(57)【要約】  方法の一実施形態では、方法は、複数のイディオタイプ調節薬理エフェクター（ＩＭＰ）（１、１ａ、１ｂ）を細胞集団中に導入するステップを含む。各ＩＭＰ（１、１ａ、１ｂ）は、検出ドメイン（２、２ａ、２ｂ）及び活性化ドメイン（３、３ａ、３ｂ）を含み得る。１つ又は複数のエピトープは検出ドメイン（２、２ａ、２ｂ）によって結合される。活性化ドメイン（３、３ａ、３ｂ）は結合に応答して活性化される。適用は、ウイルス感染、他の細胞内感染、癌、ベクター媒介性疾患、自己免疫疾患、細胞疾患、細胞増強、及び研究を含み得るが、これらに限られない。
2013534913.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞集団中に、複数のイディオタイプ調節薬理エフェクター（ＩＭＰ）の製造に関する指示を導入するステップを含み、複数の製造されるＩＭＰの各々が、
エピトープに対して親和性を有する検出ドメイン、及び検出ドメインに結合した活性化ドメイン
を含み、複数の製造されるＩＭＰのサブセットの各ＩＭＰの検出ドメインが、１つ又は複数のエピトープに結合するように構成されており、
複数の製造されるＩＭＰのサブセットの各ＩＭＰの活性化ドメインが、活性化し細胞集団において下流効果を引き起こすように構成されている、方法。
【請求項２】
前記指示がプラスミド上にコードされている、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
細胞集団が血流を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
細胞集団が組織培養物を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
検出ドメインが、対象の細胞中又は細胞上に見られるエピトープに対して親和性を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
活性化ドメインがプロカスパーゼ−９を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
活性化ドメインの活性化が、複数のＩＭＰのサブセットを隣接エピトープに結合させるステップを含み、複数のＩＭＰのサブセットの結合が、複数のＩＭＰのサブセットの活性化ドメインを互いに相互作用させる、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
複数の遺伝子工学的に作製されたイディオタイプ調節薬理エフェクター（ＩＭＰ）を細胞集団中に導入するステップであって、各ＩＭＰが
エピトープに対して親和性を有する検出ドメイン、及び検出ドメインに結合した活性化ドメイン
を含む、前記導入ステップ、
複数のＩＭＰのサブセットの各ＩＭＰの検出ドメインを１つ又は複数のエピトープに結合させるステップ、及び
複数のＩＭＰのサブセットの各ＩＭＰの活性化ドメインを活性化するステップであって、活性化が、細胞集団の少なくとも１つのサブセットの各細胞において下流効果を引き起こす、前記活性化ステップ
を含む、方法。
【請求項９】
下流効果が複数の細胞のサブセットの各細胞の終結を含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
細胞集団が血流を含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
細胞集団が組織培養物を含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
リンカー分子を使用して検出ドメインを活性化ドメインとコンジュゲートするステップをさらに含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
活性化ドメインの活性化が、複数のＩＭＰのサブセットを隣接エピトープに結合させるステップを含み、複数のＩＭＰのサブセットの結合が、複数のＩＭＰのサブセットの活性化ドメインを互いに相互作用させる、請求項８に記載の方法。
【請求項１４】
活性化ドメインが、
エフェクター分子、及び複数のＩＭＰの検出ドメインをパウチの孔に局在化させるホルダー分子を含有する多孔質ポリマーパウチ
を含み、複数のＩＭＰのサブセットの各ＩＭＰの検出ドメインを１つ又は複数のエピトープに結合させるステップが、
ホルダー分子を解離させ、エフェクター分子を放出するステップ
