(57)【要約】【課題】  アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物を含有する微細乳化組成物を提供する。【解決手段】  米糠抽出物（Ａ）と乳化剤（Ｂ）と水（Ｃ）とを混合して乳化させた後、微細乳化装置により再乳化する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
米糠抽出物（Ａ）と、乳化剤（Ｂ）と、水（Ｃ）を含有する微細乳化組成物。
【請求項２】
米糠抽出物（Ａ）が、アシル化ステロール配糖体を１〜１５質量％含有する米糠抽出物であることを特徴とする請求項１に記載の微細乳化組成物。
【請求項３】
米糠抽出物（Ａ）を０．３〜７質量％含有することを特徴とする請求項１または２に記載の微細乳化組成物。
【請求項４】
乳化剤（Ｂ）がグリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステルである請求項１〜３のいずれかに記載の微細乳化組成物。
【請求項５】
乳化粒子の体積平均乳化粒子径が３０〜４００ｎｍである請求項１〜４のいずれかに記載の微細乳化組成物。
【請求項６】
請求項１〜５の微細乳化組成物を配合した飲料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、米糠抽出物を含有する微細乳化組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
米糠は玄米を精白する過程で産出される際に出る果皮、種皮、胚芽などの部分のことである。米糠には種々の有用な成分が含有されている。代表的な成分として、フィチン酸、イノシトール、フェルラ酸、γ-オリザノール、食物繊維、蛋白質、ビタミンB1、ビタミンB6、ビタミンE、ミネラルなどを例示することができる。これらの成分を利用した米糠の抽出物配合食品や飲料が提案されている。特許文献１（特開平１１−１４６７７４号公報）には米糠エキスを配合した健康飲料が記載されている。特許文献２（特開２００４−７５６３６号公報）には米糠から抽出した、コラーゲン様の作用を有するたんぱく質の加水分解物を配合した食品が提案されている。特許文献３（特開２００７−１８５１０９号公報）には米糠由来セラミドを配合した美容飲料が記載されている。
【０００３】
さらに最近注目されている米糠から抽出される成分としてアシル化ステロール配糖体がある。アシル化ステロール配糖体の生理作用として、血糖上昇抑制（特許文献４：特開２０１１−５７５９７号公報）、脂質代謝改善（特許文献５：特開２０１１−５７５９８号公報）、エネルギー代謝亢進（特許文献６：特開２０１１−５７５９９号公報）作用、アディポネクチン産生促進（特許文献７：特開２０１１−２０７７６号公報）作用などが知られている。このような多様な作用を有する米糠由来のアシル化ステロール配糖体を飲食品に配合することが検討されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開平１１−１４６７７４号公報
【特許文献２】特開２００４−７５６３６号公報
【特許文献３】特開２００７−１８５１０９号公報
【特許文献４】特開２０１１−５７５９７号公報
【特許文献５】特開２０１１−５７５９８号公報
【特許文献６】特開２０１１−５７５９９号公報
【特許文献７】特開２０１１−２０７７７６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明者は、アシル化ステロール配糖体を飲食品に配合しようとして、米糠抽出物を用いて検討を行ったところ、米糠抽出物、特にアシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物は、口中で張り付くような皮膜感を与え、口腔内、唇の裏側と歯が接着するような不快感を与えることが判明した。また、当該米糠抽出物は、「渋み」があり、好ましくないため嗜好性に劣るという評価であった。
さらにまた、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物は、容器の器壁に析出物が付着し易いという欠点があった。
