(57)【要約】      （修正有）【課題】Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）ＮＳ３プロテアーゼ阻害剤及びその使用の提供。【解決手段】式Ｉで表される化合物又は薬学的に許容されるその塩。2015110627.tif 000241［Ｒ１及びＲ１’は独立にＨ或いは置換されたＣ１−６の脂肪族又はＲ１とＲ１’が一緒になって置換された３〜７員炭素環；Ｒ２ａは−ＯＨ又は−ＮＨＳＯ２Ｒ２；Ｒ３は−Ｌ−Ｙ（Ｌは共有結合又は二価のＣ１−８の炭化水素鎖、−ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｓ−、−Ｎ＝Ｎ−等；ＹはＨ、オキソ、ハロゲン、Ｃ１−６の脂肪族、Ｎ、Ｓ、或いはＯから選択される０−３個のヘテロ原子を有する３−１０員複素環等）］【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書に記載された発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願への相互参照）
本願は、２００７年１２月２１日に出願された米国仮特許出願第６１／０１６，１１０号、２００７年１２月２３日に出願された米国仮特許出願第６１／０１６，４７３号、２００８年６月２３日に出願された米国仮特許出願第６１／０７５，００１号、および２００８年９月１９日に出願された米国仮特許出願第６１／０９８，６７５号の利益を主張し、これらの米国仮特許出願の全体の内容は、本明細書中に参考として援用される。
【０００２】
（発明の技術分野）
本発明は、ＨＣＶプロテアーゼの阻害剤として有用な化合物に関する。本発明は、本発明の化合物を含む薬学的に許容される組成物および様々な障害の治療において前記組成物を使用する方法も提供する。
【背景技術】
【０００３】
（発明の背景）
全世界で１億７０００万を超える人がＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）に感染していると推定されている。全世界的に３％の推定ヒト血清陽性率であり、ＨＣＶは、非Ａ非Ｂ型肝炎のほとんどの場合の主原因である（非特許文献１）。患者によっては、急性肝炎の症状は治まるが、ＨＣＶ感染症の少なくとも８５％は慢性になり、感染した人の２０％は肝硬変を発症する。肝硬変の診断後４年での生存率は５０％未満である。慢性ＨＣＶ感染は肝細胞癌の発生率の増大にも関連する。
【０００４】
ＨＣＶは、そのゲノムが約３０００個のアミノ酸のポリタンパク質をコードするプラス鎖ＲＮＡウイルスである。この前駆タンパク質はプロセッシングされて、少なくとも１０のウイルスの構造および非構造のタンパク質：Ｃ、Ｅ１、Ｅ２、ｐ７、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５ＡおよびＮＳ５Ｂになる（非特許文献２）。ＨＣＶ非構造（ＮＳ）タンパク質は、ポリタンパク質のタンパク質分解的切断によって誘導され、ウイルス複製のための本質的な触媒機構を提供すると推定される。
【０００５】
ＮＳ３は、約６８Ｋｄａのタンパク質であり、Ｎ末端セリンプロテアーゼドメインとそのＣ末端でのＲＮＡ依存性ＡＴＰａｓｅドメインの両方を有している。ＮＳ４Ａタンパク質は、ＮＳ３のセリンプロテアーゼ活性の共同因子として作用することが示されている。ＮＳ３は、ＨＣＶ複製に必要な他の非構造タンパク質を放出する部位を切断するタンパク質分解酵素として機能するものであり、抗ウイルス化学療法のための実行可能な治療標的である。
【０００６】
ＨＣＶにワクチンは使用できず、確立されているインターフェロン治療による処置は、患者のわずか１５〜２０％にしか有効でなく（非特許文献３）、それには重大な副作用を伴う（非特許文献４；非特許文献５）。現在の標準的治療法である、リバビリンと併用したペグ化インターフェロンαはより有効であり、ＨＣＶ関連肝硬変に罹っている患者の肝細胞癌を減少させるようであるが（非特許文献６）、この治療法は、甲状腺機能異常などの副作用をもたらすことも分かっている（非特許文献７）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ａｌｂｅｒｔｉ、Ａ．ら、Ｊ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ３１巻、（Ｓｕｐｐｌ．１）：１７〜２４頁、１９９９年
【非特許文献２】Ｂｌｉｇｈｔ、Ｋ．  Ｊ．、ら、Ａｎｔｉｖｉｒａｌ  Ｔｈｅｒ．３巻、Ｓｕｐｐｌ．  ３：７１〜８１頁、１９９８年
【非特許文献３】Ｗｅｉｌａｎｄ、Ｏ．、ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．  Ｒｅｖ．１４巻：２７９〜８８頁、１９９４年
【非特許文献４】Ｗａｌｋｅｒ、Ｍ．  Ａ．ら、ＤＤＴ  ４巻：５１８〜２９頁、１９９９年
【非特許文献５】Ｍｏｒａｄｐｏｕｒ、Ｄ．ら、Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．  Ｈｅｐａｔｏｌ．１１巻：１１９９〜１２０２頁、１９９９年
【非特許文献６】Ｈｕｎｇ、Ｃ．  Ｈ．ら、Ｊ  Ｖｉｒａｌ  Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  １３巻（６号）：４０９〜４１４頁、２００６年
【非特許文献７】Ｈｕａｎｇ、Ｊ．  Ｆ．ら、Ｊ、Ｖｉｒａｌ  Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  １３巻（６号）：３９６〜４０１頁、２００６年
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
ＨＣＶ感染症に苦しむ患者の不良な予後、および承認されている有効な治療薬が現在存在しないことは、ＨＣＶ  ＮＳ３プロテアーゼの新規な阻害剤に対する圧倒的な必要性を際立たせている。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
（発明の要旨）
本発明の化合物および薬学的に許容されるその組成物は、ＨＣＶプロテアーゼの阻害剤として有効であることをここに見出した。そうした化合物は、一般式Ｉ：
【００１０】
【化１】
2015110627.tif 000002
（式中、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２ａ、Ｒ３、Ｒ４、およびＲｚは本明細書で定義する通りである）
を有する化合物かまたは薬学的に許容されるその塩である。
【００１１】
本発明の化合物および薬学的に許容されるその組成物は、ＨＣＶに伴う様々な疾患、障害または状態を治療するのに有用である。そうした疾患、障害または状態には本明細書で説明するものが含まれる。
【００１２】
本発明が提供する化合物は、生物学的および病理学的現象におけるＨＣＶプロテアーゼの研究；ＨＣＶプロテアーゼによって媒介される細胞内シグナル変換経路の研究および新規なＨＣＶプロテアーゼ阻害剤の比較評価にも有用である。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
式Ｉの化合物：
【化１７２】
2015110627.tif 000003
（式中、
Ｒ１およびＲ１’は独立に、水素もしくは任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか、または、Ｒ１とＲ１’は一緒になって、任意選択で置換された３〜７員炭素環を形成しており；
Ｒ２ａは−ＯＨまたは−ＮＨＳＯ２Ｒ２であり；
Ｒ２は、−Ｎ（Ｒ）２、あるいは、Ｃ３〜７シクロアルキル、架橋二環式の６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
各Ｒは独立に、水素、任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか：または、
同一窒素原子上の２つのＲは窒素と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員複素環を形成しており；
Ｒ３は−Ｌ−Ｙであり：
Ｌは、共有結合または二価Ｃ１〜８飽和もしくは不飽和の直鎖状もしくは分枝状の炭化水素鎖であり、Ｌの１、２もしくは３個のメチレン単位は、シクロプロピレン、−ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝ＮＲ）−、−Ｎ＝Ｎ−または−Ｃ（＝Ｎ２）−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；
Ｙは、水素であり、オキソ、ハロゲンもしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族、または、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する３〜１０員単環式もしくは二環式の飽和環、部分的に不飽和な環またはアリール環であり、前記環は−Ｑ−Ｚ、オキソ、ＮＯ２、ハロゲン、ＣＮまたはＣ１〜６脂肪族から独立に選択される１〜４個の基で置換されており：
Ｑは、共有結合、または二価Ｃ１〜６飽和もしくは不飽和の直鎖状もしくは分岐状の炭化水素鎖であり、Ｑの１もしくは２個のメチレン単位は、−ＮＲ−、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＳＯ−または−ＳＯ２−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；
Ｚは、水素、またはオキソ、ハロゲンもしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか；あるいは、
Ｒ３とＲ１はその間の原子と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される２〜６個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された飽和もしくは不飽和１２〜１８員環を形成しており、それによって形成される環は−Ｌ−Ｙを含むか；または、
Ｒ３とＲ１およびＲ１’によって形成される環とはその間の原子と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される２〜６個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された飽和もしくは不飽和１２〜１８員環を形成しており、それによって形成される環は弾頭基を含み；
Ｒ４は、Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ６、
【化１７３】
2015110627.tif 000004
または天然もしくは非天然アミノ酸側鎖基であり；
各Ｒ５は独立に、−Ｎ（Ｒ）２、あるいは、Ｃ１〜６脂肪族、架橋二環式の６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
Ｒ６は、Ｃ１〜６脂肪族、架橋二環式の６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
Ｒ７は、Ｃ１〜６脂肪族、架橋二環式の６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
Ｒｚは、
【化１７４】
2015110627.tif 000005
であるか、またはＲ４とＲｚはその間の原子と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される２〜６個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された飽和もしくは不飽和１６〜２２員環を形成しており；
出現ごとにＲｙのそれぞれは、ハロゲン、−ＯＲ○、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ（Ｒ○）２または任意選択で置換されたＣ１〜４脂肪族から独立に選択され；
ｍは０および４を含む０〜４の整数であり；
ｓは０および４を含む０〜４の整数であり；
ｔは０および４を含む０〜４の整数であり；
但し、ｓとｔの合計はゼロではない）
または薬学的に許容されるその塩。
（項目２）
Ｒ３が−Ｌ−Ｙであり：
Ｌは、共有結合または二価Ｃ１〜８飽和もしくは不飽和の直鎖状もしくは分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌの１、２もしくは３個のメチレン単位は、シクロプロピレン、−ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝ＮＲ）−、−Ｎ＝Ｎ−または−Ｃ（＝Ｎ２）−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；
Ｙは、水素であり、オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する３〜１０員単環式もしくは二環式の飽和環、部分的に不飽和な環またはアリール環であり、前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており；
各Ｒｅは、−Ｑ−Ｚ、オキソ、ＮＯ２、ハロゲン、ＣＮ、適切な脱離基、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族から独立に選択され：
Ｑは、共有結合、または二価Ｃ１〜６飽和もしくは不飽和の直鎖状もしくは分岐状の炭化水素鎖であり、Ｑの１もしくは２個のメチレン単位は、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＯ−、または−ＳＯ２−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−または−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；
Ｚは、水素、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族である、項目１に記載の化合物。
（項目３）
Ｌが、二価Ｃ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１個の二重結合を有し、Ｌの１もしくは２個の追加のメチレン単位は、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ２−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、シクロプロピレン、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ）−または−Ｃ（Ｏ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；
Ｙが、水素であり、オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する３〜１０員単環式もしくは二環式の飽和環、部分的に不飽和な環またはアリール環であり、前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており；
各Ｒｅは、−Ｑ−Ｚ、オキソ、ＮＯ２、ハロゲン、ＣＮ、適切な脱離基、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族から独立に選択され：
Ｑは、共有結合、または二価Ｃ１〜６飽和もしくは不飽和の直鎖状もしくは分岐状の炭化水素鎖であり、Ｑの１もしくは２個のメチレン単位は、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＯ−、または−ＳＯ２−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−または−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；
Ｚは、水素、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族である、項目１に記載の化合物。
（項目４）
Ｌが、二価Ｃ２〜８直鎖状または分枝状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１個の二重結合を有し、Ｌの少なくとも１個のメチレン単位は、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ２−、−ＯＣ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）Ｏ−で置き換えられており、Ｌの１もしくは２個の追加のメチレン単位は、シクロプロピレン、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ）−または−Ｃ（Ｏ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；
Ｙが、水素、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族である、項目３に記載の化合物。
（項目５）
Ｌが、二価Ｃ２〜８直鎖状または分枝状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１個の二重結合を有し、Ｌの少なくとも１個のメチレン単位は−Ｃ（Ｏ）−で置き換えられており、Ｌの１もしくは２個の追加のメチレン単位は、シクロプロピレン、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ）−または−Ｃ（Ｏ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられている、項目４に記載の化合物。
（項目６）
Ｌが、二価Ｃ２〜８直鎖状または分枝状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１個の二重結合を有し、Ｌの少なくとも１個のメチレン単位は−ＯＣ（Ｏ）−で置き換えられている、項目４に記載の化合物。
（項目７）
Ｌが、−ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｏ−、−ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＲＳＯ２ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＲＳＯ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＮＲＣ（Ｏ）（Ｃ＝Ｎ２）−、−ＮＲＣ（Ｏ）（Ｃ＝Ｎ２）Ｃ（Ｏ）−、−ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＲＳＯ２ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＲＳＯ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｏ−、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｃ（＝ＣＨ２）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）−、−ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）−または−ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）シクロプロピレンであり；Ｒは、Ｈまたは任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であり；Ｙは、水素、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族である、項目３に記載の化合物。
（項目８）
Ｌが、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｏ−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＨＳＯ２ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＨＳＯ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ＝Ｎ２）−、−ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ＝Ｎ２）Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＨＳＯ２ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＨＳＯ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｏ−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ（＝ＣＨ２）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−または−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）シクロプロピレン−である、項目７に記載の化合物。
（項目９）
Ｌが、二価Ｃ２〜８直鎖状または分枝状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１個のアルキリデニル二重結合を有し、Ｌの少なくとも１個のメチレン単位は、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ２−、−ＯＣ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）Ｏ−で置き換えられており、Ｌの１もしくは２個の追加のメチレン単位は、シクロプロピレン、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ）−または−Ｃ（Ｏ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられている、項目３に記載の化合物。
（項目１０）
Ｌが、二価Ｃ２〜８直鎖状または分枝状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１個の三重結合を有し、Ｌの１もしくは２個の追加のメチレン単位は、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ２−、−ＯＣ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）Ｏ−で任意選択でかつ独立に置き換えられており、
Ｙが、水素であり、オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する３〜１０員単環式もしくは二環式の飽和環、部分的に不飽和な環またはアリール環であり、前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており；
各Ｒｅは、−Ｑ−Ｚ、オキソ、ＮＯ２、ハロゲン、ＣＮ、適切な脱離基、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族から独立に選択され：
Ｑは、共有結合、または二価Ｃ１〜６飽和もしくは不飽和の直鎖状もしくは分岐状の炭化水素鎖であり、Ｑの１もしくは２個のメチレン単位は、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−または−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；
Ｚは、水素、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族である、項目１に記載の化合物。
（項目１１）
Ｙが、水素、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族である、項目１０に記載の化合物。
（項目１２）
Ｌが、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ≡ＣＣＨ２Ｎ（イソプロピル）−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ≡ＣＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２−、−Ｃ≡ＣＣＨ２Ｏ−、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ≡Ｃ−または−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ≡Ｃ−である、項目１１に記載の化合物。
（項目１３）
Ｌが、二価Ｃ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌの１個のメチレン単位はシクロプロピレンで置き換えられており、Ｌの１もしくは２個の追加のメチレン単位は、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ２−、−ＯＣ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）Ｏ−で独立に置き換えられており；
Ｙが、水素であり、オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する３〜１０員単環式もしくは二環式の飽和環、部分的に不飽和な環またはアリール環であり、前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており；
各Ｒｅは、−Ｑ−Ｚ、オキソ、ＮＯ２、ハロゲン、ＣＮ、適切な脱離基、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族から独立に選択され：
Ｑは、共有結合、または二価Ｃ１〜６飽和もしくは不飽和の直鎖状もしくは分岐状の炭化水素鎖であり、Ｑの１もしくは２個のメチレン単位は、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−または−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；
Ｚは、水素、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族である、項目１に記載の化合物。
（項目１４）
Ｙが、水素、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族である、項目１３に記載の化合物。
（項目１５）
Ｌが、共有結合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−または二価Ｃ１〜８飽和もしくは不飽和の直鎖状または分枝状の炭化水素鎖であり；
Ｙが、以下の（ｉ）〜（ｘｖｉｉ）、すなわち：
（ｉ）オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで置換されたＣ１〜６アルキル；
（ｉｉ）オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ２〜６アルケニル；または
（ｉｉｉ）オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ２〜６アルキニル；または
（ｉｖ）酸素もしくは窒素から選択される１個のヘテロ原子を有する飽和３〜４員複素環（前記環は１〜２個のＲｅ基で置換されている）；または
（ｖ）酸素もしくは窒素から選択される１〜２個のヘテロ原子を有する飽和５〜６員複素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されている）；または
（ｖｉ）
【化１７５】
2015110627.tif 000006
；または
（ｖｉｉ）飽和３〜６員炭素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されている）；または（ｖｉｉｉ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する部分的に不飽和な３〜６員単環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されている）；または
（ｉｘ）部分的に不飽和な３〜６員炭素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されている）；または
（ｘ）
【化１７６】
2015110627.tif 000007
（式中、各Ｒｅは上記に定義され、本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｉ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する部分的に不飽和な４〜６員複素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されている）；または
（ｘｉｉ）
【化１７７】
2015110627.tif 000008
（式中、各ＲおよびＲｅは上記に定義され、本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｉｉｉ）０〜２個の窒素を有する６員芳香環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されている）；または
（ｘｉｖ）
【化１７８】
2015110627.tif 000009
（式中、各Ｒｅは上記に定義され、本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｖ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜３個のヘテロ原子を有する５員ヘテロアリール環（前記環は１〜３個のＲｅ基で置換されている）；または
（ｘｖｉ）
【化１７９】
2015110627.tif 000010
（ｘｖｉｉ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する８〜１０員二環式の飽和環、部分的に不飽和な環またはアリール環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されている）；
から選択され：
各Ｒは独立に、水素、任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか：または、
各Ｒｅは、−Ｑ−Ｚ、オキソ、ＮＯ２、ハロゲン、ＣＮ、適切な脱離基、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族から独立に選択され：
Ｑは、共有結合、または二価Ｃ１〜６飽和もしくは不飽和の直鎖状もしくは分枝状の炭化水素鎖であり、Ｑの１もしくは２個のメチレン単位は、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−または−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；
Ｚは、水素、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族である、項目１に記載の化合物。
（項目１６）
Ｌが、共有結合、−ＣＨ２−、−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２ＮＨ−、−ＮＨＣＨ２−、−ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＮＨＳＯ２−、−ＮＨＳＯ２ＣＨ２−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）−または−ＳＯ２ＮＨ−である、項目１５に記載の化合物。
（項目１７）
Ｌが共有結合である、項目１６に記載の化合物。
（項目１８）
Ｙが、
【化１８０】
2015110627.tif 000011
【化１８１】
2015110627.tif 000012
【化１８２】
2015110627.tif 000013
【化１８３】
2015110627.tif 000014
（式中、各Ｒｅはハロゲンから独立に選択される）
から選択される、項目１５に記載の化合物。
（項目１９）
Ｒ３が、
【化１８４】
2015110627.tif 000015
【化１８５】
2015110627.tif 000016
【化１８６】
2015110627.tif 000017
【化１８７】
2015110627.tif 000018
【化１８８】
2015110627.tif 000019
（式中、各Ｒｅは独立に、適切な脱離基、ＮＯ２、ＣＮまたはオキソである）
から選択される、項目１に記載の化合物。
（項目２０）
式ＩＩ−ａまたはＩＩ−ｂの化合物：
【化１８９】
2015110627.tif 000020
または薬学的に許容されるその塩である、項目１に記載の化合物。
（項目２１）
【化１９０】
2015110627.tif 000021
【化１９１】
2015110627.tif 000022
【化１９２】
2015110627.tif 000023
【化１９３】
2015110627.tif 000024
【化１９４】
2015110627.tif 000025
【化１９５】
2015110627.tif 000026
【化１９６】
2015110627.tif 000027
【化１９７】
2015110627.tif 000028
からなる群から選択される化合物。
（項目２２）
項目１に記載の化合物および薬学的に許容される補助剤、担体または媒体を含む組成物。
（項目２３）
追加の治療薬と組み合わせた、項目２２に記載の組成物。
（項目２４）
前記追加の治療薬が抗ウイルス剤である、項目２３に記載の組成物。
（項目２５）
生物学的試料または患者のＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体の活性を阻害する方法であって、前記生物学的試料を項目１に記載の化合物またはその組成物と接触させるステップを含む方法。
（項目２６）
ＨＣＶプロテアーゼサブタイプ１ｂのＣｙｓ１５９に相当する位置に保存されたシステイン残基を共有結合的に改変することによって、前記ＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体の活性を不可逆的に阻害する、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
Ｃｙｓ１５９を共有結合的に改変することによって、前記ＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体の活性を不可逆的に阻害する、項目２５に記載の方法。
（項目２８）
Ｃｙｓ１６を共有結合的に改変することによって、前記ＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体の活性を不可逆的に阻害する、項目２５に記載の方法。
（項目２９）
患者のＨＣＶプロテアーゼ媒介障害を治療する方法であって、前記患者に項目１に記載の化合物またはその組成物を投与するステップを含む方法。
（項目３０）
前記投与するステップを日に１回実施する、項目２９に記載の方法。
（項目３１）
前記障害がＣ型肝炎である、項目２９に記載の方法。
（項目３２）
患者のＨＣＶプロテアーゼ媒介障害を治療する方法であって、ＨＣＶプロテアーゼサブタイプ１ｂのＣｙｓ１５９に相当する位置に保存されたシステイン残基を共有結合的に改変することによって、ＨＣＶプロテアーゼを不可逆的に阻害するステップを含む方法。
（項目３３）
前記ＨＣＶプロテアーゼ遺伝子型またはサブタイプが、１ａ、１ｂ、１ｃ、２ａ、２ｂ、２ｃ、２ｉ、２ｋ、３ａ、３ｂ、３ｋ、４ａ、４ｄ、４ｆ、５ａ、６ａ、６ｂ、６ｃ、６ｄ、６ｅ、６ｆ、６ｇ、６ｈ、６ｉ、６ｊ、６ｋ、６ｌ、６ｍ、６ｎ、６ｏ、６ｐ、６ｑ、６ｔおよび７ａからなる群から選択される、項目３２に記載の方法。
（項目３４）
前記ＨＣＶプロテアーゼ遺伝子型またはサブタイプが、１ａ、１ｂ、２ａまたは３ａである、項目３３に記載の方法。
（項目３５）
ＨＣＶプロテアーゼのＣｙｓ１５９を共有結合的に改変することによって、ＨＣＶプロテアーゼを不可逆的に阻害するステップを含む、項目２９に記載の方法。
（項目３６）
ＨＣＶプロテアーゼのＣｙｓ１６を共有結合的に改変することによって、ＨＣＶプロテアーゼを不可逆的に阻害するステップを含む、項目２９に記載の方法。
（項目３７）
式Ｃｙｓ１５９−リンカー−阻害剤部分の結合体であって、前記Ｃｙｓ１５９がＨＣＶプロテアーゼのＣｙｓ１５９である結合体。
（項目３８）
式Ｃｙｓ１６−リンカー−阻害剤部分の結合体であって、前記Ｃｙｓ１６がＨＣＶプロテアーゼのＣｙｓ１６である結合体。
（項目３９）
前記阻害剤部分が式Ａ：
【化１９８】
2015110627.tif 000029
（式中、Ｒ１およびＲ１’は独立に、水素もしくは任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか、または、Ｒ１とＲ１’は一緒になって、任意選択で置換された３〜７員炭素環を形成しており；
Ｒ２ａは−ＯＨまたは−ＮＨＳＯ２Ｒ２であり；
Ｒ２は、−Ｎ（Ｒ）２、あるいは、Ｃ３〜７シクロアルキル、架橋二環式、６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
各Ｒは独立に、水素、任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか：または、
同一窒素原子上の２つのＲは該窒素と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員複素環を形成しており；
Ｒ４は、Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ６、
【化１９９】
2015110627.tif 000030
、または天然もしくは非天然アミノ酸側鎖基であり；
各Ｒ５は独立に、−Ｎ（Ｒ）２、あるいは、Ｃ１〜６脂肪族、架橋二環式、６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
Ｒ６は、Ｃ１〜６脂肪族、架橋二環式、６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
Ｒ７は、Ｃ１〜６脂肪族、架橋二環式、６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
Ｒｚは、
【化２００】
2015110627.tif 000031
であるか、またはＲ４とＲｚはその間の原子と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される２〜６個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された飽和もしくは不飽和１６〜２２員環を形成しており；
出現ごとにＲｙのそれぞれは、ハロゲン、−ＯＲ○、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ（Ｒ○）２または任意選択で置換されたＣ１〜４脂肪族から独立に選択され；
ｍは０および４を含む０〜４の整数であり；
ｓは０および４を含む０〜４の整数であり；
ｔは０および４を含む０〜４の整数であり；
但し、ｓとｔの合計はゼロではない）
または薬学的に許容されるその塩からなる、項目３７に記載の結合体。
（項目４０）
前記阻害剤部分が式Ａ：
【化２０１】
2015110627.tif 000032
（式中、Ｒ１およびＲ１’は独立に、水素もしくは任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか、または、Ｒ１とＲ１’は一緒になって、任意選択で置換された３〜７員炭素環を形成しており；
Ｒ２ａは−ＯＨまたは−ＮＨＳＯ２Ｒ２であり；
Ｒ２は、−Ｎ（Ｒ）２、あるいは、Ｃ３〜７シクロアルキル、架橋二環式の６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
各Ｒは独立に、水素、任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか：または、
同一窒素原子上の２つのＲは該窒素と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員複素環を形成しており；
Ｒ４は、Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ６、
【化２０２】
2015110627.tif 000033
、または天然もしくは非天然アミノ酸側鎖基であり；
各Ｒ５は独立に、−Ｎ（Ｒ）２、あるいは、Ｃ１〜６脂肪族、架橋二環式、６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
Ｒ６は、Ｃ１〜６脂肪族、架橋二環式、６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
Ｒ７は、Ｃ１〜６脂肪族、架橋二環式、６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
Ｒｚは、
【化２０３】
2015110627.tif 000034
であるか、またはＲ４とＲｚはその間の原子と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される２〜６個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された飽和もしくは不飽和１６〜２２員環を形成しており；
出現ごとにＲｙのそれぞれは、ハロゲン、−ＯＲ○、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ（Ｒ○）２または任意選択で置換されたＣ１〜４脂肪族から独立に選択され；
ｍは０および４を含む０〜４の整数であり；
ｓは０および４を含む０〜４の整数であり；
ｔは０および４を含む０〜４の整数であり；
但し、ｓとｔの合計はゼロではない）
または薬学的に許容されるその塩からなる、項目３８に記載の結合体。
（項目４１）
Ｒｚが
【化２０４】
2015110627.tif 000035
である、項目１に記載の化合物。
（項目４２）
Ｒ４とＲｚがその間の原子と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される２〜６個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された飽和もしくは不飽和１６〜２２員環を形成している、項目１に記載の化合物。
（項目４３）
式Ｉ−ｅまたはＩ−ｆの化合物：
【化２０５】
2015110627.tif 000036
（式中、
ｐは１および６を含む１〜６の整数であり；
出現ごとにＲｍのそれぞれは独立に、ハロゲン、−ＯＲ○；−ＣＮ；−Ｎ（Ｒ○）２；またはＣ１〜６脂肪族およびＣ３〜７シクロアルキルからなる群から選択される任意選択で置換された基であり；
Ｒ○は、Ｃ１〜６脂肪族から選択される任意選択で置換された基である）
または薬学的に許容されるその塩である、項目４２に記載の化合物。
（項目４４）
