(57)【要約】【課題】本発明は、複数のマイクロウェルを有する細胞培養容器において、マイクロウェルの拡大画像を取得する際に、そのマイクロウェルと細胞の成育情報との対応付けの誤りを低減する成育情報管理システム及び成育情報管理プログラムを提供することを目的とする。【解決手段】本発明の成育情報管理システムは、複数のマイクロウェルを有する細胞培養容器と、１つのマイクロウェルを含む拡大検体画像と、前記マイクロウェルを識別する識別情報と、前記マイクロウェル内の細胞の成育情報とを少なくとも対応付けて格納するための記憶手段と、前記複数のマイクロウェルの撮影順序と前記識別情報とが関連づけられた情報に基づいて、前記拡大検体画像と前記識別情報と前記成育情報とを少なくとも対応付けて前記記憶手段に登録する登録手段と、を備える。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
複数のマイクロウェルを有する細胞培養容器と、
１つのマイクロウェルを含む拡大検体画像と、前記マイクロウェルを識別する識別情報と、前記マイクロウェル内の細胞の成育情報とを少なくとも対応付けて格納するための記憶手段と、
前記複数のマイクロウェルの撮影順序と前記識別情報とが関連づけられた情報に基づいて、前記拡大検体画像と前記識別情報と前記成育情報とを少なくとも対応付けて前記記憶手段に登録する登録手段と、
を備える成育情報管理システム。
【請求項２】
前記撮影順序に従って前記拡大検体画像を撮影する際のガイドを行う撮影支援手段をさらに備える、請求項１に記載の成育情報管理システム。
【請求項３】
前記複数のマイクロウェルの全てを含む画像情報から前記複数のマイクロウェルに関する配置情報を認識し、前記配置情報がマイクロウェルの設計情報と一致するかを判定するウェル配置判定手段をさらに備える、請求項１または２に記載の成育情報管理システム。
【請求項４】
あらかじめ決められた命名規則に従って前記拡大検体画像の画像ファイルのファイル名を変更する変更手段をさらに備える、請求項１〜３のいずれかに記載の成育情報管理システム。
【請求項５】
前記細胞培養容器は、前記マイクロウェルごとに対になって付された複数の第１識別子を有し、前記拡大検体画像は、前記第１識別子と前記マイクロウェルの対を含んでおり、
前記撮影順序に関連付けられた前記識別情報と、前記第１識別子に関連付けられた前記マイクロウェルを識別する識別情報とが一致するかを判定する判定手段をさらに備える、請求項１〜４のいずれかに記載の成育情報管理システム。
【請求項６】
複数のマイクロウェルを有する細胞培養容器用の成育情報管理処理を、演算手段及び記憶手段を少なくとも備える情報処理装置に実行させるためのプログラムであって、
前記演算手段に、
前記複数のマイクロウェルの撮影順序と前記マイクロウェルを識別する識別情報とが関連づけられた情報に基づいて、１つのマイクロウェルを含む拡大検体画像と前記識別情報と、前記マイクロウェル内の細胞の成育情報とを少なくとも対応付けて前記記憶手段に登録する登録処理を実行させるためのプログラム。
【請求項７】
前記演算手段に、
前記撮影順序に従って前記拡大検体画像を撮影する際のガイドを行う撮影支援処理をさらに実行させる、請求項６に記載のプログラム。
【請求項８】
前記演算手段に、
前記複数のマイクロウェルの全てを含む画像情報から前記複数のマイクロウェルに関する配置情報を認識し、前記配置情報がマイクロウェルの設計情報と一致するかを判定するウェル配置判定処理をさらに実行させる、請求項６または７に記載のプログラム。
【請求項９】
前記演算手段に、
あらかじめ決められた命名規則に従って前記拡大検体画像の画像ファイルのファイル名を変更する変更処理をさらに実行させる、請求項６〜８のいずれかに記載のプログラム。
【請求項１０】
前記細胞培養容器は、前記マイクロウェルごとに対になって付された複数の第１識別子を有し、前記拡大検体画像は、前記第１識別子と前記マイクロウェルの対を含んでおり、
前記演算手段に、前記撮影順序に関連付けられた前記識別情報と、前記第１識別子に関連付けられた前記マイクロウェルを識別する識別情報とが一致するかを判定する判定処理をさらに実行させる、請求項６〜９のいずれかに記載のプログラム。
【請求項１１】
複数のマイクロウェルを有する細胞培養容器から、１つのマイクロウェルを含む拡大検体画像を取得する画像取得手段を備える第１の情報処理装置と、
前記拡大検体画像と、前記マイクロウェルを識別する識別情報と、前記マイクロウェル内の細胞の成育情報とを少なくとも対応付けて格納するための記憶手段を備える第２の情報処理装置と、
を備え、
前記第１の情報処理装置は、前記複数のマイクロウェルの撮影順序と前記識別情報とが関連づけられた情報に基づいて、前記拡大検体画像と前記識別情報とを少なくとも対応付けて前記第２の情報処理装置に送信し、
前記第２の情報処理装置は、前記拡大検体画像から前記成育情報を算出し、前記拡大検体画像と前記識別情報と前記成育情報とを少なくとも対応付けて前記記憶手段に登録する、成育情報管理システム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞培養容器内の細胞（受精卵などの個別管理が必要な細胞）の成育情報を管理するシステム及びプログラムに関する。
【背景技術】
【０００２】
培養系で精子と卵子とを体外受精させて受精卵（接合子）を作製して、さらに受精卵を卵割、桑実胚、胚盤胞の段階を経て、透明帯から孵化した脱出胚盤胞の段階まで培養することが可能となり、この卵割から胚盤胞の段階にある受精卵を子宮に移植して産子を得る補助的生殖技術（ＡＲＴ）が、家畜領域のみならずヒトの不妊医療でも確立されている。
【０００３】
しかし、体外受精による妊娠成功率は必ずしも高くはなく、たとえばヒトにおいては、その妊娠成功率は、依然として２５〜３５％程度に留まっている。その原因の一つとして、培養において子宮への移植に適した良質な受精卵を得られる確率が高くないことが挙げられる。培養された受精卵は、専門家が顕微鏡で個別に観察することにより、子宮への移植に適した良質な受精卵であるか否か判別されている。
【０００４】
体外受精においては、容器中に培養液のドロップを作り、この中に受精卵を入れて体外培養するマイクロドロップ法が用いられることが多い。従来、このマイクロドロップ法には、細胞培養容器として、底面が単一平面であり、直径が３０〜６０ｍｍの細胞培養容器が使用され、細胞培養容器の底面に、培養液のドロップを、間隔をあけて複数個作製し、その中で細胞を培養する方法が使用されてきた。
【０００５】
通常の細胞培養容器でドロップを作成すると、受精卵自身の細胞運動やドロップ内の対流によって受精卵の位置が変わってしまい、その中で培養して観察していた受精卵の特定が難しくなるという問題があった。したがって、受精卵の位置を制御できる手段が求められていた。
【０００６】
受精卵の培養効果をより効率的にするためには受精卵同士の相互作用（パラクライン効果）を利用することが好ましいとされている。これらの効果を利用しつつ、受精卵の位置を制御する目的で、細胞培養容器の底面に受精卵のサイズと同程度のマイクロウェルを形成し、複数個のマイクロウェルを覆うように培養液のドロップを添加し、培養液で満たされたマイクロウェルに受精卵を配置して培養を行うシステムが知られている。それにより複数の受精卵の位置を制御して個別観察を可能としつつ、少量の培養液の中で複数の受精卵の培養を行うことができ、パラクライン効果を利用できる。
【０００７】
一方、個々の受精卵の成育状態を管理するためには、個々のマイクロウェルを識別するとともに、個々のマイクロウェル内の受精卵の成育状態を認識する必要がある。従来は、受精卵などの細胞毎の成育情報を管理する場合、人が培養箇所などで個々の細胞を見分けて成育情報と紐付けるか、あるいは、顕微鏡観察した際の細胞の画像から特徴量を抽出して個々の細胞を見分けて管理していた。
【０００８】
しかし、上記の管理方法では、人為的ミスは避けがたい。例えば、人が個々のマイクロウェルを見分ける際の見間違いがある。また、目算で検出した特徴量（細胞の直径など）を成育情報として登録する場合において、細胞の特徴に微妙な差しかないときに転記ミスなどが生じ、個々のマイクロウェルの識別と個々のマイクロウェル内の細胞の成育情報との関連付けの誤りが発生するおそれがあった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開第２０１１／００４５６８号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、複数のマイクロウェルを有する細胞培養容器において、マイクロウェルの拡大画像を取得する際に、そのマイクロウェルと細胞の成育情報との対応付けの誤りを低減する成育情報管理システム及び成育情報管理プログラムを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、複数のマイクロウェルを有する細胞培養容器において、複数のマイクロウェルの撮影順序とマイクロウェルを識別する識別情報とを関連付けることによって、上記課題が解決できることを見出した。
すなわち、本発明は以下の発明を包含する。
【００１２】
（１）複数のマイクロウェルを有する細胞培養容器と、
１つのマイクロウェルを含む拡大検体画像と、前記マイクロウェルを識別する識別情報と、前記マイクロウェル内の細胞の成育情報とを少なくとも対応付けて格納するための記憶手段と、
前記複数のマイクロウェルの撮影順序と前記識別情報とが関連づけられた情報に基づいて、前記拡大検体画像と前記識別情報と前記成育情報とを少なくとも対応付けて前記記憶手段に登録する登録手段と、
を備える成育情報管理システム。
【００１３】
（２）前記撮影順序に従って前記拡大検体画像を撮影する際のガイドを行う撮影支援手段をさらに備える、（１）に記載の成育情報管理システム。
【００１４】
（３）前記複数のマイクロウェルの全てを含む画像情報から前記複数のマイクロウェルに関する配置情報を認識し、前記配置情報がマイクロウェルの設計情報と一致するかを判定するウェル配置判定手段をさらに備える、（１）または（２）に記載の成育情報管理システム。
【００１５】
（４）あらかじめ決められた命名規則に従って前記拡大検体画像の画像ファイルのファイル名を変更する変更手段をさらに備える、（１）〜（３）のいずれかに記載の成育情報管理システム。
【００１６】
（５）前記細胞培養容器は、前記マイクロウェルごとに対になって付された複数の第１識別子を有し、前記拡大検体画像は、前記第１識別子と前記マイクロウェルの対を含んでおり、
前記撮影順序に関連付けられた前記識別情報と、前記第１識別子に関連付けられた前記マイクロウェルを識別する識別情報とが一致するかを判定する判定手段をさらに備える、（１）〜（４）のいずれかに記載の成育情報管理システム。
【００１７】
（６）複数のマイクロウェルを有する細胞培養容器用の成育情報管理処理を、演算手段及び記憶手段を少なくとも備える情報処理装置に実行させるためのプログラムであって、
前記演算手段に、
前記複数のマイクロウェルの撮影順序と前記マイクロウェルを識別する識別情報とが関連づけられた情報に基づいて、１つのマイクロウェルを含む拡大検体画像と前記識別情報と、前記マイクロウェル内の細胞の成育情報とを少なくとも対応付けて前記記憶手段に登録する登録処理を実行させるためのプログラム。
【００１８】
（７）前記演算手段に、
前記撮影順序に従って前記拡大検体画像を撮影する際のガイドを行う撮影支援処理をさらに実行させる、（６）に記載のプログラム。
【００１９】
（８）前記演算手段に、
前記複数のマイクロウェルの全てを含む画像情報から前記複数のマイクロウェルに関する配置情報を認識し、前記配置情報がマイクロウェルの設計情報と一致するかを判定するウェル配置判定処理をさらに実行させる、（６）または（７）に記載のプログラム。
【００２０】
