(57)【要約】【課題】製造時における取り扱い性に優れ、かつ皮膚における皮脂の分泌を抑制することができる化粧料および皮膚外用剤を提供すること。【解決手段】皮膚における皮脂の分泌を抑制する化粧料であって、スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物を有効成分として含有することを特徴とする化粧料および皮膚における皮脂の分泌を抑制する皮膚外用剤であって、スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物を有効成分として含有する皮膚外用剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
皮膚における皮脂の分泌を抑制する化粧料であって、スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物を有効成分として含有することを特徴とする化粧料。
【請求項２】
前記化合物が、アスコルビン酸化合物、ピリドキシン化合物および（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物からなる群より選ばれた少なくとも１種である請求項１に記載の化粧料。
【請求項３】
皮膚における皮脂の分泌を抑制する皮膚外用剤であって、スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物を有効成分として含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項４】
前記化合物が、アスコルビン酸化合物、ピリドキシン化合物および（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物からなる群より選ばれた少なくとも１種である請求項３に記載の皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、化粧料に関する。さらに詳しくは、本発明は、スキンケア、スカルプケアなどに有用な化粧料および皮膚外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮脂は、皮脂膜を形成して皮膚表面を覆うことにより、外界からの異物の侵入または種々の物質による刺激から皮膚を保護するバリア機能を発現している。また、皮膚における皮脂は、皮膚における水分保持作用および殺菌作用を有している。
【０００３】
しかし、皮膚における皮脂の過剰分泌は、ニキビ、皮膚のテカり、ベタつきなどの原因となるため、美容上好まれない傾向がある。また、皮膚における皮脂量は、皮膚における水分量と同様に、美容学上、肌質を決定する因子の１つである。したがって、皮膚における皮脂の分泌を適度に抑制する化粧料および皮膚外用剤が望まれている。
【０００４】
皮膚における皮脂の分泌を抑制する皮脂分泌抑制剤として、例えば、カロテノイドおよび／またはその誘導体を含有する皮脂分泌抑制剤が提案されている（例えば、特許文献１など参照）。
【０００５】
しかし、前記カロテノイドおよび／またはその誘導体は、化粧料および皮膚外用剤の成分として用いる場合、難水溶性であることから、製造時における取り扱い性に劣るという欠点がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２０１３−０２８５７２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、前記従来技術に鑑みてなされたものであり、製造時における取り扱い性に優れ、しかも皮膚における皮脂の分泌を抑制することができる化粧料および皮膚外用剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
すなわち、本発明の要旨は、
（１）  皮膚における皮脂の分泌を抑制する化粧料であって、スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物を有効成分として含有することを特徴とする化粧料、
（２）  前記化合物が、アスコルビン酸化合物、ピリドキシン化合物および（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物からなる群より選ばれた少なくとも１種の化合物である前記（１）に記載の化粧料、
（３）  皮膚における皮脂の分泌を抑制する皮膚外用剤であって、スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物を有効成分として含有することを特徴とする皮膚外用剤、ならびに
（４）  前記抗酸化物質が、アスコルビン酸化合物、ピリドキシン化合物および（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物からなる群より選ばれた少なくとも１種の化合物である前記（３）に記載の皮膚外用剤
に関する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の化粧料および皮膚外用剤は、製造時における取り扱い性に優れ、しかも皮膚における皮脂の分泌を抑制することができるという優れた効果を奏する。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】試験例１において、被験試料の濃度と、スーパーオキシドアニオン消去率との関係を調べた結果を示すグラフである。
【図２】試験例２において、被験試料の濃度と、対照細胞の脂質産生量に対する被験試料を接触させた被験細胞の脂質産生量の割合との関係を調べた結果を示すグラフである。
【図３】試験例２において、被験試料の濃度と、対照の分化細胞数に対する被験試料接触後に生じた分化細胞数の割合との関係を調べた結果を示すグラフである。
【図４】（Ａ）は試験例２において、アスコルビン酸接触後の皮脂腺細胞の形態を観察した結果を示す図面代用写真、（Ｂ）は試験例２において、アスコルビン酸を接触させていない皮脂腺細胞の形態を観察した結果を示す図面代用写真である。
【図５】（Ａ）は試験例２において、ピリドキシン環状リン酸接触後の皮脂腺細胞の形態を観察した結果を示す図面代用写真、（Ｂ）は試験例２において、ピリドキシン環状リン酸を接触させていない皮脂腺細胞の形態を観察した結果を示す図面代用写真である。
【図６】（Ａ）は試験例２において、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステル塩接触後の皮脂腺細胞の形態を観察した結果を示す図面代用写真、（Ｂ）は試験例２において、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステル塩を接触させていない皮脂腺細胞の形態を観察した結果を示す図面代用写真である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
１．化粧料
本発明の化粧料は、皮膚における皮脂の分泌を抑制する化粧料であって、スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物を有効成分として含有することを特徴とする化粧料である。
【００１２】
本発明者らは、スーパーオキシドアニオン消去作用の大きさと、未分化の皮脂腺細胞の分化に対する抑制作用および皮脂腺細胞による皮脂分泌に対する抑制作用の大きさとが相関しており、当該ラジカル消去作用を有する化合物が未分化の皮脂腺細胞の分化および皮脂腺細胞による皮脂分泌に対して、高い抑制作用を示すことを見出した。本発明は、これらの知見に基づくものである。
