(57)【要約】【課題】高リスクな骨髄異形成症候群治療薬として臨床使用されている注射剤（５−アザシチジンや５−アザ−２´−デオキシシチジン）に代わり得る経口投与剤を提供すること。【解決手段】１位が環状エーテル基で置換された５−アザシトシン誘導体、特に１位が、置換基を有していてもよい炭素数2〜７の環状エーテル基で置換された５−アザシトシン誘導体が上記課題を解決した。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
１位が環状エーテル基で置換された５−アザシトシン誘導体。
【請求項２】
環状エーテル基が、置換基を有していてもよい炭素数2〜７の環状エーテル基である請求項１記載の５−アザシトシン誘導体。
【請求項３】
置換基を有していてもよい炭素数2〜７の環状エーテル基の置換基が、環状エーテル基の任意の位置に水酸基、ハロゲン原子又はアシルオキシ基である請求項１記載の５−アザシトシン誘導体。
【請求項４】
一般式（１）
【化２】
2015164913.tif 000012
［式（１）中、ｎは１〜６の整数を示す。］で表される請求項１記載の５−アザシトシン誘導体。
【請求項５】
１位の置換基が、テトラヒドロフラン−２−イル基である請求項１記載の５−アザシトシン誘導体。
【請求項６】
１位の置換基が、テトラヒドロピラン−２−イル基である請求項１記載の５−アザシトシン誘導体。
【請求項７】
１位の置換基が、置換基を有していてもよいテトラヒドロフラン−２−イル基である請求項１記載の５−アザシトシン誘導体。
【請求項８】
１位の置換基が、２−デオキシ−２−フルオロ−Ｄ−アラビノ（又はリボ）フラノシル基又はα−Ｄ−アラビノフラノシル基である請求項１記載の５−アザシトシン誘導体。
【請求項９】
Ｏ，Ｎ−ジシリル−５−アザシトシンと環状エーテルを非プロトン性溶媒中酸触媒の存在下で反応させ、１位が環状エーテル基で置換された５−アザシトシン誘導体の製造法。
【請求項１０】
環状エーテルが、炭素数が２〜７の置換基を有していてもよい環状エーテルである請求項９記載の１位が環状エーテル基で置換された５−アザシトシン誘導体の製造法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、１位が環状エーテル基で置換された新規５−アザシトシン誘導体及びその製造法に関する。特に環状エーテル基が、置換基を有していてもよい炭素数2〜７の環状エーテル基である新規５−アザシトシン誘導体及びその製造法に関する。本発明の化合物は、抗腫瘍剤、特に骨髄異形成症候群の治療に効果があり、経口投与に適した化合物である。
【背景技術】
【０００２】
抗腫瘍性抗生物質である５−アザシチジン（例えば、特許文献１や非特許文献１参照）や、その２´−デオキシ体（例えば、特許文献２参照）は、細胞分裂が盛んながん細胞において核酸生合成ルートを経てＲＮＡやＤＮＡに取り込まれることによりタンパク質合成を阻害したり、殺細胞作用を示すことが知られている（例えば、非特許文献２参照）。
【０００３】
がん抑制遺伝子プロモーター領域においてシトシン環の５位メチル体が多く認められる高リスクな骨髄異形成症候群では、これらの５−アザシチジン類がＤＮＡ中に取り込まれると、シトシン環５位のメチル化に関与するＤＮＡメチル基転移酵素に対して不可逆的に結合して酵素阻害することにより、結果的にがん抑制遺伝子の再活性化を促すことから、高リスク骨髄異形成症候群患者の治療薬として臨床で使用されている（例えば、非特許文献３や非特許文献４参照）。
【０００４】
これらの薬剤はいずれも臨床現場では皮下投与もしくは点滴投与される。例えば、５−アザシチジン注射用製剤「ビダーザ注射用100mg」の場合は、１日１回一週間連続して点滴投与された後、３週間休薬するのを１サイクルとし、この治療サイクルが患者の症状寛解まで繰り返される（例えば、非特許文献５参照）ので、高リスクな骨髄異形成症候群罹患患者のＱＯＬに配慮して、これらの注射剤もしくは点滴用薬剤に代わり得る経口投与剤の開発が望まれている。
【０００５】
