(57)【要約】【課題】内部に収納された細胞シートを容易に取扱うことができる細胞シートパッケージおよびフィルム容器を提供する。【解決手段】細胞シートパッケージ１０Ａは、細胞シートＳと、細胞シートＳを収納するフィルム容器１０とを備えている。フィルム容器１０は第１フィルム１１と、第２フィルム１２とを有し、第１フィルム１１と第２フィルム１２の周縁にヒートシールにより形成された接着部２０が設けられている。接着部２０は固定側の強接着部２１、２２と、開封側の弱接着部２３、２４とを有する。【選択図】図１
2015133934.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞シートを収納するフィルム容器であって、
第１フィルムと、
前記第１フィルムに積層された第２フィルムとを備え、
前記第１フィルムと前記第２フィルムの周縁に、開口を残して前記第１フィルムと前記第２フィルムを接着する接着部が形成され、この接着部は開口から遠い側に位置し強い接着力をもつ固定側の強接着部と、開口から近い側に位置し弱い接着力をもつ開封側の弱接着部とを有することを特徴とするフィルム容器。
【請求項２】
前記接着部の区画線は、収納される細胞シートに交るよう形成されていることを特徴とする請求項１記載のフィルム容器。
【請求項３】
前記第１フィルムまたは前記第２フィルムは、イージーピールフィルムからなることを特徴とする請求項１または２記載のフィルム容器。
【請求項４】
前記第１フィルムおよび第２フィルムは同一方向になって延びる細長状となっており、前記第１フィルムは前記第２フィルムより長くなっており、前記区画線は前記第１フィルムに直交し、かつ前記第１フィルムの長さに対して４０〜６０％の位置に配置されていることを特徴とする請求項１乃至３のいずれか記載のフィルム容器。
【請求項５】
細胞シートと、この細胞シートを収納するフィルム容器とを備えた細胞シートパッケージであって、
前記フィルム容器は第１フィルムと、
前記第１フィルムに積層された第２フィルムとを備え、
前記第１フィルムと前記第２フィルムの周縁に、前記第１フィルムと前記第２フィルムを接着して密封する接着部が形成され、この接着部は開口から遠い側に位置し強い接着力をもつ固定側の強接着部と、開口から近い側に位置し弱い接着力をもつ開封側の弱接着部とを有することを特徴とする細胞シートパッケージ。
【請求項６】
前記接着部の区画線は、収納される細胞シートに交るよう形成されていることを特徴とする請求項５記載の細胞シートパッケージ。
【請求項７】
前記第１フィルムまたは前記第２フィルムは、イージーピールフィルムからなることを特徴とする請求項５または６記載の細胞シートパッケージ。
【請求項８】
前記前記第１フィルムおよび第２フィルムは同一方向になって延びる細長状となっており、前記第１フィルムは前記第２フィルムより長くなっており、前記区画線は前記第１フィルムに直交し、かつ前記第１フィルムの長さに対して４０〜６０％の位置に配置されていることを特徴とする請求項５乃至７のいずれか記載の細胞シートパッケージ。
【請求項９】
前記第１フィルムおよび前記第２フィルムは、開封側の弱接着部から外方へ延びる延長部を有することを特徴とする請求項５乃至８のいずれか記載の細胞シートパッケージ。
【請求項１０】
前記第１フィルムの延長部と、前記第２フィルムの延長部はその突出長さが互いに相違することを特徴とする請求項９記載の細胞シートパッケージ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞シートとフィルム容器とを備えた細胞シートパッケージおよびフィルム容器に関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞シートは皮膚、循環器、眼、消化器等の再生医療に広く応用されつつある。しかし、細胞シートは、生きた細胞で構成されているため、移植等に使用可能な状態を保ちつつ常温で長期間保存することが困難である。このため、細胞シートを使用する予定に合わせて、細胞シートを構成する細胞を培養し、さらに細胞をシート化した後、細胞シートを凍結することによって、最適な状態を維持したまま長期間保存することが検討されている。
【０００３】
またこのようにして凍結されて得られた細胞シートを保存するため、この細胞シートを支持シートにより包み込んで包装する形態が知られている（特許文献１）。
