(57)【要約】式（Ｉ）で表わされる化合物：2013512247.tif 000056または医薬的に許容されるその塩であり、フラビウイルス科ウイルス感染症の治療に有用である。ここで、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、本明細書に定義される通りである。別の実施態様では、本発明は、本明細書に記載の本発明の化合物および医薬的に許容される担体または賦形剤を含む、医薬組成物を対象とする。さらに別の実施態様では、本発明は、対象のＨＣＶ感染症を治療する方法を提供し、これは、本明細書に記載の本発明の化合物の治療的有効量を、該対象に投与することを含む。さらに別の実施態様では、本発明は、対象のＨＣＶポリメラーゼの活性を阻害または低下させる方法を対象とし、これは、本明細書に記載の本発明の化合物の治療的有効量を、該対象に投与することを含む。
2013512247.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物または医薬的に許容されるその塩：
【化３１】
2013512247.tif 000049
ここで
Ｒ１はＣ１−６アルキルまたはＣ３−６シクロアルキルであり；
Ｒ２は、置換されない、またはＲ１０によって１回以上置換されたフェニルであり；
Ｒ３は、置換されない、もしくはＲ１１によって１回以上置換されたＣ１−６アルキル；置換されない、もしくはＲ１２によって１回以上置換された６員複素環；置換されない、もしくはＲ１２によって１回以上置換されたＣ３−６シクロアルキル；または
【化３２】
2013512247.tif 000050
であり；
Ｒ１０は、ハロゲン、Ｃ１−３アルキル、ハロゲン化Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、−ＮＨ２、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、またはＣＨ３ＣＯＯ−であり；
Ｒ１１は、ハロゲン、オキソ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ３−６シクロアルキル、５〜６員複素環、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、−ＣＯＮ（Ｃ１−４アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）ＣＯＣ１−４アルキル、−ＮＨＣＯＣ１−４アルキル、カルボキシ、ヒドロキシル、ニトロ、アジド、シアノ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｈ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｃ１−４アルキル、または−ＮＨＳＯ２Ｃ１−４アルキルであり；
Ｒ１２は、ＯＨ、オキソ、ハロゲン、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＣＯ−ＮＨ−、Ｃ１−６アルキル−ＣＯ−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）−、３〜６員複素環、または５〜１０員ヘテロアリールであり；そして
Ｒ１３は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ハロゲン化Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＣＯ−、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｃ１−４アルキル、５〜１０員ヘテロアリール、またはＣ６−１４アリールである。
【請求項２】
Ｒ１はＣ１−６アルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１はＣ３−６シクロアルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１はメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓ−ブチル、またはｔ−ブチルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１はシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシルである、請求項３に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１はｔ−ブチルである、請求項４に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ２は２および４位で置換されたフェニルである、請求項１から６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ２は４位で置換されたフェニルである請求項１から６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ１０はハロゲン、Ｃ１−３アルキル、または−ＮＨ２である、請求項１から８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ１０はクロロ、メチル、または−ＮＨ２である、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ１０はハロゲンである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ１０はクロロである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ２は２，４−ジクロロフェニル、２−フルオロ−４−クロロフェニル、２，４−ジメチルフェニル、２−ヒドロキシ−４−メチルフェニル、２−メチル−４−クロロフェニル、２−ブロモ−４−メチルフェニル、３−フルオロ−４−メチルフェニル、２−アミノ−４−クロロフェニル、４−クロロフェニル、４−メチルフェニル、または４−トリフルオロメチルフェニルである、請求項１から６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ２は４−クロロフェニル、４−メチルフェニル、または４−トリフルオロメチルフェニルである、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｒ２は２，４−ジクロロフェニル、２−メチル−４−クロロフェニル、または２−アミノ−４−クロロフェニルである、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｒ２は２，４−ジクロロフェニルである、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ３は、置換されない、またはＲ１１によって１回以上置換されたＣ１−６アルキルである、請求項１から１６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒ３は、置換されない、またはＲ１２によって１回以上置換された６員複素環である、請求項１から１６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ３は、置換されない、またはＲ１２によって１回以上置換されたシクロヘキシルである、請求項１から１６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒ３はメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、メチルシクロプロピル、シクロブチル、ブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、またはシクロペンチルである、請求項１７に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｒ３はイソプロピルである、請求項１７に記載の化合物。
【請求項２２】
Ｒ３は１，３−ジメトキシイソプロピル、１−メトキシイソプロピル、メトキシエチル、２，２，２−トリフルオロエチル、２，２−ジフルオロエチル、または２−フルオロエチルである、請求項１７に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｒ３はテトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、または１，３−ジオキサンである、請求項１８に記載の化合物。
【請求項２４】
Ｒ３はＯＨ、オキソ、ハロゲン、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキル、またはトリアゾリルによって１回以上置換されたシクロヘキシルである、請求項１９に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｒ３はＯＨ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシによって１回以上置換されたシクロヘキシルである、請求項２４に記載の化合物。
【請求項２６】
Ｒ３はＯＨまたはＣ１−６アルコキシによって１回以上置換されたシクロヘキシルである、請求項２４に記載の化合物。
【請求項２７】
Ｒ３はＯＨによって１回以上置換されたシクロヘキシルである、請求項２４に記載の化合物。
【請求項２８】
Ｒ３はメトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、イソプロピルオキシ、またはブチルオキシによって１回以上置換されたシクロヘキシルである、請求項２４に記載の化合物。
【請求項２９】
Ｒ３はトリアゾリルによって置換されたシクロヘキシルである、請求項２４に記載の化合物。
【請求項３０】
Ｒ３は４位で置換されたシクロヘキシルである、請求項１〜１６、１９、および２４〜３１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３１】
Ｒ３は４位で置換されたシクロヘキシルであり、該４位の置換基はアミノ基に対してトランス位にある、請求項１〜１６、１９、および２４〜３１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３２】
Ｒ３は４位でＯＨ、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシによって置換されたシクロヘキシルであり、ここで該４位の置換基はアミノ基に対してトランス位にある、請求項１９に記載の化合物。
【請求項３３】
Ｒ３は４位で１，２，４−トリアゾリルまたは１，２，３−トリアゾリルによって置換されたシクロヘキシルであり、該４位の置換基はアミノ基に対してトランス位にある、請求項１９に記載の化合物。
【請求項３４】
Ｒ３は
【化３３】
2013512247.tif 000051
であり、Ｒ１３はＣ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ハロゲン化Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＣＯ−、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｃ１−４アルキル、５〜１０員ヘテロアリール、またはＣ６−１４アリールである、請求項１〜１６に記載の化合物。
【請求項３５】
Ｒ１１はハロゲン、オキソ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ３−６シクロアルキル、５〜６員複素環、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、−ＣＯＮ（Ｃ１−４アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）ＣＯＣ１−４アルキル、−ＮＨＣＯＣ１−４アルキル、またはヒドロキシルである、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項３６】
Ｒ１１はハロゲン、メトキシ、またはヒドロキシルである、請求項３５に記載の化合物。
【請求項３７】
Ｒ１１はフルオロまたはメトキシである、請求項３５に記載の化合物。
【請求項３８】
Ｒ１１はフルオロである、請求項３５に記載の化合物、
【請求項３９】
Ｒ１１はメトキシである、請求項３５に記載の化合物。
【請求項４０】
Ｒ１２はメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、シクロブチル、ブチル、ｓ−ブチル、またはｔ−ブチルである、請求項１〜１６、１８〜１９、および３０〜３１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項４１】
Ｒ１２はメチル、エチル、またはイソプロピルである、請求項４０に記載の化合物。
【請求項４２】
Ｒ１２はＯＨ、メトキシ、またはエトキシである、請求項４０に記載の化合物。
【請求項４３】
Ｒ１２はＯＨである、請求項４０に記載の化合物。
【請求項４４】
Ｒ１２はメトキシである、請求項４０に記載の化合物。
【請求項４５】
Ｒ１２はトリアゾリルである、請求項４０に記載の化合物。
【請求項４６】
Ｒ１２はハロゲンである、請求項４０に記載の化合物。
【請求項４７】
Ｒ１はｔ−ブチルであり；
Ｒ２は２，４−ジクロロフェニルであり；そして
Ｒ３はＯＨ、Ｆ、Ｃ１−４アルコキシ、またはＣ１−４アルキルによって１回以上置換されたシクロヘキシルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４８】
以下より選択される化合物：
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−イソプロピル−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（シス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（トランス−４−メトキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（シス−４−メトキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（トランス−４−［１，２，３］トリアゾル−１−イル−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（シス−４−［１，２，３］トリアゾル−１−イル−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（トランス−４−［１，２，４］トリアゾル−１−イル−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（シス−４−［１，２，４］トリアゾル−１−イル−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（トランス−４−フルオロ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（４，４−ジフルオロ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸塩酸塩；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（４−オキソ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（１，４−ジオキサ−スピロ［４．５］デス−８−イル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（トランス−４−メチル−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（４−クロロ−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（４−クロロ−２−フルオロ−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジメチル−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−［（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−（４−メチル−ベンゾイル）−アミノ］−チオフェン−２−カルボン酸；
５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−［（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−（２−ヒドロキシ−４−メチル−ベンゾイル）−アミノ］−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（４−クロロ−２−メチル−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（４−クロロ−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２−ブロモ−４−メチル−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−［（３−フルオロ−４−メチル−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−［１，３］ジオキサン−５−イル−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（２−メトキシ−１−メトキシメチル−エチル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［シクロプロピル−（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２−アミノ−４−クロロ−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−メチル−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［シクロヘキシル−（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（１−ピリミジン−２−イル−ピペリジン−４−イル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２−アミノ−４−クロロ−ベンゾイル）−（トランス−４−メトキシメチル−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２−アミノ−４−クロロ−ベンゾイル）−（トランス−４−イソブチリルアミノ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（１−イソブチリル−ピペリジン−４−イル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（２−メチル−３−オキソ−２−アザ−スピロ［４，５］デス−８−イル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（３−オキソ−２−アザ−スピロ［４，５］デス−８−イル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−エチル−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［シクロプロピルメチル−（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［シクロブチル−（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（テトラヒドロ−フラン−３−イル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（２−メトキシ−１−メチル−エチル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（２−メトキシ−エチル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［シクロペンチル−（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（２，２，２−トリフルオロ−エチル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−｛（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−［１−（２，２−ジフルオロ−エチル）−ピペリジン−４−イル］−アミノ｝−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［ｔ−ブチル−（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−｛（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−［１−（２−フルオロ−エチル）−ピペリジン−４−イル］−アミノ｝−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル−チオフェン−２−カルボン酸；
３−｛（２−アミノ−４−クロロ−ベンゾイル）−［４−（イソブチリル−メチル−アミノ）−シクロヘキシル］−アミノ｝−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−［（４−フルオロ−ベンゾイル）−（４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（４−クロロ−３−フルオロ−ベンゾイル）−（４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；
３−［（２−クロロ−４−メチル−ベンゾイル）−（４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸；および
５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−［（２−フルオロ−４−メチル−ベンゾイル）−（４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−チオフェン−２−カルボン酸、
ならびに
医薬的に許容されるその塩。
【請求項４９】
以下の構造式のいずれか１つにより表わされる化合物、または医薬的に許容されるその塩：
【化３４】
2013512247.tif 000052
【請求項５０】
以下の構造式のいずれか１つにより表わされる化合物、または医薬的に許容されるその塩：
【化３５】
2013512247.tif 000053
【請求項５１】
以下の構造式のいずれか１つによってあらわされる化合物、または医薬的に許容されるその塩：
【化３６】
2013512247.tif 000054
【化３７】
2013512247.tif 000055
【請求項５２】
請求項１〜５１のいずれか１項に記載の少なくとも１つの化合物、および少なくとも１つの医薬的に許容される担体または賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項５３】
請求項１〜５１のいずれか１項に記載の少なくとも１つの化合物、および少なくとも１つの追加の薬剤を含む、医薬的組合せ。
【請求項５４】
前記少なくとも１つの追加の薬剤は、ウイルスセリンプロテアーゼ阻害剤、ウイルスポリメラーゼ阻害剤、ウイルスヘリカーゼ阻害剤、免疫調節剤、抗酸化剤、抗菌剤、治療用ワクチン、肝保護剤、アンチセンス剤、および内部リボソーム侵入部位の阻害剤（ＩＲＥＳ）から選択される、請求項５３に記載の医薬的組合せ。
【請求項５５】
前記少なくとも１つの追加の薬剤は、インターフェロンα１Ａ、インターフェロンα１Ｂ、インターフェロンα２Ａ（Ｒｏｆｅｒｏｎ）、ペグインターフェロンα２Ａ（Ｐｅｇａｓｙｓ）、インターフェロンα２Ｂ（Ｉｎｔｒｏｎ  Ａ）、またはペグインターフェロンα２Ｂ（ＰＥＧ−Ｉｎｔｒｏｎ）から選択される、請求項５３に記載の医薬的組合せ。
【請求項５６】
前記少なくとも１つの追加の薬剤は、リバビリンとの組合せで、標準インターフェロンαまたはペグインターフェロンα（Ｒｏｆｅｒｏｎ、Ｐｅｇａｓｙｓ、Ｉｎｔｒｏｎ  Ａ、Ｐｅｇ−Ｉｎｔｒｏｎ）から選択される、請求項５３に記載の医薬的組合せ。
【請求項５７】
前記化合物および追加の薬剤は連続的に用いられる、請求項５３〜５６のいずれか１項に記載の医薬的組合せ。
【請求項５８】