経口投与可能な５−アザシチジン誘導体としては、適度な水溶性と安定性を有し、且つ生体内で核酸生合成経路に入り込むことが可能であり、５−アザシチジンや５−アザ−２´−デオキシシチジン自身もしくはそれらの前駆体を徐々に遊離する化合物であることが望まれる。
【０００６】
なお、経口投与剤開発の試みとしては、２´、３´、５´−トリ−Ｏ−アセチル−５−アザシチジンが例示されている（例えば、特許文献３参照）。
【０００７】
一方、５−アザシチジン類の母核であり、植物や大腸菌の核酸生合成ルートを経てＲＮＡやＤＮＡに取り込まれることが既に示されている５−アザシトシン（例えば、非特許文献６及び７参照）は、非常に安定な化合物であるので経口投与用薬剤の候補となり得るが、この化合物は水に対する溶解性がかなり低い。
【０００８】
例えば、５−アザシチジン１０ｍｇは室温下、０．０５Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ６．５）０．８ｍＬに容易に溶解するが、その母核である５−アザシトシン１０ｍｇを室温下で溶解するためには、０．０５Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ６．５）が１３．１ｍＬ必要である（後述の試験例２の表２参照）。
【０００９】
それ故、経口投与剤候補となり得る化合物としては、更に高い水溶性を有することが望まれる。
【００１０】
なお、５−アザシチジンよりも糖部水酸基が少ない５−アザ−２´，３´−ジデオキシシチジン（例えば、非特許文献８参照）や５−アザ−５´−デオキシシチジン（例えば、非特許文献９と後述の比較例１参照）は既に合成され、それぞれ抗ウイルス活性評価や抗腫瘍活性評価がなされているが、これらの化合物に関して経口投与剤開発の検討がなされたという報告はない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】米国特許第３８１６６１９号明細書.
【特許文献２】独国特許第１９２２７０２号明細書.
【特許文献３】米国特許出願公開第２００８／０１８２８０６号明細書
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】オンコロジー (Oncology)，1974年，第30巻、第5号，p. 405‐422
【非特許文献２】ヌクレイック  アシッズ  リサーチ (Nucleic Acids Research)， 2012年，第40巻，第19号，p. 9788‐9801
【非特許文献３】エキスパート  オピニオン  オン  ファーマコセラピー (Expert Opinion on Pharmacotherapy)，2013年，第14巻，9号，p. 1255‐1268
【非特許文献４】ザ  ジャーナル オブ  クリニカル  インベスティゲーション (The Journal of Clinical Investigation），2014年，第124巻，第1号，p. 40‐46
【非特許文献５】「ビダーザ（登録商標）注射用100mg」の添付文書、第２版、2012
【非特許文献６】アクタ  アグロノミカ  アカデミアーエ  サイエンチアルム  ハンガリカーエ (Acta Agronomica Academiae Scientiarum Hungaricae)，1969年，第18巻，第3‐4号，p. 367‐369
【非特許文献７】ヨーロピアン  ジャーナル  オブ  バイオケミストリー (Europian Journal of Biochemistry)，1971年，第23巻，第2号，p. 253‐261
【非特許文献８】ヌクレオシド  アンド  ヌクレオチド(Nucleosides & Nucleotides)，1995年， 第14巻，第3−5号，p. 619−625、及びテトラヘドロン（Tetrahedron），1995年，第51巻，第4号，p. 1055‐1068
【非特許文献９】安徽医科大学学報 （Anhui Yike Daxue Xuebao），2010年，第45巻，第5号，p. 634‐637、及び2011年，第46巻，第9号，p. 901‐904
