(57)【要約】  抗体を投与された被験体に抗−抗体応答を引き起こす、または悪化させるおそれの少ない予防または治療用抗体の選択に関する方法、組成物およびキット。被験体に投与する抗体は、被験体の内因性抗体のアロタイプ表現型に一致するか、または少なくともより近似するよう選択することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
モノクローナル抗体含有医薬組成物のパネルであって、（ａ）第１のヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体、および薬剤として許容される担体、ならびに（ｂ）第２のヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体、および薬剤として許容される担体を含む、第１の医薬組成物を少なくとも含み、前記第１のモノクローナル抗体が第１のアイソタイプであって、第１の可変領域を含み、前記第２のモノクローナル抗体が前記第１のアイソタイプであって、前記第１の可変領域を含み、かつ前記第１のモノクローナル抗体が第１の重鎖アロタイプ表現型を含み、前記第２のモノクローナル抗体が、前記第１の重鎖アロタイプ表現型とは異なる第２の重鎖アロタイプ表現型を含むことを特徴とするモノクローナル抗体含有医薬組成物のパネル。
【請求項２】
請求項１に記載のモノクローナル抗体含有医薬組成物のパネルにおいて、さらに（ｃ）第３のヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体、および薬剤として許容される担体を含み、前記第３のモノクローナル抗体が、前記第１のアイソタイプであって、前記第１の可変領域を含み、かつ前記第１および第２の重鎖アロタイプ表現型とは異なる第３の重鎖アロタイプ表現型を含むことを特徴とするモノクローナル抗体含有医薬組成物のパネル。
【請求項３】
請求項２に記載のモノクローナル抗体含有医薬組成物のパネルにおいて、さらに（ｄ）第４のヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体、および薬剤として許容される担体を含み、前記第４のモノクローナル抗体が、前記第１のアイソタイプであって、前記第１の可変領域を含み、かつ前記第１、第２および第３の重鎖アロタイプ表現型とは異なる第４の重鎖アロタイプ表現型を含むことを特徴とするモノクローナル抗体含有医薬組成物のパネル。
【請求項４】
請求項１に記載のモノクローナル抗体のパネルにおいて、前記第１のアイソタイプがガンマ１であることを特徴とするモノクローナル抗体のパネル。
【請求項５】
請求項４に記載のモノクローナル抗体のパネルにおいて、前記第１の重鎖アロタイプ表現型がヒトＧ１ｍ３アロタイプを含み、かつ前記第２の重鎖アロタイプ表現型がヒトＧ１ｍ１７アロタイプを含むことを特徴とするモノクローナル抗体のパネル。
【請求項６】
請求項１に記載のモノクローナル抗体のパネルにおいて、前記第１のアイソタイプがガンマ３であることを特徴とするモノクローナル抗体のパネル。
【請求項７】
請求項６に記載のモノクローナル抗体のパネルにおいて、前記第１の重鎖アロタイプ表現型がヒトＧ３ｍ５アロタイプを含み、かつ前記第２の重鎖アロタイプ表現型がヒトＧ３ｍ２１アロタイプを含むことを特徴とするモノクローナル抗体のパネル。
【請求項８】
請求項６に記載のモノクローナル抗体のパネルにおいて、前記第１の重鎖アロタイプ表現型および前記第２の重鎖が、Ｇ３ｍ５、１０、１１、１３、１４、２６、２７；Ｇ３ｍ２１、２６、２７、２８；Ｇ３ｍ１０、１１、１３、１５、２７；Ｇ３ｍ１０、１１、１３、１５、１６、２７；Ｇ３ｍ５、６、１０、１１、１４、２６、２７；およびＧ３ｍ５、６、１１、２４、２６からなる群から選択される異なるアロタイプ表現型を含むことを特徴とするモノクローナル抗体のパネル。
【請求項９】
ヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体の改変方法であって、前記モノクローナル抗体の前記重鎖の定常領域のアミノ酸配列を改変して、その表現型を第１の自然アロタイプ表現型から第２の自然アロタイプ表現型に変えるステップを含み、アロタイプ表現型をコードしない前記モノクローナル抗体のアミノ酸配列は改変しないことを特徴とする方法。
【請求項１０】
請求項９に記載の方法において、前記モノクローナル抗体が、Ｇ１ｍ１アロタイプからｎＧ１ｍ１アロタイプに改変されたＩｇＧ１であることを特徴とする方法。
【請求項１１】
請求項９に記載の方法において、前記モノクローナル抗体が、Ｇ１ｍ３アロタイプからＧ１ｍ１７アロタイプに改変されたＩｇＧ１であることを特徴とする方法。
【請求項１２】
請求項９に記載の方法において、前記第２の自然アロタイプ表現型が、イソアロタイプまたは非マーカーであることを特徴とする方法。
【請求項１３】
請求項９に記載の方法において、前記モノクローナル抗体が、Ｇ２ｍ２３アロタイプからｎＧ２ｍ２３イソアロタイプに改変されたＩｇＧ２であることを特徴とする方法。
【請求項１４】
ヒト被験体に投与するヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体を選択する方法であって、
（ａ）前記被験体に第１の抗体のアロタイプ表現型が存在することを調べるステップ；および
（ｂ）前記第１のアロタイプ表現型を含む第１のモノクローナル抗体と、前記被験体に内因的に存在しない第２のアロタイプ表現型を含む第２のモノクローナル抗体とを少なくとも含むヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体群から、前記被験体に投与するモノクローナル抗体を選択するステップ；および
（ｃ）前記被験体に前記第１のモノクローナル抗体を投与するステップ
を含むことを特徴とする方法。
【請求項１５】
請求項１４に記載の方法において、前記第１のモノクローナル抗体は、前記被験体に内因的に存在しないアロタイプ表現型を含まないことを特徴とする方法。
【請求項１６】
請求項１４に記載の方法において、前記第１のモノクローナル抗体は、第１のアイソタイプで、第１の可変領域を含み、前記第２のモノクローナル抗体は、前記第１のアイソタイプで、前記第１の可変領域を含むことを特徴とする方法。
【請求項１７】
請求項１４に記載の方法において、前記被験体は、関節リウマチを有することを特徴とする方法。
【請求項１８】
請求項１４に記載の方法において、前記被験体は、以前に異種血液の輸血を受けたことがあることを特徴とする方法。
【請求項１９】
請求項１４に記載の方法において、前記被験体は、妊娠したことのある女性であることを特徴とする方法。
【請求項２０】
請求項１４に記載の方法において、前記被験体は、１歳未満の子供であることを特徴とする方法。
【請求項２１】
請求項１４に記載の方法において、前記被験体は、以前に前記第２のアロタイプ表現型を含む抗体を投与されたことがあることを特徴とする方法。
【請求項２２】
特定の集団に属するヒト被験体に投与するモノクローナル抗体を選択する方法であって、
（ａ）前記被験体を含む特定の集団を決定するステップ；
（ｂ）前記特定の集団で一般性の高い第１のアロタイプ表現型を含む第１のモノクローナル抗体と、前記特定の集団で、前記第１のアロタイプ表現型より一般性の低い第２のアロタイプ表現型を含む第２のモノクローナル抗体とを少なくとも含むヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体群から、前記被験体に投与するモノクローナル抗体を選択するステップ；および
（ｃ）前記被験体に前記第１のモノクローナル抗体を投与するステップ
を含むことを特徴とする方法。
【請求項２３】
請求項２２に記載の方法において、前記第１のモノクローナル抗体は、前記特定の集団で一般性が高い第１のハプロタイプを含み、かつ前記第２のモノクローナル抗体は、前記特定の集団で、前記第１のハプロタイプより一般性が低い第２のハプロタイプを含むことを特徴とする方法。
【請求項２４】
請求項２２に記載の方法において、前記特定の集団は、白人の集団であることを特徴とする方法。
【請求項２５】
請求項２２に記載の方法において、前記特定の集団は、黒人の集団であることを特徴とする方法。
【請求項２６】
請求項２２に記載の方法において、前記特定の集団は、アジア人の集団であることを特徴とする方法。
【請求項２７】
請求項２２に記載の方法において、前記被験体は、関節リウマチを有する；以前に異種血液の輸血を受けたことがある；妊娠したことのある女性である；または、１歳未満の子供であることを特徴とする方法。
【請求項２８】
請求項２２に記載の方法において、前記被験体は、以前に前記第２のアロタイプ表現型を含む抗体を投与されたことがあることを特徴とする方法。
【請求項２９】
第１のヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体に対して抗抗体応答を示した被験体を治療する方法であって、前記第１のモノクローナル抗体と同一の可変領域を有するが、前記第１のモノクローナル抗体とは異なるアロタイプ表現型を有する第２のヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体を前記被験体に投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項３０】
請求項２９に記載の方法において、前記抗抗体応答が、前記第１のモノクローナル抗体のアロタイプ決定基に特異的に結合する抗体が前記被験体に存在することを特徴としていることを特徴とする方法。
【請求項３１】
請求項２９に記載の方法において、前記第２のモノクローナル抗体は、前記被験体に内因的に存在していないアロタイプ表現型を含まないことを特徴とする方法。
【請求項３２】
被験体に内因的に発現されていないアロタイプ決定基に特異的に結合する抗体の存在に関して、前記被験体をスクリーニングする方法であって、
（ａ）前記被験体から生物学的試料を得るステップ；
（ｂ）前記生物学的試料を、前記抗アロタイプ決定基に特異性を有するプローブと接触させるステップ；および
（ｃ）前記被験体に内因的に発現されていない前記アロタイプ決定基に特異的に結合する抗体を前記被験体が有していることを示す指標として、前記プローブと前記生物学的試料に含まれ得る抗体との結合を検出するステップ
を含むことを特徴とする方法。
【請求項３３】
請求項３２に記載の方法において、前記プローブが、前記被験体に内因的に発現されていないアロタイプ決定基を含む抗体であることを特徴とする方法。
【請求項３４】
被験体のアロタイプ表現型を決定するキットであって、
少なくとも、第１の抗体アロタイプ決定基を特異的に同定する第１プローブ、および前記第１の抗体アロタイプ決定基とは異なる第２の抗体アロタイプ決定基を特異的に同定する第２プローブ；
