(57)【要約】【課題】粉末状又は固形状の、米由来のASG含有組成物であってリン脂質含有量が低減され吸湿性の低い組成物を提供することを課題とする。【解決手段】米由来のライスレシチンを原料として二酸化炭素を用いた超臨界抽出操作と含水エタノールで処理し、得られた抽出残渣からエタノールを除去する。【選択図】図８
2015189730.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
粉末状又は固形状であって、米由来ASGを4% (w/w) 以上含有し、ホスファチジルコリンが30%(w/w)以下である組成物。
【請求項２】
粉末状又は固形状であって、米由来ASGを8% (w/w) 以上含有し、ホスファチジルコリンが20%(w/w)以下である組成物。
【請求項３】
40℃、75%RH条件下の恒温恒湿器内に一晩保管したとき重量増加率が5%(w/w)以下である請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
米由来のライスレシチンを原料として粉末状又は固形状ASG含有組成物を製造する方法であって、
ライスレシチンを、二酸化炭素を用いた超臨界抽出操作で処理する工程、
得られた超臨界抽出残渣に抽出溶媒を加え、超臨界抽出物と抽出溶媒の懸濁液を調製する工程、
該懸濁液を固液分離する工程、
ASGを含む不溶性画分（沈殿）を回収する工程、
を含むことを特徴とする固形状又は粉末状ASG含有組成物を製造する方法。
【請求項５】
抽出溶媒が含水エタノールである請求項４記載の製造法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アシル化ステロール配糖体を含有する粉末状又は固形状組成物及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
アシル化ステロール配糖体（以下「ASG」と記載する。）は、ステロイド骨格の3位に結合した糖がアシル化されている化合物である。このようなASGは大豆や玄米、発芽玄米などから得ることができる（特許文献１、特許文献２参照）。特許文献１の発芽玄米由来のASGは、糖尿病性神経障害の改善効果を有している。また特許文献２の大豆由来のASGは、DNA合成酵素の阻害作用を有している。
【０００３】
これらのASGを得るためには、例えば特許文献１の発芽玄米由来のASGの場合は、発芽玄米を精白する際に得られる米ぬかから極性の低いクロロホルムや極性の高いメタノールなどの有機溶媒を用いてASG画分を抽出し（非特許文献１参照）、吸着クロマトグラフィー、さらには高速液体クロマトグラフィー（HPLC）を用いて調製している。
また、特許文献２の大豆由来のステロール配糖体の場合は、大豆（Glycine max L.）にn-ヘキサンを加えてn-ヘキサン抽出物を得た後、n-ヘキサンを留去し、クロロホルムを加え、クロロホルム抽出物を得て、さらにクロマト分離、HPLC操作を行って抽出する。
上記抽出方法を用いても、発芽玄米由来のASGの場合、乾燥物あたり 2.7%の含有量のものしか得られていない。またいずれもクロロホルムなどの溶媒を使用することが抽出効率をあげるための必須条件であり、クロロホルムを抽出溶媒として使用した場合、そのクロロホルムが抽出物に残存する。さらに溶媒抽出の場合、抽出溶媒中に米ぬかや大豆に含有される脂質がASGと同様の挙動を示すため、ASGと脂質の分離がはなはだ困難であり、溶媒抽出だけではASGの純度（含有率）を高めることが難しかった。
