(57)【要約】      （修正有）【課題】容易に合成でき、シクロフィリン（ＣｙＰ）を介在した疾患の治療において有効性を示す非免疫抑制性シクロスポリン類似体分子の提供【解決手段】置換基Ｒ’、Ｒ１およびＲ２を有するオキシアルキルから成るシクロスポリンＡのアミノ酸Ｉの修飾側鎖を含むものであり、前記Ｒ’は、Ｈまたはアセチルであり、前記Ｒ１は、飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族炭素鎖であり、前記Ｒ２は、水素；非置換、Ｎ置換、若しくはＮ，Ｎ二置換アミド；Ｎ置換若しくは非置換アシル保護アミン；カルボン酸；Ｎ置換若しくは非置換アミン；ニトリル；エステル；ケトン；ヒドロキシ、ジヒドロキシ、トリヒドロキシ、若しくはポリヒドロキシアルキル；または置換若しくは非置換アリールである。【選択図】図１
2015155426.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物であって、
【化７９】
2015155426.tif 000114
式中、
ａ．Ｒ’は、Ｈまたはアセチルであり、
ｂ．Ｒ１は、炭素原子数２〜１５の長さの飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族炭素鎖であり、および、
ｃ．Ｒ２は、
ｉ．Ｎ−置換、またはＮ，Ｎ−二置換アミド、または
ｉｉ．Ｎ−置換、またはＮ，Ｎ−二置換アミンであり、
前記Ｎ−置換、またはＮ，Ｎ−二置換アミドおよび前記Ｎ−置換、またはＮ，Ｎ−二置換アミンは、
ａ）置換または非置換アルキル、アルケニル、またはアルキニル、
ｂ）ホルミル、
ｃ）置換または非置換アシル、
ｄ）アルキルスルホニル、または
ｅ）置換または非置換アリール
で置換されるものである、化合物。
【請求項２】
請求項１記載の化合物において、
ａ．前記置換または非置換アルキル、アルケニル、またはアルキニルは、炭素数２〜１５の長さであり、
ｂ．前記置換または非置換アシルは、炭素数１〜１０の長さの飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族炭素鎖であり、
ｃ．前記アルキルスルホニルは、炭素数１〜４の長さであり、および
ｄ．前記置換または非置換アリールは単環式または縮合多環式である、
化合物。
【請求項３】
請求項２記載の化合物において、前記置換または非置換アシルは、炭素数１〜７の長さの飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族炭素鎖である、化合物。
【請求項４】
請求項２記載の化合物において、前記置換または非置換アシルは、炭素数２〜４の長さの飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族炭素鎖である、化合物。
【請求項５】
請求項２記載の化合物において、前記置換または非置換アルキルＮ−置換またはＮ，Ｎ−二置換アミドは、炭素数１〜７の長さである、化合物。
【請求項６】
請求項２記載の化合物において、前記Ｎ，Ｎ−二置換アミドは窒素複素環式リングを形成するものである、化合物。
【請求項７】
請求項６記載の化合物において、前記窒素複素環式リングはＯまたはＳを有するものである、化合物。
【請求項８】
請求項１〜５いずれか１つに記載の化合物において、前記置換アルキル、アルケニル、またはアルキニル、前記置換アシル、および前記置換アリールは、
ａ．ハロゲン、
ｂ．ニトロ、
ｃ．シアノ、
ｄ．ヒドロキシ、
ｅ．チオール、
ｆ．選択的に置換されたアミノ、
ｇ．選択的にハロゲン化されたＣ１〜４アルコキシ、
ｈ．選択的にハロゲン化されたＣ１〜４アルコキシ−Ｃ１〜４アルコキシ、
ｉ．ホルミル、
ｊ．Ｃ２〜４アルカノイル、
ｋ．Ｃ１〜４アルキルスルホニル、
ｌ．またはそれらの組合せ
から選択される置換基で置換されるものである、化合物。
【請求項９】
請求項８記載の化合物において、前記置換アルキル、アルケニル、またはアルキニル、前記置換アシル、および前記置換アリールは、１〜３の置換基で置換されるものである、化合物。
【請求項１０】
請求項８または９記載の化合物において、
ａ．前記ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素であり、
ｂ．前記チオールは、Ｃ１〜４アルキルチオであり、
ｃ．前記アミノは、モノ−Ｃ１〜４アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノ、または５〜６員環式アミノであり、
ｄ．前記Ｃ２〜４アルカノイルは、アセチルまたはプロピオニルであり、
ｅ．前記Ｃ１〜４アルコキシは、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、またはブトキシであり、
ｆ．前記Ｃ１〜４アルコキシ−Ｃ１〜４アルコキシは、メトキシメトキシ、メトキシエトキシ、またはエトキシエトキシであり、
ｇ．前記Ｃ１〜４アルキルスルホニルは、メタンスルホニルまたはエタンスルホニルである、
化合物。
【請求項１１】
請求項８または９記載の化合物において、
ａ．前記ハロゲン化されたＣ１〜４アルコキシはトリフルオロメトキシ、またはトリフルオロエトキシであり、および、
ｂ．前記ハロゲン化されたＣ１〜４アルコキシ−Ｃ１〜４アルコキシはトリフルオロメトキシエトキシ、またはトリフルオロエトキシエトキシである、
化合物。
【請求項１２】
請求項１０記載の化合物において、前記５〜６員環式アミノはテトラヒドロピロール、ピペラジン、ピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、ピロール、またはイミダゾールである、化合物。
【請求項１３】
請求項１記載の化合物において、
ａ．前記置換または非置換アシルはアセチル、プロピオニル、ブチリル、またはイソブチリルであり、
ｂ．前記アルキルスルホニルはメタンスルホニル、またはエタンスルホニルであり、および、
ｃ．前記置換または非置換アリールは、フェニル、ナフチル、アントリル、フェナントリル、またはアセナフチレニルである、
化合物。
【請求項１４】
請求項１３記載の化合物において、前記置換アリールは、
ａ．低級アルコキシ、
ｂ．ハロゲン、
ｃ．低級アルキル、アルケニル、またはアルキニル、
ｄ．選択的に置換されたアミノ、
ｅ．選択的に置換されたヒドロキシル、
ｆ．シアノ、
ｇ．選択的に置換されたアミジノ、
ｈ．カルボキシル、
ｉ．低級アルコキシカルボニル、または、
ｊ．選択的に置換されたカルバモイル、
で置換されるものである、化合物。
【請求項１５】
請求項１４記載の化合物において、
ａ．前記低級アルコキシはメトキシ、エトキシ、またはプロポキシのようなＣ１〜６アルコキシであり、
ｂ．前記ハロゲンはフッ素、塩素、臭素、またはヨウ素であり、
ｃ．前記低級アルキルは、メチル、エチルまたはプロピルのようなＣ１〜６アルキルであり、
ｄ．前記低級アルケニルは、ビニルまたはアリルのようなＣ２〜６アルケニルであり、
ｅ．前記低級アルキニルは、エチニルまたはプロパルギルのようなＣ２〜６アルキニルであり、
ｆ．前記低級アルコキシカルボニルは、メトキシカルボニルまたはエトキシカルボニルのようなＣ１〜６アルコキシカルボニルであり、および、
ｇ．前記置換されたカルバモイルは、Ｃ１〜６アルキルまたはアシルで置換されたものである、
化合物。
【請求項１６】
Ｒ’がＨである、請求項１〜１５のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項１７】
請求項１記載の化合物において、Ｒ２がＮ−置換アシルアミンである場合、Ｒ１−Ｒ２は炭素原子数４〜８の長さの連続する炭素鎖を有するものである、化合物。
【請求項１８】
請求項１記載の化合物において、Ｒ２はＣ２〜１５アルキルで置換されたヒドロキシで置換されたＮ−置換アミドである、化合物。
【請求項１９】
請求項１〜１８のいずれか１つに記載の化合物の治療的有効量と、１つ以上の医薬賦形剤とを有する医薬組成物。
【請求項２０】
シクロフィリン介在性疾患または傷害を治療するための請求項１〜１８のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項２１】
請求項２０記載の化合物において、前記疾患は、シクロフィリンの過剰発現によって介在されるものである、化合物。
【請求項２２】
請求項２０記載の化合物において、前記疾患は、シクロフィリンの先天性過剰発現である、化合物。
【請求項２３】
請求項２０記載の化合物において、前記シクロフィリン介在性疾患は、
ａ．ウイルス感染症、
ｂ．炎症性疾患、
ｃ．癌、
ｄ．筋肉変性障害、
ｅ．神経変性障害、および
ｆ．細胞内カルシウム恒常性の喪失に関連した傷害
から成る群から選択されるものである、化合物。
【請求項２４】
請求項２３記載の化合物において、前記ウイルス感染症は、ヒト免疫不全ウイルス、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、およびＥ型肝炎から成る群から選択されるウイルスによって引き起こされるものである、化合物。
【請求項２５】
請求項２３記載の化合物において、前記炎症性疾患は、喘息、自己免疫疾患、慢性炎症、慢性前立腺炎、糸球体腎炎、過敏性疾患、炎症性腸疾患、敗血症、血管平滑筋細胞疾患、動脈瘤、骨盤内感染症、再灌流傷害、関節リウマチ、移植拒絶反応、および脈管炎から成る群から選択されるものである、化合物。
【請求項２６】
請求項２３記載の化合物において、前記癌は、小および非小細胞肺癌、膀胱癌、肝細胞癌、膵臓癌、および乳癌から成る群から選択されるものである、化合物。
【請求項２７】
請求項２３記載の化合物において、前記筋肉変性障害は、心筋再灌流傷害、筋ジストロフィー、およびＶＩ型コラーゲンミオパチーから成る群から選択されるものである、化合物。
【請求項２８】
請求項２３記載の化合物において、前記神経変性障害は、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、多系統委縮症、多発性硬化症、脳性麻痺、発作、糖尿病性神経障害、筋委縮性側索硬化症（ルー・ゲーリッグ病）、脊髄損傷、および脳損傷から成る群から選択されるものである、化合物。
【請求項２９】
請求項２３記載の化合物において、前記細胞内カルシウム恒常性の喪失に関連した傷害は、心筋梗塞、発作、急性肝毒性、胆汁うっ滞、および移植臓器の保存／再灌流傷害から成る群から選択されるものである、化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００８年７月３０日付で出願された米国特許出願第６１／１３７，５２２号、および２００８年７月３１日付で出願された米国特許出願第６１／０８４，９９９号に対して優先権を主張するものであり、前記出願は、これらの参照により本明細書に全面的に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、シクロスポリン族に属する分子、具体的にはシクロスポリンＡ（Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ  Ａ：ＣｓＡ）の新規類似体であって、免疫抑制活性が低減されたまたは免疫抑制活性を有さないシクロフィリン（ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ：ＣｙＰ）に結合する新規類似体に関する。
【背景技術】
【０００３】
シクロスポリンは、強力な免疫抑制活性を有する環状ポリペプチド類に属する。例えばシクロスポリンＡ（Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ  Ａ：ＣｓＡ）などのこれらの化合物の少なくとも一部は、トリポクラジウム・インフラタム（Ｔｏｌｙｐｏｃｌａｄｉｕｍ  ｉｎｆｌａｔｕｍ）種によって二次代謝産物として生産される。ＣｓＡは、例えば同種移植片拒絶反応、遅延型過敏症、実験的アレルギー性脳脊髄炎、フロイントアジュバント関節炎、および移植片体宿主病などの体液性免疫および細胞媒介免疫反応を抑制することが立証されている強力な免疫抑制剤であり、臓器移植における臓器拒絶反応の予防、関節リウマチの治療、および乾癬の治療に使用される。
【０００４】
多数のシクロスポリン族化合物が公知であるが、おそらくＣｓＡが最も広く医療用に使用されている。ＣｓＡの免疫抑制効果は、Ｔ細胞を介在した活性化事象の阻害に関連する。免疫抑制は、シクロスポリンがシクロフィリン（ＣｙＰ）と呼ばれるユビキタス細胞内タンパク質に結合することによって達成される。この複合体は、その結果、酵素カルシニューリンのカルシウムおよびカルモジュリン依存性セリン−トレオニンホスファターゼ活性を阻害する。カルシニューリンを阻害することにより、Ｔ細胞を活性化している間、サイトカイン遺伝子（ＩＬ−２、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−４、およびＧＭ−ＣＳＦ）の誘導に必要なＮＦＡＴｐ／ｃおよびＮＦ−κＢなどの転写因子の活性化を阻止する。
【０００５】
シクロスポリンの最初の発見以来、多種多様な天然に存在するシクロスポリンが単離され、同定されてきた。さらに、天然に存在しない多くのシクロスポリンが、部分または全合成手段および修飾細胞培養技術の適用によって調製されてきた。従って、シクロスポリンを含む種類はかなりあり、例えば、天然に存在するシクロスポリンＡからＺ、天然に存在しない様々なシクロスポリン誘導体、ジヒドロおよびイソシクロスポリンを含む人工若しくは合成シクロスポリン、誘導体化されたシクロスポリン（例えば、ＭｅＢｍｔ残基の３’−Ｏ−原子をアシル化することもでき、またはさらなる置換基をサルコシル残基の３位に導入することもできる）、ＭｅＢｍｔ残基が異性体形態で存在するシクロスポリン（例えば、ＭｅＢｍｔ残基の位置６’と７’の立体配置がトランスではなくシスであるもの）、および変異アミノ酸がそのペプチド配列内の特定の位置に組み込まれているシクロスポリンを含む。
【０００６】
１位に修飾アミノ酸を含有するシクロスポリン類似体は、ＷＯ９９／１８１２０およびＷＯ０３／０３３５２７に開示されており、これらの開示は、この参照によりそれら全体が本明細書に組み込まれる。これらの出願には、「ＩＳＡＴＸ２４７」または「ＩＳＡ２４７」または「ＩＳＡ」として公知のシクロスポリン誘導体が記載されている。この類似体は、アミノ酸−１残基における修飾を除き、ＣｓＡと構造的に同一である。本出願人は、主としてトランスＩＳＡ２４７から成る混合物を含む、ＩＳＡ２４７のシス異性体とトランス異性体の特定の混合物が、天然に存在し、現在周知のシクロスポリンより強化された免疫抑制効果と低減された毒性との組み合わせを示すことを以前に発見した。
【０００７】
シクロスポリンは、カルシニューリンと、ＣｙＰ異性体（これらに限定されるものではないが、ＣｙＰ−Ａ、ＣｙＰ−Ｂ、およびＣｙＰ−Ｄを含む）と、Ｐ−糖タンパク質（ＰｇＰ）の３つの確立した細胞ターゲットを有する。シクロスポリンのカルシニューリンに対する結合により顕著な免疫抑制がもたらされ、当該結合は移植と自己免疫適応症との従来の関連性に関与する。
【０００８】
シクロフィリンファミリー
ＣｙＰｓ（酵素番号（Ｅｎｚｙｍｅ  Ｃｏｍｍｉｓｉｏｎ（ＥＣ）ｎｕｍｂｅｒ）５．１．２．８）は、ペプチジル−プロリル  シス−トランスイソメラーゼ活性を有するタンパク質の１群に属し、そのようなタンパク質は、集合的にイムノフィリンとして知られており、ＦＫ−５０６結合タンパク質およびパルブリンも含む。ＣｙＰｓは、原核生物と真核生物の両方の研究されているすべての生物のすべての細胞において見られ、進化を通して構造的に保存されている。ヒトには７つの主要ＣｙＰｓ、すなわちＣｙＰ−Ａ、ＣｙＰ−Ｂ、ＣｙＰ−Ｃ、ＣｙＰ−Ｄ、ＣｙＰ−Ｅ、ＣｙＰ−４０、およびＣｙＰ−ＮＫ（ヒト天然キラー細胞から最初に同定されたもの）と、全部で１６の特有のタンパク質がある（Ｇａｌａｔ  Ａ．Ｐｅｐｔｉｄｙｌｐｒｏｌｙｌ  ｃｉｓ／ｔｒａｎｓ  ｉｓｏｍｅｒａｓｅｓ（ｉｍｍｕｎｏｐｈｉｌｉｎｓ）：ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ−ｔａｒｇｅｔｓ−ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ．Ｃｕｒｒ  Ｔｏｐ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  ２００３，３：１３１５−１３４７；Ｗａｌｄｍｅｉｅｒ  ＰＣ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  Ｄ  ａｓ  ａ  ｄｒｕｇ  ｔａｒｇｅｔ．Ｃｕｒｒ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  ２００３，１０：１４８５−１５０６）。
【０００９】
哺乳動物において同定されたＣｙＰｓの最初のメンバーはＣｙＰ−Ａであった。ＣｙＰ−Ａは１８−ｋＤａサイトゾルタンパク質であり、ＣｓＡ結合のための最も豊富に存在するタンパク質である。ＣｙＰ−Ａは、全サイトゾルタンパク質の０．６％を構成すると推定される（Ｍｉｋｏｌ  Ｖ  ｅｔ  ａｌ．Ｘ−ｒａｙ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ｍｏｎｍｅｒｉｃ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  Ａ−ｃｙｃｌｏｐｏｒｉｎ  Ａ  ｃｒｙｓｔａｌ  ｃｏｍｐｌｅｘ  ａｔ  ２．１  Ａ  ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９９３，２３４：１１１９−１１３０；Ｇａｌａｔ  Ａ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｅｔｃａｌｆｅ  ＳＭ．Ｐｅｐｔｉｄｙｌｐｒｏｌｉｎｅ  ｃｉｓ／ｔｒａｎｓ  ｉｓｏｍｅｒａｓｅｓ．Ｐｒｏｇ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９９５，６３：６７−１１８）。
【００１０】
シクロフィリンの細胞内位置
