(57)【要約】      （修正有）【課題】歯肉炎の予防又は治療に優れた医薬の提供。【解決手段】6−フルオロ−2',5'−ジオキソスピロ［クロマン−4,4'−イミダゾリジン］−2−カルボキサミドのようなヒダントイン誘導体又はその薬理学的に許容される塩。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
【化１】
2015110525.tif 000004
（式中、Ｘはハロゲン原子又は水素原子を意味し、R1およびR2は、同時にあるいは別々に、水素原子又は置換されていてもよいC1-6アルキル基を示す。）
で示されるヒダントイン誘導体又はその薬理学的に許容される塩を有効成分とする、歯肉炎の予防又は治療のための医薬。
【請求項２】
前記C1-6アルキル基がC1-3アルキル基である、請求項１に記載の医薬。
【請求項３】
前記一般式（Ｉ）で示されるヒダントイン誘導体が、6−フルオロ−2',5'−ジオキソスピロ［クロマン−4,4'−イミダゾリジン］−2−カルボキサミドである、請求項１に記載の医薬。
【請求項４】
前記6−フルオロ−2',5'−ジオキソスピロ［クロマン−4,4'−イミダゾリジン］−2−カルボキサミドが(2Ｓ,4Ｓ)体である、請求項３に記載の医薬。
【請求項５】
前記歯肉炎が、プラーク性歯肉炎、非プラーク性歯肉病変、および歯肉増殖から選択される、請求項１〜４のいずれかに記載の医薬。
【請求項６】
前記歯肉炎がプラーク性歯肉炎である、請求項５に記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒダントイン誘導体を有効成分とする、歯肉炎の予防又は治療のための医薬に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
歯周病は、歯肉炎、歯周炎等に代表される歯周組織（歯肉、セメント質、歯根膜および歯槽骨）に起こるすべての疾患の総称である。病状の進行は、まず、歯垢（プラーク）等の蓄積により歯肉炎が発症し、放置することで歯周ポケットが形成され、その後、その歯周ポケットに歯周病原性細菌が繁殖し、歯周炎を発症する。歯肉炎と歯周炎は関連する疾患ではあるが、病態、発症原因菌等により区別することができる。
【０００３】
病態的には、歯肉炎はアタッチメントロス（歯肉上皮とセメント質の付着喪失）が無く、歯肉に限局した病変であり、一方、歯周炎は歯肉上皮付着の破壊により深部歯周組織に炎症が波及し、アタッチメントロスや骨吸収を生じた疾患である。言い換えると、歯肉炎は歯肉のみの炎症性疾患であるため、その原因を除去（治療）することにより可逆的に治癒可能な疾患であり、歯周炎は歯槽骨や歯根膜が破壊される不可逆的且つ治癒困難な疾患、と捉えることができる。更に、発症原因菌も異なっている。歯肉炎は、グラム陽性球菌を中心とした歯肉縁上プラークによって引き起こされる。これに対して歯周炎は、歯肉縁下に存在するグラム陰性嫌気性菌であるポルフィロモナス・ジンジバリス（Porphyromonas
gingivalis）などの歯周病原性細菌が、深く関与している。即ち、歯肉炎は細菌感染により炎症性サイトカイン産生が誘導され、歯肉毛細血管が刺激を受けて血管拡張および／又は血管透過性亢進が引き起こされ、好中球が浸潤して炎症状態となる。一方、歯周炎は細菌の内毒素や炎症性サイトカインが破骨細胞を活性化することにより骨吸収（骨破壊）が引き起こされる。
【０００４】
健康な歯肉は淡いピンク色をしている。歯ブラシ等による不完全なブラッシングの結果、口腔内が不衛生な状態が続くと歯の表面に歯垢が堆積する。歯垢は、歯に付着した細菌とその代謝物の集合体として知られている。歯肉炎では、発赤、浮腫、出血、疼痛、腫脹等が見られるが、自覚症状はそれほど顕著ではない。従って、患者が自覚しないまま放置されることが多く、不完全なブラッシングに伴う口腔内不衛生が繰り返されて、緩慢に症状が進行して歯石が形成される。歯石に代表されるプラークリテンションファクター（プラーク蓄積因子）があると、歯垢が付着しやすくなったり増加しやすくなったりして、口腔内を衛生的に保つことの妨げとなる。これらの悪循環により歯肉炎は増悪する。
【０００５】
