(57)【要約】【課題】消化管内真菌感染動物モデルの作製方法及び該方法により作製された消化管内真菌感染動物モデルを用いた真菌感染症に予防治療効果を有する活性物質のスクリーニング方法を提供する。【解決手段】げっ歯目に属する動物に、免疫抑制効果のある薬剤および抗生物質によって、該動物を真菌に易感染状態にし、また、感染源である真菌には薬剤処理を施して形態および代謝系に変化を加えて該動物に対して易感染性に移行させる。真菌を該動物の消化管内に接種し、その後、該動物を麻痺させる薬剤を投与して麻痺させ、一定時間麻痺を持続させることにより、該動物の消化管内に真菌を定着させるとともにその時間内に酵母形から菌糸形への変化を強く誘導することを特徴とする消化管内真菌感染動物モデル及びその作製方法であり、麻痺させる薬剤が精神安定剤もしくは麻酔剤のいずれか又はそれらの両方であること、微生物が真菌であること、その真菌が薬剤によって菌糸形に誘導されていること、及びげっ歯目に属する動物がマウスであることを望ましい態様としている。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
げっ歯目に属する動物に、真菌を酵母形から菌糸形に変化させる物質を投与することによって、該動物消化管内の真菌定着を高める消化管内真菌感染動物モデルの作製方法。
【請求項２】
真菌が発育形を酵母形から菌糸形に変化させる物質として、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、あるいは、それを、生体内で産生する類縁化合物を経口投与して作製する請求項１に記載の消化管内真菌感染動物モデルの作製方法。
【請求項３】
げっ歯目に属する動物に、真菌を経口接種し、その菌を該動物の消化管内に定着させることを特徴とする請求項１または２の消化管内真菌感染動物モデルの作製方法。
【請求項４】
げっ歯目に属する動物がマウスである請求項１〜３のいずれか一項に記載の消化管内真菌感染動物モデルの作製方法。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法により作製され、真菌が消化管内に定着している消化管内真菌症動物モデル。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法により作製した消化管真菌感染動物モデルを用いた、真菌感染に及ぼす薬物作用を調べる評価法。
【請求項７】
消化管感染の程度を、胃と腸の症状により判定する請求項６に記載の評価法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】本発明は、消化管内に微生物が感染して発生する病態およびそこから微生物が血流内に侵入して引き起こす全身性の病態の予防法、診断法、治療法を開発するための、微生物を消化管内に感染させた消化管感染動物モデルの作製方法、および、その感染動物モデルを用いた真菌症に予防治療効果を有する活性物質のスクリーニング方法に関する。本発明の方法により作製された消化管真菌感染動物モデルは、消化管から全身に広がる内臓真菌症および深在性真菌症等の疾患を予防又は治療するための医薬品及び食品を開発することを目的としたスクリーニングに有用である。
【背景技術】
【０００２】感染症の予防と治療のためには、発症のメカニズムを解明したり、治療薬を開発しなければならないが、このためには感染症の動物モデルにおける実験が不可欠である。つまり、ヒトの感染症に近い病態を再現する動物モデルを作製し、これを用いることによって発症のメカニズムの解明や治療方法の検討が可能となる。【０００３】感染症の予防治療効果を目的とした動物モデルに関する特許としては、特開２０００−１９７４２７号公報では、胃内へヘリコバクター・ピロリ菌を定着させたヘリコバクター・ピロリ感染動物モデル及びその作製方法（マウス）が開示されており、特表２００１−５２３１１６で他の動物について同様の感染モデルとその作成方法が開示されている。また、特開２０００−２６２１８２号公報では、肺炎球菌等を肺へ感染させた肺感染モデル動物の作製方法が開示されている。ウイルス感染モデルについては、特開２００８−０２２８５３および特表平０８−５１１９３７で肝炎ウイルス感染症、特開２００４−２０１５４６でヒト免疫不全ウイルスタイプ１、特表２００７−５０５１６３ではＳＡＲＳ感染モデルが開示されている。