そこで、本発明は、口中に皮膜感を与えず、口腔内、唇の裏側と歯が接着するような不快感を与えることがなく、「渋み」がなく、容器の器壁に析出物が付着しにくい、米糠抽出物を含有する乳化組成物および当該乳化組成物を含む飲料を提供することを本発明の課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
すなわち、本発明の主な構成は、次のとおりである。
（１）米糠抽出物（Ａ）と、乳化剤（Ｂ）と、水（Ｃ）を含有する微細乳化組成物。
（２）米糠抽出物（Ａ）が、アシル化ステロール配糖体を３〜１５質量％含有する米糠抽出物であることを特徴とする（１）に記載の微細乳化組成物。
（３）米糠抽出物（Ａ）を０．３〜７質量％含有することを特徴とする（１）または（２）に記載の微細乳化組成物。
（４）乳化剤（Ｂ）がグリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステルである（１）〜（３）のいずれかに記載の微細乳化組成物。
（５）乳化粒子の体積平均乳化粒子径が、３０〜４００ｎｍである（１）〜（４）のいずれかに記載の微細乳化組成物。
（６）（１）〜（５）の微細乳化組成物を配合した飲料。
【発明の効果】
【０００７】
本発明により、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物を含有する乳化組成物であって、飲食時に口中で皮膜感を感じさせず、口腔内、唇の裏側と歯が接着するような不快感を与えることがなく、「渋み」がなく、容器の器壁に析出物が付着しにくい乳化組成物が提供される。また米糠抽出物の微細乳化組成物は、飲料などの飲食品に適している。
さらに、アシル化ステロール配糖体はグルカゴン様ペプチド−１；glucagon-like peptide-1(以下、ＧＬＰ−１と略記する。）の産生促進作用を有することが確認できており、本乳化組成物や飲料はＧＬＰ−１産生促進剤としても有用である。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】アシル化ステロール配糖体を含む米糠抽出物が濃度依存的にヒト大腸細胞由来の培養細胞のＧＬＰ−１産生を促進することを示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明は、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物（Ａ）と乳化剤（Ｂ）と水（Ｃ）を含有する微細乳化組成物に関する。本発明の乳化組成物は、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物を０．３〜７質量％と乳化剤を含有し、微粒化処理を行い乳化粒子の平均粒子径が３０〜４００ｎｍに調整されているため、安定性の高い乳化組成物となっている。 
本発明に用いる米糠抽出物に含まれるアシル化ステロール配糖体は、通常混合物である。アシル化ステロール配糖体の構成糖は主にグルコースである。また構成ステロールはβ−シトステロール、スチグマステロール、カンペステロール等である。アシル化は主にグルコースの６位が、脂肪酸によってアシル化されており、構成脂肪酸は主にリノール酸、オレイン酸、パルミチン酸であることが明らかになっている（帯大研報，10，（1977）507〜514）。
【００１０】
本発明に用いられるアシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物は、アシル化ステロール配糖体を３〜１５質量％含有する。さらに本発明に用いられるアシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物は、その他の成分として、トリグリセライド油、レシチン等を含む。また、米糠からのアシル化ステロールを含有する組成物の抽出方法は任意の方法が選択できる。一般的には有機溶媒抽出や超臨界抽出法などが例示できる。
【００１１】
＜米糠抽出物（Ａ成分）について＞