【００１３】
本発明の化粧料は、前記スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物を有効成分として含有する点に１つの大きな特徴を有する。前記スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物は、一般的に、水系溶媒中でスーパーオキシドアニオン消去作用を示す。したがって、本発明の化粧料は、製造時における取り扱い性に優れる。しかも、本発明の化粧料は、スーパーオキシドアニオンの消去作用を発現し、これにより、未分化の皮脂腺細胞の分化に対する抑制作用および皮脂腺細胞による皮脂分泌に対する抑制作用を発現し、皮膚における皮脂の分泌を抑制することができるという優れた効果を奏する。
【００１４】
前記「スーパーオキシドアニオン消去作用」は、スーパーオキシドアニオン消去率を指標として用いることによって評価することができる。前記スーパーオキシドアニオン消去率は、例えば、
（Ａ）  ９６ウェルマイクロプレートのウェル内において、反応液（ｉ）〔０．２５ｍＭニトロテトラゾリウムクロリドブルー、１ｍＭヒポキサチンおよび０．１ｍＭエチレンジアミン四酢酸を含む１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）〕７５μＬと、反応液（ｉｉ）〔２０ユニット／ｍＬ濃度のキサンチンオキシダーゼを含む１ｍｇ／ｍＬウシ血清アルブミン水溶液〕２５μＬと、被験試料含有溶液〔被験試料を所定濃度となるように１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）に溶解させることによって得られた試料〕７５μＬとの混合物を３７℃で１０分間インキュベーションして反応産物（Ａ）を得るステップ、
（Ｂ）  ９６ウェルマイクロプレートのウェル内において、反応液（ｉ）７５μＬと、反応液（ｉｉ）２５μＬと、１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）７５μＬとの混合物を３７℃で１０分間インキュベーションするステップ、
（Ｃ）  前記ステップ（Ａ）において、反応液（ｉｉ）を用いる代わりに１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）を用いて得られた混合物を３７℃で１０分間インキュベーションして反応産物（Ｃ）を得るステップ、
（Ｄ）  前記ステップ（Ｂ）において、反応液（ｉｉ）を用いる代わりに１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）を用いて得られた混合物を３７℃で１０分間インキュベーションして反応産物（Ｄ）を得るステップ、
（Ｅ）  マイクロプレートリーダーを用いて前記反応産物（Ａ）〜（Ｄ）それぞれの５５０ｎｍでの吸光度を測定するステップ、ならびに
（Ｆ）  前記ステップ（Ｅ）で得られた反応産物（Ａ）〜（Ｄ）それぞれの吸光度を用い、
式（Ｉ）：
【００１５】
【数１】
2015166330.tif 000002
【００１６】
〔式中、Ａｂｓ［Ａ］は反応産物（Ａ）の吸光度、Ａｂｓ［Ｂ］は反応産物（Ｂ）の吸光度、Ａｂｓ［Ｃ］は反応産物（Ｃ）の吸光度、Ａｂｓ［Ｄ］は反応産物（Ｄ）の吸光度を示す〕
にしたがってスーパーオキシドアニオン消去率を算出するステップ
を行なうことによって求めることができる。
【００１７】
前記スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物としては、例えば、アスコルビン酸化合物、ピリドキシン化合物、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらのスーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物は、単独でまたは２種以上を混合して用いることができる。
【００１８】
なお、前記スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物の代わりに、一重項酸素の消去作用を有する抗酸化物質であるアスタキサンチンなどのカロテノイドおよび／またはその誘導体を用いた場合、当該カロテノイドおよび／またはその誘導体は、難水溶性物質であることから、化粧料または皮膚外用剤の有効成分として用いる場合には、きわめて取り扱いにくく、適用することができる製品形態が制限される。これに対し、本発明に用いられる前記アスコルビン酸化合物、ピリドキシン化合物、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物などのスーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物は、一般的に、水系溶媒中でスーパーオキシドアニオン消去作用を示すことから、製造時における取り扱い性に優れている。
【００１９】
本明細書において、前記「アスコルビン酸化合物」とは、アスコルビン酸、アスコルビン酸塩およびアスコルビン酸誘導体の総称をいう。前記「アスコルビン酸塩」は、前記アスコルビン酸の生理学的に許容される塩をいい、より具体的には、例えば、ラジカル消去能によって未分化の皮脂腺細胞の分化を抑制して皮脂の分泌を抑制する性質を有するアスコルビン酸の塩をいう。前記アスコルビン酸塩としては、例えば、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸カリウムなどのアスコルビン酸アルカリ金属塩；アスコルビン酸マグネシウム、アスコルビン酸カルシウムなどのアスコルビン酸アルカリ土類金属塩どが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。前記アスコルビン酸誘導体としては、例えば、Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド、３−Ｏ−エチルアスコルビン酸などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらのアスコルビン酸化合物のなかでは、皮脂の分泌抑制能に優れ、しかも易水溶性であり、取り扱い性に優れることから、アスコルビン酸、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸マグネシウム、Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシドが好ましく、アスコルビン酸がより好ましい。本発明の化粧料においては、前記アスコルビン酸化合物として、例えば、市販のアスコルビン酸化合物を用いることができる。
【００２０】