（９）前記演算手段に、
あらかじめ決められた命名規則に従って前記拡大検体画像の画像ファイルのファイル名を変更する変更処理をさらに実行させる、（６）〜（８）のいずれかに記載のプログラム。
【００２１】
（１０）前記細胞培養容器は、前記マイクロウェルごとに対になって付された複数の第１識別子を有し、前記拡大検体画像は、前記第１識別子と前記マイクロウェルの対を含んでおり、
前記演算手段に、前記撮影順序に関連付けられた前記識別情報と、前記第１識別子に関連付けられた前記マイクロウェルを識別する識別情報とが一致するかを判定する判定処理をさらに実行させる、（６）〜（９）のいずれかに記載のプログラム。
【００２２】
（１１）複数のマイクロウェルを有する細胞培養容器から、１つのマイクロウェルを含む拡大検体画像を取得する画像取得手段を備える第１の情報処理装置と、
前記拡大検体画像と、前記マイクロウェルを識別する識別情報と、前記マイクロウェル内の細胞の成育情報とを少なくとも対応付けて格納するための記憶手段を備える第２の情報処理装置と、
を備え、
前記第１の情報処理装置は、前記複数のマイクロウェルの撮影順序と前記識別情報とが関連づけられた情報に基づいて、前記拡大検体画像と前記識別情報とを少なくとも対応付けて前記第２の情報処理装置に送信し、
前記第２の情報処理装置は、前記拡大検体画像から前記成育情報を算出し、前記拡大検体画像と前記識別情報と前記成育情報とを少なくとも対応付けて前記記憶手段に登録する、成育情報管理システム。
【発明の効果】
【００２３】
本発明により、複数のマイクロウェルを有する細胞培養容器において、マイクロウェルの拡大画像を取得する際に、そのマイクロウェルと細胞の成育情報との対応付けの誤りを低減することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】本発明の成育情報管理システムの一実施形態の構成図である。
【図２Ａ】細胞培養容器の第１の例の上面図を示す概略図である。
【図２Ｂ】細胞培養容器の第１の例における細胞収容部の拡大上面図を示す概略図である。
【図３Ａ】細胞培養容器の第１の例における細胞収容部の拡大上面図を示す概略図である。
【図３Ｂ】細胞培養容器の第１の例における細胞収容部の拡大上面図を示す概略図である。
【図４Ａ】細胞培養容器の第１の例における細胞収容部の拡大上面図を示す概略図である。
【図４Ｂ】マイクロウェルと識別子の対を顕微鏡で撮影した拡大画像の概念図である。
【図５Ａ】細胞培養容器の第２の例の上面図を示す概略図である。
【図５Ｂ】細胞培養容器の第２の例における細胞収容部の拡大上面図を示す概略図である。
【図６】細胞培養容器の第３の例における細胞収容部の拡大上面図を示す概略図である。
【図７】本発明の検体情報データベースの一実施形態を示す概略図である。
【図８Ａ】本発明のウェルＩＤ対応テーブルの第１の例を示す概略図である。
【図８Ｂ】本発明のウェルＩＤ対応テーブルの第２の例を示す概略図である。
【図８Ｃ】本発明のウェルＩＤ対応テーブルの第３の例を示す概略図である。
【図９】本発明の第２識別子対応テーブルの一実施形態を示す概略図である。
【図１０】本発明のウェル設計情報テーブルの一実施形態を示す概略図である。
【図１１】本発明の成育情報データベースの一実施形態を示す概略図である。
【図１２】本発明の判定プロファイルテーブルの一実施形態を示す概略図である。
【図１３】本発明の輪郭線抽出処理の一実施形態を説明する概念図である。
【図１４】本発明の第１識別子認識処理部の一実施形態の処理内容を説明する概念図である。
【図１５】本発明の第１識別子認識処理部の一実施形態の処理内容を説明する概念図である。
【図１６】本発明の特徴量算出処理部の一実施形態の処理内容を説明する概念図である。
【図１７】本発明の特徴量算出処理部の一実施形態の処理内容を説明する概念図である。
【図１８】胚盤胞を簡略的に示す図である。
【図１９】内部細胞塊と栄養外胚葉の形態的評価を説明する図である。
【図２０】前核期胚の形態的評価を説明する図である。
【図２１】経過時間に応じたプロファイルの切替えを説明する図である。
【図２２】本発明の成育情報管理システムの一実施形態の処理の流れを説明するフローチャートである。
【図２３】本発明の成育情報管理システムの特徴量算出処理の流れを説明するフローチャートである。
【図２４】成育情報データベースの別の実施形態を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
以下、本発明をヒトの受精卵に適用した実施例について説明する。例えば、ヒトの受精卵を培養する場合には、通常、培養しながら受精卵の成育段階が判定され、これにより、子宮への移植に適した良質な受精卵であるか否かが判定される。本発明の成育情報管理システムは、複数のマイクロウェルの撮影順序とマイクロウェルを識別する識別情報とを関連付けることにより、そのマイクロウェルと細胞の成育情報とを対応付けて、間違いのない成育情報の管理を実現する。
【００２６】
図１は、本発明の成育情報管理システムの一実施形態の構成図を示す。成育情報管理システム１は、細胞培養容器１００と、画像取得装置１１０と、第２識別子読取装置１２０と、成育情報管理装置１３０とから構成される。以下、成育情報管理システム１の各構成要素について説明する。
【００２７】
図１に示すように、細胞培養容器１００は、第１識別子１０１と、第２識別子１０２とを有する。図２Ａは細胞培養容器１００の第１の例の上面図を示し、図２Ｂは、図２Ａの細胞収容部の拡大上面図である。本実施例の細胞培養容器１００は、底部１０３と側壁１０４とを有し、底部１０３に、細胞を収容するための複数のマイクロウェル１０５が配置されてなる細胞収容部１０６を有する。本例では、底部１０３の形状は上面視で円形である。側壁１０４は底部１０３の外縁を囲うように形成される。なお、底部１０３の形状は特に制限されず、三角形および四角形等の多角形の形状でもよく、円に類似する形状（略円形、楕円形および略楕円形を含む）でもよい。
【００２８】
底部１０３と反対側は開口しており、開口部の形状は好ましくは底部１０３の形状と同一である。図２Ａに示すように、一例として、開口部が円形で、開口幅が、好ましくは３０〜６０ｍｍ、特に３５ｍｍ程度のものが用いられる。これは従来の細胞培養に用いられている細胞培養容器と同等のサイズであり、汎用の細胞培養容器から簡便に作製できること、および既存の培養装置等に適合しやすいことから、上記のようなサイズのものが好ましい。また、細胞培養容器１００は、通常の細胞培養容器と同様に蓋を有していてもよい。
【００２９】
マイクロウェル１０５は、壁面と開口部を有する凹部を形成し、細胞培養容器１００の底部１０３に直接窪みとして設けられた凹部でもよいし、底部１０３から突出した部材により形成される凹部でもよい。図２Ａの例では、底部１０３の中央部に窪みを形成することにより、細胞収容部１０６が形成されている。細胞収容部１０６の断面はＶ字状である。
【００３０】
高倍率でマイクロウェル１０５を撮影し、これを繰り返して複数の対を撮影する場合、撮影する際の細胞培養容器１００の向きを常に一定とする必要がある。撮影する際の細胞培養容器１００の向きを常に一定とする観点から、細胞培養容器１００が、細胞培養容器１００の向きを特定するための構成を備えていることが好ましい。例えば、図２Ａに示すように、拡大検体画像上で上下方向の「下方向」を認識するために、底部１０３に横方向に延びるバー模様１０９が付されている。バー模様１０９は、底部１０３に対して凸形状で形成されており、例えば、バー模様の幅は、０．５〜２ｍｍである。また、側壁１０４に凹部１０９ａを設けて、細胞培養容器１００の側壁１０４を指で触ることによって、細胞培養容器１００の向きを認識できるようになっている。
【００３１】
また、底部１０３には、円形の第１の天地マーク１０７が付されている。第１の天地マーク１０７もまた、細胞培養容器１００の天地（拡大検体画像上での上下方向）を認識するために付されるものである。第１の天地マーク１０７は、小さすぎると目視しづらくなり、大きすぎると細胞収容部１０６の邪魔になるため、好ましくは、１〜５ｍｍの大きさ（直径）である。また、第１の天地マーク１０７の深さは、目視可能であり、かつ観察時に入れるオイル（培地液の蒸発を防ぐためのオイル）を無駄にしないという観点から、好ましくは、０．０１〜０．０５ｍｍである。
【００３２】
第１の天地マーク１０７は表面加工によって形成されている。図２Ａにおいて、第１の天地マーク１０７の黒色部分は荒く表面加工されており、やや不透明に見える。一方、第１の天地マーク１０７の白色部分は、平らに形成されており、透明に見える。このように円形の第１の天地マーク１０７を見た際に模様と思えるような荒い部分と平らな部分を付けることで、光の加減で見にくくなる確率を減らす。例えば、平らな部分は、特定方向に対する反射光が強くなるため、光源によっては平らな方が極端に見やすい場合がある。また、荒い部分は、どのような光源でもある程度散乱するので光源条件によらず均一に見えるため、円形の第１の天地マーク１０７以外の部分との見え方の差を安定して確保しやすい場合がある。なお、第１の天地マーク１０７のための表面加工は、ユーザの細胞培養容器１００の利用環境を加味して、円形の全体に同一の処理を施してもよいし、図２Ａのように、荒く表面加工した部分と平らな部分とを組み合わせてもよい。
【００３３】
また、図２Ａの例では、第１の天地マーク１０７は、底部１０３に４つ付されている。４つの第１の天地マーク１０７は、細胞収容部１０６を囲む正方形の４つの頂点に１つずつ配置されている。例えば、４つの第１の天地マーク１０７は、上述したバー模様１０９を平行移動した直線と、第１の天地マーク１０７の重心と底部１０３の中心とを通る直線とがなす角度が４５度、１３５度、２２５度、３１５度の位置に付される。細胞培養容器１００の天地の調整はバー模様１０９で主に行われるが、その場合でも数度斜めになってしまう場合がある。細胞収容部１０６を囲む正方形の４つの頂点に１つずつ第１の天地マーク１０７を配置することで、数度の傾きも認識し易くなる。
【００３４】
さらに、第２の天地マーク１０８を底部１０３に付してもよい。図２Ａの例では、バー模様１０９に沿って、かつ、側壁１０４の凹部１０９ａを挟むように、２つの第２の天地マーク１０８が付されている。第２の天地マーク１０８も、第１の天地マーク１０７と同様に表面加工が施されている。なお、第２の天地マーク１０８は、第１の天地マーク１０７よりも小さい直径で形成されている。光の反射具合で第１の天地マーク１０７及び第２の天地マーク１０８の両方を認識することにより、バー模様１０９を利用しなくても、細胞培養容器１００の向きを調整することが容易になる。
【００３５】
図２Ｂに示すように、細胞収容部１０６は、上面視で円形形状である。細胞収容部１０６の直径は、２〜５ｍｍが好ましい。細胞収容部１０６の大きさが小さいと、マイクロウェル１０５以外の余白が少なく、操作が難しくなる可能性がある。また、大きすぎると、培地液が多く必要になり、無駄になる培地液の量も多くなる。細胞収容部１０６内において、複数のマイクロウェル１０５は、正方格子状又は最密充填状に配置されていることが好ましい。正方格子状又は最密充填状に配置することにより、細胞培養容器１００の底部１０３における各マイクロウェル１０５の位置の特定が容易になる。また、図２Ｂの例では、第１識別子１０１との組み合わせで、各マイクロウェル１０５の位置の特定がさらに容易になり、自動化処理に適用しやすい。
【００３６】
複数のマイクロウェル１０５の配置は、正方格子又は最密充填の配置から、一部が欠落したような配置でもよい。例えば、８個以上のマイクロウェルが、平行四辺形の辺上および頂点上に等しいピッチで配置され、細胞収容部を構成している場合が挙げられる。平行四辺形には、正方形、長方形、菱形およびそれ以外の平行四辺形が包含される。図２Ｂに示すように、本例の細胞培養容器１００では、８個のマイクロウェルが、正方形の４つの頂点に１つずつ配置され、かつ４つの辺の中点に１つずつ配置されている。これにより、受精卵等の細胞を、１のマイクロウェル１０５に１個ずつ配置して、複数の細胞を培養することができる。