現在、歯肉炎治療は、プラークコントロールおよびスケーリング（歯石除去）を基盤として成されており、日々の口腔清掃が完璧に成されれば改善すると考えられている。また、歯肉炎を適応疾患とした、十分な治療効果を示す薬剤も少ないため、積極的な薬物治療が行われているとは言い難い。
【０００６】
（2Ｓ,4Ｓ）−6−フルオロ−2',5'−ジオキソスピロ［クロマン−4,4'−イミダゾリジン］−2−カルボキサミド（一般名フィダレスタット）は、アルドース還元酵素（AR）阻害薬として知られている。当該化合物については、糖尿病合併症（特許文献１）、循環器系疾患（特許文献２）、メイラード反応阻害剤として老化に伴う諸疾患（特許文献３）、糖尿病性単純網膜症（特許文献４）、糖尿病性角膜症（特許文献５）、糖尿病黄斑症（特許文献６）、重症糖尿病網膜症（特許文献７）、虚血又は虚血再灌流によって起こる心臓機能障害又は心筋障害（特許文献８）、急性腎不全（特許文献９）、脳卒中における脳虚血又は脳虚血再灌流障害（特許文献１０）、網膜神経又は視神経の保護剤（特許文献１１）としての用途が報告されている。また、STZ糖尿病ラットで網膜の酸化ストレス及びVEGF発現を抑制することが報告されている（非特許文献１）。
【０００７】
歯周病とアルドース還元酵素阻害薬の関係については、ポルフィロモナス・ジンジバリス由来のリポ多糖を歯周組織に投与して歯周炎を惹起したラットに対して、ケルセチン、トルレスタット、イミレスタットが有効であるとの報告（特許文献１２）がある。また、トルレスタット又はソルビニルが、T細胞増殖およびB細胞抗体生成を抑制することにより歯根膜炎の治療薬になりうること（特許文献１３）、トルレスタットが歯周組織微小血管基底膜の肥厚を改善することにより糖尿病性歯周炎の治療薬になりうること（特許文献１４）が報告されている。しかし、これらはいずれも歯周炎に関するものであり、前述のように、アルドース還元酵素阻害薬が歯肉炎に有効であることを示唆するものではない。
【０００８】
このように、フィダレスタットをはじめとするアルドース還元酵素阻害薬については、種々の疾患に対する薬理作用が報告されているが、歯肉炎について論じられている報告例、および歯肉炎に対する有効性を示唆する報告例はない。一方、不完全なプラークコントールによる歯肉炎罹患率の高さから、また、より深刻な歯周炎、歯周病への進行防止の観点から、歯肉炎の予防又は治療のための医薬品開発が期待されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開昭６１−２００９９１
【特許文献２】特開平４−１７３７９１
【特許文献３】特開平６−１３５９６８
【特許文献４】特開平７−２４２５４７
【特許文献５】特開平８−２３１５４９
【特許文献６】国際公開第２００５／０７２０６６号パンフレット
【特許文献７】国際公開第２００５／０７９７９２号パンフレット
【特許文献８】国際公開第２００６／０９０６９９号パンフレット
【特許文献９】国際公開第２００７／０６９７２７号パンフレット
【特許文献１０】国際公開第２００７／０９７３０１号パンフレット
【特許文献１１】国際公開第２００８／０９３６９１号パンフレット
【特許文献１２】ＵＳ２０１０／０２９２２８７
【特許文献１３】特表平５−５０８３８６
【特許文献１４】ＵＳ４７３１３８０
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Diabetes,Vol.52,864,2003
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
歯肉炎の予防又は治療のために、日々のブラッシング等による口腔清掃、並びにプラークコントロールおよびスケーリングを基盤とした口腔清掃を毎日完璧に行うことは困難であるため、歯肉炎の罹患率は高い数値を示す。しかしながら、薬物による予防又は治療の方法が確立されていないのが現状であり、人体への安全性が高い薬物による予防法又は治療法の開発が期待されている。従って、本発明は、歯肉炎罹患率を低下させるための歯肉炎の予防薬又は歯肉炎の治療効果のある治療薬を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
上記課題に鑑み、本発明者等が鋭意研究を重ねた結果、アルドース還元酵素阻害薬である下記一般式（Ｉ）で示されるヒダントイン誘導体、中でも、