ＣｙＰｓは、殆どの組織の殆どの細胞区画において見られ、特有の機能をコードする。哺乳動物において、ＣｙＰ−ＡおよびＣｙＰ−４０はサイトゾル性であるのに対して、ＣｙＰ−ＢおよびＣｙＰ−Ｃは、小胞体タンパク質分泌経路にそれらをターゲッティングするアミノ末端シグナル配列を有する（Ｇａｌａｔ，２００３；Ｄｏｒｎａｎ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎｏｐｈｉｌｉｎｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｌｉｇａｎｄ  ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ．Ｃｕｒｒ  Ｔｏｐ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  ２００３，３：１３９２−１４０９に概説されている）。ＣｙＰ−Ｄは、それをミトコンドリアに方向づけるシグナル配列を有し（Ａｎｄｒｅｅｖａ，１９９９；Ｈａｍｉｌｔｏｎ  ＧＳ  ｅｔ  ａｌ．Ｉｍｍｕｎｏｐｈｉｌｉｎｓ：ｂｅｙｏｎｄ  ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  １９９８，４１：５１１９−５１４３）、ＣｙＰ−Ｅは、アミノ末端ＲＮＡ結合ドメインを有し、核内に位置し（Ｍｉ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ．Ａ  ｎｕｃｌｅａｒ  ＲＮＡ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ  １９９６，３９８：２０１−２０５）、ならびにＣｙＰ−４０は、ＴＰＲｓを有し、サイトゾル内に位置する（Ｋｉｅｆｆｅｒ  ＬＪ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ−４０，ａ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｗｉｔｈ  ｈｏｍｏｌｏｇｙ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｐ５９  ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｓｔｅｒｏｉｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｃｏｍｐｌｅｘ．Ｃｌｏｎｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｃＤＮＡ  ａｎｄ  ｆｕｒｔｈｅｒ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  １９９３，２６８：１２３０３−１２３１０）。ヒトＣｙＰ−ＮＫは、最も大きいＣｙＰであり、正電荷を有する親水性の大きなカルボキシル末端を有し、サイトゾル内に位置する（Ａｎｄｅｒｓｏｎ  ＳＫ  ｅｔ  ａｌ．Ａ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎｖｏｌｖｅｄ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎａｔｕｒａｌ  ｋｉｌｌｅｒ  ｃｅｌｌｓ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  １９９３，９０：５４２−５４６；Ｒｉｎｆｒｅｔ  Ａ  ｅｔ  ａｌ．Ｔｈｅ  Ｎ−ｔｅｒｍｉｎａｌ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ−ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ  ｄｏｍａｉｎ  ｏｆ  ａ  １５０−ｋｉｌｏｄａｌｔｏｎ  ｔｕｍｏｒ  ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ｅｘｈｉｂｉｔｓ  ｂｏｔｈ  ｐｅｐｔｉｄｙｌｐｒｏｌｙｌ  ｃｉｓ−ｔｒａｎｓｉｓｏｍｅｒａｓｅ  ａｎｄ  ｃｈａｐｅｒｏｎｅ  ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９９４，３３：１６６８−１６７３）。
【００１１】
シクロフィリンの機能および活性
ＣｙＰｓは、多くの細胞プロセスに関与する多機能タンパク質である。ＣｙＰｓは、進化を通して高度に保存されているため、これは、ＣｙＰｓについての本質的役割を示唆している。初めに、ＣｙＰｓは、ペプチジル−プロリル結合のシス−トランス異性体化を触媒するという特異的酵素特性を有する（Ｇａｌａｔ，１９９５；Ｆｉｓｈｅｒ  ＧＡ，Ｈａｌｓｅｙ  Ｊ，Ｈａｕｓｆｏｒｆｆ  Ｊ，ｅｔ  ａｌ．Ａ  ｐｈａｓｅ  Ｉ  ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ（ｔａｘｏｌ）（Ｔ）ｉｎ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ＳＤＺ  ｖａｌｓｐｏｄａｒ，ａ  ｐｏｔｅｎｔ  ｍｏｄｕｌａｔｏｒ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ（ＭＤＲ）．Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇｓ．１９９４；５（Ｓｕｐｐｌ  １）：４３）。従って、ＣｙＰｓは、ペプチジル−プロリル−シス−トランスイソメラーゼ（ｐｅｐｔｉｄｙｌ−ｐｒｏｌｙｌ−ｃｉｓ−ｔｒａｎｓ  ｉｓｏｍｅｒａｓｅ：ＰＰｌａｓｅ）と呼ばれ、新たに合成されるタンパク質の正しいフォールディングの促進因子として作用することができるものであり、ＰＰｌａｓｅｓは、熱応力、紫外線照射、細胞環境のｐＨの変化、および酸化剤での処理のために損傷したタンパク質の修復にも関与する。この機能は、分子シャペロニング活性として周知である（Ｙａｏ  Ｑ  ｅｔ  ａｌ．Ｒｏｌｅｓ  ｏｆ  Ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎｓ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒｓ  ａｎｄ  Ｏｔｈｅｒ  Ｏｒｇａｎｓ  Ｓｙｓｔｅｍｓ．Ｗｏｒｌｄ  Ｊ．Ｓｕｒｇ．２００５，２９：２７６−２８０）。
【００１２】
さらに、ＣｙＰｓのＰＰｌａｓｅ活性は、細胞内タンパク質輸送（Ａｎｄｒｅｅｖａ  Ｌ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｐｏｓｓｉｂｌｅ  ｒｏｌｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｓｔｒｅｓｓ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ．Ｉｎｔ  Ｊ  Ｅｘｐ  Ｐａｔｈｏｌ  １９９９，８０：３０５−３１５，Ｃａｒｏｎｉ  Ｐ  ｅｔ  ａｌ．Ｎｅｗ  ｍｅｍｂｅｒ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  ｆａｍｉｌｙ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  ｓｅｃｒｅｔｏｒｙ  ｐａｔｈｗａｙ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  １９９１，２６６：１０７３９−４２）、ミトコンドリア機能（Ｈａｌｅｓｔｒａｐ  ＡＰ  ｅｔ  ａｌ．ＣｓＡ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｔｏ  ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ｔｈｅ  ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ  ｐｏｒｅ  ａｎｄ  ｐｒｏｔｅｃｔｓ  ｈｅａｒｔｓ  ｆｒｏｍ  ｉｓｃｈａｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  ｉｎｊｕｒｙ．Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  １９９７，１７４：１６７−７２；Ｃｏｎｎｅｒｎ  ＣＰ，Ｈａｌｅｓｔｒａｐ  ＡＰ．Ｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ  ｉｎｎｅｒ  ｍｅｍｂｒａｎｅ  ｕｎｄｅｒ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  ｓｔｒｅｓｓ  ｔｈａｔ  ｅｎｈａｎｃｅ  ｔｈｅ  ｏｐｅｎｉｎｇ  ｏｆ  ａ  ｃａｌｃｉｕｍ−ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  ｎｏｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｃｈａｎｎｅｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ  １９９４，３０２：３２１−４）、ｍＲＮＡ前駆体処理（Ｂｏｕｒｑｕｉｎ  ＪＰ  ｅｔ  ａｌ．Ａ  ｓｅｒｉｎｅ／ａｒｇｉｎｉｎｅｒｉｃｈ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｍａｔｒｉｘ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  ｉｎｔｅｒａｃｔｓ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  Ｃｔｅｒｍｉｎａｌ  ｄｏｍａｉｎ  ｏｆ  ＲＮＡ  ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  ＩＩ．Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ  １９９７，２５：２０５５−６１）、および多タンパク質複合体安定性の維持（Ａｎｄｒｅｅｖａ，１９９９）を含む、多様な細胞プロセスに関与することが最近証明された。
【００１３】
シクロスポリンは、疎水性ポケット内での接触によりＣｙＰ−Ａにナノモルの親和性で結合し（Ｃｏｌｇａｎ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  Ａ−Ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ  Ｍｉｃｅ  Ａｒｅ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｔｏ  Ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｂｙ  Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ．Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ２００５，１７４：６０３０−６０３８，Ｍｉｋｏｌ，１９９３）、ＰＰｌａｓｅ活性を阻害する。しかし、この効果は、免疫抑制には不適切であると考えられる。むしろ、ＣｓＡとＣｙＰ−Ａ間の複合体は、カルシニューリンに結合してカルシニューリンにサイトカイン遺伝子転写を調節させない複合面を生じさせる（Ｆｒｉｅｄｍａｎ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．Ｔｗｏ  ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ  ｃａｎｄｉｄａｔｅｓ  ｆｏｒ  ｉｍｍｕｎｏｐｈｉｌｉｎ  ａｃｔｉｏｎ  ａｒｅ  ｒｅｖｅａｌｅｄ  ｂｙ  ａｆｆｉｎｉｔｙ  ｆｏｒ  ａ  ｎｅｗ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ：ｏｎｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｐｒｅｓｅｎｃｅ  ａｎｄ  ｏｎｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ａｂｓｅｎｃｅ  ｏｆ  ＣｓＡ．Ｃｅｌｌ  １９９１，６６：７９９−８０６；Ｌｉｕ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．Ｃａｌｃｉｎｅｕｒｉｎ  ｉｓ  ａ  ｃｏｍｍｏｎ  ｔａｒｇｅｔ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ−ＣｓＡ  ａｎｄ  ＦＫＢＰ−ＦＫ５０６  ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ．Ｃｅｌｌ  １９９１，６６：８０７−８１５）。
【００１４】
シクロフィリンの相同性
ＣｙＰ−Ａ、このファミリーの原型メンバーは、哺乳動物細胞において高度に保存されているタンパク質である（Ｈａｎｄｓｃｈｕｍａｃｈｅｒ  ＲＥ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ：ａ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｃｙｔｏｓｏｌｉｃ  ｂｉｎｄｉｎｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｆｏｒ  ＣｓＡ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９８４，２２６：５４４−７）。ヒトＣｙＰ−Ａの配列相同性分析は、それがヒトＣｙＰ−Ｂ、ＣｙＰ−Ｃ、およびＣｙＰ−Ｄに対して高相同性であることを示す（Ｈａｒｄｉｎｇ  ＭＷ，Ｈａｎｄｓｃｈｕｍａｃｈｅｒ  ＲＥ，Ｓｐｅｉｃｈｅｒ  ＤＷ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  １９８６，２６１：８５４７−５５）。すべてのＣｙＰｓのシクロスポリン結合ポケットが、約１０９アミノ酸の高保存領域によって構成されている。公知ＣｙＰｓのうち、ＣｙＰ−Ｄは、ＣｙＰ−Ａに対して最も高い相同性を有する。実際、この領域でのＣｙＰ−ＡとＣｙＰ−Ｄ間の配列同一性は１００％である（Ｗａｌｄｍｅｉｅｒ  ２００３；Ｋｒｉｓｔａｌ  ＢＳ  ｅｔ  ａｌ．Ｔｈｅ  Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ  Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  Ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ  ａｓ  ａ  Ｔａｒｇｅｔ  ｆｏｒ  Ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｅｎｅｒｇｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｍｅｍｂｒａｎｅｓ  ２００４，３６（４）；３０９−３１２）。従って、ＣｙＰ−Ａ親和性はＣｙＰ−Ｄ親和性の非常によい予測因子であり、逆にＣｙＰ−Ｄの親和性はＣｙＰ−Ａ親和性の非常によい予測因子である（Ｈａｎｓｓｏｎ  ＭＪ  ｅｔ  ａｌ．Ｔｈｅ  Ｎｏｎｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ  ａｎａｌｏｇｕｅｓ  ＮＩＭ８１１  ａｎｄ  ＵＮＩＬ０２５  Ｄｉｓｐｌａｙ  Ｎａｎｏｍｏｌａｒ  Ｐｏｔｅｎｃｉｅｓ  ｏｎ  Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  Ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｂｒａｉｎ−Ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｅｎｅｒｇｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｍｅｍｂｒａｎｅｓ，２００４，３６（４）：４０７−４１３）。この関係は、シクロスポリン類似体で実験により重ね重ね証明されている（Ｈａｎｓｓｏｎ，２００４；Ｐｔａｋ  Ｒｇ  ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｖｉｒｕｓ  Ｔｙｐｅ  １  Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  Ｄｅｂｉｏ−０２５，ａ  Ｎｏｖｅｌ  Ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  Ｂｉｎｄｉｎｇ  Ａｇｅｎｔ＿Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ２００８：１３０２−１３１７；Ｍｉｌｌａｙ  ＤＰ  ｅｔ  ａｌ．Ｇｅｎｅｔｉｃ  ａｎｄ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ  ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ  ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ  ｍｕｓｃｕｌａｒ  ｄｙｓｔｒｏｐｈｙ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ２００８，１４（４）：４４２−４４７；Ｈａｒｒｉｓ  Ｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｔｈｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｎｏｖｅｌ  Ｎｏｎ−Ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ  Ｅｔｈｅｒｓ  ａｎ���  Ｔｈｉｏｅｔｈｅｒｓ  Ｗｉｔｈ  Ｐｏｔｅｎｔ  ＨＣＶ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｐｏｓｔｅｒ  ＃  １９１５，５９ｔｈ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ（ＡＡＳＬＤ），２００８）。ＣｙＰｓ全体にわたる配列相同性は、すべてのＣｙＰｓがシクロスポリン類似体のターゲットになる可能性があることを示唆している。ＣｙＰｓが関与する多数の細胞プロセスのため、これは、ＣｙＰへの有意な結合を保持するＣｓＡ類似体が多くの疾病徴候の治療に有用であるはずであることを、さらに示唆している。
【００１５】
シクロスポリン媒介疾患
ヒト免疫不全ウイルス（Ｈｕｍａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｖｉｒｕｓ：ＨＩＶ）：
