(57)【要約】【課題】生体内の低酸素領域を可視化できる放射性テクネチウム錯体を提供する。【解決手段】所定の構造式で表され、放射性テクネチウムとの結合部位を有する化合物又はその塩、その放射性テクネチウム錯体、これを含む放射性医薬組成物、これを調製するために用いられるキットである。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）で表され、放射性テクネチウムとの結合部位を有する化合物又はその塩。
【化１】
2015063503.tif 000030
〔式中、Ｘはアミノ基（ＮＨ）又は硫黄原子（Ｓ）であり、Ａ１及びＡ２は、一方が一般式（２）で表される置換基、他方が水素原子（Ｈ）であり、
【化２】
2015063503.tif 000031
（式中、ｍは１以上１０以下の整数であり、ｎは０又は１の整数である。）、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、メチレン基（ＣＨ２）、又は、カルボニル基（ＣＯ）であり、Ｒ６は水素原子（Ｈ）、又は、炭素数１〜４のアルキル基である。ただし、Ｒ２及びＲ３は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ４及びＲ５は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ２又はＲ３がカルボニル基（ＣＯ）であり、かつ、Ｒ４又はＲ５がカルボニル基（ＣＯ）のとき、Ｒ１はメチレン基（ＣＨ２）である。〕
【請求項２】
一般式（１）中、Ａ１が一般式（２）で表される置換基の場合において、Ｘがアミノ基（ＮＨ）であり、一般式（２）中、ｎは１である、請求項１記載の化合物又はその塩。
【請求項３】
一般式（１）中、Ａ１が一般式（２）で表される置換基の場合において、Ｘが硫黄原子（Ｓ）であり、一般式（２）中、ｎは０である、請求項１記載の化合物又はその塩。
【請求項４】
一般式（１）中、Ａ２が一般式（２）で表される置換基のとき、一般式（２）中、ｍは１であり、ｎは１である、請求項１記載の化合物又はその塩。
【請求項５】
請求項１乃至４いずれか一項に記載の化合物と、放射性テクネチウムとの錯体。
【請求項６】
請求項５記載の錯体を含む放射性医薬組成物。
【請求項７】
請求項１乃至４いずれか一項に記載の化合物又はその塩を含み、請求項６記載の放射性医薬組成物を調製するために用いられる、キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、放射性テクネチウムの結合部位を有する化合物、その放射性テクネチウム錯体、これを含む放射性医薬組成物、これを調製するためのキットに関する。
【背景技術】
【０００２】
腫瘍内低酸素領域は、放射線治療や化学療法に対して抵抗性を示す原因となるため、その可視化はがん治療の最適化に有用と考えられている。
【０００３】
低酸素領域を画像化するためのＰＥＴ（Ｐｏｓｉｔｒｏｎ  Ｅｍｉｓｓｉｏｎ  Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ）トレーサーとして、例えば、［１８Ｆ］フルオロミソニダゾル（［１８Ｆ］ＦＭＩＳＯ）（非特許文献１）、［１８Ｆ］フルオロアゾマイシンアラビノシド（［１８Ｆ］ＦＡＺＡ）（非特許文献２）、［６２／６４Ｃｕ］Ｃｕ‐ＡＴＳＭ（Ｃｕ‐ジアセチル‐ｂｉｓ（Ｎ４‐メチルチオセミカルバゾン）（非特許文献３）が知られている。
【０００４】
また、腫瘍の低酸素領域を画像化するためのＳＰＥＣＴ（Ｓｉｎｇｌｅ  Ｐｈｏｔｏｎ  Ｅｍｉｓｓｉｏｎ  Ｃｏｍｐｕｔｅｄ  Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ）トレーサーとしては、テクネチウム‐９９ｍで標識した２‐ニトロイミダゾールが知られている（非特許文献４、５）。
【０００５】
非特許文献６には、ニトロベンジル部位と、キレート部位としてメルカプトアセチルグリシンを有する９９ｍＴｃ標識錯体が記載されている。この９９ｍＴｃ標識錯体は、低酸素領域のプローブとしてドラッグデザインされたものであり、そのドラッグデザインによれば、低酸素部位においてニトロベンジルが還元され、脱ベンジル化し、これにより、水溶性となった９９ｍＴｃキレート部位を低酸素細胞内に停滞させようというものである。そして、非特許文献６には、かかる９９ｍＴｃ標識錯体が、通常細胞に比較して低酸素細胞に集積したことを示すインビトロにおける実験結果が開示されている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｇｒａｈａｍ，Ｍ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，１９９７，３８，１６３１‐１６３６
【非特許文献２】Ｐｉｅｒｔ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，２００５，４６，１０６‐１１３
【非特許文献３】Ｆｕｊｉｂａｙａｓｈｉ，Ｙ．ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，１９９７，３８，１１５５‐１１６０
【非特許文献４】Ｂａｌｌｉｎｇｅｒ，Ｊ．Ｒ．ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，１９９６，３７，１０２３‐１０３１
【非特許文献５】Ｔｒｉｃｉａ  Ｍｅｌｏ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，２０００，４１，１６９‐１７６
【非特許文献６】Ｓａｄａａｋｉ  Ｋｉｍｕｒａ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，２０１１，２１，７３５９−７３６２
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、本発明者らの知見によれば、上記非特許文献６記載の９９ｍＴｃ標識錯体は、生体内では、腫瘍内に到達する前に、体内から排泄されてしまうことが明らかとなった。
【０００８】
本発明は、上記事情に鑑みてなされたものであり、生体内の低酸素領域、特に腫瘍を可視化できる放射性テクネチウム錯体を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の一側面によれば、一般式（１）で表され、放射性テクネチウムとの結合部位を有する化合物又はその塩が提供される。
【００１０】
【化１】
2015063503.tif 000002
【００１１】
一般式（１）中、Ｘはアミノ基（ＮＨ）又は硫黄原子（Ｓ）であり、Ａ１及びＡ２は、一方が一般式（２）で表される置換基、他方が水素原子（Ｈ）である。
【００１２】
【化２】
2015063503.tif 000003
【００１３】
一般式（２）中、ｍは１以上１０以下の整数であり、ｎは０又は１の整数である。また、上記一般式（１）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、メチレン基（ＣＨ２）、又は、カルボニル基（ＣＯ）であり、Ｒ６は水素原子（Ｈ）、又は、炭素数１〜４のアルキル基である。ただし、Ｒ２及びＲ３は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ４及びＲ５は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ２又はＲ３がカルボニル基（ＣＯ）であり、かつ、Ｒ４又はＲ５がカルボニル基（ＣＯ）のとき、Ｒ１はメチレン基（ＣＨ２）である。
【００１４】
また、本発明の他の側面によれば、上記の化合物と、放射性テクネチウムとの錯体が提供される。
【００１５】
また、本発明の他の側面によれば、上記の錯体を含む放射性医薬組成物が提供される。
【００１６】
さらに、本発明の他の側面によれば、上記の化合物又はその塩を含み、上記の放射性医薬組成物を調製するために用いられる、キットが提供される。
【発明の効果】
【００１７】
本発明によれば、生体内の低酸素領域を可視化できる放射性テクネチウム錯体が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】４‐ニトロベンジル  Ｎ‐（２‐スルファニルエチル）グリシルグリシルグリシナート（ＳＤ５９）、及び、４‐ニトロベンジル  Ｎ‐メチル‐Ｎ‐（２‐スルファニルエチル）グリシルグリシルグリシナート（ＳＤ６０）の合成スキームを示す図である。
【図２】４‐ニトロベンジル  Ｎ‐（２‐スルファニルエチル）‐Ｎ‐（２‐スルファニルエチル）カルバモイルメチル‐２‐アミノアセテート（ＳＤ６１）の合成スキームを示す図である。
【図３】４‐ニトロベンジル  Ｎ‐［２‐（２‐スルファニルアセチルアミノ）エチル］グリシルグリシナート（ＳＤ７０）の合成スキームを示す図である。
【図４】４‐ニトロベンジル  ２‐［Ｎ‐（２‐｛２‐［Ｎ’’‐（２‐スルファニルエチル）アミノ］アセチルアミノ｝エチル］アミノ］アセテート（ＳＤ７８）の合成スキームを示す図である。
【図５】Ｎ‐［２‐（４‐ニトロベンジル）スルファニルアセチル］‐Ｎ’‐（２‐スルファニルアセチル）エチレンジアミン（ＳＤ８２）の合成スキームを示す図である。
【図６】Ｎ‐｛２‐（４‐ニトロベンジル）スルファニルエチル｝‐２‐（２‐スルファニルアセチルアミノ）アセタミド（ＳＤ８６）の合成スキームを示す図である。
【図７】Ｎ‐［２‐（４‐ニトロベンジル）スルファニルエチル］‐２‐［Ｎ’‐（２‐スルファニルエチル）アミノ］アセタミド（ＳＤ９０）の合成スキームを示す図である。
【図８】９９ｍＴｃ錯体の脂溶性の評価を示す図である。
【図９】９９ｍＴｃ錯体の腫瘍集積性の評価を示す図である。
【図１０】９９ｍＴｃ錯体の腫瘍集積性と腫瘍の大きさとの関係を示す図である。（ａ）が投与１５分後の腫瘍集積を示し、（ｂ）が投与１時間後の腫瘍集積を示す。
【図１１】９９ｍＴｃ錯体の腫瘍集積性と腫瘍の大きさとの関係を示す図である。（ａ）が投与３時間後の腫瘍集積を示し、（ｂ）が投与６時間後の腫瘍集積を示す。
【図１２】９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０のＳＰＥＣＴ像とＣＴ像との重ね合わせ画像を示す。（ａ）がＭＩＰ（最大値投影法）画像であり、（ｂ）が冠状面像である。
【図１３】９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０のＳＰＥＣＴ像とＣＴ像との重ね合わせ画像を示す。（ａ）が矢状面画像であり、（ｂ）が長軸断面像である。
【図１４】９９ｍＴｃ‐ＳＤ８６のＳＰＥＣＴ像とＣＴ像との重ね合わせ画像を示す。
【図１５】９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０の低酸素領域への集積評価を示す図である。（ａ）が腫瘍スライスの外観を示す図であり、（ｂ）がＨＥ染色を示す図であり、（ｃ）がオートラジオグラムを示す図であり、（ｄ）がネガティブコントロールの染色を示す図であり、（ｅ）がピモニダゾールの免疫染色を示す図であり、（ｆ）が（ｃ）と（ｅ）との重ね合わせを示す図である。
【図１６】９９ｍＴｃ‐ＳＤ８６の低酸素領域への集積評価を示す図である。（ａ）がＨＥ染色を示す図であり、（ｂ）がピモニダゾールの免疫染色を示す図であり、（ｃ）がオートラジオグラムを示す図であり、（ｄ）が（ｂ）と（ｃ）との重ね合わせを示す図である。
【図１７】４−ニトロベンジル  ３−｛Ｎ−［２−（２−スルファニルアセタミド）エチル］グリシルアミノ｝プロパノエート（ＳＤ１２８）、４−ニトロベンジル  ３−｛Ｎ−［２−（２−スルファニルアセタミド）エチル］グリシルアミノ｝ブタノエート（ＳＤ１２９）及び４−ニトロベンジル  ３−｛Ｎ−［２−（２−スルファニルアセタミド）エチル］グリシルアミノ｝ヘキサノエート（ＳＤ１３０）の合成スキームを示す図である。
【図１８】９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２８のＳＰＥＣＴ像とＣＴ像との重ね合わせ画像を示す。（ａ）がＭＩＰ（最大値投影法）画像であり、（ｂ）が冠状面像であり、（ｃ）が矢状面画像であり、（ｄ）が長軸断面像である。
【図１９】９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２８の低酸素領域への集積評価を示す図である。（ａ）が腫瘍スライスの外観を示す図であり、（ｂ）がＨＥ染色を示す図であり、（ｃ）がオートラジオグラムを示す図であり、（ｄ）がネガティブコントロールの染色を示す図であり、（ｅ）がピモニダゾールの免疫染色を示す図であり、（ｆ）が（ｃ）と（ｅ）との重ね合わせを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
［リガンド］
本発明において、「放射性テクネチウムとの結合部位」とは、放射性テクネチウムと配位結合をする部位をいい、上記一般式（１）で表される化合物は、配位子として、放射性テクネチウムと錯体を形成する。放射性テクネチウムは、好ましくは、テクネチウム‐９９ｍである。また、放射性テクネチウムとしては、５価のテクネチウムが好ましい。より好ましい態様において、上記一般式（１）で表される化合物は、［Ｔｃ＝Ｏ］３＋に配位し、これを中心とするオキソコア錯体を形成する。
【００２０】
また、本発明において、「炭素数１〜４のアルキル基」には、メチル基、エチル基、ｎ‐プロピル基、イソプロピル基、ｎ‐ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ‐ブチル基が含まれる。好ましくは、メチル基又はエチル基であり、メチル基がより好ましい。
【００２１】
上記一般式（２）の中のアスタリスク（＊）は、分子の残部との結合点を示すものである。
【００２２】
上記一般式（１）で表される化合物は、塩を形成していてもよく、かかる塩が製薬学的に許容される塩において本発明に包含される。
【００２３】
本発明において「塩」には、無機若しくは有機の酸、又は、無機若しくは有機の塩基から誘導されるものが挙げられる。具体的には、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸、硫酸塩、硝酸塩、過塩素酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、リン酸塩、グリコール酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ｐ‐トルエンスルホン酸塩、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、マロン酸塩、ナフタレン‐２‐スルホン酸塩、トリフルオロ酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、アミン塩及びアンモニウム塩等が挙げられるが、これらに限定はされない。
【００２４】
一般式（１）中、Ａ１が一般式（２）で表される置換基の場合において、Ｘがアミノ基（ＮＨ）のとき、一般式（２）中、ｎは１であることが好ましい。また、一般式（１）中、Ａ１が一般式（２）で表される置換基の場合において、Ｘが硫黄原子（Ｓ）のとき、一般式（２）中、ｎは０であることが好ましい。また、一般式（１）中、Ａ２が一般式（２）で表される置換基のとき、一般式（２）中、ｍは１であり、ｎは１であることが好ましい。これにより、低酸素領域において、ニトロベンジル基が還元・脱離されやすくなる。ニトロベンジル基の脱離により、脂溶性が低下するため、細胞内に錯体が留まることができる。
【００２５】
上記一般式（１）で表される化合物又はその塩は、生体内における腫瘍集積性の観点からは、一般式（１）中、Ａ１が一般式（２）で表される置換基であり、Ａ２が水素原子（Ｈ）であることが好ましい。すなわち、下記一般式（３）で表される化合物又はその塩が好ましい。
【００２６】
【化３】
2015063503.tif 000004
【００２７】
上記一般式（３）中、Ｘはアミノ基（ＮＨ）又は硫黄原子（Ｓ）であり、ｍは１以上１０以下の整数であり、好ましくは１以上５以下の整数であり、より好ましくは１以上４以下の整数であり、更に好ましくは１以上３以下の整数であり、１又は２の整数がより更に好ましい。ｎは０又は１の整数であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、メチレン基（ＣＨ２）、又は、カルボニル基（ＣＯ）であり、Ｒ６は水素原子（Ｈ）、又は、炭素数１〜４のアルキル基である。ただし、Ｒ２及びＲ３は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ４及びＲ５は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ２又はＲ３がカルボニル基（ＣＯ）であり、かつ、Ｒ４又はＲ５がカルボニル基（ＣＯ）のとき、Ｒ１はメチレン基（ＣＨ２）である。
【００２８】
上記一般式（１）で表される化合物は、放射性テクネチウムとＮ２Ｓ２キレートを形成するＮ２Ｓ２キレート配位子と、放射性テクネチウムとＮ３Ｓ１キレートを形成するＮ３Ｓ１キレート配位子とに分類される。Ｎ２Ｓ２キレート配位子としては、生体内における腫瘍集積性の観点から、上記一般式（１）中、Ｘが硫黄原子（Ｓ）であり、Ｒ６が水素原子（Ｈ）である化合物が好ましい。すなわち、下記一般式（４）で表される化合物が好ましい。
【００２９】
【化４】
2015063503.tif 000005
【００３０】
上記一般式（４）中、Ａ１及びＡ２は、一方が上記一般式（２）で表される置換基、他方が水素原子（Ｈ）であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、メチレン基（ＣＨ２）、又は、カルボニル基（ＣＯ）である。ただし、Ｒ２及びＲ３は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ４及びＲ５は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ２又はＲ３がカルボニル基（ＣＯ）であり、かつ、Ｒ４又はＲ５がカルボニル基（ＣＯ）のとき、Ｒ１はメチレン基（ＣＨ２）である。
【００３１】
上記一般式（４）で表されるＮ２Ｓ２キレート配位子のうち、生体内における腫瘍集積性の観点からは、Ａ１が上記一般式（２）で表される置換基であり、Ａ２が水素原子（Ｈ）であり、上記一般式（２）中、ｎが０である化合物が好ましい。すなわち、下記一般式（５）で表される化合物が好ましい。
【００３２】
【化５】
2015063503.tif 000006
【００３３】
上記一般式（５）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、メチレン基（ＣＨ２）、又は、カルボニル基（ＣＯ）である。ただし、Ｒ２及びＲ３は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ４及びＲ５は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ２又はＲ３がカルボニル基（ＣＯ）であり、かつ、Ｒ４又はＲ５がカルボニル基（ＣＯ）のとき、Ｒ１はメチレン基（ＣＨ２）である。
【００３４】
上記一般式（１）で表される化合物において、生体内における腫瘍集積性の観点から、Ｎ３Ｓ１キレート配位子としては、Ｘがアミノ基（ＮＨ）であり、Ａ１が一般式（２）で表される置換基であり、Ａ２が水素原子（Ｈ）であり、一般式（２）中、ｎは１の整数である化合物が好ましい。すなわち、下記一般式（６）で表される化合物が好ましい。
【００３５】
【化６】
2015063503.tif 000007
【００３６】
上記一般式（６）中、ｍは１以上１０以下の整数であり、好ましくは１以上５以下の整数であり、より好ましくは１以上４以下の整数であり、更に好ましくは１以上３以下の整数であり、１又は２の整数がより更に好ましい。Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、メチレン基（ＣＨ２）、又は、カルボニル基（ＣＯ）であり、Ｒ６は水素原子（Ｈ）、又は、炭素数１〜４のアルキル基である。ただし、Ｒ２及びＲ３は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ４及びＲ５は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ２又はＲ３がカルボニル基（ＣＯ）であり、かつ、Ｒ４又はＲ５がカルボニル基（ＣＯ）のとき、Ｒ１はメチレン基（ＣＨ２）である。
【００３７】
上記一般式（１）で表される化合物として、より具体的には、以下に示す化合物が挙げられる。
・４‐ニトロベンジル  Ｎ‐（２‐スルファニルエチル）グリシルグリシルグリシナート（ＳＤ５９）
・４‐ニトロベンジル  Ｎ‐メチル‐Ｎ‐（２‐スルファニルエチル）グリシルグリシルグリシナート（ＳＤ６０）
・４‐ニトロベンジル  Ｎ‐（２‐スルファニルエチル）‐Ｎ‐（２‐スルファニルエチル）カルバモイルメチル‐２‐アミノアセテート（ＳＤ６１）
・４‐ニトロベンジル  Ｎ‐［２‐（２‐スルファニルアセチルアミノ）エチル］グリシルグリシナート（ＳＤ７０）
・４‐ニトロベンジル  ２‐［Ｎ‐（２‐｛２‐［Ｎ’’‐（２‐スルファニルエチル）アミノ］アセチルアミノ｝エチル］アミノ］アセテート（ＳＤ７８）
・Ｎ‐［２‐（４‐ニトロベンジル）スルファニルアセチル］‐Ｎ’‐（２‐スルファニルアセチル）エチレンジアミン（ＳＤ８２）
・Ｎ‐｛２‐（４‐ニトロベンジル）スルファニルエチル｝‐２‐（２‐スルファニルアセチルアミノ）アセタミド（ＳＤ８６）
・Ｎ‐［２‐（４‐ニトロベンジル）スルファニルエチル］‐２‐［Ｎ’‐（２‐スルファニルエチル）アミノ］アセタミド（ＳＤ９０）
・４−ニトロベンジル  ３−｛Ｎ−［２−（２−スルファニルアセタミド）エチル］グリシルアミノ｝プロパノエート（ＳＤ１２８）
・４−ニトロベンジル  ３−｛Ｎ−［２−（２−スルファニルアセタミド）エチル］グリシルアミノ｝ブタノエート（ＳＤ１２９）
・４−ニトロベンジル  ３−｛Ｎ−［２−（２−スルファニルアセタミド）エチル］グリシルアミノ｝ヘキサノエート（ＳＤ１３０）
【００３８】
ＳＤ５９、６０、７０、７８、１２８〜１３０は、上記一般式（６）で表されるＮ３Ｓ１キレート配位子である。
ＳＤ５９は、上記一般式（６）中、ｍが１であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４がメチレン基（ＣＨ２）、Ｒ３、Ｒ５がカルボニル基（ＣＯ）、Ｒ６が水素原子（Ｈ）の化合物である。
ＳＤ６０は、上記一般式（６）中、ｍが１であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４がメチレン基（ＣＨ２）、Ｒ３、Ｒ５がカルボニル基（ＣＯ）、Ｒ６がメチル基（ＣＨ３）の化合物である。
ＳＤ７０は、上記一般式（６）中、ｍが１であり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４がメチレン基（ＣＨ２）、Ｒ１、Ｒ５がカルボニル基（ＣＯ）、Ｒ６が水素原子（Ｈ）の化合物である。
ＳＤ７８は、上記一般式（６）中、ｍが１であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５がメチレン基（ＣＨ２）、Ｒ３がカルボニル基（ＣＯ）、Ｒ６が水素原子（Ｈ）の化合物である。
ＳＤ１２８は、上記一般式（６）中、ｍが２であり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４がメチレン基（ＣＨ２）、Ｒ１、Ｒ５がカルボニル基（ＣＯ）、Ｒ６が水素原子（Ｈ）の化合物である。
ＳＤ１２９は、上記一般式（６）中、ｍが３であり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４がメチレン基（ＣＨ２）、Ｒ１、Ｒ５がカルボニル基（ＣＯ）、Ｒ６が水素原子（Ｈ）の化合物である。
ＳＤ１３０は、上記一般式（６）中、ｍが５であり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４がメチレン基（ＣＨ２）、Ｒ１、Ｒ５がカルボニル基（ＣＯ）、Ｒ６が水素原子（Ｈ）の化合物である。
【００３９】
ＳＤ８２、８６、９０は、上記一般式（５）で表されるＮ２Ｓ２キレート配位子である。
ＳＤ８２は、上記一般式（５）中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５がメチレン基（ＣＨ２）、Ｒ１、Ｒ４がカルボニル基（ＣＯ）の化合物である。
ＳＤ８６は、上記一般式（５）中、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５がメチレン基（ＣＨ２）、Ｒ１、Ｒ３がカルボニル基（ＣＯ）の化合物である。
ＳＤ９０は、上記一般式（５）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５がメチレン基（ＣＨ２）、Ｒ３がカルボニル基（ＣＯ）の化合物である。
【００４０】
ＳＤ６１は、上記一般式（４）で表されるＮ２Ｓ２キレート配位子である。上記一般式（４）中、Ａ１が水素原子（Ｈ）、Ａ２が上記一般式（２）で表される置換基、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５がメチレン基（ＣＨ２）、Ｒ２がカルボニル基（ＣＯ）、Ｒ６は水素原子（Ｈ）であり、上記一般式（２）中、ｎが１の化合物である。
【００４１】
以下、ＳＤ５９、６０の合成法の一例について、図１を用いつつ説明する。
まず、グリシンと、４‐ニトロベンジルアルコールとをエステル縮合する（ステップａ）。次いで、得られたグリシンの４‐ニトロベンジルエステルと、グリシンとをアミド結合し（ステップｂ）、さらに、ブロモ酢酸とアミド結合を形成する（ステップｃ）。その後、２‐アミノエタンチオールのアミノ基を求核剤、ブロモ基を脱離基とした求核置換反応により、２‐アミノエタンチオールを導入し（ステップｅ）、ＳＤ５９を得る。ＳＤ６０は、ＳＤ５９のＮ‐メチル化反応（ステップｇ）により得ることができる。
【００４２】
続いて、ＳＤ６１の合成法の一例について、図２を用いつつ説明する。
２‐アミノエタンチオールのアミノ基に、２等量のブロモ酢酸エチルを作用させ、三級アミンを形成する（ステップｂ）。その後、カルボキシル基の脱保護により、ジカルボン酸を形成した（ステップｃ）後、２‐アミノエタンチールとアミド結合を形成し、モノカルボン酸を得る（ステップｄ）。得られたモノカルボン酸とニトロベンジルアルコールとをエステル縮合して（ステップｅ）、ＳＤ６１を得る。
