(57)【要約】  本発明は、加水分解哺乳類タンパク質と、１以上の炭水化物と、化合物結合剤と、の混合物中に含まれたプロバイオティクスを含む、乳児及び子供の栄養摂取用組成物を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
加水分解哺乳類タンパク質と、１以上の炭水化物と、化合物結合剤と、の混合物中に含有されたプロバイオティクスを含む摂取可能な組成物。
【請求項２】
前記プロバイオティクスが、生きている微生物細胞を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記生きている微生物細胞が、ラクトバチルス・ラムノサス（Lactobacillus rhamnosus）を含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記加水分解哺乳類タンパク質が、加水分解カゼインを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記加水分解哺乳類タンパク質の少なくとも２０％が、分子量２０００ダルトン未満のたんぱく質で構成されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記加水分解哺乳類タンパク質の少なくとも７０％が、分子量２０００ダルトン未満のたんぱく質で構成されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記加水分解哺乳類タンパク質の少なくとも９０％が、分子量２０００ダルトン未満のたんぱく質で構成されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
前記加水分解タンパク質が、乾燥状態で、前記混合物の約１０〜約２０％を構成する、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
加水分解哺乳類タンパク質の安定化混合物を含む摂取可能な組成物であって、
前記加水分解タンパク質の７０％が２０００ダルトン未満の分子量を有し、そして、前記加水分解哺乳類タンパク質が、乾燥状態において、前記安定化混合物の約１０〜約２０％を構成する、組成物。
【請求項１０】
脂質又は脂肪と、たんぱく質源と、ドコサヘキサエン酸を含む長鎖ポリ不飽和脂肪酸源約５〜約１００ｍｇ／１００ｋｃａｌと、プレバイオティクス組成物約０．１〜約１ｍｇ／１００ｋｃａｌと、加水分解たんぱく質を含有する安定化プロバイオティクスと、を含む栄養製品であって、
前記プレバイオティクス組成物が、少なくとも２０％のオリゴ糖を含み、そして、前記加水分解哺乳類たんぱく質の少なくとも７０％が、約２０００ダルトン未満の分子量を有する、栄養製品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、個体（individual）による摂取用の生物材料（biological material）の安定化に関する。詳細に、本発明は、加水分解哺乳類（特に、ウシ）のたんぱく質を含んで、プロバイオティック生物（probiotic organism）が、製品の分布及び貯蔵の際に向上された安定性を有するようにした安定化細菌混合物（stabilized bacterial mixture）に関する。本発明は、新規のプロバイオティクス安定化方法をも含む。
【背景技術】
【０００２】
現に、人間と動物の両方の消化管を補完する様々な組成物が存在している。これらのサプリメント（組成物）は、消化に望ましい効果を引き起こすために、個々の腸内細菌叢を変化、減少、又は、増加させるために提供され得る。理想的には、補完又は補充は、人間の胃腸（GI）管内の特定の細菌の変化に基づいて、ヒトを含めた個体に対し改良されたマイクロフローラを養うことであり得る。この種の補充は、有効量で投与した場合、ホストに健康や栄養の利点を与える生きた微生物であると理解されるプロバイオティクスを使用することで行われる。プロバイオティクスの一般的なタイプの一つは、糖および他の炭水化物を乳酸に変換することができる乳酸菌である。この変換は、ホストの腸内のpHを低下させ、かつ、有害な有機体が成長して、胃腸感染症を介した問題を引き起こす機会を減らす。
【０００３】
一般的な技術的課題は、プロバイオティクスの維持、及び、個々の健康と楽しみの両方について適切な方法でホストにプロバイオティクスを導入することである。現在の技術では、保護された微生物が、個々の消化管内の適切な場所を通る（へ移動する）ように、保護層またはマトリックスでプロバイオティクスを遮蔽するカプセル化及び安定化技術の利用が含まれている。たとえば、米国特許第5286495号には、腸および腹腔内の両方の投与のために、シュウ酸分解酵素と細菌をカプセル化するように、細胞をマイクロカプセル化するプロセスが記載されている。その特許文献によれば、細菌及び酵素は、正常にアルギン酸マイクロカプセルまたは酢酸フタル酸セルロースミクロスフェア（cellulose acetate phthalate microspheres）のいずれかにカプセル化され得る。そのモデルによれば、カプセル化細胞が動物の適切な胃領域に達するように、細菌や酵素の生存能力が保たれていることが示唆される。
【０００４】
米国特許第５，７３３，５６８号によれば、マイクロカプセル化乳酸菌（Lactobacilli）細菌を皮膚に投与して、再発性の皮膚感染症を治療又は予防することが記載されている。乳酸菌（Lactobacillus）種をグルコース食塩水と混合して、アルギン酸ナトリウム溶液とそっと撹拌した後、針を通させて、ゲル化液滴が生じるよう乾燥させる。カプセル化の別の方法は、細菌のカプセル化用のヒドロキシプロピルメチルセルロース又はポリビニルポビドンの懸濁液に細菌を加えることを含み得る。
【０００５】
米国特許第６，４６５，７０６号には、生物学的汚染除去に用いるための微生物のカプセル化が記載されている。その特許文献によれば、適当なカプセル化材料として、ゲル及び発泡体の両方を含む合成又は天然ポリマー結合剤、ゼラチンポリマーを含む。
【０００６】
しかしながら、動物の消化系への送達（伝達）用の微生物を含んだカプセル化及び安定化技術に進歩はあるものの、分布（配布）及び保管時におけるプロバイオティクスの生存能力を保護する安定化技術又はカプセル化についてはほとんど進歩がないのが現状である。冷凍（refrigeration）を排除し、またその製剤が様々な環境、特に、熱帯気候等に露呈され得る状況下で利用できる安定化技術に対するニーズが存在している。また、製品の固有水分は、プロバイオティクスが一般的に水（特に、高温と組み合わせられた水）に敏感であることから課題をもたらす。栄養製品へ組み込まれたとき、配布及び保管（保存、貯蔵）の際の高温（即ち、約３０℃〜約４０℃、及び、４０℃を超える温度）、並びに、中間水分条件（即ち、水分活性約０．２〜約０．４程度、又は、０．４より高い）の状況下でプロバイオティクスに有意義な保護をもたらすことが確認された技術は現に存在しない。
