(57)【要約】【課題】オリゴ糖類を有効成分とする、安全に摂取可能なＤＮＡ損傷抑制剤の提供。【解決手段】マンノースを主体とした単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類を有効成分とすることを特徴とする、ＤＮＡ損傷抑制剤；８−ヒドロキシ−２’−デオキシグアノシン（８−ＯＨｄＧ）の産生抑制作用を有する、前記記載のＤＮＡ損傷抑制剤；前記オリゴ糖類が、マンノース、グルコース、ガラクトース及びフルクトースからなる群より選択される１種以上の単糖類が１〜１０分子結合したものである、前記いずれか記載のＤＮＡ損傷抑制剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
マンノースを主体とした単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類を有効成分とすることを特徴とする、ＤＮＡ損傷抑制剤。
【請求項２】
８−ヒドロキシ−２’−デオキシグアノシン（８−ＯＨｄＧ）の産生抑制作用を有する、請求項１に記載のＤＮＡ損傷抑制剤。
【請求項３】
前記オリゴ糖類が、マンノース、グルコース、ガラクトース及びフルクトースからなる群より選択される１種以上の単糖類が１〜１０分子結合したものである、請求項１又は２に記載のＤＮＡ損傷抑制剤。
【請求項４】
前記オリゴ糖類中のマンノース残基の割合が、７０質量％以上である、請求項１〜３のいずれか一項に記載のＤＮＡ損傷抑制剤。
【請求項５】
前記オリゴ糖類が、マンナンを加水分解処理することによって得られるものである、請求項１〜４のいずれか一項に記載のＤＮＡ損傷抑制剤。
【請求項６】
前記マンナンが、コーヒー豆及び／又はコーヒー抽出残渣から得られるものである、請求項５に記載のＤＮＡ損傷抑制剤。
【請求項７】
前記オリゴ糖類が、マンノースが１〜１０分子結合したオリゴ糖類である、請求項１又は２に記載のＤＮＡ損傷抑制剤。
【請求項８】
前記オリゴ糖類が、マンノースが１〜１０分子結合したβ−１，４−マンノオリゴ糖類である、請求項１又は２に記載のＤＮＡ損傷抑制剤。
【請求項９】
前記オリゴ糖類の含量割合が、総固形分に対して６０質量％以上である、請求項１〜８のいずれか一項に記載のＤＮＡ損傷抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、マンノースを構成糖とするオリゴ糖類からなる、ＤＮＡ損傷抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒトをはじめとする多くの生物において遺伝情報を担っているＤＮＡは、放射線や化学物質等の外的要因や、細胞内代謝の過程で生じる活性酸素や細胞内 ｐＨの変化等の内的要因によって損傷を受けやすい。ＤＮＡ損傷の多くは遺伝子変異を引き起こす原因となり、様々な生活習慣病の発症・進展や老化に影響することから、ＤＮＡ損傷はできる限り抑制できるほうが好ましい。
【０００３】
ＤＮＡ損傷の指標としては、尿中の８−ヒドロキシ−２’−デオキシグアノシン（８−ＯＨｄＧ）が用いられている。８−ＯＨｄＧは、ＤＮＡの構成成分であるデオキシグアノシン（ｄＧ）が酸化されて分子内に生成する物質である。８−ＯＨｄＧが生じると、ＤＮＡ修復酵素が速やかに働いてこれを切り出し、正常なｄＧに置換され、放出された８−ＯＨｄＧはそのまま尿中に排泄される。
【０００４】
一方で、Ｄ−マンノースがβ−１，４結合した化合物であるβ−１，４マンノビオースなどのβ−１，４−マンノオリゴ糖の持つ生理機能が注目されている。また、人間の糖タンパク質の糖鎖の重要な部分構造にはＤ−マンノースがβ−１，４結合したマンノオリゴ糖が含まれており、飲食品原料としてのみならず、医薬品の原料としての応用も期待されている。例えば、マンノースを構成糖とするオリゴ糖類を経口摂取することにより、血清中の総コレステロールや中性脂肪の量が低下することが報告されている（例えば、特許文献１参照。）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００６−１６９２５６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
