(57)【要約】  本発明は、ＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）もしくはその変異体を含むポリペプチドを含有する組成物を投与すること、またはアミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）もしくはその変異体を含むポリペプチドのペプチドミメティックを含有する組成物を投与することを含む、ＨＩＶまたはＡＩＤＳを治療する方法に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）またはその変異体を含むポリペプチドを含有する組成物を投与することを含む、ＨＩＶまたはＡＩＤＳを治療する方法。
【請求項２】
アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）またはその変異体を含むポリペプチドのペプチドミメティックを含有する組成物を投与することを含む、ＨＩＶまたはＡＩＤＳを治療する方法。
【請求項３】
ポリペプチドがＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）またはＡｃ−ＬＫＫＴＥＴＱ−ＯＨである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
組成物が、チモシンβ４またはＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）もしくは配列番号：３を含むそのフラグメントを含有する、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
ペプチドミメティックが、ポリペプチドＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）または配列番号：３に基づく、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
ペプチドミメティックが、チモシンβ４またはＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）を含むそのフラグメントに基づく、請求項２に記載の方法。
【請求項７】
ＡＩＤＳ、ＡＩＤＳ関連症候群（ＡＲＣ）、進行性全身性リンパ節症（ＰＧＬ）、カポジ肉腫、血小板減少性紫斑病、ＡＩＤＳに関連する神経学的状態、例えばＡＩＤＳ認知症症候群、多発性硬化症または熱帯性不全対麻痺、無症候性患者におけるそのような状態を含む抗ＨＩＶ抗体陽性およびＨＩＶ陽性状態を治療するための、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
感染患者におけるウイルス感染の症状または作用を治療するための、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
ウイルス感染がレトロウイルス感染である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
レトロウイルス感染がＨＩＶ感染である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
組成物を別の治療薬と共に治療される被験者に投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
その他の治療薬が、ヌクレオチド逆転写酵素阻害剤、非ヌクレオチド逆転写酵素阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、侵入阻害剤、インテグラーゼ阻害剤または出芽阻害剤である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
被験者が複数の他の治療薬で治療されている、請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＨＩＶまたはＡＩＤＳの治療の方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）は、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、すなわち免疫系が機能しなくなり始め、生命を脅かす日和見感染症へと至るヒトにおける疾病を引き起こすレンチウイルス（レトロウイルス科の成員）である。
【０００３】
ＨＩＶは、主としてＣＤ４＋Ｔ細胞、マクロファージおよび樹状細胞などのヒト免疫系の生活細胞に感染する。ＨＩＶ感染は３つの主要な機構を介してＣＤ４＋Ｔ細胞の低レベルをもたらす：第一に、ウイルスによる感染細胞の直接の死滅：第二に、感染細胞のアポトーシスの割合の増大；そして第三に、感染細胞を認識するＣＤ８細胞傷害性リンパ球による感染ＣＤ４＋Ｔ細胞の死滅である。ＣＤ４＋Ｔ細胞の数が臨界レベル以下に低下した場合、細胞媒介性免疫は失われ、身体は徐々に日和見感染症を起こしやすくなる。
