(57)【要約】【課題】本発明の課題は、安全かつ優れた脂質異常症、又は消化器症状の予防又は治療のための経口用組成物を提供することである。【解決手段】活性炭及びリパーゼを含有する経口用組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
活性炭及びリパーゼを含有する経口用組成物。
【請求項２】
活性炭が薬用炭である、請求項１に記載の経口用組成物。
【請求項３】
リパーゼがアスペルギルス属の菌から産生されるリパーゼである、請求項１もしくは２に記載の経口用組成物。
【請求項４】
活性炭１重量部に対するリパーゼの配合割合が２〜０．００１重量部である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の経口用組成物。
【請求項５】
消化器症状の予防又は治療に用いる、請求項１〜４のいずれか１項に記載の経口用組成物。
【請求項６】
消化器症状が、胃もたれ、胸やけ、胃部・腹部膨満感、又は便秘である、請求項５に記載の経口用組成物。
【請求項７】
脂質異常症の予防又は治療に用いる、請求項１〜４のいずれか１項に記載の経口用組成物。
【請求項８】
血中トリグリセリドの低下に用いる、請求項１〜４のいずれか１項に記載の経口用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、活性炭及びリパーゼを含有する経口用組成物に関する。より詳しくは、脂質異常症、又は消化器症状の予防又は治療のための経口用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
脂質は重要なエネルギー源であると共に、生体組織を構成する成分としても必須である。
【０００３】
しかし、脂質は糖質やたんぱく質と比較すると消化に時間を要するため、脂質の多い食事を過剰に摂取してしまうと、未消化の食物が胃や腸に長時間滞留することで、消化器への負担が大きくなり、更には、消化器機能が乱れて胃もたれ、胃部・腹部膨満感や便秘などの不快な消化器症状を呈しやすくなる。
【０００４】
脂質の多い食物を過剰摂取した際の不快な消化器症状の改善薬としては、消化管運動機能改善剤、胃粘膜保護剤、胃酸分泌抑制剤、整腸剤及びそれらを配合した医薬品などが存在する。しかし、これら薬剤は食物や脂質に対して直接作用するものではなく、その脂質に対する効果は十分とは言えないものである。
【０００５】
脂質に対して、より直接的に作用させることを目的として、特に脂質を分解する作用を有する消化酵素であるリパーゼを経口摂取することがある。消化を補助する目的で胃腸薬等の医薬品に配合されている（例えば、非特許文献１、２参照）。
【０００６】
リパーゼは、消化液に含まれる消化酵素として知られており、脂質を構成するエステル結合を加水分解する酵素である。腸管においてリパーゼが働くことで、脂質が脂肪酸とアルコールに分解される。分解された脂肪酸とアルコールが細胞内に吸収され、吸収された脂肪酸とアルコールは、細胞中で脂質に再合成され、血中に放出される。しかし、一般に、腸管内に存在するリパーゼの活性を阻害することによって、腸管における脂質の分解・吸収を抑制できるとされているため、リパーゼ活性を向上させることで、脂質の吸収が促進されてしまうと考えられている（例えば、非特許文献３参照）。
【０００７】
さらに、リパーゼのみでは胃もたれ、胃部・腹部膨満感や便秘などの消化器症状に対する効果が十分ではないため、リパーゼを用いる際には、主に糖質を分解するジアスターゼ、たんぱく質を分解するプロテアーゼ、繊維質を分解するセルラーゼ等の消化酵素が併用されている。
【０００８】
脂質の過剰摂取に対する直接的な改善策としては、現在リパーゼを含む消化酵素群の経口摂取しか無く、今後の更なる食の欧米化に伴い、より脂質に特化して効果的に胃もたれ、胃部・腹部膨満感や便秘などの消化器症状を予防・改善する手段の開発が望まれている。
【０００９】
