(57)【要約】  本発明は、３本全てのＰＥＧ鎖が等しい長さであり、そして各々が１〜３０個の−ＯＣＨ２ＣＨ２−単位を含んでなる３本のＰＥＧ鎖に結合した四級炭素と、四級炭素に結合した少なくとも１個の炭素原子を有する１つの基とを有する分子からなる分枝状ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）誘導体に関する。また、そのような誘導体を含む組成物と、そのような誘導体の使用を開示する。【選択図】図１
2013523943.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
３本のＰＥＧ鎖に結合した四級炭素と、少なくとも１個の炭素原子を有する１つの基とを有する分子からなる分枝状ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）誘導体において、３本全てのＰＥＧ鎖が等しい長さであり、そして各々が１〜３０個の−ＯＣＨ２ＣＨ２−単位を含んでなり、前記少なくとも１個の炭素原子が前記四級炭素に結合していることを特徴とする分枝状ＰＥＧ誘導体。
【請求項２】
請求項１に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体において、一般式ＩまたはＩＩ
2013523943.tif 000021
（式中、
Ｒ１は、−ＯＨ、−ＯＳＯ２ＣＨ３、−ＯＳＯ２ＰｈＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２、−Ｏベンジル、−ハロゲン、−ＮＨ２、−ＮＨＣＯ２Ｒ２、−ＮＨＣＯＮＨＲ２、−ＮＨＣＯＮ（Ｒ２）２、−ＮＣＯ、ＮＨＣＯ（ＣＨ２）４ＣＨ（ＳＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＳＨ、−ＮＨＣＯＣＨ２ＳＨ、−ＳＨ、−ＳＲ２、−ＳＯ３Ｈ、−Ｏ（ＣＨ２）３ＳＨ、−ＯＣＨ２ＣＨ（ＳＨ）ＣＨ２ＳＨ、−ＯＣＯ（ＣＨ２）４ＣＨ（ＳＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＳＨ、−ＰＯ３Ｈ２、−ＰＯ３（Ｒ２）２、−ＯＣＨ２ＣＯＯＨ、−ＯＣＨ２ＣＯＲ４、−Ｏ（ＣＨ２）２ＮＨ２、−Ｏ（ＣＨ２）２ＮＨＲ２、−Ｏ（ＣＨ２）２Ｎ（Ｒ２）２、−Ｏ（ＣＨ２）２ＮＨＣＯ２Ｒ２、−Ｏ（ＣＨ２）２ＮＨＣＯＮＨＲ２、−Ｏ（ＣＨ２）２ＮＨＣＯＮ（Ｒ２）２、−Ｏ（ＣＨ２）２ＮＣＯ、−Ｏ（ＣＨ２）３Ｓｉ（Ｒ３）３、−Ｏ（ＣＨ２）２ＮＨＣＯ（ＣＨ２）４およびＣＨ（ＳＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＳＨからなる群から選択され、
Ａ、ＢおよびＣは、−Ｃ１〜Ｃ８炭化水素、−（ＣＨ２）２Ｎ３、−（ＣＨ２）２ＮＲ５２およびＣＨ２ＣＯＯＲ４からなる群から独立して選択され、
Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ８炭化水素からなる群から選択され、
Ｒ３は、Ｃ１〜８アルコキシ基、アリールオキシ基、ハロゲン、ジ−Ｃ１〜８アルキルアミノ基、窒素含有複素環またはアシルオキシ基からなる群から選択され、
Ｒ４は、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ２、ＮＨＲ２、Ｎ（Ｒ２）２、ハロゲン、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル（ＮＨＳエステル）およびペルフルオロフェノレートからなる群から選択され、
そしてＲ５は、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８炭化水素、−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ２、−（Ｃ＝Ｏ）−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３からなる群から独立して選択され、そしてｍは１〜３０から選択される）を有することを特徴とする分枝状ＰＥＧ誘導体。
【請求項３】
請求項１または２に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体において、ｍが３〜２０であることを特徴とする分枝状ＰＥＧ誘導体。
【請求項４】
請求項１乃至３の何れか１項に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体において、ｍが３〜１０であることを特徴とする分枝状ＰＥＧ誘導体。
【請求項５】
請求項１乃至４の何れか１項に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体において、ｍが３〜５であることを特徴とする分枝状ＰＥＧ誘導体。
【請求項６】
請求項２乃至５の何れか１項に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体において、Ａ、ＢおよびＣが全て同一であることを特徴とする分枝状ＰＥＧ誘導体。
【請求項７】
請求項６に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体において、Ａ、ＢおよびＣが全て−ＣＨ３であることを特徴とする分枝状ＰＥＧ誘導体。
【請求項８】
請求項２乃至７の何れか１項に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体において、前記化合物が式Ｉを有し、そしてＲ１がＯ（ＣＨ２）３Ｓｉ（Ｒ３）３であり、Ｒ３が、Ｃ１〜８アルコキシ、アシルオキシ、ジアルキルアミノおよびアリールオキシ）からなる群から選択されることを特徴とする分枝状ＰＥＧ誘導体。
【請求項９】
請求項２乃至７の何れか１項に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体において、前記化合物が式Ｉを有し、そしてＲ１がＣＨ２ＮＨ２またはＯＣＨ２ＣＯＯＨであることを特徴とする分枝状ＰＥＧ誘導体。
【請求項１０】
請求項１に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体において、以下の２つの一般式：
2013523943.tif 000022
（式中、
「生体分子」は、ペプチドまたは抗体フラグメントまたはリボ核酸または炭水化物を示し、
Ｘは、カップリングに使用される官能性の残基であり、
Ｙは、ｎが１〜５０から選択される構造−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎＯ−を有するスペーサー基であり、
ｍは２〜３０であり、
Ａ、ＢおよびＣは、独立して、−Ｃ１〜Ｃ８炭化水素、−（ＣＨ２）２Ｎ３、−（ＣＨ２）２ＮＲ５２および−ＣＨ２ＣＯＯＲ４からなる群から選択され、
Ｒ２はＣ１〜Ｃ８炭化水素からなる群から選択され、
Ｒ３は、Ｃ１〜８アルコキシ基、アリールオキシ基、ハロゲン、ジ−Ｃ１〜８−アルキルアミノ基、窒素含有複素環またはアシルオキシ基からなる群から選択され、
Ｒ４は、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ２、ＮＨＲ２、Ｎ（Ｒ２）２、ハロゲン、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル（ＮＨＳエステル）およびペルフルオロフェノレートからなる群から選択され、
そしてＲ５は、独立して、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８炭化水素、−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ２、−（Ｃ＝Ｏ）−ＯＣＨ３および−ＯＣＨ２ＣＨ３からなる群から選択される）の１つを有することを特徴とする分枝状ＰＥＧ誘導体。
【請求項１１】
請求項１に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体において、以下の２つの一般式：
2013523943.tif 000023
（式中、
「薬剤」は、１０００ｇ／ｍｏｌ未満の分子量の薬学的に活性な薬剤を示し、
Ｘは、カップリングに使用される官能性の残基であり、
Ｙは、ｎが１〜５０から選択される構造−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎＯ−を有するスペーサー基であり、
ｍは２〜３０であり、
Ａ、ＢおよびＣは、独立して、−Ｃ１〜Ｃ８炭化水素、−（ＣＨ２）２Ｎ３、−（ＣＨ２）２ＮＲ５２および−ＣＨ２ＣＯＯＲ４からなる群から選択され、
Ｒ２はＣ１〜Ｃ８炭化水素からなる群から選択され、
Ｒ３は、Ｃ１〜８アルコキシ基、アリールオキシ基、ハロゲン、ジ−Ｃ１〜８−アルキルアミノ基、窒素含有複素環またはアシルオキシ基からなる群から選択され、
Ｒ４は、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ２、ＮＨＲ２、Ｎ（Ｒ２）２、ハロゲン、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル（ＮＨＳエステル）およびペルフルオロフェノレートからなる群から選択され、
そしてＲ５は、独立して、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８炭化水素、−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ２および−（Ｃ＝Ｏ）−ＯＣＨ３からなる群から選択される）の１つを有することを特徴とする分枝状ＰＥＧ誘導体。
【請求項１２】
請求項１に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体において、一般式Ｖａ
2013523943.tif 000024
（式中、ｍ＝１〜３０であり、そしてＡ、ＢおよびＣは、独立して、Ｈおよびメチルからなる群から選択される）を有することを特徴とする分枝状ＰＥＧ誘導体。
【請求項１３】
請求項１に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体において、
一般式ＩＸａ
2013523943.tif 000025
（式中、
Ｒ６およびＲ７は、独立して、Ｃ８〜Ｃ２５炭化水素からなる群から選択され、
ｍは２〜３０から選択され、
