(57)【要約】【課題】貫通孔の数や大きさなどを容易にカスタマイズできるスパージャーを提供すること。【解決手段】スパージャー５０は複数の貫通孔２１を有する軟質チューブ１０と、軟質チューブ１０に連結された硬質コネクター４２、４３、４４とを有する。軟質チューブ１０は一対の端部１０Ａ、１０Ｂを有するとともにリング状に形成され、硬質コネクタ４２、４３、４４は一対の端部１０Ａ、１０Ｂ間に設けられて一対の端部１０Ａ、１０Ｂを互いに連結する。【選択図】図５
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
培養液を収納する培養袋内に配置され、前記培養袋内の前記培養液に対して気体を供給するスパージャーにおいて、
リング状に延びるとともに、少なくとも一対の端部を有し、壁面に複数の貫通孔が形成された中空状の軟質チューブと、
前記軟質チューブの一対の端部を互いに連結する硬質コネクターとを備えたことを特徴とするスパージャー。
【請求項２】
前記硬質コネクターは直線型コネクター、コック付き直線型コネクター、Ｔ字型コネクター、およびＹ字型コネクターからなる群から選択される少なくとも１つを有することを特徴とする請求項１記載のスパージャー。
【請求項３】
前記軟質チューブは２本の軟質チューブ部分を有し、前記２本の軟質チューブ部分によって互いに向き合う２つの対の端部が形成され、前記硬質コネクターは各一対の端部を連結するコック付き直線型コネクター、Ｔ字型コネクター、またはＹ字型コネクターとを有することを特徴とする請求項２記載のスパージャー。
【請求項４】
前記コック付き直線型コネクターは開閉自在のコックを有し、前記培養袋内の前記培養液に対して気体を供給する間、当該コックは閉じられていることを特徴とする請求項３記載のスパージャー。
【請求項５】
前記軟質チューブは３．０〜９．０ｍｍの内径を有することを特徴とする請求項１乃至４のいずれか記載のスパージャー。
【請求項６】
前記培養袋内においてスパージャーは水平方向に配置され、前記貫通孔は内側であってかつ斜め上方を向くことを特徴とする請求項１乃至５のいずれか記載のスパージャー。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、シングルユース型細胞培養袋の内部に設置されるスパージャーに関する。
【背景技術】
【０００２】
抗体医薬やワクチンなどのバイオ医薬品の開発や製造において、シングルユース製品（使い捨て製品）が着実に浸透しつつある。シングルユース製品は洗浄や滅菌の作業が必要ないこと、交叉汚染がないこと、簡易的に無菌環境が得られることなどのメリットがあるため、バイオ医薬品の開発コストを大幅に削減できる場合がある。
【０００３】
近年注目されているシングルユース製品の１つが３Ｄ細胞培養袋である。これはフィルム、チューブ、ポート、スパージャー、攪拌機構、溶存酸素センサー、ｐＨセンサー、温度センサーなどの様々な材料、部品、機構を有する細胞培養袋である。この細胞培養袋のなかに細胞培養用の培養液（培地ともいう）を充填し、培地へ供給する気体の流量、培地を攪拌する速度、培地の温度などを制御しながら細胞培養を行う。培地へ供給する気体は空気、酸素、窒素、二酸化炭素などであるが、とりわけ酸素の供給が細胞培養に重要である。
【０００４】
この酸素供給で重要な役割を担う部品が気体供給装置として機能するスパージャーである。最も一般的なスパージャーは射出成型を含む方法によって得られるプラスチック製のリング型スパージャーである（非特許文献１）。スパージャーの表面には直径１ｍｍ前後の貫通孔が多数設けられている。この貫通孔の数や大きさは、細胞への物理的ダメージや培地への酸素供給率に直接影響するため、培養する細胞に合わせて最適化するのが理想的である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】ザルトリウス・ステディム・ジャパン（株）  「ザルトリウス・ステディムのシングルユース バイオリアクター」  カタログＮｏ．ＢＴ−３１  Ｒｅｖ．Ｂ