【０００４】
また本パッケージを用いる事により効率良く細胞シートを凍結させる事もできる。
【０００５】
また細胞シートを凍結する方法として例えば下記、特許文献２および非特許文献に記載の方法でガラス化凍結法による細胞シート凍結法が記載されている。
【０００６】
しかし上記、特許文献２で提唱されている方法では受精卵のガラス化凍結法を踏襲しており凍結のための試薬を2段階に分けて使用する事で凍結し、さらに保管のためにパッケージするというステップになっており、その手間の多さが課題となっている。そのためステップを省略するべく上記、非特許文献にはEnvelope Methodと称した2つの溶液を同時に細胞シートに浸した上で市販のラップに包んでから液体窒素蒸気により凍結する方法が提案されている。しかし市販のラップを用いて包んでいるため生体安全性に乏しく、かつ、細胞生存率が上記、2段階凍結法と比較して悪いという課題が生じていた。さらに、保管のために凍結後に、更にパッケージするという2つのステップが必要であった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特許４４２１７８６号公報
【特許文献２】特開２０１３−１１１０１７号
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ｍａｅｈａｒａ  ｅｔ  ａｌ．，  ＢＭＣ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １３巻 ５８ ２０１３年
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
従来、凍結された細胞シートを包装袋等で包装する形態がいくつか開発されているが、包装袋を容易に開封して包装袋内の細胞シートを容易に取扱うことができる細胞シートパッケージおよびフィルム容器は開発されていない。
【００１０】
本発明は、このような点を考慮してなされたものであり、内部に収納された細胞シートを容易かつ安全に取扱うことができる細胞シートパッケージおよびフィルム容器を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明の一実施形態に係るフィルム容器は、細胞シートを収納するフィルム容器であって、第１フィルムと、前記第１フィルムに積層された第２フィルムとを備え、前記第１フィルムと前記第２フィルムの周縁に、開口を残して前記第１フィルムと前記第２フィルムを接着する接着部が形成され、この接着部は開口から遠い側に位置し強い接着力をもつ固定側の強接着部と、開口から近い側に位置し弱い接着力をもつ開封側の弱接着部とを有することを特徴とする。
【００１２】
本発明の一実施形態に係るフィルム容器は、前記接着部の区画線は、収納される細胞シートに交るよう形成されていてもよい。
【００１３】
本発明の一実施形態に係るフィルム容器は、前記第１フィルムまたは前記第２フィルムは、イージーピールフィルムからなっていてもよい。
【００１４】
本発明の一実施形態に係るフィルム容器は、前記前記第１フィルムおよび第２フィルムは同一方向になって延びる細長状となっており、前記第１フィルムは前記第２フィルムより長くなっており、前記区画線は前記第１フィルムに直交し、かつ前記第１フィルムの長さに対して４０〜６０％の位置に配置されていてもよい。
【００１５】
本発明の一実施形態に係る細胞シートパッケージは、細胞シートと、この細胞シートを収納するフィルム容器とを備えた細胞シートパッケージであって、前記フィルム容器は第１フィルムと、前記第１フィルムに積層された第２フィルムとを備え、前記第１フィルムと前記第２フィルムの周縁に、前記第１フィルムと前記第２フィルムを接着して密封する接着部が形成され、この接着部は開口から遠い側に位置し強い接着力をもつ固定側の強接着部と、開口から近い側に位置し弱い接着力をもつ開封側の弱接着部とを有することを特徴とする。
【００１６】
本発明の一実施形態に係る細胞シートパッケージは、前記接着部の区画線は、収納される細胞シートに交るよう形成されていてもよい。
【００１７】
本発明の一実施形態に係る細胞シートパッケージは、前記第１フィルムまたは前記第２フィルムは、イージーピールフィルムからなっていてもよい。
【００１８】
