(57)【要約】本発明は、式（Ｉ）：2013542916.tif 000050［式中、ｎ、Ｒ1およびＲ2は明細書に定義したとおりである］で示される化合物およびその製薬的に許容し得る塩に関する。本発明はさらに、当該化合物の製造方法、当該化合物の製造に有用な新規な中間体、及びこれらを含有する医薬組成物、並びに疾患（例えば癌）の処置におけるそれらの使用に関する。
2013542916.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2013542916.tif 000047
［式中、
ｎは１または２であり；
Ｒ1は、水素、Ｃ1-4アルキル、Ｃ1-3アルコキシＣ2-4アルキル、ヒドロキシＣ2-4アルキルおよび（ＲX）（ＲY）Ｎ−Ｃ2-4アルキルから選択され、ここでＲXおよびＲYはそれぞれ独立に水素またはＣ1-3アルキルを示し；
Ｒ2は、水素、ヒドロキシメチルまたは２−ヒドロキシエチルである］
で示される化合物、またはその製薬的に許容し得る塩。
【請求項２】
ｎが１である請求項１記載の化合物、またはその製薬的に許容し得る塩。
【請求項３】
Ｒ1が水素またはＣ1-4アルキルである請求項１または２記載の化合物、またはその製薬的に許容し得る塩。
【請求項４】
Ｒ1がメチルである請求項１〜３のいずれか記載の化合物、またはその製薬的に許容し得る塩。
【請求項５】
以下からなる群から選択される請求項１記載の化合物：
１−（４−｛［２−アミノ−４−（ブチルアミノ）−６−メチルピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）−４−メチルピペラジン−２−オン；
１−（４−｛［２−アミノ−４−メチル−６−（ペンチルアミノ）ピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）−４−メチルピペラジン−２−オン；
（Ｓ）−１−（４−｛［２−アミノ−４−（１−ヒドロキシヘキサン−３−イルアミノ）−６−メチルピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）−４−メチルピペラジン−２−オン；
（Ｓ）−１−（４−｛［２−アミノ−４−（１−ヒドロキシペンタン−２−イルアミノ）−６−メチルピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）−４−メチルピペラジン−２−オン；
（Ｓ）−１−（４−｛［２−アミノ−４−（１−ヒドロキシヘキサン−３−イルアミノ）−６−メチルピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）ピペラジン−２−オン；
またはその製薬的に許容し得る塩。
【請求項６】
製薬的に許容し得る希釈剤または担体と組み合わせて、請求項１〜５のいずれか記載の化合物またはその製薬的に許容し得る塩を含有する医薬組成物。
【請求項７】
医薬として使用するための、請求項１〜５のいずれか記載の化合物またはその製薬的に許容し得る塩。
【請求項８】
癌の処置において使用するための、請求項１〜５のいずれか記載の化合物またはその製薬的に許容し得る塩。
【請求項９】
癌の処置において使用するための医薬の製造における、請求項１〜５のいずれか記載の化合物またはその製薬的に許容し得る塩。
【請求項１０】
ヒトなどの温血動物における癌を処置する方法であって、請求項１〜５のいずれかにおいて定義される有効量の式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩を、そのような処置を必要とする動物に投与することを含んでなる、方法。
【請求項１１】
請求項１において定義される式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩の製造方法であって、式（ＸＸＩＩＩ）：
【化２】
2013542916.tif 000048
［式中、Ｒ1は、請求項１の式（Ｉ）で定義したとおりであり、ＬＧ4は脱離基である］
で示される化合物と、式（ＸＩＩ）：
【化３】
2013542916.tif 000049
［式中、Ｒ2およびｎは請求項１の式（Ｉ）で定義したとおりである］
で示される化合物を、塩基の存在下または非存在下で反応させる工程を含んでなる方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な環状アミド化合物、より具体的には、ＴＬＲ７アゴニストとして作用する新規な環状アミド化合物に関する。本発明はさらに、そのような化合物の製造方法およびその製造における新規な中間体、そのような化合物を含有する医薬組成物、医薬の製造におけるそのような化合物の使用、ならびにＴＬＲ７が介在する状態（アレルギー疾患、自己免疫疾患、ウイルス性疾患、特に癌、等）の処置におけるそのような化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）は、マクロファージや樹状細胞（ＤＣ）を含む様々な免疫細胞で発現する。ＴＬＲは、病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）と称する病原体上の分子モチーフを認識する。ヒトにおいては、細胞表面に存在するＴＬＲ１、２、４、５および６、エンドソーム内に発現するＴＬＲ３、７、８および９を含む１３種のＴＬＲがこれまでに同定されている。ＴＬＲによってそれぞれ認識する病原体由来のリガンドが異なる（例えば、ＴＬＲ２（細菌のリポタンパク）、ＴＬＲ３（二本鎖ＲＮＡ／ポリ（Ｉ：Ｃ））、ＴＬＲ４（リポ多糖類）、ＴＬＲ５（フラジェリン）、ＴＬＲ７（一本鎖ＲＮＡ）およびＴＬＲ９（ＣｐＧ含有ＤＮＡ））。ＤＣ等の抗原提示細胞上のＴＬＲとリガンドの結合は、炎症性サイトカインの産生、樹状細胞の成熟および適応免疫系の刺激につながる。ＴＬＲ７とＴＬＲ９は、形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）で発現し、リガンド認識はインターフェロン−α（ＩＮＦ−α）の分泌につながる。ＴＬＲの活性化の効果を評価する細菌またはウイルス成分を用いた前臨床研究（単剤療法および／または抗がん剤との併用）では、様々なマウス腫瘍モデルにおいて腫瘍増殖阻害を示した。
【０００３】
数多くの皮膚疾患（例えば、生殖器疣贅、伝染性軟属腫および黒色腫）の処置に用いられているイミダゾキノリンであるイミキモドを含め、低分子量のＴＬＲ７アゴニストが幾つか記載されている。黒色腫の場合、イミキモド（アルダラTM、Graceway Pharmaceuticals, Bristol, TN）の局所適用は、皮膚転移性黒色腫および悪性黒子において治療効果を示し、表在性の基底細胞癌（ＢＣＣ）の処置について承認されている。前臨床研究および臨床研究が示すところによれば、イミキモドは、１型ＩＦＮおよびＩＦＮ誘導性遺伝子の誘導を介して機能しているようであり、これにより腫瘍細胞の増殖に対する直接の効果を有し、および／または適応免疫系のコンポーネントを利用し得る。イミキモドとは異なり、８５２Ａは、全身投与に適したイミダゾキノリンである。現在、８５２Ａは、黒色腫を含む多くの癌の適応症について第ＩＩ相臨床試験が行われている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
優れた効果および／または有益な物性（例えば、高い浸透性および／または低い血漿タンパク結合）および／または好ましい毒性プロファイルおよび／または好ましい代謝プロファイルという理由によって、知られている他のＴＬＲ７アゴニスト（例えば８５２Ａ）と比較して疾患（例えば癌）の処置においてより効果の高い、さらなるＴＬＲ７アゴニストが必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本明細書において説明するように、本発明の環状アミド化合物は、in vitroでＴＬＲ７を活性化することができる。この活性化の結果として、本発明の環状アミド化合物は、ヒトの疾患（例えば癌）の予防または処置（単剤治療または他の化学療法剤もしくは放射線療法との併用）において有用である。
【０００６】
本発明のさらなる特徴として、本発明の化合物は、ＴＬＲ８と比較してＴＬＲ７に対する顕著に優れた選択性を有する。ＴＬＲ７とＴＬＲ８は、細胞内での発現に違いがあり、結果として選択的なアゴニストによる刺激は異なったサイトカインプロファイルを誘導する。ＴＬＲ８刺激（ＴＬＲ８選択的アゴニストまたはＴＬＲ７／８デュアルアゴニストのいずれかでの）の結果、ＴＮＦα、ＩＬ−１βおよびＩＬ−６を含む炎症性サイトカインのレベルは増大する（Gorden et al (2005) J. Immunol. 174, 1259-1268）。反対に、ＴＬＲ８刺激の結果ＩＦＮαは低レベルとなる。したがって、ＴＬＲ７選択的なアゴニストは、アレルギー疾患で増加するＴｈ２サイトカインの抑制に重要なＩＦＮα（Huber et al (2010) J. Immunol. 185; 813-817）の誘導に有利に働く。また、化合物がＴＬＲ８と比べてＴＬＲ７に対し選択的であることで、炎症性サイトカインの誘導が減少し、ヒトでの炎症反応が回避される。
【０００７】
本発明のさらなる特徴として、本発明の化合物の幾つかはまた、顕著に優れたＰＡＭＰＡ（Parallel Artificial Membrane Permeability Assay）プロファイルを有する。ＰＡＭＰＡで低い数値を示す化合物は、浸透性が低く化合物の経口での投与不足に関係するので望ましいといえない。
【０００８】
本発明のさらなる特徴として、本発明の化合物はまた、顕著に優れたｈＥＲＧプロファイルを有する。ｈＥＲＧイオンチャンネルに対する活性が顕著な化合物は、ＱＴ延長の誘発と関連し、そのような活性が多型性心室頻拍の発生や心臓死に関係するため、望ましいといえない。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明の第一の態様によれば、式（Ｉ）：
【化１】
2013542916.tif 000003
［式中、
ｎは１または２であり；
Ｒ1は、水素、Ｃ1-4アルキル、Ｃ1-3アルコキシＣ2-4アルキル、ヒドロキシＣ2-4アルキルおよび（ＲX）（ＲY）Ｎ−Ｃ2-4アルキルから選択され、ここでＲXおよびＲYはそれぞれ独立に水素またはＣ1-3アルキルを示し； 
Ｒ2は、水素、ヒドロキシメチルまたは２−ヒドロキシエチルである］
で示される化合物、またはその製薬的に許容し得る塩を提供する。
【００１０】
上で定義した式（Ｉ）の化合物が、１またはそれ以上の不整炭素原子によって光学活性体としてまたはラセミ体として存在する場合、上述の活性を有する任意のそのような光学活性体またはラセミ体が本発明の定義に包含されることは理解されよう。光学活性体の合成は、当分野でよく知られた有機化学の標準的な技術（例えば光学活性な出発物質からの合成またはラセミ体の分割）によって行うことができる。同様に、上述の活性は、以下に記載する標準的な実験技術を用いて評価することができる。
【００１１】
上記式（Ｉ）で示される化合物が、溶媒和されていない形態でも溶媒和された形態（例えば水和物）でも存在し得ることは理解されよう。本発明が、ＴＬＲ７を活性化するそのような溶媒和された形態のすべてを包含することは理解されよう。
【００１２】
また、式（Ｉ）で示される化合物が結晶形として存在し結晶多形を示し得ることは理解されよう。本発明はＴＬＲ７を活性化するそのような形態のすべてを包含する。
【００１３】
用語「Ｃ1-4アルキル」は、直鎖または分岐鎖であってよい１〜４炭素原子長の飽和の炭素鎖を意味する。但し、「プロピル」など個別のアルキル基に言及する場合は、特に直鎖であるもののみを指し、tert-ブチルなど個別の分岐鎖アルキル基に言及する場合は、特に分岐鎖であるもののみを指す。例えば、「Ｃ1-4アルキル」としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチルおよびtert-ブチルが挙げられるがこれに限定されない。用語「Ｃ2-4アルキル」および「Ｃ1-3アルキル」は、これに準じて解釈される。
【００１４】
用語「Ｃ1-3アルコキシＣ2-4アルキル」は、酸素原子を介して、直鎖または分岐鎖であってよい２〜４炭素原子長の他の飽和炭素鎖と連結した、直鎖または分岐鎖であってよい１〜３炭素原子長の飽和の炭素鎖を意味する。例えば、「Ｃ1-3アルコキシＣ2-4アルキル」としては、メトキシエチル、メトキシプロピル、エトキシプロピル、プロポキシエチルおよびメトキシプロピルが挙げられるがこれに限定されない。
【００１５】
用語「ヒドロキシＣ2-4アルキル」は、水素原子の１つがヒドロキシ基で置換された、直鎖または分岐鎖であってよい２〜４炭素原子長の飽和の炭素鎖を意味する。例えば、「ヒドロキシＣ２−４アルキル」としては、ヒドロキシエチル、２−ヒドロキシプロピル、３−ヒドロキシプロピル、１−ヒドロキシイソプロピルおよび４−ヒドロキシブチルが挙げられるが、これに限定されない。
【００１６】
用語「（ＲX）（ＲY）Ｎ−Ｃ2-4アルキル」は、水素原子の１つが「（ＲX）（ＲY）Ｎ−」（ここで、ＲXおよびＲYはそれぞれ独立に水素またはＣ1-3アルキルを示す）で示される基で置換された、直鎖または分岐鎖であってよい２〜４炭素原子長の飽和の炭素鎖を意味する。「Ｃ1-3アルキル」は、直鎖または分岐鎖であってよい１〜３炭素原子長の飽和の炭素鎖を意味し、メチル、エチル、プロピルおよびイソプロピルが挙げられる。
【００１７】
一実施形態では、式（ＩＡ）：
【化２】
2013542916.tif 000004
［式中、Ｒ1、Ｒ2およびｎはそれぞれ、Ｒ1、Ｒ2およびｎについてそれぞれ本明細書に定義したとおりである］
で示される、式（Ｉ）の化合物またはその製薬的に許容し得る塩を提供する。
【００１８】
また、可変基ｎ、Ｒ1およびＲ2は、以下に記載するいずれでもよい。そのような可変基を、定義、クレーム、本明細書において定義した態様または実施形態のいずれかと一緒に用い、本発明のさらなる実施形態またはクレームを提供することができ、文脈上許されない場合を除いて、任意の数の当該基の定義を互いに組み合わせて用い、さらなる実施形態、態様およびクレームを形成してもよい。例えば、当業者は、下記（２）、（４）および（９）を組み合わせれば、ｎが１であり、Ｒ1が水素、Ｃ1-4アルキル、Ｃ1-3アルコキシＣ2-4アルキル、ヒドロキシＣ2-4アルキルまたは（ＲX）（ＲY）Ｎ−Ｃ2-4アルキルであり、Ｒ2が水素または２−ヒドロキシエチルである、式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩が提供されると理解するであろう。あるいは、例えば、当業者は、下記（２）、（７）および（８）を組み合わせれば、ｎが1であり、Ｒ1がメチルであり、Ｒ2が水素、ヒドロキシメチルまたは２−ヒドロキシエチルである、式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩が提供されると理解するであろう。
