(57)【要約】治療を必要としている患者にルテニウム錯体塩を投与することを含む、難治性癌を治療するための治療法が開示される。2013531064.tif 000005
2013531064.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
オキサリプラチン、カペシタビン（capecitibine）、セツキシマブ、イリノテカン、およびパニツムマブからなる群より選択される1種または複数種の薬物を含むレジメンで以前に治療された結腸直腸癌を治療するための医薬の製造のための、ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]の使用。
【請求項２】
前記レジメンがオキサリプラチンを含む、請求項1記載の使用。
【請求項３】
前記レジメンがイリノテカンを含む、請求項1記載の使用。
【請求項４】
テモゾロミドを含むレジメンで以前に治療された黒色腫を治療するための医薬の製造のための、ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]の使用。
【請求項５】
（1）EGFR遺伝子にT790M変異を保持している腫瘍細胞を有することを同定された肺癌、あるいは（2）パクリタキセル、ドセタキセル、カルボプラチン、ベバシズマブ、ソラフェニブ、ゲムシタビン、ゾレドロン酸、ペメトレキセド、ナベルビン、バタラニブ、イマチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、セツキシマブ、およびパニツムマブ（panutimumab）の群より選択される1種または複数種の薬物を含むレジメンで以前に治療された肺癌を治療するための医薬の製造のための、ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]の使用。
【請求項６】
前記肺癌がNSCLCである、請求項5記載の使用。
【請求項７】
前記肺癌がパクリタキセルを含むレジメンで以前に治療されてきた、請求項5または6記載の使用。
【請求項８】
前記肺癌がゲムシタビンを含むレジメンで以前に治療されてきた、請求項5または6記載の使用。
【請求項９】
前記肺癌がエルロチニブまたはゲフィチニブを含むレジメンで以前に治療されてきた、請求項5または6記載の使用。
【請求項１０】
前記肺癌がソラフェニブを含むレジメンで以前に治療されてきた、請求項5または6記載の使用。
【請求項１１】
前記肺癌がベバシズマブを含むレジメンで以前に治療されてきた、請求項5または6記載の使用。
【請求項１２】
前記肺癌がドセタキセルおよび／またはカルボプラチンを含むレジメンで以前に治療されてきた、請求項5または6記載の使用。
【請求項１３】
ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]が、少なくとも320mg/m2の量で静脈内投与される、請求項1〜12のいずれか一項記載の使用。
【請求項１４】
ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]が、少なくとも500mg/m2の量で静脈内投与される、請求項1〜12のいずれか一項記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、その全内容が参照により本明細書に組み入れられる2010年7月17日に提出された米国仮出願第61/365,328号の優先権を主張するものである。
【０００２】
発明の分野
本発明は、概して、癌を治療するための方法、とくに難治性癌を治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
当技術分野において、多数のルテニウム錯体化合物が抗腫瘍化合物として有用であることが知られている。例えば、米国特許第4,843,069号（特許文献1）、PCT 国際公開公報第WO 9736595号（特許文献2）、および米国特許出願公開第2005032801号（特許文献3）を参照されたい。とくに、ルテニウム錯体塩のインダゾリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]およびナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]は、結腸癌細胞においてアポトーシスを誘導するのに有効であることが前臨床試験で示されている。加えて、ルテニウム錯体塩の化合物インダゾリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]（KP1019）は、第I相臨床試験においていくらかの抗癌活性を示した。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】米国特許第4,843,069号
【特許文献２】PCT 国際公開公報第WO 9736595号
【特許文献３】米国特許出願公開第2005032801号
【発明の概要】
【０００５】
現在、化合物ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]は、いくつかの難治性癌を治療するのにとりわけ有効であることが見出されている。具体的には、化合物ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]は、驚くべきことに、オキサリプラチン、カペシタビン（capecitibine）、セツキシマブ、ならびにイリノテカンおよびパニツムマブで失敗していた結腸直腸癌を制御するのに有効であることが臨床試験で見出されている。該化合物は、テモゾロミド抵抗性の黒色腫細胞にも有効である。加えて、該化合物は、難治性肺癌を制御し得ることが見出されている。
