(57)【要約】【課題】ＰＣＲのための前処理に要する時間を短縮できる核酸抽出用デバイスを提供する。【解決手段】本発明に係る核酸抽出用デバイスは、オイルからなる第１プラグ、核酸が吸着した物質を洗浄する、オイルと混和しない洗浄液からなる第２プラグ、オイルからなる第３プラグ、前記物質から核酸を溶出させる、オイルと混和しない溶出液からなる第４プラグ、及び、オイルからなる第５プラグ、が当該順で内部に配置されたチューブ部と、前記チューブ部の周囲に配置されたカバー部と、を有する。【選択図】図１
2015097512.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
オイルからなる第１プラグ、
核酸が吸着した物質を洗浄する、オイルと混和しない洗浄液からなる第２プラグ、
オイルからなる第３プラグ、
前記物質から核酸を溶出させる、オイルと混和しない溶出液からなる第４プラグ、及び
、
オイルからなる第５プラグ、が当該順で内部に配置されたチューブ部と、
前記チューブ部の周囲に配置されたカバー部と、を有する、核酸抽出用デバイス。
【請求項２】
前記カバー部が脱着可能である、請求項１に記載の核酸抽出用デバイス。
【請求項３】
前記カバー部は前記チューブ部が延在する方向に伸縮可能である、請求項１に記載の核
酸抽出用デバイス。
【請求項４】
前記チューブ部と前記カバー部とが離間している、請求項１に記載の核酸抽出用デバイ
ス。
【請求項５】
前記チューブ部の内腔表面から前記カバー部の外表面までの距離が３ｍｍ以上である、
請求項１〜４のいずれか１項に記載の核酸抽出用デバイス。
【請求項６】
前記カバー部は前記チューブ部が延在する方向に延びるスリットが設けられている、請
求項１、４または５のいずれか１項に記載の核酸抽出用デバイス。
【請求項７】
前記カバー部に穴が設けられている、請求項１、４または６のいずれか１項に記載の核
酸抽出用デバイス。
【請求項８】
前記カバー部は変形可能な材料で形成され、前記チューブ部と前記カバー部との間に気
体が封入されて前記チューブ部と前記カバー部とが付着することが防止されている、請求
項１に記載の核酸抽出用デバイス。
【請求項９】
前記カバー部に非磁性物質である金属または合金を含有する、請求項１〜９のいずれか
１項に記載の核酸抽出用デバイス。
【請求項１０】
オイルからなる第１プラグ、
核酸が吸着した物質を洗浄する、オイルと混和しない洗浄液からなる第２プラグ、
オイルからなる第３プラグ、
前記物質から核酸を溶出する、オイルと混和しない溶出液からなる第４プラグ、及び、
オイルからなる第５プラグ、が当該順で内部に配置されたチューブ部を有し、
前記チューブ部の側壁の厚みが３ｍｍ以上であること、を特徴とする、核酸抽出用デバ
イス。
【請求項１１】
前記チューブ部の側壁に非磁性物質である金属または合金を含有する、請求項１〜９の
いずれか１項に記載の核酸抽出用デバイス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、核酸抽出用デバイスに関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、遺伝子の利用技術の発展により、遺伝子診断や遺伝子治療など遺伝子を利用した
医療が注目されている。また農畜産分野においても品種判別や品種改良に遺伝子を用いた
手法が多く開発されている。遺伝子を利用するための技術として、ＰＣＲ（Polymerase C
hain Reaction）などの技術が広く普及している。今日では、ＰＣＲは生体物質の情報解
明において必要不可欠な技術となっている。ＰＣＲは、増幅の対象とする核酸（標的核酸
）及び試薬を含む溶液（反応液）に熱サイクルを施すことで、標的核酸を増幅させる手法
である。ＰＣＲの熱サイクルとしては、２段階又は３段階の温度で熱サイクルを施す手法
が一般的である。
【０００３】
一方、医療の現場におけるインフルエンザに代表される感染症の診断は、現状ではイム
ノクロマト等の簡易検査キットを用いることが主流である。しかしこのような簡易検査で
は、精度が不十分となる場合があり、より高い検査精度を期待できるＰＣＲを感染症の診
断に適用することが望まれている。また、医療機関における一般外来等では、診察の時間
が制限される関係から、検査に費やすことのできる時間は短時間に制限される。そのため
、例えばインフルエンザの検査は、検査の精度を犠牲にして、簡易的なイムノクロマト等
の検査により短時間化して行われているのが現状である。
【０００４】
このような事情から、医療の現場で、より高い精度を期待できるＰＣＲによる検査を実
現するためには反応に要する時間を短縮する必要があった。ＰＣＲの反応を短時間で行う
ための装置として、例えば特許文献１には、反応液と、反応液と混和せず反応液よりも比
重の小さい液体とが充填された生体試料反応用チップを、水平方向の回転軸の周りに回転
させることで、反応液を移動させて熱サイクルを施す生体試料反応装置が開示されている
（特許文献１）。また、ＰＣＲの一手法として、磁性ビーズを用いた方法（特許文献２）
や、磁性ビーズを液滴の移動手段として用い、基板上の温度変化領域での液滴を移動させ
ることによりＰＣＲの熱サイクルを行う方法（特許文献３）等の開示がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００９−１３６２５０号公報
【特許文献２】特開２００９−２０７４５９号公報
【特許文献３】特開２００８−０１２４９０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
このようにＰＣＲの熱サイクルに要する時間を短縮する検討は進められているものの、
検体から鋳型となる核酸を抽出してＰＣＲを開始することのできる状態にするために要す
る時間を短縮する技術は、必ずしも十分に開発されたとはいえない状況である。例えば、
ＰＣＲを行うためには検体（血液、鼻腔粘液、口腔粘膜など）から鋳型となる核酸（ＤＮ
Ａ：Deoxyribonucleic Acid、及び／又はＲＮＡ：Ribonucleic Acid）を抽出する処理（
以下、単に「前処理」ということがある。）が必要であるが、ＰＣＲの熱サイクルに要す
る時間のみを短縮できたとしても、核酸を抽出する（前処理）に要する時間を短縮できな
ければ、医療の現場での要求には十分応えることはできない。
【０００７】
通常はカラムや磁性ビーズを使った前処理が行われているが、試薬の分注や撹拌・遠心
作業などをすべて手作業で行うか、自動抽出装置等の高価で大掛かりな装置が必要である
。そしてそのいずれの方法であっても前処理に少なくとも３０分以上の時間と手間がかか
っている。したがって仮にＰＣＲの熱サイクルのみを短時間（例えば１５分以内）で行う
ことができても、前処理のために要する時間を合わせると、検体の採取から検査結果が出
るまでの全体の検査時間は短くても１時間程度を要してしまうのが現状である。
【０００８】
したがって、診療時間等の制限のある現場で核酸の抽出（前処理）からＰＣＲの熱サイ
クルまでを一貫して行うことは現実的には不可能であった。このような事情がＰＣＲによ
る検査手法の医療機関への普及のための障害の一つとなっていた。すなわち、ＰＣＲその
ものと前処理にかかる時間及び煩雑さが、ＰＣＲがイムノクロマトより高感度、高精度な
検査方法であるにもかかわらず、医療の現場で普及しにくい原因の一つとなっていた。
【０００９】
本発明は上記課題に鑑みてなされたものであり、その幾つかの態様に係る目的の一つは
、ＰＣＲのための前処理に要する時間を短縮できる核酸抽出用デバイスを提供することに
ある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明に係る核酸抽出用デバイスは、オイルからなる第１プラグ、核酸が吸着した物質
を洗浄する、オイルと混和しない洗浄液からなる第２プラグ、オイルからなる第３プラグ
、前記物質から核酸を溶出させる、オイルと混和しない溶出液からなる第４プラグ、及び
、オイルからなる第５プラグ、が当該順で内部に配置されたチューブ部と、前記チューブ
部の周囲に配置されたカバー部と、を有する。
【００１１】
前記カバー部が脱着可能でもよく、チューブ部が延在する方向に伸縮可能でもよい。前
記チューブ部と前記カバー部とが離間していてもよい。前記チューブ部の内腔表面から前
記カバー部の外表面までの距離が３ｍｍ以上であることが好ましい。前記カバー部に前記
チューブ部が延在する方向に延びるスリットが設けられていてもよい。前記カバー部に穴
が設けられていてもよい。前記カバー部は変形可能な材料で形成され、前記チューブ部と
前記カバー部との間に気体が封入されて前記チューブ部と前記カバー部とが付着すること
が防止されていてもよい。前記カバー部に非磁性物質である金属または合金を含有しても
よい。
【００１２】
他の実施形態に係る本発明に係る核酸抽出用デバイスは、オイルからなる第１プラグ、
核酸が吸着した物質を洗浄する、オイルと混和しない洗浄液からなる第２プラグ、オイ
ルからなる第３プラグ、前記物質から核酸を溶出させる、オイルと混和しない溶出液から
なる第４プラグ、及び、オイルからなる第５プラグ、が当該順で内部に配置されたチュー
ブ部を有し、前記チューブ部の側壁の厚みが３ｍｍ以上である。前記チューブ部の側壁に
非磁性物質である金属または合金を含有してもよい。
【００１３】
本明細書において、液体の「プラグ」とは、チューブ又はチューブ部の長手方向におい
て、実質的に当該液体のみが内部を占める形状となったものを指し、プラグによってチュ
ーブ又はチューブ部の内部の空間が区画されている状態を指す。ここでの実質的にとの表
現は、プラグの周囲すなわち、チューブ又はチューブ部の内壁に少量（例えば薄膜状）の
他の物質（液体等）が存在していてもよいことを指す。また、チューブ又はチューブ部と
は、筒状の部分を指し、チューブ又はチューブ部は、液体が当該チューブ又はチューブ部
内でプラグを維持できる内部空洞の断面を有しており、変形してもよい管状の部分のこと
を指す。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】実施形態に係る核酸抽出用デバイスの要部を模式的に示す図。
【図２】実施形態に係る核酸抽出用デバイスの要部を模式的に示す図。
【図３】実施形態に係る核酸抽出用デバイスの要部を模式的に示す図。
【図４】実施形態に係る核酸抽出用デバイスを模式的に示す図。
【図５】実施形態に係る核酸抽出用デバイスを模式的に示す図。
【図６】実施形態に係る核酸抽出用デバイスを模式的に示す図。
【図７】実施形態に係る核酸抽出用デバイスを模式的に示す図。
【図８】実施形態に係る核酸抽出用デバイスを模式的に示す図。
【図９】（Ａ）実施形態に係る核酸抽出用デバイスを模式的に示す図。（Ｂ）その破線部における断面図。
【図１０】（Ａ）実施形態に係る核酸抽出用デバイスを模式的に示す図。（Ｂ）その破線部における断面図。
【図１１】（Ａ）実施形態に係る核酸抽出用デバイスを模式的に示す図。（Ｂ）その破線部における断面図。
【図１２】実施形態に係る核酸抽出用デバイスを模式的に示す図。
【図１３】実施形態に係る核酸抽出用デバイスの要部を模式的に示す図。
【図１４】実施形態に係る核酸抽出用キットの一例を模式的に示す図。
【図１５】実施形態に係る核酸抽出用キットの一例を模式的に示す図。
【図１６】実施形態の核酸抽出方法の変形例を説明するための模式図。
【図１７】実施形態に係る核酸抽出用装置の一例を示す斜視図。
【図１８】実施形態に係る核酸抽出用装置の一例を示す斜視図。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
以下に本発明のいくつかの実施形態について説明する。以下に説明する実施形態は、本
発明の例を説明するものである。本発明は以下の実施形態になんら限定されるものではな
く、本発明の要旨を変更しない範囲において実施される各種の変形形態も含む。なお以下
で説明される構成の全てが本発明の必須構成要素であるとは限らない。
【００１６】
１．核酸抽出用デバイス
本実施形態の核酸抽出用デバイス１０００は、チューブ部１００と、第１プラグ１０、
第２プラグ２０、第３プラグ３０、第４プラグ４０及び第５プラグ５０と、を有する。
【００１７】