本発明者らは、このような取り扱い難いASGを含有する組成物を効率よく抽出する方法を検討し、超臨界抽出技術を応用した米糠からの二段階抽出技術を開発し既に特許出願を行っている（特願２０１２−１４６５７７号）。さらに発明者らは、超臨界抽出技術を応用した二段階抽出技術を用いて、ライスレシチンからASGを含有する粉末状の組成物を提供する技術においても既に特許出願を行っている（特願２０１３−１８０９０９）。しかし、上記の技術を用いることでライスレシチンに含まれる遊離脂肪酸およびグリセライド化合物を分離することは可能であるが、リン脂質を分離することは困難であり、得られるASG含有組成物のリン脂質含有率は57.8〜88.1%(w/w)である。上記の技術によって得られるASGは吸湿性が高く、その原因は両親媒性の特性を持つリン脂質であると考えられる。よってASGの高含有化および吸湿性改善のためにリン脂質分離の検討が必要であった。
【０００４】
一般的なリン脂質を分離する方法として、エタノール（純度99〜90%(v/v)、その他の1〜10%(v/v)はほとんど水）を作用させて抽出する方法が知られている。また超臨界二酸化炭素抽出の際に、エントレーナーとしてエタノール（純度99.5%(v/v)、その他の0.5%(v/v)はほとんど水）を用いることでリン脂質を抽出する方法も知られている。しかし、上記のようなエタノールによる抽出方法では、ASGもエタノールと共に抽出されるため、得られる最終組成物は極めてASG含有率の低いものとなってしまう。よって、上記したような欠点を有する抽出方法に代えて、効率良く、リン脂質を分離でき、ASG含有率の高い組成物を提供しうる方法の開発が望まれているのが現状である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第2009/110612号
【特許文献２】特開2011−213609号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Jordi Folch et.al. ：J．Biol．Chem.，226，497-505， 1957
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、高純度化された粉末状米由来ASGおよび吸湿性の低いASG含有組成物を提供することを課題とする。また本発明は、ライスレシチンオイルから遊離脂肪酸、グリセライド化合物およびリン脂質を効率的に分離する米由来のASG含有組成物の製造方法を提供することを課題とする。また本発明においてリン脂質とは、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、これらのリゾ化物（リゾホスファチジルコリン、リゾホスファチジルエタノールアミン）およびスフィンゴミエリンなどを構成成分とするものである。これらは類似した抽出挙動を示すため、本発明ではホスファチジルコリンを定量した。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、このような課題に即して研究を重ねた結果、より効率の良いASG含有組成物の製造技術を見出し、リン脂質含有量が低く、吸湿性の低いASG高含有組成物を得るに至った。
本発明は以下の構成である。
（１）粉末状又は固形状であって、米由来ASGを4% (w/w) 以上含有し、ホスファチジルコリン含有率が30%(w/w)以下である組成物。
（２）粉末状又は固形状であって、米由来ASGを8% (w/w) 以上含有し、ホスファチジルコリン含有率が20%(w/w)以下である組成物。
（３）40℃、75%RH条件下の恒温恒湿器内に一晩保管したとき重量増加率が5%(w/w)以下である（１）又は（２）記載の組成物。
（４）米由来のライスレシチンを原料として粉末状又は固形状ASG含有組成物を製造する方法であって、
ライスレシチンを、二酸化炭素を用いた超臨界抽出操作で処理する工程、
得られた超臨界抽出残渣に抽出溶媒を加え、超臨界抽出物と抽出溶媒の懸濁液を調製する工程、
該懸濁液を固液分離する工程、
ASGを含む不溶性画分（沈殿）を回収する工程、
を含むことを特徴とする固形状又は粉末状ASG含有組成物を製造する方法。
