(57)【要約】  本発明は新規の複素環誘導体、それらの製造法、それを含有する組成物およびその用途、特に、ＰＡＲＰ阻害剤としてのそれらの医薬用途に関する。【選択図】なし
2013544261.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物、およびそれらの水和物、異性体、溶媒和物、プロドラッグ、およびそれらの薬学的に許容される塩：
【化１】
2013544261.tif 000021
式中、Ａはアリールまたは置換アリール；ヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールであり、該置換基はハロゲン、シアノ、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、スルホンアミド、低級アルキルアルコキシ、および置換されていてもよい複素環基もしくは置換されていてもよいアリールで置換されたアルキルから成る群から選択され；
Ｂは、アリールまたは置換アリール；ヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールであり、該置換基はハロゲン、シアノ、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、スルホンアミド、低級アルキルアルコキシ、および置換されていてもよい複素環基もしくは置換されていてもよいアリールで置換されたアルキルから成る群から選択され；
Ｑは、環構成原子として少なくとも２つの窒素原子を含む置換されていてもよい複素環基であって、前記少なくとも２つの窒素原子は、それぞれ、独立してカルボニルの炭素原子で−ＣＯ−Ａ−Ｂ基および−ＣＯ−ＣＯ−Ｒ基に結合していて；モノ複素環基、架橋複素環基、ジ複素環基、およびスピロ複素環基から成る群から選ばれ；そして
Ｒは、アルキルまたは置換アルキル、アルケニルまたは置換アルケニル、アルキニルまたは置換アルキニル、シクロアルキルまたは置換シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルまたは置換ヘテロシクロアルキル、アリールまたは置換アリール、およびヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールから成る群から選ばれ、該置換基はハロゲン、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、低級アルキルアルコキシ、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸およびカルボン酸エステルから成る群から選択される。
【請求項２】
Ａが水素、ハロゲン、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロゲン、ハロアルキル、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、スルホンアミド、アミド、アミノカルボニル、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、アミノアルキル、ヒドロキシアルキル、ヘテロ環式アルキル、カルボン酸、およびカルボン酸エステルから成る群から選択される１以上の置換基を有していてもよいフェニルまたはピリジルであり；
Ｂが、
【化２】
2013544261.tif 000022
であって：
Ａｒはフェニルであり、Ｈｅｔはピリジルであり；
Ｒ２は、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸、カルボン酸エステル、およびハロゲンから成る群から選ばれ；
Ｑは、環構成原子として少なくとも２つの窒素原子を含む置換されていてもよい複素環基であって、前記少なくとも２つの窒素原子は、それぞれ、独立してカルボニルの炭素原子で−ＣＯ−Ａ−Ｂ基および−ＣＯ−ＣＯ−Ｒ基に結合していて；モノ複素環基、架橋複素環基、ジ複素環基、およびスピロ複素環基から成る群から選ばれ；そして
Ｒは、アルキルまたは置換アルキル、アルケニルまたは置換アルケニル、アルキニルまたは置換アルキニル、シクロアルキルまたは置換シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルまたは置換ヘテロシクロアルキル、アリールまたは置換アリール、およびヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールから成る群から選ばれ、該置換基はハロゲン、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、低級アルキルアルコキシ、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸およびカルボン酸エステルから成る群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
式（ＩＡ）で表される、請求項１に記載の化合物、およびそれらの水和物、異性体、溶媒和物、プロドラッグ、および薬学的に許容される塩：
【化３】
2013544261.tif 000023
式中、ＺはＣ−Ｒ１またはＮであり；
Ｑは、環構成原子として少なくとも２つの窒素原子を含む置換されていてもよい複素環であって、前記少なくとも２つの窒素原子は、それぞれ、独立してカルボニルの炭素原子で−ＣＯ−Ａ−Ｂ基および−ＣＯ−ＣＯ−Ｒ基に結合していて；モノ複素環基、架橋複素環基、ジ複素環基、およびスピロ複素環基から成る群から選ばれ；
Ｒは、アルキルまたは置換アルキル、アルケニルまたは置換アルケニル、アルキニルまたは置換アルキニル、シクロアルキルまたは置換シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルまたは置換ヘテロシクロアルキル、アリールまたは置換アリールおよびヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールから成る群から選ばれ、該置換基はハロゲン、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、低級アルキルアルコキシ、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸およびカルボン酸エステルから成る群から選択され；そして
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸、カルボン酸エステル、およびハロゲンから成る群から選択される。
【請求項４】
式（ＩＢ）で表される、請求項１に記載の化合物、およびそれらの水和物、異性体、溶媒和物、プロドラッグ、および薬学的に許容される塩：
【化４】
2013544261.tif 000024
式中、Ｒは、アルキルまたは置換アルキル、アルケニルまたは置換アルケニル、アルキニルまたは置換アルキニル、シクロアルキルまたは置換シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルまたは置換ヘテロシクロアルキル、アリールまたは置換アリール、およびヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールから成る群から選ばれ、該置換基はハロゲン、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、低級アルキルアルコキシ、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸およびカルボン酸エステルから成る群から選択され；そして
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸、カルボン酸エステル、およびハロゲンから成る群から選択され；そして
【化５】
2013544261.tif 000025
は、これらに限定されないが、
【化６】
2013544261.tif 000026
から選択される複素環基を表す。
【請求項５】
式（ＩＣ）または（ＩＤ）または（ＩＥ）で表される、請求項１に記載の化合物、およびそれらの水和物、異性体、溶媒和物、プロドラッグ、および薬学的に許容される塩：
【化７】
2013544261.tif 000027
式中、Ｒは、アルキルまたは置換アルキル、アルケニルまたは置換アルケニル、アルキニルまたは置換アルキニル、シクロアルキルまたは置換シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルまたは置換ヘテロシクロアルキル、アリールまたは置換アリール、およびヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールから成る群から選ばれ、該置換基はハロゲン、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、低級アルキルアルコキシ、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸およびカルボン酸エステルから成る群から選択され；そして
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸、カルボン酸エステル、およびハロゲンから成る群から選択される。
【請求項６】
式（ＩＦ）または（ＩＧ）または（ＩＨ）で表される、請求項１に記載の化合物、およびそれらの水和物、異性体、溶媒和物、プロドラッグ、および薬学的に許容される塩：
【化８】
2013544261.tif 000028
式中、Ｒは、メチル、トリフルオロメチル、
【化９】
2013544261.tif 000029
から成る群から選択される。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物および薬学的に許容される担体、アジュバントまたは溶媒を含有する医薬組成物。
【請求項８】
請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物の治療上の有効量を、治療を必要とする被験者に投与することを特徴とする、ＰＡＲＰの阻害により改善できる疾患の治療方法。
【請求項９】
ＰＡＲＰの阻害により改善できる疾患が、癌；血管疾患；炎症性疾患；移植拒絶反応；糖尿病；パーキンソン病；敗血症ショック；虚血性傷害；細胞毒性；出血性ショック；およびウイルス感染症から選択されるものである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物の治療上の有効量を患者に投与することを特徴とする、ＨＲ依存性ＤＮＡ  ＤＳＢ修復過程が欠損している、または癌細胞がＢＲＣＡ１またはＢＲＣＡ２が欠損している癌の患者を治療する方法。
【請求項１１】
請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物の治療上の許容量を、これらに限定されないが、メチルメタンスルホン酸（ＭＭＳ）、テモゾロミドおよびダカルバジン（ＤＴＩＣ）；および／またはトポテカン、イリノテカン、ルビテカン、エキサテカン、ルルトテカン、ギメテカン、ジフロモテカン（ホモカンプトテシン類）などのトポイソメラーゼ−１阻害剤；および／または７−置換非シラテカン類；７−シリルカンプトテシン類、ＢＮＰ  １３５０；および／またはインドロカルバゾール類などの非カンプトテシントポイソメラーゼ−Ｉ阻害剤；および／またはベンゾフェナジン類、ＸＲ  １１５７６/ＭＬＮ  ５７６およびベンゾピリドインドール類のような二重トポイソメラーゼ−ＩおよびII阻害剤；および／または抗がん剤カルボプラチン、シスプラチンおよびオキサリプラチンに基づく白金から選択される電離放射線剤または化学療法剤と組み合わせて患者に投与することを含む、癌患者を治療する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な複素環誘導体、その合成方法、それを含有する組成物およびその用途、特に、ＰＡＲＰ阻害剤としてのそれらの医薬用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＰＡＲＰは「ポリ（ＡＤＰリボース）ポリメラーゼ」の略である。癌細胞は、化学療法薬によって受けた損傷を含め、ＤＮＡ損傷を修復するために酵素ＰＡＲＰを使用している。研究者達は酵素ＰＡＲＰを阻害する薬剤がこの自己修復機構を減弱して、癌細胞を治療により感受性が高くなるようにし、癌細胞死を促進させるかどうか研究している。
【０００３】
ＰＡＲＰ阻害剤は酵素ポリＡＤＰリボースポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）の一群の薬理学的阻害剤であって、ＤＮＡ修復を促進し、ＲＮＡ転写をコントロールし、細胞死を仲介し、そして免疫応答を調節するのに重要である。それ故、ＰＡＲＰ阻害剤は複数の適応症に開発され；もっとも重要な適応症は癌である。いくつかのタイプの癌は通常の細胞よりＰＡＲＰに依存性があって、ＰＡＲＰを癌の化学療法の魅力的なターゲットにしている。
【０００４】
癌治療で使用する化学増感剤としてのＰＡＲＰ阻害剤を開発し、虚血または内毒素ストレス後の細胞損傷を制限することにかなりの興味が持たれている。一般的に、細胞傷害性薬物や放射線照射はＰＡＲＰの活性化を誘発し、ＰＡＲＰの阻害剤は化学療法や放射線照射のＤＮＡ損傷および細胞傷害性効果を増強することが示されている（非特許文献１参照）。ＤＮＡ損傷剤に応答してＤＮＡ修復を仲介するＰＡＲＰは、腫瘍における薬剤耐性の機構を示し、そしてこの酵素を阻害すると電離放射線やテモゾロミドやトポテカンを含むいくつかの細胞傷害性抗腫瘍薬の活性を高めることが示されている。Sutoらは、特許文献１で、電離放射線や化学療法剤の腫瘍細胞に対する致死効果を高めるために用いた幾つかのイソキノリンを開示している。非特許文献２は、ＰＡＲＰ活性を阻害すると腫瘍細胞の増殖を減少させ、腫瘍細胞をアルキル化薬と一緒に処理すると著しい相乗効果が生じることを開示している。ＰＡＲＰは、この様に、ＤＮＡ損傷を高める癌治療の非常に重要な治療上のターゲットである。
【０００５】
