴捴瑡杧瑴琠慣捣瑡捣⁣条杣慡杧捧挠瑡捧瑡捧⁡捴慧慡瑴慡†††㐵㰰牢ਾ戼㹲琊捡慧杣慡⁡瑴慡慴杣捡琠慣瑣瑡条⁧捧慡瑴瑧慴琠慣捧慴杴⁣捧杣捡慣慧†††〶㰰牢ਾ戼㹲愊慣捣瑴捧⁣慧捴条捣慡愠杣捴捴瑴⁣条捧慣瑣慧挠慴捧慧慴⁡瑣瑴捣捣捡†††㘶㰰牢ਾ戼㹲愊捡杧慡慣⁡瑣瑣慣瑣捧愠杴杧瑡慣⁴杴杧慴瑣瑧朠杧瑴慴瑧⁧瑧杴慴慡慡†††㈷㰰牢ਾ戼㹲挊捡瑣慧捣⁧瑣瑡捣瑣慧琠慣瑧瑴瑣⁴慧条瑧慡捡琠慣捴捡捣⁣慣条捴杴捧†††㠷㰰牢ਾ戼㹲琊瑡捧条慡⁡捴捡瑣杧瑣挠慡慣捧瑣⁧瑣慣杧瑧慣愠杣条慡瑴⁡捡瑡捴杣捴†††㐸㰰牢ਾ戼㹲愊杧慡条瑣⁴杧瑣杴慧捧挠杴瑴杧杴⁣杧捴瑡杧慡琠慴捣瑴慣⁡捣捴慡捧慣†††〹㰰牢ਾ戼㹲朊慡杴慣慧⁡捴捡杴捧瑴琠瑣杴瑧杴⁴捧瑴捡捣瑡挠捴捴杣慣⁴慣捣瑴杴瑧†††㘹㰰牢ਾ戼㹲愊慡杧瑴瑣⁡条瑣慴杧杴愠慧捡瑡捣⁣杴捣杴慡慣琠慧慧慡慡⁡慣杧瑧捡捴††ㄠ㈰㰰牢ਾ戼㹲愊慴瑣慣瑣⁴瑣慡瑧慧杣朠瑣捧瑡捡⁴慡捣捧瑴慣琠捡瑡瑣杣⁴条瑡瑴瑣瑣††ㄠ㠰㰰牢ਾ戼㹲朊捧慧瑴慧⁡杧捧慴慡瑴挠瑴慣捡捧⁴慡瑣瑴慧慧愠瑴瑴杴慴⁡捧慡杴杣捧†���ㄠ㐱㰰牢ਾ戼㹲朊瑴瑡慡捧⁡瑴慴瑡捧瑡琠慧杴捣瑡⁴慡瑡慡条慣挠慣捡捧瑣⁧捡杴捣捣瑡††ㄠ〲㰰牢ਾ戼㹲挊捣慣捴瑴⁧捴杴杣捡条愠瑴捣杴杧⁡慴条捣慡瑧琠慣瑴瑴捴⁴瑴瑴瑴慣慴††ㄠ㘲㰰牢ਾ戼㹲愊瑡杴瑣瑴⁡条捧慧杣杴挠瑧捣捴慡⁧瑣捧捴瑴瑧朠瑴慡杴瑧⁴捴瑴瑴瑴瑧††ㄠ㈳㰰牢ਾ戼㹲朊瑣慣慴杣⁴慴慡捴慴捴愠捣捧慡杧⁧瑡慡瑡瑡瑣愠捡捡杣杴⁣瑧瑧杴捡慴††ㄠ㠳㰰牢ਾ戼㹲琊瑴慴捣捴⁴杧杣瑧慧慴愠杴瑧杴慣⁴瑣慴条慡杧愠杧瑡捣瑡⁡杴瑡瑣杴瑡††ㄠ㐴㰰牢ਾ戼㹲朊慧捡捧杴⁧杣慧慡捴慡愠捣捧瑡捣⁣慧捴条瑧杣琠杣杴捣杴⁡慣瑡瑡捴杴††ㄠ〵㰰牢ਾ戼㹲挊慡杧捡慴⁣条瑣捡杴捧愠捡杣慣条⁴慧杴瑧捧瑡琠杧慣瑴慧⁴瑡慣杧捧捧††ㄠ㘵㰰牢ਾ戼㹲琊慣瑡杧杴⁧条瑣杴捡捧愠瑣杧慣慡⁡捣瑴瑡杣瑣琠捣杣瑴条⁣杧捧瑧捧瑡††ㄠ㈶㰰牢ਾ戼㹲朊杧捧杧条⁣捧杣杴捡瑡挠慡杴瑧慡⁡捡捡瑡瑡杣琠捴瑡瑣捧⁣杧瑡捧慧瑴††ㄠ㠶㰰牢ਾ戼㹲朊杣杣杴瑡⁡瑴条杣杴慣愠瑣捧瑡捡⁡瑧慣捴捧捴愠瑧瑡捣杣⁧杣杣慧捧杴††ㄠ㐷㰰牢ਾ戼㹲朊条捧慧慡⁧杧瑡杧瑣瑴琠捧捧杴慣⁴慴捴瑧慣杧挠捴杣慣捧⁡杴慡慧杣慣††ㄠ〸㰰牢ਾ戼㹲琊慴瑡慧慣⁴慴捧捧慡杣琠瑡慴瑣慣⁧瑡瑣杧捣捡愠慡杴捧瑧⁴捡条慣杧慧††ㄠ㘸㰰牢ਾ戼㹲愊条杴杴瑴⁧捴慧慧捴慡愠捣慧慧杧⁴捡慣瑧慡条朠杴条捧慡⁴杴慣捧瑴瑴††ㄠ㈹㰰牢ਾ戼㹲愊杴慣杧慡⁧瑣捣瑣瑴瑡挠杧捧慧捡⁧捣杣慴瑴捴琠杧捧慧杴⁡瑴慴捡杣瑡††ㄠ㠹㰰牢ਾ戼㹲朊慡捴杴捧⁴捴捧条捴瑧琠慡捣慧瑣⁧杧杣慧瑡瑧挠条慴慡慡⁴杴捧捡条瑧††㈠㐰㰰牢ਾ戼㹲朊慣捡捴条⁧慣捴瑡杧杣愠瑣杧杣杧⁴瑧捧杣慧杴琠瑣杧条瑣⁧捧瑴慧慡杴††㈠〱㰰牢ਾ戼㹲愊慴捡慣捣⁧慣瑴捡慡慣愠慡慡慧慧⁡慡慴捡条慧朠杴瑡慧瑣⁡杴条捴瑧瑴††㈠㘱㰰牢ਾ戼㹲愊瑧杣慴瑧⁡捴慴捡杣慧琠杴慣捣捡⁣条捡慧捧捡朠捣捧慣瑧⁧捣杧杴捧瑣††㈠㈲㰰牢ਾ戼㹲琊捧杣瑴杧⁣瑡捡杴杧杧挠捡杴慡条⁣杣慣杧杣慧挠杴杴瑧瑴⁧捧杴慧瑧杧††㈠㠲㰰牢ਾ戼㹲琊慧慡慣杧⁧慡杴条慧捴愠捧杣瑣慡⁡慡条瑧慧慡愠慡杧慴捡⁡瑴捡瑧杧捧††㈠㐳㰰牢ਾ戼㹲挊捴瑴瑴慡⁣瑣慣捧慧捡愠杧捡瑣杴⁡杣慡慴瑣捡愠捡慣瑡捴⁴捣慡杴捣瑧††㈠〴㰰牢ਾ戼㹲琊瑣瑣杧捣⁣捧瑴瑴慣瑴愠捴杧瑣杣⁡捴杴瑧捧慡琠瑴慣捧瑧⁣瑣捧瑣杧慧††㈠㘴㰰牢ਾ戼㹲挊杧瑣瑡瑣⁡杣杣慴慡杴挠瑧杴瑣杧⁣条瑡慡瑡慴挠杴捣捧杴⁴杴慣条捡慧††㈠㈵㰰牢ਾ戼㹲琊慧慣瑴瑡⁣杴慧捴慣杣愠瑴瑡慣捣⁴瑧杴捣瑡瑴朠杣慣杴慡⁴慴杣慣慡杣††㈠㠵㰰牢ਾ戼㹲朊杧条杴慡⁴慡捴捧瑡杴朠瑴捴瑴捴⁴捧瑡瑡捴瑣琠捴捣慧慣⁣杣慧慡捴瑴††㈠㐶㰰牢ਾ戼㹲挊慡杣杣瑣⁧捣慧慣慴杴愠慣捣瑴捧⁴杴慡慣捧瑴琠瑧慧瑴瑡⁧瑡瑴捧杴杧††㈠〷㰰牢ਾ戼㹲琊瑴捣条捡⁡慧慡捡慧捴朠捴杴捧瑧⁴捣杴慧瑴瑧挠瑴捴慴捡⁣杴捡捣捧瑧††㈠㘷㰰牢ਾ戼㹲挊捡慧慣杣⁴条杣慣慡慡朠捣瑡捡条⁣瑣杧杧慣慡朠慣瑴捴慧⁡慣慧条捴慴††㈠㈸㰰牢ਾ戼㹲挊捣慧捴杧⁣瑡杴慡捣慧愠条慡瑡条⁣慣慡慣杧瑣朠捣杧捧慣⁣杴捣捧慣慡††㈠㠸㰰牢ਾ戼㹲愊瑣杧杣慣⁡瑣慴慡捧杧愠捡杴慡慡⁡杣慴慣慡瑡愠捴瑴瑴瑣⁧捴慧捡杧瑣††㈠㐹㰰牢ਾ戼㹲朊慧瑴瑡捴⁣慡条瑧瑴捧挠条条杣瑴⁴捴捴捧瑣瑡朠慡捧瑧杴⁣杴慧慡慡慴††㌠〰㰰牢ਾ戼㹲琊捣捧条慣⁴慣杴瑧慡慡琠捴瑧慴慴⁣捣条瑡杴慣挠慣捡瑧杣⁣瑧杧杴瑡瑧††㌠㘰㰰牢ਾ戼㹲朊慣条捣慴⁴慣杧瑡瑡捴朠捴���慣捧⁴杣慡慡杴慡朠瑣杧捡慧⁡瑴慡杴瑧慡††㌠㈱㰰牢ਾ戼㹲愊慴杣杧慣⁡瑴条捧杴慧挠捧杣瑣瑴⁡瑴瑡瑴慧瑡挠条慣瑴瑴⁧捡杣慴慡瑴††㌠㠱㰰牢ਾ戼㹲愊瑣慧杴慡⁡瑡瑡捴杣瑣愠瑣瑣慧杣⁴杧捧瑴条杴愠杣捣捡杴⁣瑧慧杣杧瑡††㌠㐲㰰牢ਾ戼㹲朊慡捣杴瑧⁡捧慡慡慧瑧愠杴瑴捧杴⁣捴条慧捣慣朠捣慡捴杣⁧捧瑧捴瑴瑧††㌠〳㰰牢ਾ戼㹲琊瑣瑴杣慣⁡瑴杴杣杧条挠杧慣慡杣⁡瑧慴捡瑧杣朠杣瑴慡瑴⁧瑴慡捣捣慴††㌠㘳㰰牢ਾ戼㹲挊慧捴瑧慧⁣慧条瑴捧条挠杴杣瑣杧⁡捴瑧捧瑡杴愠瑣瑡瑧杣⁣杴捧杧慡杣††㌠㈴㰰牢ਾ戼㹲琊瑡瑴捣杣⁴慣杴慣慧慡琠捧杴慧杣⁴慴捴瑧慧慡愠捡慧慴瑴⁡捡慣瑣杧慣††㌠㠴㰰牢ਾ戼㹲朊慧瑧捧瑴⁣瑡慴捧慧捣琠慡条慣慧⁴条瑴捣捧慧愠捧捧杧慡⁡捧慣捧条杣††㌠㐵㰰牢ਾ戼㹲挊慧慴慡瑧⁴捧慴捣瑴捴挠慡条瑣杴⁣瑧条慧捧慴朠瑣捧瑣杣⁡慡杧杧瑡捧††㌠〶㰰牢ਾ戼㹲朊瑡捴捧慣⁣瑣瑣慣瑣捣朠瑣杧杣慧⁴捴瑣瑣杴条愠捡瑡瑴杴⁧杴捧条捧慧††㌠㘶㰰牢ਾ戼㹲琊捴杴瑧慡⁣慧杴条慧慡琠捧捴慡杧⁧捣瑡慡捴捴朠捧瑧杴慴⁧瑴杧慣瑡慴††㌠㈷㰰牢ਾ戼㹲挊捴捡杣慧⁡瑴杧条捣捡琠捧捧条瑣⁡杣条杣杣捴琠瑡瑴杴瑣⁧条杧捣捡慴††㌠㠷㰰牢ਾ戼㹲琊捧慴瑡杧⁣瑡捴杴慧条挠瑣慴慡捡⁡瑣瑡杣瑣瑴琠瑴慧杧杣⁡捴捧瑴慡捣††㌠㐸㰰牢ਾ戼㹲琊瑴捴条慡⁴慧慧杣瑴慧琠杣捧捡瑧⁡条杣杴条捡朠瑴慧捴杧⁣捡瑧慡慧杧††㌠〹㰰牢ਾ戼㹲琊捴慣捡瑴⁴慣捣瑡慡杴愠慡慴条瑡⁣捡慴捣杧捧朠慴瑴瑴瑴⁧条瑴瑡杣条††㌠㘹㰰牢ਾ戼㹲愊瑴瑴慣杧⁡捧慴条慧条挠慴慡瑡杧⁡慧慡慡慡捴愠瑣杧瑡瑡⁡捣捡杣瑴慧††㐠㈰㰰牢ਾ戼㹲琊瑡瑡捣慣⁡杴捧瑡杣慴愠条慡慣瑴⁴杴条捧瑡瑴挠条捴条瑴⁧瑣慣瑡瑧捡††㐠㠰㰰牢ਾ戼㹲挊慴慴捡慣⁧捡杣瑴慣捧琠杧瑡瑡慴⁣杧捣瑴瑴慴愠条捡杣慴⁡条慡慡瑡慡††㐠㐱㰰牢ਾ戼㹲朊慣慣条瑴⁴慴捴杣捧瑣琠慴瑴慣慣⁴捴瑴捧捣捧挠杴瑡慧瑡⁧瑣慣捴杣慧††㐠〲㰰牢ਾ戼㹲愊瑴捣瑧瑡⁧捧慡杴慡条愠杣瑧慧捧⁴杧杴瑡瑡杧朠瑡条杴瑴⁣捡捣瑴瑧慴††㐠㘲㰰牢ਾ戼㹲挊捡杣瑴瑴⁣慣杴条慣慡挠杴慡捡瑧⁴瑴慣捴捧捴琠杧条杴慡⁴捡慣杣捡慧††㐠㈳㰰牢ਾ戼㹲琊瑴捣杧慣⁧瑴捴慴慣慣琠瑡瑡捴捧⁡条瑡瑧杧杣琠瑧慴杣瑧⁧慡慡捣杴捧††㐠㠳㰰牢ਾ戼㹲挊慴瑴捴捣⁴慡条杧瑴慴琠杴条慡慴⁴瑧瑴瑴杣捴琠慣捧慣瑡⁣捣杴杧杴条††㐠㐴㰰牢ਾ戼㹲琊瑴慣捣条⁴瑴杴瑡瑴慡愠杣杴捧慣⁡慴杴慧慣捡琠捴瑴杣捣⁣捣瑧瑴捴捡††㐠〵㰰牢ਾ戼㹲挊瑡杧捧慡⁡慴瑴瑡捡捧愠条捧慧慣⁡杧杴瑣慧杴挠杣瑣杧杣⁡瑴慣杧瑴慣††㐠㘵㰰牢ਾ戼㹲琊慣杴捣瑧⁴杴杴瑡杧瑣琠捣瑡瑧杣⁧慣慧瑡捧瑴愠瑡慧瑡慴⁣慡慣瑧捡杴††㐠㈶㰰牢ਾ戼㹲挊慧杴条杴⁧慣杧捧杧杧挠瑧慡瑴瑴⁴瑴慡杧慣瑧琠瑡杴瑧捧⁣瑣慴慡杣捣††㐠㠶㰰牢ਾ戼㹲琊杧瑴捧慴⁣捧瑣慧瑡慡朠杴瑡慡慴⁡捧杧瑡慧瑡朠捧条慡瑡⁴杣瑡慧慴条††㐠㐷㰰牢ਾ戼㹲挊杴捴慡捡⁡慣捡慣捣瑡挠慡捡条慧⁴瑴捴捧瑣捧琠杧杧慣慡⁣慣捧瑧杧捡††㐠〸㰰牢ਾ戼㹲挊捧瑴捧杴⁣慡瑣瑣瑣慣朠杧捣条捧⁧瑧慧条杧慣愠捴条瑣瑧⁴捧捣瑧瑣慣††㐠㘸㰰牢ਾ戼㹲挊杴瑧慧慡⁡慧慡慡捣捡挠瑣杧杣捣⁣慡慴杣慣慡挠杣捣捴捴⁣捣捧捧瑧杴††㐠㈹㰰牢ਾ戼㹲朊捣慧瑴慣⁴慴瑡捧条瑣朠捧捡慧慣⁧瑧瑴捣杣捡琠杧慡条杣⁧捧条杴条杣††㐠㠹㰰牢ਾ戼㹲挊慡杣慣瑡⁴慡杴慴条瑴愠捧捧慧瑡⁴捧慡捧杴捧挠慧杣杣瑣⁧杧瑣捡瑧瑣†���㔠㐰㰰牢ਾ戼㹲琊捧杴捧瑧⁴杣杧条慣慧愠慧捧瑡捡⁡捴杴慧条慣愠条捣条慧⁡条杣捧瑣瑡††㔠〱㰰牢ਾ戼㹲朊慧捧杴杴⁣杧慣捧捧捴愠瑧条捧慡⁴瑴瑴慣慡瑡愠瑴瑧慴条⁣瑣瑴捴杴条††㔠㘱㰰牢ਾ戼㹲挊瑡杧慴瑴⁴瑴慣杴瑧瑡琠捡慣瑡慴⁧慣杧慡慡慴愠捧慣瑴慧⁡慴慴慡条瑡††㔠㈲㰰牢ਾ戼㹲愊慡慡杴捴⁴杴瑴慴慣瑡愠慧瑧杧杧⁧杧瑧慣捧瑣朠捣捧瑣杴⁧捧杣杧杴瑡††㔠㠲㰰牢ਾ戼㹲朊捴瑧捡瑴⁧捣杣捣捧慧愠瑣杣瑧慴⁣杣捴慣捧捣愠捧捧慧捣⁡捧捴杣捧慡††㔠㐳㰰牢ਾ戼㹲挊捧瑣杣杣⁣捡捣捧瑴捧朠捧捧瑴捧⁧慣杴瑧杣慡挠慣瑣杧捣⁴瑣慧杣捧慣††㔠〴㰰牢ਾ戼㹲朊捡瑡条捣⁧慣慣条瑧瑡挠慴杴慧条⁣瑣杴捣杧瑴琠杴捣杧杧⁴杣瑡捣条捣††㔠㘴㰰牢ਾ戼㹲愊慣慣捧杣⁣杴瑧捧条慣朠捧杧捧杧⁴瑴杣瑣瑧捣愠捧捧捣捧⁡捣捴瑧捣瑡††㔠㈵㰰牢ਾ戼㹲朊瑣慧杴杣⁣捡瑡捧杴捧挠捧慣捣慣⁴慧杣捧瑣捧朠杣瑡慣条⁧杧瑴慣杧捧††㔠㠵㰰牢ਾ戼㹲挊捡瑧捡条⁧杣捣杣捴杣挠瑣杣捴捧⁴杧杣慴瑣捣朠捡条慣捧⁣慧慡捣捣杴††㔠㐶㰰牢ਾ戼㹲挊杣瑣杴杣⁧捣瑡捴杴杧挠慧杴瑡杧⁡慴捣瑴捣慡愠杧杣瑣杣⁡杴慣瑧捣杴††㔠〷㰰牢ਾ戼㹲琊瑡瑧捧瑴⁧条杣捣捣捡挠捡慴捴慧⁣瑣瑣捧捣杣愠瑴捴瑣瑴⁧捣条杣捣杣††㔠㘷㰰牢ਾ戼㹲愊慴捧慴捣⁴瑴慧捣捡瑡朠捧瑡捴条⁣杧杴捡杧捣琠捣慣瑣杴⁧瑧捴慣杧慡††㔠㈸㰰牢ਾ戼㹲挊条捣杧条⁣杴捣瑧捣捧挠瑴杣瑧瑣⁴杧瑧捴杣杧挠慣条慣瑣⁡杧捣瑡慴杧††㔠㠸㰰牢ਾ戼㹲挊捣条捣瑡⁧捧慣捣条捣挠瑴捧条慧⁴捧捧条瑡慣琠慣捧捧捣⁡捧杧瑣捣杧††㔠㐹㰰牢ਾ戼㹲朊捣捧杴慡⁣捴慧捴杣瑣琠捧杣捴捧⁣瑧条捴瑡捡朠捴捡瑧捣⁡捧瑴捧杴杣††㘠〰㰰牢ਾ戼㹲挊瑴捧捧捴⁧捣捣捧瑴慧朠杧慣杣慧⁡慣杧捣杧杧朠捣条捡条⁴捧捧杣杧捴††㘠㘰㰰牢ਾ戼㹲朊杴捣杧捡⁧杴捧杴条捧琠瑧捧瑴瑧⁴瑣慴杧瑣捴愠捣捡杧杧⁣捡捣捣瑴捧††㘠㈱㰰牢ਾ戼㹲琊瑣杴杣瑣⁧捣捴捴慣捧愠杣捧杧捧⁴杴条慣捣捣朠捣瑧慣杴⁣杣捣杴慡捣††㘠㠱㰰牢ਾ戼㹲愊捣慧捴条⁣慧捡杧杴杣挠慣慴瑧杴⁧捣瑴捧捴捡愠捣慧条杣⁧捡慧条慡捣††㘠㐲㰰牢ਾ戼㹲朊捧捧杴瑧⁣瑧杣捴慣慣挠捣慣瑴捣⁴杣捧瑣杣捧朠瑣杧捴瑡⁧瑣杣捡条瑧††㘠〳㰰牢ਾ戼㹲愊杧捡杴捣⁡捧杧瑡瑧慴琠杣捡慣瑧⁡捣慧捧杴捣挠杣捧杴捧⁣杴瑣捧杴瑧††㘠㘳㰰牢ਾ戼㹲挊捧瑣捧捧⁣慣捴瑡杧捣朠杣捣瑣杴⁣杴捧瑡杧杴挠条慧捡捡⁧瑡条条慣捣††㘠㈴㰰牢ਾ戼㹲挊杧慴捴杧⁣杧杣瑡杧捣琠捣瑡捧慧⁣杣瑡慧捣杴朠捧慣杴杧⁧捣捧杴捧瑧††㘠㠴㰰牢ਾ戼㹲琊瑴瑣捴瑣⁣慧杴杴慧捡挠杧杣慣捧⁧杴捴慣捧捡挠瑡慣杧杣⁧杣捧捣捴杧††㘠㐵㰰牢ਾ戼㹲挊杧杣杣瑣⁴慧杧捣瑧杣愠捡慣瑣捣⁧杧捧慣杴瑡朠瑴杧捧条⁧瑣捧杣瑡慣††㘠〶㰰牢ਾ戼㹲朊杣捧杴慧⁴慣捧条捧杣琠慣捧慣杣⁧瑣杴捣瑧捴挠捴杧杣瑣⁧条瑧捧捧捣††㘠㘶㰰牢ਾ戼㹲挊慡杧捧瑧⁧慣杧杣瑧慧琠慧瑡杧杣⁧杴杧杣杧捴琠捴杧杣杧⁣条瑧条瑡慣††㘠㈷㰰牢ਾ戼㹲挊杣杧捣杧⁴杧捧条瑴杣挠捣捡瑣捣⁡捧条瑡捣杧挠捣捧瑣捧⁡瑡瑣瑧捧杧††㘠㠷㰰牢ਾ戼㹲挊慣瑧杴慣⁧杧捣条慣杴朠瑡瑴捡杣⁧慣捣捡杣杧挠慧慣捣条⁣捧捣杣捡杣††㘠㐸㰰牢ਾ戼㹲琊捡杣捧慣⁣慣杴瑴杧捧愠慡捡瑧条⁴捣条杣瑧杧挠杧杣瑣捧⁴捧慧捡捧瑣††㘠〹㰰牢ਾ戼㹲挊慣慧瑡瑡⁴慧慴杧瑣慴琠杧瑧条捣⁡瑴慧瑴捧瑣挠瑣瑴捧条⁧慣瑧杴瑧杧††㘠㘹㰰牢ਾ戼㹲琊慴杧杣瑣⁧捧杧杧捴捡琠捡���捣捧⁣瑣捧捧杣瑣挠杴条瑴瑣⁴捣条捧捡捴††㜠㈰㰰牢ਾ戼㹲朊杣慣捧捧⁣捴瑧瑡捴瑧挠瑧杣瑧慣⁧捣条慡瑣杴挠捧杴捡捧⁡捴捣瑴杴捧††㜠㠰㰰牢ਾ戼㹲挊瑴慣杴杣⁣捴杧慣慴捴朠杣瑣杴捧⁧慴慣捧瑧慣朠杧瑣杧捣⁡捧条瑧杣捣††㜠㐱㰰牢ਾ戼㹲朊瑧瑣捧瑴⁧捴瑣瑴杴瑧挠瑴捴瑡瑡⁣条捴捡杣条愠慡瑣杴捣⁧杧捧杣慡条††㜠〲㰰牢ਾ戼㹲朊瑣杴捴瑴⁣捧杧慡慣条朠捡慡杧杴⁣条捣瑧慣条朠瑴慡杧瑣⁧捧慣慴捴条††㜠㘲㰰牢ਾ戼㹲挊慧瑣慧慡⁡捧杧捣条捣琠杣捧瑣杴⁴瑴慧杣慴慴愠捣慡条捣⁡捣杧捧慡捣††㜠㈳㰰牢ਾ戼㹲愊瑡条捣瑣⁴瑧慣瑣瑴杴愠捴条瑧条⁡捣慧捣瑣慧愠捧捧瑴瑴⁴捴瑧瑡捴慣††㜠㠳㰰牢ਾ戼㹲琊慡慡捣捣⁣瑴瑣瑧捧瑧朠条慴瑣慣⁴条慴慴捡条朠杣杴条慴⁣慣捡捧慡捧††㜠㐴㰰牢ਾ戼㹲愊瑣捡瑡捧⁴慧慡捴杴捧挠杣捣捣杴⁴捣瑡捧瑣杣挠杴捧杧杧⁴捧杣瑧捧捣††㜠〵㰰牢ਾ戼㹲朊杴捣条瑣⁣杧捣杣杣慣愠捧杴慧杣⁣杴杧慣慧捣挠瑡慧捣瑴⁧瑣慧杣瑧捧††㜠㘵㰰牢ਾ戼㹲朊瑣杣瑡瑧⁡瑡捣捧瑴杣琠杧捣杧捧⁴杴杣瑣瑣捧挠条杣瑣杧⁧瑣杧捣捴杧††㜠㈶㰰牢ਾ戼㹲挊慣杴捧瑣⁴捧杣瑡瑴捣琠杣捧捡杴⁣杧捣捣杧瑣朠捧慣捧瑴⁣杴杣杣捧慧††㜠㠶㰰牢ਾ戼㹲琊慡条捴捧⁡瑣杴瑣慧杧琠慣杴捡杣⁡条杣瑣杴捡挠条捣杣捧⁣瑡瑣杣瑣捧††㜠㐷㰰牢ਾ戼㹲朊瑧捡捴瑧⁣慣捧捧杣杴挠捧杣瑧杧⁣杧瑣慡捧杴挠杣瑣杣杧⁣条瑴杣条捧††㜠〸㰰牢ਾ戼㹲琊杧捣条捣⁴捧杧捧瑣捴琠捣杴瑣捧⁣捧杴杧捣杴挠捴慧捴杴⁣杴捧慣捧瑣††㜠㘸㰰牢ਾ戼㹲朊瑣捧捡慣⁧杣捣杧捧慣朠杣瑧杧杣⁧捴瑴捧捣瑴朠慧瑴慣杣⁣条慣捧捡捣††㜠㈹㰰牢ਾ戼㹲愊杣捧杴瑡⁡捡杣捧捧杧朠杴瑧瑧捧⁴杴捴瑣杴杣朠瑴杧杴慡⁧捣杣捣慡捧††㜠㠹㰰牢ਾ戼㹲朊捧慣慴瑧⁧捧杧瑣瑧杣朠杣瑣杧捣⁧杧捴杧杣捴朠慴瑣杣瑣⁧捧慣捧瑧捣††㠠㐰㰰牢ਾ戼㹲朊杧慣瑡瑣⁧捣捣杣慡瑧琠慣捣捧瑣⁧杣捧瑧杣捧挠捡瑣杴捡⁣慣杴捣杴瑡††㠠〱㰰牢ਾ戼㹲愊瑧捴瑴杣⁧捧杴瑧瑴捣愠瑣捡慣杧⁧慣杧瑣捣杣朠捣瑣杣捧⁴瑴慣杴捴瑡††㠠㘱㰰牢ਾ戼㹲挊慣杧捴慡⁡瑣杣瑣慧杧琠杣捴慣捣⁡捧捡慣慧捣愠杴捣捧捴⁣杴瑣杣捧杧††㠠㈲㰰牢ਾ戼㹲朊捣杴瑡瑡⁡慣杣捴瑡杴挠捣杴杧慣⁴捴瑡捣捧瑴朠条捣瑡杧⁣瑧瑧捴杴慧††㠠㠲㰰牢ਾ戼㹲朊慣瑣捴杧⁣杧瑣慧捣瑡琠捣杣瑧捴⁡捴瑡瑣杧捣朠瑧杧瑧捧⁧捴捣杴捡捧††㠠㐳㰰牢ਾ戼㹲挊慧慴捴慧⁡捧捧捴捡条挠捣瑡杧捣⁴杴条瑣瑧杣朠捣慴杴捧⁣杴慣慡瑧捣††㠠〴㰰牢ਾ戼㹲琊瑧杣瑴瑣⁴慣捴杧捧慣挠慣条杣慣⁧捣条瑡杣条挠杣捴瑣杣⁧瑴瑧慣瑧杧††㠠㘴㰰牢ਾ戼㹲挊瑧慣杧捴⁧条慣条条慣愠杣瑡捧慧⁴慣捧条慣捣愠捣瑧条捧⁡捴瑡杧慡捧††㠠㈵㰰牢ਾ戼㹲挊条慣捴捡⁧瑧慴捧慣慴朠瑣捴慣瑧⁧捣捡捣捣捧朠捡捧捧捴⁣杧捧捧捴杴††㠠㠵㰰牢ਾ戼㹲挊捧杧杣瑣⁧瑣慣捣捴杧挠杧瑣捡瑣⁣捣捧慡瑣瑣琠杴捧慣捧⁴捣捡捣瑡捧††㠠㐶㰰牢ਾ戼㹲挊捧捣瑣瑧⁣杴捧捧杴杧挠瑴捴条捣⁡瑣捣捧杣捣琠捧捧瑣杣⁣杴捧瑣捧瑴††㠠〷㰰牢ਾ戼㹲朊瑧瑣杧瑣⁣瑡慧捣杴捣朠杧瑣捴瑧⁣杧捣条杴捴朠捣瑡捧捴⁴杧捧慣捧杧††㠠㘷㰰牢ਾ戼㹲琊捴慧捴杴⁣捴杣瑣慡瑣挠瑧杴瑡捧⁣捴杴慧瑴捴琠捴捡捴杴⁴杣瑡杴杣瑴††㠠㈸㰰牢ਾ戼㹲挊瑡杧捴慴⁴杴捣捴捣杧琠瑡捴瑣瑧⁡条捴慧杴瑡挠杴杧杣瑴⁧捧杧杴捴慧††㠠㠸㰰牢ਾ戼㹲琊瑧捴条杧⁣慣杣捴杴捣挠杧捴杧杴⁣杧瑡捧捣杣朠捣瑴捣瑡⁣捴慣捣捡瑧†���㠠㐹㰰牢ਾ戼㹲琊杣捧捣慣⁧瑧慧捡捡杣朠捧条捧捧⁴杣瑡捧捣杴挠捧瑣慣条⁴瑧捴杴杴瑧††㤠〰㰰牢ਾ戼㹲挊慡杴杣杧⁣瑧杣杴捧慣朠捣杣瑣瑣⁡瑡捧捣杧瑴朠捧瑡杧捴⁧捧捣瑡捧瑣††㤠㘰㰰牢ਾ戼㹲挊捧杧瑧瑣⁧瑣慣条捣瑡朠捣瑴杧捧⁴杴条杣瑣捴朠瑧瑣捴杴⁴捧捣杣捣瑣††㤠㈱㰰牢ਾ戼㹲琊瑣捣杧杧⁴瑣杴捣瑧杴琠捡杣瑣杴⁡捡慣瑣慧捧朠捧杧捧杣⁣捴慧杴捣瑧††㤠㠱㰰牢ਾ戼㹲挊瑡杴瑡捣⁧瑣杣慧慧捴愠捴条瑧杧⁣条杴杣杧瑴挠捴捧杣捣⁡捣杧慣杴慧††㤠㐲㰰牢ਾ戼㹲琊杧捣条杣⁴瑡捡杧慣杧挠捧捴杧慣⁣杣瑧慣杧杴挠杴杧杣慡⁣捴杧捡捧慣††㤠〳㰰牢ਾ戼㹲朊杣捣瑴瑣⁧瑣杧捴慧杧朠捴条瑣杣⁡捣杧慣杧捧愠慡瑴杣捡⁣捴瑣杴慡慣††㤠㘳㰰牢ਾ戼㹲朊捣捧捣瑡⁴杧杣杣瑴慣琠捡条瑧杣⁧慣捧瑡捣慣朠慴瑧杣捧⁧杧捣捧捴慧††㤠㈴㰰牢ਾ戼㹲挊慧捡捴杣⁧慣杴杴捣杣朠瑡捴杧杣⁴捧慡慧瑣捴愠捴慣杴捴⁧杣杧慣慴瑣††㤠㠴㰰牢ਾ戼㹲琊捧瑣捴捧⁧瑣杧瑡瑧条琠杣捧瑣杴⁧捣瑣杧捣慧琠杴捧杣捣⁣慧捣杴瑣捧††㤠㐵㰰牢ਾ戼㹲挊杧瑴瑴杣⁣杣慴条瑧慧琠慡瑡杣捣⁡杴瑣捧瑣杣挠杴瑴捧瑴⁴杴瑣瑴捴杧††㤠〶㰰牢ਾ戼㹲挊捴慣杴慣⁡杴捧捣捴杧愠慧捧捧捡⁣捧捣慧条杧琠杧捣瑧慴⁧捧慣瑧瑴瑣††㤠㘶㰰牢ਾ戼㹲挊慧条条慡⁡捣杧慴条杴挠捧捣捴捣⁣慴慣慡瑧条朠瑧杣杧瑡⁴捧杣捣捧杴††㤠㈷㰰牢ਾ戼㹲琊捧瑣捣瑡⁧瑡条捣慴杣愠慧慣捧捡⁡瑴慡慣瑡杧朠瑧瑧慣条⁡杴瑧慴条杧††㤠㠷㰰牢ਾ戼㹲朊条慣捡慡⁧捧杧杣慧捴朠捧杴捧慣⁡捧捴慧条慡挠慡杣条杣⁣慧瑡慣瑡捧††㤠㐸㰰牢ਾ戼㹲挊慧慡瑴慣⁧杣杧条杣杧挠慡杧慧捡⁡捧条慣条条挠捧慡慧捡⁧慡捡慡杧杣††㤠〹㰰牢ਾ戼㹲挊慡杧杴瑣⁧瑧杧杧捧慣琠慧瑴瑴杧⁣慣条瑧慧捡愠捧条杣条⁴杧捣杧条慧††㤠㘹㰰牢ਾ戼㹲琊杣捧捴瑡⁧捧杧慣瑡杧愠杴杣慴捣⁴杴慡杣杣捡挠捡慧捣捧⁧捣瑴瑧捴杧††〱㈰㰰牢ਾ戼㹲琊瑣捧杣捣⁡杣捣条慡杧愠杴条捣杧⁧瑣慧瑡慧捴朠捡杣条捡⁡杧捣瑣捧杧††〱㠰㰰牢ਾ戼㹲朊捧杴慣慣⁣捧捧捣捣捡挠瑣捴杧瑧⁡杧杧慧慡杧挠杣瑣慡条⁣杧瑣慡慡捧††〱㐱㰰牢ਾ戼㹲朊瑣捣条杣⁴瑡瑴瑣捧杧朠瑧瑴杧杴⁴杧杧瑴慴捧朠杧瑣瑴捧⁣杣捣瑴捴捣††〱〲㰰牢ਾ戼㹲挊瑣捧杣杣⁣条杣瑧杧杧挠杧杴杴慴⁧捣慴捧捧条挠慧瑡条捡⁣条瑣瑡捣杧††〱㘲㰰牢ਾ戼㹲挊瑣瑣杧捣⁧杧慣慴瑴杧朠慣条杧慣⁧慣捧捧捣慣挠慡杧捧捧⁴慧慴捡杣杣††〱㈳㰰牢ਾ戼㹲挊瑣条杴慧⁴慴瑴瑣慴慧琠慡捴瑡杧⁡杴慧瑴瑴捴挠慡慣捣捣⁧捣条捣捣杣††〱㠳㰰牢ਾ戼㹲挊捣瑣捧杴⁧瑧瑴捧条瑧琠杴杧杧杣⁴慧慣瑧慴瑴朠慣杧杧瑴⁣瑧慧慣瑧慴††〱㐴㰰牢ਾ戼㹲琊杴慣杧杧⁧捧瑧慧慣瑧琠瑡杴慣杧⁧瑧捴瑧慧慣朠瑴条慴杣⁧慧瑧慧杣杧††〱〵㰰牢ਾ戼㹲挊捡杴捧杴⁧慣瑡瑧瑣条挠慡杣捧条⁧慣瑴捴杧瑣朠条杧慴慡⁡慧捡瑴捴杣††〱㘵㰰牢ਾ戼㹲挊慴条杣瑡⁡慧瑣瑧瑡瑧愠慡慣慣瑧⁡瑴捧慡杧捡朠杣慧捡瑡⁧捣捴瑡瑧杧††〱㈶㰰牢ਾ戼㹲挊杧捣条慧⁣杧捣条捣杧朠瑡杣杧瑡⁡瑣杧捴瑧慴挠慣慧捧慣⁣杣捡捣慧捧††〱㠶㰰牢ਾ戼㹲愊慡捣瑣捴⁴瑣瑡慣慧捴朠瑴慧杣条⁴瑡慴捣杣捧愠瑴杣瑣捧⁧瑣慴杴捧条††〱㐷㰰牢ਾ戼㹲愊捧条杧慡⁡杧慡瑴捧杣朠捧慴杴杴⁣慡杣杧慡瑴琠慧条慡瑴⁴瑣捣慡杴杣††〱〸㰰牢ਾ戼㹲朊捧杧瑣杧⁡捧瑡杧瑣瑴挠慴杣杧瑴⁣捧杴杣条捴琠杴捣捡捧⁣慧捧捡瑣杧††〱㘸㰰牢ਾ戼㹲琊杣瑣瑴慣⁧慡瑡慣瑡瑣愠慡���瑡瑡⁡杴条慴慡瑣琠杧捴杴捡⁡瑧慴捣慡杴††〱㈹㰰牢ਾ戼㹲挊瑴慡捴条⁴慧杧慣捣慴琠瑣慣捧慧⁴瑣瑧瑣瑡瑴挠瑧捴瑡捣⁡慴瑧杴捣杴††〱㠹㰰牢ਾ戼㹲愊瑣捣捣瑧⁣瑧瑧条瑡慡挠慴杣瑡捡⁧杧条杧瑣慴挠慣捴杴捧⁣捣条杴瑣捧††ㄱ㐰㰰牢ਾ戼㹲愊瑡慧慴捣⁧杣条捡捣捡朠瑣慣捣杧⁣捴慣慧瑴慴琠慣捧慡慴⁡捡慣捧慣捧††ㄱ〱㰰牢ਾ戼㹲挊杧慡杧捧⁣慧捧捧条慡朠杴瑧捣杴⁣慡瑣瑴瑡捣朠捣捴慣捴⁣条捴慴瑴慡††ㄱ㘱㰰牢ਾ戼㹲琊杴瑴捧杣⁧慧条瑣条条琠慡瑧条瑴⁣捧慣瑧慴瑡愠瑧瑴捧捧⁡捡瑧杴瑴捧††ㄱ㈲㰰牢ਾ戼㹲挊瑡杴瑣捡⁡杧慣捴瑧杧琠瑧慣杣瑣⁣瑧杣瑴杴瑧愠杴捧瑴慣⁴捴条瑣捣杧††ㄱ㠲㰰牢ਾ戼㹲琊捴捣慡杣⁡捴慡杧杣条琠慴慣杴瑡⁣捣捣瑡瑧杴琠捧慡慡慡⁧杣瑧慴捧捴††ㄱ㐳㰰牢ਾ戼㹲挊瑴杣瑧捣⁴捣慧捴瑧杴琠慣慧条慴⁡瑧杴捧杣慣朠杴瑴瑡慣⁣捴瑡杧瑴瑡††ㄱ〴㰰牢ਾ戼㹲朊捧条慣瑣⁧慣慴瑡捴捴琠慴瑣瑧慣⁴捧慣捴杣慴愠慧杴瑣瑴⁴瑣瑧慧瑣杧††ㄱ㘴㰰牢ਾ戼㹲琊慧瑧捡捴⁡捡慣条捴瑡琠瑣慧慧瑡⁡瑧瑧瑡捧杧挠慧捣慧瑧⁴捧捴瑴捧捣††ㄱ㈵㰰牢ਾ戼㹲朊捧瑧慣捡⁡杣杧瑡慡慴挠杣杣捣捡⁡慴捧条慡瑣琠慴慡条杴⁣捴瑡慣瑴杧††ㄱ㠵㰰牢ਾ戼㹲愊慡捡瑧捴⁴捴杧杧杣慡愠捡捴捴慡⁧慧捴瑴捡杣挠杴瑴慧慧⁴捣条瑴杣瑡††ㄱ㐶㰰牢ਾ戼㹲朊慴捡捣捡⁴杣杴慣捣慣愠瑣慧捴瑴⁣条慣捴瑴瑴愠瑣瑴慣捣⁡捧瑧瑴瑣杧††ㄱ〷㰰牢ਾ戼㹲朊杴条慣慡⁡捡条慧条捧愠慡瑡捧杣⁣慡慡慡杧慧愠慴条杧杣⁡慣杣慧慡杴††ㄱ㘷㰰牢ਾ戼㹲琊杴慡慴瑣⁣瑡捡捴瑴捣琠瑴瑴慣瑡⁡瑴瑡杴慡捧愠瑴慴捴条⁧瑧慴瑴瑧瑣††ㄱ㈸㰰牢ਾ戼㹲挊瑡慧捧杧⁡慴慣慴瑴杴愠瑡瑧瑡瑴⁡慧慡慡慴慡挠慡慡慧瑧⁴杴慴慧慡杣††ㄱ㠸㰰牢ਾ戼㹲挊慡慡条捧⁣瑡捣瑧慣杧愠杴捧瑣捴⁴捧瑴慡瑴杴愠杴捣杴捧⁡瑧瑴瑡杧杣††ㄱ㐹㰰牢ਾ戼㹲朊捧瑧捣杴⁣捣捧慣捣瑣挠杣杧捣瑧⁴捧瑴杣慣捡朠瑴慣慡捴⁣捧捴捣杧杣††㈱〰㰰牢ਾ戼㹲朊瑡瑴瑧捣⁴捡捴条慧慧朠杣瑴慣捣⁧捡慡捡慡慣朠瑡慡慡杣⁡⁡††††††㈱㔰㰱牢ਾ戼㹲㰊牢ਾ氦㭴ㄲ☰瑧※ㄠ㤱戼㹲☊瑬㈻ㄱ朦㭴†㌲戼㹲☊瑬㈻㈱朦㭴†乄㱁牢ਾ氦㭴ㄲ☳瑧※䄠瑲晩捩慩⁬敓畱湥散戼㹲㰊牢ਾ氦㭴㈲☰瑧㰻牢ਾ氦㭴㈲☳瑧※倠剃瀠楲敭㱲牢ਾ戼㹲☊瑬㐻〰朦㭴†ㄱ㰹牢ਾ瑴慣瑴瑡杣朠瑣杣瑡瑣⁧瑧⁧†††††††††††††††††††††††㌲戼㹲㰊牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〱朦㭴†㈱㰰牢ਾ氦㭴ㄲ☱瑧※㈠㰵牢ਾ氦㭴ㄲ☲瑧※䐠䅎戼㹲☊瑬㈻㌱朦㭴†牁楴楦楣污匠煥敵据㱥牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〲朦㭴戼㹲☊瑬㈻㌲朦㭴†䍐⁒牰浩牥戼㹲㰊牢ਾ氦㭴〴☰瑧※ㄠ〲戼㹲挊慡慣杧杴⁡慴瑡杣杴慧琠捣条††††††††††††††††††††††㈠㰵牢ਾ戼㹲㰊牢ਾ氦㭴ㄲ☰瑧※ㄠㄲ戼㹲☊瑬㈻ㄱ朦㭴†ㄱ㐳㰸牢ਾ氦㭴ㄲ☲瑧※䐠䅎戼㹲☊瑬㈻㌱朦㭴†牁楴楦楣污匠煥敵据㱥牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〲朦㭴戼㹲☊瑬㈻㌲朦㭴†汰獡業⁤䱰批䱁㠲挠湯慴湩湩⁧瑯䉳⁁灯牥湯戼㹲㰊牢ਾ氦㭴〴☰瑧※ㄠㄲ戼㹲愊杧捣慣瑧⁣瑴捴慧瑣慧朠捣瑴捴瑧⁴瑴瑡瑴慧杴挠瑣杧慣瑧⁴捣瑣捡捴捴†††㘠㰰牢ਾ戼㹲朊慣杴杧慧⁧捡捣慣慣瑣愠捣瑡杣捧⁧瑣捡杧杣瑴琠慣瑣捴杴⁡瑧捴杧慣杴†††㈱㰰牢ਾ戼㹲朊杧捴条瑧⁧杧捡慣捣捧朠瑣捡杴捣⁧捣条捧慡瑡琠瑣瑧瑴慴⁴慣慧捣捧瑴†††㠱㰰牢ਾ戼㹲挊杴杣瑴瑣⁧瑡瑴慡捴杴琠瑡慣杧瑣⁧慡慡捴瑴瑣挠捴瑡捣捧⁣慡慡慣捧慣†††㐲㰰牢ਾ戼㹲愊���瑴捧瑡⁧捣瑧慴瑴慧琠杧慡杴杧⁡条慡捧慡杴朠捴捡慡慴⁡捡杴慧杧瑴†††〳㰰牢ਾ戼㹲愊杴杧慴杴⁴瑴瑴慴捧捣琠慡杴瑣捣⁡瑡杣捣瑴慧琠杴慴捴慧⁡杴瑡捧条捴†††㘳㰰牢ਾ戼㹲琊瑣慡