(57)【要約】  下記式(I)のＯＲＬ−１受容体アンタゴニスト：2013510859.tif 000100                                        （I）、その使用、およびその調製方法が記載される。ＯＲＬ−１アンタゴニストは、鬱病の治療ならびに／あるいは過体重、肥満の治療、および／または過体重もしくは肥満の治療後の体重維持に有用であるとみなされている。特定の化合物はまた、本発明の化合物が片頭痛の治療に有用であると動物モデルにより実証されている。
2013510859.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式の化合物：
【化１】
2013510859.tif 000099
（式中、
Ｒ１は、フルオロまたはクロロであり、
Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、各々水素であるか、または各々フルオロであり、
Ｒ３は、水素、メチル、ヒドロキシメチル、または（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシメチルであり、
Ｒ４は、フルオロ、クロロ、シアノ、シアノメチル、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、シクロプロピル、ヒドロキシメチル、メトキシ、シクロプロピルメトキシ、アミノカルボニルメトキシ、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシメチル、シクロプロピルオキシメチル、シクロプロピルメトキシメチル、１−ヒドロキシ−１−メチルエチル、アミノカルボニルオキシメチル、メチルアミノカルボニルオキシメチル、ジメチルアミノカルボニルオキシメチル、アミノカルボニル、アミノカルボニルメチル、−ＣＨ２−ＮＲ５Ｒ６、ヒドロキシイミン、メトキシイミン、モルホリン−４−イル、モルホリン−４−イルメチル、Ａｒ１、−ＣＨ２Ａｒ１、テトラヒドロフラン−２−イル、３−オキソモルホリン−４−イルメチル、２−オキソピロリジン−１−イルメチル、および２−オキソピペリジン−１−イルメチルからなる群より選択され、
Ｒ５は、水素、Ｃ１−Ｃ３アルキル、シアノメチル、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、またはアミノカルボニルメチルであり、
Ｒ６は、水素またはメチルであり、
Ａｒ１は、イミジゾール−１−イル、イミジゾール−２−イル、２−メチルイミジゾール−１−イル、ピラゾール−１−イル、１，２，３−トリアゾール−１−イル、１，２，３−トリアゾール−２−イル、１，２，４−トリアゾール−１−イル、イソオキサゾール−３−イル、オキサゾール−５−イル、および３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イルからなる群より選択される部分である）
またはその医薬的に許容可能な塩。
【請求項２】
Ｒ１がクロロである、請求項１に記載の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩。
【請求項３】
Ｒ２ａおよびＲ２ｂが各々フルオロである、請求項１または２に記載の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩。
【請求項４】
Ｒ１がフルオロであり、Ｒ２ａおよびＲ２ｂが各々水素である、請求項１に記載の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩。
【請求項５】
Ｒ３がメチルである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩。
【請求項６】
Ｒ４がフルオロ、ヒドロキシメチル、メトキシメチル、またはピラゾール−１−イルメチルである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩。
【請求項７】
［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メタノール、
２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［［３−メチル−１−［３−（ピラゾール−１−イルメチル）−２−ピリジル］ピラゾール−４−イル］メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］、または
［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’―ピペリジン］−１’−イル）メチル］−１−（３−フルオロ−２−ピリジル）ピラゾール−３−イル］メタノール
である、請求項１に記載の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩。
【請求項８】
［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メタノールである、請求項１に記載の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩と、医薬的に許容可能な担体、希釈剤、または賦形剤とを含む、医薬組成物。
【請求項１０】
少なくとも１つの追加の治療成分をさらに含む、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記追加の治療成分は、ＳＳＲＩ抗鬱剤である、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
治療に使用するための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１３】
ヒトにおける肥満または過体重の治療に使用するための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１４】
片頭痛の治療に使用するための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩。
【請求項１５】
鬱病の治療に使用するための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＯＲＬ−１受容体アンタゴニストとしてのスピロピペリジン化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
オルファニンＦＱ（ＯＦＱ）／ノシセプチンは、ＯＲＬ１  Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）に対して高い親和性を有する１７個のアミノ酸ペプチドである。ＯＲＬ１受容体は、中枢神経系および末梢神経系において、ならびに胃腸管、平滑筋、および免疫系において主に発現されるクラスＡ  ＧＰＣＲである。オピオイドペプチド／受容体に構造的に関連しているが、ＯＦＱ／ノシセプチン系は、古典的オピオイドペプチド／受容体に対する有意な交差反応を示さず、インビボにおける抗オピオイド活性を示す（例えば、ＯＲＱ／ノシセプチンは抗侵害受容特性を示すことが報告されている）。
【０００３】
ノシセプチン／オルファニンＦＱ受容体（ＮＯＣ／ＯＦＱ）アンタゴニスト、具体的にはＯＲＬ−１受容体のアンタゴニストは、鬱病および摂食行動に関する多数の研究において動物モデルを用いて抗鬱作用および食欲抑制作用が実証されている。このように、ＯＲＬ−１アンタゴニストは、鬱病の治療ならびに／あるいは過体重、肥満の治療、および／または過体重もしくは肥満の治療後の体重維持に有用であるとみなされている。
【０００４】
特許文献１は、鎮痛薬として使用するためのＯＲＬ−１アンタゴニストとしての特定のスピロピペリジニル化合物を記載している。
【０００５】
非特許文献１は、選択的ＯＲＬ−１アンタゴニストとして特定のＮ−ビアリールメチル−スピロピペリジン化合物を記載している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】国際公開第２００３／０９５４２７号パンフレット
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｙｏｓｈｉｚｕｍｉ，Ｔａｋａｓｈｉら（２００８），Ｄｅｓｉｇｎ，ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ａｎｄ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｃｌａｓｓ  ｏｆ  ＯＲＬ−１  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ  ｂａｓｅｄ  ｏｎ  Ｎ−ｂｉａｒｙｌｍｅｔｈｙｌ  ｓｐｉｒｏｐｉｐｅｒｉｄｉｎｅ，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ｖｏｌ．１８，ｐｇ．３７７８−３７８２
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、ＯＲＬ−１受容体の高いアンタゴニスト効力およびインビボでのＣＮＳにおける高いＯＲＬ−１受容体占有率を有する４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］化合物のファミリーを提供する。さらに、特定の化合物は、ｈＥＲＧチャネル活性に対する選択性、および他の重要な受容体（例えば、μ、κおよびδオピオイド、セロトニン、ならびにドーパミン受容体）に対する高い選択性により決定される場合、有益な心臓毒性学プロファイルを有する。さらに、特定の本発明の化合物は、有益な生物薬剤学的および薬物動態特性（例えば溶解性、経口曝露、およびＣＮＳ透過性）を有する。本発明の特定の化合物は、有益な経口バイオアベイラビリティを生じる低い酸化的代謝を示す。特定の化合物はまた、本発明の化合物が片頭痛の治療に有用であると動物モデルにより実証されている。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、式Ｉの化合物：
【化１】
2013510859.tif 000003
（式中、
Ｒ１は、フルオロまたはクロロであり、
Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、各々水素であるか、または各々フルオロであり、
Ｒ３は、水素、メチル、ヒドロキシメチル、または（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシメチルであり、
Ｒ４は、フルオロ、クロロ、シアノ、シアノメチル、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、シクロプロピル、ヒドロキシメチル、メトキシ、シクロプロピルメトキシ、アミノカルボニルメトキシ、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシメチル、シクロプロピルオキシメチル、シクロプロピルメトキシメチル、１−ヒドロキシ−１−メチルエチル、アミノカルボニルオキシメチル、メチルアミノカルボニルオキシメチル、ジメチルアミノカルボニルオキシメチル、アミノカルボニル、アミノカルボニルメチル、−ＣＨ２−ＮＲ５Ｒ６、ヒドロキシイミン、メトキシイミン、モルホリン−４−イル、モルホリン−４−イルメチル、Ａｒ１、−ＣＨ２Ａｒ１、テトラヒドロフラン−２−イル、３−オキソモルホリン−４−イルメチル、２−オキソピロリジン−１−イルメチル、および２−オキソピペリジン−１−イルメチルからなる群より選択され、
Ｒ５は、水素、Ｃ１−Ｃ３アルキル、シアノメチル、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、またはアミノカルボニルメチルであり、
Ｒ６は、水素またはメチルであり、
Ａｒ１は、イミジゾール−１−イル、イミジゾール−２−イル、２−メチルイミジゾール−１−イル、ピラゾール−１−イル、１，２，３−トリアゾール−１−イル、１，２，３−トリアゾール−２−イル、１，２，４−トリアゾール−１−イル、イソオキサゾール−３−イル、オキサゾール−５−イル、および３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イルからなる群より選択される部分である）
またはその医薬的に許容可能な塩を提供する。
【００１０】
本発明の別の態様において、医薬的に許容可能な担体、希釈剤、または賦形剤と共に式Ｉの化合物またはその医薬的に許容可能な塩を含む医薬組成物が提供される。本発明のこの態様の一実施形態において、医薬組成物はさらに、例えばフルオキセチンなどの例えばＳＳＲＩ抗鬱剤などの少なくとも１つのさらなる治療成分を含む。さらに、本発明のこの態様は、１つ以上の医薬的に許容可能な賦形剤、担体、またはそれらの希釈剤と共に、式Ｉの化合物またはその医薬的に許容可能な塩を含む、鬱病の治療に適合される医薬組成物を提供する。本発明のこの態様の別の実施形態において、１つ以上の医薬的に許容可能な賦形剤、担体、またはそれらの希釈剤と共に式Ｉの化合物またはその医薬的に許容可能な塩を含む、過体重、肥満および／または体重維持の治療に適合される医薬組成物が提供される。さらなる実施形態は、１つ以上の医薬的に許容可能な賦形剤、担体、またはそれらの希釈剤と共に、式Ｉの化合物またはその医薬的に許容可能な塩を含む、片頭痛の治療に適合される医薬組成物を提供する。
【００１１】
本発明はまた、哺乳動物における鬱病を治療する方法であって、そのような治療を必要とする哺乳動物に有効量の式Ｉの化合物またはその医薬的に許容可能な塩を投与することを含む、方法を提供する。さらなる実施形態は、哺乳動物における鬱病を治療する方法であって、そのような治療を必要とする哺乳動物に有効量の式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容可能な塩、および有効量のＳＳＲＩ抗鬱剤、またはその医薬的に許容可能な塩、例えばフルオキセチンなどを投与することを含む、方法を提供する。本発明の他の実施形態は、過体重および／または肥満を治療する方法、ならびに／あるいは体重維持のための方法であって、そのような治療を必要とする哺乳動物に有効量の式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容可能な塩を投与することを含む、方法を提供する。本発明のこれらの態様の１つの特定の実施形態において、哺乳動物はヒトである。
【００１２】
本発明はまた、治療に使用するための式Ｉの化合物またはその医薬的に許容可能な塩を提供する。この態様内で、本発明は、哺乳動物、特にヒトにおける鬱病の治療に使用するための、式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容可能な塩を提供する。本発明はまた、哺乳動物、特にヒトにおける鬱病の治療に使用するためのＳＳＲＩ抗鬱剤、またはその医薬的に許容可能な塩、例えばフルオキセチンなどと共に式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容可能な塩を提供する。さらに、本発明のこの態様は、以下のうちのいずれか１つを含む：過体重の治療に使用するための式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容可能な塩、肥満の治療に使用するための式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容可能な塩、特に過体重または肥満の治療後の体重の維持（体重維持）に使用するための式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容可能な塩、片頭痛の治療に使用するための式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容可能な塩を提供する。
【００１３】
本発明の別の態様は、鬱病の治療のための医薬の製造における、式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容可能な塩の使用を提供する。本発明の別の態様は、過体重、肥満の治療、および／または体重の維持のための医薬の製造における、式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容可能な塩の使用を提供する。本発明のさらに別の実施形態は、片頭痛の治療のための医薬の製造における式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容可能な塩の使用を提供する。
【００１４】
本発明の化合物は塩基であり、従って、多くの有機酸および無機酸と反応して医薬的に許容可能な塩を形成する。本発明の化合物の各々の医薬的に許容可能な塩は本発明の範囲内であると意図される。本明細書で用いる、用語「医薬的に許容可能な塩」とは、生物に実質的に無毒である式Ｉの化合物の任意の塩を指す。このような塩には、当業者に公知である、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，６６，２−１９（１９７７）に記載されているものが含まれる。
【００１５】
本明細書で用いる略語は以下のように定義する。
「ＢＳＡ」はウシ血清アルブミンを意味する。
「ｍＣＰＰ」はメタ−クロロフェニルピペラジン、非選択セロトニン受容体アゴニストを意味する。
「ＥＤＴＡ」はエチレンジアミン四酢酸を意味する。
「ＥＧＴＡ」はエチレングリコール四酢酸を意味する。
「ＧＴＰ」はグアノシン三リン酸を意味する。
「ＨＥＰＥＳ」は４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸を意味する。
「ＨＰＬＣ」は高圧液体クロマトグラフィーを意味する。
「ＩＣ５０」は最大阻害の５０％が達成される濃度を意味する。
「ＬＣ／ＭＳ」は液体クロマトグラフィー後の質量分析を意味する。
「ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ」は液体クロマトグラフィー後の質量分析、その後の第２のイオン化質量分析を意味する。
「ｍＦＳＴ」はマウス強制水泳試験、抗鬱作用についての動物モデルを意味する。
「ＭＳ」は質量分析を意味する。
「ＭＳ（ＥＳ＋）」はエレクトロスプレーイオン化を用いる質量分析を意味する。
「ＮＭＲ」は核磁気共鳴を意味する。
「ＲＯトレーサー」は２−［（２−フルオロフェニル）メチル］−３−（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−プロパンアミドを意味する。
「ＲＯ」は受容体占有を意味する。
「ＳＣＸカラム」は強カチオン交換カラムを意味する。
「ＳＮＡｒ」は芳香族求核置換を意味する。
「ＳＳＲＩ」は選択的セロトニン再摂取阻害剤を意味する。
「ｔＢｕ」は第三級ブチル部分を意味する。
「ＴＬＣ」は薄層クロマトグラフィーを意味する。
「ＸＲＤ」はＸ線回折を意味する。
【００１６】
本発明の好ましい化合物は、
１）Ｒ１がクロロであり、
２）Ｒ２ａおよびＲ２ｂが各々フルオロであり、
３）Ｒ１がクロロであり、Ｒ２ａおよびＲ２ｂが各々フルオロであり、
４）Ｒ１がフルオロであり、Ｒ２ａおよびＲ２ｂが各々水素であり、
５）Ｒ３が水素、メチル、ヒドロキシメチル、またはメトキシメチルであり、
６）Ｒ３がメチルであり、
７）Ｒ３がヒドロキシメチルであり、
８）Ｒ１がクロロであり、Ｒ２ａおよびＲ２ｂが各々フルオロであり、Ｒ３がメチルであり、
９）Ｒ１がクロロであり、Ｒ２ａおよびＲ２ｂが各々フルオロであり、Ｒ３がヒドロキシメチルであり、
１０）Ｒ４がフルオロ、ヒドロキシメチル、メトキシメチル、またはピラゾール−１−イルメチルであり、
１１）Ｒ４がフルオロであり、
１２）Ｒ４がヒドロキシメチルであり、
１３）Ｒ４がメトキシメチルであり、
１４）Ｒ４がピラゾール−１−イルメチルであり、
１５）Ｒ４がフルオロである好ましい実施形態１）〜９）のいずれか１つであり、
１６）Ｒ４がヒドロキシメチルである好ましい実施形態１）〜９）のいずれか１つであり、
１７）Ｒ４がメトキシメチルである好ましい実施形態１）〜９）のいずれか１つであり、
１８）Ｒ４がピラゾール−１−イルメチルである好ましい実施形態１）〜９）のいずれか１つである、
化合物である。
【００１７】
特定の好ましい化合物は、［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メタノール、２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［［３−メチル−１−［３−（ピラゾール−１−イルメチル）−２−ピリジル］ピラゾール−４−イル］メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］、および［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−１−（３−フルオロ−２−ピリジル）ピラゾール−３−イル］メタノール、またはその医薬的に許容可能な塩（すなわち実施例１、２３、５３、６２、および６３）である。
【００１８】
１つの特に好ましい本発明の化合物は、［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メタノール、またはその医薬的に許容可能な塩、例えば実施例１、６２および６３に例示されているようなＬ−酒石酸塩および／またはＨＣｌ塩などである。
【００１９】
Ｒ２ａおよびＲ２ｂが各々フルオロである化合物が好ましい。なぜなら、その化合物はより有益な薬物動態プロファイルを有し、酸化的代謝に安定であるからである。これは化合物の経口バイオアベイラビリティを改善する一般的効果を有する。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
一般化学
本発明の化合物は、当該技術分野において周知であり、理解されている方法による以下の合成スキームに従って調製できる。これらのスキームの工程についての適切な反応条件は当該技術分野において周知であり、溶媒および試薬の適切な置換は当業者の範囲内である。同様に、必要または所望の場合、合成中間体が種々の周知技術により単離および／または精製されてもよく、多くの場合、ほとんどまたは全く精製せずに後の合成工程において直接、種々の中間体を使用できることは当業者により理解されるだろう。さらに、当業者は、一部の状況において、部分が導入される順序は重要でないことを理解するだろう。熟練した化学者によって十分に理解されているように、式Ｉの化合物を生成するのに必要とされる工程の特定の順序は、合成される特定の化合物、出発物質、および置換部分の相対的不安定性に依存する。他に記載しない限り、全ての置換基は上記に定義した通りであり、全ての試薬は当該技術分野において周知であり、理解されている。
【００２１】
【化２】
2013510859.tif 000004
還元的アミノ化反応条件を用いることによって、室温にてテトラヒドロフランなどの適切な溶媒中で、化合物ＩＩＩを、適切に置換されたピラゾールカルバルデヒドおよびナトリウムトリアセトキシボロヒドリドなどの還元剤と反応させて、化合物ＩＩを得る。適切なカップリング条件下で、高温にてトルエンなどの溶媒中でヨウ化銅などの適切な触媒、炭酸カリウムなどの適切な塩基を用いて、化合物ＩＩを、化合物ＩＶ（式中、Ｈａｌはクロロ、ブロモ、またはヨードである）とカップリングさせて、化合物Ｉ’（式中、Ｒ４’はＲ４またはＲ４の前駆体である）を得る。化合物ＩＶ上のＨａｌがＦまたはＣｌである場合、芳香族求核置換（ＳＮＡｒ）が化合物Ｉ’を生成する代替方法である。より具体的には、高温にて炭酸カリウムなどの適切な塩基を含むジメチルホルムアミドなどの適切な溶媒中で化合物ＩＩは化合物ＩＶと反応して、化合物Ｉ’を得ることができる。化合物ＩＩＩはまた、上記の還元的アミノ化条件下で適切に置換されたアルデヒド化合物Ｖと反応して、所望の化合物Ｉ’を得ることができる。Ｒ４’がＲ４の前駆体である場合、公知の方法によりＲ４に変換される。
【００２２】
【化３】
2013510859.tif 000005
化合物ＩＩＩａ、ＩＩＩｂ、およびＩＩＩｃはスキーム２に示したように生成できる。化合物ＸＩＶおよびＸＶを、トリフルオロ酢酸などの適切な酸の存在下でジクロロメタンなどの適切な溶媒中で反応させる。得られたトリフルオロ酢酸塩を水酸化ナトリウム水溶液で塩基性にして、遊離塩基として化合物ＸＩＩＩを得る。メチルｔ−ブチルエーテルなどの適切な溶媒中の化合物ＸＩＩＩを、室温にて塩化スルフリルの酢酸溶液で処理して、塩酸塩として化合物ＶＩＩＩを得る。次いで当業者に周知の条件下で化合物ＶＩＩＩを窒素保護基で保護して、化合物ＶＩＩを得る（例えば、ＧｒｅｅｎｅおよびＷｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｈａｐｔｅｒｓ２および７，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ  Ｉｎｃ．，（１９９９）を参照のこと）。典型的に、保護基はＢｏｃ（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）基である。光源照射を用いてクロロベンゼンなどの適切な溶媒中で、化合物ＶＩＩを、Ｎ−ブロモスクシンイミドと反応させて、臭化物化合物を得て、次いでそれを重炭酸ナトリウム水溶液などの塩基溶液で処理して、ヒドロキシル化合物を得る。単離してまたはせずに、臭化カリウム、テトラメチルピペリジン−Ｎ−オキシド、および次亜塩素酸ナトリウム水溶液中などの適切な酸化条件下でヒドロキシル化合物をさらに酸化させて、所望のケトン化合物ＶＩを得る。次いで高温にてテトラヒドロフランなどの適切な溶媒中で、化合物ＶＩを、（ビス（２−メチルエチル）アミノ）硫黄トリフルオリドと反応させ、得られた生成物を脱保護して化合物ＩＩＩａを得る。
【００２３】
式ＸＩＩＩの化合物を保護して、化合物ＶＩＩを生成するのに使用したものと同様の方法を用いて化合物ＸＩＩを得る。低温にてテトラヒドロフランなどの適切な溶媒中の化合物ＸＩＩを、リチウムテトラメチルピペリジンなどの適切な塩基で処理し、その後Ｎ−フルオロベンゼンスルホンアミドを加えて、フッ化物化合物を得て、それをＨＣｌ水溶液で脱保護し、ＮａＯＨ水溶液で塩基性にして、化合物ＩＩＩｂを得る。
【００２４】
上記の化合物ＶＩを生成するのに使用した同じ方法によって、臭素化、ヒドロキシル化、および酸化などの３工程合成を介して、化合物ＩＸを、化合物ＸＩＩから得ることができる。各々の中間体を、さらなる反応のために純粋化合物として単離できるか、または化合物ＶＩの合成に記載されているように単離せずに反応できる。次いで低温下でテトラヒドロフランなどの適切な溶媒中のブチルリチウムなどの適切なハロゲン−金属交換試薬、続いてＮ−フルオロ−ベンゼンスルホンアミドなどのフッ素化試薬を用いて化合物ＩＸを処理して、所望のフッ素化生成物を得て、次いでそれを適切に脱保護して、所望の化合物ＩＩＩｃを得る。
【００２５】
【化４】
2013510859.tif 000006
式Ｖの化合物はスキーム３に示されるように生成できる。化合物ＩＩを化合物Ｉ’に変換するために上記のＳＮＡｒまたはカップリング条件下で化合物ＸＶＩを化合物ＸＶＩＩと反応させて式ＸＶの化合物を得る。Ｚがエステル基である場合、それは、テトラヒドロフランなどの適切な溶媒中の水素化アルミニウムリチウムなどの適切な還元剤により最初にアルコールに還元され得る。次いでジクロロメタンなどの溶媒中の酸化マンガン（ＩＶ）などの適切な酸化剤を用いてアルコールをアルデヒドに酸化する。
【００２６】
Ｒ４’がＲ４の前駆体である場合、Ｒ４’からＲ４への変換は、限定されないが、所望の新規アミンを得るための還元的アミノ化、エステル、ケトン、またはアルデヒドの還元などの反応、それをアルコキシ化合物またはカルバミン酸塩にさらに変換でき、ニトリルのアミドまたはアミンへの還元、適切な条件下でのエステルの、オキサジアゾールなどのヘテロシクリルへの変換を含む（例えば、Ｒｉｃｈａｒｄ  Ｃ．Ｌａｒｏｃｋ，  Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｈａｐｔｅｒｓ  ２  ａｎｄ  ７，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ  Ｉｎｃ．，（１９９９）を参照のこと）。
【００２７】
以下の調製例および実施例は、本発明の化合物の合成に有用な方法の例示である。調製例および実施例に例示した化合物の多くの名称は、「Ｓｙｍｙｘ  Ｄｒａｗ  ３．１」または「Ａｕｔｏｎｏｍ  ２０００Ｎａｍｅ」を用いて描かれる構造から得られる。
【００２８】
調製例１：４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］
【化５】
