(57)【要約】【課題】異なる密度の物質を分離するための装置および方法を提供すること。【解決手段】異なる密度の物質を分離するためのデバイスが提供される。カップ本体は、媒体を保持するように構成された内部空洞を有する。内壁は、上端と下端とを有する中心本体領域を規定する。この上端は、この下端より広い。内部ショルダーは、この中心本体領域の上端に外接する。この内部ショルダーは、この中心本体領域の上方にネック領域を規定し、そしてこのネック領域の下方にショルダートラップを規定する。このショルダートラップは、この中心本体領域の上端に外接し、そしてこのネック領域より広い。このデバイスが中心軸の周りでスピンさせられるとき、この媒体は、この内壁に沿って上向きに、このショルダートラップに向かって移動する。【選択図】図６
2015047133.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
異なる密度の物質を分離するためのデバイス（３００）であって、該デバイスは：
媒体を保持するように構成された内部空洞（３０２）を有するカップ本体（３０４）；
上端と下端とを有する中心本体領域（３０８）を規定する内壁（３０６）であって、該上端は該下端より広い、内壁（３０６）；および
該中心本体領域（３０８）の該上端に外接する内部ショルダー（３１８）であって、該内部ショルダーは、該中心本体領域の上方にネック領域（３１０）を規定し、そして該ネック領域の下方にショルダートラップ（３２０）を規定し、該ショルダートラップは、該中心本体領域の該上端に外接する、内部ショルダー（３１８）
を備え；
該ショルダートラップ（３２０）は、該ネック領域（３１０）より広く、その結果、該デバイスが中心軸の周りでスピンさせられるときに、該媒体は該内壁（３０６）に沿って上向きに、該ショルダートラップ（３２０）に向かって移動し、該媒体内の比較的高密度の物質は、該ショルダートラップ内に収集され、そして該媒体内の比較的低密度の物質は、該ネック領域の上方の開口部（３２２）を通して該デバイスから排出される、デバイス（３００）。
【請求項２】
前記中心本体領域（３０８）における前記内部空洞（３０２）は、実質的に円錐の形状を有し、その結果、該中心本体領域における該内部空洞（３０２）の直径は、該中心本体領域の前記下端に向かって下向きにテーパ状である、請求項１に記載のデバイス。
【請求項３】
前記デバイスを回転アクチュエータ（２０６）に結合するために構成された結合部材（３２８）を備え、前記カップ本体（３０４）は、該カップ本体の中心軸の周りで回転可能である、請求項１または２に記載のデバイス。
【請求項４】
前記内壁（３０６）は、前記中心本体領域（３０８）の下方に底領域を規定し、そして該底領域は、実質的に半球の形状を有する、請求項１、２または３に記載のデバイス。
【請求項５】
前記ネック領域（３１０）の上方に、前記開口部（３２２）を規定する開口部分（３２４）をさらに備え、該開口部を通して、前記比較的低密度の物質が排出され、該開口部分は、該ネック領域に外接し、そして該ネック領域から離れる方向に外向きに広がっている、請求項１〜４のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項６】
前記カップ本体（３０４）を通して前記中心本体領域（３０８）の前記下端から該中心本体領域の前記上端まで形成された１つ以上の通路（６０２）をさらに備え、該１つ以上の通路の各々は、該中心本体領域の該下端から該上端までの流路を規定し、特に、該１つ以上の通路（６０２）の各々は、該カップ本体（３０４）を通して形成された長手軸方向ボア（６０４）を備え、該長手軸方向ボアは、該中心本体領域（３０８）の前記下端の近くで前記内壁（３０６）に形成された下アパーチャを、該中心本体領域の前記上端の近くで前記ショルダートラップ（３２０）の下方で該内壁に形成された上アパーチャに接続する、請求項１〜５のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項７】
細胞懸濁物を出発混合物から分離する方法であって、該出発混合物は、比較的低密度の緩衝溶液および比較的高密度の細胞を含み、該方法は：
該出発混合物をデバイス（２０４、３００、６００）に分与する工程であって、該デバイスは、該出発混合物を保持するための内部空洞（３０２）を有するカップ本体（３０４）を有し、該デバイスは、特に、請求項１〜６のいずれか１項に記載のデバイスである、工程；
該デバイスを中心軸の周りでスピンさせる工程であって、その結果、該出発混合物は、該カップ本体（３０４）の内壁（３０６）に沿って上向きに、該内部空洞に外接するショルダートラップ（３２０）に向けて駆動され、その結果、該出発混合物中の該比較的高密度の細胞は、該ショルダートラップ内に収集され、そして該出発混合物中の該比較的低密度の緩衝溶液の少なくともいくらかは、該カップ本体の開口部（３２２）を通して該デバイスから排出される、工程；
該比較的低密度の緩衝溶液の少なくともいくらかを排出した後に、所望の溶液を該カップ本体（３０４）の該内部空洞（３０２）内に分与する工程；および
該所望の溶液と該比較的高密度の細胞とが一緒に混合されるように、該デバイスを撹拌する工程
を包含する、方法。
【請求項８】
前記デバイス（３００）を撹拌する工程が：
該デバイスを前方向に所定の前方向加速率で加速すること；
所定の前方向スピン速度を第一の所定の時間量にわたって維持すること；
該デバイスを所定の前方向減速率で減速すること；
該デバイスを後方向に所定の後方向加速率で加速すること；
所定の後方向スピン速度を第二の所定の時間量にわたって維持すること；
該デバイスを所定の後方向減速率で減速すること；ならびに
前記所望の溶液および前記比較的高密度の細胞をピペッターで粉砕または滴定すること
のうちの少なくとも１つを包含する、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
異なる密度の物質を分離するための装置（２００）であって、該装置は：
分離カップ（２０４、３００）であって、特に、請求項１〜６のいずれか１項に記載の分離デバイスであって、該分離カップは、媒体を保持するように構成された内部空洞（３０２）を有し、そして該内部空洞に外接するショルダートラップ（３２０）を備え、該ショルダートラップは、該分離カップが中心軸の周りでスピンさせられるときに、該媒体中の比較的高密度の物質が該ショルダートラップ（３２０）内に収集され、そして該媒体中の比較的低密度の物質が該分離カップ（２０４、３００）から排出されるように構成されている、分離カップ（２０４、３００）；ならびに
該分離カップに結合された回転アクチュエータ（２０６）であって、該分離カップを該分離カップの中心軸の周りでスピンさせるように構成されている、回転アクチュエータ（２０６）
を備える、装置（２００）。
【請求項１０】
前記分離カップ（２０４、３００）が：
上端と下端とを有する中心本体領域（３０８）を規定する内壁（３０６）であって、該上端は該下端より広い、内壁（３０６）；ならびに
該中心本体領域（３０８）の該上端に外接する内部ショルダー（３１８）であって、該内部ショルダーは、前記内部空洞（３０２）に外接する前記ショルダートラップ（３２０）、および該中心本体領域の上方のネック領域を規定する、内部ショルダー
をさらに備え、
特に、該分離カップの該中心本体領域（３０８）における該内部空洞（３０２）は、実質的に円錐の形状を有し、その結果、該中心本体領域における該内部空洞の直径は、該中心本体領域の該下端に向かって下向きにテーパ状である、請求項９に記載の装置。
【請求項１１】
前記分離カップ（２０４、３００）の前記内部空洞（３０２）の前記直径は、前記ショルダートラップ（３２０）を通って下方向に増大し、そして該分離カップの該内部空洞の該直径は、前記ネック領域（３１０）を通って下方向に減少し；そして／または
該分離カップ（２０４、３００）は、該ネック領域（３１０）の上方で、該ネック領域に外接する開口部分（３２４）をさらに備え、そして該開口部分（３２４）は、該ネック領域から離れる方向に外向きに広がっている、
請求項９または１０に記載の装置。
【請求項１２】
前記分離カップ（２０４、３００、６００）は、前記分離カップを通して、前記中心本体領域（３０８）の前記下端から該中心本体領域の前記上端まで形成された１つ以上の通路（６０２）をさらに備え；そして
該１つ以上の通路（６０２）の各々は、該分離カップの該中心本体領域の該下端から該上端までの流路を規定する、
請求項９、１０または１１に記載の装置。
【請求項１３】
前記分離カップ（２０４、３００、６００）の前記１つ以上の通路（６０２）の各々が、長手軸方向ボア（６０４）を備え、該長手軸方向ボアは、前記中心本体領域（３０８）の前記下端の近くで前記内壁（３０６）に形成された下アパーチャ（６０６）を、該中心本体領域の前記上端の近くで前記ショルダートラップ（３２０）の下方で該内壁に形成された上アパーチャ（６０８）に接続する、請求項１２に記載の装置。
【請求項１４】
前記分離カップ（２０４、３００、６００）を囲むハウジング（４００）をさらに備え、該ハウジングは、収集チャンバ（４１２）を備え、該収集チャンバは、前記分離カップの開口部分（３２４）に外接し、その結果、該分離カップが前記中心軸の周りでスピンさせられるときに、該収集チャンバは、該分離カップから排出された前記比較的低密度の物質を受容し、特に、該収集チャンバ（４１２）の床（４１４）は、排液口（４１６、４１８）に向かって傾斜しており、その結果、該分離カップから排出された該比較的低密度の物質は、該収集チャンバから排液可能である、請求項９〜１３のいずれか１項に記載の装置。
【請求項１５】