をさらに含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１５】
イディオタイプ特異的治療のためのシステムであって、
複数の遺伝子工学的に作製された非天然イディオタイプ調節薬理エフェクター（ＩＭＰ）を含み、各ＩＭＰが、
エピトープに対して親和性を有する検出ドメイン、及び
検出ドメインに結合した活性化ドメインを含み、活性化ドメインが、活性化されると細胞集団において下流効果を引き起こすように構成されている、上記システム。
【請求項１６】
検出ドメインと活性化ドメインとをコンジュゲートするリンカー分子をさらに含む、請求項１５に記載のシステム。
【請求項１７】
各ＩＭＰの検出ドメインが抗体断片を含む、請求項１５に記載のシステム。
【請求項１８】
各ＩＭＰの検出ドメインがヌクレオチド配列を含む、請求項１５に記載のシステム。
【請求項１９】
各ＩＭＰの検出ドメインが、細胞のクローン亜集団の抗原受容体が特異的である抗原を含む、請求項１５に記載のシステム。
【請求項２０】
各ＩＭＰの活性化ドメインが不活性カスパーゼ−９単量体を含む、請求項１５に記載のシステム。
【請求項２１】
各ＩＭＰの活性化ドメインが生体活性分子のサブユニットを含む、請求項１５に記載のシステム。
【請求項２２】
各ＩＭＰの活性化ドメインが毒素前駆体又は毒素変換酵素のいずれかを含む、請求項１５に記載のシステム。
【請求項２３】
活性化ドメインの活性化が、複数のＩＭＰのサブセットを隣接エピトープに結合させるステップを含み、複数のＩＭＰのサブセットの結合が、複数のＩＭＰのサブセットの活性化ドメインを互いに相互作用させる、請求項１５に記載のシステム。
【請求項２４】
イディオタイプ特異的治療のためのシステムであって、
複数のイディオタイプ調節薬理エフェクター（ＩＭＰ）の製造に関する指示を含み、複数の製造されるＩＭＰの各々が、
エピトープに対して親和性を有する検出ドメイン、及び
検出ドメインに結合した活性化ドメイン
を含み、複数の製造されるＩＭＰのサブセットの各ＩＭＰの検出ドメインが、１つ又は複数のエピトープに結合するように構成されており、
複数の製造されるＩＭＰのサブセットの各ＩＭＰの活性化ドメインが、活性化し細胞集団において下流効果を引き起こすように構成されている、上記システム。
【請求項２５】
指示がプラスミド上にコードされている、請求項２４に記載のシステム。
【請求項２６】
検出ドメイン（単数又は複数）及び活性化ドメイン（単数又は複数）がセルフアセンブリして機能的ＩＭＰを生成する、請求項２４に記載のシステム。
【請求項２７】
ＩＭＰのセルフアセンブリが、特異的ヌクレオチド配列に対するリボ核タンパク質サブユニットの親和性により達成される、請求項２４に記載のシステム。
【請求項２８】
活性化ドメインの活性化が、複数のＩＭＰのサブセットを隣接エピトープに結合させるステップを含み、複数のＩＭＰのサブセットの結合が、複数のＩＭＰのサブセットの活性化ドメインを互いに相互作用させる、請求項２４に記載のシステム。
【請求項２９】
検出ドメインが、生成されるＩＭＰが突然変異した標的に対して利用可能となるようにその親和性が変更されてもよい、請求項２４に記載のシステム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は一般に、細胞及び生物のイディオタイプ特異的治療に関し、より詳細には遺伝子工学的に作製されたイディオタイプ調節薬理エフェクター（ＩＭＰ）を使用する細胞及び生物のイディオタイプ特異的治療に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒトの体内では、各々の細胞型は、タンパク質、脂質、糖、ヌクレオチド配列、及び他の代謝産物の特有な集合体を発現する。これらの各々は、所定の親和性を有する分子が相互作用することができるエピトープを有する潜在的抗原である。前記抗原の発現は、細胞の状態及びその環境によって改変される。この発現は、ウイルス又は細胞内細菌がそれらの感染時に外来物質を細胞中に導入するとき、さらに改変された状態になる。特にウイルスは細胞機構を乗っ取り、細胞から発芽し他の細胞に感染する多くのビリオンコピーを生成する。
【０００３】