ＨＩＶは、レトロウイルスファミリーのレンチウイルスであり、ならびに一定のウイルスの感染および複製プロセスへのＣｙＰの関与の一例として役立つ。ＣｙＰ−Ａは、抗ＨＩＶ化学療法において有効なターゲットであることが、１０年以上前に確証された（Ｒｏｓｅｎｗｉｒｔｈ  ＢＡ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  Ａ  ａｓ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｔａｒｇｅｔ  ｉｎ  ａｎｔｉ−ＨＩＶ−１  ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．Ｉｎｔ．Ａｎｔｉｖｉｒ．Ｎｅｗｓ  １９９５，３：６２−６３）。ＣｙＰ−Ａは、ＨＩＶ−１複製サイクルの早期において欠くことのできない機能を果たす。それは、ＨＩＶ−１  Ｇａｇポリプロテインに特異的に結合することが判明した（Ｌｕｂａｎ  ＪＫＬ  ｅｔ  ａｌ．Ｈｕｍａｎ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ  ｔｙｐｅ  １  Ｇａｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｂｉｎｄｓ  ｔｏ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎｓ  Ａ  ａｎｄ  Ｂ．Ｃｅｌｌ  １９９３，７３：１０６７−１０７８）。カプシドタンパク質ｐ２４（ＣＡ）のＧ８９およびＰ９０あたりの被定義アミノ酸配列がＣｙＰ−Ａに対する結合部位として同定された（Ｂｕｋｏｖｓｋｙ  ＡＡＡ  ｅｔ  ａｌ．Ｔｒａｎｓｆｅｒ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＨＩＶ−１  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｓｉｔｅ  ｔｏ  ｓｉｍｉａｎ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ  ｆｒｏｍ  Ｍａｃａｃａ  ｍｕｌａｔｔａ  ｃａｎ  ｃｏｎｆｅｒ  ｂｏｔｈ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  ａｎｄ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ  ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １９９７，９４：１０９４３−１０９４８；Ｇａｍｂｌｅ  ＴＲＦ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｒｙｓｔａｌ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  Ａ  ｂｏｕｎｄ  ｔｏ  ｔｈｅ  ａｍｉｎｏ−ｔｅｒｍｉｎａｌ  ｄｏｍａｉｎ  ｏｆ  ＨＩＶ−１  ｃａｐｓｉｄ．Ｃｅｌｌ  １９９６，８７：１２８５−１２９４）。ＣＡに対するＣｙＰ−Ａの親和性は、組み立て中のビリオン粒子へのＣｙＰ−Ａの組み込みを促進する（Ｔｈａｌｉ  ＭＡ  ｅｔ  ａｌ．Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  Ａ  ｗｉｔｈ  ＨＩＶ−１  ｖｉｒｉｏｎｓ．Ｎａｔｕｒｅ  １９９４，３７２：３６３−３６５）。実験に基づく証拠は、ＣｙＰ−Ａ−ＣＡ相互作用がＨＩＶ−１複製にとって不可欠であることを示しており；この相互作用の阻害は、ヒト細胞におけるＨＩＶ−１複製を害する（Ｈａｔｚｉｉｏａｎｎｏｕ  ＴＤ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ｗｉｔｈ  ｉｎｃｏｍｉｎｇ  ｈｕｍａｎ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ  ｔｙｐｅ  １  ｃａｐｓｉｄｓ  ｗｉｔｈ  ｏｐｐｏｓｉｎｇ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｎ  ｉｎｆｅｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｃｅｌｌｓ．Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．２００５，７９：１７６−１８３；Ｓｔｅｉｎｋａｓｓｅｒｅｒ  ＡＲ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｏｄｅ  ｏｆ  ａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ＳＤＺ  ＮＩＭ  ８１１，ａ  ｎｏｎｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  ＣｓＡ  ａｎａｌｏｇ  ｗｉｔｈ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｇａｉｎｓｔ  ｈｕｍａｎ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ  ｔｙｐｅ  １（ＨＩＶ−���）：ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ  ｗｉｔｈ  ｅａｒｌｙ  ａｎｄ  ｌａｔｅ  ｅｖｅｎｔｓ  ｉｎ  ＨＩＶ−１  ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ．Ｊ．Ｖｉｒｏｌ  １９９５，６９：８１４−８２４）。ＣｙＰ−Ａが関与するウイルス複製サイクルにおける段階は、ウイルス粒子の侵入後、および細胞ゲノムへの二本鎖ウイルスＤＮＡの組み込み前の事象であることが立証された（Ｂｒａａｔｅｎ  ＤＥＫ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  Ａ  ｉｓ  ｒｅｑｕｉｒｅｄ  ｆｏｒ  ａｎ  ｅａｒｌｙ  ｓｔｅｐ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｌｉｆｅ  ｃｙｃｌｅ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ  ｔｙｐｅ  １  ｂｅｆｏｒｅ  ｔｈｅ  ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒｅｖｅｒｓｅ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ．Ｊ．Ｖｉｒｏｌ  １９９６  ７０：３５５１−３５６０；Ｍｌｙｎａｒ  ＥＤ  ｅｔ  ａｌ．Ｔｈｅ  ｎｏｎ−ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  ＣｓＡ  ａｎａｌｏｇｕｅ  ＳＤＺ  ＮＩＭ  ８１１  ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  Ａ  ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ  ｉｎｔｏ  ｖｉｒｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｖｉｒｕｓ  ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ  ｔｙｐｅ  １−ｉｎｆｅｃｔｅｄ  ｐｒｉｍａｒｙ  ａｎｄ  ｇｒｏｗｔｈ−ａｒｒｅｓｔｅｄ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ．Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ  １９９６，７８：８２５−８３５；Ｓｔｅｉｎｋａｓｓｅｒｅｒ，１９９５）。ＣｓＡの抗ＨＩＶ−１活性は、１９９８年に初めて報告された（Ｗａｉｎｂｅｒｇ  ＭＡ  ｅｔ  ａｌ．Ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ＣｓＡ  ｏｎ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ｈｕｍａｎ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ  ｔｙｐｅ  １．Ｂｌｏｏｄ  １９９８，７２：１９０４−１９１０）。ＨＩＶ−１複製の阻害についてのＣｓＡおよび多くの誘導体の評価は、非免疫抑制性ＣｓＡ類似体が、免疫抑制性類似体のものに等しいまたは免疫抑制性類似体のものより優れていることさえある抗ＨＩＶ−１活性を有することを明らかにした（Ｂａｒｔｚ  ＳＲＥ  ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ  ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｎｏｎｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  ａｎａｌｏｇｓ  ｏｆ  ＣｓＡ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １９９５，９２：５３８１−５３８５；Ｂｉｌｌｉｃｈ  ＡＦ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｏｄｅ  ｏｆ  ａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ＳＤＺ  ＮＩＭ  ８１１，ａ  ｎｏｎｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  ＣｓＡ  ａｎａｌｏｇ  ｗｉｔｈ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｇａｉｎｓｔ  ｈｕｍａｎ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ（ＨＩＶ）ｔｙｐｅ  １：ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ  ｗｉｔｈ  ＨＩＶ  ｐｒｏｔｅｉｎ−ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  Ａ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ．Ｊ．Ｖｉｒｏｌ  １９９５，６９：２４５１−２４６１；Ｐｔａｋ，２００８）。
【００１６】
炎症
疾患における炎症は、感染領域への白血球（Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ）（白血球（ｗｈｉｔｅ  ｂｌｏｏｄ  ｃｅｌｌｓ））の内向き流束を伴う。白血球は、ケモカイン、化学誘因物質の１ファミリー、によってその領域に引き込まれる。インビトロ研究により、細胞外ＣｙＰ−Ａはヒト白血球およびＴ細胞についての強力な化学誘因物質であることが証明された（Ｋａｍａｌｐｒｅｅｔ  Ａ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎｓ  Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ２００５；１７５：５１７−５２２；Ｙｕｒｃｈｅｎｋｏ  ＶＧ  ｅｔ  ａｌ．Ａｃｔｉｖｅ−ｓｉｔｅ  ｒｅｓｉｄｕｅｓ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  Ａ  ａｒｅ  ｃｒｕｃｉａｌ  ｆｏｒ  ｉｔｓ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｖｉａ  ＣＤ１４７．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００２；２７７：２２９５９−２２９６５；Ｘｕ  ＱＭＣ  ｅｔ  ａｌ．Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ  ｃｈｅｍｏｔａｃｔｉｃ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９２；２６７：１１９６８−１１９７１；Ａｌｌａｉｎ  ＦＣ  ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｇｌｙｃｏｓａｍｉｎｏｇｌｙｃａｎｓ  ｉｓ  ｒｅｑｕｉｒｅｄ  ｆｏｒ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  Ｂ  ｔｏ  ｔｒｉｇｇｅｒ  ｉｎｔｅｇｒｉｎ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ａｄｈｅｓｉｏｎ  ｏｆ  ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｂｌｏｏｄ  Ｔ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  ｔｏ  ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｍａｔｒｉｘ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ２００２；９９：２７１４−２７１９）。さらに、ＣｙＰ−Ａは、インビボで注射されたとき、白血球内向き流束を特徴とする急速な炎症反応を誘導してもよい（Ｓｈｅｒｒｙ  ＢＮ  ｅｔ  ａｌ．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  ａｓ  ａ  ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｓｅｃｒｅｔｏｒｙ  ｐｒｏｄｕｃｔ  ｏｆ  ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １９９２；８９：３５１１−３５１５）。ＣｙＰ−Ａは、細胞内に遍在的に分布しているが、炎症反応の過程で、ＣｙＰ−Ａは、生細胞と死細胞の両方によって細胞外組織空間に放出される（Ｓｈｅｒｒｙ，１９９２）。実際、高レベルのＣｙＰ−Ａが、敗血症、関節リウマチ、および血管平滑筋細胞疾患を含む、幾つかの異なる炎症性疾患において報告されている（Ｊｉｎ  ＺＧ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  Ａ  ｉｓ  ａ  ｓｅｃｒｅｔｅｄ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  ｓｔｒｅｓｓ．Ｃｉｒｃ．Ｒｅｓ．２０００；８７：７８９−７９６；Ｔｅｇｅｒ，１９９７；Ｂｉｌｌｉｃｈ，１９９７）。関節リウマチの場合、関節リウマチ患者の滑液におけるＣｙＰ−Ａレベルと好中球数の間の直接相関が報告されている（Ｂｉｌｌｉｃｈ，１９９７）。
【００１７】
癌
ＣｙＰ−Ａは、これら限定されるものではないが、小および非小細胞肺癌、膀胱癌、肝細胞癌、膵臓癌、および乳癌を含む、多くの癌組織および細胞系において過剰発現されることが近年証明された（Ｌｉ，２００６；Ｙａｎｇ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  Ａ  ｉｓ  ｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｉｎ  ｓｍａｌｌ  ｃｅｌｌ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  ａｃｔｉｖａｔｅｓ  ＥＲＫ１／２  ｓｉｇｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  ２００７；３６１：７６３−７６７；Ｃａｍｐａ，２００３）。外在性ＣｙＰ−Ａが供給されると、癌細胞成長が刺激され（Ｌｉ，２００６；Ｙａｎｇ，２００７）、一方、ＣｓＡは成長を阻止する（Ｃａｍｐａ，２００３）。ごく最近では、ＣｙＰ（ＡおよびＢ）は、ヒト乳癌細胞を成長させる生化学経路に複雑に関与すること、ならびにＣｙＰノックダウン実験は、癌細胞成長、増殖、および運動性を低下させることが、立証された（Ｆａｎｇ  Ｆ  ｅｔ  ａｌ．Ｔｈｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  Ｂ  ｉｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  Ｍａｌｉｇｎａｎｔ  Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｇｅｎｅｓ  Ｉｍｐｌｉｃａｔｅｄ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ．Ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ  ２００９；１７４（１）：２９７−３０８；Ｚｈｅｎｇ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｌｙｌ  Ｉｓｏｍｅｒａｓｅ  Ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  Ａ  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｊａｎｕｓ−Ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ｋｉｎａｓｅ  ２  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２００８；６８（１９）：７７６９−７７７８）。最も興味深いこととして、乳癌細胞を異種移植したマウスのＣｓＡ治療は、腫瘍壊死を誘導し、転移を完全に阻害した（Ｚｈｅｎｇ，２００８）。前記研究者らは、「シクロフィリンＢ作用は、ヒト乳癌の病理発生に有意に寄与するだろう」および「シクロフィリン阻害は、ヒト乳癌の治療における新規治療的戦略になるだろう」という結論を下している（Ｆａｎｇ，２００９；Ｚｈｅｎｇ，２００８）。
【００１８】
Ｃ型肝炎
Ｃ型肝炎ウイルス（Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  Ｖｉｒｕｓ：ＨＣＶ）は、世界中で最も流行している肝臓病であり、世界保健機構により流行病と見なされている。ＨＶＣは、発見される前に何十年間も患者を感染させる場合があるので、「静かな」流行病と呼ばれることが多い。研究は、世界中で２億人を超える人がＨＣＶに感染していること、世界人口の約３．３％の総発生率、を示唆している。米国だけでも、ほぼ４００万人がＨＣＶに感染しているまたはしたことがあり、これらのうちの２７０万人が、進行中の慢性感染症を有する。すべてのＨＣＶ感染個体が、生命にかかわる重篤疾患を発現するリスクを有する。慢性Ｃ型肝炎の現行の標準的な療法は、リバビリンと併用でのペグインターフェロン、両方とも一般化された抗ウイルス薬の併用から成る（Ｃｒａｘｉ  Ａ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｔｒｉａｌ  ｒｅｓｕｌｔｓ  ｏｆ  ｐｅｇｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎｓ  ｉｎ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｒｉｂａｖｉｒｉｎ．Ｓｅｍｉｎ  Ｌｉｖｅｒ  Ｄｉｓ  ２００３；２３（Ｓｕｐｐｌ  １）：３５−４６）。この治療についての失敗率は、約５０％である（Ｍｏｌｉｎｏ  ＢＦ．Ｓｔｒａｔｅｇｉｃ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ：３ｒｄ  ａｎｎｕａｌ  ｖｉｒａｌ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  ｉｎ  ｄｒｕｇ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｗｏｒｌｄ  ｓｕｍｍｉｔ  ２００７．ＡＭＲＩ  Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｒｅｐｏｒｔｓ；１２（１））。
【００１９】