【０００４】
ＨＩＶ−１に感染した、治療を受けていない人々の大部分は最終的にＡＩＤＳを発症する。これらの個人は、ほとんどが日和見感染症または免疫系の進行性破壊に関連する悪性疾患のために死亡する。ＨＩＶは、ウイルス、宿主および環境因子によって影響される様々な速度でＡＩＤＳへと進行する：大半はＨＩＶ感染から１０年以内にＡＩＤＳに進行する：一部の人々ははるかに早く進行し、また発症までにはるかに長くかかる人々もある。抗レトロウイルス薬での治療はＨＩＶに感染した人々の平均余命を延長させる。ＨＩＶが診断可能なＡＩＤＳに進行した後でさえも、抗レトロウイルス療法による平均生存期間は、２００５年現在で５年以上と推定された。抗レトロウイルス療法を受けなかった場合、ＡＩＤＳを有する患者は、典型的には１年以内に死亡する。
【０００５】
ＨＩＶ感染のための現在の治療は、高活性抗レトロウイルス療法またはＨＡＡＲＴから成る。これは、プロテアーゼ阻害剤に基づくＨＡＡＲＴが最初に使用可能となった１９９６年のその導入以来、多くのＨＩＶ感染者にとって極めて有益となってきた。現在のＨＡＡＲＴの選択肢は、抗レトロウイルス薬の少なくとも２つのタイプまたは「クラス」に属する少なくとも３つの薬剤から成る組合せ（または「カクテル」）である。典型的には、これらのクラスは、２つのヌクレオシド類似体逆転写酵素阻害剤（ＮＡＲＴＩまたはＮＲＴＩ）に加えてプロテアーゼ阻害剤または非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（ＮＮＲＴＩ）のいずれかである。
【０００６】
ＨＩＶ感染を抑制し、ＨＩＶ関連の死亡率を低下させるうえでのＨＡＡＲＴの成功にもかかわらず、現在の薬剤レジメンではＨＩＶ感染を完全に根絶することはできない。ＨＡＡＲＴを受けている多くの人々は、長年にわたりＨＩＶを標準的な臨床アッセイの検出限界未満のレベルに抑制することを達成する。しかし、ＨＡＡＲＴの使用中止後は、付随するＣＤ４＋Ｔ細胞の減少を伴ってＨＩＶウイルス負荷が急速にリバウンドし、ほとんどの症例において、治療を再開しなければ、ＡＩＤＳと死亡をもたらす。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
ＨＩＶまたはＡＩＤＳのための治療を提供することが本発明の１つの実施形態の目的である。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の第１の態様は、ＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）またはその変異体を含むポリペプチドを含有する組成物を投与することを含む、ＨＩＶまたはＡＩＤＳを治療する方法を提供する。
【０００９】
代替的な第１の態様は、ＨＩＶまたはＡＩＤＳを治療するための、ＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）またはその変異体を含むポリペプチドを含有する組成物を提供する。
【００１０】
代替的な第１の態様は、ＨＩＶまたはＡＩＤＳを治療するための薬剤の製造における、ＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）またはその変異体を含むポリペプチドを含有する組成物の使用を提供する。
【００１１】
本発明の第２の態様は、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）またはその変異体を含むポリペプチドのペプチドミメティックを含有する組成物を投与することを含む、ＨＩＶまたはＡＩＤＳを治療する方法を提供する。
【００１２】
代替的な第２の態様は、ＨＩＶまたはＡＩＤＳを治療するための、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）またはその変異体を含むポリペプチドのペプチドミメティックを含有する組成物を提供する。
【００１３】
代替的な第２の態様は、ＨＩＶまたはＡＩＤＳを治療するための薬剤の製造における、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）またはその変異体を含むポリペプチドのペプチドミメティックを含有する組成物の使用を提供する。
【００１４】
第１の態様の１つの実施形態では、ポリペプチドは、ＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）もしくはＡｃ−ＬＫＫＴＥＴＱ−ＯＨであるか、またはＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）を含むチモシンβ４のフラグメントを含むか、または基本的に配列番号：３から成る。
【００１５】
