(57)【要約】【課題】高エナンチオ選択的な化学反応のための不斉合成法に用いられる触媒の材料となる触媒材料と、その触媒材料を含有するハイブリッド触媒を提供する。【解決手段】ＤＮＡが担体に担持されてなる触媒材料であって、前記担体は第四級アンモニウムカチオンを有し、ＤＮＡの前記担体への担持が、ＤＮＡが有するリン酸骨格と、担体が有する第四級アンモニウムカチオンの静電相互作用によるものである、触媒材料。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＤＮＡが担体に担持されてなる触媒材料であって、
前記担体は第四級アンモニウムカチオンを有し、
ＤＮＡの前記担体への担持が、ＤＮＡが有するリン酸骨格と、担体が有する第四級アンモニウムカチオンの静電相互作用によるものである、触媒材料。
【請求項２】
前記担体が以下の式（１）で表される第四級アンモニウムカチオンを有するシリカゲルである、請求項１に記載の触媒材料。
【化１】
2015047555.tif 000012
（式中、Ｒ1は、炭素数１〜２７の炭化水素基を示す。）
【請求項３】
前記Ｒ1が、任意の−ＣＨ2−の一つがフェニルで置換されているエチル、プロピル及びブチルから選択されるものである、請求項２に記載の触媒材料。
【請求項４】
前記ＤＮＡが、ｓｔ−ＤＮＡである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の触媒材料。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の触媒材料と、金属錯体とから形成される、ハイブリッド触媒。
【請求項６】
前記金属錯体を構成する金属が、銅（ＩＩ）である、請求項５に記載のハイブリッド触媒。
【請求項７】
前記金属錯体を構成する配位子が、下記式（１）〜（１０）で表される化合物のいずれか１以上である、請求項５または６に記載のハイブリッド触媒。
【化２】
2015047555.tif 000013
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＤＮＡを含有するハイブリッド触媒を用いた連続的な不斉合成法に関する。
【背景技術】
【０００２】
フリーデル−クラフツアルキル化反応およびそれによるエナンチオ選択的な変異体の合成は、有機化学における炭素−炭素結合反応の重要な一態様である。
近年では、銅の触媒活性とＤＮＡのらせん不斉を組み合わせたハイブリッド触媒系がＦｅｒｉｎｇａ等によって開発され、上記のフリーデル−クラフツアルキル化反応に加え、ディールス・アルダー反応やマイケル付加反応などの炭素−炭素結合反応において、このようなハイブリッド触媒を用いた場合には、高エナンチオ選択的に目的の生成物が得られることが報告されている（例えば、非特許文献１参照）。
上記のハイブリッド触媒には、ＤＮＡの他に銅のような金属の錯体が用いられており、そのような金属錯体を構成する配位子としては、４，４’−ジメチル−２，２’−ビピリジン（ｄｍｂｐｙ）を用いることが報告されており、また、ＤＮＡとしては、例えばサケ精巣から抽出されるＤＮＡ（salmon testes DNA）を用いることが報告されている（例えば、非特許文献１参照）。
このようなハイブリッド触媒を用いた不斉合成法は、従来必要とされていたレアメタルや人工的なキラルリガンドを用いる必要がなく、また、水のような環境に対する負荷の少ない溶媒中で反応を起こさせることが可能であることから、有望な不斉合成法として注目されている（例えば、非特許文献２参照）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２００９，４８，３３４６−３３４８
【非特許文献２】Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２０１０，４９，３８７０−３８７８
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、これまでの研究例では、いずれも研究室内で行われるバッチ実験のみであり、その実験に用いられるハイブリッド触媒の作製については検討の余地がある。
【０００５】
