(57)【要約】【課題】アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物を配合する乳化組成物を提供する。【解決手段】米糠抽出物（Ａ）と乳化剤（Ｂ）と水（Ｃ）とを混合して乳化させる。【選択図】図１
2015047080.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
米糠抽出物（Ａ）と、グリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステル（Ｂ）と、水（Ｃ）を含有する乳化組成物。
【請求項２】
米糠抽出物（Ａ）が、アシル化ステロール配糖体を３〜１５質量％含有する米糠抽出物であることを特徴とする請求項１に記載の乳化組成物。
【請求項３】
グリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステル（Ｂ）がＨＬＢ１１以上のグリセリン脂肪酸エステルであることを特徴とする請求項１または２に記載の乳化組成物。
【請求項４】
グリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステル（Ｂ）がＨＬＢ１１以上のグリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステルとＨＬＢ２以下のグリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステルの混合物であることを特徴とする請求項１または２に記載の乳化組成物。
【請求項５】
ＨＬＢ１１以上のグリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステル（Ｂ）がヘキサグリセリンのモノ脂肪酸エステルであることを特徴とする請求項３または４に記載の乳化組成物。
【請求項６】
ＨＬＢ２以下のグリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステル（Ｂ）がポリグリセリンの縮合リシノレイン酸エステルであることを特徴とする請求項４に記載の乳化組成物。
【請求項７】
米糠抽出物（Ａ）を０．３〜７質量％含有することを特徴とする請求項１〜６のいずれかに記載の乳化組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、米糠抽出物を含有する乳化組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
米糠は玄米を精白する過程で産出される際に出る果皮、種皮、胚芽などの部分のことである。米糠には種々の有用な成分が含有されている。代表的な成分として、フィチン酸、イノシトール、フェルラ酸、γ−オリザノール、食物繊維、蛋白質、ビタミンＢ１、ビタミンＢ６、ビタミンＥ、ミネラルなどを例示することができる。これらの成分を利用した米糠の抽出物配合食品や飲料が以下のように提案されている。特許文献１（特開平１１−１４６７７４号公報）には米糠エキスを配合した健康飲料が記載されている。特許文献２（特開２００４−７５６３６号公報）には米糠から抽出した、コラーゲン様の作用を有するタンパク質の加水分解物を配合した食品が提案されている。特許文献３（特開２００７−１８５１０９号公報）には米糠由来セラミドを配合した美容飲料が記載されている。
【０００３】
さらに最近注目されている米糠から抽出される成分としてはアシル化ステロール配糖体がある。アシル化ステロール配糖体の生理作用として、血糖上昇抑制（特許文献４：特開２０１１−５７５９７号公報）、脂質代謝改善（特許文献５：特開２０１１−５７５９８号公報）、エネルギー代謝亢進（特許文献６：特開２０１１−５７５９９号公報）作用、アディポネクチン産生促進（特許文献７：特開２０１１−２０７７６号公報）などの作用が知られている。このような多様な作用を有する米糠由来のアシル化ステロール配糖体を飲食品に配合することが検討されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開平１１−１４６７７４号公報
【特許文献２】特開２００４−７５６３６号公報
【特許文献３】特開２００７−１８５１０９号公報
【特許文献４】特開２０１１−５７５９７号公報
【特許文献５】特開２０１１−５７５９８号公報
【特許文献６】特開２０１１−５７５９９号公報