本発明の一実施形態に係る細胞シートパッケージは、前記前記第１フィルムおよび第２フィルムは同一方向になって延びる細長状となっており、前記第１フィルムは前記第２フィルムより長くなっており、前記区画線は前記第１フィルムに直交し、かつ前記第１フィルムの長さに対して４０〜６０％の位置に配置されていてもよい。
【００１９】
本発明の一実施形態に係る細胞シートパッケージは、前記第１フィルムおよび前記第２フィルムは、開封側の弱接着部から外方へ延びる延長部を有していてもよい。
【００２０】
本発明の一実施形態に係る細胞シートパッケージは、前記第１フィルムの延長部と、前記第２フィルムの延長部はその突出長さが互いに相違していてもよい。
【発明の効果】
【００２１】
本発明によればフィルム容器の内部に収納された細胞シートを容易かつ安全に取扱うことができる。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】図１（ａ）（ｂ）は本実施の形態による細胞シートパッケージを示す図。
【図２】図２はフィルム容器を構成する第１フィルムと第２フィルムを示す図。
【図３】図３は本実施の形態による密封前のフィルム容器を示す図。
【図４】図４は細胞シートの凍結および解凍作用を示す図。
【図５】図５は実施例１の結果を示す図。
【図６】図６は実施例２の結果を示す図。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
以下、図面を参照して本発明の実施の形態について説明する。
【００２４】
＜細胞シートの凍結および解凍作用＞
まず図４により、細胞シートの凍結および解凍作用について説明する。なお、図４に示す細胞シートの取扱いは一例であって、適宜変更されることがある。図４に示すように、はじめに細胞を培地内で培養することにより、シート状に形成した細胞シートＳを得る。
【００２５】
次に細胞シートＳは細胞浸透性の凍結保存液で被覆され、凍結保存液で被覆された細胞シートＳを、−１９６℃の液体窒素（９〜３３気圧）中で凍結する。なお、この時、液体窒素からの蒸気に当てる事で凍結する事も可能である。
【００２６】
次に凍結された細胞シートＳが本発明によるフィルム容器１０内に収納されて、細胞シートＳとフィルム容器１０とを備えた細胞シートパッケージ１０Ａが得られる。
【００２７】
細胞シートパッケージ１０Ａはその後、内部に液体窒素が充填された冷凍庫３０内に収納される。この場合、冷凍庫３０内には、複数の細胞シートパッケージ１０Ａが多段に積層して配置され、各細胞シートパッケージ１０Ａは、冷凍庫３０内に設けられた棚３１上に載置される。また冷凍庫３０内の液体窒素は、−１９６℃の温度および９〜３３気圧に保たれている。
【００２８】
次に内部に複数の細胞シートパッケージ１０Ａを収納した冷凍庫３０は、トラック等で病院まで輸送される。次に病院内で冷凍庫３０から各細胞シートパッケージ１０Ａが取出され、この細胞シートパッケージ１０Ａは容器３２内に充填された温水中（３７℃）内に浸される。このようにして、細胞シートパッケージ１０Ａ内に収納された細胞シートＳが湯浴により解凍される。
【００２９】
その後、細胞シートパッケージ１０Ａのフィルム容器１０が開封され、フィルム容器１０内の細胞シートＳがフィルム容器１０から取出されて移植手術に使用される。
【００３０】
ここで、細胞シートＳは、典型的には細胞が単層連結したシート状物であるが、これに限らず、細胞が複数層連結したシート状物であってもよい。この場合、細胞シートＳとしては、例えば、温度応答性表面を用いて作製した細胞シート、あるいは遠心力や磁力を用いて積層された細胞シートを用いることができる。
【００３１】
＜細胞シートパッケージおよびフィルム容器＞
次に本発明による細胞シートパッケージおよびフィルム容器について説明する。
【００３２】
図１および図２に示すように、細胞シートパッケージ１０Ａは、細胞シートＳと、この細胞シートＳを収納するフィルム容器１０とを備えている。このうちフィルム容器１０は、裏面を構成する第１フィルム１１と、第１フィルム１１上に積層された表面を構成する第２フィルム１２とを備えている。この場合、第１フィルム１１および第２フィルム１２は同一方向に延びる細長状となっている。
【００３３】
第１フィルム１１と第２フィルム１２の周縁に、第１フィルム１１と第２フィルム１２を接着する接着部２０が形成されている。