本発明は、高エナンチオ選択的な化学反応のために用いられるＤＮＡが、特定の担体に担持されて形成される触媒を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は上記実情に鑑みてなされたものであり、本発明者は鋭意研究の結果、第四級アンモニウムカチオンを有する担体にＤＮＡを特定の態様で担持させた触媒材料を作製した。また、これを特定の配位子を持つ金属錯体と組み合わせたハイブリッド触媒を作製した。
すなわち、本発明は、ＤＮＡが担体に担持されてなる触媒材料であって、前記担体は第四級アンモニウムカチオンを有し、ＤＮＡの前記担体への担持が、ＤＮＡが有するリン酸骨格と、担体が有する第四級アンモニウムカチオンの静電相互作用によるものである、触媒材料によって、上記課題を解決する。
【発明の効果】
【０００７】
本発明の触媒材料は、金属錯体と組み合わせることで、高収率かつ高エナンチオ選択的に目的物質を連続的に得るための触媒になる。このような触媒材料を用いた場合には、ＤＮＡが担体に担持されていることで、繰り返しの使用に用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】本発明の実施例の触媒材料の作製に用いたシリカゲル、市販品の修飾シリカゲル、本発明の実施例の触媒材料のＩＲ分析の結果を示す図である。
【図２】各触媒材料におけるＤＮＡの担持を確認するために行った、ＤＮＡ濃度の経時変化を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明の触媒材料は、ＤＮＡと担体に担持されてなる触媒材料であって、前記担体は第四級アンモニウムカチオンを有し、ＤＮＡの前記担体への担持が、ＤＮＡが有するリン酸骨格と、担体が有する第四級アンモニウムカチオンの静電相互作用によるものである。
なお、本発明でいう触媒材料とは、それ自身が触媒となるものではないものの、金属錯体と組み合わせて用いることで、不斉合成の触媒を形成するものである。
【００１０】
本発明の触媒材料に用いる担体は、第四級アンモニウムカチオンが共有結合により結合している。
そのような結合を介して第四級アンモニウムカチオンを有している担体であれば、特段の制限なく用いることができる。
担体の平均粒径としては、通常５〜１００μｍのものを用いることができる。
本発明で用いる担体の粒径は、メディアン径（Ｄ５０）をいい、その測定は、平均粒径Ｄ50：レーザー回折散乱式粒子分布測定装置によって測定した粒子分布（直径）の中央値を３回測定し、この平均値を算出して得ることができる。
担体の材料の具体的な例としては、シリカゲルを用いることが、取扱いの容易さ、汎用性の観点から好ましい。シリカゲルは市販されているものを用いることができる。
シリカゲル以外の担体の材料としては、ガラスを挙げることができる。ガラスからなる担体とは、ガラスを構成成分として含む担体をいう。そのようなガラス系担体としては、細孔直径が４．５ｎｍ〜４００ｎｍで、細孔容積が５０〜７０％程度のコントロールドポアガラス（Controlled Pore Glass）のような粒子形状ものが好ましく例示できる。
【００１１】
また、担体の材料としてシリカゲルを用いる場合には、後述するように、その表面を予め処理することが好ましい。
表面処理としては、後述するように第四級アンモニウムカチオンを導入するために必要な官能基を有するようにすれば特段の限定はなく、例えばシリカゲルのシラノールをアミノアルキルシリル基で修飾する処理を挙げることができる。アミノアルキルシリル基のアルキルとしては、炭素数１〜５程度の直鎖炭化水素を挙げることができ、例えばメチル、エチル、プロピルを好ましく挙げることができる。
アミノアルキルシリル基でシラノールを修飾する方法として、公知のアミノ基を有するシランカップリング剤を用いて、公知の方法により行うことができる。
【００１２】
第四級アンモニウムカチオンをシリカゲルに導入する方法としては、以下の方法を挙げることができる。
第四級アンモニウムカチオンは、下記式（１）で表される第四級アンモニウムカチオンが有しているアルキル基を介してシリカゲルと直接結合していてもよいし、アルキル基とシリカゲルの間に、その他のスペーサーとなる結合基を介して結合していてもよい。なお、結合の際には、下記式（１）で表される第四級アンモニウムカチオンが有しているアルキル基の一つの水素が置換されることになる。
【００１３】
【化１】
2015047555.tif 000002
（式中、Ｒ1は、炭素数１〜２７の炭化水素基を示す。）
【００１４】