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、射出成型を含む方法で製造されるスパージャーは金型作製に莫大な費用がかかるため、十分な最適化検討ができないのが実情であった。
【０００７】
本発明はこのような点を考慮してなされたものであり、金型を用いることなく貫通孔の数や大きさなどを容易にカスタマイズできるスパージャーを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、培養液を収納する培養袋内に配置され、前記培養袋内の前記培養液に対して気体を供給するスパージャーにおいて、リング状に延びるとともに、少なくとも一対の端部を有し、壁面に複数の貫通孔が形成された中空状の軟質チューブと、前記軟質チューブの一対の端部を互いに連結する硬質コネクターとを備えたことを特徴とするスパージャーである。
【０００９】
本発明は、前記硬質コネクターは直線型コネクター、コック付き直線型コネクター、Ｔ字型コネクター、およびＹ字型コネクターからなる群から選択される少なくとも１つを有していてもよい。
【００１０】
本発明は、前記軟質チューブは２本の軟質チューブ部分を有し、前記２本の軟質チューブ部分によって互いに向き合う２つの対の端部が形成され、前記硬質コネクターは各一対の端部を連結するコック付き直線型コネクター、Ｔ字型コネクター、またはＹ字型コネクターとを有してもよい。
【００１１】
本発明は、前記コック付き直線型コネクターは開閉自在のコックを有し、前記培養袋内の前記培養液に対して気体を供給する間、当該コックは閉じられていてもよい。
【００１２】
本発明は、前記軟質チューブは３．０〜９．０ｍｍの内径を有していてもよい。
【００１３】
本発明は、前記培養袋内においてスパージャーは水平方向に配置され、前記貫通孔は内側であってかつ斜め上方を向いていてもよい。
【発明の効果】
【００１４】
本発明によれば、金型を作製せずに貫通孔の数や大きさなどを容易にカスタマイズできるスパージャーを提供できる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】図１は本発明によるスパージャーの軟質チューブを示す図。
【図２】図２（ａ）（ｂ）（ｃ）は軟質チューブの貫通孔の向きを示す図。
【図３】図３（ａ）（ｂ）（ｃ）は軟質チューブの貫通孔から気泡が出る様子を示す図。
【図４】図４（ａ）（ｂ）（ｃ）（ｄ）は硬質コネクターを示す図。
【図５】図５（ａ）（ｂ）（ｃ）（ｄ）は本発明によるスパージャーを示す平面図。
【図６】図６は本発明によるスパージャーが配置された培養袋を示す全体概略図。
【発明の実施形態】
【００１６】
以下、図面を参照して本発明の実施形態について説明する。
【００１７】
（培養袋）
まず図６により本発明によるスパージャーが配置される培養袋１１０について説明する。
【００１８】
図６に示すように、培養袋１１０は、被培養物１０８ａを含む培養液（培地ともいう）１０８を収容する袋本体１１１と、袋本体１１１内の培養液１０８を撹拌する攪拌器１３０と、を備えている。このうち、袋本体１１１は、複数のフィルム１１１ａをヒートシールして形成されている。フィルム１１１ａに用いる材料としては、可撓性を有するとともに耐ガンマ線滅菌性を有する樹脂材料であれば特に限定されることはない。例えば、フィルム１１１ａには、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ナイロン、エチレンビニルアルコール（ＥＶＯＨ）、ポリエチレン（ＰＥ）等を用いることができる。