慡瑴⁧慴捴杣慴慡愠慧捣捴杴⁣捡杣捣慧杣朠瑧瑣杧瑡⁴瑡杧捧慡慴†††㈴㰰牢ਾ戼㹲愊捴捡条捴⁧条捣条捡慴挠捣瑣杧条⁧慴慡瑣捣杧朠捧杴慧捧⁣瑡慡条瑡慴†††㠴㰰牢ਾ戼㹲朊慧瑡捴瑡⁴慡慧慡杴慴愠慣瑡杣捡⁧瑴瑣条瑡慣琠捡慣杣捣⁣捣捡杴捴杣†††㐵㰰牢ਾ戼㹲朊慣杧瑧慧⁡慣慧杧条捡琠瑴捣捣杴⁴慴慣瑧瑧慣朠杴捡慡慡⁣慡瑣瑴瑴杧†††〶㰰牢ਾ戼㹲挊瑡杣瑧捧⁡杧杴瑧慧捧挠瑡杧杣捧⁣慣慧捴瑡杴愠慡瑴瑣瑴⁣捣杣慧杧慡†††㘶㰰牢ਾ戼㹲愊捴杣捡瑧⁡捣瑣慴捣杣琠瑣杧瑣捴⁣慣杧慴瑡瑴愠杧慴捣瑧⁴慡慧条慧杧†††㈷㰰牢ਾ戼㹲愊捴慣慴杴⁡捴瑴慧杴慧愠杣瑣杧杣⁧慡瑡慣慡捣朠慣捴捣慧⁴慣杧捴瑧杣†††㠷㰰牢ਾ戼㹲琊捧瑣慧慣⁡慴瑴瑣捧慡朠慧瑣捡条⁣慴瑣杧慣捡挠捧慡瑧慧⁴杧杴慣瑴杧†††㐸㰰牢ਾ戼㹲挊瑡杴瑡瑡⁣条杧杣瑣慣愠杴瑧杧条⁣瑴慧杣慣瑣朠捧慡慡捣⁴慴捴捧瑴捣†††〹㰰牢ਾ戼㹲挊瑧慴捧杧⁧杣杴慣杴杧朠杣慧捧捧⁣瑧慧慣捴慡琠杧慴慡捡⁡慣慴捴瑧捴†††㘹㰰牢ਾ戼㹲愊捴杴捣杧⁡杴杣瑡杴杣挠瑧慧慴瑴⁡捧瑧捧慡瑣朠慣慴慣瑧⁣瑡杣瑣慣瑧††ㄠ㈰㰰牢ਾ戼㹲愊捴捣杧杣⁣杧条瑣杧条朠杣慡条杧⁡杴捧瑴瑴捧朠瑣捧瑡慴⁴杣捴条捧捴††ㄠ㠰㰰牢ਾ戼㹲挊捧条慣杴⁡条捡捧瑡慴愠杴捡瑡慴⁧杣慣捡瑧瑡琠捡捴条瑡⁣杴捧慣慣慡††ㄠ㐱㰰牢ਾ戼㹲琊杧杣瑴捡⁡捧条杧慡条琠瑧瑧杴捴⁧条瑡慣慡捣朠条条瑧捡⁣条慴慡杧杴††ㄠ〲㰰牢ਾ戼㹲愊杧慣瑡杴⁣条瑣瑴慴杴挠条慧条瑣⁣捣瑴慴捴杧朠杣慡杣捣⁣瑧瑡瑴瑣杧††ㄠ㘲㰰牢ਾ戼㹲朊杣瑡慧瑴⁴慡捣慧杴慡琠瑣杧瑣捴⁧慣瑧杣瑴慡挠杣捡杴杧⁣杧慡杴捴条††ㄠ㈳㰰牢ਾ戼㹲琊慡慡瑡杴⁧慣慣杧杴慣愠瑣慣杧慣⁴慣杴捧慧瑣朠捧杧瑧瑧⁧捣杧瑡瑧瑣††ㄠ㠳㰰牢ਾ戼㹲朊慧捧杴捧⁴杴慡瑡慧慴愠捣捡杣慣⁴慴慣捡慡慡愠条条慡慡⁴慡慣杧条杴††ㄠ㐴㰰牢ਾ戼㹲愊杴捡慴杴⁡瑧杣瑴慴瑧挠瑧条慴捴⁴慡捣杧瑡杴挠捡慣捣条⁡杣条慣杣捣††ㄠ〵㰰牢ਾ戼㹲朊捣条杴捣⁧瑧杧捣瑴捧挠瑧杴捧瑡⁡瑣杧杧捧捡琠慧慡捧杣⁣条捧杧捡杴††ㄠ㘵㰰牢ਾ戼㹲琊杧瑴杴捧⁴杧条杴瑧慧愠捡条杧慡⁴慧杧瑡慣捧挠捧慴慡慡⁡杧杴慡慡慡††ㄠ㈶㰰牢ਾ戼㹲朊瑧慡慣瑴⁡杣杴杧捣捴琠瑴慴捡瑣⁣条杣慡慣杧愠捣瑴慧杣⁡瑡捡慴慣捡††ㄠ㠶㰰牢ਾ戼㹲挊慡瑴瑣捣⁡瑡捧杣瑴瑣挠杴捧捣捧⁴瑴捴瑡慴捴朠捧捴慧捴⁴杧杴慣瑡瑴††ㄠ㐷㰰牢ਾ戼㹲挊条杣捴瑣⁧捣杴杧捡杧挠慴捴慴杣⁣瑧慡瑡捧瑧琠捧杴捧条⁡慴慡瑴捡杴††ㄠ〸㰰牢ਾ戼㹲挊杣瑣瑧杴⁣慡慧杣瑡慧挠瑡慴捴杴⁧瑡捣捡慧瑴愠捴捡瑣瑧⁴捧慣瑴杴杣††ㄠ㘸㰰牢ਾ戼㹲挊瑡慧瑡慴⁣捧慡捡杧杧愠瑧慧瑡慡⁴杣慣瑴杧瑴琠瑣瑴瑣捧⁡慴瑴捣瑴捴††ㄠ㈹㰰牢ਾ戼㹲挊杣捡捡杣⁧慡瑡瑣捴慡挠捧捧杴捣⁧捡瑡瑡慧慣挠瑣杴瑣杴⁡捡条瑣瑴瑧††ㄠ㠹㰰牢ਾ戼㹲朊瑡慴杴瑡⁴杴瑣杧瑧瑴挠慣慧慣慧⁡慡杣瑡杣捴琠杧杣瑴捣⁴杧瑡杴捴瑴††㈠㐰㰰牢ਾ戼㹲琊瑣慡捣杴⁡捣杣杣捴捡朠捡捡瑧条⁣捧慡慡条捣愠慴慣捧瑣⁧杧捧慡条慣††㈠〱㰰牢ਾ戼㹲琊瑴杣慡慣⁧慡瑧瑣捡捣朠瑡杣捧瑡⁴慧捡杣慡条愠慡慴捧慣⁡捡条捧杴捣††㈠㘱㰰牢ਾ戼㹲朊杧捣捡杴⁣杣捣慡慡瑣朠捧捧慡瑣⁴慡条杣慧捡���慧慡慡杣⁴捡慡慡慴捴††㈠㈲㰰牢ਾ戼㹲琊瑴捴杴捴⁧慡杣捧杴慧琠慴瑴捣慡⁡杧瑴杴捣条愠捧瑧瑴捴⁴杣捣慴杴慡††㈠㠲㰰牢ਾ戼㹲朊杣瑴捧杴⁧慡慡瑡瑡捣朠慣捧瑡慣⁴杧慴慡瑡捴朠瑴瑡捡捣⁡慧瑴捧捡慣††㈠㐳㰰牢ਾ戼㹲愊杣捴捧瑧⁧瑧慧杴杴慣愠捧瑣瑡慣⁧慧慴瑴杣捴愠捴条瑣杣⁡慡瑡慧条瑣††㈠〴㰰牢ਾ戼㹲朊慧杣慡瑴⁡瑡杧慴慡慴挠杧捧慡瑴⁡杧瑣杧捡捧挠捧瑴慴瑴⁡瑴杴慡捴条††㈠㘴㰰牢ਾ戼㹲挊瑡瑴杴捡⁣瑧慡瑡慴瑣朠瑡慧慡瑡⁡瑴捣捧慴瑣挠杴捡瑧杧⁧瑣慴瑧慧杣††㈠㈵㰰牢ਾ戼㹲挊慣瑣捧瑧⁧捡杧慧杴慡挠瑣杧慴捧⁡慡条条慴杴琠杴瑣捧捴⁡杧捡捣条捣††㈠㠵㰰牢ਾ戼㹲愊瑡捣杧捧⁧瑴瑣杴瑴瑣琠捴捧慡瑴⁴捧杧慧捧杧挠慡捡慧瑧⁴慡杣捴杧杣††㈠㐶㰰牢ਾ戼㹲琊慴瑡杴瑴⁡捡捣瑣捡慧琠杣杴捡慧⁡瑧杴慣捧杴挠捧杴慧捴⁧杴慣瑴慧瑣††㈠〷㰰牢ਾ戼㹲愊杴捴捧杴⁧杣慧捡瑧瑡琠捴捣瑧慣⁴捧条慡瑡捧琠杧捡瑧慴⁴杣杴慡慡捡††㈠㘷㰰牢ਾ戼㹲朊瑡瑡慴捡⁣捡杴捧条慧朠杴瑣捴瑡⁴条杣捡瑣慡愠捧条瑡条⁴捴杣杣慡捧††㈠㈸㰰牢ਾ戼㹲朊杣慧慡捧⁣条慣捧捧慧琠慡条瑴捧⁴捡瑣瑴捣慡愠捧瑴捧瑧⁡杧条瑣条瑣††㈠㠸㰰牢ਾ戼㹲朊捣捴慧慡⁧杧慧杴杣瑡琠杣捣捡瑣⁣捴捡捴杣瑣朠捧杧瑡捴⁣捴瑴慧慧捡††㈠㐹㰰牢ਾ戼㹲愊瑴瑴杧杴⁧慣杧杣瑡捴琠杧慴捡慧⁴慧杧慡瑡捧琠慣条杧捣⁡慴瑡瑣杣捧††㌠〰㰰牢ਾ戼㹲朊瑴瑧条瑴⁧捧慡瑴捡捴愠捣杧慡瑴⁧慧捧慣瑣捧朠慣捧慴杣⁡捧捧瑧瑣瑡††㌠㘰㰰牢ਾ戼㹲琊瑴捧杴条⁧捧慣瑣瑡捧琠慡杴捧瑡⁴瑣杧慡捧瑣琠慡慡慣瑣⁡捴捧瑴瑴瑴††㌠㈱㰰牢ਾ戼㹲朊条捧慧捴⁧瑣慴捡瑣瑴琠慣慧瑡慧⁧捡瑧杴瑡杣朠慣杣慴条⁣瑧慧慧杣瑴††㌠㠱㰰牢ਾ戼㹲朊瑡杣捧捡⁧慴条条瑧捴挠慡瑣瑴慣⁣慣慴瑡慧慡琠慡慧捴捡⁴捡杣杧杣慴††㌠㐲㰰牢ਾ戼㹲琊瑴瑴杴条⁴慴捴慧慧瑴琠捴条慧捧⁴慡杧慡捧慴愠慡杴慧慧⁡慡慡瑡慣瑣††㌠〳㰰牢ਾ戼㹲朊慧慴慴捣⁡捣瑧杴瑡瑡愠捴捣慡杴⁧慣捴瑧慡条愠捡瑡瑴杴⁡杧慣瑴捴条††㌠㘳㰰牢ਾ戼㹲琊慣瑧杴瑣⁣慡杴慴捣慴琠慡捣条捡⁣瑧捴条瑣杧愠慴瑴捡杧⁣瑣瑴瑴慡条††㌠㈴㰰牢ਾ戼㹲愊捣瑧慡条⁡慡慡慴条慣挠慡瑧瑴慴⁴捣杧捣瑴慴琠捴捡瑡捴⁴杴捣杣捣杴††㌠㠴㰰牢ਾ戼㹲愊杴慡杴瑣⁣瑡捣杧慡瑴挠杣慴杴捧⁡瑡慧慡慧杣朠杴条瑣杧⁴慧慴杴杧瑡††㌠㐵㰰牢ਾ戼㹲愊瑧瑧捴捡⁣瑣杴瑴捡捡挠瑧瑴捴慣⁴慧捧慡捡杴愠慡杣瑴瑴⁣瑡杣瑣瑣杧††㌠〶㰰牢ਾ戼㹲愊瑧慧瑡捡⁣捡慧杣瑡瑴挠杣捧条瑴⁴瑣捡捡瑡瑡愠瑴杣慣条⁡杴杴捧瑧瑧††㌠㘶㰰牢ਾ戼㹲琊捡杧杴慡⁡捡瑣杧捣慴琠瑴捣瑣慡⁡杧瑧瑴瑡杴愠慧瑡瑡瑧⁴瑴捴瑧瑣慣††㌠㈷㰰牢ਾ戼㹲朊捣慡捴捣⁴杧瑧慧瑧瑴挠捡慣瑧瑴⁴慧瑴慴慡杣琠杧捣慡慴⁴杧捡慡瑣捴††㌠㠷㰰牢ਾ戼㹲琊捴捧捣捣⁧瑴瑴慣捣瑡朠杧慣慡慴⁴慴慴杣慣条朠杣捡慡杧⁴捧杴瑡捧杣††㌠㐸㰰牢ਾ戼㹲挊杴捧慧瑴⁣条瑧捴瑡慣琠捧杣瑴杴⁴慧杴捧瑴捣愠杴捴杧慣⁧慡杴瑣慴瑡††㌠〹㰰牢ਾ戼㹲朊慡瑴捡慡⁣条慴瑣捧慧琠慧瑧杧慣⁧杧杣杧捧瑧愠瑡瑴瑴瑴⁡条捧条瑴瑡††㌠㘹㰰牢ਾ戼㹲琊杧杴捣瑣⁴慡捡捧瑣杧琠杴瑣捡捧⁣杴慡慴条杴愠慴瑡慡捧⁧慧杴慡杴捧††㐠㈰㰰牢ਾ戼㹲愊慧慡瑴杣⁡杴瑡慡捧杴琠慣慡慣慣⁡捣捡慣捴慡愠慣杧瑡瑴⁴杣捣杴瑣杧††㐠㠰㰰牢ਾ戼㹲朊捧慡捡慣⁧杣杴慧捣捧琠杴瑣捧慡⁣捴捴捴条杧挠慣杧杣瑧⁧慡杧捧慡捴††㐠㐱㰰牢ਾ戼㹲愊���杴瑴捧⁣杣捴捴捡杴朠杴慡慡慧⁡慡捡慣捣瑣朠捧捧捣慡⁴捡捧慡捡杣††㐠〲㰰牢ਾ戼㹲挊瑣瑣捣捣⁧杣杣瑴杧捣朠瑡捴瑡慴⁡杴慣捧杴捧愠杣捡条瑧⁴捴捣慧瑣杧††㐠㘲㰰牢ਾ戼㹲愊慡捧杧捧⁡瑧慧捧捧慡挠捧慡瑴慡⁴瑧慡瑧慴捧朠杣慡瑴捧⁡条瑣杧捣慧††㐠㈳㰰牢ਾ戼㹲挊捧捧杴杧⁣慴杣捴瑴捧琠杧杣瑴杣⁧慧捧条慡慧朠慣慴慣捴⁴杧慡捧慡条††㐠㠳㰰牢ਾ戼㹲挊慣杧慡条⁣杧捣慴杴慧朠瑣瑧捧杧⁣条杣瑣慣瑧愠杧慣瑡瑴⁴捴慡慡慴瑴††㐠㐴㰰牢ਾ戼㹲朊瑴慡捧瑣⁴瑴瑣慧捧瑡朠瑧瑡瑴瑴⁣瑡杧慴瑴捡挠慡瑴条慣⁧慧慡瑡慡捧††㐠〵㰰牢ਾ戼㹲挊瑡杴慡慴⁴慡慡慧慴慡愠瑡瑧瑣杴⁴瑴捡慡慴慧朠杴杧杧杧⁧捴条捣杴捣††㐠㘵㰰牢ਾ戼㹲朊捣瑴杧捧⁣杧瑧慧杴捴朠慴瑣杴捣⁣捧杣杣慡瑣挠杧瑴捡杣⁴捣条捣慣捧††㐠㈶㰰牢ਾ戼㹲朊杣捡慣捧⁴捣杧慣捡捧挠捴捧捧捡⁣杣瑣杴杣捧朠瑣杴杣慣⁴杧捴慧捡慣††㐠㠶㰰牢ਾ戼㹲挊杴捧瑣瑣⁧捡杧捣条捡愠慴捧杣慣⁣慡杧慴捴慴琠杧慡捧瑣⁴捧杣瑧瑴杴††㐠㐷㰰牢ਾ戼㹲挊杣杧瑧杣⁡捴慣捧慣慣挠条捣捧杴⁧杴慣捧条捧朠杧杣瑧瑴⁣捧杴捴慣捧††㐠〸㰰牢ਾ戼㹲朊捣杣慣捣⁴杣捴慣杴瑣朠瑡捧捧捡⁡杴瑣杧捣捧挠捡捣瑡慧⁣杧捣杴杣杣††㐠㘸㰰牢ਾ戼㹲愊捴慡杧杧⁴捴条杧捣捡朠慴慣杧杣⁣捣瑧捣捧瑣挠瑧杣瑣杧⁣瑧捡捴杣捡††㐠㈹㰰牢ਾ戼㹲愊捧条捣慧⁡捡捣瑣捧杣挠瑴捧杧捣⁡瑴瑣杧捧慧琠慧杴慧慴⁣瑣捴慣慡杧††㐠㠹㰰牢ਾ戼㹲挊捧捴慧杴⁣条捴瑣瑧瑡朠杴瑣杴条⁣捧捣慣捣捡琠瑡杣捡瑣⁣杴捣捣慧瑴††㔠㐰㰰牢ਾ戼㹲琊捣瑴杴捣⁡捧捧捣慧慴朠瑣捡瑣瑴⁧捡慣慣杴捧愠瑴慣捧杧⁴慧杣捧瑣捣††㔠〱㰰牢ਾ戼㹲挊捡瑴杧瑧⁴捣条慧捡条挠杣慧捧杴⁣杣捴杣捣瑴挠杧捴瑴杧⁧瑴捣杧捧慣††㔠㘱㰰牢ਾ戼㹲愊捧捡慴杧⁣慣瑴条捧捣愠捧慣杴捧⁣捡慣捧捣瑴朠慣杧瑡捧⁧慣慧捴瑡慣††㔠㈲㰰牢ਾ戼㹲朊杣捣慣捧⁧捧捴杣杧捣朠瑣慧捡捴⁧瑡捣捧瑴捧挠瑧杣捣瑧⁡瑧慣慴杣捴††㔠㠲㰰牢ਾ戼㹲愊杣捴慣捧⁴杴瑣捧捧瑴朠杣瑣杣捣⁣杣瑣杴条杧挠捡杧慡慣⁧捧杣杧杧捣††㔠㐳㰰牢ਾ戼㹲愊慧慣瑧捧⁧捣杧瑧杣杴挠杣慧杣杴⁧瑣慧杧瑣瑧朠瑣杴瑴瑣⁴条捧瑴慣捣††㔠〴㰰牢ਾ戼㹲愊杣杧捧捡⁣捣瑣杴瑣瑣琠捧捧杴捣⁴瑣捣条慣杣朠杣杧瑣杴⁡捧捡捣杣捣††㔠㘴㰰牢ਾ戼㹲朊捴瑡捧杣⁣瑣慧捡慣捣朠瑡慣捧慧⁡杣瑧捧捧慣琠条瑴杧捣⁴杴瑣慣慣捣††㔠㈵㰰牢ਾ戼㹲朊慡捧杧捡⁧慡慧捡杣捧朠瑣杧捴瑧⁣瑧捣捡捡捣挠瑡捴瑣杣⁧捣捴杧杣瑣††㔠㠵㰰牢ਾ戼㹲朊瑧慣杴瑣⁣慧慣杧慴杧愠瑣捧慣捧⁧慧杴瑴瑡杣愠捣条慴捣⁧条瑣捧捣杣††㔠㐶㰰牢ਾ戼㹲朊瑣杧捣杴⁣杴瑣杧捴捧挠杴杣捣慣⁴慣杴捧杣杣挠捣瑴捧杴⁧慣杴瑧捧条††㔠〷㰰牢ਾ戼㹲朊慡慣杣瑡⁡慧捧捡捣杧琠瑡杣捧杧⁣慧杴捧瑣捣愠杴杣捡杣⁡杴捡瑣杧捧††㔠㘷㰰牢ਾ戼㹲挊瑡杧杧捣⁧瑣杧杣瑴瑴挠瑴捣捴慧⁴瑧杧慡捣杧挠捧条杣杴⁴捣条慣捣瑡††㔠㈸㰰牢ਾ戼㹲挊条捧杧杣⁧捣瑣杣捧杧挠捧捧瑴慧⁧捧杣捴慧捡挠捡捴杣杧⁧捣瑡慧杴瑴††㔠㠸㰰牢ਾ戼㹲朊杧慣杧瑣⁧捣慧捴条杣朠瑣杧瑡慣⁧慣杧捣瑧慣朠捣捡杧瑣⁴捧杣瑴捣捴††㔠㐹㰰牢ਾ戼㹲朊捧捧杴条⁧杴杣捣捣慡朠杧杣杴慣⁧捧杧杴瑡慧愠杴捧杧杴⁧捧杧瑧瑣捴††㘠〰㰰牢ਾ戼㹲朊捧杧捧条⁧慴慧捴捡杣朠捧杣瑧杧⁧慣瑧捴捧捣愠捣捴慣捧⁡慧捴杣捧捣††㘠㘰㰰牢ਾ戼㹲朊捣杴慣瑡⁣杴杴杣捧慣朠瑴捧条杧⁣慣捧瑡杧瑡���慴捣杧慣⁣慣捣杧捧慧††㘠㈱㰰牢ਾ戼㹲挊捡慣捧捧⁣捣慧捣瑧捡挠杧捣捡慣⁴瑧杴杧慣慡愠杣慴瑧捣⁡捧杧杴捧杧††㘠㠱㰰牢ਾ戼㹲挊捧杴瑣捧⁧慡杣捣捴慣朠慡慴瑴慧⁴条捧瑴瑡杧朠慴捧慣瑴⁧瑡杴捣捴瑣††㘠㐲㰰牢ਾ戼㹲琊杴慣杧慣⁧瑴杧杴瑧慴朠捧捧杴捧⁧杧瑧慣瑣捡挠捣杣捣瑣⁧杣捣捧捴杴††㘠〳㰰牢ਾ戼㹲愊瑧捴瑴捣⁡杧慣瑣杣杣挠条杣捣捴⁧慴瑴杣捴瑧挠杧捴条捣⁡慧捡瑴捧捧††㘠㘳㰰牢ਾ戼㹲琊慧杣慣捴⁣瑣瑴杧捣瑴挠瑡捧捧捴⁧捧瑡瑡杣杣挠瑴杧杣慴⁣条杣捴条杧††㘠㈴㰰牢ਾ戼㹲挊杴捧慣捧⁡杧捴捧杣瑧挠杴瑣杴捴⁣瑴瑴杧捴瑴琠慣慴捴条⁴慣捣慧慧慡††㘠㠴㰰牢ਾ戼㹲挊瑴捧杣杧⁧捣慧慡杧瑣琠瑧瑣捴捧⁧慧捡慡杧捡愠条瑧捧条⁣杣捴慡杧瑴††㘠㐵㰰牢ਾ戼㹲愊条捧杴捧⁣瑡瑡慣捧慧挠杴慡慡捧⁧捧慣捧瑣杣朠捣瑴瑧瑴⁧捡瑧瑡慡捣††㘠〶㰰牢ਾ戼㹲愊慡捧慣捣⁧杧慣捡慣瑡愠捧捣瑴瑧⁣捡瑴瑴慧捴愠杧慴慧捣⁧捡捣杴慡捧††㘠㘶㰰牢ਾ戼㹲朊瑣瑴瑴捴⁧慴瑴捣瑡慡愠捡捣捣瑴⁣杴杴杣杴条琠捡捴瑡条⁴瑡慡慣杧杣††㘠㈷㰰牢ਾ戼㹲琊慧瑧捡慣⁡杣慣条慣瑣愠慣杴瑣慧⁡瑡瑣杧捣杣挠捣瑣瑧捣⁡杴捣捴捧杴††㘠㠷㰰牢ਾ戼㹲朊杣杧瑧捧⁣杧杴捣杣杴挠慣捧捴杧⁣捣捧捧慡捧琠杧捡捧杴⁧捧条捡捣瑡††㘠㐸㰰牢ਾ戼㹲朊捡瑣杴瑣⁧捡杧杴杣瑣挠慧杴慴瑡⁣杣瑣捴瑧杧挠杣杧瑣杴⁣捧捴杴捣条††㘠〹㰰牢ਾ戼㹲挊捧杴杧瑣⁧捧瑣杣捧慣琠杧捣瑴捧⁣慧瑴捴瑣杣朠慣瑣捧杧⁣捣杣捧杴捧††㘠㘹㰰牢ਾ戼㹲挊条瑣捴杴⁣捧杧杣瑡慡愠瑧杣慣瑣⁴捧杴条瑧慣琠慧捣慧条⁣捧瑴慧捣条††㜠㈰㰰牢ਾ戼㹲挊捣杧捣瑡⁣捴捧杴杣瑧愠瑣杣捴慣⁧杣捣瑧捧捧挠杧杴捧杧⁣慴条瑣捧杣††㜠㠰㰰牢ਾ戼㹲挊捴杧捧条⁴捴慧杧瑣杧挠慣捧瑣捧⁧杧捣瑴瑣捣琠捧杴捣捧⁴杧捧瑣捧捴††㜠㐱㰰牢ਾ戼㹲朊瑡瑣捧杴⁧捣条捣杴瑣朠慣捣条杣⁣杣杧捣条杣朠杴捧杧捴⁴杴捣瑣杴慧††㜠〲㰰牢ਾ戼㹲琊捴捡捧条⁣条慣捣慣杣朠瑣慧慴捡⁣杧杣杣杧杴朠杴杴瑣杴⁴捣瑴捧杧瑴††㜠㘲㰰牢ਾ戼㹲朊瑧慧条捣⁣捧慣条杣捧挠瑡条杴捧⁧捧杴捴杧杣挠杴捧杣杧⁴杣捧瑧杣慴††㜠㈳㰰牢ਾ戼㹲挊捴捧杴捧⁣条杣捴杣杧挠慡捴杴捣⁣捣慧条瑴慣挠杣捣杴杣⁧杣捴杧捣捡††㜠㠳㰰牢ਾ戼㹲挊瑴慧捣慣⁴捧瑣慧慴瑧琠瑣捴杧捧⁴杧瑴捴慣瑣愠捣条杧慣⁧捧捴捣杧捣††㜠㐴㰰牢ਾ戼㹲挊捴杧瑣瑴⁣瑡瑧慣捴慣朠瑧慣慡瑣⁣捧杴条瑧杣琠捣捡慣捧⁡捣条捡慣杴††㜠〵㰰牢ਾ戼㹲挊杣瑣捣杴⁣捴杧杣杧捣琠慧慴慴慣⁣瑧慣瑴捧捣琠杧捧瑡捴⁡捴杣瑣杴条††㜠㘵㰰牢ਾ戼㹲挊慣杴捧瑧⁧瑴瑣杧条慣挠瑴杣捧杧⁣杴捡慣瑴捣挠杧瑴慣捴⁡捴杴捧杣瑧††㜠㈶㰰牢ਾ戼㹲朊杧杴杣捴⁣瑣慧杣捣慧琠瑡杣慡捧⁧瑣慣慣捧捣愠杴捧瑣杴⁡捧杴捴杧捣††㜠㠶㰰牢ਾ戼㹲琊瑡杧捣杴⁣慡条捴瑣瑧挠瑧捴瑴慣⁴杣杧捣捡慣愠捧捧条捣⁡慧捴慧捧杣††㜠㐷㰰牢ਾ戼㹲琊捣捴杧瑴⁧捴条杴捧瑧挠条瑧杣条⁣慡慧捧慡杣愠杴杣瑡慣⁧慣捧捡慣捣††㜠〸㰰牢ਾ戼㹲朊慴杧慣捴⁡杴慧条捣条挠瑡慣杣瑧⁴条捣瑡条瑣琠捣条杴捣⁡捣捣杣杣捡††㜠㘸㰰牢ਾ戼㹲朊杣瑣捣杧⁧杣瑣瑣捧捧朠捧捧杴瑣⁣捡瑣杣捧杧挠慴捣捴捣⁧慣捡捴瑴杴††㜠㈹㰰牢ਾ戼㹲朊捣条瑣捣⁡捣慣杴捣捧挠捣杴捴杴⁧杣瑣杧捧瑴琠慣捧慣瑣⁣杣捣捧瑣捧††㜠㠹㰰牢ਾ戼㹲朊捣捴捧杴⁧捣杴瑣杴瑧挠杴捧捴瑡⁧捡瑣捧杣杧挠瑴杣捴杧⁣慣瑧瑧杣捣††㠠㐰㰰牢ਾ戼㹲愊���瑣瑣杧⁧捣条杣瑧捴朠瑡瑣捧捴⁣捧慴捡捴瑧琠慧杴捣捴⁴杧瑡瑴瑣捴††㠠〱㰰牢ਾ戼㹲愊瑣瑣瑧杣⁡瑴捧瑧捴瑡朠瑧瑣瑡杴⁣瑣捣杣瑧瑡琠捣杴慴条⁴杣瑡慧捴杴††㠠㘱㰰牢ਾ戼㹲朊捧瑧杴捧⁧瑧瑧杣瑡瑧琠慣杧捧慣⁣瑧瑣捧捣杧琠杣瑧捧杧⁡杴捣捣杧捣††㠠㈲㰰牢ਾ戼㹲琊捴慣捴捴⁣捡慣杣瑴杣朠捣捣条瑧⁧慡慣捣杧捧愠杧杣瑣杣⁡杴捣瑣捧捧††㠠㠲㰰牢ਾ戼㹲挊捴慡瑧瑧⁴瑣瑧杧捴慡琠捧杧捧瑧⁣瑧杧捣条捣挠捧捴慴瑡⁧捣杣瑧杴捧††㠠㐳㰰牢ਾ戼㹲愊杴瑧杣捧⁣慣杴捣捴捧朠杧捴杴瑣⁣慡捧慣杴捣琠杴杧瑣杴⁡捧捧瑴杣瑧††㠠〴㰰牢ਾ戼㹲挊瑴瑣瑧捧⁣捣捧捣瑴瑣挠杣杧瑧瑣⁴捧杣瑴瑧捡挠捧瑴慧捡⁣捡杴条杣捧††㠠㘴㰰牢ਾ戼㹲朊杧捣捧捴⁧瑡捧杣捴瑡琠慧捴杣瑣⁣杧条瑡慣捴愠杧杴捧条⁴捧杧瑧捴捴††㠠㈵㰰牢ਾ戼㹲朊捣捧慣捣⁧捧瑡杧瑡杧挠慣捧瑧瑡⁡杣捧条捧捧琠杣捧捡杣⁧捴条瑧捧杴††㠠㠵㰰牢ਾ戼㹲朊捧慧捡捴⁧慧杣捣条杣挠瑣捴杴瑣⁧瑧杣条杧捴愠捧捴慧捣⁧捧条杧慣慡††㠠㐶㰰牢ਾ戼㹲琊捴慧捣捴⁣瑴慧捡条捣朠捣慣瑴杧⁣捧瑧捴瑡捡愠杧捴杧慣⁧慣捴捣条慴††㠠〷㰰牢ਾ戼㹲朊捴杧杣杧⁣杣瑣杣捡慧愠瑣捣杧慣⁴瑧捧捣杧瑡琠杣捧瑧捧⁡条捡瑴慣捴††㠠㘷㰰牢ਾ戼㹲挊瑡瑧杣杣⁧捧瑡捡瑴捧挠瑴杣杣瑣⁧慧杴慴瑧杣朠捣瑴杧捣⁣杴捧杣瑡杴††㠠㈸㰰牢ਾ戼㹲朊捣捧捣慧⁣瑣捧杴捣杧琠瑴捴捧杣⁴慡杧杴瑡慡愠捴捧慣杴⁣杴捣捴捧杴††㠠㠸㰰牢ਾ戼㹲琊杴瑣瑴杴⁣瑴瑴杣捧捴挠瑡捧慡杴⁧捣瑣杣慧慧朠杣慣捣捧⁣杣慡杧瑧杧††㠠㐹㰰牢ਾ戼㹲挊杣瑴条捧⁣条瑴捴捴慧愠慧慧慡捣⁧瑧慡瑧捧捧挠瑣捣捣慴⁣慡条慴杧瑧††㤠〰㰰牢ਾ戼㹲挊杧慧瑴捧⁣捧杣瑣瑧捧挠捴慣杴瑡⁡捧瑣捡慧慧挠条慣慣瑴⁡捡慡杴杧瑧††㤠㘰㰰牢ਾ戼㹲朊捴慡慧杴⁧瑴慡杧杧条挠慡慣条捧⁧捧杧瑡杣捧琠杧捣慡捧⁴杣慡慧捡慡††㤠㈱㰰牢ਾ戼㹲挊慧捧捧慧⁡捴慡杴捣慧愠瑡捴条杣⁧慧捧杧捧慡朠杧慡慣捧⁡捧慡慧捧捧††㤠㠱㰰牢ਾ戼㹲愊条慡杣慡⁡慣条捧捧慡朠瑧捧杴瑧⁧杧杧捣瑡慧琠瑴杴捧慣⁡杧杴慡慣捧††㤠㐲㰰牢ਾ戼㹲愊捧慧瑧杧⁣杣慧杧瑡杣朠瑣慣杴捧⁧捧慡杴慧杴挠瑧捡瑣杴⁡捡捧慧捣捡††㤠〳㰰牢ਾ戼㹲朊捡杣杣捣⁴杴瑴杣瑧瑣朠捣捧慣杣⁣慣慧条慧杴愠捧杣杧瑣⁧慡杴瑡杣捡††㤠㘳㰰牢ਾ戼㹲挊慧慧慣杧⁣捣杴杣杧捧琠捧捡捡捧⁧捣捣慣捣瑣琠杣杧慴杧⁧杧慡条捧杣††㤠㈴㰰牢ਾ戼㹲挊慴慡捧杧⁣慴慡条杣瑣挠慣捧瑧瑡⁴捴杴杣杧瑧琠杴瑧瑧杧⁧瑧瑴条杣杧††㤠㠴㰰牢ਾ戼㹲挊瑴杴捣杣⁣瑣瑴捣捣瑣朠捣捧捧条⁣杧杴杧捧杧琠瑧瑧条捣⁴条杣慣捧慧††㤠㐵㰰牢ਾ戼㹲愊慴慧捣条⁣慴捴杣捧瑣挠杴捧杣杧⁣瑡瑡杴杧慣愠杧捧条慣⁧杣捣捣捡慡††㤠〶㰰牢ਾ戼㹲朊杧杣瑣慧⁴慡捣捧捧瑣愠瑧杧瑡慴⁴捴瑴条瑡慡琠慣杴慧杴⁧瑡瑴瑴捣慡††㤠㘶㰰牢ਾ戼㹲挊捡捣杣捣⁡捧捣捣捧捣挠杴瑣杧瑧⁴杴慣杧瑴杴朠杧捧瑧慧⁣条瑴瑡杴慣††㤠㈷㰰牢ਾ戼㹲朊杧瑧捴瑧⁧捡条瑴瑡杴挠条杧杧捧⁧杴捡条瑴瑡琠捧条杧瑧⁴杣杴捡条瑴††㤠㠷㰰牢ਾ戼㹲愊瑧捡杧慧⁧杴捡杧捧捡琠杧瑣杧慣⁡杴捴慴捧慡挠杧慣杧慣⁴瑴杣捧杴条††㤠㐸㰰牢ਾ戼㹲朊瑧慡慡慧⁡瑣瑴捣捧慴愠捧慧慴慧⁣杴慴杴慴慡挠捡条慴瑴⁧慣条慧杣杣††㤠〹㰰牢ਾ戼㹲朊慡慣杴捣⁴慣杴杴捧杧挠慣杧捡杧⁣慣捧杣杧瑡挠杧慧慴瑣⁧瑧杣瑴捡慣††㤠㘹㰰牢ਾ戼㹲朊条捣捡杣⁡捣杣条慣慡挠捣瑴瑣瑣⁡捴条瑡杣瑴���捡慧瑧瑡⁴捡捣杧慣瑴††〱㈰㰰牢ਾ戼㹲挊捧杴杣瑣⁴瑡杧慣慧捧愠杧慧慡杧⁡瑡杴捣杧捧琠瑡瑧捧慡⁣杧慧瑡瑴慧††〱㠰㰰牢ਾ戼㹲愊慧瑡瑴瑣⁣慣瑡捧杧捧朠捧杴慧捧⁡杴捧瑴捴慴挠杧瑧捴捧⁴捧慧瑧瑣杴††〱㐱㰰牢ਾ戼㹲挊慣杣捣慧⁧慣捣杴瑧杣挠瑴捴条慡⁡捴慡捴慴慡朠慴慴慴杴⁡瑧慡捡瑴杧††〱〲㰰牢ਾ戼㹲琊瑣慧慣瑧⁴捡慣瑡捧瑴愠瑡慣瑧慧⁧捧捡瑣瑡瑣挠条杣瑡瑣⁧捴慴瑴捴瑧††〱㘲㰰牢ਾ戼㹲琊慣捴慣慴⁧瑴捧瑣慧瑣挠捣杣捴瑧⁧慴慧慴捡慴挠慧慴杣杧⁡杧捧瑴捡慣††〱㈳㰰牢ਾ戼㹲琊瑣杧捣捣⁡瑧捧杴慣瑡朠瑡捡杣杣⁡慧捣慣杣瑣挠捡杣捧捴⁣条瑡瑴瑡慣††〱㠳㰰牢ਾ戼㹲朊慣瑡慡捡⁣条捣条捣杧愠条杧捣慧⁧杣慣慧条杴朠捴瑣捧慡⁣瑴慴捴杣捣††〱㐴㰰牢ਾ戼㹲琊捣瑡捣条⁴瑣瑡慴瑡杴琠杴捣杧慧⁡捧慴慧瑧慡朠慴瑧捴捧⁣条瑴慡慴瑧††〱〵㰰牢ਾ戼㹲琊杴杣慣捡⁧瑴瑧杴捣瑡琠捧慴慣杧⁣瑡杣杴瑧瑧挠捡捧捴瑧⁣瑧瑴杧慴杴††〱㘵㰰牢ਾ戼㹲朊瑣捴瑡捴⁡捧捴杣瑧捴挠慣捡慧捴⁡条捧慧瑧慴挠瑡慧捴捣⁣慣杴瑴瑧捧††〱㈶㰰牢ਾ戼㹲愊慡慡条杣⁧瑴条瑣捣瑴挠杧捴瑣捣⁧瑡杣瑴瑧慣朠慡瑧慡瑧⁴杧捣捧条杴††〱㠶㰰牢ਾ戼㹲琊慴捴捡捴⁡杴瑧慴杴捧愠捧捡杴慣⁴慡瑴瑣瑣慴挠杴捴瑡捧⁣瑡捣瑧慡慧††〱㐷㰰牢ਾ戼㹲琊捧瑴瑴瑣⁧杴捡杴瑧慧朠慴瑣慣捡⁣慡瑧慣瑴瑣朠条慡慴瑧⁧慴杴杣捧慧††〱〸㰰牢ਾ戼㹲挊杣条瑴捧⁴瑣杴捣杣捧朠捴慡慣杣⁧慧慴瑡捡杣挠捧慣慣慴⁧慣慧捡瑴慴††〱㘸㰰牢ਾ戼㹲愊慡瑧捧捴⁡捴瑡杴慧慡愠杣瑴瑣捴⁧杧捧慧慡捡琠瑣慣条慧⁴瑣慴捣捧杴††〱㈹㰰牢ਾ戼㹲琊杴条瑡捣⁡瑧捴慧杴慴愠捣慣瑣杣⁴捧捡捣慡瑣朠瑡瑣捴条⁣瑡瑣瑴慴瑣††〱㠹㰰牢ਾ戼㹲琊捴捡慣捧⁧瑴捴杴杧杴愠捧慡慡捡⁡杧慡杧慣慡愠杴捣捧慡⁡慡条杧慡慴††ㄱ㐰㰰牢ਾ戼㹲愊杧捧慧慣⁣杧慡瑡瑧杴愠瑡捡捴瑡⁡瑣瑣捴瑣瑴琠捴慡慴瑴⁡瑴慧条慣瑴††ㄱ〱㰰牢ਾ戼㹲琊瑡慣杧瑧⁴瑡杴捴捴瑡朠条杣慧慴⁣瑡瑡瑴慧瑡朠慴瑴慴慧⁡慡瑡慡捡慡††ㄱ㘱㰰牢ਾ戼㹲愊条条瑴杴⁴条慡捡捧慡愠慡杧捣瑡⁣杣捴条慧杴朠捣瑴瑣捧⁴慴瑡瑴慧杴††ㄱ㈲㰰牢ਾ戼㹲挊瑣杧慣瑧⁴慴杴捧杧捧朠捴瑣捧捣⁧捣捡捣捴杣朠捧杣瑴捧⁴捴捧慡杣瑴††ㄱ㠲㰰牢ਾ戼㹲挊慡瑡捣捧⁴捣杣捧杧瑡琠杴捴瑣捡⁴慣杧条条杣琠捴捡杣捡⁡慡慣捡条瑡††ㄱ㐳㰰牢ਾ戼㹲愊慡捡慧⁡††††††††††††††††††††††††††††††ㄱ㐳㰸牢ਾ戼㹲㰊牢ਾ氦㭴ㄲ☰瑧※ㄠ㈲戼㹲☊瑬㈻ㄱ朦㭴†ㄱ㈵㰷牢ਾ氦㭴ㄲ☲瑧※䐠䅎戼㹲☊瑬㈻㌱朦㭴†牁楴楦楣污匠煥敵据㱥牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〲朦㭴戼㹲☊瑬㈻㌲朦㭴†汰獡業⁤䱰批䱁㤲挠湯慴湩湩⁧瑯䉳⁁灯牥湯戼㹲㰊牢ਾ氦㭴〴☰瑧※ㄠ㈲戼㹲愊杧捣慣瑧⁣瑴捴慧瑣慧朠捣瑴捴瑧⁴瑴瑡瑴慧杴挠瑣杧慣瑧⁴捣瑣捡捴捴†††㘠㰰牢ਾ戼㹲朊慣杴杧慧⁧捡捣慣慣瑣愠捣瑡杣捧⁧瑣捡杧杣瑴琠慣瑣捴杴⁡瑧捴杧慣杴†††㈱㰰牢ਾ戼㹲朊杧捴条瑧⁧杧捡慣捣捧朠瑣捡杴捣⁧捣条捧慡瑡琠瑣瑧瑴慴⁴慣慧捣捧瑴†††㠱㰰牢ਾ戼㹲挊杴杣瑴瑣⁧瑡瑴慡捴杴琠瑡慣杧瑣⁧慡慡捴瑴瑣挠捴瑡捣捧⁣慡慡慣捧慣†††㐲㰰牢ਾ戼㹲愊捧瑴捧瑡⁧捣慧捧瑣慧琠瑧瑧慧慣⁣瑣慡慧捴捡琠捣条瑴瑣⁣瑴杴慧慡瑣†††〳㰰牢ਾ戼㹲朊捧杴瑡慧⁧杴慡慧慣捣愠捴瑴杴捧⁡条瑡慣捴杣朠杣杣条瑡⁴捣条慣慧慣†††㘳㰰牢ਾ戼㹲琊杴瑴慴杴⁡条瑡慧捴捴琠瑧瑣杧瑣⁴瑴杣条瑡���朠捧捡捣慣⁡捧捧杣瑧捴†††㈴㰰牢ਾ戼㹲愊慣瑴瑣杧⁴慧瑴捣慣条挠慡捣慡瑴⁧捣慡捣瑴瑴朠慧条杣捡⁡捧条慡慣捴†††㠴㰰牢ਾ戼㹲愊条杣瑣捧⁴杧瑧慣瑴杴琠杴瑣慧瑣⁧慴慡杧杣瑡挠捧杧捣慣⁡慧条慧瑣慣†††㐵㰰牢ਾ戼㹲挊杣条杧瑣⁡捣捧捡杣杴愠瑴慡慣杣⁧捧捣杴杣杧琠杧捧慡捡⁣瑧瑴捡慣捣†††〶㰰牢ਾ戼㹲琊捧瑡瑡捴⁡瑣慴瑣杧捧朠杧杣瑡杣⁣杴捧瑴杧捣朠捣杣捧杴⁡慧慡条捴杴†††㘶㰰牢ਾ戼㹲愊慡瑧捴瑴⁴捡慡慡瑣慣愠捴杴瑣杴⁴慴慧瑴瑴捡琠慣杣条捧⁴瑡慴条捴捴†††㈷㰰牢ਾ戼㹲朊慴慡慴瑧⁴慣捡慴条慧挠捴瑡杣慣⁡慡杴捡慧瑣朠慣瑴捧条⁣杧杣杣条条†††㠷㰰牢ਾ戼㹲挊捧慣捧瑣⁧杴捧条慣瑧琠瑣捧慧瑧⁧杧慴捡慣捧愠捣慧慣捡⁣捧瑣瑣瑡瑧†††㐸㰰牢ਾ戼㹲朊杧瑴杧瑴⁣杧杣杴瑣慧琠慧捴捣慣⁣捴杴瑣慧捣朠瑧捡杣瑴⁡条慡杧条慧†††〹㰰牢ਾ戼㹲琊捣瑡瑡慧⁴瑣杴瑡杧慡挠捧杴捧杧⁡慡捴慡捡杣挠瑡捣杣瑡⁣条瑧杣捴瑧†††㘹㰰牢ਾ戼㹲朊捣杴捡慡⁴瑡捴杴慣条朠捡慴慣捧⁴捡杴捧慡捣朠慣条杴瑡⁧瑧捧瑡杴捧††ㄠ㈰㰰牢ਾ戼㹲愊瑴慧慴捴⁡杧捧捧捴慡琠杧杴慧捧⁴杴捡捧捡杴朠慣慡捡瑣⁴瑡杣瑣捴捣††ㄠ㠰㰰牢ਾ戼㹲朊瑴条杣杧⁣瑧捧瑡杧杧挠杧条杣捣⁧杴捡瑡慣瑡朠瑧慡慡慣⁣瑡瑡杣瑴慣††ㄠ㐱㰰牢ਾ戼㹲琊瑣捧杣慧⁴捧慧瑴捧捧朠杴瑡瑡慴⁧杣杴慣捡杴挠瑡捡条捴⁡捴捧捴条慴††ㄠ〲㰰牢ਾ戼㹲琊捣杣捧捧⁧慧捧杴慧杧挠慧慡杧慧⁴杧瑣瑴杴杣挠杴慣瑴瑡⁣瑧慣杧瑣捣††ㄠ㘲㰰牢ਾ戼㹲朊慣捧瑡慧⁡慧杣慣瑴慡琠慧慣瑴条⁣捧慡杣慴瑴愠瑣慣慧捴⁴杧捣捡慡瑡††ㄠ㈳㰰牢ਾ戼㹲朊捧瑧慴慣⁧慣杧慧慡瑧朠杴瑴瑧杣⁡慧捴慡捡杣愠慧杧慴捣⁡瑧慡条瑧慧††ㄠ㠳㰰牢ਾ戼㹲朊捧慡瑴捧⁡捧瑴瑴瑡捧愠杧慡捧捴⁣瑣瑴瑡杣杧挠