式（１）において、前記炭化水素基としては、例えば、任意の−ＣＨ2−がフェニルやナフチルのようなアリーレンで置換されてもよい、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ノニル、デシル、ドデシル、オクタデシル、シクロペンチル、シクロヘキシル基等の炭素数１〜２７の直鎖状、分岐鎖状若しくは環状のアルキル基が挙げられる。これらの中でも、前記Ｒ1が、任意の−ＣＨ2−の一つがフェニルで置換されている炭素数７〜１７のアルキル基であることが好ましく、任意の−ＣＨ2−の一つがフェニルで置換されているエチル、プロピル及びブチルから選択されるものであることがより好ましい。
【００１５】
上記式（１）で表される第四級アンモニウムカチオンを、スペーサーとなる結合基を介して担体に結合させる場合、担体の材料としてアミノプロピルシリル基が導入されたシリカゲルを用いる態様を挙げることができる。
そして、アミノプロピルシリル基が導入されたシリカゲルと、例えばイソシアネートを有する臭素化炭化水素をジクロロメタンのような溶媒中で反応させて、臭素化炭化水素をシリカゲルに導入する。
その際、アミノ基とイソシアネート基の反応により、臭素化炭化水素とシリカゲルの間にはウレア結合が介在する。
あるいは、アミノプロピルシリル基が導入されたシリカゲルと、例えば臭素化炭化水素を有する炭酸エステルをベンゼンのような溶媒中で反応させて、臭素化炭化水素をシリカゲルに導入する。
その際、アミノ基と炭酸エステル基との反応により、臭素化炭化水素とシリカゲルの間にはウレタン結合が介在する。
臭素化炭化水素を構成する炭化水素としては、フェニルやナフチルのようなアリールを有する炭素数１〜１０のアルキルを挙げることができる。
炭素数１〜１０のアルキルとしては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−ドデシルのような直鎖状の炭化水素を挙げることができ、これらの中でも、メチル、エチル、ｎ−プロピルのような短鎖のものが好ましく挙げられる。
【００１６】
イソシアネートを有する臭素化炭化水素は、例えば以下のような方法で得ることができる。
ヒドロキシメチルアニリンのようなヒドロキシ基を有するアニリンを臭化水素の溶解液中で還流させることでヒドロキシ基を有するアニリンのヒドロキシ基を臭素に置換させて臭素が導入された芳香族アミンを形成させ、これをさらにトリホスゲンと反応させることで、イソシアネートが導入された臭素化炭化水素を得ることができる。
【００１７】
炭化水素基を有する炭酸エステルは、例えば以下のような方法で得ることができる。
4-ブロモ安息香酸メチルのような臭素を有するエステルをジイソブチルアルミニウムヒ
ドリドのような還元剤を用いて、（４−（ブロモメチル）フェニル）メタノールのような臭素を有するアルコールを調製する。その後、これを４−ニトロクロロホルメートのようなクロロギ酸エステルとピリジンのような塩基性溶媒のもとで反応させると、（４−（ブロモメチル）ベンジル（４−ニトロフェニル）カーボネートのような臭素化炭化水素を有する炭酸エステルを調製することができる。
【００１８】
上記の手順により得られたシリカゲルをメタノールのような適当な溶媒の存在下で、トリメチルアミンを加えて反応させると、シリカゲルに導入された臭素化炭化水素の臭素とトリメチルアミンが反応して第四級アンモニウムカチオン（置換基の３つがメチル）と臭素イオンを有する基がシリカゲルに導入される。
トリメチルアミンを用いることで、上記式（１）の第四級アンモニウムカチオンを構成する基がメチル基のような立体障害の少ないものになり、ＤＮＡとの静電相互作用が好ましいものになり、担体への担持が確保される。
【００１９】
本発明の触媒材料における担体とＤＮＡの重量の割合は、特に限定されないが、通常、２０〜１００μｇ／ｍｇ（ＤＮＡ／担体）である態様を挙げることができ、好ましくは３５〜５０μｇ／ｍｇ（ＤＮＡ／担体）である態様を挙げることができる。
【００２０】
本発明の触媒材料を用いたハイブリッド触媒を使用する不斉合成方法によれば、基質を含む溶液中の基質が、上記のハイブリッド触媒と接触することで、中心金属がルイス酸として作用して炭素−炭素結合反応に代表される化学反応が起こるとともに、不斉源としてのＤＮＡのらせん構造により、生成物のエナンチオ選択性が高まる。
上記の化学反応としての炭素−炭素結合反応には、フリーデル−クラフツ反応に加え、ディールス−アルダー反応やマイケル付加反応も含まれる。上記フリーデル−クラフツ反応には、同一分子内での反応も含まれる。
