(57)【要約】【課題】肌保湿に関連する保湿関連遺伝子発現促進剤を提供する。【解決手段】ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する、保湿関連遺伝子発現促進剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
肌保湿に関連するタンパク質の遺伝子である保湿関連遺伝子の発現を促進する、保湿関連遺伝子発現促進剤であって、
ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有し、
前記保湿関連遺伝子が細胞内外の液体の移動を制御するタンパク質の遺伝子である、
保湿関連遺伝子発現促進剤。
【請求項２】
請求項１に記載の保湿関連遺伝子発現促進剤において、
前記保湿関連遺伝子がアクアポリンの遺伝子である、
保湿関連遺伝子発現促進剤。
【請求項３】
請求項１に記載の保湿関連遺伝子発現促進剤において、
前記保湿関連遺伝子がオクルディン、クローディン、ＪＡＭから選ばれる少なくとも１種の遺伝子である、
保湿関連遺伝子発現促進剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、保湿関連遺伝子発現促進剤に関し、より詳細には、肌保湿に関連する細胞内外の液体の移動を制御するタンパク質の遺伝子の発現を促進する、保湿関連遺伝子発現促進剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
肌の潤いを保つことは、肌のハリや弾力性の向上につながるため、美しい肌には潤いが欠かせない。
肌すなわち皮膚は人間の身体の最外層に位置する臓器であり、その重要な役割のひとつに身体の内部から水分が過剰に蒸散するのを抑える機能がある。身体からの水分の過剰な蒸発により皮膚細胞内の水分量が低下すると、皮膚のハリの低下や弾力性の低下など皮膚環境の悪化をもたらす。したがって、身体からの水分の過剰な蒸発を抑制するとともに、正常な細胞内への水分の取り込みを維持することは、皮膚の潤いを保ち、ハリや弾力性の向上など皮膚環境の改善につながる。
【０００３】
皮膚の構造は表面から表皮、真皮、皮下組織の３層の構造をとっている。特に表皮は、身体から水分が蒸発するのを防ぎ水分調整をしており、肌の潤いを保つ役割を担っている。表皮は角質層、顆粒層、有棘層、基底層に分かれている。表皮の基底層から生まれる角化細胞が、分化しながら押し上げられ、有棘層、顆粒層、角質層を経て角質細胞となり、はがれ落ちるというサイクルを繰り返している。
【０００４】
肌の保湿機能にとって重要な表皮における細胞内外の液体の移動には、主に２つの経路があり、１つは水チャンネルとして知られる細胞膜上の輸送タンパク質であるアクアポリンが、表皮の顆粒層から基底層の角化細胞の細胞膜上に発現して、細胞間隙の水をはじめとする低分子物質を細胞内へ取り込む役割を担っている経路が知られている。もう１つは細胞接着構造の１つであるタイトジャンクションが細胞同士の密着により顆粒層における水分の細胞間透過を制御している経路が知られている。
【０００５】
水チャネルとして知られる細胞膜上の輸送タンパク質であるアクアポリンは、ヒトでは、１３種類のアクアポリン（ＡＱＰ０〜ＡＱＰ１２）の存在が知られている。表皮においては、主にアクアポリン３が存在し、水や水分保持作用に関与するグリセロールや尿素等の低分子化合物をも取り込む役割を担っていると考えられている。
【０００６】
表皮顆粒層の細胞周囲には、タイトジャンクションと呼ばれるタンパク質がベルト状に存在し、隣接する細胞と細胞を密着させ、水分などの液体や物質の角質層における細胞間透過を制御している。タイトジャンクションを構成するタンパク質としては、オクルディン、クローディン、ＪＡＭ（Ｊｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ａｄｈｅｓｉｏｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅ）などがあげられる。
【０００７】
したがって、肌の潤いを保ち美しい肌を実現するためには、上記のような細胞内外の液体の移動を制御するタンパク質の産生を促進することが非常に重要である。
【０００８】
このため、従来から、タイトジャンクション形成促進効果のあるカクタスフルーツ果実抽出物による皮膚バリア機能改善剤（特許文献１）やタイトジャンクションの形成促進効果の優れた、安定した化学物質が開示されている。（特許文献２）。
また、トコフェリルレリノエートが、皮膚細胞においてアクアポリン発現を促進することが開示されている。（特許文献３）
【０００９】
しかしながら、医薬品、医薬部外品、化粧品、食品に用いる上で、より安全で効果の高い素材が求められていた。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】特開２０１２−１２１８７１号公報
【特許文献２】特開２００７−２１０９４８号公報
【特許文献３】特開２００６−２９０８７３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、保湿関連遺伝子の発現の促進に有効な、保湿関連遺伝子発現促進剤を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩が、細胞内外の液体の移動を制御するタンパク質の遺伝子である保湿関連遺伝子の発現を促進することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１３】
すなわち、本発明は、
