(57)【要約】  本発明は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を用いた癌患者の治療の有効性を予測するための診断方法を提供する。方法は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い癌患者を確認するために提供される。本方法または、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認することも提供する。本方法はまた、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性がより高い癌患者を確認することも提供する。さらに、これらの方法を包含するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤で癌患者を治療するための改良方法も提供する。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い癌患者を同定する方法であって、該方法は：
患者の腫瘍サンプルを得ること、
サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；
５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；
サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、
を含む、上記方法。
【請求項２】
ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を同定する方法であって、該方法は：
患者の腫瘍サンプルを得ること、
サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；
５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；
サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；
サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、
従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を同定すること、
を含む、上記方法。
【請求項３】
ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を同定する方法であって、該方法は：
患者の腫瘍サンプルを得ること、
サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；
５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；
サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；
サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＡ６７３腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、
従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を同定すること、
を含む、上記方法。
【請求項４】
以下の（Ａ）と（Ｂ）の工程を含む、患者の癌を治療する方法：
（Ａ）ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を用いた治療に応答する可能性が高い腫瘍を患者が有するかどうかを決定することによって、このようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する患者の反応可能性を診断する工程、
ここで該決定は：
患者の腫瘍サンプルを得て、
サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価し；
５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定し；
サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定することによってなされる；および、
（Ｂ）前記患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与する工程。
【請求項５】
以下の（Ａ）と（Ｂ）の工程を含む、患者の癌を治療する方法：
（Ａ）ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療に応答する可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある腫瘍を患者が有するかどうかを決定することによって、そのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する患者の反応可能性を診断する工程、
ここで該決定は：
患者の腫瘍サンプルを得て、
サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価し；
５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定し；
サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定し；
サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、によってなされ、
従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を同定する；および、
（Ｂ）前記患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与すること。
【請求項６】
以下の（Ａ）と（Ｂ）の工程を含む、患者の癌を治療する方法：
（Ａ）ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療に応答する可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある腫瘍を患者が有するかどうかを決定することによって、このようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する患者の反応可能性を診断する工程、
ここで該決定は：
患者の腫瘍サンプルを得て、
サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価し；
５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定し；
サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定し；
サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＡ６７３腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、によってなされ、
従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を同定する；および、
（Ｂ）前記患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与すること、
を含む、上記方法。
【請求項７】
患者の癌を治療する方法であって、該方法は、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与することを含み、ここで該投与は、患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合になされ、ここでこのような診断は、癌の腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；および、腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞またはＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きいことを決定することによってなされる、上記方法。
【請求項８】
患者の癌を治療する方法であって、該方法は、
癌の腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；および、腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞またはＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きいことを決定することによって、患者がＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合であって、且つ
上記癌の腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯまたはＡ６７３腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きいことを決定することによって、患者が抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性があると診断された場合に、
前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与することを含む、上記方法。
【請求項９】
ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による阻害に対する腫瘍細胞増殖の感受性の予測方法であって、該方法は：
腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；
５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；
腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その腫瘍細胞は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に高い感受性を示すであろうと決定すること、
を含む、上記方法。
【請求項１０】
ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による増殖阻害に対する感受性を有すると予想されるが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想される腫瘍細胞を同定する方法であって、該方法は：
腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；
５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；
腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その腫瘍細胞は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に高い感受性を示すであろうと決定すること、および、該腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その腫瘍細胞は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないであろうと決定すること、
を含む、上記方法。
【請求項１１】
前記腫瘍細胞は、骨髄腫、ＮＳＣＬＣ、ＡＣＣ、卵巣癌、ＨＮＳＣＣ、結腸癌、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、神経芽細胞腫、膵臓癌、または、乳癌から選択される癌由来ものである、請求項１〜１０、１４〜１５および２６〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、ＯＳＩ−９０６である、請求項１〜１０および２２〜３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
１種またはそれより多くの追加の抗癌剤が、前記ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤と同時または連続的に共に投与される、請求項４〜８、２０〜２１、２６〜２７および３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある、ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療が必要な癌患者を同定する方法であって、該方法は：
患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の２種の遺伝子転写物ＩＲおよびＩＲ−Ａの発現レベルを評価すること；および、
サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯまたはＡ６７３腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、
を含む、上記方法。
【請求項１５】
抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある、ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療が必要な癌患者を同定する方法であって、該方法は：
患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中のホスホ−ＩＲのレベルを評価すること；および、
サンプルの腫瘍細胞中のホスホ−ＩＲのレベルが、同じ方法で決定されたＧＥＯまたはＡ６７３腫瘍細胞のホスホ−ＩＲのレベルに等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、
を含む、上記方法。
【請求項１６】
抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療に応答する可能性があると予想される、ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療が必要な癌患者を確認する方法であって、該方法は：
患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の２種の遺伝子転写物ＩＲおよびＩＲ−Ａの発現レベルを評価すること；および、
サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより小さい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、
を含む、上記方法。
【請求項１７】
前記サンプルの腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計は、ゼロかまたは検出不可能である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療に応答する可能性があると予想される、ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療が必要な癌患者を確認する方法であって、該方法は：
患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中のホスホ−ＩＲのレベルを評価すること；および、
サンプルの腫瘍細胞中のホスホ−ＩＲのレベルが、同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞のホスホ−ＩＲのレベルに等しいかまたはそれより小さい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、
を含む、上記方法。
【請求項１９】
前記サンプルの腫瘍細胞中のホスホ−ＩＲのレベルは、ゼロかまたは検出不可能である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
患者の癌を治療する方法であって、該方法は、患者が抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が高いと決定される場合に、患者に治療有効量の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を投与することを含み、ここで該決定は、患者の腫瘍の腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより小さいことを決定することによってなされる、上記方法。
【請求項２１】
患者の癌を治療する方法であって、該方法は、患者が抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が高いと決定される場合に、患者に治療有効量の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を投与することを含み、ここで該決定は、サンプルの腫瘍細胞中のホスホ−ＩＲのレベルが、同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞のホスホ−ＩＲのレベルに等しいかまたはそれより小さいことを決定することによってなされる、上記方法。
【請求項２２】
ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い癌患者を同定する方法であって、該方法は：
患者の腫瘍サンプルを得て、
サンプルの腫瘍細胞中の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；
サンプルの腫瘍細胞がＩＧＦ−１Ｒを発現する場合、および、サンプルの腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＲＤ腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計より大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、
を含む、上記方法。
【請求項２３】
ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い癌患者を同定する方法であって、該方法は：
患者の腫瘍サンプルを得て、
サンプルの腫瘍細胞中の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；
サンプルの腫瘍細胞がＩＧＦ−１Ｒを発現し、ＩＲおよび／またはＩＲ−Ａを発現する場合であって、且つ、サンプルの腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＲＤ腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計より大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、
を含む、上記方法。
【請求項２４】
ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による阻害に対する腫瘍細胞増殖の感受性の予測方法であって、該方法は：
腫瘍細胞中の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；
腫瘍細胞がＩＧＦ−１Ｒを発現する場合であって、且つ、腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＲＤ腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計より大きい場合、その腫瘍細胞は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に高い感受性を示すであろうと決定すること、
を含む、上記方法。
【請求項２５】
ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による阻害に対する腫瘍細胞増殖の感受性の予測方法であって、該方法は：
腫瘍細胞中の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；
腫瘍細胞がＩＧＦ−１Ｒを発現し、ＩＲおよび／またはＩＲ−Ａを発現する場合であって、且つ、腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＲＤ腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計より大きい場合、その腫瘍細胞は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に高い感受性を示すであろうと決定すること、
を含む、上記方法。
【請求項２６】
患者の癌を治療する方法であって、治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を、患者がこのような阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定される場合に前記患者に投与することを含み、ここで該決定は、
患者の腫瘍の腫瘍細胞中の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；および、
患者の腫瘍の腫瘍細胞がＩＧＦ−１Ｒを発現し、患者の腫瘍の腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＲＤ腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計より大きいことを決定すること、
によってなされる、上記方法。
【請求項２７】
患者の癌を治療する方法であって、治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を、患者がこのような阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定される場合に前記患者に投与することを含み、ここで該決定は、
患者の腫瘍の腫瘍細胞中の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；および、
患者の腫瘍の腫瘍細胞がＩＧＦ−１Ｒを発現し、ＩＲおよび／またはＩＲ−Ａを発現すること、さらに、患者の腫瘍の腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＲＤ腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計より大きいことを決定すること、
によってなされる、上記方法。
【請求項２８】
ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い癌腫を有する患者を同定する方法であって、該方法は：
患者の腫瘍サンプルを得て、
サンプルの腫瘍細胞中の遺伝子転写物ＩＧＦ−１ＲおよびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；
サンプルの腫瘍細胞がＩＧＦ−１Ｒを発現する場合、さらに、サンプルの腫瘍細胞のＩＧＦ−２の発現レベルが、同じ方法で決定されたＭＤＡＨ−２７７４腫瘍細胞のＩＧＦ−２の発現レベルより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、
を含む、上記方法。
【請求項２９】
ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い骨髄腫を有する患者を同定する方法であって、該方法は：
患者の腫瘍サンプルを得て、
サンプルの腫瘍細胞中の遺伝子転写物ＩＧＦ−１ＲおよびＩＧＦ−１の発現レベルを評価すること；
サンプルの腫瘍細胞がＩＧＦ−１Ｒを発現する場合、さらに、サンプルの腫瘍細胞のＩＧＦ−１の発現レベルが、同じ方法で決定されたＵ２６６腫瘍細胞のＩＧＦ−１の発現レベルより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、
を含む、上記方法。
【請求項３０】
ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い肉腫を有する患者を同定する方法であって、該方法は：
患者の腫瘍サンプルを得て、
サンプルの腫瘍細胞中の遺伝子転写物ＩＧＦ−１ＲおよびＩＧＦ−１の発現レベルを評価すること；
サンプルの腫瘍細胞がＩＧＦ−１Ｒを発現する場合、さらに、サンプルの腫瘍細胞のＩＧＦ−１の発現レベルが、同じ方法で決定されたＡ６７３腫瘍細胞のＩＧＦ−１の発現レベルより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、
を含む、上記方法。
【請求項３１】
ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い癌患者を同定する方法であって、
患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価し；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定し；サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が、予め決められた値であってその値よりも低いと腫瘍細胞がＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に耐性である、予め決められた最低発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定することを含む、方法。
【請求項３２】
前記の予め決められた最低発現レベルの指標は、患者サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値を決定するのに使用されたのと同じ条件下で決定された、RDES腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記予め決められた最低発現レベルの指標は、患者サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値を決定するのに使用されたのと同じ条件下で決定された、ＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
追加の工程を含む請求項３１に記載の方法であって、該追加の工程において、サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が、前記合計についての予め決められたレベルであってこれよりも高いと腫瘍細胞は抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対して耐性である、予め決められた最低レベルに等しいかまたはそれより大きいかさらに決定され、したがって、患者が抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療によっても利益を得る可能性が高いかどうかが示される、方法。
【請求項３５】
前記ＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計について予め決められた最低レベルは、患者サンプルの腫瘍細胞に係る合計値を決定するのに使用されたのと同じ条件下で決定された、ＧＥＯまたはＡ６７３腫瘍細胞に係る合計値である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い癌患者を同定する方法であって、該方法は：
患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の遺伝子ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；
該遺伝子それぞれの発現レベルの値を加算することによって、該遺伝子の発現レベルの指標を決定すること；
サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が、予め決められた最低発現レベルの指標の値であって、これよりも低いと腫瘍細胞はＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対して耐性である、最低発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、
を含む、上記方法。
【請求項３７】
ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を同定する方法であって、該方法は：
患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中のホスホ−ＩＲおよびホスホ−ＩＧＦ−１Ｒのレベルを評価すること；および、
腫瘍細胞がホスホ−ＩＲとホスホ−ＩＧＦ−１Ｒの両方を発現する場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性があると決定すること、
を含む、上記方法。
【請求項３８】
癌患者の治療方法であって、患者の腫瘍の腫瘍細胞がホスホ−ＩＲとホスホ−ＩＧＦ−１Ｒの両方を発現することを決定することによって、患者が、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応性を有する可能性があるが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性があると同定された場合に、患者へのそのような阻害剤を投与することを含む、上記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
[1]本願は、２０１０年３月３日付けで出願された米国仮出願第６１／３１０，０３１号（これは、参照によりその全体を本発明に組み入れられる）の優先権を主張する。
【背景技術】
【０００２】
[2]癌は、無秩序な増殖、分化しないこと、および、局所組織へ侵入し転移する能力を特徴とする様々な細胞の悪性腫瘍の一般名である。これらの新生物性の悪性腫瘍は、罹患率程度は様々であるが体内のあらゆる組織および臓器に影響を与える。本発明は、癌患者を診断および治療する方法を対象とする。具体的に言えば、本発明は、どの患者がインスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）キナーゼ阻害剤での治療によって最も利益を得るかを決定する方法を対象とする。
【０００３】
[3]ＩＧＦ−１Ｒはインスリン受容体ファミリーに属するものであり、このファミリーには、インスリン受容体（ＩＲ）、ＩＧＦ−１Ｒ（ホモ二量体）、ＩＧＦ−１Ｒ／ＩＲ（ハイブリッド受容体）およびＩＧＦ−２Ｒ（マンノース６−リン酸受容体）などが含まれる。ＩＧＦ−１Ｒ／ＩＲハイブリッドは、ＩＧＦと選択的に結合しシグナル伝達するホモ二量体として作用する。ＩＲは２種のアイソフォーム、すなわち：ＩＲ−Ｂ（従来のインスリン受容体）、および、ＩＲ−Ａ（胎児型、これは、選択された腫瘍で再発現されＩＧＦ−ＩＩと選択的に結合する）で存在する。ＩＧＦ−２Ｒは、ＩＧＦ−ＩＩのための「吸込み（sink）」として作用する非シグナル伝達受容体である（Pollak M.N., et al. Nat Rev Cancer 2004 4：505-18）。６種のよく特徴付けられたインスリン様増殖因子結合タンパク質（ＩＧＦＢＰ−１〜６）があり、これらは、ＩＧＦリガンドと会合して、ＩＧＦを安定化しそれらのＩＧＦ−ＩＲと結合する能力を調節する。
【０００４】
[4]ＩＧＦ−１Ｒは膜貫通ＲＴＫであって、これは、主にＩＧＦ−１と結合するが、ｌＧＦ−ＩＩおよびインスリンともそれより低い親和性で結合する。ＩＧＦ−１がその受容体に結合すると、そのチロシンキナーゼ活性の活性化、分子間の受容体自己リン酸化、および、ＩＲＳ１やＳｈｃなどの細胞基質のリン酸化が起こり、続いてＰＩ３Ｋ／Ａｋｔとマイトジェン活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）経路の活性化が起こる（Adams T.E., et al. Cell Mol Life Sci 2000 57：1050-93; Pollak M.N., et al. Nat Rev Cancer 2004 4：505-18; Baserga R., Exp Cell Res 1999 253：1-6）。リガンドによって活性化されたＩＧＦ−１Ｒは正常な細胞では分裂促進性の活性を誘導し、異常な増殖では重要な役割を果たす。ＩＧＦ−ｌ系の主要な生理学的な役割は、正常な増殖および再生の促進である。過剰発現させたＩＧＦ−１Ｒ（インスリン様増殖因子１受容体）は有糸分裂誘発を開始させてリガンド依存性の腫瘍形質転換を促進することができる。さらにＩＧＦ−１Ｒは悪性の表現型の確立と維持において重要な役割を果たす。上皮増殖因子（ＥＧＦ）受容体とは異なり、ＩＧＦ−１Ｒの腫瘍形成性の突然変異型は未だ同定されていない。しかしながら、数種の腫瘍遺伝子がＩＧＦ−１およびＩＧＦ−１Ｒ発現に影響を与えることが実証されている。ＩＧＦ−１Ｒ発現の減少と形質転換への耐性との相関が観察されている。細胞をＩＧＦ−１ＲのＲＮＡに対するｍＲＮＡアンチセンスに曝露することによって、ある種のヒト腫瘍細胞系の軟寒天での増殖が抑制される。ＩＧＦ−１Ｒは、インビボとインビトロの両方においてアポトーシスへの進行を阻害する。また、インビボにおいて、ＩＧＦ−１Ｒレベルが野生型レベルよりも低くなると腫瘍細胞のアポトーシスを引き起こすことも示されている。正常な非腫瘍形成性の細胞では、ＩＧＦ−１Ｒのアポトーシスを引き起こす破壊能力は小さくなるようである。
【０００５】
[5]IGF-1経路はヒト腫瘍の発達において重要な役割を有する。ＩＧＦ−１Ｒの過剰発現は様々な腫瘍（乳房、結腸、肺、肉腫）で頻繁にみられ、高悪性度の表現型と関連することが多い。高い循環ＩＧＦ１濃度は、前立腺、肺および乳癌のリスクと強い相関を示す。さらにＩＧＦ−１Ｒは、インビトロおよびインビボにおいて形質転換した表現型の確立と維持に必要である（Baserga R. Exp. Cell. Res., 1999, 253, 1-6）。ＩＧＦ−１Ｒのキナーゼ活性は、数種の腫瘍遺伝子：ＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＳＶ４０Ｔ抗原、活性化Ｒａｓ、Ｒａｆおよびｖ−Ｓｒｃの形質転換活性に必須である。正常な線維芽細胞におけるＩＧＦ−１Ｒの発現は腫瘍性の表現型を誘導し、続いてこれはインビボで腫瘍を形成する。ＩＧＦ−１Ｒ発現は、足場依存性増殖において重要な役割を果たす。またＩＧＦ−１Ｒは、化学療法、放射線およびサイトカインによって誘導されるアポトーシスから細胞を保護することも示されている。逆に、優性阻害ＩＧＦ−１Ｒによる内因性ＩＧＦ−１Ｒの阻害、三重らせん形成、または、アンチセンス発現ベクターは、インビトロでの動物モデルにおける腫瘍増殖で形質転換活性を抑制すること示されている。またＩＧＦ−１Ｒシグナル伝達経路は、ＣＲＣにおける受容体およびリガンドの過剰発現、より悪性の表現型との関連、化学療法耐性および予後不良との相関を実証するデータによれば、結腸直腸癌（ＣＲＣ）における確固たる標的となる可能性がある（Saltz, L.B., et al. J Clin Oncol 2007；25（30）: 4793-4799; Tripkovic I., et al. Med Res. 2007 Jul；38（5）：519-25. Epub 2007 Apr 26; Miyamoto S., et al. Clin Cancer Res. 2005 May 1；11（9）：3494-502; Nakamura M., et al. Clin Cancer Res. 2004 Dec 15；10（24）：8434-41; Grothey A, et al. J Cancer Res Clin Oncol. 1999；125（3-4）：166-73）。
【０００６】
[6]タンパク質−チロシンキナーゼ阻害剤は、哺乳動物の癌細胞の増殖の選択的な阻害剤として有用であることが認識されている。例えばＢＣＲ−ＡＢＬ融合遺伝子産物のキナーゼ活性を阻害するグリベック（GleevecTM）（また、メシル酸イマチニブとして知られている）という２−フェニルピリミジンチロシンキナーゼ阻害剤は、米国食品医薬品局によってＣＭＬ治療用として承認されている。また４−アニリノキナゾリン化合物のタルセバ（TarcevaTM）（塩酸エルロチニブ）もＦＤＡによって承認されており、これは、選択的にＥＧＦ受容体キナーゼを高い効力で阻害するものである。ＩＧＦ−１Ｒのキナーゼ活性を直接阻害する化合物、加えてＩＧＦ−１Ｒ活性化をブロックすることによってＩＧＦ−１Ｒキナーゼ活性を減少させる抗体、または、ＩＧＦ−１Ｒ発現をブロックするアンチセンスオリゴヌクレオチドの抗癌剤として使用するための開発は、熱心な研究努力が続けられている分野である（例えば、Larsson, O. et al (2005) Brit. J. Cancer 92:2097-2101; Ibrahim, Y.H. and Yee, D. (2005) Clin. Cancer Res. 11:944s-950s; Mitsiades, C.S. et al. (2004) Cancer Cell 5:221-230; Camirand, A. et al. (2005) Breast Cancer Research 7:R570-R579 (DOI 10.1186/bcr1028); Camirand, A. and Pollak, M. (2004) Brit. J. Cancer 90:1825-1829; Garcia-Echeverria, C. et al. (2004) Cancer Cell 5:231-239; Sachdev D, and Yee D., Mol Cancer Ther. 2007 Jan;6(1):1-12; Hofmann F., and Garcia-Echeverria C., Drug Discov Today 2005 10:1041-7を参照）。ＩＧＦ−１Ｒ経路を阻害する物質は、インビトロとインビボの両方において複数のヒト癌モデルで、具体的にはユーイング肉腫および横紋筋肉腫の小児モデルで抗腫瘍性の有効性が実証されてきた（Manara MC, et al. Int J Oncol 2005 27:1605-16）。肉腫を有する患者で有効性があったという初期の示唆があったにもかかわらず、初期の臨床試験におけるＩＧＦ−１Ｒ阻害剤のこれまでの結果にめざましいものはなく、これは、このアプローチで前進するためには患者の選択法および合理的な組み合わせが必要であろうということを示唆している（Tolcher A.W., et al. Journal of Clinical Oncology, 2007 ASCO Annual Meeting Proceedings Part I. Vol 25, No. 18S (June 20 Supplement), 2007: 3002）。これまでに得られたデータは、ＩＧＦ−１Ｒ経路の構成要素の活性化、過剰発現または増幅が反応性を予測し得ることを示していない。
【０００７】
[7]腫瘍形成およびその他の血管増殖性障害のより有効な治療と、その治療にどの腫瘍が応答するかを決定するためのより有効な手段の両方が必要である。いくつかのグループが、タンパク質−チロシンキナーゼ阻害剤に対する患者の応答を予測する見込みのあるバイオマーカーを調査または開示している（例えば、ＰＣＴ公報：ＷＯ２００４／０６３７０９、ＷＯ２００５／０１７４９３、ＷＯ２００４／１１１２７３、ＷＯ２００８／１０８９８６、ＷＯ２００７／００１８６８、および、ＷＯ２００４／０７１５７２；および、米国特許公開公報：ＵＳ２００５／００１９７８５、ＵＳ２００７／００６５８５８、ＵＳ２００９／００９２５９６、ＵＳ２００９／００９３４８８、ＵＳ２００６／０１４０９６０、および、ＵＳ２００４／０１３２０９７を参照）。結腸直腸癌における非反応性を予測するものとして突然変異型ＫＲＡＳなどのＥＧＦＲキナーゼ阻害剤に対する応答を予想するために、数種のバイオマーカーが提案されている（例えば、Brugger, W. et al. （2009） J Clin Oncol 27：15s, （suppl; abstr 8020）; Siena, S et al （2009） JNCI 101（19）：1308-1324; Riely and Ladanyi （2008） J Mol Diagnostics 10（6）：493; Jimeno, A. et al. （2009） Cancer J. 15（2）：110-13を参照）。加えて、突然変異型ＫＲＡＳなどのいくつかのバイオマーカーが、ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する患者の応答を予想する可能性を有することが開示されている（例えば、Rodon, J. et al （2008） Mol Cancer Ther. 7：2575-2588; T. Pitts et al. （2009） EORTC Conference, Boston, MA, abstract #2141; Huang, F. et al. （2009） Cancer Res. 69（1）：161-170; Rodon, J. et al., （2008） Mol. Cancer Ther. 7：2575-2588を参照）。しかしながらほとんどの場合、このような阻害剤を用いた患者の治療において効果的に医師を導くことができる、または、どの腫瘍がこのような阻害剤と標準的な化学療法薬との併用に最も好適な応答を示すかを医師に示すことができるＦＤＡ承認の診断テストはいまだ存在しない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】ＷＯ２００４／０６３７０９
【特許文献２】ＷＯ２００５／０１７４９３
【特許文献３】ＷＯ２００４／１１１２７３
【特許文献４】ＷＯ２００８／１０８９８６
【特許文献５】ＷＯ２００７／００１８６８
【特許文献６】ＷＯ２００４／０７１５７２
【特許文献７】米国特許公開公報ＵＳ２００５／００１９７８５
【特許文献８】米国特許公開公報ＵＳ２００７／００６５８５８
【特許文献９】米国特許公開公報ＵＳ２００９／００９２５９６
【特許文献１０】米国特許公開公報ＵＳ２００９／００９３４８８
【特許文献１１】米国特許公開公報ＵＳ２００６／０１４０９６０
【特許文献１２】米国特許公開公報ＵＳ２００４／０１３２０９７
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Pollak M.N., et al. Nat Rev Cancer 2004 4：505-18
【非特許文献２】Adams T.E., et al. Cell Mol Life Sci 2000 57：1050-93
【非特許文献３】Baserga R., Exp Cell Res 1999 253：1-6
【非特許文献４】Saltz, L.B., et al. J Clin Oncol 2007；25（30）: 4793-4799
【非特許文献５】Tripkovic I., et al. Med Res. 2007 Jul；38（5）：519-25. Epub 2007 Apr 26
【非特許文献６】Miyamoto S., et al. Clin Cancer Res. 2005 May 1；11（9）：3494-502
【非特許文献７】Nakamura M., et al. Clin Cancer Res. 2004 Dec 15；10（24）：8434-41
【非特許文献８】Grothey A, et al. J Cancer Res Clin Oncol. 1999；125（3-4）：166-73
【非特許文献９】Larsson, O. et al (2005) Brit. J. Cancer 92:2097-2101
【非特許文献１０】Ibrahim, Y.H. and Yee, D. (2005) Clin. Cancer Res. 11:944s-950s
【非特許文献１１】Mitsiades, C.S. et al. (2004) Cancer Cell 5:221-230
【非特許文献１２】Camirand, A. et al. (2005) Breast Cancer Research 7:R570-R579 (DOI 10.1186/bcr1028)
【非特許文献１３】Camirand, A. and Pollak, M. (2004) Brit. J. Cancer 90:1825-1829
【非特許文献１４】Garcia-Echeverria, C. et al. (2004) Cancer Cell 5:231-239
【非特許文献１５】Sachdev D, and Yee D., Mol Cancer Ther. 2007 Jan;6(1):1-12
【非特許文献１６】Hofmann F., and Garcia-Echeverria C., Drug Discov Today 2005 10:1041-7
【非特許文献１７】Manara MC, et al. Int J Oncol 2005 27:1605-16
【非特許文献１８】Tolcher A.W., et al. Journal of Clinical Oncology, 2007 ASCO Annual Meeting Proceedings Part I. Vol 25, No. 18S (June 20 Supplement), 2007: 3002