第２の態様の１つの実施形態では、ペプチドミメティックはポリペプチドＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）に基づく。第２の態様の１つの実施形態では、ペプチドミメティックは、ＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）を含むそのチモシンβ４フラグメントまたは基本的に配列番号：３から成るペプチドに基づく。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明は、チモシンβ４（Ｔβ４）に由来するペプチドである配列番号：１のペプチドの、ＨＩＶ陽性患者およびＡＩＤＳの症状を示すまでに進行していた患者への投与が、ＣＤ４およびＣＤ８陽性白血球数を増加させ、ウイルス負荷を有意に低減させたという発見に基づく。
【００１７】
配列番号：１のペプチドは、一次細胞中で培養したＴ細胞向性またはマクロファージ向性ＨＩＶ単離物に作用を及ぼさず、その抗ＨＩＶ活性が代替的な機構によって生じることを指示する。
【００１８】
Ｔβ４は、１９８１年に胸腺から初めて単離された小さな天然に生じる４３アミノ酸のペプチド（配列番号：２）であり、現在、多くの組織において同定されている。Ｔβ４は、創傷治癒、血管新生、アクチン結合、細胞移動および細胞接着を含む多くの生物学的活性に関係づけられてきた。Ｔβ４は抗菌性、抗アポトーシス性であり、抗炎症活性を有する。
ＭＳＤＫＰＤＭＡＥＩ  ＥＫＦＤＫＳＫＬＫＫ  ＴＥＴＱＥＫＮＰＬＰ  ＳＫＥＴＩＥＱＥＫＱ  ＡＧＥＳ（配列番号：２）
【００１９】
本発明までは、ＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）がＨＩＶまたはＡＩＤＳの治療のために使用できることは開示または示唆されていなかった。
【００２０】
１つの実施形態では、ポリペプチドは配列番号：２の完全長ヒト野生型Ｔβ４を含まない。
【００２１】
第１および第２の態様における使用のためのポリペプチドは、Ｔβ４および／または配列番号：１もしくはその変異体を含むＴβ４アイソフォーム、類似体もしくは誘導体を包含し得る。
【００２２】
配列番号：１の変異体は、１またはそれ以上のアミノ酸位置にアミノ酸挿入、欠失または保存的もしくは非保存的なアミノ酸置換が存在するポリペプチドである。ポリペプチド配列ＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）の位置の１、２、３または４つに突然変異が存在し得る。
【００２３】
保存的置換は、類似の大きさまたは電荷を有する残基による別の残基の置換であり、例えば以下の群の中の１つの残基の同じ群内の別の残基による置換は保存的とみなされる：
Ｇｌｙ、Ａｌａ
Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ
Ａｓｐ、Ｇｌｕ
Ａｓｎ、Ｇｌｎ
Ｓｅｒ、Ｔｈｒ
Ｌｙｓ、Ａｒｇ
Ｐｈｅ、Ｔｙｒ
【００２４】
１つの実施形態では、変異体はコンセンサス配列Ｘ１ＬＫＸ２ＴＸ３Ｘ４Ｘ５Ｘ６（配列番号：３）（式中、Ｘは任意のアミノ酸である）に基づく。好ましくは、Ｘは、配列番号：２に示すＴβ４の天然アミノ酸の保存的置換である。
【００２５】
１つの実施形態では、Ｘ１は、１、２、３、４もしくは５アミノ酸残基であるかまたは存在せず、Ｘ２はＫ、ＨまたはＡであり、Ｘ３はＥまたはＮであり、Ｘ４はＴまたはＭであり、Ｘ５はＱ、Ｎ、ＥまたはＡであり、そしてＸ６は１、２、３、４もしくは５アミノ酸残基であるかまたは存在しない。
【００２６】
好ましくは、Ｘ１は（Ｆ／Ｌ）（Ｄ／Ｎ）（Ｓ／Ａ／Ｔ／Ｋ／Ｎ）（Ｋ／Ｎ／Ｇ）を含む。
【００２７】
好ましくは、Ｘ６は（Ｅ／Ｔ）（Ｋ／Ｅ）（Ｎ／Ｅ）を含む。
【００２８】
ポリペプチドは、アミノ酸配列：
ＦＤＫＳＫＬＫＫＴＥＴＱＥＫＮ（配列番号：４）
ＦＤＫＡＫＬＫＫＴＥＴＱＥＫＮ（配列番号：５）
ＦＤＲＳＫＬＫＫＴＥＴＮＴＥＥ（配列番号：６）
ＦＤＫＴＫＬＫＫＴＥＴＱＥＫＮ（配列番号：７）
ＦＤＫＳＫＬＫＫＴＮＴＥＥＫＮ（配列番号：８）
ＦＤＲＳＫＬＫＫＴＮＴＥＥＫＮ（配列番号：９）
ＦＤＫＴＫＬＫＫＴＥＴＡＥＫＮ（配列番号：１０）
ＦＮＲＡＫＬＫＫＴＥＴＱＥＫＮ（配列番号：１１）
ＦＮＫＡＫＬＫＫＴＥＭＱＥＫＮ（配列番号：１２）
ＦＤＡＫＫＬＫＨＴＥＴＮＥＫＮ（配列番号：１３）
ＦＮＱＮＮＬＫＨＴＥＴＮＥＫＮ（配列番号：１４）
ＬＤＫＡＫＬＫＡＴＥＭＱＥＫＮ（配列番号：１５）
ＦＤＫＡＧＬＫＫＴＥＴＥＥＫＥ（配列番号：１６）
の１つを含み得る。
【００２９】
１つの実施形態では、ポリペプチドは、基本的に配列番号：１または配列番号：３〜１６のいずれか１つに示すアミノ酸配列から成る。
【００３０】
１つの実施形態では、ポリペプチドは、Ｎ末端アセチル基およびＣ末端ヒドロキシル基を有し、例えばＡｃ−ＬＫＫＴＥＴＱ−ＯＨである。
【００３１】