（１）肌保湿に関連するタンパク質の遺伝子である保湿関連遺伝子の発現を促進する、保湿関連遺伝子発現促進剤であって、
ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有し、
前記保湿関連遺伝子が細胞内外の液体の移動を制御するタンパク質の遺伝子である、
保湿関連遺伝子発現促進剤、
（２）（１）に記載の保湿関連遺伝子発現促進剤において、
前記保湿関連遺伝子がアクアポリンの遺伝子である、
保湿関連遺伝子発現促進剤、
（３）（１）に記載の保湿関連遺伝子発現促進剤において、
前記保湿関連遺伝子がオクルディン、クローディン、ＪＡＭから選ばれる少なくとも１種の遺伝子である、
保湿関連遺伝子発現促進剤、
である。
【発明の効果】
【００１４】
上記保湿関連遺伝子発現促進剤によれば、細胞内外の液体の移動を制御する、肌保湿に関連するタンパク質の産生を促進するため、肌の内側から保湿力を向上させるのに有効な新規製剤が提供される。
【００１５】
また、ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩は、皮膚表皮から角質層に浸透し、効果を発揮することができる。経口摂取された際にも、腸管から吸収され、皮膚に到達し、効果を発揮することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下、図面を参照しつつ、本発明を詳細に説明する。なお、本発明において、格別に断らない限り、「部」は「質量部」を意味し、「％」は「質量％」を意味する。
【００１７】
＜保湿関連遺伝子発現促進剤＞
本発明の保湿関連遺伝子発現促進剤は、ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有することを特徴とする。本発明において、保湿関連遺伝子とは、肌の保湿機能向上に関わるタンパク質の遺伝子を指す。さらに、本発明における保湿関連遺伝子は、細胞内外の液体の移動を制御するタンパク質の遺伝子である。本発明の保湿関連遺伝子発現促進剤は、保湿関連遺伝子の発現を促進することによって、肌の保湿機能向上に関わるタンパク質の産生を促進する。
肌の保湿機能にとって重要な表皮における細胞内外の液体の移動には、主に２つの経路があり、１つは水チャンネルとして知られる細胞膜上の輸送タンパク質による経路、もう１つは細胞接着構造タンパク質が細胞同士を密着させることによる細胞間透過を制御している経路が知られている。
細胞内外の液体の移動を制御する保湿関連タンパク質としては、例えば、細胞膜上の水分輸送を制御しているアクアポリン３、アクアポリン５、アクアポリン９などや、液体の細胞間透過を制御しているタイトジャンクションを構成する、オクルディン、クローディン、ＪＡＭなどがあげられる。
【００１８】
＜遺伝子発現促進効果の評価＞
本発明の保湿関連遺伝子発現促進効果は、例えば保湿関連遺伝子発現促進剤添加後のヒト表皮角化細胞からＲＮＡを抽出し、ｃＤＮＡを合成し、リアルタイムＰＣＲ法によりｃＤＮＡを増幅させ、ｍＲＮＡ発現を測定することにより、遺伝子発現の促進効果を確認することができる。
【００１９】
＜ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩＞
本発明において、「ヒアルロン酸」とは、β−Ｄ−グルクロン酸とβ−Ｄ−Ｎ−アセチルグルコサミンとの二糖からなる繰り返し構成単位を１以上有する多糖類である。すなわち、ヒアルロン酸は、β−Ｄ−グルクロン酸の１位とβ−Ｄ−Ｎ−アセチル−グルコサミンの３位とが結合した２糖単位を少なくとも１個含む２糖以上のものである。また、「ヒアルロン酸の薬学的に許容される塩」としては、特に限定されないが、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、亜鉛塩、マグネシウム塩、アンモニウム塩等が挙げられる。
以下本発明において、ヒアルロン酸またはその薬学的に許容される塩を、単に「ヒアルロン酸」とも言う。
【００２０】
＜ヒアルロン酸の由来＞
ヒアルロン酸は、動物等の生体組織（例えば鶏冠、さい帯、皮膚、関節液等）から抽出されたものでもよく、あるいは、微生物、動物細胞または植物細胞を培養して得られたもの（例えばストレプトコッカス属の細菌等を用いた発酵法）、化学的または酵素的に合成されたもの等を使用することができる。
【００２１】
＜ヒアルロン酸の純度＞
なお、本発明において使用するヒアルロン酸の純度は、医薬品で使用できるレベルであればよく、好ましくは９０％以上であればよく、より好ましくは９５％以上であればよい。この純度は、カルバゾール硫酸法（例えば日本薬局方）にて測定されたグルクロン酸定量値から算出された値である。
【００２２】
＜純度の測定方法＞
カルバゾール硫酸法は、ホウ酸ナトリウム・硫酸溶液中にヒアルロン酸水溶液を加えて混和し、ヒアルロン酸を加熱分解した後冷却し、カルバゾール・エタノール溶液を加えて混和し、加熱後放冷した試料液の吸光度（５３０ｎｍ）を測定する方法である。同様に処理したＤ−グルクロノラクトンを用いて検量線を作成し、Ｄ−グルクロノラクトン換算値を算出した後、１．１０２を乗じてグルクロン酸定量値を求める。得られたグルクロン酸定量値に（ヒアルロン酸の分子量／グルクロン酸の分子量）を乗じてヒアルロン酸の含有量を算出する。
【００２３】
＜ヒアルロン酸の分子量＞
また、本発明の保湿関連遺伝子発現促進剤で使用するヒアルロン酸の平均分子量は、遺伝子発現促進効果を十分に得られる点から、１０万以下、好ましくは７万以下であり、より好ましくは４００〜６万以下、さらに好ましくは１，０００〜１万である。ヒアルロン酸の平均分子量が１０万よりも大きいと、外用剤として塗布した場合に、角質に浸透できないため、本願発明の保湿関連遺伝子発現促進効果が得られにくくなる可能性がある。