前記分離カップ（２０４、３００、６００）を前記回転アクチュエータ（２０６）に結合させる設置アセンブリ（２２０、５００）をさらに備え、該分離カップは、該設置アセンブリ内に取り外し可能に固定可能される、請求項９〜１４のいずれか１項に記載の装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、自動および半自動の電気生理学的分析に関し、そして特に、高スループットの自動電気生理学に関する。この目的で、媒体を受容するための分離デバイス、分離カップを有する装置、および分離方法が提供される。
【背景技術】
【０００２】
（背景）
細胞および細胞膜の電気的挙動は、基礎研究において、および現代の薬物開発において意味深く重要である。この分野における目的の特定領域は、イオンチャネルおよびトランスポータの研究にある。イオンチャネルは、細胞外環境と細胞の細胞質との間の電気化学的勾配を維持することの原因となる、細胞膜中に見いだされるタンパク質を基礎にした孔である。イオンチャネルは、一旦開くと、イオンが存在する電気化学的勾配の方向に流れる点で、受動的な要素である。
【０００３】
イオンチャネルの研究は、基礎的学究的研究、ならびに生物工学的および薬学的研究を包含する非常に多様で、かつ実を結ぶ領域である。電気生理学は、単離された細胞膜または小胞（ｖｅｓｉｃｌｅ）に対し、ならびに可溶化されたチャネルが製造された膜に再構築されている合成の膜に対して実施される。イオンチャネルの自動化された、高スループットの研究のための計測器が開発されており、そして高スループット電気生理学的測定システムと称され得る。
【０００４】
一般に、多くの型のアッセイは、充分な細胞の準備を必要とする。従って、細胞の準備のための効果的な方法、およびこのような方法を実施するために構成された装置またはデバイスに対する必要性が、存在し続けている。充分な細胞の準備は、自動アッセイの観点で特に興味深いものであり、自動アッセイは、複数のアッセイを、人の介入を最小にして実施し、スループットを増大させ得、従って、１日あたりに獲得されるデータ点の数を増大させ得る。公知の自動化された高スループット測定システム（例えば、上記のもの）は、比較的迅速で、かつ効率的な様式で電気生理学的アッセイを実施するために採用され得るが、このようなシステムは、これらアッセイで用いられる細胞および細胞の溶液を自動的に調製するために装備されてはいない。
【０００５】
本発明の目的は、電気生理学的アッセイで用いられる細胞および細胞の溶液を自動的に調製するために便利なデバイス、装置および方法を提供することである。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、例えば、以下を提供する：
（項目１）
異なる密度の物質を分離するためのデバイス（３００）であって、該デバイスは：
媒体を保持するように構成された内部空洞（３０２）を有するカップ本体（３０４）；
上端と下端とを有する中心本体領域（３０８）を規定する内壁（３０６）であって、該上端は該下端より広い、内壁（３０６）；および
該中心本体領域（３０８）の該上端に外接する内部ショルダー（３１８）であって、該内部ショルダーは、該中心本体領域の上方にネック領域（３１０）を規定し、そして該ネック領域の下方にショルダートラップ（３２０）を規定し、該ショルダートラップは、該中心本体領域の該上端に外接する、内部ショルダー（３１８）
を備え；
該ショルダートラップ（３２０）は、該ネック領域（３１０）より広く、その結果、該デバイスが中心軸の周りでスピンさせられるときに、該媒体は該内壁（３０６）に沿って上向きに、該ショルダートラップ（３２０）に向かって移動し、該媒体内の比較的高密度の物質は、該ショルダートラップ内に収集され、そして該媒体内の比較的低密度の物質は、該ネック領域の上方の開口部（３２２）を通して該デバイスから排出される、デバイス（３００）。
（項目２）
前記中心本体領域（３０８）における前記内部空洞（３０２）は、実質的に円錐の形状を有し、その結果、該中心本体領域における該内部空洞（３０２）の直径は、該中心本体領域の前記下端に向かって下向きにテーパ状である、上記項目に記載のデバイス。
（項目３）
前記デバイスを回転アクチュエータ（２０６）に結合するために構成された結合部材（３２８）を備え、前記カップ本体（３０４）は、該カップ本体の中心軸の周りで回転可能である、上記項目のいずれかに記載のデバイス。
（項目４）
前記内壁（３０６）は、前記中心本体領域（３０８）の下方に底領域を規定し、そして該底領域は、実質的に半球の形状を有する、上記項目のいずれかに記載のデバイス。
（項目５）
前記ネック領域（３１０）の上方に、前記開口部（３２２）を規定する開口部分（３２４）をさらに備え、該開口部を通して、前記比較的低密度の物質が排出され、該開口部分は、該ネック領域に外接し、そして該ネック領域から離れる方向に外向きに広がっている、上記項目のいずれかに記載のデバイス。
（項目６）
前記カップ本体（３０４）を通して前記中心本体領域（３０８）の前記下端から該中心本体領域の前記上端まで形成された１つ以上の通路（６０２）をさらに備え、該１つ以上の通路の各々は、該中心本体領域の該下端から該上端までの流路を規定し、特に、該１つ以上の通路（６０２）の各々は、該カップ本体（３０４）を通して形成された長手軸方向ボア（６０４）を備え、該長手軸方向ボアは、該中心本体領域（３０８）の前記下端の近くで前記内壁（３０６）に形成された下アパーチャを、該中心本体領域の前記上端の近くで前記ショルダートラップ（３２０）の下方で該内壁に形成された上アパーチャに接続する、上記項目のいずれかに記載のデバイス。
（項目７）
細胞懸濁物を出発混合物から分離する方法であって、該出発混合物は、比較的低密度の緩衝溶液および比較的高密度の細胞を含み、該方法は：
該出発混合物をデバイス（２０４、３００、６００）に分与する工程であって、該デバイスは、該出発混合物を保持するための内部空洞（３０２）を有するカップ本体（３０４）を有し、該デバイスは、特に、上記項目のいずれかに記載のデバイスである、工程；
該デバイスを中心軸の周りでスピンさせる工程であって、その結果、該出発混合物は、該カップ本体（３０４）の内壁（３０６）に沿って上向きに、該内部空洞に外接するショルダートラップ（３２０）に向けて駆動され、その結果、該出発混合物中の該比較的高密度の細胞は、該ショルダートラップ内に収集され、そして該出発混合物中の該比較的低密度の緩衝溶液の少なくともいくらかは、該カップ本体の開口部（３２２）を通して該デバイスから排出される、工程；
該比較的低密度の緩衝溶液の少なくともいくらかを排出した後に、所望の溶液を該カップ本体（３０４）の該内部空洞（３０２）内に分与する工程；および
該所望の溶液と該比較的高密度の細胞とが一緒に混合されるように、該デバイスを撹拌する工程
を包含する、方法。
（項目８）
前記デバイス（３００）を撹拌する工程が：
該デバイスを前方向に所定の前方向加速率で加速すること；
所定の前方向スピン速度を第一の所定の時間量にわたって維持すること；
該デバイスを所定の前方向減速率で減速すること；
該デバイスを後方向に所定の後方向加速率で加速すること；
所定の後方向スピン速度を第二の所定の時間量にわたって維持すること；
該デバイスを所定の後方向減速率で減速すること；ならびに
前記所望の溶液および前記比較的高密度の細胞をピペッターで粉砕または滴定すること
のうちの少なくとも１つを包含する、上記項目に記載の方法。
（項目９）
異なる密度の物質を分離するための装置（２００）であって、該装置は：
分離カップ（２０４、３００）であって、特に、上記項目のいずれかに記載の分離デバイスであって、該分離カップは、媒体を保持するように構成された内部空洞（３０２）を有し、そして該内部空洞に外接するショルダートラップ（３２０）を備え、該ショルダートラップは、該分離カップが中心軸の周りでスピンさせられるときに、該媒体中の比較的高密度の物質が該ショルダートラップ（３２０）内に収集され、そして該媒体中の比較的低密度の物質が該分離カップ（２０４、３００）から排出されるように構成されている、分離カップ（２０４、３００）；ならびに
該分離カップに結合された回転アクチュエータ（２０６）であって、該分離カップを該分離カップの中心軸の周りでスピンさせるように構成されている、回転アクチュエータ（２０６）
を備える、装置（２００）。
（項目１０）
前記分離カップ（２０４、３００）が：
上端と下端とを有する中心本体領域（３０８）を規定する内壁（３０６）であって、該上端は該下端より広い、内壁（３０６）；ならびに
該中心本体領域（３０８）の該上端に外接する内部ショルダー（３１８）であって、該内部ショルダーは、前記内部空洞（３０２）に外接する前記ショルダートラップ（３２０）、および該中心本体領域の上方のネック領域を規定する、内部ショルダー
をさらに備え、
特に、該分離カップの該中心本体領域（３０８）における該内部空洞（３０２）は、実質的に円錐の形状を有し、その結果、該中心本体領域における該内部空洞の直径は、該中心本体領域の該下端に向かって下向きにテーパ状である、上記項目に記載の装置。
（項目１１）
前記分離カップ（２０４、３００）の前記内部空洞（３０２）の前記直径は、前記ショルダートラップ（３２０）を通って下方向に増大し、そして該分離カップの該内部空洞の該直径は、前記ネック領域（３１０）を通って下方向に減少し；そして／または
該分離カップ（２０４、３００）は、該ネック領域（３１０）の上方で、該ネック領域に外接する開口部分（３２４）をさらに備え、そして該開口部分（３２４）は、該ネック領域から離れる方向に外向きに広がっている、
上記項目のいずれかに記載の装置。
（項目１２）
前記分離カップ（２０４、３００、６００）は、前記分離カップを通して、前記中心本体領域（３０８）の前記下端から該中心本体領域の前記上端まで形成された１つ以上の通路（６０２）をさらに備え；そして
該１つ以上の通路（６０２）の各々は、該分離カップの該中心本体領域の該下端から該上端までの流路を規定する、
上記項目のいずれかに記載の装置。
（項目１３）