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明の課題は、経口投与が可能な５−アザシチジン誘導体であって、適度な水溶性と安定性を有し、且つ、生体内で核酸生合成経路に入り込むことができる５−アザシチジンもしくは５−アザ−２´−デオキシシチジンの前駆体５−アザシトシンを徐々に遊離する化合物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
５−アザシチジン類の母核である５−アザシトシンは、経口投与が可能な化合物であるが、中性付近の水溶液に対する溶解性がかなり低い（後述の試験例２中の表２参照）。
【００１５】
その理由は、５−アザシトシンが分子内に弱塩基性を示すアミジノ部と微酸性を示すアミド部を有する両性イオン物質であるからと解釈される（化１参照）。
【００１６】
なお、アミノ酸に例示されるように、このような両性イオン物質の場合は、等電点付近で溶解性が極端に低くなるのが一般的である。
【化１】
2015164913.tif 000002
【００１７】
そこで本発明者は、そのアミド部分の遊離アミノ基へ水に対する親和性が高い置換基を導入し、水溶液中でアミド部が解離できないようにすることにより、水に対する溶解性を向上させることができるのではないかと幾多の実験を重ねた。
【００１８】
すなわち、５−アザシトシンの１位遊離アミノ基をテトラヒドロフラン環で置換した１−（テトラヒドロフラン−２−イル）−５−アザシトシンを合成し、種々の液性を有する水溶液に対する溶解性や溶液中での安定性を調べると共にその抗腫瘍活性を評価したところ、この化合物が経口投与剤に見合った水に対する適度な溶解性と安定性を有し、且つ、生理的条件下で徐々に５−アザシトシンを遊離する可能性を有する（後述の試験例１と試験例２参照）と共に５−アザシトシンと同等もしくはより高い抗腫瘍活性を有していた（後述の試験例３参照）ことから、１−（テトラヒドロフラン−２−イル）−５−アザシトシンは抗腫瘍性５−アザシチジン類のプロドラッグとなり得ることが判明した。
【００１９】
その結果を基に更に実験と検討を重ね、１位に環状エーテル基を有する一群の新規５−アザシトシン誘導体が上記目的を達成し得ることを知見し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、
［１］１位が環状エーテル基で置換された５−アザシトシン誘導体、
［２］環状エーテル基が、置換基を有していてもよい炭素数2〜７の環状エーテル基である［１］記載の５−アザシトシン誘導体、
［３］置換基を有していてもよい炭素数2〜７の環状エーテル基の置換基が、環状エーテル基の任意の位置に水酸基、ハロゲン原子又はアシルオキシ基である［１］記載の５−アザシトシン誘導体、
［４］一般式（１）
【化２】
2015164913.tif 000003
［式（１）中、ｎは１〜６の整数を示す。］で表される［１］記載の５−アザシトシン誘導体、
［５］１位の置換基が、テトラヒドロフラン−２−イル基である［１］記載の５−アザシトシン誘導体、
［６］１位の置換基が、テトラヒドロピラン−２−イル基である［１］記載の５−アザシトシン誘導体、
［７］１位の置換基が、置換基を有していてもよいテトラヒドロフラン−２−イル基である［１］記載の５−アザシトシン誘導体、
［８］１位の置換基が、２−デオキシ−２−フルオロ−Ｄ−アラビノ（又はリボ）フラノシル基又はα−Ｄ−アラビノフラノシル基である［１］記載の５−アザシトシン誘導体、
［９］Ｏ，Ｎ−ジシリル−５−アザシトシンと環状エーテルを非プロトン性溶媒中酸触媒の存在下で反応させ、１位が環状エーテル基で置換された５−アザシトシン誘導体の製造法、
［１０］環状エーテルが、炭素数が２〜７の置換基を有していてもよい環状エーテルである［９］記載の１位が環状エーテル基で置換された５−アザシトシン誘導体の製造法、
である。
【００２０】