図１は、本実施形態の核酸抽出用デバイス１０００の要部を模式的に示す図である。
【００１８】
１．１．チューブ部
チューブ部１００は、核酸抽出用デバイス１０００の要部を構成している。核酸抽出用
デバイス１０００は、チューブ部１００の他に、各種の構成を含んでもよい。核酸抽出用
デバイス１０００は、例えば、図示しないが、チューブ部１００に接続される配管、容器
、栓、継ぎ手、ポンプ、制御装置などを含んでもよい。
【００１９】
チューブ部１００は、内部に空洞を有し、当該空洞内に液体を長手方向に流通させるこ
とのできる筒状の部分である。チューブ部１００は、長手方向を有するが、屈曲してもよ
い。チューブ部１００の内部の空洞は、液体がチューブ部１００内でプラグ形状を維持で
きれば、大きさ、形状ともに特に限定されない。また、チューブ部１００の内部の空洞の
大きさや長手方向に垂直な断面の形状は、チューブ部１００の長手方向に沿って変化して
もよい。液体がチューブ部１００内でプラグ形状を維持できるかどうかについては、チュ
ーブ部１００の材質、液体の種類等の条件に依存するので、チューブ部１００の長手方向
に垂直な断面の形状は、液体がチューブ部１００内でプラグ形状を維持できる範囲内で適
宜に設計される。
【００２０】
チューブ部１００の外形の長手方向に垂直な断面の形状も限定されない。さらにチュー
ブ部１００の肉厚（内部の空洞の側面から外部の表面までの長さ）も特に限定されない。
チューブ部１００の内部の空洞の長手方向に垂直な断面が円形である場合、チューブ部１
００の内径（内部の空洞の長手方向に垂直な断面における円の直径）は、例えば、０．５
ｍｍ以上３ｍｍ以下とすることができる。チューブ部１００の内径がこの範囲であると、
チューブ部１００の材質、液体の種類において広範な範囲で液体のプラグを形成しやすい
のでより好ましい。
【００２１】
チューブ部１００の材質は、特に限定されないが、例えば、ガラス、高分子、金属など
とすることができる。しかし、チューブ部１００の材質にガラスや高分子などの可視光に
おいて透明性を有する材質を選択すると、チューブ部１００の外部から内部（空洞内）を
観察することができるのでより好ましい。また、チューブ部１００の材質に、磁力を透過
する物質や非磁性体を選択すると、チューブ部１００に磁性粒子を通過させる場合などに
、チューブ部１００の外部から磁力を与えることによってこれを行うことが容易化される
ため好ましい。
【００２２】
チューブ部１００の内部には、オイルからなる第１プラグ１０、オイルと混和しない第
１洗浄液からなる第２プラグ２０、第１洗浄液と混和しないオイルからなる第３プラグ３
０、オイルと混和しない溶出液からなる第４プラグ４０、及び溶出液と混和しないオイル
からなる第５プラグ５０が、当該順で配置される。
【００２３】
１．２．第１プラグ、第３プラグ、及び第５プラグ
第１プラグ１０、第３プラグ３０、及び第５プラグ５０は、いずれもオイルからなる。
第１プラグ１０、第３プラグ３０、及び第５プラグ５０のオイルは、互いに異なる種類の
オイルであってもよい。また、第１プラグ１０、第２プラグ２０、第３プラグ３０、第４
プラグ４０、及び第５プラグ５０の隣り合うプラグを形成する液体は、互いに混和しない
ように選択される。
【００２４】
オイルとしては、例えば、シリコーンオイル又はミネラルオイルを使用することができ
る。ここで、シリコーンとは、主骨格としてシロキサン結合を有するオリゴマーまたはポ
リマーを意味する。本明細書においては、シリコーンのうち熱サイクル処理に使用する温
度帯において液体の状態であるものを特にシリコーンオイルと称する。また、本明細書に
おいては、石油から精製され、熱サイクル処理に使用する温度帯において液体であるもの
をミネラルオイルと称する。これらのオイルは熱に対する安定性が高く、例えば粘度が５
×１０3Ｎｓｍ-2以下の製品も入手しやすいので、昇降型のＰＣＲに好適である。
【００２５】
シリコーンオイルとしては、信越シリコーン社製のＫＦ−９６Ｌ−０．６５ｃｓ、ＫＦ
−９６Ｌ−１ｃｓ、ＫＦ−９６Ｌ−２ｃｓ、ＫＦ−９６Ｌ−５ｃｓ、東レ・ダウコーニン
グ社製のＳＨ２００ Ｃ ＦＬＵＩＤ ５ ＣＳ、あるいはモメンティブ・パフォーマンス・
マテリアルズ・ジャパン合同会社製のＴＳＦ４５１−５Ａ、ＴＳＦ４５１−１０等のジメ
チルシリコーンオイルが例示される。ミネラルオイルとしては、主成分として炭素数１４
から２０程度のアルカンを含有するものが例示される。すなわち、ｎ−テトラデカン、ｎ
−ペンタデカン、ｎ−ヘキサデカン、ｎ−ヘプタデカン、ｎ−オクタデカン、ｎ−ノナデ
カン、ｎ−テトラコサンが例示される。
【００２６】
上述したように、オイルには、帯電防止剤を添加するのが好ましい。帯電防止剤として
は、例えば、変性シリコーンオイルを使用することができる。ここで、変性シリコーンオ
イルとは、置換基を有するシリコーンオイルを意味する。第２の液体としては、例えばカ
ルビノール基、アルキルシリル基、フロロアルキル基、シラノール基、又はアルキルシル
セスキオキシ基を置換基として有するものが好ましい。第２の液体はこれらの置換基を複
数種類有するものであってもよく、例えばアルキルシリル基とアルキルシルセスキオキシ
基とを有するもの、アルキルシリル基とフロロアルキル基とを有するものであってもよい
。また、環状シロキサンを用いてもよい。第２の液体は、熱サイクル処理を行う温度範囲
において、熱に対して安定な性質であることがより好ましい。例えば、カルビノール変性
シリコーンオイル、信越シリコーン社製のＫＦ−６００１、東レ・ダウコーニング社製の
ＢＹ １６−２０１、５５６２ ＣＡＬＢＩＮＯＬ ＦＬＵＩＤ、及びモメンティブ・パフ
ォーマンス・マテリアルズ・ジャパン合同会社製のＸＦ４２−Ｂ０９７０が例示される。
カルビノール変性シリコーンオイルは、粘度は３×１０4Ｎｓｍ-2以上であり、単独で昇
降型のＰＣＲに用いるには粘度が高いが、ジメチルシリコーンオイルよりも体積抵抗値が
低いため、ジメチルシリコーンオイルと混合することで、用いるオイルの導電性を調整す
ることができる。すなわち、添加量を多くするほど、体積固有抵抗は小さくなり、添加量
は特に限定されないが、混合後のオイルが５．４×１０１０Ω・ｃｍ以下の体積固有抵抗
値を有することが好ましい
【００２７】
帯電防止剤は、複数の成分を含有する液体であってもよく、複数種類の液体の混合物で
あってもよい。例えば、信越シリコーン社製のＸ２１−５２５０（トリメチルシロキシケ
イ酸５０％、シクロペンタロキサン５０％）、Ｘ２１−５６１６（トリメチルシロキシケ
イ酸６０％、イソドデカン４０％）を用いてもよい。
【００２８】
第１プラグ１０と第３プラグ３０の間には、第２プラグ２０が配置される。第１プラグ
１０の第２プラグ２０と反対側の領域には、他の液体のプラグが配置されてもよい。第１
プラグ１０の中には、気泡や他の液体がないことが好ましいが、核酸を吸着させた粒子等
が第１プラグ１０を通過できる限りにおいて、気泡や他の液体が存在してもよい。また、
第１プラグ１０と第２プラグ２０の間には、気泡や他の液体がないことが好ましいが、核
酸を吸着させた粒子等が第１プラグ１０から第２プラグ２０へと通過できる限りにおいて
、気泡や他の液体が存在してもよい。同様に、第２プラグ２０と第３プラグ３０の間には
、気泡や他の液体がないことが好ましいが、核酸を吸着させた粒子等が第２プラグ２０か
ら第３プラグ３０へと通過できる限りにおいて、気泡や他の液体が存在してもよい。
【００２９】
第３プラグ３０と第５プラグ５０の間には、第４プラグ４０が配置される。第５プラグ
５０の第４プラグ４０と反対側の領域には、他の液体のプラグが配置されてもよい。第３
プラグ３０の中には、気泡や他の液体がないことが好ましいが、核酸を吸着させた粒子等
が第３プラグ３０を通過できる限りにおいて、気泡や他の液体が存在してもよい。また、
第３プラグ３０と第４プラグ４０の間には、気泡や他の液体がないことが好ましいが、核
酸を吸着させた粒子等が第３プラグ３０から第４プラグ４０へと通過できる限りにおいて
、気泡や他の液体が存在してもよい。同様に、第４プラグ４０と第５プラグ５０の間には
、気泡や他の液体がないことが好ましいが、核酸を吸着させた粒子等が第４プラグ４０か
ら第５プラグ５０へと通過できる限りにおいて、気泡や他の液体が存在してもよい。さら
に、第５プラグ５０の中には、気泡や他の液体がないことが好ましい。
【００３０】
第１プラグ１０、第３プラグ３０、及び第５プラグ５０のチューブ部１００の長手方向
における長さは、プラグが形成可能な範囲であれば、いずれも特に限定されない。第１プ
ラグ１０、第３プラグ３０、及び第５プラグ５０のチューブ部１００の長手方向における
具体的な長さとしては、１ｍｍ以上５０ｍｍ以下であり、粒子等の移動距離を大きくしす
ぎないように、１ｍｍ以上３０ｍｍ以下が好ましく、５ｍｍ以上２０ｍｍ以下がさらに好
ましい。これらのうち第３プラグ３０のチューブ部１００の長手方向における長さを長く
すると、第４プラグ４０をチューブ部１００の第５プラグ５０側の端から吐出する態様を
採る場合に、第２プラグ２０を吐出しにくくすることができる。この場合、第３プラグ３
０の具体的な長さとしては、１０ｍｍ以上５０ｍｍ以下とすることができる。
【００３１】
第１プラグ１０及び第５プラグ５０は、チューブ部１００の少なくとも一方の端が開放
されたとしても、第１洗浄液（第２プラグ２０）及び溶出液（第４プラグ４０）の、蒸発
等の外気との物質交換や、外部からの汚染を防ぐ機能を有している。そのため、チューブ
部１００の少なくとも一方の端が外気に開放されたとしても、第１洗浄液や溶出液の体積
を一定に保つことができ、各液体の濃度の変動や汚染を抑制することができる。これによ
り、核酸抽出における核酸や各種の薬剤の濃度の精度を高めることができる。
【００３２】
また、第３プラグ３０は、第１洗浄液（第２プラグ２０）及び溶出液（第４プラグ４０
）が互いに混合することを抑制する機能を有する。また第３プラグ３０は、より高粘度の
オイルとすることにより、第１洗浄液（第２プラグ２０）との界面で、粒子等を移動させ
る場合に、オイルによる「ぬぐい効果」を高めることができる。これにより、第２プラグ
２０の第１洗浄液のプラグから、オイルの第３プラグ３０に粒子等を移動させた場合に、
粒子等に付着した水溶性の成分を第３プラグ３０（オイル）に、より持ち込まれにくくす
ることができる。
【００３３】
１．３．第２プラグ
第２プラグ２０は、チューブ部１００内の第１プラグ１０と第３プラグ３０との間の位
置に配置される。第２プラグ２０は、第１洗浄液からなる。第１洗浄液は、第１プラグ１
０を構成するオイル及び第３プラグ３０を構成するオイルのいずれとも混和しない液体で
ある。第１洗浄液としては、水、又は溶質濃度が１０ｍＭ以下、好ましくは７ｍＭ以下、
より好ましくは５ｍＭ以下の緩衝液が挙げられる。緩衝液の組成は、特に限定されないが
、トリス−塩酸緩衝液などを例示することができ、ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）
等を含有してもよい。このような第１洗浄液であれば、核酸が吸着した粒子等を効率よく
洗浄することができる。
【００３４】
第２プラグ２０の体積は、特に限定されず、核酸を吸着させた粒子等の量等を指標とし
て適宜設定することができる。例えば、粒子等の体積が、０．５μＬである場合には、第
２プラグ２０の体積は、１０μＬ以上であれば十分であり、２０μＬ以上５０μＬ以下と
することが好ましく、２０μＬ以上３０μＬ以下とすることがさらに好ましい。第２プラ
グ２０の体積が、この範囲であれば、粒子等の体積が、０．５μＬである場合に粒子等の
洗浄を十分に行うことができる。なお、粒子等の洗浄には、第２プラグ２０の体積は、よ
り大きいことが好ましいが、チューブ部１００の長さや太さ、これに依存する第２プラグ
２０のチューブ部１００の長手方向における長さ等を考慮して、適宜に設定することがで
きる。
【００３５】
第２プラグ２０は、オイルのプラグによって分割されて複数のプラグから構成されても
よい。第２プラグ２０がオイルプラグで分割された複数のプラグからなる場合は、第１洗
浄液のプラグが複数形成される。そのため、第２プラグ２０がオイルプラグで分割された
場合には、洗浄の対象が水溶性物質であれば、分割された第１洗浄液によって到達する水