慧捡捧捣⁧慴瑴捴杴杧††ㄠ㐴㰰牢ਾ戼㹲挊慧杴瑡瑴⁡捡杣瑡慧瑡挠杴捧瑴杣⁣条捴瑧慴捡挠慧瑣杧捧⁧慧瑡瑧慣瑧††ㄠ〵㰰牢ਾ戼㹲愊慡慡瑴杧⁣捡条瑧捧慡挠捴条捧瑡⁣瑡杧杣捡杴朠杣杧杴杴⁣杣慧杴捴杴††ㄠ㘵㰰牢ਾ戼㹲朊条瑣杧瑣⁴慧慡杴瑡慡挠慣捣捧瑡⁴捡慡慣慡慡愠慧慧慡瑡⁡捡条慧瑧慧††ㄠ㈶㰰牢ਾ戼㹲琊慧瑣瑡慧⁧捴瑧瑴条捴朠慴瑧瑡瑣⁡捡杣慧瑴捧愠捣捡慣慧⁣慧捧捡捧杣††ㄠ㠶㰰牢ਾ戼㹲挊慣瑧捧杣⁧杴捧瑣杴捣朠瑴杧慣慴⁣杴杧杧慣瑣朠慡条捣捧⁡杧杣慧瑣瑧††ㄠ㐷㰰牢ਾ戼㹲朊瑧瑴杧瑣⁧慧瑧杧杴慡愠慣杧慧瑡⁧条慧捴条捣朠瑣慡慡慡⁧瑧慧慡慡条††ㄠ〸㰰牢ਾ戼㹲朊慴捡瑡慴⁣瑧杧捧瑣瑣琠瑴慡捣捴⁡捧慧捡条慧挠瑣杴捡慧⁡慴瑣捡慡捣††ㄠ㘸㰰牢ਾ戼㹲愊瑡捴捴慣⁡杴捣瑧捴捴琠杧捣杣瑣⁴瑴慣瑴瑡杣朠瑣杣瑡瑣⁧瑧捧慡瑴捴††ㄠ㈹㰰牢ਾ戼㹲愊捧瑧捣杴⁣瑣杧慧杣捧琠瑡瑣捡捧⁧慴慡杴杣瑴朠瑣杧慣慧⁴慡瑡慴瑣捧††ㄠ㠹㰰牢ਾ戼㹲挊捧杴瑴捧⁡条捡慧杴捡愠瑴瑡瑣杧⁡捴慣杣瑡慴琠慣捣杴瑴⁧捣瑡瑴捧捧††㈠㐰㰰牢ਾ戼㹲愊杴慡瑴捡⁧慣慡杣杧慧朠杴慡慴瑡⁣捧瑡杴瑧瑴挠瑴捴杴慣⁴瑡捴瑣瑴捣††㈠〱㰰牢ਾ戼㹲挊慧慣捣杧⁡慡捴瑴慣捡朠杣瑣捧杣⁡慣慴杴捡捡挠瑴捧瑴慧⁡慣捧瑴杴杴††㈠㘱㰰牢ਾ戼㹲愊瑴瑡慧瑴⁴捧杴杧瑴捴挠条捡条慡⁡捡慧捴瑧瑣朠捧瑧捴瑣⁧慧瑴瑧瑣瑴††㈠㈲㰰牢ਾ戼㹲挊慴捡瑣慧⁣捣捧瑧慣杣愠慣杣慴捧⁧慣慡慡捧慣琠捡条捣杴⁧杧慣慡捧瑡††㈠㠲㰰牢ਾ戼㹲琊捴慧捡条⁡条捴慴捣杣愠捴杧慣瑴⁧慡捣慧慡慧愠瑡条捣慡⁡慣杧瑣捧杣††㈠㐳㰰牢ਾ戼㹲���捧慣瑣捧⁣捧慣慡捡杴朠杣慣捡瑴⁡慡捧杧慡瑣朠慡慡捡瑧⁡慣慡瑡瑡瑣††㈠〴㰰牢ਾ戼㹲琊瑴瑣瑧杣⁡捡杧瑣杧瑡琠瑡捴慣慡⁧瑧瑴捧慣慧朠杣瑴瑴瑣⁣捧瑣瑡慧条††㈠㘴㰰牢ਾ戼㹲挊瑧杴瑣杧⁡慡慡慴捴杣挠条慣捴瑡⁧瑧慡慡瑴杣琠慴慴捣慣⁧瑡杴慣捣慡††㈠㈵㰰牢ਾ戼㹲挊瑧杣杣杴⁧杴瑡瑧捧慡朠捣慴捴条⁧瑡瑡捴瑧慣琠慣捧捴慧⁡慡杴慡捧杴††㈠㠵㰰牢ਾ戼㹲朊捡慧瑡慴⁡杴瑧慡瑡捡朠杧慣瑡慴⁧捧杴慧杣捣朠瑣瑴瑡慴⁴瑴慧瑡慣捧††㈠㐶㰰牢ਾ戼㹲愊瑴瑴慧捣⁧慴慡瑴捡杴愠杴慡慡慴⁴捴杣瑣捡捴琠慧杣杴杧⁣瑴条杴捡捧††㈠〷㰰牢ਾ戼㹲挊捡杴杣杴⁡杣杧瑡慧捡挠杴瑧条慣⁡慡慧瑧瑡瑧琠捧杴瑣慣⁧慧捣慣捧慣††㈠㘷㰰牢ਾ戼㹲愊捴杣杧杣⁴捴瑴瑧捴瑴琠杣慣瑡瑴⁧杣杧条杣捧愠慡杣条瑴⁡捡瑧杣捧瑧††㈠㈸㰰牢ਾ戼㹲琊慡瑴瑧慴⁡捣捣慴杣瑡挠瑧慧杣慡⁧瑴捧条瑣捧朠瑣杧瑡杣⁴捧瑡杴捡慴††㈠㠸㰰牢ਾ戼㹲琊瑧杣瑣杧⁣杧慡杣慴瑴琠捣杣捴瑡⁧慣慧慡杴瑣朠慧杣瑴瑡⁣瑧慧慡慡杣††㈠㐹㰰牢ਾ戼㹲愊慴瑴慡捣⁡瑣杧慣杧条琠捧瑴慣瑴⁡捧慧捣慴慡朠慣慧慴瑧⁴捣捧慧条杣††㌠〰㰰牢ਾ戼㹲挊杧慡条捣⁡捧条杣杣瑡愠慡瑧杴瑣⁡捣瑴捴慣慡朠瑣杴杣慴⁧慧捧慴捧杴††㌠㘰㰰牢ਾ戼㹲挊瑣杣慡条⁧杧瑡捧慧瑴挠捧慣捣捴⁴慣瑣捣捧杴朠杣慧瑴捣⁴瑣杴条慡慣††㌠㈱㰰牢ਾ戼㹲琊瑴杴瑧杧⁣条捧慧瑴瑣朠瑧慡杣瑡⁧条慧慡杴瑣挠慡杧捧慣⁴慡捴捴杧杣††㌠㠱㰰牢ਾ戼㹲琊杴慴瑧杴⁧慣瑡慴瑣慣挠杣慧瑡杴⁧条捣捡杴杣挠条瑣捡慧⁧杣杣捴慴瑴††㌠㐲㰰牢ਾ戼㹲琊杴瑣慧杧⁧捣捡慴杴瑣愠瑡杧慣瑴⁣杴慧条捣瑴愠慡捡捡慴⁴杣瑣瑴瑴杴††㌠〳㰰牢ਾ戼㹲愊杧杣瑡杣⁣瑴慡捣瑴瑴挠条慡杴条⁡杣瑴慧捴杧挠捡瑧慡捧⁧杴条捡瑧杴††㌠㘳㰰牢ਾ戼㹲愊捴杧慣杣⁴慡慧杧瑴捣愠捡瑴捴捡⁣瑡慡杴慡瑡愠条瑡慣瑣⁡捣杧捧瑧瑡††㌠㈴㰰牢ਾ戼㹲琊瑴瑴慧瑧⁴瑡杣条瑡瑴琠慣杧条瑣⁡条慧条瑣慡愠瑡杧条慡⁡慡慡捴捡杴††㌠㠴㰰牢ਾ戼㹲朊瑡瑡捡慣⁣杣瑴慧慴慴琠捣慣瑡杧⁣瑡杣慴慡慧愠慣瑴瑴慧⁧捧瑡瑴慣瑧††㌠㐵㰰牢ਾ戼㹲挊条瑴捧捴⁡瑡瑧捡瑣瑡愠捡慣慧捣⁧瑴慣捧杴慧琠瑡慴杣捧⁣瑴瑴慴慡慧††㌠〶㰰牢ਾ戼㹲挊杣慴慡慧⁡慡瑡慡捧捡愠条瑴瑴瑡⁣杣捧瑣瑴瑡琠慣慣瑴瑣⁴捧捣捧瑣慧††㌠㘶㰰牢ਾ戼㹲琊慧瑡捧捴⁡捴杣慧瑡捴挠瑧瑡杧慣⁡杴慡条捡杧琠慧捧杴瑧⁧瑡瑡杧慧慴††㌠㈷㰰牢ਾ戼㹲朊杴瑴慣捣⁣瑴瑧慴慣捣朠瑴瑴捣瑡⁧条慣慡瑣慧愠捡瑧瑴捴⁡捴捧捴杴慧††㌠㠷㰰牢ਾ戼㹲朊杴慡慴捣⁡杣捡慧瑴捴挠杧慣瑧瑴⁣慴慣慣慴慴琠捴捧慡慧⁴瑧杧杣杴瑴††㌠㐸㰰牢ਾ戼㹲愊杣瑧慧慡⁡捣杴捧瑣瑡琠捴捣慴慡⁧杧瑴慴瑴慧朠慡慴杴瑴⁴瑴杣捴捴条††㌠〹㰰牢ਾ戼㹲挊慣瑡捣瑣⁧杧杴条瑴捴愠捣条瑴瑴⁧瑡瑴慡捡瑧朠捧慣瑡瑡⁧慧慣捡瑴瑣††㌠㘹㰰牢ਾ戼㹲琊杣捣捣杣⁴瑴捴捡慣杴朠捧慡瑡瑡⁴瑡捡捧慡杧挠慧慣条瑧⁧瑣慧杴捣捧††㐠㈰㰰牢ਾ戼㹲琊杧杣瑡捴⁡杧瑴慣捴瑡朠捣瑧瑴瑧⁧瑡杧瑣捴慣琠瑧杣捧条⁡瑡捧瑴慡杴††㐠㠰㰰牢ਾ戼㹲愊瑡慴慣捡⁡瑧捡杴杣瑡朠条杴捧条⁧捧杧杧杣慴愠瑴瑴瑴慴⁡杧慣瑧慴瑴††㐠㐱㰰牢ਾ戼㹲朊瑧捧捣瑴⁡慡杣捣杴瑧琠捧慴杣捣⁴慧瑡慡瑧慧琠慡慴条杣⁧瑡慧瑡杧慣††㐠〲㰰牢ਾ戼㹲朊慡瑡捴慧⁴慧慴条瑣瑧挠慡捡捡慡⁣慣捣瑡慣慡挠条慧瑴瑴⁣捧瑣捧杴杧††㐠㘲㰰牢ਾ戼㹲朊慣慡捣条⁣瑧杧捡杣瑣琠捧杴慣捡⁴瑣瑣慣杧���挠条捧杧杴⁡条杧慣瑡慣††㐠㈳㰰牢ਾ戼㹲朊瑣瑧杴捣⁣瑧瑣慣瑣杧琠慧慡条慡⁡慡捣捡捣杴朠杣捣慣瑡⁡杣慣慡捣捧††㐠㠳㰰牢ਾ戼㹲挊捴捴捣杣⁣捧瑧杴捧杣愠瑴慣瑴慡⁴捧条瑣杧慣挠慧慣杧瑴⁴捣杣捡杴慧††㐠㐴㰰牢ਾ戼㹲愊条杣杧慣⁧杴条杣慣捡朠慣瑡慴瑡⁧慴条瑴条杣挠慧瑡杴慣⁡捧杴捧杣捡††㐠〵㰰牢ਾ戼㹲朊杣瑣杧捧⁴捡瑧瑣杴瑣朠捧瑧捴杧⁧条慣慧条条挠瑡捡瑡瑣⁧慧条慣慡捧††㐠㘵㰰牢ਾ戼㹲挊条慧慡捧⁧捧瑣瑡杧条挠杴杴杣捧⁡捧捧捴条慴朠捧慡瑴瑴⁴慣慡瑡瑡杴††㐠㈶㰰牢ਾ戼㹲琊慴条捣瑴⁴捴杴条慣杴朠慴瑴瑴捴⁡杴瑧瑡慴捣愠瑡慴捧条⁧慡慡慴条捣††㐠㠶㰰牢ਾ戼㹲愊瑴慧瑡瑡⁡慡条瑡慡慡愠杴捴瑴瑧⁴慴慣瑡条条琠杧杧杧杧⁴慣捧瑣捧杣††㐠㐷㰰牢ਾ戼㹲挊瑣杴杧捣⁧杧杴瑡瑧杣琠捡瑴捧捣⁧捣捧慧捡捴朠瑧慴捣瑧⁣慣捧捣条杣††㐠〸㰰牢ਾ戼㹲挊慧捣条瑣⁣杣捧慡杣捣琠杣杣慣捣⁣捧瑴捧杧杣挠瑴捧捧瑡⁧瑧杣慡捣捡††㐠㘸㰰牢ਾ戼㹲琊杧捣捴杴⁡杣捧慣慧慣琠条捣捧捡⁡条瑧瑡瑣瑡朠慧条捣瑴⁧捣杧瑴瑴捧††㐠㈹㰰牢ਾ戼㹲挊杧杧捴慧⁴捣条捣捡捡愠捧杣瑣杧⁴捧条慣杧杣朠捧杧瑴捴⁧瑣瑧捣条杣††㐠㠹㰰牢ਾ戼㹲挊捣捧捡瑣⁣瑧捣瑡捧杴愠杴杣慣慣⁴捧杴捧杣捣愠捣慣杴捡⁧捧瑣捧捧慧††㔠㐰㰰牢ਾ戼㹲琊慣条杧瑧⁴慣杧捧慣杣琠捡条捧捧⁣杣捴杣捣捴朠捴捧杴捧⁧慴瑣捣慧慣††㔠〱㰰牢ਾ戼㹲朊慣捧杣慡⁡捣捣杴捣捧琠杴杣捧慣⁴捴杴杧杣瑡朠瑡杧瑡捡⁣瑴捣慡条捧††㔠㘱㰰牢ਾ戼㹲朊瑣杣瑡捧⁡瑧捣杴慴杴琠捧瑴慧捧⁧捣捣捡慣瑣愠捴慧捣捴⁴捧捣杣瑡瑴††㔠㈲㰰牢ਾ戼㹲挊瑣瑴捧慣⁧杣捣杣瑡条挠慴捣瑴杴⁡捣捡瑡杧慣琠捴条杣瑧⁧捡杧捣捴捣††㔠㠲㰰牢ਾ戼㹲愊瑣杴杧瑴⁣慣杧慡慣捧挠杧条瑣捧⁣瑧捣捧瑣捴朠瑧瑣杴杧⁴捴杣杧捣慡††㔠㐳㰰牢ਾ戼㹲朊慣瑣条捧⁣瑡慴杧捣慣朠捣瑡杧捣⁡捣条捣瑣杴挠条慧杴杣⁣条瑡慣捴条††㔠〴㰰牢ਾ戼㹲挊捧捣条杣⁧瑣捣杧捧杣挠杴慡瑣杣⁡捴杣瑣杴捣朠捴捧杣慴⁧捴瑡捡瑧慣††㔠㘴㰰牢ਾ戼㹲挊瑧捣条瑣⁴捧杴杣瑣杴挠捧捴捧捣⁣捧瑴慧杧捧愠杣慧捡条⁧捣杧杧捧慣††㔠㈵㰰牢ਾ戼㹲朊捡条杴杣⁣杣杧捴瑧捧挠杧捡瑧杧⁣杴条捧杴杴挠瑴瑧捴瑴⁡杧瑣捴捡慣††㔠㠵㰰牢ਾ戼㹲挊杧杧慣捣⁣捣瑴捧捴瑴朠杣瑣捧瑣⁣捴慣捧捡杧挠杧捧瑴慧⁧慣捣捣捧杣††㔠㐶㰰牢ਾ戼㹲琊慣杴捣捧⁣杴慡捣捡杣愠捴条杣慡⁣杧杴杣捣瑡愠瑧杴捧瑣⁴捧捴捡捡杣††㔠〷㰰牢ਾ戼㹲愊条杣慧杣⁡条慡捣杧杣挠杴瑧杣捴⁧捴慣慣捣捣愠瑴捣捴杧⁣瑣杣捧捧杴††㔠㘷㰰牢ਾ戼㹲朊捴瑡捧捴⁧捡条瑧条慧挠杴捣条杣⁧瑡瑧慴捴慧挠慣瑧捡杣⁡捧杴捣捣杧††㔠㈸㰰牢ਾ戼㹲挊杴捧瑣捧⁴捧杴瑧杣捣琠捧捧捣瑡⁣瑡杧捣捧捧挠瑣杴瑣杧⁣瑡杧杴慣杧††㔠㠸㰰牢ਾ戼㹲愊捡捡慧慴⁧条慣捣杣瑧愠捴杧杣捧⁧瑡杧捣捴慣琠捧慧捣慧⁴慧捣杴杧捣††㔠㐹㰰牢ਾ戼㹲愊杴杧捧杣⁣杴捧瑧瑴捴琠捴瑣杣瑡⁧杴慧捡杣捧朠慣捧瑧瑧⁣慣捧捡慣捴††㘠〰㰰牢ਾ戼㹲愊杧杣捧杧⁣捣捴杧杣捧朠杣瑣杴条⁧捣瑧杣慡捣愠瑣捣杧杧⁣慣杴瑡瑧杴††㘠㘰㰰牢ਾ戼㹲朊捧条捧杴⁣杣瑡慣捧杧挠杴慧捴条⁣条捧杣捴条挠慣杣捧瑴⁧捣瑧捴瑣杣††㘠㈱㰰牢ਾ戼㹲朊杣瑣慧杧⁴捧捧捣慣条朠捧瑧捧条⁧杣瑧慧杴慡琠杧杣瑧杧⁧杣杧捴瑴杣††㘠㠱㰰牢ਾ戼㹲朊杣杧慣杧⁴条瑡慣捣杧朠捣杧杴杧⁣条瑴杣捣慣挠瑣捣条慣⁧瑡捣杧捣杣††㘠㐲㰰牢ਾ戼㹲���瑣捧慡捴⁴瑧捧杧捣条琠杴慣杧捧⁣条慣杴慧瑴琠捡杣捧捡⁣捡杣杧杣捡††㘠〳㰰牢ਾ戼㹲愊捣条杣捣⁣杣捡杣慴捣朠捧慣捣瑡⁧瑴杧捧慡慡挠瑧条捴慣⁧杣瑧杧杣捧††㘠㘳㰰牢ਾ戼㹲朊瑣捧杴杣⁡捡捧瑣捣条愠瑡瑡杴瑡⁡杧瑣慴杴杧琠条捣瑡杴⁡瑴捧瑣捣瑴††㘠㈴㰰牢ਾ戼㹲琊捧条捧条⁴杴瑧杧瑴条朠杣瑣杧杣⁧杧捴捡慴捣挠捣捧捣杴⁣捧杣瑣瑣慧††㘠㠴㰰牢ਾ戼㹲朊瑴瑣捴慣⁧捧捡捴捧捧愠捧捧瑣杣⁴瑡捴瑧杣捴朠瑧慣捧慣⁧慡瑣杴杣瑣††㘠㐵㰰牢ਾ戼㹲朊捡捧瑡捣⁣瑴杴捧瑣捴愠杴杣瑣杣⁧慣慴捴捧捧琠杴捧瑧捡⁡捧瑧慣杧捧††㘠〶㰰牢ਾ戼㹲琊杧捣条慣⁧瑧杣捣杧捴琠捧瑴瑧捣⁴瑴杴瑧瑣瑴挠瑡瑡慣瑧⁣捡杣条慡捡††㘠㘶㰰牢ਾ戼㹲琊杴捣杧杧⁣杣慡条捧瑴朠捴瑴杣杣⁧慡慣条慧慣愠杧杴慣捧⁣瑧慣条瑧慴††㘠㈷㰰牢ਾ戼㹲愊杧瑣杧捣⁡慴捴条杣捡琠慧慡条杣⁧捣条捣捴杧挠瑣杴瑴杴⁡杣慴慴捡慣††㘠㠷㰰牢ਾ戼㹲愊条捣捡杣⁧捧慡捣慡慴朠捣瑣杴捴⁡瑣瑴杴瑡慣朠瑧条捡杣⁡捣瑣慧条杣††㘠㐸㰰牢ਾ戼㹲挊瑴瑴瑴杣⁴瑡捴慣慴慡愠捣捣瑣捴⁴瑧捧瑧慧瑧愠瑣慣慴瑧⁡慴捡条捧瑧††㘠〹㰰牢ਾ戼㹲朊条慴捣慡⁣捧慡捧捡慴挠瑡捧杴慡⁡捴杴捧捣捧挠捣杴捴慣⁴捧瑣杣瑣杧††㘠㘹㰰牢ਾ戼㹲挊杧杧杴捣⁧瑧捧捣瑧捧挠条瑣杣捧⁣杣杣慣条瑣朠慧杣瑣杧⁧慣慧捣慣杴††㜠㈰㰰牢ਾ戼㹲愊捣瑴捧杴⁡杣瑧捧捧捴朠瑡瑧慡捴⁣捧瑴杣杴捧挠杧捧瑴捧⁧瑣瑣捧慣捧††㜠㠰㰰牢ਾ戼㹲朊瑣杧捧杴⁧捣捴杧捣瑡朠捧瑣杴捣⁧瑡瑴捣捴杧挠捡杴杣捧⁣捣杧瑣杧捣††㜠㐱㰰牢ਾ戼㹲愊捧瑴瑣捧⁧杣捧慧慴慡朠捴捧捡瑴⁧瑣慧杧捴瑡朠捡杣慡捧⁧瑣杴捡慣捧††㜠〲㰰牢ਾ戼㹲挊杣捧慣捴⁴杣瑣捧杧慴挠捴瑧捣条⁣捧杣杴杣捣朠瑧杧杣捧⁴慡捧杴捣捧††㜠㘲㰰牢ਾ戼㹲琊杣杧慣瑧⁴杣条捧杴捧挠条捣杴杣⁧捧瑣捴捴瑣朠瑣捧杣瑣⁧杧捣杴瑣杣††㜠㈳㰰牢ਾ戼㹲愊捴杴瑣杧⁣慣捧瑣捧杴挠捡慣捧捧⁣杧捧慣捧杧琠杧杣瑧瑣⁴捧捣瑴杧瑡††㜠㠳㰰牢ਾ戼㹲琊慣杣慣捧⁡捧捡捣捡杧挠杴瑡慡捣⁧捧捧杧瑧杧琠瑧捧瑴瑧⁣瑣杴杣瑧杴††㜠㐴㰰牢ਾ戼㹲朊杴慡捧捣⁧捣慡捧杧捣愠慴瑧杧杣⁧瑣瑧杣捧捧琠杧捣杧瑧⁣杧杣捴瑧捡††㜠〵㰰牢ਾ戼㹲琊杣瑣杧捣⁡捧瑧捣杧捧愠瑡瑣捧捣⁣杣慡瑧捴捡挠捧瑣捧杧⁣瑧杣捧慣捣††㜠㘵㰰牢ਾ戼㹲琊杴捡捣瑡⁧捣杴瑡条瑴挠瑴杣杧瑣⁧瑧瑴捣捡慴挠慣杧捧条⁧瑣捣杣捧捣††㜠㈶㰰牢ਾ戼㹲琊杣捧瑴捴⁡杴捴瑡捣条朠捴慡捡捴⁧瑣慧杧捴瑧挠慣捣条慣⁣慣慧捣瑡捧††㜠㠶㰰牢ਾ戼㹲挊捧捴瑣捧⁴杣捧杧捧瑣朠瑡瑡捡捡⁧捴瑡杴捣瑣朠杧慣瑴慣⁴捣捧瑴慧捧††㜠㐷㰰牢ਾ戼㹲挊瑡杧杣杴⁴捴杴慧捧捡琠捴杧杣捧⁴慧捣瑡捴捣朠瑧捴瑡慣⁴瑣杧捣杧杴††㜠〸㰰牢ਾ戼㹲朊瑧捧瑧捣⁣杴捡捧杣瑡愠捴慧条杣⁣捴捡条捣慣琠杧捣瑴慧⁧瑣瑧杣捧瑣††㜠㘸㰰牢ਾ戼㹲愊杴捧瑣捧⁡慡瑧捣杴捴朠瑴瑣捴瑡⁣杧捧慣捣慡朠杣慣捧慣⁧瑡杣条捣瑧††㜠㈹㰰牢ਾ戼㹲挊瑣杣瑧杴⁴慣瑧杧杣捴愠杧捴慧捧⁡条条慣捡慧琠捧慧捴条⁣条慣捣捡杣††㜠㠹㰰牢ਾ戼㹲琊条捧瑡慣⁴杧慡捧慣捧愠捴捡杧瑴⁡捧慣慴捧瑴挠慣瑧捧慣⁣捣捣捧慧杣††㠠㐰㰰牢ਾ戼㹲挊捧捴杣杧⁣捧捴杴杣杣朠杣瑣捧捴⁡捣捴杧杣捧琠捡瑣捣杣⁣慡瑣瑣瑴杧††㠠〱㰰牢ਾ戼㹲挊慣捧捴慣⁣捣瑡捧杣捣挠瑣瑧瑣杧⁣捧杴杧瑣瑴挠条捣捡捴⁣捧杣捣杴杣††㠠㘱㰰牢ਾ戼㹲挊瑣杣瑣杧⁣瑣捧瑴杧捴琠杧瑣慣杴⁡捣杴捣杧���琠捴瑧杣捧⁣条杴捴捧慣††㠠㈲㰰牢ਾ戼㹲琊捧捴杴杧⁣慣捧杧瑴杣愠捴杴瑣捣⁧瑣慡瑣杣瑴朠瑡捧瑣瑣⁧慧瑴捴瑴慣††㠠㠲㰰牢ਾ戼㹲挊捴杴捴慧⁴杴杣瑴慣杴朠捴慴瑴捧⁣捴捣杧慴瑴挠瑣瑧慡瑧⁣慧杴瑡瑣杧††㠠㐳㰰牢ਾ戼㹲朊杣瑴杧杣⁧杴捴慧杴瑴挠条杧捣捡⁧捴杴捣杣瑧挠杧杴杣慧⁴捧捣杣捧瑣††㠠〴㰰牢ਾ戼㹲琊捣瑡瑣捣⁡捣捡瑧捴杧挠捣慣杧杴⁡捡捡杣杧慣朠捧捧捴慧⁴捧捣杴杣捣††㠠㘴㰰牢ਾ戼㹲琊慣条杴瑴⁣杴杴瑧慣瑡朠杣杧杣捴⁧杴捧慣捧捣朠瑣瑣慡杴⁣捣杧瑴杧慣††㠠㈵㰰牢ਾ戼㹲琊杧捴杧捣⁣瑡捧瑣杣杣朠瑧瑣捧捴⁡条捣瑡捧瑣琠杧捧瑴慧⁧杣瑣捴杧捴††㠠㠵㰰牢ਾ戼㹲琊捴杴杴捣⁣杣捣瑣捴捴挠杧杧捴瑴⁧捣瑧杴慴捣朠瑣杴慡捣⁡瑣慧捧杧杣††㠠㐶㰰牢ਾ戼㹲朊捧杣瑣杣⁡杴捣瑧慣瑴朠瑡捣捧捴⁧慧慧捴瑡慣朠瑧杧慣瑧⁧杣杧瑴瑣杣††㠠〷㰰牢ਾ戼㹲挊杣捣捡杣⁧慣杴慧杴捧挠条杣慴慴⁣杧慣杧杣瑣挠杧慣捣杧⁴慣杧杴瑣杧††㠠㘷㰰牢ਾ戼㹲朊杣慡瑣杣⁧捡捧慣捧捧挠瑴瑣捧杴⁧捴慧杧瑧慣朠瑣杣捡杣⁧慣杧捧慡瑡††㠠㈸㰰牢ਾ戼㹲琊杣捡瑣捣⁴杴慡慣捧杣挠捣瑡杴捧⁧杣瑴慣慴慣朠瑧杣捧条⁣瑡捣慣瑧条††㠠㠸㰰牢ਾ戼㹲琊杣捧杧捧⁣捧捴慧杣慡挠捴杣捧瑡⁧杴捣杣慧瑴挠杧杣杴慣⁡慧瑣捴瑡捣††㠠㐹㰰牢ਾ戼㹲愊杴捴捧杧⁧慣慴瑣杴捣琠捴捧捧杴⁧瑡瑧条捴杧挠瑣杴捧捣⁴杧捣慧瑴杧††㤠〰㰰牢ਾ戼㹲挊杣捣杣捡⁣杴瑣捧杣瑧琠瑴杣捣瑧⁡条瑧慧慴慡琠杣捣瑡捧⁴捧瑣杣瑣瑧††㤠㘰㰰牢ਾ戼㹲琊捧瑴瑴捧⁴瑴捴杧瑣捣愠杴慣瑡杧⁣捣捴杧条条挠捧捡杣捣⁣慧条杧杴捧††㤠㈱㰰牢ਾ戼㹲挊瑧慴杧捣⁡瑧瑴瑣杣慡朠条慡捡杣⁧慴条杴杣捣挠捴捣瑣捡⁡慡瑧条杧捴††㤠㠱㰰牢ਾ戼㹲朊杧瑡杴捣⁧捣捧杴杴捣琠捣瑡慧慴⁧捣慴杣条捡愠捧捡瑡慴⁡慣瑡杧杧杴††㤠㐲㰰牢ਾ戼㹲琊慣条瑡杧⁴慴条杧慧捧愠捡慡杧杣⁧杣慧捴杧瑣朠捧慣条瑣⁣慧条慡慣捡††㤠〳㰰牢ਾ戼㹲朊条杣杣慡⁴慣瑡捧杣慡愠瑴慣捧杧⁧条杣杧慣条朠慧捡条慣⁧慣条条杣慣††㤠㘳㰰牢ਾ戼㹲愊慧捡慧慡⁣慡杧杣慣条朠杴瑣杧杴⁧杧捧慣杴瑡琠瑴杧捣慡⁧瑧慧捡条慣††㤠㈴㰰牢ਾ戼㹲朊杣条杴捧⁣杧条慧捴杧挠捴瑡杧杣⁧慣瑡杧瑡捧朠慴捣瑴慧⁡杣杣捡慣杣††㤠㠴㰰牢ਾ戼㹲愊捣捧捧瑣⁴瑧捴杧捴杴挠杣捣捡捧⁣条慡杧瑡慧朠捣杧捧杴⁡瑡慧捴慧捣††㤠㐵㰰牢ਾ戼㹲朊条捡条捧⁣瑣捧杧杧瑣朠慣慣杣杣⁣捣捣捡捣瑴挠杧瑧条杧⁧慧慡杧捣捧††㤠〶㰰牢ਾ戼㹲琊慡条杣捧⁴慡慡捧捧捴挠条杣慴瑴⁴瑣捧杧杧瑴琠杧杴杴杧⁧瑴慴捧杧捧††㤠㘶㰰牢ਾ戼㹲琊瑴捧捣捧⁣瑴捴捣捣杴挠杣杣慣捧⁧瑧杧杧杣瑧朠杴慴捧瑣⁡捧捧条杣慡††㤠㈷㰰牢ਾ戼㹲琊条捡慣捧⁴瑡捣杧捣捴琠杧捣杧捧⁡慴瑴杧捧慡朠杧慣捧条⁣捧捣慣慣条††㤠㠷㰰牢ਾ戼㹲朊捧捧杴瑡⁡捡杣杣捣慴朠杴慧瑴瑡⁴瑣慴慧慴瑡挠瑡杧瑡杧⁡瑴瑴捴慣捡††㤠㐸㰰牢ਾ戼㹲愊捣捣捧慣⁧捣捣杣捣捣琠捧杴杧瑴⁴捧条瑧瑴杧朠杧杣杴捡⁡瑧慴瑴捧条††㤠〹㰰牢ਾ戼㹲朊杧瑴杣杴⁡慣瑧慴瑴捧愠杧杧杧杣⁴慧慣瑧慴瑴朠慣杧杧瑴⁣瑧慧慣瑧慴††㤠㘹㰰牢ਾ戼㹲朊慴杣杧条⁴慧杣杧慣瑣朠捧杴捧慡⁴瑧瑣条慣捡朠捧条捧瑡⁴捴杧瑣慧杧††〱㈰㰰牢ਾ戼㹲朊慴慡条慡⁣瑴捴杣瑣慡朠杣瑡条捡⁴瑧瑡瑧慡捡愠慣瑧瑡杴⁣慡杧捡捧杧††〱㠰㰰牢ਾ戼㹲愊捡瑡捧瑣⁣瑡瑧杧杣捧挠条慧杣捧⁣条捣杧慧捴朠杧瑡捡杴⁧捴瑧慴捣条††〱㐱㰰牢ਾ戼㹲���捧慣捣慧⁣捣慧捧慡捡挠瑣捴捴慴⁴慣慧捴瑧杴愠杣条慴瑴⁡捣杣捧瑡捴††〱〲㰰牢ਾ戼㹲朊瑣捧捧瑴⁡杴捧条条慣朠杧慡条慧⁡瑴捧杣杧瑣愠杴杴慣捡⁧杧慡瑴杴慡††〱㘲㰰牢ਾ戼㹲朊慡瑴捴捴⁣慡杴杣杧杣朠瑣杧条慣⁴杧瑣瑴瑣捡朠杧瑴杣瑣⁧杣条捴瑴捧††〱㈳㰰牢ਾ戼㹲挊捡捧杣条⁣捡瑣杧捴捧琠瑴慣慧慡⁴慣瑡瑣慡条琠瑡瑡瑡慧⁧慴慡瑣杴瑧††〱㠳㰰牢ਾ戼㹲挊杴捡条瑴⁡捣慡杴瑣慴愠捴条杴条⁧慣捣慴捴捴愠捧慧捴杴⁴瑣瑡瑴杣瑴††〱㐴㰰牢ਾ戼㹲挊瑡捣瑡条⁴杴捣杴捡捴挠捣瑧杣杴⁴条瑡慡瑣捡朠瑡捡杧慧⁧杧瑣慴捣瑡††〱〵㰰牢ਾ戼㹲挊杴捧捣慣⁧杴瑣捧慡杴愠慴捣捧慧⁧捡捣捡捧捴愠捣杧瑣捣⁡慧瑴慴捴条††〱㘵㰰牢ਾ戼㹲挊慡慴慡捣⁡捧慣捧杣慧愠杧捧杣条⁣捧条慡瑧杧琠捣杴慣捡⁴瑴瑡捣捧瑣††〱㈶㰰牢ਾ戼㹲挊慣捴慣瑧⁣慴瑴慡瑴瑧琠捧杣杧慡⁧瑣条条慴条琠条瑴杣捣⁡瑧慴瑡条瑴††〱㠶㰰牢ਾ戼㹲琊捧捧慡杣⁴杴瑴捧慣瑴朠瑣捡条捧⁡捴瑧杧杴捴愠杣瑣杣捴⁧瑴杴瑧瑡杧††〱㐷㰰牢ਾ戼㹲挊瑴慣瑴慣⁧瑣捣杧瑴捣挠慡杣瑡慣⁡杧杣条瑴捡愠杴瑡捣捣⁣瑡瑧杴杴慣††〱〸㰰牢ਾ戼㹲愊慡慡捧杧⁴慴捧捴瑣捴朠瑧捣捴杣⁡捴瑧杴捴条愠条慴条瑴⁧捧杣慣瑧瑧††〱㘸㰰牢ਾ戼㹲琊瑡慣瑣慣⁴杧瑴瑡杧慣朠慣瑣捧瑡⁡瑡捴捴瑴捡琠瑧慣杴捣⁡捴杣慴条瑡††〱㈹㰰牢ਾ戼㹲朊瑣瑴捴杴⁴慧瑣杧杴条琠捡捴慡捣⁡条捴瑡捴杴愠慧瑡条杴⁴瑡捧杧杣捡††〱㠹㰰牢ਾ戼㹲挊慧瑧杴瑣⁣瑴捧捣杧杣琠慣捡捡杧⁧瑡慡慴捣捧朠捣捡瑡条⁣条慡瑣瑴慡††ㄱ㐰㰰牢ਾ戼㹲愊条杴瑣慣⁴慣瑴杧慡慡挠瑧捴瑴杣⁧杧杣慡慡瑣挠捴慡杧瑡⁣瑴捡杣瑣瑧††ㄱ〱㰰牢ਾ戼㹲琊慧慧捴慣⁧瑴杣瑡瑧慡挠捣捡捴瑧⁧慣捣慣捡杴愠捴瑴慣捧⁡捴瑴瑴捡瑴††ㄱ㘱㰰牢ਾ戼㹲琊慣捣条杣⁴瑴瑣杧瑧慧朠慣慡慡慣⁧慧条捧慡慡琠捧杣慣慡⁡慡杧慧瑡慡††ㄱ㈲㰰牢ਾ戼㹲朊杧杣捡捡⁧慧慡杴瑴慧愠慴瑣慣慴⁣捴瑴捣瑴瑴琠慣瑡瑡慴⁴杴慡捧瑡瑴††ㄱ㠲㰰牢ਾ戼㹲愊捴条杧瑴⁡瑴瑧瑣慣杴愠捧杧瑡捡⁡慴瑴杴慡杴琠瑡瑴条慡⁡慡慴慡慣慡††ㄱ㐳㰰牢ਾ戼㹲愊慧瑧瑴瑧⁡慧慡杣慣慡愠条捧慣捴⁣瑧慣杧瑡杧挠瑣捴杴瑣⁴慡瑴杴瑡捧††ㄱ〴㰰牢ਾ戼㹲挊杴捧条瑴⁴瑡杧杣杧杣琠捣杴捣杣⁣慣捣瑣捣杧朠捣瑧杴瑣⁴杣慣捡瑧捴††ㄱ㘴㰰牢ਾ戼㹲愊慡捴杣瑣⁣捣杧杣慧瑴琠瑧捣慴瑣⁣条慧慧捧瑧琠慣捣慧慣⁡捡慡慣慧慴††ㄱ㈵㰰牢ਾ戼㹲愊慡杣慡†††††††††††††††††††††††††††††††ㄱ㈵㰷牢ਾ戼㹲㰊牢ਾ氦㭴ㄲ☰瑧※ㄠ㌲戼㹲☊瑬㈻ㄱ朦㭴†ㄱ㘷㰹牢ਾ氦㭴ㄲ☲瑧※䐠䅎戼㹲☊瑬㈻㌱朦㭴†牁楴楦楣污匠煥敵据㱥牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〲朦㭴戼㹲☊瑬㈻㌲朦㭴†汰獡業⁤䱰批䱁〳挠湯慴湩湩⁧瑯䉳⁁灯牥湯戼㹲㰊牢ਾ氦㭴〴☰瑧※ㄠ㌲戼㹲愊杧捣慣瑧⁣瑴捴慧瑣慧朠捣瑴捴瑧⁴瑴瑡瑴慧杴挠瑣杧慣瑧⁴捣瑣捡捴捴†††㘠㰰牢ਾ戼㹲朊慣杴杧慧⁧捡捣慣慣瑣愠捣瑡杣捧⁧瑣捡杧杣瑴琠慣瑣捴杴⁡瑧捴杧慣杴†††㈱㰰牢ਾ戼㹲朊杧捴条瑧⁧杧捡慣捣捧朠瑣捡杴捣⁧捣条捧慡瑡琠瑣瑧瑴慴⁴慣慧捣捧瑴†††㠱㰰牢ਾ戼㹲挊杴杣瑴瑣⁧瑡瑴慡捴杴琠瑡慣杧瑣⁧慡慡捴瑴瑣挠捴瑡捣捧⁣慡慡慣捧慣†††㐲㰰牢ਾ戼㹲愊捧瑴捧瑡⁧慣捣条慴慡挠瑡慡瑡瑣⁣捣杣捧慧杣挠慡慡慡杣⁧瑧慧捣瑡慣†††〳㰰牢ਾ戼㹲愊捧杣瑧捧⁧瑣捴杧慣瑴琠瑴瑣捧瑴⁴捧瑣条慣杧挠瑡杴杴杧⁧杧杧慣捡杴†††㘳㰰牢ਾ戼���挊捣慴瑡慴⁴慣瑡杣慴瑣朠捧慧捴捣⁣慴杧杴杧瑴朠瑣条慡慧⁣捣捣慴慧杴†††㈴㰰牢ਾ戼㹲琊瑴捴瑣杧⁡捣慡捣瑴慣朠慡瑴慴捴⁣捣慧杴慡捧挠捡慧捧杣⁧慡瑴杴瑡捴†††㠴㰰牢ਾ戼㹲琊慣瑧慣捡⁣慣捡瑴慣瑡挠条慣条杴⁧瑧慣慧杴瑧愠瑧捡慡杧⁣杴捧瑴慧慴†††㐵㰰牢ਾ戼㹲朊慴慡慡瑧⁴条捣瑴杴捧挠慡慡瑣捡⁧瑡瑧杣杧捧愠瑴捧条条⁴瑧瑴慴捧捣†††〶㰰牢ਾ戼㹲挊慣瑡瑣捣⁴杴捣慣捡慡挠杧杧捴杧⁧捣慣捡杧慧琠慣条捣慣⁡慡杧捴慴捴†††㘶㰰牢ਾ戼㹲愊捣慡慴杣⁡捡捡慡瑧杴挠条瑡瑴慴⁧捣慴捴慡瑧琠慡捣捣慣⁡慧捣捣慡捣†††㈷㰰牢ਾ戼㹲朊条捣捡杣⁴慴瑣捧捣杧朠慴慧条慡⁡瑴条捣条捣挠瑴慴捣瑣⁡杧慴瑡慣捡†††㠷㰰牢ਾ戼㹲愊捧条慡杧⁧瑣捣捧慣捣愠慡慧杴捡⁴杴捡杴杴杣挠慴捴条瑣⁡瑧捡慧慣捣†††㐸㰰牢ਾ戼㹲愊条杧瑧瑴⁧慧慡瑡杴捡挠慡瑡捡慡⁧杴瑧慡瑡杧挠捣捣瑧慴⁧杴杣杴捧瑧†††〹㰰牢ਾ戼㹲琊慡瑣捣捣⁴瑴杴捡慣瑡朠捧瑡捡杧⁣慴慧杴捣捣挠瑡条瑧捡⁧慧慡捣杴慣†††㘹㰰牢ਾ戼㹲挊瑴捣慧慧⁡瑣慡捧捣瑣愠捣瑧慣瑣⁡慴条条杴杴愠捡瑧瑧杣⁧捣捣条捧慡††ㄠ㈰㰰牢ਾ戼㹲琊杧瑡杴慧⁡捣瑡杧瑣瑴琠杣捧捣瑡⁣瑧杴杴捴瑴愠慴瑴瑣慴⁣瑴瑧慴捡杧††ㄠ㠰㰰牢ਾ戼㹲朊条瑴慡瑴⁡慡瑡慴杴杧愠慡条瑴瑧⁴杧慧瑴慧捣琠杣瑧捡杣⁴慴条慡杧条††ㄠ㐱㰰牢ਾ戼㹲朊瑡捣瑡瑡⁧瑡瑣杴瑡杧愠捡捧杴捧⁧慧慡捴慡捡挠捧瑡捣杣⁡捴条瑧杣捴††ㄠ〲㰰牢ਾ戼㹲朊杴捣杴捡⁡瑡瑡捴杴慣愠杧捡慴慣⁧瑣捡杴捧慡挠杣慣条杴⁡杴瑧捧瑡杴††ㄠ㘲㰰牢ਾ戼㹲朊慣瑴慧慴⁴慣杧捧捧捴愠瑡杧杴慧⁧瑣杴捡捧捡琠杧慣慡捡⁣瑴瑡杣瑣捴††ㄠ㈳㰰牢ਾ戼㹲挊杣瑴条杣⁧捧瑧捧瑡杧朠捧杧条杣⁣杣杴捡瑡慣愠杴瑧慡慡⁣捡瑡瑡杣瑴††ㄠ㠳㰰牢ਾ戼㹲挊瑡瑣捧杣⁧瑡捧慧瑴捧朠杣杴瑡瑡⁴条杣杴慣捡琠捧瑡捡条⁴慣捴捧捴条††ㄠ㐴㰰牢ਾ戼㹲琊瑡捣杣捧⁧杣慧捧杴慧朠捧慧慡杧⁧瑡杧瑣瑴杴挠捧杴慣瑴⁡捴瑧慣杧瑣††ㄠ〵㰰牢ਾ戼㹲挊杣慣捧瑡⁧慡慧杣慣瑴愠瑡慧慣瑴⁡捧捧慡杣慴琠慴瑣慣慧⁴瑣杧捣捡慡††ㄠ㘵㰰牢ਾ戼㹲愊杴捧瑧慴⁣条慣杧慧慡朠杴杴瑴瑧⁣慧慧捴慡捡挠慧慧杧慴⁣慣瑧慡条瑧††ㄠ㈶㰰牢ਾ戼㹲朊条捧慡瑴⁧慣捧瑴瑴瑡朠慣杧慡捧⁴捣瑣瑴瑡杣朠捧慧捡捧⁣杣慴瑴捴杴††ㄠ㠶㰰牢ਾ戼㹲朊捧慧杴瑡⁴慴捡杣瑡慧愠捴杴捧瑴⁣捧条捴瑧慴愠捣慧瑣杧⁧杣慧瑡瑧慣††ㄠ㐷㰰牢ਾ戼㹲朊慴慡慡瑴⁧捧捡条瑧捧愠捡捴条捧⁡捴瑡杧杣捡琠杧杣杧杴⁴捧杣慧杴捴††ㄠ〸㰰牢ਾ戼㹲琊杧条瑣杧⁣瑴慧慡杴瑡愠捡慣捣捧⁡瑴捡慡慣慡愠慡慧慧慡⁡慴捡条慧瑧††ㄠ㘸㰰牢ਾ戼㹲朊瑡慧瑣瑡⁧条捴瑧瑴条琠杣慴瑧瑡⁣慴捡杣慧瑴朠慣捣捡慣⁧捡慧捧捡捧††ㄠ㈹㰰牢ਾ戼㹲挊捧慣瑧捧⁣杧杴捧瑣杴挠杣瑴杧慣⁴捡杴杧杧慣挠杴慡条捣⁧慣杧杣慧瑣††ㄠ㠹㰰牢ਾ戼㹲朊杴瑧瑴杧⁣杴慧瑧杧杴愠慡慣杧慧⁡杴条慧捴条挠杣瑣慡慡⁡条瑧慧慡慡††㈠㐰㰰牢ਾ戼㹲愊杧慴捡瑡⁴捡瑧杧捧瑣挠瑴瑴慡捣⁴慣捧慧捡条朠捡瑣杴捡⁧慡慴瑣捡慡††㈠〱㰰牢ਾ戼㹲挊慣瑡捴捴⁣慡杴捣瑧捴琠瑣杧捣杣⁣瑴瑴慣瑴瑡挠杧瑣杣瑡⁣杴瑧捧慡瑴††㈠㘱㰰牢ਾ戼㹲琊慣捧瑧捣⁴捧瑣杧慧杣朠瑣瑡瑣捡⁧杣慴慡杴杣琠杴瑣杧慣⁧瑡慡瑡慴瑣††㈠㈲㰰牢ਾ戼㹲朊捣捧杴瑴⁧慣条捡慧杴愠慣瑴瑡瑣⁧慧捴慣杣瑡琠瑡慣捣杴⁴杴捣瑡瑴捧††㈠㠲㰰牢ਾ戼㹲朊慣