(57)【要約】  本発明は、本発明において記載されている化合物を治療有効量で投与するステップを含む、ウイルス誘発腫瘍またはウイルス感染を治療する方法を提供する。本発明のいくつかの態様によれば、該方法は、免疫抑制剤を必要としている対象への、ウイルス感染および／またはウイルス誘発腫瘍を治療するための少なくとも１種の免疫抑制剤をさらに含み得る。【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象において、ウイルス誘発腫瘍を治療するための方法であって、前記対象に、治療有効量の式Ａもしくは式Ｂの化合物
【化１】
2013501056.tif 000037
［式中、
Ｍは
【化２】
2013501056.tif 000038
であり、ここで、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２およびＲ２’は、独立に、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＲｉ、−ＳＲｉ、−ＮＨＲｉ、−ＮＲｉＲｉｉであり、かつ、ＲｉおよびＲｉｉは、独立に、水素または脂肪族であり、
Ｑは、存在する場合、
【化３】
2013501056.tif 000039
であり、ｍは０から６までの整数であり、
Ｂは、水素、−ＣＨ３、Ｆ、ＣＦ３、−ＣＨＦ２、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨ＝ＣＨ２および−ＣＨ２Ｎ３からなる群から選択され、
Ｘは、セレン、硫黄または酸素から選択され、
Ｒ３は、ヒドロキシ、−ＯＲ２ａ、−ＢＨ３、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニルまたは−ＮＲ’Ｈであり、
Ｒ２ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２であり、
Ｒ’は、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ６〜１０アリール、または置換もしくは非置換アミノ酸残基であり、
Ｚは、少なくとも１個のＮを含む複素環式部分を含み、かつ
符号＊は、式（Ａ）または（Ｂ）中のメチレンとＺとの結合点が、前記複素環式部分の利用可能な窒素を介していることを指示する］、
または薬学的に許容されるその塩、立体異性体、ジアステレオマー、鏡像異性体もしくはラセミ体を投与するステップを含む方法。
【請求項２】
式ＡまたはＢの化合物が、ウイルス感染細胞および／またはウイルス複製を特異的に標的とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記対象がヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記腫瘍が、ポリオーマウイルス、パピローマウイルス、ヘルペスウイルス、アデノウイルス、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）、ヒトサイトメガロウイルス（ＨＣＭＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルスまたはそれらの組合せに関連する、請求項１から３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
前記腫瘍が、ヒトパピローマウイルス、ワタオウサギパピローマウイルス、ウマパピローマウイルスおよびウシパピローマウイルスからなる群から選択されるパピローマウイルスに関連する、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記腫瘍が、ヒトパピローマウイルスに関連する子宮頸がんである、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
前記腫瘍が、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）に関連する移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）である、請求項４に記載の方法。
【請求項８】
前記腫瘍が、サイトメガロウイルスに関連する膠芽細胞腫である、請求項４に記載の方法。
【請求項９】
前記腫瘍が、ＢＫ、ジョン・カニンガムウイルス（ＪＣＶ）、メルケル細胞ウイルス（ＭＣＶ）、ＫＩポリオーマウイルス（ＫＩＶ）、ＷＵポリオーマウイルス（ＷＵＶ）、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）またはそれらの組合せに関連する、請求項４に記載の方法。
【請求項１０】
前記腫瘍が、ＢＫウイルスまたはＪＣＶに関連する、請求項４に記載の方法。
【請求項１１】
前記対象が免疫無防備状態である、請求項１から１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
前記対象が、免疫抑制薬治療中の移植患者である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記移植患者が、腎臓、骨髄、肝臓、肺、胃、骨、精巣、心臓、膵臓、腸およびそれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つの移植臓器を有する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記対象がＨＩＶに感染している、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記対象が、原発性または後天性免疫不全を有する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１６】
前記対象が、免疫抑制療法の結果として免疫無防備状態である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１７】
少なくとも１つの前記腫瘍が、脳がん、結腸直腸がん、上咽頭癌（ＮＰＣ）、バーキットリンパ腫（ＢＬ）、リンパ腫（例えば、Ｂ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、ダンカン症候群）、メルケル細胞癌（ＭＣＣ）、前立腺がん、肝細胞癌、子宮頸がん、肺がん、頭頸部扁平上皮がん、前立腺がん、乳がん、急性リンパ性白血病、成人急性骨髄性白血病、成人非ホジキンリンパ腫、脳腫瘍、小児がん、小児肉腫、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、食道がん、有毛細胞白血病、腎臓がん、肝臓がん、多発性骨髄腫、神経芽細胞腫、口腔がん、膵臓がん、原発性中枢神経系リンパ腫、皮膚がんおよびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１から１６のいずれかに記載の方法。
【請求項１８】
Ｘが酸素である、請求項１から１７のいずれかに記載の方法。
【請求項１９】
Ｒ３がヒドロキシルである、請求項１から１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２０】
Ｚが、グアニン−９−イル、アデニン−９−イル、２，６−ジアミノプリン−９−イル、２−アミノプリン−９−イルまたはその１−デアザ、３−デアザもしくは８−アザ化合物、あるいはシトシン−１−イルである、請求項１から１９のいずれかに記載の方法。
【請求項２１】
Ｚが、
【化４】
2013501056.tif 000040
［ここで、式１、２、３または４中の符号＊は、Ｎと式ＡまたはＢ中のメチレンとの結合点を指示する］
である、請求項１から１９のいずれかに記載の方法。
【請求項２２】
Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２またはＲ２’が、独立に、−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル、−Ｏ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル、−Ｏ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル、−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ２４）アシル、−Ｓ（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル、−Ｓ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル、−Ｓ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル、−Ｓ（Ｃ１〜Ｃ２４）アシル、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル、−ＮＨ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル、−ＮＨ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ２４）アシル、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アシル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルケイル））（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルケニル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキニル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アシル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル）または−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アシル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル）である、請求項１から２１のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】
Ｍが、−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−Ｃ１〜２４アルキル、−Ｏ−（ＣＨ２）３−Ｏ−Ｃ１〜２４アルキル、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ１〜２４アルキルおよび−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ（ＯＨ）−Ｓ−Ｃ１〜２４アルキルからなる群から選択される、請求項１から２２のいずれかに記載の方法。
【請求項２４】
Ｍが−Ｏ−（ＣＨ２）ａ−Ｏ−（ＣＨ２）ｔ−ＣＨ３［ここで、ａは２から４であり、かつｔは１１から１９である］である、請求項１から２２のいずれかに記載の方法。
【請求項２５】
Ｍが−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）１５ＣＨ３、または−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）１７ＣＨ３である、請求項１から２２のいずれかに記載の方法。
【請求項２６】
Ｍが−Ｏ−（ＣＨ２）３−Ｏ−（ＣＨ２）１５ＣＨ３、または−Ｏ−（ＣＨ２）３−Ｏ−（ＣＨ２）１７ＣＨ３である、請求項１から２２のいずれかに記載の方法。
【請求項２７】
Ｂが−ＣＨ３、または−ＣＨ２ＯＨである、請求項１から２６のいずれかに記載の方法。
【請求項２８】
前記化合物が、
【化５Ａ】
2013501056.tif 000041
【化５Ｂ】
2013501056.tif 000042
【化５Ｃ】
2013501056.tif 000043
または薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される、請求項１から１７のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】
前記対象が免疫抑制剤を必要としている、請求項１から２８のいずれかに記載の方法。
【請求項３０】
前記対象に、少なくとも１種の免疫抑制剤を前記式ＡまたはＢの化合物と組み合わせて投与するステップをさらに含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記免疫抑制剤が、前記対象に同時発生的にまたは順次に投与される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
少なくとも１種の前記免疫抑制剤が、ダクリズマブ、バシリキシマブ、タクロリムス、シロリムス、ミコフェノレート（ナトリウムまたはモフェチルとして）、シクロスポリンＡ、グルココルチコイド、抗ＣＤ３モノクローナル抗体（ＯＫＴ３）、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）、抗ＣＤ５２モノクローナル抗体（キャンパス１−Ｈ）、アザチオプリン、エベロリムス、ダクチノマイシン、シクロフォスファミド、白金、ニトロソ尿素、メトトレキサート、アザチオプリン、メルカプトプリン、ムロモナブ、ＩＦＮガンマ、インフリキシマブ、エタネルセプト、アダリムマブ、タイサブリ（ナタリズマブ）、フィンゴリモドおよびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
少なくとも１種の前記免疫抑制剤がタイサブリ（ナタリズマブ）である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３４】
前記化合物が、構造：
【化６】
2013501056.tif 000044
または薬学的に許容されるその塩を有し、かつ、前記免疫抑制剤がタイサブリ（ナタリズマブ）である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３５】
免疫抑制剤を必要としている対象において、ウイルス感染を治療するための方法であって、前記対象に、治療有効量の式Ａもしくは式Ｂの化合物
【化７】
2013501056.tif 000045
［式中、
Ｍは
【化８】
2013501056.tif 000046
であり、ここで、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２およびＲ２’は、独立に、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＲｉ、−ＳＲｉ、−ＮＨＲｉ、−ＮＲｉＲｉｉであり、かつ、ＲｉおよびＲｉｉは、独立に、水素または脂肪族であり、
Ｑは、存在する場合、
【化９】
2013501056.tif 000047
であり、ｍは０から６までの整数であり、
Ｂは、水素、−ＣＨ３、Ｆ、ＣＦ３、−ＣＨＦ２、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨ＝ＣＨ２および−ＣＨ２Ｎ３からなる群から選択され、
Ｘは、セレン、硫黄または酸素から選択され、
Ｒ３は、ヒドロキシ、−ＯＲ２ａ、−ＢＨ３、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニルまたは−ＮＲ’Ｈであり、
Ｒ２ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２であり、
Ｒ’は、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ６〜１０アリール、または置換もしくは非置換アミノ酸残基であり、
Ｚは、少なくとも１個のＮを含む複素環式部分を含み、かつ
符号＊は、式（Ａ）または（Ｂ）中のメチレンとＺとの結合点が、前記複素環式部分の利用可能な窒素を介していることを指示する］、
または薬学的に許容されるその塩、立体異性体、ジアステレオマー、鏡像異性体もしくはラセミ体を投与するステップを含む方法。
【請求項３６】
少なくとも１種の前記免疫抑制剤が、ダクリズマブ、バシリキシマブ、タクロリムス、シロリムス、ミコフェノレート（ナトリウムまたはモフェチルとして）、シクロスポリンＡ、グルココルチコイド、抗ＣＤ３モノクローナル抗体（ＯＫＴ３）、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）、抗ＣＤ５２モノクローナル抗体（キャンパス１−Ｈ）、アザチオプリン、エベロリムス、ダクチノマイシン、シクロフォスファミド、白金、ニトロソ尿素、メトトレキサート、アザチオプリン、メルカプトプリン、ムロモナブ、ＩＦＮガンマ、インフリキシマブ、エタネルセプト、アダリムマブ、タイサブリ（ナタリズマブ）、フィンゴリモドおよびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
少なくとも１種の前記免疫抑制剤がタイサブリ（ナタリズマブ）である、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
Ｘが酸素である、請求項３５から３７に記載の方法。
【請求項３９】
Ｒ３がヒドロキシルである、請求項３５から３８のいずれかに記載の方法。
【請求項４０】
Ｚが、グアニン−９−イル、アデニン−９−イル、２，６−ジアミノプリン−９−イル、２−アミノプリン−９−イルまたはその１−デアザ、３−デアザもしくは８−アザ化合物、あるいはシトシン−１−イルである、請求項３５から３９のいずれかに記載の方法。
【請求項４１】
Ｚが、
【化１０】
2013501056.tif 000048
［ここで、式１、２、３または４中の符号＊は、Ｎと式ＡまたはＢ中のメチレンとの結合点を指示する］
である、請求項３５から３９のいずれかに記載の方法。
【請求項４２】
Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ２’が、独立に、−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル、−Ｏ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル、−Ｏ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル、−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ２４）アシル、−Ｓ（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル、−Ｓ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル、−Ｓ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル、−Ｓ（Ｃ１〜Ｃ２４）アシル、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル、−ＮＨ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル、−ＮＨ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ２４）アシル、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アシル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルケイル））（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルケニル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキニル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アシル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル）または−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アシル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル）である、請求項３５から４１のいずれかに記載の方法。
【請求項４３】
Ｍが、−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−Ｃ１〜２４アルキ、−Ｏ−（ＣＨ２）３−Ｏ−Ｃ１〜２４アルキル、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ１〜２４アルキルおよび−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ（ＯＨ）−Ｓ−Ｃ１〜２４アルキルからなる群から選択される、請求項３５から４２のいずれかに記載の方法。
【請求項４４】
Ｍが−Ｏ−（ＣＨ２）ａ−Ｏ−（ＣＨ２）ｔ−ＣＨ３［ここで、ａは２から４であり、かつｔは１１から１９である］である、請求項３５から４２のいずれかに記載の方法。
【請求項４５】
Ｍが−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）１５ＣＨ３または−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）１７ＣＨ３である、請求項３５から４２のいずれかに記載の方法。
【請求項４６】
Ｍが−Ｏ−（ＣＨ２）３−Ｏ−（ＣＨ２）１５ＣＨ３または−Ｏ−（ＣＨ２）３−Ｏ−（ＣＨ２）１７ＣＨ３である、請求項３５から４２のいずれかに記載の方法。
【請求項４７】
Ｂが−ＣＨ３または−ＣＨ２ＯＨである、請求項３５から４６のいずれかに記載の方法。
【請求項４８】
前記化合物が、
【化１１Ａ】
2013501056.tif 000049
【化１１Ｂ】
2013501056.tif 000050
【化１１Ｃ】
2013501056.tif 000051
または薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される、請求項３５から３７のいずれかに記載の方法。
【請求項４９】
前記化合物が、構造：
【化１２】
2013501056.tif 000052
または薬学的に許容されるその塩を有し、かつ、少なくとも１種の前記少なくとも１種の免疫抑制剤がタイサブリ（ナタリズマブ）である、請求項３５に記載の方法。
【請求項５０】
少なくとも１種のウイルス感染が、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、インフルエンザ、単純ヘルペスウイルス−１（ＨＳＶ−１）、単純ヘルペスウイルス−２（ＨＳＶ−２）、ヒトヘルペスウイルス６（ＨＨＶ−６）、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）、リンホクリプトウイルス、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、オルトポックスウイルス、天然痘、牛痘、ラクダ痘、サル痘、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎ウイルス、大痘瘡および小痘瘡ウイルス、ワクシニア、エボラウイルス、パピローマウイルス、アデノウイルス、ポリオーマウイルス、ならびにそれらの組合せからなる群から選択されるウイルスに関連する、請求項３５から４９のいずれかに記載の方法。
【請求項５１】
少なくとも１種の前記ウイルスが、ヒトサイトメガロウイルス、ＢＫウイルス、ジョン・カニンガムウイルス、ヒトヘルペスウイルス６（ＨＨＶ−６）、ヒト単純ヘルペスウイルス、アデノウイルス、エプスタイン・バーウイルスおよびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項３５から４９に記載の方法。
【請求項５２】
少なくとも１種の前記ウイルスが、ヒトパピローマウイルス、ワタオウサギパピローマウイルス、ウマパピローマウイルス、ウシパピローマウイルスおよびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項３５から４９に記載の方法。
【請求項５３】
少なくとも１種のウイルスが、ジョン・カニンガムウイルス（ＪＣＶ）、ＢＫウイルス、ＳＶ４０、メルケル細胞ウイルス（ＭＣＶ）、ＫＩポリオーマウイルス（ＫＩＶ）、ＷＵポリオーマウイルス（ＷＵＶ）、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項５０に記載の方法。
【請求項５４】
請求項１から５３のいずれか一項に記載の治療方法を行うための、式ＡまたはＢの化合物。
【請求項５５】