【非特許文献１９】Brugger, W. et al. （2009） J Clin Oncol 27：15s, （suppl; abstr 8020）
【非特許文献２０】Siena, S et al （2009） JNCI 101（19）：1308-1324
【非特許文献２１】Riely and Ladanyi （2008） J Mol Diagnostics 10（6）：493
【非特許文献２２】Jimeno, A. et al. （2009） Cancer J. 15（2）：110-13
【非特許文献２３】Rodon, J. et al （2008） Mol Cancer Ther. 7：2575-2588
【非特許文献２４】T. Pitts et al. （2009） EORTC Conference, Boston, MA, abstract #2141
【非特許文献２５】Huang, F. et al. （2009） Cancer Res. 69（1）：161-170
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
[8]従って、どのような癌患者にとっても最良の治療形態を決定する改良方法が緊急的に必要とされている。本発明は、腫瘍細胞がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する感受性を予測するｍＲＮＡ転写物を所定レベルで発現するかどうか、および、このようなバイオマーカーの決定をより効果的な癌患者治療計画に取り入れるために、このような阻害剤を単一の物質として用いるか、または、その他の抗癌剤と組み合わせて用いるかということに基づいて、どの腫瘍がＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療に対して最も効果的に応答するかを決定する方法を提供するものである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
[9]本発明は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を用いた癌患者の治療有効性を予測するための診断方法を提供する。これらの方法は、このようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による阻害に対する腫瘍細胞増殖の感受性は、５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルの合計で構成される遺伝子発現レベルの指標の値がこのような腫瘍細胞において十分に高いかどうかによって予測されるという驚くべき発見に基づく。腫瘍細胞が感受性を予測する十分に高い発現レベルの指標の値を有するかどうかは、その指標の値が、阻害剤の感受性を予測するのに必要な最小値と定められた発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きいかを評価することによって決定される。後者の最小値は、阻害剤に対する腫瘍細胞の感受性と、発現レベルの指標との関係を確立した研究によって決定されたものであり、この最小値の規模を示すための比較に用いることができる参照用腫瘍細胞系としては、例えばＲＤＥＳまたはＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞が提供される。
【００１２】
[10]従って、本発明は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い癌患者を確認（同定）する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳまたはＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、を含む。
【００１３】
[11]また、上記の方法論を包含するＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤で癌患者を治療するための改良方法も提供される。従って、本発明はさらに、患者の腫瘍または腫瘍転移を治療する方法を提供するものであり、本方法は、腫瘍細胞が、５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルの合計を含む遺伝子発現レベルの十分に高い指標の値を有するかどうかを評価することによって、患者が有する可能性があるＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する反応性（反応可能性：likely responsiveness）を診断する工程、および、阻害剤に対する反応性が予測される場合、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤（例えばＯＳＩ−９０６）を投与する工程を含む。
【００１４】
[12]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認（同定）するための診断方法も提供し、本方法は、上記で説明した方法論と、腫瘍細胞が、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による増殖阻害に対する耐性を予測する遺伝子転写物ＩＲおよびＩＲ−Ａの発現レベルの合計を含む十分に高い遺伝子発現レベルの指標の値を有するかどうかの決定とを組み合わせることによってなされる。さらにこの方法論を包含するＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤で癌患者を治療するための改良方法も提供される。
【００１５】
[13]従って本発明は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認（同定）する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；および、サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯまたはＡ６７３腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認すること、を含む。
【００１６】
[14]本発明はまた、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低い癌患者を確認（同定）するための診断方法を提供するものであり、本方法は、患者の腫瘍細胞が、インスリン受容体またはホスホ−ＩＲを発現するかどうかを決定することを含み、ここでインスリン受容体またはホスホ−ＩＲが発現される場合、該腫瘍細胞は該抗体による阻害に耐性を有すると予想される。またこれらの方法を包含するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤で癌患者を治療するための改良方法も提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】[15]ＯＳＩ−９０６に感受性を有する腫瘍細胞系でＩＧＦ受容体／リガンド対の高い発現が観察される。図１Ａは、１０種の腫瘍タイプから誘導された３２種の腫瘍細胞系を含むパネルについてのＯＳＩ−９０６に対する感受性をＥＣ５０値として示したものである。細胞系を、ＯＳＩ−９０６に対して感受性あり（ＥＣ５０＜１μＭ）または感受性なし（ＥＣ５０＞１０μＭ）のどちらかに分類した。ＫＲＡＳ、ＢＲＡＦおよびＰＩＫ３ＣＡの突然変異の状態は、サンガー・ウェルカム・データベース（Sanger Wellcome database）によって報告されているように示した。報告されていない突然変異の状態は灰色の影を付けた。図１Ｂは、３２種の腫瘍細胞系を含むパネルのｑＰＣＲによるＩＧＦ１、ＩＧＦ２、ＩＧＦ１Ｒ、ＩＲおよびＩＲＡのｍＲＮＡの発現である。遺伝子発現を、３２種の細胞系を含むパネル中の所定の遺伝子についての第４四分位数表示に正規化した。
【図２】[16]図２は、代表的な５種の感受性腫瘍細胞系を含むパネルのについての、様々な濃度のＯＳＩ−９０６の細胞増殖への作用である。
【図３−１】[17]ＩＧＦ−１Ｒ中和抗体ＭＡＢ３９１は、代償的な高度なＩＲリン酸化を提供し、ＩＧＦ−１ＲとＩＲとを共に標的化することによって選択された腫瘍細胞のＩＲＳ１−ＡＫＴ経路阻害の強化を達成する。図３Ａは、８種のヒト腫瘍細胞系の代表的なグループに関するＩＲおよびＩＧＦ−１Ｒのリン酸化を示す（１頁目の上のパネル）。９種の腫瘍細胞系を含むパネルについてのＯＳＩ−９０６（３μＭ）またはＭＡＢ３９１（３μｇ／ｍｌ）のＩＲおよびＩＧＦ−１Ｒのリン酸化への作用を、ＯＳＩ−９０６に対する感受性と分類した（２頁目）。投与後に１６時間かけてデータを取り、基準のリン酸化シグナルに対する割合（％）として示した。Ａ６７３ユーイング肉腫細胞についての代表的なアレイの画像群を示す（１頁目の下のパネル）。
【図３−２】図３Ａ続き。
【図３−３】図３Ｂは、４種の腫瘍細胞系を含むパネルの、ＯＳＩ−９０６（３μＭ）またはＭＡＢ３９１（３μｇ／ｍｌ）を１６時間用いた治療の、ＩＲまたはＩＧＦ−１Ｒのリン酸化、合計のＩＧＦ−１Ｒ発現およびホスホ−ＡＫＴＳ４３７またはホスホ−ＥＲＫへの作用を示す（１頁目：Ｈ３２２およびＳＫ−Ｎ−ＡＳ；２頁目：Ｈ２９５ＲおよびＡ６７３）。
【図３−４】図３Ｂ続き。
【図３−５】図３Ｃは、Ｈ２９５Ｒ、Ａ６７３およびＨ３２２細胞についてのＯＳＩ−９０６（３μＭ）またはＭＡＢ３９１（３μｇ／ｍｌ）のホスホ−ＩＲＳ−１Ｙ６１２への作用を示す。また、Ｈ２９５Ｒ細胞についての、基準となる状態またはＯＳＩ−９０６またはＭＡＢ３９１で処理した際のホスホ−ＡＫＴＳ４７３、ホスホ−ＰＲＡＳ４０および合計のＩＧＦ−１ＲおよびＩＲレベルも示される。３回以上行われた独立した実験の典型的な結果を示す。
【図４−１】[18]ｐＩＧＦ−１ＲとｐＩＲを共発現する異種移植腫瘍は、ＯＳＩ−９０６に対して感受性を有するがＭＡＢ３９１には感受性を有さず、一方でＩＧＦ−１Ｒを発現するがＩＲは発現しない腫瘍は、ＯＳＩ−９０６とＭＡＢ３９１の両方に対して感受性を有する。図４Ａは、定量ＰＣＲによって決定されたＩＧＦ１、ＩＧＦ２、ＩＧＦ−１ＲおよびＩＲＡの発現、および、キャプチャーアレイによって決定されたホスホ−ＩＲおよびホスホ−ＩＧＦ−１Ｒの発現を示す（１頁目の上のパネル）。ＳＫ−Ｎ−ＡＳまたはＧＥＯ腫瘍を有するマウスに指示通りにＯＳＩ−９０６（５０ｍｇ／ｋｇ、毎日）またはＭＡＢ３９１（１ｍｇ／マウス，３日毎）のいずれかを投与し（１頁目の下のパネル）、１４日間にわたりＴＧＩを決定した（２頁目）。ＧＥＯおよびＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍に関するＯＳＩ−９０６またはＭＡＢ３９１の単回投与のＡＫＴのリン酸化への作用を示す（第３頁目）。
【図４−２】図４Ａ続き。
【図４−３】図４Ａ続き。
【図４−４】図４Ｂは、投与期間（すなわちＯＳＩ−９０６の場合は２４時間、または、ＭＡＢ３９１の場合は７２時間）にわたる、ＧＥＯ腫瘍に関する、ＯＳＩ−９０６またはＭＡＢ３９１の、ＩＲおよびＩＧＦ−１Ｒのリン酸化状態へのインビボでの作用を示す（上のパネル）。代表的な画像を示す。投与期間にわたるＭＡＢ３９１またはＯＳＩ−９０６の腫瘍性ホスホ−ＡＫＴＳ４７３への作用を示す（下のパネル）。
【図５Ａ】[19]腫瘍細胞ＩＲ−ＡＫＴのシグナル伝達におけるインスリンの活性化はＯＳＩ−９０６で阻害されるが、ＭＡＢ３９１では阻害されない。図５Ａは、ＯＳＩ−９０６（３μＭ）またはＭＡＢ３９１（３μｇ／ｍｌ）のいずれかで１６時間処理し、続いて細胞溶解の前に５０μＩＵ／ｍｌインスリンで５分間刺激したＨＴ−２９腫瘍細胞のＩＧＦ−１ＲおよびＩＲのリン酸化への作用を示す。
【図５Ｂ】図５Ｂは、基準となる状態での、または、５または５０μＩＵ／ｍｌインスリンで刺激した後の、ＯＳＩ−９０６、ＭＡＢ３９１またはＩＧＦＢＰ３のＨＴ−２９細胞のホスホ−ＡＫＴＳ４７３への作用を示す。
【図６Ａ】[20]ＭＡＢ３９１はＩＧＦ−１を阻害するが、ＩＧＦ−２またはｐＩＲのインスリン介在刺激は阻害しない。図６Ａは、ＯＳＩ−９０６（３μＭ）またはＭＡＢ３９１（３μｇ／ｍｌ）の、コントロール細胞、または、溶解の５分前にインスリン（５０μＩＵ／ｍｌ）、ＩＧＦ−１（４０ｎｇ／ｍｌ）もしくはＩＧＦ−２（４０ｎｇ／ｍｌ）で処理した細胞についてのホスホ−ＩＲおよびホスホ−ＩＧＦ−１Ｒへの作用を示す。リガンド−受容体結合対の模式図である（右のパネル）。
【図６Ｂ】図６Ｂは、ＩＧＦ−１またはＩＧＦ−２の存在下におけるＯＳＩ−９０６またはＭＡＢ３９１のホスホ−ＡｋｔＳ４７３への作用を示す。
【図６Ｃ】図６Ｃは、処理から１６時後における、ＯＳＩ−９０６（３μＭ）、ＭＡＢ３９１（３μｇ／ｍｌ）またはＩＧＦ−２中和抗体（１０μｇ／ｍｌ）の、ＭＤＡＨ−２７７４細胞についてのＩＧＦ−１ＲもしくはＩＲ（左のパネル）またはｐＰＲＡＳ４０（右のパネル）のリン酸化への作用を示す。３回以上の独立した実験の典型的な結果を示す。
【図６Ｄ】図６Ｄは、特異的なＩＧＦ−１Ｒ阻害の際に生じる可能性があるＩＲを介した代償的なシグナル伝達を説明する模式図である。
【図７】[21]ＯＳＩ−９０６は、ホスホ−ＩＧＦ−１Ｒとホスホ−ＩＲを共発現する腫瘍においてＭＡＢ３９１と比較して強化されたＡＫＴリン酸化阻害を示す。単回投与のＯＳＩ−９０６（５０ｍｇ／ｋｇ）またはＭＡＢ３９１（１ｍｇ／マウス）の、ＳＫ−Ｎ−ＡＳ（Ａ）およびＧＥＯ（Ｂ）腫瘍についての処理から４時間後における腫瘍ＡＫＴリン酸化への作用。ｐＡＫＴは免疫ブロッティングによって決定された。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
[22]動物における「癌」という用語は、例えば制御不能な増殖、致死性、転移の可能性、急速な増殖および増殖率、ならびに所定の特徴的な形態学的特徴といった癌を引き起こす細胞に典型的な特徴を有する細胞が存在することを意味する。癌細胞は腫瘍の形態であることが多いと予想されるが、このような細胞は動物体内で単独で存在する場合もあるし、または、例えば白血病細胞のような独立した細胞として血流中に循環する場合もある。
【００１９】
[23]本明細書で用いられる「細胞増殖」は、例えば「腫瘍細胞増殖」に関して、特に他の指定がない限り腫瘍学において一般的に使用されるように用いられるが、ここで、この用語は、主として細胞の複製速度が（例えばアポトーシスまたは壊死による）細胞死の速度より速い場合の細胞の複製（すなわち増殖）によって起こる細胞数の増加に関して述べられており、それにより細胞群の大きさの増加がもたらされるが、そのような増殖のうちいくらかは、ある種の環境においては細胞の大きさの増加または個々の細胞の細胞質の体積によるものである可能性もある。従って、細胞増殖を阻害する物質は、増殖の阻害もしくは細胞死の刺激のいずれかまたはその両方によって、これらの２つの対立するプロセス間の平衡が変るように作用することができる。
【００２０】
[24]本明細書で用いられる「腫瘍増殖」または「腫瘍転移の増殖」は、特に他の指定がない限り腫瘍学において一般的に使用されるように用いられ、すなわちこれらの用語は、主として腫瘍細胞増殖の結果としての腫瘍または腫瘍転移の質量または体積の増加に関して述べられる。
【００２１】
[25]本明細書で用いられる「異常な細胞増殖」は、特に他の指定がない限り、正常な調節メカニズムから独立した細胞増殖（例えば接触阻止の喪失）を意味する。このような増殖としては、例えば（１）突然変異したチロシンキナーゼを発現すること、または、受容体チロシンキナーゼの過剰発現によって増殖する腫瘍細胞（腫瘍）；（２）異常なチロシンキナーゼの活性化が起こるその他の増殖性疾患の良性細胞および悪性細胞；（３）受容体チロシンキナーゼによって増殖するあらゆる腫瘍；（４）異常なセリン／スレオニンキナーゼの活性化によって増殖するあらゆる腫瘍；および、（５）異常なセリン／スレオニンキナーゼの活性化が起こるその他の増殖性疾患の良性細胞および悪性細胞の異常な増殖が挙げられる。
【００２２】
[26]本明細書で用いられる用語「〜を治療すること」は、特に他の指定がない限り、病気または状態を和らげる医療的な補助を施すことを意味する。「〜の治療方法」という成句またはそれと同等の表現は、癌に対して用いられる場合、患者における癌細胞数を減少させたり若しくは除去したり、または、癌の症状を緩和したりするように計画された手法または行動指針を意味する。癌またはその他の増殖性疾患の「治療方法」は必ずしも、そのような癌細胞またはその他の障害が実際に除去されたり、細胞数または障害が実際に低減されたり、または、癌またはその他の障害の症状が実際に緩和されたりするであろうということを意味するものではない。しばしば癌の治療方法は成功の見込みが低くても行われると予想されるが、患者の病歴と推定される生存見込みを考慮すれば、それでも全体的に有益な行動指針とみなされる。
【００２３】
[27]用語「治療上有効な物質」は、研究者、獣医師、医師またはその他の臨床医が求めている組織、系、動物またはヒトの生物学的または医学的な応答を惹起すると予想される組成物を意味する。
【００２４】
[28]用語「治療有効量」または「有効量」は、研究者、獣医師、医師またはその他の臨床医が求めている組織、系、動物またはヒトの生物学的または医学的な応答を惹起すると予想される対象の化合物または組み合わせの量を意味する。
【００２５】
[29]本明細書において用いられる用語「反応性を有する」または「反応（可能）性」は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤の投与に対する患者の反応について述べられる場合、患者が利益を得る可能性が高い陽性の応答または有効な応答を意味する。
【００２６】
[30]本明細書において以下に記載される実験の詳細説明の章で示されたデータは、腫瘍細胞は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤（例えばＯＳＩ−９０６）による増殖阻害に対して多様な感受性を有することを実証するものである（ただしある種の腫瘍細胞は阻害に対して比較的耐性を有する）。さらにこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する腫瘍細胞の感受性の程度は、腫瘍細胞が、５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルの値の合計を含む遺伝子発現レベルの十分に高い指標の値を有するかどうかを決定することによって評価できることを実証するものでもある。腫瘍細胞が十分に高い感受性を予測する発現レベルの指標の値を有するかどうかは、その指標の値が、阻害剤の感受性を予測するのに必要な最小値と定められた発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きいかを評価することによって決定される。この最小値は、ＲＤＥＳまたはＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞のような腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値である。この値と等しいかまたはそれより高い発現レベルの指標を示す腫瘍細胞はいずれも、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する感受性を有する（例えば図１Ａおよび１Ｂを参照、これらは、様々な腫瘍細胞型を用いてＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤ＯＳＩ−９０６と共に上記のことを実証するものである）。
【００２７】
[31]また実験の詳細説明の章に示されるデータは、所定のレベルより高くインスリン受容体タンパク質を発現する腫瘍細胞は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対して比較的耐性を有することも示す。従って、十分に高い遺伝子発現レベルの指標の値（遺伝子転写物ＩＲおよびＩＲ−Ａの発現レベルの合計を含む）は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による増殖阻害に対する耐性を予測することが見出された。例えば、ＩＲ遺伝子＋ＩＲ−Ａ遺伝子の発現レベルの指標がＧＥＯまたはＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞のいずれかに関連する指標と同等かまたはそれより高い腫瘍細胞は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対して比較的耐性を有することが見出された。
【００２８】
[32]従ってこれらの観察は、どの患者が例えばＯＳＩ−９０６のようなＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤で効果的に治療されるかをうまく予測し、さらにそれらの患者のうち、代替の治療剤としての抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体では効果的に治療されないと予想される患者を確認するのに利用することができる。従ってこれらの観察は、ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤の腫瘍増殖への作用を予測するための有用な新しい診断方法の原理となるものであって、それにより患者に最適な治療を選択する際に助けとなる追加のツールを腫瘍学者に提供することができる。
【００２９】
[33]従って、本発明は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い癌患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、を含む。
【００３０】
[34]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い癌患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、を含む。
【００３１】
[35]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認すること、を含む。
【００３２】
[36]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認すること、を含む。
【００３３】
[37]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＡ６７３腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認すること、を含む。
【００３４】
[38]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＡ６７３腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認すること、を含む。
【００３５】
[39]本発明はまた、患者の癌を治療する方法を提供するものであり、本方法は、（Ａ）患者が有する可能性があるＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する反応性を診断する工程（ここで該診断は、患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療に応答する可能性が高い腫瘍を有するかどうかを決定することによってなされ、ここで該決定は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定することによってなされる）；および、（Ｂ）前記患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与する工程を含む。
【００３６】
[40]本発明はまた、患者の癌を治療する方法を提供するものであり、本方法は、（Ａ）患者が有する可能性があるＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する反応性を診断する工程（ここで該診断は、患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療に応答する可能性が高い腫瘍を有するかどうかを決定することによってなされ、ここで該決定は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定することによってなされる）；および、（Ｂ）前記患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与する工程を含む。
【００３７】
[41]本発明はまた、患者の癌を治療する方法を提供するものであり、本方法は、（Ａ）患者が有する可能性があるＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する反応性を診断する工程（ここで該診断は、患者が、このようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療に応答する可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある腫瘍を有するかどうかを決定することによってなされ、ここで該決定は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認することによってなされる）；および、（Ｂ）前記患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与する工程を含む。
【００３８】
[42]本発明はまた、患者の癌を治療する方法を提供するものであり、本方法は、（Ａ）患者が有する可能性があるＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する反応性を診断する工程（ここで該診断は、患者が、このようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療に応答する可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある腫瘍を有するかどうかを決定することによってなされ、ここで該決定は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認することによってなされる）；および、（Ｂ）前記患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与する工程を含む。
【００３９】
[43]本発明はまた、患者の癌を治療する方法を提供するものであり、本方法は、（Ａ）患者が有する可能性があるＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する反応性を診断する工程（ここで該診断は、患者が、このようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療に応答する可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある腫瘍を有するかどうかを決定することによってなされ、ここで該決定は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＡ６７３腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認することによってなされる）；および、（Ｂ）前記患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与する工程を含む。
【００４０】
[44]本発明はまた、患者の癌を治療する方法を提供するものであり、本方法は、（Ａ）患者が有する可能性があるＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する反応性を診断する工程（ここで該診断は、患者が、このようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療に応答する可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある腫瘍を有するかどうかを決定することによってなされ、ここで該決定は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＡ６７３腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認することによってなされる）；および、（Ｂ）前記患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与する工程を含む。
【００４１】
[45]本発明はまた、患者の癌を治療する方法を提供するものであり、本方法は、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与することを含み、ここで該投与は、患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合になされ、ここでこのような診断は、癌の腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；および、腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞またはＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きいことを決定することによってなされる。従ってこの方法は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での効果的な治療の作用を受けやすい腫瘍を有すると予め確認または特徴付けられた特定の患者群を標的とした治療方法である。
【００４２】
[46]本発明はまた、患者の癌を治療する方法を提供するものであり、本方法は、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与することを含み、ここで該投与は、患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合になされ、ここでこのような診断は、癌の腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；および、腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞またはＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きいことを決定することによってなされ、さらに、患者が抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性があると診断された場合になされ、ここでこのような診断は、上記癌の腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯまたはＡ６７３腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きいことを決定することによってなされる。従ってこの方法は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での効果的な治療の作用を受けやすい腫瘍を有すると予め確認または特徴付けられた特定の患者群を標的とした治療方法である。
【００４３】
[47]加えて本発明は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による阻害に対する腫瘍細胞増殖の感受性の予測方法を提供するものであり、本方法は：腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その腫瘍細胞は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に高い感受性を示すと予想されると決定すること、を含む。
【００４４】
[48]加えて本発明は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルからの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳまたはＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯまたはＡ６７３腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認すること、を含む。
【００４５】
[49]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による阻害に対する腫瘍細胞増殖の感受性の予測方法を提供するものであり、本方法は：腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その腫瘍細胞は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に高い感受性を示すと予想されると決定すること、を含む。
【００４６】
[50]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による増殖阻害に対する感受性を有すると予想されるが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想される腫瘍細胞を確認する方法を提供するものであり、本方法は：腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その腫瘍細胞は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に高い感受性を示すと予想されると決定すること、および、該腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その腫瘍細胞は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想されると決定すること、を含む。
【００４７】
[51]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による増殖阻害に対する感受性を有すると予想されるが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想される腫瘍細胞を確認する方法を提供するものであり、本方法は：腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その腫瘍細胞は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に高い感受性を示すと予想されると決定すること、および、該腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その腫瘍細胞は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想されると決定すること、を含む。
【００４８】
[52]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による増殖阻害に対する感受性を有すると予想されるが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想される腫瘍細胞を確認する方法を提供するものであり、本方法は：腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その腫瘍細胞は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に高い感受性を示すと予想されると決定すること、および、該腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＡ６７３腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その腫瘍細胞は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想されると決定すること、を含む。
【００４９】
[53]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による増殖阻害に対する感受性を有すると予想されるが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想される腫瘍細胞を確認する方法を提供するものであり、本方法は：腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その腫瘍細胞は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に高い感受性を示すと予想されると決定すること、および、該腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＡ６７３腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その腫瘍細胞は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想されると決定すること、を含む。
【００５０】
[54]従って、本発明は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い癌患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得ること、サンプルの細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、を含む。
【００５１】
[55]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い癌患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得ること、サンプルの細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、を含む。
【００５２】
[56]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；サンプルの細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認すること、を含む。
【００５３】
[57]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；サンプルの細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認すること、を含む。
【００５４】
[58]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；サンプルの細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＡ６７３腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認すること、を含む。
【００５５】
[59]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；サンプルの細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＡ６７３腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認すること、を含む。
【００５６】
[60]本発明はまた、患者の癌を治療する方法を提供するものであり、本方法は、（Ａ）患者が有する可能性があるＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する反応性を診断する工程（ここで該診断は、患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療に応答する可能性が高い腫瘍を有するかどうかを決定することによってなされ、ここで該決定は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定することによってなされる）；および、（Ｂ）前記患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与する工程を含む。
【００５７】
[61]本発明はまた、患者の癌を治療する方法を提供するものであり、本方法は、（Ａ）患者が有する可能性があるＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する反応性を診断する工程（ここで該診断は、患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療に応答する可能性が高い腫瘍を有するかどうかを決定することによってなされ、ここで該決定は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定することによってなされる）；および、（Ｂ）前記患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与する工程を含む。
【００５８】
[62]本発明はまた、患者の癌を治療する方法を提供するものであり、本方法は、（Ａ）患者が有する可能性があるＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する反応性を診断する工程（ここで該診断は、患者が、このようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療に応答する可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある腫瘍を有するかどうかを決定することによってなされ、ここで該決定は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；サンプルの細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認（同定）すること、によってなされる）；および、（Ｂ）前記患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与する工程を含む。
【００５９】
[63]本発明はまた、患者の癌を治療する方法を提供するものであり、本方法は、（Ａ）患者が有する可能性があるＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する反応性を診断する工程（ここで該診断は、患者が、このようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療に応答する可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある腫瘍を有するかどうかを決定することによってなされ、ここで該決定は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；サンプルの細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認すること、によってなされる）；および、（Ｂ）前記患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与する工程を含む。
【００６０】
[64]本発明はまた、患者の癌を治療する方法を提供するものであり、本方法は、（Ａ）患者が有する可能性があるＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する反応性を診断する工程（ここで該診断は、患者が、このようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療に応答する可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある腫瘍を有するかどうかを決定することによってなされ、ここで該決定は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；サンプルの細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＡ６７３腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認すること、によってなされる）；および、（Ｂ）前記患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与する工程を含む。
【００６１】
[65]本発明はまた、患者の癌を治療する方法を提供するものであり、本方法は、（Ａ）患者が有する可能性があるＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する反応性を診断する工程（ここで該診断は、患者が、このようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療に応答する可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある腫瘍を有するかどうかを決定することによってなされ、ここで該決定は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること；サンプルの細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＡ６７３腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、従って、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認することによってなされる）；および、（Ｂ）前記患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与する工程を含む。
