(57)【要約】【課題】再生の前段階又は再生プロセス下にある脳組織中に見られるネスチン陽性活性化アストロサイトを直接検出可能な放射性イメージング剤を提供する【解決手段】下記式（１）で表わされる化合物を有効成分として含有する、ネスチン陽性活性化アストロサイトの放射性イメージング剤。2015086195.tif 000004（式（１）中、ｎは１２の整数、Ｘは放射性ヨウ素原子である。）イメージング可能な再生の前段階又は再生プロセス下にある脳組織、例えば、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、脳卒中、又は神経変性疾患に罹患した後の脳組織の状態を診断するのに有用である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）で表わされる化合物、又はその塩を有効成分として含有する、ネスチン陽性活性化アストロサイトの放射性イメージング剤。
【化１】
2015086195.tif 000003
（式（１）中、ｎは１２の整数、Ｘは放射性ヨウ素原子である。）
【請求項２】
前記化合物が、１５−（４−［１２３Ｉ］ヨードフェニル）−３（Ｒ、Ｓ）−メチルペンタデカン酸である、請求項１記載のネスチン陽性活性化アストロサイトの放射性イメージング剤。
【請求項３】
ネスチン陽性活性化アストロサイトが、再生の前段階又は再生プロセス下にある脳組織に見られるものであるである、請求項１又は２に記載の放射性イメージング剤。
【請求項４】
脳組織が、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、脳卒中、又は神経変性疾患に罹患した後の脳組織である、請求項３に記載の放射性イメージング剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、再生プロセス下にある脳組織中に見られるネスチン陽性活性化アストロサイトを直接検出可能な放射性イメージング剤であって、神経保護・再生のプロセスを正確に診断できるようにするものに関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、脳卒中、神経変性疾患（アルツハイマー病等）で損傷を受けた脳細胞の予後の神経保護・再生のプロセスを直接検出可能なイメージング剤は知られていない。そのため、脳梗塞、脳出血、ＴＢＩの患者の脳細胞の予後予測を正確に行うことができず、適切な診断や治療を施すことができないのが現状である。
【０００３】
近年、脳損傷の周辺部位に集積するネスチン陽性活性化アストロサイトが脳組織再生を担っていることが明らかとなりつつある（非特許文献６）。ネスチンは神経幹細胞のマーカーであり、アストロサイトにおけるこのタンパク質の発現は脳組織の形成過程に関係する。また、組織の保護と再生に関わる活性化アストロサイトにおいて脂肪酸代謝が亢進することが報告されている（非特許文献３〜５）。
【０００４】
一方、脳梗塞のモデル動物の脳に骨髄間質細胞を移植した場合に脳のグルコース代謝やγ―アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）受容体の発現が改善することが報告されており（非特許文献１及び２）、脳細胞の再生治療も成果を上げてきている。したがって、脳組織の再生プロセスが正確に診断できれば、脳細胞の再生治療法の選択、治療時期の決定、予後予測や治療効果判定などに有用である。
【０００５】
また、アルツハイマー病等の神経変性疾患にも活性化アストロサイトが関与していることが報告されている（非特許文献７及び８）。したがって、脳組織の再生プロセスが正確に診断できれば、脳卒中・外傷などの急性疾患のみならず、神経変性疾患などの慢性疾患における脳組織の再生・損傷のプロセスを解明し、適切な治療薬の開発に結びつくことも期待される。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Miyamoto M. et al., J. Nucl. Med., 54, 145-150 (2013).
【非特許文献２】Shichinohe H. et al., J. Nucl. Med., 47, 486-491 (2006).
【非特許文献３】Escartin C. et al., J. Neurosci., 27(27), 7094-7104 (2007).
【非特許文献４】Zamanian, J. et al., J. Neurosci., 32(18), 6391-6410 (2012).
【非特許文献５】Bao et al J Crebral Blood Flow and Metab, 32, p1567 (2012）
【非特許文献６】Suzuki T. et al., Eur. J. Neurosci., 36, 3653-3664 (2012).
【非特許文献７】Fuller S. et al., Mutation Research, 690, 40-49 (2010).
【非特許文献８】Verkhratsky A. et al., Neurotherapeutics, 4, 399-412 (2010).