溶性物質の濃度は、分割されていない同体積の第１洗浄液によって到達する水溶性物質の
濃度よりも小さくなるためより好ましい。第２プラグ２０が分割される数は任意であるが
、洗浄の対象が水溶性物質であれば、例えば、等体積で２分割すると、計算上は分割しな
い場合の１／４の濃度まで水溶性物質の濃度を低下させることができる。第２プラグ２０
が分割される数は、例えば、チューブ部１００の長さや洗浄の対象等を考慮して適宜設定
されることができる。
【００３６】
１．４．第４プラグ
第４プラグ４０は、チューブ部１００内の第３プラグ３０と第５プラグ５０との間の位
置に配置される。第４プラグ４０は、溶出液からなる。
【００３７】
溶出液とは、粒子等に吸着した核酸を、粒子から脱離させて液中に溶離させる液体のこ
とを指す。溶出液としては、例えば、滅菌水、蒸留水、イオン交換水等の精製された水、
又はそのような水に対して、酵素、ｄＮＴＰ、プローブ、プライマー及びバッファーの少
なくとも一種を溶解させた水溶液を挙げることができる。溶出液は、第３プラグ３０を構
成するオイル及び第５プラグ５０を構成するオイルのいずれとも混和しない液体である。
【００３８】
溶出液を水又は水溶液とすれば、核酸が吸着された粒子等が溶出液に浸漬されることで
、粒子等に吸着した核酸を遊離（溶出）させることができる。また、溶出液に酵素、ｄＮ
ＴＰ、プローブ、プライマー及びバッファーの少なくとも一種を溶解させた水溶液を選択
すると、粒子等に吸着した核酸を遊離（溶出）させるとともに、ＰＣＲの反応液に必要な
成分の一部又は全部を溶出液に含有させることができるので、溶出液を用いてＰＣＲの反
応液を調製する際の時間と手間をさらに省くことができる。第４プラグ４０の溶出液に酵
素、ｄＮＴＰ、プローブ、プライマー及びバッファーの少なくとも一種を溶解させる場合
の濃度は特に限定されず、調製するＰＣＲの反応液に合わせて設定できる。
【００３９】
なお、ここで、ｄＮＴＰは、４種類のデオキシリボヌクレオチド三リン酸（deoxynucle
otide triphosphate）（ｄＡＴＰ（Deoxyadenosine triphosphate）、ｄＣＴＰ（Deoxycy
tidine triphosphate）、ｄＧＴＰ（Deoxyguanosine triphosphate）、及びｄＴＴＰ（Th
ymidine triphosphate）を混合したもの）を表す。
【００４０】
第４プラグ４０の体積は、特に限定されず、核酸を吸着させた粒子等の量などを指標と
して適宜設定することができる。例えば、粒子等の体積が、０．５μＬである場合には、
第４プラグ４０の体積は、０．５μＬ以上であれば十分であり、０．８μＬ以上５μＬ以
下とすることが好ましく、１μＬ以上３μＬ以下とすることがさらに好ましい。第４プラ
グ４０の体積が、この範囲であれば、粒子等の体積が、０．５μＬである場合に粒子等か
らの核酸の溶出を十分に行うことができる。なお、粒子等からの核酸の溶出には、第４プ
ラグ４０の体積は、チューブ部１００の長さや太さ、及びＰＣＲの熱サイクルの迅速性を
考慮して、反応液の熱容量が大きくなりすぎないように考慮して適宜に設定することがで
きる。
【００４１】
１．５．作用効果
本実施形態の核酸抽出用デバイス１０００は、オイル、第１洗浄液及び溶出液がプラグ
状に配置されたチューブ部１００を有している。そのため、チューブ部１００に、核酸が
吸着された粒子等を第１プラグ１０側から導入して、第４プラグ４０まで移動させること
によって、核酸の抽出をきわめて短時間で容易に行うことができる。より詳細には、核酸
が吸着された粒子等を、チューブ部１００の第１プラグ１０側から導入し、第１プラグ１
０のオイル内を通過させ、第２プラグ２０の第１洗浄液で洗浄し、第３プラグ３０のオイ
ルを通過させ、第４プラグ４０の溶出液において粒子等から核酸を脱離させることができ
る。すなわち、本実施形態の核酸抽出用デバイス１０００は、核酸が吸着された粒子等を
チューブ部１００内において移動させることによって、高い純度で核酸を含有する溶出液
を得ることができる。そのため、核酸抽出用デバイス１０００によれば、ＰＣＲのための
前処理に要する時間と手間を大幅に削減することができる。
【００４２】
１．６．核酸抽出用デバイスの構成等
本実施形態の核酸抽出用デバイスは、チューブ部１００と、第１プラグ１０、第２プラ
グ２０、第３プラグ３０、第４プラグ４０、及び第５プラグ５０と、を有するが、他の機
能を付加する構成を含んでもよい。本実施形態の核酸抽出用デバイスは、以下に説明する
構成の組み合わせや、各構成の変形形態を含んでもよい。
【００４３】
１．６．１．チューブ部の端部
図２は、核酸抽出用デバイスの変形例の一種である核酸抽出用デバイス１０１０を模式
的に示す図である。本実施形態の核酸抽出用デバイスは、例えば、チューブ部１００の第
５プラグ５０側の端が開放されていてもよい。すなわち、図２に示すように、核酸抽出用
デバイス１０１０では、チューブ部１００の第５プラグ５０側の端が、開放された状態と
なっている。核酸抽出用デバイス１０１０によれば、チューブ部１００の第１プラグ１０
側からチューブ部１００の内部に圧力を印加することにより、第５プラグ５０及び第４プ
ラグ４０を順に吐出させることができる。これにより、核酸抽出用デバイス１０１０を用
いて、例えばＰＣＲのための反応容器等に、標的核酸を含む溶出液（第４プラグ４０）を
容易に分注することができる。
【００４４】
１．６．２．栓
図３は、核酸抽出用デバイスの変形例の一種である核酸抽出用デバイス１０２０を模式
的に示す図である。本実施形態の核酸抽出用デバイスは、図示のように、例えば、チュー
ブ部１００の第５プラグ５０側の端を封止する、脱着自在の栓１１０をさらに有してもよ
い。栓１１０は、例えば、ゴムやエラストマー、高分子等によりなることができる。栓１
１０によってチューブ部１００が封止される場合、栓１１０は、第５プラグ５０と接して
もよいし、第５プラグ５０と栓１１０の間に空気等の気体が配置されてもよい。また、栓
１１０は脱着自在であるが、その機構は特に限定されない。図３の例では、栓１１０の一
部がチューブ部１００の内部に挿入されて固定される態様を示しているが、栓１１０はキ
ャップ状であってもよい。
【００４５】
核酸抽出用デバイス１０２０において、栓１１０が外された場合には、チューブ部１０
０の第５プラグ５０側の端が開放して、上述した図２の核酸抽出用デバイス１０１０の態
様となり、核酸抽出用デバイス１０２０を用いて、例えばＰＣＲのための反応容器等に、
標的核酸を含む溶出液（第４プラグ４０）を容易に分注することができる。また、栓１１
０によってチューブ部１００の第５プラグ５０側の端が封止された状態（図３に示す状態
）であれば、各プラグのチューブ部１００内での移動を抑制する効果が得られ、これによ
り、例えば、粒子等をチューブ部１００内で移動させる場合に、粒子等の移動に伴ってプ
ラグが移動することを抑制することができる。
【００４６】
１．６．３．容器
図４は、核酸抽出用デバイスの構成の一例である核酸抽出用デバイス１０３０を模式的
に示す図である。図４に例示するように、核酸抽出用デバイス１０３０は、チューブ部１
００の第１プラグ１０側の端に内部を連通させて接続できる、脱着自在の容器１２０をさ
らに有している。
【００４７】
容器１２０は、独立した部材とすることができる。容器１２０は、内部に液体を収容す
ることができる。容器１２０は、液体や固体を出し入れできる開口１２１を有する。また
、図４の例では、容器１２０の開口１２１が、チューブ部１００の第１プラグ１０側の端
に内部を連通させて接続される態様となっている。また、容器１２０は、開口１２１を複
数有してもよく、この場合の開口１２１の１つをチューブ部１００の第１プラグ１０側の
端に内部を連通させて接続される態様としてもよい。
【００４８】
容器１２０の内容積は、特に限定されないが、例えば、０．１ｍＬ以上１００ｍＬ以下
とすることができる。容器１２０の開口１２１は、必要に応じて蓋１２２によって封止で
きる構造としてもよい。容器１２０の材質は、特に限定されず、高分子、金属等とするこ
とができる。
【００４９】
容器１２０の開口１２１は、チューブ部１００の第１プラグ１０側の端に接続すること
ができるが、容器１２０とチューブ部１００との間の接続は、内容物が漏出しない態様で
ある限り特に限定されない。容器１２０とチューブ部１００とが接続された場合には、容
器１２０の内部とチューブ部１００の内部とが連通することができる。また、容器１２０
は、必要に応じてチューブ部１００から取り外すことができる。
【００５０】
核酸抽出用デバイス１０３０のように、容器１２０を備えることにより、容器１２０内
において、例えば、粒子等と、吸着液と、検体と、を収容し、粒子等に核酸を吸着させる
ことができる。その後、容器１２０をチューブ部１００の第１プラグ１０側の端に接続す
れば、当該粒子等をチューブ部１００の第１プラグ１０側から容易にチューブ部１００内
に導入できる状態とすることができる。
【００５１】
吸着液とは、粒子（磁性粒子Ｍ）に核酸を吸着させる場となる液体のことを指し、例え
ば、カオトロピック剤を含む水溶液である。吸着液には、キレート剤、界面活性剤等が含
まれてもよい。具体的には、吸着液には、エチレンジアミン四酢酸二水素二ナトリウムや
その二水和物などが溶解されていてもよいし、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレ
ートなどが含まれてもよい。
【００５２】
ここで、カオトロピック剤とは、水分子間の相互作用を減少させ、それによって水分子
の構造を不安定化させる物質のことを指し、具体的には、グアニジニウムイオン、尿素、
ヨウ化物イオンなどが挙げられる。水中にカオトロピック剤が存在することによって、水
中の核酸は、水分子に囲まれて存在するよりも、固体に吸着して存在するほうが熱力学的
に有利となるため、粒子等の表面に吸着することとなる。カオトロピック剤を水中に発生
させうる物質としては、グアニジン塩酸塩、ヨウ化ナトリウムなどが挙げられる。
【００５３】
容器１２０は、チューブ部１００に接続していない状態で、振とうすることができ、容
器１２０内の液体を十分に撹拌することができる。これにより、迅速に粒子等に核酸を吸
着させることができる。容器１２０は、開口１２１を封止する蓋１２２を有してもよい。
さらに容器１２０に導入する検体の量とチューブ部１００内の液体（特に第４プラグ４０
）の体積とを適宜変更することによって、検体中の核酸を第４プラグ４０の溶出液におい
て定量的に濃縮することもできる。
【００５４】
容器１２０の材質にゴム、エラストマー、高分子等の可とう性を有するものを選択する
と、容器１２０をチューブ部１００に接続した状態で、容器１２０を変形させることによ
り、チューブ部１００の内部を加圧することができる。このようにすれば、第４プラグ４
０の溶出液をチューブ部１００の第５プラグ５０側の端から吐出させる際に、チューブ部
１００の第１プラグ１０側から圧力を印加することが容易である。これにより、例えばＰ
ＣＲのための反応容器等に溶出液を分注することができる。
【００５５】
１．６．４．液溜部
図５は、核酸抽出用デバイスの構成の一例である核酸抽出用デバイス１０４０を模式的
に示す図である。図５に例示するように、核酸抽出用デバイス１０４０は、チューブ部１
００の第１プラグ１０側の端に、チューブ部１００に連通する液溜部１３０が形成されて
いる。液溜部１３０の内部とチューブ部１００の内部とは連通している。
【００５６】
液溜部１３０は、内部に液体を収容することができる。液溜部１３０は、液溜部１３０
内部に外部から物質を導入できる開口１３１を有する。液溜部１３０における開口１３１
が形成される位置は特に限定されない。液溜部１３０は、開口１３１を複数有してもよい
。液溜部１３０の内容積は、特に限定されないが、例えば、０．１ｍＬ以上１００ｍＬ以
下とすることができる。液溜部１３０の材質は、特に限定されず、高分子、金属等とする
ことができ、チューブ部１００の材質と同じであってもよい。
【００５７】
核酸抽出用デバイス１０４０のように、液溜部１３０を備えることにより、液溜部１３
０内において、例えば、粒子等と、吸着液と、検体と、を収容し、粒子等に核酸を吸着さ
せることができる。そして、当該粒子等をチューブ部１００の第１プラグ１０側から容易