（１）ｎ＝１または２
（２）ｎ＝１
（３）ｎ＝２
（４）Ｒ1は、水素、Ｃ1-4アルキル、Ｃ1-3アルコキシＣ2-4アルキル、ヒドロキシＣ2-4アルキルまたは（ＲX）（ＲY）Ｎ−Ｃ2-4アルキル
（５）Ｒ1は、水素またはＣ1-4アルキル
（６）Ｒ1は、Ｃ1-4アルキル
（７）Ｒ1は、メチル
（８）Ｒ2は、水素、ヒドロキシメチルまたは２−ヒドロキシエチル
（９）Ｒ2は、水素または２−ヒドロキシエチル
（１０）Ｒ2は、水素
（１１）Ｒ2は、２−ヒドロキシメチル
【００１９】
式（Ｉ）で示される具体的な新規化合物としては、以下の化合物が挙げられるがこれに限定されない：
１−（４−｛［２−アミノ−４−（ブチルアミノ）−６−メチルピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）−４−メチルピペラジン−２−オン：
１−（４−｛［２−アミノ−４−メチル−６−（ペンチルアミノ）ピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）−４−メチルピペラジン−２−オン：
（Ｓ）−１−（４−｛［２−アミノ−４−（１−ヒドロキシヘキサン−３−イルアミノ）−６−メチルピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）−４−メチルピペラジン−２−オン：
（Ｓ）−１−（４−｛［２−アミノ−４−（１−ヒドロキシペンタン−２−イルアミノ）−６−メチルピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）−４−メチルピペラジン−２−オン：
（Ｓ）−１−（４−｛［２−アミノ−４−（１−ヒドロキシヘキサン−３−イルアミノ）−６−メチルピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）ピペラジン−２−オン：
およびその製薬的に許容し得る塩。
【００２０】
本発明の一実施形態では、本明細書記載のいずれかの実施例またはその製薬的に許容し得る塩を提供する。
【００２１】
式（Ｉ）で示される化合物の適当な製薬的に許容し得る塩は、例えば、式（Ｉ）で示される化合物の酸付加塩、例えば無機または有機酸（塩酸、臭化水素酸、硫酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸またはマレイン酸等）との酸付加塩である。
【００２２】
本発明の化合物は、ヒトまたは動物の体内で分解され本発明の化合物を生じるプロドラッグの形態として投与することができる。プロドラッグは、本発明の化合物の物性および／または薬物動態特性を変えるために用いることができる。本発明の化合物が、特性を修飾する基が結合可能な適当な基または置換基を含む場合、プロドラッグを形成することができる。プロドラッグの例としては、式（Ｉ）で示される化合物のアミノ基にて形成し得る、in-vivoで開裂可能なアミド誘導体が挙げられる。
【００２３】
したがって、本発明は、有機合成によって入手可能となるとき、そのプロドラッグの開裂を経てヒトまたは動物の体内で利用可能となるとき、上で定義した式（Ｉ）で示される、そのような化合物を包含する。したがって、本発明は、有機合成の手段によって製造される、また、そのような化合物が前駆体化合物の代謝を経てヒトまたは動物の体内で生じる、式（Ｉ）で示される化合物を包含する。即ち、式（Ｉ）で示される化合物は、合成により製造された化合物であっても、代謝により生じた化合物であってもよい。
【００２４】
式（Ｉ）で示される化合物の好適な製薬的に許容し得るプロドラッグは、望ましくない薬理学的活性や過度の毒性なしに、ヒトまたは動物の身体への投与に適しているとの合理的な医学的判断に基づいたものである。
【００２５】
様々な形態のプロドラッグが、例えば下記文献において記述されている：
a) Methods in Enzymology, Vol. 42, p. 309-396, edited by K. Widder, et al. (Academic Press, 1985)；
b) Design of Pro-drugs, edited by H. Bundgaard, (Elsevier, 1985)；
c) A Textbook of Drug Design and  Development, edited by Krogsgaard-Larsen and H. Bundgaard, Chapter 5 “Design and Application of Pro-drugs”, by H. Bundgaard p. 113-191 (1991)；
d) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992)；
e) H. Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988)；
f) N. Kakeya, et al., Chem. Pharm. Bull., 32, 692 (1984)；
g) T. Higuchi and V. Stella, “Pro-drugs as Novel Delivery Systems”, A.C.S. Symposium Series, Volume 14；および
h) E. Roche (editor), “Bioreversible Carriers in Drug Design”, Pergamon Press, 1987
【００２６】
アミノ基を有する式（Ｉ）で示される化合物の好適な製薬的に許容し得るプロドラッグは、例えば、in vivoで開裂可能なそのアミド誘導体である。アミノ基を形成する好適な製薬的に許容し得るアミドとしては、例えば、Ｃ1-10アルカノイル基（アセチル、ベンゾイル、フェニルアセチル、並びに置換されたベンゾイルおよびフェニルアセチル基、等）と形成するアミドが挙げられる。フェニルアセチルおよびベンゾイル基における置換基の例としては、アミノメチル、Ｎ−アルキルアミノメチル、Ｎ,Ｎ−ジアルキルアミノメチル、モルホリノメチル、ピペラジン−１−イルメチルおよび４−（Ｃ1-4アルキル）ピペラジン−１−イルメチルが挙げられる。
【００２７】
式（Ｉ）で示される化合物は、式（Ｉ）で示される化合物の投与後にヒトまたは動物の体内で形成する１またはそれ以上の代謝物質により部分的にin vivoで効果を奏し得る。上に記載したように、式（Ｉ）で示される化合物のin vivoの効果は、前駆体化合物（プロドラッグ）の代謝によっても発揮され得る。
【００２８】
式（Ｉ）で示される化合物の調製
式（Ｉ）で示される化合物は、以下の反応スキームに記載するとおり調製することができる。
【００２９】
工程（ｉ）
【化３】
2013542916.tif 000005
式（ＩＶ）で示される化合物は、適当な溶媒（ＴＨＦまたはＤＭＦ等）中、適当な温度（例えば０℃〜室温）にて、式（ＩＩＩ）で示される化合物と塩基（ＮａＨ等）を反応させた後、式（ＩＩ）で示される化合物［式中、ＬＧ1およびＬＧ2はそれぞれ独立に適当な脱離基（ブロモ、クロロまたは−ＯＳＯ2Ｒ3等であり、ここでＲ3はＣ1-3アルキルまたは場合により置換されたアリール（フェニル、４−メチルフェニルまたは２,４,６−トリメチルフェニル等）である）を示す］を添加することにより調製することができる。次いで、好ましくは、反応混合物を、場合により添加剤（ＫＩ等）の存在下、加熱（例えば５０〜１００℃）する。
【００３０】
あるいは、式（ＩＶ）で示される化合物を下記スキーム１−２により調製することができる：
【化４】
2013542916.tif 000006
式（ＶＩＩ）で示される化合物は、スキーム１−２に示すように、式（Ｖ）で示される化合物と式（ＶＩ）で示される化合物との反応により調製することができる。反応は、酢酸とピペリジンの存在下、適当な溶媒（トルエン等）中、適当な温度（例えば、５０〜１５０℃）にて行うことができる。式（ＩＶ）で示される化合物は、触媒（Ｐｄ／Ｃ等）の存在下、水素雰囲気下（１〜２０ｂａｒ）、適当な溶媒（ＭｅＯＨ等）中、適当な温度（例えば、２０〜１００℃）にて、式（ＶＩＩ）で示される化合物を還元することにより調製することができる。
【００３１】
式（ＩＶ）で示される化合物はまた、下記スキーム１−３に示す方法によって合成することもできる。
【化５】
2013542916.tif 000007
式（ＩＶ）で示される化合物は、スキーム１−３に示すように、式（ＶＩＩＩ）で示される化合物と式（ＩＸ）で示される化合物とのＨｅｃｋ反応により調製することができる（式中、Ｈａｌはブロモまたはヨードを示す）。反応は、パラジウム触媒（酢酸パラジウム（II）、ビス（トリ−ｏ−トリルホスフィン）パラジウム（II）ジクロリドまたは１,１−ビス（ジ-tert-ブチルホスフィノ）−フェロセンパラジウム（II）クロリド（Pd-118）等）、塩基（ＮａＨＣＯ3、トリエチルアミンまたはジシクロヘキシルメチルアミン等）および塩化テトラブチルアンモニウムまたは臭化テトラブチルアンモニウムを用いて行うことができる。反応は、適当な溶媒（ＴＨＦ、ＤＭＦまたはＤＭＡ等）中、適当な温度（例えば５０〜１５０℃）にて行う。
【００３２】
工程（ｉｉ）
【化６】
2013542916.tif 000008
式（Ｘ）で示される化合物は、適当な溶媒（ＭｅＯＨまたはＥｔＯＨ等）中、適当な温度（例えば５０〜１５０℃）にて、式（ＩＶ）で示される化合物とグアニジンまたは炭酸グアニジンとを反応させることによって調製することができる。
【００３３】
工程（ｉｉｉ）
【化７】
2013542916.tif 000009
式（ＸＩ）で示される化合物は、ＬＧ3がクロロを示す場合、適当な温度（例えば５０〜１５０℃）にて、式（Ｘ）で示される化合物とＰＯＣｌ3とを反応させることにより調製することができる。あるいは、式（ＸＩ）で示される化合物は、式（Ｘ）で示される化合物を、式Ｒ3ＳＯ2Ｃｌ［式中、Ｒ3はＣ1-3アルキルまたは場合により置換されたアリール（フェニル、４−メチルフェニルまたは２,４,６−トリメチルフェニル等）を示す］で示される化合物と反応させることにより調製することもできる。ＬＧ3が−ＯＳＯ2Ｒ3を示すとき、反応は、適当な溶媒（ＤＣＭまたはＴＨＦ等）中、適当な塩基（Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチル−１,３−プロパンジアミンまたはトリエチルアミン等）の存在下、適当な温度（例えば０〜５０℃）にて行うことができる。
【００３４】
工程（ｉｖ）
【化８】
2013542916.tif 000010
式（ＸＩＩＩ）で示される化合物は、場合により添加剤（トリフルオロ酢酸またはＤＩＰＥＡ等）の存在下、適当な溶媒（ブタノール、プロピオニトリル、酢酸ブチルまたは１,４−ジオキサン等）中、適当な温度（例えば５０〜１５０℃）にて、式（ＸＩ）で示される化合物と過剰量の式（ＸＩＩ）のアミンとを反応させることにより調製することができる。あるいは、マイクロウェーブ中、適当な温度（例えば５０〜２００℃）にて、反応を行うことができる。
【００３５】
式（ＸＩＩ）および／または（ＸＩＩＩ）において、Ｒ2がヒドロキシメチルまたは２−ヒドロキシエチルを示す場合、Ｒ2におけるヒドロキシル基を保護基（ベンジルまたはtert-ブチルジメチルシリル等）で保護してもよい。ヒドロキシル基は工程（ｉｖ）の反応後に保護してもよい。
【００３６】
工程（ｖ）
【化９】
2013542916.tif 000011
式（Ｉ）で示される化合物は、適当な溶媒（１,４−ジオキサン、トルエンまたはＤＭＦ等）中、触媒（ＣｕＩ等）、添加剤（Ｎ,Ｎ'−ジメチルジアミノエタンまたはtrans−１,２−シクロヘキサンジアミン）および適当な塩基（Ｃｓ２ＣＯ3またはＫ2ＣＯ3等）の存在下、適当な温度（例えば５０〜１５０℃）にて、式（ＸＩＩＩ）で示される化合物と（ＸＩＶ）とを反応させることにより調製することができる。
【００３７】
式（Ｉ）で示される化合物においてＲ1が水素である場合、式（ＸＩＶ）で示される化合物のＲ1を保護基（tert-ブトキシカルボニル基等）で保護し、これを式（ＸＩＩＩ）で示される化合物と反応させた後、適当な溶媒（１,４−ジオキサンまたはＭｅＯＨ等）中、酸（塩酸またはＴＦＡ等）で脱離してもよい。Ｒ2におけるヒドロキシル基を保護する場合、下記スキーム５−２またはスキーム６に示すように、ヒドロキシ基を保護し保護基を除去するさらなる工程により、式（Ｉ）で示される化合物を調製することができる。
【化１０】
2013542916.tif 000012
スキーム５−２において、ｍは１または２を示し、ＰＧ1は保護基（tert-ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）またはベンジル等）を示す。式（ＸＩＩＩ−２）で示される化合物は、式（ＸＩＩＩ）で示される化合物のヒドロキシル基を保護基：ＰＧ1（ベンジルまたはＴＢＤＭＳ等）で保護することによって調製することができる。式（Ｉ−２）で示される化合物は、スキーム５の工程（ｖ）記載の方法により調製することができる。
【００３８】
保護基がベンジルエーテルを示す場合、脱保護反応は、触媒（Ｐｄ／Ｃ等）を用い、水素雰囲気下（１〜２０ｂａｒ）、適当な溶媒（ＭｅＯＨ等）中、適当な温度（例えば２０〜１００℃）にて、場合により添加剤（塩酸または酢酸）の存在下で、行うことができる。保護基がＴＢＤＭＳを示す場合、保護基をフッ素化合物（フッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ）等）と反応させることにより脱離することができる。
【００３９】
あるいは、スキーム４の反応プロセスにおいて、式（ＸＩＩ）で示される化合物の代わりにスキーム６の式（ＸＶＩＩＩ）で示される化合物を用いてもよい。Ｒ2におけるヒドロキシル基が保護された式（ＸＶＩＩＩ）で示される化合物は、スキーム６により調製することができる。
【化１１】
2013542916.tif 000013