人がウイルスに感染すると、免疫系は、感染細胞を検出し破壊しようと試みる様々な機構を有する。残念ながら、多くのウイルスはこの防御を避けるように適合した機構を有しており、複製したビリオンを送って他の細胞に感染する。これらの適合は、ウイルスが２つの重要な特徴、速やかな複製及び迅速な突然変異速度を有するので成功する。類似した属性は、癌、兵器化された生物剤、及び他の感染にも特徴的である。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
方法の一実施形態では、方法は、複数の遺伝子工学的に作製されたイディオタイプ調節薬理エフェクター（ＩＭＰ）を細胞集団中に導入するステップを含む。各々のＩＭＰは、検出ドメイン及び活性化ドメインを含むことができる。１つ又は複数のエピトープは検出ドメインによって結合される。活性化ドメインは結合に応答して活性化される。
【０００５】
システムの一実施形態では、複数のイディオタイプ調節薬理エフェクターの各々は、検出ドメイン及び活性化ドメインを含む。検出ドメインは、エピトープに対して親和性を有する。活性化ドメインは、活性化されると細胞集団において下流効果を引き起こすように構成されている。
【０００６】
別のシステムの実施形態では、複数のイディオタイプ調節薬理エフェクターの製造に関する指示が存在する。複数のイディオタイプ調節薬理エフェクターの各々は、検出ドメイン及び活性化ドメインを含む。複数の製造されるＩＭＰのサブセットの各ＩＭＰの検出ドメインは、１つ又は複数のエピトープに結合するように構成されている。複数の製造されるＩＭＰのサブセットの各ＩＭＰの活性化ドメインは、活性化し細胞集団において下流効果を引き起こすように構成されている。
【０００７】
方法の特定の実施形態は、幾つかの技術的利点を有し得る。例えば、幾つかの実施形態は、疾患の細胞又は病原細胞を終結させることが可能であってもよい。幾つかの他の実施形態は、細胞を増強させることを含み得る。幾つかのさらなる実施形態は、人獣共通感染症の保因者を排除することができる。さらに他の実施形態は、移植に関連する合併症を減らすことができる。様々な実施形態は、前述の利点の幾つか、全てを含んでもよく、又は前述の利点を含まなくともよい。特定の実施形態は、他の利点を含むことができる。
【０００８】
本開示及びその利点をより完全に理解するために、添付の図面と共に以下の説明をここで参照し、図面中、同じ参照符号は同じ部分を表す。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】一実施形態による、検出ドメイン及び活性化ドメインを含む遺伝子工学的に作製されたイディオタイプ調節薬理エフェクターの一例を示す図である。
【００１０】
【図２Ａ】一実施形態による、細胞集団中に導入することができる多数の非結合型イディオタイプ調節薬理エフェクターの一例を示す図である。
【００１１】
【図２Ｂ】一実施形態による、多数のイディオタイプ調節薬理エフェクターの検出ドメインへの多数の隣接イディオタイプエピトープの結合の一例を示す図である。
【００１２】
【図２Ｃ】一実施形態による、多量体化イディオタイプ調節薬理エフェクターと内因性カスケードメディエーターとの相互作用を示す図である。
【００１３】
【図３Ａ】一実施形態による、細胞集団中に導入することができる多数の非結合型イディオタイプ調節薬理エフェクターの一例を示す図である。
【００１４】
【図３Ｂ】一実施形態による、多数のイディオタイプ調節薬理エフェクターの検出ドメインへの多数の隣接イディオタイプエピトープの結合の一例を示す図である。
【００１５】
【図３Ｃ】一実施形態による、多量体化イディオタイプ調節薬理エフェクターと内因性カスケードメディエーターとの相互作用を示す図である。
【００１６】
【図４】一実施形態による、幾つかのエフェクター分子を含有するポリマーパウチの孔を塞ぐことができる抗体又は抗体様複合体を示す図である。
【００１７】
【図５】一実施形態による、リンカーにより活性化ドメインに連結した検出ドメインを示す図である。
【００１８】
【図６】一実施形態による、イディオタイプ病原Ｂ細胞の表面抗原受容体への複数のイディオタイプ調節薬理エフェクターの結合を示す図である。
【００１９】
【図７】一実施形態による、標的細胞に細胞中へのイディオタイプ調節薬理エフェクターの導入に関する指示を与える、イディオタイプ調節薬理エフェクターの例示的なプラスミド構築物を示す図である。
【００２０】
【図８Ａ】図７からの例示的なプラスミド構築物の産物の一例を示す図である。
【００２１】
【図８Ｂ】図８Ａ中に示した部分がセルフアセンブリした組合せの一例を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