【００４３】
続いて、ＳＤ７０の合成法の一例について、図３を用いつつ説明する。
グリシンと、４‐ニトロベンジルアルコールとをエステル縮合し、得られたグリシンの４‐ニトロベンジルエステルと、ブロモ酢酸との間にアミド結合を形成する（ステップａ）。一方、２‐メルカプト酢酸と、エチレンジアミンとの間にアミド結合を形成し（ステップｃ）、得られた一級アミン（１８）を求核剤、ブロモ基を脱離基とした求核置換反応によりカップリングを行い（ステップｄ）、ＳＤ７０を得る。
【００４４】
続いて、ＳＤ７８の合成法の一例について、図４を用いつつ説明する。
２‐メルカプトエチルアミンのアミノ基を求核剤、ブロモ酢酸エチルのブロモ基を脱離基として求核置換反応を行い（ステップｂ）、カルボキシル基を脱保護した後、ジエチルアミンの一方のアミノ基とアミド結合を形成する（ステップｅ）。その後、ジエチルアミンの他方のアミノ基を求核剤とし、２‐ブロモ酢酸ニトロベンジルエステルのブロモ基を脱離基として求核置換反応を行い（ステップｈ）、ＳＤ７８を得る。
【００４５】
続いて、ＳＤ８２の合成法の一例について、図５を用いつつ説明する。
２‐メルカプト酢酸とジエチルアミンの一方のアミノ基との間にアミド結合を形成し（ステップａ）、ジエチルアミンの他方のアミノ基と２‐（４‐ニトロベンジル）スルファニル酢酸との間にアミド結合を形成して(ステップｄ)、ＳＤ８２を得る。
【００４６】
続いて、ＳＤ８６の合成法の一例について、図６を用いつつ説明する。
２‐アミノエタンチオールと、４‐ニトロベンジルブロマイドとを反応させて、チオエーテル結合を形成した（ステップａ）後、グリシンを作用させてアミド結合を形成する（ステップｂ）。その後、２‐メルカプト酢酸を作用させアミド結合を形成し（ステップｄ）、ＳＤ８６を得る。
【００４７】
続いて、ＳＤ９０の合成法の一例について、図７を用いつつ説明する。
２‐アミノエタンチオールと、４‐ニトロベンジルブロマイドとを反応させて、チオエーテル結合を形成した後、２‐ブロモ酢酸を作用させアミド結合を形成する（ステップａ）。その後、２‐アミノエタンチオールのアミノ基を求核剤とし、ブロモ基を脱離基として求核置換反応を行い（ステップｂ）、ＳＤ９０を得る。
【００４８】
以下、ＳＤ１２８、１２９、１３０の合成法の一例について、図１７を用いつつ説明する。
エチレンジアミンを出発物質とし、ブロモ酢酸エチルのブロモ基を脱離基とした求核置換反応によりＮ−モノアルキル化して、エステル体を得る（ステップｂ）。得られたエステル体とチオグリコール酸とをアミド結合させ（ステップｃ）、エステル部位の加水分解によりカルボン酸とする（ステップｄ）。一方で、各種のメチレン鎖の長さが異なるＮ−保護アミノ酸と、４‐ニトロベンジルアルコールとをエステル縮合することでニトロベンジルエステル体を得た後（ステップｅ）、Ｎ−アミノ基を脱保護し、ステップｄで得られたカルボン酸と縮合することでアミド結合を形成して（ステップｆ）、ＳＤ１２８、ＳＤ１２９、ＳＤ１３０を得る。
【００４９】
なお、上記一連の化合物の合成においては、収率を向上させるため、各ステップで反応に寄与しないアミノ基、カルボキシル基、及び、チオール基は、それぞれ保護基で保護することにより、活性を低下させることができる。保護基の選択、及び、脱保護の方法は、図１〜７、１７に示すもののほか、Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｗｉｌｅｙ‐Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ；４版）記載のものを種々選択することができる。
【００５０】
また、上記一連の化合物の合成中、求核置換反応の脱離基にはブロモ基を例に挙げて説明した。しかしながら、ブロモ基に代えて、クロロ基、又は、ヨード基などのハロゲン基、メタンスルホン酸エステル基、トリフルオロメタンスルホン酸基、ｐ‐トルエンスルホン酸エステル基などのスルホン酸エステル基等の種々の脱離基を用いることも可能である。
【００５１】
［放射性テクネチウム錯体］
本発明に係る放射性テクネチウム錯体は、上記一般式（１）で表される化合物を配位子とした、放射性テクネチウム錯体であれば限定されないが、上記一般式（１）で表される化合物を配位子と、５価の放射性テクネチウムとの錯体が好ましく、上記一般式（１）で表される化合物が［Ｔｃ＝Ｏ］３＋に配位し、これを中心としたオキソコア錯体がより好ましい。中でも、放射性テクネチウムとしてＴｃ‐９９ｍを用いた下記一般式（１１）で表される、９９ｍＴｃ（Ｖ）‐オキソコア錯体が好ましい。
【００５２】
【化７】
2015063503.tif 000008
【００５３】
上記一般式（１１）中、Ｘ１は窒素原子（Ｎ）又は硫黄原子（Ｓ）であり、Ａ１及びＡ２は、一方が上記一般式（２）で表される置換基、他方が水素原子（Ｈ）であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、メチレン基（ＣＨ２）、又は、カルボニル基（ＣＯ）であり、Ｒ６は水素原子（Ｈ）、又は、炭素数１〜４のアルキル基である。ただし、Ｒ２及びＲ３は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ４及びＲ５は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ２又はＲ３がカルボニル基（ＣＯ）であり、かつ、Ｒ４又はＲ５がカルボニル基（ＣＯ）のとき、Ｒ１はメチレン基（ＣＨ２）である。
【００５４】
生体内における腫瘍集積性の観点からは、上記一般式（３）で表される化合物を配位子とした９９ｍＴｃ（Ｖ）‐オキソコア錯体が好ましく、このような錯体としては、例えば、下記一般式（１３）で表される化合物として示すことができる。
【００５５】
【化８】
2015063503.tif 000009
【００５６】
上記一般式（１３）中、Ｘ１は窒素原子（Ｎ）又は硫黄原子（Ｓ）であり、ｍは１以上１０以下の整数であり、好ましくは１以上５以下の整数であり、より好ましくは１以上４以下の整数であり、更に好ましくは１以上３以下の整数であり、１又は２の整数がより更に好ましい。ｎは０又は１の整数であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、メチレン基（ＣＨ２）、又は、カルボニル基（ＣＯ）であり、Ｒ６は水素原子（Ｈ）、又は、炭素数１〜４のアルキル基である。ただし、Ｒ２及びＲ３は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ４及びＲ５は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ２又はＲ３がカルボニル基（ＣＯ）であり、かつ、Ｒ４又はＲ５がカルボニル基（ＣＯ）のとき、Ｒ１はメチレン基（ＣＨ２）である。
【００５７】
上記一般式（１１）で表される錯体は、より具体的には、下記一般式（１４）で表されるＮ２Ｓ２キレートと、下記一般式（１６）で表されるＮ３Ｓ１キレートとに分類される。一般式（１４）で表されるＮ２Ｓ２キレートは、上記一般式（４）で表される化合物を配位子とした９９ｍＴｃ（Ｖ）‐オキソコア錯体である。また、一般式（１６）で表されるＮ３Ｓ１キレートは、上記一般式（６）で表される化合物を配位子とした９９ｍＴｃ（Ｖ）‐オキソコア錯体である。
【００５８】
【化９】
2015063503.tif 000010
【００５９】
上記一般式（１４）中、Ａ１及びＡ２は、一方が上記一般式（２）で表される置換基、他方が水素原子（Ｈ）であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、メチレン基（ＣＨ２）、又は、カルボニル基（ＣＯ）である。ただし、Ｒ２及びＲ３は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ４及びＲ５は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ２又はＲ３がカルボニル基（ＣＯ）であり、かつ、Ｒ４又はＲ５がカルボニル基（ＣＯ）のとき、Ｒ１はメチレン基（ＣＨ２）である。
【００６０】
【化１０】
2015063503.tif 000011
【００６１】
上記一般式（１６）中、ｍは１以上１０以下の整数であり、好ましくは１以上５以下の整数であり、より好ましくは１以上４以下の整数であり、更に好ましくは１以上３以下の整数であり、１又は２の整数がより更に好ましい。Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、メチレン基（ＣＨ２）、又は、カルボニル基（ＣＯ）であり、Ｒ６は水素原子（Ｈ）、又は、炭素数１〜４のアルキル基である。ただし、Ｒ２及びＲ３は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ４及びＲ５は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ２又はＲ３がカルボニル基（ＣＯ）であり、かつ、Ｒ４又はＲ５がカルボニル基（ＣＯ）のとき、Ｒ１はメチレン基（ＣＨ２）である。
【００６２】
Ｎ２Ｓ２キレートは、好ましい態様において、下記一般式（１５）で表される錯体として示すことができる。これは、一般式（５）で表される化合物を配位子としとした９９ｍＴｃ（Ｖ）‐オキソコア錯体である。
【００６３】
【化１２】
2015063503.tif 000012
【００６４】
上記一般式（１５）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、メチレン基（ＣＨ２）、又は、カルボニル基（ＣＯ）である。ただし、Ｒ２及びＲ３は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ４及びＲ５は、一方がカルボニル基（ＣＯ）のとき、他方がメチレン基（ＣＨ２）であり、Ｒ２又はＲ３がカルボニル基（ＣＯ）であり、かつ、Ｒ４又はＲ５がカルボニル基（ＣＯ）のとき、Ｒ１はメチレン基（ＣＨ２）である。
【００６５】
以下、放射性テクネチウムとして、テクネチウム‐９９ｍを例にとり、本発明に係る放射性テクネチウム錯体の製造方法の一例について説明する。
【００６６】
テクネチウム‐９９ｍは、モリブデン酸塩（モリブデン‐９９）を担体に保持させた９９Ｍｏ／９９ｍＴｃジェネレータとして、例えば日本メジフィジックス社より市販されており、ミルキングにより、９９Ｍｏ／９９ｍＴｃジェネレータから過テクネチウム酸塩（９９ｍＴｃＯ４−）として供給される。
【００６７】
過テクネチウム酸塩（９９ｍＴｃＯ４−）を５価のテクネチウムに還元する場合、還元剤としては、スズ、亜鉛、鉄など金属、若しくは、これらの金属塩、又は、ジフェニルホスフィノベンゼン‐３‐スルホン酸ナトリウム，ホルムアミジンスルホン酸、グルコヘプトン酸等の非金属化合物を一種又は二種以上組み合わせて用いることができる。中でも、グルコヘプトン酸と塩化第一スズとを組み合わせて用いることが好ましい。過テクネチウム酸塩をグルコヘプトン酸で還元することにより、９９ｍＴｃ‐グルコへプタン錯体を得ることができる。
【００６８】
本発明において錯形成は、好ましくは、９９ｍＴｃ‐グルコへプタン錯体と、本発明に係るリガンド（すなわち、上記一般式（１）で表される化合物又はその塩）との配位子交換反応により行うことができる。かかる交換反応は、炭酸水素ナトリウム、水酸化ナトリウムなどの塩基存在下、溶媒中、２０℃〜１００℃下に加熱しながら実行することが好ましい。溶媒としては、水溶性溶媒が好ましく、水、エタノール、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド等を用いることができる。これら水溶性溶媒中、リン酸、リン酸トリス（２‐クロロエチル）等の緩衝剤を含んでいても良い。
【００６９】
［放射性医薬組成物］
本発明において「放射性医薬組成物」とは、上記の本発明に係る放射性テクネチウム錯体を生体内への投与に適した形態で含む処方物と定義することができる。この放射性医薬組成物には、本発明に係る放射性テクネチウム錯体を有効成分とし、薬理学的に許容される担体、希釈剤、エマルジョン、賦形剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、溶解補助剤、防腐剤、着色剤、安定化剤等の追加成分を含んでいても良い。
【００７０】
本発明の放射性医薬組成物の剤形は、経口投与又は非経口投与の投与方法に使用することができるが、非経口投与の投与方法に使用できるものが好ましく、静脈内投与、動脈内投与、局所投与、腹腔又は胸腔への投与、皮下投与、筋肉内投与、舌下投与、経皮投与又は直腸内投与等に使用できる注射剤がより好ましい。このような注射剤は、本発明に係る放射性テクネチウム錯体を水、生理食塩液、又は、リンゲル液等に溶解させることで調製することができる。
【００７１】
本発明の放射性医薬組成物中の放射性テクネチウム錯体の濃度は、放射線分解に対する安定性を確保できる濃度であればよい。
【００７２】
本発明の放射性医薬組成物は、ヒトを始めとする哺乳類動物に投与し、ＳＰＥＣＴ装置を用いて撮像することで、生体の低酸素領域を非侵襲的に検出し、画像化するための画像化剤として使用することができる。したがって、本発明の放射性医薬組成物は、特に腫瘍の画像化剤として有用である。
【００７３】
［キット］
本発明のキットは、本発明の放射性医薬組成物を調製するために用いられるものであり、少なくとも上記一般式（１）で表される化合物又はその塩を含む。
【００７４】
また、本発明のキットは、上記説明した本発明の放射性テクネチウム錯体の製造する方法を記載した添付文書を含むことが好ましい。この添付文書には、調製した放射性医薬組成物が、腫瘍の画像化剤として用いられることを記載することができる。
【００７５】
また、本発明のキットは、更にグルコヘプトン酸、及び、塩化第一スズ等の還元剤を含んでいてもよい。これにより、９９Ｍｏ／９９ｍＴｃジェネレータから得られた７価の９９ｍＴｃ‐過テクネチウム酸を５価に還元し、上記一般式（１）で表される化合物又はその塩と、９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸との配位子交換反応により、上記一般式（１１）で示す９９ｍＴｃ錯体を得ることができる。
【実施例】
【００７６】
以下、実施例を記載して本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらの内容に限定されるものではない。
実施例中、各化合物のＮＭＲスペクトルによる分子構造は、1Ｈ‐ＮＭＲスペクトル、１３Ｃ‐ＮＭＲ、又は、質量分析で同定した。ＮＭＲスペクトルは、ＮＭＲ装置として、ＢｒｕｋｅｒＡｖａｎｃｅ  ＩＩＩ  ４００ＭＨｚＮＭＲ  ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ（ブルカー・バイオスピン株式会社）を使用して得た。1Ｈ‐ＮＭＲスペクトルにおいて、内部標準物質としてテトラメチルシランを溶媒に対して０．０５％添加し、そのシグナルδ０．００を参照として使用した。１３Ｃ‐ＮＭＲスペクトルにおいて、溶媒が重クロロホルム（ＣＤＣｌ３）の場合は、シグナルδ７７を参照として使用し、溶媒がジメチルスルホキシド‐ｄ６（ＤＭＳＯ‐ｄ６）の場合は、シグナルδ３９．７を参照とし、溶媒が重メタノール（ＣＤ３ＯＤ）の場合は、シグナルδ４９．０を参照として使用した。全ての化学シフトはデルタスケール（δ）上のｐｐｍであり、シグナルの微細分裂については、略号（ｓ：シングレット、ｄ：ダブレット、ｄｄ：ダブルダブレット、ｄｔ：ダブルトリプレット、ｔ：トリプレット、ｔｄ：トリプルダブレット、ｔｔ：トリプルトリプレット、ｑ：カルテット、ｍ：マルチプレット、ｂｓ：ブロードシングレット、ｂｔ：ブロードトリプレット、ｂｍ：ブロードマルチプレット）を用いて示した。質量分析は、化合物７、８、１９、ＳＤ９０は、Ｘｅｖｏ  ＱＴｏｆ  ＭＳ（Ｗａｔｅｒｓ社製）を使用し、その他はＬＣＭＳ−ＩＴ−ＴＯＦ（島津製作所社製）を使用して行った。
【００７７】
（実施例１）ＳＤ５９の合成
図１に示すスキームに沿って、４‐ニトロベンジル  Ｎ‐（２‐スルファニルエチル）グリシルグリシルグリシナート（ＳＤ５９）を合成した。
【００７８】
［ステップａ］４‐ニトロベンジル  Ｎ‐（ｔｅｒｔ‐ブトキシカルボニル）グリシナート（化合物２）の合成
Ｎ‐（ｔｅｒｔ‐ブトキシカルボニル）グリシン（１．９３ｇ、１１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解し、４‐ニトロベンジルアルコール（１．５３ｇ、１０ｍｍｏｌ）を加え、１‐エチル‐３‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（２．３０ｇ、１２ｍｍｏｌ）、及び、Ｎ，Ｎ‐ジメチル‐４‐アミノピリジン（０．１２２ｇ、１ｍｍｏｌ）の存在下、室温で１４時間反応させた。溶媒を減圧留去した後に蒸留水を加え、酢酸エチルを用いて抽出した。有機層を１０％（ｖ／ｖ）クエン酸水溶液にて洗浄後、飽和塩化ナトリウム水溶液にて洗浄し、さらに飽和炭酸水素ナトリウム水溶液にて洗浄、飽和塩化ナトリウム水溶液にて洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後、有機層をろ過、得られたろ液を減圧留去し、得られた残渣をシリカゲルカラム（ヘキサン/酢酸エチル）にて精製し、化合物２（２．９７６ｇ、収率９６％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２３（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．１，２Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ），５．２８（ｓ，２Ｈ），５．０２（ｂｓ，１Ｈ），４．００（ｄ，Ｊ＝２．９，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７０．１，１５５．７，１４７．８，１４２．４，１２８．５，１２３．８，８０．３，６５．４，４２．４，２８．３。
【００７９】
［ステップｂ］４‐ニトロベンジル  Ｎ‐（ｔｅｒｔ‐ブトキシカルボニル）グリシルグリシナート（化合物３）の合成
化合物２（０．６３３ｇ、２．０４ｍｍｏｌ）を９５体積％トリフルオロ酢酸水溶液（２０ｍＬ）に溶解し、室温で３時間反応させた。溶媒を減圧留去し、  得られた残査をジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶解し、Ｎ‐（ｔｅｒｔ‐ブトキシカルボニル）グリシン（０．３６８ｇ、２．１０ｍｍｏｌ）を加え、１‐エチル‐３‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（０．４０３ｇ、２．１０ｍｍｏｌ）、１‐ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（０．３２２ｇ、２．１０ｍｍｏｌ）、及び、トリエチルアミン（５８５μL、４．２０ｍｍｏｌ）存在下、室温で終夜、反応させた。溶媒を減圧留去し、残渣に有機層を１０％（ｖ／ｖ）クエン酸水溶液にて洗浄後、飽和塩化ナトリウム水溶液にて洗浄し、さらに飽和炭酸水素ナトリウム水溶液にて洗浄、飽和塩化ナトリウム水溶液にて洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後、有機層をろ過、得られたろ液を減圧留去し、化合物３（０．７２１ｇ、収率９６％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２０（ｄ，Ｊ＝８．４，２Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝８．４，２Ｈ），７．２５（ｂｓ，１Ｈ），５．６３（ｂｓ，１Ｈ），５．２７（ｂｓ，１Ｈ），４．１４（ｄ，Ｊ＝５．３，２Ｈ），３．８８（ｂｓ，２Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７０．４，１６９．５，１５６．２，１４７．７，１４２．５，１２８．４，１２３．８，８０．２，６５．５，４４．０，４１．１，２８．２。
【００８０】
［ステップｃ］４‐ニトロベンジル  Ｎ‐ブロモアセチルグリシルグリシナート（化合物４）の合成
化合物３（１．６２ｇ、４．４７ｍｍｏｌ）を９５体積％トリフルオロ酢酸水溶液（３０ｍＬ）に溶解し、室温で７時間反応させた。溶媒を減圧留去し、得られた残査をジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）に溶解しブロモ酢酸を加え、１‐エチル‐３‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（１．０２７ｇ、５．３６ｍｍｏｌ）、１‐ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（０．８２１ｇ、５．３６ｍｍｏｌ）、及び、ジイソプロピルエチルアミン（１．８７ｍＬ、１０．７２ｍｍｏｌ）存在下、室温で２４時間反応させた。溶媒を減圧留去し、残渣に有機層を１０％（ｖ／ｖ）クエン酸水溶液にて洗浄後、飽和塩化ナトリウム水溶液にて洗浄し、さらに飽和炭酸水素ナトリウム水溶液にて洗浄、飽和塩化ナトリウム水溶液にて洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後、有機層をろ過、得られたろ液を減圧留去し、化合物４（１．１２ｇ、収率６５％）を得た。化合物４は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ‐ｄ６）：δ  ８．５３−８．４８（ｍ，２Ｈ），８．２４（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ），７．６５（ｄ，Ｊ＝８．８，２Ｈ），５．２９（ｓ，２Ｈ），４．１５（ｓ，２Ｈ），３．９８（ｄ，Ｊ＝５．８，２Ｈ），３．８２（ｄ，Ｊ＝５．８，２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ‐ｄ６）：δ  １６９．７，１６９．３，１６６．５，１４７．３，１４３．９，１２８．６，１２３．７，６４．８，４２．７，４２．２，４０．９。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ１３Ｈ１４Ｎ３Ｏ６ＢｒＮａ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ４０９．９９５８，ｆｏｕｎｄ  ４０９．９９７１。
【００８１】
［ステップｄ］２‐トリチルスルファニルエチルアミン塩酸塩（化合物６）の合成
２‐アミノエタンチオール塩酸塩（化合物５）（２．３１ｇ、３０ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（３０ｍＬ）に溶解し、トリチルクロリド（８．３６ｇ、３０ｍｍｏｌ）を加え、室温で７時間反応させた。溶媒を減圧留去し、得られた固体をジエチルエーテル／ヘキサンにて再結晶し、化合物６（１０．７ｇ）を定量的に得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ  ７．４７（ｄｄ，Ｊ＝７．３，１．２５Ｈｚ，６Ｈ），７．３４（ｔｔ，Ｊ＝７．３，１．２５Ｈｚ，６Ｈ），７．２７（ｔｔ，Ｊ＝７．３，１．２５Ｈｚ，３Ｈ），２．６０（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．５１（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ｄ６‐ＤＭＳＯ）：δ１４５．６，１３０．７，１２９．２，１２８．２，６８．４，３９．６，３０．１。
【００８２】
［ステップｅ］４‐ニトロベンジル  Ｎ‐（２‐トリチルスルファニルエチル）グリシルグリシルグリシナート（化合物７）の合成
化合物４（３８８ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、及び、化合物６（５３４ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（５ｍＬ）に溶解し、炭酸カリウム（６２２ｍｇ、４．５ｍｍｏｌ）、及び、ヨウ化テトラブチルアンモニウム（１１１ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）存在下、室温で１９時間、反応させた。溶媒を減圧留去後、残渣を酢酸エチルに溶解し、精製水、次いで飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥・ろ過後、ろ液を濃縮し得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）にて分離し、化合物７（４０９ｍｇ、収率６５％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２０（ｄｔ，Ｊ＝８．９，２．１Ｈｚ，２Ｈ），７．８２（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｄｔ，Ｊ＝８．９，２．１Ｈｚ，２Ｈ），７．４０（ｄｔ，Ｊ＝７．０，１．６Ｈｚ，６Ｈ），７．２８（ｔｔ，Ｊ＝７．０，１．６Ｈｚ，６Ｈ），７．２１（ｔｔ，Ｊ＝７．０，１．６Ｈｚ，３Ｈ），７．００（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），５．２４（ｓ，２Ｈ），４．０６（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ），３．９５（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），３．１３（ｓ，２Ｈ），２．４９（ｄｄ，Ｊ＝６．２，５．５Ｈｚ，２Ｈ），２．３７（ｄｄ，Ｊ＝６．２，５．５Ｈｚ，２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７２．７，１６９．４，１６９．２，１４７．８，１４４．６，１４２．３，１２９．５，１２８．４，１２７．９，１２６．７，１２３．８，６６．８，６５．５，５１．６，４８．４，４２．９，４１．１，３２．３。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ３４Ｈ３５Ｎ４Ｏ６Ｓ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６２７．２２７７，ｆｏｕｎｄ  ６２７．２２９０。