2013510859.tif 000007
３−チオフェンエタノール（１２３．０３ｍＬ、１．１１ｍｏｌ）を、ジクロロメタン（１３００ｍＬ）中のＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−ピペリドン（１８５ｇ、９２８．４８ｍｍｏｌ）の溶液に加え、室温にて攪拌する。次いでトリフルオロ酢酸（２８０．８２ｍＬ、３．７１ｍｏｌｅ）を、氷／水浴（内部温度＝１４℃〜３０℃、注意：ＣＯ２発生）で冷却しながら滴下して加える（５分）。反応混合物を室温まで徐々に加温し、その温度にて２０時間攪拌する。溶媒を蒸発させて、真空中での冷却時にベージュ色の結晶性固体を得る。固体をメチルｔ−ブチルエーテル（２００ｍＬ）中でスラリーにし、濾過し、メチルｔ−ブチルエーテル（２×１０００ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イウムトリフルオロアセテートを９５％収率で白色の固体として得る。ＭＳ＝（ｍ／ｚ）：２１０（Ｍ＋１）。１０Ｍの水酸化ナトリウム（２２０．３６ｍＬ、２．２０ｍｏｌ）を、冷却（氷／水浴）しながらジクロロメタン（１Ｌ）中の４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イウムトリフルオロアセテート（２８５ｇ、８８１．４４ｍｍｏｌ）の攪拌した懸濁液に加え、得られた混合物を、二相混合物が得られるまで攪拌する。相を分離し、水層をジクロロメタン（２×２００ｍＬ）で抽出する。合わせた有機物を真空下で濃縮して厚い油を得て、それを水で粉砕して淡黄色の沈殿物を得る。その沈殿物を濾過し、水（３００ｍＬ）およびヘキサン（２００ｍＬ）で洗浄し、３５℃にて２０時間真空下で乾燥させて、８６％収率で淡黄色の固体として標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２１０（Ｍ＋１）。
【００２９】
調製例２：ｔｅｒｔ−ブチルスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−カルボキシレート
【化６】
2013510859.tif 000008
２−メチルテトラヒドロフラン（６００ｍＬ）中のスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］（６０ｇ、２８６．６ｍｍｏｌ）を２２℃にて１０分間攪拌する。次いで、２−メチルテトラヒドロフラン（３００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルｔｅｒｔ−ブチルカルボネート（６５．６ｇ、３０１ｍｍｏｌ）を滴下して加える。１２時間後、塩化ナトリウム水溶液（２５０ｍＬ）を加え、有機層を分離する。水層を２−メチルテトラヒドロフラン（２×５０ｍＬ）で２回洗浄し、有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、９９％収率で標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３１０（Ｍ＋１）。
【００３０】
調製例３：２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，２−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］
【化７】
2013510859.tif 000009
１．ｔｅｒｔ−ブチル  ２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−カルボキシレート
２，２，６，６−テトラメチルピペリジン（１８．７ｍＬ、１１０．５ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）に加え、−７８℃にて窒素下で溶液を冷却する。ヘキサン中のブチルリチウムの２．５Ｍ溶液（３７．２ｍＬ、９３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を−７８℃にて３０分間攪拌する。新たなリチウム２，２，６，６−テトラメチルピペリジン溶液に、−７０℃以下に温度を維持しながら、テトラヒドロフラン（９０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチルスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−カルボキシレート（２０ｇ、５８．２ｍｍｏｌ）の溶液を加える。２０分後、窒素下で−２０℃に事前に冷却したテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）中のＮ−フルオロベンゼンスルホンイミド（３０．２６ｇ、９３．０７ｍｍｏｌ）の溶液を、カニューレを介して加える。１時間攪拌後、水（２０ｍＬ）および塩化アンモニウム水溶液（５０ｍＬ）を加える。次いで、有機層を分離し、水層をメチルｔ−ブチルエーテル（２×２５ｍＬ）で２回洗浄する。有機物を合わせ、溶媒を減圧下で蒸発させる。粗物質を、溶媒としてヘキサン／メチルｔ−ブチルエーテルを用いる順相ＨＰＬＣにより精製して、ｔｅｒｔ−ブチル２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−カルボキシレートを５０％収率で得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３２８（Ｍ＋１）。
【００３１】
２．２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，２−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］
３７％塩酸（１１．７５ｍＬ、１２５．２２ｍｍｏｌ）を、４５℃にて、イソプロピルアルコール（５７．４ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル２’−フルオロ−４’，５’−ジヒドロ−１Ｈ−スピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−カルボキシレート（８．２ｇ、２５．０４ｍｍｏｌ）の溶液に加える。得られた溶液を４５℃にて６．５時間攪拌する。溶媒を黄色の懸濁液まで濃縮する。水（５０ｍＬ）を加え、混合物を５Ｎの水酸化ナトリウムで塩基性にする。水相を酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、９６％収率で標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２２８（Ｍ＋１）。
【００３２】
調製例４：２’−クロロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］塩酸塩
【化８】
2013510859.tif 000010
酢酸（４００ｍＬ）とメチルｔ−ブチルエーテル（４０ｍＬ）との混合物中の４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］（５０ｇ、２３８．８８ｍｍｏｌ）の溶液を１５℃まで冷却する。次いで、酢酸（１００ｍＬ）中の塩化スルフリル（２１．２０ｍＬ、２６２．７７ｍｍｏｌ）の溶液を、その温度（内部温度＝１５℃〜２２℃）にて４０分滴下して加え、混合物を室温にて２０時間攪拌する。次いで、酢酸（５０ｍＬ）中の塩化スルフリル（１１．５６ｍＬ、１４３．３３ｍｍｏｌ）の溶液を室温にて滴下して加える。反応混合物を室温にて３０分間攪拌し、次いでそれを、攪拌しながら氷／水浴で冷却しているメチルｔ−ブチルエーテル（１Ｌ）に滴下して加える（３０分）。白色の懸濁液が形成し、固体を濾過する。物質の第２の産物を得るために、濾液を濃縮する（ロータリエバポレーターによりメチルｔ−ブチルエーテルを補充する）。得られた固体をメチルｔ−ブチルエーテル（３００ｍＬ）に懸濁し、懸濁液を還流（浴：１００℃）にて攪拌し、濁った懸濁液が形成するまでメタノール（３０ｍＬ）を加える。次いで、その懸濁液を一晩室温まで冷却する。さらに懸濁液を氷／水浴中で冷却し、濾過する。固体をメチルｔ−ブチルエーテル（５０ｍＬ）で洗浄し、第１の産物を合わせて、６０％収率で標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２４４（Ｍ＋１）。
【００３３】
調製例５：２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］
【化９】
2013510859.tif 000011
１．ｔｅｒｔ−ブチル２−クロロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−カルボキシレート
ジクロロメタン（１．１２Ｌ）中の２−クロロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，２−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］塩酸塩（１４０ｇ、０．４９ｍｏｌｅ）の懸濁液に、トリエチルアミン（６７．２５ｍＬ、１．０５ｍｏｌｅ）、４−ピリジンアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−（３．０５ｇ、０．０２５ｍｏｌｅ）およびジ−ｔ−ブチルジカルボネート（１１１．２２ｇ、０．５０９ｍｏｌｅ）を一部ずつ加え、得られた混合物を室温にて一晩攪拌する。反応物を１Ｎ  ＨＣｌ（２×）および水で洗浄する。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル２−クロロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−カルボキシレートを５３％の収率で得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２４４（Ｍ＋１−Ｂｏｃ）。
【００３４】
２．ｔｅｒｔ−ブチル４’−オキソ−２’−クロロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−カルボキシレート
５Ｌのジャケット形リアクター中に、室温にて、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１１５．０２ｇ、６３９．７７ｍｍｏｌ）を、クロロベンゼン（１．６０Ｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル２−クロロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−カルボキシレート（２００ｇ、５８１．６１ｍｍｏｌ）の溶液に加える。得られた懸濁液に、外部リアクター壁とほぼ接触して配置された３×１００ｗ電球を照射し、リアクターの温度を４５℃に設定する。４時間後、Ｎ−ブロモスクシンイミド（２６．１４ｇ、１４５．４０ｍｍｏｌ）を加え、温度を１５時間４０℃に維持する。反応混合物を０℃に冷却し、メチルｔ−ブチルエーテル（５００ｍＬ）を加える。固体を濾過し、溶液を約１０００ｍＬのクロロベンゼン溶液まで濃縮する。次いで、メチルｔ−ブチルエーテル（１０００ｍＬ）を加え、固体を濾過し、濾液を濃縮して６００ｍＬのクロロベンゼン溶液を得る。ジメチルスルホキシド（８０６．４７ｍＬ、１１．３５ｍｏｌ）を加え、炭酸水素ナトリウム（９５．３８ｇ、１．１４ｍｏｌ）を室温にて加える。２４時間後、室温にて、水／氷（１０００ｍＬ）を加え、相を分離する。有機相を水（２×１Ｌ）で洗浄し、濃縮して、クロロベンゼン溶液を得る。次いで、ジクロロメタン（１．２Ｌ）を加え、混合物を５℃（氷／水浴）に冷却する。臭化カリウム（２０．２７ｇ、１７０．３１ｍｍｏｌ）および２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−Ｎ−オキシド（４．４３ｇ、２８．３８ｍｍｏｌ）を加える。次いで、炭酸水素ナトリウムでｐＨ＝９に調整した６％次亜塩素酸ナトリウム水溶液（６４４．４０ｍＬ、５６７．６８ｍｍｏｌ）を５℃にて反応混合物に加え、得られた混合物を５℃から室温にて１時間攪拌する。水（１Ｌ）を加え、相を分離する。有機相を水（２×０．５Ｌ）で洗浄し、氷／水浴で冷却した。次いで、臭化カリウム（２．０３ｇ、１７．０３ｍｍｏｌ）、２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−Ｎ−オキシド（０．０５ｇ、０．３２ｍｍｏｌｅ）および固体の炭酸水素ナトリウムでｐＨ＝９に調整した６％次亜塩素酸ナトリウム水溶液（１２８．８８ｍＬ、１１３．５４ｍｍｏｌ）を５℃にて反応混合物に加え、得られた混合物を５℃から室温まで１時間攪拌する。次いで、水（１Ｌ）を加え、相を分離する。有機相を水（２×１Ｌ）で洗浄し、乾燥させ、濃縮して暗褐色の固体を得る。
【００３５】
ヘキサン（５００ｍＬ）、メチルｔ−ブチルエーテル／ヘキサン５％（２５０ｍＬ）およびメチルｔ−ブチルエーテル／ヘキサン１０％（２５０ｍＬ）で固体を粉砕して、ｔｅｒｔ−ブチル４’−オキソ−２’−クロロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−カルボキシレートを６６％収率で淡褐色の固体として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２５８（Ｍ＋１（Ｂｏｃ））。
【００３６】
３．ｔｅｒｔ−ブチル２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−カルボキシレート
テトラヒドロフラン（８１ｍＬ）を入れた５００ｍＬのＰＦＡフラスコ中に、（ビス（２−メトキシエチル）アミノ）硫黄トリフルオリド（１８３．６２ｇ、８２９．９４ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル４’−オキソ−２’−クロロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−カルボキシレート（１３５ｇ、３７７．２４ｍｍｏｌ）を加える。得られた懸濁液を７０℃にて２４時間攪拌する。次いで、室温に冷却し、攪拌しながら氷と飽和炭酸水素ナトリウム（４Ｌ）との混合物にゆっくりと注ぐ（ガス発生）。メチルｔ−ブチルエーテルを使用して、残っている物質をフラスコから移す。ガス発生が停止した後、固体の炭酸水素ナトリウムをｐＨ８になるまで攪拌しながら加える。得られた混合物を、水相中で生成物がＴＬＣにより検出されなくなるまで、メチルｔ−ブチルエーテル（３×５００ｍＬ）で抽出する。合わせた有機物を水（３×５００ｍＬ）およびブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して、暗色の厚い油（２５０ｇ）を得る。粗物質をジクロロメタンに溶解し、メチルｔ−ブチルエーテル／ヘキサン１０％（６Ｌ）およびメチルｔ−ブチルエーテル／ヘキサン（４Ｌ）で溶出するシリカゲルプラグで濾過する。ＴＬＣ（２０％メチルｔ−ブチルエーテル／ヘキサン  ＵＶ、Ｒｆ＝０．５）により生成物が検出されなくなるまで、画分を回収する。画分を濃縮して淡褐色の固体を得て、それを一定重量まで４０℃にて真空下で乾燥させて、７０％収率のｔｅｒｔ−ブチル２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−カルボキシレートを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３２４（Ｍ＋１  ｔＢｕ）。
【００３７】
４．２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］
３７％塩酸（７４．１２ｍＬ、７８９．７８ｍｍｏｌ）を、４５℃にて、イソプロピルアルコール（４２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−カルボキシレート（６０ｇ、１５７．９６ｍｍｏｌ）の溶液に加える。得られた溶液を４５℃にて１５時間攪拌する。次いで、混合物を１／４容量まで濃縮して、白色の懸濁液を得る。水（１００ｍＬ）を加え、懸濁液を６Ｎの水酸化ナトリウム水溶液で塩基性にして、メチルｔ−ブチルエーテル（３×１００ｍＬ）で抽出される２層混合物を得る。合わせた有機物をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して、淡褐色の固体を得て、それを一定重量まで真空下で乾燥させて、９７％の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２８０（Ｍ＋１）。
【００３８】
調製例６：２，４，４−Ｔｒｉフルオロスピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］
【化１０】
2013510859.tif 000012
１．ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−４−ヒドロキシ−スピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−カルボキシレート
Ｎ−ブロモスクシンイミド（２．２当量）を、クロロベンゼン（１０８ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチルスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−カルボキシレート（１３．５ｇ）の溶液に加える。得られた懸濁液に、２６０ｗの電球を一晩照射する。さらにＮ−ブロモスクシンイミド（１．７ｇ）を混合物に加え、その混合物に、２６０ｗの電球を３時間照射する。溶媒を減圧下で除去して、残渣を得、それを、アセトン（６５０ｍＬ）に溶解し、硝酸銀（８．８ｇ）水溶液（６５０ｍＬ）を加える。混合物を暗所で一晩室温にて攪拌する。混合物を濾過し、アセトンを蒸発させる。酢酸エチルを加え、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液およびブラインで洗浄する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させる。残渣を順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィー（溶出液：ヘキサン／酢酸エチル１５〜６０％）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル−２−ブロモ−４−ヒドロキシ−スピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−カルボキシレートを３８％収率で得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４２６／４２８（Ｍ＋２３／Ｍ＋２＋２３）。
【００３９】
２．ｔｅｒｔ−ブチル  ２’−ブロモ−４’−オキソ−スピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−カルボキシレート
臭化カリウム（５３５．６７ｍｇ、４．５０ｍｍｏｌ）を、０℃にて、ジクロロメタン（７０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−４−ヒドロキシ−スピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−シクロヘキサン］−１’−カルボキシレート（７．２８ｇ）および２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−Ｎ−オキシド（２８１．３３ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ）の溶液に加える。別の容器中に、ｐＨ９になるまで、１０％次亜塩素酸ナトリウム水溶液（２２．３４ｍＬ、３６．０１ｍｍｏｌ）に炭酸水素ナトリウムを加える。この次亜塩素酸ナトリウム−炭酸水素ナトリウム溶液を０℃にて滴下して加え、得られた暗色の懸濁液を０℃にて１５分間攪拌する。ジクロロメタン（２０ｍＬ）および水（２０ｍＬ）を加え、相を分離する。有機相を水（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させる。溶媒を減圧下で除去して、ｔｅｒｔ−ブチル２’−ブロモ−４’−オキソ−スピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−カルボキシレートを９９％収率で得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３４６／３４８（Ｍ＋１ｔＢｕ／Ｍ＋３−ｔＢｕ）。
【００４０】
３．ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−４，４−ジフルオロスピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−カルボキシレート
１００ｍＬのペルフルオロアルコキシ−フラスコフラスコ（ｐｅｒｆｌｕｏｒｏａｌｃｏｘｙ−ｆｌａｓｋ  ｆｌａｓｋ）中で、（ビス（２−メトキシエチル）アミノ）硫黄トリフルオリド（５．１６ｍＬ、２７．９６ｍｍｏｌ）を乾燥テトラヒドロフラン（３．５ｍＬ）に加える。次いでｔｅｒｔ−ブチル２’−ブロモ−４’−オキソ−スピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−カルボキシレート（４．５ｇ、１１．１９ｍｍｏｌ）を加える。溶液を７０℃にて一晩攪拌する。その時間の後、メチルｔ−ブチルエーテルを加え（３０ｍＬ）、反応混合物を、氷浴中で冷却した炭酸水素ナトリウム（飽和水溶液）に注意深く注ぐ。ＣＯ２発生が見られ、ｐＨ８になるまで炭酸水素ナトリウム（飽和水溶液）を加える。混合物をメチルｔ−ブチルエーテルで抽出する。有機層をデカントし、ブライン（２×）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で蒸発させる。粗物質を、メチルｔ−ブチルエーテル／ヘキサンで溶出する順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、３．２ｇのｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−４，４−ジフルオロスピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−カルボキシレートを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３６８／３７０（Ｍ＋１−ｔＢｕ／Ｍ＋３−ｔＢｕ）。
【００４１】
４．ｔｅｒｔ−ブチル２，４，４−トリフルオロスピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−カルボキシレート
ヘキサン（４７ｍＬ）中の２．５Ｍのブチルリチウムを、窒素下で−７８℃にて、テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−４，４−ジフルオロスピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−カルボキシレート（１．９９ｇ、４．６９ｍｍｏｌ）の溶液に加える。混合物を−７８℃にて１時間攪拌し、固体のＮ−フルオロ−ベンゼンスルホンアミド（３．６９ｇ、１１．７３ｍｍｏｌ）を加える。混合物を室温まで加温し、室温にて一晩攪拌する。飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、有機相を酢酸エチルで抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で溶媒を除去する。粗物質を、順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル３〜１２％）により精製して、１．３ｇのｔｅｒｔ−ブチル２，４，４−トリフルオロスピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−カルボキシレートを得て、それらをＨＰＬＣによりさらに精製して、０．８１８ｇのその化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３０８（Ｍ＋１−ｔＢｕ）。
【００４２】
５．２，４，４−トリフルオロスピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］
ｔ−ブチル２，４，４−トリフルオロスピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−カルボキシレート（２．００ｇ、５．５０ｍｍｏｌ）を塩酸（ジオキサン中に４Ｎ）（１０ｍＬ、４０ｍｍｏｌ）に溶解する。混合物を室温にて１時間攪拌し、次いで５０ｇのＳＣＸカートリッジ（固体の陽イオン交換）に通して、メタノール画分中の２Ｎのアンモニアの蒸発後に１．３ｇの標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２６４（Ｍ＋１）。
【００４３】
調製例７：２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］
【化１１】
2013510859.tif 000013
テトラヒドロフラン（１．５８Ｌ）中の２−クロロ−４，４−ジフルオロスピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン（１０５ｇ、３７５ｍｍｏｌ）の溶液に、３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド（４３．４０ｇ、３９４．１２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温にて１時間攪拌する。次いで、粉末のナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（９５．４６ｇ、４５０．４２ｍｍｏｌ）を３部で加える。混合物を室温にて１５時間攪拌する。次いで、反応混合物を氷−炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（４００ｍＬ）に注ぐ。相を分離する。水相を酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出する。合わせた有機層を５０％ブラインで洗浄し、固体が有機相中で沈殿する。有機相を合わせて、１７０ｇの標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３７４（Ｍ＋１）。
【００４４】
調製例８〜１１の化合物を、溶媒として１，２−ジクロロエタンを用いて調製例７に記載されるように本質的に調製する。
【００４５】
【表１】
2013510859.tif 000014
【００４６】
調製例１２：２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロスピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］ピリジン−３−カルバルデヒド
【化１２】
2013510859.tif 000015
２５０ｍＬのフラスコに、ヨウ化銅（Ｉ）（１．９１ｇ、１０．０３ｍｍｏｌ）、２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］（２５ｇ、６６．８７ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１９．６０ｇ、１４０．４３ｍｍｏｌ）、トルエン（５０ｍＬ）および攪拌バーを加える。反応混合物を５回の真空／再充填サイクルにより脱気する。次いで、２−ブロモ−３−ホルミルピリジン（１８．６６ｇ、１００．３１ｍｍｏｌ）およびｔｒａｎｓ−Ｎ，Ｎ’−ジメチルシクロヘキサン−１，２−ジアミン（３．１６ｍＬ、２０．０６ｍｍｏｌ）を加える。反応物を室温にて５分間攪拌する。次いで、１１５℃にて予熱した油浴に浸し、その温度で１５時間攪拌する。反応混合物を室温に冷却し、３００ｍＬの酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過する。それを酢酸エチル（１００ｍＬ）で洗浄し、水酸化アンモニウム水溶液（３％）（４×１００ｍＬ）で洗浄して、痕跡銅を除去し、次いで、それを水（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄する。溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させる。溶媒を真空中で蒸発させて、黄褐色の固体を得る。固体を、溶出液として２−プロパノール／ジクロロメタン（３％〜５％の２−プロパノール）を用いるシリカゲルパッドで濾過して、６９％収率で標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４７９（Ｍ＋１）。