請求項１から５３のいずれか一項に記載の方法を行うための薬剤を調製するための、式ＡまたはＢの化合物の使用。
【請求項５６】
（ａ）式Ａもしくは式Ｂの化合物
【化１３】
2013501056.tif 000053
［式中、
Ｍは
【化１４】
2013501056.tif 000054
であり、ここで、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２およびＲ２’は、独立に、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＲｉ、−ＳＲｉ、−ＮＨＲｉ、−ＮＲｉＲｉｉであり、かつ、ＲｉおよびＲｉｉは、独立に、水素または脂肪族であり、
Ｑは、存在する場合、
【化１５】
2013501056.tif 000055
であり、ｍは０から６までの整数であり、
Ｂは、水素、−ＣＨ３、Ｆ、ＣＦ３、−ＣＨＦ２、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨ＝ＣＨ２および−ＣＨ２Ｎ３からなる群から選択され、
Ｘは、セレン、硫黄または酸素から選択され、
Ｒ３は、ヒドロキシ、−ＯＲ２ａ、−ＢＨ３、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニルまたは−ＮＲ’Ｈであり、
Ｒ２ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２であり、
Ｒ’は、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ６〜１０アリール、または置換もしくは非置換アミノ酸残基であり、
Ｚは、少なくとも１個のＮを含む複素環式部分を含み、かつ
符号＊は、式（Ａ）または（Ｂ）中のメチレンとＺとの結合点が、前記複素環式部分の利用可能な窒素を介していることを指示する］、
または薬学的に許容されるその塩、立体異性体、ジアステレオマー、鏡像異性体もしくはラセミ体と、
（ｂ）少なくとも１種の免疫抑制剤と、
（ｃ）薬学的に許容される担体と
を含む、医薬組成物。
【請求項５７】
少なくとも１種の前記免疫抑制剤が、ダクリズマブ、バシリキシマブ、タクロリムス、シロリムス、ミコフェノレート（ナトリウムまたはモフェチルとして）、シクロスポリンＡ、グルココルチコイド、抗ＣＤ３モノクローナル抗体（ＯＫＴ３）、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）、抗ＣＤ５２モノクローナル抗体（キャンパス１−Ｈ）、アザチオプリン、エベロリムス、ダクチノマイシン、シクロフォスファミド、白金、ニトロソ尿素、メトトレキサート、アザチオプリン、メルカプトプリン、ムロモナブ、ＩＦＮガンマ、インフリキシマブ、エタネルセプト、アダリムマブ、タイサブリ（ナタリズマブ）、フィンゴリモドおよびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項５６に記載の組成物。
【請求項５８】
少なくとも１種の前記免疫抑制剤がタイサブリ（ナタリズマブ）である、請求項５６に記載の組成物。
【請求項５９】
Ｘが酸素である、請求項５６から５８のいずれかに記載の組成物。
【請求項６０】
Ｒ２がヒドロキシルである、請求項５６から５９のいずれかに記載の組成物。
【請求項６１】
Ｚが、グアニン−９−イル、アデニン−９−イル、２，６−ジアミノプリン−９−イル、２−アミノプリン−９−イルまたはその１−デアザ、３−デアザもしくは８−アザ化合物、あるいはシトシン−１−イルである、請求項５６から６０のいずれかに記載の組成物。
【請求項６２】
Ｚが、
【化１６】
2013501056.tif 000056
［ここで、式１、２、３または４中の符号＊は、Ｎと式ＡまたはＢ中のメチレンとの結合点を指示する］
である、請求項５６から６０のいずれかに記載の組成物。
【請求項６３】
Ｍが、−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−Ｃ１〜２４アルキル、−Ｏ−（ＣＨ２）３−Ｏ−Ｃ１〜２４アルキル、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ１〜２４アルキル、および−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ（ＯＨ）−Ｓ−Ｃ１〜２４アルキルからなる群から選択される、請求項５６から６２のいずれかに記載の組成物。
【請求項６４】
Ｍが−Ｏ−（ＣＨ２）ａ−Ｏ−（ＣＨ２）ｔ−ＣＨ３［ここで、ａは２から４であり、かつｔは１１から１９である］である、請求項５６から６２のいずれかに記載の組成物。
【請求項６５】
Ｍが−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）１５ＣＨ３または−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）１７ＣＨ３である、請求項５６から６２のいずれかに記載の組成物。
【請求項６６】
Ｍが−Ｏ−（ＣＨ２）３−Ｏ−（ＣＨ２）１５ＣＨ３または−Ｏ−（ＣＨ２）３−Ｏ−（ＣＨ２）１７ＣＨ３である、請求項５６から６２のいずれかに記載の組成物。
【請求項６７】
Ｂが−ＣＨ３または−ＣＨ２ＯＨである、請求項５６から６６のいずれかに記載の組成物。
【請求項６８】
前記化合物が、
【化１７Ａ】
2013501056.tif 000057
【化１７Ｂ】
2013501056.tif 000058
【化１７Ｃ】
2013501056.tif 000059
または薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される、請求項５６に記載の組成物。
【請求項６９】
前記化合物が、
【化１８】
2013501056.tif 000060
または薬学的に許容されるその塩であり、かつ、前記免疫抑制剤がタイサブリ（ナタリズマブ）である、請求項５６に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
［関連出願］
本願は、２００９年８月３日に出願された米国仮特許出願第６１／２３０，９３１号の、３５Ｕ．Ｓ．Ｃ．§１１９（ｅ）に基づく利益を主張するものであり、その開示は、引用することにより本明細書の一部をなすものとする。
【０００２】
［発明の分野］
本発明は、概して、ウイルス感染およびウイルス誘発腫瘍を治療するための化合物、その類似体および方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
がんは、細胞増殖における正常な制限の破壊の結果である。がんは、ヒトの死因全体の約１３％を占めている。米国がん協会によれば、２００７年だけでも世界中で７６０万人が、がんにより死亡した。がんの重要な原因は、ウイルス感染である。ウイルスは世界中のヒトがんの１５％の原因であると推定されている。ウイルス感染は、ヒトにおけるがん発生の２番目に重要な危険因子であり、喫煙だけがこれを上回っているように思われる。ヒトがんに関連する主要なウイルスは、ヒトパピローマウイルス、Ｂ型肝炎およびＣ型肝炎ウイルス、エプスタイン・バーウイルス、ならびにヒトＴリンパ球向性ウイルスである。
【０００４】
加えて、免疫不全患者は、ポリオーマウイルス（例えば、ＢＫウイルスまたはＪＣウイルス）等の日和見性ウイルスに特に感染しやすい。いくつかの最近の研究は、ポリオーマウイルスとがんとの間には関連性があり得ることを示した（Ｆｅｎｇら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、３９巻、１０９６〜１１００（２００８年２月）およびＭｏｅｎｓら、Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．、６４、１６５６〜１６７８（２００７）を参照）。他の調査は、サイトメガロウイルスと結腸偽腫瘍および多形性膠芽腫（ＧＢＭ）との間（Ｊｅｓｕｓら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｏｎｃｏｌ、９４：４４５〜４４８（２００９）、Ｍｉｔｅｃｈｅｌｌら、Ｎｅｕｒｏ−ｏｎｃｏｌｏｇｙ、１０〜１８頁（２００８年２月）を参照、エプスタイン（Ｅｐｓｔｉｅｎ）・バーウイルスと胃がんとの間（Ｔｒｕｏｎｇら、Ｊ．ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ＆Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２００９、２８：１４を参照）、ヒトパピローマウイルスと子宮頸がんとの間（Ｓｃｈｉｆｆｍａｎら、Ｓｅｍｉｎａｒ、３７巻、８９０〜９０７頁、２００７年９月８日を参照、ｈｔｔｐ：ｗｗｗ．ｔｈｅｌａｎｃｅｔ．ｃｏｍにて利用可能）には関連性があることも示している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
したがって、ウイルス関連腫瘍を治療するため、特に免疫無防備状態の患者のために使用され得る新たな療法が必要である。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の第一の態様は、対象における免疫抑制に関連するウイルス誘発性状態／疾患（例えば、ウイルス誘発腫瘍またはウイルス感染）を治療する方法であって、前記対象に、治療有効量の本明細書において記載されている化合物を投与するステップを含む方法である。本明細書において記載されている化合物は、ウイルス複製および／またはウイルス感染／形質転換細胞（例えばウイルス誘発腫瘍細胞）を特異的に標的としている。
【０００７】
いくつかの実施形態において、ウイルス誘発腫瘍は、ポリオーマウイルス（ＢＫ、ジョン・カニンガムウイルス（ＪＣＶ）、メルケル細胞ウイルス（ＭＣＶ）、ＫＩポリオーマウイルス（ＫＩＶ）、ＷＵポリオーマウイルス（ＷＵＶ）、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）を含む）、パピローマウイルス（ヒトパピローマウイルス、ワタオウサギパピローマウイルス、ウマパピローマウイルスおよびウシパピローマウイルスを含む）、ヘルペスウイルス、アデノウイルス、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）、ヒトサイトメガロウイルス（ＨＣＭＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルスまたはそれらの組合せに関連する。
【０００８】
いくつかの実施形態において、ウイルス誘発腫瘍は、ＢＫまたはＪＣウイルスに関連する。
【０００９】
別の実施形態において、対象は免疫無防備状態（ｉｍｍｎｏｃｏｍｐｒｏｍｉｓｅｄ）である。さらに、一実施形態において、対象は腎移植または肝移植患者である。
【００１０】
一実施形態において、化合物は、
【化１】
2013501056.tif 000002
または薬学的に許容されるその塩である。
【００１１】
本発明のさらなる態様は、免疫抑制剤を必要としている対象におけるウイルス感染の治療的および／または予防的処置のための方法であって、前記対象に、治療有効量の本明細書において記載されている化合物を、１種または複数の免疫抑制剤と組み合わせて投与するステップを含む方法である。
【００１２】
いくつかの実施形態において、少なくとも１種の免疫抑制剤は、ダクリズマブ、バシリキシマブ、タクロリムス、シロリムス、ミコフェノレート（ナトリウムまたはモフェチルとして）、シクロスポリンＡ、グルココルチコイド、抗ＣＤ３モノクローナル抗体（ＯＫＴ３）、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）、抗ＣＤ５２モノクローナル抗体（キャンパス１−Ｈ）、アザチオプリン、エベロリムス、ダクチノマイシン、シクロフォスファミド、白金、ニトロソ尿素、メトトレキサート、アザチオプリン、メルカプトプリン、ムロモナブ、ＩＦＮガンマ、インフリキシマブ、エタネルセプト、アダリムマブ、タイサブリ（ナタリズマブ）、フィンゴリモドおよびそれらの組合せから選択される。
【００１３】
一実施形態において、少なくとも１種の免疫抑制剤は、タイサブリ（ナタリズマブ）である。
【００１４】
本発明のさらなる態様は、（ａ）本明細書において記載されている化合物と、（ｂ）少なくとも１種の免疫抑制剤と、（ｃ）薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物を提供する。
【００１５】
下記の図面は、本明細書の一部をなし、本発明のある特定の態様をさらに実証するために含まれる。本発明は、これらの図面の１つまたは複数を、本明細書において提示される具体的な実施形態の詳細な説明と組み合わせて参照することにより、よりよく理解され得る。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】ＢＫＶ負荷およびＢＫＶタンパク質の発現に対する漸増濃度のＣＭＸ００１の効果を例証する図である。図１（ａ）は、ＣＭＸ００１の濃度と細胞外ＢＫＶ負荷の低減との間の関係を例証する。図１（ｂ）は、ＢＫＶ感染ＲＰＴＥＣの感染７２時間後における免疫蛍光染色の画像を示す。  図１（ａ）では、ＲＰＴＥＣ上清を感染７２時間後、すなわち指示されたＣＭＸ００１濃度での処理開始７０時間後に収穫した。ＢＫＶ負荷をｑＰＣＲによって計測し、流入ウイルスを減じた。未処理細胞中のＤＮＡ負荷（１．０５Ｅ＋０９Ｇｅｑ／ｍｌ）を１００％として設定した。  図１（ｂ）では、感染７２時間後にメタノール固定し、後期アグノタンパク質の可視化のためのウサギ抗アグノタンパク質血清（緑色）およびＢＫＶ  ＬＴａｇの可視化のためのＳＶ４０  ＬＴａｇモノクローナルＰａｂ４１６（赤色）で染色した、未処理およびＣＭＸ００１処理ＢＫＶ感染ＲＰＴＥＣの間接免疫蛍光法。細胞密度を、青色に染色してドラック５によって示す。
【図２】図２（ａ）は、ＣＭＸ００１の濃度と非感染ＲＰＴＥＣのＤＮＡ複製との間の関係を例証する。図２（ｂ）は、ＣＭＸ００１の濃度と非感染ＲＰＴＥＣの代謝活性との間の関係を例証する。  図２（ａ）では、ＢｒｄＵ取り込み（ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を用いて細胞ＤＮＡ複製を検査した。指示されたＣＭＸ００１濃度を持つ培地を感染２時間後に添加し、感染７２時間後に吸光度を計測した。未処理細胞の吸光度を１００％として設定した。  図２（ｂ）では、代謝活性をＷＳＴ−１開裂として検査した。指示されたＣＭＸ００１濃度を持つ培地を感染２時間後に添加し、感染７２時間後に吸光度を計測した。未処理細胞の吸光度を１００％として設定した。
【図３】ＢＫＶゲノム複製に対するＣＭＸ００１  ０．３１μＭの影響を例証する図である。図では、ＣＭＸ００１処理および未処理ＢＫＶ感染ＲＰＴＥＣを指示された時点で収穫し、細胞１個当たりの細胞内ＢＫＶ  ＤＮＡ負荷をｑＰＣＲによって計測した。
【図４】ＢＫＶの初期および後期発現に対するＣＭＸ００１  ０．３１μＭの影響を例証する図である。図４（ａ）は、未処理およびＣＭＸ００１処理ＢＫＶ感染ＲＰＴＥＣの間接免疫蛍光法の画像を示す。図４（ｂ）は、ＣＭＸ００１処理および未処理ＢＫＶ感染ＲＰＴＥＣからの細胞抽出物を感染４８および７２時間後に収穫し、ウエスタンブロット法を、ウサギ抗ＢＫＶ  ＶＰ１、抗アグノタンパク質血清、およびハウスキーピングタンパク質ＧＡＰＤＨに向けられるモノクローナル抗体を用いて実施したことを示す。  図４（ａ）では、感染４８および７２時間後にメタノール固定し、後期アグノタンパク質の可視化のためのウサギ抗アグノタンパク質血清（緑色）およびＢＫＶ  ＬＴａｇの可視化のためのＳＶ４０  ＬＴａｇモノクローナルＰａｂ４１６（赤色）で染色した、未処理およびＣＭＸ００１処理ＢＫＶ感染ＲＰＴＥＣの間接免疫蛍光法。図４（ｂ）では、ＣＭＸ００１処理および未処理ＢＫＶ感染ＲＰＴＥＣからの細胞抽出物を感染４８および７２時間後に収穫し、ウエスタンブロット法を、ウサギ抗−ＢＫＶ  ＶＰ１、抗アグノタンパク質血清、およびハウスキーピングタンパク質ＧＡＰＤＨに向けられるモノクローナル抗体を用いて実施した。
【図５】ＢＫＶ細胞外ＢＫＶ負荷に対するＣＭＸ００１  ０．３１μＭの影響を例証する図である。図５は、ＢＫＶ細胞外ＢＫＶ負荷に対するＣＭＸ００１  ０．３１μＭの影響を実証している。ＣＭＸ００１処理および未処理ＢＫＶ感染ＲＰＴＥＣからの上清を、感染後の指示された時点で収穫し、ＢＫＶ負荷をｑＰＣＲによって計測した。データはＢＫＶ負荷としてＧｅｑ／ｍｌで提示する。
【図６】感染前のＲＰＴＥＣの前処理に対するＣＭＸ００１の衝撃を実証する図である。図６では、ＲＰＴＥＣは、感染２０時間前まで４時間処理して、このときに新たな完全成長培地を添加するか、または感染１時間前まで２４時間処理して、このときに感染前の完全成長培地中で１時間洗浄するかのいずれかとした。上清を感染７２時間後に収穫し、細胞外ＢＫＶ負荷をｑＰＣＲによって計測した。データは、１００％に設定された未処理細胞のパーセントで提示する。
【図７】ＣＭＸ００１の安定性を例証する図である。図７では、ＢＫＶ感染ＲＰＴＥＣを、新しく作製したＣＭＸ００１、または４℃もしくは−２０℃で１週間保存した１ｍｇ／ｍｌのストック溶液からのＣＭＸ００１で処理した。上清を感染７２時間後に収穫し、細胞外ＢＫＶ負荷をｑＰＣＲによって計測した。データは、ＢＫＶ負荷として、１００％に設定された未処理細胞のパーセントで提示する。
【図８】ＣＯＳ−７細胞におけるＪＣＶ  Ｍａｄ−４の複製を実証する図である。図８では、感染７日後に固定し、後期カプシドタンパク質ＶＰ１の可視化のためのウサギ抗ＶＰ１血清（赤色）およびＤＮＡを示すためのヘキスト３３３４２色素（青色）で染色した、ＪＣＶ感染ＣＯＳ−７細胞の間接免疫蛍光法。マージした写真を右パネルに示す。
【図９】星状膠細胞におけるＪＣＶ  Ｍａｄ−４の複製およびＪＣＶ感染星状膠細胞の間接免疫蛍光法の画像を示す図である。固定および染色は、図８のものと同じである。
【図１０】星状膠細胞におけるＪＣＶ複製の経過を実証する図である。図１０（ａ）は、感染７日後に固定し、後期カプシドタンパク質ＶＰ１の可視化のためのウサギ抗ＶＰ１血清（赤色）およびＤＮＡを示すためのヘキスト３３３４２色素（青色）で染色した、ＪＣＶ感染星状膠細胞の間接免疫蛍光法を示す。マージした写真を右パネルに示す。図１０（ｂ）は、感染１４日後に固定したＪＣＶ感染星状膠細胞の間接免疫蛍光法の画像を示す。固定および染色は、ａ）の通りである。図１０（ｃ）は、感染１４日後に固定した偽感染星状膠細胞の間接免疫蛍光法の画像を示す。固定および染色は、１０（ａ）のものと同じである。
【図１１】ＣＯＳ−７細胞における再連結したＪＣＶ  Ｍａｄ−４  ＤＮＡの複製、ならびに、トランスフェクション７日後に固定し、後期カプシドタンパク質ＶＰ１の可視化のためのウサギ抗ＶＰ１血清（赤色）およびＤＮＡを示すためのヘキスト３３３４２色素（青色）で染色した、ＪＣＶ  ＤＮＡトランスフェクトＣＯＳ−７細胞の間接免疫蛍光法の画像を実証する図である。マージした写真を右パネルに示す。
【図１２】ＣＭＸ００１  ＩＣ−５０およびＩＣ−９０の決定を実証する図である。ＣＯＳ−７上清を感染５日後、すなわち指示されたＣＭＸ００１濃度での処理開始１１８時間後に収穫した。ＪＣＶ負荷をｑＰＣＲによって計測し、流入ウイルスを減じた。未処理細胞中のＤＮＡ負荷（５．０４×１０Ｅ＋９ｇｅｑ／ｍｌ）を１００％として設定した。ＩＣ−５０およびＩＣ−９０を決定するために、ＪＣＶの複製を、未処理細胞のパーセンテージとして示す。
【図１３】ＣＯＳ−７細胞の代謝活性に対する漸増濃度のＣＭＸ００１の効果を実証する図である。代謝活性をＷＳＴ−１開裂として検査した。指示されたＣＭＸ００１濃度を持つ培地をＣＯＳ−７細胞に添加し、播種７２時間後に吸光度を計測した。未処理細胞の吸光度を１００％として設定した。
【図１４】ＣＯＳ−７細胞の複製に対する漸増濃度のＣＭＸ００１の効果を例証する図である。ＤＮＡ複製をＢｒｄＵ取り込みによって決定した。指示されたＣＭＸ００１濃度を持つ培地をＣＯＳ−７細胞に添加し、播種７２時間後に吸光度を計測した。未処理細胞の吸光度を１００％として設定した。
【図１５】細胞外ウイルス負荷に対する漸増濃度のＣＭＸ００１の効果を示す図である。ＣＭＸ００１処理および未処理ＪＣＶ感染ＣＯＳ−７細胞からの上清を、感染後の指示された時点で収穫し、ＪＣＶ負荷をｑＰＣＲによって計測した。データは、ＪＣＶ負荷として対数ｇｅｑ／ｍｌで提示する。
【図１６】ＪＣＶタンパク質の発現に対する漸増濃度のＣＭＸ００１の効果を例証する図である。感染７日後に固定し、後期カプシドタンパク質ＶＰ１の可視化のためのウサギ抗ＶＰ１血清（赤色）およびＤＮＡを示すためのヘキスト３３３４２色素（青色）で染色した、指示された濃度のＣＭＸ００１で処理されたＪＣＶ感染ＣＯＳ−７細胞の間接免疫蛍光法。マージした写真を右パネルに示す。
【図１７】星状膠細胞における細胞外ウイルス負荷に対する漸増濃度のＣＭＸ００１の効果を例証する図である。指示された濃度のＣＭＸ００１で処理されたＪＣＶ感染ＰＤＡ細胞からの上清を感染後の指示された時点で収穫し、ＪＣＶ負荷をｑＰＣＲによって計測した。データは、ＪＣＶ負荷として対数ｇｅｑ／ｍｌで提示する。
【図１８】ドキソルビシン、シドフォビルおよびＣＭＸ００１によるＣａｋｉ−１細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図１９】ドキソルビシン、シドフォビルおよびＣＭＸ００１によるＣａｋｉ−２細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図２０】ドキソルビシン、シドフォビルおよびＣＭＸ００１によるＳＣａＢＥＲ細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図２１】ドキソルビシン、シドフォビルおよびＣＭＸ００１によるＳＷ７８０細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図２２】ドセタキセル（Ａ）、シドフォビルおよびＣＭＸ００１（Ｂ）によるＤＵ１４５細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図２３】ドセタキセル（Ａ）、シドフォビルおよびＣＭＸ００１（Ｂ）によるＰＣ−３細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図２４】ドセタキセル（Ａ）、シドフォビルおよびＣＭＸ００１（Ｂ）によるＭＤＡ−２３１細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図２５】ドセタキセル（Ａ）、シドフォビルおよびＣＭＸ００１（Ｂ）によるＭＣＦ−７細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図２６】ゲムシタビン、シドフォビルおよびＣＭＸ００１によるＰＡＮＣ−１細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図２７】ゲムシタビン、シドフォビルおよびＣＭＸ００１によるＭＩＡ ＰａＣａ−２細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図２８】オキサリプラチン、シドフォビルおよびＣＭＸ００１によるＨＴ−２９細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図２９】オキサリプラチン、シドフォビルおよびＣＭＸ００１によるＨＣＴ−１１６細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図３０】ドセタキセル（Ａ）、シドフォビルおよびＣＭＸ００１（Ｂ）によるＨ４６０細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図３１】ドセタキセル（Ａ）、シドフォビルおよびＣＭＸ００１（Ｂ）によるＡ５４９細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図３２】ＤＴＩＣ、シドフォビルおよびＣＭＸ００１によるＡ２０５８細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図３３】ＤＴＩＣ、シドフォビルおよびＣＭＸ００１によるＳＫ−ＭＥＬ−２細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図３４】シスプラチン、シドフォビルおよびＣＭＸ００１によるＣ３３細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図３５】シスプラチン、シドフォビルおよびＣＭＸ００１によるＳｉＨａ細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図３６】シスプラチン、シドフォビルおよびＣＭＸ００１によるＳＫ−ＯＶ−３細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図３７】シスプラチン、シドフォビルおよびＣＭＸ００１によるＯｖＣａｒ−３細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図３８】ドキソルビシン、シドフォビルおよびＣＭＸ００１によるＳＫ−ＨＥＰ−１細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図３９】ドキソルビシン、シドフォビルおよびＣＭＸ００１によるＨＥＰ Ｇ２細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図４０】シドフォビルおよびＣＭＸ００１によるＨｅｔ−１Ａ細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【図４１】シドフォビルおよびＣＭＸ００１によるＴＨＬＥ−３細胞成長の阻害を図式的に例証する図である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
