(57)【要約】異なる種類の反応性基を有するマルチアームポリエチレングリコール（Ｉ）およびその使用が開示され、この有するマルチアームポリエチレングリコール（Ｉ）は、オリゴペンタエリスリトールを開始剤として用いてエチレンオキシドを重合することにより形成され、ＰＥＧは同じかまたは異なり、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ−であり、ｍの平均値は２〜２５０の整数であり、ｌは１以上の整数である。この異なる種類の反応性基を有するマルチアームポリエチレングリコールを製造するための方法、ＰＥＧに結合された連結基ＸおよびＸに結合された末端反応性基Ｆを含むマルチアームポリエチレングリコール活性誘導体、このマルチアームポリエチレングリコール活性誘導体によって形成されるゲル、このマルチアームポリエチレングリコール活性誘導体および薬物分子によって形成される薬物接合体、ならびに薬物調製におけるこれらの使用も開示される。【化１】2013515791.tif 000061【選択図】なし
2013515791.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉのマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体：
【化１】
2013515791.tif 000050
（式中、
Ｆ１、Ｆ２、Ｆ３およびＦ４は、各々、−Ｘ−Ｙの構造を有し、かつＦ１、Ｆ２、Ｆ３およびＦ４のうちの少なくとも２つは異なり；
Ｘは、（ＣＨ２）ｉ、（ＣＨ２）ｉＮＨ、（ＣＨ２）ｉＯＣＯＯ−、（ＣＨ２）ｉＯＣＯＮＨ−、（ＣＨ２）ｉＮＨＣＯＯ−、（ＣＨ２）ｉＮＨＣＯＮＨ−、ＯＣ（ＣＨ２）ｉＣＯＯ−、（ＣＨ２）ｉＣＯＯ−および（ＣＨ２）ｉＣＯＮＨ−からなる群から選択される連結部であり、ｉは０〜１０の整数であり；
Ｙは、ヒドロキシル、アミノ、メルカプト、カルボキシル、エステル基、アルデヒド基、アクリル基およびマレイミド基からなる群から選択される官能性末端基であり；
ＰＥＧは、互いに同じまたは異なる−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ−であり、ｍの平均は２〜２５０の整数であり；
ｌは１以上の整数である）。
【請求項２】
前記ｌは１以上１０以下の整数である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項３】
Ｆ１は−Ｘ−ＣＯＯＨであり、Ｆ２、Ｆ３およびＦ４は、各々、−Ｘ−Ｙの構造を有し、Ｆ２、Ｆ３およびＦ４のうちの少なくとも１つは−Ｘ−ＣＯＯＨではない、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項４】
Ｆ１およびＦ２はともに−Ｘ−ＣＯＯＨであり、Ｆ３およびＦ４は、各々、−Ｘ−Ｙの構造を有し、Ｆ３およびＦ４のうちの少なくとも１つは−Ｘ−ＣＯＯＨではない、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項５】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体は、式ＩＩＩのマルチアームポリ（エチレングリコール）ヒドロキシ−モノ−酢酸：
【化２】
2013515791.tif 000051
である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項６】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体は、式ＩＩＩＡのマルチアームポリ（エチレングリコール）ヒドロキシ−ポリ−酢酸：
【化３】
2013515791.tif 000052
である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項７】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体は、式ＩＶのマルチアームポリ（エチレングリコール）ヒドロキシ−モノ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル：
【化４】
2013515791.tif 000053
である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項８】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体は、式ＩＶＡのマルチアームポリ（エチレングリコール）ヒドロキシ−ポリ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル：
【化５】
2013515791.tif 000054
である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項９】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体は、式Ｖのマルチアームポリ（エチレングリコール）アミノ−モノ−酢酸：
【化６】
2013515791.tif 000055
である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項１０】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体は、式ＶＡのマルチアームポリ（エチレングリコール）アミノ−ポリ−酢酸：
【化７】
2013515791.tif 000056
である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項１１】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体は、式ＶＩのマルチアームポリ（エチレングリコール）マレイミド−モノ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル：
【化８】
2013515791.tif 000057
である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項１２】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体は、式ＶＩＡのマルチアームポリ（エチレングリコール）マレイミド−ポリ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル：
【化９】
2013515791.tif 000058
である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項１３】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体は、式ＶＩＩのマルチアームポリ（エチレングリコール）アクリレート−モノ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル：
【化１０】
2013515791.tif 000059
である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項１４】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体は、式ＶＩＩＡのマルチアームポリ（エチレングリコール）アクリレートポリ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル：
【化１１】
2013515791.tif 000060
である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項１５】
