(57)【要約】      （修正有）【課題】マトリックス支援レーザ脱離イオン化質量分析用マトリックスを提供する。【解決手段】一般式（１）2015169446.tif 000010で表される、５−ベンジリデンチアゾリジン−４−オン誘導体。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）
【化１】
2015169446.tif 000008
で表される、５−ベンジリデンチアゾリジン−４−オン誘導体。
ここで、Ｒ１は酸素原子を表し、Ｒ２〜Ｒ６は水素原子及びハロゲン元素のいずれかを表す。
【請求項２】
マトリックス支援レーザ脱離イオン化質量分析に供する試料をイオン化するためのマトリックスであって、次の一般式（１）
【化１】
2015169446.tif 000009
で表される、マトリックス支援レーザ脱離イオン化質量分析用マトリックス。
ここで、Ｒ１は酸素原子を表し、Ｒ２〜Ｒ６は水素原子及びハロゲン元素のいずれかを表す。
【請求項３】
Ｒ１が酸素原子、Ｒ２及びＲ６がフッ素原子、Ｒ３が塩素原子、Ｒ４及びＲ５が水素原子である請求項２に記載のマトリックス支援レーザ脱離イオン化質量分析用マトリックス。
【請求項４】
Ｒ１が酸素原子、Ｒ３及びＲ５が臭素原子、Ｒ２、Ｒ４及びＲ６が水素原子である請求項２に記載のマトリックス支援レーザ脱離イオン化質量分析用マトリックス。
【請求項５】
Ｒ１が酸素原子、Ｒ３がフッ素原子、Ｒ４が塩素原子、Ｒ２、Ｒ５及びＲ６が水素原子である請求項２に記載のマトリックス支援レーザ脱離イオン化質量分析用マトリックス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、マトリックス支援レーザ脱離イオン化質量分析において試料のイオン化に用いられるマトリックスに関する。
【背景技術】
【０００２】
質量分析におけるイオン化法の１つとしてマトリックス支援レーザ脱離イオン化（ＭＡＬＤＩ＝Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization）法が知られている。ＭＡＬＤＩ法は、レーザ光を試料に短時間照射して瞬間的に試料を気化させることにより、試料中の測定対象物質の分子を分解することなくイオン化するものである。
【０００３】
ＭＡＬＤＩ法では一般に測定対象物質の溶液をマトリックス溶液と混合し、さらに必要であれば別のイオン化助剤を混合した上で、試料プレート上に塗布し、溶媒を除去することにより試料を調製する。こうして調製された試料は、測定対象物質が多量のマトリックスとほぼ均一に混合された状態にある。この試料にレーザ光を照射すると、マトリックスがレーザ光のエネルギーを吸収して熱エネルギーに変換する。このときにマトリックスの一部が急速に加熱され、測定対象物質とともに気化する。その過程で測定対象物質がイオン化される。
【０００４】
こうしたＭＡＬＤＩ法をイオン化に利用した質量分析装置、特に、マトリックス支援レーザ脱離イオン化飛行時間型質量分析装置（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ＝Time of Flight Mass Spectrometer）は、タンパク質などの高分子化合物をあまり開裂させることなく分析することが可能であり、しかも微量分析にも好適であることから、近年、生命科学や工業材料の分野などで広範に利用されている（非特許文献１）。
【０００５】
従来、ＭＡＬＤＩ法においてマトリックスとして用いられている化合物は、例えば、２，５−ジヒドロキシ安息香酸（ＤＨＢ）、α−シアノ−４−ヒドロキシ桂皮酸（ＣＨＣＡ）、ジスラノール、２−（４−ヒドロキシルフェニルアゾ）安息香酸（ＨＡＢＡ）などの、いわゆる低分子有機化合物が一般的である。また、ＭＡＬＤＩ法におけるイオン化効率やイオン化の安定性などを改善するために、従来より、マトリックスとして用いられる化合物の改良が試みられている（例えば特許文献１〜３、５参照）。
【０００６】
これまでＭＡＬＤＩ法は、特に高分子化合物のイオン化に利用されてきたが、ＭＡＬＤＩ法が非常に簡便で且つ高感度なイオン化法であることから、近年、低分子化合物への適用の要望が非常に高まっている。上記のような従来のマトリックスを用いてＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ分析を行った場合、マススペクトルにはマトリックス由来の夾雑物イオンピークが低質量領域（低 m/z領域）に顕著に観測される。測定対象物質が高分子化合物である場合には、そうした低質量領域の妨害ピークの存在は問題にならない。しかしながら、測定対象物質が低分子化合物である場合には、マススペクトル上で、目的とする低分子化合物由来の各種分子イオンピークと上記妨害ピークとが混在したり、場合によっては重なったりしてしまい、目的ピークを正確に把握することができなくなる。このような理由により、従来のマトリックスを用いたＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳで低分子化合物を適切に分析することは困難であった。
【０００７】