【０００７】
特に、プロバイオティクスは、健康な胃腸管フローラ（gastrointestinal flora）を維持し、免疫（力）を増強し、下痢、アトピー性皮膚炎等に対する保護作用をするなど、ホストに様々な有利な効果をもたらし得る。そのため、ポロバイオティックの生存能力が落ちる熱帯気候を含んだ様々な地理的な場所において投与できるプロバイオティクスに対するニーズが存在している。従来のカプセル化及び安定化技術は、もっぱら人間以外の動物を対象にしたものであり、乳児用調製粉乳及び子供用に適していない化学的構造（chemical makeup）を有していたり、又は、商業性を有意義に制限する弱い安定性を有している。
【０００８】
したがって、乳児用調製粉乳又は子供用の栄養剤のいずれかに許容可能な成分を用いる安定化方法、及び、安定化細菌混合物が求められていた。その安定化混合物によって、安定性が改善されて、その有用な保存可能期間を維持しつつも、広範囲に及ぶ地理的な位置及び気候にプロバイオティクスを分布させ得る。また、乳児用調製粉乳、サプリメント及び、子供用の製品に使用するためのラクトバチルス・ラムノサス（Lactobacillus rhamnosus）を保護するための安定化技術が求められていた。向上された安定性と、栄養ファクタとの組み合わせを含んだ特性の組み合わせは、出産前、乳児、及び、子供の栄養に適用可能な改善された安定化混合物を提供する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、生物材料の安定性を向上させるために用いられる安定化技術、及び、安定化混合物を提供する。一実施形態において、その安定化基質（substrate）は、その安定化微生物を含んだ組成物を摂取した個体に対し、安定化プロバイオティクスに関連した様々な健康上の利点をもたらし得るプロバイオティクスであっても良い。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
プロバイオティクスは、栄養的に有利であることが知られているものの、大部分のプロバイオティクスは、微生物が生きている時にのみ最適な効果（有利な効果）を提供するものと理解されている。最適な有効性の観点から、プロバイオティクスは、消耗品（consumable item）（例えば、食品又は飲料）に製造される条件、及び、プロバイオティクスがＧＩ管に入るために摂取される前の輸送及び貯蔵（保管）の際に生き残る必要がある。従来のプロバイオティクス組成物のほとんどは、極めて多い細菌細胞を用いていたが、それは、有意義な数の細胞は、製造工程、輸送、及び、保管の際に、最終的に生存能力を失い、死んでしまうことによるものと理解される。現時点における取込み（encapsulation）及び安定化技術は、プロバイオティクスに対してある程度の保護作用は示すものの、乳児用調製粉乳（infant formula）、及び、子供用の製品の有効性（functional）を保ちつつ所望の安定性をもたらすようなものではない。
【００１１】
本発明を実施することによって、加水分解哺乳類タンパク質は安定化混合物中に取り込まれて（incorporated）、そのマトリックスを強化するとともに、プロバイオティクスの安定性を増加させる。その結果、乳児及び子供に適合したプロバイオティクス（infant- and children-compatible probiotics）は、加水分解哺乳類タンパク質を含んだ混合物によって安定化され、かつ、プロバイオティクスが改善された生存能力を示すため、様々な環境において使用され得る。本発明によって安定化されたプロバイオティクスは、そのプロバイオティクスが、安定化マトリックスの改善された安定性に基づいて、長時間の輸送及び保管を経てもその生存能力を維持するので、栄養製品（nutritional product）等の成分として含まれて、長距離輸送され得る。
【００１２】
プロバイオティクスを安定化させる本発明の方法は、加水分解哺乳類タンパク質（hydrolyzed mammalian protein）、１以上の炭水化物、及び、化合物結合剤（compound binder）を含んだ、生物材料（biological material）を安定させる混合物の使用を含む。
【００１３】
安定化マトリックスは、様々な物質に対して用いられるが、好ましい実施形態において、 ラクトバチルス・ラムノサス（Lactobacillus rhamnosus）のようなプロバイオティクスに対して用いることができる。ラクトバチルス・ラムノサスは、ヒトの腸管粘膜細胞に対して高い親和性を有する共に、比較的良い生物学的安定性（bio-stability）を有すると理解される。プロバイオティクスとして用いる場合、ラクトバチルス・ラムノサスは、消化管にコロニーを作り、腸管マイクロフローラのバランスをとるものと考えられる。
【００１４】
プロバイオティクス用安定化混合物を製造するにあたり、加水分解哺乳類たんぱく質を用いて、プロバイオティクスをめぐる（プロバイオティクス周りの）マトリックスを増加させるとともに、強化し得る。その加水分解哺乳類たんぱく質は、広範囲にわたって（extensively）加水分解されたカゼインだけでなく、その他の加水分解された哺乳類たんぱく質を含んでも良く、そして、加水分解たんぱく質を含んだ短鎖ペプチドに関連するその特徴に基づいて、強度を増加させると考えられる。加水分解たんぱく質は、強酸又は強塩基中で哺乳類たんぱく質を沸騰させるか（boil）、又は、酵素分解技術を通して、そのたんぱく質をより短い配列の成分アミノ酸に分解させることによって、得ることができる。
【００１５】
安定化細菌混合物は、それ以外の別の成分として、単糖、二糖、及び、多糖等の炭水化物を含んでも良い。二糖の一つであるトレハロースは、安定化混合物における炭水化物として用いられる。それは、比較的高い水分保持力（water retention capacity）を有するものと知られ、かつ、ゲル相を形成することができる。トレハロースは、長期間の乾燥（desiccation）の際に動物及び植物によって使用され、そして、乾燥した（湿気のない）環境において生物材料を保護するのに有効な試薬（agent）であると理解される。植物に生じる多糖であるイヌリンは、胃における消化に適したものであるために、ヒト酵素であるプチアリン及びアミラーゼによって消化しにくい。その結果、イヌリンは、消化系の大部分をそのままの状態で通り、結腸におけるマイクロフローラによって代謝されて、腸管内菌叢（gut bacterial flora）の成長を促すので、有用な安定化混合物成分である。また、イヌリンは、マトリックスのガラス転移温度を増加させて、マトリックスがゴム状となる温度を上方にシフトさせる。それによって、低温におけるプロバイオティクスの分解（degradation）、及び、水分の移動性（water mobility）の増加を防ぐことができる。