(2Ｓ,4Ｓ)−6−フルオロ−2',5'−ジオキソスピロ［クロマン−4,4'−イミダゾリジン］−2−カルボキサミド（フィダレスタット）に歯肉炎の予防又は治療効果があることを見出し、本発明を完成した。即ち、本発明の主な構成は次のとおりである。
【００１３】
(1)一般式（Ｉ）
【化１】
2015110525.tif 000002
（式中、Ｘはハロゲン原子又は水素原子を意味し、R1およびR2は、同時にあるいは別々に、水素原子又は置換されていてもよいC1-6アルキル基を示す。）
で示されるヒダントイン誘導体又はその薬理学的に許容される塩を有効成分とする、歯肉炎の予防又は治療のための医薬。
(2)前記C1-6アルキル基がC1-3アルキル基である、(1)に記載の医薬。
【００１４】
(3)前記一般式（Ｉ）で示されるヒダントイン誘導体が、6−フルオロ−2',5'−ジオキソスピロ［クロマン−4,4'−イミダゾリジン］−2−カルボキサミドである、(1)に記載の医薬。
(4)前記6−フルオロ−2',5'−ジオキソスピロ［クロマン−4,4'−イミダゾリジン］−2−カルボキサミドが(2Ｓ,4Ｓ)体である、(3)に記載の医薬。
(5)前記歯肉炎が、プラーク性歯肉炎、非プラーク性歯肉病変、および歯肉増殖から選択される、(1)〜(4)のいずれかに記載の医薬。
(6)前記歯肉炎がプラーク性歯肉炎である、(5)に記載の医薬。
【発明の効果】
【００１５】
本発明によれば、歯肉炎の予防又は治療効果に優れ、人体への安全性の高い医薬を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】正常ラット歯肉炎発症モデルに対する上顎組織切片ヘマトシリン・エオジン（H・E）染色結果を示す。(A)コントロール（正常＋フィダレスタット非投与）；(B)比較例（歯肉炎＋フィダレスタット非投与）；(C)実施例（歯肉炎＋フィダレスタット投与）。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
以下に、本発明を更に詳細に説明する。
一般式（Ｉ）の化合物は、アルドース還元酵素阻害活性を有する化合物としてよく知られた化合物であり、特開昭６３−０５７５８８等に記載されている。本化合物は、特開昭６３−０５７５８８に記載の合成方法に準じて容易に製造することができ、中でもフィダレスタットは、その製造例３（ｄ体の製造）の合成方法で合成することができる。本化合物において、C1-6アルキル基としては、好ましくはC1-3アルキル基であり、より好ましくはメチル基である。本化合物の中でも、6−フルオロ−2',5'−ジオキソスピロ［クロマン−4,4'−イミダゾリジン］−2−カルボキサミドが好ましく、特に、その(2Ｓ,4Ｓ)体であるフィダレスタットは、薬効および安全性の面で優れている。
【００１８】
歯肉炎は、作用因子、環境因子および宿主因子からなる多因性疾患である。歯肉炎は、大きく分けると、プラーク性歯肉炎、非プラーク性歯肉病変、歯肉増殖に分類される。プラーク性歯肉炎には、プラーク単独性歯肉炎、全身因子関連歯肉炎、栄養障害関連歯肉炎が含まれる。また、非プラーク性歯肉病変には、プラーク細菌以外の感染による歯肉病変、粘膜皮膚病変、アレルギー性歯肉病変、外傷性歯肉病変が含まれる。更に歯肉増殖には、原因となる薬物として、フェニトイン、ニフェジピン、シクロスポリンＡが挙げられる薬物性歯肉増殖症と、遺伝性歯肉線維腫症が知られている。本発明の医薬は、これらすべての歯肉炎に対して用いることができるが、プラーク性歯肉炎又は非プラーク性歯肉病変に対して効果が優れており、プラーク性歯肉炎に対してより効果が優れている。
【００１９】
本発明の医薬の製剤化については、通常の製剤技術により、例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、液剤、又はシロップ剤として、経口的に、あるいは注射剤等として非経口的に投与することができる。また、口腔内局所投与の形態として、軟膏状製剤、練歯磨剤、ジェル剤、パスタ剤、洗口剤、ゼリー製剤、ガム剤、又はフィルム剤等も可能である。
【００２０】