なお、本発明において基質とは、上記化学反応に用いられる原料のことを意味する。
また、本発明いうハイブリッド触媒とは、ＤＮＡと金属錯体から形成される超高分子集合体のことをいう。
本発明によれば、不斉合成反応に用いる触媒材料が粒子状のものであることにより、生成物との分離にかける手間を省くことができるとともに、ハイブリッド触媒の再利用が既存の方法に比べて容易になる。これはＤＮＡが担体に特定の態様で担持されていることで、水や緩衝液などの水溶液、またはアセトニトリルやエーテルなどの高極性の有機溶媒により、ハイブリッド触媒を洗浄することができるためである。
【００２１】
本発明のハイブリッド触媒では、前記触媒材料と金属錯体とが組み合わされる。
本発明のハイブリッド触媒によれば、これが有するＤＮＡのらせん構造に起因する不斉源の作用により、得られる生成物の鏡像体過剰率が高まる、つまりエナンチオ選択性が高まる。なお、以下の文で略号として用いる「ｅｅ」は鏡像体過剰率のことを示す。
鏡像体過剰率は、多い方の物質量から少ない方の物質量を引き、全体の物質量で割った値で表されるものである。
【００２２】
本発明で用いることのできるＤＮＡとして、例えば市販されているＤＮＡ材料、例えば、サケ精巣ＤＮＡ（以下、ｓｔ−ＤＮＡともいう）を利用することもできるし、ＤＮＡを含有する天然試料から、公知の方法を用いて抽出したＤＮＡを用いることもできる。また、所望の塩基配列を有する合成オリゴヌクレオチドを用いることもできる。さらに、エナンチオ選択性に影響を与えない程度に、ＤＮＡの一部がメチル化されている配列を含むものも用いることができる。
上記の中では、入手の容易性と目的物の高いエナンチオ選択性を得る観点から、ｓｔ−ＤＮＡ、さらにはｃｔ−ＤＮＡ（仔ウシ胸腺 ＤＮＡ）を用いることが好ましい。また、反応速度の観点からは二重鎖のＤＮＡを用いることが好ましい。
ここで、ＤＮＡとしては、高ＡＴ含量のものを用いる場合に、目的物のエナンチオ選択性や反応速度を若干高める傾向がある。
また、本発明で用いることのできるＤＮＡは、通常４００〜３０００ｂｐサイズのものを用いことができ、ｓｔ−ＤＮＡを用いる場合には、約５００〜２０００ｂｐサイズのものを挙げることができる。
ＤＮＡとしては、例えば非特許文献２に記載されているように、官能基で修飾されたオリゴヌクレオチドを用いることもできる。
上記ＤＮＡは、ハイブリッド触媒として用いる際に、一種のみを用いてもよいし、異なる複数種を用いることでもできる。
ＤＮＡ原料は、上記で説明した第四級アンモニウムカチオンと臭素イオンからなる基を有する担体に静電相互作用により担持させるために、前記担体をＤＮＡ原料の水溶液（例えば１〜５ｍｇ／ｍＬ程度の濃度）に加え、５〜５５℃程度の温度で１時間〜１週間程度撹拌する手段を用いることができる。撹拌時の温度としては、４５〜５５℃程度であることが好ましい。このような温度帯で撹拌した場合、撹拌時間を短縮しても十分に担体へのＤＮＡの担持が起こる。これにより、本発明の触媒材料を得ることができる。
【００２３】
金属錯体とＤＮＡが担持された担体は、金属触媒の溶解に用いる溶媒が例えば水である場合には、水溶液中で金属錯体がＤＮＡに対して非共有結合により結合してハイブリッド触媒となる。
このようなハイブリッド触媒を形成するためには、ＤＮＡの分子と、金属錯体を構成する金属とのモル比が１０：３〜１：１の範囲となるように、調製を行うことが好ましい。
【００２４】
本発明のハイブリッド触媒を構成する金属錯体が有する金属は、スカンジウム（Ｓｃ）、チタン（Ｔｉ）、バナジウム（Ｖ）、クロム（Ｃｒ）、マンガン（Ｍｎ）、鉄（Ｆｅ）、コバルト（Ｃｏ）、ニッケル（Ｎｉ）、銅（Ｃｕ）、亜鉛（Ｚｎ）のような遷移金属を例示することができる。
このような遷移金属は、硝酸塩、硫酸塩、塩化物及びその水和物、トリフルオロメタンスルホン酸塩などから選択される塩等により、本発明のハイブリッド触媒の金属源として供されることが好ましい。
上記の中でも、特に二価の銅を用いることが、目的物の収率及び高エナンチオ選択性を得る観点から好ましい。またその塩としては、Ｃｕ（ＮＯ3）2で表される組成式を有する硝酸銅を好ましく例示できる。
【００２５】
本発明のハイブリッド触媒を用いて基質の反応を行う場合、上記金属の濃度は、後述する金属錯体の濃度として、基質に対して、通常０．０３〜１００ｍｏｌ％であり、１０〜４０ｍｏｌ％であることが、目的物のエナンチオ選択性を高める観点から好ましい。