また、本明細書において、前記「ピリドキシン化合物」とは、ピリドキシン、ピリドキシン塩酸塩、ピリドキシン環状リン酸、ピリドキシン環状リン酸およびピリドキシン環状リン酸塩の総称をいう。前記「ピリドキシン環状リン酸塩」は、前記ピリドキシン環状リン酸の生理学的に許容される塩をいい、より具体的には、例えば、ラジカル消去能によって未分化の皮脂腺細胞の分化を抑制して皮脂の分泌を抑制する性質を有するピリドキシン環状リン酸の塩をいう。前記ピリドキシンリン酸としては、例えば、ピリドキシン５’−リン酸などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。前記ピリドキシン環状リン酸としては、例えば、ピリドキシン３，４’−環状リン酸などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。前記ピリドキシン環状リン酸塩としては、例えば、ピリドキシン３，４’−環状リン酸ナトリウム、ピリドキシン３，４’−環状リン酸カリウムなどのピリドキシン環状リン酸アルカリ金属塩；ピリドキシン３，４’−環状リン酸マグネシウム、ピリドキシン３，４’−環状リン酸カルシウムなどのピリドキシン環状リン酸アルカリ土類金属塩などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらのピリドキシン化合物のなかでは、皮脂の分泌抑制能に優れ、しかも易水溶性であり、取り扱い性に優れることから、ピリドキシン環状リン酸およびピリドキシン環状リン酸塩が好ましく、ピリドキシン環状リン酸がより好ましく、ピリドキシン３，４’−環状リン酸がさらに好ましい。本発明の化粧料においては、前記ピリドキシン化合物として、例えば、市販のピリドキシン化合物を用いることができる。
【００２１】
さらに、本明細書において、前記「（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物」とは、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステル、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステル塩の総称をいう。前記「（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステル塩」は、前記（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルの生理学的に許容される塩をいい、より具体的には、例えば、ラジカル消去能によって未分化の皮脂腺細胞の分化を抑制して皮脂の分泌を抑制する性質を有する（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルの塩をいう。前記（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステル塩としては、例えば、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルナトリウム、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウムなどの（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルアルカリ金属塩；（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルマグネシウム、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカルシウムなどの（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルアルカリ土類金属塩などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。これらの（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物のなかでは、皮脂の分泌抑制能に優れ、しかも易水溶性であり、取り扱い性に優れることから、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステル塩が好ましく、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルアルカリ金属塩がより好ましく、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウムがさらに好ましい。本発明の化粧料においては、前記（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物として、例えば、市販の（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物を用いることができる。
【００２２】
前記スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物のなかでは、取り扱い性に優れ、しかも低濃度で、高いスーパーオキシドアニオン消去作用を発現して皮脂腺細胞による皮脂の分泌を効果的に抑制することができることから、アスコルビン酸化合物、ピリドキシン化合物および（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物からなる群より選ばれた少なくとも１種の化合物が好ましく、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物がより好ましく、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルおよび（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステル塩がさらに好ましく、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステル塩がより一層好ましい。なお、本発明の化粧料において、前記スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物は、本発明の目的を阻害しない範囲内で、イオンの状態で存在していてもよい。
【００２３】
本発明の化粧料における前記スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物の含有量は、前記スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物の種類、化粧料の種類、化粧料の用途などによって異なるので、一概には決定することができないことから、前記スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物の種類、化粧料の種類、化粧料の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。例えば、前記スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物がアスコルビン酸化合物またはピリドキシン化合物である場合、本発明の化粧料におけるアスコルビン酸化合物またはピリドキシン化合物の含有量は、通常、皮脂分泌抑制効果を十分に発揮させる観点から、好ましくは０．０１質量％以上、より好ましくは０．０５質量％以上、さらに好ましくは０．１質量％以上であり、安定性の観点から、好ましくは１０質量％以下、より好ましくは７質量％以下、さらに好ましくは５質量％以下である。また、前記スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物が（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物である場合、本発明の化粧料における（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物の含有量は、通常、皮脂分泌抑制効果を十分に発揮させる観点から、好ましくは０．００１質量％以上、より好ましくは０．００５質量％以上、さらに好ましくは０．０１質量％以上であり、保存安定性を向上させる観点から、好ましくは５質量％以下、より好ましくは３質量％以下、さらに好ましくは２質量％以下である。
【００２４】