ＰＡＲＰ阻害剤はまた、二本鎖ＤＮＡ修復の相同的組換え（ＨＲ）経路に欠陥を持つ細胞の成長を阻害する。例えば、非特許文献３および４参照。この効果は化学増感剤が存在しなくても作動する。ＨＲ欠損と関連する公知の状態としては、ＢＲＣＡ−１欠損、ＢＲＣＡ−２欠損、およびファンコニ貧血を伴う癌が挙げられる（非特許文献５）。ファンコニ貧血と関連すると同定されるタンパクとしてはＦＡＮＣＡ，ＦＡＮＣＢ，ＦＡＮＣＣ，ＦＡＮＣＤ２，ＦＡＮＣＥ，ＦＡＮＣＦ，ＦＡＮＣＧ，ＦＡＮＣＬおよびＦＡＮＣＭが挙げられる。レビューとして非特許文献６および７参照。
【０００６】
多数の公知ＰＡＲＰ阻害剤が非特許文献８および９に記載されている。
【０００７】
上記に加え、ＰＡＲＰ阻害剤は次の国際特許出願（特許文献２〜１４）に開示され、記載されている。腫瘍細胞を化学療法剤の細胞毒性効果に対して化学感作することにより細胞傷害性薬物の致死性を高めるＰＡＲＰ阻害剤は、とりわけ、特許文献１５〜１７、非特許文献１０〜１５および特許文献１８〜１９に報告されている。
【０００８】
癌治療以外に、ＰＡＲＰ阻害剤は脳卒中や心筋梗塞、糖尿病、炎症などの急性の重篤な疾患の有望な薬剤であるとともに、神経変性疾患の長期投与薬とも考えられている（非特許文献１６）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】U.S. Pat. No. 5,177,075
【特許文献２】WO09/04356
【特許文献３】WO04/80976
【特許文献４】WO 00/42040
【特許文献５】WO00/39070
【特許文献６】WO00/39104
【特許文献７】WO99/11623
【特許文献８】WO99/11628
【特許文献９】WO99/11622
【特許文献１０】WO 99/59975
【特許文献１１】WO99/11644
【特許文献１２】WO99/11945
【特許文献１３】WO99/11649
【特許文献１４】WO99/59973
【特許文献１５】US2002/0028815
【特許文献１６】US2003/0134843
【特許文献１７】US2004/0067949
【特許文献１８】WO98/33802
【特許文献１９】WO2005/012305
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Kock, et al, 45, J. Med. Chem. 4961, 2002
【非特許文献２】Weltin et al, "6(5H)-フェナントリジノン、ポリ（ＡＤＰリボース）ポリメラーゼ阻害剤、の培養腫瘍細胞に対する効果（Effectof 6(5H)-Phenanthridinone, an Inhibitor of Poly (ADP-ribose)Polymerase, on Cultured Tumor Cells）", Oncol. Res.,6:9, 399-403 (1994)
【非特許文献３】Bryant et al,"ポリ（ＡＤＰリボース）ポリメラーゼ阻害剤を用いたＢＲＣＡ２欠損腫瘍の特異的死滅（Specific killing of BRCA2-deficient tumors withinhibitors of poly (ADP-ribose) polymerase）," Nature 434,913 (2005)
【非特許文献４】Farmer et al,"治療戦略としてのＢＲＣＡ変異細胞における欠損のＤＮＡ修復のターゲッティング（Targeting the DNA repair defect in BRCA mutantcells as a therapeutic strategy）," Nature 434,917 (2005)
【非特許文献５】McCabe et al.,"相同的組換えによるＤＮＡ損傷の修復における欠損およびポリ（ＡＤＰリボース）ポリメラーゼ阻害に対する感受性（Deficiency in the Repair of DNA Damage byHomologous Recombination and Sensitivity to Poly (ADP-Ribose) PolymeraseInhibition）," Cancer Res. 66. 8109, 2006
【非特許文献６】Zaremba et al.,"全身性癌をターゲットとするＰＡＲＰ阻害剤の開発（PARP Inhibitor Development for Systemic Cancer Targeting）," Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry 7, 515(2007)
【非特許文献７】Lewis et al.,"癌治療のための臨床用ポリ（ＡＤＰリボース）ポリメラーゼ阻害剤（Clinical poly(ADP-ribose) polymerase inhibitorsfor the treatment of cancer）," Curr. Opin.Investigational Drugs 8, 1061 (2007)
【非特許文献８】Banasik et al.,"ポリ（ＡＤＰリボース）シンセターゼおよびモノ（ＡＤＰリボース）トランスフェラーゼの特異的阻害剤（Specific Inhibitors of Poly (ADP-Ribose)Synthetase and Mono (ADP-Ribose) -Transferase）",J. Biol. Chem., 267:3, 1569-75 (1992)
【非特許文献９】Banasik et al.,"ＡＤＰリボシル化反応の阻害剤と活性化剤（Inhibitors and Activators of ADP-RibosylationReactions）", Molec. Cell. Biochem., 138, 185-97(1994)
【非特許文献１０】White AW, et al.,14 Bioorg. and Med. Chem Letts. 2433 (2004)
【非特許文献１１】Canon Koch SS, etal., 45 J. Med. Chem. 4961 (2002)
【非特許文献１２】Skalitsky DJ, etal, 46 J. Med. Chem. 210 (2003)
【非特許文献１３】Farmer H, et al,434 Nature 917 (14 April 2005)
【非特許文献１４】Plummer ER, etal., 11(9) Clin. Cancer Res. 3 402 (2005)
【非特許文献１５】Tikhe JG, et al.,47 J. Med. Chem. 5467 (2004)
【非特許文献１６】Graziani G, SzaboC (July 2005). "ＰＡＲＰ阻害剤の臨床的展望（Clinical perspectives of PARP inhibitors）". Pharmacol. Res. 52 (1): 109-18
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明者らは一連の新規複素環化合物を見出した。これらの化合物はＱで表される複素環を持つことを特徴とし、このＱは複素環の２つの窒素原子の一つで−ＣＯ−ＣＯ−Ｒ基と結合するとともに、他の窒素原子で−ＣＯ−Ｂ−Ａ基と結合している。この化合物は、ＰＡＲＰ酵素活性の阻害レベルの驚くべき増加、および／または放射線治療および種々の化学療法に対する腫瘍細胞の増感レベルの驚くべき増加を示し、および／または化合物の溶解性（水性媒体および／またはリン酸緩衝液中の）の驚くべき増加を示し、溶解度の増加は、たとえば、ＩＶルート経由での投与、または成人および小児用の経口剤（例、液剤および小さな錠剤）など化合物の製剤化に有用である。本発明化合物の経口でのバイオアベイラビリティは高められている。化合物はまた細胞中でＭＤＲ１の作用を受けにくい。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
従って、本発明の第１の態様は、式（Ｉ）の化合物、および水和物、異性体、溶媒和物、プロドラッグ、それらを含む医薬組成物、およびそれらの薬学的に許容される塩を提供する：
【化１】
2013544261.tif 000003
式中、Ａはアリールまたは置換アリール；またはヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールであり、Ａの該置換基はハロゲン、シアノ、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、スルホンアミド、ヒドロキシル、低級アルキルアルコキシ、および置換されていてもよい複素環基もしくは置換されていてもよいアリールで置換されたアルキルから選択され；
【００１３】
Ｂは、アリールまたは置換アリール；またはヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールであり、Ｂの該置換基はハロゲン、シアノ、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、スルホンアミド、ヒドロキシル、低級アルキルアルコキシ、および置換されていてもよい複素環基もしくは置換されていてもよいアリールで置換されたアルキルから選択され；
【００１４】
Ｑは、環構成原子として少なくとも２つの窒素原子を含む置換されていてもよい複素環基であって、前記少なくとも２つの窒素原子は、それぞれ、独立してカルボニルの炭素原子で−ＣＯ−Ａ−Ｂ基および−ＣＯ−ＣＯ−Ｒ基に結合していて；モノ複素環基、ジ複素環基、架橋複素環基、およびスピロ複素環基から成る群から選ばれ；そして
【００１５】
Ｒは、アルキルまたは置換アルキル、アルケニルまたは置換アルケニル、アルキニルまたは置換アルキニル、シクロアルキルまたは置換シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルまたは置換ヘテロシクロアルキル、アリールまたは置換アリール、およびヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールから成る群から選ばれ、該置換基はハロゲン、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、低級アルキルアルコキシ、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸およびカルボン酸エステルから成る群から選択される。
【００１６】
興味深い本発明化合物の一つのサブセットは、式（ＩＡ）の化合物、および水和物、異性体、溶媒和物、プロドラッグ、それらを含む医薬組成物、およびそれらの薬学的に許容される塩に関する：
【化２】
2013544261.tif 000004
式中、Ａｒはアリールであり、Ｈｅｔはヘテロアリールであり；
Ｚ１はＣ−Ｒ１またはＮであり；
Ｑは、環構成原子として少なくとも２つの窒素原子を含む置換されていてもよい複素環基であって、前記少なくとも２つの窒素原子は、それぞれ、独立してカルボニルの炭素原子で−ＣＯ−Ａ−Ｂ基および−ＣＯ−ＣＯ−Ｒ基に結合していて；モノ複素環基、架橋複素環基、ジ複素環基、およびスピロ複素環基から成る群から選ばれ；
【００１７】
Ｒは、アルキルまたは置換アルキル、アルケニルまたは置換アルケニル、アルキニルまたは置換アルキニル、シクロアルキルまたは置換シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルまたは置換ヘテロシクロアルキル、アリールまたは置換アリール、およびヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールから成る群から選ばれ、該置換基はハロゲン、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、低級アルキルアルコキシ、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸およびカルボン酸エステルから成る群から選択され；そして
【００１８】
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸、カルボン酸エステル、およびハロゲンから成る群から選択される。
【００１９】
興味深い本発明化合物の他のサブセットは、式（ＩＢ）の化合物、および水和物、異性体、溶媒和物、プロドラッグ、それらを含む医薬組成物、およびそれらの薬学的に許容される塩に関する：
【化３】
2013544261.tif 000005
式中、Ａｒはアリールであり、Ｈｅｔはヘテロアリールであり；
Ｚ１はＣ−Ｒ１またはＮであり；
Ｒは、アルキルまたは置換アルキル、アルケニルまたは置換アルケニル、アルキニルまたは置換アルキニル、シクロアルキルまたは置換シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルまたは置換ヘテロシクロアルキル、アリールまたは置換アリール、およびヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールから成る群から選ばれ、該置換基はハロゲン、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、低級アルキルアルコキシ、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸およびカルボン酸エステルから成る群から選択され；そして
【００２０】
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸、カルボン酸エステル、およびハロゲンから成る群から選択され；そして
【化４】
2013544261.tif 000006
は、
【化５】
2013544261.tif 000007
から選択される複素環基を表すが、これらに限定されない。
【００２１】
興味深い本発明化合物のもう一つのサブセットは、式（ＩＣ）の化合物、および水和物、異性体、溶媒和物、プロドラッグ、それらを含む医薬組成物、およびそれらの薬学的に許容される塩に関する：
【化６】
2013544261.tif 000008
式中、Ｚ１はＣ−Ｒ１またはＮであり；
Ｚ２は、ＣまたはＮであり；
