(57)【要約】【課題】ワキガ等、嫌な体臭の発生を抑制することができる消臭剤の提供。【解決手段】アズキからエタノール抽出した組成物は、皮膚を保護する働きのある皮膚常在菌である表皮ブドウ球菌に対して殺菌活性を示さず、ワキガ起因菌の一つとされているＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  属菌に対して強い殺菌活性を示し、ワキガ臭などの体臭を防ぐ。これを含有する化粧料、石鹸やナプキンは、体臭の発生を防ぐ作用がある。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
体臭の発生を抑制する方法であって、体臭を発生させる原因菌のみに殺菌効果を有する、アズキ（種）（小豆、Ｖｉｇｎａ  ａｎｇｕｌａｒｉｓ）及びインゲン豆（種）など全ての抽出物を用いることを特徴とする方法。
【請求項２】
請求項１に記載の体臭が、ワキガ臭、生理臭であることを特徴とする方法。
【請求項３】
請求項１に記載の体臭が、ワキガ臭であることを特徴とする方法。
【請求項４】
アズキの抽出物がエタノール抽出物である請求項１の方法。
【請求項５】
ワキガ原因菌としてコリネバクテリウム属（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｐ．）に対して、殺菌活性を有するが、常在菌であるブドウ球菌に殺菌作用を有さないことを特徴とする請求項１に記載するアズキ抽出物。
【請求項６】
アズキの抽出物がエタノール濃度１０％から８０％である請求項１の方法。
【請求項７】
アズキの抽出物がエタノール濃度２０％から６０％である請求項１の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、ワキガやその他の嫌な体臭の抑制に有益な体臭発生抑制剤およびその製造法に関する。
【背景技術】
【０００２】  ワキガや頭髪臭、生理臭などの嫌な体臭の発生を抑制することは大変重要であり、特にワキガ臭の為に、人前に出ることを避けるなど、通常の生活を快適に送ることが困難となっている場合があり、嫌な体臭を抑制することは、ワキガ臭に悩む人にとっては、大変重要なことである。【０００３】  ワキガ臭の原因として、皮膚に住む細菌によって発汗時にアポクリン腺から分泌される皮脂から生産される揮発性物質が主原因と考えられている。中でもコリネバクテリウム属細菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｐ．）は悪臭の鍵となる中程度炭素鎖脂肪酸やチオアルコール類を生成する。さらに様々な菌が多様な物質を生産し、それらが複合して不快臭となる（非特許文献１）【０００４】  ワキガ臭を抑制する方法として、原料となるアポクリン腺の分泌をはじめとする発汗を抑制し、ワキガ臭の原因を除去することが挙げられる。そのため外科的に手術により汗腺を除去する方法があるが、患者の負担は大きい。【０００５】  一方、手軽な対症法として、制汗デオドラント製品が用いられているが、デオドラント常用による肌荒れや皮膚の異常を訴える人が増えている。デオドラント剤の制汗成分に、殺菌成分が加えられており、制汗デオドラント製品の多用による肌荒れや皮膚の異常は、無差別に表皮ブドウ球菌をはじめとする皮膚常在菌叢を破壊する殺菌成分に起因する。従って、常在細菌叢への影を抑えつつ、ワキガ等の悪臭の原因菌を除去する技術開発が望まれている【０００６】  皮膚に住む主要常在菌のうち表皮ブドウ球菌は、有機酸を生産して皮膚をｐＨ５前後の弱酸性に保つとともに、黄色ブドウ球菌など、より病原性の強い細菌の侵入を、抑制している重要な常在菌である。人間の皮膚表面には、数十種類の常在菌が生息し（非特許文献２、３、４、５、６）、皮膚を健全に保っている。常在菌を殺菌せずに、ワキガの原因菌のようなコリネバクテリウム属など、有害な菌のみを殺菌できるような選択的殺菌剤は、これまでに知られていない。ヒトの皮膚表面で増殖し、皮膚の健康状態を改善させる有用菌を選択的に増殖させて、有用菌とさらに有用菌が産生する物質から選択した組成物を、ヒトの皮膚に投与するという美容方法の特許がある（特許文献１）。【０００７】アルキルジアミノエチルグリシン塩とトリクロサン混合物は、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｍｉｎｕｔｉｓｓｉｍｕｍに加え、表皮ブドウ球菌に対しても殺菌効果を示す。これらは化粧品などに含まれた場合界面活性剤と殺菌剤となる。（特許文献２）。