(57)【要約】      （修正有）【課題】顕著に優れた抗腫瘍効果を示し、副作用の少ないトリフルリジン（ＦＴＤ）・チピラシル塩酸塩（ＴＰＩ）配合剤の新規な癌治療方法の提供。【解決手段】トリフルリジン（ＦＴＤ）・チピラシル塩酸塩（ＴＰＩ）配合剤とレゴラフェニブを併用投与することを特徴とする抗腫瘍剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤と、レゴラフェニブを併用投与することを特徴とする抗腫瘍剤。
【請求項２】
トリフルリジン１モルあたりに対して、レゴラフェニブが０．１７５〜１．７６モルである請求項１記載の抗腫瘍剤。
【請求項３】
トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤のトリフルリジンの投与日における１日投与量が、単独で投与する場合における推奨用量の５０〜１００％である請求項１又は２記載の抗腫瘍剤。
【請求項４】
トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤のトリフルリジンの投与日における１日投与量が３５〜７０ｍｇ／ｍ2／ｄａｙである請求項１〜３のいずれか１項の抗腫瘍剤。
【請求項５】
レゴラフェニブの投与日における１日投与量が、単独で投与する場合における最大耐量の２０〜１００％である請求項１〜４のいずれか１項記載の抗腫瘍剤。
【請求項６】
レゴラフェニブの投与日における１日投与量が３２〜１６０ｍｇ／ｂｏｄｙ／ｄａｙである請求項１〜５のいずれか１項記載の抗腫瘍剤。
【請求項７】
対象となる癌が、消化器癌である請求項１〜６のいずれか１項記載の抗腫瘍剤。
【請求項８】
対象となる癌が、大腸癌である請求項１〜７のいずれか１項記載の抗腫瘍剤。
【請求項９】
レゴラフェニブの抗腫瘍効果を増強するための、トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤からなる抗腫瘍効果増強剤。
【請求項１０】
トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤の抗腫瘍効果を増強するための、レゴラフェニブからなる抗腫瘍効果増強剤。
【請求項１１】
レゴラフェニブを投与された癌患者を治療するための、トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤からなる抗腫瘍剤。
【請求項１２】
トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤を投与された癌患者を治療するための、レゴラフェニブからなる抗腫瘍剤。
【請求項１３】
レゴラフェニブと併用することを特徴とする、トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤からなる抗腫瘍剤。
【請求項１４】
トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤と併用することを特徴とする、レゴラフェニブからなる抗腫瘍剤。
【請求項１５】
トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤と使用説明書を含むキット製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩の配合剤と、レゴラフェニブとを併用する抗腫瘍剤、及びレゴラフェニブの抗腫瘍効果増強剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
トリフルリジン（別名：α，α，α−トリフルオロチミジン。以下、「ＦＴＤ」とも称す）は、チミジレート生成阻害作用によるＤＮＡ合成阻害とＤＮＡへの取り込みによるＤＮＡ機能障害により抗腫瘍効果を発揮する。一方、チピラシル塩酸塩（化学名：５−クロロ−６−［（２−イミノピロリジン−１−イル）メチル］ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン塩酸塩。以下、「ＴＰＩ」とも称す）は、チミジンホスホリラーゼ阻害作用を有する。ＴＰＩがチミジンホスホリラーゼによるＦＴＤの生体内での分解を抑制することにより、ＦＴＤの抗腫瘍効果が増強されることが知られている（特許文献１）。現在、ＦＴＤとＴＰＩをモル比１：０．５で含有する抗腫瘍剤（以下、「ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤」とも称す）は、大腸癌等の固形癌の治療剤として開発中であり、再発の結腸直腸癌の治療剤として承認されている（非特許文献１及び２）。
さらに、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤の抗腫瘍効果を高めるべく、併用療法の検討がなされており、これまで当該配合剤とイリノテカンやオキサリプラチン等との併用による効果が示唆されている。（非特許文献３及び４）。
【０００３】
また、レゴラフェニブは、マルチキナーゼ阻害剤であり、ＶＥＧＦＲ、ＴＩＥ２、ｃ−ＫＩＴ、ＲＥＴ、Ｂ−ＲＡＦ、ＰＤＧＦＲ、ＦＧＦＲなどを阻害することが知られている。これらのキナーゼを阻害することにより、血管新生、腫瘍形成に関わるシグナル伝達を阻害して抗腫瘍効果を発揮する。レゴラフェニブは治癒切除不能な進行・再発の大腸癌（結腸・直腸癌）に使用されており、胃癌、小細胞肺癌、腎細胞癌、肝細胞癌でも開発が進められている。また、ＦＯＬＦＯＸ（５−フルオロウラシル、ロイコボリン、オキザリプラチン）、または、ＦＯＬＦＩＲＩ（５−フルオロウラシル、ロイコボリン、イリノテカン）とレゴラフェニブの併用療法の開発も進められている（非特許文献５）。