本発明の化合物における環状エーテル基には、１ないし複数の置換可能な炭素原子が存在するが、そのいずれの炭素に置換基を有していてもよい。置換基としては、ハロゲン原子、水酸基、アシルオキシ基などが挙げられる。ハロゲン原子としてはフッ素、塩素、臭素、沃素などが、アシルオキシ基としてはアセチルオキシ、プロピオニルオキシ等炭素数１〜３の脂肪族カルボキシルなどが、ベンゾイルオキシなどのアリールカルボキシル基などが挙げられる。
本発明によれば、環状エーテル［式（１）中、ｎが１〜６の整数］が５−アザシトシンの１位に置換した５−アザシトシン誘導体〔例えば、ｎが３の場合の１−（テトラヒドロフラン−２−イル）−５−アザシトシン〕は適度な水溶性と安定性を有するので、経口投与が可能であり、胃部もしくは腸部で吸収された後、血中で徐々に１位置換の環状エーテルを加水分解的に解離して５−アザシトシンを遊離し、この５−アザシトシンが細胞分裂の盛んながん細胞中で核酸生合成ルートを経てＲＮＡ及びＤＮＡに取り込まれることによりタンパク質合成を阻害したり、殺細胞作用を示す一方、高リスクな骨髄異形成症候群の治療薬として機能することが期待できる。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明に係る１位が置換基を有していてもよい環状エーテル基で置換された５−アザシトシン誘導体は、５−アザシトシンを原料とし、既知の方法［例えば、ケミカル  アンド  ファーマシューティカル  ビューレチン（Chemical and Pharmaceutical Bulletin），1979年，第27巻，第4号，p. 899-906］に準拠して製造することができる。
【００２２】
すなわち、５−アザシトシンを自体公知のシリル化法によりＯ，Ｎ−ジシリル−５−アザシトシンとし、このＯ，Ｎ−ジシリル−５−アザシトシンと置換基を有していてもよい環状エーテル（例えば、２，３−ジヒドロフラン、３，４−ジヒドロピラン、２−デオキシ−２−フルオロ−３、５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｄ−アラビノフラノース、１，２，３−トリ−Ｏ−アセチル−５−デオキシ−β−Ｄ−リボフラノース）を非プロトン性溶媒及び酸触媒の存在下での縮合反応させることにより、置換基を有していてもよい環状エーテルが５−アザシトシンの１位に置換した５−アザシトシン誘導体を製造することができる。反応溶媒としては、アセトニトリルやトルエンなどの非プロトン性溶媒を用いることができる。酸触媒としては、ピリジン塩酸塩やトリフルオロメタンスルホン酸などを用いることができる。
【００２３】
また、得られた本発明の５−アザシトシン誘導体の各種ｐＨ（ｐＨ１．２〜ｐＨ８．５）を有する水溶液に対する安定性に関する試験の結果から、本発明に係る５−アザシトシン誘導体は、水に対する適度な溶解性と安定性を有し、且つ、生理的条件下で徐々に５−アザシトシンを遊離することが判明した（後述の試験例１参照）。
【００２４】
さらに、本発明に係る５−アザシトシン誘導体の各種ｐＨ（ｐＨ１．２〜ｐＨ８．５）を有する水溶液に対する溶解性を調べた結果、本発明に係る５−アザシトシン誘導体は、前記各種ｐＨ水溶液に対する溶解性が改善され、消化管より効率よく吸収され得ることが判明した（後述の試験例２参照）。
【００２５】
上記の安定性と溶解性を示す本発明の５−アザシトシン誘導体について、抗腫瘍活性を調べたところ、人由来の非小細胞肺がん細胞ＮＣＩ‐Ｈ５２２に対し、優れた細胞増殖抑制作用を示すことが判明した（後述の試験例３参照）。すなわち、本発明に係る５−アザシトシン誘導体は、高リスク骨髄異形成症候群の治療薬となり得る。
【００２６】
以下に実施例、比較例及び試験例を挙げて本発明を更に具体的に説明する。
【実施例１】
【００２７】
１−（テトラヒドロフラン−２−イル）−５−アザシトシン（化３参照）の製造
【化３】
2015164913.tif 000004