前記分離カップ（２０４、３００、６００）の前記１つ以上の通路（６０２）の各々が、長手軸方向ボア（６０４）を備え、該長手軸方向ボアは、前記中心本体領域（３０８）の前記下端の近くで前記内壁（３０６）に形成された下アパーチャ（６０６）を、該中心本体領域の前記上端の近くで前記ショルダートラップ（３２０）の下方で該内壁に形成された上アパーチャ（６０８）に接続する、上記項目のいずれかに記載の装置。
（項目１４）
前記分離カップ（２０４、３００、６００）を囲むハウジング（４００）をさらに備え、該ハウジングは、収集チャンバ（４１２）を備え、該収集チャンバは、前記分離カップの開口部分（３２４）に外接し、その結果、該分離カップが前記中心軸の周りでスピンさせられるときに、該収集チャンバは、該分離カップから排出された前記比較的低密度の物質を受容し、特に、該収集チャンバ（４１２）の床（４１４）は、排液口（４１６、４１８）に向かって傾斜しており、その結果、該分離カップから排出された該比較的低密度の物質は、該収集チャンバから排液可能である、上記項目のいずれかに記載の装置。
（項目１５）
前記分離カップ（２０４、３００、６００）を前記回転アクチュエータ（２０６）に結合させる設置アセンブリ（２２０、５００）をさらに備え、該分離カップは、該設置アセンブリ内に取り外し可能に固定可能される、上記項目のいずれかに記載の装置。
【０００７】
（摘要）
異なる密度の物質を分離するためのデバイス（２０４、３００、６００）が提供される。カップ本体（３０４）は、媒体を保持するように構成された内部空洞（３０２）を有する。内壁（３０６）は、上端と下端とを有する中心本体領域（３０８）を規定する。この上端は、この下端より広い。内部ショルダー（３１８）は、この中心本体領域（３０８）の上端に外接する。この内部ショルダーは、この中心本体領域（３０８）の上方にネック領域（３１０）を規定し、そしてこのネック領域の下方にショルダートラップ（３２０）を規定する。このショルダートラップ（３２０）は、この中心本体領域（３０８）の上端に外接し、そしてこのネック領域（３１０）より広い。このデバイスが中心軸の周りでスピンさせられるとき、この媒体は、この内壁（３０６）に沿って上向きに、このショルダートラップ（３２０）に向かって移動する。この媒体中の比較的高密度の物質は、このショルダートラップ内に収集され、そして比較的低密度の物質は、このネック領域（３１０）の上方の開口部（３２２）を通してこのデバイスから排出される。さらに、本発明は、媒体を分離するための装置（２００）、およびこの分離デバイスを使用して媒体を分離する方法を提供する。
【０００８】
（要旨）
本発明はそれぞれ、請求項１、７および９において規定される。具体的な実施形態は、従属請求項に記載されている。
【０００９】
異なる密度の物質を分離するためのデバイスが提供される。カップ本体は、媒体を保持するように構成された内部空洞を有する。内壁は、上端と下端とを有する中心本体領域を規定する。この上端は、この下端より広い。内部ショルダーは、この中心本体領域の上端に外接する。この内部ショルダーは、この中心本体領域の上方にネック領域を規定し、そしてこのネック領域の下方にショルダートラップを規定する。このショルダートラップは、この中心本体領域の上端に外接し、そしてこのネック領域より広い。このデバイスが中心軸の周りでスピンさせられるとき、この媒体は、この内壁に沿って上向きに、このショルダートラップに向かって移動する。この媒体中の比較的高密度の物質は、このショルダートラップ内に収集され、そして比較的低密度の物質は、このネック領域の上方の開口部を通してこのデバイスから排出される。
【００１０】
１つの実施形態において、この分離デバイスは、装置の請求項に特定される、または詳細な説明において特定されるような、分離カップについての詳細に従って設計される。本明細書中に開示される特徴は、個々に、またはあらゆる任意の組み合わせで組み合わせられ得る。
【００１１】
比較的低密度の緩衝溶液と比較的高密度の細胞とを含む出発混合物から、細胞懸濁物を分離する方法もまた提供される。この出発混合物は、デバイス内に分与され、このデバイスは、この出発混合物を保持するための内部空洞を有するカップ本体を有する。このデバイスは、中心軸の周りでスピンさせられ、その結果、この出発混合物は、このカップ本体の内壁に沿って上向きに、この内部空洞に外接するショルダートラップに向けて駆動される。この出発混合物中の比較的高密度の細胞は、このショルダートラップ内に収集され、そしてこの出発混合物中の比較的低密度の緩衝溶液の少なくともいくらかは、このカップ本体の開口部を通して、このデバイスから排出される。
【００１２】
方法の好ましい実施形態によれば、スピンさせる工程は、出発混合物の少なくともいくらかをこのカップ本体の１つ以上の通路に通して流すことを包含し、その結果、比較的高密度の物質が、この１つ以上の通路を出るときにこのショルダートラップ内に堆積する。好ましくは、これらの通路は、装置の請求項において特定されるように、または詳細な説明において特定されるように、設計される。
【００１３】
異なる密度の物質を分離するための装置が、さらに提供される。分離カップは、媒体を保持するように構成された内部空洞を有する。この分離カップは、この内部空洞に外接するショルダートラップを備える。このショルダートラップは、この分離カップが中心軸の周りでスピンさせられるときに、この媒体中の比較的高密度の物質がこのショルダートラップ内に収集され、そしてこの媒体中の比較的低密度の物質がこの分離カップから排出されるように、構成される。回転アクチュエータは、この分離カップに結合され、そしてこの分離カップをこの分離カップの中心軸の周りでスピンさせるように構成される。
【００１４】
好ましくは、この装置の分離カップは、上記デバイスに従って、特許請求の範囲に記載される分離用に設計されるか、または詳細な説明に特定される特徴に従って設計される。これらの特徴は、個々にか、またはあらゆる任意の組み合わせで組み合わせられる。
【００１５】
本発明は、添付の図面を参照することにより、より良好に理解され得る。図面中の構成要素は必ずしもスケール通りではなく、それに代わって、本発明の原理を示す際に強調がなされている。図面において、同様の参照番号は、異なる図の全体で対応する部品を指定している。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】図１は、自動化高スループット電気生理学的測定システムの実施形態の一例の平面図である。
【図２】図２は、自動化高スループット電気生理学的測定システムのロボットピペッターヘッドの実施形態の一例の側面図である。
【図３】図３は、自動化高スループット電気生理学的測定システムのプレナム上に支持されたパッチプレートの例示の実施形態の側断面図である。
【図４Ａ】図４Ａは、異なる密度の物質を分離するための装置の１つの実施形態の一例の分解図である。
【図４Ｂ】図４Ｂは、組み立てられた構成で示される、図４Ａの異なる密度の物質を分離するための自動装置の正面右上斜視図である。
【図５】図５は、分離カップの１つの実施形態の一例の上面斜視図である。
【図６】図６は、図５の分離カップの側面断面図である。
【図７】図７は、カップハウジングの１つの実施形態の一例の上面斜視図である。
【図８】図８は、図７のカップハウジングの側面断面図である。
【図９】図９は、組み立てられた構成で示される、図４Ａの異なる密度の物質を分離するための自動装置の上部の側面断面図である。
【図１０】図１０は、カップ設置アセンブリの１つの実施形態の一例の斜視図である。
【図１１】図１１は、組み立てられた構成で示される、図４Ａの異なる密度の物質を分離するための自動装置の下部の側面断面図である。
【図１２】図１２は、分離カップの代替の実施形態の一例の上面斜視図である。
【図１３】図１３は、異なる密度の物質を自動的に分離するための例示的な方法工程のフローチャートである。
【図１４】図１４は、異なる密度の物質を分離するための自動装置の分離カップを自動的に撹拌するための例示的な方法工程のフローチャートである。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
（詳細な説明）
異なる密度の物質を分離するための装置、デバイス、システムおよび方法が、図示および記載される。この装置は、例えば、生物学的アッセイ（例えば、自動化高スループットの電気生理学的測定システムによって実施される電気生理学的アッセイ）において使用される細胞の自動準備のために利用され得る。生物学的アッセイのための細胞の準備としては、例えば、細胞が所望の緩衝溶液に所望の濃度で、そして所望のレベルの均質性で懸濁させられることを確実にすることが挙げられ得る。しかし、この装置は、生物学的アッセイのための細胞の準備を超えた観点で、異なる密度の物質を分離するために使用され得ることが理解される。
【００１８】
本明細書中に開示されるように、異なる密度の物質を分離するための装置（またはデバイス、またはシステム）は、流動性媒体を保持するために構成された分離カップを備え得、この流動性媒体は、異なるそれぞれの密度の物質を含み得る。この分離カップは、この分離カップ内に保持された異なる密度の物質を分離する、１つ以上の内部特徴を備え得る。細胞の溶液を調製するための方法もまた開示され、この方法は、細胞を所望の緩衝溶液に、所望の濃度で所望のレベルの均質性で懸濁させる方法を包含する。いくつかの実施形態において、物質を準備するための装置は、これらの方法のうちの１つ以上を実施する際に利用され得る。例えば、細胞は、この装置の１つ以上の操作パラメータ（例えば、分離カップの加速率および減速率、分離カップの回転速度、分離カップのスピン方向、ならびにスピンの持続時間）を制御することによって、準備され得る。この装置は、自動化高スループットの電気生理学的測定システムのプロセスデッキに提供され得、これによって、細胞濃縮物の自動化されたデッキ上での（ｏｎ−ｄｅｃｋ）調製を可能にし得る。細胞準備の装置および方法に関するこれらおよび他の局面が、以下でさらに詳細に議論される。