ＣｙＰ−Ｂは、Ｃ型肝炎ウイルス（ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ：ＨＣＶ）の効率的複製に不可欠であることが、最近、立証された（Ｗａｔａｓｈｉ  Ｋ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  Ｂ  Ｉｓ  ａ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｇｕｌａｔｏｒ  ｏｆ  Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  Ｖｉｒｕｓ  ＲＮＡ  Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｅｌｌ  ２００５，１９：１１１−１２２）。ウイルスは、それらの効率的ゲノム複製については、ＣｙＰ−Ｂなどの宿主由来因子に依存する。ＣｙＰ−Ｂは、ＨＣＶ  ＲＮＡポリメラーゼＮＳ５Ｂと相互作用して、そのＲＮＡ結合活性を直接刺激する。ＲＮＡ干渉（ＲＮＡ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ：ＲＮＡｉ）によって媒介される内因性ＣｙＰ−Ｂ発現低下も、ＣｙＰ−ＢへのＮＳ５Ｂの結合の誘導喪失も、ＨＣＶ複製レベルを低下させる。従って、ＣｙＰ−Ｂは、ＨＣＶ複製機構においてＮＳ５Ｂの刺激調節因子として機能する。ウイルス複製に対するこの調節メカニズムにより、ＣｙＰ−Ｂは、抗ウイルス療法戦略のターゲットとして特定される。他のＨＣＶ治療とは異なり、シクロフィリン阻害は、ＨＣＶウイルスを直接ターゲットにしない。従って、ＣｙＰ結合薬に対する耐性が現行のＨＣＶ治療薬より遅く発生すると考えられる（Ｍａｎｎｓ  ＭＰ，ｅｔ  ａｌ．Ｔｈｅ  ｗａｙ  ｆｏｒｗａｒｄ  ｉｎ  ＨＣＶ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ−ｆｉｎｄｉｎｇ  ｔｈｅ  ｒｉｇｈｔ  ｐａｔｈ．Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ２００７；６：９９１−１０００）。加えて、宿主−ウイルス相互作用レベルでの干渉により、ＣｙＰ阻害は、インターフェロンに基づく治療に対してばかりでなく、プロテアーゼおよびポリメラーゼ阻害剤などのＨＣＶ複製酵素を直接ターゲットにする将来の治療に対しても相補的であり得る、抗ＨＣＶ治療への新規アプローチのための道を開くことができる（Ｆｌｉｓｉａｋ  Ｒ，Ｄｕｍｏｎｔ  ＪＭ，Ｃｒａｂｂｅ  Ｒ．Ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒａｌ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｏｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌ  Ｄｒｕｇｓ  ２００７，１６（９）：１３４５−１３５４）。適する実験ＨＣＶモデルが無いことが、ＨＣＶウイルス複製に作用する新規抗ＨＣＶ薬の開発を有意に妨げてきた。この障害は、幾つかの適する細胞培養モデル（サブゲノムＨＣＶレプリコンシステム）およびヒト肝臓細胞を含有するマウスモデルの開発により、つい最近、克服された（Ｇｏｔｏ  Ｋ，ｅｔ  ａｌ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｎｔｉ−ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ，ＣｓＡ，ａｎｄ  ＮＩＭ８１１．Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍ  ２００６；３４３：８７９−８８４；Ｍｅｒｃｅｒ  ＤＦ，ｅｔ  ａｌ．Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ  ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｍｉｃｅ  ｗｉｔｈ  ｃｈｉｍｅｒｉｃ  ｈｕｍａｎ  ｌｉｖｅｒｓ．Ｎａｔ  Ｍｅｄ  ２００１；７：９２７−９３３）。シクロスポリンは、最近、スクリーニングモデルおいておよび小規模臨床試験において抗ＨＣＶ活性を実証した（Ｗａｔ��ｓｈｉ  Ｋ，ｅｔ  ａｌ．ＣｓＡ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ  ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ  ｇｅｎｏｍｅ  ｉｎ  ｃｕｌｔｕｒｅｄ  ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２００３；３８：１２８２−１２８８；Ｉｎｏｕｅ  Ｋ，Ｙｏｓｈｉｂａ  Ｍ．Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ｃｏｍｂｉｎｅｄ  ｗｉｔｈ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ａｓ  ａｎ  ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ｃｏｕｎｔｅｒｍｅａｓｕｒｅ  ａｇａｉｎｓｔ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ  ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ  ｉｎ  ｌｉｖｅｒ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｅｎｄ−ｓｔａｇｅ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ  ｒｅｌａｔｅｄ  ｄｉｓｅａｓｅ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  Ｐｒｏｃ  ２００５；３７：１２３３−１２３４）。
【００２０】
筋肉変性障害
ＣｙＰ−Ｄは、すべての細胞においてミトコンドリア膜透過性遷移孔（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ  ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ  ｐｏｒｅ：ＭＴＰ）の不可欠部分である。ＭＴＰ孔の機能は、細胞内のカルシウム恒常性をもたらすことである。正常状態では、ＭＴＰ孔の開口および閉鎖は、可逆的である。細胞への過剰なカルシウム内向き流束を伴う病的状態では、これは、ミトコンドリアに過剰な負荷をかけ、ＭＰＴ孔の不可逆的開口を誘導して、細胞死またはアポトーシスをもたらす。ＣｓＡは、ウルリッヒ型先天性筋ジストロフィーおよびベスレムミオパチーを有する患者においてミトコンドリア機能不全および筋アポトーシスを治すと報告されている［（Ｍｅｒｌｉｎｉ  Ｌ  ｅｔ  ａｌ．ＣｓＡ  ｃｏｒｒｅｃｔｓ  ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｍｕｓｃｌｅ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｃｏｌｌａｇｅｎ  ＶＩ  ｍｙｏｐａｔｈｉｅｓ．ＰＮＡＳ  ２００８；１０５（１３）：５２２５−５２２９］。ＣｓＡは、単離された心臓ミトコンドリアにおいてｍＰＴＰ開口を用量依存的に阻害し、それによってアポトーシスを防止し、細胞に修復のための貴重な時間を与えることが、インビトロで立証されている（Ｇｏｍｅｚ  Ｌ  ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ  ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ  ｉｍｐｒｏｖｅｓ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｒｅｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  ｒｅｄｕｃｅｓ  ｍｏｒｔａｌｉｔｙ  ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  ａｃｕｔｅ  ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｍｉｃｅ  Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｈｅａｒｔ  Ｃｉｒｃ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ２００７，２９３：Ｈ１６５４−Ｈ１６６１）。急性心筋梗塞が生じた５８人の患者における臨床研究により、再灌流時のＣｓＡの投与は、プラセボで見られるものより小さい梗塞を伴うことが立証された（Ｐｉｏｔ  Ｃ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ  ｏｎ  Ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  Ｉｎｊｕｒｙ  ｉｎ  Ａｃｕｔｅ  Ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  Ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ．Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ２００８；３９５（５）：４７４−４８１））。
【００２１】
慢性神経変性疾患
ＣｓＡは、脳外傷の結果としての、急性脳虚血および損傷の症例において、神経保護薬として作用することができる（Ｋｅｅｐ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ  ｐｒｏｌｏｎｇｓ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｏｆ  ｌａｔｅ−ｓｔａｇｅ  ＡＬＳ  ｍｉｃｅ．Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２００１；８９４：３２７−３３１）。ＣｓＡで治療した動物は、治療不在時のわずか１０％の生存率に比べて劇的な８０％の生存率を示した。これは、主として、ミトコンドリアＣｙＰ−ＤへのＣｓＡの結合の結果であることが、後に確証された。その後、ＣｓＡの有用性が慢性神経変性にわたることが確証され、その後、ルー・ゲーリック病（ＡＬＳ）のラットモデルにおいても立証され（米国特許第５，９７２，９２４号明細書）、この場合、ＣｓＡ治療は残りの寿命を倍より多く増加させた。実験的自己免疫性脳脊髄炎におけるＣｙＰ−Ｄノックアウトマウス、多発性硬化症の動物モデル、においてＣｙＰ−Ｄ不活性化が軸索を保護することも、最近、証明された（Ｆｏｒｔｅ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  Ｄ  ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｐｒｏｔｅｃｔｓ  ａｘｏｎｓ  ｉｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ，ａｎ  ａｎｉｍａｌ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ．ＰＮＡＳ  ２００７；１０４（１８）：７５５８−７５６３）。アルツハイマー病マウスモデルにおいて、ＣｙＰ−Ｄ欠乏は、学習および記憶ならびにシナプス機能を実質的に向上させる（Ｄｕ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ  Ｄ  ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ  ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ  ａｎｄ  ｎｅｕｒｏｎａｌ  ｐｅｒｔｕｒｂａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ａｍｅｌｉｏｒａｔｅｓ  ｌｅａｒｎｉｎｇ  ａｎｄ  ｍｅｍｏｒｙ  ｉｎ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ  Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ２００８，１４（１０）：１０９７−１１０５）。加えて、ＣｓＡは、ハンチントン病のラットモデルにおいて有効であること（Ｌｅｖｅｎｔｈａｌ  Ｌ  ｅｔ  ａｌ．ＣｓＡ  ｐｒｏｔｅｃｔｓ  ｓｔｒｉａｔａｌ  ｎｅｕｒｏｎｓ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ａｎｄ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｆｒｏｍ  ３−ｎｉｔｒｏｐｒｏｐｉｏｎｉｃ  ａｃｉｄ  ｔｏｘｉｃｉｔｙ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ２０００，４２５（４）：４７１−４７８）、およびパーキンソン病のマウスモデルにおいて部分的に有効であること（Ｍａｔｓｕｕｒａ  Ｋ  ｅｔ  ａｌ．ＣｓＡ  ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ  ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｏｐａｍｉｎｅｒｇｉｃ  ｎｅｕｒｏｎｓ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ６−ｈｙｄｒｏｘｙｄｏｐａｍｉｎｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｍｏｕｓｅ  ｂｒａｉｎ．Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １９９６，７３３（１）：１０１−１０４）が証明されている。従って、ミトコンドリア依存性壊死は、ＣｙＰ−Ｄの阻害がこれらの疾病のための新たな薬理学的治療戦略をもたらすだろうことを示唆する顕著な疾病メカニズムの代表である（Ｄｕ，２００８）。
【００２２】
細胞内カルシウムイオン（Ｃａ２＋）恒常性の喪失に起因する細胞、組織および臓器傷害
Ｃａ２＋は、健常ミトコンドリア機能を含む、細胞レベルでの多数の生理プロセスに関与する。心筋梗塞、発作、急性肝毒性、胆汁うっ滞、および移植臓器の保存／再灌流傷害などの、一定の病的状態では、ミトコンドリアは、カルシウムレベルを調節する能力を喪失し、ミトコンドリアのマトリックス内の過剰なカルシウム蓄積がミトコンドリア内膜に大きな孔を開ける結果となる。（Ｒａｓｏｌａ  Ａ．ｅｔ  ａｌ．Ｔｈｅ  ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ  ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ  ｐｏｒｅ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ  ｉｎ  ｃｅｌｌ  ｄｅａｔｈ  ａｎｄ  ｉｎ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ２００７，１２：８１５−８３３）。その孔を通る１．５キロダルトン以下のイオンおよび分子の非選択的コンダクタンス、ミトコンドリア膜透過性遷移と呼ばれるプロセスは、ミトコンドリアの膨潤、および結果的に細胞死となる他の事象（アポトーシスの誘導を含む）をもたらす。そのミトコンドリア膜透過性遷移孔（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ  ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ  ｐｏｒｅ：ＭＰＴＰ）の構成要素の１つがＣｙＰ−Ｄである。ＣｙＰ−Ｄは、イムノフィリン分子であって、そのイソメラーゼ活性がＭＰＴＰの開口を調節するものである分子であり、ＣｓＡまたはＣｓＡ類似体によるそのイソメラーゼ活性の阻害は、ＭＰＴＰの生成を阻害し、従って、細胞死を防止する。
【００２３】
非免疫抑制性シクロスポリン類似体シクロフィリン阻害剤
上で述べた適応症におけるＣｓＡの有利な効果にもかかわらず、臨床実践では免疫抑制の付随効果がＣｙＰ阻害剤としてのＣｓＡの有用性を制限する。現在、免疫抑制活性をほとんど有さないまたは低減された免疫活性を有し（すなわち、ＣｓＡの免疫抑制効力の<１０％）、尚、ＣｙＰに結合する能力（すなわち、ＣｓＡと比較して>１０％のＣｙＰ結合能力）を保持することが証明されているＣｓＡ類似体はほんの少数しかない。
【００２４】
ＮＩＭ  ８１１（Ｍｅｌｌｅ４−シクロスポリン）
ＮＩＭ  ８１１は、アミノ酸４が修飾された、真菌トリポクラジウム・ニベウム（Ｔｏｌｙｐｏｃｌａｄｉｕｍ  ｎｉｖｅｕｍ）の発酵生成物であり、（カルシニューリン結合を欠くため）免疫抑制活性を示さないが、ＣｙＰ−Ａに対する結合親和性を保持する（Ｒｏｓｅｎｗｉｒｔｈ  ＢＡ  ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ  ｔｙｐｅ  １  ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｂｙ  ＳＤＺ  ＮＩＭ  ８１１，ａ  ｎｏｎｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ  Ａｎａｌｏｇｕｅ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  １９９４，３８：１７６３−１７７２）。
【００２５】
ＤＥＢＩＯ  ０２５（ＭｅＡｌａ３ＥｔＶａｌ４−シクロスポリン）
ＤＥＢＩＯ  ０２５は、ＣｓＡのアミノ酸３および４での二重化学修飾体であり、これも免疫抑制活性を示さないが、ＣｙＰ−Ａ  ＰＰｌａｓｅ活性を保持する（Ｋｒｉｓｔａｌ，２００４）。
【００２６】
ＳＣＹ−６３５（ジメチルアミノエチルチオＳａｒ３−ヒドロキシＬｅｕ４−シクロスポリン）
ＳＣＹ−６３５は、ＣｓＡのアミノ酸３および４での二重化学修飾体であり、これも免疫抑制活性を示さないが、ＣｙＰ−Ａ  ＰＰｌａｓｅ活性を保持する（ＰＣＴ公開第ＷＯ２００６／０３９６６８号パンフレット）。
【００２７】
一般に、これらの化合物は、カルシニューリンへの結合を担うＣｓＡの面に対する修飾を有し、一般にはアミノ酸３および４の修飾を必要とする。アミノ酸３および４の修飾は、骨の折れる複雑なものである。このアプローチは、シクロスポリン環を開環する工程と、それらのアミノ酸を置換および／または修飾する工程と、その後、その環を閉環して修飾シクロスポリンを生じさせる工程とを必要とするからである。
【００２８】
対照的に、アミノ酸１の側鎖の修飾は、シクロスポリン環の開環を必要としない。しかし、アミノ酸１は、（カルシニューリン結合に対して）ＣｙＰ結合に関係しており、ＣｓＡの免疫抑制効率を増加させるために修飾されてきた。例えば、米国特許第６，６０５，５９３号明細書には、免疫抑制効力が増加されたＣｓＡ類似体を生じさせる結果となるアミノ酸１の単一修飾が開示されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２９】
従って、容易に合成され、ＣｙＰを介在した疾患の治療において有効性を示す非免疫抑制性シクロスポリン類似体分子（ｎｏｎ−ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ  ａｎａｌｏｇｕｅ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ：ＮＩＣＡＭ）を有することが望ましい。  
【課題を解決するための手段】
【００３０】
本発明の１つの観点は、式Ｉの化学構造によって表される化合物またはそれらの医薬的に許容される塩に関する：
【００３１】
【化１】
2015155426.tif 000003
【００３２】
（式中、
ａ．Ｒ’は、Ｈまたはアセチルであり；
ｂ．Ｒ１は、炭素原子数２から１５の長さの飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族炭素鎖であり；ならびに
