(57)【要約】【課題】  放射性ハロゲン標識化合物を効率的に製造できる手段を提供する。【解決手段】  式：Ｓｕｂ−Ｘ（式中、Ｓｕｂは基質を表し、Ｘは放射性ハロゲン原子を表す。）で表される放射性ハロゲン標識化合物の製造方法であって、（１）相間移動触媒の存在する条件で、基質を含む高分子化合物を、放射性ハロゲン化物イオンと反応させる工程、（２）高分子化合物から遊離する式：Ｓｕｂ−ＯＨ（式中、Ｓｕｂは基質を表す。）で表される副生物を、イソシアナート基を有する化合物と結合させる工程、（３）イソシアナート基を有する化合物と結合した副生物を除去する工程、及び（４）高分子化合物と放射性ハロゲン化物イオンとの反応生成物から放射性ハロゲン標識化合物を得る工程を含むことを特徴とする放射性ハロゲン標識化合物の製造方法。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：Ｓｕｂ−Ｘ（式中、Ｓｕｂは基質を表し、Ｘは放射性ハロゲン原子を表す。）で表される放射性ハロゲン標識化合物の製造方法であって、（１）相間移動触媒の存在する条件で、基質を含む高分子化合物を、放射性ハロゲン化物イオンと反応させる工程、（２）高分子化合物から遊離する式：Ｓｕｂ−ＯＨ（式中、Ｓｕｂは基質を表す。）で表される副生物を、イソシアナート基を有する化合物と結合させる工程、（３）イソシアナート基を有する化合物と結合した副生物を除去する工程、及び（４）高分子化合物と放射性ハロゲン化物イオンとの反応生成物から放射性ハロゲン標識化合物を得る工程を含むことを特徴とする放射性ハロゲン標識化合物の製造方法。
【請求項２】
塩基の存在下で、高分子化合物と放射性ハロゲン化物イオンとの反応を行うことを特徴とする請求項１に記載の放射性ハロゲン標識化合物の製造方法。
【請求項３】
塩基が水酸化カリウムであることを特徴とする請求項２に記載の放射性ハロゲン標識化合物の製造方法。
【請求項４】
相間移動触媒が、クリプトフィックス2,2,2、12-クラウン-4、15-クラウン-5、18-クラウン-6、ベンゾ-12-クラウン-4、ベンゾ-15-クラウン-5、又はベンゾ-18-クラウン-6であることを特徴とする請求項１乃至３のいずれか一項に記載の放射性ハロゲン標識化合物の製造方法。
【請求項５】
クリプトフィックス2,2,2の存在下で、高分子化合物と放射性ハロゲン化物イオンとの反応を行うことを特徴とする請求項１乃至４のいずれか一項に記載の放射性ハロゲン標識化合物の製造方法。
【請求項６】
イソシアナート基を有する化合物が、放射性ハロゲン標識化合物から分離可能な性質又は化学構造を有する化合物であることを特徴とする請求項１乃至５のいずれか一項に記載の放射性ハロゲン標識化合物の製造方法。
【請求項７】
放射性ハロゲン標識化合物から分離可能な性質又は化学構造を有する化合物が、イオン性化合物、分子量が基質の３倍以上である化合物、又は特定の固相担体と結合し得る基を有する化合物であることを特徴とする請求項６に記載の放射性ハロゲン標識化合物の製造方法。
【請求項８】
放射性ハロゲン化物イオンが、18F-、123I-、124I-、125I-、又は131I-であることを特徴とする請求項１乃至７のいずれか一項に記載の放射性ハロゲン標識化合物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、18Fなどの放射性ハロゲンで標識された化合物の製造方法に関する。放射性ハロゲンで標識された化合物は、PET（positron emission tomography）用トレーサーとして有用である。
【背景技術】
【０００２】
近年、18F-FDG（2-デオキシ-2-[18F]フルオロ-D-グルコース）や18F-FMISO（[18F]フルオロミソニダゾール）などの放射性ハロゲン標識化合物をトレーサーとしたPETが腫瘍性疾患に対する画像診断法として注目を集めている。このような放射性ハロゲン標識化合物は、通常、液相中で標識しようとする基質を放射性ハロゲン化物イオンと反応させることにより製造される。例えば、特開平6-157572号公報には、1,3,4,6-テトラ-O-アセチル-2-O-トリフルオルメタンスルホニル-2-デオキシ-β-D-マンノピラノースと放射性フッ化物イオンを、溶媒と相間移動触媒の存在下で反応させ、得られる生成物を脱アセチル化することにより18F-FDGを製造する方法が記載されている。しかし、このような製造法では、反応後の溶媒中に、未反応の基質が多量に残存し、それらを目的の標識化合物と分離するのに多大な労力が必要とされる。
【０００３】
このような問題を解決するため、本発明者は、標識しようとする基質と相間移動触媒を固定した高分子化合物を合成し、この高分子化合物を放射性フッ化物イオンと反応させることにより、放射性フッ素標識化合物を製造する方法を開発し、出願を行った（特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開WO2011/099480
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、特許文献１に記載されている方法、即ち、標識しようとする基質が固定された高分子化合物を利用して、放射性フッ素標識化合物を製造する方法を改良し、より効率的に放射性フッ素標識化合物を製造できるようにすることにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者は、特許文献１に記載されている方法を実際に実施すると、目的とする放射性フッ素で標識された基質の他に、OH基を持つ基質が多量に副生するという問題が生じることを見出した。また、この副生物に関する問題は、イソシアナート基を持つ化合物を使用することにより解決できることも見出した。
【０００７】
本発明は以上の知見に基づき完成したものである。
【０００８】
即ち、本発明は、以下の〔１〕〜〔８〕を提供するものである。
〔１〕式：Ｓｕｂ−Ｘ（式中、Ｓｕｂは基質を表し、Ｘは放射性ハロゲン原子を表す。）で表される放射性ハロゲン標識化合物の製造方法であって、（１）相間移動触媒の存在する条件で、基質を含む高分子化合物を、放射性ハロゲン化物イオンと反応させる工程、（２）高分子化合物から遊離する式：Ｓｕｂ−ＯＨ（式中、Ｓｕｂは基質を表す。）で表される副生物を、イソシアナート基を有する化合物と結合させる工程、（３）イソシアナート基を有する化合物と結合した副生物を除去する工程、及び（４）高分子化合物と放射性ハロゲン化物イオンとの反応生成物から放射性ハロゲン標識化合物を得る工程を含むことを特徴とする放射性ハロゲン標識化合物の製造方法。
〔２〕塩基の存在下で、高分子化合物と放射性ハロゲン化物イオンとの反応を行うことを特徴とする〔１〕に記載の放射性ハロゲン標識化合物の製造方法。
〔３〕塩基が水酸化カリウムであることを特徴とする〔２〕に記載の放射性ハロゲン標識化合物の製造方法。