【００８３】
［ステップｆ］ＳＤ５９の合成
化合物７（６１．５ｍｇ、０．０９８ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸／トリイソプロピルシラン／水／エタンジチオール（９４：１：２．５：２．５（体積比））の混合溶液（１０ｍＬ）に溶解し、室温で３０分間反応させた。溶媒を減圧留去した後に、残渣に４℃に冷却したジエチルエーテルを加え、結晶化させ、得られた結晶を乾燥することで、ＳＤ５９（４６．４ｍｇ、収率９５％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ‐ｄ６）：δ  ９．０８（ｂｓ，２Ｈ），８．８４（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），８．５９（ｔ，Ｊ＝５．８，１Ｈ），８．２５（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．６６（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），５．２９，（ｓ，２Ｈ），４．００（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），３．８８（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），３．８４（ｓ，２Ｈ），３．１３（ｔ，Ｊ＝７．４，２Ｈ），２．８５−２．７１（ｍ，３Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ‐ｄ６）：δ  １６９．６，１６９．１，１６５．６，１４７．２，１４３．９，１２８．５，１２３．７，６４．８，４９．６，４７．６，４１．８，４０．８，１９．７。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ１５Ｈ２１Ｎ４Ｏ６Ｓ［Ｍ＋Ｈ］＋  ３８５．１１７６，ｆｏｕｎｄ  ３８５．１１９０。
【００８４】
（実施例２）ＳＤ６０の合成
図１に示すスキームに沿って、４‐ニトロベンジル  Ｎ‐メチル‐Ｎ‐（２‐スルファニルエチル）グリシルグリシルグリシナート（ＳＤ６０）を合成した。
【００８５】
［ステップｇ］４‐ニトロベンジル  Ｎ‐メチル‐Ｎ‐（２‐トリチルスルファニルエチル）グリシルグリシルグリシナート（化合物８）の合成
実施例１と同様な方法で合成した化合物７（３６ｍｇ、５７．４μｍｏｌ）を１，２‐ジクロロエタン（５００μＬ）に溶解し、トリエチルアミン（１９．５μＬ、１４０μｍｏｌ）存在下、ヨードメタン（４８μＬ、７７０μｍｏｌ）を加え、６５℃で１時間反応させた。溶媒を減圧留去し、酢酸エチルに溶解後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液し、次いで飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を濃縮後、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール）にて精製し、化合物８（９ｍｇ、収率２４％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２２（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．９１（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．３８（ｄｔ，Ｊ＝７．２，１．８Ｈｚ，６Ｈ），７．３０−７．２６（ｍ，６Ｈ），７．２１（ｔｔ，Ｊ＝７．２，１．２Ｈｚ，３Ｈ），６．８１（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ），５．２５（ｓ，２Ｈ），４．０１（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），３．９６（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），２．９６（ｓ，２Ｈ），２．４３（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），２．３２（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７２．０，１６９．５，１６９．２，１４７．９，１４４．７，１４２．３，１２９．５，１２８．５，１２８．０，１２６．８，１２３．９，６６．７，６５．５，６０．６，５６．５，４３．２，４２．６，４１．１，３０．２。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ３５Ｈ３６Ｎ４Ｏ６ＮａＳ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ６６３．２２５３，ｆｏｕｎｄ  ６６３．２２５２。
【００８６】
［ステップｈ］ＳＤ６０の合成
化合物８（９ｍｇ、１４μｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸／トリイソプロピルシラン／水（９５：２．５：２．５（体積比））の混合溶液（５ｍＬ）に溶解し、室温で２時間反応させた。溶媒を減圧留去した後に、残渣に４℃に冷却したジエチルエーテルを加え、結晶化させ、得られた結晶を乾燥することで、ＳＤ６０（５ｍｇ、収率７０％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ‐ｄ６）：δ  ９．８６（ｂｓ，１Ｈ），８．９４（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ），８．６０（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ），８．２４（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），５．２９（ｓ，２Ｈ），４．０１（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ），４．００（ｓ，２Ｈ），３．８８（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ），３．３０−３．２７（ｍ，２Ｈ），２．８５−２．７９（ｍ，３Ｈ），２．８３（ｓ，３Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ‐ｄ６）：δ  １６９．７，１６８．９，１６４．９，１４７．２，１４３．９，１２８．５，１２３．７，６４．８，５８．３，５６．３，４１．８，４１．０，４０．９，１８．０。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：  ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ１６Ｈ２３Ｎ４Ｏ６Ｓ［Ｍ＋Ｈ］＋  ３９９．１３３３，ｆｏｕｎｄ  ３９９．１３１７。
【００８７】
（実施例３）ＳＤ６１の合成
図２に示すスキームに沿って、４‐ニトロベンジル  Ｎ‐（２‐スルファニルエチル）‐Ｎ‐（２‐スルファニルエチル）カルバモイルメチル‐２‐アミノアセテート（ＳＤ６１）を合成した。図２中、ＰＳは、１％ジビニルベンゼン含有ポリスチレン樹脂を示す。
【００８８】
［ステップａ］２‐アミノエタンチオール固定化樹脂（化合物１０）の合成
トリチルクロリド樹脂（１％ジビニルベンゼン含有ポリスチレン樹脂、渡辺化学工業社製）（１ｇ、活性基１．５７ｍｍｏｌ相当）と、２‐アミノエタンチオール（化合物５）（８９２ｍｇ、７．８５ｍｍｏｌ）とを、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）中、室温で終夜反応させた。溶媒を除去後、ジクロロメタン（５回）、ジメチルホルムアミド（５回）、ジクロロメタン（５回）、ジクロロメタン／メタノール／ジイソプロピルエチルアミン（１７：２：１（体積比））混合液（５回）、メタノール（５回）にて順次、洗浄した後、乾燥することで、化合物１０（１．０５９ｇ、収率９２％）を得た。Ｋａｉｓｅｒテスト陽性であったことから、２‐アミノエタンチオールが担持され、化合物１０が得られたことを確認した。
【００８９】
［ステップｂ］ジエチル  Ｎ‐（２‐トリチルスルファニルエチル）イミノジアセテート（化合物１１）の合成
実施例１に示す方法で合成した化合物６（２．０５ｇ、５．７７ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２０ｍＬ）に溶解し、ブロモ酢酸エチル（５．１１ｍＬ、４６．２ｍｍｏｌ）を加え、トリエチルアミン（６．４３ｍＬ、４６．２ｍｍｏｌ）存在下、５０℃で１時間反応させた。溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）にて精製し、化合物１１（２．８５ｇ）を定量的に得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．４２−７．３９（ｍ，６Ｈ），７．２８−７．２３（ｍ，６Ｈ），７．２０−７．１６（ｍ，３Ｈ），４．１０（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，４Ｈ），３．３６（ｓ，２Ｈ），２．６４−２．６０（ｍ，２Ｈ），２．３６−２．３３（ｍ，２Ｈ），１．２２（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７０．９，１４４．８，１２９．５，１２７．７，１２６．５，６６．６，６０．３，５４．８，５３．６，３０．２，１４．１。
【００９０】
［ステップｃ］Ｎ‐（２‐トリチルスルファニルエチル）イミノジ酢酸（化合物１２）の合成
化合物１１（２．８４ｇ、５．７７ｍｍｏｌ）をメタノール（３５ｍＬ）に溶解し、９ｍｏｌ／Ｌ水酸化カリウム水溶液（５ｍＬ）を加え室温で１６時間反応させた。メタノールを減圧留去後、氷冷下、６ｍｏｌ／Ｌ塩酸をｐＨが２になるまで加えた。生成した結晶をろ取した後、乾燥することで化合物１２（１．８１ｇ、収率６７％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ  ７．４２−７．３９（ｍ，６Ｈ），７．３３−７．２８（ｍ，６Ｈ），７．２６−７．２２（ｍ，３Ｈ），３．６８（ｓ，４Ｈ），２．８４−２．８０（ｍ，２Ｈ），２．６２−２．５８（ｍ，２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ  １６９．９，１４５．６，１３０．７，１２９．２，１２８．２，６８．７，５６．０，５５．７，２７．８。
【００９１】
［ステップｄ］２‐［Ｎ‐［Ｎ‐（２‐スルファニルエチル）アセトアミド］‐Ｎ‐（２‐トリチルスルファニル）エチル］アミノ酢酸固定化樹脂（化合物１３）の合成
０．５ｍｏｌ／Ｌ１‐ヒドロキシベンゾトリアゾールのジメチルホルムアミド溶液（１．２ｍＬ）中、化合物１２（２７３ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）を、ジイソプロピルカルボジイミド（８９μＬ、０．５８ｍｍｏｌ）存在下に室温で１０分間反応させた後、化合物１０（２００ｍｇ、活性基０．２９ｍｍｏｌ相当）を加え、室温にて１８時間反応させた。溶媒を除去後、ジクロロメタン（５回）、ジメチルホルムアミド（５回）、ジクロロメタン（５回）、ジクロロメタン／メタノール／ジイソプロピルエチルアミン（１７：２：１（体積比））混合液（５回）、メタノール（５回）にて順次、洗浄し、化合物１３の粗生成物を得た。化合物１３は精製することなくそのまま次の反応（ステップｅ）に用いた。
【００９２】
［ステップｅ］２‐［Ｎ‐（２‐トリチルスルファニルエチル）‐Ｎ‐（４‐ニトロベンジルオキシカルボニルメチル）アミノ］‐Ｎ‐（２‐メルカプトエチル）アセトアミド固定化樹脂（化合物１４）の合成
ジメチルホルムアミド（２．９ｍＬ）中、トリエチルアミン（４０４μＬ、２．９ｍｍｏｌ）存在下に、ステップｄにて得られた化合物１３と、４‐ニトロベンジルブロマイド（６２６ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ）とを室温で１６時間反応させた。溶媒を除去後、ジメチルホルムアミド（５回）で洗浄し、化合物１４の粗生成物を得た。化合物１４は精製することなくそのまま次の反応（ステップｆ）に用いた。
【００９３】
［ステップｆ］ＳＤ６１の合成
ステップｅにて得られた化合物１４にトリフルオロ酢酸／水／トリイソプロピルシラン（９２．５：２．５：５（体積比））の混合溶液（５ｍＬ）を加え、室温で４時間反応させた。樹脂をろ過により除き、トリフルオロ酢酸、クロロホルム、メタノールで順次、樹脂を洗浄した後、得られた溶液を合わせ、溶媒を減圧留去した。残渣を分取用ＨＰＬＣにて分取し、目的のＳＤ６１（２３ｍｇ、化合物１０からの収率２０％）をトリフルオロ酢酸塩として得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２４（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．９４‐７．９０（ｂｍ，１Ｈ），７．５２（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），５．２５（ｓ，２Ｈ），３．５３（ｓ，２Ｈ），３．４８（ｑ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．３３（ｓ，２Ｈ），２．９２（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），２．７１−２．６２（ｍ，４Ｈ），１．５４（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），１．４２（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７０．６５，１７０．５９，１４７．９，１４２．３，１２８．７，１２３．９，６５．３，５８．９，５７．９，５５．６，４２．０，２４．６，２３．０。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ１５Ｈ２２Ｎ３Ｏ５Ｓ２［Ｍ＋Ｈ］＋  ３８８．０９９５，ｆｏｕｎｄ  ３８８．１００４。
＜分取用ＨＰＬＣ条件＞
カラム：Ｃ１８カラム（ＣＡＰＣＥＬＬＰＡＫ（登録商標）Ｃ１８−ＭＳ−ＩＩＭＧ−ＩＩ、２０×１５０ｍｍ、資生堂製）
検出器：ＵＶ（ＬａＣｈｌｏｍ  ＥＬＩＴＥ  Ｌ−２４５５、日立ハイテクノロジーズ社製）
移動相：０．１体積％トリフルオロ酢酸水溶液／アセトニトリル＝９５／５−５／９５（リニアグラジエント、１０分間）
ＳＤ６１の保持時間：５．３分
【００９４】
（実施例４）ＳＤ７０の合成
図３に示すスキームに沿って、４‐ニトロベンジル  Ｎ‐［２‐（２‐スルファニルアセチルアミノ）エチル］グリシルグリシナート（ＳＤ７０）を合成した。
【００９５】
［ステップａ］４‐ニトロベンジル  ２‐ブロモアセチルグリシナート（化合物１５）の合成
実施例１に示す方法で合成した化合物２（６２０ｍｇ、２ｍｍｏｌ）を、９５％トリフルオロ酢酸水溶液（５ｍＬ）中、室温で２．５時間反応させた。溶媒を減圧留去後、残査をジクロロメタン（１０ｍＬ）に溶解し、炭酸カリウム（８２９ｍｇ、６ｍｍｏｌ）存在下、ブロモアセチルブロマイド（１７２μＬ、１．９ｍｍｏｌ）を０℃で２５分反応させた後、室温にて７時間反応させた。水を加えた後、塩酸水溶液（１ｍｏｌ／Ｌ）で中和し、ジクロロメタンを用いて抽出し、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥したのちにろ過し、ろ液の溶媒を減圧留去し、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）にて精製し、化合物１５（０．４１８ｇ、収率６３％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２４（ｄｔ，Ｊ＝９．０，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．５３（ｄｔ，Ｊ＝９．０，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．００（ｂｓ，１Ｈ），５．３０（ｓ，２Ｈ），４．１７（ｄ，Ｊ＝５．１８Ｈｚ，２Ｈ），３．９３（ｓ，２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６８．８，１６５．９，１４７．９，１４２．１，１２８．６，１２３．９，６５．７，４１．８，２８．４。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ１１Ｈ１２Ｎ２Ｏ５Ｂｒ［Ｍ＋Ｈ］＋  ３３０．９９２４，ｆｏｕｎｄ  ３３０．９９３６。
【００９６】
［ステップｂ］（２‐トリチルスルファニル）酢酸（化合物１７）の合成
２‐メルカプト酢酸（化合物１６）（１．５３ｍＬ、２２ｍｍｏｌ）を、トリフルオロエタン酢酸（４０ｍＬ）中、トリチルクロリド（５．５８ｇ、２０ｍｍｏｌ）と室温で２４時間反応させた。溶媒を減圧留去し、得られ結晶をジエチルエーテル／ヘキサンにて再結晶により精製し、化合物１７（４．９６ｇ、収率７４％）で得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．４２（ｄｔ，Ｊ＝７．６，１．７，６Ｈ），７．３０（ｔｔ，Ｊ＝７．６，１．９，６Ｈ），７．２３（ｔｔ，Ｊ＝７．２，１．３，３Ｈ），３．０４（ｓ，１Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７５．６，１４３．９，１２９．５，１２８．１，１２７．０，６７．３，３４．５。
【００９７】
［ステップｃ］Ｎ‐（２‐アミノエチル）‐２‐トリチルスルファニルアセタミド（化合物１８）の合成
化合物１７（３３４ｍｇ、１ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（１．５ｍＬ）に溶解し、エチレンジアミン（６７５μＬ、１０ｍｍｏｌ）を加え、１‐エチル‐３‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（２１１ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）、及び、１‐ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（１６８ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）存在下に、室温で３１時間反応させた。溶媒を減圧留去し、得られた残渣に飽和炭酸ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出後、有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥後、ろ過し、ろ液を濃縮したのちに、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール）で精製し、化合物１８（１４０ｍｇ、収率３７％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．４３（ｄｔ，Ｊ＝７．１，１．８Ｈｚ，６Ｈ），７．２９（ｔｔ，Ｊ＝７．４，１．６Ｈｚ，６Ｈ），７．２２（ｔｔ，Ｊ＝７．３，１．３Ｈｚ，３Ｈ），６．５５（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ），３．１１（ｓ，２Ｈ），３．０３−２．９９（ｍ，４Ｈ），２．６４（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６８．７，１４４．１，１２９．５，１２８．２，１２７．０，６７．７，４１．５，４０．８，３６．０。
【００９８】
［ステップｄ］４‐ニトロベンジル  Ｎ‐［２‐（２‐トリチルスルファニルアセチルアミノ）エチル］グリシルグリシナート（化合物１９）の合成
化合物１５（１０８ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）と化合物１８（１４０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（１ｍＬ）に溶解し、炭酸ナトリウム（７４．２ｍｇ、ｍｍｏｌ）を加え、室温で３３時間反応させた。反応溶液に水を加え、クロロホルムで抽出後、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶液をろ過過後、ろ液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール）にて精製し、化合物１９（１８．６ｍｇ、収率９％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２２（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．６５（ｔ，Ｊ＝５．８，１Ｈ），７．４９（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．４２−７．３９（ｍ，６Ｈ），７．３１−７．２７（ｍ，６Ｈ），７．２５−７．２１（ｍ，３Ｈ），６．３０（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），５．２１（ｓ，２Ｈ），４．０６（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），３．２８（ｓ，２Ｈ），３．１５（ｓ，２Ｈ），３．０７（ｑ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），２．６２（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７２．０，１６９．７，１６８．６，１４７．８，１４３．９，１４２．３，１２９．４，１２８．５，１２８．２，１２７．１，１２３．９，６７．９，６５．５，５２．１，４９．１，４０．６，３９．５，３５．９。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ３４Ｈ３５Ｎ４Ｏ６Ｓ［Ｍ＋Ｈ］＋  ６２７．２２７７，ｆｏｕｎｄ  ６２７．２２７４。
【００９９】
［ステップｅ］ＳＤ７０の合成
化合物１９（１８．６ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸／水／エタンジチオール／トリイソプロピルシラン（９４：２．５：２．５：１（体積比））の混合溶液（５ｍＬ）に溶解し、室温で２．５時間反応させた。溶媒を減圧留去した後に、残渣に４℃に冷却したジエチルエーテルを加え、結晶化させ、得られた結晶を乾燥することで、ＳＤ７０（１５．０ｍｇ）を定量的に得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．９９（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），８．８８（ｂｓ，２Ｈ），８．３４−８．２４（ｍ，１Ｈ），８．２５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．６６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），５．３１（ｓ，２Ｈ），４．１０（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），３．８５（ｓ，２Ｈ），３．４１−３．３３（２Ｈ），３．１３（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．０３（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７０．６，１６９．３，１６６．０，１４７．３，１４３．７，１２８．６，１２３．７，６５．０，４７．６，４６．５，４０．８，３５．６，２７．３。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ１５Ｈ２０Ｎ４Ｏ６ＳＮａ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ４０７．０９９６，ｆｏｕｎｄ  ４０７．０９８６。
なお、１Ｈ‐ＮＭＲのδ３．４１−３．３３ｐｐｍのピークはトリフルオロ酢酸由来のプロトンシグナルと重なったため、二次元ＮＭＲ（Ｈ−Ｈ  ＣＯＳＹ，ＨＭＱＣ及びＨＭＢＣ）で決定した。
【０１００】
（実施例５）ＳＤ７８の合成
図４に示すスキームに沿って、４‐ニトロベンジル  ２‐［Ｎ‐（２‐｛２‐［Ｎ’’‐（２‐スルファニルエチル）アミノ］アセチルアミノ｝エチル］アミノ］アセテート（ＳＤ７８）を合成した。
【０１０１】
［ステップａ］Ｎ‐（２‐トリチルスルファニル）エチル‐２‐ニトロベンゼンスルホンアミド（化合物２０）の合成
実施例１に示す方法で合成した化合物６（２ｇ、５．６３ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）に溶解し、２‐ノシルクロリド（１．２２ｇ、５．５ｍｍｏｌ）を加え、トリエチルアミン（２．３６ｇ、１７ｍｍｏｌ）存在下に、室温で１５時間反応させた。溶媒を減圧留去し、塩酸（１ｍｏｌ／Ｌ）を加え、ジエチルエーテルで抽出後、有機層を飽和炭酸水溶液で洗浄し、さらに飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を減圧濃縮した後、得られた結晶を酢酸エチル／ジエチルエーテルを用いて再結晶し化合物２０（１．９９ｇ、収率７２％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．００−７．９７（ｍ，１Ｈ），７．８７−７．８５（ｍ，１Ｈ），７．７４−７．６６（ｍ，２Ｈ），７．３６−７．３３（ｍ，６Ｈ），７．２６−７．２１（ｍ，６Ｈ），７．１９−７．１５（ｍ，３Ｈ），５．３８（ｔ，Ｊ＝６．１，１Ｈ），２．７６（ｑ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．４３（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １４８．０，１４４．３，１３３．８，１３３．４，１３２．７，１３１．０，１２９．４，１２８．０，１２６．８，１２５．４，６７．０，４２．５，３１．９。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ２７Ｈ２４Ｎ２Ｏ４Ｓ２［Ｍ＋Ｎａ］＋  ５２７．１０７０，ｆｏｕｎｄ  ５２７．１０９５。