少なくとも、前記第１のアロタイプ決定基を含むか、またはコードする第１の分子を含む第１の陽性対照、および前記第２のアロタイプ決定基を含むか、またはコードする第２の分子を含む第２の陽性対照；
少なくとも、前記第１のアロタイプ決定基を含まず、コードもしない第３の分子を含む第１の陰性対照、および前記第２のアロタイプ決定基を含まず、コードもしない第４の分子を含む第２の陽性対照；ならびに
前記キットの使用説明書
を含むことを特徴とするキット。
【請求項３５】
請求項３４に記載のキットにおいて、前記第１および第２プローブが、Ｇ１ｍ１、Ｇ１ｍ２、Ｇ１ｍ３、Ｇ１ｍ１７、Ｇ３ｍ５、Ｇ３ｍ６、Ｇ３ｍ１０、Ｇ３ｍ１１、Ｇ３ｍ１３、Ｇ３ｍ１４、Ｇ３ｍ１５、Ｇ３ｍ１６、Ｇ３ｍ２１、Ｇ３ｍ２４、Ｇ３ｍ２６、Ｇ３ｍ２７、およびＧ３ｍ２８からなる群から選択される、異なるアロタイプ決定基に特異的に結合する抗体であることを特徴とするキット。
【請求項３６】
請求項３５に記載のキットにおいて、異なるアロタイプ決定基を特異的に増幅する複数ポリメラーゼ連鎖反応プライマーをさらに含み、前記異なるアロタイプ決定基が、Ｇ１ｍ１、Ｇ１ｍ２、Ｇ１ｍ３、Ｇ１ｍ１７、Ｇ３ｍ５、Ｇ３ｍ６、Ｇ３ｍ１０、Ｇ３ｍ１１、Ｇ３ｍ１３、Ｇ３ｍ１４、Ｇ３ｍ１５、Ｇ３ｍ１６、Ｇ３ｍ２１、Ｇ３ｍ２４、Ｇ３ｍ２６、Ｇ３ｍ２７、およびＧ３ｍ２８からなる群から選択されることを特徴とするキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２００９年９月２４日出願の米国仮特許出願第６１／２４５，３０５号に基づく優先権を主張するものであり、その全体を参照によりここに組み込むものとする。
【０００２】
本発明は、一般に、免疫学、抗体（Ａｂ）および医薬品の分野に関する。より詳しくは、本発明は抗Ａｂ応答を伴う副反応を軽減するための、アロタイプ表現型に基づく予防または治療用Ａｂの選択に関する。
【背景技術】
【０００３】
治療用モノクローナルＡｂ［ｍＡｂ］は、医薬品産業で最も急速に成長している部門である。これまで、２０種を超えるｍＡｂがＦＤＡにより薬品としてその使用が認められており、より多くが開発途中にある。今では、完全なヒトｍＡｂを創出する方法が存在するが、ＦＤＡが認めている治療用ｍＡｂの殆どは齧歯類に由来している。
残念なことに、非ヒト由来のｍＡｂの投与は、重篤で、ときには致命的な反応を引き起こすことがある。
【０００４】
非ヒト由来のＡｂをヒト被験体に投与することにより引き起こされる過敏反応は、数十年も前から知られている。病気を引き起こす微生物に対するワクチンに酷似して、非ヒト由来の抗体の投与は、ヒトにこれらの外来糖タンパク質に対する免疫を与える。非ヒト由来のＡｂの最初の投与は、通常、強い抗Ａｂ応答を伴わないが、慢性症状の治療のために非ヒト由来のＡｂを繰り返し投与すると、その後の抗Ａｂ応答によって引き起こされる重篤な副作用（致死を含む）に繋がることがある。
【０００５】
この問題は、馬の抗血清またはマウスのｍＡｂを使用する初期のＡｂに基づく治療で特に深刻であった。その後、非ヒト由来のＡｂを修飾して、よりヒト型のものに近付けることにより、抗Ａｂ応答を軽減することが試みられている。例えば、マウスのＡｂを「ヒト型化する」ために広く行われていることとして、マウスのｍＡｂの相補性決定領域（ＣＤＲ）の外側のマウス配列を実際のヒトの配列で置換することがある。そのようなＣＤＲグラフト技術は、ヒト抗マウスＡｂ（ＨＡＭＡ）応答を軽減することに有用であったが、全てのマウス配列が除かれるものではないため、問題は解消されていない。
【０００６】
所謂「ヒト型」Ａｂを開発するために、多くのアプローチが採られてきている。これらのアプローチには、ヒトの遺伝子配列からＡｂを産生するように遺伝子操作したマウスの使用、およびＤＮＡライブラリーを使用した、生体外でのコンビナトリアルなアプローチの使用が含まれる。ヒトＡｂ配列により類似した配列から誘導された治療用Ａｂが、抗Ａｂに関連する副作用の開始時期または強度を遅延させることは、臨床研究から明らかである。完全なヒトＡｂの使用は、将来、ほぼ確実に標準的治療となるであろう。とは言え、ヒト個体群の遺伝的変異の多さのために、ヒト抗ヒトＡｂ（ＨＡＨＡ）応答を解消することは困難であろう。
【発明の概要】
【０００７】
本発明は、投与されたＡｂに対して被験体が抗Ａｂ応答を示す可能性を減じる方法および組成物の開発に関する。ヒトには、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧおよびＩｇＭとして知られる５種類のＡｂ（または免疫グロブリン、Ｉｇ）がある。１つのクラスの中の異なるＡｂは、異なる可変領域を有するものの、類似の構造の定常領域を有している。Ｉｇの１つの種類の中に、サブクラスがあるものもある。例えば、ＩｇＧ種のヒトＩｇは、４つのＩｇＧサブクラス、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４の中の１つであり得る。任意の所与のサブクラスの定常領域はほぼ同一のアミノ酸配列を有するが、異なるサブクラスでは、アミノ酸配列はあまり類似していない。正常なヒトは全て、全てのＩｇクラスおよびサブクラスを有するが、同じクラスおよびサブクラスのＩｇは、２種以上の対立形質（アロタイプ）として存在でき、対立形質のいくつかはある人々には見出せるが他の人々には見出せないことがある。例えば、ＩｇＧ１サブクラスには、４つの重鎖対立遺伝子（またはアロタイプ）：Ｇ１ｍ１、Ｇ１ｍ２、Ｇ１ｍ３およびＧ１ｍ１７と、３つの軽（カッパ）鎖対立遺伝子：Ｋｍ１、Ｋｍ１、２およびＫｍ３が存在する。異なるＩｇＧ１対立遺伝子は、定常領域のアミノ酸配列の小さな変異によって決まる。例えば、Ｇ１ｍ３とＧ１ｍ２のアロタイプの定常領域間の違いは、全部で４個のアミノ酸の違いであり、他の配列は同じである。
【０００８】
従来のＡｂ治療法の重大な欠点は、被験体の内因性Ａｂのアロタイプ表現型を考慮していないことである。したがって、もし所与のｍＡｂが特定の被験体に発現していないアロタイプ決定基を有するなら、被験体の免疫系は、おそらく治療用ｍＡｂに対する抗アロタイプＡｂ（ＡＡＡｂ）応答―過敏反応などの副作用、またはｍＡｂの治療効果の中和に繋がり得る応答を引き起こすであろう。ＡＡＡｂ応答は、被験体がそれ以前に治療用ｍＡｂを投与されたことがない場合、例えば、被験体が、（ｉ）自然発生のＡＡＡｂ、（ｉｉ）高力価の抗Ａｂを伴う疾患（例えば、関節リウマチ）、（ｉｉｉ）輸血により生じたＡＡＡｂ、（ｉｖ）母親由来のＡＡＡｂ、（ｖ）妊娠により生じたＡＡＡｂ、および／または（ｖｉ）他の治療用ｍＡｂによって生じたＡＡＡｂを有している場合でも起こり得るであろう。
【０００９】
本発明は、Ａｂで誘発される副作用および中和を軽減するために、被験体の内因性Ａｂのアロタイプ表現型に一致させるか、または少なくともより近似するように、被験体に投与するＡｂを選択することに関する。免疫系は自己抗原には応答しないよう調整されているので、免疫系から自己Ａｂのように見えるＡｂの投与は、抗Ａｂ応答を引き起こし難くする。このように、本発明によれば、そうでない場合に可能な期間より長期間、かつ／または免疫抑制剤（例えば、メトトレキサートまたはステロイド）を併用しないで、特定のＡｂを使用することが可能となり得る。
【００１０】
したがって、本発明はモノクローナル抗体含有医薬組成物のパネルを特徴とする。（ａ）第１のヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体、および薬剤として許容される担体、ならびに（ｂ）第２のヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体、および薬剤として許容される担体を含む、第１の医薬組成物を少なくとも含むパネルであって、第１のモノクローナル抗体が第１のアイソタイプであって、第１の可変領域を含み、第２のモノクローナル抗体が第１のアイソタイプであって、第１の可変領域を含み、かつ第１のモノクローナル抗体が第１の重鎖アロタイプ表現型を含み、第２のモノクローナル抗体が、第１の重鎖アロタイプ表現型とは異なる第２の重鎖アロタイプ表現型を含むパネル。
【００１１】
パネルは、さらに（ｃ）第３のヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体、および薬剤として許容される担体（但し、第３のモノクローナル抗体が、第１のアイソタイプであって、第１の可変領域を含み、かつ第１および第２の重鎖アロタイプ表現型とは異なる第３の重鎖アロタイプ表現型を含む）；並びに、ある場合には、（ｄ）第４のヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体、および薬剤として許容される担体（但し、第４のモノクローナル抗体が、第１のアイソタイプであって、第１の可変領域を含み、かつ第１、第２および第３の重鎖アロタイプ表現型とは異なる第４の重鎖アロタイプ表現型を含む）を含むことができる。
【００１２】
このパネルにおいて、第１のアイソタイプはガンマ１であり得て、そして、例えば、第１の重鎖アロタイプ表現型はヒトＧ１ｍ３アロタイプを含むことができ、第２の重鎖アロタイプ表現型はヒトＧ１ｍ１７アロタイプを含むことができる。第１のアロタイプはまた、ガンマ３であり得て、例えば、第１の重鎖アロタイプ表現型はヒトＧ３ｍ５アロタイプを含むことができ、第２の重鎖アロタイプ表現型はヒトＧ３ｍ２１アロタイプを含むことができる。第１の重鎖アロタイプ表現型および第２の重鎖はまた、Ｇ３ｍ５、１０、１１、１３、１４、２６、２７；Ｇ３ｍ２１、２６、２７、２８；Ｇ３ｍ１０、１１、１３、１５、２７；Ｇ３ｍ１０、１１、１３、１５、１６、２７；Ｇ３ｍ５、６、１０、１１、１４、２６、２７；およびＧ３ｍ５、６、１１、２４、２６からなる群から選択される異なるアロタイプ表現型を含むことができる。
【００１３】
他の態様では、本発明はヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体の改変方法を特徴とする。この方法は、モノクローナル抗体の重鎖の定常領域のアミノ酸配列を改変して、その表現型を第１の自然アロタイプ表現型から第２の自然アロタイプ表現型に変える（但し、アロタイプ表現型をコードしないモノクローナル抗体のアミノ酸配列は変えない）ステップを含むことができる。この方法では、モノクローナル抗体は、Ｇ１ｍ１アロタイプからｎＧ１ｍ１アロタイプへ、かつ／またはＧ１ｍ３アロタイプからＧ１ｍ１７アロタイプへと改変されるＩｇＧ１であり得る。この方法では、第２の自然アロタイプ表現型は、イソアロタイプまたは非マーカーであり得る。例えば、モノクローナル抗体がＩｇＧ２である場合、Ｇ２ｍ２３アロタイプからｎＧ２ｍ２３イソアロタイプに改変され得る。
【００１４】
