(57)【要約】【課題】  傷んだキューティクルの修復が可能な天然成分由来の毛髪改質剤を提供すること。【解決手段】  本発明の毛髪改質剤は、桑枝の抽出物を有効成分とする。桑枝の抽出物は、経口摂取による傷んだキューティクルの修復作用を有する。抽出溶媒としては含水アルコールが望ましい。【選択図】  図３
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
桑枝の抽出物を有効成分とする毛髪改質剤。
【請求項２】
毛髪改質剤が傷んだキューティクルの修復剤である請求項１記載の毛髪改質剤。
【請求項３】
毛髪改質剤が経口摂取するものである請求項１または２記載の毛髪改質剤。
【請求項４】
桑枝の抽出物が抽出溶媒として含水アルコールを用いたものである請求項１乃至３のいずれかに記載の毛髪改質剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、毛髪改質剤に関する。より詳細には、傷んだキューティクルの修復が可能な天然成分由来の毛髪改質剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
３層構造を有する毛髪の最も外側に位置し、毛髪を保護する役割を担っているキューティクルが、洗髪時の摩擦などが原因で傷んでしまうと、毛髪がダメージを受けてハリやコシが損なわれる。従って、キューティクルのケアは、毛髪の健康状態を保つために重要であり、そのための様々なヘアケア製品が市販されている。また、近年、キューティクルのケアを細胞レベルで行う試みもなされており、例えば特許文献１では、キューティクルのもととなる細胞の分化を促進させる物質として、ヨモギやセイヨウトチノキなどに含まれる、エスクレチン、クエルセチン、バイカレインが報告されている。しかしながら、傷んだキューティクルの修復が可能な天然成分の探索は今なお意義深い状況にある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２０１４−１２６４５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
そこで本発明は、傷んだキューティクルの修復が可能な天然成分由来の毛髪改質剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは上記の点に鑑みて鋭意検討を行った結果、桑枝（Ｒａｍｕｌｕｓ  Ｍｏｒｉ）の含水エタノール抽出物が、経口摂取による傷んだキューティクルの修復作用を有することを見出した。
【０００６】
上記の知見に基づいてなされた本発明の毛髪改質剤は、請求項１記載の通り、桑枝の抽出物を有効成分とする。
また、請求項２記載の毛髪改質剤は、請求項１記載の毛髪改質剤において、毛髪改質剤が傷んだキューティクルの修復剤である。
また、請求項３記載の毛髪改質剤は、請求項１または２記載の毛髪改質剤において、毛髪改質剤が経口摂取するものである。
また、請求項４記載の毛髪改質剤は、請求項１乃至３のいずれかに記載の毛髪改質剤において、桑枝の抽出物が抽出溶媒として含水アルコールを用いたものである。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、傷んだキューティクルの修復が可能な天然成分由来の毛髪改質剤として、桑枝の抽出物を有効成分とする毛髪改質剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】実施例１における桑枝の抽出粉末のＨＰＬＣクロマトグラムである。
【図２】同、桑枝の抽出粉末をマウスに経口投与する前後の体重変化を示すグラフである。
【図３】同、マウスの毛髪の摩擦係数に対する桑枝の抽出粉末の経口投与による作用を示すグラフである。
【図４】同、マウスの毛髪のキューティクルに対する桑枝の抽出粉末の経口投与による作用を示す走査型プローブ顕微鏡写真（表面トポグラフィー）とグラフ（横断面プロファイル）である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明の毛髪改質剤は、桑枝の抽出物を有効成分とする。桑枝の抽出物が有する薬理作用としては、美白作用が知られているが（特許第３５４９７１７号公報）、毛髪改質作用はこれまでのところ知られていない。