【０００６】
したがって、第一の局面において、本発明は、難治性結腸直腸癌を治療する方法であって、オキサリプラチン、カペシタビン、セツキシマブ、イリノテカン、およびパニツムマブの群のうちの1種または複数種を含む治療に対して難治性の結腸直腸癌を有するとして同定された患者を、治療上有効量のナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を用いて治療することを含む方法を提供する。
【０００７】
別の局面において、本発明は、テモゾロミドに対して難治性の黒色腫を治療する方法であって、テモゾロミドに対して難治性の黒色腫を有する患者を同定すること、および該患者を治療上有効量のナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を用いて治療することを含む方法を提供する。
【０００８】
本発明は、さらに、非小細胞肺癌（NSCLC）等の難治性肺癌を治療する方法であって、そのような難治性肺癌を有する患者を同定すること、および該患者を治療上有効量のナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を用いて治療することを含む方法を提供する。いくつかの態様において、難治性肺癌は、パクリタキセルを含む治療に対して難治性である。いくつかの態様において、難治性肺癌は、エルロチニブおよびゲフィチニブ等のEGFR阻害剤に抵抗性のNSCLC、またはEGFR遺伝子にT790M変異を有するNSCLC細胞を有するNSCLCである。いくつかの態様において、難治性肺癌は、カルボプラチン、ゲムシタビン、ゾレドロン酸、ペメトレキセド、ゲムシタビン、ナベルビン、バタラニブ、イマチニブ、およびベバシズマブより選択される1種または複数種の薬物を含むレジメンで以前に治療されてきた。
【０００９】
本発明の上記および他の利点および特徴、ならびにそれが達成される様式は、好ましいかつ例示的な態様を例証している付随する実施例と合わせて以下の本発明の詳細な説明を検討すれば、より容易に明白となるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]で処理したG361細胞のMTTアッセイからのS字形用量反応曲線である（Y軸：対照に対するパーセント；X軸：濃度）。
【図２】テモゾロミドで処理したG361細胞のMTTアッセイからのS字形用量反応曲線である（Y軸：対照に対するパーセント；X軸：濃度）。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
発明の詳細な説明
本発明は、概して、特定の難治性癌を治療するための方法を提供する。本明細書において用いるとき、「(治療)に対して難治性の」という用語は、特定の癌が、特定の抗新生物治療に好ましく反応しないこと、あるいは特定の抗新生物治療に好ましく反応した後に再発または再燃することを意味する。したがって、例えば、エルロチニブ「に対して難治性の」非小細胞肺癌とは、小細胞肺癌が、エルロチニブを含むが必ずしもこれに限定されない治療レジメンに好ましく反応しなかったまたは抵抗性であること、あるいは該治療レジメンに好ましく反応した後に再発または再燃したことを意味する。
【００１２】
難治性癌を検出または同定するために、化学療法による治療を受けている患者を、抵抗性、非反応性、または再発性癌の兆候について慎重にモニターすることができる。これは、化学療法による治療に対する患者の癌の反応をモニターすることによっても達成され得る。初期治療に対する癌の反応、反応の欠如、または再燃は、当技術分野において実践される任意の適切な方法によって判定され得る。例えば、これは、腫瘍の大きさおよび数の評価によって達成され得る。腫瘍の大きさ、あるいは腫瘍の数の増加は、腫瘍が化学療法に反応していないこと、または再燃が生じていることを示す。判定は、Therasse et al, J. Natl. Cancer Inst., 92:205-216 (2000)において詳細に記載されている「RECIST」の基準に従ってなされ得る。
【００１３】
本発明の第一の局面によると、オキサリプラチン、カペシタビン、セツキシマブ、イリノテカン、およびパニツムマブからなる群より選択される1種、2種、3種、またはそれ以上の薬物を含むレジメンで以前に治療された結腸直腸癌を治療するための方法が提供される。該方法は、難治性結腸直腸癌を治療および予防するのに、または結腸直腸癌の再発を遅らせるのに有用であり得る。該方法は、結腸直腸癌を以前そのように治療されてきたことを同定された患者に、治療上有効量のトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を投与することを含む。いくつかの態様において、該方法を適用して、オキサリプラチン、カペシタビン、セツキシマブ、イリノテカン、およびパニツムマブからなる群より選択される1種または複数種の薬物を含む治療レジメンに対して難治性の結腸直腸癌を有する患者を、該患者に治療上有効量のトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を投与することによって治療する。つまり、本発明は、オキサリプラチン、カペシタビン、セツキシマブ、イリノテカン、およびパニツムマブからなる群より選択される1種、2種、3種、またはそれ以上の薬物を含む治療レジメンで以前に治療されたか、またはそれに対して難治性の結腸直腸癌を治療するための医薬の製造のための、トランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]の使用に向けられている。