【００４７】
調製例１３：２−［４−［（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］ピリジン−３−カルバルデヒド
【化１３】
2013510859.tif 000016
調製例１３の化合物を、２−ブロモピリジン−３−カルバルデヒドおよび２−フルオロ−１’−［（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］スピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］を用いることによって調製例１２に記載されるように本質的に実施する。残渣を順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、８３％の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４２７（Ｍ＋１）。
【００４８】
調製例１４：Ｎ−［（２−クロロ−３−ピリジル）メチル］アセトアミド
【化１４】
2013510859.tif 000017
室温にて、ジクロロメタン（２ｍＬ）中の（２−クロロ−３−ピリジル）メタンアミン（３００ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ）の溶液に、酢酸無水物（１９８．８８μＬ、２．１０ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２９３．２６μＬ、２．１０ｍｍｏｌ）を加える。１時間後、反応を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でクエンチし、ジクロロメタンで抽出する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で溶媒を蒸発させて、１８４ｍｇのＮ−［（２−クロロ−３−ピリジル）メチル］アセトアミドを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：１８５（Ｍ＋１）。
【００４９】
調製例１５：（２−ブロモ−３−ピリジル）メチルメタンスルホネート
【化１５】
2013510859.tif 000018
１．（２−ブロモ−３−ピリジル）メタノール
２−ブロモ−３−ピリジン−カルボキシアルデヒド（２２．１５ｇ、１１９．０８ｍｍｏｌ）およびメタノール（２００ｍＬ）を含有する２Ｌの丸底フラスコ（攪拌バーを備え付け、窒素下、０℃にて）に、水素化ホウ素ナトリウム（１．３５ｇ、３５．７２ｍｍｏｌ）を３部で加える。１時間後、０℃にて水（２００ｍＬ）を加え、反応物を減圧下で濃縮して、メタノールを除去する。得られた残渣を酢酸エチルに溶解し、水（２００ｍＬ）で洗浄する。有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、２２ｇの（２−ブロモ−３−ピリジル）メタノールを白色の固体として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：１８８（Ｍ＋１）、１９０（Ｍ＋３）。
【００５０】
２．（２−ブロモ−３−ピリジル）メチルメタンスルホネート
トリエチルアミン（８．９０ｍＬ）を、０℃にて、ジクロロメタン（２１２ｍＬ）中の（２−ブロモピリジン−３−イル）メタノール（８ｇ、４２．５５ｍｍｏｌ）の溶液を含有する丸底フラスコに加え、次いで塩化メタンスルホニル（３．９５ｍＬ）を加え、混合物をその温度で１．５時間攪拌する。その時間の後、混合物を水で洗浄し、有機層をデカントし、硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で蒸発させて、１０．４ｇの標題化合物を得て、それをさらに精製せずに使用する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２６６、２６８（Ｍ＋１；Ｍ＋３）。
【００５１】
調製例１６：２−（２−ブロモ−３−ピリジル）プロパン−２−オール
【化１６】
2013510859.tif 000019
リチウムジイソプロピルアミド（２Ｍ、１２．５ｍＬ、２５ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（４０ｍＬ）に溶解し、−７８℃に冷却する。２−ブロモピリジン（３．９ｇ、２５ｍｍｏｌ）を滴下して加え、アセトン（１ｍＬ、新たに活性化させたモレキュラーシーブで乾燥させる）を加える前に反応物を３時間攪拌し、室温まで加温する。反応物を飽和塩化アンモニウムでクエンチし、酢酸エチルで抽出する。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発させる。残渣を、２０％ヘキサン／ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで溶出するシリカ上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（１．４ｇ、２６％）を得る。１Ｈ−ＮＭＲ（ｄ６−ジメチルスルホキシド）：８．２３（ｄｄ，Ｊ＝１．９，４．５Ｈｚ，１Ｈ），８．１９（ｄｄ，Ｊ＝２．０，７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４４（ｄｄ，Ｊ＝４．５，７．７Ｈｚ，１Ｈ），５．４３（ｓ，１Ｈ），２．１２（ｓ，１Ｈ），１．４６（ｓ，６Ｈ）。
【００５２】
調製例１７：エチル３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキシレート
【化１７】
2013510859.tif 000020
硫酸（１８ｍＬ、３３７．６９ｍｍｏｌ）を、エタノール（９０ｍＬ）中の１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸、３−メチル−（１０ｇ、７９．２９ｍｍｏｌ）の懸濁液に加え、混合物を８５℃にて２０時間攪拌する。その時間の後、溶媒を部分的に除去する。残渣を１Ｍの水酸化ナトリウムでｐＨ６〜７に塩基性にし、ジクロロメタンで抽出する。有機層をデカントし、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で溶媒を蒸発させて、１０．３ｇの標題化合物を得て、それをさらに精製せずに使用する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：１５５（Ｍ＋１）。
【００５３】
調製例１８：メチル２−フルオロピリジン−３−カルボキシレート
【化１８】
2013510859.tif 000021
２Ｍのリチウムジイソプロピルアミド（１１．３ｍＬ、２２．５ｍｍｏｌ）を、−７８℃にて窒素雰囲気下で、テトラヒドロフラン（９０ｍＬ）中の２−フルオロピリジン（２ｇ、２０．５ｍｍｏｌ）の溶液に加える。その温度で４時間後、クロロギ酸メチル（１．９ｍＬ、２４．６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を−７８℃にてさらに１時間攪拌し、一晩で室温に到達させる。反応混合物を水にゆっくりと注ぎ、ジエチルエーテルで抽出する。有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を真空中で蒸発させる。残渣を、ヘキサン／ジエチルエーテル（９／１）で溶出する順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、４９５．２ｍｇの標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：１５６（Ｍ＋１）。
【００５４】
調製例１９：１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−メチル−ピラゾール−４−カルバルデヒド
【化１９】
2013510859.tif 000022
カリウムｔ−ブチルアルコール（２９．２５ｇ、２６０．６８ｍｍｏｌ）を、水浴で冷却したジメチルホルムアミド（２５０ｍＬ）中の３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド（２６．００ｇ、２３６．１２ｍｍｏｌ）の溶液に加える。混合物を室温にて１０分間攪拌する。次いで、２，３−ジフルオロピリジン（２５ｇ、２１７．２４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温にて２０時間攪拌する。混合物を氷／水混合物に注ぎ、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）中で抽出する。有機物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を真空中で蒸発させる。残渣を、溶出液としてヘキサン／イソプロピルアルコールを用いるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、残りのジメチルホルムアミドと共に粗物質を得る。次いでその物質を酢酸エチル（１００ｍＬ）に溶解し、水（３×２０ｍＬ）で洗浄する。水相を酢酸エチル（２×２０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して、１９ｇの標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２０６（Ｍ＋１）。
【００５５】
調製例２０：  ２−（４−ホルミル−３−メチル−ピラゾール−１−イル）ピリジン−３−カルボニトリル
【化２０】
2013510859.tif 000023
調製例２０の化合物を、３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒドおよび２−フルオロピリジン−３−カルボニトリルを用いることによって調製例１９に記載されるように実質的に調製する。標題化合物を２３％の収率で得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２１３（Ｍ＋１）。
【００５６】
調製例２１：メチル２−（４−ホルミル−３−メチル−ピラゾール−１−イル）ピリジン−３−カルボキシレート
【化２１】
2013510859.tif 000024
３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド（３００ｍｇ、２．７２ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（５６５ｍｇ、４．０８ｍｍｏｌ）、メチル２−フルオロピリジン−３−カルボキシレート（５０７ｍｇ、３．２７ｍｍｏｌ）およびジメチルホルムアミド（２ｍＬ）の混合物を６０℃にて１６時間攪拌する。水を加え、化合物を酢酸エチル中で抽出する。有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を蒸発させる。粗混合物を、溶出液としてヘキサン：酢酸エチル、２：１を用いる順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、４２２ｍｇの標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２４６（Ｍ＋１）。
【００５７】
調製例２２〜２３の化合物は、対応する２−クロロピリジル試薬を用いて調製例２１に記載されるように実質的に調製できる。
【００５８】
【表２】
2013510859.tif 000025
【００５９】
調製例２４：１−［３−（ジメチルアミノメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−カルバルデヒド
【化２２】
2013510859.tif 000026
１．エチル１−［３−（ジメチルアミノメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−カルボキシレート
この化合物は、９５％の収率でエチル１−（３−ホルミル−２−ピリジル）−３−メチル−ピラゾール−４−カルボキシレートおよびジメチルアミンを用いることによって調製例７に記載されるように実質的に調製し、後処理の後、さらに精製せずに使用する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２８９（Ｍ＋１）。
【００６０】
２．［１−［３−（ジメチルアミノメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−イル］メタノール
０℃に冷却し、窒素下でテトラヒドロフラン（５ｍＬ）中のエチル１−［３−（ジメチルアミノメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−カルボキシレート（２１７．７ｇ、０．７５ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラヒドロフラン中の１Ｍの水素化アルミニウムリチウム（０．９ｍＬ、０．９ｍｍｏｌ）を加え、混合物をその温度にて５分間攪拌する。反応を飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、粗物質を酢酸エチルで抽出する。有機層を分離し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を真空中で蒸発させる。この特定の実施例において、化合物は有機抽出物中で単離せず、最終的にＳＣＸカートリッジを用いて水溶液から分離して、１４６ｍｇ（７８％）の［１−［３−（ジメチルアミノメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−イル］メタノールを得て、それをさらに精製せずに使用する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２４７（Ｍ＋１）。
【００６１】
３．１−［３−（ジメチルアミノメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−カルバルデヒド
３，３，３−トリアセトキシ−３−ヨードフタリド（０．５５３ｇ、１．３ｍｍｏｌ）を、室温にて、ジクロロメタン（４ｍＬ）中の［１−［３−（ジメチルアミノメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−イル］メタノール（０．１４６ｇ、０．５９ｍｍｏｌ）の溶液に加える。１時間後、反応を、２Ｎの炭酸ナトリウム水溶液の添加によりクエンチし、化合物をジクロロメタン中で抽出する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を真空中で蒸発させて、１２６ｍｇの１−［３−（ジメチルアミノメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−カルバルデヒドを得て、それをさらに精製せずに使用する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２４５（Ｍ＋１）。
【００６２】
調製例２５：１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−（イソプロポキシメチル）ピラゾール−４−カルバルデヒド
【化２３】
2013510859.tif 000027
１．エチル３−（ブロモメチル）−１−（３−フルオロ−２−ピリジル）ピラゾール−４−カルボキシレート
クロロベンゼン（２０５ｍＬ）中のエチル１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−メチル−ピラゾール−４−カルボキシレート（１０．２ｇ、４０．９ｍｍｏｌ）の溶液に、室温にてＮ−ブロモスクシンイミド（８ｇ）を加える。反応混合物を攪拌し、室温にて一晩、１００Ｗのランプ下で照射する。次いでさらにＮ−ブロモスクシンイミド（２ｇ）を加え、２時間後、出発物質は検出されない。固体を濾過し、溶媒を蒸発させる。粗物質を、溶出液としてジクロロメタンおよびメタノールを用いる順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、５．３ｇのエチル３−（ブロモメチル）−１−（３−フルオロ−２−ピリジル）ピラゾール−４−カルボキシレートを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３２８；３３０（Ｍ＋１；Ｍ＋３）。
【００６３】
２．イソプロピル１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−（イソプロポキシメチル）ピラゾール−４−カルボキシレート
プロパン−２−オール（２３ｍＬ）中のエチル３−（ブロモメチル）−１−（３−フルオロ−２−ピリジル）ピラゾール−４−カルボキシレート（１．５ｇ、４．５７ｍｍｏｌ）の溶液に、リチウムイソプロポキシド（３．０２ｇ）を加え、混合物を室温にて一晩攪拌する。その時間の後、さらにリチウムプロポキシド（４．５ｇ）を１６時間毎に各々１．５ｇで３部で加える。最後の添加の後、反応混合物を最終的に４０℃にて１６時間攪拌する。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルに溶解し、ブラインで洗浄する。有機層をデカントし、硫酸ナトリウムで乾燥させる。溶媒を蒸発させ、残渣を、溶出液としてジクロロメタンおよびメタノールを用いる順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、３１７ｍｇのイソプロピル１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−（イソプロポキシメチル）ピラゾール−４−カルボキシレートを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３２２（Ｍ＋１）。
【００６４】
３．［１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−（イソプロポキシメチル）ピラゾール−４−イル］メタノール
窒素下で０℃に冷却したジエチルエーテル（４．９ｍＬ）中のイソプロピル１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−（イソプロポキシメチル）ピラゾール−４−カルボキシレート（３１６ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラヒドロフラン（１．２ｍＬ）中の１Ｍの水素化アルミニウムリチウムを加える。混合物を０℃にて１時間攪拌する。水（４６μＬ）を加え、５分間攪拌し、次いで１５％ＮａＯＨ水溶液（４６μＬ）および水（１３８μＬ）を連続して加える。固体を濾過し、溶媒を蒸発させて、２４１ｍｇの［１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−（イソプロポキシメチル）ピラゾール−４−イル］メタノールを得て、それをさらに精製せずに使用する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２６６（Ｍ＋１）。
【００６５】
４．１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−（イソプロポキシメチル）ピラゾール−４−カルバルデヒド
［１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−（イソプロポキシメチル）ピラゾール−４−イル］メタノール（２４１ｍｇ、０．９１ｍｍｏｌ）および酸化マンガン（ＩＶ）（７９１ｍｇ）の混合物を、室温にて一晩ジクロロメタン（５ｍＬ）中で攪拌する。その時間の後、反応混合物をセライトで濾過し、溶媒を蒸発させて、１９７ｍｇの標題化合物を得て、それをさらに精製せずに使用する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２６４（Ｍ＋１）。
【００６６】
調製例２６：１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−（メトキシメチル）ピラゾール−４−カルバルデヒド
【化２４】
2013510859.tif 000028
１．エチル１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−（メトキシメチル）ピラゾール−４−カルボキシレート
アセトン（２３ｍＬ）中の３−ブロモメチル−１−（３−フルオロ−ピリジン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステル（１．１３ｇ、３．４４ｍｍｏｌ）の溶液に、ヨウ化カリウム（２００．１ｍｇ）、炭酸カリウム（８６５．３３ｍｇ）およびメタノール（４．１８ｍＬ）を加える。その混合物を室温にて４８時間攪拌する。所望の化合物のメチルおよびエチルエステルを検出する。溶媒を蒸発させる。残渣をジクロロメタンで希釈し、水で洗浄する。有機層をデカントし、硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を蒸発させる。粗物質を、溶出液として酢酸エチルおよびヘキサンを用いる順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、メチルおよびエチルエステルの両方の５９９ｍｇの混合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２６６（Ｍ＋１）および２８０（Ｍ＋１）。
【００６７】
２．［１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−（メトキシメチル）ピラゾール−４−イル］メタノール
この化合物は、９３％の収率で、出発物質としてエチル１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−（メトキシメチル）ピラゾール−４−カルボキシレート（メチルエステルも含有する混合物中）を使用して、調製例２５の工程３（還元工程）に記載されるように実質的に調製する。［１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−（メトキシメチル）ピラゾール−４−イル］メタノールをさらに精製せずに使用する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２３８（Ｍ＋１）。
【００６８】
３．１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−（メトキシメチル）ピラゾール−４−カルバルデヒド
この化合物は、９１％の収率で、出発物質として［１−（３−フルオロ−ピリジン−２−イル）−３−メトキシメチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−メタノールを使用して、調製例２５の工程４（酸化工程）に記載されるように実質的に調製する。標題化合物をさらに精製せずに使用する。ＭＳ（ｍ／ｚ）２３６（Ｍ＋１）。
【００６９】
調製例２７：３−メチル−１−（３−モルホリノ−２−ピリジル）ピラゾール−４−カルバルデヒド
【化２５】
2013510859.tif 000029
１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−メチル−ピラゾール−４−カルバルデヒド（２３０ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）およびモルホリン（２ｍＬ、２２．９３ｍｍｏｌ）の混合物をマイクロ波照射下で加熱する（温度１６０℃、ランプ時間：２分、保持時間：１０分、効力：２５０Ｗ）。過剰のモルホリンを真空中で除去し、残渣をジクロロメタンで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液中で洗浄する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を真空中で蒸発させる。残渣を、溶出液としてヘキサン／酢酸エチル（酢酸エチル中に５０〜１００％）を用いる順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、７２％の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２７３（Ｍ＋１）。
【００７０】
調製例２８：２−ブロモ−３−（メトキシメチル）ピリジン
【化２６】
2013510859.tif 000030
１４０ｍＬのテトラヒドロフラン中の（２−ブロモピリジン−３−イル）メタノール（２０ｇ、１０６．３７ｍｍｏｌｅ）の溶液に、窒素雰囲気下０℃にて、鉱油中の６０％水素化ナトリウム（６．３８ｇ、１５５．５ｍｍｏｌ）を加える。溶液を０℃にて３０分間攪拌する。ヨウ化メチル（７．９５ｍＬ、１２７．６ｍｍｏｌ）を溶液に加え、混合物を室温にて一晩攪拌する。その混合物を水の添加によりクエンチし、粗物質を酢酸エチルで抽出する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を真空中で蒸発させて、２−ブロモ−３−（メトキシメチル）ピリジンを９８％の収率で得て、それをさらに精製せずに使用する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２０２（Ｍ＋１），２０４（Ｍ＋３）。
【００７１】
調製例２９〜３０からの化合物を、対応するヨウ化アルキル試薬を用いて調製例２８に記載されるように実質的に調製する。
【００７２】
【表３】
2013510859.tif 000031
【００７３】
調製例３１：２−ブロモ−３−（イソプロポキシメチル）−ピリジン
【化２７】
2013510859.tif 000032
１．２−ブロモ−３−（ブロモメチル）−ピリジン
２５ｍＬのシュレンク管に、２−ブロモ−３−ピリジンベンジルアルコール（１ｇ、５．３２ｍｍｏｌ）およびジクロロメタン（１５ｍＬ）を入れる。得られた溶液を、激しく磁気攪拌しながら塩水／氷浴中で０℃に冷却した。次いで三臭化リン（０．５５ｍＬ、５．８０ｍｍｏｌ）を滴下して加え、発熱を１０℃以下に制御する。厚いスラリーが生じ、添加後、浴を取り除き、スラリーを室温に加温する。次いで混合物を３時間、徐々に還流まで加熱し、次いで一晩室温にする。
【００７４】
事前に０℃に冷却した混合物に氷水を加え、次いで２Ｍの炭酸ナトリウム溶液を加えてｐＨを塩基性に調整する。有機層を分離し、水溶液を２回ジクロロメタン（２×１０ｍＬ）で洗浄する。全ての有機物を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、１．２ｇの２−ブロモ−３−ブロモメチル−ピリジンを得て、それをさらに精製せずに使用する。
【００７５】
２．２−ブロモ−３−（イソプロポキシメチル）−ピリジン
０℃にて、ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）中のイソプロピルアルコール（７．３１ｍＬ、９５．６５ｍｍｏｌ）の溶液に、水素化ナトリウム（３．６３ｇ、９０．８７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温にて３０分間攪拌する（この反応は特別な保護としてシールドを用いて実施する）。次いで、１０ｍＬのジメチルホルムアミド中の２−ブロモ−３−ブロモメチル−ピリジン（６ｇ、２３．９１ｍｍｏｌ）を、シリンジを介して加え、混合物を室温にて１時間攪拌する。水を加え、混合物を酢酸エチルで抽出し、ブラインおよび水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させる。粗物質を、溶出液として酢酸エチルおよびヘキサン（５〜２５％の酢酸エチルの勾配）を用いる順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、３．６７ｇの標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２３０，２３２（Ｍ＋１，Ｍ＋３）。
【００７６】
調製例３２：２−（２−ブロモ−３−ピリジル）アセトニトリル
【化２８】
2013510859.tif 000033
