(57)【要約】【課題】消化管機能を調節し、便秘改善に有用な医薬品又は飲食品を提供する。【解決手段】ε−ヴィニフェリンを有効成分とする消化管内のイオンチャネルを刺激する剤とする。 【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ε−ヴィニフェリンを有効成分とする消化管内のイオンチャネルを刺激する剤。
【請求項２】
請求項１記載のアニオン分泌を刺激する剤を含む消化管内への水分移行刺激剤。
【請求項３】
請求項１又は請求項２記載の剤を含む便秘改善剤。
【請求項４】
請求項１又は請求項２記載の剤を含む消化管機能改善剤。
【請求項５】
請求項１又は請求項２記載の剤を含む飲食品。
【請求項６】
ε−ヴィニフェリンを有効成分とする過敏性腸症候群の改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、消化管の機能を調節する剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、生活習慣の変化や食事内容の変化、あるいは、ストレスなどの生活環境の変化により、過敏性腸症候群、機能性ディスペプシア（消化不良）、あるいは、慢性便秘症などの消化器の異常を主訴とする病態が増加している。これらは直接生命を脅かす疾患ではないが、QOLが著しく低下するため、社会生活に少なからぬ支障をきたし、また、大腸癌など消化器系腫瘍の発症リスクが高まることが指摘されている。
これらの消化管機能の異常症候群中でも、便秘型過敏性大腸症候群（Irritable Bowel Syndrom:IBS）や慢性便秘症の治療改善効果を有する薬物は、下剤以外ほとんど提供されていない。しかし、近年、慢性便秘症の改善剤として適応を取得したアミティーザ（登録商標）は、３０年ぶりの便秘の新薬で、小腸粘膜上皮細胞に存在するタイプ−2 クロライドイオンチャネルに作用することで、腸管内への水分の分泌を促進し、便を軟らかくして排便を促す効果を持つ（特許文献１：特表２００４−５０８３２７号公報）。酸化マグネシウムも似たような作用機序を有するが、酸化マグネシウムには、長期服用により高マグネシウム血症が生じ、徐脈性の不整脈から心停止を生じるリスクが指摘されており、米国では酸化マグネシウムは、緊急時に短期間使用する薬剤と位置付けられており、長期処方はできない。国内でも酸化マグネシウムの漫然とした長期処方には注意喚起が行われていて、腎不全患者には投与できない。
このような消化管に作用し、消化管の機能を調節することによる慢性の便秘症を改善することのできる新たな薬剤の提供が求められている。
【０００３】
また近年、消化管の機能をインビトロで試験し、その結果によって消化管のもつ機能を評価する試みが行われ、種々の試験技術が開発されている。
たとえば消化管粘膜のイオンの輸送を見ることで消化管管内への水分の移行を知ることができる技術がある。この技術を応用すれば、前記のアミティーザのような消化管機能の調節剤を探索しやすくなる。
生体の上皮膜（epithelial membrane）は、膜を介して様々な種類の電解質（イオンion）を能動的あるいは受動的に輸送する機能を有している。上皮膜の電解質輸送（iontransport）は、上皮細胞（epithelial cell）の細胞膜に存在するイオンチャネルやポンプ、トランスポーター等の働きによって選択的に調節されている。この機能によって、上皮膜は生体にとって必要な電解質を取り込み、不要な電解質を排出すると共に、上皮膜を境界とした管腔側と血管側の溶液間に浸透圧差を生じさせる。消化管粘膜や唾液腺、乳腺等における水の分泌・吸収は、このような上皮膜のイオン輸送によって生じる浸透圧差を駆動力として誘発されると考えられている。したがって、上皮膜における電解質輸送を測定することで、消化管の管壁から管腔内への水分の移動を評価することができる（非特許文献１参照）。この手法は、短絡電流法（short-circuit technique）又はユッシングチャンバー法として普及している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特表２００４−５０８３２７号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】唐木晋一郎他、日薬理誌（Folia Pharmacol. Jpn.）１２３，２１１〜２１８（２００４）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、消化管機能を調節し、便秘改善に有用な医薬品又は飲食品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者は、前記のユッシングチャンバー法を用いて各種天然物由来の成分について、消化管内への水分移動を引き起こす物質について検討を行ったところ、植物由来の天然成分であるε−ヴィニフェリンに強いイオンチャネルを刺激し、アニオン分泌を介した水分移行作用を見出し、さらにこの作用を便秘改善や消化管機能の改善、過敏性腸症候群の症状の改善に利用できることを見出した。