【００１９】
攪拌器１３０は、袋本体１１１に回転自在に設けられた、袋本体１１１の上下方向に延びる回転シャフト１３１と、回転シャフト１３１に設けられ、袋本体１１１内の培養液１０８を撹拌する撹拌用羽根１３２と、回転シャフト１３１を回転可能に支持し、袋本体１１１から外方（図６において上方）に突出する第１回転支持部（上側回転支持部）１３３と、回転シャフト１３１を回転可能に支持し、袋本体１１１から外方（図６において下方）に突出する第２回転支持部（下側回転支持部）１３４と、を有している。
【００２０】
このうち、第１回転支持部１３３は、袋本体１１１の上部にヒートシールされている。回転シャフト１３１は、袋本体１１１から外方に延びており、回転シャフト１３１の上端部は、第１回転支持部１３３内に配置されている。回転シャフト１３１の上端部には、撹拌器側磁石が設けられている。この撹拌器側磁石が培養システムの撹拌駆動装置１０６と磁気カップリング方式で磁気結合されることにより、撹拌駆動装置１０６から回転シャフト１３１に回転駆動力が伝達されるようになっている。
【００２１】
第２回転支持部１３４は、袋本体１１１の下部にヒートシールされている。回転シャフト１３１の下端部は、袋本体１１１内に配置されており、第２回転支持部１３４は、回転シャフト１３１の下端部を、袋本体１１１内において回転可能に支持している。
【００２２】
袋本体１１１の上部には、培養液１０８を注入する培養液注入部１５０が設けられている。この培養液注入部１５０には、培養システムの培養液供給部から、被培養物１０８ａを含む培養液１０８が供給されて、培養液１０８が袋本体１１１内に注入されるようになっている。また、袋本体１１１の上部には、培養液注入部１５０から袋本体１１１に培養液１０８を注入する際、袋本体１１１内の気体を排出する気体排出部１５１が設けられている。なお、上述した第２回転支持部１３４が、袋本体１１１から培養液１０８を排出する機能を有しており、当該第２回転支持部１３４から、袋本体１１１内の培養液１０８が排出されるようになっている。
【００２３】
袋本体１１１内に、本発明によるスパージャー（気体供給装置）５０が設けられている。このスパージャー５０は、袋本体１１１内に収容された培養液１０８に空気１０９等の気体を導入するためのものである。スパージャー５０から袋本体１１１の上部を貫通して気体供給チューブ１５３が延びている。この気体供給チューブ１５３は、外方の培養システムの気体供給源１６０からスパージャー５０に空気１０９を供給するためのものである。
【００２４】
袋本体１１１には、温度センサ１５４、ｐＨセンサ１５５およびＤｏ（溶存酸素）センサ１５６が取り付けられている。このうち温度センサ１５４は、培養中の培養液１０８の温度を計測し、ｐＨセンサ１５５は、培養中の培養液１０８のｐＨを計測するためのものである。Ｄｏセンサ１５６は、培養中の培養液１０８の溶存酸素量を計測するためのものである。
【００２５】
また、袋本体１１１に、サンプリングチューブ１５７が取り付けられている。このサンプリングチューブ１５７は、培養中の培養液１０８を取り出し可能になっている。
【００２６】
なお、上述した培養液注入部１５０、温度センサ１５４等の配置は、図６に示すような配置に限られることはなく、各々の機能を果たすことが可能であれば任意とすることができる。
【００２７】
（スパージャー）
次にこのような構成からなる培養袋１１０内に配置された本発明によるスパージャー５０について述べる。
【００２８】