特許文献１には、マンノースを構成糖とするオリゴ糖類が血清脂質量を低下させられることは開示されているものの、ＤＮＡ損傷に関する記載はない。
【０００７】
本発明は、オリゴ糖類を有効成分とする、安全に摂取可能なＤＮＡ損傷抑制剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究した結果、マンノースを主体とした単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類を経口摂取することにより、尿中の８−ＯＨｄＧ量が低減することを見出し、本発明を完成させた。
【０００９】
［１］  本発明に係るＤＮＡ損傷抑制剤は、マンノースを主体とした単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類を有効成分とすることを特徴とする。
［２］  前記［１］のＤＮＡ損傷抑制剤は、８−ヒドロキシ−２’−デオキシグアノシン（８−ＯＨｄＧ）の産生抑制作用を有することが好ましい。
［３］  前記［１］又は［２］のＤＮＡ損傷抑制剤においては、前記オリゴ糖類が、マンノース、グルコース、ガラクトース及びフルクトースからなる群より選択される１種以上の単糖類が１〜１０分子結合したものであることが好ましい。
［４］  前記［１］〜［３］のいずれかのＤＮＡ損傷抑制剤においては、前記オリゴ糖類中のマンノース残基の割合が、７０質量％以上であることが好ましい。
［５］  前記［１］〜［４］のいずれかのＤＮＡ損傷抑制剤においては、前記オリゴ糖類が、マンナンを加水分解処理することによって得られるものであることが好ましい。
［６］  前記［５］のＤＮＡ損傷抑制剤においては、前記マンナンが、コーヒー豆及び／又はコーヒー抽出残渣から得られるものであることが好ましい。
［７］  前記［１］のＤＮＡ損傷抑制剤においては、前記オリゴ糖類が、マンノースが１〜１０分子結合したオリゴ糖類であることが好ましい。
［８］  前記［１］のＤＮＡ損傷抑制剤においては、前記オリゴ糖類が、マンノースが１〜１０分子結合したβ−１，４−マンノオリゴ糖類であることが好ましい。
［９］  前記［１］〜［８］のいずれかのＤＮＡ損傷抑制剤においては、前記オリゴ糖類の含量割合が、総固形分に対して６０質量％以上であることが好ましい。
【発明の効果】
【００１０】
本発明に係るＤＮＡ損傷抑制剤は、経口摂取することによってＤＮＡの損傷を効果的に抑制することができる。
また、本発明に係るＤＮＡ損傷抑制剤は、オリゴ糖類を有効成分とするため、安全に摂取可能であり、医薬、機能性飲食品等としても好適である。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】実施例１において、マンノオリゴ糖を配合した試験飼料を投与した試験飼料群と、対照飼料を投与した対照飼料群における、尿中の８−ＯＨｄＧ量の測定結果（平均値）を示した図である。
【図２】実施例２において、試験飲料摂取前後における、［尿中８−ＯＨｄＧ量測定値（ｎｇ／ｍＬ）］／［尿中クレアチニン量測定値（ｍｇ／ｄＬ）］値の測定結果（平均値）を示した図である。
【図３】実施例２において、試験飲料摂取前後における、［尿中ＨＥＬ量測定値（ｐｍｏｌ／ｍＬ）］／［尿中クレアチニン量測定値（ｍｇ／ｄＬ）］値の測定結果（平均値）を示した図である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明及び本願明細書において、「マンノースを主体としたオリゴ糖類」とは、単糖であるマンノースを主たる構成要素とするオリゴ糖類を意味する。ここで「オリゴ糖類」なる語は、一般に単糖類と多糖類との間に位し、一定の小数量の単糖類分子のグリコシル結合からなる物質を指す。すなわち、結合している単糖の数が比較的少ないポリマーのことである。「オリゴ糖『類』」という場合、構成単糖の種類や数が様々である複数のオリゴ糖が含まれる組成物であることを意味する。「マンノースを主体としたオリゴ糖『類』」という場合は、オリゴ糖類のうち、特に、組成物全体の構成単糖に占めるマンノースの割合が５０％以上である組成物を指す。本発明及び本願明細書において「マンノオリゴ糖類」の語は、「マンノースを主体としたオリゴ糖類」の語と同様の意味において用いられる。
