(57)【要約】【課題】トランスポゾンの移動を制御する剤を提供する。【解決手段】本発明は、マンネンタケ抽出物を含有することを特徴とするトランスポゾン移動抑制剤である。本発明のマンネンタケ抽出物を用いることにより、トランスポゾン特有のＤＮＡメチル化酵素の産生を促進し、トランスポゾンの移動を制御することができる。又、本発明のマンネンタケ抽出物を用いることにより、トランスポゾンの移動により引き起こされる筋ジストロフィー、血友病、アルツハイマー病、悪性腫瘍等の疾病を予防若しくは軽減することができる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
マンネンタケ抽出物を含有することを特徴とするトランスポゾン移動抑制剤。
【請求項２】
マンネンタケが赤霊芝であることを特徴とする請求項１記載のトランスポゾン移動抑制剤。
【請求項３】
赤霊芝が赤霊芝胞子であることを特徴とする請求項２記載のトランスポゾン移動抑制剤。
【請求項４】
温度範囲２０〜１５０℃、圧力範囲１〜８０ＭＰａの状態にある二酸化炭素によるマンネンタケ抽出物を含有することを特徴とするトランスポゾン移動抑制剤。
【請求項５】
温度範囲２０〜１５０℃、圧力範囲１〜８０ＭＰａの状態にある二酸化炭素による赤霊芝抽出物を含有することを特徴とするトランスポゾン移動抑制剤。
【請求項６】
温度範囲２０〜１５０℃、圧力範囲１〜８０ＭＰａの状態にある二酸化炭素による赤霊芝胞子抽出物を含有することを特徴とするトランスポゾン移動抑制剤。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項記載のトランスポゾン移動抑制剤を含有することを特徴とする、筋ジストロフィー、血友病、アルツハイマー病、又は悪性腫瘍の予防若しくは軽減用組成物。
【請求項８】
マンネンタケ抽出物を含有することを特徴とするＤＮＡメチル化酵素産生促進剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、マンネンタケ抽出物を含有することを特徴とするトランスポゾン移動抑制剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
私達ヒトをはじめとする真核生物のゲノムには、トランスポゾンと呼ばれる、ゲノム上を自由に動き回ることのできる利己的な因子群が存在する（非特許文献１）。このトランスポゾンがゲノム上を動き回ることで、遺伝子が破壊されたり、発現が制御されたりする。このように、トランスポゾンは細胞内の遺伝子配列を変化させることで突然変異を引き起こし、生物の進化を促進してきた一方で、加齢や致死等の甚大な負の効果をもたらす大きな要因にもなってきた。
【０００３】
しかし、生体内には、トランスポゾンが動き回らないように制御する機構が複数存在する。例えば、トランスポゾンの転写を制御する機構、新規トランスポゾンを分解する機構、新規トランスポゾンのＤＮＡへの組み込みを制御する機構等がある。それらのうち、トランスポゾンの転写を制御する機構は、トランスポゾンの移動の初期段階に関わっており、トランスポゾンの移動を抑制するのに重要な役割を果たしている。
【０００４】
トランスポゾンの転写を制御する機構に関して、哺乳類のゲノムでは、５’−ＣｐＧ−３’配列のシトシンの５位がメチル化修飾を受けることにより、トランスポゾンの転写が制御されている（非特許文献２）。通常、遺伝子のプロモーター領域に存在するＣｐＧアイランドはメチル化されていないが、メチル化を受けることにより遺伝子発現が抑制される。ＤＮＡメチル化は、３種類のＤＮＡメチル基転移酵素ＤＮＭＴ１｛ＤＮＡ（ｃｙｔｏｓｉｎｅ−５−）−ｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ  １｝、ＤＮＭＴ３Ａ｛ＤＮＡ（ｃｙｔｏｓｉｎｅ−５−）−ｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ  ３α｝、ＤＮＭＴ３Ｂ｛ＤＮＡ（ｃｙｔｏｓｉｎｅ−５−）−ｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ  ３β｝により起こる。ＤＮＡメチル化が関与する生理的現象として、ＬＩＮＥ１（ｌｏｎｇ  ｉｎｔｅｒｓｐｅｒｓｅｄ  ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  ｅｌｅｍｅｎｔ  １）等のトランスポゾンの不活化、ゲノムインプリンティング、Ｘ染色体不活化等が挙げられる。
【０００５】