スパージャー５０は、図５（ａ）に示すように、リング状に延びるとともに一対の端部１０Ａ、１０Ｂを有し、壁面２０に複数の貫通孔２１が形成された中空状の軟質チューブ１０と、軟質チューブ１０の一対の端部１０Ａ、１０Ｂを互いに連結する硬質コネクタ４３とを備えている。
【００２９】
このうち、軟質チューブ１０は、円形のリング状に延びるとともに、後述のようにリング状に曲げても折れない柔軟な素材からなり、内部に空間１１を有するとともに、壁面２０に複数の貫通孔２１が形成されている（図１および図５（ａ）参照）。
【００３０】
また硬質コネクター４３はＴ字型コネクターからなり、軟質チューブ１０よりも硬質の素材で形成されている。また硬質コネクター４３は、気体供給源１６０側に連通する気体供給チューブ１５３に連結された接続部４３ａを有している。
【００３１】
ここで「リング状に延びる軟質チューブ１０」とは、軟質チューブ１０が環状に延びることをいい、必ずしも円形を形成する必要はなく、軟質チューブ１０はだ円形を形成してもよい（図５（ｂ）参照）。
【００３２】
図５（ｂ）に示すように、スパージャー５０は、だ円状に延びるとともに一対の端部１０Ａ、１０Ｂを有し、壁面２０に複数の貫通孔２１が形成された中空状の軟質チューブ１０と、軟質チューブ１０の一対の端部１０Ａ、１０Ｂを互いに連結する硬質コネクター４４とを有している。この硬質コネクター４４はＹ字状コネクターからなっており、硬質コネクター４４は気体チューブ１５３に連結された連結部４４ａを有している。
【００３３】
また、リング状に延びる軟質チューブ１０は、複数、例えば２本の軟質チューブ部分１０ａ、１０ｂを有していてもよい（図５（ｃ）参照）。
【００３４】
図５（ｃ）に示すように、軟質チューブ１０は２本の軟質チューブ部分１０ａ、１０ｂを有しており、２本の軟質チューブ部分１０ａ、１０ｂによって互いに向き合う２つの対の端部１０Ａ、１０Ｂおよび１０Ｃ、１０Ｄが形成されている。そして一対の端部１０Ａ、１０Ｂ間に、硬質コネクターとしてコック付き直線型コネクター４２が設けられ、一対の端部１０Ｃ、１０Ｄ間に硬質コネクターとして、Ｔ字型コネクター４３が設けられている。またコック付き直線型コネクター４２はコック４２ａを有するとともに、Ｔ字型コネクター４３は気体チューブ１５３に連結された連結部４３ａを有している。
【００３５】
なお、各々の軟質チューブ部分１０ａ、１０ｂの壁面２０には複数の貫通孔２１が形成されている。
【００３６】
同様に図５（ｄ）に示すように、リング状に延びる軟質チューブ１０は、複数、例えば２本の軟質チューブ部分１０ａ、１０ｂを有していてもよい。
【００３７】
図５（ｄ）に示すように、軟質チューブ１０は２本の軟質チューブ部分１０ａ、１０ｂを有しており、２本の軟質チューブ部分１０ａ、１０ｂによって互いに向き合う２つの対の端部１０Ａ、１０Ｂおよび１０Ｃ、１０Ｄが形成されている。そして一対の端部１０Ａ、１０Ｂ間に、硬質コネクターとしてＴ字型コネクター４３が設けられ、一対の端部１０Ｃ、１０Ｄ間に硬質コネクターとして、Ｔ字型コネクター４３が設けられている。また各々のＴ字型コネクター４３は気体チューブ１５３に連結された連結部４３ａを有している。
【００３８】
なお、各々の軟質チューブ部分１０ａ、１０ｂの壁面２０には複数の貫通孔２１形成されている。
【００３９】
次に以下、各部の構造について述べる。
【００４０】
（軟質チューブ）
軟質チューブ１０は、リング状に曲げても折れない柔軟な素材でできた中空管からなり、内部に空間１１が形成された壁面２０を有する（図１参照）。具体的には、軟質チューブ１０の素材としては熱可塑性エラストマー、白金処理シリコン、酸化物処理シリコン、ポリ塩化ビニル、ポリウレタン、ポリオレフィン、フッ素樹脂などが挙げられるが、溶出性の観点から米国薬局方クラスVI、ヨーロッパ薬局方、日本薬局方などに適合した熱可塑性エラストマーが望ましい。
【００４１】