【０１０２】
［ステップｂ］エチル  Ｎ‐（２‐ニトロベンゼンスルホニル）‐Ｎ‐（２‐トリチルスルファニルエチル）グリシナート（化合物２１）の合成
化合物２０（１．０９ｇ、２ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（３５ｍＬ）に溶解し、ブロモ酢酸エチル（３３２μＬ、３ｍｍｏｌ）を加え、炭酸セシウム（１．９５ｇ、６ｍｍｏｌ）及びテトラブチルアンモニウムヨージド（１４８ｇ、０．４ｍｍｏｌ）存在下に６０℃で１．５時間反応させた。反応液に飽和塩化ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出後、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶液をろ過後、ろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、化合物２１（１．２ｇ）を定量的に得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．９２−７．９０（ｍ，１Ｈ），７．６０−７．５７（ｍ，２Ｈ），７．５２−７．５０（ｍ，１Ｈ），７．３８−７．３５（ｍ，６Ｈ），７．２７−７．２２（ｍ，６Ｈ），７．２０−７．１６（ｍ，３Ｈ），４．０１（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），３．８５（ｓ，１Ｈ），３．２４−２．９９（ｍ，２Ｈ），２．５５−２．５１（ｍ，２Ｈ），１．１３（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６８．３，１４７．７，１４４．３，１３３．５，１３２．９，１３１．６，１３０．６，１２９．４，１２７．８，１２６．７，１２３．９，６７．１，６１．２，４８．６，４８．１，３０．２，１３．９。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ３１Ｈ３０Ｎ２Ｏ６Ｓ２Ｎａ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ６１３．１４３７，ｆｏｕｎｄ  ６１３．１４５２。
【０１０３】
［ステップｃ］Ｎ‐（２‐ニトロベンゼンスルホニル）‐Ｎ‐（２‐トリチルスルファニルエチル）グリシン（化合物２２）の合成
化合物２１（２２６ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）に溶解し、１０％水酸化ナトリウム水溶液（２ｍＬ）を加え、室温で１４時間反応させた。塩酸（６ｍｏｌ／Ｌ）を用いてｐＨ１〜２にし、クロロホルムで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥後、溶液をろ過した。ろ液を濃縮した後にシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール）で精製し、化合物２２（１７６ｍｇ、収率８２％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ‐ｄ６）：δ  ７．９５−７．９１（ｍ，２Ｈ），７．８４（ｔｄ，Ｊ＝７．７，１．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７７（ｔｄ，Ｊ＝７．７，１．４Ｈｚ，１Ｈ），７．３３−７．２７（ｍ，１２Ｈ），７．２４−７．２０（ｍ，３Ｈ），３．８５（ｓ，２Ｈ），２．９９（ｂｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，２Ｈ），２．４２（ｂｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ‐ｄ６）：δ  １６９．９，１４７．５，１４４．４，１３４．６，１３２．５，１３２．０，１３０．２，１２９．２，１２８．２，１２６．９，１２４．３，６６．５，４８．７，４７．７，２９．８。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ２９Ｈ２６Ｎ２Ｏ６Ｓ２Ｎａ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ５８５．１１２４，ｆｏｕｎｄ  ５８５．１１４１。
【０１０４】
［ステップｄ］ｔｅｒｔ‐ブチル  Ｎ‐（２‐アミノエチル）カルバメート（化合物２３）の合成
１，２‐エチレンジアミン（２．２３ｍＬ、３３．３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１１０ｍＬ）に溶解し、0℃に冷却し、二炭酸ジ‐ｔｅｒｔ‐ブチル（１．２１ｇ、５．５５ｍｍｏｌ）を加え、０℃で４０分間撹拌したのち、室温で２３時間反応させた。溶媒を減圧留去後、水を加えた後、炭酸ナトリウムを用いてｐＨを１１に調整した。ジクロロメタンを用いて抽出操作を行い、得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層をろ過した。ろ液を減圧濃縮することで、化合物２３（８８５ｍｇ）を定量的に得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ４．９６（ｂｓ，１Ｈ），３．１７（ｂｑ，Ｊ＝５．８，２Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝５．８，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ），１．２７（ｂｓ，２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １５６．２，７９．１，４３．４，４１．８，２８．４。
【０１０５】
［ステップｅ］ｔｅｒｔ‐ブチル  Ｎ‐｛２‐［Ｎ’‐（２‐ニトロベンゼンスルホニル）‐Ｎ’‐（２‐トリチルスルファニルエチル）アミノアセチル］アミノエチル｝カルバメート（化合物２４）の合成
化合物２２（５００ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）及び化合物２３（１６０．２２ｇ、１ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶解し、１‐エチル‐３‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（１８２．１ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ）、１‐ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（１４５．５ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ）、及び、ジイソプロピルエチルアミン（３４８μＬ、２ｍｍｏｌ）存在下、室温で１４時間反応させた。反応溶媒を減圧留去後、酢酸エチルに溶解し、有機層を１０体積％クエン酸水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥後ろ過し、ろ液を減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、化合物２４（５８２ｍｇ、収率９３％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．９４（ｄｄ，Ｊ＝７．５，１．７Ｈｚ，１Ｈ），７．６６−７．５９（ｍ，３Ｈ），７．３７−７．３４（ｍ，６Ｈ），７．２９−７．２４（ｍ，６Ｈ），７．２２−７．１８（ｍ，３Ｈ），６．６０（ｂｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ），４．８７（ｂｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），３．６９（ｓ，２Ｈ），３．２２−３．１８（ｍ，２Ｈ），３．０９−３．０３（ｍ，４Ｈ），２．５２−２．４９（ｍ，２Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６７．８，１５６．３，１４７．８，１４４．３，１３４．０，１３２．１，１３１．９，１３１．２，１２９．５，１２７．９，１２６．８，１２４．２，７９．６，６７．１，５０．４，４８．９，４０．２，３９．９，３０．１，２８．３。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ３６Ｈ４０Ｎ４Ｏ７Ｓ２Ｎａ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ７２７．２２３１，ｆｏｕｎｄ  ７２７．２２４１。
【０１０６】
［ステップｆ］２‐［Ｎ’‐（２‐ニトロベンゼンスルホニル）‐Ｎ’‐（２‐トリチルスルファニルエチル）アミノアセチル］アミノエチルアミン（化合物２５）の合成
化合物２４（３４４ｍｇ、０．４８８ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸／ジクロロメタン／水（５０：５０：１）の混合溶液（１０ｍＬ）に溶解し、室温で１．５時間反応させた。溶媒を減圧留去し、化合物２５を得た。化合物２５は精製せずに次の反応（ステップｈ）に全量使用した。
【０１０７】
［ステップｇ］４‐ニトロベンジル  ２‐ブロモアセテート（化合物２６）の合成
４‐ニトロベンジルアルコール（３．０６ｇ、２０ｍｍｏｌ）とコリジン（２．９ｍＬ、２２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１００ｍＬ）に溶解し、０℃下、ブロモアセチルブロマイド（１．８１ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を加えた後、室温で２４時間反応させた。溶媒を減圧留去し、残渣にジエチルエーテルを加え、析出した結晶をろ過することで除去した。ろ液を濃縮後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）にて精製し、化合物２６（４．７３ｇ、収率８６％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２４（ｄｔ，Ｊ＝８．７，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．５５（ｄｔ，Ｊ＝８．７，２．２Ｈｚ，２Ｈ），５．３１（ｓ，２Ｈ），３．９２（ｓ，２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６６．８，１４７．８，１４２．１，１２８．４，１２３．８，６６．２，２５．２。
【０１０８】
［ステップｈ］４‐ニトロベンジル  ２‐（Ｎ‐｛２‐［Ｎ’‐（２‐ニトロベンゼンスルホニル）‐Ｎ’‐（２‐トリチルスルファニルエチル）アミノ］アセチル｝アミノエチル）アミノアセテート（化合物２７）の合成
ステップｆで得られた化合物２５と化合物２６（１２３ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２ｍＬ）に溶解し、炭酸カリウム（２０７ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１２時間反応させた。水を加えた後、クロロホルムを用いて抽出操作を行い、得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥した。有機層をろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール）で精製し、化合物２７（２２９．６ｍｇ、化合物２４からの２段階収率６４％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．１８（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．９３−７．９１（ｍ，１Ｈ），７．６７−７．５８（ｍ，３Ｈ），７．５０（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．３６−７．３１（ｍ，６Ｈ），７．２７−７．２３（ｍ，７Ｈ），７．２０−７．１６（ｍ，３Ｈ），６．６７（ｂｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），５．２４（ｓ，２Ｈ），３．７１（ｓ，２Ｈ），３．４３（ｓ，２Ｈ），３．１９（ｑ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），３．０９−３．０５（ｍ，２Ｈ），２．６５（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），２．５２−２．４８（ｍ，２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７２．０，１６７．４，１４７．７，１４７．６，１４４．２，１４２．７，１３３．８，１３２．０，１３１．８，１３０．９，１２９．３，１２８．４，１２７．８，１２６．７，１２４．２，１２３．６，６７．０，６４．９，５０．６，５０．０，４８．９，４７．８，３８．８，３０．０。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ４０Ｈ４０Ｎ５Ｏ９Ｓ２［Ｍ＋Ｈ］＋  ７９８．２２６２，ｆｏｕｎｄ  ７９８．２２７１。
【０１０９】
［ステップｉ］４-ニトロベンジル  ２‐［Ｎ‐（２‐｛２‐［Ｎ’’‐（２‐トリチルスルファニルエチル）アミノ］アセチルアミノ｝エチル）アミノ］アセテート（化合物２７ａ）の合成
化合物２７（９６．１ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（３ｍＬ）に溶解し、チオグリコール酸５０μＬ、０．７２ｍｍｏｌ）を加え、水酸化リチウム（５５．４ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）存在下に、室温で１時間反応させた。蒸留水を加えた後に、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出操作を行い、得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥した。有機層をろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残渣をアセトニトリルに溶解し、ジエチルエーテルを加え析出した結晶をろ過により除去し、ろ液を濃縮することで化合物２７ａ（４４．６ｍｇ、収率６１％）を得た。
【０１１０】
［ステップｊ］ＳＤ７８の合成
化合物２７ａ（４４．６ｍｇ、０．０７２８ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸／エタンジチオール／水／トリイソプロピルシラン（９４：２．５：２．５：１）の混合溶液（５ｍＬ）に溶解し、室温で２．５時間反応させた。溶媒を減圧留去し、４℃に冷却したジエチルエーテルを加え、結晶化させ、得られた結晶を乾燥することで、ＳＤ７８（４０．３ｍｇ、収率９２％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ９．２９（ｂｓ，４Ｈ），８．８２（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ），８．２６（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．７０（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），５．４１（ｓ，２Ｈ），４．２０（ｓ，２Ｈ），３．７８（ｓ，２Ｈ），３．４９（ｑ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），３．１５−３．１０（ｍ，４Ｈ），２．８３（ｂｓ，１Ｈ），２．７４（ｔ，Ｊ＝７．０），２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６６．７，１６６．０，１４７．４，１４３．０，１２８．９，１２３．７，６５．７，４９．７，４７．６，４６．９，４６．１，３５．２，１９．７。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ１５Ｈ２２Ｎ４Ｏ５Ｓ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ３９３．１２０３，ｆｏｕｎｄ  ３９３．１２０１。
【０１１１】
（実施例６）ＳＤ８２の合成
図５に示すスキームに沿って、Ｎ‐［２‐（４‐ニトロベンジル）スルファニルアセチル］‐Ｎ’‐（２‐スルファニルアセチル）エチレンジアミン（ＳＤ８２）を合成した。
【０１１２】
［ステップａ］ｔｅｒｔ‐ブチル  Ｎ‐｛［２‐（２‐トリチルスルファニルアセチル）アミノ］エチル｝カルバメート（化合物２８）の合成
実施例４に示す方法で合成した化合物１７（４１８ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ）、及び、実施例５に示す方法で合成した化合物２３（２００ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（５ｍＬ）に溶解し、１‐エチル‐３‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（２６８ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）、１‐ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（２１４ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）、及び、ジイソプロピルエチルアミン（４８８μＬ、２．８ｍｍｏｌ）存在下、室温で１７時間反応させた。溶媒を減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶解後、有機層を１０％（ｖ／ｖ）クエン酸水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。有機層をろ過し、ろ液を減圧濃縮後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製（ヘキサン／酢酸エチル）し、化合物２８（０．５２３ｇ、収率８８％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．４３−７．４０（ｍ，６Ｈ），７．３１−７．２７（ｍ，６Ｈ），７．２５−７．２０（ｍ，３Ｈ），６．３６（ｂｓ，１Ｈ），４．７７（ｂｓ，１Ｈ），３．１１（ｓ，２Ｈ），３．０６−３．０４（ｍ，４Ｈ），１．４１（ｓ，９Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６８．８，１５６．２，１４３．９，１２９．４，１２８．１，１２７．０，７９．４，６７．８，４０．２，４０．１，３５．８，２８．３。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ２８Ｈ３２Ｎ２Ｏ３ＳＮａ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ４９９．２０２６，ｆｏｕｎｄ  ４９９．２０２７。
【０１１３】
［ステップｂ］Ｎ‐［２‐（２‐トリチルスルファニルアセチル）アミノ］エチルアミン（化合物２９）の合成
化合物２８（１００ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸／ジクロロメタン／水（４９．５：４９．５：１（体積比））の混合溶液（１０ｍＬ）に溶解し、室温で２時間反応させた。溶媒を減圧留去し、化合物２９を得た。化合物２９は精製せずに次の反応（ステップｄ）に全量使用した。
【０１１４】
［ステップｃ］２‐（４‐ニトロベンジル）スルファニル酢酸（化合物３０）の合成
２‐メルカプト酢酸（３４７μＬ、５ｍｍｏｌ）と４‐ニトロベンジルブロマイド（５４０ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）をメタノール（５０ｍＬ）に溶解し、炭酸ナトリウム（５３０ｍｇ、５ｍｍｏｌ）存在下、２５時間加熱還流した。塩酸（６ｍｏｌ／Ｌ）を加え、ｐＨを２に調整し、メタノールを減圧留去した。得られた水溶液をクロロホルムで抽出し、有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶液をろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール）で精製し、化合物３０（２０１．６ｍｇ、収率３５％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２０（ｔｄ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．５４（ｔｄ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），３．９４（ｓ，２Ｈ），３．１０（ｓ，  ２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７６．０，１４７．３，１４４．７，１３０．１，１２３．９，６４．０，３５．７，３２．０。
【０１１５】
［ステップｄ］Ｎ‐［２‐（４‐ニトロベンジル）スルファニルアセチル］‐Ｎ’‐（２‐トリチルスルファニルアセチル）エチレンジアミン（化合物３１）の合成
ステップｂで得られた化合物２９及び、化合物３０（６８．２ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（３ｍＬ）に溶解し、１‐エチル‐３‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（５７．５ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、１‐ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（４５．９ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、及び、ジイソプロピルエチルアミン（１５７μＬ、０．９ｍｍｏｌ）存在下、室温で２４時間反応させた。溶媒を減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶解した後、有機層を１０％（ｖ／ｖ）クエン酸水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶液をろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール）で精製し、化合物３１（８２ｍｇ、化合物２８からの２段階収率６７％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．１５（ｔｄ，Ｊ＝８．７，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．４７（ｔｄ，Ｊ＝８．７，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．４２−７．３９（ｍ，６Ｈ），７．３２−７．２７（ｍ，６Ｈ），７．２５−７．２１（ｍ，３Ｈ），６．９８（ｂｔ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，１Ｈ），６．３０（ｂｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），３．７７（ｓ，２Ｈ），３．２１−３．１７（ｍ，２Ｈ），３．１４（ｓ，２Ｈ），３．１１−３．０７（ｍ，２Ｈ），３．００（ｓ，２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６９．６，１６８．９，１４７．１，１４４．９，１４３．８，１３０．０，１２９．４，１２８．２，１２７．１，１２３．８，６７．９，４０．５，３９．４，３６．０，３５．７，３４．７。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ３２Ｈ３１Ｎ３Ｏ４Ｓ２Ｎａ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ６０８．１６４８，ｆｏｕｎｄ  ６０８．１６４９。
【０１１６】
［ステップｅ］ＳＤ８２の合成
化合物３１（５０ｍｇ、０．０８５４ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸／水／トリイソプロピルシラン（９５：２．５：２．５）の混合溶液（５ｍＬ）に溶解し、室温で５時間反応させた。溶媒を減圧留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール）で精製し、ＳＤ８２（２３．１ｍｇ、収率７９％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．１９（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．６４（ｂｓ，１Ｈ），７．５９（ｂｓ，１Ｈ），７．５３（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），３．８７（ｓ，２Ｈ），３．３９−３．３４（ｍ，４Ｈ），３．２０（ｓ，２Ｈ），３．０７（ｓ，  ２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７１．５，１７０．３，１４７．０，１４５．０，１２９．９，１２３．７，３９．５，３９．４，３５．８，３４．４，２７．８。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ１３Ｈ１７Ｎ３Ｏ４Ｓ２Ｎａ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ３６６．０５５３，ｆｏｕｎｄ  ３６６．０５４６。
【０１１７】
