(57)【要約】  本発明は、式（ＩＩ）で表される３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルをアルカリ金属水酸化物水溶液の中で加水分解することにより式（Ｉ）で表される結晶質３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸を調製する方法、及び、３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸のガドリニウム錯体［（Ｇｄ−ＥＯＢ−ＤＴＰＡ）＝プリモビスト（Ｐｒｉｍｏｖｉｓｔ）（登録商標）］を調製するための式（Ｉ）で表される３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸の使用に関する。2013531643.tif 000014
2013531643.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2013531643.tif 000010
で表される結晶質３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸を製造する方法であって、式（ＩＩ）
【化２】
2013531643.tif 000011
で表される３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス−（ｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニルメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルを、アルカリ金属水酸化物水溶液を用いて加水分解し、濃縮し、その残渣を水に溶解させ、得られた溶液を酸性化し、及び、沈澱物から濾過することを特徴とする、前記方法。
【請求項２】
式（Ｉ）
【化３】
2013531643.tif 000012
で表される結晶質３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸を製造する方法であって、式（ＩＩ）
【化４】
2013531643.tif 000013
で表される３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルを、低級アルコールに溶解させ、アルカリ金属水酸化物水溶液を用いて加水分解し、得られた反応混合物を濃縮し、その残渣を水に溶解させ、得られた溶液を水性無機酸をゆっくりと添加することにより酸性化し、及び、沈澱物から濾過することを特徴とする、前記方法。
【請求項３】
得られた粗製結晶を４〜６倍量の沸騰水に溶解させ、それを１時間当たり最大で１０℃の冷却速度で冷却することを特徴とする、請求項１又は２に記載の結晶質３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸を製造する方法。
【請求項４】
３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸のガドリニウム錯体（Ｇｄ−ＥＯＢ−ＤＴＰＡ）を製造するための、式（Ｉ）で表される３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸の使用。
【請求項５】
３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸のガドリニウム錯体（Ｇｄ−ＥＯＢ−ＤＴＰＡ）のガレヌス製剤（ｇａｌｅｎｉｃａｌ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）を製造するための、式（Ｉ）で表される結晶質３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸の使用。
【請求項６】
純度が９９％を超えている、３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式（ＩＩ）
【０００２】
【化１】
2013531643.tif 000003
で表される３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルを鹸化することによる、式（Ｉ）
【０００３】
【化２】
2013531643.tif 000004
で表される結晶質３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸を製造する方法、及び、３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸のガドリニウム錯体（Ｇｄ−ＥＯＢ−ＤＴＰＡ＝プリモビスト（Ｐｒｉｍｏｖｉｓｔ）（登録商標））を製造するための式（Ｉ）で表される３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸の使用に関する。
【背景技術】
【０００４】
３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸（ＥＯＢ−ＤＴＰＡ）は、錯化剤又はキレート化剤であり、これとランタノイド元素の錯体は、ＮＭＲ及びＸ線診断のための薬品を製造するのに使用され、さらに、放射線療法においても使用される（ＥＰ  ０４０５７０４  Ｂ１）。
【０００５】
３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸のガドリニウム錯体（Ｇｄ−ＥＯＢ−ＤＴＰＡ）は、文献中において、エオビスト（Ｅｏｖｉｓｔ）及びプリモビスト（Ｐｒｉｍｏｖｉｓｔ）（登録商標）（ガドキセト酸）の名称で二ナトリウム塩として知られており、
【０００６】