また、脂質の多い欧米型食生活の浸透により、胃もたれなどの消化器症状のみならず、脂質異常症（高脂血症）の増加が問題となってきている。脂質異常症は、動脈硬化の原因として知られており、メタボリックシンドロームの診断基準としても定められ、治療又は予防することが重要だと考えられている。
【００１０】
これまでに、脂質異常症の原因や治療について、直接又は間接に関連している因子として、運動、食習慣、体重、血糖値、血中トリグリセリド又は各種コレステロール値、インスリン抵抗性、アディポネクチン、レプチン、ＡＭＰＫ活性、エストロゲン等の性ホルモン、遺伝的因子等が知られている。
【００１１】
現在、脂質異常症を治療するための有効な方法は、運動による体重減少と食事制限である。即ち、エネルギー代謝を促進し、結果として体内における過剰エネルギーの消費を増大させるとともに、エネルギー蓄積を阻害することであるが、これらの実行は患者には厳し過ぎるものである。そこで、このような多大な努力を強いることなく、当該疾患が予防又は治療できることが望まれている。
【００１２】
活性炭は、様々な物質を吸着する吸着剤として広く知られており、基本的には植物質を炭化して製造される。その機能性から、経口的に服用するものとして、健康食品や医薬品等でも使用されている。
【００１３】
活性炭は、医療用医薬品においては過酸症及び消化管内発酵による生成ガスの吸着、毒物や毒素の消化管内吸着、薬物中毒の解毒、下痢症等に用いられている（例えば、非特許文献１参照）。また、一般用医薬品においても止瀉目的や整腸目的で消化器疾患用薬に配合されている（例えば、非特許文献２参照）。しかし、活性炭を服用した際に、便秘などの消化不良を起こすこと（例えば、特許文献１、２参照）、酵素類等の有用成分を吸着してしまうこと（例えば、非特許文献４参照）があり、問題となっている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１４】
【特許文献１】再表９８／０３２５９
【特許文献２】特許第５４５２０５６
【非特許文献】
【００１５】
【非特許文献１】ＪＡＰＩＣ「医療用医薬品集」２０１３  丸善出版、２０１２
【非特許文献２】ＪＡＰＩＣ「一般用医薬品集」２０１３  丸善出版、２０１２
【非特許文献３】よく効く市販薬の選び方使い方辞典  １４１頁  医薬情報研究所／（株）エス・アイ・シー
【非特許文献４】第十六改正日本薬局方  Ｃ−５０１７  厚生労働省
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
本発明の課題は、摂取した脂質の体外への排出を促進することで、脂質が消化管に長時間滞留することによる胃もたれなどの消化器症状を予防・改善し、また、脂質の体外への排出を促進することにより血中脂質を有意に改善し、しかも安全な経口組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
活性炭が体内で不要となった老廃物を吸着する作用はよく知られ、実用に供されているが、活性炭を摂取した際、活性炭により便秘などの消化不良が生じることが問題となっていた。
【００１８】
また、一般的にリパーゼは、その作用により脂質を脂肪酸とアルコールに分解するが、その結果脂質の吸収が促進されてしまうと考えられていた。
【００１９】
本発明者らは、上記課題を解決するために長年にわたり鋭意研究を重ねた結果、意外にも、活性炭及びリパーゼを組み合わせることにより、摂取した脂質の体外への排出が促進されるというこれまでの予想に反するような現象を見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、下記の（１）〜（９）に関する。
（１）活性炭及びリパーゼを含有する経口用組成物。
（２）活性炭が薬用炭である、（１）に記載の経口用組成物。
（３）リパーゼがアスペルギルス属の菌から産生されるリパーゼである、（１）もしくは（２）に記載の経口用組成物。
（４）活性炭１重量部に対するリパーゼの配合割合が２〜０．００１重量部である（１）〜（３）のいずれか１つに記載の経口用組成物。
（５）消化器症状の予防又は治療に用いる、（１）〜（４）のいずれか１つに記載の経口用組成物。