【００１６】
安定化混合物には、化合物結合剤（compound binder）を用いることができるが、その例として、化合物アルギン酸ナトリウムがある。アルギン酸ナトリウムは、ガム状材料を形成し、それが加えられる混合物の粘度を増加させる。また、化合物は、例えば、アルギン酸ナトリウムが乳化剤特性を有し得ることから、それらの成分同士の混合性を改善する役割をもする。
【００１７】
安定化混合物は、プロバイオティクスの安定性を改善するが、それは、加工後、輸送、及び、保管状態においてより多くの（比率の）プロバイオティック細胞が生きていることを意味する。詳細に、プロバイオティクスの保存可能期間（shelf life）は、完全なたんぱく質、加水分解非哺乳類たんぱく質、又は、本明細書に記載されたほど広範囲にわたって加水分解されてないたんぱく質を用いるカプセル封入（encapsulation）及び安定化技術に比べて、改善される。
【００１８】
本発明の安定化混合物は、安定化プロバイオティック製品の製造における多数のプロセスに用いられる。これらのプロセスは、凍結、凍結乾燥、周囲温度乾燥（ambient air drying）、真空乾燥、噴霧乾燥、低温乾燥、高温乾燥、及び、それらの組み合わせを含む。それによって得られる安定化プロバイオテッック（独立しているか、又は、栄養製品に組み込まれているかに関係なく）は、広範囲に及ぶ温度及び条件において有効な生存能力を示すとともに、改善された保存可能期間を示す。また、安定化プロバイオティクスは、乳児及び子供に栄養を供給しつつも、腸内の微生物叢（gut microflora）を改善する目的で、様々な出産前、乳児、及び、子供の栄養製品に含まれ得る。
【００１９】
したがって、一実施形態において、本発明は、生物材料の増加された安定性を提供するための生物材料の安定化である。
【００２０】
別の実施形態は、プロバイオティクス用の安定化混合物である。
【００２１】
別の実施形態は、加水分解哺乳類タンパク質を含むプロバイオティクス用の安定化混合物である。
【００２２】
別の実施形態は、１以上の炭水化物、化合物結合剤、及び、加水分解哺乳類たんぱく質を含む、プロバイオティクス安定化用の混合物である。
【００２３】
別の実施形態は、加水分解哺乳類たんぱく質を含んだ安定化混合物を用いてプロバイオティクスを安定化させるステップを含む、プロバイオティクスの保存可能期間を増加させる方法である。
【発明の効果】
【００２４】
次の［発明を実施するための形態］の欄の記載から当業者に明らかなこれらの特徴及びその他の特徴は、プロバイオティクスのような生物材料の安定化のために、加水分解哺乳類たんぱく質を含んだ混合物を提供して、その生物材料の改善された安定性、その結果として、その生物材料の改善された、長期生存能力（long-term viability）をもたらすことを伴う。一実施形態において、安定化混合物は、非加水分解たんぱく質または加水分解非哺乳類たんぱく質を用いた場合に比べて、ラクトバチルス・ラムノサスのようなプロバイオティクスの保存可能期間を延ばす。この安定化混合物は、プロバイオティクスを保存（貯蔵）するために、冷凍乾燥、空気乾燥（air drying）、真空乾燥、噴霧乾燥、及び、それらの組み合わせを含む様々な方法においてプロバイオティクスと組み合わせられえる。
【００２５】
前述の一般的な説明、及び、以下の実施形態の両方を設けた理由は、請求項に記載された発明に対する概観を提供することにある。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
本発明は、標的微生物の生存能力を改善するために、生物材料に安定性及び保護を提供する新規の安定化製剤及び方法に関する。本発明は、一実施形態において、１以上の炭水化物と、化合物結合剤と組み合わせられた、加水分解哺乳類たんぱく質を含んだ安定化混合物を含む。ここで、１以上の炭水化物と化合物結合剤は共に、非加水分解たんぱく質又は加水分解非哺乳類たんぱく質を用いるそれ以外の封入及び安定化製品よりも、長い保存可能期間を示す保護マトリックス（protective matrix）を提供する。
【００２７】
＜定義＞
本明細書において使用する用語「プロバイオティック」又は「プロバイオティクス」（probiotic）は、ホスト（host）の健康に有利な（有益な）効果を及ぼす低又は非病原性の微生物をいう。
【００２８】
本明細書において使用する用語「乳児（infant）」は、生後から１２ヶ月までのヒトという。
【００２９】
本明細書において使用する用語「早産児（pre-term infant）」は、妊娠３７週より前に生まれた乳児をいう。
【００３０】
本明細書において使用する「満期出産乳児（full-term infant）」は、妊娠３７週以降に生まれた乳児をいう。
【００３１】
本明細書において使用する「子供（children）」は、約１２ヶ月から約１２歳までの（年齢）のヒトをいう。
【００３２】
本明細書において使用する用語「有効量（effective amount）」は、投与された被験者において観察できる結果をもたらす試薬または薬剤の量をいう。
【００３３】
本明細書において使用する用語「栄養製品（nutritional product）」は、栄養素（nutrient）を含み得る植物、動物、又は、合成源（source）の任意の消耗材（consumable matter）を含む。
【００３４】
＜説明＞
本発明を実施するにあたり、加水分解哺乳類たんぱく質は、生物材料（biological material）を安定化するための安定化混合物中の一成分として用いられる。本明細書において使用する加水分解たんぱく質は、多数のペプチド断片を提供するように分解されたたんぱく質分子をいう。本発明において、加水分解たんぱく質、及び、たんぱく質加水分解物（protein hydrolysate）は、たんぱく質加水分解の産物を説明するためにほぼ同じ意味で使用される。広範囲にわたって加水分解されたたんぱく質（extensively hydrolyzed protein）は、加水分解たんぱく質の２０％以上、より好ましくは、７０％以上、最も好ましくは、約９０％以上が２０００ダルトン未満の分子量を有するたんぱく質加水分解産物を説明するために用いられる。
【００３５】
加水分解哺乳類たんぱく質は、様々な哺乳類たんぱく質源から生じ得る。そのたんぱく質源として、例えば、乳製品（milk product）、及び、動物製品（animal product）等がある。加水分解哺乳類たんぱく質は、所定の大きさのアミノ酸断片が生じるまでに哺乳類たんぱく質に対し強酸処理を施し、加熱するという酸加水分解工程を通して、得られる。別の種のたんぱく質加水分解は、より短鎖のアミノ酸を得るためにたんぱく質分子を消化させる酵素剤（enzymatic agent）を用いることを含む。たんぱく質を加水分解するための通常の方法は、例えば、米国特許第4,377,601号、米国特許第4,443,540号、米国特許第4,545,933号、米国特許第4,757,007号、米国特許第4,873,108号、米国特許第5,401,527号、米国特許第6,214,585号、米国特許第6,221,423号などに記載され、これらの各文献は、参考までに本明細書の一部をなす。