上記のとおり、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤を含む治療法及びレゴラフェニブを含む治療法の開発がそれぞれ精力的に行われているが、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤とレゴラフェニブを用いた併用療法は行なわれていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開第９６／３０３４６号
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｉｎｖｅｓｔ  Ｎｅｗ  Ｄｒｕｇｓ  ２６（５）：４４５−５４，２００８．
【非特許文献２】Ｌａｎｃｅｔ  Ｏｎｃｏｌ．１３（１０）：９９３−１００１，２０１２．
【非特許文献３】Ｅｕｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．４３（１）：１７５−８３，２００７．
【非特許文献４】Ｂｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．９６（２）：２３１−４０，２００７．
【非特許文献５】Ａｎｎ  Ｏｎｃｏｌ .２４（６）：１５６０−１５６７，２０１３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、顕著に優れた抗腫瘍効果を示し、副作用の少ないＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤を用いた新規な癌治療方法を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
そこで本発明者は、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤とレゴラフェニブの併用療法について検討したところ、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤とレゴラフェニブを併用することにより、単独でＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤またはレゴラフェニブを使用するよりも、さらに抗腫瘍効果が顕著に増強することを見出した。
【０００８】
すなわち本発明は、次の〔１〕〜〔１５〕を提供するものである。
【０００９】
〔１〕トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤と、レゴラフェニブを併用投与することを特徴とする抗腫瘍剤。
〔２〕トリフルリジン１モルあたりに対して、レゴラフェニブが０．１７５〜１．７６モルである〔１〕記載の抗腫瘍剤。
〔３〕トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤のトリフルリジンの投与日における１日投与量が、単独で投与する場合における推奨用量の５０〜１００％である〔１〕又は〔２〕に記載の抗腫瘍剤。
〔４〕トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤のトリフルリジンの投与日における１日投与量が３５〜７０ｍｇ／ｍ2／ｄａｙである〔１〕〜〔３〕のいずれか１項の抗腫瘍剤。
〔５〕レゴラフェニブの投与日における１日投与量が、単独で投与する場合における最大耐量の２０〜１００％である請求項１〜４のいずれか１項記載の抗腫瘍剤。
〔６〕レゴラフェニブの投与日における１日投与量が３２〜１６０ｍｇ／ｂｏｄｙ／ｄａｙである〔１〕〜〔５〕のいずれか１項記載の抗腫瘍剤。
〔７〕対象となる癌が、消化器癌である〔１〕〜〔６〕のいずれか１項記載の抗腫瘍剤。
〔８〕対象となる癌が、大腸癌である〔１〕〜〔７〕のいずれか１項記載の抗腫瘍剤。
〔９〕レゴラフェニブの抗腫瘍効果を増強するための、トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤からなる抗腫瘍効果増強剤。
〔１０〕トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤の抗腫瘍効果を増強するための、レゴラフェニブからなる抗腫瘍効果増強剤。
〔１１〕レゴラフェニブを投与された癌患者を治療するための、トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤からなる抗腫瘍剤。
〔１２〕トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤を投与された癌患者を治療するための、レゴラフェニブからなる抗腫瘍剤。
〔１３〕レゴラフェニブと併用することを特徴とする、トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤からなる抗腫瘍剤。
〔１４〕トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤と併用することを特徴とする、レゴラフェニブからなる抗腫瘍剤。