【００２６】
本発明のハイブリッド触媒には、上記遷移金属を中心原子する金属錯体が含まれるが、当該金属錯体を構成するリガンド（配位子ともいう）は、例えば下記式（１）：４，４’−ジメチル−２，２’−ビピリジン（以下、ｄｍｂｐｙともいう）、（２）：２−（２’−ピリジニル）イミダゾール、（３）：フェナントロリン、（４）：５，６−ジメチル−１，１０−フェナントロリン（以下、５，６−ｄｍｐともいう）、（５）４、７−ジクロロ−１，１０−フェナントロリン、（６）３，４，７，８−テトラメチル−１，１０−フェナントロリン、（７）：１、１０−フェナントロリンピロール、（８）：ピラジノ［２，３−ｆ］［１，１０］フェナントロリン、（９）：ジピリド［１，３］ジアゼピノン、（１０）：ジピリド［３，２−ａ：２’−３’−ｃ］フェナジンで示されるものを例示することができる。これらは特に、フリーデル−クラフツ反応に好適に用いられる。
【００２７】
【化２】
2015047555.tif 000003
【００２８】
配位子としては、その他に下記式（１１）で表される２，２’−ビピリジン、式（１２
）で表される２−（２−ピリジニル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾールを用いることもできる。これらと、上記式（１）、（２）、（３）、（８）及び（１０）で表される化合物は、ディールス・アルダー反応用のハイブリッド触媒の作製に好適に用いられる。
【化３】
2015047555.tif 000004
【００２９】
上記各式で示される化合物のうち、式（１）で示される４，４’−ジメチル−２，２’−ビピリジン（ｄｍｂｐｙ）を用いることが、目的物の高い収率と高いエナンチオ選択性を得る観点から好ましい。これは特にディールス・アルダー反応において顕著である。
上記の化合物は、上記金属源との金属錯体を形成する配位子となるために、例えば水溶液中で金属錯体を調製する際に、金属源となる金属原子と配位子となる化合物のモル比が、１：１〜１：２となるように混合することが好ましい。
【００３０】
本発明の触媒材料は、担体に担持されて形成されるものであり、これをカラムのような円柱状の筒に充填する充填剤として用いる態様を挙げることができる。この態様によれば、連続的な通液が可能となり、化学反応も連続的に行われ、これにより、目的物も連続的に得ることができる。
本発明の触媒材料をカラムに充填して用いる場合には、カラムの長さは通常５〜１５ｍｍであり、内径は、通常３〜６ｍｍである。カラムの材質としては、ステンレスのような金属製あるいはフッ素樹脂や他の樹脂製のものも使用することができる。
そのようなカラムに、本発明の触媒材料を充填し、さらに金属錯体を溶液のような状態で導入し、カラム内で上述した超分子集合体を形成させることもできる。このような操作を経ることで、カラム内の担体上に保持されたハイブリッド触媒を形成することができる。
【００３１】
本発明の触媒材料を用いたハイブリッド触媒を用いて反応を起こさせる際に用いる溶媒としては、水系溶媒を挙げることができ、その中でもＭＯＰＳ（３−モルホリノプロパンスルホン酸）緩衝液を用いることが好ましい。このような緩衝液を用いることで、反応器内でＤＮＡ及び金属錯体からなるハイブリッド触媒を安定に保つことができる。
ＭＯＰＳの濃度としては、通常１０〜１００ｍＭで用いる。
また、通液のための溶媒のｐＨの範囲は、通常５．５〜６．５である。
【００３２】
本発明の触媒材料を用いたハイブリッド触媒を用いた不斉合成方法によれば、高収率かつ高エナンチオ選択的に目的物質を得ることができる。これにより、有用な薬剤や農薬の開発に貢献できる。また、本発明によれば、担体にＤＮＡが静電相互作用により担持されていることで、使用後に洗浄等の操作を行ってもＤＮＡが担体に担持され続けることから、複数回の利用に耐えることができる。
【実施例】
【００３３】
以下に、実施例をあげて、本発明について更に詳細に説明を加えるが、本発明の範囲がかかる実施例にのみ限定されないことはいうまでもない。
【００３４】
＜実施例１：アンモニウム修飾シリカゲルの合成＞
１．（4-(2-bromoethyl)anilinium bromide (1)の合成）