以下に論じた図１〜８Ｂ、及び本特許文書中で本開示の原理を記載するために使用される様々な実施形態は単なる例示によるものであり、本開示の範囲を限定するとは決して解釈されるべきではない。当業者には、本開示の原理を任意の適切に成された構成で実施できることが理解されよう。しかしながら、本発明は多くの異なる形態で具体化することができ、本明細書中に述べる実施形態に限定されると解釈されるべきでない。むしろ、開示された実施形態は、本開示が一貫した完全なものであり本発明の範囲を当業者に伝えるように提供されている。本発明の原理及び特徴は、本発明の範囲から逸脱せずに、様々な多数の実施形態において利用することができる。
【００２３】
図１は、一実施形態による、遺伝子工学的に作製されたイディオタイプ調節薬理エフェクター（１）の一例を示す。図示した例では、ＩＭＰ（１）は検出ドメイン（２）及び活性化ドメイン（３）を含む。本明細書中で使用される用語「検出ドメイン」は、対象の分子に対して親和性を有する任意の分子（例えばタンパク質、ヌクレオチド配列、脂質）を指す。本明細書中で使用される用語「活性化ドメイン」は、検出ドメインの結合に応答して活性化されて細胞又はその環境と相互作用することができる任意の分子（例えばタンパク質、ヌクレオチド配列、物質）を指す。特定の実施形態では、「遺伝子工学的に作製された」イディオタイプ調節薬理エフェクター又はＩＭＰ（１）は、独特の使用がある生体物質の非天然製造物又は組成物を指すことができる。さらに他の実施形態では、ＩＭＰ又はＩＭＰ生成物質（例えば、ヌクレオチド）を、それらの部分を生成するために身体中に導入することができ、例えば、ＩＭＰをコードするプラスミドを導入することができる。様々な実施形態を以下に記載する。
【００２４】
図２Ａは、一実施形態による、細胞集団中に導入することができる多数の非結合型イディオタイプ調節薬理エフェクター（１ａ、１ｂ）の一例を示す。これらのＩＭＰ（１ａ、１ｂ）の検出ドメイン（２ａ、２ｂ）は、特定のイディオタイプの細胞中に存在するとき、所定の標的抗原（４）上の隣接エピトープに対して親和性を有する。本明細書中で使用される用語「エピトープ」は、前に定義した検出ドメインが相互作用又は結合する、対象の分子の任意の部分を指す。本明細書中で使用される用語「イディオタイプ（ｉｄｅｏｔｙｐｅ）」、「イディオタイプの（ｉｄｅｏｔｙｐｉｃａｌ）」及び「イディオタイプによる（ｉｄｅｏｔｙｐｉｃａｌｌｙ）」は、細胞のサブセット中又は上で発現される抗原のセット（及びそれらの付随するエピトープ）の特有性又は示差的発現を指す。本明細書中で使用される用語「抗原」は、エピトープを含む任意の対象の分子を指す。検出ドメイン（２ａ、２ｂ）は、用途に応じて同一であってよく又は異なってよい。例えば、反復性エピトープを含む抗原（４）を検出する際には、同一の検出ドメイン（２ａ、２ｂ）が有利である可能性がある。隣接エピトープへの２個以上のイディオタイプ調節薬理エフェクター（１ａ、１ｂ）の結合は、図２Ｂ中に示されるように、活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）の二量体化又は多量体化をもたらす。本明細書中で使用される用語「二量体化」及び「多量体化」は、同種又は異種であれ分子の同時局在化を指し、これは前記分子の活性を変化させる。検出ドメインと同様に、活性化ドメインは、適用に応じて同一であってよく又は異なってよい。例えば、細胞死を誘導するための活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）は不活性カスパーゼ−９単量体であってもよく、それは二量体化すると活性型に変換される。この場合、同一の活性化ドメインが有利であり得る。
【００２５】
図２Ｃは、一実施形態による、多量体化イディオタイプ調節薬理エフェクターと細胞由来の内因性カスケードメディエーター（５）との相互作用を示す図である。これは、対象の抗原のエピトープ（４）を含有する細胞において、所望の下流効果のカスケードを誘導する。本明細書中で使用される用語「下流効果」は、活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）と内因性分子（５）との相互作用の任意の生物学的結果を指すことができる。特定の状況では、対象の抗原のエピトープ（４）は、対象のウイルス、癌、又はその他であれ、所望の標的細胞型（即ちイディオタイプ）で発現され得る。結果として、これらの下流効果はこれらの標的細胞において誘導され、これによって下流効果の特異性を与えることができる。幾つかの実施形態では、ある種のリンカー（例えばコラーゲン）は、図５中に示したように検出ドメインと活性化ドメインとをコンジュゲートさせることができる。このリンカーの長さを調節して下流効果を最大にすることができる。
