(57)【要約】  本発明は、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体と、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体とを含む組み合わせ医薬組成物、並びに自律神経血管ジストニア（ＶＶＤ）及びその症状を治療するためのその使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体と、ｂ）内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを含むことを特徴とする組み合わせ医薬組成物。
【請求項２】
脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体が、ウシ脳特異的タンパク質Ｓ−１００全体に対するものである請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項３】
脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体が、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、又は配列番号１２を有する脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対するものである請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項４】
内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、ウシＮＯ合成酵素全体に対するものである請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項５】
内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、ヒトＮＯ合成酵素全体に対するものである請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項６】
脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体が、固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０及びＣ５０ホメオパシー希釈物の混合物の形態であり、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、前記固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０及びＣ５０ホメオパシー希釈物の混合物の形態である請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項７】
脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体が、固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０及びＣ２００ホメオパシー希釈物の混合物の形態であり、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、前記固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０及びＣ２００ホメオパシー希釈物の混合物の形態である請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項８】
内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０及びＣ５０ホメオパシー希釈物の混合物の形態であり、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体が、前記固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０及びＣ５０ホメオパシー希釈物の混合物の形態である請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項９】
内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０及びＣ２００ホメオパシー希釈物の混合物の形態であり、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体が、前記固体担体に浸透させたＣ１２、Ｃ３０及びＣ２００ホメオパシー希釈物の混合物の形態である請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項１０】
脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体が、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体又は天然の抗体である請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項１１】
脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体が、ポリクローナル抗体である請求項１０に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項１２】
脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体が、希釈するごとに振とうしながら連続的に１００倍希釈することにより調製される請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項１３】
内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体又は天然の抗体である請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項１４】
内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、ポリクローナル抗体である請求項１３に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項１５】
内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体が、希釈するごとに振とうしながら連続的に１００倍希釈することにより調製される請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物。
【請求項１６】
請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物を投与することを特徴とする、種々の起源の回転性めまい、動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）及び自律神経血管ジストニアを治療する方法。
【請求項１７】
請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物を投与することを特徴とする、ＣＣＥＡＣ試験により測定される動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）を軽減する方法。
【請求項１８】
請求項１に記載の組み合わせ医薬組成物を投与することを特徴とする、ＣＣＥＡＣ試験により測定される、自律神経系の不均衡に対する効果を安定化する方法。
【請求項１９】
組み合わせ医薬組成物が１つから２つの単位剤形で投与され、前記剤形のそれぞれが１日１回から１日４回投与される請求項１６から１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２０】
組み合わせ医薬組成物が１つから２つの単位剤形で投与され、前記剤形のそれぞれが１日２回投与される請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
種々の起源の回転性めまい、動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）及び自律神経血管ジストニアに罹患している患者の治療において使用するための医薬組成物であって、それぞれ、ホメオパシーの技術に従って、連続して繰り返し希釈し、得られた溶液をそれぞれ多数回振とうすることによって調製した、ａ）脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体及びｂ）内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体を提供し、次いで、前記増強溶液を混合することによって組み合わせるか、或いは、担体塊に組み合わせ前記溶液を浸透させる又は前記溶液を別々に浸透させることによって得られたことを特徴とする医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体と、タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体とを含む組み合わせ医薬組成物、並びに種々の起源の回転性めまい、動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）及び自律神経（ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ）血管ジストニアを治療するためのその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
自律神経血管ジストニア（ＶＶＤ）（同義語：神経循環性失調症、神経循環無力症、精神自律神経症候群（ｐｓｙｃｈｏｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、自律神経症（ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ  ｎｅｕｒｏｓｉｓ）、自律神経機能不全症候群（ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）（ＶＤＳ）の症候群；及び自律（ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ、ａｕｔｏｎｏｍｏｕｓ）神経系の機能不全を特徴とする多病因性症候群（ｐｏｌｙｅｔｉｏｌｏｇｉｃ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）は、生物体内の系（主に心臓血管系）の大部分に影響を及ぼす機能性（非器質性）障害である。ＶＶＤの対象の主要な臨床的特性は、視床下部構造のプロセスに関与する病原の特性によって引き起こされる多数の訴え及び種々の症状及び症候群が存在することである。ＶＶＤの最も頻度の高い症状は、心臓痛、無力症、神経症性障害、頭痛、睡眠障害、回転性めまい、呼吸器疾患、頻脈、四肢冷感（ｅｘｔｒｅｍｉｔｙ  ｃｏｌｄｎｅｓｓ）、自律神経血管性発作、腕の震え、体内振戦（ｉｎｔｅｒｎａｌ  ｔｒｅｍｏｒ）、心臓恐怖症、筋痛、関節痛、組織腫脹、心臓間欠性（ｈｅａｒｔ  ｉｎｔｅｒｍｉｔｔｅｎｃｅ）、顔の熱感、低度の発熱、及び失神である。
【０００３】
生物の自律神経血管系、呼吸器系及び他の系の調節の障害において顕在化する自律神経の症状はまた、いくつもの病態、例えば、高血圧性疾患、内分泌障害、慢性虚血性心疾患などの構成要素にもなり得る。したがって、自律神経血管ジストニア及び神経循環性失調症は、対象において、自律神経系の身体表現性機能不全（ｓｏｍａｔｏｆｏｒｍ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ）に典型的な症状の複合に基づいて突きとめることができる。
【０００４】
自律神経血管ジストニアの症状の複合の一部として、頭痛、回転性めまい、頭部及び耳における耳鳴り、前庭器の虚弱、失神及び動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）の傾向を特徴とする別々に特定された脳血管障害を区別することができる。それが心臓において発生したものが大脳の血管ジストニアであり、その病原性の基礎は、脳の血管緊張、高張性、低張性又は混合特性の調節不全である。
【０００５】
動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）（同義語：動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）、船酔い、空酔い、乗り物酔いなど）は、大体長く続き、加速度が変動する体の動きで現れる動作の疾患である（Ｇｒｅｅｋ：ｋｙｎｅｓｉｓ−ｍｏｔｉｏｎ）。動作の協調の障害、回転性めまい、悪心、嘔吐、蒼白、冷汗、血圧の低下、低周波の心拍数が動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）に典型的である。重篤な場合には、うつ病、無力症、意識清明の障害の可能性がある。しかし、加速を停止した後、動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）の症状は消失する。動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）の時には、前庭器の異なる受容体が次々に炎症を起こすという事実に起因して、小脳がインパルスを受け、それにより頸部、背中、及び四肢の筋肉の種々の群の緊張度の変化が引き起こされ、したがって筋肉の緊張度及び筋肉の動きの協調が非対称になる。動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）の顕在化は、神経系の交感神経系部分又は副交感神経部分又は前庭分析器（ｖｅｓｔｉｂｕｌａｒ  ａｎａｌｙｚｅｒ）の興奮性亢進がある人においてより多く表れる。
【０００６】
回転性めまい（めまい発作）の攻撃は、大部分は、交感神経系と副交感神経系との間の機能的な相互作用が、副交感神経系の機能が優位の方向に変化することによって引き起こされる。これらの変化は、内耳における血管運動障害を伴い、血管壁の浸透性が増し、その後前庭器内の内リンパの量が増加する。回転性めまいは、前庭神経及び前庭蝸牛系の機能不全、椎骨−脳底系における血液循環の障害、中枢神経系（ＣＮＳ）の病態などを含めた、種々の起源の前庭器の損失の典型的な徴候である。動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）の症状発現としての回転性めまいは、３種類の反応：前庭運動（眼振及び偏視の反応）、前庭感覚（回転性めまい以外は、眼振（又は回転後の反応）、保護的な動きであり得る）及び自律神経（悪心、嘔吐、多汗、頻脈、熱感、脈拍及び血圧の振動）を含めた他の前庭−自律神経障害を伴う。
【０００７】
ホメオパシー薬「ＡＶＩＡＭＯＲＥ」（特許文献１）が当技術分野で公知であり、それは植物原料に基づき、移動酔い（ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）、船酔い及び空酔いの形態の動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）（動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ））の治療及び予防法のために設計される。この薬剤の効率は、ほとんどの場合、あまり高くない。
【０００８】
脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する抗血清に基づく向神経薬も公知である（特許文献２）。
【０００９】
種々の起源の回転性めまい、動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）及び自律神経血管ジストニアを治療するための所望の治療効果を有する新しい製剤が継続して必要とされている。
【００１０】
ホメオパシーの技術により増強された、極度に希釈された型（又は超低型）の抗体（活性化増強型）の治療効果が本特許出願の発明者であるＤｒ．Ｏｌｅｇ  Ｉ．Ｅｐｓｈｔｅｉｎにより発見されている。米国特許第７，５８２，２９４号には、ホメオパシーによる活性型の前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）に対する抗体を投与することによって良性前立腺肥大又は前立腺炎を治療するための医薬品が開示されている。米国特許第７，７００，０９６号には、内皮ＮＯ合成酵素に対するホメオパシーにより増強された型の抗体が開示されている。
【００１１】
Ｓ−１００タンパク質は、主に脳の灰白質において、主にグリア細胞及びシュワン細胞において見いだされる細胞質内の酸性カルシウム結合性タンパク質である。このタンパク質は、２つの免疫学的に別個のサブユニット、アルファ及びベータからなる、いくつかのホモ二量体又はヘテロ二量体のアイソフォームで存在する。Ｓ−１００タンパク質は、脳卒中の場合と同様に、脳病変及び脳傷害に起因する神経損傷の診断及び評価を補助するものとして使用することが提案されている。非特許文献１、参照により本明細書に組み込まれる。
【００１２】
超低用量の、Ｓ−１００タンパク質に対する抗体は、抗不安活性、抗無力症活性、抗攻撃性活性、ストレス−保護活性、抗低酸素活性、抗虚血活性、神経保護活性及び向知性活性を有することが示されている。全て参照により本明細書に組み込まれる、非特許文献２、非特許文献３、及び非特許文献４を参照されたい。
