(57)【要約】【課題】本発明は、メイラード反応の結果生成される生成物である「ＡＧＥｓ」を分解する作用（切断する作用）のすぐれた分解剤（切断剤）を提供することを目的とするものである。【解決手段】本発明の切断剤は、遊離型の没食子酸を有効成分とすることを特徴とするものである。その遊離型の没食子酸を植物から得るルートの一例は、植物を低温かつ減圧条件下に乾留したときの残渣（低温減圧乾留残渣Ｒ）や、その低温減圧乾留残渣Ｒからの溶媒による抽出物（残渣抽出分Ｅ）に含まれる没食子酸を利用することである。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
メイラード反応生成物分解剤を「切断剤」と称するとき、遊離型の没食子酸を有効成分とすること、を特徴とする切断剤。
【請求項２】
メイラード反応生成物分解剤を「切断剤」と称するとき、
（ア）前記の切断剤が、植物由来の遊離型の没食子酸を含有する没食子酸含有組成物からなること、および、
（イ）減圧乾留機構を備えた乾留装置を用いて植物を低温かつ減圧条件下に乾留したときに、その低温減圧乾留操作後に乾留装置内に残る乾燥状態の固体状の残留物を低温減圧乾留残渣Ｒと称し、その低温減圧乾留残渣Ｒからの溶媒による抽出物を残渣抽出分Ｅと称するとき、
前記の没食子酸含有組成物の少なくとも一部が、前記の低温減圧乾留残渣Ｒまたは／および残渣抽出分Ｅからなる植物由来の没食子酸含有組成物であること、
を特徴とする切断剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、メイラード反応の結果生成される生成物である「ＡＧＥｓ」を分解する（切断する）作用のすぐれた分解剤（切断剤）に関するものである。ここで「ＡＧＥｓ」とは、「アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ」のことである。
【背景技術】
【０００２】
（メイラード反応抑制剤と切断剤）
−１−
周知のように、メイラード反応とは、還元糖とアミノ化合物（アミノ酸、ペプチド、蛋白質など）とを加熱したときに褐色物質を生ずるところ、その褐色物質を生成する非酵素的な反応のことである。
−２−
この反応が進むと、食品の諸品質が低下するとされている。そこで、食品の品質低下を抑制するためには、メイラード反応の進行を効果的に抑制する物質（つまり「抑制剤」）の開発が望まれる。
−３−
また、メイラード反応は生体内においても生じていて、そのことが老化の一因となっていたり糖尿病合併症の一因となっていたりする。そこでこの観点からも、有効かつ安全なメイラード反応抑制剤の開発が望まれる。
−４−
加えて、メイラード反応生成物が生体内において生ずることを充分に抑制することは困難であるので、生じてしまったメイラード反応生成物を有効に分解（切断）する「分解剤（つまり切断剤）」を見い出すことも、メイラード反応抑制剤の開発に劣らず重要である。
−５−
本発明は、上記の抑制剤および分解剤（切断剤）のうち、後者の分解剤（切断剤）に関するものである。
なお、後者における「分解剤」と「切断剤」とは同義であるが、評価を「切断率ないし切断活性」の度合いで行うことが多いので、本明細書においては主として「切断剤」の用語を使用することにする、
【０００３】
（特許文献１）
−１−
特開２００７−１１９３７３号公報（特許文献１、出願日は２００５年１０月２６日）の請求項１（および段落０００９）には、種々の植物のエキスから選択される活性物質を含むメイラード反応生成物分解剤（つまり切断剤）が示されている。
その請求項２には、上記の活性物質が、植物由来組織を水又は熱水で抽出して得られる抽出物であることが示されている。
その請求項１〜４は、上記の分解剤（活性物質）の切断活性の規定にかかるものである。