【化３】
2013531643.tif 000005
そして、核スピン断層撮影法（ｎｕｃｌｅａｒ  ｓｐｉｎ  ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ）のための造影剤としての肝臓造影剤として、２００４年以来認可されている。
【０００７】
プリモビスト（Ｐｒｉｍｏｖｉｓｔ）（登録商標）は、非経口的に使用するための造影剤として、０．２５モル溶液として提供され、そして、使用されている。既知従来技術においては、（静脈内）注射用製剤で使用することが可能な品質の純粋な当該物質を合成することは、極めて複雑であり、費用がかかり、且つ、式（ＩＩ）で表されるペンタ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルのクロマトグラフィーによる精製と、それに続く、トリフルオロ酢酸による当該エステルの鹸化及びイオン交換を用いた当該反応混合物の酸性化が必要である。結果として生じる一ナトリウム塩は、結晶質ではなく、凍結乾燥によって固体形態で得ることができるのみである。そのような合成については、ＥＰ  ０４０５７０４Ｂ１（実施例８）及び「Ｓｃｈｍｉｔｔ−Ｗｉｌｌｉｃｈ  Ｈ．，  Ｂｒｅｈｍ  Ｍ．，  Ｅｗｅｒｓ  Ｃ．Ｌ．，  Ｍｉｃｈｌ  Ｇ．，  Ｍｕｌｌｅｒ−Ｆａｈｒｎｏｗ  Ａ．，  Ｐｅｔｒｏｖ  Ｏ．，  Ｐｌａｔｚｅｋ  Ｊ．，  Ｒａｄｕｃｈｅｌ  Ｂ．，  Ｓｕｌｚｌｅ  Ｄ．  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  Ｎｅｗ  Ｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ  Ｃｈｅｌａｔｅ：Ｔｈｅ  Ｌｉｖｅｒ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｍａｇｎｅｔｉｃ  Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｃｏｎｔｒａｓｔ  Ａｇｅｎｔ  Ｇｄ−ＥＯＢ−ＤＴＰＡ．  Ｉｎｏｒｇ  Ｃｈｅｍ．  １９９９；  ３８  （６）：１１３４−１１４４」に記載されている。しかしながら、この方法は、製造には適していない。
【０００８】
プリモビスト（Ｐｒｉｍｏｖｉｓｔ）（登録商標）製剤（商業用製品）の実際の製造では、最初に、予め凍結乾燥させておいた二ナトリウム塩としてのガドリニウム錯体を水に溶解させ、商業的に慣習的な緩衝液を添加し、及び、さらに、過剰量のＥＯＢ−ＤＴＰＡ〔一般的には、３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸のカルシウム錯体の形態にあるＥＯＢ−ＤＴＰＡ〕も添加する。この過剰量の錯化剤（過剰量のリガンド）又はカルシウム（Ｃａ）塩の使用に関しては、特許ＥＰ  ０２７０４８３Ｂ２において詳細に論じられている。
【０００９】
二ナトリウム塩としてのガドリニウム錯体は極めて吸湿性の特性を有しているので、上記調製方法の所謂「規模拡大（ｕｐｓｃａｌｉｎｇ）」は、極めて困難である。この目的のために、比較的変動し得る含水量特性の生成物をもたらす大規模な凍結乾燥機が使用された。さらに、その後の原薬（ｄｒｕｇ  ｓｕｂｓｔａｎｃｅ）を包装及び貯蔵する段階も、極めて困難である。当該ガドリニウム錯体をリガンド（ＥＯＢ−ＤＴＰＡ）及び酸化ガドリニウムから直接的に製造することが可能な製造方法を利用することが可能であれば、さらに有利であろう。しかしながら、この目的のためには、リガンド（キレート化剤＝３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸）の高純度の装入材料を入手できることが必須条件である。
当該リガンドを極めて高品質の結晶質形態で得ること、及び、複雑なクロマトグラフィー処理及びイオン交換処理を使用する必要なく生成させることが、可能となった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】欧州特許第０４０５７０４号明細書
【特許文献２】欧州特許第０２７０４８３号明細書
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Ｓｃｈｍｉｔｔ−Ｗｉｌｌｉｃｈ  Ｈ．，  Ｂｒｅｈｍ  Ｍ．，  Ｅｗｅｒｓ  Ｃ．Ｌ．，  Ｍｉｃｈｌ  Ｇ．，  Ｍｕｌｌｅｒ−Ｆａｈｒｎｏｗ  Ａ．，  Ｐｅｔｒｏｖ  Ｏ．，  Ｐｌａｔｚｅｋ  Ｊ．，  Ｒａｄｕｃｈｅｌ  Ｂ．，  Ｓｕｌｚｌｅ  Ｄ．  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  Ｎｅｗ  Ｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ  Ｃｈｅｌａｔｅ：Ｔｈｅ  Ｌｉｖｅｒ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｍａｇｎｅｔｉｃ  Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｃｏｎｔｒａｓｔ  Ａｇｅｎｔ  Ｇｄ−ＥＯＢ−ＤＴＰＡ．  Ｉｎｏｒｇ  Ｃｈｅｍ．  １９９９；  ３８  （６）：１１３４−１１４４
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明の目的は、当該ガドリニウム錯体をリガンド（ＥＯＢ−ＤＴＰＡ）及び酸化ガドリニウムから直接的に製造することが可能な、製造方法及びＥＯＢ−ＤＴＰＡ品質を提供することである。しかしながら、この目的のためには、充分な品質であり且つ貯蔵安定性の形態にある高純度のリガンド（＝３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸）（ＥＯＢ−ＤＴＰＡ）を入手できることが不可欠である。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明は、式（Ｉ）