本発明の化粧料には、本発明の目的が阻害されない範囲内で、本発明の目的が阻害されない範囲内で、化粧料に配合されるその他の成分が配合されていてもよい。前記成分としては、例えば、保湿剤、着色剤、界面活性剤、防腐剤、殺菌剤、香料、精製水、油剤、アルコール、高分子、ｐＨ調整剤、紫外線吸収剤、金属イオン封鎖剤、粉体、酸化防止剤などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。本発明の化粧料における前記成分の含有量は、当該成分の種類などによって異なるので、一概には決定することができないことから、前記成分の種類などに応じて適宜設定することが好ましい。なお、本発明の化粧料に前記成分が配合されている場合、前記スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物は、本発明の目的を阻害しない範囲内で、当該成分と複合体を形成していてもよい。
【００２５】
本発明の化粧料としては、例えば、石鹸、洗顔料、ボディ洗浄料、化粧水（ローション）、美容液、パック・マスク、髭剃り剤、サンケア剤、ハンドケア剤、デオドラント剤、消臭剤などのスキンケア化粧料；シャンプー、リンス、育毛剤、スカルプ剤などのスカルプケア化粧料；白粉、ファンデーション、頬紅などのメーキャップ化粧料；香水、コロンなどの芳香化粧料などが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。また、前記化粧料の剤型としては、例えば、液状、乳液状、クリーム状、ジェル状、ワックス状、軟膏、粉状、固形粉末状、固形状、エアゾールなどが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。本発明の化粧料は、当該化粧料の種類に応じた方法で使用することができる。
【００２６】
以上説明したように、本発明の化粧料は、製造時における取り扱い性に優れ、しかも皮膚における皮脂の分泌を抑制することができることから、スキンケア、スカルプケアなどに有用な化粧料として好適に使用することができる。
【００２７】
２．皮膚外用剤
本発明の皮膚外用剤は、前記したように、皮膚における皮脂の分泌を抑制する皮膚外用剤であって、スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物を有効成分として含有することを特徴とする皮膚外用剤である。なお、本明細書において、「皮膚外用剤」とは、皮膚に適用される医薬部外品および医薬品をいう。
【００２８】
本発明の皮膚外用剤は、スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物を有効成分として含有しているので、製造時における取り扱い性に優れ、しかも、スーパーオキシドアニオンの消去作用を発現し、これにより、未分化の皮脂腺細胞の分化に対する抑制作用および皮脂腺細胞による皮脂分泌に対する抑制作用を発現し、皮膚における皮脂の分泌を抑制することができるという優れた効果を奏する。
【００２９】
本発明の皮膚外用剤に用いられるスーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物は、本発明の化粧料に用いられるスーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物と同様である。なお、本発明の皮膚外用剤において、前記スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物は、本発明の目的を阻害しない範囲内で、イオンの状態で存在していてもよい。
【００３０】
また、本発明の皮膚外用剤におけるスーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物の含有量は、前記スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物の種類、皮膚外用剤の種類、皮膚外用剤の用途などによって異なるので、一概には決定することができないことから、前記スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物の種類、皮膚外用剤の種類、皮膚外用剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。例えば、前記スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物がアスコルビン酸化合物またはピリドキシン化合物である場合、本発明の皮膚外用剤におけるアスコルビン酸化合物またはピリドキシン化合物の含有量は、通常、皮脂分泌抑制効果を十分に発揮させる観点から、好ましくは０．０１質量％以上、より好ましくは０．０５質量％以上、さらに好ましくは０．１質量％以上であり、十分な保存安定性を確保する観点から、好ましくは１０質量％以下、より好ましくは７質量％以下、さらに好ましくは５質量％以下である。また、前記スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物が（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物である場合、本発明の皮膚外用剤における（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物の含有量は、通常、皮脂分泌抑制効果を十分に発揮させる観点から、好ましくは０．００１質量％以上、より好ましくは０．００５質量％以上、さらに好ましくは０．０１質量％以上であり、十分な保存安定性を確保する観点から、好ましくは５質量％以下、より好ましくは３質量％以下、さらに好ましくは２質量％以下である。
【００３１】
本発明の皮膚外用剤には、本発明の目的が阻害されない範囲内で、医薬部外品または医薬品に配合されるその他の成分が配合されていてもよい。前記成分としては、例えば、保湿剤、着色剤、界面活性剤、殺菌剤、安定化剤、防腐剤、防腐剤、粘度調整剤、ｐＨ調整剤、香料、精製水、油剤、アルコール、高分子、ｐＨ調整剤、紫外線吸収剤、金属イオン封鎖剤、粉体、酸化防止剤などが挙げられる。本発明の皮膚外用剤中における前記成分の含有量は、当該成分の種類などによって異なるので、一概には決定することができないことから、前記成分の種類などに応じて適宜設定することが好ましい。なお、本発明の皮膚外用剤に前記成分が配合されている場合、前記スーパーオキシドアニオン消去作用を有する化合物は、本発明の目的を阻害しない範囲内で、当該成分と複合体を形成していてもよい。
【００３２】
本発明の皮膚外用剤としては、例えば、石鹸、洗顔剤、ボディ洗浄剤、美容液、パック・マスク、髭剃り剤、サンケア剤、ハンドケア剤、デオドラント剤、消臭剤などのスキンケア剤；シャンプー、リンス、育毛剤、スカルプ剤などのスカルプケア剤が挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。また、前記皮膚外用剤の剤型としては、例えば、液状、乳液状、クリーム状、ジェル状、ワックス状、軟膏、粉状、固形粉末状、固形状、エアゾールなどが挙げられるが、本発明は、かかる例示のみに限定されるものではない。本発明の皮膚外用剤は、当該皮膚外用剤の種類に応じた方法で使用することができる。
【００３３】
以上説明したように、本発明の皮膚外用剤は、製造時における取り扱い性に優れ、しかも皮膚における皮脂の分泌を抑制することができることから、スキンケア、スカルプケアなどに有用な皮膚外用剤として好適に使用することができる。
【実施例】
【００３４】