固形剤の場合には、製剤化に際して薬理学的に認容し得る賦形剤、例えばデンプン、乳糖、精製白糖、グルコース、結晶セルロース、カルボキシセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシエチルセルロース、リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、アラビアゴム等を用いることができ、必要であれば滑沢剤、結合剤、崩壊剤、被覆剤、着色剤等を配合することができる。また、液剤の場合には、安定剤、溶解助剤、懸濁化剤、乳化剤、緩衝剤、保存剤等を用いることができる。
【００２１】
口腔内局所投与形態であるフィルム剤の場合には、製剤化に際して、キトサン、デンプン、ペクチン等のような一般的に用いられる基剤の他に、薬理学的に認容し得る結合剤、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、甘味剤、香味剤、防腐剤、着色剤等の添加物を薬物層および／又は非薬物層に加えることができる。
【００２２】
一般式（Ｉ）で示されるヒダントイン誘導体、特にフィダレスタットの投与量は、症状、年齢、投与法、剤型等により異なるが、成人患者（体重60kg）1人あたり、通常0.1〜2000mg/日、好ましくは 1〜1000mg/日を１回又は数回に分けて連日投与する。経口投与する場合の投与量は、成人患者（体重60kg）1人あたり、通常0.1〜2000mg/日、好ましくは0.5〜1000mg/日、更に好ましくは、1〜800mg/日である。
【００２３】
本発明の医薬は、歯肉炎の発症後に患者に投与すると、歯肉炎を治療することができるが、歯肉炎を発症していない健常者に投与すれば、歯肉炎の発症を予防することができる。  本発明は、以下の実施例によって、更に詳しく説明されるが、これらは本発明を限定するものではなく、また本発明の範囲を逸脱しない範囲で変化させてもよい。
【実施例】
【００２４】
[動物および実験環境]
実験動物には5週齢雄性Sprague-Dawley（SD）ラット（Chubu Kagakushizai、Nagoya）を用いた。すべてのラットは、12時間の明暗周期の環境下で温度（23±1.0℃）および湿度（45±10％）が一定な恒温動物室で飼育した。飲料水は水道水を自動供給装置によって与えた。
【００２５】
[歯肉炎の誘導]
ジエチルエーテル全身麻酔下で、上顎右側第二臼歯（M2）の歯頸部歯肉に損傷を与えないように縫合用ナイロン糸（3-0 Surgilon，Tyco Healthcare，NJ）を全周に巻いて近心口蓋で結紮して、実験側とした。また、同部反対側の第二臼歯（M2）は無処置で対照側とした。
【００２６】
[フィダレスタットの投与]
縫合用ナイロン糸で処置したラットを2群に分け、フィダレスタット（32mg/kg/day）投与群と非投与群とした。フィダレスタットは飲料水に溶解して、縫合用ナイロン糸処置と同日から投与した。
【００２７】
[組織学的解析]
実験的歯肉炎作成2週間後にペントバルビタールを投与（150mg/kg）して屠殺した。両側上顎を10％ホルマリン溶液に24時間固定し、その後、水洗を行った。液体窒素、イソペンタンを用いて、川本法（未脱灰凍結切片作成法）に従い専用の包埋剤（SCEM）で包埋し、切片支持用粘着フィルム（Cryofilm type I）、専用封入剤（SCMM-R2）を使用し、第二臼歯を頬舌方向に、厚さ5μmで連続組織切片を作成した。組織切片はヘマトキシリン・エオジン（H・E）染色を行った後、光学顕微鏡で観察した。歯肉炎の評価は、コントロール、実施例および比較例それぞれの炎症性細胞数をカウントすることで行った。組織切片スライドはすべて暗号化し、条件が分からないようにした後、同一の験者がカウントした。炎症性細胞の浸潤数は、14個/mm2未満を（−）、15〜29個/mm2を（±）、30〜49個/mm2を（＋）、50〜69個/mm2を（＋＋）、70個/mm2以上を（＋＋＋）として評価した。
【００２８】
[結果および考察]
組織切片のヘマトキシリン・エオジン（H・E）染色を行った結果を図１に、炎症性細胞数の結果を表１に示す。歯肉炎を誘導していないコントロールでは、炎症性細胞の浸潤は認められず、炎症がない状態であるのに対し、フィダレスタットを投与していない比較例では、著明な炎症性細胞浸潤を伴う歯肉の炎症を認めた。一方、フィダレスタットを投与した実施例では、炎症性細胞浸潤はごくわずかに認めるのみで、歯肉の炎症が顕著に抑制された。
【００２９】
【表１】
2015110525.tif 000003
【図１】
2015110525.tif 000005