（６）消化器症状が、胃もたれ、胸やけ、胃部・腹部膨満感又は便秘である、（５）に記載の経口用組成物。
（７）脂質異常症の予防又は治療に用いる、（１）〜（４）のいずれか１つに記載の経口用組成物。
（８）血中トリグリセリドの低下に用いる、（１）〜（４）のいずれか１つに記載の経口用組成物。
（９）活性炭及びリパーゼを含有する脂質の排出促進剤。
【発明の効果】
【００２０】
本発明の、活性炭及びリパーゼを含有する経口用組成物は、安全かつ優れた脂質の体外への排出促進効果を有することから、消化器症状の予防又は治療のみならず、脂質異常症の予防又は治療にも有用な経口用組成物となる。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】C57BL/6N Jclマウスに高脂肪食を与えた群（対照群）、薬用炭添加高脂肪食群（薬用炭群）、リパーゼ添加高脂肪食群（リパーゼ群）、薬用炭及びリパーゼ添加高脂肪食群（薬用炭＋リパーゼ群）における血中トリグリセリド(TG)濃度（単位mg/dl）を示したものである。各値はn=6の平均値を示した。
【図２】SDラットに高脂肪食を与えた群（対照群）、薬用炭添加高脂肪食群（薬用炭群）、リパーゼ添加高脂肪食群（リパーゼ群）、薬用炭及びリパーゼ添加高脂肪食群（薬用炭＋リパーゼ群）の糞中粗脂肪量（単位mg/g intake）を示したものである。各値はn=6の平均値を示した。
【図３】SDラットに高脂肪食を与えた群（対照群）、薬用炭添加高脂肪食群（薬用炭群）、リパーゼ添加高脂肪食群（リパーゼ群）、薬用炭及びリパーゼ添加高脂肪食群（薬用炭＋リパーゼ群）の糞中コレステロール量（単位mg/g intake）を示したものである。各値はn=6の平均値を示した。
【図４】SDラットに高脂肪食を与えた群（対照群）、薬用炭添加高脂肪食群（薬用炭群）、リパーゼ添加高脂肪食群（リパーゼ群）、薬用炭及びリパーゼ添加高脂肪食群（薬用炭＋リパーゼ群）の糞中遊離脂肪酸量（単位mEq/g intake）を示したものである。各値はn=6の平均値を示した。
【図５】SDラットに薬用炭を含有する0.5% メチルセルロースを投与した群（対照群）及び薬用炭＋リパーゼ配合製剤の粉砕末を0.5% メチルセルロースに懸濁して投与した群（薬用炭＋リパーゼ配合製剤群）の投与30分後の腸管輸送能を示したものである。各値はn=6の平均値を示した。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
本明細書において、「活性炭」とは、大きな比表面積と吸着能をもつ多孔質の炭素質物質を意味する。例えば、既存添加物名簿収載品目リストに食品添加物として収載されている。本発明における活性炭としては、薬用炭が好ましい。
【００２３】
本明細書において、「薬用炭」とは、活性炭であって、第１６改正日本薬局方「薬用炭」の規格を満たしているものを意味する。
【００２４】
本明細書において、「リパーゼ」とは、加水分解酵素の一つで、脂肪酸とアルコールのエステル結合を加水分解し、脂肪酸とアルコールを遊離させる酵素を意味する。例えば、既存添加物名簿収載品目リストに食品添加物として収載されている。本発明におけるリパーゼとしては、アスペルギルス属の菌が産生するリパーゼが好ましく、リパーゼＡＰ１２及びリパーゼＡＰ６がより好ましい。
【００２５】
本明細書において、「脂質」とは、タンパク質や糖質とともに生体を構成する大きな物質群であり、長鎖脂肪酸又はその誘導体及びその類似体で生体内に存在するか又は由来する物質を意味する。例えば、脂肪酸とアルコールがエステル結合したもの（例えばトリグリセリド）やその類似体（例えばコレステロールエステル）等が挙げられる。
【００２６】
本明細書において、「消化器症状」とは、一般的に胃や腸に由来する不快症状や疾患を意味する。例えば、胃もたれ、胸やけ、胃部・腹部膨満感、消化不良、食欲不振、胃痛、胃重、げっぷ、嘔吐、腹痛、便秘、軟便、胃炎、機能性ディスペプシア、又は逆流性食道炎等が挙げられる。
【００２７】