前記ｌは１、２または３である、請求項１から請求項１４のいずれか１項に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項１６】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）は、約４００ダルトン〜約８０，０００ダルトン、好ましくは１，０００〜２０，０００ダルトンの分子量を有する、請求項１から請求項１４のいずれか１項に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項１７】
請求項１から請求項１６のいずれか１項に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）の活性誘導体および医薬分子から形成される接合体。
【請求項１８】
前記医薬分子は、アミノ酸、タンパク質、酵素、ヌクレオシド、糖類、有機酸、フラボノイド、キノン類、テルペノイド、ベンゼン  フェノール、ステロイド、配糖体、アルカロイド、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１７に記載の接合体。
【請求項１９】
前記医薬分子はイリノテカンである、請求項１８に記載の接合体。
【請求項２０】
請求項１から請求項１６のいずれか１項に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）の活性誘導体から形成されるゲル。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、異なる種類の活性基を有するマルチアームポリエチレングリコール誘導体およびそれらの調製方法、薬物分子接合体およびゲル物質に関する。また、本発明は、医薬調剤および医療装置材料の調製における上記の、異なるタイプの活性基を有する新しいマルチアームポリエチレングリコール誘導体およびそのゲルの役割に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、ポリエチレングリコール誘導体は、タンパク質、ペプチド、および他の治療薬の生理的半減期を延長し、免疫原性および毒性を低減するために、このような薬物と組み合わせて広く使用されている。臨床使用においては、医薬調剤の製造において担体として作用するＰＥＧおよびその誘導体は、数々の医薬品で広く使用されてきた。ＰＥＧを薬物分子に結合しようという試みは、過去１０年間のうちに著しい発展も見せてきており、ＰＥＧａｓｙｓ（登録商標）（これは、α−インターフェロンおよびポリエチレングリコールの組み合わせであり、より循環半減期およびより良好な治療効果を有する）などの多くの承認された医薬で広く使用されてきている。人体の中でのポリエチレングリコールの代謝プロセスは、十分に明らかになっており、ポリエチレングリコールは、副作用のない安全な合成ポリマー物質である。
【０００３】
薬物修飾に関して、最近の研究の方向は、最良の治療効果を成し遂げるように、標的とされた分子をポリエチレングリコールを介して薬物分子に連結して、薬物分子を病巣の近くに濃縮することである。例えば、抗癌薬はモノクローナル抗体に連結される。出願人の最近の研究によれば、ポリエチレングリコールを介した２つの異なる医薬分子の組み合わせは、２つの分子の相乗効果を十分に発揮しながら、上述の、生理的半減期の増加を維持し、かつ免疫原性および毒性を低減することができる。分子間の相乗効果は、漢方薬の理論では非常に重要である。２以上の異なる分子がポリエチレングリコールによって連結されているとき、異時性の二種の官能基を有するＰＥＧ誘導体が必要とされる。現在、出願人は、異時性の二種の官能基を有する様々なＰＥＧ誘導体、例えばＭＡＬ−ＰＥＧ−ＮＨＳ、アクリル酸−ＰＥＧ−ＮＨＳ、およびＨＯ−ＰＥＧ−ＣＯＯＨを製造することができる。しかしながら、それらの、異時性の二種の官能基を有するＰＥＧ誘導体は、直鎖ポリエチレングリコール誘導体である。
【０００４】
異時性の二種の官能基を有する直鎖ポリエチレングリコール誘導体は、応用例がある程度は限定される。異時性の二種の官能基を有する直鎖エチレングリコール誘導体によって連結された２つの分子の比は、基本的に１：１である。１つの分子が別の分子よりも多く必要とされる場合、例えば１つの分子が低いインビボ活性を有する場合、その低活性分子のために、高活性分子よりも多くの連結部が必要とされるであろうが、これは、異時性の二種の官能基を有する直鎖ポリエチレングリコール誘導体にとっては課題である。同時に、薬物運搬に関しては、マルチアームポリエチレングリコールは直鎖ポリエチレングリコールよりも有利である。異時性の二種の官能基を有する直鎖ポリエチレングリコール誘導体は２つの分子しか運べないのに対し、マルチアームポリエチレングリコールはいくつかの末端基を有し、従って複数の薬物連結点を有し、そのためいくつかの薬物分子を運ぶことができる。現在、マルチアームポリエチレングリコールは、ペプチドおよび小分子薬物のＰＥＧ修飾において広く使用されている。しかしながら、市場のマルチアームＰＥＧ誘導体は、例えば４アームのポリエチレングリコールコハク酸−ＮＨＳエステル、（４アーム−ＳＳ）など、同じ活性基しか有しない。特許文献１は、ただ１つの活性基を有する、重合反応を通して形成される星型ポリエチレングリコール誘導体を示す。同時に、この星型ポリエチレングリコール誘導体の１つのアームは、非エーテル結合、例えばアミド結合またはエステル結合を通して他のアームと連結されている。この連結は、状態が異なり、この誘導体の安定性を低下させる可能性がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】米国特許第６０４６３０５号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、異なるタイプの活性基を有する新しい、単純な構造の安定なマルチアームポリエチレングリコール誘導体を提供することにより、既存の技術におけるマルチアームポリエチレングリコールの活性基の種類を増加させることである。この異なるタイプの活性基を有する新しいマルチアームＰＥＧ誘導体としては、異時性の二種の官能基ポリエチレングリコール誘導体および異時性の３官能基ポリエチレングリコール誘導体が挙げられる。同時に、本発明は、異なるタイプの活性基を有するマルチアームＰＥＧ誘導体についての新しい調製方法、ならびにマルチアームポリエチレングリコール、活性ポリエチレングリコール誘導体と医薬分子との接合体およびゲルならびにそれらの応用例を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、一般式Ｉの構造：
【化１】
2013515791.tif 000003
を有する新規なマルチアームポリエチレングリコール誘導体を提供し、式中：
Ｆ１、Ｆ２、Ｆ３およびＦ４は、各々、−Ｘ−Ｙの構造を有し、かつＦ１、Ｆ２、Ｆ３およびＦ４のうちの少なくとも２つは異なり；
Ｘは、（ＣＨ２）ｉ、（ＣＨ２）ｉＮＨ、（ＣＨ２）ｉＯＣＯＯ−、（ＣＨ２）ｉＯＣＯＮＨ−、（ＣＨ２）ｉＮＨＣＯＯ−、（ＣＨ２）ｉＮＨＣＯＮＨ−、ＯＣ（ＣＨ２）ｉＣＯＯ−、および（ＣＨ２）ｉＣＯＮＨ−からなる群から選択される連結部であり；ｉは０〜１０の整数であり；
Ｙは、ヒドロキシル、アミノ、メルカプト、カルボキシル、エステル基、アルデヒド基、アクリル基およびマレイミド基からなる群から選択される官能性末端基であり；
ＰＥＧは同じまたは異なる−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ−であり、平均値ｍは２〜２５０の整数であり；
ｌは１以上の整数である。
【０００８】
好ましい実施形態では、本発明のマルチアームポリエチレングリコール誘導体の中のＦ１は−Ｘ−ＣＯＯＨであり、Ｆ２、Ｆ３およびＦ４は、各々、−Ｘ−Ｙの構造を有し、Ｆ２、Ｆ３およびＦ４のうちの少なくとも１つは−Ｘ−ＣＯＯＨではない。上記のマルチアームポリエチレングリコールの活性誘導体は式ＩＩの構造：
【化２】
2013515791.tif 000004
を有する。
【０００９】
好ましい実施形態では、本発明のマルチアームポリエチレングリコール誘導体の中のＦ１およびＦ２はともに−Ｘ−ＣＯＯＨであり、Ｆ３およびＦ４は、各々、−Ｘ−Ｙの構造を有し、Ｆ３およびＦ４のうちの少なくとも１つは−Ｘ−ＣＯＯＨではない。上記のマルチアームポリエチレングリコールの活性誘導体は式ＩＩＡの構造：