【００１４】
いくつかの態様において、方法は、トランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を、オキサリプラチンを含むレジメンで以前に治療された結腸直腸癌を有する患者に投与することを含む。いくつかの態様において、方法は、トランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を、イリノテカンを含むレジメンで以前に治療された結腸直腸癌を有する患者に投与することを含む。いくつかの態様において、治療上有効量のトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を、FOLFOXレジメン（フォリン酸、5-フルオロウラシル、およびオキサリプラチン）、FOLFIRIレジメン（フォリン酸、5-フルオロウラシル、およびイリノテカン）、オキサリプラチンおよびカペシタビンを含むレジメン、あるいはそれぞれベバシズマブを伴うかもしくは伴わない、またはそれぞれEGFR抗体（例えば、セツキシマブおよびパニツムマブ）を伴うかもしくは伴わない、イリノテカンを含むレジメンで以前に治療された結腸直腸癌を有する患者に投与する。別の態様において、治療上有効量のトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を、カペシタビンおよび1種または複数種の他の薬物で以前に治療されたか、またはそれに対して難治性の結腸直腸癌を有する患者に投与する。難治性結腸直腸癌は、いかなるステージにあっても、局所性または転移性のいずれかであってもよい。
【００１５】
別の局面において、本発明は、テモゾロミドで以前に治療された黒色腫を治療するための方法を提供する。したがって、該方法は、難治性黒色腫を治療および予防するのに、またはテモゾロミドで以前に治療された黒色腫の再発を遅らせるのに有用である。具体的には、該方法は、テモゾロミドで以前に治療された黒色腫を有する患者に、治療上有効量のトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を投与することを含む。つまり、本発明は、テモゾロミドを含む治療レジメンに対して難治性の黒色腫を治療および予防するための医薬の製造のための、トランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]の使用に向けられている。いくつかの態様において、テモゾロミドを含む治療レジメンに対して難治性の黒色腫患者を同定し、該患者に治療上有効量のナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]等のトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩を投与する。
【００１６】
さらに別の局面において、本発明は、難治性肺癌、とくに非小細胞肺癌（NSCLC）を治療および予防するための、またはNSCLC等の肺癌の再発を遅らせるための方法を提供する。具体的には、該方法は、治療上有効量のトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を、肺癌、とくに（1）EGFR遺伝子にT790M変異を保持している細胞を有するNSCLC、または（2）パクリタキセル、ドセタキセル、カルボプラチン、ベバシズマブ、ソラフェニブ、ゲムシタビン、ゾレドロン酸、ペメトレキセド、ナベルビン、バタラニブ、イマチニブ、およびEGFR阻害剤（例えば、エルロチニブ、ゲフィチニブ、セツキシマブ、およびパニツムマブ（panutimumab））の群より選択される1種、2種、3種、もしくはそれ以上の薬物を含む治療レジメンで以前に治療され、例えばそれに対して難治性もしくは抵抗性のNSCLCを有する患者に投与することを含む。つまり、本発明は、難治性肺癌、とくにEGFR遺伝子にT790M変異を有する、または、パクリタキセル、ドセタキセル、カルボプラチン、ベバシズマブ、ソラフェニブ、ゲムシタビン、ゾレドロン酸、ペメトレキセド、ナベルビン、バタラニブ、イマチニブ、およびEGFR阻害剤（例えば、エルロチニブ、ゲフィチニブ、セツキシマブ、およびパニツムマブ）からなる群より選択される1種、2種、3種、もしくはそれ以上の薬物で以前に治療され、例えばそれに対して難治性もしくは抵抗性の非小細胞肺癌（NSCLC）を治療および予防するための医薬の製造のための、トランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]の使用に向けられている。
【００１７】
一態様において、方法は、NSCLC患者が腫瘍細胞におけるEGFR遺伝子にT790M変異を有するかどうか、および該変異が同定されるかどうかを判定すること、該患者に治療上有効量のトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を投与することを含む。