杴慡瑴⁡杣慣慡杣杧朠条杴慡慴⁡捴捧瑡���瑧琠捴瑴捴杴⁣瑡瑡捴瑣瑴††㈠㐳㰰牢ਾ戼㹲挊捣慧慣捣⁧慧慡捴瑴慣愠杣杣瑣捧⁣慧慣慴杴捡愠捣瑴捧瑴⁧慡慣捧瑴杴††㈠〴㰰牢ਾ戼㹲琊慧瑴瑡慧⁴瑴捧杴杧瑴琠捣条捡条⁡慡捡慧捴瑧挠杴捧瑧捴⁣杴慧瑴瑧瑣††㈠㘴㰰牢ਾ戼㹲琊捴慴捡瑣⁧捡捣捧瑧慣挠慧慣杣慴⁧杣慣慡慡捧挠瑡捡条捣⁴杧杧慣慡捧††㈠㈵㰰牢ਾ戼㹲愊瑴捴慧捡⁡慧条捴慴捣挠慧捴杧慣⁴杴慡捣慧慡朠慡瑡条捣⁡慡慣杧瑣捧††㈠㠵㰰牢ਾ戼㹲挊杧捧慣瑣⁧捣捧慣慡捡琠杧杣慣捡⁴慴慡捧杧慡挠杴慡慡捡⁧慴慣慡瑡瑡††㈠㐶㰰牢ਾ戼㹲挊瑴瑴瑣瑧⁣慧捡杧瑣杧愠瑴瑡捴慣⁡条瑧瑴捧慣朠条杣瑴瑴⁣捴捧瑣瑡慧††㈠〷㰰牢ਾ戼㹲愊捧瑧杴瑣⁧慧慡慡慴捴挠捧条慣捴⁡杴瑧慡慡瑴挠瑧慴慴捣⁣条瑡杴慣捣††㈠㘷㰰牢ਾ戼㹲愊捡瑧杣杣⁴杧杴瑡瑧捧愠条捣慴捴⁡杧瑡瑡捴瑧挠瑡慣捧捴⁧慡慡杴慡捧††㈠㈸㰰牢ਾ戼㹲琊杧捡慧瑡⁴慡杴瑧慡瑡愠杣杧慣瑡⁴条捧杴慧杣挠杣瑣瑴瑡⁴瑡瑴慧瑡慣††㈠㠸㰰牢ਾ戼㹲朊慣瑴瑴慧⁣杣慴慡瑴捡琠慧杴慡慡⁴瑡捴杣瑣捡琠瑣慧杣杴⁧捧瑴条杴捡††㈠㐹㰰牢ਾ戼㹲朊捣捡杴杣⁴慧杣杧瑡慧愠捣杴瑧条⁣慡慡慧瑧瑡朠瑴捧杴瑣⁣条慧捣慣捧††㌠〰㰰牢ਾ戼㹲挊慡捴杣杧⁣瑧捴瑴瑧捴琠瑴杣慣瑡⁴杴杣杧条杣朠慣慡杣条⁴慴捡瑧杣捧††㌠㘰㰰牢ਾ戼㹲朊瑴慡瑴瑧⁴慡捣捣慴杣愠捴瑧慧杣⁡条瑴捧条瑣朠杣瑣杧瑡⁣瑧捧瑡杴捡††㌠㈱㰰牢ਾ戼㹲琊瑡瑧杣瑣⁧捧杧慡杣慴琠瑴捣杣捴⁡杴慣慧慡杴挠杴慧杣瑴⁡捴瑧慧慡慡††㌠㠱㰰牢ਾ戼㹲挊慧慴瑴慡⁣慣瑣杧慣杧愠瑧捧瑴慣⁴慴捧慧捣慴愠条慣慧慴⁧瑴捣捧慧条††㌠㐲㰰牢ਾ戼㹲挊捧杧慡条⁣慣捧条杣杣愠慴慡瑧杴⁣慴捣瑴捴慣愠条瑣杴杣⁴条慧捧慴捧††㌠〳㰰牢ਾ戼㹲琊捧瑣杣慡⁡杧杧瑡捧慧琠捴捧慣捣⁴瑣慣瑣捣捧琠杧杣慧瑴⁣瑣瑣杴条慡††㌠㘳㰰牢ਾ戼㹲挊瑡瑴杴瑧⁧捧条捧慧瑴挠杴瑧慡杣⁡杴条慧慡杴挠捴慡杧捧⁣瑡慡捴捴杧††㌠㈴㰰牢ਾ戼㹲挊瑧杴慴瑧⁴杧慣瑡慴瑣挠捡杣慧瑡⁴杧条捣捡杴挠捧条瑣捡⁧条杣杣捴慴††㌠㠴㰰牢ਾ戼㹲琊瑴杴瑣慧⁧杧捣捡慴杴挠慴瑡杧慣⁴捴杴慧条捣琠慴慡捡捡⁴瑡杣瑣瑴瑴††㌠㐵㰰牢ਾ戼㹲琊慧杧杣瑡⁣捧瑴慡捣瑴琠捴条慡杴⁡慧杣瑴慧捴朠捧捡瑧慡⁧杣杴条捡瑧††㌠〶㰰牢ਾ戼㹲琊慧捴杧慣⁣瑧慡慧杧瑴挠慣捡瑴捴⁡捣瑡慡杴慡愠慴条瑡慣⁣慴捣杧捧瑧††㌠㘶㰰牢ਾ戼㹲愊瑴瑴瑴慧⁧瑴瑡杣条瑡琠瑴慣杧条⁣慴条慧条瑣愠慡瑡杧条⁡慡慡慡捴捡††㌠㈷㰰牢ਾ戼㹲琊杧瑡瑡捡⁣捡杣瑴慧慴琠瑡捣慣瑡⁧捧瑡杣慴慡朠慡慣瑴瑴⁧条捧瑡瑴慣††㌠㠷㰰牢ਾ戼㹲朊捴条瑴捧⁴慣瑡瑧捡瑣愠慴捡慣慧⁣杣瑴慣捧杴朠瑡瑡慴杣⁧捣瑴瑴慴慡††㌠㐸㰰牢ਾ戼㹲朊捡杣慴慡⁧慡慡瑡慡捧愠慣条瑴瑴⁡捴杣捧瑣瑴愠瑴慣慣瑴⁣瑴捧捣捧瑣††㌠〹㰰牢ਾ戼㹲朊瑡慧瑡捧⁴慣捴杣慧瑡琠捣瑧瑡杧⁣慡杴慡条捡朠瑧慧捧杴⁧杴瑡瑡杧慧††㌠㘹㰰牢ਾ戼㹲琊条杴瑴慣⁣捣瑴瑧慴慣挠杣瑴瑴捣⁡杴条慣慡瑣朠慡捡瑧瑴⁴慣捴捧捴杴††㐠㈰㰰牢ਾ戼㹲朊条杴慡慴⁣慣杣捡慧瑴琠捣杧慣瑧⁴捴慴慣慣慴琠瑡捴捧慡⁧瑡瑧杧杣杴††㐠㠰㰰牢ਾ戼㹲琊慴杣瑧慧⁡慡捣杴捧瑣愠瑴捴捣慴⁡条杧瑴慴瑴朠条慡慴杴⁴瑴瑴杣捴捴††㐠㐱㰰牢ਾ戼㹲愊捧慣瑡捣⁣杴杧杴条瑴琠慣捣条瑴⁴杴瑡瑴慡捡朠杴捧慣瑡⁡杴慧慣捡瑴††㐠〲㰰牢ਾ戼㹲挊瑴杣捣捣⁣瑧瑴捴捡慣琠杧捧慡瑡⁡瑴瑡捡捧慡朠捧慧慣条⁧杴瑣慧杴捣††㐠㘲㰰牢ਾ戼���朊瑣杧杣瑡⁴慣杧瑴慣捴愠杴捣瑧瑴⁧杴瑡杧瑣捴挠瑡瑧杣捧⁡慧瑡捧瑴慡††㐠㈳㰰牢ਾ戼㹲琊慧瑡慴慣⁡慣瑧捡杴杣愠杴条杴捧⁡杧捧杧杧杣琠慡瑴瑴瑴⁴慡杧慣瑧慴††㐠㠳㰰牢ਾ戼㹲琊杴瑧捧捣⁴慴慡杣捣杴朠瑴捧慴杣⁣瑣慧瑡慡瑧朠瑡慡慴条⁣杧瑡慧瑡杧††㐠㐴㰰牢ਾ戼㹲挊条慡瑡捴⁧瑡慧慴条瑣朠捴慡捡捡⁡捡慣捣瑡慣愠捡条慧瑴⁴捴捧瑣捧杴††㐠〵㰰牢ਾ戼㹲朊杧慣慡捣⁡捧瑧杧捡杣挠瑴捧杴慣⁡瑣瑣瑣慣杧朠捣条捧杧⁴慧条杧慣瑡††㐠㘵㰰牢ਾ戼㹲挊条瑣瑧杴⁣捣瑧瑣慣瑣朠瑧慧慡条⁡慡慡捣捡捣琠杧杣捣慣⁡慴杣慣慡捣††㐠㈶㰰牢ਾ戼㹲朊捣捴捴捣⁣捧捧瑧杴捧挠慧瑴慣瑴⁡瑡捧条瑣杧挠捡慧慣杧⁴瑴捣杣捡杴††㐠㠶㰰牢ਾ戼㹲朊慡条杣杧⁣条杴条杣慣愠杣慣瑡慴⁡杴慴条瑴条挠捧慧瑡杴⁣慡捧杴捧杣††㐠㐷㰰牢ਾ戼㹲愊杣杣瑣杧⁧瑣捡瑧瑣杴挠杴捧瑧捴⁧杧条慣慧条愠捧瑡捡瑡⁣杴慧条慣慡††㐠〸㰰牢ਾ戼㹲朊捣条慧慡⁧杣捧瑣瑡杧愠捧杴杴杣⁧慣捧捧捴条琠条捧慡瑴⁴瑴慣慡瑡瑡††㐠㘸㰰牢ਾ戼㹲琊瑧慴条捣⁴瑴捴杴条慣琠杧慴瑴瑴⁴慣杴瑧瑡慴挠慣瑡慴捧⁡杧慡慡慴条††㐠㈹㰰牢ਾ戼㹲挊慣瑴慧瑡⁡慴慡条瑡慡愠慡杴捴瑴⁧瑴慴慣瑡条愠瑧杧杧杧⁧瑧慣捧瑣捧††㐠㠹㰰牢ਾ戼㹲挊捧瑣杴杧⁣杣杧杴瑡瑧挠瑧捡瑴捧⁣杣捣捧慧捡琠杣瑧慴捣⁧捴慣捧捣条††㔠㐰㰰牢ਾ戼㹲挊捧慧捣条⁣捴杣捧慡杣挠瑣杣杣慣⁣捣捧瑴捧杧挠捧瑴捧捧⁡杴瑧杣慡捣††㔠〱㰰牢ਾ戼㹲愊瑣杧捣捴⁴慧杣捧慣慧挠瑡条捣捧⁡慣条瑧瑡瑣愠杴慧条捣⁴杴捣杧瑴瑴††㔠㘱㰰牢ਾ戼㹲朊捣杧杧捴⁧瑡捣条捣捡愠慣捧杣瑣⁧瑧捧条慣杧挠杧捧杧瑴⁴杣瑣瑧捣条††㔠㈲㰰牢ਾ戼㹲挊捧捣捧捡⁣捴瑧捣瑡捧琠慧杴杣慣⁣瑡捧杴捧杣挠慣捣慣杴⁡杣捧瑣捧捧††㔠㠲㰰牢ਾ戼㹲朊瑡慣条杧⁧瑴慣杧捧慣挠瑧捡条捧⁧捣杣捴杣捣琠杣捴捧杴⁧杣慴瑣捣慧††㔠㐳㰰牢ਾ戼㹲挊条慣捧杣⁡慡捣捣杴捣朠瑣杴杣捧⁣瑡捴杴杧杣愠杴瑡杧瑡⁡捣瑴捣慡条††㔠〴㰰牢ਾ戼㹲朊杣瑣杣瑡⁧慣瑧捣杴慴琠瑧捧瑴慧⁧杣捣捣捡慣挠慴捴慧捣⁴瑣捧捣杣瑡††㔠㘴㰰牢ਾ戼㹲琊捴瑣瑴捧⁣条杣捣杣瑡愠捧慴捣瑴⁴慧捣捡瑡杧挠瑡捴条杣⁧杴捡杧捣捴††㔠㈵㰰牢ਾ戼㹲挊慣瑣杴杧⁴捴慣杧慡慣朠捣杧条瑣⁧捣瑧捣捧瑣琠杣瑧瑣杴⁧瑧捴杣杧捣††㔠㠵㰰牢ਾ戼㹲愊条慣瑣条⁧捣瑡慴杧捣挠条捣瑡杧⁣慣捣条捣瑣琠捧条慧杴⁣捧条瑡慣捴††㔠㐶㰰牢ਾ戼㹲愊捧捧捣条⁣杧瑣捣杧捧挠捧杴慡瑣⁣慧捴杣瑣杴挠杣捴捧杣⁴条捴瑡捡瑧††㔠〷㰰牢ਾ戼㹲挊捡瑧捣条⁣瑴捧杴杣瑣琠捧捧捴捧⁣捣捧瑴慧杧朠慣杣慧捡⁡杧捣杧杧捧††㔠㘷㰰牢ਾ戼㹲挊条捡条杴⁣捧杣杧捴瑧朠捣杧捡瑧⁧捧杴条捧杴琠捧瑴瑧捴⁴慴杧瑣捴捡††㔠㈸㰰牢ਾ戼㹲挊捡杧杧慣⁣捣捣瑴捧捴琠杴杣瑣捧⁣捴捴慣捧捡朠捧杧捧瑴⁧条慣捣捣捧††㔠㠸㰰牢ਾ戼㹲挊瑧慣杴捣⁧捣杴慡捣捡挠慧捴条杣⁡捡杧杴杣捣愠慴瑧杴捧⁣瑴捧捴捡捡††㔠㐹㰰牢ਾ戼㹲挊慧条杣慧⁣慧条慡捣杧挠捧杴瑧杣⁴杣捴慣慣捣挠慣瑴捣捴⁧捧瑣杣捧捧††㘠〰㰰牢ਾ戼㹲琊杧捴瑡捧⁴杣捡条瑧条朠捡杴捣条⁣杧瑡瑧慴捴朠捡慣瑧捡⁣慧捧杴捣捣††㘠㘰㰰牢ਾ戼㹲朊捧杴捧瑣⁧瑣捧杴瑧杣挠瑣捧捧捣⁡捴瑡杧捣捧朠捣瑣杴瑣⁧捧瑡杧杴慣††㘠㈱㰰牢ਾ戼㹲朊慧捡捡慧⁴条条慣捣杣朠慴捴杧杣⁧杣瑡杧捣捴挠瑡捧慧捣⁧瑡慧捣杴杧††㘠㠱㰰牢ਾ戼㹲挊慣杴杧捧⁣捧杴捧瑧瑴琠瑣捴瑣杣⁡杴杴慧���杣朠杣慣捧瑧⁧捴慣捧捡慣††㘠㐲㰰牢ਾ戼㹲琊慣杧杣捧⁧捧捣捴杧杣朠杣杣瑣杴⁡杧捣瑧杣慡挠慣瑣捣杧⁧捧慣杴瑡瑧††㘠〳㰰牢ਾ戼㹲琊杧捧条捧⁴捧杣瑡慣捧朠捧杴慧捴⁡捧条捧杣捴愠捧慣杣捧⁴杴捣瑧捴瑣††㘠㘳㰰牢ਾ戼㹲挊杧杣瑣慧⁧瑧捧捧捣慣愠杧捧瑧捧⁡杧杣瑧慧杴愠瑡杧杣瑧⁧杧杣杧捴瑴††㘠㈴㰰牢ਾ戼㹲挊杧杣杧慣⁧瑧条瑡慣捣朠杧捣杧杴⁧捧条瑴杣捣挠捡瑣捣条⁣条瑡捣杧捣††㘠㠴㰰牢ਾ戼㹲挊捧瑣捧慡⁴瑣瑧捧杧捣愠瑧杴慣杧⁧捣条慣杴慧琠瑴捡杣捧⁡捣捡杣杧杣††㘠㐵㰰牢ਾ戼㹲愊慣捣条杣⁣捣杣捡杣慴挠杣捧慣捣⁡杴瑴杧捧慡愠捡瑧条捴⁣条杣瑧杧杣††㘠〶㰰牢ਾ戼㹲朊杣瑣捧杴⁣慧捡捧瑣捣愠慧瑡瑡杴⁡慴杧瑣慴杴朠瑧条捣瑡⁴慧瑴捧瑣捣††㘠㘶㰰牢ਾ戼㹲琊瑴捧条捧⁡瑧杴瑧杧瑴愠杧杣瑣杧⁣杧杧捴捡慴挠捣捣捧捣⁴捧捧杣瑣瑣††㘠㈷㰰牢ਾ戼㹲朊条瑴瑣捴⁣条捧捡捴捧朠慣捧捧瑣⁣瑧瑡捴瑧杣琠杣瑧慣捧⁣条慡瑣杴杣††㘠㠷㰰牢ਾ戼㹲挊杴捡捧瑡⁣捣瑴杴捧瑣琠慣杴杣瑣⁣杧慣慴捴捧朠瑣杴捧瑧⁡慣捧瑧慣杧††㘠㐸㰰牢ਾ戼㹲朊瑣杧捣条⁣条瑧杣捣杧琠瑣捧瑴瑧⁣瑣瑴杴瑧瑣琠捴瑡瑡慣⁧捴捡杣条慡††㘠〹㰰牢ਾ戼㹲愊瑣杴捣杧⁧捧杣慡条捧琠杴捴瑴杣⁣杧慡慣条慧挠慡杧杴慣⁧捣瑧慣条瑧††㘠㘹㰰牢ਾ戼㹲琊慡杧瑣杧⁣慣慴捴条杣愠瑣慧慡条⁣杧捣条捣捴朠捧瑣杴瑴⁴慧杣慴慴捡††㜠㈰㰰牢ਾ戼㹲挊慡条捣捡⁣杧捧慡捣慡琠条捣瑣杴⁴慣瑣瑴杴瑡挠条瑧条捡⁣慧捣瑣慧条††㜠㠰㰰牢ਾ戼㹲挊捧瑴瑴瑴⁣瑧瑡捴慣慴愠慡捣捣瑣⁴瑣瑧捧瑧慧朠慴瑣慣慴⁧慴慴捡条捧††㜠㐱㰰牢ਾ戼㹲朊杴条慴捣⁡捡捧慡捧捡琠捡瑡捧杴⁡慡捴杴捧捣朠捣捣杴捴⁣瑡捧瑣杣瑣††㜠〲㰰牢ਾ戼㹲朊捧杧杧杴⁣杣瑧捧捣瑧朠捣条瑣杣⁧捣杣杣慣条挠杴慧杣瑣⁧杧慣慧捣慣††㜠㘲㰰牢ਾ戼㹲琊慧捣瑴捧⁴慧杣瑧捧捧琠杣瑡瑧慡⁴捣捧瑴杣杴朠捣杧捧瑴⁧杣瑣瑣捧慣††㜠㈳㰰牢ਾ戼㹲朊杣瑣杧捧⁴杧捣捴杧捣愠杴捧瑣杴⁣杣瑡瑴捣捴朠捧捡杴杣⁧捣捣杧瑣杧††㜠㠳㰰牢ਾ戼㹲挊慣捧瑴瑣⁧杣杣捧慧慴愠条捴捧捡⁴杴瑣慧杧捴愠杴捡杣慡⁧杣瑣杴捡慣††㜠㐴㰰牢ਾ戼㹲朊捣杣捧慣⁴瑣杣瑣捧杧琠捡捴瑧捣⁡捧捧杣杴杣挠杣瑧杧杣⁧瑣慡捧杴捣††㜠〵㰰牢ਾ戼㹲朊瑣杣杧慣⁧瑴杣条捧杴朠捣条捣杴⁣杧捧瑣捴捴挠杴瑣捧杣⁣杴杧捣杴瑣††㜠㘵㰰牢ਾ戼㹲挊慧捴杴瑣⁧捧慣捧瑣捧琠捧捡慣捧⁧捣杧捧慣捧朠瑧杧杣瑧⁣瑴捧捣瑴杧††㜠㈶㰰牢ਾ戼㹲愊瑴慣杣慣⁧慣捧捡捣捡朠捧杴瑡慡⁣杣捧捧杧瑧朠瑧瑧捧瑴⁧捴瑣杴杣瑧††㜠㠶㰰牢ਾ戼㹲琊杧杴慡捧⁣杣捣慡捧杧挠慣慴瑧杧⁣杧瑣瑧杣捧朠瑣杧捣杧⁧捴杧杣捴瑧††㜠㐷㰰牢ਾ戼㹲愊瑣杣瑣杧⁣慣捧瑧捣杧朠慣瑡瑣捧⁣捣杣慡瑧捴愠捣捧瑣捧⁧捧瑧杣捧慣††㜠〸㰰牢ਾ戼㹲挊瑣杴捡捣⁡杴捣杴瑡条琠捴瑴杣杧⁣杴瑧瑴捣捡琠捡慣杧捧⁡杧瑣捣杣捧††㜠㘸㰰牢ਾ戼㹲挊瑣杣捧瑴⁴慣杴捴瑡捣愠杧捴慡捡⁴杣瑣慧杧捴朠捴慣捣条⁣捡慣慧捣瑡††㜠㈹㰰牢ਾ戼㹲朊捣捧捴瑣⁧瑣杣捧杧捧挠杴瑡瑡捡⁡杣捴瑡杴捣挠杴杧慣瑴⁣瑡捣捧瑴慧††㜠㠹㰰牢ਾ戼㹲朊捣瑡杧杣⁴瑧捴杴慧捧愠瑣捴杧杣⁧瑣慧捣瑡捴挠杣瑧捴瑡⁣瑡瑣杧捣杧††㠠㐰㰰牢ਾ戼㹲琊杧瑧捧瑧⁣捣杴捡捧杣愠慴捴慧条⁣捧捴捡条捣挠瑡杧捣瑴⁧条瑣瑧杣捧††㠠〱㰰牢ਾ戼㹲挊慴杴捧瑣⁧慣慡瑧捣杴琠杣瑴瑣捴⁡捴杧捧慣捣愠条杣慣捧⁣条瑡杣条捣††㠠㘱㰰牢ਾ戼���朊捴瑣杣瑧⁴瑧慣瑧杧杣琠慣杧捴慧⁧慣条条慣捡朠瑡捧慧捴⁡捧条慣捣捡††㠠㈲㰰牢ਾ戼㹲挊瑧条捧瑡⁣瑡杧慡捧慣朠慣捴捡杧⁴慴捧慣慴捧琠捴慣瑧捧⁣捡捣捣捧慧††㠠㠲㰰牢ਾ戼㹲挊捧捧捴杣⁧捧捧捴杴杣挠杧杣瑣捧⁴慣捣捴杧杣朠瑣捡瑣捣⁣捧慡瑣瑣瑴††㠠㐳㰰牢ਾ戼㹲朊捧慣捧捴⁣捡捣瑡捧杣挠捣瑣瑧瑣⁧捧捧杴杧瑣琠捴条捣捡⁴捣捧杣捣杴††㠠〴㰰牢ਾ戼㹲挊捧瑣杣瑣⁧捧瑣捧瑴杧琠瑣杧瑣慣⁴慧捣杴捣杧朠瑣捴瑧杣⁧捣条杴捴捧††㠠㘴㰰牢ਾ戼㹲挊瑡捧捴杴⁧捧慣捧杧瑴挠慧捴杴瑣⁣杣瑣慡瑣杣琠杴瑡捧瑣⁣杴慧瑴捴瑴††㠠㈵㰰牢ਾ戼㹲挊捡捴杴捴⁧瑡杴杣瑴慣琠杧捴慴瑴⁧捣捴捣杧慴琠捴瑣瑧慡⁧捴慧杴瑡瑣††㠠㠵㰰牢ਾ戼㹲朊杧杣瑴杧⁣杧杴捴慧杴琠捴条杧捣⁡杣捴杴捣杣朠捴杧杴杣⁧瑡捧捣杣捧††㠠㐶㰰牢ਾ戼㹲挊瑴捣瑡瑣⁣慣捣捡瑧捴朠捧捣慣杧⁴慧捡捡杣杧挠条捧捧捴⁧瑡捧捣杴杣††㠠〷㰰牢ਾ戼㹲挊瑣慣条杴⁴捴杴杴瑧慣愠杴杣杧杣⁴杣杴捧慣捧挠杣瑣瑣慡⁴捧捣杧瑴杧††㠠㘷㰰牢ਾ戼㹲挊瑡杧捴杧⁣捣瑡捧瑣杣挠杧瑧瑣捧⁴慣条捣瑡捧挠瑴杧捧瑴⁧条杣瑣捴杧††㠠㈸㰰牢ਾ戼㹲琊瑣捴杴杴⁣捣杣捣瑣捴琠捣杧杧捴⁴杴捣瑧杴慴挠杣瑣杴慡⁣慣瑣慧捧杧††㠠㠸㰰牢ਾ戼㹲挊杧捧杣瑣⁣慧杴捣瑧慣琠杴瑡捣捧⁴杣慧慧捴瑡挠条瑧杧慣⁧杴杣杧瑴瑣††㠠㐹㰰牢ਾ戼㹲挊捧杣捣捡⁣杧慣杴慧杴朠捣条杣慴⁴捡杧慣杧杣挠捴杧慣捣⁧瑧慣杧杴瑣††㤠〰㰰牢ਾ戼㹲朊杧杣慡瑣⁣杧捡捧慣捧朠捣瑴瑣捧⁴杧捴慧杧瑧挠条瑣杣捡⁣杧慣杧捧慡††㤠㘰㰰牢ਾ戼㹲愊瑴杣捡瑣⁣瑣杴慡慣捧挠捧捣瑡杴⁧杣杣瑴慣慴挠条瑧杣捧⁡捧瑡捣慣瑧††㤠㈱㰰牢ਾ戼㹲愊瑧杣捧杧⁧捣捧捴慧杣愠捡捴杣捧⁡杴杴捣杣慧琠捴杧杣杴⁣慡慧瑣捴瑡††㤠㠱㰰牢ਾ戼㹲挊慣杴捴捧⁧杧慣慴瑣杴挠瑣捴捧捧⁴杧瑡瑧条捴朠捧瑣杴捧⁣瑣杧捣慧瑴††㤠㐲㰰牢ਾ戼㹲朊捧杣捣杣⁡捣杴瑣捧杣朠瑴瑴杣捣⁧慴条瑧慧慴愠瑡杣捣瑡⁧瑣捧瑣杣瑣††㤠〳㰰牢ਾ戼㹲朊瑴捧瑴瑴⁧瑣瑴捴杧瑣挠慣杴慣瑡⁧捧捣捴杧条愠捧捧捡杣⁣捣慧条杧杴††㤠㘳㰰牢ਾ戼㹲朊捣瑧慴杧⁣慣瑧瑴瑣杣愠条条慡捡⁣杧慴条杴杣挠捣捴捣瑣⁡慣慡瑧条杧††㤠㈴㰰牢ਾ戼㹲琊杣杧瑡杴⁣杣捣捧杴杴挠瑣捣瑡慧⁴条捣慴杣条愠慣捧捡瑡⁴慡慣瑡杧杧††㤠㠴㰰牢ਾ戼㹲琊瑧慣条瑡⁧瑧慴条杧慧朠慣捡慡杧⁣杧杣慧捴杧挠杴捧慣条⁣捴慧条慡慣††㤠㐵㰰牢ਾ戼㹲愊杣条杣杣⁡瑡慣瑡捧杣愠慡瑴慣捧⁧杧条杣杧慣愠杧慧捡条⁣条慣条条杣††㤠〶㰰牢ਾ戼㹲挊慡慧捡慧⁡捡慡杧杣慣愠杧杴瑣杧⁴杧杧捧慣杴愠瑴瑴杧捣⁡条瑧慧捡条††㤠㘶㰰牢ਾ戼㹲挊条杣条杴⁧捣杧条慧捴朠捧捴瑡杧⁣杧慣瑡杧瑡朠杣慴捣瑴⁧慡杣杣捡慣††㤠㈷㰰牢ਾ戼㹲挊慧捣捧捧⁣瑴瑧捴杧捴琠捧杣捣捡⁧捣条慡杧瑡朠条捣杧捧⁴慧瑡慧捴慧††㤠㠷㰰牢ਾ戼㹲挊杣条捡条⁧捣瑣捧杧杧挠杴慣慣杣⁣捧捣捣捡捣琠捴杧瑧条⁧杧慧慡杧捣††㤠㐸㰰牢ਾ戼㹲朊瑣慡条杣⁧瑣慡慡捧捧琠捣条杣慴⁴瑴瑣捧杧杧琠瑴杧杴杴⁧杧瑴慴捧杧††㤠〹㰰牢ਾ戼㹲朊瑣瑴捧捣⁧捣瑴捴捣捣琠捧杣杣慣⁧杣瑧杧杧杣朠杴杴慴捧⁣慴捧捧条杣††㤠㘹㰰牢ਾ戼㹲愊瑡条捡慣⁧瑣瑡捣杧捣琠瑣杧捣杧⁧慣慴瑴杧捧愠条杧慣捧⁡捧捧捣慣慣††〱㈰㰰牢ਾ戼㹲愊杧捧捧杴⁡慴捡杣杣捣琠条杴慧瑴⁡瑴瑣慴慧慴愠捴瑡杧瑡⁧慧瑴瑴捴慣††〱㠰㰰牢ਾ戼㹲愊慣捣捣捧⁣条捣捣杣捣挠瑣捧杴杧⁴瑴捧条���瑴朠杧杧杣杴⁡慣瑧慴瑴捧††〱㐱㰰牢ਾ戼㹲愊杧杧瑴杣⁴慧慣瑧慴瑴朠慣杧杧杧⁣瑧慧慣瑧慴琠杴慣杧杧⁴捴瑧慧慣瑧††〱〲㰰牢ਾ戼㹲琊条慴杣杧⁡瑧慧杣杧慣挠杴捧杴捧⁡瑡瑧瑣条慣愠杣捧条捧⁡瑴捴杧瑣慧††〱㘲㰰牢ਾ戼㹲朊杧慴慡条⁡捡瑴捴杣瑣愠条杣瑡条⁡瑣瑧瑡瑧慡愠慣慣瑧瑡⁴捧慡杧捡捧††〱㈳㰰牢ਾ戼㹲朊慧捡瑡捧⁣捴瑡瑧杧杣朠捣条慧杣⁧捣条捣杧慧琠杣杧瑡捡⁴杧捴瑧慴捣††〱㠳㰰牢ਾ戼㹲愊慧捧慣捣⁧捡捣慧捧慡愠捣瑣捴捴⁴瑡慣慧捴瑧琠慧杣条慴⁴慴捣杣捧瑡††〱㐴㰰牢ਾ戼㹲琊杣瑣捧捧⁴慴杴捧条条挠条杧慡条⁧慡瑴捧杣杧挠慴杴杴慣⁡杣杧慡瑴杴††〱〵㰰牢ਾ戼㹲愊条慡瑴捴⁴捣慡杴杣杧挠杧瑣杧条⁣瑡杧瑣瑴瑣愠杣杧瑴杣⁣杴杣条捴瑴††〱㘵㰰牢ਾ戼㹲朊捣捡捧杣⁡捧捡瑣杧捴朠瑣瑴慣慧⁡瑡慣瑡瑣慡愠瑧瑡瑡瑡⁧条慴慡瑣杴††〱㈶㰰牢ਾ戼㹲朊捴杴捡条⁴慴捣慡杴瑣琠慡捴条杴⁡杧慣捣慴捴琠慣捧慧捴⁴瑧瑣瑡瑴杣††〱㠶㰰牢ਾ戼㹲琊捴瑡捣瑡⁡瑧杴捣杴捡琠捣捣瑧杣⁴瑧条瑡慡瑣愠杣瑡捡杧⁧条杧瑣慴捣††〱㐷㰰牢ਾ戼㹲愊捴杴捧捣⁣条杴瑣捧慡琠慧慴捣捧⁧条捡捣捡捧琠慣捣杧瑣⁣慣慧瑴慴捴††〱〸㰰牢ਾ戼㹲愊捧慡慴慡⁣慣捧慣捧杣朠慡杧捧杣⁡捧捧条慡瑧朠瑧捣杴慣⁡瑣瑴瑡捣捧††〱㘸㰰牢ਾ戼㹲挊捴慣捴慣⁧捴慴瑴慡瑴朠瑴捧杣杧⁡条瑣条条慴愠瑧条瑴杣⁣慣瑧慴瑡条††〱㈹㰰牢ਾ戼㹲琊瑴捧捧慡⁣瑧杴瑴捧慣琠杴瑣捡条⁧慣捴瑧杧杴琠慣杣瑣杣⁴杣瑴杴瑧瑡††〱㠹㰰牢ਾ戼㹲朊捧瑴慣瑴⁣条瑣捣杧瑴挠捣慡杣瑡⁣慡杧杣条瑴愠慣杴瑡捣⁣捣瑡瑧杴杴††ㄱ㐰㰰牢ਾ戼㹲挊慡慡慡捧⁧瑧慴捧捴瑣琠杣瑧捣捴⁣慧捴瑧杴捴愠慧条慴条⁴杴捧杣慣瑧††ㄱ〱㰰牢ਾ戼㹲朊瑴瑡慣瑣⁣瑡杧瑴瑡杧挠条慣瑣捧⁡慴瑡捴捴瑴愠瑣瑧慣杴⁣慣捴杣慴条††ㄱ㘱㰰牢ਾ戼㹲愊杴瑣瑴捴⁴瑧慧瑣杧杴愠瑧捡捴慡⁣慣条捴瑡捴琠慧慧瑡条⁴瑧瑡捧杧杣††ㄱ㈲㰰牢ਾ戼㹲愊捣慧瑧杴⁣捴瑴捧捣杧挠瑧慣捡捡⁧杧瑡慡慴捣朠杣捣捡瑡⁡捧条慡瑣瑴††ㄱ㠲㰰牢ਾ戼㹲愊慡条杴瑣⁣瑡慣瑴杧慡愠捡瑧捴瑴⁣杧杧杣慡慡挠捴捴慡杧⁡捴瑴捡杣瑣††ㄱ㐳㰰牢ਾ戼㹲朊瑴慧慧捴⁣条瑴杣瑡瑧愠捡捣捡捴⁧杴慣捣慣捡琠慧捴瑴慣⁧慣捴瑴瑴捡††ㄱ〴㰰牢ਾ戼㹲琊瑴慣捣条⁣瑧瑴瑣杧瑧朠条慣慡慡⁣条慧条捧慡愠瑡捧杣慣⁡慡慡杧慧瑡††ㄱ㘴㰰牢ਾ戼㹲愊条杧杣捡⁡杣慧慡杴瑴朠慡慴瑣慣⁴捡捴瑴捣瑴琠瑴慣瑡瑡⁴瑡杴慡捧瑡††ㄱ㈵㰰牢ਾ戼㹲琊慴捴条杧⁴慴瑴瑧瑣慣琠慧捧杧瑡⁡慣慴瑴杴慡琠瑧瑡瑴条⁡慡慡慴慡慣††ㄱ㠵㰰牢ਾ戼㹲愊慡慧瑧瑴⁧慴慧慡杣慣愠慡条捧慣⁴捣瑧慣杧瑡朠捧瑣捴杴⁣瑴慡瑴杴瑡††ㄱ㐶㰰牢ਾ戼㹲朊捣杴捧条⁴瑴瑡杧杣杧挠瑧捣杴捣⁣捧慣捣瑣捣朠杧捣瑧杴⁣瑴杣慣捡瑧††ㄱ〷㰰牢ਾ戼㹲琊慣慡捴杣⁣捴捣杧杣慧琠瑴瑧捣慴⁣捴条慧慧捧朠瑴慣捣慧⁣慡捡慡慣慧††ㄱ㘷㰰牢ਾ戼㹲琊慡慡杣慡††††††††††††††††††††††††††††††ㄱ㘷㰹牢ਾ戼㹲㰊牢ਾ氦㭴ㄲ☰瑧※ㄠ㐲戼㹲☊瑬㈻ㄱ朦㭴†ㄱ㜴㰷牢ਾ氦㭴ㄲ☲瑧※䐠䅎戼㹲☊瑬㈻㌱朦㭴†牁楴楦楣污匠煥敵据㱥牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〲朦㭴戼㹲☊瑬㈻㌲朦㭴†汰獡業⁤䱰批䱁ㄳ挠湯慴湩湩⁧瑯䉳⁁灯牥湯戼㹲㰊牢ਾ氦㭴〴☰瑧※ㄠ㐲戼㹲愊杧捣慣瑧⁣瑴捴慧瑣慧朠捣瑴捴瑧⁴瑴瑡瑴慧杴挠瑣杧慣瑧⁴捣瑣捡捴捴†††㘠㰰牢ਾ戼㹲朊慣杴杧慧⁧捡捣慣慣瑣愠捣瑡杣捧⁧瑣捡���杣瑴琠慣瑣捴杴⁡瑧捴杧慣杴†††㈱㰰牢ਾ戼㹲朊杧捴条瑧⁧杧捡慣捣捧朠瑣捡杴捣⁧捣条捧慡瑡琠瑣瑧瑴慴⁴慣慧捣捧瑴†††㠱㰰牢ਾ戼㹲挊杴杣瑴瑣⁧瑡瑴慡捴杴琠瑡慣杧瑣⁧慡慡捴瑴瑣挠捴瑡捣捧⁣慡慡慣捧慣†††㐲㰰牢ਾ戼㹲愊捧瑴捧瑡⁧慣慡捧捴捡琠慡瑣杧捧⁧杧瑡瑴捴杣朠瑧捣杧瑴⁧瑣慧杣瑧慡†††〳㰰牢ਾ戼㹲琊条捴瑧瑣⁡慡条瑴杴捧挠捡瑡捣慡⁡条捧杴捴杧挠杧杧杧瑡⁧瑣杧捣杧杣†††㘳㰰牢ਾ戼㹲愊杧杧瑡慴⁡瑴瑣捧瑴瑧挠瑡瑡捡慡⁡慡瑴瑧慡慡愠瑡杧条杧⁣杧杣瑡慣杧†††㈴㰰牢ਾ戼㹲朊捧瑴条捡⁡捣慣慡捴瑣愠捧慣慡慡⁧杧瑴慡瑣条挠慣条杧瑣⁡捴慣杴杧慣†††㠴㰰牢ਾ戼㹲愊条条瑡慡⁡条慡慡条捴琠捣慡瑡捣⁣杴瑧慣慴慧朠慡慡慡瑴⁧捣慡条瑴捡†††㐵㰰牢ਾ戼㹲挊捣条捧慣⁴捡捡杧捣慣朠杣捣慡慧⁴杧杧条慣慣愠瑡捴慡捡⁴瑴瑧慡捡条†††〶㰰牢ਾ戼㹲朊捣杧慡捧⁴瑡捣杧捣慡朠慧捧捡捴⁡慧瑴瑧瑧慴愠杣瑴慣杧⁧慧瑧杴瑣慴†††㘶㰰牢ਾ戼㹲愊慣慣瑡瑴⁴捣慡瑴慡慴朠慴瑴慡慴⁴瑴捴瑴慡瑣琠捧捡杣慴⁣慣杴瑧慧慧†††㈷㰰牢ਾ戼㹲愊条捣慴捴⁴慧捧捣瑴瑡琠杴瑡慴捡⁣瑴杣捡杴瑡琠瑡杴瑡捣⁣瑣瑧捧条捴†††㠷㰰牢ਾ戼㹲琊捣捣捴捴⁣瑣瑣瑧瑣瑴琠杴瑣捣杣⁡捡捡瑧杴捣挠瑡条捡捴⁡杧慴捣瑧慴†††㐸㰰牢ਾ戼㹲愊慧条慧杧⁡捴慣慴杴瑡挠瑴慧杴慧⁡杣瑣杧杣慧愠瑡慣慡捣⁧慣捴捣慧捴†††〹㰰牢ਾ戼㹲愊杧捴瑧杣⁴捧瑣慧慣瑡愠瑴瑣捧慡⁧慧瑣捡条瑣愠瑣杧慣捡⁣捧慡瑧慧杴†††㘹㰰牢ਾ戼㹲朊杴慣瑴杧⁣瑡杴瑡瑡慣朠杧杣瑣慣⁡杴瑧杧条瑣琠慧杣慣瑣⁧捧慡慡捣瑴††ㄠ㈰㰰牢ਾ戼㹲愊捴捧瑴捣⁣瑧慴捧杧捧朠杴慣杴杧⁧杣慧捧捧杣琠慧慣捴慡⁴杧慴慡捡捡††ㄠ㠰㰰牢ਾ戼㹲愊慴捴瑧捴⁡捴杴捣杧瑡朠杣瑡杴杣⁣瑧慧慴瑴条挠瑧捧慡瑣⁧慣慴慣瑧慣††ㄠ㐱㰰牢ਾ戼㹲琊杣瑣慣瑧⁡捴捣杧杣杣朠条瑣杧条⁧杣慡条杧瑡朠捧瑴瑴捧⁧瑣捧瑡慴捴††ㄠ〲㰰牢ਾ戼㹲朊捴条捧捴⁣捧条慣杴慡朠捡捧瑡慴⁡杴捡瑡慴捧朠慣捡瑧瑡⁴捡捴条瑡瑣††ㄠ㘲㰰牢ਾ戼㹲朊捧慣慣慡⁴杧杣瑴捡条挠条杧慡条⁴瑧瑧杴捴慧朠瑡慣慡捣⁧条条瑧捡慣††ㄠ㈳㰰牢ਾ戼㹲朊慴慡杧杴⁡杧慣瑡杴慣朠瑣瑴慴杴⁣条慧条瑣捣挠瑴慴捴杧⁧杣慡杣捣杣††ㄠ㠳㰰牢ਾ戼㹲琊瑡瑴瑣杧⁧杣瑡慧瑴慴愠捣慧杴慡⁴瑣杧瑣捴捧愠瑧杣瑴慡⁣杣捡杴杧杣††ㄠ㐴㰰牢ਾ戼㹲朊慡杴捴条⁴慡慡瑡杴捧愠慣杧杴慣⁡瑣慣杧慣捴愠杴捧慧瑣⁧捧杧瑧瑧捧††ㄠ〵㰰牢ਾ戼㹲挊杧瑡瑧瑣⁧慧捧杴捧瑴朠慡瑡慧慴⁡捣捡杣慣瑴愠慣捡慡慡⁡条条慡慡慴††ㄠ㘵㰰牢ਾ戼㹲愊慣杧条杴⁡杴捡慴杴条琠杣瑴慴瑧⁣瑧条慴捴慴愠捣杧瑡杴⁣捡慣捣条捡††ㄠ㈶㰰牢ਾ戼㹲朊条慣杣捣⁧捣条杴捣杧琠杧捣瑴捧⁣瑧杴捧瑡捡琠杧杧捧捡⁴慧慡捧杣慣††ㄠ㠶㰰牢ਾ戼㹲朊捧杧捡杴⁴杧瑴杴捧杴朠条杴瑧慧⁡捡条杧慡杴愠杧瑡慣捧⁣捧慴慡慡条††ㄠ㐷㰰牢ਾ戼㹲朊杴慡慡慡⁧瑧慡慣瑴捡朠杴杧捣捴⁴瑴慴捡瑣慣朠杣慡慣杧⁡捣瑴慧杣慡††ㄠ〸㰰牢ਾ戼㹲琊捡慴慣捡⁣慡瑴瑣捣慡琠捧杣瑴瑣⁣杴捧捣捧瑴琠捴瑡慴捴⁧捧捴慧捴杴††ㄠ㘸㰰牢ਾ戼㹲朊杴慣瑡瑴⁣条杣捴瑣捧挠杴杧捡杧⁣慴捴慴杣杣琠慡瑡捧瑧⁴捧杴捧条瑡††ㄠ㈹㰰牢ਾ戼㹲愊慡瑴捡杴⁣杣瑣瑧杴慣愠慧杣瑡慧⁣瑡慴捴杴慧琠捣捡慧瑴⁡捴捡瑣瑧杴††ㄠ㠹㰰牢ਾ戼㹲挊慣瑴杴杣⁣瑡慧瑡慴杣挠慡捡杧杧⁡瑧慧瑡慡捴朠慣瑴杧瑴⁴瑣瑴瑣捧瑡††㈠㐰㰰牢ਾ���㹲愊瑴捣瑴捴⁣杣捡捡杣慧愠瑡瑣捴慡⁣捧捧杴捣慧挠瑡瑡慧慣⁣瑣杴瑣杴慡††㈠〱㰰牢ਾ戼㹲挊条瑣瑴瑧⁧瑡慴杴瑡瑴朠瑣杧瑧瑴⁣慣慧慣慧慡愠杣瑡杣捴⁴杧杣瑴捣杴††㈠㘱㰰牢ਾ戼㹲朊瑡杴捴瑴⁴瑣慡捣杴捡挠杣杣捴捡⁧捡捡瑧条杣挠慡慡条捣⁡慴慣捧瑣杧††㈠㈲㰰牢ਾ戼㹲朊捧慡条慣⁴瑴杣慡慣慧愠瑧瑣捡捣⁧瑡杣捧瑡杴愠捡杣慡条⁡慡慴捧慣慡††㈠㠲㰰牢ਾ戼㹲挊条捧杴捣⁧杧捣捡杴捣朠捣慡慡瑣⁧捧捧慡瑣慴愠条杣慧捡⁴慧慡慡杣慴††㈠㐳㰰牢ਾ戼㹲挊慡慡慴捴⁴瑴捴杴捴慧愠杣捧杴慧⁴慴瑴捣慡条朠瑴杴捣条⁡捧瑧瑴捴捴††㈠〴㰰牢ਾ戼㹲朊捣慴杴慡⁧杣瑴捧杴慧愠慡瑡瑡捣⁧慣捧瑡慣杴朠慴慡瑡捴⁧瑴瑡捡捣条††㈠㘴㰰牢ਾ戼㹲愊瑴捧捡慣⁡杣捴捧瑧杧琠慧杴杴慣⁡捧瑣瑡慣杧愠慴瑴杣捴⁡捴条瑣杣慡††㈠㈵㰰牢ਾ戼㹲愊瑡慧条瑣⁧慧杣慡瑴慡琠杧慴慡慴⁣杧捧慡瑴条朠瑣杧捡捧⁣捧瑴慴瑴瑡††㈠㠵㰰牢ਾ戼㹲琊杴慡捴条⁣瑡瑴杴捡杣琠慡瑡慴瑣⁧瑡慧慡瑡瑡琠捣捧慴瑣⁣杴捡瑧杧捧††㈠㐶㰰牢ਾ戼㹲琊慴瑧慧杣⁣慣瑣捧瑧慧挠杧慧杴慡⁣瑣杧慴捧慡愠条条慴杴⁴杴瑣捧捴条††㈠〷㰰牢ਾ戼㹲朊捡捣条捣⁡瑡捣杧捧瑧琠瑣杴瑴瑣⁴捴捧慡瑴杴挠杧慧捧杧⁣慡捡慧瑧慴††㈠㘷㰰牢ਾ戼㹲愊杣捴杧杣⁴慴瑡杴瑴慡挠捣瑣捡慧⁴杣杴捡慧条琠杴慣捧杴⁣捧杴慧捴瑧††㈠㈸㰰牢ਾ戼㹲朊慣瑴慧瑣⁡杴捴捧杴捧朠慧捡瑧瑡⁴捴捣瑧慣杴挠条慡瑡捧⁴杧捡瑧慴捴††㈠㠸㰰牢ਾ戼㹲朊杴慡慡捡⁧瑡瑡慴捡慣挠杴捧条慧⁧杴瑣捴