式（ＸＶＩ）で示される化合物は、塩基（ＮａＯＨ等）の存在下、適当な溶媒（メタノールおよび水等）中、適当な温度（例えば０〜５０℃）にて、式（ＸＶ）で示される化合物と二炭酸ジ−ｔ−ブチルとを反応させることにより、式（ＸＶ）で示される化合物［式中、ｍは１または２を示す］のアミノ基を保護基：ＰＧ3（tert-ブトキシカルボニル等）で保護することによって調製することができる。式（ＸＶＩＩ）で示される化合物は、塩基（ＮａＨまたはＤＩＰＥＡ等）の存在下、適当な溶媒（ＤＭＦ等）中、適当な温度（例えば０〜５０℃）にて、式（ＸＶＩ）で示される化合物と臭化ベンジルまたは塩化ベンジルとを反応させることにより、式（ＸＶＩ）で示される化合物のヒドロキシル基を保護基：ＰＧ2（ベンジル等）で保護することにより調製することができる。式（ＸＩＩ）で示される化合物のＲ2におけるヒドロキシル基がＰＧ2で保護された式（ＸＶＩＩＩ）で示される化合物は、ＰＧ3がtert-ブトキシカルボニルである場合、適当な溶媒（１，４−ジオキサンまたはＭｅＯＨ等）中、適当な温度（例えば０〜５０℃）にて、アミノ基を酸（塩酸またはＴＦＡ等）で脱保護することにより調製することができる。
【００４０】
各反応工程に用いる条件は本明細書の実施例に記載する。
【００４１】
あるいは、式（Ｉ）で示される化合物は、スキーム７に示す方法により調製することができる：
【化１２】
2013542916.tif 000014
［式中、ＬＧ3およびＬＧ4はそれぞれ独立に適当な脱離基（クロロ、ブロモまたは−ＯＳＯ2Ｒ3等）を示し、ここでＲ3はＣ1-3アルキルまたは場合により置換されたアリール（フェニル、４−メチルフェニルまたは２,４,６−トリメチルフェニル等）である］
式（ＸＸ）で示される化合物は、適当な溶媒（１,４−ジオキサン、トルエンまたはＤＭＦ等）中、触媒（ＣｕＩ等）、添加剤（Ｎ,Ｎ'−ジメチルジアミノエタンまたはtrans-１,２−シクロヘキサンジアミン等）および塩基（Ｃｓ2ＣＯ3またはＫ2ＣＯ3等）の存在下、適当な温度（例えば５０〜１５０℃）にて、式（ＩＸＸ）で示される化合物と式（ＸＩＶ）で示される化合物とを反応させた後、酸（塩酸水溶液等）またはシリカゲルと反応させることにより調製することができる。式（ＸＸＩ）で示される化合物は、酢酸およびピペリジンの存在下、適当な溶媒（トルエン等）中、適当な温度（例えば５０〜１５０℃）にて、式（ＸＸ）で示される化合物と式（ＩＩＩ）で示される化合物とを反応させることにより調製することができる。式（ＸＸＩＩ）で示される化合物は、触媒（Ｐｄ／Ｃ等）の存在下、水素雰囲気下（１〜２０ｂａｒ）、適当な溶媒（ＭｅＯＨ等）中、適当な温度（例えば２０〜１００℃）にて、式（ＸＸＩ）で示される化合物を還元した後、適当な溶媒（ＭｅＯＨまたはＥｔＯＨ等）中、適当な温度（例えば５０〜１００℃）にて、グアニジンまたは炭酸グアニジンと反応させることにより調製することができる。ＬＧ4がクロロを示す場合、式（ＸＸＩＩＩ）で示される化合物は、適当な温度（例えば５０〜１５０℃）にて、式（ＸＸＩＩ）で示される化合物をＰＯＣｌ3と反応させることにより調製することができる。あるいは、式（ＸＸＩＩＩ）で示される化合物は、式（ＸＸＩＩ）で示される化合物を、式Ｒ3ＳＯ2Ｃｌ［式中、Ｒ3はＣ1-3アルキルまたは場合により置換されたアリール（フェニル、４−メチルフェニルまたは２,４,６−トリメチルフェニル等）を示す］で示される化合物と反応させることにより調製することができる。ＬＧ4が−ＯＳＯ2Ｒ3を示す場合、反応は、適当な溶媒（ＤＣＭまたはＴＨＦ等）中、適当な塩基（Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチル−１,３−プロパンジアミンまたはトリエチルアミン等）の存在下、適当な温度（例えば０〜５０℃）にて、行うことができる。式（Ｉ）で示される化合物は、適当な溶媒（ブタノール、プロピオニトリル、酢酸ブチルまたは１,４−ジオキサン等）中、適当な温度（例えば５０〜１５０℃）にて、場合により添加剤（トリフルオロ酢酸またはＤＩＰＥＡ等）の存在下、過剰量の式（ＸＩＩ）のアミンと反応させることにより調製することができる。あるいは、反応は、マイクロウェーブにて、適当な温度（例えば、５０〜２００℃）にて行うことができる。
【００４２】
反応式と付随する文章および後半の詳細な実験の項に詳細に記載した化合物は、式（Ｉ）の化合物の調製のための有用な中間体であり、遊離の塩基または塩として単離することができる。したがって、本発明のさらなる態様および実施形態は、ここに記載した中間体またはその塩（ここで、該中間体について記載した可変基はいずれも、その可変基に関して本明細書に記載した任意の基であってよい）を提供する。
【００４３】
Ｒ2基を有する中間体（ここで、Ｒ2は、水素以外である）は、Ｒ2基が結合する炭素原子においてキラル中心を有する。さらなる実施形態では、（Ｓ）−立体化学配置を有する、そのような中間体の各々またはその塩を提供する。
【００４４】
式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＶ）および（ＸＶ）で示される化合物は知られている化合物であるか、または知られている化合物から、慣用の方法によってか、もしくは本明細書に記載したそれらの合成によって調製できる。
【００４５】
当業者は、本発明のプロセスにおいて、反応試薬における特定の官能基（ヒドロキシル基またはアミノ基等）を保護基で保護する必要があり得ることを理解するであろう。したがって、式（Ｉ）で示される化合物の調製では、適当な段階で、１またはそれ以上の保護基の脱離を行うこともある。
【００４６】
官能基の保護と脱保護は、Protective Groups in Organic Chemistry', edited by J.W.F. McOmie, Plenum Press (1973) and 'Protective Groups in Organic Synthesis', 3rd edition, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience (1999)に記載されている。
【００４７】
本発明のさらなる態様によれば、製薬的に許容し得る希釈剤又は担体と組み合わせて、上に定義した式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩を含有する医薬組成物を提供する。医薬組成物は癌の処置に用いることができる。組成物は、経口投与のための、例えば錠剤またはカプセルとして；非経口注射（静脈内、皮下、筋肉内、血管内または輸液を含む）のための滅菌溶液、懸濁液またはエマルジョンとして；局所投与のための軟膏またはクリームとして；または直腸投与のための坐薬として適した形態であってよい。
【００４８】
式（Ｉ）で示される化合物、またはその製薬的に許容し得る塩はまた、吸入用のエアスプレーとして投与することができる。エアスプレー（例えば、スプレー、エアロゾル、ドライパウダー製剤等）は、場合により、水性の溶液又は懸濁液として、あるいは、例えば液化したプロペラントを用いる加圧式定量吸入器などの加圧包装体から送達されるエアロゾルとして製剤化することができる。ドライパウダー製剤を用いてもよい。吸入に適したエアロゾルは、懸濁液または溶液のいずれであってもよく、一般的に式（Ｉ）の化合物またはその製薬的に許容し得る塩、及び適当なプロペラント（フッ化炭素、水素含有クロロフルオロカーボン又はそれらの混合物等）を含有する。具体的には、ハイドロフルオロアルカン、具体的には１,１,１,２−テトラフルオロエタン、ヘプタフルオロアルカン（ＨＦＡ）（１,１,１,２,３,３,３−ヘプタフルオロ−ｎ−プロパン等）またはそれらの混合物を含有し得る。エアロゾルは、必要に応じ、界面活性剤などの当業者によく知られているさらなる添加剤（例えば、オレイン酸やレシチン）および共溶媒（例えば、エタノール）などを含有し得る。具体的には、エアロゾル調製物は、「タービュヘイラーTM」として知られている吸入器を使用して送達することができる。
【００４９】
経口投与のために、本発明の化合物をアジュバントまたは担体（例えば、ラクトース、サッカロース、ソルビトール、マンニトール；デンプン、例えば、ジャガイモデンプン、トウモロコシデンプンまたはアミロペクチン、セルロース誘導体）；結合剤（例えば、ゼラチンまたはポリビニルピロリドン）；および／または滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ポリエチレングリコール、ワックス、パラフィンなど）と混合した後、錠剤に圧縮することができる。コーティング錠が必要な場合は、上記のように調製したコアを、例えば、アラビアゴム、ゼラチン、タルクおよび二酸化チタンを含有し得る濃縮糖溶液でコーティングすることができる。あるいは、揮発性の有機溶媒に溶解した適当なポリマーで錠剤を被覆してもよい。
【００５０】
ソフトゼラチンカプセルの調製のために、本発明の化合物を、例えば、植物油又はポリエチレングリコールと混合することができる。ハードゼラチンカプセルは、錠剤について上に記載した賦形剤のいずれかを用いた化合物の顆粒を含有し得る。また、本発明の化合物の液体または半固体製剤をハードゼラチンカプセル内に充填してもよい。
【００５１】
経口投与用の液体製剤は、シロップまたは懸濁液の形態であってもよく、例えば、糖、並びにエタノール、水、グリセロールおよびプロピレングリコールの混合物と本発明の化合物を含有する溶液であってよい。このような液体製剤は、場合により、着色料、香料、サッカリンおよび／または増粘剤としてカルボキシメチルセルロースまたは当業者に公知の他の添加剤を含有してもよい。
【００５２】
式（Ｉ）の化合物は、温血動物に対し、通常５〜５０００ｍｇ／ｍ2（体表面積）、即ち、約０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ、の範囲の単位用量にて投与し、これは通常、治療上有効な用量をもたらす。錠剤またはカプセルのような単位投与形態は、通常、例えば１〜２５０ｍｇの活性成分を含有する。好ましくは、1日あたり１〜５０ｍｇ／ｋｇの範囲の投与量で用いられる。但し、この１日あたりの用量は、処置を受ける宿主、具体的な投与経路および処置される疾患の重症度によって変更する必要がある。したがって、至適用量は、個別の患者を処置する施術者が決定することができる。
【００５３】
投与経路および投与レジメについてのさらなる情報については、Comprehensive Medicinal Chemistry 第5巻25.3章(Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press 1990を参照のこと。
【００５４】
特段の記載がない限り、本明細書の文脈において、用語「治療」には「予防」も含まれる。用語「治療の」および「治療上」はこれに準じて解釈される。
【００５５】
本明細書において用いられる、用語「処置」は、症状のいずれか、幾つかまたはすべてを全体的にまたは部分的に緩和するため、または背景にある病理の矯正もしくは穴埋めのために、疾患に対処するという、その通常の日常の意味である。
【００５６】
本明細書において用いられる場合、用語「予防」は、その通常の日常の意味を有し、一次予防（疾患の発症を防ぐ）および二次予防（既に疾患が発症し、患者がその疾患の一時的または永続的な増悪もしくは悪化、またはその疾患に関連する新たな症状の発症が、それにより保護される）を包含する。
【００５７】
本発明で定義される化合物は、in vitroでのＴＬＲ７の効果的な活性化因子である。従って、本発明の化合物は、ＴＬＲ７が単独でまたは部分的に介在する疾患または医学的状態の処置において潜在的に有用な薬剤であると期待される。例えば、本発明の化合物で、下記１〜８に示す疾患や状態を処置することが可能である。
【００５８】
１．呼吸器：以下を含む気道の閉塞性疾患：断続的および永続的のいずれの、あらゆる重症度の喘息（気管支喘息、アレルギー性喘息、内因性喘息、外因性喘息、運動誘発性喘息、薬剤誘発性喘息（アスピリンおよびＮＳＡＩＤ誘発を含む）および粉塵誘発性喘息を含む）；および他の原因による気道過敏；慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）；気管支炎（感染性および好酸球性気管支炎を含む）、肺気腫；気管支拡張症；嚢胞性線維症；サルコイドーシス；農夫肺および関連疾患；過敏性肺炎；肺線維症（特発性線維化性肺胞炎、特発性間質性肺炎、抗新生物治療および慢性感染（結核およびアスペルギルス症および他の真菌感染症を含む）に伴う線維症を含む）；肺移植の合併症；肺血管系の血管炎や血栓症、および肺高血圧症；気道の炎症や分泌状態に関連する慢性の咳および医原性の咳の処置を含む鎮咳作用；急性及び慢性鼻炎（薬物性鼻炎および血管運動神経性鼻炎を含む）；通年性および季節性アレルギー性鼻炎（神経性鼻炎（花粉症）を含む）；鼻ポリープ症；急性ウイルス感染（一般的な風邪、および呼吸器合胞体ウイルス、インフルエンザウイルス、コロナウイルス（ＳＡＲＳを含む）およびアデノウイルスに起因する感染を含む）；
【００５９】
２．皮膚：乾癬、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎や他の湿疹性皮膚疾患、および遅延型過敏反応；植物性皮膚炎および光線皮膚炎；感染性と非感染性の両方の、脂漏性皮膚炎、疱疹状皮膚炎、扁平苔癬、硬化性萎縮性苔癬、壊疽性膿皮症、皮膚サルコイド、円板状エリテマトーデス、天疱瘡、類天疱瘡、表皮水疱症、じんましん、血管性浮腫、血管炎、中毒性紅斑、皮膚好酸球増加症、円形脱毛症、男性型脱毛症、スウィート症候群、ウェーバー・クリスチャン症候群、多形性紅斑、蜂巣炎；脂肪織炎、皮膚リンパ腫、非メラノーマ皮膚癌やその他の異形成病変；固定薬疹を含む薬剤誘発性疾患；
【００６０】
３．目：眼瞼炎；通年性および春季アレルギー性結膜炎を含む結膜炎；虹彩炎；前部および後部ブドウ膜炎；脈絡膜炎；網膜を冒す、自己免疫性、変性または炎症性障害；交感神経眼炎を含む眼炎；サルコイドーシス；ウイルス、真菌、および細菌を含む感染症；
【００６１】
４．泌尿生殖器：間質性腎炎や糸球体腎炎を含む腎炎；ネフローゼ症候群；急性および慢性（間質性）膀胱炎およびハナー潰瘍を含む膀胱炎；急性および慢性尿道炎；前立腺炎；精巣上体炎；卵巣炎や卵管炎；外陰腟炎；ペイロニー病；勃起障害（男性および女性の両方）；
【００６２】
５．同種移植片拒絶反応：例えば、腎臓、心臓、肝臓、肺、骨髄、皮膚もしくは角膜の移植後の、または輸血後の急性および慢性の拒絶反応、または慢性の移植片対宿主病；
【００６３】
６．関節リウマチ、過敏性腸症候群、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、橋本甲状腺炎、グレーブス病、アジソン病、糖尿病、特発性血小板減少性紫斑病、好酸球性筋膜炎、高ＩｇＥ症候群、抗リン脂質症候群、およびセザリー症候群を含む、その他の自己免疫疾患およびアレルギー性疾患；
【００６４】
７．癌：膀胱癌、頭頸部癌、前立腺癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、膵臓臓、腸および大腸癌、胃癌、皮膚癌および脳腫瘍などの一般的な癌、骨髄（白血病を含む）およびリンパ増殖系に影響を及ぼす悪性疾患（ホジキンリンパ腫や非ホジキンリンパ腫等）の処置（転移性疾患および腫瘍再発、並びに腫瘍随伴症候群の予防および処置を含む）；
【００６５】
８．感染症：生殖器疣、尋常性疣贅、足底疣贅、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、単純ヘルペスウイルス、伝染性軟属腫、天然痘、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、ライノウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス、インフルエンザ、パラインフルエンザなどのウイルス疾患；結核、マイコバクテリウムアビウム、ハンセン病などの細菌性疾患；真菌症、クラミジア、カンジダ、アスペルギルス、クリプトコッカス髄膜炎、ニューモシスチス・カリニ、クリプトスポリジウム症、ヒストプラズマ症、トキソプラズマ症、トリパノソーマ感染およびリーシュマニア症等の他の感染症。
【００６６】
本明細書に記載する治療方法に関して、式（Ｉ）の化合物は、哺乳動物、より具体的にはヒトに投与することが想定される。同様に、本明細書に記載する疾患または医学的状態の処置のための式（Ｉ）の化合物の使用に関して、式（Ｉ）の化合物は、哺乳動物、より具体的にはヒトに投与されることが想定される。
【００６７】
したがって、本発明の別の態様によれば、医薬として使用するための、上で定義した式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩を提供する。
【００６８】
本発明のさらなる態様によれば、ＴＬＲ７が介在する疾患の処置において使用するための、上で定義した式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩を提供する。本発明の一実施形態では、該ＴＬＲ７が介在する疾患は癌である。本発明のさらなる実施形態では、前記癌は、膀胱癌、頭頸部癌、前立腺癌、乳癌、肺癌、子宮癌、膵臓癌、肝臓癌、腎臓癌、卵巣癌、大腸癌、胃癌、皮膚癌、脳腫瘍、悪性骨髄腫およびリンパ増殖性腫瘍から選択される。本発明の一実施形態では、ＴＬＲ７が介在する前記疾患は、喘息、ＣＯＰＤ、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、ＨＩＶ、ＨＰＶ、細菌感染または皮膚病である。
【００６９】
本発明のさらなる態様によれば、ＴＬＲ７が介在する疾患の処置のための医薬の製造のための、上で定義した式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩の使用を提供する。本発明の一実施形態では、該ＴＬＲ７が介在する疾患は癌である。
本発明のさらなる実施形態では、前記癌は、膀胱癌、頭頸部癌、前立腺癌、乳癌、肺癌、子宮癌、膵臓癌、肝臓癌、腎臓癌、卵巣癌、大腸癌、胃癌、皮膚癌、脳腫瘍、悪性骨髄腫およびリンパ増殖性腫瘍から選択される。本発明の一実施形態では、ＴＬＲ７が介在する前記疾患は、喘息、ＣＯＰＤ、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、ＨＩＶ、ＨＰＶ、細菌感染または皮膚病である。
【００７０】
本発明のさらなる態様によれば、癌の処置のための医薬の製造のための、上で定義した式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩の使用を提供する。本発明の一実施形態では、前記癌は、膀胱癌、頭頸部癌、前立腺癌、乳癌、肺癌、子宮癌、膵臓癌、肝臓癌、腎臓癌、卵巣癌、大腸癌、胃癌、皮膚癌、脳腫瘍、悪性骨髄腫およびリンパ増殖性腫瘍から選択される。
【００７１】
本発明のさらなる態様によれば、喘息、ＣＯＰＤ、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、ＨＩＶ、ＨＰＶ、細菌感染または皮膚病の処置のための医薬の製造のための、上で定義した式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩の使用を提供する。
【００７２】
本発明の一態様では、癌の処置において使用するための、式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩の使用を提供する。
【００７３】
本発明のさらなる態様によれば、癌の処置のための、上で定義した式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩の使用方法を提供する。したがって、ヒトなどの温血動物における癌を処置する方法であって、有効量の、本明細書において定義される式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩を、そのような処置を必要とする温血動物に投与することを含んでなる、方法を提供する。本発明の一実施形態では、前記癌は、膀胱癌、頭頸部癌、前立腺癌、乳癌、肺癌、子宮癌、膵臓癌、肝臓癌、腎臓癌、卵巣癌、大腸癌、胃癌、皮膚癌、脳腫瘍、悪性骨髄腫およびリンパ増殖性腫瘍から選択される。
【００７４】
本発明のさらなる態様によれば、喘息、ＣＯＰＤ、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、ＨＩＶ、ＨＰＶ、細菌感染または皮膚病の処置のための、上で定義した式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩の使用方法を提供する。
【００７５】
本発明のさらなる態様によれば、ＴＬＲ７の活性化が有益である疾患を患っているヒトを処置する方法であって、それを必要とする人に、治療上有効量の、上で定義した式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩を投与する手段を含んでなる方法を提供する。本発明の一実施形態では、ＴＬＲ７の活性化が有益である疾患は癌である。本発明のさらなる実施形態では、前記癌は、膀胱癌、頭頸部癌、前立腺癌、乳癌、肺癌、子宮癌、膵臓癌、肝臓癌、腎臓癌、卵巣癌、大腸癌、胃癌、皮膚癌、脳腫瘍、悪性骨髄腫およびリンパ増殖性腫瘍から選択される。本発明の一実施形態では、ＴＬＲ７の活性化が有益である疾患は、喘息、ＣＯＰＤ、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、ＨＩＶ、ＨＰＶ、細菌感染または皮膚病である。
【００７６】
本明細書に記載したいずれかの態様または実施形態では、癌は膀胱癌である。
【００７７】
本明細書に記載したいずれかの態様または実施形態では、癌は頭頸部癌である。
【００７８】
本明細書に記載したいずれかの態様または実施形態では、癌は前立腺癌である。
【００７９】
本明細書に記載したいずれかの態様または実施形態では、癌は乳癌である。
【００８０】
本明細書に記載したいずれかの態様または実施形態では、癌は肺癌である。
【００８１】
本明細書に記載したいずれかの態様または実施形態では、癌は子宮癌である。
【００８２】
本明細書に記載したいずれかの態様または実施形態では、癌は膵臓癌である。
【００８３】
本明細書に記載したいずれかの態様または実施形態では、癌は肝臓癌である。
【００８４】
本明細書に記載したいずれかの態様または実施形態では、癌は腎臓癌である。
【００８５】
本明細書に記載したいずれかの態様または実施形態では、癌は卵巣癌である。
【００８６】
本明細書に記載したいずれかの態様または実施形態では、癌は大腸癌である。
【００８７】
本明細書に記載したいずれかの態様または実施形態では、癌は胃癌である。
【００８８】
本明細書に記載したいずれかの態様または実施形態では、癌は皮膚癌である。
【００８９】
本明細書に記載したいずれかの態様または実施形態では、癌は脳腫瘍である。
【００９０】
本明細書に記載したいずれかの態様または実施形態では、癌は悪性骨髄腫である。
【００９１】
本明細書に記載したいずれかの態様または実施形態では、癌はリンパ増殖性腫瘍である。
【００９２】
上で定義した抗がん治療は、単独療法として適用するか、または本発明の化合物に加えて慣用の外科手術または放射線療法または化学療法を含んでいてよい。そのような化学療法には、下記カテゴリーの抗がん剤の１以上が含まれ得る：
（ｉ）内科的腫瘍学において用いられる、他の抗増殖／抗新生物薬およびそれらの組み合わせ、例えばアルキル化剤（例えばシスプラチン、ミリプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、シクロホスファミド、ナイトロジェンマスタード、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン、テモゾラミドおよびニトロソ尿素化合物)；代謝拮抗薬（例えば、ゲムシタビンや葉酸代謝拮抗剤、例えば５−フルオロウラシルおよびテガフールのようなフルオロピリミジン、ラルチトレキセド、メトトレキサート、シトシンアラビノシド、およびヒドロキシ尿素）；抗腫瘍抗生物質（例えば、アドリアマイシン、ブレオマイシン、ドキソルビシン、ダウノマイシン、エピルビシン、アムルビシン、イダルビシン等のアントラサイクリン、マイトマイシン-C、ダクチノマイシンおよびミトラマイシン）；有糸分裂阻害剤（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシンおよびビノレルビンなどのビンカアルカロイド、タキソールやタキソテールなどのタキソイド、およびポロキナーゼ阻害剤）；およびトポイソメラーゼ阻害剤（例えば、エトポシドおよびテニポシド等のエピポドフィロトキシン、アムサクリン、トポテカンおよびカンプトテシン）；
【００９３】
（ｉｉ）細胞増殖抑制剤、例えば抗エストロゲン（例えばタモキシフェン、フルベストラント、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェンおよびヨードキシフェン）、抗アンドロゲン（例えばビカルタミド、フルタミド、ニルタミドおよび酢酸シプロテロン）、ＬＨＲＨアンタゴニストまたはＬＨＲＨアゴニスト（例えばゴセレリン、リュープロレリンおよびブセレリン）、プロゲストーゲン（例えば酢酸メゲストロール）、アロマターゼ阻害剤（例えばアナストロゾール、レトロゾール、ボラゾールおよびエキセメスタン）および５α−レダクターゼの阻害剤（例えばフィナステリド）；
【００９４】
（ｉｉｉ）抗侵襲剤［例えば、ｃ−Ｓｒｃキナーゼファミリー阻害剤、例えば４−（６−クロロ−２,３−メチレンジオキシアニリノ）−７−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エトキシ］−５−テトラヒドロピラン−４−イルオキシキナゾリン（AZD0530;；国際特許出願ＷＯ０１／９４３４１）、Ｎ−（２−クロロ−６−メチルフェニル）−２−｛６−［４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル］−２−メチルピリミジン−４−イルアミノ｝チアゾール−５−カルボキサミド（ダサチニブ、ＢＭＳ−３５４８２５；J. Med. Chem., 2004, 47, 6658-6661）およびボスチニブ（SKI-606）、およびメタロプロテイナーゼ阻害剤、例えばマリマスタット、ウロキナーゼプラスミノーゲンアクティベーター受容体機能の阻害剤またはヘパラナーゼに対する抗体］；
【００９５】
（ｉｖ）増殖因子機能の阻害剤：例えば、このような阻害剤としては、増殖因子抗体および増殖因子受容体抗体が挙げられる（例えば抗ｅｒｂＢ２抗体トラスツマブ[HerceptinTM]、抗ＥＧＦＲ抗体パニツムマブ、抗ｅｒｂＢ１抗体セツキシマブ[Erbitux, C225]およびStern et al. Critical reviews in oncology/haematology, 2005, Vol. 54, pp11-29に記載の増殖因子または増殖因子受容体抗体）；また、このような阻害剤にはチロシンキナーゼ阻害剤が含まれる（例えば、上皮細胞増殖因子ファミリーの阻害剤（例えばＥＧＦＲファミリーチロシンキナーゼ阻害剤、例えばＮ−(３−クロロ−４−フルオロフェニル)−７−メトキシ−６−(３−モルホリノプロポキシ)キナゾリン−４−アミン(ゲフィチニブ、ZD1839)、Ｎ−(３−エチニルフェニル)−６,７−ビス(２−メトキシエトキシ)キナゾリン−４−アミン(エルロチニブ、OSI 774)および６−アクリルアミド−Ｎ−(３−クロロ−４−フルオロフェニル)−７−(３−モルホリノプロポキシ)−キナゾリン−４−アミン(CI 1033)、ｅｒｂＢ２チロシンキナーゼ阻害剤（例えばラパチニブ）、肝細胞増殖因子ファミリーの阻害剤、インスリン増殖因子ファミリーの阻害剤；血小板由来増殖因子ファミリーの阻害剤（例えばイマチニブおよび／またはニロチニブ（AMN107））、セリン／スレオニンキナーゼの阻害剤（例えばＲａｓ／Ｒａｆシグナル伝達阻害剤、例えばファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、例えばソラフェニブ(BAY 43-9006)、チピファルニブ(R115777)およびロナファルニブ(SCH66336)）、ＭＥＫおよび／またはＡＫＴキナーゼを介する細胞シグナル伝達の阻害剤、ｃ−ｋｉｔ阻害剤、ａｂｌキナーゼ阻害剤、ＰＩ３キナーゼ阻害剤、Ｐｌｔ３キナーゼ阻害剤、ＣＳＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤、ＩＧＦ受容体（インシュリン様増殖因子）キナーゼ阻害剤；オーロラキナーゼ阻害剤（例えばAZD1152、PH739358、VX-680、MLN8054、R763、MP235、MP529、VX-528およびAX39459）、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤（例えばＣＤＫ２および／またはＣＤＫ４阻害剤）およびＢＲＡＦ阻害剤（例えばベムラフェニブ）；
【００９６】