Ａ、ＢおよびＣは、独立して、−Ｃ１〜Ｃ８炭化水素、−（ＣＨ２）２Ｎ３、−（ＣＨ２）２ＮＲ５２および−ＣＨ２ＣＯＯＲ４からなる群から選択され、
Ｒ２はＣ１〜Ｃ８炭化水素から選択され、
Ｒ３は、Ｃ１〜８アルコキシ基、アリールオキシ基、ハロゲン、ジ−Ｃ１〜８−アルキルアミノ基、窒素含有複素環またはアシルオキシ基から選択され、
Ｒ４は、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ２、ＮＨＲ２、Ｎ（Ｒ２）２、ハロゲン、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル（ＮＨＳエステル）およびペルフルオロフェノレートから選択され、
Ｒ５は、独立して、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８炭化水素、−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ２、−（Ｃ＝Ｏ）−ＯＣＨ３または−ＯＣＨ２ＣＨ３から選択され、
Ｘは、通常の原子価則によって化合物を形成するような、Ｃ、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳから独立して選択される０〜１０個の線形原子を有する結合、鎖または環構造である）を有することを特徴とする分枝状ＰＥＧ誘導体。
【請求項１４】
請求項１乃至１３の何れか１項に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体において、前記四級中心炭素が、３−ハロ−２，２−ビス（ハロメチル）プロパノールに由来することを特徴とする分枝状ＰＥＧ誘導体。
【請求項１５】
請求項１４に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体において、前記３−ハロ−２，２−ビス（ハロメチル）プロパノールが、３−ブロモ−２，２−ビス（ブロモメチル）プロパノールであることを特徴とする分枝状ＰＥＧ誘導体。
【請求項１６】
請求項１乃至１５の何れか１項に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体を含んでなることを特徴とする組成物。
【請求項１７】
請求項１乃至１５の何れか１項に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体を含んでなる表面コーティングを有するナノ粒子を含んでなることを特徴とする組成物。
【請求項１８】
請求項１３、請求項１３に従属する請求項１４、または請求項１３に従属する請求項１５に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体を含んでなる組成物において、前記組成物が、前記分枝状ＰＥＧ誘導体を含んでなるリポソームを含んでなることを特徴とする組成物。
【請求項１９】
請求項１６乃至１８の何れか１項に記載の組成物において、前記組成物の主要部分が、請求項１乃至１５の何れか１項に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体からなることを特徴とする組成物。
【請求項２０】
請求項１６乃至１９の何れか１項に記載の組成物において、前記分枝状ＰＥＧ誘導体が、一定分子量であるか、または単分散系であり、生成物の純度が５０％より高いことを特徴とする組成物。
【請求項２１】
請求項２０に記載の組成物において、前記純度が８０％より高いことを特徴とする組成物。
【請求項２２】
請求項２０または２１に記載の組成物において、前記純度が９０％より高いことを特徴とする組成物。
【請求項２３】
請求項２０乃至２２の何れか１項に記載の組成物において、前記純度が９５％より高いことを特徴とする組成物。
【請求項２４】
請求項２０乃至２３の何れか１項に記載の組成物において、前記純度が９９％より高いことを特徴とする組成物。
【請求項２５】
請求項１乃至１５の何れか１項に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体の製造方法において、非プロトン溶媒中の（３−ハロ−２，２−ビス（ハロメチル）プロパノール）の溶液を、Ａ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎＯ−、または塩基およびＡ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎＯＨ（式中、Ａは、Ｃ１〜８炭化水素、ベンジル、Ｎ３ＣＨ２、−（ＣＨ２）２ＮＨ２、またはＲがＣ１〜８炭化水素である−ＣＨ２ＣＯＯＲから選択される）と接触させ、そして前記溶液を３０分間〜３０時間、３０〜１５０℃の温度で加熱することを特徴とする方法。
【請求項２６】
請求項２５に記載の方法において、前記溶液を３０分間〜３０時間、７０〜１２０℃の温度で加熱することを特徴とする方法。
【請求項２７】
請求項２５に記載の方法において、前記溶液を３０分間〜３０時間、９０〜１１０℃の温度で加熱することを特徴とする方法。
【請求項２８】
請求項１乃至１５の何れか１項に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体または請求項１６乃至２４の何れか１項に記載の組成物の使用において、タンパク質、ペプチド、抗体、抗体フラグメント、炭水化物および核酸からなる群から選択される生体分子、または小分子薬剤の構造変性のためであることを特徴とする使用。
【請求項２９】
請求項１乃至１５の何れか１項に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体または請求項１６乃至２４の何れか１項に記載の組成物の使用において、ナノ粒子におけることを特徴とする使用。
【請求項３０】
請求項１乃至１５の何れか１項に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体または請求項１６乃至２４の何れか１項に記載の組成物の使用において、均質触媒におけることを特徴とする使用。
【請求項３１】
請求項１乃至１５の何れか１項に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体または請求項１６乃至２４の何れか１項に記載の組成物の使用において、医療用デバイスにおけることを特徴とする使用。
【請求項３２】
請求項１乃至１５の何れか１項に記載の分枝状ＰＥＧ誘導体または請求項１６乃至２４の何れか１項に記載の組成物を含んでなる表面コーティングを有することを特徴とする、医療用デバイス、または人工器官もしくはスクリュー、またはそれを通して体液が循環して、体に返送されるデバイス、またはインプラントもしくは電極インプラントなどのデバイス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、現在入手可能なＰＥＧ誘導体に勝る利点を有する、分枝状ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）誘導体に関する。それらは、ナノ粒子、タンパク質、ペプチド、薬学的に活性な小分子、リポソーム、均質触媒および生物学的に不活性な表面との結合に特に適用可能である。
【背景技術】
【０００２】
生物学的に不活性な極性ポリマー、特にポリエチレングリコール（ＨＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）Ｈ、ＰＥＧ、ポリエチレンオキシド；ＰＥＯとも呼ばれる）は、特に医薬品および医療用デバイスの領域で、広範な技術的用途が見出されている。最近では、タンパク質、ペプチド、オリゴヌクレオチド、抗体フラグメント、小分子薬剤、触媒、表面および粒子を変性するために、ＰＥＧとの共有結合によるグラフト化が使用されている。これらの変性された結合体では、しばしば、免疫原性または抗原性の低下、薬物動態学的および薬力学的特性の改善、水性媒体における溶解度の増加、安定性の増加、および体内からのクリアランス率の低下などの優れた特性が得られる。
【０００３】
巨大分子のＰＥＧ誘導体のいくつかは、現在までに、医薬品用途に関して承認されている。最初に承認されたものは、アデノシンデアミナーゼ欠乏症（ＡＤＡ欠損症）の治療のためのＰＥＧ−アデノシンデアミナーゼであった。
【０００４】
また有機触媒は、水中での反応を可能にさせるため、ＰＥＧ誘導体との共有結合によって変性されている（ＨｏｎｇおよびＧｒｕｂｂｓ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２００６，１２８，３５０８）。
【０００５】
伝統的に、ＰＥＧグラフト化に多分散系線形ＰＥＧ誘導体が使用されていたが、最近では、均一な生成物を得るために、単分散系ＰＥＧ誘導体または一定質量のＰＥＧ誘導体が適用されて、ＰＥＧ誘導体の特徴が単純化され、したがって規制プロセスが促進される。
【０００６】
２本以上のＰＥＧ鎖が共通の中心に結合していることを特徴とする分枝状ＰＥＧは、より一般的な線形ＰＥＧ誘導体の代替物として開発された。Ｍｏｎｆａｒｄｉｎｉら（Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．１９９５，６，６２−６９）は、分枝状ＰＥＧ誘導体を使用するタンパク質の表面変性によって、生物学的適合性が増加し、より良好な安定性が得られることを報告した。これらのＰＥＧは、結合した表面／分子のより良好なマスキングおよび保護を可能にする。加えて、分枝状ＰＥＧを使用するタンパク質の変性によって、化学結合に利用可能なアミノ酸／アミノ酸側鎖のより効率的な使用法がもたらされ、したがって、変性につきより多くのポリマーがもたらされる。タンパク質の化学的変性がより少ないことによって、生体分子の自然構造、したがって、生物学的活性を保持する可能性が高まる。
【０００７】