【００２４】
なお、本発明で規定されるヒアルロン酸の平均分子量は、以下の方法により測定される。
【００２５】
＜分子量の測定方法＞
即ち、約０．０５ｇの精製ヒアルロン酸を精密に量り、０．２ｍｏｌ／Ｌ濃度の塩化ナトリウム溶液に溶かし、正確に１００ｍＬとした溶液及びこの溶液８ｍＬ、１２ｍＬ並びに１６ｍＬを正確に量り、それぞれに０．２ｍｏｌ／Ｌ濃度の塩化ナトリウム溶液を加えて正確に２０ｍＬとした溶液を試料溶液とする。この試料溶液及び０．２ｍｏｌ／Ｌ濃度の塩化ナトリウム溶液につき、日本薬局方（第十四改正）一般試験法の粘度測定法（第１法 毛細管粘度測定法）により３０．０±０．１℃で比粘度を測定し（式（１））、各濃度における還元粘度を算出する（式（２））。還元粘度を縦軸に、本品の換算した乾燥物に対する濃度（ｇ／１００ｍＬ）を横軸にとってグラフを描き、各点を結ぶ直線と縦軸との交点から極限粘度を求める。ここで求められた極限粘度をＬａｕｒｅｎｔの式（式（３））に代入し、平均分子量を算出する（T.C. Laurent, M. Ryan, A. Pietruszkiewicz,:B.B.A., 42, 476-485(1960)）。
（式１）
比粘度 ＝ {(試料溶液の所要流下秒数)/(0.2moｌ/L塩化ナトリウム溶液の所要流下秒数)}−1
（式２）
還元粘度 = 比粘度/(本品の換算した乾燥物に対する濃度（g/100mL）)
（式３）
極限粘度 ＝ ３．６×１０−４Ｍ０．７８
Ｍ：平均分子量
【００２６】
＜ヒアルロン酸の含有量＞
本発明の保湿関連遺伝子発現促進剤におけるヒアルロン酸の含有量は、ヒアルロン酸が有効成分として機能しうる量であればよく、通常１質量％以上であり、好ましくは５〜９５質量％である。
【００２７】
＜遺伝子発現促進効果の作用機序＞
本発明の保湿関連遺伝子発現促進剤を摂取あるいは、塗布することによって角化細胞における保湿関連遺伝子の発現が促進される作用機序については必ずしも明らかではないが、本発明の有効成分であるヒアルロン酸またはその薬学的に許容できる塩が、皮膚の角化細胞に作用し、保湿関連遺伝子の発現を増加させるものと推察される。
分子量１０万以上のヒアルロン酸は、外用剤として塗布した場合に、角質に浸透できないため、本願発明の保湿関連遺伝子発現促進効果が得られにくくなる可能性がある。
【００２８】
＜保湿関連遺伝子発現促進剤に用いる他の原料＞
本発明の保湿関連遺伝子発現促進剤は、有効成分であるヒアルロン酸以外に、本発明の効果を損なわない範囲で、その他の原料を含むことができる。そのような原料の例としては水、賦形剤、抗酸化剤、防腐剤、湿潤剤、粘稠剤、緩衝剤、吸着剤、溶剤、乳化剤、安定化剤、界面活性剤、滑沢剤、水溶性高分子、甘味料、矯味剤、酸味料、アルコール類等が挙げられる。
また、本発明の保湿関連遺伝子発現促進剤は、本発明の効果を損なわない範囲で、その他の有効成分を含むことができる。有効成分の具体例として、例えば、抗酸化成分、老化防止成分、抗炎症成分、美白成分、細胞賦活化成分、ビタミン類、血行促進成分、保湿成分、ＤＮＡの損傷の予防及び／又は修復作用を有する成分、抗糖化成分、ペプチド又はその誘導体、アミノ酸又はその誘導体、ヒドロキノン配糖体及びそのエステル類などが挙げられる。また、本発明の保湿関連遺伝子発現促進剤と同様の保湿関連遺伝子発現促進効果の期待される成分を含むこともできる。例えば、ショウキョウエキス、ウォータークレスエキス、ケイガイエキス、アジュガツルケスタンカエキス、ホスファチジン酸、グリチルリチン酸ジカリウム、アマチャヅルエキス、ラベンダーエキス、ヒキオコシエキス、カスタスフルーツ果実エキス、キンギンカエキス、サフランエキス、レチノイン酸、クリプトキサンチンなどが挙げられる。
【００２９】
＜保湿関連遺伝子発現促進剤の剤形＞
本発明の保湿関連遺伝子発現促進剤の剤形は特に限定されないが、本発明の保湿関連遺伝子発現促進剤を経口摂取する場合、例えば錠剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤等の固形製剤、水剤、懸濁剤、シロップ剤、乳剤等の液剤等の経口投与剤が挙げられる。
また、外用剤として塗布する場合、例えば、液剤、懸濁剤、乳剤、クリーム剤、軟膏剤、ゲル剤、リニメント剤、ローション剤又はパップ剤などが挙げられる。
【００３０】
＜保湿関連遺伝子発現促進剤の摂取量および塗布量＞
ヒアルロン酸は生体物質であるため、多量に摂取あるいは塗布しても副作用がない、またはきわめて低いと考えられるが、本発明の保湿関連遺伝子発現促進剤として摂取するヒアルロン酸及び／またはその塩の量は、一日当たり１０ｍｇ〜１０００ｍｇ、好ましくは１００〜５００ｍｇを目安とすることができる。投与回数は、一日当たり一回もしくは複数回を選択できる。
また、外用剤として塗布する場合には、使用対象の皮膚の状態、年齢、性別などによって異なるが、０．０１ｍｇ〜１０００ｍｇ、好ましくは０．５〜５００ｍｇを1日数回、適量を皮膚に塗布すればよい。
【実施例】
【００３１】
以下、実施例によって本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は実施例に限定されない。
【００３２】
＜実施例１、２＞
下記の各ヒアルロン酸をそれぞれ滅菌水に溶解させ、各保湿関連遺伝子発現促進剤を得た。
実施例１： ヒアルロン酸（平均分子量８,０００、白色粉末、キユーピー株式会社製）
実施例２： ヒアルロン酸（平均分子量２,０００、白色粉末、キユーピー株式会社製）
