(57)【要約】  本発明は、細菌感染、特に細菌性バイオフィルム感染の治療のために酢酸を利用する創傷治療製品、装置及び方法に関する。特に、本発明は、酢酸を含む創傷治療製品に関し、ここでこの製品は、少なくとも１つの抗菌化合物；パッドに接続されている送達手段に接続された容器を有する送達システムであって、該容器は酢酸を含む組成物を有し、該パッドは自己接着性物質を有する、送達システム；包帯剤及び接着性膜を有するキットであって、該包帯剤は酢酸を含む組成物を含む、キット；ａ）酢酸を創傷に適用する、ｂ）創傷に陰圧をかけることを含む、創傷の治療方法を包含する。【選択図】図３
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
酢酸を含む創傷治療製品であって、前記製品は少なくとも１つの抗菌化合物をさらに含む、創傷治療製品。
【請求項２】
前記抗菌化合物は、アミノ配糖体、マクロライド、フルオロキノロン、セフタジジム、テトラサイクリン、スルホンアミド、ベータラクタム、オキサゾリジノン及び抗菌性ペプチドからなる群から選択される抗生物質である、請求項１に記載の創傷治療製品。
【請求項３】
前記抗菌化合物は、キシリトール、フラマイセチン、フシジン酸、ニトロフラール、硝酸フェニル水銀、ベンゾドデシニウム、トリクロサン、セチルピリジニウム、アルミニウム塩素水和物、ポビドンヨード、クリオキノール、ベンザルコニウム、クロルヘキシジン、ヨードホルム及び次亜塩素酸からなる群から選択される、請求項１に記載の創傷治療製品。
【請求項４】
前記創傷治療製品は、スプレー、ゲル、包帯剤、ペースト又は泡状の形である、請求項１〜３のいずれかに記載の創傷治療製品。
【請求項５】
創傷の細菌感染治療に使用するための、請求項１〜４のいずれかに記載の創傷治療製品。
【請求項６】
陰圧創傷閉鎖法と組み合わせて使用される、請求項５に記載の創傷治療製品。
【請求項７】
創傷の治療方法であって、
ａ）請求項１〜４のいずれかに記載の創傷治療製品を創傷に適用する
ことを含む、創傷の治療方法。
【請求項８】
パッドに接続されている送達手段に接続された容器を有する送達システムであって、前記容器は酢酸を含む組成物を有する、送達システム。
【請求項９】
陰圧創傷閉鎖法と組み合わせて使用するために適合させた、請求項８に記載の送達システム。
【請求項１０】
包帯剤を有するキットであって、前記包帯剤は酢酸を含む組成物を含む、キット。
【請求項１１】
排液チューブをさらに有する、請求項１０に記載のキット。
【請求項１２】
接着性膜をさらに有する、請求項１０又は１１に記載のキット。
【請求項１３】
陰圧創傷閉鎖法と組み合わせて使用するために適合させた、請求項１０〜１２のいずれかに記載のキット。
【請求項１４】
創傷の治療方法であって、
ａ）酢酸を創傷に適用し、
ｂ）創傷に陰圧をかける
ことを含む、創傷の治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細菌感染の治療のための抗菌剤として酢酸を含む、創傷治療製品及び装置に関する。本発明の態様は、創傷治療製品、送達システム、キット及び方法を包含する。
【背景技術】
【０００２】
微生物、特に細菌は、ヒト及び動物の両者に様々な型の感染を引き起こすこと、及び特に高い衛生水準が求められる産業機器にも問題を引き起こすことが知られている。抗生物質は、望ましくない微生物を殺す又は微生物の増殖を抑制するために使用することができ、感染治療のための通常の選択肢である。しかし、抗生物質耐性菌の世界的な広がりにより、従来の治療法の効果が制限され、かつて治療可能であった感染症の治療が非常に困難になっている。特に問題となるのは、投与可能な最大量の抗生物質に対して耐性を示す感染である、いわゆるバイオフィルムの形成能を有する細菌による感染である。そのような感染は、通常創傷において進行し、結果として、慢性的な創傷になりうる。この抗生物質抵抗性及び耐性のために、望ましくない微生物を効率的に根絶できる新規治療計画を構築することが重要となる。また、ヒト及び動物における感染に関して、当該治療は宿主に対して無毒で生理的に許容できることが必須である。
【０００３】
Ｍａｒｔｉｎｅａｕ Ｌ及びＤｏｓｃｈ ＨＭ（２００７），Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１０３，２９７−３０４は、「侵害受容を標的にする新規火傷ゲルによるバイオフィルムの縮小」について記載している。
【０００４】
Ａｋｉｙａｍａ Ｈら（１９９９）；Ａｒｃｈ Ｄｅｒｍａｔｏｌ Ｒｅｓ，２９１，５７０−５７３は、「黄色ブドウ球菌により形成されたバイオフィルムに対する酢酸の効果」について記載している。
【０００５】
国際特許出願第ＰＣＴ／ＤＫ２００９／０５０１４１号（現時点で未公開）は、酢酸組成物、及び細菌性バイオフィルム感染の治療におけるその使用について記載している。
【０００６】
創傷治療に関して、創傷を周辺環境から保護し、かつ活性物質を含有する組成物を創傷部位に送達できる複合効果を有する製品が多数開発されている。ＷＯ２００５／０５８３８１は、活性物質としてキシリトール含む創傷治療製品について記載しており、キシリトールをゲル又はポリマーとして、例えば、ガーゼを支持体として使用して創傷部位に適用する。ＷＯ２００５／１２３０５７は、包帯材と共に少なくとも２つの弱有機酸及びＥＤＴＡを含有する組成物を含む、創傷の細菌感染を抑制及び／又は防止する製品について記載している。
【０００７】
創傷部位を減圧する減圧装置も開発されている。これらの装置に使用される方法は、陰圧創傷閉鎖法（Ｎｅｇａｔｉｖｅ Ｐｒｅｓｓｕｒｅ Ｗｏｕｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ：ＮＰＷＴ）と呼ばれている。ＷＯ２００８／０１３８９６は、カバーが組織と該カバーとの間の空間を定め、この空間と減圧する手段との間に導管が配置されている、減圧組織治療装置について記載している。
【０００８】
しかし、細菌の成長を抑制する及び／又は細菌を殺す活性物質を含む有効な製品がなお必要であり、特により効率的にバイオフィルム形成細菌の成長を抑制する及び／又は細菌を殺す創傷治療製品及び方法が必要である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】ＰＣＴ／ＤＫ２００９／０５０１４１
【特許文献２】ＷＯ２００５／０５８３８１
【特許文献３】ＷＯ２００５／１２３０５７
【特許文献４】ＷＯ２００８／０１３８９６
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｍａｒｔｉｎｅａｕ，Ｌ．及びＤｏｓｃｈ，Ｈ．Ｍ．，（２００７），Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＡｐｐｌｉｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１０３，２９７−３０４