【００６２】
[66]本発明はまた、腫瘍を有する患者を治療する方法を提供するものであり、本方法は、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与することを含み、ここで該投与は、患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合になされ、ここでこのような診断は、腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；および、腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞またはＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きいことを決定することによってなされる。
【００６３】
[67]本発明はまた、腫瘍を有する患者を治療する方法を提供するものであり、本方法は、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与することを含み、ここで該投与は、患者がこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応する可能性があると診断された場合になされ、ここでこのような診断は、腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；および、腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞またはＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きいことを決定することによってなされ、さらに、患者が抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性があると診断された場合になされ、ここでこのような診断は、腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯまたはＡ６７３腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きいことを決定することによってなされる。
【００６４】
[68]加えて本発明は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による阻害に対する腫瘍増殖の感受性を予測する方法を提供するものであり、本方法は：腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、腫瘍増殖はＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に高い感受性を示すと予想されると決定すること、を含む。
【００６５】
[69]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による阻害に対する腫瘍増殖の感受性を予測する方法を提供するものであり、本方法は：腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、腫瘍増殖はＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に高い感受性を示すと予想されると決定すること、を含む。
【００６６】
[70]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による増殖阻害に対する感受性を有すると予想されるが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想される腫瘍を確認（同定）する方法を提供するものであり、本方法は：腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、腫瘍増殖はＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に高い感受性を示すと予想されると決定すること、および、腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、腫瘍増殖は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想されると決定すること、を含む。
【００６７】
[71]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による増殖阻害に対する感受性を有すると予想されるが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想される腫瘍を確認する方法を提供するものであり、本方法は：腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、腫瘍増殖はＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に高い感受性を示すと予想されると決定すること、および、腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、腫瘍増殖は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想されると決定すること、を含む。
【００６８】
[72]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による増殖阻害に対する感受性を有すると予想されるが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想される腫瘍を確認する方法を提供するものであり、本方法は：腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、腫瘍増殖はＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に高い感受性を示すと予想されると決定すること、および、腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＡ６７３腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、腫瘍増殖は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想されると決定すること、を含む。
【００６９】
[73]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による増殖阻害に対する感受性を有すると予想されるが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想される腫瘍を確認する方法を提供するものであり、本方法は：腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；腫瘍細胞に係る発現レベルの該指標の値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合、腫瘍増殖はＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に高い感受性を示すと予想されると決定すること、および、腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＡ６７３腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、腫瘍増殖は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想されると決定すること、を含む。
【００７０】
[74]本発明はまた、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性があるＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療が必要な癌患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の２種の遺伝子転写物ＩＲおよびＩＲ−Ａの発現レベルを評価すること；および、サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯまたはＡ６７３腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、を含む。本発明はまた、上記方法であって、２種の遺伝子転写物ＩＲおよびＩＲ−Ａのレベルを評価する代わりに、これらの転写物によってコードされた２種のタンパク質のレベル、すなわちＩＲ−ＢおよびＩＲ−Ａタンパク質を（例えば免疫組織化学的（ＩＨＣ）解析によって）評価する方法を提供する。
【００７１】
[75]本発明はまた、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性があるＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療が必要な癌患者を確認（同定）する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中のホスホ−ＩＲのレベルを評価すること；および、サンプルの腫瘍細胞中のホスホ−ＩＲのレベルが、同じ方法で決定されたＧＥＯまたはＡ６７３腫瘍細胞のホスホ−ＩＲのレベルに等しいかまたはそれより大きい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が低いと決定すること、を含む。
【００７２】
[76]本発明はまた、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想される腫瘍細胞を確認（同定）する方法を提供するものであり、本方法は：腫瘍細胞中の２種の遺伝子転写物ＩＲおよびＩＲ−Ａの発現レベルを評価すること；および、該腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＧＥＯまたはＡ６７３腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより大きい場合、その腫瘍細胞は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想されると決定すること、を含む。本発明はまた、上記方法であって、２種の遺伝子転写物ＩＲおよびＩＲ−Ａのレベルを評価する代わりに、これらの転写物によってコードされた２種のタンパク質のレベル、すなわちＩＲ−ＢおよびＩＲ−Ａタンパク質を（例えば免疫組織化学的（ＩＨＣ）解析によって）評価する方法を提供する。
【００７３】
[77]本発明はまた、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想される腫瘍細胞を確認する方法を提供するものであり、本方法は：腫瘍細胞中のホスホ−ＩＲのレベルを評価すること；および、腫瘍細胞中のホスホ−ＩＲのレベルが、同じ方法で決定されたＧＥＯまたはＡ６７３腫瘍細胞のホスホ−ＩＲのレベルに等しいかまたはそれより大きい場合、その腫瘍細胞は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想されると決定すること、を含む。
【００７４】
[78]本発明はまた、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療に応答する可能性があると予想されるＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療が必要な癌患者を確認（同定）する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の２種の遺伝子転写物ＩＲおよびＩＲ−Ａの発現レベルを評価すること；および、サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより小さい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、を含む。この方法の一実施態様において、サンプルの腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計は、ゼロかまたは検出不可能である。本発明はまた、上記方法であって、２種の遺伝子転写物ＩＲおよびＩＲ−Ａのレベルを評価する代わりに、これらの転写物によってコードされた２種のタンパク質のレベル、すなわちＩＲ−ＢおよびＩＲ−Ａタンパク質を（例えば免疫組織化学的（ＩＨＣ）解析によって）評価する方法を提供する。
【００７５】
[79]本発明はまた、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療に応答する可能性があると予想されるＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療が必要な癌患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中のホスホ−ＩＲのレベルを評価すること；および、サンプルの腫瘍細胞中のホスホ−ＩＲのレベルが、同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞のホスホ−ＩＲのレベルに等しいかまたはそれより小さい場合、その患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、を含む。この方法の一実施態様において、サンプルの腫瘍細胞中のホスホ−ＩＲのレベルは、ゼロかまたは検出不可能である。
【００７６】
[80]本発明はまた、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有すると予想される腫瘍細胞を確認（同定）する方法を提供するものであり、本方法は：腫瘍細胞中の２種の遺伝子転写物ＩＲおよびＩＲ−Ａの発現レベルを評価すること；および、該腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値は、同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより小さい場合、その腫瘍細胞は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有すると予想されると決定すること、を含む。この方法の一実施態様において、サンプルの腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計は、ゼロかまたは検出不可能である。本発明はまた、上記方法であって、２種の遺伝子転写物ＩＲおよびＩＲ−Ａのレベルを評価する代わりに、これらの転写物によってコードされた２種のタンパク質のレベル、すなわちＩＲ−ＢおよびＩＲ−Ａタンパク質を（例えば免疫組織化学的（ＩＨＣ）解析によって）評価する方法を提供する。
【００７７】
[81]本発明はまた、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有すると予想される腫瘍細胞を確認する方法を提供するものであり、本方法は：腫瘍細胞中のホスホ−ＩＲのレベルを評価すること；および、腫瘍細胞中のホスホ−ＩＲのレベルが、同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞のホスホ−ＩＲのレベルに等しいかまたはそれより小さい場合、その腫瘍細胞は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有すると予想されると決定すること、を含む。この方法の一実施態様において、サンプルの腫瘍細胞中のホスホ−−ＩＲのレベルは、ゼロかまたは検出不可能である。
【００７８】
[82]本発明はまた、患者の癌を治療する方法を提供するものであり、本方法は、前記患者に治療有効量の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を投与することを含み、ここで該投与は、患者が抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が高いと決定された場合になされ、ここで該決定は、患者の腫瘍の腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞のＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計に等しいかまたはそれより小さいことを決定することによってなされる。本発明はまた、上記方法であって、２種の遺伝子転写物ＩＲおよびＩＲ−Ａのレベルを評価する代わりに、これらの転写物によってコードされた２種のタンパク質のレベル、すなわちＩＲ−ＢおよびＩＲ−Ａタンパク質を（例えば免疫組織化学的（ＩＨＣ）解析によって）評価する方法を提供する。
【００７９】
[83]本発明はまた、患者の癌を治療する方法を提供するものであり、本方法は、前記患者に治療有効量の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を投与することを含み、ここで該投与は、患者が抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療により利益を得る可能性が高いと決定された場合になされ、ここで該決定は、患者の腫瘍の腫瘍細胞中のホスホ−ＩＲのレベルが、同じ方法で決定されたＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞のホスホ−ＩＲのレベルに等しいかまたはそれより小さいことを決定することによってなされる。
【００８０】
[84]本発明の方法において、リン酸化ＲＴＫ、例えばホスホ−ＩＲまたはホスホ−ＩＧＦ−１Ｒなどのチロシンリン酸化タンパク質のレベルは、当業者に周知のあらゆる方法によって決定される。一実施態様において、抗ホスホチロシン抗体は、例えばホスホ−ＩＲまたはホスホ−ＩＧＦ−１Ｒなどのチロシンリン酸化タンパク質のレベルを評価するために使用される。例えばＨＲＰ結合ｐａｎ抗ホスホチロシン抗体が用いられる可能性がある。
【００８１】
[85]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い癌患者を確認（同定）する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；サンプルの腫瘍細胞がＩＧＦ−１Ｒを発現する場合、および、サンプルの腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＲＤ腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計より大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、を含む。本発明はまた、上記方法であって、遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒのレベルを評価する代わりに、この転写物によってコードされたタンパク質、すなわちＩＧＦ−１Ｒタンパク質のレベルを（例えば免疫組織化学的（ＩＨＣ）解析によって）評価する方法を提供する。
【００８２】
[86]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い癌患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；サンプルの腫瘍細胞がＩＧＦ−１Ｒを発現し、ＩＲおよび／またはＩＲ−Ａを発現する場合、および、サンプルの腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＲＤ腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計より大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、を含む。本発明はまた、上記方法であって、３種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲおよびＩＲ−Ａのレベルを評価する代わりに、これらの転写物によってコードされた３種のタンパク質、すなわちＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ−ＢおよびＩＲ−Ａタンパク質のレベルを（例えば免疫組織化学的（ＩＨＣ）解析によって）評価する方法を提供する。
【００８３】
[87]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による阻害に対する腫瘍細胞増殖の感受性の予測方法を提供するものであり、本方法は：腫瘍細胞中の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；該腫瘍細胞がＩＧＦ−１Ｒを発現する場合、および、腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＲＤ腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計より大きい場合、その腫瘍細胞は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に高い感受性を示すと予想されると決定すること、を含む。本発明はまた、上記方法であって、遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒのレベルを評価する代わりに、この転写物によってコードされたタンパク質、すなわちＩＧＦ−１Ｒタンパク質のレベルを（例えば免疫組織化学的（ＩＨＣ）解析によって）評価する方法を提供する。
【００８４】
[88]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による阻害に対する腫瘍細胞増殖の感受性の予測方法を提供するものであり、本方法は：腫瘍細胞中の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；該腫瘍細胞がＩＧＦ−１Ｒを発現し、ＩＲおよび／またはＩＲ−Ａを発現する場合、および、腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＲＤ腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計より大きい場合、その腫瘍細胞は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に高い感受性を示すと予想されると決定すること、を含む。本発明はまた、上記方法であって、３種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲおよびＩＲ−Ａのレベルを評価する代わりに、これらの転写物によってコードされた３種のタンパク質、すなわちＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ−ＢおよびＩＲ−Ａタンパク質のレベルを（例えば免疫組織化学的（ＩＨＣ）解析によって）評価する方法を提供する。
【００８５】
[89]本発明はまた、患者の癌を治療する方法を提供するものであり、本方法は、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与することを含み、ここで該投与は、患者が、このような阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定された場合になされ、ここで該決定は、患者の腫瘍の腫瘍細胞中の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；および、患者の腫瘍の腫瘍細胞がＩＧＦ−１Ｒを発現すること、さらに、患者の腫瘍の腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＲＤ腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計より大きいことを決定することによってなされる。本発明はまた、上記方法であって、遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒのレベルを評価する代わりに、この転写物によってコードされたタンパク質、すなわちＩＧＦ−１Ｒタンパク質のレベルを（例えば免疫組織化学的（ＩＨＣ）解析によって）評価する方法を提供する。
【００８６】
[90]本発明はまた、患者の癌を治療する方法を提供するものであり、本方法は、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与することを含み、ここで該投与は、患者が、このような阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定された場合になされ、ここで該決定は、患者の腫瘍の腫瘍細胞中の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；および、患者の腫瘍の腫瘍細胞がＩＧＦ−１Ｒを発現し、ＩＲおよび／またはＩＲ−Ａを発現すること、さらに、患者の腫瘍の腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計値が同じ方法で決定されたＲＤ腫瘍細胞のＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２に係る発現レベルの合計より大きいことを決定することによってなされる。本発明はまた、上記方法であって、３種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲおよびＩＲ−Ａのレベルを評価する代わりに、これらの転写物によってコードされた３種のタンパク質、すなわちＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ−ＢおよびＩＲ−Ａタンパク質のレベルを（例えば免疫組織化学的（ＩＨＣ）解析によって）評価する方法を提供する。従ってこの方法は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での効果的な治療の作用を受けやすい腫瘍を有すると予め同定された、または特徴付けられた、特定の患者群を標的とした治療方法である。
【００８７】
[91]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い癌腫を有する患者を確認（同定）する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の遺伝子転写物ＩＧＦ−１ＲおよびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；サンプルの腫瘍細胞がＩＧＦ−１Ｒを発現する場合、さらに、サンプルの腫瘍細胞のＩＧＦ−２の発現レベルが、同じ方法で決定されたＭＤＡＨ−２７７４腫瘍細胞のＩＧＦ−２の発現レベルより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、を含む。本発明はまた、上記方法であって、遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒのレベルを評価する代わりに、この転写物によってコードされたタンパク質、すなわちＩＧＦ−１Ｒタンパク質のレベルを（例えば免疫組織化学的（ＩＨＣ）解析によって）評価する方法を提供する。
【００８８】
[92]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い骨髄腫を有する患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の遺伝子転写物ＩＧＦ−１ＲおよびＩＧＦ−１の発現レベルを評価すること；サンプルの腫瘍細胞がＩＧＦ−１Ｒを発現する場合、さらに、サンプルの腫瘍細胞のＩＧＦ−１の発現レベルが、同じ方法で決定されたＵ２６６腫瘍細胞のＩＧＦ−１の発現レベルより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、を含む。本発明はまた、上記方法であって、遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒのレベルを評価する代わりに、この転写物によってコードされたタンパク質、すなわちＩＧＦ−１Ｒタンパク質のレベルを（例えば免疫組織化学的（ＩＨＣ）解析によって）評価する方法を提供する。
【００８９】
[93]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い肉腫を有する患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の遺伝子転写物ＩＧＦ−１ＲおよびＩＧＦ−１の発現レベルを評価すること；サンプルの腫瘍細胞がＩＧＦ−１Ｒを発現する場合、さらに、サンプルの腫瘍細胞のＩＧＦ−１の発現レベルが、同じ方法で決定されたＡ６７３腫瘍細胞のＩＧＦ−１の発現レベルより大きい場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、を含む。本発明はまた、上記方法であって、遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒのレベルを評価する代わりに、この転写物によってコードされたタンパク質、すなわちＩＧＦ−１Ｒタンパク質のレベルを（例えば免疫組織化学的（ＩＨＣ）解析によって）評価する方法を提供する。
【００９０】
[94]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い癌患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；５種の転写物それぞれの発現レベルの値を加算することによって、５種の遺伝子転写物の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が、予め決められた最低発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合（この最低発現レベルの指標の値よりも低いと、腫瘍細胞はＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する耐性を有する）、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、を含む。この方法の一実施態様において、予め決められた最低発現レベルの指標は、患者サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値を決定するのに使用されたのと同じ条件下で決定された、ＲＤＥＳまたはＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値である。この方法のその他の実施態様において、追加の工程で、サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が、前記予め決められた最低レベルの合計に等しいかまたはそれより大きいかどうかもさらに決定され（この最低レベルよりも高いと、腫瘍細胞は抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する耐性を有する）、それにより、患者が抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療によっても利益を得る可能性が高いかどうかが示される。この追加の工程の一実施態様において、前記予め決められた最低レベルの合計は、患者サンプルの腫瘍細胞に係る合計値を決定するのに使用されたのと同じ条件下で決定された、ＧＥＯまたはＡ６７３腫瘍細胞に係る合計値である。本発明はまた、癌患者の治療方法を提供するものであり、本方法は、上述の方法のいずれかを用いて、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い癌患者を確認する工程、続いて患者が反応性を有する可能性があると確認された場合、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与する工程、を含む。
【００９１】
[95]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い癌患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中の遺伝子ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価すること；該遺伝子それぞれの発現レベルの値を加算することによって、該遺伝子の発現レベルの指標を決定すること；サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が、予め決められた最低発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きい場合（この最低発現レベルの指標の値よりも低いと、腫瘍細胞はＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する耐性を有する）、患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いと決定すること、を含む。この方法の一実施態様において、予め決められた最低発現レベルの指標は、患者サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値を決定するのに使用されたのと同じ条件下で決定された、ＲＤＥＳまたはＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値である。この方法のその他の実施態様において、追加の工程で、サンプルの腫瘍細胞におけるＩＲおよびＩＲ−Ａに係る発現レベルの合計値が、前記予め決められた最低レベルの合計に等しいかまたはそれより大きいかどうかもさらに決定され（この最低レベルよりも高いと、腫瘍細胞は抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する耐性を有する）、それにより、患者が抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体での治療によっても利益を得る可能性が高いかどうかが示される。この追加の工程の一実施態様において、前記予め決められた最低レベルの合計は、患者サンプルの腫瘍細胞に係る合計値を決定するのに使用されたのと同じ条件下で決定された、ＧＥＯまたはＡ６７３腫瘍細胞に係る合計値である。一実施態様において、このような腫瘍細胞中の遺伝子ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価する方法は、本明細書のどこかで記載されているように該遺伝子それぞれのｍＲＮＡ転写レベルの決定によってなされる。その代わりの実施態様において、このような腫瘍細胞中の遺伝子ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルを評価する方法は、該遺伝子それぞれのタンパク質レベルの決定（例えばＩＨＣによる決定）によってなされる。本発明はまた、癌患者の治療方法を提供するものであり、本方法は、上述の方法のいずれかを用いて、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高い癌患者を確認する工程、続いて患者が反応性を有する可能性があると確認された場合、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与する工程、を含む。
【００９２】
[96]本発明はまた、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性がある癌患者を確認する方法を提供するものであり、本方法は：患者の腫瘍サンプルを得て、サンプルの腫瘍細胞中のホスホ−ＩＲおよびホスホ−ＩＧＦ−１Ｒのレベルを評価すること；および、該腫瘍細胞がホスホ−ＩＲとホスホ−ＩＧＦ−１Ｒの両方を発現する場合、その患者は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療により利益を得る可能性が高いが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性があると決定すること、を含む。
【００９３】
[97]癌患者の治療方法であって、本方法は、患者の腫瘍の腫瘍細胞が、ホスホ−ＩＲとホスホ−ＩＧＦ−１Ｒの両方を発現することを決定することによって、
患者がこのような阻害剤に反応性を有する可能性があるが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を用いた治療には応答しない可能性があると確認された場合、前記患者にＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与すること、を含む。一実施態様において、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、ＯＳＩ−９０６である。
【００９４】
[98]本発明はまた、患者の癌を治療する方法を提供するものであり、本方法は、化学療法剤が、腫瘍細胞中のＩＲとＩＧＦ−１Ｒ両方のリン酸化をアップレギュレートすると決定された場合、前記患者にＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤と化学療法剤との治療上有効な組み合わせを投与すること、を含む。この方法の一実施態様において、腫瘍細胞中のＩＲとＩＧＦ−１Ｒ両方のリン酸化をアップレギュレートすると決定された化学療法剤は、ドキソルビシンである。
【００９５】
[99]また本発明は、本明細書において説明される本発明の方法のうち「患者の腫瘍サンプルを得る」工程を省略したものも包含する。このようなケースにおいて、腫瘍バイオマーカーの発現（例えばＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１またはＩＧＦ−２の遺伝子転写レベル）を決定する工程は、例えば、バイオマーカーの発現を評価することができる予め処理または調製された腫瘍サンプルに対して行うこともでき、このようなサンプルとしては、例えば凍結させた腫瘍サンプル、固定済みの腫瘍標本、細胞抽出物、ＲＮＡ標本、タンパク質標本または同種のもの、または、腫瘍サンプルそれ自身（例えば生検）の代替物として腫瘍バイオマーカーを検出することができる生体液が挙げられる。
【００９６】
[100]本発明の方法において、用語「発現レベルの指標」は、様々なｍＲＮＡ転写物の発現レベルの値の合計を意味する。従って、例えば本発明の方法において用いられる１つの発現レベルの指標は、５種の遺伝子転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の発現レベルの値の合計を含む。本発明の方法において用いられる第二の発現レベルの指標は、２種の遺伝子転写物ＩＲおよびＩＲ−Ａの発現レベルの値の合計を含む。好ましい実施態様において、発現レベルの指標の値を決定するのに用いられる遺伝子それぞれの転写物の発現レベルの値は、同じ実験方法を用いて決定される。
【００９７】
[101]本発明の方法において、試験用の腫瘍細胞または腫瘍細胞サンプルにおいて、所定の転写物群の発現レベルの指標の値または遺伝子発現値の合計が、特定の参照の腫瘍細胞（例えばＲＤＥＳ、ＳＫ−Ｎ−ＡＳ、ＧＥＯ、Ａ６７３）の値または合計より大きいかまたはそれに等しいかどうかを決定する工程について、当業者であれば当然のことながら、本方法を実施するものは、常に試験用の腫瘍細胞と参照の腫瘍細胞とを直接的に対照比較しなければならないということはない。指定された特定の参照の腫瘍細胞は、単に発現レベルの指標の値の最小限のカットオフ値（この値を超えると高い感受性（または有益な作用）が予測される）を例示するために記載したものであって、これらは例えば転写レベルを決定するための分析系を較正するのに用いることが可能であり、このような較正がなされれば、本方法を実施するのに参照の腫瘍細胞との直接的な比較は必ずしも必要ではない。指定された腫瘍細胞の代わりに、それと類似した発現レベルの指標の値を有するその他の腫瘍細胞を用いてもよい。当業者であれば当然のことながら、分析を行いつつ参照の腫瘍細胞サンプルを分析ごとに確立する必要はなく、感受性を有する腫瘍細胞と耐性を有する腫瘍細胞（または、応答する患者と応答しない患者）を区別するための予め決定されたカットオフレベルに関する保存された形態の情報を参照することによって、基準または参照を確立することができる。このような保存された形態の情報としては、これらに限定されないが、例えば、感受性を有する腫瘍と耐性を有する腫瘍もしくは患者に関する個体群または個体のデータ、または、評価しようとする患者または腫瘍細胞に有用な、感受性または耐性を有する腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値のカットオフレベルに関するその他のあらゆるデータ源の参照チャート、リストまたは電子ファイルが挙げられる。
【００９８】
[102]本発明の方法を実施することにおいて、その他の発現レベルの指標の値を有する腫瘍細胞の使用は、参照の腫瘍細胞として利用してもよいし、または、転写分析系を較正するのに利用してもよい。例えば、本発明の方法であって発現レベルの指標の値を示すのにＲＤＥＳまたはＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞が用いられるような場合、ＧＥＯ、Ｈ９２９、８２２６、２６５０またはＨ２９５Ｒ腫瘍細胞のいずれか（これらはそれぞれ、発現レベルの指標の値（すなわち転写物ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ、ＩＲ−Ａ、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２の合計を用いた値）の約２倍である）を代わりに用いてもよい。しかしながら、それらは、ＲＤＥＳまたはＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞の発現レベルの指標の値の２倍であるため、「サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＲＤＥＳ（またはＳＫ−Ｎ−ＡＳ）腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値に等しいかまたはそれより大きいかどうかを決定する」工程は、「サンプルの腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値が同じ方法で決定されたＧＥＯ、Ｈ９２９、８２２６、２６５０またはＨ２９５Ｒ腫瘍細胞に係る発現レベルの指標の値の半分に等しいかまたはそれより大きいかどうかを決定する」工程で置き換えられる。本明細書において開示されたその他の腫瘍細胞系の多くは、発現レベルの指標の値を、発現レベルの指標の最小値（それより高いと、腫瘍細胞がＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する感受性を有する）を示すＲＤＥＳまたはＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞の指標の値に調節するために異なる倍率を方法に取り入れることによって同じように用いることができる。
【００９９】
[103]遺伝子発現の転写レベルの決定は当業界公知のあらゆる方法（例えばＲＴ−ＰＣＲ）によって行うことができるが、試験またはサンプル腫瘍細胞の計算された発現レベルの指標の値と、参照の腫瘍細胞の発現レベルの指標の値または分析標準曲線のいずれかとの間で有効な比較がなされるためには、試験またはサンプル、腫瘍細胞の決定は、いずれかの参照の腫瘍細胞（例えばＲＤＥＳ、ＳＫ−Ｎ−ＡＳ、ＧＥＯ、Ａ６７３）で用いられるのと同じ方法、または、分析方法を較正するのに用いられる方法によってなされなければならない。その結果得られた遺伝子発現の転写レベル値は、例えば絶対値の形態であってもよいし（例えば分子／細胞）、相対レベルの形態であってもよいし（例えば、ハウスキーピング遺伝子転写レベル、例えばＧＡＰＤＨ、β−アクチン、チューブリン、２８Ｓのコピー数などに相対的な転写レベル）、または、正規化した形態であってもよい（例えば、転写が測定される腫瘍細胞の所定の遺伝子転写に関する第４（上位）四分位数または中位数の発現値に相対的な遺伝子転写レベルの形態；または、所定のパーセンタイル値（例えば７５パーセンタイル）に正規化した形態であってもよい）。正規化のために、試験またはサンプル腫瘍細胞を、例えばＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する様々な感受性を有する参照の腫瘍細胞を含む細胞パネルに入れてもよいし、または、このようなパネルからのデータを用いて試験またはサンプル腫瘍細胞からのデータを解析することもできる。
【０１００】