【化３】
2013515791.tif 000005
を有する。
【００１０】
詳細な実施形態では、上記のマルチアームポリエチレングリコール誘導体は、式ＩＩＩの構造のマルチアームポリエチレングリコールヒドロキシ−モノ−酢酸：
【化４】
2013515791.tif 000006
を有する。
【００１１】
詳細な実施形態では、上記のマルチアームポリエチレングリコール誘導体は、以下のとおりの式ＩＩＩＡのマルチアームポリエチレングリコールヒドロキシ−ポリ−酢酸：
【化５】
2013515791.tif 000007
を有する。
【００１２】
詳細な実施形態では、上記のマルチアームポリエチレングリコール誘導体は、以下のとおりの式ＩＶのマルチアームポリエチレングリコールヒドロキシ−モノ−ＮＨＳエステル：
【化６】
2013515791.tif 000008
を有する。
【００１３】
詳細な実施形態では、上記のマルチアームポリエチレングリコール誘導体は、以下のとおりの式ＩＶＡの構造のマルチアームポリエチレングリコールヒドロキシ−ポリ−ＮＨＳエステル：
【化７】
2013515791.tif 000009
を有する。
【００１４】
詳細な実施形態では、上記のマルチアームポリエチレングリコール誘導体は、以下のとおりの式Ｖの構造のマルチアームポリエチレングリコールアミノ−モノ−酢酸：
【化８】
2013515791.tif 000010
を有する。
【００１５】
詳細な実施形態では、上記のマルチアームポリエチレングリコール誘導体は、以下のとおりの式ＶＡの構造のマルチアームポリエチレングリコールアミノ−ポリ−酢酸：
【化９】
2013515791.tif 000011
を有する。
【００１６】
詳細な実施形態では、上記のマルチアームポリエチレングリコール誘導体は、以下のとおりの式ＶＩの構造のマルチアームポリエチレングリコールマレイミド−モノ−ＮＨＳエステル：
【化１０】
2013515791.tif 000012
を有する。
【００１７】
詳細な実施形態では、上記のマルチアームポリエチレングリコール誘導体は、以下のとおりの式ＶＩＡの構造マルチアームポリエチレングリコールマレイミド−ポリ−ＮＨＳエステル：
【化１１】
2013515791.tif 000013
を有する。
【００１８】
詳細な実施形態では、上記のマルチアームポリエチレングリコール誘導体は、以下のとおりの式ＶＩＩの構造のマルチアームポリエチレングリコールアクリレート−モノ−ＮＨＳエステル：
【化１２】
2013515791.tif 000014
を有する。
【００１９】
詳細な実施形態では、上記のマルチアームポリエチレングリコール誘導体は、以下のとおりの式ＶＩＩＡの構造のマルチアームポリエチレングリコールアクリレート−ポリ−ＮＨＳエステル：
【化１３】
2013515791.tif 000015
を有する。
【００２０】
好ましい実施形態では、上記のマルチアームポリエチレングリコール誘導体の中のｌは、１〜１０（１および１０を含む）の整数であり、さらに好ましいｌは１〜３（１および３を含む）の整数である。
【００２１】
好ましい実施形態では、上記のマルチアームポリエチレングリコールの分子量は、４００〜８００００ダルトン、好ましくは１０００〜２００００ダルトンである。
【００２２】
また、本発明は、上記のマルチポリエチレングリコールの活性誘導体の末端基Ｆを通した、その活性誘導体および医薬分子から形成される接合体を提供する。いくつかの実施形態では、特定の医薬分子は、アミノ酸、タンパク質、酵素、ヌクレオシド、糖類、有機酸、フラボノイド、キノン類、テルペノイド、ベンゼン  フェノール、ステロイドおよびその配糖体、アルカロイド、ならびにこれらの組み合わせからなる群から選択される。好ましくは、本発明は、８アームのポリエチレングリコール酸と、イリノテカンまたはドセタキセルとから形成される接合体を提供する。
【００２３】
また、本発明は、上記の活性マルチアームポリエチレングリコールの活性誘導体から形成されるゲルを提供する。
【００２４】
本発明は、医薬調剤における上記の接合体の応用をさらに提供する。
【００２５】
本発明は、異なるタイプの活性基を有する、新しい、単純で安定なマルチアームＰＥＧ誘導体を調製する方法をさらに提供する。上記の方法は、ペンタエリスリトールまたはオリゴマーペンタエリスリトールを開始剤として使用して、エチレンオキシドを重合し、マルチアームポリエチレングリコールを生成すること、このマルチアームポリエチレングリコールの１以上の末端ヒドロキシ基を、化学反応を介してカルボン酸またはアミンへと転化すること、次いでイオン交換カラムを用いて、このモノ−カルボキシルまたはポリ−カルボキシル、モノ−アミノまたはポリ−アミノ生成物を単離し精製すること、次いで化学反応を介して対応するヒドロキシル、カルボキシルおよびアミノ基を所望の反応性基へと変換すること、ならびに最後に、本発明で記載される異なるタイプの活性基を有するマルチアームポリエチレングリコール誘導体を生成すること、を含む。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
異なるタイプの活性基を有するマルチアームポリエチレングリコール誘導体を調製する方法が、以下の例を用いて説明される。マルチアームＰＥＧ鎖の構造式は以下のとおりである：
【化１４】
2013515791.tif 000016
式中、
Ｒは、開始剤分子の中心分子、または非分子のヒドロキシル部分であり、典型的にはアルキル、シクロアルキルまたはアラルキルであり、
ｎは分枝の数またはアームの数であり、
ＰＥＧは、同じまたは異なる−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ−であり、ｍは、ポリエチレングリコールの１本のアームの重合度を特徴づけるいずれかの整数である。
【００２７】
Ｒがペンタエリスリトールの非ヒドロキシル部分であるとき、開始剤分子はペンタエリスリトールであり、その化学構造は以下のとおりである：
【化１５】
2013515791.tif 000017
このとき、ｎは４であり、形成されるものは４アームのポリエチレングリコールである。
【００２８】
Ｒがペンタエリスリトールの二量化の非ヒドロキシル部分であるとき、開始剤分子は、以下の化学構造を有する、ペンタエリスリトールの二量化である：
【化１６】
2013515791.tif 000018
このとき、ｎは６であり、形成されるものは６アームのポリエチレングリコールである。
【００２９】
Ｒが三量体ペンタエリスリトールの非ヒドロキシル部分であるとき、開始剤分子は、以下の化学構造を有する、三量体ペンタエリスリトールである：
【化１７】
2013515791.tif 000019
このとき、ｎは８であり、形成されるものは８アームのポリエチレングリコールである。
【００３０】
本発明で使用されるマルチアームポリエチレングリコールは、開始剤としての上記のペンタエリスリトールまたはオリゴマーペンタエリスリトールを用いてエチレンオキシドを重合することにより生成される。
【００３１】
ポリエチレングリコールの１本のアームの分子量が３００〜６０，０００ダルトンである（これは、ｍが約６〜１３００であることと等価である）限りは、ポリエチレングリコールは、一般に、分子量を用いて表すことができる。より好ましくは、ｍは、２８、１１２および４５０であり、これらは、それぞれ１，３２５、５，０００および２０，０００の分子量に対応する。その繰り返し単位ではなく平均分子量によって通常は限定される最初のＰＥＧ化合物の潜在的な不均一性があるため、整数ｍを使用して当該ＰＥＧポリマーの中の自己繰り返し単位を表す代わりに、分子量でポリエチレングリコールポリマーを特徴づけることが好ましい。
【００３２】
活性基：
本発明のマルチアームポリエチレングリコールの活性誘導体を使用するとき、その誘導体の異なる目的は、異なる末端官能基Ｆによって決定される。これらの官能基の導入は、当該誘導体の応用分野および適用できる構造を決定することになろう。最も一般的な官能基は、式ＩＶで見ることができるように、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（ＮＨＳ）である。ＮＨＳエステル構造を有する活性誘導体は、アミンを有する基と連結することができる。