Ｒ１とＲ１’が一緒になって、任意選択で置換された３〜７員炭素環を形成している、項目１に記載の化合物。
（項目４５）
Ｒ１とＲ１’が一緒になって、
【化２０６】
2015110627.tif 000037
（式中、Ｒ○は、Ｃ１〜６脂肪族から選択される任意選択で置換された基である）
を形成している、項目４４に記載の化合物。
（項目４６）
Ｒ○がビニルである、項目４５に記載の化合物。
（項目４７）
Ｒ○がエチルである、項目４５に記載の化合物。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】試験化合物Ｉ−１の存在下でのＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａ野生型プロテアーゼの質量分析結果を示す図である。
【図２】試験化合物Ｉ−２５の存在下でのＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａ野生型プロテアーゼの質量分析結果を示す図である。
【図３】ＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａプロテアーゼの質量分析結果を示す図である。
【図４】試験化合物Ｉ−１１の存在下でのＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａ変異体Ｄ１６８Ｖプロテアーゼの質量分析結果を示す図である。
【図５】試験化合物Ｉ−１１の存在下でのＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａ変異体Ａ１５６Ｓプロテアーゼの質量分析結果を示す図である。
【図６】試験化合物Ｉ−１１の存在下でのＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａ変異体Ｒ１５５Ｋプロテアーゼの質量分析結果を示す図である。
【図７】試験化合物Ｉ−１１の存在下でのＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａ変異体Ａ１５６Ｔプロテアーゼの質量分析結果を示す図である。
【図８】ＮＳ３内部自己切断産生物を、レプリコン細胞を化合物Ｉ−４７で１６時間処理することによって阻害することを示す図である。
【図９】化合物を取り除いた後、自己切断によって測定して、野生型レプリコン細胞において、ＮＳ３プロテアーゼの不可逆的共有結合性阻害剤（化合物Ｉ−１１）がＮＳ３プロテアーゼ活性の長期的阻害を示す図である。
【図１０】化合物を取り除いた後、自己切断によって測定して、野生型レプリコン細胞において、ＮＳ３プロテアーゼの不可逆的共有結合性阻害剤（化合物Ｉ−２５）がＮＳ３プロテアーゼ活性の長期的阻害を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
特定の実施形態の詳細な説明
１．本発明の化合物の概要：
特定の実施形態では、本発明は式Ｉの化合物
【００１５】
【化２】
2015110627.tif 000038
または、薬学的に許容されるその塩を提供する
（式中、
Ｒ１およびＲ１’は独立に、水素もしくは任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか、または、Ｒ１とＲ１’は一緒になって、任意選択で置換された３〜７員炭素環を形成しており；
Ｒ２ａは−ＯＨまたは−ＮＨＳＯ２Ｒ２であり；
Ｒ２は、−Ｎ（Ｒ）２、あるいは、Ｃ３〜７シクロアルキル、架橋二環式の６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
各Ｒは独立に、水素、任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか：または、
同一窒素原子上の２つのＲは窒素と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員複素環を形成しており；
Ｒ３は−Ｌ−Ｙであり：
Ｌは、共有結合または二価Ｃ１〜８飽和もしくは不飽和の直鎖状もしくは分枝状の炭化水素鎖であり、Ｌの１、２もしくは３個のメチレン単位は、シクロプロピレン、−ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝ＮＲ）−、−Ｎ＝Ｎ−または−Ｃ（＝Ｎ２）−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；
Ｙは、水素であり、オキソ、ハロゲンもしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族、または、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する３〜１０員単環式もしくは二環式の飽和環、部分的に不飽和な環またはアリール環であり、前記環は−Ｑ−Ｚ、オキソ、ＮＯ２、ハロゲン、ＣＮまたはＣ１〜６脂肪族から独立に選択される１〜４個の基で置換されており：
Ｑは、共有結合、または二価Ｃ１〜６飽和もしくは不飽和の直鎖状もしくは分岐状の炭化水素鎖であり、Ｑの１もしくは２個のメチレン単位は、−ＮＲ−、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＳＯ−または−ＳＯ２−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；
Ｚは、水素、またはオキソ、ハロゲンもしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか；あるいは、
Ｒ３とＲ１はその間の原子と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される２〜６個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された飽和もしくは不飽和１２〜１８員環を形成しており、それによって形成される環は−Ｌ−Ｙを含むか；または、
Ｒ３とならびにＲ１およびＲ１’によって形成される環は、その間の原子と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される２〜６個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された飽和もしくは不飽和１２〜１８員環を形成しており、それによって形成される環は弾頭基を含み；
Ｒ４は、Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ６、
【００１６】
【化３】
2015110627.tif 000039
または天然もしくは非天然アミノ酸側鎖基であり；
各Ｒ５は独立に、−Ｎ（Ｒ）２、あるいは、Ｃ１〜６脂肪族、架橋二環式の６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
Ｒ６は、Ｃ１〜６脂肪族、架橋二環式の６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
Ｒ７は、Ｃ１〜６脂肪族、架橋二環式の６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
Ｒｚは、
【００１７】
【化４】
2015110627.tif 000040
であるか、またはＲ４とＲｚはその間の原子と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される２〜６個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された飽和もしくは不飽和１６〜２２員環を形成しており；
出現ごとにＲｙのそれぞれは、ハロゲン、−ＯＲ○、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ（Ｒ○）２または任意選択で置換されたＣ１〜４脂肪族から独立に選択され；
ｍは０および４を含む０〜４の整数であり；
ｓは０および４を含む０〜４の整数であり；
ｔは０および４を含む０〜４の整数であり；
但し、ｓとｔの合計はゼロではない）。
【００１８】
２．化合物および定義：
本発明の化合物には、上記に概説されており、本明細書で開示するクラス、サブクラスおよび種でさらに示されるものが含まれる。本明細書で用いるように、別段の表示がない限り、以下の定義が適用されるものとする。本発明のために、化学元素は、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｓ、７５ｔｈ  Ｅｄの元素周期表、ＣＡＳ版によって特定される。さらに、有機化学の一般的原理は、「Ｏｒｇａｎｉｃ
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、Ｔｈｏｍａｓ  Ｓｏｒｒｅｌｌ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｂｏｏｋｓ、Ｓａｕｓａｌｉｔｏ：１９９９年、および「Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、５ｔｈ  Ｅｄ．、Ｅｄ．：Ｓｍｉｔｈ、Ｍ．  Ｂ．  ａｎｄ  Ｍａｒｃｈ、Ｊ．、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：２００１年に記載されている。これらの内容全体を参照により本明細書に組み込む。
【００１９】
本明細書で用いる「脂肪族」または「脂肪族基」という用語は、完全に飽和しているかまたは１個もしくは複数の不飽和単位を含む直鎖状（すなわち、非分岐状）もしくは分岐状の置換もしくは非置換の炭化水素鎖、あるいは、その分子の残りに単一の結合点を有する完全に飽和しているかまたは１個もしくは複数の不飽和単位を含むが、芳香族ではない、単環式炭化水素または二環式炭化水素（本明細書では「炭素環」、「脂環式」または「シクロアルキル」とも称する）を意味する。別段の指定のない限り、脂肪族基は１〜６個の脂肪族炭素原子を含む。いくつかの実施形態では、脂肪族基は１〜５個の脂肪族炭素原子を含む。他の実施形態では、脂肪族基は１〜４個の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、脂肪族基は１〜３個の脂肪族炭素原子を含み、さらに他の実施形態では、脂肪族基は１〜２個の脂肪族炭素原子を含む。いくつかの実施形態では、「脂環式」（または「炭素環」もしくは「シクロアルキル」）は、その分子の残りに単一の結合点を有する完全に飽和しているかまたは１個もしくは複数の不飽和単位を含むが、芳香族ではない単環式Ｃ３〜Ｃ６炭化水素を指す。適切な脂肪族基には、これらに限定されないが、直鎖状もしくは分岐状の置換または非置換のアルキル基、アルケニル基、アルキニル基およびその組合せ、例えば（シクロアルキル）アルキル、（シクロアルケニル）アルキルまたは（シクロアルキル）アルケニルが含まれる。
【００２０】
本明細書で用いる「架橋型二環式」という用語は、任意の二環系、すなわち、少なくとも１つの架橋を有する飽和もしくは部分不飽和の炭素環または複素環を指す。ＩＵＰＡＣで定義されているように、「架橋」は、２つの橋頭を連結する原子の非分岐鎖または原子価結合であり、「橋頭」は、３個以上の骨格原子（水素を除く）と結合している環系の任意の骨格原子である。いくつかの実施形態では、架橋型二環基は、７〜１２環員、および窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜４個のヘテロ原子を有する。そうした架橋型二環基は当技術分野で周知であり、それらには、各基が置換可能な任意の炭素原子または窒素原子でその分子の残りと結合している以下に示す基が含まれる。別段の指定のない限り、架橋型二環基は、脂肪族基について示す１つまたは複数の置換基で任意選択で置換されている。さらに、またはあるいは、架橋型二環基の置換可能な任意の窒素は任意選択で置換されている。架橋型二環基の例には：
【００２１】
【化５】
2015110627.tif 000041
が含まれる。
【００２２】
「低級アルキル」という用語は、Ｃ１〜４直鎖状または分岐状アルキル基を指す。低級アルキル基の例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルである。
【００２３】
「低級ハロアルキル」という用語は、１個もしくは複数のハロゲン原子で置換されているＣ１〜４直鎖状または分岐状アルキル基を指す。
【００２４】
「ヘテロ原子」という用語は、酸素、イオウ、窒素、リンまたはケイ素（窒素、イオウ、リンまたはケイ素の任意の酸化形態；任意の塩基性窒素の四級化形態；または、複素環の置換可能な窒素、例えばＮ（３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピロリルなどの）、ＮＨ（ピロリジニルなどの）またはＮＲ＋（Ｎ置換ピロリジニルなどの）を含む）の１つまたは複数を意味する。
【００２５】
本明細書で用いる「不飽和」という用語は、ある部分が１つまたは複数の不飽和単位を有することを意味する。
【００２６】
本明細書で用いる「二価Ｃ１〜８（またはＣ１〜６）飽和もしくは不飽和の、直鎖状もしくは分岐状の炭化水素鎖」という用語は、本明細書で定義するような直鎖状または分岐状の二価アルキレン鎖、アルケニレン鎖およびアルキニレン鎖を指す。
【００２７】
「アルキレン」という用語は二価アルキル基を指す。「アルキレン鎖」は、ポリメチレン基、すなわち−（ＣＨ２）ｎ−（ｎは正の整数、好ましくは１〜６、１〜４、１〜３、１〜２または２〜３である）である。置換アルキレン鎖は、１つまたは複数のメチレン水素原子が置換基で置き換えられたポリメチレン基である。適切な置換基には、置換脂肪族基について以下に説明するものが含まれる。
【００２８】
「アルケニレン」という用語は、二価アルケニル基を指す。置換アルケニレン鎖は、その１つまたは複数の水素原子が置換基で置き換えられている、少なくとも１つの二重結合を含むポリメチレン基である。適切な置換基には、置換脂肪族基について以下に説明するものが含まれる。
【００２９】
本明細書で用いる「シクロプロピレニル」という用語は、以下の構造：
【００３０】
【化６】
2015110627.tif 000042
の二価シクロプロピル基を指す。
【００３１】
「ハロゲン」という用語は、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを意味する。
【００３２】
単独で用いるか、または「アラルキル」、「アラルコキシ」または「アリールオキシアルキル」のようなより大きな部分の一部として用いる「アリール」という用語は、合計５〜１４の環員を有しており、その環系中の少なくとも１つの環が芳香族であり、環系中の各環が３〜７環員を含む単環系または二環系を指す。「アリール」という用語は、「アリール環」という用語と互換的に用いることができる。
【００３３】
単独で用いるか、または「アラルキル」、「アラルコキシ」または「アリールオキシアルキル」のようなより大きな部分の一部として用いる「アリール」という用語は、合計５〜１０環員を有しており、その環系中の少なくとも１つの環が芳香族であり、環系中の各環が３〜７環員を含む単環系および二環系を指す。「アリール」という用語は、「アリール環」という用語と互換的に用いることができる。本発明の特定の実施形態では、「アリール」は、これらに限定されないが、フェニル、ビフェニル、ナフチル、アントラシルなどを含み、１つまたは複数の置換基を担持していてよい芳香環系を指す。本明細書で用いるような、芳香環が、インダニル、フタリミジル、ナフチミジル、フェナントリジニルまたはテトラヒドロナフチルなどのような１つまたは複数の非芳香環と縮合している基も、やはり「アリール」という用語の範囲に含まれる。
【００３４】
「ヘテロアリール」、および単独で用いるか、またはより大きな部分の一部として用いる「ヘテロアル−（ｈｅｔｅｒｏａｒ−）」という用語、例えば「ヘテロアラルキル」または「ヘテロアラルコキシ」は、５〜１０個の環原子、好ましくは５、６または９個の環原子を有し；かつ環状配列中に共有された６、１０または１４個のπ電子を有し；炭素原子に加えて、１〜５個のヘテロ原子を有する基を指す。「ヘテロ原子」という用語は、窒素、酸素またはイオウを指し、窒素またはイオウの任意の酸化形態および塩基性窒素の任意の四級化形態を含む。ヘテロアリール基には、これらに限定されないが、チエニル、フラニル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、インドリジニル、プリニル、ナフチリジニルおよびプテリジニルが含まれる。本明細書で用いる「ヘテロアリール」および「ヘテロアル−」という用語は、複素芳香環が１つもしくは複数のアリール環、脂環式環またはヘテロシクリル環と縮合しており、その基（ｒａｄｉｃａｌ）または結合点が複素芳香環上にある基（ｇｒｏｕｐ）も含む。非限定的な例には、インドリル、イソインドリル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、ジベンゾフラニル、インダゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンズチアゾリル、キノリル、イソキノリル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、４Ｈ−キノリジニル、カルバゾリル、アクリジニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニルおよびピリド［２，３−ｂ］−１，４−オキサジン−３（４Η）−オンが含まれる。ヘテロアリール基は単環式または二環式であってよい。「ヘテロアリール」という用語は、「ヘテロアリール環」、「ヘテロアリール基」または「複素芳香族」という用語（これらの用語のいずれも、任意選択で置換された環を含む）と互換的に用いることができる。「ヘテロアラルキル」という用語は、そのアルキル部およびヘテロアリール部が独立に任意選択で置換されている、ヘテロアリールで置換されたアルキル基を指す。
【００３５】
本明細書で用いる「複素環」、「ヘテロシクリル」、「複素環基」および「複素環」という用語は、互換的に用いられ、飽和しているかまたは部分的に不飽和であり、炭素原子に加えて１個もしくは複数、好ましくは１〜４個の上記定義のヘテロ原子を有する安定な５〜７員単環式または７〜１０員の二環式複素環部分を指す。複素環の環原子の関連で用いられる場合、「窒素」という用語は置換された窒素を含む。例としては、酸素、イオウもしくは窒素から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する飽和しているかまたは部分的に不飽和の環において、その窒素は、Ｎ（３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピロリルなどの）、ＮＨ（ピロリジニルなどの）または＋ＮＲ（Ｎ置換ピロリジニルなどの）であってよい。
【００３６】
複素環は、安定な構造をもたらす任意のヘテロ原子または炭素原子でそのペンダント基に結合していてよく、その環原子のいずれかは任意選択で置換されていてよい。そうした飽和しているかまたは部分的に不飽和の複素環基の例には、これらに限定されないが、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニル  ピロリジニル、ピペリジニル、ピロリニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、デカヒドロキノリニル、オキサゾリジニル、ピペラジニル、ジオキサニル、ジオキソラニル、ジアゼピニル、オキサゼピニル、チアゼピニル、モルホリニルおよびキヌクリジニルが含まれる。「複素環」、「ヘテロシクリル」、「ヘテロシクリル環」、「複素環基」、「複素環部分」および「複素環基」という用語は、本明細書では互換的に用いられ、ヘテロシクリル環が、その基または結合点がヘテロシクリル環上にある、インドリニル、３Ｈ−インドリル、クロマニル、フェナントリジニルまたはテトラヒドロキノリニルなどの１つもしくは複数のアリール、ヘテロアリールまたは脂環と縮合している基も含む。ヘテロシクリル基は単環式であってもまたは二環式であってよい。「ヘテロシクリルアルキル」という用語は、そのアルキル部およびヘテロシクリル部が独立に任意選択で置換されている、ヘテロシクリルで置換されたアルキル基を指す。
【００３７】
本明細書で用いる「部分的に不飽和（の）」という用語は、少なくとも１つの二重結合または三重結合を含む環部分を指す。「部分的に不飽和（の）」という用語は、複数の不飽和部位を有する環を包含するが、本明細書で定義するアリール部またはヘテロアリール部分は含まないものとする。
【００３８】
本明細書で用いる「天然アミノ酸側鎖基」という語句は、タンパク質における天然由来の２０個のアミノ酸のいずれかの側鎖基を指す。そうした天然アミノ酸には、非極性または疎水性のアミノ酸、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファンおよびプロリンが含まれる。システインは、ある場合は非極性または疎水性として分類され、他の場合、極性として分類される。天然アミノ酸には、チロシン、セリン、トレオニン、アスパラギン酸（荷電している場合、アスパラギン酸塩としても知られている）、グルタミン酸（荷電している場合、グルタミン酸塩としても知られている）、アスパラギンおよびグルタミンなどの極性または親水性アミノ酸も含まれる。特定の極性または親水性アミノ酸は荷電した側鎖を有する。そうした荷電したアミノ酸には、リシン、アルギニンおよびヒスチジンが含まれる。当業者は、極性または親水性アミノ酸側鎖を保護すると、アミノ酸に非極性を付与することができることを理解されよう。例えば、適切に保護されたチロシンのヒドロキシル基において、そのヒドロキシル基を保護することによって、チロシンに非極性および疎水性を付与することができる。
【００３９】
本明細書で用いる「非天然のアミノ酸側鎖基」という語句は、上記のようなタンパク質において天然に由来する２０個のアミノ酸のリストに含まれないアミノ酸の側鎖基を指す。そうしたアミノ酸には、２０個の天然由来のアミノ酸のいずれかのＤ異性体が含まれる。非天然のアミノ酸にはホモセリン、オルニチン、ノルロイシンおよびチロキシンも含まれる。他の非天然のアミノ酸側鎖は当業者に周知であり、それらには、非天然の脂肪族側鎖が含まれる。他の非天然のアミノ酸には、Ｎ−アルキル化、環化、リン酸化、アセチル化、アミド化、アジド化、標識化されたものなどを含む改変されたアミノ酸が含まれる。いくつかの実施形態では、非天然のアミノ酸はＤ異性体である。いくつかの実施形態では、非天然のアミノ酸はＬ異性体である。
【００４０】
本明細書で記載するように、本発明の化合物は「任意選択で置換された」部分を含むことができる。一般に、「置換（された）」という用語は、「任意選択で」という用語が先行してもしなくても、指定された部分の１つまたは複数の水素が適切な置換基で置き換えられていることを意味する。別段の表示のない限り、「任意選択で置換された」基は、その基のそれぞれの置換可能な位置で適切な置換基を有することができ、所与の任意の構造において２つ以上の位置を、指定された基から選択される２つ以上の置換基で置換できる場合、その置換基はその位置ごとに同じであっても異なっていてもよい。本発明で想定される置換基の組合せは、好ましくは安定であるかまたは化学的に実現可能な化合物の形成をもたらすものである。本明細書で用いる「安定な」という用語は、その製造、検出、特定の実施形態では、回収、精製および本明細書で開示する目的の１つまたは複数での使用のための条件にかけても、実質的に変化しない化合物を指す。
【００４１】
「任意選択で置換された」基の置換可能な炭素原子上の適切な一価置換基は独立に、ハロゲン；−（ＣＨ２）０〜４Ｒ○；−（ＣＨ２）０〜４ＯＲ○；−Ｏ（ＣＨ２）０〜４Ｒ○、−Ｏ−（ＣＨ２）０〜４Ｃ（Ｏ）ＯＲ○；−（ＣＨ２）０〜４ＣＨ（ＯＲ○）２；−（ＣＨ２）０〜４ＳＲ○；Ｒ○で置換されていてよい−（ＣＨ２）０〜４Ｐｈ；Ｒ○で置換されていてよい−（ＣＨ２）０〜４Ｏ（ＣＨ２）０〜１Ｐｈ；Ｒ○で置換されていてよい−ＣＨ＝ＣＨＰｈ；Ｒ○で置換されていてよい−（ＣＨ２）０〜４Ｏ（ＣＨ２）０〜１−ピリジル；−ＮＯ２；−ＣＮ；−Ｎ３；−（ＣＨ２）０〜４Ｎ（Ｒ○）２；−（ＣＨ２）０〜４Ｎ（Ｒ○）Ｃ（Ｏ）Ｒ○；−Ｎ（Ｒ○）Ｃ（Ｓ）Ｒ○；−（ＣＨ２）０〜４Ｎ（Ｒ○）Ｃ（Ｏ）ＮＲ○２；−Ｎ（Ｒ○）Ｃ（Ｓ）ＮＲ○２；−（ＣＨ２）０〜４Ｎ（Ｒ○）Ｃ（Ｏ）ＯＲ○；−Ｎ（Ｒ○）Ｎ（Ｒ○）Ｃ（Ｏ）Ｒ○；−Ｎ（Ｒ○）Ｎ（Ｒ○）Ｃ（Ｏ）ＮＲ○２；−Ｎ（Ｒ○）Ｎ（Ｒ○）Ｃ（Ｏ）ＯＲ○；−（ＣＨ２）０〜４Ｃ（Ｏ）Ｒ○；−Ｃ（Ｓ）Ｒ○；−（ＣＨ２）０〜４Ｃ（Ｏ）ＯＲ○；−（ＣＨ２）０〜４Ｃ（Ｏ）ＳＲ○；−（ＣＨ２）０〜４Ｃ（Ｏ）ＯＳｉＲ○３；−（ＣＨ２）０〜４ＯＣ（Ｏ）Ｒ○；−ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ２）０〜４ＳＲ−、ＳＣ（Ｓ）ＳＲ○；−（ＣＨ２）０〜４ＳＣ（Ｏ）Ｒ○；−（ＣＨ２）０〜４Ｃ（Ｏ）ＮＲ○２；−Ｃ（Ｓ）ＮＲ○２；−Ｃ（Ｓ）ＳＲ○；−ＳＣ（Ｓ）ＳＲ○、−（ＣＨ２）０〜４ＯＣ（Ｏ）ＮＲ○２；−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＲ○）Ｒ○；−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ○；−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ○；−Ｃ（ＮＯＲ○）Ｒ○；−（ＣＨ２）０〜４ＳＳＲ○；−（ＣＨ２）０〜４Ｓ（Ｏ）２Ｒ○；−（ＣＨ２）０〜４Ｓ（Ｏ）２ＯＲ○；−（ＣＨ２）０〜４ＯＳ（Ｏ）２Ｒ○；−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ○２；−（ＣＨ２）０〜４Ｓ（Ｏ）Ｒ○；−Ｎ（Ｒ○）Ｓ（Ｏ）２ＮＲ○２；−Ｎ（Ｒ○）Ｓ（Ｏ）２Ｒ○；−Ｎ（ＯＲ○）Ｒ○；−Ｃ（ＮＨ）ＮＲ○２；−Ｐ（Ｏ）２Ｒ○；−Ｐ（Ｏ）Ｒ○２；−ＯＰ（Ｏ）Ｒ○２；−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ○）２；ＳｉＲ○３；−（Ｃ１〜４直鎖状または分岐状アルキレン）Ｏ−Ｎ（Ｒ○）２；または−（Ｃ１〜４直鎖状または分岐状アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｎ（Ｒ○）２であり、各Ｒ○は、以下に定義するように置換されていてよく、それは独立に、水素、Ｃ１〜６脂肪族、−ＣＨ２Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ２）０〜１Ｐｈ、−ＣＨ２−（５〜６員ヘテロアリール環）、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の飽和環、５〜６員の部分的に不飽和な環またはアリール環であるか、あるいは、上記定義にかかわらず、２つの独立に出現するＲ○はその介在原子（単数または複数）と一緒になって、以下に定義するように置換されていてよい窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜４個のヘテロ原子を有する３〜１２員の飽和環、３〜１２員の部分的に不飽和な環またはアリール単環もしくはアリール二環を形成している。
【００４２】
Ｒ○（または、２つの独立に出現するＲ○がその介在原子と一緒になって形成された環）上の適切な一価置換基は独立に、ハロゲン、−（ＣＨ２）０〜２Ｒ●、−（ハロＲ●）、−（ＣＨ２）０〜２ＯＨ、−（ＣＨ２）０〜２ＯＲ●、−（ＣＨ２）０〜２ＣＨ（ＯＲ●）２；−Ｏ（ハロＲ●）、−ＣＮ、−Ｎ３、−（ＣＨ２）０〜２Ｃ（Ｏ）Ｒ●、−（ＣＨ２）０〜２Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−（ＣＨ２）０〜２Ｃ（Ｏ）ＯＲ●、−（ＣＨ２）０〜２ＳＲ●、−（ＣＨ２）０〜２ＳＨ、−（ＣＨ２）０〜２ＮＨ２、−（ＣＨ２）０〜２ＮＨＲ●、−（ＣＨ２）０〜２ＮＲ●２、−ＮＯ２、−ＳｉＲ●３、−ＯＳｉＲ●３、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ●、−（Ｃ１〜４直鎖状または分岐状アルキレン）Ｃ（Ｏ）ＯＲ●または−ＳＳＲ●であり、各Ｒ●は、置換されていないか、または、「ハロ」が先行する場合、１個もしくは複数のハロゲンだけで置換されており、Ｃ１〜４脂肪族、−ＣＨ２Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ２）０〜１Ｐｈ、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の飽和環、５〜６員の部分的に不飽和な環またはアリール環から独立に選択される。Ｒ○の飽和炭素原子上の適切な二価置換基には＝Ｏおよび＝Ｓが含まれる。
【００４３】
「任意選択で置換された」基の飽和炭素原子上の適切な二価置換基には、以下の：＝Ｏ、＝Ｓ、＝ＮＮＲ＊２、＝ＮＮＨＣ（Ｏ）Ｒ＊、＝ＮＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ＊、＝ＮＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ＊、＝ＮＲ＊、＝ＮＯＲ＊、−Ｏ（Ｃ（Ｒ＊２））２〜３Ｏ−または−Ｓ（Ｃ（Ｒ＊２））２〜３Ｓ−が含まれ、独立に出現するそれぞれのＲ＊は、水素、以下に定義するように置換されていてよいＣ１〜６脂肪族、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜４個のヘテロ原子を有する非置換５〜６員の飽和環、非置換５〜６員の部分的に不飽和な環またはアリール環から選択される。「任意選択で置換された」基の隣接する置換可能な炭素と結合している適切な二価置換基には：−Ｏ（ＣＲ＊２）２〜３Ｏ−が含まれ、独立に出現するそれぞれのＲ＊は、水素、以下に定義するように置換されていてよいＣ１〜６脂肪族、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜４個のヘテロ原子を有する非置換５〜６員の飽和環、部分的に非置換５〜６員の不飽和な環またはアリール環から選択される。
【００４４】
Ｒ＊の脂肪族基上の適切な置換基には、ハロゲン、−Ｒ●、−（ハロＲ●）、−ＯＨ、−ＯＲ●、−Ｏ（ハロＲ●）、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ●、−ＮＨ２、−ＮＨＲ●、−ＮＲ●２または−ＮＯ２が含まれ、各Ｒ●は、置換されていないか、または、「ハロ」が先行する場合、１個もしくは複数のハロゲンだけで置換されており、独立に、Ｃ１〜４脂肪族、−ＣＨ２Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ２）０〜１Ｐｈ、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の飽和環、５〜６員の部分的に不飽和な環またはアリール環である。
【００４５】
「任意選択で置換された」基の置換可能な窒素上の適切な置換基には、−Ｒ†、−ＮＲ†２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ†、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ†、−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ†、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ†、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ†、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ†２、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ†２、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲ†２または−Ｎ（Ｒ†）Ｓ（Ｏ）２Ｒ†が含まれ；各Ｒ†は独立に、水素、以下に定義するように置換されていてよいＣ１〜６脂肪族、非置換−ＯＰｈ、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜４個のヘテロ原子を有する非置換５〜６員の飽和環、非置換５〜６員の部分的に不飽和な環またはアリール環であるか、あるいは、上記定義にかかわらず、２つの独立に出現するＲ†はその介在原子（単数または複数）と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜４個のヘテロ原子を有する非置換３〜１２員の飽和環、非置換３〜１２員の部分的に不飽和な環またはアリール単環もしくはアリール二環を形成している。
【００４６】
Ｒ†の脂肪族基上の適切な置換基は独立に、ハロゲン、−Ｒ●、−（ハロＲ●）、−ＯＨ、−ＯＲ●、−Ｏ（ハロＲ●）、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ●、−ＮＨ２、−ＮＨＲ●、−ＮＲ●２または−ＮＯ２であり、各Ｒ●は、置換されていないか、または、「ハロ」が先行する場合、１個もしくは複数のハロゲンだけで置換されており、独立に、Ｃ１〜４脂肪族、−ＣＨ２Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ２）０〜１Ｐｈ、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の飽和環、５〜６員の部分的に不飽和な環またはアリール環である。
【００４７】
本明細書で用いる「薬学的に許容される塩」という用語は、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応などを伴うことなくヒトや下等動物の組織と接触して用いるのに適しており、かつ、妥当な便益／リスク比に相応した塩を指す。薬学的に許容される塩は当技術分野で周知である。例えば、Ｓ．  Ｍ．  Ｂｅｒｇｅらは、Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１９７７年、６６巻、１〜１９頁において薬学的に許容される塩を詳細に記載している。これを参照により本明細書に組み込む。本発明の化合物の薬学的に許容される塩には、適切な無機および有機の酸および塩基から誘導されるものが含まれる。薬学的に許容される無毒性付加塩の例は、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸および過塩素酸などの無機酸、または酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸もしくはマロン酸などの有機酸と形成させるか、あるいは、イオン交換などの当技術分野で用いられている他の方法によるアミノ基の塩である。他の薬学的に許容される塩には、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、ショウノウ酸塩、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモン酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などが含まれる。
【００４８】
適切な塩基から誘導される塩には、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩およびＮ＋（Ｃ１〜４アルキル）４塩が含まれる。代表的なアルカリ塩またはアルカリ土類金属塩には、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどの塩が含まれる。他の薬学的に許容される塩には、適切な場合、ハライド、ヒドロキシド、カルボキシレート、サルフェート、ホスフェート、ナイトレート、低級アルキルスルホネートならびにアリールスルホネートなどの対イオンを用いて形成される、無毒性アンモニウム、四級アンモニウムおよびアミンカチオンが含まれる。
【００４９】
別段の言及のない限り、本明細書で示す構造は、その構造のすべての異性体（例えば、鏡像異性体、ジアステレオマーおよび幾何（または構造）異性体）形態；例えば、各不斉中心についてのＲ型およびＳ型の構造、Ｚ型およびＥ型の二重結合異性体ならびにＺ型およびＥ型の構造異性体を含むことも意味する。したがって、本発明の化合物の単一の立体異性体、ならびに鏡像異性体の混合物、ジアステレオマーの混合物および幾何（または構造）異性体の混合物は本発明の範囲内である。別段の言及のない限り、本発明の化合物のすべての互変異性形態は本発明の範囲内である。さらに、別段の言及のない限り、本明細書で示す構造は、１つまたは複数の同位体的に濃縮された原子が存在することだけが異なる化合物を含むことも意味する。例えば、水素を重水素または三重水素で置き換えていること、あるいは、炭素を１３Ｃ−富化炭素または１４Ｃ−富化炭素で置き換えていることを含み、本発明の構造を有する化合物は本発明の範囲内である。そうした化合物は、例えば、生物学的アッセイにおける分析ツールまたはプローブとして、あるいは、本発明による治療薬として有用である。特定の実施形態では、提供した化合物の弾頭部分、Ｒ３は１つまたは複数の重水素原子を含む。
【００５０】
本明細書で用いる「不可逆的」または「不可逆的阻害剤」という用語は、実質的に非可逆的な仕方でＨＣＶプロテアーゼと共有結合することができる阻害剤（すなわち、ある化合物）を指す。すなわち、可逆的阻害剤はＨＣＶプロテアーゼと結合することができ（しかし、一般にそれと共有結合を形成することはできない）、したがって、ＨＣＶプロテアーゼから解離することができるが、不可逆的阻害剤は、共有結合がいったん形成されたらＨＣＶプロテアーゼと実質的に結合したままとなる。不可逆的阻害剤は通常時間依存性を示し、それによって、阻害剤がその酵素と接触している時間とともに、阻害の度合いが増大する。特定の実施形態では、共有結合形成がいったんなされたら、不可逆的阻害剤はＨＣＶプロテアーゼと実質的に結合したままとなり、タンパク質の寿命より長い期間結合したままとなる。
【００５１】
化合物が不可逆的阻害剤として作用しているかどうかを特定する方法は、当業者に公知である。そうした方法には、これらに限定されないが、化合物のＨＣＶプロテアーゼでの阻害プロファイルの酵素動力学的解析、阻害剤化合物の存在下で改変されたタンパク質薬物標的の質量分析の使用、「ウォッシュアウト」実験としても公知の不連続曝露、および酵素の共有結合性改変を示すための放射性標識阻害剤などの標識化の使用、ならびに当業者に公知の他の方法が含まれる。
【００５２】
当業者は、特定の反応性官能基が「弾頭」として作用することができることを理解されよう。本明細書で用いる「弾頭」または「弾頭基」という用語は、本発明の化合物上に存在する官能基であって、標的タンパク質の結合ポケット中に存在するアミノ酸残基（システイン、リシン、ヒスチジン、または共有結合的に改変することができる他の残基など）と共有結合し、それによってタンパク質を不可逆的に阻害することができる官能基を指す。本明細書で定義し説明する−Ｌ−Ｙ基が、タンパク質を共有結合的にかつ不可逆的に阻害するためのそうした弾頭基を提供することを理解されよう。
【００５３】
本明細書で用いる「阻害剤」という用語は、測定可能な親和力でＨＣＶプロテアーゼと結合する、かつ／またはそれを阻害する化合物と定義される。特定の実施形態では、阻害剤は、約５０μＭ未満、約１μＭ未満、約５００ｎＭ未満、約１００ｎＭ未満、約１０ｎＭ未満または約１ｎＭ未満のＩＣ５０および／または結合定数を有する。
【００５４】
本発明の化合物は、検出可能部分につなぎ止めることができる。当業者は、適切な置換基を介して、検出可能部分を、提供される化合物と結合させることができることを理解されよう。本明細書で用いる「適切な置換基」という用語は、検出可能部分と共有結合することができる部分を指す。そうした部分は当業者に周知であり、若干挙げるとすると、例えば、カルボキシレート部分、アミノ部分、チオール部分またはヒドロキシル部分を含む基が含まれる。そうした部分は、提供される化合物と直接結合することも、また、二価の飽和または不飽和の炭化水素鎖などのつなぎ止め基を介して結合することもできることを理解されよう。いくつかの実施形態では、そうした部分は、クリック化学を介して結合することができる。いくつかの実施形態では、そうした部分は、任意選択で銅触媒の存在下、アジドのアルキンとの１，３−付加環化を介して結合することができる。クリック化学を用いる方法は、当技術分野で公知であり、それには、Ｒｏｓｔｏｖｔｓｅｖら、Ａｎｇｅｗ．  Ｃｈｅｍ．  Ｉｎｔ．  Ｅｄ．２００２年、４１巻、２５９６〜９９頁およびＳｕｎら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．、２００６年、１７巻、５２〜５７頁に記載されているものが含まれる。
【００５５】
本明細書で用いる「検出可能部分」という用語は、「標識」という用語と互換的に用いることができ、それは、検出することができる任意の部分、例えば一次標識および二次標識と関連する。放射性同位体（例えば、三重水素、３２Ｐ、３３Ｐ、３５Ｓまたは１４Ｃ）、質量タグおよび蛍光標識などの一次標識は、さらに改変することなく検出することができるシグナル発生レポーター基である。検出可能部分は、発光性基およびリン光性基も含む。
【００５６】
本明細書で用いる「二次標識」という用語は、検出可能なシグナルを生成するための第２の中間体の存在を必要とする、ビオチンや様々なタンパク質抗原などの部分を指す。ビオチンのためには、二次中間体は、ストレプトアビジン−酵素複合体を含むことができる。抗原標識のためには、二次中間体は抗体−酵素複合体を含むことができる。無放射蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）の過程で別の基にエネルギーを移動させ、その第２の基が検出されるシグナルを発生するので、いくつかの蛍光基は二次標識として作用する。
【００５７】
本明細書で用いる「蛍光標識」、「蛍光色素」および「フルオロフォア」という用語は、規定された励起波長で光エネルギーを吸収し、異なる波長で光エネルギーを放出する部分を指す。蛍光標識の例には、これらに限定されないが：Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ色素（Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ３５０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ４８８、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ５３２、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ５４６、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ５６８、Ａｌｅｘａ