【００１３】
一酸化窒素（ＮＯ）は、種々の生物学的プロセスのシグナル伝達において作用することが示されている気体分子である。内皮由来のＮＯは、血管緊張の調節において重要な分子であり、それと血管疾患との関連性は長く認識されてきた。ＮＯは、単球接着、血小板凝集及び血管平滑筋細胞の増殖を含めた、動脈硬化巣の形成に関与することが知られている多くのプロセスを阻害する。内皮ＮＯの別の重要な役割は、血管壁を、それ自体の代謝生成物、及び脂質及びリポタンパク質の酸化生成物によって誘導される酸化ストレスから防御することである。アテローム性動脈硬化症の非常に早い段階で内皮の機能不全が生じる。したがって、局所的なＮＯの利用ができないことが、ヒトにおけるアテローム発生を加速する最終的な一般的な経路になり得る可能性がある。血管内皮におけるその役割に加えて、ＮＯの利用可能性によってリポタンパク質の代謝が調節されることが示されている。ＮＯ代謝生成物の血漿中濃度と、血漿中の総コレステロールレベル及び低密度リポタンパク質［ＬＤＬ］コレステロールレベルとの間には負の相関が報告されているが、高密度リポタンパク質［ＨＤＬ］は高コレステロール血症の対象における血管の機能を改善する。ＮＯの損失は、疾患の発生にかなりの影響を及ぼす。糖尿病は、主にアテローム動脈硬化性疾患の発生が加速することによって引き起こされる罹患率及び死亡率の上昇を伴う。更に、報告により、糖尿病患者の肺機能が損なわれることが示されている。インスリン抵抗性により気道炎症が導かれることが提唱されている。非特許文献５。
【００１４】
一酸化窒素は、内皮でＬ−アルギニンから一酸化窒素合成酵素（ＮＯ合成酵素）によって合成される。ＮＯ合成酵素は、構成型（ｃＮＯＳ）及び誘導型（ｉＮＯＳ）を含めた種々のアイソフォームで生じる。構成型は、正常な内皮細胞、ニューロン及びいくつかの他の組織に存在する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】露国特許第２１１３２３０号明細書（Ａ６１Ｋ３５／７８、１９９８年）
【特許文献２】露国特許第２１５６６２１号明細書（Ａ６１Ｋ３９／３９５、２７．０９．２０００）
【特許文献３】米国特許第７，５８２，２９４号明細書
【特許文献４】米国特許第７，７００，０９６号明細書
【非特許文献】
【００１６】
【非特許文献１】Ｙａｒｄａｎら、Ｕｓｅｆｕｌｎｅｓｓ  ｏｆ  Ｓ１００Ｂ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ、Ｊ  Ｐａｋ  Ｍｅｄ  Ａｓｓｏｃ  ６１巻、３号、２０１１年３月
【非特許文献２】Ｃａｓｔａｇｎｅ  Ｖ．ら、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔｏ  Ｓ１００  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｈａｖｅ  ａｎｘｉｏｌｙｔｉｃ−ｌｉｋｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｔ  ｕｌｔｒａ−ｌｏｗ  ｄｏｓｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ａｄｕｌｔ  ｒａｔ、Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  ２００８年、６０巻（３号）：３０９〜１６頁
【非特許文献３】Ｅｐｓｔｅｉｎ  Ｏ．  Ｉ．、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔｏ  ｃａｌｃｉｕｍ−ｂｉｎｄｉｎｇ  Ｓ１００Ｂ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｂｌｏｃｋ  ｔｈｅ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ  ｏｆ  ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｔｅｒｒｅｓｔｒｉａｌ  ｓｎａｉｌ、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｅｈａｖ．、２００９年、９４巻（１号）：３７〜４２頁
【非特許文献４】Ｖｏｒｏｎｉｎａ  Ｔ．Ａ．ら、第８章、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｔｏ  Ｓ−１００  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｉｎ  ａｎｘｉｅｔｙ−ｄｅｐｒｅｓｓｉｖｅ  ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ  ｉｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．「Ａｎｉｍａｌ  ｍｏｄｅｌｓ  ｉｎ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ」、Ｋａｌｕｅｆｆ  Ａ．Ｖ．  Ｎ−Ｙ編、「Ｎｏｖａ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，  Ｉｎｃ．」、２００６年、１３７〜１５２頁
【非特許文献５】Ｈａｂｉｂら、Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｆｒｏｍ  Ｂｌｏｏｄ  Ｔｏ  Ｌｕｎｇｓ、Ｉｓ  Ｔｈｅｒｅ  Ａ  Ｌｉｎｋ？  Ｐａｋ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ２００７年；３巻（１号）
【発明の概要】
【００１７】
一態様では、本発明は、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体と、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを含む組み合わせ医薬組成物を提供する。
【００１８】
１つの変形では、本発明は、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体と、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを含む組み合わせ医薬組成物であって、抗体が、タンパク質Ｓ−１００全体又はその断片に対するものである組成物を提供する。
【００１９】
１つの変形では、本発明は、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体と、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを含む組み合わせ医薬組成物であって、抗体が、ＮＯ合成酵素全体又はその断片に対するものである組成物を提供する。
【００２０】
１つの変形では、本発明のこの態様の組み合わせ医薬組成物は、固体担体に浸透させた（Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ５０）又は（Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００）ホメオパシー希釈物の混合物の形態のタンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体を含む。その後に、（Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ５０）又は（Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００）ホメオパシー希釈物の混合物の形態のＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体を固体担体に浸透させることができる。
【００２１】
１つの変形では、本発明のこの態様の組み合わせ医薬組成物は、固体担体に浸透させた（Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ５０）又は（Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００）ホメオパシー希釈物の混合物の形態のＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体を含む。その後に、（Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ５０）又は（Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００）ホメオパシー希釈物の混合物の形態のタンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体を固体担体に浸透させることができる。
【００２２】
タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体又は天然の抗体であることが好ましく、ポリクローナル抗体であることがより好ましい。本発明のこの態様の１つの変形では、タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体は、希釈するごとに振とうしながら連続的に１００倍希釈することによって調製される。具体的には、垂直方向の振とうが意図されている。
【００２３】
ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体又は天然の抗体であることが好ましく、ポリクローナル抗体であることがより好ましい。本発明のこの態様の１つの変形では、ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体は、希釈するごとに振とうしながら連続的に１００倍希釈することによって調製される。具体的には、垂直方向の振とうが意図されている。
【００２４】
別の態様では、本発明は、種々の起源の回転性めまい、動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）及び自律神経血管ジストニアを治療する方法であって、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体と、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを含む組み合わせ医薬組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む方法を提供する。
【００２５】
１つの変形では、治療方法は、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体と、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを含む組み合わせ医薬組成物を、それを必要とする対象に投与することを含み、前記組み合わせの前記投与により、ＣＣＥＡＣ試験の耐容性によって測定される動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）が有意に改善される。
【００２６】
１つの変形では、治療方法は、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体と、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを含む組み合わせ医薬組成物を、それを必要とする対象に投与することを含み、前記組み合わせの前記投与により、ＣＣＥＡＣ試験によって測定される、自律神経系の平衡に対する効果の安定化が有意に改善される。
【００２７】
本発明の１つの変形では、タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体の１つから２つの単位剤形及びＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体の１つから２つの単位剤形の投与が提供され、剤形のそれぞれは１日１回から１日４回投与される。活性化増強型抗体のそれぞれの１つから２つの単位剤形が１日２回投与されることが好ましい。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
本発明は、添付の特許請求の範囲と関連して定義される。特許請求の範囲に関して、以下の用語解説によって関連する定義がもたらされる。
【００２９】
「抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、別の分子の特定の空間的な極性の構成に特異的に結合し、それにより、それと相補的であると定義される免疫グロブリンを意味するものとする。特許請求の範囲において列挙されている抗体は、天然、ポリクローナル又はモノクローナルであってよい完全な免疫グロブリン又はその断片を含んでよく、それらとしては、例えば、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ３、ＩｇＭなどの種々のクラス及びアイソタイプを挙げることができる。その断片としては、Ｆａｂ、Ｆｖ及びＦ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’などを挙げることができる。単数形の「抗体（ａｎｔｉｂｏｄｙ）」は、複数形の「抗体（ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）」を含む。
【００３０】
「活性化増強型」又は「増強型」という用語はそれぞれ、本明細書において列挙されている抗体に関しては、任意の抗体の最初の溶液のホメオパシーポテンタイゼーション（ｐｏｔｅｎｔｉｚａｔｉｏｎ）の生成物を示すために使用される。「ホメオパシーポテンタイゼーション」とは、ホメオパシーの方法を用いて最初の関連物質の溶液にホメオパシーポーテンシーを付与することを示す。そのように限定するものではないが、「ホメオパシーポテンタイゼーション」は、例えば、連続した希釈を、外部からの処理、特に垂直方向の（機械的な）振とうと組み合わせて繰り返すことを伴ってよい。言い換えれば、ホメオパシーの技術に従って、抗体の最初の溶液を連続して繰り返し希釈し、得られた溶液をそれぞれ多数回、垂直方向に振とうする。溶媒、好ましくは水又は水とエチルアルコールの混合物中の抗体の最初の溶液の好ましい濃度は、約０．５ｍｇ／ｍＬから約５．０ｍｇ／ｍＬまでにわたる。各成分、すなわち、抗体溶液を調製するための好ましい手順は、それぞれ１００倍単位ホメオパシー希釈物（Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００）に相当する、抗体の一次マトリックス溶液（母液）を１００１２倍希釈、１００３０倍希釈及び１００２００倍希釈した３種の水希釈物若しくは水−アルコール希釈物の混合物を使用すること、又は、それぞれ１００倍単位ホメオパシー希釈物（Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ５０）に相当する抗体の一次マトリックス溶液を１００１２倍希釈、１００３０倍希釈及び１００５０倍希釈した３種の水希釈物若しくは水−アルコール希釈物の混合物を使用することである。ホメオパシーポテンタイゼーションの例は、その全体が参照により明示された目的で本明細書に組み込まれる、米国特許第７，５７２，４４１号及び同第７，５８２，２９４号に記載されている。特許請求の範囲では「活性化増強型」という用語が使用され、実施例では「超低用量」という用語が使用される。「超低用量」という用語は、ホメオパシーにより希釈され、増強された型の物質の研究及び使用によって創出された技術分野における専門用語になった。「超低用量（ｕｌｔｒａ−ｌｏｗ  ｄｏｓｅ）」又は「超低用量（ｕｌｔｒａ−ｌｏｗ  ｄｏｓｅｓ）」という用語は、特許請求の範囲において使用される「活性化増強」型という用語を完全に支持し、それと主に同義であるものとする。
【００３１】
言い換えれば、抗体は、３つの因子が存在すれば、「活性化増強」型又は「増強」型である。第１に、「活性化増強」型抗体は、ホメオパシーの技術分野では広く受け入れられている調製プロセスの生成物である。第２に、「活性化増強」型抗体は、現代薬理学において広く受け入れられている方法によって決定される生物活性を有さなければならない。第３に、「活性化増強」型抗体により示される生物活性は、ホメオパシーのプロセスの最終生成物に分子型抗体が存在することによっては説明することができない。
【００３２】