Ｒは、アルキルまたは置換アルキル、アルケニルまたは置換アルケニル、アルキニルまたは置換アルキニル、シクロアルキルまたは置換シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルまたは置換ヘテロシクロアルキル、アリールまたは置換アリール、およびヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールから成る群から選ばれ、該置換基はハロゲン、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、低級アルキルアルコキシ、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸およびカルボン酸エステルから成る群から選択され；そして
【００２２】
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸、カルボン酸エステル、およびハロゲンから成る群から選択される。
【００２３】
興味深い本発明化合物のもう一つのサブセットは、式（ＩＤ）の化合物、および水和物、異性体、溶媒和物、プロドラッグ、それらを含む医薬組成物、およびそれらの薬学的に許容される塩に関する：
【化７】
2013544261.tif 000009
式中、Ｚ１はＣ−Ｒ１またはＮであり；
Ｚ２は、ＣまたはＮであり；
Ｒは、アルキルまたは置換アルキル、アルケニルまたは置換アルケニル、アルキニルまたは置換アルキニル、シクロアルキルまたは置換シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルまたは置換ヘテロシクロアルキル、アリールまたは置換アリールおよびヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールから成る群から選ばれ、該置換基はハロゲン、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、低級アルキルアルコキシ、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸およびカルボン酸エステルから成る群から選択され；そして
【００２４】
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸、カルボン酸エステル、およびハロゲンから成る群から選択される。
【００２５】
興味深い本発明化合物のもう一つのサブセットは、式（ＩＥ）の化合物、および水和物、異性体、溶媒和物、プロドラッグ、それらを含む医薬組成物、およびそれらの薬学的に許容される塩に関する：
【化８】
2013544261.tif 000010
式中、Ｚ１はＣ−Ｒ１またはＮであり；
Ｚ２は、ＣまたはＮであり；
Ｒは、アルキルまたは置換アルキル、アルケニルまたは置換アルケニル、アルキニルまたは置換アルキニル、シクロアルキルまたは置換シクロアルキル、ヘテロシクロアルキルまたは置換ヘテロシクロアルキル、アリールまたは置換アリールおよびヘテロアリールまたは置換ヘテロアリールから成る群から選ばれ、該置換基はハロゲン、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、低級アルキルアルコキシ、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸およびカルボン酸エステルから成る群から選択され；そして
【００２６】
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アミド、アミノカルボニル、スルホンアミド、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリルオキシ、カルボン酸、カルボン酸エステル、およびハロゲンから成る群から選択される。
【００２７】
本発明の第２の態様は、式（Ｉ）、（ＩＡ）、（ＩＢ）、（ＩＣ）、（ＩＤ）、または（ＩＥ）の化合物、それらの水和物、異性体、溶媒和物、それらを含む医薬組成物、またはそれらの薬学的に許容される塩を有効な治療用量で、薬学的に許容される担体、アジュバントまたは溶媒とともに含有して成る医薬組成物を提供する。
【００２８】
本発明の第３の態様は、ＰＡＲＰ阻害剤としての薬物の製造における本発明開示の化合物、水和物、異性体、溶媒和物、それらを含む医薬組成物またはそれらの薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【００２９】
本発明の第４の態様は、下記のための薬物の製造における本発明の第１の態様で定義した化合物の使用を提供する：
（ａ）細胞ＰＡＲＰ酵素の活性を阻害することによるポリ（ＡＤＰ−リボース）鎖形成の防止
（ｂ）次の疾患の治療：血管疾患；敗血症ショック；脳と循環器の両方の虚血性傷害；脳と循環器の両方の再灌流傷害；脳卒中とパーキンソン病の急性および慢性治療を含む神経毒性；出血性ショック；目に関係する酸化的損傷；移植拒絶反応；関節炎、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎およびクローン病などの炎症性疾患；多発性硬化症；糖尿病の二次的作用；ならびに循環器の手術に伴う細胞毒性の急性治療；膵炎；アテローム性動脈硬化症；またはＰＡＲＰ活性の阻害により寛解される疾患；
（ｃ）癌治療における補助剤としての使用または電離放射線または化学療法剤での治療のために腫瘍細胞を増感するための使用。
【００３０】
特に、本発明の第１の態様で定義した化合物は、メチルメタンスルホン酸（ＭＭＳ）、テモゾロミドおよびダカルバジン（ＤＴＩＣ）などのアルキル化剤とともに；また、トポテカン、イリノテカン、ルビテカン、エキサテカン、ルルトテカン、ギメテカン、ジフロモテカン（ホモカンプトテシン類）などのトポイソメラーゼ−１阻害剤とともに；また同様に、７−置換非シラテカン類；７−シリルカンプトテシン類、ＢＮＰ  １３５０；およびインドロカルバゾール類などの非カンプトテシントポイソメラーゼ−Ｉ阻害剤；また、ベンゾフェナジン類、ＸＲ  １１５７６/ＭＬＮ  ５７６およびベンゾピリドインドール類のような二重トポイソメラーゼ−ＩおよびII阻害剤；抗がん剤カルボプラチン、シスプラチンおよびオキサリプラチンに基づく白金と共に、抗がん併用療法において（または補助剤として）使用することができる。このような組み合わせは、特定の薬剤の好ましい投与方法に基づいて、たとえば、静脈用製剤としてまたは経口投与により、投与することができる。
【００３１】
本発明の他のさらなる態様は、本発明の第１の態様で定義した化合物の治療上の有効量を、好ましくは医薬組成物の形で、治療を必要とする被験者に投与することを含む、ＰＡＲＰの阻害により改善される疾患の治療方法；および第１の態様で定義した化合物の治療上の有効量を、好ましくは医薬組成物の形で、放射線療法（電離放射線）または化学療法剤と組み合わせて、治療を必要とする被験者に同時にまたは連続的に投与することを含む、癌の治療方法を提供する。
【００３２】
本発明のさらなる態様においては、化合物は相同的組換え（ＨＲ）依存性ＤＮＡ二本鎖切断（ＤＳＢ）修復過程が欠損している癌の治療のための薬剤の調製において、または化合物の治療上の有効量を患者に投与することを含む、ＨＲ依存性ＤＮＡ  ＤＳＢ修復過程が欠損している癌患者の治療において使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】動物モデルの試験結果を示し、溶媒、化合物、テモゾロミド（ＴＭＺ）の単独または組合せで処理したマウスの平均腫瘍容積を測定して、投与日数に対してプロットしたものである。ＴＭＺと本発明化合物の組合せが、有意に相乗効果を持つことが見られる。
【図２】動物モデルの試験結果を示し、溶媒、化合物、テモゾロミド（ＴＭＺ）の単独または組合せで処理したマウスの平均体重を測定して、投与日数に対してプロットしたものである。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
発明の詳細な説明
特に明記しない限り、明細書および特許請求の範囲で用いられた次の用語は以下で定義する意味を有する。
用語「アルキル」は、Ｃ１−Ｃ２０の直鎖および分岐鎖基を含む飽和脂肪族炭化水素基をいう。好ましくは、アルキル基は、１〜１０個の炭素原子を持つ中規模アルキル、例えば、メチル、エチル、プロピル、２-プロピル、ｎ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル等である。より好ましくは、１〜４個の炭素原子を持つ低級アルキル、例えば、メチル、エチル、プロピル、２-プロピル、ｎ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、またはｔｅｒｔ−ブチル等である。用語「置換されていてもよいアルキル」は、ハロゲン、ヒドロキシル、低級アルコキシ、アリール（それぞれ独立してハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキルまたは低級アルコキシ基である１以上の置換基で置換されていてもよい）、アリールオキシ（それぞれ独立してハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキルまたは低級アルコキシ基である１以上の置換基で置換されていてもよい）、ヘテロアリール（それぞれ独立してハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキルまたは低級アルコキシ基である１以上の置換基で置換されていてもよい）、ヘテロシクロアルキル（それぞれ独立してハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキルまたは低級アルコキシ基である１以上の置換基で置換されていてもよい）、ハロアルコキシル、アミノ、アルキルアミノ、アミド、アミノカルボニル、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリールオキシ、カルボン酸およびカルボン酸エステルから成る群から選ばれる１〜４個の置換基で置換されていてもよいアルキル基をいう。
【００３５】
用語「シクロアルキル」は、３〜８員の全て炭素の単環式環、全て炭素の３員/６員、４員/６員、５員/６員もしくは６員/６員縮合２環式環または多環式縮合環基（「縮合」環系は、系内の各環が系内の他の環と隣り合った炭素原子のペアを共有していることを意味する）をいい、１以上の環は１以上の二重結合を含んでいてもよいが、環のどれも完全に共役したπ電子系は持たない。シクロアルキル基の例としてはシクロプロピロ、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキサジエニル、アダマンチル、シクロへプチル、シクロヘプタトリエニル等がある。シクロアルキル基は置換されていてもよいし、無置換でもよい。置換されている場合、置換基は、好ましくは、低級アルキル、トリハロアルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、低級アルキルアミノ、低級アルキルアルコキシ、シアノ、アシル、チオアシル、カルボン酸、カルボン酸エステル、メルカプト、低級アルコキシ、アリール（それぞれ独立してハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキルまたは低級アルコキシ基である１以上の置換基で置換されていてもよい）、アリールオキシ（それぞれ独立してハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキルまたは低級アルコキシ基である１以上の置換基で置換されていてもよい）、６員ヘテロアリール（環に１〜３個の窒素原子を持ち、環の炭素はそれぞれ独立してハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキルまたは低級アルコキシ基である１以上の置換基で置換されていてもよい）、５員ヘテロアリール（窒素、酸素および硫黄から成る群から選ばれる１〜３個のヘテロ原子を持ち、環の炭素および窒素原子はそれぞれ独立してハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキルまたは低級アルコキシ基である１以上の置換基で置換されていてもよい）、５または６員ヘテロ環式アルキル［窒素、酸素および硫黄から成る群から選ばれる１〜３個のヘテロ原子を持ち、環の炭素および窒素（存在するなら）原子はそれぞれ独立してハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキルまたは低級アルコキシ基、メルカプト、低級アルキル、アリールチオ（それぞれ独立してハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキルまたは低級アルコキシ基である１以上の置換基で置換されていてもよい）である１以上の置換基で置換されていてもよい］、シアノ、アシル、チオアシル、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、ニトロ、Ｎ−スルホンアミド、およびＳ−スルホンアミドから成る群から独立して選ばれる１以上である。
【００３６】
用語「アルケニル」は、少なくとも２つの炭素原子と少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を持つ上記で定義したアルキル基をいう。代表例としては、これらに限定されないが、エテニル、１−プロペニル、２−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニル、３−ブテニル等が挙げられる。用語「置換されていてもよいアルケニル」は、それぞれ独立してハロゲン、シアノ、低級アルキルまたは低級アルコキシ基である１以上の置換基で置換されていてもよいアルケニルを意味する。
【００３７】
用語「アルキニル」は、少なくとも２つの炭素原子と少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を持つ上記で定義したアルキル基をいう。代表例としては、これらに限定されないが、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、３−ブチニル等が挙げられる。用語「置換されていてもよいアルキニル」は、それぞれ独立してハロゲン、シアノ、低級アルキルまたは低級アルコキシ基である１以上の置換基で置換されていてもよいアルキニルを意味する。
【００３８】