Ｆｌｕｏｒ５９４、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ６３３、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ６６０およびＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ６８０）、ＡＭＣＡ、ＡＭＣＡ−Ｓ、ＢＯＤＩＰＹ色素（ＢＯＤＩＰＹ  ＦＬ、ＢＯＤＩＰＹ  Ｒ６Ｇ、ＢＯＤＩＰＹ  ＴＭＲ、ＢＯＤＩＰＹ  ＴＲ、ＢＯＤＩＰＹ  ５３０／５５０、ＢＯＤＩＰＹ  ５５８／５６８、ＢＯＤＩＰＹ  ５６４／５７０、ＢＯＤＩＰＹ  ５７６／５８９、ＢＯＤＩＰＹ  ５８１／５９１、ＢＯＤＩＰＹ  ６３０／６５０、ＢＯＤＩＰＹ  ６５０／６６５）、カルボキシローダミン６Ｇ、カルボキシ−Ｘ−ローダミン（ＲＯＸ）、Ｃａｓｃａｄｅ  Ｂｌｕｅ、Ｃａｓｃａｄｅ  Ｙｅｌｌｏｗ、クマリン３４３、シアニン色素（Ｃｙ３、Ｃｙ５、Ｃｙ３．５、Ｃｙ５．５）、ダンシル、Ｄａｐｏｘｙｌ、ジアルキルアミノクマリン、４’，５’−ジクロロ−２’，７’−ジメトキシ−フルオレセイン、ＤＭ−ＮＥＲＦ、エオシン、エリトロシン、フルオレセイン、ＦＡＭ、ヒドロキシクマリン、ＩＲ色素（ＩＲＤ４０、ＩＲＤ７００、ＩＲＤ８００）、ＪＯＥ、リサミンローダミンＢ、マリーナブルー、メトキシクマリン、ナフトフルオレセイン、Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ４８８、Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ５００、Ｏｒｅｇｏｎ  Ｇｒｅｅｎ５１４、Ｐａｃｉｆｉｃ  Ｂｌｕｅ、ＰｙＭＰＯ、ピレン、ローダミンＢ、ローダミン６Ｇ、ローダミングリーン、ローダミンレッド、Ｒｈｏｄｏｌ  Ｇｒｅｅｎ、２’，４’，５’，７’−テトラ−ブロモスルホン−フルオレセイン、テトラメチル−ローダミン（ＴＭＲ）、カルボキシテトラメチルローダミン（ＴＡＭＲＡ）、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ−Ｘが含まれる。
【００５８】
本明細書で用いる「質量タグ」という用語は、質量分析（ＭＳ）検出手法を用いて、その質量によって独自に検出することができる任意の部分を指す。質量タグの例には、Ｎ−［３−［４’−［（ｐ−メトキシテトラフルオロベンジル）オキシ］フェニル］−３−メチルグリセロニル］イソニペコチン酸、４’−［２，３，５，６−テトラフルオロ−４−（ペンタフルオロフェノキシル）］メチルアセトフェノンおよびその誘導体などのエレクトロフォア放出タグが含まれる。これらの質量タグの合成法および有用性は、米国特許第４，６５０，７５０号、同第４，７０９，０１６号、同第５，３６０，８１９１号、同第５，５１６，９３１号、同第５，６０２，２７３号、同第５，６０４，１０４号、同第５，６１０，０２０号および同第５，６５０，２７０号に記載されている。質量タグの他の例には、これらに限定されないが、ヌクレオチド、ジデオキシヌクレオチド、様々な長さおよび塩基組成のオリゴヌクレオチド、オリゴペプチド、オリゴ糖、および様々な長さおよびモノマー組成の他の合成ポリマーが含まれる。適切な質量範囲（１００〜２０００ダルトン）の中性と荷電型の両方の種々の有機分子（生体分子または合成化合物）も質量タグとして使用することができる。
【００５９】
本明細書で用いる「測定可能な親和力」および「測定可能な程度に阻害する（ｍｅａｓｕｒａｂｌｙ  ｉｎｈｉｂｉｔ）」という用語は、本発明の化合物またはその組成物およびＨＣＶプロテアーゼを含む試料と、前記化合物またはその組成物の非存在下でＨＣＶプロテアーゼを含む対応する試料との間のＨＣＶプロテアーゼ活性の測定可能な変化を意味する。
【００６０】
３．例示化合物の説明：
特定の実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物：
【００６１】
【化７】
2015110627.tif 000043
または、薬学的に許容できるその塩を提供する
（式中、
Ｒ１およびＲ１’は独立に、水素もしくは任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか、または、Ｒ１とＲ１’は一緒になって、任意選択で置換された３〜７員炭素環を形成しており；
Ｒ２ａは−ＯＨまたは−ＮＨＳＯ２Ｒ２であり；
Ｒ２は、−Ｎ（Ｒ）２、あるいは、Ｃ３〜７シクロアルキル、架橋二環式の６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
各Ｒは独立に、水素、任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか：または、同一窒素原子上の２つのＲは窒素と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員複素環を形成しており；
Ｒ３は−Ｌ−Ｙであり：
Ｌは、共有結合または二価Ｃ１〜８飽和もしくは不飽和の直鎖状もしくは分枝状の炭化水素鎖であり、Ｌの１、２もしくは３個のメチレン単位は、シクロプロピレン、−ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝ＮＲ）−、−Ｎ＝Ｎ−または−Ｃ（＝Ｎ２）−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；
Ｙは、水素であり、オキソ、ハロゲンもしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族、または、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する３〜１０員単環式もしくは二環式の飽和環、部分的に不飽和な環またはアリール環であり、前記環は−Ｑ−Ｚ、オキソ、ＮＯ２、ハロゲン、ＣＮまたはＣ１〜６脂肪族から独立に選択される１〜４個の基で置換されており：
Ｑは、共有結合、または二価Ｃ１〜６飽和もしくは不飽和の直鎖状もしくは分岐状の炭化水素鎖であり、Ｑの１もしくは２個のメチレン単位は、−ＮＲ−、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＳＯ−または−ＳＯ２−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；
Ｚは、水素、またはオキソ、ハロゲンもしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか；あるいは、
Ｒ３とＲ１はその間の原子と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される２〜６個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された飽和もしくは不飽和１２〜１８員環を形成しており、それによって形成される環は−Ｌ−Ｙを含むか；または、
Ｒ３とならびにＲ１およびＲ１’によって形成される環は、その間の原子と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される２〜６個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された飽和もしくは不飽和１２〜１８員環を形成しており、それによって形成される環は弾頭基を含み；
Ｒ４は、Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ６、
【００６２】
【化８】
2015110627.tif 000044
または天然もしくは非天然アミノ酸側鎖基であり；
各Ｒ５は独立に、−Ｎ（Ｒ）２、あるいは、Ｃ１〜６脂肪族、架橋二環式の６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
Ｒ６は、Ｃ１〜６脂肪族、架橋二環式の６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
Ｒ７は、Ｃ１〜６脂肪族、架橋二環式の６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基であり；
Ｒｚは、
【００６３】
【化９】
2015110627.tif 000045
であるか、またはＲ４とＲｚはその間の原子と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される２〜６個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された飽和もしくは不飽和１６〜２２員環を形成しており；
出現ごとにＲｙのそれぞれは、ハロゲン、−ＯＲ○、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ（Ｒ○）２または任意選択で置換されたＣ１〜４脂肪族から独立に選択され；
ｍは０および４を含む０〜４の整数であり；
ｓは０および４を含む０〜４の整数であり；
ｔは０および４を含む０〜４の整数であり；
但し、ｓとｔの合計はゼロではない）
特定の実施形態では、Ｌは共有結合である。
【００６４】
特定の実施形態では、Ｌは二価のＣ１〜８飽和もしくは不飽和の、直鎖状もしくは分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌの１、２もしくは３個のメチレン単位は、シクロプロピレン、−ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝ＮＲ）−、−Ｎ＝Ｎ−または−Ｃ（＝Ｎ２）−で任意選択でかつ独立に置き換えられている。
【００６５】
特定の実施形態では、Ｌは、二価のＣ１〜８飽和もしくは不飽和の、直鎖状もしくは分岐状の炭化水素鎖である。特定の実施形態では、Ｌは−ＣＨ２−である。
【００６６】
特定の実施形態では、Ｌは、共有結合、−ＣＨ２−、−ＮＨ−、−ＣＨ２ＮＨ−、−ＮＨＣＨ２−、−ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＮＨＳＯ２−、−ＮＨＳＯ２ＣＨ２−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）−または−ＳＯ２ＮＨ−である。
【００６７】
いくつかの実施形態では、Ｌは二価のＣ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１つの二重結合を有しており、Ｌの１もしくは２個の追加のメチレン単位は、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ２−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ）−または−Ｃ（Ｏ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられている。
【００６８】
特定の実施形態では、Ｌは二価のＣ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１つの二重結合を有しており、Ｌの少なくとも１個のメチレン単位は、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ２−、−ＯＣ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）Ｏ−で置き換えられており、Ｌの１もしくは２個の追加のメチレン単位は、シクロプロピレン、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ）−または−Ｃ（Ｏ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられている。
【００６９】
いくつかの実施形態では、Ｌは二価のＣ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１つの二重結合を有しており、Ｌの少なくとも１個のメチレン単位は−Ｃ（Ｏ）−で置き換えられており、Ｌの１もしくは２個の追加のメチレン単位は、シクロプロピレン、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ）−または−Ｃ（Ｏ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられている。
【００７０】
上記で説明したように、特定の実施形態では、Ｌは二価のＣ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１つの二重結合を有する。当業者は、そうした二重結合が、炭化水素鎖骨格内に存在してもよく、また、それが骨格鎖の「外（ｅｘｏ）」にあり、それによってアルキリデン基を形成していてもよいことを理解されよう。例を挙げると、アルキリデン分枝鎖を有するそうしたＬ基には−ＣＨ２Ｃ（＝ＣＨ２）ＣＨ２−が含まれる。したがって、いくつかの実施形態では、Ｌは二価のＣ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１つのアルキリデニル二重結合を有する。Ｌ基の例には、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ（＝ＣＨ２）ＣＨ２−が含まれる。
【００７１】
特定の実施形態では、Ｌは二価のＣ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１つの二重結合を有しており、Ｌの少なくとも１個のメチレン単位は−Ｃ（Ｏ）−で置き換えられている。特定の実施形態では、Ｌは、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ３）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＮＨ（ＣＨ３）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ３）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２ＮＨ（ＣＨ３）−、または−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ３）−または−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−である。
【００７２】
特定の実施形態では、Ｌは二価のＣ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１つの二重結合を有しており、Ｌの少なくとも１個のメチレン単位は−ＯＣ（Ｏ）−で置き換えられている。
【００７３】
いくつかの実施形態では、Ｌは二価のＣ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１つの二重結合を有しており、Ｌの少なくとも１個のメチレン単位は−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ２−、−ＯＣ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）Ｏ−で置き換えられており、Ｌの１もしくは２個の追加のメチレン単位は、シクロプロピレン、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ）−または−Ｃ（Ｏ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられている。いくつかの実施形態では、Ｌは−ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＣＨ２−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−または−ＣＨ（ＣＨ＝ＣＨ２）ＯＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−である。
【００７４】
特定の実施形態では、Ｌは、−ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｏ−、−ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＲＳＯ２ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＲＳＯ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＮＲＣ（Ｏ）（Ｃ＝Ｎ２）Ｃ（Ｏ）−、−ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＲＳＯ２ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＲＳＯ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｏ−、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｃ（＝ＣＨ２）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）−、−ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）−または−ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）シクロプロピレン−であり、各Ｒは独立に、水素であるかまたは任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族である。
【００７５】
特定の実施形態では、Ｌは、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｏ−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＨＳＯ２ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＨＳＯ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ＝Ｎ２）Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＨＳＯ２ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＨＳＯ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｏ−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ（＝ＣＨ２）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−または−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）シクロプロピレン−である。
【００７６】
いくつかの実施形態では、Ｌは二価のＣ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１つの三重結合を有する。特定の実施形態では、Ｌは二価のＣ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１つの三重結合を有し、Ｌの１もしくは２個の追加のメチレン単位は、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝ＮＲ）−、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ）−または−Ｃ（Ｏ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられている。いくつかの実施形態では、Ｌは少なくとも１つの三重結合を有し、Ｌの少なくとも１個のメチレン単位は−Ｎ（Ｒ）−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−または−Ｏ−で置き換えられている。
【００７７】
Ｌ基の例には、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ≡ＣＣＨ２Ｎ（イソプロピル）−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ≡ＣＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２−、−Ｃ≡ＣＣＨ２Ｏ−、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ≡Ｃ−または−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ≡Ｃ−が含まれる。
【００７８】
特定の実施形態では、Ｌは二価のＣ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌの１個のメチレン単位はシクロプロピレンで置き換えられており、Ｌの１もしくは２個の追加のメチレン単位は、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−または−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−で独立に置き換えられている。Ｌ基の例には、−ＮＨＣ（Ｏ）−シクロプロピレン−ＳＯ２−および−ＮＨＣ（Ｏ）−シクロプロピレン−が含まれる。
【００７９】
上記に一般的に定義したように、Ｙは、水素であるか、オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する３〜１０員の単環式もしくは二環式の飽和環、部分的に不飽和な環またはアリール環であり、前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは、−Ｑ−Ｚ、オキソ、ＮＯ２、ハロゲン、ＣＮ、適切な脱離基またはＣ１〜６脂肪族から独立に選択され、Ｑは、共有結合であるかまたは二価のＣ１〜６飽和もしくは不飽和の、直鎖状もしくは分岐状の炭化水素鎖であり、Ｑの１もしくは２個のメチレン単位は、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＯ−、または−ＳＯ２−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−または−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；Ｚは、水素であるか、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族である。
【００８０】
特定の実施形態では、Ｙは水素である。
【００８１】
特定の実施形態では、Ｙは、オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族である。いくつかの実施形態では、Ｙは、オキソ、ハロゲン、ＮＯ２またはＣＮで任意選択で置換されたＣ２〜６アルケニルである。他の実施形態では、Ｙはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２またはＣＮで任意選択で置換されたＣ２〜６アルキニルである。いくつかの実施形態では、ＹはＣ２〜６アルケニルである。他の実施形態では、ＹはＣ２〜４アルキニルである。
【００８２】
他の実施形態では、Ｙはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２またはＣＮで置換されたＣ１〜６アルキルである。そうしたＹ基には、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨ２Ｃｌ、−ＣＨ２ＣＮおよび−ＣＨ２ＮＯ２が含まれる。
【００８３】
特定の実施形態では、Ｙは、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する飽和３〜６員単環であり、Ｙは１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。
【００８４】
いくつかの実施形態では、Ｙは、酸素または窒素から選択される１個のヘテロ原子を有する飽和３〜４員複素環であり、前記環は１〜２個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。そうした環の例はエポキシドおよびオキセタン環であり、各環は１〜２個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。
【００８５】
他の実施形態では、Ｙは、酸素または窒素から選択される１〜２個のヘテロ原子を有する飽和５〜６員複素環であり、前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。そうした環には、ピペリジンおよびピロリジンが含まれ、各環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。特定の実施形態では、Ｙは、
【００８６】
【化１０】
2015110627.tif 000046
であり、但し、各Ｒ、Ｑ、ＺおよびＲｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。
【００８７】
いくつかの実施形態では、Ｙは飽和３〜６員炭素環であり、前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。特定の実施形態では、Ｙは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルまたはシクロヘキシルであり、各環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。特定の実施形態では、Ｙは、
【００８８】
【化１１】
2015110627.tif 000047
であり、但し、Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。特定の実施形態では、Ｙは、ハロゲン、ＣＮまたはＮＯ２で任意選択で置換されたシクロプロピルである。
【００８９】
特定の実施形態では、Ｙは、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する部分的に不飽和の３〜６員単環であり、前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。
【００９０】
いくつかの実施形態では、Ｙは部分的に不飽和の３〜６員炭素環であり、前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。いくつかの実施形態では、Ｙは、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニルまたはシクロヘキセニルであり、各環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。特定の実施形態では、Ｙは、
【００９１】
【化１２】
2015110627.tif 000048
であり、但し、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。
【００９２】
特定の実施形態では、Ｙは、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する部分的に不飽和の４〜６員複素環であり、前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。特定の実施形態では、Ｙは、
【００９３】
【化１３】
2015110627.tif 000049
から選択される。但し、各ＲおよびＲｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。
【００９４】
特定の実施形態では、Ｙは０〜２個の窒素を有する６員芳香環であり、前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅ基は上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。特定の実施形態では、Ｙは、フェニル、ピリジルまたはピリミジニルであり、各環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。
【００９５】
いくつかの実施形態では、Ｙは：
【００９６】
【化１４】
2015110627.tif 000050
から選択され、但し、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。
【００９７】
他の実施形態では、Ｙは、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜３個のヘテロ原子を有する５員ヘテロアリール環であり、前記環は１〜３個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅ基は上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。いくつかの実施形態では、Ｙは、窒素、酸素およびイオウから独立に選択される１〜３個のヘテロ原子を有する５員の部分的に不飽和な環またはアリール環であり、前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅ基は上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。そうした環の例は、イソオキサゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、ピロリル、フラニル、チエニル、トリアゾール、チアジアゾールおよびオキサジアゾールであり、各環は１〜３個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅ基は上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。特定の実施形態では、Ｙは、
【００９８】
【化１５】
2015110627.tif 000051
から選択される。但し、各ＲおよびＲｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。
【００９９】
特定の実施形態では、Ｙは、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式の飽和環、部分的に不飽和な環またはアリール環であり、前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。他の態様によれば、Ｙは、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜３個のヘテロ原子を有する９〜１０員の二環式の部分的に不飽和な環またはアリールの環であり、前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。そうした二環の例には、２，３−ジヒドロベンゾ［ｄ］イソチアゾールが含まれ、前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。
【０１００】
上記に一般的に定義したように、各Ｒｅ基は、−Ｑ−Ｚ、オキソ、ＮＯ２、ハロゲン、ＣＮ、適切な脱離基、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族から独立に選択され、Ｑは、共有結合であるかまたは二価のＣ１〜６飽和もしくは不飽和の、直鎖状もしくは分岐状の炭化水素鎖であり、Ｑの１もしくは２個のメチレン単位は、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＯ−、または−ＳＯ２−、−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−または−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；Ｚは、水素であるか、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族である。
【０１０１】
特定の実施形態では、Ｒｅは、オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族である。他の実施形態では、Ｒｅは、オキソ、ＮＯ２、ハロゲンまたはＣＮである。
【０１０２】
いくつかの実施形態では、Ｒｅは−Ｑ−Ｚであり、Ｑは共有結合であり、Ｚは水素（すなわち、Ｒｅは水素である）である。他の実施形態では、Ｒｅは−Ｑ−Ｚであり、Ｑは、二価のＣ１〜６飽和もしくは不飽和の、直鎖状もしくは分岐状の炭化水素鎖であり、Ｑの１もしくは２個のメチレン単位は、−ＮＲ−、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＳＯ−または−ＳＯ２−で任意選択でかつ独立に置き換えられている。他の実施形態では、Ｑは、少なくとも１つの二重結合を有する二価のＣ２〜６直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｑの１もしくは２個のメチレン単位は、−ＮＲ−、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｓ−、−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＳＯ−または−ＳＯ２−で任意選択でかつ独立に置き換えられている。特定の実施形態では、Ｒｅ基のＺ部分は水素である。いくつかの実施形態では、−Ｑ−Ｚは、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ２または−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ２である。
【０１０３】
特定の実施形態では、各Ｒｅは、オキソ、ＮＯ２、ＣＮ、フルオロ、クロロ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ２、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ２、−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２、−Ｃ≡ＣＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｃｌ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２Ｆ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃｌ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｆ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２ＣＮまたは−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＣＨ３から独立に選択される。
【０１０４】
特定の実施形態では、Ｒｅは、適切な脱離基、すなわち、求核置換を施される基である。「適切な脱離（基）」は、対象システインのチオール部分などの所望の取り込まれる化学部分によって容易に置換される化学基である。適切な脱離基は当技術分野で周知である。例えば、「Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、Ｊｅｒｒｙ  Ｍａｒｃｈ、５ｔｈ  Ｅｄ．、３５１〜３５７頁、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、Ｎ．Ｙを参照されたい。そうした脱離基には、これらに限定されないが、ハロゲン、アルコキシ、スルホニルオキシ、任意選択で置換されたアルキルスルホニルオキシ、任意選択で置換されたアルケニルスルホニルオキシ、任意選択で置換されたアリールスルホニルオキシ、アシルおよびジアゾニウム部分が含まれる。適切な脱離基の例には、クロロ、ヨード、ブロモ、フルオロ、アセトキシ、メタンスルホニルオキシ（メシルオキシ）、トシルオキシ、トリフリルオキシ、ニトロ−フェニルスルホニルオキシ（ノシルオキシ）およびブロモ−フェニルスルホニルオキシ（ブロシルオキシ）が含まれる。
【０１０５】
特定の実施形態では、−Ｌ−Ｙの以下の実施形態および組合せが適用される：
（ａ）Ｌは、二価のＣ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１つの二重結合を有しており、Ｌの１もしくは２個の追加のメチレン単位は、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ２−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、シクロプロピレン、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ）−または−Ｃ（Ｏ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；Ｙは、水素であるか、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか；または、
（ｂ）Ｌは、二価のＣ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１つの二重結合を有しており、Ｌの少なくとも１個のメチレン単位は、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ２−、−ＯＣ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）Ｏ−で置き換えられており、Ｌの１もしくは２個の追加のメチレン単位は、シクロプロピレン、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ）−または−Ｃ（Ｏ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；Ｙは、水素であるか、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか；または、
（ｃ）Ｌは、二価のＣ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１つの二重結合を有しており、Ｌの少なくとも１個のメチレン単位は−Ｃ（Ｏ）−で置き換えられており、Ｌの１もしくは２個の追加のメチレン単位は、シクロプロピレン、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ）−または−Ｃ（Ｏ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；Ｙは、水素であるか、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか；または、
（ｄ）Ｌは、二価のＣ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１つの二重結合を有しており、Ｌの少なくとも１個のメチレン単位は−Ｃ（Ｏ）−で置き換えられており；Ｙは、水素であるか、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか：または、（ｅ）Ｌは、二価のＣ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１つの二重結合を有しており、Ｌの少なくとも１個のメチレン単位は−ＯＣ（Ｏ）−で置き換えられており；Ｙは、水素であるか、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか：または、
（ｆ）Ｌは、−ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｏ−、−ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＲＳＯ２ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＲＳＯ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＮＲＣ（Ｏ）（Ｃ＝Ｎ２）−、−ＮＲＣ（Ｏ）（Ｃ＝Ｎ２）Ｃ（Ｏ）−、−ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＲＳＯ２ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＲＳＯ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｏ−、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｃ（＝ＣＨ２）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）−、−ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）−または−ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）シクロプロピレン−であり；ＲはＨまたは任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であり；Ｙは、水素であるか、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか：または、
（ｇ）Ｌは、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｏ−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＨＳＯ２ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＨＳＯ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ＝Ｎ２）−、−ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ＝Ｎ２）Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）−、−ＮＨＳＯ２ＣＨ＝ＣＨ−、−ＮＨＳＯ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨＣＨ２Ｏ−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ（＝ＣＨ２）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−または−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）シクロプロピレン−であり；Ｙは、水素であるか、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか：または、
（ｈ）Ｌは、二価のＣ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１つのアルキリデニル二重結合を有し、Ｌの少なくとも１個のメチレン単位は、−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ２−、−ＯＣ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）Ｏ−で置き換えられており、Ｌの１もしくは２個の追加のメチレン単位は、シクロプロピレン、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ）−または−Ｃ（Ｏ）−で任意選択でかつ独立に置き換えられており；Ｙは、水素であるか、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか：または、
