(57)【要約】  式（Ｉ）の化合物を組成物の総重量の０．０１重量％から１５重量％含み、主鎖および／または任意の側鎖に遊離基および／若しくは反応基または官能基を有しない、化粧品用および薬剤用に許容性である少なくとも一つの無水エステルを組成物の総重量の０．１重量％から９９．９重量％含み、前記組成物の総重量が１００重量％となるように、任意で化粧品用および薬剤用に許容性である賦形剤をさらに含んでいる、式（Ｉ）の化合物の安定した生薬組成物。【化１】2013531052.tif 000019（式中のＲ１とＲ２は互いに独立して、任意に１以上の直鎖または分岐鎖で置換され、任意に１以上のヘテロ原子を有するアルキル、アリール、アリールアルキル基である。）
2013531052.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物の安定した生薬組成物であって、
式中のＲ１とＲ２は互いに独立して、任意に１以上の直鎖または分岐鎖で置換され、任意に環状基であり、任意に１以上のヘテロ原子を有していてよいアルキル、アリール、アリールアルキル基であり、
【化１】
2013531052.tif 000016
式（Ｉ）の化合物を、前記組成物の総重量の０．０１重量％から１５重量％含み、
主鎖および／または任意の側鎖に遊離基および／若しくは反応基または官能基を有しない、化粧品用および薬剤用に許容性である少なくとも一つの無水エステルを０．１重量％から９９．９重量％含み、
前記組成物の総重量が１００重量％となるように、任意で化粧品用および薬剤用に許容性である賦形剤をさらに含んでいることを特徴とする生薬組成物。
【請求項２】
前記少なくとも一つの化粧品用および薬剤用に許容性である無水エステルは、アセテート、ベンソエート、サリチル酸塩、エステル６１０、カプリル／カプリン／コハクトリグリセリド、ステアレートおよびイソステアレート、エチルヘキサノエート、パルミテート、イソナノエート、オレエート、ネオペンタノエート、およびミリステートなど、並びにこれらの混合物から成る群から選択されることを特徴とする請求項１記載の組成物。
【請求項３】
Ｒ１はブチル基であり、Ｒ２はメチル基であり、式（Ｉ）の化合物はスルフォラファンである請求項１または２記載の組成物。
【請求項４】
前記スルフォラファンは、抽出された天然スルフォラファンまたは合成スルフォラファンである請求項３記載の組成物。
【請求項５】
前記化粧品用および／または薬剤用に許容される賦形剤は、メチルポリシロキサンである請求項１から４のいずれかに記載の組成物。
【請求項６】
式（Ｉ）の化合物を、鎖中に遊離基および／若しくは反応基または官能基がない化粧品用および薬剤用に許容性である無水エステルと混合する工程と、
求核基に対して安定した組成物を形成する工程と、を含む、式（Ｉ）の化合物を安定させる方法。
【化２】
2013531052.tif 000017
（式中のＲ１とＲ２はそれぞれ独立して、アルキル基、アリール基、アリールアルキル基であり、任意に１以上の直鎖または分岐鎖で置換され、任意で環状基であり、任意で１以上のヘテロ原子を有する。）
【請求項７】
前記遊離基および／若しくは反応基または官能基がない鎖を有する化粧品用および薬剤用に許容性である無水エステルは、アセテート、ベンソエート、サリチル酸塩、エステル６１０、カプリル／カプリン／コハクトリグリセリド、ステアレートおよびイソステアレート、エチルヘキサノエート、パルミテート、イソナノエート、オレエート、ネオペンタノエート、並びにミリステートなどから成る群から選択される、請求項６記載の方法。
【請求項８】
Ｒ１はブチル基であり、Ｒ２はメチル基であり、式（Ｉ）の化合物はスルフォラファンである請求項６または７記載の方法。
【請求項９】
前記スルフォラファンは、天然若しくは合成ラセミ型又は任意に純粋なスルフォラファンである請求項７記載の方法。
【請求項１０】
典型的には、サンスクリーン生成物、色素沈着過剰防護生成物、色素脱失生成物、汚染防止スクリーン、ルーサイト治療生成物、ガン（皮膚）治療生成物などの、例えば放射線の影響に対する防護生成物のごとき生薬製剤中で、前記安定化された式（Ｉ）の化合物を、少なくとも一つの化粧用および薬剤用に許容性である賦形剤と混合する工程をさらに含む、請求項５から８のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
前記賦形剤は、メチルポリシロキサンおよびそれらの誘導体から成る群から選択される請求項９記載の方法。
【請求項１２】
式（Ｉ）の化合物を安定させるための、鎖中に遊離基および／または反応基または官能基を有しない無水エステルの使用。
【化３】
2013531052.tif 000018
（式中のＲ１とＲ２はそれぞれ独立して、アルキル、アリール、アリールアルキル基であり、任意に１以上の直鎖または分岐鎖で置換され、任意に環状基であり、任意に１以上のヘテロ原子を有する。）
【請求項１３】
前記遊離基および／または反応基または官能基がない鎖を有する無水エステルは、アセテート、ベンソエート、サリチル酸塩、エステル６１０、カプリル／カプリン／コハクトリグリセリド、ステアレートおよびイソステアレート、エチルヘキサノエート、パルミテート、イソナノエート、オレエート、ネオペンタノエート、並びにミリステートなどから選択される、請求項１２記載の使用。
【請求項１４】