【００１９】
図１を参照して、自動化高スループット電気生理学的測定システム１００の実施の一例が平面図で示される。この例におけるシステム１００は、複数サンプル（例えば、サンプルの二次元グリッドまたはアレイ）に対する同時測定を行うように構成されている。この高スループット電気生理学的測定システムは、測定プラットホーム１０２を含み得、これはまたプロセスデッキ１０２とも称される。このプロセスデッキ１０２は、システム１００の種々の構成要素を支持し得、そしてこの測定システム１００のいくつか、またはすべての構成要素の所望の空間的配列を支持または維持するためにほぼ平面状の表面を備え得る。
【００２０】
このシステムは、アッセイの間にシステム１００の操作を制御する制御モジュール１０４を含み得る。この制御モジュール１０４は、例えば、外部マイクロコンピュータ、ディスプレイデバイス、およびソフトウェアユーザインターフェースを含み得る。この制御モジュール１０４はまた、運動制御、流体工学的制御、および電気的データ記録を含むシステム１００のリアルタイムの機能的局面を制御するために、外部マイクロコンピュータにインターフェースされるマイクロコントローラを含み得る。
【００２１】
このシステム１００はまた、システム１００の構成要素を制御し、電気生理学的測定を実施し、そしてパッチクランプアッセイの間に獲得されたデータをデジタル化するパッチエンジンを含み得る。この例では、パッチエンジンは、プレナム１０６、電極プレート１０８、およびデータ獲得エンジンを含む。これらの構成要素は、以下でさらに詳細に論議される。
【００２２】
このシステム１００は、種々の機能を実行するために構成された複数のステーションまたはモジュールを含み得る。例示される例では、このシステム１００は、７つのステーション：チップラックステーション１１０；外部緩衝ステーション１１２；第１の化合物ステーション１１４；分析ステーション１１６；洗浄ステーション１１８；第２の化合物ステーション１２０；および細胞ステーション１２２を含む。このシステム１００が、まさに上記した機能とは異なる機能を提供するステーションを含む、より多く、またはより少ないステーションを含み得ることが理解される。
【００２３】
この例では、これらステーションの各々は、ＳＢＳ−標準３８４ウェルマイクロタイタープレート（Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を受容するような形状である。換言すれば、この例では、これらのステーションは、ＳＢＳ−標準３８４ウェルマイクロプレートフットプリントを有するとして記載され得る。アッセイのステップは、プロセスデッキ１０２で行われ、そしてロボットピペッターヘッドが、流体を、外部緩衝ステーション１１２、細胞ステーション１２２、ならびに化合物ステーション１１４および１２０から、分析ステーション１１６にある測定基板に送達する。このロボットヘッドは、図２を参照して以下にさらに論議される。
【００２４】
測定基板はパッチプレートと称され得、そしてその周りが、対応するサンプル（例えば、細胞または細胞膜）が分析のために位置決め、またはシールされる複数の穴または孔を含み得る。この例においては、パッチプレートは、ＳＢＳ−標準３８４ウェルマイクロプレートである。従って、この例におけるパッチプレートは、細胞、外部緩衝液、および生物学的スクリーニング化合物を保持するための３８４の個々のウェルを含む。この例においては、パッチプレートの３８４のウェルは、１６の列（Ａ−Ｐで識別される）および２４の縦列（１−２４）のグリッドで配列され得る。このパッチプレートのウェルは、下部表面を通って形成された１つ以上の孔を含み得る。各孔は、例えば、約２マイクロメートル（μｍ）の直径を有し得る。ウェルあたり１つの孔を有するパッチプレートは、単一穴プレートと称され得る。ウェルあたり複数の孔（例えば、６４孔のアレイ）を有するパッチプレートは、集団パッチクランプ（ＰＰＣ）プレートと称され得る。このパッチプレートは、アッセイの間に分析ステーションに、および分析ステーションから移動され得る。このパッチプレートは、図３を参照して以下にさらに詳細に論議される。
【００２５】
チップラックステーション１１０は、ピペッターチップが予備装填され得るトレイを保持する。ロボットピペッターヘッドは、チップラックステーション１１０の方に向けられてより低く、アッセイの開始時にピペッターチップを装填する。このピペッターチップは、アッセイのために指示された特定方法に依存して、外部緩衝溶液、化合物、および細胞を、所定のアッセイの間に適切な回数で吸引および分与するために利用され得る。
【００２６】
外部緩衝ステーション１１２はまた、入力ステーションとも称され得、そして外部緩衝溶液を保持する外部緩衝ボートを含み得る。いくつかの例の実施では、蠕動ポンプおよび減圧支援廃棄ボトルが選択的に採用されて外部緩衝ステーション１１２を自動的に充填かつ排液する。この外部緩衝ボートは、アッセイの開始前に外部緩衝溶液で充填され得る。この外部緩衝溶液は、細胞外溶液を模倣する塩または塩の混合物（例えば、低濃度のカリウムを含む溶液）を含む生理学的塩溶液であり得る。ロボットピペッターヘッドは、外部緩衝ステーション１１２から外部緩衝溶液を吸引し、この外部緩衝溶液を分析ステーション１１６に輸送し、そしてこの緩衝溶液をパッチプレートのウェル中に分与し得る。
【００２７】
第１および第２の化合物ステーション１１４および１２０はまた、入力ステーションとも称され、そして、アッセイの間に利用され得る生物学的スクリーニング化合物またはその他のタイプの試薬を保持する。ＳＢＳ−標準３８４ウェル化合物プレート（例えば、マイクロプレート）は、生物学的スクリーニング化合物を保持し得、そして上記第１または第２の化合物ステーション１１４または１２０にある設置面積内にある。ロボットピペッターヘッドは、同様に、化合物ステーション１１４または１２０から化合物を吸引し、化合物を分析ステーション１１６に輸送し、そして化合物をパッチプレートのウェル中に分与し得る。
【００２８】
分析ステーション１１６は、パッチエンジンのプレナム１０６を含み、そしてアッセイの間パッチプレートを支持する。プレナム１０６はリザーバ１２６を含み、そして内部緩衝溶液が、アッセイの間に下からこのプレナムリザーバ１２６中に、かつそれからポンプ輸送され得る。内部緩衝溶液は、生存細胞の内部細胞質を模倣する塩または塩の混合物を含む塩溶液（例えば、高濃度のカリウムを含む溶液）であり得る。パッチプレートはプレナム１０６上に静止し、そしてプレナム１０６の周を取り囲むｏ−リング１２８は、パッチプレートとプレナムリザーバ１２６との間に気密シールを作製する。小さな負（差動的）の圧力が導入され、これは、ウェル中にある細胞（または細胞膜）をウェルの底にある孔に向かって押す。この差動的な圧力は、それ故、当業者に認識されるように、細胞（または細胞膜）とウェルの底との間に高い抵抗の電気的シールを形成する。
【００２９】
電極プレート１０８は、電子工学的ヘッドとも称され、そしてパッチプレートにおいて細胞サンプルに対する電気生理学的測定を実施するために用いられる。電気生理学的測定は、パッチプレートのウェル中の孔を横切る電気的回路を形成することにより実施され得る。電気的回路は、パッチプレートの膜の対向する側面上に電極を位置決めすることにより形成され得る。例えば、感知電極が膜の上の位置決めされ得、そして接地電極が膜の下に位置決めされ得る。従って、この例では、プレナム１０６は、プレナムリザーバ１２６の頂部に位置決めされる４つの接地電極１３０を含み得、そして、この例では、電極プレート１０８は、パッチプレートの頂部およびプレナムに適合するフレーム中に収容される感知電極１３２のアレイを含み得る。電極プレート１０８は、図２および図３を参照して以下にさらに詳細に論議される。
【００３０】
電極プレート１０８の感知電極１３２の配列は、パッチプレートのウェルの配列に対応し得、各感知電極１３２は、パッチプレートの個々のウェルで電気生理学的測定を実施し得る。従って、この例では、電極プレート１０８は、３８４の感知電極１３２のアレイを含み得る。各感知電極１３２は、１つの電子チャネルに対応する。従って、この例では、３８４の感知電極１３２は、３８４の電子チャネルに対応する。
【００３１】
電極１３２は、例えば、銀または銀で被覆されたピン（例えば、Ａｇ／ＡｇＣｌ）であり得る。回路を完成するために、適切な電解質（例えば、塩）溶液がパッチプレートのウェルおよびプレナムリザーバ１２６に添加され得る。例えば、外部緩衝溶液および内部緩衝溶液は、感知電極１３２および接地電極１３０が電気的活性をモニターすることを可能にするために塩化物イオンを含み得る。
【００３２】
電極プレート１０８は、アッセイの間にプレナム１０６にクランプされ得、感知電極１３２がパッチプレートの個々のウェル中に受容される。電極プレート１０８は、その上部表面を通って形成された孔を含み得、ピペッターチップへのアクセスを提供する。このようにして、電極プレート１０８は、パッチプレートウェルへの化合物の添加を可能にし、その一方、同時にウェル中のイオン電流を測定する。図３を参照して以下にさらに詳細に論議されるように、感知電極１３２および接地電極１３０は測定電子部品に連結されてもよく、電気生理学的測定に関連するデータを得る。
【００３３】
洗浄ステーション１１８は種々の構成要素を受容し得、アッセイの後で、これら構成要素をきれいにする。この例では、洗浄ステーション１１８は、洗浄手順のために、ピペッターチップおよび電極プレートの電極ピンを収容するリザーバを含む。従って、この例では、洗浄ステーション１１８は、ピペッターチップおよび電極ピンの寸法に一致する入力ポートのマニホールドを含み得る。流体取扱いシステム（図示はされていない）は、洗浄ステーション１１８を通って洗浄溶液をポンプ輸送し得、この洗浄溶液は、プロセスデッキ１０２の下の箱入り大型ガラス瓶（ｃａｒｂｏｙ）（図示はされていない）中に注がれる。洗浄ステーション１１８はまた、使用されていないとき、電極プレートのための静止位置として供され得る。ロボットピペッターヘッドは、洗浄ステーション１１８で電極プレート１０８をピックアップし得、そしてアッセイの間に電極プレート１０８を分析ステーション１１６に輸送し得る。ロボットピペッターヘッドは、次いで、電極プレート１０８を、アッセイの終わりで洗浄ステーション１１８にあるその静止位置に戻し得る。