真菌感染症動物モデルとしては、口腔に関して特開２００３−１０２３２９で開示されているが、いずれの技術も消化管への真菌感染のモデルとしては使用できない。【０００４】真菌の中にはカンジダきんを含めて腸内常在真菌、いわゆるマイコバイオームとしてヒトの体内で病原化することなく生存するものが報告されている（キャラクテリゼーション・オブ・ザ・オーラル・ファンガル・マイクロバイオーム（マイコバイオーム）・イン・ヘルシー・インディビヂュアルズ、マーモウド・ギャニウム他著［Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｏｒａｌ  ｆｕｎｇａｌ  ｍｉｃｒｏｂｉｏｍｅ（ｍｙｃｏｂｉｏｍｅ）ｉｎ  ｈｅａｌｔｈｙ  ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ，Ｍａｈｍｏｕｄ  Ａ．Ｇｈａｎｎｏｕｍ  ｅｔ  ａｌ．］  ＰＬｏＳ  Ｐａｔｈｏｇｅｎｓ６巻ｅ１０００７１３、２０１０年）。この報告は、今後、腸管真菌感染が宿主消化管の病理・生理状態に影響を及ぼし、腸の炎症性疾患にとどまらず、ヒトの健康状態に強く影響する可能性を示唆している。また、それらの真菌類もひとたび宿主の健康状態が変化すると内臓および深在性（全身性）真菌症として病気を引き起こす原因となる。特に、カンジダ属の真菌は通常消化管内に常在するが、何らかの要因で、カンジダ菌が増殖し、消化管バリアーを越えて、血流内に侵入し、全身性カンジダ症をおこすことが知られている（キャンディダ・アンド・キャンディディエーシス、リチャード・カルデロン編、アメリカ微生物協会出版［Ｃａｎｄｉｄａ  ａｎｄ  Ｃａｎｄｉｄｉａｓｉｓ］ｅｄｉｔｅｄ  ｂｙ  Ｒｉｃｈａｒｄ  Ａ．Ｃａｌｄｅｒｏｎｅ，ＡＳＭ  ｐｒｅｓｓ）、２００２年）。更に、入れ歯利用者のカンジダ感染は年配者の間に広く起こる口内炎に端を発して、内臓性および深在性（全身性）への移行する病態であり、消化管感染症の診断や治療に関する研究が現在も盛んに進められている。このような状況から消化管感染病態の動物モデルの開発は、消化管感染症の診断法や治療法の開発及び消化管関連の炎症性疾患のあたらな治療法開発に結びつく重要な課題であると考えられる。【０００５】従来、感染症の中でも消化管感染病態の動物モデルとしては、げっ歯目に属する動物が用いられてきており、消化管内に微生物を感染させることによって動物モデルが作製され、治療法の前臨床評価に利用されている。一方、疾病に対する治療効果を有する活性物質は、様々な方法によるスクリーニングが行われることによって、その効果が評価されるが、消化管感染症に予防治療効果を有する活性物質についても、スクリーニングによって薬剤としての可能性や予防治療効果に対する検討がなされている。
【本発明が解決しようとする課題】
【０００６】しかし、従来の消化管感染動物モデルにおいては、微生物の定着が不充分で、感染巣ができにくいことから消化管、特に、胃・腸での症状を認めにくく、胃・腸での真菌感染モデルは報告されていない。また、特殊な系統で遺伝的に免疫不全性を示すマウスなどでの感染実験は行われているが、マウスが非常に高価で、限られた研究所での実験に供されている。通常用いられる比較的安価な系統の動物を用いて、一般の研究室での実施が可能な、そして、微生物の定着率が高い消化管内感染動物モデル作製方法の開発が希求されていた。
【０００７】一方、従来のスクリーニング方法においては、微生物の感染率が低い消化管感染動物モデルを使用していたため、消化管感染症に予防治療効果を有する活性物質のスクリーニングを行った場合、例えば、最適な投与量を判定するスクリーニングにおいては、本来効果が弱い活性物質であっても、その効果は現れやすいために、最適な投与量を検討するにはスクリーニング精度が低すぎるという問題が生じていた。また、特定の活性物質の選定を行うスクリーニングにあっては、種々の活性物質を使用しても治療効果にあまり差が出てこないことから、特定の病態の治療に対して、どの活性物質を使用することが最適かをスクリーニングするにはデータとして不充分であった。即ち、消化管感染症に予防治療効果を有する活性物質に対する精度の高いスクリーニング方法の開発が望まれていた。