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２０１２−３６２１５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
しかしながら、骨髄間質細胞移植に関する上記報告は、脳組織の再生結果を反映するグルコース代謝やγ―アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）受容体の発現を１８Ｆ−ＦＤＧや１２５Ｉ−イオマゼニルを用いて検出しているに過ぎず、ネスチン陽性活性化アストロサイトのような初期診断に重要な、再生の前段階又は再生プロセス下にある脳組織を直接かつ特異的に検出する方法は開示していない。
【０００９】
β−メチル−脂肪酸アナログで哺乳動物の心臓血管障害や脳障害を検出するイメージング方法は公知であるが（特許文献１）、再生の前段階又は再生プロセス下にある脳組織を直接かつ特異的に検出することは何ら開示も示唆もしていない。
【００１０】
本発明は、再生の前段階又は再生プロセス下にある脳組織中に見られるネスチン陽性活性化アストロサイトを直接検出可能な放射性イメージング剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者等は、上記の課題を解決するために鋭意検討した結果、15-(4-ヨードフェニル)-3(R,S)-メチルペンタデカン酸(BMIPP)などのβ−メチル−脂肪酸アナログを放射性イメージング剤として用いることにより、ネスチン陽性活性化アストロサイトを特異的に検出できることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１２】
すなわち、本発明は、一局面によれば、下記式（１）で表わされる化合物を有効成分として含有する、ネスチン陽性活性化アストロサイトの放射性イメージング剤を提供する。
【化１】
2015086195.tif 000002
（式（１）中、ｎは１２の整数、Ｘは放射性ヨウ素原子である。）
【発明の効果】
【００１３】
上記式（Ｉ）で示されるβ−メチル−脂肪酸アナログはネスチン陽性活性化アストロサイトに選択的に集積するので、ネスチン陽性活性化アストロサイトの発生が見られる再生の前段階又は再生プロセス下にある脳組織等の放射性イメージングが可能となり、脳組織等における神経保護・再生のプロセスを直接診断できるようになる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】実施例で得られたオートラジオグラフを示す図である。
【図２】左パネル（GFAP + Nestin (7d）)は、Suzuki T. et al.（Eur. J. Neurosci., 36, 3653-3664 (2012)）のFIG. 6Aに示されるネスチン及びＧＦＡＰの二重免疫蛍光染色像を転載したものであり、右パネル（BMIPP (7d）)は実施例１で得られたオートラジオグラフである。
【図３】左パネル（GFAP)及び中央パネル（Nestin）は、Suzuki T. et al.（Eur. J. Neurosci., 36, 3653-3664 (2012)）のFIG. 6Bの中央パネル（GFAP)及び右パネル（Nestin）(上記図２のボックス部に相当する部分の像)を転載したものであり、右パネル（BMIPP)は上記図２のボックス部の拡大像である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
（本発明のβ−メチル−脂肪酸アナログ及びその製造方法）
本発明のβ−メチル−脂肪酸アナログを規定する上記式（Ｉ）中、ｎは、１２である。また、上記式（Ｉ）中、Ｘは放射性ヨウ素原子であり、好ましくは１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ又は１３１Ｉであり、ＳＰＥＣＴ（単一光子放射断層撮影）を用いた画像診断に適用できるという観点から、特に好ましくは１２３Ｉである。上記式（Ｉ）で示される化合物中、１５−（４−［１２３Ｉ］ヨードフェニル）−３（Ｒ，Ｓ）−メチルペンタデカン酸（１２３Ｉ）（１２３Ｉ−ＢＭＩＰＰ）が特に好ましい。
【００１６】
本発明のβ−メチル−脂肪酸アナログの塩としては、例えば、アミノ酸（グリシン、アルギニンなど）、アンモニア、第一級、第二級及び第三級アミン及び環状アミン（ピペリジン、モルホリン、ピペラジンなど）などの有機塩基、又は、水酸化ナトリウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、水酸化マグネシウム、水酸化マンガン、水酸化鉄、水酸化銅、水酸化亜鉛、水酸化アルミニウム、水酸化リチウムなどの無機塩基から誘導される塩にすることができる。
【００１７】
上記式（Ｉ）で示されるβ−メチル−脂肪酸アナログは、公知の合成法、例えば、米国特許第４，５２４，０５９号明細書に記載の合成法に従って製造することができる。また、上記式（Ｉ）のフェニル基に放射性ヨウ素原子を導入する方法としては、公知の放射性ヨウ素標識方法、例えば、求核置換反応又は同位体交換反応を利用した方法を使用することができる。例えば、上記式（Ｉ）のＸをトリアルキルスタンニル置換基とした標識前駆体化合物に、目的に応じた種々の放射性ヨウ化物イオンと酸化剤とを加え、反応させることにより、Ｘを放射性ヨウ素原子に置換した化合物を得ることが可能である。また、上記式（Ｉ）のＸを非放射性ヨウ素置換基とした標識前駆体化合物は、求核置換反応又は同位体交換反応を用いて放射性ヨウ素標識することができる。