ここで、本明細書において提供されている記述および方法論に関して、本発明の前述および他の態様をさらに詳細に記載する。本発明は異なる形態で具現化され得、本明細書において説明される実施形態に限定されるものとして解釈されるべきでないことを理解すべきである。むしろ、これらの実施形態は、本開示が徹底的かつ完全となり、当業者に本発明の範囲を十分に伝えるように提供される。
【００１８】
本明細書における本発明の記述において使用される術語は、特定の実施形態を記述することのみを目的とし、本発明の限定を意図するものではない。本発明の実施形態の記述および添付の請求項において使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈上明らかに別段の定めがある場合を除き、複数形も含むことが意図されている。また、本明細書において使用される場合、「および／または」は、関連して記載されている項目の１つまたは複数のあらゆる考えられる組合せを指し、かつ包含する。さらに、化合物の量、用量、時間、温度等、測定可能な値に言及する際の用語「約」は、本明細書において使用される場合、明記された量の２０％、１０％、５％、１％、０．５％またはさらに０．１％の変動を包含するように意味付けられている。用語「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および／または「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、本明細書において使用される場合、挙げられた装備、整数、ステップ、動作、要素および／または成分の存在を明記するが、１つまたは複数の他の装備、整数、ステップ、動作、要素、成分および／またはそれらの群の存在または追加を除外するものではないことがさらに理解されよう。別段の定義がない限り、本明細書において使用される技術用語および科学用語を含むすべての用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されているのと同じ意味を有する。
【００１９】
本明細書において参照されるすべての特許、特許出願および刊行物は、引用することにより本明細書の一部をなすものとする。術語に矛盾がある場合、本明細書が優先される。
【００２０】
本明細書において使用される場合、「アルキル」は、１から３０個までの炭素原子を含有する直鎖または分枝鎖の炭化水素を指す。いくつかの実施形態において、アルキル基は、１から２４、２から２５、２から２４、１７から２０、１から１０または１から８個の炭素原子を含有する。いくつかの実施形態において、アルキル基は、１７〜２０個の炭素原子を含有する。いくつかの実施形態において、アルキル基は、１７、１８、１９または２０個の炭素原子を含有する。また他の実施形態において、アルキル基は、１〜５個の炭素原子を含有し、さらに他の実施形態において、アルキル基は、１〜４または１〜３個の炭素原子を含有する。アルキルの代表例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉｓｏ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシル、３−メチルヘキシル、２，２−ジメチルペンチル、２，３−ジメチルペンチル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシル等を含むがこれらに限定されない。追加の例または一般的に適用可能な置換基は、本明細書において記載されている実施例に示す具体的な実施形態によって例証される。
【００２１】
本明細書において使用される場合、「アルケニル」は、２から３０個までの炭素を含有し、かつ２個の水素の除去によって形成された少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を含有する、直鎖または分枝鎖の炭化水素を指す。いくつかの実施形態において、アルケニル基は、２から２５、２から２４、１７から２０、２から１０、２から８個の炭素原子を含有する。いくつかの実施形態において、アルケニル基は、１７〜２０個の炭素原子を含有する。また他の実施形態において、アルケニル基は、１７、１８、１９または２０個の炭素原子を含有し、さらに他の実施形態において、アルケニル基は、２〜５、２〜４または２〜３個の炭素原子を含有する。「アルケニル」の代表例は、エテニル、２−プロペニル、２−メチル−２−プロペニル、３−ブテニル、４−ペンテニル、５−ヘキセニル、２−ヘプテニル、２−メチル−１−ヘプテニル、３−デセニル等を含むがこれらに限定されない。追加の例または一般的に適用可能な置換基は、本明細書において記載されている実施例に示す具体的な実施形態によって例証される。
【００２２】
本明細書において使用される場合、「アルキニル」は、２から３０個までの炭素原子を含有し、かつ少なくとも１個の炭素−炭素三重結合を含有する、直鎖または分枝鎖の炭化水素基を指す。いくつかの実施形態において、アルキニル基は、２から２５、２から２４、２から１０または２から８個の炭素原子を含有する。いくつかの実施形態において、アルキニル基は、１７〜２０個の炭素原子を含有する。また他の実施形態において、アルキニル基は、１７、１８、１９または２０個の炭素原子を含有し、さらに他の実施形態において、アルキニル基は、２〜５、２〜４または２〜３個の炭素原子を含有する。アルキニルの代表例は、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、３−ブチニル、２−ペンチニル、１−ブチニル等を含むがこれらに限定されない。追加の例または一般的に適用可能な置換基は、本明細書において記載されている実施例に示す具体的な実施形態によって例証される。
【００２３】
本明細書において使用される場合、「アシル」は、２から３０個までの炭素を含有する直鎖または分枝鎖の炭化水素を指し、該炭化水素鎖の少なくとも１個の炭素は、オキソ（＝Ｏ）で置換されている。いくつかの実施形態において、アシル基は、２から２５、２から２４、１７から２０、２から１０、２から８個の炭素原子を含有する。いくつかの実施形態において、アシル基は、１７〜２０個の炭素原子を含有する。また他の実施形態において、アシル基は、１７、１８、１９または２０個の炭素原子を含有し、さらに他の実施形態において、アシル基は、２〜５、２〜４または２〜３個の炭素原子を含有する。追加の例または一般的に適用可能な置換基は、本明細書において記載されている実施例に示す具体的な実施形態によって例証される。
【００２４】
本明細書において使用される場合、用語「アルコキシ」は、酸素原子を介して親分子部分に結合している先に定義した通りのアルキル基を指す。いくつかの実施形態において、アルコキシ基は、１〜３０個の炭素原子を含有する。他の実施形態において、アルコキシ基は、１〜２０、１〜１０または１〜５個の炭素原子を含有する。いくつかの実施形態において、アルコキシ基は、２から２５、２から２４、１７から２０、２から１０、２から８個の炭素原子を含有する。いくつかの実施形態において、アルコキシ基は、１７〜２０個の炭素原子を含有する。また他の実施形態において、アルコキシ基は、１７、１８、１９または２０個の炭素原子を含有する。いくつかの実施形態において、アルコキシル基は、１から８個の炭素原子を含有する。いくつかの実施形態において、アルコキシル基は、１から６個の炭素原子を含有する。いくつかの実施形態において、アルコキシル基は、１から４個の炭素原子を含有する。また他の実施形態において、アルコキシル基は、１〜５個の炭素原子を含有し、さらに他の実施形態において、アルコキシル基は、１〜４または１〜３個の炭素原子を含有する。アルコキシルの代表例は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシおよびｎ−ペントキシを含むがこれらに限定されない。追加の例または一般的に適用可能な置換基は、本明細書において記載されている実施例に示す具体的な実施形態によって例証される。
【００２５】
用語「脂肪族」は、本明細書において使用される場合、１個または複数の官能基で場合により置換されている、飽和、不飽和、直鎖（すなわち非分岐鎖）、または分枝鎖、脂肪族の炭化水素を含む。いくつかの実施形態において、脂肪族は、二重結合、三重結合もしくはカルボニル基（Ｃ＝Ｏ）、またはそれらの組合せから選択される１個または複数の官能基を含有し得る。当業者であれば理解するであろうが、「脂肪族」は、本明細書において、アルキル、アルケニル、アルキニルまたはアシル部分を含むがこれらに限定されないことが意図されている。故に、本明細書において使用される場合、用語「アルキル」は、直鎖、分枝鎖飽和基を含む。類似の慣習は、「アルケニル」、「アルキニル」、「アシル」等の他の一般用語にも当てはまる。さらに、本明細書において使用される場合、用語「アルキル」、「アルケニル」、「アルキニル」、「アシル」等は、置換基および非置換基の両方を包含する。いくつかの実施形態において、用語「脂肪族」は、−（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル、−（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル、−（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル、−（Ｃ１〜Ｃ２４）アシルを指す。当業者には理解されるように、上記で指示されている炭素数の範囲は、該範囲内の個々の数を包含する。
【００２６】
本明細書において使用される場合、「アミノ酸残基」は、第一級アミノ（−ＮＨ２）基と結合している炭素原子、カルボン酸（−ＣＯＯＨ）基、側鎖および水素原子からなる化合物を指す。例えば、用語「アミノ酸」は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオニン、アスパラギン酸およびグルタミン酸を含むがこれらに限定されない。本発明では、式ＩまたはＩａにおいて、Ｒ２が−ＮＲ’Ｈであり、かつＲ’がアミノ酸残基である場合、Ｎは側鎖として炭素原子に結合している。加えて、本明細書において使用される場合、「アミノ酸」は、エステルおよびアミド等のアミノ酸ならびに塩の誘導体、ならびに、活性形態への代謝時に薬学的特性（ｐｈａｒｍａｃｏｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ）を有する誘導体を含む他の誘導体も含む。追加の例または一般的に適用可能な置換基は、本明細書において記載されている実施例に示す具体的な実施形態によって例証される。
【００２７】
本明細書において使用される場合、「シクロアルキル」は、単一の水素原子の除去によってシクロアルカンから誘導される３〜１２個の炭素の一価飽和環式または二環式炭化水素基を指す。いくつかの実施形態において、シクロアルキルは、３から８個の炭素原子を含有する。いくつかの実施形態において、シクロアルキルは、３から６個の炭素原子を含有する。シクロアルキル基は、アルキル、アルコキシ、ハロまたはヒドロキシ置換基で場合により置換されていてよい。シクロアルキルの代表例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびシクロオクチルを含むがこれらに限定されない。一般的に適用可能な置換基の追加の例は、本明細書において記載されている実施例に示す具体的な実施形態によって例証される。
【００２８】
本明細書において使用される場合、「ヘテロアルキル」、「ヘテロアルケニル」または「ヘテロアルキニル」は、例えば炭素原子の代わりに１個または複数の酸素、硫黄、窒素、リンまたはケイ素原子を含有する、アルキル、アルケニルまたはアルキニル基を指す。いくつかの実施形態において、ヘテロアルキル基は、１〜８個の炭素原子を含有する。ある特定の実施形態において、ヘテロアルケニルおよびヘテロアルキニル基は、独立に、２〜８個の炭素原子を含有する。また他の実施形態において、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニルおよびヘテラルキニルは、独立に、２〜５個の炭素原子を含有し、さらに他の実施形態において、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニルおよびヘテラルキニルは、独立に、２〜４または２〜３個の炭素原子を含有する。
【００２９】
用語「ヘテロシクロアルキル」または「複素環」は、本明細書において使用される場合、環の一部として、酸素、硫黄および窒素から独立に選択される１個または複数のヘテロ原子を間に有する二環または三環式を含むがこれらに限定されない、非芳香族、飽和または不飽和の５、６もしくは７員環または多環式基を指し、ここで、（ｉ）各５員環は０から１個の二重結合を有し、各６員環は０から２個の二重結合を有し、（ｉｉ）窒素および硫黄ヘテロ原子は、場合により酸化されていてよく、（ｉｉｉ）窒素ヘテロ原子は、場合により四級化されていてよく、かつ／または（ｉｖ）上記複素環式環のいずれかは、ベンゼン環と縮合していてよい。例示的な複素環は、ピロリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、オキサゾリジニル、イソオキサゾリジニル、モルホリニル、チアゾリジニル、イソチアゾリジニルおよびテトラヒドロフリルを含むがこれらに限定されない。
【００３０】
本明細書において使用される場合、用語「ハロゲン」は、フッ素（Ｆ）、塩素（Ｃｌ）、臭素（Ｂｒ）またはヨウ素（Ｉ）を指し、用語「ハロ」は、ハロゲンラジカル：フルオロ（−Ｆ）、クロロ（−Ｃｌ）、ブロモ（−Ｂｒ）およびヨード（−Ｉ）を指す。
【００３１】
本明細書において使用される場合、用語「ハロアルキル」は、少なくとも１個のハロ基で置換されている少なくとも１個の炭素原子を含有する、本明細書において定義される通りの直鎖または分枝鎖アルキル基を指し、ハロは本明細書において定義される通りである。いくつかの実施形態において、ハロアルキルは、１から３０個の炭素原子を含有する。いくつかの実施形態において、ハルアルキル（ｈａｌｋａｌｋｙｌ）は、１から８または１から６個の炭素原子を含有する。他の実施形態において、ハロアルキルは、１から４個の炭素原子を含有する。追加の例または一般的に適用可能な置換基は、本明細書において記載されている実施例に示す具体的な実施形態によって例証される。
【００３２】
本明細書において使用される場合、用語「アリール」は、１個または複数の芳香族環を有する単環式炭素環式環系または二環式炭素環式縮合環系を指す。アリールの代表例は、アズレニル、インダニル、インデニル、ナフチル、フェニル、テトラヒドロナフチル等を含む。用語「アリール」は、別段の指示がない限り、置換および非置換アリールの両方を含むことが意図されている。例えば、アリールは、１個または複数のヘテロ原子（例えば、酸素、硫黄および／または窒素）で置換されていてよい。追加の例または一般的に適用可能な置換基は、本明細書において記載されている実施例に示す具体的な実施形態によって例証される。
【００３３】
いくつかの実施形態において、本明細書において記載されているアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アシルは、置換部分および非置換部分の両方を含む。例示的な置換基は、ハロ、ヒドロキシル、アミノ、アミド、−ＳＨ、シアノ、ニトロ、チオアルキル、カルボン酸、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ２、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルを含むがこれらに限定されず、ここで、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキルおよびヘテロシクロアルキルは、さらに置換されていてよい。
【００３４】
本明細書において使用される場合、用語「アミノ酸」は、第一級アミノ（−ＮＨ２）基およびカルボン酸（−ＣＯＯＨ）基を含む化合物を指す。本発明において使用されるアミノ酸は、天然に存在するアミノ酸および合成α、β、γまたはδアミノ酸ならびにＬ、Ｄアミノ酸を含み、タンパク質において見られるアミノ酸を含むがこれらに限定されない。例示的なアミノ酸は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、プロリン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパルテート、グルタメート、リジン、アルギニンおよびヒスチジンを含むがこれらに限定されない。いくつかの実施形態において、アミノ酸は、アラニル、バリニル、ロイシニル、イソロイシニル、プロリニル、フェニルアラニニル、トリプトファニル、メチオニニル、グリシニル、セリニル、トレオニニル、システイニル、チロシニル、アスパラギニル、グルタミニル、アスパルトイル、グルタロイル、リジニル、アルギニニル、ヒスチジニル、β−アラニル、β−バリニル、β−ロイシニル、β−イソロイシニル、β−プロリニル、β−フェニルアラニニル、β−トリプトファニル、β−メチオニニル、β−グリシニル、β−セリニル、β−トレオニニル、β−システイニル、β−チロシニル、β−アスパラギニル、β−グルタミニル、β−アスパルトイル、β−グルタロイル、β−リジニル、β−アルギニニルまたはβ−ヒスチジニルの誘導体であってよい。加えて、本明細書において使用される場合、「アミノ酸」は、エステルおよびアミド等のアミノ酸ならびに塩の誘導体、ならびに、活性形態への代謝時に薬物特性を有する誘導体を含む他の誘導体も含む。
【００３５】
本明細書において使用される場合、用語「天然αアミノ酸」は、第一級アミノ（−ＮＨ２）基と結合している炭素原子、カルボン酸（−ＣＯＯＨ）基、側鎖および水素原子を含む天然に存在するα−アミノ酸を指す。例示的な天然αアミノ酸は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、プロリン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギネート、グルタミネート、アスパルテート、グルタメート、リジン、アルギニンおよびヒスチジンを含むがこれらに限定されない。
【００３６】
本明細書において使用される場合、用語「ウイルス誘発腫瘍」は、本明細書において記載されているウイルスの少なくとも１種によって誘発され、引き起こされ、かつ／またはそれに関連する腫瘍として定義される。
【００３７】
本発明の方法によって治療される対象は、概して、哺乳類および霊長類対象（例えば、ヒト、サル、類人猿、チンパンジー）である。対象は、雄であっても雌であってもよく、出生前（すなわち子宮内）、新生児、幼児、若年、青年、成体および高齢対象を含む、任意の年齢のものであってもよい。故に、いくつかの事例において、対象は、妊婦対象であってよい。治療は、以前に感染した対象の治療的処置および非感染対象（例えば、感染リスクが高いとして同定された対象）の予防的処置を含む、任意の目的のものであってよい。
【００３８】
本明細書において使用される場合、「ヒト免疫不全ウイルス」（または「ＨＩＶ」）は、本明細書において使用される場合、ＨＩＶ亜型Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、ＧおよびＯ、ならびにＨＩＶ−２を含むその亜型すべてを含むことが意図されている。
【００３９】
本明細書において使用される場合、「Ｂ型肝炎ウイルス」（または「ＨＢＶ」）は、本明細書において使用される場合、その亜型（ａｄｗ、ａｄｒ、ａｙｗおよびａｙｒ）およびまたは遺伝子型（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、ＧおよびＨ）すべてを含むことが意図されている。
【００４０】
本明細書において使用される場合、または「治療有効量」は、対象における少なくとも１つの臨床症状において、いくらかの軽減、緩和および／または減少を提供する量を指す。当業者であれば、何らかの利益が対象に提供される限り、治療効果は完全である必要も治癒的である必要もないことを理解するであろう。
【００４１】
本明細書において使用される場合、「特異性」または「に対して特異的に」は、ある特定の種類の腫瘍細胞またはウイルス感染細胞の代謝活性および／またはＤＮＡ複製を選択的に阻害し得る化合物を指す。特異性は、当業者に公知の任意の方法を使用することによって、例えば、ＩＣ９０および／またはＩＣ５０を試験することによって試験され得る。いくつかの実施形態において、本明細書において記載されている化合物は、正常（非感染）細胞に対するＩＣ９０および／またはＩＣ５０よりも少なくとも約３倍低い、ウイルス感染細胞に対するＩＣ９０および／またはＩＣ５０を有し得る。いくつかの実施形態において、本明細書において記載されている化合物は、正常（非感染）細胞に対するＩＣ９０および／またはＩＣ５０よりも約３倍から１０倍低い、ウイルス感染細胞に対するＩＣ９０および／またはＩＣ５０を有し得る。いくつかの実施形態において、本明細書において記載されている化合物は、正常（非感染）細胞に対するＩＣ９０および／またはＩＣ５０よりも少なくとも１０倍低い、ウイルス感染細胞に対するＩＣ９０および／またはＩＣ５０を有し得る。いくつかの実施形態において、本明細書において記載されている化合物は、ウイルス感染および／または形質転換細胞に対する特異的な細胞毒性を有し得る。細胞毒性は、当業者に公知である任意の方法によって計測できる。
【００４２】
別段の規定がない限り、本明細書において描写されている構造は、該構造のすべての異性（例えば、鏡像異性、ジアステレオ異性および幾何（または立体配座））形態；例えば、各不斉中心についてのＲおよびＳ立体配置、（Ｚ）および（Ｅ）二重結合異性体、ならびに（Ｚ）および（Ｅ）立体配座異性体を含むように意味付けられている。したがって、本発明の化合物の単一の立体化学異性体、ならびに鏡像異性、ジアステレオ異性および幾何（または立体配座）混合物は、本発明の範囲内である。別段の規定がない限り、本発明の化合物の互変異性形態はすべて、本発明の範囲内である。
【００４３】
本明細書において使用される場合、用語「治療」、「治療する」および「治療すること」は、本明細書において記載されている通りの疾患または障害の進行を回復させ、軽減し、阻害すること、あるいは、講じられる対策が存在しない場合に生じるであろうものと比較した際の、本明細書において記載されている通りの障害または疾患の発生率または発症を遅延させ、解消しまたは低減させることを指す。いくつかの実施形態において、治療は、１つまたは複数の症状が発生した後に施されてよい。他の実施形態において、治療は、症状が存在しない場合に施されてよい。例えば、治療は、症状の発症前に（例えば、症状歴に照らして、かつ／または遺伝的もしくは他の感受性要因に照らして）感受性個体に施されてよい。治療は、例えば症状の再発を予防しまたは遅延させるために、症状が消散した後も続けてよい。
【００４４】
本発明の活性化合物は、場合により、本明細書において記載されている通りのウイルス感染の治療において有用な他の活性化合物および／または剤と組み合わせて（または併用して）投与され得る。２種以上の化合物を「組み合わせて」または「併用して」投与することは、２種の化合物が、複合効果、例えば相加および／または相乗効果を有するように、時間的に十分近接して投与されることを意味する。２種の化合物を、同時に（同時発生的に）または順次に投与してよく、あるいは、投与は、互いの前または後の短期間内に生じる２つ以上の事象であってよい。同時投与は、投与前に化合物を混合することによって、または同じ時点であるが異なる解剖学的部位に、もしくは異なる投与ルートを使用して、化合物を投与することによって行われ得る。いくつかの実施形態において、他の抗ウイルス剤を場合により同時発生的に投与してよい。
【００４５】
Ａ．活性化合物
本発明のいくつかの態様によれば、様々な生物学的特性を持つ化合物が提供される。本明細書において記載されている化合物は、ウイルス誘発腫瘍の治療に関わる生物学的活性を有する。
【００４６】