【００１３】
本発明及び本願明細書において、オリゴ糖類の重合度を表すために「ＤＰ」と記載することがある。ＤＰとは、オリゴ糖類を構成している単糖の数を意味する。すなわち単糖であるマンノースは「ＤＰ１」と表され、４つのマンノースから構成されたマンノオリゴ糖は重合度４、すなわち「ＤＰ４」と表される。学術的観点からは、重合度１（ＤＰ１）の糖は単糖であって、オリゴ糖ではない。しかし、本発明に用いるオリゴ糖類（組成物）中には、単糖が含まれる場合があるので、本願明細書においてはこのような場合であっても総称して「オリゴ糖類」と呼ぶものとする。すなわち、「１以上１０分子以下の、マンノースを主体とした単糖類が結合した、マンノースを主体としたオリゴ糖類」という場合には、この糖組成物中に重合度１の単糖も含まれている場合があると理解されたい。
【００１４】
本発明に係るＤＮＡ損傷抑制剤は、マンノースを主体とした単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類、すなわち、「マンノースを主体としたオリゴ糖類」のうち、構成単糖の数が１〜１０分子である組成物である。本発明に係るＤＮＡ損傷抑制剤の有効成分としては、構成単糖がマンノース、グルコース、ガラクトース及びフルクトースからなる群より選択される１種以上の単糖が１〜１０分子結合したオリゴ糖が複数種類含まれており、かつ構成単糖全体に占めるマンノースの割合が５０％以上であるオリゴ糖類（組成物）が好ましく、構成単糖がマンノース及びフルクトースからなる群より選択される１種以上の単糖が１〜１０分子結合したオリゴ糖が複数種類含まれており、かつ構成単糖全体に占めるマンノースの割合が５０％以上であるオリゴ糖類（組成物）がより好ましい。
【００１５】
本発明に係るＤＮＡ損傷抑制剤の有効成分としては、オリゴ糖類中のマンノース残基の割合（構成単糖全体に占めるマンノースの割合）が７０質量％以上であるオリゴ糖類（組成物）が好ましく、オリゴ糖類中のマンノース残基の割合が８０質量％以上であるオリゴ糖類（組成物）がより好ましい。マンノース残基の割合が充分に高いことにより、マンノオリゴ糖によるＤＮＡ損傷抑制作用をより効果的に得ることができ、また、グルコース等の他の単糖類の含有割合が比較的低いことにより、甘味度等を低く抑えることができ、飲食品やサプリメント、医薬品等へ幅広く適用しやすくなる。
【００１６】
本発明に係るＤＮＡ損傷抑制剤の有効成分として用いられる「マンノースを主体としたオリゴ糖類」としては、単糖のマンノース由来の苦味を抑えることができるため、遊離のマンノース含量が５０質量％以下に抑えられたものが好ましい。また、当該「マンノースを主体としたオリゴ糖類」としては、２〜９分子の単糖類が結合したオリゴ糖の含量が多いものが好ましく、２〜６分子の単糖類が結合したオリゴ糖の含量が多いものがより好ましい。また、当該「マンノースを主体としたオリゴ糖類」としては、各構成単糖がβー１，４結合したオリゴ糖の含有割合が５０質量％以上であるものが好ましい。
【００１７】
本発明において用いられる「マンノースを主体としたオリゴ糖類」としては、構成単糖がマンノースのみからなる（マンノースのみを構成単位とする）マンノオリゴ糖類、すなわち、マンノースが１〜１０分子結合したオリゴ糖類であることも好ましい。この場合には、マンノースが１〜１０分子結合したβ−１，４−マンノオリゴ糖類であることがより好ましい。
【００１８】