【０００８】１，２−アルカンジオールを主成分とし、それと塩化リゾチームあるいはそれとカツミレ精油由来のα−ビサボロールの混合物では、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｍｉｎｕｔｉｓｓｉｍｕｍに対する殺菌効果が確認されている。アルカンジオールは化粧品などに含まれた場合、指定成分でない殺菌剤、防腐剤となる（特許文献３，４）。【０００９】一方、既知の殺菌物質である炭素数８〜２２を有する脂肪酸ショ糖エステルがＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｍｉｎｕｔｉｓｓｉｍｕｍに対して選択的抗菌作用があることが確認されている。脂肪酸ショ糖エステルは食品の乳化剤としても使われている界面活性剤である（特許文献５���。【００１１】古来より、身近に存在している食材や、様々な植物について、様々な抽出法により活性成分を抽出し、殺菌活性の検討を重ねた。特に、アズキは、食用としての効能は、脚気、はれもの、低血圧、疲労回復、筋肉痛、肩こりに効くことが知られているが、殺菌作用があることは知られていない。特に、ワキガ症など、体臭の防ぐという効能についての報告はない。アズキの煮汁中の配糖体について、抗腫瘍活性があること（特許文献６、非特許文献７，８）および血糖降下活性、細胞接着阻害、高脂血症予防等の効果があること（非特許文献９，１０，１１、１２）、アレルギー疾患に有効であること（特許文献７）の報告はある。【００１０】発明者は、植物系ポリフェノール及び植物性脂質、タンパク質、糖質、ビタミン類を用いることにより、ワキガ原因菌の一つであるブドウ球菌を抑制するワキガ防止用品を開発してきた（特許文献８）。
発明者らは、アズキに含まれる成分に関して、ワキガ症の原因菌であるコリネバクテリウム属細菌に対して特異的に殺菌効果を有するが、皮膚を保護する作用のある常在菌は殺菌せず、常用しても皮膚障害が少なく安全性の高い殺菌剤を見いだすに至った。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】ＰＣＴ／ＪＰ２０１２／０７８８３５
【特許文献２】特開２００９−２６３３１５
【特許文献３】特開２００７−１４５７５０
【特許文献４】特開２００９−４６４４２
【特許文献５】特開２００２−２５５７７５
【特許文献６】特開２００３−６３９６７
【特許文献７】特開２０１１−１７８６８０
【特許文献８】特開２０１０−１８４９００
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】Ａ．Ｊａｍｅｓ  ｅｔ．ａｌ．，ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｅｃｏｌ，８３（３）：５２７−５４０（２０１３）
【非特許文献２】出来尾  格、服部  正平共著、「人体と共生する１００兆個の菌たち」、Ｎｅｗｔｏｎ（株式会社ニュートンプレス刊），２０１０年１１月号，ｐｐ．６８−７５．
【非特許文献３】桜井稔三：医系微生物学（１９９３）加藤延夫編集，朝倉書店（東京）
【非特許文献４】Ｎａｔｕｒｅ，４６５：３４６−３４（２０１０）
【非特許文献５】Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，２０１０；１３０：１９２−２００（２０１０）
【非特許文献６】ＫＡＯ  ｈｙｇｉｅｎｅ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ，１：１８−２１（２００２）
【非特許文献７】日本食品科学工学誌，４９：３３９−３４４（２００２）
【非特許文献８】日本食品科学工学誌，５８：２８１−２８７（２００５）
【非特許文献９】Ｂｉｏｓｉｃ．Ｂｉｏｔｅｃｈｏｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，６８，２４２１−２４２６（２００４）
【非特許文献１０】Ｂｉｏｓｉｃ．Ｂｉｏｔｅｃｈｏｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，６９：４４８−４５４４（２００５）
【非特許文献１１】Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，２５：１３４−１４１（２００９）
【非特許文献１２】Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，２５：３１８−３２１（２００９）