（ｉ）Ｌは、二価のＣ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌは少なくとも１つの三重結合を有し、Ｌの１もしくは２個の追加のメチレン単位は、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ２−、−ＯＣ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）Ｏ−で任意選択でかつ独立に置き換えられており、Ｙは、水素であるか、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか：または、
（ｊ）Ｌは、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ≡ＣＣＨ２Ｎ（イソプロピル）−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｃ≡ＣＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２−、−Ｃ≡ＣＣＨ２Ｏ−、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ（Ｏ）Ｃ≡Ｃ−または−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ≡Ｃ−であり；Ｙは、水素であるか、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか：または、
（ｋ）Ｌは、二価のＣ２〜８直鎖状または分岐状の炭化水素鎖であり、Ｌの１個のメチレン単位はシクロプロピレンで置き換えられており、Ｌの１もしくは２個の追加のメチレン単位は、−ＮＲＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ−、−Ｎ（Ｒ）ＳＯ２−、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ２−、−ＯＣ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）Ｏ−で独立に置き換えられており；Ｙは、水素であるか、またはオキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか：または、
（ｌ）Ｌは共有結合であり、Ｙは：
（ｉ）オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで置換されたＣ１〜６アルキル；
（ｉｉ）オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ２〜６アルケニル；または
（ｉｉｉ）オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ２〜６アルキニル；または
（ｉｖ）酸素もしくは窒素から選択される１個のヘテロ原子を有する飽和３〜４員複素環（前記環は１〜２個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｖ）酸素もしくは窒素から選択される１〜２個のヘテロ原子を有する飽和５〜６員複素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｖｉ）
【０１０６】
【化１６】
2015110627.tif 000052
（但し、各Ｒ、Ｑ、ＺおよびＲｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｖｉｉ）飽和３〜６員炭素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｖｉｉｉ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する部分的に不飽和の３〜６員単環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｉｘ）部分的に不飽和の３〜６員炭素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘ）
【０１０７】
【化１７】
2015110627.tif 000053
（但し、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｉ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する部分的に不飽和の４〜６員複素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｉｉ）
【０１０８】
【化１８】
2015110627.tif 000054
（但し、各ＲおよびＲｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または（ｘｉｉｉ）０〜２個の窒素を有する６員芳香環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅ基は上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｉｖ）
【０１０９】
【化１９】
2015110627.tif 000055
（但し、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｖ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜３個のヘテロ原子を有する５員ヘテロアリール環（前記環は１〜３個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅ基は上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｖｉ）
【０１１０】
【化２０】
2015110627.tif 000056
（但し、各ＲおよびＲｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または、
（ｘｖｉｉ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式の飽和環、部分的に不飽和な環またはアリール環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；
から選択されるか、
（ｍ）Ｌは−Ｃ（Ｏ）−であり、Ｙは：
（ｉ）オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで置換されたＣ１〜６アルキル；または
（ｉｉ）オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ２〜６アルケニル；または
（ｉｉｉ）オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ２〜６アルキニル；または
（ｉｖ）酸素もしくは窒素から選択される１個のヘテロ原子を有する飽和３〜４員複素環（前記環は１〜２個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｖ）酸素もしくは窒素から選択される１〜２個のヘテロ原子を有する飽和５〜６員複素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｖｉ）
【０１１１】
【化２１】
2015110627.tif 000057
（但し、各Ｒ、Ｑ、ＺおよびＲｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｖｉｉ）飽和３〜６員炭素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｖｉｉｉ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する部分的に不飽和の３〜６員単環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｉｘ）部分的に不飽和の３〜６員炭素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘ）
【０１１２】
【化２２】
2015110627.tif 000058
（但し、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｉ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する部分的に不飽和の４〜６員複素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｉｉ）
【０１１３】
【化２３】
2015110627.tif 000059
（但し、各ＲおよびＲｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または（ｘｉｉｉ）０〜２個の窒素を有する６員芳香環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅ基は上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｉｖ）
【０１１４】
【化２４】
2015110627.tif 000060
（但し、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｖ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜３個のヘテロ原子を有する５員ヘテロアリール環（前記環は１〜３個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅ基は上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｖｉ）
【０１１５】
【化２５】
2015110627.tif 000061
【０１１６】
【化２６】
2015110627.tif 000062
（但し、各ＲおよびＲｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または、
（ｘｖｉｉ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式の飽和環、部分的に不飽和の環またはアリール環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；
から選択されるか、
（ｎ）Ｌは−Ｎ（Ｒ）Ｃ（Ｏ）−であり、Ｙは：
（ｉ）オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで置換されたＣ１〜６アルキル；または
（ｉｉ）オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ２〜６アルケニル；または
（ｉｉｉ）オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ２〜６アルキニル；または
（ｉｖ）酸素もしくは窒素から選択される１個のヘテロ原子を有する飽和３〜４員複素環（前記環は１〜２個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｖ）酸素もしくは窒素から選択される１〜２個のヘテロ原子を有する飽和５〜６員複素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｖｉ）
【０１１７】
【化２７】
2015110627.tif 000063
（但し、各Ｒ、Ｑ、ＺおよびＲｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｖｉｉ）飽和３〜６員炭素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または（ｖｉｉｉ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する部分的に不飽和の３〜６員単環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｉｘ）部分的に不飽和の３〜６員炭素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘ）
【０１１８】
【化２８】
2015110627.tif 000064
（但し、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｉ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する部分的に不飽和の４〜６員複素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｉｉ）
【０１１９】
【化２９】
2015110627.tif 000065
（但し、各ＲおよびＲｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または（ｘｉｉｉ）０〜２個の窒素を有する６員芳香環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅ基は上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｉｖ）
【０１２０】
【化３０】
2015110627.tif 000066
（但し、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｖ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜３個のヘテロ原子を有する５員ヘテロアリール環（前記環は１〜３個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅ基は上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｖｉ）
【０１２１】
【化３１】
2015110627.tif 000067
【０１２２】
【化３２】
2015110627.tif 000068
（但し、各ＲおよびＲｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または、
（ｘｖｉｉ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式の飽和環、部分的に不飽和な環またはアリール環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；
から選択されるか、
（ｏ）Ｌは、二価のＣ１〜８飽和もしくは不飽和の、直鎖状もしくは分岐状の炭化水素鎖であり；Ｙは：
（ｉ）オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで置換されたＣ１〜６アルキル；
（ｉｉ）オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ２〜６アルケニル；または
（ｉｉｉ）オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ２〜６アルキニル；または
（ｉｖ）酸素もしくは窒素から選択される１個のヘテロ原子を有する飽和３〜４員複素環（前記環は１〜２個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｖ）酸素もしくは窒素から選択される１〜２個のヘテロ原子を有する飽和５〜６員複素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｖｉ）
【０１２３】
【化３３】
2015110627.tif 000069
（但し、各Ｒ、Ｑ、ＺおよびＲｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｖｉｉ）飽和３〜６員炭素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｖｉｉｉ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する部分的に不飽和の３〜６員単環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｉｘ）部分的に不飽和の３〜６員炭素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘ）
【０１２４】
【化３４】
2015110627.tif 000070
（但し、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｉ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する部分的に不飽和の４〜６員複素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｉｉ）
【０１２５】
【化３５】
2015110627.tif 000071
（但し、各ＲおよびＲｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または（ｘｉｉｉ）０〜２個の窒素を有する６員芳香環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅ基は上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｉｖ）
【０１２６】
【化３６】
2015110627.tif 000072
（但し、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｖ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜３個のヘテロ原子を有する５員ヘテロアリール環（前記環は１〜３個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅ基は上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｖｉ）
【０１２７】
【化３７】
2015110627.tif 000073
【０１２８】
【化３８】
2015110627.tif 000074
（但し、各ＲおよびＲｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または、
（ｘｖｉｉ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式の飽和環、部分的に不飽和な環またはアリール環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）
から選択されるか、
（ｐ）Ｌは、共有結合、−ＣＨ２−、−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２ＮＨ−、−ＮＨＣＨ２−、−ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）−、−ＣＨ２ＮＨＣ（Ｏ）−、−ＮＨＳＯ２−、−ＮＨＳＯ２ＣＨ２−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）−または−ＳＯ２ＮＨ−であり；Ｙは、
（ｉ）オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで置換されたＣ１〜６アルキル；または
（ｉｉ）オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ２〜６アルケニル；または
（ｉｉｉ）オキソ、ハロゲン、ＮＯ２もしくはＣＮで任意選択で置換されたＣ２〜６アルキニル；または
（ｉｖ）酸素もしくは窒素から選択される１個のヘテロ原子を有する飽和３〜４員複素環（前記環は１〜２個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｖ）酸素もしくは窒素から選択される１〜２個のヘテロ原子を有する飽和５〜６員複素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｖｉ）
【０１２９】
【化３９】
2015110627.tif 000075
（但し、各Ｒ、Ｑ、ＺおよびＲｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｖｉｉ）飽和３〜６員炭素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｖｉｉｉ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する部分的に不飽和の３〜６員単環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｉｘ）部分的に不飽和の３〜６員炭素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘ）
【０１３０】
【化４０】
2015110627.tif 000076
（但し、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｉ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する部分的に不飽和の４〜６員複素環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｉｉ）
【０１３１】
【化４１】
2015110627.tif 000077
（但し、各ＲおよびＲｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または（ｘｉｉｉ）０〜２個の窒素を有する６員芳香環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅ基は上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｉｖ）
【０１３２】
【化４２】
2015110627.tif 000078
（但し、各Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｖ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜３個のヘテロ原子を有する５員ヘテロアリール環（前記環は１〜３個のＲｅ基で置換されており、各Ｒｅ基は上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または
（ｘｖｉ）
【０１３３】
【化４３】
2015110627.tif 000079
【０１３４】
【化４４】
2015110627.tif 000080
（但し、各ＲおよびＲｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）；または、
（ｘｖｉｉ）窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される０〜３個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式の飽和環、部分的に不飽和な環またはアリール環（前記環は１〜４個のＲｅ基で置換されており、Ｒｅは上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである）
から選択される。
【０１３５】
特定の実施形態では、式ＩのＹ基は以下の表１に示すものから選択され、各波線はその分子の残りとの結合点を示す。
【０１３６】
【表１−１】
2015110627.tif 000081
【０１３７】
【表１−２】
2015110627.tif 000082
【０１３８】
【表１−３】
2015110627.tif 000083
【０１３９】
【表１−４】
2015110627.tif 000084
（式中、各Ｒｅは独立に、適切な脱離基、ＮＯ２、ＣＮまたはオキソである。）。
【０１４０】
特定の実施形態では、式ＩのＲ３基は以下の表２に示すものから選択され、各波線はその分子の残りとの結合点を示す。
【０１４１】
【表２−１】
2015110627.tif 000085
【０１４２】
【表２−２】
2015110627.tif 000086
【０１４３】
【表２−３】
2015110627.tif 000087
【０１４４】
【表２−４】
2015110627.tif 000088
【０１４５】
【表２−５】
2015110627.tif 000089
（式中、各Ｒｅは独立に、適切な脱離基、ＮＯ２、ＣＮまたはオキソである。）。
【０１４６】
特定の実施形態では、式ＩのＲ１基およびＲ１’基は独立に、水素または任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族である。いくつかの実施形態では、Ｒ１は水素であり、Ｒ１’はＣ１〜４脂肪族である。他の実施形態では、Ｒ１は水素であり、Ｒ１’はｎ−プロピルである。
【０１４７】
特定の実施形態では、式ＩのＲ１基とＲ１’基は一緒になって、任意選択で置換された３〜７員炭素環を形成している。いくつかの実施形態では、式ＩのＲ１基とＲ１’基は一緒になって、任意選択で置換されたシクロプロピル環を形成している。いくつかの実施形態では、式ＩのＲ１基とＲ１’基は一緒になって、エチルまたはビニルで置換されたシクロプロピル環を形成している。
【０１４８】
いくつかの実施形態では、Ｒ４はＨ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ６、
【０１４９】
【化４５】
2015110627.tif 000090
であるか；または、Ｒ４とＲｚはその介在原子と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される２〜６個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された飽和または不飽和の１６〜２２員環を形成している。
【０１５０】
特定の実施形態では、式ＩのＲ４基は−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ５である。いくつかの実施形態では、式ＩのＲ４基は−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ６である。他の実施形態では、式ＩのＲ４基は
【０１５１】
【化４６】
2015110627.tif 000091
である。特定の実施形態では、式ＩのＲ４基は水素である。
【０１５２】
いくつかの実施形態では、Ｒ４が−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ５である場合、Ｒ５は、Ｃ１〜６脂肪族、あるいは、架橋型二環式、６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基である。
【０１５３】
いくつかの実施形態では、Ｒ４が−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ６である場合、Ｒ６は、Ｃ１〜６脂肪族、あるいは、架橋型二環式、６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基である。
【０１５４】
いくつかの実施形態では、式ＩのＲ４基はアミノ酸側鎖基である。いくつかの実施形態では、式ＩのＲ４基は非天然のアミノ酸側鎖基である。いくつかの実施形態では、式ＩのＲ４基は脂肪族非天然アミノ酸側鎖基である。いくつかの実施形態では、式ＩのＲ４基は、アラニンを１、２または３個のＲ○基で置換した非天然アミノ酸側鎖基であり、各Ｒ○は上記定義通りである。いくつかの実施形態では、式ＩのＲ４基は天然アミノ酸側鎖基である。
【０１５５】
特定の実施形態では、式ＩのＲ４基は、アラニンの天然アミノ酸側鎖基である（すなわち、Ｒ４はメチルである）。いくつかの実施形態では、式ＩのＲ４基は、Ｄ−アラニンの天然アミノ酸側鎖基である。いくつかの実施形態では、式ＩのＲ４基は、Ｌ−アラニンの天然アミノ酸側鎖基である。
【０１５６】
他の実施形態では、式ＩのＲ４基は、バリンの天然アミノ酸側鎖基である。いくつかの実施形態では、式ＩのＲ４基は、Ｄ−バリンの天然アミノ酸側鎖基である。いくつかの実施形態では、式ＩのＲ４基は、Ｌ−バリンの天然アミノ酸側鎖基である。
【０１５７】
いくつかの実施形態では、式ＩのＲ４基は、Ｄ体とＬ体の両方の構造のアミノ酸側鎖基の混合物からなる。そうしたＲ４基を、本明細書では「Ｄ、Ｌ−混合アミノ酸側鎖基」と称する。いくつかの実施形態では、Ｄ−アミノ酸側鎖基とＬ−アミノ酸側鎖基の比は、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、１：２、１：３、１：４；１：５および１：６のいずれかから選択される。したがって、特定の実施形態では、式ＩのＲ４基はＤ、Ｌ−混合アラニン側鎖基である。他の実施形態では、式ＩのＲ４基はＤ、Ｌ−混合バリン側鎖基である。
【０１５８】
特定の理論に拘泥するわけではないが、式Ｉの化合物について、Ｄ体構造のアミノ酸側鎖基を有することは、化合物が、ＨＣＶプロテアーゼを結合し易くする配置をとることを可能にするのに有用であると考えられる。
【０１５９】
特定の実施形態では、式ＩのＲ５基およびＲ７基は独立に、Ｃ１〜６脂肪族、６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基から選択される任意選択で置換された基である。いくつかの実施形態では、Ｒ５は、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された５〜１０員ヘテロアリールであり、Ｒ７は任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族基である。いくつかの実施形態では、Ｒ５は
【０１６０】
【化４７】
2015110627.tif 000092
であり、Ｒ７はシクロヘキシルである。
【０１６１】
特定の実施形態では、Ｒ４は−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ５であり、Ｒ５は独立に、−Ｎ（Ｒ）２、またはＣ１〜６脂肪族から選択される任意選択で置換された基である。いくつかの実施形態では、Ｒ５は−Ｎ（Ｒ）２であり、各Ｒは独立に、水素、任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族であるか、または同一窒素原子上の２つのＲは窒素と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員複素環を形成している。いくつかの実施形態では、Ｒ５は−Ｎ（Ｒ）２であり、各Ｒは独立に水素またはｔ−ブチルである。
【０１６２】
特定の実施形態では、式ＩのＲ５基は、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された５〜１０員ヘテロアリール環である。いくつかの実施形態では、Ｒ５は、１〜２個の窒素を有する任意選択で置換された６員ヘテロアリール環である。特定の実施形態では、Ｒ５はピペラジニルである。
【０１６３】
特定の実施形態では、式ＩのＲ７基は任意選択で置換されたＣ１〜６脂肪族基である。いくつかの実施形態では、Ｒ７は分岐状Ｃ１〜５アルキル基である。他の実施形態では、Ｒ７はシクロペンチルまたはシクロヘキシルである。
【０１６４】
特定の実施形態では、Ｒｚは
【０１６５】
【化４８】
2015110627.tif 000093
である。特定の実施形態では、Ｒｚは
【０１６６】
【化４９】
2015110627.tif 000094
である。特定の実施形態では、Ｒｚは
【０１６７】
【化５０】
2015110627.tif 000095
である。特定の実施形態では、Ｒｚは
【０１６８】
【化５１】
2015110627.tif 000096
である。特定の実施形態では、Ｒｚは
【０１６９】
【化５２】
2015110627.tif 000097
である。特定の実施形態では、Ｒｚは
【０１７０】
【化５３】
2015110627.tif 000098
である。特定の実施形態では、Ｒｚは
【０１７１】
【化５４】
2015110627.tif 000099
である。特定の実施形態では、Ｒｚは
【０１７２】
【化５５】
2015110627.tif 000100
である。特定の実施形態では、Ｒｚは
【０１７３】
【化５６】
2015110627.tif 000101
である。
【０１７４】
いくつかの実施形態では、Ｒｙはハロゲンである。他の実施形態では、ＲｙはＣ１〜４脂肪族である。特定の実施形態では、Ｒｙはフルオロである。特定の実施形態では、Ｒｙはクロロである。特定の実施形態では、Ｒｙはブロモである。特定の実施形態では、Ｒｙはヨードである。他の実施形態では、Ｒｙはビニルである。
【０１７５】
いくつかの実施形態では、ｍは１および３を含む１〜３の整数である。いくつかの実施形態では、ｍは１である。いくつかの実施形態では、ｍは２である。いくつかの実施形態では、ｍは３である。
【０１７６】
いくつかの実施形態では、ｓは１および３を含む１〜３の整数である。いくつかの実施形態では、ｓは０である。いくつかの実施形態では、ｓは１である。いくつかの実施形態では、ｓは２である。いくつかの実施形態では、ｓは３である。いくつかの実施形態では、ｓは４である。
【０１７７】
いくつかの実施形態では、ｔは１および３を含む１〜３の整数である。いくつかの実施形態では、ｔは０である。いくつかの実施形態では、ｔは１である。いくつかの実施形態では、ｔは２である。いくつかの実施形態では、ｔは３である。いくつかの実施形態では、ｔは４である。
【０１７８】
特定の実施形態では、式ＩのＲ２ａ基は−ＯＨである。他の実施形態では、式ＩのＲ２ａ基は−ＮＨＳＯ２Ｒ２であり、Ｒ２は上記に定義し、かつ本明細書で説明する通りである。したがって、本発明は、式Ｉ−ａまたはＩ−ｂの化合物：
【０１７９】
【化５７】
2015110627.tif 000102
または薬学的に許容されるその塩を提供する。式中、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、およびＲｚのそれぞれは、式Ｉについて上記に定義し、上記および本明細書でのクラスおよびサブクラスにおいて説明した通りである。
【０１８０】
特定の実施形態では、式Ｉ−ｂのＲ２基は−Ｎ（Ｒ）２である。他の実施形態では、式Ｉ−ｂのＲ２基はＣ３〜７シクロアルキル、６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される任意選択で置換された基である。特定の実施形態では、Ｒ２は、Ｃ３〜７シクロアルキルまたは６〜１０員アリールである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は任意選択で置換された６〜１０員アリールである。いくつかの実施形態では、Ｒ２はフェニルである。特定の実施形態では、Ｒ２はシクロプロピルである。
【０１８１】
特定の実施形態では、Ｒ２は、Ｃ３〜７シクロアルキル、架橋型二環式、６〜１０員アリール、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５〜１０員ヘテロアリール、または窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜７員ヘテロシクリルから選択される。
【０１８２】
特定の実施形態では、式ＩのＲ３基は弾頭基である。いくつかの実施形態では、式ＩのＲ３基とＲ１基はその介在原子と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される２〜６個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された飽和または不飽和の１２〜１８員環を形成しており、それによって形成される環は弾頭基を含む。いくつかの実施形態では、Ｒ３と、Ｒ１およびＲ１’によって形成される環とは、その介在原子と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される２〜６個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された飽和または不飽和の１２〜１８員環を形成しており、それによって形成される環は弾頭基を含む。
【０１８３】
上記に一般的に定義したように、式ＩのＲ３基とＲ１基によって形成される環は弾頭基を含む。本明細書で用いる「弾頭基を含む」という語句は、Ｒ３とＲ１によって形成される環が、弾頭基で置換されているか、またはその環内に組み込まれたそうした弾頭基を有することを意味する。例えば、Ｒ３とＲ１によって形成される環は、−Ｌ−Ｙ弾頭基で置換されていてよく、そうした基は本明細書で説明する通りである。あるいは、Ｒ３とＲ１によって形成される環は、その環内に組み込まれた弾頭基の適切な特徴を有する。例えば、Ｒ３とＲ１によって形成される環は、１つまたは複数の不飽和単位と任意選択の置換基および／またはヘテロ原子を含むことができ、これらは一緒になって、本発明によるＨＣＶプロテアーゼを共有結合的に改変できる部分をもたらす。特定の実施形態では、Ｒ３とＲ１によって形成される環は、それにＲ４が結合している炭素に関してα−、β−、またはγ−位で任意選択で置換されている。
【０１８４】
Ｒ３とＲ１がその介在原子と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される２〜６個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された飽和または不飽和の１２〜１８員環を形成している場合、そうした化合物は、Ｒ３と、Ｒ１およびＲ１’によって形成された環と一緒になった化合物を含むことを理解されよう。
【０１８５】
Ｒ３と、Ｒ１およびＲ１’とによって形成された環が一緒になった式Ｉの化合物の例には、式Ｉ−ｃ−１、Ｉ−ｃ−２、Ｉ−ｃ−３、Ｉ−ｃ−４、Ｉ−ｃ−５−およびＩ−ｃ−６：
【０１８６】
【化５８】
2015110627.tif 000103
の化合物または薬学的に許容されるその塩が含まれる。
（式中、Ｒ２ａ、Ｒ４およびＲｚのそれぞれは、上記に定義し、本明細書でのクラスおよびサブクラスにおいて説明した通りである）
式Ｉ−ｃ−１、Ｉ−ｃ−２、Ｉ−ｃ−３、Ｉ−ｃ−４、Ｉ−ｃ−５およびＩ−ｃ−６は、Ｒ１およびＲ１’によって形成されたシクロプロピル環を示しているが、この基は例として示されており、したがって、本明細書で説明する他のＲ１基およびＲ１’基を意図することを理解されよう。
【０１８７】
そうした化合物の例には、以下の表３に示すものが含まれる。
【０１８８】
式Ｉ−ｃ−１、Ｉ−ｃ−２、Ｉ−ｃ−３、Ｉ−ｃ−４、Ｉ−ｃ−５およびＩ−ｃ−６の化合物を、大環状環（ｍａｃｒｏｃｙｃｌｉｃ  ｒｉｎｇ）中に（Ｚ）形の二重結合立体配置（ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）を有する形で表しているが、特定の実施形態では、式Ｉ−ｃ−１、Ｉ−ｃ−２、Ｉ−ｃ−３、Ｉ−ｃ−４、Ｉ−ｃ−５およびＩ−ｃ−６の化合物は、大環状環中に（Ｅ）形の二重結合立体配置を有する形で提供できることを理解されよう。いくつかの実施形態では、両方の立体異性体の混合物が提供される。他の実施形態では、式Ｉ−ｃ−１、Ｉ−ｃ−２、Ｉ−ｃ−３、Ｉ−ｃ−４、Ｉ−ｃ−５およびＩ−ｃ−６の化合物を適切な条件下で処理して二重結合を飽和させることができる。
【０１８９】
特定の実施形態では、Ｒ１とＲ１’は一緒になって、任意選択で置換された３〜７員炭素環を形成している。いくつかの実施形態では、そうした化合物は式Ｉ−ｄの化合物：
【０１９０】
【化５９】
2015110627.tif 000104
または薬学的に許容されるその塩である。
（式中、各Ｒ２ａ、Ｒ３、Ｒ４、ＲｚおよびＲＯは、式Ｉについて定義し、上記および本明細書でのクラスおよびサブクラスにおいて説明した通りである）
いくつかの実施形態では、Ｒ○は、Ｃ１〜６脂肪族から選択される任意選択で置換された基である。いくつかの実施形態では、Ｒ○はエチルである。他の実施形態では、Ｒ○はビニルである。
【０１９１】
式Ｉ−ｄのＲ３基の例には、上記および本明細書で説明するもの、ならびに以下の表３に示すものが含まれる。
【０１９２】
特定の実施形態では、Ｒ４とＲｚはその介在原子と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される２〜６個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された飽和または不飽和の１６〜２２員環を形成している。いくつかの実施形態では、Ｒ４とＲｚはその介在原子と一緒になって、窒素、酸素もしくはイオウから独立に選択される３〜５個のヘテロ原子を有する任意選択で置換された不飽和の１８〜２２員環を形成している。いくつかの実施形態では、Ｒ４とＲｚによって形成される環は１つまたは複数のＲｍ基で置換されており、出現ごとにＲｍのそれぞれは独立に、ハロゲン、−ＯＲ○；−ＣＮ；−ＳＣＮ；−ＳＲ○；−ＳＯＲ○；−ＳＯ２Ｒ○；−ＮＯ２；−Ｎ（Ｒ○）２；−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ○、またはＣ１〜６脂肪族およびＣ３〜７シクロアルキルからなる群から選択される任意選択で置換された基である。特定の実施形態では、本発明は、式Ｉ−ｅまたはＩ−ｆの化合物：
【０１９３】
【化６０】
2015110627.tif 000105
または薬学的に許容されるその塩を提供する
（式中、各ｍ、ｓ、ｔ、Ｒ２ａ、Ｒ３、ＲｙおよびＲ○は、式Ｉについて上記に定義し、上記および本明細書でのクラスおよびサブクラスにおいて説明した通りであり、
ｐはそれを含む１〜６の整数であり；
Ｒｍの出現ごとにＲｍのそれぞれは独立に、ハロゲン、−ＯＲ○；−ＣＮ；−Ｎ（Ｒ○）２；またはＣ１〜６脂肪族およびＣ３〜７シクロアルキルからなる群から選択される任意選択で置換された基である。）。
【０１９４】
いくつかの実施形態では、ｐは１である。いくつかの実施形態では、ｐは２である。
【０１９５】
特定の実施形態では、ＲｍはＣ１〜６脂肪族である。いくつかの実施形態では、Ｒｍはメチルである。
【０１９６】
いくつかの実施形態では、Ｒ○は、Ｃ１〜６脂肪族から選択される任意選択で置換された基である。いくつかの実施形態では、Ｒ○はエチルである。他の実施形態では、Ｒ○はビニルである。
【０１９７】
式Ｉ−ｅおよびＩ−ｆのＲ３基の例には、本明細書で説明するもの、ならびに以下の表３に示すものが含まれる。
【０１９８】
式Ｉ−ｅおよびＩ−ｆの化合物を、大環状環中に（Ｚ）形かまたは（Ｅ）形の二重結合立体配置を有する形で表しているが、特定の実施形態では、式Ｉ−ｅおよびＩ−ｆの化合物は、大環状環中に（Ｅ）形の二重結合の立体配置を有する形で提供できることを理解されよう。特定の実施形態では、式Ｉ−ｅおよびＩ−ｆの化合物は大環状環中に（Ｚ）形の二重結合立体配置を有する形で提供できる。いくつかの実施形態では、両方の立体異性体の混合物が提供される。他の実施形態では、式Ｉ−ｅおよびＩ−ｆの化合物を適切な条件下で処理して二重結合を飽和させ、それによって、式Ｉ−ｇまたはＩ−ｈの化合物：
【０１９９】
【化６１】
2015110627.tif 000106
または薬学的に許容されるその塩を形成させることができる。