〔４〕相間移動触媒が、クリプトフィックス2,2,2、12-クラウン-4、15-クラウン-5、18-クラウン-6、ベンゾ-12-クラウン-4、ベンゾ-15-クラウン-5、又はベンゾ-18-クラウン-6であることを特徴とする〔１〕乃至〔３〕のいずれかに記載の放射性ハロゲン標識化合物の製造方法。
〔５〕クリプトフィックス2,2,2の存在下で、高分子化合物と放射性ハロゲン化物イオンとの反応を行うことを特徴とする〔１〕乃至〔４〕のいずれかに記載の放射性ハロゲン標識化合物の製造方法。
〔６〕イソシアナート基を有する化合物が、放射性ハロゲン標識化合物から分離可能な性質又は化学構造を有する化合物であることを特徴とする〔１〕乃至〔５〕のいずれかに記載の放射性ハロゲン標識化合物の製造方法。
〔７〕放射性ハロゲン標識化合物から分離可能な性質又は化学構造を有する化合物が、イオン性化合物、分子量が基質の３倍以上である化合物、又は特定の固相担体と結合し得る基を有する化合物であることを特徴とする〔６〕に記載の放射性ハロゲン標識化合物の製造方法。
〔８〕放射性ハロゲン化物イオンが、18F-、123I-、124I-、125I-、又は131I-であることを特徴とする〔１〕乃至〔７〕のいずれかに記載の放射性ハロゲン標識化合物の製造方法。
【発明の効果】
【０００９】
本発明により、PET用トレーサーなどとして有用な放射性ハロゲン標識化合物の効率的な製造が可能になる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】硫酸カリウム存在下でFMISO前駆体複合高分子とフッ化物イオンを反応させた場合の生成物のHPLCによる分析結果を示す図。
【図２】水酸化カリウム存在下でFMISO前駆体複合高分子とフッ化物イオンを反応させた場合の生成物のHPLCによる分析結果を示す図。
【図３】硫酸カリウム存在下におけるメトキシベンゼンスルホン酸エステル化したFMISO（MBS-FMISO）からの生成物のHPLCによる分析結果を示す図。
【図４】水酸化カリウム存在下におけるMBS-FMISOからの生成物のHPLCによる分析結果を示す図。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下、本発明を詳細に説明する。
【００１２】
本発明の放射性ハロゲン標識化合物の製造方法は、式：Ｓｕｂ−Ｘ（式中、Ｓｕｂは基質を表し、Ｘは放射性ハロゲン原子を表す。）で表される放射性ハロゲン標識化合物の製造方法であって、（１）相間移動触媒の存在する条件で、基質を含む高分子化合物を、放射性ハロゲン化物イオンと反応させる工程、（２）高分子化合物から遊離する式：Ｓｕｂ−ＯＨ（式中、Ｓｕｂは基質を表す。）で表される副生物を、イソシアナート基を有する化合物と結合させる工程、（３）イソシアナート基を有する化合物と結合した副生物を除去する工程、及び（４）高分子化合物と放射性ハロゲン化物イオンとの反応生成物から放射性ハロゲン標識化合物を得る工程を含むことを特徴とするものである。
【００１３】
製造対象とする放射性ハロゲン標識化合物は特に限定されないが、放射性ハロゲン標識化合物は主としてPETによる疾患の診断のためのトレーサーとして用いられるので、PET用トレーサーとして使用されている糖やアミノ酸などを製造対象とすることができる。具体的には、2-デオキシ-2-[18F]フルオロ-D-グルコース、2-デオキシ-2-[18F]フルオロ-D-マンノース、3-デオキシ-3-[18F]-フルオロ-D-グルコース、O-(2-[18F]フルオロエチル)-L-タイロシン、3'-[18F]フルオロ-3'-デオキシチミジン、16α-[18F]フルオロ-17β-エストラジオール、[18F]フルオロミソニダゾールなどを製造対象とすることができる。また、PETは疾患の診断だけでなく、薬剤の体内動態を知るためにも利用されているので、そのような薬剤も製造対象とすることができる。
【００１４】
本発明において「基質」とは、放射性ハロゲン原子の標識対象物を意味する。「基質」には、放射性ハロゲン標識化合物から放射性ハロゲン原子を除いた残基が含まれるが、標識の際、通常、標識対象物には保護基が導入されているので、放射性ハロゲン標識化合物から放射性ハロゲン原子を除いた残基に保護基が導入されたものも本発明における「基質」に含まれる。このような保護基としては、例えば、ヒドロキシ基の保護基であるアセチル基、トリメチルシリル基、エチリデン基、イソプロピリデン基、2-テトラヒドロピラニル基などを挙げることができる。
【００１５】
相間移動触媒は、高分子化合物と放射性ハロゲン化物イオンの反応系に存在すればよく、国際公開WO2011/099480に記載されている相間移動触媒と同様に、高分子化合物中に含まれる形態で存在してもよく、また、高分子化合物中に含まれない形態（遊離状態）で存在してもよい。更に、高分子中に含まれる形態の相間移動触媒と遊離状態の相間移動触媒の両方が存在してもよい。
【００１６】
相間移動触媒は、対陽イオンを捕捉し、対陰イオン（放射性ハロゲン化物イオン）を活性化できるものであればよく、例えば、クラウンエーテルなどを使用できる。クラウンエーテルの具体例としては、クリプトフィックス2,2,2、12-クラウン-4、15-クラウン-5、18-クラウン-6、ベンゾ-12-クラウン-4、ベンゾ-15-クラウン-5、ベンゾ-18-クラウン-6などを挙げることができる。使用する相間移動触媒は、反応に用いるハロゲン化物イオンのカウンターカチオンの種類に応じて決めることができる。例えば、カウンターカチオンがカリウムイオンであれば、クリプトフィックス2,2,2、18-クラウン-6、ベンゾ-18-クラウン-6などを用いるのが好ましく、ナトリウムイオンであれば、15-クラウン-5、ベンゾ-15-クラウン-5などを用いるのが好ましい。また、相間移動触媒が遊離状態で存在する場合には、クリプトフィックス2,2,2を用いるのが好ましい。クリプトフィックス2,2,2を用いることにより、放射性ハロゲン標識化合物の収率が高くなり、また、塩基として水酸化カリウムが存在する条件では、更に、加水分解やβ脱離といった副反応を抑制する効果もあるからである。
【００１７】
高分子化合物は、分子中に基質を含んでいる。基質は、酸素原子を介して、高分子化合物と結合している。即ち、高分子化合物は、式：Ｓｕｂ−Ｏ−Ｐ（式中、Ｓｕｂは基質を表し、Ｐは高分子化合物の残基を表す。）で表される。高分子化合物は、分子中に基質の他に相間移動触媒も含んでいてもよい。このような高分子化合物は、国際公開WO2011/099480に記載の高分子化合物と同様に、基質を含む単量体と相間移動触媒を含む単量体を共重合させることによって得ることができる。以下、この高分子化合物について説明する。
【００１８】