一方、有機化合物であるマトリックスを用いずにＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳにより低分子化合物を分析する技術として、従来、いくつかの提案がなされている。例えば非特許文献２には、多孔質シリコン（ポーラスシリコン）を基板としたＤＩＯＳ（Desorption/Ionization on Silicon）と呼ばれるレーザ脱離イオン化法が提案されている。また、非特許文献３には、「ナノ・フラワー」と名付けられた白金ナノ粒子を無機マトリックスとして用いたレーザ脱離イオン化法が提案されている。また、特許文献４には、分子線エピタキシー法を用いてシリコン単結晶上にＧｅナノドットを形成したプレートを使用したレーザ脱離イオン化法が提案されている。さらにまた、マススペクトル上で低質量領域にマトリックス由来のピークを生じさせないために、従来よりも分子量がかなり大きな、いわゆる高分子マトリックスを使用したレーザ脱離イオン化法の例も報告されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２０１０−２０４０５０号公報
【特許文献２】特開２００４−３４７５９５号公報
【特許文献３】特開２００８−２６１８２４号公報
【特許文献４】特開２００６−２０１０４２号公報
【特許文献５】特開２０１３−２３４９７４号公報
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Shrivas K, ほか４名、「イオニック・マトリックス・フォー・エンハンスド・マルディ・イメージング・マス・スペクトロメトリー・フォー・アイデンティフィケーション・オブ・フォスフォリピッズ・イン・マウス・リバー・アンド・セレベラム・ティッシュ・セクションズ（Ionic matrix for enhanced MALDI imaging mass spectrometry for identification of phospholipids in mouse liver and cerebellum tissue sections）」、アナリティカル・ケミストリー（Anal Chem.）、2010年、第82(21)巻、pp.8800-8806
【非特許文献２】ウェイ（J.Wei）ほか２名、「デソープション-アイオナイゼイション・マス・スペクトロメトリー・オン・ポーラス・シリコン（Desorption-ionization mass spectrometry on porous silicon）」、ネイチャー（Nature）、1999年5月20日、第339巻、pp.243-246
【非特許文献３】カワサキ（H.Kawasaki）ほか３名、「プラチニウム・ナノフラワーズ・フォー・サーフェス-アシステッド・レーザ・デソープション/アイオナイゼイション・マス・スペクトロメトリー・バイオモレキュールズ（Platinum Nanoflowers for Surface-Assisted Laser Desorption/Ionization Mass Spectrometry of Biomolecules）」、ザ・ジャーナル・オブ・フィジカル・ケミストリー・C（The Journal of physical chemistry C）、2007年、第11巻、pp.16278-16283
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
しかしながら、上述したマトリックスを使用しない方法や無機マトリックスを使用する方法は、従来の有機化合物のマトリックスを用いたＭＡＬＤＩ法に比べて分析コストがかなり高くなる。一方、高分子有機マトリックスを使用する方法では、マトリックスの粘性が高いために扱いにくく、試料の調製が難しいという問題がある。
【００１１】
本発明はこうした点に鑑みてなされたものであり、その目的とするところは、分子量500以下の低分子化合物をＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ分析の測定対象物質としても、該測定対象物質の分子イオンピークがマトリックス由来の分子イオンピークによって妨害されることのない、低分子有機化合物である、マトリックス支援レーザ脱離イオン化質量分析用マトリックスを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
現在、マトリックスとして使用されている２，５−ジヒドロキシ安息香酸（ＤＨＢ）やα−シアノ−４−ヒドロキシ桂皮酸（ＣＨＣＡ）などの化合物は、ベンゼン環を基本として水酸基やカルボン酸などを含んだものである。特にカルボン酸は、測定対象物質の分子のイオン化時における該分子へのプロトン付加に寄与しているとされ、該分子のイオン化に重要な役割を担っていると考えられている。そこで本願発明者は、カルボン酸と同様の性質を有する官能基を有する低分子有機化合物を探索した。具体的には、カルボン酸は酸性基であるから、酸性を示し、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ分析に適するように沸点が高いこと、並びに、できるだけ分子量が小さいこと等を官能基の探索条件とした。
【００１３】
