(57)【要約】【課題】皮膚バリア機能を増強する作用を有する新たな成分の提供。【解決手段】ニンジン及びその抽出物から選ばれる１種以上を含有する、皮膚バリア機能増強剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ニンジン及びその抽出物から選ばれる１種以上を含有する、皮膚バリア機能増強剤。
【請求項２】
ニンジン及びその抽出物から選ばれる１種以上を含有する、皮膚バリア機能関連タンパク発現促進剤。
【請求項３】
皮膚バリア機能タンパクが、claudin-1、desmoglein及びinvolucrinから選ばれる１種以上である、請求項２に記載の剤。
【請求項４】
ニンジン及びその抽出物から選ばれる１種以上を含有する、肌あれ、かぶれ、ただれ、湿疹及び皮膚炎よりなる群から選ばれる１種以上の症状の緩和に用いられる医薬。
【請求項５】
ニンジン及びその抽出物から選ばれる１種以上を含有する、乾燥性皮膚疾患及び炎症性皮膚疾患から選ばれる疾患の予防及び／又は治療に用いられる医薬。
【請求項６】
乾燥性皮膚疾患及び炎症性皮膚疾患から選ばれる疾患が、乾皮症、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、主婦湿疹及び乾燥性湿疹から選ばれる疾患である、請求項５に記載の医薬。
【請求項７】
皮膚外用剤である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の剤または医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚におけるバリア機能を増強させる作用を有する皮膚バリア機能増強剤等に関する。
【０００２】
皮膚におけるバリア機能は、異物の生体内への侵入を防ぐ重要な働きをしている。斯かる機能の不全は、アトピー性皮膚炎等の炎症や肌荒れの原因となり、また、皮膚からの水分の喪失により乾皮症等の原因にもなる。そのため、皮膚のバリア機能を増強する成分の探索が、医薬品分野・化粧品分野において課題となっている。  
研究の進展により、表皮の構造と皮膚バリア機能との関連が分子レベルで明らかとなりつつあり、近年注目を集めている。例えば、表皮を構成する角質細胞膜（コーニファイド・セルエンベロープ）の構成分子であるインボルクリン（involcrin）の産生を促進することで角質バリア機能を改善することが提案されている（特許文献１）。また、角質細胞間の接着構造であるデスモソームとその構成分子たるデスモグレイン（desmoglein）の分解や、クローディン(claudin)の欠損と、皮膚バリア機能低下の関連についてもそれぞれ報告されている（非特許文献１、２）。そのため、こうした皮膚バリア機能に関連するタンパク質の発現を促進する成分は、皮膚バリア機能の増強に有用であると考えられる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００９−１１４１４６
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Descargues P, et. al., Nat. Genet., 37, 56-65 (2005)
【非特許文献２】Furuse M, et. al., J. Cell Biol., 156, 1099-1111 (2002)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の課題は、皮膚バリア機能を増強する作用を有する新たな成分を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
そこで、本発明者らは鋭意検討したところ、アロエ、オウギ、ジオウ、シャクヤク、セネガ、トウキ若しくはニンジン又はそれらの抽出物や、パントテン酸類、ピリドキシン類が皮膚バリア機能の増強作用を有すること、そして斯かる皮膚バリア機能の増強作用が、皮膚バリア機能関連タンパクの発現促進に起因することを見出し、本発明を完成した。