【００１０】
本発明において用いることができる桑としては、例えば、カラヤマグワ（Ｍｏｒｕｓ ａｌｂａ Ｌ．）、ヤマグワ（Ｍｏｒｕｓ ｂｏｍｂｙｃｉｓ ｋｏｉｄｚ）、ログワ（Ｍｏｒｕｓ ｌａｔｉｆｏｌｉａ Ｐｏｉｒ．）、シマグワ（Ｍｏｒｕｓ ａｃｉｄｏｓａ Ｇｒｉｆｆ．）、これらの交配種や交雑種などが挙げられる。
【００１１】
本発明において、桑枝の抽出物は、例えば、葉を除去した桑の枝を１〜５ｃｍ程度の大きさに切断して自然乾燥した後、抽出溶媒としての、水や、各種の有機溶媒、例えばメタノールやエタノールやイソプロピルアルコールなどのアルコール（水を含んでいてもよい）、アセトン（水を含んでいてもよい）、アセトニトリル（水を含んでいてもよい）、エーテル、ヘキサン、酢酸エチルなどに投入し、３〜１００℃で１時間〜１週間震盪や静置させて成分抽出することで得ることができる。抽出溶媒は、単一の溶媒を用いてもよいし、複数の溶媒を混合して用いてもよい。こうして得られる抽出液は、そのまま液状抽出物として用いてもよいし、減圧濃縮を行って濃縮液にして用いてもよいし、凍結乾燥を行って固形物や粉末にして用いてもよい。なお、こうして得られる抽出液を、さらに硫安分画、ゲルろ過、イオンクロマトグラフィーなどによって精製し、得られた画分を液状抽出物として用いてもよい。また、例えば、最初にヘキサンを用いて抽出操作を行った後、順次、酢酸エチル、アセトン、水といったように、用いる抽出溶媒の極性をだんだんと高くして抽出操作を行い、いずれかの抽出溶媒を用いることで得られた抽出液を液状抽出物として用いてもよい。好適な抽出溶媒としては、４０〜７０℃に加温した含水アルコールが挙げられる。含水アルコールのアルコール濃度は、２０〜８０％が望ましく、３０〜７０％がより望ましく、４０〜６０％がさらに望ましい。
【００１２】
本発明の毛髪改質剤の有効成分である桑枝の抽出物は、例えば、錠剤（糖衣錠、コーティング錠、バッカル錠を含む）、散剤、カプセル剤（ソフトカプセルを含む）、顆粒剤（コーティングしたものを含む）、丸剤、トローチ剤、液剤などの経口剤の形態で摂取することで、傷んだキューティクルの修復作用を発揮する。経口剤の製剤組成は特段限定されるものではなく、自体公知の一般的なものを採用することができる。また、桑枝の抽出物は、各種の飲食品の成分として経口摂取してもよい。桑枝の抽出物の摂取量は、適用対象者の年齢や性別、症状の程度などに基づいて適宜決定すればよい。なお、桑枝の抽出物は、ヘアケア製品、例えばシャンプー、リンス、リンスインシャンプー、コンディショナー、トリートメント、ヘアパックなどに添加するなどして毛髪に直接適用してもよい。また、桑枝の抽出物は、ウシやブタなどの家畜、ニワトリなどの家禽、イヌやネコなどのペットなどのヒト以外の哺乳動物のための毛髪改質剤の有効成分として用いることもできる。
【実施例】
【００１３】
以下、本発明を実施例によって詳細に説明するが、本発明は以下の記載に限定して解釈されるものではない。
【００１４】
実施例１：桑枝の抽出物の経口投与がマウスの毛髪に与える作用
（実験方法）
１．供与試料
岩手県のあおばねずみ（Ｍｏｒｕｓ ａｌｂａ，‘Ａｏｂａｎｅｚｕｍｉ’）の枝先端から１〜１．５ｍの新鮮な枝の部分を用いた。葉を除去した枝を２〜３ｃｍサイズに切断し、自然乾燥させた。得られた乾燥チップを５０±５℃の５０％含水エタノールに浸漬して静置し、２時間かけて成分抽出した。この操作を合計３回行った。３回分の抽出液を混合し、真空濃縮して黄土色〜茶色の懸濁濃縮液（Ｍｕｌｂｅｒｒｙ  Ｔｗｉｇ  Ｅｘｔｒａｃｔ，‘ＭＴＥ’）を得た。得られた懸濁濃縮液５００ｇを凍結乾燥し、回収した１４７．６ｇの茶色の粉末をマイナス２０℃の冷凍庫で保存し、実験に用いた。
【００１５】
２．実験動物