基質を含む単量体と相間移動触媒を含む単量体は特に限定されないが、前者としては、式(I)：ＣＨ２＝Ｃ＝ＣＨ−Ｌ１−ＳＯ２−Ｓｕｂ〔式中、Ｌ１はリンカーを表し、Ｓｕｂは基質を表す。〕で表される単量体を例示でき、後者としては、式(II)：ＣＨ２＝Ｃ＝ＣＨ−Ｌ２−Ｙ〔式中、Ｌ２はリンカーを表し、Ｙは相間移動触媒の残基を表す。〕で表される単量体を例示できる。これらの単量体を共重合させ、高分子化合物を製造する方法は、公知文献（例えば、1） Macromolecules 1994, 27, 4413.  2) Taguchi, M.; Tomita, I.; Endo, T. Angew. Chem. Int. Ed. 2000, 39, 3667.）に記載されており、当業者であればそれらの文献から容易に目的の高分子化合物を製造することができる。これらの単量体を共重合させることによって得られる高分子化合物は、下記の式(Ia)、(Ib)、(IIa)、及び(IIb)で表される構造単位を含む。
【００１９】
【化１】
2015054840.tif 000002
【００２０】
〔式中、Ｌ１及びＬ２リンカーを表し、Ｓｕｂは基質を表し、Ｙは相間移動触媒の残基を表す。〕
上記式におけるＬ１及びＬ２は、高分子化合物の主鎖と反応性部位との距離を保持できるリンカーであれば特に限定されない。具体的には、０〜４個のアリール基（好適にはフェニル）、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜６のフルオロアルキル基、炭素数１〜６のアルコキシ基、及び炭素数１〜６のフルオロアルコキシ基からなる群から選ばれる１以上の基からなり、適宜、スルホニル基、アミド基、又はスルホンアミド基のような１〜４個の官能基を含むリンカーを例示できる。また、このようなリンカーは、公知文献（例えば、特表2006-510706号公報、特表2007-500688号公報）に記載されており、当業者であればそれらの文献を基に適切なリンカーを選択できる。好適なＬ１及びＬ２としては、それぞれ下記の式(III)及び(IV)
【００２１】
【化２】
2015054840.tif 000003
【００２２】
で表されるリンカーを例示できるが、これらに限定されるわけではない。式(I)及び(II)で表される単量体だけを共重合させると、直鎖状の高分子化合物が生成するが、これらの構造単位に別の構造単位を加え、架橋を生じさせることによって、網目状の高分子化合物にしてもよい。網目状にするための別の構造単位としては、例えば、下記の式(V)
【００２３】
【化３】
2015054840.tif 000004
【００２４】
で表される構造単位を示すことができる。高分子化合物を直鎖状から網目状にすることにより、溶媒への溶解性が低下すると予測されるので、切り出された放射性ハロゲン標識化合物の単離が容易になると考えられる。高分子化合物には、溶媒からの分離などを容易にするため、官能基を付加してもよい。付加する官能基としては、例えば、長鎖アルキル基、パーフルオロアルキル基などを挙げることができる。また、高分子化合物は、溶媒に不要な固相に担持させてもよい。これにより、切り出された放射性ハロゲン標識化合物の単離がより容易になると考えられる。高分子化合物の分子量は特に限定されないが、500〜50,000,000であることが好ましく、5,000〜5,000,000であることがより好ましく50,000〜500,000であることが更に好ましい。高分子化合物中に含まれる基質の数は特に限定されないが、50〜50,000であることが好ましく、50〜5,000であることがより好ましく、50〜500であることが更に好ましい。高分子化合物中に含まれる相間移動触媒の数は特に限定されないが、50〜50,000であることが好ましく、50〜5,000であることがより好ましく、50〜500であることが更に好ましい。高分子化合物中の基質数と相間移動触媒の数の比は特に限定されないが、前者と後者の比は、1000：1〜1：1000であることが好ましく、100：1〜1：100であることがより好ましく、10：1〜10：1であることが更に好ましい。
【００２５】
高分子化合物と放射性ハロゲン化物イオンとの反応は、高分子化合物と放射性ハロゲン化物イオンを含む塩を適当な溶媒中で共存させることにより行うことができる。放射性ハロゲン化物イオンとしては、18F-、123I-、124I-、125I-、又は131I-などを例示できる。放射性ハロゲン化物イオンを含む塩としては、リチウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、セシウム塩などを例示できる。溶媒としては、アセトニトリル、プロピオニトリル、ジメチルフォルムアミド、ジメチルスルホキシド、エタノール、ブタノール、ジオキサン、水および、それら同士の混合溶媒などを例示できる。溶媒中の高分子化合物の濃度は特に限定されないが、0.1〜1000mg/mLであることが好ましく、1〜100mg/mLであることがより好ましく、10〜100mg/mLであることが更に好ましい。また、溶媒中のフッ化物イオンを含む塩の濃度も特に限定されないが、1pM〜１Mであることが好ましく、100pM〜1mMであることがより好ましく、1pM〜1μMであることが更に好ましい。溶媒中に遊離状態の相間移動触媒を含む場合、その濃度は特に限定されないが、0.01〜1000mg/mLであることが好ましく、0.1〜100mg/mLであることがより好ましく、1〜20mg/mLであることが更に好ましい。高分子化合物と放射性ハロゲン化物イオンとの反応の際の温度は、特に限定されないが、0〜200℃であることが好ましく、50〜150℃であることがより好ましく、80〜100℃であることが更に好ましい。高分子化合物と放射性ハロゲン化物イオンとの反応時間は、特に限定されないが、0.1〜30分であることが好ましく、1〜15分であることがより好ましく、5〜10分であることが更に好ましい。
【００２６】
高分子化合物と放射性ハロゲン化物イオンとの反応は、塩基の存在下で行うことが好ましい。塩基の存在下で行うことにより、Ｓｕｂ−ＯＨで表される副生物の生成を抑制できるからである。塩基としては、水酸化カリウム、硫酸カリウムなどを用いることができ、これらの中でも副生物の生成抑制効果の高い水酸化カリウムを用いるのが好ましい。
【００２７】