【０００７】
すなわち、本発明は以下の［１］〜［１０］を提供するものである。
［１］皮膚バリア機能関連タンパク発現促進剤を含有する、皮膚バリア機能増強剤。
［２］アロエ及びその抽出物、オウギ及びその抽出物、ジオウ及びその抽出物、シャクヤク及びその抽出物、セネガ及びその抽出物、トウキ及びその抽出物、ニンジン及びその抽出物、パントテン酸類並びにピリドキシン類から選ばれる１種以上を含有する、皮膚バリア機能増強剤。
［３］アロエ及びその抽出物、オウギ及びその抽出物、ジオウ及びその抽出物、シャクヤク及びその抽出物、セネガ及びその抽出物、トウキ及びその抽出物、ニンジン及びその抽出物、パントテン酸類並びにピリドキシン類から選ばれる１種以上を含有する、皮膚バリア機能関連タンパク発現促進剤。
［４］皮膚バリア機能関連タンパクが、claudin-1、desmoglein及びinvolucrinから選ばれる１種以上である、［１］又は［３］記載の剤。
［５］アロエ及びその抽出物、オウギ及びその抽出物、ジオウ及びその抽出物、シャクヤク及びその抽出物、セネガ及びその抽出物、トウキ及びその抽出物、ニンジン及びその抽出物、パントテン酸類並びにピリドキシン類から選ばれる１種以上を含有する、次の諸症状の緩和に用いられる医薬：肌あれ、かぶれ、ただれ、湿疹又は皮膚炎。
［６］アロエ及びその抽出物、オウギ及びその抽出物、ジオウ及びその抽出物、シャクヤク及びその抽出物、セネガ及びその抽出物、トウキ及びその抽出物、ニンジン及びその抽出物、パントテン酸類並びにピリドキシン類から選ばれる１種以上を含有する、保湿剤。
［７］アロエ及びその抽出物、オウギ及びその抽出物、ジオウ及びその抽出物、シャクヤク及びその抽出物、セネガ及びその抽出物、トウキ及びその抽出物、ニンジン及びその抽出物、パントテン酸類並びにピリドキシン類から選ばれる１種以上を含有する、皮膚外用剤。
［８］保湿用の化粧品の形態である、［７］記載の皮膚外用剤。
［９］乾燥性皮膚疾患及び炎症性皮膚疾患から選ばれる疾患の予防及び／又は治療に用いられる医薬品（医薬部外品を含む。本明細書において以下同じ。）の形態である、［７］記載の皮膚外用剤。
［１０］乾燥性皮膚疾患及び炎症性皮膚疾患から選ばれる疾患が、乾皮症、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、主婦湿疹及び乾燥性湿疹から選ばれる疾患である、［９］に記載の皮膚外用剤。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によれば、優れた皮膚バリア機能増強作用を有し、保湿用化粧品や、乾燥性皮膚疾患・炎症性皮膚疾患の予防・治療用の医薬品等として有用な剤を提供できる。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
「アロエ」とは、Aloe  Ferox  Miller又はこれとAloe  Africana  Miller又はAloe  spicata  Bakerとの雑種（Liliaceae）の葉を意味する。アロエは必要に応じてその形態を調節することができる。また、本発明の実施に際しての取扱いの便宜等を考慮して、アロエに何らかの抽出処理を施したもの（以下、「アロエの抽出物」と称する。）を用いてもよい。
なお、上記「アロエの抽出物」には、抽出処理に加えて、加熱、乾燥、粉砕等の加工処理を施したものも包含される。具体的には、アロエを必要に応じて適当な大きさとした後に、適当な抽出溶媒を加えて浸出した液や、当該浸出液を濃縮した液（軟エキス、チンキ等）、さらにこれらを乾燥させたもの（乾燥エキス等）なども本発明の「アロエの抽出物」に包含される。
本発明において、「アロエ及びその抽出物から選ばれる１種以上」としては、第十六改正日本薬局方に記載の「アロエ」又は「アロエ末」が好ましい。
【００１０】