例えば、活性化増強型抗体は、最初の、単離された分子型抗体を、機械的な振とうなどの外部からの衝撃と併せて連続して多数回希釈することによって調製することができる。濃度低下の過程における外部からの処理は、例えば、超音波、電磁気、又は他の物理的因子に曝露させることによって実現することもできる。その全体が参照により明示された目的で本明細書に組み込まれるＶ．  Ｓｃｈｗａｂｅ  「Ｈｏｍｅｏｐａｔｈｉｃ  ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ」、Ｍ．、１９６７年、米国特許第７，２２９，６４８号及び同第４，３１１，８９７号には、ホメオパシーの技術分野において広く受け入れられているホメオパシー増強の方法であるそのようなプロセスが記載されている。この手順により、最初の分子型抗体の分子濃度が均一に低下する。所望のホメオパシーポーテンシーが得られるまでこの手順を繰り返す。個々の抗体について、所要のホメオパシーポーテンシーは、中間希釈物を所望の薬理学的モデルにおいて生物学的試験に供することによって決定することができる。そのように限定するものではないが、「ホメオパシーポテンタイゼーション」は、例えば、外部からの処理、特に（機械的な）振とうと組み合わせて連続した希釈を繰り返すことを伴ってよい。言い換えれば、ホメオパシーの技術に従って、抗体の最初の溶液を連続して繰り返し希釈し、得られた溶液をそれぞれ多数回、垂直方向に振とうする。溶媒、好ましくは水又は水とエチルアルコールの混合物中の抗体の最初の溶液の好ましい濃度は、約０．５ｍｇ／ｍＬから約５．０ｍｇ／ｍＬにわたる。各成分、すなわち、抗体溶液を調製するための好ましい手順は、それぞれ１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００に相当する、抗体の一次マトリックス溶液（母液）を１００１２倍希釈、１００３０倍希釈及び１００２００倍希釈した３種の水希釈物若しくは水−アルコール希釈物の混合物を使用すること、又は、それぞれ１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ５０に相当する、抗体の一次マトリックス溶液（母液）を１００１２倍希釈、１００３０倍希釈及び１００５０倍希釈した３種の水希釈物若しくは水−アルコール希釈物の混合物を使用することである。所望のポーテンシーをどのように得るかの例も、例えば、明示された目的で参照により組み込まれる、米国特許第７，２２９，６４８号及び同第４，３１１，８９７号において提供される。本明細書に記載の「活性化増強」型抗体に適用可能な手順は、下に詳しく記載されている。
【００３３】
ヒト対象のホメオパシー治療に関してはかなりの量の議論がなされてきた。本発明は、「活性化増強」型抗体を得るために、受け入れられているホメオパシーのプロセスに依拠するが、本発明は、活性を証明するためにはヒト対象におけるホメオパシー単独に依拠するのではない。驚くべきことに、本願の発明者は、認められている薬理学的モデルにおいて、出発分子型抗体を連続して多数回希釈することから最終的に得られた溶媒が、標的希釈物中に分子型抗体の痕跡が存在することとは無関係の決定的な活性を有することを発見し、十分に実証した。本明細書で提供される「活性化増強」型抗体を、生物活性について、広く受け入れられている活性の薬理学的モデルにおいて、適切なｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験において、又は適切な動物モデルにおいてｉｎ  ｖｉｖｏで試験した。該実験により、更に以下に提供される、そのようなモデルにおける生物活性の証拠がもたらされた。ヒト臨床試験によって、ヒト療法に首尾よく変換される、動物モデルにおいて観察された活性の証拠ももたらされる。ヒト研究によって、医科学において病的状態として広く認められている特定のヒト疾患又は障害を治療するための、本明細書に記載の「活性化増強」型の利用可能性の証拠ももたらされている。
【００３４】
また、特許請求された「活性化増強」型抗体は、その生物活性が、最初の出発溶液から残っている分子型抗体が存在することによっては説明することができない溶液又は固体調製物のみを包含する。言い換えれば、「活性化増強」型抗体は、最初の分子型抗体の痕跡を含有してよいことが意図されているが、連続して希釈した後に残った分子型抗体は非常に低濃度であるので、当業者は、認められている薬理学的モデルにおいて観察される生物活性が、いかなる程度の妥当性でも残りの分子型抗体に起因すると考えることができない。本発明は特定の理論に限定されるものではないが、本発明の「活性化増強」型抗体の生物活性は、最初の分子型抗体には起因しない。その中に含まれる最初の分子型抗体の濃度が、認められている分析的な技法、例えば、キャピラリー電気泳動及び高速液体クロマトグラフィーなどの検出限界を下回る、液体又は固体の形態の「活性化増強」型抗体が好ましい。その中に含まれる最初の分子型抗体の濃度がアボガトロ数未満である液体又は固体の形態の「活性化増強」型抗体が特に好ましい。分子型の治療用物質の薬理学において、薬理学的反応のレベルが、対象に投与される、又はｉｎ  ｖｉｔｒｏで試験される活性薬物の濃度に対してプロットされた用量反応曲線を作成することは一般的である。任意の検出可能な反応を生じる薬物の最小レベルは、閾値用量として公知である。「活性化増強」型抗体は、もしあれば、分子抗体を、所与の生物学的モデルにおける分子型抗体の閾値用量を下回る濃度で含有することが具体的に意図されており、それが好ましい。
【００３５】
本出願で用いた試験を以下に説明する。
【００３６】
（１）コリオリによる加速度の連続的累積的効果（ＣＣＥＡＣ）を用いた試験とは、コリオリの加速度の効果に対する対象の安定性を検出することができ、したがって、対象の動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）に対する感受性の程度を示すことができる試験を指す（Ｍａｒｋａｒｙａｎら、Ｖｅｓｔｉｂｕｌａｒ  ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｂｙ  ｔｈｅ  ｍｅｔｈｏｄ  ｏｆ  ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ  ｃｕｍｕｌａｔｉｖｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ａｃｃｅｌｅｒａｔｉｏｎｓ  ｂｙ  Ｃｏｒｉｏｌｉｓ、Ｍｉｌｉｔａｒｙ  ｍｅｄｉｃａｌ  ｍａｇａｚｉｎｅ、１９６６年、９号、５９〜６２頁；Ｖｏｙｅｎｉｚｄａｔ、Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｎｄ  Ｆｌｉｇｈｔ  Ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ、１９７２年）。
【００３７】
試験を実行する順序は以下の通りである：対象は、Ｂａｒａｎｙ回転椅子又は電気回転椅子に、回転の軸が体に沿うように座る。眼を閉じる。椅子を１８０ｄｅｇ／秒の速度で一定に回転させ（２秒当たり回転１回）、５回目の回転の最後に、対象に、頭部を右肩側から左肩側に、又は左肩側から右肩側に、及び背中側に、各方向に垂直方向から３０度以上の角度で傾けるように指示する。この屈曲を、全回転期間中に、頸部筋肉を過剰に緊張させず、また、頭部を回転させずに連続的に行う。したがって、肩から肩への頭部の全ての移動を、中間の位置又は一番高い位置で止めることなく２秒間滑らかに行う。傾ける速度は、２秒に対応するメトロノーム又は時間宣告数２１及び２２によって制御する。試験を実行するために必要な時間は１回目の頭部輾転（ｊａｃｔａｔｉｏ  ｃａｐｉｔｉｓ）から開始する。
【００３８】
試験の前に、対象に、試験の間に起こり得るいかなる揺れ、熱感、発熱、唾液分泌、悪心の錯覚の出現も報告するように指示する。試験の前に、対象に、対象が振動動作の速度制御に慣れ、移動時に頭部を正しい位置にできるように、何回か試しに頭部の移動を行うように指示する。
【００３９】
ＣＣＥＡＣ試験を連続的に実行している間の顕著な前庭自律神経障害（蒼白、多汗、悪心、むかつき）の出現が、コリオリ加速度の効果に対する耐容性の限界の基準である。ＣＣＥＡＣ試験を開始してから前庭自律神経反応が出現した時間及び、ＣＣＥＡＣ試験の実行が完了した後にそれが終わった時間を登録する。コリオリ加速度に対する耐容性についての試験を、１日の前半、食事の２時間以後に、１日１回のみ行った。試験日には、対象は他の影響には長く曝露させなかった（高度チャンバー、遠心分離機など）。
【００４０】
（２）前庭自律神経感受性の障害を定量的に評価する方法（Ｈａｌｌｅ尺度）は、ＣＣＥＡＣ試験を実行している間に起こる前庭自律神経症状（浮動性めまい、悪心、発汗、皮膚蒼白、嗜眠状態など）のエビデンスを評価すること（点数で）に基づく。この技術により、コリオリ加速度に対するヒトの耐容性の程度を同定することが可能になる（不十分、可、良及び優）（Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ  ｏｆ  ｖｅｓｔｉｂｕｌａｒ−ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ  ｓｅｎｓｉｂｉｌｉｔｙ，  Ｃｏｓｍｉｃ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  ａｅｒｏａｓｔｒｏｍｅｄｉｃｉｎｅ、１９８１年、３号、７２〜７５頁）。
【００４１】
（３）心拍変動（ＨＲＶ）の試験を用いて、ＢｉｏＣｏｍ  Ｗｅｌｌｎｅｓｓ  ＳｃａｎシステムでＨＲＶのデータを収集する。このシステムは、ＡＷＳ、ＬＬＣ．により開発され、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  ｏｆ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｉｓｔｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｔａｓｋ  Ｆｏｒｃｅ  ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  ＳｏＣｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｐａｃｉｎｇ  ａｎｄ  Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ、１９９６年）に従って製作された（Ｔａｓｋ  Ｆｏｒｃｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｐａｃｉｎｇ  ａｎｄ  Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ．  Ｈｅａｒｔ  Ｒａｔｅ  Ｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙ  ｓｔａｎｄａｒｄｓ  ｏｆ  ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ，  ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｉｎｔｅｒｐｒｅｔａｔｉｏｎ，  ａｎｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｕｓｅ．  Ｃｉｒ．  １９９６年；９３巻：１０４３〜１０６５頁）。
【００４２】
以下の装置を使用する：
１．オペーレティングシステムのウインドウズを備えたパーソナルコンピュータ（ＰＣ）。
２．フォトプレチスモグラフＨＲＭ−０２（ＰＰＧ）。
３．イヤセンサー（ＰＰＧ  ｅａｒ−ｃｌｉｐ）。
４．ソフトウェアであるＢｉｏｃｏｍ  Ｗｅｌｌｎｅｓｓ  Ｓｃａｎ  ＳｏｆｔｗａｒｅのＣＤ。
５．電子形式（ＰＤＦ）の使用説明書。
【００４３】
対象は、自律神経の平衡についての評価の３つの検査：安静時ＨＲＶの５分間の記録；呼吸検査；起立検査を受ける。
【００４４】
ＨＲＶ検査の手順
１．検査を開始する前に、研究者が対象にそれぞれの検査について簡単に説明する。
２．対象は楽でリラックスした姿勢で座る。
３．イヤセンサーをアルコール溶液でふき、耳たぶに付ける。イヤリングがある場合は検査の前に外さなければならない。
４．研究者は、実行のために安静時ＨＲＶを５分間記録する（短期安静時ＨＲＶ検査）。
５．研究者はガイドラインに従って検査を施行する。
６．検査が完了し、データをデータベースに記録した直後に、研究者は、次の検査を呼吸（メトロノーム呼吸検査）か起立検査のいずれかから選択する。
７．研究者はガイドラインに従って呼吸検査又は起立検査を施行する。
８．検査が完了し、データをデータベースに記録したすぐ後に、検査が適正に施行されたかどうかを決定するために、研究者は実施された検査全ての結果を見直す。
９．データを見直した最後に、検査を終了し、イヤセンサーを対象の耳から外す。
【００４５】
安静時ＨＲＶの５分間の記録の手順
短期ＨＲＶ検査を用いて、自律神経系の交感神経枝と副交感神経枝との間の平衡を評価する。これは、誘発性の操作をせず、座位で行うフォトプレチスモグラフィの５分間の記録である。有効なＨＲＶのパラメータを得るために、検査中、試験参加者に少なくとも１分当たり９回の呼吸数でランダムに呼吸するように指示する。次のＨＲＶパラメータを算出する：
【００４６】
１．時間領域のパラメータは以下の通りである：
（ａ）１分間当たりの心拍数（ＢＰＭ）の単位で測定された心拍数の平均値であるＨＲ。
（ｂ）ミリ秒単位で測定されたビット間隔（ｉｎｔｅｒ−ｂｉｔ  ｉｎｔｅｒｖａｌ）の平均値である平均ＮＮ。
（ｃ）ＮＮ間隔の標準偏差であるＳＤＮＮ。平方根の下の数はスペクトル解析のトータルパワーと数学的に等しいので、ＳＤＮＮは変動性に関与する巡回成分の全てを反映する。ＳＤＮＮの実測値は記録の長さに左右される−より長く記録すると、ＳＤＮＮ値は高くなる。したがって、実際には、異なる時間間隔で算出されたＳＤＮＮの値を比較することは不可能である。ＳＤＮＮはミリ秒単位で測定する。
（ｄ）連続的なＮＮ間隔間の差異の平方根であるＲＭＳ−ＳＤ。この指標により、副交感神経による心臓の調節に伴う心拍変動の高周波成分を評価する。ＲＭＳ−ＳＤはミリ秒単位で測定する。
【００４７】
全てのＨＲＶの時間領域のパラメータを、検査中に記録された正常な洞性心拍数に起因する正常なビット間隔（ＮＮ）に対して算出する。
【００４８】
２．周波数領域のパラメータは以下の通りである：
（ａ）トータルパワー（ＴＰ）は、０Ｈｚ〜０．４Ｈｚの範囲のパワースペクトル密度の評価である。この指標は、交感神経の活動がほとんどの付与に寄与する自律神経系（ａｕｔｏｎｏｍｉｃ  ｎｅｒｖｏｕｓ  ｓｙｓｔｅｍ）の全体的な活動を反映する。トータルパワーは平方ミリ秒単位（ｍｓ２）で算出する。
（ｂ）超低周波（ＶＬＦ）は、０．００３３Ｈｚから０．０４Ｈｚの範囲のパワースペクトル密度である。この指数の生理学的性質は、調節の種々のゆっくりとした機構の全体的活動の指標であることである。ＶＬＦは平方ミリ秒単位（ｍｓ２）で算出する。
（ｃ）低周波（ＬＦ）は、０．０４Ｈｚから０．１５Ｈｚの範囲のパワースペクトル密度である。この数値は、交感神経の活動と副交感神経の活動の両方を反映する。これは、ＨＲＶの長期記録における交感神経の活動の良い指標である。副交感神経の影響は、呼吸数が１分当たり９回未満であるときにＬＦに現れる。ＬＦは平方ミリ秒（ｍｓ２）の単位で算出する。
（ｄ）高周波（ＨＦ）は、０．１５Ｈｚから０．４Ｈｚの範囲のパワースペクトル密度である。この指標は副交感神経の活動を反映する。ＨＦは、呼吸によって引き起こされるＮＮ間隔の変動（呼吸性洞性不整脈（ＲＳＡ）として公知の現象）に対応するので、「呼吸器」成分としても公知である。心拍数は、息を吸い込むときに増加し、息を吐き出す時に減少する。ＨＦは平方ミリ秒（ｍｓ２）の単位で算出する。
（ｅ）ＬＦ／ＨＦ比は、ＬＦとＨＦの範囲内のパワースペクトルの密度間の比率である。この指標は、交感神経の活動と副交感神経の活動との間の全体的な平衡を反映する。この指数が高値であれば、交感神経の活動が優位であることが示され、最低であれば、副交感神経の活動が優位であることが示される。ＬＦ／ＨＦ比は正規化された単位で算出する。
（ｆ）正規化された低周波（ＬＦ  ｎｏｒｍ）は、ＬＦの絶対値とＶＬＦを伴わないＴＰの比率である。この指数により、パワースペクトル全体におけるＶＬＦの影響の効果が最小限になり、交感神経による調節の変化が強調される。ＨＬＦ  ｎｏｒｍは百分率で算出する。
（ｇ）正規化された高周波（ＨＦ  ｎｏｒｍ）は、ＨＦの絶対値とＶＬＦを伴わないＴＰの比率である。この指数により、パワースペクトル全体におけるＶＬＦの影響の効果が最小限になり、副交感神経による調節の変化が強調される。ＨＦｎｏｒｍは百分率で算出する。
【００４９】
周波数ＨＲＶパラメータは、高速フーリエ変換（ＦＦＴ）によって算出したパワースペクトル密度（ＰＳＤ）から算出する。
【００５０】
（５）呼吸検査についての説明。この検査は、自律神経系の副交感神経枝について評価するために設計する。この検査では、副交感神経による心臓調律の調節の正の刺激が与えられる。
【００５１】
この検査中、対象に、均一に１分間当たり６回の呼吸数で深呼吸するように指示する。検査中、ランダムな呼吸に影響を及ぼす可能性がある、話すこと、咳嗽、ため息などのいかなる事象も排除することが重要である。この干渉は、望ましくない心拍数のゆらぎを引き起こす恐れがあり、結果を歪める可能性がある。対象には、スクリーン上に示されている物体の動きに従って１分間呼吸するように指示した。以下の検査パラメータを算出する：
１．最小ＨＲ（ｂｐｍ）；
２．最大ＨＲ（ｂｐｍ）；
３．ＨＲの標準偏差（ｂｐｍ）；
４．最大ＨＲ／最小ＨＲの平均比率（Ｅ／Ｉ比率）；及び
５．検査中のＨＲの最大分散（ｂｐｍ）。
【００５２】
（６）起立検査についての説明。この検査を用いて、副交感神経による心臓の調律の調節の効果を評価する。この検査は、対象の体位の変化に基づく。対象は、座位でリラックスしなければならない。心調律を１分間記録した後、対象に、突然動かないようにしながら立ち上がるように指示する。対象は、更に１分間立ったままでいる。検査全体を通して心調律のモニタリングを続ける。ベースライン及び立ち上がる動作を記録する目的は、体位の変化によって引き起こされる心臓の調律の非定常の移行プロセスを評価することである。心拍数が安定化するまで心拍数をモニターする。以下の試験パラメータを算出する：