【００２６】
イディオタイプ調節薬理エフェクター（１）を製造することができる幾つかの方法が存在する。一例では、標的エピトープに対して特異的親和性があるＦＡｂ抗体断片を、合成コンジュゲートプロセスによってコラーゲンリンカーにより、エフェクタードメインに共有結合によりコンジュゲートさせることが可能である。他の例では、アミノホスホネート基は、ＦＡｂ断片のＣ末端を不活性カスパーゼのＮ末端と化学結合させることが可能である。別の例では、完全複合体に関する遺伝暗号は、後でコンジュゲートするユニット又はサブユニットとして複合体を大量に生成することができる細菌、ヒト、又は他の生物種中に導入されてよい。さらに別の例では、細胞中のヌクレオチド配列の標的エピトープに対して特異的なアンチセンスヌクレオチド配列（２ａ、２ｂ）を、活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）に化学的にコンジュゲートさせることが可能である。これは、カルボジイミド又は他の利用可能なコンジュゲート手段を介して達成することができる。非制限的な例として、一例では、ヌクレオチド検出ドメイン（２ａ、２ｂ）は、シュタウディンガーのライゲーション化学により、活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）上の活性化エステル基に連結することが可能であるアジドを含有する。別の例では、ヌクレオチド検出ドメイン（２ａ、２ｂ）は、氷酢酸における改変型ピクテ−スペングラーのライゲーションにより、活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）上の末端ヒスチジン残基に連結することが可能であるベンズアルデヒド基を含有することができる。本開示の出願人により、前述の両方のライゲーション法を使用して有効なプロトタイプが作製されている。さらに他の例では、他のライゲーション法を利用することができる。これらの例は、実施形態を製造することができる方法の幾つかにすぎず、限定的であると考えるべきではない。ＩＭＰの製造のさらなる例は、図２Ａ〜６を参照しながら以下に記載する。
【００２７】
図３Ａは、一実施形態による、細胞集団中に導入することができる多数の非結合型イディオタイプ調節薬理エフェクター（１ａ、１ｂ）の一例を示す。この実施形態では、検出ドメイン（２ａ、２ｂ）はアンチセンスヌクレオチド鎖を含むことができる。本明細書中で使用される用語「アンチセンス」及び「相補的」は、別のヌクレオチド鎖に対してコード親和性がある任意の長さのヌクレオチド配列を指し、非制限的な例として、配列５’−ＡＴＧＣＣ−３’は、配列５’−ＧＧＣＡＴ−３’に対して相補的又はアンチセンスであり得る。幾つかの実施形態では、活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）は、図１〜２Ｃ中に示した活性化ドメインと実質的に同じ機能を実行することができる。化学プロセスにおいてカルボジイミド又はある他の官能基若しくはリンカーにより、これらのエレメントをコンジュゲートさせて（２ａ、３ａ及び２ｂ、３ｂ）ＩＭＰ（１ａ、１ｂ）を形成することが可能である。
【００２８】
図３Ｂは、一実施形態による、多数のイディオタイプ調節薬理エフェクターの検出ドメイン（２ａ、２ｂ）への多数の隣接イディオタイプエピトープ（４）の結合の一例を示す。二量体化又は多量体化法を使用することができるこの実施形態では、エピトープ（４）は、対象の標的細胞に特有であり得るヌクレオチド鎖を含むことができる。一実施形態では、例えばこれらの鎖は、それが細胞に感染するときウイルスによって導入されるヌクレオチド配列を含むことができる。このような場合、検出ドメイン（２ａ、２ｂ）は、ウイルスによって導入されるものに対して相補的であるアンチセンスヌクレオチド配列であり得る。
【００２９】