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】  本発明は、悪臭と発生させる、いわゆるワキガの原因とコリネバクテリウム属細菌に特異的で、かつ、表皮ブドウ球菌に作用が少ない、常用しても皮膚障害が少なく安全性の高い殺菌剤を見いだす為に、食経験のある植物に求め、その抽出物をコリネバクテリウム属細菌に優れた殺菌力を示す天然成分として提供することを目的とする。さらに本発明は当該コリネバクテリウム属細菌の生育並びに増殖を防止することによって、ワキガの発生を有意に防止できる安全性の高い体臭発生防止剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１４】  本発明者は、古来より、身近に存在している食材や、様々な植物について、様々な抽出法により活性成分を抽出し、殺菌活性の検討を重ねた特許では、アズキを熱湯で煮沸することによって生じた煮汁から上清を分離し、合成吸着剤に吸着させた後、エタノール水溶液で溶出した成分を用いている。本発明者らは、アズキの熱水抽出でも効果は有るがさらに効率を得るために、鋭意検討を重ねた結果、アズキの常温でのエタノール抽出物がＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｍｉｎｕｔｉｓｓｉｍｕｍおよびＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｔｒｉａｔｕｍに対して殺菌作用を示すが、同濃度で表皮ブドウ球菌には作用は認められないことを確認した。皮膚に常在する表皮ブドウ球菌が優勢な皮膚細菌叢は他の病原微生物の侵入を防ぐことが知られており、本発明の使用によって、健全な皮膚細菌叢を大きく破壊すること無く、ワキガ起因菌を減少させることが出来ることが明らかとなった。原材料物質は産地や種類を問わず大納言等のササゲ属と金時豆等のインゲン属の種子および草根皮子の全ての抽出物を対象とする。
【発明を実施するための形態】
【００１５】  以下、本発明を実施するための好適な形態について説明する。なお、以下に説明する実施形態は、本発明の代表的な実施形態の一例を示したものであり、これにより本発明の範囲が狭く解釈されることはない。
【００１６】  本発明者らは、腋下部の処理法の一つとして、殺菌液を含んだカット綿などを一定時間当てることを想定した。すなわち、殺菌活性のある水溶性画分と被検菌検索液を混合して直接接触させ、一定時間処理後に生き残っている菌数を測定し、生残率として表した。この方法で検出できるのは、静菌的ではなく、殺菌的に作用した活性となる。アルコール抽出物ではアルコールそのものが極めて強い殺菌活性を持っているため、抽出後にアルコールを除去し、滅菌水に溶解した水溶性画分を用いた。その結果、アズキのアルコール抽出物の水溶性画分中にコリネバクテリウム細菌に対する殺菌活性を確認した。アルコール抽出法は、アズキをアルコールで抽出する方法であれば、どの様な方法でも良いが、熱水抽出法では、活性が減少するので、例えば、水に一夜、室温で浸漬した後、アルコール濃度を１０％〜８０％、好ましくは、４０％〜６０％となるように、エタノールを加えても良いし、水に浸漬せずに、１０％〜８０％エタノール、好ましくは、４０％〜６０％エタノールを加えて、室温で、緩やかに振盪しながら、抽出する方法を取ることができる。
【００１７】  本発明はコリネバクテリウム属細菌、例えばＣ．ｍｉｎｕｔｉｓｓｉｍｕｍおよびＣ．ｓｔｒｉａｔｕｍに対して強い殺菌活性を示すが、人皮膚の代表的常在菌であり、健康な皮膚細菌叢の維持に重要な表皮ブドウ球菌にはほとんど活性を示さなかった。
【００１８】  本発明による１回の処理によって、コリネバクテリウム属細菌の生残数は１／１０００以下に減少し、菌が増殖し、菌数が回復するまでにより長い時間を要する。一方、表皮ブドウ球菌は本発明の影響をほとんど受けない。従って、表皮ブドウ球菌の菌数が回復し、かつコリネバクテリウムの菌数の回復が進む前の適切な時間を置いて数回反復使用することにより、常在菌叢に影響を与えずにコリネバクテリウムを抑制することが出来る。
【００１９】  そこで、ワキガ臭のある被験者の腋下に、入浴後本発明を含む試験液を浸したかカット綿を密着させる処理を３回以上繰り返したところ、ワキガ臭の軽減がみられた。
【００２０】  本成分は水溶性であるため、ワキガ抑制剤等として使用するためには、使用形態に応じて様々な担体並びに防腐剤、保湿剤、ｐＨ調製剤、香料などを加えることが出来る。