イソシアナート基を有する化合物は、放射性ハロゲン標識化合物から分離可能な性質又は化学構造を有する化合物であることが好ましい。このような性質や化学構造を持つことにより、イソシアナート基を有する化合物と結合するＳｕｂ−ＯＨで表される副生物を放射性ハロゲン標識化合物から容易に分離することができるようになるからである。放射性ハロゲン標識化合物から分離可能な性質の一例として、「イオン性である」という性質を挙げることができる。イオン性は、カチオン性、アニオン性、両イオン性のいずれであってもよい。イソシアナート基を有する化合物がイオン性である場合、この化合物と結合する副生物を、例えば、イオン液体による抽出やイオン交換樹脂による吸着によって、放射性ハロゲン標識化合物から分離し、除去することができる。放射性ハロゲン標識化合物からの分離は、イソシアナート基を有する化合物の分子サイズを大きくすることによっても可能である。イソシアナート基を有する化合物の分子サイズを大きくするとは、例えば、この化合物の分子量を基質の3倍以上、好ましくは5倍以上、より好ましくは10倍以上、更に好ましくは15倍以上とすることである。イソシアナート基を有する化合物の分子サイズが大きい場合、この化合物と結合する副生物を、例えば、限外ろ過やゲルろ過クロマトグラフィーによって、放射性ハロゲン標識化合物から分離し、除去することができる。更に、イソシアナート基を有する化合物が特定の固相担体と結合し得る基を有するようにしても、放射性ハロゲン標識化合物から副生物の分離は可能である。特定の固相担体と結合し得る基とその固相担体としては、例えば、マレイミドフェニル基とアミン修飾シリカゲル、マレイミドフェニル基とチオール修飾シリカゲル、マレイミドフェニル基とジエン修飾シリカゲル、マレイミド基とアミン修飾シリカゲル、マレイミド基とチオール修飾シリカゲル、マレイミド基とジエン修飾シリカゲル、ベンズアルデヒド基とアミン修飾シリカゲル、ベンズアルデヒド基とオキシム修飾シリカゲル、ベンズアルデヒド基とヒドラジン修飾シリカゲルなどを挙げることができる。
【００２８】
Ｓｕｂ−ＯＨで表される副生物とイソシアナート基を有する化合物との結合は、Ｓｕｂ−ＯＨで表される副生物を含む溶媒中にイソシアナート基を有する化合物を加えることにより行うことができる。溶媒中のイソシアナート基を有する化合物の濃度は、副生物の量やイソシアナート基を有する化合物の種類によって変わるが、0.0001〜100mg/mLであることが好ましく、0.001〜10mg/mLであることがより好ましく、0.01〜1mg/mLであることが更に好ましい。副生物とイソシアナート基を有する化合物の結合反応時の温度は特に限定されないが、0〜200℃であることが好ましく、50〜150℃であることがより好ましく、80〜120℃であることが更に好ましい。この結合反応の時間は、特に限定されないが、0.1〜10分であることが好ましく、0.5〜5分であることがより好ましく、1〜3分であることが更に好ましい。
【００２９】
イソシアナート基を有する化合物と結合した副生物の除去は、常法に従ってクロマトグラフィーやろ過などより行うことができる。また、イソシアナート基を有する化合物が放射性ハロゲン標識化合物から分離可能な性質又は化学構造を有する化合物である場合は、上述した手段、例えば、イオン液体による抽出、イオン交換樹脂による吸着、限外ろ過、ゲルろ過クロマトグラフィー、特定の固相担体を使用したろ過又はクロマトグラフィーなどにより行うことができる。
【００３０】
反応生成物からの放射性ハロゲン標識化合物の精製は、クロマトグラフィーやろ過などの常法に従って行うことができる。このようにして精製された放射性ハロゲン標識化合物には、通常、保護基などが付いているので、必要に応じて脱保護などを行い目的の化合物とすることができる。
【実施例】
【００３１】
以下、実施例により本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
（１）実験方法
（１−１）ヘプタ-5,6-ジエン-1-イル-4-メチルベンゼンスルホン酸の合成
5-ヘキシン-1-オール(5.00 g, 51.0 mmol, 1.00 eq.)のジオキサン溶液(75.0 mL)にパラホルムアルデヒド(5.35 g, 178 mmol, 3.50 eq.)と触媒量の臭化銅(I)(2.42 g, 16.8 mmol, 0.330 eq.)、ジイソプロピルアミン(12.9 mL, 91.7 mmol, 1.80 eq.)を室温で加えた。110 ℃で16時間撹拌した後、反応溶液をセライトを用いてろ過した。ろ液を0 ℃に冷やした１M塩酸溶液に注いだ。水溶液をエーテルにより2回抽出した。エーテル層を１M塩酸溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウム水溶液で乾燥した。ろ過したのち、ろ液を減圧下溶媒留去した。残渣を精製せず次の反応に用いた。
【００３２】
上記の残渣を溶解した脱水塩化メチレン(75 mL)溶液にトリエチルアミン(17.7 mL, 127 mmol, 2.50 eq.)とトリメチルアミン塩酸塩(4.86 g, 51.0 mmol, 1.00 eq.)、4-メチルベンゼンスルホン酸クロリド(11.7 g, 61.2 mmol, 1.20 eq.)を0 ℃で加えた。0 ℃で一時間撹拌した後、室温にしさらに一時間撹拌した。反応溶液を0 ℃に冷却した1M塩酸にゆっくり注いた。水溶液を2回塩化メチレンで抽出したのち、合わせた塩化メチレン層を1M塩酸、飽和重炭酸水溶液、ブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。ろ過後、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒  95:5 ヘキサン:酢酸エチル）により単離を行い収率56%で表題化合物(7.63 g, 28.6 mmol)を得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3):δ 7.79 (d, 2H, H-a, Ja,b = 8.2 Hz), 7.34 (d, 2H, H-b, Ja,b = 8.2 Hz), 5.02 (tt, 1H, H-g, Jf,g = Jg,h = 6.8 Hz), 4.64 (dt, 2H, H-h, Jf,h = 3.4 Hz, Jg,h = 6.8 Hz), 4.03 (t, 2H, H-c, Jc,d = 6.3 Hz), 2.45 (s, 3H, CH3), 1.95 (dtt, 2H, H-f, Je,f = Jf,g = 6.8 Hz, Jf,h = 3.4 Hz), 1.69 (tt, 2H, H-d, Jc,d = 6.3 Hz, Jd,e = 6.8 Hz), 1.44 (tt, 2H, H-e, Jd,e = Je,f = 6.8 Hz); 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ207.9, 144.6, 133.2, 129.8, 127.9, 89.2, 75.0, 70.4, 28.2, 27.3, 24.7, 21.6; FT-IR (neat): 2941, 1956, 1598, 1455, 1359, 1176, 933, 555 (cm-1); HRMS (ESI-TOF) calcd for C14H19O3S［M+H］+ 267.1055, found 267.1052.