ｃ．Ｒ２は、
（ｉ）Ｈ；
（ｉｉ）不飽和、Ｎ−置換、またはＮ，Ｎ−二置換アミド；
（ｉｉｉ）Ｎ−置換または非置換アシル保護アミン；
（ｉｖ）カルボン酸；
（ｖ）Ｎ−置換または非置換アミン；
（ｖｉ）ニトリル；
（ｖｉｉ）エステル；
（ｖｉｉｉ）ケトン；
（ｉｘ）ヒドロキシ、ジヒドロキシ、トリヒドロキシ、またはポリヒドロキシアルキル；および
（ｘ）置換または非置換アリール
から成る群から選択される）。
【００３３】
本発明の第二の観点は、式ＩＩの化合物またはそれらの医薬的に許容される塩に関する：
【００３４】
【化２】
2015155426.tif 000004
【００３５】
（式中、
ａ．Ｒ’は、Ｈまたはアセチルであり；
ｂ．Ｒ１は、炭素原子数２から１５の長さの飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族炭素鎖であり；ならびに
ｃ．Ｒ３は、
（ｉ）水素、ケトン、ヒドロキシル、ニトリル、カルボン酸、エステル、および１，３−ジオキサンから成る群から選択される置換基を含有する飽和または不飽和、直線状または分岐脂肪族鎖；
（ｉｉ）ハロゲン化物、エステル、およびニトロから成る群から選択される１若しくはそれ以上の置換基を含有する芳香族基；ならびに
（ｉｉｉ）前記飽和または不飽和、直線状または分岐脂肪族鎖と前記芳香族基との組み合わせ
から成る群から選択される）。
【００３６】
本発明の第三の観点は、式ＩＩＩの化合物またはそれらの医薬的に許容される塩に関する：
【００３７】
【化３】
2015155426.tif 000005
【００３８】
（式中、
ａ．Ｒ’は、Ｈまたはアセチルであり；
ｂ．Ｒ１は、炭素原子数２から１５の長さの飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族炭素鎖であり；ならびに
ｃ．Ｒ４は、
【００３９】
【化４】
2015155426.tif 000006
【００４０】
【化５】
2015155426.tif 000007
【００４１】
から成る群から選択され、これらの式中、
１．Ｒ５は、炭素数１と１０の間の長さの飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族炭素鎖であり
２．Ｒ６は、炭素数１と１０の間の長さのモノヒドロキシル化、ジヒドロキシル化、トリヒドロキシル化、またはポリヒドロキシル化飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族炭素鎖である）。
【００４２】
本発明の第四の観点は、第ＩＶの化合物またはそれらの医薬的に許容される塩に関する：
【００４３】
【化６】
2015155426.tif 000008
【００４４】
（式中、
Ｉ．Ｒ’は、Ｈまたはアセチルであり；ならびに
ＩＩ．Ｒ７は、
【００４５】
【化７】
2015155426.tif 000009
【００４６】
【化８】
2015155426.tif 000010
【００４７】
【化９】
2015155426.tif 000011
【００４８】
【化１０】
2015155426.tif 000012
【００４９】
【化１１】
2015155426.tif 000013
【００５０】
【化１２】
2015155426.tif 000014
【００５１】
【化１３】
2015155426.tif 000015
から成る群から選択される）。
【００５２】
本発明のもう１つの観点に従って、前記式Ｉの化合物を製造するためのプロセスであって、
ａ．式ＩＸのアミノ酸１が修飾されたアセチルＣｓＡアルデヒド：
【００５３】
【化１４】
2015155426.tif 000016
【００５４】
を式ＶＩＩＩのホスホニウム塩：
【００５５】
【化１５】
2015155426.tif 000017
【００５６】
（式中、
Ｉ．Ｒ１３は、炭素原子数１から１４の長さの飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族炭素鎖であり；および
ＩＩ．Ｒ２は、式Ｉについて上で定義したとおりである）
と反応させて、式Ｘのアセチル化化合物：
【００５７】
【化１６】
2015155426.tif 000018
【００５８】
を製造する工程と、
ｂ．塩基を使用して式Ｘの化合物を脱アセチル化する工程と、
ｃ．Ｒ１が飽和されている場合には、式Ｘの化合物の二重結合を、前記化合物と水素化剤とを反応させることによって水素化して、式Ｉの飽和類似体を製造する工程と
を有するプロセスを提供する。
【００５９】
本発明のもう１つの観点に従って、式ＸＶの非免疫抑制化合物：
【００６０】
【化１７】
2015155426.tif 000019
【００６１】
を製造するプロセスであって、
ａ．式ＸＶの化合物：
【００６２】
【化１８】
2015155426.tif 000020
【００６３】
を還元剤およびアシル化剤の存在下で反応させて、式ＸＶＩのアセチル化化合物：
【００６４】
【化１９】
2015155426.tif 000021
【００６５】
を製造する工程と、
ｂ．塩基を使用して式ＸＶＩの化合物を脱アセチル化する工程と
を有し、
式ＸＩＶ、ＸＶ、およびＸＶＩのＲ１は、炭素数２と１５の間の長さの飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族炭素鎖である
プロセスを提供する。
【００６６】
本発明のもう１つの観点に従って、式ＸＸＩの非免疫抑制化合物：
【００６７】
【化２０】
2015155426.tif 000022
【００６８】
を製造するプロセスであって、
ａ．式ＸＸの化合物：
【００６９】
【化２１】
2015155426.tif 000023
【００７０】
を無水溶媒に溶解する工程と、
ｂ．その溶液をトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）と反応させる工程と
を有し、
式ＸＸおよびＸＸＩのＲ１は、炭素数２と１５の間の長さの飽和または不飽和、直鎖または分岐脂肪族炭素鎖である
プロセスを提供する。
【００７１】
本発明のもう１つの観点に従って、式ＸＩＶの非免疫抑制化合物：
【００７２】
【化２２】
2015155426.tif 000024
【００７３】
を製造するプロセスであって、
ａ．式ＸＸＩの化合物：
【００７４】
【化２３】
2015155426.tif 000025
【００７５】
を無水ピリジンに溶解する工程と、
ｂ．その溶液をアシル化剤と反応させる工程と、
ｃ．その溶剤を除去して、式ＸＩＶの化合物を生じさせる工程と
を有し、
式ＸＩＶおよびＸＸＩのＲ１は、炭素数２と１５の間の長さの飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族炭素鎖である
プロセスを提供する。
【００７６】
本発明ももう１つの観点に従って、式ＸＸＩＶの免疫抑制化合物：
【００７７】
【化２４】
2015155426.tif 000026
【００７８】
（式中、
Ｉ．Ｒ１は、炭素数２と１５の間の長さの飽和または不飽和、直線状または分岐脂肪族炭素鎖であり；ならびに
ＩＩ．Ｒ１５およびＲ１６は、独立して、水素または飽和若しくは不飽和直鎖若しくは分岐脂肪族基であり；あるいはＮＲ１５Ｒ１６は一緒に、モルホリニル部分を形成する）
を製造するプロセスであって、
ａ．式ＸＸＶの化合物：
【００７９】
【化２５】
2015155426.tif 000027
【００８０】
を塩化チオニルと組み合わせて、式ＸＸＶＩの残基：
【００８１】
【化２６】
2015155426.tif 000028
【００８２】
を生じさせる工程と、
ｂ．前記残基を無水溶媒に溶解し、式ＸＸＶＩＩの化合物：
【００８３】
【化２７】
2015155426.tif 000029
【００８４】
と反応させて、式ＸＸＶＩＩＩの化合物：
【００８５】
【化２８】
2015155426.tif 000030
【００８６】
を生じさせる工程と、
ｃ．式ＸＸＩＶの化合物を塩基で脱アシル化する工程と
を有するプロセスを提供する。
【００８７】
本発明のもう１つの観点に従って、式ＸＸＩＶの非免疫抑制化合物：
【００８８】
【化２９】
2015155426.tif 000031
【００８９】
（式中、
Ｉ．Ｒ１は、炭素数２と１５の間の長さの飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族炭素鎖であり；
ＩＩ．Ｒ１５およびＲ１６は、独立して、水素または飽和若しくは不飽和直鎖若しくは分岐脂肪族基であり；あるいはＮＲ１５Ｒ１６は一緒に、モルホリニル部分を形成する）
を製造するプロセスであって、
ａ．式ＸＸＶの化合物：
【００９０】
【化３０】
2015155426.tif 000032
【００９１】
を窒素下で無水溶媒に溶解する工程と、
ｂ．ジシクロヘキシルカルボジイミド（ｄｉｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌｃａｒｖｏｄｉｉｍｉｄｅ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物および式ＸＶＩＩＩの化合物と反応させる工程：
【００９２】
【化３１】
2015155426.tif 000033
【００９３】
と、
ｃ．式ＸＶＩＩＩの化合物を塩基で脱アセチル化する工程と
を有するプロセスを提供する。
【００９４】
本発明のもう１つの観点に従って、式ＸＸＸＩＩの非免疫抑制化合物：
【００９５】
【化３２】
2015155426.tif 000034
【００９６】
（式中、
Ｉ．Ｒ１は、炭素数２と１５の間の長さの飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族炭素鎖であり；および
ＩＩ．Ｒ１７は、ハロゲンまたはヒドロキシル置換基を任意選択で含有する、飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族基である）
を製造するプロセスであって、
式ＸＸＸの化合物：
【００９７】
【化３３】
2015155426.tif 000035
【００９８】
を酸の存在下で式ＸＸＸＩの化合物：
【００９９】
【化３４】
2015155426.tif 000036
【０１００】
と反応させる工程
によるものであるプロセスを提供する。
【０１０１】
本発明のもう１つの観点に従って、式ＸＸＶＩの非免疫抑制化合物：
【０１０２】
【化３５】
2015155426.tif 000037
【０１０３】
（式中、
Ｉ．Ｒ１は、炭素数２と１５の間の長さの飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族炭素鎖であり；および
ＩＩ．Ｒ２０は、飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族基である）
の化合物を製造するプロセスであって、
式ＸＸＸＶの化合物：
【０１０４】
【化３６】
2015155426.tif 000038
【０１０５】
（式中、Ｒ’は、任意選択でＨまたはアセチルである）
を水素化ホウ素ナトリウムと反応させる工程と、
Ｒ’がアセチルである場合には、式ＸＸＸＶの化合物を塩基で脱アセチル化する工程と
によるものであるプロセスを提供する。
【０１０６】
本発明のもう１つの観点に従って、式ＸＸＩＸの非免疫抑制化合物：
【０１０７】
【化３７】
2015155426.tif 000039
【０１０８】
（式中、Ｒ１は、炭素数２と１５の間の長さの飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族炭素鎖である）
を製造するプロセスであって、
式ＸＸＶＩＩＩの化合物：
【０１０９】
【化３８】
2015155426.tif 000040
【０１１０】
をボラン−テトラヒドロフランおよび過酸化ナトリウムと反応させる工程
によるものであるプロセスを提供する。
【０１１１】
本発明のもう１つの観点に従って、式ＸＬＩＩＩの非免疫抑制化合物：
【０１１２】
【化３９】
2015155426.tif 000041
【０１１３】
（式中、
Ｉ．Ｒ’は、Ｈまたはアセチルであり；および
ＩＩ．Ｒ１は、炭素数２と１５の間の長さの飽和または不飽和、直線状または分岐脂肪族鎖である）
を製造するプロセスであって、
式ＸＬＩの化合物：
【０１１４】
【化４０】
2015155426.tif 000042
【０１１５】
を無水溶媒中で式ＸＬＩＩの化合物：
【０１１６】
【化４１】
2015155426.tif 000043
【０１１７】
と反応させる工程と、
式ＸＶＩＩＩの化合物を塩基で脱アセチル化する工程と
によるものであるプロセスを提供する。
【０１１８】
本発明のもう１つの観点に従って、式ＸＬＶＩの非免疫抑制化合物：
【０１１９】
【化４２】
2015155426.tif 000044
【０１２０】
（式中、
Ｉ．Ｒ１は、炭素数２から１５の長さの飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族炭素鎖であり；および
ＩＩ．Ｒ２３は、飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族基である）
を製造するプロセスであって、
ａ．式ＸＬＶの化合物：
【０１２１】
【化４３】
2015155426.tif 000045
【０１２２】
を過酸化水素およびギ酸と反応させる工程と、
ｂ．その生成物と塩基を反応させて、式ＸＬＶＩの化合物を生じさせる工程と、
ｃ．式ＸＬＶの化合物を塩基で脱アセチル化する工程と
を有するプロセスを提供する。
【０１２３】
本発明は、非免疫抑制性シクロスポリン類似体を開示する。そのような化合物は、ＣｙＰに結合し、およびＣｙＰ媒介疾患の治療に潜在的に有用である。
【０１２４】
一般に、式ＩからＸＬＶＩについて：
「カルボン酸」は、カルボン酸部分が以下の置換基のうちの１つに連結されている基を含む：
１．置換されていてもよいアルキル（例えば、炭素数２から１５のアルキル）；
２．置換されていてもよいアルケニル（例えば、炭素数２から１５のアルケニル）；および
３．置換されていてもよいアルキニル（例えば、炭素数２から１５のアルキニル）。
【０１２５】
上で説明した上記の置換基としては、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素など）、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、置換されていてもよいチオール（例えば、チオール、Ｃ１〜４アルキルなど）、置換されていてもよいアミノ（例えば、アミノ、モノ−Ｃ１〜４アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノ、５から６員環式アミノ、例えばテトラヒドロピロール、ピペラジン、ピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、ピロール、イミダゾールなど）、ハロゲン化されていてもよいＣ１〜４アルコキシ（例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、トリフルオロメトキシ、トリフルオロエトキシなど）、ハロゲン化されていてもよいＣ１〜４アルコキシ−Ｃ１〜４アルコキシ（例えば、メトキシメトキシ、メトキシエトキシ、エトキシエトキシ、トリフルオロメトキシエトキシ、トリフルオロエトキシエトキシなど）、ホルミル、Ｃ２〜４アルカノイル（例えば、アセチル、プロピオニルなど）、Ｃ１〜４アルキルスルホニル（例えば、メタンスルホニル、エタンスルホニルなど）などを挙げることができ、および前記置換基の数は、好ましくは１から３である。
【０１２６】
さらに、上の「置換されていてもよいアミノ」の置換基は、互いに結合して、環式アミノ基（例えば、置換基を窒素原子に結合させることができるように５から６員環の環構成窒素原子から水素原子を取り去ることにより形成される基、例えばテトラヒドロピロール、ピペラジン、ピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、ピロール、イミダゾールなど）を形成してもよい。前記環式アミノ基は置換されていてもよく、その置換基の例としては、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素など）、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、置換されていてもよいチオール（例えば、チオール、Ｃ１〜４アルキルチオなど）、置換されていてもよいアミノ（例えば、アミノ、モノ−Ｃ．ｓｕｂ．１〜４アルキルアミノ、ジ−Ｃ１〜４アルキルアミノ、５から６員環式アミノ、例えば、テトラヒドロピロール、ピペラジン、ピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、ピロール、イミダゾールなど）、エステル化またはアミド化されていてもよいカルボキシル（例えば、カルボキシル、Ｃ１〜４アルコキシ−カルボニル、カルバモイル、モノ−Ｃ１〜４アルキル−カルバモイル、ジ−Ｃ１〜４アルキル−カルバモイルなど）、ハロゲン化されていてもよいＣ１〜４アルコキシ（例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、トリフルオロメトキシ、トリフルオロエトキシなど）、ハロゲン化されていてもよいＣ１〜４アルコキシ−Ｃ．ｓｕｂ．１〜４アルコキシ（例えば、メトキシメトキシ、メトキシエトキシ、エトキシエトキシ、トリフルオロメトキシエトキシ、トリフルオロエトキシエトキシなど）、ホルミル、Ｃ２〜４アルカノイル（例えば、アセチル、プロピオニルなど）、Ｃ１〜４アルキルスルホニル（例えば、メタンスルホニル、エタンスルホニル）などが挙げられ、および前記置換基の数は、好ましくは１から３である。
【０１２７】
「アミン」は、非置換であってもよい基、またはアミン部分が、
１．置換されていてもよいアルキル基（例えば、炭素数２から１５のアルキル）、
２．置換されていてもよいアルケニル（例えば、炭素数２から１５のアルケニル）、
３．置換されていてもよいアルキニル（例えば、炭素数２から１５のアルキニル）、
４．置換されていてもよいホルミル若しくはアシル（例えば、炭素数２から４のアルカノイル（例えば、アセチル、プロピニル、ブチリル、イソブチリルなど）、炭素数１から４のアルキルスルホニル（例えば、メタンスルホニル、エタンスルホニルなど）など）、
５．置換されていてもよいアリール（例えば、フェニル、ナフチルなど）など
から独立して選択することができる１つ若しくは２つの置換基を有する、および上で「カルボン酸」について定義したような置換基から独立して選択される置換基に連結されている、Ｎ−置換若しくはＮ，Ｎ二置換されているものである基を含む。
【０１２８】
「アミド」は、上で「カルボン酸」について定義したような置換基から独立して選択される置換基に連結されているアミド部分のカルボン酸基が、
１．置換されていてもよいアルキル基（例えば、炭素数２から１５のアルキル）、
２．置換されていてもよいアルケニル（例えば、炭素数２から１５のアルケニル）、
３．置換されていてもよいアルキニル（例えば、炭素数２から１５のアルキニル）、
４．置換されていてもよいホルミル若しくはアシル（例えば、炭素数２から４のアルカノイル（例えば、アセチル、プロピオニル、ブチリル、イソブチリルなど）、炭素数１から４のアルキルスルホニル（例えば、メタンスルホニル、エタンスルホニルなど）など）、