前記化合物および追加の薬剤は同時に用いられる、請求項５３〜５６のいずれか１項に記載の医薬的組合せ。
【請求項５９】
宿主のフラビウイルス科ウイルス感染症を治療または予防するための方法であって、請求項１〜５１のいずれか１項に記載の化合物の治療的有効量を投与することを含む、方法。
【請求項６０】
宿主のウイルスポリメラーゼの活性を阻害または低下させるための方法であって、請求項１〜５１のいずれか１項に記載の化合物の治療的有効量を投与すること含む、方法。
【請求項６１】
宿主のＨＣＶ感染症を治療または予防するための方法であって、請求項１〜５１のいずれか１項に記載の化合物の治療的有効量を投与することを含む、方法。
【請求項６２】
宿主のフラビウイルス科ウイルス感染症を治療または予防するための、請求項１〜５１のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項６３】
宿主のウイルスポリメラーゼの活性を阻害または低下させるための、請求項１〜５１のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項６４】
宿主のＨＣＶ感染症を治療または予防するための、請求項１〜５１のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項６５】
宿主のフラビウイルス科ウイルス感染症を治療または予防する医薬品の製造のための、請求項１〜５１のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項６６】
宿主のＨＣＶ感染症を治療または予防する医薬品の製造のための、請求項１〜５１のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項６７】
宿主のＨＣＶ感染症を治療または予防するための、請求項１〜５１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項６８】
請求項１〜５１のいずれか１項に記載の化合物の、抗ＨＣＶ剤としての使用。
【請求項６９】
請求項１〜５１のいずれか１項に記載の化合物を、宿主のＨＣＶ感染症を治療または予防するために使用する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、２００９年１１月２５日に出願された米国特許仮出願第６１／２６４，３０５号および２０１０年８月１７日に出願された米国特許仮出願第６１／３７４，３９６号の利益を主張する。この両出願の全ての内容は、参照により本明細書に取り入れられている。
【０００２】
本発明は、新規化合物に関し、また、新規化合物を用いたフラビウイルス感染症の治療または予防のための方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
肝炎は、世界中で発生している疾患である。通常はウイルス性であるが、他にも公知の原因がある。肝炎では、ウイルス性肝炎が圧倒的に多い。毎年、７５万人近いアメリカ人が肝炎に感染しており、そのうち１５万人以上がＣ型肝炎ウイルス（「ＨＣＶ」）に感染している。
【０００４】
ＨＣＶは、フラビウイルス科に属するプラス鎖ＲＮＡウイルスであり、豚コレラウイルスおよびウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）をはじめとするペスチウイルス属と最も近い関係にある。ＨＣＶは、相補的なマイナス鎖ＲＮＡ鋳型の生成を通じて複製すると考えられている。このウイルスには培養による効率的な複製装置がないため、プールされたヒト血漿からＨＣＶ粒子を単離して電子顕微鏡で見ることにより、直径約５０〜６０ｎｍであることがわかった。ＨＣＶのゲノムは、翻訳時または翻訳後に開裂されて成熟したウイルスタンパク（コア、Ｅ１、Ｅ２、ｐ７、ＮＳ２、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ、ＮＳ５Ａ、ＮＳ５Ｂ）となるアミノ酸３００９〜３０３０個のポリタンパク質をコードする、約９，６００塩基対の一本鎖プラス鎖ＲＮＡである。構造糖タンパク質であるＥ１およびＥ２は、ウイルスの脂質エンベロープに埋め込まれて安定したヘテロ二量体を形成すると考えられている。また、構造コアタンパク質も、ウイルスのＲＮＡゲノムと相互作用してヌクレオカプシドを形成すると考えられている。ＮＳ２〜ＮＳ５に指定される非構造タンパク質には、ポリメラーゼ、プロテアーゼ、およびヘリカーゼなど、ウイルスの複製とタンパク質のプロセシングに関わる酵素的機能を持つタンパク質がある。
【０００５】
ＨＣＶの汚染源は主に血液である。健康上問題となるＨＣＶ感染の規模は、高リスク群の有病率によって示される。例えば、西側諸国の血友病患者の６０％〜９０％、および静脈内薬物乱用者の８０％以上が、ＨＣＶの慢性的感染者である。有病率は、静脈内薬物乱用者の場合では、試験対象集団によって異なる約２８％〜７０％である。輸血後に関連するＨＣＶの新規感染率は、供血者の選別に用いる診断ツールの進歩により最近は著しく低下している。
【０００６】
現在利用できるＨＣＶ感染の唯一の治療法は、インターフェロンα（ＩＦＮ−α）である。しかし、様々な臨床試験によれば、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）の血漿内濃度が正常化したのは治療患者の７０％にすぎず、またこの応答患者の３５％〜４５％が、ＩＦＮの中断後に再発している。一般的に言って、長期にわたってＩＦＮに応答するのは患者の２０％〜２５％にすぎない。臨床試験からは、ＩＦＮとリバビリン（ＲＩＢＡ）とを組合せて投与すると、ＩＦＮの単独投与より優れた臨床反応が得られることが明らかになっている。
【０００７】
したがって、フラビウイルス感染症を治療または予防するための抗ウイルス薬の開発が、大いに必要とされている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、一般的には、ＨＣＶ感染症などのフラビウイルス感染症を治療または予防するために有用な化合物に関する。
【０００９】
一実施態様では、本願は、式（Ｉ）の化合物：
【化１】
2013512247.tif 000003
または医薬的に許容されるその塩を対象とし、
ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルまたはＣ３−６シクロアルキルであり；
Ｒ２は置換されない、もしくはＲ１０によって１回以上置換されたフェニルであり；
Ｒ３は置換されない、もしくはＲ１１によって１回以上置換されたＣ１−６アルキル；置換されない、もしくはＲ１２によって１回以上置換された６員複素環；置換されない、もしくはＲ１２によって１回以上置換されたＣ３−６シクロアルキル；または
【化２】
2013512247.tif 000004
であり；
Ｒ１０はハロゲン、Ｃ１−３アルキル、ハロゲン化Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、−ＮＨ２、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、またはＣＨ３ＣＯＯ−であり；
Ｒ１１はハロゲン、オキソ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ３−６シクロアルキル、５−６員複素環、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、−ＣＯＮ（Ｃ１−４アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）ＣＯＣ１−４アルキル、−ＮＨＣＯＣ１−４アルキル、カルボキシ、ヒドロキシル、ニトロ、アジド、シアノ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｈ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｃ１−４アルキル、または−ＮＨＳＯ２Ｃ１−４アルキルであり；
Ｒ１２はＯＨ、オキソ、ハロゲン、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＣＯ−ＮＨ−、Ｃ１−６アルキル−ＣＯ−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）、３〜６員複素環、または５〜１０員ヘテロアリールであり；そして
Ｒ１３はＣ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ハロゲン化Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＣＯ−、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｃ１−４アルキル、５〜１０員ヘテロアリール、またはＣ６−１４アリールである。
【００１０】
別の実施態様では、本発明は、本明細書に記載の本発明の化合物および医薬的に許容される担体または賦形剤を含む、医薬組成物を対象とする。
【００１１】
さらに別の実施態様では、本発明は、対象のＨＣＶ感染症を治療する方法を提供し、これは、本明細書に記載の本発明の化合物の治療的有効量を、該対象に投与することを含む。
【００１２】
さらに別の実施態様では、本発明は、対象のＨＣＶポリメラーゼの活性を阻害または低下させる方法を対象とし、これは、本明細書に記載の本発明の化合物の治療的有効量を、該対象に投与することを含む。
【００１３】
さらに別の実施態様では、本発明は、インビトロ生物試料のＨＣＶポリメラーゼの活性を阻害または低下させる方法を対象とし、これは、本明細書に記載する本発明の化合物の治療的有効量を、該試料に投与することを含む。
【００１４】
また本発明は、対象のＨＣＶ感染症を治療するため、または対象のＨＣＶポリメラーゼの活性を阻害もしくは低下させる薬剤を製造するための、本明細書に記載の本発明の化合物の使用をも提供する。
【００１５】
また本明細書では、対象のＨＣＶ感染症を治療するため、または対象のＨＣＶポリメラーゼの活性を阻害もしくは低下させるための、本明細書に記載の本発明の化合物の使用をも提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
発明の詳細な説明
一態様では、本発明は式Ｉの化合物：
【化３】
2013512247.tif 000005
または医薬的に許容されるその塩を提供し；
ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルまたはＣ３−６シクロアルキルであり；
Ｒ２は、置換されない、またはＲ１０により１回以上置換されたフェニルであり；
Ｒ３は、置換されない、またはＲ１１により１回以上置換されたＣ１−６アルキル；置換されない、またはＲ１２により１回以上置換された６員複素環；置換されない、またはＲ１２により１回以上置換されたＣ３−６シクロアルキル；または
【化４】
2013512247.tif 000006
であり；
Ｒ１０はハロゲン、Ｃ１−３アルキル、ハロゲン化Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルコキシ、−ＮＨ２、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、またはＣＨ３ＣＯＯ−であり；
Ｒ１１はハロゲン、オキソ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ３−６シクロアルキル、５〜６員複素環、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、ＣＯＮ（Ｃ１−４アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）ＣＯＣ１−４アルキル、−ＮＨＣＯＣ１−４アルキル、カルボキシ、ヒドロキシル、ニトロ、アジド、シアノ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｈ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｃ１−４アルキル、またはＮＨＳＯ２Ｃ１−４アルキルであり；
Ｒ１２はＯＨ、オキソ、ハロゲン、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＣＯ−ＮＨ−、Ｃ１−６アルキル−ＣＯ−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）−、３〜６員複素環、または５〜１０員ヘテロアリールであり；
Ｒ１３はＣ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ハロゲン化Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＣＯ−、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｃ１−４アルキル、５〜１０員ヘテロアリール、またはＣ６−１４アリールである。
【００１７】
一実施態様では、本発明の化合物は、以下の実施態様が独立または組合せで存在する化合物を含む。
【００１８】
さらなる実施態様では、Ｒ１はＣ１−６アルキルである。
【００１９】
さらなる実施態様では、Ｒ１はＣ３−６シクロアルキルである。
【００２０】
さらなる実施態様では、Ｒ１はメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓ−ブチル、またはｔ−ブチルである。
【００２１】
さらなる実施態様では、Ｒ１はｔ−ブチルである。
【００２２】
さらなる実施態様では、Ｒ１はシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシルである。
【００２３】
さらなる実施態様では、Ｒ２は二置換フェニルである。
【００２４】
さらなる実施態様では、Ｒ２は２および４位において置換されたフェニルである。
【００２５】
さらなる実施態様では、Ｒ２は４位において置換されたフェニルである。
【００２６】
さらなる実施態様では、Ｒ２は２，４−ジクロロフェニル、２−フルオロ−４−クロロフェニル、２，４−ジメチルフェニル、２−ヒドロキシ−４−メチルフェニル、２−メチル−４−クロロフェニル、２−ブロモ−４−メチルフェニル、３−フルオロ−４−メチルフェニル、２−アミノ−４−クロロフェニル、４−クロロフェニル、４−メチルフェニル、または４−トリフルオロメチルフェニルである。
【００２７】
さらなる実施態様では、Ｒ２は４−クロロフェニル、４−メチルフェニル、または４−トリフルオロメチルフェニルである。
【００２８】
さらなる実施態様では、Ｒ２は２，４−ジクロロフェニル、２−メチル−４−クロロフェニル、または２−アミノ−４−クロロフェニルである。
【００２９】
さらなる実施態様では、Ｒ２は２，４−ジクロロフェニルである。
【００３０】
さらなる実施態様では、Ｒ２はフェニルである。
【００３１】
さらなる実施態様では、Ｒ３は、置換されない、またはＲ１１によって１回以上置換されたＣ１−６アルキルである。
【００３２】
さらなる実施態様では、Ｒ３は置換されない、またはＲ１２によって１回以上置換された６員複素環である。
【００３３】
さらなる実施態様では、Ｒ３は置換されない、またはＲ１２によって１回以上置換されたＣ３−６シクロアルキルである。
【００３４】
さらなる実施態様では、Ｒ３は置換されない、またはＲ１２によって１回以上置換されたシクロヘキシルである。
【００３５】
さらなる実施態様では、Ｒ３はメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、メチルシクロプロピル、シクロブチル、ブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、またはシクロペンチルである。
【００３６】
さらなる実施態様では、Ｒ３はイソプロピルである。
【００３７】
さらなる実施態様では、Ｒ３はメチルテトラヒドロピラニルである。
【００３８】
さらなる実施態様では、Ｒ３はメチルテトラヒドロフラニルである。
【００３９】
さらなる実施態様では、Ｒ３は１，３−ジメトキシイソプロピル、１−メトキシイソプロピル、メトキシエチル、２，２，２−トリフルオロエチル、２，２−ジフルオロエチル、または２−フルオロエチルである。
【００４０】
さらなる実施態様では、Ｒ３はテトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、または１，３−ジオキサンである。
【００４１】
さらなる実施態様では、Ｒ３は、ＯＨ、オキソ、ハロゲン、Ｃ１−６−アルコキシ、Ｃ１−６−アルキル、Ｃ１−６−アルキル−ＣＯ−ＮＨ−、Ｃ１−６−アルキル−ＣＯ−Ｎ（Ｃ１−６−アルキル）、３〜６員複素環、または５〜１０員ヘテロアリールによって４位で置換されたシクロヘキシルであり、ここで、該４位の置換基はアミノ基に対してトランス位にある。
【００４２】
さらなる実施態様では、Ｒ３は、ＯＨ、Ｃ１−６−アルキル、またはＣ１−６−アルコキシによって４位で置換されたシクロヘキシルであり、ここで、該４位の置換基はアミノ基に対してトランス位にある。
【００４３】
さらなる実施態様では、Ｒ３は、４位において１，２，４−トリアゾリルまたは１，２，３−トリアゾリルに置換されたシクロヘキシルであり、該４位の置換基はアミノ基に対してトランス位にある。
【００４４】
さらなる実施態様では、Ｒ３は、ＯＨ、オキソ、ハロゲン、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキル、またはトリアゾリルによって１回以上置換されたシクロヘキシルである。
【００４５】
さらなる実施態様では、Ｒ３は、ＯＨ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、またはＣ１−６アルコキシによって１回以上置換されたシクロヘキシルである。
【００４６】
さらなる実施態様では、Ｒ３はＯＨまたはＣ１−６アルコキシによって１回以上置換されたシクロヘキシルである。
【００４７】
さらなる実施態様では、Ｒ３はＯＨによって１回以上置換されたシクロヘキシルである。
【００４８】
さらなる実施態様では、Ｒ３はＣ１−６アルコキシによって１回以上置換されたシクロヘキシルである。
【００４９】
さらなる実施態様では、Ｒ３はメトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、イソプロピルオキシ、またはブチルオキシによって１回以上置換されたシクロヘキシルである。
【００５０】
さらなる実施態様では、Ｒ３はトリアゾリルによって置換されたシクロヘキシルである。
【００５１】
さらなる実施態様では、Ｒ３はＯＨまたはＣ１−６アルコキシによって４位で置換されたシクロヘキシルである。
【００５２】
さらなる実施態様では、Ｒ３は４位で置換されたシクロヘキシルである。
【００５３】
さらなる実施態様では、Ｒ３は４位で置換されたシクロヘキシルであり、該４位の置換基はアミノ基に対してトランス位にある。
【００５４】
さらなる実施態様では、Ｒ３は４位で置換されたシクロヘキシルであり、該４位の置換基はアミノ基に対してシス位にある。
【００５５】
さらなる実施態様では、Ｒ３は
【化５】
2013512247.tif 000007
であり、
Ｒ１３はＣ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ハロゲン化Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＣＯ−、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｃ１−４アルキル、５〜１０員ヘテロアリール、またはＣ６−１４アリールである。
【００５６】
さらなる実施態様では、Ｒ３は
【化６】
2013512247.tif 000008
であり、Ｒ１３はＣ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ハロゲン化Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＣＯ−、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｃ１−４アルキル、５−１０員ヘテロアリール、またはＣ６−１４アリールである。
【００５７】
さらなる実施態様では、Ｒ３は
【化７】
2013512247.tif 000009
であり、Ｒ１３はメチル、エチル、プロピル、またはイソプロピルである。
【００５８】
さらなる実施態様では、Ｒ１０はハロゲン、Ｃ１−３アルキル、または−ＮＨ２である。
【００５９】
さらなる実施態様では、Ｒ１０はハロゲンである。
【００６０】
さらなる実施態様では、Ｒ１０はクロロ、メチル、または−ＮＨ２である。
【００６１】
さらなる実施態様では、Ｒ１０はクロロである。
【００６２】
さらなる実施態様では、Ｒ１１はハロゲン、オキソ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ３−６シクロアルキル、５〜６員複素環、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、−ＣＯＮ（Ｃ１−４アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）ＣＯＣ１−４アルキル、−ＮＨＣＯＣ１−４アルキル、またはヒドロキシルである。
【００６３】
さらなる実施態様では、Ｒ１１はハロゲン、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ３−６シクロアルキル、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、またはヒドロキシルである。
【００６４】
さらなる実施態様では、Ｒ１１は５〜６員複素環である。
【００６５】
さらなる実施態様では、Ｒ１１はハロゲン、メトキシ、またはヒドロキシルである。
【００６６】
さらなる実施態様では、Ｒ１１はフルオロまたはメトキシである。
【００６７】
さらなる実施態様では、Ｒ１１はフルオロである。
【００６８】
さらなる実施態様では、Ｒ１１はメトキシである。
【００６９】
さらなる実施態様では、Ｒ１２はＯＨ、オキソ、ハロゲン、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３アルキル−ＣＯ−ＮＨ−、Ｃ１−３アルキル−ＣＯ−Ｎ（Ｃ１−３アルキル）−、３〜６員複素環、または５〜１０員ヘテロアリールである。
【００７０】
さらなる実施態様では、Ｒ１２はメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、シクロブチル、ブチル、ｓ−ブチル、またはｔ−ブチルである。
【００７１】
さらなる実施態様では、Ｒ１２はメチル、エチル、またはイソプロピルである。
【００７２】
さらなる実施態様では、Ｒ１２はＯＨ、メトキシ、またはエトキシである。
【００７３】
さらなる実施態様では、Ｒ１２はＯＨである。
【００７４】
さらなる実施態様では、Ｒ１２はメトキシである。
【００７５】
さらなる実施態様では、Ｒ１２はハロゲンである。
【００７６】
さらなる実施態様では、Ｒ１２はフルオロである。
【００７７】
さらなる実施態様では、Ｒ１２はトリアゾリルである。
【００７８】
さらなる実施態様では、Ｒ１２は１，２，４−トリアゾリルまたは１，２，３−トリアゾリルである。
【００７９】
さらなる実施態様では、Ｒ１２はスピロピロリジノンまたはＮ−メチルスピロピロリジノンである。
【００８０】
本発明のある好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は、置換されない、またはハロゲン、Ｃ１−３アルキル、もしくは−ＮＨ２によって１回以上置換されたフェニルであり、
Ｒ３は、置換されない、またはハロゲン、オキソ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ３−６シクロアルキル、５−６員複素環、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、−ＣＯＮ（Ｃ１−４アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）ＣＯＣ１−４アルキル、−ＮＨＣＯＣ１−４アルキル、カルボキシ、ヒドロキシル、ニトロ、アジド、シアノ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｈ、Ｓ（Ｏ）０−２Ｃ１−４アルキル、または−ＮＨＳＯ２Ｃ１−４アルキルによって１回以上置換されたＣ１−６アルキルである。
【００８１】
本発明のある好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は、置換されない、またはハロゲンによって１回以上置換されたフェニルであり；