【０００８】このような実情に鑑みて、本発明者らは鋭意検討を重ねた結果、既に我々が、口腔内では真菌の一種であるカンジダについて酵母形から菌糸形への移行を促し、カンジダ感染症の悪化が検証されて論文として報告した（メディカル・マイコロジー［Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｍｙｃｏｌｏｇｙ］第５０巻、第２５２頁乃至２５８頁、２０１２年）Ｎ‐ａｃｅｔｙｌｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ（ＧｌｃＮＡｃ）を投与したげっ歯類の消化管内感染モデルでは、従来よりもカンジダの定着量が多く、感染の重篤度の高いことを見出し、本発明が可能であることが判明した。
【０００９】また、該動物の消化管内に真菌であるカンジダを感染後に薬剤を投与して一定時間麻痺を持続させることにより作製された消化管内感染動物モデルでは、従来よりも微生物の定着の効果が高いことを見出し、本発明を完成するに至った。更に、本発明の方法に従って作製された消化管感染動物モデルを使用することにより、消化管感染症に予防治療効果を有する活性物質のスクリーニングの精度が高まることが確認された。
【００１０】本発明の第一の目的は、操作が簡便であり、且つ高い定着率で微生物を消化管内に感染させられる消化管感染動物モデルの作製方法を提供することである。
【００１１】本発明の第二の目的は、第一の目的の作製方法により作製された消化管感染動物モデルを提供することである。
【００１２】本発明の第三の目的は、第一の目的の作製方法により消化管感染動物モデルを作製し、作製した消化管感染動物モデルに消化管内感染症に予防治療効果を有する活性物質を投与し、投与した活性物質の効果を評価することを特徴とする消化管内感染症に予防治療効果を有する活性物質のスクリーニング方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１３】前記課題を解決する本発明の第一の発明は、げっ歯目に属する動物に、真菌の代謝に影響してその形態を酵母形から菌糸形に変化させることによって、真菌が該動物に感染する効率が圧倒的に高くなるような薬剤を投与して、次いで該動物に真菌を経口接種し、該動物の消化管内に微生物を定着させることを特徴とする消化管感染動物モデルの作製方法であり、薬剤がＧｌｃＮＡｃおよび、それを生体内で産生する類縁化合物、または、血清のどちらか一方か両方であること、微生物が真菌であること、及びげっ歯目に属する動物がマウスであることを特に望ましい態様としている。
【００１４】前記課題を解決する本発明の第二の発明は、完成した消化管内感染モデルマウスの消化管感染の程度を、胃と腸の症状により判定するスクリーニング方法の開発である。前記消化管内真菌症モデルマウスでは、胃や腸への感染が強いので、特に、胃では感染の程度を肉眼的にカンジダによる白苔の形成の程度でスコア化することにより、より簡便にかつ客観的に症状の程度を評価することができるようになった。
【００１５】一般に、薬理試験等において、スクリーニングとは、特別の目的で設計されたスクリーニング計画にかけて有効で毒性が小さいと推定される物質を選び出すこととして定義されるが、本発明においてスクリーニングとは、本発明の消化管感染動物モデルに、消化管感染症に予防治療効果を有する活性物質を投与し、消化管内の感染の程度を指標として、投与した活性物質の効果を評価する工程等を組み合わせることを特徴とする消化管感染症に予防治療効果を有する活性物質の判定又は選定を意味する。尚、本発明において、消化管感染症に予防治療効果を有する活性物質は、抗真菌剤であることを望ましい態様とし、その他にもプロバイオティクスなども次いで望ましい態様とする。その投与方法は、経口投与、静脈投与、及び腹腔内投与等を例示することが可能であり、投与量は、薬剤の種類、投与方法、投与される動物の種類、年齢、性別、及び消化管感染症の症状等に応じて適宜設定することができる。更に、投与した活性物質による消化管感染動物モデルの病態変化の結果から、例えば活性物質の望ましい投与量の判定、又は特定の消化管感染症に最も治療効果を発揮する活性物質の選定等を行うことによって、活性物質の効果を評価することが可能である。