（１）いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、式Ｉの構造：
【化２】
2013501056.tif 000003
［式中、
Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２およびＲ２’は、独立に、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＲｉ、−ＳＲｉ、−ＮＨＲｉ、−ＮＲｉＲｉｉであり、かつ、ＲｉおよびＲｉｉは、独立に、水素または脂肪族であり、
Ｒ３は、薬学的に活性なホスホネート、ビスホスホネート、または薬理活性化合物のホスホネート誘導体であり、
Ｘは、存在する場合、
【化３】
2013501056.tif 000004
であり、かつｍは０から６までの整数である］
を有する。
【００４７】
いくつかの実施形態において、前記アルキル、アルケニル、アルキニルまたはアシル部分は、１から６個の二重結合または三重結合を場合により有する。
【００４８】
いくつかの実施形態において、Ｒ１およびＲ１’の少なくとも一方は−Ｈではない。
【００４９】
いくつかの実施形態において、ｍは、０、１または２である。一実施形態において、Ｒ２およびＲ２’はＨである。別の実施形態において、化合物は、治療用ホスホネートのエタンジオール、プロパンジオールまたはブタンジオール誘導体である。一実施形態において、本発明の化合物は、構造：
【化４】
2013501056.tif 000005
［式中、Ｒ１、Ｒ１’およびＲ３は、上記で定義した通りである］
を有するエタンジオールホスホネート種である。
【００５０】
いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、構造：
【化５】
2013501056.tif 000006
［式中、ｍは１であり、かつ、Ｒ１、Ｒ１’およびＲ３は、一般式において上記で定義した通りである］
を有するプロパンジオール種である。
【００５１】
一実施形態において、本発明の化合物は、構造：
【化６】
2013501056.tif 000007
［式中、ｍは１であり、Ｒ２はＨであり、Ｒ２’はＯＨであり、かつ、Ｃα上のＲ２およびＲ２’はいずれも−Ｈである］を有するグリセロール種である。グリセロールは、光学活性分子である。グリセロールに立体特異的番号付け規則を使用すると、グリセロールキナーゼによってリン酸化される位置はｓｎ−３位である。グリセロール残基を有する本発明の化合物において、Ｒ３部分は、グリセロールのｓｎ−３またはｓｎ−１位のいずれかで結合していてよい。
【００５２】
いくつかの実施形態において、Ｒ１は、式−Ｏ−（ＣＨ２）ｔ−ＣＨ３［式中、ｔは０〜２４である］を有するアルコキシ基である。一実施形態において、ｔは１１〜１９である。別の実施形態において、ｔは１５または１７である。
【００５３】
加えて、シドフォビル、環式シドフォビル、アデフォビル、テノフォビル等の抗ウイルスホスホネートを、本発明に従ってＲ３基として使用してよい。
【００５４】
（２）本発明の一態様によれば、抗ウイルス性化合物は、式Ａ、Ａ’またはＢの構造：
【化７】
2013501056.tif 000008
［式中、
Ｍは
【化８】
2013501056.tif 000009
であり、ＭのＯは−Ｐ（＝Ｘ）と結合しており、
ここで、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２およびＲ２’は、独立に、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＲｉ、−ＳＲｉ、−ＮＨＲｉ、−ＮＲｉＲｉｉであり、かつ、ＲｉおよびＲｉｉは、独立に、水素または脂肪族であり、
Ｑは、存在する場合、
【化９】
2013501056.tif 000010
であり、ｍは０から６までの整数であり、
Ｂは、水素、Ｆ、ＣＦ３、ＣＨＦ２、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨ＝ＣＨ２および−ＣＨ２Ｎ３からなる群から選択され、
Ｘは、セレン、硫黄または酸素（いくつかの実施形態において、酸素）であり、
Ｒ３は、ヒドロキシ、−ＯＲ２ａ、−ＢＨ３、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニルまたは−ＮＲ’Ｈであり（いくつかの実施形態において、Ｒ２はヒドロキシルである）、
Ｒ２ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２であり、
Ｒ’は、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ６〜１０アリール、または置換もしくは非置換アミノ酸残基であり、
Ｚは、少なくとも１個のＮを含む複素環式部分（いくつかの実施形態において、該複素環式部分はプリンまたはピリミジンから選択される）を含み、かつ
符号＊は、式Ａ、Ａ’またはＢ中のメチレン部分とＺとの結合点が、該複素環式部分の利用可能な窒素を介していることを指示する］
または薬学的に許容されるその塩を有する。
【００５５】
いくつかの実施形態において、抗ウイルス性化合物は、鏡像異性体、ジアステレオマー、ラセミ体、立体異性体、互変異性体、回転異性体またはそれらの混合物の形態である。
【００５６】
別の実施形態において、Ｂは−ＣＨ３または−ＣＨ２ＯＨである。
【００５７】
いくつかの実施形態において、Ｒ３はヒドロキシルである。
【００５８】
いくつかの実施形態において、Ｍは、−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−Ｃ１〜２４アルキ（ａｌｋｙ）、−Ｏ−（ＣＨ２）３−Ｏ−Ｃ１〜２４アルキル、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−Ｏ−Ｃ１〜２４アルキルまたは−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ（ＯＨ）−Ｓ−Ｃ１〜２４アルキルから選択される。別の実施形態において、Ｍは−Ｏ−（ＣＨ２）ａ−Ｏ−（ＣＨ２）ｔ−ＣＨ３［ここで、ａは２から４であり、かつｔは１１から１９である］である。いくつかの実施形態において、ａは２または３であり、かつｔは１５または１７である。いくつかの実施形態において、Ｍは−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）１５ＣＨ３または−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−（ＣＨ２）１７ＣＨ３である。一実施形態において、Ｍは−Ｏ−（ＣＨ２）３−Ｏ−（ＣＨ２）１５ＣＨ３または−Ｏ−（ＣＨ２）３−Ｏ−（ＣＨ２）１７ＣＨ３である。
【００５９】
一実施形態において、Ｍは、式ａ、ｂまたはｃ
【化１０】
2013501056.tif 000011
［式中、ＲａおよびＲｂは、独立に、−Ｈ、ハロゲン、−ＯＲｉ、−ＳＲｉ、−ＮＨＲｉ、−ＮＲｉＲｉｉであり、かつ、ＲｉおよびＲｉｉは、独立に、水素または脂肪族である］から選択される。いくつかの実施形態において、ＲｉおよびＲｉｉは、独立に、−（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル、−（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル、−（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニルまたは−（Ｃ１〜Ｃ２４）アシルである。
【００６０】
いくつかの実施形態において、ＲａまたはＲｂの少なくとも一方は水素ではない。いくつかの実施形態において、ＲａおよびＲｂは、−Ｈ、場合により置換されている−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル、−Ｏ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル、−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ２４）アシル、−Ｓ（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル、−Ｓ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニルおよび−Ｓ（Ｃ１〜Ｃ２４）アシルからなる群から独立に選択される。
【００６１】
いくつかの実施形態において、Ｍ、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２またはＲ２’は、独立に、−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル、−Ｏ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル、−Ｏ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル、−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ２４）アシル、−Ｓ（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル、−Ｓ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル、−Ｓ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル、−Ｓ（Ｃ１〜Ｃ２４）アシル、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル、−ＮＨ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル、−ＮＨ（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル、−ＮＨ（Ｃ１〜Ｃ２４）アシル、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アシル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルケイル））（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルケニル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキニル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル）、−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アシル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルキニル）または−Ｎ（（Ｃ１〜Ｃ２４）アシル）（（Ｃ２〜Ｃ２４）アルケニル）である。
【００６２】
一実施形態において、Ｚは、少なくとも１個の置換基によって場合により置換されていてよいプリンまたはピリミジンを含む。いくつかの実施形態において、少なくとも１個の置換基は、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、置換アミノ、二置換アミノ、硫黄、ニトロ、シアノ、アセチル、アシル、アザ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ６〜１０アリール、およびＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニルまたはＣ６〜１０アリールで置換されているカルボニル、ハロアルキル、ならびにアミノアルキルからなる群から選択され得る。
【００６３】
いくつかの実施形態において、Ｚは、アデニン、６−クロロプリン、キサンチン、ヒポキサンチン、グアニン、８−ブロモグアニン、８−クロログアニン、８−アミノグアニン、８−ヒドラジノグアニン、８−ヒドロキシグアニン、８−メチルグアニン、８−チオグアニン、２−アミノプリン、２，６−ジアミノプリン、チミン、シトシン、５−フルオロシトシン、ウラシル；５−ブロモウラシル、５−ヨードウラシル、５−エチルウラシル、５−エチニルウラシル、５−プロピニルウラシル、５−プロピルウラシル、５−ビニルウラシルまたは５−ブロモビニルウラシルから選択され得る。いくつかの実施形態において、Ｚは、グアニン−９−イル、アデニン−９−イル、２，６−ジアミノプリン−９−イル、２−アミノプリン−９−イルもしくはそれらの１−デアザ、３−デアザ、８−アザ化合物、またはシトシン−１−イルから選択される。いくつかの実施形態において、Ｚは、グアニン−９−イルまたは２，６−ジアミノプリン−９−イルである。
【００６４】
別の実施形態において、Ｚは、６−アルキルプリンおよびＮ６−アルキルプリン、Ｎ６−アシルプリン、Ｎ６−ベンジルプリン、６−ハロプリン、Ｎ６−アセチレンプリン、Ｎ６−アシルプリン、Ｎ６−ヒドロキシアルキルプリン、６−チオアルキルプリン、Ｎ２−アルキルプリン、Ｎ４−アルキルピリミジン、Ｎ４−アシルピリミジン、４−ハロピリミジン、Ｎ４−アセチレンピリミジン、４−アミノおよびＮ４−アシルピリミジン、４−ヒドロキシアルキルピリミジン、４−チオアルキルピリミジン、チミン、シトシン、６−アザシトシン、２−および／または４−メルカプトピリミジンを含む６−アザピリミジン、ウラシル、Ｃ５−アルキルピリミジン、Ｃ５−ベンジルピリミジン、Ｃ５−ハロピリミジン、Ｃ５−ビニルピリミジン、Ｃ５−アセチレンピリミジン、Ｃ５−アシルピリミジン、Ｃ５−ヒドロキシアルキルプリン、Ｃ５−アミドピリミジン、Ｃ５−シアノピリミジン、Ｃ５−ニトロピリミジン、Ｃ５−アミノピリミジン、Ｎ２−アルキルプリン、Ｎ２−アルキル−６−チオプリン、５−アザシチジニル、５−アザウラシリル、トリアゾロピリジニル、イミダゾロピリジニル、ピロロピリミジニル、ならびにピラゾロピリミジニルから選択される。塩基上の官能性酸素および窒素基は、必要または要望に応じて保護され得る。適切な保護基は当業者に周知であり、トリメチルシリル、ジメチルヘキシルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリルおよびｔ−ブチルジフェニルシリル、トリチル、アルキル基、アセチルおよびプロピオニル等のアシル基、メタンスルホニル、ならびにｐ−トルエンスルホニルを含む。好ましい塩基は、シトシン、５−フルオロシトシン、ウラシル、チミン、アデニン、グアニン、キサンチン、２，６−ジアミノプリン、６−アミノプリン、６−クロロプリンおよび２，６−ジクロロプリンを含む。
【００６５】
一実施形態において、Ｚは、
【化１１】
2013501056.tif 000012
［式中、式１〜４中の符号＊は、Ｎと式Ａ、Ａ’またはＢ中のメチレンとの結合点を指示する］
である。
【００６６】
Ｚの例は、米国特許第６，５８３，１４９号においてさらに記載されており、該特許は引用することにより本明細書の一部をなすものとする。
【００６７】
Ｚの追加の例は、一般式：
【化１２】
2013501056.tif 000013
［式中、
ＹはＮまたはＣＸであり、
Ｘは、Ｈ、ハロ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、ＣＮ、ＣＦ３、Ｎ３、ＮＯ２、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ６〜１０ヘテロアリールおよびＣＯＲｂからなる群から選択され、
Ｒｂは、Ｈ、ＯＨ、ＳＨ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アミノアルキル、Ｃ１〜６アルコキシおよびＣ１〜６チオアルキルからなる群から選択され、かつ
Ｒ１１は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニル、Ｃ３〜６シクロアルキル、Ｃ４〜１２アルキルシクロアルキル、Ｃ６〜１０アリール、およびＣ１〜６アルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ２〜６アルキニルまたはＣ６〜１０アリールで置換されているカルボニルからなる群から選択される］
の部分を含むがこれらに限定されない。
【００６８】
Ｚの追加の例は、一般式：
【化１３】
2013501056.tif 000014
［式中、
Ｙは−ＮＲａＲｂまたは−ＯＲａであり、
Ｌ２は、共有結合（すなわち、存在しない）、−Ｎ（−Ｒ１５）−、Ｎ（−Ｒ１５）Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−または−Ｓ（＝Ｏ）２−であり、
Ｒ１３は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ヘテロアルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ７〜１６アリールアルキル、Ｃ３〜１０カルボシクリル、Ｃ６〜１０ヘテロシクリルまたはＣ７〜１６ヘテロシクリルアルキルであり、
Ｒ１４は、Ｈ、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、−Ｏ（ＣＨ２）ｘＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ１５またはＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ１５であり、ここで、ｘは、２または３から１０、１５または２０であり、
Ｒ１５は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６ヘテロアルキル、Ｃ２〜６アルケニル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ７〜１６アリールアルキル、Ｃ３〜１０シクロアルキル、Ｃ６〜１０ヘテロシクリルまたはＣ７〜１６ヘテロシクロアルキル（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌａｌｋｙｌ）であり、かつ
Ｒａ、Ｒｂは、水素、Ｃ１〜６アルキルまたはＣ３〜６シクロアルキルおよびＣ３〜８ヘテロシクリルからなる群から独立に選択され、ここで、Ｃ３〜６シクロアルキルおよびＣ３〜８ヘテロシクリルは、１個または複数のＣ１〜５アルキルで場合により置換されていてよい］
の化合物を含むがこれらに限定されない。
【００６９】
Ｚの追加の例は、一般式：
【化１４】
2013501056.tif 000015
［Ｒ１６およびＲ１７は、水素、Ｃ１〜６アルキルもしくはＣ３〜６シクロアルキル、またはＣ３〜８ヘテロシクリルからなる群から独立に選択され、ここで、Ｃ３〜６シクロアルキルおよびＣ３〜８ヘテロシクリルは、１個または複数のＣ１〜５アルキルで場合により置換されていてよい］
の部分を含むがこれに限定されない。
【００７０】
本発明の例示的な化合物は、
【化１５Ａ】
2013501056.tif 000016
【化１５Ｂ】
2013501056.tif 000017
または薬学的に許容されるその塩
を含むがこれらに限定されない。
【００７１】
さらなる例示的な化合物を以下に示す。
【化１６】
2013501056.tif 000018
【００７２】
本発明のさらなる態様によれば、シドフォビル、テノフォビル、環式シドフォビルおよびアデフォビル等の非環式ヌクレオチドホスホネートの多様な脂質誘導体を、本明細書において提供される方法および組成物において活性剤として使用してもよい。一実施形態において、活性剤は、下記の構造：
【化１７】
2013501056.tif 000019
［式中、Ｗ１、Ｗ２およびＷ３は、それぞれ独立に、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ２、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−、−（Ｃ＝Ｏ）Ｏ−、−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−、−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−または−ＮＨ−であり、一実施形態において、それぞれ独立に、Ｏ、Ｓまたは−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−であり、
ｎは０または１であり、ｍは０または１であり、ｐは０または１であり、
Ｒ１は、場合により置換されているアルキル、アルケニルまたはアルキニル、例えば、Ｃ１〜３０アルキル、Ｃ２〜３０アルケニルまたはＣ２〜３０アルキニルであるか、あるいは一実施形態において、Ｒ１は、場合により置換されているＣ８〜３０アルキル、Ｃ８〜３０アルケニルまたはＣ８〜３０アルキニルであるか、あるいはＲ１は、Ｃ８〜２４アルキル、Ｃ８〜２４アルケニルまたはＣ８〜２４アルキニル（例えば、Ｃ１７、Ｃ１８、Ｃ１９、Ｃ２０、Ｃ２１、Ｃ２２、Ｃ２３もしくはＣ２４アルキル、アルケニルまたはアルキニル）であり、
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立に、場合により置換されているＣ１〜２５アルキル、Ｃ２〜２５アルケニルまたはＣ２〜２５アルキニルであり、
Ｄは、式Ｖ〜Ｘにおいて描写されている通りのメチレン基と直接連結しているシドフォビル、テノフォビル、環式シドフォビルまたはアデフォビルであってよい］を有する。例えば、Ｄがテノフォビルである場合、Ｄは、式：
【化１８】
2013501056.tif 000020
の部分である。
【００７３】
Ｄがシドフォビルである場合、Ｄは、式：
【化１９】
2013501056.tif 000021
の部分である（例えば、シドフォビルまたはテノフォビルは、ホスホネートヒドロキシル基を介して式Ｖ〜Ｘのメチレン基と直接連結している）。
【００７４】
式Ｖ〜Ｘのいくつかの実施形態において、
Ｗ１、Ｗ２およびＷ３は、それぞれ独立に、−Ｏ−、−Ｓ−または−Ｏ（ＣＯ）−であり、
ｎは０または１であり、ｍは０または１であり、ｐは０または１であり、
Ｒ１は、場合により置換されているＣ１２〜２４アルキルまたはアルケニル（例えば、Ｃ１２、Ｃ１３、Ｃ１４、Ｃ１５、Ｃ１６、Ｃ１７、Ｃ１８、Ｃ１９、Ｃ２０、Ｃ２１、Ｃ２２、Ｃ２３もしくはＣ２４アルキルまたはアルケニル）であり、
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立に、場合により置換されているＣ１〜２４アルキルもしくはＣ２〜２４アルケニル、またはＣ２〜２４アルキニルである。
Ｄは、式Ｖ〜Ｘにおいて描写されている通りのメチレン基と直接連結しているシドフォビル、テノフォビル、環式シドフォビルまたはアデフォビルである。
【００７５】
別の実施形態において、式Ｖ〜Ｘの活性化合物は、下記の構造の１つを有し、ここで、Ｒ１は、場合により置換されているＣ８〜２４アルキル、例えばＣ１２〜２４アルキルであり、Ｄは、式Ｖ〜Ｘにおいて描写されている通りのメチレン基と直接連結しているシドフォビル、テノフォビル、環式シドフォビルまたはアデフォビルである。
【００７６】
（３）本発明を行うために使用され得る、化合物、組成物、製剤および対象を治療する方法は、米国特許第６，７１６，８２５号、米国特許第７，０３４，０１４号、米国特許第７，０９４，７７２号、米国特許第７，０９８，１９７号、米国特許第７，４５２，８９８号および米国特許第７，６８７，４８０号において記載されているものを含むがこれらに限定されず、その開示は、引用することにより本明細書の一部をなすものとする。
【００７７】
いくつかの実施形態において、活性化合物は、構造式Ｃ：
【化２０】
2013501056.tif 000022
［式中、
Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２およびＲ２’は、独立に、−Ｈ、ハロゲン、−ＮＨ２、−ＯＨもしくは−ＳＨまたは場合により置換されている−ＸＲｉであり、ここで、Ｘは、Ｏ、Ｓ、−ＮＨまたは−ＮＲｉｉであり、かつ、ＲｉおよびＲｉｉは、独立に、−（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ２４）アルケニル、−（Ｃ１〜Ｃ２４）アルキニルまたは−（Ｃ１〜Ｃ２４）アシルである］
を有する。
【００７８】
いくつかの実施形態において、Ｒ１およびＲ１’の少なくとも一方は−Ｈではない。いくつかの実施形態において、前記アルケニルまたはアシル部分は、１から６個の二重結合を場合により有し、
Ｒ３は、任意選択のリンカーＬ上の官能基と、またはＣα上の利用可能な酸素原子と連結している、薬学的に活性なホスホネート、ビスホスホネート、または薬理活性化合物のホスホネート誘導体であり、
Ｘは、存在する場合、
【化２１】
2013501056.tif 000023
であり、