〔１５〕トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５で含有する配合剤と使用説明書を含むキット製剤。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の抗腫瘍剤によれば、副作用の発症を抑えつつ、高い抗腫瘍効果（特に、腫瘍縮小効果、増殖遅延効果（延命効果））を奏する癌治療を行うことが可能である。ひいては、癌患者の長期間の生存をもたらす。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】マウスにおける、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤（トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５）のＦＴＤとしての投与量７５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙと投与量１０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙのレゴラフェニブ・１水和物を併用した際の抗腫瘍効果を示す。
【図２】マウスにおける、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤（トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５）のＦＴＤとしての投与量７５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙと投与量５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙのレゴラフェニブ・１水和物を併用した際の抗腫瘍効果を示す。
【図３】マウスにおける、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤（トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５）のＦＴＤとしての投与量１５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙと投与量１０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙのレゴラフェニブ・１水和物を併用した際の抗腫瘍効果を示す。
【図４】マウスにおける、ＦＴＤとしての投与量１５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙのＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤（トリフルリジン及びチピラシル塩酸塩をモル比１：０．５）と投与量５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙのレゴラフェニブ・１水和物を併用した際の抗腫瘍効果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明におけるＦＴＤ及びＴＰＩはそれぞれ公知の化合物であり、例えば、国際公開第９６／３０３４６号パンフレットに記載の方法に準じて合成することができる。また、ＦＴＤ及びＴＰＩをモル比１：０．５で含有する配合剤も公知である（非特許文献１及び２）。また、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤は、日本において進行・再発の結腸直腸癌の治療剤として承認されており、その用法用量は「ＦＴＤとして７０ｍｇ／ｍ２／ｄａｙを、１日２回、５日間連続経口投与したのち２日間休薬する。これを２回繰り返したのち１４日間休薬する。これを１コースとして投与を繰り返す。」と定義されている。
【００１３】
レゴラフェニブ（化学名：４−［４−（｛［４−クロロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］カルバモイル｝アミノ）−３−フルオロフェノキシ］−Ｎ−メチルピリジン−２−カルボキサミド）も公知化合物である。レゴラフェニブは、国際公開第２００８／０４３４４６号パンフレットに記載の方法に準じて合成することができる。また、本発明において「レゴラフェニブ」には、本発明の効果を奏する限り、レゴラフェニブ・１水和物等の水和物も包含される。なお、レゴラフェニブは、１水和物として市販されており、その市販品（スチバーガ錠（登録商標）、バイエル薬品）を用いてもよい。
【００１４】
本発明の抗腫瘍剤におけるＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤（ＦＴＤとＴＰＩとの両者のモル比が例えば、１：０．５である場合）の投与日における１日投与量としては、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤によるレゴラフェニブの抗腫瘍効果の増強作用の観点から、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤を単独で投与する場合における推奨用量の５０〜１００％が好ましく、より好ましくは１００％である。具体的には、ヒトにおけるＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤の単独で投与する場合における推奨用量は、上述のとおり日本において承認を受けた投与量であるＦＴＤとして７０ｍｇ／ｍ2／ｄａｙであることから、本発明の抗腫瘍剤におけるＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤の投与日における１日投与量は、ＦＴＤとして３５〜７０ｍｇ／ｍ2／ｄａｙが好ましく、より好ましくは７０ｍｇ／ｍ2／ｄａｙである。また、ヒト体表面積は標準的な男女成人において約１．６ｍ2とされていることから、本発明の抗腫瘍剤におけるＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤の投与日における１日投与量は、ＦＴＤとして５６〜１１２ｍｇ／ｂｏｄｙ／ｄａｙが好ましく、より好ましくは１１２ｍｇ／ｂｏｄｙ／ｄａｙである。