【非特許文献２】Ａｋｉｙａｍａ，Ｈ．ら，（１９９９），Ａｒｃｈ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ Ｒｅｓ．，２９１，５７０−５７３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明者らは上記問題を解決するために鋭意努力した結果、驚くべきことに、酢酸を細菌感染、特にバイオフィルム形成細菌による細菌感染に特定の方法で適用することが、感染の除去に非常に有効であり、創傷治癒を促進することを見出した。特に、発明者らは、驚くべきことに、酢酸は単独で、又は例えばトブラマイシン、シプロフロキサシン、コリスチン、スルファジアイジン銀などの他の抗菌剤と共に、そのまま又は創傷治癒方法に適用できる新規装置で使用できることを見出した。また、酢酸及び必要に応じて他の抗菌剤を使用する方法は、陰圧創傷閉鎖法（ＮＰＷＴ）と組み合わせた場合に特に効果的であることを見出した。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明の１つの態様は、酢酸を含む創傷治療製品に関し、該製品は少なくとも１つの抗菌化合物をさらに含む。
【００１３】
本発明の他の態様は、パッドに接続されている送達手段に接続された容器を含む送達システムに関し、該容器は酢酸を含む組成物を含み、該パッドは自己接着性物質を含む。
【００１４】
本発明の他の態様は、包帯剤及び接着性膜を含むキットに関し、該包帯剤は酢酸を含む組成物を含む。
【００１５】
本発明のさらに他の態様は、
ａ）酢酸を創傷に適用し、
ｂ）創傷に陰圧をかける
ことを含む創傷の治療方法に関する。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】種々のｐＨ値に調整したＡＢ最小培地中で成長した、２４時間齢、静止状態の緑膿菌バイオフィルムに対する０．５％酢酸の抗菌作用を示す図である。種々のｐＨ値に調整した、酢酸不含のＡＢ最小培地を対照として使用した。バイオフィルム細菌を採取し、ＬＢプレート上に置き、処理後のＣＦＵを求めた（外観「成長なし」に対しては、ＣＦＵ値２を任意に与える）。
【図２】ｐＨ３〜６．８５での２４時間齢、静止状態の緑膿菌バイオフィルムに対する、トブラマイシンの濃度増加に伴う相乗的な０．５％酢酸の抗菌作用を示す図である。酢酸不含ＡＢ最小培地中に、濃度を増加させつつトブラマイシンを添加して、対照とした。バイオフィルムを採取し、ＬＢプレート上に置き、治療後のＣＦＵを求めた（外観「成長なし」に対しては、ＣＦＵ値２を任意に与える）。
【図３】種々のｐＨ値での２４時間齢、静止状態の緑膿菌バイオフィルムに対する、トブラマイシンの濃度増加に伴う相乗的な０．５％酢酸の抗菌作用を示す図である。酢酸不含ＡＢ最小培地中に、濃度を増加させつつトブラマイシンを添加して、対照とした。バイオフィルム細菌を採取し、ＬＢプレート上に置き、処理後のＣＦＵを求めた（外観「成長なし」に対しては、ＣＦＵ値２を任意に与える）。
【図４】種々のｐＨ値での、非ムコイド型緑膿菌臨床分離株の２４時間齢、静止状態のバイオフィルムに対する、トブラマイシンの濃度増加に伴う相乗的な０．５％酢酸の抗菌作用を示す図である。酢酸不含ＡＢ最小培地中に、濃度を増加させつつトブラマイシンを添加して、対照とした。バイオフィルムを採取し、ＬＢプレート上に置き、処理後のＣＦＵを求めた（外観「成長なし」に対しては、ＣＦＵ値２を任意に与える）。
【図５】種々のｐＨ値での、ムコイド型緑膿菌臨床分離株の２４時間齢、静止状態のバイオフィルムに対する、トブラマイシンの濃度増加に伴う相乗的な０．５％酢酸の抗菌作用を示す図である。酢酸不含ＡＢ最小培地中に、濃度を増加させつつトブラマイシンを添加して、対照とした。バイオフィルムを採取し、ＬＢプレート上に置き、処理後のＣＦＵを求めた（外観「成長なし」に対しては、ＣＦＵ値２を任意に与える）。
【図６】緩衝化酢酸溶液を含む本発明の創傷治療製品とＮＰＷＴとを組み合わせた治療前の、３８歳、２型糖尿病男性患者における、緑膿菌に感染した慢性踵部潰瘍を示す（０日目）。この段階で、いくつかの周知抗菌治療が試みられていた。
【図７】緩衝化酢酸溶液を含む本発明の創傷治療製品とＮＰＷＴとを組み合わせた治療後１１日目の、図６の踵部潰瘍を示す（１１日目）。ムコイド感染は根絶され、潰瘍は順当に治療しつつある。
【図８】緩衝化酢酸溶液を含む本発明の創傷治療製品とＮＰＷＴとを組み合わせた治療前の、７３歳、２型糖尿病女性患者における、緑膿菌に感染した慢性下肢潰瘍を示す（０日目）。治療前の培養物には、緑膿菌及び黄色ブドウ球菌が見られた。患者は、対側下肢先端の感染のため、抗ブドウ球菌治療（ヘラシリン）を受けた。
【図９】緩衝化酢酸溶液を含む本発明の創傷治療製品とＮＰＷＴとを組み合わせた治療後３日目の、図８の下肢潰瘍を示す（３日目）。ムコイド感染は顕著に低減し、潰瘍は、順当な創傷治癒過程の再建を示す暗赤色の状態に達した。
【図１０】緩衝化酢酸溶液を含む本発明の創傷治療製品とＮＰＷＴとを組み合わせた治療後６日目の、図８及び９の下肢潰瘍を示す（６日目）。ムコイド感染は根絶され、潰瘍は治癒しつつある。
【図１１】本発明の送達システムの好ましい実施形態の側面図を示す。この特定の例では、送達システムは、パッド６に接続されたチューブなどの送達手段４に接続された容器１を有する。該容器は酢酸を含む組成物２を含み、該パッド６は自己接着性物質８を含む。チューブの開口部はパッド６を貫通しているチューブコネクター又はノズル７に接続されている。チューブ４はソフトチューブ５などの柔らかい送達手段を含む部分を有する。空気ノズル３を有する透明な点滴液室を、組成物送達の監視や制御に使用してもよい。
【図１２】本発明の送達システムが有するパッド６の底面図を示す。該パッド６は、貫通ノズル７と自己接着性物質８を含む。
【図１３】本発明の包帯剤９と接着性膜１０を有するキットの側面及び上面図である。接着性膜は、１つ又は複数のチューブを差し込むための切り込み１１と、該１つ又は複数のチューブの配置のための孔又は切り抜き１２を中央に有する。該チューブは送達チューブ及び／又は排液チューブであってよい。
【図１４】治療前に１年間にわたる下腿の潰瘍形成歴を有する、５３歳女性の緑膿菌に感染した足部潰瘍を示す。
【図１５】図１４の足部潰瘍に対する本発明の送達システムと組み合わせた、本発明の創傷治療製品及びキットを示す。
【図１６】緩衝化酢酸溶液を有する本発明の創傷治療製品とＮＰＷＴとを組み合わせた治療後６日目における、図１４及び１５の足部潰瘍を示す（６日目）。ムコイド感染は根絶され、潰瘍は治療しつつある。
【図１７】治療開始後９日目における、図１４〜１６の足部潰瘍を示す。ムコイド感染は根絶され、潰瘍は順当に治療しつつある。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
次いで、以下に本発明をより詳細に説明する。
【００１８】
以下では、本発明の態様、即ち送達システム、キット、方法、酢酸を含む包帯剤を、好ましい実施形態と共に説明する。以下、本明細書では、用語「創傷」はその最も広い意味、即ち、治療、特に抗菌治療の必要があると思われる、ヒト又は動物の体のあらゆる外部と理解されるべきである。本文脈における創傷として、例えば、創傷、慢性創傷、火傷、切傷、皮膚の状態に伴われる創傷、移植組織、圧力性創傷、外傷性創傷、骨、関節又は軟組織からの瘻孔形成を伴う潜在的感染などの皮膚の裂傷、カテーテル、医療骨接合ネジ、ピン、ワイヤー、ロッド、人工関節、プレートなどの医療機器の挿入又は突出点、自家移植、同種移植、異種移植が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００１９】