【００３６】
本発明の安定化混合物に用いられるために加水分解され得る哺乳類たんぱく質は、卵たんぱく質、動物たんぱく質、家禽、肉、血清アルブミン（serum albumen）、グリコールたんぱく質、コラーゲン、ゲラチン、ミルクたんぱく質、カゼイン、乳清、卵白（albumen）などを含む。好ましい実施形態において、哺乳類たんぱく質は、ウシたんぱく質である。前述した通り、好ましい実施形態において、前述の種の任意の加水分解哺乳類たんぱく質は、好ましくは、広範囲にわたって加水分解された哺乳類たんぱく質である。ここで、広範囲にわたって加水分解されたというのは、加水分解たんぱく質の約７０％以上が約２０００ダルトン未満の分子量を有するペプチドを生じることを意味する。
【００３７】
一実施形態において、加水分解哺乳類たんぱく質は、分子量２０００ダルトン未満のペプチドが約８０％超、好ましくは、約９０％超である加水分解カゼインを含む。カゼインは、牛乳（bovine milk）における総たんぱく質のほぼ８０％を構成するリンたんぱく質（phospho-protein）であると理解される。このたんぱく質は、何らジスルフィド架橋を有しないため、２次又は３次構造をほとんど有しない。非加水分解カゼインは、分子量約１９０００ダルトンから約６８０００ダルトンまでのカゼイン変異体(variant)を含む。本発明を実施する際に用いられる哺乳類たんぱく質加水分解物の一例（例えば、カゼイン加水分解物）は、１０００ダルトン未満の分子量を有するペプチドを９０％よりも多く含み(即ち、９０％超)、分子量２０００ダルトン未満のペプチドを９７％よりも多く含む。一部の実施形態において、哺乳類たんぱく質加水分解物の０．３％未満が５，０００ダルトンを越えるものであるが、それは、ほぼ全てのたんぱく質が加水分解された状態であることを示す。
【００３８】
前述の加水分解カゼインを含んだ加水分解哺乳類たんぱく質を用いることによって、より大きいペプチド断片又は全たんぱく質（whole protein）を用いるときに見られる保護を上回る、ラクトバチルス・ラムノサス（Lactobacillus rhamnosus）を含めたプロバイオティクスに対する優れた保護が得られる。特定の理論にこだわるわけではないが、水分及び熱に対するプロバイオティクスの保護が増加された一つの可能性は、加水分解哺乳類たんぱく質による表面のゼータ電位の増加にかかわることである。ゼータ電位は、分散液（dispersion）における隣接した同様の電荷粒子（similarly charged particles）間の反発力の程度を示す数値である。より小さい化合物及び分子は、高いゼータ電位を有するが、その高いゼータ電位は、溶液または分散液が凝集に耐えるため、安定性を付与する。逆に、ゼータ電位が低いときに、引力が反発力を上回り、その分散液は壊れ、凝集し得る。疎水性は減少するが、ゼータ電位（の大きさ）は、加水分解（の程度）が進むにつれて増加する。多くの短いペプチド配列を提供する高度の加水分解によって、プロバイオティクスと接触しているたんぱく質界面のゼータ電位が増加して、熱及び湿度（水分）の両方に対する生物材料の安定性を増加させる。勿論、これは、加水分解哺乳類及び非哺乳類たんぱく質間の驚くべき差異を説明するものではない。
【００３９】
一部の実施形態において、乾燥重量に基づく安定化混合物の主要成分（又は、大部分）（majority component）は、１以上の炭水化物である。その炭水化物は、多糖類、二糖類、及び、単糖類を含んでも良い。単糖類の例として、グルコース、フルクトース、リボース、ガラクトース等があり、二糖類の例として、トレハロース、スクロース、マルトース、ラクトース、及び、セロビオースなどがあり、多糖類の例として、グルコース、フラクトース、及びガラクトースポリマー、アミロース、グリコゲン、セルロース、イヌリン、ラフィノース、及び、スタキオース（stachyose）等がある。一部の実施形態において、炭水化物は、スクロース及びトレハロースのような二糖類を含んでも良く、これらの二糖類は、水利用性が低い（low water availability）間に植物及び微生物の生命を助けることが知られている。トレハロース（「ミコース」として知られている）は、真菌、植物、及び、特定の動物によって合成され、かつ、長期間にわたる乾燥（状態）に耐える無水生活（anhydrobiosis）における重要な炭水化物として働く。物理的に、トレハロースは、ゲル相を形成し、かつ、プロバイオティクスの周囲に保護マトリックスを形成するのに有用である。別の実施形態は、イヌリンを含んで、栄養的利用（nutritional application）におけるしばしばプレバイオティクス的なものとして考えられる可溶性繊維を提供する。イヌリンは、胃及び十二指腸を消化されないまま通過し、腸管内菌叢によって消化される。イヌリンを含有させることによって、プロバイオティクスが、イヌリンが消化され得る腸管内菌叢とともに適当に配置されるまでに、消化酵素、及び、高酸性（高酸度）からプロバイオティクスを保護し得る。
【００４０】
一部の実施形態において、安定化混合物の更なる成分は、増粘剤として働き、ゲル状の濃度（consistency）を生じる化合物結合剤（compound binder）（「ゲル化剤」とも呼ぶ。）であり得る。化合物結合剤の例として、アルギン酸ナトリウム等のアルギン酸塩、キトサン、カルボキシメチルセルロース等がある。これらの化合物結合剤を含有させることによって、粘性（viscous consistency）が生じて、次なる乾燥（ステップ）に適した構造（structural quality）、及び、有効なマトリックス形成を促す。
【００４１】
安定化混合物は、プロバイオティクス又はその安定化プロバイオティクスを摂取した個体に対して更なる利点を提供する別の成分を含んでも良い。これらの成分は、ミネラル、ビタミン、酸化防止剤（抗酸化剤）、微量元素、ステロール、脂肪酸、機能性分子（functional molecule）、及び、これらの組み合わせを含んでも良い。その他の成分は、ペクチン、難消化性でんぷん（resistant starches）、高アミローススターチ、グアー（guar）、ローカストビーンガム、寒天、キサンタン、カラギーナン、グルカン、フルクトオリゴ糖、ポリフルクトース、マルトデキストリン、及び、これらの組み合わせを含んでも良い。
【００４２】
混合物の発泡（foaming）は、スラリーに存在する空気の量を減少させることによって制御され得る。一部の実施形態において、これは、1.0 to 1.2 g/cm3の標的スラリー密度を生じさせるように、真空下で混合することによって、得られる。