なお、本発明において「推奨用量」とは、臨床試験などにより決定された、重篤な副作用を発症せずに安全に使用できる範囲で、最大の治療効果をもたらす投与量であり、具体的には、日本独立行政法人医薬品医療機器総合機構（ＰＭＤＡ；Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  Ａｇｅｎｃｙ）、米国食品医薬品局（ＦＤＡ；Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）、欧州医薬品庁（ＥＭＡ；Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ  Ａｇｅｎｃｙ）等の公的機関や団体により承認・推奨・勧告され、添付文書・インタビューフォーム・治療ガイドライン等に記載された投与量があげられ、ＰＭＤＡ、ＦＤＡ又はＥＭＡのいずれかの公的機関により承認された投与量が好ましい。
【００１５】
本発明の抗腫瘍剤におけるレゴラフェニブの投与日における１日投与量としては、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤によるレゴラフェニブの抗腫瘍効果の増強作用の観点から、レゴラフェニブを単独で投与する場合における推奨用量の２０〜１００％が好ましく、１００％がより好ましい。具体的には、ヒトにおけるレゴラフェニブの単独で投与する場合における推奨用量は添付文書・インタビューフォームの承認情報より、３週間連日経口投与し、その後１週間休薬する場合、１６０ｍｇ／ｂｏｄｙ／ｄａｙ（例えば、結腸・直腸癌、消化管間質腫瘍が好ましい）であることから、本発明の抗腫瘍剤におけるレゴラフェニブの投与日における１日投与量は、３２〜１６０ｍｇ／ｂｏｄｙ／ｄａｙが好ましく、１６０ｍｇ／ｂｏｄｙ／ｄａｙがより好ましい。
【００１６】
上記のＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤及びレゴラフェニブの投与量から、これらのモル比を算出することができる。
本発明の抗腫瘍剤におけるＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤とレゴラフェニブのヒト投与量のモル比は、ＦＴＤ１モルに対して、レゴラフェニブが０．１７５〜１．７６モルが好ましく、０．１７５〜０．８７８モルがより好ましい。
【００１７】
本発明の抗腫瘍剤の投与スケジュールは、癌腫や病期等に応じて適宜選択しうる。ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤は、５日間連日投与し２日間休薬を２回繰り返した後、２週間休薬する投与スケジュールが好ましい。レゴラフェニブは、連日投与を３週間行った後、１週間休薬するスケジュールが好ましい。また、投与スケジュールは副作用等に応じて適宜休薬期間を設けても構わない。
【００１８】
本発明の抗腫瘍剤の１日の投与回数は、癌種や病期等に応じて適宜選択しうるが、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤は１日２回、レゴレフェ二ブは１日１回が好ましい。
【００１９】
本発明のＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤及びレゴレフェ二ブの投与順序は、癌種や病期等に応じて適宜選択しうるが、どちらを先に投与しても、同時に投与しても構わない。
【００２０】
本発明の抗腫瘍剤の対象となる癌としては、具体的には、頭頚部癌、消化器癌（食道癌、胃癌、消化管間質腫瘍、十二指腸癌、肝臓癌、胆道癌（胆嚢・胆管癌など）、膵臓癌、小腸癌、大腸癌（結腸直腸癌、結腸癌、直腸癌など）など）、肺癌、乳癌、卵巣癌、子宮癌（子宮頚癌、子宮体癌など）、腎癌、膀胱癌、前立腺癌等が挙げられる。なお、ここで癌には、原発巣のみならず、他の臓器（肝臓など）に転移した癌をも含む。このうち、抗腫瘍効果と副作用の観点から、消化器癌、乳癌、腎癌、小細胞肺癌が好ましく、消化器癌がより好ましく、大腸癌、消化管間質腫瘍、及び胃癌がより好ましく、大腸癌が特に好ましい。また、本発明の抗腫瘍剤は、腫瘍を外科的に摘出した後に再発防止のために行われる術後補助化学療法に用いるものであっても、腫瘍を外科的に摘出するために事前行われる術前補助化学療法であってもよい。
【００２１】
本発明は各有効成分を１つの剤形にまとめ製剤化しても構わない。本発明の抗腫瘍剤は各有効成分を複数の剤形に分けて製剤化するのが好ましい。即ち、ＦＴＤ及びＴＰＩは配合剤として、レゴラフェニブは単剤として製剤化することが好ましい。
【００２２】
また、本発明の投与量によって各有効成分が投与される限り、各製剤を併用投与に適した１個のパッケージにまとめて製造販売してもよく、また各製剤を別個のパッケージに分けて製造販売してもよい。