本発明に用いられる米糠抽出物中のアシル化ステロール配糖体の含有量の測定は以下の方法により行うことができる。
（１）米糠抽出物を適量秤取し、クロロホルム／メタノール混液（クロロホルム：メタノール＝２：１）を加え、メスフラスコにてメスアップする。
（２）（１）で得られた溶液は成分濃度に応じて適宜希釈し、分析用試料溶液とする。
（３）標品はＥｓｔｅｒｉｆｉｅｄ  Ｓｔｅｒｙｌ  Ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ（フナコシ）とし、高速液体クロマトグラフ法によりアシル化ステロール配糖体の濃度を算出する。
（４）高速液体クロマトグラフ法による分析条件
分析装置：ＨＰＬＣ
移動相Ａ：メタノール：水  ＝  ９５：５（ｖ／ｖ）
移動相Ｂ：クロロホルム  ＝  １００（ｖ／ｖ）
ポンプ：Ｍｏｄｅｌ  ５８２  ｓｏｌｖｅｎｔ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｓｙｓｔｅ                ｍ
分析カラム：ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  Ｓｉ６０（５μｍ）ＨＰＬＣ−Ｃａｒｔ                    ｒｉｄｇｅ（ＭＥＲＣＫ）
検出器：荷電化粒子検出器（コロナ  ダイオネクス社）
Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ  Ｖｏｌｕｍｅ：２０μＬ
カラムオーブン：４０℃（ＦＬＯ社  ｍｏｄｅｌ  ５０２）
分析時間：４０ｍｉｎ
脱泡装置：ｕｎｉｆｌｏｗｓ  Ｄｅｇａｓｙｓ  Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＤＶ                        ３００３
流速：１ｍＬ／ｍｉｎ
グラジェント条件
以下に示すとおり
０−１５分
移動相Ａ：１％  →  ２５％、  移動相Ｂ：  ９９％  →  ７５％
１５−２０分
移動相Ａ：２５％  →  ９０％、移動相Ｂ：  ７５％  →  １０％
２０−２５分
移動相Ａ：９０％、            移動相Ｂ：  １０％
２５−３０分
移動相Ａ：９０％  →  １％、  移動相Ｂ：  １０％  →  ９９％
３０−４０分
移動相Ａ：１％、              移動相Ｂ：  ９９％
【００１２】
本発明に用いられる米糠抽出物の抽出方法としては、溶媒抽出法、超臨界抽出法等が挙げられる。
また、具体的な抽出操作を以下に示す。
なお、得られた米糠抽出物をカラムクロマトグラフィーでアシル化ステロール配糖体を再度濃縮してもよい。
【００１３】
＜抽出方法１  （溶媒抽出法）＞
市場に流通している米糠を選別した後に、ノルマルヘキサンなどの溶媒を用いて脱脂する。得られた油、脱脂糠等の粗原料を蒸留装置により脱溶媒し、さらにノルマルヘキサン、アセトン、エタノールなどの溶媒によって抽出する。かくして得られた抽出液を、脱溶剤装置を用いて再度脱溶剤することで米糠抽出物を得ることができる。
【００１４】
＜抽出方法２  （超臨界抽出法）＞
第一段階抽出
通常の精米機で精白率９５％に精米して米糠を調製する。米糠を予め脱水し、超臨界二酸化炭素抽出装置によって、トリグリセライド油を主成分とする脂質を除去した米糠を得る工程である。一般的に実施されている二酸化炭素の超臨界条件で容易に米糠からトリグリセライド油を主成分とする脂質が抽出される。適切な抽出条件は、例えば、抽出時間１〜５時間、抽出圧力１０〜５０ＭＰａおよび抽出温度３２〜８０℃である。好ましくは抽出時間１〜３時間、抽出圧力１５〜４０ＭＰａおよび抽出温度３５〜５０℃であり、より好ましくは抽出時間２時間、抽出圧力２５ＭＰａ付近および抽出温度４０℃付近である。
【００１５】
第二段階抽出
第一段階が終了した米糠から、低級アルコールを添加した超臨界二酸化炭素でアシル化ステロール配糖体を含有する画分を抽出する。低級アルコールとしては、エタノールを使用することが好ましい。エタノールは安全性の面からも好ましく、食品や医薬品を製造する際に有機溶媒として最適であり、残留することもほとんどなく、他の有機溶媒と比較して安全性も高い。
