(57)【要約】【課題】創傷及び褥瘡の症状を改善する創傷治療剤、及び前記創傷治療剤を含む医薬組成物又は栄養組成物を提供する。【解決手段】有効成分として含むビフィズス菌と、並びに、グルタミン、食物繊維、及びオリゴ糖を含む組成物とを含有する創傷治療剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効成分として含むビフィズス菌と、並びに、グルタミン、食物繊維、及びオリゴ糖を含む組成物とを含有する創傷治療剤。
【請求項２】
創傷後に８日間以上投与されるものである請求項１に記載の創傷治療剤。
【請求項３】
少なくとも創傷前から投与されるものである請求項１又は２に記載の創傷治療剤。
【請求項４】
創傷前から投与される期間が４週間以上である請求項３に記載の創傷治療剤。
【請求項５】
褥瘡の予防用、改善用又は治療用である請求項１〜４のいずれか一項に記載の創傷治療剤。
【請求項６】
前記組成物に含まれるグルタミン、食物繊維及びオリゴ糖の合計質量１ｇに対して、前記創傷治療剤に含まれるビフィズス菌の菌数が、８．０×１０８〜３．５×１０１０ＣＦＵである請求項１〜５のいずれか一項に記載の創傷治療剤。
【請求項７】
前記ビフィズス菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)、ビフィドバクテリウム・ビフィダム(Bifidobacterium bifidum)、ビフィドバクテリウム・インファンティス(Bifidobacterium infantis)、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス(Bifidobacterium adolescentis)、ビフィドバクテリウム・カテヌラツム(Bifidobacterium catenulatum)、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム(Bifidobacterium pseudolongum)、及びビフィドバクテリウム・サーモフィルム(Bifidobacterium thermophilum)からなる群から選択される少なくとも１種又は２種以上である請求項１〜６のいずれか一項に記載の創傷治療剤。
【請求項８】
前記食物繊維が、水溶性食物繊維である請求項１〜７のいずれか一項に記載の創傷治療剤。
【請求項９】
前記水溶性食物繊維が、ポリデキストロースである請求項８に記載の創傷治療剤。
【請求項１０】
前記オリゴ糖が、ラクチュロース及び／又はラクトスクロースである請求項１〜９のいずれか一項に記載の創傷治療剤。 
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の創傷治療剤を含む医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の創傷治療剤を含む栄養組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、有効成分として含むビフィズス菌と、並びに、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖を含む組成物とを含有する創傷治療剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
日常生活において、切創、刺創等のように創傷を受けることがある。創傷が軽度の場合には自然治癒力にまかして治ることがある。しかし、創傷の軽度・重度に拘わらず、創傷部分の治癒がより速く進むことが望ましい。
特に、高齢者は、日常の些細な動作でも創傷を受けたり、様々な疾患によって寝たきり状態となった場合には褥瘡（床ずれ）を受けやすい。さらに、高齢者は、若者に比べ、創傷の自然治癒の速さが遅くなりやすい。また、経口摂取であれば、注射等のように専門的な知識や方法を知らなくともよく、利便性が高い。したがって、高齢者にとって、専門的な知識を必要とせずに経口摂取により、栄養摂取と共に簡便に創傷治療ができる創傷治療剤が望まれている。
【０００３】
特許文献１には、少なくともグルタミン又はアルギニンを含有するゲル化炭化水素からなる軟膏剤である創傷治癒剤が開示されており、グルタミン又はアルギニンと、ゲル化炭化水素とを併用して塗布することにより高い創傷治療効果が得られることが開示されている。
特許文献２には、食物繊維を有効成分とする褥瘡抑制組成物が開示されている。
特許文献３には、有効成分として少なくとも、竹エキスと、マリンコラーゲンと、イソマルトオリゴ糖と、糖セラミドとを含んだ褥瘡治療用経口剤が開示されている。
【０００４】
特許文献４には、グルタミンとオリゴ糖及び食物繊維を特定の割合で配合した組成物が開示されており、当該組成物はグルタミン単独投与又はオリゴ糖と食物繊維を含有する組成物を単独で投与した場合に比べて、難治性日和見感染を呈した患者の免疫能の回復効果が有意に優れていることが開示されている。
【０００５】
また、医療現場において、消化管手術の術前・術後において、絶食をして経静脈栄養法を施行する治療が行われる場合があるが、長期絶食に伴う高カロリー輸液が、腸管由来の免疫能低下や腸内細菌叢の異常による腸炎等の種々の合併症を併発することが知られている。このような術後の合併症を予防する目的で、消化管手術の術前・術後に、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖からなる組成物を、経静脈栄養法にて投与することが実施されている。
また、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖からなる組成物は、経口投与による、腸管粘膜の萎縮防止、下痢・便秘などの消化器症状の改善等の効果が期待されている。
このように、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖からなる組成物は、消化器外科、救急・集中治療、緩和医療等の分野で注目されている。
【０００６】
【特許文献１】特開平１０−１７５８５７号公報
【特許文献２】特開２００８−１１５０９５号公報
【特許文献３】特開２００８−０４４９１６号公報
【特許文献４】特開２００２−２２６３６９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、創傷治療効果又は創傷治癒効果の高い創傷治療薬剤を提供することを主な目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者等は、前記事情に鑑みて鋭意研究を進めた結果、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖を含む組成物（以下、「ＧＦＯ組成物」ともいう）を投与した場合と比較し、このＧＦＯ組成物にさらにビフィズス菌を加えて、グルタミン、食物繊維、オリゴ糖及びビフィズス菌の４成分を有効成分として併せて使用すると、顕著に創傷治療又は創傷治癒効果が得られることを見出した。本発明はこれらの知見に基づいて完成されたものである。
【０００９】