酢酸を含む創傷治療製品
本発明の１つの態様は、酢酸を含む創傷治療製品に関し、該製品は少なくとも１つの抗菌化合物をさらに含む。
【００２０】
本文脈において、「酢酸」又は「酢酸を含む組成物」は互いに置換可能な用語であり、酢酸自体又はその液体、固体及び乾燥組成物、又は水性組成物を包含してよい。使用される組成物は、好ましくは以下に説明される特徴を有する。さらに、湿らせることによって活性化される、創傷治療製品に分散された酢酸の乾燥又は半乾燥組成物であってもよい。乾燥又は半乾燥組成物は、包帯への吸収に先だち、酢酸が予め吸収された粉体であってもよい。
【００２１】
組成物中の酢酸の好適な濃度は、０．０１〜２０％ｗｔ／ｗｔであり、例えば、０．０１〜１５％ｗｔ／ｗｔの酢酸、０．０１〜１０％ｗｔ／ｗｔの酢酸若しくは０．０１〜５％ｗｔ／ｗｔの酢酸、又は０．０５〜２０％ｗｔ／ｗｔの酢酸、０．０５〜１５％ｗｔ／ｗｔの酢酸若しくは０．０５〜１０％ｗｔ／ｗｔの酢酸、又は０．０１〜５％ｗｔ／ｗｔの酢酸、０．１０〜２０％ｗｔ／ｗｔの酢酸、０．１０〜１５％ｗｔ／ｗｔの酢酸、０．１〜１０％ｗｔ／ｗｔの酢酸若しくは０．１０〜５％ｗｔ／ｗｔの酢酸、又は０．５〜２０％ｗｔ／ｗｔの酢酸、０．５〜１５％ｗｔ／ｗｔの酢酸、０．５〜１０％ｗｔ／ｗｔの酢酸若しくは０．５〜５％ｗｔ／ｗｔの酢酸、又は１．０〜２０％ｗｔ／ｗｔの酢酸、１．０〜１５％ｗｔ／ｗｔの酢酸、１．０〜１０％ｗｔ／ｗｔの酢酸、若しくは１．０〜５％ｗｔ／ｗｔの酢酸、又は２．５〜２０％ｗｔ／ｗｔの酢酸、２．５〜１５％ｗｔ／ｗｔの酢酸、２．５〜１０％ｗｔ／ｗｔの酢酸若しくは２．５〜５％ｗｔ／ｗｔの酢酸、又は５〜２０％ｗｔ／ｗｔの酢酸、５〜１５％ｗｔ／ｗｔの酢酸若しくは５〜１０％ｗｔ／ｗｔの酢酸、又は１０〜２０％ｗｔ／ｗｔの酢酸若しくは１０〜１５％ｗｔ／ｗｔの酢酸である。
【００２２】
本発明の発明者らは、式ＣＨ３ＣＯＯＨで示される解離していない形態の酢酸が、その酸性形態で存在するとき、微生物生育を弱める能力を有することを見出した。本発明の文脈において、酢酸に関して使用される用語「酸性形態」は、ＣＨ３ＣＯＯＨとして存在することを意味する。ＣＨ３ＣＯＯ−とＣＨ３ＣＯＯＨとの間の平衡は、ｐＨがｐＫａ値４．７６のときに起こるため、このｐＫａ値において、ＣＨ３ＣＯＯ−及びＣＨ３ＣＯＯＨの全量の５０％が、解離していないＣＨ３ＣＯＯＨとなる。実施例にも示されるように、ＨＣｌはＣＨ３ＣＯＯＨと同じｐＨで用いられる場合でも、微生物の生育に対して酢酸と同様の効果を発揮しない。これは、微生物の生育を減少させるのは、酸性のｐＨではなく、解離していない酢酸分子それ自体であることを示している。
【００２３】
酢酸を活性なプロトン化形態に維持するために、酢酸を含む組成物は、酢酸を酸性形態に維持できる緩衝剤を含有してもよい。好ましい緩衝剤は、酢酸のｐＨを２〜７、例えば２〜６．５、２〜６、２〜５．５若しくは２〜５、又は２．５〜７、２．５〜６．５、２．５〜６、２．５〜５．５若しくは２．５〜５、又は３〜７、３〜６．５、３〜６、３〜５．５若しくは３〜５、又は３．５〜７、３．５〜６．５、３．５〜６、３．５〜５．５若しくは３．５〜５、又は４〜７、４〜６．５、４〜６、４〜５．５若しくは４〜５の範囲に維持できる、生理的に許容される緩衝剤である。
【００２４】
本発明の文脈において、用語「生理的に許容される緩衝剤」は、本発明に使用される投与量及び濃度においてレシピエントに対し無毒であり、無菌であって、内毒素不含、発熱性物質不含の溶液である、緩衝剤として理解されるべきである。無菌性及び毒性は、米国薬局方の各条、例えば、無菌試験法ＵＳＰ７１、細菌内毒素試験法ＵＳＰ８５及び発熱性物質試験法ＵＳＰ１５１に従って評価することができる。また、本文脈における生理的に許容される緩衝剤は、適用される投与量及び濃度において、非発癌性、非変異原性である。
【００２５】
緩衝剤という用語は、弱酸及びその塩、又は弱塩基及びその塩を含み、ｐＨの変化に対して抵抗性を持つ溶液の一般的な呼称として良く知られている。本発明の文脈において、用語「酢酸のｐＨを２〜７の範囲に維持できる緩衝剤」とは、組成物が、例えば感染性創傷における微生物のバイオフィルムに添加されたときにも、酢酸を酸性形態に維持することができる緩衝剤であると理解されるべきである。この文脈において、用語「維持することができる」とは、２０分、３０分、４０分、５０分、６０分、７０分、８０分、９０分、１００分、又は１１０分以上、好ましくは２時間以上、例えば３時間以上、４時間以上、５時間以上、６時間以上、７時間以上、８時間以上、９時間以上、１０時間以上、１５時間以上、２０時間以上、２４時間以上、３６時間以上、４８時間以上、７２時間以上、９６時間以上、１００時間以上、又は１５０時間以上の特定の期間において、酢酸のｐＨを維持することができる緩衝剤であると理解されるべきである。
【００２６】
種々の緩衝剤は、生理的に許容されるとともに、酢酸を２〜７の範囲のｐＨに維持することができ、例えば、酢酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、リン酸緩衝剤、トリス緩衝剤、及びＨＥＰＥＳ緩衝剤が挙げられるが、これらに限定されるものではない。従って、好ましい実施形態では、酢酸を含む組成物は、この群から選ばれる緩衝剤を含有する。酢酸を含む組成物において緩衝剤を用いることの一つの利点としては、緩衝剤を含まない同等の組成物に比べて、より長く所望のｐＨ値を維持できることにある。これは、例えば、組成物を患者に適用する場合に、緩衝剤がない場合に比べて、この組成物の酢酸が長い期間活性を示し、組成物を頻繁に再適用又は交換する必要がないので、有利である。重要なことには、比較的多量の組成物を、創傷のような易感染性又は敏感な組織に投与する可能性があるので、トリエタノールアミン、トリ−及びジ−エチルアミン並びにそれらの塩などの毒性及び／又は発癌性の緩衝剤は、本発明に包含されない。
【００２７】
緩衝剤は様々な緩衝能を有することが知られており、使用に適した緩衝剤の量は、特に、酢酸の量、緩衝剤の選択、及び組成物が使用される条件に依存する。
【００２８】
酢酸を含む組成物は、好ましくは無菌である。即ち、菌類、細菌、ウイルスなどの感染要因を本質的に含まない。無菌組成物は、輸液バッグ又は皮下注射針で貫通することができる栓を有するバイアル等の無菌アクセスポートを有する容器に収容する前に、無菌成分を用いること、及び／又は最終組成物を滅菌処理すること、及び／又は除菌膜で濾過することで、実現することができる。
【００２９】
本発明の発明者らは、酢酸を含む組成物のｐＨが５以上である場合、トブラマイシン、シプロフロキサシン、コリスチン及びスルファジアイジン銀などの抗菌剤が組成物中に存在すると、これらの抗菌剤を有さないことを除いて他は同じである組成物と比較して、生存可能な細菌量を低下させる抗菌作用を相乗的に発揮することを示した。従って、特にｐＨが４．５より高い、例えば５である場合、本発明の組成物が抗菌剤又は抗生物質を含むと有利である。