１０週齡の、ＳＡＭ系統の正常老化マウスＳＡＭ−Ｒ１（体重２７〜３２ｇ：雄）と、老化促進マウスＳＡＭ−Ｐ８（体重２３〜２９ｇ：雄）を、日本ＳＬＣ社より購入した。正常老化マウス群（ＮＣ；ＳＡＭ−Ｒ１）、老化促進マウス群（ＡＣ；ＳＡＭ−Ｐ８）、ポジティブコントロール群（老化促進マウスにＮ−アセチル−Ｌ−システィン（シグマ社）を１００ｍｇ／ｋｇ体重／日で経口投与する群、ＮＡＣ；ＳＡＭ−Ｐ８）、老化促進マウスに桑枝の抽出粉末を５ｍｇ／ｋｇ体重／日で経口投与する群（５ｍｇ／ｋｇＭＴＥ；ＳＡＭ−Ｐ８）、老化促進マウスに桑枝の抽出粉末を２５ｍｇ／ｋｇ体重／日で経口投与する群（２５ｍｇ／ｋｇＭＴＥ；ＳＡＭ−Ｐ８）の５群に分け、１ケージに１頭ずつ飼育しながら、１５週齢から実験を行った。動物飼育室は、室温を２３±２℃、照明時間を１２時間（朝７時に自動的に照明点灯、夜１９時に自動的に消灯）に保った。飼育飼料（ＭＦオリエンタル酵母工業社）とソフトチップ（日本ＳＬＣ社）は滅菌して用いた。飲水は水道水を自由に行わせた。実験中、体重は毎日、摂食量と飲水量は隔日、計測した。なお、マウスの飼育および取り扱いは、国立大学法人岩手大学動物実験委員会認可のもとに行った。
【００１６】
３．供試試料の投与
１５週齢から、５ｍｇ／ｋｇＭＴＥ群および２５ｍｇ／ｋｇＭＴＥ群に、滅菌水で溶解した桑枝の抽出粉末を、それぞれ５ｍｇ／ｋｇ体重／日および２５ｍｇ／ｋｇ体重／日の投与量で１２週間経口投与した。ＮＡＣ群には滅菌水で溶解したＮ−アセチル−Ｌ−システィンを１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の投与量で１２週間経口投与した。ＮＣ群およびＡＣ群には生理食塩水（扶桑薬品工業社）を０．１ｍＬ／１０ｇ体重／日の投与量で１２週間経口投与した。なお、マウスへの供試試料の経口投与は、胃ゾンデを用いて胃に直接行った。
【００１７】
４．毛髪の摩擦係数（Ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ  ｏｆ  ｆｒｉｃｔｉｏｎ，ＣＯＦ）の測定
毛髪の表皮は損傷すればするほど摩擦係数が増加することが知られている（Ｂｈｕｓｈａｎ  Ｂ，ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ｗｅａｒ，２５９，１０１２−１０２１）。供試試料の毛髪への作用を調べるために、Ｙａｍａｍｏｔｏ  Ｋ，ｅｔ  ａｌ．（２０１２）Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｅｎｔｏｍｏｌｏｇｙ，２３，２０１−２０６に記載の携帯型摩擦計（ハンディラブテスターＴＬ７０１、トリニティーラボ社）を用いてマウスの毛髪の摩擦係数を測定した。この摩擦計を用いれば、髪の束や顔面の肌などの部位の摩擦係数を測定できる（内舘道正ら（２００８）日本トライボロジー学会トライボロジー会議予稿集，４５５−４５６）。この摩擦計は、指先接触子（指先に見合った硬度と指紋パターンを模したもの）を利用して触覚を測定するものである。ジエチルエーテルでマウスを麻酔している間に、およそ０．５Ｎ荷重でマウスの頭頸部を滑走接触し、測定した。
【００１８】
５．走査型プローブ顕微鏡（Ｓｃａｎｎｉｎｇ  ｐｒｏｂｅ  ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ，ＳＰＭ）による毛髪の観察
マウスの頭頸部の毛髪をマウス用ハサミで根元から切断して採取し、タッピングモード走査型プローブ顕微鏡（ＳＰＡ４００，ＳＩＩ  Ｎａｎｏ−Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社）を用いて観察した。毛髪は両面テープで観察プレートに固定し、ＳＰＭの試料台に載せ、微細な探針と毛髪根元の表面を微小な力で接触させて、水平（Ｘ，Ｙ）に走査することで、表面性状Ｚ（Ｘｉ，Ｙｊ）を画像化した。
【００１９】
６．毛髪性状パラメータの算出法
得られた表面性状データＺ（Ｘｉ，Ｙｊ）に対し、Ｓｑ：二乗平均平方根粗さ、ＳΔｑ：二乗平均平方根傾斜、Ｓｓｋ：スキューネス、Ｓｋｕ：クルトシスの４つの表面性状（微細凹凸）に関するパラメータを算出し、それぞれの毛髪性状の特徴量とした。なお、これらのパラメータは以下の数式で定義される（以下の数式において、ＭとＮはそれぞれＸ方向とＹ方向のデータ個数を意味し、ΔｘとΔｙはそれぞれＸ方向とＹ方向のデータ間隔を意味する）。
【００２０】
【数１】
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【００２１】
【数２】