【００３７】
マイクロウェル１０５の開口部の外縁が形成する図形は特に制限されず、三角形および四角形等の多角形の形状、円（円形、略円形、楕円形および略楕円形を含む）の形状、あるいは、Ｕ字の形状等でもよいが、好ましくは円形である。なお、マイクロウェル１０５は、マイクロウェル１０５の中心に向かって階段状の凹部を形成するような形状でもよい。細胞などが中心位置へ流れ易くなるためである。図２Ｂに示すように、本例では、マイクロウェル１０５の開口部の外縁が形成する図形は円形である。細胞培養容器１００の上面視における各マイクロウェル１０５の開口部の面積は、好ましくは３ｍｍ２以下、より好ましくは１ｍｍ２以下、さらに好ましくは０．５ｍｍ２以下であり、好ましくは０．０３ｍｍ２以上である。上面視における各マイクロウェル１０５の開口部の面積は、換言すれば、マイクロウェル１０５の開口部の外縁が形成する図形の面積である。
【００３８】
本発明の細胞培養容器１００により受精卵を培養する場合、胚盤胞の段階まで培養することが望ましいため、円形の開口部の直径は、胚盤胞の段階の細胞の最大寸法より大きいものであることが望ましい。また、マイクロウェルの開口部の外縁が円形である場合、開口幅は、マイクロウェル間のピッチより小さい。したがって、マイクロウェルの開口部の開口幅（マイクロウェルの開口部の外縁が円形である場合はその直径）は、好ましくは０．１ｍｍ以上、より好ましくは０．１５ｍｍ以上、さらに好ましくは０．２ｍｍ以上であり、好ましくは０．６ｍｍ未満、さらに好ましくは０．４ｍｍ未満である。また、上記マイクロウェルの開口部の開口幅は、Ｘ＋ｍ（ここでＸは細胞の最大径を表す）と規定することもできる。ここで、ｍは、好ましくは０．０１ｍｍ以上、さらに好ましくは０．０２ｍｍ以上である。また、マイクロウェル間のピッチは好ましくは１ｍｍ以下、より好ましくは０．８ｍｍ以下、さらに好ましくは０．６ｍｍ以下である。
【００３９】
マイクロウェル１０５の深さは、マイクロウェルの開口部から最深部までを垂直に測った深さをいい、好ましくは０．０５〜０．５ｍｍである。マイクロウェルの深さは、浅過ぎると、細胞培養容器の輸送時や細胞の分裂時などに細胞が動き、細胞がマイクロウェルの範囲外に出てしまう恐れがあるため、確実に細胞をマイクロウェル内に保持できるように設定される。例えば、細胞をマイクロウェル内に保持するには、深さが細胞の最大径の１／３以上であることが好ましく、１／２以上であることがさらに好ましい。一方、深過ぎると、マイクロウェル内に培養液や細胞を導入することが難しくなるため、細胞をマイクロウェル内に保持しつつ、深過ぎない値になるよう適宜設定される。例えば、深さの上限をマイクロウェルの開口部の開口幅に対して３倍以下とすることができる。さらに、培養液の導入を容易にするためには、深さはマイクロウェルの開口幅の１倍以下であることが好ましく、１／２以下であることが特に好ましい。
【００４０】
複数のマイクロウェル１０５の近傍には、それぞれ、第１識別子１０１がマイクロウェル１０５ごとに対になって付されており、第１識別子１０１のその対となるマイクロウェル１０５に対する相対位置が、第１識別子１０１とマイクロウェル１０５の対ごとに異なることを特徴とする。第１識別子１０１のマイクロウェル１０５に対する相対位置が、マイクロウェル１０５ごとに異なることによって、マイクロウェル１０５と第１識別子１０１の対を１組観察するだけで、複数のマイクロウェル１０５における当該マイクロウェルの位置を特定することができる。第１識別子１０１は、各マイクロウェル１０５の近傍に付されていることから、高倍率で観察する際に、マイクロウェル１０５から観察位置を大きくずらす必要はなく、迅速な観察が可能になる。さらに、高倍率で細胞を撮影した際も、拡大検体画像には、マイクロウェル１０５とともに第１識別子１０１が撮影されることから、拡大検体画像に対して手作業で情報を付与する必要がなく、煩雑な作業を回避でき、作業者のミスによる関連付けの誤りが発生するリスクも回避できる。
【００４１】
各マイクロウェル１０５と対になって付される第１識別子１０１の位置は、マイクロウェル１０５の内部、外部を問わないが、好ましくはマイクロウェル１０５の外部に配置される。マイクロウェル１０５の内部に設けると受精卵の観察を阻害する可能性や、受精卵の培養性能に影響を及ぼす可能性があるためである。好ましくは、図２Ｂに示すように、第１識別子１０１は、複数配置されたマイクロウェル１０５の外側で、かつ、マイクロウェル１０５の近傍に付される。第１識別子１０１のサイズは、好ましくはマイクロウェル１０５のサイズより小さい。より具体的には、細胞培養容器の上面視における第１識別子の面積は、３００００μｍ２以下、好ましくは１５０００μｍ２以下、より好ましくは８０００μｍ２以下であり、好ましくは１００μｍ２以上である。
【００４２】
また、第１識別子１０１は、どのマイクロウェル１０５と対になっているかが明らかなように、対となるマイクロウェル１０５の十分近傍に付されることとなる。したがって、各第１識別子１０１は、好ましくは、すべてのマイクロウェル１０５の中で、対となるマイクロウェル１０５との距離が最も小さくなるように付される。第１識別子１０１とマイクロウェル１０５との距離は、マイクロウェル１０５の開口部が形成する図形の重心と第１識別子１０１が形成する図形の重心との距離として定義される。したがって、第１識別子１０１とマイクロウェル１０５との距離は、好ましくはマイクロウェル１０５の開口幅の１／２より大きく、マイクロウェル１０５間のピッチよりも小さい。具体的には、識別子とマイクロウェルとの距離は、好ましくは５００μｍ以下、より好ましくは４００μｍ以下、さらに好ましくは３００μｍ以下である。
【００４３】
図２Ｂに示すように、例えば、第１識別子１０１の形状はドット形状である。なお、第１識別子１０１が形成する図形の形状は、特に制限されない。図形の例として、文字、数字、多角形などの図形、矢印、線（バー）、ドット、ＱＲコード、バーコードおよびこれらの組合せが挙げられる。受精卵等の細胞を個別に収容するのに好適な微小なマイクロウェル１０５の近傍に、好ましくは当該マイクロウェル１０５よりサイズの小さい第１識別子１０１を付すことから、第１識別子１０１の形状は、成形が容易な単純な形状であることが好ましい。細胞培養容器１００は、射出成型で製造される場合が多いため、あまり複雑な形状を微小なサイズで成形することが困難だからである。第１識別子１０１の形状は単純であっても、すなわち第１識別子１０１自体が持つ情報が少なくても、マイクロウェル１０５との相対位置という情報を付加することによって、各マイクロウェル１０５の位置を特定することができる。また、第１識別子１０１を複雑な形状とすると、細胞培養容器１００の製造時における歩留りが低下するおそれがあるが、単純な形状とすることで、歩留りの低下を回避でき、製造コストを下げることができる。例えば、図２Ｂの例では、第１識別子１０１は、凸状に形成されており、その高さは、０．０１〜０．０５ｍｍが好ましい。第１識別子１０１の高さは低すぎると目視しづらくなるが、高すぎると培地の流れや受精卵の扱い時の邪魔になる可能性があるためである。
【００４４】
また、図２Ｂに示すように、複数のマイクロウェル１０５の近傍には、それぞれ、文字列（アルファベット）１１１がマイクロウェル１０５ごとに対になって付されている。マイクロウェル１０５に対する文字列１１１が、マイクロウェル１０５ごとに異なることによって、マイクロウェル１０５の位置を識別することができる。文字列１１１は、凸状に形成されており、その高さは、０．０１〜０．０５ｍｍが好ましい。文字列１１１の高さは低すぎると目視しづらくなるが、高すぎると培地の流れや受精卵の扱い時の邪魔になる可能性があるためである。
【００４５】
また、文字列１１１の大きさは、０．１〜０．５ｍｍ角内に収まる大きさが好ましい。文字列１１１の大きさが小さすぎると目視しづらくなるが、大きすぎると培地の流れや受精卵の扱い時の邪魔になる可能性がある。また、文字列１１１を大きく形成してしまうと、マイクロウェル１０５の配置数などに影響するためである。文字列１１１の間の間隔（例えば、ＡとＢとの間の間隔）は、０．３〜０．７ｍｍが好ましい。間隔が小さいと文字列１１１の見分けが難しくなり、間隔が大きすぎると、どのマイクロウェル１０５に対応する文字列であるかを認識しづらくなる。なお、マイクロウェル１０５に付されるものは、アルファベットなどの文字に限定されず、数字、多角形などの図形、記号などが挙げられる。
【００４６】
さらに、複数のマイクロウェル１０５の中央の位置には、記号（ハート）１１２が付されている。中央部に記号１１２があった場合、画像取得装置１１０で低倍率で観察したときに複数のマイクロウェル１０５に囲まれた中心位置を認識し易くなる。これにより、高倍率で観察したときの位置合わせなどが容易になる。
【００４７】
図３Ａ及び図３Ｂは、ドット状の第１識別子１０１とマイクロウェル１０５との関係をより分かり易く説明する図である。これらの図では、説明のために、アルファベットの文字列や中央部の図形は省略されている。図３Ｂに示すように、本例では、第１識別子１０１のその対となるマイクロウェル１０５に対する角度が異なる。第１識別子１０１のマイクロウェル１０５に対する角度αについては、以下のように定義することができる。例えば図３Ａ及び図３Ｂに示す例において、角度αは、上面視において細胞培養容器１００の底部１０３に一本の直線Ｘを引いた場合に、当該直線Ｘに平行な直線と、マイクロウェル１０５の重心と第１識別子１０１の重心とを通る直線Ｙとがなす角度と定義することができる。そして、角度αを、マイクロウェル１０５と第１識別子１０１の対ごとに異なるよう配置することで、複数のマイクロウェル１０５における特定のマイクロウェル１０５の位置を特定することができる。
【００４８】
また、図４Ａ及び図４Ｂは、第１識別子１０１の別の例である。この例では、８個のマイクロウェル１０５が、正方形の４つの頂点に１つずつ配置され、かつ４つの辺の中点に１つずつ配置され、細胞収容部１０６を構成している。そして、線状の第１識別子１０１が、各マイクロウェル１０５の近傍に１つずつ付されている。
【００４９】
図４Ｂは、それぞれ図４Ａにおける位置Ａ、Ｅ、Ｈのマイクロウェル１０５と第１識別子１０１の対の顕微鏡画像を表す。この例では、第１識別子１０１のマイクロウェル１０５に対する角度α及び／又は線（バー）の長さが、対ごとに異なることから、一対のマイクロウェル１０５と第１識別子１０１を観察するだけで、各マイクロウェル１０５の位置を特定することができる。さらに、いずれの第１識別子１０１も、同方向を向いた線状であり、かつマイクロウェル１０５に対して右側に付されていることから、高倍率で撮影されたマイクロウェル１０５と第１識別子１０１の一対の拡大画像においても、第１識別子１０１の位置と線（バー）の向きに基づいて、撮影時の細胞培養容器の向きを特定できる。ここでいう「向き」は自転角度であって、角度αとは異なる。例えば、図３Ａ及び図３Ｂの例においてドットを線（バー）に置き換えた場合、線がドットの位置で直線Ｘに対して回転（自転）する角度、すなわち直線Ｘと識別子の線がなす角度をさす。この向きの情報量を使って、細胞培養容器の向きを特定することができる。
【００５０】
図５Ａは細胞培養容器１００の第２の例の上面図を示し、図５Ｂは、図５Ａの細胞収容部の拡大上面図である。本例の細胞培養容器１００は、第１の例と同様に、底部１０３と側壁１０４とを有し、底部１０３に、細胞を収容するための複数のマイクロウェル１０５が配置されてなる細胞収容部１０６を有する。本例でも、底部１０３の形状は円形である。図５Ａの例では、３つの天地マーク１２１が付されており、「＋」の形状である。天地マーク１２１の大きさは、１〜５ｍｍ角内に収まる大きさが好ましい。天地マーク１２１が小さすぎると目視しづらくなり、大きすぎると細胞収容部１０６の邪魔になるためである。