５−アザシトシン水和物（MW１３０）２６０ｍｇ（２mＭ）のアセトニトリル５mＬ懸濁液を減圧下６０℃で乾固して得られた残留物に、無水アセトニトリル１０mＬとヘキサメチルジシラザン（MW１６１、ｄ＝０．７７）２ｍL（１０ｍM）と無水硫酸アンモニウム塩６ｍｇを添加し、この懸濁液を８５℃で約２時間加熱攪拌した。不溶物が完全に溶解したのを確認した後、反応液を減圧下に濃縮することにより反応溶媒と過剰のシリル化剤を留去して得られた残留物に、無水アセトニトリル約２０ｍLと２，３−ジヒドロフラン（MW ７０、ｄ＝０．９３）１ｍL（１０ｍM）と無水ピリジン塩酸塩（MW１１６）５６ｍｇ（５ｍM）を徐々に加えて、８５℃にて約１時間加熱攪拌した。その反応液を飽和重曹水で中和後に減圧濃縮して得られた残留物をシリカゲルカラムにかけ、クロロホルム−メタノール（３０：１）で溶出させることにより目的物・１−（テトラヒドロフラン−２−イル）−５−アザシトシン（MW１８２）２３２ｍｇを得た。
ｍｐ：１７９−１８０℃（アセトンから再結晶）
１H−NMR（DMSO−ｄ６）：δ１．８５−２．２８（４H，ｍ）、３．８２−３．８６（１H，ｄｄ，J=８Hzと１５Hz）、４．２０−４．２５（１H，ｍ）、５．８２−５．８６（１H，ｄｄ，J=３Hzと７Hz）、７．５５（２H，ｂｒ，重水添加により消失）、８．１８（１H，ｍ）ｐｐｍ。
IR（KBｒ）：υ３２１２、３０９７、１６７８、１６１５、１５１３、１４７５ｃｍ−１。
【実施例２】
【００２８】
１−（テトラヒドロピラン−２−イル）−５−アザシトシン（化４参照）の製造
【化４】
2015164913.tif 000005
５−アザシトシン水和物（MW１３０）２６０ｍｇ（２mＭ）のアセトニトリル５mＬ懸濁液を減圧下６０℃で乾固して得られた残留物に、無水アセトニトリル１０mＬとヘキサメチルジシラザン（MW１６１、ｄ＝０．７７）２ｍL（１０ｍM）と無水硫酸アンモニウム塩６ｍｇを添加し、この懸濁液を８５℃で約２時間加熱攪拌した。不溶物が完全に溶解したのを確認した後、反応液を減圧下に濃縮することにより反応溶媒と過剰のシリル化剤を留去して得られた残留物に、無水アセトニトリル約２０ｍLと３，４−ジヒドロ−２H−ピラン（MW８４、ｄ＝０．９２）１ｍL（１０ｍM）と無水ピリジン塩酸塩（MW１１６）５６ｍｇ（５ｍM）を徐々に加えて、８５℃にて約１時間加熱攪拌した。その反応液を飽和重曹水で中和後に減圧濃縮して得られた残留物をシリカゲルカラムにかけ、クロロホルム−メタノール（３０：１）で溶出させることにより目的物・１−（テトラヒドロピラン−２−イル）−５−アザシトシン（MW１９６）９２ｍｇを得た。
ｍｐ：２１０−２１１℃（アセトンから再結晶）  
１H−NMR（DMSO−ｄ６）：δ１．４０−１．９０（６H，ｍ）、３．５４−３．６１（１H，ｍ）、４．００−４．０５（１H，ｂｒ ｄ，J=１２Hz）、５．４０−５．５０（１H，ｍ，重水添加によりｄｄ，J=３Hzと１０Hz）、７．５８（２H，ｂｒ，重水添加により消失）、８．３５（１H，ｍ）ｐｐｍ。
IR（KBｒ）：υ３３７０、３１２２、１６７３、１６４８、１６１５、１５１３、１４７０ｃｍ−１。
【００２９】
［試験例１］１−（テトラヒドロフラン−２−イル）−５−アザシトシンの安定性
実施例１において得られた１−（テトラヒドロフラン−２−イル）−５−アザシトシンの各種液性を有する水溶液（表１の左欄参照）を室温にて撹拌し、３時間後と２０時間後に各溶液のＨＰＬＣ分析をした。１−（テトラヒドロフラン−２−イル）−５−アザシトシン（表中、ＡＺＣ−ＴＨＦと略記）の残存量と５−アザシトシン（表中、ＡＺＣと略記）の生成量を表１に示した。
ＨＰＬＣ測定条件
カラム：ＣＡＰＣＥＬＬ  ＰＡＫ  Ｃ−１８  ＵＧ１２０
４．６ｍｍｘ１５０ｍｍ、粒子サイズ：３μｍ
溶出：  溶出液Ａ＝ＴＦＡ（１/５０００ｖ/ｖ）含有精製水
溶出液Ｂ＝ＴＦＡ（１/５０００ｖ/ｖ）含有アセトニトリル
Ａ：Ｂ＝９９：１→５：９５、３０分間のグラジエントモード
流出速度：１．０ｍＬ/分        オーブン温度：４０℃
検出器：ＵＶ２１０ｎｍ
【表１】
2015164913.tif 000006
【００３０】