Ｒ３は、置換されない、またはハロゲン、オキソ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ３−６シクロアルキル、５−６員複素環、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、−ＣＯＮ（Ｃ１−４アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）ＣＯＣ１−４アルキル、−ＮＨＣＯＣ１−４アルキル、カルボキシ、ヒドロキシル、ニトロ、アジド、シアノ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｈ、Ｓ（Ｏ）０−２Ｃ１−４アルキル、または−ＮＨＳＯ２Ｃ１−４アルキルによって１回以上置換されたＣ１−６アルキルである。
【００８２】
本発明のある好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は２，４−ジクロロフェニルであり；そして
Ｒ３は、置換されない、またはハロゲン、オキソ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ３−６シクロアルキル、５−６員複素環、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、−ＣＯＮ（Ｃ１−４アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）ＣＯＣ１−４アルキル、−ＮＨＣＯＣ１−４アルキル、カルボキシ、ヒドロキシル、ニトロ、アジド、シアノ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｈ、Ｓ（Ｏ）０−２Ｃ１−４アルキル、または−ＮＨＳＯ２Ｃ１−４アルキルによって１回以上置換されたＣ１−６アルキルである。
【００８３】
本発明のある好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は２，４−ジクロロフェニルであり；そして
Ｒ３は、置換されない、またはハロゲン、Ｃ１−６アルコキシ、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−４アルキル）、もしくは−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）２によって１回以上置換されたＣ１−６アルキルである。
【００８４】
本発明のある好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は２，４−ジクロロフェニルであり；そして
Ｒ３は置換されない、またはハロゲンもしくはＣ１−６アルコキシによって１回以上置換されたＣ１−６アルキルである。
【００８５】
本発明のある好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は２，４−ジクロロフェニルであり；そして
Ｒ３は置換されない、またはフルオロまたはメトキシによって１回以上置換されたＣ１−６アルキルである。
【００８６】
本発明のある好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は、置換されない、またはハロゲン、Ｃ１−３アルキル、または−ＮＨ２によって１回以上置換されたフェニルであり；そして
Ｒ３は、ＯＨ、ハロゲン、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキル−ＣＯ−ＮＨ−、Ｃ１−４アルキル−ＣＯ−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、またはトリアゾリルによって１回以上置換されたシクロヘキシルである。
【００８７】
本発明のある好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は式（Ｉ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は、置換されない、またはハロゲンによって１回以上置換されたフェニルであり；そして
Ｒ３は、ＯＨ、ハロゲン（例えばＦ）、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキル−ＣＯ−ＮＨ−、Ｃ１−４アルキル−ＣＯ−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、またはトリアゾリルによって１回以上置換されたシクロヘキシルである。
【００８８】
本発明の別の好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は式（ＩＢ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は２，４−ジクロロフェニルであり；そして
Ｒ３は、ＯＨ、ハロゲン、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキル−ＣＯ−ＮＨ−、Ｃ１−４アルキル−ＣＯ−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、またはトリアゾリルによって４位で置換されたシクロヘキシルである。
【００８９】
本発明の別の好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は２，４−ジクロロフェニルであり；そして
Ｒ３は、ＯＨ、ハロゲン、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキル−ＣＯ−ＮＨ−、Ｃ１−４アルキル−ＣＯ−Ｎ（Ｃ１−４アルキル）−、またはトリアゾリルによって４位で置換されたシクロヘキシルであり、該４位の置換基はアミノ基に対してトランス位にある。
【００９０】
本発明の別の好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は２，４−ジクロロフェニルであり；そして
Ｒ３は、ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキル、またはハロゲン化Ｃ１−４アルキルによって１回以上置換されたシクロヘキシルである。
【００９１】
本発明の別の好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は２，４−ジクロロフェニルであり；そして
Ｒ３は、ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−４アルコキシ、またはＣ１−４アルキルによって１回以上置換されたシクロヘキシルである。
【００９２】
本発明の別の好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は２，４−ジクロロフェニルであり；そして
Ｒ３は、ＯＨ、Ｆ、メトキシ、またはメチルによって１回以上置換されたシクロヘキシルである。
【００９３】
本発明の別の好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓ−ブチル、またはｔ−ブチルであり；
Ｒ２は２，４−ジクロロフェニルであり；そして
Ｒ３は、ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−４アルコキシ、またはＣ１−４アルキルによって１回以上置換されたシクロヘキシルである。
【００９４】
本発明の別の好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はｔ−ブチルであり；
Ｒ２は２，４−ジクロロフェニルであり；そして
Ｒ３は、ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−４”アルコキシ、またはＣ１−４”アルキルによって１回以上置換されたシクロヘキシルである。
【００９５】
本発明の別の好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は置換されない、またはハロゲン、Ｃ１−３アルキル、または−ＮＨ２によって１回以上置換されたフェニルであり；
Ｒ３は
【化８】
2013512247.tif 000010
であり；そして
Ｒ１３はＣ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ハロゲン化Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＣＯ−、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｃ１−４アルキル、ヘテロアリール、またはＣ６−１４アリールである。
【００９６】
本発明の別の好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は置換されない、またはハロゲンによって１回以上置換されたフェニルであり；
Ｒ３は
【化９】
2013512247.tif 000011
であり；そして
Ｒ１３はＣ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ハロゲン化Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル−ＣＯ−、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｃ１−４アルキル、ヘテロアリール、またはＣ６−１４アリールである。
【００９７】
本発明の別の好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は２，４−ジクロロフェニルであり；
Ｒ３は
【化１０】
2013512247.tif 000012
であり；そして
Ｒ１３はＣ１−６アルキルまたはハロゲン化Ｃ１−６アルキルである。
【００９８】
本発明の別の好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は２，４−ジクロロフェニルであり；
Ｒ３は
【化１１】
2013512247.tif 000013
であり；そして
Ｒ１３はＣ１−６アルキルである。
【００９９】
本発明の別の好ましい実施態様によれば、本発明の化合物は、式（Ｉ）の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択され、ここで：
Ｒ１はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ２は２，４−ジクロロフェニルであり；
Ｒ３は
【化１２】
2013512247.tif 000014
であり；そして
Ｒ１３はメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓ−ブチル、またはｔ−ブチルである。
【０１００】
本発明のある態様によれば、本発明の代表的な化合物は、以下に掲載の化合物および医薬的に許容されるその塩から選択される：
【表１−１】
2013512247.tif 000015
【表１−２】
2013512247.tif 000016
【表１−３】
2013512247.tif 000017
【表１−４】
2013512247.tif 000018
【表１−５】
2013512247.tif 000019
【表１−６】
2013512247.tif 000020
【表１−７】
2013512247.tif 000021
【表１−８】
2013512247.tif 000022
【表１−９】
2013512247.tif 000023
【表１−１０】
2013512247.tif 000024
【表１−１１】
2013512247.tif 000025
【０１０１】
本発明の別の態様によれば、本発明の代表的な化合物は、表２に掲載の化合物、または医薬的に許容されるその塩から選択される。
【０１０２】
本発明の別の態様によれば、本発明の代表的な化合物は、以下の構造式のいずれか１つまたは医薬的に許容されるその塩から選択される。
【化１３】
2013512247.tif 000026
【化１４】
2013512247.tif 000027
【０１０３】
本発明の別の態様によれば、本発明の代表的な化合物は、以下の構造式のいずれか１つ、または医薬的に許容されるその塩から選択される。
【化１５】
2013512247.tif 000028
【化１６】
2013512247.tif 000029
および
【化１７】
2013512247.tif 000030
【０１０４】
本発明の別の態様によれば、本発明の代表的な化合物は、表２に記載の構造式のいずれか１つ、または医薬的に許容されるその塩から選択される。
【０１０５】
式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＩ）の化合物：
【化１８】
2013512247.tif 000031
と、下記式の化合物：
【化１９】
2013512247.tif 000032
とを、通常の薗頭カップリング条件下で反応させることによって調製してよく、ここで：
Ｘは上に定義されたように、例えば−ＮＲ３−ＣＯ−Ｒ２であり；
Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、本明細書の定義の通りであり；
Ｐｇ１はＯＨまたはカルボキシル保護基であり、そして
ＨａｌはＣｌ、Ｂｒ、またはＩ（例えばＢｒ）である。
【０１０６】
さらなる実施態様では、Ｐｇ１はメトキシである。
【０１０７】
薗頭カップリング反応は、定評のあるアセチレン含有化合物製造法である。このようなカップリングの条件は本技術分野で周知であり、例えば本願の実施例、Ｙａｍａｇｕｃｈｉら（Ｓｙｎｌｅｔｔ  １９９９，Ｎｏ．５，５４９−５５０）、またはＴｙｋｗｉｎｓｋｉら、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２００３，４２，１５６６−１５６８に見ることができる。
【０１０８】
別の態様では、本発明の少なくとも１つの化合物、および少なくとも１つの医薬的に許容される担体または賦形剤を含む医薬組成物が提供される。
【０１０９】
一実施態様では、本発明は、本明細書に記載の発明に基づく少なくとも１つの化合物を含み、また少なくとも１つの追加の薬剤の投与をさらに含む、医薬的組合せを提供する。
【０１１０】
別の態様では、本発明のある化合物と、ウイルスセリンプロテアーゼ阻害剤、ウイルスポリメラーゼ阻害剤、ウイルスヘリカーゼ阻害剤、免疫調節剤、抗ウイルス剤、抗酸化剤、抗菌剤、治療用ワクチン、肝保護剤、アンチセンス剤、ＨＣＶ  ＮＳ２／３プロテアーゼ阻害剤、および内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）阻害剤から選択される１以上の追加の薬剤とを含む、組合せが提供される。
【０１１１】
別の態様では、患者のフラビウイルス科ウイルス感染症を治療または予防する方法が提供され、これは、本発明の化合物、組成物、または組合せの治療的有効量を、該患者に投与することを含む。
【０１１２】
別の態様では、患者のＨＣＶウイルス感染を治療または予防する方法が提供され、これは、本発明の化合物、組成物、または組合せの治療的有効量を、該患者に投与することを含む。
【０１１３】
別の態様では、患者のウイルスポリメラーゼの活性を阻害または低下させる方法が提供され、これは、本発明の化合物、組成物、または組合せの治療的有効量を該患者に投与することを含む。
【０１１４】
さらなる態様では、患者のフラビウイルス科ウイルス感染症を治療または予防するための、本発明の化合物、組成物、または組合せの使用が提供される。
【０１１５】
さらなる態様では、患者のＨＣＶウイルス感染症を治療または予防するための、本発明の化合物、組成物、または組合せの使用が提供される。
【０１１６】
さらに別の態様では、患者のウイルスポリメラーゼの活性を阻害または低下させるための、本発明の化合物、組成物、または組合せの使用が提供される。
【０１１７】
さらに別の態様では、患者のフラビウイルス科ウイルス感染症を治療または予防する医薬品を製造するための、本発明の化合物、組成物、または組合せの使用が提供される。
【０１１８】
さらに別の態様では、患者のＨＣＶウイルス感染症を治療または予防する医薬品を製造するための、本発明の化合物、組成物、または組合せの使用が提供される。
【０１１９】
一実施態様では、本発明は、本明細書に記載する本発明の化合物の、抗ＨＣＶ剤としての使用が提供される。
【０１２０】
一実施態様では、本発明は宿主のフラビウイルス科ウイルス感染症を治療または予防するための方法を提供し、これは、本明細書に記載する本発明の少なくとも１つの化合物の治療的有効量を該宿主に投与することを含み、また、ウイルスセリンプロテアーゼ阻害剤、ウイルスポリメラーゼ阻害剤、ウイルスヘリカーゼ阻害剤、免疫調節剤、抗酸化剤、抗菌剤、治療用ワクチン、肝保護剤、アンチセンス剤、ＨＣＶ  ＮＳ２／３プロテアーゼ阻害剤、および内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）阻害剤から選択される少なくとも１つの追加の薬剤を投与することをさらに含む。
【０１２１】
一実施態様では、前記ウイルス感染症はフラビウイルス感染症から選択される。
【０１２２】
一実施態様では、前記フラビウイルス感染症は、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、ウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）、豚コレラウイルス、デング熱ウイルス、日本脳炎ウイルス、または黄熱病ウイルスである。
【０１２３】
一実施態様では、前記フラビウイルス科ウイルス感染症はＣ型肝炎ウイルス感染症（ＨＣＶ）である。
【０１２４】
用語「ウイルスポリメラーゼ阻害剤」は、本明細書において、哺乳類のＨＣＶポリメラーゼをはじめとするウイルスポリメラーゼの機能を阻害するのに有効な薬剤を意味する。ＨＣＶポリメラーゼ阻害剤は、例えば以下に記載された化合物をはじめとする非ヌクレオシドを含む：
ＷＯ  ０３／０１０１４０（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、ＷＯ  ０３／０２６５８７（Ｂｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＷＯ  ０２／１００８４６  Ａ１、ＷＯ  ０２／１００８５１  Ａ２、ＷＯ  ０１／８５１７２  Ａ１（ＧＳＫ）、ＷＯ  ０２／０９８４２４  Ａ１（ＧＳＫ）、ＷＯ  ００／０６５２９（Ｍｅｒｃｋ）、ＷＯ  ０２／０６２４６  Ａ１（Ｍｅｒｃｋ）、ＷＯ  ０１／４７８８３（日本たばこ）、ＷＯ  ０３／０００２５４（日本たばこ）、およびＥＰ  １  ２５６  ６２８  Ａ２（Ａｇｏｕｒｏｎ）。
【０１２５】
さらに、他のＨＣＶポリメラーゼ阻害剤は、例えば以下に記載された化合物をはじめとするヌクレオシド類似体も含む：ＷＯ  ０１／９０１２１  Ａ２（Ｉｄｅｎｉｘ）、ＷＯ  ０２／０６９９０３  Ａ２（Ｂｉｏｃｒｙｓｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｉｎｃ．）、およびＷＯ  ０２／０５７２８７（Ｍｅｒｃｋ／Ｉｓｉｓ）、およびＷＯ  ０２／０５７４２５（Ｍｅｒｃｋ／Ｉｓｉｓ）。
【０１２６】
ＨＣＶポリメラーゼ阻害剤の具体例としては、ＶＣＨ−７５９（ＶｉｒｏＣｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａ）、ＶＣＨ−９１６（ＶｉｒｏＣｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａ）、ＶＣＨ−２２２（ＶｉｒｏＣｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａ）、Ｒ１６２６（Ｒｏｃｈｅ）、Ｒ７１２８（Ｒｏｃｈｅ／Ｐｈａｒｍａｓｓｅｔ）、ＰＦ−８６８５５４（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＭＫ−０６０８（Ｍｅｒｃｋ／Ｉｓｉｓ）、ＭＫ−３２８１（Ｍｅｒｃｋ）、Ａ−８３７０９３（Ａｂｂｏｔｔ）、ＧＳ  ９１９０（Ｇｉｌｅａｄ）、ａｎａ５９８（Ａｎａｄｙｓ）、ＨＣＶ−７９６（Ｖｉｒｏｐｈａｒｍａ）、およびＧＳＫ６２５４３３（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）がある。
【０１２７】
本明細書において、用語「ウイルスヘリカーゼ阻害剤」は、哺乳類のフラビウイルス科ヘリカーゼを含むウイルスヘリカーゼの機能を阻害するのに有効な薬剤を意味する。
【０１２８】
本明細書において、用語「免疫調節剤」は、哺乳類の免疫系応答を増強または強化するのに有効な薬剤を意味する。免疫調節剤には、例えばクラスＩインターフェロン（α−、β−、δ−、およびΩ−インターフェロン、ならびにτインターフェロン、コンセンサスインターフェロン、およびアシアロインターフェロンなど）、クラスＩＩインターフェロン（γ−インターフェロンなど）、およびペグインターフェロンがある。
【０１２９】
本明細書において、用語「クラスＩインターフェロン」は、いずれもＩ型受容体に結合する一群のインターフェロンから選択されるインターフェロンを意味する。これには、天然および合成いずれのクラスＩインターフェロンも含まれる。クラスＩインターフェロンとしては、α−、β−、δ−、およびΩ−インターフェロン、ならびにτインターフェロン、コンセンサスインターフェロン、およびアシアロインターフェロンが挙げられる。用語「クラスＩＩインターフェロン」は、本明細書において、いずれもＩＩ型受容体に結合する一群のインターフェロンから選択されるインターフェロンを意味する。クラスＩＩインターフェロンとしては、γ−インターフェロンが挙げられる。
【０１３０】
本明細書で使用する免疫調節剤の具体例としては、ＩＬ−２９（ＰＥＧ−Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  Ｌａｍｂｄａ，ＺｙｍｏＧｅｎｅｔｉｃｓ）、注射または経口用Ｂｅｌｅｒｏｆｏｎ（Ｎａｕｔｉｌｕｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈ）、Ｏｒａｌ  Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ａｌｐｈａ（Ａｍａｒｉｌｌｏ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＢＬＸ−８８３（Ｌｏｃｔｅｒｏｎ，Ｂｉｏｌｅｘ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ／Ｏｃｔｏｐｌｕｓ）、Ｏｍｅｇａ  Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ（Ｉｎｔａｒｃｉａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、ｍｕｌｔｉｆｅｒｏｎ（Ｖｉｒａｇｅｎ）、Ａｌｂｕｆｅｒｏｎ（Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ  Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ（Ｉｎｆｅｒｇｅｎ，Ｔｈｒｅｅ  Ｒｉｖｅｒｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、Ｍｅｄｕｓａ  Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ（Ｆｌａｍｅｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ＮＯＶ−２０５（Ｎｏｖｅｌｏｓ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、Ｏｇｌｕｆａｎｉｄｅ  ｄｉｓｏｄｉｕｍ（Ｉｍｐｌｉｃｉｔ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、ＳＣＶ−０７（ＳｃｉＣｌｏｎｅ）、Ｚａｄａｘｉｎ（登録商標）（ｔｈｙｍａｌｆａｓｉｎ，ＳｃｉＣｌｏｎｅ／Ｓｉｇｍａ−Ｔａｕ）、ＡＢ６８（ＸＴＬ  ｂｉｏ）、およびＣｉｖａｃｉｒ  （ＮＡＢＩ）が挙げられる。
【０１３１】