ＰＥＧを巨大分子および小型有機分子に結合させるためのそれぞれの戦略は、結合可能なＰＥＧ分子径および数に関して異なる。巨大分子では、生物学的活性を保ちながら、血液からのクリアランスの低下、より良好な特異性を得るため、一般に、５ｋＤａ〜９０ｋＤａの範囲の分子量のＰＥＧポリマーを使用して変性される。しかしながら、大型ＰＥＧ分子は、小型有機分子の変性には適切でない。薬学的に活性な小分子と、大型ＰＥＧポリマーとの結合体では、ほとんどの場合、立体障害のため、結合体がレセプターまたは結合ポケットと相互作用することが阻害されるか、あるいはさらには、それらの標的に達するために膜を通して拡散する分子の能力が変更される。大型ＰＥＧ部分との結合体は、あらゆる大型分子と同様に、低い拡散速度を有する。したがって、小型有機分子の変性のためには、一般に、２ｋＤａ未満の分子量を有するＰＥＧ誘導体が使用される（Ｏｕｃｈｉ，Ｔ．，ｉｎ  Ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ）：Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｈａｒｒｉｓ  ａｎｄ  Ｚａｌｉｐｓｋｙ  Ｅｄｓ，Ｃｈａｐｔｅｒ  １９）。一般には、巨大分子では、より小さいＰＥＧを使用して、いくつかの位置へのＰＥＧの結合が可能であるが、通常できる限り少ないことが有利である。他方、小型有機化合物では、ＰＥＧに対する結合点が少なくて、未変性分子の生理活性特性を保持する結合体を得ることはさらに困難である。
【０００８】
国際公開第９５／０２５７６３号パンフレットには、（より大きな構造の一部として）分枝状ＰＥＧ状構造が開示されている。これは本発明の構造と表面的には類似点を有するが、個別であり、本明細書に開示される用途に有用であるという不可欠な特徴が欠如している。
【０００９】
国際公開第２００７／０２５７６３号パンフレットには、定義された特徴の分枝状ＰＥＧ誘導体が開示されている。しかしながら、それらの構造は、以下の不利益をもたらす様式で本発明とは異なる。それらは、コア構造として２，２，２−トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミンを利用し、詳細な構造はより複雑であり、したがって、製造するためにはより高価である。コアはアミドに基づき、したがって、加水分解により感受性であり、そして個々の分枝状ＰＥＧ誘導体はチオエーテルを含有する。チオエーテルは、酸化に感受性であることが知られている官能基であり、酸化は生成物の不均質性のさらなる原因となる可能性がある。コア構造がコンパクトではない。したがって、本明細書で開示される用途のいくつかに有用ではない。
【００１０】
用語の定義
「ナノ粒子」という用語は、１〜１００ｎｍの最長寸法を有する、あらゆる形状の粒子を記載するために使用される。
【００１１】
「生物学的に不活性」とは、生物学的適合性、すなわち、生体に無害であり、同時に生体内での分解に安定である物質を指す。
【００１２】
「単分子層」とは、１分子の厚みの層を指す。
【００１３】
コーティングの文脈中での「配向」とは、コーティング分子の全ての頭部および尾部（ケースごとに任意に定義されるが、本発明では一貫して、頭部として、存在する場合、シランを指すように意図される）が、粒子コア表面に関して同様に配向しているコーティング分子の層を指す。
【００１４】
「活性化シラン」は、以下の型、ＲｎＳｉ（Ｘ）４−ｎ（式中、Ｘは、アルコキシ基、アリールオキシ基、ハロゲン、ジアルキルアミノ基、窒素含有複素環またはアシルオキシ基であり、そしてＲが有機基である）のシランを指す。
【００１５】
「オキシシラン」は、１個またはそれ以上の酸素原子がケイ素原子に結合している、あらゆる有機化合物を指す。それらの非限定的な例は、
2013523943.tif 000003
である。
【００１６】
「オルガノシラン」は、１個またはそれ以上の炭素ケイ素結合を含有する有機化合物を指す。
【００１７】
「有機残基」は、分子的実体に共有結合した有機化合物を指す。
【００１８】
「オルガノオキシシラン」は、ケイ素原子に結合している１個またはそれ以上の炭素原子および１個またはそれ以上の酸素原子を含有する有機化合物を指す。それらの非限定的な例は、
2013523943.tif 000004
である。
【００１９】
「炭化水素」または「炭化水素鎖」は、水素および炭素からなる有機残基である。本発明で使用される場合、炭化水素は、示される場合、Ｏ、ＳおよびＮから選択されるヘテロ原子を含んでもよい。これは、炭素原子の１個以上がＯ、ＳまたはＮから選択されるヘテロ原子によって置き換えられたことを意味する。炭化水素は完全に飽和されていてもよく、あるいは１個またはそれ以上の不飽和を含んでもよい。特記されない限り、炭化水素は１〜５０のいずれかの数の炭素原子を含有してもよい。次いで、化合物の炭化水素基は、「Ｃ１〜８炭化水素」または同様の呼称で記載されてもよい。代表的な炭化水素基としては、限定されないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、第３級ブチル、ペンチル、ヘキシル、エテニル、プロペニル、ブテニル、フェニル、ベンジルが含まれる。
【００２０】
「アルキル」は、直鎖または分枝状炭化水素鎖、完全飽和（二重または三重結合がない）炭化水素基を指す。アルキル基は、１〜８個の炭素原子を有してもよい。化合物のアルキル基は、「Ｃ１〜８アルキル」または同様の呼称で記載されてもよい。代表的なアルキル基としては、限定されないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、第３級ブチル、ペンチル、ヘキシルなどが含まれる。
【００２１】
本明細書で記載される場合、「１から８まで」または「１〜８」などの数値的な範囲は、示された範囲の各々の整数を指し、例えば、「１個から８個までの炭素原子」は、アルキル基が、１個の炭素原子、２個の炭素原子、３個の炭素原子などからなってよく、最大で８個の炭素原子を含むことを意味する。
【００２２】
本明細書で使用される場合、「アルコキシ」は、式−ＯＲ（式中、Ｒは、Ｃ１〜８アルキル、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、１−メチルエトキシ（イソプロポキシ）、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、アミルオキシ、イソ−アミルオキシなどである）を指す。アルコキシは、任意に置換されていてもよい。
【００２３】
本明細書で使用される場合、「アリールオキシ」は、ＲがアリールであるＲＯ−を指す。「アリール」とは、完全に非局在化されたパイ電子系を有する炭素環（全て炭素）または２個以上の縮合環（２個の隣接する炭素原子を共有する環）を指す。アリール基の例としては、限定されないが、ベンゼン、ナフタレンおよびアズレンが含まれる。アリール基は任意に置換されてもよく、例えば、フェノキシ、ナフタレニルオキシ、アズレニルオキシ、アントラセニルオキシ、ナフタレニルチオ、フェニルチオなどである。アリールオキシは、任意に置換されてもよい。
【００２４】
本明細書で使用される場合、「アシル」はカルボニル基、すなわち、−Ｃ（＝Ｏ）−を指す。
【００２５】
本明細書で使用される場合、「アシルオキシ」は、酸素原子がカルボニル基を介して結合しているもの、すなわち、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−を指す。
【００２６】
本明細書で使用される場合、「複素環」は、炭素原子と、窒素、酸素および硫黄からなる群から選択されるヘテロ原子１〜５個とからなる安定な３員〜１８員環を指す。複素環は、単環式であっても、二環式であっても、三環式であってもよい。
【００２７】
「強塩基」は、本文脈中、水酸化物よりも強く、水性環境に適合性がない塩基を指す。
【００２８】
「結合体」は、蛍光性マーカー、染料、スピン標識、放射性マーカー、生物学的受容体へのリガンド、キレート、酵素阻害物質、酵素基質、抗体または抗体関連構造である分子的実体を指す。例えば、この主題の背景に関しては、“Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ”，Ｇｒｅｇ  Ｔ．Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ  ｓｅｃｏｎｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  ２００８，ＩＳＢＮ  ９７８−０−１２−３７０５０１−３を参照のこと。
【００２９】
「結合のためのハンドル」または「結合点」は、シランコーティングに結合可能であるか、またはシランコーティング中に組み込み可能であるが、上記で定義された結合体に結合可能な１個の反応基を残す二官能性分子を指す。代表的であるが、排除的ではない例は、（ＥｔＯ）３ＳｉＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２である。
【００３０】
「ｍ−ＰＥＧ」は、ｎが状況次第である構造ＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−ＯＨを指す。
【００３１】
「非プロトン性溶媒」は、水性環境で除去可能であるか、または迅速に交換可能であるプロトンを有さない溶媒を指す。そのような溶媒の代表的な例は、限定されないが、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジエチルエーテル、グリム、ジグリム、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシドまたはＮ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）である。
【００３２】
ＤＣＭは、ジクロロメタンの頭字語である。
【発明の概要】
【００３３】
本発明の第１の態様は、共通の四級炭素原子に結合した３本のＰＥＧ鎖を含んでなる分枝状ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）誘導体である。３本全てのＰＥＧ鎖が等しい長さであり、そして、各々が１〜３０個の−ＯＣＨ２ＣＨ２−単位を含んでなることが好ましい。前記四級炭素原子に結合する第４の基は、多数の種々の有機基のいずれであることも可能である。この第４の基は炭素原子を含有すべきであり、これが四級炭素原子に結合する。四級炭素原子に結合する第４の基の例の非限定的なリストは、以下の基Ｒ１を記載するリストに与えられる。
【００３４】
本発明による分枝状ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）誘導体は、式Ｉまたは式ＩＩ
2013523943.tif 000005
（式中、
ｍは１〜３０から選択され、