すなわち、本発明は、有効成分として含むビフィズス菌と、並びに、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖を含む組成物とを含有する創傷治療剤を提供するものである。
また、本発明は、前記創傷治療剤を含む医薬組成物を提供するものである。
また、本発明は、前記創傷治療剤を含む栄養組成物を提供するものである。
【発明の効果】
【００１０】
本発明は、創傷治療効果又は創傷治癒効果の高い創傷治療薬剤を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
［創傷治療剤］
本開示の創傷治療剤は、有効成分として含むビフィズス菌と、並びに、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖を含む組成物とを含有するものである。本開示の創傷治療剤における重要な有効成分は、ビフィズス菌、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖の４成分である。
【００１２】
（創傷）
一般的に創傷とは、外的、内的要因によって起こる体表組織の物理的損傷を指す。医学的には、創傷はその形状や原因等によって分類されている。本明細書において、「創傷」とは、切創、割創といった開放性損傷、擦過傷や挫傷といった非開放性の損傷、又は褥瘡（例えば、「床ずれ」）の少なくとも何れか１つを含む皮膚組織の損傷をいう。
また、本明細書において、「褥瘡」とは、エネルギーや蛋白質の摂取不足による低栄養や皮膚への圧力、せん断力、摩擦力、湿度、温度などの物理的刺激による要因により、皮膚、皮下脂肪組織、筋肉への血流が持続的に悪くなり、これらの組織が死んでしまった状態をいう。また、「床ずれ」とは、長期に渡って同じ体勢で寝ることで、体と支持面（ベッド等）との接触局所で血行不全となって組織周辺が壊死を起こすものをいう。
【００１３】
また、本明細書において、「創傷の治療」又は「創傷の治癒」とは、創傷による創面形成箇所における血小板の凝集と血管収縮による止血及びマクロファージによる創面の死滅細胞の取込みが行われる第１ステップと、繊維芽細胞が分泌するコラーゲンを主体とした肉芽組織による創面の修復が行われる第２ステップと、肉芽組織が瘢痕組織へと変化し安定化する第３ステップからなる一連の作用機序又は第１〜３の何れかのステップの作用機序を促進させることをいう。
【００１４】
創傷治療効果又は創傷治癒効果の程度は、創傷面積の減少率で評価することができ、例えば、開放創径の測定により算出することができる。創傷面積の減少が早いほど治療効果又は治癒効果が高い。
例えば、開放創傷面積の比［（各投与群の開放創傷面積（％）／コントロール投与群の開放創傷面積（％））×１００で算出される面積比］が９５％程度以下であれば好ましく、９０％以下であればより好ましく、８０％以下であればさらに好ましく、７０％以下であればよりさらに好ましく、６５％以下であれば特に好ましい。このような開放創傷面積の比率の低下により、良好な創傷治療効果が発揮されていると判断される。
【００１５】
前記創傷治療剤は、グルタミン、食物繊維、オリゴ糖及びビフィズス菌の上記構成を有するため、安全性が高く飲食を通じた栄養摂取が可能であり、これと共に、創傷の症状の改善等も期待される。安全性が高く、飲食を通じて摂取可能であるので、専門的な知識を必要とせず、経口投与によって誰にでも簡便に治療や症状の改善等を行うことができる。さらに、副作用が生じないか少ないため、長期に継続的に摂取することが可能である。
有効成分としてビフィズス菌を含ませることで、創傷治療効果又は創傷治癒効果が奏される。そして、このように、ビフィズス菌、グルタミン、食物線維及びオリゴ糖の４成分を有効成分として含有させることで、際立って顕著な創傷治療効果又は創傷治癒効果が奏される。さらに、褥瘡の予防、改善又は治療に用いることが好適である。
【００１６】
（ビフィズス菌）
本開示において、ビフィズス菌を使用することを特徴とする。本技術の期待する創傷治療等の効果を奏するには、プロバイオティクスとして乳酸菌のなかでも特にビフィズス菌を使用することが重要である。ビフィズス菌は腸に届くと、そこで炭水化物を分解して乳酸と短鎖脂肪酸の１つである酢酸を産生するが、産生された酢酸は腸粘膜上皮の増殖促進や保護作用を有する。また、ビフィズス菌に創傷の治療又は創傷の治癒効果を発揮することは明確に理解されていない。しかも、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖の組み合わせと併用することで、より良好に創傷の治療又は創傷の治癒効果を発揮することは予測し得ないことである。
尚、本明細書において「ビフィズス菌」とはビフィドバクテリウム属に属する細菌を意味する。
【００１７】
前記ビフィズス菌としては、ビフィドバクテリウム属に属する細菌であればよく、例えば、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)、ビフィドバクテリウム・ビフィダム(Bifidobacterium bifidum)、ビフィドバクテリウム・インファンティス(Bifidobacterium infantis)、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス(Bifidobacterium adolescentis)、ビフィドバクテリウム・カテヌラツム(Bifidobacterium catenulatum)、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム(Bifidobacterium pseudolongum)、及びビフィドバクテリウム・サーモフィルム(Bifidobacterium thermophilum)を挙げることができる。これらは１種を単独で又は２種以上を組み合わせて使用することができる。
【００１８】
本開示で使用されるビフィズス菌は特に限定されないが、経口投与または経口摂取される点で、胃酸に曝露しても死滅することなく腸まで生きて届くビフィズス菌が好ましく、これは天然微生物又は改変微生物の何れでもよい。具体的には、胃酸耐性を元々有していているビフィズス菌又は胃酸耐性が付与されたビフィズス菌の何れでもよい。
【００１９】
前記ビフィズス菌のなかでも、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)が、耐酸性及び耐酸素性に優れる点で好ましい。
本開示に使用するビフィズス菌として、例えば、商品名「ＢＢ５３６」（（株）クリニコ製）等の市販品を使用することができる。
【００２０】
前記ビフィズス菌の含有量は、特に限定されないが、創傷治療剤（不揮発分）１００ｇ中に、例えば１．６×１０９〜２．８×１０１２ＣＦＵ程度である。ビフィズス菌の含有量の上限は、好ましくは１．４×１０１２ＣＦＵ、より好ましくは６．４×１０１１ＣＦＵである。なお、「ＣＦＵ」は「colony forming units」を意味するものである。
【００２１】