図３Ｃは、一実施形態による、多量体化イディオタイプ調節薬理エフェクター（１ａ、１ｂ）と内因性カスケードメディエーター（５）との相互作用を示す。特定の状況では、ヌクレオチドエピトープ（４）は、対象のウイルス、癌、又はその他であれ、特定の標的細胞型（即ちイディオタイプ）で発現され得る。特定の他の状況では、ヌクレオチドエピトープは、特定の標的細胞型又はイディオタイプにおいて様々なレベルで発現され得る。
【００３０】
図４は、一実施形態による、幾つかのエフェクター分子（９）を含有するポリマーパウチ（６）の孔（７）を塞ぐことができる抗体又は抗体様複合体を示す。特定の実施形態では、これらの抗体又は抗体様複合体はＦｃ結合ホルダー分子（８）によって孔（７）中に保持される。幾つかの実施形態では、このホルダー分子は黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）の表面プロテインＡであってよい。孔（７）のこの封鎖によって、エフェクター分子（８）が細胞環境と相互作用しないようにすることができる。一実施形態の検出ドメイン（２）は、前の実施形態において述べたもののように、対象のエピトープに対して特異的であり得る。対象のエピトープの結合は、複合体の残り部分、活性化ドメイン（３）における立体配座の変化を誘導する。これはホルダー分子（８）を解離させ、次いでこれは孔（７）からエフェクター分子（９）を遊離させる。エフェクター分子（９）は環境中に流出し、相互作用して、下流効果を引き起こす。前の実施形態と同様に、これは細胞の死、又はある他の下流効果をもたらす可能性がある。
【００３１】
図７は、一実施形態による、標的細胞に細胞中へのイディオタイプ調節薬理エフェクターの導入に関する指示を与える、イディオタイプ調節薬理エフェクターの例示的なプラスミド構築物（１３）を示す。プラスミド（１５）上に見られる様々なヌクレオチド配列は、数ある機能の中で、ヌクレオチド配列検出ドメイン（２ａ、２ｂ）及びタンパク質活性化ドメイン（３）の発現を促進することができる。図８Ａ中に示した一実施形態によれば、活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）は、リボ核タンパク質サブユニット（１７ａ、ｂ）とカスパーゼとの融合体を含むことができる。本明細書中で使用される用語「リボ核タンパク質」及び「核タンパク質」は、任意のヌクレオチド結合タンパク質又はタンパク質サブユニットを指し、それらは人為的に生成することができ、又は自然に見られる（例えば、リボスイッチ）。このような融合体は、広く利用されている組換え遺伝子技法を使用して生成することができる。検出ドメイン（２ａ、２ｂ）は、リボ核タンパク質結合特異的リボヌクレオチド配列（１６ａ、１６ｂ）と、対象の細胞中に見られる標的配列に対して相補的である配列との融合体を含むことができる。一例では、プラスミドにより細胞を誘導して、検出ドメインと活性化ドメインとの両方を細胞中に導入することができる。活性化ドメインは、検出ドメイン中に見られるリボ核タンパク質特異的リボヌクレオチド配列（１６ａ、１６ｂ）と結合するサブユニットリボ核タンパク質（１７ａ、ｂ）を含有するので、ＩＭＰは図８Ｂ中に示したようにセルフアセンブリすることができ、図３Ｃ中に記載した実施形態とほぼ同様に機能することができる。様々な取り込み配列（１４）は、細胞中への取り込みを誘導するためのプラスミドの一部分であり得る。本明細書中で使用される用語「取り込み配列」は、細胞が誘導されてプラスミドを細胞中に取り込ませる配列を指す。
【００３２】
幾つかの実施形態で必要とされ得る、細胞内で発現されたエピトープを検出するための細胞中へのＩＭＰの導入は、幾つかの機構によって実施することができる。改変型ウイルスベクター（ヌクレオチド物質の代わりの実施形態による）は、細胞中への実施形態の細胞特異的又は一般的導入をもたらすことができる。このような構築物は、遺伝子療法のために開発されており、この目的のために改変することができる。宿主ゲノム中に挿入されるヌクレオチド物質を注入するのではなく、これらの構築物はＩＭＰを含有することができる。他の潜在的な方法には、受容体介在性エンドサイトーシスがあり、これは異物を取り入れるために細胞及びウイルスなどによっても使用される。一例ではＩＭＰは、細胞の全て又はサブセット上の表面受容体に対して親和性があるサブユニットを有することができる。結合の結果として、ＩＭＰを細胞中に運び込むことができる。一例ではプラスミドは、幾つかの細胞により認識され取り込まれる配列（「取り込み配列」）を含有することができる。