（５）抽出溶媒が含水エタノールである（４）記載の製造法。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によって、粉末状又は固形状の米由来のASGであって、リン脂質含有量が低く吸湿性の低いASG含有組成物を提供が提供される。
また本発明のASG含有組成物はリン脂質が少なく、粉末にした場合の流動性が向上し、ASG含有組成物の打錠などの製剤化操作が容易となる利点がある。また吸湿性が低いため製剤化した際の安定性が高い。さらに組成物中のASG濃度が高くなるため、錠剤の小型化（小粒化）が可能となる。また、粉末化のための助剤を必要としないため、食品や医薬品原料として高濃度で利用可能なASG含有組成物となる。
さらに、本発明の製造方法は、超臨界抽出操作の回数が少ないため、簡便に製造できる特徴を有している。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】ASG標準品のグラジエントプログラムによる溶出パターンを示す。溶出時間5分直前にASGが溶出される。
【図２】ホスファチジルコリン標準品のグラジエントプログラムによる溶出パターンを示す。溶出時間８分直後にホスファチジルコリンが溶出される。
【図３】本発明の原料であるライスレシチン中のASG含有率を測定するために行ったHPLCクロマトグラフィーのチャートを示す。
【図４】実施例１の組成物中のASGを分析したHPLCクロマトグラフィーのチャートを示す。
【図５】実施例３の組成物中のASGを分析したHPLCクロマトグラフィーのチャートを示す。
【図６】本発明の原料であるライスレシチン中のホスファチジルコリン含有率を測定するために行ったHPLCクロマトグラフィーのチャートを示す。
【図７】実施例１の組成物中のホスファチジルコリン含有率を測定するために行ったHPLCクロマトグラフィーのチャートを示す。
【図８】実施例３の組成物中のホスファチジルコリン含有率を測定するために行ったHPLCクロマトグラフィーのチャートを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下本発明の実施形態を更に詳細に説明する。
粉末状又は固形状であって、米由来ASGを4% (w/w) 以上含有し、ホスファチジルコリンが30%(w/w)以下である組成物に係る発明である。
（１）原料
本発明の原料であるライスレシチンは、一般的に以下の方法により製造される。
米ぬかを加熱処理し、水分調整した後にヘキサンにより油分を抽出する。抽出した油分からヘキサンと不溶物を取り除き脱ガム処理として温水を加えてリン脂質を水和させる。その後、遠心分離器でガムと油を分離し、得られたガムがライスレシチンとなる。なお、ライスレシチンは約28.9〜43.3 % (w/w) のリン脂質を含有する。ライスレシチンはリン脂質を豊富に含有しており、レシチンの供給源としても利用されている。
【００１２】
（２）超臨界抽出操作
ASGを抽出するために米油の精製工程で得られたライスレシチンを、超臨界二酸化炭素抽出装置の抽出槽に収納し、二酸化炭素の超臨界条件で抽出操作を行う。適切な抽出条件は、例えば、二酸化炭素流量  10〜100g/分、抽出時間1〜5時間、抽出圧力10〜50MPaおよび抽出温度32〜70℃である。より好ましくは二酸化炭素流量65g/分、抽出時間4時間、抽出圧力25MPaおよび抽出温度40℃であり、さらに好ましくは二酸化炭素流量65g/分、抽出時間4時間、抽出圧力50MPaおよび抽出温度70℃である。これにより、遊離脂肪酸およびグリセライド化合物が分離された超臨界二酸化炭素抽出残渣が得られる。
【００１３】
（３）溶媒抽出
第一段階の超臨界抽出が終了した抽出槽の残渣は、極性を有する有機溶媒（たとえばアセトン、メタノール、エタノールおよびイソプロパノール）と水の混合溶液で溶媒抽出を行う。有機溶媒は特にエタノールが好ましい。