その請求項５は、上記のメイラード反応生成物分解剤を含む飲食品にかかるものである。
【０００４】
−２−
その段落００１９には、上記の活性物質を植物の各種部位を、そのままもしくは粉砕後、搾取したものであっても良いし、そのままもしくは粉砕後、溶媒で抽出したものであっても良いとの記載がある。
また、その段落００１９には、溶媒としては、水、熱水、アルコール、ケトン、エーテル、ニトリル、エステル、芳香族溶媒、ハロゲン化溶媒などがあげられるとの記載がある。
【０００５】
−３−
その段落００２１には、上記の請求項５の飲食品（および上記のメイラード反応生成物分解剤を含むサプリメント、医薬品、化粧品その他の製品）について説明するとあり、その段落００３９〜００４８には、植物系原料、無機原料、動物系原料に由来するおびただしい数の添加物が例示されている。
【０００６】
−４−
その段落００２６には、上記の飲食品、化粧品または医薬品は必要に応じ下記に例示する成分や添加剤を適宜含んでいても良いとの記載がある。
その段落００５９には、抗酸化剤の例として、没食子酸プロピルにつき言及がある。
その段落００７５には、染料剤の例として、没食子酸につき言及がある。ただし、染料剤としての使用可能性を述べたものである。（ちなみに、後述の特許文献３のように、没食子酸は鉄イオンとの組み合わせにおいて黒色になるので、染毛剤として用いられる。）
その段落００７６には、香料の例として、バラ精油につき言及がある。
その段落００９９には、「表１および表２に、対照例および実施例１〜４７におけるオキザル基の炭素間結合切断活性（α−ジカルボニル化合物分解活性）を示す」との記載があるが、これは「ＡＧＥ−タンパク質架橋形成物モデル化合物がα−ジカルボニル構造を持っている」ということを述べている。
【０００７】
−５−
その実施例および比較例にかかる段落００８３〜００９８には、緑茶葉抽出物を濃縮後、カラムクロマトグラフィーに供し、カテキン類（カテキン、エピガロカテキン、エピガロカテキンガレート）の溶出する画分を回収したものをエキスやパウダーとして用いて切断活性を求めたときの結果につき記載がある。
そして、段落０１００〜０１０１の表１および表２には、多種の植物エキスを用いたときの「切断率（％）」と、対照であるＰＴＢの切断率を基準の１００としたときの「相対切断活性」とが示されており、対照ＰＴＢとの対比で６９４や４５６をはじめとして１００超えの相対切断活性値のものが４７例のうち１７例もある。
【０００８】
−６−
ちなみに、次に述べる特許文献２（特許文献１よりも４年８ケ月前に出願）においては、その段落０１１５の箇所に記載のあるように陽性対照として「１００ｍＭ  ＰＴＢ」を用いている。そして、その対照の修復率（その段落０１１４によれば蛋白質切断架橋活性のこと）を１００％としたとき、各種植物抽出物を用いた実施例の修復率は２２〜９０％であるので、不自然さはない。
【０００９】
−７−
そこで、この特許文献１に立ち戻って、その対照であるＰＴＢについての記載を見ると、その段落００８８に、反応液組成として「１０ｍＭ  ＰＴＢ溶液」との記載がある。
つまり、特許文献１においては、対照であるＰＴＢとして、特許文献２の濃度（１００ｍＭ）の１／１０の「１０ｍＭ」のものを用いているのであるから、特許文献１の段落０１００〜０１０１の表１〜２の実施例の切断率が陽性対照との対比で高めになるのは当然である。
【００１０】
−８−
なお、特許文献１の比較例１２〜３８にかかる段落０１０４においては、それに先立つ他社の出願にかかる特許文献２の請求項１とその段落０１２３とに列挙されている２７種の植物抽出物をそっくりそのまま列記して、それらの分解活性測定結果は特許文献２と同じであったとしている（最も高いザクロ抽出物が９０、最も低いゲンノショウコ抽出物が２２）。