また、本開示の創傷治療剤において、ビフィズス菌と、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖の含有量の比率は、例えば、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖の合計質量１ｇに対して、ビフィズス菌が８．０×１０８〜３．５×１０１０ＣＦＵ程度である。好ましくは、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖の合計質量１ｇに対してビフィズス菌が７．０〜９．０×１０９ＣＦＵである。
【００２２】
（グルタミン）
本開示で使用されるグルタミンは、アミノ酸の１つであり、骨格筋の遊離アミノ酸の約６割を占めるアミノ酸である。グルタミンは、筋肉のタンパク質合成の促進や、消化器系、特に腸管の機能維持等の主要なエネルギー源として知られている。また、グルタミンは非必須アミノ酸であるが、代謝性ストレスなど異化機能が著しく亢進した状態では、生体内の合成だけではまかなうことができなくなるため、グルタミンの要求量が急激に高まることから準必須アミノ酸とされることもある。
【００２３】
前記グルタミンの含有量は、本発明の創傷治療剤（不揮発分）１００ｇ中に、例えば０．５〜５０ｇである。グルタミンの含有量の上限は、好ましくは４０ｇ、より好ましくは３０ｇであり、その下限は、好ましくは０．８ｇ、より好ましくは１ｇである。
前記グルタミンの含有量は、本開示に用いるＧＦＯ組成物（不揮発分）１００ｇ中に、例えば１０〜４０ｇである。グルタミンの含有量の上限は、好ましくは３５ｇ、より好ましくは３２ｇであり、その下限は、好ましくは１５ｇ、より好ましくは２０ｇである。
【００２４】
（食物繊維）
本開示で使用される食物繊維は、ヒトの消化酵素で消化されない食品中の難消化性成分の総体（五訂増補日本食品標準成分表：平成１７年１月２４日；日本国文部科学省）である。食物繊維として、食品由来の炭水化物ポリマーが好適であり、化学処理又は酵素処理等にて難消化成分にした炭水化物ポリマーを使用してもよい。
前記食物繊維には、不溶性食物繊維及び／又は水溶性食物繊維が含まれる。
前記食物繊維のうち、胃で消化されずに腸まで届き、ビフィズス菌の栄養源となるものが好ましく、例えば難消化性多糖類が挙げられる。
【００２５】
前記食物繊維の構成単位として、例えばＤ−グルコース、Ｄ−マンノース、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−フラクトース、Ｄ−キシロース等；ウロン酸（例えばガラクツロン酸等）；デオキシ糖（例えば、Ｌ−ラムノース等）；アミノ糖（例えば、グルコサミン等）等の単糖類（例えば、アルドース及びケトース等）等から選択される少なくとも１種又は２種以上の構成単糖がグリコシド結合により結合されてなる構成単位を挙げることができる。なお、前記食物繊維において単糖類の重合度は少なくとも１１以上である。
【００２６】
前記不溶性食物繊維として、例えば、セルロース、ヘミセルロース、リグニン等の植物系不溶性食物繊維；キチン、キトサン等の動物又は菌類系不溶性食物繊維等を挙げることができる。これらを単独で又は２種以上組み合わせて使用することができる。
前記水溶性食物繊維としては、例えば、ペクチン、グアーガム酵素分解物、アガロース、グルコマンナン、ポリデキストロース、アルギン酸ナトリウム、イヌリン、カラギーナン等を挙げることができる。これらを単独で又は２種以上組み合わせて使用することができる。
これらを単独で又は２種以上組み合わせて使用することができる。これら水不溶性及び水溶性の食物繊維を、さらに難消化化、低分子化、水溶性化、水不溶性化等した食物繊維を得るための処理（例えば、化学処理及び／又は酵素処理等）を行ってもよい。
前記食物繊維としては、水溶性食物繊維を含有することが好ましく、水溶性食物繊維のグルカンを含有することがより好ましく、ポリデキストロースを含有することがさらに好ましい。
【００２７】
前記食物繊維の含有量は、本開示の創傷治療剤（不揮発分）１００ｇ中に、例えば０．５〜５０ｇである。食物繊維の含有量の上限は、好ましくは４０ｇ、より好ましくは３０ｇである。下限は、好ましくは０．７ｇ、より好ましくは１ｇである。
前記食物繊維の含有量は、本開示に用いるＧＦＯ組成物（不揮発分）１００ｇ中に、例えば２５〜６０ｇである。食物繊維の含有量の上限は、好ましくは５５ｇ、より好ましくは５３ｇであり、その下限は、好ましくは３０ｇ、より好ましくは３３ｇである。
【００２８】
（オリゴ糖）
本開示で使用されるオリゴ糖は、Ｄ−グルコース、Ｄ−フラクトース、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−キシロース、Ｄ−マンノース等の単糖類（例えば、アルドース及びケトース等）から選択される少なくとも１種以上の単糖類がグリコシド結合により結合されてなる化合物（例えば、ホモオリゴ糖及びヘテロオリゴ糖等）である。前記単糖類の重合度は、例えば２以上、好ましくは２〜１０である。
前記オリゴ糖のうち、胃で消化されずに腸まで届き、ビフィズス菌の栄養源となるオリゴ糖が好ましい。
【００２９】
前記オリゴ糖として、例えば、ラクチュロース、スクロース、ラクトース、マルトース、トレハロース、ツラノース、セロビオース等の二糖類；メレジトース、ラフィノース、マルトトリオース等の三糖類；アカルボース、スタキオース等の四糖類等；ラクトスクロース、フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、大豆オリゴ糖、イソマルトオリゴ糖、キシロオリゴ糖、マンナンオリゴ糖、デキストリン等の５個以上の単糖が結合されてなる化合物等を挙げることができる。
これらを単独で又は２種以上組み合わせて使用することができる。
前記オリゴ糖としては、なかでもラクチュロース及び／又はラクトスクロースを含有することが好ましい。
【００３０】
前記オリゴ糖の含有量としては、本発明の創傷治療剤（不揮発分）１００ｇ中に、例えば１〜５０ｇである。オリゴ糖の含有量の上限は、好ましくは４０ｇ、より好ましくは３５ｇである。下限は、好ましくは２ｇである。オリゴ糖の含有量が上記範囲を上回ると、軟便になる傾向がある。
前記オリゴ糖の含有量としては、本開示に用いるＧＦＯ組成物（不揮発分）１００ｇ中に、例えば５〜２０ｇである。オリゴ糖の含有量の上限は、好ましくは１８ｇ、より好ましくは１６ｇであり、その下限は、好ましくは７ｇ、より好ましくは９ｇである。
【００３１】
（ＧＦＯ組成物）
本開示に使用するＧＦＯ組成物は、少なくとも、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖から構成されるものである。
本開示の創傷治療剤（不揮発分）１００ｇ中における、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖を含む組成物の含有量は、例えば２．０〜８０ｇである。当該ＧＦＯ組成物の含有量の上限は、好ましくは、７８ｇであり、より好ましくは７６ｇであり、その下限は、好ましくは３．５ｇ、より好ましくは４．０ｇである。
本開示の創傷治療剤（不揮発分）に使用される、グルタミンと、食物繊維と、オリゴ糖との組成比（質量部）は、例えば、グルタミン：食物繊維：オリゴ糖＝１：０．６〜６：０．１〜２であり、好ましくは１：１．４〜１．９：０．２〜０．７である。
【００３２】