本発明において用いられる「マンノースを主体としたオリゴ糖類」としては、マンナンを加水分解処理することによって得られるものが好ましい。なお、本発明及び本願明細書において、単に「マンナン」という場合は、Ｄ−マンノースのみを構成単位とする多糖であるマンナンの他、マンノースとガラクトース又はグルコースと構成単位とした多糖であるガラクトマンナン、グルコマンナンも広義に含めるものとする。Ｄ−マンノースはアルドヘキソースであり、Ｄ−グルコース中のカルボキシル基に隣接する炭素に結合している水酸基の立体配置が逆になっているものである。
【００１９】
ここで、原料のマンナンは、例えばココナッツ椰子から得られるコプラミール、フーク、南アフリカ産椰子科植物ＨｕａｃｒａＰａｌｍ、ツクネイモマンナン、ヤマイモマンナンより抽出することにより得ることができる。このように得たマンナンを、酸加水分解、高温加熱加水分解、酵素加水分解、微生物発酵の中から選択される１種又は２種以上の方法で処理し、好ましくは活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理、イオン交換膜処理等の方法で精製して、糖混合物を得ることができる。かかる当混合物中には、上述した「マンノースを主体としたオリゴ糖類」が含まれている。したがって、このようにして得た組成物は、本発明に係るＤＮＡ損傷抑制剤の有効成分として用いられる。さらに、「マンノースを主体としたオリゴ糖類」は、コンニャクイモ、ユリ、スイセン、ヒガンバナ等に含まれるグルコマンナン、ローカストビーンガム、グアーガム等に含まれるガラクトマンナンを酸加水分解、高温加熱加水分解、酵素加水分解、微生物発酵の中から選択される１種又は２種以上の方法で処理し、活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理、イオン交換膜処理等の方法で分離精製し構成糖としてマンノースの比率を高めることにより製造したものであってもよい。
【００２０】
本発明において用いられる「マンノースを主体としたオリゴ糖類」としては、コーヒー生豆又は焙煎したコーヒー豆を酸加水分解、高温加熱加水分解、酵素加水分解、微生物発酵の中から選択される１種又は２種以上の方法で処理し、活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理、イオン交換膜処理等の方法で精製することによって得ることができる。あるいは、使用済みコーヒー残渣を酸加水分解、高温加熱加水分解、酵素加水分解、微生物発酵の中から選択される１種又は２種以上の方法で処理し、活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理、イオン交換膜処理等の方法で精製することによって得ることも可能である。一般に、焙煎粉砕コーヒーを商業用の抽出器にて抽出すると、その際に焙煎コーヒーに含まれるガラクトマンナンの側鎖であるガラクトースが可溶化したり、アラビノガラクタンが加水分解によって可溶化する。従って、コーヒー残渣中にはマンナンが豊富であり、しかも直鎖構造をとっているものと推定される。一方、セルロースは分解されにくく残渣として残っているが、セルロースを分解せずにマンナンを特異的に加水分解する条件を適宜選択することにより、マンノースを主体とするオリゴ糖を得ることができる。
【００２１】
特にコーヒー抽出残渣を分解する方法としては、酸及び／又は高温により加水分解する方法、酵素により分解する方法、微生物発酵により分解する方法が挙げられるが、これらに限定されない。酸及び／又は高温により加水分解する方法としては特開昭６１−９６９４７号公報、特開平２−２００１４７号公報等に開示されている。商業用のコーヒー多段式抽出系において出てくる使用済みコーヒー残渣を反応容器中において酸触媒を添加して加水分解することもでき、酸触媒を添加せずに高温で短時間処理して加水分解することによっても得ることができる。管形栓流反応器を使用する方法が便利であるが、比較的高温で短時間の反応を行わせる方法に向いているものであれば、いかなる反応器を使用しても良好な結果が得られる。反応時間と反応温度を調節し、可溶化して加水分解させることによってＤＰ１０〜４０のマンナンをＤＰ１〜１０のマンノオリゴ糖に分解し、その後コーヒー残渣と分離してマンノオリゴ糖類を得ることができる。なお、ここでコーヒー抽出残査とは、大気中あるいは加圧条件下で焙煎粉砕コーヒーを水などの溶媒で抽出した後の、いわゆるコーヒー抽出粕を意味する。