本願発明者は、上記条件に適合する化合物として、カルボン酸とほぼ同じpKaを有する５−ベンジリデンチアゾリジン−４−オン環に着目し、種々の低分子５−ベンジリデンチアゾリジン−４−オン誘導体をデザイン及び合成し、実分析による実験を行った。その結果、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ分析の正イオン測定モードにおいてマトリックス由来のプロトン付加イオンが測定対象物質の分子イオン検出を妨げることなく、ＣＨＣＡと同程度の感度またはＣＨＣＡよりも高感度で低分子化合物を測定することができる、マトリックス支援レーザ脱離イオン化質量分析用マトリックスとして好都合な新規５−ベンジリデンチアゾリジン−４−オン誘導体を創製するに至った。
【００１４】
即ち、上記課題を解決するためになされた本発明に係る物質は、
一般式（１）
【化１】
2015169446.tif 000002
で表される５−ベンジリデンチアゾリジン−４−オン誘導体であることを特徴とする。
【００１５】
また、本発明に係るマトリックス支援レーザ脱離イオン化質量分析用マトリックスは、
一般式（１）
【化１】
2015169446.tif 000003
で表される５−ベンジリデンチアゾリジン−４−オン誘導体から成ることを特徴とする。
【００１６】
上記の一般式において、Ｒ１は酸素原子を表し、Ｒ２〜Ｒ６は水素原子及びハロゲン元素のいずれかを表す。特に、Ｒ１が酸素原子、Ｒ２及びＲ６がフッ素原子、Ｒ３が塩素原子、Ｒ４及びＲ５が水素原子である構造、Ｒ１が酸素原子、Ｒ３及びＲ５が臭素原子、Ｒ２、Ｒ４及びＲ６が水素原子である構造、Ｒ１が酸素原子、Ｒ３がフッ素原子、Ｒ４が塩素原子、Ｒ２、Ｒ５及びＲ６が水素原子である構造は、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ分析の正イオン測定モードにおいてマトリックスの分子イオンが検出されないか、検出されても比較的低強度であり、ＭＡＬＤＩ質量分析用マトリックスとして有用である。
【発明の効果】
【００１７】
本発明に係る５−ベンジリデンチアゾリジン−４−オン誘導体をマトリックスとして使用した場合、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ分析の正イオン測定モードにおいて、マトリックスの分子イオンは、全く検出されないか又は検出されても無視できる程度である。このため、低分子化合物を測定対象試料とする場合でも、この試料由来の分子イオンピークを正確に把握することが可能となる。従って、それまで困難であった低分子化合物のＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ分析を容易に行うことができる。
【００１８】
また、本発明に係る５−ベンジリデンチアゾリジン−４−オン誘導体は比較的短いステップで合成できるため、安価に製造することができる。従って、従来の無機マトリックス又は高分子有機マトリックスを使用する方法に比べて分析コストを抑えることができる。さらに、本発明に係る５−ベンジリデンチアゾリジン−４−オン誘導体は分子量が500以下と低いため、従来の高分子有機マトリックスに比べて粘性が低く、取扱いが容易である。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】本発明の実施例１である５−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジリデン）チアゾリジン−２，４−ジオンのＮＭＲ分析結果（ａ）、（ｂ）。
【図２】５−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオンをマトリックスとし、ドーパミンを測定対象物質として正イオン測定モードでＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ分析を行って得られたマススペクトル（ａ）、５−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオンの負イオン測定モードのマススペクトル（ｂ）。
【図３】本発明の実施例２である５−（３，５−ジブロモベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオンのＮＭＲ分析結果（ａ）、（ｂ）。
【図４】５−（３，５−ジブロモベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオンをマトリックスとし、ドーパミンを測定対象物質として正イオン測定モードでＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ分析を行って得られたマススペクトル（ａ）、５−（３，５−ジブロモベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオンの負イオン測定モードのマススペクトル（ｂ）。
【図５】本発明の実施例３である、５−（４−クロロ−３−フルオロベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオンのＮＭＲ分析結果（ａ）、（ｂ）。