【００３０】
抗菌化合物は、好ましくはアミノ配糖体、マクロライド、フルオロキノロン、セフタジジム、テトラサイクリン、スルホンアミド、ベータラクタム、オキサゾリジオン及び抗菌性ペプチドからなる群から選択される抗生物質である。特に、抗生物質化合物のトブラマイシン、シプロフロキサシン及びコリスチンは、バイオフィルム形成細菌を有する感染性創傷の治療に酢酸と共に使用された場合に有効であることが証明されている。
【００３１】
あるいは、抗菌化合物は、キシリトール、フラマイセチン、フシジン酸、ニトロフラール、硝酸フェニル水銀、ベンゾドデシニウム、トリクロサン、セチルピリジニウム、アルミニウム塩素水和物、ポビドンヨード、クリオキノール、ベンザルコニウム、クロルヘキシジン、ヨードホルム及び次亜塩素酸からなる群から選択される。他の実施形態では、抗菌化合物は銀（Ａｇ）である。銀は、銀塩などのイオン型であるＡｇ＋でも、ナノサイズ銀粒子などの銀金属でもよい。特に、スルファジアイジン銀は酢酸との組み合わせにおいて相乗効果を示すことが証明されている。
【００３２】
他の実施形態の創傷治療製品は、形質転換成長因子、表皮成長因子、血小板由来成長因子、インスリン様成長因子、ケラチノサイト成長因子、線維芽細胞成長因子、顆粒球マクロファージコロニー刺激成長因子、顆粒球コロニー刺激成長因子などの少なくとも１つの成長因子を含有してもよい。
【００３３】
また、創傷治療製品は、さらにｐＨ指示薬、リンガー溶液及び等張食塩水からなる群から選択される化合物を含有してもよい。
【００３４】
他の実施形態では、創傷治療製品は、スプレー、ゲル、包帯剤、泡又はペースト状の製品として提供されてもよい。
【００３５】
他の実施形態では、創傷治療製品は、二層以上の包帯剤として提供されてもよい。該包帯剤は、コア層の周りに２層の外層を有するものでもよく、コアは吸収性物質を含む。
【００３６】
包帯剤の吸収性物質は、好ましくはポリウレタン−エーテル、ポリアクリレート、セルロース、ポリプロピレン繊維、ガーゼ、アルギン酸塩、寒天、及びこれらの混合物からなる群から選択される。包帯剤の外層は不織ポリプロピレン繊維、ビスコース又は綿（ガーゼ）から選択される物質を有してもよい。
【００３７】
本発明の他の態様は、創傷の細菌感染、特にバイオフィルム形成細菌を含む細菌感染の治療に使用する、上述の創傷治療製品である。上述の感染を起こすバイオフィルム形成細菌は、グラム陰性菌でもグラム陽性菌でもよい。細菌は嫌気性でも好気性でもよい。そのような細菌として、緑膿菌や黄色ブドウ球菌が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３８】
特に、創傷治療製品を陰圧創傷閉鎖法と組み合わせて細菌感染治療に使用することが効果的であることが示されており、創傷治療製品はそのような使用に適合される、即ち、包帯剤は陰圧創傷閉鎖法に使用するのに好適な物質で作製される。陰圧創傷閉鎖法（ＮＰＷＴ）は、局所陰圧（Ｔｏｐｉｃａｌ Ｎｅｇａｔｉｖｅ Ｐｒｅｓｓｕｒｅ：ＴＮＰ）法、減圧被覆（Ｓｕｂ-ａｔｍｏｓｐｈｅｒｉｃ Ｐｒｅｓｓｕｒｅ Ｄｒｅｓｓｉｎｇ：ＳＰＤ）法又は負圧封着技術（Ｖａｃｕｕｍ Ｓｅａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ：ＶＳＴ）としてもよく知られている。これらの方法は当業者に公知であり、特に、創傷液を除去し、組織を乾燥させ、創傷の血液流を改善し、創傷の細菌量を減らすという利点を有する。上述のように、本文脈において、これらの方法は、酢酸を含む創傷治療製品の余分な又は「使用済み」分を除去する助けともなる。
【００３９】
本発明の他の態様は、
ａ）酢酸を含み、さらに少なくとも１つの抗菌化合物を含む創傷治療製品を創傷に適用すること
を含む、創傷の治療方法である。
【００４０】
特に、陰圧創傷閉鎖法との組み合わせで説明された方法は、有効であることが示されている。
【００４１】
酢酸を含む送達システム
本発明の他の態様は、パッド６に接続された送達手段４に接続された容器１を有する送達システムであり、該容器１は酢酸を含む組成物２を含み、パッド６は自己接着性物質８を含む（図１１及び図１２参照）。
【００４２】
本発明の文脈において、広義における用語「容器」とは、液体を保持できるあらゆる容器を意味する。ここで、容器は、酢酸を含む酸性組成物などの酸性液を保持できる容器である。容器の材料は化学的にも不活性である必要がある。即ち、本発明の組成物と容易に化学反応せず、組成物の化学的汚染の重大な原因とならないことが必要である。そのような容器としては、例えば、点滴バックなどの流体用のバックや皮下注射針で貫通することができる栓を有するバイアルが挙げられるが、これらに限定されない。容器を使用する際には、液体の送達手段よりも高い位置において、液体送達の駆動力として重力を利用することが有利であるが、駆動力として、流れ及び／又は量を制御する導管に挿入されたバルブを有する又は有しないポンプを使用してもよい。
【００４３】
好ましい実施形態では、送達手段はチューブを有してもよい。ここで、「チューブ」とは、液体を輸送することができる導管、溝、チューブ又はパイプとして定義される。チューブの材料は、特に化学的に不活性である必要がある。即ち、本発明の組成物と容易に化学反応せず、組成物の化学的汚染の重大な原因とならない。そのようなチューブとしては、点滴チューブなどの医療用チューブが挙げられるが、これらに限定されない。チューブは、流れや気泡、詰まりを点検できるように、半透明であることが好ましい。
【００４４】
本発明の文脈において、「パッド」は、包帯剤など、パッドを貼りつける対象物の表面に対して垂直な面において平らな又は薄い器具として定義され、平面を円形、矩形、四角又は包帯剤若しくは皮膚表面に合わせた形にしてもよい。パッドの合わせた平面の表面積は、例えば、創傷及び／又は包帯剤の大きさに合わせて変えてよい。パッドは、チューブなどの少なくとも１つの導管に結合する手段及び自己接着性物質を有する（図１２参照）。
【００４５】
パッドを使用することの利点は、チューブのみを使用する場合と比較して、より広い面積に自己接着性物質を保持することができるため、パッドの比較的広い表面積による、定められた表面へのより優れた接着性が得られることである。また、パッドの形により、使用者は、接着性包帯などの接着性膜やガーゼを、パッドの上面やチューブの連結部の周りに適用することによって、創傷の包帯剤などの表面にパッドをさらにしっかりと止めることができる。接着性膜やガーゼは、チューブの取付けを有するパッドの周りにぴったりと合わさるように個々に作ることもできる。さらに、パッドを、チューブから包帯剤への流体の分布を促進するように形作り、酢酸を含む組成物が創傷部全体により確実に接触するようにしてもよい。
【００４６】