【０００８】
本発明は、次の構成からなる。
（１）ε−ヴィニフェリンを有効成分とする消化管内のイオンチャネルを刺激する剤。
（２）（１）記載のアニオン分泌を刺激する剤を含む消化管内への水分移行刺激剤。
（３）（１）又は（２）記載の剤を含む便秘改善剤。
（４）（１）又は（２）記載の剤を含む消化管機能改善剤。
（５）（１）又は（２）記載の剤を含む飲食品。
（６）ε−ヴィニフェリンを有効成分とする過敏性腸症候群の改善剤。 
【発明の効果】
【０００９】
本発明により、ε−ヴィニフェリンを有効成分とする消化管内のイオンチャネルを刺激する剤、並びに水分移行刺激剤が提供される。本発明の消化管内のイオンチャネルを刺激する剤、並びに水分移行刺激剤は便秘改善剤として有用である。また本発明の消化管内のイオンチャネルを刺激する剤、並びに水分移行刺激剤は、便秘性の過敏性大腸症の改善、治療に有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】消化管内への水分移行を評価するためのユッシングチャンバー法の試験装置を示す模式図である
【図２】各種成分の消化管内腔側へのアニオン分泌を確認した電流変化測定チャートを示す。
【図３】ε−ヴィニフェリンが濃度依存性に消化管内腔側にアニオンを分泌させることを確認したグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下、本発明について詳述する。
本発明は、ε−ヴィニフェリンを有効成分とする消化管内のイオンチャネルを刺激する剤、水分移行刺激剤、便秘改善剤、消化管機能改善剤及びこれらの剤を含む飲食品に係る発明である。
消化管粘膜内のイオンチャネルが刺激されると、不要なアニオンを排出すると共に、消化管粘膜の上皮膜を境界とした管腔側と血管側の溶液間に浸透圧差を生じさせ、水を消化管管腔側に分泌させる。この結果、消化管内の糞便が水分を吸収して軟質化され、便秘が改善する。また、便秘性の過敏性大腸症は、大腸内の糞便が軟質化されることで蠕動運動が刺激されて、便が排泄されやすくなる。
したがってε−ヴィニフェリンは、便秘の改善剤あるいは過敏性大腸症など腸機能異常に伴って発生する消化管機能の改善剤として利用できる。
【００１２】
本発明で用いるε−ヴィニフェリンは、スチルベン化合物であり、ブドウのファイトアレキシンの一種として知られている。本発明でいうレスベラトロールは、スチルベン骨格を基本構造とするポリフェノールのモノマーを言う。ε−ヴィニフェリンはこのダイマーである。スチルベン化合物を含有する植物体、好ましくはブドウ側枝より、各種抽出溶媒、好ましくは７０％メタノールを用いてε−ヴィニフェリンを抽出することができる。抽出されたε−ヴィニフェリンは分取高速液体クロマトグラフィなどの分離精製手段によって分離、精製できる。
【００１３】
ε−ヴィニフェリンは、レスベラトロール類と総称されているが、本発明においては区別して用いることとする。本発明においてはレスベラトロールは上述のとおり、ブドウの葉、新芽、果皮等に存在するポリフェノールの一種で、スチルベン化合物の単量体を言い、ｔｒａｎｓ−レスベラトロールが代表的な化合物である。
【００１４】
ε−ヴィニフェリンは、有機化学的または微生物を用いて合成した高純度品を用いることが好ましい。しかし、まだ大量に供給することはできない。また、上述のブドウなどの植物体から抽出して用いることもでき、その場合、抽出物を用いてもよく、またはその抽出物から得たレスベラトロール類をε−ヴィニフェリン高濃度含有物としてそのまま用いてもよい。天然物としては、ε−ヴィニフェリンの含有量がコントロールされているものであればよく、例えば、ブドウ、落花生、およびイタドリやツルドクダミ等のタデ科植物等が挙げられる。
【００１５】
天然物から抽出する場合の原料としてはブドウが特に好ましい。ブドウの種類は、特に限定されるものではないが、デラウエア、巨峰、甲州、ピオーネ、マスカット、シュナンブラン、グレナッシュ、マタロ、ミュラーテュルガウ、トレッビアーノ、ベリーＡ、カベルネソービニオン、メルロー、ピノノアール、カベルネフラン、シラー、シャルドネ、ソービニヨンブラン、セミヨン、シラー、ガメイ、リースリング、アリゴテ等が好ましい。