１．３０：１５比（立ち上がった後の最初の１５秒間の最大心拍数の値と立ち上がった、又は運動反応の後の最初の３０秒間の心拍数の最小値の比率、ｃ．ｕ．）。
２．回復後に最大ＨＲ値に到達する時間（又は反応時間、秒）。
３．ＨＲがベースラインのレベルの７５％に到達する時間（又は安定化時間、秒）。
４．最小ＨＲ値（ｂ／ｐ／ｓ）。
５．最大ＨＲ値（ｂ／ｐ／ｓ）。
【００５３】
（７）機能的状態（ＷＢＡＭ）の自己評価。この試験により、特別なフォームシートを使用することによって決定される３種類の主観的な状態：健康、活動性及び気分（ＷＢＡＭ）を数値的に特徴付けることが可能になる。フォームシートには、３０対の逆の意味の単語が書かれており、その間には評点の尺度がある。自己の状態の主観的評価に応じて、対象は一方の特徴又は別の特徴のエビデンスの程度を７点の尺度で記述する。数字の符号は、：１〜２、７〜８、１３〜１４、１９〜２０、２５〜２６−健康、３〜４、９〜１０、１５〜１６、２１〜２２、２７〜２８−活動、５〜６、１１〜１２、１７〜１８、２３〜２４、２９〜３０−気分について記載している。健康及び気分の結果を処理する際、評価を左から右に７から９まで再度コード化し、活動については右から左に再度コード化する。（Ｄｏｓｋｉｎら、Ｔｈｅ  Ｔｅｓｔ  Ｏｆ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅ  Ｓｅｌｆ−ｅｓｔｅｅｍ  Ｏｆ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｓｔａｔｅ、Ｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  ｑｕｅｓｔｉｏｎｓ、１９７３年、６号、１４１〜１４５頁）。
【００５４】
それぞれの特徴（健康、活動性、気分）について、算術平均値、その誤差及び標準偏差を算出する。これにより、主観的な状態を一体化して評価することが可能になる。算術平均値は、機能的状態及び実行能力の直接的な主観的特性であり、特徴の１つの群内の評価の分散量（標準偏差）により、見いだされた結果の有効性について判断することができる。
【００５５】
（８）精神測定的試験。この試験は、Ｐｒｏｆｅｓｓｏｒ  Ｖ．Ｙｕ．ＲｙｂｎｉｋｏｖによるＣｅｎｔｒａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｓｈｉｐｂｕｉｌｄｉｎｇ  ｆｏｒ  Ｒｕｓｓｉａｎ  Ｄｅｆｅｎｓｅ  Ｍｉｎｉｓｔｒｙの「Ｌｉｖａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  ｈｅａｌｔｈ  ｃａｒｅ  ｏｆ  ｐｅｒｓｏｎｎｅｌ  ｏｆ  Ｎａｖｙ」により開発されたコンピュータプログラム「ＯＫＯ」（操作員が操作を制御する）を使用して実施する。
【００５６】
以下の精神心理学的パラメータを決定する：
・移動物体に対する反応（ＲＭＯ）；
・単純な運動反応の時間（ＳＭＲＴ）；
・注意の範囲（ＲＡ）；及び
・注意持続時間（ＡＳ）。
【００５７】
精神心理学的指標の変動性が高いので、測定を何回か実施し、次いで、一連全体の算術平均値を算出する。具体的には、ＳＭＲＴ評価を５０回、ＲＭＯを２０回、ＲＡ及びＡＳを５回繰り返した。２０個の値のＲＭＯ試験においても標的に対するヒットの数を算出し、次いで、正確なヒットの百分率を算出した。ＡＳ試験では、試験実行の平均時間、正しい答えの数を、対象が行ったその総数に対する百分率で試験した。
【００５８】
指標を統合するために、注意安定度（ＡＳＦ）を測定し、正しい答えの百分率を試験実行の平均時間で割り算することによって算出した。
【００５９】
（９）移動物体に対する反応（ＲＭＯ）。移動物体に対する反応により、刺激に対する対象の反応の正確度を決定すること及び大脳皮質における興奮プロセスと抑制プロセスの平衡に関して評価することが可能になる。予め固定した点における物体の急速な動きを止めるために反応の核心が必要である。このために、研究者が遠隔制御でスイッチを入れる電子ストップウォッチを適用することができ、その秒針を、対象が遠隔制御のボタンを押すことにより正確に「０」の印のところで止めなければならない。この試験は、ＰＣ上で特別なコンピュータプログラムを使用して実施することもできる。対象の反応は、未熟−電子ストップウォッチの針が「０」印に到達しなかった、遅延−針が「０」印を飛び越えた、正確−針が「０」印上で止まった、であり得る。未熟反応又は遅延反応のそれぞれは、絶対的単位で定量的特性を有する。実施した試験の結果を評価するために、答えの相対的な正確度（全反応の％）並びに示されている反応全ての偏差の平均算術値及び平均代数値を算出する（Ｚｈｅｇｌｏｖら、Ｔｈｅ  Ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ  Ｏｆ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｃａｐａｂｉｌｉｔｙ  Ｏｆ  Ｓａｉｌｉｎｇ  Ｐｅｒｓｏｎｎｅｌ  Ｏｆ  Ｎａｖｙ．  Ｇｕｉｄａｎｃｅ  Ｆｏｒ  Ｄｏｃｔｏｒｓ、１９９０年、１９２頁）。
【００６０】
（１０）光信号に対する単純な感覚運動反応又は単純な運動反応の時間（ＳＭＲＴ）。単純な運動反応の時間は、神経のプロセスの強度を特徴付けるための技術である。単純な感覚運動反応では、２つの精神的行為を区別することができる：知覚力（反応の感覚的モーメント）及び反応の動き（運動成分）。ＳＭＲＴ評価は、従来のやり方で（クロノレフレキソメーター（Ｃｈｒｏｎｏｒｅｆｌｅｘｏｍｅｔｅｒ）を使用して）並びに特別なコンピュータプログラムを使用して行うことができる。試験の前に、研究者は対象に試験の規則を説明する。次いで、対象に、椅子に座り、テーブルの上のクロノレフレキソメーターの前に手を置き、利き手の指をその対応するボタンに置くように指示する。対象の用意ができたら、医師−研究者がコマンドを与え、３秒間〜１０秒間後にデバイスのスイッチを入れる。対象に課せられた作業は、シグナルが発生した後、できるだけ早くボタンを押すことによって反応し、電球を消すことである。単純な運動反応の時間は、対象が遠隔操作装置（キーボード又はマウス）上のボタンを押す前にモニタースクリーン上に特別な物体が出現した時から測定する（ミリ秒単位で）。ＳＭＲＴは、一般には５０回測定し、その後、指標の平均算術値を決定する。（Ｚｈｅｇｌｏｖら、Ｔｈｅ  Ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ  Ｏｆ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｃａｐａｂｉｌｉｔｙ  Ｏｆ  Ｓａｉｌｉｎｇ  Ｐｅｒｓｏｎｎｅｌ  Ｏｆ  Ｎａｖｙ．  Ｇｕｉｄａｎｃｅ  Ｆｏｒ  Ｄｏｃｔｏｒｓ、１９９０年、１９２頁）。
【００６１】
（１１）Ｈａｒｖａｒｄステップ検査。これは、有害作用、具体的にはコリオリ加速度の影響に対する心臓血管系の反応を同定することを可能にする機能的検査であり、２分間のＨａｒｖａｒｄステップ検査を用いた（Ｖ．  Ｌ．  Ｋａｒｐｍａｎら、１９８８年；Ｎｏｖｉｃｏｖら、Ｓｔｕｄｙ  ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｍｉｌｉｔａｒｙ  ｌａｂｏｕｒ．  Ｇｕｉｄａｎｃｅ、１９９３年、２４０頁）。
【００６２】
この技術は、スクワットの実行における自律神経のシフト及び体が心拍数を正常化する回復可能性の評価に基づく。
【００６３】
ステップ検査の値により、十分激しい筋肉の仕事後の回復プロセスの速度が特徴付けられる。脈拍の回復が速いほど（Ｐ２＋Ｐ３＋Ｐ４）の値は小さくなり、したがって、ステップ検査の指数が高くなる。
【００６４】
運動選手では、通常この指数は非運動選手よりも高くなる。指数は、薬物毒性がある対象では低下することが予想される。同時に、指数の増加は、薬物により体の機能的予備力及び動力学的作用を含めた有害な環境の影響に耐える能力が増大したことを示す。
【００６５】
検査は、対象に１分間当たり３０回の速度で２分間にわたってスクワットさせて実施する。スクワットの２分後、３分後及び４分後に、それぞれの分の最初の３０秒間脈拍を測定する。ステップ検査の指数は次式を使用して算出した：
Ｈａｒｖａｒｄステップ検査の指数＝Т＊１００／（Р２＋Р３＋Р４）＊２
（式中、Тはスクワットした時間（秒）であり；Р２、Р３、Р４は、回復期間の２分、３分及び４分時点の脈拍数であり、＊は掛け算の符号である。
【００６６】
薬物を、ドライバーを含めた動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）になりやすい人に割り当てるという事実に起因して、その安全性を、人による信頼できるオペレーター機能を実行して評価した。操作型の活動の質についての重要な予測因子を決定するために、中枢神経系の機能的状態（例えば、協調及び反応の系、効率の高い活動の細かい運動成分をもたらす系並びに注意の系などの状態）の詳細な試験を実施した。
【００６７】
（１２）Ｓｔａｎｇｅ試験。Ｓｔａｎｇｅ試験の核心は、３回息を吸った後に、完全な深さの３／４まで吸ったところで息を止めることである。試験の前に、対象の鼻をクリップで留めるか、対象が自分の鼻を指で押さえた。対象が息を止めた時間の長さをストップウォッチで記録した。（Ｚｈｅｇｌｏｖら、Ｔｈｅ  Ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ  Ｏｆ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｃａｐａｂｉｌｉｔｙ  Ｏｆ  Ｓａｉｌｉｎｇ  Ｐｅｒｓｏｎｎｅｌ  Ｏｆ  Ｎａｖｙ．  Ｇｕｉｄａｎｃｅ  Ｆｏｒ  Ｄｏｃｔｏｒｓ、１９９０年、１９２頁）。
【００６８】
試験は、決定の間に３分間〜５分間の間隔で２回行うことができる。試験を、息を止めた時間によって以下の通り評価する：
・３９秒間未満−不十分；
・４０秒間〜９秒間−可；
・５０秒間超−良。
【００６９】
（１３）Ｇｅｎｃｈ試験。この試験実行の核心は、３回呼吸した後に息を吐いたところで息を止めることである。（Ｚｈｅｇｌｏｖら、Ｔｈｅ  Ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ  Ｏｆ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｃａｐａｂｉｌｉｔｙ  Ｏｆ  Ｓａｉｌｉｎｇ  Ｐｅｒｓｏｎｎｅｌ  Ｏｆ  Ｎａｖｙ．  Ｇｕｉｄａｎｃｅ  Ｆｏｒ  Ｄｏｃｔｏｒｓ、１９９０年、１９２頁）。腹臥位でＧｅｎｃｈ試験を行う場合、健康な対象における息こらえの持続時間は２５秒間〜３０秒間である。これを歩行段階（３０秒間に４４ｍ）の後に繰り返すと、息こらえの持続時間は１７秒間〜２２秒間に低下し、体に機能的な欠乏があると、５秒間〜１５秒間にまで低下する。試験の評価を以下の通り行った：
・３４秒間未満−不十分；
・３５秒間〜３９秒間−可；
・４０秒間超−良。
【００７０】
一態様では、本発明は、ａ）ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体と、ｂ）脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体とを含む組み合わせ医薬組成物を提供する。本明細書において上記されている通り、組み合わせの個々の成分のそれぞれは、それ自体の個々の医学的使用について一般に公知である。しかし、本出願の発明者らは、驚いたことに、組み合わせを投与することが、種々の起源の回転性めまい、動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）及び自律神経血管ジストニアを治療するために著しく有用であることを発見した。
【００７１】
別の態様では、本発明は、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体と内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体を同時に、超低用量のアフィニティー精製した抗体の状態で生物に挿入することによって自律神経血管ジストニア及びその症状を治療する方法を提供する。
【００７２】
治療のために、組み合わせ医薬組成物を１日１回から１日４回投与し、各投与が１つ又は２つの組み合わせ単位剤形を含むことが好ましい。
【００７３】
種々の起源の回転性めまい、動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）及び自律神経血管ジストニアを治療するための本出願の医薬組成物は、活性成分を、主に１：１の体積比で含有する。
【００７４】
種々の起源の回転性めまい、動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）及び自律神経血管ジストニアを治療するために、医薬組成物の成分を別々に投与することができる。しかし、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体と、したがって内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とを含有する１つの溶液の形態及び／又は固体剤形（錠剤）に組み合わせた成分を同時投与することが好ましい。
【００７５】
更に、種々の起源の回転性めまい、動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）及び自律神経血管ジストニアの治療時に、示されている医薬組成物を、そのそれぞれが内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体又はＳ−１００タンパク質に対する活性化増強型抗体を含有する、溶液の形態及び固体剤形（錠剤）の両方で別々に調製した２つの薬剤の形態で別々に適用すること（生物体への摂取）及び同時に適用すること（生物体への摂取）が可能である。
【００７６】
医薬製品は主に以下の通りに調製する。
【００７７】
本発明による組み合わせ医薬組成物は、液体の形態であっても固体の形態であってもよい。医薬組成物中に含まれる活性化増強型の抗体のそれぞれは、最初の分子型抗体から、ホメオパシーの技術分野で受け入れられているプロセスによって調製される。出発抗体は、公知のプロセスに従って、例えば、どちらも参照により本明細書に組み込まれる、Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、Ｇ．  Ｆｒｉｍｅｌ，  Ｍ．、「Ｍｅｄｉｔｓｙｎａ」、１９８７年、９〜３３頁；「Ｈｕｍ．  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｄ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，  ３０  ｙｅａｒｓ  ａｆｔｅｒ」、Ｌａｆｆｌｙ  Ｅ．、Ｓｏｄｏｙｅｒ  Ｒ．、２００５年、１４巻、１〜２号、３３〜５５頁に記載の通り調製されたモノクローナル抗体、又はポリクローナル抗体であってよい。
【００７８】
モノクローナル抗体は、例えば、ハイブリドーマ技術によって得ることができる。このプロセスの最初の段階は、ポリクローナル抗血清の調製の過程においてすでに開発された原理に基づいた免疫化を含む。研究のさらなる段階は、同一の特異性を有する抗体のクローンを生成するハイブリッド細胞の作製を伴う。それらの別々の単離は、ポリクローナル抗血清を調製する場合と同じ方法を使用して実施する。
【００７９】
ポリクローナル抗体は、動物の能動免疫によって得ることができる。この目的で、例えば、適切な動物（例えば、ウサギ）に適切な抗原：脳特異的タンパク質Ｓ−１００及び内皮ＮＯ合成酵素の一連の注射を受けさせる。動物の免疫系により、対応する抗体が生成し、それを公知の様式で動物から採取する。この手順により、単一特異性の抗体が豊富な血清を調製することが可能になる。
【００８０】
所望であれば、抗体を含有する血清は、例えば、アフィニティークロマトグラフィー、塩析による分画、又はイオン交換クロマトグラフィーを使用して精製することができる。得られた精製抗体濃縮血清を、活性化増強型の抗体を調製するための出発材料として使用することができる。得られた、溶媒、好ましくは水又は水とエチルアルコールの混合物中の抗体の最初の溶液の好ましい濃度は、約０．５ｍｇ／ｍＬから約５．０ｍｇ／ｍＬまでにわたる。
【００８１】
各成分を調製するための好ましい手順は、それぞれ１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００に相当する、抗体の一次マトリックス溶液を１００１２倍希釈、１００３０倍希釈及び１００２００倍希釈した３種の水−アルコール希釈物の混合物を使用することである。固体剤形を調製するために、固体担体を、ホメオパシーのプロセスによって得られた所望の希釈物で処理する。本発明の組み合わせの固体単位剤形を得るために、担体集団に各希釈物を浸透させる。どちらの浸透の階数も、所望の組み合わせ剤形を調製するために適している。
【００８２】
好ましい実施形態では、本発明の組み合わせを含む活性化増強型を調製するための出発材料は、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対するポリクローナル抗体及び内皮ＮＯ合成酵素に対するポリクローナル抗体である。その後の活性化増強型を調製するために０．５〜５．０ｍｇ／ｍＬの濃度の最初の（マトリックス）溶液を使用する。