本明細書において、用語「ウイルスセリンプロテアーゼ阻害剤」は、哺乳類のＨＣＶセリンプロテアーゼを含むウイルスセリンプロテアーゼの機能を阻害するのに有効な薬剤を意味する。ＨＣＶセリンプロテアーゼ阻害剤としては、例えばＷＯ  ９９／０７７３３（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、ＷＯ  ９９／０７７３４（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、ＷＯ  ００／０９５５８（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、ＷＯ  ００／０９５４３（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、ＷＯ  ００／５９９２９（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ  ）、ＷＯ０２／０６０９２６（ＢＭＳ）、ＷＯ  ２００６０３９４８８（Ｖｅｒｔｅｘ）ＷＯ  ２００５０７７９６９（Ｖｅｒｔｅｘ）、ＷＯ  ２００５０３５５２５（Ｖｅｒｔｅｘ）、ＷＯ  ０３／０８７０９２（Ｖｅｒｔｅｘ）のＷＯ  ２００５０２８５０２（Ｖｅｒｔｅｘ）ＷＯ  ２００５００７６８１（Ｖｅｒｔｅｘ）、ＷＯ  ２００４０９２１６２（Ｖｅｒｔｅｘ）、ＷＯ  ２００４０９２１６１（Ｖｅｒｔｅｘ）、ＷＯ  ２００３０３５０６０（Ｖｅｒｔｅｘ）、ＷＯ  ０２／１８３６９、またはＷＯ９８／１７６７９（Ｖｅｒｔｅｘ）に記載された化合物が挙げられる。
【０１３２】
ウイルスセリンプロテアーゼ阻害剤の具体例としては、Ｔｅｌａｐｒｅｖｉｒ（ＶＸ−９５０、Ｖｅｒｔｅｘ）、ＶＸ−５００（Ｖｅｒｔｅｘ）、ＴＭＣ４３５３５０（Ｔｉｂｏｔｅｃ／Ｍｅｄｉｖｉｒ）、ＭＫ−７００９（Ｍｅｒｃｋ）、ＩＴＭＮ−１９１（Ｒ７２２７，ＩｎｔｅｒＭｕｎｅ／Ｒｏｃｈｅ）、およびＢｏｃｅｐｒｅｖｉｒ（ＳＣＨ５０３０３４，Ｓｃｈｅｒｉｎｇ）が挙げられる。
【０１３３】
内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）の阻害剤には、ＷＯ  ２００６０１９８３１（ＰＴＣ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）に記載された化合物がある。
【０１３４】
一実施態様では、前記追加の薬剤はインターフェロンα、リバビリン、およびオオアザミである。
【０１３５】
一実施態様では前記追加の薬剤はインターフェロンα１Ａ、インターフェロンα１Ｂ、インターフェロンα２Ａ（Ｒｏｆｅｒｏｎ）、ＰＥＧ−ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  α２Ａ（Ｐｅｇａｓｙｓ）、ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  α２Ｂ（Ｉｎｔｒｏｎ  Ａ）、またはＰＥＧ−ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎα２Ｂ（Ｐｅｇ−ｉｎｔｒｏｎ）である。
【０１３６】
一実施態様では、前記追加の薬剤は、標準インターフェロンαまたはペグインターフェロンα（Ｒｏｆｅｒｏｎ，  Ｐｅｇａｓｙｓ，  Ｉｎｔｒｏｎ  Ａ，  Ｐｅｇ−Ｉｎｔｒｏｎ）と、リバビリンとの組合せである。
【０１３７】
一実施態様では、前記追加の薬剤は、Ａ−８３１（ＡＺＤ０５３０，ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａに買収されたＡｒｒｏｗ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、ＴＬＲ９拮抗剤：ＩＭＯ−２１２５（Ｉｄｅｒａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＰＹＮ１７（Ｐｈｙｎｏｖａ）、バビツキシマブ（Ｔａｒｖａｃｉｎ，Ｐｅｒｅｇｒｉｎｅ）、ＤＥＢＩＯ−０２５（ＤＥＢＩＯ）、ＮＩＭ−８１１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＳＣＹ６３５（Ｓｃｙｎｅｘｉｓ）、ＰＦ−０３４９１３９０（ＩＤＮ−６５５６，Ｐｆｉｚｅｒ）、Ｓｕｖｕｓ（以前はＢＩＶＮ−４０１，Ｖｉｒｏｓｔａｔ，Ｂｉｏｅｎｖｉｓｉｏｎ）、ＭＸ−３２５３（Ｃｅｌｇｏｓｉｖｉｒ，Ｍｉｇｅｎｉｘ）、ビラミジン（タリバビリン，Ｖａｌｅａｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、Ｈｅｐａｃｏｎｄａ（Ｇｉａｃｏｎｄａ）、ＴＴ０３３（Ｂｅｎｉｔｅｃ／Ｔａｃｅｒｅ  Ｂｉｏ／Ｐｆｉｚｅｒ）、ＳＩＲＮＡ−０３４（Ｍｅｒｃｋに買収されたＳｉｒｎａ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、およびＥＨＣ−１８（Ｅｎｚｏ  Ｂｉｏｃｈｅｍ）、ＡＣＨ−１０９５（Ａｃｈｉｌｌｉｏｎ／Ｇｉｌｅａｄ）、ＪＫＢ−０２２（Ｊｅｎｋｉｎ）、ＣＴＳ−１０２７（Ｃｏｎａｔｕｓ）、ＭｉｔｏＱ（ミトキノン、Ａｎｔｉｐｏｄｅａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、アリニア（ニタゾキサニド、Ｒｏｍａｒｋ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、およびバビツキシマブ（Ｐｅｒｅｇｒｉｎｅ  Ｐｈａｒｍ）から選択される。
【０１３８】
一実施態様では、前記追加の薬剤は、ＣＳＬ１２３（Ｃｈｉｒｏｎ／ＣＳＬ）、ＩＣ４１（Ｉｎｔｅｒｃｅｌｌ  Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＧＩ  ５００５（Ｇｌｏｂｅｉｍｍｕｎｅ）、ＴＧ４０４０（Ｔｒａｎｓｇｅｎｅ）、Ｃｈｒｏｎｖａｃ  Ｃ（Ｔｒｉｐｅｐ／Ｉｎｏｖｉｏ）、ＧＮＩ−１０３（ＧＥＮｉｍｍｕｎｅ）、ＨＣＶ／ＭＦ５９（Ｃｈｉｒｏｎ／Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＰｅｖｉＰＲＯ（商標）  （Ｐｅｖｉｏｎ  ｂｉｏｔｅｃｔ）から選択される治療用ワクチンである。
【０１３９】
上に記載した組合せは、医薬製剤の形で用いるために供給するのが好都合であり、したがって、上に定義された組合せとそのための医薬的に許容される担体とを含む医薬製剤が、本発明の追加の一態様を構成する。
【０１４０】
本発明の方法または本発明の組合せに用いる個々の成分は、別々の製剤または一体の製剤として、連続的または同時に投与してよい。
【０１４１】
組合せの一実施態様では、前記化合物および追加の薬剤は連続的に投与される。
【０１４２】
組合せの別の実施態様では、前記化合物及び追加の薬剤は同時に投与される。
【０１４３】
本発明の化合物が立体異性体（例えば、光学異性体（＋と−）、幾何異性体（シスとトランス）、および配座異性体（アキシアルとエクアトリアル）として存在しうることを、当業者は理解されるであろう。このような立体異性体はすべて、本発明の範囲に含まれる。
【０１４４】
本発明の化合物がキラル中心を含み得ることを、当業者は理解されるであろう。したがって、前記式の化合物は、異なる２種類の光学異性体（すなわち、（＋）または（−）のエナンチオマー）の形で存在しうる。このようなエナンチオマーまたはラセミ混合物を含むその混合物は、すべて本発明の範囲内に含まれる。単一の光学異性体、すなわちエナンチオマーは、キラルＨＰＬＣ、酵素溶解、およびキラル補助などの当分野で周知の方法によって得ることができる。
【０１４５】
一実施態様では、本発明の化合物は、対応するエナンチオマーが少なくとも９５％存在しない、少なくとも９７％存在しない、および少なくとも９９％存在しない単一エナンチオマーの形で提供される。
【０１４６】
さらなる実施態様では、本発明の化合物は（＋）エナンチオマーの形であり、対応する（−）エナンチオマーが少なくとも９５％存在しない。
【０１４７】
さらなる実施態様では、本発明の化合物は（＋）エナンチオマーの形であり、対応する（−）エナンチオマーが少なくとも９７％存在しない。
【０１４８】
さらなる実施態様では、本発明の化合物は（＋）エナンチオマーの形であり、対応する（−）エナンチオマーが少なくとも９９％存在しない。
【０１４９】
さらなる実施態様では、本発明の化合物は（−）エナンチオマーの形であり、対応する（＋）エナンチオマーが少なくとも９５％存在しない。
【０１５０】
さらなる実施態様では、本発明の化合物は（−）エナンチオマーの形であり、対応する（＋）エナンチオマーが少なくとも９７％存在しない。
【０１５１】
さらなる実施態様では、本発明の化合物は（−）エナンチオマーの形であり、対応する（＋）エナンチオマーが少なくとも９９％存在しない。
【０１５２】
また、本発明の化合物の医薬的に許容される塩も提供される。化合物の医薬的に許容される塩という用語が意味するものは、医薬的に許容される無機および有機の酸および塩基に由来する塩である。適切な酸としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、過塩素酸、フマル酸、マレイン酸、リン酸、グリコール酸、乳酸、サリチル酸、コハク酸、ｐ−トルエンスルホン酸、酒石酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ギ酸、安息香酸、マロン酸、２−ナフタレンスルホン酸、およびベンゼンスルホン酸が挙げられる。これ以外のシュウ酸などの酸はそれ自体では医薬的に許容されないが、本発明の化合物および医薬的に許容されるその酸付加塩を得る際の中間体として有用でありうる。
【０１５３】
アミノ酸から誘導される塩も含まれる（例えば、Ｌ−アルギニン、Ｌ−リジンなど）。
【０１５４】
適切な塩基から誘導される塩には、アルカリ金属（例えばカルシウム、ナトリウム、リチウム、カリウムなど）、アルカリ土類金属（例えばマグネシウム）、アンモニウム、ＮＲ４＋（ここでＲはＣ１−４アルキル）塩、コリン、およびトロメタミンがある。
【０１５５】
本明細書でこれ以降に言及される化合物には、該化合物および医薬的に許容されるその塩が含まれる。
【０１５６】
本発明の一実施態様では、前記医薬的に許容される塩はナトリウム塩である。
【０１５７】
本発明の一実施態様では、前記医薬的に許容される塩はリチウム塩である。
【０１５８】
本発明の一実施態様では、前記医薬的に許容される塩はカリウム塩である。
【０１５９】
本発明の化合物が様々な多形相で存在しうることを、当業者は理解されるであろう。当分野では公知の通り、多形性とは、化合物が異なる複数の結晶体からなる種または「多形」種として結晶する能力のことである。多形とは、ある化合物の固体結晶相であり、固体状態における該化合物の分子の異なる配置または多形相が少なくとも２つ存在する。ある任意の化合物の多形相は、同一の化学式または化学組成によって定義され、化学構造は、異なる２種類の化合物の結晶構造のように異なる。
【０１６０】
本発明の化合物は、例えば水和物をはじめとする様々な溶媒和物の形で存在しうることが、当業者にはお分かりであろう。また本発明の化合物の溶媒和物は、結晶化の過程で溶媒分子が該化合物の分子の格子構造に結合した場合にも形成され得る。
【０１６１】
ほかに定義されない限り、本明細書に用いるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する分野の当業者が通常理解する意味で用いられる。本明細書に記載するすべての刊行物、特許出願、特許、およびその他の参考資料は、参照によりその全体が組み込まれる。係争に当たっては、本明細書がその定義と共に優先される。また、材料、方法、および実施例は例証するものにすぎず、制限することを意図したものではない。
【０１６２】
用語「アルキル」は、直鎖または分岐の炭化水素部分である。用語「アルケニル」および「アルキニル」は、直鎖、分岐または環状の炭化水素部分であり、その鎖の中に１以上の二重結合または三重結合を有する。アルキル基、アルケニル基、およびアルキニル基としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｔ−ペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ネオヘキシル、アリル、ビニル、アセチレニル、エチレニル、プロぺニル、イソプロぺニル、ブテニル、イソブテニル、ヘキセニル、ブタジエニル、ペンテニル、ペンタジエニル、ヘキセニル、ヘキサジエニル、ヘキサトリエニル、へプテニル、へプタジエニル、へプタトリエニル、オクテニル、オクタジエニル、オクタトリエニル、オクタテトラエニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、およびヘキシニルが挙げられるが、これに限定されない。指示がある場合は、「アルキル」、「アルケニル」、および「アルキニル」を、例えばハロゲン化アルキルのようなハロゲンによって１以上の水素原子が置換されるハロアルキルの場合のように、任意に置換することができる。ハロアルキルの例としては、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、フルオロメチル、トリクロロメチル、ジクロロメチル、クロロメチル、トリフルオロエチル、ジフルオロエチル、フルオロエチル、トリクロロエチル、ジクロロエチル、クロロエチル、クロロフルオロメチル、クロロジフルオロメチル、ジクロロフルオロエチルが挙げられるが、これに限定されない。ハロゲンのほかに、指示がある場合は、アルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基を、例えばオキソ、−ＮＲｄＲｅ、−ＣＯＮＲｄＲｅ、＝ＮＯ−Ｒｅ、−ＮＲｄＣＯＲｅ、カルボキシ、−Ｃ（＝ＮＲｄ）ＮＲｅＲｆ、アジド、シアノ、Ｃ１−６アルキルオキシ、Ｃ２−６アルケニルオキシ、Ｃ２−６アルキニルオキシ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（＝ＮＲｅ）−ＮＲｆＲｇ、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、−Ｎ（Ｒｈ）ＣＯＮＲｉＲｊ、Ｓ（Ｏ）０−２Ｒａ、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、ＮＲａＣ（Ｏ）Ｒｂ、ＳＯ２ＮＲａＲｂ、ＮＲａＳＯ２Ｒｂ、ＮＲａＳＯ２ＮＲｂＲｃ、ＣＲａＮ＝ＯＲｂ、および／またはＮＲａＣＯＯＲｂによって任意に置換することもでき、ここで、Ｒａ−Ｒｊはそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、またはＣ２−４アルキニルである。
【０１６３】
用語「シクロアルキル」および「シクロアルケニル」は、それぞれ環状炭化水素のアルキルまたはアルケニルであり、単環式（例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロヘキセニル、シクロヘキサジエニル、およびシクロヘキシル）、スピロ（例えば、スピロ［２，３］ヘキサニル）、縮合炭化水素部分（例えば、ビシクロ［４，４，０］デカニル）、および橋かけ炭化水素部分（例えば、ビシクロ［２，２，１］ヘプタニル）を含むことが意図されている。指示がある場合は、「シクロアルキル」および「シクロアルケニル」を、例えばオキソ、ＮＲｄＲｅ、−ＣＯＮＲｄＲｅ、＝ＮＯ−Ｒｅ、ＮＲｄＣＯＲｅ、カルボキシ、−Ｃ（＝ＮＲｄ）ＮＲｅＲｆ、アジド、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシ、Ｃ２−６アルケニルオキシ、Ｃ２−６アルキニルオキシ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（＝ＮＲｅ）＝ＮＲｆＲｇ、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、−Ｎ（Ｒｈ）ＣＯＮＲｉＲｊ、Ｓ（Ｏ）０−２Ｒａ、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、ＮＲａＣ（Ｏ）Ｒｂ、ＳＯ２ＮＲａＲｂ、ＮＲａＳＯ２Ｒｂ、ＮＲａＳＯ２ＮＲｂＲｃ、ＣＲａＮ＝ＯＲｂ、および／またはＮＲａＣＯＯＲｂ、で任意に置き換えることもでき、ここでＲａ−Ｒｊはそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、またはＣ２−４アルキニルである。
【０１６４】
用語「アルコキシ」、「アルケニルオキシ」、および「アルキニルオキシ」は、それぞれ酸素原子を通して隣接する原子に共有結合したアルキニル、アルケニル、またはアルキニルの部分を表わす。アルキル、アルケニル、およびアルキニル基と同じく、アルコキシ、アルケニルオキシ、およびアルキニルオキシ基もまた指示があれば任意に置換することができる。例を挙げると、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｓ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、ペンチルオキシ、イソペンチルオキシ、ネオペンチルオキシ、ｔ−ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、イソヘキシルオキシ、トリフルオロメトキシ、およびネオヘキシルオキシがあるが、これに限定されない。アルコキシ、アルケニルオキシ、およびアルキニルオキシ基は、例えばハロゲン、オキソ、−ＮＲｄＲｅ、−ＣＯＮＲｄＲｅ、ＮＲｄＣＯＲｅ、カルボキシ、−Ｃ（＝ＮＲｄ）ＮＲｅＲｆ、アジド、シアノ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（＝ＮＲｅ）ＮＲｆＲｇ、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、−Ｎ（Ｒｈ）ＣＯＮＲｉＲｊ、Ｓ（Ｏ）０−２Ｒａ、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、＝ＮＯ−Ｒｅ、ＮＲａＣ（Ｏ）Ｒｂ、ＳＯ２ＮＲａＲｂ、ＮＲａＳＯ２Ｒｂ、ＮＲａＳＯ２ＮＲｂＲｃ、ＣＲａＮ＝ＯＲｂ、および／またはＮＲａＣＯＯＲｂで任意に置換することができ、ここで、Ｒａ−Ｒｊはそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、またはＣ２−４アルキニルである。
【０１６５】
用語「アリール」は、ベンゼノイド型の環（例えば、単環式または多環式でよい）を少なくとも１つ含み、指示があれば１以上の置換基で任意に置換されうる炭素環式部分である。例を挙げると、フェニル、トリル、ジメチルフェニル、アミノフェニル、アニリニル、ナフチル、アントリル、フェナントリル、およびビフェニルがあるが、これに限定されない。アリール基は、例えばハロゲン、−ＮＲｄＲｅ、−ＣＯＮＲｄＲｅ、−ＮＲｄＣＯＲｅ、カルボキシ、−Ｃ（＝ＮＲｄ）ＮＲｅＲｆ、アジド、シアノ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（＝ＮＲｅ）ＮＲｆＲｇ、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、−Ｎ（Ｒｈ）ＣＯＮＲｉＲｊ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ１−６アルキルオキシ、Ｃ２−６アルケニルオキシ、Ｃ２−６アルキニルオキシ、Ｓ（Ｏ）０−２Ｒａ、任意に置換された５−１２員ヘテロアリール、任意に置換された６−１８員ヘテロアラルキル、任意に置換された３−１２員複素環、任意に置換された４−１８員複素環アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、ＮＲａＣ（Ｏ）Ｒｂ、ＳＯ２ＮＲａＲｂ、ＮＲａＳＯ２Ｒｂ、ＮＲａＳＯ２ＮＲｂＲｃ、ＣＲａＮ＝ＯＲｂ、および／またはＮＲａＣＯＯＲｂによって任意に置換することができ、ここで、Ｒａ−Ｒｊはそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４  アルケニル、Ｃ２−４アルキニルである。
【０１６６】
用語「アラルキル」は、アルキル、アルケニル、またはアルキニルにより隣接する原子に結合したアリール基である。アリール基と同じく、指示があれば、アラルキル基も任意に置換することができる。例を挙げると、ベンジル、ベンズヒドリル、トリチル、フェネチル、３−フェニルプロピル、２−フェニルプロピル、４−フェニルブチル、およびナフチルメチルがあるが、これに限定されない。指示があれば、アラルキル基は、例えばハロゲン、−ＮＲｄＲｅ、−ＣＯＮＲｄＲｅ、−ＮＲｄＣＯＲｅ、カルボキシ、−Ｃ（＝ＮＲｄ）ＮＲｅＲｆ、アジド、シアノ、Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（＝ＮＲｅ）ＮＲｆＲｇ、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、−Ｎ（Ｒｈ）ＣＯＮＲｉＲｊ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ１−６アルキルオキシ、Ｃ２−６アルケニルオキシ、Ｃ２−６アルキニルオキシ、Ｓ（Ｏ）０−２Ｒａ、任意に置換された５−１２員ヘテロアリール、任意に置換された６−１８員ヘテロアラルキル、任意に置換された３−１２員複素環、任意に置換された４−１８員複素環アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、ＮＲａＣ（Ｏ）Ｒｂ、ＳＯ２ＮＲａＲｂ、ＮＲａＳＯ２ＮＲｂＲｃ、ＣＲａＮ＝ＯＲｂ、および／またはＮＲａＣＯＯＲｂによって任意に置換することができるがこれに限定されず、ここでＲａ−Ｒｊはそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、またはＣ２−４アルキニルである。
【０１６７】
用語「複素環」は、任意に置換された飽和または部分的飽和の非芳香族であり、ここで前記環状部分は、酸素（Ｏ）、硫黄（Ｓ）、または窒素（Ｎ）から選択される少なくとも１つのヘテロ原子によって分断される。複素環は単環式でも多環式でもあり得る。例を挙げると、アゼチジニル、ジオキソラニル、モルホリニル、モルホリノ、オキセタニル、ピぺラジニル、ピペリジル、ピペリジニル、ピぺリジノ、シクロペンタピラゾリル、シクロペンタオキサジニル、シクロペンタフラニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、チアゾリニル、オキサゾリニル、オキサジニル、ピラニル、アジリジニル、アゼピニル、ジオキサゼピニル、ジアゼピニル、オキシラニル、ピロリジニル、およびチオピラニルがあるが、これに限定されない。指示があれば、複素環基は例えば、ハロゲン、オキソ、−ＮＲｄＲｅ、−ＣＯＮＲｄＲｅ、＝ＮＯ−Ｒｅ、−ＮＲｄＣＯＲｅ、カルボキシ、−Ｃ（＝ＮＲｄ）ＮＲｅＲｆ、アジド、シアノ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（＝ＮＲｅ）ＮＲｆＲｇ、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、−Ｎ（Ｒｈ）ＣＯＮＲｉＲｊ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ７−１２アラルキル、Ｃ６−１２アリール、Ｃ１−６アルキルオキシ、Ｃ２−６アルケニルオキシ、Ｃ２−６アルキニルオキシ、Ｓ（Ｏ０−２）Ｒａ、Ｃ６−１０アリール、Ｃ６−１０アリールオキシ、Ｃ７−１０アリールアルキル、Ｃ６−１０アリール−Ｃ１−１０アルキルオキシ、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、ＮＲａＣ（Ｏ）Ｒｂ、ＳＯ２ＮＲａＲｂ、ＮＲａＳＯ２Ｒｂ、ＮＲａＳＯ２ＮＲｂＲｃ、ＣＲａＮ＝ＯＲｂ、および／またはＮＲａＣＯＯＲｂによって任意に置換することができ、ここで、Ｒａ−Ｒｊはそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、またはＣ２−４アルキニルである。
【０１６８】
用語「複素環−アルキル」は、アルキル、アルケニル、またはアルキニル基によって隣接する原子に結合する任意に置換された複素環基を表わす。この５−１８員複素環−アルキル部分では、該５−１８員は、複素環部分とアルキル、アルケニル、またはアルキニル基との両方に存在する原子を表わすと理解される。例えば、以下の基は、７員複素環−アルキルに含まれる（＊は結合点を
表わす）。
【化２０】
2013512247.tif 000033
【０１６９】
指示がある場合は、複素環−アルキル基を、例えばハロゲン、オキソ、−ＮＲｄＲｅ、−ＣＯＮＲｄＲｅ、−ＮＲｄＣＯＲｅ、カルボキシ、−Ｃ（＝ＮＲｄ）ＮＲｅＲｆ、アジド、シアノ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（＝ＮＲｅ）ＮＲｆＲｇ、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、−Ｎ（Ｒｈ）ＣＯＮＲｉＲｊ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ１−６アルキルオキシ、Ｃ２−６アルケニルオキシ、Ｃ２−６アルキニルオキシ、Ｓ（Ｏ）０−２Ｒａ、Ｃ６−１０アリール、Ｃ６−１０アリールオキシ、Ｃ７−１０アリールアルキル、Ｃ６−１０アリール−Ｃ１−１０アルキルオキシ、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、ＮＲａＣ（Ｏ）Ｒｂ、＝ＮＯ−Ｒｅ、ＳＯ２ＮＲａＲｂ、ＮＲａＳＯ２Ｒｂ、ＮＲａＳＯ２ＮＲｂＲｃ、ＣＲａＮ＝ＯＲｂ、および／またはＮＲａＣＯＯＲｂによって任意に置換することができ、ここで、Ｒａ−Ｒｊはそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、またはＣ２−４アルキニルである。