ブドウ抽出物とは、ブドウ果実、ブドウ葉またはブドウに由来する物からの抽出物を指す。ブドウに由来する物としては、ブドウジュース、ワイン、ワイン製造時の残渣、ワイン濃縮物等をいう。
抽出は、例えば、レスベラトロール類はブドウの果皮や新芽、葉、蔓に多く含まれていることが知られているので、それらを必要により乾燥した後、抽出溶媒に一定期間浸漬するか、あるいは加熱還流している抽出溶媒と接触させ、次いで濾過し、濃縮し、さらに上述の分取クロマトによって分取することができる。抽出溶媒としては、通常抽出に用いられる溶媒であれば任意に用いることができ、例えば、水、メタノール、エタノール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、グリセリン等のアルコール類、クロロホルム、ジクロルエタン、四塩化炭素、アセトン、酢酸エチル等の有機溶媒を、それぞれ単独あるいは組み合わせて用いることができる。
上記溶媒で抽出して得た抽出液をそのまま、あるいは濃縮したエキスを用いるか、あるいはこれらエキスを吸着法、例えばイオン交換樹脂を用いて不純物を除去したものや、ポーラスポリマー（例えばアンバーライトＸＡＤ−２）のカラムにて吸着させた後、メタノールまたはエタノールで溶出し、濃縮したものも使用することができる。また分配法、例えば水／酢酸エチルで抽出した抽出物等も用いられる。また、ワイン、ワインの濃縮物または濃縮乾固した固形物中にも含まれているので、それらを用いることもできる。また、ワイン製造時に発生するブドウの残渣をそのまま用いるか、それから上記抽出方法と同様にして抽出することもできる。有機溶剤としてはエタノール等のアルコールが好ましく、特にエタノールが好ましい。
【００１６】
医薬製剤は、経口的にあるいは非経口的（静脈投与、腹腔内投与、等）に適宜に使用される。剤型も任意で、例えば錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等の経口用固形製剤や、内服液剤、シロップ剤等の経口用液体製剤、または、注射剤などの非経口用液体製剤など、いずれの形態にも公知の方法により適宜調製することができる。
これらの医薬製剤には、通常用いられる結合剤、崩壊剤、増粘剤、分散剤、再吸収促進剤、矯味剤、緩衝剤、界面活性剤、溶解補助剤、保存剤、乳化剤、等張化剤、安定化剤やｐＨ調製剤などの賦形剤を適宜使用してもよい。
【００１７】
本発明医薬製剤において、有効成分であるε−ヴィニフェリンの投与量は、その純度、その剤型、また患者の年令、体重、適応症状などによって異なるが、例えば経口投与の場合は、成人１日１回〜数回投与され、１日あたり１回約１ｍｇ〜２００ｍｇ、好ましくは３ｍｇ〜２０ｍｇ／人程度投与するのがよい。
【００１８】
飲食品の形態としては、例えば、顆粒状、粒状、ペースト状、ゲル状、固形状、または、液体状に任意に成形することができる。これらには、食品中に含有することが認められている公知の各種物質、例えば、結合剤、崩壊剤、増粘剤、分散剤、再吸収促進剤、矯味剤、緩衝剤、界面活性剤、溶解補助剤、保存剤、乳化剤、等張化剤、安定化剤やｐＨ調製剤などの賦形剤を適宜含有させることができる。
【００１９】
本発明の飲食品中に含まれる有効成分であるε−ヴィニフェリンの含有量は、それらの種類、目的、形態、利用方法などに応じて、適宜決めることができ、例えば、１〜１０質量％程度とすることができる。特に、保健用飲食品等として利用する場合には、本発明の有効成分を所定の効果が十分発揮されるような量で含有させることが好ましい。従ってこのような場合には、本発明の飲食品は、ε−ヴィニフェリンを含有し、過敏性大腸症として診断された慢性的な便秘症の患者などの治療等に用いられるものである旨の表示を付した飲食品とすることができる。
【実施例】
【００２０】
以下、本発明を参考例、実施例に基づきさらに詳細に説明する。なお、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。また、配合量はすべて質量％で示す。
【００２１】
実施例
＜ラット大腸粘膜を用いたユッシングチャンバー法による試験＞
１．試験系の作製（ユッシングチャンバーの作製と測定方法）
非特許文献１に記載された以下の方法で試験を実施した。
雄性SDラットをジエチルエーテル麻酔後、断頭、放血屠殺し盲腸を除く大腸全体を摘出し、速やかに氷冷したKrebs-Ringer液中に移した。