にチューブ部１００内に導入することができる。
【００５８】
また、液溜部１３０は、チューブ部１００とともに振とうすることができ、液溜部１３
０内の液体を十分に撹拌することができる。これにより、迅速に粒子等に核酸を吸着させ
ることができる。さらに液溜部１３０に導入する検体の量とチューブ部１００内の液体の
体積とを適宜変更することによって、検体中の核酸を溶出液において定量的に濃縮するこ
とができる。
【００５９】
核酸抽出用デバイス１０４０のように液溜部１３０を有する場合、液溜部１３０の開口
１３１を封止する、脱着自在の蓋１３２をさらに有してもよい。そして、液溜部１３０の
材質にゴム、エラストマー、高分子等の可とう性を有するものを選択すると、液溜部１３
０に蓋１３２を装着した状態で、液溜部１３０を変形させることにより、チューブ部１０
０の内部を加圧することができる。
【００６０】
このようにすれば、核酸が溶出された第４プラグ４０の溶出液をチューブ部１００の第
５プラグ５０側の端から吐出させる際に、チューブ部１００の第１プラグ１０側から圧力
を容易に印加することができる。これにより、容器１２０に検体を導入する工程から、例
えばＰＣＲのための反応容器等に容易に溶出液を分注する工程までを行うことができる。
また、蓋１３２を装着すれば、液溜部１３０をチューブ部１００とともに振とうする際の
液漏れを抑制することができるため、より粒子等に核酸を吸着させる効率を向上させるこ
とができる。
【００６１】
１．６．５．運搬・保存用構造
核酸抽出デバイスを持ち運んだり保存したりするときに、帯電したニトリル手袋をはめ
た手がチューブ部に触れることにより、水性溶液とチューブとの間に電場が生じる。その
場合、例えば、後述するように水性溶液をチューブの外に押し出そうとするとき、水性溶
液がチューブの内壁に引き寄せられて付着し、オイルだけが押し出され、水性溶液が動か
なかったり、プラグが分裂したり、あるいは水性溶液がチューブの内壁に反発し、水性溶
液の液滴がオイル中に浮遊したりすることがある。分裂したり、液滴になったりした水性
溶液は、静電気の作用によりオイル中を移動し、他の前処理試薬からなるプラグと混和す
ることがある。そうすると、混和したプラグの水性溶液の組成が変化し、各プラグの機能
を失いうる。
【００６２】
このため、核酸抽出デバイスは、その運搬時や保存時に、チューブ部内のオイルや水性
溶液の帯電を防止できる構造を備えることが好ましく、帯電したニトリル手袋をはめた手
などの帯電物質が、チューブ部内のオイルや水生溶液に近接しないような構造を備えるこ
とが好ましい。なお、本明細書で、「帯電の防止」というときは、帯電を１００％無くす
必要はなく、生じる帯電が、チューブが問題なく機能するほどにまで減少すれば、そのよ
うに呼ぶものとする。
【００６３】
帯電したニトリル手袋をはめた手などの帯電物質が、チューブ部内のオイルや水性溶液
に近接しないように、例えば、チューブ部を囲むようにカバー部を設けることができる。
図６は、チューブ部１００を覆うことのできる、脱着式カバー部としてのキャップ１４０
を装着した核酸抽出デバイス１０５０と、そのキャップ１４０を取り外したものを模式的
に示す図である。キャップ１４０の材質は、例えば、非磁性金属、ガラス、プラスティッ
ク、ゴム、石が例として挙げられる。核酸抽出デバイス１０４０を核酸抽出するために使
用する際には、キャップ１４０を除去し、後述する永久磁石４１０をチューブ部１００に
接近させてもよい。
【００６４】
図７は、チューブ部１００を覆うことのできる、カバー部としての、蓋１５１付き伸縮
式キャップ１５０を装着した核酸抽出デバイス１０６０と、その伸縮式キャップ１５０を
縮めたものを模式的に示す図である。伸縮式キャップ１５０は、チューブ部１００が延在
する方向に伸縮することができればどのような構造でもよく、例えば、ジャバラ構造にし
てもよい。核酸抽出するために核酸抽出デバイス１０６０を使用する際には、蓋１５１を
除去し、伸縮式キャップ１５０をチューブ部１００の伸長方向に縮めることによりチュー
ブ部１００を露出させる。伸縮式キャップ１５０は手で縮ませてもよく、または、核酸抽
出用装置に、伸縮式キャップ１５０の外径よりも小さい口径のデバイス挿入口を設け、核
酸抽出デバイス１０６０をそのデバイス挿入口に押し入れることで、伸縮式キャップ１５
０を縮ませ、後述する永久磁石４１０をチューブ部１００に接近させてもよい。
【００６５】
図８は、チューブ部１００を覆うことのできる、伸縮式カバー部としての、バネ１６１
とバネ１６１の保持部１６２とを有するカバー１６０を装着した核酸抽出デバイス１０７
０と、そのバネ１６１を縮めたものを模式的に示す図である。バネ１６１が容易に左右に
揺れる場合は、バネ１６１を所定の位置に固定するための支柱をバネ１６１の内側に設け
てもよい。核酸抽出するために核酸抽出デバイス１０７０を使用する際には、バネ１６１
をチューブ部１００の伸長方向に手で縮ませ、チューブ部１００を露出させ、縮ませたバ
ネ１６１を保持部１６２に固定する。核酸抽出用装置に、バネ１６１の外径よりも小さい
口径のデバイス挿入口を設け、デバイスをそのデバイス挿入口に押し入れることで、バネ
を縮ませてチューブ部１００を露出させ、後述する永久磁石４１０をチューブ部１００に
接近させてもよい。
【００６６】
図９は、チューブ部１００から支持部１７０を介して形成したカバー部１７１を備えた
核酸抽出デバイス１０８０を模式的に示す図である。図９Ｂは、図９Ａの破線部における
断面図である。核酸抽出するために核酸抽出デバイス１０８０を使用する際には、カバー
部１７１の外側から永久磁石４１０を近接させてもよい。
【００６７】
図１０は、カバー部１７１に、チューブ部１００の延在する方向に延びるスリット１７
３を設けた核酸抽出デバイス１０８２を模式的に示す図である。図１０Ｂは、図１０Ａの
破線部における断面図である。核酸抽出するために核酸抽出デバイス１０８２を使用する
際には、後述する永久磁石４１０は、スリット１７３に挿入して、チューブ部１００に近
接させることができる。
【００６８】
図１１Ａは、網目構造としたカバー部１７４を有する核酸抽出デバイス１０８４を模式
的に示す図である。図１１Ｂは、水玉状に穴が開いているカバー部１７５を有する核酸抽
出デバイス１０８５を模式的に示す図である。核酸抽出デバイス１０８４，１０８５には
、カバー部に穴が１つ以上設けられているが、穴の大きさが人の指の大きさよりも小さい
ため、運搬時に核酸抽出デバイス１０８４，１０８５を把持した人の手の指がカバー部を
超えてチューブ部１００に接近することを抑制する。
【００６９】
図１２は、留具１８０付きの袋１８１に入れた核酸抽出デバイス１０８６を模式的に示
す図である。核酸抽出デバイス１０８６の運搬時に、帯電したニトリル手袋をはめた手で
袋１８１を握っても、前記チューブ部と前記カバー部とが付着することが防止できるよう
に、手がチューブ部１００の内腔表面から３ｍｍ以上近接しない程度に、袋１８１内に窒
素などの気体を封入して、膨張させることが好ましい。袋１８１の素材は、変形可能な材
料で形成されれば特に限定されないが、例えばビニールを用いることができる。核酸抽出
するために核酸抽出デバイス１０８６を使用する際には、袋１８１を破いて、チューブ部
１００を露出させてもよい。これにより、チューブ部１００に永久磁石４１０を近接させ
ることができる。袋１８１は、留具１８０を引けば容易に袋が裂ける構造にしてもよい。
【００７０】
帯電したニトリル手袋をはめた手などの帯電物質が、チューブ部内腔に近接しないよう
に、核酸抽出デバイスのチューブ部の側壁の厚みを厚くすることもできる。これにより、
帯電した手などがチューブ部に触れた場合でも、チューブ部内のオイルや水性溶液が帯電
することを防止できる。チューブ部の側壁の厚みは、チューブ部内腔中のオイルや水性溶
液の帯電を防止することのできる厚みであり、かつ、後述する永久磁石での操作がチュー
ブ部の側壁を介してできる厚みであればよいが、３ｍｍ以上であることが好ましく、９．
５ｍｍ以下であることが好ましい。
【００７１】
チューブ部の側壁中には、非磁性で導電物質の金属または合金などを埋め込むことによ
り、チューブ部内のオイルや水性溶液の帯電を防止する効果をさらに向上させることがで
きる。例えば、らせん状の銅線を埋め込むことができる。
【００７２】
以上のようにして、チューブ部内のオイルや水性溶液の帯電を防止すれば、チューブ部
における各プラグの位置を安定に維持することができる。そして、核酸抽出デバイスの帯
電を防止することによって、核酸抽出デバイスを用いた核酸抽出を自動化することが容易
となる。
【００７３】
１．６．６．第６プラグ及び第７プラグ
本実施形態の核酸抽出用デバイスは、チューブ部の内部に、第６プラグ及び第７プラグ
を有してもよい。図１３は、チューブ部１００の内部に、第６プラグ６０及び第７プラグ
７０を有する核酸抽出用デバイス１１００を模式的に示す図である。
【００７４】
核酸抽出用デバイス１１００は、上述の核酸抽出用デバイスのチューブ部１００の内部
の第３プラグ３０と第４プラグ４０との間に、第３プラグ３０側から順に、オイルと混和
しない第２洗浄液からなる第６プラグ６０、及びオイルからなる第７プラグ７０を追加し
た構成を有している。
【００７５】
第６プラグ６０は、チューブ部１００内の第３プラグ３０の第２プラグ２０と反対側の
位置に配置される。第６プラグ６０は、第２洗浄液からなる。第２洗浄液は、第３プラグ
３０を構成するオイル及び第７プラグ７０を構成するオイルのいずれとも混和しない液体
である。第２洗浄液としては、水、又は溶質濃度が１０ｍＭ以下、好ましくは７ｍＭ以下
、より好ましくは５ｍＭ以下の緩衝液が挙げられる。緩衝液の組成は、特に限定されない
が、トリス−塩酸緩衝液などを例示することができ、ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸
）等を含有してもよい。また、第２洗浄液は、第１洗浄液と同じ組成であってもよいし、
異なる組成であってもよい。
【００７６】
第６プラグ６０の体積は、特に限定されず、核酸を吸着させた粒子等の量等を指標とし
て適宜設定することができる。例えば、粒子等の体積が、０．５μＬである場合には、第
６プラグ６０の体積は、１０μＬ以上であれば十分であり、２０μＬ以上５０μＬ以下と
することが好ましく、２０μＬ以上３０μＬ以下とすることがさらに好ましい。第６プラ
グ６０の体積が、この範囲であれば、粒子等の体積が、０．５μＬである場合に粒子等の
洗浄を十分に行うことができる。なお、粒子等の洗浄には、第６プラグ６０の体積は、よ
り大きいことが好ましいが、チューブ部１００の長さや太さ、これに依存する第６プラグ
６０のチューブ部１００の長手方向における長さ等を考慮して、適宜に設定することがで
きる。
【００７７】
第６プラグ６０は、オイルのプラグによって分割されて複数のプラグから構成されても
よい。第６プラグ６０がオイルプラグで分割された複数のプラグからなる場合は、第２洗
浄液のプラグが複数形成される。そのため、第６プラグ６０がオイルプラグで分割された
場合には、洗浄の対象が水溶性物質であれば、分割された第２洗浄液によって到達する水
溶性物質の濃度は、分割されていない同体積の第２洗浄液によって到達する水溶性物質の
濃度よりも小さくなるためより好ましい。第６プラグ６０が分割される数は任意であるが
、洗浄の対象が水溶性物質であれば、例えば、等体積で２分割すると、計算上は分割しな
い場合の１／４の濃度まで水溶性物質の濃度を低下させることができる。第６プラグ６０
が分割される数は、例えば、チューブ部１００の長さや洗浄の対象等を考慮して適宜設定
されることができる。なお、第２プラグ２０の第１洗浄液と、第６プラグ６０の第２洗浄
液を同一とした場合には、上述の第６プラグ６０及び第７プラグ７０を有さない核酸抽出
用デバイスにおいて第２プラグ２０を分割した場合と同様の効果が得られる。
【００７８】
第７プラグ７０は、隣り合う第６プラグ６０及び第４プラグ４０の液体と混和しないオ
イルからなる。第７プラグ７０のオイルは、第１プラグ１０、第３プラグ３０、及び第５
プラグ５０のオイルと異なる種類のオイルであってもよい。オイルとしては、第１プラグ
１０等において例示したと同様とすることができる。
【００７９】
