(57)【要約】有害生物を制御するための組成物および方法を記載する。本組成物は、（a）グルコシノレート分解産物の有効量を含む植物から入手可能な材料と、（b）糖とを含む。該新規組成物は、例えばその有効性、製造の容易さおよび適用の容易さに関して、公知の製剤と比べて向上した特性を示す。2013523604.tif 000007
2013523604.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（a）グルコシノレート分解産物の有効量を含む、植物から入手可能な材料と、（b）糖とを含む、有害生物を制御するための組成物。
【請求項２】
前記植物がカラシナである、請求項1記載の組成物。
【請求項３】
前記カラシナから入手可能な前記材料が加工された植物材料である、請求項2記載の組成物。
【請求項４】
前記カラシナから入手可能な前記材料がカラシナ種子である、請求項2記載の組成物。
【請求項５】
加工された前記カラシナ材料が種子ミールである、請求項3記載の組成物。
【請求項６】
担体をさらに含む、請求項1または5のいずれか一項記載の組成物。
【請求項７】
前記グルコシノレート分解産物が、ナイトライト、チオシアネートまたはイソチオシアネートである、請求項1または6のいずれか一項記載の組成物。
【請求項８】
前記グルコシノレート分解産物が、アリルイソチオシアネートであり、かつ少なくとも10 μg/モルの濃度で前記組成物中に存在する、請求項1から6のいずれか一項記載の組成物。
【請求項９】
前記カラシナが、ブラシカ・ナパス（Brassica napus）（ナタネ）、ブラシカ・ラパ（Brassica rapa）（ナタネ）、ブラシカ・ユンセア（Brassica juncaea）（インディアンマスタード（Indian mustard））、ブラシカ・カリタナ（Brassica carinata）（アビシニアンマスタード（Abyssinian mustard））、ブラシカ・ニグラ（Brassica nigra）（クロガラシ）、シナピス・アルバ（Sinapis alba）（シロガラシ）、シナピス・アルベンシス（Sinapis arvensis）（ワイルドマスタード(wild mustard））からなる植物の群より選択される、請求項2から8のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１０】
前記糖が二糖または単糖である、請求項1から9のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１１】
前記糖が、スクロース、フルクトース、グルコースまたはラクトースからなる糖の群から選択される、請求項1から9のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１２】
0.01 mmから0.25 mmまで；0.25 mmから0.75 mmまで;および2 mmから6mmまでの範囲の粒子サイズの群から選択される粒子サイズを有する、請求項5記載の組成物。
【請求項１３】
（a）グルコシノレート分解産物の有効量を含む、植物から入手可能な材料を供給する工程、および（b）カラシナから得られた該材料を糖と混合する工程を含む、駆除剤組成物を調製するための方法。
【請求項１４】
（a）グルコシノレート分解産物の有効量を含むカラシナから入手可能な材料を供給する工程、（b）ペレット化装置、破砕装置およびスクリーニング装置からなる装置の群より選択される装置を用いて該カラシナ材料を加工して、駆除組成物を調製する工程、ならびに（c）該加工された植物材料を糖と混合する工程を含む、駆除組成物を調製するための方法。
【請求項１５】
前記カラシナ材料がカラシナ種子ミールである、請求項13または14記載の方法。
【請求項１６】
（a）植物から入手可能でありかつグルコシノレート分解産物の有効量を含む材料と（b）糖とを含む組成物を、有害生物に適用する工程を含む、有害生物を制御するための方法。
【請求項１７】
（a）組成物を調製する工程であって、
該組成物が、
（i）植物から入手可能でありかつグルコシノレート分解産物の有効量を含む材料
を含み、かつ
（ii）カラシナ材料から得られた該材料を糖と混合すること
を伴う、
工程；ならびに
（b）該組成物を有害生物に適用する工程
を含む、請求項16記載の有害生物を制御するための方法。
【請求項１８】
前記植物がカラシナである、請求項16または17記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示の分野
本明細書に記載の開示は、グルコシノレートを含む植物材料、特にカラシナ材料を含む組成物、およびそれらを作製するための方法に関する。糖をさらに含むこれらの組成物は、有害生物の処理に有用である。
【背景技術】
【０００２】
本開示の背景