５．置換されていてもよいアリール（例えば、フェニル、ナフチルなど）など
からそれぞれ独立して選択することができる１つまたは２つの置換基を有するＮ−置換またはＮ，Ｎ二置換されているものであるアミド部分のアミノ基に連結している化合物を含む。
【０１２９】
「アリール」は、単環式または縮合多環式芳香族炭化水素基によって例示することができ、例えば、Ｃ６〜１４アリール基、例えばフェニル、ナフチル、アントリル、フェナントリル、またはアセナフチレニルなどが好ましく、フェニルが好ましい。前記アリールは、１若しくはそれ以上の置換基、例えば、低級アルコキシ（例えば、Ｃ１〜６アルコキシ、例えば、メトキシ、エトキシ、若しくはプロポキシなど）、ハロゲン原子（例えば、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素など）、低級アルキル（例えば、Ｃ１〜６アルキル、例えば、メチル、エチル、若しくはプロピルなど）、低級アルケニル（例えば、Ｃ２〜６アルケニル、例えば、ビニル若しくはアリルなど）、低級アルキニル（例えば、Ｃ２〜６アルキニル、例えば、エチニル若しくはプロパルギルなど）、置換されていてもよいアミノ、置換されていてもよいヒドロキシル、シアノ、置換されていてもよいアミジノ、カルボキシル、低級アルコキシカルボニル（例えば、Ｃ１〜６アルコキシカルボニル、例えば、メトキシカルボニル若しくはエトキシカルボニルなど）、置換されていてもよいカルバモイル（例えば、５から６員芳香族単環式複素環式の基（例えば、ピリジルなど）で置換されていてもよいＣ１〜６アルキル若しくはアシル（例えば、ホルミル、Ｃ２〜６アルカノイル、ベンゾイル、ハロゲン化されていてもよいＣ１〜６アルコキシカルボニル、ハロゲン化されていてもよいＣ１〜６アルキルスルホニル、ベンゼンスルホニルなど）、１−アゼチジニルカルボニル、１−ピロリジニルカルボニル、ピペリジノカルボニル、モルホリノカルボニル、チオモルホリノカルボニル（この硫黄原子は酸化されていてもよい）、１−ピペラジニルカルボニルなどで置換されていてもよい、カルバモイル）などで置換されていてもよい。これらの置換基はいずれも、１から３の置換可能な位置で独立して置換されていてもよい。
【０１３０】
「ケトン」は、ケトン部分のカルボニル基が、前記「カルボン酸」について上で定義したような置換基から独立して選択される１つまたは２つの置換基に連結されている化合物を含む。
【０１３１】
「エステル」は、エステル基が、「カルボン酸」または「アリール」について定義したような置換基から独立して選択される１つまたは２つの置換基から成る、カルボン酸エステルまたはアルコールエステルのいずれかを含む。
【０１３２】
「アルキル」は、特に定義されていない限り、好ましくは、長さが１から１５炭素単位のアルキルである。
【０１３３】
「芳香族基」は、上で定義したとおりのアリール、または５から６員芳香族単環式複素環式の環、例えば、フリル、チエニル、ピロリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、１，２，３−オキサジアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，３，４−オキサジアゾリル、フラザニル、１，２，３−チアジアゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル、１，２，３−トリアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、テトラゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニルなど；および８から１６員（好ましくは、１０から１２員）芳香族縮合複素環式の基によって例示することができる。
【０１３４】
「非免疫抑制（性）の」は、細胞培養でのヒトリンパ球の増殖を阻害するその化合物の能力によって測定したとき、好ましくは、下の実施例１９において述べる方法によって測定したとき、ＣｓＡと比較して実質的に低減された免疫系抑制レベルを示す化合物の能力を指す。
【０１３５】
「類似体」は、１若しくはそれ以上の官能基がＣｓＡと異なる、ＣｓＡの構造類似体を意味する。好ましくは、そのような類似体は、ＣｙＰに結合するＣｓＡの能力の少なくともかなりの部分を保持する。
【０１３６】
式Ｉの好ましい化学種は、Ｒ’が、Ｈであり、Ｈ１が、炭素数２と１５の間の長さの飽和または不飽和アルキルであり、およびＲ２が、
１．カルボキシル基を含むカルボン酸；
２．Ｎ−置換またはＮ，Ｎ−二置換アミドであって、置換基が、Ｈ、炭素数１と７の間の長さのアルキルから独立して選択されるものである、または前記置換基が、ヘテロ原子がＯ、Ｎ、若しくはＳから選択される複素環式の環を形成するものであるＮ−置換またはＮ，Ｎ−二置換アミド；
３．炭素数１と７の間の長さのエステル；
４．炭素数１と７の間の長さのモノヒドロキシル化またはジヒドロキシル化アルキル；
５．炭素数１と７の間の長さのＮ−置換または非置換アシル保護アミン；
６．ニトリル；
７．ケトンであって、そのケトンのカルボン酸基がＲ１および炭素数１と７の間の長さの飽和または不飽和アルキル鎖に連結されているものであるケトン；
８．フェニルであって、二酸化窒素、フッ素、アミン、エステル、またはカルボキシル基から独立して選択される１若しくはそれ以上の置換基で任意選択で置換されているものであるフェニル
から選択されるものである。
【０１３７】
本発明の化合物は、光学活性化合物の形態で存在してもよい。本発明は、上の式の範囲内の光学活性化合物のすべてのエナンチオマーを、個々にも、ラセミ体の混合物ででも、包含する。その上、本発明は、本明細書において定義する化合物のプロドラッグを含む。
【０１３８】
もう１つの観点に従って、本発明の化合物は、哺乳動物、好ましくはヒト、におけるシクロフィリン媒介疾患の治療または予防または研究に有用である。そのような疾患は、通常、シクロフィリンの過剰発現、例えば、シクロフィリンの先天性過剰発現によって媒介される。
【０１３９】
本発明の化合物によって治療することができるシクロフィリン媒介疾患としては、
ａ．ウイルス感染症；
ｂ．炎症性疾患；
ｃ．癌；
ｄ．筋肉変性障害；
ｅ．神経変性障害；および
ｆ．細胞内カルシウム恒常性の喪失に関連した傷害
が挙げられる。
【０１４０】
前記ウイルス感染症は、ヒト免疫不全ウイルス、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、およびＥ型肝炎から成る群から選択されるウイルスによって引き起こされる。前記炎症性疾患は、喘息、自己免疫疾患、慢性炎症、慢性前立腺炎、糸球体腎炎、過敏性疾患、炎症性腸疾患、敗血症、血管平滑筋細胞疾患、動脈瘤、骨盤内感染症、再灌流傷害、関節リウマチ、移植拒絶反応、および脈管炎から成る群から選択される。前記癌は、小および非小細胞肺癌、膀胱癌、肝細胞癌、膵臓癌、および乳癌から成る群から選択することができる。前記筋肉変性障害は、心筋再灌流傷害、筋ジストロフィー、およびＶＩ型コラーゲンミオパチーから成る群から選択することができる。前記神経変性障害は、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、多系統委縮症、多発性硬化症、脳性麻痺、発作、糖尿病性神経障害、筋委縮性側索硬化症（ルー・ゲーリッグ病）、脊髄損傷、および脳損傷から成る群から選択することができる。前記細胞内カルシウム恒常性の喪失に関連した傷害は、心筋梗塞、発作、急性肝毒性、胆汁うっ滞、および移植臓器の保存／再灌流傷害から成る群から選択することができる。
【図面の簡単な説明】
【０１４１】
本発明のこれらおよび他の利点は、以下の詳細な説明を読むことによって、および図を参照することによって、明らかになるであろう。
【図１】図１は、ＣｓＡ不在または存在下、塩化カルシウム添加後のミトコンドリア吸光度によって測定したときのＣｙＰ−Ｄの阻害を図示する折れ線グラフを示すものである。
【発明を実施するための形態】
【０１４２】
本発明の化合物は、その必要がある温血動物にニートでまたは医薬担体と共に投与することができる。前記医薬担体は、固体である場合もあり、または液体である場合もある。本発明の混合物は、従来の非毒性で医薬的に許容される担体、アジュバントおよびビヒクルを含有する投薬単位調合物で、経口的に、局所的に、非経口的に、吸入スプレーにより、または直腸内に投与することができる。用語非経口的は、本明細書において用いる場合、皮下注射、静脈内、筋肉内、胸骨内注射または注入技術を含む。
【０１４３】
本発明の混合物を含有する医薬組成物は、好ましくは、例えば、錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性若しくは油性懸濁剤、分散性粉末若しくは顆粒、エマルジョン、ハード若しくはソフトカプセル、またはシロップ若しくはエリキシルのような、経口使用に適する形態のものであってもよい。経口使用のための組成物は、医薬組成物の製造についての当分野において公知の方法に従って調製することができ、そのような組成物は、医薬的に上品で味のよい製剤を生じさせるために、甘味剤、着香剤、着色剤および保存薬から成る群から選択される１若しくはそれ以上の薬剤を含有してもよい。非毒性で医薬的に許容される賦形剤との混合物で活性成分を含有する錠剤も、公知の方法によって製造することができる。使用される賦形剤は、例えば、（１）不活性希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、ラクトース、リン酸カルシウム、またはリン酸ナトリウム；（２）造粒および崩壊剤、例えば、トウモロコシデンプン、またはアルギン酸；（３）結合剤、例えば、デンプン、ゼラチン、またはアラビアゴム；および（４）滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、またはタルクであってもよい。錠剤は、コーティングされなくてもよく、または胃腸管内での崩壊および吸収を遅らせ、それによって長期間にわたって持続作用をもたらすために公知の技術によりコーティングされてもよい。例えば、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルなどの時間遅延材料を利用することができる。それらを米国特許第４，２５６，１０８号明細書、同第４，１６０，４５２号明細書、および同第４，２６５，８７４号明細書に記載されている技術によってもコーティングして、制御放出用の浸透圧治療錠を形成することもできる。
【０１４４】
場合により、経口使用のための調合物は、ハードゼラチンカプセルの形態であってもよく、この場合、活性成分は、不活性固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、またはカオリンと混合される。それらは、軟質ゼラチンカプセルの形態であることもあり、この場合、活性成分は、水または油性媒質、例えば、ピーナッツ油、液体パラフィン、若しくはオリーブ油と混合される。
【０１４５】
水性懸濁剤は、通常、水性懸濁剤の製造に適する賦形剤との混合物で活性材料を含有する。そのような賦形剤としては、（１）懸濁化剤、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴム、およびアラビアゴム、または（２）分散若しくは湿潤剤を挙げることができ、前記分散若しくは湿潤剤は、自然に存在するリン脂質、例えばレシチン、アルキレンオキシドと脂肪酸の縮合生成物、例えばステアリン酸ポリオキシエチレン、エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールの縮合生成物、例えばヘプタデカエチレンオキシセタノール、エチレンオキシドと、脂肪酸およびヘキシトールから誘導された部分エステルとの縮合生成物、例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール、若しくはエチレンオキシドと、脂肪酸および無水ヘキシトールから誘導された部分エステルとの縮合生成物、例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタンであってもよい。
【０１４６】
前記水性懸濁剤は、１若しくはそれ以上の保存薬、例えば、ポリヒドロキシ安息香酸エチルまたはｎ−プロピル；１若しくはそれ以上の着色剤；１若しくはそれ以上の着香剤；および１若しくはそれ以上の甘味剤、例えば、スクロース、アスパルテーム、またはサッカリンも含有してもよい。
【０１４７】
油性懸濁剤は、植物油、例えばラッカセイ油、オリーブ油、ごま油、若しくはココナッツ油、オメガ３脂肪酸を含有する魚油、または鉱物油、例えば液体パラフィンに活性成分を懸濁させることによって調合することができる。前記油性懸濁剤は、増粘剤、例えば、蜜蝋、硬質パラフィン、またはセチルアルコールを含有してもよい。味のよい経口製剤を生じさせるために甘味剤および着香剤が添加されることもある。アスコルビン酸などの抗酸化物質の添加により、これらの組成物を保存することができる。
【０１４８】
分散性粉末および顆粒は、水性懸濁剤の調製に適する。それらは、活性成分を分散または湿潤剤、懸濁化剤、および１若しくはそれ以上の保存薬との混合物で提供する。適する分散または湿潤剤は、上で既に述べたものによって例示される。追加の賦形剤、例えば、上で説明した甘味、着香および着色剤、が存在することもある。
【０１４９】
本発明の混合物を含有する医薬組成物は、水中油エマルジョンの形態であることもある。油相は、植物油、例えばオリーブ油若しくはラッカセイ油、または鉱物油、例えば液体パラフィン、またはそれらの混合物であってもよい。適する乳化剤は、（１）自然に存在するゴム、例えば、アラビアゴムおよびトラガカントゴム、（２）自然に存在するリン脂質、例えば、大豆およびレシチン、（３）脂肪酸および無水ヘキシトールから誘導されたエステルまたは部分エステル３０、例えば、モノオレイン酸ソルビタン、（４）前記部分エステルとエチレンオキシドの縮合生成物、例えば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタンであってもよい。前記エマルジョンは、甘味および着香剤も含有してもよい。
【０１５０】
シロップおよびエリキシルは、甘味剤、例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール、アスパルテーム、またはスクロースを用いて調合することができる。そのような調合物は、粘滑薬、保存薬、ならびに着香および着色剤も含有してもよい。
【０１５１】
前記医薬組成物は、滅菌注射用水性または油性懸濁液の形態であってもよい。この懸濁剤は、上で述べた適切な分散または湿潤剤および懸濁化剤を使用して公知の方法に従って調合することができる。前記滅菌注射用製剤は、例えば１，３−ブタンジオール中の溶液のような、非毒性で非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の滅菌注射用溶液または懸濁液であることもある。利用することができる許容されるビヒクルおよび溶媒には、水、リンガー溶液、および等張塩化ナトリウム溶液などがある。加えて、滅菌固定油が、従来、溶媒または懸濁化媒質として利用されている。このために、合成モノまたはジグリセリドをはじめとする任意の無菌固定油を利用することができる。加えて、オレイン酸などの脂肪酸が注射剤の調製に使用されている。
【０１５２】
本発明の混合物を薬物の直腸内投与のために坐剤の形態で投与することもできる。これらの組成物は、薬物と、常温で固体であるが直腸温度では液体であり、従って直腸内で融解して薬物を放出する適切な無刺激賦形剤とを混合することによって、調製することができる。そのような材料は、カカオ脂およびポリエチレングリコールである。
【０１５３】
局所使用のために、シクロスポリンとともに通常使用されるものを含有する適切なクリーム、軟膏、ゼリー、溶液または懸濁液などを利用することができる。
【０１５４】
特に好ましい実施形態では、非活性成分として界面活性剤、エタノール、親油性および／または両親媒性溶媒を含有する溶液が使用される。具体的には、異性体類似体と以下の非医療成分とを含有する経口複合エマルジョン調合物が使用される：ｄ−アルファトコフェリルポリエチレングリコール１０００コハク酸（ｄ−ａｌｐｈａ  ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ  ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ  １０００  ｓｕｃｃｉｎａｔｅ：ビタミンＥ  ＴＰＧＳ）、中鎖トリグリセリド（ｍｅｄｉｕｍ  ｃｈａｉｎ  ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ：ＭＣＴ）油、Ｔｗｅｅｎ  ４０、およびエタノール。経口溶液として前記化合物とまさにそれらの非医療成分とを含有する（ゼラチン、グリセリド、水およびソルビトールを含む）ソフトゼラチンカプセルも、好ましく使用することができる。
【０１５５】
しかし、任意の個々の患者のための具体的な用量レベルは、利用する具体的な化合物の活性、年齢、体重、全身の健康状態、性別、食事、投与回数、投与経路、排泄率、薬の組み合わせ、ならびに治療を受ける個々の疾病または状態の性質および重症度をはじめとする様々な要因に依存し得る。
【０１５６】
方法論
下で述べる反応１から１８は、必要な化学特性を有する試薬を使用して、本明細書において以下、
【０１５７】
【化４４】
2015155426.tif 000046
【０１５８】
と描くＣｓＡのアミノ酸１が修飾された所望の化合物を合成できる化学反応の一般例である。一定の反応体の置換を行うことができることは、当業者には理解されるだろう。
【０１５９】
調製した化合物の素性および純度を、一般に、質量分析法、ＨＰＬＣおよびＮＭＲ分光分析法をはじめとする方法論によって確証した。質量スペクトル（ＥＳＩ−ＭＳ）は、Ｈｅｗｌｅｔｔ  Ｐａｃｋａｒｄ  １１００  ＭＤＳシステムで測定した。ＮＭＲスペクトルは、Ｖａｒｉａｎ  ＭｅｒｃｕｒｙＰｌｕｓ  ４００ＭＨｚ分光計を使用して、重水素化溶媒（ホスホニウム塩についてはＤＭＳＯ、すべての他の化合物についてはベンゼン）中で測定した。分析および分取逆相ＨＰＬＣは、Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓシステムで行った。
【０１６０】
ホスホニウム塩化合物の合成
トリフェニルホスフィンまたは任意の他の適するホスフィンとハロゲン化アルキル（Ｒ−Ｘ；Ｘ＝Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩ）との反応により、ホスホニウム塩を調製する。適するハロゲン化アルキルは、任意の鎖長または分子量の任意の第一級または任意の第二級脂肪族ハロゲン化物である。これらのハロゲン化アルキルは、分岐しているまたは分岐していない、飽和されているまたは不飽和である場合がある。
【０１６１】
前記反応をトルエン中で行うと（反応１）、生成物が反応溶液から直接沈殿する。しかし、未反応物質は、反応時間を短縮するためおよび満足のいく収率を達成するためにジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）などのより極性の高い溶媒を必要とする（反応２）。
反応１：
【０１６２】
【化４５】
2015155426.tif 000047
【０１６３】