【００４３】
安定化混合物は、個体の健康及び福祉に対して有益な効果を及ぼし得るプロバイオティクスに安定性を持たせるために用いられる。適切なプロバイオティクスの例を挙げると、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cereviseae）のようなイースト、アスペルギルス（Aspergillus）、クモノスカビ（Rhizopus）、ケカビ（Mucor）のようなモールド（カビ）、及び、乳酸菌（Lactobacillus）のような細菌を含むが、それらに制限されない。適当なプロバイオティック微生物の具体例を挙げると、Aspergillus niger, A. oryzae, Bacillus coagulans, B. lentus, B. licheniformis, B. mesentericus, B. pumilus, B. subtilis, B. natto, Bifidobacterium adolescentis, B. animalis, B. breve, B. bifidum, B. infantis, B. lactis, B. longum, B. pseudolongum, B. thermophilum, Candida pintolepesii, Clostridium butyricum, Enterococcus cremoris, E. diacetylactis, E. faecium, E. intermedius, E. lactis, E. muntdi, E. thermophilus, Lactobacillus acidophilus, L. alimentarius, L. amylovorus, L. crispatus, L. brevis, L. case, L. curvatus, L. cellobiosus, L. delbrueckii ss. bulgaricus, L. farciminis, L. fermentum, L. gasseri, L. helveticus, L. lactis, L. plantarum, L. johnsonii, L. reuteri, L. rhamnosus, L. sakei, and L. salivarius.等がある。
【００４４】
本発明に係る一実施形態では、本発明によって安定化され得るプロバイオティクスとして、ラクトバチルス・ラムノサスＧＧ（Lactobacillus rhamnosus GG）が用いられる。ラクトバチルス・ラムノサスＧＧについては、米国特許第４，８３９，２８１号に記載されているが、その文献の記載内容は、参考までに本明細書に含まれる。とりわけ、前記特許文献によれば、ラクトバチルス・ラムノサスＧＧは、低ｐＨにおいて生存し（生き残り）、多量の乳酸を産生しつつも、腸細胞に対して強い付着力（adherence）を有する種として記載されている。
【００４５】
選択されたプロバイオティクスは、本発明に係る安定化混合物と組み合わせられる前に、ぬれたペースト状の濃度（consistency）に濃縮されるのが好ましい。乾燥状態のプロバイオティクスから出発するのも可能である。約３×〜約２０×の濃度を含んだ、選択されたプロバイオティクスの濃度（濃縮水準）は、特定のプロバイオティック・バイオマスおよびその後の加工ステップによって、その濃度がより高くなったり、より低くなったりし得る。一般的に、安定化プロバイオティクスの製造は、選択されたプロバイオティック又はプロバイオティクスを濃縮するステップ、安定化混合物の成分を所定量だけ用意するステップ、安定化混合物と、濃縮したプロバイオティクスとを混合するステップと、安定化プロバイオティクスを乾燥させるステップと、安定化プロバイオティクスをパックするか、又は、乳児用調製粉乳を含み得る栄養製品へ前記安定化プロバイオティクスを組み合わせるステップと、を含む。
【００４６】
本発明の原理及び中身をよりよく理解してもらうために、次の実施例を提供する。しかしながら、この実施例は、決して本発明を制限するものではない。
【００４７】
［実施例］
ラクトバチルス・ラムノサスＧＧ (LGG)を発酵槽において成長させる。その後、そのバイオマス（biomass）を緩衝液で洗浄し、遠心分離にかけてＬＧＧ湿潤ペレット（moist pellet）を得る。乾燥重量（dry weight basis）に基づいて、約７５％のトレハロース、約１６．７％の加水分解カゼイン、約５．２％のイヌリン、及び、約３．１％のアルギン酸ナトリウムを含む安定剤混合物を予め配合させる。３７℃の温度で、ＬＧＧ湿潤ペレット（moist pellet）を安定化混合物、及び、十分な水と混合し、総固形分（total solid content）約５５％を得る。真空下でそのスラリーを混合して、約１．１g/cm3の密度を得る。
【００４８】
その後、安定化混合物とＬＧＧの組み合わせを真空乾燥させるか、又は、凍結乾燥させて、最終水分含量約３％にする。負荷100g/ft2〜150g/ft2のトレーに混合物を広げる(spread)ことが好ましい。混合物を乾燥させて、全体水分の８０％を除去する間に、製品の温度が３０℃未満となるようにする。残り１７％の水分を除去する際の温度は、５０℃以下にする。その後、乾燥された安定化ＬＧＧを粉にし（grind）、所定の大きさを有する製品となるようにふるいを用いてサイズを選択する。
【００４９】
プロバイオティクスの安定化を最適化するために、一部の実施形態において各成分の含量は異なり得る。炭水化物は安定化混合物の約７０％〜約８５％を構成し得る（無水ベース（乾燥状態）；dry basis）。加水分解タンパク質は、安定化混合物の約１０％〜約２０％を構成し得る（無水ベース（乾燥状態））。化合物結合剤は、安定化混合物の約０％〜約１０％（即ち、最大約１０％）を構成し得る（無水ベース（乾燥状態））。
【００５０】
マトリックスタンパク質の７０％超が分子量２０００ダルトン未満である安定化プロバイオティクスは、パックされて市販されるか、又は、様々な栄養製品と組み合わせられ得る。かかる栄養製品は、向上された保存可能期間及び安定性を必要とする栄養製品にプロバイオティクスを含有させようとする使用（適用）に適した乳児用調製粉乳、及び、子供用の製品の両方を含み得る。
【００５１】
安定化プロバイオティクスとの組み合わせのための栄養製品の一つのタイプは、乳児用調製粉乳であり得る。用語「乳児用調製粉乳（infant formula）」は、母乳の代わりとなる、乳児の栄養要件を満たしている液体または粉末形態の組成物に適用される。米国では、乳児用調製粉乳の成分（含量）は、２１ＣＦＲ§§100、106および107に規定された連邦政府の規制によって定められる。これらの規制は、ヒトの母乳の栄養およびその他のプロパティをシミュレートするための主要栄養素（macronutrient）、ビタミン、ミネラル、および他の成分のレベルを定義している。別の栄養製品は、ヒトの母乳の栄養価を高めるためにヒトの母乳に追加された組成物であるヒト母乳強化剤（human milk fortifier）であっても良い。ヒト母乳強化剤として、その組成物は、安定したプロバイオティクスと組み合わせられた、粉末または液体の形態でああっても良い。