２−ブロモ−３−ブロモメチル−ピリジン（８４０ｍｇ、３．３５ｍｍｏｌ）およびシアン化ナトリウム（１８７．９９ｍｇ、３．６８ｍｍｏｌ）の混合物を攪拌し、水（１０ｍＬ）−エタノール（２ｍＬ）混合物中で１時間還流する。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を真空中で蒸発させて、８３％の標題化合物を得て、それをさらに精製せずに使用する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：１９７（Ｍ＋１）、１９９（Ｍ＋３）。
【００７７】
調製例３３：１−［３−（シクロプロポキシメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−カルバルデヒド
【化２９】
2013510859.tif 000034
１．エチル１−［３−（ヒドロキシメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−カルボキシレート
メタノール（２５ｍＬ）中の１−（３−ホルミル−ピリジン−２−イル）−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステル（１ｇ、３．９ｍｍｏｌ）の溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（２２０．２ｍｇ、５．８ｍｍｏｌ）を加える。混合物を室温にて２時間攪拌する。溶媒を除去し、粗物質を酢酸エチルに溶解し、飽和塩化アンモニウム水溶液で洗浄する。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させて、１ｇのエチル１−［３−（ヒドロキシメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−カルボキシレートを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２６２（Ｍ＋１）。
【００７８】
２．エチル３−メチル−１−［３−（ビニルオキシメチル）−２−ピリジル］ピラゾール−４−カルボキシレート
トリフルオロ酢酸パラジウム（ＩＩ）（５．１ｍｇ、１５．３μｍｏｌｅ）および４，７−ジフェニル−フェナントロリン（５．１ｍｇ、１５．３μｍｏｌｅ）を、ｎ−ブチルビニルエーテル（６．１ｍＬ、６１．２ｍｍｏｌ）および１−（３−ヒドロキシメチル−ピリジン−２−イル）−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステル（８００ｍｇ、３．１ｍｍｏｌ）に溶解し、数滴のトリエチルアミンを加える。フラスコを密閉し、７５℃にて２４時間攪拌する。次いで混合物を２４℃に冷却し、セライトパッドで濾過する。溶媒を減圧下で除去し、残渣を、溶出液としてヘキサンおよび酢酸エチル（酢酸中に５〜２０％）を用いる順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、６０５ｍｇのエチル３−メチル−１−［３−（ビニルオキシメチル）−２−ピリジル］ピラゾール−４−カルボキシレートを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２８８（Ｍ＋１）。
【００７９】
３．エチル１−［３−（シクロプロポキシメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−カルボキシレート
ヘキサン中の１．０Ｍジエチル亜鉛（３６５．７μＬ、３．５ｍｍｏｌ）を窒素下でジクロロメタン（０．９ｍＬ）に加える。溶液を０℃に冷却し、ジクロロメタン（０．９ｍＬ）中のトリフルオロ酢酸（２６８．４μＬ、３．５ｍｍｏｌ）の溶液を非常にゆっくり加える。２０分後、ジクロロメタン（０．９ｍＬ）中のジヨードメタン（２８６．１μＬ、３．５ｍｍｏｌ）の溶液を加える。さらに２０分後、ジクロロメタン（０．９ｍＬ）中の３−メチル−１−（３−ビニルオキシメチル−ピリジン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステル（５１０ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）の溶液を加える。混合物を室温にて一晩攪拌する。５％ＨＣｌを加え、水層を酢酸エチルで抽出する。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で除去する。粗物質を、溶出液としてヘキサンおよび酢酸エチル（酢酸エチル中に５〜２０％）を用いる順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、３１０ｍｇのエチル１−［３−（シクロプロポキシメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−カルボキシレートを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３０２（Ｍ＋１）。
【００８０】
４．１−［３−（シクロプロポキシメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−カルバルデヒド
０℃にて窒素下で、テトラヒドロフラン（０．１５Ｍ）中の１−（３−シクロプロポキシメチルピリジン−２−イル）−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステル（４１０ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラヒドロフラン（１．２当量）中の１．０Ｍ水素化アルミニウムリチウムを加える。混合物を室温にて１時間攪拌し、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、水層を酢酸エチルで抽出する。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で除去する。粗物質をジクロロメタン（１４ｍＬ）に溶解し、酸化マンガン（ＩＶ）（１．２ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）を加える。混合物を室温にて一晩攪拌し、次いでセライトパッドで濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させる。粗物質をシリカゲルパッドに通す（溶出液：酢酸エチルおよびジクロロメタン）。溶媒を減圧下で除去して、９０ｍｇの標題生成物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２５８（Ｍ＋１）。
【００８１】
調製例３４：１−［３−（メトキシメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−カルバルデヒド
【化３０】
2013510859.tif 000035
１．エチル１−［３−（メトキシメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−カルボキシレート
この化合物は、８３％の収率でエチル３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキシレートおよび２−ブロモ−３−（メトキシメチル）ピリジンを用いることによって調製例１２に記載されるように実質的に調製する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２７６（Ｍ＋１）。
【００８２】
２．［１−［３−（メトキシメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−イル］メタノール
この化合物は、８８％の収率でエチル１−［３−（メトキシメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−カルボキシレートを用いることによって調製例２４（工程２）に記載されるように実質的に調製する。
【００８３】
３．１−［３−（メトキシメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−カルバルデヒド
［１−［３−（メトキシメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−イル］メタノール（２．２ｇ、９．４ｍｍｏｌ）および酸化マンガン（ＩＶ）（１９ｇ、１８８．８ｍｍｏｌ）の混合物の混合物を室温にて一晩、ジクロロメタン（２０ｍＬ）中で攪拌する。反応混合物をセライトで濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させて１．８ｇの標題化合物を得て、それをさらに精製せずに使用する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２３２（Ｍ＋１）。
【００８４】
調製例３５：２−ブロモ−３−（イミダゾール−１−イルメチル）ピリジン
【化３１】
2013510859.tif 000036
室温にて、エタノール（４６．９７ｍＬ）中の（２−ブロモ−３−ピリジル）メチルメタンスルホネート（２．５ｇ、９．３９ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸カリウム（２．６２ｇ）および１Ｈ−イミダゾール（１．３１ｇ）を加える。混合物を５０℃にて攪拌する。厚い種類のエマルションが形成し、１０ｍＬのエタノールを加え、その種類のエマルションを５０℃にて一晩攪拌する。全ての固体が溶解するまで水を加える。次いで、それを減圧下で濃縮して、残渣を酢酸エチルで希釈し、炭酸水素ナトリウム（飽和水溶液）で洗浄する。有機層をデカントし、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で溶媒を蒸発させる。粗物質を、溶出液としてジクロロメタンおよびメタノール（９８／２〜９０／１０）を用いる順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、１．４２ｇの標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２３８，２４０（Ｍ＋１，Ｍ＋３）。
【００８５】
調製例３６〜４０の化合物を、対応する窒素複素環から調製例３５に記載されるように実質的に調製する。
【００８６】
【表４】
2013510859.tif 000037
【００８７】
調製例４１：２−［（２−ブロモ−３−ピリジル）オキシ］アセトアミド
【化３２】
2013510859.tif 000038
０℃にて、テトラヒドロフラン（１５ｍＬ）中の２−ブロモ−３−ピリジンノール（１．５ｇ、８．４９ｍｍｏｌ）の溶液に、鉱油（５０９．４４ｍｇ、１２．７４ｍｍｏｌ）中の６０％水素化ナトリウムを加え、混合物をその温度にて３０分間攪拌する。次いで、アセトアミド、２−クロロ−（１６．９８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温にてウィークエンドにわたって攪拌する。混合物を水でクエンチし、酢酸エチルで抽出する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を真空中で蒸発させて、７５％の収率で標題化合物を得る。その化合物をさらに精製せずに使用する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２３１（Ｍ＋１），２３３（Ｍ＋３）。
【００８８】
調製例４２：２−ブロモ−３−（シクロプロピルメトキシ）ピリジン
【化３３】
2013510859.tif 000039
ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中の２−ブロモ−３−ピリジノール（５００ｍｇ、２．８３ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃にて、鉱油中の６０％水素化ナトリウム（１６９．８１ｍｇ、４．２５ｍｍｏｌ）を加える。混合物をその温度で１５分間攪拌し、ブロモメチルシクロプロパン（３２９．６６μＬ、３．４０ｍｍｏｌ）を加える。次いで反応物を室温にて１時間攪拌し、水でクエンチし、酢酸エチルで抽出する。有機層を分離し、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で溶媒を蒸発させる。粗物質を短いシリカゲルプラグに通し、化合物をジクロロメタンで溶出して、２３％の標題化合物を得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２２８（Ｍ＋１），２３０（Ｍ＋３）。
【００８９】
調製例４３：エチル１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−４−ホルミルピラゾール−３−カルボキシレート
【化３４】
2013510859.tif 000040
１．エチル４−ホルミル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート
１００ｍＬの丸底フラスコに、セミカルバジド塩酸塩（２ｇ、１７．９３ｍｍｏｌ）、ピルビン酸エチル（１１．８ｍＬ）およびエタン酸ナトリウム（２．９７ｇ）を入れる。次いで水（９ｍＬ）を加える。混合物を室温にて９０分間攪拌し、次いでそれを濾過し、固体を十分な水で洗浄する。白色の固体をオーブン（４０℃）中で一晩真空下で乾燥させる。２．６６ｇのエチル−２−（カルバモイルヒドラゾノ）−プロパノエートを純粋に得る。塩化ホスホリル（３．２８ｍＬ）を０℃にてジメチルホルムアミド（７．１３ｍＬ）に滴下して加える。冷却浴を取り除いて室温に到達させる。次いで、混合物を４０℃に加熱し、以前に得たエチル−２−（カルバモイルヒドラゾノ）プロパノエート（２．６６ｇ、１５．３６ｍｍｏｌ）を、１５〜２０分にわたって数回に分けて加える（添加の間にガスが発生する）。内部温度が５５℃になると、加熱浴を取り除くので、内部温度は６０〜７０℃の範囲を維持する。次いで、混合物を８０℃に加熱する。反応が８０℃で安定すると、ガス発生はほとんど観測されない。得られた懸濁液を８０℃にて２時間攪拌する。反応混合物を氷／水（３０ｍＬ）混合物に注ぎ、攪拌して懸濁液を得る。ｐＨが１０に到達するまで、５０％水酸化ナトリウム水溶液を滴下して加える。溶液を５０℃にて５分間攪拌する。次いで溶液を氷／水浴で冷却し、ｐＨ７になるまで３５％塩酸水溶液を加える。混合物を酢酸エチルで抽出する。有機層をデカントし、硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で蒸発させる。残渣をヘキサンおよび数滴のジクロロメタンで粉砕して、１．６ｇのエチル４−ホルミル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレートを得て、それをさらに精製せずに次の工程に使用する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：１６９（Ｍ＋１）。
【００９０】
２．エチル１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−４−ホルミルピラゾール−３−カルボキシレート
ジメチルホルムアミド（８ｍＬ）中のエチル４−ホルミル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート（１．６ｇ、９．５２ｍｍｏｌ）、２，３−ジフルオロピリジン（１．２０ｇ）および炭酸カリウム（１．９７ｇ）の混合物を加熱し、１００℃にて１．５時間攪拌する。次いで、反応混合物を室温にて一晩攪拌する。水を加え、有機層を酢酸エチルで抽出し、デカントし、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で溶媒を蒸発させる。粗物質を、酢酸エチルおよびヘキサンを用いる順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、７１１ｍｇの標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２６４（Ｍ＋１）。
【００９１】
調製例４４：３−メチル−１−（３−（テトラヒドロフラン−２−イル）ピリジン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド
【化３５】
2013510859.tif 000041
１．３−（２，５−ジヒドロフラン−２−イル）−２−フルオロピリジン
乾燥ジメチルホルムアミド（１．８ｍＬ）中の酢酸カリウム（４４０ｍｇ、４．５ｍｍｏｌ）、テトラブチルアンモニウムブロミド（１．４ｇ、４．５ｍｍｏｌ）および４Ａモレキュラーシーブを含有するスクリューキャップ試験管に、窒素下で、２−フルオロ−３−ヨードピリジン（４００ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）、２，３−ジヒドロフラン（１．４ｍＬ、１８ｍｍｏｌ）および酢酸パラジウム（２０ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）を加える。反応管を迅速に密閉し、室温にて一晩攪拌する。混合物をジエチルエーテルで希釈し、混合物をセライトで濾過する。濾液を水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で溶媒を蒸発させる。得られた残渣を、ヘキサン：アセトン（アセトン中に５〜３０％の勾配）で溶出する順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーを用いるシリカゲルにより精製して、１７０ｍｇの３−（２，５−ジヒドロフラン−２−イル）−２−フルオロピリジンを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：１６６（Ｍ＋１）。
【００９２】
２．２−フルオロ−３−（テトラヒドロフラン−２−イル）ピリジン
メタノール（３．１ｍＬ）中の３−（２，５−ジヒドロフラン−２−イル）−２−フルオロピリジン（１７０ｍｇ、１ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃを含有する丸底フラスコを、真空下で排気して、バルーンを用いて水素を充填する。反応物を室温にて一晩攪拌し、セライトで濾過する。溶媒を真空中で蒸発させて、１４８ｍｇの２−フルオロ−３−（テトラヒドロ−２−イル）ピリジンを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：１６８（Ｍ＋１）。
【００９３】
３．３−メチル−１−（３−（テトラヒドロフラン−２−イル）ピリジン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド
ジメチルホルムアミド（２．２ｍＬ）中の２−フルオロ−３−（テトラヒドロフラン−２−イル）ピリジン（１４８ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）含有するスクリューキャップ試験管に、３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド（８１ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１５２ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を加える。反応管を迅速に密閉し（注意：起こり得る圧力の増大；安全なシールドを使用すること）、１１０℃にて１８時間、磁気攪拌器を用いて予熱した油浴中で攪拌する。混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で溶媒を蒸発させる。得られた残渣を、ヘキサン：アセトン（アセトン中の５〜２０％の勾配）で順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーを用いてシリカゲルにより精製して、１１６ｍｇの標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２５８（Ｍ＋１）。
【００９４】
調製例４５：３−（２−ブロモ−ピリド−３−イル）イソオキサゾール
【化３６】
2013510859.tif 000042
１．２−ブロモピリジン−３−カルバルデヒドオキシム
エタノール（２５ｍＬ）中の２−ブロモピリジン−３−カルバルデヒド（２．０４ｇ）の溶液に、ヒドロキシルアミン塩酸塩（９４８ｍｇ、１３．１６ｍｍｏｌ）およびエタン酸ナトリウム（１．０９ｇ、１３．１６ｍｍｏｌ）を加える。混合物を室温にて一晩攪拌する。溶媒を減圧下で蒸発させて、残渣をジクロロメタンと水との間に分配する。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させて、２ｇの２−ブロモピリジン−３−カルバルデヒドオキシムを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２０１／２０３（Ｍ＋１／Ｍ＋３）。
【００９５】
２．［３−（２−ブロモ−３−ピリジル）イソオキサゾール−５−イル］−トリメチル−シラン
０℃にて、ジクロロメタン（３．９８ｍＬ）中の２−ブロモピリジン−３−カルバルデヒドオキシム（４００ｍｇ、１．９９ｍｍｏｌ）の攪拌した懸濁液に、ピリジン（２０１．１３μｌ、２．４９ｍｍｏｌ）、続いてＮ−クロロスクシンイミド（３３７．１９ｍｇ、２．４９ｍｍｏｌ）を数回に分けて加える。次いで、トリメチルシリル）アセチレン（３５０．６０μｌ、２．４９ｍｍｏｌ）、続いてトリエチルアミン（３４６．６８μＬ、２．４９ｍｍｏｌ）を加える。混合物を０℃から室温で攪拌する。２時間後、十分なピリジン（３２１．８１μＬ、３．９８ｍｍｏｌ）およびＮ−クロロスクシンイミド（５３９．５１ｍｇ、３．９８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温にて１６時間攪拌する。次いで反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチする。層を分離し、有機物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、［３−（２−ブロモ−３−ピリジル）イソオキサゾール−５−イル］−トリメチル−シランを定量的収率で得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２９７／２９９（Ｍ＋１／Ｍ＋３）。
【００９６】
３．３−（２−ブロモ−３−ピリジル）イソオキサゾール
メタノール（１８ｍＬ）中の［３−（２−ブロモ−３−ピリジル）イソオキサゾール−５−イル］−トリメチル−シラン（６２０ｍｇ、２．０９ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸カリウム（２９．１２ｍｇ、２０８．５９μｍｏｌｅ）を一度に加える。混合物を室温にて２４時間攪拌する。溶媒を真空中で除去する。粗物質を酢酸エチルと飽和塩化アンモニウム水溶液との間に分配する。有機物を水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。粗物質を、溶出液として６６／３３〜５０／５０のヘキサン／酢酸エチルを用いる順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、１４０ｍｇの標題化合物を白色の固体として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２２５／２２７（Ｍ＋１／Ｍ＋３）。
【００９７】
調製例４６：１−（３−クロロ−２−ピリジル）−３−メチル−ピラゾール−４−カルバルデヒド
【化３７】
2013510859.tif 000043
乾燥ジメチルホルムアミド（１５ｍＬ）中の３−メチル−ピラゾール−４−カルバルデヒド（０．５ｇ、４．５ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸カリウム（２．５ｇ、１８ｍｍｏｌ）を室温にて加える。反応混合物を４０℃にて３０分間攪拌し、次いで１−フルオロ−２−クロロピリジン（０．７７ｇ、６ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を７０℃にて１６時間攪拌する。完了後、反応混合物を室温に冷却し、水で希釈し、次いで酢酸エチルで抽出する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。粗物質を、ヘキサン／酢酸エチル（７５：２５、６５：３５）で溶出するシリカゲル上でのクロマトグラフィーにより精製して、０．５２５ｇ（５２％）の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２２２（Ｍ＋１）。
【００９８】
調製例４７：１−（３−シクロプロピル−２−ピリジル）−３−メチル−ピラゾール−４−カルバルデヒド
【化３８】
2013510859.tif 000044
１．１−（３−ブロモ−ピリジン−２−イル）−３−メチル−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステル
乾燥ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）中の３−メチル−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステル（２．０ｇ、１３  ｍｍｏｌ）の溶液に、室温にて炭酸カリウム（７．２ｇ、５２ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を４０℃にて３０分間攪拌し、次いで１−フルオロ−２−ブロモピリジン（３．０ｇ、１７ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を７０℃にて４時間攪拌する。反応混合物を室温に冷却し、水で希釈し、次いで酢酸エチルで抽出する。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。粗混合物を、ヘキサン／酢酸エチル（８５：１５、８０：２０）で溶出するシリカゲル上でのクロマトグラフィーにより精製して、３．２ｇ（７９％）の１−（３−ブロモ−ピリジン−２−イル）−３−メチル−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステルを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３１２（Ｍ＋３），３１０（Ｍ＋１）。
【００９９】
２．１−（３−シクロプロピル−ピリジン−２−イル）−３−メチル−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステル
１−（３−ブロモ−ピリジン−２−イル）−３−メチル−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステル（１．５ｇ、５．５ｍｍｏｌ）、リン酸カリウム（４．０ｇ、１９．２ｍｍｏｌ）、シクロプロピルボロン酸（０．７ｇ、８．２ｍｍｏｌ）およびトルエン／水（２：１、１５ｍＬ）の混合物を窒素で脱気し、トリシクロヘキシルホスフェン（０．１５３ｇ、０．５４ｍｍｏｌ）および酢酸パラジウム（０．０６１ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を加える。混合物を窒素で再び脱気し、反応容器を密閉し、１００℃にて１６時間加熱する。反応混合物を濃縮し、水で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。粗混合物を、ヘキサン／酢酸エチル（８５：１５）で溶出するシリカゲル上でのクロマトグラフィーにより精製して、１．６ｇ（９３％）の１−（３−シクロプロピル−ピリジン−２−イル）−３−メチル−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステルを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２７２（Ｍ＋１）。
【０１００】
３．［１−（３−シクロプロピル−ピリジン−２−イル）−３−メチル−ピラゾール−４−イル］−メタノール
乾燥テトラヒドロフラン（２５ｍＬ）中の水素化アルミニウムリチウム（０．４４ｇ、１１．７ｍｍｏｌ）の攪拌した懸濁液に、−７８℃にて窒素雰囲気下で、乾燥テトラヒドロフラン（５ｍＬ）中の１−（３−ブロモ−ピリジン−２−イル）−３−メチル−ピラゾール−４−カルボン酸エチルエステル（１．６ｇ、５．８ｍｍｏｌ）の溶液を加える。添加の完了後、反応混合物を室温まで加温し、次いで一晩攪拌する。反応混合物を１Ｎ水酸化ナトリウムでクエンチし、次いでセライトで濾過する。有機層を分離し、水層を酢酸エチルで抽出する。合わせた有機層を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、１．１ｇ（８４％）の［１−（３−シクロプロピル−ピリジン−２−イル）−３−メチル−ピラゾール−４−イル］−メタノールを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２３０（Ｍ＋１）。