（ｖ）抗血管新生剤、例えば血管内皮増殖因子の作用を阻害するもの［例えば抗血管内皮増殖因子抗体ベバシズマブ（AvastinTM）、およびＶＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ阻害剤（例えば、バンデタニブ（ZD6474）、バタラニブ（PTK787）、スニチニブ（SU11248）、アキシチニブ（AG-013736）、パゾパニブ（GW 786034）および４−（４−フルオロ−２−メチルインドール−５−イルオキシ）−６−メトキシ−７−（３−ピロリジン−１−イルプロポキシ）キナゾリン（AZD2171；ＷＯ００／４７２１２の実施例２４０）、例えば国際特許出願ＷＯ９７／２２５９６、ＷＯ９７／３００３５、ＷＯ９７／３２８５６およびＷＯ９８／１３３５４に記載の化合物および他のメカニズムにより作用する化合物（例えばリノミド、インテグリンαｖβ３機能およびアンジオスタチンの阻害剤）］；
【００９７】
（ｖｉ）血管傷害剤、例えばコンブレタスタチンＡ４および国際特許出願ＷＯ９９／０２１６６、ＷＯ００／４０５２９、ＷＯ００／４１６６９、ＷＯ０１／９２２２４、ＷＯ０２／０４４３４およびＷＯ０２／０８２１３に開示された化合物；
【００９８】
（ｖｉｉ）エンドセリン受容体アンタゴニスト、例えばジボテンタン（ZD4054）またはアトラセンタン；
【００９９】
（ｖｉｉｉ）アンチセンス治療、例えば上記の標的に対するもの、例えばISIS 2503、抗ｒａｓアンチセンス；
【０１００】
（ｉｘ）遺伝子治療アプローチ、例えば、異常遺伝子（異常ｐ５３または異常ＢＲＣＡ１またはＢＲＣＡ２等）を置換するためのアプローチ、ＧＤＥＰＴ（遺伝子指向性酵素プロドラッグ治療）アプローチ（例えばシトシンデアミナーゼ、チミジンキナーゼまたは細菌ニトロレダクターゼ酵素を用いるもの）、および化学療法または放射線療法に対する患者の耐容性を上げるためのアプローチ（例えば多剤耐性遺伝子治療）；および
【０１０１】
（ｘ）免疫治療アプローチ、例えば、患者の腫瘍細胞の免疫原性を増大させるためのex vivoおよびin vivoアプローチ（例えばインターロイキン２、インターロイキン４または顆粒球マクロファージコロニー刺激因子等のサイトカインでのトランスフェクション）、Ｔ細胞アネルギーを低下させるためのアプローチ、トランスフェクト免疫細胞（例えばサイトカイントランスフェクト樹状細胞）を使用したアプローチ、サイトカイントランスフェクト腫瘍細胞株を使用したアプローチ、および抗イディオタイプ抗体を使用したアプローチ、免疫抑制細胞（例えば、制御性Ｔ細胞、骨髄由来抑制細胞またはIDO（インドールアミン２,３−デオキシゲナーゼ）発現樹状細胞）の機能を減少させるためのアプローチ、および腫瘍関連抗原由来のタンパク質またはペプチド（例えばNY-ESO-1、MAGE-3、WT1またはHer2/neu）からなる癌ワクチンを用いたアプローチ。
【０１０２】
本発明のこの態様によれば、上で定義した式（Ｉ）で示される化合物および癌の併用治療（conjoint treatment）のための上で定義したさらなる抗腫瘍物質を含有する医薬品を提供する。
【０１０３】
本発明のこの態様によれば、上で定義した式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩および癌の併用治療のためのさらなる抗腫瘍物質を含有する医薬品を提供する。
【０１０４】
本発明のこの態様によれば、上で定義した式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩と、上記（ｉ）〜（ｉｘ）に記載した任意の抗がん剤とを含んでなる、癌の処置における使用に適した組み合わせを提供する。
【０１０５】
したがって、本発明のさらなる態様では、上記（ｉ）〜（ｉｘ）に記載したものから選択される抗がん剤と組み合わせて、式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩を提供する。
【０１０６】
本明細書において、用語「組み合わせ」を用いる場合、同時に、別個にまたは逐次的に投与することを意味すると理解される。本発明の一態様では、「組み合わせ」は同時に投与することを意味する。本発明の別の態様では、「組み合わせ」は別個に投与することを意味する。本発明のさらに別の態様では、「組み合わせ」は逐次的に投与することを意味する。逐次的にまたは別個に投与する場合は、その組み合わせによる有益な効果が失われないうちに２番目の成分を投与する。
【０１０７】
本発明のさらなる態様によれば、式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩と、上記（ｉ）〜（ｉｘ）に記載したものから選択される抗がん剤とを、製薬的に許容し得る希釈剤または担体とともに組み合わせて含んでなる医薬組成物を提供する。
【０１０８】
本発明のさらなる態様によれば、式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩と、上記（ｉ）〜（ｉｘ）に記載したものから選択される抗がん剤とを、製薬的に許容し得る希釈剤または担体とともに組み合わせて含んでなる、癌の処置において使用するための医薬組成物を提供する。
【０１０９】
本発明の別の特徴によれば、温血動物（ヒトなど）における癌において使用するための医薬の製造における、上記（ｉ）〜（ｉｘ）に記載したものから選択される抗がん剤と組み合わせた、式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩の使用を提供する。
【０１１０】
本発明のさらに別の特徴によれば、温血動物（ヒトなど）における癌の処置において使用するための、上記（ｉ）〜（ｉｘ）に記載したものから選択される抗がん剤と組み合わせた、式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩を提供する。
【０１１１】
したがって、本発明のさらなる特徴では、有効量の式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩を、上記（ｉ）〜（ｉｘ）に記載したものから選択される抗がん剤と組み合わせて、温血動物（ヒトなど）に投与することを含んでなる、そのような処置を必要とする該動物において癌を処置する方法を提供する。
【０１１２】
本発明のさらなる態様によれば、上記（ｉ）〜（ｉｘ）に記載したものから選択される抗がん剤と組み合わせて、式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩を含んでなるキットを提供する。
【０１１３】
本発明のさらなる態様によれば、以下を含んでなるキットを提供する：
ａ）式（Ｉ）で示される化合物、またはその製薬的に許容し得る塩の第一の単位投与形態；
ｂ）上記（ｉ）〜（ｉｘ）に記載したものから選択される抗癌剤の第二の単位投与形態；および
ｃ）該第一および第二の単位投与形態を入れるための容器手段。
【０１１４】
本発明のさらなる態様によれば、さらなる抗癌剤と組み合わせて、式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩を含んでなるキットを提供する。
【０１１５】
本発明のさらなる態様によれば、以下を含んでなるキットを提供する：
ａ）式（Ｉ）で示される化合物、またはその製薬的に許容し得る塩の第一の単位投与形態；
ｂ）別の抗癌剤の第二の単位投与形態；および
ｃ）該第一および第二の単位投与形態を入れるための容器手段。
【０１１６】
本発明の一態様では、式（Ｉ）の化合物はワクチンアジュバントとして有用であり得る。
【０１１７】
本発明のさらなる態様として、ワクチンアジュバントとして使用するための、上で定義した式（Ｉ）で示される化合物、またはその製薬的に許容し得る塩を提供する。
【０１１８】
本発明のさらなる態様として、疾患または状態の処置のためのワクチンの製造における、ワクチンアジュバントとしての、上で定義した式（Ｉ）で示される化合物、またはその製薬的に許容し得る塩の使用を提供する。
【０１１９】
本発明はさらに、疾患または状態を処置またはそのリスクを減少させる方法であって、治療上有効量のワクチンおよび上で定義した式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩を、それを必要とする患者に投与することを含んでなる方法を提供する。
【０１２０】
本発明はさらに、患者におけるワクチンに対する応答を増大する方法であって、治療上有効量のワクチンおよび上で定義した式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩を、それを必要とする患者に投与することを含んでなる方法を提供する。
【実施例】
【０１２１】
以下の実施例により本発明を説明するが、特に記載しない限り、記載した材料はいずれも商業的に入手可能である。「r.t.」は「室温」、即ち１７〜２８℃の範囲、通常は２０℃を意味する。エレクトロスプレーイオン化質量分析(ESI mass)スペクトルは、Waters Micromass ZQTM質量分析器、Waters Waters 2790 AllianceTMセパレーションモジュール、およびImtakt Cadenza CD-C18TMカラム（以下のグラジェントで溶出：A (MeCN), B (H2O)およびC (2% ギ酸/ 98% MeCN)、0.0〜0.1分: A 95%, B 2%およびC 3%、0.1〜3.1分: 直線グラジェント A 95%, B 2%およびC 3%〜A 1%, B 96%およびC 3%、3.1〜3.5分: A 1%, B 96%およびC 3%）を用いて記録した。
【０１２２】
プロトン核磁気共鳴(1H NMR）スペクトルは、特に記載しない限り、重水素化クロロホルムを用いて３００〜５００ＭＨｚにて記録した。ＮＭＲデータについて以下の略号を用いる：ｓ＝シングレット、ｄ＝ダブレット、ｔ＝トリプレット、ｑ＝カルテット、ｍ＝マルチプレット、ｄｄ＝ダブルダブレット、ｔｔ＝トリプルトリプレット、ｂｒ＝ブロード、クィンテット＝ｑｎ。
【０１２３】
本明細書の科学的部分において、下記の略語を使用することもある：ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル；ＤＣＭ＝ジクロロメタン；ＮＭＰ＝Ｎ−メチルピロリドン；ＤＭＦ＝Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド；ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド；ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン；ＭｅＯＨ＝メタノール；ＥｔＯＨ＝エタノール；ＭｅＣＮ＝アセトニトリル；Ｐｄ／Ｃ＝パラジウム炭素；ＤＭＡＰ＝４−ジメチルアミノピリジン；Ｍｅｓ＝メシチレニル（２，４，６−トリメチルフェニル）；ｓａｔ．＝飽和；ａｑ．＝水性；ＤＭＡ＝Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド；ｃｏｎｃ．＝濃縮；ｈ＝時間；ｍｉｎ（ｓ）＝分．；Ｍ＝モル濃度；ＭＳ＝質量分析；ＥＳＩ＝電子スプレーイオン化法；ＨＰＬＣ＝高速液体クロマトグラフィー；ＲＰＨＰＬＣ＝逆相高速液体クロマトグラフィー；ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン。
【０１２４】
実施例１：１−（４−｛［２−アミノ−４−（ブチルアミノ）−６−メチルピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）−４−メチルピペラジン−２−オン
【化１３】
2013542916.tif 000015
標題の化合物は以下に記載する工程によって製造することができる：
（ｉ）メチル２−（４−ブロモ−２−メトキシベンジル）−３−オキソブタノエート
【化１４】
2013542916.tif 000016
ＣＨＣｌ３（１００ｍＬ）中の４−ブロモ−２−メトキシベンジルアルコール（１１．０ｇ，５０．７ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、４℃にてＳＯＣｌ２（１４．５ｍＬ，２００ｍｍｏｌ）を滴加した。添加後、混合物を室温にし、６時間攪拌した。溶媒を留去し、水を加えた。得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、集めた有機溶液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）した。溶媒を減圧留去した後、得られた粗製のベンジルクロリド誘導体をさらに精製することなく次の工程に用いた。
室温にて、ＤＭＦ（１２０ｍＬ）中のＮａＨ（２．５５ｇ，５８．４ｍｍｏｌ，ミネラルオイル中５５％）の攪拌した懸濁液に、アセト酢酸メチル（６．２１ｇ，５３．６ｍｍｏｌ）を添加した。３０分間攪拌した後、ＫＩ（８．４７ｇ，５１．０ｍｍｏｌ）および上記ベンジルクロリド誘導体を加えた。得られた混合物を５０℃に加熱し、４時間攪拌した。室温に冷却後、飽和ＮＨ4Ｃｌ水溶液を加え、得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。集めた有機溶液を飽和食塩水で洗浄した後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）した。溶媒を減圧留去した後、粗製の残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して副題の化合物を淡黄色の油状物質として得た（１３．０ｇ，４１．５ｍｍｏｌ，８２％）；LC-MS: m/z = 315 [MH+］(T = 2.26分)。
【０１２５】
（ｉｉ）２−アミノ−５−（４−ブロモ−２−メトキシベンジル）−６−メチルピリミジン−４−オール
【化１５】
2013542916.tif 000017
工程（ｉ）で得た生成物（１３．０ｇ，４１．４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１００ｍＬ）溶液に、炭酸グアニジン（１６．２ｇ，９０．０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を還流温度で１２時間攪拌した。室温に冷却後、溶媒を留去して溶液の体積を半分にした。生じた沈殿を濾過により回収し、水とＭｅＯＨで洗浄して副題の化合物を白色の固形物として得た（４．１０ｇ，１２．８ｍｍｏｌ，３１％）； 1H NMR:(d6-DMSO) 7.10 (1H, d), 7.00 (1H, dd), 6.78 (1H, d), 6.40 (2H, br-s), 3.83 (s, 3H), 3.48 (s, 2H), 1.92 (s, 3H); LC-MS: m/z = 324 [MH+］(T = 1.75分).