Ｌは、原子価結合、または式−Ｊ−（ＣＲ２）ｔ−Ｇ−［式中、ｔは１から２４の整数であり、ＪおよびＧは、独立に、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−または−ＮＨ−であり、かつ、Ｒは、−Ｈ、置換もしくは非置換アルキル、またはアルケニルである］の二官能性連結分子であり、
ｍは０から６の整数であり、かつ
ｎは０または１である。
【００７９】
いくつかの実施形態において、ｍ＝０、１または２である。いくつかの実施形態において、Ｒ２およびＲ２’はＨであり、このときプロドラッグは、治療用ホスホネートのエタンジオール、プロパンジオールまたはブタンジオール誘導体である。例示的なエタンジオールホスホネート種は、構造：
【化２２】
2013501056.tif 000024
［式中、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ３、Ｌおよびｎは、上記で定義した通りである］
を有する。
【００８０】
いくつかの実施形態において、プロパンジオール種は、構造：
【化２３】
2013501056.tif 000025
［式中、ｍ＝１であり、かつ、Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ３、Ｌおよびｎは、一般式において上記で定義した通りである］
を有する。
【化２４】
2013501056.tif 000026
［式中、ｍ＝１、Ｒ２＝Ｈ、Ｒ２’＝ＯＨであり、かつ、Ｃα上のＲ２およびＲ２’はいずれも−Ｈである］。グリセロールは、光学活性分子である。グリセロールに立体特異的番号付け規則を使用すると、グリセロールキナーゼによってリン酸化される位置はｓｎ−３位である。グリセロール残基を有する本発明の化合物において、−（Ｌ）ｎ−Ｒ３部分は、グリセロールのｓｎ−３またはｓｎ−１位のいずれかで結合していてよい。
【００８１】
別の実施形態において、Ｒ１は、式−Ｏ−（ＣＨ２）ｔ−ＣＨ３［式中、ｔは０〜２４である］を有するアルコキシ基である。より好ましくは、ｔは１１〜１９である。最も好ましくは、ｔは、１５または１７である。
【００８２】
例示的なＲ３基は、臨床的に有用であることが公知であるビスホスホネート、例えば、化合物：
エチドロネート：１−ヒドロキシエチリデンビスホスホン酸（ＥＤＨＰ）、
クロドロネート：ジクロロメチレンビスホスホン酸（Ｃ１２  ＭＤＰ）、
チルドロネート（Ｔｉｌｕｄｒｏｍａｔｅ）：クロロ−４−フェニルチオメチレンビスホスホン酸、
パミドロネート：３−アミノ−１−ヒドロキシプロピリデンビスホスホン酸（ＡＤＰ）、
アレンドロネート：４−アミノ−１−ヒドロキシブチリデンビスホスホン酸、
オルパドロネート：３ジメチルアミノ−１−ヒドロキシプロピリデンビスホスホン酸（ジメチル−ＡＰＤ）、
イバンドロネート：３−メチルペンチルアミノ−１−ヒドロキシプロピリデンビスホスホン酸（ＢＭ２１．０９５５）、
ＥＢ−１０５３：３−（１−ピロリジニル）−１−ヒドロキシプロピリデンビスホスホン酸、
リセドロネート（Ｒｉｓｅｄｍｎａｔｅ）：２−（３−ピリジニル）−１−ヒドロキシ−エチリデンビスホスホン酸、
アミノ−オルパドロネート：３−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ−１−アミノプロピリデン）ビスホスホネート（ＩＧ９４０２）
等を含む。
【００８３】
Ｒ３は、同じく本明細書における使用を企図されている、多様なホスホネート含有ヌクレオチド（またはそれらの対応するホスホネートに誘導体化され得るヌクレオシド）から選択されてもよい。好ましいヌクレオシドは、２−クロロ−デオキシアデノシン、１−β−Ｄ−アラビノフラノシル−シチジン（シタラビン、ａｒａ−Ｃ）、フルオロウリジン、フルオロデオキシウリジン（フロキシウリジン）、ゲムシタビン、クラドリビン、フルダラビン、ペントスタチン（２’−デオキシコホルマイシン）、６−メルカプトプリン、６−チオグアニン、および置換または非置換１−β−Ｄ−アラビノフラノシル−グアニン（ａｒａ−Ｇ）、１−β−Ｄ−アラビノフラノシル−アデノシン（ａｒａ−Ａ）、１−β−Ｄ−アラビノフラノシル−ウリジン（ａｒａ−Ｕ）等、不適切な細胞増殖によって引き起こされる障害を治療するために有用なものを含む。
【００８４】
ウイルス感染を治療するために有用なヌクレオシドは、Ｒ３基としての使用のために、それらの対応する５’−ホスホネートにも変換できる。そのようなホスホネート類似体は、典型的に、抗ウイルス性ヌクレオシドの５’−ヒドロキシルを置換するホスホネート（−ＰＯ３Ｈ２）またはメチレンホスホネート（−ＣＨ２−ＰＯ３Ｈ２）基のいずれかを含有する。５’−ヒドロキシルを−ＰＯ３Ｈ２で置換することによって誘導される抗ウイルス性ホスホネートのいくつかの例は、
【表１】
2013501056.tif 000027
である。
【００８５】
５’−ヒドロキシルを−ＣＨ２−ＰＯ３Ｈ２で置換することによって誘導される抗ウイルス性ホスホネートのいくつかの例は、
【表２】
2013501056.tif 000028
である。
【００８６】
他の例示的な抗ウイルス性ヌクレオチドホスホネートは、ｄｄＡ、ｄｄＩ、ｄｄＧ、Ｌ−ＦＭＡＵ、ＤＸＧ、ＤＡＰＤ、Ｌ−ｄＡ、Ｌ−ｄＩ、Ｌ−（ｄ）Ｔ、Ｌ−ｄＣ、Ｌ−ｄＧ、ＦＴＣ、ペンシクロビル等を含む抗ウイルス性ヌクレオシドから同様に誘導される。
【００８７】
加えて、シドフォビル、環式シドフォビル、アデフォビル、テノフォビル等の抗ウイルス性ホスホネートを、本発明に従ってＲ３基として使用してよい。
【００８８】
例えば、それぞれ引用することにより本明細書の一部をなすものとする下記の特許において開示されている化合物：米国特許第３，４６８，９３５号（エチドロネート）、米国特許第４，３２７，０３９号（パミドロネート）、米国特許第４，７０５，６５１号（アレンドロネート）、米国特許第４，８７０，０６３号（ビスホスホン酸誘導体）、米国特許第４，９２７，８１４号（ジホスホネート）、米国特許第５，０４３，４３７号（アジドジデオキシヌクレオシドのホスホネート）、米国特許第５，０４７，５３３号（非環式プリンホスホネートヌクレオチド類似体）、米国特許第５，１４２，０５１号（ピリミジンおよびプリン塩基のＮ−ホスホニルメトキシアルキル誘導体）、米国特許第５，１８３，８１５号（骨活性剤）、米国特許第５，１９６，４０９号（ビスホスホネート）、米国特許第５，２４７，０８５号（抗ウイルス性プリン化合物）、米国特許第５，３００，６７１号（Ｇｅｍ−ジホスホン酸）、米国特許第５，３００，６８７号（トリフルオロメチルベンジルホスホネート）、米国特許第５，３１２，９５４号（ビス−およびテトラキス−ホスホネート）、米国特許第５，３９５，８２６号（グアニジンアルキル−１，１−ビスホスホン酸誘導体）、米国特許第５，４２８，１８１号（ビスホスホネート誘導体）、米国特許第５，４４２，１０１号（メチレンビスホスホン酸誘導体）、米国特許第５，５３２，２２６号（トリフルオロメチルベンジルホスホネート（Ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｂｅｎｚｙｌｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅｓ））、米国特許第５，６５６，７４５号（ヌクレオチド類似体）、米国特許第５，６７２，６９７号（ヌクレオシド−５’−メチレンホスホネート）、米国特許第５，７１７，０９５号（ヌクレオチド類似体）、米国特許第５，７６０，０１３号（チミジレート類似体）、米国特許第５，７９８，３４０号（ヌクレオチド類似体）、米国特許第５，８４０，７１６号（ホスホネートヌクレオチド化合物）、米国特許第５，８５６，３１４号（チオ置換、窒素含有、複素環式ホスホネート化合物）、米国特許第５，８８５，９７３号（オルパドロネート）、米国特許第５，８８６，１７９号（ヌクレオチド類似体）、米国特許第５，８７７，１６６号（鏡像異性的に純粋な２−アミノプリンホスホネートヌクレオチド類似体）、米国特許第５，９２２，６９５号（抗ウイルス性ホスホノメトキシヌクレオチド類似体）、米国特許第５，９２２，６９６号（プリンのエチレンおよびアレンホスホネート誘導体）、米国特許第５，９７７，０８９号（抗ウイルス性ホスホノメトキシヌクレオチド類似体）、米国特許第６，０４３，２３０号（抗ウイルス性ホスホノメトキシヌクレオチド類似体）、米国特許第６，０６９，２４９号（抗ウイルス性ホスホノメトキシヌクレオチド類似体）；ベルギー特許第６７２２０５号（クロドロネート）；欧州特許第７５３５２３号（アミノ置換ビスホスホン酸）；欧州特許出願第１８６４０５号（ジェミナルジホスホネート）等、それらの薬理活性を改善するため、またはそれらの経口吸収を増大させるために、本発明に従って誘導体化され得る多くのホスホネート化合物が存在する。
【００８９】
ある特定のビスホスホネート化合物は、人間を含む哺乳動物において、スクアレンシンターゼを阻害し血清中コレステロールレベルを低減させる能力を有する。これらのビスホスホネートの例は、例えば、Ｐａｕｌｓらによる米国特許第５，４４１，９４６号および同５，５６３，１２８号、Ｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ  ｏｆ  ｌｉｐｏｐｈｉｌｉｃ  ａｍｉｎｅｓにおいて開示されており、これらはいずれも引用することにより本明細書の一部をなすものとする。本発明に従って化合物を阻害するこれらのスクアレンシンターゼの類似体およびヒトの脂質障害の治療におけるそれらの使用は、本発明の範囲内である。本発明のビスホスホネートは、引用することにより本明細書の一部をなすものとする米国特許第５，２７０，３６５号において開示される通り、歯周疾患を予防または治療するために、経口的にまたは局所的に使用され得る。
【００９０】
いくつかの実施形態において、活性化合物は、シドフォビル、アデフォビル、環式シドフォビルおよびテノフォビルからなる群から選択される抗ウイルス性化合物と、アルキルグリセロール、アルキルプロパンジオール、１−Ｓ−アルキルチオグリセロール、アルコキシアルカノールもしくはアルキルエタンジオールからなる群から選択されるアルコールまたは薬学的に許容されるその塩との共有結合によって形成されるホスホン酸エステルを有する。
【００９１】
いくつかの実施形態において、活性化合物は、５’−ヒドロキシル基が、アルキルエタンジオールと共有結合しているホスホネートまたはメチルホスホネートを置換した、抗ウイルス性ヌクレオシド化合物を含む。
【００９２】
本発明のある特定の化合物は、例えば糖部分中に１つまたは複数のキラル中心を保有し、故に光学活性形態で存在し得る。同じように、化合物がアルケニル基または不飽和アルキルもしくはアシル部分を含有する場合、化合物のシス−およびトランス−異性形態の可能性が存在する。追加の不斉炭素原子は、アルキル基等の置換基中に存在し得る。Ｒ−およびＳ−異性体、ならびにラセミ混合物とシス−およびトランス−異性体の混合物とを含むその混合物は、本発明によって企図されている。すべてのそのような異性体およびその混合物は、本発明に含まれることが意図されている。特定の立体異性体が望ましい場合、当業者に周知の方法により、不斉中心を含有し既に分割されている出発材料との立体特異的反応を使用して、または代替として、立体異性体の混合物をもたらす方法および既知の方法による分割によって、調製できる。
【００９３】
化合物が安定な非毒性酸または塩基塩を形成するために十分塩基性または酸性である事例において、薬学的に許容される塩としての化合物の投与が適切となり得る。薬学的に許容される塩は、親化合物の望ましい生物学的活性を保持し、かつ望ましくない毒物学的効果を付与しない塩である。薬学的に許容される塩は、薬学的に許容される無機または有機塩基および酸から誘導されるものを含む。適切な塩は、カリウムおよびナトリウム等のアルカリ金属；カルシウムおよびマグネシウム等のアルカリ土類金属；またはアンモニウムから誘導される塩、薬学分野において周知の数ある他の酸の中でも、ジシクロヘキシルアミンおよびＮ−メチル−Ｄ−グルカミン等の有機塩基とのアンモニウム塩を含む。いくつかの実施形態において、薬学的に許容される塩は、生理学的に許容されるアニオンを形成する酸と形成された有機酸付加塩、例えば、トシル酸塩、メタンスルホン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、マロン酸塩、酒石酸塩（ｔａｒｔａｒａｔｅ）、コハク酸塩、安息香酸塩、アスコルビン酸塩、α−ケトグルタル酸塩およびα−グリセロリン酸塩から選択される。硫酸塩、硝酸塩、重炭酸塩および炭酸塩を含む適切な無機塩も形成され得る。
【００９４】
塩を形成するために使用され得る例示的な作用物質は、（１）無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸；または有機酸、例えば、酢酸、クエン酸、フマル酸、アルギン酸、グルコン酸、ゲンチシン酸、馬尿酸、安息香酸、マレイン酸、タンニン酸、Ｌ−マンデル酸、オロチン酸、シュウ酸、サッカリン、コハク酸、Ｌ−酒石酸、アスコルビン酸、パルミチン酸、ポリグルタミン酸、トルエンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、メタンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、ポリガラクツロン酸等の酸、（２）アンモニア、一または二置換アンモニア；水酸化カリウム、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム等のアルカリ金属塩基；水酸化マグネシウム、水酸化カルシウム等のアルカリ土類塩基；エルアルギニン、ジエチルアミン、ジエチルアミノエタノール、ジシクロヘキシルアミン、エチレンジアミン、イミダゾール、Ｌ−リジン、２−ヒドロキシエチルモルホリン、Ｎ−メチル−グルカミン、カリウムメタノレート、亜鉛ｔｅｒｔ−ブトキシド等の有機塩基等の塩基を含むがこれらに限定されない。
【００９５】
本明細書において記載されている通りの活性化合物は、公知の手順、または当業者には明らかであろうその変形形態に従って調製できる。例えば、Ｐａｉｎｔｅｒら、Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｅｘａｄｅｃｙｌｏｘｙｐｒｏｐｙｌ−９−Ｒ−［２−（Ｐｈｏｓｐｈｏｎｏｍｅｔｈｏｘｙ）Ｐｒｏｐｙｌ］−Ａｄｅｎｉｎｅ，ＣＭＸ１５７，ａｓ  ａ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｆｏｒ  Ｈｕｍａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｖｉｒｕｓ  Ｔｙｐｅ  １  ａｎｄ  Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｂ  Ｖｉｒｕｓ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ５１、３５０５〜３５０９（２００７）およびＡｌｍｏｎｄらによる米国特許出願公開第２００７／０００３５１６号を参照されたい。
【００９６】
薬学的に許容される塩は、当技術分野において周知の標準的な手順を使用して、例えば、アミン等の十分に塩基性の化合物を適切な酸と反応させて生理学的に許容されるアニオンを産出することによって得ることができる。カルボン酸のアルカリ金属（例えば、ナトリウム、カリウムまたはリチウム）またはアルカリ土類金属（例えばカルシウム）塩を作製することもできる。
【００９７】
Ｂ．活性化合物の合成
本明細書において記載されている化合物の調製において利用される過程は、望ましい特定化合物によって決まる。特定置換基の選択および特定置換基の種々の可能な場所等の要因はいずれも、本発明の特定化合物の調製において辿られる経路において役割を果たす。それらの要因は、当業者には容易に認識される。
【００９８】
概して、本発明の化合物は、当技術分野において公知の標準的な技術によって、およびそれに類似する公知の過程によって調製できる。本発明の化合物を調製するための一般的方法を以下に説明する。
【００９９】
下記の記述において、すべての変数は、別段の注記がない限り、本明細書において記載されている式において定義されている通りである。下記の非限定的な記述は、本明細書において記載されている化合物を得るために使用され得る一般的方法論を例証するものである。
【０１００】
本発明において有用な化合物（またはプロドラッグ）は、米国特許第６，７１６，８２５号のスキームＩ〜ＶＩにおいて概ね描写されている通り、多様な手法で調製できる。以下に記載する一般的なホスホネートエステル化法は、例証目的でのみ提供され、いかようにも本発明を限定するものとして解釈されるべきでない。実際に、ホスホン酸とアルコールとの直接縮合のための数種の方法が開発された（例えば、Ｒ．Ｃ．Ｌａｒｏｃｋ、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ、ＶＣＨ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９８９、９６６頁およびその中で引用されている参考文献を参照）。実施例において記載されている化合物および中間体の単離および精製は、要望に応じて、例えば、濾過、抽出、結晶化、フラッシュカラムクロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー、蒸留、またはそれらの手順の組合せ等、任意の適切な分離または精製手順によって達成され得る。適切な分離および単離手順の具体的例証は、以下の実施例において記す。当然ながら、他の同等の分離および単離手順を使用してもよい。
【０１０１】
米国特許第６，７１６，８２５号のスキームＩは、パミドロネートまたはアレンドロネート等の第一級アミノ基を含有するビスホスホネートプロドラッグの合成を概説するものである。その中の実施例１は、１−Ｏ−ヘキサデシルオキシプロピル−アレンドロネート（ＨＤＰ−アレンドロネート）または１−Ｏ−ヘキサデシルオキシプロピル−パミドロネート（ＨＤＰ−パミドロネート）の合成のための条件を提供している。この過程において、ピリジン溶液中のジメチル４−フタルイミドブタノイルホスホネート（１ｂ、米国特許第５，０３９，８１９号において記載されている通りに調製したもの））およびヘキサデシルオキシプロピルメチルホスファイト（２）の混合物をトリエチルアミンで処理してビスホスホネートテトラエステル３ｂを生み出し、これをシリカゲルクロマトグラフィーによって精製する。Ｋｅｒｓ，Ａ．、Ｋｅｒｓ，Ｉ．、Ｓｔａｗｉｎｓｋｉ，Ｊ．、Ｓｏｂｋｏｗｓｋｉ，Ｍ．、Ｋｒａｓｚｅｗｓｋｉ，Ａ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、１９９５年４月、４２７  ４３０において記載されている通りのジフェニルホスファイトのエステル交換によって、中間体２を得る。このように、ピリジン溶液中のジフェニルホスファイトを、最初にヘキサデシルオキシプロパン−１−オールで、次いでメタノールで処理して、化合物２を提供する。
【０１０２】
該過程の重要な態様は、ヘキサデシルオキシプロパン−１−オールの代わりに他の長鎖アルコールを使用して、本発明の種々の化合物を生成できることである。アセトニトリル中のブロモトリメチルシランによる中間体３ｂの処理により、メチルエステルを選択的に開裂してモノエステル４ｂを生み出す。混合溶媒系（２０％メタノール／８０％１，４−ジオキサン）中のヒドラジンによる４ｂの処理は、示されている通り、フタルイミド保護基の除去を招く。所望のアレンドロネートプロドラッグを濾過によって収集し、メタノール性アンモニアでの処理によって三アンモニウム塩に変換する。
【０１０３】
米国特許第６，７１６，８２５号のスキームＩＩは、第一級アミノ基を欠くビスホスホネートの類似体の合成を例証するものであり、この事例において、処理ステップは、フタルイミド基での保護およびその後のヒドラジン分解による脱保護が不必要であることを除き、スキーム１のものと同様である。アミノ−オルパドロネート等の１−アミノ基を有するビスホスホネートは、米国特許第６，７１６，８２５号のスキームＩＩＩにおいて示されている過程を若干修正したものを使用して、本発明による類似体のプロドラッグに変換され得る。化合物２および３−（ジメチルアミノ）プロピオニトリルの混合物の乾燥ＨＣｌによる処理、続いてジメチルホスファイトの添加によりテトラエステル３を産出し、ブロモトリメチルシランでの脱メチル化後、ヘキサデシルオキシプロピル−アミノ−オルパドロネートを生み出す。
【０１０４】
米国特許第６，７１６，８２５号のスキームＩＶは、ホスホン酸エステルとしてではなく、脂質基を親化合物の第一級アミノ基と結合させる、ビスホスホネート類似体の合成を例証するものである。
【０１０５】
米国特許第６，７１６，８２５号のスキームＶは、シドフォビル、環式シドフォビルおよび他のホスホネートのアルキルグリセロールまたはアルキルプロパンジオール類似体の一般的合成を例証するものである。ジメチルホルムアミド中のＮａＨでの２，３−イソプロピリデングリセロール１の処理、続いてアルキルメタンスルホネートとの反応により、アルキルエーテル２を生み出す。酢酸での処理によるイソプロピリデン基の除去、続いてピリジン中のトリチルクロリドとの反応により、中間体３を生み出す。ハロゲン化アルキルによる中間体３のアルキル化により、化合物４を生じさせる。８０％酢酸水溶液によるトリチル基の除去により、Ｏ，Ｏ−ジアルキルグリセロール５を産出する。化合物５の臭素化、続いて環式シドフォビルまたは他のホスホネート含有ヌクレオチドのナトリウム塩との反応により、所望のホスホネート付加物７を生み出す。環式付加物の開環は、水酸化ナトリウム水溶液との反応によって遂行される。プロパンジオール種の化合物は、スキームＶにおける化合物５を１−Ｏ−アルキルプロパン−３−オールで代用することによって合成され得る。テノフォビルおよびアデフォビル類似体は、スキームＶの反応（ｆ）におけるｃＣＤＶをこれらのヌクレオチドホスホネートで代用することによって合成され得る。同様に、本発明の他のヌクレオチドホスホネートがこの方式で形成され得る。
【０１０６】
米国特許第６，７１６，８２５号のスキームＶＩは、例として１−Ｏ−ヘキサデシルオキシプロピル−アデフォビルを使用する本発明のヌクレオチドホスホネートの合成のための一般的方法を例証するものである。ヌクレオチドホスホネート（５ｍｍｏｌ）を乾燥ピリジンに懸濁させ、アルコキシアルカノールまたはアルキルグリセロール誘導体（６ｍｍｏｌ）および１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ｄｉｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌｃａｒｂｏｄｉｉｍｄｅ）（ＤＣＣ、１０ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を加熱還流し、薄層クロマトグラフィーによってモニターしながら縮合反応が完了するまで激しく撹拌する。次いで混合物を冷却し、濾過する。濾液を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲルに吸着させ、フラッシュカラムクロマトグラフィー（およそ９：１ジクロロメタン／メタノールでの溶離）によって精製して、対応するホスホネートモノエステルを生み出す。
【０１０７】
スキームＶＩＩ（Ｋｅｒｎら、ＡＡＣ  ４６（４）：９９１において図１として参照されるもの）は、シドフォビル（ＣＤＶ）および環式シドフォビル（ｃＣＤＶ）のアルコキシアルキル類似体の合成を例証するものである。図１において、矢印は、下記の試薬：（ａ）Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルモルホリノカルボキサミド、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド、ピリジン、１００℃；（ｂ）１−ブロモ−３−オクタデシルオキシエタン（ＯＤＥ）、または１−ブロモ−３−ヘキサデシルオキシプロパン（ＨＤＰ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、８０℃；（ｃ）０．５Ｍ  ＮａＯＨを指示している。
【０１０８】
当業者であれば、当業者に公知である任意の適用可能な方法を使用することにより、本願において開示されている塩を遊離酸に変換することができるはずである。
【化２５】
2013501056.tif 000029
【０１０９】
本明細書において記載されている通り、本発明の化合物は、上記で概ね例証されているもの、または本発明の特定のクラス、サブクラスおよび種によって例示されているもの等、１個または複数の置換基で場合により置換されていてよい。概して、用語「置換されている」は、明記された置換基のラジカルによる、所与の構造中の水素ラジカルの置き換えを指す。別段の指示がない限り、置換されている基は、該基の各置換可能な位置に置換基を有し得、任意の所与の構造における複数の位置が、明記された基から選択される複数の置換基で置換されていてよい場合、置換基は、すべての位置で同じであっても異なっていてもよい。本発明によって想定される置換基の組合せは、安定なまたは化学的に実現可能な化合物の形成を招くものとなり得る。
