(57)【要約】【課題】卵巣明細胞腺癌細胞を容易に検出可能とする、卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法を提供する。【解決手段】本発明は、生体試料中の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法であって、以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質を腫瘍マーカーとして用いる工程Ａを有することを特徴とする卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法を提供する。（ａ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列、（ｂ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列において、１〜数個のアミノ酸が欠失、置換、又は付加されているアミノ酸配列、（ｃ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列に対して、８０％以上の同一性を有するアミノ酸配列【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体試料中の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法であって、以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質を腫瘍マーカーとして用いる工程Ａを有することを特徴とする卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法。
（ａ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列、
（ｂ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列において、１〜数個のアミノ酸が欠失、置換、又は付加されているアミノ酸配列、
（ｃ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列に対して、８０％以上の同一性を有するアミノ酸配列
【請求項２】
前記工程Ａは、前記生体試料中の前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質を検出する工程Ａ１を有する請求項１に記載の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法。
【請求項３】
前記工程Ａ１は、前記タンパク質に対する特異的抗体を用いて前記タンパク質を検出する工程である請求項２に記載の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法。
【請求項４】
前記工程Ａは、生体試料中の前記タンパク質を規定するポリヌクレオチドの発現を検出する工程Ａ２を有する請求項１に記載の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法。
【請求項５】
前記工程Ａ２は、以下の（ｄ）〜（ｆ）のいずれかの塩基配列に基づいて作製したプローブ及び／又はプライマーを用いて、前記タンパク質を規定するポリヌクレオチドの発現を検出する工程である請求項４に記載の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法。
（ｄ）配列番号３又は４で表される塩基配列、
（ｅ）配列番号３又は４で表される塩基配列において、１〜数個のヌクレオチドが欠失、置換、又は付加されている塩基配列、
（ｆ）配列番号３又は４で表される塩基配列に対して、８０％以上の同一性を有する塩基配列
【請求項６】
前記工程Ａ２は、配列番号５で表される塩基配列、及び／又は、配列番号６で表される塩基配列を有するプローブ及び／又はプライマーを用いて前記タンパク質を規定するポリヌクレオチドの発現を検出する工程である請求項４又は５に記載の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法。
【請求項７】
前記生体試料が卵巣明細胞腺癌細胞の検出対象者から採取された体液である請求項１〜６のいずれか一項に記載の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法。
【請求項８】
以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質に対する特異的抗体を含有することを特徴とする卵巣明細胞腺癌診断薬。
（ａ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列、
（ｂ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列において、１〜数個のアミノ酸が欠失、置換、又は付加されているアミノ酸配列、
（ｃ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列に対して、８０％以上の同一性を有するアミノ酸配列
【請求項９】
配列番号５で表される塩基配列を有するプライマー、及び配列番号６で表される塩基配列を有するプライマーを含むことを特徴とする卵巣明細胞腺癌診断用プライマー。
【請求項１０】
請求項９に記載の卵巣明細胞腺癌診断用プライマーを含むことを特徴とする卵巣明細胞腺癌診断用キット。
【請求項１１】
以下の（ｇ）〜（ｉ）のいずれかを含むことを特徴とする卵巣明細胞腺癌診断用プローブ。
（ｇ）配列番号７又は８で表される塩基配列の少なくとも一部を含む塩基配列、又は配列番号７又は８で表される塩基配列と相補的な塩基配列の少なくとも一部を含む塩基配列、を含むヌクレオチド断片、
（ｈ）配列番号７又は８で表される塩基配列において１〜数個のヌクレオチドが欠失、置換、又は付加されている塩基配列の少なくとも一部を含む塩基配列、
又は配列番号７又は８で表される塩基配列において１〜数個のヌクレオチドが欠失、置換、又は付加されている塩基配列と相補的な塩基配列の少なくとも一部を含む塩基配列、を含むヌクレオチド断片、
（ｉ）配列番号７又は８で表される塩基配列の少なくとも一部を含む塩基配列、又は配列番号７又は８で表される塩基配列と相補的な塩基配列の少なくとも一部を含む塩基配列を有するポリヌクレオチドと、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド又はヌクレオチド断片
【請求項１２】
請求項１１に記載の卵巣明細胞腺癌診断用プローブを含むことを特徴とする卵巣明細胞腺癌診断用キット。
【請求項１３】
以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質に対する特異的抗体を含有することを特徴とする卵巣明細胞腺癌診断キット。
（ａ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列、
（ｂ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列において、１〜数個のアミノ酸が欠失、置換、又は付加されているアミノ酸配列、
（ｃ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列に対して、８０％以上の同一性を有するアミノ酸配列