【特許文献７】特開２０１１−２０７７７６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明者は、アシル化ステロール配糖体を飲食品に配合しようとして、米糠抽出物を用いて検討を行った。ところが、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物は極めて水に分散または溶解し難く、特に飲料に配合した場合には、油状に飲料表面に浮遊してしまった。このため、アシル化ステロール配糖体を飲料に配合することは困難であった。
本発明はアシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物を水や飲料に容易に配合するための乳化組成物を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
すなわち、本発明の主な構成は、次のとおりである。
（１）米糠抽出物（Ａ）と、グリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステル（Ｂ）と、水（Ｃ）を含有する乳化組成物。
（２）米糠抽出物（Ａ）が、アシル化ステロール配糖体を３〜１５質量％含有する米糠抽出物であることを特徴とする（１）に記載の乳化組成物。
（３）グリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステル（Ｂ）がＨＬＢ１１以上のグリセリン脂肪酸エステルであることを特徴とする（１）または（２）に記載の乳化組成物。
（４）グリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステル（Ｂ）がＨＬＢ１１以上のグリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステルとＨＬＢ２以下のグリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステルの混合物であることを特徴とする（１）または（２）に記載の乳化組成物。
（５）ＨＬＢ１１以上のグリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステル（Ｂ）が、ヘキサグリセリンのモノ脂肪酸エステルであることを特徴とする（３）または（４）に記載の乳化組成物。
（６）ＨＬＢ２以下のグリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステル（Ｂ）が、ポリグリセリンの縮合リシノレイン酸エステルであることを特徴とする（４）に記載の乳化組成物。
（７）米糠抽出物（Ａ）を０．３〜７質量％含有することを特徴とする（１）〜（６）のいずれかに記載の乳化組成物。
【発明の効果】
【０００７】
本発明により、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物の乳化組成物の提供が可能になる。また米糠抽出物の乳化組成物は、飲料などの飲食品に利用可能である。さらに、アシル化ステロール配糖体はグルカゴン様ペプチド−１；ｇｌｕｃａｇｏｎ−ｌｉｋｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ−１（以下、ＧＬＰ−１と略記する。）の産生促進作用を有することが確認できており、本乳化組成物はＧＬＰ−１産生促進剤としても有用である。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】アシル化ステロール配糖体を含む米糠抽出物が濃度依存的にヒト大腸細胞由来の培養細胞にＧＬＰ−１産生を促進することを示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明はアシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物と乳化剤と水を含有する乳化組成物である。本発明の乳化組成物はアシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物（Ａ）とグリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステル（Ｂ）と、水（Ｃ）を含有し、乳化安定性の高い組成物である。
本発明に用いる米糠抽出物に含まれるアシル化ステロール配糖体は、通常混合物である。アシル化ステロール配糖体の構成糖は主にグルコースである。また構成ステロールはβ−シトステロール、スチグマステロール、カンペステロール等である。アシル化は主にグルコースの６位が脂肪酸によってアシル化されており、構成脂肪酸は主にリノール酸、オレイン酸、パルミチン酸であることが明らかになっている（帯大研報，１０，（１９７７）５０７〜５１４）。