【０１７０】
用語「ヘテロアリール」は、任意に置換された芳香族の環状部分であり、ここで該環状部分は、酸素（Ｏ）、硫黄（Ｓ）、または窒素（Ｎ）から選択される少なくとも１個のヘテロ原子によって分断される。ヘテロアリールは、単環式または多環式であってよい。例としては、アツェチル、ジチアジアジニル、ジチアゾリル、フラニル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、イミダゾリル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピリジル、ピラゾリル、ピロリル、チアトリアゾリル、テトラゾリル、チアジアゾリル、トリアゾリル、ピリミジニル、ピリジル、ピラゾリル、ピロリル、チアトリアゾリル、テトラゾリル、チアジアゾリル、トリアゾリル、チアゾリル、チエニル、テトラジニル、チアジアジニル、トリアジニル、チアジニル、フロイソキサゾリル、イミダゾチアゾリル、チエノイソチアゾリル、チエノチアゾリル、イミダゾピラゾリル、ピロロピロリル、チエノチエニル、チアジアゾロピリミジニル、チアゾロチアジニル、チアゾロピリミジニル、チアゾロピリジニル、オキサゾロピリミジニル、オキサゾロピリジル、ベンゾオキサゾリル、ベンズイソチアゾリル、ベンゾチアゾリル、イミダゾピラジニル、プリニル、ピラゾロピリミジニル、イミダゾピリジニル、ベンズイミダゾリル、インダゾリル、ベンゾオキサチオリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾジチオリル、インドリジニル、インドリニル、イソインドリニル、フロピリミジニル、フロピリジル、ベンゾフラニル、イソベンゾフラニル、チエノピリミジニル、チエノピリジル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサジニル、ベンゾチアジニル、キナゾリニル、ナフチリジニル、キノリニル、イソキノリニル、ベンゾピラニル、ピリドピリダジニル、およびピリドピリミジニルがあるが、これに限定されない。指示がある場合は、ヘテロアリール基を、例えばハロゲン、−ＮＲｄＲｅ、−ＣＯＮＲｄＲｅ、−ＮＲｄＣＯＲｅ、カルボキシ、−Ｃ（＝ＮＲｄ）ＮＲｅＲｆ、アジド、シアノ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（＝ＮＲｅ）ＮＲｆＲｇ、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、−Ｎ（Ｒｈ）ＣＯＮＲｉＲｊ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ１−６アルキルオキシ、Ｃ２−６アルケニルオキシ、Ｃ２−６アルキニルオキシ、Ｓ（Ｏ０−２）Ｒａ、Ｃ６−１０アリール、Ｃ６−１０アリールオキシ、Ｃ７−１０アリールアルキル、Ｃ６−１０アリール−Ｃ１−１０アルキルオキシ、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、ＮＲａＣ（Ｏ）Ｒｂ、ＳＯ２ＮＲａＲｂ、ＮＲａＳＯ２Ｒｂ、ＮＲａＳＯ２ＮＲｂＲｃ、ＣＲａＮ＝ＯＲｂ、および／またはＮＲａＣＯＯＲｂによって任意に置換することができ、ここで、Ｒａ−Ｒｊはそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、またはＣ２−４アルキニルである。
【０１７１】
用語「ヘテロアラルキル」は、アルキル、アルケニル、またはアルキニル基によって隣接する原子に結合する任意に置換されたヘテロアリール基を表わす。指示がある場合は、ヘテロアラルキル基を、例えばハロゲン、−ＮＲｄＲｅ、−ＣＯＮＲｄＲｅ、−ＮＲｄＣＯＲｅ、カルボキシ、−Ｃ（ＮＲｄ）ＮＲｅＲｆ、アジド、シアノ、−Ｎ（Ｒｄ）Ｃ（ＮＲｅ）ＮＲｆＲｇ、ヒドロキシル、ニトロ、ニトロソ、−Ｎ（Ｒｈ）ＣＯＮＲｉＲｊ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ１−６アルキルオキシ、Ｃ２−６アルケニルオキシ、Ｃ２−６アルキニルオキシ、Ｓ（Ｏ０−２）Ｒａ、Ｃ６−１０アリール、Ｃ６−１０アリールオキシ、Ｃ７−１０アリールアルキル、Ｃ６−１０アリール−Ｃ１−１０アルキルオキシ、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、ＮＲａＣ（Ｏ）Ｒｂ、ＳＯ２ＮＲａＲｂ、ＮＲａＳＯ２Ｒｂ、ＮＲａＳＯ２ＮＲｂＲｃ、ＣＲａＮ＝ＯＲｂ、および／またはＮＲａＣＯＯＲｂで任意に置換することができ、ここで、Ｒａ−Ｒｊはそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、またはＣ２−４アルキニルである。６−１８員ヘテロアラルキル部分において、該６−１８員は複素環部分とアルキル、アルケニル、またはアルキニル基との両方に存在する原子を表わすと、理解されなければならない。例えば、以下の基は、ある７員ヘテロアラルキルに含まれる（＊は結合点を表わす）：
【化２１】
2013512247.tif 000034
【０１７２】
「ハロゲン原子」は、具体的にはフッ素原子、塩素原子、臭素原子、またはヨウ素原子である。
【０１７３】
用語「オキソ」は＝Ｏを表わす。
【０１７４】
用語「アミジノ」は、−Ｃ（＝ＮＲｗ）ＮＲｘＲｙを表わし、ここで、Ｒｗ、Ｒｘ、およびＲｙはそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ２−１０アルキニル、Ｃ６−１２アリール、およびＣ７−１２アラルキルから選択され、または、ＲｘおよびＲｙがその結合する窒素と共に、任意に置換された４−１０員複素環、または任意に置換された５−１２員ヘテロアリールを形成する。
【０１７５】
用語「グアニジノ」は、−Ｎ（Ｒｗ）Ｃ（＝ＮＲｘ）ＮＲｙＲｚを表わし、ここで、Ｒｗ、Ｒｘ、Ｒｙ、およびＲｚはそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ２−１０アルキニル、Ｃ６−１２アリール、およびＣ７−１２アラルキルから選択され、または、ＲｙおよびＲｚはその結合する窒素と共に、任意に置換された４−１０員複素環、または任意に置換された５−１２員ヘテロアリールを形成する。
【０１７６】
用語「アミド」は、−ＣＯＮＲｘＲｙおよび−ＮＲｘＣＯＲｙを表わし、ここで、ＲｘおよびＲｙはそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ２−１０アルキニル、Ｃ６−１２アリール、およびＣ７−１２アラルキルから選択され、または、ＲｘおよびＲｙがその結合する窒素と（または−ＮＲｘＣＯＲｙの場合には窒素原子およびＣＯ基と）共に、任意に置換された４−１０員複素環、または任意に置換された５−１２員ヘテロアリールを形成する。
【０１７７】
用語「アミノ」は、１以上の水素原子を置換することにより得られるアンモニアの誘導体を表わし、−ＮＲｘＲｙを含み、ここで、ＲｘおよびＲｙはそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ２−１０アルキニル、Ｃ６−１２アリール、およびＣ７−１２アラルキルから選択され、または、ＲｘおよびＲｙがその結合する窒素と共に、任意に置換された４−１０員複素環、または任意に置換された５−１２員ヘテロアリールを形成する。
【０１７８】
用語「スルホンアミド」はＳＯ２ＮＲｘＲｙおよび−ＮＲｘＳＯ２Ｒｙを表わし、ここで、ＲｘおよびＲｙはそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ２−１０アルキニル、Ｃ６−１２アリール、およびＣ７−１２アラルキルから選択され、または、ＲｘおよびＲｙがその結合する窒素と共に、任意に置換された４−１０員複素環、または任意に置換された５−１２員ヘテロアリールを形成する。
【０１７９】
硫黄原子が存在する場合は、該硫黄原子の酸化レベルは、例えばＳ、ＳＯ、またはＳＯ２など様々でありうる。このような酸化レベルはいずれも本発明の範囲内である。
【０１８０】
用語「独立して」は、各種目に対する置換基の定義が同一であることも異なることもありうることを意味する。
【０１８１】
治療で使用するために必要な本発明の化合物の量が、選択される特定の化合物によるばかりでなく、投与経路、治療を要する状態の性質、ならびに患者の年齢および状態によっても異なり、最終的には担当する医師または獣医の裁量で決定されることは理解されるであろう。しかし、一般的に言って適切な用量は、１日に体重１ｋｇ当たり約０．１〜約７５０ｍｇの範囲、例えば１日０．５〜６０ｍｇ／ｋｇ、あるいは、例えば１日１〜２０ｍｇ／ｋｇの範囲であろう。
【０１８２】
所望の用量は、単回投与にしてもよく、または、例えば１日２回、３回、４回もしくはそれ以上の回数に分割した量を、適切な間隔で投与するようにしても好都合でありうる。
【０１８３】
本化合物は、例えば１０〜１５００ｍｇ、好都合には２０〜１０００ｍｇ、最も好都合には５０〜７００ｍｇの活性成分を含む単位投与量の形で投与してよい。
【０１８４】
理想的には、該活性化合物の最大血漿中濃度が約１〜約７５μＭ、約２〜約５０μＭ、約３〜約３０μＭとなるように、該活性成分を投与するべきである。これは、例えば任意に生理食塩水で準備した活性成分の０．１〜５％溶液の静脈内投与、または約１〜約５００ｍｇの活性成分を含むボーラスの経口投与によって達成できると思われる。所望の血中濃度は、１時間当たり約０．０１〜約５．０ｍｇ／ｋｇの持続点滴、または約０．４〜約１５ｍｇ／ｋｇの活性成分を含む間欠的点滴によって維持することができると思われる。
【０１８５】
本発明の化合物または医薬的に許容されるその塩を、同じウイルスに対して活性を有する第２の治療薬と組合せて用いる場合は、各化合物の用量は、該化合物を単独投与する場合と同じであっても異なってもよい。当業者には、適切な用量が容易に理解されるであろう。
【０１８６】
治療で用いる場合に、本発明の化合物を生の化学物質として投与することも可能ではあるが、活性成分を医薬組成物の形で供給するのが好ましい。そのため、本発明は、本発明の化合物または医薬的に許容されるその誘導体と、１以上の医薬的に許容されるその担体ならびに任意で他の治療および／または予防薬とを共に含む医薬組成物を、さらに提供する。該担体（複数可）は、その製剤の他の成分との適合性があり、それを投与される者にとって有害ではないという意味で、「許容される」ものでなければならない。
【０１８７】
医薬組成物には、経口投与、直腸内投与、鼻粘膜投与、局所投与（口腔内および舌下を含む）、経皮投与、経腟投与、もしくは非経口的投与（筋肉内、皮下、および静脈内を含む）に適したもの、または、吸入またはガス注入による投与に適した形態のものがある。製剤は適宜個別の投与単位で提供し、薬学の分野で周知の任意の方法を用いて調製すると好都合である。活性化合物を、液体担体もしくは微細固形の担体またはその両方と合わせて、必要に応じて製品を所望の製剤に成形する工程が、すべての方法に含まれる。
【０１８８】
経口投与に適した医薬組成物は、それぞれに所定量の活性成分が入ったカプセル、オブラート剤、または錠剤などの個別の単位剤形で；粉末または顆粒として；溶液、懸濁液、または乳濁液として供給して好都合である。また活性成分は、ボーラス、なめ剤、またはペーストとし供給するのもよい。経口投与のための錠剤及びカプセルには、結合剤、充填剤、潤滑剤、崩壊剤、または湿潤剤などの通常の賦形剤を入れてよい。錠剤は、当分野で周知の方法に従ってコーティングしてよい。経口用液体製剤は、例えば水性または油性の懸濁液、溶液、乳濁液、シロップ、もしくはエリキシル剤の形をとってよく、または、水もしくは他の適切なビヒクルで調製して使用するための乾燥製品として供給してもよい。このような液体製剤には、懸濁化剤、乳化剤、非水性ビヒクル（食用油も含めてよい）又は保存料などの通常の添加剤を入れてもよい。
【０１８９】
本発明の化合物は、非経口的投与用（例えば、ボーラス注入または持続点滴などの注射）に調剤し、保存料を添加したアンプル、プレフィルドシリンジ、少量浸剤、または多回投与容器に入れて、単回用量として供給してもよい。該組成物は、油性または水性のビヒクルの懸濁液、溶液、乳濁液などの形にしてもよく、懸濁化剤、安定剤、および／または分散化剤などの製剤化物質を入れてもよい。あるいは、活性成分は、滅菌固体の無菌単離または溶液の凍結乾燥によって得られる粉末状にし、使用前に、例えば滅菌した無パイロジェン水などの適切なビヒクルで調製するようにしてもよい。
【０１９０】
表皮への局所投与には、本発明の化合物を軟膏、クリーム、もしくはローション、または経皮的な貼付剤として製剤化してもよい。このような経皮的貼付剤は、リナロール、カルバクロール、チモール、シトラール、メントール、およびｔ−アネトールなどの経皮吸収促進剤を含有してよい。軟膏やクリームは、例えば水性又は油性のベースで調製し、適切な増粘剤および／またはゲル化剤を添加する。ローションは、水性又は油性のベースで調製し、通常は１以上の乳化剤、安定剤、分散剤、懸濁化剤、増粘剤、または着色料を入れて調整する。
【０１９１】
口腔内の局所投与に適した組成物としては、通常はショ糖およびアカシアまたはトラガカントで風味付けしたベースに活性成分を含むロゼンジ；ゼラチンおよびグリセリンまたはショ糖およびアカシアなどの不活性のベースに活性成分を含む香錠；ならびに適切な液体担体に活性成分を含む洗口剤などがある。
【０１９２】
直腸内投与に適した固形担体の医薬組成物は、例えば単位用量の坐薬の形で供給される。適切な担体としては、ココア脂などの当技術分野で通常用いられる材料があり、坐薬は、活性成分と軟化または溶融させた担体（複数可）とを混合した後、型に入れて成形することによって調整すると好都合であろう。
【０１９３】
膣内投与に適した組成物は、活性成分に加えて、適切であることが当分野で公知の担体を含有するペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォームまたはスプレーの形で供給してよい。
【０１９４】
鼻腔内投与の場合は、本発明の化合物は、液体スプレー剤または飛散性散剤として、または滴下剤の形で用いてよい。滴下剤は、水性または非水性のベースに１以上の分散剤、可溶化剤、または懸濁化剤も入れたものを用いて製剤化しうる。液体スプレー剤は、加圧包装から投与すると好都合である。
【０１９５】
吸入による投与の場合は、本発明の化合物は、吸入器、ガス注入器、もしくは加圧包装、またはその他のエアゾルスプレー投与に便利な手段で投与すると好都合である。加圧包装には、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素その他をはじめとする適切な噴霧体を含めてよい。加圧エアゾルの場合は、定量を投与するための弁を備えることによって投薬単位を決定してもよい。
【０１９６】
あるいは、吸入またはガス注入による投与の場合は、本発明の化合物は、例えば本化合物と乳糖またはデンプンなどの適切な粉末ベースとの混合粉末をはじめとする乾燥粉末組成物の形をとってもよい。該粉末組成物は、例えばカプセルもしくは薬包、または、吸入器もしくはガス注入器の助けを借りて粉末投与ができる、例えばゼラチンもしくはブリスターパックなどで、単位投与量の形で供給してよい。
【０１９７】
所望であれば、活性成分を持続放出するように構成された上記の剤形を用いることができる。
【０１９８】
以下の一般的図式および実施例は、本発明の様々な実施態様を例示するために提供されるものであり、範囲を限定するものと解釈されてはならない。総称的または具体的に記載された反応物質および／または以下の実施例で用いられる実施条件を置き換えれば、本発明の化合物がこれ以外にも得られることは、当業者には理解されるであろう。チオフェン化合物を得るための合成方法は、特許出願ＷＯ０２／１００８５１、ＵＳ６８８１７４１、ＷＯ２００４／０５２８８５、ＵＳ  ２００５−０００９８０４、ＷＯ２００４／０５２８７９、ＵＳ  ２００４−０１９２７０７、ＷＯ２００６／１１９６４６、ＵＳ  ２００６−０２７６５３３、ＷＯ２００６／０７２３４７、ＷＯ２００６／０７２３４８、およびＷＯ２００８／０５８３９３にも記載されており、その開示は参照によって本明細書に組み入れられる。
【０１９９】
上記および以下の実施例において、温度はいずれも摂氏のまま表記され；また、別の指示がない限り、部分数およびパーセンテージはいずれも重量に基づく。
【０２００】
以下の省略形は、下記のように使用してよい：
ＡｃＯＨ      酢酸
Ａｃ          酢酸塩
Ｃｐｄ        化合物
ＤＭＦ        Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
Ｅｑ          当量
ＴＨＦ        テトラヒドロフラン
【０２０１】
ＨＰＬＣによる精製はすべて、５μｍ粒子を充填した逆相Ｃ１８カラムを用いて実施される。カラムの直径は１９ｍｍであり、長さは１００ｍｍである。溶離剤は、適切な勾配のアセトニトリルおよび水であり、塩酸濃度３ｍＭである。
【実施例】
【０２０２】
本明細書に記載された本発明の化合物は、例えばＵＳ  ６，８８１，７４１、ＵＳ  ２００５／０００９８０４、ＵＳ  ２００６／０２７６５３３、ＷＯ  ２００２／１００８５１、およびＷＯ  ０８／５８３９３などの当分野で公知の任意の方法により、適宜調製することができる。いくつかの典型的な化合物の調製の詳細については、以下の通りである。一般に、本発明の化合物は、これらの合成に示される方法で調製することができ、所望の修正を任意に適宜加えることもできる。
【０２０３】
一般的分析方法および化合物の合成およびキャラクタリゼーションのための方法論
本明細書において、用語ＲＴ（ｍｉｎ）は、本化合物に関連するＬＣＭＳ保持時間（分単位）のことである。ある特定の化合物のＮＭＲおよび質量分析のデータを、表２に示す。
【０２０４】
実施例１．チオフェン類似体合成のための一般図式
【化２２】
2013512247.tif 000035
【０２０５】
ステップＩ
１，２−ジクロロエタン（０．８Ｍ）に３−アミノ−５−ブロモ−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステルを入れた撹拌溶液に、Ｒ３のケトンまたはその誘導体（４当量）、ＡｃＯＨ（４当量）、およびＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（４当量）を連続的に加える。反応混合物を、室温で一晩撹拌する。それを次にクロロホルムと水で希釈する。有機層を分離し、硫酸ナトリウム（Ｎａ２ＳＯ４）で乾燥させ、濾過する。ロータリー蒸発装置の下で溶媒を除去し、カラムクロマトグラフィーで残渣を精製し、アルキルアミンを得る。
【０２０６】
ステップＩＩ
ジクロロメタン（０．１５Ｍ）にアルキルアミンを入れた溶液に、非置換または置換の塩化ベンゾイル（２当量）、Ｎ−クロロスクシンアミド（１当量）、およびトリフェニルホスフィン（２当量）を室温で加える。反応混合物を１６時間還流する。それを次にクロロホルムおよび水性ＮａＨＣＯ３溶液で希釈する。有機層を分離し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮する。カラムクロマトグラフィーで残渣を精製し、アシル化合物を得る。
【０２０７】
ステップＩＩＩ
無水ＤＭＦにアシル化合物、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（０．０４当量）および第Ｉ銅ヨウ化物（０．０４当量）を入れた混合物を、トリエチルアミン（２．５当量）で処理する。Ｒ１ブチンを加え、結果として生じる混合物を６０℃で２４時間撹拌する。反応混合物を、そのまま室温になるまで冷ます。酢酸エチルで希釈し、３杯分の水で洗浄し、硫酸ナトリウムの上で乾燥させ、濃縮する。シリカゲルクロマトグラフィーで残渣を精製し、所望のアルキン化合物と出発物質の混合物を得る。この混合物を、これ以上精製せずに次のステップで使う。
【０２０８】
ステップＩＶ
ＴＨＦ、メタノール、水（比率３：２：１）にアルキン化合物を入れた溶液に、水酸化リチウム（５−１０当量）を加える。結果として生じる混合物を、室温で１６時間撹拌する。溶媒を除去する。１杯分の水を加え、混合物を約ｐＨ  ３になるまで１Ｎ塩酸水溶液で酸性化する。次に、酢酸エチルで抽出する。有機部分を水で洗浄し、硫酸ナトリウムの上で乾燥させ、濃縮する。生原料を分取ＨＰＬＣで精製し、最終生成物を産出する。
【０２０９】
実施例２：本発明のいくつかの化合物の模範的合成
３−［（２，４−ジクロロベンゾイル）イソプロピルアミノ］−５−（３，３−ジメチルブト−１−イニル）チオフェン−２−カルボン酸（化合物１）の調製
【化２３】
2013512247.tif 000036
【０２１０】
ステップＩ
１，２−ジクロロエタン（２０ｍＬ）に３−アミノ−５−ブロモ−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（４．０ｇ，１６．９５ｍｍｏｌ）を入れた撹拌溶液に、２−メトキシプロペン（６．５ｍＬ，６７．７９ｍｍｏｌ）、ＡｃＯＨ（３．８ｍＬ，６７．７９ｍｍｏｌ）、およびＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（７．２ｇ，６７．７９ｍｍｏｌ）を連続的に加えた。反応混合物を、室温で一晩撹拌した。次に、それをクロロホルムと水で希釈した。有機層を分離し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過した。溶媒をロータリー蒸発装置の下で除去し、酢酸エチルとヘキサン（０：１から１：１）を使ったカラムクロマトグラフィーで残渣を精製し、５−ブロモ−３−イソプロピルアミノ−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（４．０ｇ）を得た。
【０２１１】
ステップＩＩ
ジクロロメタン（５ｍＬ）に５−ブロモ−３−イソプロピルアミノ−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２２０ｍｇ，０．７９ｍｍｏｌ）を入れた撹拌溶液に、２，４−ジクロロ−ベンゾイルクロライド（３３１ｍｇ，１．５８ｍｍｏｌ）、Ｎ−クロロスクシンアミド（１０５ｍｇ，０．７９ｍｍｏｌ）とトリフェニルホスフィン（４１４ｍｇ，１．５８ｍｍｏｌ）を室温で加えた。反応混合物を１６時間還流した。次にそれを、クロロホルムと水性ＮａＨＣＯ３溶液で希釈した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。酢酸エチルとヘキサン（０：１から１：１）を用いたカラムクロマトグラフィーで残渣を精製し、５−ブロモ−３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−イソプロピル−アミノ］−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２５９ｍｇ）を得た。
【０２１２】
ステップＩＩＩ
無水ＤＭＦ４．９ｍＬに入れた５−ブロモ−３−［（２，４−ジクロロベンゾイル）−イソプロピルアミノ］−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（５０３ｍｇ，１．１１５ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（４１ｍｇ，０．０４５）、および第Ｉ銅ヨウ化物（８．５ｍｇ，０．０４５ｍｍｏｌ）の混合物を、トリエチルアミン（３９０μＬ，２．７９ｍｍｏｌ）で処理した。３，３−ジメチル−１−ブチンを加え、結果として生じた混合物を６０℃で２４時間撹拌した。反応混合物をそのまま室温まで冷ました。それを１００ｍＬの酢酸エチルで希釈し、７５ｍＬの水３杯分で洗浄し、硫酸ナトリウムの上で乾燥し、濃縮した。勾配０％〜５０％の酢酸エチル：ヘキサンを溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーで残渣を精製した。白色固体（４０１ｍｇ）は、３−［（２，４−ジクロロベンゾイル）イソプロピルアミノ］−５−（３，３−ジメチルブト−１−イニル）チオフェン−２−カルボン酸メチルエステルと出発物質５−ブロモ−３−［（２，４−ジクロロベンゾイル）イソプロピルアミノ］−チオフェン−２−カルボン酸を７０：３０の比率で含有した。この混合物を、それ以上精製することなく次のステップに使用した。
【０２１３】
ステップＩＶ