式中、Ｘは、ハロゲン化物（これらに限定されるものではないが、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩを含む）であり、ならびにＲ１０は、ケトン、ヒドロキシル、ニトリル、カルボン酸、エステル、および１，３−ジオキソランから成る群から選択される置換基を任意選択で含有する、飽和若しくは不飽和、直線状若しくは分岐脂肪族鎖；ハロゲン化物、エステル、およびニトロから成る群から選択される置換基を任意選択で含有する芳香族基；または上述の飽和若しくは不飽和、直線状若しくは分岐脂肪族鎖と上述の芳香族基の組み合わせである。
【実施例１】
【０１６４】
４０４−１５の合成
【０１６５】
【化４６】
2015155426.tif 000048
【０１６６】
説明例として、トリフェニルホスフィン（１３ｍｍｏｌ）を５０ｍＬトルエンに溶解し、クロロアセトン（１０ｍｍｏｌ）を添加して透明な溶液を得る。その反応物を還流させながら一晩攪拌する。無色の固体を濾別し、トルエンおよびヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させる。
【０１６７】
反応１を用いるとき、以下の化合物が、合成できる化合物のさらなる例である。
【０１６８】
【表１】
2015155426.tif 000049
【０１６９】
【表２】
2015155426.tif 000050
【０１７０】
あるいは、下に図示するような反応２によって適するホスホニウム塩を合成することができる：
反応２：
【０１７１】
【化４７】
2015155426.tif 000051
【０１７２】
式中、Ｘは、ハロゲン化物（これらに限定されるものではないが、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩを含む）であり、ならびにＲ１０は、ケトン、ヒドロキシル、ニトリル、カルボン酸、エステル、および１，３−ジオキソランから成る群から選択される置換基を任意選択で含有する、飽和若しくは不飽和、直線状若しくは分岐脂肪族鎖；ハロゲン化物、エステル、およびニトロから成る群から選択される置換基を任意選択で含有する芳香族基；または上述の飽和若しくは不飽和、直線状若しくは分岐脂肪族鎖と上述の芳香族基の組み合わせである。
【実施例２】
【０１７３】
４０４−５１の合成
【０１７４】
【化４８】
2015155426.tif 000052
【０１７５】
説明例として、トリフェニルホスフィン（１１ｍｍｏｌ）を１０ｍＬ  ＤＭＦに溶解し、４−ブロモ酪酸（１０ｍｍｏｌ）を添加する。その反応物を１１０℃で７時間攪拌し、その後、一晩放置して冷却する。５０ｍＬトルエンを添加し、結晶質無色固体を濾過によって回収する。その生成物をトルエンおよびヘキサンで洗浄し、真空下で一晩乾燥させる。
【０１７６】
トルエンでの処理後に結晶化が起こらなかった場合、生成物を２０ｍＬ  ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：１混合物）で抽出する。水性相をトルエンおよびヘキサンで洗浄し、乾固させる。残留物を５０ｍＬ酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）と共に還流温度で２０〜３０分間攪拌する。結晶質固体が得られた場合、その生成物を濾過によって回収し、ＥｔＯＡｃおよびヘキサンで洗浄し、乾固させる。生成物が油またはゴムとして得られた場合、ＥｔＯＡｃをデカントし、残存生成物を真空下で乾燥させる。
【０１７７】
反応２を用いるとき、以下の化合物が、合成できる化合物のさらなる例である。
【０１７８】
【表３】
2015155426.tif 000053
【０１７９】
【表４】
2015155426.tif 000054
【０１８０】
【表５】
2015155426.tif 000055
【０１８１】
【表６】
2015155426.tif 000056
【０１８２】
ウィッティヒ反応
ウィッティヒ反応は、広範な基質および反応体に広く適用できる。反応中に基質に導入される側鎖は、可変長（Ｒ’）の任意の数の分岐および非分岐、飽和および不飽和脂肪族化合物を表すことができ、ならびに広範な官能基を含有する可能性がある。
【０１８３】
ウィッティヒ反応では、カリウムｔ−ブトキシド（ＫＯｔＢｕ）などの塩基を使用して、ホスホニウム塩から収量を生じさせる。この収量は、基質、ＣｓＡ−アルデヒドのカルボニル基と反応してアルケンを形成する。カルボン酸側鎖を含有するホスホニウム塩は、その収量を生じさせるために少なくとも２当量の塩基を必要とする。
【０１８４】
反応３：ウィッティヒ反応によるホスホニウム塩を使用するアセチル化シクロスポリン類似体中間体の合成
【０１８５】
【化４９】
2015155426.tif 000057
【０１８６】
式中、Ｘは、ハロゲン化物（これらに限定されるものではないが、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩを含む）であり、ならびにＲ１２は、ケトン、ヒドロキシル、ニトリル、カルボン酸、エステル、および１，３−ジオキソランから成る群から選択される置換基を任意選択で含有する、飽和若しくは不飽和、直線状若しくは分岐脂肪族鎖；ハロゲン化物、エステル、およびニトロから成る群から選択される置換基を任意選択で含有する芳香族基；または上述の飽和若しくは不飽和、直線状若しくは分岐脂肪族鎖と上述の芳香族基の組み合わせである。
【実施例３】
【０１８７】
ウィッティヒ反応によるホスホニウム塩化合物を使用する化合物４０４−２０の合成
【０１８８】
【化５０】
2015155426.tif 000058
【０１８９】
説明例として、オーブン乾燥させた２５０ｍＬフラスコにアルゴン雰囲気下で臭化トリフェニルブチルホスホニウム（６．０ｍｍｏｌ）および４０ｍＬ無水テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）を投入する。その懸濁液を０℃に冷却し、カリウムｔ−ブトキシド（６．０ｍｍｏｌ）を添加してオレンジ色を得る。その反応物を周囲温度で１〜２時間攪拌し、その後、ＣｓＡ−アルデヒド（２０ｍＬ無水ＴＨＦに溶解した、２．０ｍｍｏｌ）を添加する。３時間、室温で攪拌を継続する。１０ｍＬ飽和ＮＨ４Ｃｌおよび２０ｍＬ氷水で反応を停止させる。層を分離し、水性相をＥｔＯＡｃで抽出する。有機層を組み合わせ、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。溶媒を除去し、その粗製生物をシリカゲル（ヘキサン／アセトン  ３：１）で精製する。
【０１９０】
反応３を用いるとき、以下の化合物が、合成できる化合物のさらなる例である。
【０１９１】
【表７】
2015155426.tif 000059
【０１９２】
【表８】
2015155426.tif 000060
【０１９３】
【表９】
2015155426.tif 000061
【０１９４】
【表１０】
2015155426.tif 000062
【０１９５】
【表１１】
2015155426.tif 000063
【０１９６】
脱アセチル化
反応４：アセチル化シクロスポリン類似体の脱アセチル化
【０１９７】
【化５１】
2015155426.tif 000064
【０１９８】
式中、Ｒ１２は、ケトン、ヒドロキシル、ニトリル、カルボン酸、エステル、アミド、アシル保護アミン、および１，３−ジオキサンから成る群から選択される置換基を任意選択で含有する、飽和若しくは不飽和、直線状若しくは分岐脂肪族鎖；ハロゲン化物、エステル、アミン、およびニトロから成る群から選択される置換基を任意選択で含有する芳香族基；または前述の飽和若しくは不飽和、直線状若しくは分岐脂肪族鎖と前述の芳香族基の組み合わせである。
【実施例４】
【０１９９】
脱アセチル化による化合物４０４−９０の合成
【０２００】
【化５２】
2015155426.tif 000065
【０２０１】
説明例として、１０ｍＬ  ＭｅＯＨ中の４０４−２０（０．１６ｍｍｏｌ）の溶液を２ｍＬ  Ｈ２Ｏ中のテトラメチルアンモニウムヒドロキシド五水和物（０．４７ｍｍｏｌ）の溶液と組み合わせる。その混合物を室温で２日間攪拌する。その反応物を真空下で濃縮し、５ｍＬ  Ｈ２Ｏを添加する。その反応物をＥｔＯＡｃで抽出し、抽出物をブランで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮乾固させる。その粗製生物を逆相分取ＨＰＬＣによって精製する。
【０２０２】
脱アセチル化化合物の生成は、一般に、シリカゲル（ヘキサン／アセトン  ２：１）を用いてまたは分取ＨＰＬＣによって行う。化合物４０４−６０、４０４−１３７、４１６−０８、４２０−９８、および４２０−１００（カルボン酸）の場合、抽出前に反応物を１Ｍ  ＨＣｌでｐＨ２〜３に酸性化する。
【０２０３】
反応４を用いるとき、以下の化合物が、合成できる化合物のさらなる例である。
【０２０４】
【表１２】
2015155426.tif 000066
【０２０５】
【表１３】
2015155426.tif 000067
【０２０６】
【表１４】
2015155426.tif 000068
【０２０７】
【表１５】
2015155426.tif 000069
【０２０８】
【表１６】
2015155426.tif 000070
【０２０９】
【表１７】
2015155426.tif 000071
【０２１０】
二重結合の水素化
大気圧下で二重結合を水素化して飽和側鎖を得ることができる。ヒドロキシル、カルボニル、およびカルボキシルなどの官能基は、これらの条件下で安定しており、保護を必要としない。Ｒ’は、アセチル基または水素のいずれかを表す。α，β−不飽和カルボニル化合物の場合、活性化された二重結合への遊離ヒドロキシ基の求核付加による環化を避けるために、脱アセチル化前に二重結合を還元しなければならない。
反応５：
【０２１１】
【化５３】
2015155426.tif 000072
【０２１２】
式中、Ｒ１２は、ケトン、ヒドロキシル、ニトリル、カルボン酸、エステル、アミド、アシル保護アミン、および１，３−ジオキサンから成る群から選択される置換基を任意選択で含有する、飽和若しくは不飽和、直線状若しくは分岐脂肪族鎖；ハロゲン化物、エステル、アミン、およびニトロから成る群から選択される置換基を任意選択で含有する芳香族基；または前述の飽和若しくは不飽和、直線状若しくは分岐脂肪族鎖と前述の芳香族基の組み合わせであり、ならびにＲ’は、Ｈまたはアセチル基のいずれかである。
【実施例５】
【０２１３】
４０４−５６の合成：
【０２１４】
【化５４】
2015155426.tif 000073
【０２１５】
説明例として、４０４−０３（０．３４ｍｍｏｌ）を４０ｍＬ無水ＥｔＯＨに溶解し、４３ｍｇ  Ｐｄ／Ｃ（１０％）および０．２ｍＬ酢酸を添加する。その混合物を水素下、大気圧で２日間攪拌する。反応物をＣｅｌｉｔｅに通して濾過し、真空下で濃縮する。その粗製生物を分取ＨＰＬＣによって精製する。
【０２１６】
反応５を用いるとき、以下の化合物が、合成できる化合物のさらなる例である。
【０２１７】
【表１８】
2015155426.tif 000074
【０２１８】
【表１９】
2015155426.tif 000075
【０２１９】
【表２０】
2015155426.tif 000076
【０２２０】
ニトリル基の還元
水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＢＨ４）および塩化ニッケル（ＩＩ）（ＮｉＣｌ２）からインサイチューで生成される臭化ニッケルを用いて、ニトリル基の対応する第一アミンへの還元を達成することができる。適する捕捉試薬の添加は、アシル保護第一アミン（それぞれ、カルバミン酸塩またはアミド）をもたらし、第二アミンの形成を望ましくない副反応として防止する。所与の条件下で二重結合を部分的に還元し、生成物の混合物を得る。飽和保護アミン化合物と不飽和保護アミン化合物の両方を単離し、精製する。反応４２０−１２３については、その混合物を分離しなかった。その代りにその混合物を接触水素化に付して完全飽和化合物を生じさせた。
反応６：
【０２２１】
【化５５】
2015155426.tif 000077
【０２２２】
アシルが、ＢＯＣ、アセチル、またはブチリルのうちのいずれか１つである場合、アシル化剤は、二炭酸ジ−ｔ−ブチル、無水酢酸、および無水酪酸酸のうちのいずれか１つであり、ならびにＲ１は、飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族基である。上で説明したアシル化剤の代わりに広範なアシル化剤を代用して同様に広範なアシル保護アミンを生成できることは、当業者には理解されるだろう。
【実施例６】
【０２２３】
４２０−０８の合成
【０２２４】
【化５６】
2015155426.tif 000078
【０２２５】
説明例として、４０４−１８７（０．２５７ｍｍｏｌ）を１５ｍＬメタノールに溶解し、０℃に冷却する。二炭酸ジ−ｔ−ブチル（０．５１４ｍｍｏｌ）および塩化ニッケル（ＩＩ）（０．０２５ｍｍｏｌ）を添加して透明な溶液を得る。水素化ホウ素ナトリウム（３．８５ｍｍｏｌ）を１時間にわたって少しずつ添加する。得られた混合物を周囲温度で一晩攪拌する。追加の水素化ホウ素ナトリウム（１．９５ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、３時間、室温で攪拌を継続する。ＨＰＬＣは、４２０−０８−１（カルバミン酸塩化合物）と４２０−０８−２（二重結合が還元されたカルバミン酸塩化合物）の混合物を示す。その反応物をジエチレントリアミン（０．２５７ｍｍｏｌ）と共に３０分間攪拌し、その後、真空下で濃縮する。残留物を７５ｍＬ  ＥｔＯＡｃに溶かし、２０ｍＬ飽和ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水する。溶媒を真空下で除去する。その粗製生物を分取ＨＰＬＣによって精製する。
【０２２６】
反応６を用いるとき、以下の化合物が、合成できる化合物のさらなる例である。
【０２２７】
【表２１】
2015155426.tif 000079
【０２２８】
【表２２】
2015155426.tif 000080
【０２２９】
アミン脱保護
トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を使用する酸水解により、ＢＯＣ保護アミン（カルバミン酸塩）を遊離アミンに転化させることができる。
反応７：
【０２３０】
【化５７】
2015155426.tif 000081
【０２３１】
式中、Ｒ１は、飽和または不飽和、直線状または分岐脂肪族鎖であり、およびＲ’は、Ｈまたはアセチル基のいずれかである。
【実施例７】
【０２３２】
４２０−２３の合成
【０２３３】
【化５８】
2015155426.tif 000082
【０２３４】
説明例として、４２０−１７（０．０２６ｍｍｏｌ）を４ｍＬ無水ＤＣＭに溶解し、２ｍＬトリフルオロ酢酸を０℃で添加する。その反応物を室温で３時間攪拌する。２０ｍＬジクロロメタンを添加する。その反応混合物をＨ２Ｏおよび飽和ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水する。溶媒を除去し、その粗製生物を分取ＨＰＬＣによって精製する。
【０２３５】
反応７を用いるとき、以下の化合物が、合成できる化合物のさらなる例である。
【０２３６】
【表２３】
2015155426.tif 000083
【０２３７】
アミノ基の保護
確立した方法を用いて広範な保護基を使用して遊離アミノ官能基を保護することができる。ニトリルから出発する還元的導入と比べると、広範な保護剤を利用できる。合せて、反応７および８は、アシル保護アミノ化合物の調製のための反応６の代替経路を提供する。
反応８：
【０２３８】
【化５９】
2015155426.tif 000084
【０２３９】
アシルが、ＢＯＣ、アセチル、またはブチリルのうちのいずれか１つである場合、アシル化剤は、二炭酸ジ−ｔ−ブチル、無水酢酸、および無水酪酸のうちのいずれか１つである。二炭酸塩、無水物、およびハロゲン化アシルをはじめとする広範なアシル化剤を利用して広範なアシル保護アミンを生じさせることができること、ならびにＲ１が、飽和または不飽和直鎖または分岐脂肪族基であることは、当業者には理解されるだろう。
【実施例８】
【０２４０】
４２０−２７の合成
【０２４１】
【化６０】
2015155426.tif 000085
【０２４２】
説明例として、４２０−２５（０．０３９ｍｍｏｌ）を窒素下で３ｍＬ無水ピリジンに溶解する。その反応物を０℃に冷却し、無水酢酸（０．５９ｍｍｏｌ）を添加する。その混合物を周囲温度で一晩攪拌する。溶媒を真空下で除去し、残留物を２５ｍＬ  ＥｔＯＡｃに溶かす。その反応物を２×１０ｍＬ  １Ｍ  ＨＣｌ、２×１０ｍＬ飽和ＮａＨＣＯ３溶液、および１０ｍＬブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水する。溶媒を真空下で除去して、生成物を無色の固体として得る。
【０２４３】
アルデヒドの脱保護
１，３−ジオキソラン部分を酸水解によりアルデヒド官能基に転化させる。
【実施例９】
【０２４４】
反応９および実施例９：４０４−４７の合成
【０２４５】
【化６１】
2015155426.tif 000086
【０２４６】
説明例として、２０ｍＬギ酸中の４０４−３３（０．２４６ｍｍｏｌ）の溶液を室温で４５分間攪拌する。１００ｍＬ氷水および２００ｍＬ飽和ＮａＨＣＯ３溶液をその反応物にゆっくりと添加する（強い泡立ち）。反応物を２×１５０ｍＬ  ＥｔＯＡｃで抽出する。組み合わせた抽出物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液、水、およびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水する。溶媒を除去し、生成物を真空下で乾燥させる。
【０２４７】
ニトロ基の還元
芳香族ニトロ化合物を接触水素化によってアニリンに還元する。この反応は、二重結合の還元をもたらす。
【実施例１０】
【０２４８】
反応１０および実施例１０：４０４−１２０の合成
【０２４９】
【化６２】
2015155426.tif 000087
【０２５０】
説明例として、４０４−８９（０．１３ｍｍｏｌ）を２ｍＬエタノールに溶解し、ラネーニッケル（０．１８ｇ、Ｈ２Ｏ中５０％；エタノールで３回洗浄し、その後、２ｍＬエタノールに懸濁させたもの）および０．１ｍＬ酢酸を添加する。その反応物を室温で２日間攪拌する。反応物をＣｅｌｉｔｅに通して濾過し、そのフィルターケーキをメタノールで洗浄する。その濾液を乾固させる。残留物をＥｔＯＡｃに溶かし、ＮａＨＣＯ３溶液およびブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水する。溶媒を真空下で除去する。その粗製生物をシリカゲル（ヘキサン／アセトン２：１）で精製する。
【０２５１】
アミド合成
アミンと対応する酸塩化物の反応によってカルボン酸からアミドを調製する（反応１１）。この合成は、ＤＣＣおよびＨＯＢｔなどの適切なカップリング試薬の使用により、酸から直接進行し得る（反応１２）。
反応１１：
【０２５２】
【化６３】
2015155426.tif 000088
【０２５３】
Ｒ１が、飽和または不飽和、直線状または分岐脂肪族鎖である場合、Ｒ１５およびＲ１６は、独立して、水素または飽和若しくは不飽和、直線状若しくは分岐脂肪族鎖であり、あるいはＮＲ１５Ｒ１６は一緒に、モルホリニル部分を形成する。
【実施例１１】
【０２５４】
４０４−８５の合成
【０２５５】
【化６４】
2015155426.tif 000089
【０２５６】