[104]本明細書において列挙されるＮＣＢＩ遺伝子ＩＤ番号は、ＮＣＢＩエントレッツ（Entrez）遺伝子データベース登録簿（国立バイオテクノロジー情報センター(NCBI), アメリカ国立医学図書館（U.S. National Library of Medicine), 8600ロックビルパイク,ビルディング38A, ベセスダ,メリーランド州20894; インターネットアドレス: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/）からの本明細書において説明される遺伝子の一意の識別子である。さらに上記遺伝子から発現された代表的なｍＲＮＡの受託番号も本明細書において列挙した。
【０１０１】
[105]本明細書で用いられる「ＲＤＥＳ腫瘍細胞」は、細胞系ＲＤ−ＥＳの細胞を意味し、これは、アメリカン・ティッシュー・カルチャー・コレクション（American Tissue Culture Collection ：ATCC）よりヒトユーイング肉腫から誘導されたＨＴＢ−１６６ＴＭとして入手可能である。この細胞系は、G. MarshallおよびM. Kirchenによって上腕骨の初期の骨性ユーイング肉腫から作製されたものである。これは、上皮の形態を示す。
【０１０２】
[106]「ＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞」は、本明細書で用いられるように、細胞系ＳＫ−Ｎ−ＡＳの細胞を意味し、これは、アメリカン・ティッシュー・カルチャー・コレクション（ＡＴＣＣ）からＣＲＬ−２１３７ＴＭとして入手可能であり、骨髄の転移部位におけるヒト神経芽細胞腫から誘導されたものである。これは、上皮の形態を示す。
【０１０３】
[107]本明細書で用いられる「ＧＥＯ腫瘍細胞」は、細胞系ＧＥＯの細胞を意味し、ロズウェルパーク癌研究所（Roswell Park Cancer Institute: RPCC; ニューヨーク州バッファロー）より入手可能である。ＧＥＯは、ヒト結腸腫瘍から誘導された。
【０１０４】
[108]本明細書で用いられる「Ａ６７３腫瘍細胞」は、細胞系Ａ−６７３の細胞を意味し、これは、アメリカン・ティッシュー・カルチャー・コレクション（ＡＴＣＣ）からＣＲＬ−１５９８ＴＭとして入手可能であり、ヒト横紋筋肉腫から誘導されたものであり、多角形の形態を示す。
【０１０５】
[109]本明細書で用いられる「ＲＤ腫瘍細胞」は、細胞系ＲＤの細胞を意味し、これは、アメリカン・ティッシュー・カルチャー・コレクション（ＡＴＣＣ）からＣＣＬ−１３６ＴＭとして入手可能であり、ヒト横紋筋肉腫から誘導されたものであり、紡錘細胞および大きな多核細胞の形態を示す。
【０１０６】
[110]本明細書で用いられる「ＭＤＡＨ−２７７４腫瘍細胞」は、卵巣腫瘍細胞系ＭＤＡＨ−２７７４の細胞を意味し、これは、転移性の漿液性嚢胞腺癌を有する３８歳の患者の腹水から誘導されたものであり（Freedman, R., et al. (1978) Characterization of an ovarian carcinoma cell line, Cancer 42, 2352-2359）、癌腫の形態を示す。
【０１０７】
[111]本明細書で用いられる「Ｕ２６６腫瘍細胞」は、細胞系Ｕ２６６Ｂ１［Ｕ２６６］の細胞を意味し、これは、アメリカン・ティッシュー・カルチャー・コレクション（ＡＴＣＣ）からＴＩＢ−１９６ＴＭとして入手可能であり、ヒト骨髄腫から誘導されたものであり、リンパ芽球の形態を示す。
【０１０８】
[112]本発明に関して、腫瘍細胞増殖のＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤ＯＳＩ−９０６に対する感受性は、腫瘍細胞が１μＭ未満のＥＣ５０（半数効果濃度）で阻害される場合は高いと定義され、腫瘍細胞が１０μＭより大きいＥＣ５０で阻害される場合は低い（すなわち相対的に耐性を有する）と定義される。これらの値の間の感受性は、中間とみなされる。その他のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤、具体的には本明細書において以下で説明される式Ｉで示される化合物の場合、それらは、同じシグナル伝達経路を阻害することによって腫瘍細胞増殖を阻害するため、定性的に類似した結果が期待されるが、ＥＣ５０値は、定量的に、ＯＳＩ−９０６に対するその他の阻害剤の相対的な細胞の効力に応じて異なる可能性がある。従って、例えばＯＳＩ−９０６よりも有効なＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する腫瘍細胞増殖の感受性は、その腫瘍細胞がそれ相応に低いＥＣ５０で阻害される場合は高いと定義されると予想される。腫瘍の異種移植片の研究において、インビトロでの培養でいずれもＯＳＩ−９０６に高い感受性を有する様々な腫瘍細胞型の腫瘍細胞を用いたところ、これらの腫瘍は一貫して、インビボにおいて高い腫瘍増殖抑制率（ＴＧＩ）で阻害される（本明細書に記載の実験の章を参照）。それとは対照的に、類似の研究において、インビトロでの培養でＯＳＩ−９０６に低い感受性しか有さない腫瘍細胞を用いたところ、このような腫瘍は、インビボにおいて低い腫瘍増殖抑制率（ＴＧＩ）でしか阻害されない。これらのデータから、腫瘍細胞培養におけるＯＳＩ−９０６などのＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する感受性は、インビボでの腫瘍の感受性を予測するものであるということが示される。
【０１０９】
[113]ＥＣ５０（半数効果濃度）という用語は、特定の曝露時間中に基底値と最大値との間の半分まで応答を誘導する化合物の濃度を意味し、化合物の効力の尺度として用いられる。
【０１１０】
[114]本明細書で示された実験の実施例はＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤であるＯＳＩ−９０６に関するものであるが、本発明の方法は、いずれかの特定のＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に応答するまたは応答しないと予想される患者または腫瘍の予測に限定されるものではなく、あらゆるＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する患者の結果を予測するのにも利用される可能性がある。同様に、本明細書で説明されるＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療方法は、この種のＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤どれを使用してもよい。さらに、本明細書において説明される方法のいずれかのその他の実施態様において、ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、政府の規制当局（例えば米国食品医薬品局（ＦＤＡ）；欧州医薬品庁；日本厚生労働省；英国医薬品庁（ＭＨＲＡ））によって承認されたＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤（例えばすでにそのように承認された本明細書において開示されたＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤のいずれか）であってもよい。
【０１１１】
[115]本発明の方法において、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、これらの受容体チロシンキナーゼの両方を阻害するならばどのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤であってもよい（それらの薬理学的に許容できる塩またはそれらの多形体を含む）。好ましい実施態様において、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、低分子量のＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤である。その他の実施態様において、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、キナーゼ触媒部位においてＡＴＰ競合性の低分子量のＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤である。一実施態様において、ＩＧＦ−１ＲキナーゼとＩＲキナーゼとの阻害剤のＩＣ５０（インビトロでの生化学的なキナーゼ分析を用いて決定された値、例えば、Mulvihill, M.J. et al. (2008) Bioorganic & Medicinal Chemistry, Volume 16, Issue 3, 1359-1375を参照）の比率（すなわち、ＩＧＦ−１ＲのＩＣ５０：ＩＲのＩＣ５０）は、１：１０〜１０：１の範囲内である。その他の実施態様において、ＩＧＦ−１ＲキナーゼとＩＲキナーゼとの阻害剤のＩＣ５０の比率は、１：５〜５：１；１：３〜３：１；１：２〜１：３；１：２〜１：５；または、１：２〜１：１０から選択される範囲内である。追加の実施態様において、ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、インビトロでの生化学分析において、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するが、インビトロでの生化学分析その他のあらゆるキナーゼに対して有意な阻害活性を示さない。ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤の例としては、これらに限定されないが、ＯＳＩ−９０６（シス−３−［８−アミノ−１−（２−フェニル−キノリン−７−イル）−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−３−イル］−１−メチル−シクロブタノール）；ＰＱＩＰ（シス−３−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−シクロブチル］-１−（２−フェニル−キノリン−７−イル）−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−８−イルアミン）；ＢＭＳ−５５４４１７（Haluska P, et al. Cancer Res 2006；66(1)：362-71）；ＢＭＳ５３６９２４（Huang, F. et al. (2009) Cancer Res. 69(1)：161-170）；ＢＭＳ−７５４８０７（Carboni et al. (2009) Molecular Cancer Therapeutics 8(12)）が挙げられる。
【０１１２】
[116]本明細書において説明される本発明の方法、組成物またはキットのいずれかにおいて、用語「低分子量のＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤」は、低分子量（すなわち５０００ダルトン未満；好ましくは１０００ダルトン未満、および、より好ましくは３００〜７００ダルトン）の、酵素のキナーゼドメインに結合することによってＩＧＦ−１Ｒキナーゼを阻害する有機化合物を意味する。このような化合物の例としては、本明細書において説明される式（Ｉ）で示されるＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤が挙げられる。式（Ｉ）で示されるＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、患者に投与されるとＩＧＦ−１Ｒキナーゼを阻害する式（Ｉ）に包含されるあらゆるＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤化合物であってよい。このような阻害剤の例は、米国特許公開公報ＵＳ２００６／０２３５０３１（これは、その全体が本明細書意包含される）で公開されており、例えば、本明細書において説明される実験で用いられるようなＯＳＩ−９０６、すなわち（シス−３−［８−アミノ−１−（２−フェニル−キノリン−７−イル）−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−３−イル］−１−メチル−シクロブタノール）が挙げられる。
【０１１３】
[117]医療分野、特に診断テストの適用や治療剤での治療に関する医療分野における当業者であれば当然のことと思われるが、生物系は多少なりとも変動するものであり必ずしも完全に予想可能とは限らないため、多くの優れた診断テストまたは治療剤が場合によっては効果がないこともある。従って、個々の患者ごとの最適な治療方針を決定することは、最終的には、試験結果、患者の状態や病歴、および、医師自身の経験に基づいて治療にあたる医師の判断にゆだねられる。従って、腫瘍がＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対して特定の感受性を有さないと予測される場合であっても、診断テストまたはその他の基準からのデータに基づいて、具体的にはその他の自明な治療の選択肢の全てまたはほとんどが失敗に終わった場合や、または、その他の治療を施した際にある程度の相乗効果が期待されるような場合、医師がＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を用いて患者を治療することを選択すると予想されることさえも起こり得る。癌治療で用いられるより一般的な化学療法剤または細胞毒性物質などのその他の多くの抗癌性化合物と比較して、ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、化合物の分類的に比較的よく許容されるという事実から、このような阻害剤はより実用性の高い選択肢となっている。また注目すべきことに、本明細書において開示された方法は、どの腫瘍を有する患者がＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤によって最も利益を得る可能性が高いかを予測するものであるが、これは、必ずしも最適な遺伝子転写の徴候を示さない腫瘍を有する患者は利益を受けないだろうということを意味するわけではなく、より適切な作用が期待されるということを意味する。
【０１１４】
[118]生物系における診断分析は、絶対確実であることはめったにないため、本発明はまた、ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する腫瘍細胞阻害を受けやすいことを決定するための１種より多くの診断方法が同時使用される追加の実施態様も提供する。このような実施態様において、このような決定にたった一つの方法しか用いない方法と比較して、誤った予想を出す可能性がより低くなると予想される。いずれの診断方法も起こり得る利点と不利益を有するものであり、最終的にどの方法が好ましいかの決定は患者それぞれの環境によって様々であると予想されるが、複数の診断方法を使用することによって、ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤の使用を含む治療計画によって起こり得る結果を正確に予測する個人の能力を改善し得ると予想される。それゆえに、本発明はまた、ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による阻害に対する感受性を予測するための２種またはそれより多くの診断方法の使用を含む、癌患者を診断または治療する方法を提供するものであり、該方法が治療方法の場合、２種またはそれより多くの診断方法によって、患者がＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応性を有する可能性があることが示された場合、それに続いて前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与すること、を含む。ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による阻害に対する感受性を予測するための診断方法の一つは、本明細書で説明されているようなＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による阻害に対する感受性を有する腫瘍を予測する方法であり得る。その他の診断方法は、ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による阻害に対する感受性を予測するためのバイオマーカーを用いた当業界ですでによく知られているあらゆる方法であってもよく、このような方法としては、例えば腫瘍細胞のＥＭＴ状態を評価するための上皮または間充組織のバイオマーカーの発現レベルの決定（例えばＥ−カドヘリン；ＵＳ２００７／００６５８５８；ＵＳ２００９００９２５９６）；ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する感受性または耐性を予測するバイオマーカー、例えばT. Pitts et al. (2009) EORTC Conference, マサチューセッツ州ボストン, 要約番号2141；ｐＥＲＫ、ｐＨＥＲ３またはＨＥＲ３（ＵＳ２００９／００９３４８８）（ＵＳ２００９／００９３４８８）で説明されているもの；ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する感受性を予測することが報告されているＩＧＦ−１、ＩＧＦ−２またはその他のバイオマーカー（例えば、Huang F. H.W., et al. Identification of sensitivity markers for BMS-536924, an inhibitor for insulin-like growth factor-1 receptor. J Clin Oncol ASCO Ann Meet Proc Part I 2007;25：3506を参照）が挙げられる。
【０１１５】
[119]本発明の方法においてＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２およびＩＧＦ−１転写物に関して評価された遺伝子発現の転写レベルは、腫瘍細胞中でＩＧＦ−１Ｒ、ＩＧＦ−２およびＩＧＦ−１遺伝子によって発現された全てのｍＲＮＡ、すなわち例えば天然に存在する対立遺伝子変異体、スプライス変異体などを含む腫瘍細胞によって自然に発現された全てのｍＲＮＡを含む。従って、一実施態様において、このような転写物としては、ヒト遺伝子ＩＧＦ−１Ｒ（遺伝子ＩＤ：３４８０、インスリン様増殖因子１受容体）、ＩＧＦ−１（遺伝子ＩＤ：３４７９、インスリン様増殖因子１（ソマトメジンＣ））、および、ＩＧＦ−２（遺伝子ＩＤ：３４８１、インスリン様増殖因子２（ソマトメジンＡ））によって発現されたｍＲＮＡ、または、これらの核酸の相補鎖にストリンジェントな条件下でハイブリダイズするｍＲＮＡが挙げられ、ここでストリンジェントな条件は、例えば５０％ホルムアミド、５×ＳＳＣおよび１％ＳＤＳを含む溶液中で４２℃でインキュベートし、０．２×ＳＳＣおよび０．１％ＳＤＳを含む溶液中で６５℃で洗浄することを含む条件である。従って、「ＩＧＦ−１転写物」は、例えばＮＣＢＩデータベースで説明されている以下の転写物：インスリン様増殖因子１アイソフォーム４プレプロタンパク質転写物ＮＭ＿０００６１８．３；インスリン様増殖因子１アイソフォーム１転写物ＮＭ＿００１１１１２８３．１；インスリン様増殖因子１アイソフォーム２転写物ＮＭ＿００１１１１２８４．１；および、インスリン様増殖因子１アイソフォーム３転写物ＮＭ＿００１１１１２８５．１のうち１つまたはそれより多くを含む。「ＩＧＦ−２転写物」は、例えばＮＣＢＩデータベースで説明されている以下の転写物：インスリン様増殖因子１アイソフォーム１前駆体転写物ＮＭ＿０００６１２．４；インスリン様増殖因子１アイソフォーム１転写物ＮＭ＿００１００７１３９．４；および、インスリン様増殖因子１アイソフォーム２転写物ＮＭ＿００１１２７５９８．１のうち１つまたはそれより多くを含む。「ＩＧＦ−１Ｒ転写物」は、例えばＮＣＢＩデータベースで説明されている以下の転写物：インスリン様増殖因子１受容体前駆体転写物ＮＭ＿０００８７５．３を含む。
【０１１６】
[120]本発明の方法において、好ましい実施態様において、ヒトインスリン受容体（遺伝子ＩＤ：３６４３；ＩＮＳＲ）発現の結果生じる遺伝子発現の転写物ＩＲおよびＩＲ−Ａは以下の通りである：（Ａ）「ＩＲ転写物」は、ＩＲ−Ｂ転写物、すなわちインスリン受容体アイソフォームの長い前駆体転写物を検出する分析で測定された転写物を意味し、例えば転写物ＮＭ＿０００２０８．２（ＩＲ−Ｂ；エキソン１１＋））（天然に存在する対立遺伝子変異体も含む）が挙げられ；および、（Ｂ）「ＩＲ−Ａ転写物」は、ＩＲ−Ａ転写物、すなわちインスリン受容体アイソフォームの短い前駆体転写物を検出する分析で測定された転写物を意味し、例えば転写物ＮＭ＿００１０７９８１７．１（ＩＲ−Ａ；エキソン１１−）（天然に存在する対立遺伝子変異体も含む）が挙げられる。転写物ＩＲおよびＩＲ−Ａのレベルの評価は、例えば以下から選択される１種またはそれより多くのＰＣＲプライマー対の組み合わせを用いることによって行うことができる：ＩＲ−Ｂを特異的に検出するＰＣＲプライマー（例えばオーバーラップするエキソン１０とエキソン１１との境界部位）；ＩＲ−Ａを特異的に検出するＰＣＲプライマー（例えばオーバーラップするエキソン１０とエキソン１２との境界部位）；および、ＩＲ−ＡとＩＲ−Ｂの両方を同時に検出するＰＣＲプライマー（例えばオーバーラップするエキソン５とエキソン６との境界部位）。
【０１１７】
[121]ヒト以外の患者に腫瘍が存在するような本発明の方法のいずれかのその代わりの実施態様において、上記転写物は、ヒト遺伝子転写物の動物相同体である（例えばイヌ由来、マウス由来、ラット由来、ウサギ由来、ネコ由来、サル由来、類人猿由来など）。
【０１１８】
[122]本発明の方法において、遺伝子転写物の発現レベルは、腫瘍細胞サンプル中の転写物の量（例えば絶対量または濃度）を評価することによって決定することができ、このようなサンプルとしては、例えば患者から得られた腫瘍生検や、腫瘍から誘導された腫瘍細胞を含むその他の患者サンプル（例えば血液、血清、尿またはその他の体液もしくは排泄物）が挙げられる。患者由来の腫瘍のサンプルは、より大量の組織が得られるＦＮＡ（穿刺吸引細胞診）またはコア生検のような手法によって得ることもできる。このような細胞サンプルは、サンプル中の転写量を評価する前に、周知の様々な回収後の分取および貯蔵技術（例えば核酸および／またはタンパク質抽出、固定、貯蔵、凍結、限外ろ過、濃縮、蒸発、遠心分離など）で処理してもよい。マクロ解剖および／または顕微解剖法（例えばレーザー顕微解剖および圧力カタパルティング（Laser Microdissection and Pressure Catapulting : LMPC）、例えばＰＡＬＭ（Ｒ）マイクロビーム顕微鏡（Ｐ．Ａ．Ｌ．Ｍ．マイクロレーザーテクノロジーズ社（P.A.L.M. Microlaser Technologies AG）, ドイツ国ベルンリート）を用いた方法；ＳＬ−マイクロテストＵＶレーザー顕微解剖システム（モレキュラー・マシーンズ＆インダストリーズ（Molecular Machines & Industries), スイス国グラットブルグ））は、正常な組織細胞または間質細胞を除去することによって腫瘍サンプルの腫瘍細胞群を高濃度化するのに用いることができる（例えば、de Bruin EC. et al. BMC Genomics. 2005 Oct 14;6：142; Dhal, E. et al. Clinical Cancer Research July 2006 12; 3950; Funel, N. et al. Laboratory Investigation (2008) 88, 773-784, doi：10.1038/labinvest.2008.40, 2008年5月19日にオンラインで公開された）。また純粋な腫瘍細胞群を生産するために、原発腫瘍細胞の培養物を調製する場合もある。
【０１１９】
[123]本発明で説明されている転写物の発現は、転写された核酸の発現を検出するための周知の様々な方法のいずれかによって評価することができる。このような方法の例としては、これらに限定されないが、核酸ハイブリダイゼーション法、核酸逆転写法、および、核酸増幅方法が挙げられる。
【０１２０】
[124]その他の実施態様において、転写の発現は、患者サンプル中の細胞からｍＲＮＡ／ｃＤＮＡ（すなわち転写されたポリヌクレオチド）を製造すること、および、ｍＲＮＡ／ｃＤＮＡを転写核酸またはそれらのフラグメントに相補的な参照ポリヌクレオチドとハイブリダイゼーションすることによって評価される。ｃＤＮＡは、参照ポリヌクレオチドとのハイブリダイゼーションの前に様々なポリメラーゼ連鎖反応法のいずれかを用いて任意に増幅してもよい。同様に、転写物の発現レベルを評価するための定量ＰＣＲを用いて転写物の発現を検出することもできる。
【０１２１】
[125]関連する実施態様において、サンプルから得られた転写されたポリヌクレオチドの混合物を、転写核酸の少なくとも一部（例えば少なくとも７個、１０個、１５個、２０個、２５個、３０個、４０個、５０個、１００個、５００個またはそれより多いヌクレオチド残基）に相補的かまたは相同なポリヌクレオチドに固定させた基質と接触させる。このような相補的または相同なポリヌクレオチドを基質上で差異的に検出することができる場合（例えば、異なる発色団または蛍光団を用いて検出可能にするか、または、選択された異なる位置に固定させた場合）、同時に複数の転写物の発現レベルを、単一の基質（例えば選択された位置に固定したポリヌクレオチドの「遺伝子チップ」マイクロアレイ）を用いて評価することができる。ある核酸とその他の核酸とのハイブリダイゼーションを含む転写物発現の評価方法が用いられる場合、ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下でハイブリダイゼーションを行うことが好ましい。
【０１２２】
[126]生体サンプル中に核酸転写が存在するかどうかを検出する典型的な方法は、試験被検体から生体サンプル（例えば腫瘍生検；腫瘍に関連する腫瘍細胞を含む体液）を得ること、および、生体サンプルとポリペプチドまたは核酸（例えばｍＲＮＡ、ｃＤＮＡ）を検出することができる化合物または物質とを接触させることを含む。従って本発明の検出方法は、例えば生体サンプル中のｍＲＮＡまたはｃＤＮＡを検出するのに用いることができる。例えばｍＲＮＡを検出するためのインビトロでの技術としては、ノーザンハイブリダイゼーション、インサイチュハイブリダイゼーション、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）、定量リアルタイムＰＣＲ、インビトロでの転写、ノーザンハイブリダイゼーション、および、インサイチュハイブリダイゼーションが挙げられる。
【０１２３】
[127]多くの発現検出方法において、単離したＲＮＡが用いられる。インビトロでの方法において、ｍＲＮＡの単離に選択性を有さないあらゆるＲＮＡ単離技術が腫瘍細胞からのＲＮＡの精製に利用できる（例えば、Ausubel et al., ed., Current Protocols in Molecular Biology, ジョン・ワイリー＆サンズ(John Wiley&Sons), ニューヨーク1987-1999）を参照。加えて、例えばチョムクジンスキー（Chomczynski）の一工程のＲＮＡ単離法（１９８９年，米国特許第４，８４３，１５５号）のような当業者によく知られている技術を用いれば膨大な数の組織サンプルを容易に処理できる。
【０１２４】
[128]単離したｍＲＮＡは、ハイブリダイゼーションまたは増幅分析で用いることができ、このような分析としては、これらに限定されないが、ノーザン解析、ポリメラーゼ連鎖反応解析、および、プローブアレイが挙げられる。ｍＲＮＡレベルの検出方法の一つは、単離したｍＲＮＡと、検出しようとする遺伝子によってコードされたｍＲＮＡにハイブリダイズすることができる核酸分子（プローブ）とを接触させることを含む。このような核酸プローブは、例えば全長ｃＤＮＡまたはそれらの一部であってもよく、例えば、長さが少なくとも７個、１５個、３０個、５０個、１００個、２５０個または５００個であり、本発明のｍＲＮＡ転写物またはこのような転写物から製造された相同ｃＤＮＡにストリンジェントな条件下で特異的にハイブリダイズするのに十分な長さのヌクレオチドのオリゴヌクレオチドである。その他の本発明の方法で使用するための適切なプローブを本明細書で説明する。ｍＲＮＡまたはｃＤＮＡとプローブとのハイブリダイゼーションから、対象の転写物が発現されていることが示される。
【０１２５】
[129]一つの様式において、例えばアガロースゲル上で単離したｍＲＮＡを泳動し、ｍＲＮＡをゲルからニトロセルロースのようなメンブレン移動させることによって、ｍＲＮＡを固体表面に固定してプローブと接触させる。代りの形態において、例えばアフィメトリックス（Affymetrix）遺伝子チップアレイ中で、このようなプローブを固体表面に固定して、ｍＲＮＡをプローブと接触させる。当業者であれば容易に、既知のｍＲＮＡ検出方法を本発明の転写物レベルの検出に使用するために適合させることができる。
【０１２６】
[130]サンプル中のｍＲＮＡ転写物のレベルを決定する代わりの方法は、核酸増幅工程、例えばＲＴ−ＰＣＲ（Mullisの米国特許第４，６８３，２０２号（１９８７年）に記載された実験的な実施態様）、リガーゼ連鎖反応（Barany, 1991, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88：189-193）、自律的な配列複製（Guatelli et al., 1990, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87：1874-1878）、転写増幅システム（Kwoh et al., 1989, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86：1173-1177）、Ｑ−ベータレプリカーゼ（Lizardi et al., 1988, Bio/Technology 6：1197）、ローリングサークル複製（Lizardi et al., 米国特許第５，８５４，０３３号）、または、その他のあらゆる核酸増幅方法による核酸増幅工程、それに続いて当業者によく知られている技術を用いた増幅した分子の検出を含む。これらの検出スキームは、このような核酸分子が極めて少数しか存在しないような場合での核酸分子の検出に特に有用である。本明細書で用いられる増幅プライマーは、遺伝子の５’または３’領域（それぞれプラス鎖およびマイナス鎖、または、その逆）にアニールすることができ、その間に短い領域を含む一対の核酸分子と定義される。一般的に、増幅プライマーは長さが約１０〜３０個のヌクレオチドであり、それらは長さが約５０〜２００個のヌクレオチドの領域の両端に配置される。適切な条件下で適切な試薬を用いれば、このようなプライマーは、プライマーが両端に配置されたヌクレオチド配列を含む核酸分子の増幅を可能にする。
【０１２７】
[131]インサイチュの方法に関しては、検出の前にｍＲＮＡを該腫瘍細胞から単離する必要はない。このような方法において、細胞または組織サンプルは既知の組織学的な方法を用いて調製／処理される。続いてこのようなサンプルを支持体（典型的にはスライドガラス）に固定し、続いてｍＲＮＡ転写物にハイブリダイズすることができるプローブと接触させる。
【０１２８】
[132]転写の絶対的な発現レベルに基づいて決定を行う代替法として、正規化した転写の発現レベルに基づいて決定を行ってもよい。発現レベルは、例えばその発現とその他の遺伝子（例えば構成的に発現されるハウスキーピング遺伝子）の発現とを比較することで遺伝子の絶対的な発現レベルを補正することによって正規化される。正規化するための適切な遺伝子としては、ハウスキーピング遺伝子、例えばアクチン遺伝子、または、対象の腫瘍細胞タイプで一定レベルで発現される腫瘍細胞に特異的な遺伝子が挙げられる。このような正規化は、あるサンプル（例えば患者サンプル）における発現レベルと、その他のサンプル（例えば非腫瘍サンプル、コントロールサンプル）における発現レベルとの比較、または、異なる源由来のサンプル間の発現レベル比較を可能にする。
【０１２９】
[133]また本発明は、本発明の方法のいずれかを用いて生体サンプル中の転写物の存在を検出するためのキットも包含する。このようなキットは、被検体が、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による阻害の作用を受けやすい腫瘍に罹っているかどうかを決定するのに用いることができる。例えば本キットは、生体サンプル中の核酸を検出することができる標識された化合物または物質、および、サンプル中のｍＲＮＡの量を決定するための手段（例えばタンパク質をコードするＤＮＡまたはｍＲＮＡに結合するオリゴヌクレオチドプローブ、ＰＣＲプライマー）を含んでいてもよい。またキットは、参照またはコントロールサンプル、および、本キットを用いて得られた結果を解釈するための説明書を含んでいてもよい。
【０１３０】
[134]オリゴヌクレオチドベースのキットの場合、本キットは、を例えば：（１）オリゴヌクレオチド、例えば核酸配列ハイブリダイズする検出可能に標識されたオリゴヌクレオチド、または、（２）転写核酸分子またはｃＤＮＡの増幅に有用な一対のプライマー含んでいてもよい。また本キットは、例えば緩衝剤、保存剤またはタンパク質安定剤を含んでいてもよい。本キットはさらに、検出可能な標識を検出するのにに必要な成分（例えば酵素または基質）を含んでいてもよい。また本キットは、分析して試験サンプルと比較することができるコントロールサンプルまたは一連のコントロールサンプルを含んでいてもよい。本キットの各成分はそれぞれ個別のコンテナーに封入させてもよく、これらの様々なコンテナーはいずれも、本キットを用いて行われた分析結果を解釈するための説明書と共に一つのパッケージ内にまとめてもよい。
【０１３１】
[135]本発明のいくつかの実施態様において、腫瘍細胞中で発現されたタンパク質のレベルが検出される。本発明のタンパク質を検出するのに好ましい物質は、このようなタンパク質またはそれらのフラグメントに結合することができる抗体であり、好ましくは検出可能な標識を有する抗体である。抗体はポリクローナルであってもよく、または、より好ましくはモノクローナルである。無傷抗体またはそれらのフラグメントもしくは誘導体（例えばＦａｂまたはＦ（ａｂ’）２）を用いてもよい。用語「標識された」は、抗体に関して用いられる場合、検出可能な物質をプローブまたは抗体にカップリングすること（すなわち物理的に結合させること）によって抗体に直接標識を付けること、加えて、直接的に標識されるその他の試薬との反応によるプローブまたは抗体の間接的な標識付けを包含することとする。間接的な標識付けの例としては、蛍光標識された二次抗体を用いた一次抗体の検出が挙げられる。
【０１３２】
[136]腫瘍細胞由来のタンパク質は、当業者によく知られている技術を用いて検出前に単離することができる。用いられるタンパク質単離方法としては、例えば、HarlowおよびLane(Harlow and Lane, 1988, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, ニューヨーク州コールドスプリングハーバー）で説明されている方法が挙げられる。
【０１３３】
[137]腫瘍細胞サンプルが所定の抗体に結合するタンパク質を含むかどうかを決定するために様々な様式を用いることができる。このような様式の例としては、これらに限定されないが、酵素免疫検査法（ＥＩＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、免疫組織化学（ＩＨＣ）、ウェスタンブロット解析、および、酸素結合免疫吸着検査法（ＥＬＩＳＡ）が挙げられる。当業者であれば、腫瘍細胞が本発明のタンパク質を発現するかどうかを決定する際に使用するための既知のタンパク質／抗体検出方法を容易に適合させることができる。
【０１３４】
[138]一つの様式において、発現されたタンパク質を検出するために、例えばウェスタンブロットまたは免疫蛍光技術のような方法で、抗体または抗体フラグメントまたは誘導体を用いることができる。このような使用において、一般的に、抗体またはタンパク質のいずれかを固体支持体に固定することが好ましい。適切な固相支持体またはキャリアーとしては、抗原または抗体と結合することができるあらゆる支持体が挙げられる。よく知られた支持体またはキャリアーとしては、ガラス、ポリスチレン、ポリプロピレン、ポリエチレン、デキストラン、ナイロン、アミラーゼ、天然および修飾セルロース、ポリアクリルアミド、斑レイ岩、および、磁鉄鉱が挙げられる。
【０１３５】
[139]当業者であれば抗体または抗原と結合させるのに適したその他多くのキャリアーを認識しているものと予想され、さらにこのような支持体を本発明での使用に適合させることができるものと予想される。例えば腫瘍細胞から単離したタンパク質をポリアクリルアミドゲル電気泳動で泳動し、ニトロセルロースのような固相支持体に固定することができる。続いてこの支持体を適切な緩衝液で洗浄し、続いて検出可能に標識された抗体で処理することができる。続いてこの固相支持体を再度緩衝液で洗浄して未結合の抗体を除去することができる。続いて固体支持体に結合した標識の量を従来の手段で検出することができる。
【０１３６】
[140]ＥＬＩＳＡ分析の場合、特異的な結合対は、免疫型であってもよいし、または、免疫型でなくてもよい。免疫性の特異的な結合対としては、例えば、抗原−抗体系、または、ハプテン／抗ハプテン系が挙げられる。さらに、フルオレセイン／抗フルオレセイン、ジニトロフェニル／抗ジニトロフェニル、ビオチン／抗ビオチン、ペプチド／抗ペプチドなども挙げられる。特異的な結合対の抗体部分は、当業者によく知られている慣例的な方法によって生産することができる。このような方法は、動物を特異的な結合対の抗原部分で免疫化することを含んでいてもよい。特異的な結合対の抗原部分が例えばハプテンのように非免疫原性である場合、その抗原部分を免疫原性にするために、それらをキャリアータンパク質に共有結合でカップリングしてもよい。非免疫性の結合対としては、２種の構成要素が互いに天然の親和性を共有する系が挙げられる（ただし抗体ではない）。典型的な非免疫性の対は、ビオチン−ストレプトアビジン、内因子−ビタミンＢ１２、葉酸−葉酸結合タンパク質などである。
【０１３７】
[141]様々な方法を用いて、抗体を特異的な結合対の部分で共有結合によって標識することができる。特異的な結合対の部分の性質、望ましい結合のタイプ、および、様々な共役化学作用に対する抗体の寛容性に基づいて方法が選択される。ビオチンは、市販の活性誘導体を利用することによって、共有結合で抗体にカップリングさせることができる。このうちいくつかは、タンパク質のアミン基に結合するビオチン−Ｎ−ヒドロキシ−スクシンイミド；カルボジイミドカップリングによって炭水化物部分、アルデヒドおよびカルボキシル基に結合するビオチンヒドラジド；および、スルフヒドリル基に結合するビオチンマレイミドおよびヨードアセチルビオチンである。フルオレセインは、フルオレセインイソチオシアネートを用いてタンパク質のアミン基にカップリングさせることができる。ジニトロフェニル基は、硫酸２，４−ジニトロベンゼンまたは２，４−ジニトロフルオロベンゼンを用いてタンパク質のアミン基にカップリングさせることができる。モノクローナル抗体を特異的な結合対の部分にカップリングするために、その他の標準的な共役方法を使用することもでき、このような方法としては、ジアルデヒド、カルボジイミドカップリング、ホモ官能性の架橋を形成すること、および、ヘテロ二官能性の架橋を形成することが挙げられる。カルボジイミドカップリングは、ある物質上のカルボキシル基をその他の物質のアミン基にカップリングする有効な方法である。カルボジイミドカップリングは、市販の試薬１−エチル−３−（ジメチル−アミノプロピル）−カルボジイミド（ＥＤＡＣ）を用いることによって促進される。
【０１３８】
[142]二官能性イミドエステルや二官能性Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルなどのホモ二官能性の架橋剤は市販されており、ある物質上のアミン基をその他の物質上のアミン基にカップリングするのに用いられる。ヘテロ二官能性架橋剤は、異なる官能基を有する試薬である。最も一般的な市販のヘテロ二官能性架橋剤は、１つの官能基としてアミン反応性のＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルを有し、第二の官能基としてスルフヒドリル反応性基を有する。最も一般的なスルフヒドリル反応性基は、マレイミド、ピリジルジスルフィド、および、活性ハロゲンである。一方の官能基は、放射線照射すると様々な基と反応する光活性を有するアリールニトレンであってもよい。
【０１３９】
[143]検出可能に標識された抗体または特異的な結合対の検出可能に標識された部分は、レポーターにカップリングすることによって製造され、ここでこのようなレポーターとしては、放射性同位体、酵素、蛍光原性、化学発光材料または電気化学材料が挙げられる。２種の一般的に使用される放射性同位体は、１２５Ｉおよび３Ｈである。標準的な放射性同位体の標識付け法としては、１２５Ｉの場合はクロラミンＴ、ラクトペルオキシダーゼ、および、ボルトン−ハンター法が挙げられ、３Ｈの場合は還元メチル化が挙げられる。用語「検出可能に標識された」は、標識固有の酵素活性によって、または、それ自身容易に検出することができるその他の構成要素の標識への結合によって容易に検出することができるように標識された分子を意味する。
【０１４０】
[144]本発明で使用するのに適した酵素としては、これらに限定されないが、ホースラディッシュペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、グルコースオキシダーゼ、ルシフェラーゼ（例えばホタルおよびウミシイタケ）、β−ラクタマーゼ、ウレアーゼ、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、および、リゾチームが挙げられる。酵素の標識付けは、上記で抗体の特異的な結合対の部分でのカップリングで述べたようなジアルデヒド、カルボジイミドカップリング、ホモ二官能性の架橋剤、および、ヘテロ二官能性架橋剤を用いることによって促進される。
【０１４１】
[145]選択される標識付け法は、酵素に適用することができる官能基と標識しようとする材料、および、それら両方の共役状態に対する寛容性によって決定される。本発明で使用される標識付け法は、これらに限定されないが、現在使用されているあらゆる従来の方法が挙げられ、例えば、Engvall and Pearlmann, Immunochemistry 8, 871 (1971), AvrameasおよびTernynck, Immunochemistry 8, 1175 (1975), Ishikawa et al., J. Immunoassay 4(3)：209-327 (1983)、および、Jablonski, Anal. Biochem. 148：199 (1985)で説明されている方法が挙げられる。
【０１４２】
[146]標識付けは、例えばスペーサーまたは特異的な結合対の他の部分を用いるような間接的な方法によって達成することができる。この例としては、非標識ストレプトアビジンを用いたビオチン化抗体の検出、および、ストレプトアビジンを用いたビオチン化酵素の検出、および、連続的または同時に添加されたビオチン化酵素の検出が挙げられる。従って、本発明によれば、検出するのに用いられる抗体は、レポーターで直接的に検出可能に標識してもよいし、または、特異的な結合対の一方の部分で間接的に標識してもよいし。このような抗体が特異的な結合対の一方の部分でカップリングされる場合、検出は、抗体と一方の部分とが特異的に結合した複合体を、上述したように標識されたまたは非標識の結合対の第二の部分と反応させることによって実行される。
【０１４３】
[147]その上、非標識の検出抗体は、非標識の抗体を非標識の抗体に特異的な標識抗体と反応させることによって検出が可能である。この例において、上記で用いられる「検出可能に標識された」は、非標識抗体に特異的な抗体が結合することができるエピトープを含むことを意味するものとする。このような抗抗体は、上記で考察されたアプローチのいずれかを用いて直接的または間接的に標識することができる。例えば、上記で考察されたストレプトアビジン−ホースラディッシュペルオキシダーゼ系を反応させることによって検出が可能なビオチンに抗抗体をカップリングすることができる。
【０１４４】
[148]本発明の一実施態様において、ビオチンが利用される。ビオチン化抗体は、続いてストレプトアビジン−ホースラディッシュペルオキシダーゼ複合体と反応する。クロモジェニック検出を達成するために、オルトフェニレンジアミン、４−クロロ−ナフトール、テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）、ＡＢＴＳ、ＢＴＳまたはＡＳＡを使用することができる。
【０１４５】
[149]本発明を実施するためのイムノアッセイの一つの様式において、従来の技術を用いて支持体表面に捕獲試薬が固定されているフォワードサンドイッチ分析が用いられる。分析に用いられる適切な支持体としては、合成ポリマー支持体、例えばポリプロピレン、ポリスチレン、置換ポリスチレン、例えばアミノ化またはカルボキシル化ポリスチレン、ポリアクリルアミド、ポリアミド、ポリ塩化ビニル、ガラスビーズ、アガロース、または、ニトロセルロースが挙げられる。
【０１４６】
[150]本発明に係るタンパク質に特異的な抗体を用いて組織切片の細胞中の腫瘍タンパク質を局所化しそれらを定量するために、ＩＨＣを用いてもよい。一実施態様において、同じ腫瘍サンプル中の２種の別個のタンパク質の発現を評価するために、例えばホルマリンで固定したパラフィン包埋組織サンプルのＩＨＣ二重染色のためのウサギモノクローナル抗体を用いてＩＨＣ二重染色を用いてもよい。