３：２：１の比率のＴＨＦ、メタノール、水１４ｍＬに３−［（２，４−ジクロロベンゾイル）−イソプロピルアミノ］−５−（３，３−ジメチルブト−１−イニル）チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（３９１ｍｇ，純度７０％）を入れた溶液に、水酸化リチウム一水和物（１４５ｍｇ，３．４６ｍｍｏｌ）を加えた。結果として生じた混合物を室温で１６時間撹拌した。溶媒を除去した。３０ｍＬの水１杯分を加えた。１Ｎ塩酸水溶液を用いて約ｐＨ３まで酸性化させた。次に、エチルアセテート４０ｍＬで抽出した。有機部分を水２０ｍＬで洗浄し、硫酸ナトリウムの上で乾燥し、濃縮した。勾配３９％〜６９％のアセトニトリルが入ったＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  ＡＸＩＡ  Ｇｅｍｉｎｉ  ５ｕ  Ｃ１８  １１０Ａ  １００ｍｍ  ｘ  ３０ｍｍカラムを使って分取ＨＰＬＣによって生原料を精製した：９０分間で３ｍＭの水性ＨＣｌ、および流量１２ｍＬ／分。これにより、３−［（２，４−ジクロロベンゾイル）イソプロピルアミノ］−５−（３，３−ジメチルブト−１−イニル）チオフェン−２−カルボン酸（２つのステップを通じて１５１ｍｇ）を白色固体で得た。Ｍ＋Ｈ＋＝４４０．０
【０２１４】
化合物１８の調製：３−［（２，４−ジメチル−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸
【化２４】
2013512247.tif 000037
【０２１５】
ステップＩ
３−アミノ−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（３．１８ｇ，１３．１ｍｍｏｌ）をトルエン（１６ｍＬ）に入れた溶液に、１，４−シクロヘキサンジオンモノエチレンケタール（４．０９ｇ，２６．２ｍｍｏｌ）、酢酸（７５０μＬ，０．０１３１ｍｍｏｌ）、およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（５．５５ｇ，２６．２ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下で連続的に加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌し、濾過し、トルエン（１０ｍＬ）で洗浄した。有機層を飽和重炭酸ナトリウム溶液（１ｘ１０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（１ｘ２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥状態まで濃縮した。残滓を、シリカゲル（１００％ＤＣＭ）のフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−（１，４−ジオキサ−スピロ［４，５］デス−８−イルアミノ）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（４．１ｇ，８３％）を得た。
【０２１６】
ステップＩＩ
ＴＨＦ（２０ｍＬ）に５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−（１，４−ジオキサ−スピロ［４，５］デス−８−イルアミノ）−チオフェン−２−カルボン酸メチル（４．０ｇ，１０．１６ｍｍｏｌ）を入れた溶液に、窒素雰囲気下で水性ＨＣＬ（２０ｍＬ，３．６Ｎ）を加えた。反応混合物を４０℃で一晩撹拌した。追加のＴＨＦ（３０ｍＬ）およびＨＣｌ（５ｍＬ，１２Ｎ）を加え、混合物を４０℃で一晩撹拌し、室温まで冷まし、ＴＨＦ（１０ｍＬ）で希釈した。有機層を水（１ｘ２０ｍＬ）で希釈すると、ＴＨＦが蒸発してＨ２Ｏに沈殿物を形成した。沈殿物を濾過し、Ｈ２Ｏで洗浄し、トルエンで共蒸発させ、５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−（４−オキソ−シクロヘキシルアミノ）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２．７５ｇ，７３％）を得た。
【０２１７】
ステップＩＩＩ
トルエン（５ｍＬ）に５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−（４−オキソ−シクロヘキシルアミノ）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２００ｍｇ，０．５３９ｍｍｏｌ）を入れた溶液に、窒素雰囲気下でピリジン（８５ｍＬ，１．０８ｍｍｏｌ）および２，４−ジメチルベンゾイル塩化物（１８２ｍＬ，１．０８ｍｍｏｌ）を連続的に加えた。反応混合物を封管に入れて１１０℃で一晩加熱し、室温まで冷ましＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で希釈した。反応混合物を飽和重炭酸ナトリウム溶液（１ｘ５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４の上で乾燥させ、濾過し、乾燥状態まで濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーでシリカゲル（ヘキサン中ＥｔＯＡｃ０〜５０％）上で精製し、３−［（２，４−ジメチル−ベンゾイル）−（４−オキソ−シクロヘキシル）−アミノ］−５（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２００ｍｇ，８０％）を得た。
【０２１８】
ステップＩＶ
ホウ化水素ナトリウムを−２０℃でＴＨＦ（２ｍＬ）およびＨ２Ｏ（４０μＬ）に加えた。この混合物に、３−［（２，４−ジメチル−ベンゾイル）−（４−オキソ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２００ｍｇ，０．４３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４ｍＬ）溶液を、窒素雰囲気下で加えた。反応混合物を、−２０℃で３０分間撹拌し、水性ＨＣｌ  １Ｎ（２ｍＬ）を加えた。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２ｘ５ｍＬ）で抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４の上で乾燥し、濾過し、乾燥状態まで濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーでシリカゲル（ヘキサン中ＥｔＯＡｃ  ０〜５０％）上で精製し、３−［（２，４−ジメチル−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（１２３ｍｇ，６１％）を得た。
【０２１９】
ステップＶ
ＴＨＦ：メタノール：Ｈ２Ｏ（２ｍＬ）の３：２：１混合物に３−［（２，４−ジメチル−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチルブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（８０ｍｇ，０．１７１ｍｍｏｌ）を入れた溶液に、水酸化リチウムモノヒドリド（２０ｍｇ，０．８５６ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で加えた。反応混合物を一晩撹拌し、水性ＨＣｌ  １ＮでｐＨ３〜４まで酸性化した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２ｘ５ｍＬ）で抽出し、複合有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥状態まで濃縮した。シリカゲル（ＤＣＭ中メタノール０〜１０％）を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィーで残渣を精製し、３−［（２，４−ジメチル−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸（３５ｇ，４５％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  ７．１５  -  ７．０１  （ｍ，  ２Ｈ），  ６．８６  （ｓ，  １Ｈ），  ６．７２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．６１  -  ４．３３  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．４４  -  ３．２１  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．１８  （ｄ，  Ｊ  ＝  １７．２  Ｈｚ，  ６Ｈ），  ２．０３  -  １．９６  （ｄ，  Ｊ  ＝  １１．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  １．９０  -  １．７５  （ｍ，  ３Ｈ），  １．４５  -  １．２８  （ｍ，３Ｈ），  １．２５  （ｓ，  ９Ｈ），  ０．９９  -  ０．８５  （ｍ，  １Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：  ｍ／ｚ  ＝  ４５４．１３  （Ｍ＋Ｈ＋）．
【０２２０】
化合物２、１７、５１、および２２の調製
以下の化合物は、上の化合物１８と基本的に同じ手順で調製された：
【０２２１】
化合物２：３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−Ｄ６）：  δ  １３．７１  （ｓ，  １Ｈ），  ７．５４  （ｄ，  １Ｈ），  ７．３５  （ｄｄ，  １Ｈ），  ７．２５  （ｄ，  １Ｈ），  ７．２１  （ｓ，  １Ｈ），  ４．５８  （ｓ，  １Ｈ），  ４．４４  -  ４．３４  （ｍ，  １Ｈ），  ３．３０  -  ３．２３  （ｍ，  １Ｈ），  ２．０５  -  １．９９  （ｍ，  １Ｈ），  １．９３  -  １．６９  （ｍ，  ４Ｈ），  １．５３  -  １．４１  （ｍ，  ２Ｈ），  １．２７  （ｓ，  ９Ｈ），  １．０２  -  ０．９０  （ｍ，  ２Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｍ／ｚ  ＝  ４９４．０３  （Ｍ＋Ｈ＋）．
【０２２２】
化合物１７：３−［（４−クロロ−２−フルオロ−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  ７．５１  （ｍ，  １Ｈ），  ７．２６  （ｍ，  １Ｈ），  ７．０８  （ｍ，  １Ｈ），  ６．８４  （ｓ，  １Ｈ），  ４．５３  （ｂｓ，  １Ｈ），  ４．３４  （ｍ，  １Ｈ），  ３．２５  （ｍ，  １Ｈ），  １．９５  -  １．８４  （ｍ，  ３Ｈ），  １．８２  -  １．７３  （ｍ，  １Ｈ），  １．４４  -  １．１２  （ｍ，  １２Ｈ），  ０．９９  -  ０．８４  （ｍ，  １Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：  ｍ／ｚ  ＝  ４７８．０４  （Ｍ＋Ｈ＋）．
【０２２３】
化合物５１：５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−［（４−フルオロ−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−チオフェン−２−カルボン酸
ＬＣ／ＭＳ：ｍ／ｚ  ＝  ４４４．０９  （Ｍ＋Ｈ＋）
【０２２４】
化合物２２：５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−［（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−（４−トリフルオロメチル−ベンゾイル）−アミノ］−チオフェン−２−カルボン酸
ＬＣ／ＭＳ：ｍ／ｚ  ＝  ４９４．０８  （Ｍ＋Ｈ＋）
【０２２５】
化合物５３の調製：３−［（２−クロロ−４−メチル−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸
【化２５】
2013512247.tif 000038
【０２２６】
ステップＩ
ＴＨＦ（１５ｍＬ）およびＨ２Ｏ（３００μＬ）の混合物に、−１５℃で水素化ホウ素ナトリウム（１７０ｍｇ，４．４９ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物に、５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−（４−オキソ−シクロヘキシルアミノ）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（１．５８ｇ，４．４９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を窒素雰囲気下で加えた。反応混合物を−１５℃で４５分間撹拌し、室温まで温め、水性ＨＣｌ（２ｍＬ，１Ｎ）を加えた。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２ｘ２０ｍＬ）で抽出し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥状態まで濃縮した。シリカゲル（０〜５０％ヘキサン中ＥｔＯＡｃ）のフラッシュカラムクロマトグラフィーで残渣を精製し、５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシルアミノ）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（１．３２ｇ，８８％）を得た。
【０２２７】
ステップＩＩ
トルエン（２ｍＬ）に２−クロロ−４−メチルベンゾイル塩化物（２８０ｍｇ，１．４８ｍｍｏｌ）を入れた溶液に、窒素雰囲気下で５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシルアミノ）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（１２５ｇ，０．３７ｍｍｏｌ）とピリジン（１４０μＬ，１．７４ｍｍｏｌ）を連続的に加えた。反応混合物を１００℃で一晩撹拌し、室温まで冷まし、乾燥状態まで濃縮した。残渣をシリカゲル（ヘキサン中０〜５０％ＥｔＯＡｃ）のフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、３−｛（２−クロロ−４−メチル−ベンゾイル）−［トランス−４−（２−クロロ−４−メチル−ベンゾイルオキシ）−シクロヘキシル］−アミノ｝−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（１７５ｍｇ，７４％）を得た。
【０２２８】
ステップＩＩＩ
ＴＨＦ、メタノール、Ｈ２Ｏ（２ｍＬ）の３：２：１の混合物に３−｛（２−クロロ−４−メチル−ベンゾイル）−［トランス−４−（２−クロロ−４−メチル−ベンゾイルオキシ）−シクロヘキシル］−アミノ｝−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（１７５ｍｇ，０．２１ｍｍｏｌ）を入れた溶液に、窒素雰囲気下で水酸化リチウム（１７０ｍｇ，２．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を一晩撹拌し、１Ｎの水性ＨＣｌでｐＨ３〜４まで酸性化した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２ｘ３ｍＬ）で抽出し、複合有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥状態まで濃縮した。残渣をシリカゲル（ＤＣＭ中メタノール０〜１０％）のフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、３−［（２−クロロ−４−メチル−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸（３５ｇ，４５％）を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  ７．１４  （ｄ，  ３Ｈ），  ７．００  （ｄ，  １Ｈ），  ４．５６  （ｂｓ，  １Ｈ），  ４．４５  -  ４．３３  （ｍ，１Ｈ），  ３．３０  （ｍ，  １Ｈ），  ２．２１  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．０６  -  １．９８  （ｍ，  １Ｈ），  １．９３  -  １．７０  （ｍ，  ４Ｈ），  １．５２  -  １．３９  （ｍ，  ２Ｈ），  １．３４  -  １．２８  （ｍ，  ２Ｈ），  １．２６  （ｓ，  ９Ｈ），  １．２４  -  １．１２  （ｍ，  ２Ｈ），  １．０１  -  ０．８８  （ｍ，  １Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｍ／ｚ  ＝  ４７４．０７  （Ｍ＋Ｈ＋）．
【０２２９】
化合物５４、１９、８７、８８、８９、１６、２４、および５２の調製
以下の化合物は、化合物５３について上に記載した手順と基本的に同じ手順で調製した。
【０２３０】
化合物５４：５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−［（２−フルオロ−４−メチル−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−チオフェン−２−カルボン酸
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  １３．４８  （ｓ，  １Ｈ），  ７．１７  （ｓ，  １Ｈ），  ７．１０  （ｔ，  １Ｈ），  ６．８６  （ｄ，  ２Ｈ），  ４．５５  （ｄ，  １Ｈ），  ４．４５  -  ４．３２  （ｍ，  １Ｈ），  ３．３１  -  ３．２０  （ｍ，  １Ｈ），  ２．２２  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．００  -  １．６９  （ｍ，  ５Ｈ），  １．５５  -  １．３９  （ｍ，  ２Ｈ），  １．２８  （ｓ，  ９Ｈ），  １．０７  -  ０．８９  （ｍ，２Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：  ｍ／ｚ  ＝  ４５８．１１  （Ｍ＋Ｈ＋）．
【０２３１】
化合物１９：５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−［（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−（４−メチル−ベンゾイル）−アミノ］−チオフェン−２−カルボン酸
ＬＣ／ＭＳ：  ｍ／ｚ  ＝  ４４０．１３  （Ｍ＋Ｈ＋）．
【０２３２】
化合物８７：３−［（２−クロロ−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  １３．６６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．３６  -  ７．１２  （ｍ，  ５Ｈ），  ４．５７  （ｓ，  １Ｈ），  ４．４１  （ｓ，  １Ｈ），  ３．３０  -  ３．２２  （ｍ，  １Ｈ），  ２．０９  -  １．７０  （ｍ，  ５Ｈ），  １．５４  -  １．３９  （ｍ，  ２Ｈ），  １．３５  -  １．１８  （ｍ，  ９Ｈ），  １．０３  -  ０．８９  （ｍ，  ９Ｈ），  １．０３  -  ０．８９  （ｍ，  １Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：  ｍ／ｚ  ＝  ４６１．９４  （Ｍ＋Ｈ＋）．
【０２３３】
化合物８８：５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−［（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−（２−メチル−ベンゾイル）−アミノ］−チオフェン−２−カルボン酸
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  １３．４９  （ｓ，  １Ｈ），  ７．２４  （ｓ，  １Ｈ），  ７．１３  -  ６．９２  （ｍ，  ４Ｈ），  ４．５６  （ｄ，  １Ｈ），  ４．４８  -  ４．３６  （ｍ，  １Ｈ），  ３．３１  -  ３．２２  （ｍ，  １Ｈ），  ２．２３  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．０６  -  １．７２  （ｍ，  ５Ｈ），  １．５４  -  １．３９  （ｍ，  ２Ｈ），  １．３３  -  １．３１  （ｍ，  １Ｈ），  １．２６  （ｓ，  ９Ｈ），  １．０４  -  ０．９０  （ｍ，  ２Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：  ｍ／ｚ  ＝  ４３９．９８  （Ｍ＋Ｈ＋）．
【０２３４】
化合物８９：３−［（２，３−ジフルオロ−４−メチル−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  １３．５６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．２５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．０３  -  ６．８３  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．５６  （ｄ，  １Ｈ），  ４．４５  -  ４．３０  （ｍ，  １Ｈ），  ３．３０  -  ３．３７  （ｍ，  １Ｈ），  ２．１９  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．０５  -  １．６５  （ｍ，  ５Ｈ，  １．５８  -  １．３８  （ｍ，  １Ｈ），  １．３７  -  １．１５  （ｍ，  １０Ｈ），  １．０７  -  ０．９０  （ｍ，  １Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：  ｍ／ｚ  ＝  ４７５．９７  （Ｍ＋Ｈ＋）．
【０２３５】
化合物１６：３−［（４−クロロ−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  ７．２９  （ｄ，  ２Ｈ），  ７．２０  （ｄ，  ２Ｈ），  ６．９９  （ｓ，  １Ｈ），  ４．６０  （ｄ，  １Ｈ），  ４．３９  -  ４．２８  （ｍ，  １Ｈ），  ４．２８  -  ４．１９  （ｍ，  １Ｈ），  ３．２９  -  ３．１７  （ｍ，  １Ｈ），  ３．１５  （ｄ，  ２Ｈ），  １．９７  -  １．８２  （ｍ，  ３Ｈ），  １．８２  -  １．７１  （ｍ，  １Ｈ），  １．２９  -  １．２０  （ｍ，  ９Ｈ），  １．０１  -  ０．８６  （ｍ，  ２Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｍ／ｚ  ＝  ４６０．０１  （Ｍ＋Ｈ＋）．
【０２３６】
化合物２４：５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−［（３−フルオロ−４−メチル−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−チオフェン−２−カルボン酸
ＬＣ／ＭＳ：ｍ／ｚ  ＝  ４５８．１１  （Ｍ＋Ｈ＋）．
【０２３７】
化合物５２：３−［（４−クロロ−３−フルオロ−ベンゾイル）−（トランス−４−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  １３．５９  -  １３．４０  （ｍ，  １Ｈ），  ７．４８  （ｔ，  １Ｈ），  ７．３８  （ｓ，  １Ｈ），  ７．２０  （ｄ，  １Ｈ），  ７．０３  （ｄ，  １Ｈ），  ４．５５  （ｄ，  １Ｈ），  ４．４３  -  ４．３２  （ｍ，  １Ｈ），  ３．３１  -  ３．２１  （ｍ，  １Ｈ），  ２．０２  -  １．７１  （ｍ，  ５Ｈ），  １．５１  -  １．３９  （ｍ，  ２Ｈ），  １．２９  （ｓ，  ９Ｈ），  １．２７  -  １．１７  （ｍ，  １Ｈ），  １．０８  -  ０．９４  （ｍ，  １Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ  ：  ｍ／ｚ  ＝  ４７８．０６  （Ｍ＋Ｈ＋）．