【００３４】
細胞ステーション１２２はまた、入力ステーションとも称され得、そしてアッセイで用いられる細胞（またはその他の生物学的サンプル）を保持する細胞ボートを含む。細胞は、細胞ボートに存在しながら、外部緩衝溶液中に分散され得る。ロボットピペッターヘッドは、同様に、細胞ステーション１２２から細胞を吸引し、細胞を分析ステーション１１６に輸送し、そしてパッチプレートのウェル中に細胞を分与し得る。
【００３５】
図２を参照して、高スループット電気生理学的測定システム１００のためのロボットピペッターヘッド１５０の実施の例が側面図で示される。このロボットピペッターヘッド１５０はまた、流体工学的ヘッドまたは複数チャネル分与ヘッドとも称され得る。このロボットピペッターヘッド１５０は、流体、細胞溶液、および化合物をパッチプレートのウェル中に添加し、除去し、または移すために用いられ得る。この例では、ロボットピペッターヘッド１５０は、流体を、細胞ステーション１２２、外部緩衝ステーション１１２、および化合物ステーション１１４および１２０から、分析ステーション１１６に輸送するために利用されるピペッターチップを保持し得る。ピペッターチップは、アッセイプロトコルに従って、流体を正確な量で吸引または分与する。
【００３６】
ロボットピペッターヘッド１５０は、ロボットピペッターヘッド１５０をプロセスデッキのステーション間で移動するための三次元の機械的構台（ｇａｎｔｒｙ）システム１５２に連結され得る。制御モジュール１０４は、この機械的構台システム１５２と通信し得、アッセイの間、ロボットピペッターヘッド１５０の移動を制御する。
【００３７】
アッセイの開始のときに、ロボットピペッターヘッド１５０は、チップラックステーション１１０に移動し得、そしてピペッターチップを装填する。ロボットピペッターヘッド１５０はまた、電極プレート１０８のための輸送機構としても供される。従って、ロボットピペッターヘッド１５０は、例えば、電極プレート１０８を保持する電極プレート輸送クリップ１５４を含み得る。このロボットピペッターヘッド１５０は、電極プレート１０８を洗浄ステーション１１８にあるその静止位置から装填し得、そしてそれを分析ステーション１１６に輸送し、そこで、それは、アッセイの間にプレナム１０６にクランプする。アッセイの終わりに、ロボットピペッターヘッド１５０は、分析ステーション１１６から電極プレート１０８を装填し得、そしてそれを洗浄ステーション１１８に輸送して戻す。
【００３８】
ここで、図３を参照して、高スループット電気生理学的測定システム１００のプレナム１０６によって支持されるパッチプレート１６０の例示の実行が示される。このパッチプレート１６０は、上記で論議されたように、複数のウェル１６２（例えば、３８４のウェル）を含み得る。パッチプレート１６０の２つのウェル１６２が、図３に例示の目的で示される。各ウェル１６２は、ウェル壁１６４によって区画され、そしてパッチプレート１６０の底１６６によって境される。さらに、図３の例示のパッチプレート１６０中のウェル１６２は、各々がパッチプレート１６０の底１６６を通って形成された孔１６８を含む。個々のウェル１６２中の細胞１７０は、上記で論議されたように、差動的圧力によりパッチプレート１６０の底１６６にシールされ得る。
【００３９】
パッチプレート１６０のウェル１６２は外部緩衝溶液１７２で充填され得、そしてパッチプレート１６０の下に位置するプレナム１０６のプレナムリザーバ１２６は、内部緩衝溶液１７４で充填され得る。感知電極１３２は、パッチプレート１６０の個々のウェル１６２中に位置決めされ得、当業者によって認識されるように、細胞１７０のイオンチャネル１７６の活性のような、アッセイの間にウェル１６２中で起こる電気的活性を測定する。プレナム１０６の接地電極１３０は、パッチプレート１６０の個々の孔１３８を横切る電気的回路を完成する。
【００４０】
電極プレート１０８の感知電極１３２および接地電極１３０は、例えば、プログラム可能な電圧供給源（図示はされていない）、増幅器１８２およびアナログ−デジタルコンバータ（ＡＤＣ）１８４のような、測定電子機器１８０を経由して、データ獲得エンジン１７８と通信し得る。図３に示される例で見られるように、感知電極１３２および接地電極１３０は、増幅器１８２と信号通信しており、増幅器はＡＤＣ１８４と信号通信しており、ＡＤＣは次にデータ獲得エンジン１７８と信号通信している。増幅器１８２は、感知電極１３２上で測定された電流を、アナログ電圧信号に変換する、高ゲイン、低ノイズのトランス−インピーダンス増幅器であり得る。ＡＤＣ１８４は、増幅器１８２からのこのアナログ電圧信号をデジタル電圧測定値に変換し得る。データ獲得エンジン１７８は、それ故、コンピュータメモリ中に、感知電極チャネルのためのこのデジタル電圧測定値を記録し得る。
【００４１】
ここで図４Ａを参照すると、異なる密度の物質を分離するための装置２００の１つの実施形態の一例の分解図が示されている。設置フレーム２０２は、分離カップ２０４および回転アクチュエータ２０６を支持する。回転アクチュエータ２０６は、中心軸の周りでの分離カップ２０４の回転を駆動して、異なる密度の物質を分離する。設置フレーム２０２は、例えば、図１および図２に図示されるような、自動化高スループットの電気生理学的測定システム１００のプロセスデッキ１０２の一部分であり得る。以下でさらに議論されるように、分離カップ２０４は、比較的高密度の物質を捕捉しながら比較的低密度の物質がカップ２０４の頂部の開口部２０８を通ってカップ２０４を出ることを可能にする、内部特徴を備える。
【００４２】
回転アクチュエータ２０６は、モータ２１０を備え、そしてアクチュエータハウジング２１２によって、設置フレーム２０２の下側に設置される。分離カップ２０４は、カップハウジング２１４内に受容され、そしてカップハウジング２１４内に配置される。カップハウジング２１４は、設置フレーム２０２の上側に設置され、そして１対の支持フレーム２１６（これらもまた、設置フレーム２０２の上側に設置される）に固定され得る。
【００４３】
以下でさらに議論されるように、分離カップ２０４は、回転アクチュエータ２０６に、設置フレーム２０２に形成された開口部２１８を通して、カップ設置アセンブリ２２０およびローターアセンブリ２２２によって結合される。カップ設置アセンブリ２２０は、この例において、カップマウント２２４、支持パッド２２６、付勢ばね２２８、および回転アクチュエータマウント２３０を備える。ローターアセンブリ２２２は、この例において、カップ設置アセンブリ２２０の回転を容易にする１対のボールベアリング２３２を備える。ローターアセンブリ２２２はまた、１つ以上のワッシャ２３４を備え得、これらのワッシャは、異なる型のモータをアクチュエータハウジング２１２に選択的に適合させるために使用され得る。
【００４４】
図４Ａに見られるように、カップハウジング２１４は、この例において、排液管２３６を備え、排液管２３６は、設置フレーム２０２を通して形成された排液開口部２４０を通して、排液ノズル２３８と流体連絡し得る。排液ノズル２３８は、分離カップ２０４から遠心力で出された比較的低密度の物質を除去する目的で、配管システム（図示はされていない）に接続され得る。図４Ａにまた見られるように、分離カップ２０４がカップハウジング２１４内に置かれるときに分離カップ２０４を閉じ込める目的で、ハウジングキャップ２４２が、カップハウジング２１４の上面を覆い得る。開口部２４４が、ハウジングキャップ２４２を通して形成され、この例において、ピペッターがカップハウジング２１４の内部にアクセスすることを可能にする。ハウジングキャップ２４２の開口部２４４は、この例において、分離カップ２０４の上方に位置し、その結果、このピペッターは、分離カップ２０４から物質を吸引し得、または分離カップ２０４内に物質を分与し得る。
【００４５】
図４Ｂは、組み立てられた図で示される、図４Ａの異なる密度の物質を分離するための装置２００の正面右上斜視図である。図４Ｂに見られるように、分離カップ２０４は、カップハウジング２１４内に置かれ、カップハウジング２１４は、設置フレーム２０２に設置される。分離カップ２０４は、設置フレーム２０２を通して形成された開口部２１８を通して回転アクチュエータ２０６に結合される。従って、回転アクチュエータ２０６は、分離カップ２０４の回転を駆動して、比較的低密度の物質を分離カップ２０４から排出し得る。以下でさらに議論されるように、分離カップ２０４から遠心力で出された比較的低密度の物質は、排液管２３６内に排液され得、そして排液ノズル２３８を介して配管システム（図示はされていない）により除かれ得る。
【００４６】
モータ２１０は、対応するエンコーダ２４６に結合された、ブラシなし直流（ＤＣ）モータであり得る。モータ２１０は、設置アセンブリ２２０と、設置アセンブリ２２０内に固定された分離カップ２０４とを、中心軸の周りで回転させ得る。回転アクチュエータ２０６のモータ２１０は、設置アセンブリ２２０および分離カップ２０４を回転させるようにモータ２１０の動作を制御する、コントローラ（例えば、サーボドライブコントローラ）と通信し得る。このコントローラは、この例において、図１を参照しながら上で議論された制御モジュール１０４と信号通信し得、そして制御モジュール１０４によって駆動され得る。この様式で、制御モジュール１０４は、１つ以上の操作パラメータ（例えば、分離カップ２０４の回転の加速および減速、回転速度、ならびに回転の持続時間）を制御し得る。制御モジュール１０４は、この例において、図１を参照しながら上で議論された制御モジュールであり得る。