適切な超臨界抽出条件として例えば抽出時間０．５〜５時間、抽出圧力１０〜５０ＭＰａおよび抽出温度３２〜８０℃の条件で抽出する。好ましくは抽出時間１〜３時間、抽出圧力１５〜４０ＭＰａおよび抽出温度３５〜５０℃であり、より好ましくは抽出時間２時間、抽出圧力２５ＭＰａ付近および抽出温度４０℃付近である。
【００１６】
なお、超臨界抽出する場合の二酸化炭素の供給量は、第一段階抽出及び第二段階抽出とも、米糠１重量に対し二酸化炭素の重量を１〜４５０倍量とする。好ましくは１００〜３００倍量、より好ましくは２５０倍量である。
また、第二段階抽出における二酸化炭素とエタノールの混合比率は、重量比で、５０：１〜５：１、好ましくは３０：１〜１０：１、より好ましくは２０：１である。
アシル化ステロール配糖体を３〜１５質量％含む米糠抽出物を乳化組成物とする場合は、米糠抽出物の含有量を乳化組成物当たり０．３〜７質量％配合することで、アシル化ステロール配糖体を約０．０１〜１質量％含有する乳化組成物を得ることができる。このようなアシル化ステロール配糖体を含有する乳化組成物は、飲用することで生体機能の改善に有効に作用する。
なお、上記の方法で得ることのできる米糠抽出物はアシル化ステロール配糖体を３〜１５質量％含有している。アシル化ステロール配糖体を含む米糠抽出物を乳化組成物とする場合、通常０．１％〜１０質量％配合する。好ましくは０．３〜７質量％を配合する。
【００１７】
＜乳化剤（Ｂ成分）について＞
本発明に用いる乳化剤としては、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、レシチン、リゾレシチン等が挙げられる。乳化剤としては、グリセリン脂肪酸エステルおよび／またはポリグリセリン脂肪酸エステルが乳化安定性の点で好ましい。ポリグリセリン脂肪酸エステルとしては、ジグリセリンモノオレエート、ジグリセリンモノステアレート、ジグリセリンモノパルミテート、ヘキサグリセリンモノラウレート、ヘキサグリセリンモノミリステート、ヘキサグリセリンモノステアレート、ヘキサグリセリントリステアレート、ヘキサグリセリンペンタステアレート、ヘキサグリセリンモノオレエート、デカグリセリンモノラウレート、デカグリセリンモノミリステート、デカグリセリンモノパルミテート、デカグリセリンモノステアレート等が挙げられる。グリセリン脂肪酸エステルとしては、グリセリンモノパルミテート、グリセリンモノステアレート、グリセリンモノオレエート、グリセリンモノカプレート等が挙げられる。ショ糖脂肪酸エステルとしては、ショ糖ステアリン酸エステル、ショ糖パルミチン酸エステル、ショ糖ミリスチン酸エステル、ショ糖オレイン酸エステル、ショ糖ラウリン酸エステル等が挙げられる。ソルビタン脂肪酸エステルとしては、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノミリステート、ソルビタンモノパルミテート、ソルビタンモノステアレート、ソルビタンモノオレート等が挙げられる。
本発明に配合する乳化剤の量は、目的および使用する乳化剤により異なるが、好ましくは０．５〜７質量％である。７質量％以上の場合、乳化剤に由来する風味上の問題が発生する場合がある。
【００１８】
本発明の乳化組成物を含む飲料は、本発明の乳化組成物そのもの、あるいは、本発明の乳化組成物を希釈して飲料とするもの、あるいは、本発明の乳化組成物と他の液体を混合して飲料とするもの等が例示できる。また本発明で得られる乳化組成物はソフトカプセルなどに充填し、経口剤とすることもできる。
【００１９】
＜その他添加成分＞
本発明の乳化組成物中には、食品に一般的に配合される添加物を配合することができる。例えば、甘味料、着色料、保存料、増粘剤、安定剤、ゲル化剤、酸化防止剤、漂白剤、香料、酸味料、調味料、ｐＨ調整剤等を配合することができる。
【００２０】
＜本発明の微細乳化組成物の調製方法＞