【００８３】
医薬組成物を調製するために脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対するポリクローナル抗体及び内皮ＮＯ合成酵素に対するポリクローナル抗体を使用することが好ましい。
【００８４】
内皮ＮＯ合成酵素に対するポリクローナル抗体は、ウサギを免疫化するための免疫原（抗原）としてアジュバント、及び以下の配列のウシ内皮ＮＯ合成酵素の全分子を使用して得られる。
配列番号１
2013536174.tif 000002
2013536174.tif 000003
2013536174.tif 000004
2013536174.tif 000005
2013536174.tif 000006
【００８５】
ＮＯ合成酵素に対するポリクローナル抗体は、以下の配列のヒト内皮ＮＯ合成酵素の全分子を使用して得ることができる：
配列番号２
2013536174.tif 000007
2013536174.tif 000008
2013536174.tif 000009
2013536174.tif 000010
2013536174.tif 000011
【００８６】
ＮＯ合成酵素に対するポリクローナル抗体を得るために、例えば、以下の配列から選択される内皮ＮＯ合成酵素の断片を使用することも可能である。
配列番号３
2013536174.tif 000012
配列番号４
2013536174.tif 000013
配列番号５
2013536174.tif 000014
配列番号６
2013536174.tif 000015
配列番号７
2013536174.tif 000016
配列番号８
2013536174.tif 000017
【００８７】
ＮＯ合成酵素に対する出発ポリクローナル抗体を調製するための例示的な手順は、以下の通り説明することができる：血液試料を採取する７〜９日前に、ウサギに１〜３回静脈内注射して、ウサギの血流中のポリクローナル抗体のレベルを上昇させる。免疫化したら、抗体レベルを検査するために血液試料を取得する。一般には、可溶性抗原の免疫応答の最大レベルは、最初に注射した後４０〜６０日以内に実現される。第１の免疫化サイクルが終了した後、ウサギを３０日のリハビリテーション期間におき、その後、更に１〜３回静脈内注射して再免疫化を実施する。
【００８８】
所望の抗体を含有する抗血清を得るために、ウサギから、免疫化されたウサギの血液を採取し、５０ｍＬの遠心管に入れる。管の側面に形成された生成物である血餅を木べらで除去し、管の中心の血餅にロッドを入れる。次いで、血液を冷蔵庫に約４℃の温度で一晩置く。次の日に、へらの上の血餅を除去し、残りの液体を１分当たり１３，０００回転で１０分間遠心分離する。上清の流体が標的抗血清である。得られた抗血清は一般には黄色である。抗血清に、２０％のＮａＮ３（重量濃度）を最終濃度が０．０２％になるまで加え、使用する前に、−２０℃の温度で（又は、ＮａＮ３を加えずに−７０℃の温度で）凍結した状態で保管する。内皮ＮＯ合成酵素に対する標的抗体を抗血清から分離するためには、以下の固相吸収の連続が適している：
（ａ）ウサギの抗血清１０ｍＬを０．１５ＭのＮａＣｌで２倍希釈し、その後、６．２６ｇのＮａ２ＳＯ４を加え、混合し、４℃で約１２〜１６時間インキュベートする；
（ｂ）沈渣を遠心分離によって除去し、リン酸緩衝液１０ｍＬ中に溶解させ、同じ緩衝液に対して室温で一晩にわたって透析する；
（Ｃ）沈渣を遠心分離によって除去した後、溶液を、リン酸緩衝液によって均衡させたＤＥＡＥ−セルロースのカラムに入れる；
（ｄ）溶出液の２８０ナノメートルにおける光学濃度を測定することによって抗体画分を決定する。
【００８９】
単離された粗製の抗体を、アフィニティークロマトグラフィー法を使用し、得られた抗体を、クロマトグラフィー媒体の不溶性マトリックス上にある内皮ＮＯ合成酵素に付着させることによって精製し、その後濃縮した水性塩類溶液により溶出させる。
【００９０】
得られた緩衝溶液を、活性化増強型の抗体を調製するために用いるホメオパシー希釈プロセスの最初の溶液として使用する。内皮ＮＯ合成酵素に対する抗原精製ポリクローナルウサギ抗体の最初のマトリックス溶液の好ましい濃度は０．５〜５．０ｍｇ／ｍＬ、好ましくは、２．０〜３．０ｍｇ／ｍＬである。
【００９１】
ニューロン及びグリア細胞（星状細胞及び乏突起膠細胞）によって発現される脳特異的Ｓ１００タンパク質は、直接的に、又は他のタンパク質との相互作用を通じて、学習プロセス及び記憶プロセス、ニューロンの成長及び生存能力、神経組織における代謝プロセスの調節などに影響を及ぼすことを含めた、正常な脳機能を維持するためのいくつかの機能をＣＮＳにおいて果たす。脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対するポリクローナル抗体を得るために、脳特異的タンパク質Ｓ−１００が使用され、その物理的性質及び化学的性質は、論文Ｍ．Ｖ．Ｓｔａｒｏｓｔｉｎ、Ｓ．Ｍ．  Ｓｖｉｒｉｄｏｖ、Ｎｅｕｒｏｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓ−１００、Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｏｆ  Ｍｏｄｅｒｎ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、１９７７年、５巻、１７０〜１７８頁において説明され、書籍Ｍ．Ｂ．  Ｓｈｔａｒｋ、Ｂｒａｉｎ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｎｔｉｇｅｎｅｓ  ａｎｄ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｎ、「Ｍｅｄｉｃｉｎｅ」、１９８５年；  １２〜１４頁に見出される。脳特異的タンパク質Ｓ−１００は、以下の技術によって、雄ウシの脳組織から割り当てられる：
−特殊な粉砕機を用いて、液体窒素中で凍結させた雄ウシ脳組織を粉末に変化させる；
−抽出用緩衝液を用いてホモジナイゼーションして、タンパク質を１：３の比（重量／体積）で抽出する；
−ホモジネートを６０℃で１０分間加熱し、次いで、氷浴中で４℃まで冷却する；
−遠心分離によって、熱不安定性タンパク質を除去する；
−硫酸アンモニウム分画を段階的に実施し、沈殿したタンパク質を続いて除去する；
−ｐＨを４．０に落とすことによって達成される１００％飽和硫酸アンモニウムを用いてＳ−１００タンパク質を含有する画分を沈殿させる；遠心分離によって、所望の画分を回収する；
−ＥＤＴＡ及びメルカプトエタノールを含有する最小限の体積の緩衝液に沈殿物を溶解し、脱イオン水を用いて沈殿物を透析し、凍結乾燥する；
−酸性タンパク質を分画した後に、イオン交換媒体、ＤＥＡＥ−セルロースＤＥ−５２、次いでＤＥＡＥ−セファデックスＡ−５０中でのクロマトグラフィーを続ける；
−セファデックスＧ−１００を用いたゲル濾過により、分子量に従って、Ｓ−１００タンパク質を含有する回収し透析した画分を分割する；
−精製されたＳ−１００タンパク質を透析し、凍結乾燥する。
【００９２】
精製された脳特異的タンパク質Ｓ−１００の分子量は２１，０００Ｄである。
【００９３】
アスパラギン酸及びグルタミン酸が高濃度であるため、脳特異的タンパク質Ｓ−１００は酸性度が高く、ポリアクリルアミドゲルの不連続緩衝系における電気浸透の間、極端な陽極位置を占め、それにより、それを同定することが容易になる。
【００９４】
Ｓ−１００タンパク質に対するポリクローナル抗体は、アジュバントを使用して、内皮ＮＯ合成酵素抗体に関して記載されている方法と同様の方法によって得ることもできる。Ｓ−１００タンパク質の分子全体を、ウサギを免疫化するための免疫原（抗原）として使用することができる。
ウシＳ１００Ｂ  （配列番号９）
2013536174.tif 000018
2013536174.tif 000019
ヒトＳ１００Ｂ  （配列番号１０）
2013536174.tif 000020
ヒトＳ１００Ａ１  （配列番号１１）
2013536174.tif 000021
ウシＳ１００Ａ１  （配列番号１２）
2013536174.tif 000022
2013536174.tif 000023
【００９５】
抗血清を得るために、フロイント完全アジュバントを入れた、運搬剤としてのメチル化雄ウシ血清アルブミンと複合体をなした脳特異的Ｓ−１００タンパク質又はＳ−１００タンパク質の混合物（抗原）を調製し、割り当てられた脳特異的タンパク質Ｓ−１００に添加し、実験動物の真皮下に注射する。すなわち、ウサギの背中領域に１〜２ｍＬの量を注射する。８日目、１５日目に免疫化を反復して行う。２６日目及び２８日目に（例えば、耳の静脈から）血液試料を採取する。
【００９６】
得られた抗血清の力価は１：５００〜１：１，０００であり、神経組織の抽出物と単一の沈降バンドを形成するが、ヘテロロジカルボディ（ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｉＣａｌ  ｂｏｄｙ）抽出物とは反応せず、純粋なタンパク質Ｓ−１００及び神経組織の抽出物のどちらとも単一の沈降素ピークを形成することから、得られた抗血清が単一特異性であることが示唆される。
【００９７】
組み合わせの各成分の活性化増強型は、最初の溶液から、ホメオパシーポテンタイゼーションによって、好ましくは、約０．５ｍｇ／ｍＬから約５．０ｍｇ／ｍＬまでの、溶媒、好ましくは水又は水とエチルアルコールの混合物中の抗体の最初の溶液の濃度から出発して、（最初の溶液から開始する）前の溶液のそれぞれ（最初の溶液から開始する）１部を９部（１０倍希釈）、又は９９部（１００倍希釈）、又は９９９部（１，０００倍希釈−希薄化Ｍ）の中性の溶媒に入れて段階希釈することによる比例的な濃度低下の方法を外部からの衝撃と併せて用いて調製することができる。外部からの衝撃は、各希釈物を多数回垂直方向に振とうすること（ダイナマイゼーション）を伴うことが好ましい。その後の、所要のポーテンシーレベル、又は希釈因子に至るまでの希釈のそれぞれには別々の容器を使用することが好ましい。この方法は、ホメオパシーの技術分野では広く受け入れられている。例えば、明示された目的で参照により本明細書に組み込まれるＶ．Ｓｃｈｗａｂｅ「Ｈｏｍｅｏｐａｔｈｉｃ  ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ」、Ｍ．、１９６７年、１４〜２９頁を参照されたい。
【００９８】
例えば、１２−１００倍希釈物（Ｃ１２と示される）を調製するために、２．５ｍｇ／ｍＬの濃度の脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する抗体（又は内皮ＮＯ合成酵素に対する抗体）の最初のマトリックス溶液１部を、中性の、水を含む又は水−アルコールを含む溶媒（好ましくは、１５％エチルアルコール）９９部中に希釈し、次いで何回も（１０回以上）垂直方向に振とうして、第１の１００倍単位希釈物（Ｃ１と示される）を創出する。第１の１００倍単位希釈物Ｃ１から第２の１００倍単位希釈物（Ｃ２）を調製する。この手順を１１回繰り返して第１２の１００倍単位希釈物Ｃ１２を調製する。したがって、第１２の１００倍単位希釈物Ｃ１２は、異なる容器内で、２．５ｍｇ／ｍＬの濃度の脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する抗体の最初のマトリックス溶液１部を中性の溶媒９９部中に１２回段階希釈することによって得られる溶液を表し、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２に相当する。関連する希釈因子を用いて同様の手順を実施して、希釈物Ｃ３０、Ｃ５０及びＣ２００を得る。中間希釈物を所望の生物学的モデルにおいて試験して活性を確認することができる。本発明の組み合わせを含む両方の抗体の好ましい活性化増強型は、Ｃ１２希釈物、Ｃ３０希釈物、及びＣ２００希釈物の混合物又はＣ１２希釈物、Ｃ３０希釈物及びＣ５０希釈物の混合物である。活性な物質の種々のホメオパシー希釈物（主に１００倍単位希釈物）の混合物を生物活性のある液体成分として使用する場合、組成物（例えば、Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ５０、Ｃ２００）の各成分は、上記の手順に従って、最後から二番目の希釈物が得られるまで（例えば、それぞれＣ１１、Ｃ２９、及びＣ１９９まで）別々に調製し、次いで各成分１部を、混合物の組成に従って１つの容器に加え、所要量（例えば、１００倍希釈するためには９７部）の溶媒と混合する。
【００９９】
したがって、超低用量の、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体は、マトリックス溶液を、ホメオパシーの技術で調製した１００倍単位溶液Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００に相当する１００１２倍、１００３０倍及び１００２００倍に、又は１００倍単位溶液Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ５０に相当する１００１２倍、１００３０倍及び１００５０倍に、極希薄化することによって得られる。
【０１００】
活性な物質を、ホメオパシーの技術の他の種々の溶液、例えば、１０倍単位及び／又は１００倍単位（Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ１００；Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ５０；Ｄ２０、Ｃ３０、Ｃ１００又はＤ１０、Ｃ３０、Ｍ１００など）の混合物の形態で使用することが可能性である。効率は実験により定義される。
【０１０１】
増強及び濃度低下の過程における外部処理は、超音波、電磁気又はホメオパシーの技術分野で受け入れられている任意の他の物理的な影響によって行うこともできる。
【０１０２】
好ましくは、本発明の医薬組成物は、液体の形態又は固体単位剤形であってよい。好ましい液体の形態の医薬組成物は、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体とタンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体の混合物であり、その比率は１：１であることが好ましい。好ましい液体担体は、水又は水とエチルアルコールの混合物である。
【０１０３】
本発明の医薬組成物の固体単位剤形は、薬学的に許容される固体担体に、主に１：１の比率で混合し、液体剤形で用いる、活性化増強型の、活性成分の水溶液又は水−アルコール溶液の混合物を浸透させることを用いて調製することができる。或いは、必要な希釈物のそれぞれを継続的に担体に浸透させることができる。どちらの浸透の順序も許容できる。
【０１０４】
好ましくは、固体単位剤形の医薬組成物は、活性化増強型抗体の水希釈物又は水−アルコール希釈物を予め染み込ませた薬学的に許容される担体の顆粒から調製する。固体剤形は、錠剤、カプセル剤、ロゼンジ、及びその他を含めた製薬技術分野で公知の任意の形態であってよい。不活性な医薬成分として、医薬品の製造において使用されるグルコース、スクロース、マルトース、デンプン、イソマルトース、イソマルト及び他の単糖、オリゴ糖及び多糖、並びに上記の不活性な医薬成分と、潤滑剤、崩壊剤、結合剤及び着色料を含めた他の薬学的に許容される賦形剤、例えば、イソマルト、クロスポビドン、シクラミン酸ナトリウム、サッカリンナトリウム、無水クエン酸など）との技術的混合物を使用することができる。好ましい担体はラクトース及びイソマルトである。医薬剤形は、標準の医薬賦形剤、例えば、結晶セルロース、ステアリン酸マグネシウム及びクエン酸を更に含んでよい。
【０１０５】
固体単位剤形の調製物の例は下に記載されている。経口用の固体形態を調製するために、ラクトースの顆粒１００〜３００μｍを、ヒスタミンに対する活性化増強型抗体、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体及びタンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体の水溶液又は水−アルコール溶液に、ラクトース５ｋｇ又は１０ｋｇに対して抗体溶液１ｋｇ（１：５〜１：１０）の比率で浸透させる。浸透に影響を及ぼすために、ラクトース顆粒を、煮沸ベッドプラント（例えば、Ｈｕｔｔｌｉｎ  ＧｍｂＨの「Ｈｕｔｔｌｉｎ  Ｐｉｌｏｔｌａｂ」）中の流動煮沸ベッド中で染み込ませるための注水に曝露させ、その後、４０℃未満の加熱した空気の流れによって乾燥する。活性化増強型抗体を染み込ませた乾燥顆粒（１０〜３４重量）の推定量をミキサーに入れ、２５〜４５重量部の「染み込ませていない」純粋なラクトース（処理効率を低下させることなく科学技術的なプロセスの費用を縮小し、それを単純化及び加速するために使用する）と、０．１〜１重量部のステアリン酸マグネシウム、及び３〜１０重量部の結晶セルロースと一緒に混合する。得られた錠剤集団を均一に混合し、（例えば、Ｋｏｒｓｃｈ−ＸＬ４００打錠機において）直接乾式プレスすることによって錠剤化して、１５０〜５００ｍｇ、好ましくは、３００ｍｇの丸剤を形成する。錠剤化した後、活性化増強型抗体の組み合わせの水−アルコール溶液（丸剤１粒当たり３．０〜６．０ｍｇ）を染み込ませた丸剤３００ｍｇを得る。担体に浸透させるために使用する組み合わせの各成分は、１００倍単位ホメオパシー希釈物、好ましくは、Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ２００の混合物の形態である。