つぎに、実施例に基づいて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は、かかる実施例のみに限定されるものではない。
【００３５】
（試験例１）
（１）被験試料の調製
被験物質をその濃度が０．０１ｍＭ、０．１ｍＭ、１ｍＭまたは５ｍＭとなるように１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）に添加し、被験試料を得た。なお、被験物質として、アスコルビン酸化合物であるＬ−アスコスビン酸〔和光純薬（株）製、Ｌ（＋）−アスコルビン酸標準品〕、ピリドキシン化合物であるピリドキシン３，４’−環状リン酸〔第一ファインケミカル（株）製、商品名：パナドシキンＰ〕または（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物であるｄｌ−α−トコフェロール  ２−Ｌ−アスコルビン酸リン酸ジエステルカリウム〔千寿製薬（株）製、商品名：ＥＰＣ（ＳＥＮＪＵ）〕を用いた。
【００３６】
（２）混合物（Ａ）の調製
９６ウェルマイクロプレートのウェル内において、反応液（ｉ）〔０．２５ｍＭニトロテトラゾリウムクロリドブルー、１ｍＭヒポキサチンおよび０．１ｍＭエチレンジアミン四酢酸を含む１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）〕７５μＬと、反応液（ｉｉ）〔２０ユニット／ｍＬ濃度のキサンチンオキシダーゼを含む１ｍｇ／ｍＬウシ血清アルブミン水溶液〕２５μＬと、前記（１）で得られた被験試料７５μＬとを混合し、混合物（Ａ）を得た。
【００３７】
（３）混合物（Ｂ）の調製
９６ウェルマイクロプレートのウェル内において、反応液（ｉ）７５μＬと、反応液（ｉｉ）２５μＬと、１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）７５μＬとを混合し、混合物（Ｂ）を得た。
【００３８】
（４）混合物（Ｃ）の調製
前記（２）において、反応液（ｉｉ）を用いる代わりに、１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）を用いたことを除き、前記（２）と同様の操作を行ない、混合物（Ｃ）を得た。
【００３９】
（５）混合物（Ｄ）の調製
前記（３）において、反応液（ｉｉ）を用いる代わりに、１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）を用いたことを除き、前記（３）と同様の操作を行ない、混合物（Ｄ）を得た。
【００４０】
(６)スーパーオキシドアニオン消去率の算出
前記（２）〜（５）で得られた混合物（Ａ）〜（Ｄ）を３７℃で１０分間インキュベーションし、各反応産物を得た。なお、以下において、混合物（Ａ）から得られた反応産物を「反応産物（Ａ）」、混合物（Ｂ）から得られた反応産物を「反応産物（Ｂ）」、混合物（Ｃ）から得られた反応産物を「反応産物（Ｃ）」、混合物（Ｄ）から得られた反応産物を「反応産物（Ｄ）」という。
【００４１】
インキュベーション終了後、マイクロプレートリーダー〔バイオ−ラッド（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）社製、商品名：ｘＭａｒｋマイクロプレートリーダー〕を用いて、反応産物（Ａ）〜（Ｄ）それぞれの波長５５０ｎｍでの吸光度を測定した。つぎに、反応産物（Ａ）〜（Ｄ）それぞれの波長５５０ｎｍでの吸光度を用い、前記式（Ｉ）にしたがってスーパーオキシドアニオン消去率を算出した。
【００４２】
試験例１において、被験試料の濃度と、スーパーオキシドアニオン消去率との関係を調べた結果を図１に示す。
【００４３】
図１に示された結果から、アスコルビン酸、ピリドキシン環状リン酸および（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウムそれぞれによるスーパーオキシドアニオン消去率は、濃度の増加に伴い増加していることがわかる。なかでも、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウムは、アスコルビン酸またはピリドキシン環状リン酸と比べ、より低い濃度で、より高いスーパーオキシドアニオン消去作用を示すことがわかる。
【００４４】
（実施例１）
被験試料として、アスコルビン酸を、当該アスコルビン酸の濃度が０．０１ｍＭ、０．１ｍＭ、１ｍＭまたは３ｍＭとなるように、皮脂腺細胞分化誘導用培地〔倉敷紡績（株）製、商品名：ＨｕＭｅｄｉａ−ＢＧ培地〕に添加し、被験試料含有培地を得た。
【００４５】
（実施例２）
被験試料として、ピリドキシン環状リン酸であるピリドキシン３，４’−環状リン酸を、当該ピリドキシン環状リン酸の濃度が０．０１ｍＭ、０．１ｍＭ、１ｍＭまたは５ｍＭとなるように、皮脂腺細胞分化誘導用培地〔倉敷紡績（株）製、商品名：ＨｕＭｅｄｉａ−ＢＧ培地〕に添加し、被験試料含有培地を得た。
【００４６】
（実施例３）
被験試料として、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステル塩であるｄｌ−α−トコフェロール  ２−Ｌ−アスコルビン酸リン酸ジエステルカリウム〔千寿製薬（株）製、商品名：ＥＰＣ（ＳＥＮＪＵ）〕を、当該（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウムの濃度が０．００５ｍＭ、０．０１ｍＭ、０．０５ｍＭまたは０．１ｍＭとなるように、皮脂腺細胞分化誘導用培地〔倉敷紡績（株）製、商品名：ＨｕＭｅｄｉａ−ＢＧ培地〕に添加し、被験試料含有培地を得た。
【００４７】
（試験例２）
（１）細胞培養物の調製
正常ハムスター皮脂腺細胞５．０×１０４細胞を、皮脂腺細胞増殖用培地〔倉敷紡績（株）製、商品名：ＨｕＭｅｄｉａ−ＢＧ培地〕０．５ｍＬが入った２４ウェルプレートの各ウェルに播種し、３７℃、ＣＯ2濃度：５体積％で１２０時間（５日間）培養した。
【００４８】
つぎに、各ウェル中の液体成分を実施例１で得られた被験試料含有培地に交換した後、前記正常ハムスター皮脂腺細胞を３７℃、ＣＯ2濃度：５体積％で１０日間培養し、被験細胞の培養物を得た。なお、培養期間中、各ウェル中の液体成分を、２日毎に、実施例１で得られた被験試料含有培地に交換した。
【００４９】
また、前記において、実施例１で得られた被験試料含有培地を用いる代わりに、実施例２で得られた被験試料含有培地または実施例３で得られた被験試料含有培地を用いたことを除き、前記と同様の操作を行ない、被験細胞の培養物を得た。
【００５０】
なお、対照として、前記において、実施例１で得られた被験試料含有培地を用いる代わりに、皮脂腺細胞分化誘導用培地〔倉敷紡績（株）製、商品名：ＨｕＭｅｄｉａ−ＢＧ培地〕を用いたことを除き、前記と同様の操作を行ない、対照細胞の培養物を得た。
【００５１】
（２）脂質産生量の定量
前記（１）で得られた培養物から細胞を回収した後、クロロホルム−メタノール−水混合溶液〔クロロホルム／メタノール／水（体積比）＝１／２／０．８〕に添加し、細胞懸濁液を得た。超音波ホモジナイザー〔ブランソン（ＢＲＡＮＳＯＮ）製、商品名：Ｓｏｎｉｆｉｅｒ  ｍｏｄｅｌ  ２５０Ａ−Ａｄｖａｎｃｅｄ〕を用いて前記細胞懸濁液中の当該細胞を破砕して細胞破砕物を得た。つぎに、前記細胞破砕物にクロロホルム／メタノール／水（体積比）が２／２／１．８となるようにクロロホルム−メタノール混合溶液〔クロロホルム／メタノール（体積比）＝１／１〕を添加し、クロロホルム層を回収した。得られたクロロホルム層を窒素ガスで乾固させることによって脂質を抽出した。