【０１１０】
Ｃ．医薬製剤および投与
一実施形態において、本発明は、本明細書において記載されている化合物を含む医薬組成物である。別の実施形態において、医薬組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含む。用語「薬学的に許容される担体」は、本明細書において使用される場合、対象への治療剤の送達のためのビヒクルとして使用される、それ自体は治療剤でない任意の物質を指す。薬学的に許容される担体、および種々の組成物の製造方法の例は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１８版、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．（１９９０）（米国特許出願第ＵＳ２００７／００７２８３１号も参照）において記載されているものを含むがこれらに限定されない。
【０１１１】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は、第Ｅ項において記載されている１種または複数の免疫抑制剤をさらに含む。
【０１１２】
活性成分を単独で投与することが可能である場合、該成分を医薬製剤として提示することが好ましい。本発明の製剤は、獣医学のためおよびヒト使用のためのいずれであっても、上記で定義した通りの少なくとも１種の活性成分を、その１種または複数の薬学的に許容される担体（添加剤、賦形剤等）および場合により他の治療成分と一緒に含む。担体（複数可）は、製剤の他の成分と適合し、そのレシピエントに有害でないという意味で「許容される」ものでなくてはならない。
【０１１３】
本発明の化合物は、通常の実務に準拠して選択される、慣例的な担体、賦形剤および添加剤とともに製剤化され得る。錠剤は、添加剤、流動促進剤、充填剤、結合剤、賦形剤等を含有することになる。水性製剤は、無菌形態で調製され、経口投与以外による送達が意図されている場合、概して等張性となる。製剤は、「Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ」（１９８６）において説明されているもの等の添加剤を場合により含有し、アスコルビン酸および他の酸化防止剤、ＥＤＴＡ等のキレート剤、デキストリン等の炭水化物、ヒドロキシアルキルセルロース、ヒドロキシアルキルメチルセルロース、ステアリン酸等を含む。
【０１１４】
哺乳動物、とりわけヒトに、有効投薬量の本発明の化合物を提供するために、任意の適切な投与ルートが用いられ得る。例えば、本発明の組成物は、経口、非経口（皮下、筋肉内、静脈内、皮内、髄腔内および硬膜外を含む）、吸入噴霧、局所、経直腸、経鼻、舌下、口腔内、膣内または埋込みレザバー投与等のための製剤に適切となり得る。いくつかの実施形態において、組成物は、経口的に、局所的に、腹腔内にまたは静脈内に投与される。これらの懸濁剤は、当技術分野において公知の技術に従い、適切な分散または湿潤剤および懸濁化剤を使用して製剤化され得る。許容されるビヒクルおよび溶媒の中でも、用いられ得るのは、水、リンゲル液および等張塩化ナトリウム溶液である。加えて、滅菌固定油が溶媒または懸濁媒として慣例的に用いられる。
【０１１５】
本発明の化合物およびその生理学的に許容される塩（以後、活性成分と総称する）は、治療される状態に適切な任意のルート、経口、経直腸、経鼻、局所（眼内、口腔内および舌下を含む）、膣内および非経口（皮下、筋肉内、静脈内、皮内、髄腔内および硬膜外を含む）を含む適切なルートによって投与され得る。好ましい投与ルートは、例えばレシピエントの状態に伴って変動し得る。
【０１１６】
薬学的に許容される油を、本発明の組成物において溶媒または懸濁媒として用いてよい。オレイン酸およびそのグリセリド誘導体等の脂肪酸は、注射用製剤において適宜含まれ、オリーブ油またはヒマシ油等の天然の薬学的に許容される油も、とりわけそのポリオキシエチル化バージョンで含まれる。本発明の組成物を含有する油は、カルボキシメチルセルロース、または乳剤および懸濁剤を含む薬学的に許容される剤形の製剤において一般的に使用される同様の分散剤等、長鎖アルコール賦形剤または分散剤も含有し得る。組成物は、適宜、界面活性剤（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）またはＳｐａｎ（登録商標）を含む非イオン性洗剤等）、他の乳化剤またはバイオアベイラビリティー増強剤をさらに含む。
【０１１７】
本発明の組成物は、カプセル剤、錠剤、懸濁剤または液剤を含むがこれらに限定されない経口的に許容される剤形の形態であってよい。経口剤形は、少なくとも１種の添加剤を含み得る。本発明の経口製剤において使用される添加剤は、賦形剤、不快な味または臭気をマスキングまたは相殺するために添加される物質、香味料、色素、香料、および組成物の外観を改善するために添加される物質を含み得る。本発明のいくつかの経口剤形は、組成物の用量単位の、経口投与に適したカプセル剤または錠剤等の不連続な物品への形成を可能にしまたは容易にする、崩壊剤、結合剤、接着剤、湿潤剤、ポリマー、滑沢剤または流動促進剤等の添加剤を適宜含む。本発明の添加剤含有錠剤組成物は、１種または複数の添加剤を本発明の化合物と、溶解、懸濁、ナノ粒子、微粒子、またはその制御放出、緩徐放出、プログラム放出、時限放出、パルス放出、持続放出もしくは長時間放出形態の組合せにおいて併せるステップを含む、任意の適切な調剤方法によって調製できる。
【０１１８】
経口投与に適した本発明の製剤は、所定量の活性成分をそれぞれ含有するカプセル剤、カシェ剤または錠剤等の不連続単位として、散剤または顆粒剤として、水性液体または非水性液体中の液剤または懸濁剤として、あるいは水中油型液体乳剤または油中水型液体乳剤として提示され得る。活性成分は、ボーラス剤、舐剤またはペースト剤としても提示され得る。
【０１１９】
錠剤は、場合により１種または複数の副成分とともに、圧縮または成型によって作製され得る。圧縮錠剤は、結合剤、滑沢剤、不活性賦形剤、保存剤、表面活性剤または分散剤と場合により混合されている散剤または顆粒剤等の易流動性形態の活性成分を、適切なマシン内で圧縮することによって調製できる。成型錠剤は、不活性液体賦形剤で湿らせた粉末状化合物の混合物を、適切なマシン内で成型することによって作製できる。錠剤は、場合によりコーティングされているかまたは切り込み線が入れられていてよく、その中の活性成分の緩徐または制御放出を提供するように製剤化されていてよい。
【０１２０】
口中への局所投与に適した製剤は、香味付けされた基剤、通常はスクロースおよびアカシアまたはトラガカント中に活性成分を含むロゼンジ剤、ゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアカシア等の不活性基剤中に活性成分を含むパステル剤、ならびに適切な液体担体中に活性成分を含む洗口剤を含む。
【０１２１】
経直腸投与用の製剤は、例えばココアバターまたはサリチレートを含む適切な基剤を有する坐剤として提示され得る。
【０１２２】
担体が固体である経鼻投与に適した製剤は、例えば２０から５００ミクロンの範囲内の粒子サイズ（２０から５００ミクロンの間の範囲内の粒子サイズを、３０ミクロン、３５ミクロン等、５ミクロン刻みで含む）を有する粗散剤を含み、鼻で吸い込む方式で、すなわち、鼻に接近して保持した散剤の容器から鼻孔を経由する急速吸入によって、投与される。担体が液体である場合、例えば鼻腔用スプレーまたは点鼻剤としての投与に適した製剤は、活性成分の水性または油性溶液を含む。エアゾール投与に適した製剤は、慣例的な方法に従って調製でき、ニューモシスチス肺炎の治療用のペンタミジン等、他の治療剤とともに送達され得る。
【０１２３】
膣内投与に適した製剤は、活性成分に加えて、適切であることが当技術分野において公知であるような担体を含有する、ペッサリー、リング、タンポン、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、フォーム剤またはスプレー製剤として提示され得る。
【０１２４】
非経口投与に適した製剤は、製剤を意図されているレシピエントの血液と等張にする、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤および溶質を含有し得る水性および非水性滅菌注射液、ならびに懸濁化剤および増粘剤を含み得る水性および非水性滅菌懸濁剤を含む。製剤は、単回用量または複数回用量容器、例えば、密封したアンプルおよびバイアル内に提示され得、滅菌液体担体、例えば注射用水を使用直前に添加するだけでよいフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存できる。即席の注射液および懸濁液は、先に記載した種類の滅菌粉末、顆粒剤および錠剤から調製できる。好ましい単位投薬量製剤は、本明細書において上記に列挙した通りの日用量もしくは単位分割日用量、またはその適切な画分の活性成分を含有するものである。
【０１２５】
特に上述した成分に加えて、本発明の製剤は、問題の製剤の種類を考慮して当該技術分野において慣例的な他の作用物質を含み得ること、例えば、経口投与に適した製剤は香味剤を含み得ることを理解すべきである。
【０１２６】
本発明の薬学的に許容される組成物は、活性構成要素が１種または複数の担体に懸濁または溶解されている、局所液剤、軟膏剤またはクリーム剤の形態であってよい。本発明の化合物の局所投与用の担体は、鉱油、流動ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化ロウおよび水を含むがこれらに限定されない。局所製剤が軟膏剤またはクリーム剤の形態である場合、適切な担体は、鉱油、ソルビタンモノステアレート、ポリソルベート６０、セチルエステルロウ、セテアリルアルコール、２オクチルドデカノール、ベンジルアルコールおよび水を含むがこれらに限定されない。いくつかの実施形態において、本発明の局所組成物は、スプレー剤の形態である。
【０１２７】
本発明の薬学的に許容される組成物は、経鼻、エアゾールによって、または吸入投与ルートによって投与されてもよい。そのような組成物は、医薬製剤の分野において周知の技術に従って調製され、ベンジルアルコールまたは他の適切な保存剤、バイオアベイラビリティーを増強するための吸収促進剤、フッ化炭素、および／または他の慣例的な可溶化または分散剤を用い、生理食塩水中溶液として調製され得る。いくつかの実施形態において、本発明の組成物の経鼻投与は、スプレー剤の形態である。噴霧適用のための任意の適切な担体が本発明において使用され得る。
【０１２８】
代替として、本発明の薬学的に許容される組成物は、経直腸投与用の坐剤の形態であってよい。坐剤は、作用物質を、室温では固体であるが直腸温では液体であり、したがって直腸内で融解して薬物を放出する、適切な非刺激性の添加剤と混合することによって調製できる。そのような材料は、ココアバター、蜜ロウおよびポリエチレングリコールを含む。
【０１２９】
加えて、本発明の化合物を含む医薬製剤は、非経口製剤の形態であってよい。用語「非経口」は、本明細書において使用される場合、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑液嚢内、胸骨内、髄腔内、肝内、病巣内および頭蓋内注射または注入技術を含む。
【０１３０】
ある特定の実施形態において、本発明の薬学的（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ）組成物は、経口投与用に製剤化される。ヒトへの経口投与では、投薬量範囲は、分割用量で体重１ｋｇにつき０．０１から１０００ｍｇである。一実施形態において、投薬量範囲は、分割用量で体重１ｋｇにつき０．１から１００ｍｇである。別の実施形態において、投薬量範囲は、分割用量で体重１ｋｇにつき０．５から２０ｍｇである。経口投与では、組成物は、治療される患者に対する投薬量の対症調整のために、１．０から１０００ミリグラムの活性成分、特に、１、５、１０、１５、２０、２５、５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、４００、５００、６００、７５０、８００、９００および１０００ミリグラムの活性成分を含有する錠剤またはカプセル剤の形態で提供され得る。
【０１３１】
任意の特定の患者のための具体的な投薬量および治療レジメンは、用いられる特定化合物の活性、投薬モード、年齢、体重、全身の健康、性別、食習慣、排泄率、薬物の組合せ、および治療を行う医師の判断、治療されている状態および該状態の重症度を含む多様な要因によって決まることも理解すべきである。そのような投薬量は、当業者によって容易に解明され得る。この投薬レジメンは、最適な治療応答を提供するように調整され得る。
【０１３２】
本発明は、上記で定義した通りの少なくとも１種の活性成分を獣医用担体と一緒に含む獣医用組成物をさらに提供する。獣医用担体は、組成物を投与する目的のために有用な材料であり、獣医学分野において別様に不活性または許容され、かつ活性成分と適合する、固体、液体または気体材料であってよい。これらの獣医用組成物は、経口的に、非経口的に、または任意の他の所望のルートによって投与され得る。
【０１３３】
本発明の化合物を使用して、活性成分として１種または複数の本発明の化合物を含有し、ここで該活性成分の放出は、頻度の少ない投薬を可能にするように、または所与の発明化合物の薬物動態もしくは毒性プロファイルを改善するように制御および調節され得る、制御放出医薬製剤（「制御放出製剤」）を提供することができる。不連続単位が１種または複数の本発明の化合物を含む、経口投与に適応する制御放出製剤は、慣例的な方法に従って調製できる。制御放出製剤は、種々のウイルス感染および／またはウイルス誘発腫瘍の治療または予防に用いられ得る。例示的なウイルス感染および／またはウイルス誘発腫瘍は、ヘルペスウイルス（ＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＶＺＶ等）、パピローマウイルス、ポリオーマウイルス（ＪＣウイルス、ＢＫウイルス、ＳＶ４０等）、レトロウイルス、アデノウイルス等のウイルスに関連するヒトウイルス感染または腫瘍を含むがこれらに限定されない。制御放出製剤を使用して、結核、マラリア、ニューモシスチス肺炎、ＣＭＶ網膜炎、ＡＩＤＳ、ＡＩＤＳ関連症候群（ＡＲＣ）および進行性全身性リンパ節症（ｌｙｍｐｈａｄｅｏｐａｔｈｙ）（ＰＧＬ）等のＨＩＶ感染および関連状態、ならびに多発性硬化症および熱帯性痙性不全対麻痺等のＡＩＤＳ関連神経学的状態を治療することもできる。本発明による制御放出製剤で治療され得る他のヒトレトロウイルス感染は、ヒトＴ細胞リンパ向性ウイルスおよびＨＩＶ−２感染を含む。本発明は、したがって、上述したヒトまたは獣医学的状態の治療または予防において使用するための医薬製剤を提供する。
【０１３４】
薬物動態増強剤。本発明の化合物は、薬物動態増強剤（時に「ブースター剤」とも称される）と組み合わせて用いられ得る。本発明の一態様は、本発明の化合物の薬物動態を増強するまたは「ブーストする」ために有効量の増強剤の使用を提供する。増強剤の有効量、例えば、本発明の活性化合物または追加の活性化合物を増強するために必要な量は、単独で使用される場合のそのプロファイルと比較した際に、化合物の薬物動態プロファイルまたは活性を改善するのに必要な量である。化合物は、増強剤の添加がない場合よりも効果的な薬物動態プロファイルを保有する。化合物の効能を増強するために使用される薬物動態増強剤の量は、好ましくは、治療量以下（例えば、患者における感染を治療的に処置するために慣例的に使用されるブースター剤の量を下回る投薬量）である。本発明の化合物の増強用量は、感染を治療するための治療量以下であるが、本発明の化合物の代謝変調を達成するには十分高いため、患者におけるそれらの暴露は、バイオアベイラビリティーの増大、血中レベルの増大、半減期の増大、時間対ピーク血漿濃度の増大、ＨＩＶインテグラーゼ、ＲＴもしくはプロテアーゼの阻害の増大／加速、および／または全身（ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ）クリアランスの低減によってブーストされる。薬物動態増強剤の一例は、ＲＩＴＯＮＡＶＩＲ（商標）（Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）である。
【０１３５】
組合せ。上記で注記した通り、本発明の組成物は、上記の第Ａ項において記載されている通りの活性化合物を、以下の第Ｅ項において記載されているような１種または複数（例えば、１、２、３種）の免疫抑制剤と、当技術分野において公知のものと類似の方式で組み合わせて含み得る。
【０１３６】
そのような組合せの具体例は、ダクリズマブ、バシリキシマブ、タクロリムス、シロリムス、ミコフェノレート（ナトリウムまたはモフェチルとして）、シクロスポリンＡ、グルココルチコイド、抗ＣＤ３モノクローナル抗体（ＯＫＴ３）、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）、抗ＣＤ５２モノクローナル抗体（キャンパス１−Ｈ）、アザチオプリン、エベロリムス、ダクチノマイシン、シクロフォスファミド、白金、ニトロソ尿素、メトトレキサート、アザチオプリン、メルカプトプリン、ムロモナブ、ＩＦＮガンマ、インフリキシマブ、エタネルセプト、アダリムマブ、タイサブリ（ナタリズマブ）、フィンゴリモドおよびそれらの組合せから選択される少なくとも１種の免疫抑制剤と組み合わせたＣＭＸ００１または薬学的に許容されるその塩を含むがこれらに限定されない。いくつかの実施形態において、医薬組成物は、ＣＭＸ００１、タイサブリ（ナタリズマブ）および薬学的に許容される担体を含む。
【０１３７】
Ｄ．使用方法
本発明の一態様は、対象（例えばヒト）における免疫抑制に関連するウイルス誘発性状態／疾患（例えば、ウイルス誘発腫瘍またはウイルス感染）を治療する方法であって、該対象に、治療有効量の本明細書において記載されている化合物を投与するステップを含む方法を提供する。一実施形態において、本明細書において記載されている化合物は、ウイルス複製および／またはウイルス感染／形質転換細胞を特異的に標的とする。例えば、ＣＭＸ００１は、ＢＫウイルスおよびＪＣウイルス感染細胞等のポリオーマウイルス感染細胞に対する特異性を実証する（以下の実施例２参照）。一実施形態において、本明細書において記載されている化合物は、ウイルス感染および／または形質転換細胞に対し、正常（非感染細胞）と比較して高い細胞毒性を有する。
【０１３８】
一態様によれば、本明細書において記載されている化合物を使用して、ウイルス誘発腫瘍を治療することもできる。例示的なウイルス誘発腫瘍は、脳がん、結腸直腸がん、上咽頭癌（ＮＰＣ）、バーキットリンパ腫（ＢＬ）、リンパ腫（例えば、Ｂ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、ダンカン症候群）、メルケル細胞癌（ＭＣＣ）、前立腺がん、肝細胞癌、子宮頸がん、肺がん、頭頸部扁平上皮がん、前立腺がん、乳がん、急性リンパ性白血病、成人急性骨髄性白血病、成人非ホジキンリンパ腫、脳腫瘍、小児がん、小児肉腫、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病、食道がん、有毛細胞白血病、腎臓がん、肝臓がん、多発性骨髄腫、神経芽細胞腫、口腔がん、膵臓がん、原発性中枢神経系リンパ腫、皮膚がんおよびそれらの組合せから選択される。一実施形態において、ウイルス誘発腫瘍は、パピローマウイルスに関連する子宮頸がんである。別の実施形態において、ウイルス誘発腫瘍は、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）に関連する移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）である。
【０１３９】
いくつかの実施形態において、ウイルス誘発腫瘍は、ポリオーマウイルス（ＢＫ、ジョン・カニンガムウイルス（ＪＣＶ）、メルケル細胞ウイルス（ＭＣＶ）、ＫＩポリオーマウイルス（ＫＩＶ）、ＷＵポリオーマウイルス（ＷＵＶ）、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）を含む）、パピローマウイルス（ヒトパピローマウイルス、ワタオウサギパピローマウイルス、ウマパピローマウイルスおよびウシパピローマウイルスを含む）、単純ヘルペスウイルス−１（ＨＳＶ−１）、単純ヘルペスウイルス−２（ＨＳＶ−２）、ヒトヘルペスウイルス６（ＨＨＶ−６）等のヒトヘルペスウイルスを含むがこれらに限定されないヘルペスウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）、リンホクリプトウイルス、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）（ヒトサイトメガロウイルス（ＨＣＭＶ）を含むがこれに限定されない）、オルトポックスウイルス、天然痘、牛痘、ラクダ痘、サル痘、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎ウイルス、大痘瘡および小痘瘡、ワクシニア、エボラウイルス、パピローマウイルス、アデノウイルスまたはポリオーマウイルス、ならびにそれらの組合せに関連する。
【０１４０】
一実施形態において、ウイルス誘発腫瘍は、ポリオーマウイルス、パピローマウイルス、ヘルペスウイルス、アデノウイルス、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）、ヒトサイトメガロウイルス（ＨＣＭＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルスまたはそれらの組合せに関連する。前記ウイルス誘発腫瘍が、ヒトパピローマウイルス、ワタオウサギパピローマウイルス、ウマパピローマウイルスおよびウシパピローマウイルスからなる群から選択されるパピローマウイルスに関連する、請求項４に記載の方法。
【０１４１】
いくつかの実施形態において、ウイルス誘発腫瘍は、ＢＫウイルスまたはＪＣＶに関連する。
【０１４２】
一実施形態において、本明細書において記載されている腫瘍は、サイトメガロウイルスに関連する結腸偽腫瘍；サイトメガロウイルスに関連する膠芽細胞腫、エプスタイン・バーウイルスに関連する胃がん、ＳＶ（４０）またはＣＭＶに関連する脳腫瘍、Ｂ型肝炎および／またはＣ型肝炎ウイルスに関連する肝臓がん、メルケル細胞ポリオーマウイルスに関連するメルケル細胞癌；ＥＢＶに関連するバーキットリンパ腫、ホジキンリンパ腫、移植後リンパ増殖性疾患（ＰＴＬＤ）または上咽頭癌、あるいは、ヒトパピローマウイルスに関連する頚部、肛門または陰茎のがんである。
【０１４３】
一実施形態において、対象はヒトである。一実施形態において、対象は免疫無防備状態の対象である。
【０１４４】
本明細書において使用される場合、免疫不全（または免疫機能不全）は、感染性疾患と闘う免疫系の能力が損なわれているまたは全く存在しない状況である。免疫無防備状態の対象は、任意の種類のまたは任意のレベルの免疫不全を有する対象である。例示的な免疫無防備状態の対象は、原発性免疫不全を持つ対象（生まれつき免疫系に欠陥がある対象）および続発性（後天性）免疫不全を持つ対象を含むがこれらに限定されない。加えて、続発性免疫不全の他の一般的な原因は、栄養失調、加齢および特定の投薬法（例えば、化学療法、疾患修飾性抗リウマチ薬、臓器移植後の免疫抑制薬、グルココルチコイド等の免疫抑制療法）を含むがこれらに限定されない。免疫系を直接的にまたは間接的に低下させる他の例示的な疾患は、各種のがん（例えば、骨髄および血球（白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫））、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）によって引き起こされる後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、慢性感染および自己免疫疾患（例えば、急性播種性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）、アジソン病、円形脱毛症、強直性脊椎炎、抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性内耳疾患、水疱性類天疱瘡、セリアック病、シャーガス病、慢性閉塞性肺疾患、クローン病、皮膚筋炎、１型真性糖尿病、子宮内膜症、グッドパスチャー症候群、バセドウ病、ギラン・バレー症候群（ＧＢＳ）、橋本病、化膿性汗腺炎、川崎病、ＩｇＡ腎症、特発性血小板減少性紫斑病、間質性膀胱炎、エリテマトーデス、混合性結合組織疾患、限局性強皮症、多発性硬化症（ＭＳ）、重症筋無力症、ナルコレプシー、神経筋緊張症、尋常性天疱瘡、悪性貧血、乾癬、乾癬性関節炎、多発性筋炎、原発性胆汁性肝硬変、関節リウマチ、統合失調症、強皮症、シェーグレン症候群、スティッフパーソン症候群、側頭動脈炎（「巨細胞性動脈炎」としても公知である）、潰瘍性結腸炎、血管炎、白斑、ウェゲナー肉芽腫症）を含むがこれらに限定されない。