【００５１】
また、天地マーク１２１は、凸状に形成されており、その高さは０．０１〜２ｍｍが好ましい。天地マーク１２１の高さが低すぎると目視がしづらくなり、高すぎると作業の邪魔になる可能性があるためである。３つの天地マーク１２１は、細胞収容部１０６を囲むように配置され、細胞培養容器１００の天地（拡大検体画像上での上下方向）の「下方向」に対応する部分には、天地マークは付されていない。したがって、天地マークが付されてない方向を操作者の手前に配置することで、細胞培養容器１００の向きを一定に保つことが可能となる。
【００５２】
図５Ｂに示すように、細胞収容部１０６において、２５個のマイクロウェル１０５が５×５の正方格子状に配置されている。この例では、複数のマイクロウェル１０５に第１の例のような第１識別子１０１は付されていない。一方、正方格子状のマイクロウェル１０５の各行が認識できるように、正方格子状のマイクロウェル１０５の左側に、Ａ〜Ｅのアルファベットが各行に対応するように付されている。また、正方格子状のマイクロウェル１０５の各列が認識できるように、正方格子状のマイクロウェル１０５の上側に、１〜５の数字が各列に対応するように付されている。このような構成でも、以下で説明する本発明の処理を適用することが可能である。なお、行及び列を認識するために付されるものは、アルファベットなどの文字や数字に限定されず、多角形などの図形、記号などが挙げられる。
【００５３】
なお、図６は、細胞収容部の第３の例の拡大上面図である。細胞収容部１０６において、２５個のマイクロウェル１０５が５×５の正方格子状に配置されている。この例では、行及び列を認識するための文字及び数字が付されていない。このような構成でも、以下で説明する本発明の処理を適用することが可能である。
【００５４】
次に、第２識別子１０２について説明する。細胞培養容器１００には、第２識別子１０２が付されている。第２識別子１０２の例として、文字、数字、多角形などの図形、ＱＲコード、バーコード、ＩＣタグ、ドットパターン（コード化パターン）およびこれらの組合せが挙げられる。ここで、ドットパターン（コード化パターン）の技術について簡単に説明する。ドットパターンは、例えば、電子ペン用の専用ペーパーの表面に印刷される。ドットパターンは、約０．３ｍｍ間隔の格子状の上に配置された縦横６×６＝３６ドットの組合せである。縦横６×６個のドットが、専用ペーパー上のどの部分から６×６ドットを取ってもユニークなパターンとなるように配置されている。これら３６個のドットにより形成されるドットパターンは位置座標（例えば、そのドットパターンがその専用ペーパー上のどの位置にあるのか）と専用ペーパー毎に固有の識別子であるドットパターンアドレスを保持している。各ドットは、格子の基準位置からのシフト方向によって、予め決められた情報に対応付けられる。すなわち、この技術によれば、各ドットの格子の基準位置からのシフト方向を、文字、数字などに対応させることにより、ドットパターンを第２識別子１０２に対応させることが可能となる。なお、ドットパターンの撮影は、カメラを内蔵した電子ペン等の読取手段によって行うことができる。ここで説明したドットパターンの技術については、特開２００４−２５２６０７号公報や特開２００４−０５４３７５号公報にも記載されており、これらの文献に記載の技術を利用することができる。第２識別子１０２は、細胞培養容器１００の側壁１０４あるいは底部１０３に付されてもよい。また、細胞培養容器１００が蓋を備える場合には、第２識別子１０２は蓋に付されてもよい。第２識別子１０２は、細胞培養容器１００毎に異なり、第２識別子１０２を認識することにより、細胞培養容器１００を特定することができる。
【００５５】
次に、成育情報管理システム１の他の構成要素について説明する。画像取得装置１１０は、細胞培養容器１００のマイクロウェル１０５内の細胞及び第１識別子１０１を含む拡大検体画像を撮影するものであり、例えば、顕微鏡である。画像取得装置１１０として、例えば、１／２インチのＣＣＤ素子、４、１０、２０倍の対物レンズを備えたものがよく用いられる。
【００５６】
第２識別子読取装置１２０は、細胞培養容器１００の第２識別子１０２を読み取る装置である。第２識別子読取装置１２０については、第２識別子１０２に対応した装置を採用すればよく、例えば、公知の文字・図形認識装置、カメラ、バーコードスキャナ、ＩＣタグリーダーなどが挙げられる。
【００５７】
成育情報管理装置１３０は、パーソナルコンピュータやワークステーションなどの情報処理装置によって構成されている。この情報処理装置は、中央演算処理部（ＣＰＵ：Central Processing Unit）などのプロセッサと、メモリやハードディスクなどの記憶装置１３１と、キーボード、マウスなどの入力部１３２と、ディスプレイなどの出力部１３３とを備えている。なお、図１では、成育情報管理装置１３０を１つの情報処理装置として示しているが、これに限定されない。成育情報管理装置１３０の構成要素をネットワーク上の複数の情報処理装置に分散して構成してもよい。また、各種テーブル及びデータベースなどは、他の情報処理装置あるいはネットワーク上のサーバに格納されてもよい。
【００５８】
次に、本実施形態の成育情報管理システム１で使用される各種情報について説明する。記憶装置１３１には、検体情報データベース１４１と、ウェルＩＤ対応テーブル１４２、第２識別子対応テーブル１４３と、ウェル設計情報テーブル１４４と、成育情報データベース１４５と、判定プロファイルテーブル１４６とが格納されている。なお、これら各種テーブル及びデータベースについて、以後の説明では「テーブル」構造を用いて説明するが、必ずしもテーブルによるデータ構造で表現されていなくても良く、他のデータ構造で表現されていても良い。そのため、データ構造に依存しないことを示すために、以下では、各種テーブル及びデータベースを単に「情報」と呼ぶことがある。
【００５９】
図７は、検体情報データベース１４１の一例である。検体情報データベース１４１は、細胞培養容器内の細胞（受精卵などの個別管理が必要な細胞）に関する各種情報を格納する。検体情報データベース１４１は、患者ＩＤ７０１、施術日時７０２と、細胞培養容器ＩＤ（容器ＩＤ）７０３と、ウェルＩＤ７０４とを構成項目として含む。患者ＩＤ７０１は、患者を一意に識別する番号である。患者ＩＤ７０１を、細胞培養容器ＩＤ７０３及びウェルＩＤ７０４に対応付けることにより、ヒトの不妊治療の際などのＩＤ管理に適用が可能となる。施術日時７０２は、施術日時を示す数字の列である。後述するが、受精卵の成育段階を判定する場合、施術日時からの経過時間に基づいて判定する場合がある。このような場合、検体情報データベース１４１において施術日時などの基準となる情報を管理することが好ましい。細胞培養容器ＩＤ７０３は、細胞培養容器１００を一意に識別する番号である。また、ウェルＩＤ７０４は、細胞培養容器１００内の各マイクロウェル１０５の位置を識別するＩＤである。ウェルＩＤ７０４によって、マイクロウェル１０５内部に配置した細胞（受精卵など）の検体の情報を管理することができる。
【００６０】
図８Ａは、ウェルＩＤ対応テーブル１４２の第１の例である。図８Ａは、図２Ｂで示した例に対応するテーブルの一例である。ウェルＩＤ対応テーブル１４２では、以下で説明するように撮影順序とウェルＩＤとが関連付けられているため、これを用いることにより、ウェルＩＤと拡大検体画像と細胞の成育情報とを対応付けて記録することが可能となる。ウェルＩＤ対応テーブル１４２は、ウェルＩＤ８０１と、第１識別子１０１とマイクロウェル１０５との相対位置を示す情報８０２（ここでは、第１識別子１０１のマイクロウェル１０５に対する角度α）と、マイクロウェル１０５の位置を示す情報８０３と、撮影順序８０４とを構成項目として少なくとも含む。なお、撮影順序８０４の情報は、あらかじめ登録されていてもよいし、拡大検体画像の撮影の度に操作者に入力させて、一時的に登録するような形式でもよい。また、ウェルＩＤ対応テーブル１４２は、マイクロウェル１０５の位置を示す情報８０３とは別に、ある所定の位置を基準としてマイクロウェル１０５の位置を示すＸＹ座標などの情報を格納してもよい。この情報は、撮影順序に従った自動撮影などの機能に用いることができる。また、ウェルＩＤ対応テーブル１４２は、各マイクロウェル１０５と対となる第１識別子１０１の設計情報を含んでもよい。第１識別子１０１の設計情報は、第１識別子１０１の形状、サイズ、位置などの情報である。
【００６１】
なお、図８Ａの例において、角度αの値は所定の幅を持たせて設定されてもよい。後述する成育情報管理装置１３０における画像処理において誤差が生じる可能性があるためである。また、図８Ａでは、角度αの情報のみを示しているが、第１識別子１０１が線（バー）の場合、第１識別子１０１とマイクロウェル１０５との相対位置を示す情報（角度α）及び／又は第１識別子１０１自体が有する情報（線の長さや向きなど）を格納してもよい。また、上述したように、第１識別子１０１としては、文字、数字、多角形などの図形、矢印、線（バー）、ドット、ＱＲコード、バーコードおよびこれらの組合せが挙げられる。したがって、ウェルＩＤ対応テーブル１４２には、これらに対応する第１識別子１０１に関する情報が格納されていればよい。
【００６２】
図８Ｂは、ウェルＩＤ対応テーブル１４２の第２の例である。図８Ｂは、図５Ｂで示した例に対応するテーブルの一例である。したがって、本例では、ウェルＩＤ対応テーブル１４２は、第１識別子１０１の情報を保持していない。図８ＢのウェルＩＤ対応テーブル１４２は、ウェルＩＤ８０１と、マイクロウェル１０５の位置を示す情報８０３と、撮影順序８０４とを構成項目として含む。また、図５Ｂに対応するように、マイクロウェル１０５の位置を示す情報８０３は、アルファベットと数字の組み合わせで定義される。
【００６３】
図８Ｃは、ウェルＩＤ対応テーブル１４２の第３の例である。図８Ｃは、図６で示した例に対応するテーブルの一例である。図８ＣのウェルＩＤ対応テーブル１４２は、ウェルＩＤ８０１と、マイクロウェル１０５の位置を示す情報８０３と、撮影順序８０４とを構成項目として含む。図６では、マイクロウェル１０５の周囲に文字列等が付されていないため、本例では、マイクロウェル１０５の位置を示す情報８０３は、５×５の正方格子の中の位置で定義される。このような構成とすることで、マイクロウェル１０５の周囲に文字列等が付されていない場合でも、撮影順序に従ってウェルＩＤと関連付けを行うことができる。また、撮影順序に従って拡大検体画像の取得位置（マイクロウェル１０５の位置）をガイドすることが可能となる。
【００６４】
上記の通り、ウェルＩＤ対応テーブル１４２の複数の例を説明したが、これらの各テーブルは、後述する細胞培養容器のタイプの情報に紐付けられてもよい。医療の現場では、異なるタイプの細胞培養容器が使用される可能性がある。したがって、上述のように各細胞培養容器のタイプに従ってウェルＩＤ対応テーブル１４２を保持することが好ましい。成育情報管理装置１３０における処理では、細胞培養容器のタイプが決定された後に、対応するウェルＩＤ対応テーブル１４２が選択されることになる。
【００６５】
図９は、第２識別子対応テーブル１４３の一例である。第２識別子対応テーブル１４３は、細胞培養容器ＩＤ９０１と、第２識別子情報９０２と、容器タイプ９０３とを構成項目として少なくとも含む。このテーブルを用いて、細胞培養容器１００に付された第２識別子１０２から各細胞培養容器１００を特定することができる。なお、容器タイプ９０３は、細胞培養容器のタイプを示す情報である。上述したように、細胞培養容器ごとにマイクロウェル１０５の配列や第１識別子１０１の有無などが変わる場合がある。したがって、容器タイプ９０３の情報を持つことにより、容器タイプ９０３に対応するマイクロウェルの設計情報（マイクロウェルのアライメントや数などの情報）を選択することができる。