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法、卵巣明細胞腺癌診断薬、卵巣明細胞腺癌診断用プライマー、卵巣明細胞腺癌診断用キット、及び卵巣明細胞腺癌診断用プローブに関する。
【背景技術】
【０００２】
卵巣癌は、その解剖学的位置関係から、画像による早期診断は困難なことが多い。また、卵巣発癌機構の解析も大幅に遅れており、分子標的薬を含む新規治療法の開発へも深刻な影響を及ぼしている。最近、一部の卵巣癌（明細胞腺癌・類内膜腺癌）の前駆病変として、子宮内膜症性卵巣嚢胞が注目されている。これは、月経を有する約10％の女性に認められる現代病で、治療法として、40歳代で6cm以上、閉経後は大きさによらず全て摘出することが推奨されている。しかしながら、手術侵襲や術後後遺症等のリスクを考慮すると、癌合併を予知する早期診断法の確立が必要である。
卵巣癌は、Clear Cell（明細胞）、Endometrioid（類内膜性）、Serous（漿液性）、Mucinous（粘液性）の４種の組織型に分類することができる。なかでも卵巣明細胞腺癌は、既存の抗癌剤には低感受性で治療に苦渋することが多い点から、新規治療法の開発が望まれている。これまでに、明細胞腺癌に特異的に発現する遺伝子としてHepatocyte nuclear factor (HNF)-1βが報告されている（非特許文献１）。しかし、卵巣明細胞腺癌症例の中にはHNF-1β発現の陰性例も認められる。したがって、より正確な診断を実現するためにも、新規診断マーカーの開発が望まれている。
【０００３】
Left right determinant factor (LEFTY)はtransforming growth factor β（TGF-β）スーパーファミリーの１因子であり、中内胚葉の形成や胚形成における左右軸決定に重要な役割を担う分子として同定された（非特許文献２〜３参照）。他のTGF-βファミリー分子と異なり、同じスーパーファミリー因子であるNodalと拮抗性に働くことが知られており、LEFTYとNodalの活性のバランスにより適切な発生が行われている（非特許文献４参照）。また、ES細胞は他の幹細胞に比べLEFTY遺伝子のメチル化が少なく、エピジェネティックにNodal/TGF-β-LEFTYシグナルが調節されていることが知られている（非特許文献５〜６参照）。さらに、miR-302により制御されていることも明らかとなり、microRNA依存LEFTY発現はES細胞において、細胞の多機能性と分化性の均衡を保っていると考えられている（非特許文献７参照）。
近年、腫瘍におけるLEFTYの発現は、腫瘍増殖抑制因子として機能していることが報告され、ヌードマウスを用いたin vivo実験においても、腫瘍細胞にLEFTYを導入した結果増殖が制御された（非特許文献８〜１０参照）。しかし、これまでに、LEFTYと卵巣明細胞腺癌との関連は知られていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Tsuchiya A, Sakamoto M, Yasuda J, Chuma M, Ohta T, Ohki M, Yasugi T, Taketani Y, Hirohashi S. Expression profiling in ovarian clear cell carcinoma: identification of hepatocyte nuclear factor 1 beta as a molecular marker and a possible molecular target for therapy of ovarian clear cell carcinoma. Am J Pathol. 2003, 163, 2503-2512.
【非特許文献２】Meno C, Saijoh Y, Fujii H, Ikeda M, Yokoyama T, Yokoyama M, Toyoda Y, Hamada H. Left-right asymmetric expression of the TGF beta-family member lefty in mouse embryos. Natrure. 1996, 381, 151-155.
【非特許文献３】Meno C, Ito Y, Saijoh Y, Matsuda Y, Tashiro K, Kuhara S, Hamada H. Two closely-related left-right asymmetrically expressed genes, lefty-1 and lefty-2: their distinct expression domains, chromosomal linkage and direct neuralizing activity in Xenopus embryos. Genes Cells. 1997, 8, 513-524.
【非特許文献４】Schier AF. Annu Rev Cell Dev Biol. 2003, 19, 589-621.
【非特許文献５】Costa FF, Seftor EA, Bischof JM, Kirschmann DA, Strizzi L, Arndt K, Bonaldo Mde F, Soares MB, Hendrix MJ. Epigenetically reprogramming metastatic tumor cells with an embryonic microenvironment. Epigenomics. 2009, 1, 387-398.
【非特許文献６】Malchenko S, Malchenko S1, Galat V, Seftor EA, Vanin EF, Costa FF, Seftor RE, Soares MB, Hendrix MJ. Cancer hallmarks in induced pluripotent cells: new insights. J Cell Physiol. 2010, 225, 390-393.
【非特許文献７】Barroso-delJesus A, Lucena-Aguilar G, Sanchez L, Ligero G, Gutierrez-Aranda I, Menendez P. The Nodal inhibitor Lefty is negatively modulated by the microRNA miR-302 in human embryonic stem cells. FASEB J. 2011, 25, 1497-1508.
【非特許文献８】Yashiro K, Saijoh Y, Sakuma R, Tada M, Tomita N, Amano K, Matsuda Y, Monden M, Okada S, Hamada H. Distinct transcriptional regulation and phylogenetic divergence of human LEFTY genes. Genes Cells. 2000, 5, 343-357.
【非特許文献９】Tabibzadeh S, Kothapalli R, Buyuksal I. Distinct tumor specific expression of TGFB4 (ebaf)*, a novel human gene of the TGF-beta superfamily. Front Biosci 1997 2, a18-25.