【００１０】
本発明に用いられるアシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物は、アシル化ステロール配糖体を３〜１５質量％含有する。さらに本発明に用いられるアシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物は、その他の成分として、トリグリセライド油、レシチン等を含む。また、米糠からのアシル化ステロール配糖体を含有する組成物の抽出方法は任意の方法が選択できる。一般的には有機溶媒抽出法や超臨界抽出法などが例示できる。
【００１１】
＜米糠抽出物（Ａ成分）について＞
本発明に用いられる米糠抽出物中のアシル化ステロール配糖体の含有量の測定は以下の方法により行うことができる。
（１）米糠抽出物を適量秤取し、クロロホルム／メタノール混液（クロロホルム：メタノール＝２：１）を加え、メスフラスコにてメスアップする。
（２）（１）で得られた溶液は成分濃度に応じて適宜希釈し、分析用試料溶液とする。
（３）標品はＥｓｔｅｒｉｆｉｅｄ  Ｓｔｅｒｙｌ  Ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ（フナコシ社製）とし、高速液体クロマトグラフ法によりアシル化ステロール配糖体の濃度を算出する。
（４）高速液体クロマトグラフ法による分析条件
分析装置：ＨＰＬＣ
移動相Ａ：メタノール：水  ＝  ９５：５（ｖ／ｖ）
移動相Ｂ：クロロホルム  ＝  １００（ｖ／ｖ）
ポンプ：Ｍｏｄｅｌ  ５８２  ｓｏｌｖｅｎｔ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｓｙｓｔｅｍ
分析カラム：ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  Ｓｉ６０（５μｍ）ＨＰＬＣ−Ｃａｒｔｒｉｄｇｅ（ＭＥＲＣＫ社製）
検出器：荷電化粒子検出器（コロナ  ダイオネクス社製）
Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ  Ｖｏｌｕｍｅ：２０μＬ
カラムオーブン：４０℃（ＦＬＯ社製  ｍｏｄｅｌ  ５０２）
分析時間：４０ｍｉｎ
脱泡装置：ｕｎｉｆｌｏｗｓ  Ｄｅｇａｓｙｓ  Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＤＶ３００３
流速  ：１ｍＬ／ｍｉｎ
グラジェント条件
以下に示すとおり
０−１５分
移動相Ａ：１％  →  ２５％、移動相Ｂ：  ９９％  →  ７５％
１５−２０分
移動相Ａ：２５％  →  ９０％、移動相Ｂ：  ７５％  →  １０％
２０−２５分
移動相Ａ：９０％、移動相Ｂ：  １０％
２５−３０分
移動相Ａ：９０％  →  １％、移動相Ｂ：  １０％  →  ９９％
３０−４０分
移動相Ａ：１％、移動相Ｂ：  ９９％
【００１２】
本発明に用いられる米糠抽出物の抽出方法としては、溶媒抽出法、超臨界抽出法等が挙げられる。
また、具体的な抽出操作を以下に示す。
なお、得られた米糠抽出物をカラムクロマトグラフィーでアシル化ステロール配糖体を再度濃縮してもよい。
【００１３】
＜抽出方法１（溶媒抽出法）＞
市場に流通している米糠を選別した後にノルマルヘキサンなどの溶媒を用いて脱脂する。得られた油、脱脂米糠等の粗原料を蒸留装置により脱溶媒し、さらにノルマルヘキサン、アセトン、エタノールなどの溶媒によって抽出する。かくして得られた抽出液を、脱溶剤装置を用いて再度脱溶剤することで米糠抽出物を得ることができる。
【００１４】
＜抽出方法２（超臨界抽出法）＞
第一段階抽出
超臨界二酸化炭素抽出装置によってトリグリセライド油を主成分とする脂質を除去した米糠を得る工程である。通常の精米機で精白率９５％に精米して米糠を調製する。米糠を予め脱水し、一般的に実施されている二酸化炭素の超臨界条件下で容易に米糠からトリグリセライド油を主成分とする脂質を選択的に除去する。適切な抽出条件は、例えば、抽出時間１〜５時間、抽出圧力１０〜５０ＭＰａおよび抽出温度３２〜８０℃である。好ましくは抽出時間１〜３時間、抽出圧力１５〜４０ＭＰａおよび抽出温度３５〜５０℃であり、より好ましくは抽出時間２時間、抽出圧力２５ＭＰａ付近および抽出温度４０℃付近である。
【００１５】
第二段階抽出
第一段階が終了した米糠から、低級アルコールを添加した超臨界二酸化炭素でアシル化ステロール配糖体を含有する画分を抽出する。低級アルコールとしては、エタノールを使用することが好ましい。エタノールは安全性の面からも好ましく、食品や医薬品を製造する際に有機溶媒として最適であり、残留することもほとんどなく、他の有機溶媒と比較して安全性も高い。