【０２００】
特定の実施形態では、Ｒ４とＲｚは上記で説明したように一緒になり、Ｒ３と、Ｒ１およびＲ１’とによって形成された環は上記で説明したように一緒になって、新規なビス大環状化合物を形成する。特定の実施形態では、Ｒ４とＲｚによって形成される環は、式Ｉ−ｅおよびＩ−ｆについて上記したような１つまたは複数のＲｍ基で置換されている。いくつかの実施形態では、Ｒ３と、Ｒ１およびＲ１’とによって形成された環とで形成された大環状環は、−Ｌ−Ｙ弾頭基で置換されて式Ｉ−ｊまたはＩ−ｋの化合物：
【０２０１】
【化６２】
2015110627.tif 000107
または薬学的に許容されるその塩を提供する。但し、各
【０２０２】
【化６３】
2015110627.tif 000108
は、独立に単結合または二重結合を表す。このような化合物を調製する方法には、他の大員環および弾頭を取り込んだ化合物の合成について本明細書で説明するものに加えて、ＭｃＣａｕｌｅｙ、Ｊ．  Ａ．ら、Ａｎｇｅｗ．  Ｃｈｅｍ．  Ｉｎｔ．  Ｅｄ．、２００８年、４７巻、９１０４〜７頁に記載されている方法のが含まれる。
【０２０３】
いくつかの実施形態では、Ｒ３と、Ｒ１およびＲ１’とによって形成された環とで形成された大環状環のメチレン単位を、Ｌ−Ｙ部分で置き換えて式Ｉ−ｍまたはＩ−ｎの化合物：
【０２０４】
【化６４】
2015110627.tif 000109
または薬学的に許容されるその塩を提供する。但し、各
【０２０５】
【化６５】
2015110627.tif 000110
は、独立に単結合または二重結合を表す。
【０２０６】
上記および本明細書中に記載されるように、特定の実施形態において、式Ｉの化合物のＲ４基は水素である。特定の実施形態では、本発明は、式ＩＩ−ａまたはＩＩ−ｂの化合物：
【０２０７】
【化６６】
2015110627.tif 000111
または薬学的に許容されるその塩を提供する
（式中、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ３、およびＲｚ基のそれぞれは、上記式Ｉについて定義し、本明細書でのクラスおよびサブクラスにおいて説明した通りである）。
【０２０８】
式Ｉの化合物の例を以下の表３に示す。
【０２０９】
【表３−１】
2015110627.tif 000112
【０２１０】
【表３−２】
2015110627.tif 000113
【０２１１】
【表３−３】
2015110627.tif 000114
【０２１２】
【表３−４】
2015110627.tif 000115
【０２１３】
【表３−５】
2015110627.tif 000116
【０２１４】
【表３−６】
2015110627.tif 000117
【０２１５】
【表３−７】
2015110627.tif 000118
【０２１６】
【表３−８】
2015110627.tif 000119
特定の実施形態では、本発明は、上記表３に示した任意の化合物または薬学的に許容されるその塩を提供する。
【０２１７】
上記に一般的に定義したように、Ｒ３は弾頭基である。特定の理論に拘泥するわけではないが、そうしたＲ３基、すなわち弾頭基は、ＨＣＶプロテアーゼの結合ドメイン中の主要なシステイン残基と共有結合させるのに特に適していると考えられる。当業者は、ＨＣＶプロテアーゼおよびその変異体が、結合ドメインにシステイン残基を有することを理解されよう。特定の実施形態では、本発明の化合物は、本発明の化合物がＨＣＶプロテアーゼのＣ１５９システイン残基を標的とすることができることを特徴とする弾頭基を有する。
【０２１８】
したがって、いくつかの実施形態では、Ｒ３は、−Ｌ−Ｙ部分が、システイン残基と共有結合し、それによって酵素を不可逆的に阻害することができることを特徴とする。特定の実施形態では、システイン残基は、ＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体のＣｙｓ１５９であり、ここで提供される残基の番号づけはＵｎｉｐｒｏｔ（コードＱ９１ＲＳ４）による。
【０２１９】
当業者は、本明細書で定義する様々な弾頭基がそうした共有結合に適していることを理解されよう。そうしたＲ３基には、これらに限定されないが、本明細書で説明し、上記の表３に示すものが含まれる。この現象は、以下の実施例１７〜２１に詳細に説明する手順を用いた質量分光実験を行うことによって判定され得る。
【０２２０】
他の態様によれば、本発明は、阻害剤とＣｙｓ１５９で共有結合したＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体を含む結合体を提供する。いくつかの実施形態では、阻害剤は、リンカー部を介して共有結合している。
【０２２１】
特定の実施形態では、本発明は、式Ｃｙｓ１５９−リンカー−阻害剤部分の結合体を提供する。当業者は、「リンカー」基は、本明細書で説明する−Ｌ−Ｙ弾頭基と対応することを理解されよう。したがって、特定の実施形態では、リンカー基は、−Ｌ−Ｙが上記に定義され、本明細書でのクラスおよびサブクラスにおいて説明されたのと同様に定義される。しかし、リンカー基は二価であり、したがって、弾頭とＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体のＣｙｓ１５９の反応によって得られる対応−Ｌ−Ｙ基も二価となることを理解されよう。
【０２２２】
特定の実施形態では、その阻害剤部分は式Ａの化合物：
【０２２３】
【化６７】
2015110627.tif 000120
である。式中、式ＡのＲ１、Ｒ１’、Ｒ２a、Ｒ４、およびＲｚ基のそれぞれは、式Ｉに
ついて上記に定義し、本明細書でのクラスおよびサブクラスにおいて説明した通りである。したがって、特定の実施形態では、本発明は次式の結合体：
【０２２４】
【化６８】
2015110627.tif 000121
を提供する。式中、結合体のＲ１、Ｒ１’、Ｒ２a、Ｒ４、およびＲｚ基のそれぞれは、
式Ｉについて上記に定義し、本明細書でのクラスおよびサブクラスにおいて説明した通りである。
【０２２５】
いくつかの実施形態では、Ｒ３は、−Ｌ−Ｙ部分が、システイン残基と共有結合し、酵素を不可逆的に阻害することができることを特徴とする。特定の実施形態では、システイン残基は、ＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体のＣｙｓ１６であり、提供される残基の番号づけはＵｎｉｐｒｏｔ（コードＱ９１ＲＳ４）による。
【０２２６】
他の態様によれば、本発明は、阻害剤とＣｙｓ１６で共有結合したＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体を含む結合体を提供する。いくつかの実施形態では、阻害剤は、リンカー部を介して共有結合ししている。
【０２２７】
特定の実施形態では、本発明は、式Ｃｙｓ１６−リンカー−阻害剤部分の結合体を提供する。当業者は、「リンカー」基は、本明細書で説明する−Ｌ−Ｙ弾頭基と対応することを理解されよう。したがって、特定の実施形態では、リンカー基は、−Ｌ−Ｙが上記に定義され、本明細書でのクラスおよびサブクラスにおいて説明されたのと同様に定義される。しかし、リンカー基は二価であり、したがって、弾頭とＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体のＣｙｓ１６の反応によって得られる対応−Ｌ−Ｙ基も二価となることを理解されよう。
【０２２８】
特定の実施形態では、阻害剤部分は式Ａ−１の化合物：
【０２２９】
【化６９】
2015110627.tif 000122
である。式Ａ−１のＲ１、Ｒ１’、Ｒ２a、Ｒ４、およびＲｚ基のそれぞれは、式Ｉにつ
いて上記に定義し、本明細書でのクラスおよびサブクラスにおいて説明した通りである。したがって、特定の実施形態では、本発明は、次式の結合体：
【０２３０】
【化７０】
2015110627.tif 000123
を提供する。結合体のＲ１、Ｒ１’、Ｒ２a、Ｒ４、およびＲｚ基のそれぞれは、式Ｉに
ついて上記に定義し、本明細書でのクラスおよびサブクラスにおいて説明した通りである。
【０２３１】
本発明の化合物の一般的提供方法
特定の実施形態では、本発明の化合物は一般に、以下に示すスキーム１に従って調製する：
スキーム１
【０２３２】
【化７１】
2015110627.tif 000124
一態様では、本発明は、上記のスキーム１に示した工程によって式Ｉの化合物を調製する方法を提供する。ここで、各変数は本明細書で定義し、説明する通りであり、各ＰＧは適切な保護基である。工程Ｓ−１で、式ＡのＮ保護（例えば、Ｂｏｃ）プロリン誘導体を、ペプチドカップリング条件を用いて式Ｂのα−アミノエステルと縮合させて式Ｃのジペプチドを得る。適切なペプチドカップリング条件は当技術分野で周知であり、ＰＣＴ公開番号ＷＯ２００２０９４８２２（米国特許第６８２５３４７号）に詳細に記載されているものが含まれる。その全体を参照により本明細書に組み込む。別段の表示のない限り、前記条件は、本出願を通じて、適切なペプチドカップリング条件として参照される。
【０２３３】
工程Ｓ−２で、エステル基を適切な塩基で加水分解し、続いて中和して式Ｄのジペプチドを得る。適切な塩基には、これらに限定されないが、アルカリ金属、アルカリ土類金属の水酸化物およびその組合せが含まれる。いくつかの実施形態では、その塩基は水酸化リチウムである。
【０２３４】
工程Ｓ−３で、適切なペプチドカップリング条件を用いて、式Ｄのジペプチドを式Ｅのスルホンアミドとカップリングして式Ｆのアシルスルホンアミドを得る。
【０２３５】
工程Ｓ−４で、式Ｆのジペプチドから保護基を切断（例えば、Ｂｏｃ除去）すると式Ｇのアミンが得られる。特定の実施形態では、Ｂｏｃ基の切断は、ハロゲン化炭化水素溶媒中で式Ｆの化合物を鉱酸または有機酸と接触させて実施する。いくつかの実施形態では、その酸はトリフルオロ酢酸であり、溶媒はジクロロメタンである。
【０２３６】
工程Ｓ−５で、適切なペプチドカップリング条件を用いて、式Ｇのアミンを式Ｈのカルボン酸とカップリングしてＩ−０の中間体化合物を得る。
【０２３７】
式Ｉ−０の中間体化合物を、本明細書の実施例で説明する工程で、式Ｉの化合物に変換させる。
【０２３８】
上記に一般的に定義したように、式Ａ、Ｃ、ＤおよびＦのＰＧ基は適切なアミノ保護基である。適切なアミノ保護基は当技術分野で周知であり、それらには、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｔ．  Ｗ．  Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．  Ｇ．  Ｍ．  Ｗｕｔｓ、３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、１９９９年に詳細に記載されているものが含まれる。その全体を参照により本明細書に組み込む。保護アミンは当技術分野で周知であり、それらには、Ｇｒｅｅｎｅ（１９９９年）に詳細に記載されているものが含まれる。適切なモノ保護アミンには、これらに限定されないが、アラルキルアミン、カルバメート、アリルアミン、アミドなどがさらに含まれる。適切なモノ保護アミノ部分の例には、ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ（−ＮＨＢＯＣ）、エチルオキシカルボニルアミノ、メチルオキシカルボニルアミノ、トリクロロエチルオキシカルボニルアミノ、アリルオキシカルボニルアミノ（−ＮＨＡｌｌｏｃ）、ベンジルオキソカルボニルアミノ（−ＮＨＣＢＺ）、アリルアミノ、ベンジルアミノ（−ＮＨＢｎ）、フルオレニルメチルカルボニル（−ＮＨＦｍｏｃ）、ホルムアミド、アセトアミド、クロロアセトアミド、ジクロロアセトアミド、トリクロロアセトアミド、フェニルアセトアミド、トリフルオロアセトアミド、ベンズアミド、ｔ−ブチルジフェニルシリルなどが含まれる。適切なジ保護アミンには、モノ保護アミンとして上記に記載されているものから独立に選択される２つの置換基で置換されたアミンが含まれ、さらには、フタルイミド、マレイミド、スクシンイミドなどの環状イミドが含まれる。
【０２３９】
他の実施形態では、本発明の化合物を一般に、以下に示すスキーム２によって調製する。
【０２４０】
スキーム２
【０２４１】
【化７２】
2015110627.tif 000125
一態様では、本発明は、上記スキーム１に示した工程に従って、式Ｉの化合物を調製する方法を提供する。工程Ｓ−６では、式ＣのジペプチドからのＢｏｃ基の除去を、酸による触媒作用条件下で実施して式Ｊのジペプチドエステルを得る。
【０２４２】
工程Ｓ−７で、適切なペプチドカップリング条件を用いて、式Ｊのジペプチドエステルを式Ｈの官能性アミノ酸と縮合させて式Ｋのトリペプチドエステルを得、これを、本明細書で例として説明する工程で、式Ｌのトリペプチドエステルへさらに変換させる。
【０２４３】
工程Ｓ−８で、式Ｌの化合物のエステル基を適切な塩基で加水分解し、続いて中和して式Ｍのトリペプチドを得る。適切な塩基には、これらに限定されないが、アルカリ金属、アルカリ土類金属の水酸化物およびその組合せが含まれる。いくつかの実施形態では、塩基は水酸化リチウムである。
【０２４４】
工程Ｓ−９で、適切なペプチドカップリング条件を用いて、式Ｍのトリペプチドを式Ｅのスルホンアミドと縮合させて式Ｉの化合物を得る。
【０２４５】
式Ｃ、ＨおよびＫのＰＧ基は、上記したような適切なアミノ保護基である。
【０２４６】
４．使用、調合および投与
薬学的に許容される組成物
他の実施形態によれば、本発明は、本発明の化合物または薬学的に許容されるその誘導体および薬学的に許容される担体、補助剤または媒体を含む組成物を提供する。本発明の組成物中の化合物の量は、生物学的試料または患者において、ＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体を、測定可能な程度に阻害するのに有効な量である。特定の実施形態では、本発明の組成物中の化合物の量は、生物学的試料または患者において、ＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体を、測定可能な程度に阻害するのに有効な量である。特定の実施形態では、本発明の組成物を、そうした組成物を必要とする患者に投与するために調合する。いくつかの実施形態では、本発明の組成物を、患者に経口投与するために調合する。
【０２４７】
本明細書で用いる「患者」という用語は、動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを意味する。
【０２４８】
「薬学的に許容される担体、補助剤または媒体」という用語は、それを用いて調合される化合物の薬理学的活性を無効にしない無毒性担体、補助剤または媒体を指す。本発明の組成物で使用できる薬学的に許容される担体、補助剤または媒体には、これらに限定されないが、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質、例えばヒト血清アルブミン、緩衝物質、例えばリン酸塩、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物性脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質、例えば硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベースの物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂が含まれる。
【０２４９】
「薬学的に許容される誘導体」は、レシピエントに投与して、直接的かまたは間接的に、本発明の化合物あるいは阻害剤として活性な代謝産物またはその残基を提供できる本発明の化合物の任意の無毒性塩、エステル、エステルの塩または他の誘導体を意味する。
【０２５０】
本明細書で用いる「阻害剤として活性な代謝産物またはその残基」という用語は、代謝産物またはその残基がＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体の阻害剤でもあることを意味する。
【０２５１】
本発明の組成物は、経口、非経口、噴霧吸入、局所、経直腸、経鼻、経口腔（ｂｕｃｃａｌｌｙ）、経膣または埋め込み式リザーバーにより投与することができる。本明細書で用いる「非経口」という用語には、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑液嚢内、胸骨内、髄腔内、肝臓内、病巣内および頭蓋内への注射または注入技術が含まれる。組成物は、経口、腹腔内または静脈内で投与することが好ましい。本発明の組成物の滅菌注射剤の形態は、水性または油性の懸濁液であってよい。これらの懸濁液は、適切な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤を用いて、当技術分野で公知の技術に従って調合することができる。滅菌注射用製剤は、無毒性の非経口的に許容される希釈剤もしくは溶媒中の滅菌注射液剤または懸濁剤、例えば１，３−ブタンジオール中の液剤であってもよい。使用できる許容される媒体および溶媒には、水、リンガー溶液および等張性塩化ナトリウム溶液がある。さらに、滅菌固定油は、溶媒または懸濁化媒質として慣用的に使用される。
【０２５２】
そのために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む任意の無刺激固定油を用いることができる。オレイン酸およびそのグリセリド誘導体などの脂肪酸は、注射剤の調製に有用であり、オリーブ油またはヒマシ油などの天然の薬学的に許容される油（特にそのポリオキシエチル化されたタイプのもの）も同様に有用である。これらの油状液剤または懸濁剤は、カルボキシメチルセルロース、または乳剤および懸濁剤を含む薬学的に許容される剤形の調製で通常用いられる同様の分散剤などの長鎖アルコール希釈剤または分散剤も含むことができる。Ｔｗｅｅｎ類、Ｓｐａｎ類などの他の通常使用される界面活性剤、および、薬学的に許容される固体、液体または他の剤形の製造において通常使用される他の乳化剤または生物学的利用能増進剤も調合のために使用することができる。
【０２５３】
本発明の薬学的に許容される組成物は、これらに限定されないが、カプセル剤、錠剤、水性の懸濁剤または液剤を含む経口的に許容される任意の剤形で経口投与することができる。経口使用のための錠剤の場合、通常使用される担体には、ラクトースやトウモロコシでんぷんが含まれる。ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤も通常添加される。カプセルの形態での経口投与に有用な希釈剤には、ラクトースや乾燥トウモロコシでんぷんが含まれる。経口使用のために水性懸濁剤が必要な場合、活性成分を、乳化剤および懸濁化剤と混合する。望むなら、特定の甘味剤、香味剤または着色剤も加えることができる。
【０２５４】
あるいは、本発明の薬学的に許容される組成物は、直腸投与のための坐剤の形態で投与することができる。これらは、その薬剤を、室温で固体であるが直腸温度で液体であり、したがって直腸内で溶けて薬物を放出する適切な無刺激性賦形剤と混合することによって調製することができる。そうした材料には、ココアバター、蜜ろうおよびポリエチレングリコールが含まれる。
【０２５５】
本発明の薬学的に許容される組成物は、特に、治療の標的が、眼、皮膚または下部腸管の疾患などの局所使用により容易に到達できる領域または器官を含む場合、局所で投与することもできる。適切な局所調合物は、これらの領域または器官のそれぞれを目的として容易に調製される。
【０２５６】
下部腸管のための局所使用は、直腸坐剤調合物（上記参照）または適切なかん腸製剤で実施することができる。局所用経皮パッチも使用することができる。
【０２５７】
局所使用のために、提供される薬学的に許容される組成物は、１つまたは複数の担体中に懸濁または溶解させた活性成分を含む適切な軟膏剤で調合することができる。本発明の化合物の局所投与のための担体には、これらに限定されないが、鉱油、流動ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化ろうおよび水が含まれる。あるいは、提供される薬学的に許容される組成物は、１つもしくは複数の薬学的に許容される担体中に懸濁または溶解させた活性成分を含む適切なローション剤またはクリーム剤で調合することができる。適切な担体には、これらに限定されないが、鉱油、モノステアリン酸ソルビタン、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリルアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコールおよび水が含まれる。
【０２５８】
眼での使用のために、提供される薬学的に許容される組成物は、塩化ベンザルコニウム（ｂｅｎｚｙｌａｌｋｏｎｉｕｍ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ）などの保存剤を用いるか用いないで、等張性のｐＨ調節滅菌食塩水中の微粉末懸濁剤として、または、好ましくは等張性のｐＨ調節滅菌食塩水中の液剤として調合することができる。あるいは、眼での使用のために、薬学的に許容される組成物を、ワセリンなどの軟膏剤で調合することができる。
【０２５９】
本発明の薬学的に許容される組成物は、鼻エアロゾルまたは吸入により投与することもできる。そうした組成物は、製剤調合技術分野で周知の技術によって調製され、ベンジルアルコールまたは他の適切な保存剤、生物学的利用能を促進させる吸収促進剤、フルオロカーボンおよび／または他の慣用的な可溶化剤または分散剤を用いて、食塩水中の液剤として調製することができる。
【０２６０】
本発明の薬学的に許容される組成物は、経口投与用に調合することが最も好ましい。そうした調合物は、食物を用いるか用いないで投与することができる。いくつかの実施形態では、本発明の薬学的に許容される組成物は、食物を用いないで投与される。他の実施形態では、本発明の薬学的に許容される組成物は、食物とともに投与される。
【０２６１】
担体材料と混合して単一剤形の組成物を得ることができる本発明の化合物の量は、治療を受ける宿主、具体的な投与方式によって変わることになる。好ましくは、提供される組成物は、０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲の阻害剤の投薬量が、これらの組成物を受け入れる患者に投与することができるように調合すべきである。
【０２６２】
特定の任意の患者に対する具体的な投薬および治療レジメンは、使用する具体的な化合物の活性、年齢、体重、全体的な健康、性別、食事、投与時間、排出速度、薬物の組合せ、ならびに担当医の判断および治療を受ける具体的な疾患の重篤度を含む様々な因子に依存することも理解すべきである。組成物中の本発明の化合物の量は、組成物中の具体的な化合物にも依存する。
【０２６３】
化合物および薬学的に許容される組成物の使用
本明細書で説明する化合物および組成物は一般に、ＨＣＶプロテアーゼ活性および／またはその変異体の活性を阻害するのに有用である。したがって、提供される化合物は、Ｃ型肝炎を含む非Ａ非Ｂ型肝炎を治療するのに有用である。
【０２６４】
ＨＣＶは、宿主内で変形体の多形的な群れ（ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ  ｓｗａｒｍ）を形成する非常に変異性のウイルスである。世界的には、６つの異なる遺伝子型が現在明確にされている（Ｓｉｍｍｏｎｄｓら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ、４２巻、４号、２００５年）。これらの遺伝子型は、より密接に関係する遺伝子的に明確なサブタイプにさらに分類されている。コンセンサス配列として知られる比較配列部分を以下の表３ａに示す。ＨＣＶの遺伝子型およびサブタイプは、世界の異なる部分で異なった分布をしており、特定の地域に特定の遺伝子型が多くある。遺伝子型１〜３は世界中に広く分布している。サブタイプ１ａは、南北アメリカ、ヨーロッパおよびオーストラリアで広く行き渡っている。サブタイプ１ｂは北アメリカやヨーロッパでよく見られ、アジアの一部でも見られる。遺伝子型２は先進国において見られるが、遺伝子型１ほど一般的ではない（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｈｃｖａｄｖｏｃａｔｅ．ｏｒｇ／ｈｅｐａｔｉｔｉｓ／ｆａｃｔｓｈｅｅｔｓ＿ｐｄｆ／ｇｅｎｏｔｙｐｅ＿ＦＳ．ｐｄｆ）。他の遺伝子型は、米国以外の患者集団で広く行き渡っており、したがって重要な標的である。
【０２６５】
注目すべきことに、遺伝子型１ｂのアミノ酸位置１５９に位置するシステインは、これまで配列決定されたＨＣＶ  ＮＳ３のすべての遺伝子型およびサブタイプに保存されているが、そのアミノ酸位置は他の遺伝子型およびサブタイプで異なっている場合がある。不可逆的阻害剤でこのシステイン残基を標的化することは、複数のＨＣＶ遺伝子型に対して有効な薬剤の開発を可能にするはずである。
【０２６６】
本明細書で説明するように、本発明は、１つまたは複数のＨＣＶプロテアーゼ遺伝子型およびその変形体に対する不可逆的阻害剤を提供する。Ｒ３として表される弾頭基を含むそうした化合物には、本明細書で説明する式Ｉ、Ｉ−ａ、Ｉ−ｂ、Ｉ−ｃ−１、Ｉ−ｃ−２、Ｉ−ｃ−３、Ｉ−ｃ−４、Ｉ−ｃ−５、Ｉ−ｃ−６、Ｉ−ｄ、Ｉ−ｅ、Ｉ−ｆ、Ｉ−ｇ、Ｉ−ｈ、ＩＩ−ａ、およびＩＩ−ｂの化合物が含まれる。いくつかの実施形態では、Ｒ３は、−Ｌ−Ｙ部分が、システイン残基と共有結合し、それによって酵素を不可逆的に阻害することができるということを特徴とする。特定の理論に拘泥するわけではないが、そうしたＲ３基、すなわち弾頭基は、１つまたは複数のＨＣＶプロテアーゼ遺伝子型またはその変形体の結合ドメイン中の主要なシステイン残基と共有結合するのに特に適していると考えられる。いくつかの実施形態では、本発明の化合物によって阻害される１つまたは複数の遺伝子型には、１ａ、１ｂ、２ａおよび３ａが含まれる。特定の実施形態では、そうした１つまたは複数の変形体には、Ａ１５６Ｔ、Ａ１５６Ｓ、Ｄ１６８Ｖ、Ｄ１６８ＡおよびＲ１５５Ｋが含まれる。
【０２６７】
当業者は、ＨＣＶプロテアーゼ遺伝子型およびその変形体が、結合ドメイン近傍に１つまたは複数のシステイン残基を有することを理解されよう。特定の理論に拘泥するわけではないが、弾頭基と対象のシステインが近接していると、弾頭基によるそのシステインの共有結合性修飾を容易にすると考えられる。いくつかの実施形態では、対象とするシステイン残基は、ＨＣＶプロテアーゼサブタイプ１ｂまたはその変形体のＣｙｓ１５９である。ここで、提供される残基の番号づけはＵｎｉｐｒｏｔ（コードＱ９１ＲＳ４）による。本発明の不可逆的阻害剤による共有結合性修飾に適した他のＨＣＶプロテアーゼの遺伝子型およびサブタイプのシステイン残基には、以下の表３ａにまとめたものが含まれる。ここで、ボールド体で下線を引いた「Ｃ」は、ＨＣＶプロテアーゼサブタイプ１ｂのＣｙｓ１５９に相当する位置に保存されたシステイン残基を指す。
【０２６８】
【表３ａ−１】
2015110627.tif 000126
【０２６９】
【表３ａ−２】
2015110627.tif 000127
【０２７０】
【表３ａ−３】
2015110627.tif 000128
ａ  当業者は、どのウイルスも変異しがちであり多形性となりやすく、本明細書で説明する任意の遺伝子型コンセンサス配列が、所与の遺伝子型またはサブタイプを代表するものであることを理解されよう。そうした代表的なコンセンサス配列は、ｈｔｔｐ：／／ｈｃｖ．ｌａｎｌ．ｇｏｖ／ｃｏｎｔｅｎｔ／ｓｅｑｕｅｎｃｅ／ＮＥＷＡＬＩＧＮ／ａｌｉｇｎ．ｈｔｍｌより入手することができる。
【０２７１】
薬物耐性は、標的化による治療法の重要な課題として持ち上がってくる。例えば、薬物耐性は、開発中のＨＣＶプロテアーゼ阻害剤で報告されている。そうした化合物には、それぞれＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  ＩｎｇｅｌｈｅｉｍおよびＶｅｒｔｅｘ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓによって開発されたＢＩＬＮ  ２０６１およびＶＸ−９５０が含まれる。ＢＩＬＮ  ２０６１およびＶＸ−９５０の構造は以下の通りである。
【０２７２】
【化７３】
2015110627.tif 000129
実際、Ｖｅｒｔｅｘ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓにより公開された、「Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  Ｓｔｕｄｉｅｓ  ｏｆ  Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  Ｖｉｒｕｓ  Ｓｅｒｉｎｅ  Ｐｒｏｔｅａｓｅ」という題名の最近の記事は、ＶＸ−９５０およびＢＩＬＮ  ２０６１で認められる変異体耐性の問題に正面から対処している。Ｌｉｎら、Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２７９巻、１７号、４月２３日発行、１７５０８〜１７５１４頁、２００４年を参照されたい。この記事は、「ＨＣＶ酵素の小分子阻害剤を含む将来のＣ型肝炎治療法は、現在のＨＩＶ治療の場合のように、多剤併用を必要とする可能性がある」と結論づけしている。１７５１３頁の最終段落を参照されたい。
【０２７３】
特定の抗ウイルス剤に対する耐性は、多くのレトロウイルスまたはＲＮＡウイルスに対する治療効能を限定する主要な要因である。これらのウイルスの変異を受けやすい特徴（ｅｒｒｏｒ−ｐｒｏｎｅ  ｎａｔｕｒｅ）は、現在入手できる薬物または臨床試験を受けている薬物に対して耐性を付与する変異の発現を可能にするものである。耐性の問題は、ＨＣＶ患者を治療するための新規なＨＣＶ特異性阻害剤の薬物開発において直面する重要なハードルである。
【０２７４】
２つのＨＣＶ  ＮＳ３−４Ａプロテアーゼ阻害剤のＶＸ−９５０およびＢＩＬＮ２０６１を用いた最近のインビトロでの耐性研究によれば、どちらかの阻害剤に対して選択された耐性変異が、阻害剤自体に対する感受性の大幅な低下をもたらすことが分かっている。しかし、ＢＩＬＮ２０６１に対する主要耐性変異はＶＸ−９５０に対して十分な感受性を有しており、ＶＸ−９５０に対する主要耐性変異はＢＩＬＮ２０６１に対する高い感受性を保持していた（Ｌｉｎら、Ｊｏｕｒ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．２７９巻（１７号）：１７５０８〜１４頁、２００４年）。
【０２７５】
驚くべきことに、提供される化合物が、Ａ１５６Ｔ、Ａ１５６Ｓ、Ｄ１６８Ｖ、Ｄ１６８ＡおよびＲ１５５Ｋを含む少なくとも５つのＨＣＶプロテアーゼ変異体を阻害することを見出した。これは、それぞれ２つの変異体しか阻害しない他の既知のＨＣＶプロテアーゼ阻害剤（例えば、ＶＸ−９５０およびＢＩＬＮ２０６１）と対照を成している。実際、従来技術において記載されている薬物はどれも、既知のすべてのＨＣＶプロテアーゼ変異体の有効な阻害剤であるとは示されていない。例えば、以下に表４ａおよび４ｂを示すが、ＢＩＬＮ２０６１およびＶＸ−９５０のデータは、ＬｉｎらおよびＨＣＶ文献のどこかに報告されているものであり、化合物Ｉ−３のデータは、以下の実施例に示す方法で得たものである。特定の理論に拘泥するわけではないが、本発明の化合物は薬物耐性型のＨＣＶプロテアーゼの有効な阻害剤であり得ると考えられる。表４ｂは、４つの参照ＨＣＶ変形体（Ａ１５６Ｔ、Ａ１５６Ｓ、Ｄ１６８ＶおよびＤ１６８Ａ）に対する化合物Ｉ−３の活性を示すが、以下の実施例で、これらの変形体ならびに第５の（Ｒ１５５Ｋ）変形体に対して活性である本発明の他の提供化合物を説明することにする。
【０２７６】
【表４ａ】
2015110627.tif 000130
ａ  野生型のデータは細胞に基づいたアッセイから得、変異体のデータは生化学的アッセイから得た。Ｌｉｎら、および本明細書で説明する手順を参照されたい。
【０２７７】
【表４ｂ】
2015110627.tif 000131
ａ  野生型のデータは細胞に基づいたアッセイから得、変異体のデータは生化学的アッセイから得た。Ｌｉｎら、および本明細書で説明する手順を参照されたい。
【０２７８】
特定の理論に拘泥するわけではないが、式Ｉの化合物は、式Ｉの化合物に対応する化合物（ここで、式ＩのＲ３部分は、代わりに、直鎖状アルキル（例えば、非置換アルキル）、分岐状アルキル、シクロアルキルまたはアルケニルなどの非弾頭基である）と比較して、ＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体を阻害するのにより有効であると考えられる。例えば、式Ｉの化合物は、式Ｉの化合物に対応する化合物（ここで、式ＩのＲ３部分は、代わりに、メチル、エチル、プロピル、ブチル（例えば、ｔ−ブチル）、非置換直鎖状または分岐状アルケニル（例えば、Ｃ１〜８アルケニル）、シクロヘキシルまたはシクロペンチルなどの非弾頭部分である）と比較して、ＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体の阻害という点でより有効であり得る。
【０２７９】
上記に開示したように、式Ｉの化合物は、Ａ１５６Ｔ、Ａ１５６Ｓ、Ｄ１６８Ｖ、Ｄ１６８ＡなどのＨＣＶプロテアーゼもしくは変異体、または本明細書で開示するものなどの他の変異体に対するＩＣ５０に関して、式Ｉの化合物に対応する化合物（ここで、式ＩのＲ３部分は、代わりに、メチル、エチル、プロピル、ブチル（例えば、ｔ−ブチル）、非置換直鎖状または分岐状アルケニル（例えば、Ｃ１〜８アルケニル）、シクロヘキシルまたはシクロペンチルなどの非弾頭部分である）より強力であり得る。式Ｉの化合物に対応する化合物（式ＩのＲ３部分は、代わりに、非弾頭部分である）と比較して、式Ｉの化合物がそのようにかなり強力であるということは、以下の実施例の部に詳細に説明する方法などの標準的な時間依存性アッセイ法によって判定することができる。特定の実施形態では、式Ｉの化合物は、式Ｉの化合物に対応する化合物（ここで、式ＩのＲ３部分は、代わりに、メチル、エチル、プロピル、ブチル（例えば、ｔ−ブチル）、非置換直鎖状または分岐状アルケニル（例えば、Ｃ１〜８アルケニル）、シクロヘキシルまたはシクロペンチルなどの非弾頭部分である）より測定可能な程度に強力である。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物に対応する化合物（ここで、式ＩのＲ３部分は、代わりに、メチル、エチル、プロピル、ブチル（例えば、ｔ−ブチル）、非置換直鎖状または分岐状アルケニル（例えば、Ｃ１〜８アルケニル）、シクロヘキシルまたはシクロペンチルなどの非弾頭部分である）より、式Ｉの化合物は測定可能な程度に強力である（そうした効能は、約１分、約２分、約５分、約１０分、約２０分、約３０分、約１時間、約２時間、約３時間、約４時間、約８時間、約１２時間、約１６時間、約２４時間または約４８時間後に観察される）。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物は、式Ｉの化合物に対応する化合物（ここで、式ＩのＲ３部分は、代わりに、メチル、エチル、プロピル、ブチル（例えば、ｔ−ブチル）、非置換直鎖状または分岐状アルケニル（例えば、Ｃ１〜８アルケニル）、シクロヘキシルまたはシクロペンチルなどの非弾頭部分である）より、約１．５倍、約２倍、約５倍、約１０倍、約２０倍、約２５倍、約５０倍、約１００倍、さらに約１０００倍のいずれかの倍数で、より効能が高い。
【０２８０】
本明細書で用いる「臨床薬物耐性」という用語は、薬物標的における変異の結果としての、薬物標的の薬物治療に対する感受性の損失を指す。
【０２８１】
本明細書で用いる「耐性」という用語は、標的タンパク質をコードする野生型核酸配列および／または標的のタンパク質配列の変化であって、阻害剤の標的タンパク質に対する阻害効果を低減させるかまたは終わらせる変化を指す。
【０２８２】
本明細書で説明する化合物および組成物によって阻害され、かつ本明細書で説明する方法が有用であるプロテアーゼの例には、ＮＳ３、ＮＳ３・４Ａまたはその変異体が含まれる。
【０２８３】
ＮＳ３、ＮＳ３・４Ａまたはその変異体の阻害剤としての本発明で使用する化合物の活性は、インビトロ、インビボまたは細胞系においてアッセイすることができる。インビトロでのアッセイには、セリンプロテアーゼ活性および／またはそれに続く機能的結果か、あるいは活性化されたＮＳ３、ＮＳ３・４Ａまたはその変異体のＡＴＰａｓｅ活性のいずれかの阻害を判定するアッセイが含まれる。インビトロでの代替のアッセイは、阻害剤がＮＳ３またはＮＳ３・４Ａと結合する能力を定量する。阻害剤の結合は、結合する前に阻害剤を放射能標識化し、阻害剤／ＮＳ３複合体または阻害剤／ＮＳ３・４Ａ複合体を単離し、結合した放射能標識の量を決定することによって測定することができる。あるいは、阻害剤の結合は、新規な阻害剤を、既知の放射性リガンドと結合したＮＳ３またはＮＳ３・４Ａとインキュベートする競合実験を行うことによって決定することができる。ＮＳ３もしくはＮＳ３・４Ａまたはその変異体の阻害剤としての本発明で使用する化合物をアッセイするための詳細な条件を、以下の実施例において示す。
【０２８４】
セリンプロテアーゼは、タンパク質中のペプチド結合を切断するタンパク質分解酵素の大きなファミリーである。セリンプロテアーゼファミリーは消化酵素のキモトリプシン、トリプシン、およびエラスターゼ、および血液凝固に関与するプロテアーゼを含む。セリンプロテアーゼは、一緒になって機能して、セリンを活性化させて酵素と基質の共有結合を形成し、それによってペプチド結合を加水分解する、セリン、アスパラギン酸およびヒスチジンを含む特徴的な「触媒作用性の３つの組」を有する。上記に加えて、セリンプロテアーゼは、免疫および炎症を含む様々な機能に関与する。
【０２８５】
本明細書で用いる「治療」、「治療する（ｔｒｅａｔ）」および「治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」という用語は、本明細書で説明する疾患または障害または１つもしくは複数のその症状を逆戻りさせ、軽減し、その発現を遅延させるか、あるいはその進行を阻止することを指す。いくつかの実施形態では、治療を、１つまたは複数の症状が現れた後に施すことができる。他の実施形態では、症状がなくても治療を施すことができる。例えば、症状が発現する前に（例えば、症状の経歴に照らすか、かつ／または遺伝的または他の感受性因子に照らして）、影響を受けやすい個体に治療を施すことができる。例えば、その再発を阻止するかまたは遅延させるために、治療を、症状がなくなった後も続行することができる。
【０２８６】
本発明の方法による化合物および組成物は、癌、自己免疫疾患、神経変性障害もしくは神経障害、統合失調症、骨関連疾患、肝疾患または心疾患を治療するかまたはその重篤度を軽減するのに有効な任意の量および任意の投与経路を用いて投与することができる。必要とされる正確な量は、対象の種、年齢および全身状態、感染症の重症度、具体的な薬剤、その投与方式などによって対象ごとに変わることになる。本発明の化合物は、好ましくは、投与を容易にし投薬を均一にする投薬単位形態で調合する。本明細書で用いる「投薬単位形態」という表現は、治療を受ける患者に適した物理的分離型の薬剤の単位を指す。しかし、本発明の化合物および組成物の合計日用量は、健全な医学的判断の範囲内で、担当医によって判断されることになることを理解されよう。特定の任意の患者または生体のための具体的な有効量レベルは、治療を受ける障害およびその障害の重篤度；使用する具体的な化合物の活性；使用する具体的な組成物；患者の年齢、体重、全体的な健康、性別および食事；使用する具体的な化合物の投与時間、投与経路および排出速度；治療の期間；使用する具体的な化合物と併用するかまたは同時に使用する薬物を含む様々な因子、ならびに医学的技術分野で周知の同様の因子に依存することになる。本明細書で用いる「患者」という用語は、動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを意味する。
【０２８７】
本発明の薬学的に許容される組成物は、治療を受ける感染症の重症度に応じて、経口、経直腸、非経口、嚢内、膣内、腹腔内、局所（粉剤、軟膏剤または滴下剤（ｄｒｏｐ））、経口腔で、また、経口または経鼻スプレーなどでヒトや他の動物に投与することができる。特定の実施形態では、本発明の化合物は、所望の治療効果を得るために、１日に対象体重当たり約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約１ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇの投薬レベルで、日に１回または複数回、経口または非経口で投与することができる。
【０２８８】
いくつかの実施形態では、提供される組成物を、それを必要とする患者に日に１回投与する。特定の理論に拘泥するわけではないが、ＨＣＶ  ＮＳ３プロテアーゼの不可逆的阻害剤の作用持続期間が長いことは、ＨＣＶ  ＮＳ３プロテアーゼに伴う障害の治療のために、それを必要とする患者に日に１回投与するのに特に有利であると考えられる。特定の実施形態では、提供される組成物を、それを必要とする患者に少なくとも日に１回投与する。他の実施形態では、提供される組成物を、それを必要とする患者に日に２回、日に３回または日に４回投与する。
【０２８９】
例えば、式Ｉの化合物は、患者に投与した場合、式Ｉの化合物に対応する化合物（ここで、式ＩのＲ３部分は、代わりに、直鎖状アルキル（例えば、非置換アルキル）、分岐状アルキル、シクロアルキルまたはアルケニルなどの非弾頭基である）と比較して、一般に長い作用持続期間を提供する。例えば、式Ｉの化合物は、患者に投与した場合、式Ｉの化合物に対応する化合物（ここで、式ＩのＲ３部分は、代わりに、メチル、エチル、プロピル、ブチル（例えば、ｔ−ブチル）、非置換直鎖状または分岐状アルケニル（例えば、Ｃ１〜８アルケニル）、シクロヘキシルまたはシクロペンチルなどの非弾頭基である）と比較して、長い作用持続期間を提供することができる。
【０２９０】
経口投与用の液体剤形には、これらに限定されないが、薬学的に許容される乳剤、マイクロエマルジョン、液剤、懸濁剤、シロップ剤およびエリキシル剤が含まれる。活性化合物に加えて、液体剤形は、当技術分野で通常用いられる不活性希釈剤、例えば水または他の溶媒、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、オイル（具体的には、綿実油、ラッカセイ油、コーンオイル、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステルならびにその混合物などの可溶化剤および乳化剤などを含むことができる。不活性希釈剤の他に、経口組成物は、湿潤剤、乳化剤および懸濁化剤、甘味剤、香味剤ならびに芳香剤などの補助剤も含むことができる。
【０２９１】
注射用製剤、例えば滅菌した水性または油性の注射用懸濁剤は、適切な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤を用いて当分野の公知の技術によって調合することができる。滅菌注射用製剤は、無毒性の非経口的に許容される希釈剤もしくは溶媒中の滅菌注射用の液剤、懸濁剤または乳剤、例えば１，３−ブタンジオール中の液剤であってもよい。使用できる許容される媒体および溶媒には、水、リンガー溶液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．および等張性の塩化ナトリウム溶液がある。さらに、滅菌固定油は、溶媒または懸濁化媒質として慣用的に使用される。そのために、合成のモノグリセリドまたはジグリセリドを含む任意の無刺激固定油を用いることができる。さらに、オレイン酸などの脂肪酸が、注射用物質の調製で使用される。