【図６】５−（４−クロロ−３−フルオロベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオンをマトリックスとし、ドーパミンを測定対象物質として負イオン測定モードでＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ分析を行って得られたマススペクトル（ａ）、５−（４−クロロ−３−フルオロベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオンの負イオン測定モードのマススペクトル（ｂ）。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本発明は以下の一般式（１）で表される５−ベンジリデンチアゾリジン−４−オン誘導体である。
【化１】
2015169446.tif 000004
一般式（１）において、Ｒ１は酸素原子であり、Ｒ２〜Ｒ６は水素原子及びハロゲン元素のいずれかである。
Ｒ１が酸素原子、Ｒ２及びＲ６がフッ素原子、Ｒ３が塩素原子、Ｒ４及びＲ５が水素原子である５−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジリデン）チアゾリジン−２，４−ジオンの実施例１、Ｒ１が酸素原子、Ｒ３及びＲ５が臭素原子、Ｒ２、Ｒ４及びＲ６が水素原子である５−（３，５−ジブロモベンジリデン）チアゾリジン−２，４−ジオンの実施例２、Ｒ１が酸素原子、Ｒ３がフッ素原子、Ｒ４が塩素原子、Ｒ２、Ｒ５及びＲ６が水素原子である５−（４−クロロ−３−フルオロベンジリデン）チアゾリジン−２，４−ジオンの実施例３について順に説明する。
【実施例１】
【００２１】
（１）５−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジリデン）チアゾリジン−２，４−ジオンの製造方法
チアゾリジン−２，４−ジオン（Thiazolidine-2,4-dione）0.663gと ３−クロロ−２，６−ジフルオロベンズアルデヒド（3-chloro-2,6-difluorobenzaldehyde）1.0g及びトリエチルアミン 4mlをエタノール 5mlに加え、18時間加熱還流したのち、室温で2時間放置した。この溶液に濃塩酸を加えてpH2とした後、水 20mlを加えると赤色の沈殿物が析出した。この赤色沈殿物を濾取し、熱エタノール 20mlに溶解したのち、室温で 1時間放置した。これにより析出した結晶を濾過した後、減圧下で乾燥し生成物 0.922gを得た。この生成物の融点を測定したところ、146℃であった。
【００２２】
（２）生成物の同定
得られた生成物の化学構造を13C-NMR分析、及び1H-NMR分析にて同定した。13C-NMR分析及び1H-NMR分析の結果を図１の（ａ）及び（ｂ）に示す。なお、NMR分析試料調製用の溶媒として重水素化ジメチルスルホキシド（DMSO-d6）を使用した。これらの分析結果により、得られた生成物は、以下の式（２）で示される５−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジリデン）チアゾリジン−２，４−ジオン（分子式：Ｃ１０Ｈ４ＣｌＦ２ＮＯ２Ｓ、分子量：275）であると同定された。
【化２】
2015169446.tif 000005
【００２３】
（３）５−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジリデン）チアゾリジン−２，４−ジオンのＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ分析結果
得られた生成物である５−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジリデン）チアゾリジン-２，４−ジオンをマトリックスとして用い、ドーパミン（分子量：153.18）を測定対象試料として調製した測定試料をＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳで測定した。なお、測定試料は以下の方法により調製した。
５−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオン20nM/μLジメチルホルムアミド溶液と、ドーパミン塩酸塩  2nM/?L50％アセトニトリル水溶液 を調製し、それぞれを0.5μLずつステンレス製ターゲットプレート（株式会社島津製作所製）上に載せて風乾し、測定試料とした。この測定試料をＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ（株式会社島津製作所製AXIMA CFRplus）で測定した。
【００２４】
正イオンモードで得られたマススペクトルの一例を図２（ａ）に示す。
図２（ａ）から明らかなように、測定対象試料であるドーパミンのプロトン付加分子イオン[M+H]+ のピークが m/z 154の位置に出現している。また、m/z 210-340領域に５−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジリデン）チアゾリジン−２，４−ジオン由来と考えられるピークが多数観察されたが、これらはいずれもドーパミン由来のイオンとは明確に区別された。このことから、マトリックスとしての５−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジリデン）チアゾリジン−２，４−ジオン由来のイオンは測定対象物質由来のイオンの検出を妨げないことが分かる。