［試験例２］５−アザシトシン誘導体の各種液性を有する水溶液への溶解性
１００号（１５０μｍ）篩を通過した各試料（１０．０ｍｇ）を試験管に取り、室温（２３℃）下で、各種液性を有する水溶液を少しずつ加えて約５分毎に強く３０秒間振り混ぜ、３０分以内に溶解する各溶液の容量を調べた。その結果は、表２に示した。
【表２】
2015164913.tif 000007
【００３１】
［試験例３］抗腫瘍活性の比較
人由来の非小細胞肺がん細胞NCI-H522を96 ウェルプレ−トに撒き込み、翌日各検体溶液（5 doses, 10-4〜10-8）を添加し、２日間培養後、細胞増殖をスルホローダミンＢによる比色定量で評価した。その際の前記細胞の増殖阻害活性は、細胞増殖を50％抑制する濃度（ＧＩ）を基にした ＬｏｇＧＩ５０ で表した。
【表３】
2015164913.tif 000008
【００３２】
〔比較例１〕５−アザ−５´−デオキシシチジン（化５参照）の製造
【化５】
2015164913.tif 000009
５−アザシトシン水和物（MW１３０）１３０ｍｇ（１mＭ）のアセトニトリル５mＬ懸濁液を減圧下６０℃で乾固して得られた残留物に、無水アセトニトリル１０mＬとヘキサメチルジシラザン（MW１６１、ｄ＝０．７７）１ｍL（５ｍM）と無水硫酸アンモニウム塩６ｍｇを添加し、この懸濁液を８５℃で約２時間加熱攪拌した。不溶物が完全に溶解したのを確認した後、反応液を減圧下に濃縮することにより反応溶媒と過剰のシリル化剤を留去して得られた残留物に、無水アセトニトリル約２０ｍLと１，２，３−トリ−O−アセチル−５−デオキシ−β−D−リボフラノース（MW２６０）２６０ｍｇ（１ｍM）を加えて８５℃に加熱攪拌し、これにトリフルオロメタンスルホン酸（MW１５０、ｄ＝１．７０）１０６μL（１．２ｍM）を徐々に加えて、約１時間加熱攪拌した。その反応液を飽和重曹水で中和後に減圧濃縮して得られた残留物をシリカゲルカラムにかけ、クロロホルム−メタノール（３０：１）で溶出させることにより目的物・２´、３´−ジ−O−アセチル−５−アザ−５´−デオキシシチジン（MW３１２）２７５ｍｇを得た。
１H−NMR（CD３OD）：δ１．４０（３H，ｄ，J=６Hz）、２．０８（３H，ｓ）、２．０９（３H，ｓ）、４．１５−４．２２（１H，ｍ）、５．１９（１H，ｄｄ，J=６Hzと７Hz）、５．５８（１H，ｄｄ，J=３Hzと６Hz）、５．６３（１H，ｄ，J=３Hz）、８．２５（１H，ｓ）ｐｐｍ。
IR（KBｒ）：υ３２５０、１７４９、１７０７、１６８１、１６１４ｃｍ−１。
【００３３】
上記ジアセチル体（MW３１２）３１ｍｇ（０．１ｍM）をメタノール５ｍLに溶解し、この溶液に室温攪拌下で２８％アンモニア水５０μLを徐々に添加した。原料の消失をTLC分析（展開系：クロロホルム：メタノール＝１０：１）で確認した後、反応液を減圧濃縮して得られた残留物をシリカゲルカラムにかけ、クロロホルム−メタノール（５：１）にて溶出した。最初の溶出液から目的物・５−アザ−５´−デオキシシチジンの立体異性体（α―体）１２ｍｇ：
１H−NMR（CD３OD）：δ１．３３（３H，ｄ，J=６Hz）、３．８５（１H，ｄｄ，J=４Hzと８Hz）、４．１５−４．２２（１H，ｍ）、４．２８（１H，ｔ，J=４Hz）、６．１３（１H，ｄ，J=４Hz）、８．２０（１H，ｓ）ｐｐｍ。
次の溶出液から目的物５−アザ−５‘−デオキシシチジン（β―体）１０ｍｇ：
１H−NMR（CD３OD）：δ１．３９（３H，ｄ，J=７Hz）、３．８３（１H，ｄｄ，J=５Hzと８Hz）、４．００−４．０７（１H，ｍ）、４．２４（１H，ｄｄ，J=３Hzと５Hz）、５．６２（１H，ｄ，J=３Hz）、８．２４（１H，ｓ）ｐｐｍ。
１H−NMR（DMSO-ｄ６）：δ１．２７（３H，ｄ，J=６Hz）、３．７４（１H，ｄｄ，J=６Hzと１２Hz）、３．８１−３．８８（１H，ｍ）、４．１５（１H，ｄｄ，J=５Hzと９Hz）、５．０１（１H，ｄ，J=６Hz：重水添加により消失）、５．３３（１H，ｄ，J=５Hz：重水添加により消失）、５．５７（１H，ｄ，J=４Hz：重水添加により消失）、７．５７（２H，ｂｒ：重水添加により消失）、８．２６（１H，ｓ）ｐｐｍ。