【００３３】
＜試験例１＞
試験例１では、低分子ヒアルロン酸の保湿関連遺伝子発現促進効果を確認するために、表皮角化細胞に低分子ヒアルロン酸を含む培地を添加しインキュベートした後、各種保湿関連遺伝子の発現を測定した。
【００３４】
＜細胞培養とＲＮＡの抽出＞
正常ヒト成人表皮角化細胞NHEK（倉敷紡績株式会社）をSUMILON 24well Multi Well Plateに1×105ずつ分注し正常ヒト表皮角化細胞基礎培地（HuMedia-KG2  倉敷紡績株式会社）を用い、CO2濃度5％、37℃条件下で培養する。コンフルエントになるまで培養し上清を除去した後、カルシウムイオン1.8mM含有正常ヒト表皮角化細胞基礎培地に交換しCO2濃度5％、37℃条件下で2〜4日培養する。培地を除去した後、実施例１または実施例２の保湿関連遺伝子発現促進剤を含むカルシウムイオン1.8mM含有正常ヒト表皮角化細胞基礎培地をヒアルロン酸濃度が最終0.01μg/mLとなるように添加しCO2濃度5％、37℃条件下で３時間後または６時間インキュベートした。その後、上清を除去し細胞を回収し総RNAを調整した。
【００３５】
＜リアルタイムＰＣＲ＞
総ＲＮＡを基にAffinity Script cDNA Synthesis Kit（アジレント・テクノロジー株式会社）を用いてcDNAの合成を行った。さらにBrilliant III Ultra Fast SYBR Green QPCR Master Mix（アジレント・テクノロジー株式会社）と表１に示した各種プライマー（100pmoL／μL、北海道システム・サイエンス株式会社）を用いてリアルタイムＰＣＲ機器（Mx3005  アジレント・テクノロジー株式会社）を用いた保湿関連遺伝子のmRNA発現量を定量した。すなわち、熱変性（95℃、10秒）およびアニーリング（60℃、20秒）を40回繰り返す増幅反応を行い、同時にDNAに結合するSYBR Greenの蛍光をモニタリングすることによってmRNA発現量の増幅を測定した。保湿関連遺伝子としてアクアポリン3、オクルディン、クローディン１、ＪＡＭ-１のmRNA発現量を、内部標準であるGAPDH mRNA発現量に対する割合として求め、対照を1とした場合の発現比で表した。なお、培地のみを添加したものを比較例（対照）とした。各遺伝子発現量測定の結果を表２に示す。
【００３６】
＜プライマー配列＞
リアルタイムＰＣＲに用いたプライマー配列を表１に示した。
【００３７】
【表１】
2015063510.tif 000002
【００３８】
【表２】
2015063510.tif 000003
【００３９】
表２より、平均分子量１０万以下の低分子ヒアルロン酸を添加した実施例１および実施例２において、ヒト表皮角化細胞での保湿関連遺伝子の発現が促進されることが示された。
また、インキュベート後３時間という短時間のインキュベート時間の方が、６時間インキュベートした場合よりも遺伝子発現が促進されていることから、低分子ヒアルロン酸は短時間での保湿関連遺伝子発現の促進に効果が高いと考えられた。
【００４０】
以下に、本発明に係る保湿関連遺伝子発現促進剤の処方例を示す。本発明は、この処方例によって限定されるものではない。
【００４１】
＜処方例１＞
実施例１で使用したヒアルロン酸（平均分子量８,０００のヒアルロン酸）を保湿関連遺伝子発現促進剤として使用して、下記の配合の散剤（顆粒剤）を製した。
【００４２】
［配合割合］
保湿関連遺伝子発現促進剤（実施例１のヒアルロン酸）            １０％
乳糖                                                          ６０％
トウモロコシデンプン                                          ２５％
ヒプロメロース                                                 ５％
――――――――――――――――――――――――――――――――――――    
１００％
【００４３】
＜処方例２＞
実施例１で使用したヒアルロン酸（平均分子量８，０００のヒアルロン酸）を保湿関連遺伝子発現促進剤として使用して、下記の配合の錠剤を製した。
【００４４】
［配合割合］
保湿関連遺伝子発現促進剤（実施例１のヒアルロン酸）              ２５％
乳糖                                                            ２４％
結晶セルロース                                                  ２０％
トウモロコシデンプン                                            １５％
デキストリン                                                    １０％
乳化剤                                                            ５％
二酸化ケイ素                                                      １％
――――――――――――――――――――――――――――――――――――
１００％
【００４５】
＜処方例３＞
実施例２で使用したヒアルロン酸（平均分子量２，０００のヒアルロン酸）を保湿関連遺伝子発現促進剤として使用して、内容物が下記の配合であるソフトカプセルを製した。
【００４６】
［配合割合］