【００２５】
一方、５−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオンをＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳで測定した場合の負イオンモードで得られたマススペクトルを図２（ｂ）に示す。図２（ｂ）から分かるように、負イオンモードのマススペクトルには、５−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオンのプロトン脱離イオン［M-H]-のピークがm/z 274の位置に観察される。これは、レーザ脱離イオン化により、本実施例の生成物から１個のプロトンが容易に脱離すること、言い換えると、正イオン化の際に、５−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオン由来のプロトンが測定対象試料に付加してプロトン付加イオンが容易に生成されることを示している。これにより、５−（３−クロロ−２，６−ジフルオロベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオンが低分子化合物の正イオン測定に有用なマトリックスであることが分かる。
【実施例２】
【００２６】
（１）５−（３，５−ジブロモベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオンの製造方法
チアゾリジン−２，４−ジオン 0.843g と３，５−ジブロモベンズアルデヒド（3,5-dibromobenzaldehyde）1.0g 及びトリエチルアミン 4mlをエタノール 5mlに加え、16時間加熱還流したのち、室温で2時間放置した。この溶液に濃塩酸を加えてpH2とした後、水 400mlを加えると赤褐色の沈殿物が析出した。この沈殿物を濾別し、粉末沈殿物を得た。得られた粉末状沈殿物は、エタノール 10mlで熱時溶解した後、酢酸エチルを加え加熱し、その後、ヘキサン 10mlを加えて室温で１時間放置した。これにより析出した結晶は濾過した後、減圧下で乾燥し、生成物0.786gを得た。この生成物の融点を測定したところ、222℃であった。
【００２７】
（２）生成物の同定
得られた生成物の化学構造を13C-NMR分析、及び1H-NMR分析にて同定した。13C-NMR分析、及び1H-NMR分析の結果を図３の（ａ）及び（ｂ）に示す。なお、ＮＭＲ分析試料調製用の溶媒として重水素化ジメチルスルホキシド（DMSO-d6）を使用した。これらの分析の結果により、得られた生成物は、式（３）で示される５−（３，５−ジブロモベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオン（分子式：Ｃ１０Ｈ５Ｂｒ２ＮＯ２Ｓ、分子量：363）であると同定された。
【化３】
2015169446.tif 000006
【００２８】
（３）５−（３，５−ジブロモベンジリデン）チアゾリジン−２，４−ジオンのＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ分析結果
得られた生成物である５−（３，５−ジブロモベンジリデン）チアゾリジン−２，４−ジオンをマトリックスとして用い、ドーパミン（分子量：153.18）を測定対象試料として調製した測定試料をＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳで測定した。なお、測定試料の調整は実施例１と同様に行った。
【００２９】
正イオンモードで得られたマススペクトルの一例を図４（ａ）に示す。
図４（ａ）から明らかなように、測定対象試料であるドーパミンのプロトン付加分子イオン[M+H]+のピークが m/z 154の位置に出現している。また、m/z 240-340領域に５−（３，５−ジブロモベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオン由来と考えられるピークが多数観察されたが、これらはいずれもドーパミン由来のイオンとは明確に区別された。このことから、本実施例のマトリックスである５−（３，５−ジブロモベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオン由来のイオンは測定対象物質由来のイオンの検出を妨げないことが分かる。
【００３０】
一方、５−（３，５−ジブロモベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオンをＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳで測定した場合の負イオンモードで得られたマススペクトルを図４（ｂ）に示す。図４（ｂ）から分かるように、５−（３，５−ジブロモベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオンのプロトン脱離イオン［M-H]-のピークがm/z 360の位置に観察される。これは、レーザ脱離化により、本実施例の生成物から１個のプロトンが容易に脱離すること、言い換えると、正イオン化の際に、５−（３，５−ジブロモベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオン由来のプロトンが測定対象試料に付加してプロトン付加イオンが容易に生成されることを示している。これにより、５−（３，５−ジブロモベンジリデン）チアゾリジン−２，４−ジオンが低分子化合物の正イオン測定に有用なマトリックスであることが分かる。