Ｒ１はブチル基であり、Ｒ２はメチル基であり、式（Ｉ）の化合物はスルフォラファンである請求項１０または１１記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は式（Ｉ）の化合物の安定化の分野に関し、式中のＲ１とＲ２はそれぞれ独立して、直鎖または分岐鎖であり、任意に１以上のヘテロ原子で置換された、アルキル、アリール、アリールフルキル基を表わす。
【０００２】
【化１】
2013531052.tif 000003
【０００３】
更に詳細には、本発明は式（Ｉ）の化合物の安定化に関し、式中のＲ１はブチル基を表わし、Ｒ２はメチル基を表わし、式（Ｉ）の化合物はスルフォラファンである。
【背景技術】
【０００４】
文献によれば、スルフォラファンは水の存在下で熱に対して不安定であるため、−２０℃に維持することが一般的に薦められる。
【０００５】
更に、ガスクロマトグラフィ内でスルフォラファン（Ｉ）を放出すると、反応（Ｉ）により、生成物の８０％が分解して３−ブテニルイソチオシアネート（４）が生じる。
【０００６】
【化２】
2013531052.tif 000004
【０００７】
この生成物は特に、気相クロマトグラフィの２５０℃での恒温注射器内でのスルフォラファンの熱分解に由来することが示されている（図１Ａ）。サンプルが、注射器を通らず、カラムに直接注入されたときには、分解ピークは観察されない（図１Ｂ）。
【０００８】
前述の３−ブテニルイソチオシアネート（４）の生成に加えて、水中でのスルフォラファンの加熱中に、反応（ＩＩ）により、二硫化ジメチル（５）、Ｓ−メチリチオスルフィネート（６）、Ｓ−メチル  メチリチオスルフォネート（７）、メチル（メチリチオ）メチルジスルフィド（８）、１，２，４−トリチオラン（９）、および（４）−イソチオシアネート−１−（メチリチオ）−１−ブテン（１０）などの多様な他の揮発性分解生成物が同定された。
【０００９】
これらの揮発性生成物は、メチリチオラジカル（１２）およびメチリチオスルフィニルラジカル（１３）が発生するラジカル経路を介し、さらに、スルフォキシド基が関与する多様な分子間反応を通じ、また、中間体（１１）を経由することで生成される。
【００１０】
【化３】
2013531052.tif 000005
【００１１】
一つの重要な非揮発性生成物は単離され、この生成物は、残留スルフォラファンでのスルフォラファンの加水分解中に発生したアミンのカップリング生成物であるＮ，Ｎ’−ジ−（４−メチルスルフィニル）ブチルチオ尿素（１４）であると同定された。この生成物は、反応（ＩＩＩ）に示す、スルフォラファン（１）と、スルフォラファン（１）の加水分解によって発生する４−メチルスルフィニルブチルアミン（１５）自体との反応の結果として形成される。
【００１２】
【化４】
2013531052.tif 000006
【００１３】
したがって、スルフォラファンの安定化剤を発見する必要がある。
【００１４】
文献ＦＲ２８８８２３５は、スルフォラファンをアカシアゴムによって安定化させる方法を開示している。この文献は、スルフォラファンが光、酸素および抽出濃縮生成物の温度に敏感であると開示している。アカシアゴムまたはアラビアゴムは、マトリックス封入により、酸素、光および水に対する防壁を形成することによって、活性成分を保護する膜形成特性を有する。
【００１５】
スルフォラファンの天然試料を異なるアカシアゴム含有率で安定させた。文献ＦＲ２８８８２３５では、アカシアゴムを５０％および７０％含む試料、すなわち、それぞれのスルフォラファン含有量が３６．０５％と２２．４％であるものを通常熟成条件下（２５℃、湿度６０％）および促進条件下（４０℃、湿度７５％）に置いた。スルフォラファンは数週間に渡って試験され、生成物の分解率を決定した。
【００１６】
残念なことに、この文献では、５０％のアカシアゴムを有する試料は特に安定化を示さず、促進経時条件下で、分解は通常条件下の２倍大きいことを示した。７０％のアラビアゴム含有量を有する試料は両方の経時条件下で分解を示したが、上記の試料よりも低いものであった。分解は１ヶ月後、４０℃で３０％を超えないが、２５℃では僅かな分解が第１週目で観察され、その後、スルフォラファン抽出物は相対的に安定しているように見え、分解率の増加を示さない。さらに、そのような量の安定化剤は処方物の生成においてその他の化合物である余地を残さない。
【００１７】
文献ＥＰ２１２０９６９もスルフォラファンを安定化させる方法について開示しており、これはシクロデキストリンを使用することによる不安定なオイルの形態であることが知られている。この文献はスルフォラファンの不安定性の由来を開示しておらず、それをシクロデキストリンと接触させる前に希釈することさえ提案している。シクロデキストリンは、１個から４個で結合されており、疎水性分子を含むことによって複合物を形成することができる５（またはそれ以上）のα−グルコピラノシド単位体で成るオリゴ糖である。疎水性分子は、シクロデキストリンに別の分子を挿入することによって、一定の条件で解放されることができる。
【００１８】
ＥＰ２１２０９６９によれば、３つの異なるシクロデキストリンが使用されている：それぞれ６個、７個および８個の糖分子で成る、α、βおよびγシクロデキストリンである。スルフォラファンの量は、スルフォラファンシクロデキストリン複合体を異なる条件下（室温または−３０℃で保管された封止試料、４０℃で包装された開封試料）に置いた後に、内部基準を使用したＨＰＬＣによって決定された。この研究の結果では、α−シクロデキストリンはさらに安定化させ、７ヶ月後でも１０％以下の分解に保つが、同じ期間後に５０％まで分解する不適であまり安定しないシクロデキストリンが観察される。