ここで定義される「自己接着性物質」は、表面に接着できる物質である。特に、加熱や湿潤、混合化合物など、接着効果を得るための予備操作なしに、表面に接着できる物質である。本発明の文脈において、自己接着性物質は、一般的には本発明のパッドに事前に接着されていて、包帯剤又は皮膚に容易に接着することができる。自己接着性物質は、包帯剤への適用前に除去される、プラスチックフィルムのようなフィルムにより保護されていてもよい。または、接着性物質は、使用前にパッドに適用可能なチューブなどにパッドと共に包含される。本文脈において、接着性物質は、無毒、特に、皮膚科学的に無毒でなければならない。有用な自己接着性物質として、シリコーンゲル、付加硬化室温加硫（Ｒｏｏｍ Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ Ｖｕｌｃａｎｉｓｉｎｇ：ＲＴＶ）シリコーンシステム、透湿性接着フィルム、及びｄｉｓｐｏｍｅｌｔ（登録商標）７０−４６４７、Ｎｕｓｉｌ−Ｍｅｄ（登録商標）６３４０、Ｎｕｓｉｌ−Ｍｅｄ（登録商標）３−６３００、Ｎｕｓｉｌ−Ｍｅｄ（登録商標）１２−６３００などの市販品が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の一実施形態は、自己接着性物質が、パッドの接合部位を有する側又はチューブに取り付ける側の反対側に配置されている、送達システムを提供する。
【００４７】
本送達システムの「酢酸を含む組成物」は、好ましくは酢酸を（ＣＨ３ＣＯＯＨ）を含む液体組成物である。好ましくは、酢酸の水溶性組成物である。組成物の有用な実施形態は、上述の創傷治療製品に関する記載の中で述べられている。
【００４８】
従って、本発明の一実施形態において、酢酸を含む組成物は、さらに抗生物質を有してもよい。そのような好適な抗生物質としては、例えば、アミノ配糖体、マクロライド、フルオロキノロン、セフタジジム、テトラサイクリン、スルホンアミド、ベータラクタム、オキサゾリジオン及び抗菌性ペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。特に、トブラマイシン、シプロフロキサシン、コリスチンは、感染性創傷の治療において酢酸と組み合わせることにより相乗効果を示すことが示されている。
【００４９】
他の実施形態では、酢酸を含む組成物は、限定的ではないが、キシリトール、フラマイセチン、フシジン酸、ニトロフラール、硝酸フェニル水銀、ベンゾドデシニウム、トリクロサン、セチルピリジニウム、アルミニウム塩素水和物、ポビドンヨード、クリオキノール、ベンザルコニウム、クロルヘキシジン及びヨードホルムからなる群から選択される１つ又は複数の抗菌化合物をさらに含んでもよい。他の実施形態において、抗菌化合物が銀であってもよい。特に、スルファジアイジン銀は、感染性創傷の治療において酢酸と組み合わせることにより相乗効果を示すことが示されている。銀は、上述の創傷治療製品に関する記載の中で述べられているものであってよい。
【００５０】
さらに他の実施形態では、組成物は成長因子を含有し、成長因子の例は上述のものである。
【００５１】
他の実施形態において、酢酸を含む組成物は、限定的ではないが、洗浄剤、殺菌剤、リンガー溶液及び等張食塩水からなる群から選択される１つ又は複数の化合物をさらに含んでもよい。
【００５２】
本発明のさらに他の実施形態では、点滴液室は、本発明のチューブ、特にチューブの垂直部分に組み込まれる。点滴液室は、チューブ内に輸送される液体組成物の流路中にある容器、好ましくは半透明の容器であって、点滴液室内に配置される小さな液だめに該液体が滴下される。該液だめの底部では、液体を以降のチューブへ再度流出させる。そのような点滴液室は市販されており、当業者に公知である。点滴液室は、酢酸を含む組成物から、流れを妨げる気泡を取り除くという利点を有する。さらに、使用者は液体の流れを監視できる。
【００５３】
他の実施形態は、容器とパッドの間に空気ノズル３をさらに有する送達システムに関する。本文脈において、空気ノズルは、容器、液室、チューブなどにより規定される容積外に空気を通す手段として定義される。空気ノズルは、蓋や栓などのノズルを通る空気流を妨げる手段をさらに有してもよい。空気ノズルは、チューブ内に任意に設置される点滴液室に配置すると有利である（図１１参照）。
【００５４】
送達システムの好ましい実施形態では、チューブがパッドの中央に接続されている。パッドは対称である必要はないので、「パッドの中央」はパッドの中央部、即ち、パッドの端に隣接していないパッドの部分として理解されるべきである。この特徴は、使用者がパッド上の接着性物質及び／又はガーゼをチューブコネクター又はノズル７の側の全体に適用できるという利点を有し、これにより、流体が包帯剤などへ最適に分布できる正しい位置にパッドを保持することを補助できる。即ち、パッドが滑り落ちる、及び／又はずれることがない。
【００５５】
送達システムの他の実施形態では、ソフトチューブ５を含むチューブが提供される。ソフトチューブは、チューブの一部分として含まれていてもよい。該部分は、有利には、長さが２〜１００ｃｍの範囲、例えば、５〜５０ｃｍ、７〜４０ｃｍ、８〜３０ｃｍ、９〜２０ｃｍ、好ましくは１０〜１５ｃｍであってもよい。「ソフトチューブ」は、弾力性又は軟質であるように構成された。即ち、弾性物質から作製された、上述のようなチューブであるソフトチューブは十分に柔らかく、例えば、流れ方向にチューブを圧縮することにより機能するポンプ（蠕動ポンプ）として、医療用ポンプに適用することができる。医療用の蠕動ポンプは当業者に周知である。ソフトチューブはまた、機械式栓を外部バルブとして作動させることもできる。チューブの各部分の間に連続的に挿入されるバルブのような内部バルブも使用してよい。チューブはまた、十分に柔らかく、非蠕動式医療用ポンプ又はシリンジなどの本発明に使用される医療用器具の入口及び出口ノズルに適用することもできる。従って、使用者は、ソフトチューブ又はハードチューブのどちらのチューブ材もこの好ましい実施形態に組み入れられるので、本発明のチューブをソフトチューブ又はハードチューブを必要とする医療用器具に適合させる必要はない。
【００５６】
特に有用な実施形態では、送達システムはＮＰＷＴ法と組み合わせての使用に適合される。そのような適合は、蠕動ポンプなどの陰圧を送達する手段に適合可能な、上述のソフトチューブを有するが、それに限定されない。また、パッドを、包帯剤などの広い面積に陰圧を効果的に付与するように適合させてもよく、さらに２つのチューブ、即ち、送達システム用のチューブと陰圧を付与する手段用のチューブを取り付けるように適合させてもよい。
【００５７】
酢酸を含むキット
本発明の他の態様は、包帯剤９と接着性膜１０を有するキットであり、該包帯剤は酢酸を含む組成物を有する。
【００５８】
ここで定義される包帯剤は、創傷に適用可能であり、液体を吸収、放出することができる物質である。包帯剤物質は、ナイロン、ポリエステル、アクリル、レーヨン、ビスコース、綿（ガーゼ）、ポリウレタン、他の高分子材料、セルロース材料、網状発泡体またはそれらの混合物であってよい。本文脈において、「網状発泡体」とは架橋高分子物質を有する発泡体を意味する。そのような物質として、ポリウレタン−エーテル、ポリアクリレート、セルロース、ポリプロピレン繊維、アルギン酸塩、ビスコース、寒天、及びこれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５９】