用語「アリール」は、少なくとも１つの芳香環を持つ基を言い、即ち、共役したπ電子系を持ち、全て炭素の環状アリール、ヘテロアリールおよびビアリール基を含む。アリールの例としては、フェニル、ナフチルが挙げられる。該アリール基は、ハロゲン、トリハロメチル、ヒドロキシ、アミノ、低級アルキルアミノ、スルホンアミド、メルカプト、アルキルチオ、ニトロ、シアノ、アルコキシル、およびアルキルから成る群からそれぞれ独立して選ばれる１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００３９】
用語「ヘテロアリール」は、環原子としてＮ，ＯおよびＳから成る群から選ばれる１〜３個のヘテロ原子を持ち、残りの環原子がＣであるアリールをいう。該環は、５員環、６員環または６員/６員縮合二環式環である。ヘテロアリール基の例としては、フリル、チエニル、ピリジル、ピロリル、Ｎ−アルキルピロリル、ピリミジニル、ピラジニル、イミダゾリル、フタラジン−１−（２Ｈ）−オン−イル−４、ピリド［３，２−ｄ］ピリダジン−５（６Ｈ）−オン−イル−８等が挙げられる。該ヘテロアリールは、ハロゲン、トリハロメチル、ヒドロキシ、メルカプト、アルキルチオ、アミノ、低級アルキルアミノ、スルホンアミド、シアノ、アルコキシル、およびアルキルから成る群からそれぞれ独立して選ばれる１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００４０】
用語「ヘテロ環式アルキル」は、環原子４〜９個の単環または縮合環基を言い、１または２個の環ヘテロ原子はＮ，ＯおよびＳ（Ｏ）ｎ（ｎは０−２の整数である）から成る群から選ばれ、残りの環原子がＣである。また、環は１以上の二重結合を持っていてもよいが、完全に共役したπ電子系は持たない。無置換のヘテロ環式アルキルとしては、これらに限定されないが、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ホモピペラジニル等が挙げられる。ヘテロ環式アルキルは、置換されていてもよいし、無置換でもよい。置換されている場合、置換基は、好ましくは１以上、より好ましくは１，２または３個の置換基、さらに好ましくは１または２個の置換基で、低級アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、トリハロアルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、低級アルコキシ、シアノ、およびアシルから成る群からそれぞれ独立して選ばれる。好ましくは、ヘテロ環式アルキルは、ハロゲン、低級アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、トリハロアルキル、ヒドロキシ、メルカプト、シアノ、Ｎ−アミドおよびカルボキシから成る群から独立して選ばれる１または２の置換基で置換されていてもよい。
【００４１】
Ｑで表される用語「ヘテロ環式環」は、環を構成する原子として少なくとも２つの窒素原子を含有し、この少なくとも２つの窒素原子は、独立して−ＣＯ−Ａ−Ｂ基と−ＣＯ−ＣＯ−Ｒ基に、それぞれカルボニルの炭素原子で結合している。ヘテロ環式環は、単環式ヘテロ環基、架橋ヘテロ環基、二環式ヘテロ環基、またはスピロヘテロ環基であってもよい。
【００４２】
単環式ヘテロ環式環の例としては、これらに限定されないが、次のものが挙げられる。
【化９】
2013544261.tif 000011
架橋ヘテロ環式環の例としては、これらに限定されないが、次のものが挙げられる。
【化１０】
2013544261.tif 000012
二環式ヘテロ環式環の例としては、これらに限定されないが、次のものが挙げられる。
【化１１】
2013544261.tif 000013
スピロヘテロ環式環の例としては、これらに限定されないが、次のものが挙げられる。
【化１２】
2013544261.tif 000014
上記単環式ヘテロ環基、架橋ヘテロ環基、二環式ヘテロ環基、またはスピロヘテロ環基は、ハロゲン、低級アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、トリハロアルキル、ヒドロキシ、メルカプト、シアノ、アミノおよびカルボキシから成る群から選ばれる１〜４の置換基で置換されていてもよい。
【００４３】
用語「ヒドロキシ］は、−ＯＨ基をいう。
用語「アルコキシル」は、−Ｏ−（アルキル）および−Ｏ−（無置換シクロアルキル）基の両方をいう。代表例としては、これらに限定されないが、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、シクロプロピルオキシ、シクロブチルオキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシなどが挙げられる。
用語「ハロアルコキシ」は、−Ｏ−（ハロアルキル）をいう。代表例としては、これらに限定されないが、トリフルオロメトキシ、トリブロモメトキシなどが挙げられる。
用語「アリールオキシ」は、−Ｏ−アリールおよび−Ｏ−ヘテロアリール基の両方を言い、アリールおよびヘテロアリール基は上記で定義した通りである。代表例としては、これらに限定されないが、フェノキシ、ピリジニルオキシ、フラニルオキシ、チエニルオキシ、ピリミジニルオキシ、ピラジニルオキシ等、およびそれらの誘導体が挙げられる。
用語「メルカプト」は、−ＳＨ基をいう。
用語「アルキルチオ」は、−Ｓ−（アルキル）および−Ｓ−（無置換シクロアルキル）基をいう。代表例としては、これらに限定されないが、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、ブチルチオ、シクロプロピルチオ、シクロブチルチオ、シクロペンチルチオ、シクロヘキシルチオなどが挙げられる。
用語「アリールチオ」は、−Ｓ−アリールおよび−Ｓ−ヘテロアリール基を言い、アリールおよびヘテロアリール基は上記で定義した通りである。代表例としては、これらに限定されないが、例えば、フェニルチオ、ピリジニルチオ、フラニルチオ、チエニルチオ、ピリミジニルチオ等、およびそれらの誘導体が挙げられる。
【００４４】
用語「アシル」は、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ３基を言い、Ｒ３は水素、低級アルキル、トリハロメチル、無置換シクロアルキル、アリール（低級アルキル、トリハロメチル、低級アルコキシ、およびハロゲン基から成る群から選ばれる１以上、好ましくは１，２または３個の置換基で置換されていてもよい）、ヘテロアリール（環炭素を通じて結合していて、低級アルキル、トリハロアルキル、低級アルコキシ、およびハロゲン基から成る群から選ばれる１以上の置換基、好ましくは１，２または３個の置換基で置換されていてもよい）、およびヘテロ脂環式基（環炭素を通じて結合していて、低級アルキル、トリハロアルキル、低級アルコキシ、およびハロゲン基から成る群から選ばれる１以上の置換基、好ましくは１，２または３個の置換基で置換されていてもよい）から成る群から選択される。代表的なアシル基としては、これらに限定されないが、アセチル、トリフルオロアセチル、ベンゾイルなどが挙げられる、
用語「チオアシル」は、−Ｃ（Ｓ）−Ｒ３基を言い、Ｒ３は上記で定義した通りである。
用語「アセチル」は、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３基をいう。
用語「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素を言い、好ましくはフッ素または塩素である。
用語「トリフルオロメチル」は、−ＣＦ３基をいう。
用語「シアノ」は、−Ｃ≡Ｎ基をいう。
用語「アミノ」は、−ＮＨ２基をいう。
用語「カルボン酸」は、−ＣＯＯＨ基をいう。
用語「カルボン酸エステル」は、−ＣＯＯＲ３基を言い、Ｒ３はアルキルまたはシクロアルキルである。
用語「ヒドロキシルアルキル」は、−（ＣＨ２）ｒＯＨ基を言い、ｒは１〜４の整数である。
【００４５】
用語「任意の」または「任意に」は、続いて記載した出来事または状況が起こっても、起こらなくてもよいことを意味し、その記載は出来事または状況が起こっても、起こらなくてもよい事例を含むことを意味している。たとえば、「アルキル基で置換されていてもよいアリール基」は、アルキル基は存在しても、しなくてもよいこと、すなわち、その記載はアリール基がアルキル基で置換されている場合とアリール基がアルキル基で置換されていない場合を含むことを意味している。
用語「医薬組成物」は、本発明の明細書記載の式（Ｉ）の化合物、または水和物、または溶媒和物、または異性体、または生理学的/薬学的に許容される塩またはそれらのプロドラッグの１以上と、生理学的/薬学的に許容される担体や賦形物などの他の化学成分との混合物をいう。医薬組成物の目的は、温血動物やヒトへの化合物の投与を容易にすることである。
【００４６】
本発明化合物の合成
本発明の化合物は、次のスキームに示した方法により調製される。
スキーム１
【化１３】
2013544261.tif 000015
【００４７】
スキーム２
【化１４】
2013544261.tif 000016
【００４８】
スキーム３
【化１５】
2013544261.tif 000017
【００４９】
式（ＩＢ）の化合物は、Ｒ１およびＲ２が前記で定義したものである式（II）の化合物をＲが前記で定義したものである式（III）の化合物と、HATUまたはHOBT/EDCIなどの試薬およびDIPEAなどの塩基の存在下、DMFなどの溶媒中で０℃〜用いた溶媒の沸点の範囲の温度で反応させることにより合成することができる。
【化１６】
2013544261.tif 000018
【００５０】
式（II）の化合物は、Ｒ１およびＲ２が前記で定義したものである式（IV）の化合物を、式（V）の化合物と、HATUまたはHOBT/EDCIなどの試薬およびDIPEAなどの塩基の存在下、DMFなどの溶媒中で０℃〜用いた溶媒の沸点の範囲の温度で反応させ、次いで得られた生成物の保護基をDCMなどの溶媒中で０℃〜用いた溶媒の沸点の範囲の温度でTFAで脱保護することにより合成することができる。
【化１７】
2013544261.tif 000019
【００５１】
式（IV）の化合物は、Ｒ１およびＲ２が前記で定義したものである式（VI）の化合物を、水酸化ナトリウムなどの塩基および水などの溶媒の存在下、０℃〜用いた溶媒の沸点の範囲の温度でヒドラジンと反応させ、次いで得られた生成物を希塩酸で産生にすることにより合成することができる。
【化１８】
2013544261.tif 000020
【００５２】
式（VI）の化合物は、Ｒ２が前記で定義したものである式（VII）の化合物をリン酸水素ジメチルとカップリングさせ、次いで得られた生成物をＲ１が前記で定義したものである式（VIII）の化合物と典型的なヴィッティヒ反応により反応させて合成することができる。
式（III）、（V）および（VIII）の化合物は、市販品で手に入るか、文献や書籍に報告されている方法で合成することができる。
【００５３】
本発明はまた、式（Ｉ），（ＩＡ），（ＩＢ），（ＩＣ），（ＩＤ），（ＩＥ）の化合物、または異性体、または水和物、または溶媒和物、それらを含む医薬組成物またはそれらの薬学的に許容される塩に関し、式（Ｉ）の化合物はフリー体で、または薬学的に許容され、非毒性である酸付加塩の形で存在してもよい。薬学的に許容される塩としては、塩酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩、硫酸塩、リン酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、およびトリフルオロ酢酸塩が挙げられ、好ましくはｐ−トルエンスルホン酸塩、塩酸塩、酒石酸塩、およびトリフルオロ酢酸塩である。
【００５４】
さらに、本発明は、治療上有効な用量で式（Ｉ），（ＩＡ），（ＩＢ），（ＩＣ），（ＩＤ），（ＩＥ）の化合物、または異性体、または水和物、またはそれらの塩、および薬学的に許容される担体、アジュバント、または溶媒を含んで成る医薬組成物；およびＰＡＲＰ阻害剤としての薬物の調製における本願開示の化合物またはそれらの薬学的に許容される塩の使用に関する。言い換えると、本願はまた、上述の化合物を治療上有効な用量で含有する医薬組成物も、ＰＡＲＰ阻害剤としての薬物の調製におけるそれらの使用も提供する。
【００５５】
本発明の式（Ｉ）の化合物は結晶であっても、非結晶形であってもよい。本発明の化合物が結晶形である場合は、多くの異なる多形の形で存在してもよく、そして水和していても、または溶媒和していてもよい。本発明は、その範囲内に化学量論的水和物およびさまざまな量の水を含む化合物も含んでいる。一般に、特に水やエタノールなどの薬学的に許容される溶媒では、溶媒和体は本発明の目的に対しては非溶媒和体と等価である。
【００５６】
本発明の式（Ｉ）の化合物は、種々の薬学的に許容される塩の形で有用である。用語「薬学的に許容される塩」は、薬化学者に自明な塩の形、即ち、実質的に非毒性で、望みの薬物動態特性、嗜好性、吸収、分布、代謝または排出を提供するものをいう。選択においても重要である、より実際的な他の要因は、原料物質のコスト、および結晶化の容易性、収率、安定性、吸湿性、および得られるバルク薬の流動性である。便宜上、医薬組成物は薬学的に許容される担体、アジュバント、または溶媒と組み合わせて活性成分から調製される。
【００５７】
式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容される塩としては、非毒性無機または有機酸から生成する式（Ｉ）の化合物の通常の非毒性塩または４級アンモニウム塩が挙げられる。例えば、非毒性塩としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機酸由来のもの；酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリセリン酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモン酸、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸、トリフルオロ酢酸などの有機酸から調製された塩が挙げられる。本発明の薬学的に許容される塩は、通常の化学的方法により合成することができる。
【００５８】