【００４７】
ここで図５および図６を参照すると、分離カップ３００の１つの実施形態の一例の上面斜視図および側面断面図が、それぞれ示されている。分離カップ３００は、分離カップ３００の本体３０４（図６）に形成された内部空洞３０２を備える。分離カップ本体３０４の内部空洞３０２は、流動性媒体（例えば、溶液、懸濁物、スラリー、エマルジョンなど）を保持し得る。内部空洞３０２は、例えば、分離されるべき比較的高密度の物質および比較的低密度の物質を含む、出発混合物を保持し得る。この出発混合物は、例えば、媒体（例えば、血清、緩衝液、抗生物質など）に懸濁した細胞を含む細胞懸濁物であり得る。従って、分離カップ３００の、少なくとも部分的に内部空洞３０２を規定する内壁３０６は、分離カップ３００の種々の領域（例として図５に図示されるような、中心本体領域３０８、ネック領域３１０、および底領域３１２が挙げられる）をさらに規定し得る。分離カップ３００のネック領域３１０は、この例において、中心本体領域３０８の上方に位置し、そしてこの分離カップの底領域３１２は、この例において、中心本体領域３０８の下方に位置する。
【００４８】
内壁３０６の輪郭は、内壁３０６に沿った上方向への細胞懸濁物の移動を容易にする。これに関して、内部空洞３０２は、例として図５に図示されるような、実質的に円錐の形状を有し得る。具体的には、分離カップ３００の中心本体領域３０８は、この例において、実質的に切頭円錐の形状を有し得、そして分離カップ３００の底領域３１２は、この例において、実質的に半球の形状を有し得る。従って、中心本体領域３０８の上端３１４は、中心本体領域３０８の下端３１６より広くあり得、そして内部空洞３０２の直径Ｄは、中心本体領域３０８を通って下方向に、中心本体領域３０８の下端３１６に向かってテーパ状であり得る。すなわち、直径Ｄは、中心本体領域３０８において、下端３１６に向かう方向で減少する。
【００４９】
分離カップ３００はまた、この例において、中心本体領域３０８の上端３１４に外接するショルダー３１８を備える。図５に見られるように、ショルダー３１８は、この例において、ネック領域３１０を中心本体領域３０８の上方に規定し、そしてショルダートラップ３２０をネック領域３１０の下方に規定する。ショルダートラップ３２０もまた、分離カップ３００の中心本体領域３０８の上端３１４に外接する。従って、ショルダー３１８およびショルダートラップ３２０の各々は、環状の形状を有すると記載され得る。図５に見られるように、ショルダートラップ３２０は、ネック領域３１０より広い。この様式で、分離カップ３００のショルダートラップ３２０は、分離カップ３００が中心軸の周りでスピンさせられるときに、比較的高密度の物質を収集する（すなわち、捕捉する、局在させるなど）。分離カップ３００が中心軸の周りでスピンすると、細胞懸濁物が上方向に、内壁３０６に沿ってショルダートラップ３２０に向かって移動する。ショルダートラップ３２０は、この細胞懸濁物中の比較的高密度の物質を収集し、一方で、この細胞懸濁物中の比較的低密度の物質は、ネック領域３１０を通って上方向に移動し続け、そしてネック領域３１０の上部の開口部３２２を通って分離カップ３００から排出される。分離カップ３００はまた、ネック領域３１０の上方に、ネック領域３１０に外接する開口部分３２４を備え得る。開口部分３２４は、外向きに広がった形状を有し得、この形状もまた、分離カップ３００が中心軸の周りで回転するときの、比較的低密度の物質の、内壁３０６に沿った上向きの、その頂部から出る移動を容易にする。
【００５０】
分離カップ３００はまた、この例において、カップ３００の開口部分３２４を囲むリム３２６、およびカップ３００の底部のベース３２８を備える。図５に見られるように、環状ノッチ３３０が、リム３２６の下側に形成され得、その結果、ノッチ３３０は、分離カップ本体３０４の外壁３３２を、リム壁３３６の内側に向く表面３３４から分離する。分離カップ３００のベース３２８は、１つ以上の結合部材を備え得、これらの結合部材は、分離カップ３００を回転アクチュエータに結合させるように、従って、分離カップ３００が回転アクチュエータにより駆動されることにより分離カップ３００がその中心軸の周りで回転するように構成される。図示される例において、ベース３２８は、複数の足３３７を備え、これらの足は、以下でさらに議論されるように、分離カップ３００を設置アセンブリ（図４Ａの２２０）内に固定するときに使用され得る。
【００５１】
特に図６を参照すると、上記のように、内部空洞３０２は、この例において、上から下に向かって、ネック領域３１０、ショルダートラップ３２０、中心本体領域３０８、および底領域３１２を備える。この例において、ネック領域３１０は、切頭円錐の形状を有すると記載され得、ショルダートラップ３２０は、環状の形状を有すると記載され得、中心本体領域３０８もまた、切頭円錐の形状を有すると記載され得、そして底領域３１２は、半球の形状を有すると記載され得る。従って、上から下に向かって、内部空洞３０２の内径Ｄは、この例において、ネック領域３１０を通って減少し得、ショルダートラップ３２０を通って増大し得、そして中心本体領域３０８および底領域３１２を通って減少し得る。この様式で、ネック領域３１０、中心本体領域３０８、および底領域３１２は、この例において、下向きの方向にテーパ状であると記載され得る。従って、ショルダートラップ３２０は、この例において、カップ本体３０４の外壁３３２に向かって横方向に広がっていると記載され得る。図６に見られるように、内壁３０６の輪郭は、ショルダートラップ３２０を通るいくらかＳ字型の曲線を辿り得る。
【００５２】
分離カップ３００が中心軸の周りでスピンさせられると、遠心力が、カップ３００内に保持された細胞懸濁物に作用する。分離カップ３００がスピンすると、遠心力が細胞懸濁物をテーパ状の内壁３０６に向けて引く。内部空洞３０２の円錐形の形状に起因して、この細胞懸濁物は内壁３０６を上方に、環状のショルダートラップ３２０に向かって移動する。この細胞懸濁物がショルダートラップ３２０に達すると、この細胞懸濁物中の比較的高密度の物質は、ショルダートラップ３２０内に集まる。この細胞懸濁物中の比較的低密度の物質は、ショルダートラップ３２０を越えて上方向に、ネック領域３１０に沿って、そして外向きに広がった開口部分３２４に沿って移動し続けて、分離カップ３００を出る。
【００５３】
また図６に見られるように、分離カップ３００のリム３２６は、この例において、環状リム３２６であり、折り返されて、環状ノッチ３３０を、リム３２６のリム壁３３６の内側に向く表面３３４と、分離カップ３００の本体３０４の外壁３３２との間に形成する。例として図６に示されるように、リム３２６のリム壁３３６は、分離カップ本体３０４の外壁３３２と実質的に平行であり、ノッチ３３０は、リム壁３３６と外壁３３２との間に位置する。
【００５４】
分離カップ３００は、例えば約１００ミリメートル（ｍｍ）の高さ、および例えば約７０ｍｍの外径を有し得る。内部空洞３０２は、例えば約７０ｍｍの深さを有し得、そして円錐形の内部空洞３０２の内径Ｄは、例えば、中心本体領域３０８の上端３１４の近くの約３５ｍｍから、中心本体領域３０８の下端３１６の近くの約１０ｍｍまでテーパ状であり得る。
【００５５】
図７を参照すると、分離カップハウジング４００の１つの実施形態の一例の上面斜視図が示されている。分離カップハウジング４００は、複数の設置フランジ４０２をベース４０４の周囲に備え得、これらの設置フランジは、分離カップハウジング４０４を設置フレーム（図４Ａの２０２）に設置するために使用される。上で議論されたように、分離カップ（図４Ａの２０４）は、分離カップハウジング４００内に位置する。従って、カップハウジング４００は、この例において、垂直ダクト壁４０８により規定される中心ダクト４０６を備え、中心ダクト４０６は、下内部チャンバ４１０まで続く。ダクト壁４０８は、この例において、円筒形の形状を有する。
【００５６】
分離カップ２０４は、中心ダクト４０６を通して挿入され得、その結果、分離カップ２０４の下部（例えば、図６のベース３２８）は、カップハウジング４００の下内部チャンバ４１０内に位置する。分離カップハウジング４００の下側は、この例において開いており、その結果、カップ設置アセンブリ（図４Ａの２２０）は、下内部チャンバ４１０に受容され得、そして下内部チャンバ４１０内に位置し得る。カップハウジング４００はまた、中心ダクト４０６および分離カップ２０４を囲む、環状収集チャンバ４１２を備える。
【００５７】
収集チャンバ４１２は、カップ２０４が中心ダクト４０６内で中心軸の周りでスピンするときに、分離カップ２０４から遠心力で出た比較的低密度の物質を受容する。収集チャンバ４１２の床４１４は、収集チャンバ４１２の床４１４に形成された上排液開口部４１６に向かって傾斜している。排液管４１８は、上排液開口部４１６を、カップハウジング４００のベース４０４にある下方の下排液開口部４２０に接続する。下排液開口部４２０は、設置フレーム２０２の排液開口部（図４Ａの２４０）を覆って配置され得る。この排液開口部は、上記のように、排液ノズル（図４Ａの２３８）を受容する。この様式で、カップハウジング４００は、分離カップ２０４から遠心力で出た低密度の物質の除去を容易にする。
【００５８】
図８は、図７のカップハウジング４００の側面断面図である。図８に見られるように、カップハウジング４００は、中心ダクト４０６のダクト壁４０８とカップハウジング４００の外壁４２２との間に形成された、環状の収集チャンバ４１２を備える。中心ダクト４０６は、以下でさらに議論されるように、カップ設置アセンブリ２２０を収容する下内部チャンバ４１０まで続く。収集チャンバ４１２の床４１４は、上排液開口部４１６および排液管４１８に向かって傾斜している。
【００５９】