第７プラグ７０の中には、気泡や他の液体がないことが好ましいが、核酸を吸着させた
粒子等が第７プラグ７０を通過できる限りにおいて、気泡や他の液体が存在してもよい。
また、第７プラグ７０と隣り合う第４プラグ４０及び第６プラグ６０との間には、気泡や
他の液体がないことが好ましいが、核酸を吸着させた粒子等がチューブ部１００内を移動
できる限りにおいて、気泡や他の液体が存在してもよい。なお、第７プラグ７０の中には
、気泡や他の液体がないことが好ましい。
【００８０】
第７プラグ７０のチューブ部１００の長手方向における長さは、プラグが形成可能な範
囲であれば特に限定されない。第７プラグ７０のチューブ部１００の長手方向における具
体的な長さとしては、１ｍｍ以上５０ｍｍ以下であり、粒子等の移動距離を大きくしすぎ
ないように、１ｍｍ以上３０ｍｍ以下が好ましく、５ｍｍ以上２０ｍｍ以下がさらに好ま
しい。核酸抽出用デバイス１１００では、第７プラグ７０のチューブ部１００の長手方向
における長さを長くすると、第４プラグ４０をチューブ部１００の第５プラグ５０側の端
から吐出する態様を採る場合に、第６プラグ６０を吐出しにくくすることができる。この
場合、第７プラグ７０の具体的な長さとしては、１０ｍｍ以上５０ｍｍ以下とすることが
できる。
【００８１】
また、第７プラグ７０は、第２洗浄液（第６プラグ６０）及び溶出液（第４プラグ４０
）が互いに混合することを抑制する機能を有する。また第７プラグ７０は、より高粘度の
オイルとすることにより、第２洗浄液（第６プラグ６０）との界面で、粒子等を移動させ
る場合に、オイルによる「ぬぐい効果」を高めることができる。これにより、第６プラグ
６０の第２洗浄液のプラグから、オイルの第７プラグ７０に粒子等を移動させた場合に、
粒子等に付着した水溶性の成分を第７プラグ７０（オイル）に、より持ち込まれにくくす
ることができる。
【００８２】
核酸抽出用デバイス１１００によれば、核酸が吸着された粒子等を、第２プラグ２０及
び第６プラグ６０において洗浄することができる。これにより、粒子等の洗浄効率をさら
に高めることができる。
【００８３】
また、核酸抽出用デバイス１１００においては、第２プラグ２０の第１洗浄液にカオト
ロピック剤を含有させてもよい。例えば、第２プラグ２０の第１洗浄液にグアニジン塩酸
塩を含有させると、第２プラグ２０において、粒子等に吸着した核酸の吸着を維持又は強
化しつつ粒子等を洗浄することができる。第２プラグ２０にグアニジン塩酸塩を含有させ
る場合の濃度としては、例えば、３ｍｏｌ／Ｌ以上１０ｍｏｌ／Ｌ以下、好ましくは５ｍ
ｏｌ／Ｌ以上８ｍｏｌ／Ｌ以下とすることができる。グアニジン塩酸塩の濃度がこの範囲
であれば、粒子等に吸着された核酸をより安定に吸着させつつ、他の夾雑物等を洗浄する
ことができる。
【００８４】
そして、第６プラグ６０の第２洗浄液を、水又は緩衝液とすることで、第２プラグ２０
（第１洗浄液）において、粒子等に吸着した核酸をより安定して吸着させるとともに洗浄
を行うことができ、かつ、第６プラグ６０（第２洗浄液）において、カオトロピック剤を
希釈しつつ粒子等をさらに洗浄することができる。
【００８５】
チューブ部１００の内部に、第６プラグ６０及び第７プラグ７０を有する核酸抽出用デ
バイス１１００であっても、上述した栓、容器、液溜部等を構成に付加することができ、
上述と同様の効果が得られることは容易に理解されよう。
【００８６】
２．核酸抽出用キット
図１４は、本実施形態の核酸抽出用キットの一例を示す模式図である。図１４に例示し
た核酸抽出用キット２０００は、上述した核酸抽出用デバイスの要部を構成する部品を含
む。「１．核酸抽出用デバイス」の項において説明した構成と同様の構成については、同
じ符号を付して詳細な説明は省略する。
【００８７】
本実施形態の核酸抽出用キット２０００は、オイルからなる第１プラグ１０、オイルと
混和しない第１洗浄液からなる第２プラグ２０、オイルからなる第３プラグ３０、オイル
と混和しない溶出液からなる第４プラグ４０、及びオイルからなる第５プラグ５０、が当
該順で内部に配置されたチューブ２００と、チューブ２００の第１プラグ１０側の端に内
部を連通させて接続可能な容器１２０と、を含む。
【００８８】
チューブ２００は、核酸抽出用デバイス１０００のチューブ部１００の両端が開放され
た態様のものであり、内部に空洞を有し、当該空洞内に液体を長手方向に流通させること
のできる筒状の形状を有する。チューブ２００の内部形状、外形形状、大きさ、性質、材
質等は、核酸抽出用デバイス１０００のチューブ部１００と同様である。チューブ２００
の内部に配置されるプラグは、核酸抽出用デバイス１０００のチューブ部１００に配置さ
れるプラグと同様である。また、チューブ２００の両端は、脱着自在の栓１１０によって
封止されてもよい。チューブ２００の両端が栓１１０によって封止されている場合、例え
ば、核酸抽出用キット２０００の保管、移送がより容易になる。さらに、チューブ２００
の使用時に、栓１１０がチューブ２００の第５プラグ５０側の端を封止した状態とすれば
、チューブ２００の内部で粒子等を移動させる際に、各プラグのチューブ２００内での移
動を抑制することができるので、洗浄、抽出をさらに容易化することができる。その上、
当該栓１１０は、脱着自在であるため、チューブ２００の第５プラグ５０側の端を開放す
ることができ、核酸が溶出された第４プラグ４０の溶出液をチューブ２００の第５プラグ
５０側の端から吐出させることが容易である。
【００８９】
容器１２０は、核酸抽出用デバイス１０００の項で説明した容器１２０と同様である。
【００９０】
図１４の例では、チューブ２００の両端が、脱着自在の栓１１０によって封止されてい
る。また、核酸抽出用キット２０００は、容器１２０の開口１２１を脱着自在に封止する
蓋１２２を含んでもよく、容器１２０の開口１２１が脱着自在の蓋１２２によって封止さ
れてもよい。さらに、核酸抽出用キット２０００では、吸着液の成分の一部又は全部が容
器１２０に収容されていてもよい。
【００９１】
また、核酸抽出用キット２０００では、容器１２０は、吸着液及び磁性粒子を収容して
いてもよい。このようにすれば、検体を容器１２０に導入した際、検体に含まれる核酸を
磁性粒子に吸着させる工程を、容器１２０において行うことができる。これにより、他の
容器を用意する必要がなく、さらに迅速にＰＣＲの前処理を行うことができる。またこの
場合、容器１２０の開口１２１は、必要に応じて脱着自在の蓋１２２によって封止されて
もよい。磁性粒子については後に詳述する。
【００９２】
また、容器１２０を、既に述べたように、可とう性を有する材質とすれば、容器１２０
をチューブ２００に接続した状態で、容器１２０を変形させることにより、チューブ２０
０の内部を加圧することができる。このようにすれば、核酸が溶出された第４プラグ４０
の溶出液をチューブ２００の第５プラグ５０側の端から吐出させる際に、チューブ２００
の第１プラグ１０側から圧力を容易に印加することができる。これにより、例えばＰＣＲ
のための反応容器等に容易に溶出液を分注することができる。
【００９３】
核酸抽出用キット２０００には、チューブ２００及び容器１２０の他に、例えば、栓、
蓋、取扱説明書、試薬、ケース等の他の構成が含まれてもよい。またここではチューブ２
００内に５つのプラグが配置されている例を示したが、「１．６．核酸抽出用デバイス」
の項において説明したと同様に、チューブ２００（チューブ部１００）内には、第６プラ
グ６０、第７プラグ７０等や、必要に応じてその他のプラグが配置されてもよいことは容
易に理解されよう。
【００９４】
本実施形態の核酸抽出用キット２０００は、チューブ２００の第１プラグ１０側の端に
内部を連通させて接続可能な容器１２０を有するため、容器１２０内において、粒子等と
検体とを収容すれば、粒子等に核酸を吸着させることができ、容器１２０をチューブ２０
０の第１プラグ１０側の端に接続すれば、当該粒子等をチューブ２００の第１プラグ側か
ら容易にチューブ２００内に導入することができる。また、本実施形態の核酸抽出用キッ
ト２０００は、容器１２０を有するため、容器１２０を振とうすることができ、容器１２
０内の液体を十分に撹拌することができる。これにより迅速に粒子等に核酸を吸着させる
ことができる。
【００９５】
また、チューブ２００に容器１２０を接続することにより、核酸が吸着された粒子等を
チューブ２００の第１プラグ１０側の端から導入して、第４プラグ４０まで移動させるこ
とが容易である。これにより、核酸の抽出をきわめて短時間で容易に行うことができる。
核酸抽出用キット２０００は、核酸が吸着された粒子等をチューブ２００内において移動
させることによって、高い純度で核酸を含有する溶出液を得ることができる。そのため、
核酸抽出用キット２０００によれば、ＰＣＲのための前処理に要する時間と手間を大幅に
削減することができる。
【００９６】
３．核酸抽出方法
上述した核酸抽出用デバイス、核酸抽出用キット及びそれらの変形形態、並びに後述す
る核酸抽出用装置は、いずれも本実施形態の核酸抽出方法に好適に利用することができる
。以下、本実施形態の核酸抽出方法の一例として、上述の核酸抽出用キット２０００を利
用した方法を述べる。
【００９７】
本実施形態の核酸抽出方法は磁性粒子Ｍ及び吸着液が収容された可とう性を有する容器
１２０に、核酸を含有する検体を導入する工程と、容器１２０を揺動して核酸を磁性粒子
Ｍに吸着させる工程と、オイルからなる第１プラグ１０、オイルと混和しない第１洗浄液
からなる第２プラグ２０、オイルからなる第３プラグ３０、オイルと混和しない溶出液か
らなる第４プラグ４０及びオイルからなる第５プラグ５０、が当該順で内部に配置された
チューブ２００の第１プラグ１０側の端に、容器１２０内部とチューブ２００内部を連通
させて容器１２０を接続する工程と、磁力を印加して容器１２０内部からチューブ２００
内部を通過させて第５プラグ５０の位置まで、磁性粒子Ｍを移動させる工程と、第４プラ
グ４０の溶出液に対して磁性粒子Ｍから核酸を溶出させる工程と、を含む。
【００９８】
本実施形態の核酸抽出方法では、吸着液を用いて核酸を吸着させることのできる粒子で
あって、チューブ２００内を移動させることのできる粒子であれば、各種（例えばシリカ
粒子、ポリマー粒子、磁性粒子等）の粒子を用いることができるが、以下に説明する核酸
抽出方法の一実施形態では、磁性体を含有する粒子であって、粒子表面に核酸を吸着でき
る磁性粒子Ｍを使用する。なお、磁性粒子Ｍ以外の粒子等をチューブ内で移動させる場合
は、例えば、重力や電位差を利用してこれを行うことができる。
【００９９】
本実施形態の核酸抽出方法では、容器１２０及びチューブ２００に磁力を透過する材質
を選び、容器１２０及びチューブ２００の外部から磁力を印加することによって磁性粒子
Ｍを容器１２０及びチューブ２００の内部で移動させる。
【０１００】
検体には標的となる核酸が含まれている。以下、これを単に標的核酸ということがある
。標的核酸は、例えば、ＤＮＡやＲＮＡ（ＤＮＡ：Deoxyribonucleic Acid、及び／又は
ＲＮＡ：Ribonucleic Acid）である。標的核酸は、本実施形態の核酸抽出方法によって検
体から抽出され、溶出液に溶出された後、例えばＰＣＲの鋳型として利用される。検体と
しては、血液、鼻腔粘液、口腔粘膜、その他各種の生体試料などが挙げられる。
【０１０１】
３．１．容器に検体を導入する工程
容器１２０に検体を導入する工程は、例えば、綿棒に検体を付着させ、容器１２０の開
口１２１から、当該綿棒を差し入れ、吸着液にこれを浸漬して行うことができる。また、
検体は、ピペット等によって容器１２０の開口１２１から導入してもよい。また検体がペ
ースト状や固体状であれば、例えば、容器１２０の開口１２１から匙やピンセット等によ
り容器１２０の内壁に付着させたり投入してもよい。
【０１０２】
３．２．核酸を磁性粒子に吸着させる工程
核酸を吸着させる工程は、容器１２０を揺動させて行われる。この工程は、容器１２０
の開口１２１を封止する蓋１２２があれば、これを用いて容器１２０を封止して行うとよ
り効率的に行うことができる。この工程により、標的核酸は、カオトロピック剤の作用に
より、磁性粒子Ｍの表面に吸着される。この工程では、磁性粒子Ｍの表面には、標的核酸
の他に標的核酸以外の核酸や蛋白質が吸着してもよい。