駆除剤は、作物、住宅および食品貯蔵の分野などの分野で有害生物の制御に用いられる。しかしながら、特に20世紀の後半および21世紀初頭には駆除剤の大規模使用は、環境影響、有害生物集団における駆除剤耐性の増加、ならびにヒトを含む非標的生物体への毒性に関して重大な懸念をもたらしている。例えば、DDTなどのポリ塩化炭化水素類は、環境中に長期間持続し、例えば魚および猛禽類に有害であるため、それらの使用は議論の的となっている。別の種類の駆除剤、臭化メチルは、ヒトの神経系および呼吸器系に有毒であるのに加えて、成層圏のオゾン層へのダメージの原因となり、その結果、多くの管轄区域の政府が臭化メチルの使用を厳しく制限している。他に広く用いられている効果的な駆除剤は、有機リン酸化合物類およびカルバメート類を含み、これらの化合物は環境中でより急速に分解するが、まだ毒性が高いと考えられている。
【０００３】
1つの代替法は、天然源から入手可能な駆除剤の使用であり、当技術分野ではバイオ駆除剤とも言われる。これらバイオ駆除剤は、昆虫および他の有害生物に対する天然の防御物をしばしば含む、植物などの供給源から調製される。例えばカラシナまたはナタネを含む、カラシナ科（あるいは「十字花科」（Cruciferae）または「アブラナ科」（Brassicaceae）としても当技術分野に公知である）内で遍在的に見いだされるグルコシノレート類は、多くの植物で駆除剤として作用する。カラシナ材料の駆除効果は、グルコシノレートそれ自体よりはむしろアリルチオシアネートおよびアリルイソチオシアネートを含むグルコシノレート分解産物に起因するものである。これらのグルコシノレート分解産物は、カラシナ材料に内因的に存在する酵素が関係する酵素反応に続いて形成される。
【０００４】
カラシナ材料に基づく駆除剤製品は、当技術分野に公知である。例えば、米国特許出願第2008/0182751号（特許文献1）は、昆虫を含む植物有害生物を制御するカラシナ材料の使用を開示し、米国特許第5,717,056号（特許文献2）は、土壌有害生物を制御するカラシナふすまの使用を教示する。植物有害生物を制御するカラシナミールの使用は、Brown, J. and Morra, M. J, 2005, Subcontract Report National Renewable Energy Laboratory NREL/SR-510-35254（非特許文献1）に開示されている。有害生物の処理の使用のためにカラシナから入手可能な精製産物および有機抽出物もまた、当技術分野に公知である。この点に関して、米国特許第7,087,553号（特許文献3）は、水中カラシナ油および水中リン溶液の共適用を含む、農業において望ましくない生物体を排除するための方法を開示する。米国特許第6,545,043号（特許文献4）は、カラシナから入手可能な精製グルコシノレート分解産物を含む組成物を用いて標的有害生物を抑制するための方法を教示する。カラシナミールに基づくグルコシノレート産物は、節足動物、ならびに雑草、菌類およびバクテリアに対して阻害効果を示すことが実証されている（Brown, J. and Morra, M. J, 2005, Subcontract Report National Renewable Energy Laboratory NREL/SR-510-35254（非特許文献1）参照）。
【０００５】
上記にも関わらず、駆除剤としてのカラシナ材料の広範な使用および許容性を制限する、カラシナ材料、具体的には、種子ミールなどのカラシナ種子に基づく材料の駆除剤としての使用に関連する重要な問題が存在する。第一に、カラシナ種子由来材料は、種子油の存在のため、水中に容易に溶解しない。結果として、カラシナミールの商業的に受け入れられる駆除剤および肥料製剤への調製は、例えば、適用時に表面上に望ましくない残留物を残す製剤をもたらす課題を呈する。第二に、カラシナミールに圧力をかけると、その粉末状の組成のために、圧力をかけたミールを商業的に適用可能な産物に製剤化することは難しい。粉末は軽く、そのため製剤化は困難であり、標的領域に適用するのが難しく、風で周囲に飛ばされてしまう。第三に、カラシナミールに圧力をかけ商業的に受け入れられる製品にすると、製品の粒子サイズを制御することは難しい。粒子サイズの制御は、駆除化合物を生成しかつ表面領域への適用性を改善する酵素反応の制御を可能にするため、望ましい。第四に、駆除化合物の形成を担うカラシナ種子酵素がそれらの基質、すなわちグルコシノレート類と接触することが重要である。カラシナ材料に基づく駆除剤の調製ではしばしば、カラシナ種子酵素は、それらの基質から部分的に隔離された状態となり、十分に反応していない産物を生じさせ、そのため有効性および効果が低い。第五に、酵素反応に必要な試薬は水だが、カラシナミールの親油性の性質は最適未満の反応を招き、生成物の有効性を減ずる。
【０００６】