【００１６】また、本発明のスクリーニング法においては、消化管内の感染の程度は、例えば胃の症状により判定することができる。胃の症状は、例えば後述の「胃症状スコア」のように数値化することによって、定量的な判定が可能となる。また、消化管感染動物モデルの作製においても、前記のようにして舌の症状を指標として、消化管内の感染の程度を判定することによって、高い定着率で微生物が消化管内に感染した消化管感染動物モデルを製造することができる。なお、以下の実施例では、Ｎ‐ａｃｅｔｙｌｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ（ＧｌｃＮＡｃ）を用いているが、当然ながら、ＧｌｃＮＡｃと同様の活性を発揮する、あるいは、ＧｌｃＮＡｃを腸内で産生するような化合物、もしくは、チロソール（ｔｙｒｏｓｏｌ）などの菌糸誘導作用がある化合物でも原理的には可能である。
【実施例】
【００１７】本発明を以下の実施例によりさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
実施例１：本試験は、本発明の根幹的効果であるＮ‐ａｃｅｔｙｌｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ（ＧｌｃＮＡｃ）の有無によるマウス消化管カンジダ感染の悪化について検討するために、濃度を変えてＧｌｃＮＡｃを投与した動物にカンジダを感染させ、感染後に精神安定剤によって鎮静化すると同時にカンジダ菌を消化管に定着させた動物モデルの消化管への微生物の定着効果を検討した。
（１）動物モデルの作製と試料の調製：５週齢、ＩＣＲ系雌性マウス（日本チャールス・リバー（株）より購入）、１群５匹で計１５匹を、１週間予備飼育した。感染前日に副腎皮質ホルモンであるプレドニゾロン（三鷹製薬社製）を１００ｍｇ／ｋｇ体重となるように皮下投与し、給水（滅菌水道水）液中に４．２ｍｇ／ｍｌとなるようにＣＴＣ可溶散「ＳＰ」（塩酸テトラサイクリン；住化エンビロサイエンス株式会社）を添加して自由摂取させた。さらに、給水中にそれぞれの群ごとにＮ−アセチル−Ｄ（＋）‐グルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ：和光純薬工業株式会社）を終濃度０、２５、５０ｍＭとなるように添加した。
感染させる真菌には、カンジダ菌（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ  ＴＩＭＭ１７６８株、帝京大学医真菌研究センターより入手可能。）を使用し、感染直前に細胞数が２×１０８個／ｍｌとなるように、２．５％ウシ胎児血清（ギブコ社製）を含むＲＰＭＩ１６４０液体培地（ギブコ社製）に懸濁して接種菌液を調製した。
動物を麻痺させる目的として使用した薬剤は、精神安定剤であるクロルプロマジン塩酸塩（和光純薬社製）を生理食塩水（大塚製薬社製）に、０．２５％となるように溶解した。
感染当日、感染３時間前に該動物の餌を取り除き、感染時にはマウスを手で固定して口腔を大きく開かせ、マウス様のゾンデでＣａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ  ＴＩＭＭ１７６８株２×１０８個／ｍｌを０．２ｍｌ投与した。投与後、１時間後に、マウスの左右大腿部に試料１乃至試料４又は対照試料をそれぞれ１００μｌ筋肉注射し、消化管感染動物モデルを作製した。
（２）試験方法：感染３日目に、マウスを頚椎脱臼でと殺し、消化管感染の程度を、感染動物モデルの胃の症状によって表１に示す６段階の評価をスコア化し、その平均を算出することによって「胃症状スコア」として示した［表１］。
更に、消化管をそれぞれの臓器の部分ごとに切り出し、内容物を生理食塩水で洗浄した後に破砕機によって細かく砕き、生理食塩水に懸濁し、希釈後、これをカンジダＧＳプレート（栄研化学社製）にまき、３７℃、２０時間培養し菌数を計測した。