本開示の創傷治療剤には、上記成分以外にも本発明の効果を損なわない範囲内で、以下の他の成分を含有していてもよい。
他の成分としては、例えば、ビフィズス菌以外のプロバイオティクスを挙げることができる。ビフィズス菌以外のプロバイオティクスとしては、例えば、ラクトバチルス・カゼイ（Lactobacillus casei）、ラクトバチルス・アシドフィルス（L. acidophilus）、ラクトバチルス・プランタラム（L. plantarum）、ラクトバチルス・ブヒネリ（L. buchneri）、ラクトバチルス・ガリナラム（L. gallinarum）、ラクトバチルス・アミロボラス（L. amylovorus）、ラクトバチルス・ブレビス（L. brevis）、ラクトバチルス・ラムノーサス（L. rhamnosus）、ラクトバチルス・ケフィア（L. kefir）、ラクトバチルス・パラカゼイ（L. paracasei）、ラクトバチルス・クリスパタス（L. crispatus）、ラクトバチルス・ゼアエ（L. zeae）、ラクトバチルス・ヘルベティカス（L. helveticus）、ラクトバチルス・サリバリウス（L. salivalius）、ラクトバチルス・ガセリ（L. gasseri）、ラクトバチルス・ファーメンタム（L. fermentum）、ラクトバチルス・ロイテリ（L. reuteri）、ラクトバチルス・クリスパータス（L. crispatus）、ラクトバチルス・デルブルッキィ  サブスピーシーズ  ブルガリカス（L. delbrueckii subsp. bulgaricus）、ラクトバチルス・デルブルッキィ  サブスピーシーズ  デルブルッキィ（L. delbrueckii subsp. delbrueckii）、ラクトバチルス・ジョンソニー（L. johnsonii）、ラクトバチルス・ペントサス（L. pentosus）、ラクトバチルス・マリ（L. mali）等のラクトバチルス属細菌；ストレプトコッカス・サーモフィルス（Streptococcus thermophilus）等のストレプトコッカス属細菌；ラクトコッカス・ラクチス  サブスピーシーズ  ラクチス（Lactococcus lactis subsp. lactis）、ラクトコッカス・ラクチス  サブスピーシーズ  クレモリス（Lactococcus lactis subsp. cremoris）等のラクトコッカス属細菌；エンテロコッカス・フェカーリス（Enterococcus faecalis）、エンテロコッカス・フェシウム（E. faecium）等のエンテロコッカス属細菌；バチルス・ズブチリス（Bacillus subtilis）等のバチルス属細菌；サッカロマイセス・セルビシエ（Saccharomyses cerevisiae）等のサッカロマイセス属に属する酵母；トルラスポラ・デルブルッキィ（Torulaspora delbrueckii）等のトルラスポラ属に属する酵母；キャンジダ・ケフィア（Candida kefyr）等のキャンジダ属に属する酵母等を挙げることができる。
これらは１種を単独で又は２種以上を組み合わせて使用することができる。
【００３３】
他の成分としては、更に、カルシウム、マグネシウム、亜鉛、鉄、ドロマイト等のミネラル又はその塩；クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、グルコン酸、コハク酸、フマル酸、アスコルビン酸、乳酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、リン酸等の酸又はその塩；グルタミン以外のアミノ酸；グルタチオン、フィチン、フィチン酸、リグニン、サポニン、フェルラ酸、γ−アミノ酪酸、γ−オリザノール、カルコン、フラバノン、フラボン、フラボノール、イソフラボン、アントシアン、カテキン、プロアントシアニジン、茶葉ポリフェノール、クルクミド、カプサイシノイド、セサミノール、ゴマリグナン、テアフラビン、β−ジケトン類、カロチノイド類、アリルイオウ化合物、イソチオシアナート類、テルペン類、クロロフィル類、飽和脂肪酸類、多価不飽和脂肪酸類、共役リノール酸類、リン脂質類、植物ステロール類、卵タンパク、乳タンパク、米タンパク、大麦タンパク、小麦タンパク、魚肉タンパク、コラーゲン等の天然物成分；ビタミンＡ、ビタミンＢ類、ビタミンＣ、ビタミンＤ類、ビタミンＥ、ビタミンＫ類、β−カロチン、レチノイン酸、葉酸等のビタミン；イチョウ葉、ドクダミ、ナツメ、クコシ、甘草、霊芝、高麗ニンジン等のエキス又はその抽出成分等を挙げることができる。これらは１種を単独で又は２種以上を組み合わせて使用することができる。
【００３４】
更に、本開示の創傷治療剤は、本技術の効果を損なわない範囲内で、公知の、若しくは将来的に見出され得る創傷改善作用を有する薬剤を併用することができる。併用する薬剤は、本発明の創傷治療剤に含有させてもよいし、含有させなくてもよい。
【００３５】
上記他の成分の含有量（２種以上を含有する場合はその総量）は、創傷治療剤（不揮発分）１００ｇ中に、例えば９４ｇ以下である。
【００３６】
本開示の創傷治療剤は、上記成分を混合することにより調製することができる。例えば、本開示の創傷治療剤は、少なくとも前記ビフィズス菌と、前記グルタミン、前記食物繊維及び前記オリゴ糖とを有効成分として含有させて調製することができる。又は、前記ビフィズス菌と前記ＧＦＯ組成物とを含有させて調製することができる。
【００３７】
本開示の前記ビフィズス菌と、前記グルタミン、前記食物繊維及び前記オリゴ糖とを有効成分として組み合わせたもの、又は前記ビフィズス菌と前記ＧＦＯ組成物とを組み合わせたものは、創傷予防、創傷改善又は創傷治療作用を有する。
本開示の前記ビフィズス菌と、前記グルタミン、前記食物繊維及び前記オリゴ糖とを有効成分として組み合わせたもの、又は前記ビフィズス菌と前記ＧＦＯ組成物とを組み合わせたものは、創傷を予防、改善又は治療することができる。これらは、本技術の効果を発揮するように、同時期に又は別々に使用してもよい。
本開示の前記ビフィズス菌と、前記グルタミン、前記食物繊維及び前記オリゴ糖とは、又は前記ビフィズス菌と前記ＧＦＯ組成物は、創傷予防、創傷改善又は創傷治療等の各種製剤の有効成分として、組み合わせて含有させることができる。
【００３８】
上記使用とは、適用対象であるヒト又は非ヒト動物における使用であり得、また治療的使用であっても非治療的使用であってもよい。
本明細書において、「非治療的」とは、医療行為、すなわち治療による人体への処置行為を含まない概念である。
また、本明細書において、「改善」とは、疾患、症状又は状態の好転；疾患、症状又は状態の悪化の防止、遅延若しくは疾患又は症状の進行の逆転、防止又は遅延をいう。
また、本明細書において、「予防」とは、適用対象における疾患若しくは症状の発症の防止又は遅延、或いは適用対象の疾患若しくは症状の発症の危険性を低下させることをいう。
【００３９】
また、本開示の前記ビフィズス菌と、前記グルタミン、前記食物繊維及び前記オリゴ糖は、又は前記ビフィズス菌と前記ＧＦＯ組成物とは、組み合わせて各種製剤として使用することができ、また製造するために使用してもよい。