要約すると、当技術分野に公知である有害生物を制御する能力を有するカラシナ材料に基づく製剤には重大な短所がまだ存在している。具体的には、カラシナ材料から調製された駆除剤を容易に製剤化しかつ容易に適用するのに有効なものとする必要がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】米国特許出願第2008/0182751号
【特許文献２】米国特許第5,717,056号
【特許文献３】米国特許第7,087,553号
【特許文献４】米国特許第6,545,043号
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Brown, J. and Morra, M. J, 2005, Subcontract Report National Renewable Energy Laboratory NREL/SR-510-35254
【発明の概要】
【０００９】
本開示の概要
本開示は、有害生物の処置に有用である植物材料を含む、グルコシノレートを含む新規製剤を提供する。本明細書において開示される製剤は、これまで公知であるグルコシノレート植物材料に基づく製剤より、その有効性、製造の容易さおよび適用の容易さを含む多くの面で優れている。
【００１０】
したがって、本開示は、（a）植物から入手可能でありかつグルコシノレート分解産物の有効量を含む材料と、（b）糖とを含む、有害生物を制御するための組成物を提供する。
【００１１】
本開示の好ましい態様において、植物から入手可能な材料は、カラシナから入手可能である。特に好ましい態様において、カラシナ材料は、カラシナ種子ミールである。
【００１２】
本開示はさらに、グルコシノレート分解産物の有効量を含む、植物から入手可能な材料を供給する工程、およびカラシナから入手した材料を糖と混合する工程を含む、駆除組成物を調製するための方法を提供する。
【００１３】
本開示はまた、（a）植物から入手可能でありかつグルコシノレート分解産物の有効量を含む材料と（b）糖とを含む組成物を、有害生物に適用する工程を含む、有害生物を制御するための方法も提供する。
【００１４】
本開示はさらに、
（a）組成物を調製する工程であって、
該組成物が、
（i）植物から入手可能でありかつグルコシノレート分解産物の有効量を含む材料
を含み、かつ
（ii）植物から入手した該材料を糖と混合すること
を伴う、
工程；ならびに
（b）該組成物を有害生物に適用する工程
を含む有害生物を制御するための方法を提供する。
【００１５】
本開示の他の特徴および利点は、以下の詳細な説明から明らかになる。しかしながら、本開示の趣旨内および範囲内での様々な変形および修正が、詳細な説明により当業者に明らかになることから、詳細な説明および特定の実施例は、本開示の好ましい態様を示す一方、例示としてのみ提供されることが理解されるべきである。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】様々な濃度のオリエンタルマスタード（Oriental mustard）ミールおよびオリエンタルミール＋糖から発生する蒸気への曝露後3日目のリゾクトニア・ソラニ（R. solani）菌糸体成長の阻害を、水対照のパーセンテージとして図示する。
【図２】異なる濃度のオリエンタルマスタードミール＋スクロースへの曝露下での経時的なリゾクトニア・ソラニ菌糸体の半径方向の成長の平均を図示する。
【図３】異なる濃度のオリエンタルマスタードミールから発生する蒸気への曝露下での経時的なリゾクトニア・ソラニ菌糸体の半径方向の成長の平均を図示する。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本開示の詳細な説明
前述のとおり、本開示は、有害生物の制御に使用するための、植物材料を含む新規組成物に関する。本発明者は、グルコシノレート類を含む植物材料は、糖と共に製剤化されると、優れた駆除特性を示す組成物を生じることを見いだした。具体的には、本明細書で提供される組成物は驚くべきことに、グルコシノレートの駆除活性産物への変換を担う酵素反応の制御を可能にし、よって広範囲の様々な有効性を伴う組成物の調製を可能にする。加えて、本開示の組成物を用いて達成されうる有効性は、当技術分野に公知である植物材料に基づく組成物の有効性を上回る。さらに、本明細書において提供される製剤は、様々な粒子サイズを有する組成物の調製を可能にする様式で調製され、よって粉末に基づく製剤以外の駆除製剤の調製を可能にする。本開示に従って調製される組成物はまた、通常の植物材料に基づく製剤より容易に分解し、駆除産物が適用される表面上に残される残留物の量の低減または除去をもたらす。最後に、本明細書において提供される組成物は、それらが、天然、有機かつ生分解性であるという点でさらに有益である。
【００１８】