ここで図９を参照すると、図４Ａの異なる密度の物質を分離するための装置２００の上部の側面断面図が、組み立てられた構成で示されている。図９に見られるように、分離カップ３００は、カップハウジング４００の中心ダクト４０６内に位置する。中心ダクト４０６のダクト壁４０８は、分離カップ３００を、カップハウジング４００の収集チャンバ４１２から分離する。分離カップ３００は、カップハウジング４００の中心ダクト４０６を通過し、その結果、分離カップ３００の下部は、カップ設置アセンブリ２２０と一緒に、カップハウジング４００の下内部チャンバ４１０内に位置する。カップハウジング４００の下内部チャンバ４１０は、図１１を参照しながら以下でさらに詳細に議論される。
【００６０】
さらに、ダクト壁４０８の頂部は、分離カップ３００の頂部を囲む、リム３２６のノッチ３３０内に受容され、その結果、リム３２６のリム壁３３４と中心ダクト４０６のダクト壁４０８とは、例として図９に示されるように、重なる。この様式で、ノッチ３３０は、分離カップ３００から排出された流体が、分離カップ３００の外壁３３２に接触することを防止する。さらに、ハウジングキャップ２４２は、ハウジング４００内に位置する分離カップ３００を閉じ込める目的で、カップハウジング４００の頂部を覆い得る。ハウジングキャップ２４２のピペッター開口部２４４は、分離カップ２０４の開口部２０８の上方に位置する。この様式で、媒体を分離カップ３００から吸引する目的、および媒体を分離カップ３００内に分与する目的で、ピペッターがハウジングキャップ２４２の開口部２４４を通して挿入され得る。図９に見られるように、この構成は、分離カップ３００がスピンしているときでさえも、ピペッターが媒体を吸引および分与することを可能にする。
【００６１】
例として図９に示される分離カップ３００およびカップハウジング４００の構成は、遠心力を使用する、比較的高密度の物質と比較的低密度の物質との分離を容易にする。上で説明されたように、カップ３００がカップハウジング４００内にあるときに、分離カップ３００は中心軸の周りでスピンさせられ得る。比較的高密度の物質は、内部空洞３０２のショルダートラップ３２０に捕捉され、そして比較的低密度の物質は、カップ３００の外向きに広がった開口部分３２４を通って出る。従って、分離カップ３００を囲む、カップハウジング４００の環状の収集チャンバ４１２は、分離カップ３００から遠心力で出た比較的低密度の物質を受容する。
【００６２】
ここで図１０を参照すると、カップ設置アセンブリ５００の１つの実施形態の一例の斜視図が示されている。カップ設置アセンブリ５００は、この例において、ローターマウント５０２、付勢ばね５０４、支持パッド５０６、およびカップマウント５０８を備える。この例において、付勢ばね５０４および支持パッド５０６は、ローターマウント５０２内に受容され、そしてカップマウント５０８は、ローターマウント５０２に（例えば、ねじまたは他の取り付け手段によって）固定される。図１０において、ローターマウント５０２の上面が示されており、そして支持パッド５０６およびカップマウント５０８のそれぞれの下面が示されている。
【００６３】
ローターマウント５０２は、この例において、付勢ばね５０４および支持パッド５０６を受容する凹部５１０、ならびに支持パッド５０６のシャフト５１４の受容のための中心ダクト５１２を備える。付勢ばね５０４は、この例において、ローターマウント５０２の中心ダクト５１２の壁５１６を囲むように配置される。付勢ばね５０４はまた、この例において、支持パッド５０６のシャフト５１４を囲むように配置される。支持パッド５０６はまた、その下面に形成された、付勢ばね５０４の受容のための凹部５１８を備える。この構成において、付勢ばね５０４は、支持パッド５０６をローターマウント５０２から離れる方向に付勢する。付勢ばね５０４が負荷を受けると、ローターマウント５０２の中心ダクト５１２は、支持パッド５０６のシャフト５１４を受容する。ローターマウント５０２は、ローターアセンブリ（図４Ａの２２２）に結合されて、回転アクチュエータ（図４Ａの２０６）によって提供される回転力を受け取る。
【００６４】
分離カップマウント５０８は、この例において、分離カップ（図５の３００）がカップハウジング（図７の４００）内に置かれるときに、分離カップ３００を固定する。図１０に見られるように、分離カップマウント５０８は、内部フランジ５２０のセットを備え、これらの内部フランジは、カップマウント５０８を通して形成された、分離カップ３００のベース（図５の３２８）のための開口部５２２を規定する。内部フランジ５２０によって規定されたベース開口部５２２は、分離カップ３００のベース３２８に一致する形状を有する。従って、カップマウント５０８のベース開口部５２２は、分離カップ３００のベース３２８の足（図５の３３７）を受容するための、それぞれの開口部５２４を備える。カップマウント５０８はまた、この例において、内部フランジ５２０の下面に形成された、分離カップ３００のベース３２８のための凹部５２６を備える。内部フランジ５２０の下面のベース凹部５２６の形状もまた、この例において、分離カップ３００のベース３２８の形状に一致する。従って、各内部フランジ５２０は、この例において、分離カップ３００のベース３２８の足３３７のうちの１つを受容するための凹部５２８をそれぞれ備える。
【００６５】
しかし、カップマウント５０８の下面のベース凹部５２６の形状は、カップマウント５０８のベース開口部５２２の形状に対して回転している。従って、分離カップ３００のベース３２８は、カップマウント５０８の開口部５２２を通して挿入され得、そして分離カップ３００のベース３２８の足３３７が内部フランジ５２０の下面に形成された足凹部５２８と整列してこれらの足凹部５２８内に受容されるように、回転させられ得る。従って、内部フランジ５２０の下面に形成された凹部５２８は、足３３７を分離カップ３００のベース３２８に固定してロックし得る。この様式で、カップ３００を中心軸の周りでスピンさせる目的で、カップマウント５０８は、回転アクチュエータ２０６によって提供される回転力を分離カップ３００に加え得る。
【００６６】
ローターマウント５０２はまた、足３３７を分離カップ３００のベース３２８に受容するための、それぞれの凹部５３０を備え得る。図１０に見られるように、足凹部５３０は、ローターマウント５０２において、分離カップ３００のベース３２８の足３３７が、カップマウント５０８の足開口部５２４または足凹部５２８とそれぞれ整列する目的で、時計回りおよび反時計回りに回転することを可能にするためのサイズおよび形状にされる。この様式で、分離カップ３００は、カップ３００のベース３２８の足３３７を内部フランジ５２０の下面に形成された足凹部５２８と整列させることによってカップ３００をカップマウント５０８に固定するために、一方向に回転させられ得る。同様に、分離カップ３００は、カップ３００のベース３２８の足３３７を内部フランジ５２０によって規定された足開口部５２４と整列させることによってカップ３００をカップマウント５０８から取り外すために、逆方向に回転させられ得る。回転アクチュエータ（図４Ａの２０６）は、分離カップ３００をカップ設置アセンブリ５００内で固定または除去するときにこの回転アクチュエータの回転を防止するために、ブレーキを備え得る。
【００６７】
図１１を参照すると、図４Ａの異なる密度の物質を分離するための装置２００の下部の側面断面図が、組み立てられた構成で示されている。図１１に見られるように、分離カップ３００の下部およびカップ設置アセンブリ５００は、分離カップハウジング４００の下内部チャンバ４１０内に位置する。
【００６８】
分離カップ３００が分離ハウジング４００に挿入されると、カップ３００は、カップ３００のベース３２８がカップ設置アセンブリ５００に係合するまで、中心ダクト４０６を通過する。分離カップ３００は、カップ３００のベース３２８の足３３７がカップマウント５０８の足開口部（図１０の５２４）と整列するまで、回転させられ得る。分離カップ３００のベース３２８の足３３７がカップマウント５０８の足開口部５２４と整列した状態で、カップ３００は、カップマウント５０８の開口部（図１０の５２２）を通して下向きに押され得る。分離カップ３００がカップマウント５０８の開口部５２２を通して押されると、カップ３００のベース３２８が支持パッド５０６に係合し、そして付勢ばね５０４に負荷を与える。分離カップ３００のベース３２８の足３３７はまた、カップ３００がカップマウント５０８の開口部５２２を通して押されると、ローターマウント５０２の足凹部５３０内に受容される。
【００６９】
一旦、分離カップ３００のベース３２８の足３３７がカップマウント５０８の開口部５２２を通過すると、カップ３００は、カップ３００のベース３２８の足３３７がカップマウント５０８の内部フランジ５２０の下面に形成された足凹部５２８と整列するように、ローターマウント５０２の足凹部５３０内で回転させられ得る。次いで、分離カップ３００は解放され得、その結果、付勢ばね５０４が負荷を受けなくなり、そして分離カップ３００を上方向に押し、そしてカップマウント５０８の内部フランジ５２０の下面に形成された凹部（図１０の５２６）に入れる。内部フランジ５２０の下面に形成された足凹部５２８は、分離カップ３００のベース３２８の足３３７を受容する。付勢ばね５０４は、支持パッド５０６を分離カップ３００のベース３２８に押し付けて付勢し続け、これにより、カップ３００を、カップマウント５０８の内部フランジ５２０の下面に形成された凹部５２６内に固定する。凹部５２６内に固定されて、カップマウント５０８は、上記のように、回転アクチュエータ（図４Ａの２０６）によって提供される回転力を分離カップ３００に加え得る。
【００７０】
分離カップ３００は、この手順を逆にすること（すなわち、分離カップ３００を下方に押してローターマウント５０２の足凹部５３０がカップ３００のベース３２８の足３３７を受容するようにし；カップ３００のベース３２８の足３３７がカップマウント５０８の足開口部５２４と整列するまでカップ３００を回転させ；そしてカップ３００をカップマウント５０８の開口部５２２を通してカップ設置アセンブリ５００から持ち上げること）によって、カップ設置アセンブリ５００から取り外され得る。