【０２３８】
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸（２６）の調製
【化２６】
2013512247.tif 000039
【０２３９】
ステップＩ
乾性ＤＭＦ（４０ｍＬ）に３−（ｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−５−ブロモ−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（４．５６６ｇ，１３．５８ｍｍｏｌ）を入れた溶液に、ヨウ化第一銅（５２ｍｇ，０．２７）、Ｐｄ２ｄｂａ３（６２２ｍｇ，０．６８ｍｍｏｌ）、およびトリエチルアミン（９．４６ｍＬ，６７．９ｍｍｏｌ）を加えた。溶液に窒素の泡を１０分間通すことによって混合物を脱酸素化した。次に、混合物にｔ−ブチルアセチレン（６．６２ｍＬ，５４．３２ｍｍｏｌ）とＢＩＮＡＰ（６７６ｍｇ，１．０９ｍｍｏｌ）を加え、窒素下で一晩、６０℃で加熱した。混合物をジクロロメタンで希釈し、ジクロロメタンで洗浄しながらセライトで濾過した。濾液を食塩水で洗浄し、有機部分を回収し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、残滓をシリカゲルクロマトグラフィーによりヘキサン中ＥｔＯＡｃ勾配（０〜５０％）で溶離して精製し、５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−（ｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（４．３６４ｇ，９５％）を得た。
【０２４０】
ステップＩＩ
ジクロロメタン（３０ｍＬ）に５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−（ｔ−ブトキシカルボニル）アミノ−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（４．３４４ｇ，９．５８ｍｍｏｌ）を入れた溶液に、トリフルオロ酢酸（３０ｍＬ）を加え、混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を乾燥状態まで蒸発させ、残滓をジクロロメタンに溶解させて水性ＮａＨＣＯ３と食塩水で洗浄した。有機部分を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、未精製の５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−アミノ−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステルを３．１３５ｇを得た。
【０２４１】
ステップＩＩＩ
トルエン（３ｍＬ）に５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−アミノ−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（０．５００ｇ，２．１１ｍｍｏｌ）およびテトラヒドロ−ピラン−４−オン（４２１ｍｇ，４．２１ｍｍｏｌ）を入れた溶液に、酢酸（１２０μＬ，２．１０ｍｍｏｌ）およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（８８６．０ｍｇ，４．１８ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌し、濾過し、トルエン（１０ｍＬ）で洗浄した。有機層を飽和重炭酸ナトリウム溶液（１ｘ１０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（１ｘ２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥状態まで濃縮した。残滓をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中エチルアセテート０〜５０％）で精製し、５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−（テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（３８８ｍｇ，５７％）を得た。
【０２４２】
ステップＩＶ
ジクロロエタン（１ｍＬ）に５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−３−テトラヒドロ−ピラン−４−イルアミノ）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（５０ｍｇ，０．１５５）を入れた溶液に、２，４−ジクロロ−ベンゾイル塩化物（４８ｍｇ，０．２３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１６時間還流させた後、室温にした。次に、混合物をジクロロメタンで希釈し、食塩水で洗浄し、有機部分を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。ヘキサン中エチルアセテートの勾配（０％〜５０％）を使って残滓をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（７０ｍｇ，９１％）を得た。
【０２４３】
ステップＶ
ステップＩＶで得た３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（７０ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ：Ｈ２Ｏ（２ｍＬ，４：１）に入れた溶液に、窒素雰囲気下で水酸化リチウム一水和物（３２ｍｇ，０．７６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を５０℃で３時間加熱し、室温まで冷まし、体積が３分の１になるまで濃縮した。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、１ＮのＨＣｌでｐＨ３になるまで酸性化した。反応混合物をジクロロメタンで抽出し、有機層を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥状態まで濃縮した。残滓をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン中メタノール０〜１０％）で精製し、３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸（３２ｍｇ，４８％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ  ：  ｍ／ｚ  ４８２．００    （Ｍ＋Ｈ＋）。（室温：１５．１０、条件：運転時間２０分でＴＦＡ０．０１％の水にＣＨ３ＣＮ５〜８５％。カラム：Ｓｙｍｍｅｔｒｙ  Ｓｈｉｅｌｄ  ＲＰ１８．２  ｘ  ５０  ｍｍ、粒子径３．５ｍｉｃｒｏ）。
【０２４４】
４−［［２−カルボキシ−５−（３，３−ジメチル−１−ブト−イニル）−チオフェン−３−イル］−（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−アミノ］−１−メチル−ピペリジニウム塩化物  （９５）：
【化２７】
2013512247.tif 000040
【０２４５】
ステップＩ
ジクロロエタン（１００ｍＬ）に３−アミノ−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（１０ｇ，６３．６ｍｍｏｌ）および１−メチル−ピペリジン−４−オン（１２．９ｇ，１１０ｍｍｏｌ）を入れた溶液に、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（２３ｇ，１１０ｍｍｏｌ）および酢酸（６．６ｇ，１１０ｍｍｏｌ）を加えた。結果として生じた懸濁液をＮ２（ｇ）下で２０〜２５℃で２４時間撹拌した。反応を水（２５ｍＬ）で急冷し、混合物を１時間撹拌した。ジクロロエタン層を分離し、もう一度水（７５ｍＬ）で処理した。混合物をもう１時間撹拌し、有機層を分離した。
【０２４６】
ジクロロエタン層に水を加え、２０分撹拌している間にＮａＨＣＯ３固体が部分的に充満した。最終ｐＨは８〜９であった。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、乾燥状態まで蒸発させた。残滓をシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、３−（１−メチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２．８ｇ，収率１８％）を得た。
【０２４７】
ステップＩＩ
ジクロロエタン（１０ｍＬ）に３−（１−メチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２．８ｇ，１１ｍｍｏｌ）を入れた溶液に、２，４−ジクロロ−ベンゾイル塩化物（２．６９ｇ，１３．２ｍｍｏｌ）を加え、この溶液を８０℃で一晩加熱した。加熱浴を除去し、反応混合物を室温まで冷却した。ジクロロメタン（７５ｍＬ）を加え、懸濁液を氷浴で３０分間撹拌した。懸濁液を濾過し、３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−アミノ］−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの塩酸塩を得た（４．０ｇ，収率７９％）。
【０２４８】
ステップＩＩＩ
ジクロロメタン（３０ｍＬ）に３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−アミノ］−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステルの塩酸塩（３．０ｇ、６．４９ｍｍｏｌ）を入れた撹拌懸濁液に、重炭酸ナトリウム（１０ｍＬ）の飽和溶液を加えた。混合物を３０分間撹拌した後、有機部分を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、乾燥状態まで濃縮して３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−アミノ］−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２．７ｇ，収率９８％）を得た。
【０２４９】
ステップＩＶ
無水ＴＨＦ（３ｍＬ）にジイソプロピルアミン（０．６ｍＬ，４．２１ｍｍｏｌ）を入れた溶液に、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中１．６Ｍ、２．３４ｍＬ，３．７４ｍｍｏｌ）を−４０℃で加えた。反応混合物を−４０℃で１５分間撹拌した後、−７８℃まで冷却した。３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−アミノ］−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（１ｇ，２．３４ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（１３ｍＬ）に溶解し、温度を約−７８℃に保ちながらこの溶液を徐々にＬＤＡ溶液に３０分かけて加えた。全部加えた後、溶液を３０分間撹拌した。
【０２５０】
無水ＴＨＦ（２ｍＬ）にヨード（９44ｍｇ，３．７４ｍｍｏｌ）を入れた溶液をアニオンに入れ、−７８℃で１時間撹拌した。反応混合物をそのまま室温になるまで放置した後、塩化アンモニウムの飽和溶液で急冷した。相分離させ、水相を酢酸エチルで抽出した。有機層をチオ硫酸ナトリウム５％液で洗浄し、次に食塩水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、乾燥状態まで蒸発させた。生成物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−アミノ］−５−ヨード−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２００ｍｇ，収率１５％）を得た。
【０２５１】
ステップＶ
無水ＤＭＦ（２ｍＬ）に３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−アミノ］−５−ヨード−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２００ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）を入れた溶液に、ヨウ化第一銅（２ｍｇ，０．００９ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２ｄｂａ３（３ｍｇ，０．００４ｍｍｏｌ）、およびトリエチルアミン（１２５μＬ，０．９ｍｍｏｌ）を加えた。溶液に窒素の泡を１０分間通すことにより、混合物を脱酸素化した。混合物にｔ−ブチルアセチレン（８９μＬ，０．７２ｍｍｏｌ）を加え、管を密封した。混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を酢酸エチルおよび水で希釈し、５分間撹拌した。有機部分を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、１４０ｍｇ（７７％）の３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステルを得た。
【０２５２】
ステップＶＩ
ステップＶの生成物（１４０ｍｇ，０．２７５ｍｍｏｌ）を前記のように水酸化リチウム一水和物（６３ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）で加水分解し、ＨＰＬＣ精製した後、８６ｍｇ（６３％）の４−［［２−カルボキシ−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−３−イル］−（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−アミノ］−１−メチル−塩化ピペリジニウムを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  ［ｐｐｍ］  ７．５５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．３９  -  ７．２２  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．１５  （ｓ，  １Ｈ），  ４．７５  -  ４．６１  （ｍ，  １Ｈ），  ３．５０  -  ２．９０  （ｍ，  ４Ｈ），  ２．６９  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．３０  -  １．５０  （ｍ，  ４Ｈ），  １．２９  （ｓ，  ９Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ：ｍ／ｚ  ４９４．７３  （Ｍ＋Ｈ＋）．
【０２５３】
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（２−メトキシ−エチル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸（４４）の調製
【化２８】
2013512247.tif 000041
【０２５４】
ステップＩ
トルエン（２ｍＬ）に３−アミノ−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（２５０ｍｇ，１．０５ｍｍｏｌ）を入れた溶液に、窒素雰囲気下でピリジン（１００ｍｇ，１．２３ｍｍｏｌ）および２，４−ジクロロ−塩化ベンゾイル（３２９ｍｇ，１．５８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を一晩１００℃で加熱し、次に室温まで冷却した。有機部分を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、乾燥状態まで濃縮した。ヘキサン中濃度０〜３０％の酢酸エチルを溶離剤に使い、シリカゲルクロマトグラフィーで残渣を精製し、３−（２，４−ジクロロ−ベンゾイルアミノ）−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（３００ｍｇ，７０％）を得た。
【０２５５】
ステップＩＩ
０℃のＤＭＦ（２ｍＬ）に３−（２，４−ジクロロ−ベンゾイルアミノ）−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（１５０ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）を入れた溶液に、窒素雰囲気下で鉱油中６０％の水素化ナトリウム（２９ｍｇ，０．７２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を氷浴で１０分間撹拌した後、１−ブロモ−２−メトキシ−エタン（７５ｍｇ，０．５４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌し、Ｈ２Ｏ（２ｍＬ）で急冷した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２ｘ５ｍＬ）で抽出し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥状態まで濃縮した。メタノール中０〜１０％のメタノールを溶離剤に使ったシリカゲルクロマトグラフィーで残渣を精製し、３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（２−メトキシ−エチル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（６０ｍｇ，収率３５％）を得た。
【０２５６】
ステップＩＩＩ
ＴＨＦ、メタノール、Ｈ２Ｏ（２ｍＬ）の３：２：１の混合物に３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（２−メトキシ−エチル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸メチルエステル（６０ｍｇ，０．１２８ｍｍｏｌ）を入れた溶液に、窒素雰囲気下で水酸化リチウム一水和物（９ｍｇ，０．２１４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌し、１Ｎの水性ＨＣｌでｐＨ３〜４まで酸性化した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２ｘ５ｍＬ）で抽出し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、乾燥状態まで濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーで０〜１０％ジククロロメタン／メタノールを溶離剤として使用して精製し、３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（２−メトキシ−エチル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸（４４ｍｇ，収率７６％）を２種の回転異性体の混合物（９：１）として得た。
主な回転異性体の１Ｈ  ＮＭＲ：（４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  ［ｐｐｍ］  ７．５０  （ｄ，  １Ｈ），  ７．４２  （ｄ，  １Ｈ），  ７．２８  （ｄｄ，  １Ｈ），  ６．９２  （ｓ，  １Ｈ），  ４．２３  -  ４．１０  （ｍ，  １Ｈ），  ３．５２  -  ３．１５  （ｍ，  ３Ｈ），  ３．１８  （ｓ，  ３Ｈ），  １．１８  （ｓ，  ９Ｈ）．
ＬＣ／ＭＳ  ：  ｍ／ｚ  ４５５．９８  （Ｍ＋Ｈ＋）．    （ＲＴ  ：  １５．１７，  条件：２０分間の運転でＴＦＡ０．０１％の水中ＣＨ３ＣＮ５〜８５％。カラム：Ｓｙｍｍｅｔｒｙ  Ｓｈｉｅｌｄ  ＲＰ１８２．１  ｘ  ５０  ｍｍおよび粒子径３．５マイクロ）。
３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−（２−ヒドロキシ−エチル）−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸（９７）の調製：
化合物は、化合物４４について報告したものと同様の手法に従って合成する。
ＬＣ／ＭＳ  ：  ｍ／ｚ  ４４１．８２  （Ｍ＋Ｈ＋）．    （ＲＴ  ：  １３．６５，  条件：２０分間の運転でＴＦＡ０．０１％の水中ＣＨ３ＣＮ５〜８５％。カラム：Ｓｙｍｍｅｔｒｙ  Ｓｈｉｅｌｄ  ＲＰ１８２．１  ｘ  ５０  ｍｍおよび粒子径３．５マイクロ）。
【０２５７】
３−（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−イソプロピル−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸（１）：
【化２９】
2013512247.tif 000042
１Ｈ  ＮＭＲ：（４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  ［ｐｐｍ］  ７．５４  （ｄ，  １Ｈ），  ７．３５  （ｄｄ，  １Ｈ），  ７．２７    （ｄ，  １Ｈ），  ７．２４  （ｓ，  １Ｈ），  ４．８４  -  ４．６８  （ｍ，  １Ｈ），  １．２８  （ｄ，  ３Ｈ），  １．２７  （ｓ，  ９Ｈ），  ０．９６  （ｄ，  ３Ｈ）．
【０２５８】
３−（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−イソプロピル−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸ナトリウム（９６）：
【化３０】
2013512247.tif 000043
水（３ｍＬ）とＣＨ３ＣＮ（０．５ｍＬ）との混合物に３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−イソプロピル−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸（１１．８２ｍｇ，０．０２７ｍｍｏｌ）を入れ、それに水酸化ナトリウム溶液（５３．３μＬ，０．５０６５Ｎ，０．０２７ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液を３０分間撹拌した後、凍結乾燥して３−［（２，４−ジクロロ−ベンゾイル）−イソプロピル−アミノ］−５−（３，３−ジメチル−ブト−１−イニル）−チオフェン−２−カルボン酸ナトリウム（１２．４ｍｇ，１００％）を得た。
【０２５９】
実施例３：Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼアッセイにおける化合物の評価
以下の参考資料はすべて参照により組み込まれる。
１．  Ｂｅｈｒｅｎｓ，  Ｓ．，  Ｔｏｍｅｉ，  Ｌ．，  Ｄｅ  Ｆｒａｎｃｅｓｃｏ，  Ｒ．    （１９９６）  ＥＭＢＯ  １５，  １２−２２
２．  Ｈａｒｌｏｗ，  Ｅ，  ａｎｄ  Ｌａｎｅ，  Ｄ．    （１９８８）  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ．    Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ．    Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒｄ，  ＮＹ．
３．  Ｌｏｈｍａｎｎ，  Ｖ．  Ｋｏｅｒｎｅｒ，  Ｆ．，  Ｈｅｒｉａｎ，  Ｕ．，  ａｎｄ  Ｂａｒｔｅｎｓｃｈｌａｇｅｒ，  Ｒ．    （１９９７）  Ｊ．  Ｖｉｒｏｌ．  ７１，  ８４１６−８４２８
４．  Ｔｏｍｅｉ，  Ｌ．，  Ｆａｉｌｌａ，  Ｃ．，  Ｓａｎｔｏｌｉｎｉ，  Ｅ．，  Ｄｅ  Ｆｒａｎｃｅｓｃｏ，  Ｒ．，  ａｎｄ  Ｌａ  Ｍｏｎｉｃａ，  Ｎ．    （１９９３）  Ｊ  Ｖｉｒｏｌ  ６７，  ４０１７−４０２６