【００３４】
この接着部２０は、強い接着力をもつ固定側の強接着部２１、２２と、弱い接着力をもつ開封側の弱接着部２３、２４とを有している。この場合、強接着部２１、２２と、弱接着部２３、２４とは、区画線２５を介して互いに区画されている。なお、区画線２５は、典型的には強接着部２１と弱接着部２３との境界と、強接着部２２と弱接着部２４との境界とを結んで出来る仮想線を指すが、これに限らず、実際に線が印刷等されて区画線として構成されていてもよい。
【００３５】
また接着部２０は矩形状をなしており、このうち、強接着部２１および弱接着部２４は矩形状の接着部２０の区画線２５と平行に延びる対向する一対の辺を構成し、強接着部２２および弱接着部２３は、区画線２５と直交して延びる対向する一対の辺を構成する。
【００３６】
また、第１フィルム１１は、弱接着部２４から外方へ突出する延長部１１ａを有し、第２フィルム１２も弱接着部２４から外方へ突出する延長部１２ａを有している。この場合、第１フィルム１１の延長部１１ａの突出長さは第２フィルム１２の延長部１２ａの突出長さより長くなっており、第１フィルム１１の延長部１１ａを押え、第２フィルム１２の延長部１２ａを引上げることにより、第２フィルム１２を第１フィルム１１から容易に剥離することができる。
【００３７】
また第２フィルム１２を第１フィルム１１から剥離する際、弱接着部２４と弱接着部２３を介して互いに剥離されるが、この剥離作用は区画線２５で停止し、強接着部２２および強接着部２１では第１フィルム１１から第２フィルム１２が剥離されることが抑制される。
【００３８】
ところで上述のように、第１フィルム１１の延長部１１ａの突出長さは、第２フィルム１２の延長部１２ａの突出長さより長くなっている。このため第１フィルム１１の全長Ｌ１は、第２フィルム１２の全長Ｌ２より長くなっている。また区画線２５は第２フィルム１１に対し、その全長Ｌ１の４０％〜６０％の位置に配置されている。
【００３９】
次に第１フィルム１１と第２フィルム１２の材料について述べる。第１フィルム１１と第２フィルム１２は、典型的には軟包装材に用いられる樹脂を用いることができ、なかでも耐熱性および耐圧性に優れた材料からなることが好ましく、例えばポリエチレン（ＰＥ）製、ポリプロピレン（ＰＰ）製、またはポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）製となっている。また、好ましくは第１フィルム１１と第２フィルム１２のうち、一方のフィルムはイージーピール性を有するフィルムからなっている。これによりフィルム容器を容易に開封することができる。これに限らず、第１フィルム１１と第２フィルム１２の双方がイージーピール性を有するフィルムからなっていてもよい。
【００４０】
イージーピール性を有するフィルムとしては、例えば、ポリエチレン製のＩＭＸフィルム（Ｊ−Ｆｉｌｍ社）を挙げることができ、腰があるがイージーピール性をもたないフィルムとしてはポリエチレン製のリックスフィルム（東洋紡社）を挙げることができる。
【００４１】
次に第１フィルム１１と第２フィルム１２を有し、これら第１フィルム１１と第２フィルム１２を接着することにより得られるフィルム容器１０の物性および特徴について更に詳述する。フィルム容器１０は上述のように内部に細胞シートＳを収納するものであり、細胞シート１０を内部に封入した上で−２０℃〜−１９６℃での環境下で保管することができる。
【００４２】
接着部２０は、シール強度や、第１フィルム１１と第２フィルム１２とを接着する接着剤の接着強度を適宜調整して形成することができる。接着部２０は、好ましくはヒートシールにより形成でき、このとき接着部２０のうち開封側の弱接着部２３、２４のシール強度が３〜６Ｎ／１５ｍｍの範囲にあり、固定側の強接着部２１、２２のシール強度が６Ｎ／１５ｍｍ以上となるように設定するとよい。
【００４３】
またフィルム容器１０は超低温下で耐性を有し、保管や輸送を容易に行なうことができる。さらにまた開封時に剥離が一旦停止するため、フィルム容器１０が一気に開封せずに細胞シートＳが落下することが防止される。また、フィルム容器１０は剥離していない強接着部２１、２１を含み袋状が維持されるため、フィルム容器１０内に洗浄に用いる緩衝液等を入れる事ができ、洗浄工程を容易に実施する事ができる。
【００４４】