【非特許文献１０】Ulloa L, Creemers JW, Roy S, Liu S, Mason J, Tabibzadeh S. J Biol Chem. 2001, 276, 21387-21396.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は上記事情に鑑みてなされたものであり、卵巣明細胞腺癌細胞を容易に検出可能とする、卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法、卵巣明細胞腺癌診断薬、卵巣明細胞腺癌診断用プライマー、卵巣明細胞腺癌診断用キット、及び卵巣明細胞腺癌診断用プローブの提供を課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究した結果、卵巣明細胞腺癌の病原部でLeft right determinant factor（LEFTY）が特異的に発現することを見出し、この分子を標的とすることで、卵巣明細胞腺癌細胞の検出が可能となることを見出した。
【０００７】
すなわち、本発明は、下記の特徴を有する卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法、卵巣明細胞腺癌診断薬、卵巣明細胞腺癌診断用プライマー、卵巣明細胞腺癌診断用キット、及び卵巣明細胞腺癌診断用プローブを提供するものである。
【０００８】
（１）生体試料中の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法であって、以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質を腫瘍マーカーとして用いる工程Ａを有することを特徴とする卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法。
（ａ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列、
（ｂ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列において、１〜数個のアミノ酸が欠失、置換、又は付加されているアミノ酸配列、
（ｃ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列に対して、８０％以上の同一性を有するアミノ酸配列
（２）前記工程Ａは、前記生体試料中の前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質を検出する工程Ａ１を有する前記（１）に記載の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法。
（３）前記工程Ａ１は、前記タンパク質に対する特異的抗体を用いて前記タンパク質を検出する工程である前記（２）に記載の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法。
（４）前記工程Ａは、生体試料中の前記タンパク質を規定するポリヌクレオチドの発現を検出する工程Ａ２を有する前記（１）に記載の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法。
（５）前記工程Ａ２は、以下の（ｄ）〜（ｆ）のいずれかの塩基配列に基づいて作製したプローブ及び／又はプライマーを用いて、前記タンパク質を規定するポリヌクレオチドの発現を検出する工程である前記（４）に記載の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法。
（ｄ）配列番号３又は４で表される塩基配列、
（ｅ）配列番号３又は４で表される塩基配列において、１〜数個のヌクレオチドが欠失、置換、又は付加されている塩基配列、
（ｆ）配列番号３又は４で表される塩基配列に対して、８０％以上の同一性を有する塩基配列
（６）前記工程Ａ２は、配列番号５で表される塩基配列、及び／又は、配列番号６で表される塩基配列を有するプローブ及び／又はプライマーを用いて前記タンパク質を規定するポリヌクレオチドの発現を検出する工程である前記（４）又は（５）に記載の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法。
（７）前記生体試料が卵巣明細胞腺癌細胞の検出対象者から採取された体液である前記（１）〜（６）のいずれか一つに記載の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法。
【０００９】
（８）以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質に対する特異的抗体を含有することを特徴とする卵巣明細胞腺癌診断薬。
（ａ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列、
（ｂ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列において、１〜数個のアミノ酸が欠失、置換、又は付加されているアミノ酸配列、
（ｃ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列に対して、８０％以上の同一性を有するアミノ酸配列
（９）配列番号５で表される塩基配列を有するプライマー、及び配列番号６で表される塩基配列を有するプライマーを含むことを特徴とする卵巣明細胞腺癌診断用プライマー。
（１０）前記（９）に記載の卵巣明細胞腺癌診断用プライマーを含むことを特徴とする卵巣明細胞腺癌診断用キット。
（１１）以下の（ｇ）〜（ｉ）のいずれかを含むことを特徴とする卵巣明細胞腺癌診断用プローブ。
（ｇ）配列番号７又は８で表される塩基配列の少なくとも一部を含む塩基配列、又は配列番号７又は８で表される塩基配列と相補的な塩基配列の少なくとも一部を含む塩基配列、を含むヌクレオチド断片、
（ｈ）配列番号７又は８で表される塩基配列において１〜数個のヌクレオチドが欠失、置換、又は付加されている塩基配列の少なくとも一部を含む塩基配列、