瑡慴朠杣捡瑣慡⁡捧条瑡条瑴††㈠㐹㰰牢ਾ戼㹲挊杣杣慡捧⁧杣慧慡捧慣朠慣捧捧慧⁴慡条瑴捧慴挠瑣瑴捣慡⁡捧瑴捧瑧条††㌠〰㰰牢ਾ戼㹲朊条瑣条瑣⁧捣捴慧慡杧朠慧杴杣瑡⁴杣捣捡瑣瑣挠捡捴杣瑣⁧捧杧瑡捴瑣††㌠㘰㰰牢ਾ戼㹲挊瑴慧慧捡⁡瑴瑴杧杴捧愠杧杣瑡捴⁴杧慴捡慧杴愠杧慡瑡捧⁴慣条杧捣瑡††㌠㈱㰰牢ਾ戼㹲愊瑡瑣杣捧⁧瑴瑧条瑴杧挠慡瑴捡捴⁡捣杧慡瑴杧愠捧慣瑣捧⁧慣捧慴杣条††㌠㠱㰰牢ਾ戼㹲挊捧瑧瑣瑡⁴瑴捧杴条杧挠慣瑣瑡捧⁴慡杴捧瑡捴琠杧慡捧瑣⁴慡慡慣瑣瑡††㌠㐲㰰牢ਾ戼㹲挊捧瑴瑴瑴⁧条捧慧捴捧琠慴捡瑣瑴⁴慣慧瑡慧慧挠瑧杴瑡杣⁧慣杣慴条杣††㌠〳㰰牢ਾ戼㹲琊慧慧杣瑴⁧瑡杣捧捡瑧愠条条瑧捴⁣慡瑣瑴慣捣愠慴瑡慧慡⁴慡慧捴捡慴††㌠㘳㰰牢ਾ戼㹲挊杣杧杣慴⁴瑴瑴杴条瑴愠捴慧慧瑴⁴捴条慧捧慴愠杧慡捧慴⁡慡杴慧慧慡††㌠㈴㰰牢ਾ戼㹲愊慡瑡慣瑣⁧慧慴慴捣捡挠瑧杴瑡瑡⁡捴捣慡杴捧愠捴瑧慡条⁡捡瑡瑴杴条††㌠㠴㰰牢ਾ戼㹲朊慣瑴捴条⁴慣瑧杴瑣慣愠杴慴捣慴⁴慡捣条捡杣琠捴条瑣杧⁡慴瑴捡杧捣††㌠㐵㰰牢ਾ戼㹲琊瑴瑴慡条⁡捣瑧慡条慡愠慡慴条慣⁣慡瑧瑴慴捴挠杧捣瑴慴⁴捴捡瑡捴瑴††㌠〶㰰牢ਾ戼㹲朊捣杣捣杴⁡杴慡杴瑣慣琠捣杧慡瑴⁣杣慴杴捧慡琠慧慡慧杣⁧杴条瑣杧杴††㌠㘶㰰牢ਾ戼㹲愊慴杴杧瑡⁡瑧瑧捴捡捣琠杴瑴捡捡⁣瑧瑴捴慣杴愠捧慡捡杴⁡慡杣瑴瑴慣††㌠㈷㰰牢ਾ戼㹲琊杣瑣瑣杧⁡瑧慧瑡捡慣挠慧杣瑡瑴⁣杣捧条瑴捴琠捡捡瑡瑡⁡瑴杣慣条瑡††㌠㠷㰰牢ਾ戼㹲朊杴捧瑧瑧⁴捡杧杴慡慡挠瑣杧捣慴⁴瑴捣瑣慡条朠瑧瑴瑡杴⁡慧瑡瑡瑧瑴††㌠㐸㰰牢ਾ戼㹲琊捴瑧瑣慣⁧捣慡捴捣杴朠瑧慧瑧瑴⁣捡慣瑧瑴杴愠瑴慴慡杣⁴杧捣慡慴杴††㌠〹㰰牢ਾ戼㹲朊捡慡瑣捴⁴捴捧捣捣瑧琠瑴慣捣瑡⁧杧慣慡慴瑴愠慴杣慣条⁧杣捡慡杧杴††㌠㘹㰰牢ਾ戼㹲挊杴瑡捧杣⁣杴捧慧瑴慣朠瑧捴瑡慣⁴捧杣���杴杴愠杴捧瑴捣⁡杴捴杧慣慧††㐠㈰㰰牢ਾ戼㹲愊杴瑣慴瑡⁧慡瑴捡慡慣朠慴瑣捧慧⁴慧瑧杧慣杧朠杣杧捧瑧⁡瑡瑴瑴瑴慡††㐠㠰㰰牢ਾ戼㹲朊捧条瑴瑡⁴杧杴捣瑣慴愠捡捧瑣杧⁴杴瑣捡捧瑣朠慡慴条杴⁡慴瑡慡捧杧††㐠㐱㰰牢ਾ戼㹲愊杴慡杴捧⁡慧慡瑴杣瑡朠瑡慡捧杴⁴慣慡慣慣捡挠捡慣捴慡⁡慣杧瑡瑴捴††㐠〲㰰牢ਾ戼㹲朊捣杴瑣杧⁧捧慡捡慣捧朠杴慧捣捧⁴杴瑣捧慡瑣挠捴捴条杧⁣慣杧杣瑧慧††㐠㘲㰰牢ਾ戼㹲愊杧捧慡捴⁡捧杴瑴捧捣朠捴捴捡杴⁧杴慡慡慧慡愠捡慣捣瑣⁧捧捧捣慡慴††㐠㈳㰰牢ਾ戼㹲挊捧慡捡杣⁣瑣瑣捣捣捧朠杣瑴杧捣⁧瑡捴瑡慴瑡朠慣捧杴捧⁡杣捡条瑧瑴††㐠㠳㰰牢ਾ戼㹲挊捣慧瑣杧⁡慡捧杧捧条琠慧捧捧慡⁣捧慡瑴慡杴琠慡瑧慴捧⁧杣慡瑴捧慡††㐠㐴㰰牢ਾ戼㹲朊瑣杧捣慧⁣捧捧杴杧瑣愠杣捴瑴捧⁴杧杣瑴杣杧愠捧条慡慧⁧慣慴慣捴杴††㐠〵㰰牢ਾ戼㹲朊慡捧慡条⁣慣杧慡条杣朠捣慴杴慧⁧瑣瑧捧杧慣朠杣瑣慣瑧⁡杧慣瑡瑴瑴††㐠㘵㰰牢ਾ戼㹲挊慡慡慴瑴⁧瑴慡捧瑣瑴琠瑣慧捧瑡⁧瑧瑡瑴瑴慣琠杧慴瑴捡⁣慡瑴条慣杧††㐠㈶㰰牢ਾ戼㹲愊慡瑡慡捧⁣瑡杴慡慴慴愠慡慧慴慡⁡瑡瑧瑣杴瑴琠捡慡慴慧⁧杴杧杧杧瑧††㐠㠶㰰牢ਾ戼㹲挊条捣杴捣⁧捣瑴杧捧杣朠瑧慧杴捴⁧慴瑣杴捣杣挠杣杣慡瑣⁣杧瑴捡杣捴††㐠㐷㰰牢ਾ戼㹲挊条捣慣捧⁧杣捡慣捧捴挠杧慣捡捧⁣捴捧捧捡捣朠瑣杴杣捧⁧瑣杴杣慣杴††㐠〸㰰牢ਾ戼㹲朊捴慧捡慣⁣杴捧瑣瑣慧挠杧捣条捡⁡慴捧杣慣慣愠杧慴捴慴⁴杧慡捧瑣杴††㐠㘸㰰牢ਾ戼㹲挊杣瑧瑴杴⁣杣杧瑧杣瑡挠慣捧慣慣⁣条捣捧杴瑧朠慣捧条捧⁧杧杣瑧瑴杣††㐠㈹㰰牢ਾ戼㹲挊杴捴慣捧⁧捣杣慣捣捴朠捴慣杴瑣⁧瑡捧捧捡瑡朠瑣杧捣捧⁣捡捣瑡慧杣††㐠㠹㰰牢ਾ戼㹲朊捣杴杣杣⁡捴慡杧杧瑴挠条杧捣捡⁧慴慣杧杣捣挠瑧捣捧瑣⁣瑧杣瑣杧杣††㔠㐰㰰牢ਾ戼㹲琊捡捴杣捡⁡捧条捣慧慡挠捣瑣捧杣⁣瑴捧杧捣瑡琠瑣杧捧慧⁴慧杴慧慴捣††㔠〱㰰牢ਾ戼㹲琊捴慣慡杧⁣捧捴慧杴慣朠捴瑣瑧瑡⁧杴瑣杴条杣挠捣慣捣捡⁴瑡杣捡瑣瑣††㔠㘱㰰牢ਾ戼㹲朊捣捣慧瑴⁴捣瑴杴捣条挠捧捣慧慴⁧瑣捡瑣瑴慧挠慣慣杴捧⁡瑴慣捧杧杴††㔠㈲㰰牢ਾ戼㹲愊杣捧瑣捣⁣捡瑴杧瑧捴挠条慧捡条⁣杣慧捧杴捣朠捴杣捣瑴⁣杧捴瑴杧瑧††㔠㠲㰰牢ਾ戼㹲琊捣杧捧慣⁡捧捡慴杧捣愠瑴条捧捣⁡捧慣杴捧慣挠慣捧捣瑴⁧慣杧瑡捧捧††㔠㐳㰰牢ਾ戼㹲愊慧捴瑡慣⁧杣捣慣捧杧挠捴杣杧捣⁧瑣慧捡捴慧琠捣捧瑴捧⁣瑧杣捣瑧条††㔠〴㰰牢ਾ戼㹲琊慣慴杣捴⁡杣捴慣捧瑴朠瑣捧捧瑴⁧杣瑣杣捣捣朠瑣杴条杧⁣捡杧慡慣杧††㔠㘴㰰牢ਾ戼㹲挊杣杧杧捣⁡慧慣瑧捧捧挠杧瑧杣杴⁣杣慧杣杴捧琠慧杧瑣瑧⁧瑣杴瑴瑣慴††㔠㈵㰰牢ਾ戼㹲朊捧瑴慣捣⁡杣杧捧捡捣挠瑣杴瑣瑣⁴捧捧杴捣捴琠捣条慣杣⁧杣杧瑣杴条††㔠㠵㰰牢ਾ戼㹲挊捡捣杣捣⁧捴瑡捧杣捣琠慧捡慣捣⁧瑡慣捧慧捡朠瑧捧捧慣⁴条瑴杧捣瑴††㔠㐶㰰牢ਾ戼㹲朊瑣慣慣捣⁧慡捧杧捡慧愠慧捡杣捧⁧瑣杧捴瑧杣琠捣捡捡捣⁣瑡捴瑣杣捧††㔠〷㰰牢ਾ戼㹲挊捴杧杣瑣⁧瑧慣杴瑣杣愠慣杧慴杧⁡瑣捧慣捧杧愠杴瑴瑡杣⁡捣条慴捣慧††㔠㘷㰰牢ਾ戼㹲朊瑣捧捣杣⁧瑣杧捣杴瑣朠瑣杧捴捧⁣杴杣捣慣捴愠杴捧杣杣⁣捣瑴捧杴捧††㔠㈸㰰牢ਾ戼㹲愊杴瑧捧条⁧慡慣杣瑡条愠捧捡捣杧⁴瑡杣捧杧杣愠杴捧瑣捣⁡杴杣捡杣瑡††㔠㠸㰰牢ਾ戼㹲朊捡瑣杧捧⁣瑡杧杧捣捧琠杧杣瑴瑴⁣瑴捣捴慧杴琠杧慡捣杧⁣捧条杣杴捴††㔠㐹㰰牢ਾ���㹲挊条慣捣瑡⁣条捧杧杣捧挠瑣杣捧杧⁣捧捧瑴慧杧挠杣捴慧捡⁣捡捴杣杧捧††㘠〰㰰牢ਾ戼㹲挊瑡慧杴瑴⁧杧慣杧瑣捧挠慧捴条杣⁧瑣杧瑡慣捧愠杧捣瑧慣⁧捣捡杧瑣杴††㘠㘰㰰牢ਾ戼㹲挊杣瑴捣捴⁧捧捧杴条瑧朠杣捣捣慡⁧杧杣杴慣杧挠杧杴瑡慧⁡杴捧杧杴杧††㘠㈱㰰牢ਾ戼㹲挊杧瑧瑣捴⁧捧杧捧条瑧愠慧捴捡杣⁧捧杣瑧杧捧愠瑧捴捧捣⁡捣捴慣捧条††㘠㠱㰰牢ਾ戼㹲愊捴杣捧捣⁧捣杴慣瑡瑣朠杴杣捧慣⁧瑴捧条杧捣愠捧瑡杧瑡⁴慴捣杧慣捣††㘠㐲㰰牢ਾ戼㹲愊捣杧捧慧⁣捡慣捧捧捣挠慧捣瑧捡⁣杧捣捡慣杴琠杴杧慣慡⁡杣慴瑧捣条††㘠〳㰰牢ਾ戼㹲挊杧杴捧杧⁣捧杴瑣捧慧愠杣捣捴慣⁧慡慴瑴慧慴朠捧瑴瑡杧⁧慴捧慣瑴慧††㘠㘳㰰牢ਾ戼㹲琊杴捣捴瑣⁴杴慣杧慣瑧琠杧杴瑧慴⁧捧捧杴捧杧朠瑧慣瑣捡⁣捣杣捣瑣捧††㘠㈴㰰牢ਾ戼㹲朊捣捧捴杴⁡瑧捴瑴捣条朠慣瑣杣杣⁣条杣捣捴瑧愠瑴杣捴瑧⁣杧捴条捣条††㘠㠴㰰牢ਾ戼㹲愊捡瑴捧捧⁴慧杣慣捴捣琠瑴杧捣瑴⁣瑡捧捧捴杧挠瑡瑡杣杣⁣瑴杧杣慴慣††㘠㐵㰰牢ਾ戼㹲朊杣捴条杧⁣杴捧慣捧条朠捴捧杣瑧⁣杴瑣杴捴瑣琠瑴杧捴瑴⁴慣慴捴条捴††㘠〶㰰牢ਾ戼㹲愊捣慧慧慡⁣瑴捧杣杧捧挠慧慡杧瑣⁴瑧瑣捴捧杧愠捡慡杧捡⁡条瑧捧条捣††㘠㘶㰰牢ਾ戼㹲朊捴慡杧瑴⁡条捧杴捧慣琠瑡慣捧慧⁣杴慡慡捧杧挠慣捧瑣杣⁧捣瑴瑧瑴慧††㘠㈷㰰牢ਾ戼㹲挊瑧瑡慡捣⁡慡捧慣捣杧朠慣捡慣瑡⁡捧捣瑴瑧慣挠瑴瑴慧捴⁡杧慴慧捣慧††㘠㠷㰰牢ਾ戼㹲挊捣杴慡捧⁧瑣瑴瑴捴瑧愠瑴捣瑡慡⁡捡捣捣瑴瑣朠杴杣杴条⁴捡捴瑡条慴††㘠㐸㰰牢ਾ戼㹲琊慡慣杧杣⁴慧瑧捡慣捡朠慣条慣瑣⁡慣杴瑣慧慡琠瑣杧捣杣⁣捣瑣瑧捣瑡††㘠〹㰰牢ਾ戼㹲朊捣捴捧杴⁧杣杧瑧捧杣朠杴捣杣杴⁣慣捧捴杧捣挠捧捧慡捧⁴杧捡捧杴杧††㘠㘹㰰牢ਾ戼㹲挊条捡捣瑡⁧捡瑣杴瑣慧挠杧杴杣瑣⁣慧杴慴瑡捣朠瑣捴瑧杧⁣杣杧瑣杴杣††㜠㈰㰰牢ਾ戼㹲挊捴杴捣条⁣捧杴杧瑣杧挠瑣杣捧慣⁴杧捣瑴捧杣愠瑴捴瑣杣⁧慣瑣捧杧捣††㜠㠰㰰牢ਾ戼㹲挊杣捧杴捧⁣条瑣捴杴杣挠杧杣瑡慡⁡瑧杣慣瑣杴挠杴条瑧慣⁴慧捣慧条杣††㜠㐱㰰牢ਾ戼㹲挊瑴慧捣条⁣捣杧捣瑡瑣挠捧杴杣瑧⁡瑣杣捴慣捧朠捣瑧捧捧⁣杧杴捧杧瑣††㜠〲㰰牢ਾ戼㹲愊条瑣捧杣⁣捴杧捧条瑴挠慧杧瑣杧⁣慣捧瑣捧杧朠捣瑴瑣捣⁴捧杴捣捧杴††㜠㘲㰰牢ਾ戼㹲朊捧瑣捧捴⁧瑡瑣捧杴捧挠条捣杴瑣⁧慣捣条杣捣朠杧捣条杣⁧杴捧杧捴瑴††㜠㈳㰰牢ਾ戼㹲朊捣瑣杴慧⁴捴捡捧条慣朠慣捣慣杣⁧瑣慧慴捡杣朠杣杣杧杴⁧杴杴瑣杴捴††㜠㠳㰰牢ਾ戼㹲挊瑴捧杧瑴⁧瑧慧条捣杣挠慣条杣捧⁣瑡条杴捧杧挠杴捴杧杣⁣杴捧杣杧捴††㜠㐴㰰牢ਾ戼㹲朊捧瑧杣慴⁣捴捧杴捧慣朠杣捴杣杧⁣慡捴杴捣捣挠慧条瑴慣⁣杣捣杴杣捧††㜠〵㰰牢ਾ戼㹲朊捴杧捣捡⁣瑴慧捣慣杴挠瑣慧慴瑧⁴瑣捴杧捧杴朠瑴捴慣瑣⁡捣条杧慣杧††㜠㘵㰰牢ਾ戼㹲挊捴捣杧捣⁣捴杧瑣瑴慣琠瑧慣捴慣⁧瑧慣慡瑣杣挠杴条瑧杣⁴捣捡慣捧捡††㜠㈶㰰牢ਾ戼㹲挊条捡慣杴⁣杣瑣捣杴瑣挠杧杣杧捣⁴慧慴慴慣杣琠慣瑴捧捣⁴杧捧瑡捴瑡††㜠㠶㰰牢ਾ戼㹲挊杣瑣杴条⁣慣杴捧瑧瑧琠瑣杧条慣⁣瑴杣捧杧瑣朠捡慣瑴捣⁣杧瑴慣捴瑡††㜠㐷㰰牢ਾ戼㹲挊杴捧杣瑧⁧杧杴杣捴捣琠慧杣捣慧⁴瑡杣慡捧捧琠慣慣捧捣⁡杴捧瑣杴条††㜠〸㰰牢ਾ戼㹲挊杴捴杧捣⁴瑡杧捣杴慣愠条捴瑣瑧⁣瑧捴瑴慣捴朠杧捣捡慣⁡捧捧条捣条††㜠㘸㰰牢ਾ戼㹲愊捴慧捧杣⁴捣捴杧瑴瑧挠条杴捧瑧⁣条瑧���条慣愠慧捧慡杣⁡杴杣瑡慣捧††㜠㈹㰰牢ਾ戼㹲愊捧捡慣捣⁧慴杧慣捴瑡朠慧条捣条⁣瑡慣杣瑧慴朠捣瑡条瑣⁴捣条杴捣捡††㜠㠹㰰牢ਾ戼㹲挊捣杣杣捡⁧杣瑣捣杧捧朠瑣瑣捧捧⁧捧捧杴瑣慣挠瑣杣捧杧⁣慴捣捴捣捧††㠠㐰㰰牢ਾ戼㹲愊捡捴瑴杴⁧捣条瑣捣捡挠慣杴捣捧⁣捣杴捴杴捧朠瑣杧捧瑴⁴慣捧慣瑣捣††㠠〱㰰牢ਾ戼㹲朊捣捧瑣捧⁧捣捴捧杴捧挠杴瑣杴瑧⁣杴捧捴瑡慧挠瑣捧杣杧⁣瑴杣捴杧捣††㠠㘱㰰牢ਾ戼㹲愊瑧瑧杣捣⁡杴瑣瑣杧捧挠条杣瑧捴⁧瑡瑣捧捴杣挠慴捡捴瑧⁴慧杴捣捴杴††㠠㈲㰰牢ਾ戼㹲朊瑡瑴瑣捴⁡瑣瑣瑧杣瑡琠捧瑧捴瑡⁧瑧瑣瑡杴捣琠捣杣瑧瑡⁴捣杴慴条捴††㠠㠲㰰牢ਾ戼㹲朊瑡慧捴杴⁧捧瑧杴捧杧琠瑧杣瑡瑧⁴慣杧捧慣杣琠瑣捧捣杧⁴杣瑧捧杧瑡††㠠㐳㰰牢ਾ戼㹲朊捣捣杧捣⁴捴慣捴捴慣挠慣杣瑴杣⁧捣捣条瑧慧愠慣捣杧捧⁡杧杣瑣杣瑡††㠠〴㰰牢ਾ戼㹲朊捣瑣捧捧⁣捴慡瑧瑧捴琠瑧杧捴慡⁴捧杧捧瑧杣琠杧捣条捣⁣捧捴慴瑡捧††㠠㘴㰰牢ਾ戼㹲挊杣瑧杴捧⁡杴瑧杣捧捣愠杴捣捴捧⁧杧捴杴瑣慣愠捧慣杴捣⁴杴杧瑣杴条††㠠㈵㰰牢ਾ戼㹲挊捧瑴杣瑧⁣瑴瑣瑧捧捣挠捧捣瑴瑣⁣杣杧瑧瑣杴挠杣瑴瑧捡⁣捧瑴慧捡慣††㠠㠵㰰牢ਾ戼㹲挊杴条杣捧⁧杧捣捧捴慧琠捧杣捴瑡⁴慧捴杣瑣杣朠条瑡慣捴⁡杧杴捧条杴††㠠㐶㰰牢ਾ戼㹲挊杧瑧捴捴⁧捣捧慣捣杧挠瑡杧瑡杧⁣慣捧瑧瑡捡朠捧条捧捧⁴杣捧捡杣瑧††㠠〷㰰牢ਾ戼㹲挊条瑧捧杴⁧捧慧捡捴杧愠杣捣条杣⁣瑣捴杴瑣杧琠杣条杧捴⁡捧捴慧捣杧††㠠㘷㰰牢ਾ戼㹲挊条杧慣慡⁴捴慧捣捴瑣琠慧捡条捣⁧捣慣瑴杧杣挠瑧捴瑡捡⁡杧捴杧慣捧††㠠㈸㰰牢ਾ戼㹲愊捴捣条慴⁧捴杧杣杧捣朠瑣杣捡慧⁡瑣捣杧慣杴琠捧捣杧瑡⁴杣捧瑧捧慡††㠠㠸㰰牢ਾ戼㹲朊捡瑴慣捴⁣瑡瑧杣杣杧挠瑡捡瑴捧⁣瑴杣杣瑣杧愠杴慴瑧杣⁧捣瑴杧捣瑣††㠠㐹㰰牢ਾ戼㹲朊捧杣瑡杴⁧捣捧捣慧捣琠捧杴捣杧⁴瑴捴捧杣慴愠杧杴瑡慡⁡捴捧慣杴瑣††㤠〰㰰牢ਾ戼㹲朊捣捴捧杴⁴杴瑣瑴杴瑣琠瑴杣捧捴⁣瑡捧慡杴捧挠瑣杣慧慧⁧杣慣捣捧捣††㤠㘰㰰牢ਾ戼㹲朊慡杧瑧杧⁣杣瑴条捧慣朠瑴捴捴慧⁡慧慧慡捣杧琠慡瑧捧捧⁣瑣捣捣慴慣††㤠㈱㰰牢ਾ戼㹲愊条慴杧瑧⁣杧慧瑴捧杣挠杣瑣瑧捧⁣捴慣杴瑡条挠瑣捡慧慧⁣条慣慣瑴慡††㤠㠱㰰牢ਾ戼㹲挊慡杴杧瑧⁧捴慡慧杴瑧琠慡杧杧条⁣慡慣条捧杧挠杧瑡杣捧⁴杧捣慡捧捴††㤠㐲㰰牢ਾ戼㹲朊慡慧捡慡⁣慧捧捧慧瑡挠慡杴捣慧⁡瑡捴条杣杧愠捧杧捧慡⁧杧慡慣捧条††㤠〳㰰牢ਾ戼㹲挊慡慧捧捧⁡条慡杣慡捡愠条捧捧慡⁧瑧捧杴瑧杧朠杧捣瑡慧⁴瑴杴捧慣条††㤠㘳㰰牢ਾ戼㹲朊杴慡慣捧⁡捧慧瑧杧捣朠慧杧瑡杣⁧瑣慣杴捧杧挠慡杴慧杴⁣瑧捡瑣杴慡††㤠㈴㰰牢ਾ戼㹲挊捧慧捣捡⁧捡杣杣捣瑴朠瑴杣瑧瑣⁧捣捧慣杣捣愠慧条慧杴⁡捧杣杧瑣慧††㤠㠴㰰牢ਾ戼㹲愊杴瑡杣捡⁣慧慧慣杧捣挠杴杣杧捧⁴捧捡捡捧捧挠捣慣捣瑣⁴杣杧慴杧杧††㤠㐵㰰牢ਾ戼㹲朊慡条捧杣⁣慴慡捧杧瑣愠慡条杣瑣⁣慣捧瑧瑡瑴挠杴杣杧瑧⁴杴瑧瑧杧杧††㤠〶㰰牢ਾ戼㹲琊瑴条杣杧⁣瑴杴捣杣捣琠瑴捣捣瑣⁧捣捧捧条杣朠杴杧捧杧⁴瑧瑧条捣慴††㤠㘶㰰牢ਾ戼㹲朊杣慣捧慧⁡慴慧捣条瑣愠捴杣捧瑣⁣杴捧杣杧慣琠瑡杴杧慣⁡杧捧条慣捧††㤠㈷㰰牢ਾ戼㹲朊捣捣捡慡⁧杧杣瑣慧慴愠捣捧捧瑣⁡瑧杧瑡慴瑴挠瑴条瑡慡⁴慣杴慧杴慧††㤠㠷㰰牢ਾ戼㹲琊瑴瑴捣慡⁣捡捣杣捣条挠捣捣捧捣⁣杴瑣杧瑧瑴朠慣杧瑴杴⁧杧捧瑧慧慣††㤠㐸㰰牢ਾ���㹲朊瑴瑡杴慣⁧杧瑧捴瑧慧挠条瑴瑡杴⁣条杧杧捧瑧朠捡条瑴瑡⁴捧条杧瑧捴††㤠〹㰰牢ਾ戼㹲朊杴捡条瑴⁡瑧捡杧慧瑧朠捡杧捧捡⁴杧瑣杧慣瑡朠捴慴捧慡⁣杧慣杧慣瑴††㤠㘹㰰牢ਾ戼㹲琊杣捧杴条⁧瑧慡慡慧捡琠瑴捣捧慴⁡捧慧慴慧瑣朠慴杴慴慡⁣捡条慴瑴捧††〱㈰㰰牢ਾ戼㹲愊条慧杣杣⁧慡慣杴捣捴愠杴杴捧杧⁣慣杧捡杧捣愠捧杣杧瑡⁣杧慧慴瑣杧††〱㠰㰰牢ਾ戼㹲琊杣瑴捡慣⁧条捣捡杣捡挠杣条慣慡⁣捣瑴瑣瑣瑡挠条瑡杣瑴⁧捡慧瑧瑡慴††〱㐱㰰牢ਾ戼㹲挊捣杧慣瑴⁣捧杴杣瑣慴琠杧慣慧捧⁡杧慧慡杧慡琠杴捣杧捧⁴瑡瑧捧慡杣††〱〲㰰牢ਾ戼㹲朊慧瑡瑴慧⁡慧瑡瑴瑣捣愠瑡捧杧捧⁧捧杴慧捧瑡朠捧瑴捴慴⁣杧瑧捴捧杴††〱㘲㰰牢ਾ戼㹲挊慧瑧瑣杴⁣慣杣捣慧捧愠捣杴瑧杣⁣瑴捴条慡瑡挠慡捴慴慡⁧慴慴慴杴条††〱㈳㰰牢ਾ戼㹲琊慡捡瑴杧⁴瑣慧慣瑧慴挠慣瑡捧瑴⁡瑡慣瑧慧杧挠捡瑣瑡瑣⁣条杣瑡瑣瑧††〱㠳㰰牢ਾ戼㹲挊慴瑴捴瑧⁴慣捴慣慴瑧琠捧瑣慧瑣⁣捣杣捴瑧瑧愠慧慴捡慴⁣慧慴杣杧条††〱㐴㰰牢ਾ戼㹲朊捧瑴捡慣⁴瑣杧捣捣条琠捧杴慣瑡⁧瑡捡杣杣条愠捣慣杣瑣⁣捡杣捧捴慣††〱〵㰰牢ਾ戼㹲朊瑡瑴瑡慣⁧慣瑡慡捡慣朠捣条捣杧⁡条杧捣慧捧朠慣慧条杴⁧捴瑣捧慡瑣††〱㘵㰰牢ਾ戼㹲琊慴捴杣捣⁴捣瑡捣条捴琠瑡慴瑡杴⁴杴捣杧慧条挠慴慧瑧慡⁧慴瑧捴捧慣††〱㈶㰰牢ਾ戼㹲朊瑴慡慴瑧⁴杴杣慣捡瑧琠瑧杴捣瑡⁴捧慴慣杧慣琠杣杴瑧瑧⁣捡捧捴瑧杣††〱㠶㰰牢ਾ戼㹲琊瑴杧慴杴⁧瑣捴瑡捴条挠捴杣瑧捴⁣慣捡慧捴慡朠捧慧瑧慴⁣瑡慧捴捣捣††〱㐷㰰牢ਾ戼㹲愊杴瑴瑧捧⁡慡慡条杣瑧琠条瑣捣瑴⁣杧捴瑣捣慧琠杣瑴瑧慣⁧慡瑧慡瑧杴††〱〸㰰牢ਾ戼㹲朊捣捧条杴⁴慴捴捡捴瑡朠瑧慴杴捧⁡捧捡杴慣慴愠瑴瑣瑣慴⁣杴捴瑡捧慣††〱㘸㰰牢ਾ戼㹲琊捣瑧慡慧⁴捧瑴瑴瑣瑧朠捡杴瑧慧⁧慴瑣慣捡慣愠瑧慣瑴瑣⁧条慡慴瑧瑧††〱㈹㰰牢ਾ戼㹲愊杴杣捧慧⁣杣条瑴捧捴琠杴捣杣捧⁧捴慡慣杣杧愠慴瑡捡杣⁣捧慣慣慴捧††〱㠹㰰牢ਾ戼㹲愊慧捡瑴慴⁡慡瑧捧捴瑡挠瑡杴慧慡⁡杣瑴瑣捴杧朠捧慧慡捡⁴瑣慣条慧捴††ㄱ㐰㰰牢ਾ戼㹲琊慴捣捧杴⁴杴条瑡捣条琠捴慧杴慴⁡捣慣瑣杣杴挠捡捣慡瑣⁧瑡瑣捴条慣††ㄱ〱㰰牢ਾ戼㹲琊瑣瑴慴瑣⁴捴捡慣捧瑧琠捴杴杧杴⁡捧慡慡捡条朠慡杧慣慡⁡杴捣捧慡慡††ㄱ㘱㰰牢ਾ戼㹲愊条杧慡慴⁡杧捧慧慣杣朠慡瑡瑧杴⁡瑡捡捴瑡捡琠瑣捴瑣瑴⁴捴慡慴瑴瑡††ㄱ㈲㰰牢ਾ戼㹲琊慧条慣瑴⁴瑡慣杧瑧慴琠杴捴捴瑡⁧条杣慧慴慣琠瑡瑴慧瑡⁧慴瑴慴慧慡††ㄱ㠲㰰牢ਾ戼㹲愊瑡慡捡慡⁡条条瑴杴慴朠慡捡捧慡⁡慡杧捣瑡捣朠捴条慧杴⁧捣瑴瑣捧瑴††ㄱ㐳㰰牢ਾ戼㹲愊瑡瑴慧杴⁣瑣杧慣瑧瑴愠杴捧杧捧⁧捴瑣捧捣捧挠捡捣捴杣⁧捧杣瑴捧瑴††ㄱ〴㰰牢ਾ戼㹲挊捧慡杣瑴⁣慡瑡捣捧捴挠杣捧杧瑡⁴杴捴瑣捡捴愠杧条条杣⁴捴捡杣捡慡††ㄱ㘴㰰牢ਾ戼㹲愊慣捡条瑡⁡慡捡慧⁡†††††††††††††††††††††††††ㄱ㜴㰷牢ਾ戼㹲㰊牢ਾ氦㭴ㄲ☰瑧※ㄠ㔲戼㹲☊瑬㈻ㄱ朦㭴†ㄱ㔲㰸牢ਾ氦㭴ㄲ☲瑧※䐠䅎戼㹲☊瑬㈻㌱朦㭴†牁楴楦楣污匠煥敵据㱥牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〲朦㭴戼㹲☊瑬㈻㌲朦㭴†汰獡業⁤䱰批䱁㘳挠湯慴湩湩⁧瑯䉳⁁灯牥湯戼㹲㰊牢ਾ氦㭴〴☰瑧※ㄠ㔲戼㹲愊杧捣慣瑧⁣瑴捴慧瑣慧朠捣瑴捴瑧⁴瑴瑡瑴慧杴挠瑣杧慣瑧⁴捣瑣捡捴捴†††㘠㰰牢ਾ戼㹲朊慣杴杧慧⁧捡捣慣慣瑣愠捣瑡杣捧⁧瑣捡杧杣瑴琠慣瑣捴杴⁡瑧捴杧慣杴†††㈱㰰牢���戼㹲朊杧捴条瑧⁧杧捡慣捣捧朠瑣捡杴捣⁧捣条捧慡瑡琠瑣瑧瑴慴⁴慣慧捣捧瑴†††㠱㰰牢ਾ戼㹲挊杴杣瑴瑣⁧瑡瑴慡捴杴琠瑡慣杧瑣⁧慡慡捴瑴瑣挠捴瑡捣捧⁣慡慡慣捧慣†††㐲㰰牢ਾ戼㹲愊捧瑴捧瑡⁧慣杧慡慡慣愠捧捴条慡⁴捧杴杣杧慧朠慡杧捧慡⁣捴捣慣捣条†††〳㰰牢ਾ戼㹲挊捣慣慡瑴⁴瑴捧杴捧慧琠慡瑡瑡瑴⁴捴杧瑴慴瑡琠瑧捴捡慡⁡捧瑴瑴杴慡†††㘳㰰牢ਾ戼㹲琊瑴慧瑧瑴⁡慴慧慡瑴慴琠杴捧杴瑧⁡瑡捧瑴瑴瑴朠捣捣捣杴⁣条慧瑣捴瑡†††㈴㰰牢ਾ戼㹲琊慧捴瑣杴⁣瑣瑡捡慣捴愠瑡瑡慣瑴⁧瑧慣瑡慡杴愠杴瑡慧瑴⁧捡慴慡捡瑡†††㠴㰰牢ਾ戼㹲朊瑴慴捡慡⁡瑡瑴慡杣慣琠瑡捧慴慡⁴捧瑧慡捡杴挠瑡瑡捧瑣⁴杧瑣慧瑧瑧†††㐵㰰牢ਾ戼㹲愊瑡瑴捡瑧⁴捡慡瑡瑴慴愠杣慡捡杧⁧慡捣瑣瑡瑡琠慧捴捴慴⁣杴瑴瑡瑣杧†††〶㰰牢ਾ戼㹲挊瑴慧条杣⁴杴瑧捡杣瑴愠条慡杧条⁧瑡捣瑡瑡慧琠瑣杴瑡杧⁡捡捧杴捧杧†††㘶㰰牢ਾ戼㹲愊慡捴慡捡⁣捧瑡捣杣瑡挠条瑧杣捴⁧杴捣杴捡慡琠瑡捴杴慣⁡杧捡慴慣捧†††㈷㰰牢ਾ戼㹲琊捡杴捧慡⁣杣慣条杴瑡朠瑧捧瑡杴⁧慣瑴慧慴捴愠杧捧捧捴⁡瑡杧杴慧捧†††㠷㰰牢ਾ戼㹲琊杴捡捧捡⁴杧慣慡捡瑣琠瑡杣瑣捴⁣杣瑴条杣杧挠瑧捧瑡杧⁧捧杧条杣捣†††㐸㰰牢ਾ戼㹲朊杴捡瑡慣⁡杴瑧慡慡慣挠瑡瑡杣瑴⁣瑡瑣捧杣慧琠捧慧瑴捧⁧杣杴瑡瑡慴†††〹㰰牢ਾ戼㹲朊杣杴慣捡⁴捧瑡捡条捴愠捴捧捴条⁴瑡捣杣捧捧朠慧捧杴慧⁧捧慧慡杧慧†††㘹㰰牢ਾ戼㹲琊杧瑣瑴杴⁣捧杴慣瑴瑡挠瑧慣杧瑣⁣杣慣捧瑡慧愠慧杣慣瑴⁡瑡慧慣瑴条††ㄠ㈰㰰牢ਾ戼㹲挊捧慡杣慴⁴慴瑣慣慧捴琠杧捣捡慡⁡杴捧瑧慴慣朠慣杧慧慡⁧杴杴瑴瑧杣††ㄠ㠰㰰牢ਾ戼㹲愊慧捴慡捡⁣慧慧杧慴捣愠瑧慡条瑧⁧条捧慡瑴捧愠捧瑴瑴瑡⁧慣杧慡捧捴††ㄠ㐱㰰牢ਾ戼㹲挊瑣瑴瑡杣⁧捧慧捡捧捣朠慴瑴捴杴⁧捧慧杴瑡瑴愠捡杣瑡慧⁡捴杴捧瑴杣††ㄠ〲㰰牢ਾ戼㹲挊条捴瑧慴⁡捣慧瑣杧捧朠慧瑡瑧慣⁧慴慡慡瑴杧挠捡条瑧捧⁡捡捴条捧瑡††ㄠ㘲㰰牢ਾ戼㹲挊瑡杧杣捡⁴杧杣杧杴杴挠杣慧杴捴⁴杧条瑣杧瑣琠慧慡杴瑡⁡捡慣捣捧瑡††ㄠ㈳㰰牢ਾ戼㹲琊捡慡慣慡⁡慡慧慧慡瑡愠捡条慧瑧⁧瑡慧瑣瑡慧朠捴瑧瑴条⁴杣慴瑧瑡瑣††ㄠ㠳㰰牢ਾ戼㹲愊捡杣慧瑴⁧慣捣捡慣慧挠慧捧捡捧⁣捧慣瑧捧杣朠杴捧瑣杴⁣杣瑴杧慣慴††ㄠ㐴㰰牢ਾ戼㹲挊杴杧杧慣⁣杴慡条捣捧愠杧杣慧瑣⁧杴瑧瑴杧瑣朠慧瑧杧杴⁡慡慣杧慧瑡††ㄠ〵㰰牢ਾ戼㹲朊条慧捴条⁣杣瑣慡慡慡朠瑧慧慡慡⁡杧慴捡瑡慴挠瑧杧捧瑣⁣瑴瑴慡捣捴††ㄠ㘵㰰牢ਾ戼㹲愊捧慧捡条⁧捡瑣杴捡慧愠慴瑣捡慡⁣慣瑡捴捴慣愠杴捣瑧捴⁴瑣杧捣杣瑣††ㄠ㈶㰰牢ਾ戼㹲琊瑴慣瑴瑡⁣杧瑣杣瑡瑣朠瑧捧慡瑴⁴慣捧瑧捣杴挠瑣杧慧杣⁧瑣瑡瑣捡捧††ㄠ㠶㰰牢ਾ戼㹲朊慴慡杴杣⁴杴瑣杧慣慧琠慡瑡慴瑣⁧捣捧杴瑴捧愠条捡慧杴⁡慣瑴瑡瑣杧††ㄠ㐷㰰牢ਾ戼㹲愊捴慣杣瑡⁴瑡慣捣杴瑴朠捣瑡瑴捧⁧慣杴慡瑴捡朠慣慡杣杧⁧条杴慡慴瑡††ㄠ〸㰰牢ਾ戼㹲挊捧瑡杴瑧⁴捴瑴捴杴慣琠瑡捴瑣瑴⁣捣慧慣捣杧愠慡捴瑴慣⁡杣杣瑣捧杣††ㄠ㘸㰰牢ਾ戼㹲愊慣慴杴捡⁡捣瑴捧瑴慧愠慣捧瑴杴⁴慧瑴瑡慧瑴琠捧杴杧瑴⁴捣条捡条慡††ㄠ㈹㰰牢ਾ戼㹲愊捡慧捴瑧⁣杴捧瑧捴瑣朠慧瑴瑧瑣⁴捴慴捡瑣慧挠捣捧瑧慣⁣慧慣杣慴捧††ㄠ㠹㰰牢ਾ戼㹲朊慣慡慡捧⁣瑡捡条捣杴朠杧慣慡捧⁡瑴捴慧捡条愠条捴慴捣⁣慧捴杧慣瑴††㈠㐰㰰牢ਾ戼㹲朊慡捣慧慡⁧慡瑡条捣慡愠慣杧瑣捧⁣杧���慣瑣捧挠捧慣慡捡⁴杧杣慣捡瑴††㈠〱㰰牢ਾ戼㹲愊慡捧杧慡⁣杴慡慡捡瑧愠慣慡瑡瑡⁣瑴瑴瑣瑧杣愠捡杧瑣杧⁡瑴瑡捴慣慡††㈠㘱㰰牢ਾ戼㹲朊瑧瑴捧慣⁧条杣瑴瑴瑣挠捧瑣瑡慧⁡捧瑧杴瑣杧愠慡慡慴捴⁣捧条慣捴瑡††㈠㈲㰰牢ਾ戼㹲朊瑧慡慡瑴⁣瑧慴慴捣慣朠瑡杴慣捣⁡捡瑧杣杣杴朠杴瑡瑧捧⁡条捣慴捴条††㈠㠲㰰牢ਾ戼㹲朊瑡瑡捴瑧⁣瑡慣捧捴慧愠慡杴慡捧⁴杧捡慧瑡慴愠杴瑧慡瑡⁡杣杧慣瑡慴††㈠㐳㰰牢ਾ戼㹲朊捧杴慧杣⁣杣瑣瑴瑡慴琠瑴慧瑡慣⁧慣瑴瑴慧捣朠慴慡瑴捡⁴慧杴慡慡慴††㈠〴㰰牢ਾ戼㹲琊捴杣瑣捡⁴瑣慧杣杴杧挠瑴条杴捡⁧捣捡杴杣杴愠杣杧瑡慧⁡捣杴瑧条慣††㈠㘴㰰牢ਾ戼㹲愊慡慧瑧瑡⁧瑴捧杴瑣慣朠慧捣慣捧⁣慡捴杣杧杣琠捴瑴瑧捴⁴瑴杣慣瑡瑴††㈠㈵㰰牢ਾ戼㹲朊杣杧条杣⁧慣慡杣条瑴愠捡瑧杣捧⁧瑴慡瑴瑧慴愠捣捣慴杣⁡捴瑧慧杣慡††㈠㠵㰰牢ਾ戼㹲朊瑴捧条瑣⁧杣瑣杧瑡杣琠捧瑡杴捡⁴瑡瑧杣瑣杧挠杧慡杣慴⁴瑴捣杣捴瑡††㈠㐶㰰牢ਾ戼㹲朊慣慧慡杴⁣杴慧杣瑴瑡挠瑧慧慡慡⁣慧慴瑴慡捣愠瑣杧慣杧⁡瑧捧瑴慣瑴††㈠〷㰰牢ਾ戼㹲愊捧慧捣慴⁡条慣慧慴瑧琠捣捧慧条⁣捧杧慡条捣愠捧条杣杣⁡慴慡瑧杴瑣††㈠㘷㰰牢ਾ戼㹲愊捣瑴捴慣⁡条瑣杴杣慴朠慧捧慴捧⁴捧瑣杣慡条朠杧瑡捧慧⁴捴捧慣捣捴††㈠㈸㰰牢ਾ戼㹲琊慣瑣捣捧⁴杧杣慧瑴捣琠瑣杴条慡⁣瑡瑴杴瑧杧挠条捧慧瑴⁣杴瑧慡杣瑡††㈠㠸㰰牢ਾ戼㹲朊条慧慡杴⁣捴慡杧捧慣琠慡捴捴杧⁣瑧杴慴瑧杴朠慣瑡慴瑣⁣捡杣慧瑡杴††㈠㐹㰰牢ਾ戼㹲朊条捣捡杴⁣捧条瑣捡慧朠杣杣捴慴⁴瑴杴瑣慧杧朠捣捡慴杴⁣慴瑡杧慣瑴††㌠〰㰰牢ਾ戼㹲挊杴慧条捣⁴慴慡捡捡慴琠杣瑣瑴瑴⁴慧杧杣瑡杣挠瑴慡捣瑴⁴捴条慡杴条††㌠㘰㰰牢ਾ戼㹲愊杣瑴慧捴⁧捧捡瑧慡捧朠杴条捡瑧⁴慧捴杧慣杣琠慡慧杧瑴⁣慣捡瑴捴捡††㌠㈱㰰牢ਾ戼㹲挊瑡慡杴慡⁡慴条瑡慣瑣愠捣杧捧瑧⁡瑴瑴瑴慧瑧琠瑡杣条瑡⁴瑴慣杧条瑣††㌠㠱㰰牢ਾ戼㹲愊条慧条瑣⁡慡瑡杧条慡愠慡慡捴捡⁴杧瑡瑡捡慣挠杣瑴慧慴⁴瑡捣慣瑡杧††㌠㐲㰰牢ਾ戼㹲挊瑡杣慴慡⁧慡慣瑴瑴慧朠捧瑡瑴慣⁧捴条瑴捧捴愠瑡瑧捡瑣⁡慴捡慣慧捣††㌠〳㰰牢ਾ戼㹲朊瑴慣捧杴⁧瑡瑡慴杣捧挠瑴瑴慴慡⁧捡杣慴慡慧愠慡瑡慡捧⁡慣条瑴瑴瑡††㌠㘳㰰牢ਾ戼㹲挊杣捧瑣瑴⁡瑴慣慣瑴瑣琠捧捣捧瑣⁧瑡慧瑡捧捴愠捴杣慧瑡⁴捣瑧瑡杧慣††㌠㈴㰰牢ਾ戼㹲愊杴慡条捡⁧瑧慧捧杴瑧朠瑡瑡杧慧⁴条杴瑴慣捣挠瑴瑧慴慣⁣杣瑴瑴捣瑡††㌠㠴㰰牢ਾ戼㹲朊条慣慡瑣⁧慡捡瑧瑴捴愠捴捧捴杴⁧条杴慡慴捣愠杣捡慧瑴⁴捣杧慣瑧瑴††㌠㐵㰰牢ਾ戼㹲挊慴慣慣慴⁴瑡捴捧慡慧琠瑧杧杣杴⁴慴杣瑧慧慡愠捣杴捧瑣⁡瑴捴捣慴慡††㌠〶㰰牢ਾ戼㹲朊杧瑴慴瑴⁧条慡慴杴瑴琠瑴杣捴捴⁡捧慣瑡捣瑣朠杧杴条瑴⁴慣捣条瑴瑴††㌠㘶㰰牢ਾ戼㹲朊瑡瑴慡捡⁧杴捧慣瑡瑡朠慧慣捡瑴⁣瑴杣捣捣杣琠瑴捴捡慣⁴杧捧慡瑡瑡††㌠㈷㰰牢ਾ戼㹲琊瑡捡捧慡⁧捧慧慣条瑧朠瑣慧杴捣⁧瑣杧杣瑡捴愠杧瑴慣捴⁡杴捣瑧瑴瑧††㌠㠷㰰牢ਾ戼㹲朊瑡杧瑣捴⁣瑡瑧杣捧条愠瑡捧瑴慡⁴慧瑡慴慣捡愠瑧捡杴杣⁡杴条杴捧条††㌠㐸㰰牢ਾ戼㹲朊捧杧杧杣⁴慡瑴瑴瑴慴愠杧慣瑧慴⁴杴瑧捧捣瑴愠慡杣捣杴⁧瑴捧慴杣捣††㌠〹㰰牢ਾ戼㹲琊慧瑡慡瑧⁧瑡慡慴条杣朠瑡慧瑡杧⁣条慡瑡捴慧琠慧慴条瑣⁧捴慡捡捡慡††㌠㘹㰰牢ਾ戼㹲挊慣捣瑡慣⁡捡条慧瑴瑴挠捧瑣捧杴⁧杧慣慡捣条挠瑧杧捡杣⁣瑴捧杴慣捡††㐠㈰㰰牢���戼㹲琊瑣瑣慣杧⁧捣条捧杧杴愠条杧慣瑡⁣条瑣瑧杴捣挠瑧瑣慣瑣⁧瑧慧慡条慡††㐠㠰㰰牢ਾ戼㹲愊慡捣捡捣⁴杧杣捣慣瑡愠杣慣慡捣⁧捣捴捴捣杣挠捧瑧杴捧⁣慧瑴慣瑴慡††㐠㐱㰰牢ਾ戼㹲琊捧条瑣杧⁣捡慧慣杧瑴琠捣杣捡杴⁧慡条杣杧慣朠杴条杣慣⁡杣慣瑡慴瑡††㐠〲㰰牢ਾ戼㹲朊慴条瑴条⁣捧慧瑡杴慣愠捧杴捧杣⁡杣杣瑣杧捧琠捡瑧瑣杴⁣杴捧瑧捴杧††㐠㘲㰰牢ਾ戼㹲朊条慣慧条⁡捧瑡捡瑡瑣朠慧条慣慡⁧捣条慧慡捧朠捧瑣瑡杧⁡捧杴杴杣捧††㐠㈳㰰牢ਾ戼㹲愊捧捧捴条⁴条捧慡瑴瑴琠慣慡瑡瑡⁴瑧慴条捣瑴琠捴杴条慣⁴杧慴瑴瑴捴††㐠㠳㰰牢ਾ戼㹲愊杴瑧瑡慴⁣慣瑡慴捧条朠慡慡慴条⁣慣瑴慧瑡瑡愠慡条瑡慡⁡慡杴捴瑴瑧††㐠㐴㰰牢ਾ戼㹲琊慴慣瑡条⁡瑧杧杧杧杧琠慣捧瑣捧⁣捧瑣杴杧捣朠杧杴瑡瑧⁣瑧捡瑴捧捣††㐠〵㰰牢ਾ戼㹲朊捣捧慧捡⁴杣瑧慴捣瑧挠慣捧捣条⁣捧慧捣条瑣挠杣捧慡杣⁣瑣杣杣慣捣††㐠㘵㰰牢ਾ戼㹲挊捧瑴捧杧⁣捧瑴捧捧瑡朠瑧杣慡捣⁡瑣杧捣捴杴愠杣捧慣慧⁣瑡条捣捧捡††㐠㈶㰰牢ਾ戼㹲愊条瑧瑡瑣⁡杴慧条捣瑴朠捣杧瑴瑴⁧捣杧杧捴慧琠捣条捣捡⁡慣捧杣瑣杧††㐠㠶㰰牢ਾ戼㹲琊捧条慣杧⁣杧捧杧瑴捴朠瑣瑧捣条⁣捧捣捧捡瑣挠瑧捣瑡捧⁴慧杴杣慣慣††㐠㐷㰰牢ਾ戼㹲琊捧杴捧杣⁣慣捣慣杴捡朠捧瑣捧捧⁧瑡慣条杧瑧琠慣杧捧慣⁣瑧捡条捧捧††㐠〸㰰牢ਾ戼㹲挊杣捴杣捣⁴杣捴捧杴捧朠慴瑣捣慧⁣条慣捧杣慡愠捣捣杴捣⁧瑣杴杣捧慣††㐠㘸㰰牢ਾ戼㹲琊捴杴杧杣⁡杴瑡杧瑡捡挠瑴捣慡条⁧杣瑣杣瑡捧愠瑧捣杴慴⁴瑧捧瑴慧捧††㐠㈹㰰牢ਾ戼㹲朊捣捣捡慣⁣慴捴慧捣捴琠捧捣杣瑡⁴捴瑣瑴捧慣朠杣捣杣瑡⁡捧慴捣瑴杴††㐠㠹㰰牢ਾ戼㹲愊捣捡瑡杧⁣瑡捴条杣瑧朠捡杧捣捴⁣慣瑣杴杧瑴挠慣杧慡慣⁧捣杧条瑣捧††㔠㐰㰰牢ਾ戼㹲挊瑧捣捧瑣⁴杣瑧瑣杴杧琠捴杣杧捣⁡条慣瑣条捧挠瑡慴杧捣⁣条捣瑡杧捣††㔠〱㰰牢ਾ戼㹲愊捣条捣瑣⁴捧条慧杴杣挠条瑡慣捴⁡捧捧捣条杣朠瑣捣杧捧⁣捧杴慡瑣杣††㔠㘱㰰牢ਾ戼㹲愊捴杣瑣杴⁣杣捴捧杣慴朠捴瑡捡瑧⁣捡瑧捣条瑣琠捧杴杣瑣⁴捧捧捴捧捣††㔠㈲㰰牢ਾ戼㹲挊捧瑴慧杧⁧慣杣慧捡条朠捣杧杧捧⁣条捡条杴杣挠杣杧捴瑧⁧捣杧捡瑧杧††㔠㠲㰰牢ਾ戼㹲挊杴条捧杴⁴捧瑴瑧捴瑴愠杧瑣捴捡⁣捡杧杧慣捣挠捣瑴捧捴⁴杴杣瑣捧瑣††㔠㐳㰰牢ਾ戼㹲挊捴慣捧捡⁧捧杧捧瑴慧朠慣捣捣捧⁣瑧慣杴捣捧挠杴慡捣捡⁣慧捴条杣慡††㔠〴㰰牢ਾ戼㹲挊杧杴杣捣⁡慴瑧杴捧瑣琠捧捴捡捡⁣慧条杣慧杣愠条慡捣杧⁣捧杴瑧杣捴††㔠㘴㰰牢ਾ戼㹲朊捴慣慣捣⁣慣瑴捣捴杧挠瑣杣捧捧⁴杧捴瑡捧捴朠捡条瑧条⁧捡杴捣条杣††㔠㈵㰰牢ਾ戼㹲朊瑡瑧慴捴⁧捡慣瑧捡杣愠捧杴捣捣⁧捧杴捧瑣捧琠捧杴瑧杣⁣瑣捧捧捣瑡††㔠㠵㰰牢ਾ戼㹲挊瑡杧捣捧⁧捣瑣杴瑣杧挠瑡杧杴慣⁧慧捡捡慧慴朠条慣捣杣⁧慴捴杧杣捧††㔠㐶㰰牢ਾ戼㹲朊瑡杧捣捴⁣瑡捧慧捣慧琠慧捣杴杧⁣慣杴杧捧杣挠杴捧瑧瑴⁴瑣捴瑣杣瑡††㔠〷㰰牢ਾ戼㹲朊杴慧捡杣⁧杣慣捧瑧瑧挠慣捧捡慣⁴慣杧杣捧杧挠捣捴杧杣⁧杣杣瑣杴条††㔠㘷㰰牢ਾ戼㹲朊捣瑧杣慡⁣慣瑣捣杧杧挠慣杴瑡瑧⁴杧捧条捧杴挠杣瑡慣捧⁧捧杴慧捴条††㔠㈸㰰牢ਾ戼㹲挊条捧杣捴⁡捧慣杣捧瑴朠捣瑧捴瑣⁣杧杣瑣慧杧琠捧捧捣慣⁡杧捧瑧捧条††㔠㠸㰰牢ਾ戼㹲朊杣瑧慧杴⁡瑡杧杣瑧杧朠杣杧捴瑴⁣杧杣杧慣杧琠条瑡慣捣⁧杧捣杧杴杧††㔠㐹㰰牢ਾ戼㹲挊条瑴杣捣⁣捡瑣捣条慣朠瑡捣杧捣⁣捧���捧慡捴琠瑧捧杧捣⁡瑧杴慣杧捧††㘠〰㰰牢ਾ戼㹲挊条慣杴慧⁴瑴捡杣捧捡挠捡杣杧杣⁡慣捣条杣捣挠杣捡杣慴⁣杣捧慣捣瑡††㘠㘰㰰牢ਾ戼㹲朊瑴杧捧慡⁡捡瑧条捴慣朠杣瑧杧杣⁧杣瑣捧杴杣愠捡捧瑣捣⁡慧瑡瑡杴瑡††㘠㈱㰰牢ਾ戼㹲愊杧瑣慴杴⁧瑧条捣瑡杴愠瑴捧瑣捣⁴瑴捧条捧条琠杴瑧杧瑴⁡杧杣瑣杧杣††㘠㠱㰰牢ਾ戼㹲朊杧捴捡慴⁣捣捣捧捣杴挠捧杣瑣瑣⁧条瑴瑣捴慣朠捧捡捴捧⁧慣捧捧瑣杣††㘠㐲㰰牢ਾ戼㹲琊瑡捴瑧杣⁴杣瑧慣捧慣朠慡瑣杴杣⁣杴捡捧瑡捣挠瑴杴捧瑣⁴慣杴杣瑣杣††㘠〳㰰牢ਾ戼㹲朊慣慴捴捧⁧瑣杴捧瑧捡愠捧瑧慣杧⁧瑣杧捣条慣朠瑧杣捣杧⁴瑣捧瑴瑧捣††㘠㘳㰰牢ਾ戼㹲琊瑴杴瑧瑣⁴捴瑡瑡慣瑧挠捡杣条慡⁡瑣杴捣杧杧挠杣慡条捧⁴杴捴瑴杣杣††㘠㈴㰰牢ਾ戼㹲朊慡慣条慧⁣慡杧杴慣捧挠瑧慣条瑧⁴慡杧瑣杧捣愠慴捴条杣⁡瑣慧慡条杣††㘠㠴㰰牢ਾ戼㹲朊捣条捣捴⁧捧瑣杴瑴杴愠杣慴慴捡⁣慡条捣捡杣朠捧慡捣慡⁴条捣瑣杴捴††㘠㐵㰰牢ਾ戼㹲愊瑣瑴杴瑡⁣条瑧条捡杣愠捣瑣慧条⁣捧瑴瑴瑴杣琠瑡捴慣慴⁡慡捣捣瑣捴††㘠〶㰰牢ਾ戼㹲琊瑧捧瑧慧⁧慴瑣慣慴瑧愠慴捡条捧⁧杴条慴捣慡挠捧慡捧捡⁴捡瑡捧杴慡††㘠㘶㰰牢ਾ戼㹲愊捴杴捧捣⁧捣捣杴捴慣琠捧瑣杣瑣⁧捧杧杧杴捣朠瑧捧捣瑧⁧捣条瑣杣捧††㘠㈷㰰牢ਾ戼㹲挊杣杣慣条⁣杴慧杣瑣杧朠慣慧捣慣⁴慧捣瑴捧杴愠杣瑧捧捧⁴杣瑡瑧慡捴††㘠㠷㰰牢ਾ戼㹲挊捧瑴杣杴⁧捣杧捧瑴捧朠瑣瑣捧慣⁧杣瑣杧捧杴朠捣捴杧捣⁡杴捧瑣杴捣††㘠㐸㰰牢ਾ戼㹲朊瑡瑴捣捴⁧捧捡杴杣捧挠捣杧瑣杧⁣慣捧瑴瑣捧朠杣捧慧慴⁡条捴捧捡瑴††㘠〹㰰牢ਾ戼㹲朊瑣慧杧捴⁡杴捡杣慡捧朠瑣杴捡慣⁧捣杣捧慣捴琠杣瑣捧杧⁴捡捴瑧捣条††㘠㘹㰰牢ਾ戼㹲挊捧杣杴杣⁣杣瑧杧杣捧琠慡捧杴捣⁧瑣杣杧慣瑧琠杣条捧杴⁧捣条捣杴杣††㜠㈰㰰牢ਾ戼㹲朊捧瑣捴捴⁣杴瑣捧杣瑣朠杧捣杴瑣⁣慧捴杴瑣杧挠慣捧瑣捧⁴捧捡慣捧捧††㜠㠰㰰牢ਾ戼㹲挊杧捧慣捧⁧瑧杧杣瑧瑣琠捧捣瑴杧⁡瑴慣杣慣捧愠捧捡捣捡⁧捧杴瑡慡捣††㜠㐱㰰牢ਾ戼㹲朊捧捧杧瑧⁧瑧瑧捧瑴瑧挠瑣杴杣瑧⁴杧杴慡捧捣朠捣慡捧杧⁣慣慴瑧杧杣††㜠〲㰰牢ਾ戼㹲朊瑣瑧杣捧⁧瑣杧捣杧瑧挠杧杣捴瑧⁡瑣杣瑣杧捣愠捧瑧捣杧⁧慣瑡瑣捧捣††㜠㘲㰰牢ਾ戼㹲挊杣慡瑧捴⁡捣捧瑣捧杧挠瑧杣捧慣⁣瑣杴捡捣瑡朠捣杴瑡条⁴捴瑴杣杧瑣††㜠㈳㰰牢ਾ戼㹲朊瑧瑴捣捡⁴捡慣杧捧条朠瑣捣杣捧⁣瑣杣捧瑴捴愠杴捴瑡捣⁡杧捴慡捡捴††㜠㠳㰰牢ਾ戼㹲朊瑣慧杧捴⁧捴慣捣条慣挠慣慧捣瑡⁧捣捧捴瑣捧琠杣捧杧捧⁣杴瑡瑡捡捡††㜠㐴㰰牢ਾ戼㹲朊捴瑡杴捣⁣杴杧慣瑴慣琠捣捧瑴慧⁧捣瑡杧杣杴琠捴杴慧捧⁡瑣捴杧杣捧††㜠〵㰰牢ਾ戼㹲琊慧捣瑡捴⁣杣瑧捴瑡慣琠瑣杧捣杧⁴杧瑧捧瑧捣挠杴捡捧杣⁡慴捴慧条杣††㜠㘵㰰牢ਾ戼㹲挊捴捡条捣⁣瑡杧捣瑴慧朠瑣瑧杣捧⁣慴杴捧瑣捧愠慡瑧捣杴⁴杣瑴瑣捴瑡††㜠㈶㰰牢ਾ戼㹲挊杧捧慣捣⁡条杣慣捧慣朠瑡杣条捣⁧捴瑣杣瑧杴琠慣瑧杧杣⁴慣杧捴慧捧††㜠㠶㰰牢ਾ戼㹲愊条条慣捡⁧瑡捧慧捴条挠条慣捣捡⁣瑧条捧瑡慣琠杧慡捧慣⁧慣捴捡杧瑴††㜠㐷㰰牢ਾ戼㹲愊捧慣慴捧⁴捴慣瑧捧慣挠捣捣捧慧⁣捧捧捴杣杧挠捧捴杴杣⁣杧杣瑣捧捴††㜠〸㰰牢ਾ戼㹲愊捣捴杧杣⁧瑣捡瑣捣杣挠慡瑣瑣瑴⁧捧慣捧捴慣挠捣瑡捧杣⁣捣瑣瑧瑣杧††㜠㘸㰰牢ਾ戼㹲挊捧杴杧瑣⁴捴条捣捡捴挠捧杣捣杴⁣捧瑣杣瑣杧挠瑣捧瑴杧⁴瑣杧瑣慣杴††㜠㈹㰰牢���戼㹲愊捣杴捣杧⁧瑣捴瑧杣捧挠条杴捴捧⁣瑡捧捴杴杧挠慣捧杧瑴⁣慧捴杴瑣捣††㜠㠹㰰牢ਾ戼㹲朊瑣慡瑣杣⁴杴瑡捧瑣瑣朠慧瑴捴瑴⁣捡捴杴捴慧琠杴杣瑴慣⁴杧捴慴瑴捧††㠠㐰㰰牢ਾ戼㹲挊捴捣杧慴⁴捴瑣瑧慡瑧挠慧杴瑡瑣⁧杧杣瑴杧杣朠杴捴慧杴⁴捴条杧捣捡††㠠〱㰰牢ਾ戼㹲朊捴杴捣杣⁧捴杧杴杣慧琠捧捣杣捧⁣瑴捣瑡瑣捣愠捣捡瑧捴⁧捧捣慣杧杴††㠠㘱㰰牢ਾ戼㹲愊捡捡杣杧⁣条捧捧捴慧琠捧捣杴杣⁣瑣慣条杴瑴挠杴杴瑧慣⁡杴杣杧杣捴††㠠㈲㰰牢ਾ戼㹲朊杴捧慣捧⁣杣瑣瑣慡杴挠捣杧瑴杧⁣瑡杧捴杧捣挠瑡捧瑣杣⁣杧瑧瑣捧捴††㠠㠲㰰牢ਾ戼㹲愊条捣瑡捧⁣瑴杧捧瑴慧朠杣瑣捴杧⁴瑣捴杴杴捣挠杣捣瑣捴⁴捣杧杧捴瑴††㠠㐳㰰牢ਾ戼㹲朊捣瑧杴慴⁣杣瑣杴慡捣愠瑣慧捧杧⁣杧捧杣瑣杣愠杴捣瑧慣⁴杴瑡捣捧捴††㠠〴㰰牢ਾ戼㹲朊慧慧捴瑡⁣条瑧杧慣瑧朠杣杧瑴瑣⁣捧杣捣捡杣朠慣杴慧杴⁧捣条杣慴慴††㠠㘴㰰牢ਾ戼㹲挊杧慣杧杣⁣捴杧慣捣杧琠慣杧杴瑣⁧杧杣慡瑣杣朠捡捧慣捧⁧捣瑴瑣捧杴††㠠㈵㰰牢ਾ戼㹲朊捴慧杧瑧⁣条瑣杣捡杣朠慣杧捧慡⁡瑴杣捡瑣捣琠杴慡慣捧⁣捧捣瑡杴捧††㠠㠵㰰牢ਾ戼㹲朊杣瑴慣慴⁣条瑧杣捧条挠瑡捣慣瑧⁡瑧杣捧杧捧挠捧捴慧杣⁡捡捴杣捧瑡††㠠㐶㰰牢ਾ戼㹲朊杴捣杣慧⁴捴杧杣杴慣愠慧瑣捴瑡⁣慣杴捴捧杧朠慣慴瑣杴⁣瑣捴捧捧杴††㠠〷㰰牢ਾ戼㹲朊瑡瑧条捴⁧捧瑣杴捧捣琠杧捣慧瑴⁧捧杣捣杣捡挠杴瑣捧杣⁧瑴瑴杣捣瑧††㠠㘷㰰牢ਾ戼㹲愊条瑧慧慴⁡瑡杣捣瑡捧琠捧瑣杣瑣⁧瑴捧瑴瑴捧琠瑴捴杧瑣⁣慣杴慣瑡杧††㠠㈸㰰牢ਾ戼㹲挊捣捴杧条⁡捧捧捡杣捣挠慧条杧杴⁧捣瑧慴杧捣愠瑧瑴瑣杣⁡条条慡捡杣††㠠㠸㰰牢ਾ戼㹲朊慴条杴杣⁣捣捴捣瑣捡愠慡瑧条杧⁴杣杧瑡杴捣朠捣捧杴杴⁣瑣捣瑡慧慴††㠠㐹㰰牢ਾ戼㹲朊捣慴杣条⁡慣捧捡瑡慴愠慣瑡杧杧⁴瑧慣条瑡杧琠慴条杧慧⁧慣捡慡杧杣††㤠〰㰰牢ਾ戼㹲朊杣慧捴杧⁣杴捧慣条瑣挠慧条慡慣⁡杣条杣杣慡琠慣瑡捧杣⁡慡瑴慣捧杧††㤠㘰㰰牢ਾ戼㹲朊条杣杧慣⁡杧慧捡条慣朠慣条条杣⁣慡慧捡慧慡挠慡杧杣慣⁡杧杴瑣杧杴††㤠㈱㰰牢ਾ戼㹲朊杧捧慣杴⁡瑴瑴杧捣慡朠瑧慧捡条⁣条杣条杴捧挠杧条慧捴⁧捧捴瑡杧杣††㤠㠱㰰牢ਾ戼㹲朊慣瑡杧瑡⁧杣慴捣瑴慧愠杣杣捡慣⁣慧捣捧捧瑣琠瑧捴杧捴⁴捧杣捣捡捧††㤠㐲㰰牢ਾ戼㹲挊条慡杧瑡⁧条捣杧捧杴愠瑡慧捴慧⁣杣条捡条捧挠瑣捧杧杧⁣杴慣慣杣杣††㤠〳㰰牢ਾ戼㹲挊捣捣捡捣⁴捴杧瑧条杧朠慧慡杧捣⁧瑣慡条杣捧琠慡慡捧捧⁴捣条杣慴瑴††㤠㘳㰰牢ਾ戼㹲琊瑣捧杧杧⁴瑴杧杴杴杧朠瑴慴捧杧⁧瑣瑴捧捣捧挠瑴捴捣捣⁴捧杣杣慣捧††㤠㈴㰰牢ਾ戼㹲朊瑧杧杧杣⁧杴杴慴捧瑣愠捧捧条杣⁡瑡条捡慣捧琠瑡捣杧捣⁴瑣杧捣杧捧††㤠㠴㰰牢ਾ戼㹲愊慴瑴杧捧⁡条杧慣捧条挠捧捣慣慣⁡杧捧捧杴瑡愠捡杣杣捣⁴条杴慧瑴瑡††㤠㐵㰰牢ਾ戼㹲琊瑣慴慧慴⁡捴瑡杧瑡杧愠瑴瑴捴慣⁡慣捣捣捧慣朠捣捣杣捣⁣瑣捧杴杧瑴††㤠〶㰰牢ਾ戼㹲琊捧条瑧瑴⁧杧杧杣杴捡愠瑧慴瑴捧⁡杧杧瑴杣杴愠慣瑧慴瑴⁧慣杧杧杧杣††㤠㘶㰰牢ਾ戼㹲琊慧慣瑧慴⁴杴慣杧杧瑴挠瑧慧慣瑧⁴条慴杣杧条琠慧杣杧慣⁣杴捧杴捧慡††㤠㈷㰰牢ਾ戼㹲琊瑧瑣条慣⁡杣捧条捧瑡琠捴杧瑣慧⁧杧慴慡条慡挠瑴捴杣瑣⁡条杣瑡条捡††㤠㠷㰰牢ਾ戼㹲琊瑧瑡瑧慡⁡慣慣瑧瑡杴挠慡杧捡捧⁧慧捡瑡捧瑣挠瑡瑧杧杣⁧捣条慧杣捧††㤠㐸㰰牢ਾ戼㹲挊条捣杧慧⁴杣杧瑡捡杴朠捴瑧慴捣⁡慧���慣捣慧挠捣慧捧慡⁡捣瑣捴捴慴††㤠〹㰰牢ਾ戼㹲琊慣慧捴瑧⁴慧杣条慴瑴愠捣杣捧瑡⁴杣瑣捧捧瑴愠杴捧条条⁣条杧慡条慧††㤠㘹㰰牢ਾ戼㹲愊瑴捧杣杧⁣慴杴杴慣捡朠杧慡瑴杴⁡条慡瑴捴捴挠慡杴杣杧⁣杧瑣杧条慣††〱㈰㰰牢ਾ戼㹲琊杧瑣瑴瑣⁡杣杧瑴杣瑣朠杣条捴瑴⁧捣捡捧杣条挠捡瑣杧捴⁧瑣瑴慣慧慡††〱㠰㰰牢ਾ戼㹲琊慣瑡瑣慡⁡瑧瑡瑡瑡慧朠慴慡瑣杴⁧捴杴捡条瑴愠捣慡杴瑣⁴慡捴条杴条††〱㐱㰰牢ਾ戼㹲朊慣捣慴捴⁴慣捧慧捴杴琠瑣瑡瑴杣⁴捴瑡捣瑡条琠杴捣杴捡⁴捣捣瑧杣杴††〱〲㰰牢ਾ戼㹲琊条瑡慡瑣⁡杣瑡捡杧慧朠杧瑣慴捣⁡捴杴捧捣慣朠杴瑣捧慡⁴慧慴捣捧慧††〱㘲㰰牢ਾ戼㹲朊捡捣捡捧⁴慣捣杧瑣捣愠慧瑴慴捴⁡捧慡慴慡捣愠捧慣捧杣⁧慡杧捧杣条††〱㈳㰰牢ਾ戼㹲挊捧条慡瑧⁧瑧捣杴慣捡琠瑴瑡捣捧⁣捴慣捴慣瑧挠慴瑴慡瑴⁧瑴捧杣杧慡††〱㠳㰰牢ਾ戼㹲朊瑣条条慴⁡瑧条瑴杣捣愠瑧慴瑡条⁴瑴捧捧慡杣琠杴瑴捧慣⁴杴瑣捡条捧††〱㐴㰰牢ਾ戼㹲愊捴瑧杧杴⁴慣杣瑣杣捴朠瑴杴瑧瑡⁧捧瑴慣瑴慣朠瑣捣杧瑴⁣捣慡杣瑡慣††〱〵㰰牢ਾ戼㹲愊杧杣条瑴⁡慣杴瑡捣捣挠瑡瑧杴杴⁣慡慡慡捧杧琠慴捧捴瑣⁴杣瑧捣捴杣††〱㘵㰰牢ਾ戼㹲愊捴瑧杴捴⁡慧条慴条瑴朠捧杣慣瑧⁧瑴瑡慣瑣慣琠杧瑴瑡杧⁣条慣瑣捧瑡††〱㈶㰰牢ਾ戼㹲愊瑡捴捴瑴⁡瑣瑧慣杴捣愠捴杣慴条⁡杴瑣瑴捴杴琠慧瑣杧杴⁡瑧捡捴慡捣††〱㠶㰰牢ਾ戼㹲愊条捴瑡捴⁴慧慧瑡条杴琠瑡捧杧杣⁡捣慧瑧杴瑣挠瑴捧捣杧⁣瑧慣捡捡杧††〱㐷㰰牢ਾ戼㹲朊瑡慡慴捣⁧杣捣捡瑡条挠条慡瑣瑴⁡慡条杴瑣慣琠慣瑴杧慡⁡捡瑧捴瑴杣††〱〸㰰牢ਾ戼㹲朊杧杣慡慡⁣捴捴慡杧瑡挠瑴捡杣瑣⁧瑴慧慧捴慣朠瑴杣瑡瑧⁡捡捣捡捴瑧††〱㘸㰰牢ਾ戼㹲朊慣捣慣捡⁴慧捴瑴慣捧愠捴瑴瑴捡⁴瑴慣捣条杣琠瑴瑣杧瑧⁧条慣慡慡慣††〱㈹㰰牢ਾ戼㹲朊慧条捧慡⁡瑡捧杣慣慡愠慡杧慧瑡⁡条杧杣捡捡朠慧慡杴瑴⁧慡慴瑣慣慴††〱㠹㰰牢ਾ戼㹲挊捴瑴捣瑴⁴瑴慣瑡瑡慴琠杴慡捧瑡⁴慴捴条杧瑴愠瑴瑧瑣慣⁴慧捧杧瑡捡††ㄱ㐰㰰牢ਾ戼㹲愊慴瑴杴慡⁴瑧瑡瑴条慡愠慡慴慡慣⁡慡慧瑧瑴瑧愠慧慡杣慣⁡慡条捧慣捴††ㄱ〱㰰牢ਾ戼㹲挊瑧慣杧瑡⁧捧瑣捴杴瑣琠慡瑴杴瑡⁧捣杴捧条瑴琠瑡杧杣杧⁣瑧捣杴捣杣††ㄱ㘱㰰牢ਾ戼㹲挊慣捣瑣捣⁧杧捣瑧杴瑣琠杣慣捡瑧⁴慣慡捴杣瑣挠捣杧杣慧⁴瑴瑧捣慴瑣††ㄱ㈲㰰牢ਾ戼㹲挊条慧慧捧⁧瑴慣捣慧慣愠捡慡慣慧⁴慡慡杣慡††††††††††††††ㄱ㔲㰸牢ਾ戼㹲㰊牢ਾ氦㭴ㄲ☰瑧※ㄠ㘲戼㹲☊瑬㈻ㄱ朦㭴†ㄱ㔴㰳牢ਾ氦㭴ㄲ☲瑧※䐠䅎戼㹲☊瑬㈻㌱朦㭴†牁楴楦楣污匠煥敵据㱥牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〲朦㭴戼㹲☊瑬㈻㌲朦㭴†汰獡業⁤䱰批䱁㜳挠湯慴湩湩⁧瑯䉳⁁灯牥湯戼㹲㰊牢ਾ氦㭴〴☰瑧※ㄠ㘲戼㹲愊杧捣慣瑧⁣瑴捴慧瑣慧朠捣瑴捴瑧⁴瑴瑡瑴慧杴挠瑣杧慣瑧⁴捣瑣捡捴捴†††㘠㰰牢ਾ戼㹲朊慣杴杧慧⁧捡捣慣慣瑣愠捣瑡杣捧⁧瑣捡杧杣瑴琠慣瑣捴杴⁡瑧捴杧慣杴†††㈱㰰牢ਾ戼㹲朊杧捴条瑧⁧杧捡慣捣捧朠瑣捡杴捣⁧捣条捧慡瑡琠瑣瑧瑴慴⁴慣慧捣捧瑴†††㠱㰰牢ਾ戼㹲挊杴杣瑴瑣⁧瑡瑴慡捴杴琠瑡慣杧瑣⁧慡慡捴瑴瑣挠捴瑡捣捧⁣慡慡慣捧慣†††㐲㰰牢ਾ戼㹲愊捧瑴捧瑡⁧慣慴慡瑴捴琠瑧瑴杴捡⁣慡捡慣捴捣朠捡瑡慡瑣⁣杧捴条杧瑣†††〳㰰牢ਾ戼㹲琊捧慡慡慣⁧杣杧慧杴杣愠捴瑧捧杴⁣慣慧慧瑣捧愠慡杧杴条⁣慣瑡慡捣捡†††㘳㰰牢ਾ戼㹲琊捧瑧瑣捧⁣条捴瑡慣杧琠瑡杣瑣杴⁧���捧捧杴慣愠捣慣捧瑴⁣慧杧捡捧慧†††㈴㰰牢ਾ戼㹲愊慣捴慡瑣⁧瑴瑴杧捣条琠杴瑣慧捡⁣杴捴捧慣捡愠瑡瑧捴慡⁡瑡慣捣捧瑴†††㠴㰰牢ਾ戼㹲朊捧慣捧杣⁴慣瑣瑣瑣捧愠慡杣瑣捧⁡捴条捴瑡瑧朠慣瑡慣瑡⁡慣杧瑴慡慡†††㐵㰰牢ਾ戼㹲愊捣瑡捧慴⁡杴捧捴慣捣琠慡捧杧捧⁴捴条条捴慡朠捧瑴瑧条⁣慡瑴捧慴瑣†††〶㰰牢ਾ戼㹲愊慡慡瑣捧⁧瑡杣瑣捧杴愠慡杴条瑣⁧慧瑡捴杴捴挠瑣瑣慣捧⁴慣慡慡瑧瑡†††㘶㰰牢ਾ戼㹲挊慡杴瑡慴⁣瑴慡杴瑴杴琠捴杴杣慣⁡捡瑴瑣杴慣朠慡慣杴慣⁴慧瑴慴慣慡†††㈷㰰牢ਾ戼㹲愊条瑴瑧条⁴瑴瑣瑧慴捣愠瑡杴杣慡⁴杣条慡瑣捧挠慴瑡瑣捧⁣慧瑧瑡捧慡†††㠷㰰牢ਾ戼㹲朊瑣捧瑴杴⁴条捧条瑡慧愠捴慣杴瑧⁡捣瑧慴条慡朠慧杧瑡捣⁡慴杴瑡瑣杴†††㐸㰰牢ਾ戼㹲愊杴慧捡捧⁴杧杣慧慡捴愠慡捣捧瑡⁣捣慧捴条瑧挠瑧杣杴捣⁴慧慣瑡瑡捴†††〹㰰牢ਾ戼㹲琊捧慡杧捡⁴捡条瑣捡杴朠慣捡杣慣⁡瑧慧杴瑧捧愠瑴杧慣瑴⁧瑡瑡慣杧捧†††㘹㰰牢ਾ戼㹲朊瑣慣瑡杧⁴杧条瑣杴捡朠慣瑣杧慣⁡慡捣瑴瑡杣挠瑴捣杣瑴⁡捧杧捧瑧捧††ㄠ㈰㰰牢ਾ戼㹲愊杴杧捧杧⁡捧捧杣杴捡愠捴慡杴瑧⁡慡捡捡瑡瑡挠瑧捴瑡瑣⁧捣杧瑡捧慧††ㄠ㠰㰰牢ਾ戼㹲琊杴杣杣杴⁡慴瑴条杣杴挠慡瑣捧瑡⁡慣瑧慣捴捧琠慣瑧瑡捣⁣杧杣杣慧捧††ㄠ㐱㰰牢ਾ戼㹲琊杧条捧慧⁡条杧瑡杧瑣琠瑴捧捧杴⁣瑡慴捴瑧慣朠捧捴杣慣⁧慣杴慡慧杣††ㄠ〲㰰牢ਾ戼㹲挊瑡慴瑡慧⁣瑡慴捧捧慡挠瑧瑡慴瑣⁣条瑡瑣杧捣愠慣慡杴捧⁧瑴捡条慣杧††ㄠ㘲㰰牢ਾ戼㹲朊慡条杴杴⁴杴捴慧慧捴愠慡捣慧慧⁧瑧捡慣瑧慡愠杧杴条捧⁡瑡杴慣捧瑴††ㄠ㈳㰰牢ਾ戼㹲琊慴杴慣杧⁡条瑣捣瑣瑴愠捴杧捧慧⁡杣捣杣慴瑴琠瑣杧捧慧⁴慧瑴慴捡杣††ㄠ㠳㰰牢ਾ戼㹲愊杴慡捴杴⁧瑣捴捧条捴朠瑴慡捣慧⁣杴杧杣慧瑡朠捴条慴慡⁡瑡杴捧捡条††ㄠ㐴㰰牢ਾ戼㹲朊杴慣捡捴⁡杧慣捴瑡杧挠慧瑣杧杣⁧瑧瑧捧杣慧琠瑧瑣杧条⁣杴捧瑴慧慡††ㄠ〵㰰牢ਾ戼㹲琊慧慴捡慣⁣杣慣瑴捡慡挠慡慡慡慧⁧慡慡慴捡条朠条杴瑡慧⁣慴杴条捴瑧††ㄠ㘵㰰牢ਾ戼㹲琊慴瑧杣慴⁧慴捴慴捡杣朠瑡杴慣捣⁡捣条捡慧捧愠杣捣捧慣⁧杴捣杧杴捧††ㄠ㈶㰰牢ਾ戼㹲挊瑴捧杣瑴⁧捧瑡捡杴杧朠捧捡杴慡⁡捧杣慣杧杣朠捡杴杴瑧⁴杴捧杴慧瑧††ㄠ㠶㰰牢ਾ戼㹲朊瑧慧慡慣⁧杧慡杴条慧琠慣捧杣瑣⁡慡慡条瑧慧愠慡慡杧慴⁡慣瑴捡瑧杧††ㄠ㐷㰰牢ਾ戼㹲朊捣捴瑴瑴⁡捡瑣慣捧慧愠慣杧捡瑣⁴慧杣慡慴瑣愠慣捡慣瑡⁴瑣捣慡杴捣††ㄠ〸㰰牢ਾ戼㹲朊瑴瑣瑣杧⁣捣捧瑴瑴慣琠慴捴杧瑣⁣慧捴杴瑧捧愠瑡瑴慣捧⁧捴瑣捧瑣杧††ㄠ㘸㰰牢ਾ戼㹲朊捡杧瑣瑡⁣慴杣杣慴慡琠捧瑧杴瑣⁧捧条瑡慡瑡琠捡杴捣捧⁴瑧杴慣条捡††ㄠ㈹㰰牢ਾ戼㹲朊瑡慧慣瑴⁡捴杴慧捴慣挠慧瑴瑡慣⁣瑣瑧杴捣瑡琠杴杣慣杴⁡瑡慴杣慣慡††ㄠ㠹㰰牢ਾ戼㹲挊杧杧条杴⁡瑡慡捴捧瑡琠杧瑴捴瑴⁴瑣捧瑡瑡捴挠瑴捴捣慧⁣捡杣慧慡捴††㈠㐰㰰牢ਾ戼㹲琊捴慡杣杣⁣杴捣慧慣慴琠慧慣捣瑴⁧瑣杴慡慣捧琠瑴瑧慧瑴⁡杴瑡瑴捧杴††㈠〱㰰牢ਾ戼㹲朊瑧瑴捣条⁡慣慧慡捡慧琠杣捴杴捧⁧瑴捣杴慧瑴朠捴瑴捴慴⁡捣杴捡捣捧††㈠㘱㰰牢ਾ戼㹲朊捴捡慧慣⁣瑧条杣慣慡愠条捣瑡捡⁡捧瑣杧杧慣愠条慣瑴捴⁧慡慣慧条捴††㈠㈲㰰牢ਾ戼㹲琊捡捣慧捴⁧捧瑡杴慡捣朠慡条慡瑡⁡捧慣慡慣杧挠杴捣杧捧⁣捡杴捣捧慣††㈠㠲㰰牢ਾ戼㹲愊慡瑣杧杣⁣慡瑣慴慡捧朠慧捡杴慡⁡慡杣慴慣慡愠慴捴瑴瑴⁣杴捴慧捡杧††㈠㐳㰰���ਾ戼㹲挊杴慧瑴瑡⁴捣慡条瑧瑴朠捣条条杣⁴瑴捴捴捧瑣愠杴慡捧瑧⁴捧杴慧慡慡††㈠〴㰰牢ਾ戼㹲琊瑡捣捧条⁣瑡慣杴瑧慡愠瑡捴瑧慴⁴捡捣条瑡杴挠捡慣捡瑧⁣捧瑧杧杴瑡††㈠㘴㰰牢ਾ戼㹲朊杴慣条捣⁴瑡慣杧瑡瑡琠杣捴瑡慣⁧瑣杣慡慡杴愠条瑣杧捡⁧慡瑴慡杴瑧††㈠㈵㰰牢ਾ戼㹲愊慡慴杣杧⁣慡瑴条捧杴朠捡捧杣瑣⁴慴瑴瑡瑴慧愠捴条慣瑴⁴杴捡杣慴慡††㈠㠵㰰牢ਾ戼㹲琊慴瑣慧杴⁡慡瑡瑡捴杣挠慴瑣瑣慧⁣瑧杧捧瑴条琠慧杣捣捡⁴捧瑧慧杣杧††㈠㐶㰰牢ਾ戼㹲愊杴慡捣杴⁧慴捧慡慡慧朠慴杴瑴捧⁴捧捴条慧捣挠条捣慡捴⁣杧捧瑧捴瑴††㈠〷㰰牢ਾ戼㹲朊瑴瑣瑴杣⁣慡瑴杴杣杧愠捧杧慣慡⁣慧瑧慴捡瑧挠杧杣瑴慡⁴杴瑴慡捣捣††㈠㘷㰰牢ਾ戼㹲琊捡慧捴瑧⁧捡慧条瑴捧愠捧杴杣瑣⁧慧捴瑧捧瑡琠慧瑣瑡瑧⁣捧杴捧杧慡††㈠㈸㰰牢ਾ戼㹲挊瑧瑡瑴捣⁣瑧慣杴慣慧愠瑡捧杴慧⁣瑧慴捴瑧慧愠慡捡慧慴⁴慴捡慣瑣杧††㈠㠸㰰牢ਾ戼㹲挊条慧瑧捧⁴捴瑡慴捧慧挠瑣慡条慣⁧瑡条瑴捣捧朠慡捧捧杧⁡慡捧慣捧条††㈠㐹㰰牢ਾ戼㹲挊捧慧慴慡⁧瑴捧慴捣瑴琠捣慡条瑣⁴捧瑧条慧捧琠条瑣捧瑣⁣慧慡杧杧瑡††㌠〰㰰牢ਾ戼㹲朊杣瑡捴捧⁣捡瑣瑣慣瑣挠杣瑣杧杣⁧瑡捴瑣瑣杴愠慧捡瑡瑴⁴杧杴捧条捧††㌠㘰㰰牢ਾ戼㹲朊瑡捴杴瑧⁡捡慧杴条慧愠瑡捧捴慡⁧杧捣瑡慡捴琠杣捧瑧杴⁴条瑴杧慣瑡††㌠㈱㰰牢ਾ戼㹲琊捡捴捡杣⁧慡瑴杧条捣愠瑣捧捧条⁣慴杣条杣杣琠瑣瑡瑴杴⁣杴条杧捣捡††㌠㠱㰰牢ਾ戼㹲琊瑡捧慴瑡⁧捧瑡捴杴慧愠捧瑣慴慡⁡慣瑣瑡杣瑣琠瑴瑴慧杧⁣慧捴捧瑴慡††㌠㐲㰰牢ਾ戼㹲挊瑣瑴捴条⁡瑡慧慧杣瑴朠瑡杣捧捡⁧慴条杣杴条愠杣瑴慧捴⁧捧捡瑧慡慧††㌠〳㰰牢ਾ戼㹲朊瑧捴慣捡⁴瑴慣捣瑡慡琠慧慡慴条⁡捴捡慴捣杧朠杣慴瑴瑴⁴杴条瑴瑡杣††㌠㘳㰰牢ਾ戼㹲愊慧瑴瑴慣⁧慧捧慴条慧愠捧慴慡瑡⁧慧慧慡慡慡琠慣瑣杧瑡⁡慴捣捡杣瑴††㌠㈴㰰牢ਾ戼㹲朊瑡瑡瑡捣⁣慡杴捧瑡杣琠慡条慡慣⁴瑴杴条捧瑡琠捴条捴条⁴杴瑣慣瑡瑧††㌠㠴㰰牢ਾ戼㹲愊捣慴慴捡⁣条捡杣瑴慣朠瑣杧瑡瑡⁴捡杧捣瑴瑴琠慡条捡杣⁴慡条慡慡瑡††㌠㐵㰰牢ਾ戼㹲愊条慣慣条⁴瑴慴捴杣捧挠瑴慴瑴慣⁣瑡捴瑴捧捣朠捣杴瑡慧⁡杴瑣慣捴杣††㌠〶㰰牢ਾ戼㹲朊慡瑴捣瑧⁡杴捧慡杴慡愠慧杣瑧慧⁧瑣杧杴瑡瑡朠杧瑡条杴⁴捴捡捣瑴瑧††㌠㘶㰰牢ਾ戼㹲琊捡捡杣瑴⁴捴慣杴条慣愠捡杴慡捡⁧瑴瑴慣捴捧琠瑣杧条杴⁡瑡捡慣杣捡††㌠㈷㰰牢ਾ戼㹲朊瑡瑴捣杧⁣条瑴捴慴慣挠瑡瑡瑡捴⁧慣条瑡瑧杧挠瑧瑧慴杣⁧杴慡慡捣杴††㌠㠷㰰牢ਾ戼㹲朊捣慴瑴捴⁣瑣慡条杧瑴琠瑡杴条慡⁴瑡瑧瑴瑴杣琠瑣慣捧慣⁡捴捣杴杧杴††㌠㐸㰰牢ਾ戼㹲愊瑧瑴慣捣⁡瑧瑴杴瑡瑴愠慡杣杴捧⁣慡慴杴慧慣愠瑣捴瑴杣⁣捣捣瑧瑴捴††㌠〹㰰牢ਾ戼㹲愊捣瑡杧捧⁡慡慴瑴瑡捡朠慣条捧慧⁣慡杧杴瑣慧琠捧杣瑣杧⁣慧瑴慣杧瑴††㌠㘹㰰牢ਾ戼㹲挊瑡慣杴捣⁧瑴杴杴瑡杧挠瑴捣瑡瑧⁣杧慣慧瑡捧琠慴瑡慧瑡⁴捡慡慣瑧捡††㐠㈰㰰牢ਾ戼㹲琊捧慧杴条⁴杧慣杧捧杧朠捧瑧慡瑴⁴瑴瑴慡杧慣朠瑴瑡杴瑧⁧捣瑣慴慡杣††㐠㠰㰰牢ਾ戼㹲挊瑣杧瑴捧⁴捡捧瑣慧瑡愠条杴瑡慡⁴慡捧杧瑡慧愠杴捧条慡⁡瑴杣瑡慧慴††㐠㐱㰰牢ਾ戼㹲愊捧杴捴慡⁡慣慣捡慣捣愠捴慡捡条⁧瑡瑴捴捧瑣朠瑣杧杧慣⁡捡慣捧瑧杧††㐠〲㰰牢ਾ戼㹲愊捣捧瑴捧⁴捧慡瑣瑣瑣挠条杧捣条⁧杣瑧慧条杧挠慡捴条瑣⁧瑴捧捣瑧瑣††㐠㘲㰰牢ਾ戼㹲挊捡杴瑧慧⁡慡慧慡慡捣愠捣瑣杧杣⁣���慡慴杣慣愠捡杣捣捴⁴捣捣捧捧瑧††㐠㈳㰰牢ਾ戼㹲琊杧捣慧瑴⁣瑡慴瑡捧条挠杴捧捡慧⁣条瑧瑴捣杣愠瑣杧慡条⁣杧捧条杴条††㐠㠳㰰牢ਾ戼㹲挊捧慡杣慣⁡瑴慡杴慴条琠慴捧捧慧⁡瑴捧慡捧杴朠捣慧杣杣⁣杴杧瑣捡瑧††㐠㐴㰰牢ਾ戼㹲挊瑴捧杴捧⁧瑴杣杧条慣朠慡慧捧瑡⁡慣捴杴慧条挠慡条捣条⁧慡条杣捧瑣††㐠〵㰰牢ਾ戼㹲愊杴慧捧杴⁴捧杧慣捧捧琠慣瑧条捧⁡瑡瑴瑴慣慡愠慴瑴瑧慴⁡捧瑣瑴捴杴††㐠㘵㰰牢ਾ戼㹲愊捧瑡杧慴⁴瑴瑴慣杴瑧愠瑴捡慣瑡⁴条慣杧慡慡琠慡捧慣瑴⁧慡慴慴慡条††㐠㈶㰰牢ਾ戼㹲愊慴慡慡杴⁴瑣杴瑴慴慣愠慴慧瑧杧⁧杧杧瑧慣捧挠杴捣捧瑣⁴杧捧杣杧杴††㐠㠶㰰牢ਾ戼㹲愊杴捴瑧捡⁴杴捣杣捣捧朠慡瑣杣瑧⁴捡杣捴慣捧挠慣捧捧慧⁣慣捧捴杣捧††㐠㐷㰰牢ਾ戼㹲愊捡捧瑣杣⁣捧捡捣捧瑴朠杣捧捧瑴⁧杣慣杴瑧杣愠捡慣瑣杧⁣瑣瑣慧杣捧††㐠〸㰰牢ਾ戼㹲挊条捡瑡条⁣杣慣慣条瑧愠捴慴杴慧⁡捧瑣杴捣杧琠瑴杴捣杧⁧瑧杣瑡捣条††㐠㘸㰰牢ਾ戼㹲挊慣慣慣捧⁣捧杴瑧捧条挠条捧杧捧⁧瑧瑴杣瑣瑧挠慣捧捧捣⁧慣捣捴瑧捣††㐠㈹㰰牢ਾ戼㹲愊杴瑣慧杴⁣捧捡瑡捧杴朠捣捧慣捣⁣瑡慧杣捧瑣朠杣杣瑡慣⁡杧杧瑴慣杧††㐠㠹㰰牢ਾ戼㹲朊捣捡瑧捡⁡杧杣捣杣捴挠捧瑣杣捴⁧