軟質チューブ１０の内径は特に限定されないが、軟質チューブ１０に設けたすべての貫通孔２１から均等に気泡を発生させるためには３．０〜９．０ｍｍの内径をもつことが好ましい。これは、貫通孔２１を通って軟質チューブ１０の流路内に浸入した培養液１０８が、再び貫通孔２１を通って軟質チューブ１０の外側へ出て行きやすいからである。軟質チューブ１０の外径は内径よりも２．０〜６．０ｍｍ程度大きくすることが望ましい。
【００４２】
（貫通孔）
軟質チューブ１０に設けられる貫通孔２１は、ステンレス製の丸刃やドリルを含む公知の手段で設けることができる。その形状は円形であることが好ましいが、三角形や四角形、不定形であってもよい。貫通孔が円形の場合、最適な貫通孔の直径は培養する細胞によって異なるが、多くの場合０．５〜１．５ｍｍが望ましい。
【００４３】
すなわち、貫通孔２１の直径が０．５ｍｍ以下の場合、気泡が小さすぎるため細胞によってはダメージを受ける。他方、貫通孔２１の直径が１．５ｍｍ以上の場合、気泡が大きすぎるため気体供給効率が低くなり、また、標準条件ですべての貫通孔から気泡を出すのが難しい。
【００４４】
ここで、標準条件とは、圧力：０．１〜０．３ＭＰa、流速：５〜３０Ｌ／分の条件を言う。
【００４５】
このことから、本実施の形態においては、適度な大きさの気泡をすべての貫通孔２１から出すのに適した直径の範囲を０．５〜１．５ｍｍと定めた。
【００４６】
培養袋１１０内においてスパージャー５０を水平方向に配置した場合、貫通孔２１は内側であってかつ斜め上方を向くことが好ましい（図２（ａ）参照）。ここで、「内側」とは、図５（ａ）に示すような、リング状に延びるとともに一対の端部１０Ａ、１０Ｂを有し、壁面２０に複数の貫通孔２１が形成された中空状の軟質チューブ１０と、軟質チューブ１０の一対の端部１０Ａ、１０Ｂを互いに連結する硬質コネクタ４３とを備えている場合において、リング状となったスパージャー５０が形成するリングの中心側の面を示している。
【００４７】
これは、スパージャー５０が何らかの原因（自身の浮力など）で傾いてしまった場合でも、すべての貫通孔２１から気泡１０９が出やすいからである。貫通孔２１が真上を向いたり（図２（ｂ）参照）あるいは貫通孔２１が真横を向く場合（図２（ｃ）参照）、一部の貫通孔２１から気泡１０９が出ないことがある。
【００４８】
これらの現象は、スパージャー５０が傾くと軟質チューブ１０内の気体の分布が偏ることと関係している。例えばスパージャー５０が左側へ約３０°傾く場合を考える。貫通孔２１が真上を向いている場合、左半分の貫通孔は真上を向かなくなる上、左側の気体の一部が右側へ移動する。このため左半分だけ気泡１０９が出づらくなる（図３（ｂ）参照）。同様に、貫通孔２１が内側真横を向いている場合も、左側の気体の一部が右側へ移動するため気泡１０９が出づらくなる（図３（ｃ）参照）。
【００４９】
これに対して貫通孔２１が内側であってかつ斜め上方を向いている場合は、左半分の貫通孔はほぼ真上を向くようになるため、左側へ気体の一部が移動したとしても気泡１０９が出やすい（図３（ａ）参照）。
【００５０】
ところで軟質チューブ１０の１本あたりの貫通孔２１の数は３〜３０個であることが好ましく、それらはほぼ等間隔で設けられていることが望ましい。５Ｌ／分程度の低い流速で小さな気泡１０９を少量発生させたい場合は、貫通孔２１の数は少ない方が好ましい。逆に、３０Ｌ／分程度の高い流速で大きな気泡１０９を多量に発生させたい場合は、貫通孔２１の数は多い方が好ましい。
【００５１】
すなわち、貫通孔２１の数が３個以下の場合、気泡が少なすぎるため気体供給効率が低い。他方、貫通孔２１の数が３０個以上の場合、上記の標準条件ですべての貫通孔２１から気泡を出すのが難しい。
【００５２】