【０２９２】
注射用調合物は、例えば、細菌保持フィルターで濾過するか、あるいは、使用前に滅菌水または他の滅菌注射用媒質中に溶解させるかまたは分散させることができる滅菌固体組成物の形態に滅菌剤を混ぜ込むことによって滅菌することができる。
【０２９３】
本発明の化合物の作用を持続させるために、皮下または筋肉内注射からの化合物の吸収を遅延させることがしばしば望ましい。これは、水への溶解性の低い結晶性または無定型の物質の液体懸濁液を使用することによって実現することができる。化合物の吸収速度はその溶解速度に依存する。したがってその速度は結晶サイズや結晶形態に依存する。あるいは、非経口で投与される化合物形態の吸収を遅延させることは、それを油性媒体に化合物を溶解または懸濁させることによって実現される。注射用デポー形態は、ポリラクチド−ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中に、化合物のマイクロカプセル化マトリックスを形成させることによって達成される。化合物とポリマーの比、および使用する具体的なポリマーの特性に応じて、化合物の放出速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例には、ポリ（オルトエステル）およびポリ（アンヒドリド）が含まれる。デポー注射用調合物は、生体組織に適合するリポソームまたはマイクロエマルジョン中に化合物を取り込むことによっても調製される。
【０２９４】
経直腸または経膣投与のための組成物は、本発明の化合物を、周囲温度では固体であるが体温で液体であり、したがって、直腸または膣腔内で溶けて活性化合物を放出する、ココアバター、ポリエチレングリコールまたは坐薬用ワックスなどの適切な非刺激性の賦形剤または担体と混合することによって調製することができる。
【０２９５】
経口投与用の固体剤形には、カプセル剤、錠剤、丸薬、粉剤および顆粒剤が含まれる。そうした固体剤形では、活性化合物を、少なくとも１つの不活性な薬学的に許容される賦形剤または担体、例えばクエン酸ナトリウムまたは第二リン酸カルシウム、および／または、ａ）フィラーすなわち増量剤、例えばでんぷん、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトールおよびケイ酸、ｂ）結合剤、例えばカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、スクロースおよびアカシアなど、ｃ）保湿剤、例えばグリセロール、ｄ）崩壊剤、例えば寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカでんぷん、アルギン酸、ある種のケイ酸塩、および炭酸ナトリウム、ｅ）溶解遅延剤、例えばパラフィン、ｆ）吸収促進剤、例えば四級アンモニウム化合物、ｇ）湿潤剤、例えばセチルアルコールおよびグリセロールモノステアレートなど、ｈ）吸収剤、例えばカオリンおよびベントナイト粘土、ならびに、ｉ）滑沢剤、例えばタルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムおよびその混合物と混合させる。カプセル剤、錠剤および丸薬の場合、その剤形は緩衝剤を含むこともできる。
【０２９６】
同様の種類の固体組成物は、ラクトースまたは乳糖ならびに高分子量のポリエチレングリコールなどの賦形剤を用いて、軟質および硬質のゼラチンカプセル中のフィラーとして用いることもできる。固体剤形の錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸薬および顆粒剤は、腸溶コーティングおよび製薬技術分野で周知の他のコーティングなどのコーティングおよびシェルを用いて調製することができる。それらは、任意選択で乳白剤を含むことができ、また、任意選択で遅延した形で、腸管の特定の部分において、活性成分（単数または複数）だけか、またはそれを優先して放出する組成物でできていてもよい。使用できる埋め込み型組成物の例には、ポリマー物質およびワックスが含まれる。同種の固体組成物は、ラクトースまたは乳糖ならびに高分子量のポリエチレングリコールなどの賦形剤を用いて、軟質および硬質のゼラチンカプセル中のフィラーとして用いることもできる。
【０２９７】
活性化合物は、上記したような１つまたは複数の賦形剤でマイクロカプセル化した形態であってもよい。固体剤形の錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸薬および顆粒剤は、腸溶コーティング、放出制御コーティングおよび製薬技術分野で周知の他のコーティングなどのコーティングおよびシェルを用いて調製することができる。このような固体剤形では、活性化合物を、スクロース、ラクトースまたはでんぷんなどの少なくとも１つの不活性希釈剤と混合することができる。そうした剤形は、通常実施されるように、不活性希釈剤以外の他の物質、例えば、ステアリン酸マグネシウムや微結晶性セルロースのような錠剤化用滑沢剤よび他の錠剤化用助剤も含むことができる。カプセル剤、錠剤および丸薬の場合、その剤形は緩衝剤を含むこともできる。それらは任意選択で乳白剤を含むことができ、また、任意選択で遅延した形で、腸管の特定の部分において、活性成分（単数または複数）だけを放出するか、またはそれを優先して放出する組成物でできていてもよい。使用できる埋め込み型組成物の例には、ポリマー物質およびワックスが含まれる。
【０２９８】
本発明の化合物の局所または経皮投与のための剤形は、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、粉剤、液剤、噴霧剤、吸入剤またはパッチ剤を含む。活性成分は、無菌条件下で、薬学的に許容される担体、必要に応じて任意の所要保存剤または緩衝剤と混合する。眼科用調合物、点耳剤および点眼剤も意図し、これらも本発明の範囲内である。さらに、本発明は、身体に化合物を制御放出するという追加的な利点を有する経皮パッチ剤の使用を意図する。そうした剤形は、適切な媒質中に化合物を溶解するかまたは分散させて調製することができる。吸収促進剤を用いて、皮膚を通る化合物フラックスを増大させることもできる。その速度は、速度制御膜を提供するか、またはポリマーマトリックスもしくはゲル中に化合物を分散させることによって制御することができる。
【０２９９】
一実施形態によれば、本発明は、生物学的試料中のセリンプロテアーゼ活性を阻害する方法であって、前記生物学的試料を本発明の化合物または前記化合物を含む組成物と接触させる工程を含む方法に関する。
【０３００】
他の実施形態によれば、本発明は、生物学的試料中のＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体の活性を阻害する方法であって、前記生物学的試料を本発明の化合物または前記化合物を含む組成物と接触させる工程を含む方法に関する。特定の実施形態では、本発明は、生物学的試料中のＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体の活性を不可逆的に阻害する方法であって、前記生物学的試料を本発明の化合物または前記化合物を含む組成物と接触させる工程を含む方法に関する。
【０３０１】
本明細書で用いる「生物学的試料」という用語は、これらに限定されないが、細胞培養物またはその抽出物；哺乳動物から得られた生検材料またはその抽出物；および血液、唾液、尿、糞便、精液、涙液または他の体液もしくはその抽出物を含む。
【０３０２】
生物学的試料中のＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体の活性の阻害は、当業者に公知の様々な目的に有用である。そうした目的の例には、これらに限定されないが、輸血、臓器移植、生物学的試料の保管および生物学的アッセイが含まれる。
【０３０３】
本発明の他の実施形態は、患者のＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体の活性を阻害する方法であって、前記患者に本発明の化合物または前記化合物を含む組成物を投与する工程を含む方法に関する。
【０３０４】
他の実施形態によれば、本発明は、患者のＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体の活性を阻害する方法であって、前記患者に本発明の化合物または前記化合物を含む組成物を投与する工程を含む方法に関する。特定の実施形態によれば、本発明は、患者のＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体の活性を不可逆的に阻害する方法であって、前記患者に本発明の化合物または前記化合物を含む組成物を投与する工程を含む方法に関する。他の実施形態では、本発明は、それを必要とする患者のＨＣＶプロテアーゼまたはその変異体によって媒介される障害を治療する方法であって、前記患者に本発明による化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与する工程を含む方法を提供する。そうした障害は本明細書で詳細に説明されている。
【０３０５】
治療を受ける具体的な状態または疾患に応じて、その状態を治療するために通常投与される追加の治療薬を、本発明の化合物および組成物と併用して投与することができる。本明細書で用いる、特定の状態または疾患を治療するために通常投与される追加の治療薬は、「治療を受ける状態または疾患に適切である」ことが公知であるものである。
【０３０６】
特定の実施形態では、提供される化合物またはその組成物を、ＨＣＶプロテアーゼまたはその変形体の他の阻害剤と併用して投与する。いくつかの実施形態では、提供される化合物またはその組成物を、他の抗ウイルス剤と併用して投与する。そうした抗ウイルス剤には、これらに限定されないが、免疫調節薬、例えばα−、β−およびγ−インターフェロン、ペグ化誘導体化インターフェロン−α化合物およびサイモシン；他の抗ウイルス剤、例えばリバビリン、アマンタジンおよびテルビブジン；Ｃ型肝炎プロテアーゼの他の阻害剤（ＮＳ２−ＮＳ３阻害剤およびＮＳ３−ＮＳ４Ａ阻害剤、例えばＢＩＬＮ２０６１およびＶＸ−９５０）；ヘリカーゼ阻害剤およびポリメラーゼ阻害剤を含むＨＣＶライフサイクルにおける他の標的の阻害剤；内部リボソーム侵入の阻害剤；ＩＭＰＤＨ阻害剤などの広範なスペクトルのウイルス阻害剤（例えば、ミコフェノール酸およびその誘導体）；または上記のいずれかの組合せが含まれる。
【０３０７】
特定の実施形態では、２つ以上の抗ウイルス剤の併用物も投与することができる。特定の実施形態では、３つ以上の抗ウイルス剤の併用物も投与することができる。いくつかの実施形態では、抗ウイルス剤はリバビリンまたはインターフェロンから選択される。他の実施形態では、抗ウイルス剤はα−インターフェロンである。
【０３０８】
本発明の阻害剤とやはり併用できる薬剤の他の例には、これらに限定されないが：アルツハイマー病の治療薬のＡｒｉｃｅｐｔ（登録商標）およびＥｘｃｅｌｏｎ（登録商標）など；ＨＩＶの治療薬のリトナビルなど；パーキンソン病の治療薬のＬ−ＤＯＰＡ／カルビドパ、エンタカポン、ロピニロール（ｒｏｐｉｎｒｏｌｅ）、プラミペキソール、ブロモクリプチン、ペルゴリド、トリヘキセフェンジルおよびアマンタジンなど；βインターフェロン（例えば、Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）およびＲｅｂｉｆ（登録商標））、Ｃｏｐａｘｏｎｅ（登録商標）およびミトキサントロンなどの多発性硬化症（ＭＳ）の治療用薬剤；ぜんそくの治療薬のアルブテロールおよびＳｉｎｇｕｌａｉｒ（登録商標）など；ジプレキサ（ｚｙｐｒｅｘａ）、リスパダール（ｒｉｓｐｅｒｄａｌ）、セロクエル（ｓｅｒｏｑｕｅｌ）およびハロペリドールなどの統合失調症の治療用薬剤；コルチコステロイド、ＴＮＦ遮断薬、ＩＬ−１ＲＡ、アザチオプリン、シクロホスファミドおよびスルファサラジンなどの抗炎症剤；シクロスポリン、タクロリムス、ラパマイシン、ミコフェノール酸モフェチル、インターフェロン、コルチコステロイド、シクロホスファミド、アザチオプリンおよびスルファサラジンなどの免疫調節剤および免疫抑制剤；神経栄養因子、例えばアセチルコリンエステラーゼ阻害剤、ＭＡＯ阻害剤、インターフェロン、抗けいれん剤、イオンチャンネル遮断薬、リルゾールおよび抗パーキンソン病薬；β遮断薬、ＡＣＥ阻害剤、利尿薬、ナイトレート（ｎｉｔｒａｔｅ）、カルシウムチャンネル遮断薬およびスタチンなどの循環器疾患の治療用薬剤；コルチコステロイド、コレスチラミン、インターフェロンおよび抗ウイルス剤などの肝疾患の治療用薬剤；コルチコステロイド、抗白血病薬および成長因子などの血液疾患の治療用薬剤；シトクロムＰ４５０阻害剤（すなわち、代謝機能停止（ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｂｒｅａｋｄｏｗｎ）の阻害剤）およびＣＹＰ３Ａ４阻害剤（例えば、ケトコナゾール（ｋｅｔｏｋｅｎｏｚｏｌｅ）およびリトナビル）などの薬物動態を持続させるかそれを改善させる薬剤ならびにγグロブリンなどの免疫不全疾患の治療用薬剤が含まれる。
【０３０９】
特定の実施形態では、本発明の化合物または薬学的に許容されるその組成物を、モノクローナル抗体またはｓｉＲＮＡ治療薬と併用して投与する。
【０３１０】
これらの追加の薬剤は、複数投薬レジメンの一部として、本発明の化合物含有組成物とは別個に投与することができる。あるいは、これらの薬剤は、単一組成物中に本発明の化合物と一緒に混合された単一剤形の一部であってよい。複数投薬レジメンの一部として投与する場合、２つの活性薬剤を、同時か、逐次的か、または互いにある時間内、通常互いに５時間以内で提供することができる。
【０３１１】
本明細書で用いる「併用（ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）」、「併用した（ｃｏｍｂｉｎｅｄ）」という用語および関連する用語は、本発明による治療薬の同時または逐次的投与を指す。例えば、本発明の化合物は、別個の単位剤形かまたは単一の単位剤形に一緒にして、同時または逐次的に別の治療薬とともに投与することができる。したがって、本発明は、式Ｉの化合物、追加の治療薬および薬学的に許容される担体、補助剤または媒体を含む単一単位剤形を提供する。
【０３１２】
担体材料と組合せて単一剤形を形成させることができる、本発明の化合物と追加の治療薬の両方の量（上記したような追加の治療薬を含む組成物における）は、治療を受ける宿主および具体的な投与方式によって変わることになる。好ましくは、本発明の組成物を、０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の投薬量の本発明の化合物を投与できるように調合すべきである。
【０３１３】
追加の治療薬を含む組成物では、その追加の治療薬と本発明の化合物は相乗的に作用し得る。したがって、そうした組成物における追加の治療薬の量は、その治療薬だけを使用する単剤治療で必要とされる量より少なくなる。そうした組成物では、０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の投薬量の追加の治療薬を投与することができる。
【０３１４】
本発明の組成物中に存在する追加の治療薬の量は、その治療薬を唯一の活性薬剤として含む組成物で通常投与される量以下となる。本発明で開示する組成物中の追加の治療薬の量は、その薬剤を唯一の治療用活性薬剤として含む組成物中に通常存在する量の約５０％〜１００％の範囲となることが好ましい。
【０３１５】
（例示）
以下の実施例に示すように、特定の例示的実施形態では、化合物を、以下の一般的手順によって調製する。一般的方法では、本発明の特定の化合物の合成を示すが、以下の一般的方法、および当業者に公知の他の方法は、本明細書で説明するすべての化合物ならびにこれらの化合物のそれぞれのサブクラスおよびクラスに適用できることが理解されよう。
【０３１６】
以下の実施例で使用する化合物番号は、上記の表３に示した化合物番号に対応する。
【実施例】
【０３１７】
（実施例１）
【０３１８】
【化７４】
2015110627.tif 000132
標題化合物を以下に記載した通りのステップおよび中間体に従って調製した。
【０３１９】
ステップ１ａ：中間体１ａ
【０３２０】
【化７５】
2015110627.tif 000133
１０ｍＬのアセトニトリル中の（１Ｒ，２Ｓ）−１−アミノ−２−ビニルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルトルエンスルホン酸（０．３３ｇ、１．０ｍｍｏｌ）および（２Ｓ，４Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−（４−フルオロイソインドリン−２−カルボニルオキシ）ピロリジン−２−カルボン酸（０．４ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＡＴＵ（０．４４ｇ、１．２ｍｍｏｌ）、次いでＤＩＥＡ（０．４６ｍＬ、２．５ｍｍｏｌ）を撹拌下で加えた。この混合物を室温において２時間撹拌した。出発物質が完全に消費された後、この反応混合物を蒸発させた。この残渣を３０ｍＬの酢酸エチルに溶解し、水およびブラインで２回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒除去後、粗生成物をシリカゲル上のクロマトグラフィーに供した（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１）。０．３５ｇの標題化合物を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ：  ５３２．０（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３２１】
ステップ１ｂ：中間体１ｂ
【０３２２】
【化７６】
2015110627.tif 000134
５ｍＬのＴＨＦ／ＭｅＯＨ（１：１）中のステップ１ａの生成物（０．３５ｇ、０．６６ｍｍｏｌ）の溶液に１ＮのＬｉＯＨ水溶液（２ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）を加えた。室温において１０時間撹拌後、この反応混合物を１．０ＮのＨＣｌで中和した。有機溶媒を真空蒸発させ、残余の水相を１．０ＮのＨＣｌを使用してｐＨ約３まで酸性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒除去後、０．３ｇの標題化合物を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ：  ５２６．２（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３２３】
ステップ１ｃ：中間体１ｃ
【０３２４】
【化７７】
2015110627.tif 000135
１０ｍＬのＤＣＭ中のステップ１ｂの生成物（０．３０ｇ、０．６ｍｍｏｌ）の溶液にＣＤＩ（０．１６ｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加え、得られた溶液を４０℃において１時間撹拌した。シクロプロピルスルホンアミド（０．１８ｇ、１．５ｍｍｏｌ）およびＤＢＵ（０．１６ｇ、１．０ｍｍｏｌ）をこの反応混合物に加えた。この混合物を４０℃においてさらに１０時間撹拌した。次いで溶媒を除去し、残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、水性ＮａＯＡｃバッファー（ｐＨ約５、２×１０ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３溶液およびブラインで洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、溶媒を除去した後、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（１：１〜１：２）を使用するシリカゲル上のクロマトグラフィーに残渣を供した。合計０．３０ｇの標題化合物を得た。Ｒｆ０．１（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝１：１）、ＭＳ  ｍ／ｚ：  ６０５．０（Ｍ−１）。
【０３２５】
ステップ１ｄ：中間体１ｄ
【０３２６】
【化７８】
2015110627.tif 000136
ステップ１ｃからの生成物（０．２５ｇ、０．４１ｍｍｏｌ）をジオキサン中４ＮのＨＣｌに溶解した。混合物を室温において１時間撹拌した。溶媒除去後、１０ｍＬ分量のＤＣＭを注ぎ、次いで蒸発乾固した。ＤＣＭの添加、次いで蒸発のこのプロセスを４回繰り返して、残渣固体を得、これを次のステップに直接使用した。ＭＳ  ｍ／ｚ：  ５０７．０（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３２７】
ステップ１ｅ：中間体１ｅ
【０３２８】
【化７９】
2015110627.tif 000137
５．０ｍＬのＤＭＦ中のステップ１ｄの生成物（０．１６ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）およびＮ−Ｂｏｃ−３−（Ｆｍｏｃ）アミノ−Ｌ−アラニン（０．１５ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）の溶液にＨＡＴＵ（１２５ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１３０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を室温において撹拌下で加えた。ＴＬＣ分析により１時間後にカップリング反応が完了したことが示された。２０ｍＬ分量のＥｔＯＡｃを注ぎ、この混合物を緩衝液（ｐＨ約４、ＡｃＯＮａ／ＡｃＯＨ）、ＮａＨＣＯ３およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。溶媒除去後、粗製の油生成物をシリカゲル上のクロマトグラフィーに供した（溶離液：ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）。合計０．１４ｇの標題化合物を得た。
【０３２９】
ステップ１ｆ：中間体１ｆ
【０３３０】
【化８０】
2015110627.tif 000138
１２％ピペリジンを含む１ｍＬのＤＭＦ中の０．１０ｇのステップ１ｅの生成物の溶液を１．５時間、室温において撹拌し、次いで高真空下で蒸発乾固した。残渣をヘキサン／エーテル（４：１）で磨砕して、７０ｍｇの標題化合物を得た。
【０３３１】
ステップ１ｇ：
化合物（Ｉ−１）
【０３３２】
【化８１】
2015110627.tif 000139
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−３−アクリルアミド−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）プロパノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：塩化アクリロイル（１０μＬ、０．１２ｍｍｏｌ）を３当量のトリエチルアミンを含有する３ｍＬのＤＣＭ中の５５ｍｇ（０．０８ｍｍｏｌ）のステップ１ｆからの生成物の撹拌溶液に０℃において滴下した。この反応混合物を室温において１．５時間撹拌し、次いで１０ｍＬのＤＣＭで希釈した。得られた溶液をブラインで２回洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を除去して粗生成物を得、これを最初にヘキサン／ＥｔＯＡｃ（１：３〜１：５）、次いでＤＣＭ−メタノール（５０：１〜２５：１）で溶離するシリカゲル上のクロマトグラフィーにより精製した。合計２７ｍｇの標題化合物を得た。Ｒｆ０．４（ＥＡ：ＭｅＯＨ＝１０：１）；ＭＳ
ｍ／ｚ：  ７４６．９（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３３３】
中間体１ｆの生成物を使用して同様に以下の化合物を調製した。
【０３３４】
【化８２】
2015110627.tif 000140
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（ビニルスルホンアミド）プロパノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：Ｒｆ：０．５０（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ、１０：１）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ８０５．３（Ｍ＋Ｈ  ＋）。
【０３３５】
【化８３】
2015110627.tif 000141
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（２−クロロ−２−フェニルアセトアミド）プロパノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：Ｒｆ：０．５０（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、９５：５）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ８４５．２（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３３６】
【化８４】
2015110627.tif 000142
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）ブタ−２−エンアミド）プロパノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：Ｒｆ：０．３５（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、９：１）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ８０４．３（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３３７】
中間体１ｄの生成物および（Ｓ）−４−（Ｆｍｏｃアミノ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ブタン酸を使用して同様に以下の化合物を調製した。
【０３３８】
【化８５】
2015110627.tif 000143
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−４−アクリルアミド−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ブタノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：Ｒｆ：０．４０（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ、１０：１）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７６１．３（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３３９】
（実施例２）
【０３４０】
【化８６】
2015110627.tif 000144
標題化合物を以下に記載した通りのステップおよび中間体に従って調製した。
【０３４１】
ステップ２ａ：中間体２ａ
【０３４２】
【化８７】
2015110627.tif 000145
４．０ｍＬのアセトニトリル中の実施例１からのステップ１ｄの生成物（０．１２ｇ、０．２２ｍｍｏｌ）およびＮ−Ｂｏｃ−グリシン（０．０５４ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）の溶液にＨＡＴＵ（１３３ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．１２ｍＬ、０．６６ｍｍｏｌ）を室温において撹拌下で加えた。この反応混合物を２時間撹拌した。ＬＣ−ＭＳおよびＴＬＣ分析によりカップリング反応が完了したことが示された。２０ｍＬのＥｔＯＡｃを注ぎ、混合物を緩衝液（ｐＨ約４、ＡｃＯＮａ／ＡｃＯＨ）、ＮａＨＣＯ３およびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒除去後、粗生成物をシリカゲル上のクロマトグラフィーに供した（溶離液：ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）。合計０．１０ｇの標題化合物を得た。Ｒｆ０．２（ＥｔＯＡｃ）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ６６４．０（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３４３】
ステップ２ｂ：中間体２ｂ
【０３４４】
【化８８】
2015110627.tif 000146
ステップ２ａからの生成物（０．１０ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を２ｍＬのジオキサン中４ＮのＨＣｌに溶解し、反応を１時間室温において撹拌した。溶媒除去後、３ｍＬ分量のＤＣＭを注ぎ、次いで蒸発乾固した。ＤＣＭの添加、次いで蒸発のこのプロセスを３回繰り返して、標題化合物中間体２ｂをそのＨＣｌ塩（０．１０ｇ）としてを得た。ＭＳ  ｍ／ｚ：  ５６４．０（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３４５】
ステップ２ｃ：
【０３４６】
【化８９】
2015110627.tif 000147
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−アクリルアミドアセチル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：ＨＡＴＵを使用して中間体２ａについて記載したカップリング反応に従って中間体２ｂとアクリル酸をカップリングさせることによって標題化合物を作製した。合計５０ｍｇの標題化合物を得た。Ｒｆ０．１（ＥｔＯＡｃ）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ６１７．９（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３４７】
実施例２で記載した手順に従って以下の化合物を同様に作製した。
【０３４８】
【化９０】
2015110627.tif 000148
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−（Ｅ）−ブト−２−エンアミドアセチル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル−４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：ＭＳ  ｍ／ｚ：  ６３２．０（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３４９】
【化９１】
2015110627.tif 000149
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｒ）−２−アクリルアミドプロパノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル−４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：ＭＳ  ｍ／ｚ：  ６３２．１（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３５０】
【化９２】
2015110627.tif 000150
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｒ）−２−アクリルアミド−３−メチルブタノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル−４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：ＭＳ  ｍ／ｚ：  ６６０．２（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３５１】
【化９３】
2015110627.tif 000151
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（２−（２−アセトキシベンズアミド）アセチル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル−４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７２４．０（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３５２】
【化９４】
2015110627.tif 000152
（５Ｓ）−１−（（Ｒ）−２−（２−クロロピリミジン−４−イルアミノ）プロパノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル−４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：Ｒｆ：０．３５（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、９５：５）、ＭＳ  ｍ／ｚ：  ６９０．３（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３５３】
実施例２で記載した手順に従って以下の化合物を同様に作製した。
【０３５４】
【化９５】
2015110627.tif 000153
（５Ｓ）−１−（２−アセトアミド−２−（１−アクリロイルアゼチジン−３−イル）アセチル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル−４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７１５．２（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３５５】
【化９６】
2015110627.tif 000154
（５Ｓ）−１−（２−（１−アクリロイルアゼチジン−３−イル）−２−（シクロペンチルオキシカルボニルアミノ）アセチル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル−４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７８５．２（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３５６】
（実施例３）
【０３５７】
【化９７】
2015110627.tif 000155
標題化合物を以下に記載した通りのステップおよび中間体に従って調製した。
【０３５８】
ステップ３ａ：中間体３ａ
【０３５９】
【化９８】
2015110627.tif 000156
５０ｍＬのＣＨ２Ｃｌ２中の（Ｓ）−３−アミノ−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）プロパン酸（２．０４ｇ、１０ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（４．５ｍＬ、３０ｍｍｏｌ）の溶液に塩化ニトロベンゼンスルホニル（２．９ｇ、１３．０ｍｍｏｌ）を室温において加えた。この混合物を１０時間室温において撹拌した。溶媒を真空除去し、次いで１００ｍＬのＥｔＯＡｃを加えた。有機層を１ＮのＨＣｌ（ｐＨ３まで）、水およびブラインで洗浄した。この有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を除去して、粗製中間体３ａ（４．０ｇ）を得た。
【０３６０】
ステップ３ｂ：中間体３ｂ
【０３６１】
【化９９】
2015110627.tif 000157
粗製中間体３ａ（２．０ｇ）、Ｋ２ＣＯ３（１．５、４当量）を１０ｍＬのＤＭＦに溶解した。ＭｅＩ（０．８ｍＬ、４当量）をこの反応物に室温において加えた。得られた混合物を２０時間撹拌した。ＤＭＦの大部分を真空除去し、１００ｍＬのＥｔＯＡｃを加え、混合物を水およびブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒除去後、粗生成物を短シリカゲルカラムにかけて（溶離液：ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）、１．６２ｇの中間体３ｂを得た。ＭＳ  ｍ／ｚ：  ４３９．９（Ｍ＋Ｎａ＋）。
【０３６２】
ステップ３ｃ：中間体３ｃ
【０３６３】
【化１００】
2015110627.tif 000158
１０ｍＬのＴＨＦ／ＭｅＯＨ（１：１）中の中間体３ｂ（１．６ｇ、３．８ｍｍｏｌ）の溶液に１ＮのＬｉＯＨ水溶液（５．８ｍＬ、５．８ｍｍｏｌ）を加えた。室温において１０時間撹拌後、反応混合物を１．０ＮのＨＣｌで中和した。有機溶媒を真空蒸発させ、残余の水相を１．０ＮのＨＣｌを使用してｐＨ約３まで酸性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒除去後、１．５ｇの中間体３ｃを得た。ＭＳ  ｍ／ｚ：  ４０２．０（Ｍ−１，負モード）。
【０３６４】
ステップ３ｄ：中間体３ｄ
【０３６５】
【化１０１】
2015110627.tif 000159
５．０ｍＬの無水アセトニトリル中の中間体１ｄ（０．１２ｇ、０．２０ｍｍｏｌ）および中間体３ｃ（０．１２ｇ、０．３ｍｍｏｌ）の溶液にＨＡＴＵ（０．１１ｇ、０．３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．１４ｍＬ、０．９ｍｍｏｌ）を室温において撹拌下で加えた。ＴＬＣ分析およびＬＣ−ＭＳにより１時間後にカップリング反応が完了したことが示された。２０ｍＬ分量のＥｔＯＡｃを注ぎ、この混合物を緩衝液（ｐＨ約４、ＡｃＯＮａ／ＡｃＯＨ）、ＮａＨＣＯ３およびブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒除去後、粗生成物をシリカゲル上のクロマトグラフィーに供した（溶離液：ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）。合計０．１０ｇの中間体３ｄを得た。Ｒｆ０．１（ＥｔＯＡｃ）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ８９１．８（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３６６】
ステップ３ｅ：中間体３ｅ
【０３６７】
【化１０２】
2015110627.tif 000160
３ｍＬのＤＭＦ中の中間体３ｄ（０．１０ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の溶液にフェニルチオール（３０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（４０ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を２０時間室温において撹拌した。３０ｍＬのＥｔＯＡｃを加え、混合物を水およびブラインおよび水で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。溶媒除去後、粗生成物をシリカゲル上のクロマトグラフィーに供し（溶離液：ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）、０．１ｇの粗製中間体３ｅを得た。ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７０６．９（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３６８】
ステップ３ｆ：化合物Ｉ−１１
【０３６９】
【化１０３】
2015110627.tif 000161
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（Ｎ−メチルアクリルアミド）プロパノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート（Ｉ−１１）：塩化アクリロイル（９μｌ、Ｌ、０．１１ｍｍｏｌ）を０．０４ｍＬ（０．３ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを含有する３ｍＬのＤＣＭ中の０．１ｇ（０．１ｍｍｏｌ）のステップ３ｅからの生成物の撹拌溶液に０℃において滴下した。この反応混合物を室温において１．５時間撹拌し、次いで１０ｍＬのＤＣＭで希釈した。得られた溶液をブラインで２回洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を除去して粗生成物を得、これを最初にヘキサン／ＥｔＯＡｃ（１：３〜１：５）、次いでＥｔＯＡｃで溶離するシリカゲル上のクロマトグラフィーにより精製した。合計２０ｍｇの標題化合物を得た。
【０３７０】
Ｒｆ０．１５（ＥｔＯＡｃ）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７６０．９  （Ｍ＋Ｈ＋）．    １ＨＮＭＲ  （ＣＤ３ＯＤ，４００  ＭＨｚ）  δ  ７．３２  （ｍ，１Ｈ），７．１３−６．９８  （ｍ，２Ｈ），６．７５  （ｍ，１Ｈ），６．２３  （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３，１６．５  Ｈｚ），５．７３  （ｍ，２Ｈ），５．４５−５．２９  （ｍ，２Ｈ），５．１２  （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．４，１０．０  Ｈｚ），４．７２  （ｓ，４Ｈ），４．４５  （ｍ，１Ｈ），４．２５−４．０９  （ｍ，１Ｈ），３．９１  （ｍ，１Ｈ），３．７５−３．５０  （ｍ，１Ｈ），３．１５  （ｓ，３Ｈ），２．９６  （ｍ，１Ｈ），２．４２  （ｍ，１Ｈ），２．２５  （ｍ，２Ｈ），１．８７  （ｍ，１Ｈ），１．４５−０．８５  （ｍ，１４Ｈ）．
中間体３ｅ、塩化２−クロロエタンスルホニルおよびトリエチルアミンを使用して同様に以下の化合物を調製した。
【０３７１】
【化１０４】
2015110627.tif 000162
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（Ｎ−メチルビニルスルホンアミド）プロパノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：Ｒｆ：０．５５（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、９５：５）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７９７．３（Ｍ＋Ｈ  ＋）。