ここで定義される「接着性膜」は、キットが有する包帯剤を覆うことができ、創傷や包帯剤の周りの表面領域に接着できる膜であればよい。接着性膜は包帯剤自体に接着していてもよい。接着性膜は例えば、十分な大きさと形の自己接着性プラスター、包帯又はテープであることができる。プラスター、包帯又はテープなどの部材に、例えば、切り込み１１及び中央を貫通する切り抜き１２を介して、チューブなどを貫通させることが有利である（図１３参照）。これにより、包帯剤及び創傷領域に液体を送達したり、除去したりすることができる。しかし、接着性物質を必ずしも有する必要はなく、創傷のある部分の周りをガーゼで覆うときの力によって創傷部分に接着するガーゼも、接着性膜の意味する範囲である。これは、特に、プラスターやテープよりもガーゼの方が適用しやすい、四肢、即ち、腕、手、脚又は足が罹っている創傷に当てはまり、プラスターやテープよりも好適に、目的とする位置に包帯剤を保持することができる（図１３参照）。
【００６０】
キットの包帯剤に含有される酢酸を含む組成物は、上述の創傷治療製品に関する記載に述べられているものであってよい。
【００６１】
さらに他の実施形態において、キットは、排液チューブをさらに有する。ここで定義される「排液チューブ」は、包帯剤から液体を輸送し、これによって創傷領域から液体を除くことができる、上記の導管、溝、チューブ又はパイプである。キットはまた、排液チューブに接着可能な、上述のパッドを有してもよい。パッドは、チューブを適切な位置に保持し、接着及び（吸引される場合には）吸引の面積を広くするという、上述の利点を有する。
【００６２】
キットは、有用な実施形態において、ＮＰＷＴ法との組み合わせに適合させてよく、例えば、排液チューブをＮＰＷＴ装置又はポンプに嵌め込んでもよい。排液チューブは、例えば、陰圧を得るために使用されるポンプに嵌め込まれる、上述のようなソフトチューブでもよい。または、包帯剤物質は、陰圧が創傷領域全体に均等に分布できる物質から選択される。
【００６３】
酢酸を含む方法
本発明の他の態様は、
ａ）酢酸を含む組成物を創傷に適用し、
ｂ）創傷に陰圧を印加する
ことを含む、創傷の治療方法に関する。
【００６４】
酢酸を含む組成物は、上述と同様に定義される。
【００６５】
本発明の文脈において、「陰圧」は、一定容積内の圧力として定義され、通常は大気圧である雰囲気圧力などの周囲圧よりも小さい。本文脈において、容積は、創傷を含む領域、好ましくは創傷腔内の包帯剤を有する領域に配置される包帯やガーゼなどの接着性膜により定められる容積であってよい。該容積の大きさは、創傷、接着性膜、包帯剤の大きさにより決定される。該容積は、包帯剤の圧縮性により影響されてもよい。陰圧の作用により、創傷からの滲出液などの余分の液体を連続的に排除することができる。本文脈において、酢酸を含む創傷治療製品の余分な又は「使用済み」の量を除去する助けともなる。
【００６６】
一つの実施形態において、酢酸を含む組成物は、包帯剤を介して適用してもよい。包帯剤が該組成物を有してもよく、組成物をｉｎ  Ｓｉｔｕで包帯剤に添加してもよい。
【００６７】
酢酸を含む組成物を、１０〜４０分間、例えば、１５〜３５分、好ましくは２０〜３０分間適用してよい。これらの期間の開始点は、酢酸を含む組成物が創傷に接触するようになった時であり、終点は、陰圧を付与する時と定義される。陰圧は、０．５〜１８時間、例えば、１〜１２時間、２〜８時間、３〜６時間又は４時間付与されてよい。一般的には、陰圧を付与する期間は、新たに酢酸を含む組成物を適用することにより中断され、その後、陰圧を下記のように付与する。陰圧のあらゆる所定の中断の間に、包帯剤を取り換えてもよい。
【００６８】
一つの実施形態において、陰圧創傷閉鎖法（ＮＰＷＴ）により陰圧を付与する方法が提供される。陰圧創傷閉鎖法は、局所陰圧（Ｔｏｐｉｃａｌ Ｎｅｇａｔｉｖｅ Ｐｒｅｓｓｕｒｅ：ＴＮＰ）法、減圧被覆（Ｓｕｂ-ａｔｍｏｓｐｈｅｒｉｃ Ｐｒｅｓｓｕｒｅ Ｄｒｅｓｓｉｎｇ：ＳＰＤ）法又は負圧封着技術（Ｖａｃｕｕｍ Ｓｅａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ：ＶＳＴ）としても知られている。これらの方法は当業者に公知であり、特に、創傷液を除去し、組織を乾燥させ、創傷の血液流を改善し、創傷の細菌量を減らすという利点を有する。上述のように、本文脈において、酢酸を含む組成物の余分な又は「使用済み」の量を除去する助けともなる。
【００６９】
さらに他の有用な実施形態において、上記の工程ａ）及びｂ）を繰り返す方法、即ち、工程ａ）及びｂ）を行った後に、再度工程ａ）及びｂ）を行うなどの方法が提供される。この繰り返しは何回行ってもよく、少なくとも創傷の感染が根絶されるまで行うことが有利である。繰り返しの周期は、創傷が完全に治癒するまで繰り返してもよく、それによって再感染やいわゆる重複感染を妨げることができる。
【００７０】
酢酸を含む組成物は、上述の送達システムにおいて説明したように、容器、チューブ及び接着性物質を含むパッドを有する送達システムを使用して適用してもよい。送達システムに使用されるチューブは、工程ｂ）では、該容器に接続されず、陰圧を付与する医療用ポンプに接続されることが有利である。他の実施形態において、工程ａ）で組成物を送達するためにチューブが蠕動ポンプに既に適用されている場合には、該チューブを単に容器から外せばよく、その場合、ポンプの方向を逆にして工程ｂ）の陰圧を付与し、必要であれば導管内のバルブに連結して容積及び／又は流量及び／又は流れの方向を制御してもよい。
【００７１】
本方法は、本発明の送達システムにおいて説明したように、１本のチューブ、即ち、酢酸を含む組成物を送達するためのチューブと、陰圧を付与するＮＰＷＴ装置（例えば、医療用ポンプ）に使用される追加のチューブとを使用してもよい。追加のチューブは、一つの実施形態では、上述のようにキットの排液チューブであってよい。該２つのチューブは、２つのチューブの接続に適合された、本発明による１つのパッドに挿入してもよく、あるいは２つの別々のパッドを使用し、必要に応じて導管内のバルブに連結して容積及び／又は流量及び／又は流れの方向を制御してもよい。
【００７２】
この方法の他の実施形態では、酢酸を含む組成物は、上述のキットに関する記載で説明した、酢酸を含む包帯剤及び接着性膜を有するキットを使用して適用される。排液チューブを有するキットは、ＮＰＷＴの際に陰圧を付与でき、有利である。
【００７３】
なお、本発明の態様の１つの文脈において記載された実施形態及び特徴は、本発明の他の態様でも同様である。
【００７４】
本出願で引用された特許及び非特許文献の全ては、その全体を参照することにより本明細書中に組み込まれる。
【００７５】
本発明を以下の非制限的実施例によりさらに詳細に説明する。
【実施例】
【００７６】
材料及び方法
細菌株