したがって、本開示は、（a）植物から入手可能であるかまたは入手され、かつグルコシノレート分解産物の有効量を含む、材料と（b）糖とを含む、有害生物を制御するための組成物を提供する。
【００１９】
好ましい態様において、本開示に従って用いられる植物は、カラシナである。本明細書で用いられる「カラシナ」または「アブラナ科」という用語は、アブラナ属（Brassica）およびシロガラシ属（Sinapis）に属する任意の植物を含む、アブラナ科（Brassicaceae）に属する任意の植物を意味する。本開示にしたがって用いられうる代表的なカラシナの例は、ブラシカ・ナパス（Brassica napus）（ナタネ）、ブラシカ・ユンセア（Brassica juncaea）（インディアンマスタード（Indian mustard）、オリエンタルマスタード（Oriental mustard）またはブラウンマスタード（brown mustard））、ブラシカ・カリタナ（Brassica carinata）（アビシニアンマスタード（Abyssinian mustard）またはエチオピアンマスタード(Ethiopian mustard)）、ブラシカ・ニグラ（Brassica nigra）（クロガラシ）、ブラシカ・ラパ（Brassica rapa）（ナタネ）、シナピス・アルバ（Sinapis alba）（シロガラシ）、シナピス・アルベンシス（Sinapis arvensis）（ワイルドマスタード(wild mustard））、および、ブラシカ・ナパスのキャノーラ（Canola）品種を含む前記の任意の品種を含む。
【００２０】
「グルコシノレート分解産物」という用語は、グルコシノレートの加水分解にしたがって入手可能な産物を指す。グルコシノレートの一般構造は、
2013523604.tif 000003
である。
【００２１】
本開示にしたがって用いられる植物材料で見いだされうるグルコシノレート類の例は、エピプロゴイトリン（epiprogoitrin）、シニグリン（sinigrin）およびシナルビン（sinalbin）である。以下のグルコシノレート分解産物の3つの一般的なクラスが、グルコシノレート分解産物という用語に包含される。
2013523604.tif 000004
【００２２】
さらなるグルコシノレート分解産物は、1-シアノ-2-ヒドロキシ-3-ブテン（「CHB」）およびゴイトリン（goitrin）を含み、それらはグルコシノレート エピプロゴイトリンの分解に続いて得られる。さらなるグルコシノレート分解産物は、アリルチオシアネート（「ATC」）、アリルイソチオシアネート（「AITC」）およびシアン化アリル（「AC」）を含み、それらは全てグルコシノレート シニグリンの分解産物である。さらなるグルコシノレート分解産物は、ヒドロキシル ベンゾール類を含む。
【００２３】
植物材料
本開示によれば、グルコシノレートを含む任意の植物材料が用いられてもよく、植物の葉、茎、根または種子から入手可能な任意の加工された植物材料を含む。好ましくは、本明細書において用いられる植物材料は、処理されて、例えば加工された植物材料を産生する。例えば、植物材料は、圧砕または圧縮された植物材料を得るために、圧砕されるかまたは圧力をかけられてもよい。好ましくは、本明細書にしたがって用いられる、植物材料または加工された植物材料は、グルコシノレート類の加水分解を促進するために、水を用いて湿潤されホモジナイズされる。植物材料の前処理は、種子などの特定の植物材料にとって好ましい。本明細書にしたがって用いられうる前処理工程は、脱ぷ工程、破砕工程、粉砕工程、フレーキング工程、圧縮工程、押出工程、およびペレット成形工程などを含む。油分が豊富な植物材料が本明細書にしたがって用いられる場合は、植物材料から油分を取り除くことが好ましい。これは、溶媒抽出、液圧圧搾工程（hydraulic pressing）、エキスペラーによる圧搾工程（expeller pressing）、冷温圧搾工程（cold pressing）、および当業者に周知である他の油分除去工程などの方法を通じて達成されうる。グルコシノレート類の加水分解は、熱不安定性酵素植物酵素ミロシナーゼにより行われるため、全ての前処理工程は60℃より低い、より好ましくは50℃より低い、最も好ましくは35℃より低い温度で行われることが好ましい。
【００２４】