【００３３】
【化４】
2015054840.tif 000005
【００３４】
（１−２）4-(ヘプタ-5,6-ジイン-1-イルオキシ)ベンゼンスルホン酸クロリドの合成
4-ヒドロキシベンゼンスルホン酸ナトリウム(2.29 g, 11.7 mmol, 1.00 eq.)とヘプタ-5,6-ジエン-イル-4-メチルベンゼンスルホン酸のエタノール(12.0 mL)と水(12.0 mL)の混合溶液に室温下ナトリウムNaOH (703 mg, 17.6 mmol, 1.50 eq.)を加えた。85℃で24時間反応した後、反応溶液を冷却した。その後、反応溶液が賛成になるまでダウエックス H+を加えた。溶液をろ過し、ろ液を減圧下溶媒留去した。残渣を精製せず次の反応に用いた。
【００３５】
乾燥トルエンから2回共沸脱水した上記残渣を乾燥DMF(22 mL)に溶解し、室温で塩化チオニル(920 μL, 11.7 mmol, 1.00 eq.)をゆっくり滴下した。室温で15分間撹拌した後、冷却した水に反応溶液を注いだ。水溶液を2回塩化メチレンで抽出した後、有機層を水とブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。ろ過後、ろ液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒  クロロホルム）により分離した後、リサイクル分取高速液体クロマトグラフィーにより単離を行い収率65%で表題化合物 (2.23 g, 7.61 mmol)を得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ7.96 (d, 2H, H-a, Ja,b = 9.2 Hz), 7.03 (d, 2H, H-b, Ja,b = 9.2 Hz), 5.12 (tt, 1H, H-g, Jf,g = 6.3 Hz, Jg,h = 6.8 Hz), 4.69 (dt, 2H, H-h, Jf,h = 3.4 Hz, Jg,h = 6.8 Hz), 4.08 (t, 2H, H-c, Jc,d = 6.3 Hz), 2.09 (dtt, 2H, H-f, Je,f = 6.8 Hz, Jf,g = 6.3 Hz, Jf,h = 3.4 Hz), 1.91-1.84 (m, 2H, H-d), 1.65-1.58 (m, 2H, H-e); 13C NMR (67.8 MHz, CDCl3): δ208.6, 164.4, 135.9, 129.5, 115.1, 89.4, 75.1, 68.6, 28.2, 27.7, 25.3; FT-IR (neat): 2943, 1956, 1592, 1376, 1188, 833, 567 (cm-1); HRMS (ESI-TOF) calcd for C13H15O3SClNa［M+Na］+ 309.0328, found 309.0300.
【００３６】
【化５】
2015054840.tif 000006
【００３７】
（１−３）2-アミノ-1H-イミダゾール ヘミ硫酸の合成
O-メチルイソウレア(5.30 g, 44.2 mmol, 1.00 eq.)水溶液(8.80 mL)に室温下2-アミノアセトアルデヒドジメチルアセタール(4.65 g, 44.2 mmol, 1.00 eq.)を加えた。50 ℃で5.5時間撹拌した後、反応溶液を冷却した。冷却した溶液にpHが３になるまで濃硫酸を加えた。その後100 ℃で2.5時間反応し、溶液を室温まで冷却した後氷冷したエタノール(200 mL)に一時間かけて滴下した。不均一溶液を0 ℃で一時間撹拌し、ろ過し、固体を氷冷したエタノールで2回洗浄した。そのろ液を減圧下濃縮し、収率56%で表題化合物(3.20 g, 24.8 mmol)を得た1H NMR (400 MHz, D2O): δ6.69 (s, 2H); 13C NMR (100 MHz, D2O, Acetone-d6): δ147.0, 113.2; FT-IR (KBr): 3148, 1667, 1088, 838, 602 (cm-1).
【００３８】
【化６】
2015054840.tif 000007
【００３９】
（１−４）2-ニトロ-1H-イミダゾールの合成
化合物1H-イミダゾール-2-アミン  ヘミ硫酸 (1.12 g, 8.48 mmol, 1.00 eq.)の10%硫酸水溶液に0 ℃で硝酸ナトリウム水溶液(614 mg, 8.90 mmol, 1.05 eq.)を加えた。0 ℃で30分撹拌した後、硫酸銅（II）・5水和物(11.9 g, 63.6 mmol, 7.50 eq.)と亜硝酸ナトリウム(2.92 g, 42.4 mmol, 5.00 eq.)、重炭酸水素ナトリウムNaHCO3 (3.20 g, 38.1 mmol, 4.50 eq.)の混合水溶液(50.0 mL)を50 ℃で前述した溶液にゆっくり加えた。50 ℃で2時間撹拌した後、水溶液を1%ギ酸酢酸エチル溶液で3回抽出し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。ろ過後減圧下溶媒留去し表題化合物(651 mg, 5.77 mmol)を収率68%で得た。 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ6.69 (s, 2H); 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6): δ146.5, 126.3; FT-IR (KBr): 3148, 1667, 1088, 838, 602 (cm-1).
【００４０】
【化７】
2015054840.tif 000008
【００４１】
（１−５）1-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-3-(2-ニトロ-1H-イミダゾール-1-イル)プロパン-2-オールの合成
化合物2-ニトロ-1H-イミダゾール(1.00 g, 8.84 mmol, 1.00 eq.)とグリシドール(1.10 g, 14.9 mmol, 1.60 eq.)をDMFに溶解し、触媒量の炭酸カリウム(183 mg, 1.33 mmol, 0.150 eq.)を室温で加えた。85 ℃で6時間撹拌した後、溶液を冷やし室温にした。反応溶液にイミダゾール(1.51 g, 22.1 mmol, 2.50 eq.)とtert-ブチルジメチルシリルクロリド(2.67 g, 17.7 mmol, 2.00 eq.)を室温で加えた。室温で3時間撹拌した後、冷却した1M塩酸を反応溶液にゆっくり注いだ。水溶液を酢酸エチルで2回抽出し、1M HCl、飽和重炭酸水素ナトリウム溶液、ブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。ろ過後、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーを用い、99:1の塩化メチレンーメタノール溶液により精製し、表題化合物(1.12 g, 3.63 mmol)を収率41%で得た。Mp 123-125 ℃; 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ7.20 (d, 1H, H-b, Ja,b = 1.4 Hz), 7.14 (d, 1H, H-a, Ja,b = 1.4 Hz), 4.66 (dd, 1H, H-c, Jc,d = 3.4 Hz, Jgem = 13.5 Hz), 4.37 (dd, 1H, H-c, Jc,d = 7.7 Hz, Jgem = 13.5 Hz), 4.07-4.00 (m, 1H, H-d), 3.76 (dd, 1H, H-e, Je,f = 4.4 Hz, Jgem = 10.6 Hz), 3.60 (dd, 1H, H-e, Je,f = 5.3 Hz, Jgem = 10.6 Hz), 2.52 (d, 1H, OH, Jd,OH = 6.3 Hz), 0.92 (s, 9H, -C(CH3)3), 0.10 (s, 6H, CH3); 13C NMR (100 MHz, CDCl3): δ127.9, 127.3, 70.3, 64.1, 52.5, 25.8, 18.2, -5.51; FT-IR (KBr): 3282, 2929, 1540, 1513, 1489, 1363, 1258, 1103, 843, 776 (cm-1); HRMS (ESI-TOF) calcd. for C12H24N3O4Si［M+H］+ 302.1536, found 302.1526.