アロエの抽出物の製造方法は特に限定されず、例えば第十六改正日本薬局方  製剤総則の「エキス剤」、「浸剤・煎剤」、「チンキ剤」、「流エキス剤」の項の記載など、公知の植物抽出物の製造方法を参考にして製造できる。具体的には例えば、アロエを必要に応じて切断、加熱、乾燥、粉砕等したうえ、適当な抽出溶媒を加え抽出を行うことで、製造することができる。得られた抽出物は、必要に応じさらに濃縮、乾燥等させてもよい。
【００１１】
上記抽出溶媒としては例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール等の低級一価アルコール；エチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の低級多価アルコール；ジエチルエーテル等のエーテル類；アセトン、エチルメチルケトン等のケトン類；酢酸エチル等のエステル類；アセトニトリル等のニトリル類；ペンタン、ヘキサン、シクロペンタン、シクロヘキサン等のアルカン類；ジクロロメタン、クロロホルム等のハロゲノアルカン類；ベンゼン、トルエン等の芳香族炭化水素；ジメチルホルムアミド等のアミド類；ジメチルスルホキシド等のスルホキシド類；水（熱水を含む）等が挙げられる。これらは各々単独で用いてもよいし、２種以上を組み合わせて用いてもよい。本発明においては、水、エタノール、又は水とエタノールの混液が好ましい。
抽出操作は特に限定されず、植物からの抽出操作に利用される公知の方法を採用することができ、具体的には例えば、抽出溶媒への浸漬（冷浸、温浸、パーコレーション等）、超臨界流体や亜臨界流体を用いた抽出などが挙げられる。なお、抽出効率を上げるため、撹拌や抽出溶媒中でホモジナイズしてもよい。
抽出温度は特に限定されず、使用する抽出溶媒、抽出操作等により異なるが、５℃程度から抽出溶媒の沸点以下の温度とするのが好ましい。
抽出時間は特に限定されず、使用する抽出溶媒、抽出操作等により異なるが、１時間〜１４日程度とするのが好ましい。
【００１２】
本発明において、アロエ及びその抽出物から選ばれる１種以上としては、市販品を用いることができ、具体的な市販品としては例えば、日局「アロエ末」、アロエエキス（以上、小城製薬（株）製）などが挙げられる。
【００１３】
「オウギ」（黄耆）とは、第十六改正日本薬局方に記載のとおり、キバナオウギ（Astragalus  membranaceus  Bunge）又はAstragalus  mongholicus  Bunge（Leguminosae）の根を意味する。オウギは必要に応じてその形態を調節することができる。また、本発明の実施に際しての取扱いの便宜等を考慮して、オウギに何らかの抽出処理を施したもの（以下、「オウギの抽出物」と称する。）を用いてもよい。
なお、上記「オウギの抽出物」には、抽出処理に加えて、加熱、乾燥、粉砕等の加工処理を施したものも包含される。具体的には、オウギを必要に応じて適当な大きさとした後に、適当な抽出溶媒を加えて浸出した液や、当該浸出液を濃縮した液（軟エキス、チンキ等）、さらにこれらを乾燥させたもの（乾燥エキス等）なども本発明の「オウギの抽出物」に包含される。
【００１４】
オウギの抽出物の製造方法は特に限定されず、例えば、上記したアロエの抽出物の製造方法と同様の方法により製造できる。
【００１５】
本発明において、オウギ及びその抽出物から選ばれる１種以上としては、市販品を用いることができ、具体的な市販品としては例えば、オウギエキス、オウギ流エキス、オウギ流エキス−Ｃ、黄耆乾燥エキス（以上、日本粉末薬品（株）製）等が挙げられる。
【００１６】
「ジオウ」（地黄）とは、第十六改正日本薬局方に記載のとおり、アカヤジオウRehmannia  glutinosa  Liboschitz  var.  purpurea  Makino又はRehmannia  glutinosa  Liboschitz（Scrophulariaceae）の根又はそれを蒸したものである。ジオウは必要に応じてその形態を調節することができ、小片、小塊に切断若しくは粉砕、又は粉末に粉砕することができる。また、本発明の実施に際しての取扱いの便宜等を考慮して、ジオウに何らかの抽出処理を施したもの（以下、「ジオウの抽出物」と称する。）を用いてもよい。