【０１４７】
[151]また本発明は、生体サンプル中の腫瘍タンパク質の存在を検出するためのキットも包含する。このようなキットは、被検体が、ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による阻害の作用をあまり受けない腫瘍に罹っている、または、それらをを成長させるリスクが高い状態にあるかどうかを決定するのに用いることができる。例えば本キットは、生体サンプル中のタンパク質を検出することができる標識された化合物または物質、および、サンプル中のタンパク質量を決定するための手段（例えばタンパク質またはそれらのフラグメントに結合する抗体）を含んでいてもよい。またキットは、キットを用いて得られた結果を解釈するための説明書を含んでいてもよい。抗体ベースのキットの場合、本キットは、例えば：（１）腫瘍タンパク質に結合する第一の抗体（例えば固体支持体に取り付けられた抗体）；および、任意に（２）上記タンパク質または第一の抗体のいずれかに結合しており、検出可能な標識に連結させた第二の異なる抗体を含んでいてもよい。
【０１４８】
[152]本発明はさらに、患者の腫瘍または腫瘍転移を治療する方法を提供するものであり、本方法は、例えば本明細書において説明される方法のいずれかによって該腫瘍細胞がＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤による阻害に対する感受性を有するかどうかを評価することによって、患者が有する可能性があるＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する反応性を診断する工程、前記患者が、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療に対して有効な応答を示す可能性が高い患者であることを確認する工程、および、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与する工程、を含む。一実施態様において、治療に用いられるＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、ＯＳＩ−９０６を含む。
【０１４９】
[153]医療分野における当業者であれば当然のことながら、前記患者に治療有効量のＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与する的確な方式、それに続く患者が有する可能性があるＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する反応性の診断は、治療にあたる医師の裁量で行われると予想される。用量、その他の抗癌剤との組み合わせ、タイミングおよび投与頻度などの投与様式は、患者が有する可能性があるＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する反応性の診断、加えて患者の状態および病歴の影響を受ける可能性がある。従って、ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対して比較的感受性が低いと予測された腫瘍を有すると診断された患者でさえも、具体的には腫瘍のＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する感受性を変更する可能性があるその他の抗癌剤または物質と組み合わせれば、このような阻害剤での治療によっても利益を得る可能性がある。
【０１５０】
[154]本明細書において説明されるいずれかの治療方法の治療有効性は、例えば腫瘍性の状態にある患者に存在する腫瘍のサイズの減少を測定することによって、または、腫瘍細胞の増殖の程度の分子決定基を分析することによって決定することができる。
【０１５１】
[155]本発明はさらに、本明細書において説明される患者の腫瘍もしくは腫瘍転移または癌を治療するあらゆる方法を提供するものであり、本方法は、患者に、治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与し、それに加えて、１種またはそれより多くのその他の細胞毒性の物質、化学療法剤もしくは抗癌剤またはこのような物質の作用を強める化合物を同時にまたは連続的に投与することを含む。本発明に関して、その他の抗癌剤としては、例えば、その他の細胞毒性の物質、化学療法剤もしくは抗癌剤またはこのような物質の作用を強める化合物、抗ホルモン剤、血管新生阻害剤、ＥＭＴを阻害または逆行させる物質（例えばＴＧＦ−ベータ受容体阻害剤）、腫瘍細胞アポトーシス促進性またはアポトーシス刺激性物質、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤、ヒストンデメチラーゼ阻害剤、ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤、シグナル伝達阻害剤、増殖抑制剤、抗ＨＥＲ２抗体もしくは免疫治療活性を有するそれらのフラグメント、増殖抑制剤、「その他のＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤」（すなわち本発明のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤以外のもの）、ＣＯＸＩＩ（シクロオキシゲナーゼＩＩ）阻害剤、および、本明細書において説明されているような抗腫瘍性の免疫反応を強化することができる物質が挙げられる。
【０１５２】
[156]本発明に関して、追加のその他の細胞毒性の物質、化学療法剤もしくは抗癌剤またはこのような物質の作用を強める化合物としては、例えば、アルキル化剤またはアルキル化作用を有する物質、例えばシクロホスファミド（CTX；例えばシトキサン（CYTOXAN(R)））、クロラムブシル（CHL；例えばリューケラン（LEUKERAN(R)））、シスプラチン（CisP；例えばプラチノール（PLATINOL(R)））ブスルファン（例えばマイレラン（MYLERAN(R)））、メルファラン、カルムスチン（BCNU）、ストレプトゾトシン、トリエチレンメラミン（TEM）、マイトマイシンＣなど；抗代謝産物、例えばメトトレキセート（MTX）、エトポシド（ＶＰ１６；例えばベプシド（Vepesid(R)））、６−メルカプトプリン（6MP）、６−チオグアニン（6TG）、シタラビン（Ara-C）、５−フルオロウラシル（5-FU）、カペシタビン（例えばゼローダ（Xeloda(R)））、ダカルバジン（DTIC）など；抗生物質、例えばアクチノマイシンＤ、ドキソルビシン（DXR；例えばアドリアマイシン（adriamycin(R)））、ダウノルビシン（ダウノマイシン）、ブレオマイシン、ミトラマイシンなど；アルカロイド、例えばビンカアルカロイド、例えばビンクリスチン（VCR）、ビンブラスチンなど；およびその他の抗癌剤、例えばパクリタキセル（例えばタキソール（taxol(R)））およびパクリタキセル誘導体、細胞増殖抑制性剤、糖質コルチコイド、例えばデキサメタゾン（DEX；例えばデカドロン（decadron(R)））、および、コルチコステロイド、例えばプレドニゾン、ヌクレオシド酵素阻害剤、例えばヒドロキシ尿素、アミノ酸枯渇酵素、例えばアスパラギナーゼ、ロイコボリンおよびその他の葉酸酸誘導体、および、類似の様々な抗癌剤が挙げられる。また以下の物質も、追加の物質として用いることが可能である：アミホスチン（例えばエチオール（ETHYOL(R)））、ダクチノマイシン、メクロレタミン（ナイトロジェンマスタード）、ストレプトゾシン、シクロホスファミド、ロムスチン（CCNU）、ドキソルビシンリポ（例えばドキシル（DOXIL(R)））、ゲムシタビン（例えばジェムザール（GEMZAR(R)））、ダウノルビシンリポ（例えばダウノキソーム（DAUNOXOME(R)））、プロカルバジン、マイトマイシン、ドセタキセル（例えばタキソテール（TAXOTERE(R)））、アルデスロイキン（アルデスロイキン）、カルボプラチン、オキサリプラチン、クラドリビン、カンプトテシン、CPT11（イリノテカン）、１０−ヒドロキシ７−エチル−カンプトテシン（SN38）、フロクシウリジン、フルダラビン、イフォスファミド、イダルビシン、メスナ、インターフェロンベータ、インターフェロンアルファ、ミトキサントロン、トポテカン、ロイプロリド、メゲストロール、メルファラン、メルカプトプリン、プリカマイシン、ミトタン、ペグアスパラガーゼ、ペントスタチン、ピポブロマン、プリカマイシン、タモキシフェン、テニポシド、テストラクトン、チオグアニン、チオテパ、ウラシルマスタード、ビノレルビン、クロラムブシル、および、ペメトレキセド。
【０１５３】
[157]本発明はさらに、本明細書において説明される患者の腫瘍もしくは腫瘍転移または癌を治療するあらゆる方法を提供するものであり、本方法は、患者に、治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与し、それに加えて、１種またはそれより多くのその他の細胞毒性の物質、化学療法剤もしくは抗癌剤またはこのような物質の作用を強める化合物を同時にまたは連続的に投与することを含む。本発明に関して、その他の抗癌剤としては、例えば、その他の細胞毒性の物質、化学療法剤もしくは抗癌剤またはこのような物質の作用を強める化合物、抗ホルモン剤、血管新生阻害剤、ＥＭＴを阻害または逆行させる物質（例えばＴＧＦ−ベータ受容体阻害剤）、腫瘍細胞アポトーシス促進性またはアポトーシス刺激性物質、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤、ヒストンデメチラーゼ阻害剤、ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤、シグナル伝達阻害剤、増殖抑制剤、抗ＨＥＲ２抗体または免疫治療活性を有するそれらのフラグメント、増殖抑制剤、ＣＯＸＩＩ（シクロオキシゲナーゼＩＩ）阻害剤、および、本明細書において説明されているような抗腫瘍性の免疫反応を強化することができる物質が挙げられる。
【０１５４】
[158]本発明はさらに、本明細書において説明される患者の腫瘍または腫瘍転移を治療するあらゆる方法を提供するものであり、本方法は、患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲ  キナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与し、それに加えて１種またはそれより多くの抗ホルモン剤を同時にまたは連続的に投与することを含む。本明細書で用いられる用語「抗ホルモン剤」は、腫瘍に対するホルモン作用を調節または阻害するように作用する天然または合成の有機化合物またはペプチド化合物を含む。
【０１５５】
[159]抗ホルモン剤としては、例えば：ステロイド受容体アンタゴニスト、抗エストロゲン、例えばタモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼを阻害する４（５）−イミダゾール、その他のアロマターゼ阻害剤、４２−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、および、トレミフェン（例えばファレストン（FARESTON(R)））；抗アンドロゲン、例えばフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、および、ゴセレリン；および、上記のいずれかのものの医薬的に許容される塩、酸または誘導体；例えば胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）ならびに黄体形成ホルモン（ＬＨ）、および、ＬＨＲＨ（黄体形成ホルモン放出ホルモン）のような糖タンパク質ホルモンのアゴニストおよび／またはアンタゴニスト；ゾラデックス（ZOLADEX(R)）（アストラゼネカ（AstraZeneca））として市販されているＬＨＲＨアゴニストの酢酸ゴセレリン；ＬＨＲＨアンタゴニストＤ−アラニンアミドＮ−アセチル−３−（２−ナフタレニル）−Ｄ−アラニル−４−クロロ−Ｄ−フェニルアラニル−３−（３−ピリジニル）−Ｄ−アラニル−１−セリル−Ｎ６−（３−ピリジニルカルボニル）−１−リシル−Ｎ６−（３−ピリジニルカルボニル）−Ｄ−リシル−１−ロイシル−Ｎ６−（１−メチルエチル）−１−リシル−１−プロリン（例えばアンタイド（ANTIDE(R)）、アレス−セロノ（Ares-Serono））；ＬＨＲＨアンタゴニスト酢酸ガニレリクス；ステロイド系抗アンドロゲン物質の酢酸シプロテロン（ＣＰＡ）、および、メゲース（MEGACE(R)）（ブリストル・マイヤーズ・オンコロジー（Bristol-Myers Oncology））として市販されている酢酸メゲストロール；オイレキシン（EULEXIN(R)）（シエーリング社（Schering Corp.））として市販されている非ステロイド系抗アンドロゲン物質のフルタミド（２−メチル−Ｎ−［４，２０−ニトロ−３−（トリフルオロメチル）フェニルプロパンアミド）；非ステロイド系抗アンドロゲン物質のニルタミド、（５，５−ジメチル−３−［４−ニトロ−３−（トリフルオロメチル−４’−ニトロフェニル）−４，４−ジメチル−イミダゾリジン−ジオン）；および、その他の非許容受容体に関するアンタゴニスト、例えばＲＡＲ、ＲＸＲ、ＴＲ、ＶＤＲなどのアンタゴニストが挙げられる。
【０１５６】
[160]上記の化学療法計画で述べられた細胞毒性の物質およびその他の抗癌剤の使用は、一般的に癌治療分野においてよく特徴付けられており、本発明においてそれらを使用することも、多少の調整を行うことで、寛容性および有効性のモニターと投与経路および投与量の制御についても同様に考慮される。例えば細胞毒性物質の実際の投与量は、組織培養法を用いることによって決定された患者の培養細胞の応答に応じて様々であってもよい。その用量は、一般的に、追加のその他の物質の非存在下で用いられる量と比較して少ないと予想される。
【０１５７】
[161]有効な細胞毒性薬の典型的な投与量は、製造元が推奨する範囲であってもよく、インビトロでの応答または動物モデルでの応答で特に指定された場合、約１桁の規模で濃度または量を減少させてもよい。従って、実際の用量は、医師の判断、患者の状態、および、初代培養の悪性細胞または組織培養された組織サンプルのインビトロでの反応性または適切な動物モデルで観察された応答に基づいた治療方法の有効性によって様々であると予想される。
【０１５８】
[162]本発明はさらに、本明細書において説明される患者の腫瘍または腫瘍転移を治療するあらゆる方法を提供するものであり、本方法は、患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与し、それに加えて１種またはそれより多くの血管新生阻害剤を同時にまたは連続的に投与することを含む。
【０１５９】
[163]抗血管形成剤としては、例えば：ＶＥＧＦＲ阻害剤、例えばＳＵ−５４１６、および、ＳＵ−６６６８（スージェン社（Sugen Inc.），米国カリフォルニア州サウスサンフランシスコ）、または、例えば国際特許出願ＷＯ９９／２４４４０、ＷＯ９９／６２８９０、ＷＯ９５／２１６１３、ＷＯ９９／６１４２２、ＷＯ９８／５０３５６、ＷＯ９９／１０３４９、ＷＯ９７／３２８５６、ＷＯ９７／２２５９６、ＷＯ９８／５４０９３、ＷＯ９８／０２４３８、ＷＯ９９／１６７５５、および、ＷＯ９８／０２４３７、および、米国特許第５，８８３，１１３号、５，８８６，０２０号、５，７９２，７８３号、５，８３４，５０４号および６，２３５，７６４号で説明されているもの；ＶＥＧＦ阻害剤、例えばＩＭ８６２（サイトラン社（Cytran Inc.），米国ワシントン州カークランド）；スニチニブ（ファイザー（Pfizer））；アンギオザイム、リボザイム（Ribozyme）（コロラド州ボールダー）およびカイロン（Chiron）（カリフォルニア州エミリービル）製の合成リボザイム；および、ＶＥＧＦに対する抗体、例えばベバシズマブ（例えばアバスチン（AVASTINTM）、ジェネンテック（Genentech），カリフォルニア州サウスサンフランシスコ）、ＶＥＧＦに対する組換えヒト化抗体；例えばαｖβ３、αｖβ５およびαｖβ６インテグリンおよびそれらのサブタイプに対するインテグリン受容体アンタゴニストおよびインテグリンアンタゴニスト、例えばシレンジタイド（cilengitide）（ＥＭＤ１２１９７４）、または、抗インテグリン抗体、例えばαｖβ３特異的ヒト化抗体（例えばバイタクシン（VITAXIN(R)））；例えばＩＦＮ−アルファのような因子（米国特許第４１５３０，９０１号、４，５０３，０３５号および５，２３１，１７６号）；アンギオスタチンおよびプラスミノゲンフラグメント（例えばクリングル１−４、クリングル５、クリングル１−３（O’Reilly, M. S. et al.(1994)Cell 79:315-328;Cao et al.(1996)J. Biol. Chem. 271: 29461-29467;Cao et al.(1997)J. Biol. Chem. 272:22924-22928）；エンドスタチン（O’Reilly, M. S. et al.(1997)Cell 88:277；および、国際特許公報ＷＯ９７／１５６６６）；トロンボスポンジン（TSP-1;Frazier,(1991)Curr. Opin. Cell Biol. 3:792）；血小板第４因子（ＰＦ４）；プラスミノゲン活性化因子／ウロキナーゼ阻害剤；ウロキナーゼ受容体アンタゴニスト；ヘパリナーゼ；フマギリン類似体、例えばＴＮＰ−４７０１；スラミンおよびスラミン類似体；血管新生抑制性のステロイド；ｂＦＧＦアンタゴニスト；ｆｌｋ−１およびｆｌｔ−１アンタゴニスト；抗血管新生剤、例えばＭＭＰ−２（マトリックス−メタロプロテイナーゼ２）阻害剤、および、ＭＭＰ−９（マトリックス−メタロプロテイナーゼ９）阻害剤が挙げられる。有用なマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤の例は、国際特許公報ＷＯ９６／３３１７２、ＷＯ９６／２７５８３、ＷＯ９８／０７６９７、ＷＯ９８／０３５１６、ＷＯ９８／３４９１８、ＷＯ９８／３４９１５、ＷＯ９８／３３７６８、ＷＯ９８／３０５６６、ＷＯ９０／０５７１９、ＷＯ９９／５２９１０、ＷＯ９９／５２８８９、ＷＯ９９／２９６６７、および、ＷＯ９９／０７６７５、欧州特許公報第８１８，４４２号、７８０，３８６号、１，００４，５７８号、６０６，０４６号および９３１，７８８号；英国特許公報第９９１２９６１号および米国特許第５，８６３，９４９号および５，８６１，５１０号で説明される。好ましいＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９阻害剤は、ＭＭＰ−１を阻害する活性がほとんどないかまったくないものである。より好ましくは、その他のマトリックス−メタロプロテイナーゼ（すなわちＭＭＰ−１、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−４、ＭＭＰ−５、ＭＭＰ−６、ＭＭＰ−７、ＭＭＰ−８、ＭＭＰ−１０、ＭＭＰ−１１、ＭＭＰ−１２、および、ＭＭＰ−１３）に対してＭＭＰ−２および／またはＭＭＰ−９を選択的に阻害するものである。
【０１６０】
[164]本発明はさらに、本明細書において説明される患者の腫瘍または腫瘍転移を治療するあらゆる方法を提供するものであり、本方法は、患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与し、それに加えて１種またはそれより多くの腫瘍細胞アポトーシス促進性またはアポトーシス刺激性物質を同時にまたは連続的に投与することを含む。
【０１６１】
[165]本発明はさらに、本明細書において説明される患者の腫瘍または腫瘍転移を治療するあらゆる方法を提供するものであり、本方法は、患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与し、それに加えて１種またはそれより多くのシグナル伝達阻害剤を同時にまたは連続的に投与することを含む。
【０１６２】
[166]シグナル伝達阻害剤としては、例えば：ｅｒｂＢ２受容体阻害剤、例えばｅｒｂＢ２受容体に結合する有機分子または抗体、例えばトラスツズマブ（例えばハーセプチン（HERCEPTIN(R)））；その他のタンパク質チロシン−キナーゼの阻害剤、例えばイマチニブ（例えばグリベック（GLEEVEC(R)））；ＥＧＦＲキナーゼ阻害剤（本明細書の以下を参照）；Ｍｅｔキナーゼ阻害剤（例えばＰＦ−２３４１０６６）；ｒａｓ阻害剤；ｒａｆ阻害剤；ＭＥＫ阻害剤；ｍＴＯＲ阻害剤、例えばｍＴＯＲＣ１とｍＴＯＲＣ２キナーゼの両方に結合してそれらを直接阻害するｍＴＯＲ阻害剤（例えばＯＳＩ−０２７，ＯＳＩファーマシューティカルズ（OSI Pharmaceuticals））；ＰＩ３Ｋ／ｍＴＯＲキナーゼの二重阻害剤であるｍＴＯＲ阻害剤、例えばFan, Q-W et al (2006) Cancer Cell 9:341-349 and Knight, Z.A. et al. (2006) Cell 125:733-747で説明されているような化合物ＰＩ−１０３；ｍＴＯＲキナーゼの二重の阻害剤であるｍＴＯＲ阻害剤、および、１種またはそれより多くのその他のＰＩＫＫ（またはＰＩＫ関連）キナーゼファミリーに属するものが挙げられる。このようなファミリーに属するものとしては、ＭＥＣ１、ＴＥＬ１、ＲＡＤ３、ＭＥＩ−４１、ＤＮＡ−ＰＫ、ＡＴＭ、ＡＴＲ、ＴＲＲＡＰ、ＰＩ３ＫおよびＰＩ４Ｋキナーゼ；サイクリン依存性キナーゼ阻害剤；プロテインキナーゼＣ阻害剤；ＰＩ−３キナーゼ阻害剤；および、ＰＤＫ−１阻害剤（このような阻害剤のいくつかの例および癌治療の臨床試験におけるそれらの使用の説明については、Dancey, J. and Sausville, E.A. (2003) Nature Rev. Drug Discovery 2:92-313を参照）が挙げられる。
【０１６３】
[167]ＥＧＦＲキナーゼ阻害剤としては、例えば、［６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）−４−キナゾリン−４−イル］−（３−エチニルフェニル）アミン（また、ＯＳＩ−７７４、エルロチニブ、または、タルセバ（TARCEVATM）（塩酸エルロチニブ）；ＯＳＩファーマシューティカルズ／ジェネンテック／ロシュ（Roche）としても知られている）（米国特許第５，７４７，４９８号；国際特許公報ＷＯ０１／３４５７４、および、Moyer, J.D. et al. (1997) Cancer Res. 57:4838-4848);CI-1033（以前は、ＰＤ１８３８０５；ファイザーとして知られている）（Sherwood et al., 1999, Proc. Am. Assoc. Cancer Res. 40:723）；ＰＤ−１５８７８０（ファイザー）；ＡＧ−１４７８（カリフォルニア大学）；ＣＧＰ−５９３２６（ノバルティス（Novartis））；ＰＫＩ−１６６（ノバルティス）；ＥＫＢ−５６９（ワイス（Wyeth））；ＧＷ−２０１６（また、ＧＷ−５７２０１６、または、二トシル酸ラパチニブ；ＧＳＫとしても知られている）；ゲフィチニブ（また、ＺＤ１８３９、または、イレッサ（IRESSATM）；アストラゼネカとしても知られている）（Woodburn et al., 1997, Proc. Am. Assoc. Cancer Res. 38:633）；および、抗体ベースのＥＧＦＲキナーゼ阻害剤が挙げられる。本発明に従って使用することができる特に好ましい低分子量のＥＧＦＲキナーゼ阻害剤は、［６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）−４−キナゾリン−４−イル］−（３−エチニルフェニル）アミン（すなわちエルロチニブ）、その塩酸塩（すなわち塩酸エルロチニブ、タルセバ（TARCEVATM））、または、その他の塩の形態（例えばメシル酸エルロチニブ）である。抗体ベースのＥＧＦＲキナーゼ阻害剤としては、ＥＧＦＲの活性化をその天然リガンドによって部分的または完全にブロックすることができるあらゆる抗ＥＧＦＲ抗体または抗体フラグメントが挙げられる。抗体ベースのＥＧＦＲキナーゼ阻害剤の例としては、これらに限定されないが、Modjtahedi, H., et al., 1993, Br. J. Cancer 67:247-253; Teramoto, T., et al., 1996, Cancer 77:639-645; Goldstein et al., 1995, Clin. Cancer Res. 1:1311-1318; Huang, S. M., et al., 1999, Cancer Res. 15:59(8):1935-40; and Yang, X., et al., 1999, Cancer Res. 59:1236-1243で説明されているものが挙げられる。従ってＥＧＦＲキナーゼ阻害剤は、モノクローナル抗体のＭａｂＥ７．６．３（Yang, X.D. et al.(1999) Cancer Res. 59:1236-43）、または、ＭａｂＣ２２５（ＡＴＣＣ登録番号ＨＢ−８５０８）、または、それらの結合特異性を有する抗体または抗体フラグメントであってもよい。適切なモノクローナル抗体のＥＧＦＲキナーゼ阻害剤としては、これらに限定されないが、ＩＭＣ−Ｃ２２５（また、セツキシマブまたはアービタックス（ERBITUXTM）；イムクローン・システムズ（Imclone Systems）としても知られている）、ＡＢＸ−ＥＧＦ（アブジェニックス（Abgenix））、ＥＭＤ７２０００（メルク社（Merck KgaA），ダルムシュタット）、ＲＨ３（ヨーク・メディカル・バイオサイエンス（York Medical Bioscience Inc.））、および、ＭＤＸ−４４７（メダレックス（Medarex）／メルク社）が挙げられる。
【０１６４】
[168]またＥＧＦＲキナーゼ阻害剤としては、例えば、ＥＧＦＲキナーゼに対して活性を有するマルチキナーゼ阻害剤、すなわちＥＧＦＲキナーゼと１種またはそれより多くの追加のキナーゼを阻害する阻害剤も挙げられる。このような化合物の例としては、ＥＧＦＲおよびＨＥＲ２阻害剤ＣＩ−１０３３（以前は、ＰＤ１８３８０５；ファイザーとして知られていた）；ＥＧＦＲおよびＨＥＲ２阻害剤ＧＷ−２０１６（また、ＧＷ−５７２０１６、または、二トシル酸ラパチニブ；ＧＳＫとしても知られている）；ＥＧＦＲおよびＪＡＫ２／３阻害剤ＡＧ４９０（チルホスチン）；ＥＧＦＲおよびＨＥＲ２阻害剤ＡＲＲＹ−３３４５４３（アレイ・バイオファーマ（Array BioPharma））；ＢＩＢＷ−２９９２、不可逆的な二重のＥＧＦＲ／ＨＥＲ２キナーゼ阻害剤（ベーリンガー・インゲルハイム社（Boehringer Ingelheim Corp.））；ＥＧＦＲおよびＨＥＲ２阻害剤ＥＫＢ−５６９（ワイス）；ＶＥＧＦ−Ｒ２およびＥＧＦＲ阻害剤ＺＤ６４７４（また、ZACTIMATM；アストラゼネカ・ファーマシューティカルズ（AstraZeneca Pharmaceuticals）としても知られている）、および、ＥＧＦＲおよびＨＥＲ２阻害剤ＢＭＳ−５９９６２６（ブリストル・マイヤーズ・スクイブ（Bristol-Myers Squibb））が挙げられる。
【０１６５】
[169]ＥｒｂＢ２受容体阻害剤としては、例えば、ＥｒｂＢ２受容体阻害剤、例えばラパチニブ、または、ＧＷ−２８２９７４（いずれもグラクソ・ウェルカム社（Glaxo Wellcome plc））、モノクローナル抗体、例えばＡＲ−２０９（アロネックス・ファーマシューティカルズ社（Aronex Pharmaceuticals Inc.），米国テキサス州ウッドランズ）、および、２Ｂ−１（カイロン）、および、ｅｒｂＢ２阻害剤、例えば国際公報ＷＯ９８／０２４３４、ＷＯ９９／３５１４６、ＷＯ９９／３５１３２、ＷＯ９８／０２４３７、ＷＯ９７／１３７６０、および、ＷＯ９５／１９９７０、および、米国特許第５，５８７，４５８号、５，８７７，３０５号、６，４６５，４４９号および６，５４１，４８１号で説明されているものが挙げられる。
【０１６６】
[170]本発明はさらに、本明細書において説明される患者の腫瘍または腫瘍転移を治療するあらゆる方法を提供するものであり、本方法は、患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与し、それに加えて抗ＨＥＲ２抗体（例えばトラスツズマブ、ジェネンテック）、または、免疫治療活性を有するそれらのフラグメントを同時にまたは連続的に投与することを含む。
【０１６７】
[171]本発明はさらに、本明細書において説明される患者の腫瘍または腫瘍転移を治療するあらゆる方法を提供するものであり、本方法は、患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与し、それに加えて１種またはそれより多くの追加の増殖抑制剤を同時にまたは連続的に投与することを含む。
【０１６８】
[172]追加の増殖抑制剤としては、例えば酵素ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼの阻害剤、および、受容体チロシンキナーゼＰＤＧＦＲの阻害剤、例えば、米国特許第６，０８０，７６９号、６，１９４，４３８号、６，２５８，８２４号、６，５８６，４４７号、６，０７１，９３５号、６，４９５，５６４号、６，１５０，３７７号、６，５９６，７３５号および６，４７９，５１３号および国際特許公報ＷＯ０１／４０２１７で開示され特許請求された化合物、および、ＦＧＦＲキナーゼ阻害剤が挙げられる。
【０１６９】
[173]本発明に従って使用することができるＰＤＧＦＲキナーゼ阻害剤の例としては、イマチニブ（グリベック（GLEEVEC(R)）；ノバルティス）；ＳＵ−１２２４８（リンゴ酸スニチニブ、スーテント（SUTENT(R)）；ファイザー）；ダサチニブ（スプリセル（SPRYCEL(R)）；ＢＭＳ；また、ＢＭＳ−３５４８２５としても知られている）；ソラフェニブ（ネクサバール（NEXAVAR(R)）；バイエル（Bayer）；また、Ｂａｙ−４３−９００６としても知られている）；ＡＧ−１３７３６（アキシチニブ；ファイザー）；ＲＰＲ１２７９６３（サノフィ−アベンティス）；ＣＰ−８６８５９６（ファイザー／ＯＳＩファーマシューティカルズ）；ＭＬＮ−５１８（タンヅチニブ；ミレニアム・ファーマシューティカルズ（Millennium Pharmaceuticals））；ＡＭＧ−７０６（モテサニブ；アムジェン（Amgen））；アラバ（ARAVA(R)）（レフルノミド；サノフィ・アベンティス（Sanofi-Aventis））；また、ＳＵ１０１としても知られている）、および、ＯＳＩ−９３０（ＯＳＩファーマシューティカルズ）が挙げられ；さらに本発明に従って使用することができるＦＧＦＲキナーゼ阻害剤である低分子量ＰＤＧＦＲキナーゼ阻害剤の追加の好ましい例としては、ＸＬ−９９９（エクセリクシス（Exelixis））；ＳＵ６６６８（ファイザー）；ＣＨＩＲ−２５８／ＴＫＩ−２５８（カイロン）；ＲＯ４３８３５９６（ホフマン・ラ・ロシュ（Hoffmann-La Roche)）、および、ＢＩＢＦ−１１２０（ベーリンガー・インゲルハイム）が挙げられる。
【０１７０】
[174]本発明に従って使用することができるＦＧＦＲキナーゼ阻害剤の例としては、ＲＯ−４３９６６８６（ホフマン・ラ・ロシュ）；ＣＨＩＲ−２５８（カイロン；また、ＴＫＩ−２５８としても知られている）；ＰＤ１７３０７４（ファイザー）；ＰＤ１６６８６６（ファイザー）；ＥＮＫ−８３４、および、ＥＮＫ−８３５（いずれもエンカム・ファーマシューティカルズ社（Enkam Pharmaceuticals A/S））；および、ＳＵ５４０２（ファイザー）が挙げられる。さらに本発明に従って使用することができるＰＤＧＦＲキナーゼ阻害剤である低分子量ＦＧＦＲキナーゼ阻害剤の追加の好ましい例としては、ＸＬ−９９９（エクセリクシス）；ＳＵ６６６８（ファイザー）；ＣＨＩＲ−２５８／ＴＫＩ−２５８（カイロン）；ＲＯ４３８３５９６（ホフマン・ラ・ロシュ）、および、ＢＩＢＦ−１１２０（ベーリンガー・インゲルハイム）が挙げられる。
【０１７１】
[175]本発明はさらに、本明細書において説明される患者の腫瘍または腫瘍転移を治療するあらゆる方法を提供するものであり、本方法は、患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与し、それに加えてＣＯＸＩＩ（シクロオキシゲナーゼＩＩ）阻害剤を同時にまたは連続的に投与することを含む。有用なＣＯＸ−ＩＩ阻害剤の例としては、アレコキシブ（例えばセレブレックス（CelebrexTM））、バルデコキシブ、および、ロフェコキシブが挙げられる。
【０１７２】
[176]本発明はさらに、本明細書において説明される患者の腫瘍または腫瘍転移を治療するあらゆる方法を提供するものであり、本方法は、患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与し、それに加えて放射線または放射性医薬品での治療を同時にまたは連続的に投与することを含む。
【０１７３】
[177]放射線源は、治療を受ける患者にとって外部のものであってもよいし、または、内部のものであってもよい。放射線源が患者にとって外部のものである場合、そのような治療は外部ビーム放射線療法（ＥＢＲＴ）として知られている。放射線源が患者にとって内部のものである場合、そのような治療はブラキー治療（ＢＴ）と呼ばれる。本発明に従って使用するための放射性原子は、これらに限定されないが、ラジウム、セシウム１３７、イリジウム１９２、アメリシウム２４１、金１９８、コバルト５７、銅６７、テクネチウム９９、ヨウ素１２３、ヨウ素１３１、および、インジウム１１１からなる群より選択することができる。
【０１７４】
[178]放射線療法は、切除不能な腫瘍または手術不可能な腫瘍および／もしくは腫瘍転移を制御するための標準的な治療である。放射線療法を化学療法と組み合わせると、改善された結果がみられる。放射線療法は、標的領域に送達された高線量の放射線によって腫瘍と正常な組織両方の増殖可能な細胞を殺すという原理に基づく。放射線量は、一般的に放射線吸収線量（Ｇｙ）、時間および分割に関して定義され、腫瘍学者による慎重な定義が必要である。患者が受ける放射線量は様々な考察によって決定されると予想されるが、最も重要な２点は、体の他の重要な構造または臓器に対する腫瘍の位置と、腫瘍が広がっている程度である。放射線療法を受ける患者の典型的な治療計画は、１〜６週間にわたる治療スケジュールで、患者に投与される合計線量は１０〜８０Ｇｙであり、１回の１日分割量は約１．８〜２．０Ｇｙであり、１週間のうち５日と予想される。本発明の好ましい実施態様において、人間の患者の腫瘍を本発明と放射線との併用療法で治療すれば、相乗効果がある。言い換えれば、本発明の組み合わせを含む物質を用いた腫瘍増殖の阻害は、放射線と組み合わせることによって強化され、さらに任意に追加の化学療法剤または抗癌剤を用いてもよい。アジュバントの放射線療法のパラメーターは、例えば国際特許公報ＷＯ９９／６００２３に記載されたものがある。
【０１７５】
[179]本発明はさらに、本明細書において説明される患者の腫瘍または腫瘍転移を治療するあらゆる方法を提供するものであり、本方法は、患者に治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を投与し、それに加えて抗腫瘍性の免疫反応を強化することができる１種またはそれより多くの物質での治療を同時にまたは連続的に投与することを含む。
【０１７６】
[180]抗腫瘍性の免疫反応を強化することができる物質としては、例えば、ＣＴＬＡ４（細胞障害性リンパ球抗原４）抗体（例えばＭＤＸ−ＣＴＬＡ４、イピリムマブ、ＭＤＸ−０１０）、および、ＣＴＬＡ４をブロックすることができるその他の物質が挙げられる。本発明において用いることができる特異的なＣＴＬＡ４抗体としては、米国特許第６，６８２，７３６号で説明されているものが挙げられる。
【０１７７】
[181]本発明に関して、物質または治療の「有効量」は上記で定義した通りである。物質または治療の「治療量未満の量（sub-therapeutic amount）」は、その物質または治療の有効量より少ない量であるが、有効量または治療量未満の量のその他の物質または治療と組み合わせた場合、例えば結果得られた有効な作用との相乗効果または副作用の減少のために医師が望む結果を得ることができる量である。
【０１７８】
[182]本明細書で用いられる用語「患者」は、好ましくは、癌または前癌性の状態または病変（例えばその他の治療に応答しなかった癌の難治性の型も含む）についてＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療が必要な人間を意味する。しかしながら用語「患者」は人間以外の動物、好ましくは哺乳動物を意味することもあり、このような動物としては、なかでも、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療が必要なイヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、および、人間以外の霊長類のような動物が挙げられる。
【０１７９】
[183]本発明における癌または腫瘍および腫瘍転移としては、これらに限定されないが、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、および、白血病またはリンパ球系腫瘍、例えばＮＳＣＬ（非小細胞肺）癌、膵臓癌、頭頸部癌、口腔癌または鼻の扁平上皮癌、結腸癌、卵巣癌または乳癌癌、肺癌、細気管支肺胞上皮癌、骨癌、皮膚癌、頭頚部癌、ＨＮＳＣＣ、皮膚黒色腫または眼内黒色腫、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、肛門領域の癌、胃癌（stomach cancer）、胃癌（gastric cancer）、子宮癌、卵管癌、子宮内膜癌、膣癌、外陰癌、ホジキン病、食道癌、小腸癌、結腸直腸癌、内分泌癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、副腎皮質癌（ＡＣＣ）、軟部組織の肉腫、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、骨髄腫、多発性骨髄腫、尿道癌、陰茎癌、前立腺癌、膀胱癌、尿管癌、腎盂癌、中皮腫、肝細胞癌、胆管癌、腎臓癌、腎細胞癌、慢性または急性白血病、リンパ球性リンパ腫、神経芽細胞腫、中枢神経系（ＣＮＳ）腫瘍、脊髄の軸の腫瘍、脳幹グリオーマ、多形性膠芽腫、星状細胞腫、神経鞘腫、脳室上皮腫、髄芽細胞腫、髄膜腫、扁平上皮癌、下垂体腺腫が挙げられ、さらに例えば上記の癌のいずれか、または、上記の癌の１種またはそれより多くの組み合わせの難治性の型も含まれる。癌に加えて、本発明の方法はまた、前癌状態または病変、例えば口腔白板症、日光性角化症（日光性角化症）、結腸または直腸の前癌状態のポリープ、胃上皮細胞の異形成、腺腫の異形成、遺伝性非腺腫性大腸癌症候群（ＨＮＰＣＣ）、バレット食道、膀胱の異形成、肝硬変または瘢痕化、および、前癌状態の頚部の状態などに使用することもできる。
【０１８０】
[184]本明細書で用いられる用語「難治性」は、治療（例えば化学療法薬、生物学的に作用する物質、および／または、放射線療法）が効果のないことが証明されている癌を定義するために用いられる。難治性癌の腫瘍は収縮する場合もあるが、治療が有効であると決定されるほどではない。しかしながら、通常は腫瘍は治療前と同じ大きさを保つか（病勢安定）、または、成長する（進行性の病気）。本明細書で用いられるこの用語は、本明細書において説明される治療または物質のいずれにも適用することができ、これらが単一の物質として用いられる場合または組み合わせとして用いられる場合も適用することができる。
【０１８１】
[185]本発明の目的に関して、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤と追加の抗癌剤との「共投与」およびそれらを「共投与すること」（いずれの構成要素も、以下「２種の活性物質」と称する）は、２種の活性物質の、別々または一緒のあらゆる投与を意味し、ここで２種の活性物質は、併用療法の利点が得られるように設計された適切な薬剤投与計画の一部として投与される。従ってこれら２種の活性物質は、同じ医薬組成物の一部として、または、別々の医薬組成物で投与することができる。追加の物質は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤の投与の前に、それと同時に、または、それに続いて投与してもよいし、または、それらをいくつか組み合わせて投与してもよい。ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤が繰り返しのインターバルで、例えば標準的な治療期間の間に患者に投与される場合、追加の物質は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤それぞれの投与の前に、それと同時に、もしくはそれに続いて、または、それらをいくつか組み合わせて投与してもよいし、または、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療について異なるインターバルで、または、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤での治療期間の前に、その間のあらゆる時に、または、それに続いて単回投与することによって投与してもよい。
【０１８２】
[186]ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、典型的には、当業界で知られた、例えば国際特許公報ＷＯ０１／３４５７４で開示されているような、患者を治療するための（有効性と安全性の見通しの両面から）最も有効な癌治療を提供する薬剤投与計画で患者に投与されると予想される。本発明の治療方法を行う際に、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、当業界でよく知られているあらゆる有効な方式で投与することができ、例えば、治療しようとする癌のタイプ、用いる予定の具体的なＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤、および、例えば公開された臨床的な研究の結果に基づく担当医師の医学的判断に応じて経口、局所、静脈内、腹膜内、筋肉内、関節内、皮下、鼻腔内、眼内、膣内、直腸内または皮内経路で投与することができる。
【０１８３】
[187]投与されたＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤の量とＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤投与のタイミングは、治療を受ける患者のタイプ（人種、性別、年齢、体重など）と状態、病気の重症度または治療しようとする状態、さらには投与経路によって決定されると予想される。例えばＩＧＦ−１ＲおよびＩＲキナーゼの両方を阻害する低分子量のＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、１日あたり、または、１週間あたり０．００１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の用量で、１回の用量または数回に分けた用量で、または、連続的な点滴によって患者に投与することができる（例えば国際特許公報ＷＯ０１／３４５７４を参照）。具体的に言えば、ＯＳＩ−９０６または類似の化合物のような化合物は、１日あたり５〜２００ｍｇ、または、１週間あたり１００−１６００ｍｇの範囲の用量で、１回の用量または数回に分けた用量で、または、連続的な点滴によって患者に投与することができる。場合によっては、前述の範囲の下限より低い用量レベルでも適量よりも多い場合もあり、一方でその他のケースにおいて、なんら有害な副作用を引き起こすことなくさらにより高い用量が用いられる場合もあるが、このようなより高い用量はまず、一日かけて投与するために数回分の少ない用量に分割される。
【０１８４】
[188]ＩＧＦ−１ＲおよびＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤およびその他の追加の物質は、別々にまたは一緒に、同一または異なる経路で、および、多種多様の異なる投薬形態で投与することができる。例えばＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、好ましくは経口投与または非経口投与される。ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤がＯＳＩ−９０６またはこのような化合物と類似した化合物である場合、経口投与が好ましい。ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤およびその他の追加の物質はいずれも、１回または複数回の用量で投与することができる。
【０１８５】
[189]ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、様々な医薬的に許容される不活性キャリアーと共に、錠剤、カプセル、ロゼンジ、トローチ、ハードキャンディー、粉末、スプレー、クリーム、軟膏、坐剤、ゼリー、ゲル、ペースト、ローション、軟膏、エリキシル、シロップなどの形態で投与することができる。このような投薬形態の投与は、１回または複数回の用量で行うことができる。キャリアーとしては、固形の希釈剤または充填剤、滅菌水性媒体、および、様々な非毒性の有機溶媒などが挙げられる。経口用医薬組成物は、適切に加糖したり、および／または、フレーバーを付けたりすることができる。
【０１８６】