特許文献２と同じ結果が得られたということは、そのときの対照ＰＴＢの濃度は１００ｍＭでなければ辻褄が合わないことになるが、上述のように特許文献１においてはその段落００８８のように「１０ｍＭ  ＰＴＢ溶液」を陽性対照としているのであるから、特許文献１の段落０１０４の記載は矛盾しているように見える。
【００１１】
（特許文献２）
−１−
特開２００２−２４１２９９号公報（特許文献２、出願日は２００１年２月１３日）の請求項１には、２７種の植物（チャノキ、バラを含む）から選ばれる１種以上の植物抽出物を含有するメイラード反応修復剤が示されている。
その請求項２には、蛋白質架橋切断活性を有する請求項１記載のメイラード反応修復剤が示されている。
その段落００３２には、上記の「バラ」の例として、ダマスク・ローズにつき言及がある。
その段落００６２には、クェルクス・インフェクトリア（没食子）につき言及がある。
その段落００８１には、抗酸化剤の例として、没食子酸プロピルにつき言及がある。
その段落００９７には、染料剤の例として、没食子酸につき言及がある。
その段落００９８には、香料の例として、バラ精油につき言及がある。
【００１２】
−２−
その実施例にかかる製造例１〜６には、この順に、各種植物（バラにも言及）を「水；５０％エタノール溶液；５０％１，３−ブチレングリコール溶液；５０％１，３−ブチレングリコール溶液；５０％プロピレングリコール溶液；水」に浸漬して抽出した抽出液を用いて、蛋白質架橋切断活性（修復率）の測定を行ったことが示されている。
【００１３】
−３−
そのときの結果はその段落０１１７の表１に示されているが、対照（１００ｍＭ  ＰＴＢ）の修復率を１００％としたとき、上記の各種植物抽出物を用いたときの修復率は２２〜９０％である。なお、チャノキの修復率は３０％、バラの修復率は７４％である。
その表１に関連する段落０１１８の説明によれば、「各植物抽出物には、ブランクと比較して、著しい蛋白質架橋切断活性（２２〜７４％）を有することが確認され、」とあるものの、対照（１００ｍＭ  ＰＴＢ）の修復率が１００％であることから、各試料の修復率（２２〜７４％）が対照の修復率を超えるような事例はない。
【００１４】
（特許文献３）
−１−
特開２０１４−００９１６０号公報（特許文献３）の請求項１には、「タンニン酸、没食子酸及び没食子酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも１種（ａ）と、アンモニウム塩（ｂ）とを含む第１剤（１）」、及び、「鉄塩を含む第２剤（２）」、を含む染毛剤組成物が示されている。
−２−
ただし、この特許文献３にかかる「染毛剤」（第１剤と第２剤（鉄塩など）との反応により発色させて毛髪に色素を固定する目的の染毛剤）は、本発明の狙いとする「ＡＧＥ−タンパク質架橋形成物モデルの切断活性のすぐれたメイラード反応生成物分解剤（つまり切断剤）」とは無関係である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】特開２００７−１１９３７３号公報
【特許文献２】特開２００２−２４１２９９号公報
【特許文献３】特開２０１４−００９１６０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
（特許文献１について）
−１−
特許文献１（出願日は２００５年１０月２６日）の段落００２６には、「また、本発明の飲食品、化粧品または医薬品は、必要に応じ、例えば、下記（１）〜（４５）に例示する成分や添加剤を適宜含んでいても良い。」との記載がある。そして、その記載を受けて、段落００７５には、「（４０）染料剤」として５７の染料があげられており、その５３番目が「没食子酸」である。
−２−
しかしながら、その段落００８８以降の［実施例］の個所においては、実施例１〜４７、比較例１〜１１、比較例１２〜３８の計８５例があげられているものの、「染料剤」を添加した例は皆無である。