５．  Ｆｅｒｒａｒｉ，  Ｅ．，  Ｗｒｉｇｈｔ−Ｍｉｎｏｇｕｅ，  Ｊ．，  Ｆａｎｇ，  Ｊ．  Ｗ．，  Ｂａｒｏｕｄｙ，  Ｂ．  Ｍ．，  Ｌａｕ，  Ｊ．  Ｙ．，  ａｎｄ  Ｈｏｎｇ，  Ｚ．  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｏｌｕｂｌｅ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ  ＲＮＡ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ＲＮＡ  ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  ｉｎ  Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ．  Ｊ．  Ｖｉｒｏｌ．  １９９９，  ７３，  １６４９−１６５４
６．  Ｌｅｓｂｕｒｇ，  Ｃ．  Ａ；  Ｃａｂｌｅ，  Ｍ．  Ｂ；  Ｆｅｒｒａｒｉ，  Ｅ；  Ｈｏｎｇ，  Ｚ；  Ｍａｎｎａｒｉｎｏ，ｍ  Ａ．  Ｆ；  Ｗｅｂｅｒ，  Ｐ．Ｃ．  Ｃｒｙｓｔａｌ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＲＮＡ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ＲＮＡ  ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ  ｆｒｏｍ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ  ｒｅｖｅａｌｓ  ａ  ｆｕｌｌｙ  ｅｎｃｉｒｃｌｅｄ  ａｃｔｉｖｅ  ｓｉｔｅ．    Ｎａｔｕｒｅ  Ｓｔｒｕｃｔ．  Ｂｉｏｌ．    １９９９，  ６，  ９３７−９４３
【０２６０】
化合物は、大腸菌に発現されたＨＣＶの精製組換えＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ（ＮＳ５Ｂタンパク）を含むインビトロポリメラーゼアッセイを用いて評価することができる。ＨＣＶのＮＳ５Ｂタンパクのクローニング、発現、および精製に用いられた実験手順は、下記の通りである。化合物を試験するためのＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼアッセイについての詳細を以下に述べる。
【０２６１】
実施例４：大腸菌細胞におけるＨＣＶのＮＳ５Ｂタンパクのクローニングおよび発現
遺伝子型１ｂのＨＣＢ−Ｂｋ株のＮＳ５Ｂタンパク全体をコードするｃＤＮＡを、プライマーＮＳ５Ｎｈｅ５’（５’−ＧＣＴＡＧＣＧＣＴＡＧＣＴＣＡＡＴＧＴＣＣＴＡＣＡＣＡＴＧＧ−３’）およびＸｈｏＮＳ５３’（５’−ＣＴＣＧＡＧＣＴＣＧＡＧＣＧＴＣＣＡＴＣＧＧＴＴＧＧＧＧＡＧ−３’）、ならびにプラスミドｐＣＤ  ３．８−９．４を鋳型として用いたＰＣＲにより増幅した（Ｔｏｍｅｉ  ｅｔ  ａｌ，  １９９３）。ＮＳ５Ｎｈｅ５’およびＸｈｏＮＳ５３’には、５’末端にそれぞれ２つの部位Ｎｈｅ  ＩおよびＸｈｏ  Ｉ（下線の配列）が含まれていた。増幅されたＤＮＡ断片を、制限部位Ｎｈｅ  ＩおよびＸｈｏ  Ｉの間の細菌発現プラスミドｐＥＴ−２１ｂ（Ｎｏｖａｇｅｎ）内でクローニングし、プラスミドｐＥＴ／ＮＳ５Ｂを生成した。このプラスミドは、後に、２１アミノ酸のカルボキシ末端領域を除去し、プライマーＮＨＩＳＮＳ５Ｂ  （５’−  ＧＣＴ  ＡＧＧ  ＧＣＴ  ＡＧＣ  ＣＡＣ  ＣＡＣ  ＣＡＣ  ＣＡＣ  ＣＡＣ  ＣＡＣ  ＴＣＡ  ＡＧＴ  ＴＣＣ  ＴＡＣ  ＡＣＡ  ＴＧＧ  ＡＣＡ−３’）およびＨＣＶ  ＮＳ５ＢＴＲ１  （５’−  ＣＴＣ  ＧＡＧ  ＣＴＣ  ＧＡＧ  ＴＣＡ  ＡＣＧ  ＧＧＧ  ＴＣＧ  ＧＧＣ  ＡＣＧ  ＡＧＡ  ＣＡＧ−３’）を使ってＮ末端のヒスチジンタグを追加したＮＳ５Ｂコード領域をＰＣＲ増幅するためのテンプレートとして使用した。メーカーのプロトコルに従い、このＰＣＲ断片をｐＥＴ−２１ｂ発現プラスミドにもう一度クローニングし、これをヒスチジンタグの付いたｈＣＶポリメラーゼの切断型を大腸菌ＢＬ２１（ＤＥ３）に発現するために用いた（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，  Ｃａｒｌｓｂａｄ，  ＵＳＡ）。
【０２６２】
実施例５：ＦＰＬＣ（生体分子用高速液体クロマトグラフィー）を用いた組換えＮＳ５Ｂの精製
Ｌｅｓｂｕｒｇら、およびＦｅｒｒａｒｉらの記述に従い、多少の修正を加えて、切断された酵素を精製した。簡単に言えば、ニッケル製ＨｉＴｒａｐキレートアフィニティカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，  Ｂａｉｅ  ｄ’Ｕｒｆｅ，  Ｃａｎａｄａ）に溶菌液を入れた。１０〜５００ｍＭのイミダゾル勾配を用いて、結合酵素を溶離した。次に、ＰＤ−１０脱塩カラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使ってプールされた活性分画の緩衝液からイミダゾルを除去した。タンパク質溶離に３００  〜１０００  ｍＭのＮａＣｌ勾配を使ってＨｉＴｒａｐ  ＳＰ陽イオン交換セファロースカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）でタンパク質を作製することにより、さらに精製することができた。その後、ＰＤ−１０カラムを用いて、緩衝液を１０  ｍＭトリスｐＨ  ７．５、１０％グリセロール、５  ｍＭ  ＤＤＴ、６００  ｍＭ  ＮａＣｌに変えた。陽性分画のＲＮＡ依存性ポリメラーゼの活性を試験し、最も活性の分画をプールし、−８０℃で保存した。
【０２６３】
実施例６：類似体の評価に用いるインビトロのＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼのシンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）
ホモポリマーのポリｒＡ  ＲＮＡにアニールされた１５塩基長の５’−ビオチン化ＤＮＡオリゴヌクレオチド（ｏｌｉｇｏ  ｄＴ）プライマーをストレプトアビジンコートビーズ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）の表面で捕捉し、プライマーの成長する３’末端への放射性同位元素標識された［３Ｈ］ＵＴＰ基質の取り込みを測定することによりＣ型肝炎ウイルスＮＳ５Ｂ酵素のポリメライゼーション活性を定量した。簡潔に言うと、４００ｎｇ／μｌのポリｒＡ  ＲＮＡ溶液（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ）を２０ｐｍｏｌ／μｌの５’ビオチン−オリゴｄＴ１５と容積対容積で混合した。テンプレートおよびプライマーは９５℃で５分間変性させた後、３７℃で１０分間インキュベートした。１０μｌの溶液に化合物を加え、次に以下を最終濃度として含有する融合体を加えた：１０ｍＭのＭｇＣｌ２、２０ｍＭのトリスＨＣｌ  ｐＨ７．５、５０ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＤＴＴ、および２５０ｎｇのポリｒＡ／オリゴｄＴテンプレート。酵素反応は酵素および基質を加えた直後に開始し、次の濃度を得た：１μＭ  ＵＴＰ、１  μＣｉ  ［３Ｈ］  ＵＴＰ、および５０ｎＭ組換えＨＣＶ  ＮＳ５Ｂ。取り込まれた放射能は、液体シンチレーションカウンター（Ｗａｌｌａｃ  Ｍｉｃｏｂｅｔａ  Ｔｒｉｌｕｘ，Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，ＭＡ，ＵＳＡ）を用いてシグナルを計数することによって検出することができた。
【０２６４】
このアッセイで得られた本発明のいくつかの化合物のＩＣ５０値を、表２に示す（「ＨＣＶ＿Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ＿１ｂ」という題の欄を参照されたい）。
Ａ：    ＩＣ５０値（平均）≦  ０．１  μＭ
Ｂ：      ０．１  μＭ  ＜  ＩＣ５０値（平均）≦  １  μＭ
Ｃ：      １  μＭ  ＜  ＩＣ５０値（平均）≦  １０  μＭ
Ｄ：      ＩＣ５０値（平均）＞  １０  μＭ
【０２６５】
実施例７：ＨＣＶレプリコンアッセイ
Ａ．原則
以下の手順は、細胞培養に適合性の高いレプリコン（遺伝子型１ｂ）（以下、細胞系ＥＴと名付ける）を宿すＨｕｈ７肝腫細胞を用いたＨＣＶレプリコンアッセイを記述するものである。該ＥＴ細胞は細胞培養に適合性の高いレプリコンＩ３８９ｌｕｃ−ｕｂｉ−ｎｅｏ／ＮＳ３−３’／５．１構成体を含み、この構成体は、ネオマイシン遺伝子に加えて、ホタルのルシフェラーゼ遺伝子の総合的なコピーを持っていた（Ｋｒｉｅｇｅｒ，Ｎ；Ｌｏｈｍａｎｎ，Ｖ；Ｂａｒｔｅｎｓｃｈｌａｇｅｒ，Ｒ．Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｃ  ｖｉｒｕｓ  ＲＮＡ  ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｃｅｌｌ  ｃｕｌｔｕｒｅ−ａｄａｐｔｉｖｅ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ．Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．２００１，７５，４６１４−４６２４）。ＨＣＶの１ａ遺伝子型を含むレプリコン細胞系Ｗ１１．８も用いた。この２種類の細胞系（遺伝子型１ａおよび１ｂ）は、（遺伝子型１ｂに対する）ルシフェラーゼ活性の測定、または（遺伝子型１ａに対する）ＥＬＩＳＡアッセイを用いるＮＳ５Ａレベルの測定によって、ＲＮＡの複製および翻訳を測定することが可能であった。ルシフェラーゼ活性は、ＥＴ細胞のレプリコンＲＮＡレベルに緊密に従うことが分かった。ＥＴ細胞系は培養でサブコンフルエントなレベルに維持された（＜８５％）。細胞の継代に用いた培地は、ペニシリン／ストレプトマイシンを１％含む胎仔牛血清１０％、グルタミン１％、ピルビン酸ナトリウム１％、可欠アミノ酸１％、およびＧ４１８最終濃度１８０μｇ／ｍｌを補充したＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｍｉｓｓｉｓｓａｕｇａ，ＯＮ，Ｃａｎａｄａ）で構成された。
【０２６６】
Ｂ．ルシフェラーゼ活性の測定（Ｌｕｃｉ−ＥＴ−１ｂ）
細胞を試験薬で処理するため、１７５ｃｍ２のＴフラスコから培地を除去した。１０ｍＬのＰＢＳ  １Ｘを用いて細胞単層を室温で洗浄した。ＰＢＳを吸引により除去した。１ｍＬのトリプシン／ＥＤＴＡを用いて細胞をトリプシン処理した。フラスコを３７℃で（インキュベーター）７分間インキュベートした。次に、Ｇ４１８もフェノールレッドもない完全培地（９ｍＬ）を加えた。ピペットで数回上下させることにより細胞集塊を崩壊させた。次いで、細胞懸濁液をポリプロピレン製の５０ｍＬファルコン管に移した。次に、血球計数器を使って細胞を数回数えた。Ｇ４１８もフェノールレッドもない完全ＤＭＥＭで、細胞を３００００個／ｍＬに希釈し、滅菌貯槽に移した。多チャネルピペットを使い、乳白色の９６ウェル・マイクロタイタープレートで１ウェル当たり約３０００の生存細胞（１００μＬ）を平板培養した。５％ＣＯ２インキュベーターで２〜４時間３７℃でインキュベートした後、様々な濃度の化合物を加えた。
【０２６７】
試験中の化合物を１００ｍＭのストック濃度でＤＭＳＯに再懸濁した。次に、前に記載したものと同じ培地（Ｇ４１８なし）で、滅菌した９６深型ウェルのプレートで特定のテンプレートに従って最終濃度の２倍に希釈した。細胞が入った各ウェルまたは細胞が入っていない対照ウェルに、各化合物の希釈物１容積（１００μＬ）を加えた。最終薬剤濃度は、通常２００μＭ〜０．０００１μＭであった。薬剤を入れない陽性対照として１０ウェルを使った。細胞を５％ＣＯ２インキュベーターに入れ、３７℃でさらに４日間インキュベートした。対照化合物を上記と同じ濃度にして内標準として用いた。
【０２６８】
４日間のインキュベーション期間の後培地を除去し、滅菌吸収紙を重ねた上に逆さにして速やかに乾燥させた。次に、多チャネルピペットを使って９５μＬのルシフェラーゼ緩衝液Ａを加えることにより細胞を溶解させ、ＴｏｐＳｅａｌ（商標）接着性シール膜を用いて密封し、反応混合物を室温でインキュベートし、少なくとも１０分間直射光から保護した。照度計（Ｗａｌｌａｃ  ＭｉｃｒｏＢｅｔａ  Ｔｒｉｌｕｘ，  Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ（商標），ＭＡ，ＵＳＡ）を用いてプレートのルシフェラーゼ数を読み取った。
【０２６９】
（２部構成で）試験した各薬剤濃度の阻害割合を計算した。次に、ウイルスの複製を５０％低下させるのに必要な濃度（ＩＣ５０）を、非線形回帰分析法（例えば、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェア、バージョン２．０（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ））を使って用量反応曲線から決定した。ＩＣ５０値を表２に示す：
Ａ：    ＩＣ５０値（平均）≦    ０．１  μＭ
Ｂ：        ０．１  μＭ  ＜  ＩＣ５０値（平均）≦    １  μＭ
Ｃ：        １  μＭ  ＜  ＩＣ５０値（平均）≦    １０  μＭ
Ｄ：        ＩＣ５０値（平均）＞  １０  μＭ
【０２７０】
Ｃ．Ｅｌｉｓａアッセイ（ＥＬＩＳＡ  Ｗ  １１．８−１ａ）
ＥＬＩＳＡを用いたＨＣＶレプリコン細胞ベースの検出に、遺伝子型１ａのサブゲノムクローンを含むレプリコン細胞系Ｗ１１．８を使用した。様々な薬剤濃度の存在下におけるこれらの細胞系のＲＮＡ複製を、４日間薬物療法をした直後のＮＳ５Ａタンパク質含有量によって間接的に測定した。ＮＳ５ＡはＨＣＶの非構造タンパクであり、このアッセイにおけるＨＣＶ複製のマーカーとして使われる。
【０２７１】
試験薬を用いて細胞を処置するため、吸入により１７５ｃｍ２のＴフラスコから培地を除去した。１０〜２０ｍＬのＰＢＳ  １Ｘを使い、室温で細胞単層を洗浄した。ＰＢＳは吸入により除去した。３ｍＬのトリプシン（０．２５％）／ＥＤＴＡ（０．１％）溶液で細胞をトリプシン化した。フラスコを３７℃（インキュベーター）で７分間インキュベートした。次に、Ｇ４１８なしの完全培地（９ｍＬ）を加えた。ピペットを数回上下させることにより細胞集塊を崩壊させた。
【０２７２】
その後、細胞懸濁液をポリプロピレン製の５０ｍＬファルコン管に移した。次に、血球計数器を使って細胞を数回数えた。Ｇ４１８のない完全ＤＭＥＭで細胞を５０，０００個／ｍＬに希釈し、その後滅菌貯槽に移した。多チャネルピペットを使い、乳白色の９６ウェル・マイクロタイタープレートのウェルごとに約５０００個の生存細胞（１００μＬ）を平板培養した。５％ＣＯ２のインキュベーターに入れ、３７℃で２〜４時間インキュベートした後、様々な濃度の化合物を加えた。
【０２７３】
１００ｍＭまたは１０ｍＭのストック濃度でＤＭＳＯに薬剤を再懸濁した。場合によっては（薬剤の力価がｎモル値未満の場合）、ＤＭＳＯの化合物を出発溶液として１ｍＭ又は１００μＭに希釈する必要があった。次に、薬剤を滅菌９６深型ウェルプレートに入れ、特定のテンプレート（付属書を参照のこと）に従って、前に述べた同じ培地（Ｇ４１８なし）の最終濃度の２倍まで薬剤を希釈した。次に、各薬剤の希釈物の１容量（１００μＬ）ずつを、細胞を含む各ウェルに加えた。
【０２７４】
薬剤なしの対照（阻害率０％）として１６ウェルを用いた。基準化合物を２μＭ（最終濃度）含むバックグラウンド対照（阻害率１００％）として、８ウェルを用いた。２μＭの基準化合物は、ＮＳ５Ａの発現を約１００％で阻害し、細胞に対して非毒性であることが分かった。１００％阻害ウェルの数値を平均し、バックグラウンド値として用いた。細胞は、５％ＣＯ２のインキュベーターで４日間、３７℃でさらにインキュベートする。
【０２７５】
４日間のインキュベーション期間の後、ＮＳ５Ａタンパクの含有量を測定するため、プレートを裏返して培地を適切なごみ容器に捨てた。残液があれば、吸収紙の上で静かに数回たたいて除去した。次に、プレートを１ウェル当たり１５０μＬのＰＢＳで１回洗浄し、シェーカー（５００ｒｐｍ）にのせて室温で５分間インキュベートした。１ウェル当たり１５０μＬの冷たい（−２０℃）固定溶液（メタノール５０％／アセトン５０％混合）をプレートに加え、室温でプレートを５分間インキュベートした。次にプレートを裏返し、吸収紙の上で静かに数回たたいて残液を除去した。次に１ウェル当たり１５０μＬのＰＢＳでプレートを２回洗浄し、１回ごとにシェーカー（５００ｒｐｍ）に載せて室温で５分間インキュベートした。１ウェル当たり１５０μＬのブロック液をプレートに加えた。次に、ＴｏｐＳｅａｌ（商標）接着性シール膜でプレートを密封し、３７℃で１時間、または４℃で一晩インキュベートして非特異的サイトをブロックした。
【０２７６】
プレートを裏返し、ブロック液を適切なごみ容器に捨てた。吸収紙の上で静かに数回たたくことによって残液を除去した。次に、１ウェル当たり１５０μＬのＰＢＳでプレートを２回、１ウェル当たり１５０μＬのＰＢＳＴＳ液で１回洗浄し、洗浄後１回ごとにシェーカー（５００ｒｐｍ）に載せて室温で５分間インキュベートした。次に、１ウェル当たり５０μＬの抗ヒトＮＳ５Ａ抗体（Ａｂ１）をブロック液で１／１０００に希釈してくわえた。次に、ＴｏｐＳｅａｌ（商標）接着性シール膜でプレートを密封し、４℃で一晩インキュベートした。
【０２７７】
翌日、プレートを裏返して適切なごみ容器に溶液を捨てた。次に、プレートを吸収紙の上で静かに数回たたいて残液を除去した。１ウェル当たり１５０μＬのＰＢＳでプレートを５回洗浄し、１回ごとにシェーカー（５００ｒｐｍ）に載せて室温で５分間インキュベートした。次に、１ウェル当たり５０μＬのペロキシダーゼ共役ロバ抗マウス抗体（Ａｂ２）をブロック液で１／１００００に希釈してプレートに加えた。その後、ＴｏｐＳｅａｌ（商標）接着性シール膜を使ってプレートを密封し、シェーカー（５００ｒｐｍ）に載せて室温で３時間インキュベートした。３時間のインキュベーションが終わる頃に、市販の化学ルミネセンス基質液を調製した。ルミノールとエンハンサーの等容量混合物および安定した過酸化物の試薬を作製し、光から保護した。次にプレートを裏返し、適切なごみ容器に溶液を捨てた。吸収紙の上で静かに数回たたいて残液を除去した。プレートを１５０μＬのＰＢＳＴＳで４回、１５０μＬのＰＢＳで１回洗浄した後、１回ごとにシェーカー（５００ｒｐｍ）に載せて室温で５分間インキュベートした。その後、１ウェル当たり１００μＬの基質溶液をプレートに加えた。次に、ＴｏｏｐＳｅａｌ（商標）接着性シール膜を使ってプレートを密封し、シェーカー（５００ｒｐｍ）に載せて室温で１分間インキュベートし、その後室温で３０〜６０分間インキュベートしてからＡｎｌｙｓｔ  ＨＴプレートリーダーでルミネセンス（相対光単位（ｒｅｌａｔｉｖｅ  ｌｉｇｈｔ  ｕｎｉｔ）を読み取った（ＬＪＬ  Ｄｅｆａｕｌｔ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ  Ｍｅｔｈｏｄ）。
【０２７８】
（２部構成で）試験した各薬剤濃度の阻害割合を計算した。次に、非線形回帰分析法（例えば、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェア、バージョン２．０（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ））をもちいた用量反応曲線から、ウイルス複製の５０％低下に必要な濃度を決定した。ＩＣ５０値を表２に示す：
Ａ：        ＩＣ５０値（平均）≦  ０．１  μＭ
Ｂ：        ０．１  μＭ  ＜  ＩＣ５０値（平均）≦  １  μＭ
Ｃ：        １  μＭ  ＜  ＩＣ５０値（平均）≦  １０  μＭ
Ｄ：        ＩＣ５０値（平均）＞  １０  μＭ
【０２７９】
実施例８：［３Ｈ］チミジン取り込みアッセイ（ＣＣ５０）
９６ウェルのクラスターディッシュで、１ウェル当たり合計２０００個の細胞を、１０％のＦＢＳ（Ｗｉｓｅｎｔ．，Ｓｔ  Ｂｒｕｎｏ，ＱＣ）および２ｍＭのグルタミン（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．）を補充した体積１００μＬのＤＭＥＭ（Ｗｉｓｅｎｔ．，Ｓｔ  Ｂｒｕｎｏ  ＱＣ）に植え付けた。ペニシリンおよびストレプトマイシン（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．）を加え、最終濃度をそれぞれ５００Ｕ／ｍＬおよび５０μｇ／ｍＬにした。５％ＣＯ２の雰囲気下で３時間以上、３７℃でインキュベートした後、最終濃度の２倍に調整した化合物を細胞に加えた。２〜４倍の薬剤希釈物を、２部構成で連続１１回試験した。７２時間インキュベートした後、培地に入れた［３Ｈ］メチルチミジンの１０μＣｉ／ｍＬ溶液（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  Ｉｎｃ．，  Ａｒｌｉｎｇｔｏｎ  Ｈｅｉｇｈｔｓ，ＩＩＩ．；２Ｃｉ／ｍｍｏｌ）２０μＬを加え、プレートを３７℃で２４時間さらにインキュベートした。次に、細胞をリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄し、２分間トリプシン化し、Ｔｏｍｔｅｃセルハーベスター（Ｔｏｍｔｅｃ，Ｏｒａｎｇｅ，Ｃｏｎｎ．）を使ってファイバーグラスフィルター上に収集した。フィルターを３７℃で１時間乾燥し、４．５ｍＬの液体シンチレーションカクテル（Ｗａｌｌａｃ  Ｏｙ，Ｔｕｒｋｕ，Ｆｉｎｌａｎｄ）の入った袋に入れた。生存複製細胞を表わす［３Ｈ］メチルチミジンの蓄積量を、液体シンチレーション計数器（１４５０−Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ；Ｗａｌｌａｃ  Ｏｙ）で測定した。ＳＯＰ：２６５−１６２−０３を参照のこと。この実験に使用した細胞系は、Ｈｕｈ−７ＥＴ（Ｈｕｈ−７細胞系（肝細胞癌、ヒト）に由来し、ＨＣＶサブゲノムレプリコンを含有する細胞）、Ｍｏｌｔ−４（末梢血、急性リンパ球性白血病、ヒト）、ＤＵ−１４５（前立腺癌、脳転移、ヒト）、Ｈｅｐ−Ｇ２（肝細胞癌、ヒト）、およびＳＨ−ＳＹ５Ｙ（神経芽細胞腫、ヒト）細胞である。
【０２８０】
上述の［３Ｈ］チミジン取り込みアッセイを使い、試験化合物の細胞毒性能を決定した。細胞毒性に関する５０％細胞毒性濃度（ＣＣ５０）を、１化合物当たり６〜８種類の濃度を用いて３部構成で用量反応曲線から決定した。非線形回帰分析法を用いて曲線をデータポイントに適合させた。ＣＣ５０値は、結果として生じる曲線から書き換えることができる（例えば、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェア、バージョン２．０（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡ））。本発明の化合物のＣＣ５０値を表２に示す。
Ａ：    ＣＣ５０値（平均）≧  １００  μＭ
Ｂ：    １０  μＭ  ≦  ＣＣ５０値（平均）＜  １００  μＭ
Ｃ：        ＣＣ５０値（平均）≦  １０  μＭ
【０２８１】
【表２−１】
2013512247.tif 000044
【表２−２】
2013512247.tif 000045
【表２−３】
2013512247.tif 000046
【表２−４】
2013512247.tif 000047
【表２−５】
2013512247.tif 000048
【０２８２】
本明細書に記載したすべての参考文献は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。本明細書において、すべての略号、記号、および慣習は、現代の科学文献で使用されるものと一致する。例えば、Ｊａｎｅｔ  Ｓ．Ｄｏｄｄ，ｅｄ．，Ｔｈｅ  ＡＣＳ  Ｓｔｙｌｅ  Ｇｕｉｄｅ：Ａ  Ｍａｎｕａｌ  ｆｏｒ  Ａｕｔｈｏｒｓ  ａｎｄ  Ｅｄｉｔｏｒｓ，２ｎｄ  Ｅｄ．，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．：Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，１９９７を参照されたい。
【０２８３】
当業者は、以上の記述から本発明の基本的な性格を容易に理解し、その精神および範囲から逸脱することなく、多様な用途および状況に合わせて、本発明に様々な変更および修正を加えることができる。
【手続補正書】
【提出日】平成24年10月18日(2012.10.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2013512247000001.app
【国際調査報告】
2013512247.tif 000057
2013512247.tif 000058