2015168657.tif 000004
【００２２】
【数３】
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【００２３】
【数４】
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【００２４】
７．統計分析
マウスの体重測定および摩擦係数測定において、ＪＭＰ８ソフトウエア（ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｅ  Ｉｎｃ．，ＵＳＡ）を用いて分散分析（ＡＮＯＶＡ）を行った。なお、有意差が認められた場合はＤｕｎｎｅｔｔの方法で事後検定（Ｐｏｓｔ−ｈｏｃ  ｔｅｓｔ）を行った。
【００２５】
（実験結果）
１．桑枝の抽出粉末のＣｈｅｍｉｃａｌ  ｐｒｏｆｉｌｉｎｇによる特性評価
図１は桑枝の抽出粉末の高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）クロマトグラムである。図１（Ａ）に示すように、桑枝の抽出粉末には、アザ糖として、１−デオキシノジリマイシン（ＤＮＪ）、２−Ｏ−α−ガラクトピラノシル−ＤＮＪ（Ｇａｌ−ＤＮＪ）、ファゴミン（Ｆａｇｏｍｉｎｅ）が存在することを確認した。また、図１（Ｂ）に示すように、オキシレスベラトロール（Ｏｘｙｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ）とレスベラトロール（Ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ）を同定することができた。なお、ＨＰＬＣによるこれらの同定は、ＧＬ−７４００シリーズ（ＧＬ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．）を用いて次のようにして行った。桑枝の抽出粉末を蒸留水５μＬに溶解し、アザ糖は、カラムとしてＩｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＤＳ−３（φ４．６ｍｍ×１５０ｍｍ、５μｍ）（ＧＬ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．）を用い、移動相として０．１ｖ／ｖ％酢酸水溶液とアセトニトリルによるグラジエントを行い、カラム温度を３５℃、流速を１ｍＬ／ｍｉｎとし、蛍光検出器による励起波長２５４ｎｍと蛍光波長３２２ｎｍで測定することで同定した。オキシレスベラトロールとレスベラトロールは、上記と同じカラムと同じ移動相によるグラジエントを行い、カラム温度を４０℃、流速を０．６ｍＬ／ｍｉｎとし、ＵＶ検出器によるＵＶ吸収波長３１０ｎｍで測定することで同定した。
【００２６】
２．マウスへの桑枝の抽出粉末の経口投与前後の体重変化
正常老化マウス群（ＮＣ；ＳＡＭ−Ｒ１）、老化促進マウス群（ＡＣ；ＳＡＭ−Ｐ８）、ポジティブコントロール群（ＮＡＣ；ＳＡＭ−Ｐ８）、老化促進マウスに桑枝の抽出粉末を５ｍｇ／ｋｇ体重／日で経口投与した群（５ｍｇ／ｋｇＭＴＥ；ＳＡＭ−Ｐ８）、老化促進マウスに桑枝の抽出粉末を２５ｍｇ／ｋｇ体重／日で経口投与した群（２５ｍｇ／ｋｇＭＴＥ；ＳＡＭ−Ｐ８）の５群それぞれについて、供試試料を１２週間経口投与する前後の体重変化を調べた結果を図２に示す。図２から明らかなように、いずれの群においても体重減少は認められず、桑枝の抽出粉末を経口投与したことによる健康への悪影響はないと判断した。
【００２７】
３．マウスの毛髪の摩擦係数（ＣＯＦ）に対する桑枝の抽出粉末の経口投与による作用
正常老化マウス群（ＮＣ；ＳＡＭ−Ｒ１）、老化促進マウス群（ＡＣ；ＳＡＭ−Ｐ８）、ポジティブコントロール群（ＮＡＣ；ＳＡＭ−Ｐ８）、老化促進マウスに桑枝の抽出粉末を５ｍｇ／ｋｇ体重／日で経口投与した群（５ｍｇ／ｋｇＭＴＥ；ＳＡＭ−Ｐ８）、老化促進マウスに桑枝の抽出粉末を２５ｍｇ／ｋｇ体重／日で経口投与した群（２５ｍｇ／ｋｇＭＴＥ；ＳＡＭ−Ｐ８）の５群それぞれについて、供試試料を１２週間経口投与した後、２０１日齢から２０８日齢の間に毛髪の摩擦係数を測定した結果を図３に示す。図３から明らかなように、老化促進マウス群（ＡＣ；ＳＡＭ−Ｐ８）のＣＯＦは、他の群と比較して有意に高く（Ｐ＜０．００１）、正常老化マウス群（ＮＣ；ＳＡＭ−Ｒ１）のＣＯＦよりも３１％高かった。この結果から、老化が毛髪の損傷を伴うことが確認できた。しかしながら、老化促進マウスに桑枝の抽出粉末を２５ｍｇ／ｋｇ体重／日で経口投与した群（２５ｍｇ／ｋｇＭＴＥ；ＳＡＭ−Ｐ８）のＣＯＦは、ポジティブコントロール群（ＮＡＣ；ＳＡＭ−Ｐ８）のＣＯＦと同程度であり、桑枝の抽出粉末の経口投与によって老化に伴う毛髪の損傷が改善されることがわかった。