本開示の好ましい態様において、用いられる加工された植物材料はカラシナ種子ミールである。未加工のカラシナ種子を油およびミールに加工するための多くの工程が当技術分野に知られている。例示的な工程は、Morra, M. J, 2000-2002, Subcontract Report National Renewable Energy Laboratory NREL/SR-510-3628によって教示される工程である。これらの工程は典型には、汚く多くの場合湿った条件で、通常の輸送手段、例えば鉄道またはトラックによって畑からカラシナ種子を受け取る。次いで、カラシナ種子は、例えば、振動ふるいと接触させるかまたは精穀機、例えばDamas A/S (Denmark)によって製造される精穀機を用いる、初歩的な選別方法に供され、カラシナ種子は、石、棒、土、葉、雑草種子、ばらばらの殻（loose hull）などの非カラシナ種子材料から分離される。精穀後に、カラシナ種子は、種子の水分含量が5％から7％の間に低減されるように、例えばVertec Industries Limited (Canada)によって製造された穀物乾燥機を用いて、乾燥されることが好ましい。非カラシナ種子混入物を取り除き乾燥した後に、カラシナ種子は、保存されるか、他のカラシナ種子と混合されるか、またはカラシナ種子ミールを得るために加工される場合がある。工程のこの時点で、種子殻またはふすまとしても公知である種子外皮は、種子仁を得るために、種子を製粉もしくは破砕するまたは別の適切な研磨工程を用いることにより、種子から除去されうる。しかしながら、そのようなふすまの除去は、任意であり決定的に重要なものではない。プロセスの次の工程は、望ましいカラシナミールの含油量（「脂質」または「脂肪」としても公知である）に広く依存する。「脂肪分の高い」ミールが望ましい場合、仁は、油抽出をもたらさないプロセスに供される。反対に「脱脂」ミールが望ましい場合、仁は、油抽出をもたらすプロセスに供される。本開示の好ましい態様では、脱脂ミールが好ましい。したがって、カラシナ種子またはカラシナ仁（ここではふすまは除去されている）は好ましくは、カラシナ粉を得るために、例えばハンマーミルを用いて粉砕される。その後、油分は、例えば、ヘキサンなどを用いる化学的抽出、またはSkeppsta Maskin AB (Sweden)により製造されたTaby PressまたはMonforts Oekotec GmbH (Germany)により製造されたKometオイルエキスペラーなどの搾油器などのオイルエキスペラーまたは搾油器などを用いる機械的抽出により、粉から除去される。好ましくは、本開示にしたがって用いられるカラシナ種子ミールは、2％から50％の得られうる種子油を含み、より好ましくはおよそ10から15％、最も好ましくは15％の得られうる種子油を含む。本開示の好ましい態様において、プロセスのこの時点で得られるカラシナ種子ミールは、糖およびこの出願において言及される他の任意の成分と共に製剤化するための成分として使用する準備が整っている。プロセスのこの時点で1つまたは複数の異なる供給源に由来する種子ミールが混合されてもよく、例えば、シナピス・アルバミールは、ブラシカ・ユンセアミールと混合されてもよく、この方法では、ブレンドされたミールを得ることができ、このようなブレンドされたミールは異なる駆除特性を示し、例えば、シナピス・アルバミールとブラシカ・ユンセアミールのブレンドは、高速徐放剤が所望される場合に特に有用で��ることが、本発明者によって観察されている。
【００２５】
糖
本開示によれば、任意の単糖、二糖、三糖、オリゴ糖または多糖を含む任意の糖が用いられうる。本開示にしたがって用いられうる単糖は、任意のテトロース、ペントース、ヘキソースまたはヘプトースを含む。用いられうるテトロースは、エリトロースおよびトレオースを含む。用いられうるペントースは、アラビノース、リボース、リブロース、キシロース、キシルロースおよびリキソースを含む。本開示にしたがって用いられうるヘキソースは、アロース、アルトロース、フルクトース、ガラクトース、グルコース（デキストロース）、グルコースイドース、マンノース、ソルボース、タロース、およびタガトースを含む。用いられうるヘプトースは、セドヘプツロースを含む。本開示にしたがって用いられうる二糖は、スクロース、マルトール、トレハロース、ラクトースおよびメリビオースを含む。用いられうる三糖は、ラフィノースを含む。用いられうる多糖は、例えばグリコーゲン、デンプン、デキストランである。任意の上記の糖は、ほぼ純粋な形で用いられうる。さらに、糖の混合物が、本開示にしたがって用いられうる。本開示の好ましい態様において、用いられる糖は、二糖または単糖である。特に好ましい態様において、二糖、スクロースまたはラクトースが用いられ、または単糖、フルクトースおよびグルコースである。
【００２６】
駆除製剤の調製