【００７１】
ここで図１２を参照すると、分離カップ６００の代替の実施形態の一例が示されている。この分離カップ６００の代替の実施形態は、カップ６００の本体３０４を通して形成された１つ以上の通路６０２を備え、これらの通路は、中心本体領域３０８の下端３１６から、環状のショルダートラップ３２０の近くの中心本体領域３０８の上端３１４までの流路を規定する。通路６０２の各々は、分離カップ６００の本体３０４を通して形成された長手軸方向ボア６０４を備え、長手軸方向ボア６０４は、内壁３０６に中心本体領域３０８の下端３１６の近くで形成された下アパーチャ６０６を、内壁３０６に中心本体領域３０８の上端３１４の近くでショルダートラップ３２０の下方に形成された上アパーチャ６０８に接続する。
【００７２】
分離カップ６００がスピンすると、遠心力が、細胞懸濁物を、内壁３０６に中心本体領域３０８の下端３１６の近くで形成された下アパーチャ６０６に向けて駆動する。この遠心力は、この細胞懸濁物を下アパーチャ６０６に通して駆動し、そして通路６０２のボア６０４に入れる。次いで、この遠心力は、この細胞懸濁物を上方向に、通路６０２のボア６０４を通して駆動し、そしてショルダートラップ３２０の下方の上アパーチャ６０８から出す。上記のように、この細胞懸濁物が上アパーチャ６０８を出るとき、比較的高密度の物質は、ショルダートラップ３２０内に堆積し、一方で、比較的低密度の物質は、ショルダートラップ３２０を通過し続け、そしてカップ６００から出る。
【００７３】
上記のように、この細胞懸濁物は、媒体（例えば、緩衝溶液（比較的低密度の物質））に懸濁した細胞（比較的高密度の物質）を含み得る。分離カップ６００の通路６０２は、この代替の例において、有利なことに、これらの細胞が上方向に通路６０２を通ってショルダートラップ３２０に向かって移動するときに、これらの細胞がこの緩衝溶液中に確実に浸漬されたままになることを補助する。
【００７４】
例として図１２に示される、分離カップ６００の代替の実施形態は、中心本体領域３０８の下端３１６から上端３１４までに、６つの通路６０２を備える。通路６０２の各々は、この例において、内壁３０６に形成された下アパーチャ６０６を内壁３０６に形成された上アパーチャ６０８に接続する、長手軸方向ボア６０４を備える。また図１２に見られるように、通路６０２は、この例において、分離カップ６００の本体３０４に対して角度を付けられ得る。
【００７５】
さらに、通路６０２は、それぞれの流路を規定する様々な領域を含み得る。例として図１２に示されるように、通路６０２は、下アパーチャ６０６に接続された下エルボ型領域６１０を備え得；下エルボ型領域６１０は傾斜した中間領域６１２まで続き；傾斜した中間領域６１２は上エルボ型領域６１４まで続き；上エルボ型領域６１４は垂直頂領域６１６まで続き；そして垂直頂領域６１６は上アパーチャ６０８に接続される。
【００７６】
上アパーチャ６０８および下アパーチャ６０６は、例えば、円形または楕円形の形状を有し得る。従って、通路６０２のボア６０４の断面もまた、円形または楕円形の形状を有し得る。アパーチャ６０６および６０８の幅は、例えば約１ｍｍであり得、そして通路６０２のボア６０４の幅もまた、例えば約１ｍｍであり得る。通路６０２は、例えば約４０ｍｍの長さを有し得る。
【００７７】
上記分離カップを使用して異なる密度の物質を分離する方法もまた、開発された。この方法は、生物学的アッセイ（例えば、自動化高スループットの電気生理学的測定システムによって実施されるもの）において使用するために、細胞を準備するために使用され得る。本開示から明らかであるように、この方法は自動化され得、従って、適切な自動化システム（例えば、上に記載され、例として図１および図２に図示されたシステム１００）を用いての実施を行い得る。
【００７８】
図１３を参照すると、異なる密度の物質を分離するための方法工程の例のフローチャート７００が示されている。この例において、この方法は、生物学的アッセイのために細胞を準備する観点で記載されている。しかし、この方法は、他の型の異なる密度の物質を分離する、他の観点で使用されてもよいことが理解されるべきである。
【００７９】
最初に、ピペッターが、細胞保持ステーションから細胞の溶液を吸引し得、そしてこの細胞の溶液を分離カップに分与し得る（工程７０２）。例えば、約１５ミリリットル（ｍｌ）〜約３０ｍｌの細胞の溶液が、この分離カップに分与され得る。このピペッターは、この細胞の溶液をこの分離カップに、例えば、１秒間（ｓ）あたり約１００マイクロリットル（μｌ）の速度で分与し得る。
【００８０】
次いで、この分離カップは、上記のように比較的低密度の物質をこのカップから除去する目的で、中心軸の周りで回転させられ得る（工程７０４）。この分離カップは、この例において、比較的低密度の物質を除去する目的で、１分間あたり約３０００回転（ｒｐｍ）のスピン速度で回転させられ得る。
【００８１】
比較的低密度の物質がこの分離カップから除去された後に、このピペッターは、所望の溶液（例えば、洗浄緩衝液）をこのカップに分与し得る（工程７０６）。例えば、約２０ｍｌ〜約３０ｍｌの所望の溶液が、分離カップ内に分与され得る。上記と同様に、このピペッターは、所望の溶液をこの分離カップ内に、約１００μｌ／ｓの速度で分与し得る。このピペッターは、このカップが依然としてスピンしている間に、所望の溶液をこの分離カップに送達し得る。
【００８２】
所望の溶液をこの分離カップに送達したら、このカップは撹拌されて、比較的高密度の物質をショルダートラップから除去し得、そして比較的高密度の物質を所望の溶液に入れ得る（工程７０８）。この様式で、この方法は、比較的高密度の物質の実質的に全てが所望の溶液に入ることを確実にする。
【００８３】
分離カップを撹拌して所望の溶液と細胞とを混合することは、回転の持続時間、方向、速度、加速、および減速を制御することを包含し得る。上記のように、回転アクチュエータが分離カップの回転を駆動するとき、制御モジュールが、この回転アクチュエータを制御し得る。図１４を参照すると、分離カップを自動的に撹拌するための方法工程の例のフローチャート８００が示されている。以下で議論される撹拌工程の任意の組み合わせまたは部分集合が、分離カップを撹拌するために選択的に実施され得ることが理解される。最初に、分離カップは、前方向（例えば、時計回り）に、所定の前方向加速率で加速され得（工程８０２）、そして所定の前方向スピン速度は、所定の持続時間にわたって維持され得る（工程８０４）。この前方向スピン速度を維持した後に、この分離カップは、所定の前方向減速率で減速され得る（工程８０６）。この所定の前方向加速率は、例えば、１秒間あたり１０００ｒｐｍ（ｒｐｍ／ｓ）であり得；この所定の前方向スピン速度は、例えば、３０００ｒｐｍであり得；この所定の持続時間は、例えば、１００ｓであり得；そしてこの所定の前方向減速率は、例えば、１０００ｒｐｍ／ｓであり得る。
【００８４】
次いで、この分離カップは、後方向（例えば、反時計回り）に、所定の後方向加速率で加速され得（工程８０８）、そして所定の後方向スピン速度は、所定の持続時間にわたって維持され得る（工程８１０）。この後方向スピン速度を維持した後に、この分離カップは、所定の後方向減速率で減速され得る（工程８１２）。この所定の後方向加速率は、例えば、１０００ｒｐｍ／ｓであり得；この所定の後方向スピン速度は、例えば、３０００ｒｐｍであり得；この所定の持続時間は、例えば、１００ｓであり得；そしてこの所定の後方向減速率は、例えば、１０００ｒｐｍ／ｓであり得る。
【００８５】
上記のように分離カップを前方向および後方向にスピンさせた後に、ピペッターは、細胞の溶液を粉砕または滴定するために使用され得（工程８１４）、そしてこれによって、所望のレベルの均質性を達成する。細胞の溶液の粉砕または滴定は、細胞の溶液を分離カップからピペッターを用いて吸引すること、およびこの細胞の溶液をこの分離カップに分与して戻すことを包含し得る。ピペッターは、細胞の溶液を粉砕または滴定するとき、所定の回数（例えば、１０回）だけ、この溶液を吸引および分与し得る。より均一な均質性が望まれる場合、さらなる粉砕または滴定工程が実施され得る。
【００８６】
一般に、「連絡する」、「通信する」、「…と連絡している」および「…と通信している」などの用語（例えば、第一の構成要素が第二の構成要素と「連絡する」、「通信する」、「連絡している」または「通信している」）は、２つ以上の構成要素または要素の間での、構造的関係、機能的関係、機械的関係、電気的関係、信号的関係、光学的関係、磁気的関係、電磁的関係、イオン的関係、または流体的関係を示すために、本明細書中で使用される。従って、１つの構成要素が第二の構成要素と連絡（通信）していると記載される事実は、さらなる構成要素が、第一の構成要素と第二の構成要素との間に存在し得る可能性、および／または作動可能に関連もしくは係合している可能性を、排除することを意図しない。
【００８７】
上記実施形態の説明は、図示および説明の目的で提示された。上記説明は、排他的なものではなく、そして本願発明を開示される正確な形態に限定するものではない。改変および変更が、上記説明を考慮して可能であるか、または本発明の実施から獲得され得る。特許請求の範囲およびその均等物が、本発明の範囲を規定する。
【符号の説明】
【００８８】
２０４、３００、６００  デバイス
３０４  カップ本体
３０２  内部空洞
３０６  内壁
３０８  中心本体領域
３１８  内部ショルダー
３１０  ネック領域
３２０  ショルダートラップ
３２２  開口部
２００  装置
【図１３】
2015047133.tif 000003
【図１４】
2015047133.tif 000004
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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