ヒト被験体に投与するヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体を選択する方法もまた、本発明の範囲に含まれる。この方法は、（ａ）被験体に第１の抗体のアロタイプ表現型が存在することを調べるステップ；および（ｂ）第１のアロタイプ表現型を含む第１のモノクローナル抗体と、被験体に内因的に存在しない第２のアロタイプ表現型を含む第２のモノクローナル抗体とを少なくとも含むヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体群から、被験体に投与するモノクローナル抗体を選択するステップ；および（ｃ）被験体に第１のモノクローナル抗体を投与するステップを含むことができる。この方法では、第１のモノクローナル抗体は、被験体に内因的に存在しないアロタイプ表現型を含まないものであり得る。第１のモノクローナル抗体は、第１のアイソタイプで、第１の可変領域を含み得、第２のモノクローナル抗体は、第１のアイソタイプで、第１の可変領域を含み得る。この方法の被験体は、関節リウマチを有する；以前に異種血液の輸血を受けたことがある；妊娠したことのある女性である；１歳未満の子供である；および／または以前に第２のアロタイプ表現型を含む抗体を投与されたことがあるものであり得る。
【００１５】
本発明は、さらに、特定の集団（例えば、白人、黒人またはアジア人の集団）に属するヒト被験体に投与するモノクローナル抗体を選択する方法を特徴とする。この方法は、（ａ）被験体を含む特定の集団を決定するステップ；（ｂ）特定の集団で一般性の高い第１のアロタイプ表現型を含む第１のモノクローナル抗体と、特定の集団で、第１のアロタイプ表現型より一般性の低い第２のアロタイプ表現型を含む第２のモノクローナル抗体とを少なくとも含むヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体群から、被験体に投与するモノクローナル抗体を選択するステップ；および（ｃ）被験体に第１のモノクローナル抗体を投与するステップを含むことができる。この方法では、第１のモノクローナル抗体は、特定の集団で一般性が高い第１のハプロタイプを含み得、また、第２のモノクローナル抗体は、特定の集団で、第１のハプロタイプより一般性が低い第２のハプロタイプを含み得る。特定の集団は、白人の集団である。この方法では、被験体は、関節リウマチを有する；以前に異種血液の輸血を受けたことがある；妊娠したことのある女性である；１歳未満の子供である；および／または以前に第２のアロタイプ表現型を含む抗体を投与されたことがあるものであり得る。
【００１６】
他の態様では、本発明は、第１のヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体に対して抗抗体応答を示した被験体を治療する方法を特徴とする。この方法は、第１のモノクローナル抗体と同一の可変領域を有するが、第１のモノクローナル抗体とは異なるアロタイプ表現型を有する第２のヒトまたはヒト型化モノクローナル抗体を被験体に投与するステップを含むことができる。抗抗体応答は、第１のモノクローナル抗体のアロタイプ決定基に特異的に結合する抗体が被験体に存在することを特徴としているものであり得る。第２のモノクローナル抗体は、被験体に内因的に存在していないアロタイプ表現型を含まないものであり得る。
【００１７】
被験体に内因的に発現されていないアロタイプ決定基に特異的に結合する抗体の存在に関して、被験体をスクリーニングする方法もまた、本発明の範囲に含まれる。この方法は、（ａ）被験体から生物学的試料を得るステップ；（ｂ）生物学的試料を、抗アロタイプ決定基に特異性を有するプローブと接触させるステップ；および（ｃ）被験体に内因的に発現されていないアロタイプ決定基に特異的に結合する抗体を被験体が有していることを示す指標として、プローブと生物学的試料に含まれ得る抗体との結合を検出するステップを含むことができる。プローブは、被験体に内因的に発現されていないアロタイプ決定基を含む抗体であり得る。
【００１８】
さらに、被験体のアロタイプ表現型を決定するキットも本発明の範囲に含まれる。キットは、少なくとも、第１の抗体アロタイプ決定基を特異的に同定する第１プローブ、および第１の抗体アロタイプ決定基とは異なる第２の抗体アロタイプ決定基を特異的に同定する第２プローブと；少なくとも、第１のアロタイプ決定基を含むか、またはコードする第１の分子を含む第１の陽性対照、および第２のアロタイプ決定基を含むか、またはコードする第２の分子を含む第２の陽性対照と；少なくとも、第１のアロタイプ決定基を含まず、コードもしない第３の分子を含む第１の陰性対照、および第２のアロタイプ決定基を含まず、コードもしない第４の分子を含む第２の陽性対照と；キットの使用説明書を含むことができる。第１および第２プローブは、Ｇ１ｍ１、Ｇ１ｍ２、Ｇ１ｍ３、Ｇ１ｍ１７、Ｇ３ｍ５、Ｇ３ｍ６、Ｇ３ｍ１０、Ｇ３ｍ１１、Ｇ３ｍ１３、Ｇ３ｍ１４、Ｇ３ｍ１５、Ｇ３ｍ１６、Ｇ３ｍ２１、Ｇ３ｍ２４、Ｇ３ｍ２６、Ｇ３ｍ２７、およびＧ３ｍ２８からなる群から選択される、異なるアロタイプ決定基に特異的に結合する抗体であり得る。キットはさらに、異なるアロタイプ決定基を特異的に増幅する複数のポリメラーゼ連鎖反応プライマーを含むことができ、異なるアロタイプ決定基は、Ｇ１ｍ１、Ｇ１ｍ２、Ｇ１ｍ３、Ｇ１ｍ１７、Ｇ３ｍ５、Ｇ３ｍ６、Ｇ３ｍ１０、Ｇ３ｍ１１、Ｇ３ｍ１３、Ｇ３ｍ１４、Ｇ３ｍ１５、Ｇ３ｍ１６、Ｇ３ｍ２１、Ｇ３ｍ２４、Ｇ３ｍ２６、Ｇ３ｍ２７、およびＧ３ｍ２８からなる群から選択される。
【００１９】
他に特に定義がなければ、本明細書中で使用する全ての技術用語は、本発明が属する技術分野の通常の知識を有する者が一般に理解しているものと同じ意味を有する。生物学用語の一般に理解されている定義は、Ｒｉｅｇｅｒら、Ｇｌｏｓｓａｒｙ  ｏｆ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ：Ｃｌａｓｓｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  第５版  Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  １９９１；およびＬｅｗｉｎ  Ｇｅｎｅｓ  Ｖ  Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  １９９４に見出すことができる。
【００２０】
本明細書で使用されるとき、「抗体」または「Ａｂ」は、Ｉｇ、同種もしくは異種のＩｇの溶液、またはＩｇの混合物である。少なくとも１つのＩｇアロタイプ決定基を有する、二重特異性抗体およびイムノアドヘシンなどの人工Ｉｇもまた、「Ａｂ」である。「モノクローナル抗体」または「ｍＡｂ」は、単一クローンＢ細胞系列により発現されたＡｂである。本明細書で使用されるとき、この用語は、特定の抗原の特定のエピトープと免疫反応を起こすことができる、ただ１種の抗原結合部位を含むＡｂ分子の集団を指す。「多クローン性抗体」または「多クローン性Ａｂ」は、異種のＡｂの混合物である。通常、多クローン性Ａｂは、少なくともいくつかの異なるＡｂが、抗原または有機体の異なるエピトープと免疫反応を起こして、特定の抗原または特定の有機体と結合する、多数の異なるＡｂ分子を含む。本明細書で使用されるとき、多クローン性Ａｂは、２種以上のｍＡｂの混合物であり得る。
【００２１】
「アロタイプ決定基」という語句は、アロタイプを決定する部位に相当するＩｇの位置にある内因性アミノ酸配列を意味する。
【００２２】
本明細書で使用されるとき、「アロタイプ表現型」という語句は、アロタイプを決定するＡｂのアミノ酸配列、またはＡｂアロタイプを決定する位置と同じ位置にあるアミノ酸配列を意味する。アロタイプ表現型という語句は、単一アロタイプ、イソアロタイプもしくは非マーカー；または２種以上（例えば、２、３、４、５、６、もしくはそれ以上）のアロタイプ、イソアロタイプもしくは非マーカーを有する抗体を含むことができる。
【００２３】
Ａｂの「抗原結合部位」は、ＡｂのＦａｂ部位の可変領域内にあり、Ａｂに抗原特異性を与えるＡｂの部位（すなわち、通常、Ａｂの重鎖および軽鎖のＣＤＲにより形成された３次元の窪み）である。「Ｆａｂ部位」または「Ｆａｂ領域」は、パパイン消化Ｉｇのタンパク質分解フラグメントであって、そのＩｇの抗原結合部位を含むものである。「Ｆ（ａｂ’）２部位」は、ペプシン消化Ｉｇのタンパク質分解フラグメントである。「Ｆａｂ’部位」は、Ｆ（ａｂ’）２部位のジスルフィド架橋を減少させることにより得られる生成物である。「非Ｆａｂ部位」は、Ｆａｂ部位内にないＡｂのその部位であり、例えば、「Ｆｃ部位」もしくは「Ｆｃ領域」である。Ａｂの「定常領域」は、可変領域の外側にあるＡｂのその部位である。一般に、定常領域に包含されるのは、免疫応答を促進する他の免疫系要素との結合に関与するＡｂの部位である、Ａｂの「作動体部位」である。したがって、例えば、補体要素またはＦｃ受容体と結合する（その抗原結合部位を介さずに）Ａｂ上の場所は、一般に、そのＡｂの作動体部位である。
【００２４】
Ａｂなどのタンパク質分子に言及するとき、「精製されている」は、そのような分子に自然に伴う成分から分離されていることを意味する。通常、Ａｂまたはタンパク質は、その少なくとも約１０重量％（例えば、９重量％、１０重量％、２０重量％、３０重量％、４０重量％、５０重量％、６０重量％、７０重量％、８０重量％、９０重量％、９５重量％、９８重量％、９９重量％、９９．９重量％、および１００重量％）が、非Ａｂタンパク質も、自然に結合した他の自然発生有機分子も含まないとき、精製されている。純度は、任意の適切な方法、例えば、カラムクロマトグラフィ、ポリアクリルアミドゲル電気泳動、またはＨＰＬＣ分析により測定することができる。化学的に合成されたタンパク質、または他の、自然発生の細胞型以外の細胞型で生成された組み換えタンパク質は、「精製されている」。所望のＩｇ型、および所望しないＩｇ型を含むＡｂは、Ａｂを処理することによって、所望のＩｇと所望しないＩｇとの比が処理前より処理後に高くなったとき、所望のＩｇ型が「濃縮されている」。例えば、アロタイプＧ１ｍ３およびＧ１ｍ１７のＩｇＧを含有するＡｂ溶液は、アロタイプＧ１ｍ３のＩｇＧの一部または全部が溶液から除去されたとき、Ｇ１ｍ１７が濃縮されている。
【００２５】
「結合する」または「〜と反応する」は、試料中で１つの分子が特定の第２の分子を認識し付着するが、試料中で他の分子を認識し付着することは実質的にないことを意味する。一般に、他の分子に「特異的に結合する」Ａｂは、その他の分子に対し約１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１０１０、１０１１または１０１２リットル／モルを超えるＫｄを有する。
【００２６】