【００３３】
同様に、本願明細書によれば、当業者は、式ＩＩＩで見ることができるような、アミノ官能基を有するマルチアームの活性ポリエチレングリコール誘導体を得ることができる。
【００３４】
同様に、当業者は、式ＩＶで見ることができるような、カルボキシル官能基を有するマルチアームの活性ポリエチレングリコール誘導体を得ることができる。
【００３５】
同様に、当業者は、式ＶＩで見ることができるような、マレイミド官能基（ＭＡＬ）を有するマルチアームの活性ポリエチレングリコール誘導体を得ることができる。ＭＡＬ構造を有する活性誘導体は、チオール基と連結することができる。
【００３６】
多くの医薬は、活性なアミノ、カルボキシルおよびヒドロキシルなどの官能基を含有し、これらは、単糖、多糖、ヌクレオシド、ポリヌクレオシドホスホリルおよびインビボの他の成分と組み合わせて、生物における活性な薬理学構造を形成することができる。
【００３７】
それゆえ、インビボでの生物有機分子の短い半減期および短時間の生理的有効性といった短所を克服するように、修飾された官能基を有するＰＥＧ誘導体は、生物有機分子に代わって、同様にこれらの医薬分子と組み合わせることができる。
【００３８】
本発明のマルチアームポリエチレングリコールの活性誘導体は、適切な末端官能基（Ｆ）を通して薬物分子と組み合わせることができる。上記の末端官能基は、タンパク質、ペプチドまたは他の天然の医薬の中の遊離のアミノ基、ヒドロキシル、硫黄ヒドロキシルをＰＥＧ誘導体に連結することができる。小分子の医薬については、各マルチアームＰＥＧ分子は、いくつかの医薬分子を結合することができる。このようなＰＥＧ誘導体は、体内中での薬物分子の生理的役割を改善するように、比較的高い薬物量を有して、薬物の適切な濃度を確保し、放出機能を高める。
【００３９】
すべてのこれらの応用例の目的は、ＰＥＧ誘導体の医学的応用についての起こりうる参照モデルを提供することにすぎず、実際の応用例および選択は、薬理学的、毒物学的および臨床の試験に基づいて確認されることになる。
【００４０】
本発明の組み合わせにおいて、アミノ酸、タンパク質、酵素、ヌクレオシド、糖類、有機酸、フラボノイド、キノン類、テルペン、フェノール系のフェニルプロパノイド、ステロイドおよびその配糖体、アルカロイドなどの医薬分子のうちのいくつかが好ましい。インターフェロン薬物、ＥＰＯ薬物、成長ホルモン薬物、抗体薬物などのタンパク質医薬分子は好ましい。
【００４１】
本発明の組み合わせは、いずれかの許容できる投与方法で、または同様の目的をもつ試薬とともに、純粋な化合物または好適な医薬組成物の形態で投与することができる。それゆえ、当該医薬は、経口投与、鼻内投与、経直腸投与、経皮投与または注射投与の方法を通して、固体、半固体、凍結乾燥された粉末または液体の形態で、例えば、錠剤、座薬、丸剤、軟ゼラチンカプセルおよび硬ゼラチンカプセル、粉末、溶液、懸濁液、またはエアロゾルなどの形態で摂取することができ、正確な用量の単位剤形および簡単な投与方法が好ましいことになろう。当該組み合わせは、従来の医薬担体または賦形剤、および有効成分（１以上）として使用される本発明の組み合わせを含むことができる。加えて、他の薬物、担体および助剤も含めることができる。
【００４２】
典型的には、所望の投与方法によれば、薬学的に許容できる組み合わせは、１〜約９９重量％の本発明の組み合わせ、および９９〜１重量％の好適な医薬賦形剤を含むことになろう。当該好ましい組み合わせは、約５〜７５％の本発明の組み合わせを含有し、残りの組成は好適な医薬賦形剤である。
【００４３】
好ましい投与方法は、従来の１日投与計画による注射であるが、この計画は、疾患の重症度に応じて調整することができる。本発明の組み合わせまたはそれらの薬学的に許容できる塩は、溶液または懸濁液を形成するように、約０．５〜約５０％の有効成分を、液体として投与することができる医薬助剤、例えば水、食塩水、グルコース水溶液、グリセロール、エタノールなどに分散させるなどして注射剤へと構成することもできる。
【００４４】
液体として投与することができる医薬的組み合わせについては、本発明の組み合わせ（約０．５〜約２０％）および選択的に存在する医薬アジュバントは、水、生理食塩水、グルコース水溶液、グリセロール、エタノールなどの担体へと分散させて、溶液または懸濁液を形成することができる。
【００４５】
必要に応じて、本発明の医薬的組み合わせは、湿潤剤または乳化剤、ｐＨ緩衝剤および酸化防止剤、例えば、クエン酸、ソルビタンモノラウレート、トリエタノールアミン、オレイン酸エステル、ブチル化ヒドロキシトルエンなどの少量の助剤物質を含有してもよい。
【００４６】
このような製剤の実際の調製方法は、当業者には公知であり、例えば、調製方法は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｕｅｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、ペンシルベニア州、イーストン（Ｅａｓｔｏｎ）、１９９０年）に見出すことができる。いずれの場合も、本発明の技術を用いて、使用される組み合わせは、対応する疾患の処置のための治療上有効な組み合わせを含有してもよい。
【実施例】
【００４７】
以下の実施例は、説明のために提供され、本発明を限定するために提供されるのではない。
【００４８】
以下の実施例で言及するすべての試薬は、特段の記載がない限り、市販されている。
【００４９】
実施例１：
４アームのポリ（エチレングリコール）ヒドロキシ−モノ−酢酸（ＩＩＩ−１）および４アームのポリ（エチレングリコール）ヒドロキシ−ジ−酢酸（ＩＩＩＡ−１）の合成
【化１８】
2013515791.tif 000020
手順：
８００ｍｌのＴＨＦ中の４アームのＰＥＧ（１０ｋＤａ、１００ｇ）を、窒素下でＴＨＦ（２０％）を留去することにより共沸乾燥し、この溶液を室温まで冷却した。この溶液にカリウム  ｔｅｒｔ−ブトキシド（４．４８ｇ）を加え、室温で２時間撹拌した。ブロモ酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（５．１７ｍｌ）を滴下し、この混合物を室温で一晩撹拌した。この混合物を濾過し、真空下でエバポレーションして、溶媒を除去した。残渣を水溶液（Ｈ２Ｏ  ５００ｍＬ＋水酸化ナトリウム  ８．１６ｇ＋リン酸ナトリウム）に溶解させ、８０℃で２時間撹拌した。この水溶液のＰＨを約２〜３に調整した。塩化ナトリウム（１５％）を加え、生成物をジクロロメタンで抽出した。抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空下、５０℃で濃縮し、次いでジエチルエーテルの中へ沈殿させた。濾液を真空下で乾燥し、ＤＥＡＥイオン交換クロマトグラフィカラムを用いて分離し、４アームのポリ（エチレングリコール）ヒドロキシ−モノ−酢酸（ＩＩＩ−１）および４アームのポリ（エチレングリコール）ヒドロキシ−ジ−酢酸（ＩＩＩＡ−１）を得た。
ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：  ４．０１（ｓ，ＣＨ２ＣＯＯＨ），４．５４（ｔ，ＣＨ２ＯＨ）。
【００５０】
実施例２：
４アームのポリエチレングリコールヒドロキシ−モノ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル（ＩＶ−１）の合成
【化１９】
2013515791.tif 000021
手順：
４アームのポリ（エチレングリコール）ヒドロキシ−モノ−酢酸（ＩＩＩ−１）（１０ｋＤａ、０．５ｇ）およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド（０．０１４３９ｇ）をジクロロメタンに溶解させた。ＤＣＣ（０．０１２９０ｇ）を加え、この溶液を室温で一晩撹拌し、濾過し、真空下、４０℃で濃縮した。残渣を熱イソプロパノールに溶解させ、次いでこの溶液を０℃に冷却することにより、結晶化させた。得られた沈殿物を集め、イソプロパノールで洗浄し、乾燥し、４アームのポリ（エチレングリコール）ヒドロキシ−モノ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル（ＩＶ−１）を得た。