【０１０６】
特許請求された医薬組成物の錠剤１〜２錠を１日２〜４回投与することが好ましい。
【０１０７】
べき乗のホメオパシーの技術に従って、その後の希釈を外部からの機械的作用−希釈するごとに垂直方向に振とうすることと組み合わせて繰り返すことにより調製される（例えば、Ｖ．Ｓｈｗａｂｅ「Ｈｏｍｅｏｐａｔｈｉｃ  ｄｒｕｇｓ」、Ｍ．、１９６７年、１４〜２９頁を参照されたい）、種々の起源の回転性めまい、動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）及び自律神経血管ジストニア）の薬理学的モデル及び／又は臨床的な治療方法においてべき乗の当該技術によって引き起こされる活性を保有する医薬組成物中の脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型抗体と内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型抗体の組み合わせにより、種々の起源の回転性めまい、動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）及び自律神経血管ジストニアの両方の治療の効率の上昇にある適切な（有効な）実験モデル及び臨床的な調査において確認される急な協同治療効果が得られる。記載の技術的な結果は、リガンドとシグマ−１受容体との相互作用の効率に対する影響によって引き起こされるタンパク質Ｓ−１００に対する抗体の神経保護活性の増強、自律神経安定化作用、それまで露出していなかった脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型の抗体の特徴が顕在化することによる自律神経の状態の正常化、及び中性可塑性に対する両方の成分の協同的影響によってもたらされ、その結果、毒性作用に対する脳の抵抗性が増大することにより、統合的な活性が改善され、脳の半球間の関連性が回復し、認知障害の排除が容易になり、修復プロセスが刺激され、身体自律神経症状発現（ｓｏｍａｔｏｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ  ｍａｎｉｆｅｓｔａｔｉｏｎ）を安定化する機能の回復が加速され、大脳の血流が増加し、また、それぞれ、薬剤の治療範囲の拡大、並びに回転性めまい、動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）及び血圧の上昇と低下の両方を伴う自律神経血管ジストニアを含めた種々の起源の自律神経血管ジストニアの治療効率の上昇がもたらされる。更に、示されている薬物及びその成分は鎮静作用及び筋弛緩作用を保有せず、嗜癖及び順応を惹起しない。示されている薬物は、複合療法の成分としても使用することができる。
【０１０８】
更に、示されている薬物により、種々の起源の回転性めまい、動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）及び自律神経血管ジストニアを治療するために設計される薬剤の種別が広がる。
【０１０９】
更に、本発明の組み合わせ医薬組成物は、注意欠陥多動性障害、精神器質症候群（ｐｓｙｃｈｏｏｒｇａｎｉｃ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、種々の起源の脳症、脳卒中を含めた神経系の器質性疾患、アルツハイマー病、パーキンソン病を治療するために使用することができる。前記障害を治療するために、組み合わせ医薬組成物は、活性成分を１：１の体積比で含有してよい、したがって、各成分を、それぞれ、１００倍単位ホメオパシー希釈物（Ｃ１２、Ｃ３０、及びＣ２００）に相当する、１００１２倍希釈、１００３０倍希釈及び１００２００倍希釈した抗体の３種のマトリックス溶液（母液）の混合物、又は、それぞれ、１００倍単位ホメオパシー希釈物（Ｃ１２、Ｃ３０及びＣ５０）に相当する１００１２倍希釈、１００３０倍希釈及び１００５０倍希釈した抗体の３種のマトリックス溶液の混合物として使用する。特許請求された医薬組成物は、好ましくは、１日に錠剤１〜２錠を２〜６回（２〜４回が好ましい）摂取することが推奨される。
【０１１０】
特許請求された医薬組成物並びにその成分は、鎮静作用及び筋弛緩作用（ｍｙｏｒｅｌａｘａｎｔ  ｅｆｆｅｃｔ）を保有せず、嗜癖及び習慣化を引き起こさない。
【実施例】
【０１１１】
実施例１
最初のマトリックス溶液（濃度：２．５ｍｇ／ｍＬ）を超希釈（１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍）することによって得られ、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の混合物（比率：１：１）に相当する、超低用量の、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型のポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（抗Ｓ１００）及び内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型のポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（抗ｅＮＯＳ）を含有する複合調製物（「ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ」）、並びにその成分：最初のマトリックス溶液を超希釈（１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍することによって得られ、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の混合物に相当する、超低用量の、抗原に対して精製した脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型のポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（「ＵＬＤの抗Ｓ１００」）、並びに、最初のマトリックス溶液を超希釈（１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍）することによって得られ、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の混合物に相当する、超低用量の、内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型のポリクローナルウサギ抗体（ＵＬＤの抗ｅＮＯＳ）の、標準のリガンドである［３Ｈ］ペンタゾシンとヒト組換えσ１受容体の結合に対するｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける効果を、放射性リガンド法を用いて評価した試験。増強蒸留水（ホメオパシー希釈物Ｃ１２＋Ｃ３０＋Ｃ２００の混和物）を試験調製物の対照として使用した。
【０１１２】
シグマ−１（σ１）受容体は、中枢神経系の細胞、末梢組織の大部分の細胞、及び免疫成分細胞に局在する細胞内受容体である。これらの受容体は、多くの向精神薬によって引き起こされると考えられている移行を受ける独特の能力を示す。シグマ−１受容体のダイナミクスは、シグマ−１受容体に作用する調製物によってなされる種々の影響と直接関連づけられる。これらの影響としては、活性チャネル、エキソサイトーシス、シグナル伝達、原形質膜のリモデリング（ラフトの形成）及び脂質輸送／代謝の調節が挙げられ、これら全てが脳におけるニューロンの可塑性に寄与する可能性がある。シグマ−１受容体が、主要な神経メディエーター系：ノルアドレナリン作動系、セロトニン作動系、ドーパミン作動系、コリン作動系及びＮＭＤＡにより調整可能なグルタミン酸効果の全てに対する調節効果を有するというエビデンスがある。シグマ−１受容体は、神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病）、精神障害及び情動障害及び脳卒中の病態生理において重要な役割を果たし、また、学習及び記憶のプロセスにも関与する。この点について、薬物の、リガンドとシグマ−１受容体の相互作用の効率に影響を及ぼす能力は、これらの薬物を、特に脳血管疾患を治療するための有効な調製物として考えることを可能にするその薬理活性のスペクトルにおける神経保護成分、抗虚血成分、抗不安成分、抗うつ成分及び抗無力成分の存在を示している。
【０１１３】
（総結合を測定するための）試験の間、２０μＬのＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ複合調製物又は１０μＬのＵＬＤの抗Ｓ１００又は１０μＬのＵＬＤの抗ＮＯＳをインキュベーション培地に加えた。したがって、複合調製物を試験する際に試験たらいに移したＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳの量は、単一調製物として試験したＵＬＤの抗Ｓ１００及びＵＬＤの抗ＮＯＳの量と同一であり、それにより、調製物の効率を、その別々の成分と比較することが可能になる。増強水２０μＬ及び１０μＬをインキュベーション培地に移した。
【０１１４】
更に、Ｊｕｒｋａｔ細胞株の膜ホモジネート（ヒト白血病性Ｔリンパ球株）１６０μＬ（タンパク質約２００μｇ）、及び最後に、トリチウムで標識した放射性リガンド［３Ｈ］ペンタゾシン２０μＬ（１５ｎｍ）を移した。
【０１１５】
非特異的な結合を測定するために、標識されていないリガンド−ハロペリドール２０μＬ（１０μＭ）を調製物又は増強水の代わりにインキュベーション培地に移した。
【０１１６】
５０ｍＭのトリス−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ＝７．４）中２２℃で１２０分間インキュベートし、ガラス繊維フィルター（ＧＦ／Ｂ、Ｐａｃｋａｒｄ）を使用して濾過した後、シンチロメーター（Ｔｏｐｃｏｕｎｔ、Ｐａｃｋａｒｄ）及びシンチレーションブレンド（Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ  ０、Ｐａｃｋａｒｄ）を使用して放射活性を測定した。特異的な結合（試験物又は対照における）を総結合（試験物又は対照における）と非特異的な結合の差異として算出した。
【０１１７】
結果は、対照（蒸留水を対照として使用した）における特異的結合の阻害の百分率（％）として示されている（表１）
【０１１８】
【表１】
2013536174.tif 000024
表１：調製物及び増強水の、標準のリガンドである［３Ｈ］ペンタゾシンとヒト組換え型σ１受容体との結合に対する効果
注：対照における特異的な結合の百分率（％）＝（試験中の特異的な結合／対照における特異的な結合）＊１００％；
対照における特異的な結合の阻害の百分率（％）＝１００％−（試験中の特異的な結合／対照における特異的な結合）＊１００％）
【０１１９】
５０％を超える阻害を反映する結果により被試験化合物の有意な効果が示され、２５％から５０％までの阻害により、軽度〜中程度の効果が確認され、２５％未満の阻害は、被試験化合物の効果は有意でなく、バックグラウンドレベルの範囲内であると考えられる。
【０１２０】
したがって、この試験モデルにより、ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ複合物調製物が、標準の放射性リガンドである［３Ｈ］ペンタゾシンとヒト組換えσ１受容体の結合を阻害することにおいて、その別々の成分（ＵＬＤの抗Ｓ１００及びＵＬＤの抗ｅＮＯＳ）よりも効率的であることが示された；試験たらいに移した、すなわち１０μＬのＵＬＤの抗Ｓ１００により、標準の放射性リガンドである［３Ｈ］ペンタゾシンとヒト組換えσ１受容体の結合が阻害されたが、効果の強さは、ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ複合物調製物の効果の強さよりも劣る；試験たらいに移した、すなわち１０μＬのＵＬＤの抗ｅＮＯＳは、標準の放射性リガンドである［３Ｈ］ペンタゾシンとヒト組換えσ１受容体の結合に対する効果を有さなかった；試験たらいに移した、すなわち、１０μＬ又は２０μＬの増強水は、標準の放射性リガンドである［３Ｈ］ペンタゾシンとヒト組換えσ１受容体の結合に対する効果を有さなかった。
【０１２１】
実施例２
以下の調製物を使用した：最初の溶液（濃度２．５ｍｇ／ｍＬ）を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に超希釈することにより入手し、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の等価混合物である、抗原に対して精製した、超低用量の、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型ポリクローナルウサギ抗体（抗Ｓ−１００）（ＵＬＤの抗Ｓ１００）の水−アルコール溶液を浸透させた錠剤（錠剤１錠当たり３ｍｇ）３００ｍｇ；最初の溶液（濃度２．５ｍｇ／ｍＬ）を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に超希釈することによって入手し、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の等価混合物である、超低用量の、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型のポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（抗Ｓ−１００）及びｅＮＯＳに対する活性化増強型のポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（抗ｅＮＯＳ）（ＵＬＤの抗Ｓ−１００＋ＵＬＤの抗ｅＮＯＳ）の水−アルコール溶液を浸透させた錠剤（錠剤１錠当たり６ｍｇ）３００ｍｇ；最初の溶液（濃度２．５ｍｇ／ｍＬ）を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に超希釈することによって入手し、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の等価混合物である、抗原に対して精製した、超低用量の、活性化増強型ポリクローナルウサギ抗ｅＮＯＳ（ＵＬＤの抗ｅＮＯＳ）の水−アルコール溶液を浸透させた錠剤（錠剤１錠当たり３ｍｇ）３００ｍｇ；及びプラセボとして、賦形剤：ラクトース（ラクトース一水和物）−２６７ｍｇ、結晶セルロース−３０ｍｇ、ステアリン酸マグネシウム−３ｍｇを含有する錠剤３００ｍｇ。
【０１２２】
浮動性めまい（回転性めまい）及び他の動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）の症状の治療における被試験薬物の有効性を、動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）モデル又は種々の前庭自律神経障害によって生じる動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｄｉｓｅａｓｅ）／動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）において評価した。浮動性めまいは、前庭神経及び蝸牛系の機能不全、椎骨−脳底動脈系における循環機能障害、中枢神経系（ＣＮＳ）の病態などを含めた、種々の起源の前庭分析器の病変の典型的な徴候である。動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）の症状発現としての浮動性めまいは、３種類の反応：前庭運動（眼振及び偏視の反応）、前庭感覚（浮動性めまいに加えて、眼振（又は回転後の反応）は、防御的な動きである）及び自律神経（悪心、嘔吐、発汗、動悸、熱感、脈拍及び血圧のゆらぎ）を含む他の前庭自律神経障害を伴う。
【０１２３】
種々の組成物の抗動揺病性を試験するために、肉体的に健康な対象−動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）抵抗性の程度が低い（ｎ＝５；３３％）又は平均的である（ｎ＝１０；６７％）１５歳から６０歳までの男性及び女性（平均３３．３歳±０．７５歳）１５人からなる並行群において二重盲検プラセボ対照比較試験を行った。第１群には、ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳを与え、第２群にはＵＬＤの抗Ｓ１００を与え、第３群には抗ｅＮＯＳを与えた。
【０１２４】