一般に、塩はフリーの塩基または酸を当量または過剰量の望ましい塩を形成する無機または有機酸または塩基と適当な溶媒または溶媒の組合せ中で反応させることにより調製される。本発明の式（Ｉ）の化合物は、不斉中心を持っていてもよく、そして本発明は式（Ｉ）の化合物の立体異性体や幾何異性体、および鏡像異性体およびそれらの混合物、即ちラセミ体をも含む全ての異性体にも及ぶ。異なる異性体は、慣用の方法により互いに分離または分割でき、または一定の異性体は慣用の合成法により、または立体特異的もしくは不斉合成により得ることができる。
【００５９】
本明細書記載の発明はまた、薬学的に許容される担体、アジュバント、または溶媒との組み合わせで本明細書に記載した化合物を含有する医薬組成物を含む。
【００６０】
本明細書記載の発明はまた、そのような治療を必要とする哺乳類患者にＰＡＲＰが介在する病気を治療するために有効な量の本願記載の化合物を投与することを特徴とする、癌、血管疾患、炎症性疾患、敗血症ショック、虚血性傷害、糖尿病、神経毒性、出血性ショック、および哺乳類におけるウイルス感染症から選ばれるＰＡＲＰが介在する病気を治療する方法も含む。
【００６１】
本明細書記載の発明はまた、そのような治療を必要とする哺乳類患者に癌を治療するために有効な量の本願記載の化合物を投与することを特徴とする、癌を治療する方法も含む。
【００６２】
本発明はまた、さまざまな癌を治療するために有効な量の式（Ｉ）の化合物を哺乳類に投与することから成る、そのような治療を必要とする哺乳類における癌を抑制する方法にも関する。そのような方法としては、脳、泌尿生殖器、リンパ系、胃、咽頭および肺の癌の治療を含む。さらに、そのような方法は、組織球性リンパ腫、乳がん、卵巣がん、膵臓がん、肝臓がん、前立腺がん、肺腺がん、および小細胞肺がんの治療を含む。
【００６３】
癌を治療するために患者に投与した場合、用いる投与量は、癌のタイプ、患者の年齢や一般的状態、投与する特定の化合物、薬で現れる毒性または副作用の存在または程度、および他の因子により変わる。適当な用量範囲の代表例は、約０．０１ｍｇ／被験者の体重Ｋｇ、１日〜約２００ｍｇ／被験者の体重Ｋｇ、１日である。しかしながら、投与する薬用量は、一般に医師の裁量に委ねられている。
【００６４】
本発明はまた、それを必要とする哺乳動物においてＰＡＲＰを阻害する方法に関し、癌、血管疾患、糖尿病、炎症性疾患、敗血症ショック、虚血性傷害、神経毒性、出血性ショック、およびウイルス感染症から選ばれる疾患の状態を緩和し、防止しまたは治療するため、ＰＡＲＰを正常レベルに、またはある場合は正常以下のレベルに抑制するために式（Ｉ）の化合物の有効量を哺乳動物に投与することから成る。
【００６５】
本発明の式（Ｉ）の化合物は、単独でまたは１以上の他の治療剤、特に細胞傷害性薬剤および放射線療法と組み合わせて投与することができる。可能な併用療法では、一定の組合せの形をとることにより、または本発明化合物と１以上の互いに独立して用いられもしくは与えられている治療剤の投与の形をとることにより、または一定の組合せと１以上の他の治療剤の併用投与により投与される。式（Ｉ）の化合物は、他にも、特に腫瘍治療で化学療法、放射線療法、外科的処置、またはこれらの組合せと組み合わせて投与される。上記のように、他の治療戦略との関係で長期間の治療がアジュバント療法として同様に可能である。他の可能な治療は、腫瘍退縮後の患者の状態を維持する療法、または、例えばリスクのある患者における化学予防療法である。
【００６６】
ＰＡＲＰが関係している疾患の治療のために患者に投与した場合、用いる投与量は、疾患のタイプ、患者の年齢や一般的状態、投与する特定の化合物、薬で現れる毒性または副作用の存在または程度、および他の因子により変わる。適当な用量範囲の代表例は、約０．０１ｍｇ／被験者の体重Ｋｇ、１日〜約２００ｍｇ／被験者の体重Ｋｇ、１日である。しかしながら、投与する薬用量は、一般に医師の裁量に委ねられている。
【００６７】
治療方法は、好ましくは式（Ｉ）の化合物を非経口的に送達することにより行われる。ここで用いる用語「非経口」は、経口投与、静脈内、筋肉内、または腹腔内投与を含んでいる。非経口投与の皮下および筋肉内の形式が一般には好ましい。本発明はまた、式（Ｉ）の化合物を皮下、鼻腔内、直腸内、経皮または膣内で送達することによっても行うことができる。
【００６８】
式（Ｉ）の化合物はまた、吸入によっても投与できる。「吸入」は、鼻腔内および経口の吸入投与を意味する。噴霧剤や定量噴霧式吸入器など、そのような投与の適当な剤形は、慣用の技術により製造することができる。
【００６９】
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物および薬学的に許容される担体、アジュバント、または溶媒を含有してなる医薬組成物に関する。式（Ｉ）の化合物はまた、２つ目の治療上活性な化合物との組み合わせで医薬組成物の中に含まれていてもよい。用いられる医薬担体は、例えば、固体、液体またはガスの形態であってもよい。固体担体としては、例えば、乳糖、白土、ショ糖、タルク、ゼラチン、カンテン、ペクチン、アラビアゴム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸などが挙げられる。液体担体としては、例えば、シロップ、ピーナッツ油、オリーブオイル、水などが挙げられる。ガス担体としては、これらに限定されないが、例えば、二酸化炭素および窒素が挙げられる。同様に、担体または希釈剤は、モノステアリン酸グリセリンまたはジステアリン酸グリセリン、単独またはワックスとの混合など、薬業界で公知の時間を遅らせる物質を含んでいてもよい。
【００７０】
広範な種類の医薬品の剤形を採ることができる。固形剤形を経口投与に用いる場合は、製剤は錠剤、硬ゼラチンカプセル、トローチ剤またはロゼンジの形である。固体担体の量は大きく変わるが、一般的には約０．０２５ｍｇ−約１ｇである。液体剤形が経口投与に望まれる場合は、製剤は典型的にはシロップ、エマルジョン、軟ゼラチンカプセル、懸濁剤、または溶液の形である。非経口の剤形が採用される場合、薬物は、固体でも液体形でもよく、直接投与用に製剤化されていてもよく、または再構成に適していてもよい。局所用剤形もまた含まれる。局所用剤形の例としては、固形剤、液剤、準固形剤が挙げられる。固形剤は、散布剤、湿布剤などが挙げられる。液剤としては、溶液、懸濁剤およびエマルジョンが挙げられる。準固形剤としては、クリーム剤、軟膏、ゲル剤などが挙げられる。局所で用いられる式（Ｉ）の化合物の量は、もちろん、選んだ化合物および状態の性質や重症度により変わるが、医師の裁量に合わせて変えることができる。式（Ｉ）の化合物の代表的な局所の用量は、約０．０１ｍｇから約２．０ｇで、日に１−４回、好ましくは１−２回投与される。
【００７１】
局所投与のためには、活性成分は本発明の医薬組成物の約０．００１％〜約１０％ｗ/ｗを含有する必要がある。
【００７２】
本発明の点滴剤は、無菌のまたは非滅菌の、水またはオイルの溶液または懸濁剤から成り、活性成分を適当な水溶液に溶解することにより調製して、任意に殺菌剤および/または抗真菌剤および/または他の保存剤を含めてもよく、そして任意に界面活性剤を含めてもよい。次いで、得られた溶液はろ過により澄明にして、適当な容器に移し、密閉して、加熱滅菌器で処理するか９８−１００℃で半時間維持することにより滅菌する。もしくは、溶液はろ過により無菌化し、無菌で容器に移してもよい。点滴剤に含有させるのに適した殺菌剤および抗真菌剤の例としては、硝酸フェニル水銀または酢酸フェニル水銀（０．００２％）、塩化ベンザルコニウム（０．０１％）および酢酸クロルヘキシジン（０．０１％）が挙げられる。オイル溶液の調製のための適当な溶媒としては、グリセリン、希釈したアルコールおよびプロピレングリコールが挙げられる。
【００７３】
本発明のローション剤としては、皮膚または目への投与に適したものが挙げられる。点眼薬は殺菌剤を含んでいてもよい無菌水溶液から成り、点滴剤の調製法と同様の方法で調製してもよい。皮膚に投与するためのローション剤またはリニメント剤はまた、アルコールやアセトンなどの乾燥を促進し皮膚を冷やす薬剤、および/またはグリセリンなどの保湿剤またはヒマシ油やラッカセイ油などのオイルを含んでいてもよい。
【００７４】
本発明のクリーム剤、軟膏またはペースト剤は、外用の活性成分の半固形製剤である。それらは細かく砕いたまたは粉末にした形態の活性成分を脂肪性または非脂肪性基剤と、単独でまたは水性もしくは非水性液体の溶液または懸濁液中で混ぜ合わせて製造することができる。基剤は、プロピレングリコールやマクロゴールなどのアルコールとともに、ハード、ソフトまたは液体のパラフィンなどの炭化水素類、グリセリン、蜜ろう、金属石鹸；粘液；アーモンドオイル、コム（com）、ラッカセイ油、ヒマシ油またはオリーブ油などの天然由来のオイル；羊毛脂またはその誘導体、またはステアリン酸やオレイン酸などの脂肪酸を含んでいてもよい。製剤は、ソルビタンエステルやそれらのポリオキシエチレン誘導体などのアニオン性、カチオン性または非イオン性界面活性剤等の適当な界面活性剤を含んでいてもよい。天然ゴム、セルロース誘導体またはシリカ等の無機物質などの懸濁剤、およびラノリンなどの他の成分も含まれていてもよい。
【実施例】
【００７５】
以下の実施例は、本発明を説明するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。
全ての化合物の構造は、核磁気共鳴（１ＨＮＭＲ）および質量分析法（ＭＳ）により同定した。１ＨＮＭＲケミカルシフト(δ)はｐｐｍ（１０−６）で記録した。ＮＭＲはVarian Mercury-Plus-400MHz spectrometerで測定した。適当な溶媒は、内部標準としてテトラメチルシラン（ＴＭＳ）を用いて、重クロロホルム（ＣＤＣｌ３）、重ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ−ｄ６）および重メタノール（ＣＤ３ＯＤ）であり、そしてケミカルシフトはｐｐｍ（１０−６）で記録した。
低分解能ＭＳは、Themo Finnigan LCQ-Advantage質量分析機で測定した。
ＰＡＲＰ酵素の平均阻害活性ＩＣ５０は、Thermo Electron Co., Vantaa, Finlandで測定した。
薄層シリカゲルは、Yantai Huanghai HSGF254またはQingdao GF254 silica gel plateである。
カラムクロマトグラフィーは、通常、担体としてYantai Huanghai 200-300メッシュシリカゲルを用いた。
ＤＭＳＯ−ｄ６：重ジメチルスルホキシド
ＣＤＣｌ３：重クロロホルム
ＣＤ３ＯＤ：重メタノール
【００７６】
キー中間体の調製
３，３，３−トリフルオロ―２−オキソプロパン酸の調製
３，３，３−トリフルオロ―２−オキソプロパン酸エチル（５ｇ，２９．３６ｍｍｏｌ）のエタノール（３０ｍｌ）溶液に、ゆっくりと水酸化ナトリウム水溶液（２．３５ｇ，５８．７２ｍｍｏｌ，を水（３０ｍｌ）に溶解）を添加し、室温で出発物質が消費されるまで２０時間撹拌した。反応混合液を濃縮し、得られた白色固体は水（１００ｍｌ）に溶解した。水相は酢酸エチル（５０ｍ×２）で抽出し、次いで水相を濃塩酸でｐＨ１〜２に調節し、濃縮して、白色固体を得た。固体はメタノール（２００ｍｌ）に添加して、終夜撹拌し、ろ過し、次いで、ろ液を濃縮して乾燥し、粗生成物（４．１３ｇ、９９％）を白色固体として得たが、さらに生成することなく次の工程に用いた。
【００７７】
２−シクロプロピル−２−オキソ酢酸の調製
１−シクロプロピルエタノン（１０ｇ，１１８．９ｍｍｏｌ）および水（６６ｍｌ）中の炭酸ナトリウム（１４５ｍｇ，１．３６ｍｍｏｌ）の混合物を５０℃に加熱し、次いでＫＭｎＯ４（１９．８ｇ，１２５．２ｍｍｏｌ）の水（５９４ｍｌ）溶液をこの温度で１０時間かけてゆっくりと添加し、次いでメタノール（９０ｍｌ）を加えた。混合液をろ過し、ろ液を濃縮して白色固体を得た。固体はアセトン（８０ｍｌ）に加えて６５℃で３０分間撹拌し、次いで室温に冷やし、析出した白色固体をろ取し、乾燥して、目的の生成物（１０ｇ、７４％）を白色固体として得た。
m/z [M-1]- 113.0
1H NMR(CD3OD): δ 2.49-2.43(1H, m),
1.06-0.98(4H, m)
【００７８】
２−（フラン−２−イル）−２−オキソ酢酸の調製
１−（フラン−２−イル）エタノン（５ｇ，４５．５ｍｍｏｌ）の水（６８ｍｌ）中の懸濁液に濃塩酸（２２．３ｍｌ）を添加して６５℃に加熱し、次いで亜硝酸ナトリウム（２２ｇ，３１８．５ｍｍｏｌ，水１０７ｍｌに溶解）水溶液を２時間かけて滴下し、ｐＨ３．０−３．５とした。混合液を６５℃で１時間加熱した後、さらに亜硝酸ナトリウム（１．４ｇ，２０ｍｍｏｌ，水７ｍｌに溶解）水溶液を滴下し、もう４０分間６５℃で１加熱し；反応を止めて室温に冷却した。３００ｍｌのＤＣＭを加え、水相はＤＣＭ（１００ｍｌ×３）で抽出し、水相は濃塩酸でｐＨを０．５に調整して酢酸エチル（１００ｍｌ×３）で抽出し、合わせた有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮乾固し、残渣は少量の酢酸エチルと石油エーテルに溶解して室温に保ち、析出した固体を石油エーテルで洗浄し、乾燥して目的の生成物（１．０３ｇ、１６．２％）を褐色固体として得た。
m/z [M-1]- 139.0
【実施例１】
【００７９】
1-シクロプロピル-2-(4-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)ピペラジン-1-イル)エタン-1,2-ジオン
２−フルオロ−５−ホルミルベンゾニトリルの調製
ＮＭＰ（４０ｍｌ）に３−ブロモ−４−フルオロベンズアルデヒド（１０ｇ，０．０５ｍｏｌ）およびＣｕＣＮ（５ｇ，０．０５５ｍｏｌ）を添加した。得られた混合液は反応が完了するまで（ＴＬＣでモニター）１７０℃で２４時間加熱し、次いで８０℃に冷却し、セライト１０ｇを加えてこの温度で１時間撹拌した。次いで反応混合液は室温に冷やして、酢酸エチル（２５０ｍｌ）と水（１２５ｍｌ）に分配し、有機層を水および食塩水で洗浄し、乾燥し、ろ過し、そして濃縮して粗生成物を得た。次いで、粗生成物をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝４：１）で精製し、目的化合物（８ｇ、１００％）を淡黄色固体として得た。
1H NMR (CDCl3): δ 9.99 (1H, S), 8.18
(2H, m), 7.43 (1H, m). 