保湿関連遺伝子発現促進剤（実施例２のヒアルロン酸）              ２０％
オリーブ油                                                      ５０％
ミツロウ                                                        １０％
中鎖脂肪酸トリグリセリド                                        １０％
乳化剤                                                          １０％
――――――――――――――――――――――――――――――――――――
１００％
【００４７】
＜処方例４＞
実施例１または２のヒアルロン酸を保湿関連遺伝子発現促進剤として使用して、内容物が下記の配合である乳剤を製した。
【００４８】
［配合割合］
保湿関連遺伝子発現促進剤（実施例１または２のヒアルロン酸）      ０．２０％
プロピレングリコール                                            ７．７１％
トレハロース                                                    ０．０３％
セラミド３                                                      ０．０５％
ヒノキチオール                                                  ０．０１％
クエン酸                                                        ０．０５％
グリコール酸                                                    ０．０５％
ミネラルオイル                                                  ３．００％
トリオクタノイン                                                １．５０％
スクワラン                                                      １．００％
ステアリン酸                                                    ０．５０％
セテアリルアルコール                                            ０．５０％
ラノリン                                                        ０．３０％
パラフィン                                                      ０．２０％
ステアリン酸ソルビタン                                          １．４０％
テトラオレイン酸ソルベース−３０                                １．００％
ポリソルベート６０                                              ０．８０％
メチルパラベン                                                  ０．２０％
プロピルパラベン                                                ０．１０％
エタノール                                                      ０．０１％
フェノキシエタノール                                                適量
カルボマー                                                      ０．１０％
水酸化カリウム                                                  ０．１０％
アルギニン                                                      ０．０５％
ＢＨＴ                                                          ０．０２％
トコフェロール                                                      適量
ＥＤＴＡ−２ナトリウム                                          ０．０２％
精製水                                                              残量
――――――――――――――――――――――――――――――――――――――――
１００％
【００４９】
＜処方例５＞
本試験例では、実施例１または２のヒアルロン酸を保湿関連遺伝子発現促進剤として使用して、内容物が下記の配合である温感刺激パップ剤を製した。
【００５０】
［配合割合］
保湿関連遺伝子発現促進剤（実施例１または２のヒアルロン酸）    ０．２０％
ポリアクリル酸ナトリウム                                      ４．００％
カルボキシメチルセルロースナトリウム                          ２．００％
カオリン                                                      ５．００％