【０１０１】
４．１−（３−シクロプロピル−２−ピリジル）−３−メチル−ピラゾール−４−カルバルデヒド
乾燥ジクロロメタン（１５ｍＬ）中の［１−（３−シクロプロピル−ピリジン−２−イル）−３−メチル−ピラゾール−４−イル］−メタノール（１．１ｇ、５．０ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素下で、クロロクロム酸ピリジニウム（１．２ｇ、５．５ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を室温にて２時間攪拌し、次いでセライトで濾過する。濾液を減圧下で濃縮する。粗混合物を、ヘキサン／酢酸エチル（９０：１０、８０：２０）で溶出するシリカゲル上で精製して、０．２ｇ（２０％）の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２２８（Ｍ＋１）。
【０１０２】
調製例４８：４−［（２−ブロモ−３−ピリジル）メチル］モルホリン−３−オン
【化３９】
2013510859.tif 000045
ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中の２−ブロモ−３−ブロモメチル−ピリジン（０．６８ｇ、２．３６ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃にて、水素化ナトリウム（０．１１ｇ、６０％懸濁液、２．８２ｍｍｏｌ）、モルホリン−３−オン（０．２０ｇ、１．９７ｍｍｏｌ）およびテトラブチルアンモニウムヨージド（触媒）を加える。混合物を室温にて１６時間攪拌する。完了後、反応混合物を酢酸エチル（２５ｍＬ）と水（２５ｍＬ）との間に分配する。水層を酢酸エチル（２×２５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮する。粗物質を、ヘキサン／酢酸エチル（５５：４５）で溶出するシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、０．３５ｇ（６６％）の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２７１／２７３（Ｍ＋１，Ｍ＋３）。
【０１０３】
調製例４９〜５０の化合物を、対応するラクタム試薬から調製例４８に実質的に記載されるように調製する。
【０１０４】
【表５】
2013510859.tif 000046
【０１０５】
調製例５１：エチル１−（３−クロロ−２−ピリジル）−４−ホルミルピラゾール−３−カルボキシレート
【化４０】
2013510859.tif 000047
ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中のエチル４−ホルミル−ピラゾール−３−カルボキシレート（１．７０ｇ、１０．１ｍｍｏｌ）および３−クロロ−２−フルオロピリジン（１．９９ｇ、１５．１ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸カリウム（２．８０ｇ、２０．２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１００℃にて１６時間攪拌する。完了後、反応混合物を水（２５ｍＬ）と酢酸エチル（２５ｍＬ）との間に分配する。水層を酢酸エチル（３×２５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮し、ヘキサン／酢酸エチル（５０：５０）で溶出するシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、１．５ｇ（５４％）の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２８０（Ｍ＋１）。
【０１０６】
調製例５２：エチル１−（３−メチル−２−ピリジル）−４−ホルミル−ピラゾール−３−カルボキシレート
【化４１】
2013510859.tif 000048
ジオキサン（１８ｍＬ）および水（２ｍＬ）中のエチル１−（３−クロロ−２−ピリジル）−４−ホルミル−ピラゾール−３−カルボキシレート（１．０ｇ、３．５ｍｍｏｌ）、トリメチルボロキシン（０．４４ｇ、３．５０ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１．４ｇ、１０．１ｍｍｏｌ）の混合物を、１０分間、窒素ガスで脱気し、次いでパラジウムトリフェニルホスフィン（０．４０ｇ、０．３ｍｍｏｌ）を加え、１１０℃にて１６時間攪拌する。完了後、反応混合物を、ジクロロメタン（５０ｍＬ）と水（２５ｍＬ）との間に分配する。水層をジクロロメタン（２×２５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮する。粗混合物を、ヘキサン／酢酸エチル（７０：３０）で溶出するシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、０．１２ｇ（１３％）の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：２６０（Ｍ＋１）。
【実施例】
【０１０７】
実施例１：２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メタノール（Ｌ）−酒石酸塩
【化４２】
2013510859.tif 000049
０℃にて、ジクロロメタン（１２５ｍＬ）中の２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］ピリジン−３−カルバルデヒド（１２．５０ｇ、２６．１０ｍｍｏｌ）の溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（０．３９５ｇ、１０．４４ｍｍｏｌ）およびメタノール（３７．５０ｍＬ）を加える。氷浴を取り除き、反応物を室温にて３０分間攪拌する。水（５０ｍＬ）を加え、混合物を半分の体積まで濃縮し、白色の粘性のある固体沈殿物を得る。ジクロロメタン（１００ｍＬ）を加え、二相混合物を分離する。有機層を水（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、半分の体積（約１００ｍＬ）まで濃縮する。メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１００ｍＬ）を加え、溶液を濃縮して沈殿物を得る。固体を濾過し、真空下で乾燥させて、１２ｇの［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メタノールを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４８１（Ｍ＋１）。
【０１０８】
標題化合物（０．４８ｇ、１ｍｍｏｌ）の遊離塩基を３ｍＬのメタノールに溶解し、メタノール中の（Ｌ）−酒石酸（０．１５ｇ、１ｍｍｏｌ）の溶液を加える。混合物を１０分間攪拌する。溶媒を蒸発させ、残渣を真空中で一晩乾燥させて、［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メタノール（Ｌ）−酒石酸塩を定量的収率で得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４８１（Ｍ＋１）。
【０１０９】
実施例２：２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［［１−［３−（４Ｈ−イミダゾール−２−イル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−イル］メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］
【化４３】
2013510859.tif 000050
４０％グリオキサル水溶液（４．６９ｍＬ、４０．７１ｍｍｏｌ）およびメタノール中の２Ｎアンモニア（５４．２９ｍＬ、１０８．５７ｍｍｏｌ）を、メタノール（１０ｍＬ）中の２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］ピリジン−３−カルバルデヒド（６．５０ｇ、１３．５７ｍｍｏｌ）の懸濁液に加える。反応混合物を０℃にて５分間、次いで４０℃にて１時間攪拌する。ジクロロメタン（１０ｍＬ）を懸濁液に加え、ほとんど全ての物質を溶解する。混合物を４時間攪拌し、淡褐色の溶液を得る。その溶液を４０℃にて８時間攪拌する。４０％グリオキサリル水溶液（２．３４ｍＬ、２０．３６ｍｍｏｌ）およびメタノール中の２Ｎアンモニア（２７．１４ｍＬ、５４．２９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を４０℃にて１５時間攪拌する。反応混合物を約１００ｍＬに濃縮し、氷／水（４００ｍＬ）に注ぎ、ベージュ色の固体沈殿物を形成させる。固体を濾過し、水で洗浄し、真空下で乾燥させる（７ｇ）。その固体を、同じ方法で実質的に調製した他の粗物質と合わせる（１０ｇ）。合わせた固体をジクロロメタンに溶解し、ジクロロメタン／メタノール（９６／４）で溶出するシリカゲルパッドで濾過する。生成物を含有する画分を合わせ、濃縮して淡黄色の固体（１１ｇ）を得る。固体を還流下で１０％ヘキサン／ジクロロメタンで抽出し、濾液を濃縮する。固体をさらに、メタノール／ジクロロメタン混合物中の２Ｎ水酸化アンモニウムで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、６．５ｇの標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５１８（Ｍ＋１）。
【０１１０】
実施例３：２−フルオロ−１’−［［１−［３−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−イル］メチル］スピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］
【化４４】
2013510859.tif 000051
化合物を、２−［４−［（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］ピリジン−３−カルバルデヒドを用いることによって実施例２に記載されるように実質的に調製する。残渣を、順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、３２％の標題化合物を得る：質量スペクトル（ｍ／ｚ）：４６５（Ｍ＋１）。
【０１１１】
実施例４：５−（２−（４−（（２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イル）メチル）−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピリジン−３−イル）オキサゾール
【化４５】
2013510859.tif 000052
メタノール（２．５ｍＬ）中の２−（４−（（２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イル）メチル）−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ニコチンアルデヒド（０．１２０ｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を含有するスクリューキャップ試験管に、窒素下で、炭酸カリウム（０．１０４ｇ、０．７５ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホニルメチルイソシアニド（０．０５４ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を加える。反応管を迅速に密閉し（注意：起こり得る圧力の増大；安全なシールドを使用すること）、６５℃にて３時間、磁気攪拌器を用いて予熱した油浴中で攪拌する。混合物をメタノールで希釈し、２ｇのＳＣＸカートリッジを用いて精製した。溶媒を真空中で蒸発させる。得られた残渣を、ヘキサン／エタノール（５〜３０％）で溶出する順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、０．０９３ｇの標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５１８（Ｍ＋１）。
【０１１２】
実施例５：２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［［１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−メチル−ピラゾール−４−イル］メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］（Ｌ）−酒石酸塩
【化４６】
2013510859.tif 000053
１，２−ジクロロエタン（１２０ｍＬ）中の２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］（１９．９９ｇ、６４．３３ｍｍｏｌ）の溶液に、１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−メチル−ピラゾール−４−カルバルデヒド（１２ｇ、５８．４８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温にて１５分間攪拌する。次いで、粉末のナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（１８．５９ｇ、８７．７２ｍｍｏｌ）を加え（内部温度２５〜３５℃）、得られた懸濁液を室温にて１５時間攪拌する。氷混合物中の飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２００ｍＬ）を攪拌しながら数回で加える。層が分離する。水相をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（３０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機層を水（５０ｍＬ）および５０％ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して、厚い油を得て、それを、溶出液としてジクロロメタン／メタノール混合物を用いるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、１８ｇの厚い油を得、それを、ヘキサンおよび１０％ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル／ヘキサンで粉砕して、１６．５ｇの２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［［１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−メチル−ピラゾール−４−イル］メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４６９（Ｍ＋１）。酒石酸塩を実施例１に記載されるように実質的に調製する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４６９（Ｍ＋１）。
【０１１３】
実施例６〜１５の化合物を、対応するアルデヒドを用いて実施例５に記載されるように実質的に調製する。
【０１１４】
【表６−１】
2013510859.tif 000054
【表６−２】
2013510859.tif 000055
【０１１５】
実施例１６：２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［［３−メチル−１−（３−テトラヒドロフラン−２−イル−２−ピリジル）ピラゾール−４−イル］メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］
【化４７】
2013510859.tif 000056
１，２−ジクロロエタン（２．６ｍＬ）中の３−メチル−１−（３−（テトラヒドロフラン−２−イル）ピリジン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド（１９２ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）、２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン（２０９ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）および酢酸（４３μＬ、０．７５ｍｍｏｌ）の混合物を含有するスクリューキャップ試験管に、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（２３８ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を加える。反応管を密閉し、磁気攪拌器を用いて室温にて１８時間攪拌する。混合物をメタノールで希釈し、１０ｇのＳＣＸカートリッジを用いて精製し、溶媒を真空中で蒸発させる。得られた残渣をさらに、ヘキサン：アセトン（アセトン中に５〜３０％の勾配）で溶出する順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、１１３ｍｇの標題化合物をラセミ混合物として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５２１（Ｍ＋１）。
【０１１６】
鏡像異性体分割を、固定相としてＣｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈ（登録商標）（Ｃｈｉｒａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｗｅｓｔ  Ｃｈｅｓｔｅｒ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ，ＵＳＡ）、および移動相として二酸化炭素／メタノール／ジメチルエチルアミン（０．２％）を用いるＳＣＦ（超臨界流体クロマトグラフィー）条件下で実施する。第１の溶液が所望の鏡像異性体である。
【０１１７】
実施例１７：２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［［１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−（イソプロポキシメチル）ピラゾール−４−イル］メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］（Ｌ）−酒石酸塩
【化４８】
2013510859.tif 000057
ジクロロメタン（２．４ｍＬ）中の２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］（１７０ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）の溶液に、１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−（イソプロポキシメチル）ピラゾール−４−カルバルデヒド（１９２ｍｇ）を加える。混合物を室温にて１０分攪拌する。次いで、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（２６８．３ｍｇ）を加え、反応物を室温にて一晩攪拌する。混合物をジクロロメタンで希釈し、炭酸水素ナトリウム（飽和水溶液）でゆっくりクエンチする。次いで有機相を十分なジクロロメタンで抽出し、デカントし、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で溶媒を蒸発させる。残渣を、逆相ＨＰＬＣにより精製して、６７．９ｍｇの２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［［１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−３−（イソプロポキシメチル）ピラゾール−４−イル］メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５２７（Ｍ＋１）。
酒石酸塩を実施例１に記載されるように実質的に調製する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５２７（Ｍ＋１）。
【０１１８】
実施例１８：２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［［１−［３−（メトキシメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−イル］メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］  （Ｌ）−酒石酸塩
【化４９】
2013510859.tif 000058
スクリューキャップ試験管に、ヨウ化銅（Ｉ）（１．１５ｇ、６．０２ｍｍｏｌ）、２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］（１５ｇ、４０．１２ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１１．７６ｇ、８４．２６ｍｍｏｌ）、１５ｍＬのトルエン（事前に２０分間窒素で泡立てる）および攪拌バーを加える。反応混合物をさらに１０分間窒素で泡立て、次いで２−ブロモ−３−メトキシメチル−ピリジン（１０．５４ｇ、５２．１６ｍｍｏｌ）、およびｔｒａｎｓ−Ｎ，Ｎ’−ジメチルシクロヘキサン−１，２−ジアミン（１．９０ｍＬ、１２．０４ｍｍｏｌ）を加える。反応管を迅速に密閉し（注意：起こり得る圧力の増大；安全なシールドを使用すること）、室温で５分間攪拌し、予熱した油浴中に１１５℃にて２４時間浸す。サンプルを室温まで冷却し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過する。溶媒を真空中で蒸発させる。残渣を、ヘキサン／酢酸エチル（３０〜７０％）を用いる順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製する。所望の画分を回収し、蒸発させる。一部の純粋でない画分（＜２ｇ）を、溶出液としてヘキサン／酢酸エチル（酢酸エチル中に２０〜６０％）を用いて順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより再純化する。最終化合物を含有する全ての画分を合わせ、真空中で蒸発乾固する。残渣をジクロロメタンに溶解し、１０％水酸化アンモニウム水溶液で洗浄して、残りの銅を取り除く。有機溶媒を蒸発させ、化合物を一晩乾燥させて、１３ｇの２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［［１−［３−（メトキシメチル）−２−ピリジル］−３−メチル−ピラゾール−４−イル］メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４９５（Ｍ＋１）。
【０１１９】
酒石酸塩を実施例１に記載されるように実質的に調製する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４９５（Ｍ＋１）。
【０１２０】
実施例１９〜３５の化合物を、対応する２−ブロモ−３−置換ピリジン（実施例１９〜３２および３４〜３５）または２−ヨード−３−置換ピリジン（実施例３３）から実施例１８に記載されるように実質的に調製する。
【０１２１】
【表７−１】
2013510859.tif 000059
【表７−２】
2013510859.tif 000060
【表７−３】
2013510859.tif 000061
【表７−４】
2013510859.tif 000062
【表７−５】
2013510859.tif 000063
【０１２２】
実施例３６：２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［［１−（３−メトキシ−２−ピリジル）−３−メチル−ピラゾール−４−イル］メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］
【化５０】
2013510859.tif 000064
スクリューキャップ試験管に、ヨウ化銅（Ｉ）（２３．７４ｍｇ、０．１２５ｍｍｏｌ）、２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］（２３３，００ｍｇ、０．６２３ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１８２．７１ｍｇ、１．３１ｍｍｏｌ）、トルエン（２ｍＬ）（事前に２０分間窒素で泡立てる）および攪拌バーを加える。反応混合物を２０分間窒素で泡立て、次いで２−ヨード−３−メトキシピリジン（３０２．０１ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ）およびｔｒａｎｓ−Ｎ，Ｎ’−ジメチルシクロヘキサン−１，２−ジアミン（３９．３１μＬ、０．２５ｍｍｏｌ）を加える。反応管を迅速に密閉し（注意：起こり得る圧力の増大；安全なシールドを使用すること）、磁気攪拌器を用いて１１０℃にて２４時間予熱した油浴中に浸す。次いで、混合物をＳＣＸカラム（２５ｇ）に注ぎ、メタノール、次いでメタノール中の２Ｎアンモニア溶液で溶出する。塩基性画分を濃縮し、得られた残渣を、塩基性ＨＰＬＣにより精製して、１６２ｍｇの標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４８１（Ｍ＋１）。
【０１２３】
調製例３７：２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［［１−（３−イソオキサゾール−３−イル−２−ピリジル）−３−メチル−ピラゾール−４−イル］メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］
【化５１】
2013510859.tif 000065
この化合物を、出発物質として２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］および３−（２−ブロモ−ピリド−３−イル）イソオキサゾールを用いることによって実施例３６に記載されるように実質的に調製する。残渣を、順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィー（酢酸エチルを溶出液として使用する）により精製して、４５％の標題化合物を得る：質量スペクトル（ｍ／ｚ）：５１８（Ｍ＋１）。
【０１２４】
実施例３８：２−（２−（４−（（２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イル）メチル）−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピリジン−３−イル）プロパン−２−オール
【化５２】
2013510859.tif 000066
乾燥ジメチルホルムアミド（３．２ｍＬ）中の２−（２−ブロモ−３−ピリジル）プロパン−２−オール（５２０ｍｇ、２．４１ｍｍｏｌ）を含有するスクリューキャップ試験管に、窒素下で、４−（（２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イル）メチル）−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール（６００ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）、酸化銅（Ｉ）（２３ｍｇ、１６０μｍｏｌｅ）、（Ｒ，Ｒ）−（−）−Ｎ，Ｎ’−ジメチル−１，２−シクロヘキサンジアミン（６８ｍｇ、４８０μｍｏｌｅ）および炭酸セシウム（１０４０ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ）を加える。反応管を迅速に密閉し（注意：起こり得る圧力の増大；安全なシールドを使用すること）、１１０℃にて１６時間、磁気攪拌器を用いて予熱した油浴中で攪拌する。混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させる。得られた残渣を、ヘキサン：エタノール（エタノール中の２〜１５％の勾配）で溶出する順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーを用いてシリカゲルにより精製して、３１０ｍｇの標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５０９（Ｍ＋１）。