【００６６】
図１０は、ウェル設計情報テーブル１４４の一例である。ウェル設計情報テーブル１４４は、容器タイプ１００１と、マイクロウェル１０５のアライメント（配置）の情報１００２と、マイクロウェル１０５の個数の情報１００３と、マイクロウェル１０５の周囲に文字列（図２Ｂのアルファベットや、図５Ｂのアルファベット及び数字など）があるか否かの情報１００４と、第１識別子１０１があるか否かの情報１００５とを構成項目として含む。ウェル設計情報テーブル１４４は、これら以外に、例えば、マイクロウェル１０５の形状、マイクロウェル１０５の開口部の外縁の寸法、マイクロウェル１０５の開口部の面積、マイクロウェル１０５間のピッチなどの他の設計情報を含んでもよい。
【００６７】
図１１は、成育情報データベース１４５の一例である。成育情報データベース１４５は、画像取得装置１１０から取得した拡大検体画像と、この画像に関連する各種情報を格納する。成育情報データベース１４５は、細胞培養容器ＩＤ１１０１と、ウェルＩＤ１１０２と、成育情報１１０３とを構成項目として含む。このように、成育情報データベース１４５では、成育情報１１０３と、細胞培養容器ＩＤ１１０１及びウェルＩＤ１１０２とが対応付けられている。成育情報１１０３は、画像情報１１０４と、画像内のウェルに受精卵が有るか否かを示す情報１１０５と、画像内のウェル内の細胞の第１の特徴量を示す情報１１０６と、画像内のウェル内の細胞の第２の特徴量を示す情報１１０７と、画像情報を取得した日時１１０８を含む。第１の特徴量を示す情報１１０６は割球の直径の情報であり、第２の特徴量を示す情報１１０７は割球の数の情報である。この例では、画像情報１１０４に対して２つの特徴量の情報を管理しているが、この例に限定されず、１つあるいは２つ以上の特徴量を管理してもよい。また、特徴量も図１１の例に限定されず、特徴量の様々な種類については後述する。さらに、成育情報として、特徴量とともに、成育段階を示す情報（Ｖｅｅｋ、Ｇａｒｄｎｅｒなどの分類のグレード情報）が格納されてもよい。
【００６８】
したがって、成育情報データベース１４５を参照することにより、各画像情報１１０４が、どのマイクロウェルの拡大検体画像に対応するかを管理することが、かつ、そのマイクロウェル内の細胞の成育段階の情報も同時に管理することができる。また、成育情報データベース１４５と検体情報データベース１４１の両方を参照することにより、各画像情報１１０４が、どのマイクロウェルの拡大検体画像に対応し、かつ、どの患者のいつの施術日時に対応するものであるかを管理することができる。なお、本実施形態では、成育情報データベース１４５を作成しているが、検体情報データベース１４１に画像情報や成育情報を登録できる項目を設け、検体情報データベース１４１に拡大検体画像及び成育情報を登録する形式でもよい。
【００６９】
図１２は、判定プロファイルテーブル１４６の一例である。判定プロファイルテーブル１４６は、細胞の成育段階を判定するための判定情報を格納するものである。判定プロファイルテーブル１４６は、適用時期１２０１と、グレード１２０２と、条件１２０３とを構成項目として含む。後述するが、受精卵の成育段階を判定する場合、施術日時からの経過時間に基づいて判定する場合がある。適用時期１２０１は、施術日時（培養開始日時）からの経過時間を示す。条件１２０３は、その適用時期１２０１の場合に拡大検体画像から算出されるべき特徴量の情報と、その特徴量が満たすべき条件の情報を格納している。これにより、施術日時からの経過時間に応じて、算出すべき細胞の特徴量、及び、受精卵の成育状態を判定するための判定条件を切替えることが可能となる。例えば、図１２の例において、経過時間が２〜３日の場合は、Ｖｅｅｋの評価を考慮した第１レコードのプロファイルが選択される。また、経過時間が４〜５日の場合は、Ｇａｒｄｎｅｒの評価を考慮した第２レコードのプロファイルが選択される。Ｖｅｅｋ、Ｇａｒｄｎｅｒについての詳細は後述する。条件１２０３を満たした場合のグレードの情報は、グレード１２０２に格納される。このグレード１２０２の情報を用いて、受精卵の成育段階（あるいは、受精卵の良否）を判定することが可能となる。
【００７０】
次に、成育情報管理装置１３０について詳しく説明する。図１に示すように、成育情報管理装置１３０は、第１識別子認識処理部１５１と、第２識別子認識処理部１５２と、ウェル配置判定処理部１５３と、撮影支援処理部１５４と、特徴量算出処理部１５５と、データベース作成処理部１５６とを備える。成育情報管理装置１３０は、これらの処理部１５１〜１５６により、画像取得装置１１０でマイクロウェル１０５を予め決められた撮影順序で撮影し、撮影した拡大検体画像を解析し、上述した各種テーブルなどに基づいて、全体画像情報、拡大検体画像情報、ウェルＩＤ、及び成育情報を対応付ける。これにより、マイクロウェルに対して成育情報を間違えることなく一意に対応付けることが可能となる。
【００７１】
本実施形態では、成育情報管理装置１３０の各処理部１５１〜１５６を、コンピュータ上で実行されるプログラムの機能として実現してもよい。すなわち、各処理部１５１〜１５６は、プログラムコードとしてメモリに格納して、ＣＰＵが各プログラムコードを実行することによって各処理部１５１〜１５６が実現されてもよい。以下に各処理部１５１〜１５６について説明する。
【００７２】
第１識別子認識処理部１５１は、細胞培養容器１００のマイクロウェル１０５内の細胞及び第１識別子１０１を含む拡大検体画像を画像取得装置１１０から受け取り、拡大検体画像に対して輪郭線抽出処理を実行する。輪郭線抽出処理としては、当業者に公知の技術を適用できる。輪郭線抽出処理の一例として、拡大検体画像に対して白と黒の２階調の画像に変換する２値化処理を実行し、２値化された画像で輪郭線を抽出する処理が挙げられる。なお、通常、観察の対象物が透明で、境界の濃淡さが付きにくいため、画素値の変化に対して微分演算を行った後に、２階調の画像に変換する処理を実行してもよい。また、その他の輪郭線抽出処理としては、特開２０１１−１９２１０９号公報に記載の技術を用いてもよい。この文献では、基準プロファイルと候補プロファイルと作成し、基準プロファイルと候補プロファイルとの類似性を示す類似度を算出することで、受精卵の輪郭を決定しているが、この技術をマイクロウェルの輪郭線や第１識別子の輪郭線の決定に適用してもよい。第１識別子認識処理部１５１は、輪郭線抽出処理によって、マイクロウェル１０５の開口部の外縁が形成する図形の輪郭線（以下、「外周輪郭線」と呼ぶ）と、第１識別子１０１が形成する図形の輪郭線とを抽出し、輪郭線抽出画像を出力する（図１３）。
【００７３】
また、第１識別子認識処理部１５１における輪郭線抽出処理の後に、補間処理及び／又は領域定義処理を実行してもよい。補間処理とは、予め用意しておいたパターンと輪郭線抽出画像とを組み合わせることで、輪郭線の途切れた部分を推定して補間する処理である。例えば、輪郭線抽出処理のみだと、マイクロウェル１０５の外周輪郭線や第１識別子１０１が形成する図形の輪郭線が途切れ途切れになる場合がある。したがって、マイクロウェル１０５の形状のパターンと、第１識別子１０１の形状のパターンとを予め登録しておき、輪郭線抽出画像に対してそれぞれのパターンを重ね合わせて、それぞれの輪郭線を補間する。また、領域定義処理とは、輪郭線で囲まれた領域を定義する処理である。例えば、輪郭線抽出画像上の輪郭線が途切れ途切れの場合には、輪郭線の補間処理後に補間された輪郭線で囲まれた領域を定義する。この領域定義処理を行うことで、その後に行うパターンマッチングを行う範囲や輪郭線で囲まれた領域の寸法あるいは面積の計算の領域を決定することができる。
【００７４】
第１識別子認識処理部１５１は、輪郭線抽出画像に対してパターン検出処理を実行する。ここで、パターン検出処理とは、輪郭線抽出画像においてどの輪郭線がマイクロウェル１０５の外周輪郭線であるか、および、どの輪郭線が第１識別子１０１の輪郭線であるかを検出することである。パターン検出処理としては、当業者に公知の技術を適用できる。一例として、マイクロウェル１０５の形状のテンプレートと、第１識別子１０１の形状のテンプレートとを予め成育情報管理装置１３０に格納しておき、それぞれのテンプレートによってパターンマッチングする方法がある。第１識別子認識処理部１５１は、それぞれのテンプレートに対して所定の類似度以上の部分をマイクロウェル１０５の輪郭線あるいは第１識別子１０１の輪郭線として検出する。なお、画像取得装置１１０の拡大倍率に対応させてテンプレートを適宜拡大／縮小させてもよい。
【００７５】
輪郭線抽出画像においてマイクロウェル１０５の外周輪郭と第１識別子１０１の輪郭線を検出する処理としては、これに限定されず、他の方法でもよい。例えば、ウェル設計情報テーブル１４４内のマイクロウェル１０５の設計情報及びウェルＩＤ対応テーブル１４２内の第１識別子１０１の設計情報を用いて検出を行ってもよい。例えば、輪郭線抽出画像上の輪郭線からなる図形の寸法や面積などの情報と、マイクロウェル１０５の設計情報及び第１識別子１０１の設計情報とを比較して、マイクロウェル１０５の外周輪郭線と第１識別子１０１の輪郭線を特定してもよい。
【００７６】
第１識別子認識処理部１５１は、輪郭線抽出画像に対して第１識別子１０１の認識処理を実行する。第１識別子認識処理部１５１は、第１識別子１０１のマイクロウェルに対する角度αを算出する（図１４）。第１識別子１０１が線（バー）の場合、第１識別子認識処理部１５１は、角度α及び／又は線（バー）の長さを算出してもよい。その後、第１識別子認識処理部１５１は、算出された角度αによってウェルＩＤ対応テーブル１４２を参照し、算出された角度αに対応するウェルＩＤを出力する。
【００７７】
なお、第１識別子認識処理部１５１の処理はこれに限定されず、他の方法でもよい。第１識別子認識処理部１５１の処理では、マイクロウェル１０５と第１識別子１０１との相対的な位置関係からウェルＩＤへの対応づけができればよく、図１５に示すように、マイクロウェルと第１識別子とを含む複数のテンプレートを用意して、テンプレートマッチングを行ってもよい。ウェルＩＤ対応テーブルにおいて、各テンプレートとウェルＩＤとが関連付けられていれば、テンプレートマッチングの結果から拡大検体画像とウェルＩＤとの対応付けが可能となる。
【００７８】
第２識別子認識処理部１５２は、第２識別子読取装置１２０で読み取った第２識別子１０２の情報によって第２識別子対応テーブル１４３を参照し、その情報に対応する細胞培養容器ＩＤを出力する。なお、この方式とは別に、事前に細胞培養容器ＩＤを別の方法で認識させておいて、第２識別子１０２を第２識別子読取装置１２０で読み取ることによって認識の正誤をチェックする方式でもよい。また、第２識別子認識処理部１５２は、その後の処理でウェル設計情報テーブル１４４の対応する情報を選択するために、及び、対応するウェルＩＤ対応テーブル１４２を選択するために、細胞培養容器の容器タイプ９０３を出力する。
【００７９】
ウェル配置判定処理部１５３は、全てのマイクロウェル１０５及びマイクロウェル１０５の周囲にある文字列（数字、アルファベットなど）を含む低倍率画像（以下、全画像情報）から、マイクロウェル１０５の配置情報を算出する。マイクロウェル１０５の検出については、上述した第１識別子認識処理部１５１の処理として説明したものを用いてもよい。また、マイクロウェル１０５の周囲にある文字列についてはＯＣＲ処理など公知の文字認識処理を用いればよい。ウェル配置判定処理部１５３は、全画像情報から、マイクロウェル１０５の配置、マイクロウェル１０５の数、マイクロウェル１０５の周囲にある文字列などを認識する。
【００８０】