【００１９】
残念なことに、シクロデキストリンの選択は複雑なままであり、スルフォラファンをサンスクリーンに適用させない。
【００２０】
化粧用生薬製剤を生成するため、皮膚の単位面積あたりの活性物質濃度を維持するために、活性物質を希釈するための好適な物質が発見されなければならない。この希釈物質を選択する際、当該専門家は、水性相、アルコールまたは後者（アルコール）の混合物を一般的に選択する（その他の有機溶媒は一般的に皮膚に利用できない）。
【００２１】
この主題に関して、文献ＥＰ２１６３２３８は、脱色活性を得るため、スルフォラファン、または例えばスルフォラフェンなどの誘導体と混合された多数のカルボン酸を開示している。
【００２２】
文献ＷＯ０２／１５７２２は、グルコシノレート、イソチオシアネートまたはその誘導体の一つを使用することによる、ヘリコバクターの成長を防止するための方法について開示している。イソチオシアネートはスルフォラファンでよく、開示された処置方法は患者への組成物の投与が関与する。この文献はグルコシノレート、あるいはイソチオシアネートを含有する組成物が添加されている食品についても教示している。この文献の１２ページには、そのような組成物のための多くの賦形剤または基剤が開示されており、それらの中には水、溶剤、分散剤、縣濁剤、水性または非水性乳化剤、再生用無菌粉末がある。この文献は基剤、希釈剤、溶剤、または水性または非水性賦形剤の例として、水、エタノール、ポリオール、カルボキシメチルセルロース、植物油およびオレイン酸塩エチルなどの注射可能な有機エステルを開示している。最後に、保存剤、湿潤剤、乳化剤または分散剤および抗バクテリア、抗菌剤（パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸など）、結合剤、増量剤、などの粉化性粒子、吸収遅延剤など多くの補助剤について述べられている。
【００２３】
文献ＷＯ２００８／００７７２８は、その出願物の名称によれば、脂質構造体中でのコエンザイムＡの調製について開示している。その文献の詳細な分析によれば、この文献は外部用のスキンケア剤について述べており、皮膚上でのその美白効果が向上することを開示している。この製剤は、ヒドロキノングルコシドまたは美白剤として、Ｌ‐アスコルビン酸、プラセンタ抽出物、アルキルレソルシノール、トラネキサム酸およびコエンザイムＡ等の誘導体の一つを含む。この文献は、コウジ酸、コロイド硫黄およびヒドロキノンタイプの美白剤は薬用調剤中で分解し、それらの効果は失われると開示している。
【００２４】
この文献の目的は、美白ケア製品の美白剤の効果を向上させるために酸化コエンザイムＡを添加することである。この文献は美白剤の基剤としてリポソームを使用する。しかしながら、この文献はスルフォラファンについて述べていない。
【００２５】
文献ＦＲ２８４３１８は水とグルコラフェンまたはスルフォラファンおよび抗ＵＶ／ＩＲ防護因子および／または抗酸化剤を含む処方物について開示している。
【００２６】
挙げられた防護因子中、カンフル、安息香酸エステル、ケイ皮酸エステル、サルチル酸エステル、ベンゾフェノン誘導体、ベンザルマロン酸エステル、トリアジンの誘導体またはさらに少数のケトンおよびアルカンがＵＶＢフィルター用にバルク形態で発見されている。スルホン酸とそれらの塩は別に発見されている。ＵＶＡフィルター用に、ベンゾイルメタン誘導体、エナミン化合物がさらに発見されており、最終的に金属酸化物またはその塩（ＺｎＯ、ＴｉＯ２、ＦｅＯ、Ｆｅ２Ｏ３など）、シリケート、スルフェート、ステアレートなどの光防護性顔料も発見されている。
【００２７】
さらに、二次的光防護剤と呼ばれる抗酸化剤として、非常に多くのアミノ酸、イミダゾール、ペプチド、カロテンまたはカロテノイド、クロロゲン酸、リポ酸、プロピルチオウラシル、グルタチオンエステル、グルコシルエステル、Ｎ‐アセチルエステル、メチルエステル、エチルエステルなどが発見されている。
【００２８】
残念なことに、水性相中でのスルフォラファンの希釈には、アルコールまたはアルコールの混合物はスルフォラファンの安定には不適であることが証明されている。
【００２９】
この文献では、驚くことに、スルフォラファンは、最も一般的に言われているものとは反対に、使用の通常の条件下では光や酸化剤に敏感ではないとしている。主な問題は本質的に、前述のパラメータの実際の影響が無い状態で、それが溶液中に置かれたとき、求核剤との反応能力が存在することである。
【００３０】
スルフォラファンは５０℃の水性相中、および１００℃の大気内で不安定であることが知られているとしても、この不安定性に関する本格的な調査はほとんどないため、その不安定性はその温度または水性相、あるいは酸化によるものであるかどうかを知ることは可能ではなかった。さらに、文献ＥＰ２１６３２３８は、水中油型エマルジョン（したがって、本質的には水で成る）である処方剤のセットについて述べており、それが求核剤であるため、水がスルフォラファンの分解因子であることが知られている。
【００３１】
さらに、ＥＰ２１６３２３８に開示されている処方物は、アルコール、これも求核性の１，６−ヘキサンジオールをさらに含んでいる。従って、この文献は安定せず、保存後に多くの分解生成物を含む処方物を開示している。さらに、この文献はスルフォラファンの安定化についての情報についても、活性物質の分解についても述べていない。