−３−
ある種の染料に特許文献１が狙いとしているメイラード反応生成物分解剤としての作用効果があると認識するならば、「（４０）染料剤」の項目ではなく、請求項１に有効成分として記載しているはずである。
【００１７】
（特許文献２について）
−１−
特許文献２（出願日は２００１年２月１３日）の段落００４５には、「前記の必須成分に加え必要に応じ、下記に例示する成分は添加剤を任意に選択・併用して製造することができ、製剤中への含有量は、特に規定しないが、通常、０．０００１〜５０％が好ましい。」とあり、以下、（１）〜（４５）の添加剤があげられている。そして、その段落００９７の「（４０）染料剤」には５７の染料があげられており、その５３番目が「没食子酸」である。
ただし、その段落０１０７以降の［実施例］の個所においては、「染料剤」を添加した例は皆無である。
−２−
特許文献１の場合と同様に、ある種の染料に特許文献２が狙いとしているメイラード反応生成物分解剤としての作用効果があると認識するならば、「（４０）染料剤」の項目ではなく、請求項１に有効成分として記載しているはずである。
−３−
なお、この特許文献２の段落００９７の「（４０）染料剤」の箇所の記載は、一言一句の全てが上述の特許文献１の段落００７５の「（４０）染料剤」の記載と同一である。（この特許文献２よりも特許文献１の方が４年８ケ月半遅れの出願にかかるものであるから、特許文献１の記載が特許文献２の記載と同一であるということになる。）
【００１８】
（特許文献３について）
特許文献３にかかる「染毛剤」は、第１剤と第２剤との反応により発色させて毛髪に色素を固定する目的のものであり、本発明の狙いとする「ＡＧＥ−タンパク質架橋形成物モデルの切断活性のすぐれたメイラード反応生成物分解剤（つまり切断剤）」とは無関係である。
【課題を解決するための手段】
【００１９】
（本発明の第１の切断剤）
−１−
本発明の第１の切断剤は、メイラード反応生成物分解剤を「切断剤」と称するとき、遊離型の没食子酸を有効成分とすること、を特徴とするものである。
−２−
ここで、遊離型の没食子酸とは、３，４，５−トリヒドロキシ安息香酸（３，４，５−ｔｒｉｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｏｉｃ  ａｃｉｄ）のことであり、遊離型であることが「切断剤」としての作用効果を発揮する。（「遊離型」とは、次に述べるような没食子酸誘導体ではないことを意味する。なお、環境ｐＨによってはＣＯＯＨ部分がＣＯＯ−のようなイオン型や塩型になることもあるが、これも遊離型に含まれるものとする。）
ちなみに、没食子酸アルキルやタンニンなどの没食子酸誘導体は、当然ながら、遊離型の没食子酸の範疇には含まれない。
【００２０】
（本発明の第２の切断剤）
−１−
本発明の第２の切断剤は、メイラード反応生成物分解剤を「切断剤」と称するとき、
（ア）前記の切断剤が、植物由来の遊離型の没食子酸を含有する没食子酸含有組成物からなること、および、
（イ）減圧乾留機構を備えた乾留装置を用いて植物を低温かつ減圧条件下に乾留したときに、その低温減圧乾留操作後に乾留装置内に残る乾燥状態の固体状の残留物を低温減圧乾留残渣Ｒと称し、その低温減圧乾留残渣Ｒからの溶媒による抽出物を残渣抽出分Ｅと称するとき、
前記の没食子酸含有組成物の少なくとも一部が、前記の低温減圧乾留残渣Ｒまたは／および残渣抽出分Ｅからなる植物由来の没食子酸含有組成物であること、
を特徴とするものである。
−２−
植物としては、低温減圧乾留操作により残渣側に遊離型の没食子酸が含有されるようなものであれば、種々様々なものを用いることができる。代表的な（または着目すべき）植物の一例は、バラ、殊にダマスク・ローズである。
−３−