【化２０】
2013515791.tif 000022
【００５１】
実施例３：
４アームのポリ（エチレングリコール）ヒドロキシ−モノ−酢酸メチル（ＩＶＡ−１）
【化２１】
2013515791.tif 000023
手順：
４アームのポリ（エチレングリコール）ヒドロキシル−モノ−酢酸（ＩＩＩ−１）（１０ｋＤａ、３．２ｇ）をメタノール（１６ｍｌ）に溶解させた。この溶液を０℃に冷却し、濃硫酸を滴下した。この溶液を室温で３時間撹拌した。この溶液のＰＨを、８％  ＮａＨＣＯ３水溶液を用いて約７．０に調整した。生成物をジクロロメタンで抽出した。有機層を分離し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、４０℃で濃縮し、次いでジエチルエーテルの中へ沈殿させた。濾液を真空下で乾燥し、４アームのポリ（エチレングリコール）ヒドロキシ−モノ酢酸メチル（ＩＶＡ−１）を得た。
ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：  ３．３２（ｓ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３），４．１３（ｓ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３），４．５７（ｔ，ＣＨ２ＯＨ）。
【００５２】
実施例４：
４アームのポリ（エチレングリコール）スルホン酸エステル−モノ−酢酸メチル（ＩＶＢ−１）
【化２２】
2013515791.tif 000024
手順：
５０ｍｌのトルエン中の４アームのポリ（エチレングリコール）スルホン酸エステル−モノ酢酸メチル（ＩＶＢ−１）（１００００、３．０ｇ）を、３８ｍｌのトルエンを留去することにより共沸乾燥し、この溶液を室温まで冷却した。この溶液に５ｍｌのジクロロメタンを加え、１８８μｌのトリエチルアミン、９４μｌのＭｓＣｌを滴下した。この溶液を室温で一晩撹拌し、７２０μｌの無水エタノールを加えることにより反応をクエンチした。この混合物を濾過し、６０℃でエバポレーションし、熱イソプロパノールに溶解させ、次いでこの溶液を０℃に冷却することにより、結晶化させた。得られた沈殿物を集め、イソプロパノールで洗浄し、乾燥し、４アームのポリ（エチレングリコール）スルホン酸エステル−モノ酢酸メチル（ＩＶＢ−１）を得た。
ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：  ３．１７（ｓ，ＣＨ２ＯＳＯ２ＣＨ３），４．１３（ｓ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３），４．３０（ｔ，ＣＨ２ＯＳＯ２ＣＨ３）。
【００５３】
実施例５：
４アームの（ポリエチレングリコール）アミノ−モノ−酢酸（Ｖ−１）
【化２３】
2013515791.tif 000025
手順：
１００００の分子量を有する４アームのポリ（エチレングリコール）スルホン酸エステル−モノ酢酸（Ｖ−１）（２．６ｇ）を７．８ｍｌの水に溶解させた。この水溶液のＰＨを、２Ｍ水酸化ナトリウムを用いて１２に調整し、この溶液を２〜２．５時間撹拌した。アンモニア水（２６ｍｌ）および塩化アンモニウム（１．３ｇ）を、上記の水溶液に加えた。この混合物を室温で７２時間撹拌した。塩化ナトリウム（７ｇ）を加え、反応混合物をジクロロメタンで抽出した。有機層を集め、４０℃で濃縮して溶媒を除去した。次いで水（３０ｍｌ）および塩化ナトリウムを加え、この水溶液のＰＨを、２Ｍ  塩酸を用いて２〜３に調整した。生成物をジクロロメタンで抽出した。抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、エチルエーテルに加えた。沈殿した生成物を濾別し、真空下で乾燥し、４アームのポリ（エチレングリコール）スルホン酸エステル−モノ酢酸（Ｖ−１）を得た。
ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：  ２．９６（ｔ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２），４．００（ｓ，ＣＨ２ＣＯＯＨ）。
【００５４】
実施例６：
４アームの（ポリエチレングリコール）ヒドロキシ−ジエチルメチルエステル（ＩＶＣ−１）
【化２４】
2013515791.tif 000026
出発物質は分子量１０，０００の４アームの（ポリエチレングリコール）ヒドロキシ−酢酸（ＩＩＩＡ−１）であり、その合成工程は実施例３の合成工程と同じである。
ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：  ３．３２（ｓ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３），４．１３（ｓ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３），４．５７（ｔ，ＣＨ２ＯＨ）。
【００５５】
実施例７：
４アームの（ポリエチレングリコール）スルホン酸エステル−ジエチルメチルエステル（ＩＶＤ−１）
【化２５】
2013515791.tif 000027
出発物質は分子量１０，０００の４アームの（ポリエチレングリコール）ヒドロキシ−ジエチルメチルエステル（ＩＶＣ−１）であり、その合成工程は実施例４の合成工程と同じである。
ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：  ３．１７（ｓ，ＣＨ２ＯＳＯ２ＣＨ３），３．３２（ｓ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３），４．１３（ｓ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３），４．３０（ｔ，ＣＨ２ＯＳＯ２ＣＨ３）。
【００５６】
実施例８：
４アームのポリエチレングリコールアミノ−ジ酢酸（ＶＡ−１）
【化２６】
2013515791.tif 000028
出発物質は分子量１０，０００の４アームの（ポリエチレングリコール）スルホン酸エステル−ジエチルメチルエステル（ＩＶＤ−１）であり、その合成工程は実施例５の合成工程と同じである。ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：  ２．９６（ｔ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２），４．００（ｓ，ＣＨ２ＣＯＯＨ）。
【００５７】
実施例９：
４アームの（ポリエチレングリコール）−トリマレイミド−モノ−酢酸（ＶＢ−１）
【化２７】
2013515791.tif 000029
手順：
１００００の分子量を有する４アームのポリ（エチレングリコール）アミノ−モノ酢酸（Ｖ−１）（１．０ｇ）を１０ｍｌのジクロロメタンに溶解させた。４２μｌのトリエチルアミンを加え、次いで５分後にＭＡＬ−ＮＨＳを加えた。この混合物を、光を避けて室温で一晩撹拌した。この反応溶液を４０で濃縮した。残渣を熱イソプロパノールに溶解させ、次いで氷浴の中で冷却することにより沈殿させた。沈殿物を濾過し、イソプロパノールによって洗浄し、真空下で乾燥し、４アームのポリ（エチレングリコール）  トリマレイミド−モノ酢酸（Ｖ−１）を得た。
【化２８】
2013515791.tif 000030
【００５８】
実施例１０：
４アームの（ポリエチレングリコール）−トリマレイミド−モノ−ＮＨＳエステル（ＶＩ−１）
【化２９】
2013515791.tif 000031
手順：