【００２８】
４．走査型プローブ顕微鏡（ＳＰＭ）によって観察されたマウスの毛髪のキューティクルに対する桑枝の抽出粉末の経口投与による作用
正常老化マウス群（ＮＣ；ＳＡＭ−Ｒ１）、老化促進マウス群（ＡＣ；ＳＡＭ−Ｐ８）、ポジティブコントロール群（ＮＡＣ；ＳＡＭ−Ｐ８）、老化促進マウスに桑枝の抽出粉末を５ｍｇ／ｋｇ体重／日で経口投与した群（５ｍｇ／ｋｇＭＴＥ；ＳＡＭ−Ｐ８）、老化促進マウスに桑枝の抽出粉末を２５ｍｇ／ｋｇ体重／日で経口投与した群（２５ｍｇ／ｋｇＭＴＥ；ＳＡＭ−Ｐ８）の５群それぞれについて、供試試料を１２週間経口投与した後、２０１日齢から２０８日齢の間に毛髪を観察した結果を図４に示す。なお、観察は各群２匹以上で行い、図４はそのうちの２匹の結果である（一方の結果が（ａ）と（ｂ）で他方の結果が（ｃ）と（ｄ））。（ａ）と（ｃ）は表面トポグラフィーを示すＳＰＭ写真であり、（ｂ）と（ｄ）はそれぞれ（ａ）と（ｃ）から抽出した横断面プロファイルを示すグラフである。図４から明らかなように、老化促進マウス群（ＡＣ；ＳＡＭ−Ｐ８）では、キューティクルが不鮮明（（ａ）と（ｃ））で三次元的形状（（ｂ）と（ｄ））も不揃いであった。しかしながら、老化促進マウスに桑枝の抽出物を経口投与した群（５ｍｇ／ｋｇＭＴＥ；ＳＡＭ−Ｐ８、２５ｍｇ／ｋｇＭＴＥ；ＳＡＭ−Ｐ８）では、正常老化マウス群（ＮＣ；ＳＡＭ−Ｒ１）と同程度にキューティクルが鮮明となり、揃いもきれいであった。
【００２９】
表面性状（微細凹凸）に関する４つのパラメータの算出結果を表１に示す。表１から明らかなように、老化促進マウス群（ＡＣ；ＳＡＭ−Ｐ８）のスキューネス（Ｓｓｋ）は、他の群と比較して高かった。Ｓｓｋは凹凸の分布の偏りを示すものであるので、Ｓｓｋの高さから、老化促進マウス群（ＡＣ；ＳＡＭ−Ｐ８）の毛髪には特異な山部が存在していることがわかった。しかしながら、老化促進マウスに桑枝の抽出物を経口投与した群（５ｍｇ／ｋｇＭＴＥ；ＳＡＭ−Ｐ８、２５ｍｇ／ｋｇＭＴＥ；ＳＡＭ−Ｐ８）のＳｓｋは、ポジティブコントロール群（ＮＡＣ；ＳＡＭ−Ｐ８）のＳｓｋと同程度であり、桑枝の抽出粉末の経口投与によって老化に伴う傷んだキューティクルが修復されることがわかった。
【００３０】
【表１】
2015168657.tif 000007
【００３１】
（考察）
以上の結果から、桑枝の抽出物は、経口摂取によって傷んだキューティクルの修復が可能な毛髪改質剤の有効成分として有用であることがわかった。その作用機序の全容は明らかではないが、桑枝の抽出物に含まれているオキシレスベラトロールとレスベラトロールが抗酸化作用を有することも、桑枝の抽出物の毛髪改質作用の一因として考えられた。
【００３２】
製剤例１：錠剤
以下の成分組成からなる毛髪改質のための錠剤を自体公知の方法で製造した。
桑枝の５０％含水エタノール抽出粉末        １
乳糖                                    ８０
ステアリン酸マグネシウム                １９（単位：重量％）
【産業上の利用可能性】
【００３３】
本発明は、傷んだキューティクルの修復が可能な天然成分由来の毛髪改質剤として、桑枝の抽出物を有効成分とする毛髪改質剤を提供することができる点において産業上の利用可能性を有する。
【図１】
2015168657.tif 000008
【図２】
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【図３】
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【図４】
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