【０３７２】
同様に、（Ｓ）−３−アミノ−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）プロパン酸の代わりにステップ３において（Ｓ）−４−（Ｆｍｏｃアミノ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ブタン酸を使用して以下の化合物を調製した。
【０３７３】
【化１０５】
2015110627.tif 000163
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−（Ｎ−メチルアクリルアミド）ブタノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：Ｒｆ：０．４５（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、９５：５）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７７５．３（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３７４】
同様に、実施例３で記載した手順に従って、ヨウ化メチルの代わりにステップ３ｂにおいてヨウ化エチルを使用して化合物Ｉ−１４を作製することができる。
【０３７５】
【化１０６】
2015110627.tif 000164
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（Ｎ−エチルアクリルアミド）プロパノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート
実施例３で記載した手順に従い、ヨウ化メチルの代わりにステップ３ｂにおいて臭化アリルを使用することにより、化合物Ｉ−１５を作製した。
【０３７６】
【化１０７】
2015110627.tif 000165
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−３−（Ｎ−アリルアクリルアミド）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）プロパノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：Ｒｆ：０．５８（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、９５：５）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７８７．３（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３７７】
ステップ１ａにおいて（１Ｒ，２Ｓ）−１−アミノ−２−エチルシクロプロパンカルボン酸エチルエステルから出発し、実施例３で記載した適切な手順に従って、以下の化合物を作製することができる。
【０３７８】
【化１０８】
2015110627.tif 000166
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−３−（Ｎ−アリルアクリルアミド）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）プロパノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−エチルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート
【０３７９】
【化１０９】
2015110627.tif 000167
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（Ｎ−メチルアクリルアミド）プロパノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−エチルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート
【０３８０】
【化１１０】
2015110627.tif 000168
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−３−アクリルアミド−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）プロパノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−エチルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート
同様に、以下の化合物を調製した。
【０３８１】
【化１１１】
2015110627.tif 000169
（５Ｓ）−１−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（（Ｅ）−４−（ジメチルアミノ）−Ｎ−メチルブタ−２−エンアミド）プロパノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：
Ｒｆ：０．４５（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、９５：５）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ８１８．５（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３８２】
（実施例４）
【０３８３】
【化１１２】
2015110627.tif 000170
標題化合物を以下に記載した通りのステップおよび中間体に従って調製した。
【０３８４】
ステップ４ａ：中間体４ａ
【０３８５】
【化１１３】
2015110627.tif 000171
ステップ１ｅからの中間体１ｅをステップ１ｄで記載した手順に従って４ＮのＨＣｌで処理して中間体４ａをそのＨＣｌ塩として得た。
ＭＳ  ｍ／ｚ：  ８１５．２（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３８６】
ステップ４ｂ：中間体４ｂ
【０３８７】
【化１１４】
2015110627.tif 000172
シクロペンチルクロロホルメート（１．５当量）を３当量のトリエチルアミンを含有するＤＣＭ中のステップ４ａからの中間体４ａ（１当量）の撹拌溶液に０℃において滴下した。この反応混合物を室温において１．５時間撹拌し、次いで１０ｍＬのＤＣＭで希釈した。得られた溶液をブラインで２回洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を除去して粗生成物を得、これを最初にヘキサン／ＥｔＯＡｃ（１：３〜１：５）、次いでＥｔＯＡｃで溶離するシリカゲル上のクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（６０〜９０％）を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ：  ９２５．２（Ｍ−１）。
【０３８８】
ステップ４ｃ：化合物Ｉ−１９
【０３８９】
【化１１５】
2015110627.tif 000173
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−３−アクリルアミド−２−（シクロペンチルオキシカルボニルアミノ）プロパノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：ステップ１ｆおよびステップ１ｇにおいて記載した手順に従って中間体４ｂから標題化合物を調製した。ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７５９．０（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０３９０】
適切な中間体から出発し、同様に、以下の化合物を調製した。
【０３９１】
【化１１６】
2015110627.tif 000174
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（シクロペンチルオキシカルボニルアミノ）−３−（Ｎ−メチルアクリルアミド）プロパノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：Ｒｆ：０．４（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ、２０：１）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７７３．２（Ｍ＋Ｈ  ＋）。
【０３９２】
【化１１７】
2015110627.tif 000175
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（シクロペンチルオキシカルボニルアミノ）−４−（Ｎ−メチルアクリルアミド）ブタノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：Ｒｆ：０．４（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ、２０：１）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７８７．３（Ｍ＋Ｈ  ＋）。
【０３９３】
【化１１８】
2015110627.tif 000176
（５Ｓ）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）−１−（２−（４−（メトキシカルボニル）ビシクロ［２．２．２］オクタン−１−カルボキサミド）−３−（Ｎ−メチルアクリルアミド）プロパノイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：
Ｒｆ：０．４５（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ、１０：１）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ８５５．３（Ｍ＋Ｈ  ＋）。
【０３９４】
（実施例５）
【０３９５】
【化１１９】
2015110627.tif 000177
標題化合物を以下に記載した通りのステップおよび中間体に従って調製した。
【０３９６】
ステップ５ａ：中間体５ａ
【０３９７】
【化１２０】
2015110627.tif 000178
１０．０ｍＬのＤＣＭ中のＢｏｃ−Ｌ−スレオニン（０．４４ｇ、２．０ｍｍｏｌ）の溶液に塩化クロチル（０．３２ｇ、３．０ｍｍｏｌ）を室温において加え、次いで触媒量のＤＭＡＰおよびＴＥＡ（１．０ｍＬ、６ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を１０時
間室温において撹拌した。ＮａＨＣＯ３水溶液（１０ｍＬ）を加えて反応をクエンチした。２時間後、１ＮのＨＣｌ水溶液をｐＨ約３までゆっくりと加えた。ＤＣＭ層を集め、水層をＤＣＭ（２×１０ｍＬ）で抽出した。この有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を除去して粗生成物を得た。
【０３９８】
ステップ５ｂ：Ｉ−２２
【０３９９】
【化１２１】
2015110627.tif 000179
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（（Ｅ）−ブタ−２−エノイルオキシ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ブタノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル−４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：ＨＡＴＵを使用して実施例１の中間体１ｅについて記載したカップリング反応に従って実施例１からの中間体１ｄと中間体５ａをカップリングさせることによって標題化合物を作製した。合計９０ｍｇの標題化合物を１０９ｍｇの中間体１ｄから得た。Ｒｆ０．５（ＥｔＯＡｃ）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７７４．３（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０４００】
中間体１ｄから出発し、適切な中間体とカップリングさせることにより、同様に、以下の化合物を調製した。
【０４０１】
【化１２２】
2015110627.tif 000180
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）アクリロイルオキシ）プロパノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：ＭＳ  ｍ／ｚ：  ８６２．２（Ｍ−１）。
【０４０２】
【化１２３】
2015110627.tif 000181
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（２Ｓ，３Ｒ）−３−（アクリロイルオキシ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ブタノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：Ｒｆ：０．４（ＥｔＯＡｃ）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７６０．１（Ｍ−１）。
【０４０３】
（実施例６）
化合物Ｉ−２５
【０４０４】
【化１２４】
2015110627.tif 000182
（Ｉ−２５）：標題化合物を以下に記載した通りのステップおよび中間体に従って調製した。
【０４０５】
ステップ６ａ：中間体６ａ
【０４０６】
【化１２５】
2015110627.tif 000183
１０．０ｍＬの無水ＴＨＦ中のＮ−Ｂｏｃ−ピログルタミン酸（０．２３ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液に２−メチルプロプ−１−エニル）マグネシウムブロミド（ＴＨＦ中０．５Ｍ、５ｍＬ、２．５ｍｍｏｌ）を−７８℃においてゆっくりと加えた。この反応混合物を１時間、−７８ｏＣにおいて撹拌した。１ＮのＨＣｌ（２．５ｍＬ）水溶液を加え、混合物をゆっくりと室温まで加温した。ｐＨを１ＮのＨＣｌにより約３〜４に調整した。次いでＴＨＦを真空除去し、残余の水層をＤＣＭで抽出した（３×１５ｍＬ）。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を除去して粗生成物を得た。
【０４０７】
ステップ６ｂ：Ｉ−２５
【０４０８】
【化１２６】
2015110627.tif 000184
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−オキソオクタ−６−エノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：ＨＡＴＵを使用して実施例１の中間体１ｅについて記載したカップリング反応に従って実施例１からの中間体１ｄと中間体６ａをカップリングさせることによって標題化合物を作製した。合計８０ｍｇの標題化合物を１０８ｍｇの中間体１ｄから得た。Ｒｆ０．３（ＥｔＯＡｃ）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７７４．１  （Ｍ＋Ｈ＋）．    １ＨＮＭＲ  （ＣＤ３ＯＤ，４００  ＭＨｚ）
δ  ７．３１  （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．３，７．４  Ｈｚ），７．１３−６．９８  （ｍ，２Ｈ），６．１８  （ｓ，１Ｈ），５．７４  （ｍ，１Ｈ），５．３８  （ｓ，１Ｈ），５．３２  （ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１７．０  Ｈｚ），５．１２  （ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．１  Ｈｚ），４．７２  （ｓ，４Ｈ），４．４８  （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１７．０，９．１６  Ｈｚ），４．２９  （ｍ，２Ｈ），３．８９  （ｍ，１Ｈ），２．９３  （ｍ，１Ｈ），２．６０−２．３５  （ｍ，２Ｈ），２．２２  （ｍ，２Ｈ），２．１０  （ｓ，３Ｈ），２．０２−１．７５  （ｂｒ，１Ｈ），１．８８  （ｓ，３Ｈ），１．４６−０．８０  （ｍ，１４Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （ＣＤ３ＯＤ，１００  ＭＨｚ）：  δ  ２０１．８，１７５．３，１７４．５，１７０．６，１５７．７，１５６．９，１５５．６，１４１．１，１３４．２，１３１．２，１２４．８，１１９．９，１１９．７，１１８．６，１１５．０，１１４．８，８０．３，７６．１，６１．０，５５．０，５４．９，５４．８，５３．５，５３．３，５２．７，５０．３，５０．１，４２．６，４０．３，３５．７，３５．４，３２．１，２８．７，２８．５，２７．７，２６．９，２４．０，２０．９，６．７４，６．４７．
中間体１ｄから出発し、ステップ６ａで記載した通りに同様に作製した適切な中間体とカップリングさせることによって以下の化合物を調製した。
【０４０９】
【化１２７】
2015110627.tif 000185
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ，Ｅ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５−オキソオクタ−６−エノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル−４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：合計８０ｍｇの標題化合物を１５０ｍｇの中間体１ｄから得た。Ｒｆ０．３（ＥｔＯＡｃ）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７６０．３（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０４１０】
【化１２８】
2015110627.tif 000186
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−６−メチル−５−オキソヘプタ−６−エノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：合計８０ｍｇの標題化合物を１５０ｍｇの中間体１ｄから得た。Ｒｆ０．４（ＥｔＯＡｃ）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７８２．２  （Ｍ＋Ｎａ＋）．    １ＨＮＭＲ  （ＣＤ３ＯＤ，４００  ＭＨｚ）  δ  ７．３１  （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．３，７．４  Ｈｚ），７．０９  （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３３，７．４  Ｈｚ），７．０  （ｍ，１Ｈ），６．１２  （ｓ，１Ｈ），５．８２  （ｓ，１Ｈ），５．７４  （ｍ，１Ｈ），５．３９  （ｓ，１Ｈ），５．３１  （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．４，１７．０  Ｈｚ），５．１２  （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．１，１．４
Ｈｚ），４．７３  （ｍ，４Ｈ），４．４８  （ｍ，１Ｈ），４．３２  （ｍ，２Ｈ），３．９０  （ｍ，１Ｈ），２．９１  （ｍ，１Ｈ），２．４２  （ｍ，１Ｈ），２．２２  （ｍ，２Ｈ），２．０１  （ｍ，１Ｈ），１．９０−１．８５  （ｍ，２Ｈ），１．８４  （ｓ，３Ｈ），１．４０−１．０２  （ｍ，１４Ｈ）．
【０４１１】
【化１２９】
2015110627.tif 000187
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ，Ｅ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−６−メチル−５−オキソオクタ−６−エノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−エチルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：合計５０ｍｇの標題化合物を１５０ｍｇの中間体１ｄから得た。Ｒｆ０．５（ＥｔＯＡｃ）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７９６．２（Ｍ＋Ｎａ＋）。
【０４１２】
中間体１ｄから出発し、ステップ６ａで記載した通りに同様に作製した適切な中間体とカップリングさせることによって以下の化合物を調製する。
【０４１３】
【化１３０】
2015110627.tif 000188
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５−オキソオクタ−６−イノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート
【０４１４】
【化１３１】
2015110627.tif 000189
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−８，８−ジメチル−５−オキソノナ−６−イノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート
【０４１５】
【化１３２】
2015110627.tif 000190
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３，３，７−トリメチル−５−オキソオクタ−６−エノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート
【０４１６】
【化１３３】
2015110627.tif 000191
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４，４，７−トリメチル−５−オキソオクタ−６−エノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート
【０４１７】
【化１３４】
2015110627.tif 000192
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−６−メチル−４−オキソヘプタ−５−エノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｓ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−ビニルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート
ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７６０．１（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０４１８】
中間体１ｄのパラジウム触媒水素化、次いでステップ６ｂで記載したカップリング反応により以下の化合物を作製した。
【０４１９】
【化１３５】
2015110627.tif 000193
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−オキソオクタ−６−エノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−エチルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：合計３３ｍｇの標題化合物を１００ｍｇの中間体１ｄから得た。Ｒｆ０．５（ＥｔＯＡｃ）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７７６．２（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０４２０】
同様に、以下の化合物を作製する。
【０４２１】
【化１３６】
2015110627.tif 000194
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−６−メチル−５−オキソヘプタ−６−エノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−エチルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート
【０４２２】
【化１３７】
2015110627.tif 000195
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−６−メチル−４−オキソヘプタ−５−エノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−エチルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート
【０４２３】
【化１３８】
2015110627.tif 000196
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５−シクロブテニル−５−オキソペンタノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−エチルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート
【０４２４】
【化１３９】
2015110627.tif 000197
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−６−シクロブチリデン−５−オキソヘキサノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−エチルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート
【０４２５】
【化１４０】
2015110627.tif 000198
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ，Ｅ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−８，８−ジメチル−５−オキソノナ−６−エノイル）−５−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−エチルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート
【０４２６】
【化１４１】
2015110627.tif 000199
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（（Ｓ）−２−オキソシクロペンタ−３−エニル）アセチル）−５−（（１Ｒ，２Ｒ）−１−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−２−エチルシクロプロピルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート
中間体１ｄの長時間のパラジウム触媒水素化（２４〜４８時間）、次いでステップ６ｂで記載したカップリング反応により以下の化合物を作製した。
【０４２７】
【化１４２】
2015110627.tif 000200
（３Ｒ，５Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−７−メチル−５−オキソオクタ−６−エノイル）−５−（１−（シクロプロパンスルホンアミド）−１−オキソヘキサン−２−イルカルバモイル）ピロリジン−３−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート：合計５８ｍｇの標題化合物（Ｉ−４４）を１００ｍｇの中間体１ｄから得た。Ｒｆ０．５（ＥｔＯＡｃ）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ８００．２（Ｍ＋Ｎａ＋）。
【０４２８】
（実施例７）
【０４２９】
【化１４３】
2015110627.tif 000201
（１ａＲ，３ａＳ，５Ｒ，９Ｓ，１６ａＳ，Ｚ）−１１−（ｏ−ニトロフェニルスルホニル）−９−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−１ａ−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−３，８−ジオキソ−１，１ａ，２，３，３ａ，４，５，６，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１６ａ−ヘキサデカヒドロシクロプロパ［ｎ］ピロロ［２，１−ｃ］［１，４，８］トリアザシクロペンタデシン−５−イル−４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート（Ｉ−４５）：標題化合物を以下に記載した通りのステップおよび中間体に従って調製する。
【０４３０】
ステップ７ａ：中間体７ａ
【０４３１】
【化１４４】
2015110627.tif 000202
アルキル化試薬として５−ブロモペンタ−１−エンを使用して中間体３ｃの合成について記載した手順に従って中間体７ａを作製した。
【０４３２】
ステップ７ｂ：中間体７ｂ
【０４３３】
【化１４５】
2015110627.tif 000203
ＨＡＴＵを使用して実施例１の中間体１ｅについて記載したカップリング反応に従って実施例１からの中間体１ｄと中間体７ａをカップリングさせることによって中間体７ｂを作製した。ＭＳ：９４６．２（Ｍ＋１）。
【０４３４】
ステップ７ｃ：化合物Ｉ−４５
【０４３５】
【化１４６】
2015110627.tif 000204
１５０ｍＬの無水ジクロロメタン中の５４０ｍｇの中間体７ｂの溶液に１００ｍｇの１，３−ビス（２，４，６−トリメチルフェニル）−４，５−ジヒドロイミダゾール−２−イリデン［２−（ｉ−プロポキシ）−５−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノスルホニル）フェニル］メチレンルテニウム（ＩＩ）（Ｚｈａｎ触媒１Ｂ、ＲＣ−３０３、Ｚａｎｎａｎ  Ｐｈａｒｍａ  Ｌｔｄ．）を窒素下で加えた。得られた混合物を４８℃において終夜加熱した。ＬＣ−ＭＳにより生成物への完全な変換が示された。反応溶液を溶離液（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ、ｖ／ｖ、１：１から純粋なＥｔＯＡｃ）のシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィーに供し、１４０ｍｇの所望の生成物を得た。ＭＳ：  ９１６．３（ＥＳ−）。
【０４３６】
同様に、ステップ７ａの（Ｓ）−５−アリルアミノ−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−ペンタン酸から出発して以下の化合物を調製した。
【０４３７】
【化１４７】
2015110627.tif 000205
ＭＳ：  ９１６．３（ＥＳ−）
同様に、ステップ７ａの（Ｓ）−４−［ブタ−３−エニル−（２−ニトロ−ベンゼンスルホニル）−アミノ］−２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−酪酸から出発して以下の化合物を調製した。
【０４３８】
【化１４８】
2015110627.tif 000206
ＭＳ：  ９１６．３（ＥＳ−）
（実施例８）
【０４３９】
【化１４９】
2015110627.tif 000207
（１ａＲ，３ａＳ，５Ｒ，９Ｓ，１６ａＳ，Ｚ）−１１−アクリロイル−９−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−１ａ−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−３，８−ジオキソ−１，１ａ，２，３，３ａ，４，５，６，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１６ａ−ヘキサデカヒドロシクロプロパ［ｎ］ピロロ［２，１−ｃ］［１，４，８］トリアザシクロペンタデシン−５−イル−４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート（Ｉ−３５）：標題化合物を以下に記載した通りのステップおよび中間体に従って調製した。
【０４４０】
ステップ８ａ：中間体８ａ：
【０４４１】
【化１５０】
2015110627.tif 000208
ステップ３ｅで記載した手順に従ってチオフェノールで実施例７からの化合物Ｉ−４５を処理することにより中間体８ａを作製した。ＭＳ：  ７３３．３（Ｍ＋１）。
【０４４２】
ステップ８ｂ：化合物Ｉ−３５：
【０４４３】
【化１５１】
2015110627.tif 000209
ステップ３ｆで記載した手順に従って塩化アクリロイルで中間体８ａを処理することにより標題化合物を作製した。Ｒｆ０．２（ＤＣＭ中５％ＭｅＯＨ）；ＭＳ  ｍ／ｚ：  ７８７．３（Ｍ＋Ｈ＋）。
【０４４４】
同様に、塩化クロロアセチル（１．２当量）で中間体８ａを処理することにより以下の化合物を調製した。
【０４４５】
【化１５２】
2015110627.tif 000210
（１ａＲ，３ａＳ，５Ｒ，９Ｓ，１６ａＳ，Ｚ）−１１−クロロアセチル−９−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−１ａ−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−３，８−ジオキソ−１，１ａ，２，３，３ａ，４，５，６，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１６ａ−ヘキサデカヒドロシクロプロパ［ｎ］ピロロ［２，１−ｃ］［１，４，８］トリアザシクロペンタデシン−５−イル−４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート（Ｉ−４５）
ＭＳ：  ８３１．２（Ｍ＋Ｎａ＋）。
【０４４６】
同様に、塩化クロロアセチル（３．０当量）で中間体８ａを処理することにより以下の化合物を調製した。
【０４４７】
【化１５３】
2015110627.tif 000211
ＭＳ：  ９０７．２（Ｍ＋Ｎａ＋）。
【０４４８】
同様に、化合物Ｉ−５３、およびステップ８ａのＩ−５４から出発して以下の化合物を調製した。
【０４４９】
【化１５４】
2015110627.tif 000212
（１ａＲ，３ａＳ，５Ｒ，９Ｓ，１６ａＳ，Ｚ）−１２−アクリロイル−９−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−１ａ−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−３，８−ジオキソ−１，１ａ，２，３，３ａ，４，５，６，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１６ａ−ヘキサデカヒドロシクロプロパ［ｎ］ピロロ［２，１−ｃ］［１，４，９］トリアザシクロペンタデシン−５−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート
ＭＳ：  ７８５．３（ＥＳ−）。
【０４５０】
【化１５５】
2015110627.tif 000213
（１ａＲ，３ａＳ，５Ｒ，９Ｓ，１６ａＳ，Ｚ）−１３−アクリロイル−９−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−１ａ−（シクロプロピルスルホニルカルバモイル）−３，８−ジオキソ−１，１ａ，２，３，３ａ，４，５，６，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１６ａ−ヘキサデカヒドロシクロプロパ［ｅ］ピロロ［１，２−ａ］［１，４，１０］トリアザシクロペンタデシン−５−イル  ４−フルオロイソインドリン−２−カルボキシレート
ＭＳ：  ７８７．３（ＥＳ＋），７８５．３（ＥＳ−）。
【０４５１】
（実施例９）（Ｉ−４０）
【０４５２】
【化１５６】
2015110627.tif 000214
以下のスキームで記載した通りのステップおよび中間体に従って標題化合物を調製する。
【０４５３】
【化１５７−１】
2015110627.tif 000215
【０４５４】
【化１５７−２】
2015110627.tif 000216
メチル２，２，１２，１２−テトラメチル−４，９−ジオキソ−３，１０−ジオキサ−５，８−ジアザヘキサデカ−１５−エン−７−カルボキシレート（中間体９−１）。１０ｍＬの無水ＴＨＦ中の３８１ｍｇのメチル２−アミノ−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）プロパノエート塩酸塩および１ｍＬのＥｔ３Ｎの撹拌溶液に１．５ｍｍｏｌの２，２−ジメチルヘクサ−５−エニルカルボノクロリデートを加えた。得られた混合物を室温において終夜撹拌し、次いで濃縮した。溶離液としてヘプタン／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ、７／１）を用いるシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーに残渣をかけて供し、５００ｍｇの無色の油を得た（９０％）。１ＨＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）  ｄ  ５．８２  （ｍ，１Ｈ），５．６４  （ｂｒ  ｓ，１Ｈ），５．０２  （ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．２，１．８  Ｈｚ），４．９５  （ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２  Ｈｚ），４．８３  （ｂｒ  ｓ，１Ｈ），４．３９  （ｂｒ  ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．０  Ｈｚ），３．８３
（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），３．８０  （ｓ，３Ｈ），２．５５  （ｍ，２Ｈ），２．０２  （ｍ，２Ｈ），１．４３  （ｓ，９Ｈ），１．３５  （ｍ，２Ｈ），０．９１  （ｓ，６Ｈ）．
中間体９−２
【０４５５】
【化１５８】
2015110627.tif 000217
２，２，１２，１２−テトラメチル−４，９−ジオキソ−３，１０−ジオキサ−５，８−ジアザヘキサデカ−１５−エン−７−カルボン酸（中間体９−２）。ＭｅＯＨ−ＴＨＦ（５ｍＬ−５ｍＬ）の混合溶媒中の５００ｍｇの中間体８−１の撹拌混合物に４２０ｍｇのＬｉＯＨ−Ｈ２Ｏ、次いで５ｍＬの水を加えた。反応混合物を室温において３０分間撹拌し、次いで１２ｍＬの１．０ＮのＨＣｌを使用して酸性化し、６０ｍＬのジクロロメタンで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。濾過および濃縮後、４６０ｍｇの粘稠な油を所望の生成物として得た（９５％）。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３５７．２（ＥＳ−）。
【０４５６】
中間体９−３
【０４５７】
【化１５９】
2015110627.tif 000218
（２Ｓ，４Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル２−メチル４−（４−ブロモイソインドリン−２−カルボニルオキシ）ピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（中間体９−３）。５ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド中に０．５ｇの（２Ｓ，４Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル２−メチル４−ヒドロキシピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（２ｍｍｏｌ）を含有する溶液に３７０ｍｇのカルボニルジイミダゾール（１．１当量）を加えた。反応物を６０℃において１時間加熱し、次いで４００ｍｇの４−ブロモイソインドール（２ｍｍｏｌ）を加えた。反応を６０℃において終夜続けた。冷却後、この反応混合物を５０ｍＬのＥｔＯＡｃで抽出し、水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。濾過および濃縮後、残渣をヘプタン／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ、５／２）を使用するシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して、白色の固体７４５ｍｇを得た（７９％）。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３６９．２（ＥＳ＋，Ｍ＋１  −Ｂｏｃ）。
【０４５８】
中間体９−４
【０４５９】
【化１６０】
2015110627.tif 000219
（２Ｓ，４Ｒ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル２−メチル４−（４−ビニルイソインドリン−２−カルボニルオキシ）ピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（中間体９−４）。Ａｒ下、３０ｍＬの脱気したトルエン中の７４５ｍｇの中間体８−３（１．５８ｍｍｏｌ）の溶液に１７０ｍｇのパラジウムテトラキストリフェニルホスフィン、次いで７００μＬのビニルトリブチルスズ（２．４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１００℃において終夜加熱した。冷却後、溶媒を減圧除去し、溶離液としてヘプタン／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ、９／１〜３／１）を用いるシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィーで残渣を精製して、白色の固体５３３ｍｇを得た（８１％）。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３１７．２（ＥＳ＋，Ｍ＋１−Ｂｏｃ）。
【０４６０】
中間体９−５
【０４６１】
【化１６１】
2015110627.tif 000220