又は配列番号７又は８で表される塩基配列において１〜数個のヌクレオチドが欠失、置換、又は付加されている塩基配列と相補的な塩基配列の少なくとも一部を含む塩基配列、を含むヌクレオチド断片、
（ｉ）配列番号７又は８で表される塩基配列の少なくとも一部を含む塩基配列、又は配列番号７又は８で表される塩基配列と相補的な塩基配列の少なくとも一部を含む塩基配列を有するポリヌクレオチドと、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド又はヌクレオチド断片
（１２）前記（１１）に記載の卵巣明細胞腺癌診断用プローブを含むことを特徴とする卵巣明細胞腺癌診断用キット。
（１３）以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質に対する特異的抗体を含有することを特徴とする卵巣明細胞腺癌診断キット。
（ａ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列、
（ｂ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列において、１〜数個のアミノ酸が欠失、置換、又は付加されているアミノ酸配列、
（ｃ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列に対して、８０％以上の同一性を有するアミノ酸配列
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、卵巣明細胞腺癌細胞を検出することが可能であるので、卵巣明細胞腺癌を早期に発見できる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】免疫染色法（ＩＨＣ）により得られたＬＥＦＴＹ１／２の発現の様子を示す顕微鏡写真である。
【図２】免疫染色スコアリング結果を示すグラフである。
【図３】Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ法によるＬＥＦＴＹタンパク質の発現解析結果を示す写真である。
【図４】ＲＴ−ＰＣＲ法によるＬＥＦＴＹ ｍＲＮＡの発現解析結果を示す写真である。
【図５】培養上清中におけるＬＥＦＴＹタンパク質の発現解析結果を示す写真である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
＜Ｌｅｆｔ ｒｉｇｈｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔ ｆａｃｔｏｒ＞
プロテオミクス法は、タンパク質を二次元電気泳動法で展開し、質量分析により新規バイオマーカーを網羅的に探索する手法である。しかし、その解析には、凍結試料の状態により様々な制限があった。
発明者らはまず、卵巣明細胞腺癌患者由来の卵巣明細胞腺癌組織のホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）材料を得て、マイクロダイセクションにより明細胞腺癌細胞を含む病変部の切片を切り出した。次いで、病変部からタンパク質を抽出し、予めタンパク質をトリプシンで分解し、直接質量分析で測定・同定するショットガンプロテオミクス法を行った。これら一連の方法により病変部でのタンパク質の発現を効率よく解析することができ、卵巣明細胞腺癌細胞において高発現するタンパク質であるＬｅｆｔ ｒｉｇｈｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔ ｆａｃｔｏｒ１ （ＬＥＦＴＹ１）及びＬｅｆｔ ｒｉｇｈｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔ ｆａｃｔｏｒ２ （ＬＥＦＴＹ２）を見出すことに成功した。
【００１３】
配列番号１で表されるアミノ酸配列は、ヒトのＬＥＦＴＹ１タンパク質のアミノ酸配列であり、配列番号２で表されるアミノ酸配列は、ヒトのＬＥＦＴＹ２タンパク質のアミノ酸配列である。
配列番号３で表される塩基配列は、ヒトのＬＥＦＴＹ１遺伝子の塩基配列（コーディング領域の配列）である。配列番号４で表される塩基配列は、ヒトのＬＥＦＴＹ２遺伝子の塩基配列（コーディング領域の配列）である。
ＬＥＦＴＹ１とＬＥＦＴＹ２のアミノ酸配列の相同性をMultain version 5.4.1(http://multalin.toulouse.inra.fr/multalin/multalin.html)によって求めたところ、約９６％であった。
【００１４】
≪卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法≫
従って、本発明の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法は、生体試料中の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法であって、以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質を腫瘍マーカーとして用いる工程Ａを有するものである。
（ａ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列、
（ｂ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列において、１〜数個のアミノ酸が欠失、置換、又は付加されているアミノ酸配列、
（ｃ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列に対して、８０％以上の同一性を有するアミノ酸配列
【００１５】
ここで、トランケート型タンパク質に代表される前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質に由来するポリペプチド断片、であっても腫瘍マーカーとして用いることが可能であるので、工程Ａは、前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質を検出する工程Ａ１を有するものであってもよい。この場合、前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質は、（ａ）に対する特異的抗体と反応しうるタンパク質であることがより好ましい。