【０１２５】
実施例３９：１−［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］−Ｎ−メチル−メタンアミン（Ｌ）−酒石酸塩
【化５３】
2013510859.tif 000067
標題化合物の遊離塩基を、５１％の収率で、２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］ピリジン−３−カルバルデヒドおよびメチルアミンを用いて調製例７に記載されるように実質的に調製する。
【０１２６】
酒石酸塩を実施例１に記載されるように実質的に調製する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５５１（Ｍ＋１）。
【０１２７】
実施例４０〜４４の化合物を、対応するアルデヒドおよびアミンから実施例３９に記載されるように実質的に調製する（実施例４３は溶媒として１，２−ジクロロエタンを用いて調製する）。
【０１２８】
【表８−１】
2013510859.tif 000068
【表８−２】
2013510859.tif 000069
【０１２９】
実施例４５：２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］ピリジン−３−カルバルデヒドオキシム（Ｌ）−酒石酸塩
【化５４】
2013510859.tif 000070
エタノール（３ｍＬ）中の２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］ピリジン−３−カルバルデヒド（０．２１０ｇ、０．４３８ｍｍｏｌ）の溶液に、ヒドロキシルアミン塩酸塩（０．０３８ｇ、０．５２６ｍｍｏｌ）およびエタン酸ナトリウム（０．０４４ｇ、０．５２６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１時間還流にて攪拌する。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルおよび水で抽出する。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させる。残渣を、塩基性逆相ＨＰＬＣにより精製して、０．１１０ｇの２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］ピリジン−３−カルバルデヒドオキシムを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４９４（Ｍ＋１）。
【０１３０】
酒石酸塩を実施例１に記載されるように実質的に調製する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４９４（Ｍ＋１）。
【０１３１】
実施例４６〜４７の化合物を、対応するアルデヒドおよびヒドロキシルアミンから実施例４５に記載されるように実質的に調製する。
【０１３２】
【表９】
2013510859.tif 000071
【０１３３】
実施例４８：［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メタンアミン（Ｌ）−酒石酸塩
【化５５】
2013510859.tif 000072
１．２−［［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メチル］イソインドリン−１，３−ジオン
ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（０．１０５ｍＬ、０．５４ｍｍｏｌ）を、０℃にて、トルエン（３ｍＬ）中の［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メタノール（０．１７３ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、フタルイミド（０．０７９ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（０．１４２ｇ、０．５４ｍｍｏｌ）の溶液に加える。混合物を室温にて一晩攪拌する。溶媒を除去し、残渣を最初に２ｇのＳＣＸカートリッジを用い、メタノール画分中の２Ｎアンモニウムの蒸発後、ヘキサン／エタノール（３％〜３０％）で溶出する順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーによって精製して、０．２０１ｇの２−［［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メチル］イソインドリン−１，３−ジオンを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：６１０（Ｍ＋１）。
【０１３４】
２．［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メタンアミン（Ｌ）−酒石酸塩
エタノール（２．５ｍＬ）中の２−［［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メチル］イソインドリン−１，３−ジオン（０．２０１ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）および２４μｌの水を含有するフラスコに、ヒドラジン一水和物（０．０４ｇ、０．７９ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を２．５時間還流し、次いでメタノールで希釈し、２ｇのＳＣＸカートリッジを用いて精製する。メタノール画分中の２Ｎアンモニアの蒸発後、得られた生成物を、エタノールおよびエタノール中の１５％水酸化アンモニウム水溶液（メタノール中７Ｎ）（２５〜９０％の勾配の塩基性溶出液）で溶出する順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、１２９ｍｇの標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４８０（Ｍ＋１）。
【０１３５】
酒石酸塩を実施例１に記載されるように実質的に調製する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４８０（Ｍ＋１）。
【０１３６】
実施例４９：２−［４−［（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］ピリジン−３−カルボキシアミド（Ｌ）−酒石酸塩
【化５６】
2013510859.tif 000073
１．２−［４−［（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］ピリジン−３−カルボニトリル：
この化合物を、２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］および２−（４−ホルミル−３−メチル−ピラゾール−１−イル）ピリジン−３−カルボニトリルを用いることによって調製例７に記載されるように実質的に調製する。残渣をＳＣＸにより精製して、３２％の収率で２−［４−［（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］ピリジン−３−カルボニトリルを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４２４（Ｍ＋１）。
【０１３７】
２．２−［４−［（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］ピリジン−３−カルボキシアミド（Ｌ）−酒石酸塩
ジメチルスルホキシド（７．５ｍＬ）中の２−［４−［（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］ピリジン−３−カルボニトリル（０．７１ｍｍｏｌ、０．３０ｇ）の溶液に、炭酸カリウム（０．０４９ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を０〜５℃に冷却し、その後、３３％過酸化水素水溶液（０．３９ｍＬ、３．７８ｍｍｏｌ）を加える。混合物を室温にて２時間攪拌する。次いで、水を注意深く加え、反応混合物を酢酸エチルで抽出する。有機層をデカントし、硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で蒸発させる。粗物質を、溶出液としてジクロロメタン／メタノール混合物を用いる順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、０．２５２ｇを得て、それをさらに逆相ＨＰＬＣにより精製して、０．１９８ｇの２−［４−［（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］ピリジン−３−カルボキシアミドを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４４２（Ｍ＋１）。
【０１３８】
酒石酸塩を実施例１に記載されるように実質的に調製する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４４２（Ｍ＋１）。
【０１３９】
実施例５０：２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］ピリジン−３−カルボキシアミド（Ｌ）−酒石酸塩
【化５７】
2013510859.tif 000074
標題化合物を１５％の全収率（第１の工程において２２％の収率および第２の工程において６６％の収率）で、出発物質として２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］および２−（４−ホルミル−３−メチル−ピラゾール−１−イル）ピリジン−３−カルボニトリルを用いることによって実施例４９に記載されるように実質的に調製する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４９４（Ｍ＋１）。
【０１４０】
実施例５１：２−［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］アセトアミド（Ｌ）−酒石酸塩
【化５８】
2013510859.tif 000075
ジメチルスルホキシド（４ｍＬ）中の２−［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］アセトニトリル（１７０ｍｇ、３４６．９６μｍｏｌｅ）の溶液に、炭酸カリウム（２３．９８ｍｇ、１７３．４８μｍｏｌｅ）を加え、混合物を０〜５℃に冷却する。３３％過酸化水溶液（１８９．５４μＬ、１．８４ｍｍｏｌ）を加える。混合物を室温にて１６時間攪拌し、次いで十分な３３％過酸化水溶液（１８９．５４μＬ、１．８４ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（２３．９８ｍｇ、１７３．４８μｍｏｌｅ）を加える。水を加え、混合物を酢酸エチルで抽出する。有機層を分離し、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を真空中で蒸発させる。化合物を、溶出液（メタノール中の２Ｎアンモニア中に１．５〜６％）としてジクロロメタンおよびメタノール中の２Ｎアンモニアを用いる順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、１９％の標題化合物の遊離塩基を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５０８（Ｍ＋１）。
【０１４１】
酒石酸塩を実施例１に記載されるように実質的に調製する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５３８（Ｍ＋１）。
【０１４２】
実施例５２：［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メチルＮ−メチルカルバメート（Ｌ）−酒石酸塩
【化５９】
2013510859.tif 000076
メチルイソシアネート（５．８０μＬ、０．０９６ｍｍｏｌ）を、室温にて、ジクロロメタン（１ｍＬ）中の２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メタノール（０．０４２ｇ、０．０８７ｍｍｏｌ）の溶液に加える。１時間後、ＬＣ／ＭＳにより反応の発生が観測されず、トリエチルアミン（１２．１７μＬ、８７．３２μｍｏｌｅ）およびメチルイソシアネート（５．８μＬ、０．０９６ｍｍｏｌ）を加え、反応物を一晩攪拌する。さらにトリエチルアミン（１２．１７μＬ、８７．３２μｍｏｌｅ）およびメチルイソシアネート（５．８μＬ、０．０９６ｍｍｏｌ）を加え、２４時間後、溶媒を蒸発させ、残渣を、溶出液としてジクロロメタン／メタノール中の２Ｎ水酸化アンモニウム（メタノール中の２Ｎ水酸化アンモニウム中に０〜５％）を用いて順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、０．０４１ｇの［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メチルＮ−メチルカルバメートを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５３８（Ｍ＋１）。
【０１４３】
酒石酸塩を実施例１に記載されるように実質的に調製する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５３８（Ｍ＋１）。
【０１４４】
実施例５３：［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−１−（３−フルオロ−２−ピリジル）ピラゾール−３−イル］メタノール（Ｌ）−酒石酸塩
【化６０】
2013510859.tif 000077
１．エチル４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−１−（３−フルオロ−２−ピリジル）ピラゾール−３−カルボキシレート
１，２−ジクロロエタン（６．７ｍＬ）中のエチル１−（３−フルオロ−２−ピリジル）−４−ホルミル−ピラゾール−３−カルボキシレート（３４２．５ｍｇ）の溶液に、２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］（２８０ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を加える。混合物を１０分間攪拌する。次いで、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（４４２ｍｇ）を加え、混合物を室温にて一晩攪拌する。炭酸水素ナトリウム（飽和水溶液）を加え、有機相をジクロロメタンで抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を真空中で蒸発させる。粗物質を、溶出液として酢酸エチルおよびヘキサンを用いる順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、４５０ｍｇのエチル４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−１−（３−フルオロ−２−ピリジル）ピラゾール−３−カルボキシレートを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５２７（Ｍ＋１）。
【０１４５】
２．［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−１−（３−フルオロ−２−ピリジル）ピラゾール−３−イル］メタノール（Ｌ）−酒石酸塩
窒素雰囲気下で０℃に冷却したテトラヒドロフラン（２．３７ｍＬ）中のエチル４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−１−（３−フルオロ−２−ピリジル）ピラゾール−３−カルボキシレート（２５０ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラヒドロフラン中の１Ｍ水素化アルミニウムリチウム（５６９．３μＬ）をゆっくりと加える。混合物をその温度で３０分間攪拌する。次いで、２２μＬの水を加え、冷却浴を取り除き、混合物を室温にて５分間攪拌し、その後、２２μＬの１５％水酸化ナトリウム水溶液および６５μＬの水を加える。固体を濾過し、溶媒を蒸発させる。粗物質を、溶出液としてジクロロメタンおよびメタノールを用いる順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、１４１ｍｇの標題化合物を遊離塩基として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４８５（Ｍ＋１）。
【０１４６】
酒石酸塩を実施例１に記載されるように実質的に調製する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４８５（Ｍ＋１）。
【０１４７】
実施例５３の遊離塩基を作製する代替方法：
１．エチル４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート
【化６１】
2013510859.tif 000078
テトラヒドロフラン（０．２Ｌ）中の２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン（１８．３ｇ、６５．４２ｍｍｏｌ）の懸濁液に、エチル４−ホルミル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート（１０ｇ、５９．４７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温にて１０分間攪拌する。次いで粉末のナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（１６．３９ｇ、７７．３１ｍｍｏｌ）を加える。混合物を室温にて１．５時間攪拌する。次いで、反応混合物を氷−炭酸水素ナトリウム飽和水溶液（２００ｍＬ）に注ぐ。相を分離する。水相をＮａＨＣＯ３飽和水溶液で塩基性にし、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相をＮａＨＣＯ３飽和水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して、２２．５ｇの標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３２（Ｍ＋１）。
【０１４８】
２．エチル４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−１−（３−フルオロ−２−ピリジル）ピラゾール−３−カルボキシレート
【化６２】
2013510859.tif 000079
ジメチルホルムアミド（２２５．００ｍＬ）中のエチル４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート（２２．５ｇ、５２．１０ｍｍｏｌｅ）の溶液に、炭酸カリウム（１０．８０ｇ、７８．１４ｍｍｏｌｅ）および２，３−ジフルオロピリジン（７．１９ｇ、６２．５２ｍｍｏｌｅ）を加え、得られた懸濁液を６０℃にて１５時間攪拌する。次いで、反応混合物を氷／ブライン（３０ｍＬ）に注ぎ、ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）を得られた懸濁液に加える。溶液をＨ２Ｏ（２×５０ｍＬ）で洗浄する。有機物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して、粗物質を得て、それを、２−プロパノール／ＣＨ２Ｃｌ２混合物で溶出するＳｉＯ２濾過により精製して、１８ｇの標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５２７（Ｍ＋１）。
【０１４９】
３．［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−１−（３−フルオロ−２−ピリジル）ピラゾール−３−イル］メタノール
【化６３】
2013510859.tif 000080
Ｎ２雰囲気下で−１０℃に冷却したテトラヒドロフラン（２６．００ｍＬ）中のエチル４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−１−（３−フルオロ−２−ピリジル）ピラゾール−３−カルボキシレート（２．６ｇ、４．９３ｍｍｏｌｅ）の溶液に、トルエン中の水素化ジイソブチルアルミニウム１Ｍ（２３．６８ｍＬ、２３．６８ｍｍｏｌｅ）をゆっくりと滴下して加える。次いで、反応混合物をその温度で１５分攪拌し、次いで、冷浴を取り除き、混合物を室温まで加温する。次いで、Ｈ２Ｏ（１００ｍＬ）を−１０℃にて滴下して加える。得られた懸濁液をＥｔＯＡｃ（２×３０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、淡褐色の油を得て、それを、メチルｔ−ブチルエーテル（１０ｍＬ）に溶解し、白色の結晶を晶出させる。形成した懸濁液を攪拌し、攪拌しながらヘキサン（１０ｍＬ）を滴下して加える。固体を濾過して、２ｇの標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４８５（Ｍ＋１）。
【０１５０】
実施例５４：２−（４−（（２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イル）メチル）−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾリル−５−イル）−ピリジン
【化６４】
2013510859.tif 000081
１．２−（４−（（２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イル）メチル）−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−ニコチン酸メチルエステル
スクリューキャップ試験管に、酸化銅（Ｉ）（１１ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）、２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］（３００ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（５２３ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）、乾燥ジメチルホルムアミド（１．６ｍＬ）および攪拌バーを加える。反応混合物を２０分間窒素で泡立て、次いでメチル２−ヨードピリジン−３−カルボキシレート（５１１ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）およびｔｒａｎｓ−Ｎ，Ｎ’−ジメチルシクロヘキサン−１，２−ジアミン（０．２４ｍｍｏｌ、３４ｍｇ）を加える。反応管を迅速に密閉し（注意：起こり得る圧力の増大；安全なシールドを使用すること）、１１０℃にて１６時間、磁気攪拌器を用いて予熱した油浴に浸す。次いで、混合物をＳＣＸカラム（１０ｇ）に注ぎ、メタノール、次いでメタノール中の２Ｎアンモニア溶液で溶出する。塩基性画分を濃縮し、得られた残基を、ヘキサン：エタノール（エタノール中に２〜１５％の勾配）で溶出する順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーを用いるシリカゲルにより精製して、３０７ｍｇの２−（４−（（２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イル）メチル）−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−ニコチン酸メチルエステルを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３０９（Ｍ＋１）。
【０１５１】
２．２−（４−（（２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イル）メチル）−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−３−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）−ピリジン
７ｍＬのテトラヒドロフラン中のアセトアミドオキシム（１５４ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン下で、１３９ｍｇの研磨した４Ａモレキュラーシーブおよび水素化ナトリウム（２．１ｍｍｏｌ、鉱油中に６０％として８４ｍｇ）を加える。混合物を５０℃にて３０分間攪拌する。室温まで冷却後、２−（４−（（２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イル）メチル）−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−ニコチン酸メチルエステル（３０９ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を加え、次いで混合物を５０℃にて４０分間加熱する。冷却後、水でクエンチし、ジクロロメタンで抽出する。硫酸マグネシウムで有機相を乾燥させ、溶媒を蒸発させた後、残渣をメタノール中で希釈し、５ｇのＳＣＸカートリッジを用いて精製する。得られた残渣をさらに、ＸＢｒｉｄｇｅカラム（５μｍ、１９×１００ｍｍ）および２５ｍＬ／分の流速にて５分で６０〜８０％の間のＡ中のＢの勾配（基礎条件Ａ：炭酸水素アンモニウム２０ｍＭ  ｐＨ９およびＢ：アセトニトリル）を用いて半分取逆相ＨＰＬＣ＿ＭＳにより精製して、７１ｍｇの標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５３３（Ｍ＋１）。
【０１５２】
実施例５５：２−クロロ−１’−［［１−（３−クロロ−２−ピリジル）−３−メチル−ピラゾール−４−イル］メチル］−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］（Ｌ）−酒石酸塩
【化６５】
2013510859.tif 000082
１，２−ジクロロエタン（５ｍＬ）中の２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］（０．２ｇ、０．７１ｍｍｏｌ）の溶液に、１−（３−クロロ−２−ピリジル）−３−メチル−ピラゾール−４−カルバルデヒド（０．１９ｇ、０．８６ｍｍｏｌ）および数滴の酢酸を加える。反応混合物を室温にて１時間攪拌する。反応混合物を室温にて１時間攪拌する。ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（０．３１５ｇ、１．４３ｍｍｏｌ）を加え、室温にて１４時間攪拌する。完了後、反応混合物をジクロロメタンで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液およびブラインで洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、真空中で濃縮する。粗混合物をＨＰＬＣにより精製して、０．１９５ｇ（５６％）の２−クロロ−１’−［［１−（３−クロロ−２−ピリジル）−３−メチル−ピラゾール−４−イル］メチル］−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４８５（Ｍ＋１）。
【０１５３】
酒石酸塩を実施例１に記載されるように実質的に調製する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４８５（Ｍ＋１）。
【０１５４】
実施例５６：２−クロロ−１’−［［１−（３−シクロプロピル−２−ピリジル）−３−メチル−ピラゾール−４−イル］メチル］−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］（Ｌ）−酒石酸塩
【化６６】
2013510859.tif 000083