【００２１】担体として、液化状態では水（例えば生成水）、水溶性溶剤（例えばグリセロールなど）を担体として用いることが出来る。アルコール類（例えばエタノール）等は、本発明の選択的殺菌活性を失わない濃度で加えることができる。
【００２２】防腐剤や保湿剤として、様々な水溶性物質（例えば１，３‐ブチレングリコールやフェノキシエタノール）、アズキ以外の植物由来成分などを加えることが出来る。
【００２３】ｐＨ調製剤としては、クエン酸、ＤＬ‐リンゴ酸、コハク酸、ＤＬ−酒石酸、ＤＬ−乳酸、酢酸ならびにその塩類などを挙げることができる。
【００２４】  前述する成分は単に一例を示したにすぎず、体臭抑制剤としては、他の添加成分も含めて、通常化粧品等に用いられる各種の成分が使用できる。これらの担体および添加剤は人体に安全なものが好ましく、より好ましくは皮膚等に対して刺激性が無いものとする。
【００２５】  さらに本発明のアズキ抽出物は、スプレー式水溶液や、石鹸、水溶液ボディーソープなどの形態を取ることができる。使用方法としては、コリネバクテリウム属が存在すると考えられる皮膚表面に、本発明のアズキ抽出物をカット棉などに浸み込ませて、臭いのする患部をふき取った後、更にアズキ抽出物を浸み込ませたカット棉を直接接触させる使用形態のほか、本発明のアズキ抽出物をスプレーやエアゾールなどの形態として、直接、患部にスプレーする方法や、石けんを製造する際に混入させる方法、チューブ入り軟膏やバテックス式軟膏として使用することなど、様々な使用形態で用いることができる。実施例として、最も悪臭で効果が分かり易い実施例のみを示したが、本発明のアズキ抽出物は、ワキガ臭だけでなく、女性の生理臭にも効果があり、ナプキンに本発明のアズキ抽出物を浸み込ませることによって、生理臭を防ぐことができることを確認している。
【００２６】
【表１】
アズキからのＣｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｍｉｎｕｔｉｓｓｉｍｕｍ  に対する活性成分の抽出操作の各段階における試料の殺菌活性を示す。生残率が低いほど殺菌活性が強いことを示す。ＨＰ２０に吸着した活性成分が、メタノールにより回収されている。
【表２】
アズキ殺菌成分のコリネバクテリウム族細菌に対する選択的殺菌活性を示す。生残率が低いほどアズキ成分に対する感受性が低いことを示す。表皮ブドウ球菌は感受性が低いのに対し、コリネバクテリウム族菌は極めて感受性が高い。
【表３】
アズキ殺菌成分で３０分処理後の残存菌の回復の様子を示す。増殖速度は全ての菌において対照とアズキ殺菌成分処理で大きな変化は見られない。一方、資料処理後の回復時間の差はコリネバクテリウム族細菌で極めて大きいことは、アズキ殺菌成分処理で菌数が激減していることを示す。
【実施例】以下、実験例および実施例により本発明を解説する。ただし本発明はかかる実施例によって何ら制限されるものではない。【００２７】＜実施例１：ワキガ原因菌に対する殺菌組成物の抽出＞
アズキ（小豆、Ｖｉｇｎａ  ａｎｇｕｌａｒｉｓ）をアルコール抽出し、合成吸着剤処理により活性成分を含む試料を得た。【００２８】アズキ（大納言）５０ｇに対し３５％（ｖ／ｖ）のエタノールを２００ｍｌを加えて、ガラス瓶に密封し、常温で抽出した。固形物を除き、上澄みを０．８μｍの酢酸セルロース膜で濾過したろ液を、ロータリーエバポレーターで減圧下に乾固した。乾固物を１５０ｍｌの精製水に溶解し、合成吸着剤ダイアイオンＨＰ２０に吸着させ、メタノールで段階的に溶出した。４０−６０％メタノールで溶出した画分を集め、メタノールを蒸発、乾固後、等量の滅菌水に溶解した。これを０．２μｍの酢酸セルロース膜で濾過滅菌したものを試料として、ワキガ菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｍｉｎｕｔｉｓｓｉｍｕｍ  （ＮＢＲＣ１５３６１）に対する殺菌活性を測定した。殺菌活性の測定法は、実施例２に従い、被検菌と試料を混合し、３７℃で３０分保温処理した後、希釈して生残菌数を測定した。その結果、表１に示したように、アズキの熱水抽出液では、ワキガ原因菌の殺菌活性は、見られなかったが、エタノール抽出物およびその抽出液をダイアイオンＨＰ２０で吸着させた後、メタノールで溶出画分では、ワキガの原因菌の生育率が僅か１％であることが確認された。今後の実施例おいて、このメタノールでの溶出画分をワキガ原因菌の殺菌活性組成物として使用するが、メタノール溶出画分組成物の代わりに、エタノール抽出液を用いることができる。
【表１】