この場合、洗浄に用いる緩衝液等としては、ＰＢＳ、ＴＢＳ、ＨＢＳＳ等の緩衝液、またはＤＭＥＭ、ＲＰＭＩ、ＭＥＭ等の各種培地を用いることができる。
【００４５】
また上述のように、フィルム容器１０の第１フィルム１１および第２フィルム１２の素材に関してはポリエチレン、ポリエチレンテレフタレート、ポリプロピレンが好ましく、特にポリエチレンが耐冷性はより良いため、より好ましい。また特に第１フィルム１１および第２フィルム１２のうち細胞シート１０と接触する面にコロナ処理やプラズマ処理等によって親水性処理を施しても良い。
【００４６】
また、用いられる第１フィルム１１および第２フィルム１２は医療用グレードである事が好ましい。
【００４７】
さらに使用する第１フィルム１１および第２フィルム１２の厚みは、取扱いに応じて適宜設定できるが、２０〜１００μｍである事が望ましい。これは厚みが小さいと強度を持てず、大きいとガス透過性が悪化するため細胞を保管する環境維持のためにふさわしくないからである。
【００４８】
さらに同一の性能を有するフィルムを用いてヒートシールにより接着部を形成する場合、一般的に剥離が困難である。そのため、第１フィルム１１および第２フィルム１２のうち少なくとも１枚はイージーピール性のフィルムである事が好ましい。ここでイージーピール性のフィルムについては色々あるが、主に混合樹脂からなるフィルムを用いると、主成分が同種のフィルム同士でもヒートシールが可能である。例えば、第２フィルム１２をイージーピール性のフィルムであるとすると、第１フィルム１１の厚みを第２フィルム１２の厚みよりも大きくすることが好ましい。この場合、第１フィルム１１を支持体として第２フィルム１２の剥離作業を容易に行うことができるからである。
【００４９】
この場合、本発明において用いるイージーピールフィルムに関しては主成分すなわち最も多く含まれる成分がポリエチレンである事が好ましい。
【００５０】
また、フィルム容器１０は、内部に細胞シートＳを収納する前にあらかじめ滅菌されている事が好ましく、その方法には特に制限は無い。例えば、γ線滅菌、電子線滅菌、エチレンオキサイドガス滅菌、エタノール滅菌、紫外線照射滅菌など各種方法を行う事ができる。なお細胞シートＳを収納してからフィルム袋１０に滅菌を施すと細胞が死滅してしまうため好ましくない。
【００５１】
細胞シートＳを保管する温度は−２０〜−２００℃である事が好ましく、装置としては市販の冷凍庫３０の他、ディープフリーザー、液体窒素タンクなどを用いる事ができる。
【００５２】
第１フィルム１１と第２フィルム１２を互いに接着するシール方法にはヒートシールや超音波接着等が挙げられるが、第１フィルム１１および第２フィルム１２がポリエチレンテレフタレートからなる場合は、ヒートシール性に乏しいため超音波溶着である事が好ましい。
【００５３】
また、第１フィルム１１と第２フィルム１２を接着剤により接着する場合、有機系溶剤を含む接着剤を使用すると、超低温下では性能が悪化し、接着強度が弱くなる上、保管する細胞シートに接着剤の混入が考えられるため接着剤を選択する必要がある。
【００５４】
＜細胞シートパッケージの製造方法およびその使用方法＞
次に細胞シートパッケージの製造方法について説明する。
【００５５】
まず、図２に示すような第１フィルム１１と第２フィルム１２を準備し、これらの第１フィルム１１と第２フィルム１２を積層する。
【００５６】
次に第１フィルム１１と第２フィルム１２の周縁をヒートシールして接着することにより接着部２０を形成する。このようにして矩形状の３方がヒートシールされ、一方に開口２６が形成されたフィルム容器１０が得られる（図３参照）。
【００５７】
第１フィルム１１と第２フィルム１２の周縁をヒートシールする際、区画線２５より固定側の強接着部２１、２２においては、シール強度を大きくして、強接着部２１、２２の接着強度を高める。同様に区画線２５より開封側の弱接着部２３においては、シール強度を弱めて弱接着部２３の接着力を弱める。またフィルム容器１０の一方に残された開口２６は、後述のように弱接着部２４を形成することにより密封される部分である。
【００５８】
次に、細胞シートＳを凍結することにより凍結された細胞シートＳを準備し、この細胞シートＳをフィルム容器１０の開口２６からフィルム容器１０内に挿入する。
【００５９】