【０１２６】
（ｉｉｉ）２−アミノ−５−（４−ブロモ−２−メトキシベンジル）−６−メチルピリミジン−４−イル  ２,４,６−トリメチルベンゼンスルホネート
【化１６】
2013542916.tif 000018
工程（ｉｉ）で得た生成物（１．５０ｇ，４．６４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を攪拌し、室温にてＮ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチル−１,３−プロパンジアミン（１．１７ｍＬ，７．００ｍｍｏｌ）および２−メシチレンスルホニルクロリド（１．５３ｇ，７．００ｍｍｏｌ）を加えた。１２時間攪拌後、水を加え、得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。集めた有機溶液を飽和食塩水で洗浄した後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）した。溶媒を減圧留去した後、粗製の残渣をジエチルエーテル／ヘキサン（１／４）で洗浄して副題の化合物を白色の固形物として得た（２．００ｇ，３．９４ｍｍｏｌ，８５％）； 1H NMR: 6.95-6.91 (4H, m), 6.69 (1H, d), 4.94 (2H, br s), 3.81 (3H, s), 3.76 (2H, s), 2.56 (6H, s), 2.32 (3H, s), 2.29 (3H, s); LC-MS: m/z = 506 [MH+］(T = 2.05).
【０１２７】
（ｉｖ）５−（４−ブロモ−２−メトキシベンジル）−Ｎ４−ブチル−６−メチルピリミジン−２,４−ジアミン
【化１７】
2013542916.tif 000019
工程（ｉｉｉ）で得た生成物（０．２５０ｇ，０．４９４ｍｍｏｌ）のプロピオニトリル溶液に、ブチルアミン（０．２４０ｍＬ，２．４７ｍｍｏｌ）およびトリフルオロ酢酸（０．０７４０ｍＬ，１．００ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１１０℃に加熱し、７時間攪拌した。室温に冷却後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を加え、得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。集めた有機溶液を飽和食塩水で洗浄した後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）した。溶媒を減圧留去した後、粗製の残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して副題の化合物を白色の固形物として得た（０．１４４ｇ，０．３８１ｍｍｏｌ，７７％）； LC-MS: m/z = 393 [MH+］(T = 2.05).
【０１２８】
（ｖ）１−（４−｛［２−アミノ−４−（ブチルアミノ）−６−メチルピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）−４−メチルピペラジン−２−オン
【化１８】
2013542916.tif 000020
工程（ｉｖ）で得た生成物（０．１４４ｇ，０．３８０ｍｍｏｌ）の１,４−ジオキサン（２ｍＬ）溶液に、ＣｕＩ（７２．０ｍｇ，０．３７９ｍｍｏｌ）、Ｎ,Ｎ'−ジメチルジアミノエタン（０．０８２０ｍＬ，０．７６３ｍｍｏｌ）、４−メチルピペラジン−２−オン（８７．０ｍｇ，０．７６０ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（２４７ｍｇ，０．７６０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１００℃に加熱し、１０時間攪拌した。冷却後、水を加え、得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。集めた有機溶液を飽和食塩水で洗浄した後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）した。溶媒を減圧留去した後、粗製の残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して標題の化合物を淡黄色の固形物として得た（１２０ｍｇ，０．２９１ｍｍｏｌ，７７％）； 1H NMR: 6.90 (1H , d), 6.86 (1H, s,), 6.72 (1H, d), 4.76 (3H, br s), 3.87 (3H, s), 3.68-3.65 (2H, m), 3.63 (2H, s,), 3.32-3.27 (2H, m), 3.26 (2H, s), 2.78-2.75 (2H, m), 2.39 (3H, s), 2.27 (3H, s), 1.45-1.37 (2H, m), 1.26-1.19 (2H, m), 0.85 (3H, t); LC-MS: m/z = 413 [MH+］(T = 1.48分)。
【０１２９】
実施例２：１−（４−｛［２−アミノ−４−メチル−６−（ペンチルアミノ）ピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）−４−メチルピペラジン−２−オン
【化１９】
2013542916.tif 000021
標題の化合物は以下の工程により製造することができる：
（ｉ）５−（４−ブロモ−２−メトキシベンジル）−６−メチル−Ｎ４−ペンチルピリミジン−２,４−ジアミン
【化２０】
2013542916.tif 000022
実施例１工程（ｉｉｉ）で得た生成物（１．５１ｇ，３．００ｍｍｏｌ）を用い、実施例１工程（ｉｖ）の方法（ブチルアミンの代わりにペンチルアミン（１．０５ｍＬ，９．０４ｍｍｏｌ）を使用）により製造し、副題の化合物を淡黄色の固体として得た（１．００ｇ，２．５４ｍｍｏｌ，８５％）； LC-MS: m/z = 393 [MH+］(T = 2.05).
【０１３０】
（ｉｉ）１−（４−｛［２−アミノ−４−メチル−６−（ペンチルアミノ）ピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）−４−メチルピペラジン−２−オン
【化２１】
2013542916.tif 000023
工程（ｉ）で得た生成物（６０．０ｍｇ，０．１５３ｍｍｏｌ）を用い、実施例１工程（ｖ）の方法により製造して標題の化合物を無色の油状物質として得た（２３．７ｍｇ，０．０５５６ｍｍｏｌ，３６％）； 1H NMR: 6.92 (1H , d), 6.88 (1H, d), 6.73 (1H, dd), 4.99 (3H, br s), 3.88 (3H, s), 3.67-3.63 (2H, m), 3.64 (2H, s,), 3.33-3.27 (2H, m), 3.26 (2H, s), 2.79-2.76 (2H, m), 2.39 (3H, s), 2.30 (3H, s), 1.48-1.41 (2H, m), 1.29-1.17 (4H, m), 0.85 (3H, t); LC-MS: m/z = 427 [MH+］(T = 1.66).
【０１３１】
実施例３：（Ｓ）−１−（４−｛［２−アミノ−４−（１−ヒドロキシヘキサン−３−イルアミノ）−６−メチルピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）−４−メチルピペラジン−２−オン
【化２２】
2013542916.tif 000024
標題の化合物は以下の工程により製造することができる:
（ｉ）（Ｓ）−３−［２−アミノ−５−（４−ブロモ−２−メトキシベンジル）−６−メチルピリミジン−４−イルアミノ］ヘキサン−１−オール
【化２３】
2013542916.tif 000025
実施例１工程（ｉｉｉ）で得た生成物（０．７７０ｇ，１．５２ｍｍｏｌ）を用い、実施例１工程（ｉｖ）の方法（ブチルアミンの代わりに（Ｓ）−３−アミノヘキサン−１−オール（０．８９０ｇ，７．６０ｍｍｏｌ）を使用）により副題の化合物を白色のアモルファス状の固体として得た（０．５４ｇ，１．２８ｍｍｏｌ，８４％）； LC-MS: m/z = 423 [MH+］(T = 1.90).
【０１３２】
（ｉｉ）（Ｓ）−５−（４−ブロモ−２−メトキシベンジル）−Ｎ４−［１−（tert-ブチルジメチルシリルオキシ）ヘキサン−３−イル］−６−メチルピリミジン−２,４−ジアミン
【化２４】
2013542916.tif 000026
工程（ｉ）で得た生成物（０．４３０ｇ，１．００ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、トリエチルアミン（０．６９０ｍＬ，５．００ｍｍｏｌ）およびtert-ブチルジメチルシリルクロリド（０．３７５ｇ，２．５０ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１０時間攪拌した後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を加え、得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。集めた有機溶液を飽和食塩水で洗浄した後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）した。溶媒を減圧留去した後、粗製の残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して副題の化合物を無色の油状物質として得た（０．３８０ｇ，０．７０７ｍｍｏｌ，７１％）； LC-MS: m/z = 537 [MH+］(T = 2.26).
【０１３３】
（ｉｉｉ）（Ｓ）−１−（４−｛［２−アミノ−４−（１−ヒドロキシヘキサン−３−イルアミノ）−６−メチルピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）−４−メチルピペラジン−２−オン
【化２５】
2013542916.tif 000027
工程（ｉｉ）で得た生成物（１２６ｍｇ，０．２４０ｍｍｏｌ）の１,４−ジオキサン（１ｍＬ）溶液に、ＣｕＩ（４６．０ｍｇ，０．２４０ｍｍｏｌ）、Ｎ,Ｎ'−ジメチルジアミノエタン（５２．０μＬ，０．４８０ｍｍｏｌ）、４−メチルピペラジン−２−オン（５５．０ｍｇ，０．４８０ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（２３４ｍｇ，０．７２０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１００℃に加熱し、１０時間攪拌した。冷却後、水を加え、得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。集めた有機溶液を飽和食塩水で洗浄した後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）した。溶媒を減圧留去した後、粗製の残渣をさらに精製することなく次の反応に用いた。粗製の残渣のＴＨＦ（１．０ｍＬ）溶液に、フッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム（１．０ｍＬ，ＴＨＦ中１Ｍ溶液）を加え、混合物を室温で攪拌した。５時間後、水を加え、得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。集めた有機溶液を飽和食塩水で洗浄した後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）した。溶媒を減圧留去した後、粗製の残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して標題の化合物を白色のアモルファス状の固形物として得た（１９．６ｍｇ，０．０４３０ｍｍｏｌ，１８％）； 1H NMR: 6.94 (1H , d), 6.86 (1H, d), 6.75 (1H, dd), 5.07 (2H, br s), 4.90 (1H, d), 4.51 (1H, br s), 4.13 (1H, m), 3.88 (3H, s), 3.69-3.65 (2H, m), 3.67 (2H, s,), 3.31-3.26 (2H, m), 3.25 (2H, s), 2.78-2.76 (2H, m), 2.40 (3H, s), 2.35 (3H, s), 1.80-1.76 (1H, m), 1.44-1.11 (5H, m), 0.81 (3H, t); LC-MS: m/z = 457 [MH+］(T = 1.48).
【０１３４】
実施例３：別の製造方法：（Ｓ）−１−（４−｛［２−アミノ−４−（１−ヒドロキシヘキサン−３−イルアミノ）−６−メチルピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）−４−メチルピペラジン−２−オン
【化２６】
2013542916.tif 000028
標題の化合物は以下の工程により製造することができる：
（ｉ）２−メトキシ−４−（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）ベンズアルデヒド
【化２７】
2013542916.tif 000029
４−ブロモ−２−メトキシベンズアルデヒド（１０．０ｇ，４６．５ｍｍｏｌ）の１,４−ジオキサン（１４０ｍＬ）溶液に、ＣｕＩ（８．８４ｇ，４６．５ｍｍｏｌ）、Ｎ,Ｎ'−ジメチルジアミノエタン（１０．０ｍＬ，９３．０ｍｍｏｌ）、４−メチルピペラジン−２−オン（７．９５ｇ，６９．８ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（４５．０ｇ，１３９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１００℃に加熱し５時間攪拌した。冷却後、混合物を濾過し、溶液を１規定塩酸でｐＨ２〜３に調整した。室温で３時間攪拌後、混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で中和し、得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。集めた有機溶液を飽和食塩水で洗浄した後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）した。溶媒を減圧留去した後、副題の化合物を白色の固形物として得た（１０．７ｇ，４３．１ｍｍｏｌ，９３％）； 1H NMR: 10.4 (1H, s), 7.86 (1H, d), 7.11 (1H, d), 6.92 (1H, dd), 3.92 (3H, s), 3.76 (2H, t), 3.30 (2H, s), 2.82 (2H, t), 2.42 (3H, s); LC-MS: m/z = 249 [MH+］(T = 0.92分). 