【００２２】
「マンノースを主体としたオリゴ糖類」として、コーヒー豆（焙煎コーヒー豆、及び焙煎粉砕コーヒー豆を含む。）及び／又はコーヒー抽出残渣の加水分解処理により得られたものを用いる場合、使用するコーヒー豆の種類や産地に特に制限はなく、アラビカ種、ロバスタ種、リベリカ種等いずれのコーヒー豆でもよく、さらにブラジル、コロンビア産等いずれの産地のコーヒー豆も使用することができ、１種類の豆のみを単独で使用してもよく、ブレンドした２種以上の豆を使用してもよい。通常、商品価値がないとして廃棄処分されるような品質の悪いコーヒー豆又は小粒のコーヒー豆であっても使用することができる。上記コーヒー豆を一般的に用いられている焙煎機（直火、熱風、遠赤、炭火式など）による極浅炒り、浅炒り、中炒り、深炒りに焙煎したコーヒー豆、及びこの焙煎コーヒー豆を、一般的な粉砕機、ロールミルなどを用いて粉砕することにより得た、焙煎粉砕コーヒー（粗挽き、中粗挽き、中挽き、中細挽き、細挽きなどの種々の形状のものを含む）を用いることもできる。
【００２３】
また、コーヒー抽出残渣としては、通常の液体コーヒーあるいはインスタントコーヒー製造工程において、焙煎粉砕コーヒーを抽出処理した後のものであれば、常圧下、加圧下抽出であろうと、またいかなる起源、製法のコーヒー抽出残渣であっても使用することができる。
【００２４】
ここで、上記加水分解処理について、いくつか詳細に説明する。酵素により分解する方法としては、例えばコーヒー抽出残渣を水性媒体に懸濁させ、ここへ、例えば市販のセルラーゼ及びヘミセルラーゼ等を加えて撹拌しながら懸濁させればよい。酵素の量、作用させる温度及びその他の条件としては、通常の酵素反応に用いられる量、温度、条件であれば特に問題はなく、使用する酵素の最適作用量、温度、条件及びその他の要因によって適宜選択すればよい。
微生物発酵により分解する方法としては、例えば水性媒体に懸濁させたコーヒー抽出残渣にセルラーゼ、ヘミセルラーゼなどを産出する微生物を植菌して培養させればよい。使用する微生物は、細菌類や担子菌類などコーヒー抽出残渣中のマンナンを分解する酵素を産出するものであれば良く、使用する微生物によって培養条件などは適宜選択すればよい。
【００２５】
上記の方法によって得られた「マンノースを主体としたオリゴ糖類」を含む反応液は、必要に応じて精製することができる。精製法としては、骨炭、活性炭、炭酸飽充法、吸着樹脂、マグネシア法、溶剤抽出法等で脱色・脱臭を行い、イオン交換樹脂、イオン交換膜、電気透析等で脱塩、脱酸を行うことが挙げられる。精製法の組み合わせ及び精製条件としては、マンノースを主体とするオリゴ糖類を含む反応液中の色素、塩、及び酸等の量や、その他の要因に応じて適宜選択すればよい。
【００２６】
本発明において用いられる「マンノースを主体としたオリゴ糖類」は、有効成分として使用される前に、予め必要に応じて活性炭、イオン交換樹脂、溶剤等で脱色、脱臭、脱酸等の精製処理をしておいてもよい。
【００２７】
本発明に係るＤＮＡ損傷抑制剤は、前記「マンノースを主体としたオリゴ糖類」を有効成分とする。前記「マンノースを主体としたオリゴ糖類」は、経口摂取されることにより、生体内におけるＤＮＡ損傷を抑制する効果を奏する。このため、当該オリゴ糖類を摂取することにより、８−ＯＨｄＧの産生も抑制され、ひいては尿中の８−ＯＨｄＧ量も低減する。
【００２８】