IR（KBｒ）：υ３３５５、３２３０、１７１９、１６９１、１６４２ｃｍ−１。
が得られた。
【実施例３】
【００３４】
１−（２−デオキシ−２−フルオロ−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−アザシトシン類の製造
2015164913.tif 000010
比較例１と同様な方法を用いて、５−アザシトシンと２−デオキシ−２−フルオロ−１，３，５−トリ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｄ−アラビノフラノースとを縮合することにより、１−（２−デオキシ−２−フルオロ−３、５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−アザシトシンと共に対応するβ−Ｄ−アラビノフラノシル体がほぼ１：１の割合で得られた。それらの融点とスペクトルデータは次のごとくである。
１−（２−デオキシ−２−フルオロ−３、５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−アザシトシン:
ｍｐ２３２−２３４℃
１H−NMR（CDCl３）：δ４．６２―４．６８（２Ｈ，ｍ）、５．０３―５．０６（１Ｈ，ｍ）、５．６７（１Ｈ，bｒ  d，J=４９Hz）、５．７４（１H，ｄｄｄ，J=２Hzと３Hzと１６Hz）、
６．１４（１H, ｂｒ  d，J=１４Hz）、６．５０（１H，ｂｒ）、７．３８―８．１１（１０H，ｍ）、８．２１（１H，ｓ）ｐｐｍ。
13C-NMR (CDCl3): d ６３，７６（２），８５，９２，９３．９６，９８，１２８，１２９（２），１３０（４），１３４，１５３，１５６，１６５（２），１６６ｐｐｍ。
１−（２−デオキシ−２−フルオロ−３、５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−アザシトシン:
ｍｐ２００−２０１℃
1H-NMR (CDCl3): d ４．５０―４．５３（１H，ｍ）、４．６８―４．７８（２H，ｍ）、５．４１（１H，ｄｄ，J=３Hzと５０Hz）、５．５７（１H，ｄｄ，J=３Hzと１７Hz），６．３４（１H，ｄｄ，J=３Hzと２１Hz）、６．５９（１H，ｂｒ）、７．７１（１H，ｂｒ）、７．３９―８．０６（１０H，ｍ）、８．２７（１H，ｓ）ｐｐｍ。
13C-NMR (CDCl3): d ６３，８２，８６，９１，９３，１２８，１２９（３）、１３０（２）、１３４（２）、１５３，１５６，１６５，１６６（２）ｐｐｍ。
上記で得られた１−（２−デオキシ−２−フルオロ−３、５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−アザシトシン類をメタノール中、室温下に等モルのナトリウムメチルアルコラートで処理し、反応液を中和後、シリカゲルカラム精製することにより対応する１−（２−デオキシ−２−フルオロ−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−アザシトシン類が得られた。単離できたα体とβ体の融点とスペクトルデータは以下のごとくである。
１−（２−デオキシ−２−フルオロ−α−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−アザシトシン:
1H-NMR (CD3OD): d ３．６４―３．６７（２H，ｍ）、４．３４（１H，ｄｔ，J=２Hzと１６Hz）、４．４４―４．４８（１H，ｍ）、５．１６（１H，ｄｔ，J=２Hzと５０Hz）、５．９７（１H，ｂｒ  ｄ，J=１５Hz）、８．２７（１H，ｓ）ｐｐｍ。
13C-NMR (CD3OD): d ６１，７４（２），９０，９１と９２，９８と１００，１５５，１５６，１６７ｐｐｍ。
IR (KBr): u ３３４７，３２０７，２９８３，２９３９，１６３８，１５０７，１４８１，１０９５，１０４５，８５３，７９９ｃｍ−１.