Ｒ１は、以下の表１に示されるリストから選択され、
Ａ、ＢおよびＣは、独立して、−Ｃ１〜Ｃ８炭化水素、−（ＣＨ２）２Ｎ３、−（ＣＨ２）２ＮＲ５２、−ＣＨ２ＣＯＯＲ４から選択され、
Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ８炭化水素から選択され、
Ｒ３は、Ｃ１〜８アルコキシ基、アリールオキシ基、ハロゲン、ジ−Ｃ１〜８−アルキルアミノ基、窒素含有複素環またはアシルオキシ基から選択され、
Ｒ４は、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ２、ＮＨＲ２、Ｎ（Ｒ２）２、ハロゲン、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル（ＮＨＳエステル）およびペルフルオロフェノレートから選択され、Ｒ２は上記と同様であり、
Ｒ５は、独立して、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８炭化水素、−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ２、−（Ｃ＝Ｏ）−ＯＣＨ３、−（Ｃ＝Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ３から選択される）を有してもよい。
2013523943.tif 000006
2013523943.tif 000007
【図面の簡単な説明】
【００３５】
【図１】図１は、実施例１１からの物質のＤＬＳ分析を示しており、下記の実施例において参照される。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
いくつかの実施形態において、式Ｉ中のＲ１はＯ（ＣＨ２）３Ｓｉ（Ｒ３）３であり、そしてＲ３は、Ｃ１〜８アルコキシ、アシルオキシ、ジアルキルアミノおよびアリールオキシからなる群から選択されてもよい。
【００３７】
いくつかの実施形態において、式Ｉ中のＲ１は、ＣＨ２ＮＨ２またはＯＣＨ２ＣＯＯＨである。
【００３８】
いくつかの実施形態において、ｍは３〜２０である。
【００３９】
いくつかの実施形態において、ｍは３〜１０である。
【００４０】
いくつかの実施形態において、ｍは３〜５である。
【００４１】
いくつかの実施形態において、Ａ、ＢおよびＣは全て等しい。
【００４２】
いくつかの実施形態において、Ａ、ＢおよびＣは全て−ＣＨ３である。
【００４３】
あるいは本発明による分枝状ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）誘導体は、次式
2013523943.tif 000008
（式中、「生体分子」は、ペプチドまたは抗体フラグメントまたはリボ核酸または炭水化物を示し、そしてＸはカップリングに使用される官能性の残基であり、そしてＹは、ｎが１〜５０から選択される構造−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎＯ−を有するスペーサー基であり、そしてｍは２〜３０から選択され、そしてＡ、ＢおよびＣは、独立して、−Ｃ１〜Ｃ８炭化水素、−（ＣＨ２）２Ｎ３、−（ＣＨ２）２ＮＲ５２および−ＣＨ２ＣＯＯＲ４から選択され、そしてＲ２はＣ１〜Ｃ８炭化水素から選択され、そしてＲ３は、Ｃ１〜８アルコキシ基、アリールオキシ基、ハロゲン、ジ−Ｃ１〜８−アルキルアミノ基、窒素含有複素環またはアシルオキシ基から選択され、そしてＲ４は、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ２、ＮＨＲ２、Ｎ（Ｒ２）２、ハロゲン、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル（ＮＨＳエステル）およびペルフルオロフェノレートから選択され、そして、Ｒ５は、独立して、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８炭化水素、−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ２、−（Ｃ＝Ｏ）−ＯＣＨ３または−ＯＣＨ２ＣＨ３から選択される）を有してもよい。
【００４４】
あるいは本発明による化合物は、次式
2013523943.tif 000009
（式中、「薬剤」は、１０００ｇ／ｍｏｌ未満の分子量の薬学的に活性な薬剤を示し、そしてＸはカップリングに使用される官能性の残基であり、そしてＹは、ｎが１〜５０から選択される構造−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎＯ−を有するスペーサー基であり、そしてｍは２〜３０から選択され、そしてＡ、ＢおよびＣは、独立して、−Ｃ１〜Ｃ８炭化水素、−（ＣＨ２）２Ｎ３、−（ＣＨ２）２ＮＲ５２および−ＣＨ２ＣＯＯＲ４から選択され、そしてＲ２はＣ１〜Ｃ８炭化水素から選択され、そしてＲ３は、Ｃ１〜８アルコキシ基、アリールオキシ基、ハロゲン、ジ−Ｃ１〜８−アルキルアミノ基、窒素含有複素環またはアシルオキシ基から選択され、そしてＲ４は、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ２、ＮＨＲ２、Ｎ（Ｒ２）２、ハロゲン、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル（ＮＨＳエステル）およびペルフルオロフェノレートから選択され、そして、Ｒ５は、独立して、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８炭化水素、−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ２または−（Ｃ＝Ｏ）−ＯＣＨ３から選択される）の２つのうちの１つを有してもよい。
【００４５】
あるいは本発明による化合物は、式ｖａ
2013523943.tif 000010
（式中、ｍ＝１〜３０であり、そしてＡ、ＢおよびＣは、独立して、Ｈおよびメチルからなる群から選択される）を有してもよい。
【００４６】
あるいは本発明による化合物は、式ＩＸａ
2013523943.tif 000011
（式中、
Ｒ６およびＲ７は、独立して、Ｃ８〜Ｃ２５炭化水素からなる群から選択され、
ｍは２〜３０から選択され、
Ａ、ＢおよびＣは、独立して、−Ｃ１〜Ｃ８炭化水素、−（ＣＨ２）２Ｎ３、−（ＣＨ２）２ＮＲ５２および−ＣＨ２ＣＯＯＲ４からなる群から選択され、
Ｒ２はＣ１〜Ｃ８炭化水素から選択され、
Ｒ３は、Ｃ１〜８アルコキシ基、アリールオキシ基、ハロゲン、ジ−Ｃ１〜８−アルキルアミノ基、窒素含有複素環またはアシルオキシ基から選択され、
Ｒ４は、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ２、ＮＨＲ２、Ｎ（Ｒ２）２、ハロゲン、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル（ＮＨＳエステル）およびペルフルオロフェノレートから選択され、
Ｒ５は、独立して、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８炭化水素、−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ２、−（Ｃ＝Ｏ）−ＯＣＨ３または−ＯＣＨ２ＣＨ３から選択され、
Ｘは、通常の原子価則によって化合物を形成するような、Ｃ、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳから独立して選択される０〜１０個の線形原子を有する結合、鎖または環構造である）を有してもよい。
本発明のいくつかの実施形態にとって重要なことは、組成物が、いずれかの鎖長ｍが、望ましい長さとは異なる値を有する分子を本質的に含まず、すなわち、生成物が一定の分子量を有して、同義的に単分散であり、生成物の純度は５０％より高いということである。適切な純度は、例えば、８０％より高く、９０％より高く、９５％より高く、９９％をより高い。本発明の一実施形態において、純度は９５％より高い。
【００４７】
この種類のＰＥＧ誘導体は、スキーム３に概説される簡潔な合成戦略を使用して、安価な出発材料から容易に製造される。式Ｉに従う化合物には、経済的に実行可能であるという長所もある。特に、ｍ＝３または４を有する式Ｉに対する出発材料が好ましい。以下の計算は、本発明の経済的な利点を示す。構造Ｉ中のＲ１が−ＯＨであり、そしてｍ＝４である場合、生成物の分子量は７０７ｇ／ｍｏｌである。出発材料のコストは、小規模で購入される場合、生成物１ｇあたり２０ドルである。同様の分子量を有する商業的に入手可能な線形ｍ−ＰＥＧは、高価で時間がかかるクロマトグラフィーを使用して、ＰＥＧ混合物から単離される。代表的な例は、１１個の繰り返しエチレングリコール単位を有するｍ−ＰＥＧであり、これは２４０ドル／ｇ（Ｐｏｌｙｐｕｒｅ，Ｎｏｒｗａｙ）のコストで入手可能である。単分散系ＰＥＧ類似体に基づく分枝状アミドは、Ｑｕａｎｔａ  Ｂｉｏｄｅｓｉｇｎから１３００ドル／ｇで入手可能である。
【００４８】
したがって、本発明は、低コストの出発材料に基づくＰＥＧ誘導体の形成を可能にする。
【００４９】
一定の分子量のＰＥＧアルコールは、約３０個のモノマー単位の長さまで商業的に入手可能であり、したがって、本発明は、ｍが１〜３０、または、例えば、２〜２０、３〜１２、３〜６および３〜４である一般構造Ｉに関する。一実施形態において、ｍは３〜４である。
【００５０】
本発明の分枝状ＰＥＧ誘導体の合成において使用されるＰＥＧアルコールの由来次第で、最終生成物は、微小な不純物のスペクトルを有する。それらの不純物のいくつかは、一般構造ＩまたはＩＩの同等物中でｍを有さず、したがって、望ましい物質ではなく、不純物として考えられる。一般には、純粋な出発材料を使用することが望ましい。出発材料の適切な純度は、７０％より高いか、または９０％より高いか、または９５％より高いか、または９９％より高い。中間体の不完全な反応からの残基もあり得る。そのような残基は、反応時間、反応温度、溶媒の量、溶媒の同一性、または塩基の同一性を最適化することによって、ケースごとに最小にすることができる。
【００５１】