４アームのポリ（エチレングリコール）−トリマレイミド−モノ−酢酸（ＶＢ−１）（１００００、１．０ｇ）およびＮ−ヒドロキシルスクシンイミド（０．０１４９６ｇ）を１０ｍｌのジクロロメタンに溶解させ、ＤＣＣ（０．０２８８９ｇ）を加え、この溶液を、光を避けて室温で一晩撹拌した。この反応混合物を濾過し、濃縮して溶媒を除去した。残渣を熱イソプロパノールに溶解させ、次いで氷浴の中で冷却することにより沈殿させた。沈殿物を濾過し、イソプロパノールによって洗浄し、真空下で乾燥し、４アームのポリ（エチレングリコール）−トリマレイミド−モノ−スクシンイミドエステル（ＶＩ−１）を得た。
【化３０】
2013515791.tif 000032
【００５９】
実施例１１：
４アームの（ポリエチレングリコール）−ジマレイミド−酢酸（ＶＣ−１）
【化３１】
2013515791.tif 000033
出発物質は分子量１０，０００の４アームの（ポリエチレングリコール）アミノ−ジ酢酸（ＶＡ−１）であり、その合成工程は実施例９の合成工程と同じである。
【化３２】
2013515791.tif 000034
【００６０】
実施例１２：
４アームの（ポリエチレングリコール）−ジマレイミド−ジＮＨＳエステル（ＶＩＡ−１）
【化３３】
2013515791.tif 000035
出発物質は分子量１０，０００の４アームの（ポリエチレングリコール）−ジマレイミド−酢酸（ＶＣ−１）であり、その合成工程は実施例１０の合成工程と同じである。
【化３４】
2013515791.tif 000036
【００６１】
実施例１３：
４アームの（ポリエチレングリコール）アクリレート−モノ−酢酸（ＶＤ−１）
【化３５】
2013515791.tif 000037
手順：
３つ口丸底フラスコに、窒素を導入し、１．０ｇの、分子量１０，０００の４アームのポリエチレングリコールヒドロキシ−モノ酢酸（ＩＩＩ−１）および０．０００５ｇのＢＨＴを取り、１２ｍｌのジクロロメタンに溶解させ、加熱して１０％溶媒を蒸発させ、室温まで冷却し、４９μｌのトリエチルアミンを加え、５〜１０分間撹拌し、２５０μｌのアクリロイル塩化物を加え、窒素を充填し、光から保護し、この系を密閉して撹拌し、一晩反応し、翌日、濃厚になるように３０℃で濃縮し、２０ｍｌの水を加え、透明になるように溶解し、３０分間放置し、１５％塩化ナトリウムを加え、希塩酸を用いてｐＨ＝２〜３に調整し、ジクロロメタンで３回抽出し、有機相を合わせ、この有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、透明になるようにし、濾過し、濃厚になるように３０℃で濾液を濃縮し、氷浴、２０ｍｌのイソプロパノールを加え、熱的に溶解し、沈殿させ、濾過し、イソプロパノールで洗浄し、真空乾燥し、４アームのポリエチレングリコールアクリレート−モノ−酢酸（ＶＤ−１）を得た。
ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：  ４．００（ｓ，ＣＨ２ＣＯＯＨ），４．２１（ｔ，ＣＨ２ＯＣＯＣＨ＝ＣＨ２），５．９３（ｄ，ＣＨ２ＯＣＯＣＨ＝ＣＨ２），６．２０（ｑ，ＣＨ２ＯＣＯＣＨ＝ＣＨ２），６．３６（ｄ，ＣＨ２ＯＣＯＣＨ＝ＣＨ２）。
【００６２】
実施例１４：
４アームの（ポリエチレングリコール）アクリレート−モノ−ＮＨＳエステル（ＶＩＩ−１）
【化３６】
2013515791.tif 000038
手順：
３つ口丸底フラスコに、窒素を導入し、暗所に置き、０．８ｇの、分子量１０，０００の４アームのポリエチレングリコールアクリレート−モノ−酢酸（ＶＤ−１）および０．０１１ｇのＮＨＳを秤量し、８ｍｌのジクロロメタンを用いて溶解し、０．０２０６ｇのＤＣＣを系に加え、暗所で気密で撹拌して一晩反応させ、翌日、濾過し、濃厚になるように３０℃で濾液を濃縮し、１６ｍｌのイソプロパノールを用いて熱的に溶解した後で氷浴中で３０分間撹拌し、沈殿させ、濾過し、イソプロパノールで洗浄し、真空乾燥し、４アームのポリエチレングリコールアクリレート−モノ−ＮＨＳエステル（ＶＩＩ−１）を得た。
【化３７】
2013515791.tif 000039
【００６３】
実施例１５：
４アームのポリエチレングリコールアクリル酸−酢酸（ＶＥ−１）
【化３８】
2013515791.tif 000040
出発物質は分子量１０，０００の４アームの（ポリエチレングリコール）ヒドロキシ−ジ酢酸（ＩＩＩＡ−１）であり、その合成工程は実施例１３の合成工程と同じである。
ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：  ４．００（ｓ，ＣＨ２ＣＯＯＨ），４．２１（ｔ，ＣＨ２ＯＣＯＣＨ＝ＣＨ２），５．９３（ｂ，ＣＨ２ＯＣＯＣＨ＝ＣＨ２），６．２０（４，ＣＨ２ＯＣＯＣＨ＝ＣＨ２），６．３６（ｂ，ＣＨ２ＯＣＯＣＨ＝ＣＨ２）。
【００６４】
実施例１６：
４アームのポリエチレングリコールアクリル酸−ジＮＨＳエステル（ＶＩＩＡ−１）
【化３９】
2013515791.tif 000041
出発物質は分子量１０，０００の４アームの（ポリエチレングリコール）アクリル酸−ジ酢酸（ＶＥ−１）であり、その合成工程は実施例１４の合成工程と同じである。
【化４０】
2013515791.tif 000042
【００６５】
実施例１７：
８アームの（ポリエチレングリコール）ヒドロキシ−モノ酢酸（ＩＩＩ−２）および８アームの（ポリエチレングリコール）ヒドロキシ−ジ酢酸（ＩＩＩＡ−２）の合成
【化４１】
2013515791.tif 000043
手順：
３つ口丸底フラスコに、窒素を導入し、１００ｇの８アームのＰＥＧ−１０Ｋおよび８００ｍｌのＴＨＦを加え、加熱して溶解し、約２０％溶媒を蒸発させ、冷却し、８．９６ｇのカリウム  ｔｅｒｔ−ブチルアルコールを加え、室温で２時間、１０．３４ｍｌの臭素酢酸ｔｅｒｔ−ブチルを滴下し、室温で一晩反応させ、翌日濾過し、反応溶液を濃厚になるように濃縮し、１０００ｍｌのアルカリ加水分解物（１０００ｍｌの水。１６．３２ｇの水酸化ナトリウムおよび１５５．０４ｇのナトリウムを加える）を加え、８０℃で２時間アルカリ加水分解し、２Ｎ  塩酸溶液でｐＨを２〜３に調整し、１５％塩化ナトリウム溶液を加え、ジクロロメタンで３回抽出し、有機抽出液を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、５０℃、粘性が高くなるまで濃縮し、エーテルで沈殿させ、真空乾燥した。４０ｇの粗生成物を水溶液にし、ＤＥＡＥアニオンカラムで分離し、それぞれ塩化ナトリウム水溶液溶離液を用いて集め、２Ｎ  塩酸を用いて水相をｐＨ  ２〜３に調整し、ジクロロメタンで抽出し、有機抽出液を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、ジエチルエーテルで沈殿させ、それぞれ、分子量１０，０００の８アームのポリエチレングリコールヒドロキシ−モノ−酢酸（ＩＩＩ−２）および８アームのポリエチレングリコールヒドロキシル基−酢酸（ＩＩＩＡ−２）を得た。
ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：  ４．０１（ｓ，ＣＨ２ＣＯＯＨ），４．５４（ｔ，ＣＨ２ＯＨ）。
【００６６】
実施例１８：
８アームのポリエチレングリコールヒドロキシ−モノ酢酸メチル（ＩＩＩＢ−２）
【化４２】
2013515791.tif 000044
手順：
１口丸底フラスコに、４．０ｇの、分子量１０，０００の８アームのポリエチレングリコールヒドロキシ−モノ酸（ＩＩＩ−２）を加え、２０ｍｌの無水メタノールに溶解させ、氷水浴、０．８ｍｌ濃硫酸を加え、室温で３時間、８％炭酸水素ナトリウム水溶液を用いてｐＨ値を７．０に調整し、ジクロロメタンで３回抽出し、有機相を合わせ、この有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、４０℃、粘性が高くなるまで濃縮し、エーテルを用いて沈殿させ、真空乾燥して、８アームのポリエチレングリコールヒドロキシ−モノ酢酸メチル（ＩＩＩＢ−２）を得た。
ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：  ３．３２（ｓ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３），４．１３（ｓ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３），４．５７（ｔ，ＣＨ２ＯＨ）。