本開示の前記ビフィズス菌と、前記グルタミン、前記食物繊維及び前記オリゴ糖を有効成分として組み合わせたもの、又は前記ビフィズス菌と前記ＧＦＯ組成物とを組み合わせたもの、及びいずれかを有効成分として含有する本技術の各種製剤は、ヒトを含む動物に摂取又は投与して、上述の創傷予防、創傷改善又は創傷治療等を図るための方法に使用することができる。
また、上述の本技術の各種製剤は、上述の創傷予防、創傷改善又は創傷治療等のための、ヒト用若しくは動物用の食品、飼料、医薬品、医薬部外品、皮膚外用剤等の有効成分としてこれらに配合して使用可能である。
【００４０】
さらに、本開示の創傷治療剤又は本技術の各種製剤は、医薬組成物又は栄養組成物に含有させることが可能である。これにより、これら組成物に、上述の創傷治療作用等を発揮させることが可能となる。
また、これら医薬組成物又は栄養組成物中に含有させる本開示の創傷治療剤の含有量は、例えば１０質量％であり、好ましくは３〜８質量％、より好ましくは４〜６質量％である。
【００４１】
また、本開示の創傷治療剤の用法又は用量は特に限定されず、各種組成物の形態、投与対象となる方の年齢、性別、その他の条件、摂取する医薬組成物や同様の効果を有するサプリメント等との摂取状況等により決定される。
また、本開示の創傷治療剤は、１日当たり１回又は複数回に分けて投与又は摂取することができる。
なお、本開示の創傷治療剤の用法又は用量と同様にして、上述した、ビフィズス菌、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖の４成分、又はビフィズス菌とＧＦＯ組成物を組み合わせて、創傷予防、創傷改善又は創傷治療に適用してもよい。
【００４２】
本開示の創傷治療剤の投与又は摂取の時期は特に限定されない。
本開示の創傷治療剤の適用において、創傷形成後にあっては、その投与又は摂取の期間は、好ましくは創傷後に８日間以上、より好ましくは創傷後に１１日以上、さらに好ましくは創傷後に１４日以上、よりさらに好ましくは創傷後に１６日以上、投与又は摂取することが好適であり、また、継続して投与又は摂取することがより好適である。
【００４３】
本開示の創傷治療剤の適用は創傷形成後からの投与又は摂取に限定されない。すなわち、創傷形成前から投与又は摂取することで、所望の創傷治療効果又は創傷治癒効果を得ることができ、また、継続して投与又は摂取することがより好適である。本技術において創傷前に本開示の創傷治療剤を投与又は摂取し、創傷後に通常食に代えても本技術の創傷治療効果又は創傷治癒効果を奏することができる。
前記のとおり、本開示の創傷治療剤を創傷前から投与又は摂取することは、特に褥瘡に対する予防、改善又は治療に好適である。褥瘡は、長期間同じ姿勢で寝たきりになる場合に発症し易いため、他の創傷と比較して、発症の予測可能性が高い。すなわち、長期間に渡って同じ姿勢で寝たきりになることが予測される場合に、あらかじめ本開示の創傷治療剤の投与又は摂取を開始し、継続投与又は継続摂取することにより、褥瘡発症の予防が期待されるとともに、褥瘡に伴う皮膚への損傷の治癒を促進することができる。
また、褥瘡を発症した場合の皮膚への損傷は、表皮の損傷にとどまらず真皮や皮下組織にまで達することもあり、完治するまでに時間がかかる難治性の症状になりやすい。しかしながら、褥瘡が発症すると予測される前に、本開示の創傷治療剤をあらかじめ投与又は摂取することにより治療期間を短くすることができる。
創傷前に、特に褥瘡が発症すると予測される前に、本開示の創傷治療剤を投与又は摂取する期間としては、創傷前４週間以上が好ましく、創傷前８週間以上がより短期間での創傷治癒が期待できる点でより好ましい。
【００４４】
本開示の創傷治療剤の適用として、創傷形成前と創傷形成後で投与又は摂取することが好ましく、投与又は摂取期間の好適な例として、「創傷前４週間以上〜創傷後８日間以上」の期間であり、その期間が長いほど創傷治療効果又は創傷治癒効果があるので好適である。これにより、創傷治療又は創傷治癒の範囲としては、褥瘡の治療又は褥瘡の治癒において、顕著な効果が発揮される。
また、投与又は摂取期間は、創傷治療又は創傷治癒の状況に応じて中止することができるが、上述のとおり、創傷予防効果もあることから中止することなく継続して投与又は摂取することが望ましい。
【００４５】
本明細書における本技術の用法の「継続」とは、毎日継続でもよく、一定間隔継続でもよいが、毎日継続が効能発揮の点で望ましい。
また、本技術において、上記各４成分を又は上記ビフィズス菌及びＧＦＯ組成物を、同時期に又は別々にして、投与又は摂取してもよい。
また、上記４成分は、有効成分の安全性が高いことから専門的な知識を必要とせずに経口摂取を行うことが可能であるので、本技術の用法として簡便な経口摂取が好適である。
【００４６】
本技術において使用される「ビフィズス菌、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖」（不揮発分）からなる４成分の合計の１日当たりの有効投与量又は有効摂取量は、例えば６〜２０ｇ程度である。４成分の合計の有効投与量又は有効摂取量の上限は、好ましくは１８ｇ、特に好ましくは１５ｇであり、その下限は、好ましくは１０ｇ、より好ましくは１３ｇである。
【００４７】
本技術において使用される「ビフィズス菌」（不揮発分）の１日当たりの有効投与量又は有効摂取量は、例えば、９．６×１０７〜５．６×１０１１ＣＦＵ程度である。ビフィズス菌の有効投与量又は有効摂取量の上限は、好ましくは５．０×１０１１ＣＦＵ、より好ましくは９．５×１０１０ＣＦＵである。
【００４８】
本技術において使用される「グルタミン」（不揮発分）の１日当たりの有効投与量又は有効摂取量は、例えば０．０３〜１０ｇ程度である。グルタミンの有効投与量又は有効摂取量の上限は、好ましくは９ｇ、より好ましくは７．５ｇであり、その下限は、好ましくは０．０５ｇ、より好ましくは０．０６５ｇである。
【００４９】
本技術において使用される「食物繊維」（不揮発分）の１日当たりの有効投与量又は有効摂取量は、例えば０．０３〜１０ｇ程度である。食物繊維の有効投与量又は有効摂取量の上限は、好ましくは９ｇ、より好ましくは７．５ｇであり、その下限は、好ましくは０．０５ｇ、より好ましくは０．０６５ｇである。
【００５０】
本技術において使用される「オリゴ糖」（不揮発分）の１日当たりの有効投与量又は有効摂取量は、例えば０．０６〜１０ｇ程度である。オリゴ糖の有効投与量又は有効摂取量の上限は、好ましくは９ｇ、より好ましくは７．５ｇであり、その下限は、好ましくは０．１ｇである。
【００５１】
本技術における投与方法又は摂取方法としては、特に限定されず、例えば、経口摂取、経腸摂取及び塗布等を挙げることができる。剤型は特に限定されず、例えば、経口摂取、経腸摂取又は塗布可能な剤型であればよい。このうち、用法は、経口摂取及び経腸摂取が好ましい。
【００５２】