【００１８】
別の態様において、方法は、パクリタキセルを含むレジメンで以前に治療された、例えばパクリタキセルに対して難治性または抵抗性の患者に、治療上有効量のトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を投与することを含む。
【００１９】
別の態様において、方法は、EGFR阻害剤（例えば、エルロチニブ、ゲフィチニブ）を含むレジメンで以前に治療された、例えばエルロチニブまたはゲフィチニブに対して難治性または抵抗性の肺癌患者に、治療上有効量のトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を投与することを含む。
【００２０】
別の態様において、方法は、ゲムシタビンを含むレジメンで以前に治療された、例えばゲムシタビンに対して難治性または抵抗性の肺癌患者に、治療上有効量のトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を投与することを含む。
【００２１】
別の態様において、方法は、ドセタキセル、カルボプラチン、およびベバシズマブの群より選択される1種、2種、または3種の薬物を含むレジメンで以前に治療された、例えばそのようなレジメンに対して難治性または抵抗性の肺癌患者に、治療上有効量のトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を投与することを含む。
【００２２】
別の態様において、方法は、ソラフェニブを含むレジメンで以前に治療された、例えばソラフェニブに対して難治性または抵抗性の肺癌患者に、治療上有効量のトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を投与することを含む。
【００２３】
さらに別の態様において、方法は、ペメトレキセドを含むレジメンで以前に治療された、例えばペメトレキセドに対して難治性または抵抗性の肺癌患者に、治療上有効量のトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を投与することを含む。
【００２４】
さらに別の態様において、方法は、カルボプラチン、ゲムシタビン、およびゾレドロン酸の群より選択される1種、2種、または3種の薬物を含むレジメンで以前に治療された、例えばそのようなレジメンに対して難治性または抵抗性の肺癌患者に、有効量のトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を投与することを含む。
【００２５】
さらに別の態様において、方法は、ベバシズマブを含むレジメンで以前に治療された、例えばそのようなレジメンに対して難治性または抵抗性の肺癌患者に、有効量のトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を投与することを含む。
【００２６】
いくつかの態様において、肺癌は小細胞肺癌である。好ましい態様において、肺癌は肺腺癌および肺扁平上皮癌等のNSCLCである。
【００２７】
上記の種々の局面において、方法は、投与する工程の他に、記載されるような難治性癌を有する患者を同定する工程をさらに任意で含んでもよい。
【００２８】
癌の再発を予防するまたは遅らせる目的で、治療を受けているかつ寛解期にあるまたは安定したもしくは進行していない状態にある癌患者を、予防上有効量のトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を用いて治療して、癌の再発または再燃を有効に予防するかまたは遅らせてよい。
【００２９】
本明細書において用いるとき、「...を用いて...を治療する」という語句またはその言い換えは、患者に化合物を投与すること、または患者の身体内で化合物の形成を引き起こすことを意味する。
【００３０】
本発明の方法によると、治療上有効量のトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩、とくにナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]は、単独で、あるいは1種または複数種の他の抗癌剤と組み合わせて用いられてよい。
【００３１】
トランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩は、当技術分野において公知の任意の方法で生成され得る。例えば、PCT 国際公開公報第WO/2008/154553号は、ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を生成する効率的な方法を開示している。
【００３２】
ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]等の薬学的化合物は、全体重に基づき患者の体重1kgあたり0.1mg〜1000mgの量で、静脈注射または他の任意の適切な手段によって投与され得る。活性成分を、所定の時間間隔で、例えば1日1回または2日おきに1回、1回で投与してもよく、または数回のより少ない用量に分割して投与してもよい。好ましい態様において、ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を、320mg/m2または500mg/m2またはそれ以上で静脈内投与する。それは、例えば1週間に1回、例えば各28日サイクルの1日目、8日目、および15日目に投与され得る。上記に示された用量範囲は例示的なものに過ぎず、本発明の範囲を限定することを意図するものではないことを理解すべきである。活性化合物の治療上有効量は、用いられる化合物の活性、患者の身体における活性化合物の安定性、軽減されるべき病状の重症度、治療される患者の全重量、投与の経路、身体による活性化合物の吸収、分布、および排泄の容易さ、治療されるべき患者の年齢および感受性などを含むがこれらに限定されない要素で変化し得る。種々の要素が時間とともに変化するにつれて、投与の量を調節することができる。
【００３３】
いくつかの態様において、薬学的に許容される塩（例えば、アルカリ金属塩、好ましくはナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]）を、各投与の際に、体表面積に基づき少なくとも300、320、400、500、550、600、650、700、800mg/m2またはそれ以上の量で患者に投与する。いくつかの態様において、薬学的に許容される塩（例えば、アルカリ金属塩、好ましくはナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]）を、各投与の際に、500mg、600mg、700mg、800mg、900mg、または1000mgより多い量で患者に投与する。好ましい態様において、薬物を、1週間につき1回、各28日サイクルの1日目、8日目、および15日目に静脈注射によって投与する。
【００３４】
本発明によると、トランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩（例えば、ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]）を、例えば静脈内、動脈内、皮内、または筋肉内投与に適した注射可能な形態で製剤の中に組み入れることができる。注射可能な形態は、当技術分野において一般的に知られており、例えば緩衝液中または懸濁液である。
【００３５】
本発明の別の局面によると、容器内に単位用量形態のトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩（例えば、ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]）、および本発明に従った方法、例えば上記のような難治性癌の発症を治療する、予防する、または遅らせることにおけるキットの使用のための使用説明書を任意で含む薬学的キットが提供される。単位用量形態の治療用化合物の量は、本発明の方法において患者に用いられる容量によって決定される。キット内で、トランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のアルカリ金属塩（例えば、ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]）は、アンプル中に例えば25mgの量で凍結乾燥した形態であってよい。臨床において、凍結乾燥した形態を溶解し、本発明に従った治療を必要としている患者に投与することができる。
【実施例】
【００３６】
1．難治性結腸癌におけるナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のインビボ活性
英国（UK）にある2つのセンターで、ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を用いたヒト臨床試験が実施された。試験には、2007年9月に不完全に切除され、腺嚢性の組織像、結腸直腸腺癌を有する63歳の白人男性が登録された。彼の初期療法は、2007年10月〜2009年2月までの間、オキサリプラチン、カペシタビン、およびセツキシマブからなるものであり、最良効果は進行であった。つまり、療法は腫瘍の増大を制御できなかった。次いで、彼は、イリノテカンおよびパニツムマブに変更され、2009年4月〜2009年10月までの間投与され、やはり最良効果は進行であった。2010年6月の初旬に、彼は、単一剤としてナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を試され、各21日サイクルの1〜4日目に1日500mg/m2（体表面積、すなわちBSAに基づき）で静脈内投与された。患者は、4サイクルのナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を受け、最良効果は安定であった。したがって、ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]は、オキサリプラチン、カペシタビン、およびセツキシマブ、ならびにイリノテカンおよびパニツムマブで失敗していた結腸直腸癌を制御することができた。
【００３７】
2．テモゾロミド抵抗性の黒色腫細胞、ならびにパクリタキセルおよびエルロチニブ抵抗性の肺癌細胞におけるナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]の活性