【００４２】
【化８】
2015054840.tif 000009
【００４３】
（１−６）3-(2-ニトロ-1H-イミダゾール-1-イル)-2-((テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)オキシ)プロパン-1-オールの合成
1-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-3-(2-ニトロ-1H-イミダゾイル-イル)プロパン-2-オール(922 mg, 3.06 mmol, 1.00 eq.)の乾燥塩化メチレン溶液(31.0 mL)に対して室温で2H-ジヒドロピラン(603 μL, 6.12 mmol, 2.00 eq.)と触媒量のカンファースルホン酸(142 mg, 612 μmol, 0.200 eq.)を加えた。 室温で2.5時間撹拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を注いだ。水溶液を塩化メチレンで2回抽出した。抽出した塩化メチレン溶液を炭酸水素ナトリウム水溶液、ブラインで洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶液をろ過し、ろ液を減圧下溶媒留去した。残渣を精製せず次の反応に用いた。
【００４４】
上記残渣の乾燥THF(20.0 mL)溶液に室温でTBAF(1.93 g, 7.34 mmol, 1.20 eq.)を加えた。室温で15分撹拌した後、反応溶液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を注いだ。水溶液を2回塩化メチレンで抽出した。合わせた塩化メチレン溶液を飽和炭酸水素ナトリウム、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥、ろ過した後ろ液を減圧下溶媒留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーを用い、99:1の塩化メチレンーメタノール溶液により精製し、表題化合物(770 mg, 2.85 mmol, 93% in 2 steps, Mixture of 2 diastereomers)を収率93%で得た。Mp 91-93 ℃; 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ7.23 (d, 1H, H-b, J = 1.0 Hz), 7.15 (s, 2H, H-a, H-b*), 7.13 (d, 1H, H-a*, J = 1.0 Hz), 4.74-4.66 (m, 3H, H-c, H-f, H-c*), 4.61 (dd, 1H, H-c, J = 7.7 Hz, J = 14.1 Hz), 4.36 (dd, 1H, H-c*, J = 7.7 Hz, J = 14.1 Hz), 4.22-4.14 (m, 2H, H-d, H-f*), 4.01-3.92 (m, 2H, H-j, H-d*), 3.81-3.73 (m, 2H, H-e, H-e*), 3.63-3.58 (m, 2H, H-e, H-e*), 3.52-3.42 (m, 2H, H-j*, OH), 3.34-3.31 (m, 2H, H-j, H-j*), 1.80-1.36 (m, 12H, H-g, H-h, H-i, H-g*, H-h*, H-i*); FT-IR (KBr): 3395, 2954, 1542, 1485, 1359, 1283, 1211, 1039, 839, 796 (cm-1); HRMS (ESI-TOF) calcd. for C11H18N3O5［M+H］+ 272.1246, found 272.1247.
【００４５】
【化９】
2015054840.tif 000010
【００４６】
（１−７）FMISO 前駆体モノマーの合成
3-(2-ニトロ-1H-イミダゾイル-1-イル)-2-((テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)オキシ)プロパン-1-オール(391 mg, 1.44 mmol, 1.00 eq.)のトルエン溶液(7.5 mL)にトリエチルアミン(500 μL, 3.60 mmol, 2.50 eq.), トリメチルアミン塩酸塩 (137 mg, 1.44 mmol, 1.00 eq.)と 4-(5,6-ヘプタジエニルオキシ)ベンゼンスルホニルクロリド(620 mg, 2.16 mmol, 1.50 eq.)のトルエン溶液(7.5 mL)を0 ℃で作用させ室温で3時間撹拌した。シリカゲルクロマトグラフィーを用いて99.5:0.5 塩化メチレン:メタノールにより精製し、表題化合物を収率82%で得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.86 (d, 2H, H-k, J = 8.7 Hz), 7.83 (d, 2H, H-k*, J = 8.7 Hz), 7.16 (s, 1H, H-b), 7.11 (s, 2H, H-a, H-b*), 7.10 (s, 1H, H-a*), 7.02 (d, 4H, H-l, H-l*, J = 8.7 Hz), 5.12 (tt, 2H, H-q, H-q*, J = 6.3 Hz, J = 6.8 Hz), 4.80 (dd, 1H, H-c, J = 3.4 Hz, J = 14.1 Hz), 4.70 (dd, 1H, H-c*, J = 3.4 Hz, J = 14.1 Hz), 4.69 (dt, 4H, H-r, H-r*, J = 3.4 Hz, J = 6.8 Hz), 4.53-4.51 (m, 1H, H-f), 4.44 (dd, 1H, H-c, J = 8.2 Hz, J = 14.1 Hz), 4.37 (dd, 1H, H-c*, J = 7.2 Hz, J = 14.1 Hz), 4.28-4.20 (m, 3H, H-d, H-e, H-f*), 4.13 (dd, 1H, H-e*, J = 4.4 Hz, J = 10.6 Hz), 4.07-4.00 (m, 7H, H-e, H-m, H-d*, H-e*, H-m*), 3.68-3.63 (m, 1H, H-j), 3.36-3.31 (m, 1H, H-j*), 3.27-3.22 (m, 1H, H-j), 3.12-3.06 (m, 1H, H-j*), 2.10 (dtt, 4H, H-p, H-p*, J = 6.8 Hz, J = 6.3 Hz, J = 3.4 Hz), 1.88 (tt, 4H, H-n, H-n*, J = 6.8 Hz, J = 6.3 Hz), 1.65-1.31 (m, 16H, H-g, H-h, H-i, H-o, H-g*, H-h*, H-i*, H-o*); FT-IR (neat): 2946, 1956, 1596, 1489, 1363, 1169, 986 (cm-1); HRMS (ESI-TOF) calcd. for C24H32N3O8S［M+H］+ 522.1910, found 522.1907.