適切な抽出条件として例えばエタノール50〜80%(v/v)、水50〜20%(v/v)の混合溶媒を調製し、この溶媒による振盪抽出または還流抽出を行う。特に好ましくはエタノール70%(v/v)、水30%(v/v)の比率の溶媒とする。抽出操作は、超臨界二酸化炭素抽出残渣と溶媒をよく混合し、懸濁状態にする。懸濁させる時間は長い方が好ましい。例えば、一時間、より好ましくは一晩である。加える溶媒量が多い方がリン脂質の抽出効率が高まり、分離を良くすることができる。また、超臨界二酸化炭素抽出残渣は溶媒抽出の前に、予め粉砕処理を行うことが好ましい。抽出処理を複数回繰り返すことでより多くのリン脂質を抽出除去することができる。
【００１４】
（４）固液分離
所望する時間経過後、懸濁液を遠心分離、濾過等により固液分離する。この際、リン脂質を可溶性画分にできるだけ移行させる一方、米由来ASGの大部分は可溶性画分に溶出させず、沈殿（不溶性画分）として回収することが重要である。そのためには沈殿をできる限り再懸濁させないように注意が必要である。
得られた不溶性画分は、必要により凍結乾燥などの減圧乾燥処理を施し、残存する溶媒を除去してもよい。
かくして得られる組成物は、粉末状を呈しており、リン脂質含有率が低く（特にホスファチジルコリン含有率は30%(w/w)以下である）、ASGを4〜8%(w/w)以上含有している。この組成物をカラムクロマトグラフィーや分取型高速液体クロマトグラフィー装置（HPLC）にかけてさらにASG含有率を高めた組成物を得るための原料とすることもできる。
【００１５】
（５）原料及び組成物中の分析・ASGおよびホスファチジルコリンの確認方法
原料及び得られたASG含有組成物中のASG含有量は以下に示す方法で分析を行い確認する。
１）ライスレシチンの前処理方法
i） 50mLの蓋付ガラスチューブにライスレシチンを1.0g正秤する。
ii) 次いで、クロロホルム：メタノール＝2：1(v/v)の混合溶液（以下クロメタ混液）を10mL加え、ボルテックスにて約90秒間、よく懸濁・分散させた後、遠心分離（室温、1,500×g、10分）し、上澄液を回収する。
iii)ii)の操作をさらに2回繰り返し、フィルター濾過（目開き：0.45μm）をし、その濾液を分析用試料溶液とする。（得られた試料溶液は成分濃度に応じて適宜希釈を行う。希釈液はクロメタ混液を用いる。）
２）ASG含有組成物の前処理方法
i)  得られたASG含有組成物を適量秤取し、クロメタ混液を加え、50mLメスフラスコにてメスアップする。
ii) i)で得られた溶液は成分濃度に応じて適宜希釈し、分析用試料溶液とする。  
【００１６】
３）ASG分析方法
i)HPLCによる分析
HPLC分析条件は次のとおり
分析装置：HPLC
移動相Ａ：メタノール：水 = 95：5 (v/v)
移動相Ｂ：クロロホルム = 100 (v/v)
ポンプ：Model 582 solvent delivery system
カラム：LiChrospher Si60 (5μm) HPLC-Cartridge (LiChroCART125-4:MERCK)
検出器：荷電化粒子検出器（コロナダイオネクス社）
Injection Volume：20μL
カラムオーブン：40℃（FLO社 model 502）
分析時間：40分
脱泡装置：Uniflows Degasys Ultimate DV3003
流速：1mL/分
ii)グラジエント条件
以下に示すとおり
(1)0-15分
移動相A：1%(v/v) → 25%(v/v)、移動相B：99%(v/v) → 75%(v/v)
(2)15-20分
移動相A：25%(v/v) → 90%(v/v)、移動相B：75%(v/v) → 10%(v/v)
(3)20-25分
移動相A：90%(v/v)、移動相B：10%(v/v)
(4)25-30分
移動相A：90%(v/v) → 1%(v/v)、移動相B：10%(v/v) → 99%(v/v)