動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）の状態をシミュレートし、被試験薬物の有効性を評価するために最も適し、認められている動揺病（ｋｉｎｅｔｏｓｉｓ）モデル−コリオリによる加速度の連続的累積的効果（ＣＣＥＡＣ）を用いた試験を用いた。ＣＣＥＡＣ試験の最初の耐容性は、試験対象全員において５分以下であった。動力学的効果（ＣＣＥＡＣ）によって惹起した前庭自律神経障害を、対象の検査、前庭自律神経感受性の障害の定量的評価（Ｈａｌｌｅ尺度）、心拍変動（ＨＲＶ）の分析、及び機能的状態の自己評価（ＷＢＡＭ−健康、活動性、及び気分）を含めた複合診断方法を用いて表した。行った療法の効率の基準として、動力学的影響に対する耐容性及び回復時間の程度のダイナミクス、並びに感覚運動反応（眼振）、ＨＲＶ指数（ＡＷＳによって開発されたＢｉｏｃｏｍ  Ｗｅｌｌｎｅｓｓ  Ｓｃａｎシステム、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  ｏｆ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｉｓｔｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎによるＬＬＣを用いて）及びＷＢＡＭデータの指数のエビデンスの変更を評価した。安全性の基準は、治療期間における薬剤摂取に関連づけられる推定有害事象（ＡＥ）の特性、エビデンス及び出現の期間；中枢神経系（ＣＮＳ）の機能を特徴付ける指数についての被試験薬物の影響（移動物体に対する反応（ＲＭＯ））、単純な運動反応の時間（ＴＳＭＲ）；物理的因子及び機能的因子のダイナミクス（心拍数（ＨＲ）、収縮期血圧及び拡張期血圧（ＳＢＰ、ＤＢＰ）、Ｓｔａｎｇｅ試験；運動耐容性（Ｈａｒｖａｒｄステップ検査の指数）であった。ＵＬＤの抗Ｓ−１００とＵＬＤの抗ｅＮＯＳの組み合わせを単回投与した後、及び７日間の投与後に安全性を評価した。
【０１２５】
全ての対象は、試験に参加する前１ヶ月の間にはいかなる薬物も摂取しなかった。スクリーニング後に対象を無作為に４群に分けた（第１群−ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ、第２群−ＵＬＤの抗Ｓ１００、第３群−ＵＬＤの抗ｅＮＯＳ、及び第４群−プラセボ）。
【０１２６】
試験の１日目に（来診１）対象の最初の機能的状態及び精神心理学的状態を登録し、次いで、対象にＵＬＤの抗体のそれぞれの錠剤を５錠与え、その後、ＣＣＥＡＣ試験を施行した。試験の持続時間を登録した；複合診断検査を利用して自律神経前庭障害、及び動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）に関連するＡＥを検出した。次の２〜６日間は、対象に、処方された薬物の錠剤１錠を１日３回与えた。７日目に（来診２）、対象に１日目（来診１）と同じ投与量を与えた。ＣＣＥＡＣ試験の前後に複合診断試験を行った。試験は、試験クルーが１人の対象のみを扱うように組み立てた。試験は並行的であり、１日の前半に行い、規則の通り、１日に４人、薬物又はプラセボにつき１人が参加した。次の３週間は休薬期間であり、その最後に、各群の対象に新しい薬物又はプラセボを処方した；試験のサイクルを繰り返した（来診１、薬物を一定期間摂取；来診２）。したがって、試験期間中、各対象は、試験の４サイクルに参加した。すなわち、各群に参加した対象はそれぞれ、各サイクル間に３週間の休薬期間を伴った。これにより、研究者が、試験される人の個人的特性の治療効果への影響を一様にすることが可能になった。試験プロトコールに従って被試験薬物の摂取の完全な過程を完了した試験対象全員のデータについて薬物の効率の分析を行った（ｎ＝１５）。
【０１２７】
被試験薬物の１日摂取のバックグラウンドに対する動力学的影響（ＣＣＥＡＣ）後の動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）の症状（回転性めまい、悪心、不活動性、皮膚蒼白、発汗など）のエビデンスファクターにより、医師−研究者によりＨａｌｌｅ尺度について評価された自律神経機能不全の症状のエビデンスが全群で有意に異ならなかったことに関する限りは、試験対象全員において、動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）のほぼ同じ状態が増したことが証明された（表２、来診１）。しかし、同様の動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）の症状を引き起こす動力学的影響は４つの群で異なり、試験対象が服用した薬物に左右された（表３、来診１）。ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ調製物を１日摂取することにより、ＣＣＥＡＣ試験の耐容時間の有意な延長（１０４．１０±１３．１４秒間対６８．５０±６．５７秒間−ＵＬＤの抗Ｓ１００群；７５．００±６．７９秒間−ＵＬＤの抗ｅＮＯＳ群及び６１．３０±３．１５秒間−プラセボ群）だけでなく、眼振の最短時間（それぞれ９．９０±１．２０秒間対１３．５０±１．５１；１６．１０±１．６８及び１３．３０±１．１２秒間）及び最大の急速な回復（それぞれ９６．９０±１３．５４秒間対１９４．２０±１８．４５；２０２．５０±２１．７２及び２４１．７０±３８．４１秒間）としても顕在化した、抗動揺病効果が最もはっきり導かれた。
【０１２８】
一定期間薬物を受けさせた後、来診２の際におよそ同様の指数を登録した。同様の動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）の症状（表２、来診２）を実現するために、ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ組成物を７日間受けていた対象に最長時間の動力学的衝撃を適用した（表３、来診２）。ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ組成物の最も著しい抗動揺病効果は、眼振の時間が有意に短いこと（９，５０±１，３８秒間、ｐ＜０．０１）及び回復時間の持続時間（１１７．９０±１５．６５秒間；ｐ＜０．０１）として表れた。ＵＬＤの抗Ｓ１００単一成分調製物は、ＣＣＥＡＣ試験の耐容性、眼振の回復時間及び回復の指数がプラセボ群で証明された指数より優れていたので（表３、来診１及び２）、抗動揺病効果を有したが、ＵＬＤの抗Ｓ１００の有効性は、ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ組成物よりも劣った。単一成分調製物であるＵＬＤの抗ｅＮＯＳでは、ＣＣＥＡＣ試験の結果及びその後の回復時間にプラセボ群との有意差がなかったので（表３、来診１及び２）、抗動揺病効果が示されなかった。薬物の１日摂取におけるＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ群とＵＬＤの抗Ｓ１００群のＣＣＥＡＣ試験の指数の比較分析により、ＵＬＤの抗ｅＮＯＳを加えることにより、動力学的効果の耐容性が５２％まで増大し、眼振時間が２７％減少し、それが、浮動性めまいの持続時間が４９％低下したことを含めた、動力学的効果の終了からの回復時間が５０％まで低下する一因となることが示された。しかし、ＵＬＤの抗ｅＮＯＳの成分の最大の寄与により、薬物を一定期間摂取することにおいて、組み合わせ調製物（ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ組成物）の有効性が導入され、それは、ＵＬＤの抗Ｓ１００群において得られた結果が動力学的効果の耐容性及び眼振持続時間の因子（各パラメータ）で３０％超過したことに表れた。更に、ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ組成物を摂取した場合に、ＵＬＤの抗Ｓ１００単一成分調製物と比較して、ＣＣＥＡＣ試験の耐容性の指数及び眼振の持続時間が来診２において来診１のデータと比較して効果が増大したことは、これらの指数が３０％及び４％変化した（ＵＬＤの抗Ｓ１００群では２１％及び０％であるのに対して）ことによって確認された程度の上昇に表れた。薬物の抗動揺病性の有効性の評価において、薬物の、自律神経系（ａｕｔｏｎｏｍｉｃ  ｎｅｒｖｏｕｓ  ｓｙｓｔｅｍ）（ＡＮＳ）の安定性、具体的には、その交感神経系と副交感神経系の平衡のシフトに対する、可能性のある影響に特別な注意を払った。この目的で、各来診時に静止状態において、及び機能的検査（呼吸検査及び起立検査）を実施する際にＨＲＶパラメータを解析した。
【０１２９】
【表２】
2013536174.tif 000025
表２．ＣＣＥＡＣ試験を実施した後の、適用された調製物に応じたＨａｌｌｅ尺度の指数
【０１３０】
【表３】
2013536174.tif 000026
注：１群間の有意差を決定するためにクラスカル・ワリス検定を使用した。
試験により、群間の比較で互いに対してｐ＜０．０５の有意差が示された場合、マンホイットニー検定を使用した。
＊プラセボと比較した有意差、ｐ＜０，０５；
＊＊プラセボと比較した有意差、ｐ＜０，０１；
＊＊＊プラセボと比較した有意差、ｐ＜０，００１。
×ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳと比較した有意差、ｐ＜０，０５；
××ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳと比較した有意差、ｐ＜０，０１；
×××ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳと比較した有意差、ｐ＜０，００１
表３．適用された調製物に応じたＣＣＥＡＣ試験の指数のダイナミクス
【０１３１】
ＣＣＥＡＣ試験の前後の静止状態（座位）におけるＨＲＶの分析（表４）により、試験薬物を受けている対象では、ＳＤＮＮの速度が増す傾向があったことが検出され、これは、心調律に対する副交感神経の作用により心拍変動が増すことを示している。全治療群において、動力学的効果に反応して、自立神経調節の副交感神経成分の活動を特徴付けるＲＭＳ−ＳＤの値が増加した。ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ組成物を受けている群及びＵＬＤの抗Ｓ１００を受けている群では、ＨＦの増加が示され、これは同様に、自律神経の平衡が副交感神経性の連係にシフトしたことを示している。したがって、全群においてＣＣＥＡＣ試験を行った後、心拍数に対する副交感神経の作用が増加した。
【０１３２】
【表４】
2013536174.tif 000027
注：＊プラセボと比較した有意差、ｐ≦０，０５）；
＃ベースラインのパラメータと比較した有意差、ｐ≦０，０５
表４．動力学的作用の前後の、試験参加者の静止状態におけるＨＲＶパラメータ
【０１３３】
移行状態におけるＨＲＶの分析により、ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ組成物を１日摂取することにより、反応時間（１３．９±１．１４；ｐ≦０．０５）及び安定化時間（２４．２±１．２８；ｐ≦０．０５）がＵＬＤの抗Ｓ１００及びプラセボと比較して増加することが示された（表５）。同因子は、プラセボ群の値を超え、また、動力学的効果の後、それにより組み合わせ薬物のＡＮＳの反応性に対する正の効果が実証された（体位の変化に対する耐容性の増加）。呼吸検査における最大心拍数と最小心拍数との間の差異が最小であったことにより（表６）、ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ組成物を１日受けた後にＡＮＳの２つの系の平衡がよりよくなったことが確認された（１分当たり拍動２５．１±２．６６回、ｐ≦０．０５）。１週間の治療過程の終わりまでに、ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ組成物を受けている群において、ＣＣＥＡＣ試験後のＡＮＳの平衡に対する安定化効果（起立検査及び呼吸検査を用いた）も認められた（表５及び６）。
【０１３４】
【表５】
2013536174.tif 000028
注：＊プラセボと比較した有意差、ｐ≦０．０５）；
×ＵＬＤの抗Ｓ１００と比較した有意差、ｐ≦０．０５
表５．動力学的作用の前後の起立検査における、試験の参加者のＨＲＶパラメータ
【０１３５】
【表６】
2013536174.tif 000029
注：＊プラセボと比較した有意差、ｐ≦０，０５
表６．動力学的作用の前後の呼吸検査における、試験の参加者のＨＲＶパラメータ
【０１３６】
動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）のシミュレーション（ＣＣＥＡＣ試験）後、療法の開始時及び最後に試験の参加者が行った、対象の機能的状態（健康、活動性、気分）の自己評価の結果により、全ての群の対象に、各パラメータについて「平均」点が与えられたことが示された（表７）。したがって、薬物摂取のバックグラウンドに対するＣＣＥＡＣ耐容性は申し分なかった。ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ組成物群において、摂取の７日目の終わりまでに、プラセボ群のデータと比較して最も高い成長速度（１０％超）が観察された。
【０１３７】
【表７】
2013536174.tif 000030
表７．試験参加者の機能的状態（健康−活動性−気分）の自己評価のパラメータのダイナミクス
【０１３８】
安全性分析には、この試験に参加した対象全員からのデータを含めた。観察期間中、被試験調製物の良好な耐容性が認められた。薬物を投与したことに関連づけられる有害事象は同定されなかった。試験群の対象全員が試験プロトコールによって確立された期間の治療を完了した；初期の脱落者はいなかった。
【０１３９】
心拍数の指標、収縮期血圧及び拡張期血圧を含めた理学的検査の結果、並びに、Ｈａｒｖａｒｄステップ検査データに従って、対象は、試験期間中にいかなる異常も有することは記録されなかった（表８）。同定された変化は全て、正常範囲を超えなかった。この場合、主観的に対象全員が申し分のない健康を報告した。
【０１４０】
【表８】
2013536174.tif 000031
表８．動力学的作用の前後の、試験参加者の物理的なパラメータのダイナミクス及び運動耐容性
【０１４１】
血行動態のパラメータに加えて、被試験薬物の安全性及びその中枢神経の機能に対する可能性のある負の影響を評価するために、対象において以下の生理的パラメータを検査した：（ＲＭＯ（移動物体に対する反応）、ＳＭＲＴ（単純な運動反応時間）、ＲＡ（注意の範囲）、注意持続時間（АＳ）、及び注意安定度（ＡＳＦ））。更に、低酸素症に対する耐容性を評価するためにＳｔａｎｇｅ試験を行った。
【０１４２】
得られた結果によれば（表９）、薬物の１日摂取又は一定期間摂取のいずれも推定パラメータに対する有意な効果はなかった。感覚と運動の協調の指数（ＳＭＲＴ、ＲＭＯ）は、どちらの来診時にも、ＣＣＥＡＣ試験の前後でプラセボ群の結果と異ならなかった。注意の大きさ及び安定性のような複雑な機能の検査データにより、被試験薬物により、ＣＣＥＡＣ試験の前後どちらにおいても、集中力の程度及び注意の移動が変化せず、プラセボ群と異ならなかったことが示された。
【０１４３】
息こらえを伴う標準の運動試験の分析により、対象の低酸素症への耐容性が増大する傾向が示された（表９）。息をこらえた場合のＳｔａｎｇｅ試験の持続時間は、全ての試験薬物を服用した後に増大した。しかし、ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ組み合わせ組成物を摂取することによってのみ、動力学的効果の後の息こらえの時間が有意に長かった（ベースラインにおいて６８．１±１８．８秒間及びＣＣＥＡＣ試験後９１．７±２７．４秒間；ｐ＜０．０５）。Ｇｅｎｃｈ試験（Ｓｔａｎｇｅ試験）を用いた場合にも低酸素症への耐容性の増大が示された（呼気時息こらえ、Ｐ＞０．０５）。
【０１４４】
【表９】
2013536174.tif 000032
表９．動力学的作用の前後の、試験参加者の精神心理学的状態のパラメータのダイナミクス
【０１４５】
したがって、実験的な動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）を用いた試験により、ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ組み合わせ組成物及びＵＬＤ−Ｓ１００単一成分調製物の有効性が実証された。被試験薬物により、動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）の臨床的影響及び生理的影響をシミュレーションした後の、対象の動力学的効果に対する安定性が増大し、それが動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）のより軽度の臨床過程及び処置を休止した後の対象の早期回復の一因となっている。更に、組み合わせ組成物（ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ組成物）の抗動揺病効果により、個々の成分の効率が上昇することが示された。実験的な動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）における体の前庭自律神経反応及び知覚反応の制御におけるＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ組み合わせ組成物の有効性は、一定期間摂取で増大する。ＵＬＤの抗ｅＮＯＳは、単一調製物の形態では動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）に対する保護的な効果を有さないが、ＵＬＤの抗Ｓ１００と組み合わせると、それ自体は薬物の１日摂取と同様に短い一定期間摂取で顕在化する最後の１つの抗動揺病効果を有意に高めることに留意するべきである。薬物の抗動揺病性の重要な成分であるＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ組成物で、ＣＮＳの副交感神経部及び交感神経系部の反応性に影響を及ぼすためのものである一過性の過程を調整する最高能力並びに動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｓｉｃｋｎｅｓｓ）の状態におけるＡＮＳの適応力（体位の急な変化に対する耐容性を増大させること）が観察された。ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ組成物及びＵＬＤの抗Ｓ１００単一成分調製物は、オペレーター機能を果たすことを含め、抗動揺病調製物として使用する場合、安全であり、物理的パラメータ及び精神心理学的パラメータに不利な影響を及ぼさない。