最近の研究から、トランスポゾンの一種であるＬＩＮＥ１の紫外線照射による活性化メカニズムが明らかとなってきた。即ち、紫外線照射により、トリプトファンがＦＩＣＺ（６−ｆｏｒｍｙｌｉｎｄｏｌｏ［３，２−ｂ］ｃａｒｂａｚｏｌｅ）に変換される。ＦＩＣＺは芳香剤炭化水素受容体（ＡｈＲ）に結合して様々な有害作用を仲介するが、そのうちの一つとしてＬＩＮＥ１の動きを活発にさせる（特許文献１及び非特許文献３〜５）。
【０００６】
トランスポゾンの活性化により引き起こされる疾病として、筋ジストロフィー（特許文献２及び非特許文献６）、血友病（特許文献２及び非特許文献７）、アルツハイマー病（特許文献３及び４）等が挙げられる。トランスポゾンの移動を制御することができれば、遺伝子配列の甚大な変化を抑制することができ、前述のような疾病を予防若しくは軽減することができると考えられる。しかしながら、今までのところ、そのような効果が期待され、且つ安全性が高いトランスポゾン移動抑制剤は開発されていない。
【０００７】
近年、マンネンタケ抽出物の研究が進められ、生体の遺伝子損傷抑制剤（特許文献５）、血栓症改善剤（特許文献６）、美白剤（特許文献７）、高血圧抑制剤（特許文献８）等が開示されている。又、温度範囲２０〜１５０℃、圧力範囲１〜８０ＭＰａの状態にある二酸化炭素により抽出されたマンネンタケ抽出物の研究については、美白剤（特許文献９）、幹細胞の未分化維持剤及び増殖促進剤（特許文献１０）、発毛促進剤（特許文献１１）等が開示されている。更に、霊芝胞子抽出物の研究については、制癌性健康食品及び健康食品添加剤（特許文献１２）、健康的コラーゲン化粧品（特許文献１３）、育毛剤（特許文献１４）等が開示されている。
【０００８】
特許文献５のように、マンネンタケ抽出物には遺伝子損傷抑制効果が認められている。特許文献５に用いられているＡｍｅｓ試験は、感受性を高くしたサルモネラ菌の変異株を使用して突然変異抑制効果を評価している。この試験では、菌の特定の変異遺伝子部分の変化を指標にしていること、及び紫外線照射により種々の遺伝子損傷が誘発されることから、マンネンタケ抽出物がトランスポゾンの移動を制御する効果を有するのかについては分かっていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開２００６−２６５１８６
【特許文献２】特表２００７−５１５９４１
【特許文献３】特開２００８−１８７９９４
【特許文献４】特開２００８−１８８００３
【特許文献５】特開２００２−３２２０８１
【特許文献６】特開２００６−２８１２８
【特許文献７】特開２００７−１４５８０７
【特許文献８】特開２００８−２５５０４１
【特許文献９】特開２００５−１０４８７３
【特許文献１０】特開２０１１−２１１９５６
【特許文献１１】特開２０１３−７１９２７
【特許文献１２】特開２００２−２０９５５３
【特許文献１３】特開２００５−２０６５６７
【特許文献１４】特開２００７−８８８５
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ，４３（６），１０１５−１０２２（２０１１）
【非特許文献２】豊田実，生化学，８２（８），６９３−７０１（２０１０）
【非特許文献３】Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．Ｉｎｔｅｒａｃｔ．，１１８（２），１２７−１４０（１９９９）
【非特許文献４】Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１０４（２１），８８５１−８８５６（２００７)
【非特許文献５】Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１０７（４３），１８４８７−１８４９２（２０１０）
【非特許文献６】Ｎａｔｕｒｅ，４７８（７３６７），１２７−１３１（２０１１）
【非特許文献７】Ｎａｔｕｒｅ，４６４（７２９１），９９９−１００５（２０１０）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
そこで、本発明が解決する課題は、トランスポゾンの移動を制御する成分を見出し、これを有効成分とする、作用点が明確であり、且つ優れたトランスポゾン移動抑制剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、上記課題の解決に向け鋭意検討を行った結果、マンネンタケ抽出物にトランスポゾンの移動を制御する優れた効果を見出し、本発明を完成するに至った。
【００１３】
即ち、本発明は、以下の通りである。