(5)30-40分
移動相A：1%(v/v)、移動相B：99%(v/v)
iii)標準品
ASGの標準品として、Esterified Steryl Glucoside（Larodan Fine Chemicals AB製、フナコシ社販売）を用いる。標準品2mgはアンプル開封後、窒素乾固させクロメタ混液で200μg/mLの濃度となるように溶解し、段階希釈して100、50、25、12.5及び 6.25μg/mLの濃度系列とし、検量線を作成する。
【００１７】
４）ホスファチジルコリン分析方法
i)HPLCによる分析
HPLC分析条件は次のとおり
分析装置：HPLC
移動相Ａ：クロロホルム：メタノール：25%アンモニア水溶液= 160：39：1 (v/v)
移動相Ｂ：クロロホルム：メタノール：水：25%アンモニア水溶液= 120：68：11：1 (v/v)カラム：LiChrospher Si60 (5μm) HPLC-Cartridge (LiChroCART125-4:MERCK)
Injection Volume：20μL
カラムオーブン：25℃（FLO社model 502）
分析時間：30分
流速 ：1mL/分
脱泡装置：Uniflows Degasys Ultimate DV3003
ii)グラジエント条件
以下に示すとおり
(1)0-1分
移動相A：80%(v/v)、移動相B：20%(v/v)
(2)1-8分
移動相A：80%(v/v) → 1%(v/v)、移動相B：20%(v/v) → 99%(v/v)
(3)8-20分
移動相A：1%(v/v)、移動相B：99%(v/v)
(4)20-30分
移動相A：1%(v/v) → 80%(v/v)、移動相B：99%(v/v) → 20%(v/v)
iii) 標準品
ホスファチジルコリンの標準品として、L-α-ホスファチジルコリン、 大豆由来、水素添加（和光純薬工業社販売）を用いる。標準品を秤量し200μg/mLの濃度となるようにクロメタ混液に溶解させる、段階希釈して100、50、25、12.5及び 6.25μg/mLの濃度系列とし、検量線を作成する。
【実施例】
【００１８】
以下に実施例、比較例を示し、本発明をさらに詳細に説明する。
（実施例１）
ライスレシチンを約60g採取し、これを超臨界抽出装置（三菱化工機社製）の耐圧容器（抽出槽，0.5L容器）に移した。次いで抽出溶媒として二酸化炭素を用いて、昇温・昇圧操作を行い、70℃、50MPaで4時間（CO2流速：65g/分）、超臨界二酸化炭素を抽出槽に通して抽出操作を行った。
抽出液は回収槽に移し、秤量した。本条件での抽出操作により、秤量した原料の約60%が抽出され、約40%が残渣として抽出槽から回収できた。この組成物のASG含有率は2.84%、ホスファチジルコリン含有率は22.86%(w/w)であった。
この組成物を40℃、75%RHの恒温恒湿器内で一晩保管した際の、吸湿による重量増加率（以下、「吸湿率」と記載する。）は11.10%(w/w)であった。
またこの組成物は固形状であり、粉砕時の流動性はあまり良くなかった。
図３に原料としたライスレシチンのASG含量を分析するために実施したHPLCクロマトグラフィーのチャートを示す。図４に実施例１で得たASG含有組成物のHPLCクロマトパターンを示す。さらに、図６にライスレシチンのホスファチジルコリン含有量を分析するために実施したHPLCクロマトグラフィーのチャートを、図７に実施例１で得た組成物のホスファチジルコリン含有量を分析するために実施したHPLCクロマトグラフィーのチャートを示す。
ライスレシチンに含有されているASGおよびリン脂質以外の成分が低下していることがわかる。
【００１９】
（実施例２）