適切な超臨界抽出条件として例えば抽出時間０．５〜５時間、抽出圧力１０〜５０ＭＰａおよび抽出温度３２〜８０℃の条件で抽出する。好ましくは抽出時間１〜３時間、抽出圧力１５〜４０ＭＰａおよび抽出温度３５〜５０℃であり、より好ましくは抽出時間２時間、抽出圧力２５ＭＰａ付近および抽出温度４０℃付近である。
【００１６】
なお超臨界抽出する場合の二酸化炭素の供給量は、第一段階抽出時及び第二段階抽出時とも、米糠１重量に対し二酸化炭素の重量を１〜４５０倍量とする。好ましくは１００〜３００倍量、より好ましくは２５０倍量である。
また、第二段階抽出における二酸化炭素とエタノールの混合比率は、重量比で、５０：１〜５：１、好ましくは３０：１〜１０：１、より好ましくは２０：１である。
アシル化ステロール配糖体を３〜１５質量％含む米糠抽出物を乳化組成物とする場合は乳化組成物当たり０．３〜７質量％を配合することで、アシル化ステロール配糖体を約０．０１〜１質量％含有する乳化組成物を得ることができる。このようなアシル化ステロール配糖体を含有する乳化組成物は、飲用することで生体機能の改善に有効に作用する。
【００１７】
＜グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル（Ｂ成分）について＞
本発明に用いるグリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステルは、乳化剤として使用する。特にＨＬＢ１１以上又はＨＬＢ２以下のものが好ましい。
乳化剤として用いることのできるグリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステルは、ジグリセリンモノオレエート、ジグリセリンモノステアレート、ジグリセリンモノパルミテート、テトラグリセリンモノラウレート、テトラグリセリンモノミリステート、テトラグリセリンモノステアレート、テトラグリセリントリステアレート、テトラグリセリンペンタステアレート、テトラグリセリンモノオレエート、ペンタグリセリンモノラウレート、ペンタグリセリンモノミリステート、ペンタグリセリンモノステアレート、ペンタグリセリントリステアレート、ペンタグリセリンペンタステアレート、ペンタグリセリンモノオレエート、ヘキサグリセリンモノラウレート、ヘキサグリセリンモノミリステート、ヘキサグリセリンモノステアレート、ヘキサグリセリントリステアレート、ヘキサグリセリンペンタステアレート、ヘキサグリセリンモノオレエート、オクタグリセリンモノラウレート、オクタグリセリンモノミリステート、オクタグリセリンモノステアレート、オクタグリセリントリステアレート、オクタグリセリンペンタステアレート、オクタグリセリンモノオレエート、デカグリセリンモノラウレート、デカグリセリンモノミリステート、デカグリセリンモノパルミテート、デカグリセリンモノステアレート等が挙げられる。
特に、本発明に用いるＨＬＢ１１以上の物質としては、ヘキサグリセリンモノラウレート、ヘキサグリセリンモノミリステート、デカグリセリンモノラウレート、デカグリセリンモノミリステート、デカグリセリンモノステアレート、デカグリセリンモノオレート、デカグリセリンモノリノレート、デカグリセリンモノパルミテートなどが挙げられる。
【００１８】
また、本発明に用いるＨＬＢ２以下の物質としては、グリセリンモノステアレート、テトラグリセリン縮合リシノレート、ヘキサグリセリン縮合リシノレートなどが挙げられる。
なお、本発明に配合するグリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステルの配合量は、乳化組成物中に０．５〜４質量％含有させることが好ましい。
【００１９】
＜その他添加成分＞
本発明の乳化組成物中には、食品に一般的に配合される添加物を配合することができる。例えば、甘味料、着色料、保存料、増粘剤、安定剤、ゲル化剤、酸化防止剤、漂白剤、香料、酸味料、調味料、ｐＨ調整剤等を配合することができる。
【００２０】
＜本発明の乳化組成物の調製方法＞
米糠抽出物とグリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステルと水を加熱混合し、撹拌することにより乳化させ、乳化組成物とする。この乳化組成物は飲料や経口剤として使用できる。
また、乳化組成物とすることで、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物はアシル化ステロール配糖体の作用する小腸、大腸まで速やかに到達することができ、生体機能を活性化することができる。