【００８０】
ジメチル  (3-オキソ-1,3-ジヒドロイソベンゾフラン-1-イル)ホスホネート
乾燥メタノール（４０ｍｌ）にＮ２雰囲気下０℃で撹拌しながらナトリウム（１．１５ｇ，５０ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加し、次いで亜リン酸水素ジメチル（５．５ｇ，５０ｍｍｏｌ）および２−ホルミル安息香酸（５．２５ｇ，３５ｍｍｏｌ）を添加した。氷浴を取り除いて反応混合液を室温で３０分間撹拌し、次いで反応混合液にメタンスルホン酸（５．５ｇ，５５ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、減圧濃縮して粗残渣を得た。粗残渣をＤＣＭと冷水（各１００ｍｌ）に分配させ、有機層を水および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、そして濃縮して粗生成物（５．７ｇ、６７％）をオフホワイトの固体として得たが、さらに生成することなく次の工程に用いた。
1H NMR (CDCl3): δ 7.96 (1H, d), 7.75 (2H,
m), 7.61 (1H, m), 5.73 (1H, d), 3.93 (3H, d), 3.60(3H, d).
【００８１】
2-フルオロ-5-((3-オキソイソベンゾフラン-1(3H)-イリデン)メチル)ベンゾニトリルの調製
２−フルオロ−５−ホルミルベンゾニトリル（０．７４ｇ，５ｍｍｏｌ）およびジメチル  (3-オキソ-1,3-ジヒドロイソベンゾフラン-1-イル)ホスホネート（１．２ｇ，５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍｌ）溶液に１５℃以下の温度でトリエチルアミン（０．７ｍｌ，５ｍｍｏｌ）を滴下し、次いで室温までゆっくりと上げて終夜撹拌した。反応混合液を濃縮し、残渣に水を加えて３０分間撹拌した。析出した固体をろ取して、水、ヘキサンおよびエーテルで洗浄し、真空乾燥して、目的化合物（１．２ｇ、９２．３％）を淡黄色固体（ＥとＺ異性体の５０：５０混合物）として得たが、さらに精製することなく次の工程に用いた。
1H NMR (CDCl3): δ 8.13 (1H, m), 8.05 (1H,
m), 7.98 (1H, m), 7.79 (2H, m), 7.61 (1H, m), 7.30 (1H, m), 6.35 (1H, s).
【００８２】
2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)安息香酸の調製
2-フルオロ-5-((3-オキソイソベンゾフラン-1(3H)-イリデン)メチル)ベンゾニトリル（１．２ｇ，４．５ｍｍｏｌ）の水（６．５ｍｌ）混合液に水酸化ナトリウム水溶液（０．８４ｇの水１．６ｍｌ溶液）を滴下し、次いで９０℃で１時間加熱した。７０℃に冷却後、ヒドラジンヒドラート（６．４ｍｌ）を加え、反応混合液を７０℃で終夜加熱した。次いで、反応混合液は室温に冷却し、塩酸水（２Ｎ）を加えてｐＨ３−４に調整した。析出した固体をろ取し、水で洗浄し、真空乾燥して、目的化合物（０．９ｇ、７０％）を桃色固体として得たが、さらに精製することなく次の工程に用いた。
m/z [M-1]- 296.90
1H NMR(DMSO-d6): δ 13.22 (1H, brs), 12.61 (1H,
s), 8.27 (1H, m), 7.99-7.81 (4H, m), 7.59 (1H, m), 7.25 (1H, m), 4.36 (2H, s)
【００８３】
tert-ブチル  4-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)ピペラジン-1-カルボキシレートの調製
2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)安息香酸（１００ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）、tert-ブチル  ピペラジン−１−カルボキシレート（１８７．３ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ），ＨＡＴＵ（２５５ｍｇ，０．６７ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（０．５ｍｌ，３．０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２５ｍｌ）に溶解し、室温で２４時間撹拌した。反応混合液をＤＣＭと水（各５０ｍｌ）の間で分配し、有機層は炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、次いで濃縮して粗生成物を得た。次いで、粗生成物をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１：３）で精製し、目的化合物（１００ｍｇ、６４％）を白色固体として得た。
1H NMR(CDCl3): δ 10.39 (1H, s), 8.47 (1H,
m), 7.79-7.70 (3H, m), 7.34-7.26 (2H, m), 7.04 (1H, m), 4.28 (2H, s), 3.75-3.27
(8H, m), 1.47 (9H, s)
【００８４】
4-(4-フルオロ-3-(ピペラジン-1-カルボニル) ベンジル)フタラジン-1(2H)-オン  TFA 塩の調製
tert-ブチル  4-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)ピペラジン-1-カルボキシレート（１００ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍｌ）溶液にＴＦＡ（０．５ｍｌ）を添加し、室温で６時間撹拌した。反応混合液を減圧濃縮して粗生成物を黄色固体として得たが、さらに精製することなく次の工程に用いた。
m/z [M+1]+
367.3
【００８５】
1-シクロプロピル-2-(4-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)ピペラジン-1-イル)エタン-1,2-ジオンの調製
4-(4-フルオロ-3-(ピペラジン-1-カルボニル) ベンジル)フタラジン-1(2H)-オン  TFA 塩（１．２４ｇ，２．６８ｍｍｏｌ）、２−シクロプロピル−２−オキソ酢酸（２．８４ｇ，２４．８４ｍｍｏｌ），ＤＩＰＥＡ（６．９ｍｌ，４１．４ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（４．０８ｇ，１０．８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１００ｍｌ）中で混合し、得られた反応混合液を反応が終了するまで（ＴＬＣでモニター）室温で終夜撹拌した。次いで、反応混合液をＤＣＭと水（各１００ｍｌ）の間で分配し、水相はＤＣＭ（１００ｍｌ）で抽出した。有機層を合わせて、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して粗生成物を得た。次いで、粗生成物をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１００：１）で精製し、メタノールから再結晶して目的生成物（６１０ｍｇ、４９．３％）を白色固体として得た。
m/z [M+1]+
463.3
1H NMR(CDCl3): δ 10.46 (1H, brs),
8.48-8.46 (1H, m), 7.81-7.71 (3H, m), 7.36-7.30 (2H, m), 7.09-7.02 (1H, m),
4.29-4.27 (2H, d), 3.89-3.32 (8H, m), 2.44-2.31 (1H, m), 1.27-1.12 (4H, m).
【実施例２】
【００８６】
1-シクロプロピル-2-((1S,4S)-5-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)-2,5-ジアザビシクロ[2,2,1]ヘプタン-2-イル)エタン-1,2-ジオン
(1S, 4S)-tert-ブチル  5-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)-2,5-ジアザビシクロ[2,2,1]ヘプタン-2-カルボキシレートの調製
2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)安息香酸（４００ｍｇ，１．３２ｍｍｏｌ）、(1S, 4S)-tert-ブチル  2,5-ジアザビシクロ[2,2,1]ヘプタン-2-カルボキシレート（６６５ｍｇ，３．３５ｍｍｏｌ），ＨＡＴＵ（１．０２ｇ，２．６８ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（１．２ｍｌ，６．７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２５ｍｌ）に溶解し、室温で７２時間撹拌した。反応混合液はＤＣＭと水（各５０ｍｌ）の間で分配し、有機層を炭酸水素ナトリウム水溶液、および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して粗生成物（１．２３ｇ）を褐色オイルとして得たが、さらに精製することなく次の工程に用いた。
m/z [M-1]- 477.2
【００８７】
4-(3-((1S,4S)-2,5-ジアザビシクロ[2,2,1]ヘプタン-2-カルボニル)-4-フルオロベンジル)フタラジン-1(2H)-オン  TFA 塩の調製
(1S, 4S)-tert-ブチル  5-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)-2,5-ジアザビシクロ[2,2,1]ヘプタン-2-カルボキシレート（１．２３ｇ、前工程からの粗生成物）のＤＣＭ（５０ｍｌ）溶液にＴＦＡ（４ｍｌ）を加え、室温で１６時間撹拌した。反応混合液を減圧濃縮し、粗生成物を黄色オイル（２．６４ｇ）として得たが、さらに精製することなく次の工程に用いた。
m/z [M+1]+ 379.4
【００８８】
1-シクロプロピル-2-((1S,4S)-5-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)-2,5-ジアザビシクロ[2,2,1]ヘプタン-2-イル)エタン-1,2-ジオンの調製
4-(3-((1S,4S)-2,5-ジアザビシクロ[2,2,1]ヘプタン-2-カルボニル)-4-フルオロベンジル)フタラジン-1(2H)-オン  TFA 塩（前工程からの粗生成物）、２−シクロプロピル−２−オキソ酢酸（９１７ｍｇ，８．０４ｍｍｏｌ），ＤＩＰＥＡ（１．５ｍｌ，１２．０６ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１．０２ｇ，２．６８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３０ｍｌ）中で混合した。得られた反応混合液を室温で２４時間撹拌し、反応混合液をＤＣＭと水（各１００ｍｌ）の間で分配した。水相はＤＣＭ（１００ｍｌ）で抽出し、有機層を合わせて、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して粗生成物を得た。粗生成物はシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝４０：１）で精製して目的生成物［３５０ｍｇ、５５％、2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)安息香酸（４００ｍｇ）に基づく］をオフホワイト固体として得た。
m/z [M+1]+
475.4
1H NMR(CDCl3): δ 10.57-10.30 (1H,
brs), 8.44 (1H, m), 7.77-7,63 (3H, m), 7.50-7.23 (2H, m), 7.05-6.92 (1H, m),
5.25-4.85 (2H, m), 4.50-4.48 (2H, d), 3.91-3.30 (4H, m), 2.94-2.68 (1H, m),
1.97-1.85 (2H, m), 1.20-0.96 (4H, m).