前記（ｂ）における、欠失、置換、又は付加されてもよいアミノ酸の数としては、１ 〜３０個が好ましく、１ 〜１５個がより好ましく、１ 〜１０個が特に好ましく、１ 〜 ５個が最も好ましい。
配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列に対する同一性は、８５％以上であることが好ましく、９０％以上であることがより好ましく、９５％以上であることがさらに好ましい。
【００１６】
尚、塩基配列の同一性は、例えば、ＮＣＢＩ（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ）から提供されているＢＬＡＳＴＮのプログラムを用いて解析を行うことにより算出される。アミノ酸配列の同一性は、同じくＮＣＢＩから提供されているＢＬＡＳＴＰのプログラムを用いて算出することが挙げられる。
【００１７】
これらの前記アミノ酸配列（ｂ）及びアミノ酸配列（ｃ）は、例えば、生体試料を提供する患者間又は対立遺伝子間に存在するＬＥＦＴＹ１遺伝子若しくはＬＥＦＴＹ２遺伝子の多型、変異等を有するアミノ酸配列に相当するものである。
【００１８】
前記生体試料とは、卵巣明細胞腺癌細胞の検出対象者から採取した生体試料であることが好ましい。生体試料としては、組織、細胞、体液等の区分によらずいずれのものも用いることができる。卵巣明細胞腺癌細胞の病変部を検出対象とすることを意図する場合、生体試料は腹腔及び腹膜内の臓器由来のものであることが好ましく、卵巣由来のものであることがより好ましい。また、後述の実施例で示すように、ＬＥＦＴＹ１及びＬＥＦＴＹ２タンパク質は卵巣明細胞腺癌細胞外に分泌され得る。したがって、生体試料として、尿、血液、血清、リンパ液、組織液等の体液を用いることもまた好ましく、利便性の観点から血清を用いることが特に好ましい。血清を用いることにより、卵巣明細胞腺癌細胞をより手軽に効率よく検出することが可能である。
【００１９】
前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質を腫瘍マーカーとして用いる工程Ａとは、一例として該タンパク質を検出する工程であって、例えば、前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質を検出する工程Ａ１であってもよい。又は、該タンパク質を間接的に検出する工程であって、例えば、前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質を規定するポリヌクレオチドの発現を検出する工程Ａ２であってもよい。
当該タンパク質又は当該ポリヌクレオチドの発現量を測定することで、卵巣明細胞腺癌細胞を検出することができる。例えば、卵巣明細胞腺癌に罹患していない者由来の生体試料を用いた群、及び卵巣明細胞腺癌患者由来の生体試料を用いた群でのタンパク質又はポリヌクレオチドの発現量を指標にして、検出対象者から採取した生体試料でのタンパク質又はポリヌクレオチドの発現量の値により卵巣明細胞腺癌細胞の検出を行うことができる。後述の実施例で示すように、卵巣明細胞腺癌細胞ではＬＥＦＴＹ１及びＬＥＦＴＹ２タンパク質の発現量が上昇するので、卵巣明細胞腺癌に罹患していない者由来の生体試料を用いた群と比較して、ＬＥＦＴＹ１及びＬＥＦＴＹ２の発現量が統計的に有意に上昇していることをもって、卵巣明細胞腺癌細胞の検出を判別することができる。
また、卵巣明細胞腺癌患者由来の生体試料を用いた群でのタンパク質又はポリヌクレオチドの発現量を指標にして発現量の閾値を定め、卵巣明細胞腺癌への罹患を判別しても良い。
【００２０】
卵巣明細胞腺癌への罹患の判別にあたっては、前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質を腫瘍マーカーとして用いることに加えて、その他の腫瘍マーカーとの組み合わせにより卵巣明細胞腺癌への罹患を判別しても良い。また、卵巣明細胞腺癌の腫瘍マーカーとしてはＨＮＦ−１βを挙げることができる。これらを組み合わせることで、卵巣明細胞腺癌への罹患判別の信頼性をより向上させることができる。
【００２１】
（工程Ａ１）
前記工程Ａは、前記生体試料中の前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質を検出する工程Ａ１を有するものであってもよい。
生体試料中から当該タンパク質を検出する方法としては特に制限されず、本分野の当業者において一般的な方法により実施することができる。一例として、ウェスタンブロット法、ＥＬＩＳＡ法、免疫染色等が挙げられる。また、多数の因子とともに当該タンパク質を検出する場合、抗体チップ等を用いてもよい。
【００２２】
タンパク質の検出には、前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質に対する特異的抗体を用いることが好ましい。
特異的抗体とは、ＬＥＦＴＹ１又はＬＥＦＴＹ２には結合するが、類似のタンパク質等の他の分子に対しては結合しない抗体か、又は、他の分子に結合する場合であっても卵巣明細胞腺癌細胞の検出が可能な程度の極めて低い程度でしか他のタンパク質に対しては結合しない抗体を意味する。
特異的抗体は、本分野の当業者において一般的な方法により得ることが可能である。例えば、（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列に基づいて化学合成されたポリペプチドを抗原として使用し、任意のヒト以外の動物へと免疫して目的の抗体を生産させ、動物の血清などに含まれる目的の特異的抗体のポリクローナル抗体を得ることができる。又は、目的の抗体を生産するハイブリドーマを作製するなどして、目的の特異的抗体のモノクローナル抗体を得てもよい。