【００３２】
ＷＯ０２／１５７２２も、様々な開示されたバルク化合物の多くの構成物質について明細を示すことなく述べているが、これらの大部分は水ベースまたはアルコールである。実施例では、スルフォラファンまたはスルフォラファン含有ブロッコリー抽出物が培養液中または食品中で希釈されている。その媒体は全てスルフォラファンの安定性に悪影響を及ぼし、分解生成物を急速に生成する水性、親水性、および極性特性である。
【００３３】
ＷＯ２００８／００７７２８では、コウジ酸、ヒドロキノンまたはコロイド状硫酸タイプの美白剤は薬剤中で分解されるため、リポソームを使用することを提案している。この文献によれば、リポソームはスルフォラファンを安定させない（比較例１参照）。
【００３４】
最後に、ＦＲ２８８８３２５は、幅広い添加剤と常に水を含んだ外部使用のための生薬製剤を開示している。結果として、活性物質がグルコラファニンである場合、それは安定したままであるが、それがスルフォラファンである場合、チオ尿素へと分解する（実際には、さらに安定している場合、グルコラファニンは不活性である）。従って、この文献は、生薬組成物中でのスルフォラファンの安定化への回答を開示していない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００３５】
【特許文献１】フランス特許ＦＲ２８８８３２５号公報
【特許文献２】欧州特許ＥＰ２１２０９６９号公報
【特許文献３】欧州特許ＥＰ２１６３２３８号公報
【特許文献４】国際公開ＷＯ０２／１５７２２号公報
【特許文献５】国際公開ＷＯ２００８／００７７２８号公報
【特許文献６】フランス特許ＦＲ２８４３１８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００３６】
したがって、産業的に実用性がある、安定した化粧用組成物または薬剤用組成物を提供する安定化したスルフォラファン組成物の需要が存在する。
【課題を解決するための手段】
【００３７】
この問題を解決するため、本発明は式（Ｉ）の化合物の安定した生薬組成物を提供する。式中のＲ１とＲ２は互いに独立して、アルキル、アリール、アリールアルキル基であり、任意で１以上の直鎖または分岐鎖で置換され、任意で環状基であり、任意で１以上のヘテロ原子を有する。
【００３８】
【化５】
2013531052.tif 000007
【００３９】
本発明の組成物は、式（Ｉ）の化合物を、最終生成物の総重量の０．０１重量％から１５重量％、好適には０．１重量％から０．４重量％、さらに特定すると０．１重量％から２重量％含んでいる。また、主鎖および／または任意の側鎖に遊離基および／若しくは反応基または官能基を有しない、化粧品用および薬剤用に許容性である少なくとも一つの無水エステルを０．１重量％から９９．９重量％含み、前記組成物の総重量が１００重量％となるように、任意で化粧品用および薬剤用に許容性である賦形剤を更に含んでいる。
【００４０】
「主鎖および／または任意の側鎖に遊離基および／若しくは反応基または官能基を有しない、少なくとも一つの無水エステル」とは、本発明では、その側鎖にも主鎖にも遊離基と反応性官能基または官能基、すなわち、化学的または立体的であるか否かに関係なく錯体でも保護基でもない基または官能基を含まないものとして同定され、または同定可能な化学構造を有するエステルを意味する。そのようなエステルはしたがって、活性分子と両立し、例えば求核基を有していない。遊離基および／または官能基のない、そのような無水エステルは、合成または抽出プロセスが、その活性物質と両立しない他の分子の最終生成物中での存在を誘導しないエステルでもある。もちろん、本発明においては、「主鎖および／または任意の側鎖に遊離基および／若しくは反応基または官能基を有しない、少なくとも一つの無水エステル」とは前述の定義にそれぞれ対応するエステルの混合物も包含するが、エステル中またはエステルの混合物中に豊富であるが他の分子のセットを含むと述べられているような混合物または任意の天然抽出物は除外する。
【００４１】
このように、本発明の組成物は安定した化合物（Ｉ）に基づく安定した添加剤でよく、その中に追加の賦形剤が存在する基剤または化粧用または薬剤用処方物として、遊離基および／または反応基または官能基がない鎖を有する無水エステル中で時間の経過によっては分解しないであろう。
【００４２】
この化粧品用および薬剤用に許容性である賦形剤は非水性、非求核性、非吸湿性、非水和性である。さらに特定すると、この化粧品用および薬剤用の賦形剤は、前述の定義に適合しないエステルではありえず、非吸湿性、非水和性でなければならず、水性相／油性相タイプのエマルジョンを形成する目的で界面活性物質ではありえず、スルフォラファンを分解させないため、側鎖または主鎖の位置のどちらにも、前述で定義された（例えばＳＨ、ＮＨ２、ＮＨ３＋）遊離基および／または反応基を含むことができない。したがって、組成物の効能を向上させることができるものである。
【００４３】
少数の無水エステルにおいて、その鎖が遊離基および／または反応基または官能基を含まず、よって利用可能である場合には、式（Ｉ）の化合物を分解させる求核基との接触を防ぐことが可能であり、このことは本発明によって実証されている。このことはスルフォラファンの分解の源を実際に示すことなく、求核剤を含む賦形剤または外部要素の量による不安定性について簡単に教示する従来技術の予測に反する。