説明例として、３６５−７３（０．０４ｍｍｏｌ）および塩化チオニル（６８ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で組み合わせ、加熱して２時間還流させる。その反応物を放置して冷却し、濃縮乾固させる。２０ｍＬトルエンを添加し、反応物を再び濃縮乾固させる（２回）。残留物を５ｍＬ無水トルエンに溶かし、ジエチルアミン（０．４８ｍｍｏｌ）を添加する。その反応物を室温で一晩攪拌する。５ｍＬ  Ｈ２Ｏを添加し、その混合物を２０ｍＬ  ＥｔＯＡｃで抽出する。抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水する。溶媒を真空下で除去し、その粗製生物をシリカゲル（ヘキサン／アセトン３：１）で精製する。
【０２５７】
反応１１を用いるとき、以下の化合物が、合成できる化合物のさらなる例である。
【０２５８】
【表２４】
2015155426.tif 000090
【０２５９】
反応１２：
【０２６０】
【化６５】
2015155426.tif 000091
【０２６１】
Ｒ１が、飽和または不飽和、直線状または分岐脂肪族鎖である場合、Ｒ１５およびＲ１６は、独立して、水素または飽和若しくは不飽和、直線状若しくは分岐脂肪族鎖であり、あるいはＮＲ１５Ｒ１６は一緒に、モルホリニル部分を形成する。
【実施例１２】
【０２６２】
４２０−１０４の合成
【０２６３】
【化６６】
2015155426.tif 000092
【０２６４】
説明例として、４２０−９８（０．０７８ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で１０ｍＬ無水ＤＣＭに溶解する。ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、０．１１７ｍｍｏｌ）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（ＨＯＢｔ、０．０７８ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、その混合物を１５分間攪拌する。ジメチルアミン（０．７８ｍｍｏｌ）を添加して透明無色の溶液を得る。１５分後、冷却浴を取り外し、周囲温度で５日間、攪拌を継続する。その反応物を分液漏斗に移し、２０ｍＬ  ＤＣＭおよび１０ｍＬ  ０．５Ｍ  ＨＣｌを添加する。有機層を除去し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮乾固させる。残留物を１０ｍＬアセトニトリルに溶かす。溶解しない固体を濾別し、濾液を真空下で濃縮する。その粗製生物を分取ＨＰＬＣによって精製する。
【０２６５】
反応１２を用いるとき、以下の化合物が、合成できる化合物のさらなる例である。
【０２６６】
【表２５】
2015155426.tif 000093
【０２６７】
【表２６】
2015155426.tif 000094
【０２６８】
エステル化
酸性触媒（反応１３）またはカップリング試薬（ＤＣＣおよびＤＭＡＰ、反応１４）いずれかを使用して、カルボン酸エステルを対応するカルボン酸およびアルコールから調製する。
反応１３：
【０２６９】
【化６７】
2015155426.tif 000095
【０２７０】
式中、Ｒ１は、飽和または不飽和、直線状または分岐脂肪族鎖であり、およびＲ１７は、ハロゲンまたはヒドロキシル置換基を任意選択で含有する、飽和または不飽和、直線状または分岐脂肪族鎖である。
【実施例１３】
【０２７１】
４０４−１７１の合成
【０２７２】
【化６８】
2015155426.tif 000096
【０２７３】
説明例として、４０４−６０（０．０５９ｍｍｏｌ）と４ｍＬ  ＥｔＯＨと２μＬ濃Ｈ２ＳＯ４との混合物を加熱して４時間還流させる。溶媒を蒸発させ、残留物をアセトニトリルに溶かす。その粗製生物を分取ＨＰＬＣによって精製する。
【０２７４】
反応１３を用いるとき、以下の化合物が、合成できる化合物のさらなる例である。
【０２７５】
【表２７】
2015155426.tif 000097
【０２７６】
反応１４：
【０２７７】
【化６９】
2015155426.tif 000098
【０２７８】
式中、Ｒ１は、飽和または不飽和、直線状または分岐脂肪族鎖であり、およびＲ１７は、ハロゲンまたはヒドロキシル置換基を任意選択で含有する、飽和または不飽和、直線状または分岐脂肪族鎖である。
【実施例１４】
【０２７９】
４２０−２４の合成
【０２８０】
【化７０】
2015155426.tif 000099
【０２８１】
説明例として、４０４−６０（０．０５３ｍｍｏｌ）を４ｍＬ無水ＤＣＭに溶解し、窒素雰囲気下で０℃に冷却する。ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ、０．００５ｍｍｏｌ）、２−フルオロプロパノール（０．２７ｍｍｏｌ）およびジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、０．０５８ｍｍｏｌ）を添加し、その反応物を１５分間、０℃で攪拌する。冷却浴を取り外し、一晩、周囲温度で攪拌を継続する。２０ｍＬ  ＤＣＭを添加し、その後、その反応物をＨ２Ｏで洗浄し、蒸発乾固させる。残留物を１０ｍＬアセトニトリルに溶かし、濾過する。濾液を真空下で濃縮する。その粗製生物を分取ＨＰＬＣによって精製する。
【０２８２】
アルコール
ウィッティヒ反応での直接合成に加えて、アルコールは、多数の反応によって得られる。水素化ホウ素ナトリウムでのカルボニル基の還元は、（アルデヒドから出発すると）第一アルコールまたは（ケトンから出発すると）第二アルコールをそれぞれもたらす。
【０２８３】
ヒドロホウ素化法による二重結合の酸化は、異性体の混合物をもたらすことが可能である。この反応は、主として、反マルコフニコフ配向で進行する。末端オレフィンの場合、第一アルコールが主生成物である。過酸化水素での酸化によってオレフィンをジオールに転化させることができる。カルボニル化合物とグリニャール試薬の反応は、（アルデヒドから出発すると）第二アルコールおよび（ケトンから出発すると）第三アルコールをもたらす。この方法により、炭素鎖を伸長することができる。
反応１５：
【０２８４】
【化７１】
2015155426.tif 000100
【０２８５】
式中、Ｒ’は、Ｈまたはアセチルであり、Ｒ１は、飽和または不飽和、直線状または分岐脂肪族鎖であり、およびＲ２０は、飽和または不飽和、直線状または分岐脂肪族鎖である。
【実施例１５】
【０２８６】
４０４−９８の合成
【０２８７】
【化７２】
2015155426.tif 000101
【０２８８】
説明例として、４０４−６１（０．０３６５ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で４．５ｍＬ無水ＥｔＯＨに溶解する。水素化ホウ素ナトリウム（０．５ｍＬ無水ＥｔＯＨに懸濁させたもの、０．１５ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、得られた混合物を周囲温度で一晩攪拌する。追加の水素化ホウ素ナトリウム（０．０８ｍｍｏｌ）を添加し、一晩、攪拌を継続する。氷浴で冷却しながら５ｍＬ  １Ｍ  ＨＣｌで反応を停止させ、ＥｔＯＡｃで抽出する。抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮乾固させる。その粗製生物を分取ＨＰＬＣによって精製する。
【０２８９】
反応１５を用いるとき、以下の化合物が、合成できる化合物のさらなる例である。
【０２９０】
【表２８】
2015155426.tif 000102
【０２９１】
反応１６：
【０２９２】
【化７３】
2015155426.tif 000103
【０２９３】
式中Ｒ１は、飽和または不飽和、直線状または分岐脂肪族鎖である。
【実施例１６】
【０２９４】
４２０−２８−１の合成
【０２９５】
【化７４】
2015155426.tif 000104
【０２９６】
説明例として、４０４−１６（０．１８ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下、４ｍＬ無水ＴＨＦに溶解する。その反応物を０℃に冷却し、ＢＨ３・ＴＨＦ（ＴＨＦ中１Ｍの溶液、０．０６ｍｍｏｌ）を添加する。その反応物を室温で一晩攪拌する。ＨＰＬＣは、反応が完了していないことを示す。追加のＢＨ３・ＴＨＦ（０．５ｍｍｏｌ）を添加し、攪拌を４時間、室温で継続する。反応物を０℃に冷却し、１．０ｍＬ  １Ｍ  ＮａＯＨおよび０．３０ｍＬ  ３０％過酸化水素溶液を添加する。その混合物を室温で一晩攪拌する。その反応物を２５ｍＬ  ＥｔＯＡｃで抽出する。抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮乾固させる。その生成物を分取ＨＰＬＣによって精製する。
反応１７：
【０２９７】
【化７５】
2015155426.tif 000105
【０２９８】
式中、Ｒ１は、飽和または不飽和、直線状または分岐脂肪族鎖であり、Ｒ’は、Ｈまたはアセチル基のいずれかである。
【実施例１７】
【０２９９】
４２０−４９の合成
【０３００】
【化７６】
2015155426.tif 000106
【０３０１】
説明例として、４２０−４９（０．０３７ｍｍｏｌ）をアルゴン雰囲気下で５ｍＬ無水ＴＨＦに溶解する。その反応物を−７０℃に冷却し、塩化アリルマグネシウム（ＴＨＦ中１Ｍの溶液、０．２２ｍｍｏｌ）を添加する。反応物を１５分間、−７０℃で攪拌し、その後、放置して室温にする。９０分後、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液で反応を停止させる。その反応物を２５ｍＬ  ＥｔＯＡｃで抽出する。抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濃縮乾固させる。その生成物を分取ＨＰＬＣによって精製する。アセチル化化合物と脱アセチル化化合物の混合物を得る。
反応１８：
【０３０２】
【化７７】
2015155426.tif 000107
【０３０３】
式中、Ｒ１は、飽和または不飽和、直線状または分岐脂肪族鎖であり、およびＲ２３は、飽和または不飽和、直線状または分岐脂肪族鎖である。
【実施例１８】
【０３０４】
４０４−１２６の合成
【０３０５】
【化７８】
2015155426.tif 000108
【０３０６】
説明例として、４０４−１６（０．０５４ｍｍｏｌ）を１ｍＬギ酸に溶解し、過酸化水素（３０％水溶液、０．５２ｍｍｏｌ）を添加する。その反応物を室温で一晩攪拌し、その後、濃縮乾固させる。残留物を２５ｍＬ  ＥｔＯＡｃに溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水する。溶媒を真空下で除去する。その反応物を９ｍＬ  ＴＨＦおよび３ｍＬ  １Ｍ  ＮａＯＨに溶かし、４時間、室温で攪拌する。溶媒を除去し、残留物を２５ｍＬ  ＥｔＯＡｃと５ｍＬ  Ｈ２Ｏとで分配する。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水する。溶媒を蒸発させ、その粗製生物を分取ＨＰＬＣによって精製する。
【実施例１９】
【０３０７】
免疫抑制およびシクロフィリンイソメラーゼ阻害
免疫抑制効力
試験化合物の免疫抑制効力を、細胞培養でヒトリンパ球の増殖を阻害するそれらの能力を測定することによって評定した。フィコール密度勾配遠心分離法によって正常ヒトボランティアの血液からリンパ球を単離し、２μｇ／ｍＬ  カルボキシフルオロセインジ（ｃａｒｂｏｘｙｆｌｕｏｒｏｓｃｅｉｎ）アセテート・スクシンイミジルエステル（ＣＦＳＥ）、蛍光細胞分裂トレーサー分子、で染色した。１μｇ／ｍＬ  ＵＣＨＴ−１抗ヒトＣＤ３抗体をコーティングした９６ウエル平底高結合プレートに細胞を３００，０００／ウエルで播種することにより、細胞をＣＤ３／Ｔ細胞受容体によって刺激した。試験化合物を、先ず、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中の１０ｍｇ／ｍＬ保存溶液として調製した。化合物１つにつき合計７つの濃度のために、細胞培養基（ＲＰＭＩ＋５％ＦＢＳ＋ペニシリン−ストレプトマイシン）でのそのＤＭＳＯ保存溶液の５００倍希釈、その後、３倍系列希釈により、試験溶液を調製した。細胞が入っている培養ウエルに試験溶液を等量で添加して、１３．７ｎｇ／ｍＬ〜１０，０００ｎｇ／ｍＬの希釈後最終濃度を得た。基準化合物、ＣｓＡ、を同様に、しかし１．３７〜１，０００ｎｇ／ｍＬにわたる濃度で調製した。いずれの実験でも、ＣｓＡを、それぞれの実験についての品質対照標準としておよび試験化合物に対する基準対照としてアッセイした。３日インキュベーション後、細胞をＣＤ９５−ＡＰＣ（リンパ球活性化マーカー）で染色し、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒでのフローサイトメトリーによって分析した。ＣＦＳＥ強度の系列半減によって判定して１若しくはそれ以上の細胞分裂を受けた細胞の割合を測定することにより、前方／側方散乱ゲートリンパ球において細胞分裂百分率を評定した。抗ＣＤ３刺激なしの培養で維持したサンプルから非分裂親集団を決定した。細胞分裂の阻害についてのＩＣ５０値を非線形回帰分析によって決定した。試験化合物のＩＣ５０値をＣｓＡに正規化することにより、相対効力を計算した。加えて、ビヒクル対照標準と比較して細胞表面ＣＤ９５発現の減少を測定することにより、免疫抑制効力を分析した。
【０３０８】
シクロフィリンＤ阻害アッセイ
ミトコンドリア膨潤アッセイを用いて、ＣｙＰ−Ｄのブロッキングおよびミトコンドリア透過性遷移に関するＮＩＣＡＭｓの有効度を測定した。一定の病的状態では、ミトコンドリアは、カルシウムレベルを調節する能力を喪失し、ミトコンドリアマトリックス内の過剰なカルシウム蓄積がミトコンドリア内膜に大きな孔を開ける結果となる。その孔を通る１．５キロダルトン以下のイオンおよび分子の非選択的コンダクタンス、ミトコンドリア膜透過性遷移と呼ばれるプロセスは、ミトコンドリアの膨潤、および結果的に細胞死となる他の事象をもたらす。そのミトコンドリア膜透過性遷移孔（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ  ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ  ｐｏｒｅ：ＭＰＴＰ）の構成要素の１つがＣｙＰ−Ｄである。ＣｙＰ−Ｄは、イムノフィリン分子であって、そのイソメラーゼ活性がＭＰＴＰの開口を調節するものである分子であり、ＣｓＡまたはＣｓＡ類似体によるそのイソメラーゼ活性の阻害は、ＭＰＴＰの生成を阻害する。一般に、ラット肝臓から単離されたミトコンドリアを試験化合物の不在または存在下でカルシウムに暴露してＭＰＴＰ開口を誘導し、５４０ｎｍでの吸光度の減少としてカルシウム誘導膨潤を測定した。
【０３０９】
新鮮なラット肝臓からミトコンドリアを単離した。すべての単離工程を通して氷冷または４℃条件を用いた。少量の単離緩衝液（ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ｂｕｆｆｅｒ：ＩＢ；１０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ、７０ｍＭスクロース、２１０ｍＭマンニトール、０．５ｍＭ  ＥＤＴＡ）中で肝臓を入念にすすいで刻んだ。その細断された肝臓のアリコートを、テフロン（登録商標）−ガラスＰｏｔｔｅｒ−Ｅｌｖｅｈｊｅｍ組織粉砕機を使用してＩＢ中で均質化し、細胞スクリーンフィルターに通した。濾過された均質化物を６００ｇで１０分間、遠心分離し、その後、得られた上清を７０００ｇで１０分間、遠心分離した。その上清をデカントし、そのペレットを洗浄緩衝液（１０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ、７０ｍＭスクロース、２１０ｍＭマンニトール）に再び懸濁させ、最後に７０００ｇで１０分間、遠心分離した。その上清をデカントし、そのミトコンドリア含有ペレットを２ｍＬの呼吸緩衝液（ｒｅｓｐｉｒａｔｉｏｎ  ｂｕｆｆｅｒ：ＲＢ；５ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ、７０ｍＭスクロース、２１０ｍＭマンニトール、１０ｍＭコハク酸ナトリウム、１ｍＭ二塩基性リン酸ナトリウム）に懸濁させて氷の上で保管した。
【０３１０】
先ず試験化合物を呼吸緩衝液＃２（ｒｅｓｐｉｒａｔｉｏｎ  ｂｕｆｆｅｒ  ＃２：ＲＢ２；５ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ、７０ｍＭスクロース、２１０ｍＭマンニトール、１０ｍＭコハク酸ナトリウム、１ｍＭ二塩基性リン酸ナトリウム、１％ウシ胎仔血清、２μＭロテノン）で１０００倍希釈し、その後、ＲＢ２で３倍希釈して１００００、３３３３、１１１１、３７０、１２３、４１、および１４ｎｇ／ｍＬの試験化合物濃度を達成することにより、１０ｍｇ／ｍＬのストック（ジメチルスルホキシドビヒクル）から試験化合物溶液を調製した。すべての調製にポリスチレン管およびプレートを使用した。
【０３１１】
９６ウエル平底ポリスチレンプレートで膨潤アッセイを完了した。それぞれのウエルにおいて、合計１００〜２００μｇのタンパク質と等価の１０μＬのミトコンドリア懸濁液アリコートを９０μＬの試験化合物と組み合わせ、１０分間インキュベートし、その後、プレートリーダーでベースライン吸光度を測定した（５４０ｎｍ波長；Ａ５４０）。１９０μｍの最終カルシウム濃度を達成するように５μＬの４ｍＭ塩化カルシウムを添加することにより、膨潤を誘導した。Ａ５４０の低下は、ミトコンドリア膨潤を示した。カルシウム添加直後、および２０分まで時折、Ａ５４０を測定し、２０分のときにはＡ５４０のさらなる減少は観察されなかった。二重反復試験サンプルをそれぞれの試験化合物濃度についてアッセイした。
【０３１２】
図１は、ＣｓＡの不在または存在下での塩化カルシウム添加後のミトコンドリア吸光度の時間経過を示すものである。カルシウムによって誘導されるＡ５４０の低下の阻止によって示されるように、ＣｓＡは、濃度依存的にミトコンドリア膨潤を阻害した。二重反復試験サンプルの平均値および範囲を示す。
【０３１３】
【表２９】
2015155426.tif 000109
【０３１４】
【表３０】
2015155426.tif 000110
【０３１５】
【表３１】
2015155426.tif 000111
【０３１６】
【表３２】
2015155426.tif 000112
【０３１７】
【表３３】
2015155426.tif 000113
【０３１８】
表１は、上記反応１〜１８を用いて合成可能な代表化合物である多数の同定されたＮＩＣＡＭＳを示すものである。ＮＩＣＡＭは、ＣｓＡよりも１０％より小さい免疫抑制効力を提示し、同時にＣｓＡよりも５％より大きなＣｙＰ結合を保持する。多くの場合、ＮＩＣＡＭのＣｙＰ結合は、ＣｓＡより５０％大きく、ＮＩＣＡＭの免疫抑制能はＣｓＡの免疫抑制能と比較してその５％より小さい値まで下がる。
【０３１９】
本発明の様々な実施形態および観点を説明したものである「発明を実施するための形態」により本発明を説明したが、本発明の全範囲が本明細書に提示する実施例に限定されないことは、当業者にはわかるであろう。本発明は、添付の特許請求の範囲に示すものと等価であることがわかるだろう任意の要素または態様を含む、本特許明細書の特許請求の範囲に対応する範囲を有する。
【図１】
2015155426.tif 000115
【外国語明細書】
2015155426000001.pdf
2015155426000002.pdf
2015155426000003.pdf
2015155426000004.pdf