本発明に係るＤＮＡ損傷抑制剤は、前記「マンノースを主体としたオリゴ糖類」のみからなるものであってもよく、他の成分を含むものであってもよい。本発明に係るＤＮＡ損傷抑制剤における前記「マンノースを主体としたオリゴ糖類」の含量は、総固形分に対して６０質量％以上であることが好ましく、８０質量％以上であることがより好ましい。
【００２９】
当該他の成分としては、前記「マンノースを主体としたオリゴ糖類」によるＤＮＡ損傷抑制作用を損なわないものであればよく、例えば、賦形剤、結合剤、流動性改良剤（固結防止剤）、安定剤、保存剤、ｐＨ調整剤、溶解補助剤、懸濁化剤、乳化剤、粘稠剤、矯味剤、甘味料、酸味料、香料、着色料等として用いられている各種物質を、所望の製品品質に応じて適宜含有させてもよい。
【００３０】
本発明に係るＤＮＡ損傷抑制剤の剤型は、特に限定されるものではなく、各種の剤型を適用できる。本発明に係るＤＮＡ損傷抑制剤は、経口摂取することによってＤＮＡ損傷抑制効果を奏するため、経口投与に適したものが好ましい。当該剤型としては、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤等が挙げられる。
【００３１】
本発明に係るＤＮＡ損傷抑制剤は、オリゴ糖類を主成分とするものであり、非常に安全に経口接種可能である。そこで、本発明に係るＤＮＡ損傷抑制剤は、医薬品として以外にも、飲食品中に原料として配合させてもよい。本発明に係るＤＮＡ損傷抑制剤を配合させた飲食品を継続的に摂取することにより、ＤＮＡ損傷が抑制され、遺伝子変異等により引き起こされる各種疾患（例えば、癌など）の発症リスクを低減させ、予防に資することが期待できる。本発明に係るＤＮＡ損傷抑制剤は、その他、飼料や化粧品の原料とすることも好ましい。
【００３２】
例えば、コーヒー抽出残渣を酸及び／又は熱により加水分解しオリゴ糖類を高純度に含むように調製した「マンノースを主体としたオリゴ糖類」をそのまま、又は必要に応じて活性炭、イオン交換樹脂、溶剤等で脱色、脱臭、脱酸等の精製処理をした後に、液体コーヒー、インスタントコーヒー等に添加して使用することもできる。ここで、液体コーヒーとしては、缶又はいわゆるペットボトル容器に入れられて市販されているコーヒー飲料（若しくはコーヒー入り飲料と呼ばれるもの）が挙げられる。また、インスタントコーヒーとしては、焙煎粉砕コーヒーを熱湯で抽出した抽出液を噴霧又は凍結乾燥方法により水分を除去した可溶性粉末コーヒーと呼ばれるものが挙げられる。コーヒーミックス飲料としては、可溶性粉末コーヒーに砂糖、クリーミングパウダーなどを添加して混合した飲料などが挙げられる。
【実施例】
【００３３】
次に、実施例を示して本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は以下の実施例等に限定されるものではない。
【００３４】
［実施例１］
マンノオリゴ糖を経口摂取することによる、尿中の８−ＯＨｄＧ量に対する影響を調べた。
【００３５】
＜マンノオリゴ糖の調製＞
粉砕して粒径を約１ｍｍにしたコーヒー抽出残渣を、総固形分濃度が約１４質量％の水と粉砕物からなるスラリーに調製した後、４ｍの熱栓流反応器内において熱処理した。当該熱処理においては、当該スラリーを、滞留時間８分間に対応する速度で高圧蒸気とともに栓流反応器にポンプ輸送し、６．３５ｍｍφオリフィスを用いて約２１０℃に維持した。その後、当該スラリーを大気圧下に噴出することによって、反応を急止した。得られたスラリーを濾過して、不溶性固形分から可溶性固形分を含む液を分離した。この可溶性固形分含有液を、活性炭で脱色した後、濃縮、乾燥することによって、マンノースを主体とする単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類を含有する組成物を得た。
【００３６】