２４０ｍｇの4-(2-hydroxyethyl)aniline (1.75mmol)を２０ｍLの４８％臭化水素酸に溶かし、４時間還流を行った。還流後に室温まで放冷し、その後０℃まで冷やすと白色固体が析出したので、濾過して分離し、以下の式（２）で表される4-(2-bromoethyl)anilinium bromideを得た（328mg, 67% yield)。
【００３５】
【化４】
2015047555.tif 000005
【００３６】
２．（4-(2-bromoethyl)phenylisocyanateの合成）
得られた固体を４ｍLのジクロロメタンに溶かし、さらに４ｍLの飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた。この溶液を０℃で撹拌させ、十分冷えた後に１１４ｍｇのトリホスゲン（0.39mmol）を加え、さらに０℃で４０分間撹拌を行った。その後、ジクロロメタンで抽出操作を行い、得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、減圧条件下で溶媒を留去して淡黄色のオイル（以下の式（３）で表される4-(2-bromoethyl)phenylisocyanate）を得た（224mg, 1.00mmol）。
【００３７】
【化５】
2015047555.tif 000006
【００３８】
３．（3-((4-((2-bromo)ethyl)phenyl)ureido)propyl-修飾シリカゲルの合成）
上記で得られたオイルを２０ｍLのジクロロメタンに溶かし、８００ｍｇの3-aminopropyl-functionalized silica gel (40-63μｍ, 1mmol/g NH2 loading, Aldrich)を加えた。この懸濁液を室温で２０時間撹拌した後濾過し、固体を少量のジクロロメタンで洗って、3-((4-((2-bromo)ethyl)phenyl)ureido)propyl-修飾シリカゲルを得た（以下の式（４））。
【００３９】
【化６】
2015047555.tif 000007
【００４０】
４．3-((4-((2-trimethylammonium)ethyl)phenyl)ureido)propyl-functionalizaed silica gel, bromideの合成
上記の固体に７ｍLのトリメチルアミン−メタノール溶液（3.2 mol/L, TCI）と２ｍLのエタノールを加えて、５０℃で三日間撹拌した。その後濾過し、メタノール、アセトン、水で洗浄した後、減圧乾燥し、白色固体(以下の式（５）で表される3-((4-((2-trimethylammonium)ethyl)phenyl)ureido)propyl-functionalizaed silica gel, bromide)９１４ｍ
を得た(40-63μｍ, 1 mmol/g ammonium loading)。
元素分析  計算値: C／N =4.29
実測値：C，9. 79; N，2. 32   C／N =4.22
【００４１】
【化７】
2015047555.tif 000008
【００４２】
＜シリカゲル担持ＤＮＡ（触媒材料）の作製＞
サケ精巣由来のＤＮＡ（Sigma-Aldorich）２ｍｇを超純水（MiliQ, Millipore）１ｍLに溶解させた。この溶液と、上記で合成した第四級アンモニウムカチオンが導入されたシリカゲル５０ｍｇに加え、５℃で７日間振とうした。溶液中のＤＮＡ濃度が振とう開始時の１０％未満になった時点で振とうを止めて濾過し、１ｍLの超純粋で二回洗浄、凍結乾燥を経て、本発明の触媒材料であるシリカゲル担持ＤＮＡ粉末５０ｍｇを得た。
本発明の実施例の触媒材料の作製に用いたシリカゲル、市販品のシリカゲル（３−アミノプロピル−修飾-シリカゲル(40-63μｍ，アルドリッチ社製)）、本発明の実施例のシリカゲル担持ＤＮＡ（触媒材料）について、ＩＲ分析を行った。結果を図１に示す。
図１の結果から、１４００〜１７００ｃｍ-1の間で、本発明の実施例の触媒材料では特徴的なピークが見られた。これは、本発明の実施例の触媒材料が有する、ウレア基やアリール基に起因するものであると考えられる。
【００４３】
＜シリカゲル担持ＤＮＡ粉末を用いたエナンチオ選択的Diels−Alder反応＞