【００５２】
得られた抽出物をクロロホルム−メタノール混合溶液〔クロロホルム／メタノール（体積比）＝２／１〕１００μＬに溶解させ、試料を得た。得られた試料を、高性能薄層クロマトグラフィープレート（以下、「ＨＰＴＬＣプレート」という）に展着させ、展開溶媒〔ヘキサン／エチルエーテル／酢酸（体積比）＝８０／２０／１〕で展開し、トリグリセリド、遊離脂肪酸およびコレステロールを分離した。
【００５３】
その後、１０質量％硫酸銅水溶液をＨＰＴＬＣプレートに均一に噴霧した。つぎに、前記ＨＰＴＬＣプレートを２００℃に加熱することにより、前記ＨＰＴＬＣプレート上の脂質を発色させた。得られたトリグリセリド、遊離脂肪酸およびコレステロールそれぞれに対応するスポットの濃度および面積を化学発光画像解析システム〔富士フィルム（株）製、商品名：ルミノイメージアナライザシステムＬＡＳ−１０００〕で解析した。つぎに、得られた解析結果と、既知量のトリグリセリド、遊離脂肪酸およびコレステロールそれぞれの標準品の混合標準溶液を用いて作成された検量線とに基づき、トリグリセリド、遊離脂肪酸およびコレステロールそれぞれの量（質量）を算出することによって被験細胞の脂質産生量を求めた。
【００５４】
つぎに、対照細胞の脂質産生量を１００としたときの被験試料を接触させた被験細胞の脂質産生量の相対値（対照細胞の脂質産生量に対する被験試料を接触させた被験細胞の脂質産生量の割合）を求めた。
【００５５】
試験例２において、被験試料の濃度と、対照細胞の脂質産生量に対する被験試料を接触させた被験細胞の脂質産生量の割合との関係を調べた結果を図２に示す。
【００５６】
図２に示された結果から、被験試料としてアスコルビン酸（実施例１）、ピリドキシン３，４’−環状リン酸（実施例２）および（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウム（実施例３）を用いた場合、被験試料の濃度の増加に伴い、細胞の脂質産生量が減少する傾向が見られることがわかる。また、アスコルビン酸（実施例１）、ピリドキシン３，４’−環状リン酸（実施例２）および（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウム（実施例３）は、易水溶性であることから、化粧料または皮膚外用剤への配合する際の取り扱い性に優れていると考えられる。なかでも、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウム（実施例３）は、アスコルビン酸（実施例１）またはピリドキシン３，４’−環状リン酸（実施例２）よりも低い濃度で細胞の脂質産生量をより効果的に低減させることができることがわかる。また、これらの結果および前記試験例１で得られた結果から、アスコルビン酸などのアスコルビン酸化合物、ピリドキシン３，４’−環状リン酸などのピリドキシン化合物および（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウムなどの（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物が有するスーパーオキシドアニオン消去作用と未分化の皮脂腺細胞の分化の抑制および皮膚における脂質の分泌の抑制とが関連していることが示唆される。
【００５７】
したがって、これらの結果から、アスコルビン酸などのアスコルビン酸化合物、ピリドキシン３，４’−環状リン酸などのピリドキシン化合物および（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウムなどの（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物、好ましくはアスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物、さらに好ましくはアスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステル塩は、皮脂生成抑制作用を示し、しかも易水溶性であり、取り扱い性に優れることから、種々の製品形態の化粧料および種々の製品形態の皮膚外用剤において、皮膚における皮脂の分泌を抑制する成分として有用であることが示唆される。
【００５８】
（３）皮脂腺細胞の形態の観察
前記（１）で得られた培養物に含まれる皮脂腺細胞の形態を位相差顕微鏡で観察するとともに、分化して脂質を分泌する皮脂腺細胞の数（以下、「分化細胞数」ともいう）を測定した。
【００５９】
試験例２において、被験試料の濃度と、対照の分化細胞数に対する被験試料接触後に生じた分化細胞数の割合との関係を調べた結果を図３に示す。また、試験例２において、アスコルビン酸接触後の皮脂腺細胞の形態を観察した結果を図４（Ａ）、アスコルビン酸を接触させていない皮脂腺細胞の形態を観察した結果を図４（Ｂ）ピリドキシン環状リン酸接触後の皮脂腺細胞の形態を観察した結果を図５（Ａ）、ピリドキシン環状リン酸を接触させていない皮脂腺細胞の形態を観察した結果を図５（Ｂ）、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウム接触後の皮脂腺細胞の形態を観察した結果を図６（Ａ）、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウムを接触させていない皮脂腺細胞の形態を観察した結果を図６（Ｂ）に示す。図４〜６中、矢印は、未分化の皮脂腺細胞が分化して脂質を分泌する皮脂腺細胞（分化細胞）を示す。また、図４〜６中、スケールバーは２００μｍを示す。
【００６０】
図３〜６に示された結果から、被験試料としてアスコルビン酸（実施例１）、ピリドキシン３，４’−環状リン酸（実施例２）および（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウム（実施例３）を用いた場合、被験試料の濃度の増加に伴い、分化細胞数が減少していることがわかる。なかでも、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウム（実施例３）は、アスコルビン酸（実施例１）またはピリドキシン３，４’−環状リン酸（実施例２）よりも低い濃度で未分化の皮脂腺細胞が分化するのをより効果的に抑制することができることがわかる。
【００６１】
したがって、これらの結果から、アスコルビン酸などのアスコルビン酸化合物、ピリドキシン３，４’−環状リン酸などのピリドキシン化合物および（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウムなどの（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物、好ましくはアスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物、さらに好ましくはアスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステル塩は、未分化の皮脂腺細胞が分化するのを抑制することによって脂質の分泌を抑制していることが示唆される。
【００６２】
また、以上の結果から、アスコルビン酸などのアスコルビン酸化合物、ピリドキシン環状リン酸などのピリドキシン化合物および（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウムなどの（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物が有するスーパーオキシドアニオン消去作用と未分化の皮脂腺細胞の分化の抑制および皮膚における脂質の分泌の抑制とが関連していることが示唆される。