本技術における経口摂取方法として、例えば、錠剤（糖衣錠、腸溶性コーティング錠、バッカル錠を含む）、散剤、カプセル剤（腸溶性カプセル、ソフトカプセルを含む）、顆粒剤（コーティングしたものを含む）、丸剤、トローチ剤、封入リポソーム剤、液剤、及びこれらの徐放製剤等の剤型に製剤化したものを摂取する方法や、飲食品（例えば、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果汁飲料、乳酸菌飲料、スポーツ飲料等の飲料；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の氷菓；そば、うどん、はるさめ、ギョウザの皮、シュウマイの皮、中華麺、即席麺等の麺類；飴、チューインガム、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子等の菓子類；かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、乳飲料、発酵乳、バター等の乳製品；惣菜、パン類；健康補助食品等の機能性食品等）に添加して飲食品と共に摂取する方法を挙げることができる。
【００５３】
製剤化においては通常の経口薬剤に汎用される担体、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味矯臭剤、希釈剤、界面活性剤、溶剤等の添加剤を使用することができる。
【００５４】
前記担体及び賦形剤としては、例えば、乳糖、ブドウ糖、白糖、マンニトール、馬鈴薯澱粉、トウモロコシ澱粉、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、結晶セルロース、カンゾウ末、及びゲンチアナ末等を挙げることができる。
【００５５】
前記結合剤としては、例えば、澱粉、ゼラチン、グルコース、ガラクトース、ポリビニルルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース、チルセルロース、メチルセルロース、及びカルボキシメチルセルロース等を挙げることがきる。
【００５６】
前記崩壊剤としては、例えば、澱粉、寒天、ゼラチン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、結晶セルロース、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、及びアルギン酸ナトリウム等挙げることができる。
【００５７】
前記滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、水素添加植物油、及びマクロゴール等を挙げることができる。
【００５８】
前記着色剤としては、医薬品に添加することが許容されている着色剤を使用することができ、例えば、赤色２号、黄色４号、及び青色１号等を挙げることができる。
【００５９】
前記錠剤及び顆粒剤は、必要に応じて、白糖、ヒドロキシプロピルセルロース、精製セラック、ゼラチン、ソルビトール、グリセリン、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、フタル酸セルロースアセテート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、メチルメタクリレート、及び（メタ）アクリル酸重合体等により被膜することができる。
【００６０】
本技術の経腸投与方法又は経腸摂取方法としては、例えば、経腸栄養剤等に添加して摂取する方法を挙げることができる。
【００６１】
本開示の栄養組成物は、上記創傷治療剤を含む栄養組成物であり、例えば、経腸栄養剤、経口流動食又は経腸流動食、医療食、栄養補給飲食品、サプリメント、及び飲食品等の栄養組成物に上記創傷治療剤を添加することにより製造することができる。
【００６２】
前記飲食品としては、例えば、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果汁飲料、乳酸菌飲料、スポーツ飲料等の飲料；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の氷菓；そば、うどん、はるさめ、ギョウザの皮、シュウマイの皮、中華麺、即席麺等の麺類；飴、チューインガム、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子等の菓子類；かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、乳飲料、発酵乳、バター等の乳製品；惣菜、パン類；健康補助食品等の機能性食品等を挙げることができる。
【００６３】
上記組成物（例えば医薬組成物、栄養組成物等）又は上記各種製剤等への創傷治療剤の添加量としては、特に制限されることがなく、本技術の効果を奏するように上記４成分の含有量等を適宜調整することができるが、上記創傷治療剤の１日の摂取量が上記範囲となる範囲内であることが好ましい。
【００６４】
本技術は以下の構成を採用することも可能である。
〔１〕  有効成分として含むビフィズス菌と、並びに、グルタミン、食物繊維、及びオリゴ糖を含む組成物とを含有する創傷治療剤。前記ビフィズス菌と前記組成物とは、同時期又は別々に投与してもよく、前記創傷治療剤として投与してもよい。
〔２〕  有効成分として含むビフィズス菌、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖を含有する創傷治療剤。前記のビフィズス菌、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖の４成分を、同時期又は別々に投与してもよく、前記創傷治療剤として投与してもよい。
【００６５】
〔３〕  創傷後に、（ａ）８日間以上、（ｂ）１１日間以上、（ｃ）１４日間以上、又は（ｄ）１６日間以上投与されるものである前記〔１〕又は〔２〕に記載の創傷治療剤。
〔４〕  少なくとも創傷前から投与されるものである前記〔１〕〜〔３〕いずれか一項に記載の創傷治療剤。
〔５〕  創傷前から投与される期間が４週間以上である前記〔４〕に記載の創傷治療剤。
〔６〕  創傷前から投与される期間が８週間以上である前記〔４〕に記載の創傷治療剤。
〔７〕  褥瘡の予防用、改善用又は治療用である前記〔１〕〜〔６〕のいずれか一項に記載の創傷治療剤。
【００６６】
〔８〕  前記創傷治療剤に含まれるグルタミン、食物繊維及びオリゴ糖の合計質量１ｇに対して、前記創傷治療剤に含まれるビフィズス菌の菌数が、８．０×１０８〜３．５×１０１０ＣＦＵである前記〔１〕〜〔７〕のいずれか一項に記載の創傷治療剤。
〔９〕  前記ビフィズス菌が前記創傷治療剤１００ｇ中、１．６×１０９〜２．８×１０１２ＣＦＵである、前記〔１〕〜〔８〕のいずれか一項に記載の創傷治療剤。
〔１０〕  前記創傷治療剤中のグルタミン、食物繊維及びオリゴ糖の組成比（質量部）が、１：０．６〜６：０．１〜２である前記〔１〕〜〔９〕のいずれか一項に記載の創傷治療剤。
〔１１〕  前記ビフィズス菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム(Bifidobacterium longum)、ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)、ビフィドバクテリウム・ビフィダム(Bifidobacterium bifidum)、ビフィドバクテリウム・インファンティス(Bifidobacterium infantis)、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス(Bifidobacterium adolescentis)、ビフィドバクテリウム・カテヌラツム(Bifidobacterium catenulatum)、ビフィドバクテリウム・シュードロンガム(Bifidobacterium pseudolongum)、及びビフィドバクテリウム・サーモフィルム(Bifidobacterium thermophilum)からなる群から選択される少なくとも１種又は２種以上である前記〔１〕〜〔１０〕のいずれか一項に記載の創傷治療剤。