瑣杧杣慴瑣挠杣捡条慣⁧捣慧慡捣捣††㔠㐰㰰牢ਾ戼㹲琊捧杣瑣杴⁣杧捣瑡捴杴朠捧慧杴瑡⁧慧慴捣瑴捣愠慡杧杣瑣⁣慧杴慣瑧捣††㔠〱㰰牢ਾ戼㹲琊瑧瑡瑧捧⁴杴条杣捣捣愠捣捡慴捴⁧捡瑣瑣捧捣挠慧瑴捴瑣⁴杴捣条杣捣††㔠㘱㰰牢ਾ戼㹲挊慧慴捧慴⁣瑣瑴慧捣捡愠杴捧瑡捴⁡捧杧杴捡杧挠瑣捣慣瑣⁴杧瑧捴慣杧††㔠㈲㰰牢ਾ戼㹲愊捡条捣杧⁡捧杴捣瑧捣朠捣瑴杣瑧⁣瑴杧瑧捴杣朠捧慣条慣⁣慴杧捣瑡慴††㔠㠲㰰牢ਾ戼㹲朊捧捣条捣⁡杴捧慣捣条挠捣瑴捧条⁧瑡捧捧条瑡挠瑡慣捧捧⁣慣捧杧瑣捣††㔠㐳㰰牢ਾ戼㹲朊杧捣捧杴⁡捡捴慧捴杣挠瑴捧杣捴⁧捣瑧条捴瑡愠杣捴捡瑧⁣慣捧瑴捧杴††㔠〴㰰牢ਾ戼㹲挊捧瑴捧捧⁴杣捣捣捧瑴朠条杧慣杣⁧慡慣杧捣杧朠杧捣条捡⁡瑧捧捧杣杧††㔠㘴㰰牢ਾ戼㹲琊杣杴捣杧⁡杣杴捧杴条朠瑣瑧捧瑴⁧瑴瑣慴杧瑣琠慣捣捡杧⁧捧捡捣捣瑴††㔠㈵㰰牢ਾ戼㹲朊瑣瑣杴杣⁣杴捣捴捴慣朠慣杣捧杧⁧瑣杴条慣捣挠杣捣瑧慣⁴捧杣捣杴慡††㔠㠵㰰牢ਾ戼㹲挊慣捣慧捴⁡捧慧捡杧杴挠捧慣慴瑧⁴杧捣瑴捧捴愠慣捣慧条⁣杧捡慧条慡††㔠㐶㰰牢ਾ戼㹲挊杣捧捧杴⁧捴瑧杣捴慣挠捡捣慣瑴⁣瑣杣捧瑣杣朠杣瑣杧捴⁡杴瑣杣捡条††㔠〷㰰牢ਾ戼㹲朊慴杧捡杴⁣慣捧杧瑡瑧琠瑡杣捡慣⁧慴捣慧捧杴挠捣杣捧杴⁧捣杴瑣捧杴††㔠㘷㰰牢ਾ戼㹲朊捴捧瑣捧⁧捣慣捴瑡杧挠杣杣捣瑣⁴捧杴捧瑡杧琠捧条慧捡⁡杣瑡条条慣††㔠㈸㰰牢ਾ戼㹲挊捣杧慴捴⁧捧杧杣瑡杧挠瑣捣瑡捧⁧捡杣瑡慧捣琠杧捧慣杴⁧杧捣捧杴捧††㔠㠸㰰牢ਾ戼㹲朊瑴瑴瑣捴⁣捴慧杴杴慧愠捣杧杣慣⁧杣杴捴慣捧愠捣瑡慣杧⁣杧杣捧捣捴††㔠㐹㰰牢ਾ戼㹲朊捧杧杣杣⁣瑴慧杧捣瑧挠慧捡慣瑣⁣杣杧捧慣杴愠杴瑴杧捧⁡杧瑣捧杣瑡††㘠〰㰰牢ਾ戼㹲挊条杣捧杴⁧瑡慣捧条捧挠瑧慣捧慣⁣杧瑣杴捣瑧琠捣捴杧杣⁣杴条瑧捧捧††㘠㘰㰰牢ਾ戼㹲挊捣慡杧捧⁧杴慣杧杣瑧朠瑡慧瑡杧⁣杧杴杧杣杧琠瑣捴杧杣⁧捧条瑧条瑡††㘠㈱㰰牢ਾ戼㹲挊捡杣杧捣⁧瑧杧捧条瑴挠捧捣捡瑣⁣慣捧条瑡捣朠捧捣捧瑣⁧慣瑡瑣瑧捧††㘠㠱㰰牢ਾ戼㹲朊捧慣瑧杴⁣条杧捣条慣琠杧瑡瑴捡⁣杧慣捣捡杣朠捧慧慣捣⁡捧捧捣杣捡††㘠㐲㰰���ਾ戼㹲挊瑧捡杣捧⁣捡慣杴瑴杧朠慣慡捡瑧⁡瑧捣条杣瑧朠捧杧杣瑣⁧瑣捧慧捡捧††㘠〳㰰牢ਾ戼㹲挊捴慣慧瑡⁡瑴慧慴杧瑣琠瑡杧瑧条⁣慣瑴慧瑴捧挠捴瑣瑴捧⁡杧慣瑧杴瑧††㘠㘳㰰牢ਾ戼㹲朊瑧慴杧杣⁣杴捧杧杧捴愠瑣捡捣捣⁧捣瑣捧捧杣挠捴杴条瑴⁣瑴捣条捧捡††㘠㈴㰰牢ਾ戼㹲琊杣杣慣捧⁧捣捴瑧瑡捴朠捴瑧杣瑧⁣条捣条慡瑣琠捧捧杴捡⁧慣捴捣瑴杴††㘠㠴㰰牢ਾ戼㹲朊捣瑴慣杴⁣捧捴杧慣慴琠杣杣瑣杴⁧杣慴慣捧瑧挠条杧瑣杧⁣慣捧条瑧杣††㘠㐵㰰牢ਾ戼㹲挊杣瑧瑣捧⁴杴捴瑣瑴杴朠捴瑴捴瑡⁡捴条捴捡杣愠慧慡瑣杴⁣杣杧捧杣慡††㘠〶㰰牢ਾ戼㹲愊杧瑣杴捴⁴捴捧杧慡慣愠杧捡慡杧⁴捧条捣瑧慣愠杧瑴慡杧⁣杴捧慣慴捴††㘠㘶㰰牢ਾ戼㹲愊捧慧瑣慧⁡慡捧杧捣条挠瑣杣捧瑣⁴瑧瑴慧杣慴琠慡捣慡条⁣慣捣杧捧慡††㘠㈷㰰牢ਾ戼㹲挊慣瑡条捣⁣瑴瑧慣瑣瑴琠慧捴条瑧⁡慧捣慧捣瑣朠慡捧捧瑴⁴瑴捴瑧瑡捴††㘠㠷㰰牢ਾ戼㹲挊瑡慡慡捣⁣捣瑴瑣瑧捧朠杴条慴瑣⁣瑡条慴慴捡愠杧杣杴条⁴捡慣捡捧慡††㘠㐸㰰牢ਾ戼㹲朊慣瑣捡瑡⁧瑣慧慡捴杴朠捣杣捣捣⁴瑧捣瑡捧瑣挠捧杴捧杧⁧瑧捧杣瑧捧††㘠〹㰰牢ਾ戼㹲挊杣杴捣条⁣捴杧捣杣杣挠慡捧杴慧⁣捧杴杧慣慧挠捣瑡慧捣⁴杴瑣慧杣瑧††㘠㘹㰰牢ਾ戼㹲朊杣瑣杣瑡⁧慴瑡捣捧瑴挠瑧杧捣杧⁧瑣杴杣瑣瑣朠捣条杣瑣⁧杧瑣杧捣捴††㜠㈰㰰牢ਾ戼㹲朊捧慣杴捧⁣瑴捧杣瑡瑴挠瑣杣捧捡⁴捧杧捣捣杧挠杴捧慣捧⁴捴杴杣杣捧††㜠㠰㰰牢ਾ戼㹲朊瑡慡条捴⁧慣瑣杴瑣慧朠瑧慣杴捡⁣慧条杣瑣杴愠捣条捣杣⁧捣瑡瑣杣瑣††㜠㐱㰰牢ਾ戼㹲朊杣瑧捡捴⁧捴慣捧捧杣琠捧捧杣瑧⁧捧杧瑣慡捧琠捧杣瑣杣⁧捧条瑴杣条††㜠〲㰰牢ਾ戼㹲朊瑣杧捣条⁣瑣捧杧捧瑣琠瑣捣杴瑣⁧捣捧杴杧捣琠捧捴慧捴⁴捧杴捧慣捧††㜠㘲㰰牢ਾ戼㹲挊杴瑣捧捡⁣条杣捣杧捧挠条杣瑧杧⁣杧捴瑴捧捣琠杴慧瑴慣⁣捧条慣捧捡††㜠㈳㰰牢ਾ戼㹲挊慣杣捧杴⁡慴捡杣捧捧朠杧杴瑧瑧⁧瑣杴捴瑣杴挠杧瑴杧杴⁡条捣杣捣慡††㜠㠳㰰牢ਾ戼㹲朊杣捧慣慴⁧杴捧杧瑣瑧挠杧杣瑣杧⁣杣杧捴杧杣琠杣慴瑣杣⁣杴捧慣捧瑧††㜠㐴㰰牢ਾ戼㹲挊杣杧慣瑡⁣杴捣捣杣慡朠瑴慣捣捧⁣杴杣捧瑧杣朠捣捡瑣杴⁡捣慣杴捣杴††㜠〵㰰牢ਾ戼㹲愊慴瑧捴瑴⁣杧捧杴瑧瑴挠慣瑣捡慣⁧杧慣杧瑣捣挠杧捣瑣杣⁧瑣瑴慣杴捴††㜠㘵㰰牢ਾ戼㹲愊捴慣杧捴⁡慡瑣杣瑣慧朠瑧杣捴慣⁣慣捧捡慣慧挠慣杴捣捧⁴捣杴瑣杣捧††㜠㈶㰰牢ਾ戼㹲朊杧捣杴瑡⁡慴慣杣捴瑡琠捧捣杴杧⁣瑡捴瑡捣捧琠杴条捣瑡⁧捧瑧瑧捴杴††㜠㠶㰰牢ਾ戼㹲朊条慣瑣捴⁧捧杧瑣慧捣愠瑴捣杣瑧⁴慣捴瑡瑣杧挠杣瑧杧瑧⁧杣捴捣杴捡††㜠㐷㰰牢ਾ戼㹲朊捣慧慴捴⁧慡捧捧捴捡愠捧捣瑡杧⁣瑣杴条瑣瑧挠杧捣慴杴⁧捣杴慣慡瑧††㜠〸㰰牢ਾ戼㹲挊瑣瑧杣瑴⁣瑴慣捴杧捧挠捡慣条杣⁣条捣条瑡杣愠捧杣捴瑣⁣杧瑴瑧慣瑧††㜠㘸㰰牢ਾ戼㹲朊捧瑧慣杧⁴杣条慣条条挠慡杣瑡捧⁧瑡慣捧条慣挠慣捣瑧条⁧慣捴瑡杧慡††㜠㈹㰰牢ਾ戼㹲朊捣条慣捴⁡杣瑧慴捧慣琠条瑣捴慣⁧杴捣捡捣捣朠杣捡捧捧⁴捣杧捧捧捴††㜠㠹㰰牢ਾ戼㹲琊捧捧杧杣⁣杴瑣慣捣捴朠捧杧瑣捡⁣捴捣捧慡瑣挠瑴杴捧慣⁧瑣捣捡捣瑡††㠠㐰㰰牢ਾ戼㹲朊捣捧捣瑣⁧捴杴捧捧杴朠捧瑴捴条⁣慣瑣捣捧杣挠瑣捧捧瑣⁣捧杴捧瑣捧††㠠〱㰰牢ਾ戼㹲琊杴瑧瑣杧⁣捴瑡慧捣杴挠杣杧瑣捴⁧捴杧捣条杴琠杣捣瑡捧⁴瑣杧捧慣捧††㠠㘱㰰牢ਾ戼㹲朊瑧捴慧捴⁴捧捴杣瑣慡挠捴瑧杴瑡⁧���捴杴慧瑴琠瑣捴捡捴⁴瑧杣瑡杴杣††㠠㈲㰰牢ਾ戼㹲琊捴瑡杧捴⁴瑡杴捣捴捣朠瑧瑡捴瑣⁧慴条捴慧杴愠捴杴杧杣⁴杴捧杧杴捴††㠠㠲㰰牢ਾ戼㹲朊瑡瑧捴条⁧捧慣杣捴杴挠捣杧捴杧⁴捧杧瑡捧捣挠杧捣瑴捣⁡捴捴慣捣捡††㠠㐳㰰牢ਾ戼㹲朊瑴杣捧捣⁣条瑧慧捡捡挠杧捧条捧⁧瑣杣瑡捧捣琠捧捧瑣慣⁡瑧瑧捴杴杴††㠠〴㰰牢ਾ戼㹲朊捴慡杴杣⁧捧瑧杣杴捧挠条捣杣瑣⁣慴瑡捧捣杧琠杴捧瑡杧⁴杣捧捣瑡捧††㠠㘴㰰牢ਾ戼㹲挊捴捧杧瑧⁣杴瑣慣条捣愠杴捣瑴杧⁧瑣杴条杣瑣琠杣瑧瑣捴⁴瑧捧捣杣捣††㠠㈵㰰牢ਾ戼㹲挊瑴瑣捣杧⁧瑧瑣杴捣瑧琠瑧捡杣瑣⁴慧捡慣瑣慧朠杣捧杧捧⁣捧捴慧杴捣††㠠㠵㰰牢ਾ戼㹲朊捴瑡杴瑡⁣杣瑣杣慧慧琠慣捴条瑧⁧捧条杴杣杧琠捴捴捧杣⁣慣捣杧慣杴††㠠㐶㰰牢ਾ戼㹲朊瑡杧捣条⁣瑧瑡捡杧慣朠捧捧捴杧⁣捡杣瑧慣杧琠捧杴杧杣⁡捡捴杧捡捧††㠠〷㰰牢ਾ戼㹲挊条杣捣瑴⁣杴瑣杧捴慧朠杧捴条瑣⁣慧捣杧慣杧朠慣慡瑴杣⁡捣捴瑣杴慡††㠠㘷㰰牢ਾ戼㹲挊条捣捧捣⁡瑴杧杣杣瑴挠瑡捡条瑧⁣杧慣捧瑡捣挠条慴瑧杣⁧杣杧捣捧捴††㠠㈸㰰牢ਾ戼㹲朊捡慧捡捴⁣杧慣杴杴捣挠杧瑡捴杧⁣瑧捧慡慧瑣琠慣捴慣杴⁴杣杣杧慣慴††㠠㠸㰰牢ਾ戼㹲挊瑴捧瑣捴⁧杣瑣杧瑡瑧愠瑧杣捧瑣⁴杧捣瑣杧捣朠瑡杴捧杣⁣捣慧捣杴瑣††㠠㐹㰰牢ਾ戼㹲朊捣杧瑴瑴⁣捧杣慴条瑧朠瑡慡瑡杣⁣慣杴瑣捧瑣挠捧杴瑴捧⁴瑴杴瑣瑴捴††㤠〰㰰牢ਾ戼㹲朊捧捴慣杴⁣慡杴捧捣捴朠慧慧捧捧⁡捣捧捣慧条朠瑧杧捣瑧⁴条捧慣瑧瑴††㤠㘰㰰牢ਾ戼㹲挊捴慧条条⁡慡捣杧慴条琠捧捧捣捴⁣捣慴慣慡瑧愠杧瑧杣杧⁡瑴捧杣捣捧††㤠㈱㰰牢ਾ戼㹲琊瑧捧瑣捣⁡杴瑡条捣慴挠慧慧慣捧⁡慣瑴慡慣瑡朠杧瑧瑧慣⁡慧杴瑧慴条††㤠㠱㰰牢ਾ戼㹲朊杧条慣捡⁡条捧杧杣慧琠杣捧杴捧⁣慡捧捴慧条愠捡慡杣条⁣捧慧瑡慣瑡††㤠㐲㰰牢ਾ戼㹲朊捣慧慡瑴⁣条杣杧条杣朠捧慡杧慧⁡慣捧条慣条愠捧捧慡慧⁡杣慡捡慡杧††㤠〳㰰牢ਾ戼㹲挊捧慡杧杴⁣杴瑧杧杧捧挠瑡慧瑴瑴⁧捧慣条瑧慧愠慣捧条杣⁡瑧杧捣杧条††㤠㘳㰰牢ਾ戼㹲朊瑡杣捧捴⁡杴捧杧慣瑡朠慧杴杣慴⁣瑣杴慡杣杣愠捣捡慧捣⁧杣捣瑴瑧捴††㤠㈴㰰牢ਾ戼㹲朊瑧瑣捧杣⁣慣杣捣条慡朠慧杴条捣⁧杧瑣慧瑡慧琠杣捡杣条⁡慣杧捣瑣捧††㤠㠴㰰牢ਾ戼㹲朊杧捧杴慣⁣捡捧捧捣捣愠捣瑣捴杧⁧慴杧杧慧慡朠捧杣瑣慡⁡捧杧瑣慡慡††㤠㐵㰰牢ਾ戼㹲朊杣瑣捣条⁣瑧瑡瑴瑣捧朠杧瑧瑴杧⁴瑧杧杧瑴慴朠杣杧瑣瑴⁧捣杣捣瑴捴††㤠〶㰰牢ਾ戼㹲挊捣瑣捧杣⁣捧条杣瑧杧朠捧杧杴杴⁴条捣慴捧捧愠捧慧瑡条⁡捣条瑣瑡捣††㤠㘶㰰牢ਾ戼㹲朊捧瑣瑣杧⁣杣杧慣慴瑴朠杧慣条杧⁣条慣捧捧捣挠捡慡杧捧⁧瑣慧慴捡杣††㤠㈷㰰牢ਾ戼㹲挊捧瑣条杴⁧瑡慴瑴瑣慴朠瑡慡捴瑡⁧慧杴慧瑴瑴琠捣慡慣捣⁣杣捣条捣捣††㤠㠷㰰牢ਾ戼㹲挊捧捣瑣捧⁴杧瑧瑴捧条朠瑴杴杧杧⁣瑧慧慣瑧慴琠杴慣杧杧⁴捴瑧慧慣瑧††㤠㐸㰰牢ਾ戼㹲琊瑡杴慣杧⁧杧捧瑧慧慣朠瑴瑡杴慣⁧杧瑧捴瑧慧挠条瑴条慴⁣杧慧瑧慧杣††㤠〹㰰牢ਾ戼㹲朊捧捡杴捧⁴杧慣瑡瑧瑣愠捧慡杣捧⁡杧慣瑴捴杧挠杴条杧慴⁡慡慧捡瑴捴††㤠㘹㰰牢ਾ戼㹲挊捧慴条杣⁡慴慧瑣瑧瑡朠慴慡慣慣⁧慴瑴捧慡杧愠杣杣慧捡⁡杴捣捴瑡瑧††〱㈰㰰牢ਾ戼㹲朊捧杧捣条⁧捡杧捣条捣朠杧瑡杣杧⁡慴瑣杧捴瑧琠捡慣慧捧⁣捡杣捡捣慧††〱㠰㰰牢ਾ戼㹲朊慣慡捣瑣⁴瑣瑣瑡慣慧琠杣瑴慧杣⁡瑧瑡慴捣杣朠慣瑴杣瑣⁧杣瑣慴杴捧††〱㐱㰰���ਾ戼㹲愊慧捧条杧⁡慡杧慡瑴捧挠杧捧慴杴⁴捧慡杣杧慡琠瑴慧条慡⁴瑴瑣捣慡杴††〱〲㰰牢ਾ戼㹲挊杧捧杧瑣⁧慧捧瑡杧瑣琠捴慴杣杧⁴捴捧杴杣条琠瑣杴捣捡⁧捣慧捧捡瑣††〱㘲㰰牢ਾ戼㹲朊瑧杣瑣瑴⁣条慡瑡慣瑡挠慴慡瑧瑡⁡慴杴条慴慡挠瑴杧捴杴⁡慣瑧慴捣慡††〱㈳㰰牢ਾ戼㹲琊捧瑴慡捴⁡瑧慧杧慣捣琠瑡瑣慣捧⁧瑡瑣瑧瑣瑡琠捴瑧捴瑡⁣慣慴瑧杴捣††〱㠳㰰牢ਾ戼㹲琊慧瑣捣捣⁧捴瑧瑧条瑡愠捡慴杣瑡⁡杣杧条杧瑣琠捡慣捴杴⁧捣捣条杴瑣††〱㐴㰰牢ਾ戼㹲朊慣瑡慧慴⁣杣杣条捡捣愠杣瑣慣捣⁧捧捴慣慧瑴琠瑡慣捧慡⁴慡捡慣捧慣††〱〵㰰牢ਾ戼㹲朊捣杧慡杧⁧捣慧捧捧条愠条杴瑧捣⁴捧慡瑣瑴瑡挠杣捣捴慣⁴捣条捴慴瑴††〱㘵㰰牢ਾ戼㹲愊瑡杴瑴捧⁣杧慧条瑣条愠瑧慡瑧条⁴捴捧慣瑧慴愠慴瑧瑴捧⁧慣捡瑧杴瑴††〱㈶㰰牢ਾ戼㹲朊捣瑡杴瑣⁡慣杧慣捴瑧朠瑧瑧慣杣⁣捴瑧杣瑴杴朠慴杴捧瑴⁣瑡捴条瑣捣††〱㠶㰰牢ਾ戼㹲朊瑧捴捣慡⁣慧捴慡杧杣愠瑧慴慣杴⁡捴捣捣瑡瑧琠瑧捧慡慡⁡条杣瑧慴捧††〱㐷㰰牢ਾ戼㹲琊捣瑴杣瑧⁣瑣捣慧捴瑧琠瑧慣慧条⁴慡瑧杴捧杣挠条杴瑴瑡⁣捡捴瑡杧瑴††〱〸㰰牢ਾ戼㹲愊杴捧条慣⁣杴慣慴瑡捴琠瑣慴瑣瑧⁣瑡捧慣捴杣琠慡慧杴瑣⁴瑴瑣瑧慧瑣††〱㘸㰰牢ਾ戼㹲朊瑧慧瑧捡⁴慣捡慣条捴愠瑴瑣慧慧⁡慴瑧瑧瑡捧朠捧慧捣慧⁧瑴捧捴瑴捧††〱㈹㰰牢ਾ戼㹲挊杣捧瑧慣⁡慣杣杧瑡慡琠捡杣杣捣⁡慣慴捧条慡挠瑴慴慡条⁴捧捴瑡慣瑴††〱㠹㰰牢ਾ戼㹲朊慧慡捡瑧⁴瑣捴杧杧杣愠慡捡捴捴⁡条慧捴瑴捡挠捧杴瑴慧⁧瑡捣条瑴杣††ㄱ㐰㰰牢ਾ戼㹲愊杴慴捡捣⁡瑣杣杴慣捣挠慡瑣慧捴⁴捴条慣捴瑴琠慴瑣瑴慣⁣慣捧瑧瑴瑣††ㄱ〱㰰牢ਾ戼㹲朊杧杴条慣⁡慡捡条慧条朠慣慡瑡捧⁣捧慡慡慡杧朠慡慴条杧⁣慧慣杣慧慡††ㄱ㘱㰰牢ਾ戼㹲琊瑧杴慡慴⁣捴瑡捡捴瑴挠瑣瑴瑴慣⁡慴瑴瑡杴慡朠慣瑴慴捴⁡杧瑧慴瑴瑧††ㄱ㈲㰰牢ਾ戼㹲挊捴瑡慧捧⁧慧慴慣慴瑴琠慧瑡瑧瑡⁴慴慧慡慡慴愠捡慡慡慧⁧瑴杴慴慧慡††ㄱ㠲㰰牢ਾ戼㹲挊捧慡慡条⁧捣瑡捣瑧慣朠慧杴捧瑣⁴瑣捧瑴慡瑴琠慧杴捣杴⁧慣瑧瑴瑡杧††ㄱ㐳㰰牢ਾ戼㹲挊杧捧瑧捣⁴捧捣捧慣捣挠捴杣杧捣⁧瑴捧瑴杣慣愠杣瑴慣慡⁴捣捧捴捣杧††ㄱ〴㰰牢ਾ戼㹲挊杧瑡瑴瑧⁣瑣捡捴条慧朠条杣瑴慣⁣杣捡慡捡慡挠条瑡慡慡⁣慧⁡†††††ㄱ㔴㰳牢ਾ戼㹲㰊牢ਾ氦㭴ㄲ☰瑧※ㄠ㜲戼㹲☊瑬㈻ㄱ朦㭴†㜱㐵戼㹲☊瑬㈻㈱朦㭴†乄㱁牢ਾ氦㭴ㄲ☳瑧※䄠瑲晩捩慩⁬敓畱湥散戼㹲㰊牢ਾ氦㭴㈲☰瑧㰻牢ਾ氦㭴㈲☳瑧※倠剃瀠潲畤瑣戼㹲㰊牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〲朦㭴戼㹲☊瑬㈻ㄲ朦㭴†業捳晟慥畴敲戼㹲☊瑬㈻㈲朦㭴†㜨⸩⠮㈱㰩牢ਾ氦㭴㈲☳瑧※䄠汦䥉爠獥牴捩楴湯猠瑩㱥牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〲朦㭴戼㹲☊瑬㈻ㄲ朦㭴†業捳晟慥畴敲戼㹲☊瑬㈻㈲朦㭴†ㄨ㐷⤳⸮ㄨ㐷⤸戼㹲☊瑬㈻㌲朦㭴†托䥡爠獥牴捩楴湯猠瑩㱥牢ਾ戼㹲☊瑬㐻〰朦㭴†㈱㰷牢ਾ慴瑴杣瑣慴愠捧慣慡杧⁡慧瑡慧瑴慧琠慧慡捴捣⁣杣慣捣瑴瑣挠捧捣捧慡⁡†††〶戼㹲㰊牢ਾ慡瑡杧杣瑴愠瑡捴慣捧⁣杴慴捴瑴瑴琠瑧瑧瑴杣⁣杴杣瑣瑡杣朠杴慣杧慣⁧††ㄠ〲戼㹲㰊牢ਾ慡慧慡慣捣朠瑧慡慣捣⁡慣捧杣捣杴愠慴瑴瑴瑡⁴条杧捣捧杴琠瑴慡杴瑡⁧††ㄠ〸戼㹲㰊牢ਾ杴慣慡捡捧挠慡捡瑴瑴⁴捣杧捡慣慡愠慡捣瑴杴⁣杣瑡捧杣杴挠杣慡慣捧⁧††㈠〴戼㹲㰊牢ਾ瑡捣捧杴瑡朠瑡捣瑴捧⁴慧瑴瑡杣慧琠捧条慣慡⁡捣条条杣慧琠瑴慧捴杴⁣††㌠〰戼㹲㰊牢ਾ捧慣瑴捴瑧琠慡杣捴慡⁴瑴慣���瑣捧挠慧慡慧条⁧杣条慡瑡瑡朠瑴捣捧慣⁧††㌠〶戼㹲㰊牢ਾ条杧捧条捴愠瑣捧捧慧⁡慣慴瑴慧杣朠捡瑴杴捧⁣杧慴瑴慡杣挠瑧捴慴捣⁧††㐠〲戼㹲㰊牢ਾ慡慡慣捣慧愠慡瑡杧慧⁴捴捴杴瑴捡挠捧杴捣杧⁡捡瑣慴杴捴朠杴捣杧捧⁧††㐠〸戼㹲㰊牢ਾ慧杣瑣瑴杣挠慧杧慴慴⁴慴瑣杧慧慣朠瑴捡瑴慣⁣慣杴瑴条慧挠瑴捧杣慡⁡††㔠〴戼㹲㰊牢ਾ捧杧捴捡杴朠慧慴慡瑧⁣捧杧瑡瑡杧琠杧捣慡瑴⁴杴瑣慣杴慡愠慴慧慣瑣⁴††㘠〰戼㹲㰊牢ਾ捡杧捴瑡瑡琠捣慣捡杧⁣慡捣捧条瑴愠瑣瑡瑴慡⁧捣捧捴捧慡挠杣捣瑣捴⁴††㘠〶戼㹲㰊牢ਾ瑴捧捣杴瑡朠瑧条条瑴⁡瑣杧杣慣捧愠杴慡杧杣⁡杴捣捧瑧杴愠条慣瑡捡⁣††㜠〲戼㹲㰊牢ਾ杴捣捧慡瑡朠慣慡慡慧⁡慴杴瑣慴瑣朠慧杴慧杣⁧杴瑴慧慡捡挠杴慣条捣⁧††㜠〸戼㹲㰊牢ਾ慧慣捡条慧愠慡捡捧瑧⁴瑧慣慡瑣捴愠杧瑡杧慴⁣捣瑴瑣慣捡挠捧慴瑣杧⁧††㠠〴戼㹲㰊牢ਾ捡慧捴捧慧琠捡捧慣杣⁡捣条条捴瑡朠杧杴慧条⁡慴瑴捧慣捣朠捣慡慡捧⁡††㤠〰戼㹲㰊牢ਾ瑡捣慧瑡杣愠捣杴捣捡⁴慧慡瑴慴捣朠杣捡瑣捧⁧瑣瑣捧杣瑣朠杣捴杴捧⁴††㤠〶戼㹲㰊牢ਾ杧慧瑴捴条挠捴捧捧杴⁧瑡杧捡慡捣挠捧条慣瑧⁴慡瑡捡瑣慴挠捧捡慣捣⁡††〱〲戼㹲㰊牢ਾ捧瑡杣慴捣朠瑧杣瑡瑣⁧慡慣捧瑣慧琠瑧瑴慡慡⁴杧慡慡慡捴挠捴捧捣捧⁧††〱〸戼㹲㰊牢ਾ捣条慣慡捧琠捧杣慧慧⁴慡杣杣瑡杧挠慡捡慣瑧⁡杣慡捡捧杴朠慣慡杴捣⁣††ㄱ〴戼㹲㰊牢ਾ瑧慣慡慡杧朠瑡杣慡慡⁡慴捣杴杴慧愠杣瑡慣捡⁡条捧杴瑧瑡朠捣慧瑴捡⁧††㈱〰戼㹲㰊牢ਾ捡瑣慧慡条琠慣慴慡瑧⁧杣慣瑡慣瑧琠慡捣捧杧⁣杣捣瑣瑧捴挠杣瑣瑧捡⁧††㈱〶戼㹲㰊牢ਾ捴慡杴杣捧愠捧慧慡慧⁴杣杣捣慡慣愠慡杴捧慧⁣杧杣捡慧慡愠慣慣捴杴⁣††㌱〲戼㹲㰊牢ਾ杴慣捡捣杧挠杧捣杴慡⁣捡慣杣捴杧琠慧慡条杴⁧捧慡慣瑡杧朠瑡捧捧慣⁡††㌱〸戼㹲㰊牢ਾ瑡杧瑣杧捧愠捣瑧慴慣⁧杴杧捴捧慧挠条慡杧瑡⁴捡慡慡瑣捡朠杧慣慡慡⁧††㐱〴戼㹲㰊牢ਾ条瑧杧杣瑡朠慧慣瑴条⁣杴捧捡瑴捣琠慧捣慡杴⁴捴条慣慣捣琠瑡慧捣杧⁧††㔱〰戼㹲㰊牢ਾ条慡慡条瑣朠瑧杧慡慡⁡慴杴瑡瑧慣朠慣捣捡杣⁧慡杣杧杧捧朠捧杧杴捧⁧††㔱〶戼㹲㰊牢ਾ慡慴捴慣瑴愠慣杧瑡杧⁣瑴杴捧杴慧挠慣瑡杧杣⁴慧杣瑣慧慡愠杴瑣杧瑡⁴††㘱〲戼㹲㰊牢ਾ杴瑡瑣捧捣朠慡条条慣⁡捣瑧瑧慧慣愠杴瑴捣杧⁣慧杣杣捴杣愠捣瑧慴条⁴††㘱〸戼㹲㰊牢ਾ慣捧慡杣捡朠慣捡捣捴⁡捡慣慡慧杧挠捡慡捣慣⁣捡瑣慴捡慣朠杣瑣慴瑣⁣††㜱〴戼㹲㰊牢ਾ杣捴慴慧捴愠瑴⁣†††††††††††††††††††††††††††㜱㐵戼㹲㰊牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〱朦㭴†㈱㰸牢ਾ氦㭴ㄲ☱瑧※㈠㰹牢ਾ氦㭴ㄲ☲瑧※䐠䅎戼㹲☊瑬㈻㌱朦㭴†牁楴楦楣污匠煥敵据㱥牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〲朦㭴戼㹲☊瑬㈻㌲朦㭴†䍐⁒牰浩牥戼㹲㰊牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〲朦㭴戼㹲☊瑬㈻ㄲ朦㭴†業捳晟慥畴敲戼㹲☊瑬㈻㈲朦㭴†㜨⸩⠮㈱㰩牢ਾ氦㭴㈲☳瑧※䄠汦䥉爠獥牴捩楴湯猠瑩㱥牢ਾ戼㹲☊瑬㐻〰朦㭴†㈱㰸牢ਾ慴瑴杣瑣慴愠捧慣慡杧⁡慧瑡慧瑴⁧††††††††††††††††††††㤲戼㹲㰊牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〱朦㭴†㈱㰹牢ਾ氦㭴ㄲ☱瑧※㈠㰷牢ਾ氦㭴ㄲ☲瑧※䐠䅎戼㹲☊瑬㈻㌱朦㭴†牁楴楦楣污匠煥敵据㱥牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〲朦㭴戼㹲☊瑬㈻㌲朦㭴†䍐⁒牰浩牥戼㹲㰊牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〲朦㭴戼㹲☊瑬㈻ㄲ朦㭴†業捳晟慥畴敲戼㹲☊瑬㈻㈲朦㭴†㜨⸩⠮㈱㰩牢ਾ氦㭴㈲☳瑧※堠慢⁉敲瑳楲瑣潩⁮楳整���㹲㰊牢ਾ氦㭴〴☰瑧※ㄠ㤲戼㹲朊慡杴瑡瑣⁡慧杣慧瑧慡朠杣瑣杧†††††††††††††††††††††㈠㰷牢ਾ戼㹲㰊牢ਾ氦㭴ㄲ☰瑧※ㄠ〳戼㹲☊瑬㈻ㄱ朦㭴†㈶㈸戼㹲☊瑬㈻㈱朦㭴†乄㱁牢ਾ氦㭴ㄲ☳瑧※䄠瑲晩捩慩⁬敓畱湥散戼㹲㰊牢ਾ氦㭴㈲☰瑧㰻牢ਾ氦㭴㈲☳瑧※瀠慬浳摩瀠祌䅢㉌‴潣瑮楡楮杮琠敲㱁牢ਾ戼㹲☊瑬㐻〰朦㭴†㌱㰰牢ਾ慴瑧慣杴捣挠杣杣捣慣⁣杣慧条慧捧琠慧瑣杧瑧⁴慧条捧捴捴愠条杧慣捴⁧†††〶戼㹲㰊牢ਾ瑧杣瑡慡瑡愠瑴瑣慧慡⁴慧捧杴瑴慧挠慡瑴慡捴⁡捴慧捡慴瑧琠慡瑣瑴慴⁣††ㄠ〲戼㹲㰊牢ਾ捧慡瑧捴瑴愠条捣慡条⁧条慡杴瑡杴愠杴慡瑡捣⁣捣捧捡瑣捴琠杣捣杣慣⁡††ㄠ〸戼㹲㰊牢ਾ慡慡杴捧瑧琠慡瑴捣条⁣瑣瑧瑡瑣瑴琠杴杴瑴捴⁧瑣捧捧慴捴朠瑧捧条捧⁡††㈠〴戼㹲㰊牢ਾ慧条慡捡捡挠杧慴捡捡⁣捡条捣捧瑣朠瑡瑡瑴慴⁴慴杧捧杣瑣朠瑴慴瑡慧⁴††㌠〰戼㹲㰊牢ਾ瑧捧慡慡杣挠慣慡瑣瑴⁴捴杣慧捣慡愠慡捡瑣瑴⁧捣慧杴捣瑧朠捣慧捡条⁣††㌠〶戼㹲㰊牢ਾ慧捴杣瑣慧琠慧捴瑣杴⁣杴瑡慴捴杧愠杴慣捧慡⁡捡慣慧捧杧愠瑴杴瑡瑣⁧††㐠〲戼㹲㰊牢ਾ杣捣瑡瑴杣琠慴捡瑧慣⁡瑴捴捡捣杴挠杣慡条慡⁧捧慧慧慡慴琠瑧捴杣捣⁡††㐠〸戼㹲㰊牢ਾ慧杧杧慣瑧挠捡杴杣杣⁡捡瑡瑡杴捡朠慧瑣瑴杧⁣杣瑧瑡慴捡朠杣瑴瑣捡⁣††㔠〴戼㹲㰊牢ਾ慧慡捡捡杣愠慡慡杴杧⁡瑴瑣瑣瑧慴挠杣瑣捧杣⁧慡捣瑴瑡瑧挠瑧捧杣杧⁣††㘠〰戼㹲㰊牢ਾ杧捡捧瑴捴朠杣条瑧瑡⁡瑴捡杴杧捡愠瑧慴瑣捴⁡捣瑡瑧慴杧愠瑣杴捣慧⁡††㘠〶戼㹲㰊牢ਾ条杣瑧慣瑣朠杧瑡慡条⁴杣杣慧慴杴朠杴捧慣瑡⁴瑴捧捴瑡慧愠瑡条捡捡⁴††㜠〲戼㹲㰊牢ਾ慴杣瑧慣慴琠捴捣慡杣⁧慣捡杣慣瑧琠捡慴瑴慴⁡捧杣瑣杣慣愠捣捧捣瑴⁣††㜠〸戼㹲㰊牢ਾ瑴杴捣瑣慧琠杧慴慧瑧⁴捡杴捧捧条挠瑡慧条捧⁧瑡捧杣杣瑴朠慡捧慡慴⁣††㠠〴戼㹲㰊牢ਾ瑣捧杣慣慡琠捧慡慡条⁡瑡瑡捧瑴捡琠杧瑡杧捡⁧瑧瑧杴慡慡挠瑣捧慡捧⁣††㤠〰戼㹲㰊牢ਾ杧捡慡慣杧愠慡慡杣杣⁴杴捴慡捡瑴挠条慧杴瑧⁡捣瑣捴捴慡挠杣瑣捡杴⁧††㤠〶戼㹲㰊牢ਾ慧杣瑡杣杣愠慴杣捣捡⁧捡慣慧瑧慣琠杧瑧杧慡⁧瑡瑡杴捣捡挠捧慣慡条⁣††〱〲戼㹲㰊牢ਾ慡捴杣慡捴朠捡瑣捧慣⁣杴慡瑡瑴捡挠捧慧捣杴⁣捧捴杴捣捧琠捧瑧瑣杧⁣††〱〸戼㹲㰊牢ਾ杴杧瑡瑴慣朠瑣杣杣瑣⁧慧杴慧慣捡挠杣慣捧条⁴慴慡慴捣瑴愠杣慣捣捡⁣††ㄱ〴戼㹲㰊牢ਾ条慣捴瑧捡挠杧捴慧捴⁴慧捡条捣杴愠杴瑴慴慡⁡杴慧慡慡瑡挠瑣杣捣杣⁣††㈱〰戼㹲㰊牢ਾ捧慣捧慡条挠杴捣杧条⁡慴捡捧慧杴朠慣慡捣条⁴捡慧慡杣瑣朠捧慡瑡捧⁣††㈱〶戼㹲㰊牢ਾ杣捴慡慡条朠慧捴慧慡⁡瑡捡瑣瑧杧愠捡慧捴慡⁣慡杧瑣杧慴琠捧杣瑡慴⁣††㌱〲戼㹲㰊牢ਾ慧捣杴慡慡朠捴瑡慡条⁴捧捧慡捴条琠慴捡杣杣⁧捣捧捣杴瑴挠捣捧杴慴⁣††㌱〸戼㹲㰊牢ਾ瑧慣瑡捧杧挠条杣慡条⁡捴捧捧慣捡愠慡瑡杧杣⁡杣捧慧杣慡愠捡捡瑡瑣⁧††㐱〴戼㹲㰊牢ਾ瑣捧慡捣杣朠杣捧瑣慧⁡慣捣捡瑧杣朠杴慡慡瑧⁧杧慣捡慡杴朠慧杴杣捣⁡††㔱〰戼㹲㰊牢ਾ慡杴捧杴杧挠捡杣瑴捡⁡瑧杧瑧杣杣愠慣慧条慧⁴慴慣慡捡慴挠杧捧慡慡⁡††㔱〶戼㹲㰊牢ਾ慧杧杴捧慧琠杧捡瑡慴⁧瑣杧慣瑣捴挠杴捡慣瑡⁧瑴慣捧捡捡挠慴杴捡杣⁧††㘱〲戼㹲㰊牢ਾ慧慧慡慡捧琠杧杴慧慡⁡瑡瑡慧杴捴愠捧捡慣捣⁧慧捡杧杧杧挠杧杣瑧杧⁣††㘱〸戼㹲㰊牢ਾ慧瑡瑡捣瑡琠捡条慧杴⁧瑣瑴杧瑣杧愠捣慡杴捧⁧杴捡捧杴慡愠瑡捧���慧⁴††㜱〴戼㹲㰊牢ਾ瑴慧捴杴捣挠慧慡慧捧⁡捡杣杴杴捡愠瑡瑧捴杣⁧杣捡捧瑧捣朠捡杣瑴慡⁧††㠱〰戼㹲㰊牢ਾ捴条慣捡慧挠捧慡捣瑣⁣慡捣慡条条朠慣慣捡捣⁡慣捣瑴慡捣愠捧捧瑴捡⁴††㠱〶戼㹲㰊牢ਾ捣瑧瑣条捡愠捴捡慣捴⁡捣瑡慣瑴慡琠慴条瑴杴⁴瑧瑴慡捡杴挠条捧瑡捧⁡††㤱〲戼㹲㰊牢ਾ条瑣捴杴瑴琠杴捧杧瑡⁧条条慡慧瑴琠捴条捣杴⁡慴慣慧瑴慡愠捴条慡杣⁣††㤱〸戼㹲㰊牢ਾ条慡捧杧捴琠慧慴慡捡⁡慧瑡瑴捧瑣朠捧杧慣瑧⁡捧捧杧杴瑧挠捣捡瑣慧⁣††〲〴戼㹲㰊牢ਾ捣慣杴捣慧愠瑣慣慧条⁴慧慡杣捣瑧愠捧捧杣瑡⁧瑧条杴杴杧朠捴捴捣慣⁴††ㄲ〰戼㹲㰊牢ਾ捧慧慧瑧条朠慧捡杴捣⁡杧慣捴慡瑡愠慡捡慧慡⁧捧捴条捴慧愠条捡杴杧⁣††ㄲ〶戼㹲㰊牢ਾ瑣瑴杣瑴瑴愠捴杴瑴瑧⁴杴捴杧杴慡挠捧捴捴瑣⁧条慴杧捡慡愠捴杣捣杧⁧††㈲〲戼㹲㰊牢ਾ条杣慧瑴杴愠捡瑧杴杣⁡条慣捡杧捣挠杧条杧杴⁧杣杧慣杧捡朠捣杣捣瑡⁡††㈲〸戼㹲㰊牢ਾ慡瑣捧慣杧挠瑡慣慡瑴⁡条慣慧条捧挠瑡捣杴捡⁧慧杴捧瑣瑴琠杴杣瑴捴⁴††㌲〴戼㹲㰊牢ਾ捡慡捡捴瑴琠杴瑴慴瑴⁴瑴瑣慡瑡捡愠瑴慣慡慴⁴瑧瑡捣捧捴愠杴慡慡慡⁡††㐲〰戼㹲㰊牢ਾ瑡捣瑴捡瑧琠捴捧慴条⁧瑡瑧慣捧瑧愠瑡捧捴杴⁣慣瑧瑧慴慣愠捣慡瑴慡⁣††㐲〶戼㹲㰊牢ਾ慣瑡捴杴瑡琠条慡慡捡⁴慣捴慧捧瑡挠慡瑡慧慡⁣杴慣瑡瑴瑡琠慣慴捴条⁧††㔲〲戼㹲㰊牢ਾ瑡慴捴慡慴挠慣慴瑴瑴⁴慧慡慡捧杣琠瑴瑣瑧慡⁴慧条慧慧慡愠瑣慣捣慧⁧††㔲〸戼㹲㰊牢ਾ捧条瑴捣瑡愠杧瑡杧慣⁡慧捴瑣杧慴琠杣瑧瑣捧⁧瑡捴杣捡捴朠捴慣捡瑡⁣††㘲〴戼㹲㰊牢ਾ慡慴慣捡瑣愠瑴慡瑴捴⁣捣捴瑧慣慡愠瑡慡杧瑴⁡捴慡瑧慧慧愠瑡慣捣瑡⁧††㜲〰戼㹲㰊牢ਾ条杴捡慧瑣朠慡捴杣瑧⁧条慡杴捧慡愠条瑣慴杴⁣瑡瑴瑣瑴捣愠慧瑣杴瑴⁣††㜲〶戼㹲㰊牢ਾ慡慣杧捣条挠慣瑴捡捧⁴杣捴瑡慣慡愠捴捡捴捧⁡捴慡捣慡捡挠瑧慴瑴慣⁴††㠲〲戼㹲㰊牢ਾ捴瑧慧瑴捧朠捣杴条杣⁡慧杣慡瑡捡朠杣瑡杣瑣⁧瑴慡慡杧捡愠瑡慴慣慡⁣††㠲〸