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【００２９】＜実施例２：ワキガ原因菌に対する殺菌活性組成物の各種菌に対する殺菌作用（生残数測定）の比較＞
実験例１で得たワキガ原因菌に対する殺菌活性組成物を各種菌（ワキガ菌［Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｍｉｎｕｔｉｓｓｉｍｕｍ  （ＮＢＲＣ  １５３６１），Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｔｒｉａｔｕｍ（ＮＢＲＣ  １５２９１）］および有用常在菌である表皮ブドウ球菌［Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ（ＡＴＣＣ  １２２２８）］と混合し、一定時間処理した後、希釈して生残菌数を測定した。【００３０】細菌はＬＢ液体培地（Ｌｅｎｎｏｘ、ナカライテスク）を用い、３０℃で１６時間培養し、菌液の濃度（６６０ｎｍ）を同培地で調整して０．５に合わせた。これを同培地で千分の一に希釈した菌液１０μｌと、滅菌水で適宜希釈したワキガ原因菌の殺菌活性組成物１００μｌを１．５ｍｌサンプルチューブ内で混合し、３７℃で３０分保温した。滅菌水９００μｌを加えて混合し、被検液とした。その１００μｌをとって、ＬＢ寒天培地上に塗布した。３０℃で２日間培養後、現れたコロニーを計数した。菌液に試料の代わりに滅菌水を加えたものを対照として同様に処理し、それぞれのそのコロニー数を基準として生残率を算出した。その結果、表２に示したように、ワキガ原因菌の殺菌活性組成物の組成物は、ワキガ原因菌に対する殺菌活性はあるが、有用な常在菌に対して、ほとんど殺菌作用はないことが明らかとなった。
【表２】
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【００３１】＜実施例３：ワキガ原因菌に対する殺菌作用のある組成物の有用菌に対する増殖抑制効果＞
実施例２で得た処理後の各種菌（ワキガ菌［Ｃ．ｍｉｎｕｔｉｓｓｉｍｕｍ、Ｃ．ｓｔｒｉａｔｕｍ］および表皮ブドウ球菌［Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ］を液体培養し、増殖を観察した。対照として組成物の代わりに水で処理したものを用いた。【００３２】実施例２で得た各種菌の被検液１００μＬを５ｍＬのＬＢ培地に植菌し、３０℃，１５０ｒｐｍで振盪培養した。菌液濃度が０．２（６６０ｎｍ）となるまでの回復時間、および増殖速度（菌体数が２倍になるのに要する時間）を算出した。その結果、表３に示したように、実施例１で作製したワキガ原因菌の殺菌活性組成物は、ワキガ原因菌の２種類の菌に対して、増殖抑制効果が見られたが、有用な常在菌に対して、全く増殖に影響を与えないことが明らかとなった。
【表３】
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【００３３】＜実施例４：ボランティアによるワキガ菌殺菌活性組成物の効果＞
ワキガが強いと判定された被験者１０名に対して、入浴後、最初の３日間は殺菌成分以外のものを含む試験液を、次いでアズキ３５％エタノール抽出物を含んだ試験液を浸したカット綿を被験者の腋下に３０分間密着させる処理をそれぞれ３日繰り返した後、下記の３段階で、ワキガ臭の改善の評価を行った。その結果、表４に示したように、全ての被験者でワキガ臭の軽減が観察された。
評価方法
１．基本１の処置を３日間繰り返すとほぼ自分の身体側の臭いが消えたことが自覚できた。
２．臭いは本人の嗅覚で自覚するだけではなく、第三者による確認も併せて行った。
【表４】
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【００３４】  本発明の選択的殺菌成分は、有益な表皮ブドウ球菌を中心とする皮膚細菌叢と維持しながら、体臭、特にワキガ臭の発生の原因となるコリネバクテリウム属細菌を抑制することが出来る。従って、皮膚細菌叢によって維持される本来の自浄作用や保護作用を維持しつつ、ワキガの発生を抑えることが出来る。アズキは食経験が豊富で、抗アレルギー成分を含有することが知られており、安全かつ皮膚に優しい選択的殺菌成分として有用である。
【工業上の利用可能性】
【００３５】    本発明に係る体臭発生抑制剤によれば、人の肌に優しく、かつ、継続的に、体臭を防    止できる。従って、この体臭発生抑制剤は、大変有用である。