低温減圧乾留操作とは、（Ａ）圧力については、たとえば１００ｍｍＨｇ以下（さらには５０ｍｍＨｇ以下）の減圧条件、（Ｂ）温度については、たとえば９０℃から常温程度の低温条件である。（Ｃ）乾留に供する植物の水分率については、たとえば、生の植物についてはその自然の含水率程度であり、冷凍保存の植物についてはその冷凍品の含水率程度である。
【発明の効果】
【００２１】
−１−
（第１の切断剤）
本発明の第１の切断剤にあっては、化合物である遊離型の没食子酸が「切断剤」としてのすぐれた作用効果を発揮する。この事実は、従来知られていなかったものと信じられる。
【００２２】
−２−
（第２の切断剤）
本発明の第２の切断剤は、植物由来の遊離型の没食子酸を含有する没食子酸含有組成物からなるものであり、目的物のほか、その目的物の取得源と取得手段にも着目したものである。
このときの遊離型の没食子酸を含有する没食子酸含有組成物は、減圧乾留機構を備えた乾留装置を用いて植物を低温かつ減圧条件下に乾留する工程を経て取得されるものである。
このルートは、工業的であることのほか、植物由来であることによる安全・安心感を満足する上、直接的な目的物である遊離型の没食子酸のほかに、原料植物（一例をあげればバラを選択使用することができる）中に含まれる他の成分やその分解物も含まれた形で目的物を得ることができるので、実質的にも、イメージ的にも、そして需要者の期待に沿うことできるものを商品化することができる点でも、好ましいものとなる。
【実施例】
【００２３】
次に実施例および参考例をあげて、本発明をさらに説明する。
【００２４】
実際の試験は、没食子酸やその誘導体を用いた「第１次試験」と、植物（バラを使用）を低温減圧乾留したときの「低温減圧乾留残渣Ｒ」と、その低温減圧乾留残渣Ｒからの溶媒による抽出物である「残渣抽出分Ｅ」とを用いた「第２次試験」とを混在して行っているが、この実施例の箇所においては、まず「第１次試験」の場合について述べ、ついで「第２次試験」の場合について述べることにする。
【００２５】
［第１次試験（その１）］
（１）試験に供した試薬
試薬として、下記の５種の化合物を準備した。
１：  没食子酸（純度は９８．０％以上）
２：  没食子酸エチル（純度は９８．０％以上）
３：  没食子酸ドデシル（純度は不明）
４：  ３，４，５−トリメトキシ安息香酸（純度は９７．０％以上）
５：  シリンガ酸（純度は不明）
−備考−
・没食子酸は、３，４，５−トリヒドロキシ安息香酸
・没食子酸アルキル（エチル、ドデシル）は、没食子酸のＣＯＯＨ基がＣＯＯＲ（アルキルエステル）になったもの
・３，４，５−トリメトキシ安息香酸は、没食子酸の３つのＯＨ基がＯＣＨ３基（メトキシ基）になったもの
・シリンガ酸は、没食子酸−３，５−ジメチルエーテル（つまり４−オキシ−３，５−ジメトキシ安息香酸）
【００２６】
（２）方法
Ｓ．Ｖａｓａｒａｎらの方法（Ｎａｔｕｒｅ，Ｖｏｌ．３８２，ｐ．２７５−２７８，１９９６）に従って、ＡＧＥ−タンパク質架橋形成物モデルの切断活性を測定した。
すなわち、下記に示す組成の反応液を１．５ｍＬ容量のプラスチックチューブに調製し、３７℃にて４時間振盪した）。
【００２７】
「反応液組成と添加量」
・５００ｍＭのリン酸水素二ナトリウム（ｐＨ７．４）………８００μＬ
・１００ｍＭの１−フェニル−１，２−プロパンジオン………１００μＬ
・試料溶液……………………………………………………………１００μＬ
【００２８】
「切断率の測定」
反応終了後、２Ｎ−ＨＣｌを２００μＬ加えて攪拌し、反応を停止した。
その液を０．２μｍのフィルターで濾過し、ＨＰＬＣ分析試料溶液とした。
【００２９】
「ＨＰＬＣ分析条件」
・カラム：ＹＭＣ−Ｐａｃｋ  ＯＤＳＡ−３１２  １５０×６ｍｍＩ．Ｄ． 
・溶出液：４０％ＭｅＯＨ／０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）