また、本発明の乳化組成物は飲食品として用いることができる。炭酸飲料としてもよい。ハードカプセル、ソフトカプセル、マイクロカプセルに充填して、そのまま栄養補助食品として提供することもできる。
【実施例】
【００２１】
以下に参考例、実施例を示し、本発明をさらに詳細に説明する。
＜参考例１：アシル化ステロール配糖体含有抽出物の調製（溶媒抽出）＞
市場に流通している米糠を選別し胚乳や異物を除いた米糠を得た。得られた選別済みの米糠１０kgに対して５０Ｌのノルマルヘキサンを用い脱脂した。この脱脂作業を３回繰り返し、脱脂米糠を得た。得られた脱脂糠を蒸留装置により溶媒を除去した。得られた脱脂米糠８kgに対し、５０Ｌの割合でエタノールによって７０℃にて１時間、３回抽出し、得られた抽出液について、脱溶剤装置を用いてエタノールを除去した。その抽出物をろ過して得た米糠抽出物のアシル化ステロール配糖体の含有量は３．４質量％であった。
【００２２】
＜参考例２：溶媒抽出物の濃縮＞
参考例１で得られた米糠抽出物２０ｇに対し２０ｍｌのヘキサンとクロロホルムを１：１の割合で混合した溶媒を加えた。シリカゲルにヘキサン：クロロホルムを１：１の割合で混合した溶媒を加えて膨潤させ、直径５cm、長さ６０cmのカラム内に充填し、その後に、同組成の溶媒を十分に浸透させた。米糠抽出物とヘキサンとクロロホルムの混合溶液をカラム上にアプライし、完全にシリカゲル内に浸透させた。その後、ヘキサンとクロロホルムを１：１の割合で混合した溶媒１０００ｍｌを加え、カラム下部から排出した。ヘキサンとクロロホルムの溶媒がすべて排出された後に、さらにクロロホルムを２０００ｍｌ加え、カラム下部から排出した。クロロホルムがすべて排出された後にクロロホルム：メタノールを９：１の割合で混合した溶媒１０００ｍｌを加え、溶出液を回収した。得られた溶出液について、エバポレーターを用いて脱溶媒した。得られた米糠抽出物中のアシル化ステロール配糖体の含有量は１２．０質量％であった。
【００２３】
＜参考例３：超臨界抽出例１＞
予め米糠中に含まれる水分（約９．５％）をほぼ除去し水分量を０．５％以下（水分除去にはフリーズドライ使用）にした米糠を約３６．５ｇ採取し、これを、超臨界抽出装置（三菱化工機社製）の耐圧容器（０．５Ｌ）に移した。次いで抽出溶媒として二酸化炭素を用いて昇温・昇圧操作を行い、４０℃、２５ＭＰａ、２時間の条件で超臨界二酸化炭素を抽出槽に通して抽出した。抽出液は回収槽に移し、抽出槽に余分な脂質を除去した残留物を得た。
得られた残留物を約１２ｇ採取し、次に抽出溶媒として二酸化炭素を用いて、昇温・昇圧操作を行い、４０℃、２５ＭＰａに達した後、これにエタノール（９９．５％）を３．９５ｇ／分の流速で供給し１時間抽出し、次いで別の耐圧容器中に抽出液（エタノール抽出液）を回収した。
得られたエタノール抽出液はナスフラスコに移し、エバポレーターにより濃縮乾固し、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出画分を得た。
参考例３の米糠抽出物中のアシル化ステロール配糖体の含有量は１３．２質量％であった。
【００２４】
＜参考例４：超臨界抽出例２＞
参考例３と同様、予め乾燥させた米糠を約４０ｇ採取し、これを、超臨界抽出装置（三菱化工機社製）の耐圧容器（０．５Ｌ）に移した。次いで抽出溶媒として二酸化炭素を用いて、昇温・昇圧操作を行い、４０℃、２５ＭＰａ、２時間の条件で超臨界二酸化炭素を抽出槽に通して抽出した。抽出溶液は回収槽に移し、抽出槽に余分な脂質を除去した残留物を得た。
得られた残留物を約１２ｇ採取し、次に抽出溶媒として二酸化炭素を用いて、昇温・昇圧操作を行い、４０℃、２５ＭＰａに達した後、これにエタノール（９９．５％）を３．９５ｇ／分の流速で供給し２時間抽出槽に通し、次いで別の耐圧容器中に抽出液（エタノール抽出液）を回収した。
得られたエタノール抽出液はナスフラスコに移し、エバポレーターにより濃縮乾固し、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出画分を得た。
参考例４の米糠抽出物中のアシル化ステロール配糖体の含有量は１２．４質量％であった。
【００２５】
＜乳化組成物の製造＞
表１、表２の組成で、実施例１〜５、比較例１〜５の乳化組成物を調製した。
【００２６】
【表１】
2015047080.tif 000003
【００２７】
成分７に成分１〜６を混合溶解したものを徐々に、ホモミキサーで撹拌しながら、添加して乳化させ、実施例１〜５の乳化組成物を調製した。