本明細書で使用されるとき、用語「ポリペプチド」は、天然または人工タンパク質、タンパク質フラグメント、およびタンパク質配列を有するポリペプチド類似体を包含する。ポリペプチドは、単量体であっても重合体であってもよい。
【００２７】
「ヒトＡｂ」は、ヒト生殖細胞系Ｉｇ配列由来の可変および定常領域を有するＡｂである。ヒト抗体は、例えばＣＤＲ、特にＣＤＲ３に、ヒト生殖細胞系Ｉｇ配列によってコードされないアミノ酸残基（例えば、体外でのランダムまたは部位特異的突然変異誘発により、または体内での体細胞突然変異により導入された突然変異）を含んでもよい。しかしながら、「ヒトＡｂ」は、ヒト以外の種の生殖細胞系から誘導され、ヒトフレームワーク配列にグラフトされたＣＤＲ配列を有するＡｂを含む（これは「ヒト型化Ａｂ」である）。
【００２８】
用語「組み換えＡｂ」は、宿主細胞に移入した組み換え発現ベクターを使用して発現させたＡｂ、組換えコンビナトリアルＡｂライブラリーから単離したＡｂ、ヒトＩｇ遺伝子導入動物（例えばマウス）から単離したＡｂ（例えば、Ｔａｙｌｏｒ，Ｌ．Ｄ．ら（１９９２年）Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２０：６２８７−６２９５を参照）などの、組み換え手段で調製、発現、創出または単離した全てのＡｂ、あるいはＩｇ遺伝子配列の他のＤＮＡ配列へのスプライシングを含む他の任意の手段で、調製、発現、創出または単離したＡｂを含むことを意図している。
【００２９】
用語「エピトープ」は、あるＩｇに特異的に結合することができる任意の抗原決定基を含む。
【００３０】
「治療有効量」とは、治療動物またはヒトに医学的に望ましい効果（例えば、病気の回復または予防）を引き起こすことができる量である。
【００３１】
本明細書で使用されるとき、用語「被験体」は、ヒト、イヌ、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、マウス、ウサギ、ラット、および遺伝子を導入したヒト以外の動物などの哺乳類を含む、Ａｂを保有する任意の動物を意味する。
【００３２】
用語「医薬組成物」または「薬剤」は、活性成分の生物学的活性が有効になるような形態の調製物を指す。「薬剤として許容される賦形剤」または「薬剤として許容される担体」は、採用した活性成分の有効用量を提供するために、１種以上の活性成分と混合して、被験体に無理なく（すなわち、安全に）投与することができる薬剤を形成することができる物質である。
【００３３】
定義した集団に言及するとき、用語「白人」は、もともとヨーロッパ、中東または北アフリカに住んでいた種族のいずれかを起源とする人を意味し、用語「黒人」は、アフリカの黒人集団のいずれかを起源とする人を指し、用語「アメリカインデアンおよびアラスカ原住民」はもともと南北アメリカ（中央アメリカを含む）に住んでいた種族のいずれかを起源とする人を意味し、用語「アジア人」はもともと極東、東南アジア、またはインド亜大陸に住んでいた種族のいずれかを起源とする人を意味する。
【００３４】
本発明を実施または試験する場合、本明細書に記載したものに類似の、または等価の方法および材料を使用することができるが、適切な方法および材料を以下に記載する。本明細書に記載したあらゆる刊行物、特許出願、特許および他の文献は、参照によりそれらの全体を組み込むものとする。対立する場合、本明細書が、定義を含め、優先する。さらに、材料、方法および実施例は、単に説明のためのものであって、限定を意図したものではない。
【００３５】
本発明の他の特徴および利点は、以下の詳細な説明および請求の範囲から明らかになるであろう。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
本発明は、Ａｂを投与した被験体に抗Ａｂ応答を誘起または悪化させるおそれの少ない予防または治療用Ａｂの選択に関する方法、組成物およびキットを包含する。被験体に投与するＡｂは、被験体の内因性Ａｂのアロタイプ表現型に一致させるか、または少なくともより近似するように選択することができる。以下に記載する好ましい実施形態において、これらの組成物および方法の適応について説明する。それにもかかわらず、これらの実施形態の説明から、本発明の他の態様を考案し、かつ／または下記の説明に基づいて実施することができる。
【００３７】
生物学的方法
従来の免疫学的および分子生物学的手法を含む方法をここに記載する。免疫学的方法（例えば、抗原−Ａｂ複合体の検出および局在の解析、免疫沈降法、免疫ブロット法など）はこの分野で一般に知られており、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｃｏｌｉｇａｎら編、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋなどの方法論の論文に記載されている。分子生物学の手法は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、第２版、第１〜３巻、Ｓａｍｂｒｏｏｋら編、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ、Ｎ．Ｙ．、２００１年；およびＣｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ａｕｓｕｂｅｌら編、Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  ａｎｄ  Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋなどの論文に詳しく記載されている。Ａｂ法は、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ａｂｓ、Ｄｕｂｅｌ，Ｓ．編、Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ、２００７年に記載されている。細胞培養法はこの分野で一般に知られており、Ｃｕｌｔｕｒｅ  ｏｆ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｌｌｓ：Ａ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｂａｓｉｃ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ、第４版、Ｒ  Ｉａｎ  Ｆｒｅｓｈｎｅｙ著、Ｗｉｌｅｙ−Ｌｉｓｓ、Ｈｏｂｏｋｅｎ、Ｎ．Ｊ．、２０００年、およびＧｅｎｅｒａｌ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ、Ｍａｕｒｅｅｎ  Ａ  ＨａｒｒｉｓｏｎおよびＩａｎ  Ｆ  Ｒａｅ著、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、ＵＫ、１９９４年などの方法論の論文に詳しく記載されている。タンパク質精製法は、Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ：Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ、第１８２巻、Ｄｅｕｔｓｃｈｅｒ  Ｍ  Ｐ編、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆ．、１９９０年の中で説明されている。
【００３８】
被験体
本発明の方法、組成物およびキットは、ヒト、およびネコ、イヌ、マウス、ラット、ウサギ、ヒツジ、ウシ、ウマ、ヤギ、ブタ、サル、類人猿などの他の動物を含む動物被験体に使用される。本発明は、ＡＡＡｂの測定可能な力価（例えば、血清１ｍｌ当たり０．００１、０．０１、０．０５、０．１、０．２、０．５または１μｇ超のＡｂ）を有する被験体、またはＡＡＡｂが増大する危険性が高い被験体、例えばＨＡＭＡ、ＨＡＨＡまたは高力価の抗Ａｂを伴う疾患（例えば、関節リウマチなどの自己免疫疾患）を有する被験体；妊娠している、または妊娠したことがある被験体；母親からのＡｂを有する子供（例えば、１歳未満の子供）；過去に輸血を受けたことがある被験体；自然発生のＡＡＡｂを有する被験体；および別の治療用Ａｂに応答して生じたＡＡＡｂを有する被験体に特に有用である。
【００３９】
抗体
本明細書に記載の方法、組成物およびキットは、ｍＡｂ、多クローン性Ａｂおよび各種Ａｂフラグメント（例えば、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメントおよびＦ（ａｂ’）２フラグメント）、あるいは、（ｉ）少なくとも１つ（例えば、２、３、４、５もしくはそれ以上）のアロタイプ決定基の位置に内因性アミノ酸配列を保持している、（ｉｉ）アロタイプ変異体を有さない重鎖および／または軽鎖Ｉｇからのアミノ酸配列を含む、かつ／または（ｉｉｉ）イソアロタイプまたは非マーカーを規定する重鎖および／または軽鎖Ｉｇからのアミノ酸配列を含む人工Ａｂ（例えば、単一鎖抗体およびＦａｂ発現ライブラリーを使用して製造した分子）を含む、様々な型のＡｂを使用、または含むことができる。
【００４０】
特定の抗原に対する均一な集団の抗体であるｍＡｂは、標準のハイブリドーマ技術を使用して調製することができる（例えば、Ｋｏｈｌｅｒら著、Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５、１９７５年；Ｋｏｈｌｅｒら著、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６：５１１、１９７６年；Ｋｏｈｌｅｒら著、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６：２９２、１９７６年；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇら著、「Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｔ  Ｃｅｌｌ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ」、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、Ｎ．Ｙ．１９８１年；Ａｕｓｕｂｅｌら著、同上を参照）。特に、ｍＡｂは、Ｋｏｈｌｅｒら著、Ｎａｔｕｒｅ、２５６：４９５、１９７５年、および米国特許第４，３７６，１１０号明細書に記載されているような培養液中の連続細胞系、ヒトＢ−細胞ハイブリドーマ法（Ｋｏｓｂｏｒら著、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ  ４：７２、１９８３年；Ｃｏｌｅら著、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８０：２０２６、１９８３年）、およびＥＢＶ−ハイブリドーマ法（Ｃｏｌｅら著、「Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ」、Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．、ｐｐ．７７−９６、１９８３年）により、抗体分子の製造を提供する任意の手法により得ることができる。ｍＡｂはまた、Ｃｌａｃｋｓｏｎら著、Ｎａｔｕｒｅ  ３５２：６２４−６２８（１９９１年）、およびＭａｒｋｓら著、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７（１９９１年）で記載されている技術を用いて、ファージ抗体ライブラリーから単離することができる。大量のｍＡｂを製造するために、ｍＡｂを製造する細胞系を、生体外、または生体内で培養してもよい。