[190]ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、スプレー、クリーム、軟膏、坐剤、ゼリー、ゲル、ペースト、ローション、軟膏などの形態で、様々な医薬的に許容される不活性キャリアーと共に組み合わせることができる。このような投薬形態の投与は、１回または複数回の用量で行うことができる。キャリアーとしては、固形の希釈剤または充填剤、滅菌水性媒体、および、様々な非毒性の有機溶媒などが挙げられる。
【０１８７】
[191]ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を含む医薬組成物の製造方法は、当業界でよく知られており、例えば国際特許公報ＷＯ０１／３４５７４で説明されている。本発明の教示を考慮すれば、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を含む医薬組成物の製造方法は、上記で引用された出版物およびその他の既知の参考文献から、例えばRemington’s Pharmaceutical Sciences, マック・パブリッシング社(Mack Publishing Company), ペンシルバニア州イーストン, 第１８版（１９９０）から明らかであると予想される。
【０１８８】
[192]ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤の経口投与の場合、一方または両方の活性物質を含む錠剤は、様々な賦形剤、例えば、微結晶性セルロース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸二カルシウムおよびグリシンのいずれかと、様々な崩壊剤、例えばデンプン（および好ましくはトウモロコシ、ジャガイモまたはタピオカデンプン）、アルギン酸およびある種の複合ケイ酸塩と共に、さらに顆粒結合剤（granulation binder)、例えばポリビニルピロリドン、スクロース、ゼラチン、および、アカシアと組み合わされる。加えて、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウムおよびタルクなどの潤滑剤が、錠剤形成に極めて有用であることが多い。また、ゼラチンカプセルにおける充填剤として類似のタイプの固形組成物も用いることができ、これに関して好ましい材料としては、ラクトースまたは乳糖、加えて高分子量ポリエチレングリコールが挙げられる。経口投与に水性懸濁液および／またはエリキシルが望ましい場合、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、様々な甘味剤または矯味矯臭剤、着色性の物質または色素と組み合わせてもよく、さらに、必要に応じて、乳化剤および／または懸濁化剤、同様に水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン、および、それらの組み合わせなどの様々なもののような希釈剤も組み合わせてもよい。
【０１８９】
[193]活性物質のいずれかまたはその両方を非経口投与する場合、ゴマ油もしくは落花生油の溶液、または水性プロピレングリコールの溶液のいずれかが用いられる可能性があり、加えて活性物質またはそれに相当するそれらの水溶性塩を含む滅菌水溶液が用いられる可能性もある。このような滅菌水溶液は好ましくは適切に緩衝化されており、さらに好ましくは例えば必要十分量の食塩水またはグルコースで等張にされている。これらの特定の水溶液は、静脈内、筋肉内、皮下および腹膜内注射に特に適している。関節内、筋肉内および皮下注射には、油性溶液が適している。これら全ての溶液の滅菌条件下での調製は、当業者によく知られている標準的な製薬技術によって容易に達成される。
【０１９０】
[194]加えて、活性物質のいずれかまたはその両方を局所投与してもよく、これは、標準的な製薬上の実施に従って、例えばクリーム、ローション、ゼリー、ゲル、ペースト、軟膏、軟膏などによって局所投与される。例えば約０．１％（質量／体積）〜約５％（質量／体積）濃度のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を含む局所製剤を製造することができる。
【０１９１】
[195]獣医学の目的について、活性物質は、上述の形態および上述の経路のいずれかを用いて別々または一緒に動物に投与することができる。好ましい実施態様において、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、カプセル、ボーラス、錠剤、液状の飲薬の形態で、注射によって、または、インプラントとして投与される。その代わりに、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は動物用飼料と共に投与してもよく、この目的のために、通常の動物用飼料のための濃縮した飼料添加剤または予備混合物を調製してもよい。このような調合物は、標準的な獣医学診療に従って従来の方式で製造される。
【０１９２】
[196]本明細書で用いられる用語「その他のＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤」は、併用療法のためにＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害する本発明のＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に添加される追加のＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤について述べられる場合、目下当業界でよく知られているあらゆるＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を意味するものであり、このような阻害剤としては、患者に投与すると、特に患者におけるＩＧＦ−１受容体の活性化に関与し、その天然のリガンドのＩＧＦ−１Ｒに結合した結果生じる生物活性の阻害を引き起こすあらゆる化学物質が挙げられる。このようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤としては、患者における癌の治療に関連するＩＧＦ−１Ｒ活性化をブロックし、さらにＩＧＦ−１Ｒ活性化の下流の生物学的作用をブロックすることができるあらゆる物質が挙げられる。このような阻害剤は、受容体の細胞内ドメインに直接結合し、そのキナーゼ活性を阻害することによって作用する可能性がある。あるいはこのような阻害剤は、ＩＧＦ−１受容体の正常な生物活性が妨害または低減されるように、ＩＧＦ−１受容体のリガンド結合部位またはそれらの一部を占有することによって受容体をその天然リガンドと接触不可能にすることによって作用する可能性がある。あるいはこのような阻害剤は、ＩＧＦ−１Ｒポリペプチドの二量体化またはＩＧＦ−１Ｒポリペプチドとその他のタンパク質との相互作用を調節するか、または、ＩＧＦ−１Ｒのユビキチン化およびエンドサイトーシスによる分解を強化することによって作用する可能性がある。ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤はまた、ＩＧＦ−１Ｒを活性化することができるＩＧＦ−１の量を減少させることによって、例えばＩＧＦ−１のその受容体への結合を拮抗させることによって、ＩＧＦ−１のレベルを低くすることによって、または、ＩＧＦ−１と、ＩＧＦ−１Ｒ以外のタンパク質、例えばＩＧＦ結合タンパク質（例えばＩＧＦＢＰ３）との結合を促進することによっても作用する可能性がある。ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤としては、これらに限定されないが、低分子量の阻害剤、抗体または抗体フラグメント、アンチセンスコンストラクト、低分子干渉ＲＮＡ（すなわちｄｓＲＮＡによるＲＮＡ干渉；ＲＮＡｉ）、および、リボザイムが挙げられる。好ましい実施態様において、ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、ヒトＩＧＦ−１Ｒに特異的に結合する有機小分子または抗体である。
【０１９３】
[197]ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤としては、例えば、イミダゾピラジンＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤、キナゾリンＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤、ピリド−ピリミジンＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤、ピリミド−ピリミジンＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤、ピロロ−ピリミジンＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤、ピラゾロ−ピリミジンＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤、フェニルアミノ−ピリミジンＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤、オキシインドールＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤、インドロカルバゾールＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤、フタラジンＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤、イソフラボンＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤、キノロンＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤、および、チルホスチンＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤、ならびにこのようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤のあらゆる医薬的に許容される塩および溶媒和物が挙げられる。ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤のさらなる例としては、国際特許公報ＷＯ０５／０９７８００（これは、６，６−二環の置換ヘテロ二環式プロテインキナーゼ阻害剤が説明されている）、国際特許公報ＷＯ０５／０３７８３６（これは、イミダゾピラジンＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤が説明されている）、国際特許公報ＷＯ０３／０１８０２１およびＷＯ０３／０１８０２２（これは、ＩＧＦ−１Ｒ関連疾患を治療するためのピリミジンが説明されている）、国際特許公報ＷＯ０２／１０２８０４およびＷＯ０２／１０２８０５（これは、シクロリグナンおよびＩＧＦ−１Ｒ阻害剤としてのシクロリグナンが説明されている）、国際特許公報ＷＯ０２／０９２５９９（これは、ＩＧＦ−１Ｒチロシンキナーゼ阻害に応答する病気を治療するためのピロロピリミジンが説明されている）、国際特許公報ＷＯ０１／７２７５１（これは、チロシンキナーゼ阻害剤としてのピロロピリミジンが説明されている）に記載されているもの、さらに、国際特許公報ＷＯ００／７１１２９（これは、キナーゼのピロロトリアジン阻害剤が説明されている）、および、国際特許公報ＷＯ９７／２８１６１（これは、ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンおよびチロシンキナーゼ阻害剤としてのそれらの使用が説明されている）に記載されているもの、インビトロおよびインビボでのＩＧＦ−１Ｒ阻害活性を有するチルホスチンを説明しているParrizas等（Endocrinology, 138:1427-1433 (1997)）、国際特許公報ＷＯ００／３５４５５（これは、ＩＧＦ−１Ｒ阻害剤としてのヘテロアリール−アリール尿素が説明されている）、国際特許公報ＷＯ０３／０４８１３３（これは、ＩＧＦ−１Ｒのモジュレーターとしてのピリミジン誘導体が説明されている）、国際特許公報ＷＯ０３／０２４９６７、ＷＯ０３／０３５６１４、ＷＯ０３／０３５６１５、ＷＯ０３／０３５６１６およびＷＯ０３／０３５６１９（これは、キナーゼタンパク質に阻害作用を有する化学物質が説明されている）、国際特許公報ＷＯ０３／０６８２６５（これは、過剰増殖性の状態を治療するための方法および組成物が説明されている）、国際特許公報ＷＯ００／１７２０３（これは、プロテインキナーゼ阻害剤としてのピロロピリミジンが説明されている）、日本国特許公報ＪＰ０７／１３３２８０（これは、セフェム系化合物、その製造および抗菌性組成物が説明されている）、プテリジンの研究および４位が非置換のプテリジンを説明しているAlbert, A. et al., Journal of the Chemical Society, 11: 1540-1547 (1970)、および、ピラジンからの３−４−ジヒドロプテリジンを介したプテリジン（４位非置換）の合成を説明しているA. Albert et al., Chem. Biol. Pteridines Proc. Int. Symp., 4th, 4: 1-5 (1969)に記載されているものが挙げられる。
【０１９４】
[198]本発明において有用なＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤としては、米国特許公開公報ＵＳ２００６／０２３５０３１で説明されているような式（Ｉ）で示される化合物（以下参照）が挙げられ、以下でそれらの製造を詳細に説明する。式（Ｉ）で示されるＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤の代表的なものとしては、ＰＱＩＰ（シス−３−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−シクロブチル］−１−（２−フェニル−キノリン−７−イル）−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−８−イルアミン）、および、ＯＳＩ−９０６、すなわち（シス−３−［８−アミノ−１−（２−フェニル−キノリン−７−イル）−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−３−イル］−１−メチル−シクロブタノール）が挙げられる。
【０１９５】
[199]ＯＳＩ−９０６は、以下のような構造を有する：
【０１９６】
【化１】
2013527748.tif 000003
【０１９７】
[200]ＰＱＩＰは、以下のような構造を有する：
【０１９８】
【化２】
2013527748.tif 000004
【０１９９】
[201][0202]式（Ｉ）で示されるＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、米国特許公開公報ＵＳ２００６／０２３５０３１で説明されているように、以下に示す式で示される：
【０２００】
【化３】
2013527748.tif 000005
【０２０１】
[203]またはそれらの医薬的に許容される塩であって、式中：
[204]Ｘ１およびＸ２は、それぞれ独立して、Ｎ、または、Ｃ−（Ｅ１）ａａであり；
[205]Ｘ５は、Ｎ、Ｃ−（Ｅ１）ａａ、または、Ｎ−（Ｅ１）ａａであり；
[206]Ｘ３、Ｘ４、Ｘ６、および、Ｘ７は、それぞれ独立して、ＮまたはＣであり；
[207]ここでＸ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６およびＸ７のうち少なくとも１つは、独立してＮまたはＮ−（Ｅ１）ａａであり；
[208]Ｑ１は、
【０２０２】
【化４】
2013527748.tif 000006
【０２０３】
であり；
[209]Ｘ１１、Ｘ１２、Ｘ１３、Ｘ１４、Ｘ１５およびＸ１６は、それぞれ独立して、Ｎ、Ｃ−（Ｅ１１）ｂｂ、または、Ｎ＋−Ｏ−であり；
[210]ここでＸ１１、Ｘ１２、Ｘ１３、Ｘ１４、Ｘ１５およびＸ１６のうち少なくとも１つはは、ＮまたはＮ＋−Ｏ−であり；
[211]Ｒ１は、存在しないか、Ｃ０〜１０アルキル、シクロＣ３〜１０アルキル、ビシクロＣ５〜１０アルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、ヘテロシクリル、ヘテロビシクロＣ５〜１０アルキル、スピロアルキル、または、ヘテロスピロアルキルであり、これらはいずれも、１またはそれより多くの独立したＧ１１置換基で任意に置換されていてもよく；
[212]Ｅ１、Ｅ１１、Ｇ１およびＧ４１は、それぞれ独立して、ハロ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＲ２、−ＮＲ２Ｒ３（Ｒ２ａ）ｊ１、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ２、−ＣＯ２Ｒ２、−ＣＯＮＲ２Ｒ３、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）ｊ１Ｒ２、−ＳＯ２ＮＲ２Ｒ３、−ＮＲ２Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３、−ＮＲ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３、−ＮＲ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３Ｒ２ａ、−ＮＲ２Ｓ（Ｏ）ｊ１Ｒ３、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ２、−ＮＲ２Ｃ（＝ＮＲ３）ＮＲ２ａＲ３ａ、−ＮＲ２Ｃ（＝ＮＲ３）ＯＲ２ａ、−ＮＲ２Ｃ（＝ＮＲ３）ＳＲ２ａ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ２Ｒ３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲ２、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲ２、−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＲ２Ｒ３、Ｃ０〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、Ｃ１〜１０アルコキシＣ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０アルコキシＣ２〜１０アルケニル、Ｃ１〜１０アルコキシＣ２〜１０アルキニル、Ｃ１〜１０アルキルチオＣ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０アルキルチオＣ２〜１０アルケニル、Ｃ１〜１０アルキルチオＣ２〜１０アルキニル、シクロＣ３〜８アルキル、シクロＣ３〜８アルケニル、シクロＣ３〜８アルキルＣ１〜１０アルキル、シクロＣ３〜８アルケニルＣ１〜１０アルキル、シクロＣ３〜８アルキルＣ２〜１０アルケニル、シクロＣ３〜８アルケニルＣ２〜１０アルケニル、シクロＣ３〜８アルキルＣ２〜１０アルキニル、シクロＣ３〜８アルケニルＣ２〜１０アルキニル、ヘテロシクリル−Ｃ０〜１０アルキル、ヘテロシクリル−Ｃ２〜１０アルケニル、または、ヘテロシクリル−Ｃ２〜１０アルキニルであり、これらはいずれも、任意に、１個またはそれより多くの独立したハロ、オキソ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＲ２２２、−ＮＲ２２２Ｒ３３３（Ｒ２２２ａ）ｊ１ａ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ２２２、−ＣＯ２Ｒ２２２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２２２Ｒ３３３、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（＝Ｏ）ｊ１ａＲ２２２、−ＳＯ２ＮＲ２２２Ｒ３３３、−ＮＲ２２２Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３３３、−ＮＲ２２２Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３３３、−ＮＲ２２２Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３３３Ｒ２２２ａ、−ＮＲ２２２Ｓ（Ｏ）ｊ１ａＲ３３３、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ２２２、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ２２２、−ＮＲ２２２Ｃ（＝ＮＲ３３３）ＮＲ２２２ａＲ３３３ａ、−ＮＲ２２２Ｃ（＝ＮＲ３３３）ＯＲ２２２ａ、−ＮＲ２２２Ｃ（＝ＮＲ３３３）ＳＲ２２２ａ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ２２２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ２２２Ｒ３３３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲ２２２、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲ２２２、または、−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＲ２２２Ｒ３３３置換基で置換されていてもよく；
[213]または、Ｅ１、Ｅ１１またはＧ１は、任意に−（Ｗ１）ｎ−（Ｙ１）ｍ−Ｒ４であってもよく；
[214]または、Ｅ１、Ｅ１１、Ｇ１またはＧ４１は、任意に、独立して、アリール−Ｃ０〜１０アルキル、アリール−Ｃ２〜１０アルケニル、アリール−Ｃ２〜１０アルキニル、ヘタリール−Ｃ０〜１０アルキル、ヘタリール−Ｃ２〜１０アルケニル、または、ヘタリール−Ｃ２〜１０アルキニルであってもよく、これらはいずれも、任意に、１個またはそれより多くの独立したハロ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＲ２２２、−ＮＲ２２２Ｒ３３３（Ｒ２２２ａ）ｊ２ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２２２、−ＣＯ２Ｒ２２２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２２２Ｒ３３３、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）ｊ２ａＲ２２２、−ＳＯ２ＮＲ２２２Ｒ３３３、−ＮＲ２２２Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３３３、−ＮＲ２２２Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３３３、−ＮＲ２２２Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３３３Ｒ２２２ａ、−ＮＲ２２２Ｓ（Ｏ）ｊ２ａＲ３３３、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ２２２、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ２２２、−ＮＲ２２２Ｃ（＝ＮＲ３３３）ＮＲ２２２ａＲ３３３ａ、−ＮＲ２２２Ｃ（＝ＮＲ３３３）ＯＲ２２２ａ、−ＮＲ２２２Ｃ（＝ＮＲ３３３）ＳＲ２２２ａ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ２２２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ２２２Ｒ３３３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲ２２２、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲ２２２、または、−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＲ２２２Ｒ３３３置換基で置換されていてもよく；
[215]Ｇ１１は、ハロ、オキソ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＲ２１、−ＮＲ２１Ｒ３１（Ｒ２ａ１）ｊ４、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２１、−ＣＯ２Ｒ２１、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２１Ｒ３１、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）ｊ４Ｒ２１、−ＳＯ２ＮＲ２１Ｒ３１、ＮＲ２１（Ｃ＝Ｏ）Ｒ３１、ＮＲ２１Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３１、ＮＲ２１Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３１Ｒ２ａ１、ＮＲ２１Ｓ（Ｏ）ｊ４Ｒ３１、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ２１、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ２１、−ＮＲ２１Ｃ（＝ＮＲ３１）ＮＲ２ａ１Ｒ３ａ１、−ＮＲ２１Ｃ（＝ＮＲ３１）ＯＲ２ａ１、−ＮＲ２１Ｃ（＝ＮＲ３１）ＳＲ２ａ１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ２１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ２１Ｒ３１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲ２１、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲ２１、−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＲ２１Ｒ３１、−Ｐ（Ｏ）ＯＲ２１ＯＲ３１、Ｃ１〜１０アルキリデン、Ｃ０〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、Ｃ１〜１０アルコキシＣ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０アルコキシＣ２〜１０アルケニル、Ｃ１〜１０アルコキシＣ２〜１０アルキニル、Ｃ１〜１０アルキルチオＣ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０アルキルチオＣ２〜１０アルケニル、Ｃ１〜１０アルキルチオＣ２〜１０アルキニル、シクロＣ３〜８アルキル、シクロＣ３〜８アルケニル、シクロＣ３〜８アルキルＣ１〜１０アルキル、シクロＣ３〜８アルケニルＣ１〜１０アルキル、シクロＣ３〜８アルキルＣ２〜１０アルケニル、シクロＣ３〜８アルケニルＣ２〜１０アルケニル、シクロＣ３〜８アルキルＣ２〜１０アルキニル、シクロＣ３〜８アルケニルＣ２〜１０アルキニル、ヘテロシクリル−Ｃ０〜１０アルキル、ヘテロシクリル−Ｃ２〜１０アルケニル、または、ヘテロシクリル−Ｃ２〜１０アルキニルであり、これらはいずれも、任意に、１個またはそれより多くの独立したハロ、オキソ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＲ２２２１、−ＮＲ２２２１Ｒ３３３１（Ｒ２２２ａ１）ｊ４ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２２２１、−ＣＯ２Ｒ２２２１、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２２２１Ｒ３３３１、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）ｊ４ａＲ２２２１、−ＳＯ２ＮＲ２２２１Ｒ３３３１、−ＮＲ２２２１Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３３３１、−ＮＲ２２２１Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３３３１、−ＮＲ２２２１Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３３３１Ｒ２２２ａ１、−ＮＲ２２２１Ｓ（Ｏ）ｊ４ａＲ３３３１、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ２２２１、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ２２２１、−ＮＲ２２２１Ｃ（＝ＮＲ３３３１）ＮＲ２２２ａ１Ｒ３３３ａ１、−ＮＲ２２２１Ｃ（＝ＮＲ３３３１）ＯＲ２２２ａ１、−ＮＲ２２２１Ｃ（＝ＮＲ３３３１）ＳＲ２２２ａ１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ２２２１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ２２２１Ｒ３３３１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲ２２２１、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲ２２２１、−Ｐ（Ｏ）ＯＲ２２２１ＯＲ３３３１、または、−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＲ２２２１Ｒ３３３１置換基で置換されていてもよく；
[216]または、Ｇ１１は、アリール−Ｃ０〜１０アルキル、アリール−Ｃ２〜１０アルケニル、アリール−Ｃ２〜１０アルキニル、ヘタリール−Ｃ０〜１０アルキル、ヘタリール−Ｃ２〜１０アルケニル、または、ヘタリール−Ｃ２〜１０アルキニルであり、これらはいずれも、任意に、１個またはそれより多くの独立したハロ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＲ２２２１、−ＮＲ２２２１Ｒ３３３１（Ｒ２２２ａ１）ｊ５ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２２２１、−ＣＯ２Ｒ２２２１、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２２２１Ｒ３３３１、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）ｊ５ａＲ２２２１、−ＳＯ２ＮＲ２２２１Ｒ３３３１、−ＮＲ２２２１Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３３３１、−ＮＲ２２２１Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３３３１、−ＮＲ２２２１Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３３３１Ｒ２２２ａ１、−ＮＲ２２２１Ｓ（Ｏ）ｊ５ａＲ３３３１、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ２２２１、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ２２２１、−ＮＲ２２２１Ｃ（＝ＮＲ３３３１）ＮＲ２２２ａ１Ｒ３３３ａ１、−ＮＲ２２２１Ｃ（＝ＮＲ３３３１）ＯＲ２２２ａ１、−ＮＲ２２２１Ｃ（＝ＮＲ３３３１）ＳＲ２２２ａ１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ２２２１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ２２２１Ｒ３３３１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲ２２２１、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲ２２２１、−Ｐ（Ｏ）ＯＲ２２２１ＯＲ３３３１、または、−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＲ２２２１Ｒ３３３１置換基で置換されていてもよく；
[217]または、Ｇ１１はＣであり、それらが結合する炭素と一緒になって、Ｒ５およびＧ１１１で置換される二重結合Ｃ＝Ｃを形成し；
[218]Ｒ２、Ｒ２ａ、Ｒ３、Ｒ３ａ、Ｒ２２２、Ｒ２２２ａ、Ｒ３３３、Ｒ３３３ａ、Ｒ２１、Ｒ２ａ１、Ｒ３１、Ｒ３ａ１、Ｒ２２２１、Ｒ２２２ａ１、Ｒ３３３１、および、Ｒ３３３ａ１は、それぞれ独立して、Ｃ０〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、Ｃ１〜１０アルコキシＣ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０アルコキシＣ２〜１０アルケニル、Ｃ１〜１０アルコキシＣ２〜１０アルキニル、Ｃ１〜１０アルキルチオＣ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０アルキルチオＣ２〜１０アルケニル、Ｃ１〜１０アルキルチオＣ２〜１０アルキニル、シクロＣ３〜８アルキル、シクロＣ３〜８アルケニル、シクロＣ３〜８アルキルＣ１〜１０アルキル、シクロＣ３〜８アルケニルＣ１〜１０アルキル、シクロＣ３〜８アルキルＣ２〜１０アルケニル、シクロＣ３〜８アルケニルＣ２〜１０アルケニル、シクロＣ３〜８アルキルＣ２〜１０アルキニル、シクロＣ３〜８アルケニルＣ２〜１０アルキニル、ヘテロシクリル−Ｃ０〜１０アルキル、ヘテロシクリル−Ｃ２〜１０アルケニル、ヘテロシクリル−Ｃ２〜１０アルキニル、アリール−Ｃ０〜１０アルキル、アリール−Ｃ２〜１０アルケニル、または、アリール−Ｃ２〜１０アルキニル、ヘタリール−Ｃ０〜１０アルキル、ヘタリール−Ｃ２〜１０アルケニル、または、ヘタリール−Ｃ２〜１０アルキニルであり、これらはいずれも、１個またはそれより多くの独立したＧ１１１置換基で任意に置換されていてもよく；
[219]または、−ＮＲ２Ｒ３（Ｒ２ａ）ｊ１、または、−ＮＲ２２２Ｒ３３３（Ｒ２２２ａ）ｊ１ａ、または、−ＮＲ２２２Ｒ３３３（Ｒ２２２ａ）ｊ２ａ、または、−ＮＲ２１Ｒ３１（Ｒ２ａ１）ｊ４、または、−ＮＲ２２２１Ｒ３３３１（Ｒ２２２ａ１）ｊ４ａ、または、−ＮＲ２２２１Ｒ３３３１（Ｒ２２２ａ１）ｊ５ａのケースにおいて、Ｒ２およびＲ３、または、Ｒ２２２およびＲ３３３、または、Ｒ２２２１およびＲ３３３１はそれぞれ、任意に、それらが結合している窒素原子と一緒になって３〜１０員環の飽和または不飽和の環を形成していてもよく、ここで前記環は、１個またはそれより多くの独立したＧ１１１１置換基で任意に置換されていてもよく、さらに、ここで前記環は、任意に、Ｒ２およびＲ３、または、Ｒ２２２およびＲ３３３、または、Ｒ２２２１およびＲ３３３１が結合している窒素以外の１個またはそれより多くのヘテロ原子を含んでいてもよく；
[220]Ｗ１およびＹ１は、それぞれ独立して、−Ｏ−、−ＮＲ７−、−Ｓ（Ｏ）ｊ７−、−ＣＲ５Ｒ６−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）ＯＲ７）−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｒ７）−、−Ｎ（ＳＯ２Ｒ７）−、−ＣＨ２Ｏ−、−ＣＨ２Ｓ−、−ＣＨ２Ｎ（Ｒ７）−、−ＣＨ（ＮＲ７）−、−ＣＨ２Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｒ７）−、−ＣＨ２Ｎ（Ｃ（Ｏ）ＯＲ７）−、−ＣＨ２Ｎ（ＳＯ２Ｒ７）−、−ＣＨ（ＮＨＲ７）−、−ＣＨ（ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ７）−、−ＣＨ（ＮＨＳＯ２Ｒ７）−、−ＣＨ（ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ７）−、−ＣＨ（ＯＣ（Ｏ）Ｒ７）−、−ＣＨ（ＯＣ（Ｏ）ＮＨＲ７）−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ（＝ＮＯＲ７）−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（ＯＲ７）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）−、−Ｎ（Ｒ７）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ７）Ｓ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ７）Ｓ（Ｏ）２−  −ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）−、−Ｎ（Ｒ７）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８）−、−ＮＲ７Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ７）−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｒ７）Ｓ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｒ７）Ｓ（Ｏ）２−、−Ｎ（Ｒ７）Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８）−、−Ｎ（Ｒ７）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ８）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ７）Ｃ（Ｏ）−、−ＯＳ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７）−、−ＯＳ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ７）−、−Ｎ（Ｒ７）Ｓ（Ｏ）Ｏ−、−Ｎ（Ｒ７）Ｓ（Ｏ）２Ｏ−、−Ｎ（Ｒ７）Ｓ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ７）Ｓ（Ｏ）２Ｃ（Ｏ）−、−ＳＯＮ（Ｃ（Ｏ）Ｒ７）−、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｒ７）−、−Ｎ（Ｒ７）ＳＯＮ（Ｒ８）−、−Ｎ（Ｒ７）ＳＯ２Ｎ（Ｒ８）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｎ（Ｒ７）Ｐ（ＯＲ８）Ｏ−、−Ｎ（Ｒ７）Ｐ（ＯＲ８）−、−Ｎ（Ｒ７）Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）Ｏ−、−Ｎ（Ｒ７）Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｒ７）Ｐ（ＯＲ８）Ｏ−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｒ７）Ｐ（ＯＲ８）−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｒ７）Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）Ｏ−、−Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｒ７）Ｐ（ＯＲ８）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｓ（Ｏ）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｓ（Ｏ）２−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｃ（Ｏ）ＯＲ８）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｒ８）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（ＳＯ２Ｒ８）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｏ−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｓ−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｒ８）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｒ８）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｃ（Ｏ）ＯＲ８）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（ＳＯ２Ｒ８）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｃ（＝ＮＯＲ８）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（Ｒ７）ＣＨ（ＯＲ８）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｒ８）Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｒ８）Ｓ（Ｏ）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｒ８）Ｓ（Ｏ）２−、−ＣＨ（Ｒ７）ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｒ８）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７ａ）−、−ＣＨ（Ｒ７）ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ８）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｒ８）Ｓ（Ｏ）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｒ８）Ｓ（Ｏ）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｒ８）Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ７ａ）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｒ８）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ７ａ）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８）Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｓ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８）Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ８）Ｃ（Ｏ）−、−��Ｈ（Ｒ７）ＯＳ（Ｏ）Ｎ（Ｒ８）−、−ＣＨ（Ｒ７）ＯＳ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ８）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｒ８）Ｓ（Ｏ）Ｏ−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｒ８）Ｓ（Ｏ）２Ｏ−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｒ８）Ｓ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｒ８）Ｓ（Ｏ）２Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（Ｒ７）ＳＯＮ（Ｃ（Ｏ）Ｒ８）−、−ＣＨ（Ｒ７）ＳＯ２Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｒ８）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｒ８）ＳＯＮ（Ｒ７ａ）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｒ８）ＳＯ２Ｎ（Ｒ７ａ）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｒ８）Ｐ（ＯＲ７ａ）Ｏ−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｒ８）Ｐ（ＯＲ７ａ）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｒ８）Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７ａ）Ｏ−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｒ８）Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７ａ）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｒ８）Ｐ（ＯＲ７ａ）Ｏ−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｒ８）Ｐ（ＯＲ７ａ）−、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｒ８）Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７ａ）Ｏ−、または、−ＣＨ（Ｒ７）Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｒ８）Ｐ（ＯＲ７ａ）−であり；