戼㹲㰊牢ਾ条慧瑡杣慡琠捧慡捣杧⁣捧条慧捡捡琠捧慣捧捧⁡捴慡慣瑡瑡琠瑴慣捣杴⁡††㤲〴戼㹲㰊牢ਾ瑡慣杧瑡瑡琠瑣捴慴瑡⁡捣杴慧瑡捧琠瑧瑴捴捣⁧杧慧捴捧条琠杧杴条慴⁡††〳〰戼㹲㰊牢ਾ捣瑡捧瑡慣琠慣杧条慴⁣杧瑡慡慡杴挠瑴慧杴瑧⁣杧慡慧杧慣琠慡瑡捴杣⁴††〳〶戼㹲㰊牢ਾ慣捧慣瑧瑴愠瑧瑣慧捣⁡捴捴瑡瑣瑧愠捡瑡慣瑴⁧捧慡杣瑣捡挠瑴杴捣瑡⁧††ㄳ〲戼㹲㰊牢ਾ瑴捴条慡捡愠捡捴杴捧⁧慣捴杧捧瑴挠捣瑡捡慡⁴杣瑡条瑡杴琠杣慣捣杴⁡††ㄳ〸戼㹲㰊牢ਾ瑴捧捣慧慣琠慴捴捧慧⁧捣慣瑴慴慴挠捣瑡瑡慡⁡捴条慣捴慣琠瑧杴慧瑡⁴††㈳〴戼㹲㰊牢ਾ慴瑡杣杣捧挠捴慧捧慡⁧捡瑧瑴捣杣琠杴慡慴杴⁧瑣慣慴捡捡挠捣瑴瑧瑡⁴††㌳〰戼㹲㰊牢ਾ捡杴瑴慴杴琠慡捧条捡⁡瑧瑴慴瑴瑧琠慣杴捡慣⁡慡捴捣瑴慡挠瑧慧瑧瑴⁴††㌳〶戼㹲㰊牢ਾ杣瑴捣捡杴愠捧瑧慣慧⁣捣杣慴慧慡愠慧捴慡条⁧瑡瑣捴瑴慧朠瑡捣瑴瑴⁴††㐳〲戼㹲㰊牢ਾ瑴瑣捧捧瑧愠瑡瑣捧杴⁣瑴捧慡捡慡愠慡慡捣捡⁣捧慴捣条杣朠杴瑧瑴瑧⁴††㐳〸戼㹲㰊牢ਾ杴捣杧瑡慣愠慧捧慴捣⁡捡捴瑴瑴捴挠慧条瑧慡⁣杴捧瑴慣捧愠慧捧捧条⁡††㔳〴戼㹲㰊牢ਾ慴捣慡瑡捡琠瑧捣瑴瑣⁡瑧瑧条捣瑧愠瑧慴杧捣⁡捣捡瑴慣条愠捡捴杴慴⁧††㘳〰戼㹲㰊牢ਾ慣捣捧瑣捡愠慴捣捴捧⁴瑣捧慴瑡捣琠瑧慴捣条⁴杧瑣捧杴捣愠瑧杧杣瑡⁡††㘳〶戼㹲㰊牢ਾ条捴瑧瑧瑣琠捡杣杧���⁧慧瑣慣条捡朠瑡条瑴捡⁣杧瑡慡杧杣挠条杣瑧杣⁧††㜳〲戼㹲㰊牢ਾ捧杴慡杣杧朠杧瑴杣杴⁣捡捡条捣慣朠瑣杴慧捧⁧慡杣捡瑣捡愠捣慧捡杴⁡††㜳〸戼㹲㰊牢ਾ慧慴捣慴慣朠杣杴条瑣⁡杴条慡条杣挠慣杣瑣捴⁣杣慡杧慧慧愠条捧杧捡⁡††㠳〴戼㹲㰊牢ਾ杧慴捴杣瑧愠条杣捧条⁧瑧杣慧捡条朠条条杣慣⁣慧杧慧捧瑴挠慣杧杧慧⁡††㤳〰戼㹲㰊牢ਾ捡捧瑣杧慴琠瑣瑴瑡条⁴捣杴捴杧瑧琠捴捧慣捣⁴瑣慧瑣杴条挠瑧杣瑡瑴⁴††㤳〶戼㹲㰊牢ਾ杴杴瑡捧捴朠捴条杧杧⁧杣慧捧瑣瑡朠慧慡慡杣⁣慣捧慡杣杣朠捣瑴瑴慴⁣††〴〲戼㹲㰊牢ਾ杧瑴捣杴捧挠瑴瑴捧杴⁧捣瑴瑴捧捴愠慣杴瑴瑣⁴捴瑣捧瑧慴琠捣捣杴瑡⁴††〴〸戼㹲㰊牢ਾ瑣瑧杧瑡慡挠杣慴瑴捡⁣捧瑣瑴慧瑧朠条瑣慧慴⁣杣瑣杣捣捧愠捧杣慡杣⁡††ㄴ〴戼㹲㰊牢ਾ捣慧捧捧条挠慧瑧慣瑧⁧条杣条慧条挠杧慡慧捧⁧捣杴瑡捧杧琠瑡瑴捴捴⁣††㈴〰戼㹲㰊牢ਾ瑴捡捧瑡瑣朠杴杣瑧瑡⁴捴捡捡杣慣琠瑡瑡杧杴⁣捡捴捴条慴挠慡捴杴瑣⁣††㈴〶戼㹲㰊牢ਾ杴瑡捧杣慣琠条瑴慡捧⁣条慴慴慣瑣挠杣瑣瑡杣⁣慴杣杴捡杴朠瑧慣杴捧⁴††㌴〲戼㹲㰊牢ਾ捧捧捣杣捡愠捣杣捣慡⁣捡捣捧杴捡朠杣捣瑣慧⁣杧捧瑴瑧瑣朠瑣捣杣捧⁡††㌴〸戼㹲㰊牢ਾ捴杣瑣慴慣朠捡慡捧杴⁴慧捣瑧瑣捣朠杧条瑣捧⁡杴杴捴条条朠瑴瑴慣捣⁧††㐴〴戼㹲㰊牢ਾ捴瑡慣捣慧愠捡捧捧慧⁧捧条瑣捧杧琠慡条瑣慣⁴慣捧瑧杧捴朠杴慡捧慧⁴††㔴〰戼㹲㰊牢ਾ捴捡条瑡瑧挠杴捣杴瑴⁣瑡捣捧瑧捣愠捧捴瑧杴⁡瑧瑴瑣捣条愠条杣瑴慡⁴††㔴〶戼㹲㰊牢ਾ瑧瑣杧瑣捴琠慧慴慡捧⁧杧捣瑡瑧慴愠杧捧杧瑴⁴瑴捴瑣瑧瑴朠瑧慣瑣杴⁡††㘴〲戼㹲㰊牢ਾ杴捣捴杣杴琠慡杧杧慧⁡瑴捴杴瑴慣琠杧杧瑧慡⁴慧慴捣慧杴愠慡杣条条⁡††㘴〸戼㹲㰊牢ਾ杧瑡捧捴捡朠瑡捡杧瑧⁴捡杴瑡慧杴愠捡瑡捧捣⁧瑧慴瑣杧慡挠瑧杴杴条⁧††㜴〴戼㹲㰊牢ਾ瑧慡捡慡瑣朠捧杧慴杴⁧瑡捧杧杣杧愠捣条条慡⁡慡捴捡捴条朠瑧慣瑡捧⁣††㠴〰戼㹲㰊牢ਾ条杣瑣捴瑧琠慡慴慣慧⁴瑧条瑧瑧捴挠捡条杧慴⁧捣条慣捧瑡挠瑣捧慧杴⁣††㠴〶戼㹲㰊牢ਾ条瑡捣杧慡挠瑡慡杴瑧⁧慣杧捧捧杴愠瑣捴杣杣⁴瑴捣条捡瑴琠捡慧慡慣⁣††㤴〲戼㹲㰊牢ਾ杧慡捡杣慡朠捡慣瑴慣⁴瑧杴瑴捧捴愠杧捴捧条⁡杣瑴瑴捧条挠条慣瑧杣⁣††㤴〸戼㹲㰊牢ਾ瑴慣杣瑴杣挠捴捧瑧瑡⁣杧杴瑡捴瑡琠瑣捧慴捡⁣条慴条捧慡挠捣杣捣条⁣††〵〴戼㹲㰊牢ਾ瑣条捣杧瑧挠瑣慣捡慧⁣条慧捧捡慧琠慣杴杣慣⁣捣瑧杧捣条朠捡捣慡杣⁣††ㄵ〰戼㹲㰊牢ਾ杴捣杣条瑡朠杣捣捧瑧⁧杣捧杴瑣杧愠慧杴捧杧⁡杣杣瑡杧瑡愠杴瑴瑣捧⁣††ㄵ〶戼㹲㰊牢ਾ慡杧瑧杴瑧琠杴杣慣瑴⁣捡条瑴瑣捣朠慣条慡瑴⁧瑡杴捧捴慣愠瑴瑣杴慧⁧††㈵〲戼㹲㰊牢ਾ杴瑧慧瑡捣朠瑴条杣条⁧杴捣捧杣捧琠捴慣瑴慣⁧瑧杣条瑧杧挠捣杧瑣捣⁡††㈵〸戼㹲㰊牢ਾ杴慣捣捧慧挠捧慡杣杣⁧杧条捧条捡愠条瑧瑡条⁧捧杧杣捣慴挠慡捴慣杴⁣††㌵〴戼㹲㰊牢ਾ慣捡捣瑧捴挠瑡瑧捧捴⁧捣慧杧杣捧愠慴慡捴捧⁣瑧慧杣瑡慣朠杣瑧捣条⁴††㐵〰戼㹲㰊牢ਾ慧捴慧条瑴愠杧瑣杧慴⁡慧捧杣杣条挠慧捴瑣杴⁡条瑣瑧捣瑣朠瑡杧捴瑧⁣††㐵〶戼㹲㰊牢ਾ瑡瑣捡瑣捧挠杴慧慣捧⁡杴捧瑣捧慡挠捧杧捧瑡⁣捣慧杴捣捧挠杧慡捧慧⁧††㔵〲戼㹲㰊牢ਾ慡慧瑡慣慴愠杴杧慧条⁧捣瑡捣条捣琠杣杣捴捧⁧慡杣捣条慣愠慧杣慴捧⁣††㔵〸戼㹲㰊牢ਾ慣捧捧瑧杣朠捣捧慣杴⁣杣捧慧慴瑡朠捧瑣捧瑴⁣捴捧杣慡捡朠瑴杴���杧⁣††㘵〴戼㹲㰊牢ਾ杧慧捣条杴愠杣慡杧瑣⁴慧捧慧杧捧朠杴慣条瑡⁴捣慧瑡捡杣挠慡捧慧慣⁧††㜵〰戼㹲㰊牢ਾ捧杣瑡慣捴朠捴捧捧捴⁣条杣慡条杣朠捴瑣杣捣⁧慡慡杴捡捣愠慧捧捧杴⁣††㜵〶戼㹲㰊牢ਾ杣捧捡瑣瑧挠瑣捡慧瑧⁴捧瑡慧慴慡朠慡慧慣瑧⁣瑡慡瑧捧杧挠慧杣瑡条⁴††㠵〲戼㹲㰊牢ਾ慣杴捣捣捧朠捣慣捣杧⁡条慧捧杴捡琠杧瑧杴慡⁧捧捴捴慡杧朠慣捴杧捴⁧††㠵〸戼㹲㰊牢ਾ捡捧捴捴捣琠慴杴杣捡⁴捣杴慣瑴条朠慡捧条捣⁣条慴瑧条瑧琠慧杧捣瑧⁴††㤵〴戼㹲㰊牢ਾ慧捧捡杣捣朠捣捧慡杧⁡瑡杧杴慣杴挠捴慧杴捧⁴捡慧杧捧条愠慣瑧慡瑧⁧††〶〰戼㹲㰊牢ਾ慧瑴慴捣瑡愠瑡捣瑣慴⁡瑴瑧捡捧捡挠捧慴慡捡⁧杣瑴慣捧捧朠瑡慣杣捧⁡††〶〶戼㹲㰊牢ਾ捧条捡条瑧愠慡慡杴捧⁡捡慡捡慣捣挠慴慡慡瑣⁧杣杣瑡杣杣挠瑣慧慴慡⁴††ㄶ〲戼㹲㰊牢ਾ瑴慴捡杣慴琠慧瑡捡瑣⁡杴慣捡慣慧朠杧慴慣杧⁣慣慣瑴捡捣挠慣瑣慴瑡⁣††ㄶ〸戼㹲㰊牢ਾ慣瑣慧条瑣朠捣瑡瑴瑴⁣瑡杧瑴捴捡挠瑡捣慣捧⁧慡杧捧慣杴挠瑡捧瑡杣⁡††㈶〴戼㹲㰊牢ਾ慡瑴慡慴杣愠杣慡瑡慴⁡慴杣捡捴捡琠瑡条杧慣⁡瑴††††††††††††㈶㈸戼㹲㰊牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〱朦㭴†㌱㰱牢ਾ氦㭴ㄲ☱瑧※㈠㰷牢ਾ氦㭴ㄲ☲瑧※䐠䅎戼㹲☊瑬㈻㌱朦㭴†牁楴楦楣污匠煥敵据㱥牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〲朦㭴戼㹲☊瑬㈻㌲朦㭴†䍐⁒牰浩牥戼㹲㰊牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〲朦㭴戼㹲☊瑬㈻ㄲ朦㭴†業捳晟慥畴敲戼㹲☊瑬㈻㈲朦㭴†㤨⸩⠮㐱㰩牢ਾ氦㭴㈲☳瑧※䄠汦䥉爠獥牴捩楴湯猠瑩㱥牢ਾ戼㹲☊瑬㐻〰朦㭴†㌱㰱牢ਾ杣慣条瑴瑣琠慡捧慣慡⁧慧慧瑡⁧†††††††††††††††††††††㜲戼㹲㰊牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〱朦㭴†㌱㰲牢ਾ氦㭴ㄲ☱瑧※㈠㰶牢ਾ氦㭴ㄲ☲瑧※䐠䅎戼㹲☊瑬㈻㌱朦㭴†牁楴楦楣污匠煥敵据㱥牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〲朦㭴戼㹲☊瑬㈻㌲朦㭴†䍐⁒牰浩牥戼㹲㰊牢ਾ戼㹲☊瑬㈻〲朦㭴戼㹲☊瑬㈻ㄲ朦㭴†業捳晟慥畴敲戼㹲☊瑬㈻㈲朦㭴†㜨⸩⠮㈱㰩牢ਾ氦㭴㈲☳瑧※堠慢⁉敲瑳楲瑣潩⁮楳整戼㹲㰊牢ਾ氦㭴〴☰瑧※ㄠ㈳戼㹲愊条杣瑣瑣⁡慧条瑧瑧杧朠瑴瑧⁧†††††††††††††††††††††㈠㰶牢ਾ戼㹲㰊牢ਾ氦㭴ㄲ☰瑧※ㄠ㌳戼㹲☊瑬㈻ㄱ朦㭴†㈶㐶戼㹲☊瑬㈻㈱朦㭴†乄㱁牢ਾ氦㭴ㄲ☳瑧※䄠瑲晩捩慩⁬敓畱湥散戼㹲㰊牢ਾ氦㭴㈲☰瑧㰻牢ਾ氦㭴㈲☳瑧※瀠慬浳摩瀠祌䅢㍌″潣瑮楡楮杮㘠䠭獩琠条敧⁤牴䅥戼㹲㰊牢ਾ氦㭴〴☰瑧※ㄠ㌳戼㹲琊条捴瑡捧⁣捣捧捧捣捡挠杧慡杧条⁣杴捡杴杧瑴朠慡杧瑣瑣⁣慡杧捧瑡杣†††㘠㰰牢ਾ戼㹲朊捴慧慴慡⁴瑡捴杴慡瑡朠条瑣瑧杴⁡慣瑡慴瑡慣琠杣慡瑣条⁴慴捡瑴瑴捡†††㈱㰰牢ਾ戼㹲朊慣条瑴瑣⁴慡捧慣慡杧愠慧瑡慧瑴⁧瑡慧慡捴捣挠杣慣捣瑴⁣捴捧捣捧慡†††㠱㰰牢ਾ戼㹲愊慡瑡杧杣⁴慴瑡捴慣捧挠杴慴捴瑴⁴瑴瑧瑧瑴杣挠杴杣瑣瑡⁣杧杴慣杧慣†††㐲㰰牢ਾ戼㹲朊慡慧慡慣⁣杣瑧慡慣捣愠慣捧杣捣⁴慧慴瑴瑴瑡琠条杧捣捧⁴瑧瑴慡杴瑡†††〳㰰牢ਾ戼㹲朊杴慣慡捡⁧捣慡捡瑴瑴琠捣杧捡慣⁡慡慡捣瑴杴挠杣瑡捧杣⁴捧杣慡慣捧†††㘳㰰牢ਾ戼㹲朊瑡捣捧杴⁡杴瑡捣瑴捧琠慧瑴瑡杣⁧瑡捧条慣慡愠捣条条杣⁧瑡瑴慧捴杴†††㈴㰰牢ਾ戼㹲挊捧慣瑴捴⁧瑴慡杣捴慡琠瑴慣捣瑣⁧捣慧慡慧条朠杣条慡瑡⁡杴瑴捣捧慣†††㠴㰰牢ਾ戼㹲朊条杧捧条⁴慣瑣捧捧慧愠慣慴瑴慧⁣杧捡瑴杴捧挠杧慴瑴慡⁣捧瑧捴慴捣†††㐵㰰牢ਾ戼㹲朊慡慡慣捣⁧慡慡瑡杧慧琠捴捴杴瑴⁡捣捧杴���杧愠捡瑣慴杴⁴杣杴捣杧捧†††〶㰰牢ਾ戼㹲朊慧杣瑣瑴⁣捧慧杧慴慴琠慴瑣杧慧⁣条瑴捡瑴慣挠慣杴瑴条⁧捡瑴捧杣慡†††㘶㰰牢ਾ戼㹲愊捧杧捴捡⁴杧慧慴慡瑧挠捧杧瑡瑡⁧瑧杧捣慡瑴琠杴瑣慣杴⁡慡慴慧慣瑣†††㈷㰰牢ਾ戼㹲琊捡杧捴瑡⁡瑴捣慣捡杧挠慡捣捧条⁴慴瑣瑡瑴慡朠捣捧捴捧⁡捡杣捣瑣捴†††㠷㰰牢ਾ戼㹲琊瑴捧捣杴⁡杴瑧条条瑴愠瑣杧杣慣⁧慣杴慡杧杣愠杴捣捧瑧⁴慧条慣瑡捡†††㐸㰰牢ਾ戼㹲挊杴捣捧慡⁡杴慣慡慡慧愠慴杴瑣慴⁣杴慧杴慧杣朠杴瑴慧慡⁡捣杴慣条捣†††〹㰰牢ਾ戼㹲朊慧慣捡条⁧慡慡捡捧瑧琠瑧慣慡瑣⁴慣杧瑡杧慴挠捣瑴瑣慣⁡捣捧慴瑣杧†††㘹㰰牢ਾ戼㹲朊捡慧捴捧⁧瑡捡捧慣杣愠捣条条捴⁡杴杧杴慧条愠慴瑴捧慣⁣杣捣慡慡捧††ㄠ㈰㰰牢ਾ戼㹲愊瑡捣慧瑡⁣慧捣杴捣捡琠慧慡瑴慴⁣杣杣捡瑣捧朠瑣瑣捧杣⁣杴杣捴杴捧††ㄠ㠰㰰牢ਾ戼㹲琊杧慧瑴捴⁡捧捴捧捧杴朠瑡杧捡慡⁣捣捧条慣瑧琠慡瑡捡瑣⁴捡捧捡慣捣††ㄠ㐱㰰牢ਾ戼㹲愊捧瑡杣慴⁣杣瑧杣瑡瑣朠慡慣捧瑣⁧瑡瑧瑴慡慡琠杧慡慡慡⁴捣捴捧捣捧††ㄠ〲㰰牢ਾ戼㹲朊捣条慣慡⁧瑣捧杣慧慧琠慡杣杣瑡⁧捧慡捡慣瑧愠杣慡捡捧⁴杧慣慡杴捣††ㄠ㘲㰰牢ਾ戼㹲挊瑧慣慡慡⁧杧瑡杣慡慡愠慴捣杴杴⁧慡杣瑡慣捡愠条捧杴瑧⁡杴捣慧瑴捡††ㄠ㈳㰰牢ਾ戼㹲朊捡瑣慧慡⁡瑧慣慴慡瑧朠杣慣瑡慣⁧瑴慡捣捧杧挠杣捣瑣瑧⁴捣杣瑣瑧捡††ㄠ㠳㰰牢ਾ戼㹲朊捴慡杴杣⁧慣捧慧慡慧琠杣杣捣慡⁣慡慡杴捧慧挠杧杣捡慧⁡慡慣慣捴杴††ㄠ㐴㰰牢ਾ戼㹲挊杴慣捡捣⁧捧杧捣杴慡挠捡慣杣捴⁧瑧慧慡条杴朠捧慡慣瑡⁧杧瑡捧捧慣††ㄠ〵㰰牢ਾ戼㹲愊瑡杧瑣杧⁧慣捣瑧慴慣朠杴杧捴捧⁧捡条慡杧瑡琠捡慡慡瑣⁡杣杧慣慡慡††ㄠ㘵㰰牢ਾ戼㹲朊条瑧杧杣⁡杴慧慣瑴条挠杴捧捡瑴⁣瑣慧捣慡杴琠捴条慣慣⁣瑣瑡慧捣杧††ㄠ㈶㰰牢ਾ戼㹲朊条慡慡条⁣杴瑧杧慡慡愠慴杴瑡瑧⁣条慣捣捡杣朠慡杣杧杧⁧杣捧杧杴捧††ㄠ㠶㰰牢ਾ戼㹲朊慡慴捴慣⁴慴慣杧瑡杧挠瑴杴捧杴⁧捡慣瑡杧杣琠慧杣瑣慧⁡慡杴瑣杧瑡††ㄠ㐷㰰牢ਾ戼㹲琊杴瑡瑣捧⁣杣慡条条慣愠捣瑧瑧慧⁣慡杴瑴捣杧挠慧杣杣捴⁣慧捣瑧慴条††ㄠ〸㰰牢ਾ戼㹲琊慣捧慡杣⁡杣慣捡捣捴愠捡慣慡慧⁧捧捡慡捣慣挠捡瑣捴慴⁧捡瑡慣捣瑡††ㄠ㘸㰰牢ਾ戼㹲挊捡慣捴瑡⁴慡瑴慡瑧瑴朠杴瑴慴慡⁣杴慣杧慣杴挠慡捧瑴瑣⁧瑴瑴杧杣慧††ㄠ㈹㰰牢ਾ戼㹲琊慧慧慧条⁡瑴瑴慣捧瑣朠瑡捡条瑡⁴慡瑡慣慧捡朠慣慧条杣⁧捴杴瑡慡慡††ㄠ㠹㰰牢ਾ戼㹲挊条慡瑴杴⁣瑣杧杣捧条琠条杣杣瑧⁧瑧捣慣捣杴愠捣捣瑡捧⁣慧捡捴条慡††㈠㐰㰰牢ਾ戼㹲朊杴慡捡捧⁣瑧条杣捣慧琠杧慴瑧瑧⁧杧瑧瑣捣捣愠杴杣条条⁴条杧慡瑣捧††㈠〱㰰牢ਾ戼㹲挊条捧瑡慣⁡瑡慡慡杣慡愠杧瑣慣瑧⁣慧慡慧瑣杧朠捣瑴捴瑧⁴瑴瑡瑣瑧杴††㈠㘱㰰牢ਾ戼㹲琊瑴瑧杣瑧⁧慡杣瑣瑣捣琠慧瑧条慧⁣慡瑡捣捧杣朠慧捧杧瑡⁴杴慡杣瑴捧††㈠㈲㰰牢ਾ戼㹲朊慡捧慡杣⁧捣杣慧杧瑧朠捧杧捧条⁧捡捧捣捧慣琠慡捡杴捣⁡杧慣捴慡瑡††㈠㠲㰰牢ਾ戼㹲琊慡捧条慡⁧捧慣捴瑣慧挠杧瑡杧捣⁴瑴瑴捧瑧瑴挠慴慣慡瑣⁣瑴瑴瑧瑴瑡††㈠㐳㰰牢ਾ戼㹲琊瑴捴慴慡⁴捡瑡捴慡瑡愠杴慴捴杣⁣捴瑡慧慡慡愠慡捴瑣慴⁣瑧瑴杣瑣慡††㈠〴㰰牢ਾ戼㹲朊慧杴捴条⁣瑧慡杴瑣瑣朠捣条杴瑴⁡慣捡慣瑡慴愠捣慡瑴瑣⁧瑡慴慧慡慡††㈠㘴㰰牢ਾ戼㹲挊捴瑡杣条⁣瑡慣慡杴慡愠瑣捧慡瑴⁴瑡捴瑡瑡慣朠慧瑴瑡慣⁡慴捣瑡瑡瑴††㈠㈵㰰牢ਾ戼���琊杴慡慡条⁣杣瑴捴杴慴愠杴慡杧条⁡慡捡捴捡杣愠杧慣瑧捴⁣瑡条慧杴捧††㈠㠵㰰牢ਾ戼㹲愊条瑡捣杴⁧慴捴杧捴杴挠慧瑴捣慧⁣捴瑧捣慡慣琠慣瑡捡慡⁣瑣瑡慴瑡瑴††㈠㐶㰰牢ਾ戼㹲挊捣瑣杣捴⁡慡慡慴条瑧琠瑡慣条杴⁡慧慡捴捡慣琠慧瑧慧杣⁡瑣慧瑡捣杧††㈠〷㰰牢ਾ戼㹲琊慧慧瑡杧⁣慡慡捧瑴瑡朠慣瑴捴瑴⁴捣条捡瑴瑧琠慣捡条捧⁣条捣瑡慴杣††㈠㘷㰰牢ਾ戼㹲挊捴瑧慣捴⁡慡瑡慣瑣杣挠瑡慣捡慣⁡捡杣瑴瑡捴愠瑴杣杴瑡⁴捧捧瑣慧捧††㈠㈸㰰牢ਾ戼㹲朊条捡慧慡⁴捡捧慧捴捧琠瑧慴慡条⁧捡慡瑴捡慡愠慣杧慡捴⁧慡杴慣捡杣††㈠㠸㰰牢ਾ戼㹲朊杣慣杧慡⁣捡杴捣条杣挠瑡慣捡慡⁴瑡瑴捴捡瑣朠慡捴条慧⁴瑡捴瑴瑣慡††㈠㐹㰰牢ਾ戼㹲琊捡瑣杧慡⁴捧杴瑴瑴捣挠杧杧瑡杣⁣条杴瑧慧瑧愠捡慣杴慣⁴慣捴条慧瑧††㌠〰㰰牢ਾ戼㹲愊杣慧慴慡⁡杴瑣杴瑡杧琠杣慧条条⁧慣慴慡瑴捣朠捴条捣条⁴瑴条捴杴捡††㌠㘰㰰牢ਾ戼㹲挊瑡瑣慣捴⁴瑧慡慣捴瑡琠杧慣捡捧⁴捡瑣瑴捧慣琠瑧瑴慣慧⁡捡慡瑣瑣杧††㌠㈱㰰牢ਾ戼㹲挊捧瑡杣杧⁣瑴捣慣慴慣愠捴慧慴慧⁴杴捴捧捡瑣朠瑡杴捣杣⁡慣瑴瑡杣杣††㌠㠱㰰牢ਾ戼㹲愊捧捣瑡瑴⁡慴捣慣慴慴愠瑡慣捧瑡⁣慣杴瑴杧慡琠瑴慡捴捧⁧捧瑣杣条慣††㌠㐲㰰牢ਾ戼㹲愊慧杣瑴捴⁣杣瑴慧瑡瑡朠捧捴瑡慡⁣捡捣瑣杴慴琠慴瑣瑧瑴⁡杴慴条慣慧††㌠〳㰰牢ਾ戼㹲挊条瑴瑴瑡⁴瑧捴瑡慧捣愠慡瑡捣瑣⁴慡杣杴条瑴琠捴瑧捴慣⁣杴条杣捴条††㌠㘳㰰牢ਾ戼㹲愊捣捣瑧条⁡慡条瑡慣慡朠慧捴瑴瑣⁴慧慧捴瑣瑴琠瑴捴杴杣⁣瑧慡捴杴瑣††㌠㈴㰰牢ਾ戼㹲朊瑣杴慣慡⁣慡慡慡捡慣挠杣瑣捡慣⁧杣瑧杧瑴杴琠瑴捧杣慧⁴慣条条瑣捡††㌠㠴㰰牢ਾ戼㹲挊慡瑣瑣瑴⁴捴杣慡杧慴愠瑣杧瑣捴⁡捧条条杣慣朠瑡捡慣慡⁴捡杴捴瑣捴††㌠㐵㰰牢ਾ戼㹲琊条杴慴捧⁣瑧条瑴条捧挠捡慣瑣捴⁡条慡瑣瑣瑧愠捧捡杣捣⁴捡瑡捡瑣杣††㌠〶㰰牢ਾ戼㹲挊捴杴瑣慡⁴捣杴瑴捡慣朠杴捧杴瑣⁧捣条杴捧慧琠慡瑧杣杴⁴瑣慴捣杧瑧††㌠㘶㰰牢ਾ戼㹲琊杧捡捴慡⁧捡慧慴瑧慴挠杣慧慴条⁧杣慣捧杧捴朠杧瑣慧捡⁧杧杧瑧捴瑧††㌠㈷㰰牢ਾ戼㹲朊慣慣慣捧⁣慣捧瑴杧条挠慧捡慧捣⁴捡捡杣慡瑣朠条瑡捡瑣⁡慣捧瑧慧捧††㌠㠷㰰牢ਾ戼㹲琊瑡慧慧慡⁧杣捣捡捧瑴挠捣慧条杧⁡慧慡杧杣慧挠条瑧瑡捣⁧瑧慡捧杧慣††㌠㐸㰰牢ਾ戼㹲朊杧捴杧慡⁣条慧慧捧捧愠杣条杧条⁣瑴捣条杧杧愠慡杣捣杴⁧慴捴瑴慴慴††㌠〹㰰牢ਾ戼㹲朊捴瑣瑧杣⁧瑧瑴杣捣捡挠捴杴捡瑴⁧条杣捴慧瑴琠瑴瑧慧杴⁣捴瑧慣杧杧††㌠㘹㰰牢ਾ戼㹲朊捧杧条捣⁴瑡杧慡慡捡朠捣条慣捡⁧杣捧瑣瑴瑴愠杣瑧捴瑣⁧捧瑣瑴杴瑣††㐠㈰㰰牢ਾ戼㹲朊捧瑣瑴杴⁣捴捡瑡瑧捴琠瑴捣杴杣⁴慴捴捣瑣慧琠捴杴杴慧⁴慡捣瑧瑡慴††㐠㠰㰰牢ਾ戼㹲挊杣捣瑴杴⁡瑧慧捧杴瑡愠捣捧捴捧⁣捧条捣慧捡朠捡杣条杣⁣条杣条捴条††㐠㐱㰰牢ਾ戼㹲琊慧捧慧杧⁡条杣慧条条挠捧瑣慧杴⁣杧慴瑴瑴瑣挠瑣慴杣慣⁴瑣瑧捧杧慴††㐠〲㰰牢ਾ戼㹲琊瑴慣慣捣⁧慣慴慴杴瑧朠慣瑣瑣慣⁧慴慣瑡瑣捧琠瑣慧杴捣⁧慣慴瑧慴条††㐠㘲㰰牢ਾ戼㹲挊慣瑧瑡捡⁡瑣捣捧慴捴朠瑣捡瑧慧⁣杴杧捴瑡杧挠杴杣捣捣⁧捡捡捣捧慣††㐠㈳㰰牢ਾ戼㹲愊慣捣杣瑣⁧捡捧捧捣杴愠杣杧瑣杴⁴瑣捧捴捣杧挠瑡捣捧瑴⁡慣慧慣条瑣††㐠㠳㰰牢ਾ戼㹲朊杴捡杣捴⁴捣杧慧捧杴挠瑡瑧瑧慣⁧条瑧瑴捴捡挠瑧慣捴捡⁣慧慡杣杣杣††㐠㐴㰰牢ਾ戼㹲愊杧慣捧杴⁣杧慴慡捧捴愠捴条杣杴⁧捴瑧慧���杣愠瑴慣慣慧⁴瑧瑣捧瑣瑧††㐠〵㰰牢ਾ戼㹲琊慣捴杣杣⁴捣条瑣杣瑴朠条瑴捴捴⁣条慡捧瑧慴愠杴捴杴捧⁴捴杴瑡慡条††㐠㘵㰰牢ਾ戼㹲挊杧捧慣杴⁴慴条杧杣瑧琠瑴瑴捣杴⁴瑴杧捴捡瑴朠瑡捧瑣捣⁧杴慴条杧杧††㐠㈶㰰牢ਾ戼㹲愊瑡瑴瑣瑧⁴慣杴杧杧慴愠杴瑡捡杣⁡杴慡捡慧慧朠条慧杴瑣⁣捡慧慴杣杧††㐠㠶㰰牢ਾ戼㹲琊慴瑣慧杴⁡杴慡慣杴捣挠杧瑴捡杴⁧慡杣瑴瑧慧朠杧慴慡慣⁡瑣杧杣瑧瑡††㐠㐷㰰牢ਾ戼㹲朊慧杴杣捧⁧杧捡慣慧慧愠慡瑡慣瑣⁣条杧捴慡杴挠慣捧捧瑴⁣瑧慴瑡捡条††㐠〸㰰牢ਾ戼㹲愊杴慴杧杴⁴捴慣慣杧瑧愠捧慣捧条⁣瑡捣杴杣瑡朠慣慧捴杣⁧慡慣慴瑡杧††㐠㘸㰰牢ਾ戼㹲琊捧条杧杣⁣杴捡瑴捣捧朠瑴捴慣慧⁣瑴慴杣慡捡愠杣慧慡捣⁧慡慧捣瑡捴††㐠㈹㰰牢ਾ戼㹲愊杴瑴瑧杴⁣捴条瑧杣慣朠捡瑧瑴杴⁣条慣捧条捴朠瑣捴捡瑧⁴杣瑣杣杣慴††㐠㠹㰰牢ਾ戼㹲琊杣瑧慧瑴⁣瑡捴杴瑣慡挠慣瑧慡杧⁣慡捣捣捧慣朠捣慴捧杣⁧瑧捣捴慡杣††㔠㐰㰰牢ਾ戼㹲愊慣杧条慣⁣慧捴瑡捧捧愠捣杣杴捧⁣条慧捣慣捡朠瑣捧捣慧⁧瑡捧捧杣杣††㔠〱㰰牢ਾ戼㹲琊捧杧瑣捧⁴杧条瑡杧杣朠捡捧慧杴⁧瑡瑡瑧捴杴挠慣条杧瑴⁧瑧瑴捧捧瑡††㔠㘱㰰牢ਾ戼㹲琊慣慣瑧捴⁴捣捧慡慧瑡琠慧瑴杧瑣⁣慣瑡捴瑴杧愠瑧杧杴慡⁴捣瑧慴捧慧††㔠㈲㰰牢ਾ戼㹲朊瑧捧杣捣⁧捧瑴捣瑡捴愠杧捴慧杧⁴杧捣杣捧捴挠瑡捧捡杣⁣慧杣慣捡捧††㔠㠲㰰牢ਾ戼㹲朊杧慧杧慣⁧捡慡杧慴慴朠杧杣捧捧⁣慴慣瑡捣瑡朠捣慡捣杣⁴捴慣杴杴瑣††㔠㐳㰰牢ਾ戼㹲挊捧杣条捧⁧捧瑡慡瑡杣挠杣杴捡慧⁴慣捧杧捴慣朠杴瑡杣慡⁧瑴条捧杴瑧††㔠〴㰰牢ਾ戼㹲愊条条捣捧⁧条杣瑡捣瑴朠慡捧杴捴⁣瑣慧杴瑧杣琠慣捴慴捣⁴捧瑣杧捡条††㔠㘴㰰牢ਾ戼㹲挊瑡杧捣杴⁣慡杣杣杧慣琠捣杣瑡捧⁣捧杣慧条杣愠慧条慡捴⁡慴瑡杧杧慡††㔠㈵㰰牢ਾ戼㹲朊捧慣捴慣⁧捣捴捧瑧杣挠慧捡捧慣⁧慣条捡瑧条挠捣条杣杣⁴杣捧杣捣瑡††㔠㠵㰰牢ਾ戼㹲朊捣杧杣瑡⁡瑡杧捣杴瑣琠瑣杣捣慧⁡捡瑧瑴杧杴朠杣杧捡慣⁧杴捡慧条捧††㔠㐶㰰牢ਾ戼㹲琊杴条杣条⁧捧瑧捧慡慧琠捴杣慡慴⁣杣慣条杣捡愠杧捣慧捴⁡捴瑧杣杣瑣††㔠〷㰰牢ਾ戼㹲挊慣捧慧慡⁧杣瑧捣捴捧挠慧慡瑡慧⁣捣条条杣瑣朠捣杧慣捣⁴瑧捣慴杣条††㔠㘷㰰牢ਾ戼㹲琊杴慣杴瑡⁡慡慧条捡条琠慣慴条杴⁣杧杣捡慧慴朠捴瑡捧捣⁣捧捧捣捡杣††㔠㈸㰰牢ਾ戼㹲朊慡杧条瑣⁧捡杴杧瑴慧愠杧瑣瑣慣⁡杧捧瑡杣瑧挠慧杣瑣瑣⁣捣瑴瑡捧慧††㔠㠸㰰牢ਾ戼㹲挊捴瑣捧瑡⁴条慧条慣捧挠慣瑧条慴⁧瑧杴条捧杣琠杴条慣捣⁧捣捧杣慣条††㔠㐹㰰牢ਾ戼㹲朊慡杴瑧捧⁡杴瑣杣瑡杧挠慴杣条杧⁣条捡条慴条琠杧瑡瑴捡⁣瑡慡捴捣瑴††㘠〰㰰牢ਾ戼㹲愊瑡杴慴杣⁣捡杣瑣慡慡挠捧瑧捴条⁣捧慧捴捡杧挠条慣慧慣⁧瑧慡慡瑡杧††㘠㘰㰰牢ਾ戼㹲挊慡慣慡捣⁡捣瑣慡慡捡琠捧捧慧捴⁧杣捣杴瑡慡愠瑴瑴慡捣⁧慴杴慡慴捣††㘠㈱㰰牢ਾ戼㹲琊瑡捧慡捣⁡慧杧瑧捡条朠捣捡瑡慴⁣捣捣捡瑴慡琠捣捡杴慡⁧瑣捧慣瑴瑴††㘠㠱㰰牢ਾ戼㹲琊慣杴瑧瑴⁣捡慣捴捣条挠慧条杧捣⁡杴慣杴慣捴朠慡瑡慴瑡⁡杣捡慧慡瑴††㘠㐲㰰牢ਾ戼㹲愊瑡捡慧瑣⁣捡慴慴杧捧愠瑡⁴†††††††††††††††††††††㘠㘲㰴牢ਾ戼㹲㰊牢ਾ氦㭴ㄲ☰瑧※ㄠ㐳戼㹲☊瑬㈻ㄱ朦㭴†㘱㠹戼㹲☊瑬㈻㈱朦㭴†乄㱁牢ਾ氦㭴ㄲ☳瑧※䔠捳敨楲档慩挠汯㱩牢ਾ戼㹲☊瑬㐻〰朦㭴†㌱㰴牢ਾ瑡慧慡捴捣挠杣慣捣瑴⁣捴捧捣捧慡愠慡���杧杣⁴慴瑡捴慣捧挠杴慴捴瑴⁴†††〶戼㹲㰊牢ਾ瑴瑧瑧瑴杣挠杴杣瑣瑡⁣杧杴慣杧慣朠慡慧慡慣⁣杣瑧慡慣捣愠慣捧杣捣⁴††ㄠ〲戼㹲㰊牢ਾ慧慴瑴瑴瑡琠条杧捣捧⁴瑧瑴慡杴瑡朠杴慣慡捡⁧捣慡捡瑴瑴琠捣杧捡慣⁡††ㄠ〸戼㹲㰊牢ਾ慡慡捣瑴杴挠杣瑡捧杣⁴捧杣慡慣捧朠瑡捣捧杴⁡杴瑡捣瑴捧琠慧瑴瑡杣⁧††㈠〴戼㹲㰊牢ਾ瑡捧条慣慡愠捣条条杣⁧瑡瑴慧捴杴挠捧慣瑴捴⁧瑴慡杣捴慡琠瑴慣捣瑣⁧††㌠〰戼㹲㰊牢ਾ捣慧慡慧条朠杣条慡瑡⁡杴瑴捣捧慣朠条杧捧条⁴慣瑣捧捧慧愠慣慴瑴慧⁣††㌠〶戼㹲㰊牢ਾ杧捡瑴杴捧挠杧慴瑴慡⁣捧瑧捴慴捣朠慡慡慣捣⁧慡慡瑡杧慧琠捴捴杴瑴⁡††㐠〲戼㹲㰊牢ਾ捣捧杴捣杧愠捡瑣慴杴⁴杣杴捣杧捧朠慧杣瑣瑴⁣捧慧杧慴慴琠慴瑣杧慧⁣††㐠〸戼㹲㰊牢ਾ条瑴捡瑴慣挠慣杴瑴条⁧捡瑴捧杣慡愠捧杧捴捡⁴杧慧慴慡瑧挠捧杧瑡瑡⁧††㔠〴戼㹲㰊牢ਾ瑧杧捣慡瑴琠杴瑣慣杴⁡慡慴慧慣瑣琠捡杧捴瑡⁡瑴捣慣捡杧挠慡捣捧条⁴††㘠〰戼㹲㰊牢ਾ慴瑣瑡瑴慡朠捣捧捴捧⁡捡杣捣瑣捴琠瑴捧捣杴⁡杴瑧条条瑴愠瑣杧杣慣⁧††㘠〶戼㹲㰊牢ਾ慣杴慡杧杣愠杴捣捧瑧⁴慧条慣瑡捡挠杴捣捧慡⁡杴慣慡慡慧愠慴杴瑣慴⁣††㜠〲戼㹲㰊牢ਾ杴慧杴慧杣朠杴瑴慧慡⁡捣杴慣条捣朠慧慣捡条⁧慡慡捡捧瑧琠瑧慣慡瑣⁴††㜠〸戼㹲㰊牢ਾ慣杧瑡杧慴挠捣瑴瑣慣⁡捣捧慴瑣杧朠捡慧捴捧⁧瑡捡捧慣杣愠捣条条捴⁡††㠠〴戼㹲㰊牢ਾ杴杧杴慧条愠慴瑴捧慣⁣杣捣慡慡捧愠瑡捣慧瑡⁣慧捣杴捣捡琠慧慡瑴慴⁣††㤠〰戼㹲㰊牢ਾ杣杣捡瑣捧朠瑣瑣捧杣⁣杴杣捴杴捧琠杧慧瑴捴⁡捧捴捧捧杴朠瑡杧捡慡⁣††㤠〶戼㹲㰊牢ਾ捣捧条慣瑧琠慡瑡捡瑣⁴捡捧捡慣捣愠捧瑡杣慴⁣杣瑧杣瑡瑣朠慡慣捧瑣⁧††〱〲戼㹲㰊牢ਾ瑡瑧瑴慡慡琠杧慡慡慡⁴捣捴捧捣捧朠捣条慣慡⁧瑣捧杣慧慧琠慡杣杣瑡⁧††〱〸戼㹲㰊牢ਾ捧慡捡慣瑧愠杣慡捡捧⁴杧慣慡杴捣挠瑧慣慡慡⁧杧瑡杣慡慡愠慴捣杴杴⁧††ㄱ〴戼㹲㰊牢ਾ慡杣瑡慣捡愠条捧杴瑧⁡杴捣慧瑴捡朠捡瑣慧慡⁡瑧慣慴慡瑧朠杣慣瑡慣⁧††㈱〰戼㹲㰊牢ਾ瑴慡捣捧杧挠杣捣瑣瑧⁴捣杣瑣瑧捡朠捴慡杴杣⁧慣捧慧慡慧琠杣杣捣慡⁣††㈱〶戼㹲㰊牢ਾ慡慡杴捧慧挠杧杣捡慧⁡慡慣慣捴杴挠杴慣捡捣⁧捧杧捣杴慡挠捡慣杣捴⁧††㌱〲戼㹲㰊牢ਾ瑧慧慡条杴朠捧慡慣瑡⁧杧瑡捧捧慣愠瑡杧瑣杧⁧慣捣瑧慴慣朠杴杧捴捧⁧††㌱〸戼㹲㰊牢ਾ捡条慡杧瑡琠捡慡慡瑣⁡杣杧慣慡慡朠条瑧杧杣⁡杴慧慣瑴条挠杴捧捡瑴⁣††㐱〴戼㹲㰊牢ਾ瑣慧捣慡杴琠捴条慣慣⁣瑣瑡慧捣杧朠条慡慡条⁣杴瑧杧慡慡愠慴杴瑡瑧⁣††㔱〰戼㹲㰊牢ਾ条慣捣捡杣朠慡杣杧杧⁧杣捧杧杴捧朠慡慴捴慣⁴慴慣杧瑡杧挠瑴杴捧杴⁧††㔱〶戼㹲㰊牢ਾ捡慣瑡杧杣琠慧杣瑣慧⁡慡杴瑣杧瑡琠杴瑡瑣捧⁣杣慡条条慣愠捣瑧瑧慧⁣††㘱〲戼㹲㰊牢ਾ慡杴瑴捣杧挠慧杣杣捴⁣慧捣瑧慴条琠慣捧慡杣⁡杣慣捡捣捴愠捡慣慡慧⁧††㘱〸戼㹲㰊牢ਾ捧捡慡捣慣挠捡瑣慴⁡†††††††††††††††††††††††††㘱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