【００４４】
好適には、式（Ｉ）の化合物はスルフォラファンであり、Ｒ１はブチル基を、Ｒ２はメチル基を表わす。
【００４５】
水性相、アルコールまたはアルコールの混合物中でのスルフォラファンの安定性の問題について実証する実験に引き続き、式（Ｉ）の化合物は、求核剤にアクセス可能なそのイソシアネート基によって、分解に対して本質的に敏感であり、現在までにスルフォラファンに対して実施された効果の多くの研究にもかかわらず、開発は原材料のコスト、その入手性およびその不安定性の問題によって制限されているように見えた。
【００４６】
有利には、前記の化粧品用および薬剤用に許容性である無水エステルは、アセテート、ベンソエート、サリチル酸塩、エステル６１０、カプリル／カプリン／コハクトリグリセリド、ステアレートおよびイソステアレート、エチルヘキサノエート、パルミテート、イソナノエート、オレエート、ネオペンタノエート、ミリステートなどから成る群から選択され、その鎖は遊離基および／または反応基または官能基がない。
【００４７】
本発明による有利な実施態様によれば、スルフォラファンは抽出された天然スルフォラファンまたは合成スルフォラファンである。合成スルフォラファンは量と純度の点ではよりアクセスしやすい。使用されるスルフォラファンはラセミ型またはオプションで純粋物でよい。
【００４８】
前記化粧品用および／または薬剤用に許容される賦形剤として好ましくは、メチルポリシロキサンである。
【００４９】
好適な実施態様では、前記の組成物はサンスクリーン生成物、色素沈着過剰防護生成物、色素脱失生成物、汚染防止スクリーン、ルーサイト治療生成物、ガン（皮膚）治療生成物などの、例えば放射線の影響に対する防護生成物のごとき生薬製剤である。
【００５０】
本発明による組成物の、遊離基および／または反応基または官能基がない鎖を有する無水エステルは、古くならず、良好な浸透剤を形成し、皮脂の生成を調節する、典型的には非常に安定した水和エステルおよびヒーリングエステルである。
【００５１】
既に述べたが、求核剤中が存在する場合を除いては、分解段階が室温では遅いため、長期間の安定性についての特定の情報はほとんど存在せず、生薬製剤（特に局部用製剤）のほとんどの問題を提起する。さらに、商業的な処方物では、式（Ｉ）の化合物は「空気中」で酸化に対してよりも、求核剤に対してさらに防護されなければならないようである。
【００５２】
現在のところ、求核剤を通常含むものに代わるため、化粧品用または薬剤用の組成物の新規なタイプでこの化学式の化合物の安定した生薬生成物を得る必要が存在する。
【００５３】
この目的のため、特定のスルフォラファン化合物の安定性が異なる溶解条件下と温度条件下で研究された。ＨＰＬＣトラッキング調査では、経時的な残留スルフォラファンの量を決定することが可能であった。多様な分解生成物も特定された。この研究により、スルフォラファンは、イソチオシアネート官能基に作用することによって、スルフォラファンを急速に分解させる求核剤に対して非常に敏感であることが確認された。
【００５４】
本発明によるこの組成物のその他の実施態様については、「請求の範囲」で述べる。
【００５５】
本発明は式（Ｉ）の化合物を安定させる方法にも関し、式中のＲ１とＲ２はそれぞれ独立して、アルキル基、アリール基、アリールアルキル基であり、任意で１以上の直鎖または分岐鎖で置換され、任意で環状基であり、任意で１以上のヘテロ原子を有している。
【００５６】
【化６】
2013531052.tif 000008
【００５７】
この方法は、式（Ｉ）の化合物を、鎖中に遊離基および／または反応基または官能基を有しない化粧品用および薬剤用に許容性である無水エステルと混合するステップと、求核基による分解に対して安定した組成物を形成するステップとを含んでいる。
【００５８】
有利には、遊離基および／または反応基または官能基のない鎖を有するこの無水エステルは、アセテート、ベンゾエート、サリチル酸塩エステル６１０、カプリル／カプリン／コハクトリグリセリド、ステアレートおよびイソステアレート、エチルヘキサノエート、パルミテート、イソノナノエート、オレエート、ネオペンタノエート、ミリステートなどから成る群から選択される。
【００５９】
特に、このエステルは、アセテート（ベンジル、リナソル、トコフェリルアセテートなど）、ベンゾエート（ベンジルベンゾエート、アルキルベンゾエートなど）、サルチレート（ベンジル、メチル、エチル、アミル、サリチル酸塩など）、エステル６１０、カプリル／カプリン／コハクトリグリセリド、ステアレートおよびイソステアレート（イソステアリル  イソステアレート、セテアリルステアレートなど）、エチルヘキサノエート、パルミテート（オクチル  パルミテートなど）、イソノナノエート、オレエート、ネオペンタノエート（イソステアリルネオペンタノエートなど）、ミリステートなどから成る群から選択される。
【００６０】
好適には、スルフォラファンは抽出された天然スルフォラファンまたは合成スルフォラファンである。
【００６１】
本発明による好適実施態様では、本方法は、式（Ｉ）の化合物を、少なくとも一つの化粧品用および薬剤用に許容性である賦形剤と混合して安定させるステップをさらに含んでいる。
【００６２】
有利には、この賦形剤は、好適には液体形態、油性ゲル形態、クリーム形態のメチルポリシロキサンおよびそれらの誘導体から選択される。
【００６３】