別の実施形態では、ポリペプチドは、本明細書で述べる活性を有する、酸化Ｔβ４、Ｔβ４のＮ末端変異体、Ｔβ４のＣ末端変異体、アミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴＱ、ＬＫＫＴＥＴＱ、ＬＫＫＴＮＴＱ、ＫＬＫＫＴＥＴＱ、ＬＫＫＴＥＴＱＱ、その保存的変異体を含むもしくは基本的にそれから成るポリペプチドもしくはペプチドフラグメント、または本明細書で述べる他のペプチド物質を含むまたは基本的にそれから成る。
【００３２】
参照により本明細書に組み込まれる、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ９９／１７２８２号は、ＬＫＫＴＥＴ（配列番号：１７）および本発明に従って有用であり得るＴβ４のアイソフォームならびに本発明と共に使用し得るアミノ酸配列ＬＫＫＴＥＴＱおよびその保存的変異体を開示する。
【００３３】
参照により本明細書に組み込まれる、国際出願第ＰＣＴ／ＧＢ９９／００８３３号（国際公開第９９／４９８８３号）は、本発明に従って使用し得る酸化Ｔβ４を開示する。
【００３４】
本発明を以下で主として配列番号：１に関して説明するが、以下の説明は配列番号：３〜１７に示すアミノ酸配列ならびにＴβ４およびＴβ４アイソフォームにも等しく適用されることが意図されていることが了解されるべきである。
【００３５】
多くのＴβ４アイソフォームが同定されており、Ｔβ４の公知のアミノ酸配列と約７０％または約７５％または約８０％またはそれ以上の相同性を有する。そのようなアイソフォームには、例えばＴβ４ａｌａ、Ｔβ９、Ｔβ１０、Ｔβ１１、Ｔβ１２、Ｔβ１３、Ｔβ１４およびＴβ１５が含まれる。したがって、Ｔβ４ａｌａ、Ｔβ９、Ｔβ１０、Ｔβ１１、Ｔβ１２、Ｔβ１３、Ｔβ１４およびＴβ１５などの公知のＴβ４アイソフォームならびにまだ同定されていないＴβ４アイソフォームは、本発明の方法において有用であることが特に企図される。本発明は、したがって、ＨＩＶまたはＡＩＤＳを治療するためのＴβ４もしくはフラグメントもしくは変異体またはＴβ４アイソフォームＴβ４ａｌａ、Ｔβ９、Ｔβ１０、Ｔβ１１、Ｔβ１２、Ｔβ１３、Ｔβ１４およびＴβ１５もしくはフラグメントもしくは変異体を含有する組成物をさらに提供する。
【００３６】
１つの実施形態では、組成物は医薬組成物であり、医薬的に許容される担体を含有する。
【００３７】
別の実施形態では、組成物は動物用組成物であり、動物での使用に適する担体を含有する。
【００３８】
「その誘導体」という用語により、その中のアミノ酸残基が類似の側鎖またはペプチド骨格特性を有する残基（天然アミノ酸、非天然アミノ酸またはアミノ酸ミミックのいずれであるかに関わらず）によって置換されているペプチドが意味される。
【００３９】
加えて、そのようなペプチドの一方または両方の末端は、Ｎ末端およびＣ末端保護基、例えばアセチル基またはアミド基と類似の特性を有する基によって保護され得る。ひとたび最終的なペプチドが形成されれば、アミノ酸配列は変化、末端切断または修飾され得ることが認識される。
【００４０】
そのような誘導体は、インビボでペプチドの半減期を増大または低下させ得る。本発明によるペプチドおよびポリペプチドの半減期を増大させることができる誘導体の例には、ポリペプチドのペプトイド誘導体、ポリペプチドのＤ−アミノ酸誘導体およびペプチド−ペプトイドハイブリッドが含まれる。
【００４１】
ポリペプチドの作製は日常的な工程である。例えば、ポリペプチドは合成することができ、多くの企業がペプチドの商業的合成を提供する。
【００４２】
ペプチドの作製のための実験室技術も周知であり、そのような方法は、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ（２００１）：Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｃｌｏｎｉｎｇ，ａ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ｍａｎｕａｌ，３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋに記載されている組換えＤＮＡ技術を使用して、当業者によって容易に実施される。したがって当業者は、本明細書で提供する情報を使用して、通常の一般的知識からチモシンβ４ポリペプチドを作製することができる。
【００４３】
本明細書におけるポリペプチドおよびペプチドという用語は交換可能に使用され、ペプチドという用語をポリペプチドの代わりに使用するまたはその逆の場合、いかなる大きさの制限も意図されない。
【００４４】
本発明により使用されるペプチドおよびポリペプチドは、多くの手段（生物系におけるプロテアーゼ活性など）によって分解を受け得る。そのような分解はポリペプチドのバイオアベイラビリティを制限し、したがってポリペプチドがその生物学的機能を達成する能力を制限し得る。生物学的環境において高い安定性を有する誘導体を設計し、生産することができる様々な広く確立された技術が存在する。そのようなポリペプチド誘導体は、プロテアーゼを介した分解に対する抵抗性上昇の結果として改善されたバイオアベイラビリティを有し得る。