（１）マンネンタケ抽出物を含有することを特徴とするトランスポゾン移動抑制剤。
（２）マンネンタケが赤霊芝であることを特徴とする（１）記載のトランスポゾン移動抑制剤。
（３）赤霊芝が赤霊芝胞子であることを特徴とする（２）記載のトランスポゾン移動抑制剤。
（４）温度範囲２０〜１５０℃、圧力範囲１〜８０ＭＰａの状態にある二酸化炭素によるマンネンタケ抽出物を含有することを特徴とするトランスポゾン移動抑制剤。
（５）温度範囲２０〜１５０℃、圧力範囲１〜８０ＭＰａの状態にある二酸化炭素による赤霊芝抽出物を含有することを特徴とするトランスポゾン移動抑制剤。
（６）温度範囲２０〜１５０℃、圧力範囲１〜８０ＭＰａの状態にある二酸化炭素による赤霊芝胞子抽出物を含有することを特徴とするトランスポゾン移動抑制剤。
（７）（１）〜（６）のいずれか１項記載のトランスポゾン移動抑制剤を含有することを特徴とする、筋ジストロフィー、血友病、アルツハイマー病、又は悪性腫瘍の予防若しくは軽減用組成物。
（８）マンネンタケ抽出物を含有することを特徴とするＤＮＡメチル化酵素産生促進剤。
【発明の効果】
【００１４】
本発明のマンネンタケ抽出物は、安全で、且つトランスポゾン移動抑制効果及びＤＮＡメチル化酵素産生促進効果に優れていた。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明のトランスポゾンとは、ゲノム上を移動することができる遺伝子（塩基配列）である。トランスポゾンには、遺伝子が直接転移する「ＤＮＡ型」と、転写と逆転写の過程を経て転移する「ＲＮＡ型」があり、「トランスポゾン」という語は、狭義には前者のみを指し、後者は「レトロトランスポゾン」と呼ばれる。本発明のトランスポゾンは、「ＤＮＡ型」及び「ＲＮＡ型」の両者を含む。
【００１６】
本発明のＤＮＡメチル化酵素とは、ＤＮＡ配列中のＣｐＧ部位のシトシンにメチル基を付加するＤＮＭＴ１、ＤＮＭＴ３Ａ、ＤＮＭＴ３Ｂの３種類の酵素であり、好ましくはＤＮＭＴ３Ａである。尚、本発明におけるＤＮＡメチル化酵素産生促進は、ＬＩＮＥ１等のトランスポゾンの不活化、ゲノムインプリンティング、Ｘ染色体不活化等に関与しており、通常の遺伝子損傷とは無関係である。
【００１７】
本発明に用いられるマンネンタケは、生薬「霊芝」に用いられる担子菌であり、マンネンタケ科（Ｇａｎｏｄｅｒｍａｔａｃｅａｅ）、マンネンタケ属（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ）に属する。又、マンネンタケ属のキノコについては、中国の薬学古書である「本草綱目」や「神農本草経」に、赤霊芝（霊芝）、黒霊芝（黒芝）、紫霊芝（紫芝）、青霊芝（青芝）、黄霊芝（黄芝）及び白霊芝（白芝）が存在すると記載されている。赤霊芝の一種として、鹿角霊芝も挙げられる。赤霊芝、鹿角霊芝の学名は（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｌｕｃｉｄｕｍ）であり、黒霊芝の学名は（Ｇ．ａｔｒｕｍ、Ｇ．ｊａｐｏｎｉｃｕｍ、Ｇ．ｓｉｎｅｎｓｅ、Ｇ．ｄｕｒｏｐｏｒａ）である。一般的には赤霊芝、鹿角霊芝、黒霊芝等が多く流通している。これらは広く中国や日本市場等で流通しているものを用いることができるし、自生品や栽培品を用いても良い。又、菌糸体の培養物も用いることができる。これらはそのまま用いても良いし、乾燥や粉砕したものも用いることができる。好ましくは、赤霊芝が良い。
【００１８】
本発明に用いられる霊芝胞子とは、マンネンタケ科マンネンタケ属の霊芝の胞子であり、霊芝が成熟する頃に菌傘に現れる粉末のことである。本発明における霊芝胞子のうち、赤霊芝の胞子を赤霊芝胞子、黒霊芝の胞子を黒霊芝胞子と呼ぶ。
【００１９】
本発明に用いられるマンネンタケ抽出物とは、例えば、子実体や菌子体等の抽出物が挙げられ、単独又は両者を混合して用いても良い。その抽出方法は特に限定されず、例えば、溶媒を用いて加熱抽出したものであっても良いし、常温抽出したものであっても良い。又、温度範囲２０〜１５０℃、圧力範囲１〜８０ＭＰａの状態にある超臨界状態又はその近傍の状態にある二酸化炭素により、既知の抽出方法に従って実施することもできる。
【００２０】