本発明によるその他の実施態様は「請求の範囲」に示されている。
【００６４】
本発明は、式（Ｉ）の化合物で、式中のＲ１とＲ２はそれぞれ独立して、アルキル、アリール、アリールアルキル基であり、任意で１以上の直鎖または枝鎖と置換されたものであり、任意で環状基であり、任意で１以上のヘテロ原子を有する化合物を安定させるための、遊離基および／または反応基または官能基がない鎖を有する、化粧品用および薬剤用に許容性である無水エステルであり、典型的にはサンスクリーン製品、色素沈着過剰防護剤、脱色剤、抗汚染スクリーン、ルーサイト治療生成物、ガン（皮膚）治療生成物などである生薬製剤での使用にも関する。
【００６５】
【化７】
2013531052.tif 000009
【００６６】
さらに特定すれば、前記の無水エステル、（その鎖は遊離基および／または反応基および官能基がない）は、アセテート、ベンゾエート、サリチル酸塩、エステル６１０、カプリル／カプリン／コハクトリグリセリド、ステアレートおよびイソステアレート、エチルヘキサノエート、パルミテート、イソナノエート、オレエート、ネオペンタノエート、ミリステートなどから成る群から選択される。
【００６７】
本発明によるその他の使用形態も「請求の範囲」で述べられている。
【００６８】
本発明のその他の特徴、詳細および利点については、「請求の範囲」と「図面」に関して詳説する以下の、非限定的な、説明から明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００６９】
【図１】温度２５０℃でのスルフォラファンの分解を示す。
【図２】温度４０℃の水中およびアルコール中でのスルフォラファン単独での安定性を示す。
【図３】温度の変化に対する水−アルコール抗酸化媒体の安定性を示す。
【図４】リン脂質含有媒体中のスルフォラファンの安定性を示す。
【図５】求核性脂肪アルコールまたは官能基がない異なる植物油中でのスルフォラファンの安定性を示す。
【図６】本発明による、遊離基および／または反応基または官能基のない鎖を有する、化粧品用および薬剤用に許容される無水エステル中のスルフォラファンの安定性を示す。
【図７】トコフェリルアセテート中でのスルフォラファンの安定性を示す。
【図８】本発明による、生薬製剤中のスルフォラファンの安定性を示す。
【図９】トリエチルプロパントリオステアレートおよびココカプリレート−カプレート中でのスルフォラファンの安定性を示す。
【図１０】２−オクチルドデカノール（ネロール２０）およびジメチルイソソルビド中でのスルフォラファンの安定性を示す。
【００７０】
スルフォラファンの安定性は次の方法で試験された。１％のスルフォラファン溶液を異なる試験用媒体で準備する。その調製剤を閉鎖容器内に維持し、２５℃、３７℃または４０℃で自動温度調節した。残留スルフォラファンを検定することによって動的トラッキングを実行した。
【００７１】
使用したＨＰＬＣ法は以下の通りである。
‐  カラム：ディスカバリーＣ１８（１５ｃｍ×４．６ｍｍ×５μｍ）
‐  移動相：イソクラティックＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ（５０／５０）
‐  流量：１ｍＬ／分
‐  λ＝２４５ｎｍ
‐  １ｍｇ／ｍＬスルフォラファン濃縮液を得るための移動相中での元の溶液の希釈後の注入（１０μＬ）
‐  外標準：ナフタレン
【００７２】
ａ）水中での安定性
ＵＶを使用した４０℃での安定性試験サンプルのクロマトグラフィーによって、たった２日後で１０％のロスが示されることが判明した。安定性試験の当初は、この方法では検出されないアミンの形成によって説明される新たなピークを観察しない。その後、チオ尿素の形成に対応するピークが現れる。経時的な残留物の結果は図２のグラフとしてプロットされている。クロマトグラムは図示されていない。１０日後、当初の含有量の５０％だけが残っている。
【００７３】
ｂ）エタノール中での安定性
クロマトグラフィー分析（図示せず）は、第１日目で早くもスルフォラファンの一つに近い第２のピークが既に現れ、これをエタノールとのカップリング化合物と特定した。吸収性の非常に大きな差異と、スルフォラファンとカップリング誘導体との間の維持時間の類似性が最も長い時間で分析の品質に有害であるため、４０℃でのエタノール中での分解を短期間トラッキングした。それにもかかわらず、この傾向は初期において早くも非常に明らかであった。残留スルフォラファン含有量の結果を図２のグラフにプロットした。
【００７４】
ｃ）水アルコール媒体中の溶液形態の“抗酸性”媒体中の安定性
図３から分かるように、残留スルフォラファンの量は２５℃で１日後に降下し始める。３７℃で、７日以内に、当初量の５０％も残っていなかった。
【００７５】
スルフォラファンは、アルコールまたは水を溶媒として使用する商業的処方では回収できない。このことは抗酸化剤の存在下でも同様であった。この不安定性は本質的に酸化剤ではなく、求核剤のためであった。
【００７６】
水性媒体中では、スルフォラファンの分解はアミン（スルフォラファンの前駆体）を発生させる。アミンは残留スルフォラファンと反応して反応ＩＶによる対応するチオ尿素を形成する。
【００７７】
【化８】
2013531052.tif 000010
【００７８】
アルコール媒体中では（チオールの存在下）形成された中間物はさらに安定しており、アルコールの場合には、反応Ｖで以下に示すように反応は停止する。