【０１４６】
ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ組み合わせ組成物及びＵＬＤの抗Ｓ１００は、低中程度の安定性を有する人に対する予防法及び動揺病（ｍｏｔｉｏｎ  ｄｉｓｅａｓｅ）（船酔い、空酔い及び乗り物酔いを含めた）における動揺病（ｋｉｎｅｓｉａ）の軽減のために推奨することができる。組み合わせ組成物は高い安全性を有し、専門的活動の質に対する有害作用はない。
【０１４７】
実施例３
重さ３００ｍｇの錠剤を使用して、精神心理学的起源の自律神経機能不全症候群（ＶＤＳ）及びホルモンの不均衡が起源である自律神経機能不全症候群（ＶＤＳ）の対象の、ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ及びＵＬＤの抗Ｓ１００組み合わせ医薬組成物を用いた治療の有効性を評価した。錠剤に、出発原液（濃度２．５ｍｇ／ｍＬ）を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に限外希釈することによって得られ、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の混合物に相当する、超低用量（ＵＬＤ）の、脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型のポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（抗Ｓ１００）及び内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型のポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（抗ｅＮＯＳ）（ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ）の水−アルコール溶液を含有する医薬組成物を染み込ませた（錠剤１錠当たり６ｍｇ）。
【０１４８】
参照群には、出発原液（濃度  ２．５ｍｇ／ｍＬ）を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に限外希釈することによって得られ、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００の混合物に相当する、超低用量の、抗原に対して精製した脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型ポリクローナルウサギ抗体（ＵＬＤの抗Ｓ１００）の水−アルコール溶液を染み込ませた重さ３００ｍｇの錠剤（錠剤１錠当たり３ｍｇ）を受けている対象を含めた。
【０１４９】
研究デザインは、精神心理学的起源の自律神経機能不全症候群（ＶＤＳ）及びホルモンの不均衡が起源である自律神経機能不全症候群（ＶＤＳ）の対象を治療する場合の、ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳを含有する薬物及び単独療法としてのＵＬＤの抗Ｓ１００の有効性及び安全性に関する単施設非盲検無作為化比較臨床試験であった。
【０１５０】
試験には、精神心理学的起源のＶＤＳの対象及びホルモンの不均衡が起源であるＶＤＳの対象１２人、２３〜６１歳を登録した。対象の平均年齢は４９．２５±１２．６３歳であった。
【０１５１】
組み入れ基準及び除外基準を用いて対象のコンプライアンスを確認した後、対象を無作為に試験群のうちの１つに入れた：第１群−ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ群、対象６人（精神心理学的起源のＶＳＤの対象３人及びホルモンの不均衡が起源であるＶＤＳの対象３人）を含んだ。第１群の平均年齢は４１．３３±１２．５歳であった（男性１７．７％及び女性８２．３％）；第２群−ＵＬＤの抗Ｓ１００群、対象６人（精神心理学的ＶＳＤの対象３人及びホルモンの不均衡が起源であるＶＤＳの対象３人）を含んだ。第２群の対象の平均年齢は５７．１６±４．３５年であった（男性１７．７％及び女性８２．３％）。
【０１５２】
この試験の間に試験場所への来診を４回行った。治療段階は来診１から来診３まで続けた。来診３（５６日目±５）が試験の第１のエンドポイントであり、その後に経過観察段階を開始した。経過観察段階は来診４（８４日目±５）まで続けた。
【０１５３】
安全性分析には、この試験に登録された対象全員のデータ（ｎ＝１２）を含めた。全観察期間の間、対象で良好な薬物耐容性が実証された。有害事象は報告されなかった。１人の対象が来診２に出席せず、分析に含めなかった。他の試験対象は全員、試験プロトコールによって確立された期間内に治療を完了した。この期間が登録される前にこの試験から脱退した対象はいなかった。
【０１５４】
ＶＤＳの主要な症状並びに不安及びうつ病性障害（Ｂｅｃｋうつ病質問表）に対するＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳの効果の評価により、総ＳＦ−３６質問表スコアの統計的に有意な増加（下位尺度「身体的健康」が３８．０４±２．４４から４７．８４±１．２７へ、ｐ＝０．００５、下位尺度「精神的健康」−５７．８８±３．９４から７２．７５±１．６４へ、ｐ＜０．０１）並びにＢｅｃｋうつ病質問表の総スコアの統計的に有意な減少（１１．０±１．４から５．５±１．３７へ、ｐ＜０．０２）として実証された、対象の生活の質の改善が明らかになった。
【０１５５】
主要なＶＤＳの症状並びに不安及びうつ病性障害（Ｂｅｃｋうつ病質問表）に対するＵＬＤの抗Ｓ１００の効果の評価により、総ＳＦ−３６質問表スコアの統計的に有意な増加（下位尺度「身体的健康」、５６．１０７±１．３６から７０．７±１．３９へ、ｐ＜０．００１）として実証された、生活の質の改善が明らかになった。この群では「身体的健康」下位尺度の総スコアが増加する傾向は報告されなかった。
【０１５６】
ＵＬＤの抗Ｓ１００群における不安及びうつ病性障害の変化を分析することにより、Ｂｅｃｋうつ病質問表の総スコアの統計的に有意な減少（１０．５±１．０４から５．３３±１．５へ、ｐ＜０．０２）が明らかになった（表１０）。
【０１５７】
【表１０】
2013536174.tif 000033
＊−ベースラインに対するｐ＝０．００５
＊＊−ベースラインに対するｐ＜０．０１
＊＊＊−ベースラインに対するｐ＜０．０２
＊＊＊＊−ベースラインに対するｐ＜０．００１
【０１５８】
治療後のこれらのパラメータに有意な群間の差異は決定されなかった。試験の計画及び対象の登録の間、群を以下のサブグループに分けた：
１．ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳを単独療法として受ける精神心理学的起源の（慢性のストレス）自律神経機能不全症候群の対象；
２．ＵＬＤの抗Ｓ１００を単独療法として受ける精神心理学的起源の（慢性のストレス）自律神経機能不全症候群の対象；
３．ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳを単独療法として受けるホルモンの不均衡（閉経期の）が起源である自律神経機能不全症候群の対象；
４．ＵＬＤの抗Ｓ１００を単独療法として受けるホルモンの不均衡（閉経期の）が起源である自律神経機能不全症候群の対象。
【０１５９】
データ解析におけるサブグループの傾向は、概括的な群の分析に対応したが、おそらく観察数が少ないことに関連して有意性が低かった（表１１、１２）。
【０１６０】
【表１１】
2013536174.tif 000034
＊−ベースラインに対するｐ＜０．０５
＊＊−ベースラインに対するｐ＜０．００５
＊＊＊−ベースラインに対するｐ＝０．０５３
＊＊＊＊−ベースラインに対するｐ＝０．０１
表１１．ホルモンの不均衡（閉経期の）が起源であるＶＤＳ
【０１６１】
【表１２】
2013536174.tif 000035
＊−ベースラインに対するｐ＜０．０２
＊＊−ベースラインに対するｐ＜０．０５
＊＊＊−ベースラインに対するｐ＝０．００２
＊＊＊＊−ベースラインに対するｐ＝０．０８２
表１２．ホルモンの不均衡（慢性のストレス）が起源であるＶＤＳ
【０１６２】
動脈圧、統合的な自律神経パラメータ、及び脈拍測定の変動値の変化の群間及び群内の分析では、自律神経平衡指数（ＶＢＩ）が減少したことを除いて、統計的に有意な傾向は示されなかった。ほぼ確実に、これは、観察数が不十分であることに関連づけられる。
【０１６３】
ＶＢＩは、Ｍｏ振幅（モード範囲に対応する心臓間欠期（Ｃａｒｄｉｏｉｎｔｅｒｖａｌ）の数）及び変動範囲（最大Ｒ−Ｒ値と最小Ｒ−Ｒ値の差異）比として算出される統合的なパラメータである。このパラメータの低下は、自律神経の平衡が交感神経緊張から正常緊張及び迷走神経緊張に置き換えられたこと、すなわち、自律神経系（ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ  ｎｅｒｖｏｕｓ  ｓｙｓｔｅｍ）（ＶＮＳ）の副交感神経のセグメントの効果が増強されたことのエビデンスとなる。
【０１６４】
ホルモンの不均衡によるＶＤＳ群では、ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳサブグループにおいて、ＶＢＩが低下する統計的に有意な傾向が認められた。ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳとＵＬＤの抗Ｓ１００サブグループの間に統計的に有意な（Ｐ＜０．０５）差異が認められた（表１３）。
【０１６５】
【表１３】
2013536174.tif 000036
＊−ベースラインに対するｐ＜０．０５
＃−ＵＬＤの抗Ｓ１００に対するｐ＜０．０５
表１３．ホルモンの不均衡によるＶＤＳ
【０１６６】
したがって、ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ組み合わせ医薬組成物の臨床試験により、精神心理学的起源の自律神経機能不全症候群（ＶＤＳ）の対象及びホルモンの不均衡が起源である自律神経機能不全症候群（ＶＤＳ）の対象の生活の質に対する正の効果、対象の不安及びうつ病性障害に対する正の効果が実証された。本発明の組み合わせ医薬組成物の、自律神経系（ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ  ｎｅｒｖｏｕｓ  ｓｙｓｔｅｍ）に対する正の効果が示された。更に、本発明の組み合わせ医薬組成物の高い耐容性が認められた。有害事象は報告されなかった。
【０１６７】
実施例４
アルツハイマー病（ＡＤ）は、認知機能の低下、記憶力低下、意識の混乱、及び感情の変化を特徴とする神経変性疾患である。この病態の主要な原因は、今日では、脳組織におけるベータ−アミロイドプラークの形成及び神経原線維変化を導くベータアミロイドの蓄積であると考えられている；ＡＤは、コリン作動系の欠乏も伴う。これは、コリン作動系のアンタゴニストであるスコポラミンを利用する、最も一般的な動物におけるＡＤのモデリング法の基礎である。スコポラミンを実験動物（通常、ラット又はマウス）に注射することにより、学習する能力が妨害され、記憶力が低下する。
【０１６８】
ラット及びマウスの認知機能を、モリス水迷路を含めた種々の方法を使用して評価した。この試験の核心は、濁った水が入った容器内に異なるポイントから放した動物に、隠れている固定されたプラットフォームを探させることである。この方法の利点は、研究者が、記憶力の強度を評価するために（このためにはプラットフォームを取り除いた時に試験を行う）、動物の訓練の過程（動物がどこで水中に入れられたかを問わず、プラットフォームの空間的な配置に関する観念が形成されること）をモニターすることが可能になることである。
【０１６９】
スコポラミンにより記憶喪失させたラットにおける、貯蔵原液（濃度２．５ｍｇ／ｍＬ）を１００１２倍、１００３０倍、１００２００倍に超希釈することによって得られ、１００倍単位ホメオパシー希釈物Ｃ１２、Ｃ３０、Ｃ２００に相当する、超低用量（ＵＬＤ）の、抗原に対して精製した脳特異的タンパク質Ｓ−１００に対する活性化増強型のポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（抗Ｓ１００）及び内皮ＮＯ合成酵素に対する活性化増強型のポリクローナルアフィニティー精製ウサギ抗体（抗ｅＮＯＳ）を含有する本発明の組み合わせ医薬組成物（ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ）の有効性を試験する。
【０１７０】
スコポラミンにより記憶喪失させたラット（アルツハイマー病のモデル）におけるＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ薬の有効性の試験では、Ｒｊ：Ｗｉｓｔａｒ（Ｈａｎ）系の雄のラット４８匹（体重１８０〜２８０ｇ）を用いた。４日間、ラットに、通常の生理食塩水を皮下注射したか（ｎ＝１２、インタクト）、又はスコポラミンを、０．５ｍｇ／ｋｇの用量で皮下注射した（ｎ＝３６）（スコポラミン誘導記憶喪失）。スコポラミン誘導記憶喪失のラットを３群に分け、蒸留水（７．５ｍＬ／ｋｇ、ｎ＝１２、対照第１群）、又はＵＬＤの抗Ｓ１００（７．５ｍＬ／ｋｇ、ｎ＝１２、第２群）又はＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ（７．５ｍＬ／ｋｇ、ｎ＝１２、第３群）を、胃内に９日間にわたって（スコポラミンを注射する前４日間、スコポラミンのバックグラウンドに対して４日間、及び最後にスコポラミンを注射した後１日）投与した。
【０１７１】
モリス水迷路における訓練セッションを、スコポラミンを注射してから４日以内に、被試験薬物を投与した後６０分間及びスコポラミンを投与した後３０分間にわたって行った（６０秒間の間隔で４回の逐次的な試験）。モリス迷路は、水（２６〜２８℃）を３０ｃｍ満たした丸い貯蔵器（直径１５０ｃｍ、高さ４５ｃｍ）である。容器の縁から１８ｃｍのところに隠れたプラットフォーム（直径１５ｃｍ）が１．５ｃｍ下の水位に埋もれている。無毒性の色素（例えば、粉乳）を加えることによって濁らせた水により、プラットフォームが見えなくなる。それぞれの試験について、動物を、迷路内の、隠れたプラットフォームからの距離が等しい最初のポイントのうちの１つに置き、動物にプラットフォームを見つけさせる。動物が１２０秒間以内にプラットフォームを見つけられなかった場合は、動物をプラットフォーム上に置いて６０秒間放置してから試験を再開した。順不同の４回の試験中、動物は、各開始ポイントから２回迷路内を歩き始めた。試験をビデオテープに記録し、次いで、各試験におけるプラットフォームの検索を克服する距離及びプラットフォームを検索する潜伏期間について分析した。５日目に試験を実施した：プラットフォームを迷路から取り除き、ラットを６０秒間自由に浮遊させた。プラットフォームがあった場所で費やされた時間を記録した。
【０１７２】
スコポラミンを投与することにより、動物の学習能力が有意に悪化した。対照群では、動物がプラットフォームを検索するために費やした時間及び動物がプラットフォームを検索するために泳いだ距離が有意に増加した（表１４、１５）。この試験は、対照群の動物の記憶力が悪化したことを示している：この群の動物が、プラットフォームが位置していた場所において費やした時間は、インタクトな動物がそこで費やした時間よりも短かった（表１６）。ＵＬＤの抗Ｓ１００を投与することによっては、試験されたパラメータは改善されなかった（表１４、１５、１６）。ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳを投与することにより、学習がいくらか改善し、その結果、訓練の４日以内にプラットフォーム検索時間の潜伏時間が短縮され（表１４）、踏破距離が短縮され（表１５）、プラットフォームが位置していた場所で費やされた時間が増えたことに反映される通り、記憶力が改善された（表１６）。
【０１７３】
【表１４】
2013536174.tif 000037
＊＊＊−インタクトとの差異は有意である、ｐ＜０．０５
表１４．プラットフォーム検索の潜伏期間（秒）
【０１７４】
【表１５】
2013536174.tif 000038
＊＊＊−インタクトとの差異は有意である、ｐ＜０．０５
表１５．プラットフォームの検索を克服する距離（ｃｍ）
【０１７５】
【表１６】
2013536174.tif 000039
＊＊＊−インタクトとの差異は有意である、ｐ＜０．０５
表１６．プラットフォームが位置していた場所で費やされた時間（秒）
【０１７６】
したがって、アルツハイマー病のモデルにおいて、ＵＬＤの抗Ｓ１００＋抗ｅＮＯＳ複合物の投与は、ＵＬＤの抗Ｓ１００の投与及びビヒクルの投与と比較するとより有効であった。
【配列表】
2013536174000001.app
【国際調査報告】
2013536174.tif 000040
2013536174.tif 000041
2013536174.tif 000042
2013536174.tif 000043