浮遊及びバイオフィルムの実験に用いた野生株緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＰＡＯ１は、シュードモナス・ジェネティック・ストック・センター（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｓｔｏｃｋ Ｃｅｎｔｅｒ）(www.psedomonas.med.ecu.edu, strain PAO0001)より入手した。浮遊及びバイオフィルムの実験に用いた野生型黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）８３２５−４は、Ｎｏｖｉｃｋ，Ｒ．Ｐ．，１９６７に記載されている。緑膿菌の臨床分離株は、コペンハーゲン大学病院（ｔｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｃｏｐｅｎｈａｇｅｎ）で、慢性的に感染している嚢胞性線維症の患者から得た。
【００７７】
生育培地
平板培養に、２．０％寒天含有ＬＢ培地を使用した。特に異なる旨を記載しない限り、細菌性バイオフィルムを含む全ての実験において、グルコース添加ＡＢ最小培地を使用した。ＡＢ最小培地は、（ＮＨ４）２ＳＯ４（１５．１ｍＭ）、Ｎａ２ＨＰＯ４・２Ｈ２Ｏ（３３．７ｍＭ）及びＫＨ２ＰＯ４（２２．０ｍＭ）からなる標準緩衝系、及びＮａＣｌ（０．０５１Ｍ）、ＭｇＣｌ２（１ｍＭ）、ＣａＣｌ２（０．１ｍＭ）、微量金属類（１００μＬ/Ｌ)からなる。微量金属溶液は、ＣａＳＯ４・２Ｈ２Ｏ（２００ｍｇ／Ｌ）、ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ（２００ｍｇ／Ｌ）、ＭｎＳＯ４・Ｈ２Ｏ（２０ｍｇ／Ｌ）、ＣｕＳＯ４・５Ｈ２Ｏ（２０ｍｇ／Ｌ）、ＺｎＳＯ４・７Ｈ２Ｏ（２０ｍｇ／Ｌ）、ＣｏＳＯ４・７Ｈ２Ｏ（１０ｍｇ／Ｌ）、ＮａＭｏＯ４・Ｈ２Ｏ、及びＨ３ＢＯ３（５ｍｇ／Ｌ）を含有した。さらに、ＡＢ標準培地の標準緩衝系を酢酸ナトリウムに置換した実験も以下の全ての実施例において行った。緩衝剤の交換は、結果に影響を及ぼさなかった。
【００７８】
細菌の生育
連続フロー系と静止系の二種のバイオフィルム設定を用いた。
連続フロー系は、Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎら（１９９９）の記載のように、０．３ｍＭグルコースを含む滅菌ＡＢ最小培地で灌流した貫流フローチャンバに基づいている。静止状態のバイオフィルム設定は、Ｏ’ｔｏｏｌｅら（１９９９）の記載のように、０．３ｍＭグルコースを含むＡＢ最小培地を有するマイクロタイター皿内で生育したバイオフィルムに基づいている。浮遊培養菌は、３７℃の振盪フラスコ内で生育させた。
【００７９】
抗菌処理
緑膿菌又は黄色ブドウ球菌のバイオフィルムを３日間生育させ、続いて３日から４日目に様々な濃度の酢酸又はＨＣｌ（ＨＣｌは、酢酸処理の対照として使用した）を含むＡＢ最小培地を補うことによって、連続フロー系バイオフィルムの酢酸に対する耐性を評価した。静止状態のバイオフィルムの酢酸に対する耐性は、２４時間齢のバイオフィルムのＡＢ最小培地を、様々な濃度の酢酸又は対照としてのＨＣｌを添加したＡＢ最小培地で交換することにより評価した。酢酸又はＨＣｌのｐＨを上昇させるため、ＮａＯＨを様々な濃度で添加した。
【００８０】
実施例１
成熟バイオフィルムの根絶に関する酢酸の有効性を、緑膿菌又は黄色ブドウ球菌の３日齢のフローチャンババイオフィルムを、０．５％及び１．０％の酢酸で２４時間処理することにより試験した。使用したＡＢ最小培地の緩衝能力により、溶液のｐＨは、４．３３となった。対照として、同様のバイオフィルムを、ＨＣｌを使ってｐＨを４．３３に調整したＡＢ最小培地で処理した。処理後、バイオフィルムのバイオマスを、フローチャンバから機械的に回収し、ＬＢプレート上に適用し、生存能力を決定した。０．５又は１．０％の酢酸で処理した場合、緑膿菌のバイオフィルムは完全に根絶された。一方、ＨＣｌでの処理では効果がなかった。黄色ブドウ球菌については、１．０％酢酸を用いた場合には、完全な根絶が達成されたのに対し、０．５％酢酸で処理した場合には、生存菌体数を減少させただけだった。
【００８１】
実施例２
実施例１における処理の殺菌能力が酢酸単独によるものであり、培地成分との組み合わせによるものでないことを検証するため、グルコース添加ＡＢ最小培地に代えて、０．５％又は１．０％の酢酸を含む滅菌ミリＱ水を用いて、実施例１の実験を繰り返した。回収された０．５％酢酸処理緑膿菌及び１．０％酢酸処理黄色ブドウ球菌のバイオフィルムでは、対照と比べて完全な根絶が観察された。
【００８２】
実施例３
成熟バイオフィルムに対する抗菌活性の動力学を、緑膿菌及び黄色ブドウ球菌の３日齢の連続フローチャンババイオフィルムをそれぞれ０．５％酢酸及び１．０％酢酸で２４時間処理することにより、試験した。使用したＡＢ最小培地の緩衝能力により、溶液のｐＨは、４．３３となった。対照として、同様のバイオフィルムを、ＨＣｌの添加によりｐＨを４．３３に調整したＡＢ最小培地で処理した。処理後、バイオフィルムを、滅菌した外科用メスで削り取って、フローチャンバから機械的に回収し、ＬＢプレート上に適用し、生菌数を決定した。０．５％酢酸で処理した緑膿菌及び１．０％酢酸で処理した黄色ブドウ球菌は、３時間後に完全に殺菌された。
【００８３】
実施例４
酢酸の抗菌作用のｐＨ依存性を明らかにするために、２４時間齢の静止状態のバイオフィルムを、ｐＨを増大させながら０．５％酢酸溶液で処理した。ＡＢ最小培地の酢酸は、４．３３のｐＨ値となり、また、低ｐＨはＨＣｌを、高ｐＨはＮａＯＨを添加することで得た。これを、ＨＣｌ又はＮａＯＨ単独で同一のｐＨ範囲に調整したＡＢ最小培地と比較した。図１から分かるように、ｐＨが３〜４．７６の範囲において、酢酸は、緑膿菌のバイオフィルムを根絶した。ｐＨ５では、弱い効果が観察されたが、ｐＨ５．５以上では、酢酸の効果は観察されなかった。このｐＨ依存性は、ｐＨ４．７６（ｐＫａ値）で平衡となる酢酸の解離によるものである。ｐＨが４．７６を下回る場合には、平衡は左、即ち酢酸にシフトし、ｐＨが４．７６を上回る場合には、平衡は右、即ち対応する塩基にシフトする。
ＣＨ３ＣＯＯＨ→ＣＨ３ＣＯＯ−＋Ｈ＋ ｐＨ＞４．７６
ＣＨ３ＣＯＯＨ←ＣＨ３ＣＯＯ−＋Ｈ＋ ｐＨ＜４．７６
ＣＨ３ＣＯＯＨ＝ＣＨ３ＣＯＯ−＋Ｈ＋ ｐＨ＝４．７６
【００８４】
本実験モデルの結果は、殺菌の要因が、酸性自体の効果（低ｐＨ値）ではなく、酢酸分子そのものであることを示している。
【００８５】
実施例５
酢酸及び抗生物質の相乗的な抗菌作用を明らかにするため、２４時間生育させた静止状態の緑膿菌のバイオフィルムを、続いて、ｐＨ３〜６．８５の範囲で、トブラマイシンの濃度を増加させながらトブラマイシンと０．５％酢酸とで処理した。ｐＨは、ＨＣｌ又はＮａＯＨをＡＢ最小培地に添加することで調整した。ｐＨ６．８５において、酢酸にトブラマイシンを添加した場合と添加しない場合とを比べると（図１、２）、相乗的な抗菌作用が酢酸及び抗生物質の間に認められる。酢酸の解離点であるｐＨ値４．７６を超えると、酢酸単独での効果は減少する（図１）。ｐＨ６．８５では、酢酸は単独で、細菌に対する抗菌作用を示さないが（図１）、トブラマイシンが存在すると、ｐＨ６．８５の場合を含めて、生菌数に対する効果が観察された（図２）。トブラマイシン単独では、１２．５μｇ／ｍＬを超える濃度で、細菌の生存能力を５分の１に低減させた（図３参照）。トブラマイシンと組み合わせた酢酸は、４．７６を超えるｐＨ値において、細菌の生存能力を低減し、トブラマイシン単独の場合に比較して生存能力に対する効果が高かった（図３）。トブラマイシン以外の抗菌物質として、シプロフロキサシン、コリスチン及びスルファジアイジン銀も同様に試験した結果、同様の相乗効果が認められた。