【００７９】
【化９】
2013531052.tif 000011
【００８０】
その後、スルフォラファンの安定性を有機溶媒中で試験した。
【００８１】
化粧品には使用できないが、この分子に対しては不活性であると仮定される溶媒中の溶液形態のスルフォラファンの安定性試験をＮＭＲトラッキングで実行した。このように、閉鎖フラスコ中に保たれているが、ＤＭＳＯまたはクロロホルムの溶液中で不活性化されて光に曝露された場合、スルフォラファンは少なくとも一週間安定したままであることを示すことができた。
【００８２】
クロロホルム中のスルフォラファン溶液を還流しながら２４時間加熱しても分解（ＮＭＲによる）を示さなかった。
【００８３】
スルフォラファンはイソシアネート基を含んでおり、アリルイソシアネートはスルフォラファンで観察されるものと類似する分解物質を発生させることで知られているため、アリルイソシアネートの安定化生成物が試験された。
【００８４】
１時間、沸騰水中で加熱した後、アリルイソシアネートの熱分解が見られた。この分解は反応ＶＩによるジアリルチオ尿素の生成を誘導する。
【００８５】
【化１０】
2013531052.tif 000012
【００８６】
これはスルフォラファン（チオ尿素の生成）で観察されたものと類似する。
【００８７】
酸媒体中のイソチオシアネートの最良の熱安定性はアリルイソシアネートのケースで既に報告されている。沸騰水中で試料を１時間処理する間、分解生成物の濃度はｐＨと共に増加する。この結果を表に示す。
【００８８】
【表１】
2013531052.tif 000013
【００８９】
商業性のアリルイソチオシアネートは、例えばシグマ−オールドリッチ社によって、その抗酸化特性で知られる、イオノール（２，６−ｄｉｔ−ｔｅｒｔ  ブチル−４−メチルフェノール）によって安定化した形態で販売されている。
【００９０】
【化１１】
2013531052.tif 000014
【００９１】
さらに、アリルイソチオシアネートをアスコルビン酸で安定化させる方法も知られている。３７℃で１６週間、０．１重量％で加えられたアスコルビン酸がアリルイソチオシアネートの安定性に顕著な効果を有することを観察することができた。アスコルビン酸は、イソチオシアネートを含有するホースラディッシュ粉末（わさび）の色に影響を及ぼさず、この粉末が水と混合されたときにアスコルビン酸はアリルイソチオシアネートおよびその色の安定性にも効果を示す。
【００９２】
スルフォラファンでの類似の試験は、アスコルビン酸は、それが、酸で抗酸化剤である間は、スルフォラファンを安定させることができないことを示した。
【００９３】
公開されている説明とは異なり、光または酸素はスルフォラファンの分解を促進せず、最大の問題提起要因ではない。実際には、禁止および変更されなければならないのは現在化粧品または生薬に使用されている、アルコールまたは水などの求核剤を含む媒体の使用である。
【００９４】
したがって、求核基はスルフォラファンの分解を引き起こす要因であることが結論付けられた。
【００９５】
多様な潜在的な安定化マトリックスをその後に試験した。
【００９６】
比較例１：
リン脂質でのスルフォラファンの安定化
リン脂質はそのような求核基を有さず、化粧品に使用されるマトリックスを形成することがある。
【００９７】
１％のスルフォラファンを、フォサル（Ｐｈｏｓａｌ（登録商標））などのジホスホリピド含有溶液１ｍＬあたりに入れた。閉鎖容器内に維持されたその調製液をその後４０℃に温度調節した。残留スルフォラファンを分析することによって動態トラッキングを実行した。
【００９８】
使用したＨＰＬＣ法は次の通りである。
‐  カラム：ディスカバリーＣ１８（１５ｃｍ×４．６ｍｍ×５μｍ）
‐  移動相：イソクラティックＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ（５０／５０）
‐  流量：１ｍＬ／分
‐  λ＝２４５ｎｍ
‐  １ｍｇ／ｍＬのスルフォラファン濃度を得るため、移動相中での元の溶液の希釈後の注入（１０μＬ）
‐  外標準：ナフタレン
【００９９】
図４に示すように、分解は非常に速く、３日未満で４０％以上である。
【０１００】
リン脂質の場合、この生成物は実際には一定量のエタノールを含んでいる。これは、我々が実験した化合物の急速な形成が、エタノールとスルフォラファンイソチオシアネートとの間のカップリング生成物であることを説明する。しかしながら、分解はエタノール単独の場合よりも速い。
【０１０１】
比較例２：
多様な植物油中でのスルフォラファンの安定化
ホホバオイルは脂肪アルコールのない単不飽和脂肪酸の誘導体を含む。１％（ｍ／ｍ）スルフォラファン溶液をホホバ、アルガンおよびエグランチンローズオイル（植物抽出物）中に準備した。外基準として前述のようなナフタレンを使用することによって、分解の動態トラッキングを実行した。図５に示すように、分解は以前の媒体中よりも遅いが、潜在的安定性はむしろ失望的なものである。さらに、オイル中でのスルフォラファンの溶解性も、ホホバオイル中で約０．５％（ｍ／ｍ）、アルガンオイル中で２％およびエグランチンローズオイル中で３．５％に制限される。さらに、観察された分解（図５）は非常に大きいままであり、商業的に使用できない。さらに、これらは複合的な天然生成物であるので、提供者によって、またバッチ間で品質の多様性が存在する。
【０１０２】
比較例３：