【００１８】
（本発明の放射性イメージング剤）
本発明の放射性イメージング剤は、他の一般に知られている放射性イメージング剤と同様に、上記式（Ｉ）の化合物を所望により適当なｐＨに調整された水又は生理食塩水若しくはリンゲル液等に配合させた液として調製することができる。この場合における上記式（Ｉ）の化合物の濃度は、配合された当該化合物の安定性が得られる濃度以下とする必要がある。上記式（Ｉ）の化合物の投与量は、診断するために十分な濃度であれば特に限定されない。上記式（Ｉ）の化合物は、被験者の状態に応じた必要量を、静脈投与又は局所投与して使用することができる。
【００１９】
（診断可能な疾患）
上記式（Ｉ）の化合物はネスチン陽性活性化アストロサイトに特異的に集積するので、該化合物を有効成分として含有する本発明の放射性イメージング剤は、再生の前段階又は再生のプロセス下にある神経細胞を特異的に検出できるだけでなく、かかる神経細胞の再生を伴う疾患の状態を正確に診断することができる。診断可能な疾患としては、例えば、ＴＢＩ、脳梗塞及び脳出血等の脳卒中、アルツハイマー病等の神経変性疾患、骨髄間質細胞移植による再生治療下にある脳疾患などが挙げられる。
【実施例】
【００２０】
以下、実施例により、本発明を更に具体的に説明するが、本発明は下記の実施例のみに限定されるものではない。なお、実施例で使用した、15-(4-[125I]ヨードフェニル)- 3(R,S)-メチルペンタデカン酸（125I-BMIPP）は、日本メジフィジックス社製のもの（ロット番号ＢＭＩ−１３０３２６）を使用した。
【００２１】
実施例１
Suzuki T. et al.（Eur. J. Neurosci., 36, 3653-3664 (2012)）のAnimal experimentsの項に記載された方法と同じ方法で、マウス（C57BL/6, オス，約25g）の脳に光損傷の処置を行い、該処置の７日後、又は、１４日後に１晩絶食させた後、該マウスの尾静脈に、125I-BMIPP（1 MBq）を投与した。投与から１時間後、マウスを安楽死させ、脳を取り出し、ドライアイスを用いて脳を急速凍結させた。厚さ50マイクロメーターの脳の切片を作成してスライドガラスに貼り付け、イメージングプレートに数日露光し、イメージアナライザー（Ｔｙｐｈｏｏｎ９４００、ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社製）で解析した。得られたオートラジオグラフを、図１に示す。図１には、光処置を行っていない同種のマウスに対し、125I-BMIPP（1 MBq）を投与した結果も併せて示す。また、図２及び図３には、光損傷の処置の７日後のオートラジオグラフを、上掲Suzuki T. et al.のFIG. 6Aに示されるネスチン及びＧＦＡＰの二重免疫蛍光染色像とともに示した。なお、図２のオートラジオグラフは、図１に示す光損傷の処置の７日後のオートラジオグラフの拡大図である。
【００２２】
図１で示すように、光損傷の処置７日後のオートラジオグラフにおいては、光損傷の処置を行った領域（図１中、矢印で示す領域）には、未処置のマウスに比べて、放射能の集積が認められた。光損傷の処置７日後と、光損傷の処置１４日後との結果を比較すると、光損傷の処置１４日後の損傷領域の方が放射能の集積が低かった。これは、光損傷の処置１４日後においては、損傷領域が一部再生し、正常領域になったためと考察された。
【００２３】
図２の左パネル（GFAP + Nestin (7d）)と右パネル（BMIPP (7d）)との対比から、左パネルの抗ネスチン抗体及び抗ＧＦＡＰ抗体で二重免疫蛍光染色されたＰＲ（proximal region）（すなわち、ネスチン陽性活性化アストロサイト）の部分に対応する右パネルの部分に125I-BMIPPが集積していることがわかる。同様に、図３の左パネル（GFAP）、中央パネル(Nestin)及び右パネル(BMIPP)の対比から、右パネルの125I-BMIPPが集積した部分は、左パネルの抗ＧＦＡＰ抗体で免疫蛍光染色された活性化アストロサイトのうち、中央パネルの抗ネスチン抗体で免疫蛍光染色された部分（すなわち、ネスチン陽性活性化アストロサイト）に局在していることがわかる。
【００２４】
以上の結果から、125I-BMIPPはネスチン陽性活性化アストロサイトに特異的に集積してネスチン陽性活性化アストロサイトをイメージング化できることが示された。 
【産業上の利用可能性】
【００２５】
本発明の放射性イメージング剤は、ネスチン陽性活性化アストロサイトへ特異的に集積するので、再生の前段階を含む再生のプロセスの状態の診断に有用であり、放射性画像診断薬の分野で広く利用できる。
【図１】
2015086195.tif 000005
【図２】
2015086195.tif 000006
【図３】
2015086195.tif 000007