（２Ｓ，４Ｒ）−メチル１−（（Ｓ）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−（（２，２−ジメチルヘクサ−５−エニルオキシ）カルボニルアミノ）プロパノイル）−４−（４−ビニル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−カルボニルオキシ）ピロリジン−２−カルボキシレート（中間体９−５）。ジオキサン中４ＮのＨＣｌを使用し、実施例１で記載した通りに中間体９−４をＢｏｃ脱保護した。この脱Ｂｏｃ中間体（０．８２ｍｍｏｌ）２８８ｍｇを５ｍＬのＴＨＦ中３５８ｍｇの中間体９−２（１．０ｍｍｏｌ）、４００ｍｇのＨＡＴＵ（１．０５ｍｍｏｌ）、３００μＬのＤＩＰＥＡを含有する撹拌混合物に加えた。終夜撹拌後、反応混合物を６０ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、飽和重炭酸ナトリウムで洗浄し、ＨＣｌで希釈し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。濃縮し、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ（１／１）を用いるシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して、白色の固体４８５ｍｇを得た（９０％）。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５５７．３（ＥＳ＋，Ｍ＋１−Ｂｏｃ）。
【０４６２】
中間体９−６
【０４６３】
【化１６２】
2015110627.tif 000221
大環状中間体９−６。Ｎ２下、４８５ｍｇの中間体９−５および１５０ｍｇのＺｈａｎ触媒１Ｂの希釈溶液を５０℃において終夜１００ｍＬの脱気したジクロロエタン中で撹拌した。次いで反応混合物を短カラムに通し、次いでヘプタン／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ、１／３）で溶離した。次いで濃縮した画分を分取ＨＰＬＣ精製にかけて、３１２ｍｇの帯褐色の固体を得た（７０％）。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５２９．２（ＥＳ＋，Ｍ＋１−Ｂｏｃ）。
【０４６４】
中間体９−８
【０４６５】
【化１６３】
2015110627.tif 000222
大環状中間体９−８。２５ｍｇの中間体９−６を１ｍＬのＭｅＯＨおよび１ｍＬのＴＨＦ中、１ｍＬの１．０ＮのＬｉＯＨを使用して１時間加水分解した。次いで１．２ｍＬの１．０ＮのＨＣｌを加え、反応混合物を３０ｍＬのジクロロメタンで抽出した。次いで有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。濾過および濃縮後、残渣を１．５ｍＬの無水アセトニトリル、２５ｍｇのＨＡＴＵ、２００μＬのＤＩＰＥＡに再溶解し、次いで１３ｍｇの中間体９−７を加えた。室温において２０分間撹拌後、反応混合物を濃縮し、分取ＨＰＬＣで直接精製して、２０ｍｇの黄色の固体を得た（６１％）。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７２７．２（ＥＳ＋，Ｍ＋１−Ｂｏｃ，８２５．２（ＥＳ−）。
【０４６６】
Ｉ−４０：１Ｌのジクロロメタン中の２０ｍｇの中間体９−８の撹拌溶液に１．５ｍＬのジオキサン中４．０ＭのＨＣｌを加えた。３０分後、反応混合物を濃縮した。残渣に１．５ｍＬのアセトニトリル、２００μＬのＤＩＰＥＡ、２０ｍｇのアクリル酸および５０ｍｇのＨＡＴＵを加えた。室温において３０分間撹拌後、反応混合物を濃縮し、分取ＨＰＬＣで精製して、白色の固体１４．０ｍｇを得た（６８％）。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７７９．３（ＥＳ−），７８１．２（ＥＳ＋）
同様に、中間体３ａの代わりに中間体３ｃから出発して以下の化合物を作製することができる。
【０４６７】
【化１６４】
2015110627.tif 000223
同様に、飽和形態の中間体９−６を使用して以下の化合物を作製した。
【０４６８】
【化１６５】
2015110627.tif 000224
ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７８１．３（ＥＳ−），７８３．２（ＥＳ＋）。
【０４６９】
同様に、中間体９−７および中間体９−８の両方を水素化し、次いでカップリングすると、以下の化合物を作製することができる。
【０４７０】
【化１６６】
2015110627.tif 000225
（実施例１０）
【０４７１】
【化１６７】
2015110627.tif 000226
エノン−大環状Ｉ−４５。以下のスキームで記載した通りのステップおよび中間体に従って標題化合物を調製した。
【０４７２】
【化１６８】
2015110627.tif 000227
中間体１０−１
【０４７３】
【化１６９】
2015110627.tif 000228
（Ｓ）−２−ベンジル１−（２，２−ジメチルヘクスサ−５−エニル）５−オキソピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（中間体１０−１）：０℃において、７ｍＬのジクロロメタン中の４４０ｍｇの５−オキソ−ピロリジン−２−カルボン酸ベンジルエステル（２ｍｍｏｌ）、３００μＬのトリエチルアミン、３００ｍｇのＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（２．２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に２ｍｍｏｌの４−ペンテニル−１−イルクロロホルメートを加えた。次いで反応混合物を室温まで加温し、２４時間撹拌した。濃縮後、得られた残渣をＥｔＯＡｃ４０ｍＬに溶解し、６ｍＬの１．０ＮのＨＣｌ水溶液、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。有機溶媒を減圧蒸発させ、ヘプタン／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ、４／１−２／１）を使用するシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーで残渣を精製して、４３０ｍｇの無色の油を中間体１０−１として得た（５８％）。
【０４７４】
中間体１０−２
【０４７５】
【化１７０】
2015110627.tif 000229
２−（（２，２−ジメチルヘクサ−５−エニルオキシ）カルボニルアミノ）−７−メチル−５−オキソオクタ−６−エン酸（中間体１０−２）。２ｍＬのジクロロメタン中の１３ｍｇのＰｄ（ＯＡｃ）２、２４μＬのＥｔ３Ｎ、２７８μＬのＥｔ３ＳｉＨで室温において３０分間脱ベンジル化を実施した。濾過後、濃縮残渣にグリニャール試薬（２．５当量）を−７８℃において２時間加えた。希釈酸でクエンチ後、生成物をジクロロメタンで抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。濃縮生成物は所望の中間体１０−２であり、これを次のステップに直接使用した。
【０４７６】
実施例９で記載した一般手順に従って、中間体９−４を４ＮのＨＣｌで脱Ｂｏｃし、次いで中間体１０−２とカップリングさせ、これにより中間体１０−３を得た。Ｇｒｕｂｂｓ触媒またはＺｈａｎ触媒のいずれかを使用して中間体１０−３をオレフィンメタセシスに付して、大環状中間体１０−４を得た。ＬｉＯＨによる塩基性加水分解後、酸形態の中間体１０−４を中間体９−７とカップリングさせて、標題化合物Ｉ−５５を得た。ＭＳ：ｍ／ｅ＝８０６．３（ＥＳ−）。
【０４７７】
同様に、飽和形態の中間体９−７を使用して化合物Ｉ−５６を調製できる。
【０４７８】
【化１７１】
2015110627.tif 000230
（実施例１１）
一本鎖ＨＣＶプロテアーゼ（ｗｔ）ペプチドの発現および精製
一本鎖タンパク質分解ドメイン（ＮＳ４Ａ２１−３２−ＧＳＧＳ−ＮＳ３３−６３１）を、ｐＥＴ−１４ｂ（Ｎｏｖａｇｅｎ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）にクローン化し、ＤＨ１０Ｂ細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に形質転換した。得られたプラスミドを、上記で説明したように（１、２）、タンパク質の発現および精製のために、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）ＢＬ２１（Ｎｏｖａｇｅｎ）に移した。簡単に述べると、１００μｇ／ｍｌのアンピシリンを含むＬＢ培地中、３７℃で培養物を、６００ｎｍ（ＯＤ６００）での光学濃度が１．０に達するまで増殖させ、イソプロピル−β−Ｄ−チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）を加えて１ｍＭにして誘導した。１８℃で２０時間さらにインキュベーションした後、６，０００×ｇで１０分間遠心分離にかけてバクテリアを収集し、５０ｍＭのＮａ３ＰＯ４、ｐＨ８．０の３００ｍＭ  ＮａＣｌ、５ｍＭの２−メルカプトエタノール、１０％グリセロール、０．５％Ｉｇｅｐａｌ  ＣＡ６３０、ならびに１ｍＭフェニルメチルスルホニルフルオリド、０．５μｇ／ｍｌのロイペプチン、ペプスタチンＡおよび２ｍＭベンズアミジンからなるプロテアーゼ阻害剤カクテルを含む溶解緩衝液中に再懸濁させた。凍結融解させて細胞を溶解し、続いて超音波処理した。１２，０００×ｇで３０分間遠心分離にかけて細胞残屑を除去した。上澄みを０．４５μｍフィルター（Ｃｏｒｎｉｎｇ）で濾過してさらに清浄化し、次いで、ＮｉＳＯ４をチャージしたＨｉＴｒａｐキレートカラム（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ）にロードした。結合したタンパク質を１００〜５００ｍＭの直線的勾配のイミダゾール溶液で溶出させた。選択した画分をＮｉ２＋カラムクロマトグラフィーにかけ、１０％ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）−ポリアクリルアミドゲルで分析した。精製したタンパク質を、１２％ＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルでの電気泳動により分離させ、ニトロセルロース膜上に移した。タンパク質を、ＮＳ３に対するモノクローナル抗体を用いたＷｅｓｔｅｒｎブロット分析により分析した。二次抗体としてのセイヨウワサビペルオキシダーゼ結合ヤギ抗マウス抗体（Ｐｉｅｒｃｅ）を用いたケミルミネッセンスキット（Ｒｏｃｈｅ）により、タンパク質を可視化した。タンパク質を分けて、−８０℃で貯蔵した。
【０４７９】
（実施例１２）
ＨＣＶプロテアーゼＡ１５６Ｓ、Ａ１５６Ｔ、Ｄ１６８Ａ、Ｄ１６８Ｖ薬物耐性変異体およびＣ１５９Ｓ変形体のクローニングおよび発現
ＰＣＲによりＮＳ４Ａ／ＮＳ３の変異体ＤＮＡフラグメントを生成させ、ｐＥＴ発現ベクターにクローン化した。ＢＬ２１コンピテント細胞に形質転換した後、ＩＰＴＧで２時間発現を誘導させた。Ｈｉｓタグ融合タンパク質を、アフィニティーカラム、続いてサイズ排除クロマトグラフィーを用いて精製した。
【０４８０】
（実施例１３）
アッセイ緩衝液：２％ＣＨＡＰＳ、５０ｍＭトリスｐＨ７．５の５０％グリセロール、２ｕＭのＭ−２２３５（Ｂａｃｈｅｍ）基質。５０ｕｌの反応物において、４９ｕｌアッセイ緩衝液、１ｕｌ（１Ｕ）のＨＣＶセリンプロテアーゼ（Ｂｉｏｅｎｚａ）を加える。室温で２０分間インキュベートする。プレートを、蛍光マイクロプレートリーダーを用いて３５０／４６０ｎｍ（励起／放射）で読むか、または１分間隔でモニターして動的カーブを得た。
【０４８１】
酵素は、１％ＤＭＳＯおよび２％メタノールに耐容性があった。試験化合物の実験では、純粋ＤＭＳＯ中の化合物を、２０％メタノール（１０％ＤＭＳＯおよび２０％メタノール）で１０倍に希釈した。この化合物溶液を反応物に加えた（最終反応ボリュームの１０％を超えないで）。有機溶媒の最終濃度は１％ＤＭＳＯおよび２％メタノールであった。
【０４８２】
（実施例１４）
追加のアッセイ手順
方法Ａ：
化合物のインビトロでの抗ウイルス活性および細胞毒性を評価するためにＨＣＶ  ＲＮＡレプリコンを用いて化合物をアッセイした。このアッセイでは細胞系ＥＴ（ｌｕｃ−ｕｂｉ−ｎｅｏ／ＥＴ）を用いた。これは、安定なルシフェラーゼ（Ｌｕｃ）リポーターおよび３つの細胞培養適応変異体を有するＨＣＶ  ＲＮＡレプリコンを含むヒトＨｕｈ７肝臓癌細胞系である。ＨＣＶ  ＲＮＡレベルを、ウイルス特異性ＴａｑＭａｎ  ＲＴ−ＰＣＲ：
【０４８３】
【数１】
2015110627.tif 000231
により直接測定した。
【０４８４】
ＥＴ細胞系を、５％ＣＯ２のインキュベーター中、３７℃で、ダルベッコ変法基礎培地（ＤＭＥＭ）、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、１％ペニシリン−ストレプトマイシン（ｐｅｎ−ｓｔｒｅｐ）、１％グルタミン、２５０μｇ／ｍｌのＧ４１８中で増殖させた。すべての細胞培養試薬はＭｅｄｉａｔｅｃｈ（Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ）から入手した。細胞をトリプシン処理し（１％トリプシン：ＥＤＴＡ）、細胞数（細胞毒性）評価または抗ウイルス活性評価を目的として、白色９６ウェルアッセイプレート（Ｃｏｓｔａｒ）に５×１０３細胞／ウェルで蒔いた。薬物を６つの各３倍希釈濃度（３−ｆｏｌｄ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ）で加え、アッセイをＤＭＥＭ、５％ＦＢＳ、１％ｐｅｎ−ｓｔｒｅｐ、１％グルタミンで実行した。その実行ごとに、ヒトインターフェロンα−２ｂ（ＰＢＬ  Ｂｉｏｌａｂｓ、Ｎｅｗ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ、ＮＪ）を陽性対照化合物として含有させた。細胞がまだサブコンフルエントである場合、薬物を添加した後の７２時間に処理した。Ｓｔｅａｄｙ−Ｇｌｏルシフェラーゼアッセイシステム（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）を用いて、メーカーの使用説明書に従って、レプリコン誘導ルシフェラーゼ活性を分析して抗ウイルス活性を測定した。各ウェル中の細胞数をＣｙｔｏＴｏｘ−１試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）で測定した。適用できるＥＣ５０（ウイルス複製を５０％阻害する有効濃度）、ＥＣ９０（ウイルス複製を９０％阻害する有効濃度）、ＩＣ５０（細胞の生存率を５０％減少させる濃度）およびＳＩ５０（選択的指数：ＥＣ５０／ＩＣ５０）値を計算して化合物プロファイルを得た。選択された化合物についてのＩＣ５０値を以下の表５に示す。
【０４８５】
方法Ｂ：ＦＲＥＴ法を用いたＨＣＶプロテアーゼアッセイ
ＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤を特定するために、定量的な蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）をベースとした方法を用いた。ＨＣＶ  ＮＳ５Ａ／５Ｂ切断部位由来の合成ＦＲＥＴペプチドを、ＨＣＶ  プロテアーゼとともに用いて複合体の切断活性をモニターすることによって、プロテアーゼに対する化合物の活性を評価した。ＮＳ５Ａ−５Ｂ結合部（ＮＨ２−ＥＤＶＶＣＣＳＭＳＹＫ−ＣＯＯＨ）を含む合成ペプチドを、Ｎ−末端およびＣ−末端において、ダブシル（Ｄａｂｃｙｌ）およびエダンス（Ｅｄａｎｓ）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）でそれぞれ標識化した。蛍光測定値を用いて試験化合物のＩＣ５０値を推定した。２つのフルオロフォアはクエンチングペアを形成し、インタクトなペプチド内でＦＲＥＴを示す。ＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａプロテイナーゼ複合体（１００ｎｇ／ｍＬ）によってＦＲＥＴペプチドが切断されると、蛍光が回復し、励起／放射＝３４０／４９０ｎｍで連続的にモニターすることができる。
【０４８６】
（実施例１５）
以下のプロトコルを用いて、上記表４の化合物２３９の化合物について記載されるＩＣ５０値を計算した。野生型酵素および変異ＮＳ３／４Ａ  １ｂ酵素（ＩＣ５０）についてのＨＣＶプロテアーゼＦＲＥＴアッセイ
手順は、ＪＢＣ、２７９巻、１７号、１７５０８〜１７５１４頁（２００４年）のＩｎ
Ｖｉｔｒｏ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  Ｓｔｕｄｉｅｓ  ｏｆ  ＨＣＶ  Ｓｅｒｉｎｅ  Ｐｒｏｔｅａｓｅ  ＩｎｈｉｂｉｔｏｒｓによるＦＲＥＴベースのアッセイ（ｖ＿０２）を改変したものである。化合物の固有の効能を、以下のようにして、ＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａ１ｂプロテアーゼ酵素のＡ１５６Ｓ、Ａ１５６Ｔ、Ｄ１６８ＡおよびＤ１６８Ｖ変異体に対して評価した。
【０４８７】
Ｂｉｏｅｎｚａ（Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ、ＣＡ）からのＮＳ３／４Ａプロテアーゼ酵素の１０Ｘストック液と、Ａｎａｓｐｅｃ（Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）からの１．１３Ｘの５−ＦＡＭ／ＱＸＬ（商標）５２０ＦＲＥＴペプチド基質ストック液を、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．８の１００ｍＭ  ＮａＣｌ、５ｍＭのＤＴＴおよび２０％グリセロール中に調製した。５μＬの各酵素を、０．５μＬの体積の５０％ＤＭＳＯおよび５０％ＤＭＳＯ中に調製した連続希釈化合物とともに、Ｃｏｒｎｉｎｇ（＃３５７３）３８４ウェル、黒色の無処理マイクロタイタープレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、ＮＹ）中、２５℃で３０分間プレインキュベートした。４５μＬのＦＲＥＴ基質を加えてプロテアーゼ反応を開始させ、ＢｉｏＴｅｋ（Ｗｉｎｏｏｓｋｉ、ＶＴ）からのＳｙｎｅｒｇｙ４プレートリーダーのＱｕａｄ４モノクロメーター（ｍｏｎｏｃｈｒｏｍｏｔｏｒ）により、λｅｘ４８７／λｅｍ５１４で１２０分間モニターした。各アッセイの終わりに、各ウェルからのプログレス曲線を線形反応動力学について試験し、統計学的に当てはめた（Ｒ２、絶対平方和（ａｂｓｏｌｕｔｅ  ｓｕｍ  ｏｆ  ｓｑｕａｒｅｓ））。各反応物からの初速度（０分〜３０＋分）を、相対蛍光単位対時間（分）プロットの傾斜から決定し、次いで阻害剤濃度に対してプロットし、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）によるＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍのｌｏｇ［阻害剤］対応答、可変勾配（Ｖａｒｉａｂｌｅ  Ｓｌｏｐｅ）モデルからＩＣ５０を推定した。選択された化合物のＩＣ５０値を、以下の表５に示す。
【０４８８】
表５は、ＦＲＥＴアッセイによる本発明での選択した化合物の活性を示す。化合物番号は表３の化合物番号と対応する。「Ａ」で表した活性を有する化合物は≦１０ｎＭのＩＣ５０を示し；「Ｂ」で表した活性を有する化合物は１０ｎＭ〜１００ｎＭのＩＣ５０を示し；「Ｃ」で表した活性を有する化合物は１００ｎＭ〜１０００ｎＭのＩＣ５０を示し；「Ｄ」で表した活性を有する化合物は１０００ｎＭ〜１０，０００ｎＭのＩＣ５０を示し；「Ｅ」で表した活性を有する化合物は≧１０，０００ｎＭのＩＣ５０を示す。
【０４８９】
【表５】
2015110627.tif 000232
（実施例１６）
ＷＴおよび変異ＮＳ３／４Ａ  １ｂ酵素（ＩＣ５０＿ＡＰＰ）についてのＨＣＶプロテアーゼＦＲＥＴアッセイ。
【０４９０】
以下の手順を用いて以下の表６に示す「見掛けの」ＩＣ５０（ＩＣ５０＿ＡＰＰ）値を得た。特定の理論に拘泥するわけではないが、ＩＣ５０値と対比させたＩＣ５０＿ＡＰＰは時間依存性阻害のより有用な目安を提供し、したがって、より結合親和性を表すと考えられる。手順は、ＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａ  １ｂプロテアーゼ酵素の野生型およびＣ１５９Ｓ、Ａ１５６Ｓ、Ａ１５６Ｔ、Ｄ１６８Ａ、Ｄ１６８Ｖ、Ｒ１５５Ｋ変異体に対する化合物の効能、順位および耐性プロファイルを評価するために開発された改変型ＦＲＥＴベースアッセイ（ｖ＿０３）であり、それは以下の通りである：Ｂｉｏｅｎｚａ（Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ、ＣＡ）からのＮＳ３／４Ａプロテアーゼ酵素の１０Ｘストック液と、Ａｎａｓｐｅｃ（Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）からの５−ＦＡＭ／ＱＸＬ（商標）５２０ＦＲＥＴペプチド基質の１．１３Ｘストック液を、５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．５の５ｍＭ  ＤＴＴ、２％ＣＨＡＰＳおよび２０％グリセロール中に調製した。５μＬの各酵素を、０．５μＬ容量の５０％ＤＭＳＯおよび５０％ＤＭＳＯ中に調製した連続希釈した化合物をスポットした後、Ｃｏｒｎｉｎｇ（＃３５７５）３８４ウェル、黒色、マイクロタイタープレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ、ＮＹ）に加えた。酵素を添加し、４５μＬのＦＲＥＴ基質を添加した後、プロテアーゼ反応を直ちに開始させ、ＢｉｏＴｅｋ（Ｗｉｎｏｏｓｋｉ、ＶＴ）からのＳｙｎｅｒｇｙ４プレートリーダーにより、λｅｘ４８５／λｅｍ５２０で６０〜９０分間モニターした。各アッセイの終わりに、各ウェルからのプログレス曲線を線形反応動力学について試験し、統計学的に当てはめた（Ｒ２、９５％信頼区間、絶対平方和）。各反応物からの初速度（０分〜１５＋分）を、相対蛍光単位対時間（分）プロットの傾斜から決定し、次いでこれを、阻害剤を含まず、酵素を含まない対照に対する割合として阻害剤濃度に対してプロットして、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）によるＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍのｌｏｇ［阻害剤］対応答、可変勾配モデルから見掛けのＩＣ５０を推定した。
【０４９１】
表６は、ＦＲＥＴアッセイによる本発明での選択した化合物の活性を示す。化合物番号は表３の化合物番号と対応する。「Ａ」で表した活性を有する化合物は≦１０ｎＭのＩＣ５０を示し；「Ｂ」で表した活性を有する化合物は＞１０ｎＭおよび≦１００ｎＭのＩＣ５０を示し；「Ｃ」で表した活性を有する化合物は＞１００ｎＭおよび≦１０００ｎＭのＩＣ５０を示し；「Ｄ」で表した活性を有する化合物は＞１０００ｎＭおよび＜１０，０００ｎＭのＩＣ５０を示し；「Ｅ」で表した活性を有する化合物は≧１０，０００ｎＭのＩＣ５０を示す。
【０４９２】
【表６−１】
2015110627.tif 000233
【０４９３】
【表６−２】
2015110627.tif 000234
【０４９４】
【表６−３】
2015110627.tif 000235
【０４９５】
【表６−４】
2015110627.tif 000236
【０４９６】
【表６−５】
2015110627.tif 000237
【０４９７】
【表６−６】
2015110627.tif 000238
【０４９８】
【表６−７】
2015110627.tif 000239
１  ＩＣ９０値（ｎＭ）を表す。
２  実施例１４で説明したアッセイにより収集したデータ。
２  ＥＣ５０値（ｎＭ）を表す。実施例３４で説明したアッセイにより収集したデータ。３  ＥＣ９０値（ｎＭ）を表す。実施例３４で説明したアッセイにより収集したデータ。
【０４９９】
（実施例１７）
試験化合物の存在下でのＨＣＶ野生型またはＨＣＶ変形体Ｃ１５９Ｓの質量分析を実施する。１００ピコモルのＨＣＶ野生型（Ｂｉｏｅｎｚａ  ＣＡ）を、タンパク質に対して１０倍過剰（ａｃｃｅｓｓ）の試験化合物で、試験化合物で１時間および３時間インキュベートする。１ｕｌの分量の試料（４．２４ｕｌの合計体積）を１０ｕｌの０．１％ＴＦＡで希釈し、次いで、脱離マトリックスとしてシナピン酸（０．１％ＴＦＡ：アセトニトリル５０：５０中に１０ｍｇ／ｍＬ）を用いてＭＡＬＤＩ標的上に直接マイクロＣ４ジップチッピング（ｍｉｃｒｏ  Ｃ４  ＺｉｐＴｉｐｐｉｎｇ）する。分析を、Ｓｈｉｍａｄｚｕ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  Ａｘｉｍａ  ＴＯＦ２（Ｓｈｉｍａｄｚｕ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）マトリックス支援レーザー脱離／イオン化飛行時間型（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ）質量分析計を用いて実施する。同じ手順を、１００ピコモルのＨＣＶプロテアーゼのＨＣＶ  Ｃ１５９Ｓ変異体について、タンパク質に対して１０倍過剰の試験化合物で３時間実施する。
【０５００】
（実施例１８）
トリプシン消化ストラテジーを用いた野生型ＨＣＶプロテアーゼのＣｙｓ１５９の改変
トリプシン消化の前に、ＨＣＶを試験化合物で３時間インキュベートする。化合物をインキュベーションした後、ヨードアセトアミドをアルキル化剤として用いる。トリプシン消化のため、２ｕｌの分量（０．０６ｕｇ／ｕｌ）を１０ｕｌの０．１％ＴＦＡに希釈し、次いで、マトリックスαシアノ−４−ヒドロキシ桂皮酸（０．１％ＴＦＡ：アセトニトリル５０：５０中に５ｍｇ／ｍＬ）を用いてＭＡＬＤＩ標的上に直接マイクロＣ１８ジップチッピングする。
【０５０１】
トリプシン消化のために、装置を、１８００のパルス型抽出設定でリフレクトロンモードにセットする。較正は、レーザーＢｉｏｌａｂｓ  Ｐｅｐ  Ｍｉｘ標準（１０４６．５４、１２９６．６９、１６７２．９２、２０９３．０９、２４６５．２０）を用いて較正を実施する。ＣＩＤ／ＰＳＤ分析のために、イオンゲートのタイミングをセットするためのカーソルを用いてペプチドを選択し、フラグメンテーションを約２０％高いレーザー出力で発生させ、ＨｅをＣＩＤのための衝突ガスとして使用する。フラグメントのための較正はカーブドフィールドリフレクトロン用のＰ１４Ｒフラグメンテーション較正を用いて実施する。
【０５０２】
（実施例１９）
図１および図２に示すように、試験化合物Ｉ−１およびＩ−２５の存在下でのＨＣＶ野生型の質量分析を、以下の手順を用いて実施した：ＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａ野生型（ｗｔ）を、タンパク質に対して１０Ｘ倍過剰の試験化合物で１時間インキュベートした。２ｕｌの分量の試料を１０ｕｌの０．１％ＴＦＡで希釈し、次いで、脱離マトリックスとしてシナピン酸（０．１％ＴＦＡ：アセトニトリル５０：５０中に１０ｍｇ／ｍｌ）を用いてＭＡＬＤＩ標的上に直接マイクロＣ４ジップチッピングした。インタクトタンパク質質量測定のために、２４，５００のパルス型抽出設定と、装置を較正するための標準品としてのアポミオグロビンを用いて、装置を線形モードでセットした。
【０５０３】
図１に示すように、化合物を含まないタンパク質と比較して、化合物Ｉ−１でインキュベートされたタンパク質は、著しく反応してＭＷ２５，２１８Ｄａで新規の種を生成した。これは約７５１Ｄａの値で質量がより重くなっており、化合物Ｉ−１の質量、７４７Ｄａと一致している。
【０５０４】
図２に示すように、１時間反応した後、２５，２４０ＤａのＭＨ＋での新規のピークへの転換が見られた。これは７７３Ｄａの値で質量がより重く、化合物Ｉ−２５の質量と一致する。
【０５０５】
実施例１７に記載の方法を用いて、化合物Ｉ−２、Ｉ−５、Ｉ−６、Ｉ−８、Ｉ−９、Ｉ−１０、Ｉ−１３、Ｉ−１９、Ｉ−２０、Ｉ−２２、Ｉ−２３、Ｉ−２４、Ｉ−２６およびＩ−２７を同様の仕方で試験し、ＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａ野生型の測定可能な共有結合性改変が観察された。
【０５０６】
（実施例２０）
図４、図５、図６および図７に示すように、化合物Ｉ−１１の存在下でのＨＣＶ変異体の質量分析を実施した。ＨＣＶ変異体（Ａ１５６Ｓ）、（Ｒ１５５Ｋ）、（Ｄ１６８Ａ）、（Ａ１５６Ｔ）および（Ｄ１６８Ｖ）を、タンパク質に対して１０倍過剰の試験化合物で３時間インキュベートした。２ｕｌの分量の試料を１０ｕｌの０．１％ＴＦＡで希釈し、次いで、脱離マトリックスとしてシナピン酸（０．１％ＴＦＡ：アセトニトリル５０：５０中に１０ｍｇ／ｍｌ）を用いてＭＡＬＤＩ標的上に直接マイクロＣ４ジップチッピングした。インタクトタンパク質質量測定のために、２４，５００のパルス型抽出設定と、装置を較正するための標準品としてのアポミオグロビンを用いて、装置を線形モードでセットした。
【０５０７】
図４に示すように、ＨＣＶ（Ｄ１６８Ｖ）変異体について、３時間反応した後、完全に転換している。新規の種と未反応変異体との間の質量差は、化合物Ｉ−１１の質量と一致している。
【０５０８】
図５に示すように、ＨＣＶ（Ａ１５６Ｓ）変異体について、３時間反応した後、完全に転換している。新規の種と未反応変異体との間の質量差は、化合物Ｉ−１１の質量と一致している。
【０５０９】
図６に示すように、ＨＣＶ（Ｒ１５５Ｋ）変異体について、３時間反応した後、十分に転換している。新規の種と未反応変異体との間の質量差は、化合物Ｉ−１１の質量と一致している。
【０５１０】
図７に示すように、ＨＣＶ（Ａ１５６Ｔ）変異体について、３時間反応した後、完全に転換している。新規の種と未反応変異体との間の質量差は、化合物Ｉ−１１の質量と一致している。
【０５１１】
実施例１８に記載の方法を用いて、化合物Ｉ−１９およびＩ−２４を同様の仕方で試験し、ＨＣＶ  ＮＳ３／４Ａ  Ｄ１６８Ａの測定可能な共有結合性改変が観察された。
【０５１２】
（実施例２１）
細胞培養
Ｈｕｈ−ｌｕｃ／ｎｅｏ−ＥＴ、Ｈｕｈ７−ＬｕｎｅｔをＲｅＢＬｉｋｏｎ  Ｇｍｂｈ（Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ、Ｇｅｒｍａｎｙ）から入手した。細胞を、２ｍＭのＬ−グルタミン、非必須アミノ酸、１００Ｕのペニシリン／ｍｌ、１００μｇのストレプトマイシン／ｍＬおよび１０％ウシ胎仔血清を含むダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ；Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）中で増殖させた。Ｇ４１８（Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎ；Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を４００ｕｇ／／ｍＬの最終濃度で加えた。Ｈｕｈ７−ＬｕｎｅｔをＧ４１８の非存在下で増殖させた。
【０５１３】
（実施例２２）
変異体コンストラクト
臨床的に関連する変異を含むコンストラクトを、ＱｕｉｃｋＣｈａｎｇｅ  ＩＩ  Ｓｉｔｅ−Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓキット（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ、Ｌａ
Ｊｏｌｌａ、ＣＡ）を用いて、以下の表７に示したプライマーを用いメーカーの指示に従って、ｐＦＫ−Ｉ３８９−ｌｕｃ−ｕｂｉ−ｎｅｏ−ＮＳ３−３’ＥＴプラスミド（ＲｅＢＬｉｋｏｎ  Ｇｍｂｈ（Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ、Ｇｅｒｍａｎｙ））に対して部位特異的突然変異誘発を行って生成させた。
【０５１４】
【表７】
2015110627.tif 000240
（実施例２３）
インビトロでの転写
Ｌｏｈｍａｎｎ  Ｖら、Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．、７７巻：３００７〜３０１９頁、２００３年に記載されている手順を用いて、ＨＣＶプラス鎖のインビトロでの転写物を作製した。プラス鎖ＨＣＶ  ＲＮＡの転写のために、プラスミドＤＮＡ（ＲｅＢＬｉｋｏｎ  Ｇｍｂｈ（Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ、Ｇｅｒｍａｎｙ）から入手したｐＦＫ  Ｉ３４１  ＰＩ−Ｌｕｃ／ＮＳ３−３’／ＥＴ）をＡｓｅＩで消化させ、続いてＳｃａ１で消化させた。制限消化の後、ＤＮＡをフェノールおよびクロロホルムで抽出し、エタノールで沈殿させ、ＲＮａｓｅフリー水に溶解させた。８０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、１２ｍＭのＭｇＣｌ２、２ｍＭスペルミジン、４０ｍＭジチオスレイトール、３．１２５ｍＭの濃度の各ヌクレオシド三リン酸、１ＵのＲＮａｓｉｎ．５ｕｇの制限プラスミドＤＮＡおよび８０ＵのＴ７ＲＮＡポリメラーゼ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を含むインビトロでの転写反応物を使用した。３７℃で２時間後、追加の４０ＵのＴ７ポリメラーゼを加え、反応物を、さらに２時間インキュベートした。プラスミドＤＮＡの１ｕｇ当たり１ＵのＲＮａｓｅフリーＤＮａｓｅ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を加えて転写を終了させ、続いて、３７℃で３０分間インキュベートした。酸性フェノールおよびクロロホルムで抽出した後、イソプロパノールでＲＮＡを沈殿させ、ＲＮａｓｅフリー水に溶解させた。２６０ｎｍでの光学濃度（ＯＤ２６０）を測定して濃度を決定し、アガロースゲル電気泳動法で変性させてＲＮＡ完全性をチェックした。
【０５１５】
（実施例２４）
ＨＣＶ完全長ゲノムのトランスフェクションおよび安定した細胞系の選択
７×１０４のＨｕｈ７−Ｌｕｎｅｔ細胞を、１２ウェルプレートに終夜かけて播種し、翌日、Ｍｉｒｕｓ  Ｔｘ（Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）キットを用いて１ｕｇのＲＮＡ／ウェルをトランスフェクトした。メーカーの使用説明書に従ってトランスフェクションを実施し、安定した細胞系を確立するために、トランスフェクション後２４時間、細胞を、ルシフェラーゼアッセイにかけるか、またはＧ４１８（４００ｕｇ／ｍｌ）選択にかけた。
【０５１６】
（実施例２５）
プロテアーゼ自己切断の阻害
Ｈｕｈ−７−Ｌｕｃ−Ｎｅｏ−ＥＴ細胞を、１２ウェルプレート中のレプリコンアッセイ培地（５％ＦＢＳ、１Ｘ非必須アミノ酸およびｐｅｎ／ｓｔｒｅｐを含むＲＰＭＩ）に、１×１０５細胞／ウェルの密度で蒔いた。８時間後、培地を取り出し、試験化合物（化合物当たり５ウェル）および０．０２％ＤＭＳＯを含む培地１ｍｌで置き換え、細胞を終夜インキュベーターに戻した。１６時間後、各化合物からの１つのウェルおよび１つの未処理ウェルをＰＢＳで洗浄し、次いで溶解させ、３０ｕｌの細胞抽出緩衝液（Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ、Ｃａｍａｒｉｌｌｏ、ＣＡ）＋完全プロテアーゼ阻害剤（Ｒｏｃｈｅ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、ＩＮ）中に掻き取って入れた。残りのウェルを２ＸのＰＢＳで濯ぎ、次いでレプリコン培地を供給し、インキュベーターに戻した。細胞を、１時間に１回、古い培地を取り出し新鮮な培地で置き換えて洗浄し、最初の収集に続く４、１２、２４および４８時間に溶解させ収集した。
【０５１７】
細胞溶解物をＳＤＳ−Ｐａｇｅ（４〜２０％）により分離し、Ｉｍｍｏｂｉｌｏｎ−Ｐ
ＰＶＤＦ膜（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、ＭＡ）に移し、ポリクローナル抗ＮＳ３抗体（Ｂｉｏｅｎｚａ、ＣＡ）でブロットした。ブロットを、ＬｉｃｏｒからのＯｄｙｓｓｅｙ赤外線走査装置でスキャニングし、ＦＬバンドおよび切断産生物を、スキャナーに備えられたＬｉｃｏｒソフトウェアを用いて別個に定量化した。切断産生物を各試料中の合計ＮＳ３の割合として計算し、ＤＭＳＯ対照が１００％の活性を反映するように、ＤＭＳＯ対照に対して正規化した。
【０５１８】
結果および論考
プロテアーゼ活性が阻害されると自己切断は止まり、検出可能な唯一のタンパク質種はホロ酵素となる。レプリコン細胞をＮＳ３阻害剤化合物に連続的に曝露して１６時間後、自己切断産生物は、処理試料中には検出されなかったが、処理されていない対照レプリコン細胞中では容易に検出することができた。作用の長い持続期間は、レプリコン細胞をプロテアーゼ阻害剤に１６時間曝露し、その時点で化合物を取り出し、レプリコン細胞を数時間以上繰り返し洗浄することによって実証された。共有結合性の不可逆的ＮＳ３阻害剤は、最大で４８時間、ＮＳ３内部自己切断活性の持続的阻害を示したが、可逆的化合物を用いた場合、プロテアーゼ自己切断活性は急速に戻った。
【０５１９】
図８は、ＮＳ３内部自己切断産生物を、レプリコン細胞を化合物Ｉ−４７で１６時間処理することによって阻害することを示す図である。
【０５２０】
図９は、化合物を取り除いた後、自己切断によって測定して、野生型レプリコン細胞においてＮＳ３プロテアーゼの不可逆的共有結合性阻害剤（化合物Ｉ−１１）がＮＳ３プロテアーゼ活性の長期的阻害を示す図である。化合物をレプリコン細胞で１６時間インキュベートし、次いでそれを取り除いた（時間０）。共有結合性不可逆的ＮＳ３阻害剤を取り除いた後、最大で４８時間でも、ＮＳ３自己切断活性は少なくとも５０％阻害されているが、可逆的薬物、ＶＸ−９５０は、薬物を取り除いた後、わずか４時間で活性の実質的に完全な逆戻りを示している。
【０５２１】
図１０は、化合物を取り除いた後、自己切断によって測定して、野生型レプリコン細胞におけるＮＳ３プロテアーゼの不可逆的共有結合性阻害剤（化合物Ｉ−２５）がＮＳ３プロテアーゼ活性の長期的阻害を実証していることを示す図である。化合物をレプリコン細胞で１６時間インキュベートし、次いでそれを取り除いた（時間０）。共有結合性の不可逆的ＮＳ３阻害剤を取り除いた後、最大で４８時間でも、ＮＳ３自己切断活性は少なくとも４０％阻害されているが、可逆的薬物、ＶＸ−９５０は、薬物を取り除いた後、わずか８時間で活性の実質的に完全な逆戻りを示している。
【０５２２】
（実施例２６）
ルシフェラーゼアッセイ
レプリコン誘導ルシフェラーゼ活性を用いて、化合物の抗ウイルス活性および細胞毒性を評価するために化合物をアッセイした。このアッセイでは細胞系ＥＴ（ｌｕｃ−ｕｂｉ−ｎｅｏ／ＥＴ）を用いた。これは、ＨＣＶ  ＲＮＡレプリコンを、安定ルシフェラーゼ（Ｌｕｃ）リポーターおよび細胞培養適応変異とともに含むヒトＨｕｈ７肝臓癌細胞系である。ＥＴ細胞系を、５％ＣＯ２のインキュベーター中、３７℃で、２ｍＭのＬ−グルタミン、非必須アミノ酸、１００Ｕのペニシリン／ｍｌ、１００μｇのストレプトマイシン／ｍＬおよび１０％ウシ胎仔血清を含むダルベッコ変法基礎培地（ＤＭＥＭ）中で増殖させた。Ｇ４１８（Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎ；Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を４００ｕｇ／／ｍＬの最終濃度で加えた。
【０５２３】
すべての細胞培養試薬はＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（Ｃａｒｌｓｂａｄ）から入手した。細胞をトリプシン処理し（１％トリプシン：ＥＤＴＡ）、細胞数（細胞毒性）評価または抗ウイルス活性評価を目的として、白色９６−ウェルアッセイプレート（Ｃｏｓｔａｒ）に５×１０３細胞／ウェルで蒔いた。試験化合物を６つの各３倍希釈濃度で加え、アッセイをＤＭＥＭ、５％ＦＢＳ、１％ｐｅｎ−ｓｔｒｅｐ、１％グルタミン、１％非必須アミノ酸中で実行した。その実行ごとに、ヒトインターフェロンα−２ｂ（ＰＢＬ  Ｂｉｏｌａｂｓ、Ｎｅｗ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ、ＮＪ）を陽性対照化合物として含めた。細胞がまだサブコンフルエントである場合、試験化合物を添加した後の７２時間に細胞を処理した。Ｓｔｅａｄｙ−Ｇｌｏルシフェラーゼアッセイシステム（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）をメーカーの使用説明書に従って用いて、レプリコン誘導ルシフェラーゼ活性を分析することにより、抗ウイルス活性を測定した。各ウェル中の細胞数を、Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｂｌｕｅアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）で判定した。適用できるＥＣ５０（ウイルス複製を５０％阻害する有効濃度）、ＥＣ９０（ウイルス複製を９０％阻害する有効濃度）、ＩＣ５０（細胞の生存率を５０％減少させる濃度）およびＳＩ５０（選択的指数：ＥＣ５０／ＩＣ５０）値を計算して化合物プロファイルを得た。
【０５２４】
本発明のいくつかの例を説明してきたが、本発明者らの基本的な実施例を変えて、本発明の化合物および方法を用いた他の実施形態を提供することができることは明らかである。したがって、本発明の範囲は、例として示してきた特定の実施形態ではなく、添付の特許請求の範囲によって定義されることを理解されよう。
【図１】
2015110627.tif 000242
【図２】
2015110627.tif 000243
【図３】
2015110627.tif 000244
【図４】
2015110627.tif 000245
【図５】
2015110627.tif 000246
【図６】
2015110627.tif 000247
【図７】
2015110627.tif 000248
【図８】
2015110627.tif 000249
【図９】
2015110627.tif 000250
【図１０】
2015110627.tif 000251
【配列表】
2015110627000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成27年2月2日(2015.2.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】全図
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１】
2015110627.tif 000252
【図２】
2015110627.tif 000253
【図３】
2015110627.tif 000254
【図４】
2015110627.tif 000255
【図５】
2015110627.tif 000256
【図６】
2015110627.tif 000257
【図７】
2015110627.tif 000258
【図８】
2015110627.tif 000259
【図９】
2015110627.tif 000260
【図１０】
2015110627.tif 000261
【外国語明細書】
2015110627000001.pdf