表示される細胞株に対するナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]の抗増殖活性を、ATCCのMTT Cell Proliferation Assay（カタログNo. 30-1010K）を用いることによってインビトロで評価した。ヒト悪性黒色腫細胞株G361のプレートに2,500個/ウェルの細胞を播種し、10％FBSおよび1％ペニシリン/ストレプトマイシン（strep）/グルタミンを含有するMcCoy's 5a培地中で細胞を増大させた。ヒト肺癌腫細胞株A549のプレートに2,500個/ウェルの細胞を播種し、10％FBSおよび1％ペニシリン/ストレプトマイシン/グルタミンを含有するHam's F12培地中で細胞を増大させた。培養物を37℃の加湿した5％ CO2/95％大気中で維持した。本研究のために、ストックの培養物を70〜80％コンフルエントまで増大させた。細胞を、1,000μMのナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]もしくはテモゾロミド、またはそれらの4×希釈系列（250μM、62.5μMなど）、あるいは1000nMのパクリタキセル、またはその4×希釈系列で処理した。処理後72時間で各ウェルから100μlの培地を取り出し、10μlのMTT試薬を各ウェルに添加した。プレートを37℃で4時間インキュベートし、次いで100μlの界面活性剤を添加した。プレートを室温にて暗所で一晩置き、SoftMax（登録商標）Pro（バージョン5.2、Molecular Devices）を用いたプレートリーダーで読み取った。
【００３８】
吸光度データを以下のように解析した：吸光度の値を対照に対するパーセントに変換し、SoftMax（登録商標）Pro（バージョン5.2、Molecular Devices）を用いたIC50の算出のために試験物質の濃度に対してプロットした。対照に対するパーセントを算出する前に、全ウェルからプレートのブランクシグナルの平均を差し引いた。各試験ウェルに対する吸光度の値を薬物なしの対照の平均（カラム11の値；細胞＋溶剤の対照）で割り、かつ100倍することによって、対照に対するパーセントを算出した。化合物濃度 対 対照に対するパーセントのプロットを、IC50値を得るための4パラメーター方程式およびS字形用量反応曲線を描く他のパラメーターを用いて解析した。
【００３９】
試験物質に対するIC50値を、以下の4パラメーターロジスティック方程式を用いてデータを曲線適合させることによって概算した。
2013531064.tif 000003
式中、「最高値」は対照吸光度の最大％（100％）であり、「最低値」は物質の最高濃度における対照吸光度の最小％（ゼロに至るまで）であり、Yは対照吸光度に対するパーセントであり、Xは試験物質の濃度であり、IC50は細胞の増大を対照細胞と比較して50％まで阻害する物質の濃度であり、nは曲線の傾きである。ヒト黒色腫G361細胞株において、ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]（「試験薬物」）のIC50は41μMであった（図1）。G361細胞は、テモゾロミドに対して比較的抵抗性であった（テモゾロミドのIC50は199μMであった）（図2）。
【００４０】
ヒト肺癌腫A549細胞株におけるナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のIC50は9.9μMであり、他の細胞株におけるそのIC50と比較して非常に強力であった。別のヒト肺癌腫細胞株H1975も上記と同じ様式で試験し、ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]およびパクリタキセルのIC50値を得た。パクリタキセルはH1975細胞において非常に有効である（IC50＝0.005μM）。これと比較して、A549細胞は9.92μMのIC50を有し、パクリタキセルに対して比較的抵抗性であった。下記の表2は、試験された異なる肺癌細胞株における2種の化合物に対する活性をまとめたものである。ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]（「試験薬物」）が、パクリタキセルに抵抗性の肺癌細胞に対してさらにより有効であることは明白である。
【００４１】
【表２】
2013531064.tif 000004
【００４２】
加えて、ヒト肺癌腫細胞株H1975は、細胞におけるEGFR遺伝子のT790M変異が理由で、エルロチニブおよびゲフィチニブに対して抵抗性であることが当技術分野において知られている。例えば、Bao et al., Mol. Cancer Ther., 8(12):3296-3306 (2009)を参照されたい。したがって、ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]は、エルロチニブおよびゲフィチニブ等のEGFR阻害剤に抵抗性のNSCLC細胞に対しても、またはT790M変異を有するNSCLC細胞に対しても活性を有する。
【００４３】
A549細胞は、ゲムシタビンに対しても本質的に抵抗性である。例えば、Denlinger et al, Ann., Thorac. Surg., 78:1207-1214 (2004)を参照されたい。したがって、ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]は、ゲムシタビンに抵抗性のNSCLC細胞に対しても活性を有する。