本発明の第２の態様は、第１の態様による分子を製造する方法に関する。生成物ＩまたはＩは、当業者に明らかであるいくつかのルートによって製造可能であるが、本発明の第２の態様として本明細書に記載される方法は、スキーム３に概説されるように、重要な中間体および四級炭素の供給源として、安くて商業的に入手可能なトリハロアルコールを使用する利点を有する。
【００５２】
この方法は、以下のステップを含んでなる。
ａ．重要な出発材料、３−ハロ−２，２−ビス（ハロメチル）プロパノールを、好ましくは、３−ブロモ−２，２−ビス（ブロモメチル）プロパノールの形態で、塩化アリル、メシル酸アリル、もしくはトシル酸アリル、または好ましくは臭化アリルなどのアリル化試薬と、任意に反応条件に不活性な溶媒中で、強塩基、例えば水素化ナトリウムの存在下で、接触させるステップ。次いで、中間体を、有機化学のテキスト（Ａｄｖａｎｃｅｄ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｌｅｏｎａｒｄ，Ｌｙｇｏ  ａｎｄ  Ｐｒｏｃｔｅｒ  １９９８，２ｎｄ  ｅｄ，Ｓｔａｎｌｅｙ  Ｔｈｏｒｎｅｓ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｃｈｅｌｔｅｎｈａｍ）に記載されるいずれかの標準的な技術によって単離してもよい。中間体、３−（３−ブロモ−２，２−ビス（ブロモメチル）プロポキシ）プロプ−１−エンを単離することなく、次のステップに進むことも考えられる。
ｂ．中間生成物を、一定の分子量を有する構造Ａ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｍＯ−のＰＥＧ−オリゴマー、または塩基およびＡ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｍＯＨ（式中、Ａは、−Ｃ１〜Ｃ８炭化水素、−（ＣＨ２）２Ｎ３、−（ＣＨ２）２ＮＲ５２および−ＣＨ２ＣＯＯＲ４から選択され、そしてＲ２はＣ１〜Ｃ８炭化水素から選択され、そしてＲ３は、Ｃ１〜８アルコキシ基、アリールオキシ基、ハロゲン、ジ−Ｃ１〜８−アルキルアミノ基、窒素含有複素環またはアシルオキシ基から選択され、そしてＲ４は、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ２、ＮＨＲ２、Ｎ（Ｒ２）２、ハロゲン、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル（ＮＨＳエステル）およびペルフルオロフェノレートから選択され、そして、Ｒ５は、独立して、−Ｈ、−Ｃ１〜Ｃ８炭化水素、−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ２、−（Ｃ＝Ｏ）−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３から選択され、そしてｍは１〜３０から選択される）と、任意に反応条件に不活性な溶媒中で、水素化ナトリウムのような強塩基存在下で接触させるステップ。このステップの温度は、都合よく、３０〜１５０℃、または７０〜１２０℃、または好ましくは９０〜１１０℃などで室温より高くてもよい。任意に、得られた分枝状ＰＥＧ中間体を、有機化学のテキスト（Ａｄｖａｎｃｅｄ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｌｅｏｎａｒｄ，Ｌｙｇｏ  ａｎｄ  Ｐｒｏｃｔｅｒ  １９９８，２ｎｄ  ｅｄ，Ｓｔａｎｌｅｙ  Ｔｈｏｒｎｅｓ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｃｈｅｌｔｅｎｈａｍ）に記載されるいずれかの標準的な技術によって単離してもよい。
ｃ．次いで、当業者に明らかである多くの方法のいずれかによって、ステップｂの中間体を実際の誘導体化剤に変換する。限定されないが、いくつかの例を以下に記載し、実施例３〜６でさらに詳述する。
【００５３】
一実施形態において、抽出手順または真空蒸留が、ａ）で使用されることが好ましいことが見出された。
【００５４】
一実施形態において、単純なクロマトグラフィーが続いて行われる抽出手順が、ｂ）で使用されることが好ましいことが見出された。
【００５５】
Ｉｄのアリル基が、標準的な保護基処理、例えば、ＤＭＳＯ／ＫＯｔ−Ｂｕ（カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド）と、その後、ＨＣｌ（塩酸）によって除去される場合（実施例４）、続いて生じるアルコールＩａを、いくつかの他の官能基へと合成することができる。ここで、非限定的ないくつかの例を示す。例えば、クロロクロム酸ピリジニウムまたはＤｅｓｓ−ＭａｒｔｉｎペルヨージナンによるＩａの水酸基の穏やかな酸化によって、アルデヒドＩＩ（Ｒ４＝Ｈ）が生じるのに対し、発煙硝酸または過マンガン酸カリウムのようなより強力な酸化条件によって、相当するカルボン酸ＩＩ（Ｒ４＝ＯＨ）が生じる。次に、カルボン酸は、多数の方法で活性化および誘導体化が可能である。アルデヒドに還元アミノ化条件、すなわち、ＮａＣＮＢＨ３／ＮＨ３を受けさせ、アミンＩｇが得られる。その代わりに、アルコールを、ＳＯＣｌ２またはＰＢｒ３などのハロゲン化試薬で処理し、ハロゲン化合物ＩＵを得る。次にこれを使用して、例えば、チオ尿素による反応と、それに続いて、ＮａＯＨ／ＥｔＯＨ中での加水分解によって、チオールＩｑを製造することができる。次にチオールをＩｒにアルキル化すること、またはスルホン酸Ｉｓに酸化することができる。次いで、ＩｔをスルホキシドＩｕまたはスルホンＩｖに酸化することができる。あるいは、亜リン酸ジメチルまたはジエチルとの反応によって、ＩｕをホスホネートＩａｃへと変換することができる。トリメチルシリルブロミドによる処理によって、これを相当するホスホン酸Ｉａｂへと加水分解することができる。
【００５６】
Ｒ３が表１に定義されたとおりであるＺ＝（Ｒ３）３Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｏ−を有するＩａｍを中間体Ｉｄから得るためには、ヒドロシリル化の方法が好ましい。これは、触媒の存在下で、二重結合を横断して、トリアルコキシシランを付加することを伴う。白金に基づく触媒が好ましく、特に、Ｋａｒｓｔｅｄｔの触媒が効率的であることが見出された。
【００５７】
Ｉｄから直接アクセス可能なものは、２つの他の手順によるアルデヒドＩａｅ（Ｒ４＝Ｈ）である。小規模では、オゾン化と、それに続く還元処理を考えることができる。より大きな規模では、隣接ジアルコールを生じる四酸化オスミウムによる反応と、それに続く過ヨウ素酸による裂開が好ましい。
【００５８】
上記の方法のさらなる利点は、短いということ、そして分枝状ＰＥＧ誘導体が、変化しやすい結合を含まないということである。商業的に入手可能な分枝状ＰＥＧ誘導体はアミドに基づき、したがって、加水分解に対してより感受性である。これは、生成物の不均質性のさらなる原因となり、したがって、臨床使用のための開発の間、規制の複雑化につながるおそれがある。
【００５９】
本発明の第３の態様において、溶解度、粘度、安定性、生物学的適合性または薬物動態学もしくは薬力学に関する特性を高めるため、ナノ粒子などのナノサイズ材料に共有結合した一般構造ＩまたはＩＩを含んでなる組成物が考えられる。腎クリアランスのために考案されるナノ粒子を誘導体化する目的で、一方では、コアの最良の保護および安定化と、他方では、最小径との間で最良の妥協を与えるコーティングを使用することは避けられないか、または物質が腎臓を通って濾過されず、そして本発明に記載される分枝状ＰＥＧは、この目的のためにきわめて適切である。特に、遷移金属、重金属またはランタニドのような体に異質の物質を含有するナノ粒子に関連して、これは重要である。これらの物質は、以前のものと組み合わせて、診断学もしくは治療学または両方として興味深いものである。特に、ナノ粒子に組み込まれた金、タンタルまたはタングステンのような重元素をＣＴ（コンピューター断層撮影）のための造影剤として使用することは興味深く、そして、それらは、一般構造ＩまたはＩＩの物質の単分子層でコーティングされることで利益があるであろう。それらの物質の有効性は、ナノ粒子中の重元素の体積分数と非常に相関しており、そして保護層が、安定化を達成しながらも非常に薄いことから、ＩまたはＩＩの単分子層によるコーティングは、非常に良好な特性を有する物質をもたらす。
【００６０】
末端アルキルシラノキシ基を有する線形ＰＥＧ−誘導体は、金属酸化物のコアを有するナノ粒子の表面変性のために適切である。これらのシロキサンは、ＰＥＧ尾部が周囲溶液に配向して表面上に存在するヒドロキシル基と結合する。溶解度および安定性が改善されたが、粒子表面の湾曲とＰＥＧ−尾部の折りたたみのために、コア金属酸化物を暴露しているＰＥＧ−コーティングにおいてギャップがなお存在する。したがって、理想的なコーティング分子は、１個の表面反応基、例えばシロキサンと、２個以上の尾部、例えばＰＥＧを含有して、円錐形構造を生じるべきである。この種類の分枝状ＰＥＧ−シロキサンでは、より少ない金属酸化物コアを暴露するより高密度のＰＥＧ層が導かれる。この理論と一致して、直接的にナノ粒子を取り扱わないが、Ｍｏｎｆａｒｄｉｎｉら（Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．１９９５，６，６２−９）は、分枝状ＰＥＧ誘導体を使用するタンパク質の表面変性によって、バイオコンパビリティ（ｂｉｏｃｏｍｐａｂｉｌｉｔｙ）の増加と、より良好な安定性がもたらされることを示している。
【００６１】
特に、そのような粒子の安定化のために、Ｒ１＝（Ｒ３）３Ｓｉ（ＣＨ２）３Ｏ−（式中、Ｒ３は表１中で定義されたものと同様である）であるＩａｍ、Ｒ１＝ＨＯ２ＣＣＨ２Ｏ−であるＩａｅ（Ｒ４＝ＯＨ）、Ｒ１＝ＨＯ３Ｓ（ＣＨ２）３Ｏ−であるＩｓ、Ｒ１＝（ＨＯ）２ＰＯ（ＣＨ２）３Ｏ−であるＩａｂ、Ｒ１＝ＨＳ（ＣＨ２）３Ｏ−であるＩｑ、Ｒ１＝ＨＳＣＨ２（ＨＳ）ＣＨＣＨ２Ｏ−であるＩｚ、またはＲ１＝−Ｏ（ＣＨ２）２ＮＨＣＯ（ＣＨ２）４ＣＨ（ＳＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＳＨであるＩａｎが好ましい。我々の知る限りでは、分枝状ＰＥＧ−シロキサンは商業的に入手可能ではなくて、文献に記載されていなかった。
【００６２】