ゼラチン                                                      ３．００％
グリセリン                                                  ２０．００％
トウガラシエキス                                              ０．１５％
ヒアルロン酸                                                  ５．００％
精製水                                                            残量
―――――――――――――――――――――――――――――――――――――
１００．００％
【００５１】
＜処方例６＞
本試験例では、実施例１または２のヒアルロン酸を保湿関連遺伝子発現促進剤として使用して、内容物が下記の配合である軟膏を製した。
【００５２】
［配合割合］
保湿関連遺伝子発現促進剤（実施例１または２のヒアルロン酸）    ０．５％
白色ワセリン                                                ２５．０％
ステアリルアルコール                                        ２０．０％
プロピレングリコール                                        １２．０％
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０                            ４．０％
モノステアリン酸グリセリン                                    １．０％
パラオキシ安息香酸メチル                                      ０．１％
パラオキシ安息香酸プロピル                                    ０．１％
精製水                                                          残量
―――――――――――――――――――――――――――――――――――――
１００％
【００５３】
＜処方例７＞
本実施例では、実施例１または２のヒアルロン酸を保湿関連遺伝子発現促進剤として使用して、内容物が下記の配合である化粧水を製した。
【００５４】
［配合割合］
保湿関連遺伝子発現促進剤（実施例１または２のヒアルロン酸）      ０．２％
アセチル化ヒアルロン酸                                          ０．１％
コンドロイチン硫酸                                              ０．１％
コラーゲンペプチド                                              ０．１％
１，３−ブチレングリコール                                      ５．０％
グリセリン                                                      ３．０％
イソステアリルアルコール                                        ０．１％
酢酸トコフェロール                                              ０．１％
ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノラウリル酸エステル                  ０．５％
ＰＯＥ（１５）ラウリルアルコールエーテル                        ０．５％
ピロリドンカルボン酸亜鉛                                        ０．１％
レチノイン酸                                                    ０．５％
ラベンダーエキス                                                ０．３％
ショウキョウエキス                                              ０．３％
ウォータークレスエキス                                          ０．３％
ケイガイエキス                                                  ０．３％
サフランエキス                                                  ０．３％
エチルパラベン                                                  ０．１％
メチルパラベン                                                  ０．１５％
エタノール                                                      ５．０％
香料                                                              適量
精製水                                                            残量