【００２３】
本発明の抗腫瘍剤の投与形態としては特に制限は無く、治療目的に応じて適宜選択でき、具体的には経口剤（錠剤、被覆錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤など）、注射剤、坐剤、貼付剤、軟膏剤等が例示できる。ＦＴＤ及びＴＰＩの配合剤は経口剤が好ましい。レゴラフェニブを含有する製剤も、上記の投与形態が挙げられ、経口剤が好ましい。
【００２４】
本発明における抗腫瘍剤は、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤についても、レゴラフェニブについても、その投与形態に応じて、薬学的に許容される担体を用いて、通常公知の方法により調製することができる。斯かる担体としては、通常の薬剤に汎用される各種のもの、例えば賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、希釈剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、ｐＨ調整剤、緩衝剤、安定化剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を例示できる。
【００２５】
本発明はまた、癌患者（特に、大腸癌患者）に対するレゴラフェニブの抗腫瘍効果を増強するためのＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤を含む抗腫瘍効果増強剤に関する。当該抗腫瘍効果増強剤は、上記抗腫瘍剤の製剤形態を有する。
本発明はまた、癌患者（特に、大腸癌患者）に対するＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤の抗腫瘍効果を増強するためのレゴラフェニブを含む抗腫瘍効果増強剤に関する。当該抗腫瘍効果増強剤は、上記抗腫瘍剤の製剤形態を有する。
【００２６】
本発明はまた、レゴラフェニブを投与された癌患者（特に、大腸癌患者）を治療するためのＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤を含む抗腫瘍剤に関する。当該抗腫瘍剤は、上記の製剤形態を有する。
本発明はまた、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤を投与された癌患者（特に、大腸癌患者）を治療するためのレゴラフェニブを含む抗腫瘍剤に関する。当該抗腫瘍剤は、上記の製剤形態を有する。
本発明はまた、癌患者（特に、大腸癌患者）に対し、レゴラフェニブと併用することを特徴とする、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤を含む抗腫瘍剤に関する。当該抗腫瘍剤は、上記の製剤形態を有する。
本発明はまた、癌患者（特に、大腸癌患者）に対し、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤と併用することを特徴とする、レゴラフェニブを含む抗腫瘍剤に関する。当該抗腫瘍剤は、上記の製剤形態を有する。
【００２７】
本発明はまた、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤と、癌患者（特に、大腸癌患者）に対してＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤とレゴラフェニブを併用投与することを記載した使用説明書を含むキット製剤に関する。ここで「使用説明書」とは、上記投与量が記載されたものであればよく、法的拘束力の有無を問わないが、上記投与量が推奨されているものが好ましい。具体的には、添付文書、パンフレット等が例示される。また、使用説明書を含むキット製剤とは、キット製剤のパッケージに使用説明書が印刷・添付されているものであっても、キット製剤のパッケージに抗腫瘍剤とともに使用説明書が同封されているものであってもよい。
【実施例】
【００２８】
次に実施例及び参考例を挙げて本発明をさらに詳細に説明する。本発明はこれらの実施例により何ら限定されるものではなく、多くの変形が本発明の技術的思想内で当分野において通常の知識を有する者により可能である。
【００２９】
参考例１
ヒト大腸癌株（ＫＭ２０Ｃ）の培養細胞（１×１０7ｃｅｌｌs／マウス）を５〜６週齢のＢＡＬＢ／ｃＡ  Ｊｃｌ−ｎｕマウスの腹腔内に移植した。各群の平均体重が均等になるようにマウスを割り付け、群分け（ｎ＝１０）を実施した日をＤａｙ０とした。
ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤（ＦＴＤとＴＰＩのモル比１：０．５の混合物）は、ＦＴＤとして、７５、１００、１５０、３００および４５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙとなるよう調製した。薬剤の投与はＤａｙ３から開始し、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤は５日間連日経口投与・２日間休薬を６週間行った。
抗腫瘍効果の指標として、各群のマウスの生存数を確認し、各群の生存期間、延命率を比較した。延命率（ＩＬＳ； Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ  Ｌｉｆｅ  Ｓｐａｎ）は以下のように計算した。