（３）試験結果：本試験の結果は、表２に示すとおりである。表２は、ＧｌｃＮＡｃ濃度を変えた飲み水で飼ったマウスの濃度別の感染した微生物の数、及び胃症状スコアを示した表である。表２から明らかなとおり、生菌数では３倍程度の増加であるが、白苔症状で明確な差が認められた。真菌感染の際に、ＧｌｃＮＡｃを予め投与しておくと真菌は効果的にマウスに定着することが判明した。【００１８】実験例２：本試験は真菌感染後に精神安定剤を投与して動物モデルを鎮静化させ、カンジダ菌の消化管への定着を誘導する際に、カンジダ投与後精神安定剤を投与するまでの時間経過を変化させて定着の効果を検討した。
（１）動物モデルの作製と試料の調製：５週齢、ＩＣＲ系雌性マウス（日本チャールス・リバー（株）より購入）、１群４匹で５群計２０匹を、１週間予備飼育した。感染前日に副腎皮質ホルモンであるプレドニゾロン（三鷹製薬社製）を１００ｍｇ／ｋｇ体重となるように皮下投与し、給水（滅菌水道水）液中に４．２ｍｇ／ｍｌとなるようにＣＴＣ可溶散「ＳＰ」（塩酸テトラサイクリン；住化エンビロサイエンス株式会社）を添加して自由摂取させた。さらに、給水中に全ての群にＮ−アセチル−Ｄ（＋）‐グルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ：和光純薬工業株式会社）を終濃度２５ｍＭとなるように添加した。
感染させる真菌には、カンジダ菌（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ  ＴＩＭＭ１７６８株、帝京大学医真菌研究センターより入手可能。）を使用し、感染直前に細胞数が２×１０８個／ｍｌとなるように、２．５％ウシ胎児血清（ギブコ社製）を含むＲＰＭＩ１６４０液体培地（ギブコ社製）に懸濁して接種菌液を調製した。
動物を麻痺させる目的として使用した薬剤は、精神安定剤であるクロルプロマジン塩酸塩（和光純薬社製）を生理食塩水（大塚製薬社製）に、０．２５％となるように溶解した。
感染当日、感染３時間前に該動物の餌を取り除き、感染時にはマウスを手で固定して口腔を大きく開かせ、マウス様のゾンデでＣａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ  ＴＩＭＭ１７６８株２×１０８個／ｍｌを０．２ｍｌ投与した。真菌感染後の時間経過とともに試料１（０．５時間）、試料２（１時間）、試料３（２時間）、及び試料４（４時間）にマウスの左右大腿部に試料１乃至試料４又は対照試料をそれぞれ１００μｌ筋肉注射し、消化管感染動物モデルを作製した。
（２）試験方法：感染３日目に、マウスを頚椎脱臼でと殺し、消化管感染の程度を、表１に示す６段階の「胃症状スコア」によって判定し、各群ごとに平均化した。
更に、消化管をそれぞれの臓器の部分ごとに切り出し、内容物を生理食塩水で洗浄した後に破砕機によって細かく砕き、生理食塩水に懸濁し、希釈後、これをカンジダＧＳプレート（栄研化学社製）にまき、３７℃、２０時間培養し菌数を計測した。
（３）試験結果：本試験の結果は、表３に示すとおりである。表３は、真菌を感染させてから１時間以上してから、マウスを麻痺させると定着の効果は高められ、４時間後以降に麻痺させてもその効果が軽減することが顕著である。マウスはこの条件で３時間は麻痺した状態を継続したので、真菌感染後１時間から２時間ほどでマウスを麻痺させ、その麻痺が３時間ほど継続させることによってカンジダ感染率が上昇することが判明した。【００１９】  実験例３：本試験は、実施例１および２で行った消化管内感染動物モデルを用いてカンジダ感染症に対して治療効果の期待される乳酸菌を投与した群と非投与群での胃でのカンジダ感染の程度を判断してこの乳酸菌の抗真菌活性を評価することを目的とした。
（１）動物モデルの作製と試料の調製：５週齢、ＩＣＲ系雌性マウス（日本チャールス・リバー（株）より購入）、１群６匹で２群計１２匹を、１週間予備飼育した。感染前日に副腎皮質ホルモンであるプレドニゾロン（三鷹製薬社製）を１００ｍｇ／ｋｇ体重となるように皮下投与し、給水（滅菌水道水）液中に４．２ｍｇ／ｍｌとなるようにＣＴＣ可溶散「ＳＰ」（塩酸テトラサイクリン；住化エンビロサイエンス株式会社）を添加して自由摂取させた。さらに、給水中に全ての群にＮ−アセチル−Ｄ（＋）‐グルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ：和光純薬工業株式会社）を終濃度２５ｍＭとなるように添加した。