その後、大腸を解剖学的基準により近位結腸、中位結腸、遠位結腸及び直腸に分け、それぞれの部位を実態顕微鏡下で輪走筋及び縦走筋層を剥離し、粘膜下神経叢を含む粘膜−粘膜下神経叢標本を作製した。作製したラット大腸粘膜−粘膜下神経叢標本を測定面積０．６４cm２のUssing chamber(CHM2, WPI, FL, USA)に装着し、粘膜側、血管側に３７℃のKrebs-Ringer液（１１７mM NaCl, ４．７mM KCl, １．２mM MgCl2,１．２mM NaH2PO4, ２．５mM CaCl2および血管側のみ５mM glucose）を１０mLずつ循環させ、９５%O2−５%CO2混合ガスを曝気しpHを７．４に維持した。
電位差および短絡電流short-circuitcurrent（Isc）測定には銀−塩化銀電極を用い、Krebs-Ringer４％寒天で固めた塩橋を介して短絡電流測定用アンプ（CEZ-9100,日本光電、東京）に接続した。標本の粘膜側−漿膜側間に生じる電位差は常時０mVに固定し、IscをPowerLab System (Power Lab 4/26, ADInstrument, Castle Hill, Australia)を用いてコンピュータに記録した。また、1分間に３秒間、１０mVのコマンドパルスを組織に与え、短絡電流の変化量から膜コンダクタンス(Gt)を算出した。ユッシングチャンバーに標本を装着してから1時間後、basal IscおよびGtが安定したところで粘膜下神経に電気刺激（２５V, durationof ０．５ms, ５Hz, １２０s）を行い組織の状態を確認し、電気刺激によるＩscやGtの上昇が再び基線に戻った後にε−ヴィニフェリンおよびレスベラトロールの作用を測定した。測定手法の模式図を図１に示す。
【００２２】
２．試験試料
最終濃度が３×１０-5、１０-４Ｍになるように希釈調整したｔｒａｎｓレスベラトロール（和光純薬工業株式会社）エタノール溶解液を上記の試験系に添加した。同様に、最終濃度３×１０-6、１０-5、３×１０-5、１０-４Ｍになるように希釈調整したε−ヴィニフェリン（和光純薬工業株式会社）を添加した。また、試験対照として希釈溶媒のエタノールを添加した。試験溶液の添加量は１０μｌとした。
【００２３】
３．試験結果
十二指腸〜回腸中央部では、ε−ヴィニフェリンをバス濃度10-4 Mとなるように管腔側に投与しても上皮膜の起電性イオン輸送の指標となる短絡電流（Isc）に対して何ら作用を示さなかった。しかし、回腸終末部〜直腸では一過性の Isc および上皮膜コンダクタンス Gt 上昇を惹起した。この Isc 上昇は血管側から管腔側へのアニオン分泌であり、ラット下部消化管粘膜では、ε−ヴィニフェリンの管腔側投与によって水分泌が惹起されるものと判断できる。一方、ｔｒａｎｓレスベラトロールではε−ヴィニフェリンが上記の水分泌反応を惹起する 10-4M の濃度では Isc や Gt に作用せず、3×10-4M からIscおよびGt上昇が惹起されることから、ｔｒａｎｓレスベラトロールがε−ヴィニフェリン と同等の作用を惹起するためには、10倍以上の濃度が必要であることが明らかとなった。この短絡電流変化は、ラット盲腸粘膜を用いた場合にもっとも大きかったことから、ヒトにおいては糞便の滞留する大腸下部においてもこのような変化が起きることが予測された。したがって便秘による滞留糞便に水分が供給されて、便秘が改善し、消化管機能が改善する。
【００２４】
ラット盲腸粘膜を用いた短絡電流の測定によって得た代表的なチャートを図２、電流の最大変化値のグラフを図３に示した。
【００２５】
以上の試験結果から、ε−ヴィニフェリンは大腸下部における水分の管腔内の分泌を調節し、便秘を改善できることが判明した。
【００２６】
参考例１
天然物からのε−ヴィニフェリンの調製例
ブドウ側枝（品種デラウエア）約５ｋｇよりε−ヴィニフェリンを７０％メタノール１０ｌにより抽出し、分取ＨＰＬＣにより分離・精製して約２００ｍｇのε−ヴィニフェリンを得た。
ＨＰＬＣ分取時の移動相としてはアセトニトリル／水（７：１３）を用い、１ｍｌ／分の流速で約８分後に検出される。検出は紫外吸収２８８ｎｍで行った。
またメタノール抽出後溶媒を留去して得た残渣を、粗精製ε−ヴィニフェリンとした。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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