ＣｄＳ、ＺｎＳまたはＩｎＳのような様々な半導体材料に基づく、しばしばナノオードと呼ばれる発光性ナノ粒子も、腎臓を通して体から排除される必要があり、そしてＩまたはＩＩの単分子層でコーティングされることによる利益があるだろう。特に、そのような粒子の安定化のために、Ｚが、ＨＳ（ＣＨ２）３Ｏ−、ＨＳＣＨ（ＨＳ）（ＣＨ２）２Ｏ−またはＲ１＝−Ｏ（ＣＨ２）２ＮＨＣＯ（ＣＨ２）４ＣＨ（ＳＨ）ＣＨ２ＣＨ２ＳＨから選択されたＩまたはＩＩが好ましい。
【００６３】
本発明の第４の態様において、一般構造ＩまたはＩＩの分子は、タンパク質、ペプチド、リボ核酸または炭水化物のような生体分子に結合され、そして、Ｘが、カップリングに使用される基の残基であり、そしてＹが、ｎが１〜５０から選択される−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−などの結合またはリンカーであり、ｍは１〜３０から選択され、そしてＡ、ＢおよびＣが、独立して、−Ｃ１〜Ｃ８炭化水素、−（ＣＨ２）２Ｎ３、−（ＣＨ２）２ＮＨ２ならびに限定されないがアミド、カルバメートおよび尿素などのそれらの誘導体、ＣＨ２ＣＯＯＨならびに限定されないが、エステル、無水物、酸塩化物、アミド、カルバメートなどのそれらの誘導体から選択される構造ＩＩＩまたはＩＶを形成する。
【００６４】
生体分子のこのような誘導体化の目的は、溶解度、凍結乾燥後の再構成性、粘度、処理に対する安定性、製剤の安定性、生体内で安定性、生物学的適合性、免疫原性、抗原性または薬物動態学もしくは薬力学に関するその特性を高めることである。粘度に関しては、生成物の注入に関して非常に重要であり、そして、これらのよりコンパクトなＰＥＧ誘導体は、相当する線形誘導体よりも低い粘度をもたらす。以下のスキーム１には、１つまたはそれ以上の位置で生体分子を誘導体化するための、いくつかの方法を示す。
2013523943.tif 000012
【００６５】
本発明の第５の態様において、一般構造ＩまたはＩＩは、溶解度、粘度、製剤の安定性、生体内安定性、生物学的適合性、薬物動態学または薬力学に関するその特性を高めるため、薬学的に活性な小分子に結合される。ＰＥＧ誘導体は、薬剤が血液脳関門を通過する能力を低下させることから、薬剤をＣＮＳの中に入れない効果は特に重要である。より大きな分子径は、血流からのより遅いクリアランスをもたらすことが可能であり、したがって、経時的により均一な薬剤濃度をもたらすことが可能である。
【００６６】
多分散系材料によってこの概念が使用されており、そして本発明の分枝状ＰＥＧ誘導体を使用することが利益をもたらすであろう非限定的な例は、オピオイドが、中枢神経系ではなく末梢器官を標的とする国際公開第２００８１１２２８８号パンフレットに見出すことができる。
【００６７】
小分子に関しては通常１つの変性部位のみが利用可能であるが、本発明の分枝状構造では１本ではなく３本のＰＥＧ鎖が導入されるため、利点をもたらす。鎖長がより短いということも、薬剤の生物学的効果に対する望ましくない阻害の可能性を少なくさせる。
2013523943.tif 000013
（式中、Ｘは、スキーム１に誘導体化に関して概説されたようなカップリングに使用される基の残基であり、そして、Ｙは、ｎが１〜５０から選択される−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−などの結合またはリンカーである）非限定的な例は、ｍ＝１〜３０であり、Ａ、ＢおよびＣがＨまたはメチルである構造Ｖａである。一態様において、ｍ＝１〜１０であり、Ａ、ＢおよびＣはメチルである。一態様において、ｍ＝１〜５であり、Ａ、ＢおよびＣはメチルである。
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【００６８】
アルテミシニン部分とＰＥＧとの間の結合については多くの些細な変化を想像することができる。例えば、スペーサー基が挿入されてもよく、そして／または結合が、エステル、アミドまたはスルホンアミドを含有してもよい。硫黄、炭素または窒素原子によってヘミアセタール酸素を置換することも可能である。
【００６９】
本発明の第６の態様において、一般式ＩまたはＩＩの分子は、触媒的に活性な分子に結合し、Ｘが、スキーム１に誘導体化に関して概説されたようなカップリングに使用される基の残基であり、そしてＹが、ｎが１〜５０から選択される−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−などの結合またはリンカーである化合物ＶＩＩまたはＶＩＩＩを形成する。様々な溶媒中、特に水中でのその溶解度を高めるため、固体状態もしくは溶液中での安定性を改善するため、溶解度特性を変性して、生成物からの除去を促進するため、または触媒の活性を高めるため、通常、触媒は均質触媒である。特に、これは、オレフィンメタセシス触媒、接触水素化触媒およびクロスカプリング触媒に関連して興味深い。
2013523943.tif 000015
【００７０】
ＨｏｎｇおよびＧｒｕｂｂｓ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２００６，１２８，３５０８に、いくつかの合成ステップを通して、多分散系線形ｍ−ＰＥＧによる誘導体化によって水溶性にされた触媒が記載されており、この物質はより扱いやすく、したがって、その代わりに一般式ＩまたはＩＩのＰＥＧなどの単分散系ＰＥＧで製造するよりも安上がりである。
【００７１】
ほとんどの均質触媒は、構造の必要不可欠な部分としてホスフィンを有し、ホスフィンを通して可溶性の基Ｉを組み込むことは、しばしば都合がいい。これに関しては多くの可能性があるが、芳香族ホスフィンが望ましい場合、ＩまたはＩＩは、エーテル酸素を通して結合可能である。脂肪族ホスフィンが望ましい場合は、アルキル化を通して導入されたリン原子に直接結合する基としてＩまたはＩＩを使用することが、しばしば可能である。
【００７２】
本発明の分枝状ＰＥＧ誘導体のよりコンパクトな構造が、触媒プロセスを阻害するリスクを低下させることも重要である。
【００７３】
本発明の第７の態様において、一般構造ＩまたはＩＩは、デバイスの表面に結合する。医療用デバイス、特に人工器官またはスクリュー、それを通して体液が循環して、体に返送されるデバイス、またはインプラントもしくは電極インプラントなどのデバイスが体液と接触している場合を目的とする。そのようなデバイスの表面は、デバイスによる体のタンパク質との相互作用を減少させるためにＩまたはＩＩでコーティングされることによって利益がもたらされ得る。特に、これは、デバイス周辺で瘢痕組織の形成を減少させ得、デバイス上でのバイオフィルムの形成を減少させ得、デバイス周辺での感染症のリスクを減少させ得、デバイス周辺での炎症のリスクを減少させ得、デバイスの腐食のリスクを減少させ得るか、またはデバイスに対する免疫反応のリスクを減少させ得る。
【００７４】
分枝状ＰＥＧ誘導体の結合は、デバイス材料次第であり、そして当該分野において多くの標準方法がある。１つは、アンモニア水の存在下でオキシ−シラン状Ｉａｍを使用して、ＰＥＧ誘導体を表面に結合することである。もう１つは、表面に対して高い親和性を有するＩａｂのようなホスホネートを使用することである。
【００７５】
本発明の第８の態様において、一般構造ＩまたはＩＩは、ポリマー構造（巨大分子フレームワーク）、好ましくは一定の分子量の、または多分散性の低いポリマー構造にグラフト化される。これには、高いが一定の分子量の物質を生じさせるという利点があり、そしてそれは、比較的少ない結合点が利用可能である上記のようなタンパク質を誘導体化する場合に特に有益であり得る。スキーム２に、この態様によるいくつかの代表的な構造を示す。
【００７６】
一態様において、第４および第８の態様を組み合わせる。一態様において、第７および第８の態様を組み合わせる。
2013523943.tif 000016
【００７７】
本発明の第９の態様において、両親媒性分子を得るために、一般構造ＩおよびＩＩを非極性部分と組み合わせる。薬物送達の媒体としてリポソームを使用することは興味深く、そしてそのような生成物への免疫反応を抑制するため、それらはしばしば、それらの表面においてＰＥＧによって誘導体化される。本発明の一態様は、リポソームの一部として脂質に結合した一般式ＩまたはＩＩの分子を使用することである。これには、より均一な生成物が得られ、したがって、承認のための規制プロセスを単純化するという利点がある。ｍが１〜３０、例えば、２〜２０、または３〜１２、または３〜６もしくは３〜４から選択される構造ＩＸ。Ｒ６およびＲ７は、独立して、Ｃ８〜２５炭化水素から選択される。Ａ、ＢおよびＣは、以前に定義されたとおりである。リポソーム以外の他のラメラ構造も考えられ得る。非限定的な例は、ミセル、逆ミセル、ベシクルおよび液晶である。
【００７８】
本発明の一態様において、ｍは３〜４である。
【００７９】
構造ＩＸａは、本発明によるリポソームの形成のために適切な化合物の一般構造である。構造ＩＸｂおよび１０は、リポソームまたは他のラメラ構造への組み込みのために適切な非限定的な例である。
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【００８０】
構造ＩＸａ、Ｘは、通常の原子価則によって化合物を形成するような、Ｃ、Ｏ、Ｎ、ＰおよびＳから独立して選択される０〜１０個の線形原子を有する結合、鎖または環構造である。
2013523943.tif 000018
【００８１】
構造ＩＸｂ、ｍ、Ａ、ＢおよびＣは、化合物ＩおよびＩＩに関して定義されたとおりである。
2013523943.tif 000019
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【実施例】
【００８２】
実施例１：３−（３−ブロモ−２，２−ビス（ブロモメチル）プロポキシ）プロプ−１−エン（１）。窒素下、０℃で、乾燥および脱気（真空による）ＤＭＦ（４０ｍｌ、２４時間  ４Å  ＭＳ）中、水素化ナトリウム（１．６８ｇ、４２ｍｍｏｌ）を３−ブロモ−２，２−ビス（ブロモメチル）プロパノール（９．７５ｇ、３０ｍｍｏｌ）および臭化アリル（１２．９ｍｌ、１５０ｍｍｏｌ）に分割添加した。次いで、温度を室温（２２℃）まで高め、そして反応混合物をさらに３時間撹拌した。次いで、反応混合物を水飽和ＮＨ４Ｃｌ（５０ｍｌ）に慎重に添加した。次いで、Ｈ２Ｏ相をジエチルエーテル（２×５０ｍｌ）で抽出し、そして組み合わせた有機相をＨ２Ｏ（５×５０ｍｌ）および塩水（５０ｍｌ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、続いて濾過を行った。揮発性物質を減圧除去し、淡黄色油状物（９．７ｇ）が得られた。カラムクロマトグラフィー（ヘプタン：ＥｔＯＡｃ  ９：１）によって、透明油状物として６．６ｇ（６２％）の１が得られた。この生成物は減圧蒸留を使用して単離可能であった。０．０５ｍｂａｒで沸点８５〜８７℃。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）；５．９３（ｍ，１Ｈ），５．２８（ｍ，２Ｈ），４．０５（ｄ，２Ｈ），３．５８（ｓ，６Ｈ），３．５２（ｓ，２Ｈ）。