【００４１】
多クローン性Ａｂは、免疫がある被験体の血清中に存在する異種集団のＡｂ分子、または異なるｍＡｂの組み合わせである。多クローン性Ａｂは、従来法により、免疫がある宿主動物から血清を採取することによって単離することができる。血清から採取した多クローン性抗体は、一般にアロタイプに関して不均一であるが、例えばアロタイプ決定基に特異的な固定化Ａｂを使用する免疫親和性精製により、同一のアロタイプ決定基を有する多クローン性Ａｂの調製に使用することができる。
【００４２】
標的抗原に対する単鎖Ａｂは、従来の方法（例えば、米国特許第４，９４６，７７８号明細書、同第４，９４６，７７８号明細書および同第４，７０４，６９２号明細書）、例えば、アミノ酸架橋を介してＦｖ領域の重鎖および軽鎖フラグメントを結合させ、単鎖ポリペプチド（ｓｃＦｖ）を得ることにより調製することができる。標的抗原に特異的に結合するＡｂフラグメントもまた、従来の手法により調製することができる。例えば、Ｆａｂフラグメントは、完全長のＩｇをパパインで消化することにより製造することができ、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントは、完全長のＩｇ分子をペプシンで消化することにより製造することができ、そしてＦａｂ’フラグメントは、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントのジスルフィド架橋を減らすことにより生成することができる。Ｆａｂ発現ライブラリーを既知の方法（例えば、Ｈｕｓｅら著、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４６：１２７５、１９８９年）により構築し、スクリーニングして、所望の特異性を有するモノクローナルＦａｂフラグメントを製造することができる。二重特異性抗体（すなわち、ＶＨおよびＶＬドメインが単一のポリペプチド鎖上に存在する二価のＡｂ）は、既知の方法（例えば、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ  Ｐ．ら著、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８（１９９３年）、およびＰｏｌｊａｋ  Ｒ．Ｊ．ら著、Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ２：１１２１−１１２３（１９９４年））で製造することができる。Ａｂの一部（例えば、Ｉｇ重鎖の一部）を含有し、非Ａｂ分子（例えば、サイトカインまたはサイトカイン受容体）に結合したイムノアドヘシンもまた、本発明で使用することができよう。
【００４３】
Ａｂは、塩析（例えば、飽和硫酸アンモニウム沈殿）、冷アルコール分画法（例えば、Ｃｏｈｎ−Ｏｎｃｌｅｙ冷アルコール分画法）、サイズ排除クロマトグラフ法、イオン交換クロマトグラフ法、免疫アフィニティークロマトグラフ法（例えば、ヒトＩｇを単離するために、抗−ヒトＩｇ抗体に結合したクロマトグラフィビーズを使用することができる）、プロテインＡまたはプロテインＧクロマトグラフ法、および抗原アフィニティークロマトグラフ法などの従来方法により精製することができる。例えば、上記Ｃｏｌｉｇａｎらを参照。
【００４４】
Ａｂを分析し操作するために、免疫学およびタンパク質化学の標準手法を使用することができる。例えば、Ａｂが溶解している培養液を変えるために、透析を使用することができる。Ａｂはまた、保存のために凍結乾燥させることができる。Ａｂの特定の抗原との結合性を、ウエスタンブロット法、免疫沈降分析、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）、および放射免疫測定法（ＲＩＡ）などの標準方法の１つを使用して試験することができる。例えば、上記Ｃｏｌｉｇａｎらを参照。
【００４５】
本明細書に記載の各種Ａｂは、検出可能標識、細胞毒性薬または放射性同位体などの他の分子に結合していてもよい。検出可能標識の例としては、発色酵素（ペルオキシダーゼおよびアルカリフォスファターゼなど）、放射性同位元素（１２４Ｉ、１２５Ｉ、１１１Ｉｎ、９９ｍＴｃ、３２Ｐ、３５Ｓなど）、発色団、ビオチン、および発光または蛍光染料（ＦＩＴＣ、ＲＩＴＣ、ローダミン、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ、フルオレセイン、フィコエリトリン、染料含浸ナノ粒子、および量子ドットなど）、ＭＲ造影剤（超常磁性酸化鉄（ＳＰＩＯ）および超超常磁性酸化鉄（ＵＳＰＩＯ）など）などを挙げ得る。細胞毒性薬の例としては、放射性同位元素（例えば、３５Ｓ、１４Ｃ、３２Ｐ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、９０Ｙ、８９Ｚｒ、２０１Ｔｌ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、５７Ｃｕ、２１３Ｂｉおよび２１１Ａｔ）、共役放射性同位元素、代謝拮抗薬［例えば、５−フロウロウリシル（ｆｌｏｕｒｏｕｒｉｃｉｌ）（５−ＦＵ）、メソトレキセート（ＭＴＸ）、フルダラビンなど］、微小管阻害薬［例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチンおよびタキサン（パクリタキセルおよびドセタキセルなど）］、アルキル化剤［例えば、シクロファスファミド（ｃｙｃｌｏｐｈａｓｐｈａｍｉｄｅ）、メルファランおよびビスクロロエチルニトロスウレア（ｂｉｓｃｈｌｏｒｏｅｔｈｙｌｎｉｔｒｏｓｕｒｅａ）（ＢＣＮＵ）］、プラチナ製剤［例えば、シスプラチン（ｃＤＤＰともいう）、カルボプラチンおよびオキサリプラチン］、アントラサイクリン（例えば、ドキソルビシンおよびダウノルビシン）、抗生物質（例えば、マイトマイシン−Ｃ）、トポイソメラーゼ阻害薬（例えば、エトポシド、テノポシド（ｔｅｎｏｐｏｓｉｄｅ）およびカンプトテシン）、または、リシン、ジフテリア毒素（ＤＴ）、緑膿菌外毒素（ＰＥ）Ａ、ＰＥ４０、アブリン、サポリン、ヤマゴボウウイルスタンパク、臭化エチジウム、グルココルチコイド、炭疽毒素などの他の細胞毒性薬が挙げられるが、これらに限定されるものではない。例えば、米国特許第５，９３２，１８８号明細書を参照。
【００４６】
標的抗原
本明細書に記載のＡｂは、一般に、標的抗原に特異的に結合するよう選択されるが、被験体の内因性Ａｂのアロタイプ表現型に一致させるか、または少なくともより近似するように調製された静注用免疫グロブリン組成物などの非抗原特異性Ａｂも、本発明の範囲に含まれる。標的抗原の例としては、細胞表面で発現する分子；細胞内で発現する分子；体液または組織中に存在する分子；細菌、ウイルスまたは寄生虫によって発現する分子；薬物；および毒物が挙げられる。限定はされないが、これらには、接着分子、ＣＤ抗原、受容体、サイトカイン、サイトカイン受容体、酵素、酵素補因子、または、ＡｐｏＥ、Ａｐｏ−ＳＡＡ、ＢＤＮＦ、ベータアミロイド、ＣＡ１２５、心筋ミオシン、カルジオトロフィン−１、癌関連抗原、ＣＤ１（ａ−ｃ、１Ａ、１Ｄ、１Ｅ）、ＣＤ２、ＣＤ３（γ、δ、ε）、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ６、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１１（ａ、ｂ、ｃ）、ＣＤ１３、ＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６（Ａ、Ｂ）、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＣＤ２５、ＣＤ２６、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ２９、ＣＤ３０、ＣＤ３１、ＣＤ３２（Ａ、Ｂ）、ＣＤ３３、ＣＤ３４、ＣＤ３５、ＣＤ３６、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ３９、ＣＤ４０、ＣＤ４１、ＣＤ４２（ａ、ｂ、ｃ、ｄ）、ＣＤ４３、ＣＤ４４、ＣＤ４５、ＣＤ４６、ＣＤ４７、ＣＤ４８、ＣＤ４９（ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ）、ＣＤ５０、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ５３、ＣＤ５４、ＣＤ５５、ＣＤ５６、ＣＤ５７、ＣＤ５８、ＣＤ５９、ＣＤ６１、ＣＤ６２（Ｅ、Ｌ、Ｐ）、ＣＤ６３、ＣＤ６４（Ａ、Ｂ、Ｃ）、ＣＤ６６（ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ）、ＣＤ６８、ＣＤ６９、ＣＤ７０、ＣＤ７１、ＣＤ７２、ＣＤ７３、ＣＤ７４、ＣＤ７８、ＣＤ７９（ａ、ｂ）、ＣＤ８０、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ８３、ＣＤ８４、ＣＤ８５（ａ、ｄ、ｅ、ｈ、ｊ、ｋ）、ＣＤ８６、ＣＤ８７、ＣＤ８８、ＣＤ８９、ＣＤ９０、ＣＤ９１、ＣＤ９２、ＣＤ９３、ＣＤ９４、ＣＤ９５、ＣＤ９７、ＣＤ９８、ＣＤ９９、ＣＤ１００、ＣＤ１０１、ＣＤ１０２、ＣＤ１０３、ＣＤ１０４、ＣＤ１０５、ＣＤ１０６、ＣＤ１０７（ａ、ｂ）、ＣＤ１０８、ＣＤ１０９、ＣＤ１１０、ＣＤ１１１、ＣＤ１１２、ＣＤ１１３、ＣＤ１１４、ＣＤ１１５、ＣＤ１１６、ＣＤ１１７、ＣＤ１１８、ＣＤ１１９、ＣＤ１２０（ａ、ｂ）、ＣＤ１２１（ａ、ｂ）、ＣＤ１２２、ＣＤ１２３、ＣＤ１２４、ＣＤ１２５、ＣＤ１２６、ＣＤ１２７、ＣＤ１２９、ＣＤ１３０、ＣＤ１３１、ＣＤ１３２、ＣＤ１３３、ＣＤ１３４、ＣＤ１３５、ＣＤ１３６、ＣＤ１３７、ＣＤ１３８、ＣＤ１４０ｂ、ＣＤ１４１、ＣＤ１４２、ＣＤ１４３、ＣＤ１４４、ＣＤ１４６、ＣＤ１４７、ＣＤ１４８、ＣＤ１５０、ＣＤ１５１、ＣＤ１５２、ＣＤ１５３、ＣＤ１５４、ＣＤ１５５、ＣＤ１５６（ａ、ｂ、ｃ）、ＣＤ１５７、ＣＤ１