感染させる真菌には、カンジダ菌（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ  ＴＩＭＭ１７６８株、帝京大学医真菌研究センターより入手可能。）を使用し、感染直前に細胞数が２×１０８個／ｍｌとなるように、２．５％ウシ胎児血清（ギブコ社製）を含むＲＰＭＩ１６４０液体培地（ギブコ社製）に懸濁して接種菌液を調製した。
動物を麻痺させる目的として使用した薬剤は、精神安定剤であるクロルプロマジン塩酸塩（和光純薬社製）を生理食塩水（大塚製薬社製）に、０．２５％となるように溶解した。
感染当日、感染３時間前に該動物の餌を取り除き、感染時にはマウスを手で固定して口腔を大きく開かせ、マウス様のゾンデでＣａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ  ＴＩＭＭ１７６８株２×１０８個／ｍｌを０．２ｍｌ投与した。真菌感染後１時間でマウスの左右大腿部にクロロプロマジンそれぞれ１００μｌ（５０μｌ×２）筋肉注射し、消化管感染動物モデルを作製した。また、感染３時間後にカンジダに対して感染抑制効果の期待される乳酸菌Ａと対照として生理食塩水をカンジダ感染と同様の方法で胃内に投与した。
（２）試験方法：感染３日目に、マウスを頚椎脱臼でと殺し、消化管感染の程度を、表１に示した６段階の「胃症状スコア」によって判定し、群ごとにスコアを平均化した。
更に、消化管をそれぞれの臓器の部分ごとに切り出し、内容物を生理食塩水で洗浄した後に破砕機によって細かく砕き、生理食塩水に懸濁し、希釈後、これをカンジダＧＳプレート（栄研化学社製）にまき、３７℃、２０時間培養し菌数を計測した。
（３）試験結果：本試験の結果は、表４に示すとおりである。乳酸菌Ａ投与群ではＣＦＵおよび胃の症状のスコアの両方でカンジダによる感染の改善傾向がみられた。しかも、症状によるスコアの方がより簡便に顕著にその効果を判断することができた。
【表と図の簡単な説明】
【００２０】
【表１】
動物モデルの胃の内壁に形成された白苔の量を胃内壁表面積に占める割合で分類し、スコア化した。白苔の割合が大きくなると胃症状のスコアの数が増える形式になっている。
【００２１】
【図１】
ＡはＮ−アセチル−Ｄ（＋）‐グルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）投与カンジダ感染マウスの胃の内壁の症状を示す写真、スコアは“５点”。Ｂは正常マウスの胃の内壁の状態を示す写真、スコアは“０点”。
【００２２】
【表２】
給水中のＧｌｃＮＡｃの濃度変化とカンジダ感染の程度の関連を示す表。試料１は２５ｍＭの濃度になるように、試料２は５０ｍＭの濃度になるようにマウスの飲料水にＧｌｃＮＡｃを溶解し、その後、カンジダを感染させたマウスの胃の感染状態を胃内の菌数と症状のスコアで示した。対照試料１はＧｌｃＮＡｃを全く与えていない。
【００２３】
【表３】
カンジダ感染後の精神安定剤投与条件と感染後の変化について示す表。マウスの給水中の飲用水に２５ｍＭの濃度になるようにＧｌｃＮＡｃを添加し、その後、カンジダを感染させ、感染後の３０分、１、２、４時間後に精神安定剤を投与して、カンジダ感染の程度を胃内の菌数と胃の症状スコアとの関連で示した。カンジダ感染後１〜２時間後に精神安定剤を投与して鎮静化するとカンジダの感染が増強されることが分かった。
【００２４】
【表４】
カンジダ感染に対する乳酸菌による治療効果を示す表。マウスの給水中の飲用水に２５ｍＭの濃度になるようにＧｌｃＮＡｃを添加し、その後、カンジダを感染させ、感染後の１時間後に精神安定剤を投与した。また、試料１はカンジダ感染３時間後に乳酸菌Ａを投与し、試料２については同様に３時間後に生理食塩水を投与した。乳酸菌Ａ投与群でカンジダの胃内菌数および胃症状スコアが改善された。
【表１】
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【表２】
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【表３】
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【表４】
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