本明細書において、「脂質異常症」とは、血液中に含まれる脂質（コレステロールやトリグリセリド）が多すぎる状態にある病気をいう（厚生労働省、“脂質異常症ホームページへようこそ”、［平成24年12月25日検索］、インターネット＜URL：http://www.mhlw.go.jp/topics/bukyoku/kenkou/seikatu/kousi/index.html＞の“脂質異常症ってどんな病気？” ［平成24年12月25日検索］、インターネット＜http://www.mhlw.go.jp/topics/bukyoku/kenkou/seikatu/kousi/about.html＞）。
【００２８】
本明細書において、「トリグリセリド（ＴＧ）」とは、1分子のグリセロールに3分子の脂肪酸がエステル結合したアシルグリセロール（トリアシルグリセロール）を意味する。
本明細書において、「治療」とは、脂質の排出を促進させることにより消化器症状や脂質異常症を治癒、軽減、又は改善することを意味する。
【００２９】
本明細書において、「予防」とは、脂質の排出を促進させることにより消化器症状や脂質異常症の、疾患又は症状の発症を阻止、抑制、又は遅延することを意味する。
【００３０】
本発明の経口用組成物が投与される対象は、哺乳動物である。例えば、ヒト、マウス、ラット、モルモット、ウサギ、イヌ、ネコ、サル等が挙げられ、ヒトがより好ましい。
【００３１】
本発明の一つの態様によれば、活性炭及びリパーゼを含有する、消化器症状や脂質異常症を予防又は治療する医薬組成物が提供されるが、サプリメント乃至保健用食品であっても構わない。
【００３２】
本発明の経口用組成物は、種々の形態で投与でき、例えば、錠剤、散剤、カプセル剤、懸濁剤、乳剤、丸剤、散剤、液剤（シロップ剤を含む）、エリキシル剤等による経口投与等を挙げることができる。特に、錠剤、散剤、カプセル剤が好ましいが、本発明はこれに限定されるものではない。
【００３３】
上記の経口用組成物には、本発明の効果を損なわない限り、活性炭及びリパーゼに加えて、他の補助的な薬効成分を配合することができる。特に活性炭とリパーゼが胃腸で効率的に効果を示すために、胃腸機能を改善する生薬や消化酵素が好適である。
【００３４】
上記補助的な薬効成分を例示すると、オウゴン、オウバク、オウレン、ウコン、ケイヒ、ショウキョウ、ソウジュツ、ダイオウ、ニンジン、アロエ、アカメガシワ、ゲンノショウコ、ロートエキス、メントール、カルニチン、ウルソデオキシコール酸、でんぷん消化酵素、たん白消化酵素、繊維消化酵素、乳酸菌等の整腸生菌成分等が挙げられる。
【００３５】
本発明の経口用組成物の製剤化においては、更に、賦形剤、結合剤、崩壊剤、潤沢剤、安定剤、防腐剤、着色剤、界面活性剤、ｐＨ調節剤、矯味剤、風味剤、甘味剤、保存剤、香料等、一般に許容されている医薬品や食品添加物を配合することができる。
【００３６】
本発明の製剤は、各剤形に適した添加剤や基材を適宜使用し、例えば第１６改正日本薬局方製剤総則に記載の方法等の常法に従って製造することができる。
【００３７】
本発明の活性炭（薬用炭）の１日使用量は対象の症状、年齢、剤形等により異なるが、成人１人に対して１日当たり０．１〜２０ｇ、好適には０．４〜５ｇである。また、本発明の活性炭（薬用炭）は、通常1日当たり１〜６回に分けて服用し、好適には１日当たり１〜３回に分けて服用する。好適な組み合わせとしては、成人1日０．４〜５ｇを２〜３回に分けて服用するものである。
【００３８】
本発明のリパーゼの１日使用量は対象の症状、年齢、剤形等により異なるが、成人１人に対して１日当たり０．００１ｇ〜１ｇ、好適には０．０１〜０．２ｇである。また、本発明のリパーゼは、通常1日当たり１〜６回に分けて服用し、好適には１日当たり１〜３回に分けて服用する。好適な組み合わせとしては、成人1日０．０１〜０．２ｇを２〜３回に分けて服用するものである。
【００３９】
本発明における、活性炭（薬用炭）とリパーゼの配合割合としては、好適には活性炭（薬用炭）１重量部に対し、リパーゼ２〜０．００１重量部であり、より好適には１〜０．０１重量部である。