なお、上記「ジオウの抽出物」には、抽出処理に加えて、加熱、乾燥、粉砕等の加工処理を施したものも包含される。具体的には、ジオウを必要に応じて適当な大きさとした後に、適当な抽出溶媒を加えて浸出した液や、当該浸出液を濃縮した液（軟エキス、チンキ等）、さらにこれらを乾燥させたもの（乾燥エキス等）なども本発明の「ジオウの抽出物」に包含される。
【００１７】
ジオウの抽出物の製造方法は特に限定されず、例えば、上記したアロエの抽出物の製造方法と同様の方法により製造できる。
【００１８】
本発明において、ジオウ及びその抽出物から選ばれる１種以上としては、市販品を用いることができ、具体的な市販品としては例えば、ジオウエキス、ジオウエキス−Ａ、ジオウ流エキス、ジオウ流エキス−Ｃ、地黄乾燥エキス（以上、日本粉末薬品（株）製）等が挙げられる。
【００１９】
「シャクヤク」（芍薬）とは、第十六改正日本薬局方に記載のとおり、シャクヤクPaeonia  lactiflora  Pallas（Paeoniaceae）の根を意味する。シャクヤクは必要に応じてその形態を調節することができ、小片、小塊に切断若しくは粉砕、又は粉末に粉砕することができ、例えば、シャクヤクを粉末とした「シャクヤク末」も本発明に用いることができる。また、本発明の実施に際しての取扱いの便宜等を考慮して、シャクヤクに何らかの抽出処理を施したもの（以下、「シャクヤクの抽出物」と称する。）を用いてもよい。
なお、上記「シャクヤクの抽出物」には、抽出処理に加えて、加熱、乾燥、粉砕等の加工処理を施したものも包含される。具体的には、シャクヤクを必要に応じて適当な大きさとした後に、適当な抽出溶媒を加えて浸出した液や、当該浸出液を濃縮した液（軟エキス、チンキ等）、さらにこれらを乾燥させたもの（乾燥エキス等）なども本発明の「シャクヤクの抽出物」に包含される。
【００２０】
シャクヤクの抽出物の製造方法は特に限定されず、例えば、上記したアロエの抽出物の製造方法と同様の方法により製造できる。
【００２１】
本発明において、シャクヤク及びその抽出物から選ばれる１種以上としては、市販品を用いることができ、具体的な市販品としては例えば、シャクヤク末、シャクヤク乾燥エキス（日本粉末薬品（株）製）等が挙げられる。
【００２２】
「セネガ」とは、第十六改正日本薬局方に記載のとおり、セネガ（Polygala  senega  Linne）又はヒロハセネガ（Polygala  senega  Linne  var.  latifolia  Torrey  et  Gray（Polygalaceae））の根を意味する。セネガは必要に応じてその形態を調節することができ、小片、小塊に切断若しくは粉砕、又は粉末に粉砕することができ、例えば、セネガを粉末とした「セネガ末」も本発明に用いることができる。また、本発明の実施に際しての取扱いの便宜等を考慮して、セネガに何らかの抽出処理を施したもの（以下、「セネガの抽出物」と称する。）を用いてもよい。
なお、上記「セネガの抽出物」には、抽出処理に加えて、加熱、乾燥、粉砕等の加工処理を施したものも包含される。具体的には、セネガを必要に応じて適当な大きさとした後に、適当な抽出溶媒を加えて浸出した液や、当該浸出液を濃縮した液（軟エキス、チンキ等）、さらにこれらを乾燥させたもの（乾燥エキス等）なども本発明の「セネガの抽出物」に包含される。
【００２３】
セネガの抽出物の製造方法は特に限定されず、例えば、上記したアロエの抽出物の製造方法と同様の方法により製造できる。
【００２４】
本発明において、セネガ及びその抽出物から選ばれる１種以上としては、市販品を用いることができ、具体的な市販品としては例えば、セネガ末、セネガ乾燥エキス（以上、日本粉末薬品（株）製）等が挙げられる。
【００２５】