【００４７】
【化１０】
2015054840.tif 000011
【００４８】
（１−８）FMISO 前駆体複合高分子の合成
アリルトリフルオロ酢酸(192 μL, 384 μmol, 0.0800 eq., 0.2 M solution in toluene) 、Ni(COD)2 (240 μL, 24.0 μmol, 0.0500 eq.)とトリフェニルホスフィンPPh3 (144 μL, 288 μmol, 0.0600 eq., 0.2 M solution in toluene) をFMISO前駆体モノマー(250 mg, 480 μmol, 1.00 eq.)と18-クラウン-6 モノマー (216 mg, 480 μmol, 1.00 eq.)のメタノール溶液(2.00 mL) に室温で加え、14時間撹拌した。溶媒を減圧下除去したのちクロロホルムでカラムクロマトグラフィーでポリマーのみを分離し、少量の塩化メチレンに溶解した。その溶液をヘキサンで再沈殿させた。 (310 mg, 67%, FMISO:Crown = 1:0.77, Mn = 12200, Mw/Mn = 1.08, Mixture of 2 diastereomers) 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.74 (br-s, 4H, A-k, A-k*), 7.40 (br-s, 4H x 0.77, B-b, B-c), 7.20 (br-s, 1H, A-b), 7.12 (br-s, 1H, A-b*), 7.04 (br-s, 2H, A-a, A-a*), 6.93 (br-s, 4H, A-l, A-l*), 6.71 (br-s, 2H x 0.77, B-a), 5.30 (br-s, 1H, -C=CH-, -CH=CH2), 4.69 (br-d, 1H, A-c, J = 14.1 Hz), 4.60 (br-d, 1H, A-c*, J = 12.1 Hz), 4.52 (br-s, 1H, A-f), 4.41 (br-d, 1H, A-c*, J = 12.1 Hz), 4.34 (br-d, 1H, A-c, J = 14.1 Hz), 4.19-3.64 (m, 12H + 40H x 0.77, A-d, A-e, A-m, A-j, A-d*, A-e*, A-f*, A-m*, B-d, B-e, B-f, B-g, B-h), 3.32 (br-s, 1H + 4H x 0.77, A-j*, B-i), 3.21 (br-s, 1H, A-j), 3.05 (br-s, 1H, A-j*), 2.67 (br-s, 2H, =C-CH2-C=), 2.01 (br-s, 4H + 4H x 0.77, A-n, A-n*, B-j), 1.76-1.38 (m, 20H + 8H x 0.77, A-g, A-h, A-i, A-o, A-p, A-g*, A-h*, A-i*, A-o*, A-p*, B-k, B-l); FT-IR (neat): 2926, 1596, 1489, 1360, 1263, 1167, 984, 838, 582 (cm-1).
【００４９】
【化１１】
2015054840.tif 000012
【００５０】
（１−９）FMISOとβ-脱離体の生成
【００５１】
【化１２】
2015054840.tif 000013
【００５２】
MBS-FMISO(28.0 mg, 63.5 μmol, 1.00 eq.)とクリプトフィックス2.2.2(28.2 mg, 76.2 μmol, 1.20 eq.) 、炭酸カリウム (26.3 mg, 191 μmol, 3.00 eq.) のアセトニトリル溶液 (1.00 mL)にフッ化カリウム(18.4 mg, 317 μmol, 5.00 eq.)を室温で加えた。105 ℃で30分撹拌した後、反応溶液を減圧下濃縮した。残渣を溶離液97:3のトルエン:酢酸エチルを用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、β-脱離体(2.8 mg, 11.1 μmol, 18%)を得た後、溶離液95:5のトルエン:酢酸エチルを用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、FMISO (9.0 mg, 32.6 μmol, 52%)を得た。
【００５３】
ヒドロキシ基を2-テトラヒドロピラニル基で保護したFMISO、即ち、1-(3-フルオロ-2-((テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)オキシ)プロピル)-2-ニトロ-1H-イミダゾールの1H NMR等のデータを以下に示す。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ7.20 (d, 1H, H-b, J = 1.0 Hz), 7.16 (d, 2H, H-b*, J = 1.0 Hz), 7.14 (d, 2H, H-a, H-a*, J = 1.0 Hz), 4.88 (dd, 1H, H-c, J = 3.9 Hz, J = 14.1 Hz), 4.78 (dd, 1H, H-c*, J = 3.9 Hz, J = 14.1 Hz), 4.69 (dd, 1H, H-f, J = 1.9 Hz, J = 3.4 Hz), 4.59 (ddd, 1H, H-e, J = 3.4 Hz, J = 9.7 Hz, J = 45.5 Hz), 4.56 (ddd, 1H, H-e*, J = 3.4 Hz, J = 11.1 Hz, J = 45.5 Hz), 4.55-4.43 (m, 2H, H-c, H-c*), 4.42 (dd, 1H, H-e*, J = 3.9 Hz, J = 11.1 Hz, J = 45.5 Hz), 4.36-4.25 (m, 3H, H-d, H-e, H-f*), 4.17-4.07 (m, 1H, H-d*), 3.87-3.82 (m, 1H, H-j), 3.50-3.44 (m, 1H, H-j*), 3.34-3.28 (m, 1H, H-j), 3.22-3.16 (m, 1H, H-j*), 1.77-1.35 (m, 12H, H-g, H-h, H-i, H-g*, H-h*, H-i*); 19F NMR (373 MHz, CDCl3): δ 247.6 (dt, Jd,F = 18.2 Hz, Je,F = 45.5 Hz), 245.7 (dt, Je,F = 45.5 Hz, Jd,F = 18.3 Hz); FT-IR (neat): 2947, 1540, 1488, 1362, 1285, 1125, 1033, 989 (cm-1); HRMS (ESI-TOF) calcd. for C11H17N3O4F［M+H］+ 274.1203, found 274.1196.
【００５４】
【化１３】
2015054840.tif 000014
【００５５】
β脱離体、即ち、2-ニトロ-1-(2-(テトラハイドロピラニルオキシ)アリル)-1H-イミダゾールの1H NMR等のデータを以下に示す。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.16 (s, 2H, H-b, H-b*), 7.14 (s, 2H, H-a, H-a*), 5.18 (br-dd, 2H, H-f, H-f*, J = 2.4 Hz, J = 2.9 Hz), 5.04 (br-s, 4H, H-d, H-e, H-d*, H-e*), 4.51 (d, 2H, H-c, H-c*, J = 2.4 Hz), 4.31 (d, 1H, H-c, H-c*, J = 2.4 Hz), 3.66-3.64 (m, 1H, H-j), 3.58-3.52 (m, 3H, H-j, H-j*), 1.73-1.55 (m, 12H, H-g, H-h, H-i, H-g*, H-h*, H-i*); FT-IR (neat): 2926, 1738, 1646, 1540, 1489, 1366, 1286, 1118, 997, 838 (cm-1); HRMS (ESI-TOF) calcd. for C11H16N3O4［M+H］+ 254.1141, found 254.1140.