【００６７】
実施例１９：
８アームのポリエチレングリコールスルホン酸エステル−モノ酢酸メチル（ＩＩＩＣ−２）
【化４３】
2013515791.tif 000045
手順：
３つ口丸底フラスコに、窒素を導入し、３．０ｇの、分子量１０，０００の８アームのポリエチレングリコールヒドロキシ−モノ酢酸メチルを加え、５０ｍｌのトルエンに溶解させ、これを加熱して３８ｍｌのトルエンを蒸発させ、留出分が透明であるようにし、室温まで冷却し、５ｍｌのジクロロメタンを加え、１０分間撹拌し、４３９μｌのトリエチルアミンを加え、５分間撹拌し、２２０μｌの塩化メチルを滴下し、密閉して一晩反応させ、翌日、１．４４ｍｌのエタノールを加え、１５分間撹拌し、濾過し、粘性が高くなるまで濃縮し、６０ｍｌのイソプロパノールを用いて加熱溶解し、氷水浴、沈降させ、濾過し、ケーキをイソプロパノールで１回洗浄し、真空乾燥し、８アームのポリエチレングリコールスルホン酸エステル−モノ酢酸メチル（ＩＩＩＣ−２）を得た。
ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：  ３．１７（ｓ，ＣＨ２ＯＳＯ２ＣＨ３），４．１３（ｓ，ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３），４．３０（ｔ，ＣＨ２ＯＳＯ２ＣＨ３）。
【００６８】
実施例２０：
８アームのポリエチレングリコールアミノ−モノ−酢酸（Ｖ−２）の合成
【化４４】
2013515791.tif 000046
手順：
１口丸底フラスコに、２．６ｇの、分子量１０，０００の８アームのポリエチレングリコールスルホン酸エステル−モノ酢酸メチルを加え、７．８ｍｌの脱気した水に溶解させ、２Ｎ  水酸化ナトリウム水溶液を使用してこの溶液をｐＨ  １２．０に調整し、室温で２〜２．５時間、２６ｍｌの、１．３ｇの塩化アンモニウムを溶解したアンモニア溶液をこの系に加え、室温で７２時間撹拌し、反応後、７ｇの塩化ナトリウムを加え、溶解させ、反応混合物を塩化メチレンで３回抽出し、有機相を合わせ、４０℃で乾固するまで濃縮し、３０ｍｌの水を加え、撹拌して透明になるまで溶解し、２Ｎ  塩酸を用いてｐＨを２〜３に調整し、５ｇの塩化ナトリウムを加え、再度ジクロロメタンで３回抽出し、有機相を合わせ、この有機相を、清澄になるまで無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、４０℃で粘性が高くなるまで濃縮し、５０ｍｌのエーテルを用いて沈降させ、濾過し、真空乾燥し、８アームのポリエチレングリコールアミノ−モノ−酢酸（Ｖ−２）を得た。
ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：  ２．９６（ｔ，ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２），４．００（ｓ，ＣＨ２ＣＯＯＨ）。
【００６９】
実施例２１：
８アームのポリエチレングリコールアクリレート−モノ−酢酸（ＶＩ−２）の合成
【化４５】
2013515791.tif 000047
手順：
３つ口丸底フラスコに、窒素を導入し、１．０ｇの、分子量１０，０００の８アームのポリエチレングリコールヒドロキシ−モノ酢酸（ＩＩＩ−２）および０．０００５ｇのＢＨＴを取り、１２ｍｌのジクロロメタンに溶解させ、加熱して１０％溶媒を蒸発させ、室温まで冷却し、１１５μｌのトリエチルアミンを加え、５〜１０分間撹拌し、５９μｌのアクリロイル塩化物を加え、窒素を充填し、光から保護し、この系を密閉し、撹拌しながら一晩反応させ、翌日、濃厚になるように３０℃で濃縮し、２０ｍｌを加え、透明になるように溶解し、３０分間放置し、１５％塩化ナトリウムを加え、希塩酸を用いてｐＨ＝２〜３に調整し、ジクロロメタンで３回抽出し、有機相を合わせ、この有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、透明になるようにし、濾過し、濃厚になるように３０℃で濾液を濃縮し、氷浴、２０ｍｌのイソプロパノールを加え、熱的に溶解し、沈殿させ、濾過し、イソプロパノールで洗浄し、真空乾燥し、８アームのポリエチレングリコールアクリレート−モノ−酢酸（ＶＩ−２）を得た。
ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：  ４．００（ｓ，ＣＨ２ＣＯＯＨ），４．２１（ｔ，ＣＨ２ＯＣＯＣＨ＝ＣＨ２），５．９３（ｄ，ＣＨ２ＯＣＯＣＨ＝ＣＨ２），６．２０（ｑ，ＣＨ２ＯＣＯＣＨ＝ＣＨ２），６．３６（ｄ，ＣＨ２ＯＣＯＣＨ＝ＣＨ２）。
【００７０】
実施例２２：
８アームのポリエチレングリコールアクリレート−モノ−ＮＨＳエステル（ＶＩＩ−２）の合成
【化４６】
2013515791.tif 000048
手順：
８アームのポリ（エチレングリコール）アクリレート−モノ−酢酸（ＶＩ−２）（１０ｋＤａ、０．８ｇ）およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド（０．０１１ｇ）を８ｍｌのジクロロメタンに溶解させた。ＤＣＣ（０．０２０６ｇ）を加え、この溶液を室温で一晩撹拌し、濾過し、真空下、４０℃で濃縮した。残渣を熱イソプロパノールに溶解させ、次いでこの溶液を０℃に冷却することにより、結晶化させた。得られた沈殿物を集め、イソプロパノールで洗浄し、乾燥し、４アームのポリ（エチレングリコール）アクリレート−モノ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル（ＶＩＩ−２）を得た。
【化４７】
2013515791.tif 000049
【００７１】
実施例２３：
８アームのポリエチレングリコールアクリレート−モノ−酢酸（ＶＩ−２）およびエノキサパリン誘導体によって組み合わされた接合体
１グラムの、分子量１０，０００の８アームのポリエチレングリコールアクリレート−モノ−酢酸（ＶＩ−２）（実施例２１で生成した）を１０ｍｌのジクロロメタンに溶解させ、次いで０．１２ｇのエノキサパリン  トポテカン  グリシン  クール（グリシン−イリノテカン）（イリノテカンは、Ｃｈｅｎｇｄｕ  Ｆｕｒｕｎｄｅ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から購入した）、および５０ｍｇのジメチル−アミノピリジン、および９５ｍｇのジシクロヘキシルカルボジイミド  ２サブ１５  アミンを加えた。この溶液を室温で６時間撹拌し、真空にして溶媒を回収し、２０ｍｌの１，４−ジオキサンを残渣に加えて、溶解させた。濾過して沈殿物を除去し、この溶液を濃縮し、残渣に２０ｍｌのエーテルを加え、濾過して沈殿を集め、次いでエーテルとともに真空乾燥した。収量：０．８ｇ（８０％）、融点：４６〜５０℃。
【００７２】
実施例２４：
薬物ゲルを有する安定な８アームのポリエチレングリコールアクリレートの合成
８アームのポリエチレングリコールアクリレート−モノ−酢酸（ＶＩ−２）（１０ｋＤａ、０．５ｇ）および（実施例２３で調製した）エノキサパリン誘導体を１０ｍｌのリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）に溶解させた。４アームのポリエチレングリコールＳＨ（５ｋＤａ、０．４ｇ）を１０ｍｌのリン酸緩衝液（ｐＨ  ７．４）に溶解させた。これら２つの溶液を素早く混合すると、２分間のうちに８アームのポリエチレングリコールゲルが生成した。生成したゲルを１００ｍｌのリン酸緩衝液（ｐＨ  ７．４）の中に入れ、３７℃で保存した。このゲルは３６０日間安定であろうし、変性も融解も示さないであろうが、エノキサパリンはゆっくりと放出されるであろう。
【手続補正書】
【提出日】平成24年8月23日(2012.8.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉのマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体：