[221]Ｒ５、Ｒ６、Ｇ１１１およびＧ１１１１は、それぞれ独立して、Ｃ０〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、Ｃ１〜１０アルコキシＣ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０アルコキシＣ２〜１０アルケニル、Ｃ１〜１０アルコキシＣ２〜１０アルキニル、Ｃ１〜１０アルキルチオＣ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０アルキルチオＣ２〜１０アルケニル、Ｃ１〜１０アルキルチオＣ２〜１０アルキニル、シクロＣ３〜８アルキル、シクロＣ３〜８アルケニル、シクロＣ３〜８アルキルＣ１〜１０アルキル、シクロＣ３〜８アルケニルＣ１〜１０アルキル、シクロＣ３〜８アルキルＣ２〜１０アルケニル、シクロＣ３〜８アルケニルＣ２〜１０アルケニル、シクロＣ３〜８アルキルＣ２〜１０アルキニル、シクロＣ３〜８アルケニルＣ２〜１０アルキニル、ヘテロシクリル−Ｃ０〜１０アルキル、ヘテロシクリル−Ｃ２〜１０アルケニル、ヘテロシクリル−Ｃ２〜１０アルキニル、アリール−Ｃ０〜１０アルキル、アリール−Ｃ２〜１０アルケニル、アリール−Ｃ２〜１０アルキニル、ヘタリール−Ｃ０〜１０アルキル、ヘタリール−Ｃ２〜１０アルケニル、または、ヘタリール−Ｃ２〜１０アルキニルであり、これらはいずれも、任意に、１個またはそれより多くの独立したハロ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＲ７７、−ＮＲ７７Ｒ８７、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７７、−ＣＯ２Ｒ７７、−ＣＯＮＲ７７Ｒ８７、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）ｊ５ａＲ７７、−ＳＯ２ＮＲ７７Ｒ８７、−ＮＲ７７Ｃ（＝Ｏ）Ｒ８７、−ＮＲ７７Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ８７、−ＮＲ７７Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ７８Ｒ８７、−ＮＲ７７Ｓ（Ｏ）ｊ５ａＲ８７、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ７７、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ７７、−ＮＲ７７Ｃ（＝ＮＲ８７）ＮＲ７８Ｒ８８、−ＮＲ７７Ｃ（＝ＮＲ８７）ＯＲ７８、−ＮＲ７７Ｃ（＝ＮＲ８７）ＳＲ７８、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ７７、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ７７Ｒ８７、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲ７７、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲ７７、−Ｐ（Ｏ）ＯＲ７７ＯＲ８７、または、−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＲ７７Ｒ８７置換基で置換されていてもよく；
[222]または、Ｒ５およびＲ６は、任意にそれらが結合する炭素原子と一緒になって、３〜１０員環の飽和または不飽和の環を形成してもよく、ここで前記環は、任意に１個またはそれより多くの独立したＲ６９置換基で置換されていてもよく、さらに、ここで前記環は、任意に、１個またはそれより多くの  ヘテロ原子を含んでいてもよく；
[223]Ｒ７、Ｒ７ａおよびＲ８は、それぞれ独立して、アシル、Ｃ０〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、または、シクロＣ３〜１０アルキルであり、これらはいずれも、１個またはそれより多くの独立したＧ１１１置換基で任意に置換されていてもよく；
[224]Ｒ４は、Ｃ０〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロＣ３〜１０アルキル、ヘテロシクリル、シクロＣ３〜８アルケニル、または、ヘテロシクロアルケニルであり、これらはいずれも、１個またはそれより多くの独立したＧ４１置換基で任意に置換されていてもよく；
[225]Ｒ６９は、ハロ、−ＯＲ７８、−ＳＨ、−ＮＲ７８Ｒ８８、−ＣＯ２Ｒ７８、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ７８Ｒ８８、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）ｊ８Ｒ７８、−ＳＯ２ＮＲ７８Ｒ８８、Ｃ０〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、Ｃ１〜１０アルコキシＣ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０アルコキシＣ２〜１０アルケニル、Ｃ１〜１０アルコキシＣ２〜１０アルキニル、Ｃ１〜１０アルキルチオＣ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０アルキルチオＣ２〜１０アルケニル、Ｃ１〜１０アルキルチオＣ２〜１０アルキニル、シクロＣ３〜８アルキル、シクロＣ３〜８アルケニル、シクロＣ３〜８アルキルＣ１〜１０アルキル、シクロＣ３〜８アルケニルＣ１〜１０アルキル、シクロＣ３〜８アルキルＣ２〜１０アルケニル、シクロＣ３〜８アルケニルＣ２〜１０アルケニル、シクロＣ３〜８アルキルＣ２〜１０アルキニル、シクロＣ３〜８アルケニルＣ２〜１０アルキニル、ヘテロシクリル−Ｃ０〜１０アルキル、ヘテロシクリル−Ｃ２〜１０アルケニル、または、ヘテロシクリル−Ｃ２〜１０アルキニルであり、これらはいずれも、任意に、１個またはそれより多くの独立したハロ、シアノ、ニトロ、−ＯＲ７７８、−ＳＯ２ＮＲ７７８Ｒ８８８、または、−ＮＲ７７８Ｒ８８８置換基で置換されていてもよく；
[226]または、Ｒ６９は、アリール−Ｃ０〜１０アルキル、アリール−Ｃ２〜１０アルケニル、アリール−Ｃ２〜１０アルキニル、ヘタリール−Ｃ０〜１０アルキル、ヘタリール−Ｃ２〜１０アルケニル、ヘタリール−Ｃ２〜１０アルキニル、モノ（Ｃ１〜６アルキル）アミノＣ１〜６アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノＣ１〜６アルキル、モノ（アリール）アミノＣ１〜６アルキル、ジ（アリール）アミノＣ１〜６アルキル、または、−Ｎ（Ｃ１〜６アルキル）−Ｃ１〜６アルキル−アリールであり、これらはいずれも、任意に、１個またはそれより多くの独立したハロ、シアノ、ニトロ、−ＯＲ７７８、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、ハロＣ１〜１０アルキル、ハロＣ２〜１０アルケニル、ハロＣ２〜１０アルキニル、−ＣＯＯＨ、Ｃ１〜４アルコキシカルボニル、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ７７８Ｒ８８８、−ＳＯ２ＮＲ７７８Ｒ８８８、または、−ＮＲ７７８Ｒ８８８置換基で置換されていてもよく；
[227]または、−ＮＲ７８Ｒ８８のケースにおいて、Ｒ７８およびＲ８８は、任意に、それらが結合している窒素原子と一緒になって３〜１０員環の飽和または不飽和の環を形成していてもよく、ここで前記環は、任意に１個またはそれより多くの独立したハロ、シアノ、ヒドロキシ、ニトロ、Ｃ１〜１０アルコキシ、−ＳＯ２ＮＲ７７８Ｒ８８８、または、−ＮＲ７７８Ｒ８８８置換基で置換されていてもよく、さらに、ここで前記環は、任意に、Ｒ７８およびＲ８８が結合している窒素以外の１個またはそれより多くのヘテロ原子を含んでいてもよく；
[228]Ｒ７７、Ｒ７８、Ｒ８７、Ｒ８８、Ｒ７７８およびＲ８８８は、それぞれ独立して、Ｃ０〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、Ｃ１〜１０アルコキシＣ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０アルコキシＣ２〜１０アルケニル、Ｃ１〜１０アルコキシＣ２〜１０アルキニル、Ｃ１〜１０アルキルチオＣ１〜１０アルキル、Ｃ１〜１０アルキルチオＣ２〜１０アルケニル、Ｃ１〜１０アルキルチオＣ２〜１０アルキニル、シクロＣ３〜８アルキル、シクロＣ３〜８アルケニル、シクロＣ３〜８アルキルＣ１〜１０アルキル、シクロＣ３〜８アルケニルＣ１〜１０アルキル、シクロＣ３〜８アルキルＣ２〜１０アルケニル、シクロＣ３〜８アルケニルＣ２〜１０アルケニル、シクロＣ３〜８アルキルＣ２〜１０アルキニル、シクロＣ３〜８アルケニルＣ２〜１０アルキニル、ヘテロシクリル−Ｃ０〜１０アルキル、ヘテロシクリル−Ｃ２〜１０アルケニル、ヘテロシクリル−Ｃ２〜１０アルキニル、Ｃ１〜１０アルキルカルボニル、Ｃ２〜１０アルケニルカルボニル、Ｃ２〜１０アルキニルカルボニル、Ｃ１〜１０アルコキシカルボニル、Ｃ１〜１０アルコキシカルボニルＣ１〜１０アルキル、モノＣ１〜６アルキルアミノカルボニル、ジＣ１〜６アルキルアミノカルボニル、モノ（アリール）アミノカルボニル、ジ（アリール）アミノカルボニル、または、Ｃ１〜１０アルキル（アリール）アミノカルボニルであり、これらはいずれも、任意に、１個またはそれより多くの独立したハロ、シアノ、ヒドロキシ、ニトロ、Ｃ１〜１０アルコキシ、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ０〜４アルキル）（Ｃ０〜４アルキル）、または、−Ｎ（Ｃ０〜４アルキル）（Ｃ０〜４アルキル）置換基で置換されていてもよく；
[229]または、Ｒ７７、Ｒ７８、Ｒ８７、Ｒ８８、Ｒ７７８およびＲ８８８は、それぞれ独立して、アリール−Ｃ０〜１０アルキル、アリール−Ｃ２〜１０アルケニル、アリール−Ｃ２〜１０アルキニル、ヘタリール−Ｃ０〜１０アルキル、ヘタリール−Ｃ２〜１０アルケニル、ヘタリール−Ｃ２〜１０アルキニル、モノ（Ｃ１〜６アルキル）アミノＣ１〜６アルキル、ジ（Ｃ１〜６アルキル）アミノＣ１〜６アルキル、モノ（アリール）アミノＣ１〜６アルキル、ジ（アリール）アミノＣ１〜６アルキル、または、−Ｎ（Ｃ１〜６アルキル）−Ｃ１〜６アルキル−アリールであり、これらはいずれも、任意に、１個またはそれより多くの独立したハロ、シアノ、ニトロ、−Ｏ（Ｃ０〜４アルキル）、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ２〜１０アルケニル、Ｃ２〜１０アルキニル、ハロＣ１〜１０アルキル、ハロＣ２〜１０アルケニル、ハロＣ２〜１０アルキニル、−ＣＯＯＨ、Ｃ１〜４アルコキシカルボニル、−ＣＯＮ（Ｃ０〜４アルキル）（Ｃ０〜１０アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ０〜４アルキル）（Ｃ０〜４アルキル）、または、−Ｎ（Ｃ０〜４アルキル）（Ｃ０〜４アルキル）置換基で置換されていてもよく；
[230]ｎ、ｍ、ｊ１、ｊ１ａ、ｊ２ａ、ｊ４、ｊ４ａ、ｊ５ａ、ｊ７およびｊ８は、それぞれ独立して０、１または２であり；および、ａａ、および、ｂｂは、それぞれ独立して０または１である。
【０２０４】
[231]ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤の追加の具体例としては、以下のものが挙げられる：ｈ７Ｃ１０（ピエールファーブル研究所（Centre de Recherche Pierre Fabre））、ＩＧＦ−１アンタゴニスト；ＥＭ−１６４（イムノジェン社（ImmunoGen Inc.））、ＩＧＦ−１Ｒ調節因子；ＣＰ−７５１８７１（フィギツムマブ（figitumumab）；ファイザー社）、ＩＧＦ−１アンタゴニスト；ランレオチド（イプセン（Ipsen））、ＩＧＦ−１アンタゴニスト；ＩＧＦ−１Ｒオリゴヌクレオチド（リンクス・セラピューティクス社（Lynx Therapeutics Inc.））；ＩＧＦ−１オリゴヌクレオチド（国立癌研究所（National Cancer Institute））；ノバルティスが開発中のＩＧＦ−１Ｒタンパク質−チロシンキナーゼ阻害剤（例えばＮＶＰ−ＡＥＷ５４１、Garcia-Echeverria, C. et al. (2004) Cancer Cell 5:231-239；または、ＮＶＰ−ＡＤＷ７４２、Mitsiades, C.S. et al. (2004) Cancer Cell 5:221-230）；ＩＧＦ−１Ｒタンパク質−チロシンキナーゼ阻害剤（オントジェン社（Ontogen Corp））；ＡＧ−１０２４（Camirand, A. et al. (2005) Breast Cancer Research 7:R570-R579（DOI 10.1186/bcr1028）；Camirand, A. and Pollak, M. (2004) Brit. J. Cancer 90:1825-1829；ファイザー社）、ＩＧＦ−１アンタゴニスト；チルホスチンＡＧ−５３８およびＩ−ＯＭｅ−ＡＧ５３８；ＢＭＳ−５３６９２４、低分子量のＩＧＦ−１Ｒ阻害剤；ＰＮＵ−１４５１５６Ｅ（ファルマシア＆アップジョン社（Pharmacia & Upjohn SpA））、ＩＧＦ−１アンタゴニスト；ＢＭＳ５３６９２４、二重のＩＧＦ−１ＲおよびＩＲキナーゼ阻害剤（ブリストル・マイヤーズ・スクイブ）；ＡＥＷ５４１（ノバルティス）；ＧＳＫ６２１６５９Ａ（グラクソ・スミスクライン（Glaxo Smith-Kline)）；ＩＮＳＭ−１８（インスメッド（Insmed））；および、ＸＬ−２２８（エクセリクシス）。
【０２０５】
[232]抗体ベースのＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤としては、その天然リガンドによってＩＧＦ−１Ｒ活性化を部分的または完全にブロックすることができるあらゆる抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体または抗体フラグメントが挙げられる。さらに抗体ベースのＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤としては、ＩＧＦ−１Ｒ活性化を部分的または完全にブロックすることができるあらゆる抗ＩＧＦ−１抗体または抗体フラグメントも挙げられる。抗体ベースのＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤の例としては、これらに限定されないが、Larsson, O. et al (2005) Brit. J. Cancer 92:2097-2101、および、Ibrahim, Y.H. and Yee, D. (2005) Clin. Cancer Res. 11:944s-950sで説明されているもの、または、イムクローン（Imclone）によって開発されたもの（例えばＡ１２）、または、シェリング・プラウ研究所（Schering-Plough Research Institute）によって開発されたもの（例えば１９Ｄ１２；または、米国公開特許公報ＵＳ２００５／０１３６０６３Ａ１、および、ＵＳ２００４／００１８１９１Ａ１で説明されているもの）が挙げられる。ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、モノクローナル抗体であってもよいし、または、それらの結合特異性を有する抗体または抗体フラグメントであってもよい。
【０２０６】
[233]追加の抗体ベースのＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、周知の方法に従って、例えば、なかでもブタ、ウシ、ウマ、ウサギ、ヤギ、ヒツジおよびマウスから選択された宿主動物に適切な抗原またはエピトープを投与することによって生産することができる。抗体産生を強化するために、当業界でよく知られている様々なアジュバントを用いることができる。
【０２０７】
[234]本発明の実施において有用な抗体はポリクローナルであってもよいが、好ましくはモノクローナル抗体である。ＩＧＦ−１Ｒに対するモノクローナル抗体は、連続した培養中の細胞系で抗体分子を生産させるあらゆる技術を用いて生産し単離することができる。生産および単離の技術としては、これらに限定されないが、最初にKohler and Milstein (Nature, 1975, 256: 495-497）で説明されたハイブリドーマ技術；ヒトＢ−細胞ハイブリドーマ技術（Kosbor et al., 1983, Immunology Today 4:72; Cote et al., 1983, Proc. Nati. Acad. Sci. USA 80: 2026-2030）；および、ＥＢＶ−ハイブリドーマ技術（Cole et al, 1985, Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, Inc., pp. 77-96）が挙げられる。
【０２０８】
[235]あるいは、単鎖抗体の生産について説明した技術（例えば、米国特許第４，９４６，７７８号を参照）を、抗ＩＧＦ−１Ｒ単鎖抗体が生産されるように適合させてもよい。また本発明の実施において有用な抗体ベースのＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤としては抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体フラグメントも挙げられ、このような抗体フラグメントとしては、これらに限定されないが、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントが挙げられ、これは無傷抗体分子のペプシン消化によって製造することができ、さらに、Ｆａｂフラグメントも挙げられ、これは、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントのジスルフィド架橋を還元することによって製造することができる。あるいは、望ましいＩＧＦ−１Ｒに対する特異性を有するフラグメントを迅速に同定するために、Ｆａｂおよび／またはｓｃＦｖ発現ライブラリーを構築してもよい（例えば、Huse et al., 1989, Science 246: 1275-1281を参照）。
【０２０９】
[236]モノクローナル抗体および抗体フラグメントの生産および単離に関する技術は当業界公知であり、Harlow and Lane, 1988, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, and in J. W. Goding, 1986, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, Academic Press, Londonで説明されている。またヒト化抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体および抗体フラグメントは周知の技術に従って製造してもよく、このような技術としては、例えばVaughn, T. J. et al., 1998, Nature Biotech. 16:535-539で説明されているものおよびそこで引用された文献が挙げられ、このような抗体またはそれらのフラグメントもまた本発明の実施において有用なものである。
【０２１０】
[237]ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、あるいは、アンチセンスオリゴヌクレオチドコンストラクトに基づいていてもよい。アンチセンスオリゴヌクレオチドとしては、アンチセンスＲＮＡ分子およびアンチセンスＤＮＡ分子が挙げられるが、このようなアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＩＧＦ−１ＲのｍＲＮＡと結合することによってその翻訳を直接的にブロックするように作用し、それによりタンパク質の翻訳が阻害されるか、または、ｍＲＮＡ分解が増加し、従ってＩＧＦ−１Ｒキナーゼタンパク質のレベル、すなわち細胞中での活性が減少する。例えば少なくとも約１５塩基を有し、ＩＧＦ−１ＲをコードするｍＲＮＡ転写配列の特定の領域に相補的なアンチセンスオリゴヌクレオチドは、例えば従来のホスホジエステル技術によって合成することができ、さらに例えば静脈注射または点滴によって投与することができる。配列が既知の遺伝子の遺伝子発現を特異的に阻害するためのアンチセンス技術の使用方法は当業界公知である（例えば、米国特許第６，５６６，１３５号；６，５６６，１３１号；６，３６５，３５４号；６，４１０，３２３号；６，１０７，０９１号；６，０４６，３２１号；および、５，９８１，７３２号を参照）。
【０２１１】
[238]低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）は、ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤としても機能する可能性がある。ＩＧＦ−１Ｒの発現が特異的に阻害される（すなわちＲＮＡ干渉またはＲＮＡｉ）ように腫瘍、被検体または細胞を低分子量二本鎖ＲＮＡの生産を引き起こす低分子量二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）またはベクターまたはコンストラクトと接触させることによって、ＩＧＦ−１Ｒの遺伝子発現を低減させることができる。配列が既知の遺伝子に適切なｄｓＲＮＡまたはｄｓＲＮＡをコードするベクターを選択する方法は当業界公知である（例えば、Tuschi, T., et al. (1999) Genes Dev. 13(24):3191-3197; Elbashir, S.M. et al. (2001) Nature 411:494-498; Hannon, G.J. (2002) Nature 418:244-251; McManus, M.T. and Sharp, P. A. (2002) Nature Reviews Genetics 3:737-747; Bremmelkamp, T.R. et al. (2002) Science 296:550-553；米国特許第６，５７３，０９９号および６，５０６，５５９号；および、国際特許公報ＷＯ０１／３６６４６、ＷＯ９９／３２６１９、および、ＷＯ０１／６８８３６を参照）。
【０２１２】
[239]リボザイムは、ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤としても機能する可能性がある。リボザイムは、特異的なＲＮＡ切断を触媒することができる酵素的なＲＮＡ分子である。リボザイムの作用機序は、リボザイム分子の相補的標的ＲＮＡへの配列特異的なハイブリダイゼーション、それに続いてエンドヌクレアーゼによる切断を含む。従って、本発明の範囲において、ＩＧＦ−１ＲのｍＲＮＡ配列のエンドヌクレアーゼによる切断を特異的かつ効率的に触媒する加工されたヘアピンまたはハンマーヘッド型モチーフのリボザイム分子が有用である。まず、標的分子を典型的には以下の配列ＧＵＡ、ＧＵＵおよびＧＵＣを含むリボザイム切断部位に関してスキャンすることによってＲＮＡ標的内の存在し得るあらゆる特異的なリボザイム切断部位を同定する。それらが同定されたら、予測された構造的特徴（例えばオリゴヌクレオチド配列を不適合にすることができる二次構造）について、切断部位を含む標的の遺伝子領域に対応する約１５〜２０個のリボヌクレオチドの低分子ＲＮＡ配列を評価することができる。また候補標的の適性は、例えばリボヌクレアーゼ保護分析を用いてそれらの相補的オリゴヌクレオチドとのハイブリダイゼーションの達成可能性を試験することによっても評価することもできる。
【０２１３】
[240]ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤として有用なアンチセンスオリゴヌクレオチドとリボザイムはいずれも既知の方法によって製造することができる。このような方法は、例えば固相ホスホラミダイト化学合成による化学合成のための技術を含む。あるいは、アンチセンスＲＮＡ分子は、インビトロまたはインビボでのこのようなＲＮＡ分子をコードするＤＮＡ配列の転写によって生成することができる。このようなＤＮＡ配列は、適切なＲＮＡポリメラーゼプロモーター、例えばＴ７またはＳＰ６ポリメラーゼプロモーターを包含する多種多様のベクターに包含させることができる。細胞内の安定性を高め半減期を長くするための手段として、本発明のオリゴヌクレオチドに様々な改変を導入することができる。可能性のある改変としては、これらに限定されないが、分子の５’および／または３’末端へのリボヌクレオチドまたはデオキシリボヌクレオチドのフランキング配列の付加、または、オリゴヌクレオチド主鎖内に、ホスホジエステラーゼによる連結ではなくホスホ−チオエートまたは２’−Ｏ−メチルを使用することが挙げられる。
【０２１４】
[241]本発明の治療方法に関して、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤は、医薬的に許容されるキャリアー、および、非毒性の治療有効量のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤化合物（それらの医薬的に許容される塩なども含む）で構成される組成物として用いられる。
【０２１５】
[242]用語「医薬的に許容される塩」は、医薬的に許容される非毒性の塩基または酸から製造された塩を意味する。本発明の化合物が酸性である場合、それに対応する塩は、無機塩基および有機塩基などの医薬的に許容される非毒性の塩基からうまく製造することができる。このような無機塩基から誘導された塩としては、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅（第二銅および第一銅）、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン（第二マンガンおよび第一マンガン）、カリウム、ナトリウム、亜鉛などの塩が挙げられる。特に好ましいくは、アンモニウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩およびナトリウム塩である。医薬的に許容される有機性の非毒性の塩基から誘導された塩としては、第一、第二および第三アミンの塩、加えて環状アミンの塩、ならびに、置換アミンの塩、例えば天然に存在する置換アミンの塩および合成された置換アミンの塩が挙げられる。塩を形成することができるその他の医薬的に許容される有機性の非毒性の塩基としては、イオン交換樹脂、例えばアルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ’，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リシン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン類、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなどが挙げられる。
【０２１６】
[243]本発明で使用される化合物が塩基性である場合、それに対応する塩は、無機酸および有機酸などの医薬的に許容される非毒性の酸からうまく製造することができる。このような酸としては、例えば、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩化水素酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸などが挙げられる。特に好ましくは、クエン酸、臭化水素酸、塩化水素酸、マレイン酸、リン酸、硫酸、および、酒石酸である。
【０２１７】
[244]本発明で使用される活性成分としてＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤（それらの医薬的に許容される塩なども含む）を含む医薬組成物は、医薬的に許容されるキャリアーを含んでいてもよく、さらに任意にその他の治療用成分またはアジュバントを含んでいてもよい。その他の治療剤としては、上記で列挙したような細胞毒性の物質、化学療法剤もしくは抗癌剤、または、このような物質の作用を強める物質が挙げられる。本組成物は、経口投与、直腸投与、局所投与および非経口投与（例えば皮下投与、筋肉内投与および静脈内投与など）に適した組成物を含むが、最適な経路は、特定されたいずれのケースにおいても具体的な宿主、ならびに活性成分が投与されている状態の性質および重症度によって決定されると予想される。都合のよい形態としては、本医薬組成物は１回投与量で提供され、薬学分野において公知の方法のいずれかによって製造することができる。
【０２１８】
[245]実際には、本発明のＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤（それらの医薬的に許容される塩なども含む）は、活性成分として、従来の調剤技術に従って製剤用キャリアーと組み合わせて均一な混合状態にしてもよい。このようなキャリアーは、例えば経口または非経口投与（静脈内投与）などの投与に適した製剤の形態に応じて多種多様の形態であってよい。従って本発明の医薬組成物は経口投与に適した別々の単位として提供されてもよく、このような単位としては、例えば、予め決められた量の活性成分を含むカプセル、カシェ剤または錠剤が挙げられる。さらに本組成物は、粉末、顆粒、溶液、水性液体中の懸濁液、非水性の液体、水中油型エマルジョン、または、油中水型の液状エマルジョンとして提供されてもよい。上記の一般的な投薬形態に加えて、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤（例えばそれらの各成分の医薬的に許容される塩など）はまた、放出制御する手段および／または送達装置によって投与することもできる。このような組み合わせの組成物はあらゆる薬学的な方法を用いて製造することができる。このような方法は、一般的に、活性成分と１種またはそれより多くの必須成分を構成するキャリアーとを一緒にする工程を含む。一般的に、本組成物は、活性成分を、液体キャリアーもしくは微粉化した固体キャリアまたはその両方と均一によく混ざった状態に混合することによって製造される。続いて得られた生成物を、提供時の望ましい形態に都合よく成形することもできる。
【０２１９】
[246]また、本発明で用いられるＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤（それらの医薬的に許容される塩なども含む）を、１種またはそれより多くのその他の治療活性を有する化合物と組み合わせて医薬組成物に包含されていてもよい。その他の治療活性を有する化合物としては、上記で列挙したような細胞毒性の物質、化学療法剤もしくは抗癌剤、または、このような物質の作用を強める物質が挙げられる。
【０２２０】
[247]従って、本発明の一実施態様において、本医薬組成物は、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を抗癌剤と組み合わせて含んでいてもよく、ここで前記抗癌剤は、アルキル化剤、代謝拮抗物質、微小管阻害剤、ポドフィロトキシン、抗生物質、ニトロソウレア、ホルモン治療剤、キナーゼ阻害剤、腫瘍細胞アポトーシスの活性化因子、および、抗血管新生剤からなる群より選択されるものである。
【０２２１】
[248]用いられる製剤用キャリアーは、例えば固体、液体または気体であってよい。固形キャリアーの例としては、ラクトース、白土、スクロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウム、および、ステアリン酸が挙げられる。液体キャリアーの例は、シュガーシロップ、落花生油、オリーブ油、および、水である。気体キャリアーの例としては、二酸化炭素、および、窒素が挙げられる。
【０２２２】
[249]経口用投薬形態の組成物を製造する場合、あらゆる便利な製薬媒体を用いることができる。懸濁液、エリキシルおよび溶液などの経口用液状製剤を形成するためには、例えば水、グリコール、油、アルコール、矯味矯臭剤、保存剤、着色剤などを用いることができる；一方で、粉末、カプセルおよび錠剤などの経口用固形製剤を形成するためには、例えばデンプン、糖類、微結晶性セルロース、希釈剤、造粒剤、潤滑剤、結合剤、崩壊剤などのキャリアーを用いることができる。好ましい経口用の投与単位は、投与しやすさから錠剤およびカプセルであり、従って固形製剤用キャリアーが用いられる。任意に、標準的な水性の技術または非水性の技術で錠剤をコーティングしてもよい。
【０２２３】
[250]本発明で用いられる組成物を含む錠剤は圧縮または成形によって製造することもでき、このような錠剤は任意に１種またはそれより多くの補助的な成分またはアジュバントを含んでいてもよい。圧縮錠剤は、適切な装置で、任意に結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、表面活性剤または分散剤と混合された流動しやすい形態（例えば粉末または顆粒）の活性成分を圧縮することによって製造することもできる。成形錠剤は、適切な装置で、不活性な液体希釈剤で加湿した粉末状化合物の混合物を成形することによって製造してもよい。錠剤はそれぞれ、好ましくは約０．０５ｍｇ〜約５ｇの活性成分を含み、カシェ剤またはカプセルはそれぞれ、好ましくは約０．０５ｍｇ〜約５ｇの活性成分を含む。
【０２２４】
[251]例えばヒトへの経口投与を目的とした調合物は約０．５ｍｇ〜約５ｇの活性物質を含んでいてもよく、このような活性物質は適切で便利な量のキャリアー材料と配合され、このキャリアー材料の量は組成物全量の約５〜約９５パーセントの範囲の様々な量であり得る。１回投与量は、一般的には約１ｍｇ〜約２ｇの活性成分を含むと予想され、典型的には、２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、８００ｍｇ、または、１０００ｍｇの活性成分を含むと予想される。
【０２２５】
[252]本発明で使用される非経口投与に適切な医薬組成物は、活性化合物の水溶液または水懸濁液として調製することもできる。適切な界面活性剤としては、例えばヒドロキシプロピルセルロースが挙げられる。分散液はまた、油中のグリセロール、液体ポリエチレングリコールおよびそれらの混合物で調製することもできる。さらに、有害な微生物増殖を防ぐために保存剤が含まれていてもよい。
【０２２６】
[253]本発明で使用される注射用途に適切な医薬組成物としては、滅菌水溶液または分散液が挙げられる。さらにこのような組成物は、このような滅菌注射用溶液または分散液を即時調製するための滅菌粉末の形態であってもよい。いずれのケースにおいても、最終的な注射可能な形態は、滅菌されていなければならなず、さらに注射器で操作しやすいように効果的に流動し得るものでなければならない。このような医薬組成物は、製造および貯蔵条件下で安定でなければならなず、従って、好ましくは、細菌や菌類などの微生物の汚染作用から保護されるべきである。キャリアーは、例えば水、エタノール、ポリオール、例えばグリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコール、植物油、およびそれらの適切な混合物を含む溶媒または分散媒であり得る。
【０２２７】
[254]本発明に係る医薬組成物は、例えばエアロゾル、クリーム、軟膏、ローション、散粉剤または同種のもの等の局所的使用に適した形態であってもよい。さらに本組成物は、経皮送達のための装置で使用するのに適した形態であってもよい。このような調合物を、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤（それらの医薬的に許容される塩なども含む）を利用して従来の加工方法によって調製することができる。一例として、クリームまたは軟膏は、親水性材料と水とを、望ましい粘稠度を有するクリームまたは軟膏が生産されるように約５質量％〜約１０質量％の上記化合物と共に混合することによって調製される。
【０２２８】
[255]本発明に係る医薬組成物は、直腸内投与に適した形態であってもよく、このような場合のキャリアーは固体である。好ましくは、このような混合物を単位用量の坐剤の形態にすることである。適切なキャリアーとしては、カカオバター、および、当業界において一般的に使用されているその他の材料が挙げられる。坐剤は、まずキャリアーを軟らかくするか融解させ、これを組成物とを混合し、続いて型の中で冷却し成形することによってうまく形成することができる。
【０２２９】
[256]上述のキャリアー成分に加えて、上述の医薬製剤は、必要に応じて１種またはそれより多くの追加のキャリアー成分を含んでいてもよく、このような追加のキャリアー成分としては、例えば希釈剤、緩衝液、矯味矯臭剤、結合剤、表面活性剤、増粘剤、潤滑剤、保存剤（例えば抗酸化剤）などが挙げられる。さらに調合物を対象の受容者の血液と等張にするためにその他のアジュバントが含まれていてもよい。またＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤（それらの医薬的に許容される塩なども含む）を含む組成物は、粉末または液状濃縮物の形態に調製することもできる。
【０２３０】
[257]本発明を実施するために用いられる化合物の用量レベルは、およそ本明細書において説明されている通りであるか、または、これらの化合物に関して当業界で説明されている通りであると予想される。しかし当然のことながら、個々の患者それぞれのにとっての特定の用量レベルは、例えば年齢、体重、全体的な健康状態、性別、食事、投与時間、経路、排泄の頻度、薬の組み合わせ、および、治療を受けている特定の病気の重症度などの様々な要因に応じて決定されると予想される。
【０２３１】
[258]本発明はさらに、ＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤を用いていることを特徴とする、本明細書において説明されるあらゆる「治療方法」、治療方法について説明されているのと同じ指示、同一の条件または様式で使用するための、それに対応する「医薬品の製造方法」を提供するものであり、ここで、代替の治療方法の実施態様において追加の物質、阻害剤または状態のいずれかが特定されている場合、それらも、それに対応する医薬品の製造方法の代替の実施態様に包含されることとする。本発明はまた、本明細書において説明される癌の治療方法のいずれかで使用するためのＩＧＦ−１ＲとＩＲキナーゼの両方を阻害するＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤も提供する。
【０２３２】
[259]当業界でよく知られている多くの代替の実験方法が、本明細書で本発明の実施において具体的に説明されたものの代わりにうまく利用できる場合があり、ここで、このような代替の実験方法としては、例えば本発明に関連する技術分野で利用可能な優れたマニュアルや教本の多くで説明されている方法（例えば、Using Antibodies, A Laboratory Manual, edited by Harlow, E. and Lane, D., 1999, Cold Spring Harbor Laboratory Press, (例えばISBN 0-87969-544-7); Roe B.A. et. al. 1996, DNA Isolation and Sequencing (Essential Techniques Series), John Wiley & Sons.(例えばISBN 0-471-97324-0); Methods in Enzymology: Chimeric Genes and Proteins”, 2000, ed. J.Abelson, M.Simon, S.Emr, J.Thorner. Academic Press; Molecular Cloning: a Laboratory Manual, 2001, 3rd Edition, by Joseph Sambrook and Peter MacCallum, (以前のManiatis Cloning manual) (例えばISBN 0-87969-577-3); Current Protocols in Molecular Biology, Ed. Fred M. Ausubel, et. al. John Wiley & Sons (例えばISBN 0-471-50338-X); Current Protocols in Protein Science, Ed. John E. Coligan, John Wiley & Sons (例えばISBN 0-471-11184-8); and Methods in Enzymology: Guide to protein Purification, 1990, Vol. 182, Ed. Deutscher, M.P., Acedemic Press, Inc. (例えばISBN 0-12-213585-7)）、または、分子生物学における実験方法の説明を掲載している様々な大学や企業のウェブサイトで説明されている方法が挙げられる。
【０２３３】
[260]本発明は、以下に示す実験の詳細からよりよく理解されるものと思われる。しかしながら当業者であれば容易に理解するものと思われるが、考察された具体的な方法および結果は、以下に示される請求項をより十分に説明するために単に本発明の説明を示しただけであり、それらを限定するものとして解釈されないこととする。
【０２３４】
[261]実験の詳細：
[262]イントロダクション
[263]腫瘍細胞の増殖および生存におけるインスリン様増殖因子受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）の役割は十分に確立されている（１〜３）。ジスルフィド結合で配位結合した二つの二量体からなる構造を有するＩＧＦ−１Ｒは、受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）であり、これは、増殖因子リガンドＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２と結合すると活性化される（４）。ＩＧＦ−１Ｒは、アダプタータンパク質のインスリン受容体基質（ＩＲＳ）との相互作用を介してＰＩ３Ｋ−ＡＫＴシグナル伝達経路にカップリングされる。ＩＧＦ−１Ｒは腫瘍形成性の形質転換および腫瘍形成に必要であり（５，６）、加えて遺伝学的（７，８）または薬理学的（９−１５）なアプローチのいずれかによるＩＧＦ−１Ｒ活性の破壊は、腫瘍細胞の増殖を減少させてアポトーシスを促進する可能性がある。多くのヒトの癌種の原因、進行および予後は、ＩＧＦ−１Ｒおよびそのリガンドの発現の増加と関連する（１６，１７）。ＩＧＦ−１Ｒのシグナル伝達は、細胞毒性の化学療法剤、電離放射線、ならびにＥＧＦＲ、ＨＥＲ２およびｍＴＯＲの阻害剤などのある種の標的化物質に対する耐性の主な要因のひとつである（１６〜２２）。ＩＧＦ−１Ｒは癌の標的として熱心に研究が続けられており、ＩＧＦ−１Ｒの生物学的なチロシンキナーゼドメイン阻害剤と低分子量のチロシンキナーゼドメイン阻害剤（ＴＫＩ）はいずれも、腫瘍学的な臨床試験で調査が続けられている（２３〜２６）。多種多様な抗癌剤に順応できるような生存メカニズムとしてのＩＧＦ−１Ｒのシグナル伝達に関する重要な役割を前提として、ＩＧＦ−１Ｒ阻害剤を中心とした併用療法が広範囲に研究されている。
【０２３５】
[264]ＩＧＦ−１Ｒはインスリン受容体（ＩＲ）と高い関連性を示しており、すなわち、全体のアミノ酸同一性は７０％であり、触媒（チロシンキナーゼ）ドメイン内は８４％の同一性を有する（２７，２８）。ＩＧＦ−１ＲおよびＩＲはホモまたはヘテロ二量体化することができ、二量体は、リガンド、インスリン、ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２によって差異的に活性化される。インスリンはＩＲの典型的なリガンドであり、ＩＲホモ二量体を最も強く活性化するが、ＩＧＦ−２のＩＲを活性化する能力も十分に確立されている（２９〜３１）。グルコースホメオスタシスを調節する組織での代謝のシグナル伝達におけるＩＲの役割に加えて、ＩＲはさらに細胞の増殖および生存を促進することもできる。ＩＧＦ−２が介在するＩＲのシグナル伝達を増加させることによって、ＩＧＦ１Ｒ遺伝子のノックアウトによって引き起こされるマウスの小人症を防ぐためにマウス胚発生を救済することができる（３０）。腫瘍細胞は、増殖および生存を促進するするためにＩＲを利用することも可能であるということを示すデータが増えつつある（３１〜３３）。ＩＲが異所性発現すると、ＮＩＨ３Ｔ３線維芽細胞と１８４Ｂ５乳房上皮細胞とが腫瘍形成により癌化する（３４，３５）。マウスの場合、膵島細胞を切除すると、移植された異種移植腫瘍の増殖速度が低下するが、これは、腫瘍細胞におけるインスリンが介在するＩＲのシグナル伝達は腫瘍増殖を促進する可能性があるということを示唆している（４４〜４６）。疫学的な研究から、高レベルのインスリンおよびＣ−ペプチドは、予後不良と関連しており、腫瘍増殖を促進することが示されている（１，３６，３７）。さらに近年、Ｉ型糖尿病を治療するための吸入するタイプのインスリンの臨床的な研究は、肺癌を発祥させる危険が増加したことにより中止されている（３８）。