本開示によれば、カラシナ材料または加工された植物材料は、外因的糖と混合される。植物材料または加工された植物材料と外因的糖との混合率はさまざまであってもよく、カラシナ材料および糖の混合率を変えることにより最終的な駆除剤製剤の粒子サイズが制御されうる。好ましくは、カラシナミールを用いる場合、カラシナミールは、0.1％w/wから10％w/wまでのさまざまな濃度で糖と混合される。好ましい態様において、糖は、0.5％から8%w/wのさまざまな濃度でカラシナミールと混合される。糖およびカラシナ材料は好ましくは、例えばリボンブレンダー（例えばMunson Machinery Co (USA)により製造されるリボンブレンダー）を用いる、均質な混合物が得られるような様式で、完全に混合される。カラシナ材料および糖が水の存在下で混合されることはさらに好ましい。用いられる水の量はさまざまでよいが、好ましくは8％w/vから4％w/vまでの範囲である。カラシナ材料または加工されたカラシナ材料と糖の混合は簡便には、周囲温度で行われうる。その後、種子ミール糖の混合物は好ましくは、CPM (USA)により製造されたCPMペレットミルなどの製粉装置、粉砕装置またはペレット化装置を用いてさらに処理され、好ましくは2 mmから6 mmの大きさを有するペレットを得る。その後、ペレットは、ペレットを砕く能力を有する装置により、例えばApollo (USA)などにより製造されたロールクランビヤー（roll crumbier）を用いて処理され、振動ふるいまたは回転ふるいでありうる、砕いたペレットをさまざま大きさの画分に選別することが可能なゲージを含む1つまたは複数のスクリーニング装置を用いて粒子サイズによって選別されうる。異なるゲージを有する複数のふるいを含む、例えばPeacock Industries (Canada)などにより製造された、回転スクリーンセパレータを用いて、さまざまな粒子サイズの範囲の産物を得ることが可能である。よって、本開示は、カラシナミールを含むカラシナ材料および糖を含む製剤の調製を可能にし、ここでは製剤の粒子サイズを容易に制御しかつ要望に応じて設定することができる。本開示にしたがって調製される製剤の好ましい粒子サイズは、0.01 mmから10 mmの範囲である。最終製剤化製品におけるグルコシノレート類の濃度はさまざまであっもよいが、典型的には95から225 μモル/グラムの範囲である。本開示にしたがって調製された製剤中に存在するグルコシノレート分解産物の濃度もまたさまざまであってもよい。典型的なAITCは、少なくとも10μモル/グラム、より好ましくは10から200μモル/グラム、最も好ましくは10から90μモル/グラムの濃度で最終製剤中に存在する。前記濃度範囲内で、本開示のグルコシノレート分解産物は、有害生物侵襲の発生率もしくは重症度の低減もしくは制限、または限られた期間もしくはより長期間活性をもたらすという点で効果的である。
【００２７】
本開示にしたがって調製される駆除製剤は好ましくは、担体をさらに含む。本明細書で用いられる「担体」という用語は、駆除剤を標的有害生物に送達し駆除剤に曝露する手段を指す。本開示にしたがって用いられうる担体は、カノーラ油および大豆油などの任意の種類の植物油を含む油、ポリマー、プラスチック、木材、ゲル、コロイド、スプレー剤、浸漬手段および乳剤などを含む。製剤で用いられる担体の選択および担体の量はさまざまであってもよく、具体的な駆除剤の使用および好ましい適用様式を含む複数の要因に依存する。最終的な駆除調製物は、スプレー剤、液体、粉塵、煙霧もしくは粉末または所望の任意の他の形態として製剤化されうる。
【００２８】
本開示による最終産物の製剤中に用いられうる他の成分は、カラシナふすまおよび乳化剤を含む。用いられうるカラシナふすまは、用いられる出発カラシナ材料と同じまたは異なる種のカラシナに由来してもよい。本開示にしたがって用いられる任意の追加の成分は、カラシナミールが用いられる本開示の態様において、好ましくは産物のペレット化の前に糖およびカラシナミールと共混合される。
【００２９】
本明細書において前記のとおり、本開示は、（a）グルコシノレート分解産物の有効量を含む、カラシナから入手可能な材料を供給する工程、および（b）カラシナ材料から得られた材料を糖と混合する工程を含む、駆除剤組成物を調製するための方法をさらに提供する。本開示の好ましい態様において、カラシナ種子ミールは、カラシナから得られた材料として用いられる。
【００３０】
駆除製剤の使用
本明細書において提供される組成物は、有害生物を制御するために用いられうる。したがって、本開示はまた、（a）植物から入手可能でありかつグルコシノレート分解産物の有効量を含む材料と（b）糖とを含む組成物を、有害生物に適用する工程を含む、有害生物を制御するための方法も提供する。
【００３１】
本開示は、
（a）組成物を調製する工程であって、
該組成物が、
（i）植物から入手可能でありかつグルコシノレート分解産物の有効量を含む材料
を含み、かつ
（ii）カラシナから入手した該材料を糖と混合すること
を伴う、
工程；ならびに
（b）該組成物を有害生物に適用する工程
を含む有害生物を制御するための方法をさらに提供する。
【００３２】