ウェル設計情報テーブル１４４を参照することにより、第２識別子１０２に対応する容器タイプのウェル設計情報を取得することが可能である。したがって、ウェル配置判定処理部１５３は、全画像情報から認識した各種情報が、ウェル設計情報テーブル１４４のウェル設計情報に一致するかを判定する。判定は、例えば、ウェル設計情報テーブル１４４の項目に従って行う。例えば、ここでの判定は、マイクロウェル１０５の数が一致するか、マイクロウェル１０５の配置が正方格子状に配置されているか、マイクロウェル１０５の周囲に文字列が認識されたか、などである。なお、別の判定も行ってもよい。例えば、撮影した倍率とマイクロウェル１０５のサイズは予めわかっているため、取得した画像上で所定のＸＹ座標範囲にマイクロウェル１０５の全てが入っているかなどの判定も可能である。これにより、第２識別子１０２から認識された容器タイプと、実際に撮影された細胞培養容器の容器タイプとが一致するかを判定することができる。
【００８１】
また、ウェル配置判定処理部１５３は、全画像情報からマイクロウェル１０５内に細胞があるか否かを判定する。例えば、マイクロウェル１０５内に細胞が存在しない場合は、拡大検体画像においてマイクロウェル１０５内の画素値が一様な分布になる。ウェル配置判定処理部１５３は、マイクロウェル１０５内に画素値の変動があるかを判定し、マイクロウェル１０５内に細胞があるか否かを判定する。この判定処理は一例であり、細胞の有無が判定されれば、公知の他の手法を用いてもよい。ここでの判定結果は、個別の拡大検体画像を撮影する前の細胞数の確認に用いたり、成育情報データベース１４５の情報１１０５として登録することができる。
【００８２】
撮影支援処理部１５４は、各マイクロウェル１０５の個別の拡大検体画像を撮影する際の撮影順序をガイドするための各種処理、撮影順序に基づいて拡大検体画像とウェルＩＤとを対応づける処理、及び、個別の拡大検体画像が正しく取得されたかの判定処理などを行う。撮影支援処理部１５４は、あらかじめ撮影順序がウェルＩＤ対応テーブル１４２に登録されている場合は、容器タイプが判定された後に、拡大検体画像を撮影する際の撮影順序をガイドする。また、撮影支援処理部１５４は、あらかじめ撮影順序が決まってない場合は、出力部１３３に撮影順序を入力させるための画面を表示し、その画面に対する入力情報から撮影順序を取得してもよい。
【００８３】
ガイドの方法としては、操作者が入力部１３２を用いて画像取得装置１１０を操作し、マイクロウェル１０５及び第１識別子１０１がフレームに含まれるように焦点調整するときに、ディスプレイなどの出力部１３３に撮影すべきマイクロウェル１０５の位置情報を表示する方法がある。ディスプレイ上での表示に限定されず、音声など他の方法によって撮影順序がガイドされてもよい。ガイドの内容としては、「最初にＡの位置のマイクロウェルを撮影して下さい」とガイドすることや、Ａの位置のマイクロウェルを撮影した後に、「次は１つ右側のマイクロウェルを撮影して下さい」とガイドすることが挙げられる。撮影するマイクロウェル１０５の位置を認識できる内容ならば他の内容でもよい。
【００８４】
なお、画像取得装置１１０が、撮影すべきマイクロウェルの位置（ＸＹ座標）及び撮影倍率などを指定すれば自動的に画像を取得する機能を備えている場合は、撮影支援処理部１５４は、撮影順序に従って、撮影すべきマイクロウェルの位置（ＸＹ座標）及び撮影倍率を指定し、画像取得装置１１０によって自動的に拡大検体画像を取得してもよい。この場合、ウェルＩＤ対応テーブル１４２などに各マイクロウェル１０５のＸＹ座標などの情報を保持しておけばよい。
【００８５】
撮影支援処理部１５４は、ウェルＩＤと撮影順序が定義されているウェルＩＤ対応テーブル１４２を参照することにより、拡大検体画像とウェルＩＤとを対応づける。例えば、図８Ａの例では、１番目に撮影された拡大検体画像は、ウェルＩＤ「００１」に対応づけられ、２番目に撮影された拡大検体画像は、ウェルＩＤ「００２」に対応付けられる。この対応付けにより、ウェルＩＤと、拡大検体画像と、成育情報とを対応づけて成育情報データベース１４５に登録することが可能となる。なお、マイクロウェル１０５の近傍に第１識別子１０１が付されている場合は、さらに、上記の第１識別子認識処理部１５１の処理によって第１識別子１０１を認識し、撮影順序に従った拡大検体画像が取得されたかをさらに判定することが可能である。例えば、図８Ａの例で、撮影順序を誤って撮影した場合、第１識別子１０１によって認識されるウェルＩＤと、撮影順序によって対応付けられるウェルＩＤが異なることになる。したがって、撮影支援処理部１５４は、撮影順序によって対応付けられるウェルＩＤと、上記の第１識別子認識処理部１５１の処理によって認識された第１識別子１０１に関連づけられたウェルＩＤとが一致するかをさらに判定してもよい。このように、第１識別子１０１の認識と組み合わせることにより、撮影順序に従って誤りなく撮影されたかを判定することが可能となる。
【００８６】
また、撮影支援処理部１５４は、個別の拡大検体画像が正しく取得されたかの判定処理を行う。例えば、撮影支援処理部１５４は、全画像情報から認識された受精卵の数と、取得した拡大検体画像の数とを比較することにより、拡大検体画像が正しく取得されたかを判定する。さらに、撮影支援処理部１５４は、拡大検体画像の画像ファイルに対してあらかじめ指定されたファイル命名規則によってファイル名を変更する。ファイル命名規則は、あらかじめ設定されていてもよい。また、撮影支援処理部１５４は、あらかじめファイル命名規則が決まってない場合は、出力部１３３に命名規則を入力させるための画面を表示し、その画面に対する入力情報から命名規則を取得してもよい。ファイル命名規則としては、細胞培養容器ＩＤを示す文字列、ウェルＩＤを示す文字列が少なくとも含まれる。ファイル命名規則として、さらに、撮影日時を示す文字列なども含んでもよい。
【００８７】
特徴量算出処理部１５５は、拡大検体画像の画像情報から各種特徴量を算出する。以下では一例として、ヒトの受精卵の特徴量について説明する。ヒトの受精卵を培養する場合、通常、受精後に受精卵の成育状態が段階的に判定され、これにより、子宮への移植に適した良質な受精卵であるか否かが判定される。
【００８８】
まず、培養開始後、２〜３日目の時期に行われる形態的評価について説明する。受精２〜３日後の３〜８細胞期胚の時点で胚のグレードを評価する方法がある。この評価では、一般的にＶｅｅｋの分類が用いられている。Ｖｅｅｋの分類では、細胞が均等に分かれており、かつ、フラグメンテーション（細胞くず）が少ない胚ほど良好とされている。
【００８９】
以下にＶｅｅｋのグレードを示す。
グレード１：細胞（割球）の形態が均一でフラグメンテーションを認めない胚。
グレード２：細胞（割球）の形態が均等であるが、わずかにフラグメンテーションを認めない胚。
グレード３：細胞（割球）の形態が不均一な胚。または、少量のフラグメンテーションを認める胚。
グレード４：細胞（割球）の形態が均一又は不均一で、かなりのフラグメンテーションを認める胚。
グレード５：細胞（割球）をほとんど認めず、フラグメンテーションが著しい胚。
【００９０】
次に、Ｖｅｅｋの分類を参考にした、特徴量算出処理部１５５による特徴量算出処理を説明する。図１６は、拡大検体画像から細胞（割球）の均一度を算出する例を示す。図１６では、拡大検体画像を簡略的なイラストで示す。なお、以下で説明する処理の主体は、特徴量算出処理部１５５である。
【００９１】
図１６（ａ）は、本手法をわかりやすく説明するために、拡大検体画像の中で細胞の部分を切り出して示す。なお、特徴量算出処理部１５５は、拡大検体画像をそのまま画像処理してもよいし、拡大検体画像の細胞部分のみを切り出して画像処理を行ってもよい。上述したように、マイクロウェル１０５内の細胞の部分は、画素値が変動しており、公知の手法でエッジを検出できるため、細胞部分の画像を切り出すことは可能である。まず、拡大検体画像から割球の輪郭に対応するエッジを検出する。エッジ検出としては、Ｓｏｂｅｌフィルタ、Ｌａｐｌａｃｉａｎフィルタ、Ｃａｎｎｙフィルタなどの公知の手法を用いることができる。なお、上述した第１識別子１０１を認識する際の輪郭線抽出処理などを用いてもよいし、輪郭線の途切れた部分を推定して補間する処理なども追加で行ってもよい。エッジ検出後に、割球の検出処理を行う。割球の検出処理としては、一例としてハフ変換を用いて円形を検出する方法がある。また、楕円フィッティングなどの公知の手法を用いて割球の検出を行ってもよい。
【００９２】
図１６（ｂ）は、割球の検出処理によって検出された部分を示す。よりわかりやすく説明するために、割球として検出された部分を太線として拡大検体画像に重なる形で示す。図１６（ｂ）に示すように、検出された各割球には、区別するために例えば、一時的に番号やＩＤなどが付される。ここでは、割球１〜４が検出されている。なお、ここで検出された割球の数を成育情報データベース１４５の第２の特徴量を示す情報１１０７として登録することができる。
【００９３】
次に、割球の均一性の指標となる特徴量を算出する。ここでは、円形度と直径について説明する。ここで、「円形度」は、円らしさを表す値であり、以下の式で定義することができる。
円形度＝４πＳ÷Ｌ２
Ｓは、面積（画素数）であり、Ｌは周囲長である。この円形度は、値が１となる時、もっとも円に近いことを表す。図１６（ｂ）の例では、各割球のエッジで囲まれる画素数をＳとして使用し、各割球のエッジの周囲長をＬとして使用することで円形度を算出することができる。「直径」は、割球がほぼ円である場合は直径であり、楕円である場合は最大径であり、ひょうたん形など他の形の場合は重心を通る最大長さである。
【００９４】
図１６（ｃ）は、各割球について円形度と直径を算出した例を示す。このように割球ごとに特徴量を算出して、これらの全ての特徴量を成育情報として登録してもよいが、これらの複数の特徴量から、成育段階を評価するための所定のスコアを算出してもよい。ここでは、均一性（均一度）のスコアについて説明する。
【００９５】
均一性を示すスコアを一例として以下のように定義する。
均一性＝（大きさ揃い度）＋（円形度からのずれ度）
ここで、「大きさ揃い度」は、割球の直径の大きさのばらつきを示す値であり、直径の大きさが揃っているほど値は０に近くなり、ばらつきがあるほど値は大きくなる。例えば、以下の式で定義することができる。
大きさ揃い度＝変動係数＝標準偏差÷平均値
図１６（ｃ）の例では、大きさ揃い度は０．３６５となる。
【００９６】
「円形度からのずれ度」は、全ての割球に対して円形度からのずれを考慮した値であり、割球のそれぞれが円に近ければ値は０に近くなり、円からずれるほど値は大きくなる。例えば、以下の式で定義することができる。
円形度からのずれ度＝１−円形度の平均値
図１６（ｃ）の例では、円形度からのずれ度は、０．２５となる。最終的に、均一性は、大きさ揃い度（０．３６５）と円形度からのずれ度（０．２５）の和から「７．９」となる。このように複数の特徴量から算出されたスコアを成育情報データベース１４５に登録してもよい。ここで説明したスコアの算出方法は一例であり、他の計算方法が用いられてもよい。例えば、重要な特徴量については重み付けなどをしてもよい。また、スコアを計算する際に、ここで説明した以外の特徴量を用いてもよい。
【００９７】
次に、フラグメンテーションの割合を算出する処理を説明する。図１７は、拡大検体画像からフラグメンテーションの割合を算出する例を示す。図１７では、拡大検体画像を簡略的なイラストで示す。まず、拡大検体画像から胚領域を抽出する。図１６での処理と同様に、胚領域の抽出には、エッジ検出を用いることができる。エッジ検出としては、Ｓｏｂｅｌフィルタ、Ｌａｐｌａｃｉａｎフィルタ、Ｃａｎｎｙフィルタなどの公知の手法を用いることができる。なお、上述した第１識別子１０１を認識する際の輪郭線抽出処理などを用いてもよいし、輪郭線の途切れた部分を推定して補間する処理なども追加で行ってもよい。エッジ検出後に、胚領域の検出処理を行う。胚領域の検出処理としては、一例としてハフ変換を用いて円形を検出する方法がある。また、楕円フィッティングなどの公知の手法を用いてもよい。図１７（ｂ）は、胚領域の検出処理によって検出された部分を示す。よりわかりやすく説明するために、胚領域として検出された部分を点線として拡大検体画像に重なる形で示す。