１％（ｍ／ｍ）スルフォラファン溶液を、２−オクチル−ドデカノル（ネロール２０）、脂肪性アルコールおよび化粧品と両立するエーテル誘導体であるジメチルイソソルビド中で準備した。その後、前述のごとく外標準ナフタレンを使用することによって分解の動態トラッキングを実行した。図１０に示すように、スルフォラファンは経時的に分解するため、商業的な使用を許さない。
【０１０３】
実施例１：
反応基または遊離基または官能基のない鎖を有する、多様な化粧品用および薬剤用に許容性である無水エステル中でのスルフォラファンの安定化
オイル中に少量存在するが、活性物質の分解に貢献する、多様な求核剤の多様性の問題および影響の問題を解決するため、純粋分子中でのスルフォラファンの分解を評価することにした。よって、化粧品に使用され、エステル６１０、サリチル酸メチルまたは別のサリチル酸イソアミルのように反応基がなく利用できる数種のエステルを選択した。
【０１０４】
１％ｍ／ｍのスルフォラファン溶液を前述したそれぞれの無水エステルで準備した。その後、ナフタレンを外基準として使用することによって、４０℃で動態トラッキングを実行した。
【０１０５】
図６に示すように、観察された分解は無視できる程度のものであり、スルフォラファンを生薬生成物中に使用させるマトリックスの選択は、想定された化粧品用および薬剤用として適用することと両立する、反応基または遊離基または官能基のない無水エステルで主に構成されると結論される。これらの化合物で溶解性（＞６％（ｍ／ｍ））と安定性の両方が得られる。
【０１０６】
実施例２：
トコフェリルアセテートでのスルフォラファンの安定化
トコフェリルアセテートは以下の化学式を有する：
【０１０７】
【化１２】
2013531052.tif 000015
【０１０８】
トコフェリルアセテートは遊離求核基を有さず、化粧品に利用できるマトリックスである。顕著な分解は観察されない（図７）
【０１０９】
実施例３：
反応基または遊離基または官能基のない鎖を有する２個の無水エステルと少なくとも１個のメチルポリシロキサンを含む媒体中でのスルフォラファンの安定化
２％のスルフォラファンを含む２個の生薬処方物を調製した。第１の無水エステルは、遊離基および／または反応基または官能基のない鎖を有し、第２の無水エステルは、界面活性機能を有する遊離基および／または反応基または官能基のない鎖とメチルポリシロキサンＡまたはＢを有する。
【０１１０】
試験方法は実施例１と２の場合と同じである。
【０１１１】
図８に示すように、本発明による生薬処方物中での分解は観察されず、さらに化粧品マトリックスは局所適用に特に適している。
【０１１２】
実施例４：
イソステアレート中とココ  カプリレート‐カプレートＣＣＣ中でのスルフォラファンの安定化
１％（ｍ／ｍ）のスルフォラファン溶液をトリエチルプロパントリオステアレート中と、天然由来の物質中に含まれるか、または合成エステルの置換物中に含まれるエステルであるココカプリレート‐カプレートタイプＣＣＣの生成物中で調製した。その後、ナフタレンを外基準として使用することによって、４０℃で分解の動態トラッキングを実行した。
【０１１３】
図９に示すように、観察された分解は無視できる程度であり、生薬製剤へのスルフォラファンの使用を許容するマトリックスの選択は、主に、想定された化粧品および薬剤と両立する純粋および無水エステルで構成されるという結論が導かれる。これらの化合物では、溶解性（＞６％（ｍ／ｍ））と安定性の両方が得られる。
【０１１４】
実施例５：スルフォラファンベースの化粧品処方物
２％（ｍ／ｍ）のスルフォラファン溶液をサリチル酸イソアミル、カプリック／カプリリックトリグリセリドおよびシリコーンタイプの誘導体（デカメチル  シクロペンタシロキサンなど）の混合物中で調製した。その３つの化合物の混合物は、スルフォラファンの２％の溶解性、皮膚への良好な浸透性、活性物質の安定性、および使用中に潤滑で快適な質感を与える可能性があることが観察された。安定性を６ヶ月間、４０℃で追跡調査した。顕著な分解は観察されない（利用されたＨＰＬＣ法の３％未満から５％の多様性）
【０１１５】
本発明は前述の実施例に限定されず、「請求の範囲」から逸脱することなく、多くの変更が可能である。
【０１１６】
例えば、香料の追加は、活性物質の不快であるがしつこくない臭いをカバーするために想定できる。活性分子を不安定化させないよう、それ自体を快適な香りを有するエステル群（例：マンザネート、ジヒドロフロラレート、シクロヘキシルエチル  アセテートなど）から選択することもできる。
【図１】
2013531052.tif 000020
【図２】
2013531052.tif 000021
【図３】
2013531052.tif 000022
【図４】
2013531052.tif 000023
【図５】
2013531052.tif 000024
【図６】
2013531052.tif 000025
【図７】
2013531052.tif 000026
【図８】
2013531052.tif 000027
【図９】
2013531052.tif 000028
【図１０】
2013531052.tif 000029
【国際調査報告】
2013531052.tif 000030
2013531052.tif 000031
2013531052.tif 000032
2013531052.tif 000033
2013531052.tif 000034
2013531052.tif 000035