有害生物は、モネラ界に属する任意の原核有害生物含む任意の原核有害生物、ならびに原生生物界、菌界、植物界および動物界に属する任意の真核有害生物を含む、任意の有害生物でありうる。したがって、本開示の組成物が適用されうる有害生物は、マダニ（tick）、ダニ（mite）、ゾウムシ、アリ、カなどを含む、任意の昆虫、クモ類または甲殻類の有害生物を含む。本開示の組成物が適用されうるさらなる有害生物は、寄生虫および線形虫である。本明細書において上記のとおり、異なる粒子サイズを有する製剤が、本開示にしたがって調製されうる。0.01〜0.25 mmの粒子サイズは、液体懸濁液での適用および灌漑を介して適用される駆除剤に特に適している。0.25 mmから0.75 mmの範囲の粒子サイズは、表面領域への局所適用、例えば芝生への適用に特に優れている。2 mmから6 mmまでの粒子サイズは、土壌中への混和、ならびに例えばジャガイモおよびイチゴを含む作物の処理に特に適している。有害生物への送達経路は多様でありかつ所望の通りであることができ、例えば、駆除製品は、燻蒸剤としてまたは水中曝露もしくは直接的接触を介して送達されうる。有害生物への駆除剤の適用によって、有害生物侵襲の発生率もしくは重症度または活性が、少なくとも限定された期間またはより長期間、制限または低減され、したがって本明細書において開示される新規の方法および組成物は、有害生物を制御するための手段を提供する。
【００３３】
本開示は、例示にすぎず開示を限定しない、以下の実施例に参照することによりさらに説明される。
【実施例】
【００３４】
実施例1. カラシナ材料と糖とを含みかつ複数の粒子サイズを有する駆除製剤の調製
1メートルトンのカラシナ種子（ブラシカ・ユンセア カトラス（Cutlass））を、Vertec穀物乾燥機、モデルVT5000セットを用いて55℃を超えない温度で乾燥させ、6.5%の水分含量を有するおよそ980 kgの乾燥したカラシナ種子を産生した。続いて、乾燥したカラシナ種子をDamasスクリーンモデル640 anaを用いて洗浄し、およそ960 kgの種子を産生した。次いで、洗浄した種子を、Tabyタイプ90オイルエキスペラーを用いる脱油工程に供した。脱油工程は、55℃未満の温度を維持し行われ、30%の全有効含油量を含む種子ミールが供給され、およそ672 kgの種子ミールを産生した。脱油ミールに16 kgのスクロースおよび134 kgのブラシカ・ユンセアふすまが添加され、次いで、Munsonリボンブレンダー、モデル210を用いて製剤を混合し、およそ822 kgの混合物を産生した。混合物を、CPMペレットミル（CPM Masterシリーズ）を用いて50℃でペレット状にした。この工程の実行は、いかなる実質的な収率損失も生じさせなかった。その後、ペレット状産物を、3 mm〜3.5 mmでのその溝付きロール設定を有するApolloロールクランビヤー、モデル10を用いる砕く工程に供した。またもや、前記工程はいかなる実質的な収率損失も生じさせなかった。次いで、砕かれた材料を、10×10×24ゲージロードふるいおよび4×36×32仕上げふるいを含む回転ふるいユニット（Peacock Industries Inc.）用いてふるいに掛けた。これは、以下の3つの異なる画分を生じさせた：（1）0.01〜0.25 mmの粒子サイズを有する131 kgの画分；（2）0.25 mm〜0.75 mmの粒子サイズを有する543 kgの画分；および（3）2 mm〜6 mmの粒子サイズを有する148 kgの画分。各画分は、十分に製剤化された製剤であり、駆除剤として適用される準備が整っている。
【００３５】
実施例2. 糖の存在下および非存在下で製剤化されたカラシナ材料を含む駆除製剤の比較
2つのオリエンタルマスタードミールを含む駆除製剤を、一方の試料が1% w/wのスクロースを含みもう一方の試料がスクロースを含まないことを除き、上記実施例1に記載のとおりに調製した。試料を用いて、非常に広範囲の植物種を攻撃し、実生の立ち枯れ、ワイヤーステム（wire stem）ならびに他の胴枯れ病および腐敗病をもたらす種子または土壌媒介病原菌である、リゾクトニア・ソラニ（Rhizoctonia solani）J.G. Kuhnに対する駆除有効性を評価した。
【００３６】
リゾクトニア・ソラニ AG2ストックプレート培養を、細菌増殖を防止するために添加される0.05%ストレプトマイシンを加えたジャガイモデンプン寒天上で10日間増殖させた（ストレプトマイシンは、リゾクトニア・ソラニの増殖または生存能に影響を与えない）。オートクレーブから取り出した後にそれらを無菌状態に保つために、96個の開口500 mLメイソンジャーをアルミホイルで覆い、121℃で20分間オートクレーブし、次いで室温に冷却した。96個のテストプレート（PDA＋ストレプトマイシンを含むペトリ皿）を、ストックプレートの1つからおよそ0.5 cm直径の菌栓を切り出し、それをテストプレートの中心に配置することにより作製した。
【００３７】