【０１３５】
（ｉｉ）メチル  ２−（２−メトキシ−４−（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）ベンジリデン）−３−オキソブタノエート
【化２８】
2013542916.tif 000030
工程（ｉ）で得た生成物（１０．７ｇ，４３．１ｍｍｏｌ）のトルエン溶液に、アセト酢酸メチル（５．９０ｇ，５１．０ｍｍｏｌ）、酢酸（０．９８０ｍＬ，１７．２ｍｍｏｌ）およびピペリジン（０．４３０ｍＬ，４．３１ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を２０時間加熱還流した。冷却後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を加え、得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。集めた有機溶液を飽和食塩水で洗浄した後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）した。溶媒を減圧留去した後、粗製の残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して副題の化合物を淡黄色の油状物質として得た［（Ｅ）−および（Ｚ）−異性体の混合物］（１４．０ｇ，４０．５ｍｍｏｌ，９４％）； LC-MS: m/z= 347 [MH+］(T = 2.80分)。
【０１３６】
（ｉｉｉ）メチル  ２−（２−メトキシ−４−（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）ベンジル）−３−オキソブタノエート
【化２９】
2013542916.tif 000031
工程（ｉｉ）で得た生成物（１４．０ｇ，４０．５ｍｍｏｌ）のメタノール（３００ｍＬ）溶液に、１０％Ｐｄ−Ｃ（４．０ｇ）を加え、Ｈ２（１ａｔｍ）雰囲気下、室温で攪拌した。１２時間後、反応混合物を珪藻土（CeliteTM）で濾過し、溶媒を留去して副題の化合物を淡黄色の油状物質として得た（１４．０ｇ，３９．２ｍｍｏｌ，９９％）。LC-MS: m/z = 349 [MH+］(T = 2.84分)。
【０１３７】
（ｉｖ）１−（４−（（２−アミノ−４−ヒドロキシ−６−メチルピリミジン−５−イル）メチル）−３−メトキシフェニル）−４−メチルピペラジン−２−オン
【化３０】
2013542916.tif 000032
工程（ｉｉｉ）で得た生成物（１４．０ｇ，３９．２ｍｍｏｌ）のメタノール（１００ｍＬ）溶液に、炭酸グアニジン（９．９０ｇ，５５．０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を還流温度にて６時間攪拌した。室温に冷却後、混合物を濾過し、溶媒を留去した。粗製の残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して副題の化合物を白色の固形物として得た（６．１６ｇ，１７．３ｍｍｏｌ，４３％）； 1H NMR: 6.94 (1H, d), 6.71 (1H, s), 6.66 (1H, d), 3.79 (3H, s), 3.65 (4H, m), 3.25 (2H, s), 2.77 (2H, t), 2.40 (3H, s), 1.98 (3H, s); LC-MS: m/z = 358 [MH+］(T = 0.40分).
【０１３８】
（ｖ）２−アミノ−５−（２−メトキシ−４−（４−メチル−２−オキソピペラジン−１−イル）ベンジル）−６−メチルピリミジン−４−イル  ２,４,６−トリメチルベンゼンスルホネート
【化３１】
2013542916.tif 000033
工程（ｉｖ）で得た生成物（２．５０ｇ，７．００ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）攪拌溶液に、室温にてＮ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチル−１,３−プロパンジアミン（１．７５ｍＬ，１０．５ｍｍｏｌ）および２−メシチレンスルホニルクロリド（２．３０ｇ，１０．５ｍｍｏｌ）を加えた。１２時間攪拌後、水を加え、得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。集めた有機溶液を飽和食塩水で洗浄した後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）した。溶媒を減圧留去した後、粗製の残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して副題の化合物を白色のアモルファス状の固形物として得た（３．６０ｇ，６．６８ｍｍｏｌ，９５％）； 1H NMR: 6.95 (2H, s), 6.85 (1H, d), 6.79 (1H, d), 6.68 (1H, dd), 3.80 (5H, s), 3.70 (2H, m), 3.30 (2H, s), 2.82 (2H, m), 2.58 (6H, s), 2.43 (3H, s), 2.31 (3H, s), 2.29 (3H, s); LC-MS: m/z = 540 [MH+］(T = 3.44分)。
【０１３９】
（ｖｉ）（Ｓ）−１−（４−｛［２−アミノ−４−（１−ヒドロキシヘキサン−３−イルアミノ）−６−メチルピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）−４−メチルピペラジン−２−オン
【化３２】
2013542916.tif 000034
工程（ｖ）で得た生成物（１．９０ｇ，３．５３ｍｍｏｌ）のプロピオニトリル溶液に、（Ｓ）−３−アミノヘキサン−１−オール（１．２３ｇ，１０．５ｍｍｏｌ）およびトリフルオロ酢酸（０．２５９ｍＬ，３．５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１１０℃に加熱し、９時間攪拌した。室温に冷却後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を加え、得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。集めた有機溶液を飽和食塩水で洗浄した後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）した。溶媒を減圧留去した後、粗製の残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して標題の化合物を白色のアモルファス状の固形物として得た（１．１０ｇ，２．４１ｍｍｏｌ，６８％）； 1H NMR: 6.94 (1H , d), 6.86 (1H, d), 6.75 (1H, dd), 5.07 (2H, br s), 4.90 (1H, d), 4.51 (1H, br s), 4.13 (1H, m), 3.88 (3H, s), 3.69-3.65 (2H, m), 3.67 (2H, s,), 3.31-3.26 (2H, m), 3.25 (2H, s), 2.78-2.76 (2H, m), 2.40 (3H, s), 2.35 (3H, s), 1.80-1.76 (1H, m), 1.44-1.11 (5H, m), 0.81 (3H, t); LC-MS: m/z = 457 [MH+］(T = 1.48).
【０１４０】
実施例４：（Ｓ）−１−（４−｛［２−アミノ−４−（１−ヒドロキシペンタン−２−イルアミノ）−６−メチルピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）−４−メチルピペラジン−２−オン
【化３３】
2013542916.tif 000035
標題の化合物は以下に記載する工程によって製造することができる:
（ｉ）（Ｓ）−２−［２−アミノ−５−（４−ブロモ−２−メトキシベンジル）−６−メチルピリミジン−４−イルアミノ］ペンタン−１−オール
【化３４】
2013542916.tif 000036
実施例１工程（ｉｉｉ）で得た生成物（１．００ｇ，１．９８ｍｍｏｌ）を用い、実施例１工程（ｉｖ）の方法（ブチルアミンの代わりに（Ｓ）−２−アミノペンタン−１−オール（１．０２ｇ，９．９０ｍｍｏｌ）を使用）により製造して副題の化合物を無色の油状物質として得た（０．７９０ｇ，１．９３ｍｍｏｌ，９８％）； LC-MS: m/z = 410 [MH+］(T = 1.81).
【０１４１】
（ｉｉ）（Ｓ）−５−（４−ブロモ−２−メトキシベンジル）−Ｎ４−［１−（tert-ブチルジメチルシリルオキシ）ペンタン−２−イル］−６−メチルピリミジン−２,４−ジアミン
【化３５】
2013542916.tif 000037
工程（ｉ）で得た生成物（１３１ｍｇ，０．３２０ｍｍｏｌ）を用い、実施例３工程（ｉｉ）の方法により副題の化合物を無色の油状物質として得た（２７ｍｇ，０．０５１７ｍｍｏｌ，１６％）； LC-MS: m/z = 523 [MH+］(T = 2.15).
【０１４２】
（ｉｉｉ）（Ｓ）−１−（４−｛［２−アミノ−４−（１−ヒドロキシペンタン−２−イルアミノ）−６−メチルピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）−４−メチルピペラジン−２−オン
【化３６】
2013542916.tif 000038
工程（ｉｉ）で得た生成物（２７．０ｍｇ，０．０５１７ｍｍｏｌ）を用い、実施例３工程（ｉｉｉ）の方法により製造して標題の化合物を無色の油状物質として得た（５．７０ｍｇ，０．０１２９ｍｍｏｌ，２５％）； 1H NMR: 6.98 (1H , d), 6.82 (1H, d), 6.75 (1H, dd), 5.84 (2H, br s), 5.58 (1H, d), 4.12 (1H, m), 3.88 (3H, s), 3.74 (2H, s,), 3.73-3.65 (2H, m), 3.45-3.40 (2H, m), 3.25 (2H, s), 2.81-2.77 (2H, m), 2.46 (3H, s), 2.40 (3H, s), 1.47-1.20 (4H, m), 0.86 (3H, t); LC-MS: m/z = 443 [MH+］(T = 1.35).
【０１４３】
実施例５：（Ｓ）−１−（４−｛［２−アミノ−４−（１−ヒドロキシヘキサン−３−イルアミノ）−６−メチルピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）ピペラジン−２−オン
【化３７】
2013542916.tif 000039
標題の化合物は以下に記載する工程によって製造することができる：
（ｉ）（Ｓ）-tert-ブチル  ４−（４−（（２−アミノ−４−（１−ヒドロキシヘキサン−３−イルアミノ）−６−メチルピリミジン−５−イル）メチル）−３−メトキシフェニル）−３−オキソピペラジン−１−カルボキシレート
【化３８】
2013542916.tif 000040
実施例３工程（ｉｉ）で得た生成物（８０．０ｍｇ，０．１４９ｍｍｏｌ）を用い、実施例３工程（ｉｉｉ）の方法（４−メチルピペラジン−２−オンの代わりにtert-ブチル  ３−オキソピペラジン−１−カルボキシレート（４０．０ｍｇ，０．２００ｍｍｏｌ）を使用）により製造して副題の化合物を無色の油状物質として得た（７０ｍｇ，０．１２９ｍｍｏｌ，８６％）； 1H NMR: 6.95 (1H, d), 6.86 (1H, d), 6.74 (1H, dd), 4.91 (2H, br s), 4.54 (1H, br s), 4.24 (2H, s), 4.13 (1H, m), 3.90 (3H, s), 3.80-3.67 (6H, m), 3.33 (2H, m), 2.34 (3H, s), 1.81-1.11 (6H, m), 1.50 (9H, s), 0.81 (3H, t); LC-MS: m/z =543 [MH+］(T = 0.74)
【０１４４】
（ｉｉ）（Ｓ）−１−（４−｛［２−アミノ−４−（１−ヒドロキシヘキサン−３−イルアミノ）−６−メチルピリミジン−５−イル］メチル｝−３−メトキシフェニル）ピペラジン−２−オン
【化３９】
2013542916.tif 000041
クロロホルム（０．８ｍＬ）中の工程（ｉ）で得た生成物（６７ｍｇ，０．１２４ｍｍｏｌ）の溶液に、塩化水素（０．８ｍＬ，４規定１,４−ジオキサン溶液）を加え、混合物を室温で攪拌した。３時間後、１０％Ｋ２ＣＯ３水溶液を加え、得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。集めた有機溶液を飽和食塩水で洗浄した後、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）した。溶媒を減圧留去した後、粗製の残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して標題の化合物を無色の油状物質として得た（２２．０ｍｇ，０．０４９８ｍｍｏｌ，４０％）； 1H NMR: 6.94 (1H, d), 6.87 (1H, d), 6.75 (1H, dd), 4.90 (1H, br s), 4.67 (2H, br s), 4.55 (1H, d), 4.11 (1H, m), 3.89 (3H, s), 3.68-3.60 (6H, m), 3.40- 3.19 (4H, m), 2.30 (3H, s), 1.91-1.77 (1H, m), 1.44-1.09 (5H, m), 0.79 (3H, t); LC-MS: m/z = 443 [MH+］(T = 0.44)
【０１４５】
生物学的アッセイ
in vitroでＴＬＲ７を活性化する化合物の能力を、以下に記載するヒトＴＬＲ７アッセイを用いて評価した。
【０１４６】
ヒトＴＬＲ７アッセイ