【００４４】
3．肺癌におけるナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]のインビボ活性
USにある2つのセンターで、ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を用いたヒト臨床試験が実施され、治療に対して難治性の肺癌を有する2人の患者に1週間に1回、すなわち各28日サイクルの1日目、8日目、および15日目に静脈内投与された。
【００４５】
患者No.04-005は、2006年4月に診断され、中分化型腺癌の組織像、ステージIVの非小細胞肺癌を有する51歳の白人女性であった。初期療法は、2006年5月〜2006年6月までの間の放射線療法（総線量40Gy）からなるものであり、最良効果は安定であった。ドセタキセル、カルボプラチン、およびベバシズマブを用いた併用化学療法が2006年9月〜12月までの間投与され、患者は完全奏功に到達した。患者は疾患の再発を患い、2008年4月にソラフェニブを開始した。疾患の進行が理由で、2008年5月にソラフェニブは中断された。2008年6月〜2008年9月まで療法はペメトレキセドに変更され、最良効果は安定であった。2009年11月〜2010年1月までの間、患者はゲムシタビンを受けた。患者が疾患の進行を有したとき、彼女は2010年3月に、1週間につき1回、各28日サイクルの1日目、8日目、および15日目に320mg/m2（体表面積、すなわちBSAに基づき）（総量531mgに対して）で静脈内にナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を開始した。患者は、4サイクルのナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を受け、最良効果は安定であった。このことは、ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]が、ドセタキセル、カルボプラチン、ベバシズマブ、およびペメトレキセドに対して難治性であり、かつソラフェニブおよびゲムシタビンに対して抵抗性であった肺癌を制御し得たことを示している。
【００４６】
患者No.04-011は、2005年1月に診断され、低分化型腺癌の組織像、ステージIIIBの非小細胞肺癌を有する64歳の白人男性であった。初期療法は、2005年1月〜2005年8月までカルボプラチン、ゲムシタビン、およびゾレドロン酸からなるものであり、部分奏功を有した。治療はドセタキセルに変更され（2005年8月〜2005年12月）、最良効果は安定であった。2005年12月にパクリタキセル放射線増感を有する54Gyでの胸部放射線療法が開始され、2006年2月に終了した。2006年の残りの期間中、患者は単一剤エルロチニブのコースおよび単一剤ペメトレキセドのコースを受け、これらの療法に対する最良効果は不明である。2007年1月に、ゲムシタビンおよびナベルビンを用いた併用療法が開始されたが、彼の最良効果は進行であった。PTK787（バタラニブ）およびイマチニブを用いた実験的療法が2007年2月に開始された。彼は2008年10月までその治療を続け、安定であった。2009年にカルボプラチン、パクリタキセル、およびベバシズマブ療法が開始された。カルボプラチンおよびパクリタキセルは2009年4月に中断され、患者は彼が進行を有した2010年4月までベバシズマブを維持された。2010年5月、患者は、週1回、各28日サイクルの1日目、8日目、および15日目に320mg/m2（体表面積、すなわちBSAに基づき）（総量618mgに対して）で静脈内に単一剤としてナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を用いた療法を開始した。患者は、4サイクルのナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]を受け、最良効果は安定であった。このことは、ナトリウムトランス-[テトラクロロビス(1H-インダゾール)ルテナート(III)]が、カルボプラチン、ゲムシタビン、ゾレドロン酸、エルロチニブ、ペメトレキセド、ゲムシタビン、ナベルビン、バタラニブ、イマチニブ、カルボプラチン、パクリタキセル、およびベバシズマブで以前に治療されてきた肺癌を制御し得たことを示している。
【００４７】
明細書において言及されたすべての刊行物および特許出願は、本発明が関連する技術分野における当業者のレベルの指標となるものである。すべての刊行物および特許出願は、それぞれ個々の刊行物または特許出願が参照により組み入れられることがあたかも具体的かつ個々に指示されているかのように同程度に、参照により本明細書に組み入れられる。刊行物および特許出願についての単なる言及は、必ずしもそれらが本出願の先行技術であるという承認をなすものではない。
【００４８】
上記の発明は、理解の明確性のために図解および実施例によっていくらか詳細に記載されているが、ある程度の変更および修正が添付の特許請求の範囲の範囲内で行われてよいことは明白であろう。
【図１】
2013531064.tif 000006
【図２】
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【国際調査報告】
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