両方のカラシナミール産物を、1つの複製物あたり1つのジャーで、50 mL水あたり8つの濃度：0 g（対照）、0.025 g、0.05 g、0.075、0.1 g、0.25 g、0.5 gおよび1.0 gで4回ずつアッセイした。適切な重さの各カラシナミール産物をジャーに加えた後、50 mLの滅菌蒸留水を各ジャーに注ぎ、直ぐにジャーを中心にリゾクトニア・ソラニの栓を含有するテストプレートの上下逆にした下半分で覆った。次いで、プレートとメイソンジャーの接合箇所を2層の実験用パラフィルムで巻き付け密封し、混入物および寒天の乾燥ならびにカラシナミールガスの漏れを防止した。ジャーを暗中室温（21℃）でインキュベートし、菌栓の縁からの半径方向の成長を、mm単位で1、2、3および5日に、リゾクトニア・ソラニ菌糸体が対照プレートの全体を覆う（40 mm半径）まで測定した。
【００３８】
CoStatバージョン6.400、2008、CoHort Software, Monterey California, USA(著作権) 1998-2008を用いて、データを統計的に（ANOVA）解析し、平均値をTukeyのHSDにおいてP=0.05で比較した。
【００３９】
図1に示すとおり、リゾクトニア・ソラニ菌糸体の成長は、1 g/50 mlの濃度でオリエンタルマスタードミール試料を用いた後に、およそ25%まで阻害される。スクロースを含むオリエンタルマスタード試料を用いると、0.3 g/50 mlの濃度でほぼ100%の阻害を達成した。
【００４０】
表1に示すとおり、曝露後3日で菌糸体成長の50％阻害を達成するためには、1.5076 g/50 mlの濃度のオリエンタルマスタードミール試料を必要とし、一方、スクロースを含むオリエンタルマスタードでは0.0481 g/50 mlだけを必要とする。よって、およそ30分の1のスクロースを含むオリエンタルマスタードが、50％阻害を達成するために必要とされる。表1はさらに、リゾクトニア・ソラニ菌糸体成長の90％阻害を達成するためには、それぞれ2.8057 g/50 mlおよび0.1841 g/50  mlのオリエンタルマスタードミール試料およびスクロースを含むオリエンタルマスタード試料を用いる必要があることを示す。よって、およそ15分の1のスクロースを含むオリエンタルマスタードが90％阻害を達成するために必要とされる。
【００４１】
表2は、オリエンタルマスタードおよびスクロースを含むオリエンタルマスタードに5日間曝露されたリゾクトニア・ソラニの半径方向の成長の平均を比較する。表2に見ることができるとおり、リゾクトニア・ソラニの半径方向の成長の平均は、少なくとも0.05 g/50 mlの濃度でスクロースを含むマスタードミールで処理された試料において実質的に低下しており、スクロースを含むカラシナ製剤の実質的な阻害効果を示す。スクロースなしのカラシナミール試料が用いられた場合、阻害効果は5日後に観察されなかった。
【００４２】
図2および3は、スクロースを含まないオリエンタルマスタードミールを含む製剤およびスクロースを有するオリエンタルマスタードミール製剤で処理したリゾクトニア・ソラニの半径方向の成長の平均を時間の関数として決定することにより、阻害効果を比較する。図2および図3に見ることができるとおり、実質的な阻害効果が、全時間経過にわたって少なくとも0.05 g/50 mlの濃度でカラシナミールおよびスクロースを含む試料を用いて時間の関数として観察された。これに対して、スクロースなしのオリエンタルマスタードを含む試料では時間経過の初期にわずかな阻害効果が観察された。しかしながら、効果は曝露の5日後にはもはや測定できなかった。
【００４３】
（表１）曝露の3日後に「インビトロ」でリゾクトニア・ソラニの菌糸体成長を水対照の50および90％まで阻害する、各活性化カラシナミール産物の濃度1、2
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1テスト産物1つにつき1濃度当たり4回の実験の平均値。
2IW＝50 mL水当たりのカラシナミールペレットの阻害重量（g）；IC＝阻害濃度（ppm）。
【００４４】
（表２）さまざまな濃度のオリエンタルマスタードミールおよびオリエンタルミール＋糖から発生する蒸気への曝露の5日後の「インビトロ」でのリゾクトニア・ソラニ菌糸体の半径方向の成長の平均1、2
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1産物1つにつき1濃度当たり4回の実験の平均値、RCBデザイン。
2同じ文字が続く両方のカラムにおける数字は、P=0.05のTukeyのHSDにおいて有意な差はない。
340 mmの半径は、プレートの端まで成長したこと（すなわち、培地プレート上で最大限の成長）を表す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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