【００２８】
【表２】
2015047080.tif 000004
【００２９】
成分９に成分１〜８を混合溶解したものを徐々に添加しながら、ホモミキサーで撹拌し、乳化させて比較例１〜５の乳化組成物を調製した。
【００３０】
＜乳化組成物の評価＞
各乳化組成物を容量５０ｍＬガラス瓶に入れて、室温に放置した。１週間経過後、容器を肉眼で観察し、乳化状態、分離状況を観察し、乳化安定性を評価した。
肉眼での評価は次の３段階評価とした。
○：分離せず安定である。
△：わずかに分離した。
×：乳化できなかった。
【００３１】
評価結果を表１、表２の最下段に示した。実施例１〜４の乳化組成物はいずれも分離やクリームラインの発生が認められない安定な乳化液であった。また実施例５はわずかにクリーム分離が発生したが、振盪することで再分散し、分散した溶液には再分離などの変化は認められなかった。
一方比較例１〜５は調製直後から分離が発生し、安定な乳化組成物は得られなかった。
以上の試験から、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物を水に分散又は溶解させるためにはグリセリン脂肪酸エステルまたはポリグリセリン脂肪酸エステルを乳化剤として用いる必要があることが分かった。また実施例１、３、４に示すようにグリセリン脂肪酸エステルとポリグリセリン脂肪酸エステルを併用すると乳化剤量を減少させることができることが明らかとなった。
【００３２】
＜ＧＬＰ−１産生試験＞
本発明の米糠抽出物がＧＬＰ−１産生促進効果を有していることを示し、本発明の有用性をさらに説明する。
【００３３】
［細胞培養試験］
ＮＣＩ−Ｈ７１６細胞（ヒト結腸がん由来細胞）を１×１０５ｃｅｌｌｓを７５ｃｍ２  の細胞培養フラスコに播種し、１０％  ＦＢＳ含有ＲＰＭＩ１６４０培地で１４日間、３７℃、５％ＣＯ２条件下で、培養を行った。なお  ＮＣＩ−Ｈ７１６細胞は、ＡＴＣＣ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）から入手した。  培養後、マトリゲルを塗布した２４  ｗｅｌｌ  ｐｌａｔｅに４×１０４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌとなるように播種し、１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ培地で１日間培養を行った。
その後、Ｈａｎｋｓ緩衝液で２回洗浄し、試験試料を添加し、無血清ＤＭＥＭ培地で２時間培養を行った。培養終了後、培養液中に産生されたＧＬＰ−１量を「ＧＬＰ−１  ＥＬＩＳＡ  ｋｉｔ（Ｇｌｕｃａｇｏｎ−Ｌｉｋｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ−１  Ｃａｔ＃ＥＧＬＰ−３５Ｋ：Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社製）」を用いて測定した。なお、コントロールは  １％ＤＭＳＯとし、陽性対照として用いたオレオイルエタノールアミド（ＯＥＡ）は、ＧＬＰ−１産生促進査証を有することが知られている化合物である。このＯＥＡを１００μＭとなるように添加した。
【００３４】
［試験物質］
参考例１及び２で得られたアシル化ステロール配糖体（ＡＳＧ）を含有する米糠抽出物を試験に用いた。ＡＳＧを含有する米糠抽出物の濃度が１０００μｇ／ｍｌ／１％ＤＭＳＯ（ジメチルスルフォキシド）となるように、ＤＭＥＭ（ＦＢＳ−，ＰＳ−）培地で溶解し、最終培養液中のＡＳＧを３．４％含有する米糠抽出物の濃度は、２５０μｇ／ｍｌ、５００μｇ／ｍｌ、１０００μｇ／ｍｌになるように、１２．０％含有する米糠抽出物の濃度は３３３μｇ／ｍｌになるよう添加した。
【００３５】
［結果］
ＧＬＰ−１測定結果はＤＭＳＯのみの場合に得られる測定値を１としたとき、ＯＥＡとＡＳＧを含む組成物の相対値として求めた。測定結果を図１に示す。ＡＳＧにＯＥＡと同等以上のＧＬＰ−１産生促進作用が確認され、さらに濃度依存性も認められた。
なお米糠由来の脂質画分であってＡＳＧを含有しないものにはＧＬＰ−１産生促進効果が認められなかった。
したがってアシル化ステロール配糖体を含有する乳化組成物はＧＬＰ−１産生促進作用を有しており生体機能維持上有用である。また乳化分散したアシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物は消化管内のＧＬＰ−１産生細胞を効率よく刺激してＧＬＰ−１産生を促進させるものと考えられる。
【図１】
2015047080.tif 000005