【００８３】
実施例２：１６−（アリルオキシメチル）−１６−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデシル−２，５，８，１１，１４，１８，２１，２４，２７，３０−デカオキサヘントリアコンタン（２）。窒素下、０℃で、シリンジを使用して、乾燥および脱気ＤＭＦ（３．５ｍｌ、２４時間、４Å  ＭＳで乾燥）中に溶解したテトラエチレングリコールモノメチルエーテル（１．９１ｍｌ、９ｍｍｏｌ）を、乾燥および脱気ＤＭＦ（１５ｍｌ、２４時間  ４Å  ＭＳで乾燥）中の水素化ナトリウム（３６５ｍｇ、９ｍｍｏｌ）に慎重に添加した。次いで、温度を室温まで高め、そして反応混合物をさらに３０分間撹拌した。次いで、三臭化物１（７３０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を添加し、そして温度を１００℃まで高めた。１４時間後、反応は完了した（ＨＰＬＣ−ＥＬＳＤ−Ｃ１８、９５：５〜５：９５  Ｈ２Ｏ／ＡＣＮ、２５分、Ｒｔ生成物＝１９．５分）。温度を室温まで下げて、そして反応混合物をＨ２Ｏ（１５０ｍｌ）に慎重に添加し、そしてＨ２Ｏ相をジエチルエーテル（２×５０ｍｌ）で洗浄した。次いで、塩化ナトリウムを、飽和するまでＨ２Ｏ相に添加した。Ｈ２Ｏ相をＥｔＯＡｃ（４×５０ｍｌ）で抽出し、そして組み合わせた有機相を塩水（２×３０ｍｌ）で洗浄した。硫酸ナトリウムおよびチャコールを有機相に添加した。透明な有機相を濾過し、そして揮発性物質を減圧除去した（８ｍｍＨｇ、４０℃、次いで、０．１ｍｍＨｇ（油ポンプ）および４０℃、残留ＤＭＦを除去する）。カラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ  ９：１）によって、１．０５ｇ（７０％）の２が得られた。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）；５．９０（ｍ，１Ｈ），５．２０（ｍ，２Ｈ），３．９４（ｄｔ，２Ｈ），３．７０−３．５５（ｍ，４８Ｈ），３．４５（ｓ，６Ｈ），３．４３（ｓ，２Ｈ），３．４０（ｓ，９Ｈ）。
【００８４】
実施例３：３，３−ジメトキシ−９，９−ジ−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデシル−２，７，１１，１４，１７，２０，２３−ヘプタオキサ−３−シラテトラコサン（３）。窒素下、室温で、乾燥トルエン（６ｍｌ）中、プラチナ（０）−１，３−ジビニル−１，１，３，３−テトラメチルシロキサン（２０μｌ、キシレン中２％）を、２（０．７５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）およびトリメトキシシラン（２５５μｌ、２．０ｍｍｏｌ）に添加した。反応混合物を２４時間、室温で振った。次いで、チャコールを添加し、そして反応混合物を２分後に濾過した。揮発性物質を減圧除去したところ、３５％の１６−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデシル−１６−（（プロプ−１−エニルオキシ）メチル）−２，５，８，１１，１４，１８，２１，２４，２７，−３０−デカオキサヘントリアコンタン（ＨＰＬＣ−ＥＬＳＤ−Ｃ１８、９５：５〜５：９５  Ｈ２Ｏ／ＡＣＮ、２５分）を含有する８３０ｍｇ（９６％）の表題生成物が得られた。
【００８５】
実施例４：１６，１６−ジ−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデシル−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサヘプタデカン−１７−オール（４）。ＤＭＳＯ（３ｍｌ）中、２（５００ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）にカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（７４ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１５分間、１００℃で振った。ＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−ＥＬＳＤ−Ｃ１８、９５：５〜５：９５  Ｈ２Ｏ／ＡＣＮ、２５分）によって、生成物への完全な変換が示された。室温で塩水（２０ｍｌ）を添加し、そして水相を酢酸エチル（３×２０ｍｌ）で抽出した。組み合わせた有機相を塩水（３×２０ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。濾過および揮発性物質の減圧除去によって、透明油状物として１６−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデシル−１６−（（プロップ−１−エニルオキシ）メチル）−２，５，８，１１，１４，１８，２１，２４，２７，３０−デカオキサヘントリアコンタンが得られた。次いで、アセトン（４ｍｌ）中に溶解されたこの油状物にＨＣｌ（０．１Ｍ）を添加し、そして混合物を３０分間５５℃で振った。次いで、揮発性物質を減圧除去し、透明油状物として４２０ｍｇ（８９％）の４が得られた。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）；３．６６−３．５２（ｍ，４８Ｈ），３．４７（ｓ，６Ｈ），３．３７（ｓ，９Ｈ）。
【００８６】
実施例５：ｔｅｒｔ−ブチル１６，１６−ジ−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデシル−２，５，８，１１，１４，１８−ヘキサオキサイコサン−２０−オエート（５）。乾燥ＴＨＦ（３ｍｌ）中、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（３２ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を４（１００ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル−２−ブロモアセテート（１０５ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）に添加した。反応混合物を３０分間振った。ジエチルエーテル（１０ｍｌ）および塩水（５ｍｌ）を添加し、そして水相を酢酸エチル（３×２０ｍｌ）で抽出した。組み合わせた有機相を塩水で洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥させた。揮発性物質を減圧除去し、そして粗製生成物をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール  ９：１）によって精製したところ、６０ｍｇ（５２％）の５が得られた。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）；３．９１（ｓ，２Ｈ），３．６６−３．５２（ｍ，４８Ｈ），３．５１（ｓ，２Ｈ），３．４５（ｓ，６Ｈ），３．３７（ｓ，９Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ）。
【００８７】
実施例６ａ：１６，１６−ジ−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデシル−２，５，８，１１，１４，１８−ヘキサオキサイコサン−２０酸（６）。トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、０．５ｍｌ）およびジクロロメタン（ＤＣＭ、０．５ｍｌ）を２０ｍｇの５に添加した。この混合物を１時間、室温で振り、次いで揮発性物質を減圧除去し、黄色油状物として１８ｍｇの６を得た。
【００８８】
実施例６ｂ：１６，１６−ジ−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデシル−２，５，８，１１，１４，１８−ヘキサオキサイコサン−２０酸（６）の別の合成。Ｈ２Ｏ（９．５ｍｌ）中に溶解した過酸化水素（１４５ｍｇ、４．２６ｍｍｏｌ）を、モノリン酸ナトリウム（５８８ｍｇ、３．８７ｍｍｏｌ）に添加した。次いで、この混合物を、アセトニトリル（７ｍｌ）中に溶解したＰＥＧアルデヒド８（実施例８、２．２０ｇ、２．９４ｍｍｏｌ）に移した。反応混合物を０℃まで冷却し、そしてＨ２Ｏ（９ｍｌ）中の亜塩素酸ナトリウム（８９８ｍｇ、７．９４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を４．５時間、室温で撹拌した。水性の氷冷却されたメタ重亜硫酸ナトリウム（１Ｍ、１２ｍｌ）を添加し、そして混合物をさらに２５分間撹拌した。次いで、反応混合物を塩化ナトリウムで飽和し、そして水酸化ナトリウム（１Ｍ）の添加によってｐＨを７まで上げた。混合物をＥｔＯＡｃによって２回抽出し、それから、ＨＣｌ（６Ｍ）によって水相のｐＨを２に調節した。混合物をＤＣＭ（４×２５ｍｌ）で抽出し、そして組み合わせた有機相を塩水で洗浄して、硫酸ナトリウムで乾燥させた。濾過と、それに続く溶媒の減圧除去によって、油状物として１．３０ｇの生成物が得られた。ＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−ＥＬＳＤ−Ｃ１８、９０：１０〜１０：９０  Ｈ２Ｏ／ＡＣＮ、２０分）では、１０．２分に単一ピークが示された。
【００８９】