（実施例７）ＳＤ８６の合成
図６に示すスキームに沿って、Ｎ‐｛２‐（４‐ニトロベンジル）スルファニルエチル｝‐２‐（２‐スルファニルアセチルアミノ）アセタミド（ＳＤ８６）を合成した。
【０１１８】
［ステップａ］２‐アミノエチル  ４‐ニトロベンジル  スルフィド（化合物３２）の合成
３５℃に加温した水（９ｍＬ）に水酸化リチウム一水和物（０．７５５ｇ、１８ｍｍｏｌ）に溶解し、エタノール（２７ｍＬ）を加えた後、２‐アミノエタンチオール塩酸塩（化合物５）を懸濁し、同温度で４５分間反応させた。エタノールを減圧留去し、得られた水溶液に水を加え、クロロホルムで抽出し、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥した。有機層をろ過後、ろ液を減圧濃縮した後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール）で精製し、化合物３２（１．７２ｇ、収率９２％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．１７（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．５１（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），３．８０（ｓ，２Ｈ），  ２．８６（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），２．５５（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １４６．６，１４６．１，１２９．３，１２３．４，４０．５，３５．２，３５．１。
【０１１９】
［ステップｂ］Ｎ‐｛２‐（４‐ニトロベンジル）スルファニルエチル｝‐２‐（ｔｅｒｔ‐ブトキシカルボニルアミノ）アセタミド（化合物３３）の合成
化合物３２（４２４．５ｍｇ、２ｍｍｏｌ）、及び、Ｎ‐（ｔｅｒｔ‐ブトキシカルボニル）グリシン（３６７．９ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶解し、１‐エチル‐３‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（４０２．６ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）、１‐ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（３２１．６ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）、及び、ジイソプロピルエチルアミン（７３２μＬ、４．２ｍｍｏｌ）存在下、室温で２．５時間反応させた。溶媒を減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶解した後、有機層を１０％（ｖ／ｖ）クエン酸水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶液をろ過し、ろ液を減圧濃縮した後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）で精製し、化合物３３（６２７ｍｇ、収率８５％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．１９（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．５１（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），６．５３（ｂｓ，１Ｈ），５．１６（ｂｓ，１Ｈ），３．８０（ｓ，２Ｈ），３．７８（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），３．４４（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．５６（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６９．７，１５６．１，１４７．１，１４５．８，１２９．７，１２３．８，８０．５，４４．５，３８．１，３５．２，３１．０，２８．３。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ１６Ｈ２３Ｎ３Ｏ５ＳＮａ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ３９２．１２５１，ｆｏｕｎｄ  ３９２．１２４８。
【０１２０】
［ステップｃ］Ｎ‐｛２‐（４‐ニトロベンジル）スルファニルエチル｝‐２‐アミノアセタミド（化合物３４）の合成
化合物３３（１００ｍｇ、０．２７１ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸／ジクロロメタン／水（４９．５：４９．５：１（体積比））の混合溶液（１０ｍＬ）に溶解し、室温で１時間反応させた。溶媒を減圧留去し、化合物３４を得た。化合物３４は精製せずに次の反応（ステップｄ）に全量使用した。
【０１２１】
［ステップｄ］Ｎ‐｛２‐（４‐ニトロベンジル）スルファニルエチル｝‐２‐（２‐トリチルスルファニルアセチル）アミノアセタミド（化合物３５）の合成
ステップｃで得られた化合物３４、及び、実施例４に示す方法で合成した化合物１７（１００ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（３ｍＬ）に溶解し、１‐エチル‐３‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（５７．５ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、１‐ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（４５．９ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、及び、ジイソプロピルエチルアミン（１５７μＬ、０．９ｍｍｏｌ）存在下、室温で終夜反応させた。溶媒を減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶解した後、有機層を１０％（ｖ／ｖ）クエン酸水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶液をろ過し、ろ液を減圧濃縮した後、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール）で精製し、化合物３５（１００ｍｇ、化合物３３からの２段階収率６３％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６‐アセトン）：δ  ８．１６（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．６３（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），  ７．４３−７．４０（ｍ，７Ｈ），７．３７（ｔ，Ｊ＝５．４，１Ｈ），７．３４−７．２９（ｍ，６Ｈ），７．２４（ｔｔ，Ｊ＝７．２，１．３Ｈｚ，３Ｈ），３．８９（ｓ，２Ｈ），３．６９（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ），３．３６（ｔｄ，Ｊ＝７．５，６．３Ｈｚ，２Ｈ），３．０１（ｓ，２Ｈ），２．５３（ｄｄ，Ｊ＝７．５，６．３Ｈｚ，２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ｄ６‐アセトン）：δ  １６９．４，１６８．７，１４７．９，１４７．７，１４５．２，１３０．９，１３０．３，１２８．８，１２７．７，１２４．３，６７．７，４３．６，３９．３，３６．８，３５．３，３１．３。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ３２Ｈ３１Ｎ３Ｏ４Ｓ２Ｎａ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ６０８．１６４８，ｆｏｕｎｄ  ６０８．１６４７。
【０１２２】
［ステップｅ］ＳＤ８６の合成
化合物３５（５０ｍｇ、０．０８５４ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸／水／トリイソプロピルシラン（９５：２．５：２．５（体積比））の混合溶液（５ｍＬ）に溶解し、室温で５時間反応させた。溶媒を減圧留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール）で精製し、ＳＤ８６（２６．９ｍｇ、収率９２％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．１９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．７５（ｂｓ，１Ｈ），７．５３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４０（ｂｓ，１Ｈ），３．８７（ｓ，２Ｈ），３．８２（ｓ，２Ｈ），３．４３−３．３９（ｍ，２Ｈ），３．２５（ｓ，２Ｈ），２．５６（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７１．０，１６９．１，１４７．０，１４６．０，１２９．７，１２３．８，４３．０，３８．４，３５．１，３０．７，２７．７。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ１３Ｈ１７Ｎ３Ｏ４Ｓ２Ｎａ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ３６６．０５５３，ｆｏｕｎｄ  ３６６．０５４２。
【０１２３】
（実施例８）ＳＤ９０の合成
図７に示すスキームに沿って、Ｎ‐［２‐（４‐ニトロベンジル）スルファニルエチル］‐２‐［Ｎ’‐（２‐スルファニルエチル）アミノ］アセタミド（ＳＤ９０）を合成した。
【０１２４】
［ステップａ］Ｎ‐［２‐（４‐ニトロベンジル）スルファニルエチル］‐２‐ブロモアセタミド（化合物３６）の合成
実施例７の方法で合成した化合物３２（５００ｍｇ、２．３６ｍｍｏｌ）とジイソプロピルエチルアミン（８２２μＬ、４．７２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、０℃下、ブロモアセチルブロマイド（２５６μＬ、ｍｍｏｌ）を加え、同温度で１時間反応させた。塩酸（１．２ｍｏｌ／Ｌ）を加え、クロロホルムで抽出し、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した後に硫酸ナトリウムで乾燥した。溶液をろ過後、ろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、化合物３６（３５０ｍｇ、収率４５％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．１９（ｔｄ，Ｊ＝８．６，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．５２（ｔｄ，Ｊ＝８．６，２．２Ｈｚ，２Ｈ），６．８２（ｂｓ，１Ｈ），３．８８（ｓ，２Ｈ），３．８２（ｓ，２Ｈ），３．４６（ｑ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．６０（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６５．５，１４７．１，１４５．７，１２９．７，１２３．９，３８．７，３５．３，３０．８，２９．０。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ１１Ｈ１４Ｎ２Ｏ３ＳＢｒ［Ｍ＋Ｈ］＋  ３３２．９９０３，ｆｏｕｎｄ  ３３２．９９０１。
【０１２５】
［ステップｂ］Ｎ‐［２‐（４‐ニトロベンジル）スルファニルエチル］‐２‐［Ｎ’‐（２‐ニトロベンゼンスルホニル）‐Ｎ’‐（２‐トリチルスルファニルエチル）アミノ］アセタミド（化合物３７）の合成
化合物３６（１００ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、及び、実施例５で合成した化合物２０（１２１．１ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２ｍＬ）に溶解し、炭酸セシウム（２９３．２ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）、及び、テトラブチルアンモニウムヨージド（２２．２ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）存在下、７０℃で１．５時間反応させた。反応液に飽和塩化ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出し、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥した。溶液をろ過後、ろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、化合物３７（１３９ｍｇ、収率７７％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．１５（ｔｄ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．９１（ｄｄ，Ｊ＝７．６，１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．６９−７．５８（ｍ，３Ｈ），７．４７（ｔｄ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．３６−７．３３（ｍ，６Ｈ），７．２８−７．２３（ｍ，６Ｈ），７．２１−７．７．１７（ｍ，３Ｈ），６．５５（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），３．７３（ｓ，２Ｈ），３．６８（ｓ，２Ｈ），３．２８（ｑ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．０６−３．０３（ｍ，２Ｈ），２．５１−２．４８（ｍ，２Ｈ），２．４０（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６７．５，１４７．８，１４７．０，１４５．７，１４４．２，１３４．１，１３２．０，１３１．９，１３１．２，１２９．７，１２９．４，１２７．９，１２６．８，１２４．３，１２３．８，６７．２，５０．８，４９．１，３８．０，３５．１，３０．８，３０．３。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ３８Ｈ３６Ｎ４Ｏ７Ｓ３Ｎａ［Ｍ＋Ｎａ］＋  ７７９．１６３８，ｆｏｕｎｄ  ７７９．１６４５。
【０１２６】
［ステップｃ］ＳＤ９０の合成
化合物３７（６０．３ｍｇ、０．０７９７ｍｍｏｌ）、及び、チオグリコール酸（３３μＬ、０．４７８ｍｍｏｌ）を、水酸化リチウム（３６．８ｍｇ、０．８７７ｍｍｏｌ）存在下、室温で１時間反応させた。溶媒を減圧留去し、残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶液をろ過後、ろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）で精製し目的の脱ノシル体（２０ｍｇ、収率４４％）を得た。得られたノシル体（２０ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸／エタンジチオール／水／トリイソプロピルシラン（９４：２．５：２．５：１（体積比））の混合溶液（５ｍＬ）に溶解し、室温で３時間反応させた。溶媒を減圧留去し、４℃に冷却したジエチルエーテルを加え、結晶化させ、得られた結晶を乾燥することで、ＳＤ９０（６．６ｍｇ、収率４３％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲ並びに質量分析により構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ９．００（ｂｓ，２Ｈ），８．６５（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ），８．２０（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．６３（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），３．９２（ｓ，２Ｈ），３．７５（ｓ，２Ｈ），３．３１（ｑ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），３．１１（ｄｄ，Ｊ＝８．９，６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．８３（ｂｓ，１Ｈ），２．７３（ｂｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），２．５２−２．４８（ｍ，２Ｈ）。
１３Ｃ‐ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６５．２，１４７．２，１４６．５，１３０．３，１２３．７，４９．５，４７．６，３８．４，３４．１，３０．１，１９．７。
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ  ｆｏｒ  Ｃ１３Ｈ１９Ｎ３Ｏ３ＮａＳ２［Ｍ＋Ｎａ］＋  ３５２．０７６６，Ｆｏｕｎｄ：３５２．０７７５。
【０１２７】
（実施例９）９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸の合成
過テクネチウム酸イオンとグルコヘプトン酸ナトリウムとを反応させて、９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸を得るため、反応の条件の検討を行った。
グルコヘプトン酸の生理食塩水溶液（１００μＬ、４０ｍｇ／０．５ｍＬ）と、表１に示す量の塩化第一スズの２ｍｏｌ／Ｌ塩酸溶液（２ｍｇ／１ｍＬ）とを混合し、５分間室温でインキュベーションした後、過テクネチウム酸イオンの生理食塩水溶液（４００μＬ，９０〜２０ＭＢｑ／２ｍＬ）を加え、さらに５分間室温でインキュベーションした。
反応溶液をＨＰＬＣにインジェクションし、過テクネチウム酸イオン、及び、９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸のピークの面積値を調べた。
＜ＨＰＬＣ条件＞
カラム：Ｃ１８カラム（ＣＯＳＭＯＳＩＬ（登録商標）Ｃ１８−ＭＳ−ＩＩ、４．６×１５０ｍｍ、ナカライテスク製）
検出器：ＲＩ（γ  ＳＵＲＶＥＹ  ＭＥＴＥＲ  ＴＣＳ-１７２、ＡＬＯＫＡ製）
移動相：アセトニトリル／１０ｍｍｏｌ／Ｌ酢酸アンモニウム（ｐＨ７）＝５／９５
９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸の保持時間：１．７分
過テクネチウム酸イオンの保持時間：２．７分
【０１２８】
【表１】
2015063503.tif 000013
【０１２９】
結果を表１に示す。塩化第一スズの塩酸溶液を使用することで、定量的に９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸を合成できることが示された。
【０１３０】
（実施例１０）９９ｍＴｃ‐ＳＤ５９の合成検討
実施例１で合成したＳＤ５９のＴｃ‐９９ｍ標識反応の条件を検討した。
ＳＤ５９の５０体積％アセトニトリル水溶液（１ｍｇ／２０μＬ）に、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた後、実施例９の実験番号１の条件で得られた９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸溶液（１０ＭＢｑ、２００μＬ）を加え、加熱しながら反応させた。反応溶液をＨＰＬＣにインジェクションし、下記ＨＰＬＣ条件で９９ｍＴｃ‐ＳＤ５９のピークを分取し、減圧下濃縮して、９９ｍＴｃ‐ＳＤ５９を得た。得られたＨＰＬＣのクロマトグラムにおける９９ｍＴｃ‐ＳＤ５９のピーク面積値から９９ｍＴｃ標識率を求めた。
＜ＨＰＬＣ条件＞
カラム：Ｃ１８カラム（ＣＯＳＭＯＳＩＬ（登録商標）Ｃ１８−ＭＳ−ＩＩ、４．６×１５０ｍｍ、ナカライテスク社製）
検出器：ＲＩ（γ  ＳＵＲＶＥＹ  ＭＥＴＥＲ  ＴＣＳ-１７２、メーカー：ＡＬＯＫＡ）
移動相：アセトニトリル／１０ｍｍｏｌ／Ｌ酢酸アンモニウム（ｐＨ７）＝５／９５（０−２分）、５／９５−９５／５（リニアグラジエント、２−１７分）、９５／５（１７−２２分）
９９ｍＴｃ‐ＳＤ５９の保持時間：１４．５分
【０１３１】
【表２】
2015063503.tif 000014
【０１３２】
反応条件、及び、９９ｍＴｃ標識率結果を表２に示す。ＳＤ５９の５０体積％アセトニトリル水溶液（１ｍｇ／２０μＬ）を４μＬ、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液を１００μＬ使用し、６０℃で１０分反応させた、実験番号５の条件が最も９９ｍＴｃ標識率が高かった。そこで、以後の実験では、実験番号５の条件で合成した９９ｍＴｃ‐ＳＤ５９を用いた。
【０１３３】
（実施例１１）９９ｍＴｃ‐ＳＤ６０の合成
実施例２で合成したＳＤ６０のＴｃ‐９９ｍ標識反応は、実施例１０の実験番号５で行ったＳＤ５９のＴｃ‐９９ｍ標識反応と同様に行った。すなわち、ＳＤ６０の５０体積％アセトニトリル水溶液（１０μＬ、５ｍｇ／２００μＬ）に、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液（２０μＬ）を加えた後、実施例９の実験番号１の条件で得られた９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸溶液（５２．７ＭＢｑ、２３０μＬ）を加え、室温で７０分間反応させた。反応溶液をＨＰＬＣにインジェクションし、下記ＨＰＬＣ条件で９９ｍＴｃ‐ＳＤ６０のピークを分取し、減圧下濃縮して、９９ｍＴｃ‐ＳＤ６０を得た。得られたＨＰＬＣのクロマトグラムにおける９９ｍＴｃ‐ＳＤ６０のピーク面積値から９９ｍＴｃ標識率を求めた。その結果、９９ｍＴｃ標識率９０％で、９９ｍＴｃ‐ＳＤ６０が得られた。
＜ＨＰＬＣ条件＞
カラム：Ｃ１８カラム（ＣＯＳＭＯＳＩＬ（登録商標）Ｃ１８−ＭＳ−ＩＩ、４．６×１５０ｍｍ、ナカライテスク製）
検出器：ＲＩ（γ  ＳＵＲＶＥＹ  ＭＥＴＥＲ  ＴＣＳ-１７２、ＡＬＯＫＡ製）
移動相：アセトニトリル／１０ｍｍｏｌ／Ｌ酢酸アンモニウム（ｐＨ７）＝５／９５−９５／５（リニアグラジエント、０−１５分）
９９ｍＴｃ‐ＳＤ６０の保持時間：１２．９分
【０１３４】
（実施例１２）９９ｍＴｃ‐ＳＤ６１の合成
実施例３で合成したＳＤ６１のＴｃ‐９９ｍ標識反応は、以下の通りに行った。
ＳＤ６１の６７体積％アセトニトリル水溶液（１０μＬ、１ｍｇ／２０μＬ）に、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液（１００μＬ）を加えた後、実施例９の実験番号１の条件で得られた９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸溶液（１０ＭＢｑ、２００μＬ）を加え、６０℃で１０分間反応させた。反応溶液をＨＰＬＣにインジェクションし、下記ＨＰＬＣ条件で９９ｍＴｃ‐ＳＤ６１のピークを分取し、減圧下濃縮して、９９ｍＴｃ‐ＳＤ６１を得た。得られたＨＰＬＣのクロマトグラムにおける９９ｍＴｃ‐ＳＤ６１のピーク面積値から９９ｍＴｃ標識率を求めた。その結果、９９ｍＴｃ標識率９９％で、９９ｍＴｃ‐ＳＤ６１が得られた。
＜ＨＰＬＣ条件＞
カラム：Ｃ１８カラム（ＣＯＳＭＯＳＩＬ（登録商標）Ｃ１８−ＭＳ−ＩＩ、４．６×１５０ｍｍ、ナカライテスク製）
検出器：ＲＩ（γ  ＳＵＲＶＥＹ  ＭＥＴＥＲ  ＴＣＳ-１７２、ＡＬＯＫＡ製）
移動相：アセトニトリル／１０ｍｍｏｌ／Ｌ酢酸アンモニウム（ｐＨ７）＝５／９５（０−２分）、５／９５−９５／５（リニアグラジエント、２−１７分）、９５／５（１７−２２分）
９９ｍＴｃ‐ＳＤ６１の保持時間：１１．４分
【０１３５】
（実施例１３）９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０の合成検討
実施例４で合成したＳＤ７０のＴｃ‐９９ｍ標識反応の条件を検討した。
ＳＤ７０の７５体積％アセトニトリル水溶液（２０μＬ、１ｍｇ／１００μＬ）に、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液（１００μＬ）を加えた後、実施例９の実験番号１の条件で得られた９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸溶液（１０ＭＢｑ、２００μＬ）を加え、加熱しながら反応させた。反応溶液をＨＰＬＣにインジェクションし、下記ＨＰＬＣ条件で９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０のピークを分取し、減圧下濃縮して、９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０を得た。得られたＨＰＬＣのクロマトグラムにおける９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０のピーク面積値から９９ｍＴｃ標識率を求めた。
＜ＨＰＬＣ条件＞
カラム：Ｃ１８カラム（ＣＯＳＭＯＳＩＬ（登録商標）Ｃ１８−ＭＳ−ＩＩ、４．６×１５０ｍｍ、ナカライテスク製）
検出器：ＲＩ（γ  ＳＵＲＶＥＹ  ＭＥＴＥＲ  ＴＣＳ-１７２、ＡＬＯＫＡ製）
移動相：アセトニトリル／１０ｍｍｏｌ／Ｌ酢酸アンモニウム（ｐＨ７）＝５／９５（０−２分）、５／９５−９５／５（リニアグラジエント、２−１７分）、９５／５（１７−２２分）
９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０の保持時間：１３．５分
【０１３６】
【表３】
2015063503.tif 000015
【０１３７】