【０１４５】
一実施形態において、対象は、免疫抑制剤を使用中の移植患者である。一実施形態において、移植患者は、腎臓、骨髄、肝臓、肺、胃、骨、精巣、心臓、膵臓および腸からなる群から選択される少なくとも１つの移植臓器を有する。
【０１４６】
いくつかの実施形態において、本明細書において記載されている化合物は、免疫抑制薬治療中の対象（例えば、移植患者または過敏性免疫系を患っている対象）、ある特定の種類の化学療法を受けている対象、またはヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）に感染している対象に適用される。
【０１４７】
さらに、一実施形態において、ウイルス誘発腫瘍は、脳がん、結腸直腸がん、上咽頭癌（ＮＰＣ）、バーキットリンパ腫（ＢＬ）、リンパ腫（例えば、Ｂ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、ダンカン症候群）、メルケル細胞癌（ＭＣＣ）、前立腺がん、肝細胞癌、子宮頸がんおよびそれらの組合せから選択される。
【０１４８】
本発明のいくつかの態様によれば、免疫抑制剤を必要としている対象について、本明細書において記載されている化合物は、ウイルス感染および／またはウイルス誘発腫瘍を治療するための免疫抑制剤と（同時発生的にまたは順次に）組み合わせて投与され得る。任意の適切な免疫抑制剤を、本明細書において記載されている化合物と組み合わせて使用してよい。例示的な免疫抑制剤を以下の第Ｅ項において記載する。
【０１４９】
一実施形態において、
【化２６】
2013501056.tif 000030
の構造を有する化合物または薬学的に許容されるその塩は、ウイルス感染および／またはウイルス誘発腫瘍を治療するためのタイサブリ（ナタリズマブ）である少なくとも１種の免疫抑制剤と組み合わせて投与され得る。
【０１５０】
Ｅ．ウイルス感染またはウイルス誘発腫瘍を治療するための免疫抑制剤との組合せ
本明細書において記載されている化合物は、免疫抑制投薬法を必要としている対象のウイルス感染またはウイルス誘発腫瘍を治療するための追加の免疫抑制剤と組み合わせて使用され得る。当業者に公知である任意の免疫抑制剤を、本明細書において記載されている化合物と組み合わせて使用してよい。例示的な免疫抑制剤は、ダクリズマブ、バシリキシマブ、タクロリムス、シロリムス、ミコフェノレート（ナトリウムまたはモフェチルとして）、シクロスポリンＡ、グルココルチコイド、抗ＣＤ３モノクローナル抗体（ＯＫＴ３）、抗胸腺細胞グロブリン（ＡＴＧ）、抗ＣＤ５２モノクローナル抗体（キャンパス１−Ｈ）、アザチオプリン、エベロリムス、ダクチノマイシン、シクロフォスファミド、白金、ニトロソ尿素、メトトレキサート、アザチオプリン、メルカプトプリン、ムロモナブ、ＩＦＮガンマ、インフリキシマブ、エタネルセプト、アダリムマブ、タイサブリ（ナタリズマブ）、フィンゴリモドおよびそれらの組合せを含むがこれらに限定されない。いくつかの実施形態において、医薬組成物は、ＣＭＸ００１およびタイサブリ（ナタリズマブ）を含む。
【０１５１】
追加の例示的な免疫抑制剤は、Ｍｕｋｈｅｒｊｅｅら、Ａ  ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｕｓｅｄ  ｆｏｒ  ｌｉｖｅｒ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、２００９巻、論文ＩＤ７０１４６４、およびＷｏｏｄｒｏｆｆｅら、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  ｃｏｓｔ−ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓ  ｏｆ  ｎｅｗｅｒ  ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  ｒｅｇｉｍｅｎｓ  ｉｎ  ｒｅｎａｌ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ：ａ  ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  ｒｅｖｉｅｗ  ａｎｄ  ｍｏｄｅｌｉｎｇ  ｓｔｕｄｙ、Ｈｅａｌｔｈ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ、９巻、２１号（２００５）においてさらに記載されている。
【０１５２】
Ｆ．実施例
ここで、下記の例を参照して、本発明をさらに詳細に記述する。しかしながら、これらの例は例証を目的として与えられるものであり、本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきでない。
【０１５３】
下記の実施例において、ＣＭＸ００１は、
【化２７】
2013501056.tif 000031
または薬学的に許容されるその塩である。
【０１５４】
下記の実施例において、シドフォビルは、
【化２８】
2013501056.tif 000032
である。
【実施例１】
【０１５５】
Ｉ  ＢＫウイルスに対するＣＭＸ００１の抗ウイルス活性
ＢＫウイルスの複製を阻害するＣＭＸ００１の活性を試験するために、ＢＫウイルスのストックをＨＦＦ細胞中で調製し、ウイルスストックの希釈物を使用して、初代ヒト尿細管上皮細胞（ＲＰＴＥＣ）を感染させた。次いで、感染細胞を含有するウェルにＣＭＸ００１を添加し、プレートを５日間インキュベートした。全ＤＮＡを該プレートから調製し、ウイルスのＤＮＡをｑＰＣＲによって定量化した。
【０１５６】
ＢＫウイルス複製に対するＣＭＸ００１のインビトロ活性を表１に示す。ＣＭＸ００１は、ＲＰＴＥＣにおいてＢＫウイルスに対する良好な活性を呈した。ＣＭＸ００１の活性は、シドフォビルよりも強力であった（表１参照）。陰性対照薬物であるガンシクロビルは、本質的に不活性であった。細胞株におけるアッセイ最適化により、多重感染がシドフォビルおよびＣＭＸ００１の有効性に衝撃を与えるらしいことも明らかにされた。
【表３】
2013501056.tif 000033
【０１５７】
ＩＩ  ＪＣウイルスに対するＣＭＸ００１の抗ウイルス活性
ＪＣウイルスを阻害するＣＭＸ００１の能力を試験するために、ＣＯＳ−７細胞に、０．２の推定ＴＣＩＤ５０でＪＣＶ（Ｍａｄ−４）を感染させた。３７℃で２時間インキュベーション後、ＣＭＸ００１の量を増大させることなく、または増大させて、上清を新鮮培地に置き換え、５日間インキュベートした。ＤＮＡ抽出後、ＪＣウイルスをｑＰＣＲによって定量化した。
【０１５８】
ＪＣウイルス複製を阻害するＣＭＸ００１のインビトロデータを表２に示す。表２に示されている通り、ＣＭＸ００１はＪＣウイルスに対して活性であった。
【表４】
2013501056.tif 000034
【実施例２】
【０１５９】
Ｉ．ＣＭＸ００１は初代ヒト尿細管細胞においてポリオーマウイルスＢＫ複製を阻害する
Ａ．材料および方法
Ｂｅｒｎｈｏｆｆらによって記載されている通りの初代ヒト近位尿細管上皮細胞（ＲＰＴＥＣ）、ＢＫＶ（Ｄｕｎｌｏｐ）およびすべての方法（Ｂｅｒｎｈｏｆｆら、Ｃｉｄｏｆｏｖｉｒ  ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ｐｏｌｙｏｍａｖｉｒｕｓ  ＢＫ  ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｒｅｎａｌ  ｔｕｂｕｌａｒ  ｃｅｌｌｓ  ｄｏｗｎｓｔｒｅａｍ  ｏｆ  ｖｉｒａｌ  ｅａｒｌｙ  ｇｅｎｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ、Ａｍ  Ｊ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  ８、１４１３〜１４２２（２００８）を参照）。唯一の例外として、細胞内または細胞外ＢＫＶ  ＤＮＡ負荷を定量化するための定量的ＰＣＲ（ｑＰＣＲ）は、ＬＴａｇ遺伝子も標的とする異なるプライマー／プローブセットで実施した（Ｈｉｒｓｃｈら、Ｊ．Ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ  ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｐｏｌｙｏｍａｖｉｒｕｓ  ｔｙｐｅ  ＢＫ  ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ  ｉｎ  ｒｅｎａｌ−ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  ｒｅｃｉｐｉｅｎｔｓ、Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ．、３４７、４８８〜４９６（２００２）を参照）。各実験の前に、ＣＭＸ００１をメタノール／水／水酸化アンモニウム（５０／５０／２）中１ｍｇ／ｍｌに新しく溶解した。それをＲＰＴＥＣ成長培地中でさらに希釈した。
【０１６０】
Ｂ．実験および結果
（１）阻害濃度ＩＣ９０の決定
ＢＫＶ後代に対するＣＭＸ００１の効果を調査するために、感染２時間後に漸増濃度のＣＭＸ００１を添加し、上清を感染７２時間後に収穫した。ＣＭＸ００１が細胞外ＢＫＶ負荷を濃度依存方式で低減させたことが観察された（図１ａ参照）。ウイルス流入を減じた場合、ＣＭＸ００１  ０．３１μＭは、阻害濃度ＩＣ９０を定義する平均９０％だけＢＫＶ負荷を低減させた。ＢＫＶ感染ＲＰＴＥＣの感染７２時間後における免疫蛍光染色は、ＣＭＸ００１濃度を増大させるにつれてＢＫＶ感染細胞の数が減少することを実証した（図１ｂ）。ＣＭＸ００１  ０．３１ｕＭで、ＢＫＶアグノタンパク質発現細胞におけるおよそ６０％の減少が見られた。ＬＴａｇを発現している細胞の数はあまり低減しなかったが、シグナル強度は未処理細胞におけるものよりも低かった。２．５ｕＭのＣＭＸ００１では、わずかな細胞のみがアグノタンパク質およびＬＴａｇ発現について陽性であったが、ウェル中の細胞総数は低減しているように思われた。５ｕＭのＣＭＸ００１では、弱くＬＴａｇ染色された細胞のみがわずかに観察されたがアグノタンパク質発現細胞は観察されず、総細胞数に対してはより顕著な効果があった。１０ｕＭのＣＭＸ００１では、ＢＫＶ感染細胞は観察されず、総細胞数はより一層低減した。結論として、ＣＭＸ００１は初期および後期ＢＫＶタンパク質の発現ならびに細胞外後代の産生を低減させたが、高濃度ではＲＰＴＥＣの増殖速度にも影響を及ぼすようであったということである。
【０１６１】
（２）ＲＰＴＥＣに対するＣＭＸ００１の効果（ＤＮＡ複製および代謝活性）
位相差顕微鏡法によるＲＰＴＥＣの検査は、ＣＭＸ００１  ０．３１μＭへの３日間の暴露中、生存能力低下の兆候を何ら明らかにしなかった。より感受性の高いアッセイを使用するために、非感染ＲＰＴＥＣにおけるＢｒｄＵ取り込みおよびＷＳＴ−１アッセイを使用する、宿主細胞ＤＮＡ複製および代謝活性を使用した。ＣＭＸ００１の添加は、非感染ＲＰＴＥＣのＤＮＡ複製（図２ａ）および代謝活性（図２ｂ）の両方を濃度依存方式で低減させた。未処理ＲＰＴＥＣと比較して、０．０８から１０μＭのＣＭＸ００１は、ＤＮＡ複製を１５％から９３％、および代謝活性を４１％から８８％、それぞれ減少させた。ＢＫＶ複製の９０％阻害を引き起こした０．３１μＭの濃度において、ＢｒｄＵ取り込みおよびＷＳＴ−１活性におけるおよそ２０％の低減が観察される。
【０１６２】
（３）ＢＫＶゲノム複製に対するＣＭＸ００１の効果
ＢＫＶゲノム複製がＣＭＸ００１の影響を受けたかを調査するために、感染２４〜７２時間後における細胞内ＢＫＶ負荷をｑＰＣＲによって計測した。記載されている通りのアスパルトアシラーゼ（ＡＣＹ）遺伝子を使用して、細胞内ＢＫＶ負荷を細胞数に正規化した（Ｂｅｒｎｈｏｆｆら、２００８；Ｒａｎｄｈａｗａら、Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＤＮＡ  ｏｆ  ｐｏｌｙｏｍａｖｉｒｕｓｅｓ  ＢＫ  ａｎｄ  ＪＣ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｋｉｄｎｅｙｓ．Ｊ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ．、１９２、５０４〜５０９（２００５）を参照）。未処理ＲＰＴＥＣと比較して、ＣＭＸ００１  ０．３１μＭは、細胞内ＢＫＶ負荷を、感染４８時間後において９４％、７２時間後において６３％低減させた（図３）。次いで、ＢＫＶ生活環の第２ステップである細胞内ＢＫＶゲノム複製に対するＣＭＸ００１の有意な阻害効果を同定することができる。このステップは、２つの機序によって：１．後期遺伝子転写のためのＤＮＡテンプレートを増大させること、および２．後期プロモーターからの転写を活性化することによって、ウイルスの後期遺伝子発現も増大させる、ＬＴａｇ発現を必要とすることが公知である（Ｃｏｌｅ，Ｃ．Ｎ．、Ｐｏｌｙｏｍａｖｉｒｉｎａｅ：Ｔｈｅ  Ｖｉｒｕｓｅｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｉｒ  Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ．Ｉｎ  Ｆｉｅｌｄｓ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ、第３版、１９９７〜２０４３頁、Ｂ．Ｎ．Ｆｉｅｌｄｓ、Ｄ．Ｍ．ＫｎｉｐｅおよびＰ．Ｈ．Ｈｏｗｌｅｙ編、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ−Ｒａｖｅｎ（１９９６））。
【０１６３】
（４）ＢＫＶ初期および後期遺伝子発現に対するＣＭＸ００１の効果
単一細胞レベルでのＬＴａｇの発現を調査するために、感染４８および７２時間後に免疫蛍光染色を実施した。感染４８時間後において、ＢＫＶ陽性細胞の数は、ＣＭＸ００１および未処理ウェルにおけるものとほぼ同じであった。感染７２時間後において、ＣＭＸ００１処理細胞は、より少ないＬＴａｇプロ細胞を発現したようであった（図４ａ）。感染４８および７２時間後における後期タンパク質発現を免疫蛍光染色によって検査すると、ＣＭＸ００１処理ＲＰＴＥＣにおいてアグノタンパク質（図４ａ）およびＶＰ１（データは図示せず）の有意な低減が観察された。ウエスタンブロッティングにより、ＶＰ１の減少は感染４８および７２時間後においてそれぞれ８６％および６３％であることが分かり（図４ｂ）、一方、ＬＴａｇ染色は感染４８および７２時間後においてそれぞれ３３％および３０％低減したことが分かった。興味深いことに、免疫蛍光法は、最大２．５μＭのＣＭＸ００１濃度を持つ未処理細胞にも匹敵するレベルでアグノタンパク質を発現するＣＭＸ００１処理培養物において、いくつかの治療抵抗性細胞も明らかにした。ＣＭＸ００１は後期タンパク質発現を有意に低減させるだけでなく、感染の後期の時点において初期タンパク質発現も阻害すると結論付けられた。
【０１６４】
（５）細胞外ＢＫＶ負荷におけるＣＭＸ００１の時間経過
ＢＫＶ後代に対するＣＭＸ００１の効果を経時的に検査するために、処理および未処理細胞の上清を指示された時点で収穫した。以前に記載された通り（Ｂｅｒｎｈｏｆｆら、２００８）、未処理ＲＰＴＥＣ中におけるＢＫＶ（Ｄｕｎｌｏｐ）の最初の生活環の完了には、４８から７２時間の間を要する。感染４８時間後に、未処理細胞からの上清においてＢＫＶ負荷の増大が観察されたが、感染４８時間後のＣＭＸ００１処理細胞においては流入ウイルスのみが検出できた。７２時間では、未処理およびＣＭＸ００１処理細胞の両方においてウイルス負荷の増大が見られたが、ＣＭＸ００１処理細胞からの上清におけるＢＫＶ負荷は、未処理細胞におけるものよりも８４％低かった（１．１３×１０８Ｇｅｑ／ｍｌ）（図５）。ＣＭＸ００１処理ＲＰＴＥＣにおける後代産生は、遅延し得ると結論付けられる。
【０１６５】
（６）感染前におけるＲＰＴＥＣの処理
ウイルス接種前における細胞の前処理によってＢＫＶ感染を阻害し得るか否かを調査するために、ＲＰＴＥＣを４時間処理し、かつＣＭＸ００１を感染２０時間前に完全成長培地によって置き換えるか、または細胞を感染２４時間前に２３時間処理するがＣＭＸ００１を感染１時間前に完全成長培地で置き換えるかのいずれかとした。感染２０時間前に終了する４時間の処理は感染７２時間後のＢＫＶ負荷にほとんど効果を及ぼさなかったが、感染１時間前までの２３時間の処理は、ウイルス負荷を約５０％低減させた（図６）。故に、ＣＭＸ００１前処理は、ＢＫＶ複製を低減させるが予防しない。
【０１６６】
（７）ＣＭＸ００１の安定性
ＣＭＸ００１の安定性を検査するために、ストック溶液１ｍｇ／ｍｌを４または−２０℃で１週間置き、次いで０．３１ｕＭに希釈し、感染３日後にＢＫＶ感染ＲＰＴＥＣにおける細胞外ＢＫＶ負荷を計測することにより、その抗ウイルス効果について試験した。新しく調製した薬物と比較して、４℃で保存した薬物は６０％未満の活性を有し、一方、−２０℃で保存した薬物はおよそ９０％の活性を有していた（図７）。
【０１６７】
Ｃ．考察
ＢＫＶ感染ＲＰＴＥＣをＣＭＸ００１で処理することによる暫定結果を、図１〜７および図１〜７に関連する上記の考察に示した。ＣＭＸ００１は、ＣＤＶよりも約４００倍低い濃度におけるＢＫＶゲノム複製のレベルでＢＫＶ感染を阻害する（ＣＤＶ  ４０ｕｇ／ｍｌ＝１２７ｕＭ対ＣＭＸ００１  ０．３１ｕＭ）。０．３１ｕＭの濃度のＣＭＸ００１は、ＩＣ９０を定義するおよそ９０％、細胞外ＢＫＶ負荷を低減させた。同じＣＭＸ００１濃度は、非感染細胞における細胞ＤＮＡ複製を２２％、および代謝活性を２０％減少させた。しかしながら、先の調査（Ｂｅｒｎｈｏｆｆら、２００８）において、ＢＫＶ感染は細胞ＤＮＡ複製を約４０％、および代謝活性を２０％前後（ｒｏｕｎｄ）増大させ、したがって、ＣＭＸ００１  ０．３１ｕＭを使用してＢＫＶ−感染細胞を治療すると、ＤＮＡ複製および代謝活性の両方が非感染細胞のレベルになるという仮説が成り立つことが示されているものがある。
【０１６８】
０．３１ｕＭのＣＭＸ００１は、感染４８時間後にＢＫＶ  ＤＮＡ複製を９４％低減させる。同時に、ＶＰ１発現は８６％低減する。しかしながら、感染７２時間後において、ＤＮＡ複製の減少はわずか６３％である。この矛盾は、感染上清に対する効果を含むさらなる研究を必要とする。
【０１６９】
感染２４、４８および７２時間後に細胞外ＢＫＶ負荷を計測したところ、感染４８時間後のＣＭＸ００１処理細胞において流入のみが検出可能であり、感染４８時間後よりも前に放出されるウイルスは極めて少ないまたは無いことを指示していた。感染７２時間後において、ＢＫＶ負荷におけるごくわずかな増大が観察され、未処理細胞と比較して８４％の低減に相当するものであった。
【０１７０】
ＢＫＶ複製を予防し得る感染前のＣＭＸ００１によるＲＰＴＥＣの前処理の効果を検査するための実験を行い、結果を上記に示す。感染２４時間前の４時間の前処理は、ＢＫＶ複製を阻害しなかった。しかしながら、感染１時間前までの２４時間の前処理は、ウイルス負荷を約５０％低減させた。故に、細胞の前処理は、ＢＫＶ複製を部分的に阻害することになる。
【０１７１】
感染７２時間後のＣＭＸ００１  ＩＣ９０処理細胞およびＣＤＶ  ＩＣ９０処理細胞の免疫蛍光染色を比較すると（Ｂｅｒｎｈｏｆｆら、２００８）、感染７２時間後のＬＴ−ａｇ発現は、ＣＤＶによってよりもＣＭＸ００１によって、より低減するようである。ＣＤＶに関しては、ＩＣ９０よりも８倍高いＣＭＸ００１濃度においても治療抵抗性細胞が存在していた。ＣＭＸ００１は有機アニオン輸送体に依存しないため、細胞内におけるこの輸送体の選択的発現によって該現象を説明することはできない。
【０１７２】
各ＣＭＸ００１実験について、新鮮なストック溶液を調製した。これにより、実験ごとの濃度変動をわずかにすることができた。そこで、ＣＭＸ００１ストック溶液を保存することの効果を試験した。４℃または−２０℃における１週間のＣＭＸ００１の保存は、抗ウイルス活性を減少させた。しかしながら、保存したＣＭＸ００１と新しく調製したＣＭＸ００１との異なる活性が、ストックにおけるわずかな濃度差によるものである可能性は排除できない。
【０１７３】
結論として、初代ヒト近位尿細管上皮細胞におけるＢＫウイルス複製に対するＣＭＸ００１のＩＣ９０は０．３１μＭであったということである。非感染細胞において、０．３１μＭのＣＭＸ００１は、代謝活性およびＤＮＡ複製をおよそ２０％阻害した。
【０１７４】
加えて、ＣＭＸ００１はＣＤＶのように、最初のＬＴ−ａｇ発現の下流の初代ヒトＲＰＴＥＣにおけるＢＫＶ複製を阻害する。おそらく、より好適な取り込み（ｕｐｔａｋｅ）により、ＲＰＴＥＲＣＳにおけるＣＭＸ００１についてのＩＣ９０は、ＣＤＶについてのものよりも４１０倍低い。宿主細胞毒性は、ＣＤＶに匹敵するようである。ＢＫＶ治療におけるＣＭＸ００１の明らかな利点は、経口投与が可能なことである。
【０１７５】
ＩＩ．ＣＭＸ００１によるポリオーマウイルスＪＣ複製の阻害
Ａ．材料および方法
（１）細胞培養物
ＣＯＳ−７細胞をＤＭＥＭ−５％中で成長させた。前駆細胞に由来する星状膠細胞を、ゲンタマイシンを補充したＭＥＭ−Ｅ−１０％中に維持した。感染ＣＯＳ−７細胞からのＪＣＶ  Ｍａｄ−４（ＡＴＣＣ  ＶＲ−１５８３）上清に、１ｍｌ当たり１０４．５のＴＣＩＤ５０を加えたものを、培養細胞の感染に使用した。
【０１７６】
（２）感染およびＣＤＶ処理
ＣＯＳ−７または星状膠細胞に、６０〜７０％の集密で、ＪＣＶ（Ｍａｄ−４）を０．２の推定ＴＣＩＤ５０で感染させた。３７℃で２時間インキュベーション後、ＣＭＸ００１の濃度を増大させることなく、または増大させて、上清を新鮮培地に置き換えた。ＣＭＸ００１をメタノール／水／水酸化アンモニウム（５０／５０／２）中１ｍｇ／ｍｌに新しく溶解し、次いで、それぞれの成長培地中でさらに希釈した。
【０１７７】
（３）ＪＣＶゲノムのトランスフェクション
リポフェクタミン２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を製造業者の取扱説明書に従って０．８：１のＤＮＡ：脂質比で使用することにより、再連結したＪＣＶ  Ｍａｄ−４  ＤＮＡを５０％から７０％集密的ＣＯＳ−７細胞にトランスフェクトした。
【０１７８】
（４）免疫蛍光法
リン酸緩衝生理食塩水、ｐＨ６．８（ＰＢＳ）中４％のｐ−ホルムアルデヒド（ＰＦＡ）で、室温にて２０分間細胞を固定し、ＰＢＳ中０．２％のトリトンＸ−１００で、室温にて１０分間透過化した。室温にて５分間、ＰＢＳで２回洗浄した後、ＰＦＡをＰＢＳ中０．５ＭのＮＨ４Ｃｌで室温にて７分間クエンチし、続いて、室温にて５分間、ＰＢＳで２回洗浄した。非特異的結合部位のブロッキングを、ＰＢＳ中３％の乳で３７℃にて１５分間行った。一次抗体（３％乳ＰＢＳ中ウサギ抗ＶＰ１  １：３００）を、３７℃で４５〜６０分間インキュベートした。細胞を、振とう器上室温にて５分間、ＰＢＳで２回洗浄した。二次抗体（ニワトリ抗ウサギＣｙ３  １：２０００）、およびＤＮＡを染色するための５μｇ／ｍｌのヘキスト３３３４２色素を細胞に与え、次いで３７℃で４５〜６０分間インキュベートした。細胞をＰＢＳで２回、前述同様に洗浄した。カバーガラスをＮ没食子酸プロピル上に載置した。
【０１７９】
（５）リアルタイムＰＣＲ
１００ｕｌの細胞培養物上清、ならびにＣｏｒｂｅｔｔ  Ｘ−トラクタージーンおよびＣｏｒｂｅｔｔ  ＶＸ試薬（Ｑｉａｇｅｎ、Ｈｏｍｂｒｅｃｈｔｉｋｏｎ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）からのＤＮＡ抽出後に、ＪＣＶ負荷を定量化した。ＪＣＶ  ＤＮＡ試料の検出のためのリアルタイムＰＣＲプロトコールは、ＪＣＶラージＴコード配列を標的としており、（５）の他の箇所に記載されている。
【０１８０】
（６）ＷＳＴ−１アッセイ
生存細胞におけるミトコンドリアデヒドロゲナーゼの比色ＷＳＴ−１アッセイ（Ｒｏｃｈｅ）によって、代謝活性をモニターした。ＣＯＳ−７細胞を９６ウェルプレートに播種し、ＣＭＸ００１を指示された濃度で添加した。ＷＳＴ−１開裂生成物を、４５０ｎｍ（試料）および６５０ｎｍ（バックグラウンド）で計測した。ＷＳＴ−１プラス培地単独では、ブランクとして役立った。
【０１８１】
（７）ＢｒｄＵアッセイ
「細胞増殖ＥＬＩＳＡ、ＢｒｄＵ」キット（Ｒｏｃｈｅ）を使用する、増殖性細胞におけるＤＮＡへのＢｒｄＵ取り込みの比色計測によって、ＤＮＡ合成を定量化した。ＣＯＳ−７細胞を９６ウェルプレートに播種し、ＣＭＸ００１を指示された濃度で添加した。４５０ｎｍ（試料）および６５０ｎｍ（バックグラウンド）における吸光度を、基質の添加２時間後に決定した。
【０１８２】
Ｂ．実験および結果
（１）細胞培養物中におけるＪＣＶ  Ｍａｄ−４の複製