【実施例３】
【００３１】
（１）５−（４−クロロ−３−フルオロベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオンの製造方法
チアゾリジン−２，４−ジオン 0.738gと４−クロロ−３−フルオロベンズアルデヒド（4-chloro-3-fluorobenzaldehyde）1.0g及びトリエチルアミン4mlをエタノール5mlに加え、18時間加熱還流したのち、室温で2時間放置した。この溶液に濃塩酸を加えてpH2とした後、水40mlを加えると、赤色沈殿物が析出した。この沈殿物を濾別し、熱エタノール20mlに溶解したのち、室温で１時間放置した。これにより析出した結晶は濾過した後、減圧下で乾燥して生成物1.215gを得た。この生成物の融点を測定したところ、115℃であった。
【００３２】
（２）同定
得られた生成物の化学構造を13C-NMR分析、及び1H-NMR分析にて同定した。13C-NMR分析、及び1H-NMR分析の結果を図５の（ａ）及び（ｂ）に示す。なお、NMR分析試料調製用の溶媒として重水素化ジメチルスルホキシド（DMSO-d6）を使用した。この分析結果により、得られた生成物は、式（４）
【化４】
2015169446.tif 000007
で示される５−（４−クロロ−３−フルオロベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオン（分子式：Ｃ１０Ｈ５ＣｌＦＮＯ２Ｓ、分子量：257）であると同定された。
【００３３】
（３）５−（４−クロロ−３−フルオロベンジリデン）チアゾリジン−２，４−ジオンのＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ分析結果
得られた生成物である５−（４−クロロ−３−フルオロベンジリデン）チアゾリジン−２，４−ジオンをマトリックスとして用い、ドーパミン（分子量：153.18）を測定対象試料として調製した測定試料をＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳで測定した。なお、測定試料の調製は実施例１と同様に行った。
【００３４】
正イオンモードで得られたマススペクトルの一例を図６（ａ）に示す。
図６（ａ）から明らかなように、測定対象試料であるドーパミンのプロトン付加分子イオン[M+H]+ のピークが m/z 154の位置に出現している。また、m/z 230-340領域に５−（４−クロロ−３−フルオロベンジリデン）チアゾリジン−２，４−ジオン由来と考えられるイオンのピークが多数観察されたが、これらはいずれもドーパミン由来のイオンとは明確に区別された。このことから、本実施例のマトリックスである５−（４−クロロ−３−フルオロベンジリデン）チアゾリジン−２，４−ジオンのイオンが測定対象物質由来のイオンの検出を妨げないことが分かる。
【００３５】
一方、５−（４−クロロ−３−フルオロベンジリデン）チアゾリジン−２，４−ジオンをＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳで測定した場合の負イオンモードで得られたマススペクトルを図６（ｂ）に示す。図６（ｂ）から分かるように、負イオンモードのマススペクトルには、５−（４−クロロ−３−フルオロベンジリデン）チアゾリジン−２，４−ジオンのプロトン脱離イオン［M-H]-のピークがm/z 256の位置に観察される。これは、レーザ脱離化により、本実施例の生成物から１個のプロトンが容易に脱離すること、言い換えると、正イオン化の際に、５−（４−クロロ−３−フルオロベンジリデン）チアゾリジン−２，４−ジオン由来のプロトンが測定対象試料に付加してプロトン付加イオンが容易に生成されることを示している。これにより、５−（４−クロロ−３−フルオロベンジリデン)チアゾリジン−２，４−ジオンが低分子化合物の正イオン測定に有用なマトリックスであることが分かる。
【００３６】
なお、上記した実施例１〜３に係る３つの化合物のマススペクトルと既存のマトリックスＣＨＣＡのマススペクトル（図示せず）の比較から、実施例１〜３の化合物の検出感度はＣＨＣＡの検出感度と同等であった。また、実施例１〜３の化合物のスペクトルバックグラウンドの夾雑ピークはＣＨＣＡと比較して明らかに抑制されていた。
【００３７】
また、上記実施例は本発明のいくつかの例に過ぎず、本発明の趣旨の範囲内で適宜変更、修正、追加を行っても当然に本願特許請求の範囲に包含される。
【図１】
2015169446.tif 000011
【図２】
2015169446.tif 000012
【図３】
2015169446.tif 000013
【図４】
2015169446.tif 000014
【図５】
2015169446.tif 000015
【図６】
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