反応条件、及び、９９ｍＴｃ標識率結果を表３に示す。６０℃で１０分反応させた、実験番号３の条件が最も９９ｍＴｃ標識率が高かった。そこで、以後の実験では、実験番号３の条件で合成した９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０を用いた。
【０１３８】
（実施例１４）９９ｍＴｃ‐ＳＤ７８の合成検討
実施例５で合成したＳＤ７８のＴｃ‐９９ｍ標識反応の条件を検討した。
ＳＤ７８の７５体積％アセトニトリル水溶液（１ｍｇ／１００μＬ）に、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液、及び、りん酸トリス（２−クロロエチル）（ＴＣＥＰ）の生理食塩水溶液（２ｍｇ／１ｍＬ）を加えた後、実施例９の実験番号１の条件で得られた９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸溶液（１０ＭＢｑ、２００μＬ）を加え、表４に示す条件下で反応させた。反応溶液をＨＰＬＣにインジェクションし、下記ＨＰＬＣ条件で９９ｍＴｃ‐ＳＤ７８のピークを分取し、減圧下濃縮して、９９ｍＴｃ‐ＳＤ７８を得た。得られたＨＰＬＣのクロマトグラムにおける９９ｍＴｃ‐ＳＤ７８のピーク面積値から９９ｍＴｃ標識率を求めた。
＜ＨＰＬＣ条件＞
カラム：Ｃ１８カラム（ＣＯＳＭＯＳＩＬ（登録商標）Ｃ１８−ＭＳ−ＩＩ、４．６×１５０ｍｍ、ナカライテスク製）
検出器：ＲＩ（γ  ＳＵＲＶＥＹ  ＭＥＴＥＲ  ＴＣＳ-１７２、ＡＬＯＫＡ製）
移動相：アセトニトリル／１０ｍｍｏｌ／Ｌ酢酸アンモニウム（ｐＨ７）＝５／９５（０−２分）、５／９５−９５／５（リニアグラジエント、２−１７分）、９５／５（１７−２２分）
９９ｍＴｃ‐ＳＤ７８の保持時間：１２．５分
【０１３９】
【表４】
2015063503.tif 000016
【０１４０】
反応条件、及び、９９ｍＴｃ標識率結果を表４に示す。実験番号５のみ、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液に変えて、リン酸緩衝液（ｐＨ＝１２）を使用した。ＳＤ７８の７５体積％アセトニトリル水溶液（１ｍｇ／１００μＬ）を２０μＬ、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液を１００μＬを使用し、トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩の生理食塩水溶液（２ｍｇ／１ｍＬ）を加えずに、９５℃で５分反応させた、実験番号６の条件が最も９９ｍＴｃ標識率が高かった。そこで、以後の実験では、実験番号６の条件で合成した９９ｍＴｃ‐ＳＤ７８を用いた。
【０１４１】
（実施例１５）９９ｍＴｃ‐ＳＤ８２の合成検討
実施例６で合成したＳＤ８２のＴｃ‐９９ｍ標識反応の条件を検討した。
ＳＤ８２の７５体積％アセトニトリル水溶液（１ｍｇ／１００μＬ）に、アセトニトリル（１００μＬ）、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液（１００μＬ）、及び、りん酸トリス（２−クロロエチル）（ＴＣＥＰ）の生理食塩水溶液（２ｍｇ／１ｍＬ）を加えた後、実施例９の実験番号１の条件で得られた９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸溶液を加え、表５に示す条件下で反応させた。反応溶液をＨＰＬＣにインジェクションし、下記ＨＰＬＣ条件で９９ｍＴｃ‐ＳＤ８２のピークを分取し、減圧下濃縮して、９９ｍＴｃ‐ＳＤ８２を得た。得られたＨＰＬＣのクロマトグラムにおける９９ｍＴｃ‐ＳＤ８２のピーク面積値から９９ｍＴｃ標識率を求めた。
＜ＨＰＬＣ条件＞
カラム：Ｃ１８カラム（ＣＯＳＭＯＳＩＬ（登録商標）Ｃ１８−ＭＳ−ＩＩ、４．６×１５０ｍｍ、ナカライテスク製）
検出器：ＲＩ（γ  ＳＵＲＶＥＹ  ＭＥＴＥＲ  ＴＣＳ-１７２、ＡＬＯＫＡ製）
移動相：アセトニトリル／１０ｍｍｏｌ／Ｌ酢酸アンモニウム（ｐＨ７）＝５／９５（０−２分）、５／９５−９５／５（リニアグラジエント、２−１７分）、９５／５（１７−２２分）
９９ｍＴｃ‐ＳＤ８２の保持時間：１５．６分
【０１４２】
【表５】
2015063503.tif 000017
【０１４３】
反応条件、及び、９９ｍＴｃ標識率結果を表５に示す。実験番号５のみ、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液に変えて、同量の水酸化ナトリウム水溶液（ｐＨ１２）を使用した。９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸を２００μＬ（３．２ＭＢｑ）、ＳＤ８２の７５体積％アセトニトリル水溶液（１ｍｇ／１００μＬ）を２０μＬ、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液を１００μＬ、アセトニトリルを１００μＬ使用し、トリス（２‐カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩の生理食塩水溶液（２ｍｇ／１ｍＬ）を加えずに、９５℃で５分反応させた、実験番号３の条件が最も９９ｍＴｃ標識率が高かった。そこで、以後の実験では、実験番号３の条件で合成した９９ｍＴｃ‐ＳＤ８２を用いた。
【０１４４】
（実施例１６）９９ｍＴｃ‐ＳＤ８６の合成検討
実施例７で合成したＳＤ８６のＴｃ‐９９ｍ標識反応の条件を検討した。
ＳＤ８６の７５体積％アセトニトリル水溶液（１ｍｇ／１００μＬ）に、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液（１００μＬ）、及び、アセトニトリルを加えた後、実施例９の実験番号１の条件で得られた９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸溶液（３．２ＭＢｑ）を加え、９５℃で５分間反応させた。反応溶液をＨＰＬＣにインジェクションし、下記ＨＰＬＣ条件で９９ｍＴｃ‐ＳＤ８６のピークを分取し、減圧下濃縮して、９９ｍＴｃ‐ＳＤ８６を得た。得られたＨＰＬＣのクロマトグラムにおける９９ｍＴｃ‐ＳＤ８６のピーク面積値から９９ｍＴｃ標識率を求めた。
＜ＨＰＬＣ条件＞
カラム：Ｃ１８カラム（ＣＯＳＭＯＳＩＬ（登録商標）Ｃ１８−ＭＳ−ＩＩ、４．６×１５０ｍｍ、ナカライテスク製）
検出器：ＲＩ（γ  ＳＵＲＶＥＹ  ＭＥＴＥＲ  ＴＣＳ-１７２、ＡＬＯＫＡ製）
移動相：アセトニトリル／１０ｍｍｏｌ／Ｌ酢酸アンモニウム（ｐＨ７）＝５／９５（０−２分）、５／９５−９５／５（リニアグラジエント、２−１７分）、９５／５（１７−２２分）
９９ｍＴｃ‐ＳＤ８６の保持時間：１６．３分
【０１４５】
【表６】
2015063503.tif 000018
【０１４６】
反応条件、及び、９９ｍＴｃ標識率結果を表６に示す。実験番号２は、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液に変えて、同量の水酸化ナトリウム水溶液（ｐＨ１２）を使用した。９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸を２００μＬ（３．２ＭＢｑ）、ＳＤ８６の７５体積％アセトニトリル水溶液（１ｍｇ／１００μＬ）を２０μＬ、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液を１００μＬ、アセトニトリルを１００μＬ使用した、実験番号１の条件が最も９９ｍＴｃ標識率が高かった。そこで、以後の実験では、実験番号１の条件で合成した９９ｍＴｃ‐ＳＤ８６を用いた。
【０１４７】
（実施例１７）９９ｍＴｃ‐ＳＤ９０の合成検討
実施例８で合成したＳＤ９０のＴｃ‐９９ｍ標識反応の条件を検討した。
ＳＤ９０の７５体積％アセトニトリル水溶液（１ｍｇ／１００μＬ）に、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液、水酸化ナトリウム水溶液（ｐＨ１２）、及び、アセトニトリルを加えた後、実施例９の実験番号１の条件で得られた９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸溶液（３．２ＭＢｑ）を加え、加熱しながら反応させた反応溶液をＨＰＬＣにインジェクションし、下記ＨＰＬＣ条件で９９ｍＴｃ‐ＳＤ９０のピークを分取し、減圧下濃縮して、９９ｍＴｃ‐ＳＤ９０を得た。得られたＨＰＬＣのクロマトグラムにおける９９ｍＴｃ‐ＳＤ９０のピーク面積値から９９ｍＴｃ標識率を求めた。
＜ＨＰＬＣ条件＞
カラム：Ｃ１８カラム（ＣＯＳＭＯＳＩＬ（登録商標）Ｃ１８−ＭＳ−ＩＩ、４．６×１５０ｍｍ、ナカライテスク製）
検出器：ＲＩ（γ  ＳＵＲＶＥＹ  ＭＥＴＥＲ  ＴＣＳ-１７２、ＡＬＯＫＡ製）
移動相：アセトニトリル／１０ｍｍｏｌ／Ｌ酢酸アンモニウム（ｐＨ７）＝５／９５（０−２分）、５／９５−９５／５（リニアグラジエント、２−１７分）、９５／５（１７−２２分）
９９ｍＴｃ‐ＳＤ９０の保持時間：１７．７分
【０１４８】
【表７】
2015063503.tif 000019
【０１４９】
反応条件、及び、９９ｍＴｃ標識率結果を表７に示す。９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸を２００μＬ（３．２ＭＢｑ）、ＳＤ９０の７５体積％アセトニトリル水溶液（１ｍｇ／１００μＬ）を２０μＬ、水酸化ナトリウム水溶液（ｐＨ１２）を１００μＬ、アセトニトリルを１００μＬ使用し、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液を使用せずに、６０℃で１０分間反応させた、実験番号５の条件が最も９９ｍＴｃ標識率が高かった。そこで、以後の実験では、実験番号５の条件で合成した９９ｍＴｃ‐ＳＤ９０を用いた。
【０１５０】
（実施例１８）脂溶性評価
実施例１０〜１７に示す方法で合成した９９ｍＴｃ錯体の脂溶性評価を行った。
あらかじめ、オクタノール／リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ、ｐＨ７．４）（１：１、ｖ／ｖ）とを平衡化させた。次いで、実施例１０〜１７に示す方法で合成した９９ｍＴｃ錯体を加え、手で１０分程度激しく撹拌した後、遠心分離（１４０００ｇ、室温、１５分）により、オクタノール相と水相とを分離し、γカウンター（２４８０ＷＩＺＡＲＤ２、パーキンエルマー社製）にて放射能を測定し、下記数式（数１）より、オクタノール/水分配係数（ＬｏｇＰｏ／ｗ）を求めた。ｎ＝４で試験を行った結果を表８に示す。表８には、ＬｏｇＰｏ／ｗを平均値±標準偏差で示した。
【０１５１】
【数１】
2015063503.tif 000020
【０１５２】
【表８】
2015063503.tif 000021
【０１５３】
また、各９９ｍＴｃ錯体の、ＬｏｇＰｏ／ｗと、下記ＨＰＬＣ条件下における保持時間との相関関係を図８に示す。９９ｍＴｃ‐６０、及び、９９ｍＴｃ‐９０を除き、ＬｏｇＰｏ／ｗと、保持時間との間に相関関係（Ｒ２＝０．８８７９）が認められた。
＜ＨＰＬＣ条件＞
カラム：Ｃ１８カラム（ＣＡＰＣＥＬＬＰＡＫ（登録商標）ＭＧ−ＩＩ、２．０×７５ｍｍ、資生堂製）
検出器：ＲＩ（γ  ＳＵＲＶＥＹ  ＭＥＴＥＲ  ＴＣＳ-１７２、ＡＬＯＫＡ製）
移動相：アセトニトリル／１０ｍｍｏｌ／Ｌ酢酸アンモニウム（ｐＨ７）＝５／９５−９５／５（リニアグラジエント、１５分）
【０１５４】
（実施例１９）腫瘍移植マウスを用いた体内分布評価［１］
マウス腹水腫瘍細胞（ＦＭ３Ａ細胞）又はマウス扁平上皮癌細胞（ＳＣＣＶＩＩ細胞）を移植した腫瘍移植マウスを用いて、９９ｍＴｃ‐ＳＤ５９、及び、９９ｍＴｃ‐ＳＤ６０の体内分布を評価した。また、比較のため、非特許文献６に示す９９ｍＴｃ‐ＳＤ３２を用いて同様な評価を行った。
ＦＭ３Ａ細胞は、京都大学大学院薬学研究科、佐治英郎教授から供与されたものを増殖させて利用した。また、ＳＣＣＶＩＩ細胞は、京都大学粒子線生物学研究分野、増永慎一郎教授から供与されたものを増殖させて利用した。
腫瘍移植マウスは、Ｃ３Ｈ／Ｈｅマウス（日本ＳＬＣ株式会社、雌、７週齢又は１０週齢、ｎ＝３〜５）の背部皮下にＦＭ３Ａ細胞又はＳＣＣＶＩＩ細胞１×１０7個を移植して作成し、移植後２−４週後に実験に供した。
各９９ｍＴｃ錯体の５体積％ジメチルスルホキシド含有生理食塩水溶液５０−１００ｋＢｑを腫瘍移植マウスに尾静脈より投与した。９９ｍＴｃ錯体の投与１時間後に屠殺した後、各組織を摘出し重量測定を行い、さらに放射能をオートガンマカウンター（２４８０ＷＩＺＡＲＤ２、パーキンエルマー社製）で測定した。各臓器に分布した放射能は、投与した量を１００％としたときのそれぞれの臓器１ｇあたりの放射能（％ＩＤ／ｇ  ｔｉｓｓｕｅ）の平均値±標準偏差として表した。結果を表９に示す。
【０１５５】
【表９】
2015063503.tif 000022
【０１５６】
表９で示すように、９９ｍＴｃ‐ＳＤ５９、及び、９９ｍＴｃ‐ＳＤ６０の腫瘍集積量は、９９ｍＴｃ‐ＳＤ３２に比べて向上した。
【０１５７】
（実施例２０）腫瘍移植マウスを用いた体内分布評価［２］
マウス乳癌細胞（ＥＭＴ６）を用いて、９９ｍＴｃ‐ＳＤ５９、９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０、９９ｍＴｃ‐ＳＤ７８及び９９ｍＴｃ‐ＳＤ８６の体内分布を評価した。
ＥＭＴ６細胞は、ＡＴＣＣ社より購入し、増殖させて利用した。
腫瘍移植マウスは、Ｂａｌｂ／ｃマウス（日本ＳＬＣ株式会社、雌、６週齢、ｎ＝４−５）の背部皮下にＥＭＴ６細胞２×１０５個を移植して作成し、移植後２週後に実験に供した。
各９９ｍＴｃ錯体の生理食塩水溶液５０−１００ｋＢｑを腫瘍移植マウスに尾静脈より投与した。９９ｍＴｃ錯体の投与１時間又は３時間後に屠殺した後、各組織を摘出し重量測定を行い、さらに放射能をオートガンマカウンター（２４８０ＷＩＺＡＲＤ２、パーキンエルマー社製）で測定した。各臓器に分布した放射能は、投与した量を１００％としたときのそれぞれの臓器１ｇあたりの放射能（％ＩＤ／ｇ  ｔｉｓｓｕｅ）の平均値±標準偏差として表した。結果を表１０〜１３に示す。
【０１５８】
【表１０】
2015063503.tif 000023
【０１５９】
【表１１】
2015063503.tif 000024
【０１６０】
【表１２】
2015063503.tif 000025
【０１６１】
【表１３】
2015063503.tif 000026
【０１６２】
表１０〜１３で示すように、９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０、９９ｍＴｃ‐ＳＤ７８及び９９ｍＴｃ‐ＳＤ８６の腫瘍集積量は、９９ｍＴｃ‐ＳＤ５９に比べて向上した。図９には、９９ｍＴｃ‐ＳＤ５９、９９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０、９９ｍＴｃ‐ＳＤ７８及び９９ｍＴｃ‐ＳＤ８６の腫瘍／血液比、及び、腫瘍／筋肉比を示す。図示するように、９９ｍＴｃ‐ＳＤ５９及び９９ｍＴｃ‐ＳＤ８６の投与後３時間、並びに、９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０は、腫瘍／血液比が１以上、腫瘍／筋肉比が１０以上であり、腫瘍のイメージングの用途に、より適切な化合物であることが示唆された。
【０１６３】
（実施例２１）血清安定性試験
実施例２０で使用した９９ｍＴｃ錯体に関し、血清安定性の評価を行った。
まず、非動化していないウシ胎児血清（ＦＢＳ）に、９９ｍＴｃ‐ＳＤ５９、９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０、９９ｍＴｃ‐ＳＤ７８、若しくは、９９ｍＴｃ‐ＳＤ８６、又は実施例１５で合成した９９ｍＴｃ‐ＳＤ８２を加え、３７℃でインキュベートした。その後、ＦＢＳと同量のアセトニトリルを加え、撹拌後、４℃で１５分静置した。遠心分離（１４０００ｇ、４℃、１５分）後、上清をとり、ＨＰＬＣにて、９９ｍＴｃ錯体のピーク面積値が９５％以上であるとき「安定」と判断し、５０％未満を「不安定」と判断した。ＨＰＬＣ条件は、実施例１０、１３〜１６に示す条件を用いた。
その結果、９９ｍＴｃ‐ＳＤ５９、９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０、９９ｍＴｃ‐ＳＤ７８、９９ｍＴｃ‐ＳＤ８２及び９９ｍＴｃ‐ＳＤ８６は、いずれも「安定」と判断され、実施例２０における放射能分布は、９９ｍＴｃ錯体の分布に対応していることが裏付けられた。
【０１６４】
（実施例２２）腫瘍の大きさと９９ｍＴｃ錯体の集積率との関係評価
マウス乳癌細胞（ＥＭＴ６）を移植した腫瘍移植マウスを用い、腫瘍の大きさと、９９ｍＴｃ錯体の集積率との関係について、評価した。
実施例２０と同様な方法で、ＥＭＴ６をマウスに移植し、移植後の腫瘍細胞の増殖時間を変えて、腫瘍の大きさが異なる腫瘍移植マウスを作製した。９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０の生理食塩水溶液５０−１００ｋＢｑを腫瘍移植マウス（日を変えて、ｎ＝４ずつ）に尾静脈より投与した。ただし、一部のマウスについては、５体積％ジメチルスルホキシド含有の９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０溶液を投与した。９９ｍＴｃ錯体の投与後１５分、１時間、３時間、６時間後に屠殺した後、腫瘍を摘出し重量測定を行い、さらに放射能をオートガンマカウンター（２４８０ＷＩＺＡＲＤ２、パーキンエルマー社製）で測定した。各臓器に分布した放射能は、投与した量を１００％としたときの腫瘍１ｇあたりの放射能（％ＩＤ／ｇ）として表した。
【０１６５】
結果を図１０、１１に示す。図１０、１１には、腫瘍重量と、％ＩＤ／ｇとの相関関係が示されている。図１０（ａ）が投与後１５分の結果を示し、図１０（ｂ）が投与後１時間の結果を示し、図１１（ａ）が投与後３時間の結果を示し、図１１（ｂ）が投与後６時間の結果を示す。実験日６は、５体積％ジメチルスルホキシド含有の９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０溶液を投与したものである。図示するように、腫瘍の大きさが０．４ｇ以下の小さいものは、９９ｍＴｃ錯体の取り込みが少なかった。低酸素領域は、壊死領域辺縁部に多くみられることが知られている（Ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ  ａｎｄ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  ７８（２００６）１３８−１４５）が、一般に腫瘍体積が小さい場合には壊死領域が少ないため、それに伴い、腫瘍内低酸素領域が減少すると考えられる。従って、本実施例の結果は、実施例に係る９９ｍＴｃ錯体が低酸素領域に集積することを裏付けるものと考察された。
【０１６６】
（実施例２３）ＳＰＥＣＴ／ＣＴによる腫瘍移植マウスのイメージング
９９ｍＴｃ錯体を投与した腫瘍移植マウスをＳＰＥＣＴ／ＣＴで撮像した。
腫瘍移植マウスは、Ｂａｌｂ／ｃマウス（日本ＳＬＣ株式会社、雌、８週齢）の背部皮下に、実施例２０と同様な方法で入手したＥＭＴ６細胞２×１０５個を移植して作成し、移植後２週後に実験に供した。
９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０又は９９ｍＴｃ‐ＳＤ８６の１体積％ジメチルスルホキシド含有生理食塩水２６ＭＢｑを１５０μＬ腫瘍移植マウスに尾静脈より投与した。投与１．５時間後にピモニダゾール（コスモバイオ株式会社製）を投与し、投与２．４時間でＣＴ撮像を行い、投与２．６時間後にＳＰＥＣＴ撮像を行った。ＳＰＥＣＴ／ＣＴ装置は、Ｂｉｏｓｃａｎ社製のＮａｎｏＳＰＥＣＴ／ＣＴを用いた。
【０１６７】
図１２、１３に、９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０のＳＰＥＣＴ像とＣＴ像との重ね合わせ画像を示し、図１４に、９９ｍＴｃ‐ＳＤ８６のＳＰＥＣＴ像とＣＴ像との重ね合わせ画像を示す。図１２（ａ）がＭＩＰ（最大値投影法）画像であり、図１２（ｂ）が冠状面像であり、図１３（ａ）が矢状面画像であり、図１３（ｂ）及び図１４が長軸断面像である。図中、楕円で囲んだ領域が腫瘍である。図示するように、腫瘍部位への放射能集積が確認された。
【０１６８】
（実施例２４）９９ｍＴｃ錯体の分布と低酸素領域との一致性の確認
実施例２３のＳＰＥＣＴ撮像後、９９ｍＴｃ錯体の投与３．１時間後にマウスを屠殺して腫瘍を摘出し、液体窒素にて急速冷凍した。この冷凍腫瘍組織を５μｍ厚又は２５μｍ厚にスライスし、凍結切片を作成した。連続切片を用いて、オートラジオグラフィー、並びに、ヘマトキシリン・エオジン（ＨＥ）染色、及び、免疫染色に供した。
オートラジオグラフィーは、イメージングプレート（ＢＡＳ−ＩＩＩ、富士フィルム社製）に１２時間感光させた後、画像解析装置（ＦＬＡ−７０００、富士フィルム社製）にて画像化及び解析を行った。
ヘマトキシリン・エオジン（ＨＥ）染色は、マイヤー・ヘマトキシリン溶液（武藤化学社製）、エオシンＹ  １％液（武藤化学社製）を用いて行った。
免疫染色は、ピモニダゾール染色により行った。抗体として、抗ピモニダゾールウサギ抗体（コスモ・バイオ社製）用い、ネガティブコントロールとして、ウサギポリクローナルＩｇＧ（ＤＡＫＯ社製）を用いた。
【０１６９】
図１５に９９ｍＴｃ‐ＳＤ７０の結果を示し、図１６に９９ｍＴｃ‐ＳＤ８６の結果を示す。図１５（ａ）が腫瘍スライスの外観を示す画像であり、図１５（ｂ）がＨＥ染色を示し、図１５（ｃ）がオートラジオグラムを示し、図１５（ｄ）がネガティブコントロールであり、図１５（ｅ）がピモニダゾールの免疫染色を示し、図１５（ｆ）が図１５（ｃ）と図１５（ｅ）との重ね合わせを示す。図１６（ａ）がＨＥ染色を示し、図１６（ｂ）がピモニダゾールの免疫染色を示し、図１６（ｃ）がオートラジオグラムを示し、図１６（ｄ）が図１６（ｂ）と図１６（ｃ）との重ね合わせを示す。
図示するように、ピモニダゾールの好染部位と、放射能集積とがある程度一致し、９９ｍＴｃ錯体が腫瘍の低酸素領域に集積することが示唆された。
【０１７０】
（実施例２５）ＳＤ１２８の合成
図１７に示すスキームに沿って、４−ニトロベンジル  ３−｛Ｎ−［２−（２−スルファニルアセタミド）エチル］グリシルアミノ｝プロパノエート（ＳＤ１２８）を合成した。
【０１７１】
［ステップａ］Ｎ−（ｔｅｒｔブトキシカルボニル）−Ｎ’−（２−ニトロベンゼンスルホニル）エチレンジアミン（化合物４２）の合成
Ｎ−（ｔｅｒｔブトキシカルボニル）エチレンジアミン（化合物４１）（１．７７７ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（４．６４ｍＬ、３３．３ｍｍｏｌ）を溶解したジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、氷冷下、２−ニトロベンゼンスルホニルクロライド（２．４５８ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で４時間、反応させた。溶媒を減圧留去後、１ｍｍｍｏｌ／Ｌ塩酸を加え、ｐＨを３にし、クロロホルムで抽出した。得られた有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液にて洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥後、有機層をろ過、得られたろ液を減圧留去し、得られた残渣をシリカゲルカラム（ヘキサン／酢酸エチル）にて精製し、化合物４２（３．４７７ｇ、収率９１％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．１３−８．０８（ｍ，１Ｈ），７．８６−７．８１（ｍ，１Ｈ），７．７８−７．７４（ｍ，２Ｈ），６．１２（ｂｓ，１Ｈ），５．２７（ｂｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），３．２９−２．２４（ｍ，４Ｈ），１．４０（ｓ，９Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １５６．２，１４７．６，１３３．６，１３３．０，１３２．７，１３０．６，１２５．０，７９．４，４３．６，４０．０，２８．１。
【０１７２】
［ステップｂ］エチル  Ｎ−（２−ｔｅｒｔブトキシカルボニルアミノエチル）−Ｎ−（２−ニトロベンゼンスルホニル）グリシナート（化合物４３）の合成
化合物４２（１７３ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（２０７ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）、ヨウ化テトラブチルアンモニウム（３７ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２ｍＬ）に懸濁し、室温下、ブロモ酢酸エチル（５５μＬ、０．５０ｍｍｏｌ）を滴下した。６０℃に昇温し、４０分間加熱後、水（５ｍＬ）を加え反応を停止した。クロロホルムで抽出後、得られた有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液にて洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後、有機層をろ過、得られたろ液を減圧留去し、得られた残渣をシリカゲルカラム（ヘキサン/酢酸エチル）にて精製し、化合物４３（０．２１５ｇ、収率９９％）を得た。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．０６−８．０４（ｍ，１Ｈ），７．７３−７．７０（ｍ，１Ｈ），７．６３−７．６１（ｍ，２Ｈ），５．１６（ｂｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），４．２１（ｓ，２Ｈ），４．１２（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．５０（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），３．３１（ｑ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），１．４２（ｓ，９Ｈ），１．２１（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６８．９，１５５．９，１４７．８，１３３．７，１３２．７，１３１．７，１３０．８，１２４．０，７９．３，６１．５，４８．６，４８．４，３８．３，２８．２，１３．８。