【００３０】
【数１】
2015199676.tif 000002
【００３１】
結果を表１に示す。
【００３２】
【表１】
2015199676.tif 000003
【００３３】
表１に記載のように、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤は、ＦＴＤとして、７５〜４５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの全ての群で生存期間の延長効果が認められ、そのうち１５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの群で最も生存期間が長かったことから、マウスにおけるＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤の推奨用量（ＲＤ；Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ  Ｄｏｓｅ）は、ＦＴＤとして１５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙである。つまり、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤は、少なくともＲＤの５０％〜３００％の投与量において生存期間の延長効果を発揮することが示された。
一方、ヒトにおけるＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤の推奨用量は、ＦＴＤとして７０ｍｇ／ｍ2／ｄａｙであることが知られており、この用量で有意に生存期間が延長されている（非特許文献２）。よって、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤のＦＴＤとしての推奨用量は、マウスにおける１５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙが、ヒトにおける７０ｍｇ／ｍ2／ｄａｙに相当する。
【００３４】
参考例２
８週齢の非担癌ヌードマウス（ＢＡＬＢ／ｃＡＪｃｌ−ｎｕ／ｎｕ）を６つに群分け（ｎ＝３）した日をＤａｙ０とした。薬剤の投与容量は１０ｍＬ／ｋｇであり、レゴラフェニブは１水和物として、５０、１００、２００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙとなるように調製した。うち、１群を無処置群とし、残り５群にそれぞれレゴラフェニブ・１水和物を５０、１００、２００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの用量で１日１回１４日間（Ｄａｙ１からＤａｙ１４）連日経口投与した。
そして、Ｄａｙ４からＤａｙ２９まで、各群のマウスの生存数および体重変化（ｂｏｄｙ  ｗｅｉｇｈｔ  ｃｈａｎｇｅ：ＢＷＣ）を確認した。死亡例が認められた群は、毒性ありと判断した。体重変化は試験期間（Ｄａｙ０からＤａｙ２９）において、−２０％以下を示した場合に毒性ありと判断した。
なお、体重変化は以下のように計算した。
【００３５】
【数２】
2015199676.tif 000004
【００３６】
各群における投与量、死亡数および死亡の発現日は表２のとおりである。なお、各群における体重変化は死亡の発現日までの期間において−２０％よりも低くなることはなかった。
【００３７】
【表２】
2015199676.tif 000005
【００３８】
表２に記載のように、非担癌ヌードマウスでは、レゴラフェニブ・１水和物を１００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ以上投与した群ではＤａｙ１４までに死亡例が確認されたが、５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙではＤａｙ２９まで死亡例は確認されなかった。
この結果から明らかなように、レゴラフェニブ・１水和物のマウスにおける推奨用量は５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙである。即ち、レゴラフェニブとしてのマウスにおける推奨用量は、４８．２ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙである。一方、ヒトにおけるレゴラフェニブの推奨用量は、インタビューフォームによると、１６０ｍｇ／ｂｏｄｙ／ｄａｙ（水和物として１６６ｍｇ／ｂｏｄｙ／ｄａｙ）である。よって、レゴラフェニブ・１水和物の推奨用量は、マウスにおける５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙが、ヒトにおける１６６ｍｇ／ｂｏｄｙ／ｄａｙに相当する。
【００３９】
実施例（ＣＯＬＯ２０５におけるＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤とレゴラフェニブの併用）
ヒト大腸癌由来株（ＣＯＬＯ２０５）を生後５週齢のマウス・ＢＡＬＢ／ｃＡＪｃｌ−ｎｕ／ｎｕ（ヌードマウス）の右側最後位肋骨付近に移植した。腫瘍移植後に腫瘍の長径（ｍｍ）および短径（ｍｍ）を測定し、腫瘍体積（ｔｕｍｏｒ  ｖｏｌｕｍｅ：ＴＶ）を以下の式にて算出した。
【００４０】
【数３】
2015199676.tif 000006
【００４１】