その後フィルム容器１０の開口２６を弱いシール強度によりヒートシールし、弱接着部２４を形成する。このようにして開口２６を弱接着部２４により密封する。なお、上述では第１フィルム１１と第２フィルム１２とを各々独立したフィルムで構成しているが、これに限らず、例えば、１枚のフィルムを折り曲げ、開口２６に対向する部位に折り曲げ部位がくるようにしてもよい。
【００６０】
このようにして、細胞シートＳと、細胞シートＳを収納するフィルム容器１０とを備えた細胞シートパッケージ１０が得られる。細胞シートパッケージ１０はその後、冷凍庫３０内に入れられ、病院まで輸送される。
【００６１】
その後細胞シートパッケージ１０Ａは病院内で容器３２内の温水３３中に浸される。このようにして細胞シートパッケージ１０Ａ内の細胞シートＳに対して温水解凍処理が施される（図４参照）。
【００６２】
細胞シートＳの使用にあたっては、まず細胞シートパッケージ１０Ａのうち第１フィルム１１の延長部１１ａを押えておき、第２フィルム１２の延長部１２ａを引上げる。このことにより、第１フィルム１１と第２フィルム１２が弱接着部２３、２４を介して互いに引離されて剥離される。この場合、第１フィルム１１と第２フィルム１２の剥離作用は、区画線２５において停止する。
【００６３】
このように、第１フィルム１１と第２フィルム１２が弱接着部２３、２４を介して引離されることにより、フィルム容器１０が開封される。
【００６４】
この場合、フィルム容器１０は、区画線２５より固定側において、強接着部２１、２２により密封状態が保たれているため、細胞シートＳがフィルム容器１０から突然外方へ飛び出してしまうことはない。
【００６５】
このため細胞シートパッケージ１０Ａ内の細胞シートＳを安全かつ確実に取扱うことができる。
【００６６】
次にフィルム容器１０内に緩衝液等を供給して細胞シートＳの凍結保存液を希釈して洗浄し、その後フィルム容器１０から細胞シートＳを安全に取出すことができる。
【００６７】
なお細胞シートパッケージ１０内の細胞シートＳは、フィルム容器１０の区画線２５に掛っていることが好ましく、細胞シートＳの重心が区画線２５より固定側に位置していることがより好ましい。このように細胞シートＳの重心が区画線２５より固定側に位置することにより、フィルム容器１０を開封した際細胞シートＳがフィルム容器１０から外方へ飛び出すことをより効果的に防ぐことができる。
【００６８】
すなわち本発明を用いる事で細胞シートをパッケージした上で液体窒素に触れされる事によりシート自体の凍結を行う事を可能にするため、作業効率の向上と滅菌性の担保を行う事ができる。
【実施例】
【００６９】
次に本発明の具体的実施例について説明する。
【００７０】
＜実施例１＞
ヒートシールによってフィルムが接着するかどうかを検討するため以下の解析を行った。
【００７１】
ポリエチレン製フィルムのイージーピール性をもたないリックスフィルム（厚さ１００μｍ；東洋紡社）と、イージーピール性を有するＩＭＸフィルム（厚さ３０μｍ；Ｊ−Ｆｉｌｍ社）を２枚用意し、この２枚を組み合わせてポリシーラーＰ−２００（富士インパルス社）によってシール強度、弱、中、強で、それぞれで封を行い、シールした後に手で剥離できるかどうかを検討した。なおシール強度、弱以下ではフィルム同士が接着しなかったため条件からは排除した。
【００７２】
結果は図５の通りである。図５において結果内の○はシールが剥離できたフィルム容器、×はシールが剥離困難であったフィルム容器を意味する。
【００７３】
図５に示すように、リックスフィルムとＩＭＸフィルムを用いた場合、シール強度を変えることにより、剥離性を変化させて本実施の形態によるフィルム容器を得ることができた。
【００７４】
また２枚のＩＭＸフィルムを用いた場合、剥離性はシール強度によらず良好となる。この場合ヒートシールに加えて、接着剤を塗布して強接着部を形成した。このため２枚のＩＭＸフィルムを用いることにより本実施の形態によるフィルム容器を得ることができた。
【００７５】
一方、２枚のリックスフィルムを用いた場合は剥離性は悪くなっており、ヒートシールによって強接着部と弱接着部を有する接着部を形成することはできなかった。
【００７６】
＜実施例２＞
作製したフィルムの耐冷性および必要なシール強度を評価するために以下の解析を行った。
【００７７】
実施例２−１としてリックスフィルムとＩＭＸフィルムを１枚ずつ重ねて四方袋を作製した。実施例２−２としてＩＭＸフィルム２枚を用いた。