【００５２】
本発明の安定化プロバイオティクスは、最小限の、部分的、または、全体の栄養サポート（nutritional support）を提供する栄養製品と組み合わせることができる。組成物は、栄養補助食品（nutritional supplement）や食事代替品（meal replacement）であっても良い。組成物は、食品や栄養組成物と組み合わせて投与することができる。安定化プロバイオティクスを含む組成物は、被験者に摂取される前に、その食品又は栄養組成物と混合されても良く、又は、食品または栄養組成物の摂取前、又は、摂取後のいずれかの時点で、被験者に投与されても良い。組成物は、乳児用調製粉乳、母乳、ヒト母乳強化剤、またはそれらの組み合わせを摂取している（の供給を受けている）早産児（preterm infant）に投与することができる。
【００５３】
安定化プロバイオティクスとの組み合わせのための組成物は、必ずではないが、栄養的に完全なものであり得る。当業者は、用語「栄養的に完全な（nutritionally complete）」について、該用語が適用される被験者の食事摂取量（dietary intake）、年齢、及び、臨床症状を含むが、それらに制限されない、多数のファクタに基づいて異なり得るものと理解するだろう。一般的に、「栄養的に完全な」とは、栄養組成物が、正常な成長に必要とされる十分量のエネルギー、全ての炭水化物、脂質、必須脂肪酸、タンパク質、必須アミノ酸、条件的必須アミノ酸（conditionally essential amino acid）、ビタミン、及び、ミネラルを提供することを意味する。栄養素に適用されたとき、用語「必須（essential）」とは、体内では、正常な成長及び健康を維持するのに十分な量だけ合成できず、よって食事によって供給される必要がある任意の栄養素をいう。また、栄養素に適用されるとき、用語「条件的必須（conditionally essential）」は、内因性合成ができる程度にまで身体に十分な量の前駆体化合物が利用できない条件下で食事（diet）によって供給される必要がある栄養素を意味する。
【００５４】
早産児についての「栄養的に完全な」組成物は、その定義に基づいて、早産児の成長に必要とされる質的に及び量的に十分量のエネルギー、全ての炭水化物、脂質、必須脂肪酸、タンパク質、必須アミノ酸、条件的必須アミノ酸、ビタミン、及び、ミネラルを提供することを意味する。また、満期産児についての「栄養的に完全な」組成物は、その定義に基づいて、満期産児の成長に必要とされる質的に及び量的に十分量のエネルギー、全ての炭水化物、脂質、必須脂肪酸、タンパク質、必須アミノ酸、条件的必須アミノ酸、ビタミン、及び、ミネラルを提供する。子供用の「栄養的に完全な」組成物は、その定義に基づいて、子供の成長に必要とされる質的に及び量的に十分量のエネルギー、全ての炭水化物、脂質、必須脂肪酸、タンパク質、必須アミノ酸、条件的必須アミノ酸、ビタミン、及び、ミネラルを提供することを意味する。
【００５５】
本発明によって得られた安定化プロバイオティクスは、粉末、ゲル、懸濁駅、ペースト、固体、液体、液体濃縮物（liquid concentrate）、又は、使える状態の製品（即ち、仕様潤部完了製品）を含んだ、当業者に知られた任意の形態であり得る、栄養組成物と組み合わせられ得る。一実施形態において、栄養組成物は、乳児用調製粉乳（infant formula）、特に、乳児の唯一の栄養源として使用するのに適した乳児用調製粉乳であり得る。
【００５６】
安定化プロバイオティクスと組み合わせるために記載した栄養製品は、経腸的に（enterally）投与され得る。本明細書において使用する用語「径腸的（enteral）」は、胃腸管、又は、消化管を通して、又は、その内を意味する。また、本明細書において使用する用語「径腸的な投与（enteral administration）」は、経口投与（供給）、胃内投与（供給）、幽門通過投与、又は、消化管へのその他の導入法を含む。
【００５７】
適当な脂肪又は脂質源は、動物源（例えば、乳脂肪、バター、バター脂肪、卵黄脂質）、水酸源（例えば、魚油、水酸油、単細胞オイル）、野菜及び植物油（例えば、トウモロコシ油、カノーラ油、ヒマワリ油、大豆油、パームオレイン（palmolein）、ヤシ油、高オレイン酸ひまわり油、月見草油（evening primrose oil）、ナタネ油、オリーブ油、アマニ油、綿実油、高オレイン酸サフラワー油、パームステアリン、パーム核油、小麦胚芽油）、中鎖トリグリセリド油及びエマルション及び脂肪酸エステル、並びに、これらの任意の組み合わせを含むが、それらに制限されない、当業者に知られたものであり得る。
【００５８】
栄養製品のウシミルクたんぱく質は、ミルクたんぱく質粉末、ミルクたんぱく質濃縮物、ミルクたんぱく質単離物、無脂肪ミルク固体（nonfat milk solid）、無脂肪ミルク、無脱脂粉乳（nonfat dry milk）、乳性たんぱく質、乳清たんぱく質単離物、乳清たんぱく質濃縮物、スイートホエイ（sweet whey）、酸ホエイ（acid whey）、カゼイン、酸カゼイン、カゼイン塩（例えば、カゼイン塩ナトリウム、カゼイン塩ナトリウムカルシウム、カゼイン塩カルシウム）、及び、これらの組み合わせを含むが、それらに制限されない。
【００５９】
安定化プロバイオティクスは、完全なたんぱく質（intact protein）として提供されるたんぱく質を有する栄養製品と組み合わせられても良い。別の実施形態において、栄養製品のたんぱく質は、完全なタンパク質と部分的に加水分解された（その加水分解度は、約４〜１０％である。）たんぱく質の両方の組み合わせとして提供され得る。これらの実施形態の一部は、安定剤として極めて低刺激性であり、そして、栄養製品のたんぱく質は、加水分解されたたんぱく質のみを含む。別の実施形態において、栄養製品にグルタミンを含んだペプチドを補充しても良い。
【００６０】
栄養製品のたんぱく質源の乳清（whey）：カゼインの比率は、ヒトの母乳におけるそれと類似したものであり得る。一実施形態において、栄養製品のたんぱく質源は、乳清たんぱく質を約４０％〜約８０％含んでも良い。別の実施形態において、たんぱく質源は、カゼインを約２０％〜約６０％含んでも良い。
【００６１】
安定化プロバイオティクスが栄養製品と組み合わせられる場合に、その組成物は、プロバイオティクスを約104〜約1010コロニー形成単位（ｃｆｕ）／ｋｇ（体重）／日含んでも良い。別の実施形態において、安定化プロバイオティクスにおけるプロバイオティクスの量は、約106〜約109cfu／ｋｇ（体重）／日であり得る。栄養製品及び安定化プロバイオティクスの組成物に係る別の実施形態によれば、プロバイオティクスは、少なくとも約106cfu／ｋｇ（体重）／日で含まれる。別の実施形態によれば、マイクロマトリックス（micromatrix）におけるそのプロバイオティクス、例えば、ＬＧＧの濃度は、約106〜約1014 cfu／ｇ、より好ましくは、約109〜約1011 cfu／ｇであり得る。