このことから、本実施の形態においては、適度な数の気泡をすべての貫通孔２１から出すのに適した貫通孔２１の数を３〜３０個と定めた。
【００５３】
（硬質コネクター）
上述のように硬質コネクターとしては、連結部４３ａを有するＴ字型コネクター４３、連結部４４ａを有するＹ字型コネクター４４、コック４２ａを有するコック付き直線型コネクター４２を用いることができ、その他直線型コネクター４５を用いてもよい（図４（ａ）（ｂ）（ｃ）（ｄ）参照）。
【００５４】
このうち硬質コネクター４２は端部４２Ａを有し、硬質コネクター４３は端部４３Ａを有し、硬質コネクター４４は端部４４Ａを有し、硬質コネクター４５は端部４５Ａを有する。
【００５５】
硬質コネクター４２、４３、４４、４５は、軟質チューブ１０よりも硬い素材でできた、中空管である。具体的には、プラスチック、ガラス、金属などが挙げられるが、溶出性の観点から米国薬局方クラスVI、ヨーロッパ薬局方、日本薬局方などに適合したプラスチックが望ましい。
【００５６】
硬質コネクター４２、４３、４４、４５の端部４２Ａ、４３Ａ、４４Ａ、４５Ａの径は対応する軟質チューブ１０の内径と同じかそれよりもやや大きいものが選択される。
【００５７】
硬質コネクター４２、４３、４４、４５の端部４２Ａ、４３Ａ、４４Ａ、４５Ａの数は特に限定されないが、典型的には２個または３個である。２個の端部を有する典型的な硬質コネクターはコック付き直線型コネクター４２（図４（ｃ）参照）または直線型コネクター４５（図４（ｄ）参照）である。また３個の端部を有する典型的な硬質コネクターはＴ字型（コネクター４３（図４（ａ）参照）またはＹ字型コネクター４４（図４（ｂ）参照））である。ただし、Ｙ字型コネクター４４は３つの端部４４Ａが等角で枝分かれしていることが望ましい。
【００５８】
コック付き直線型コネクター４２は開閉可能なコック（４２ａ）を備えている。一般に、コック４２ａを閉じたときの方がすべての貫通孔２１から気泡１０９が出やすい。これは、コック４２ａを閉じることによって軟質チューブ１０の流路内に浸入した培地１０８が再び貫通孔２１を通って軟質チューブ１０の外側へ出て行きやすくなるためである。このため、スパージャー５０の運転中、すなわち培養袋１１０内の培養液１０８に対して気体を供給する間、コック付き直線型コネクター４２のコック４２は閉としておくことが好ましい。
【００５９】
Ｔ字型コネクター４３またはＹ字型コネクター４４の３つの端部４３Ａ、４４Ａのうち１つは気体供給源１６０側へ接続された気体チューブ１５３に連結部４３ａまたは連結部４４ａを介して連結される。残り２つの端部４３Ａ、４４Ａは、気体供給量の左右バランスをとるため、連結部４３ａまたは連結部４４ａ側の流路に対して等しい角度で分岐していることが望ましい。例えば、図５（ａ）に示すＴ字型コネクター４３は左右へそれぞれ９０°分岐し、図５（ｂ）に示すＹ字型コネクター４４は左右へそれぞれ１２０°分岐している。
【００６０】
Ｔ字型コネクター４３またはＹ字型コネクター４４は１つのスパージャー５０に２つ以上含まれていてもよい。上述のように、図５（ｄ）に示すスパージャー５０はＴ字型コネクター４３が２つ含まれている。この場合、それぞれのＴ字型コネクター４３は同一または異なる気体供給源１６０へ連結される。
【００６１】
ところで、図５（ａ）（ｂ）（ｃ）（ｄ）に示すように、軟質チューブ１０の脱落を防ぐために軟質チューブ１０と硬質コネクター４２、４３、４４、４５との嵌合部にインシュロック５１を取り付けることが望ましい。
【００６２】
（製造方法）
本発明によるスパージャー５０を製造する場合、まず軟質チューブ１０と、硬質コネクター４２、４３、４４、４５を用意する。次に軟質チューブ１０に複数の貫通孔２１を設けた後、軟質チューブ１０と、硬質コネクター４２、４３、４４、４５の１種もしくは２種以上とを互いに嵌合させる。このようにしてスパージャー５０が得られる。