・流量：１．０ｍＬ／ｍｉｎ．
・カラム温度：４０℃
・検出器：ＵＶ波長  ２７３ｎｍ
・注入量：２０μＬ
・保持時間：約１２分
【００３０】
「切断率の求め方」
−１−
切断率は、全ての１−フェニル−１，２−プロパンジオンが切断された場合は１０ｍＭの安息香酸が遊離すると仮定できるので、以下の式に従って算出した。
切断率（％）＝１００×（各分析試料から発生する安息香酸のピーク面積／１０ｍＭ安息香酸のピーク面積）
−２−
なお、念のために、上記の切断率における安息香酸の濃度について注釈する。
１−フェニル−１．２−プロパンジオンが切断されると、１−フェニル−１．２−プロパンジオンと当モルの安息香酸が生じるので、この生じた安息香酸をＨＰＬＣで定量する。
上記の「ＨＰＬＣ分析条件」のように、反応液は合計で１ｍＬとなり、その中に１００ｍＭ１−フェニル−１．２−プロパンジオンが１００μＬ加えられているので、反応液中での１−フェニル−１．２−プロパンジオン濃度は１０ｍＭとなる。よって、全量の１−フェニル−１．２−プロパンジオンが分解されると、反応液中の安息香酸濃度は１０ｍＭとなる。
【００３１】
（２）切断率の測定結果
上記で調製した試料溶液についての切断率の測定結果を次の表１に示す。
【００３２】
【表１】
2015189678.tif 000002
【００３３】
（３）考察
ＡＧＥ−タンパク質架橋形成物モデルの切断活性は、化合物量が１００ｍＭの場合で、次のような強さを持っていた。
１：没食子酸は、陽性コントロールとほぼ同等の強い活性を有していた。
２：没食子酸エチルの切断活性は、陽性コントロールの１／３程度であった。
３：没食子酸ドデシル、３，４，５−トリメトキシ安息香酸、シリンガ酸の場合の切断率は、いずれも陽性コントロールに比し極めて低いものであった。
【００３４】
［第１次試験（その２）]
（１）試験に供した試薬
上記の第１次試験（その１）で没食子酸と没食子酸類似の化合物についての切断率の傾向が把握できたので、試薬を第１次試験（その１）で好適な結果が得られた「没食子酸」のみに絞ると共に、その濃度を１００ｍＭと１０ｍＭとの２水準にして、切断活性を調べた。
【００３５】
（２）切断率の測定結果
結果を表２に示す。
【００３６】
【表２】
2015189678.tif 000003
【００３７】
（３）考察
−１−
ＡＧＥ−タンパク質架橋形成物モデルの切断活性は、没食子酸の量が１００ｍＭの場合（実施例２）に、陽性コントロールとほぼ同等の強い活性を有していた。
−２−      
没食子酸の量が１０ｍＭの場合（実施例３）には切断率が１／３程度になったが、実施例３においては実施例２よりも没食子酸の量が１／１０になっていることから、その割には予想ないし期待を上回る切断率が得られていることがわかる。
【００３８】
［第３］第２次試験
−１−
原料植物であるバラ（ダマスク・ローズ）を４０℃×２０ｍｍＨｇの低温減圧条件下に乾留した。そして、その低温減圧乾留操作後に乾留装置内に残る乾燥状態の残渣Ｒを取得した。
また、その残渣Ｒの一部を５０％エタノールを用いて抽出することにより、残渣抽出分Ｅを取得した。
上記の低温減圧乾留残渣Ｒには種々様々な成分が含まれており、上記の残渣抽出分Ｅにも種々様々な成分が含まれているが、これら双方のいずれにも没食子酸が含まれていることが確認できた。
そして、これらの低温減圧乾留残渣Ｒとその残渣抽出分Ｅのいずれも、切断特性を有することが定性的には確認できた。
【産業上の利用可能性】
【００３９】
本発明の切断剤（つまりメイラード反応生成物分解剤）を用いれば、確実かつ好ましい切断率が奏される。
従って、本発明の切断剤は、化粧料、食品、サプリメント、医薬品などとして、あるいはそれらに添加する添加剤として有用である。特に、抗老化および抗生活習慣病に有効なサプリメントとして最適である。