本発明の微細乳化組成物の乳化粒子は、体積平均粒子径としては３０〜４００ｎｍ、好ましくは１００〜３００ｎｍであることが好ましい。乳化粒子径３０ｎｍ以下の乳化組成物を調製することは困難であり、乳化粒子径４００ｎｍ以上の乳化組成物は本発明の実施にあたっては保管時に析出物が容器の器壁に付着したり、口中で張り付くような皮膜感を与え、口腔内、唇の裏側と歯が接着するような不快感を与えたり、「渋み」を生じる可能性がある。
このような微細乳化粒子径は、ホモミキサーなどの常法で使用される撹拌混合装置を用いて米糠抽出物と乳化剤と水の乳化液を、さらに高圧ホモジナイザー装置などを用いて二段乳化することで得ることができる。
具体的には、米糠抽出物と水と乳化剤を撹拌混合して一次乳化物を調製し、この乳化液をスターバースト（株式会社スギノマシン製）、マイクロフルイダイザー（株式会社パウレック製）、クレアミックス・デソルバー（エム・テクニック株式会社製）等の微細乳化装置を用いた乳化方法が挙げられる。
このようにして微細乳化した乳化組成物は、水や果汁飲料などに容易に分散し、飲料として調製できる。また炭酸飲料に分散させることもできる。さらにGLP-1産生促進の経口剤としても使用できる。
【実施例】
【００２１】
以下に参考例、実施例を示し、本発明をさらに詳細に説明する。
【００２２】
＜参考例１：アシル化ステロール配糖体含有抽出物の調製（溶媒抽出）＞
市場に流通している米糠を選別し胚乳や異物を除いた米糠を得た。得られた選別済みの米糠１０kgに対して５０Ｌのノルマルヘキサンを用い脱脂した。この脱脂作業を３回繰り返し、脱脂米糠を得た。得られた脱脂米糠を蒸留装置により溶媒を除去した。得られた脱脂米糠８kgに対し、５０Ｌの割合のエタノールによって７０℃にて１時間、３回抽出し、得られた抽出液について、脱溶剤装置を用いてエタノールを除去した。その抽出物をろ過して得た米糠抽出物のアシル化ステロール配糖体の含有量は、３．４質量％であった。
【００２３】
＜参考例２：溶媒抽出物の濃縮＞
参考例１で得られた米糠抽出物２０ｇに対し２０ｍｌのヘキサンとクロロホルムを１：１の割合で混合した溶媒を加えた。シリカゲルにヘキサン：クロロホルムを１：１の割合で混合した溶媒を加えて膨潤させ、直径５cm、長さ６０cmのカラム内に充填し、その後に、同組成の溶媒を十分に浸透させた。米糠抽出物とヘキサンとクロロホルムの混合溶液をカラム上にアプライし、完全にシリカゲル内に浸透させた。その後、ヘキサンとクロロホルムを１：１の割合で混合した溶媒１０００ｍｌを加え、カラム下部から排出した。ヘキサンとクロロホルムの溶媒がすべて排出された後に、さらにクロロホルムを２０００ｍｌ加え、カラム下部から排出した。クロロホルムがすべて排出された後にクロロホルム：メタノールを９：１の割合で混合した溶媒１０００ｍｌを加え、溶出液を回収した。得られた溶出液について、エバポレーターを用いて脱溶媒した。得られた米糠抽出物中のアシル化ステロール配糖体の含有量は、１２．０質量％であった。 
【００２４】
＜参考例３：超臨界抽出例１＞
予め米糠中に含まれる水分（約９．５％）をほぼ全て除去し水分量を０．５％以下（水分除去にはフリーズドライを使用）にした米糠を約３６．５ｇ採取し、これを、超臨界抽出装置（三菱化工機株式会社製）の耐圧容器（０．５Ｌ）に移した。次いで、抽出溶媒として二酸化炭素を用いて、昇温・昇圧操作を行い、４０℃、２５ＭＰａ、２時間、超臨界二酸化炭素を抽出槽に通して抽出した。抽出液は、回収槽に移し、抽出槽に余分な脂質を除去した残留物を得た。
得られた残留物を約１２ｇ採取し、次に抽出溶媒として二酸化炭素を用いて、昇温・昇圧操作を行い、４０℃、２５ＭＰａに達した後、これにエタノール（９９．５％）を３．９５ｇ／分の流速で供給し１時間抽出し、次いで別の耐圧容器中に抽出液（エタノール抽出液）を回収した。
得られたエタノール抽出液は、ナスフラスコに移し、エバポレーターにより濃縮乾固し、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出画分を得た。
参考例３の米糠抽出物中のアシル化ステロール配糖体の含有量は、１３．２質量％であった。
【００２５】
＜参考例４：超臨界抽出例２＞