「トウキ」（当帰）とは、第十六改正日本薬局方に記載のとおり、トウキ（Angelica  actiloba  Kitagawa）又はホッカイトウキ（Angelica  acutiloba  Kitagawa  var.  sugiyamae  Hikino（Umbelliferae））の根を意味する。トウキは必要に応じてその形態を調節することができ、小片、小塊に切断若しくは粉砕、又は粉末に粉砕することができ、例えば、トウキを粉末とした「トウキ末」も本発明に用いることができる。また、本発明の実施に際しての取扱いの便宜等を考慮して、トウキに何らかの抽出処理を施したもの（以下、「トウキの抽出物」と称する。）を用いてもよい。
なお、上記「トウキの抽出物」には、抽出処理に加えて、加熱、乾燥、粉砕等の加工処理を施したものも包含される。具体的には、トウキを必要に応じて適当な大きさとした後に、適当な抽出溶媒を加えて浸出した液や、当該浸出液を濃縮した液（軟エキス、チンキ等）、さらにこれらを乾燥させたもの（乾燥エキス等）なども本発明の「トウキの抽出物」に包含される。
【００２６】
トウキの抽出物の製造方法は特に限定されず、例えば、上記したアロエの抽出物の製造方法と同様の方法により製造できる。
【００２７】
本発明において、トウキ及びその抽出物から選ばれる１種以上としては、市販品を用いることができ、具体的な市販品としては例えば、トウキ流エキス、トウキ乾燥エキス（以上、小城製薬（株）製）等が挙げられる。
【００２８】
「ニンジン」（人参）とは、第十六改正日本薬局方に記載のとおり、オタネニンジン（Panax  ginseng  C.  A   Meyer（Panax  schinseng  Nees）（Araliaceae））の細根を除いた根又はこれを軽く湯通ししたものを意味する。ニンジンは必要に応じてその形態を調節することができ、小片、小塊に切断若しくは粉砕、又は粉末に粉砕することができ、例えば、ニンジンを粉末とした「ニンジン末」も本発明に用いることができる。また、本発明の実施に際しての取扱いの便宜等を考慮して、ニンジンに何らかの抽出処理を施したもの（以下、「ニンジンの抽出物」と称する。）を用いてもよい。
なお、上記「ニンジンの抽出物」には、抽出処理に加えて、加熱、乾燥、粉砕等の加工処理を施したものも包含される。具体的には、ニンジンを必要に応じて適当な大きさとした後に、適当な抽出溶媒を加えて浸出した液や、当該浸出液を濃縮した液（軟エキス、チンキ等）、さらにこれらを乾燥させたもの（乾燥エキス等）なども本発明の「ニンジンの抽出物」に包含される。
【００２９】
ニンジンの抽出物の製造方法は特に限定されず、例えば、上記したアロエの抽出物の製造方法と同様の方法により製造できる。
【００３０】
本発明において、ニンジン及びその抽出物から選ばれる１種以上としては、市販品を用いることができ、具体的な市販品としては例えば、ニンジン末、人参乾燥エキス（日本粉末薬品（株）製）等が挙げられる。
【００３１】
本発明において、「パントテン酸類」には、パントテン酸そのもののほか、その誘導体（パンテノール、パンテチン、パンテテイン、補酵素Ａ等）及びそれらの塩（ナトリウム塩等のアルカリ金属；カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩等）も包含され、本発明においては、これらを単独で、又は２種以上を組み合わせて用いることができる。本発明においては、パンテノール、パンテチン、パントテン酸カルシウム及びパントテン酸ナトリウムよりなる群から選ばれる１種以上が好ましい。これらのパントテン酸類は公知の化合物であり、市販のものを用いてもよく、また、公知の方法により製造することも可能である。
【００３２】
本発明において、「ピリドキシン類」には、ピリドキシンそのもののほか、その誘導体（ピリドキサミン、ピリドキサール、リン酸ピリドキサール等）及びそれらの塩（カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩；塩酸塩等の無機酸塩等）も包含され、本発明においては、これらを単独で、又は２種以上を組み合わせて用いることができる。本発明においては、ピリドキシン塩酸塩が好ましい。これらのピリドキシン類は公知の化合物であり、市販のものを用いてもよく、また、公知の方法により製造することも可能である。