５８（ａ、ｄ、ｅ、ｉ、ｋ）、ＣＤ１５９（ａ、ｃ）、ＣＤ１６０、ＣＤ１６１、ＣＤ１６２、ＣＤ１６３、ＣＤ１６４、ＣＤ１６６、ＣＤ１６７（ａ、ｂ）、ＣＤ１６８、ＣＤ１６９、ＣＤ１７０、ＣＤ１７１、ＣＤ１７２（ａ、ｂ、ｇ）、ＣＤ１７４、ＣＤ１７７、ＣＤ１７８、ＣＤ１７９（ａ、ｂ）、ＣＤ１８１、ＣＤ１８２、ＣＤ１８３、ＣＤ１８４、ＣＤ１８５、ＣＤ１８６、ＣＤ１９１、ＣＤ１９２、ＣＤ１９３、ＣＤ１９４、ＣＤ１９５、ＣＤ１９６、ＣＤ１９７、ＣＤｗ１９８、ＣＤｗ１９９、ＣＤ２００、ＣＤ２０１、ＣＤ２０２ｂ、ＣＤ２０４、ＣＤ２０５、ＣＤ２０６、ＣＤ２０７、ＣＤ２０８、ＣＤ２０９、ＣＤｗ２１０（ａ、ｂ）、ＣＤ２１２、ＣＤ２１３ａ（１、２）、ＣＤ２１７、ＣＤ２１８（ａ、ｂ）、ＣＤ２２０、ＣＤ２２１、ＣＤ２２２、ＣＤ２２２、ＣＤ２２４、ＣＤ２２５、ＣＤ２２６、ＣＤ２２７、ＣＤ２２８、ＣＤ２２９、ＣＤ２３０、ＣＤ２３３、ＣＤ２３４、ＣＤ２３５（ａ、ｂ）、ＣＤ２３６、ＣＤ２３８、ＣＤ２３９、ＣＤ２４０ＣＥ、ＣＤ２４１、ＣＤ２４３、ＣＤ２４４、ＣＤ２４６、ＣＤ２４７、ＣＤ２４８、ＣＤ２４９、ＣＤ２５２、ＣＤ２５３、ＣＤ２５４、ＣＤ２５６、ＣＤ２５７、ＣＤ２５８、ＣＤ２６１、ＣＤ２６２、ＣＤ２６４、ＣＤ２６５、ＣＤ２６６、ＣＤ２６７、ＣＤ２６８、ＣＤ２６９、ＣＤ２７、ＣＤ２７２、ＣＤ２７３、ＣＤ２７４、ＣＤ２７５、ＣＤ２７６、ＣＤ２７８、ＣＤ２７９、ＣＤ２８０、ＣＤ２８１、ＣＤ２８２、ＣＤ２８３、ＣＤ２８４、ＣＤ２８６、ＣＤ２８８、ＣＤ２８９、ＣＤ２９０、ＣＤ２９２、ＣＤｗ２９３、ＣＤ２９４、ＣＤ２９５、ＣＤ２９７、ＣＤ２９８、ＣＤ２９９、ＣＤ３００Ａ、ＣＤ３０１、ＣＤ３０２、ＣＤ３０３、ＣＤ３０４、ＣＤ３０５、ＣＤ３０６、ＣＤ３０、ＣＤ３０９、ＣＤ３１２、ＣＤ３１４、ＣＤ３１５、ＣＤ３１６、ＣＤ３１７、ＣＤ３１８、ＣＤ３２０、ＣＤ３２１、ＣＤ３２２、ＣＤ３２４、ＣＤ３２５、ＣＤ３２６、ＣＤ３２８、ＣＤ３２９、ＣＤ３３１、ＣＤ３３２、ＣＤ３３３、ＣＤ３３４、ＣＤ３３５、ＣＤ３３６、ＣＤ３３７、ＣＤ３３８、ＣＤ３３９、ＣＤ３４０、ＣＤ３４４、ＣＤ３４９、ＣＤ３５０、ＣＥＡＣＡＭ３、ＣＧＭ１、ＣＭＶ抗原、補体（例えば、Ｃ５）、ＣＴＬＡ４、ジゴキシン、ＥＧＦ、ＥＧＦ受容体、ＥＮＡ−７８、エンドトキシン、エオタキシン、エオタキシン−２、エクソダス−２、ファクターＶＩＩ、酸性ＦＧＦ、塩基性ＦＧＦ、フィブリン、線維芽細胞増殖因子−１０、ＦＬＴ３リガンド、ＦＯＬＲ１、フラクタルカイン（ＣＸ３Ｃ）、ＧＣＰ−２、ＧＤ２ガングリオシド、ＧＤＮＦ、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＧＦ−ベータ１、ＧＲＯ／ＭＧＳＡ、ＧＲＯ−ベータ、ＧＲＯ−ガンマ、ＨＢＶ抗原、ＨＣＶ抗原、ＨＣＣ１、１−３０９、熱ショックタンパク質、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＨＥＲ４、ヘルペスウイルス抗原、ＨＩＶ抗原、ＨＬＡ、ＨＭＷ−ＭＡＡ、ＨＳＶ抗原、インスリン、ＩＦＮ−ガンマ、ＩｇＥ、ＩＧＦ−Ｉ、ＩＧＦ−ＩＩ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＬ−１アルファ、ＩＬ−１ベータ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８（７２ａ．ａ．）、ＩＬ−８（７７ａ．ａ．）、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８（ＩＧＩＦ）、インヒビンアルファ、インヒビンベータ、ＩＰ−１０、ＩＲＰ−２、ケラチノサイト増殖因子−２（ＫＧＦ−２）、ＫＧＦ、ルイスＹ、リポテイコ酸、レプチン、ＬＩＦ、リンホタクチン、リゾチーム、ミュラー管抑制物質、単球コロニー抑制因子、単球誘引タンパク質、Ｍ−ＣＳＦ、ＭＤＣ（６７ａ．ａ．）、ＭＤＣ（６９ａ．ａ．）、ＭＣＰ−１（ＭＣＡＦ）、ＭＣＰ−２、ＭＣＰ−３、ＭＣＰ−４、ＭＤＣ（６７ａ．ａ．）、ＭＤＣ（６９ａ．ａ．）、ＭＩＧ、ＭＩＰ−１アルファ、ＭＩＰ−１ベータ、ＭＩＰ−３アルファ、ＭＩＰ−３ベータ、ＭＩＰ−４、ＭＵＣ１、骨髄系前駆細胞抑制因子−１（ＭＰＩＦ−１）、ＮＡＰ−２、ＮＣＡ９０、ニュールツリン、神経成長因子、ベータ−ＮＧＦ、ＮＴ−３、ＮＴ−４、オンコスタチンＭ、ＰＤＧＦ−ＡＡ、ＰＤＧＦ−ＡＢ、ＰＤＧＦ−ＢＢ、ＰＦ−４、ホスファチジルセリン、ＰＳＡ、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ、狂犬病ウイルス抗原、ＲＡＮＴＥＳ、ＲＳＶ、ＳＤＦ１アルファ、ＳＤＦ１ベータ、ＳＣＦ、ＳＣＧＦ、幹細胞因子（ＳＣＦ）、ＴＡＣＳＴＤ１、ＴＡＧ７２、ＴＡＲＣ、ＴＡＣＥ認識サイト、テナシンＣ、ＴＧＦ−アルファ、ＴＧＦ−ベータ、ＴＧＦ−ベータ２、ＴＧＦ−ベータ３、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、ＴＮＦ−アルファ、ＴＮＦ−ベータ、ＴＮＦ受容体Ｉ（ｐ５５）、ＴＮＦ受容体ＩＩ、ＴＮＩＬ−１、ＴＰＯ、ＴＲＡＩＬ−Ｒ１、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦ−Ａ、ＶＥＧＦ受容体１、ＶＥＧＦ受容体２、ＶＥＧＦ受容体３、および上記の受容体などのＤＮＡ結合タンパク質が含まれる。ムロモナブ−ＣＤ３、エドレコロマブ、イブリツモマブチウキセタン、トシツモマブ、アブシキシマブ、リツキシマブ、バシリキシマブ、インフリキシマブ、セツキシマブ、ダクリズマブ、パリビズマブ、トラスツズマブ、ゲムツズマブ、アレムツズマブ、オマリズマブ、エファリズマブ、ベバシズマブ、ニモツズマブ、ナタリズマブ、ラニビズマブ、エクリズマブ、セルトリズマブペゴール、アダリムマブ、パニツムマブ、エタネルセプト、アレファセプト、アバタセプトおよびリロナセプトもまた、本発明に有用なＡｂのエピトープを決めるものである。
【００４７】
Ｉｇアロタイプ
本発明の方法および組成物は、治療用ｍＡｂのアロタイプ表現型を被験体のそれに特異的に一致させるか、または少なくとも部分的に一致させる（例えば、少なくとも５０、６０、７０、８０、９０、９５％超、一致させる）ことに関する。この技術分野においては、各種のアロタイプが知られている。表１（下記）に、種々のヒトＩｇ対立遺伝子を示す。
2013505938.tif 000002
【００４８】
本発明の組成物、方法およびキットは、少なくとも（ｉ）第１のアロタイプ表現型の、第１の重鎖可変領域および第１の重鎖定常領域を含む第１のＡｂと、（ｉｉ）第１のＡｂと同じ（または多クローン性Ａｂの場合など、少なくとも同一の抗原結合特異性を有する）重鎖可変領域、および第１のアロタイプ表現型とは異なる第２のアロタイプ表現型の第２の重鎖定常領域を含む第２のＡｂとを含むＡｂのパネルを特徴とし得るか、または使用し得る。好ましい実施形態においては、Ａｂのパネルは、数種の異なるヒトまたはヒト型化ｍＡｂ（例えば、３、４、５、６、７、８、９、１０、またはそれ以上の異なるｍＡｂ）を含み、それぞれが同一の可変領域（または、抗原結合部位）と異なる定常領域を有しており、その定常領域は、同一のアイソタイプであるが、アロタイプ表現型が異なっている。例えば、ヒトまたはヒト型化ｍＡｂのパネルは、同一の可変領域（および任意選択により同一の重鎖定常領域）を有するが、カッパ軽鎖定常領域は異なり、カッパ軽鎖定常領域の相違が、Ｋｍ１；Ｋｍ１，２；および／またはＫｍ３アロタイプに対応する２種または３種のＩｇを含み得る。
【００４９】
他の例として、ヒトまたはヒト型化ｍＡｂのパネルは、同一の軽鎖と重鎖可変領域を有するが、重鎖定常領域は異なる少なくとも２種（例えば、２、３、または４種）のＩｇＧ１を含み、重鎖定常領域の相違がＧ１ｍ１、Ｇ１ｍ２、Ｇ１ｍ３、および／またはＧ１ｍ１７アロタイプに対応するものであり得る。アロタイプのセットは共に遺伝することが多いため、ヒトまたはヒト型化Ａｂのパネルは、同一の軽鎖および重鎖可変領域を有するが、Ｇ１ｍ３；Ｇｍ１，１７；およびＧｍ１，２，１７の中の２種または３種などの、異なるがしかし共通の重鎖定常領域ハプロタイプを有する一連のＩｇＧ１を含み得る。ヒトまたはヒト型化ＩｇＧ１ｍＡｂの好ましいセットは、同一のラムダ軽鎖および重鎖可変領域と、これは２つの異なる可能な抗原サイト（すなわち、Ｇ１ｍ３およびＧ１ｍ１７）のみを含むものであろうから、（ａ）ｎＧ１ｍ１、ｎＧ１ｍ２およびＧ１ｍ３アロタイプの重鎖定常領域、および（ｂ）ｎＧ１ｍ１、ｎＧ１ｍ２およびＧ１ｍ１７アロタイプの重鎖定常領域を含むであろう。
【００５０】
同様に、ヒトまたはヒト型化ＩｇＧ３ｍＡｂのパネルは、同一の軽鎖および重鎖可変領域を有するが、重鎖定常領域は異なり、その重鎖定常領域の相違は、Ｇ３ｍ２１、ｎＧ３ｍ２１、Ｇ３ｍ５、ｎＧｍ５、Ｇ３ｍ１１、ｎＧｍ１１、Ｇ３ｍ６、Ｇ３ｍ１０、Ｇ３ｍ１３、Ｇ３ｍ１４、Ｇ３ｍ１５、Ｇ３ｍ１６、Ｇ３ｍ２１、Ｇ３ｍ２４、Ｇ３ｍ２６、Ｇ３ｍ２７およびＧ３ｍ２８表現型の１種以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上）に対応している、少なくとも２種（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上）のＩｇＧ３を含み得る。アロタイプのセットは、共に遺伝することが多いため、ヒトまたはヒト型化Ａｂのパネルは、同一の軽鎖および重鎖可変領域を有し、Ｇ３ｍ５、１０、１１、１３、１４、２６、２７；Ｇ３ｍ２１、２６、２７、２８；Ｇ３ｍ１０、１１、１３、１５、２７；Ｇ３ｍ１０、１１、１３、１５、１６、２７；Ｇ３ｍ５、６、１０、１１、１４、２６、２７；およびＧ３ｍ５、６、１１、２４、２６の２種以上（例えば、２、３、４、５または６種）のような、異なるがしかし共通の重鎖定常領域ハプロタイプを有する、一連のＩｇＧ３を含み得る。ｍＡｂのパネルは、同一の軽鎖および重鎖可変領域を有するが、重鎖定常領域は異なり、その重鎖定常領域の相違は、Ａｍ１およびＡｍ２アロタイプに対応している、２種のヒトまたはヒト型化ＩｇＡ２を含み得る。
【００５１】
上述の重鎖定常領域パネルのＡｂは、カッパおよび／またはラムダ軽鎖を含み得る。ヒトラムダ軽鎖は対立遺伝子変異体を含まないため、パネルの複雑さを軽減するためには、この軽鎖のみを使用することが好ましい。カッパ鎖含有パネルでは、各重鎖アロタイプは、Ｋｍ１；Ｋｍ１，２；および／またはＫｍ３アロタイプのいずれかのカッパ鎖と結合し得る。パネル中に異なるカッパ鎖アロタイプが含まれない場合、Ｋｍ３が、最も一般的であるという理由から、使用する軽鎖として最も好ましく、最も一般的でないという理由から、Ｋｍ１が最も好ましくない。本発明のＡｂのパネルは、一連のＡｂ含有容器またはバイアルとして用意することができる。
【００５２】
免疫原性を低下させた抗体