【００４５】
１つの実施形態では、本発明による使用に適する誘導体または類似体は、それが由来するペプチドよりもプロテアーゼ抵抗性である。
【００４６】
ポリペプチドは、Ｎ末端および／またはＣ末端を保護することによってよりプロテアーゼ抵抗性にし得る。例えば、Ｎ末端を、各々が場合により置換されていてもよい、アセチル基によって、またはアルキルもしくはアリール基によって、またはアルキル−ＣＯ−もしくはアリール−ＣＯ−基によって保護し得る。Ｃ末端は、アミド基によってまたは置換されたアミド基によって保護し得る。
【００４７】
ポリペプチド誘導体およびそれが由来するポリペプチドのプロテアーゼ抵抗性は、周知のタンパク質分解アッセイによって評価し得る。次に、ポリペプチド誘導体およびポリペプチドに関するプロテアーゼ抵抗性の相対値を比較し得る。
【００４８】
本発明のポリペプチドのペプトイド誘導体は、ポリペプチドの構造についての知識から容易に設計し得る。広く確立されたプロトコールに従ってペプトイド誘導体を開発するために市販のソフトウエアを使用し得る。
【００４９】
本発明によるペプチドの修飾型のさらなる実施形態は、Ｄ−アミノ酸型のペプチドを含む。Ｌ−アミノ酸ではなくＤ−アミノ酸を使用したペプチドの作製は、通常の代謝工程によるそのような物質の望ましくない分解を大きく低減し、投与する必要がある物質の量を、その投与頻度と共に減少させる。
【００５０】
ペプチド、類似体または誘導体は、生体細胞によって好都合に発現され得る生成物であり、本発明は、組換えによって生産されるそのような物質の使用を包含する。
【００５１】
「ペプチドミメティック」という用語は、治療薬としての特定のペプチドの立体配座および望ましい特徴を模倣するが、望ましくない特徴を回避する化合物を指す。例えば、モルヒネは、経口投与することができる、エンドルフィンペプチドのペプチドミメティックである化合物である。当分野において周知のように、ペプチドミメティックの設計および合成には多くの異なるアプローチが存在する。
【００５２】
ペプチドはまた、チモシンのアミノ酸配列に由来しないさらなるアミノ酸配列、例えば、ペプチドの別個の機能（標識または触媒ドメインなど）を提供する他のアミノ酸配列を含むことができる。そのようなペプチドも本発明の態様に包含される。
【００５３】
また、本発明は、まだ配列番号：１およびその変異体に関する特許請求の範囲内にある、これらの好ましいペプチドの誘導体または類似体を使用して実施され得ることが認識される。
【００５４】
配列番号：１またはその変異体を含むまたはそれに基づくＴβ４のすべてのペプチド、ポリペプチド、フラグメント、変異体、誘導体またはペプチドミメティックを以下では治療薬と称する。そのような治療薬はすべて、ＨＩＶまたはＡＩＤＳに感染した被験者においてＣＤ４陽性細胞のレベルを低下させることができる。
【００５５】
認識できるように、薬剤は様々な異なる被験者に投与され得る。「被験者」により、ＨＩＶまたはＡＩＤＳを発症しやすいまたはこの疾患に感染しているあらゆる動物、好ましくは脊椎動物、より好ましくは家畜または農場の動物またはヒトなどの哺乳動物が包含される。最も好ましくは、被験者はヒトである。
【００５６】
治療薬は、従来の非毒性で医薬的に許容される担体、アジュバントおよび賦形剤を含有する薬剤中で経口的に、局所的にまたは非経口的に投与され得る。
【００５７】
本明細書で使用される非経口的という用語は、静脈内、動脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、結膜下、腔内、経皮および皮下注射、肺もしくは鼻腔への投与のためのエアロゾルまたは、例えば浸透圧ポンプによる、注入による投与を包含する。
【００５８】
治療薬を含有する薬剤を製剤することができる様々な手段を以下で提供する。
【００５９】
治療薬は、特に組成物が使用される方法に依存して、多くの異なる形態を有する組成物に製剤され得る。したがって、例えば、組成物は、粉末、錠剤、カプセル、液体、軟膏、クリーム、ゲル、ヒドロゲル、エアロゾル、スプレー、ミセル、経皮パッチ、リポソームの形態またはヒトもしくは動物に投与され得る任意の他の適切な形態であり得る。ポリペプチドのための賦形剤は、それが与えられる被験者によって十分に耐容され、好ましくは標的細胞、組織または器官への治療薬の送達を可能にするものであるべきことが認識される。
【００６０】
したがって、そのポリペプチドは適切に保護された担体粒子、例えばミセルによって送達されることが好ましい。
【００６１】