【００３３】
アロエ及びその抽出物、オウギ及びその抽出物、ジオウ及びその抽出物、シャクヤク及びその抽出物、セネガ及びその抽出物、トウキ及びその抽出物、ニンジン及びその抽出物、パントテン酸類並びにピリドキシン類から選ばれる１種以上は、下記試験例にて具体的に示される通り、皮膚バリア機能増強作用を有する。従って、皮膚バリア機能増強剤；肌あれ、かぶれ、ただれ、湿疹や皮膚炎の症状の緩和に用いられる医薬；保湿剤；皮膚外用剤（好適には、保湿用の化粧品、乾燥性皮膚疾患及び炎症性皮膚疾患から選ばれる疾患（好適には、乾皮症、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、主婦湿疹及び乾燥性湿疹から選ばれる疾患）の予防及び／又は治療用の医薬として用いられる皮膚外用剤）等の成分として用いることができる。
【００３４】
本発明の皮膚バリア機能増強剤、医薬、保湿剤を使用する場合においては、その投与方法としては、内服投与であっても経皮投与であっても良いが、皮膚バリア機能増強作用の観点から、経皮投与であるのが好ましい。
また、本発明の皮膚バリア機能増強剤、医薬、保湿剤又は皮膚外用剤の形態は特に限定されず、上記した投与方法を加味して医薬品分野、化粧品分野において用いられる剤形（例えば、第十六改正  日本薬局方に記載の剤形）とすればよい。本発明においては、外用散剤等の外用固形剤；リニメント剤、ローション剤等の外用液剤；外用エアゾール剤、ポンプスプレー剤等のスプレー剤；軟膏剤；クリーム剤；ゲル剤；テープ剤、パップ剤等の貼付剤が好ましい。
【００３５】
本発明の皮膚バリア機能増強剤、医薬、保湿剤又は皮膚外用剤において上記成分の投与量は特に限定されず、期待する皮膚バリア機能増強作用や適用する症状、適用方法・態様等により適宜調整すればよいが、具体的には例えば、１回当たり上記成分の１種又は２種以上を合計して０．０００１〜１０g、好ましくは０．００１〜５g、特に好ましくは０．０１〜３ｇ程度適用すればよい。
【００３６】
本発明の皮膚バリア機能増強剤、医薬、保湿剤又は皮膚外用剤は、上記成分をそのまま用いてもよいが、剤形等に応じて医薬品分野、化粧品分野において用いられる添加物を適宜組み合わせて用いてもよい。このような添加物としては例えば、油分；水；界面活性剤；アルコール；増粘剤；酸化防止剤；キレート剤；ｐＨ調整剤；防腐剤；香料などが挙げられる。
【実施例】
【００３７】
以下に実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に何ら限定されるものではない。
【００３８】
［試験例１］経上皮電気抵抗（transepithelial electric resistance：TER）の測定による皮膚バリア機能の評価
以下の方法によりTERを測定し、皮膚バリア機能の指標とした。
すなわち、正常ヒト表皮角化細胞（NHEK）を２４ウェルのコラーゲンコート済みのトランスウェル（コーニング社製）の上層に５〜６×１０4cells／ウェルで播種し、下層に増殖培地（KGN-Gold：Lonza社製）を添加した。
細胞藩種の３日後に、培地を、各種被験薬物を０．０１質量％の濃度で含有する１．５mM  Ca２＋含有増殖培地に交換した。
培地交換の２日後、電気抵抗値測定システム（Millicell-ERS MERS00001：ミリポア社製）を用いてTERを測定し、コントロール（被験薬物未添加）に対する相対電気抵抗値を以下の式より算出した。
相対電気抵抗値（％）＝各被験薬物処理サンプルのTER／コントロールのTER×100
試験は各被験薬物及びコントロールにつき６例ずつ実施した。
【００３９】
被験薬物としては以下のものを用いた。