実施例１で得られた超臨界抽出残渣を粉砕し、この粉砕物100mgに対して、エタノール：水＝7：3(v/v)の抽出溶媒を50mL加えて、懸濁液とし、常温で1時間振盪し、溶媒抽出した。振盪後、固液分離操作を行った。遠心分離を3,000×gで5分間行い、懸濁液を可溶性画分と沈殿に分離させ、沈殿を回収した。この沈殿を減圧下で溶媒を除去し、ASG含有組成物とした。
回収したASG含有組成物は、上記の超臨界抽出残渣の総重量の約75%が溶媒側に移行しており、回収した沈殿物は抽出残渣重量の約25%であった。
この沈殿（ASG含有組成物）は、ASGは8.83%(w/w)、ホスファチジルコリン含有率は19.76%(w/w)であった。
またこの組成物を40℃、75%RH条件下の恒温恒湿器内で一晩保管した際の、吸湿率は1.57%(w/w)であった。さらに得られた組成物は粉末状であり流動性に優れていた。
【００２０】
（実施例３）
実施例１で得られた超臨界抽出残渣を粉砕し、この粉砕物100mgに対して、エタノール：水＝7：3(v/v)の抽出溶媒を50mL加えて、懸濁液とし、常温で1時間振盪し、溶媒抽出した。振盪後、固液分離操作を行った。遠心分離を3,000×gで5分間行い、懸濁液を可溶性画分と沈殿に分離させ、沈殿を回収した。
得られた沈殿に再度エタノール：水＝7：3(v/v)の抽出溶媒を50mL加えて溶媒抽出および固液分離操作を4回繰り返した。回収した沈殿を減圧下で溶媒を除去し、ASG含有組成物とした。このASG含有組成物は、超臨界抽出残渣の総重量の約80%溶媒側に移行し、回収した沈殿物は抽出残渣重量の約20%であった。
このASG含有組成物は、ホスファチジルコリンをほとんど含んでいなかった(0.63%)。またASG含有率は9.68%(w/w)であった。
この組成物を40℃、75%RH条件下の恒温恒湿器内で一晩保管した際の、吸湿率は1.21%(w/w)であった。さらに得られた組成物は粉末状であり流動性に優れていた。
図５に実施例３の組成物のASG含有量を測定するために行ったHPLCクロマトグラフィーのチャートを、図８に同じくホスファチジルコリン含有量を測定するために行ったHPLC分析のクロマトグラフィーのチャートを示す。ASGに対してリン脂質ピークが低下し、ホスファチジルコリンが検出されなくなったことがわかる。
【００２１】
（実施例４）
実施例１で得られた超臨界抽出残渣を粉砕し、この粉砕物100mgに対して、エタノール：水＝8：2(v/v)の抽出溶媒を50mL加えて、懸濁液とし、常温で1時間振盪し、溶媒抽出した。振盪後、固液分離操作を行った。遠心分離を3,000×gで5分間行い、懸濁液を可溶性画分と沈殿に分離させ、沈殿を回収し、減圧下で溶媒を除去し、ASG含有組成物とした。
このASG含有組成物は、超臨界抽出残渣の総重量の約75%が溶媒側に移行し、回収した沈殿物は抽出残渣重量の約25%であった。
このASG含有組成物のASG含有率は5.71%(w/w)であった。またホスファチジルコリン含有率は8.12%(w/w)であった。
さらにまた、この組成物を40℃、75%RHの恒温恒湿器内で一晩保管した際の、吸湿率は2.56%(w/w)であった。さらに得られた組成物は粉末状であり流動性に優れていた。
【００２２】
（実施例５）
実施例１で得られた超臨界抽出残渣を粉砕し、この粉砕物100mgに対して、エタノール：水＝6：4(v/v)の抽出溶媒を50mL加えて、懸濁液とし、常温で1時間振盪し、溶媒抽出した。振盪後、固液分離操作を行った。遠心分離を3,000×gで5分間行い、懸濁液を可溶性画分と沈殿に分離させ、沈殿を回収した。
回収した沈殿を減圧下で溶媒を除去し、ASG含有組成物とした。このASG含有組成物は、超臨界抽出残渣の総重量の約60%が溶媒側に移行し、回収した沈殿物は抽出残渣重量の約40%であった。
このASG含有組成物は、ASG含有率は5.24%(w/w)であった。またホスファチジルコリン含有率は21.14%(w/w)であった。
さらにまた、この組成物を40℃、75%RH条件下の恒温恒湿器内で一晩保管した際の、吸湿率は4.85%(w/w)であった。さらに得られた組成物は粉末状であり流動性に優れていた。