抽出溶媒としては、例えば、水、低級アルコール類（メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等）、超臨界状態又はその近傍の状態にある二酸化炭素、液状多価アルコール（１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、アセトニトリル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、炭化水素類（ヘキサン、ヘプタン、流動パラフィン等）、エーテル類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエーテル等）が挙げられる。好ましくは、水、低級アルコール、液状多価アルコール等の極性溶媒及び超臨界状態又はその近傍の状態にある二酸化炭素が良く、特に好ましくは、超臨界状態又はその近傍の状態にある二酸化炭素である。これらの溶媒は、一種でも二種以上を混合して用いても良い。
【００２１】
超臨界状態又はその近傍の状態にある二酸化炭素による抽出は、温度２０〜１５０℃、圧力１〜８０ＭＰａ、好ましくは温度３０〜６０℃、圧力１０〜５０ＭＰａの範囲内で、目的に応じた温度及び圧力を採用することができる。又、抽出時間や二酸化炭素の供給量は、目的に応じて適宜選択できる。更に、共溶媒（エントレーナー）として有機溶媒を用いることもできる。共溶媒（エントレーナー）としては、エタノール、アセトン等が挙げられる。中でも、安全性の面からエタノールが好ましい。
【００２２】
又、超臨界状態又はその近傍の状態にある二酸化炭素による抽出は、例えば、上記抽出条件の二酸化炭素を連続的に吹き込むことにより、行うことができる。次いで、マンネンタケ抽出物を含有する二酸化炭素流体を分離槽に導き、常用されている方法、例えば、圧力を下げる方法、温度を変化させる方法等で分離する。この際、分離槽には抽出された溶質を吸着できる吸着剤や、溶解や分散させることができる媒体（溶剤、基剤）等を充填しておくこともでき、抽出条件に応じた適当な分離手段を採用できる。分離された二酸化炭素は、液化槽に輸送して再利用することができる。
【００２３】
本発明における、超臨界状態又はその近傍の状態にある二酸化炭素による抽出方法によれば、赤霊芝等に含有されるガノデリン酸等のトリテルペン類も効果的に抽出できる。特に、共溶媒（エントレーナー）を用いれば、この効果は顕著である。
【００２４】
上記抽出物は、抽出した溶液のまま用いても良く、必要に応じて、濃縮、希釈及び濾過処理、活性炭等による脱色、脱臭処理等をして用いても良い。更には、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥等の処理を行い、乾燥物として用いても良い。更には、カラム精製等を行って有効成分を濃縮や単離しても良い。
【００２５】
本発明のマンネンタケ抽出物を含有することを特徴とするトランスポゾン移動抑制剤は、食品、医薬部外品、医薬品、化粧品のいずれにも用いることができ、その剤形としては、例えば、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、乳濁剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤、軟膏、パップ剤等が挙げられる。上記抽出物をそのまま使用しても良く、本発明の効果を損なわない範囲で、賦形剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、香料、保存料、溶解補助剤、溶剤等を用いることができる。具体的には、乳糖、ショ糖、ソルビット、マンニット、澱粉、沈降性炭酸カルシウム、重質酸化マグネシウム、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、セルロース又はその誘導体、アミロペクチン、ポリビニルアルコール、ゼラチン、界面活性剤、水、生理食塩水、エタノール、グリセリン、プロピレングリコール、カカオ脂、ラウリン脂、ワセリン、パラフィン、高級アルコール等である。
【００２６】
本発明に用いられるマンネンタケ抽出物の配合量は、内用の場合、投与量は年齢、体重、症状、治療効果、投与方法、処理時間等により異なるが、通常、成人１人当たりの１日の量として５ｍｇ以上が好ましく、１０〜５００ｍｇがより好ましい。更に、２０〜２００ｍｇが最も好ましい。一方、外用の場合、固形物に換算して０．０００１重量％以上が好ましく、０．００１〜１０重量％がより好ましい。更に、０．０１〜５重量％が最も好ましい。０．０００１重量％未満では十分な効果は望みにくい。１０重量％を越えて配合した場合、効果の増強は認められにくく不経済である。
【００２７】
次に、本発明を詳細に説明するため、具体的な実施例を挙げて説明する。これらの実施例は効果を具体的に説明するもので、発明の範囲を限定するものではない。
【実施例１】
【００２８】