〔１２〕  前記食物繊維が、水溶性食物繊維である前記〔１〕〜〔１１〕のいずれか一項に記載の創傷治療剤。
〔１３〕  前記水溶性食物繊維がポリデキストロースである前記〔１２〕に記載の創傷治療剤。
〔１４〕  前記オリゴ糖が、ラクチュロース及び／又はラクトスクロースである前記〔１〕〜〔１３〕のいずれか一項に記載の創傷治療剤。
【００６７】
〔１５〕  前記〔１〕〜〔１４〕のいずれか一項に記載の創傷治療剤を含む医薬組成物。
〔１６〕  前記〔１〕〜〔１５〕のいずれか一項に記載の創傷治療剤を含む栄養組成物。
〔１７〕  医薬組成物又は栄養組成物である前記〔１〕〜〔１４〕のいずれか一項に記載の創傷治療剤。
【００６８】
〔１８〕  次の（ａ）、（ｂ）又は（ｃ）の、医薬組成物、栄養組成物又は機能性食品への使用。
（ａ）有効成分として含むビフィズス菌
（ｂ）有効成分として含むビフィズス菌と、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖を含む組成物
（ｃ）ビフィズス菌、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖
〔１９〕  前記〔１〕〜〔１４〕のいずれか一項に記載の創傷治療剤又は本技術の各種製剤の製造のための、（ａ）有効成分として含むビフィズス菌の使用、（ｂ）有効成分として含むビフィズス菌と、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖を含む組成物との使用、又は、（ｃ）ビフィズス菌、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖の使用。
〔２０〕  創傷予防、創傷改善又は創傷治療のための、（ａ）有効成分として含むビフィズス菌、（ｂ）有効成分として含むビフィズス菌と、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖を含む組成物、又は、（ｃ）ビフィズス菌、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖。
〔２１〕  創傷予防、創傷改善又は創傷治療のための、（ａ）有効成分として含むビフィズス菌の使用、（ｂ）有効成分として含むビフィズス菌と、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖を含む組成物の使用、又は、（ｃ）ビフィズス菌、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖の使用。
〔２２〕  （ａ）有効成分として含むビフィズス菌、（ｂ）有効成分として含むビフィズス菌と、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖を含む組成物、又は、（ｃ）ビフィズス菌、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖、を有効成分として摂取又は投与する、創傷予防方法、創傷改善方法又は創傷治療方法。
【実施例】
【００６９】
以下に、実施例、比較例、製造例、試験例等を用いて本技術（本発明）をさらに詳しく説明するが、本技術（本発明）はこれら実施例等に限定されるものではない。
【００７０】
＜製造例１：ＧＦＯＢ食（１）＞
グルタミン（味の素株式会社製）１００質量部、ポリデキストロース（三栄源エフ・エフ・アイ株式会社製）１６７質量部、ラクチュロース（森永乳業株式会社製）４８質量部を合わせて混合し、ＧＦＯ組成物（１）を得た。
続いて、ＧＦＯ組成物（１）３１５質量部に対し、ビフィズス菌（商品名「ＢＢ５３６」、（株）クリニコ製）１００質量部を混合して、創傷治療剤（Ａ）を得た。なお、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖の合計量１ｇに対し、ビフィズス菌７．９×１０９ＣＦＵを使用した。
なお、ビフィズス菌は、不揮発分２ｇ中にタンパク質量０．１７ｇを含み、ビフィズス菌を２．５×１０１０ＣＦＵ／ｇ含有する菌乾燥粉末（菌末）であった。
創傷治療剤（Ａ）不揮発分１００ｇ中に、グルタミン２４．１ｇ、ポリデキストロース４０．２ｇ、ラクチュロース１１．６ｇ、ビフィズス菌６．０×１０１１ＣＦＵを含有するものであった。
その後、マウスラット用標準飼料（「ＡＩＮ−９３Ｇ」、日本クレア（株）製）から繊維成分を取り除いた餌１００質量部に、創傷治療剤（Ａ）を４．３３質量部添加して得られる餌（以後、「ＧＦＯＢ食（１）」と称する場合がある。）を得た。
ＧＦＯＢ食（１）不揮発分１００ｇ中に、グルタミン１．０ｇ、ポリデキストロース１．７ｇ、ラクチュロース０．５ｇ、ビフィズス菌２．５×１０１０ＣＦＵを含有するものであった。
なお、創傷治療剤（Ａ）に含まれる、グルタミン：ポリデキストロース：ラクチュロースの組成比（質量部）は、１：１．６７：０．４８であった。
【００７１】
＜製造例２：ＧＦＯＢ食（２）＞
ＧＦＯ組成物（２）（商品名「オオツカＧＦＯ」、不揮発分１５ｇ中にグルタミン３．０ｇ、食物繊維（ポリデキストロース）５．０ｇ、オリゴ糖（ラクトスクロース）１．４５ｇ）含有、大塚製薬（株）製）１００質量部に対し、ビフィズス菌「ＢＢ５３６」２０質量部混合して創傷治療剤（Ｂ）を得た。なお、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖の合計量１ｇに対し、ビフィズス菌７．９×１０９ＣＦＵを使用した。
創傷治療剤（Ｂ）不揮発分１００ｇ中に、グルタミン１６．７ｇ、食物繊維２７．８ｇ、オリゴ糖８．１ｇ、ビフィズス菌４．２×１０１１ＣＦＵを含有するものであった。
その後、ＡＩＮ−９３Ｇから繊維成分を取り除いた餌１００質量部に、創傷治療剤（Ｂ）を６．３８質量部添加して得られる餌（以後、「ＧＦＯＢ食（２）」と称する場合がある。）を得た。
ＧＦＯＢ食（２）不揮発分１００ｇ中に、グルタミン１．０ｇ、ポリデキストロース１．７ｇ、ラクトスクロース０．５ｇ、ビフィズス菌２．５×１０１０ＣＦＵを含有するものであった。
なお、創傷治療剤（Ｂ）に含まれる、グルタミン：ポリデキストロース：ラクトスクロースの組成比（質量部）は、１：１．６７：０．４８であった。
【００７２】
＜製造例３：ＧＦＯ食＞
ＡＩＮ−９３Ｇから繊維成分を取り除いた餌１００質量部に、３．２５質量部のＧＦＯ組成物（１）を混合した飼料を得た（以後、ＧＦＯ食と称する場合がある。不揮発分１００ｇ中に、グルタミン１．０ｇ、ポリデキストロース１．７ｇ、ラクチュロース０．５ｇ含有）。
【００７３】
＜創傷治療効果確認試験１（実施例１及び比較例１）＞
製造例１〜３において得られた各飼料について、下記試験により創傷治療効果を評価した。