【０１７３】
［ステップｃ］エチル  Ｎ−［２−（２−トリチルスルファニルアセタミド）エチル］−Ｎ−（２−ニトロベンゼンスルホニル）グリシナート（化合物４４）の合成
化合物４３（１．５０ｇ、３．４８ｍｍｏｌ）を５０体積％トリフルオロ酢酸／ジクロロメタン溶液に溶解し、室温にて１５分反応させた。溶媒を減圧留去し、得られた残渣をジメチルホルムアミド（４２ｍＬ）に溶解し、トリチルチオグリコール酸（１．４０ｇ、４．１８ｍｍｏｌ）、１‐エチル‐３‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（０．８０ｇ、４．１７ｍｍｏｌ）、１‐ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（０．６４ｍｇ、４．１７ｍｍｏｌ）、及び、ジイソプロピルエチルアミン（２．１８ｍＬ、１２．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で４．５時間反応させた。溶媒を減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶解した後、有機層を１０％（ｖ／ｖ）クエン酸水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄後、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶液をろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、化合物４４（２．２３ｇ、収率９９％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．０４−８．０１（ｍ，１Ｈ），７．６９−７．７５（ｍ，２Ｈ），７．６１−７．５８（ｍ，１Ｈ），７．４２−７．４０（ｍ，６Ｈ），７．３２−７．２７（ｍ，６Ｈ），７．２５−７．２０（ｍ，３Ｈ），６．３５（ｂｔ，Ｊ＝５．７，１Ｈ），４．１１（ｓ，２Ｈ），４．０９（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．３５（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），３．１４（ｑ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），３．０４（ｓ，２Ｈ），１．２０（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６８．９，１６８．７，１４７．９，１４３．９，１３３．７，１３２．９，１３１．８，１３１．１，１２９．５，１２８．２，１２７．０，１２４．２，６７．７，６１．６，４８．７，４７．７，３７．６，３５．９，１４．０。
【０１７４】
［ステップｄ］Ｎ−［２−（２−トリチルスルファニルアセタミド）エチル］−Ｎ−（２−ニトロベンゼンスルホニル）グリシン（化合物４５）の合成
化合物４４（０．９１１ｇ、１．４１ｍｍｏｌ）をエタノール（１２．５ｍＬ）に溶解し、１０体積％水酸化ナトリウム水溶液（１２．５ｍＬ）を加え、室温で１．５時間反応させた。６ｍｏｌ／Ｌ塩酸でｐＨを１にした後、酢酸エチルを用いて抽出し、得られた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥した。溶液をろ過し、ろ液を減圧濃縮し、化合物４５（０．８５９ｇ、収率９９％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．８０（ｂｓ，１Ｈ），７．９６−７．９３（ｍ，１Ｈ），７．６１−７．５６（ｍ，２Ｈ），７．５３−７．５１（ｍ，１Ｈ），７．３９−７．３７（ｍ，６Ｈ），７．２７−７．２４（ｍ，６Ｈ），７．２０−７．１６（ｍ，３Ｈ），６．５０（ｂｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ），４．０５（ｓ，１Ｈ），３．２７（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），３．０５（ｑ，Ｊ＝３．０５Ｈｚ，２Ｈ），３．０２（ｓ，２Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７１．３，１６９．９，１４７．７，１４３．７，１３３．８，１３２．５，１３２．０，１３０．８，１２９．３，１２８．１，１２７．０，１２４．１，６７．６，４８．３，４７．３，３７．６，３５．５。
【０１７５】
［ステップｅ］４−ニトロベンジル  ３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）プロパノエート（化合物４９）の合成
３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノプロピオン酸（化合物４６）（５６８ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（６ｍＬ）に溶解し、４−ニトロベンジルアルコール（６８９ｍｇ、４．５０ｍｍｏｌ）、１‐エチル‐３‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（６３３ｍｇ、３．３０ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（７３ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、及び、トリエチルアミン（８３６μＬ、６．００ｍｍｏｌ）を加え、室温で１９時間反応させた。溶媒を減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶解した後、有機層を１０％（ｖ／ｖ）クエン酸水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶液をろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、化合物４９（０．８１２ｇ、収率８３％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２２（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．１Ｈｚ，２Ｈ），７．５３（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），５．２４（ｓ，２Ｈ），５．１１（ｂｓ，１Ｈ），３．４４（ｑ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），２．６５（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７１．８，１５５．６，１４７．５，１４２．９，１２８．２，１２３．６，７９．３，６４．７，３６．０，３４．４，２８．２。
【０１７６】
［ステップｆ］４−ニトロベンジル  ３−｛Ｎ−［２−（２−トリチルスルファニルアセタミド）エチル］−Ｎ−（２−ニトロベンゼンスルホニル）グリシルアミノ｝プロパノエート（化合物５２）の合成
化合物４９（６４．８ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸／ジクロロメタン／水（５０：５０：１（体積比））の混合溶液に溶解し、室温にて３０分反応させた。溶媒を減圧留去し、得られた残渣をジメチルホルムアミド（１ｍＬ）に溶解し、化合物４５（１３０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）、ヘキサフルオロリン酸（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリピロリジノホスホニウム（９３．２ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）、及び、ジイソプロピルエチルアミン（１０４μＬ、０．６０ｍｍｏｌ）を溶解したジメチルホルムアミド（１ｍＬ）溶液を加え、室温で１２時間反応させた。溶媒を減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶解した後、有機層を１０％（ｖ／ｖ）クエン酸水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶液をろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、化合物５２（１１７ｍｇ、収率７１％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．１９（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．１Ｈｚ，２Ｈ），８．０４−７．９９（ｍ，１Ｈ），７．７１−７．６６（ｍ，２Ｈ），７．６３−７．５８（ｍ，１Ｈ），７．４９（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．１Ｈｚ，２Ｈ），７．４１−７．３８（ｍ，６Ｈ），７．３０−７．２５（ｍ，６Ｈ），７．２３−７．１９（ｍ，３Ｈ），６．８３（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ），６．５０（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ），５．１９（ｓ，２Ｈ），３．９０（ｓ，２Ｈ），３．４８（ｑ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），３．３３（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），３．１５（ｑ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），３．０３（ｓ，２Ｈ），２．５７（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７１．６，１６８．９，１６７．９，１４７．９，１４７．７，１４３．９，１４２．８，１３４．０，１３２．１，１３２．０，１３１．３，１２９．４，１２８．５，１２８．１，１２７．０，１２４．３，１２３．８，６７．５，６５．１，５１．１，４８．８，３７．８，３５．９，３５．３，３３．６。
【０１７７】
［ステップｇ］４−ニトロベンジル  ３−｛Ｎ−［２−（２−トリチルスルファニルアセタミド）エチル］グリシルアミノ｝プロパノエート（化合物５５）の合成
化合物５２（４０．０ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解し、チオグリコール酸（２０μＬ、０．２９１ｍｍｏｌ）を加え、水酸化リチウム（２２．３ｍｇ、０．５３２ｍｍｏｌ）存在下に、室温で３０分反応させた。溶媒を減圧留去した後、残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄後、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶液をろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール）で精製し、化合物５５（２０ｍｇ、収率６４％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２１（ｄｔ，Ｊ＝８．７，２．１Ｈｚ，２Ｈ），７．４９（ｄｔ，Ｊ＝８．７，２．１Ｈｚ，２Ｈ），７．４７−７．４５（ｂｍ，１Ｈ），７．４２−７．３９（ｍ，６Ｈ），７．３１−７．２７（ｍ，６Ｈ），７．２５−７．２１（ｍ，３Ｈ），６．２５（ｂｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ），５．１９（ｓ，２Ｈ），３．５２（ｑ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ），３．１９（ｓ，２Ｈ），３．１６（ｓ，２Ｈ），３．０３（ｑ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），２．６２（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ），２．５２（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７１．８，１７１．５，１６８．５，１４７．８，１４３．９，１４２．８，１２９．４，１２８．４，１２８．２，１２７．１，１２３．８，６７．９，６５．０，５２．２，４９．１，３９．５，３５．９，３４．４，３４．０。
【０１７８】
［ステップｈ］４−ニトロベンジル  ３−｛Ｎ−［２−（２−スルファニルアセタミド）エチル］グリシルアミノ｝プロパノエート（ＳＤ１２８）の合成
化合物５５（４１ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸／ジクロロメタン／トリイソプロピルシラン（２０：２０：１）の混合溶液（２０．５ｍＬ）に溶解し、室温で１時間反応させた。溶媒を減圧留去した後に、残渣に４℃に冷却したジエチルエーテルを加え、結晶化させ、得られた結晶を乾燥することで、ＳＤ１２８（３１ｍｇ、収率９６％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．８３（ｂｓ，２Ｈ），８．６１（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），８．３５（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ），８．２５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．６５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），５．２６（ｓ，２Ｈ），３．７１（ｓ，２Ｈ），３．５２（ｓ，２Ｈ），３．４４−３．３７（ｍ，２Ｈ），３．０１（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ），２．６４（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １７１．１，１６８．８，１６５．４，１４７．３，１４４．０，１２８．７，１２３．８，６４．６，４７．９，４６．５，４２．２，３５．７，３４．９，３３．６。
【０１７９】
（実施例２６）ＳＤ１２９の合成
図１７に示すスキームに沿って、４−ニトロベンジル  ３−｛Ｎ−［２−（２−スルファニルアセタミド）エチル］グリシルアミノ｝ブタノエート（ＳＤ１２９）を合成した。
【０１８０】
［ステップｅ］４−ニトロベンジル  ３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ブタノエート（化合物５０）の合成
４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノブタン酸（化合物４７）（６１０ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（６ｍＬ）に溶解し、４−ニトロベンジルアルコール（６８９ｍｇ、４．５０ｍｍｏｌ）、１‐エチル‐３‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（６３３ｍｇ、３．３０ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（７３ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、及び、トリエチルアミン（８３６μＬ、６．００ｍｍｏｌ）を加え、室温で１９時間反応させた。溶媒を減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶解した後、有機層を１０％（ｖ／ｖ）クエン酸水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶液をろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、化合物５０（０．８３０ｇ、収率８２％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２１（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．５４（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），５．２３（ｓ，２Ｈ），４．８８（ｂｓ，１Ｈ），３．１９（ｑ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），２．４８（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ），１．９０−１．８３（ｍ，２Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７２．６，１５５．８，１４７．４，１４３．１，１２８．１，１２３．５，７８．９，６４．５，３９．６，３１．１，２８．２，２５．１。
【０１８１】
［ステップｆ］４−ニトロベンジル  ３−｛Ｎ−［２−（２−トリチルスルファニルアセタミド）エチル］−Ｎ−（２−ニトロベンゼンスルホニル）グリシルアミノ｝ブタノエート（化合物５３）の合成
化合物５０（１２３ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸／ジクロロメタン／水（５０：５０：１（体積比））の混合溶液に溶解し、室温にて２０分反応させた。溶媒を減圧留去し、得られた残渣をジメチルホルムアミド（４ｍＬ）に溶解し、実施例２５のステップａ〜ｄと同様な方法で合成した化合物４５（１８７ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）、１‐エチル‐３‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（６９ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、１‐ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（５６ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、及び、ジイソプロピルエチルアミン（１９０μＬ、１．０９ｍｍｏｌ）を加え、室温で２０時間反応させた。溶媒を減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶解した後、有機層を１０％（ｖ／ｖ）クエン酸水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄後、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶液をろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、化合物５３（１５９ｍｇ、収率６２％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．１６（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．１Ｈｚ，２Ｈ），８．０５−８．００（ｍ，１Ｈ），７．６７−７．６１（ｍ，２Ｈ），７．６０−７．５６（ｍ，１Ｈ），７．４８（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．１Ｈｚ，２Ｈ），７．４０−７．３７（ｍ，６Ｈ），７．２８−７．２４（ｍ，６Ｈ），７．２１−７．１７（ｍ，３Ｈ），６．８６（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ），６．５８（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ），５．１７（ｓ，２Ｈ），３．９４（ｓ，２Ｈ），３．３５（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），３．２４−３．１４（ｍ，４Ｈ），３．０１（ｓ，２Ｈ），２．３８（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ），１．８０−１．７３（ｍ，２Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７２．５，１６８．８，１６７．８，１４７．８，１４７．４，１４３．８，１４３．１，１３３．９，１３２．０３，１３１．９７，１３１．０，１２９．３，１２８．２，１２８．０，１２６．９，１２４．１１２３．６，６７．４，６４．７，５０．７，４８．６，３８．７，３７．６，３５．９，３１．１，２４．３。
【０１８２】
［ステップｇ］４−ニトロベンジル  ３−｛Ｎ−［２−（２−トリチルスルファニルアセタミド）エチル］グリシルアミノ｝ブタノエート（化合物５６）の合成
化合物５３（１１４ｍｇ、０．１３６ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（４ｍＬ）に溶解し、チオグリコール酸（５７μＬ、０．８１５ｍｍｏｌ）を加え、水酸化リチウム（６３ｍｇ、１．４９４ｍｍｏｌ）存在下に、室温で３０分反応させた。溶媒を減圧留去した後、残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄後、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶液をろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール）で精製し、化合物５６（６３ｍｇ、収率７０％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２０（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．５０（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．４２−７．３９（ｍ，６Ｈ），７．３１−７．２７（ｍ，６Ｈ），７．２５−７．２０（ｍ，３Ｈ），６．２９（ｂｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），５．１９（ｓ，２Ｈ），３．２６（ｑ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ），３．１９（ｓ，２Ｈ），３．１４（ｓ，２Ｈ），３．０４（ｑ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），２．５５（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），２．４１（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ），１．８７−１．８０（ｍ，２Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７２．６，１７１．５，１６８．４，１４７．６，１４３．８，１４３．１，１２９．３，１２８．３，１２８．１，１２７．０，１２３．７，６７．８，６４．７，５２．１，４９．０，３９．４，３８．１，３５．８，３１．４，２４．８。
【０１８３】
［ステップｈ］４−ニトロベンジル  ３−｛Ｎ−［２−（２−スルファニルアセタミド）エチル］グリシルアミノ｝ブタノエート（ＳＤ１２９）の合成
化合物５６（５４ｍｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸／ジクロロメタン／トリイソプロピルシラン（２０：２０：１）の混合溶液（２０．５ｍＬ）に溶解し、室温で１時間反応させた。溶媒を減圧留去した後に、残渣に４℃に冷却したジエチルエーテルを加え、結晶化させ、得られた結晶を乾燥することで、ＳＤ１２９（４０ｍｇ、収率９２％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．８５（ｂｓ，２Ｈ），８．５０（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），８．３６（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ），８．２５（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），５．２５（ｓ，２Ｈ），３．７３（ｓ，２Ｈ），３．５２（ｓ，２Ｈ），３．４１−３．３８（ｍ，２Ｈ），３．１７（ｑ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ），３．０２（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ），２．４７（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ），１．７６−１．６９（ｍ，２Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １７２．５，１６８．８，１６５．２，１４７．３，１４４．２，１２８．７，１２３．８，６４．５，４７．９，４６．５，４２．１，３８．１，３５．７，３０．８，２４．４。
【０１８４】
（実施例２７）ＳＤ１３０の合成
図１７に示すスキームに沿って、４−ニトロベンジル  ３−｛Ｎ−［２−（２−スルファニルアセタミド）エチル］グリシルアミノ｝ヘキサノエート（ＳＤ１３０）を合成した。
【０１８５】
［ステップｅ］４−ニトロベンジル  ３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ヘキサノエート（化合物５１）の合成