各群の平均ＴＶが１００ｍｍ3程度になった際にマウスを群分けし（ｎ＝６）、その日をＤａｙ０とした。うち、１群を無処置群とし、２群をＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤の単剤投与群、３群をレゴラフェニブの単剤投与群、６群をＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤とレゴラフェニブの併用投与群とした。
【００４２】
薬剤の投与容量は１０ｍＬ／ｋｇであり、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤（ＦＴＤとＴＰＩのモル比１：０．５の混合物）は、ＦＴＤとして７５、１５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙとなるように調製した。レゴラフェニブ・１水和物は、１０、５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙとなるように調製した。ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤はＤａｙ１−１４に１日２回連日経口投与した。レゴラフェニブ・１水和物はＤａｙ１−１４に１日１回連日経口投与した。併用投与群は、単剤投与群と同じ投与量及び投与スケジュールでＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤とレゴラフェニブ・１水和物を投与した。
【００４３】
抗腫瘍効果の指標をＲＴＶで示すために、Ｄａｙ０、４、７、１１、１５、１８、２２、２５、２９をＴＶ測定日とし、その際の各群のＴＶを算出し、下式によりＤａｙ０に対する相対腫瘍体積（ＲＴＶ）を求めた。
【００４４】
【数４】
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【００４５】
上記ＲＴＶを各測定日についてプロットし、無処置群、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤投与群、レゴラフェニブ・１水和物投与群およびＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤とレゴラフェニブ・１水和物投与群のＲＴＶの経日的推移を比較した。Ｄａｙ２９におけるＲＴＶの無処置群および単剤投与群の結果を表３に示す。なお、表中のＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤はヒトにおける換算した投与量であり、レゴラフェニブ・１水和物も同様である。
【００４６】
【表３】
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【００４７】
また、併用投与群の結果を表４に示す。ＲＴＶにおいて、併用投与による効果増強作用の有無は、閉手順（Ｃｌｏｓｅｄ  ｔｅｓｔｉｎｇ  ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ；Ｉｎｔｅｒｓｅｃｔｉｏｎ−Ｕｎｉｏｎ  Ｔｅｓｔ）により、各々の比較で得られる有意確率の最大値（Ｏｖｅｒａｌｌ  ｍａｘｉｍａｌ  Ｐ）が０．０１ 未満であった場合に、抗腫瘍効果増強作用ありと判定した。表中ＲＴＶの「＃」は上記の有意確率の最大値が０．０１以下であったことを示す。
なお、表中の「レゴラフェニブモル比」とは、各群におけるＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤（ＦＴＤとＴＰＩのモル比１：０．５の混合物）とレゴラフェニブ・１水和物をヒト投与量に換算し、その際のＦＴＤ１当量に対するレゴラフェニブの当量数である。参考例のとおり、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤のＦＴＤ投与量について、マウスにおける１５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙがヒトにおける７０ｍｇ／ｍ2／ｄａｙに相当する。それを、ヒト体表面積１．６ｍ2で乗じて、１１２ｍｇ／ｂｏｄｙ／ｄａｙと換算した。即ち、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤について、ＦＴＤマウス投与量（ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）に０．７４７を乗じれば、ＦＴＤヒト投与量（ｍｇ／ｂｏｄｙ／ｄａｙ）が算出される。
また、参考例のとおり、レゴラフェニブ・１水和物の投与量について、マウスにおける５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙがヒトにおける１６６ｍｇ／ｂｏｄｙ／ｄａｙに相当する。即ち、レゴラフェニブ・１水和物マウス投与量（ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ）に３．３２を乗じれば、レゴラフェニブ・１水和物ヒト投与量（ｍｇ／ｂｏｄｙ／ｄａｙ）が算出され、ＦＴＤとレゴラフェニブ・１水和物のヒト投与量の単位を「ｍｇ／ｂｏｄｙ／ｄａｙ」に合わせることができる。これらの計算結果より、ヒトにおけるＦＴＤ１当量に対するレゴラフェニブの当量数を「レゴラフェニブモル比」として、表中に記載した。なお、表中のＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤はヒトにおける換算した投与量であり、レゴラフェニブ・１水和物も同様である。