【０１０３】
容器１２０を揺動させる方法としては、ボルテックスシェイカーなどの装置を用いても
よいし、作業者の手で振り混ぜてもよい。また、磁性粒子Ｍの磁性を利用して、外部から
磁場を与えながら容器１２０を揺動してもよい。容器１２０を揺動させる時間は、適宜設
定されうるが、例えば容器１２０のおよその形状が、直径が２０ｍｍ高さが３０ｍｍ程度
の円筒状である場合には、容器１２０を１０秒間手で振って揺動する程度で十分に撹拌さ
れ、核酸が磁性粒子Ｍの表面に吸着する。
【０１０４】
３．３．チューブに容器を接続する工程
次に図１５に示すように、チューブ２００の第１プラグ１０側の端に容器１２０を接続
する。チューブ２００内の各プラグは、第１プラグ１０側の栓１１０を外しても、第７プ
ラグ７０側の栓１１０がなされているため、チューブ２００内を移動しにくくなっている
。この工程は、チューブ２００の第１プラグ１０側の端に栓１１０が取り付けられている
場合には該栓１１０を外して行う。そして、容器１２０及びチューブ２００は、内容物が
漏出しないように接続され、容器１２０内部とチューブ２００の内部との間で内容物が流
通可能なように連通される。
【０１０５】
３．４．磁性粒子を移動させる工程
上記工程を経ると、容器１２０内の核酸が吸着した磁性粒子Ｍがチューブ２００に流通
できる状態となっている。核酸が吸着した磁性粒子Ｍをチューブ２００に導く手法として
は、重力や遠心力を利用する方法を用いてもよく、特に制限されないが、本実施形態では
容器１２０及びチューブ２００の外部から磁力を印加して行う。磁力は、例えば、永久磁
石、電磁石等により印加することができるが、発熱等を生じない点で、永久磁石を用いて
印加することがより好ましい。また、永久磁石を用いる場合には、作業者の手で磁石を動
かして行ってもよいし、機械装置等を利用して行ってもよい。磁性粒子Ｍは、磁力によっ
て引き寄せられる性質を有しているため、この性質を利用して、容器１２０及びチューブ
２００と、永久磁石の相対的な配置を変化させて、容器１２０内からチューブ２００に移
動させる。これにより、第１プラグ１０から順に、各プラグを通って、第４プラグ４０ま
で磁性粒子Ｍが移動される。磁性粒子Ｍが各プラグを通過するときの各プラグにおける滞
在時間は特に限定されないし、同一プラグ内でチューブ２００の長手方向に沿って往復す
るようにして移動させてもよい。
【０１０６】
３．５．核酸を溶出させる工程
磁性粒子Ｍが第４プラグ４０に到達すると、溶出液の作用により、磁性粒子Ｍに吸着さ
れた核酸が、第４プラグ４０の溶出液に溶出する。本工程を経ると、検体から溶出液に対
して核酸が溶出し、検体から核酸が抽出された状態となる。
【０１０７】
３．６．作用効果
本実施形態の核酸抽出方法によれば、核酸の抽出をきわめて短時間で容易に行うことが
できる。本実施形態の核酸抽出方法は、核酸が吸着された磁性粒子Ｍをチューブ２００内
において移動させることによって、高い純度で核酸を含有する溶出液を得ることができる
。本実施形態の核酸抽出方法によれば、ＰＣＲのための前処理に要する時間と手間を大幅
に削減することができる。
【０１０８】
３．７．第４プラグをチューブから吐出させる工程
本実施形態の核酸抽出方法は、容器１２０を変形させて、第５プラグ５０及び第４プラ
グ４０をチューブ２００の容器１２０が接続した端と反対側の端から吐出させる工程を含
んでもよい。
【０１０９】
本工程は「３．５．核酸を溶出させる工程」の後、容器１２０を変形させることで行う
ことができる。第４プラグ４０を吐出するときには第５プラグ５０が先に吐出される。な
お、チューブ２００の第５プラグ５０側を封止している栓１１０は、本工程に先立って取
り除き、チューブ２００の第５プラグ５０側の端を開放しておく。
【０１１０】
容器１２０に外力を加えて、内圧を高めるように変形させると、圧力によりチューブ２
００の第１プラグ１０側から第５プラグ５０側へと各プラグが移動する。これにより、チ
ューブ２００の第５プラグ５０側の端から、第５プラグ５０及び第４プラグ４０の順に吐
出される。第３プラグ３０（又は第７プラグ７０）は、吐出されてもよいが、第２プラグ
２０（又は第６プラグ６０）は吐出されないようにする。この場合、例えば、第３プラグ
３０（又は第７プラグ７０）の体積を他のプラグよりも大きく設定し、第３プラグ３０（
又は第７プラグ７０）のチューブ２００の長手方向の長さを大きくすれば、第２プラグ２
０（又は第６プラグ６０）を吐出させてしまうことを防止しやすい。
【０１１１】
第４プラグ４０及び第５プラグ５０は、例えば、ＰＣＲのための反応容器に対して吐出
される。そのため、ＰＣＲのための反応容器には、溶出液とオイルが分注されるが、通常
オイルは、ＰＣＲの反応に影響を与えないため、例えば、ＰＣＲの反応容器にあらかじめ
第５プラグ５０のオイルと同種のオイルを収容しておくこともできる。また、その場合、
チューブ２００の先端がオイル内にある状態で本工程を行うと、標的核酸が含まれる溶出
液を外気に接触させることなくＰＣＲの反応容器に導入することができる。本実施形態の
核酸抽出方法が本工程を含む場合には、例えばＰＣＲのための反応容器等に、標的核酸を
含む溶出液を容易に分注することができる。
【０１１２】
３．８．変形例
３．８．１．磁性粒子を移動させる工程の変形
図１６は、本実施形態の核酸抽出方法の一変形形態を説明するための模式図である。
【０１１３】
上述の「３．４．磁性粒子を移動させる工程」では、磁性粒子Ｍに対して磁力を外部か
ら印加することによって、磁性粒子Ｍを第１プラグ１０から各プラグを通過させて第４プ
ラグ４０まで移動させると説明した。しかし、磁性粒子Ｍが第２プラグ２０に移動された
ときに、外部から印加される磁力を変化させて、第２プラグ２０内で磁性粒子Ｍを振動さ
せたり、拡散凝集を繰り返したりして行ってもよい。このようにすれば、第２プラグ２０
の第１洗浄液による磁性粒子Ｍの洗浄効果を高めることができる。
【０１１４】
具体的には、図１６のＡ、Ｂに示すように、磁力を印加する手段として、一対の永久磁
石４１０を用いる場合には、永久磁石４１０によって容器１２０から磁性粒子Ｍを移動さ
せ、第１プラグ１０を通過させて、第２プラグ２０まで磁性粒子Ｍが到達したときに、一
方の永久磁石４１０をチューブ２００から遠ざけ、他方の永久磁石４１０を、チューブ２
００に対して対向する側から近づけると、磁性粒子Ｍを第２プラグ２０内でチューブ２０
０の長手方向と交差する方向に振動させることができる（図中Ａ，Ｂの態様の繰り返し）
。このようにすれば、第２プラグ２０の第１洗浄液による磁性粒子Ｍの洗浄効果を高める
ことができる。このような磁性粒子Ｍの洗浄は、第２プラグ２０を分割した場合や、チュ
ーブ２００内に第６プラグ６０が配置される場合に、複数の第２プラグ２０や、第６プラ
グ６０において適用してもよい。
【０１１５】
また、図１６のＣに示すように、永久磁石４１０を単にチューブ２００から遠ざけるこ
とにより、第２プラグ２０内で磁性粒子Ｍを拡散させることができる。磁性粒子Ｍは、表
面が親水性であるため、例えば第２プラグ２０において、磁力を弱めて拡散されたとして
も、第１プラグ１０や第３プラグ３０のオイルには進入しにくいので、このような態様と
してもよい。
【０１１６】
具体的には、永久磁石４１０によって容器１２０から磁性粒子Ｍを移動させ、第１プラ
グ１０を通過させて第２プラグ２０に磁性粒子Ｍが到達したときに、永久磁石４１０をチ
ューブ２００から遠ざけ、第２プラグ２０内において磁性粒子Ｍを拡散させる。そして、
磁性粒子Ｍを再び永久磁石４１０の磁力によって移動させ、第３プラグ３０を通過させて
、第４プラグ４０に導くことができる。
【０１１７】
このような外部から印加される磁力を変化させて、磁性粒子Ｍを振動させたり、拡散凝
集を繰り返したりする態様は、容器１２０内の吸着液に磁性粒子Ｍが存在する状態や、第
４プラグ４０（溶出液）に磁性粒子Ｍが存在する状態において適用してもよい。
【０１１８】
３．８．２．核酸を溶出させる工程の変形
上述の「３．５．核酸を溶出させる工程」では、第４プラグ４０を加熱して行ってもよ
い。第４プラグ４０を加熱する方法としては、例えば、チューブ２００の第４プラグ４０
に対応する位置に、ヒートブロック等の熱媒体を接触させる方法や、ヒーター等の熱源を
用いる方法、電磁加熱による方法などを例示することができる。
【０１１９】
第４プラグ４０を加熱する場合には、第４プラグ４０以外のプラグも加熱されてもよい
が、核酸が吸着された磁性粒子Ｍが、洗浄液のプラグに存在する状態では、当該プラグは
加熱されないことが好ましい。第４プラグ４０を加熱する場合の到達温度としては、溶出
の効率の観点及び溶出液にＰＣＲの酵素を含む場合に該酵素の失活を抑制する観点から、
３５℃以上８５℃以下が好ましく、より好ましくは４０℃以上８０℃以下、さらに好まし
くは４５℃以上７５℃以下である。
【０１２０】
核酸を溶出させる工程において、第４プラグ４０を加熱すると、磁性粒子Ｍに吸着され
た核酸を、溶出液に対して、より効率的に溶出させることができる。また、第１洗浄液又
は第２洗浄液と、溶出液の組成が同一又は類似していても、洗浄液に対して溶出せずに磁
性粒子Ｍに残って吸着している核酸を溶出液に対して溶出させることができる。すなわち
、核酸が吸着した磁性粒子Ｍを第１洗浄液又は第２洗浄液によって洗浄した後でも、溶出
液に対して核酸をさらに溶出させることができる。これにより、洗浄液の組成と、溶出液
の組成が同一又は類似していても、十分な洗浄と、溶出液への十分な濃度での溶出とを両
立ことができる。
【０１２１】
３．８．３．第４プラグをチューブから吐出させる工程の変形
上述の「３．７．第４プラグをチューブから吐出させる工程」を採用する場合、係る工
程において、溶出液に対して吸着された核酸を溶出した磁性粒子Ｍは、第４プラグ４０内
に存在してもよいが、さらに、磁力を印加することによって、第１プラグ１０、第２プラ
グ２０、第３プラグ３０のいずれかのプラグ、又は容器１２０の中まで移動させてから行
ってもよい。このようにすれば、溶出液に磁性粒子Ｍが含まれない状態で、第４プラグ４
０をチューブ２００から吐出することができる。また、磁性粒子Ｍを移動させる先は、第
２プラグ２０又は容器１２０とすれば、磁力を取り去っても、第３プラグ３０のオイル内
に磁性粒子Ｍが進入しにくいため、第４プラグ４０をチューブ２００から吐出することを
より容易にすることができる。
【０１２２】
４．核酸抽出用装置
本実施形態に係る核酸抽出用装置は、上で説明した核酸抽出用デバイス、核酸抽出用キ
ット及び核酸抽出方法に好適に適用することができる。以下では、核酸抽出用キット２０
００を装着して核酸の抽出を行う核酸抽出用装置３０００を一実施形態として説明する。
図１７は、本実施形態の核酸抽出装置３０００を模式的に示す斜視図である。
【０１２３】
本実施形態の核酸抽出用装置３０００は、長手方向を有し、オイルからなる第１プラグ
１０、オイルと混和しない第１洗浄液からなる第２プラグ２０、オイルからなる第３プラ
グ３０、オイルと混和しない溶出液からなる第４プラグ４０、及びオイルからなる第５プ
ラグ５０、が当該順で内部に配置されたチューブを装着する装着部３００と、装着部３０
０にチューブ２００が装着された場合に、チューブ２００の側面から磁力を印加する磁力
印加部４００と、装着部３００及び磁力印加部４００の相対的な配置を、チューブ２００
の長手方向に沿って変化させる移動機構５００と、を含む。
【０１２４】
核酸抽出用装置３０００の装着部３００に装着されるチューブ２００は、上述したチュ
ーブ２００である。核酸抽出用装置３０００は、チューブ２００を装着する装着部３００
を有する。なお、チューブ２００内には、第１プラグ１０ないし第５プラグ５０が配置さ
れた例とするが、上述した第６プラグ６０、第７プラグ７０が配置されていてもよい。
【０１２５】
装着部３００は、チューブ２００を装着する部位である。装着部３００には、チューブ
２００とともに、チューブ２００に接続された容器１２０が装着されてもよい。装着部３
００は、チューブ２００及び必要に応じて容器１２０に対して、磁力印加部４００によっ
て磁力が印加できる範囲で、構成や装着するための機構等を適宜設計することができる。
装着部３００は、チューブ２００が可とう性を有して屈曲している場合などに、チューブ