このようにして得られた組成物（マンノオリゴ糖）の重合度（ＤＰ）分布は、ＤＰ１；２．４％、ＤＰ２；２６．６％、ＤＰ３；２０．２％、ＤＰ４；１７．８％、ＤＰ５；１０．９％、ＤＰ６；８．９％、ＤＰ７；６．０％、ＤＰ８；３．６％、ＤＰ９；１．９％、ＤＰ１０；１．７％であり、糖鎖中のマンノース残基の含量は９０％であった。ただし、ＤＰ分布及び糖鎖中のマンノース残基の含量は、加水分解条件により種々の値をとりうる。オリゴ糖のＤＰ１としてはマンノース等、ＤＰ２としてはマンノビオース等、ＤＰ３としてはマンノトリオース等、ＤＰ４としてはマンノテトラオース等、ＤＰ５としてはマンノペンタオース等、ＤＰ６としてはマンノヘキサオース等、ＤＰ７としてはマンノヘプタオース等、ＤＰ８としてはマンノオクタオース等、ＤＰ９としてはマンノノナオース等、ＤＰ１０としてはマンノデカオース等であり、結合様式はβ−１，４結合であった。
【００３７】
＜マウスへの経口摂取＞
得られたマンノオリゴ糖をマウスに経口投与し、尿中の８−ＯＨｄＧ量に対する影響を調べた。
実験にはＩＣＲ系雄マウスを用いた。検疫及び馴化期間をかねて１４日間の予備飼育を行った後、体重の推移及び一般状態に異常が認められない個体１６匹を２群（１群８匹）に分けて実験に供した。動物は温度、湿度、換気回数、及び照明時間をコントロールされた環境下飼育された。実験飼料は、牛脂を含んだ高脂肪飼料をベース（対照飼料）として、前記で調製したマンノオリゴ糖を５質量％となるように配合した飼料を試験飼料とした。一方の群のマウスには試験飼料を、残る一方の群のマウスには対照飼料を、２８日間にわたり自由摂取させた。投与期間終了２４時間前より、蓄積尿を採取して−８０℃下で保存した。
【００３８】
＜蓄積尿中８−ＯＨｄＧ量の測定＞
採取された尿は、ＤＮＡ損傷のマーカーである８−ＯＨｄＧ、及び尿中に常時排泄されているクレアチニン含量の測定に供した。８−ＯＨｄＧ含量は、［８−ＯＨｄＧ測定値（ｎｇ／ｍＬ）］／［クレアチニン測定値（ｍｇ／ｄＬ）］で計算した。
各群の尿中の８−ＯＨｄＧの測定結果（平均値）を図１に示す。マンノオリゴ糖を配合した試験飼料を投与した群は、対照飼料を投与した群と比べて、尿中の８−ＯＨｄＧ量が少なくなることが確認された。つまり、マンノオリゴ糖を経口摂取することにより、生体内におけるＤＮＡ損傷が抑制されることが明らかである。
【００３９】
［実施例２］
実施例１で調製されたマンノオリゴ糖を含有するコーヒー飲料を摂取することによる、尿中の８−ＯＨｄＧ量に対する影響を調べた。
【００４０】
＜ヒト試験用液体コーヒーの調製＞
表１に示す組成で、コーヒー抽出液、マンノオリゴ糖（実施例１で調製したもの）、重曹、乳化剤、高甘味度甘味料及び水を混合したものを、試験飲料とした。試験飲料は、２７５ｇボトル缶に充填した後、常法に従い殺菌した。
【００４１】
【表１】
2015189732.tif 000002
【００４２】
＜試験飲料の摂取と尿中８−ＯＨｄＧ量の測定＞
ヒト試験は、ＢＭＩ２５〜３０の成人男女６名に対して実施した。被験者は、１２週間にわたって試験飲料を１日１本摂取した。採尿は、試験飲料摂取前及び摂取後で実施した。採取された尿は、ＤＮＡ損傷のマーカーである８−ＯＨｄＧ、脂質の過酸化マーカーであるヘキサノイルリジン（ＨＥＬ）、及び尿中に常時排泄されているクレアチニンの各含量の測定に供した。８−ＯＨｄＧ量及びＨＥＬ量は、それぞれ、［尿中８−ＯＨｄＧ量測定値（ｎｇ／ｍＬ）］／［尿中クレアチニン量測定値（ｍｇ／ｄＬ）］、及び［尿中ＨＥＬ量測定値（ｐｍｏｌ／ｍＬ）］／［尿中クレアチニン量測定値（ｍｇ／ｄＬ）］で算出した。
【００４３】
尿中に排泄された８−ＯＨｄＧ量の測定結果（６名の平均値）を図２に、尿中に排泄されたＨＥＬ量の測定結果（６名の平均値）を図３に、それぞれ示す。この結果、試験飲料の摂取後には、試験飲料摂取前と比べて、尿中に含まれる８−ＯＨｄＧが減少したことが確認された。以上の結果より、マンノオリゴ糖を配合した試験飲料の摂取は、体内のＤＮＡの損傷を抑制する効果を有していることが確認された。
【図１】
2015189732.tif 000003
【図２】
2015189732.tif 000004
【図３】
2015189732.tif 000005