【００１４】
【化４】
2013531643.tif 000006
で表される結晶質３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸を製造する方法に関し、ここで、該方法においては、式（ＩＩ）
【００１５】
【化５】
2013531643.tif 000007
で表される３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス−（ｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボニルメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルを、
アルカリ金属水酸化物水溶液を用いて加水分解し、濃縮し、その残渣を水に溶解させ、得られた溶液を酸性化するか、
又は、代替的に、
低級アルコールに溶解させ、５０℃〜９０℃で５〜７当量のアルカリ金属水酸化物水溶液を用いて加水分解し、得られた反応混合物を濃縮し、その残渣を水に溶解させ、得られた溶液を水性無機酸をゆっくりと添加することにより酸性化してｐＨ２．１〜２．８（好ましくは、ｐＨ２．５〜２．７）とし、
及び、
沈澱物から濾過する。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
上記方法の下では、式（ＩＩ）で表されるペンタ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルを精製する必要がない；さらに、この方法は、当該調製方法による生成物が結晶質形態で生じるという有利点を有している。該方法は、式（ＩＩ）で表されるエステルを低級アルコール（例えば、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、又は、好ましくは、メタノール）に溶解させ、５〜７当量のアルカリ金属水酸化物の８〜１２モル溶液（好ましくは、水酸化ナトリウム溶液）と混合させ、及び、当該反応混合物の沸騰温度で反応が完結する〔反応の完結は、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）又はガスクロマトグラフィー（ＧＣ）分析によって、自体公知の方法で容易に決定することができる〕まで加水分解するといった方法で実施することができる。
【００１７】
加水分解を実施した後、溶媒を（好ましくは、減圧蒸留によって）実質的に除去し、その残渣を水に溶解させ、得られた反応混合物を濃縮し、残渣を水に溶解させ、得られた溶液を水性無機酸（好ましくは、１２〜２５％強度の硫酸）をゆっくりと添加することにより酸性化してｐＨ２．１〜２．８（好ましくは、ｐＨ２．５〜２．７）とする。濁り始めたときに添加を中断し、次いで、結晶化を促進しながら添加を継続するように、計量添加を行う。調節されたｐＨが１２時間後に２．１〜２．８（好ましくは、２．５〜２．７）で変わらないままであるとき、結晶を濾去する。この結晶は、結晶化によって４〜８倍量の沸騰水から再結晶させることによりさらに精製することが可能であるが、ここで、当該溶液の冷却速度を確実に１時間当たり最大で１０℃を超えないようにすべきである。
本発明による方法を用いてこのようにして製造されたリガンド（ＥＯＢ−ＤＴＰＡ）は、吸湿性ではなく、そして、ＨＰＬＣ（１００％法）による純度が極めて高い（＞９８．７５％、＞９９．０％）によって区別される。本発明による調製方法によって調製された生成物の残留メタノール溶媒の含有量（＜０．０１％）は、規格限界（０．１％）よりも充分に低い。さらに、結晶化の結果として、エナンチオマー過剰率が改善され、それによって、エナンチオマー過剰率が９９％ｅ．ｅ．を超えるということも分かった。該物質は、貯蔵安定性が極めて優れており、そして、後になって必用に応じてさらに加工することができる。かくして、調製方法全体は、極めて簡素化された。このことは、コストの低減によって実証されるが、それは、費用のかかるクロマトグラフィー段階や、さらに、イオン交換脱塩段階がもはや必要ではないからである。凍結乾燥された材料の技術的に困難な取扱いも省かれる。
【００１８】
３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸のガドリニウム錯体（Ｇｄ−ＥＯＢ−ＤＴＰＡ）を製造するための３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸の使用は、ＤＥ  ３９２２００５Ａ１に記載されているように、三酸化二ガドリニウムを水中で反応させ、次いで、凍結乾燥させることによって進行し、及び、診断目的用（特に、ＭＲ断層撮影用）の３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸のガドリニウム錯体（Ｇｄ−ＥＯＢ−ＤＴＰＡ）のガレヌス製剤（ｇａｌｅｎｉｃａｌ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）の製造には、式（Ｉ）で表される結晶質３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸を使用する。
【実施例】
【００１９】
［実施例１］
結晶質３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸
３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（クロマトグラフィー精製せずに予備段階から得られた１９５ｍｏｌの粗製エステル；「Ｓｃｈｍｉｔｔ−Ｗｉｌｌｉｃｈ  Ｈ．，  Ｂｒｅｈｍ  Ｍ．，  Ｅｗｅｒｓ  Ｃ．Ｌ．，  Ｍｉｃｈｌ  Ｇ．，  Ｍｕｌｌｅｒ−Ｆａｈｒｎｏｗ  Ａ．，  Ｐｅｔｒｏｖ  Ｏ．，  Ｐｌａｔｚｅｋ  Ｊ．，  Ｒａｄｕｃｈｅｌ  Ｂ．，  Ｓｕｌｚｌｅ  Ｄ．  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  Ｎｅｗ  Ｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ  Ｃｈｅｌａｔｅ：Ｔｈｅ  Ｌｉｖｅｒ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｍａｇｎｅｔｉｃ  Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｃｏｎｔｒａｓｔ  Ａｇｅｎｔ  Ｇｄ−ＥＯＢ−ＤＴＰＡ．  Ｉｎｏｒｇ  Ｃｈｅｍ．  １９９９；  ３８  （６）」に準じて製造されたもの）のメタノール性溶液２００Ｌを２８０Ｌのメタノールと混合させる。得られた溶液を、４５．１ｋｇ（１１３０ｍｏｌ）の水酸化ナトリウムと１２１Ｌの水からなる溶液に添加する。その反応混合物を還流下に２．５時間加熱し、その後、減圧下に蒸発させることにより濃縮して約２００Ｌとする。残った油状物を水で希釈して重さ３９７ｋｇとする。その溶液に、１８２Ｌの２５％強度硫酸を滴下してゆっくりと添加する（当該溶液のｐＨ：２．６３）。結晶化が始まった後、硫酸をさらに添加することによりその混合物を再度ｐＨ２．６に調節する。その反応混合物を２０℃でさらに１２時間撹拌する。生じた結晶を濾去し、水から再結晶させる。この場合、冷却速度を最大で１時間当たり１０℃に維持することが必要である。減圧下（５０℃）で乾燥させた後、７４．７ｋｇの３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸が無色の結晶の形態で得られる。収率＝理論値の６８％。
融点：  １２５℃（分解）；
［ａ］Ｄ２０＝＋８．２（ＥｔＯＨ）；
【００２０】
【表１】
2013531643.tif 000008
【００２１】
純度（１００％法、ＨＰＬＣ）：  ＞９９％；
方法についての記述（ＨＰＬＣ、１００％法）
試薬：
・  クロマトグラフィー用のアセトニトリル；
・  硫酸（９７％を超える）
・  硫酸水素テトラブチルアンモニウム；
・  水
・  ＥＯＢ−ＤＴＰＡ（標準試薬）。
【００２２】
試験方法
試験方法「Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ／Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ」を試験方法「Ｃｏｎｔｅｎｔ」と組み合わせる。被験溶液及び対照溶液は、同じ温度で調製し且つ等分しなければならない。
【００２３】
被験溶液Ｐ１及びＰ２
被験物質を移動相Ａに加熱することなく溶解させることにより、被験物質の１．００ｍｇ／ｍＬ（０．９５−１．０５ｍｇ／ｍＬ）の溶液を調製する、ｃＰ１／Ｐ２。
【００２４】
例：
１０．００ｍｇの被験物質を１０ｍＬ容メスフラスコ内の移動相Ａに加熱することなく溶解させ、印の付いているところまでとする。
【００２５】
対照溶液Ｖ
少なくとも１０ｍｇのＥＯＢ−ＤＴＰＡ（標準試薬；ｍ）を容積Ｖ［Ｖ］のメスフラスコ内の移動相Ａに溶解させることにより、ＥＯＢ−ＤＴＰＡの１．００ｍｇ／ｍＬ（「０．９５−１．０５ｍｇ／ｍＬ」に相当する）の溶液を調製する。
【００２６】
例：
１０．００ｍｇのＥＯＢ−ＤＴＰＡ（標準試薬）を１０ｍＬ容メスフラスコ内の移動相Ａに加熱することなく溶解させ、印の付いているところまでとする。
【００２７】
試験条件
【００２８】
【表２】
2013531643.tif 000009
【００２９】
［実施例２］
結晶質３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸を使用する、０．２５Ｍ  プリモビスト（Ｐｒｉｍｏｖｉｓｔ）製剤の調製（トリス−ＨＣｌ緩衝液プラスＣａ錯体過剰）
５６．０ｇの炭酸カルシウムを１．３４４ｋｇの３．６％強度水性塩酸に溶解させ、この溶液を、３３．０６ｋｇの結晶質３，６，９−トリアザ−３，６，９−トリス（カルボキシメチル）−４−（４−エトキシベンジル）ウンデカン二酸と１４．９４４ｋｇの２５％強度水酸化ナトリウム水溶液と１１．２６ｋｇの酸化ガドリニウムからなる前もって装入しておいた懸濁液に添加し、そして、１６０Ｌの水に添加する。その混合物を、約２時間、９０℃に加熱する；この約２時間加熱している間に、酸化ガドリニウムは、溶解して透明な溶液が形成される。次いで、３０１．６６ｇのトロメタモール（トリス緩衝液）を添加し、その混合物を３０℃まで冷却する。ｐＨを７．２に調節する（５％水性ＨＣｌ又は５％水酸化ナトリウム水溶液のいずれかを選択する）。水を添加することにより、当該溶液の総体積を２５０．８Ｌに調節する。その溶液を膜を通して濾過し（窒素圧）、次いで、商業的に慣習的なバイアルの中に装入して滅菌することができる。
【国際調査報告】
2013531643.tif 000015
2013531643.tif 000016
2013531643.tif 000017
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2013531643.tif 000019
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