２００を直線状の形状に伸ばして装着することができるように構成されてもよい。また、
図示の例では、装着部３００は、チューブ２００が沿うように配置される添え板３１０を
有している。添え板３１０は、必須の構成ではないが、添え板３１０を設置すると、チュ
ーブ２００の振動等を抑制することができる場合がある。また、図示の例では、装着部３
００は、クリップ機構３２０を有しており、これによりチューブ２００を２箇所で固定す
る態様となっている。
【０１２６】
装着部３００は、磁力印加部４００との位置関係を、チューブ２００の長手方向に対し
て相対的に変化するように構成される。従って、磁力印加部４００の移動を行わずに装着
部３００を磁力印加部４００に対して相対的に移動させるように設計する場合には、図示
のように、移動機構５００として、装着部３００を移動させる移動機構３６０を含んで構
成される。また、磁力印加部４００が移動機構を含む場合には、装着部３００には移動機
構３６０は不要な場合がある。図示の例では、装着部３００は、ヒンジ３３０、ガイドレ
ール３４０、駆動ベルト３５０、図示せぬモーターを含んで構成されている。
【０１２７】
核酸抽出用装置３０００の例では、装着部３００は、１つ設けられているが、複数設け
られてもよい。その場合は、磁力印加部４００も複数設けられることができるが、複数の
装着部３００は、それぞれ独立していてもよいし、連動するように設けられてもよい。
【０１２８】
磁力印加部４００は、装着部３００にチューブ２００が装着された際に、チューブ２０
０及び必要に応じて容器１２０に磁力を印加する構成である。磁力印加部４００は、例え
ば、永久磁石、電磁石、あるいはこれらの組み合わせを含んで構成される。磁力印加部４
００は、磁石等を少なくとも１つ備えるが、磁石等は複数備えられてもよい。磁力印加部
４００に電磁石を用いず、永久磁石を用いると、発熱等が生じにくいため好ましい。永久
磁石としては、例えば、ニッケル系、鉄系、コバルト系、サマリウム系、ネオジム系のも
のを用いることができる。
【０１２９】
磁力印加部４００は、容器１２０内及びチューブ２００内に存在する磁性粒子Ｍに対し
て磁力を印加する機能を有する。そして、装着部３００と磁力印加部４００との相対的な
位置関係を変化させることによって、磁性粒子Ｍを容器１２０内及びチューブ２００内で
移動させることができる。
【０１３０】
図示の例では、磁力印加部４００は、容器１２０及びチューブ２００を挟んで対向して
設けられた一対の永久磁石４１０を有している。一対の永久磁石４１０の間は、チューブ
２００の外径よりも大きい間隔で離間している。永久磁石４１０の極性の向く方向は、特
に限定されない。磁力印加部４００は、装着部３００との位置関係を、チューブ２００の
長手方向に対して相対的に変化するように構成される。従って、装着部３００の移動を行
わずに磁力印加部４００を装着部３００に対して相対的に移動させるように設計する場合
には、移動機構５００として、磁力印加部４００を移動させる移動機構を含んで構成され
る。
【０１３１】
また、図示の例では、磁力印加部４００は、一対の永久磁石４１０の一方がチューブ２
００に接近すると他方がチューブ２００から離間するように配置されている。そして、モ
ーター４２０によって、一対の永久磁石４１０がチューブ２００に接近離間するように振
動させることができるようになっている。モーター４２０が駆動することにより、チュー
ブ２００内でチューブ２００の長手方向と交差する方向に磁性粒子Ｍを往復移動させるこ
とができる。
【０１３２】
モーター４２０は、容器１２０やチューブ２００のどの位置に磁力を印加する場合でも
、必要に応じて駆動することができる。しかし、永久磁石４１０の位置が、チューブ２０
０の第２プラグ２０、第４プラグ４０の位置にあるときに、駆動すればチューブ２００内
での磁性粒子Ｍの洗浄効率や溶出効率を高めることができる。
【０１３３】
本実施形態の核酸抽出用装置３０００によれば、ＰＣＲのための前処理を自動化するこ
とが可能であり、前処理に要する時間と手間を大幅に削減することができる。また、本実
施形態の核酸抽出用装置３０００によれば、磁力印加部４００を揺動させることができる
ため、核酸が吸着した磁性粒子Ｍの洗浄（精製）をより効率的に行うことができ、ＰＣＲ
の精度をさらに高めることができる。
【０１３４】
図１８は、核酸抽出用装置の変形例に係る核酸抽出装置３１００を模式的に示す斜視図
である。核酸抽出装置３１００は、上述の核酸抽出装置３０００とは、加熱部６００を有
する点で相違する以外は同様であり、作用機能の共通する部材については、同一の符号を
付して説明を省略する。
【０１３５】
加熱部６００は、装着部３００にチューブ２００が装着された場合に、チューブ２００
の一部を加熱する構成である。加熱部６００としては、例えば、熱源及びヒートブロック
、ヒーター、電磁加熱用のコイルなどを例示することができる。加熱部６００の形状とし
ては、チューブ２００を挿入することのできる形状や、チューブ２００の側面に接触する
形状などであり、チューブ２００内の液体を加熱することができる限り任意である。
【０１３６】
加熱部６００によって加熱されるチューブ２００の部分は、チューブ２００の長手方向
のうち、第４プラグ４０が存在する部分を含む。加熱部６００は、チューブ２００のその
他の部分を加熱してもよいが、チューブ２００の長手方向のうち、第２プラグ２０が存在
する部分は加熱しないようにすることが好ましい。
【０１３７】
図１８に示した核酸抽出装置３１００では、加熱部６００として、添え板３１０に並列
して設けられた、チューブ２００の第４プラグ４０を含む位置を加熱するヒーター６１０
が備えられている。ヒーター６１０は、チューブ２００の外周の半分程度に対して接触さ
せる形状を有している。
【０１３８】
核酸抽出装置３１００は、第２プラグ２０の第１洗浄液及び第６プラグ６０の第２洗浄
液の少なくとも一方による洗浄によって、磁性粒子Ｍに吸着した核酸の量が減少している
場合でも、第４プラグ４０の溶出液に対して、十分な量の核酸を溶出させることができる
。これにより、洗浄効果を高めることができるとともに、ＰＣＲのために十分な濃度の核
酸を溶出液に対して溶出させることができる。
【０１３９】
５．実験例
以下に実験例を説明し、本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は以下の実験例によ
って何ら限定されるものではない。
【０１４０】
５．１．実験例１
実験例１では、上述の核酸抽出用キット２０００のうち、チューブ２００の内部に、第
１プラグ１０ないし第７プラグ７０を有する構成を使用した。
【０１４１】
まず、容量３ｍＬのポリエチレン製容器に、３７５μＬの吸着液、及び１μＬの磁性ビ
ーズ分散液を収容した。吸着液の組成としては、７６質量％のグアニジン塩酸塩、１．７
質量％のエチレンジアミン四酢酸二水素二ナトリウム二水和物、及び１０質量％のポリオ
キシエチレンソルビタンモノラウレートの水溶液（東洋紡製、ＭａｇＥｘｔｒａｃｔｏｒ
−Ｇｅｎｏｍｅ−、ＮＰＫ−１）である。また、磁性ビーズ分散液としては、５０体積
％の磁性シリカ粒子及び２０質量％の塩化リチウムが含有されたものを用いた。
【０１４２】
ヒトから採取した血液を、ピペットを用いて容器の口から５０μＬ入れ、容器に蓋をし
て手で３０秒間振って撹拌した。その後、容器の蓋を外してチューブに接続した。なお、
チューブには両端に栓が為されており、第１プラグ側の栓を外してチューブに容器を接続
した。
【０１４３】
ここで、第１、３、７、５プラグは、シリコンオイルとした。第２プラグの第１洗浄液
は、７６質量％のグアニジン塩酸塩の水溶液とした。また、第６プラグの第２洗浄液は、
ｐＨが８．０のトリス−塩酸緩衝液（溶質濃度５ｍＭ）とした。第４プラグの溶出液は、
滅菌水とした。
【０１４４】
そして、手で永久磁石を動かして、容器内の磁性ビーズをチューブ内に導入した。そし
て、磁性ビーズを第４プラグまで移動させた。磁性ビーズがチューブ内の各プラグに存在
した時間はおよそ以下の通りであった。第１、３、７プラグ：各３秒、第２プラグ：２０
秒、第６プラグ：２０秒、第４プラグ：３０秒。なお、第２プラグ及び第６プラグにおい
ては、磁性ビーズを振動させる等の操作は行わなかった。また、第２プラグ、第６プラグ
、及び第４プラグの体積は、それぞれ、２５μＬ、２５μＬ、及び１μＬとした。
【０１４５】
次いで、チューブの第５プラグ側の栓を取り外し、容器を手で変形させて、第５プラグ
及び第４プラグをＰＣＲの反応容器に吐出させた。この操作は、磁性ビーズを永久磁石に
よって動かして、第２プラグまで退避させた上でおこなった。
【０１４６】
そして、その抽出液に１９μＬのＰＣＲの反応試薬を加え、リアルタイムＰＣＲを定法
に従って行った。ＰＣＲの反応試薬の内訳は、ライトサイクラー４８０ジェノタイピング
マスター（ロシュ・ダイアグノスティックス社製４  ７０７  ５２４）４μＬ、滅菌水で
１０００倍希釈したＳＹＢＲ  Ｇｒｅｅｎ  Ｉ（ライフテクノロジーズ社製Ｓ７５６３）
０．４μＬ、１００μＭのβアクチン検出用プライマー（Ｆ／Ｒ）各０．０６μＬ、滅菌
水１４．４８μＬである。実験例１のＰＣＲの増幅曲線を図１２に示す。なお、図１２の
縦軸は、蛍光輝度であり、横軸はＰＣＲのサイクル数である。
【０１４７】
５．２．実験例２
実験例２では、一般的な核酸抽出法により核酸の抽出を行った。
【０１４８】
まず、容量１．５ｍＬのポリエチレン製容器に、３７５μＬの吸着液、及び２０μＬの
磁性ビーズ分散液を収容した。吸着液、磁性ビーズ分散液の組成としては、上記実験例と
同様である。
【０１４９】
次にヒトから採取した血液を容器の口からピペットを用いて５０μＬ導入し、容器に蓋
をして、ボルテックスミキサーで１０分間撹拌し、磁気スタンド及びピペットを操作して
Ｂ／Ｆ分離操作を行った。この状態では、容器内には磁性ビーズ及び少量の吸着液が残存
していた。
【０１５０】
次いで容器に実験例１と同じ組成の第１洗浄液を４５０μＬ導入し、蓋をして５秒間ボ
ルテックスミキサーにより撹拌し、磁気スタンド及びピペットを操作して第１洗浄液を除
去した。この操作を２回繰り返した。この状態では、容器内には磁性ビーズ及び少量の第
１洗浄液が残存していた。
【０１５１】
次いで容器に実験例１と同じ組成の第２洗浄液を４５０μＬ導入し、蓋をして５秒間ボ
ルテックスミキサーにより撹拌し、磁気スタンド及びピペットを操作して第１洗浄液を除
去した。この操作を２回繰り返した。この状態では、容器内には磁性ビーズ及び少量の第
２洗浄液が残存していた。
【０１５２】
そして、滅菌水（溶出液）５０μＬを容器に加え、蓋をして１０分間ボルテックスミキ
サーにより撹拌し、磁気スタンド及びピペットを操作して上澄み液を回収した。この上澄
み液が標的核酸を含んでいる。
【０１５３】
そしてその抽出液から１μＬを分注し、さらに１９μＬのＰＣＲの反応試薬を加え、リ
アルタイムＰＣＲを定法に従って行った。ＰＣＲの反応試薬の内訳は、ライトサイクラー
４８０ジェノタイピングマスター（ロシュ・ダイアグノスティックス社製４  ７０７  ５
２４）４μＬ、滅菌水で１０００倍希釈したＳＹＢＲ  Ｇｒｅｅｎ  Ｉ（ライフテクノロ
ジーズ社製Ｓ７５６３）０．４μＬ、１００μＭのβアクチン検出用プライマー（Ｆ／Ｒ
）各０．０６μＬ、滅菌水１４．４８μＬである。このときの増幅曲線を図１２に示す。
【０１５４】
５．３．実験例３
実験例３では、上述の核酸抽出用キット２０００のうち、チューブ２００の内部に、第
１プラグ１０ないし第５プラグ５０を有する構成を使用した。
【０１５５】
吸着液の組成及び磁性ビーズ分散液は実験例１と同様とし、第１、３、５プラグについ
ても実験例１と同様にシリコンオイルとした。
【０１５６】
第２プラグの第１洗浄液は、ｐＨが８．０のトリス−塩酸緩衝液（溶質濃度５ｍＭ）と
した。そして、第４プラグの溶出液は、滅菌水とした。
【０１５７】
ヒトから採取した血液を、ピペットを用いて容器の口から５０μＬ入れ、容器に蓋をし
て手で３０秒間振って撹拌した。その後、容器の蓋を外してチューブに接続した。なお、
チューブには両端に栓が為されており、第１プラグ側の栓を外してチューブに容器を接続
した。
【０１５８】
そして、手で永久磁石を動かして、容器内の磁性ビーズをチューブ内に導入した。そし