【００４０】
本発明の経口用組成物の投与期間は特に限定されないが、一定期間以上（例えば３日間以上、又は１４日以上の長期）の投与が有用である。
【実施例】
【００４１】
以下、実施例及び試験例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明の範囲はこれらに限定されるものではない。
【００４２】
実施例１  液剤
薬用炭０．４ｇ、リパーゼ６０ｍｇ、果糖ブドウ糖液糖１００ｇ、ｐＨ調整剤適量を混合し、精製水で全量１０００ｇの液剤をｐＨ５〜７になるように調製する。
【００４３】
実施例２  顆粒剤
薬用炭０．４ｇ、リパーゼ６０ｍｇ、乳糖３５０ｇ、結晶セルロース１２５ｇを投入・混合し、結合剤として５％ヒドロキシプロピルセルロース水溶液を噴霧し顆粒剤を調製する。
【００４４】
実施例３  錠剤
薬用炭０．４ｇ、リパーゼ６０ｍｇ、乳糖３５０ｇ、結晶セルロース１２５ｇを投入・混合し、結合剤として５％ヒドロキシプロピルセルロース水溶液を噴霧し造粒顆粒を調製する。得られた造粒顆粒４９．５ｇにステアリン酸マグネシウム０．５ｇを混合・打錠して裸錠を調製する。
【００４５】
製剤例１  顆粒剤
下記（表１）の成分を、日局製剤総則「顆粒剤」の項に順じて顆粒剤を製造する。
【００４６】
【表１】
2015017086.tif 000002
【００４７】
製剤例２  錠剤
下記（表２）の成分を、日局製剤総則「錠剤」の項に順じて錠剤を製造する。
【００４８】
【表２】
2015017086.tif 000003
【００４９】
試験例１  肥満モデルマウスの血中脂質改善
（１）被験薬
被験薬として、薬用炭は日医工製の薬用炭を、リパーゼは天野エンザイム製のリパーゼAP12を使用した。
（２）動物
5週齢のC57BL/6N Jclマウスを、日本クレアから購入した。これらのマウスは、12時間明暗サイクル（8-20時明期、20時-翌8時暗期）で室温22℃±3℃のもと、粉末飼料High-fat diet（D12451，45%Kcal+17%ショ糖負荷（Research Diets社））による予備飼育を１週間行った。
（３）投与経路及び投与期間
予備飼育終了後、粉末飼料High-fat dietのみを給餌される対照群（n=6）、粉末飼料High-fat dietに活性炭2%を添加したものを給餌される薬用炭群（n=6）、粉末飼料High-fat dietにリパーゼ2%を添加したものを給餌されるリパーゼ群（n=6）粉末飼料High-fat dietに薬用炭1%及びリパーゼ1%を添加したものを給餌される薬用炭＋リパーゼ群（n=6）の4群を設定した。調製した餌を5日間給餌した。
（４）試験試料の準備
5日間給餌した後に、12時間絶食させ、尾静脈より採血して血清を得た。採取した血清をトリグリセライドE-テストワコー（和光純薬工業株式会社）を用いてTG濃度を測定した。
（５）試験結果（血中TG濃度）
試験結果を図１に示す。図１より、薬用炭及びリパーゼをそれぞれ単独で投与した群では、TG値の有意な低下がみられなかったが、薬用炭とリパーゼの配合投与では、対照群に対し、血清中TG濃度が有意に低下することが認められた（p<0.05）。更に、薬用炭とリパーゼ配合群については薬用炭単独投与と比較しても、TG値の有意な低下が認められた（p<0.05）。このことから、薬用炭とリパーゼの配合により、顕著な血中脂質の抑制効果が発現することが判明した。
【００５０】
試験例２  肥満モデルラットの糞中脂質排泄
（１）被験薬
被験薬として、薬用炭は日医工製の薬用炭を、リパーゼは天野エンザイム製のリパーゼAP12を使用した。
（２）動物
6週齢のSlc:SDラットを、日本SLCから購入した。これらのラットは、12時間明暗サイクル（8-20時明期、20時-翌8時暗期）で室温22℃±3℃のもと、粉末飼料High-fat diet（D12451，45%Kcal+17%ショ糖負荷（Research Diets社））による予備飼育を１週間行った。
（３）投与経路及び投与期間