【０２３６】
[265]腫瘍細胞中でＲＴＫのみを選択的に標的化する抗癌剤に対する耐性の主な様式として、代償的なＲＴＫのシグナル伝達が出現する。ＥＧＦＲまたはＨＥＲ２の阻害に対する耐性は、ＭＥＴまたはＩＧＦ−１Ｒ活性の順応による増加が介在する可能性がある（３９，４０）。また、ＩＧＦ−１ＲとＩＲとの相互のクロストークを示すデータもある。マウスの胚形成において、ＩＧＦ−２によって駆動する代償的なＩＲのシグナル伝達は、ＩＧＦ−１Ｒ−／−マウスにおける正常な胚の成長を十分に維持することができるが、ＩＧＦ−１Ｒ−／−ＩＲ−／−のダブルノックアウトの場合は生存は不可能である（３０）。ＩＧＦ−１Ｒのシグナル伝達が増殖および分化を刺激する骨芽細胞において、遺伝子操作でＩＧＦ−１Ｒを除去すると、インスリンによって駆動するＡＫＴおよびＥＲＫシグナル伝達の促進に関連するＩＲ活性化の増加が起こる（４１）。ＩＧＦ−１Ｒの機能が失われると、骨芽細胞は、ＩＧＦが介在する増殖および分化からインスリンが介在する増殖および分化にシフトする。それと相反して、ケラチノサイトにおけるＩＲのノックアウトは、ＩＧＦによって駆動するＩＧＦ−１Ｒのシグナル伝達の代償的な増加と関連がある（４２）。従って、様々な生物系における細胞機能を維持するために、ＩＲのシグナル伝達のアップレギュレートはＩＧＦ−１Ｒの損失を代償することができ、その逆もまた同様である。ここ近年のデータによれば、腫瘍細胞において、ＩＧＦ−１Ｒのダウンレギュレーションの際にインスリンシグナル伝達の増加が観察されているため、ＩＲとＩＧＦ−１Ｒとのクロストークも起こり得ることが示されている（４３）。
【０２３７】
[266]いくつかの腫瘍細胞モデルでＩＲによる細胞分裂のシグナル伝達が実証されているにもかかわらず、ＩＧＦ−１ＲとＩＲとの共依存はあまり広く研究されてこなかった。我々はは、ＩＲが、腫瘍細胞の生存シグナル伝達を駆動させてＩＧＦ−１Ｒの選択的な阻害に対する耐性に介在する可能性があるのかどうか、さらに、ＩＲとＩＧＦ−１Ｒとを共阻害することによって、ＩＧＦ−１Ｒの選択的な阻害と比較して、ＡＫＴシグナル伝達の優れた阻害、加えて腫瘍細胞の増殖および生存の阻害を提供することができるかどうかを決定しようと試みた。ＩＧＦ−１ＲおよびＩＲは様々なヒト腫瘍細胞系で共発現されており、特にＩＧＦ−１Ｒ（ＭＡＢ３９１）に対して向けられたモノクローナル抗体（ＭＡｂ）を中和することによる処理は、ＩＲのリン酸化の増加を招いた。さらに、腫瘍細胞および異種移植片を抗ＩＧＦ−１ＲのＭＡｂ単独で処理したところ、ホスホ−ＩＲＳ１およびホスホ−ＡＫＴがほんの部分的に減少したに過ぎなかったが、それに対してＩＧＦ−１ＲおよびＩＲの選択的な二重阻害剤であるＯＳＩ−９０６は、様々なヒト腫瘍細胞系においてより効果的にホスホ−ＩＲＳ１およびホスホ−ＡＫＴを減少させた。ホスホ−ＩＧＦ−１Ｒおよびホスホ−ＩＲの容易に検出できる基底レベルを示す異種移植腫瘍において、ＯＳＩ−９０６による二重受容体阻害により、選択的な抗ＩＧＦ−１Ｒモノクローナル抗体と比較して抗腫瘍活性が強化された。インスリンまたはＩＧＦ−２のいずれかが、ＩＲ−ＡＫＴ経路を活性化して、抗ＩＧＦ−１Ｒモノクローナル抗体によるＩＧＦ−１Ｒの選択的な阻害に対する腫瘍細胞の感受性を減少させることができる。それに対して、インスリンまたはＩＧＦ−２によるＩＲ−ＡＫＴ経路の活性化は、ＯＳＩ−９０６によって完全にブロックされた。まとめると、これらのデータから、ＩＧＦ−１ＲとＩＲとを共に標的化する薬物、例えばＯＳＩ−９０６は、ＩＧＦ−１Ｒに選択的なモノクローナル抗体と比較して、ＩＲ：ＩＧＦ−１Ｒが介在する代償的なシグナル伝達を防ぐことによって優れた有効性を提供する可能性があるという仮説が裏付けられる。
【０２３８】
[267]材料および方法
[268]ＩＧＦ−１Ｒ／ＩＲ阻害剤：以前に説明されたようにして（１３）ＯＳＩ−９０６を合成し、インビトロでの細胞分析で使用するためにＤＭＳＯ中に１０ｍｍｏｌ／Ｌで溶解させた。ＭＡＢ３９１、ＩＧＦＢＰ３およびＩＧＦ−２中和抗体を、Ｒ＆Ｄシステムズ（R&D Systems）（ミネソタ州ミネアポリス）から得た。
【０２３９】
[269]細胞系および培養。
ヒト癌細胞系をアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（American Type Culture Collection, ATCC, バージニア州マナッサス）または以下に指定する追加の供給元から得て、説明通りに倍地中で培養した。また腫瘍タイプも、以下に指定したものを用いた：Ｈ２９５Ｒ（副腎皮質癌；ＡＴＣＣ）、ＮＣＩ−Ｈ３２２（ＮＳＣＬＣ；ＥＣＡＣＣ）、ＮＣＩ−Ｈ４６０（ＮＳＣＬＣ；ＡＴＣＣ）、ＳＷ１５７３（ＮＳＣＬＣ  ；ＡＴＣＣ）、Ｈ１７０３（ＮＳＣＬＣ；ＡＴＣＣ）、ＢｘＰＣ３（膵臓；ＡＴＣＣ）、ＯＶＣＡＲ５（卵巣；ＮＣＩ）、ＭＤＡＨ−２７７４（卵巣；ＡＴＣＣ）、Ｉｇｒｏｖ１（卵巣；ＮＣＩ）、ＧＥＯ（結腸；ロズウェルパーク癌研究所（Roswell Park Cancer Institute）（ＲＰＣＣ））、ＨＴ−２９（結腸；ＡＴＣＣ）、ＲＫＯ（結腸；ＡＴＣＣ）、Ｈ２２６（ＮＳＣＬＣ；ＡＴＣＣ）、８２２６（骨髄腫；ＡＴＣＣ）、Ｈ９２９（骨髄腫；ＡＴＣＣ）、Ｕ２６６（骨髄腫；ＡＴＣＣ）、ＳＫＥＳ１（ユーイング肉腫；ＡＴＣＣ）、ＲＤＥＳ（ユーイング肉腫；ＡＴＣＣ）、ＲＤ（横紋筋肉腫；ＡＴＣＣ）、ＤＵ４４７５（乳房；ＡＴＣＣ）、ＳＫＮＡＳ（神経芽細胞腫；ＡＴＣＣ）、２６５０（鼻の扁平上皮癌；ＡＴＣＣ）、ＯＶＣＡＲ４（卵巣；ＮＣＩ）、Ａ６７３（ユーイング肉腫；ＡＴＣＣ）、ＢＴ４７４（乳房；ＡＴＣＣ）、１３８６（口腔の扁平上皮癌；ＭＳＫＣＣ，ＮＹ）、１１８６（ＳＣＣＨＮ；ＭＳＫＣＣ，ＮＹ）、Ｃｏｌｏ２０５（結腸；ＡＴＣＣ）、ＨＣＴ−１５（結腸；ＡＴＣＣ）、Ｆａｄｕ（口腔の扁平上皮癌；ＡＴＣＣ）、ＳＫＢＲ３（乳房；ＡＴＣＣ）、１４８３（ＨＮＳＣＣ；ＭＳＫＣＣ，ＮＹ）、ＨＳＣ−２（ＨＮＳＣＣ；理研バイオリソースセンター（RIKEN BioResource Center）, 日本国305-0074茨城県つくば市）。細胞を、インキュベーター中で、５％ＣＯ２を含む雰囲気下で３７℃で維持した。細胞を、規定通りにマイコプラスマ（マイコアラート（MycoAlert）, キャンブレックス・バイオサイエンス（Cambrex Bio Science）, メリーランド州ボルチモア）の存在に関してスクリーニングした。増殖阻害分析のために、細胞を平板培養して、２４時間増殖させた。２４時間後、細胞がおよそ１５％のコンフルエントに達したときにＯＳＩ−９０６の連続希釈液を添加し、細胞をさらに７２時間増殖させた。セルタイター−Ｇｌｏ試薬（プロメガ社（Promega Corp.）, ウィスコンシン州マディソン）を用いて細胞の生存率を分析した。
【０２４０】
[270]タンパク質溶解産物の製造およびウェスタを調製したンブロッティング：以前に説明されたようにしてウェスタンブロッティング用の溶解産物を調製した（４４）。抗体は以下のものを用いた：ＩＧＦ−１Ｒ（サンタクルーズ）、ＩＲ（サンタクルーズ）、ホスホ−ｐ４２／ｐ４４（セル・シグナリング・テクノロジーズ（Cell Signaling Technologies)）、ホスホ−Ａｋｔ（Ｓ４７３）（セル・シグナリング・テクノロジーズ）、ホスホ−Ａｋｔ（Ｔ３０８）（セル・シグナリング・テクノロジーズ）、ホスホ−Ｓ６（２３５／２３６）（セル・シグナリング・テクノロジーズ）、ホスホ−−ＰＲＡＳ４０（セル・シグナリング・テクノロジーズ）、および、ホスホ−−ＩＲＳ−１−Ｙ６１２（バイオソース（Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ））。特に指示があれば、溶解させる５分前に４０ｎｇ／ｍｌのＩＧＦ１／２リガンドまたはインスリン（５μＩＵ／ｍｌまたは５０μＩＵ／ｍｌ）を添加した。
【０２４１】
[271]プロテオームアレイによるＲＴＫリン酸化の解析：４２種のＲＴＫに関する捕捉抗体を含むプロテオーム・プロファイラー（Proteome Profiler）アレイを、Ｒ＆Ｄシステムズ（ＲＴＫ  プロテオーム・プロファイル（RTK Proteome Profile）；Ｒ＆Ｄシステムズ，ミネソタ州ミネアポリス）から得て、製造元のプロトコールに従って加工した。ｐＩＧＦ−１ＲおよびｐＩＲをＲＴＫ捕捉アレイによって決定した。プロテオーム・プロファイラーアレイは、４２種の異なるＲＴＫを内蔵するものである。このアレイに包含されるＲＴＫとしては、以下が挙げられる：ＨＥＲ１、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＨＥＲ４、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２ａ、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＩＲ、ＩＧＦ−１Ｒ、Ａｘｌ、Ｄｔｋ、Ｍｅｒ、ＨＧＦＲ、ＭＳＰＲ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＳＣＦＲ、Ｆｌｔ−３、Ｍ−ＣＳＦＲ、ｃ−Ｒｅｔ、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、Ｔｉｅ−１、Ｔｉｅ−２、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、ＶＥＧＦＲ１、ＶＥＧＦＲ２、ＶＥＧＦＲ３、ＭｕＳＫ、ＥｐｈＡ１、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｐｈＡ４、ＥｐｈＡ６、ＥｐｈＡ７、ＥｐｈＢ１、ＥｐｈＢ２、ＥｐｈＢ４、ＥｐｈＢ６。このアレイを、ｐＩＧＦ−１ＲおよびｐＩＲレベルを決定するためのＲＴＫ捕捉分析として用いた。各ＲＴＫに特異的な捕捉抗体を用いて、腫瘍細胞抽出物中でＲＴＫと結合させた。ＨＲＰ結合ｐａｎ抗ホスホチロシン抗体を用いて、リン酸化ＲＴＫを特異的に検出した。
【０２４２】
[272]タックマン（TaqMan）分析：遺伝子ＩＧＦ２、ＩＧＦ１、ＩＧＦ−１ＲおよびＩＲに関する遺伝子発現分析を、アプライド・バイオシステムズ（Applied Biosystems，カリフォルニア州フォスターシティー）から得た。相対的な遺伝子発現の定量を、製造元の説明通りに、５０ｎｇのテンプレートを用いて行った。細胞系全体にわたる相対的な発現を決定するために、ＩＧＦ軸遺伝子の増幅をβ−アクチンに関する遺伝子の増幅と比較した。全てのデータを、３２種の細胞系を含むパネル内の所定の遺伝子に関する第４四分位数表示に正規化した。遺伝子発現分析を、アプライド・バイオシステムズから得た。ＩＧＦ１（Ｈｓ０１５４７６５６）、ＩＧＦ２（Ｈｓ０１００５９６３）、ＩＲ（Ｈｓ００９６１５５７）、および、ＩＧＦ−１Ｒ（Ｈｓ９９９９９０２０）に関して遺伝子発現分析を評価した。ＩＲＡに関する遺伝子発現分析を以下の配列に対応するようにカスタム製造した：ＩＮＳＲＡプローブ（6FAM-CCCAGGCCATCTCGGAAACGC-TAMRA）、ＩＮＳＲＡフォワードプライマー（CTGCACCACAACGTGGTTTTCGT）、および、ＩＮＳＲＡリバースプライマー（ACGGCCACCGTCACATTC）。ＩＲＡ遺伝子発現分析は、すでに説明されているK. Kalli et al. (2002) Endocrinology, 143(9), 3259-67. N.Bである。ＴＡＭＲＡは、６’−カルボキシテトラメチルローダミンであり、６−ＦＡＭは、６’−カルボキシフルオレセインである。
【０２４３】
[273]動物：雌ｎｕ／ｎｕＣＤ−１マウス（６〜８週間、２２〜２５ｇ）をチャールス・リバー・ラボラトリーズ（Charles River Laboratories, マサチューセッツ州ウィルミントン）から購入し、上述したようにＯＳＩファーマシューティカルズにおけるＡＡＡＬＡＣ認定の施設で飼育した（１２）。
【０２４４】
[274]インビボでの薬力学的解析：ＯＳＩ−９０６またはＭＡＢ３９１の腫瘍組織においてＩＧＦ−１ＲまたはＩＲリン酸化を阻害する能力を評価するために、上述したように雌ｎｕ／ｎｕＣＤ−１マウスの皮下に腫瘍細胞を移植した（１２）。３００±５０ｍｍ３のサイズを有する腫瘍を定着させた動物に、指定された用量で、２５ｍＭ酒石酸に溶解させたＯＳＩ−９０６を経口投与するか、または、ＰＢＳで希釈したＭＡＢ３９１を腹腔内投与した。特定のタイムポイントで腫瘍サンプルを回収し、液体窒素中で急速冷凍した。サンプルをプレセリス（Precellys）２４ホモジナイザー（ＭＯバイオラボラトリーズ社（MO Bio Laboratories, Inc.)，カリフォルニア州）で腫瘍溶解緩衝液（１％トリトン（Triton）Ｘ−１００、１０％グリセロール、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１．５ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのＥＤＴＡ、これに新しいプロテアーゼ阻害剤カクテル（シグマ（Sigma，ミズーリ州））、ホスファターゼ阻害剤カクテル（シグマ，ミズーリ州）、１０ｍＭのＮａＦ、および、１ｍＭのオルトバナジウム酸ナトリウムを補充したもの）と一緒にホモジナイズすることによって腫瘍溶解産物を調製した。組織ホモジネートを４℃、１４，０００ｇで５分遠心分離して透明にし、続いて上清をウェスタンブロットまたはホスホ−ＲＴＫアレイで指定された通りに解析した。
【０２４５】
[275]インビボでの有効な抗腫瘍性の研究：細胞を回収し、上述したようにｎｕ／ｎｕＣＤ−１マウスの右のわき腹の皮下に移植した（１２）。腫瘍を２００±５０ｍｍ３の大きさになるまで定着させ、その後、無作為に様々な治療群に分けた。指定された通りにＯＳＩ−９０６とＭＡＢ３９１を投与した。式：Ｖ＝（長さ×幅２）／２を用いたキャリパー測定によって腫瘍の体積を測定した。週２回、腫瘍の大きさと重さを測定した。様々なタイムポイントで以下の式に従って腫瘍増殖抑制（ＴＧＩ）を決定した：％ＴＧＩ＝｛１−［（Ｔｔ／Ｔ０）／（Ｃｔ／Ｃ０）］／１−［Ｃ０／Ｃｔ］｝×１００（式中、Ｔｔ＝時間ｔにおける処理された腫瘍体積の中央値、Ｔ０＝時間０における処理された腫瘍体積の中央値、Ｃｔ＝時間ｔのコントロール腫瘍の体積の中央値、および、Ｃ０＝時間０におけるコントロール腫瘍の体積の中央値である）。全投与期間にわたる平均ＴＧＩを計算した（ここで平均ＴＧＩの５０％を有効性に必要な最小応答値とみなした）。
【０２４６】
[276]結果および考察
[277]ＩＧＦ−１Ｒ/IRのシグナル伝達軸に関連する遺伝子を高度に発言する腫瘍細胞は、ＯＳＩ−９０６に対して感受性を有する。
【０２４７】
[278]我々は、ＩＧＦ−１Ｒ／ＩＲ軸内の遺伝子発現または突然変異が、ＩＧＦ−１ＲおよびＩＲの低分子量の二重阻害剤であるＯＳＩ−９０６に対する感受性の予測になるかどうかを決定する試みを行った。ＯＳＩ−９０６は、選択的にＩＧＦ−１Ｒ（ＩＣ５０＝３５ｎＭ）とＩＲ（ＩＣ５０＝７５ｎＭ）の両方を阻害し、追加のＲＴＫおよびその他のプロテインキナーゼの広範なパネル（ｎ＝１１６）に対するそれらの有力ははるかに低い（１μＭでの阻害率は５０％未満）（４５）。細胞増殖分析におけるＯＳＩ−９０６に対する感受性がそれぞれ異なることに基づいて、１０種の腫瘍型を提示する３２種の腫瘍細胞系を含むパネルを選択した。細胞系を、ＯＳＩ−９０６に対して感受性あり（ＥＣ５０＜１μＭ）または感受性なし（ＥＣ５０＞１０μＭ）のどちらかに分類した（図１Ａ）。感受性腫瘍細胞系に関して、ＯＳＩ−９０６による増殖阻害は用量依存性であった（図１Ｂ）。ＫＲＡＳまたはＢＲＡＦにおける突然変異は、抗ＥＧＦＲ抗体のセツキシマブに対する感受性を減少させることが報告されているが、ここでＯＳＩ−９０６−感受性腫瘍細胞系においてこのような突然変異が頻繁に発生していることがわかった。５０％を超えるＯＳＩ−９０６感受性腫瘍細胞がＫＲＡＳまたはＢＲＡＦのいずれかに突然変異を有していたが、一方でＯＳＩ−９０６非感受性腫瘍細胞においてはこれらの突然変異の出現頻度はより少なかった（＜２５％）（図１Ａ）。それに対して、ＰＩＫ３ＣＡにおける突然変異がＯＳＩ−９０６非感受性腫瘍細胞系のほぼ半分（６／１３）で観察されたが、ＯＳＩ−９０６に対して感受性を有する細胞系ではまったく観察されなかった。ＩＧＦ−１ＲおよびＩＲはＰＩ３Ｋ−ＡＫＴ経路にかなり強くカップリングするため、構成的に下流のシグナル伝達に生じる突然変異は、ＩＧＦ−１Ｒ／ＩＲＲＴＫ阻害剤の活性を弱める可能性がある。定量ＲＴ−ＰＣＲでＩＧＦ１、ＩＧＦ２、ＩＧＦ−１ＲおよびＩＲのｍＲＮＡの発現を測定した。それぞれの遺伝子ごとに、３２種の細胞系を含むパネル内のそれらの遺伝子に関する発現の第４四分位数に発現を正規化した。続いてこれらの細胞系をリガンドおよび受容体の集合的な発現に従ってランク付けした。ＩＧＦ軸において最大の遺伝子発現を示した細胞系は、ＯＳＩ−９０６に対して感受性である（図２）。１９種のＯＳＩ−９０６−感受性細胞系のなかでも、１４種がＩＧＦ１またはＩＧＦ２のｍＲＮＡの発現を、すべての３２種の細胞系を含むパネルで発現の上位四分位数の範囲内に含まれるレベル示した。興味深いことに、ＩＧＦ１およびＩＧＦ２のｍＲＮＡの発現はそれぞれ互いにほぼどちらかに限られており、すなわち、自己分泌ＩＧＦ１のｍＲＮＡ発現は、血液悪性腫瘍から誘導された腫瘍細胞（Ｕ２６６、Ｈ９２９、８２２）、または、肉腫様の腫瘍タイプから誘導された腫瘍細胞（Ａ６７３、ＲＤＥＳ、ＳＫＥＳ、ＲＤＥＳ）において頻繁にみられ、一方でＩＧＦ２のｍＲＮＡ発現は、上皮由来の腫瘍細胞（ＧＥＯ、ＨＴ２９、ＭＤＡＨ−２７７４、ＤＵ４４７５、Ｈ３２２）で頻繁にみられた。１９種のＯＳＩ−９０６感受性細胞系のうち９種において、リガンド（ＩＧＦ１またはＩＧＦ２のいずれか）をコードするｍＲＮ���の高度な（上位四分位数の）共発現が、受容体（ＩＧＦ−１ＲまたはＩＲＡのいずれか）をコードするｍＲＮＡと共に観察された。それに対して、評価されたどの１３種のＯＳＩ−９０６非感受性細胞系においてもリガンドおよび受容体ｍＲＮＡの高度な共発現は観察されなかった。これらのデータは、ＩＧＦ−１Ｒ／ＩＲ軸における受容体−リガンド対の高度な共発現が腫瘍細胞の自己分泌シグナル伝達と密接に関連しているモデルは、ＯＳＩ−９０６に対する応答を予測できるということを裏付けるものである。
【０２４８】
[279]従って、測定されたＩＧＦ−１、ＩＧＦ−２、ＩＧＦ−１ＲおよびＩＲ遺伝子から発現された転写物に係る発現レベルの合計（すなわち発現レベルの指標）は、ＯＳＩ−９０６などのＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する腫瘍細胞の感受性を予測することができるものであり、すなわちＲＤＥＳまたはＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞に係る値に等しいかまたはそれより大きい指標の値を有する腫瘍細胞は高い感受性を有することであり、従って、このような指標の値を有する腫瘍細胞を含む腫瘍を有する患者は、ＯＳＩ−９０６のようなＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に反応性を有する可能性が高い。
【０２４９】
[280]腫瘍の異種移植片の研究において、インビトロでの培養でいずれもＯＳＩ−９０６に高い感受性を有する様々な腫瘍細胞型の腫瘍細胞を用いたところ（ＥＣ５０＜１μＭ）、これらの腫瘍もまた一貫して、インビボにおいて高い腫瘍増殖抑制率（ＴＧＩ）で阻害される（例えば、以下に示す腫瘍細胞の場合、インビボで１０〜１４日間ＯＳＩ−９０６で処理した後に、次の％ＴＧＩが得られた：Ｈ２９５Ｒ：８５％；ＳＫＮＡＳ：７１％；ＢｘＰＣ３：５６％；Ｃｏｌｏ２０５：９０％）。それとは対照的に、類似の研究において、インビトロでの培養でＯＳＩ−９０６に低い感受性しか有さない腫瘍細胞を用いたところ（ＥＣ５０＞１０μＭ）、このような腫瘍は、インビボにおいて低い腫瘍増殖抑制率（ＴＧＩ）でしか阻害されない（例えば、以下に示す腫瘍細胞の場合、インビボで１０〜１４日間ＯＳＩ−９０６で処理した後に、次の％ＴＧＩが得られた：ＦａＤｕ：＜３０％；Ｈ４６０：＜３０％）。これらのデータから、腫瘍細胞培養におけるＯＳＩ−９０６などのＩＧＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤に対する感受性は、インビボでの腫瘍の感受性を予測するものであるということが示される。
【０２５０】
[281]ＩＧＦ−１Ｒの阻害は、ＩＲシグナル伝達の代償的な増加と関連がある。
[282]ホスホ−ＩＧＦ−１Ｒおよびホスホ−ＩＲは、ヒト腫瘍細胞系において同時に検出可能であることが多い（図３Ａ、左のパネル）。我々は、ヒト腫瘍細胞系において、ＩＧＦ−１ＲとＩＲの共阻害が、ＩＲＳ１およびＡＫＴを介した下流の生存シグナル伝達の最大の阻害に必要かどうかを決定する試みを行った。腫瘍細胞シグナル伝達分析で、ＩＧＦ−１ＲおよびＩＲのリン酸化、加えてホスホ−ＩＲＳ１Ｙ６１２、ホスホ−ＡＫＴおよびホスホ−ＥＲＫなどの細胞質内のシグナル伝達の中間体を測定することによって、ＯＳＩ−９０６を選択的な抗ＩＧＦ−１Ｒモノクローナル抗体、ＭＡＢ３９１と比較した。ＭＡＢ３９１は、ＩＧＦ−１Ｒホモ二量体とＩＧＦ−１Ｒ／ＩＲヘテロ二量体の両方（ただしＩＲ／ＩＲホモ二量体は除外）からのシグナル伝達を阻害することによって、現在臨床開発中の抗ＩＧＦ−１Ｒモノクローナル抗体治験薬の多くと類似した薬理学的特性を示すと考えられる。ＩＧＦ−１ＲおよびＩＲのリン酸化に対するＯＳＩ−９０６の作用（３μＭ）またはＭＡＢ３９１の作用（３μｇ／ｍＬ）を様々な腫瘍タイプを提示する９種の腫瘍細胞系を含むパネル全体にわたり決定した。試験された各細胞系において、ＯＳＩ−９０６は、ホスホ−ＩＧＦ−１Ｒを９０％より多く減少させ、ホスホ−ＩＲを５０％より多く減少させた（図３Ａ）。ＭＡＢ３９１もホスホ−ＩＧＦ−１Ｒの減少については同様に有効であったが、試験された９種の腫瘍細胞系（Ｃｏｌｏ２０５）のうち１種においてはホスホ−ＩＲを中程度にしか阻害しなかった（５０％）。興味深いことに、ＭＡＢ３９１処理によって、評価された９種の細胞系のうち７種において検出可能なホスホ−ＩＲの実質的な増加が起こり、これは、代償的なＩＧＦ−１Ｒ／ＩＲのシグナル伝達モデルを裏付けるものである。
【０２５１】
[283]ＩＧＦ−１Ｒ阻害剤の下流のＡＫＴおよびＥＲＫシグナル伝達をブロックする能力は、それらの腫瘍細胞増殖および生存を減少させる能力と関連がある。ＳＫ−Ｎ−ＡＳ（神経芽細胞腫）腫瘍細胞において、ホスホ−ＩＲではなくホスホ−ＩＧＦ−１Ｒを検出することができ、これは、ＯＳＩ−９０６またはＭＡＢ３９１のいずれかのホスホ−ＡＫＴレベルを減少させる能力に関連する（図３Ｂ）。しかしながら、検出可能な最低限のホスホ−ＩＲおよびホスホ−ＩＧＦ−１Ｒを有する４種の細胞系（Ｈ３２２、Ｈ２９５Ｒ、および、Ａ６７３）のうち３種において、ＯＳＩ−９０６は、ＭＡＢ３９１による減少よりも大規模にホスホ−ＡＫＴまたはホスホ−ＥＲＫレベルを減少させた。これは特にＨ２９５ＲＡＣＣ細胞系で顕著であり、最大のホスホ−ＩＲ／ホスホ−ＩＧＦ−１Ｒ比を示した。ＭＡＢ３９１はＩＧＦ−１Ｒ発現の（おそらく内在化および分解による）７０〜９０％の減少を促進することができる能力を有するが、それでもなおＭＡＢ３９１は、ホスホ−ＡＫＴを最大限減少させることは不可能であった。これらのデータは、ＩＧＦ−１Ｒが選択的に阻害される際の下流のシグナル伝達を維持するＩＲの役割を裏付けるものである。
【０２５２】
[284]ＩＲＳ１はＩＧＦ−１Ｒ／ＩＲの基質であり、ＰＩ３Ｋ−ＡＫＴ経路に関するシグナル伝達の中間体として役立つ。ｐＩＲＳ１Ｙ６１２の阻害は、ＩＧＦ−１Ｒ阻害剤の活性と関連がある（４７）。Ａ６７３、Ｈ３２２およびＨ２９５Ｒ腫瘍細胞系において、ＭＡＢ３９１ではなくＯＳＩ−９０６は、ＩＲＳ１Ｙ６１２のリン酸化を強く阻害した（図３Ｃ）。Ｈ２９５Ｒ細胞において、ＭＡＢ３９１ではなくＯＳＩ−９０６によるＩＲＳ１およびＡＫＴのリン酸化の阻害は、ＡＫＴの直接の基質であるホスホ−ＰＲＡＳ４０の減少に関連する。これらのデータから、ＩＲは、腫瘍細胞においてＩＲＳ１のレベルでの下流のＡＫＴシグナルの活性化に寄与する可能性があることが示される。
【０２５３】
[285]データから、ＩＲは、化学療法剤で腫瘍細胞を処理する際に生存促進性の役割を果たす可能性があることも示される。我々は、Ａ６７３腫瘍細胞をドキソルビシン（３００ｎＭ）で処理した後、ＩＲとＩＧＦ−１Ｒ両方のリン酸化のアップレギュレートが起こるが、これは、ｐＥＲＫのレベルでの下流のシグナル伝達におけるリン酸化の増加と相関があることを見出した。ＯＳＩ−９０６はＩＲとＩＧＦ−１Ｒの両方を阻害するが、ＭＡＢ３９１は、ｐＩＲを完全に阻害しない。従って、ＭＡＢ３９１と比較すると、ＯＳＩ−９０６は、ｐＥＲＫをより大規模に阻害する。
【０２５４】
[286]ＩＲおよびＩＧＦ−１Ｒの二重阻害は、インビボでの抗腫瘍活性の強化と関連がある。
[287]ＩＲおよびＩＧＦ−１Ｒの二重阻害を、インビボで２種の異種移植腫瘍モデル、ＧＥＯ（ＣＲＣ）、および、ＳＫ−Ｎ−ＡＳ（神経芽細胞腫）を用いて調査した。ＧＥＯおよびＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞はいずれもＩＧＦ２のｍＲＮＡを発現する。どちらの細胞系も類似のレベルのＩＧＦ１ＲのｍＲＮＡを発現するが、ＳＫ−Ｎ−ＡＳ細胞ではなくＧＥＯ細胞はＩＲのｍＲＮＡも発現する（図４Ａ）。ＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍細胞は、ホスホ−ＩＲではなく容易に検出できるレベルの最低限のホスホ−ＩＧＦ−１Ｒを有し、それに対してＧＥＯ細胞は、ホスホ−ＩＧＦ−１Ｒおよびホスホ−ＩＲをいずれも高レベルで含む（図３Ｂ、および、４Ａ）。ＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍モデルにおいて、ＯＳＩ−９０６を１日１回、１４日間、５０ｍｇ／ｋｇで投与したところ、投与期間中ずっと１００％の有意な平均腫瘍増殖抑制（ＴＧＩ）が起こった。このモデルにおいて、ＭＡＢ３９１を３日毎に腹腔内に１ｍｇ投与したところ、これも有効であった（平均６８％のＴＧＩ）。ＯＳＩ−９０６またはＭＡＢ３９１いずれかの単回投与での処理によってホスホ−ＡＫＴが減少し（媒体コントロールと比較して＞６０％）、そのあとのタイムポイントで部分的に回復した（図４Ａおよび図７）。ＡＫＴの基質のホスホ−ＰＲＡＳ４０に対しても似たような作用が観察された（データ示さず）。ＧＥＯ異種移植片モデルにおいて、５０ｍｇ／ｋｇのＯＳＩ−９０６で、１日１回、１４日間処理したところ、腫瘍増殖の有意な阻害が起こったが（投与期間にわたり平均７９％のＴＧＩ）、このモデルにおいて、ＭＡＢ３９１を３日毎に合計で５回の用量で投与したところ、完全に不活性であった（図４Ａ）。いずれの薬物も十分な許容性を有し、体重の損失は最小であった（１０％未満）。ＧＥＯモデルにおけるＯＳＩ−９０６の有効性は腫瘍におけるホスホ−ＡＫＴの減少で示されるが、それに対して、ＭＡＢ３９１での処理では、ホスホ−ＡＫＴの減少は起こらなかった（図４Ａ、および、データ示さず）。ＯＳＩ−９０６とＭＡＢ３９１とのホスホ−ＡＫＴに対する差異的な作用は、それらのホスホ−ＩＲに対する作用と相関する（図４Ｂ）。ＯＳＩ−９０６またはＭＡＢ３９１のどちらの処理によってもホスホ−ＩＧＦ−１Ｒの減少が起こったが（投与期間にわたり５０％を超える阻害）、ＯＳＩ−９０６単独での治療でホスホ−ＩＲの有意な減少が起こった（少なくとも１６時間で５０％を超える）。それに対して、ＭＡＢ３９１での処理は、投与してから最初の４８時間ではホスホ−ＩＲに対して有意な作用はなく、投与してから７２時間後に、媒体で処理したコントロール腫瘍と比較して２倍大きい規模でホスホ−ＩＲレベルが増加した（図４Ｂ）。これらのデータは、ＭＡＢ３９１での処理はホスホ−ＩＲの代償的な増加を起こすという我々のインビトロでの観察と一致している。それゆえに、ＧＥＯ腫瘍においてＩＧＦ−１ＲおよびＩＲを共に標的化することによりホスホ−ＡＫＴの阻害が強化され、これはすなわち腫瘍増殖抑制の改善に相当する。総合すると、ＧＥＯおよびＳＫ−Ｎ−ＡＳ腫瘍モデルにおける薬力学的研究および有効性の研究から、ＩＧＦ−１ＲおよびＩＲ両方の阻害は、両方の受容体が存在し活性化されている癌���おいて最適な有効性をもたらすのに必要な場合があることが示される。さらにこれらのデータから、インスリン受容体レベル（例えばＩＲ転写レベル（すなわちＩＲ−Ａおよび／またはＩＲ−Ｂ））がＧＥＯ腫瘍細胞に等しいかまたはそれより大きい腫瘍細胞は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想され、従って、このようなレベルを示す腫瘍細胞を含む腫瘍を有する患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体療法に応答しない可能性が高いことも示される。
【０２５５】
[288]さらにこれらのデータから、高レベルの活性インスリン受容体の指標である高いホスホ−ＩＲ／ホスホ−ＩＧＦ−１Ｒ比を有する所定の腫瘍細胞（例えばＡ６７３細胞、図３Ｂ）は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体に対する感受性を有さないと予想されることも示される。このデータから、Ａ６７３腫瘍細胞に等しいかまたはそれより大きいインスリン受容体レベル（例えばＩＲ転写レベル（すなわちＩＲ−Ａ、および／または、ＩＲ−Ｂ））を有する腫瘍細胞は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体による阻害に対する感受性を有さないと予想され、従ってこのようなレベルを示す腫瘍細胞を含む腫瘍を有する患者は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体療法に応答しない可能性が高いことが示される。
【０２５６】
[289]ＯＳＩ−９０６は、インスリンで駆動するＡＫＴシグナル伝達を阻害する。
[290]高レベルのインスリンは、多数の腫瘍タイプにおいて予後不良と関連がある（１，３６，３７）。ＨＴ−２９ＣＲＣ細胞において、５０μＩＵ／ｍＬのインスリン（これは、ヒトにおける軽度の空腹時インスリン値に相当するレベルである）で、ホスホ−ＩＧＦ−１Ｒではなく、ホスホ−ＩＲおよびホスホ−ＡＫＴの両方が増加することが確認された（図５ＡおよびＢ）。５または５０μＩＵ／ｍｌいずれかのインスリン（これは、それぞれ通常の空腹時インスリン値、および、軽度の高インスリンレベルに相当する）で処理されたＨＴ−２９細胞において、ＯＳＩ−９０６だけがホスホ−ＩＧＦ−１Ｒ、ホスホ−ＩＲおよびホスホ−ＡＫＴを完全に阻害した。それに対して、試験された全ての条件下で、ＭＡＢ３９１だけがＨＴ−２９におけるホスホ−ＩＧＦ−１Ｒ含量を有意に減少させ、ホスホ−ＩＲおよびホスホ−ＡＫＴに対して最低限の作用しか示さないかまったく作用を示さなかった（図５Ａ、および、Ｂ）。インスリンではなく、ＩＧＦ−１またはＩＧＦ−２リガンドを中和することができるＩＧＦＢＰ３でホスホ−ＡＫＴを処理したところ、ホスホ−ＡＫＴは、ＭＡＢ３９１で観察された作用と類似した作用が起こり、これは、ＯＳＩ−９０６によって引き起こされる作用よりもはるかに有意性が低かった（図５Ｂ）。これらのデータから、インスリンレベルの増加は、たとえ軽度であっても、ＩＧＦ−１Ｒ選択的な治療の活性を低減させる可能性がある腫瘍細胞に生存シグナルを提供する可能性があることが示される。
【０２５７】
[291]ＩＧＦ−２は、ＩＲ−ＡＫＴのシグナル伝達を駆動させることができる。
[292]ＩＧＦ−２の発現の増加が多数の腫瘍タイプで観察されており、これは、ある場合にはＩＧＦ２遺伝子座におけるインプリンティング消失（ＬＯＩ）によって引き起こされるものである（４８〜５３）。ＩＧＦ２に関するＬＯＩは、様々なヒトの癌のうち、結腸直腸癌（ＣＲＣ）や副腎皮質癌（ＡＣＣ）などを含む部分集合で起こる。ＩＧＦ２に関するＬＯＩ、および、ＩＧＦ２のｍＲＮＡ発現の増加は、ＡＣＣ腫瘍の９０％より多くで観察されている（５４）。ＩＧＦ−２はＩＲを活性化することができるため、我々は、ＩＧＦ−２も、ＩＧＦ−１Ｒとは独立して自己分泌ループでＡＫＴを介してシグナル伝達するのかどうかを調べた。ＭＤＡＨ−２７７４ＯｖＣａ腫瘍細胞は、ＩＧＦ−２の自己分泌ループを利用し、インビトロでＯＳＩ−９０６に対して感受性を有する。ＭＤＡＨ−２７７４細胞を、ＯＳＩ−９０６またはＭＡＢ３９１を単独で用いて、または、インスリン、ＩＧＦ−１またはＩＧＦ−２の存在下で処理した。受容体のリン酸化の増加で示されるように、インスリン（５０μＩＵ／ｍＬ）はＩＧＦ−１ＲではなくＩＲを活性化した（図６Ａ）。４０ｎｇ／ｍＬのＩＧＦ−１またはＩＧＦ−２での処理により、ＩＲおよびＩＧＦ−１Ｒのリン酸化が増加した。ＩＧＦ−１は、ＩＧＦ−１Ｒ／ＩＲヘテロ二量体との関係のなかでホスホ−ＩＲを増加させたものと推測されるが、一方でＩＧＦ−２はＩＧＦ−１Ｒ／ＩＲヘテロ二量体またはＩＲ／ＩＲホモ二量体のいずれかとの関係のなかでホスホ−ＩＲを増加させたものと推測される。ＯＳＩ−９０６は、いずれのケースにおいてもＩＧＦ−１ＲおよびＩＲのリン酸化を完全に阻害した。またＭＡＢ３９１も全ての条件下でホスホ−ＩＧＦ−１Ｒを阻害したが、ホスホ−ＩＲに対する作用は刺激リガンドに応じて様々であった。基準となる条件下で、ＭＡＢ３９１はホスホ−ＩＲをおよそ２倍に活性化した。５０μＩＵ／ｍｌのインスリンは、ホスホ−ＩＲの増加を７倍促進し、細胞をさらにＭＡＢ３９１で処理したところ、１２倍より大きく促進することができた。ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２はいずれもホスホ−ＩＲの増加を促進したが、ＭＡＢ３９１は、ＩＧＦ−１によって駆動されたホスホ−ＩＲを完全に阻害したが、ＩＧＦ−２によって駆動されたホスホ−ＩＲは完全には阻害されなかった。いずれのリガンドも下流のＡＫＴシグナル伝達を促進した。ＭＡＢ３９１は、ホスホ−ＡＫＴのＩＧＦ−１刺激を完全に阻害した（図６Ｂ）。しかしながら、ＭＡＢ３９１で前処理した細胞において、ＩＧＦ−２は部分的にＡＫＴをリン酸化から守ることができた。これらのデータから、ＩＧＦ−１Ｒを特異的に阻害する物質をＩＧＦ−１ＲとＩＲとを共に阻害する物質と比較すると有効性に差が出る可能性があるが、これは、腫瘍内の一区画で利用可能な様々なリガンドのレベルの影響を受けたためと推測できることが示される。ＩＧＦ−２および／またはインスリンの高い腫瘍内レベルは、ＩＧＦ−１ＲおよびＩＲはいずれもＩＲホモ二量体を活性化することができるため、これらのリガンドを共に標的化することが有効性を最大にするのに必要であることを示す可能性がある。
【０２５８】
[293]ＩＧＦ−２によって駆動するＩＲ−ＡＫＴシグナル伝達をさらに確認するために、ＩＧＦ−２中和抗体のホスホ−ＩＲおよびホスホ−ＡＫＴを減少させる能力を評価した。最低限の培養条件下で、ＭＡＢ３９１はＩＲを代償的な方式で活性化した。しかしながら、ＩＧＦ−２の中和によって、ＩＧＦ−１ＲおよびＩＲの両方についてのリン酸化状態はほぼ完全に阻害された（図６Ｃ）。さらに、ＩＧＦ−２中和抗体によって、ＭＡＢ３９１と比較してより大規模なホスホ−ＰＲＡＳ４０の阻害が起こった。これらのデータから、ＩＲ−ＡＫＴ経路に対するＯＳＩ−９０６の活性の強化は特異的であることが示され、従って、インスリンに加えてＩＧＦ−２が、生存シグナル伝達を維持するために腫瘍細胞においてＩＲのシグナル伝達を活性化できることが示される。
【０２５９】
[294]考察／結論
[295]各種ＲＴＫは腫瘍形成を駆動させるように機能し得るという観察は、ここ数十年にわたり医薬の発見および開発の努力に大きな変革をもたらした。しかしながら、腫瘍細胞はシグナル伝達において高度な柔軟性を示すことから、これは、ＲＴＫ阻害剤の存在下での適応性の生存に寄与する可能性があり、さらに、これらの物質に対して獲得した耐性のメカニズムを同定することが、それらの設計を最適化するた、および、診療所においてそれらの使用を適宜個別化するための主要な目的である。単一の細胞内で複数種のＲＴＫが同時に活性化される可能性があり、それらの間でクロストークが存在する可能性がある。ＥＧＦＲとＩＧＦ−１ＲまたはＭＥＴのいずれかとのクロストークは、ＥＧＦＲが個々に標的化される場合、腫瘍細胞にとって適応性の生存を提供することができる（３９，４０）。これらの受容体対の相互関係をよく示した前臨床データによって、ＥＧＦＲ阻害剤に関して診療所におけるコンビナトリアルＲＴＫ標的化の評価が高まりつつある。
【０２６０】
[296]腫瘍細胞における分裂促進性の駆動装置としてのＩＲの支持が高まりつつあり、さらに、いくつかの実施例において、ＩＧＦ−１ＲまたはＩＲが、非形質転換細胞における他方の阻害を代償することができる。実際には、最初にマウスの発生の研究においてＩＲに対するＩＧＦ−２の活性が発見され、ここで、ＩＲは、ＩＧＦ−２によって活性化されるが、ＩＲは、ＩＧＦ−１Ｒの破壊を補填して胚胚の成長を守ることができることが見出された（３０）。その他の研究から、腫瘍細胞においてＩＧＦ−１Ｒが破壊された場合のインスリンによるシグナル伝達の強化が説明されている（４３）。ＩＧＦ−１ＲおよびＩＲ両方の高度なリン酸化が多くのヒト腫瘍細胞系で観察されており、ここでは、ＩＧＦ−１Ｒ／ＩＲクロストークが、ＩＧＦ−１Ｒが特異的に標的化される場合に細胞生存経路の活性化を維持するために腫瘍細胞によって活用されるその他の手段であることが示された（図６Ｄ）。我々の観察のなかでも特に興味深いことは、腫瘍細胞系の選択的な抗ＩＧＦ−１Ｒモノクローナル抗体、ＭＡＢ３９１での処理は、選択された腫瘍細胞系においてホスホ−ＩＲの代償的な増加を促進したことである。ＩＧＦ−１Ｒモノクローナル抗体に関する観察に対して、ＯＳＩ−９０６でＩＧＦ−１ＲとＩＲとを共に標的化することによってＩＲＳ１−ＡＫＴシグナル伝達経路の阻害が強化されたことが実証された。最終的に、検出可能なホスホ−ＩＧＦ−１Ｒのみを発現するヒト腫瘍の異種移植片モデルにおいてＯＳＩ−９０６とＭＡＢ３９１とはいずれも有効性を達成したが、ホスホ−ＩＲとホスホ−ＩＧＦ−１Ｒの両方が検出可能なヒト腫瘍の異種移植片モデルではＯＳＩ−９０６のみが有効であった。このような環境において、腫瘍細胞において、増殖および／または生存シグナルを仲介するのにＩＧＦ−１ＲとＩＲの両方が必須である可能性がある。
【０２６１】
[297]インスリン過剰血症は、ある種の癌に関する高いリスクと予後不良の要因として高い関連を示してきたが、インスリンは、ＩＲ−ＡＫＴシグナル伝達を介して腫瘍細胞生存を促進するという一つの仮説がある。本明細書において、ＩＧＦ−１Ｒが選択的に標的化された場合、インスリンまたはＩＧＦ−２のいずれかでの処理は、ＡＫＴ経路の活性化を維持することができることがわかった。軽度のインスリン過剰血症に相当するインスリン濃度によって、ＩＧＦ−１Ｒとは独立してＩＲおよびＡＫＴのリン酸化の増加が促進され、さらに、インスリン処理で、ＭＡＢ３９１によるホスホ−ＡＫＴ阻害に対する耐性が促進された。最低限の条件下で、ＭＡＢ３９１によって、腫瘍細胞におけるホスホ−ＩＲの代償的な増加がおよそ２倍に促進され、インスリン添加によってさらに１２倍増加した。臨床開発におけるＩＧＦ−１Ｒ選択的な治験薬は、全身のインスリン血中濃度を高めることができ、それゆえに、腫瘍細胞において抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体に応答して起こるホスホ−ＩＲ代償的な増加が、内分泌性のインスリンリガンドの供給が増加することによってさらに強化される可能性がある（５５）。
【０２６２】
[298]またＩＧＦ−１Ｒに加えてＩＲも、ＩＧＦ−２によって活性化される可能性がある。ＭＡＢ３９１は、ＩＧＦ−１またはＩＧＦ−２によって刺激されたホスホ−ＩＧＦ−１Ｒを阻害した。しかしながら、ＩＧＦ−１によって活性化される場合、ＭＡＢ３９１は、ＩＧＦ−１Ｒ／ＩＲヘテロ二量体との関係のなかでおそらくＩＧＦ−１Ｒによるトランス−リン酸化が介在してＩＲを阻害するが、ＭＡＢ３９１は、ＩＧＦ−２によって活性化されたＩＲのシグナル伝達にほとんど作用を示さなかった。さらに、ＭＡＢ３９１で前処理した腫瘍細胞の場合、ＩＧＦ−１ではなくＩＧＦ−２は、ＡＫＴシグナル伝達を部分的に救済することができる。これらのデータから、ＩＧＦ−２が介在するＩＲホモ二量体の活性化は、ＩＧＦ−１Ｒが個々に標的化される場合、ＡＫＴ経路の活性化を代償できることが示される。最終的に、ＩＧＦ−２の自己分泌ループを有する腫瘍細胞系は、ＭＡＢ３９１と比較して、特にＯＳＩ−９０６に対する感受性を有するようである。
【０２６３】
[299]総合すれば、これらのデータから、ＩＧＦ−１ＲとＩＲとを共に標的化することは、これらの両方の受容体を介したシグナル伝達に二重に関与している腫瘍に、強化された持続的な抗腫瘍活性を送達することを可能にすることが示される。さらに、ＩＲを介したシグナル伝達の増加によってＩＧＦ−１Ｒ特異的抗体に対する急速な耐性が出現する可能性があるため、ＴＫＩ単独によるＩＧＦ−１ＲおよびＩＲの二重の標的化が、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体がなくなった後に有効となる可能性がある。ＩＧＦ−１Ｒ／ＩＲ治療剤の使用を個別に適合させるためには、これらの受容体の差異的な使用を示すマーカーを同定することが重要であると予想される。
【０２６４】
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[301]略語
[302]ＥＧＦ、上皮増殖因子；ＥＭＴ、上皮間葉移行；ＮＳＣＬＣ、非小細胞肺癌；ＳＣＣ、扁平上皮癌；ＨＮＳＣＣ、頭頸部扁平上皮癌；ＣＲＣ、結腸直腸癌；ＭＢＣ、転移性乳癌；ＩＮＳＲまたはＩＲ、インスリン受容体；ＥＧＦＲ、上皮増殖因子受容体；ＥｒｂＢ３、「ｖ−ｅｒｂ−ｂ２赤芽球性白血病ウイルス腫瘍遺伝子同族体３」、また、ＨＥＲ−３としても知られている；ｐＨＥＲ３、リン酸化ＨＥＲ３；Ｅｒｋキナーゼ、細胞外シグナルによって調節されたプロテインキナーゼ、また、マイトジェン活性化タンパク質キナーゼとしても知られている；ｐＥｒｋ、リン酸化Ｅｒｋ；Ｂｒｋ、乳房腫瘍キナーゼ（また、タンパク質チロシンキナーゼ６（ＰＴＫ６）としても知られている）；ＬＣ、液体クロマトグラフィー；ＭＳ、マススペクトロメトリー；ＩＧＦ−１、インスリン様増殖因子１；ＩＧＦ−２、インスリン様増殖因子２；ＩＧＦ−１ＲまたはＩＧＦＲ、インスリン様増殖因子１受容体；ＲＴＫ、受容体−チロシンキナーゼ；ＴＧＦα、トランスフォーミング増殖因子アルファ；ＨＢ−ＥＧＦ、ヘパリン結合性上皮増殖因子；ＬＰＡ、リゾホスファチジン酸；ＴＧＦα、トランスフォーミング増殖因子アルファ；ＩＣ５０、半数最大阻害濃度；ＲＴ、室温；ｐＹ、ホスホチロシン；ｐＰＲＯＴＥＩＮ、ホスホタンパク質、ここで「タンパク質」は、リン酸化されるならばどのようなタンパク質でもよく、例えばＥＧＦＲ、ＥＲＫ、ＨＥＲ３、Ｓ６などである；ｗｔ、野生型；ＰＩ３Ｋ、ホスファチジルイノシトール−３キナーゼ；ＧＡＰＤＨ、グリセルアルデヒド３−リン酸デヒドロゲナーゼ、ＰＭＩＤ、ＰｕｂＭｅｄ、一意の識別子；ＮＣＢＩ、国立バイオテクノロジー情報センター（National Center for Biotechnology Information）；ＮＣＩ、国立癌研究所（National Cancer Institute）；ＭＳＫＣＣ、メモリアル・スローン・ケタリング癌センター（Memorial Sloan Kettering Cancer Center）；ＥＣＡＣＣ、ヨーロピアン・コレクション・オブ・セルカルチャーズ（European Collection of Cell Cultures）；ＡＴＣＣ、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（American Type Culture Collection）。
【０２６５】
[303]参考文献の組み入れ
本明細書において開示された全ての特許、公開された特許出願およびその他の参考文献は、本明細書に援用される。
【０２６６】
[305]等価物
当業者であれば、慣例的な実験を行うだけで、本明細書において具体的に説明されている本発明の具体的な実施態様と等価な多くのものを理解するか、または、確認できるものと思われる。このような等価体も以下の特許請求の範囲に含まれることとする。
【図２】
2013527748.tif 000007
【図３−２】
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【図１】
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【図３−１】
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【図３−３】
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【図３−４】
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【図３−５】
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【図４−１】
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【図４−２】
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【図４−３】
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【図４−４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図６Ｄ】
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【図７】
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【国際調査報告】
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