【００４８】
【表４】
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【００４９】
また、ＲＴＶの経日的変化の結果を図１〜４に示す。なお、ヒト大腸癌由来株（ＣＯＬＯ２０５）だけでなく、ヒト大腸癌由来株（ＳＷ６２０）においても、同様の試験を行い、上記の抗腫瘍効果増強作用を確認することができた。
【００５０】
次に、腫瘍増殖遅延効果を確認した（Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２０００；６（２）：７０１−８．；Ｊ  Ｒａｄｉａｔ  Ｒｅｓ．２００７；４８（３）：１８７−９５．；Ｉｎｖｅｓｔ  Ｎｅｗ  Ｄｒｕｇｓ．２００８；２６（１）：１−５．；Ｊ  Ｒａｄｉａｔ  Ｒｅｓ．２０１１；５２（５）：６４６−５４．） 。腫瘍体積がＤａｙ０の時から１．５倍に大きくなる（即ち、ＲＴＶが１．５になる）までの期間を図１〜４の単剤投与群から併用投与群の結果を予測した。表５に単剤投与群の「ＲＴＶが１．５に実際に到達した日数」をまとめた。「ＲＴＶが１．５に実際に到達した日数」は、ＲＴＶが最初に１．５を超えた測定日とその直前の測定日のＲＴＶが一次関数に従って推移していると仮定して、算出した。なお、表中のＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤はヒトにおける換算した投与量であり、レゴラフェニブ・１水和物も同様である。
【００５１】
【表５】
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【００５２】
表６に併用投与群のＲＴＶが１．５に到達するのに「期待される日数」とＲＴＶが１．５に到達した「実際の日数」をまとめた。なお、表中のＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤はヒトにおける換算した投与量であり、レゴラフェニブ・１水和物も同様である。
【００５３】
【表６】
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【００５４】
ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤が７５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、レゴラフェニブが１０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの併用投与群では、それぞれの単剤投与群におけるＲＴＶが１．５に到達した「実際の日数」は１．８日間と６．３日間であった。よって、ＦＴＤ／ＴＰＩ配合剤とレゴフェニブの作用効果が拮抗しないと仮定した場合、併用投与群ではその期間の合計である８．１日間が、ＲＴＶが１．５に到達するのに「期待される日数」である。しかし、驚くべきことに、ＲＴＶが１．５に到達した「実際の日数」は２１．４日間であった。
同様にＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤が７５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、レゴラフェニブが５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの併用投与群では、ＲＴＶが１．５に到達するのに「期待される日数」が１９．２日間であったが、「実際の日数」は２６．７日であった。加えて、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤が１５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、レゴラフェニブが１０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの併用投与群では、ＲＴＶが１．５に到達するのに「期待される日数」が８．５日間であったが、「実際の日数」は２６．９日という結果であった。更に、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤が１５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ、レゴラフェニブが５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの併用投与群では、ＲＴＶが１．５に到達するのに「期待される日数」が１９．６日間であったが、「実際の日数」は２９日以上という結果であった。
なお、各群における体重変化はＤａｙ０〜２９の期間において−２０％よりも低くなることはなかった。
【００５５】
以上から、ＦＴＤ・ＴＰＩ配合剤とレゴラフェニブを併用した際に、副作用の発生を許容範囲内に抑えたまま、期待される効果を超える顕著な腫瘍増殖遅延効果が見られた。
また、大腸癌株ＳＷ６２０を用いた抗腫瘍効果試験でも、同様の効果が確認された。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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