【００９８】
次に、フラグメンテーションの領域を抽出する。フラグメンテーションとは、胚の中にある割球とは異なる細胞破片（割球よりもサイズが小さい細胞くず）である。図１７（ａ）の画像に示すように、フラグメンテーションの領域は、細胞破片が集まっている領域であるため、領域分割の手法を用いてフラグメンテーションの領域を抽出する。領域分割の手法としては、ＷａｔｅｒＳｈｅｄ、Ｓｐｌｉｔ  ａｎｄ  Ｍｅｒｇｅ、Ｍｅａｎ  Ｓｈｉｆｔ、Ｇｒａｂｃｕｔなどの公知の手法を用いることができる。図１７（ｃ）は、フラグメンテーションの領域を抽出した例を示す。最終的に、胚領域として検出された部分に対するフラグメンテーションの領域の割合を算出する。この割合は、各部分に対応する画素数から算出することができる。図１７（ｃ）の例では、フラグメンテーションの割合は４２％である。このように算出された特徴量を成育情報データベース１４５に登録してもよい。
【００９９】
次に、培養開始後、４〜５日目の時期に行われる形態的評価について説明する。受精４〜５日後の胚盤胞のグレードを評価する方法があり、Ｇａｒｄｎｅｒの分類が知られている。胚盤胞とは、卵割腔の形成後から着床前の胚形成初期に形成される構造のことである。胚盤胞は、内部細胞塊と栄養外胚葉とから構成される。内部細胞塊は、胚盤胞の内側に形成される細胞集団のことであり、将来胎児を形成することになる細胞集団である。栄養外胚葉は、内部細胞塊は異なる性質を持つ細胞集団であり、将来胎盤の一部を形成することになる細胞集団である。
【０１００】
Ｇａｒｄｎｅｒの分類では、胚盤胞の発育ステージを６段階、内部細胞塊と栄養外胚葉をそれぞれ３段階で評価し、それぞれの組み合わせで評価を行っている。一例として、図１８は、ある段階の胚盤胞を示し、内部細胞塊と栄養外胚葉を簡略的に示す。図１９は、内部細胞塊と栄養外胚葉のそれぞれの評価の例である。例えば、内部細胞塊の大きさや栄養外胚葉の均一性などが指標となる。
【０１０１】
まず、内部細胞塊の評価について説明する。内部細胞塊の評価としては、内部細胞塊の大きさ、内部細胞塊の細胞の均一性、内部細胞塊の細胞同士が密に接するか、内部細胞塊の細胞数が多いか、などがある。特徴量算出処理部１５５は、以下に示すやり方で、拡大検体画像の画像情報から内部細胞塊の各種特徴量を算出する。図１８では、内部細胞塊の領域が輪郭によって明確に示されているが、実際には、内部細胞塊は拡大検体画像において胚盤胞の内側でぼんやりと映る。したがって、一例として、胚盤胞を細かく（画素単位、あるいは、数画素単位で）区切り、区切られた部分ごとに内部細胞塊のエリアであるかを判定する。内部細胞塊のエリアは、画素値の情報、粒状度（画素値のばらつき）、空間周波数、あるいは、これらの情報の組み合わせなどで定義することができる。
【０１０２】
内部細胞塊の大きさは、検出されたエリア内の最大長さ（エリア内の重心を通る最大長さ）やエリアの面積によって判定される。内部細胞塊の細胞の均一性は、検出されたエリア内の粒状度（画素値のばらつき）によって判定される。また、上述した割球の検出処理と同様に、内部細胞塊のエリア内のエッジを検出して内部細胞塊の細胞数を算出してもよい。さらに、エリア内の内部細胞塊の細胞間の距離（各細胞の重心間の距離）によって内部細胞塊の細胞同士が密に接するかを判定してもよい。
【０１０３】
栄養外胚葉の評価としては、栄養外胚葉内の細胞数、栄養外胚葉内の均一性、などがある。特徴量算出処理部１５５は、以下に示すやり方で、拡大検体画像の画像情報から栄養外胚葉の各種特徴量を算出する。まず、栄養外胚葉が含まれる領域として、上述した内部細胞塊のエリア以外の領域を抽出する。その抽出されたエリア内で、上述と同様に、エッジ検出処理、細胞検出処理（ハフ変換、楕円フィッティング）を実行し、栄養外胚葉内の細胞数を算出する。栄養外胚葉内の均一性は、上記処理で検出された各細胞の粒状度のばらつきなどによって判定することができる。別の方法として、上記処理で検出された細胞のうち所定の直径以下の細胞数をカウントすることで、栄養外胚葉内の均一性を判定してもよい。
【０１０４】
以上では、受精２〜３日後、及び４〜５日後に行われる形態的評価について説明したが、受精初期（約１日後）などにおいて形態的評価を行ってもよい。例えば、初期の評価方法として、前核期胚の形態的評価を用いてもよい。前核期胚とは、媒精後、約十数時間程度経過した胚である。卵子の中に精子が入り込むと、卵子由来の前核と、精子由来の前核が寄り添うように並ぶ。図２０は、２つの前核及び前核内の核小体の形態を示す。図２０（ａ）〜（ｃ）に示すように、前核の大きさ、２つの前核間の距離や、前核内の核小体の配列などに違いがある。不妊治療の現場において、前核の大きさや配列、さらに、前核内の核小体の大きさや配列、対称性などでその後の胚発生に差が見られることが知られている。
【０１０５】
特徴量算出処理部１５５は、以下に示すやり方で、拡大検体画像の画像情報から前核期胚の各種特徴量を算出してもよい。上述と同様に、エッジ検出処理、細胞検出処理（ハフ変換、楕円フィッティング）を実行し、所定の直径の範囲の細胞を前核として判定する。そして、前核と判定された部分に対して、前核の大きさ（直径や面積）、前核の明度（輝度）、２つの前核間の大きさの差（直径や面積の差）、２つの前核間の距離（重心間の距離）などを算出する。
【０１０６】
また、同様のやり方で、前核と判定されたエリアに対して、核小体の検出処理を実行してもよい。細胞検出処理（ハフ変換、楕円フィッティング）を実行し、所定の直径の範囲（すなわち、所定のしきい値より小さい直径）の細胞を核小体として判定する。そして、核小体の大きさ（直径や面積）、核小体の数、核小体間の距離などを算出する。このように算出された特徴量を成育情報データベース１４５に登録してもよい。
【０１０７】
以上、特徴量算出処理部１５５によって算出される特徴量を説明したが、上述したものに限定されない。上述した実施例では、Ｖｅｅｋ、Ｇａｒｄｎｅｒ、前核期胚の評価を説明したが、これらの一部の要素を実施してもよいし、これらに類似する他の分類が用いられてもよい。また、細胞の特徴量としては、細胞の数、細胞の形状、細胞の直径、細胞の領域の重心を通る最大長さ、円形度、細胞のアスペクト比、細胞の周囲長、細胞の面積、細胞の濃度（明度や輝度）、細胞の均一性（大きさのずれや画素値のばらつきなど）、全体に対する所定の細胞が占める割合（フラグメンテーションの割合など）、細胞の配列（細胞間の距離や複数の細胞の位置関係）、これらの組み合わせなどが挙げられる。
【０１０８】
また、特徴量算出処理部１５５は、上述した特徴量に基づいて、受精卵の成育段階や良否を判定してもよい。特徴量算出処理部１５５は、判定プロファイルテーブル１４６の条件１２０３を参照し、上述した特徴量が所定の条件を満たすかを判定し、これにより、条件を満たすグレード１２０２を出力してもよい。ここで出力されるグレード１２０２の情報を成育情報データベース１４５に登録してもよい。
【０１０９】
さらに、特徴量算出処理部１５５は、培養開始日（基準時間）からの経過時間に基づいて、受精卵の成育段階を判定するためのプロファイルを切替えてもよい。図２１は、培養開始日からの経過時間に応じて適用するプロファイルを説明する図である。図２１に示すように、１日目には、上述した前核期胚の評価を用い、２〜３日目には、Ｖｅｅｋの評価を用い、４〜５日目にはＧａｒｄｎｅｒの評価を用いるようにしてもよい。判定プロファイルテーブル１４６には、適用時期（基準時間からの経過時間）１２０１の情報も格納されているため、特徴量算出処理部１５５は、基準時間（例えば、施術日時）と拡大検体画像の取得時間とから経過時間を算出し、判定プロファイルテーブル１４６を参照することにより、経過時間に応じたプロファイルを適用することができる。なお、ここでは、基準時間からの経過時間で、プロファイルを切替えることを説明したが、この手法に限定されない。特徴量算出処理部１５５は、検体拡大画像内の細胞の特徴量を算出した後に、特定の特徴量の値に基づいてプロファイルを切替えてもよい。この場合、判定プロファイルテーブル１４６に、特定の特徴量の条件を表す項目を追加すればよい。また、特徴量算出処理部１５５は、成育段階のグレードに基づいてプロファイルを切替えるようにしてもよい。例えば、前回の画像取得時にＶｅｅｋのある特定の段階まで来ていた場合、今回はＧａｒｄｎｅｒの評価用のプロファイルに切替えるというやり方でもよい。これは、成育情報データベース１４５にグレードの情報を保持することにより可能となる。
【０１１０】
データベース作成処理部１５６は、撮影支援処理部１５４によって対応付けられたウェルＩＤと、第２識別子認識処理部１５２から出力された細胞培養容器ＩＤと、拡大検体画像の画像情報とを関連付けて成育情報データベース１４５に格納する。さらに、データベース作成処理部１５６は、特徴量算出処理部１５５によって算出された各種特徴量の情報や、拡大検体画像の取得時刻の情報を、細胞培養容器ＩＤ及びウェルＩＤと関連付けて成育情報データベース１４５に格納する。なお、これらに加えて、全画像情報も細胞培養容器ＩＤ及びウェルＩＤと関連付けて成育情報データベース１４５に格納してもよい。
【０１１１】
次に、成育情報管理装置１３０における処理の流れについて説明する。図２２は、成育情報管理システム１における処理の流れを説明するフローチャートである。
【０１１２】
まず、所定の情報端末で成育情報管理プログラムを起動する（２２０１）。次に、第２識別子読取装置１２０によって、細胞培養容器１００の第２識別子１０２を読み取る（２２０２）。次に、第２識別子認識処理部１５２が、読み取った第２識別子１０２の情報を用いて、第２識別子対応テーブル１４３を参照する。そして、第２識別子認識処理部１５２は、第２識別子１０２に対応する細胞培養容器ＩＤを出力し、細胞培養容器ＩＤの情報を一旦記憶装置等に記録する（２２０３）。
【０１１３】
次に、操作者は、入力部１３２を用いて画像取得装置１１０を操作し、全てのマイクロウェル１０５及び全ての配置情報（マイクロウェル１０５の周囲の文字列）がフレームに含まれるように全画像情報を取得する（２２０４）。次に、ウェル配置判定処理部１５３によって、全画像情報からマイクロウェル１０５の配置情報を認識する（２２０５）。具体的には、全画像情報からマイクロウェル１０５を検出したり、マイクロウェル１０５の周囲にある文字列をＯＣＲ処理などによって認識する。
【０１１４】
次に、ウェル配置判定処理部１５３は、全画像情報から認識した各種情報が、ウェル設計情報テーブル１４４のウェル設計情報に対して正常な範囲内にあるかを判定する（２２０６）。判定は、例えば、ウェル設計情報テーブル１４４の項目に従って行ってもよい。ここで、正常範囲外の場合、ステップ２２０４へ戻る。
【０１１５】
次に、ウェル配置判定処理部１５３は、全画像情報からマイクロウェル１０５内に細胞があるか否かを判定し、全画像情報に中の受精卵の数を算出する（２２０７）。次に、ウェル配置判定処理部１５３は、算出された受精卵の数をディスプレイなどの出力部１３３に表示し、操作者に個数が合っているかを確認させる（２２０８）。数が正しければ、そのまま次のステップ２２０９に進む。受精卵の数が違っている場合は、操作者に正しい受精卵の個数を入力させる。ここでは、受精卵の数を算出し、受精卵のあるマイクロウェルだけを撮影する流れで説明しているが、これに限定されない。例えば、ステップ２２０７及び２２０８を省略することも可能である。例えば、全てのマイクロウェル１０５の検体拡大画像を取得することを前提とし、成育情報データベース１４５の情報１１０５として受精卵の有無を登録する場合、マイクロウェル１０５内に細胞があるか否かの判定のみを行い、受精卵の有無の情報を最終的に成育情報データベース１４５に登録するようにしてもよい。