上記で作製したシリカゲル担持ＤＮＡ粉末５０ｍｇに２４０μLのＭＯＰＳバッファー（２０mmol/L, pH6.5）を加え、さらに１２０μＬの銅触媒溶液（[Cu(dmbpy)(NO3)2]の２．７μmol/mL水溶液）を加えた後、５℃で１．５時間振とうし、触媒混和物（ハイブリッド触媒）とした。これに反応基質である2-azachalconeの０．５Ｍアセトニトリル溶液を２μLと、cyclopentadine２μLを加え、５℃で三日間振とうすることで反応を行った。反応後はジエチルエーテルで生成物を抽出し、減圧条件下で溶媒を留去して目的の生成物を得た。生成物の転化率とエナンチオ選択性はHPLCで（株）ダイセル製キラルカラム（CHIRALCEL OD-H、溶離液イソプロパノール／ヘキサン＝１９／１、流速０．５ｍL／min）を用いて調べたところ、収率９８％、９４％eeであった。
【００４４】
＜試験例１：本発明の触媒材料であるシリカゲル担持ＤＮＡ粉末の再利用実験＞
実施例１で作製した使用済みの本発明の触媒材料であるシリカゲル担持ＤＮＡ粉末を、抽出作業後の懸濁液から回収し、新しく２４０μLのMOPSバッファーと１２０μLの銅触媒溶液を加えなおし、５℃で１．５時間振とうした。これを触媒混和物（ハイブリッド触媒）とし、前項と同じ条件で基質添加からHPLCでの転化率とエナンチオ選択性の測定までの工程を繰り返した。この再利用実験を１０回繰り返したところ、以下の表１に示す結果が得られた。
【００４５】
【表１】
2015047555.tif 000009
【００４６】
この結果から、シリカゲル担持ＤＮＡ粉末は複数回反応に利用しても、高い転化率とエナンチオ選択性を失うことなく、不斉源として繰り返し用い得ることが示された。
【００４７】
＜比較例１：第四級アンモニウムカチオンと炭酸イオンとからなる基が導入されたシリカゲル（市販品）を用いた例＞
実施例１と同様の手順により、サケ精巣由来のＤＮＡ（Sigma-Aldorich：以下、単にｓｔ−ＤＮＡともいう）２ｍｇを超純水（MiliQ, Millipore）１ｍLに溶解させた。この溶液と、市販品のシリカゲル（3-(trimethylammonium）propyl-functionalized silica gel, carbonate (200-400 mesh 0.8mmol/g loading))５０ｍｇに加え、５℃で７日間振とうした。溶液中のＤＮＡ濃度が振とう開始時の１０％未満になった時点で振とうを止めて濾過し、１ｍLの超純粋で二回洗浄、凍結乾燥を経て、本発明の触媒材料であるシリカゲル担持ＤＮＡ粉末５０ｍｇを得た。
【００４８】
＜比較例２：第四級アンモニウムカチオンが導入されていないシリカゲル（市販品）を用いた例＞
実施例１と同様の手順により、サケ精巣由来のＤＮＡ（Sigma-Aldorich）２ｍｇを超純水（MiliQ, Millipore）１ｍLに溶解させた。この溶液と、市販品のシリカゲル60N（球状、中性、平均粒径40-50μｍ)５０ｍｇに加え、５℃で７日間振とうした。溶液中のＤＮＡ濃度が振とう開始時の１０％未満になった時点で振とうを止めて濾過し、１ｍLの超純粋で二回洗浄、凍結乾燥を経て、触媒材料５０ｍｇを得た。
【００４９】
＜試験例２：触媒材料におけるＤＮＡ分子の担持の確認＞
実施例１、比較例１及び２で作製した触媒材料を、ｓｔ−ＤＮＡの溶液（ｓｔ−ＤＮＡ２ｍｇを水１ｍＬに溶解）にそれぞれ加えて、１週間撹拌した。その際のＤＮＡ濃度の経時変化を確認した。結果を図２に示す。
図２の結果から明らかなように、本発明の触媒材料は、ＤＮＡ分子を徐々に吸着するのに対し、比較例の触媒材料はＤＮＡ分子をほとんど吸着しなかった。
【００５０】
＜試験例３＞
シリカゲルに担持させていないｓｔ−ＤＮＡを用い（１．３Ｍ）、金属触媒としてＣｕ（ｄｍｂｐｙ）（１．５ｍＭ）を用いて反応を行わせた例を試験例３−１とした。
実施例１の触媒材料を用い、Diels-Alder反応を行った例を試験例３−２とした。
また、実施例１の触媒材料においてＤＮＡを担持してないものを触媒材料として用い、
配位子としてdmbpyを用いた金属触媒を用いたこと以外は試験例３−２と同様の手順、操作により、Diels-Alder反応を行った例を試験例３−３とした。
得られた転化率、endo/exo比、ee%について、以下の表２に示す。試験例３−１〜３−３のいずれにおいても、用いた基質は以下の式（６）：2-azachalcone及び（７）cyclopentadieneであり、得られた生成物は式（８）：endo体、式（９）：exo体で表される化合物である。
【００５１】
【化８】
2015047555.tif 000010
【００５２】
【表２】
2015047555.tif 000011
【００５３】