ＣＯＳ−７および星状膠細胞培養物中におけるＪＣＶ  Ｍａｄ−４の複製特徴を第一に調査した。感染７日後（ｄ．ｐ．ｉ．）、ＪＣＶ感染ＣＯＳ−７細胞を固定し、間接免疫蛍光法によって染色した。図８に示されている通り、ＪＣＶ後期ウイルス性カプシドタンパク質ＶＰ１は、ＪＣＶがＣＯＳ−７細胞においてウイルスの生活環を完了していることを示唆する赤色シグナルとして検出可能である（図８、左パネル）。ヘキスト３３３４２でのＤＮＡの対比染色は、核を青色にマークした（図８、中央パネル）。両方の写真をマージしたもの（図８、右パネル）は、ＪＣＶ  Ｍａｄ−４  ＶＰ１が感染ＣＯＳ−７細胞の核に存在することを指示していた。さらに高倍率では、ＶＰ１シグナルは核全体にわたって分散していたが、核小体は残してあった（図８、左パネル）。核において強度のＶＰ１シグナルを示す細胞は、細胞質においても拡散染色パターンを有していた。ＪＣＶ感染細胞は、同じ細胞培養物中に存在する非感染細胞（図８、右パネル）と比較して拡大した核（図８、中央パネル）を示した。データは、ＣＯＳ−７細胞がＪＣＶ  Ｍａｄ−４感染に感受性であること、および感染７日後に細胞の約３０％がＪＣＶ生活環の後期に入ったことを実証している。
【０１８３】
星状膠細胞にＪＣＶ  Ｍａｄ−４を感染させる同様の実験を実施した。感染７日後、ＪＣＶ  ＶＰ１の細胞内分布は、ＪＣＶ  Ｍａｄ−４感染ＣＯＳ−７細胞と同様であるように思われた（図９、左パネル、赤色）。ヘキスト３３３４２でのＤＮＡの対比染色は、星状膠細胞核を青色にマークした（図９、中央パネル）。両方の写真をマージしたものは、ＪＣＶ−Ｍａｄ４  ＶＰ１が感染星状膠細胞の核に存在することを指示していた。ＣＯＳ−７細胞のＪＣＶ  Ｍａｄ−４感染と比較すると、有意に少ない星状膠細胞が後期タンパク質ＶＰ１について陽性であった（図９、右パネル）。さらに高倍率では、ＶＰ１シグナルは、主に核小体を残した核において、および星状膠細胞の細胞質において、やや拡散パターンで見られた（図９、左パネル）。ＤＮＡの染色は、ＪＣＶ感染細胞（図９、右パネル）に属する大核が細胞物中に存在することを指示していた（図９、中央パネル）。星状膠細胞も予想通りウイルス性初期タンパク質ラージＴ抗原（ＬＴ）が染色され、ＬＴは感染細胞の核内に位置付けられていた（データは図示せず）。後期タンパク質ＶＰ１について陽性なすべての細胞がＬＴも発現し、ＬＴについてのみ陽性な星状膠細胞はわずかであった。この観察は、ＪＣＶ  Ｍａｄ−４が予想通りポリオーマウイルスの生活環を経た（ｐｒｏｃｅｄｅｄ）ことを指示していた。感染７日後における集密度は、星状膠細胞が成長の遅い細胞であり、故に、ＪＣＶ複製がヒト近位尿細管上皮細胞におけるＢＫＶ複製と比較して長期にわたっていることを指示していた。本発明者らの観察は、７日間の成長期間が効率的なＪＣＶ複製に最適ではないことを示唆している。
【０１８４】
星状膠細胞におけるＪＣＶ  Ｍａｄ−４の緩徐な複製速度を考慮して、感染１４日後における感染状況を検査した。結果は、初期ＬＴａｇ（データは図示せず）および後期ＶＰ１について陽性である細胞の数がおよそ４倍増大したことを指示していた（図１０）。このように、星状膠細胞はＪＣＶ  Ｍａｄ−４複製を支援したが、生活環はＣＯＳ−７細胞において観察されるものと比較してかなり長期にわたっているようであった。
【０１８５】
次に、ＣＯＳ−７細胞にトランスフェクトされる再連結したＪＣＶ  Ｍａｄ−４  ＤＮＡの複製能を試験した。このアプローチは、ＪＣＶ突然変異株に対するＣＭＸ００１有効性を試験するための逆遺伝学を実施するのに役立つツールとなるであろう。図１１に示されている通り、ＪＣＶ後期ウイルス性カプシドタンパク質ＶＰ１は、ＪＣＶが、トランスフェクション７日後（ｄ．ｐ．ｔ．）に、ＣＯＳ−７細胞において複製能を有することを指示する赤色シグナルとして検出可能である（図１１、左パネル）。ヘキスト３３３４２色素でのＤＮＡの対比染色は、核を青色にマークした（図１１、中央パネル）。両方の写真をマージしたもの（図１１、右パネル）は、ＪＣＶ  Ｍａｄ−４  ＶＰ１がトランスフェクトＣＯＳ−７細胞の核に存在することを指示していた。さらに高倍率では、ＶＰ１シグナルは核全体にわたって分散していたが、核小体は残してあった（図１１、左パネル）。核において強度のＶＰ１シグナルを示す細胞は、細胞質においても拡散染色パターンを有していた。ＪＣＶトランスフェクト細胞は、同じ細胞培養物中に存在する正常細胞（図１１、右パネル）と比較して拡大した核（図１１、中央パネル）を示した。データは、ＣＯＳ−７細胞がＪＣＶ  Ｍａｄ−４  ＤＮＡトランスフェクションに感受性であること、および感染７日後までに細胞の約１５％がＪＣＶ生活環の後期に入ったことを実証している。トランスフェクション後、後期タンパク質ＶＰ１の細胞内染色パターンは、ＪＣＶ  Ｍａｄ−４感染後のＶＰ１染色と同一であった。
【０１８６】
（２）阻害濃度ＩＣ９０の決定
ＪＣＶ後代に対するＣＭＸ００１の効果を調査するために、感染２時間後に漸増濃度のＣＭＸ００１を添加し、上清を感染５日後に収穫した。ＣＭＸ００１が細胞外ＪＣＶ負荷を濃度依存方式で低減させたことが観察された（図１２）。感染１日後と５日後との間で、未処理細胞におけるウイルス負荷は約２．５対数（１．２４×１０７対５．０９×１０９）増加した。対照的に、２．５μＭのＣＭＸ００１で処理した細胞においては、同じ期間中に２と２分の１倍（９．６９×１０６対２．４４×１０７）しか増大しないことが観察される。感染１日後のウイルス負荷として定義されるウイルス流入を減じると、ＣＭＸ００１は、０．１５μＭでＪＣＶウイルス負荷を５０％超低減させ、０．６μＭでＪＣＶを９０％超低減させ、それぞれ感染５日後における阻害濃度ＩＣ−５０およびＩＣ−９０を定義するものであった。
【０１８７】
（３）ＣＯＳ−７細胞代謝活性に対するＣＭＸ００１の効果
位相差顕微鏡法によるＣＯＳ−７の検査は、ＣＭＸ００１  ０．６μＭへの７日間の暴露中、生存能力低下の兆候を何ら明らかにしなかった。より感受性の高いアッセイを使用するために、非感染ＣＯＳ−７細胞におけるＷＳＴ−１アッセイおよびＢｒｄＵ取り込みを使用して、細胞代謝活性に対する効果を調査した。ＣＭＸ００１の添加は、非感染ＣＯＳ−７細胞の代謝活性（図１３）およびＤＮＡ複製（図１４）を濃度依存方式で低下させた。未処理ＣＯＳ−７細胞と比較して、ＣＭＸ００１濃度を０．０８から１０μＭまで増大させることにより、代謝活性を３％から５２％まで、およびＤＮＡ複製を８３％から１０％、それぞれ減少させた。０．６μＭにおいて、ＣＯＳ−７細胞は、１７％の代謝活性のささやかな損失、およそ５０％低減したＢｒｄＵ取り込みを示した。まとめると、ＣＭＸ００１は、高濃度では、宿主細胞代謝活性およびＤＮＡ複製を有意に低減させた。０．０８から５μＭのＣＭＸ００１濃度の星状膠細胞でも同様の実験を行った。非感染星状膠細胞におけるＤＮＡ複製は、最高ＣＭＸ００１濃度において２５％から９２％減少した（データは図示せず）。両細胞型のＤＮＡ複製のＣＭＸ００１関連阻害を比較すると、ＣＯＳ−７の感受性が若干低い（それぞれ８３％対９２％）ようであった。しかしながら、星状膠細胞について、該アッセイの２時間の基質インキュベーション期間は、光学密度がＣＯＳ−７の測定値と比較して低いため、最適ではないようであった。これは、星状膠細胞がＣＯＳ−７細胞と比較して緩徐な代謝を有していたとする本発明者らの観察と一致する。
【０１８８】
（４）ＣＯＳ−７における細胞外ＪＣＶ負荷に対するＣＭＸ００１効果
ＪＣＶ後代レベルに対するＣＭＸ００１の効果を経時的に検査するために、処理および未処理細胞の上清を指示された時点で収穫した。感染１日後の上清を、流入ウイルスの目安として採取した。未処理細胞において、細胞外ＪＣＶ負荷は、７日間の観察期間にわたって３を超える対数（１．２４×１０７対５．６７×１０１０ｇｅｑ／ｍｌ）だけ増大した。５μＭのＣＭＸ００１の存在下では、ＪＣＶ負荷における１対数未満のささやかな変化のみが観察される（１．３４×１０７対８．８５×１０７ｇｅｑ／ｍｌ（図１５）。ＪＣウイルス負荷を、感染７日後のＣＭＸ００１  ５ｕＭ処理細胞について、感染３日後の未処理細胞におけるウイルス後代と比較すると、ＣＭＸ００１処理細胞におけるウイルス負荷は（９．７２×１０７対８．８５×１０７ｇｅｑ／ｍｌ）の９１％にしか達していなかった。ＣＭＸ００１処理ＣＯＳ−７細胞における後代産生は遅延し得ると結論付けられた。
【０１８９】
（５）ＣＭＸ００１はＪＣＶ後期遺伝子発現を低減させる
後期遺伝子発現に対するＣＭＸ００１の効果を調査するために、ＪＣＶ  ＶＰ１について免疫蛍光染色を実施した。感染７日後に、未処理ＣＯＳ−７細胞のＪＣＶ  ＶＰ１を比較として染色した（図１６、上部パネル）。１．２５μＭのＣＭＸ００１の添加は、ＪＣＶ  ＶＰ１シグナル（ｓｉｇｎａｌｙ）の有意な低減と関連していた（図１６、中央パネル）。５μＭの最高ＣＭＸ００１濃度では、本質的に免疫蛍光法によって観察され得るＶＰ１陽性細胞はない（図１６、下部パネル）。ＣＭＸ００１は、１．２５μＭから５μＭの間のＪＣＶ後期タンパク質発現を有意に低減させると結論付けられた。
【０１９０】
（６）星状膠細胞における細胞外ＪＣＶ負荷に対するＣＭＸ００１効果
ＪＣＶ後代レベルに対するＣＭＸ００１の効果を経時的に検査するために、処理および未処理細胞の上清を指示された時点で収穫した。流入ウイルスを決定するために、感染１日後に試料を採取した。未処理細胞の感染経過において、細胞外ＪＣＶ負荷は、７日間の観察期間にわたっておよそ１対数（３．２２×１０７対２．３０×１０８ｇｅｑ／ｍｌ）変化する。ＣＭＸ００１の存在下では、１対数未満のＪＣＶ負荷が見られた（１．３４×１０７対８．８５×１０７ｇｅｑ／ｍｌ（図１７）。ＪＣＶ複製は、ＣＯＳ−７よりも星状膠細胞において有意に緩徐であると結論付けられた。低濃度のＣＭＸ００１の後代産生を阻害する傾向にもかかわらず、７日間の観察期間ではＣＭＸ００１の阻害効果の計測が可能にならなかった。
【０１９１】
Ｃ．考察
暫定結果は、ＣＭＸ００１がＣＯＳ−７細胞におけるＪＣＶ複製を阻害することを示唆している。０．６μＭのＣＭＸ００１濃度は、細胞外ＪＣＶ負荷をおよそ９０％低減させた。この濃度は、ＣＤＶ阻害について報告された濃度よりも２桁低いが、ＢＫＶについて観察されたものと同じ範囲内である。ここで、ＢＫＶ複製のＣＭＸ００１  ＩＣ−９０を、初代尿細管上皮細胞において０．３１μＭと決定した（３４）。ＣＭＸ００１は、宿主細胞代謝活性を１７％、およびＤＮＡ複製を約５０％減少させることが観察された。感染１から７日後に細胞外ＪＣＶ負荷を計測すると、最高濃度のＣＭＸ００１（５μＭ）で処理した細胞からのＪＣＶ負荷は、感染１日後における流入ウイルスよりも感染５日後において若干高いだけであり、４日以内に放出されるウイルスは極めて少ないまたは無いことを指示していた。感染７日後において、この濃度でＪＣＶ負荷におけるごくわずかな増大があり、後代ウイルスのレベルは、未処理細胞の感染３日後に計測されたウイルス負荷を下回っていた。星状膠細胞においては、低濃度のＣＭＸ００１が後代ウイルスの蓄積を遅延させ得るという動向がある。しかしながら、感染７日後の未処理星状膠細胞における非効率的な後代ウイルス産生は、ＪＣＶ複製周期が有意に緩徐であることを実証するものであった。
【０１９２】
ＣＯＳ−７と星状膠細胞との間の差は、より効率的なＪＣＶの複製周期を支援するＳＶ４０ラージＴ抗原の発現を含むＣＯＳ−７細胞の形質転換表現型による可能性が高い。星状膠細胞において、これはかなり緩徐である。
【０１９３】
結論として、ＣＯＳ−７細胞におけるインビトロでのＪＣウイルス複製に対するＣＭＸ００１のＩＣ５０およびＩＣ９０値は、それぞれ０．１５および０．６μＭであったということである。非感染ＣＯＳ−７細胞において、代謝活性およびＤＮＡ複製に対するＣＭＸ００１のＩＣ５０は、それぞれおよそ５および０．６μＭであった。特に、ポリオーマウイルスＴ抗原を発現するこれらの細胞は、ＣＭＸ００１の効果に対し特異的に感受性であり得る。
【実施例３】
【０１９４】
ＥＢＶ関連頭蓋内移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）のヒト患者に対してＣＭＸ００１を使用する例
第一の患者は、鎌状赤血球貧血が発生したＥＢＶ関連頭蓋内移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）の病歴がある１１歳の患者である。ＥＢＶは血漿中において陽性（２０１０年１２月７日および１２月１４日）であり、脳生検はＰＴＬＤと一致していた。１２月上旬に、患者は、持続性頭痛、悪心、嘔吐および下痢の３日間の病歴を提示した。患者は入院し、発作活動を伴う可能性がある激しい頭痛の急性エピソードを起こした。脳のＣＴは、右前頭葉におけるリング状増強塊を示し、脳生検はＥＢＶ関連ＰＴＬＤと一致していた。患者はＰＩＣＵに入れられた。高い頭蓋内圧力、無呼吸に関連する反復性発作は、挿管およびＣＭＸ００１の緊急要求につながった。このＥＢＶ関連ＰＴＬＤ患者におけるＣＭＸ００１の使用は、２００９年１２月２６日から継続中である。患者はＣＭＸ００１に十分耐性があったため、週に２回４ｍｇ／ｋｇを受け続けている。該患者には、疾患の兆候および症状の臨床的改善、ならびに頭蓋内塊の低減とはいえないまでも安定化があった。血漿中におけるＥＢＶは陰性のままである。
【０１９５】
第二の患者は、ＥＢＶ関連ＰＴＬＤがある、生後６か月の心臓移植レシピエントであった。患者は、手術後に原発性ＥＢＶ感染を獲得した。ＰＥＴスキャンは、ＰＴＬＤと一致する肝臓、肺および骨（腸骨稜）において病変を示した。臨床状態は、ＣＳＦにおいて検出されるＥＢＶ、臨床およびＥＥＧ相関発作活動を伴うＥＢＶ関連脳炎と推測されるものによって不安定化し続け、応答性および精神状態の変化を減少させた。ＣＭＸ００１の要求時、患者は人工呼吸器使用中であり、該患者の肺の肺炎およびＰＴＬＤ両方の証拠、脳症が存在することの臨床基準を満たす発作活動の証拠を有していた。患者は、ＮＧチューブを介し、２０１０年３月３日にＣＭＸ００１  ２０ｍｇ（およそ３．３ｍｇ／ｋｇ）の初回投薬を、２０１０年３月７日に第二回投薬を受けた。患者は、ＥＢＶウイルス負荷において２６７，３３８（２０１０年３月３日）から４７，４２７コピー／ｍＬ（２０１０年３月７日）までの有意な減退を起こした。患者は、進行性神経損傷の証拠を示し続けた。ＣＭＸ００１の第二回投薬の翌日に、親が支援を中止した。
【実施例４】
【０１９６】
Ｉ．ヒト腫瘍細胞株のパネルに対するＣＭＸ００１の非ＧＬＰインビトロ評価
ＣＭＸ００１、シドフォビルおよび標準的な作用物質（細胞株の腫瘍型に応じて変動する）の細胞成長阻害活性を、多数の腫瘍型に由来する細胞株のパネルにおいて、ＭＴＳまたはＳＲＢベースの細胞増殖アッセイを使用して評価した。
【０１９７】
化合物は、細胞株に対して様々な程度の阻害活性を示した。ＣＭＸ００ｌは、研究において評価した２４の細胞株のほぼすべてにおいて、その親化合物であるシドフォビルよりも強力であった。腫瘍細胞株におけるＣＭＸ００ｌのＩＣ５０値は、標準的な作用物質の値と比較すると相対的に中程度である、６．６μＭから１００μＭ超までの範囲であった。
【０１９８】
Ｉ  材料および方法
（１）細胞株：
試験において使用した細胞株を表３に収載する。細胞に新鮮培地を２〜３日ごとに供給し、それらの成長速度に応じて３〜５日ごとに継代させた。１０〜１５継代後、細胞を廃棄し、凍結ストックから新鮮培養物を確立した。細胞培養物をマイコプラスマおよび他の汚染物質について定期的に点検した。
【表５】
2013501056.tif 000035
【０１９９】
（２）被検物質：
滅菌ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ、ｐＨ７．４）中１００ｍＭのストックをＣＭＸ００１およびシドフォビルについて作製し、−２０℃で保存した。ドキソルビシン、ドセタキセル、オキサリプラチン、ＤＴＩＣ（ダカルバジン）およびシスプラチンは、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）から購入した。ゲムシタビンはＥｌｉ  Ｌｉｌｌｙ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙによって製造され、Ｉｎｆｕｓｉｏｎ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ｔｕｃｓｏｎ、ＡＺ）から購入した。
【０２００】
（３）実験手順：
インビトロ細胞増殖アッセイは、９６ウェルプレートベースのＭＴＳアッセイ（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（Ｃ）アクオスワンソリューション細胞増殖アッセイ、Ｐｒｏｍｅｇａ）またはＳＲＢ（スルホローダミンＢ）アッセイ（１〜３）を使用して実施した。手短に述べると、細胞を０日目に９６ウェルマイクロタイタープレート（Ｆａｌｃｏｎ３０７２番）内において１００μｌの培地中で平板培養した。１日目、各化合物の１０μｌの連続希釈物（１００μＭの出発濃度での１：２希釈物９種；いくつかの事例において、４００μＭ（ＣＭＸ００１またはシドフォビル）または１μＭ（いくつかの標準的な作用物質）の出発濃度）をプレートに３通り添加した。ＤＭＳＯを溶媒として使用する標準的な作用物質については、０．５％の出発濃度でのＤＭＳＯの連続希釈物も、ビヒクル対照として含まれていた。
【０２０１】
加湿インキュベーター内、３７℃で３日間インキュベーション後、ＭＴＳまたはＳＲＢアッセイのいずれかによって生存細胞を計測した。ＭＴＳアッセイでは、（３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシフェニル）−２−（４−スルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム、内塩（ＭＴＳ、２ｍｇ／ｍｌ）および電子カップリング試薬、フェナジンメトスルフェート（ＰＭＳ、ＤＰＢＳ中０．９２ｍｇ／ｍｌ）の２０：１混合物２０μｌを各ウェルに添加し、３７℃で３時間インキュベートした。ＢｉｏＴｅｋ  ｓｙｎｅｒｇｙ（商標）ＨＴ多重検出マイクロプレートリーダーを４９０ｎｍで使用して、吸光度を計測した。ＳＲＢアッセイでは、５０μＬの冷トリクロロ酢酸（ＴＣＡ、１０％ｗ／ｖの最終濃度）で６０分間、細胞をインシチュで固定した。次いで、細胞をＨ２Ｏで５回洗浄し、風乾させた。
【０２０２】
次に、１％酢酸中０．２％のＳＲＢ２０μＬで細胞を染色し、室温で３０分間インキュベートし、１％酢酸で５回洗浄することによって結合しなかったＳＲＢを除去し、風乾させた。最後に、結合したＳＲＢ染色剤を５０μＬの５０μＭトリス緩衝液中で可溶化した後、ＢｉｏＴｅｋマイクロプレートリーダーを使用して５７０ｎｍでの光学密度計測をした。成長阻害データは、バックグラウンド補正した吸光度から算出した細胞生存のパーセンテージとして表現した。細胞の生存分率は、被験剤で処理した試料の平均吸光度値を未処理対照の平均吸光度値で割ることによって決定した。
【０２０３】
（４）統計的分析：
ＢｉｏＴｅｋ  ｓｙｎｅｒｇｙ（商標）ＨＴ多重検出マイクロプレートリーダーを使用して原データを獲得し、分析のためにＭｉｃｒｏｓｏｆｔエクセルにインポートした。各処理の平均シグナルは、ブランクシグナルを減じた後に３通りから算出した。生存パーセンテージ値は、下記の式：生存％＝（薬物治療の平均シグナル／未処理対照の平均シグナル）×１００を使用して算出した。データを最後にプリズム４ソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）にインポートして、非線形回帰曲線当てはめを使用して用量−活性曲線を生成し、ＩＣ５０値を算出した。
【０２０４】
Ｂ．結果および考察
各細胞株におけるＣＭＸ００１、シドフォビルおよび標準的な作用物質の成長阻害プロファイルを、図１８〜４１に示す。ＩＣ５０（５０％成長を達成するために必要とされる濃度値を表４に収載する。
【表６】
2013501056.tif 000036
【０２０５】
要するに、ＣＭＸ００１は、研究において評価した２４の細胞株のほぼすべてにおいて、その親化合物であるシドフォビルよりも強力であった。腫瘍細胞株におけるＣＭＸ００ｌのＩＣ５０値は、標準的な作用物質の値と比較すると相対的に中程度である、６．６μＭから１００μＭ超までの範囲であった。試験した２２の腫瘍細胞株の中でも、ＣＭＸ００１はＰＣ−３（ＩＣ５０＝６．６μＭ）およびＳＫ−ＨＥＰ−１（ＩＣ５０＝７．４μＭ）において最も活性であった。概して、ＣＭＸ００１は、前立腺、肝臓および子宮頸がん細胞株において最も活性であり、腎臓、膀胱および卵巣がん細胞株において最も活性が低かった。興味深いことに、ＣＭＸ００１は、２つの不死化ヒト正常上皮細胞株、Ｈｅｔ−１Ａ（食道）およびＴＨＬＥ−３（肝臓）に対しても相当に活性であり、それぞれ２０．５μＭおよび７．０μＭのＩＣ５０であった。いずれの細胞株も、ＳＶ４０ラージＴ抗原ウイルス（４〜５）によって不死化されたものであった。
【０２０６】
ＤＴＩＣ（ダカルバジン）は、黒色腫細胞株に対して活性ではなかった（ＩＣ５０＞１００μＭ）。細胞増殖アッセイにおけるＤＴＩＣのこの低活性の１つの説明は、ＤＴＩＣがその抗腫瘍活性に肝臓の活性化を必要とすることである。しかしながら、肝臓の活性化を必要としないＤＴＩＣの類似体であるテモゾロマイドは、これら２つの細胞株のいずれにおいても良好な活性を示さなかった（ＩＣ５０＞１００μＭ、データは図示せず）。したがって、いくつかの他の黒色腫細胞株において示されている通り、単にこれら２つの細胞株がＤＴＩＣおよびテモゾロマイドに抵抗性があるということであり得る（６〜７）。ＣＭＸ００１がこれら２つの黒色腫細胞株においていくらかの活性を示したという事実は、潜在的に有望である。活性を伴う暴露持続時間の影響に目を向けた研究を考慮する価値があり得る。この点について、より長い暴露時間は細胞毒性の増強を招き得る。
【０２０７】
前述は、本発明を例証するものであり、その限定であるとして解釈すべきではない。本発明の少数の例示的な実施形態を記載してきたが、当業者であれば、本発明の新規の教示および利点から著しく逸脱することなく、例示的な実施形態において多くの修正が可能であることを容易に理解するであろう。したがって、そのような修正はすべて、請求項において定義される通りの本発明の範囲内に含まれることが意図されている。したがって、前述は本発明を例証するものであり、開示されている具体的な実施形態に限定されるものとして解釈すべきではないこと、ならびに、開示されている実施形態への修正および他の実施形態は、添付の請求項の範囲内に含まれるように意図されていることを理解されたい。本発明は、下記の請求項によって定義され、請求項の均等物はその中に含まれる。
【図１（１）】
2013501056.tif 000061
【図１（２）】
2013501056.tif 000062
【図２】
2013501056.tif 000063
【図３】
2013501056.tif 000064
【図４】
2013501056.tif 000065
【図５】
2013501056.tif 000066
【図６】
2013501056.tif 000067
【図７】
2013501056.tif 000068
【図８】
2013501056.tif 000069
【図９】
2013501056.tif 000070
【図１０】
2013501056.tif 000071
【図１１】
2013501056.tif 000072
【図１２】
2013501056.tif 000073
【図１３】
2013501056.tif 000074
【図１４】
2013501056.tif 000075
【図１５】
2013501056.tif 000076
【図１６】
2013501056.tif 000077
【図１７】
2013501056.tif 000078
【図１８】
2013501056.tif 000079
【図１９】
2013501056.tif 000080
【図２０】
2013501056.tif 000081
【図２１】
2013501056.tif 000082
【図２２】
2013501056.tif 000083
【図２３】
2013501056.tif 000084
【図２４】
2013501056.tif 000085
【図２５】
2013501056.tif 000086
【図２６】
2013501056.tif 000087
【図２７】
2013501056.tif 000088
【図２８】
2013501056.tif 000089
【図２９】
2013501056.tif 000090
【図３０】
2013501056.tif 000091
2013501056.tif 000092
【図３１】
2013501056.tif 000093
【図３２】
2013501056.tif 000094
【図３３】
2013501056.tif 000095
【図３４】
2013501056.tif 000096
【図３５】
2013501056.tif 000097
【図３６】
2013501056.tif 000098
【図３７】
2013501056.tif 000099
【図３８】
2013501056.tif 000100
【図３９】
2013501056.tif 000101
【図４０】
2013501056.tif 000102
【図４１】
2013501056.tif 000103
【国際調査報告】
2013501056.tif 000104
2013501056.tif 000105