【００６３】
以上説明したように、スーパーオキシドアニオン消去作用を有する抗酸化物質、好ましくはアスコルビン酸化合物、ピリドキシン化合物および（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物、より好ましくは（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物、さらに好ましくは（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステル塩は、未分化の皮脂腺細胞の分化を抑制することによって皮膚における脂質の分泌を抑制することができることがわかる。したがって、スーパーオキシドアニオン消去作用を有する抗酸化物質、好ましくはアスコルビン酸化合物、ピリドキシン化合物および（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物、より好ましくは（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物、さらに好ましくは（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステル塩は、皮膚における脂質の分泌を抑制する化粧料および皮膚外用剤の有効成分として有用であることがわかる。
【００６４】
（処方例）
以下、本発明に係る化粧料および皮膚外用剤の処方例を示す。なお、原料名中のカッコ内の「Ｅ．Ｏ．」はオキシエチレン基、「Ｐ．Ｏ．」はオキシプロピレン基を示す。また、「Ｅ．Ｏ．」の前に記載されている数字はオキシエチレン基の付加モル数、「Ｐ．Ｏ．」の前に記載されている数字はオキシプロピレン基の付加モル数を示す。
【００６５】
（処方例１：スキンケア化粧料（化粧水））
下記原料を下記組成となるように混合し、スキンケア化粧料として用いられる化粧水とした。
（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウム
０．２質量％
グリセリン                                            ３．０質量％
１，３−ブチレングリコール                            ５．０質量％
エタノール                                            ７．０質量％
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（５０Ｅ．Ｏ．）        ０．３質量％
ヒアルロン酸ナトリウム                                ０．１質量％
クエン酸                                              ０．０１質量％
クエン酸ナトリウム                                    ０．０３質量％
グリセリンモノ２−エチルヘキシルエーテル              ０．２０質量％
香料                                                  ０．０２質量％
精製水                                                        残部
合計                                              １００．０質量％
【００６６】
（処方例２：スキンケア化粧料（乳液））
下記原料を下記組成となるように混合し、スキンケア化粧料として用いられる乳液とした。
（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウム
０．５質量％
デカメチルシクロペンタシロキサン                      ３．０質量％
イソノナン酸イソトリデシル                            ３．０質量％
ミネラルオイル                                        ２．５質量％
ホホバ油                                              １．０質量％
１，３−ブチレングリコール                            ７．５質量％
グリセリン                                            ２．５質量％
ポリエチレングリコール４０００                        １．０質量％
エタノール                                            ５．０質量％
ポリオキシエチレンモノステアリン酸ソルビタン（２０Ｅ．Ｏ．）
１．５質量％
親油型モノステアリン酸グリセリル                      ０．５質量％
ステアリン酸                                          １．０質量％
キサンタンガム                                        ０．０２質量％
カルボキシルビニルポリマー                            ０．３質量％
水酸化カリウム                                        ０．１２質量％
エデト酸二ナトリウム                                  ０．１質量％
フェノキシエタノール                                  ０．３質量％
１，２−オクタンジオール                              ０．１質量％
精製水                                                        残部
合計                                              １００．０質量％
【００６７】
（処方例３：スキンケア剤（薬用モイスチャークリーム））
下記原料を下記組成となるように混合し、医薬部外品のスキンケア剤として用いられる薬用モイスチャークリームとした。
（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウム
１．０質量％
サリチル酸                                            ０．１質量％
グリチルリチン酸ジカリウム                            ０．０５質量％
ワセリン                                              ７．５質量％
スクラワン                                            １．５質量％
マイクロクリスタリンワックス                          ０．５質量％
ベヘニルアルコール                                    １．０質量％
ステアリルアルコール                                  ２．５質量％
ジメチコン                                            ２．０質量％
ステアリン酸                                          ０．５質量％
酢酸トコフェロール                                    ０．１質量％