【００６２】
一実施形態において、安定化プロバイオティクスは、生きているか（viable）、又は、生き残れない（non-viable）（即ち、生きていない）ものであり得るが、生きているのが好ましい。本明細書において使用する用語「生きている（生存する）（viable）」は、生きている微生物細胞を含めて、生きている微生物をいう。また、本明細書において使用する用語「生き残れない（生きられない）（non−viable）」は、生きていないプロバイオティック微生物、その細胞成分、及び、その代謝物（代謝体）を意味する。かかる生き残れないプロバイオティクスは、加熱などによって不活性化されたものであっても良いが、ホストの健康に良い影響を及ぼす少なくとも一部の能力を保持し得る。本発明に有用な安定化プロバイオティクスは、天然、合成、又は、有機体の遺伝子操作（即ち、遺伝子組み換え）を通じて開発されたもの（その源が現に知られているものか、又は、後から開発されたものであるか関係なく）であっても良い。また、栄養製品は、非安定化プロバイオティクスを含んでも良い（つまり、その最終組成物は、安定化プロバイオティクスと非安定化プロバイオティクスの両方を含む。）。
【００６３】
安定化プロバイオティクスは、１以上のプレバイオティクス（prebiotics）を含んだ栄養製品と組み合せられ得る。本明細書において使用する用語「プレバイオティクス（prebiotics）」は、ホストに対して健康上有利な影響を及ぼす摂取可能な食品成分（indigestible food ingredient）をいう。かかる健康上有利な影響（効果）として、例えば、一つ又は限られた数の有益な腸内細菌の成長及び／又は活性の選択的な刺激、摂取されたプロバイオティック微生物（安定化されたもの、又は、安定化されないもの）の成長及び／又は活性の刺激、腸病原菌の選択的な減少、並びに、腸の短鎖脂肪プロファイルに対する有利な影響を含み得るが、それらに制限されない。かかるプレバイオティクスは、天然、合成、又は、有機体及び／又は植物の遺伝子操作を通じて開発されたもの（その源（ソース）が現に知られているものか、又は、後から開発されたものであるか関係なく）であっても良い。また、栄養製品は、非安定化プロバイオティクスを含んでも良い（つまり、その最終組成物は、安定化プロバイオティクスと非安定化プロバイオティクスの両方を含む。）。プレバイオティクスは、オリゴ糖、多糖類、並びに、フルクトース、キシロース、大豆、ガラクトース、グルコース、及び、マンノースを含む他のプレバイオティクスを含み得る。より具体的には、本発明に有用なプレバイオティクスは、ラクツロース、ラクトスクロース、ラフィノース、グルコオリゴ糖、イヌリン、ポリデキストロース、ポリデキストロースパウダー、ガラクトオリゴ糖、フラクトオリゴ糖、イソマルトオリゴ糖、大豆オリゴ糖、ラクトスクロース、キシロオリゴ糖（xylo-oligosaccharide）、キトオリゴ（chito-oligosaccharide）、マンノオリゴ糖（manno-oligosaccharide）、アリビノオリゴ糖（aribino-oligosaccharide）、シアリルオリゴ糖（siallyl-oligosaccharide）、フコオオリゴ糖（fuco-oligosaccharide）、ゲンティオオリゴ糖 （gentio-oligosaccharides） 、及び、これらの組み合わせを含み得る。
【００６４】
安定化プロバイオティクスを含んだ栄養製品の一部の組成物において、その栄養製品に存在するプレバイオティクス（prebiotics）の総量は、その組成物（液体）の約1.0 g/L〜約10.0 g/Lであり得る。前述の通り、栄養製品に存在するプレバイオティクスの総量は、組成物の約2.0 g/L〜約8.0 g/Lであり得る。好ましい実施形態において、プレバイオティクスの少なくとも２０％は、ガラクトオリゴ糖（galacto-oligosaccharide；ＧＯＳ）を含むべきである。
【００６５】
ガラクトオリゴ糖に加えて、プレバイオティクス組成物は、ポリデキストロース（polydextrose；PDX）を含み得る。プレバイオティクスとしてポリデキストロースが用いられると、一実施形態において、栄養製品中ポリデキストロースの量は約1.0 g/L〜約4.0 g/Lであり得る。
【００６６】
栄養製品中ガラクトオリゴ糖の量は、約0.2 mg/100 Kcal〜約1.0 mg/100 Kcalであり得る。別の実施形態において、栄養製品中ガラクトオリゴ糖の量は、約0.1 mg/100 Kcal〜約0.5 mg/100 Kcalであり得る。ポリデキストロースがプレバイオティクスとして用いられた場合、栄養製品中ポリデキストロースの量は、安定化プロバイオティクスを含む組成物の一実施形態において、約0.1 mg/100 Kcal〜約0.5 mg/100 Kcalであり得る。別の組成物において、ポリデキストロースの量は、約0.3 mg/100 Kcalであり得る。ガラクトオリゴ糖及びポリデキストロースは、安定化プロバイオティクスを含む栄養製品中に、総量約0.6 mg/100 Kcalで補充され得る。
【００６７】
本発明の安定化プロバイオティクスが含有され得る栄養製剤（nutritional formulation）は、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を含む長鎖ポリ不飽和脂肪酸（polyunsaturated fatty acid）（ＬＣＰＵＦＡ）源を有し得る。別の適当なＬＣＰＵＦＡは、α‐リノール酸、γ‐リノール酸、リノール酸、エイコサペンタエン酸（eicosapentanoic acid；EPA）、及び、アラキドン酸（arachidonic acid；ARA）を含み得るが、それらに制限されない。
【００６８】
別の実施形態において、ＤＨＡ及びＡＲＡの両方を最終組成物に補充しても良い（即ち、加えても良い）。この実施形態において、ＡＲＡ：ＤＨＡの重量比は、約１：３〜約９：１であり得る。一実施形態において、この重量比は、約１：２〜約４：１であり得る。
【００６９】
栄養組成物中長鎖ポリ不飽和脂肪酸の量は、約5 mg/100 kcal〜約100 mg/100 kcalであり、好ましくは、約10 mg/100 kcal〜約50 mg/100 kcalであり得る。
【００７０】
当業者に知られた標準技術を用いて、ＤＨＡ及びＡＲＡを含んだオイルを栄養組成物に補充することもあり得る。例えば、ＤＨＡ及びＡＲＡは、同量（等量）のオイル（例えば、製剤中に通常存在する高オレイン酸ヒマワリ油）を置き換えることでその製剤に加えることができる。別の実施形態として、製剤に通常存在する全体の脂肪配合物中ＤＨＡ及びＡＲＡ以外のものを同量（等量）置換する形でＤＨＡ及びＲＡＲを含有するオイルを加えることもあり得る。