＜実施例２：アンモニウム修飾シリカゲルの合成＞
１．(4-(bromomethyl)phenyl)methanol の合成
2.0 gのmethyl 4-bromomethyl benzoate (18.7 mmol)を50 mLのdichloromethaneに溶かし、-78 ℃に冷却した後、29 mLのDIBAL-H (Diisobutylaluminium hydride, 1.0 M in THF)を加えた。この溶液を-78 ℃で1.5時間撹拌した後、0 ℃まで昇温し、さらに30分間撹拌した。少量の水で反応を停止し、dichloromethaneで抽出操作を行い、得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、減圧条件下で溶媒を留去して白色の個体を得た。（(4-(bromomethyl)phenyl)methanol, 1.95 g, quant）
【００５４】
２．4-(bromomethyl)benzyl (4-nitrophenyl) carbonateの合成
得られた固体を50 mLのdichloromethaneに溶かし、2.6 gの4-nitrochloroformateと2.1
mLのpyridineを加えた。この溶液を常温で24時間撹拌した。Chloroformを加えて反応溶液を希釈し、1 Mの硫酸水素ナトリウムで洗浄し、得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥、濾過し、減圧条件下で溶媒を留去した。得られた混合物からシリカゲルカラムクロマトグラフィにより黄色の個体を得た。（4-(bromomethyl)benzyl (4-nitrophenyl) carbonate, 3.19 g, quant）
【００５５】
３．3-((4-((2-trimethylammonium)ethyl)phenyl)carbamoyl)propyl-functionalized silica gel, bromideの合成
得られた個体を20 mLのbenzeneに溶かし、500 mg の3-aminopropyl-functionalized silica gel  (40-63 μm, 1 mmol/g NH2 loading, Aldrich)を加えた。この懸濁液を室温で20時間撹拌した後濾過し、固体を少量のdichloromethaneとacetoneで洗った。この固体に4.7 mLのtrimethylamine in methanol 溶液(3.2 mol/L, TCI)と2 mLのethanolを加えて、50 ℃で三日間撹拌した。その後濾過し、methanol, acetone, 水、で洗浄した後減圧乾燥
し、白色固体310 mgを得た。（3-((4-((2-trimethylammonium)ethyl)phenyl)carbamoyl)propyl-functionalized silica gel, bromide, 40-63 μm, 1 mmol/g ammonium loading）
【００５６】
＜シリカゲル担持ＤＮＡ（触媒材料）の作製＞
サケ精巣由来DNA（sigma-aldrich）2 mgを超純水(MilliQ, Millipore)1 mLに溶解させた。この溶液と、上で合成したカチオン修飾シリカゲル 50 mgに加え、5℃で7日間振とうした。溶液中のDNA濃度が振とう開始時の10%未満になった時点で振とうを止めて濾過し、1 mLの超純水で二回洗浄、凍結乾燥を経てシリカゲル担持DNA粉末50 mgを得た。
【００５７】
実施例２で作製したシリカゲル担持ＤＮＡ粉末を用いて実施例１と同様の反応を行ったところ、優れた収率及びエナンチオ選択性を示した。また、繰り返しの使用にも耐えることができた。
【産業上の利用可能性】
【００５８】
本発明の触媒材料には、市販されているＤＮＡのような安価な材料を用いることができ、また、有機溶媒ではなく環境負荷の小さい水系溶媒を用いて反応を起こさせることができる。また、本発明によれば、連続的なプロセスにより高エナンチオ選択的に目的の生成物を得るためのハイブリッド触媒を提供できるので、薬剤あるいは農薬として使用可能性のある目的物の大量生産に本発明を利用することができる。
【図１】
2015047555.tif 000014
【図２】
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