【００７４】
実験条件
遺伝的糖尿病マウス（C57BL/KsJ-db/db）を２群に分け、一方の群をＧＦＯＢ食（１）投与群としてＧＦＯＢ食（１）を給餌し、他方の群をＧＦＯ食投与群としてＧＦＯ食を給餌しながら、いずれの群も８週間飼育した。
８週間の飼育後、吸入麻酔下にて遺伝的糖尿病マウス（C57BL/KsJ-db/db）の背部皮膚（表皮と真皮層を含む）を円形状（直径約16mm）にくり抜き、開放創を１箇所作成した。開放創作成後も同じ飼料の投与を継続した。また、創傷部位は準閉塞性フイルムドレシング（Bioclusive: Johnson and Johnson, Arlington, TX, USA）で被覆し、２〜３日毎に交換し、各飼料投与群当たり５匹のマウスの開放創径平均値の計測（創傷面積の算出）と浸出液の回収を１６日間実施した。
【００７５】
なお、前記糖尿病マウスは、非糖尿病マウスよりも創傷治癒が遅延して難治性となることから、治療剤の創傷治療効果をより厳密に測定するために使用したものである。このことは、例えば、特表２００８−５１３４２４号公報において、糖尿病マウスを用いた創傷治癒試験が開示されているように、創傷治癒効果を確認するにあたって一般的な試験系である。また、前記糖尿病マウスを用いた本試験系は、創傷治癒が遅延して難治性となることから、褥瘡の治療モデルとしても好適である。
【００７６】
ＧＦＯＢ食（１）群を実施例１とし、ＧＦＯ食群を比較例１とした。
また、コントロールとして、ＡＩＮ−９３Ｇから繊維分を取り除いた餌（以後、「コントロール食」と称する場合がある）を与えて８週間飼育したマウスでも同様の試験を実施した。
【００７７】
その結果、各飼料投与群における開放創作成時と比べた開放創傷面積平均値の変化は表１のとおりとなった。
なお、表中の開放創傷面積（％）は、［各試料投与群における（所定期間飼育後の開放創傷面積／開放創作成時の創傷面積）×１００］で算出した。表中の数値は、平均値±標準偏差を表す。また、表中の※印は、コントロール食投与群と比較して有意差があることを示す（Ｐ＜０．０５）。
【００７８】
ＧＦＯ食投与群において、コントロール食投与群と比べて創傷治癒期間に差は認められなかった。
これに対してＧＦＯＢ食（１）投与群の創傷は１１日目より改善の傾向が観察され、１６日目ではコントロール食投与群に比して有意な改善が認められた。
【００７９】
ここで、同じ飼育期間で開放創傷面積の比［（各投与群の開放創傷面積（％）／コントロール投与群の開放創傷面積（％））×１００で算出される面積比］が９５％程度以下であれば、より良好な創傷治療効果があると考える。
このときに、ＧＦＯＢ食（１）投与群の１１日目において面積比が９１．４％であり、このようにＧＦＯＢ食（１）を創傷後に１１日以上投与した場合、創傷改善効果は良好であった。なお、前記面積比は、ＧＦＯＢ食（１）投与群の１４日目においては７９．１％、１６日目では５２．３％となった。これに対してＧＦＯ食投与群では、１１日目で９９．９％、１４日目で９８．６％、１６日目で８７．４％であった。
【００８０】
また、ｔ検定の結果、１６日目におけるＧＦＯＢ食（１）投与群において、コントロール食投与群と比べて、危険率５％未満で有意差が認められた。
さらにＧＦＯＢ食（１）投与群の１６日目における創傷の状態は、創部辺縁部治癒に伴う痂皮の進行が認められた。このような創部辺縁部治癒に伴う痂皮の進行は、ＧＦＯ食投与群及びコントロール食投与群では認められなかった。
【００８１】
以上の結果から、ビフィズス菌とＧＦＯ組成物（１）を混合し、ビフィズス菌、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖の４種を組み合わせて有効成分として含有させたＧＦＯＢ食（１）における比率で混合した飼料が、他の飼料と比較して、難治性創傷に対して際立って顕著な治癒効果を示すことが示唆された。
【００８２】
【表１】
2015120646.tif 000002
【００８３】
＜創傷治療効果確認試験２（実施例２）＞
製造例２で得たＧＦＯＢ食（２）及びコントロール食を用いて、下記試験により飼料投与期間による創傷治療効果への影響を評価した。
【００８４】
実施条件
遺伝的糖尿病マウス（C57BL/KsJ-db/db）をＧＦＯＢ食（２）投与群とコントロール食投与群に分け、さらに、それぞれの飼料投与群において飼料投与期間を４、６、８週間と変更した３群（１群当りマウス５匹）に分けて、全６群を飼育した。
４、６、８週間後の飼育後、吸入麻酔下にて遺伝的糖尿病マウス（C57BL/KsJ-db/db）の背部皮膚（表皮と真皮層を含む）を円形状（直径約16mm）にくり抜き、開放創を１箇所作成した。開放創作成後も同じ飼料の投与を継続した。また、創傷部位は準閉塞性フイルムドレシング（Bioclusive: Johnson and Johnson, Arlington, TX, USA）で被覆し、２〜３日毎に交換し、マウスの開放創径平均値の計測（創傷面積の算出）と浸出液の回収を１４日間実施した。また、開放創作成後も同じ飼料の投与を継続した。
なお、表中の開放創傷面積（％）は、［各試料投与群における（所定期間飼育後の開放創傷面積／開放創作成時の創傷面積）×１００］で算出した。表中の数値は、平均値±標準偏差を表す。また、表中の※印は、コントロール食投与群と比較して有意差があることを示す（Ｐ＜０．０５）。
【００８５】
その結果、創傷前４、６、８週間の飼料投与群における、開放創作成時と比べた開放創傷面積平均値の変化は、それぞれ表２、３、４のとおりとなった。ＧＦＯＢ食（２）投与群においては、コントロール食投与群に比べて、創傷前４週間及び創傷前６週間の飼料投与において、１４日目で改善傾向が認められた。また、創傷前８週間の飼料投与群においては、ＧＦＯＢ食（２）投与群がコントロール食投与群に比べて、８日目より改善傾向が認められた。
【００８６】
ここで、同じ飼育期間で開放創傷面積の比［（各投与群の開放創傷面積（％）／コントロール投与群の開放創傷面積（％））×１００で算出される面積比］が９５％程度以下であれば、より良好な創傷治療効果があると考える。
このときに、ＧＦＯＢ食（２）における創傷前４週間投与群の創傷後１２日目の面積比が９５．６％であり、創傷前６週間投与群の創傷後１２日目の面積比が９５．９％であり、創傷前８週間投与群の創傷後８日目の面積比が８７．６％であった。このようにＧＦＯＢ食（２）を創傷後に８日目以上投与した場合、創傷改善効果は良好であった。なお、前記面積比は、ＧＦＯＢ食（２）８週間投与群の１１日目においては８９．７％、１４日目では６０．５％であった。
【００８７】
さらに、１４日目の開放創傷面積では、ｔ検定の結果、コントロール食投与群に比べて、危険率５％未満で有意差が認められた。
【００８８】
以上の結果から、ビフィズス菌、グルタミン、食物繊維及びオリゴ糖の４種を組み合わせて有効成分として含有させたＧＦＯＢ食は、特に創傷前８週間の継続投与において、創傷の治癒が有意に早くなる傾向があることが示唆された。
【００８９】
【表２】
2015120646.tif 000003
【００９０】
【表３】
2015120646.tif 000004
【００９１】
【表４】
2015120646.tif 000005