組み換えヒトＴＬＲ７を、既にpNiFty2-SEAPレポータープラスミドを安定に発現しているＨＥＫ２９３細胞株に安定に発現させた；レポーター遺伝子の組込みは、抗生物質ゼオシンでの選択により維持した。ヒトＴＬＲ７の最も一般的な変異配列(ＥＭＢＬ配列AF240467により示される)を、哺乳動物細胞発現ベクターpUNOにクローン化し、このレポーター細胞株にトランスフェクトした。抗生物質ブラストサイジンを用いて、安定に発現するトランスフェクタントを選択した。このレポーター細胞株では、分泌アルカリホスファターゼ(ＳＥＡＰ)の発現が、近位ＥＬＡＭ−１プロモーターと組み合わさった５個のＮＦκＢ部位を含んでなるＮＦκＢ／ＥＬＡＭ−１複合プロモーターにより制御される。ＴＬＲシグナル伝達はＮＦκＢの転位およびプロモーターの活性化を引き起こし、ＳＥＡＰ遺伝子の発現をもたらす。ＴＬＲ７特異的活性化は、０.１％(ｖ／ｖ)ジメチルスルホキシド(ＤＭＳＯ)存在下、３７℃にて標準化合物と一晩インキュベーション後、生成したＳＥＡＰのレベルの測定により評価した。化合物による濃度依存的なＳＥＡＰ産生誘導を、その化合物についてＳＥＡＰの最大レベルの半分をもたらす化合物の濃度として示した(ｐＥＣ５０)。本発明の化合物のＴＬＲ７活性をヒトＴＬＲ７アッセイを用いて評価し、その結果を以下の表１に示す（各化合物のＴＬＲ７活性化の程度をｐＥＣ５０値として示す）。
【表１】
2013542916.tif 000042
【０１４７】
ヒトＴＬＲ８アッセイ
TLR8/NF-κB/SEAPorterTM HEK 293 細胞株 (Imgenex Corporation)は、ＮＦ−κＢ応答エレメントの転写制御下で全長ヒトＴＬＲ８と分泌型アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）レポーター遺伝子を発現する安定なコトランスフェクト細胞株である。この細胞株でのＴＬＲ８発現はフローサイトメトリーにより試験済みである。抗生物質ブラストサイジンおよびジェネティシンを使用して、安定に発現するトランスフェクタントを選択した。ＴＬＲシグナル伝達はＮＦκＢの転位およびプロモーターの活性化を引き起こし、ＳＥＡＰ遺伝子の発現をもたらす。ＴＬＲ８特異的活性化は、０．１％（ｖ／ｖ）ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）存在下、３７℃にて標準化合物と一晩インキュベーション後、生成したＳＥＡＰのレベルの測定により評価した。化合物による濃度依存的なＳＥＡＰ産生誘導を、その化合物についてＳＥＡＰの最大レベルの半分をもたらす化合物の濃度として示した（ｐＥＣ５０）。本発明の化合物のＴＬＲ８活性を、ヒトＴＬＲ８アッセイを用いて評価し、その結果を以下の表２に示す（各化合物のＴＬＲ８活性化の程度をｐＥＣ５０値として示す）。
【表２】
2013542916.tif 000043
【０１４８】
ｈＥＲＧ（human ether-a-go-go related gene）解析−方法１
ｈＥＲＧカリウム電流を、ｈＥＲＧを安定に発現するChinese hamster ovary K1 (CHO)細胞で測定した。実験は、自動化されたプラナーパッチクランプシステムQPatch HT （Sophion Bioscience A/S）を用いて行った。QPatchアッセイソフトウェアを用いて、ギガシール形成のための圧力を与えホールセルパッチクランプの構成を確立した。パッチクランプ実験を電圧クランプモードで行い、個々の細胞からホールセル電流を記録した。
下記の刺激プロトコルを適用してｈＥＲＧカリウムチャンネルに対する化合物の効果を調べた。膜電位を−８０ｍＶに保持し、−５０ｍＶ２０ミリ秒間のパルスでベースラインを定義後、繰り返し（１５秒毎）５秒間＋２０ｍＶに脱分極させた後、５秒間−５０ｍＶの脱分極ステップで末尾電流の振幅を評価した。実験は室温（２２±２℃）で行った。
【０１４９】
化合物の効果は、累積的に濃度を増大させた４種類の濃度から決定し、ブロックされた電流の百分率として計算した。データポイントをHillの式に当てはめ、５０％阻害濃度を算出した。
試験溶液は下記を含有する：
細胞外溶液（ｍＭ）：ＣａＣｌ２（２ｍＭ）、ＭｇＣｌ２（１ｍＭ）、ＨＥＰＥＳ（１０ｍＭ）、ＫＣｌ（４ｍＭ）、ＮａＣｌ（１４５ｍＭ）およびグルコース（１０ｍＭ）；および
細胞内溶液（ｍＭ）：ＣａＣｌ２（５．４ｍＭ）、ＭｇＣｌ２（１．８ｍＭ）、ＨＥＰＥＳ（１０ｍＭ）、ＫＯＨ（３１ｍＭ）、ＥＧＴＡ（１０ｍＭ）、ＫＣｌ（１２０ｍＭ）およびＡＴＰ（４ｍＭ）
結果は、以下の表３に示す。
【０１５０】
ｈＥＲＧ解析−方法２
細胞培養
（Persson, Carlsson, Duker及びJacobson, 2005）に記載されるｈＥＲＧを発現するチャイニーズハムスター卵巣Ｋ１（ＣＨＯ）細胞を、Ｌ−グルタミン、１０％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ）及び０.６ｍｇ／ｍｌハイグロマイシン（すべてSigma-Aldrichより入手可能）を含むＦ−１２ Ｈａｍ培地にて、加湿環境（５％ ＣＯ2）下３７℃でセミコンフルエンスまで増殖させた。使用前に、単層を、予め温めておいた（３７℃）Versene １：５０００（Invitrogen）のアリコート３mLを用いて洗浄した。この溶液を吸引した後、さらにVersene １：５,０００ ２ｍｌとともにインキュベーター中３７℃で６分間フラスコをインキュベートした。次いで、軽くタッピングすることによって、フラスコの底から細胞を脱離させ、カルシウム（０.９ｍＭ）及びマグネシウム（０.５ｍＭ）（ＰＢＳ；Invitrogen）を含むダルベッコリン酸緩衝食塩水１０mLをフラスコに添加し、１５mLの遠心分離管に吸引後遠心分離（５０ｇ、４分間）した。上清を捨て、ペレットをＰＢＳ ３mLへ静かに再懸濁した。細胞懸濁液のアリコート０.５mLを取り、（トリパンブルー排除に基づく）生細胞数を、自動化したリーダー（Cedex;Innovatis）で測定し、細胞再懸濁液の容量をＰＢＳで調整して所望の最終細胞濃度が得られるようにした。アッセイのこの時点での細胞濃度が、このパラメータに言及するときに引用されるものである。IonWorksTM HTでの電圧オフセットの調整に使用されるCHO-Kv1.5細胞を、使用のために同様に維持及び調製した。
【０１５１】
電気生理学
この装置の原理及び操作は、Schroeder, Neagle, Trezise, & Worley, 2003に記載されている。簡単に言えば、３８４ウェルプレート（PatchPlateTM）をベースとし、吸引を用いて、２つの独立した液体チャンバを隔てる小さなホール上に細胞を配置および保持することにより、各ウェルにおいて記録を行うというものである。シーリングが起こったら、PatchPlateTM下側の溶液を、アムホテリシンＢを含むものに変える。これにより、各ウェルのホールを覆う細胞膜のパッチを透過処理し、実際に、穿孔ホールセルパッチクランプ記録が可能になる。
【０１５２】
Essen Instrument製のβ−test IonWorksTM HTを用いた。この装置には溶液を温める機能がないので、次の通りに室温（約２１℃）で操作した。「緩衝液」のリザーバにＰＢＳ ４mLをロードし、「細胞」のリザーバに、上記のＣＨＯ−ｈＥＲＧ細胞懸濁液をロードした。試験化合物（最終試験濃度の３倍の濃度）を含む９６ウェルプレート（Ｖ底、Greiner Bio-one）を、「プレート１」に置き、PatchPlateTMを、PatchPlateTMステーションに固定した。各化合物プレートは、カラムを１２列に並べ、１０列を８点の濃度−効果曲線作成用とし、残りの２列に賦形剤（最終濃度０.３３％のＤＭＳＯ）を加えて、アッセイベースラインを定義し、シサプリドの過最大遮断濃度（最終濃度１０μＭ）を１００％阻害レベルと定義した。次いで、IonWorksTM HTのフルイディクスヘッド（Ｆ−ヘッド）が、PatchPlateTMの各ウェルにＰＢＳ ３.５μLを添加し、そしてその下側を、次の組成（単位はｍＭ）を有する「内部」溶液が灌流する：Ｋ−グルコネート（１００部）、ＫＣｌ（４０部）、ＭｇＣｌ2（３.２部）、ＥＧＴＡ（３部）及びＨＥＰＥＳ（５部；ｐＨ７.２５〜７.３０、１０Ｍ ＫＯＨを使用）。プライミング及び脱泡後、エレクトロニクスヘッド（Ｅ−ヘッド）が、PatchPlateTMの周りを移動し、ホール試験を行った（すなわち、各ウェルのホールが開いたか否かを判定するために電圧パルスを加えた）。次いでＦ−ヘッドが、上記の細胞懸濁液３.５μLをPatchPlateTMの各ウェルに分配し、２００秒間で細胞を各ウェルのホールに到達させシールした。この後、Ｅ−ヘッドがPatchPlateTMの周りを移動し、各ウェルのシール抵抗を測定する。次に、PatchPlateTMの下側の溶液を、次の組成（単位はｍＭ）を有する「アクセス」溶液に交換する：ＫＣｌ（１４０部）、ＥＧＴＡ（１部）、ＭｇＣｌ2（１部）及びＨＥＰＥＳ（２０部；１０Ｍ ＫＯＨを使用してｐＨ７.２５〜７.３０に調整）並びに１００μｇ／mLアムホテリシンＢ（Sigma-Aldrich）。９分間でパッチ穿孔を発生させた後、Ｅ−ヘッドがPatchPlateTMの４８ウェルの周りを移動すると同時にプレ−化合物ｈＥＲＧ電流測定値を得る。次いでＦ−ヘッドが、化合物プレートの各ウェルから溶液３.５μｌをPatchPlateTM上の４つのウェルに添加する（最終ＤＭＳＯ濃度は、どのウェルも０.３３％であった）。これは、化合物のキャリーオーバーの影響を最小化するため、最も薄い化合物プレートのウェルから最も濃い化合物プレートのウェルへと移動するようにして行われる。約３.５分間のインキュベーション後、ポスト−化合物ｈＥＲＧ電流測定値を得るため、Ｅ−ヘッドがPatchPlateTMのすべての３８４ウェルを移動する。このようにして、判定基準が十分な割合のウェルで達成される場合には（以下を参照のこと）、試験化合物の各濃度の効果は１〜４の細胞からの記録に基づいた、非累積的な濃度効果曲線を作成することができる。
【０１５３】
２０秒間−７０ｍＶに保持、−６０ｍＶの１６０ミリ秒間ステップ（リークの概算を得るため）、−７０ｍＶに戻す１００ミリ秒間ステップ、＋４０ｍＶの１秒間ステップ、−３０ｍＶの２秒間ステップ、最後に−７０ｍＶの５００ミリ秒間ステップ、からなる単一の電圧パルスによって、プレ−及びポスト−化合物ｈＥＲＧ電流を誘発する。プレ−化合物電圧パルスとポスト−化合物電圧パルスの間に、膜電位のクランピングはない。電圧パルスプロトコルの開始時の＋１０ｍＶのステップの間に誘発された電流の概算に基づいて、リーク電流を差し引く。IonWorksTM HTの電圧オフセットは、２つの方法のうちのいずれかで調整した。化合物の効力を測定する場合は、脱分極電圧ランプをＣＨＯ−Ｋｖ１.５細胞に適用し、電流トレースの屈曲点が存在する電圧（すなわち、ランププロトコルを用いてチャネル活性化が見られる点）に注目する。これが生じる電圧は、慣用の電気生理学において同じ電圧コマンドを用いて測定済みであり、−１５ｍＶであることが分かっている（データは示さず）ので、オフセット電位は、この値を基準点として用いてIonWorksTM HTソフトウェアに入力することができた。ｈＥＲＧの基本的な電気生理学的性質を決定するとき、IonWorksTM HTにおいてｈＥＲＧ末尾電流逆転電位を測定し、これを、慣用の電気生理学で分かっている値（−８２ｍＶ）と比較し、次いでIonWorksTM HTソフトウェアにおいて必要なオフセット調整を行うことによって、すべてのオフセットを調整する。電流シグナルは、２.５ｋＨｚでサンプリングする。
【０１５４】
−７０ｍＶ（ベースライン電流）での最初の保持期間の間に電流の４０ミリ秒平均をとり、末尾電流レスポンスのピークからこれを差し引くことによって、リークを差し引いたトレースからプレ−及びポスト−スキャンｈＥＲＧ電流量をIonWorksTM HTソフトウェアにより自動的に測定した。各ウェルで誘発された電流の判定基準は、次の通りである：プレ−スキャンシール抵抗 ＞６０ＭΩ、プレ−スキャンｈＥＲＧテール電流振幅 ＞１５０ｐＡ；ポスト−スキャンシール抵抗 ＞６０ＭΩ。ポスト−スキャンｈＥＲＧ電流を各ウェルのそれぞれのプレ−スキャンｈＥＲＧ電流で割ることによって、ｈＥＲＧ電流の阻害程度を評価できる。参考文献：References: Persson, F. et al, J Cardiovasc.Electrophysiol., 16, 329-341 (2005),およびSchroeder, K., et al, J Biomol Screen., 8, 50-64, (2003).
結果を表３に示す。
【表３】
2013542916.tif 000044
【０１５５】
ＰＡＭＰＡ解析
試験溶液の調製
ドナー：System Solution Concentrate (pION inc.)（２５ｍＬ）およびＤＭＳＯ（５０ｍＬ）（最終濃度５％）をｍｉｌｌｉＱ水で１Ｌに希釈し、ＮａＯＨでｐＨ５．０または７．４に調整した。化合物溶液（５μＬ，ＤＭＳＯ中の１０ｍＭ溶液）を上記で調製したシステム溶液１ｍＬに加え、濾過した。
アクセプター：Acceptor Sink Buffer(pION inc.)
【０１５６】
透過実験
化合物溶液（２００μL）をドナープレートに加えた。GIT Lipid-0 (pION inc.)（４μＬ）をアクセプタープレートに加えた。Acceptor Sink Buffer（２００μＬ）をアクセプタープレートに加えた。ドナーおよびアクセプタープレートを重ね合わせた。加湿条件下で４時間インキュベーションした後、アクセプターおよびドナーの両プレートの溶液における試験化合物の濃度をＵＶプレートリーダー（１９０〜５００ｎｍ）で測定した。透過係数Ｐｅ（１０−６ｃｍ／ｓｅｃ）を以下に示す数式により計算した。
【数１】
2013542916.tif 000045
結果を表４に示す。
【表４】
2013542916.tif 000046
【国際調査報告】
2013542916.tif 000051
2013542916.tif 000052