抗原として使用するポリペプチドのアミノ酸配列は、（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列とすることができ、前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質を検出可能なように適宜配列を選択すればよい。
【００２３】
抗原として使用するポリペプチドのアミノ酸配列は、例えば、配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列中の１８aa〜３６６aaの領域を含むポリペプチドとすることができる。又は、配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列中の１８aa〜３６６aaの領域の領域からなるポリペプチドとすることができる。
【００２４】
また、特異的抗体は、前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質を検出可能な範囲において、タグ、放射性物質、蛍光分子、酵素等の任意の物質を有した状態とすることができる。また、特異的抗体を一次抗体とし、蛍光分子や酵素等で標識された２次抗体を用いて前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質を検出してもよい。
【００２５】
（工程Ａ２）
前記工程Ａは、生体試料中の前記タンパク質を規定するポリヌクレオチドの発現を検出する工程Ａ２を有するものであってもよい。タンパク質を規定するポリヌクレオチドとは、タンパク質をコードするＤＮＡから転写されたｍＲＮＡ、それに由来するｃＤＮＡ、及びそれらのヌクレオチド断片を例示することができる。
生体試料中から前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質を規定するポリヌクレオチドの発現を検出する方法としては、特に制限されず、本分野の当業者において一般的な方法により実施することができる。一例として、ＲＴ−ＰＣＲ、リアルタイムＰＣＲ、サザンブロット法、ノーザンブロット法等が挙げられる。また、多数の因子とともに当該ポリヌクレオチドを検出する場合、ＤＮＡチップ、ＲＮＡチップ等を用いてもよい。
【００２６】
前記工程Ａ２は、以下の（ｄ）〜（ｆ）のいずれかの塩基配列に基づいて作製したプローブ及び／又はプライマーを用いて、前記タンパク質を規定するポリヌクレオチドの発現を検出する工程であることが好ましい。
（ｄ）配列番号３又は４で表される塩基配列、
（ｅ）配列番号３又は４で表される塩基配列において、１〜数個のヌクレオチドが欠失、置換、又は付加されている塩基配列、
（ｆ）配列番号１又は２で表される塩基配列に対して、８０％以上、好ましくは８５％以上、より好ましくは９０％以上、さらに好ましくは９５％、特に好ましくは９８％以上の同一性を有する塩基配列
【００２７】
ここで、前記（ｄ）〜（ｆ）のいずれかの塩基配列に基づいて作製された配列とは、該塩基配列由来とする配列（例えば、ｍＲＮＡ配列、ｃＤＮＡ配列）に基づいて作製された配列を含むものとする。前記１〜数個のヌクレオチドとしては、１ 〜３０個が好ましく、１ 〜１５個がより好ましく、１ 〜１０個が特に好ましく、１ 〜 ５個が特に好ましい。
【００２８】
前記（ｄ）〜（ｆ）のいずれかの塩基配列に基づく配列の一例としては、（ｄ）〜（ｆ）のいずれかの塩基配列の部分配列、前記（ｄ）〜（ｆ）のいずれかの塩基配列と相補的な配列、前記（ｄ）〜（ｆ）のいずれかの塩基配列と相補的な配列の部分配列からなる配列を挙げることができる。
また、当該プローブ及び／又はプライマーの配列は、前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質を規定するポリヌクレオチドの発現を検出し得る範囲において、これらの配列に加えて、タグ等の任意の配列をさらに有していてもよい。また、当該プローブ及び／又はプライマーは、前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質を規定するポリヌクレオチドの発現を検出可能な範囲において、放射性物質、蛍光分子等の任意の物質を有した状態とすることができる。
【００２９】
より具体的には、配列番号５で表される塩基配列、及び／又は、配列番号６で表される塩基配列を有するプローブ及び／又はプライマーを用いて前記タンパク質を規定するポリヌクレオチドの発現を検出することができる。
【００３０】
本発明の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法によれば、生体試料中の卵巣明細胞腺癌細胞の存在に関する情報を容易に得ることができるため、卵巣癌を早期に発見することができる。
【００３１】
≪卵巣明細胞腺癌診断薬、卵巣明細胞腺癌診断用プライマー≫
本発明の卵巣明細胞腺癌診断薬は、以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質、又は以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質に対する特異的抗体を含有する。
（ａ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列、
（ｂ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列において、１〜数個のアミノ酸が欠失、置換、又は付加されているアミノ酸配列、
（ｃ）配列番号１又は２で表されるアミノ酸配列に対して、８０％以上の同一性を有するアミノ酸配列
特異的抗体としては、前記≪卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法≫の（工程Ａ１）において説明したものを同様のものを用いることができる。
卵巣明細胞腺癌診断薬を用いることにより、ＬＥＦＴＹ１又はＬＥＦＴＹ２タンパク質の発現を検出することができ、さらには卵巣明細胞腺癌の罹患を診断することができる。
【００３２】
本発明の卵巣明細胞腺癌診断用プライマーは、配列番号５で表される塩基配列を有するプライマー、及び配列番号６で表される塩基配列を有するプライマーを含む。