免疫原性を低下させたＡｂも本発明の範囲に含まれる。１つの種の構成体全体に対して概ね低い免疫原性を示す予防または治療用のＡｂは、アロタイプ表現型に基づいて選択される。アロタイプ決定基と関連する潜在的抗原決定基を全く有さないか、または殆ど有さないＡｂが好ましい。例えば、ラムダ軽鎖を使用するヒトまたはヒト型化Ａｂが（カッパ軽鎖と対照的に）、アロタイプ決定基を有さないことから好ましい。ＡＡＡｂ応答を避けるためには、カッパ鎖の中で、その集団で最も頻度の高いものが好ましい（Ｋｍ３＞Ｋｍ１，２＞Ｋｍ１）。ヒト重鎖では、アルファ１、ミュー、イプシロン、ガンマ４（アロタイプを有さないもの）、またはｎＧ２ｍ２３イソアロタイプを有するガンマ２の使用が、これらの鎖に対してＡＡＡｂ応答を示さないので好ましい。しかしながら、最も多くのアロタイプ変異を示すガンマ１およびガンマ３が、多くの用途（例えば、良好な補体の活性化またはＡＤＣＣが望まれる場合など）で好ましい。この場合、ｎＧ１ｍ１、ｎＧ１ｍ２およびＧ１ｍ３；またはｎＧ１ｍ１、ｎＧ１ｍ２およびＧ１ｍ１７を有するガンマ１が好ましい。そのような重鎖におけるアミノ酸配列もまた、遺伝子操作により、Ｇ１ｍ３またはＧ１ｍ１７を規定している残基を、イソアロタイプ決定基を規定しているアミノ酸で置換し得る。そのような人工重鎖はＡｂで使用することができ、そしてそのＡｂは必要な活性（例えば、補体の活性化およびＡＤＣＣ活性）を試験することができる。
【００５３】
投与のためのモノクローナル抗体の選択方法
１つの態様では、本発明は、異なるＡｂのパネルから、すなわち、それぞれが同一の可変領域（または、少なくとも同一の抗原結合特異性）を有し、同一のアイソタイプではあるが、アロタイプ表現型が互いに異なるＡｂのパネルから、Ａｂを選択する方法を特徴とする。この方法は、（ａ）被験体から生物学的試料を採取するステップ；（ｂ）生物学的試料を分析し、被験体により発現される１種以上（例えば、１、２、３、４、５、６種またはそれ以上）のＡｂアロタイプ表現型を決定するステップ；（ｃ）少なくとも（ｉ）所定の抗原に対して特異的な抗原結合部位を有する第１可変領域、および被験体により発現されない第１のアロタイプ表現型の第１の定常領域を有する第１のＡｂと、（ｉｉ）その所定の抗原に対して特異的な抗原結合部位を有する第１の可変領域（第１のＡｂの可変領域と同一である得る）、および第１のアロタイプ表現型とは異なり、かつ被験体により発現される第２のアロタイプ表現型の第２の定常領域を有する第２のＡｂとを含むＡｂのパネルを用意するステップ；ならびに（ｄ）第２のＡｂをヒト被験体に投与するステップを含む。この方法では、第２の定常領域が、被験体により発現される複数種（例えば、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０種またはそれ以上）のアロタイプ表現型を有し、かつ／または、被験体により発現されないアロタイプを有さないこともあり得る。
【００５４】
生物学的試料の採取には、任意の適切な方法を用いることができる。採取される生物学的試料としては、被験体からの、ＡｂまたはＡｂをコードする核酸を有する細胞を含む任意のもの、例えば血液、血漿、血清、白血球、Ｂリンパ液、脳脊髄液、関節液、脾臓、リンパ節、骨髄および胎盤などが挙げられる。例えば、抹消血試料は、静脈穿刺により採取することができる。全血は、既知の方法により、細胞分画（例えば、バフィーコート）、血漿または血清に分離することができる。骨髄は、針穿刺吸引により得ることができる。脾臓およびリンパ節試料は、生検により得ることができる。ある場合には、被験体から採取した生物学的試料をさらに処理して、Ａｂ含有部分、またはＡｂをコードする核酸配列を有する細胞を濃縮することができる。
【００５５】
Ａｂのアロタイプ表現型を被験体に一致させるために、被験体内の少なくとも１種（例えば１、２、３、４、５種またはそれ以上）の内因性Ａｂの１種または複数種（例えば、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０種またはそれ以上）のアロタイプ表現型を調べることができる。Ａｂのアロタイプ表現型は、任意の適切な方法、例えば、被験体から採取した生物学的試料中の、アロタイプ表現型に対応するＡｂのアミノ酸配列変異を同定することにより、または、被験体から採取した生物学的試料に含まれているＤＮＡまたはＲＮＡのアロタイプ表現型に対応するＡｂコード遺伝子の核酸配列を調べることにより知ることができる。例えば、アロタイプ表現型に関係するアミノ酸変異に特異的なプローブを、Ａｂ含有試料に接触させることができ、Ａｂへのプローブの結合を評価することができる。その場合、Ａｂへのプローブの結合は、その試料がその特定のアロタイプ表現型のＡｂを含んでいることを示している。他の例を挙げれば、アロタイプ表現型に関係するアミノ酸変異をコードする核酸に特異的なプローブを、被験体から採取した核酸試料と接触させることができ、そしてアロタイプ表現型に関係するアミノ酸変異をコードする核酸へのプローブの結合を検出（例えば、サザンブロット法で）することができる。その場合、アロタイプ表現型に関係するアミノ酸変異をコードする核酸へのプローブの結合は、被験体がその特定のアロタイプ表現型のＡｂを有していることを示している。
【００５６】
典型的な方法では、Ａｂの表現型を評価すべき被験体から、血液、血清または血漿などの生物学的試料を被験体から単離する。さらに、単離した試料を、例えば、塩析、サイズ排除クロマトグラフ法、イオン交換クロマトグラフ法、免疫アフィニティークロマトグラフ法（例えば、抗−ヒトＩｇ抗体に結合したクロマトグラフィビーズを使用して、ヒトＩｇを単離することができる）、および／または、プロテインＡもしくはプロテインＧクロマトグラフ法などにより処理して、試料中のＡｂを濃縮してもよい。酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）または放射免疫測定法（ＲＩＡ）などの免疫測定法により、知られていないアロタイプ表現型Ａｂを含む試料中の、特定のアロタイプ表現型Ａｂの存在を調べることができる。そのような免疫測定法では、通常、特定のアロタイプ表現型と検出可能標識を有するＡｂにのみ選択的に結合するＡｂを使用する。例えば、選択したアロタイプ表現型に特異的なキャプチャーＡｂを、マイクロタイタープレートのウェル内に固定化することができる。希釈血清などのＡｂ含有生物学的試料をウェルに加え、ウェルを洗浄する。その後、評価するＡｂのアイソタイプに特異的な酵素標識Ａｂ（例えば、ペルオキシダーゼ標識抗ヒトＩｇＧ１）をウェルに加える。その後、ウェルを洗浄し、Ａｂ含有生物学的試料が評価するその特定のアロタイプ表現型のＡｂを含んだウェル内で、発色反応が検出され得るように、酵素の基質を加える。
【００５７】
あるいは、赤血球凝集反応阻害試験を使用することもできる。代表的な赤血球凝集反応試験では、コーティングされた細胞が既知の単一アロタイプのＡｂに暴露したときに膠着するように、Ｏ＋赤血球を既知の単一アロタイプに特異的なＩｇでコーティングする。既知の単一アロタイプのＡｂを含むことが分かっている抗血清を、型を判別すべき未知の血清と混合し、混合物をコーティングした赤血球に加える。赤血球の膠着が阻害されるならば、未知の血清中にそのアロタイプが存在すると結論することができる。
【００５８】
他の手法では、生物学的試料中にアロタイプ表現型に関係するアミノ酸変異をコードする核酸が存在することを検出することができる。例えば、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）に基づく試験もまた、特定のアロタイプ表現型に特異的なＡｂのアミノ酸配列をコードする核酸領域を選択的に増幅するプライマーセットを使用して、被験体によるＡｂアロタイプ表現型の発現の検出に使用することができる。さらに、所与の被験体が発現するアロタイプを調べるために、制限断片長多型解析を使用することができる。現状では免疫測定法または核酸に基づく検出法よりも扱いにくいが、Ａｂまたはその一部の配列を直接測定して、そのアロタイプ表現型を決定することもできる。
【００５９】
Ａｂの改変方法
本発明はさらに、抗原結合可変領域を保持しながら、Ａｂを改変してアロタイプ表現型を変化させる方法を含む。この方法は、上述したようなＡｂのパネルの作成に使用することができる。Ａｂを改変する方法はこの技術分野においてはよく知られている。例えば、Ｌｏ，Ｂ．Ｋ．Ｃ．著、Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ−Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ、Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ、２００４年を参照されたい。Ａｂの改変は、一般に、従来型の分子生物学的手法、例えば、全Ｉｇの軽鎖または重鎖をコードする核酸をまず単離し、ベクターにクローニングする方法により行われる。その後、制限酵素を使用して、Ａｂの１種以上（例えば、１、２、３、４、５またはそれ以上）のアロタイプ表現型に対応するアミノ酸配列をコードする核酸配列を切り出す。次いで、１種以上（例えば、１、２、３、４、５またはそれ以上）の異なるアロタイプ表現型のアミノ酸配列をコードする新たな核酸配列で、切り出した後の核酸を置換する。この処理は、可変領域は同一であるが、定常領域はＡｂの異なるアロタイプ表現型に対応して異なっているＡｂをコードする核酸のライブラリーが作成されるまで、繰り返すことができる。あるいは、既知の抗原特異性を有するＡｂからのＣＤＲを、異なるアロタイプ表現型Ａｂのフレームワーク領域にグラフトするＣＤＲグラフト法を使用することもできる。例えば、これらの方法を使用して、アロタイプＧ１ｍ（１）のＡｂをＧ１ｍ（３）アロタイプに変化させることができる。
【００６０】
特定の集団に属するヒト被験体に対するモノクローナル抗体の選択方法
本発明はさらに、ある種のＡｂアロタイプ表現型またはハプロタイプが支配的な特定の集団に属するヒト被験体に投与するモノクローナル抗体の選択方法を特徴としている。この方法の一例では、被験体に、表現型または遺伝子型に基づいて特定の集団を割り当てる。特定の集団は、人種または祖先の背景、例えば白人、黒人またはアジア人に基づくものであってよい。被験体に特定の集団を割り当てたなら、少なくとも、特定の集団で一般性の高い第１のアロタイプ表現型またはハプロタイプを有する第１のＡｂ、および特定の集団で一般性の低い第２のアロタイプ表現型またはハプロタイプの第２のＡｂを含むＡｂのセットから、被験体に投与するＡｂを選択する。その後、被験体が第２のアロタイプ表現型またはハプロタイプよりも、第１のアロタイプ表現型またはハプロタイプをより発現し易いであろうことに基づき、被験体に投与する第１のＡｂを選択する。例えば、黒人の集団では、Ｇ１ｍ３アロタイプのＡｂの使用は稀であるが、Ｇ１ｍ１、Ｇ１ｍ１７は多く使用される。このように、Ｇ１ｍ３アロタイプのＡｂの使用は、Ｇ１ｍ１、Ｇ１ｍ１７アロタイプの使用より好ましくないであろう。