【００７８】
それぞれＨａｎｋｓ  Ｂａｌａｎｃｅｄ  Ｓａｌｔ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＨＢＳＳ；Ｓｉｇｍａ社）を２〜３ｍｌずつ入れてからポリシーラーによって封を施した。実施例１と同様にポリシーラーを用いて封をして四方袋を作製した。なおシール強度としては強を採用した。
【００７９】
それぞれ２つずつサンプルを作製し、一つは−８０℃のディープフリーザー（パナソニックヘルスケア社）に入れ、もう一つは液体窒素の中に入れた。液体窒素中の温度は約−１９６℃である。それぞれ約１週間、保管した。
【００８０】
取り出した後に再び解凍した上で溶液がリークしていないかチェックした。また溶液の状態をチェックした。
【００８１】
結果は図６に示す通りである。これより、実施例２−１および実施例２−２ではリークは見られなかったものの、比較例では液体窒素に浸漬したサンプルでリークが見られた。
【００８２】
以上の結果より本実施例が耐冷性を有している事が判明した。
【００８３】
＜実施例３＞
実施例２の結果を受けて１枚はリックスフィルム、もう１枚はＩＭＸフィルムを重ねて開封側のヒートシール強度を弱および中、固定側のヒートシール強度を強で四方袋を各種１つずつ計２つ作製した。
【００８４】
比較例として開封側と固定側の区別をつけずに全てのヒートシール強度を弱または中でシートしたフィルム容器を作製した。
【００８５】
なお内容物の落下の有無を検討するため、市販の紙を切断する事で細胞構造物の代わりとしてフィルム容器内に封入した。
【００８６】
上記、作製したフィルム容器を開封して開封の様子および内容物の落下について検討した。
【００８７】
その結果、実施例の２つのサンプルでは開封時に剥離が開封側と固定側の区画線で停止し、内容物の落下は観察されなかった。
【００８８】
これに対して比較例ではシール部が全て剥離してしまうため内容物が落下するという現象が見られた。
【００８９】
以上の結果より、本発明のシール構造は内容物の落下防止、更には緩衝液等を開封後に投入する事で洗浄しやすい形状になっている事が判明した。
【００９０】
＜実施例４＞
実施例３で作製したフィルム容器の２つのサンプルの耐冷性について検討した。
【００９１】
フィルム容器内に実施例２と同様にＨＢＳＳを入れた。フィルム容器を密封した後に実施例２の場合と同じく、液体窒素中に１週間浸漬した後に再び取り出してフィルム容器の強度を見た。
【００９２】
その結果、フィルム容器の両方のサンプルにおいてリークは見られず、かつ開封側の剥離性も問題が無い事が確認された。また、開封側と固定側の区画線で剥離が停止するため内容物の落下は見られなかった。
【００９３】
＜実施例５＞
作製したフィルム容器が細胞の生存を維持できる環境にあるかどうかを検討するために以下の解析を行った。
【００９４】
ウシ由来血管内皮細胞のＨＨ細胞を４×１０５個、ウシ胎児由来血清を１０％含んだＤＭＥＭ培地中に播種した直径３．５ｃｍの細胞培養用ディッシュを上記実施例３で作製したフィルム容器に入れた上でポリシーラーによって封をした上で３日間、３７℃インキュベーター内で培養した。
【００９５】
なおコントロールサンプルとして、フィルム容器に入れずに培養ディッシュを同様にインキュベータ内で培養したサンプルを作製した。また実施例２中の比較例によるフィルム容器内に培養ディッシュを入れて同様に様子を観察した。
【００９６】
実施例の場合では細胞はパッケージ無しの場合と同様にコンフルエントに達していた。対して、比較例では細胞増殖が見られずコンフルエントには至っていなかった。この結果より、本発明は培養細胞の生存を損なわない事が示唆された。
【符号の説明】
【００９７】
１０  フィルム容器
１０Ａ  細胞シートパッケージ
１１  第１フィルム
１１ａ  延長部
１２  第２フィルム
１２ａ  延長部
２０  接着部
２１、２２  強接着部
２３、２４  弱接着部
２５  区画線
【図１】
2015133934.tif 000003
【図２】
2015133934.tif 000004
【図３】
2015133934.tif 000005
【図４】
2015133934.tif 000006
【図５】
2015133934.tif 000007
【図６】
2015133934.tif 000008