【００６３】
このうち例えば、図５（ｃ）に示すスパージャー５０を製造する場合、まず、軟質チューブ１０を適当な長さにカットし、長さ２２０ｍｍの２本の軟質チューブ部分１０ａ、１０ｂを準備する。次に、これらを１個のＴ字型コネクター４３と、１個の二方コック（閉栓）４２ａを有するコック付き直線型コネクター４２に嵌合させてリング状の軟質チューブ１０を得る。その後、ステンレス製の丸刃（直径１ｍｍ）を用いて２本の軟質チューブ部分１０ａ、１０ｂにそれぞれ７個の貫通孔２１をほぼ等間隔に設ける。最後に、軟質チューブ部分１０ａ、１０ｂの脱落を防ぐため嵌合部にインシュロック５１を取り付ける。なお、軟質チューブ部分１０ａ、１０ｂに貫通孔２１を設ける工程は、軟質チューブ部分１０ａ、１０ｂと硬質コネクター４２、４３とを互いに嵌合させる工程の前に行なってもよい。
【実施例１】
【００６４】
次に本発明による具体的実施例について説明する。
【００６５】
本実施例において、図５（ｃ）に示すスパージャー５０を製造するとともに、軟質チューブ１０の内径と貫通孔２１の向きが異なる様々なスパージャー５０異型サンプルを準備した。
【００６６】
軟質チューブ１０の内径を３．２ｍｍ、４．８ｍｍ、６．４ｍｍ、７．９ｍｍ、９．５ｍｍ、１１．１ｍｍの６通り変化させた軟質チューブ１０を準備した。また貫通孔２１の向きを真上（図２（ｂ）参照）、内側であってかつ斜め上方（図２（ａ）参照）、内側真横（図２（ｃ）参照）の３通り変化させた軟質チューブ１０を準備した。軟質チューブ１０はＣ−フレックス（Ｒ）（サンゴバン株式会社）を使用した。貫通孔の直径は１ｍｍに統一した。
【００６７】
これらのサンプルを水中に沈め、約０°（水平）に維持したときと、約３０°傾けたときの貫通孔２１から出る気泡１０９の均等性を調べた（表１）。この場合、スパージャー５０へ供給した空気の流速と圧力はそれぞれ５Ｌ／分と０．１ＭＰａとした。軟質チューブ１０の内径が３．２ｍｍ、４．８ｍｍ、６．４ｍｍのときは貫通孔２１の向きやスパージャー５０の傾きに関わらずすべての貫通孔２１から均等に気泡１０９が出た。軟質チューブ１０の内径が７．９ｍｍのときは、貫通孔２１の向きが内側であってかつ斜め上方のときだけスパージャー５０の傾きに関わらずすべての貫通孔２１から均等に気泡１０９が出た。
【００６８】
軟質チューブ１０の内径が９．５ｍｍときは、貫通孔２１の向きが内側であってかつ斜め上方であっても一部の貫通孔２１から気泡１０９が出なかった。軟質チューブ１０の内径が１１．１ｍｍときは、貫通孔２１の向きやスパージャー５０の傾きに関わらず半分以上の貫通孔から気泡１０９が出なかった。
【００６９】
なお表１において、貫通孔が内側であってかつ斜め上方を向く場合、「内側斜め」と記載した。
【表１】
2015065944.tif 000003
【符号の説明】
【００７０】
１０  軟質チューブ
１０ａ  軟質チューブ部分
１０ｂ  軟質チューブ部分
１１  空洞
２０  壁面
２１  貫通孔
４２  コック付き直線型コネクター
４２ａ  コック
４３  Ｔ字型コネクター
４３ａ  連結部
４４  Ｙ字型コネクター
４４ａ  連結部
４５  直線型コネクター
５０  スパージャー
５１  インシュロック
１０８  培養液（培地）
１１０  培養袋
【図１】
2015065944.tif 000004
【図２】
2015065944.tif 000005
【図３】
2015065944.tif 000006
【図４】
2015065944.tif 000007
【図５】
2015065944.tif 000008
【図６】
2015065944.tif 000009