治療薬は多くの方法で使用され得る。例えば、全身投与が必要であり得、その場合治療薬は、例えば錠剤、カプセルまたは液体の形態で経口的に摂取され得る組成物中に含有され得る。治療薬は注射によって血流中に投与されることが好ましい。注射は、静脈内（ボーラスもしくは持続注入）または皮下（ボーラスもしくは持続注入）であり得る。
【００６２】
治療薬は、特に組成物が使用される方法に依存して、多くの異なる形態を有する医薬組成物に組み合わされ得る。したがって、例えば、組成物は、粉末、錠剤、カプセル、液体、軟膏、クリーム、ゲル、ヒドロゲル、エアロゾル、スプレー、ミセル、経皮パッチ、リポソームの形態またはヒトもしくは動物に投与され得る任意の他の適切な形態であり得る。治療を提供するために使用される賦形剤は、それが与えられる被験者によって十分に耐容され、好ましくは標的細胞、組織または器官への治療薬の送達を可能にするものであるべきことが認識される。
【００６３】
好ましい実施形態では、医薬賦形剤は液体であり、医薬組成物は溶液の形態である。別の実施形態では、医薬賦形剤はゲルであり、組成物はクリーム等の形態である。
【００６４】
治療薬はまた、徐放装置または遅延放出装置内に組み込まれ得る。そのような装置は、例えば、皮膚上または皮膚下に挿入され得、治療薬は数週間、さらには数か月間にわたって放出され得る。そのような装置は、治療薬による長期治療が必要である場合および通常は頻繁な投与（例えば少なくとも毎日の注射）が必要である場合に特に好都合であり得る。
【００６５】
必要とされる治療薬の量はその生物学的活性およびバイオアベイラビリティによって決定され、そして生物学的活性およびバイオアベイラビリティは、投与の方法、使用される治療薬の物理化学的性質、および治療薬が単独療法として使用されるかまたは併用療法で使用されるかに依存する。また、治療薬の量は、治療されるべき標的細胞の数および状態によっても決定される。投与の頻度も、上述した因子および特に治療される被験者の体内での治療薬の半減期によって影響される。
【００６６】
投与されるべき最適用量は当業者によって決定され得、使用される特定の治療薬、製剤の強度、投与の方法および疾患状態の進行度によって異なる。被験者の年齢、体重、性別、食事および投与の時間を含む、治療される特定の被験者に依存する付加的な因子により、用量を調節する必要が生じる。
【００６７】
製薬産業によって従来用いられているような公知の手順（例えばインビボ実験、臨床試験等）を、治療薬の具体的な製剤および明確な治療レジメン（治療薬の１日用量および投与の頻度など）を確立するために使用し得る。
【００６８】
１日用量は単回投与（例えば１日１回注射）として与えられ得る。
【００６９】
あるいは、使用される治療薬は１日の間に２回またはそれ以上の回数の投与を必要とし得る。一例として、治療薬は、１ｍｇ〜１０００ｍｇ（すなわち体重を７０ｋｇと仮定して）の１日２回（または疾病の重症度に依存してそれ以上）用量として投与され得る。治療を受ける患者は、起床時に１回目の用量を摂取し、次に夜に２回目の用量（２回投与レジメンである場合）を、またはその後３もしくは４時間の間隔で摂取し得る。あるいは、徐放装置を使用して反復用量を投与することを必要とせずに最適用量を患者に提供し得る。
【００７０】
１つの実施形態では、治療薬を含有する薬剤は、皮下的に投与されるかまたは被験者への皮下投与用に製剤される。１つの実施形態では、薬剤は注射用組成物である。
【００７１】
１つの実施形態では、薬剤は各投与当たり１ｍｇ〜１０００ｍｇの治療薬を提供するように製剤される。
【００７２】
本発明の第５の態様は、ＨＩＶまたはＡＩＤＳの予防または治療のための薬剤として使用するためのチモシンβ４を分泌する幹細胞の集団を提供する。本開示まで、そのような幹細胞がこの有用性を有することは開示または示唆されていなかった。
【００７３】
幹細胞は、体内で多くの細胞型に分化する潜在能を有する細胞である。理論的には、幹細胞は、生物が生存する限り他の細胞を補充するための無制限に分裂し得る。分化後、娘細胞は、幹細胞のままであるかまたは別の細胞型、例えば肺細胞となってその特徴を示す潜在能を有し、したがって損傷した組織を置換することにより多くの５疾患に対して有望である。これらの現象は特定の生理的および実験的条件下で誘導され得る。
【００７４】
一般に、幹細胞療法は、変性および／または進行性疾患（早期死亡または身体が置換することのできない細胞型の機能不全によって引き起こされる疾患など）を治療し得る治療方法である。幹細胞の添加は、核形成を助け、失われた細胞および／または組織を置換する機能性細胞および／または組織の発達を促進して、それにより正常な健康活動／機能を回復し得ると期待される。
【００７５】
本発明に関して、「幹細胞」は、無能性、全能性または多能性細胞を含むと解釈され、前駆細胞（または前駆体細胞）は多能性細胞を含むと解釈される。疑わしさを避けるため、本発明の薬剤および方法は、幹細胞もしくは前駆細胞のいずれか、または幹細胞と前駆細胞の両方の治療有効量を含有することができる。
【００７６】