予備飼育終了後、粉末飼料High-fat dietのみを給餌される対照群（n=6）、粉末飼料High-fat dietに薬用炭を2%添加したものを給餌される薬用炭群（n=6）、粉末飼料High-fat dietにリパーゼを2%添加したものを給餌されるリパーゼ群（n=6）、粉末飼料High-fat dietに薬用炭2%及びリパーゼ2%を添加したものを給餌される薬用炭＋リパーゼ群（n=6）の4群を設定した。調製した餌を7日間給餌し、5日目から7日目までの糞を採取した。また、投与期間中の摂餌量を測定した。
（４）試験試料の準備
採取した糞を用いて、糞中粗脂肪重量（mg/g intake）、糞中総コレステロール量（mg/g intake）、糞中遊離脂肪酸量（mEq/g intake）を測定した。（intakeは5日目から7日目の2日間の摂餌量を示す。）
糞中の粗脂肪重量は、Van de Kamer法を用い、糞中糞中総コレステロール量は、コレステロール E-テストワコー（和光純薬工業株式会社）を用い、糞中遊離脂肪酸量は、NEFA C-テストワコー（和光純薬工業株式会社）を用いて測定した。
（５）試験結果（糞中脂質濃度）
糞中粗脂肪重量、糞中総コレステロール量及び糞中遊離脂肪酸量をそれぞれ図２、図３及び図４に示す。図２より、薬用炭及びリパーゼをそれぞれ単独で投与した群では、糞中に排出される粗脂肪重量に有意な上昇がみられなかったが、薬用炭とリパーゼの配合投与では、対照群に対し、糞中粗脂肪重量が有意に上昇することが認められた（p<0.01）。図３より、薬用炭を単独で投与した群では、糞中総コレステロール重量の上昇がみられなかったが、リパーゼ単独投与及び薬用炭とリパーゼの配合投与では、対照群に対し、糞中総コレステロール重量が有意に上昇することが認められた（リパーゼ単独投与：p＜0.05、薬用炭＋リパーゼ投与：p<0.01）。図４より、薬用炭及びリパーゼをそれぞれ単独で投与した群では、糞中遊離脂肪酸重量に有意な上昇がみられなかったが、薬用炭とリパーゼの配合投与では、対照群に対し、糞中遊離脂肪酸重量が有意に上昇することが認められた（p<0.01）。これらのことから、薬用炭とリパーゼの配合により、糞中への脂質排泄が顕著に促進されることが明らかとなった。
【００５１】
試験例３  ラット腸管輸送への影響
（１）被験薬
被験薬として、薬用炭（日医工製）、リパーゼAP12（天野エンザイム製）及びその他薬効に直接関与しない成分や添加剤を用いて実際に錠剤を試作し（製剤中の配合割合：薬用炭22%、リパーゼ2.2%）、この錠剤の粉砕末を0.5% メチルセルロースに懸濁し、溶液中の薬用炭の濃度が1%となるように調製した（薬用炭＋リパーゼ配合製剤とした）。なお、対照群には薬用炭が1% となるように懸濁した0.5% メチルセルロースを用いた。
（２）動物
5週齢のCrl:CD(SD)ラットを、日本チャールス・リバーから購入した。これらのラットは、12時間明暗サイクル（7-19時明期、19時-翌7時暗期）で室温23℃±2℃のもと、固型飼料FR-2（フナバシファーム社）による予備飼育を１週間行った。
（３）投与経路及び投与期間
予備飼育終了後、16時間絶食させ、対照群（n=6）、薬用炭＋リパーゼ配合製剤群（n=6）にそれぞれ被験薬を10mL/kg 体重 となるように経口投与した。
（４）試験試料の準備
投与30分後に、ラットをイソフルラン麻酔下で放血致死させ、腸管を摘出した。摘出した腸管の全長（cm）及び薬用炭末移動距離（cm）を測定し、腸管輸送能  [薬用炭末移動距離／腸管の全長 × 100 （％）] を算出した。
（５）試験結果（腸管輸送能）
各群の腸管輸送能を図５に示す。図５より、薬用炭を単独で投与した群に対し、薬用炭＋リパーゼ配合製剤を投与した群では腸管輸送能が有意に上昇することが明らかとなった。（p<0.05）
【図１】
2015017086.tif 000004
【図２】
2015017086.tif 000005
【図３】
2015017086.tif 000006
【図４】
2015017086.tif 000007
【図５】
2015017086.tif 000008