グリセリン                                            ８．０質量％
マルチトール                                          ４．０質量％
ポリオキシエチレンモノステアリン酸ソルビタン（２０Ｅ．Ｏ．）
２．０質量％
親油型モノステアリン酸グリセリル                      ３．０質量％
パラオキシ安息香酸エステル                            ０．２質量％
エデト酸二ナトリウム                                  ０．１質量％
カルボキシルビニルポリマー                            ０．２質量％
水酸化カリウム                                        ０．０４質量％
香料                                                          適量
精製水                                                        残部
合計                                              １００．０質量％
【００６８】
（処方例４：スカルプ化粧料（頭皮用エモリエントローション））
下記原料を下記組成となるように混合し、スカルプ化粧料として用いられる頭皮用エモリエントローションとした。
（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウム
０．０５質量％
グリセリン                                            ５．０質量％
ジプロピレングリコール                              １０．０質量％
ヒドロキシプロピルメチルセルロース                    ０．７５質量％
ヒアルロン酸                                          ０．１質量％
ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンデシルテトラデシルエーテル
（３０Ｅ．Ｏ．、６Ｐ．Ｏ．）                          ０．３質量％
オリーブ油                                            ０．１質量％
エタノール                                          ３０．０質量％
ヒドロキシエタンジホスホン酸液                        ０．１質量％
精製水                                                        残部
合計                                              １００．０質量％
【００６９】
（処方例５：スカルプケア剤（育毛トニック））
下記組成からなる原液と、下記組成からなる噴射剤とを質量比（原液／噴射剤）が８５／１５となるように容器に充填し、医薬部外品のスカルプケア剤として用いられる育毛トニックとした。
〔原液〕
（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウム
０．１質量％
イソプロピルメチルフェノール                          ０．１質量％
ニコチン酸アミド                                      ０．１質量％
Ｄ−パンテノール                                      ０．２質量％
メントール                                            ０．５質量％
エタノール                                          ６０．０質量％
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（５０Ｅ．Ｏ．）        ０．４質量％
酢酸トコフェロール                                    ０．１質量％
精製水                                                        残部
合計                                              １００．０質量％
〔噴射剤〕
ＤＭＥ／ＬＰＧ（８０／２０）                      １００．０質量％
【００７０】
（処方例６：スカルプケア剤（薬用シャンプー））
下記原料を下記組成となるように混合し、医薬部外品のスカルプケア剤として用いられる薬用シャンプーとした。
（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウム
０．０５質量％
グリチルリチン酸ジカリウム                            ０．１質量％
ラウリン酸アミドプロピルベタイン液（３０質量％）    １０．０質量％
ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸ナトリウム（２Ｅ．Ｏ）
１０．０質量％
ヤシ油脂肪酸Ｎ−メチルエタノールアミド                ３．０質量％
塩化Ｏ−〔２−ヒドロキシ−３−（トリメチルアンモニオ）プロピル〕
ヒドロキシエチルセルロース                          ０．５質量％
塩化ナトリウム                                        ０．０３質量％
安息香酸ナトリウム                                    ０．３質量％
フェノキシエタノール                                  ０．３質量％
エタノール                                            ５．０質量％
精製水                                                        残部
合計                                              １００．０質量％
【００７１】
また、処方例１〜処方例６において、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウムを用いる代わりに、（アスコルビル／トコフェリル）リン酸ジエステルカリウム以外の（アスコルビル／トコフェリル）リン酸化合物、アスコルビン酸化合物またはピリドキシン化合物を用いることを除き、処方例１〜処方例６に示された組成と同様の組成となるように各原料を混合することにより、化粧水、乳液、薬用エモリエントクリーム、頭皮エモリエントローション、育毛トニックおよび、薬用シャンプーを得ることができる。
【００７２】
これらの化粧料および皮膚外用剤について、使用時および未使用時それぞれの皮脂の量を測定することにより、化粧料および皮膚外用剤を用いることによって皮膚における皮脂の分泌が抑制されていることが確認される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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