製造例１  赤霊芝の超臨界抽出物
内容積５Ｌの抽出槽に赤霊芝の粉砕物１ｋｇを仕込み、これに超臨界二酸化炭素（温度６０℃、圧力２５ＭＰａ、二酸化炭素供給量１５ｍ３）を約４．５時間供給し、抽出槽に接続した分離槽（温度４０℃、圧力４ＭＰａ）に導いて炭酸ガスと抽出物を分離し、赤霊芝の超臨界抽出物を１０．１ｇ得た。
【００２９】
製造例２  赤霊芝胞子の超臨界抽出物
内容積５Ｌの抽出槽に赤霊芝の胞子１ｋｇを仕込み、これに超臨界二酸化炭素（温度６０℃、圧力２５ＭＰａ、二酸化炭素供給量１５ｍ３）を約４．５時間供給し、抽出槽に接続した分離槽（温度４０℃、圧力４ＭＰａ）に導いて炭酸ガスと抽出物を分離し、赤霊芝胞子の超臨界抽出物を１５．９ｇ得た。
【００３０】
製造例３  赤霊芝の熱水抽出物
製造例１で使用したものと同じ赤霊芝の粉砕物２０ｇに蒸留水１Ｌを加え、１００℃にて１時間抽出した。得られた抽出液を濾過した後、その濾液を濃縮し、凍結乾燥して、赤霊芝の熱水抽出物を１．４ｇ得た。
【００３１】
製造例４  赤霊芝のエタノール抽出物
製造例１で使用したものと同じ赤霊芝の粉砕物５００ｇにエタノール５Ｌを加え、５時間還流抽出した。抽出終了後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、赤霊芝のエタノール抽出物を８．３ｇ得た。
【００３２】
製造例５  黒霊芝の超臨界抽出物
内容積５Ｌの抽出槽に黒霊芝の粉砕物１ｋｇを仕込み、これに超臨界二酸化炭素（温度６０℃、圧力２５ＭＰａ、二酸化炭素供給量１５ｍ３）を約４．５時間供給し、抽出槽に接続した分離槽（温度４０℃、圧力４ＭＰａ）に導いて炭酸ガスと抽出物を分離し、黒霊芝の超臨界抽出物を１２．５ｇ得た。
【００３３】
製造例６  黒霊芝胞子の超臨界抽出物
内容積５Ｌの抽出槽に黒霊芝の胞子１ｋｇを仕込み、これに超臨界二酸化炭素（温度６０℃、圧力２５ＭＰａ、二酸化炭素供給量１５ｍ３）を約４．５時間供給し、抽出槽に接続した分離槽（温度４０℃、圧力４ＭＰａ）に導いて炭酸ガスと抽出物を分離し、黒霊芝胞子の超臨界抽出物を１６．８ｇ得た。
【００３４】
製造例７  黒霊芝の熱水抽出物
製造例５で使用したものと同じ黒霊芝の粉砕物２０ｇに蒸留水１Ｌを加え、１００℃にて１時間抽出した。得られた抽出液を濾過した後、その濾液を濃縮し、凍結乾燥して、黒霊芝の熱水抽出物を０．９ｇ得た。
【００３５】
製造例８  黒霊芝のエタノール抽出物
製造例５で使用したものと同じ黒霊芝の粉砕物５００ｇにエタノール５Ｌを加え、５時間還流抽出した。抽出終了後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、黒霊芝のエタノール抽出物を８．５ｇ得た。
【実施例２】
【００３６】
本発明のマンネンタケ抽出物は、処方例として下記の製剤化を行うことができる。
【００３７】
処方例１  飲料１
処方                                                                配合量（ｇ）
１．赤霊芝の超臨界抽出物                                          ０．１
２．クエン酸                                                      ０．７
３．果糖ブドウ糖液糖                                            ６０．０
４．香料                                                          ０．１
５．精製水                                                      ３９．１
全量                                                          １００．０
［製造方法］成分５に成分１〜４を加え、攪拌溶解して濾過し、加熱殺菌後、５０ｍＬガラス瓶に充填する。当該飲料を１日１本摂取することで、赤霊芝の超臨界抽出物を５０ｍｇ／日摂取できる。
【００３８】
処方例２  飲料２
処方                                                                配合量（ｇ）
１．赤霊芝胞子の超臨界抽出物                                      ０．１
２．クエン酸                                                      ０．７