６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノヘキサン酸（化合物４８）（６９４ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（６ｍＬ）に溶解し、４−ニトロベンジルアルコール（６８９ｍｇ、４．５０ｍｍｏｌ）、１‐エチル‐３‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（６３３ｍｇ、３．３０ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（７３ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、及び、トリエチルアミン（８３６μＬ、６．００ｍｍｏｌ）を加え、室温で１９時間反応させた。溶媒を減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶解した後、有機層を１０％（ｖ／ｖ）クエン酸水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶液をろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、化合物５１（０．９８４ｇ、収率９０％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２３（ｄｔ，Ｊ＝８．９，２．１Ｈｚ，２Ｈ），７．５２（ｄｔ，Ｊ＝８．９，２．１Ｈｚ，２Ｈ），５．２１（ｓ，２Ｈ），４．６１（ｂｓ，１Ｈ），３．１２（ｑ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．４１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．７２−１．６５（ｍ，２Ｈ），１．５４−１．４７（ｍ，２Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ），１．４１−１．３３（ｓ，２Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７３．０，１５６．０，１４７．６，１４３．４，１２８．３，１２３．８，７９．１，６４．６，４０．３，３４．０，２９．７，２８．４，２６．２，２４．５。
【０１８６】
［ステップｆ］４−ニトロベンジル  ３−｛Ｎ−［２−（２−トリチルスルファニルアセタミド）エチル］−Ｎ−（２−ニトロベンゼンスルホニル）グリシルアミノ｝ヘキサノエート（化合物５４）の合成
化合物５１（１４７ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸／ジクロロメタン／水（５０：５０：１（体積比））の混合溶液に溶解し、室温にて２０分反応させた。溶媒を減圧留去し、得られた残渣をジメチルホルムアミド（４ｍＬ）に溶解し、実施例２５のステップａ〜ｄと同様な方法で合成した化合物４５（２０７ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）、１‐エチル‐３‐（３‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（７７ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）、１‐ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（６１ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）、及び、ジイソプロピルエチルアミン（２０９μＬ、１．２０ｍｍｏｌ）を加え、室温で２０時間反応させた。溶媒を減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶解した後、有機層を１０％（ｖ／ｖ）クエン酸水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄後、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶液をろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、化合物５４（１９２ｍｇ、収率６６％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．１８（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．１Ｈｚ，２Ｈ），８．０７−８．０２（ｍ，１Ｈ），７．６８−７．６４（ｍ，２Ｈ），７．６２−７．５７（ｍ，１Ｈ），７．４９（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．１Ｈｚ，２Ｈ），７．４１−７．３８（ｍ，６Ｈ），７．２９−７．２４（ｍ，６Ｈ），７．２２−７．１８（ｍ，３Ｈ），５．１８（ｓ，２Ｈ），  ３．９４（ｓ，２Ｈ），３．３５（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），３．１８−３．１２（ｍ，４Ｈ），３．１０（ｓ，２Ｈ），２．３７（ｔ，Ｊ＝７．４１Ｈｚ，２Ｈ），１．６５−１．５８（ｍ，２Ｈ），１．４６−１．３９（ｍ，２Ｈ），１．３２−１．２４（ｍ，２Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７２．９，１６８．７，１６７．５，１４７．７，１４７．４，１４３．８，１４３．３，１３３．９，１３２．１，１３２．０，１３１．１，１２９．３，１２８．２，１２８．０，１２６．８，１２４．１，１２３．６，６７．４，６４．５，５０．６，４８．４，３９．２，３７．５，３５．８，３３．７，２８．７，２６．０，２４．２。
【０１８７】
［ステップｇ］４−ニトロベンジル  ３−｛Ｎ−［２−（２−トリチルスルファニルアセタミド）エチル］グリシルアミノ｝ヘキサノエート（化合物５７）の合成
化合物５４（１１５ｍｇ、０．１３２ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（４ｍＬ）に溶解し、チオグリコール酸（５５μＬ、０．７９２ｍｍｏｌ）を加え、水酸化リチウム（６０ｍｇ、１．４５２ｍｍｏｌ）存在下に、室温で４０分反応させた。溶媒を減圧留去した後、残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄後、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶液をろ過し、ろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール）で精製し、化合物５７（７１ｍｇ、収率７９％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２０（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．５０（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，２Ｈ），７．４２−７．４０（ｍ，６Ｈ），７．３２−７．２７（ｍ，６Ｈ），７．２５−７．２１（ｍ，３Ｈ），７．０８（ｂｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ），６．２９（ｂｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ），５．１９（ｓ，２Ｈ），３．２０（ｑ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），３．１８（ｓ，２Ｈ），３．１４（ｓ，２Ｈ），３．０４（ｑ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），２．５５（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），２．４０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．７０−１．６２（ｍ，２Ｈ），１．５３−１．４５（ｍ，２Ｈ），１．３７−１．２９（ｍ，２Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７２．９，１７１．２，１６８．３，１４７．６，１４３．８，１４３２，１２９．３，１２８．３，１２８．１，１２７．０，１２３．７，６７．８，６４．５，５２．２，４９．０，３９．４，３８．６，３５．８，３３．８，２９．３，２６．３，２４．３。
【０１８８】
［ステップｈ］４−ニトロベンジル  ３−｛Ｎ−［２−（２−スルファニルアセタミド）エチル］グリシルアミノ｝ヘキサノエート（ＳＤ１３０）の合成
化合物５７（６２ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸／ジクロロメタン／トリイソプロピルシラン（２０：２０：１）の混合溶液（２０．５ｍＬ）に溶解し、室温で１時間反応させた。溶媒を減圧留去した後に、残渣に４℃に冷却したジエチルエーテルを加え、結晶化させ、得られた結晶を乾燥することで、ＳＤ１３０（４８ｍｇ、収率９５％）を得た。本化合物は１Ｈ‐ＮＭＲ及び１３Ｃ‐ＮＭＲにより構造を決定した。
１Ｈ‐ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．９１（ｂｓ，２Ｈ），８．４６（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），８．３９（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ），８．２４（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．１Ｈｚ，２Ｈ），７．６４（ｄｔ，Ｊ＝８．８，２．１Ｈｚ，２Ｈ），５．２４（ｓ，２Ｈ），３．７３（ｓ，２Ｈ），３．５２（ｓ，２Ｈ），３．４３−３．４０（ｍ，２Ｈ），３．１１（ｑ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ），３．０３（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ），２．４１（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ），１．６１−１．５４（ｍ，２Ｈ），１．４７−１．４０（ｍ，２Ｈ），１．３３−１．２３（ｍ，２Ｈ）。
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １７２．８，１６８．９，１６５．０，１４７．２，１４４．３，１２８．７，１２３．８，６４．４，４７．９，４６．４，４２．２，３８．６，３５．７，３３．４，２８．７，２５．９，２４．２。
【０１８９】
（実施例２８）９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸の合成
グルコヘプトン酸の生理食塩水溶液（５００μＬ、４０ｍｇ／０．５ｍＬ）と、塩化第一スズの０．０１ｍｏｌ／Ｌ塩酸溶液（２ｍｇ／１ｍＬ）２０μＬとを混合し、５分間室温でインキュベーションした後、過テクネチウム酸イオンの生理食塩水溶液（２ｍＬ，５００〜５０ＭＢｑ／２ｍＬ）を加え、さらに５分間室温でインキュベーションした。反応溶液をＨＰＬＣにインジェクションし、過テクネチウム酸イオンの消失、及び、９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸の生成を確認し、９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸が定量的に得られていることを確認した。
＜ＨＰＬＣ条件＞
カラム：Ｃ１８カラム（ＣＯＳＭＯＳＩＬ（登録商標）Ｃ１８−ＭＳ−ＩＩ、４．６×１５０ｍｍ、ナカライテスク製）
検出器：ＲＩ（γＳＵＲＶＥＹ  ＭＥＴＥＲ  ＴＣＳ-１７２、ＡＬＯＫＡ製）
移動相：アセトニトリル／１０ｍｍｏｌ／Ｌ酢酸アンモニウム（ｐＨ７）＝５／９５
９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸の保持時間：１．７分
過テクネチウム酸イオンの保持時間：２．７分
【０１９０】
（実施例２９）９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２８の合成
実施例２５で合成したＳＤ１２８のＴｃ‐９９ｍ標識反応の条件を検討した。ＳＤ１２８の５０体積％アセトニトリル水溶液（１ｍｇ／１００μＬ）に、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた後、実施例２８で得られた９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸溶液（７０−６０ＭＢｑ、４００μＬ）を加え、加熱しながら反応させた。反応溶液をＨＰＬＣにインジェクションし、下記ＨＰＬＣ条件で９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２８のピークを分取し、減圧下濃縮して、９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２８を得た。分取した９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２８のピークに含まれる放射活性をインジェクションした反応液に含まれる放射活性で除することで９９ｍＴｃ標識率を求めた。
＜ＨＰＬＣ条件＞
カラム：Ｃ１８カラム（ＣＯＳＭＯＳＩＬ（登録商標）Ｃ１８−ＭＳ−ＩＩ、４．６×１５０ｍｍ、ナカライテスク社製）
検出器：ＲＩ（γ  ＳＵＲＶＥＹ  ＭＥＴＥＲ  ＴＣＳ-１７２、メーカー：ＡＬＯＫＡ）
移動相：アセトニトリル／１０ｍｍｏｌ／Ｌ酢酸アンモニウム（ｐＨ７）＝５／９５（０−２分）、５／９５−９５／５（リニアグラジエント、２−１７分）、９５／５（１７−２２分）
９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２８の保持時間：１３．７分
【０１９１】
【表１４】
2015063503.tif 000027
【０１９２】
反応条件、及び、９９ｍＴｃ標識率結果を表１４に示す。ＳＤ１２８の５０体積％アセトニトリル水溶液（１ｍｇ／１００μＬ）を５μＬ、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液を２．５μＬ、アセトニトリルを７０μＬ使用し、９５℃で３分反応させた、実験番号４の条件が最も９９ｍＴｃ標識率が高かった。そこで、以後の実験では、実験番号４の条件で合成した９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２８を用いた。
【０１９３】
（実施例３０）９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２９の合成
実施例２６で合成したＳＤ１２９のＴｃ‐９９ｍ標識反応は、実施例２９の実験番号４で行ったＳＤ１２８のＴｃ‐９９ｍ標識反応と同様に行った。すなわち、ＳＤ１２９の５０体積％アセトニトリル水溶液（５μＬ、１ｍｇ／１００μＬ）に、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液（２．５μＬ）を加えた後、実施例２８で得られた９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸溶液（２４．７ＭＢｑ、４００μＬ）を加え、室温で３分間反応させた。反応溶液をＨＰＬＣにインジェクションし、下記ＨＰＬＣ条件で９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２９のピークを分取し、減圧下濃縮して、９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２９を得た。分取した９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２９のピークに含まれる放射活性をインジェクションした反応液に含まれる放射活性で除することで９９ｍＴｃ標識率を求めた。その結果、９９ｍＴｃ標識率４５％で９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２９が得られたことが確認された。
＜ＨＰＬＣ条件＞
カラム：Ｃ１８カラム（ＣＯＳＭＯＳＩＬ（登録商標）Ｃ１８−ＭＳ−ＩＩ、４．６×１５０ｍｍ、ナカライテスク製）
検出器：ＲＩ（γ  ＳＵＲＶＥＹ  ＭＥＴＥＲ  ＴＣＳ-１７２、ＡＬＯＫＡ製）
移動相：アセトニトリル／１０ｍｍｏｌ／Ｌ酢酸アンモニウム（ｐＨ７）＝５／９５−９５／５（リニアグラジエント、０−１５分）
９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２９の保持時間：１３．９分
【０１９４】
（実施例３１）９９ｍＴｃ‐ＳＤ１３０の合成
実施例２７で合成したＳＤ１３０のＴｃ‐９９ｍ標識反応は、実施例２９の実験番号４で行ったＳＤ１２８のＴｃ‐９９ｍ標識反応と同様に行った。すなわち、ＳＤ１３０の５０体積％アセトニトリル水溶液（５μＬ、１ｍｇ／１００μＬ）に、７質量％炭酸水素ナトリウム水溶液（２．５μＬ）を加えた後、実施例２８の条件で得られた９９ｍＴｃ‐グルコヘプトン酸溶液（１９．７ＭＢｑ、４００μＬ）を加え、室温で３分間反応させた。反応溶液をＨＰＬＣにインジェクションし、下記ＨＰＬＣ条件で９９ｍＴｃ‐ＳＤ１３０のピークを分取し、減圧下濃縮して、９９ｍＴｃ‐ＳＤ１３０を得た。分取した９９ｍＴｃ‐ＳＤ１３０のピークに含まれる放射活性をインジェクションした反応液に含まれる放射活性で除することで９９ｍＴｃ標識率を求めた。その結果、９９ｍＴｃ標識率２３％で９９ｍＴｃ‐ＳＤ１３０が得られた。
＜ＨＰＬＣ条件＞
カラム：Ｃ１８カラム（ＣＯＳＭＯＳＩＬ（登録商標）Ｃ１８−ＭＳ−ＩＩ、４．６×１５０ｍｍ、ナカライテスク製）
検出器：ＲＩ（γ  ＳＵＲＶＥＹ  ＭＥＴＥＲ  ＴＣＳ-１７２、ＡＬＯＫＡ製）
移動相：アセトニトリル／１０ｍｍｏｌ／Ｌ酢酸アンモニウム（ｐＨ７）＝５／９５−９５／５（リニアグラジエント、０−１５分）
９９ｍＴｃ‐ＳＤ１３０の保持時間：１４．６分
【０１９５】
（実施例３２）脂溶性評価
実施例２９〜３１に示す方法で合成した９９ｍＴｃ錯体の脂溶性評価を行った。あらかじめ、オクタノール／リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ、ｐＨ７．４）（１：１、ｖ／ｖ）とを平衡化させた。次いで、実施例Ｘに示す方法で合成した９９ｍＴｃ錯体を加え、手で１０分程度激しく撹拌した後、遠心分離（１４０００ｇ、室温、１５分）により、オクタノール相と水相とを分離し、γカウンター（２４８０ＷＩＺＡＲＤ２、パーキンエルマー社製）にて放射能を測定し、実施例１８で示した数式（数１）より、オクタノール/水分配係数（ＬｏｇＰｏ／ｗ）を求めた。ｎ＝４で試験を行った結果を表１５に示す。表１５には、ＬｏｇＰｏ／ｗを平均値±標準偏差で示した。
【０１９６】
【表１５】
2015063503.tif 000028
【０１９７】
（実施例３３）腫瘍移植マウスを用いた体内分布評価
マウス乳がん細胞（ＥＭＴ６）を移植した腫瘍移植マウスを用いて、実施例２９〜３１に示す方法で合成した９９ｍＴｃ−ＳＤ１２８、９９ｍＴｃ−ＳＤ１２９、及び、９９ｍＴｃ−ＳＤ１３０の体内分布を評価した。ＥＭＴ６細胞はＡＴＣＣ社（米国）から購入したものを増殖させて利用した。腫瘍移植マウスはＢａｌｂ／ｃマウス（日本ＳＬＣ株式会社、雌、６週齢、ｎ＝４〜５）の背部皮下にＥＭＴ６細胞２．５×１０５個を移植して作成し、移植後、約２週後に実験に供した。各９９ｍＴｃ錯体の生理食塩水溶液５０ｋＢｑを腫瘍移植マウスに尾静脈より投与した。９９ｍＴｃ錯体の投与１時間、及び、３時間後に屠殺した後、各組織を摘出し重量測定を行い、さらに放射能をオートガンマカウンター（２４８０ＷＩＺＡＲＤ２、パーキンエルマー社製）で測定した。各臓器に分布した放射能は、投与した量を１００％としたときのそれぞれの臓器１ｇあたりの放射能（％ＩＤ／ｇ  ｔｉｓｓｕｅ）の平均値±標準偏差として表した。結果を表１６に示す。
【０１９８】
【表１６】
2015063503.tif 000029
【０１９９】
表１６で示すように、９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２８の腫瘍集積性は１％を超えており、さらに腫瘍／血液比、及び、腫瘍／筋肉比は、投与後１時間後で２以上、腫瘍／筋肉比が１０以上である。９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２８の高い腫瘍／血液比、及び、腫瘍／筋肉比は、バックグラウンドとなる正常組織からの排泄が速やかであることを示すものであり、この性質により、投与直後からのＳＰＥＣＴ撮像が可能となる。放射活性の減衰を考慮すると、投与直後からのＳＰＥＣＴイメージングは、より高いカウントを収集することができることから、コントラストの高い画像を得ることができる。従って、腫瘍のイメージングの用途に、より適切な化合物であることが示唆された。
【０２００】
（実施例３４）血清安定性試験
実施例３３で使用した９９ｍＴｃ錯体に関し、血清安定性の評価を行った。まず、非動化していないウシ胎児血清（ＦＢＳ）に、９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２８、９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２９、９９ｍＴｃ‐ＳＤ１３０を加え、３７℃で６時間、インキュベートした。その後、ＦＢＳと同量のアセトニトリルを加え、撹拌後、４℃で１５分静置した。遠心分離（１４０００ｇ、４℃、１５分）後、上清をとり、ＨＰＬＣにて、９９ｍＴｃ錯体のピーク面積値が９５％以上であるとき「安定」と判断し、５０％未満を「不安定」と判断した。ＨＰＬＣ条件は、実施例２９〜３１に示す条件を用いた。その結果、９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２８、９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２９、及び、９９ｍＴｃ‐ＳＤ１３０は、いずれも「安定」と判断され、実施例３３における放射能分布は、９９ｍＴｃ錯体の分布に対応していることが裏付けられた。
【０２０１】
（実施例３５）ＳＰＥＣＴ／ＣＴによる腫瘍移植マウスのイメージング
９９ｍＴｃ錯体を投与した腫瘍移植マウスをＳＰＥＣＴ／ＣＴで撮像した。腫瘍移植マウスは、Ｂａｌｂ／ｃマウス（日本ＳＬＣ株式会社、雌、６週齢）の背部皮下に、実施例３３と同様な方法で入手したＥＭＴ６細胞２．５×１０５個を移植して作成し、移植後２週後に実験に供した。実施例２９に示す方法で合成した９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２８の生理食塩水２６ＭＢｑを１５０μＬ腫瘍移植マウスに尾静脈より投与した。投与３０分後にピモニダゾール（コスモバイオ株式会社製）を投与し、投与５０分でＣＴ撮像を行い、投与１時間後にＳＰＥＣＴ撮像を行った。ＳＰＥＣＴ／ＣＴ装置は、Ｂｉｏｓｃａｎ社製のＮａｎｏＳＰＥＣＴ／ＣＴを用いた。
【０２０２】
図１８に、９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２８のＳＰＥＣＴ像とＣＴ像との重ね合わせ画像を示す。図１８（ａ）がＭＩＰ（最大値投影法）画像であり、図１８（ｂ）が冠状面像であり、図１８（ｃ）が矢状面画像であり、図１８（ｄ）が長軸断面像である。図中、楕円で囲んだ領域が腫瘍である。図示するように、腫瘍部位への放射能集積が確認された。
【０２０３】
（実施例３６）９９ｍＴｃ錯体の分布と低酸素領域との一致性の確認
実施例３５のＳＰＥＣＴ撮像後、９９ｍＴｃ錯体の投与１．５時間後にマウスを屠殺して腫瘍を摘出し、−８０℃下で急速冷凍した。この冷凍腫瘍組織を７μｍ厚又は２５μｍ厚にスライスし、凍結切片を作成した。連続切片を用いて、オートラジオグラフィー、並びに、ヘマトキシリン・エオジン（ＨＥ）染色、及び、免疫染色に供した。オートラジオグラフィーは、イメージングプレート（ＢＡＳ−ＩＩＩ、富士フィルム社製）に１２時間感光させた後、画像解析装置（ＦＬＡ−７０００、富士フィルム社製）にて画像化及び解析を行った。ヘマトキシリン・エオジン（ＨＥ）染色は、マイヤー・ヘマトキシリン溶液（武藤化学社製）、エオシンＹ１％液（武藤化学製）を用いて行った。免疫染色は、ピモニダゾール染色により行った。抗体として、抗ピモニダゾールウサギ抗体（コスモ・バイオ社製）用い、ネガティブコントロールとして、ウサギポリクローナルＩｇＧ（ＤＡＫＯ社製）を用いた。
【０２０４】
図１９に９９ｍＴｃ‐ＳＤ１２８の結果を示す。図１９（ａ）が腫瘍スライスの外観を示す画像であり、図１９（ｂ）がＨＥ染色を示し、図１９（ｃ）がオートラジオグラムを示し、図１９（ｄ）がネガティブコントロールであり、図１９（ｅ）がピモニダゾールの免疫染色を示し、図１９（ｆ）が図１９（ｃ）と図１９（ｅ）との重ね合わせを示す。図示するように、ピモニダゾールの好染部位と、放射能集積とが一致し、９９ｍＴｃ錯体が腫瘍の低酸素領域に集積することが示唆された。
【０２０５】
以上、本発明の実施形態、及び、実施例について述べたが、これらは本発明の例示であり、本発明は、上記以外の様々な構成を採用することができる。
【図１】
2015063503.tif 000032
【図２】
2015063503.tif 000033
【図３】
2015063503.tif 000034
【図４】
2015063503.tif 000035
【図５】
2015063503.tif 000036
【図６】
2015063503.tif 000037
【図７】
2015063503.tif 000038
【図９】
2015063503.tif 000039
【図１０】
2015063503.tif 000040
【図１１】
2015063503.tif 000041
【図１７】
2015063503.tif 000042
【図８】
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【図１２】
2015063503.tif 000044
【図１３】
2015063503.tif 000045
【図１４】
2015063503.tif 000046
【図１５】
2015063503.tif 000047
【図１６】
2015063503.tif 000048
【図１８】
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【図１９】
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