参考例３と同様、予め乾燥させた米糠を約４０ｇ採取し、これを、超臨界抽出装置（三菱化工機株式会社製）の耐圧容器（０．５Ｌ）に移した。次いで抽出溶媒として二酸化炭素を用いて、昇温・昇圧操作を行い、４０℃、２５ＭＰａ、２時間、超臨界二酸化炭素を抽出槽に通して抽出した。抽出溶液は回収槽に移し、抽出槽に余分な脂質を除去した残留物を得た。
得られた残留物を約１２ｇ採取し、次に抽出溶媒として二酸化炭素を用いて、昇温・昇圧操作を行い、４０℃、２５ＭＰａに達した後、これにエタノール（９９．５％）を３．９５ｇ／分の流速で供給し２時間抽出槽に通し、次いで別の耐圧容器中に抽出液（エタノール抽出液）を回収した。
得られたエタノール抽出液はナスフラスコに移し、エバポレーターにより濃縮乾固し、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出画分を得た。
参考例４の米糠抽出物中のアシル化ステロール配糖体の含有量は１２．４質量％であった。
【００２６】
＜微細乳化組成物の製造＞
表１の組成で、成分７〜９を混合溶解し、この溶液を撹拌しながら、あらかじめ成分１〜６を混合した溶液を徐々に添加して乳化物（１次乳化物）を得た。次いで得られた乳化物をスターバースト（スギノマシン製）で再度乳化処理を行い、微細乳化し、乳化組成物（微細乳化組成物）を得た。比較例1の組成は、１次乳化物を形成せずアシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物が分離してしまったため、微細乳化処理を行わなかった。
なお配合成分５、６は酸化防止を目的として配合している。
【００２７】
【表１】
2015047088.tif 000003
【００２８】
＜微細乳化組成物の評価試験＞
表２の成分組成表の飲料を調製し、この飲料に実施例１〜５の乳化組成物を添加し撹拌混合したのち、分散した乳化粒子径を測定した。この粒子径は微細乳化組成物の粒子径を示す。また乳化組成物を添加した飲料の保存安定性を試験した。
乳化組成物の添加量は、飲料中に米糠抽出物が１質量％含有されるように調製した。
すなわち表２の飲料８８．４７質量％、乳化組成物１１．５３質量％とした。また比較のため各組成の１次乳化物も同様に添加して飲料を調製し、乳化粒子径および保存安定性を試験した。これを比較例２〜６とする。
【００２９】
【表２】
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【００３０】
＜乳化組成物・飲料の評価＞
１．乳化組成物の体積平均の乳化粒子径測定
乳化粒子の体積平均乳化粒子径は、１μｍ以上の体積平均乳化粒子径については、レーザー回折式粒度分布測定装置マスターサイザー２０００（商品名：Malvern Instruments Ltd.製）および、１μｍ未満の体積平均乳化粒子径については、レーザーゼータ電位計（商品名：製ゼータ電位・粒径測定装置ELSZ-1000ZS大塚電子株式会社製）を用いて測定した。 
【００３１】
２．容器内壁への付着評価
飲料を５０ｍＬ入りのガラス瓶に入れて、室温で１週間放置した。１週間経過後、ガラス瓶を横に傾けて、容器内壁への付着の程度を以下の基準により評価した。
○：容器壁に付着物が全く認められない。
△：容器壁の透明性が少し低下している。
×：容器壁に明らかに付着物が認められる。
【００３２】
３．口中の皮膜感の評価
１０名の官能試験専門パネラーにより、乳化組成物を含む飲料を口に含んだ時の皮膜感を以下の基準により評価した。
２点：全く皮膜感を感じない。
１点：少し皮膜感を感じる。
０点：皮膜感を感じる。
評価を集計し、口中の皮膜感の評価とした。
○：評価点の平均値が１．５点以上
△：評価点の平均値が０．５点を超えて、１．５未満
×：評価点の平均値が０．５点以下
【００３３】
４．渋みの評価
１０名の官能評価専門パネラーにより、乳化組成物を含む飲料を口に含んだ時の渋みを以下の基準により評価した。
２点：全く渋みを感じない。
１点：少し渋みを感じる。
０点：渋みを感じる。
各パネルの評価点を集計し、渋み感の評価とした。
○：評価点の平均値が１．５点以上