３．果糖ブドウ糖液糖                                            ６０．０
４．香料                                                          ０．１
５．精製水                                                      ３９．１
全量                                                          １００．０
［製造方法］成分５に成分１〜４を加え、攪拌溶解して濾過し、加熱殺菌後、５０ｍＬガラス瓶に充填する。当該飲料を１日１本摂取することで、赤霊芝胞子の超臨界抽出物を５０ｍｇ／日摂取できる。
【００３９】
処方例３  錠剤
処方                                                                配合量（ｇ）
１．赤霊芝の熱水抽出物                                            ５．０
２．トウモロコシデンプン                                        １０．０
３．精製白糖                                                    ２０．０
４．カルボキシメチルセルロースカルシウム                        １０．０
５．微結晶セルロース                                            ４０．０
６．ポリビニルピロリドン                                          ５．０
７．タルク                                                      １０．０
全量                                                          １００．０
［製造方法］成分１〜５を混合し、次いで成分６の水溶液を結合剤として加え、常法により顆粒化する。これに滑沢剤として成分７を加えた後、１錠１００ｍｇの錠剤に打錠する。当該錠剤を１日１２錠摂取することで、赤霊芝の熱水抽出物を６０ｍｇ／日摂取できる。
【００４０】
処方例４  カプセル剤
処方                                                                配合量（ｇ）
１．赤霊芝のエタノール抽出物                                      ５．０
２．微結晶セルロース                                            ６０．０
３．トウモロコシデンプン                                        １５．０
４．乳糖                                                        １８．０
５．ポリビニルピロリドン                                          ２．０
全量                                                          １００．０
［製造方法］成分１〜５を混合して顆粒化した後、２号硬カプセルに２５０ｍｇ充填してカプセル剤を得る。当該カプセル剤を１日６個摂取することで、赤霊芝のエタノール抽出物を７５ｍｇ／日摂取できる。
【００４１】
処方例５  散剤１
処方                                                                配合量（ｇ）
１．黒霊芝の超臨界抽出物                                          ５．０
２．微結晶セルロース                                            ４０．０
３．トウモロコシデンプン                                        ５５．０
全量                                                          １００．０
［製造方法］成分１〜３を混合し、常法により散剤を得る。当該散剤を１日１ｇ摂取することで、黒霊芝の超臨界抽出物を５０ｍｇ／日摂取できる。
【００４２】
処方例６  散剤２