標題化合物を４１％の収率で、出発物質として２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］および１−（３−シクロプロピル−２−ピリジル）−３−メチル−ピラゾール−４−カルバルデヒドを用いることによって実施例５５に記載されるように実質的に調製する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４９１（Ｍ＋１）。
【０１５５】
実施例５７：４−［［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メチル］モルホリン−３−オン
【化６７】
2013510859.tif 000084
ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］（０．２０ｇ、０．５３ｍｍｏｌ）、４−［（２−ブロモ−３−ピリジル）メチル］モルホリン−３−オン（０．２１ｇ、０．７７ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（０．０１５ｇ、０．０７８ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（０．３６ｇ、１．１０ｍｍｏｌ）の混合物を、１５分間アルゴンを泡立てることによって脱気する。１５分間脱気しながら、（１Ｒ，２Ｒ）−Ｎ，Ｎ’−ジメチルシクロヘキサン−１，２−ジアミン（０．０２ｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を加え、次いで混合物を１３０℃で１６時間加熱する。完了後、反応混合物を室温まで冷却し、セライトで濾過する。残渣を酢酸エチル（２×２５ｍＬ）で洗浄し、濾液を水（３０ｍＬ）で洗浄する。水層を酢酸エチル（２×２５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮する。粗混合物を、ジクロロメタン／メタノール（９６：４）で溶出するシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより精製して、０．０９ｇ（３０％）の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５６４（Ｍ＋１）。
【０１５６】
実施例５８〜５９の化合物を、調製例４９および５０にそれぞれ記載される中間体から実施例５７に記載されるように実質的に調製する。
【０１５７】
【表１０】
2013510859.tif 000085
【０１５８】
実施例６０：［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−１−（３−クロロ−２−ピリジル）ピラゾール−３−イル］メタノール
【化６８】
2013510859.tif 000086
１．エチル４−（（２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イル）メチル）−１−（３−クロロ−２−ピリジル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート
１，２−ジクロロメタン（２０ｍＬ）中の２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］塩酸塩（０．３５ｇ、１．１ｍｍｏｌ）およびエチル１−（３−クロロピリジン−２−イル）−４−ホルミル−ピラゾール−３−カルボキシレート（０．３ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−メチルモルホリン（０．３３ｇ、３．２ｍｍｏｌ）およびモレキュラーシーブ（０．１０ｇ）を加える。反応混合物を室温にて１時間攪拌する。ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（０．５８ｇ、２．７ｍｍｏｌ）を加え、室温にて１６時間攪拌する。完了後、反応混合物をセライトで濾過し、ジクロロメタン（１５ｍＬ）と水（１５ｍＬ）との間に分配する。水相をジクロロメタン（３×３０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮する。粗混合物を、ジクロロメタン／メタノール（９８：２）で溶出するシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、０．４ｇ（６７％）のエチル４−（（２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イル）メチル）−１−（３−クロロ−２−ピリジル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレートを得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５４３（Ｍ＋１）。
【０１５９】
２．［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−１−（３−クロロ−２−ピリジル）ピラゾール−３−イル］メタノール
テトラヒドロフラン（５ｍＬ）およびエタノール（５ｍＬ）中のエチル４−（（２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イル）メチル）−１−（３−クロロ−２−ピリジル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート（０．４ｇ、０．７３ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃にて、水素化ホウ素リチウム（１．８０ｍＬ、２．０Ｍテトラヒドロフラン溶液、３．６８ｍｍｏｌ）を加え、室温にて１６時間攪拌する。完了後、反応混合物を水（１０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（２×２５ｍＬ）で抽出する。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮する。粗混合物を、ジクロロメタン／メタノール（９７：３）で溶出するシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより精製して、０．１４ｇ（３９％）の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：５００（Ｍ＋１）。
【０１６０】
実施例６１：［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−１−（３−メチル−２−ピリジル）ピラゾール−３−イル］メタノール
【化６９】
2013510859.tif 000087
標題化合物を１４％の収率で、出発物質として２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロスピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］塩酸塩および１−（３−メチルピリジン−２−イル）−４−ホルミル−ピラゾール−３−カルボキシレートを用いることによって実施例６０に記載されるように実質的に調製する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４８１（Ｍ＋１）。
【０１６１】
実施例６２：［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メタノール
【化７０】
2013510859.tif 000088
１．２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］ピリジン−３−カルバルデヒド
無水トルエン（３４０ｍＬ）中の２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］（１６８．４ｇ、４５１ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（１２．９ｇ、６７．７ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１３１ｇ、９４７ｍｍｏｌ）の混合物を、室温にて３０分間脱気する。２−ブロモ−ピリジン−３−カルボキシアルデヒド（１２５ｇ、６７７ｍｍｏｌ）およびｔｒａｎｓ−Ｎ，Ｎ’−ジメチルシクロヘキサン−１，２−ジアミン（２１．３ｍＬ、１３５．４ｍｍｏｌ）を連続して加える。内容物を３０分間脱気し、その後、１８時間攪拌しながら１０５℃にて加熱する。反応混合物のＬＣ／ＭＳ分析により、２−クロロ−４，４−ジフルオロ−１’−［（３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル］スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］の完全な消費が明らかになる。反応混合物を室温まで冷やし、酢酸エチル（１．５Ｌ）で希釈し、攪拌し、セライトパッドで濾過する。母液を１０％水酸化アンモニウム（５×１００ｍＬ）、水（３×１００ｍＬ）、およびブラインで連続して洗浄する。次いでそれを乾燥し（硫酸ナトリウム）、濾過し、減圧下で濃縮する。残渣を、１％トリエチルアミンを含有するヘキサン中の５０％酢酸エチルを用いてシリカゲル上で精製して、２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］ピリジン−３−カルバルデヒドを固体（１５６ｇ、７２％収率）として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４７９（Ｍ＋１）。
【０１６２】
２．［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メタノール
０℃にて、無水ジクロロメタン（１．５Ｌ）中の２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］ピリジン−３−カルバルデヒド（１８０ｇ、３７７ｍｍｏｌ）の溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（７．２ｇ、１８８．５ｍｍｏｌ）および無水メタノール（０．５Ｌ）を連続して加え、内容物を３０分攪拌しながら室温に到達させる。反応混合物のＬＣ／ＭＳ分析により完了が明らかになる。揮発性物質を減圧下で除去して、得た残渣をジクロロメタン（２Ｌ）と水（３００ｍＬ）との間に分配する。層を分離し、有機層を、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（３００ｍＬ）、水（３×３００ｍＬ）、ブラインで連続して洗浄し、乾燥させ（硫酸ナトリウム）、濾過し、減圧下で濃縮する。残渣を、１％トリエチルアミンを含有するヘキサン中の５０〜５５％酢酸エチルを用いてシリカゲル上で精製して、［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メタノールを固体（１６７ｇ、９２％収率）として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４８１（Ｍ＋１）。
【０１６３】
実施例６３［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メタノール塩酸塩
【化７１】
2013510859.tif 000089
酢酸エチル（１．５Ｌ）中の［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メタノール（１５７．４ｇ、３２８ｍｍｏｌ）を、透明溶液が得られるまで８０℃にて加熱する。遊離塩基を含有する高温溶液に、イソプロパノール（６５．６ｍＬ、３２８ｍｍｏｌ）中の５〜６ＮのＨＣｌをゆっくりと加え、混合物を２時間にわたって室温に到達させながら、内容物を激しく攪拌する。ＨＣｌの添加の途中で沈殿が観察される。得られた白色固体を濾過し、ジエチルエーテル（３×１Ｌ）で洗浄し、５０℃にて真空下で３日間乾燥させて、［２−［４−［（２−クロロ−４，４−ジフルオロ−スピロ［５Ｈ−チエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）メチル］−３−メチル−ピラゾール−１−イル］−３−ピリジル］メタノール塩酸塩を、オフホワイトの固体（１６５ｇ、９７％収率）として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４８１（Ｍ＋１）。
【０１６４】
受容体占有トレーサー化合物：［（２−フルオロフェニル）メチル］−３−（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−プロパンアミド（Ｌ）−酒石酸塩
【化７２】
2013510859.tif 000090
１．ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）プロパノエート
２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，２，−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］（２．７ｇ、１１．９ｍｍｏｌ）をメタノール（６０ｍＬ）に溶解する。次いで、トリエチルアミン（２．６５ｍＬ）およびアクリル酸ｔｅｒｔ−ブチル（３．５５ｍＬ、２３．７６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を６５℃で５時間加熱する。熱を除去し、反応混合物を室温にて一晩攪拌する。溶媒を蒸発させ、粗物質を、溶出液として酢酸エチル／ヘキサン１／１を用いる順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、４．２ｇの所望の化合物を無色の油として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：３５６（Ｍ＋１）。
【０１６５】
２．ｔｅｒｔ−ブチル２−［（２−フルオロフェニル）メチル］−３−（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）プロパノエート
Ｎ２下で−７８℃に冷却したテトラヒドロフラン（４１ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル３−（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）プロパノエート（４．９ｇ、１３．７８ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド  １Ｍ（４１，３５ｍＬ、４１．４５ｍｍｏｌ）を滴下して加える。得られた混合物をその温度で３時間攪拌する。次いで、１，３−ジメチル−３，４，５，６−テトラヒドロ−２（１Ｈ）−ピリミジノン（１．３３ｍＬ、１１．０３ｍｍｏｌ）を加え、得られた溶液を同じ温度で３０分間攪拌する。得られた混合物に、乾燥テトラヒドロフラン（１ｍＬ）中の２−フルオロベンジルブロミド（２．３３ｍＬ、１９．３ｍｍｏｌ）を加え、攪拌を継続する。温度を一晩で−７８℃から室温にさせる。粗反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、酢酸エチルで抽出する。有機層をデカントし、硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を蒸発させ、得た粗物質を、５／９５〜２０／８０の酢酸エチル／ヘキサンを用いる順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、５．０６ｇの標題化合物を無色の油として得た。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４６４（Ｍ＋１）。
【０１６６】
３．２−［（２−フルオロフェニル）メチル］−３−（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）プロパン酸トリフルオロ酢酸
ｔｅｒｔ−ブチル２−［（２−フルオロフェニル）メチル］−３−（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）プロパノエート（５．０６ｇ、１０．９１ｍｍｏｌ）およびトリフルオロ酢酸（２６．２０ｍＬ、２１８ｍｍｏｌ）の混合物を室温にて一晩攪拌する。溶媒を乾燥するまで蒸発させ、粗物質をさらに精製せずに使用する。
【０１６７】
４．２−［（２−フルオロフェニル）メチル］−３−（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−プロパンアミド
２−［（２−フルオロフェニル）メチル］−３−（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）プロパン酸トリフルオロ酢酸（５．６８ｇ、１０．８９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２１８ｍＬ）に溶解し、次いでトリエチルアミン（１２．１４ｍＬ、８７．１３ｍｍｏｌ）、ジメチルアミン塩酸塩（１．８０ｇ、２１．７８ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（４．１８ｇ、２１．７８ｍｍｏｌ）、および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（３．３４ｇ、２１．７８ｍｍｏｌ）を、０℃にて溶液に連続して加える。混合物を室温にて５時間攪拌する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で処理し、ジクロロメタン（３×２０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で蒸発させる。粗物質を、溶出液として１００／０〜９０／１０のジクロロメタン／メタノール中の２Ｎアンモニウムを用いる順相Ｉｓｃｏクロマトグラフィーにより精製して、４．０ｇ（８４．５％）の標題化合物を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３５（Ｍ＋１）。
【０１６８】
５．２−［（２−フルオロフェニル）メチル］−３−（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−プロパンアミド（Ｌ）−酒石酸塩
ラセミ化合物２−［（２−フルオロフェニル）メチル］−３−（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−プロパンアミド（２．３ｇ、５．２９ｍｍｏｌ）の鏡像異性体分割を、ヘキサン／エタノール中の０．２％ジメチルエチルアミン  ９／１を用いるＣｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ（登録商標）カラム（Ｃｈｉｒａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｗｅｓｔ  Ｃｈｅｓｔｅｒ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ，ＵＳＡ）で実施する。所望の化合物を最初に溶出する鏡像異性体として３６％の収率で得る。
【０１６９】
酒石酸塩を実施例１に記載されるように実質的に調製する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４３５（Ｍ＋１）。
【０１７０】
Ｘ線粉末回折
結晶性固体のＸＲＤパターンを、３５ｋＶおよび５０ｍＡで作動する、ＣｕＫα源（λ＝１．５４０６０Å）およびＶａｎｔｅｃ検出基を備えたＢｒｕｋｅｒ  Ｄ４  Ｅｎｄｅａｂｏｒ  Ｘ−線粉末回折計で得る。サンプルを、２θにおいて０．００８７°のステップサイズおよび０．５秒／ステップの走査速度、ならびに０．６ｍｍのダイバージェンス、５．２８の一定の散乱防止、および９．５ｍｍの検出スリットを用いて、２θにおいて４から４０°の間で走査する。乾燥粉末を石英サンプルホルダに詰め、スライドガラスを用いて平滑な表面を得る。結晶形態回折パターンを周囲温度および相対湿度で収集する。ピークを取得する前にバックグラウンドを除去した。結晶学の分野において、任意の所与の結晶形態について、回折ピークの相対強度は、結晶形態および晶癖などの要因から生じる選択配向により変わり得ることは周知である。選択配向の効果が現れる所では、ピーク強度は変化するが、多形特有ピーク位置は変化しない。例えば、Ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ＃２３，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ＃１８，１８４３−１８４４ページ，１９９５を参照のこと。さらに、結晶学の分野において、任意の所与の結晶形態について、角度ピーク位置がわずかに変化し得ることもまた周知である。例えば、サンプルを分析する温度または湿度、サンプルの置き換え、または内部標準の存在もしくは不在の変化によってピーク位置はシフトし得る。この場合、ピーク位置２θのばらつき±０．１°については、これら潜在性の変化が考えられるが、示した結晶形態の明確な同定が妨げられることはないであろう。結晶形態の確認は、特徴的なピーク（°２θの単位において）、典型的により突出したピークの任意の特有の組み合わせに基づいてなされ得る。
【０１７１】
従って、ＣｕＫα放射線を用いるＸＲＤパターンにより、（２−｛４−［（２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロ−１Ｈ−スピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イル）メチル］−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピリジン−３−イル）メタノールの遊離塩基の調製した結晶サンプルを、以下の表１に記載されるような回折ピーク（２θ値）を有すると特徴付ける。特有の結晶形態は、この完全な回折ピークから特徴的なピークのサブセットにより確認され得る。従って、一実施形態において、本発明は、２θにおいて５．５、１３．５、１７．８、および２２．３±０．１°からなる群より選択されるピークのうちの１つ以上と共に１１．１における回折ピークを有する、ＣｕＫα放射線を用いるＸＲＤパターンにより特徴付けられる（２−｛４−［（２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロ−１Ｈ−スピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イル）メチル］−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピリジン−３−イル）メタノールの結晶形態を提供する。別の実施形態において、本発明は、２θにおいて５．５、１１．１、１３．５、１７．８、および２２．３±０．１°における回折ピークを有するＣｕＫα放射線を用いるＸＲＤパターンにより特徴付けられる（２−｛４−［（２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロ−１Ｈ−スピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イル）メチル］−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピリジン−３−イル）メタノール塩酸塩の結晶形態を提供する。
【０１７２】
【表１１】
2013510859.tif 000091
【０１７３】
同様に、（２−｛４−［（２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロ−１Ｈ−スピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イル）メチル］−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピリジン−３−イル）メタノールのＨＣｌ塩の調製した結晶サンプルを、以下の表２に記載されるような回折ピーク（２θ値）を有するとＣｕＫα放射線を用いるＸＲＤパターンにより特徴付ける。特有の結晶形態は、この完全な回折ピークから特徴的なピークのサブセットにより確認され得る。従って、一実施形態において、本発明は、２θにおいて１０．８、１２．１、および２１．１±０．１°からなる群より選択されるピークのうちの１つ以上と共に１６．２における回折ピークを有するＣｕＫα放射線を用いるＸＲＤパターンにより特徴付けられる（２−｛４−［（２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロ−１Ｈ−スピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イル）メチル］−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピリジン−３−イル）メタノール塩酸塩の結晶形態を提供する。別の実施形態において、本発明は、２θにおいて１０．８、１２．１、１６．２、および２１．２°±０．１°における回折ピークを有するＣｕＫα放射線を用いるＸＲＤパターンにより特徴付けられる（２−｛４−［（２’−クロロ−４’，４’−ジフルオロ−４’，５’−ジヒドロ−１Ｈ−スピロ［ピペリジン−４，７’−チエノ［２，３−ｃ］ピラン］−１−イル）メチル］−３−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル｝ピリジン−３−イル）メタノール塩酸塩の結晶形態を提供する。
【０１７４】
【表１２】
2013510859.tif 000092
【０１７５】
文献データ（ＰｒｚｙｄｚｉａｌおよびＨｅｉｓｌｅｒ，２００８，上記；Ｒｅｉｎｓｃｈｅｉｄ，２００６，上記）および非臨床的動物研究において生成されたデータは、鬱病、肥満および摂食障害、ならびに片頭痛の治療におけるノシセプチンアンタゴニストについての役割を支持している。具体的には、ノシセプチン受容体アンタゴニストが、過食症、以前の体重損失後の体重の再増加を阻害する齧歯動物モデルにおいて、および片頭痛のためのモデルにおいて、単独または三環系もしくは選択的セロトニン作動性再取り込み阻害剤（ＳＳＲＩ）の抗鬱剤と併用して鬱病の齧歯動物モデルにおいて有効であると見出されている。さらに、ノシセプチン受容体ノックアウトマウスにおいて実施した研究は、強制水泳試験（抗鬱作用の尺度）および空腹により誘発される摂取（抗肥満活性）におけるノシセプチンアンタゴニストの作用は、遺伝子型依存性であることを実証しており、これらの動物モデルにおけるノシセプチンアンタゴニスト作用の特定の機構を支持している。上述の障害が一般的な併存症の臨床症状を表す場合、ノシセプチン受容体アンタゴニストは特に、大鬱病性障害、過食障害、過体重、肥満、および臨床気分障害と併存した肥満を有する患者などのこれらの特定の患者集団において効果的であり得る。
【０１７６】
本発明の化合物の特徴をさらに実証するために、代表的な化合物を以下のインビトロおよびインビボアッセイにおいて実施する。
【０１７７】
インビトロ受容体結合
放射性リガンド結合アッセイは一般に、特定の受容体または標的タンパク質に結合する化合物の親和性（Ｋｉ）または有効性を測定するために使用される。濾過ベースの［３Ｈ］−ＯＦＱ／ノシセプチン受容体結合アッセイは、少しの改良を有して以前のアッセイフォーマットに基づいて開発されている（Ａｒｄａｔｉ  Ａ，Ｈｅｎｎｉｎｇｓｅｎ  ＲＡ，Ｈｉｇｅｌｉｎ  Ｊ，Ｒｅｉｎｓｃｈｅｉｄ  ＲＫ，Ｃｉｖｅｌｌｉ  Ｏ，Ｍｏｎｓｍａ  ＦＪ  Ｊｒ．Ｍｏｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１９９７  Ｍａｙ；５１（５）：８１６−２４）。［３Ｈ］−ＯＦＱ／ノシセプチン結合アッセイを、ディープウェル９６ウェルプレート中で実施する。［３Ｈ］ＯＦＱ（最終アッセイ濃度０．２ｎＭ）競合研究を、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＥＧＴＡ、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１％ウシ血清アルブミンを含有する０．５ｍＬの最終アッセイ体積の緩衝液中で５〜１０μｇの膜タンパク質（クローニングしたヒトＯＲＬ１受容体を発現するチャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ細胞）から単離した）を用いて実施する。サンプルを室温にて６０分間インキュベートし、それが競合アッセイに最適であることを見出す。そのアッセイは、Ｔｏｍｅｔｃ細胞収集器におけるガラス繊維フィルター（ＷａｌｌａｃフィルターマットＡ）［０．３％ポリエチレンイミン（Ｓｉｇｍａ）で１時間予め処理した］での濾過により終了し、フィルターを、５ｍＬの氷冷５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ・ＨＣｌ、ｐＨ７．４で３回洗浄する。次いでフィルターマットを乾燥させ、ＭｅｌｔｉｌｅｘシンチラントＡに埋め込み、放射線をＷａｌｌａｃ  Ｍｉｃｒｏｂｅｔａシンチレーションカウンタで計数する。特異的結合を１００ｎＭの未標識ノシセプチンでの置換により測定する。曲線を特異的結合の割合としてプロットし、ＩＣ５０値を、可変勾配を有するＳ字状用量反応曲線を用いて測定する。Ｋｉ値はチェン−プルソフ（Ｃｈｅｎｇ  ａｎｄ  Ｐｒｕｓｏｆｆ）の式（Ｃｈｅｎｇ，Ｙ．Ｃ．，  ａｎｄ  Ｐｒｕｓｏｆｆ，Ｗ．Ｈ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２２，３０９９−３１０８（１９７３））によりＩＣ５０から計算する（式中、Ｋｉ＝ＩＣ５０×（１＋Ｄ×Ｋｄ−１）−１である）。