【化１】
2013515791.tif 000062
（式中、
Ｆ１、Ｆ２、Ｆ３およびＦ４は、各々、−Ｘ−Ｙの構造を有し、かつＦ１、Ｆ２、Ｆ３およびＦ４のうちの少なくとも２つは異なり；
Ｘは、ＣＨ２−、ＣＨ２ＣＨ２、（ＣＨ２）ｉＮＨ、（ＣＨ２）ｉＯＣＯＯ−、（ＣＨ２）ｉＯＣＯＮＨ−、（ＣＨ２）ｉＮＨＣＯＯ−、（ＣＨ２）ｉＮＨＣＯＮＨ−、ＯＣ（ＣＨ２）ｉＣＯＯ−、（ＣＨ２）ｉＣＯＯ−および（ＣＨ２）ｉＣＯＮＨ−からなる群から選択される連結部であり、ｉは０〜１０の整数であり；
Ｙは、ヒドロキシル、アミノ、メルカプト、カルボキシル、エステル基、アルデヒド基、アクリル基およびマレイミド基からなる群から選択される官能性末端基であり；
ＰＥＧは、互いに同じまたは異なる−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ−であり、ｍの平均は２〜２５０の整数であり；
ｌは１以上の整数である）。
【請求項２】
前記ｌは１以上１０以下の整数である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項３】
Ｆ１は−Ｘ−ＣＯＯＨであり、Ｆ２、Ｆ３およびＦ４は、各々、−Ｘ−Ｙの構造を有し、Ｆ２、Ｆ３およびＦ４のうちの少なくとも１つは−Ｘ−ＣＯＯＨではない、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項４】
Ｆ１およびＦ２はともに−Ｘ−ＣＯＯＨであり、Ｆ３およびＦ４は、各々、−Ｘ−Ｙの構造を有し、Ｆ３およびＦ４のうちの少なくとも１つは−Ｘ−ＣＯＯＨではない、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項５】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体は、式ＩＩＩのマルチアームポリ（エチレングリコール）ヒドロキシ−モノ−酢酸：
【化２】
2013515791.tif 000063
である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項６】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体は、式ＩＩＩＡのマルチアームポリ（エチレングリコール）ヒドロキシ−ポリ−酢酸：
【化３】
2013515791.tif 000064
である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項７】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体は、式ＩＶのマルチアームポリ（エチレングリコール）ヒドロキシ−モノ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル：
【化４】
2013515791.tif 000065
である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項８】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体は、式ＩＶＡのマルチアームポリ（エチレングリコール）ヒドロキシ−ポリ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル：
【化５】
2013515791.tif 000066
である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項９】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体は、式Ｖのマルチアームポリ（エチレングリコール）アミノ−モノ−酢酸：
【化６】
2013515791.tif 000067
である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項１０】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体は、式ＶＡのマルチアームポリ（エチレングリコール）アミノ−ポリ−酢酸：
【化７】
2013515791.tif 000068
である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項１１】
式ＶＩのマルチアームポリ（エチレングリコール）マレイミド−モノ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル：
【化８】
2013515791.tif 000069
である、マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項１２】
式ＶＩＡのマルチアームポリ（エチレングリコール）マレイミド−ポリ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル：
【化９】
2013515791.tif 000070
である、マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項１３】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体は、式ＶＩＩのマルチアームポリ（エチレングリコール）アクリレート−モノ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル：
【化１０】
2013515791.tif 000071
である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項１４】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体は、式ＶＩＩＡのマルチアームポリ（エチレングリコール）アクリレートポリ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル：
【化１１】
2013515791.tif 000072
である、請求項１に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項１５】
前記ｌは１、２または３である、請求項１から請求項１４のいずれか１項に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項１６】
前記マルチアームポリ（エチレングリコール）は、約４００ダルトン〜約８０，０００ダルトン、好ましくは１，０００〜２０，０００ダルトンの分子量を有する、請求項１から請求項１４のいずれか１項に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）誘導体。
【請求項１７】
請求項１から請求項１６のいずれか１項に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）の活性誘導体および医薬分子から形成される接合体。
【請求項１８】
前記医薬分子は、アミノ酸、タンパク質、酵素、ヌクレオシド、糖類、有機酸、フラボノイド、キノン類、テルペノイド、ベンゼン  フェノール、ステロイド、配糖体、アルカロイド、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１７に記載の接合体。
【請求項１９】
前記医薬分子はイリノテカンである、請求項１８に記載の接合体。
【請求項２０】
請求項１から請求項１６のいずれか１項に記載のマルチアームポリ（エチレングリコール）の活性誘導体から形成されるゲル。
【国際調査報告】
2013515791.tif 000073
2013515791.tif 000074
2013515791.tif 000075
2013515791.tif 000076
2013515791.tif 000077
2013515791.tif 000078
2013515791.tif 000079
2013515791.tif 000080