処方                                                                配合量（ｇ）
１．黒霊芝胞子の超臨界抽出物                                      ５．０
２．微結晶セルロース                                            ４０．０
３．トウモロコシデンプン                                        ５５．０
全量                                                          １００．０
［製造方法］成分１〜３を混合し、常法により散剤を得る。当該散剤を１日１ｇ摂取することで、黒霊芝胞子の超臨界抽出物を５０ｍｇ／日摂取できる。
【００４３】
処方例７  錠菓
処方                                                                配合量（ｇ）
１．黒霊芝の熱水抽出物                                            １．０
２．乾燥コーンスターチ                                          ５０．０
３．エリスリトール                                              ４０．０
４．クエン酸                                                      ５．０
５．ショ糖脂肪酸エステル                                          ３．０
６．香料                                                          １．０
全量                                                          １００．０
[製造方法]成分１〜４に精製水を適量加えて練和し、押出し造粒した後、乾燥して顆粒を得る。顆粒に成分５及び６を加えて打錠し、１個１ｇの錠菓を得る。当該錠菓を１日６個摂取することで、黒霊芝の熱水抽出物を６０ｍｇ／日摂取できる。
【００４４】
処方例８  トローチ
処方                                                                配合量（ｇ）
１．黒霊芝のエタノール抽出物                                      １．０
２．マルチトール                                                ５０．０
３．キシリトール                                                ４５．０
４．ショ糖脂肪酸エステル                                          ３．０
５．香料                                                          １．０
全量                                                          １００．０
[製造方法]成分１〜３を混合し、流動層造粒装置で造粒する。得られた顆粒に成分４及び５を加えて打錠し、１個１ｇのトローチを得る。当該トローチを１日６個摂取することで、黒霊芝のエタノール抽出物を６０ｍｇ／日摂取できる。
【００４５】
処方例９  軟膏
処方                                                                配合量（ｇ）
１．赤霊芝の超臨界抽出物                                          １．０
２．ポリオキシエチレンセチルエーテル（３０Ｅ．Ｏ．）              ２．０
３．モノステアリン酸グリセリン                                  １０．０
４．流動パラフィン                                                ５．０
５．セタノール                                                    ６．０
６．パラオキシ安息香酸メチル                                      ０．１
７．プロピレングリコール                                        １０．０