本発明に従って使用し得る幹細胞の適切な供給源は、着床前胚の内細胞塊／胚盤葉上層に由来する細胞である。そのような胚性幹（ＥＳ）細胞は容易に入手可能であり、すべての可能な胚細胞および成体細胞系列を生じさせることができる。特に、未分化ヒトＥＳＣ（ＷｉＣｅｌｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｉｎｃ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ：ｗｗｗ．ｗｉｃｅｌｌ．ｏｒｇからのＨ１株）を本発明において使用することができた；この細胞株は市販されている。
【００７７】
本発明において使用できる幹細胞のさらなる供給源は臍帯由来細胞である。幹細胞のなおさらなる供給源は、脂肪組織を含む、成体組織から単離されるものである。
【００７８】
本発明の薬剤が生体細胞の使用を含む場合、好ましくは、製剤は適切な液体担体中に生体細胞を含有する。そのような液体担体は、好ましくは非免疫原性であり、塩類溶液、細胞培養培地または蒸留水を含み得る。注射用の製剤は、上述したとおりであり得るか、または、好ましくは治療される被験者の身体によって溶解され得る、ゲルの形態でも提供され得る。移植に適する製剤は、注射または吸入に関して述べた形態をとり得、また新たな組織発生のための基礎を提供することができる足場または土台中で提供される生体細胞も含み得る。
【００７９】
本発明の方法は、ＡＩＤＳならびに関連する臨床状態、例えばＡＩＤＳ関連症候群（ＡＲＣ）、進行性全身性リンパ節症（ＰＧＬ）、カポジ肉腫、血小板減少性紫斑病、ＡＩＤＳに関連する神経学的状態、例えばＡＩＤＳ認知症症候群、多発性硬化症または熱帯性不全対麻痺、無症候性患者におけるそのような状態を含む抗ＨＩＶ抗体陽性およびＨＩＶ陽性状態の治療のために特に有用である。
【００８０】
ＡＩＤＳまたはＨＩＶを治療することに加えて、本発明はまた、感染患者におけるウイルス感染の症状または作用を治療するまたは予防するためにも使用できる。１つの実施形態では、ウイルス感染はレトロウイルス感染、特にＨＩＶ感染である。
【００８１】
本発明に従った治療は、別の治療薬による治療で補完され得る。治療薬は、同じかもしくは異なる医薬組成物中で同時に（すなわち一斉に）または任意の順序で連続的に投与され得る。有効成分および医薬的に活性な物質の量ならびに投与の相対的な時期は、所望の併用治療効果を達成するように選択される。
【００８２】
他の治療薬の例には、ヌクレオチド逆転写酵素阻害剤、例えばジドブジン、ジダノシン、ラミブジン、ザルシタビン、アバカビル、スタブジン（ｓｔａｖｉｄｉｎｅ）、アデフォビル、アデフォビル・ジピボキシル、フォジブジン、トドキシル、エムトリシタビン、アロブジン、アムドキソビル、エルブシタビンおよび類似の薬剤；非ヌクレオチド逆転写酵素阻害剤（イムノカル、オルチプラズ等のような抗酸化活性を有する薬剤を含む）、例えばネビラピン、デラビルジン、エファビレンツ、ロビリド、イムノカル、オルチプラズ、カプラビリン、ＴＭＣ−２７８、ＴＭＣ−１２５、エトラビリンおよび類似の薬剤；プロテアーゼ阻害剤、例えばサキナビル、リトナビル、インジナビル、ネルフィナビル、アンプレナビル、ホスアンプレナビル、ブレカナビル、ラルテグラビル、アタザナビル、チプラナビル、パリナビル、ラシナビルおよび類似の薬剤；侵入阻害剤、例えばエンフビルチド（Ｔ−２０）、Ｔ−１２４９、ＰＲＯ−５４２、ＰＲＯ−１４０、ＴＮＸ−３５５、ＢＭＳ−８０６、５−Ｈｅｌｉｘおよび類似の薬剤；インテグラーゼ阻害剤、例えばＬ−８７０、８１０、ラルテグラビルおよび類似の薬剤；出芽阻害剤、例えばＰＡ−３４４およびＰＡ−４５７および類似の薬剤；ならびにＣＸＣＲ４および／またはＣＣＲ５阻害剤、例えばビクリビロック（Ｓｃｈ−Ｃ）、Ｓｃｈ−Ｄ、ＴＡＫ７７９、マラビロック（ＵＫ ４２７，８５７）、ＴＡＫ４４９および類似の薬剤が含まれる。
【００８３】
１つの実施形態では、本発明の方法は、治療薬を、上記に列挙したまたはその他の別の治療薬と共に治療される被験者に投与することを含む。
【００８４】
１つの実施形態では、治療薬は、上記に列挙したまたはその他の別の治療薬と共に治療される被験者に投与するためである。
【００８５】
１つの実施形態では、治療薬と別の治療薬は、ＨＩＶまたはＡＩＤＳの治療において相乗作用的に働く。
【００８６】
本明細書で使用される「治療する」および「治療」という用語は、症状の重症度および／または頻度の低減、症状および／または根底にある原因の排除、症状および／またはその根底にある原因の発生の防止（予防）、ならびに損傷の改善または矯正を指す。したがって、例えば、障害を「治療する」本発明の方法は、素因がある個体における障害の予防および臨床的に症候性の個体における障害の治療の両方を包含する。
【００８７】
本明細書で使用される「治療する」は、脊椎動物、哺乳動物、特にヒトにおける疾病のあらゆる治療または予防を含み、疾病を阻止すること、すなわちその発症を止めること；または疾病の作用を軽減するもしくは改善すること、すなわち疾病の作用の後退を生じさせることを包含する。