て、磁性ビーズを第４プラグまで移動させた。磁性ビーズがチューブ内の各プラグに存在
した時間はおよそ以下の通りであった。第１、３プラグ：各３秒、第２プラグ：２０秒、
第４プラグ：３０秒。なお、第２プラグにおいては、磁性ビーズを振動させる等の操作は
行わなかった。また、第２プラグ及び第４プラグの体積は、それぞれ、２５μＬ、及び１
μＬとした。
【０１５９】
次いで、チューブの第５プラグ側の栓を取り外し、容器を手で変形させて、第５プラグ
及び第４プラグをＰＣＲの反応容器に吐出させた。この操作は、磁性ビーズを永久磁石に
よって動かして、第２プラグまで退避させた上でおこなった。
【０１６０】
そして、その抽出液に１９μＬのＰＣＲの反応試薬を加え、リアルタイムＰＣＲを定法
に従って行った。ＰＣＲの反応試薬の内訳は、ライトサイクラー４８０ジェノタイピング
マスター（ロシュ・ダイアグノスティックス社製４  ７０７  ５２４）４μＬ、滅菌水で
１０００倍希釈したＳＹＢＲ  Ｇｒｅｅｎ  Ｉ（ライフテクノロジーズ社製Ｓ７５６３）
０．４μＬ、１００μＭのβアクチン検出用プライマー（Ｆ／Ｒ）各０．０６μＬ、滅菌
水１４．４８μＬである。
【０１６１】
このときの増幅曲線は、図１２とほぼ同じ特性であった。なお、この実験例において第
２プラグの第１洗浄液を７６質量％のグアニジン塩酸塩にして同様の実験を行った場合に
は、実験例１の増幅曲線より１０サイクル以上の立ち上がり遅れが見られた。
【０１６２】
５．４．実験例４
（溶出温度のＤＮＡ収量に対する影響）
実験例４では、一般的な核酸抽出法により核酸の抽出を行った。
【０１６３】
まず、容量１．５ｍＬのポリエチレン製容器に、３７５μＬの吸着液、及び２０μＬの
磁性ビーズ分散液を収容した。吸着液、磁性ビーズ分散液の組成としては、上記実験例１
と同様である。
【０１６４】
次に１ｎｇ／μＬに濃度調製したゲノムＤＮＡ溶液を容器の口からピペットを用いて５
０μＬ導入し、容器に蓋をして、ボルテックスミキサーで１０分間撹拌し、磁気スタンド
及びピペットを操作してＢ／Ｆ分離操作を行った。この状態では、容器内には磁性ビーズ
及び少量の吸着液が残存していた。
【０１６５】
次いで容器に実験例１と同じ組成の第１洗浄液を４５０μＬ導入し、蓋をして５秒間ボ
ルテックスミキサーにより撹拌し、磁気スタンド及びピペットを操作して第１洗浄液を除
去した。この操作を２回繰り返した。この状態では、容器内には磁性ビーズ及び少量の第
１洗浄液が残存していた。
【０１６６】
次いで容器に実験例１と同じ組成の第２洗浄液を４５０μＬ導入し、蓋をして５秒間ボ
ルテックスミキサーにより撹拌し、磁気スタンド及びピペットを操作して第１洗浄液を除
去した。この操作を２回繰り返した。この状態では、容器内には磁性ビーズ及び少量の第
２洗浄液が残存していた。
【０１６７】
そして、滅菌水（溶出液）５０μＬを容器に加え、蓋をして５秒間ボルテックスミキサ
ーにより撹拌後、チューブヒーターにて２分間加熱した。その後、再度１０秒間ボルテッ
クスミキサーにより撹拌し、磁気スタンド及びピペットを操作して上澄み液を回収した。
このときチューブヒーターでの加熱温度を、２３℃（室温放置）、４５℃、６５℃の３通
り行った。
【０１６８】
そして、その抽出液から１μＬを分注し、さらに１９μＬのＰＣＲの反応試薬を加え、
リアルタイムＰＣＲを定法に従って行った。このとき、比較サンプルとして１ｎｇ／μＬ
に濃度調製したゲノムＤＮＡ溶液もＰＣＲ反応サンプルに追加した。ＰＣＲの反応試薬の
内訳は、ライトサイクラー４８０ジェノタイピングマスター（ロシュ・ダイアグノスティ
ックス社製４  ７０７  ５２４）４μＬ、滅菌水で１０００倍希釈したＳＹＢＲ  Ｇｒｅ
ｅｎ  Ｉ（ライフテクノロジーズ社製Ｓ７５６３）０．４μＬ、１００μＭのβアクチン
検出用プライマー（Ｆ／Ｒ）各０．０６μＬ、滅菌水１４．４８μＬである。
【０１６９】
このときの溶出温度とＤＮＡ収量の関係を図１３に示す。この結果は、リアルタイムＰ
ＣＲの立ち上がりサイクルから計算により求めた。比較サンプルの立ち上がりサイクルを
Ｃｔ０、抽出サンプルの立ち上がりサイクルをＣｔ１とすると、ＤＮＡ収量は比較サンプ
ル（１となる）の比として、式「２（Ｃｔ０−Ｃｔ１）」で表される。
【０１７０】
５．５．実験例５
実施例５では、核酸抽出デバイスのプラグから、帯電物質である、ニトリル手袋をはめ
た手までの距離の、チューブ内のプラグの位置ずれや分裂の影響を調べた。
【０１７１】
まず、内径１ｍｍ外径３ｍｍのポリプロピレンチューブを１０本用意した。各チューブ
に対し、動粘度２ｃＳｔ（２５℃）のシリコーンオイルと１μＬの純水を充填した。その
後、ニトリル手袋をはめた手で各チューブのシリコーンオイルおよび水を充填した部分を
握り、その手を上下に１０往復移動させた。そして、水の液面の位置が１ｍｍ以上ずれた
チューブ数、および、水が分裂したチューブ数をカウントした。この結果、チューブ１０
本全てにおいて、液面の位置ずれ又はプラグの分裂が生じた。
【０１７２】
次に、内径３ｍｍ外径５ｍｍのポリプロピレンチューブ、および、内径１ｍｍ外径３ｍ
ｍのポリプロピレンチューブをそれぞれ１０本用意した。そして、内径３ｍｍ外径５ｍｍ
のポリプロピレンチューブのそれぞれの内腔に内径１ｍｍ外径３ｍｍのポリプロピレンチ
ューブを差し入れ、１０本の内径１ｍｍ、外径５ｍｍのチューブとした。
各チューブに対し、動粘度２ｃＳｔ（２５℃）のシリコーンオイルと１μＬの純水を充
填した。その後、ニトリル手袋をはめた手で各チューブのシリコーンオイルおよび水を充
填した部分を握り、その手を上下に１０往復移動させた。そして、水の液面の位置が１ｍ
ｍ以上ずれたチューブ数、および、水が分裂したチューブ数をカウントした。この結果、
チューブ１０本のうち、９本において、液面の位置ずれ又はプラグの分裂が生じた。
【０１７３】
次に、内径５ｍｍ外径７ｍｍのポリプロピレンチューブ、内径３ｍｍ外径５ｍｍのポリ
プロピレンチューブ、および、内径１ｍｍ外径３ｍｍのポリプロピレンチューブをそれぞ
れ１０本用意した。そして、内径５ｍｍ外径７ｍｍのポリプロピレンチューブのそれぞれ
の内腔に内径３ｍｍ外径５ｍｍのポリプロピレンチューブを差し入れ、その内径３ｍｍ外
径５ｍｍのポリプロピレンチューブのそれぞれの内腔に内径１ｍｍ外径３ｍｍのポリプロ
ピレンチューブをそれぞれ差し入れ、１０本の内径１ｍｍ、外径７ｍｍのチューブとした
。
各チューブに対し、動粘度２ｃＳｔ（２５℃）のシリコーンオイルと１μＬの純水を充
填した。その後、ニトリル手袋をはめた手で各チューブのシリコーンオイルおよび水を充
填した部分を握り、その手を上下に１０往復移動させた。そして、水の液面の位置が１ｍ
ｍ以上ずれたチューブ数、および、水が分裂したチューブ数をカウントした。この結果、
１０本いずれにおいても、液面の位置ずれ又はプラグの分裂が生じなかった。
【０１７４】
５．６．実験結果
上記実験例から、以下のことが判明した。
【０１７５】
（１）ＰＣＲの前処理である核酸の抽出処理に要した時間を比較すると、検体を容器に挿
入してから、ＰＣＲの反応容器に標的核酸を導入するまでの時間は、実験例１ではおよそ
２分であった。実験例２ではおよそ３０分であった。これにより実験例１の核酸抽出方法
は、実験例２の核酸抽出方法よりも、核酸抽出に要する時間が大幅に短いことが分かった
。
【０１７６】
（２）また、各洗浄液は、実験例１では実験例２の約１８分の１の量であった。さらに、
溶出液の量も実験例１は実験例２の約５０分の１であった。従って、実験例１では、洗浄
液と溶出液の量が実験例２に対して非常に少量で十分であることが判明した。
【０１７７】
（３）さらに、溶出液における標的核酸の濃度を、吸着液及び溶出液の量において比較す
ると、理想的には実験例１のほうが、実験例２よりも５０倍の濃度となると考えられる。
但し、今回の実験例では、血液サンプルに含まれる核酸量が多く、１μＬの磁性ビーズの
吸着可能量を超えており、血液サンプルに含まれる核酸を全量回収することができないた
め、実験例１では実験例２の５０倍濃度が得られていない。核酸含有量が少なく１μＬの
磁性ビーズの吸着可能量を超えない検体の場合には、実験例１では実験例２の５０倍濃度
が得られる。
【０１７８】
（４）そして、図１２のグラフをみると、核酸の含有量が多い全血サンプルにおいても、
核酸の増幅率の立ち上がりが、実験例１のほうが実験例２よりも約０．６サイクル早いこ
とが判明した。すなわち、実験例１で用いたＰＣＲの反応液は、実験例２で用いたＰＣＲ
の反応液よりも、標的核酸の濃度が高いことが判明した。これにより、溶出液における標
的核酸の濃度が、実験例１のほうが、実験例２よりも高いことが裏付けられた。
【０１７９】
（５）実験例３の結果から、第２プラグが、バッファーであっても、十分に抽出できるこ
とが判明した。また、第２プラグが、グアニジン水溶液の場合は、酵素反応阻害の影響に
より、ＰＣＲ増幅曲線の立ち上がりが大幅に遅れることが判明した。また、抽出液を少な
くとも１０００倍以上に薄めることにより、グアニジン水溶液の酵素反応阻害の影響を小
さく抑えることができることが判明した。
【０１８０】
（６）実験例４の結果から、第４プラグを４０℃程度よりも高くすれば、ＤＮＡの収量が
、ＰＣＲに利用する場合に十分となることが判明した。
【０１８１】
（７）実験例５の結果から、試薬が充填された液体部分、すなわちプラグ部分から、帯電
物質を３ｍｍ以上離すことで液面の位置ずれ又はプラグの分裂を抑制することができるこ
とが判明した。
【０１８２】
本発明は、上述した実施形態に限定されるものではなく、さらに種々の変形が可能であ
る。例えば、本発明は、実施形態で説明した構成と実質的に同一の構成（例えば、機能、
方法及び結果が同一の構成、あるいは目的及び効果が同一の構成）を含む。また、本発明
は、実施形態で説明した構成の本質的でない部分を置き換えた構成を含む。また、本発明
は、実施形態で説明した構成と同一の作用効果を奏する構成又は同一の目的を達成するこ
とができる構成を含む。また、本発明は、実施形態で説明した構成に公知技術を付加した
構成を含む。
【符号の説明】
【０１８３】
１０…第１プラグ、２０…第２プラグ、３０…第３プラグ、４０…第４プラグ、５０…第
５プラグ、６０…第６プラグ、７０…第７プラグ、１００…チューブ部、１１０…栓、１
２０…容器、１２１…開口、１２２…蓋、１３０…液溜部、１３１…開口、１３２…蓋、
１４０…キャップ、１５０…伸縮式キャップ、１５１…蓋、１６０…カバー、１６１…バ
ネ、１７０…支持部、１７１…カバー部、１７３…スリット、１７４…カバー、１７５…
カバー、１８０…留具、１８１…袋、２００…チューブ、３００…装着部、３１０…添え
板、３２０…クリップ機構、３３０…ヒンジ、３４０…ガイドレール、３５０…駆動ベル
ト、３６０…移動機構、４００…磁力印加部、４１０…永久磁石、４２０…モーター、５
００…移動機構、６００…加熱部、６１０…ヒーター、１０００，１０２０，１０３０，
１０４０，１０５０，１０６０，１０７０，１０８０，１０８２，１０８４，１０８５，
１０８６，１１００…核酸抽出用デバイス、２０００…核酸抽出用キット、３０００，３
１００…核酸抽出用装置、Ｍ…磁性粒子
【図１】
2015097512.tif 000003
【図２】
2015097512.tif 000004
【図３】
2015097512.tif 000005
【図４】
2015097512.tif 000006
【図５】
2015097512.tif 000007
【図６】
2015097512.tif 000008
【図７】
2015097512.tif 000009
【図８】
2015097512.tif 000010
【図９】
2015097512.tif 000011
【図１０】
2015097512.tif 000012
【図１１】
2015097512.tif 000013
【図１２】
2015097512.tif 000014
【図１３】
2015097512.tif 000015
【図１４】
2015097512.tif 000016
【図１５】
2015097512.tif 000017
【図１６】
2015097512.tif 000018
【図１７】
2015097512.tif 000019
【図１８】
2015097512.tif 000020