８．精製水                                                      ６５．９
全量                                                          １００．０
［製造方法］成分２〜５を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び６〜８を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。
【００４６】
次に、本発明の効果を詳細に説明するため、実験例を挙げる。
【００４７】
実験例１  ヒト皮膚線維芽細胞におけるＤＮＭＴ３Ａ産生に及ぼす赤霊芝の熱水抽出物、赤霊芝の超臨界抽出物及び赤霊芝胞子の超臨界抽出物の影響
コンフルエントになったヒト皮膚線維芽細胞（ＮＢ１ＲＧＢ）に赤霊芝の熱水抽出物、赤霊芝の超臨界抽出物及び赤霊芝胞子の超臨界抽出物を加え、ＦＢＳを含まないＤＭＥＭ培地にて２４時間培養した後、ＲＮＡｉｓｏ  ｐｌｕｓ（ＴＡＫＡＲＡ）を用いて総ＲＮＡの抽出を行った。尚、終濃度は０．１及び１．０μｇ／ｍＬにて行った。総ＲＮＡを基に、ＳＹＢＲ  Ｓｅｌｅｃｔ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ（ライフテクノロジーズ）を用いたリアルタイムＲＴ−ＰＣＲ法により、ＤＮＭＴ３ＡｍＲＮＡ発現量の測定を行った。同時に、内部標準として、１８ＳｒＲＮＡ発現量の測定を行った。尚、各遺伝子の発現量の測定に使用したプライマーは次の通りである。
【００４８】
ＤＮＭＴ３Ａ用のプライマーセット
ＧＧＣＡＧＧＡＴＡＧＣＣＡＡＧＴＴＣＡＧ（配列番号１）
ＴＴＧＣＣＣＴＧＣＴＴＴＡＴＧＧＡＧＴＴ（配列番号２）
１８ＳｒＲＮＡ用のプライマーセット
ＣＣＧＡＧＣＣＧＣＣＴＧＧＡＴＡＣ（配列番号３）
ＣＡＧＴＴＣＣＧＡＡＡＡＣＣＡＡＣＡＡＡＡＴＡＧＡ（配列番号４）
【００４９】
その結果を表１に示す。表の通り、赤霊芝の熱水抽出物、赤霊芝の超臨界抽出物及び赤霊芝胞子の超臨界抽出物はヒト皮膚線維芽細胞におけるＤＮＭＴ３ＡｍＲＮＡ発現量を増加させたが、その効果は赤霊芝の超臨界抽出物及び赤霊芝胞子の超臨界抽出物において極めて高かった。
【００５０】
【表１】
2015110546.tif 000002
【００５１】
実験例２  ヒト皮膚線維芽細胞におけるＬＩＮＥ１産生に及ぼす赤霊芝の熱水抽出物、赤霊芝の超臨界抽出物及び赤霊芝胞子の超臨界抽出物の影響
コンフルエントになったヒト皮膚線維芽細胞（ＮＢ１ＲＧＢ）に赤霊芝の熱水抽出物、赤霊芝の超臨界抽出物及び赤霊芝胞子の超臨界抽出物を加え、ＦＢＳを含まないＤＭＥＭ培地にて２４時間培養した後、ＲＮＡｉｓｏ  ｐｌｕｓ（ＴＡＫＡＲＡ）を用いて総ＲＮＡの抽出を行った。尚、終濃度は１及び１０μｇ／ｍＬにて行った。総ＲＮＡを基に、ＳＹＢＲ  Ｓｅｌｅｃｔ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ（ライフテクノロジーズ）を用いたリアルタイムＲＴ−ＰＣＲ法により、トランスポゾンの一種であるＬＩＮＥ１のｍＲＮＡ発現量の測定を行った。同時に、内部標準として、ＧＡＰＤＨｍＲＮＡ発現量の測定を行った。尚、各遺伝子の発現量の測定に使用したプライマーは次の通りである。
【００５２】
ＬＩＮＥ１用のプライマーセット
ＣＣＡＴＣＡＧＡＣＴＡＡＣＡＧＣＧＧＡ（配列番号５）
ＧＣＣＣＣＣＡＣＴＣＴＣＴＴＣＴＧ（配列番号６）
ＧＡＰＤＨ用のプライマーセット
ＴＧＡＡＣＧＧＧＡＡＧＣＴＣＡＣＴＧＧ（配列番号７）
ＴＣＣＡＣＣＡＣＣＣＴＧＴＴＧＣＴＧＴＡ（配列番号８）
【００５３】
その結果を表２に示す。表の通り、赤霊芝の熱水抽出物、赤霊芝の超臨界抽出物及び赤霊芝胞子の超臨界抽出物はヒト皮膚線維芽細胞におけるＬＩＮＥ１ｍＲＮＡ発現量を減少させたが、その効果は赤霊芝の超臨界抽出物及び赤霊芝胞子の超臨界抽出物において極めて高かった。
【００５４】
【表２】
2015110546.tif 000003
【産業上の利用可能性】
【００５５】
マンネンタケ抽出物を用いることにより、トランスポゾン特有のＤＮＡメチル化酵素の産生を促進し、トランスポゾンの移動を制御することができる。本発明により、トランスポゾンの移動が要因となる筋ジストロフィー、血友病、アルツハイマー病、悪性腫瘍等の疾病を予防若しくは軽減する食品、医薬部外品、医薬品、化粧品を提供することができる。
【配列表】
2015110546000001.app