【０１１６】
次に、撮影支援処理部１５４は、撮影順序及び拡大検体画像の画像ファイルの命名方法を選択させるための画面をディスプレイなどの出力部１３３に表示させる（２２０９）。撮影支援処理部１５４は、入力部１３２を介して入力された撮影順序及び命名方法を一時的に記録する。なお、上述したように、撮影順序及び命名方法などはあらかじめ設定されていてもよい。この場合、ステップ２２０９は省略することができる。
【０１１７】
次に、操作者が画像取得装置１１０を操作し、個別のマイクロウェル１０５がフレームにおさまるように（第１識別子１０１がある場合は、第１識別子１０１も含まれるように）焦点調整するときに、撮影支援処理部１５４は、指定された撮影順序に従ってガイドを行う（２２１０）。操作者は、このガイドに従って、個別のマイクロウェル１０５の拡大検体画像を取得する（２２１１）。このとき、拡大検体画像を取得した際の撮影時刻の情報も記録する（２２１２）。ここでは、このステップ２２１０〜２２１２をｎ回（受精卵の個数）繰り返す。
【０１１８】
次に、撮影支援処理部１５４は、全画像情報から認識された受精卵の数と、取得した拡大検体画像の数とを比較することにより、拡大検体画像が正しく取得されたかを判定する（２２１３）。拡大検体画像が正しい数取得されていない場合、ステップ２２０９に戻って撮影をやり直す。拡大検体画像が正しい数取得されている場合、次のステップに進む。
【０１１９】
次に、撮影支援処理部１５４は、指定された命名方法に従って、取得された拡大検体画像の画像ファイルのファイル名を変更する（２２１４）。次に、撮影支援処理部１５４は、撮影順序の情報（具体的には、ウェルＩＤ対応テーブル１４２などの情報）に基づいて、全画像情報と、個別の拡大検体画像と、細胞培養容器ＩＤと、ウェルＩＤと、撮影時刻とを対応付ける（２２１５）。なお、マイクロウェル１０５の近傍に第１識別子１０１が付されている場合は、このステップ２２１５の前に、上記の第１識別子認識処理部１５１の処理によって第１識別子１０１を認識し、撮影順序に従った拡大検体画像が取得されたかをさらに判定してもよい。
【０１２０】
次に、特徴量算出処理部１５５は、拡大検体画像から細胞の特徴量を算出する（２２１６）。ここでの処理の流れは後述する。次に、データベース作成処理部１５６は、ウェルＩＤと、細胞培養容器ＩＤと、全画像情報と、拡大検体画像の画像情報と、各種特徴量の情報と、拡大検体画像の撮影時刻の情報とを関連付けて成育情報データベース１４５に登録する（２２１７）。
【０１２１】
図２３は、図２２のステップ２２１６の具体的な処理の流れを説明するフローチャートである。以下の処理の主体は、特徴量算出処理部１５５である。まず、判定プロファイルテーブル１４６を参照することにより、使用するプロファイルを選択する（２３０１）。例えば、施術日時と拡大検体画像の取得時間とから経過時間を算出し、判定プロファイルテーブル１４６の適用時期１２０１を参照することにより、経過時間に応じたプロファイルを選択することができる。
【０１２２】
次に、選択したプロファイルに応じた特徴量を算出する（２３０２）。例えば、図１２の１番目のレコードの場合、特徴量として、割球及びフラグメンテーションの特徴量が算出される。次に、算出された特徴量に基づいてスコアが計算される（２３０３）。最後に、判定プロファイルテーブル１４６を参照することにより、グレードが判定される（２３０４）。ここでは、ステップ２２０３で算出した特徴量が判定プロファイルテーブル１４６の条件１２０３を満たすか否かかが判定され、条件を満たす場合は対応するグレード１２０２が出力される。なお、スコアやグレードの情報は、その後、出力部１３３に表示されてもよいし、成育情報データベース１４５に登録されてもよい。
【０１２３】
以上のように、本実施例によれば、あらかじめ指定された撮影順序に従って拡大検体画像に対して自動でウェルＩＤが対応づけられるため、手作業で拡大検体画像と成育情報とを対応付ける手間がなくなる。しかも、あらかじめ指定された撮影順序に従って撮影がガイドされるため、手作業による対応付けのミスの危険性が低減する。また、ウェルＩＤだけでなく、細胞培養容器ＩＤも拡大検体画像と対応付けることができ、拡大検体画像に対して検体情報の全てを一意に識別することが可能となる。また、拡大検体画像に対して、画像取得時刻の情報も対応付けられるため、受精卵の成育段階の判定に関する情報が管理し易くなる。また、従来では、拡大検体画像を見た操作者が目視で細胞の特徴量を判定し、受精卵の成育段階を判定していたが、本実施例によれば、拡大検体画像から自動的に特徴量を計算し、しかも、その特徴量に基づいて受精卵の成育段階も自動的に判定することができる。
【０１２４】
次に、本発明の別の実施例について説明する。図２４は、成育情報データベース１４５の別の形態を示す図である。図１１と同じ構成要素については同じ番号を付して、説明を省略する。顕微鏡等の画像取得装置１１０からは、画像を取得した際の深さ情報も取得することが可能である。したがって、成育情報データベース１４５に深さ情報（受精卵の最上端部から下方向への深さ）１１０９の項目を追加し、成育情報１１０３とともに深さ情報１１０９も管理してもよい。
【０１２５】
深さ情報１１０９を管理することにより、２次元の画像情報１１０４だけでなく、３次元の画像情報も管理することが可能となる。例えば、ある細胞に対して複数の深さで画像情報１１０４を取得する（例えば、図２４の第１〜第３レコード）。成育情報管理システム１は、これらの複数の深さに対応する複数の画像を積層する（深さ方向に重ねる）ことにより、３次元ポリゴンのグラフィックを作成するようにしてもよい。２次元の画像から３次元ポリゴンへのモデル化は、当業者に周知の手法を用いればよい。これにより、受精卵の立体的な情報も管理することができる。また、３次元ポリゴンを参照することにより、受精卵の発育段階を立体的な表示で判定することも可能となる。この実施例の場合、３次元ポリゴンの情報を用いて、細胞の体積を算出し、細胞の体積を特徴量として成育情報データベース１４５に登録してもよい。また、３次元ポリゴンの情報から受精卵全体の形状を判定し、形状の情報を特徴量として成育情報データベース１４５に登録してもよい。
【０１２６】
なお、本発明は上述した実施形態に限定されるものではなく、他の様々な変形例が含まれる。例えば、上述した実施形態は本発明を分かりやすく説明するために詳細に説明したものであり、必ずしも説明した全ての構成を備えるものに限定されるものではない。また、ある実施形態の構成の一部を他の実施形態の構成に置き換えることがあり、また、ある実施形態の構成に他の実施形態の構成を加えることも可能である。また、各実施形態の構成の一部について、他の構成の追加・削除・置換をすることが可能である。
【０１２７】
例えば、上述したように、成育情報管理装置１３０の構成要素をネットワーク上の複数の情報処理装置に分散して構成してもよい。例えば、成育情報管理システムは、画像取得装置１１０に接続された端末（第１の情報処理装置）と、記憶装置などを備えるサーバ（第２の情報処理装置）とから構成されてもよい。各種テーブル及びデータベースなどは、対応する処理に応じて端末あるいはサーバに格納される。一例として、図２２のステップ２２０１〜２２１５を端末で行い、ステップ２２１６〜２２１７をサーバで行ってもよい。この場合、ステップ２２１５において、端末が、対応付けた各種情報をサーバへ送信する。また、サーバは、端末から各種情報を受信し、特徴量の抽出及び記憶装置への登録処理を行えばよい。また、別の例では、撮影順序とウェルＩＤとの対応付けの処理もサーバ側で行ってもよい。この場合、端末が、撮影順序の情報とともに拡大検体画像の情報をサーバに送信すればよい。
【０１２８】
上述では培養対象としてヒトの受精卵の例を説明したが、これに限定されない。培養対象となる細胞は、例えば、受精卵、卵細胞、ＥＳ細胞（胚性幹細胞）およびｉＰＳ細胞（人工多能性幹細胞）が挙げられる。卵細胞は、未受精の卵細胞をさし、未成熟卵母細胞および成熟卵母細胞が含まれる。受精卵は、受精後、卵割により２細胞期、４細胞期、８細胞期と細胞数が増えていき、桑実胚を経て、胚盤胞へと発生する。受精卵には、２細胞胚、４細胞胚および８細胞胚などの初期胚、桑実胚、胚盤胞（初期胚盤胞、拡張胚盤胞および脱出胚盤胞を含む）が含まれる。胚盤胞は、胎盤を形成する潜在能力がある外部細胞と胚を形成する潜在能力がある内部細胞塊からなる胚を意味する。ＥＳ細胞は胚盤胞の内部細胞塊から得られる未分化な多能性または全能性細胞をさす。ｉＰＳ細胞は、体細胞（主に線維芽細胞）へ数種類の遺伝子（転写因子）を導入することにより、ＥＳ細胞に似た分化万能性を持たせた細胞をさす。すなわち、細胞には、受精卵や胚盤胞のように複数の細胞の集合体も包含される。
【０１２９】
また、本発明は、好ましくは哺乳動物および鳥類の細胞、特に哺乳動物の細胞の培養に好適である。哺乳動物は、温血脊椎動物をさし、例えば、ヒトおよびサルなどの霊長類、マウス、ラットおよびウサギなどの齧歯類、イヌおよびネコなどの愛玩動物、ならびにウシ、ウマおよびブタなどの家畜が挙げられる。本発明は、ヒトの受精卵の培養の場合に特に好適である。
【０１３０】
また、上述したように、成育情報管理装置１３０の各処理部は、実施形態の機能を実現するソフトウェアのプログラムコードで実現してもよい。この場合、プログラムコードを記録した記憶媒体を情報処理装置に提供し、その情報処理装置（またはＣＰＵ）が記憶媒体に格納されたプログラムコードを読み出す。この場合、記憶媒体から読み出されたプログラムコード自体が前述した実施形態の機能を実現することになり、そのプログラムコード自体、およびそれを記憶した記憶媒体は本発明を構成することになる。このようなプログラムコードを供給するための記憶媒体としては、例えば、フレキシブルディスク、ＣＤ−ＲＯＭ、ＤＶＤ−ＲＯＭ、ハードディスク、光ディスク、光磁気ディスク、ＣＤ−Ｒ、磁気テープ、不揮発性のメモリカード、ＲＯＭなどが用いられる。
【０１３１】
また、図面における情報線は、説明上必要と考えられるものを示しており、製品上必ずしも全ての情報線を示しているとは限らない。全ての構成が相互に接続されていてもよい。
【符号の説明】
【０１３２】
１        ：成育情報管理システム
１００    ：細胞培養容器
１０１    ：第１識別子
１０２    ：第２識別子
１０３    ：底部
１０４    ：側壁
１０５    ：マイクロウェル
１０６    ：細胞収容部
１０７    ：天地マーク
１１０    ：画像取得装置
１２０    ：第２識別子読取装置
１３０    ：成育情報管理装置
１３１    ：記憶装置
１３２    ：入力部
１３３    ：出力部
１４１    ：検体情報データベース
１４２    ：ウェルＩＤ対応テーブル
１４３    ：第２識別子対応テーブル
１４４    ：ウェル設計情報テーブル
１４５    ：成育情報データベース
１４６    ：判定プロファイルテーブル
１５１    ：第１識別子認識処理部
１５２    ：第２識別子認識処理部
１５３    ：ウェル配置判定処理部
１５４    ：撮影支援処理部
１５５    ：特徴量算出処理部
１５６    ：データベース作成処理部
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６】
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【図７】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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