【実施例３】
【００８９】
1-シクロプロピル-2-(4-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)-1,4-ジアゼパン-1-イル)エタン -1,2-ジオン 
tert-ブチル  4-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)-1,4-ジアゼパン-1-カルボキシレートの調製
2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)安息香酸（１００ｍｇ，０．３３５ｍｍｏｌ）、tert-ブチル  1,4-ジアゼパン-1-カルボキシレート（２０１ｍｇ，１ｍｍｏｌ）ＨＡＴＵ（２５５ｍｇ，０．６７ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（０．５ｍｌ，２．８８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３０ｍｌ）に溶解し、室温で２４時間撹拌した。反応混合液はＤＣＭと水（各５０ｍｌ）の間で分配し、有機層を炭酸水素ナトリウム水溶液、および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して粗生成物（３７０ｍｇ）を褐色オイルとして得たが、さらに精製することなく次の工程に用いた。
m/z [M-Boc]- 379 
1H NMR(CDCl3): δ 10.55-10.44 (1H, m),
8.43 (1H, m), 7.76 (3H, m), 7.27 (2H, m), 7.05-6.98 (1H, m), 4.26 (2H, s),
3.78-3.26 (8H, m), 2.10-1.55 (2H, m), 1.47 (9H, s).
【００９０】
4-(3-(1,4-ジアゼパン-1-カルボニル)-4-フルオロベンジル)フタラジン-1(2H)-オン  TFA塩の調製
粗tert-ブチル  4-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)-1,4-ジアゼパン-1-カルボキシレート（３７０ｍｇ、前工程からの粗生成物）のＤＣＭ（２０ｍｌ）にＴＦＡ（１ｍｌ）を添加し、室温で１４時間撹拌した。反応混合液を減圧濃縮して粗生成物を黄色オイル（３００ｍｇ）として得たが、さらに精製することなく次の工程に用いた。
m/z [M+1]+ 381
1H NMR(CD3OD): δ 8.36-8.34 (1H, m),
7.94-7.79 (3H, m), 7.52-7.48 (1H, m), 7.42-7.37 (1H, m), 7.19-7.15 (1H, m),
4.38 (2H, s), 3.95-3.23 (8H, m), 2.18-1.99 (2H, m).
【００９１】
1-シクロプロピル-2-(4-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)-1,4-ジアゼパン-1-イル)エタン -1,2-ジオン の調製
4-(3-(1,4-ジアゼパン-1-カルボニル)-4-フルオロベンジル)フタラジン-1(2H)-オン  TFA塩（前工程から得た粗生成物）、２−シクロプロピル−２−オキソ酢酸（２３０ｍｇ，２．０１ｍｍｏｌ），ＤＩＰＥＡ（０．５ｍｌ，２．９ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（２５５ｍｇ，０．６７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２０ｍｌ）中で混合した。得られた反応混合液を室温で２０時間撹拌し、反応混合液をＤＣＭと水（各１００ｍｌ）の間で分配した。水相はＤＣＭ（１００ｍｌ）で抽出し、有機層を合わせて、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して粗生成物を得た。次いで、粗生成物はシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝８０：１）で精製して目的生成物［３８ｍｇ、２４％、2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)安息香酸（１００ｍｇ）に基づく］をオフホワイト固体として得た。
m/z [M+1]+ 477.1
1H NMR(CDCl3): δ 10.30 (1H, brs),
8.45-8.43 (1H, m), 7.80-7.69 (3H, m), 7.30-7.22 (2H, m), 7.07-6.99 (1H, m),
4.27-4.26 (2H, d), 3.86-3.31 (8H, m), 2.39-2.35 (1H, m), 1.71-1.88(2H, m),
1.28-1.09 (4H, m).
【実施例４】
【００９２】
1-(4-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)ピペラジン-1-イル)-2-フェニルエタン-1,2-ジオン
4-(4-フルオロ-3-(ピペラジン-1-カルボニル)ベンジル)フタラジン-1(2H)-オン  TFA塩（３１１ｍｇ，０．６５ｍｍｏｌ）、２−オキソ−２−フェニル酢酸（９００ｍｇ，６ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２ｍｌ，１１．６ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１０１０ｍｇ，２．６５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５０ｍｌ）中で混合し、得られた反応混合液を反応が終了するまで（ＴＬＣでモニター）室温で４日間撹拌した。次いで、反応混合液はＤＣＭと水（各１００ｍｌ）の間で分配し、水相はＤＣＭ（１００ｍｌ）で抽出した。有機層を合わせて、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して粗生成物を得た。次いで、粗生成物はシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１００：１）でまず精製し、さらに分取ＴＬＣ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝４０：１）で再精製して目的生成物（１１０ｍｇ、３２．９％）をオフホワイト固体として得た。
m/z [M+1]+ 499.1 
1H NMR(CDCl3): δ 10.15 (1H, brs),
8.49-8.42 (1H, m), 7.95-7.91 (2H, m), 7.77-7.66 (4H, m), 7.64-7.48 (2H, m),
7.33-7.25 (2H, m), 7.08-6.85 (1H, m), 4.28-4.24 (2H, d), 3.98-3.32 (8H, m). 
【実施例５】
【００９３】
1-(4-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)ピペラジン-1-イル)-3, 3-ジメチルブタン-1,2-ジオン
4-(4-フルオロ-3-(ピペラジン-1-カルボニル)ベンジル)フタラジン-1(2H)-オン  TFA塩（３１０ｍｇ，０．６５ｍｍｏｌ）、3,3-ジメチル-2-オキソブタン酸［１．３７ｇ（６０％），６．３ｍｍｏｌ］、ＤＩＰＥＡ（２ｍｌ，１１．６ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１０３０ｍｇ，２．７２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５０ｍｌ）中で混合し、得られた反応混合液を反応が終了するまで（ＴＬＣでモニター）室温で４４時間撹拌した。次いで、反応混合液はＤＣＭと水（各１００ｍｌ）の間で分配し、水相はＤＣＭ（１００ｍｌ）で抽出した。有機層を合わせて、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して粗生成物を得た。次いで、粗生成物はシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１００：１）でまず精製し、さらに分取ＴＬＣ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝４０：１）で再精製して目的生成物（１５０ｍｇ、４６．９％）をオフホワイト固体として得た。
m/z [M+1]+ 479.1 
1H NMR(CDCl3): δ 10.06 (1H, brs),
8.45-8.43 (1H, m), 7.77-7.68 (3H, m), 7.32-7.28 (2H, m), 7.07-6.99 (1H, m),
4.27-4.26 (2H, d), 3.92-3.16 (8H, m), 1.28-1.24 (9H, d).  
【実施例６】
【００９４】
1-(4-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)-1,4-ジアゼパン-1-イル)-3,3-ジメチルブタン-1,2-ジオン
4-(3-(1,4-ジアゼパン-1-カルボニル)-4-フルオロベンジル)フタラジン-1(2H)-オン  TFA塩（３２０ｍｇ，０．６５ｍｍｏｌ）、3,3-ジメチル-2-オキソブタン酸［１．６ｇ（６０％），７．３９ｍｍｏｌ］，ＤＩＰＥＡ（３ｍｌ，１７．４ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１．５ｇ，３．９２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５０ｍｌ）中で混合した。得られた反応混合液を室温で８７時間撹拌した後、反応混合液をＤＣＭと水（各１００ｍｌ）の間で分配した。水相はＤＣＭ（１００ｍｌ）で抽出し、有機層を合わせて、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して粗生成物を得た。次いで、粗生成物を分取ＴＬＣ（ＥＡ：ＰＥ＝１：１）で精製して、目的生成物（３０ｍｇ、９．１％）をオフホワイト固体として得た。
m/z [M+1]+ 493.4 
1H NMR (CDCl3): δ 8.49 (1H, m),
7.76-7.70 (3H, m), 7.35-7.24 (2H, m), 7.04-7.02 (1H, m), 4.31-4.28 (2H, m),
3.91-3.20 (8H, m), 1.95-1.72 (2H, m), 1.27 (9H, m).
【実施例７】
【００９５】
1-(4-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)-1,4-ジアゼパン-1-イル)-2-フェニルエタン-1,2-ジオン
4-(3-(1,4-ジアゼパン-1-カルボニル)-4-フルオロベンジル)フタラジン-1(2H)-オン  TFA塩（３２０ｍｇ，０．６５ｍｍｏｌ）、2-オキソ-2-フェニル酢酸（１．４ｇ，９．３２ｍｍｏｌ），ＤＩＰＥＡ（３ｍｌ，１７．４ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１．８ｇ，４．７２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５０ｍｌ）中で混合した。得られた反応混合液を室温で８５時間撹拌した後、反応混合液をＤＣＭと水（各１００ｍｌ）の間で分配した。水相はＤＣＭ（１００ｍｌ）で抽出し、有機層を合わせて、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して粗生成物を得た。次いで、粗生成物を分取ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝１：１から１：２）で精製して、目的生成物（１４０ｍｇ、４１％）を淡黄色固体として得た。
m/z [M+1]+ 513.4 
1H NMR(CDCl3): δ 10.41 (1H, brs),
8.46-8.38 (2H, m), 7.95-7.87 (2H, m), 7.79-7.60 (4H, m), 7.53-7.45 (2H, m),
7.39-7.22 (2H, m), 7.08-6.95 (1H, m), 4.31-4.28 (2H, d), 3.93-3.30 (8H, m),
1.78-1.62 (2H, m).
【実施例８】
【００９６】
1-(4-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)-1,4-ジアゼパン-1-イル)-2-(フラン-2-イル)エタン-1,2-ジオン
4-(3-(1,4-ジアゼパン-1-カルボニル)-4-フルオロベンジル)フタラジン-1(2H)-オン  TFA塩（３２０ｍｇ，０．６５ｍｍｏｌ）、2-(フラン-2-イル)-2-オキソ酢酸（５６３ｍｇ，４ｍｍｏｌ），ＤＩＰＥＡ（１ｍｌ，６ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（５１０ｍｇ，１．３４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３０ｍｌ）中で混合した。得られた反応混合液を室温で６０時間撹拌した後、反応混合液をＤＣＭと水（各１００ｍｌ）の間で分配した。水相はＤＣＭ（１００ｍｌ）で抽出し、有機層を合わせて、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して粗生成物を得た。次いで、粗生成物はシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１：３）で精製して、目的生成物（１１１ｍｇ、３１％）を淡黄色固体として得た。
m/z [M+1]+ 503.3
1H NMR (CDCl3): δ
10.61(1H, brs), 8.46-8.40(1H, m), 7.78-7.67(4H, m), 7.40-7.26(3H, m), 7.08-6.96
(1H, m), 6.61-6.58(1H, m), 4.27 (2H, s), 3.90-3.34 (8H, m), 2.17-1.99 (2H, m).
【実施例９】
【００９７】
1-(4-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)ピペラジン-1-イル)-2-(フラン-2-イル)エタン-1,2-ジオン
4-(4-フルオロ-3-(ピペラジン-1-カルボニル)ベンジル)フタラジン-1(2H)-オン  TFA塩（１５５ｍｇ，０．３２ｍｍｏｌ）、2-(フラン-2-イル)-2-オキソ酢酸（２７８ｍｇ，１．９８ｍｍｏｌ），ＤＩＰＥＡ（０．５ｍｌ，３ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（２５１ｍｇ，０．６６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３０ｍｌ）中で混合し、得られた反応混合液を反応が終了するまで（ＴＬＣでモニター）室温で４５時間撹拌した。次いで、反応混合液をＤＣＭと水（各１００ｍｌ）の間で分配し、水相はＤＣＭ（５０ｍｌ）で抽出した。有機層を合わせて、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して粗生成物を得た。次いで、粗生成物はシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１：３）で精製して、目的生成物（２０ｍｇ、２０．４％）を淡黄色固体として得た。
m/z [M+1]+ 489.2
1H NMR(CDCl3): δ 10.56
(1H, brs),8.45 (1H, s),7.77-7.70 (4H, m),7.50-7.32 (3H,m),7.07-6.98 (1H,
m),6.61 (1H, s),4.29 (2H, s),3.82-3.36 (8H, m).