【００８６】
実施例６
酢酸の臨床的な抗菌能を評価するため、緑膿菌の臨床分離株の静止状態のバイオフィルムを、実施例５と同様に酢酸で処理した。図４から分かるように、酢酸は、解離点（ｐＨ４．７６）以下のｐＨでバイオフィルムを根絶した。加えて、酢酸と抗生物質との間に、実施例５と同様の相乗効果も確認された。
【００８７】
実施例７
臨床上重要なムコイド型（アルギン酸塩過剰産生）緑膿菌の表現型に対する、酢酸の臨床的可能性を評価するため、ムコイド型緑膿菌臨床分離株の静止状態のバイオフィルムを、実施例５と同様に酢酸で処理した。図５に見られるように、酢酸は解離点（ｐＨ４．７６）以下のｐＨでバイオフィルムを根絶した。加えて、酢酸と抗生物質との間に、実施例５と同様の相乗効果も確認された。
【００８８】
実施例８
さらに、臨床上重要なムコイド型（アルギン酸塩過剰産生）緑膿菌の表現型に対する、緩衝化された０．５％酢酸溶液の臨床的可能性を評価するため、慢性踵部潰瘍の治療について、試験を行った。
【００８９】
病歴：
神経障害を伴う２型糖尿病の３８歳男性は、創傷治療診療所を訪れた。休暇中の激しい歩行により、踵部潰瘍を起こした。３８歳男性は、下記の創傷治療歴（３カ月にわたる）において、明らかな改善は得られていない：
・除荷、治療靴、エアーギブス
・銀加工包帯及び圧迫による創傷治療
・数クールの抗生物質治療
【００９０】
治療：
リン酸緩衝化された０．５％酢酸（患者は抗生物質治療を継続した）による慢性創傷（図６［０日目］）の治療を、陰圧創傷閉鎖法と共に、１日あたり６×２０分、１１日間行った（継続的）。図７（１１日目）に示されるように、１１日目に感染症は根絶され、創傷治癒が始まっていた。
【００９１】
実施例９
緩衝化された酢酸溶液の臨床上重要なムコイド型（アルギン酸塩過剰産生）緑膿菌の表現型に対する臨床的可能性をさらに評価するため、慢性下肢潰瘍の治療について、試験を行った。
【００９２】
病歴：
２型糖尿病及び３年にわたる下肢潰瘍を有する、７３歳の女性。この患者は、２００６年に潰瘍創面切除、分層皮膚移植を受け一時的に成功したが、３カ月後に潰瘍が再発した。患者は心臓障害のため、新たな手術には適さないと判断された。治療前の培養物には、緑膿菌及び黄色ブドウ球菌が見られた。患者は、対側下肢先端の感染のため、抗ブドウ球菌治療（ヘラシリン）を受けた。
【００９３】
治療：
リン酸緩衝化された酢酸（患者は抗生物質治療を継続した）による創傷（図８［０日目］）の治療を、陰圧創傷閉鎖法と共に、１日あたり６×２０分、６日間行った（継続的）。図９（３日目）に示されるように、３日後に顕著な創傷治癒経過が表れ、図１０（６日目）に示されるように、６日後に感染症は根絶され、創傷治癒経過は良好に進んでいた。
【００９４】
実施例１０
緩衝化された酢酸溶液の臨床上重要なムコイド型（アルギン酸塩過剰産生）緑膿菌の表現型に対する臨床的可能性をさらに評価するため、慢性足部潰瘍の治療について、試験を行った。
【００９５】
病歴：
麻薬常用歴のある、２型糖尿病及び１年の下腿潰瘍形成を有する、５３歳の女性。この患者は、何年にも及ぶ圧迫包帯による治療と非常に多くの抗生物質治療を受けていた。潰瘍の症状は非常に強い痛みを有していた。
【００９６】
治療：
治療は基本的に実施例９と同様に行われた。即ち、緩衝化された酢酸による治療を１日あたり６回行い、これらの治療の合間に陰圧を、通常は４時間、適用した。図１４〜１７に、緩衝化された酢酸での治療前の臨床症状（図１１）、ＮＰＷＴ適用に使用された装置（図１２）、治療の６日目（図１３）及び治療後９日目（図１４）を示す。潰瘍は劇的に改善され、実薬治療の中止後であっても圧迫治療による改善が見られた。
【図１１】
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【図１２】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【手続補正書】
【提出日】平成24年8月9日(2012.8.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
酢酸を含む創傷治療製品であって、前記製品は少なくとも１つの抗菌化合物をさらに含む、創傷治療製品。
【請求項２】
前記抗菌化合物は、アミノ配糖体、マクロライド、フルオロキノロン、セフタジジム、テトラサイクリン、スルホンアミド、ベータラクタム、オキサゾリジノン及び抗菌性ペプチドからなる群から選択される抗生物質である、請求項１に記載の創傷治療製品。
【請求項３】
前記抗菌化合物は、キシリトール、フラマイセチン、フシジン酸、ニトロフラール、硝酸フェニル水銀、ベンゾドデシニウム、トリクロサン、セチルピリジニウム、アルミニウム塩素水和物、ポビドンヨード、クリオキノール、ベンザルコニウム、クロルヘキシジン、ヨードホルム及び次亜塩素酸からなる群から選択される、請求項１に記載の創傷治療製品。
【請求項４】
前記創傷治療製品は、スプレー、ゲル、包帯剤、ペースト又は泡状の形である、請求項１〜３のいずれかに記載の創傷治療製品。
【請求項５】
創傷の細菌感染治療に使用するための、請求項１〜４のいずれかに記載の創傷治療製品。
【請求項６】
陰圧創傷閉鎖法と組み合わせて使用される、請求項５に記載の創傷治療製品。
【請求項７】
酢酸を含む、創傷の細菌感染治療に使用するための創傷治療製品であって、陰圧創傷閉鎖法と組み合わせて使用されるものである創傷治療製品。
【請求項８】
前記創傷は慢性創傷である、請求項５〜７のいずれかに記載の創傷治療製品。
【請求項９】
前記細菌感染が、緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）及び黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）からなる群から選ばれる細菌を含む感染である、請求項５〜８のいずれかに記載の創傷治療製品。
【請求項１０】
パッドに接続されている送達手段に接続された容器を有する送達システムであって、前記容器は酢酸を含む組成物を有する、送達システム。
【請求項１１】
陰圧創傷閉鎖法と組み合わせて使用するために適合させた、請求項１０に記載の送達システム。
【請求項１２】
包帯剤を有するキットであって、前記包帯剤は酢酸を含む組成物を含む、キット。
【請求項１３】
排液チューブをさらに有する、請求項１２に記載のキット。
【請求項１４】
接着性膜をさらに有する、請求項１２又は１３に記載のキット。
【請求項１５】
陰圧創傷閉鎖法と組み合わせて使用するために適合させた、請求項１２〜１４のいずれかに記載のキット。
【国際調査報告】
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