アロエエキス、トウキエキスS（以上、小城製薬（株）製）、黄耆乾燥エキス、地黄乾燥エキス、シャクヤク乾燥エキス、セネガ乾燥エキス、人参乾燥エキス（以上、日本粉末薬品（株）製）、パントテン酸カルシウムS（BASFジャパン（株）製）、ピリドキシン塩酸塩（DSMニュートリションジャパン（株）製）
【００４０】
結果を表１に示す。相対電気抵抗値は平均値で表示した。
【表１】
2015105268.tif 000002
【００４１】
いずれの被験薬物の相対電気抵抗値も１００％を超えていたことから、これらの薬物は全て皮膚バリア機能の増強作用を有することが明らかとなった。特に、アロエ、オウギ、ジオウ、ニンジン及びピリドキシンの皮膚バリア機能増強作用は顕著に優れるものであった。
【００４２】
以上の試験結果から、アロエ及びその抽出物、オウギ及びその抽出物、ジオウ及びその抽出物、シャクヤク及びその抽出物、セネガ及びその抽出物、トウキ及びその抽出物、ニンジン及びその抽出物、パントテン酸類並びにピリドキシン類から選ばれる１種以上は、皮膚バリア機能増強剤；肌あれ、かぶれ、ただれ、湿疹や皮膚炎の症状の緩和に用いられる医薬；保湿剤；皮膚外用剤（保湿用の化粧品、乾燥性皮膚疾患及び炎症性皮膚疾患の予防及び／又は治療用の医薬など）等の成分として有用であることが明らかとなった。
【００４３】
［試験例２］皮膚バリア機能関連タンパクの発現量の確認
試験例１で確認された皮膚バリア機能の増強作用のメカニズムを確認するため、以下の方法により皮膚バリア機能関連タンパク（cladin-1、desmoglein及びinvolucrin）の発現量を確認した。
すなわち、正常ヒト表皮角化細胞（NHEK）を９６ウェルのプレートに４×１０４cells／ウェルで播種した。
細胞藩種の３日後に、各種被験薬物を０．０１質量％の濃度で含有する１．５mM  Ca２＋含有増殖培地に交換した。
培地交換の２日後に、細胞を４％ホルムアルデヒド液にて固定し、In-Cell ELISA
Colorimetric Detectionキット（Thermo Scientific社製）を用いて各皮膚バリア機能関連タンパクの発現量を測定し、コントロール（被験薬物未添加）に対する相対発現量を以下の式により算出した。
相対発現量＝各被験薬物処理サンプルのバリア機能関連タンパク発現量／コントロールのバリア機能関連タンパク発現量
なお、試験は各被験薬物及びコントロールにつき３例ずつ実施した。また、被験薬物としては試験例１と同じものを用いた。
【００４４】
結果を表２に示す。なお、相対発現量が１を超えるもの（すなわち、各被験薬物による処理に伴い発現が増加したタンパク）について平均値を表記した。
【表２】
2015105268.tif 000003
【００４５】
いずれの被験薬物も、３種の皮膚バリア機能関連タンパクのうち少なくとも１種以上の発現を促進させた（より詳細には、アロエによりclaudin-1、desmoglein及びinvolucrinの、オウギによりclaudin-1及びinvolucrinの、ジオウによりclaudin-1、desmoglein及びinvolucrinの、シャクヤクによりinvolucrinの、セネガによりclaudin-1、desmoglein及びinvolucrinの、トウキによりclaudin-1及びdesmogleinの、ニンジンによりinvolucrinの、パントテン酸によりclaudin-1の、ピリドキシンによりclaudin-1、desmoglein及びinvolucrinの発現を促進させた。）。
以上より、試験例１で確認された皮膚バリア機能の増強作用の少なくとも一つの原因（メカニズム）として、こうした皮膚バリア機能関連タンパクの発現促進が確認された。
【産業上の利用可能性】
【００４６】
本発明によれば、優れた皮膚バリア機能増強作用を有し、保湿用化粧品や、乾燥性皮膚疾患・炎症性皮膚疾患の予防・治療用の医薬品等として有用な剤を提供でき、化粧品産業や医薬品産業等において好適に利用できる。