△：評価点の平均値が０．５点を超えて、１．５未満
×：評価点の平均値が０．５点以下
【００３４】
各試験項目の評価結果を表３、表４に示した。
【００３５】
【表３】
2015047088.tif 000005
【００３６】
【表４】
2015047088.tif 000006
【００３７】
微細乳化処理後の実施例１〜５の乳化組成物を含む飲料は、いずれも瓶の壁に付着物の発生が認められなかった。さらに、口中の被膜感や渋みなどの評価では、実施例１〜４は全く問題がなかった。
実施例５は一部のパネラーが渋みを感じると評価した。このような評価を改善するためには、乳化剤を単独で用いるより、グリセリン脂肪酸エステルとポリグリセリン脂肪酸エステルの併用が好ましい効果を生むものと考えられる。
また乳化粒子径は、２１９〜３５２ｎｍの範囲に分布していた。
一方微細乳化処理をしなかった比較例２〜６の乳化組成物を含む飲料は、いずれも、容器内壁への付着評価、口中の皮膜感、渋みの評価に劣るものであった。また微細化しなかったため乳化粒子径は８．３〜１２．３μｍの範囲に分布していた。
以上の試験から、アシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物を含む乳化組成物の容器内壁への付着防止と口中の皮膜感、渋みの抑制のためには微細乳化することで解決できることが判明した。
【００３８】
＜ＧＬＰ-１産生試験＞
本発明の米糠抽出物がＧＬＰ−１産生促進効果を有していることを示し、本発明の有用性をさらに説明する。
【００３９】
［細胞培養試験］
NCI-H716細胞(ヒト結腸がん由来細胞)1×105cellsを75cm2 の細胞培養フラスコに播種し、10% FBS含有RPMI1640培地で14日間、37℃、5％ＣＯ２条件下で、培養を行った。なお NCI-H716細胞は、ATCC（American Type Culture Collection）から入手した。  培養後、マトリゲルを塗布した24 well plateに4×104cells/wellとなるように播種し、10%FBS含有DMEM培地で1日間培養を行った。
その後、Hanks緩衝液で2回洗浄し、試験試料を添加し、無血清DMEM培地で2時間培養を行った。培養終了後、培養液中に産生されたGLP-1量を 「GLP-1 ELISA kit (Glucagon-Like Peptide-1  Cat＃EGLP-35K：Millipore社)」を用いて測定した。なお、コントロールは 1％DMSOとし、陽性対照として用いたオレオイルエタノールアミド(ＯＥＡ)は、ＧＬＰ−１産生促進査証を有することが知られている化合物である。このＯＥＡを100μMとなるように添加した。
【００４０】
[試験物質]
参考例1及び2で得られたアシル化ステロール配糖体（ＡＳＧ）を含有する米糠抽出物を試験に用いた。ＡＳＧを含有する米糠抽出物の濃度が1000μg/ml/1％DMSO(ジメチルスルフォキシド)となるように、DMEM(FBS-,PS-)培地で溶解し、最終培養液中のＡＳＧを3.4％含有する米糠抽出物の濃度は、250μｇ／ｍｌ、500μｇ／ｍｌ、1000μｇ／ｍｌになるように、12.0％含有する米糠抽出物の濃度は333μｇ／ｍｌになるよう添加した。
【００４１】
[結果]
ＧＬＰ−１測定結果はＤＭＳＯのみの場合に得られる測定値を１としたとき、オレオイルエタノールアミド(ＯＥＡ)とＡＳＧを含む組成物の相対値として求めた。測定結果を図１に示す。ＡＳＧにＯＥＡと同等以上のＧＬＰ−１産生促進作用が確認され、さらに濃度依存性も認められた。
なお米糠由来の脂質画分であってＡＳＧを含有しないものにはＧＬＰ−１産生促進効果が認められなかった。
したがってアシル化ステロール配糖体を含有する乳化組成物はＧＬＰ−１産生促進作用を有しており生体機能維持上有用である。また乳化分散したアシル化ステロール配糖体を含有する米糠抽出物は消化管内のＧＬＰ−１産生細胞を効率よく刺激してＧＬＰ−１産生を促進させるものと考えられる。
【図１】
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