―――――――――――――――――――――――――――――――――――――
１００％
【００５５】
＜処方例８＞
本実施例では、実施例１または２のヒアルロン酸を保湿関連遺伝子発現促進剤として使用して、内容物が下記の配合である乳液を製した。
【００５６】
［配合割合］
保湿関連遺伝子発現促進剤（実施例１または２のヒアルロン酸）      ０．３％
ペンチレングリコール                                            ５．０％
グリセリン                                                      ３．０％
スクワラン                                                      ５．０％
ステアリン酸                                                    ０．５％
ステアリルアルコール                                            ２．０％
ワセリン                                                        ４．０％
ステアリン酸ソルビタン                                          １．０％
ＰＯＥ（１０）モノステアリン酸エステル                          １．０％
カルボキシビニルポリマー                                        ０．５％
ポリクオタニウム−５１                                          ０．１％
グリチルリチン酸ジカリウム                                      ０．１％
ホスファチジン酸                                                ０．５％
クリプトキサンチン                                              ０．５％
アジュアガツルケスタンカエキス                                  ０．３％
アマチャヅルエキス                                              ０．３％
ヒキオコシエキス                                                ０．３％
カスタスフルーツエキス                                          ０．３％
キンギンカエキス                                                ０．３％
メチルパラベン                                                  ０．１５％
プロピルパラベン                                                ０．１％
水酸化カリウム                                                  ０．１％
ＢＨＴ                                                          ０．０２％
ＥＤＴＡ−２ナトリウム                                          ０．０２％
香料                                                              適量
精製水                                                            残量
―――――――――――――――――――――――――――――――――――――
１００％
【００５７】
＜処方例９＞
本実施例では、実施例１または２のヒアルロン酸を保湿関連遺伝子発現促進剤として使用して、内容物が下記の配合であるクリーム（エモリエントクリーム）を製した。
【００５８】
［配合割合］
保湿関連遺伝子発現促進剤（実施例１または２のヒアルロン酸）        ０．５％
ポリエチレングリコール                                            ４．０％
１，３−プロパンジオール                                          ６．０％
スクワラン                                                      １１．０％
ジメチコン                                                        １．０％
セタノール                                                        ６．０％
ステアリン酸                                                      ２．０％
水添ココグリセリル                                                ４．０％
トリカプリリン                                                    ８．０％
モノステアリン酸グリセリン                                        ３．０％