当該プライマーとしては、例えば、配列番号５又は配列番号６で表される塩基配列の５’側に対応する配列番号７又は配列番号８中の配列を有するプライマー、配列番号５又は配列番号６で表される塩基配列の５’側に任意の塩基配列を有するプライマーを挙げることができる。当該プライマーの長さの目安としては、１５〜３０ｍｅｒ程度とすることができる。
卵巣明細胞腺癌診断用プライマーを用いることにより、ＬＥＦＴＹ１又はＬＥＦＴＹ２のｍＲＮＡ由来の配列を増幅することができ、ＬＥＦＴＹ１又はＬＥＦＴＹ２のｍＲＮＡ発現を検出し、卵巣明細胞腺癌の罹患を診断することができる。
【００３３】
≪卵巣明細胞腺癌診断用プローブ≫
本発明の卵巣明細胞腺癌診断用プローブは、以下の（ｇ）〜（ｉ）のいずれかを含む。
（ｇ）配列番号７又は８で表される塩基配列の少なくとも一部を含む配列、又は配列番号７又は８で表される塩基配列と相補的な塩基配列の少なくとも一部を含む配列、を含むヌクレオチド断片、
（ｈ）配列番号７又は８で表される塩基配列において１〜数個のヌクレオチドが欠失、置換、又は付加されている塩基配列の少なくとも一部を含む配列、
又は配列番号７又は８で表される塩基配列において１〜数個のヌクレオチドが欠失、置換、又は付加されている塩基配列と相補的な塩基配列の少なくとも一部を含む配列、を含むヌクレオチド断片、
（ｉ）配列番号７又は８で表される塩基配列の少なくとも一部を含む配列、又は配列番号７又は８で表される塩基配列と相補的な塩基配列の少なくとも一部を含む配列を有するポリヌクレオチドと、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド又はヌクレオチド断片
【００３４】
配列番号７で表される塩基配列は、ヒトのＬＥＦＴＹ１遺伝子のｍＲＮＡに対応するＤＮＡ配列であり、配列番号８で表される塩基配列は、ヒトのＬＥＦＴＹ２遺伝子のｍＲＮＡに対応するＤＮＡ配列である。
配列番号７又は８で表される塩基配列と相補的な塩基配列を有するポリヌクレオチドは、例えば、それぞれＬＥＦＴＹ１遺伝子のｍＲＮＡ又はＬＥＦＴＹ２遺伝子のｍＲＮＡとハイブリダイズし、ＬＥＦＴＹ１遺伝子のｍＲＮＡ又はＬＥＦＴＹ２遺伝子のｍＲＮＡを検出することができる。したがって、相補的な塩基配列は配列番号７又は８で表される塩基配列の少なくとも一部を含む部分配列でもよく、部分配列の長さの目安としては、１５ｍｅｒ〜５０００ｍｅｒ程度、好ましくは２００ｍｅｒ〜１０００ｍｅｒ程度とすることができる。
配列番号７又は８で表される塩基配列を有するポリヌクレオチドは、例えば、それぞれＬＥＦＴＹ１遺伝子のｃＤＮＡ又はＬＥＦＴＹ２遺伝子のｃＤＮＡとハイブリダイズし得るので、ＬＥＦＴＹ１遺伝子のｃＤＮＡ又はＬＥＦＴＹ２遺伝子のｃＤＮＡを検出することができる。したがって、塩基配列は配列番号７又は８で表される塩基配列の少なくとも一部を含む部分配列でもよく、部分配列の長さの目安としては、１５ｍｅｒ〜５０００ｍｅｒ程度、好ましくは２００ｍｅｒ〜１０００ｍｅｒ程度、さらに好ましくは１５ｍｅｒ〜５００ｍｅｒ程度、特に好ましくは１５ｍｅｒ〜４０ｍｅｒ程度とすることができる。
【００３５】
前記（ｈ）において、欠失、置換、又は付加されてもよいヌクレオチドの数としては、１ 〜３０個が好ましく、１ 〜１５個がより好ましく、１ 〜１０個が特に好ましく、１ 〜 ５個が最も好ましい。
また、当該卵巣明細胞腺癌診断用プローブは、卵巣明細胞腺癌を診断可能な範囲において、放射性物質、蛍光分子等の任意の物質を有した状態とすることができる。
【００３６】
前記（ｉ）におけるストリンジェントな条件下とは、例えば、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ−Ａ ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ ＭＡＮＵＡＬ ＴＨＩＲＤ  ＥＤＩＴＩＯＮ（Sambrookら、Cold Spring Harbor Laboratory Press）に記載の方法が挙げられる。例えば、５×ＳＳＣ（２０×ＳＳＣの組成：３Ｍ 塩化ナトリウム,０．３Ｍ クエン酸溶液,ｐＨ７．０）、０．１重量％ Ｎ−ラウロイルサルコシン、０．０２重量％のＳＤＳ、２重量％の核酸ハイブルダイゼーション用ブロッキング試薬、及び５０％フォルムアミドから成るハイブリダイゼーションバッファー中で、５５〜７０℃で数時間から一晩インキュベーションを行うことによりハイブリダイズさせる条件を挙げることができる。なお、インキュベーション後の洗浄の際に用いる洗浄バッファーとしては、好ましくは０．１重量％ＳＤＳ含有１×ＳＳＣ溶液、より好ましくは０．１重量％ＳＤＳ含有０．１×ＳＳＣ溶液である。
【００３７】
≪卵巣明細胞腺癌診断用キット≫
本発明の卵巣明細胞腺癌診断用キットは、本発明の卵巣明細胞腺癌診断用プライマー、本発明の卵巣明細胞腺癌診断用プローブ、又は前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列を有するタンパク質若しくは前記（ａ）〜（ｃ）のいずれかのアミノ酸配列の部分配列を有するタンパク質に対する特異的抗体、を含むものである。
卵巣明細胞腺癌診断用プライマーとしては、前記≪卵巣明細胞腺癌診断用プライマー≫で例示したものを同様のものを用いることができる。卵巣明細胞腺癌診断用プローブとしては、前記≪卵巣明細胞腺癌診断用プローブ≫で例示したものを同様のものを用いることができる。特異的抗体としては、前記≪卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法≫の（工程Ａ１）において説明したものを同様のものを用いることができる。
また、卵巣明細胞腺癌診断をより簡便にするという観点から、本発明の卵巣明細胞腺癌診断用キットは、ＬＥＦＴＹ１又はＬＥＦＴＹ２タンパク質或いはＬＥＦＴＹ１又はＬＥＦＴＹ２ｍＲＮＡの検出に必要な試薬類、器具類等を備えていることが好ましい。ＬＥＦＴＹ１又はＬＥＦＴＹ２ｍＲＮＡの検出に必要な試薬類、器具類等は、ＬＥＦＴＹ１又はＬＥＦＴＹ２のｍＲＮＡに由来する配列の増幅に必要な試薬類、器具類等であってもよい。このように、卵巣明細胞腺癌細胞の検出に必要な試薬類をキット化することにより、卵巣明細胞腺癌診断をより簡便に行うことができる。