実施例７：１６−（２−ペルオキシプロポキシメチル）−１６−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデシル−２，５，８，１１，１４，１８，２１，２４，２７，３０−デカオキサヘントリアコンタン（７）。３−クロロペルオキシベンソイック酸（３−ｃｈｌｏｒｏｐｅｒｏｘｙ  ｂｅｎｓｏｉｃ  ａｃｉｄ）（２４７ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）に、室温で、ＤＣＭ（１０ｍｌ）中に溶解した６−（アリルオキシメチル）−１６−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデシル−２，５，８，１１，１４，１８，２１，２４，２７，３０−デカオキサヘントリアコンタン（実施例２）（３７４ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で７２時間撹拌し、次いで、塩化ナトリウムで飽和した重亜硫酸ナトリウム水、飽和重炭酸ナトリウム水、そして最後に塩水で洗浄し、次いで濾過した。溶媒を減圧除去し、そしてトルエンを残渣に添加した。混合物を濾過し、そして濾液から溶媒を減圧除去し、３２０ｍｇの生成物を得た。ＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−ＥＬＳＤ−Ｃ１８、９０：１０〜１０：９０  Ｈ２Ｏ／ＡＣＮ、２０分）では、１５分に単一ピークが示された。
【００９０】
実施例８：１６，１６−ジ−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデシル−２，５，８，１１，１４，１８−ヘキサオキサイコサン−２０−アール（８）：２，６  ルチジン（１．１５ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）、四酸化オスミウム（１．３６ｍｌの２％水溶液、０．１１ｍｍｏｌ）およびペルヨウ素化ナトリウム（４．５８ｇ、２１．４ｍｍｏｌ）を、室温で、ジオキサン／Ｈ２Ｏ（３：１、６５ｍｌ）中に溶解した１６−（アリルオキシメチル）−１６−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデシル−２，５，８，１１，１４，１８，２１，２４，２７，３０−デカオキサヘントリアコンタン（２）（４．０ｇ、５．３５ｍｍｏｌ）に連続的に添加した。反応混合物を４．５時間撹拌し、そして揮発性物質を減圧除去した。残渣に塩水（２０ｍｌ）を添加し、そして水相をＤＣＭ（５×２５ｍｌ）で抽出した。組み合わせた有機相を塩水（２０ｍｌ）で２回洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥させた。粗製生成物の濾過および溶媒の減圧除去と、それに続くカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／メタノール  ９５：５）によって、２．６５ｇの最終生成物が得られた。ＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−ＥＬＳＤ−Ｃ１８、９０：１０〜１０：９０  Ｈ２Ｏ／ＡＣＮ、２０分）では、１３．５分に単一ピークが示された。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）；９．７０（ｓ，１Ｈ），４．０１（ｓ，２Ｈ），３．７−３．４（ｍ，５６Ｈ），３．３７（９Ｈ）。
【００９１】
実施例９：１６−（２，３−ジヒドロキシプロポキシメチル）−１６−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデシル−２，５，８，１１，１４，１８，２１，２４，２７，３０−デカオキサヘントリアコンタン（９）：四酸化オスミウム（１２７ｌの２％水溶液、０．０１ｍｍｏｌ）と、それに続いて４−メチルモルホリンＮ−オキシド（１７６ｍｇ、１，５ｍｍｏｌ）を、４：１のｔ−ＢｕＯＨ／Ｈ２Ｏ（５ｍｌ）中で、６−（アリルオキシメチル）−１６−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデシル−２，５，８，１１，１４，１８，２１，２４，２７，３０−デカオキサヘントリアコンタン（２）（７４７ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）に添加した。反応物を室温で２０時間撹拌した。重硫酸ナトリウム（１００ｍｇ）を添加し、そして反応混合物をさらに１０分間撹拌した。揮発性物質を減圧除去し、そして残渣をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ１００％〜ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ９：１）によって精製し、透明油状物として６００ｍｇの生成物が得られた。ＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−ＥＬＳＤ−Ｃ１８、９０：１０〜１０：９０  Ｈ２Ｏ／ＡＣＮ、２０分）では、１２分に単一ピークが示された。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）；３．６６−３．５２（ｍ，４８Ｈ），３．４７（ｓ，６Ｈ），３．３７（ｓ，９Ｈ）。
【００９２】
実施例１０：１６−（２，３−ジオレイルオキシプロポキシメチル）−１６−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデシル−２，５，８，１１，１４，１８，２１，２４，２７，３０−デカオキサヘントリアコンタン（１０）：乾燥ピリジン（０．５ｍｌ、４Å  ＭＳで乾燥）中に溶解したオレイン酸無水物（４９２ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）を、室温で、乾燥ピリジン（１ｍｌ）中に溶解したＰＥＧジオール９（２３４ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）に添加した。次いで、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（０．５ｍｇ）を反応混合物に添加し、そして撹拌を室温で４時間続けた。次いで、さらなるオレイン酸無水物（２４６ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合物をさらに２０時間撹拌した。揮発性物質を減圧除去し、そして残渣をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ１００％〜ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ９５：５）によって精製し、透明油状物として３６０ｍｇの生成物が得られた。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）；５．３６（ｍ，４Ｈ），５．２０（ｍ，１Ｈ），４．３３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２．０および３．２Ｈｚ），４．１４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２および６．４Ｈｚ），３．７０−３．５０（ｍ，５０Ｈ），３．４４（ｓ，２Ｈ），３．４２（６Ｈ），３．４０（９Ｈ），２．３１（ｍ，４Ｈ），２．０３（ｍ，８Ｈ），１．６２（ｍ，４Ｈ），１．３０（ｍ，４４Ｈ），０．９０（ｔ，６Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）。
【００９３】
実施例１１：１０のリポソーム：ＰＥＧ−グリセリルジオレエート１０（２０ｍｇ）をＨ２Ｏ（１ｍｌ）中に溶解した。混合物を３７℃で３０分間、そして室温で３０分間振った。透明溶液を濾過し（０．２ｕｍシリンジフィルター）、そして生じたナノ構造の径をＤＬＳ（Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ）によって決定し、３０ｎｍの代表的な流体力学直径（体積平均）を得た。
【００９４】
実施例１１からの物質のＤＬＳ分析の結果を図１に示す。
【００９５】
実施例１２：ジヒドロアルテミシニン−ＰＥＧ結合体１２：ボルトリフルオリド  エーテレート（Ｂｏｒｔｒｉｆｌｕｏｒｉｄｅ  ｅｔｈｅｒａｔｅ）（１０４μｌ、１．０ｍｍｏｌ）を、室温で、乾燥ジエチルエーテル（２０ｍｌ）中、１６−（ヒドロキシメチル）−１６−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデシル−２，５，８，１１，１４，１８，２１，２４，２７，３０−デカオキサヘントリアコンタン（ｍ＝４、Ａ、Ｂ、Ｃ＝ＭｅのＩａ）（７０７ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）およびジヒドロアルテミシニン（４２６ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）に添加した。４時間後、さらなるボルトリフルオリドエーテレート（３１μｌ、０．２５ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合物をさらに２０時間撹拌した。希釈重炭酸ナトリウム水（２％）を添加し、そして反応混合物をさらに３０分間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（３×３０ｍｌ）、続いてＤＣＭ（２×２５ｍｌ）によって抽出した。組み合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過および溶媒の減圧除去、それに続く粗製生成物のカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  １：１、次いで、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ  ９：１）によって、７８０ｍｇの生成物が得られた。ＨＰＬＣ分析（ＨＰＬＣ−ＥＬＳＤ−Ｃ１８、９０：１０〜５：９５  Ｈ２Ｏ／ＡＣＮ、２０分）では、２３．５分に生成物のピークが示された。ＭＳ（ＥＳＰ＋）［Ｍ＋Ｎａ＋］：９９５．６。
【図１】
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【国際調査報告】
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