【０１７８】
同様に、μ、κおよびδオピオイド、セロトニン、ドーパミン、アドレナリン作用性、ムスカリン性、およびヒスタミン受容体に対するＫｉ、ならびにノルエピネフリン輸送体、ナトリウムチャネル、クロライドチャネル、およびカルシウムチャネルに対する結合は、所望の受容体／輸送体／チャネルを発現する膜および適切な対応する放射性リガンド競合分子を用いて測定できる。
【０１７９】
例示した化合物を上記のように実質的に試験し、ＯＲＬ−１受容体に対する高親和性を有することを見出す。例示した化合物についてのＯＲＬ−１受容体に対するＫｉは２ｎＭ未満であることを見出し、一方、試験した他の受容体／輸送体／チャネルに対するＫｉは、著しく高くなることを見出す。実施例６２、２３、および５３の化合物を上記のように実質的に試験し、以下の表３に示すような親和性を有することを見出す。
【０１８０】
【表１３−１】
2013510859.tif 000093
【表１３−２】
2013510859.tif 000094
【０１８１】
従って、本発明の化合物の生理学的に関連する用量は、インビボにおけるこれらの部位と実質的に相互作用するとは予想されず、従って、このような活性に関連する望ましくない作用を回避すると予想される。
【０１８２】
アゴニストにより媒介されるＧタンパク質活性化−ＧＴＰγ−［３５Ｓ］結合のインビトロでの機能的遮断
Ｇタンパク質共役受容体のアゴニストにより媒介される刺激により、膜結合Ｇαβγ−タンパク質ヘテロ三量体複合体の活性化が生じ、細胞内経路の修飾への細胞外シグナルの変換における第１の工程を表す。Ｇαβγ−タンパク質三量体の受容体により媒介される活性化の第１の工程は、Ｇαサブユニット結合グアノシン二リン酸（ＧＤＰ）のグアノシン三リン酸（ＧＴＰ）への交換である。Ｇαサブユニットに対するＧＴＰの結合により、ヘテロ三量体サブユニット、ＧβおよびＧγの解離が引き起こされ、いくつかの細胞内シグナル伝達カスケードの調節が生じる。受容体により媒介されるＧタンパク質活性化の尺度は、非加水分解性の放射性標識したＧＴＰ、ＧＴＰ−γ−［３５Ｓ］のアナログを用いて測定され得る。
【０１８３】
この方法を利用して、アンタゴニスト親和性（Ｋｂ）を、少しの変更を有して、以前に記載されたプロトコル（ＤｅＬａｐｐら，Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ．１９９９  Ｍａｙ；２８９（２）：９４６−５５；Ｏｚａｋｉら，Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０００  Ａｕｇ  １８；４０２（１−２）：４５−５３）に従ってＧＴＰ−γ−［３５Ｓ］結合アッセイを用いてクローン化したヒトＯＲＬ１／ノシセプチン受容体を発現する膜で測定する。アッセイを、以下の緩衝液成分：１００ｍＭ  ＮａＣｌ、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．１％  ＢＳＡ、３μＭ  ＧＤＰ、０．５ｎＭ［３５Ｓ］ＧＴＰγＳを有する２００μ体積で実施する。ＯＲＬ１受容体膜懸濁液を２０μｇタンパク質／ウェルの濃度で加え、３００ｎＭノシセプチン／ＯＦＱを用いて受容体刺激を達成する。コムギ胚芽凝集素でコーティングしたビーズ（Ａｍｅｒｓｈａｍ，Ａｒｌｉｎｇｔｏｎ  Ｈｔｓ．，ＩＬ）を１ｍｇ／ウェルにて加えて、膜結合［３５Ｓ］ＧＴＰγＳを検出する。プレートを密閉し、２時間室温にてインキュベートする。次いでプレートを４℃にて一晩置き、ＳＰＡビーズを定着させ、次いでＷａｌｌａｃ  Ｍｉｃｒｏｂｅｔａでカウントする。特異的［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合を、１０μＭの非標識ＧＴＰγＳの非存在および存在下で観測されたＣＰＭの相違として測定する。特異的［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合の割合としてデータをプロットする。特異的結合の割合として曲線をプロットし、ＩＣ５０値を、可変勾配を有するＳ字状用量反応曲線を用いて測定する。アンタゴニスト親和性（Ｋｂ）を、チェン−プルソフ（１９７３）の式の変形（式中、Ｋｂ＝ＩＣ５０×（１＋Ｄ×ＥＣ５０−１）−１である）を用いてＤｅＬａｐｐら，１９９９に従って算出する。
【０１８４】
例示した化合物を上記のように実質的に試験し、ＯＲＬ−１受容体の有効なアンタゴニストであることを見出す。例示した化合物についてのＯＲＬ−１受容体についてのＫｂは、６ｎＭ未満であると見出す。実施例１、２３、および５３の化合物を上記のように実質的に試験し、それぞれ、０．２０、１．５２、および０．６２ｎＭのＯＲＬ−１受容体についてのＫｂを有すると見出す。
【０１８５】
インビボでの受容体占有
ＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用いる受容体占有（ＲＯ）は、インビボでの推定ＯＲＬ−１アンタゴニストの主要な標的結合を測定する方法として確立している。ノシセプチン／ＯＲＬ１受容体占有（ＲＯ）を、新規所有のノシセプチン／ＯＲＬ１アンタゴニストＲＯトレーサー、２−［（２−フルオロフェニル）メチル］−３−（２−フルオロスピロ［４，５−ジヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピラン−７，４’−ピペリジン］−１’−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−プロパンアミド、（ＲＯトレーサー）を用いて、血液脳関門の内側の高密度のノシセプチン／ＯＲＬ１結合部位を含有する構造である、臨床下部において測定する。これらの測定は、修飾を有して他の受容体について以前に公開された（Ｃｈｅｒｎｅｔ  Ｅ，Ｍａｒｔｉｎ  ＬＪ，Ｌｉ  Ｄ，Ｎｅｅｄ  ＡＢ，Ｂａｒｔｈ  ＶＮ，Ｒａｓｈ  ＫＳ，Ｐｈｅｂｕｓ  ＬＡ．Ｕｓｅ  ｏｆ  ＬＣ／ＭＳ  ｔｏ  ａｓｓｅｓｓ  ｂｒａｉｎ  ｔｒａｃｅｒ  ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ｉｎ  ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ，ｉｎ  ｖｉｖｏ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｏｃｃｕｐａｎｃｙ  ｓｔｕｄｉｅｓ：ｄｏｐａｍｉｎｅ  Ｄ２，ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ  ２Ａ  ａｎｄ  ＮＫ−１  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ａｓ  ｅｘａｍｐｌｅｓ．Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．  ７８（４）：３４０−６，  ２００５）ような放射性標識したトレーサーを必要とせずになされる。
【０１８６】
中枢ノシセプチン／ＯＲＬ１  ＲＯと、齧歯動物における摂食行動および強制水泳試験の調節の効果との間に正相関を確立した。中枢ノシセプチン／ＯＲＬ１  ＲＯを、試験化合物のラットへの経口投与後、６または２４時間に測定する。雄性Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（Ｈａｒｌａｎ  Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）を試験化合物、またはビヒクル（２０％カプチソール、２５ｍＭリン酸緩衝液、ｐＨ２．０）で経口処置する。試験化合物／ビヒクル投与の６または２４時間後、全ての動物に３μｇ／ｋｇ用量のＲＯトレーサーを静脈内投与する。ＲＯを測定するとみなすのは、ＲＯトレーサー投与の時である。ＲＯトレーサー投与の４０分後、ラットを頸椎脱臼により屠殺し、視床下部を除去する。ＲＯトレーサーのレベルを各組織サンプル中で測定する。
【０１８７】
中枢作用性の文献参照標準物質（−）−シス−１−メチル−７−［［４−（２，６−ジクロロフェニル）ピペリジン−１−イル］メチル］−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾシクロヘプタン−５−オール（ＳＢ６１２１１１、上記のＭａｇｄａｌｅｎａおよびＨｅｉｓｌｅｒを参照のこと）、有効なノシセプチン／ＯＲＬ１受容体選択的アンタゴニストを陽性対照として使用して、１００％ノシセプチン／ＯＲＬ１  ＲＯに関連するＲＯトレーサーレベルを確立する。ＳＢ６１２１１１を、ＲＯトレーサーの１時間前に３０ｍｇ／ｋｇの用量（視床下部ノシセプチン／ＯＲＬ１受容体の約１００％ＲＯを生じる用量）で静脈内投与する。
【０１８８】
視床下部サンプルを、０．１％ギ酸を含有する４容量（ｗ／ｖ）のアセトニトリル中でホモジナイズし、１４，０００ＲＰＭにて１６分間遠心分離する。上清を回収し、滅菌水で０．３ｍＬの最終体積まで希釈する。ＲＯトレーサーの測定を、Ａｇｉｌｅｎｔモデル１２００ＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡ）およびＡＰＩ４０００質量分析計を用いて実施する。クロマトグラフ分離は、２．１×５０ｍｍ  Ｃ１８カラム（Ａｇｉｌｅｎｔパート番号９７１７００−９０７）および全体で０．１％ギ酸含有量を含む３８％アセトニトリル水溶液からなる移動相を使用する。ＲＯトレーサーの検出は、脳組織ホモジネート中で調製した標準物質との比較により定量化したレベルを用いて、４３５対２３９の質量対電荷比でイオン遷移を生じる前駆体をモニタリングすることにより達成する。０パーセントのＲＯを、ビヒクルで前処置した動物の視床下部におけるＲＯトレーサーのレベルとして算出し、これは非特異的および特異的結合の合計を表す（全ての受容体はトレーサーに利用可能である）。ＳＢ６１２１１１、陽性対照群の非常に高い静脈内用量で前処置した動物における低いレベルのＲＯトレーサーは非特異的結合を表し、１００％占有の値が割り当てられる（受容体はトレーサーに利用可能ではない）。試験化合物で処置した群由来の視床下部に見出されるＲＯトレーサーのレベルは、これらの２点間で線形補間して、試験化合物についてのＲＯを算出する。
【０１８９】
例示した化合物を上記のように実質的に試験し、ＯＲＬ−１受容体において高い受容体占有を有することを見出す。例示した化合物についての受容体占有は、６時間後、３ｍｇ／ｋｇ用量について約４０から約１３０％の間、または２４時間後、３ｍｇ／ｋｇ用量について約２０から約９６％ＲＯの間であることを見出す。実施例６２、２３および５３の化合物についての受容体占有を、６時間後、３ｍｇ／ｋｇについて上記のように実質的にアッセイし、それぞれ、１０４、８０および８３％ＲＯを有することを見出す。このように、本発明の化合物は、有益なバイオアベイラビリティおよび標的ＯＲＬ−１受容体に対するＣＮＳ内への侵入を有することが予想される。
【０１９０】
ｈＥＲＧチャネル活性
心臓におけるＫ＋チャネル伝導性の遮断は、ＱＴ−波延長の形態で心臓毒性に関連する。ヒトＥＲＧ（ｈＥＲＧ）Ｋ＋チャネルについての例示したノシセプチン受容体アンタゴニストの親和性（Ｋｉ）を、周知の手順（例えば、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４１２（３）：２０３−１２，２００１を参照のこと）に従って、ｈＥＲＧチャネルアンタゴニスト放射性リガンド［３Ｈ］アステミゾール（２ｎＭ最終アッセイ濃度）を用いるクローン化ｈＥＲＧを発現するＨＥＫ２９３細胞において測定する。［３Ｈ］アステミゾール結合アッセイを、標準的な手順に従って委託研究会社Ｃｅｒｅｐ（Ｐａｒｉｓ  Ｆｒａｎｃｅ）にて実施する。
【０１９１】
実施例６２、２３、および５３を上記のように実質的にアッセイし、それぞれ、６．０８、１．２１、および８．６μＭのＫｉで、低い活性を有することを見出す。実施例６２の化合物についてのＣＮＳにおけるノシセプチン／ＯＲＬ１受容体の８０パーセントのＲＯ（ＥＣ８０ＲＯ）を生成するのに必要なインビボでの血漿濃度の比較は約４１ｎＭである。このように、ノシセプチン／ＯＲＬ１受容体のインビボでの受容体占有における生理学的関連を生じるのに必要とされる濃度と、ｈＥＲＧＫ＋チャネル活性に必要とされる濃度との間に大きな分離が存在する。従って、本発明の化合物の生理学的関連用量は、インビボでのｈＥＲＧ部位と実質的に相互作用すると予想されず、従って、ＱＴ延長に対する十分な効果を有さないと予想される。
【０１９２】
マウス（ｍＦＳＴ）における強制水泳試験
ｍＦＳＴを抗鬱作用についてインビボアッセイで規定する（Ｌｉら，Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ．３１９（１）：２５４−９，２００６）。既知の臨床的に有効な抗鬱剤（選択的セロトニン再摂取阻害剤および／または三環系抗鬱剤）で処置したマウスは、絶望に関連する行動である、水タンクに置かれた後、短い時間の不動行動を示す。ｍＦＳＴを使用して、以前に公開された方法に従って新規ノシセプチン／ＯＲＬ１アンタゴニストの潜在的な抗鬱剤様活性を評価した（Ｌｉら，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ．３１９（１）：２５４−９，２００６）。つまり、２５〜３０ｇの間の体重のオスのＮＩＨ−Ｓｗｉｓｓマウス（Ｈａｒｌａｎ  Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）を使用する。群で収容した動物を動物施設からそれらの動物独自のケージ内の試験領域に移動させ、試験前に少なくとも１時間、新しい環境に順応させる。代替として、オスの１２９Ｓ６野生型およびノシセプチン／ＯＲＬ１受容体ノックアウトマウスを使用して、化合物に対する反応の依存性がノシセプチン／ＯＲＬ１受容体依存性であることを確認した。使用の日に、２０％カプチソール、２５ｍＭリン酸緩衝液、ｐＨ２．０中で全ての化合物を調製する。６ｃｍの水（２２〜２５℃）で満たした円筒に６分間、マウスを置く。試験時間の６分のうちの最後の４分間、不動の時間を記録する。浮いている状態で動かないまたは水の上に頭を維持するのに必要がある動きのみをする場合、マウスを不動と記録する。
【０１９３】
代表的な化合物を上記のように実質的に試験し、野生型マウスにおいて不動時間が顕著に減少することが見出される。実施例６２、２３、および５３の化合物を上記のように実質的に試験し、それぞれ、不動時間の４５％、５８％、および５４％の減少の最大効果で、それぞれ、２４．９、９．５、および１２．９ｍｇ／ＫｇのＥＤ６０を有することが見出される。従って、本発明の化合物はインビボにおいて抗鬱活性を有すると考えられる。
【０１９４】
さらに、本発明の化合物は、高い効果を生じさせるために他の既知の抗鬱剤と併用して使用できる。実施例６２の化合物を１０ｍｇ／ｋｇフルオキセチンと併用して上記のように実質的に試験し、フルオキセチンまたは実施例６２の化合物単独のいずれかよりも不動時間をさらに顕著に減少させることが見出される。以下の表４を参照のこと。
【０１９５】
【表１４】
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【０１９６】
なおさらに、ＯＲＬ−１ノックアウトマウス、ＯＲＬ−１受容体を欠失するように操作したマウスの系統を用いる場合、短い不動時間のこれらの効果は観察されず、この効果は実際にＯＲＬ−１受容体によって媒介されることを示す。研究の第１のアームにおいて野生型マウスおよび研究の第２のアームにおいてＯＲＬ−１ノックアウトマウスを用いて実施例６２を上記のように実質的に試験し、野生型マウスにおいて不動時間が顕著に減少することが見出されるが、ノックアウトマウスにおいて効果は示されない。ノルエピネフリン再摂取阻害抗鬱剤、イミプリミンを陽性対照として実施し、同等の程度まで野生型およびノックアウトマウスの両方において不動時間を減少させることが見出され、ノルエピネフリン再摂取機構によって媒介される行動はノックアウトマウス系統において未変化であることを示す。
【０１９７】
マウスにおける空腹により誘発される過食症の遮断
齧歯動物における空腹により誘発される過食症の遮断は、過食症障害について承認されているモデルである（Ｈｏｌｌｏｐｅｔｅｒ  Ｇ，Ｅｒｉｃｋｓｏｎ  ＪＣ，Ｓｅｅｌｅｙ  ＲＪ，Ｍａｒｓｈ  ＤＪ，Ｐａｌｍｉｔｅｒ  ＲＤ．Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｏｆ  ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅ  Ｙ−ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ  ｍｉｃｅ  ｔｏ  ｆｅｅｄｉｎｇ  ｅｆｆｅｃｔｏｒｓ．Ｒｅｇｕｌ  Ｐｅｐｔ．１９９８  Ｓｅｐ  ２５；７５−７６：３８３−９）。全ての実験を、１２９Ｓ６近交系バックグラウンドにおける未処置の１２週齢オスの野生型およびＯＲＬノックアウトマウスで実施する。試験を開始する前にマウスを個々に最低で３日間収容して、群から個々の収容の変化に起因するストレスの効果を評価する。３匹のマウス／遺伝子型を試験日に各処置群に無作為に割り当てる。絶食前の体重測定を行い、次いで食物をケージから一晩取り除く。マウスを約１５時間絶食させる。翌朝、食物にアクセスする前の３０分、強制経口投与により、マウスに３用量の薬物またはビヒクルのうちの１用量を与える。薬物は２５ｍＭリン酸バッファー、ｐＨ２．０に溶解した２０％カプチソールに溶解する。体重の測定を薬物治療の直前または食物へのアクセスを戻してから２４時間後に行う。遺伝子型と関係なく全てのマウスは、一晩絶食後、約５〜１０％の体重を減少させることは注目すべきことである。食物摂取の測定を、１時間での残っている食物の重量によって示すように、食物へのアクセスから１時間後に記録する。測定した食物摂取は明期の間であり、その間の時間、マウスは典型的に休息し、通常、食べないことは留意すべきである。最初の試験後、マウスを無制限に食物にアクセスさせて１週間休息させる。その週の休息の後、表５に示すラテン方格法に従ってマウスを再試験する。
【０１９８】
【表１５】
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【０１９９】
代表的な化合物を上記のように実質的に試験し、マウスにおいて空腹により誘発される過食症を顕著に減少させることが見出される。実施例６２、２３、および５３を上記のように実質的にアッセイし、空腹により誘発される過食症が顕著に遮断されることが見出される。その効果はＯＲＬ−１ノックアウトマウス系統において観察されず、その効果がＯＲＬ−１受容体を介して媒介されることが実証される。５−ＨＴ２Ｃアゴニスト、ｍＣＰＰをポジティブ対照として使用し、野生型マウスおよびＯＲＬ−１ノックアウトマウスの両方において同等に空腹により誘発される過食症が顕著に減少することが見出される。このように、本発明の化合物は、過体重および／または肥満の治療ならびに／あるいは例えば過食症の治療としての体重維持に有用であることが予想される。
【０２００】
ラット硬膜血漿タンパク質浸出（ＰＰＥ）モデル−経口投与プロトコル
全ての試験化合物を、２５ｍＭリン酸バッファー（ｐＨ２．０）中の２０％カプチソールを含有するビヒクル溶液中に調製する。陽性対照化合物、スマトリプタンを生理食塩水中に溶解する。一晩絶食させたオスのＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（Ｈａｒｌａｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから提供）（２５０〜３５０ｇ）に、試験化合物、スマトリプタンまたはビヒクルを強制経口投与（２ｍＬ／ｋｇ）により投与する。投与の５０分後、ラットをネンブタール（６０ｍｇ／ｋｇ、ｉｐ）で麻酔し、−２．５ｍｍにて設定した切歯棒を用いて定位フレームに置く。正中矢状頭皮切開の後、頭蓋骨を貫通して２対の両側穴をドリルで開ける（３．２ｍｍ後方、１．８および３．８ｍｍ側方、全ての座標はブレグマを参照とする）。チップを除いて防護される１対のステンレス鋼刺激電極（Ｒｈｏｄｅｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ）を、両方の脳半休において穴を通して硬膜の下９．２ｍｍの深さまで下げる。
【０２０１】
フルオロセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）色素で標識したウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）（ＦＩＴＣ−ＢＳＡ）（２０ｍｇ／ｋｇ、ｉｖ）の溶液を、タンパク質溢出のためのマーカーとして機能する三叉神経節の電気刺激の２分前に大腿静脈内に注入する。試験化合物またはビヒクルの投与から６０分後、左側三叉神経節を、１．０ｍＡ（５Ｈｚ、５分間）の電流の強さで５分間電気刺激する。
【０２０２】
刺激の５分後、ラットを、４０ｍＬの生理食塩水での瀉血により殺傷し、血管外の残余のＦＩＴＣ／ＢＳＡもリンスする。頭蓋骨の上部を取り除いて硬膜を回収する。その膜サンプルを両方の脳半休から取り除き、水でリンスし、顕微鏡スライド上で平らに広げる。スライド保湿器でスライドを１５分間乾燥させ、７０％グリセロール／水溶液でカバーガラスをかける。
【０２０３】
格子モノクロメーターおよび分光光度計を備えた蛍光顕微鏡を使用して、各硬膜サンプルのＦＩＴＣ−ＢＳＡ色素の量を定量する。その顕微鏡はパーソナルコンピューターと接続された電動ステージを備える。これはステージのコンピューター制御された動きを促進し、各硬膜サンプルの２５点（５００μｍステップ）において蛍光を測定する。三叉神経節の電気刺激によって誘発される溢出は同側作用である（すなわち、三叉神経節が刺激される硬膜側のみで生じる）。これにより、硬膜の残りの（刺激されていない）半分を対照として使用することが可能となる。溢出の割合（すなわち、刺激されていない側に対して刺激された側からの硬膜における溢出の量の割合）を算出する。ビヒクル単独または効果のない用量の試験化合物を投与した動物は約２の溢出の割合を有するが、全体で有効な処置は約１の割合を生じる。
【０２０４】
標準誤差（±ＳＥＭ）を用いて平均値として結果を示す。ＡＮＯＶＡを利用して全ての統計的評価を実施し、続いてダネット法（Ｄｕｎｎｅｔｔ’ｓ  Ｍｅｔｈｏｄ）により対照群と比較する。統計的有意性はｐ＜０．０５の場合とみなす。ＪＭＰ統計的分析ソフトウェア（ＳＡＳ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，バージョン６．０．２）を利用して統計的分析を実施する。
【０２０５】
実施例６２の化合物を上記のように実質的に試験し、用量依存的に溢出を効果的に遮断することが見出される（以下の表５を参照のこと）。結果として、本発明の化合物は片頭痛の治療に有用であることが予想される。
【表１６】
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【０２０６】
反応性代謝物生成に対する安定性
先行文献は、反応性代謝物生成と、特異的薬物反応（ＩＤＲ）として知られている臨床毒性との間の相関関係を示唆しているが、直接的な因果効果は規定されていない。反応性代謝物が臨床ＩＤＲにおいて役割を果たし得ると仮定すれば、酸化による生体内活性化の潜在性を最小化することが、そのような反応性と関連する構造的特徴を含む化合物の全体の安全性プロファイルを改善する手段として提案される（Ｂａｉｌｌｉｅ，Ｔｈｏｍａｓ  Ａ．，Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｓｔａｂｌｅ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ  Ｒｅａｃｔｉｖｅ  Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ｉｎ  Ｅａｒｌｙ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｔｒｉａｌｓ，Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｉｎ  Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ  ２２（２）２００９を参照のこと）。この目的を達成するために、本発明の代表的な化合物および関連化合物を、チエニル部分の酸化による生体内活性化の潜在性を理解するために、内因性求核試薬としてグルタチオンを用いる、ラット肝臓ミクロソーム捕捉アッセイを用いてスクリーニングする。試験した化合物の中で、Ｒ２ａおよびＲ２ｂが水素であるものが、チエニル部分の酸化を示唆するグルタチオンコンジュゲート形成の証拠を示すことが見出される。試験した化合物の中で、Ｒ２ａおよびＲ２ｂがフルオロであるものは、グルタチオンコンジュゲート形成を示さないことが見出される（以下の表３を参照のこと）。分子を含有するｇｅｍ−ジフルオロに対するグルタチオンコンジュゲート形成の欠如は、ｇｅｍ−ジフルオロ置換が、このアッセイにおいて試験される生体内活性化についての内在する化学的性質を低下させることを示唆する。
【０２０７】
【表１７】
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【０２０８】
いかなる製剤も含まずに直接本発明の方法に利用される化合物を投与することも可能であるが、その化合物は通常、活性成分として、式Ｉの少なくとも１つの化合物、またはその医薬的に許容可能な塩と、少なくとも１つの医薬的に許容可能な担体、希釈剤および／または賦形剤とを含む医薬組成物の形態で投与される。それらの組成物は、経口、鼻腔内、経皮、皮下、静脈内、筋肉内、および肺を含む種々の経路によって投与されてもよい。そのような医薬組成物およびそれらを調製するためのプロセスは当該技術分野において周知である。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ｅｄ．，２１ｓｔｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ  Ｃｏ．，２００５を参照のこと）
【０２０９】
組成物は好ましくは単位投薬形態で製剤化され、各投薬量は約０．１〜約５００ｍｇ、より通常は約１．０〜約２００ｍｇ、例えば約５〜５０ｍｇの間の活性成分を含む。用語「単位投薬形態」とは、ヒト被験体および他の動物に対する単一の投薬として適切な物理的に別個の単位を指し、各単位は、少なくとも１つの適切な医薬的に許容可能な担体、希釈剤および／または賦形剤と関連して、所望の治療効果を生じるように計算された所定量の活性物質を含む。
【０２１０】
式Ｉの化合物は一般に、広範囲の投薬範囲にわたって有効である。例えば、通常、１日当たりの用量は、約０．０１〜約５０ｍｇ／ｋｇ、より通常は約０．０５〜５．０ｍｇ／ｋｇ、および例えば０．１から１．０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲内である。一部の例において、上述の範囲の下限以下の投薬レベルがより適切であってもよく、一方、他の場合において、さらに多くの用量が、あらゆる有害な副作用を引き起こさずに利用されてもよく、従って、上述の投薬範囲は本発明の範囲を限定すると決して意図されるわけではない。実際に投与される化合物の量は、治療される病態、選択される投与経路、投与される実際の化合物（複数も含む）、個々の患者の年齢、体重および反応、ならびに患者の症状の重症度を含む、関連する状況を考慮して医師によって決定されることは理解されるだろう。
【国際調査報告】
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