【００７１】
ＤＨＡ及びＡＲＡを用いる場合、ＤＨＡ及びＡＲＡの源は水産油（marine oil）、魚油（fish oil）、単細胞オイル（single cell oil）、卵黄脂質、及び脳脂質のような当業者に知られた任意の源であっても良い。一部の実施形態において、ＤＨＡ及びＡＲＡは、単細胞オイル（single cell）Martek oil、DHASCO（登録商標）等から得ることができる。ＤＨＡ及びＡＲＡは、ＬＣＰＵＦＡ源の残りが乳児に対して実質的に何ら有害な効果を及ぼさないのであれば、天然型であっても良い。その代わりに、ＤＨＡ及びＡＲＡは精製型であっても良い。
【００７２】
安定化プロバイオティクスと組み合わせられた栄養組成物に係る別の実施形態において、ＤＨＡ及びＡＲＡの源は、米国特許第5,374,567号、第5,550,156号、及び、第5,397,591号に記載されたような単細胞オイル（single cell oil）である。前記米国特許文献の内容は参考までにこの明細書の一部をなす。
【００７３】
一部の実施形態において、栄養組成物は、ミルク系栄養組成物であり得る。ここで、ミルク系栄養組成物は、生理化学及び生理学的利点をもたらす。牛乳たんぱく質は、２つの主な成分を含んでいる。その一つは、酸可溶性乳清たんぱく質であり、もう一つは、酸不溶性カゼインである。ここで、酸不溶性カゼインが牛乳の総たんぱく質含量の約８０％を構成する。カゼインは、胃の酸環境に入ると、沈殿し、ミネラルと錯体を形成して、異なる大きさ及び堅さ（firmness）の半固体の凝固物（curd）を形成する。よりやわらかくてより小さい凝固物は、より大きくてより堅い凝固物よりも（体に）消化されやすい。凝固物の形成は、乳児用調製粉乳、病人向けの特別食（medical food）、及び、未熟児（早産児）用調製粉乳を含めた栄養組成物（それらに制限されない）の開発において重要な考慮事項であり得る。こうして、安定化プロバイオティクスは、標準乳児製剤粉乳よりもやわらかくて小さい凝固物を含む組成物と組み合わせられ得る。
【００７４】
別の実施形態において、本発明の安定化プロバイオティクスは、望ましくない細菌病原体（菌）に対してヒトの腸内での安定性及び活性を保つウシラクトフェリンを含んだ栄養組成物と組み合わせることができる。本発明の栄養組成物は、TGF-sを含んでも良い。栄養組成物において、TGF-sのレベルは、約0.0150 (pg/μg) ppm〜約0.1000 (pg/μg) ppmであり得る。別の栄養組成物において、安定化プロバイオティクスを含む最終組成物中TGF-sのレベルは、約0.0225 (pg/μg) ppm〜約0.0750 (pg/μg) ppmであり得る。
【００７５】
一部の組成物において、TGF-sのレベルは、約2500 pg/mL〜約10,000 pg/mLであり、より好ましくは、約3000 pg/mL〜約8000 pg/mLである。
【００７６】
一実施形態において、TGF-s1: TGF-s2の比率は、約1:1〜約1:20であり、特に、約1:5〜約1:15である。
【００７７】
一部の実施形態において、栄養組成物におけるTGF-sの生物活性（bioactivity）は、乳清分画に生物活性物質を加えることによって改善される。当業者に知られた任意の生物活性乳清分画は、それが意図された結果を達成できるならば、この実施形態に用いられる。一実施形態において、この生物活性乳清分画は、乳清たんぱく質濃縮物であっても良い。特定の実施形態において、その乳清たんぱく質濃縮物は、Salibra（登録商標）800（Glanbia Nutritionals社製）であっても良い。この場合、 Salibra（登録商標）800乳清たんぱく質濃縮物は、２．５％酸性化したものであり得る。別の実施形態において、Salibra（登録商標）800乳清たんぱく質濃縮物は、５％酸性化したものでああり得る。別の実施形態において、Salibra（登録商標）800乳清たんぱく質濃縮物は、2%酸性化したものであり得る。別の実施形態において、Salibra（登録商標）800乳清たんぱく質は、３％酸性化したものであり得る。
【００７８】
別の実施形態において、乳清たんぱく質濃縮物はNutri Whey 800（DMV International社製）であり得る。別の実施形態において、その乳清たんぱく質濃縮物は、Salibra-850（Glanbia Nutritionals社製）であり得る。別の実施形態において、乳清たんぱく質濃縮物は、Prolacta Lactalis WPI90（Lactilus Industries U.S.A., Inc社製）であり得る。別の実施形態において、乳清たんぱく質濃縮物は、MG Nutritionals社から入手できる。
【００７９】
したがって、本発明を実施するに当たり、これまでなかった安定性を備えた安定化プロバイオティクスを製造することができる。その安定化細菌混合物は、加水分解哺乳類たんぱく質、特に、２０００ダルトン未満の分子量を有するペプチドの割合が７０％を超える加水分解哺乳類たんぱく質を用いることによって、顕著に高い安定性を示す。その安定化バイオは、暑くて湿気の多い環境における改善された安定性及び保存可能期間が求められる中間の水分レベル（intermediate moisture level）（例えば、０．４程度の水分活性（water activity））の栄養製品に対して特に有効である。その安定化プロバイオティクスは、この明細書に記載された栄養組成物の実施形態のいずれかと独立して、又は、それ（即ち、栄養組成物の実施形態のいずれ）と組み合わせられた形でパックされうる。
【００８０】
本明細書において引用された全ての文献（形式は問わない。）は、その全体として本明細書に組み込まれる。これらの引用文献に関する議論は、著者による主張を言及したものに過ぎず、いずれに対しても先行技術を構成するものと認めたわけではない。出願人は、それらの文献の正確さ及び適切さに反論を挙げる権利を留保する。
【００８１】
特定の用語、装置、方法を用いて本発明の好ましい実施形態を説明したが、かかる説明は、単に例を挙げたものに過ぎない。この明細書に用いられた言葉は、限定のためではなく、説明のための言葉である。変形及び変更は、本発明の技術的思想及び技術的範囲から逸脱することなく、当業者にとって明らかであろう。また、様々な実施形態の側面（aspect）は、全体的に若しくは部分的に、又は、両方の意味から交換できる。例えば、本明細書では、本発明の方法に基づく市販用無菌の液状栄養補充製品の製造方法の例を挙げたが、その他の用途も考えられる。したがって、添付された請求項の技術的範囲及び技術的思想は、本明細書に記載された好ましい実施形態に限られるものではない。
【国際調査報告】
2013505257.tif 000002