【００６１】
抗抗体応答を示した被験体の治療方法
他の態様では、本発明は、先に投与したＡｂに対し抗Ａｂ応答（例えば、ＨＡＨＡまたはＨＡＭＡ応答）を示した被験体の治療方法に関する。この方法では、先のＡｂの投与を中止し、代わりに被験体には、先に投与したＡｂと可変領域は同一であるが、先に投与したＡｂとアロタイプ表現型（好ましくは、被験体が発現するもの）は異なる第２のＡｂを投与する。これにより、抗抗体応答の中の抗アロタイプ反応が解消または軽減される。したがって、この方法は、抗−抗体応答が、先に投与したＡｂのアロタイプ決定基に特異的に結合するＡｂが被験体内に存在することを特徴とするものであるとき、特に有用である。
【００６２】
抗抗体応答を誘発し難いモノクローナル抗体の選択方法
被験体に抗Ａｂ応答を誘発し難いＡｂを選択する方法も本発明の範囲に含まれる。この方法は、まず被験体の１種以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０種またはそれ以上）のＡｂアロタイプ表現型を決定することを含み得る。その後、（ａ）被験体の１種以上のアロタイプ表現型を有し、かつ／または（ｂ）被験体が発現しないアロタイプ表現型を有さないＡｂを、種々のアロタイプ表現型を有し（かつ、任意選択により同一の可変領域を有する）異なるＡｂのパネルから選択する。その後、選択したＡｂを被験体に投与する。
【００６３】
医薬組成物および方法
本発明のＡｂ組成物は、投与の形態および経路、ならびに標準の投薬手法に基づいて選択した、薬剤として許容される担体（例えば、滅菌生理食塩水）により、動物またはヒトに投与することができる。薬剤として許容される担体および薬剤処方のリストは、この分野の標準のテキストであるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ著、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、およびＵＳＰ／ＮＦに見出すことができる。組成物の安定化および／または保存のために、かつ／または被験体への投与を容易にするために、他の物質を組成物に加えてもよく、また、他のステップを用いてもよい。
【００６４】
例えば、Ａｂ組成物は、凍結乾燥させたり（Ｄｒａｂｅｒら著、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ．１８１：３７、１９９５年、およびＰＣＴ／ＵＳ９０／０１３８３を参照）；ナトリウムイオンおよび塩素イオンを含む溶液に溶解させたり；アルブミン、グルコース、マルトース、スクロース、ソルビトール、ポリエチレングリコールおよびグリシンなどの１種以上の安定化剤を含む溶液に溶解させたり；ろ過したり（例えば、０．４５およびまたは０．２ミクロンフィルターを使用）；かつ／または殺菌剤を含む溶液（例えば、洗浄剤、有機溶媒、および洗浄剤と有機溶媒の混合物）に溶解させたりすることができる。
【００６５】
本発明の組成物は、適切な任意の方法で、動物またはヒトに投与することができる。通常、そのような投与は非経口（例えば、静脈内、皮下、筋肉内、胸骨内または腹腔内への導入）であろう。組成物はまた、目的の場所へ直接に、例えば、内部もしくは外部の目的とする場所へ外科的送達により、あるいは血管を通して到達可能な場所へカテーテルにより、投与してもよい。この技術分野では、他の送達方法、例えばリポソーム製剤による送達、または組成物を含浸した装置からの拡散なども知られている。組成物は、１回の急速投与、複数回の注射、または連続注入（例えば、静脈内注入または腹膜透析など）により投与してもよい。
【００６６】
治療に有効な量とは、治療した動物またはヒトに医学的に望ましい結果をもたらすことができる量である。医療分野でよく知られているように、任意の１匹の動物または１人のヒトに対する用量は、被験体の大きさ、体表面積、年齢、投与する特定の組成物、性別、投与の時間および経路、一般的な健康状態、併用投与する他の薬剤を含む、多くの因子に依存する。抗体の静脈内投与の適切な用量は、約０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲であろう。
【００６７】
キット
本発明はまた、被験体が発現するＡｂのアロタイプ表現型に一致、またはよく近似したＡｂを、被験体に投与することができるように、被験体のＡｂアロタイプ表現型を測定するキットを特徴とする。典型的なキットは、被験体から単離された生物学的試料のＡｂアロタイプ表現型を特異的に同定する複数のプローブと、緩衝液などの他の試薬と、試験管またはマイクロタイタープレートなどの容器と、陽性および陰性対照（例えば、特定のアロタイプ表現型を発現し、スクリーニングされるＡｂ、および、アロタイプ表現型を発現せず、スクリーニングされないＡｂ；またはスクリーニングされるアロタイプ表現型Ａｂをコードする核酸、および、スクリーニングされるアロタイプ表現型を含まないＡｂをコードする核酸）と、使用説明書を含み得る。プローブは、上でより詳しく説明したように、スクリーニングされるアロタイプ表現型に対応するアミノ酸配列をコードする核酸を特異的に増幅するポリメラーゼ連鎖反応プライマー、または、スクリーニングされるＡｂアロタイプ表現型に対応するアミノ酸配列に特異的に結合するＡｂであり得る。
【００６８】
ＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ、沈降素分析、またはオークタロニー二重免疫拡散法などの免疫測定法を使用して、特定のアロタイプ表現型Ａｂの存在を検出するのに、Ａｂベースのプローブを使用することができる。そのような免疫測定法は、１回の測定で数種（３、４、５、６種またはそれ以上）の異なるＡｂアロタイプ表現型を検出するように手順を整えることが好ましい。例えば、１回のＥＬＩＳＡまたはＲＩＡで、単一の生物学的試料について、異なるアロタイプ表現型を同時にスクリーニングできるように、マイクロタイタープレートの異なるウェルを、異なるＡｂアロタイプ表現型に特異的な、異なる（例えば２、３、４、５、６、７種またはそれ以上）のキャプチャーＡｂでコーティングすることができる。同様に、オークタロニー法では、生物学的試料を中央のウェルに加え、それぞれが異なるアロタイプ表現型に特異性を有する数種の異なるＡｂを、中央ウェルを囲む異なるウェルに個々に加えることができる。あるいは、特定のアロタイプ表現型のＡｂの存在を検出するために、上述したような赤血球凝集反応阻害試験をキットに含めてもよい。
【００６９】
被験体のＡｂアロタイプ表現型を測定するキットはまた、被験体からの生物学的試料が１種以上（例えば、１、２、３、４、５、６種またはそれ以上）のＡｂアロタイプ表現型をコードする核酸を含有しているか否かを測定する試薬を含んでもよい。例えば、キットは、特定のアロタイプ表現型のＡｂをコードする核酸に相補的な、検出可能なように標識を付した核酸、特定のアロタイプ表現型に特異的なＡｂ中のアミノ酸配列をコードする核酸領域を選択的に増幅するＰＣＲプライマーセット、または、拡散配列をアロタイプ表現型特異性に基づいて切断する制限酵素（ＲＦＬＰ法用）を含んでもよい。
【００７０】
ＡＡＡｂの存在について被験体をスクリーニングする方法
被験体のＡｂアロタイプ表現型に一致、またはよく近似したＡｂを使用することは、既にＡＡＡｂを保有する被験体には特に重要である。したがって、１つの態様では、本発明はＡＡＡｂの存在について被験体をスクリーニングする方法に関する。これらの方法では、生物学的試料を被験体から採取し、その後、ＡＡＡｂの存在をスクリーニングすることができる。生物学的試料は、ＡＡＡｂを含み得る任意のもの、例えば、血液、血漿、血清、リンパ液、唾液、尿、脳脊髄液および関節液を含むことができる。生物学的試料の採取には、任意の適切な方法を用いることができる。例えば、抹消血試料は、静脈穿刺により得ることができる。全血は、既知の手法により、細胞分画（例えば、バフィーコート）、血漿または血清に分離することができる。ある場合には、被験体から得た生物学的試料をさらに処理して、Ａｂ含有部分、またはＡｂをコードする核酸配列を有する細胞を精製することができる。
【００７１】
生物学的試料中のＡＡＡｂの存在は、任意の適切な方法で検出することができる。例えば、ＡＡＡｂが特異性を示すアロタイプのＡｂを、生物学的試料に接触させるプローブとして使用することができる。ＡｂプローブのＡＡＡｂへの結合は、被験体が特定のＡＡＡｂを保有していることを示すものとして検出することができる。そのようなプローブＡｂは、凝集体形成法、沈降素分析、オークタロニー二重免疫拡散法、ＥＬＩＳＡ（例えば、プローブＡｂをキャプチャーＡｂとして使用して）およびＲＩＡ（例えば、プローブＡｂをキャプチャーＡｂとして使用）などの各種免疫測定法を使用して、生物学的試料中の特定のＡＡＡｂを検出するために、使用することができる。
【００７２】
典型的方法では、血液、血清または血漿などの生物学的試料を被験体から単離する。単離した試料は、直接使用してもよく、あるいは、さらに、例えば、塩析、サイズ排除クロマトグラフ法、イオン交換クロマトグラフ法、免疫アフィニティークロマトグラフ法（例えば、抗−ヒトＩｇ抗体に結合したクロマトグラフィビーズを使用して、ヒトＩｇを単離することができる）、および／またはプロテインＡもしくはプロテインＧクロマトグラフ法などにより処理して、試料中のＡｂを濃縮してもよい。スクリーニングされるＡＡＡｂが結合するであろうアロタイプのキャプチャーＡｂを、マイクロタイタープレートのウェルに固定化することができる。ＡＡＡｂを含有する可能性がある生物学的試料をウェルに加え、ウェルを洗浄する。その後、被験体のＡｂに特異的な、標識を付したＡｂ（しかし、キャプチャーＡｂではない）をウェルに加える。その後、ウェルを洗浄し、ウェル中の標識の存在を評価する。ウェル中に標識が存在することは、そのウェルに加えた生物学的試料がＡＡＡｂを含有することを示す。あるいは、赤血球凝集反応を使用することもできる。例えば、Ｏ＋赤血球を単一の既知のアロタイプのＩｇでコーティングする。生物学的試料の添加により、コーティングした細胞が膠着を起こすならば、その生物学的試料はスクリーニングしたＡＡｂを含有する。
【００７３】
他の実施形態
本発明の詳細な説明とともに本発明を説明してきたが、上記の説明は本発明を説明することを意図したものであって、本発明の範囲を限定することを意図したものではなく、本発明の範囲は添付した特許請求の範囲で示されている。他の態様、有利性および修正は以下の特許請求の範囲に含まれている。
【国際調査報告】
2013505938.tif 000003
2013505938.tif 000004
2013505938.tif 000005