１−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−アザシトシン:
ｍｐ２１１−２１２℃（ｄｅｃｏｍｐ．）（アセトンから再結晶）
1H-NMR (CD3OD): d ３．７１―３．８２（２H，ｍ）、３．９６―３．９９（１H，ｍ）、４．３２（１H，ｄｔ，J=４Hzと１８Hz）、５．０３（１H，ｄｔ，J=４Hzと５２Hｚ）、６．１７（１H，ｄｄ，J=４Hzと１８Hz）、８．４３（１H，ｓ）ｐｐｍ。
13C-NMR (CD3OD): d ６１，７４（２），８５，９４，９６，１５５，１５６，１６７ｐｐｍ。
IR (KBr): u ３３１９，３２１６，２９５０，２９３５，１７０４，１６６９，１５０７，１４７３，１１６５，１１０５，１０６３，１０３８，８１３，７９４ｃｍ−１。  
また、同様に、２−デオキシ−２−フルオロ−１，３，５−トリ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｄ−アラビノフラノースの代わりに２−デオキシ−２−フルオロ−１，３，５−トリ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｄ−リボフラノースを用いることにより、１−［２−デオキシ−２−フルオロ−α（もしくはβ）−Ｄ−リボフラノシル］−５−アザシトシンが得られた。
このようにして得られた１位置換−５−アザシトシン類はいずれの場合も、試験例１で用いた０．０５Ｍ希塩酸溶液中ではスムーズに加水分解され、５−アザシトシンをほぼ定量的に与えた。
【実施例４】
【００３５】
１−（α−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−アザシトシンの製造
2015164913.tif 000011
比較例１と同様な方法を用いて、５−アザシトシンと等モルの１，２，３，５−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−アラビノフラノースとを縮合し、シリカゲルカラム精製することにより、１−（２、３、５−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−アザシトシンが７５％収率で単離できた。
そのスペクトルデータは、以下のごとくである。
1H-NMR (CDCl3): d  ２．０６（３H，ｓ）、２．１１（３H，ｓ）、２．１４（３H，ｓ）、４．１８―４．３１（２H，ｍ）、４．６９―４．７２（１H，ｍ）、５．１７（１H，ｄｄ，J=３Hzと４Hz）、５．５８（１H，ｔ，J=２Hz）、５．８１（１H，ｄ，J=２Hz）、６．５４（１H，ｂｒ）、８．０４（１H，ｓ）、８．０９（１H，ｂｒ）ｐｐｍ。
得られた１−（２、３、５−トリ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−アザシトシンをメタノール中で室温下にナトリウムメチルアルコラート処理し、反応液を中和後、シリカゲルカラム精製することにより対応する１−（α−Ｄ−アラビノフラノシル）−５−アザシトシンがほぼ定量的に得られた。
その融点とスペクトルデータは、以下のごとくである。
ｍｐ１２３−１２５℃（アセトンから再結晶）
1H-NMR (CD3OD): d  ３．７３―３．７７（２H，ｍ）、４．１０（１H，ｔ，J=２Hz）、４．２７（１H，ｔ，J=２Hz）、４．３９―４．４２（１H，ｍ）、５．７６（１H，ｄ，J=２Hz）、８．２８（１H，ｓ）ｐｐｍ。
13C-NMR (CD3OD): d  ６２，７６，８０，９０，９４，１５５，１５６，１６７ｐｐｍ。
IR (KBr): u  ３３４３，３２１４，２９３６，２９２７，１６３６，１５０６，１４７４，１２９２，１１１３，１０６１，８４８，７９９ｃｍ−１。
このようにして得られた１−置換−５−アザシトシン類はいずれの場合も、試験例１で用いた０．０５Ｍ希塩酸溶液中ではスムーズに加水分解され、５−アザシトシンをほぼ定量的に与えた。
【産業上の利用可能性】
【００３６】
本発明によれば、高リスクな骨髄異形成症候群治療薬として臨床使用されている注射剤（５−アザシチジン及び５−アザ−２´−デオキシシチジン）に代わる経口投与剤を医療現場に提供することができる。