【００２３】
（実施例６）
ライスレシチンを約60g採取し、これを超臨界抽出装置（三菱化工機社製）の耐圧容器（抽出槽，0.5L容器）に移した。次いで抽出溶媒として二酸化炭素を用いて、昇温・昇圧操作を行い、40℃、25MPaで4時間（CO2流速：65g/分）、超臨界二酸化炭素を抽出槽に通して抽出操作を行った。
抽出液は回収槽に移し、秤量した。本条件での抽出操作により、秤量した原料の約60%が抽出され、約40%が残渣として抽出槽から回収できた。こうして得られたASG含有組成物は、ホスファチジルコリンの含有率24.86%(w/w)、ASG含有率は2.77%(w/w)であった。
この抽出残渣を粉砕し、抽出残渣重量約100mgに対して、エタノール：水＝7：3(v/v)の抽出溶媒を50mL加えて、懸濁液とし、常温で1時間振盪し、溶媒抽出した。
振盪後、遠心分離を3,000×gにて5分間行い、可溶性画分と沈殿に分離させて、沈殿を回収した。この沈殿を減圧下で溶媒除去し、ASG組成物とした。このASG含有組成物は超臨界抽出残渣の総重量の約60%が溶媒側に移行し、抽出残渣重量の約40%が沈殿物として回収された。
この組成物のASG含有率は、5.44%(w/w)、ホスファチジルコリン含有率は10.25%(w/w)であった。
また、この組成物を40℃、75%RH条件下の恒温恒湿器内で一晩保管した際の、吸湿率は3.98%(w/w)であった。さらに得られた組成物は粉末状であり流動性に優れていた。
【００２４】
（比較例１）溶媒抽出のみによるASG組成物の調製例
ライスレシチンを約100mg採取し、エタノール：水＝7：3(v/v)の抽出溶媒を50mL加えて、懸濁液とし、常温で一時間振盪し、溶媒抽出した。振盪後の固液分離操作として、遠心分離を3,000×gにて5分間行い、可溶性画分と不溶性画分（沈殿）に分離させ沈殿を得た。この沈殿から減圧下で溶媒を除去した。この操作によって、秤量したライスレシチンに対して約50%が除去され、残りの約50%を沈殿物として得た。こうして得られたASG含有組成物は、ASG含有率は0.36%(w/w)、ホスファチジルコリン含有率は0.63%(w/w)、であった。
また、この組成物を40℃、75%RHの恒温恒湿器内で一晩保管した際の、吸湿率は1.86%(w/w)であった。さらに得られた組成物はペースト状で流動性が悪かった。 
【００２５】
（比較例２）超臨界抽出後非含水溶媒で抽出した調製例
実施例１で得られた超臨界抽出残渣を粉砕し、この粉砕物100mgに対して、無水エタノール50mLを加えて、懸濁液とし、常温で1時間振盪し、溶媒抽出した。振盪後、固液分離操作を行った。遠心分離を3,000×gで5分間行い、懸濁液を可溶性画分と沈殿に分離させ、沈殿を回収した。この沈殿を減圧下で溶媒を除去し、ASG含有組成物とした。
回収したASG含有組成物は、上記の超臨界抽出残渣の総重量の約70%が溶媒側に移行しており、回収した沈殿は抽出残渣重量の約30%であった。
この組成物は、ASG含有率0.56%(w/w)、ホスファチジルコリン含有率は15.20%(w/w)であった。また、この組成物を40℃、75%RHの恒温恒湿器内で一晩保管した際の、吸湿率は2.27%(w/w)であった。さらに得られたASG含有組成物は粉末状であり流動性に優れていた。
以上の実施例、比較例の分析結果、評価結果を下記の表1にまとめて示す。
【００２６】
【表１】
2015189730.tif 000003
【００２７】
比較例１、２から本発明の組成物を得るためには、超臨界抽出と含水有機溶媒による溶媒抽出が必須であることが判明した。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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