【００５６】
【化１４】
2015054840.tif 000015
【００５７】
（１−１０）FMISO 前駆体複合高分子からのFMISOの生成とアルコール体の除去
（１−１０−１）塩基として硫酸カリウムを用いた場合
1.2 mLのミクロチューブに0.1M フッ化カリウム水溶液(4.5 μL, 0.50 μmol)、0.1 M硫酸カリウム水溶液(4.5 μL, 0.50 μmol)と0.01 M クリプトフィックス2.2.2のアセトニトリル溶液(50 μL, 0.50 μmol) を入れ、150 μLのアセトニトリルを加えた。ミクロチューブを95 ℃にしたのち、乾燥窒素で吹付乾燥し、残存しているアセトニトリルと水を除去した。0.2 M FMISO 前駆体複合高分子(50 μL, 1.0 μmol)のアセトニトリル溶液を加え、95 ℃で15分間加熱した。冷却したのち、0.1 M PMPI(N-[p-マレイミドフェニル] イソシアナート(50 μL, 1.0 μmol)を加え、95 ℃で3分間加熱した。冷却後、200μLのアセトニトリルと100 mg アミン修飾シリカゲル(平均粒子径45-75 μm)を加え、3分間ボルテックスキサーを用い激しく撹拌した。混合溶液を0.2 μmのメンブレンフィルターでろ過し、さらに200 μL加え、同様にろ過した。
【００５８】
（１−１０−２）塩基として水酸化カリウムを用いた場合
1.2 mLのミクロチューブに0.1M フッ化カリウム水溶液(4.5 μL, 0.45 μmol)、0.1 M水酸化カリウム水溶液(4.5 μL, 0.45 μmol)と0.0183 mM クリプトフィックス2.2.2のアセトニトリル溶液(50 μL, 0.915 μmol) を入れ、150 μLのアセトニトリルを加えた。ミクロチューブを95 ℃にしたのち、乾燥窒素で吹付乾燥し、残存しているアセトニトリルと水を除去した。0.0183 mM FMISO 前駆体複合高分子(50 μL, 0.915 μmol)のアセトニトリル溶液を加え、95 ℃で5分間加熱した。冷却したのち、0.0934 mM PMPI(50 μL, 4.67 μmol)を加え、95 ℃で3分間加熱した。冷却後、200 μLのアセトニトリルと100 mgのアミン修飾シリカゲル(平均粒子径45-75 μm)を加え、3分間ボルテックスキサーを用い激しく撹拌した。混合溶液を0.2 μmのメンブレンフィルターでろ過し、さらに200 μL加え、同様にろ過した。
【００５９】
（１−１１）MBS-FMISOからのFMISOの生成
（１−１１−１）塩基として硫酸カリウムを用いた場合
1.2 mLのミクロチューブに0.1M フッ化カリウム水溶液(4.5 μL, 0.45 μmol)、0.1 M硫酸カリウム水溶液(4.5 μL, 0.45 μmol)と0.0183 mM クリプトフィックス2.2.2のアセトニトリル溶液(50 μL, 0.915 μmol) を入れ、150 μLのアセトニトリルを加えた。ミクロチューブを95 ℃にしたのち、乾燥窒素で吹付乾燥し、残存しているアセトニトリルと水を除去した。0.0183 mM MBS-FMISO(50 μL, 0.915 μmol)のアセトニトリル溶液を加え、105 ℃で１5分間加熱した。冷却したのち、0.0934 mM PMPI(50 μL, 4.67 μmol)を加え、95 ℃で3分間加熱した。冷却後、200 μLのアセトニトリルを加えた。
【００６０】
（１−１１−２）塩基として水酸化カリウムを用いた場合
1.2 mLのミクロチューブに0.1M フッ化カリウム水溶液(4.5 μL, 0.45 μmol)、0.1 M水酸化カリウム水溶液(4.5 μL, 0.45 μmol)と0.0183 mM クリプトフィックス2.2.2のアセトニトリル溶液(50 μL, 0.915 μmol) を入れ、150 μLのアセトニトリルを加えた。ミクロチューブを95 ℃にしたのち、乾燥窒素で吹付乾燥し、残存しているアセトニトリルと水を除去した。0.0183 mM MBS-FMISO (50 μL, 0.915 μmol)のアセトニトリル溶液を加え、105 ℃で１5分間加熱した。冷却したのち、0.0934 mM PMPI(50 μL, 4.67 μmol)を加え、95 ℃で3分間加熱した。冷却後、200 μLのアセトニトリルを加えた。
【００６１】
（２）実験結果
（２−１）FMISO 前駆体複合高分子とフッ化物イオンの反応生成物の分析
FMISO 前駆体複合高分子とフッ化物イオン（19F-）の反応生成物のHPLCによる分析結果を図１（硫酸カリウムを用いた場合）及び図２（水酸化カリウムを用いた場合）に示す。HPLC分析は、PMPIを入れる前（精製前）とPMPIを入れ、3分間加熱し、アミン修飾シリカゲルで処理し、ろ過した後（精製後）に行った。図に示すように、保持時間7.6-8.0分（ピーク１）に存在する副生物（アルコール体）である3-(2-ニトロ-1H-イミダゾール-1-イル)-2-((テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)オキシ)プロパン-1-オールは、ろ過前後で生成比10%から1%以下に削減できた。
【００６２】
（２−２）硫酸カリウム存在下におけるMBS-FMISOからの生成物の分析
硫酸カリウム存在下におけるMBS-FMISO（前駆体）からの生成物の分析結果を図３に示す。硫酸カリウムとクリプトフィックス2.2.2を用いて反応を行った結果（K2SO4+K.2.2.2）、アルコール体が最大収率30%（平均で25%）で得られることがわかった。次に、硫酸カリウムとクリプトフィックス2.2.2にフッ化カリウム水溶液を加えると（K2SO4+K.2.2.2+KF）と目的精製物の収率は70％、アルコール体が最大収率30%（平均で25%）で得られることを明らかにした。
【００６３】
（２−３）水酸化カリウム存在下におけるMBS-FMISOからの生成物の分析
水酸化カリウム存在下におけるMBS-FMISO（前駆体）からの生成物の分析結果を図４に示す。水酸化カリウムのみ又は水酸化カリウムと18-クラウン-6を用いて反応を行った結果（KOH又はKOH+18-crown-6）、β-脱離体のみが生成した。一方、水酸化カリウムとクリプトフィックス2.2.2（KOH+K.2.2.2）では反応は全く進行しなかった。この結果は、水酸化カリウムとクリプトフィックス2.2.2を用いるとアルコール体の生成だけでなくβ-脱離体の生成も抑制できることを示唆している。次に、水酸化カリウムとクリプトフィックス2.2.2にフッ化カリウム水溶液を加えると（KOH+K.2.2.2+KF）目的精製物が収率よく得られることを明らかにした。
【産業上の利用可能性】
【００６４】
18Fなどの放射性ハロゲンで標識された化合物は、種々の疾患の診断に利用されるPET用トレーサーとして有用である。このため、本発明は、製薬などの産業分野において利用可能である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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