【００８８】
本明細書で使用される「予防」もしくは「予防的」もしくは「防止的」療法または「予防する」もしくは「予防」は、疾病に対する素因があり得るが、まだその疾病を有すると診断されていない被験者において疾病が生じるのを防ぐことまたは疾病のその後の進行を改善することを包含する。
【００８９】
１つの実施形態では、本発明の方法または組成物は、ＨＩＶ感染がＡＩＤＳに進行するのを防ぐまたは遅延させる。別の実施形態では、本発明の方法または組成物はＡＩＤＳの症状を軽減する。別の実施形態では、本発明の方法または組成物は、ＡＩＤＳを有する被験者において免疫応答を改善する。別の実施形態では、本発明の方法または組成物は、ＡＩＤＳを有する被験者のために生活の質を改善する。別の実施形態では、本発明の方法または組成物は、ＡＩＤＳを有する被験者において寿命を延長する。
【００９０】
本明細書全体を通して、文脈上特に必要とされない限り、「含む」という語または「含むこと」などの変形は、記述される要素または整数または要素もしくは整数の群の包含を意味するが、いかなる他の要素または整数または要素もしくは整数の群の排除も意味しないことが理解される。
【００９１】
また、本明細書で使用される、「１つの」および「その」という単数形は、文脈上明らかに指示されない限り、複数の態様を包含することも留意されねばならない。
【００９２】
明確さと理解のために本発明をある程度詳細に説明したが、本明細書で開示される本発明の概念の範囲から逸脱することなく、本明細書で述べる実施形態および方法に様々な修正および変更を施し得ることは当業者に明白である。
【００９３】
以下の実施例を参照して本発明をここでさらに詳細に説明する。実施例は例示のためにのみ提供されるものであり、特に明記されない限り限定を意図されない。したがって、本発明は、本明細書で提供される教示の結果として明らかになるありとあらゆる変形・変法を包含する。
【実施例１】
【００９４】
ＬＫＫＴＥＴＱ（配列番号：１）はチモシンβ４（Ｔβ４）のフラグメントである。
【００９５】
ペプチドＡｃ−ＬＫＫＴＥＴＱ−ＯＨは、２０名の類似のＨＩＶ陽性男性および女性に関するパイロット試験において検討された活性な治療薬であり、前記男性および女性の一部は重篤なＡＩＤＳに進行していた。
【００９６】
各々の男性または女性に、ペプチドＡｃ−ＬＫＫＴＥＴＱ−ＯＨ（１０ｍｇ）を含有する組成物を週に１回１２週間にわたって皮下注射した。ＣＤ４およびＣＤ８陽性細胞ならびにＨＩＶウイルス負荷（ＰＣＲによる）および通常の病理学についての血液検査を、基線時、８週間目および１２週間目に実施した。結果を以下の３つの表に示す。ヘモグロビンレベル、クレアチニン、ＡＬＴ、ＡＳＴ、アルカリホスファターゼ、ビリルビン、ＧＧＴ、アルブミン、総タンパク質およびグロブリン試験は注目すべき点を示さなかった。血糖の小さな低下が見られたが、これは有意ではないと判定された。これまでのところ有害作用は報告されていない。
【表１】
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【表２Ａ】
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【表２Ｂ】
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【表３】
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【実施例２】
【００９７】
ペプチドドＡｃ−ＬＫＫＴＥＴＱ−ＯＨを、新鮮ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）中でＨＩＶ−１のＣＸＣＲ４補助受容体向性ＨＴ／９２／５９９およびＣＣＲ５補助受容体向性ＢａＬサブタイプＢ株に対して評価した。ペプチドを感染の８時間前および感染の直前に細胞に添加した。ＡＺＴ対照化合物をペプチドと並行して評価し、ＨＩＶ−１ＨＴ／９２／５９９に対して８および６ｎＭのＥＣ５０値ならびにＨＩＶ−１ＢａＬに対して６および１０ｎＭのＥＣ５０値を得た。配列番号：１のペプチドは、５００μＭの高試験濃度までの濃度で評価した場合、ＰＢＭＣアッセイにおいて抗ウイルス活性を示さなかった。
【００９８】
パイロット試験の結果は非常に有望であった。ＨＩＶウイルス負荷の鍵となるパラメータである、ＣＤ４陽性およびＣＤ８陽性白血球数ならびに体重増加は、すべて基線からの極めて有意の改善を示し、おそらく最も有意であったのは、１名の患者において、パイロット試験の１２週間の期間にわたって２５７０００のレベルから検出不能となったＨＩＶウイルス負荷である。
【国際調査報告】
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