【実施例】
【００３８】
次に実施例を示して本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００３９】
＜Shotgun proteomics＞
北里病院において２００６年以降に採取された卵巣癌の病理検体（ホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE））のClear Cell（明細胞）、Endometrioid（類内膜性）、Serous（漿液性）、Mucinous（粘液性）の４種卵巣癌の検体から各４つ（合計１６サンプル）を選定した。次いで、レーザーマイクロダイセクションにより明細胞腺癌の検体から、明細胞腺癌細胞のみを狙って切り出した。他の各検体の切片からも同様に、病変部の癌細胞のみを切り出した。その後、各サンプルから切り出した病変部の癌細胞からタンパク質を抽出し、予めタンパク質をトリプシンで分解し、直接質量分析で測定・同定するショットガンプロテオミクス法を行った。
その結果、全４種の癌細胞の検体から約３０００種のタンパク質が得られ、そのうち、Clear Cellで高発現し、他のEndometrioid、Serous、Mucinousでは発現の低いタンパク質が、６６種あることが判明した。更に解析を進め、この明細胞腺癌細胞特異的に発現している６６種のタンパク質のうち、ＬＥＦＴＹ１及びＬＥＦＴＹ２が明細胞腺細胞において再現性よく発現していることを突き止めた。
【００４０】
＜免疫染色によるＬＥＦＴＹタンパク質の発現解析＞
Clear Cell、Endometrioid、Serous、Mucinousの各組織型の病理検体に対し、ＬＥＦＴＹタンパク質に対する免疫染色（IHC）を行った。解析には、ＬＥＦＴＹ１及びＬＥＦＴＹ２の両タンパク質に対して結合可能な抗体ab22569（Abcam社製）を用いた。
免疫染色の結果を図１に示す。卵巣明細胞腺癌において腫瘍細胞の細胞質から細胞膜にかけてＬＥＦＴＹ１/２タンパク質の強い染色性が認められたのに対し（上段、Clear Cell）、他の組織型では弱陽性もしくは陰性であった（下段、Endometrioid（類内膜性）、Serous（漿液性）、Mucinous（粘液性））。
【００４１】
上記の免疫染色の結果を定量的に算出した。染色強度（０： ｎｅｇａｔｉｖｅ、１： ｗｅａｋ、２： ｍｏｄｅｒａｔｅ、３： ｓｔｒｏｎｇ）と陽性範囲（１： １〜２５％、２： ２６〜５０％、３： ５１〜７５％、４： ７６〜１００％）を掛け合わせたスコア（ＩＨＣ ｓｃｏｒｅ ＝ ０ − １２）を算出した結果、明細胞腺癌は他の組織型に比して有意に高発現であることが明らかとなった（図２）。
【００４２】
＜Western blot法によるＬＥＦＴＹタンパク質の発現解析＞
ＬＥＦＴＹタンパク質と卵巣明細胞腺癌の特徴的分子であるHNF-1βとを、卵巣明細胞腺癌細胞株（ES2, OVTOKO, OVISE, KOC7C, TOV21G）を用いてWestern blot法により検出を行った。ＬＥＦＴＹタンパク質に対する抗体は、上述の免疫染色で用いたものと同じものを使用した。コントロールにはβ-actinを用いた。
Western Blotの結果を図３に示す。OVTOKO, OVISE, KOC7C, TOV21Gで、HNF-1βとＬＥＦＴＹ１/2タンパク質が検出された。これにより、ＬＥＦＴＹ１及びＬＥＦＴＹ２タンパク質が卵巣明細胞腺癌の腫瘍マーカーとして利用可能であることが示された。
【００４３】
＜ＲＴ−ＰＣＲによるＬＥＦＴＹ ｍＲＮＡの発現解析＞
上記のWestern blot法による解析と同じ系を用いて、ＲＴ−ＰＣＲによりｍＲＮＡの検出を行った。ＬＥＦＴＹ１のｃＤＮＡの増幅に用いたプライマーの配列は、配列番号５（５’- ＴＧＣＴＡＣＡＧＧＴＧＴＣＧＧＴＧＣＡＧＡＧＧ -３’）及び配列番号６（５’- ＡＧＡＡＡＣＧＧＡＣＡＣＴＴＧＡＡＧＧＣＣＡＧＧ -３’）である。コントロールにはＧＡＰＤＨ遺伝子を用いた。
ＲＴ−ＰＣＲの結果を図４に示す。OVTOKO, OVISE, KOC7C, TOV21Gで、HNF-1βとＬＥＦＴＹ１のｍＲＮＡが検出された。これにより、ＬＥＦＴＹ１mRNAが卵巣明細胞腺癌の腫瘍マーカーとして利用可能であることが示された。
【００４４】
＜ＬＥＦＴＹの遺伝子導入細胞の培養上清におけるＬＥＦＴＹタンパク質の検出＞
卵巣明細胞腺癌細胞株（OVISE, TOV21G）を24-well plateに1x105個まき、無血清培地にて48時間培養した後の培養上清（コントロールとして培地のみ）からタンパク質を抽出し、western blot法にてＬＥＦＴＹタンパク質の検出を行った。その結果、様々な長さのＬＥＦＴＹ1/2が検出され、卵巣癌細胞から細胞外へＬＥＦＴＹが分泌されることが明らかとなった（図５）。
【００４５】
以上で説明した各実施形態における各構成及びそれらの組み合わせ等は一例であり、本発明の趣旨を逸脱しない範囲で、構成の付加、省略、置換、およびその他の変更が可能である。また、本発明は各実施形態によって限定されることはなく、請求項（クレーム）の範囲によってのみ限定される。
【産業上の利用可能性】
【００４６】
本発明の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法よれば、生体試料中の卵巣明細胞腺癌細胞の検出を容易に行うことができるため、生体試料由来の卵巣明細胞腺癌細胞の検出方法として、卵巣明細胞腺癌細胞の検査に用いることができる。また、本発明の卵巣明細胞腺癌診断薬等は、卵巣明細胞腺癌の診断に用いる試薬類、検査機器として利用可能である。また、新薬及び新規治療法の開発にも応用することができる。
【図２】
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【図１】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【配列表】
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