【実施例１０】
【００９８】
1-((1S,4S)-5-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)-2-(フラン-2-イル)エタン-1,2-ジオン
4-(3-((1S,4S)-2,5-ジアザビシクロ[2,2,1]ヘプタン-2-カルボニル)-4-フルオロベンジル)フタラジン-1(2H)-オン  TFA 塩（２００ｍｇ，０．４１ｍｍｏｌ）、2-(フラン-2-イル)-2-オキソ酢酸（３５２ｍｇ，２．５２ｍｍｏｌ），ＤＩＰＥＡ（０．６３ｍｌ，３．７８ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（３２０ｍｇ，０．８４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３０ｍｌ）中で混合した。得られた反応混合液を室温で６０時間撹拌した後、反応混合液をＤＣＭと水（各１００ｍｌ）の間で分配した。水相はＤＣＭ（１００ｍｌ）で抽出し、有機層を合わせて、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して粗生成物を得た。次いで、粗生成物はシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１：３）で精製して、目的生成物（１０６ｍｇ、５０．５％）を淡黄色固体として得た。
m/z [M+1]+ 501.4
1H NMR(CDCl3): δ 10.61
(1H, brs), 8.46 (1H, s), 7.81-7.62 (6H, m), 7.60-7.26 (1H, m), 7.25-6.98 (1H,
m), 6.60 (1H, s), 4.30 (2H, s), 3.94-3.38 (6H, m), 2.04-1.89 (2H, m).
【実施例１１】
【００９９】
1-(4-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)ピペラジン-1-イル)プロパン-1,2-ジオン
4-(4-フルオロ-3-(ピペラジン-1-カルボニル)ベンジル)フタラジン-1(2H)-オン  TFA塩（１５７．５ｍｇ，０．３４ｍｍｏｌ）、2-オキソプロパン酸（０．１５ｍｌ（ｄ＝１．２６），２．１５ｍｍｏｌ），ＤＩＰＥＡ（０．５ｍｌ，３ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（２５８．６ｍｇ，０．６８ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２０ｍｌ）中で混合し、得られた反応混合液を反応が終了するまで（ＴＬＣでモニター）室温で６０時間撹拌した。次いで、反応混合液をＤＣＭと水（各５０ｍｌ）の間で分配し、水相はＤＣＭ（５０ｍｌ）で抽出した。有機層を合わせて、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して粗生成物を得た。次いで、粗生成物はシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１：２）で精製して、目的生成物（２０ｍｇ、１３．５％）を淡黄色固体として得た。
m/z [M+1]+ 437.3
1H NMR(CDCl3): δ 11.10 (1H, brs),
8.47-8.4 5(1H, d), 7.78-7.69 (3H, m), 7.35-7.25 (2H, m), 7.07-7.00 (1H, m),
4.29 (2H, s), 3.82-3.35 (8H, m), 2.46-2.43 (3H, d).
【実施例１２】
【０１００】
1-(4-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)-1,4-ジアゼパン-1-イル) プロパン-1,2-ジオン
4-(3-(1,4-ジアゼパン-1-カルボニル)-4-フルオロベンジル)フタラジン-1(2H)-オン  TFA塩（３２０ｍｇ，０．６５ｍｍｏｌ）、２−オキソプロパン酸［０．３ｍｌ（ｄ＝１．２６），４．２９ｍｍｏｌ］，ＤＩＰＥＡ（１ｍｌ，６ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（５１０ｍｇ，１．３４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３０ｍｌ）中で混合した。得られた反応混合液を室温で６０時間撹拌した後、反応混合液をＤＣＭと水（各１００ｍｌ）の間で分配した。水相はＤＣＭ（１００ｍｌ）で抽出し、有機層を合わせて、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して粗生成物を得た。次いで、粗生成物はシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１：２）で精製して目的生成物（１３６ｍｇ、４５．１％）をオフホワイト固体として得た。
m/z [M+1]+ 451.3
1H NMR(CDCl3): δ 10.99 (1H, brs), 8.46
(1H, m), 7.76 (3H, m), 7.25-7.01 (3H, m), 4.28 (2H, s), 3.85-3.33 (8H, m), 2.44
(3H, s).
【実施例１３】
【０１０１】
3,3,3-トリフルオロ-1-(4-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)ピペラジン-1-イル)プロパン-1,2-ジオン
標題化合物を実施例１の方法に従って淡黄色固体として調製した。
m/z [M+1]+ 491.2
【実施例１４】
【０１０２】
3,3,3-トリフルオロ-1-(4-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)-1,4-ジアゼパン-1-イル)プロパン-1,2-ジオン
標題化合物を実施例３の方法に従って淡黄色固体として調製した。
m/z [M+1]+ 505.2
【実施例１５】
【０１０３】
1-((1S,4S)-5-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)-3,3-ジメチルブタン-1,2-ジオン
標題化合物を実施例２の方法に従って淡黄色固体として調製した。
m/z [M+1]+ 491.2
【実施例１６】
【０１０４】
1-((1S,4S)-5-(2-フルオロ-5-((4-オキソ-3,4-ジヒドロフタラジン-1-イル)メチル)ベンゾイル)-2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-イル)-2-フェニルエタン-1,2-ジオン
標題化合物を実施例２の方法に従って淡黄色固体として調製した。
m/z [M+1]+ 511.2
【０１０５】
ＰＡＲＰを阻害する活性を有する式（Ｉ）の本発明化合物、および水和物、溶媒和物、異性体、またはそれらの塩は下記の試験法で評価した。
Ａ：ＰＡＲＰ阻害試験
ＰＡＲＰ活性についての試験化合物の阻害効果を調べ、ＩＣ５０値を計算する。３−アミノベンズアミド（TREVIGEN,
MD, USA）をポジティブ対照薬として用いた。
HT Universal Colorimetric PARP Assay Kit With
Histones and Coating Buffer (TREVIGEN, Cat# 4671-096-K)を試験化合物が持つ阻害活性を試験するために用いた（Shanghai De Novo Pharmatech Co Ltd. 上海迪諾&#35834;医薬科技有限公司より）。
【０１０６】
プロトコール
プレートコーティング
クリアなタンパク結合プレートの各ウエルに、希釈したヒストン５０μｌの一定量を添加し、プレートを蓋、接着性のプレートカバーまたはパラフィンでカバーし、次いで、それを４℃で終夜インキュベートする。
【０１０７】
プレートブロッキング
プレートは1X PBS（Sangon Biotech,
Shanghai）+0.1% Triton X-100(Sangon Biotech, Shanghai)（２００μｌ／ウェル）で４回洗浄し、各ウェルに１００μｌの1X Strep-Diluentを添加してブロックし、次いで４℃で１時間または終夜インキュベートし、カバーする。次いで、プレートは1X PBS + 0.1% Triton X-100（２００μｌ／ウェル）で再度４回洗浄する。
【０１０８】
リボシル化反応
ラッパーからストリップウェルを除いた後、ウェルに関心のあるインヒビターの一連の希釈液を添加する。次いでインヒビターを含むウェルに希釈したＰＡＲＰ酵素（１ユニット／ウェル）を添加し、室温で１０分間インキュベートする。各ウェルに２５μｌの1X
PARP Cocktailを添加し、室温で３０−６０分間インキュベートする。
活性のコントロールは、インヒビターのない１ユニット／ウェルＰＡＲＰ−ＨＳＡである。これらのウェルは１００％活性対照点を与える。ヒストンコートしたウェルの使用は、他の試験蛋白を用いる場合、ポジティブコントロールとして含めるべきである。
ネガティブコントロールは、バックグラウンドの吸光度を測定するために、ＰＡＲＰなしで調製した。
マルチチャンネルピペッターを用いて２５μｌの1X
PARP Cocktailを各ウェルに分配して、プレートを室温で３０−６０分間インキュベートする。
【０１０９】
検出
1X PBS + 0.1% Triton X-100（２００μｌ／ウェル）で４回洗浄した後、各ウェルに５０μｌの希釈したStrep-HRPを添加し、室温で２０分間インキュベートした。次いで、プレートは1X PBS + 0.1% Triton X-100（２００μｌ／ウェル）で、再度４回洗浄する。各ウェルに５０μｌのTACS-Sapphire（登録商標）発色基質を添加し、暗所で１０−３０分間インキュベートする。発色状況はウェルの観察可能な青色についてモニターし、そしてプレートは６３０ｎｍまたは４５０ｎｍフィルターを用いた９６穴プレートリーダー（Thermo Electron Co., Vantaa, Finland）で６３０ｎｍで読み取る。反応はウェル当たり０．２Ｍ塩酸５０μｌを添加することにより停止し、吸光度は４５０ｎｍで読み取る。
【０１１０】
結果：
全ての化合物はin vitroでＰＡＲＰ阻害活性を示し、３−アミノベンズアミドの活性よりはるかに強力であった。試験化合物はＰＡＲＰ阻害に対して６．６ｎＭ−２００ｎＭの範囲のＩＣ５０を持つのに対し、３−アミノベンズアミドは５１．０μＭのＩＣ５０をしか持たない。
【０１１１】
Ｂ．Ｖ−Ｃ８（ＢＲＣＡ２−欠損）およびＶ−Ｃ８＃１３−５（ＢＲＣＡ２−コンピテント）細胞増殖アッセイ
以下の方法が、ＰＡＲＰの触媒活性を阻害する本発明化合物の活性を測定するために用いられる。
Ｖ−Ｃ８（ＢＲＣＡ２−欠損）およびＶ−Ｃ８＃１３−５（ＢＲＣＡ２−コンピテント）細胞は、１０％ＦＢＳを追加したＦ１０培地中で維持した。細胞は、１×１０４細胞／ｍｌで９６穴プレートに蒔き、終夜プレートに付着させた。細胞は、薬物（本発明化合物およびポジティブコントロール薬を含む）の存在下１２０時間インキュベートし、細胞の生存はスルホローダミンＢ（ＳＲＢ）試験で測定した（Skehan P, et al. J. Natl. Cancer Inst 1990; 82:
1107-1112）。各サンプルの光学密度は５１０ｎｍでマイクロプレートリーダーで読み取った。
本発明化合物は、ＰＡＲＰの触媒活性を阻害するそれらの活性について試験を行った。各化合物についての阻害率または５０％阻害濃度ＩＣ５０（酵素活性の５０％を阻害する試験化合物の濃度）は、幾つかの異なる濃度の試験化合物と酵素基質を混合した一定の量でインキュベートすることにより測定した。
試験化合物のＰＡＲＰ阻害のＩＣ５０は、４２ｎＭから２００ｎＭに亘った。
【０１１２】
結論：
試験した化合物は、強いＰＡＲＰの阻害活性を有する。
【０１１３】
Ｃ：動物モデルアッセイ
試験方法：
雌のヌードマウス（Balb/cA-nude、６−７週令）をShanghai Laboratory Animal Center, Chinese
Academy of Sciences, Shanghai, Chinaから購入した。マウスは、加圧滅菌した齧歯動物用固形飼料と自由に飲める水で病原菌フリーの条件下で収容した。各マウスは、０．１ｍｌＰＢＳ中の乳がんＭＸ−１細胞を左側腹部上に皮下注射で接種した。腫瘍容積が２００−３５０ｍｍ３に達した時、マウスを最初の腫瘍容積測定値に基づきランダム化して、溶媒、化合物、テモゾロミド（ＴＭＺ）単独またはそれらの組合せのいずれかで処理した。腫瘍容積を電子デジタルノギスで測定し、式：長さ（ｍｍ）×幅（ｍｍ）２／２を用いて計算し、ｍｍ３で表した。Studentのｔ検定を測定した差の統計的有意性を評価するために用いた。
【０１１４】
結果を図１および２に示す。図１は動物モデル試験の結果を示し、溶媒、化合物、テモゾロミド（ＴＭＺ）の単独または組合せで処理したマウスの平均腫瘍容積を測定して、投与日数に対してプロットしたものである。ＴＭＺと本発明化合物の併用投与が、有意に相乗効果を持つことが見られる。
【０１１５】
図２は、動物モデル試験の結果を示し、溶媒、化合物、テモゾロミド（ＴＭＺ）の単独または組合せで処理したマウスの平均体重を測定して、投与日数に対してプロットしたものである。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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