ＰＯＥ（２０）セチルアルコールエーテル                            ２．０％
コエンザイムＱ１０                                                ０．０３％
セラミド                                                          ０．１％
ジラウロイルグルタミン酸リシンナトリウム                          ０．１％
ＥＤＴＡ−２ナトリウム                                            ０．０２％
プロピルパラベン                                                  ０．１％
メチルパラベン                                                    ０．１５％
香料                                                                適量
精製水                                                              残量
―――――――――――――――――――――――――――――――――――――
１００％
【００５９】
＜処方例１０＞
本実施例では、実施例１または２のヒアルロン酸を保湿関連遺伝子発現促進剤として使用して、内容物が下記の配合である美容液（美白保湿エッセンス）を製した。
【００６０】
［配合割合］
保湿関連遺伝子発現促進剤（実施例１または２のヒアルロン酸）        ０．８％
１，３−ブチレングリコール                                        ５．０％
グリセリン                                                        １．５％
ＰＯＥソルビタンモノステアリン酸エステル                          １．０％
ソルビタンモノステアリン酸エステル                                ０．５％
キサンタンガム                                                    ０．２％
アルギン酸ナトリウム                                              ０．２％
カルボキシビニルポリマー                                          ０．２％
水酸化カリウム                                                    ０．１％
オリーブ油                                                        ０．２％
トコフェロール                                                    ０．１％
ＥＤＴＡ−２ナトリウム                                            ０．０２％
アルギニン                                                        ０．１５％
グリチルリチン酸ジカリウム                                        ０．０５％
アルブチン                                                        ０．２％
パルミチン酸レチノール                                            ０．２％
クジンエキス                                                      ０．２％
海藻エキス                                                        ０．２％
トラネキサム酸                                                    ０．１％
エラスチン                                                        ０．１％
コラーゲン                                                        ０．１％
リン酸アスコルビン酸マグネシウム                                  ０．１％
クエン酸ナトリウム                                                １．０％
クエン酸                                                          ０．１％
プロピルパラベン                                                  ０．１％
メチルパラベン                                                    ０．１５％
香料                                                                適量
精製水                                                              残量
―――――――――――――――――――――――――――――――――――――
１００％