前に言及したように、本明細書中で使用される用語「取り込み配列」は、細胞を誘導してプラスミドを細胞中に取り込ませる配列を指す。幾つかの例では、一実施形態をコロイド縣濁液中でカプセル化することができ、これによって実施形態を、脂質二重層との結合が可能になるのに十分に両親媒性にすることができる。同様に、１つ又は複数のＩＭＰを含有するリポソームは、それらが細胞によりさらに取り込まれやすくすることができる物質でコーティングすることができる。例えば、一実施形態を含有するリポソームにおける一連の正電荷は、非特異的細胞二重層結合及び融合を可能にすることができる。特定ペプチドの結合は、リポソーム含有物の取り込みを助長するように手助けすることもできる。異なる細胞区画は異なる送達法を必要とし得る。これらの方法は、実施形態を細胞中に導入することができる方法の幾つかにすぎず、限定的であると考えるべきではない。さらに、全ての実施形態が、有効であるために細胞中に取り込まれることを必要とし得るわけではない。細胞移入機構のさらなる例は、図２Ａ〜６を参照しながら以下に記載する。
【００３３】
Ａ．ウイルス性疾患において使用することができる実施形態
様々な実施形態では、それに限られないがＨＩＶを含むウイルス性疾患を治療することができる。例えば、図１及び２中に示したものと同様の実施形態の使用は、アポトーシスによってＨＩＶ感染細胞を死に至らせることができる。本明細書中で使用される用語「アポトーシス」は、細胞が内部及び／又は外部シグナル伝達により誘導されて死に至るプログラムされた細胞死を指す。本明細書中で使用される用語「アポトーシスを起こす」は、細胞のアポトーシスの作用を指す。一実施形態では、イディオタイプ調節薬理エフェクター（１）の検出ドメイン（２）は、ＨＩＶ逆転写酵素（ＨＩＶ  ＲＴ）上の隣接エピトープ（４）に対して特異性を有する抗体断片であってよい。ＨＩＶ  ＲＴは、特有であり正常な非感染ヒト細胞中に見ることができないエピトープを発現する。これは、細胞の２つのイディオタイプ、感染型と非感染型との区別を可能にすることができる。前に記載したように、本明細書中で使用される用語「イディオタイプ」は、細胞のサブセット中又は上で発現される抗原のセットの特有性を指す。ＨＩＶ  ＲＴはウイルスが上首尾の細胞侵入を開始するのに必要であり、したがってあらゆるＨＩＶ感染細胞中に見られる。一実施形態の活性化ドメイン（３）は、Ｆａｓ結合デスドメインタンパク質（ＦＡＤＤ）であってよい。ＦＡＤＤが十分な数の細胞において自然に三量体化するとき、それは、下流にシグナル伝達して細胞を抹殺する細胞死誘導性シグナル伝達複合体（ＤＩＳＣ）のアセンブリを引き起こす。したがって、３つのＩＭＰ（１）がＨＩＶ  ＲＴ上の隣接エピトープ（４）と結合するとき、３つのＦＡＤＤ活性化ドメイン（３）は三量体化して下流ＤＩＳＣ形成を引き起こし得る。これは十分なＤＩＳＣが形成される細胞のアポトーシスを引き起こす可能性があり、これは感染したイディオタイプの細胞であってよい。
【００３４】
別の類似した実施形態をウイルス性疾患において使用することができる。図３Ａ〜Ｃ中に示したように、検出ドメイン（２ａ、２ｂ）は、ＲＮＡ又はＤＮＡのアンチセンスヌクレオチド鎖を含むことができる。例えばＨＩＶ感染では、細胞中に導入される又は感染の結果として細胞により生成される十分に保存されたＲＮＡ配列が存在する。一実施形態の検出ドメイン（２ａ、２ｂ）は、イディオタイプウイルスヌクレオチドの隣接保存配列（４）に対して相補的であるアンチセンスヌクレオチド鎖を含むことができる。これらの鎖はＰＣＲの使用により、又は細菌をトランスフェクトしてそれらを生成することにより製造することが可能である。一実施形態の活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）は、カスパーゼ−９の不活性単量体であってよい。カスパーゼ−９が自然に二量体化するとき、それは自己活性化状態になり、細胞アポトーシスを引き起こす。検出ドメイン（２）及び活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）を、氷酢酸における改変型ピクテ−スペングラーの反応を使用して、活性化ドメイン上のＮ末端ヒスチジン残基に相互作用するベンズアルデヒド基を介して一緒にコンジュゲートさせることが可能である。この人為的実施形態では、ＨＩＶ特異的ヌクレオチド鎖の隣接部分（４）へのアンチセンス鎖（２ａ、２ｂ）の結合によって、それらが二量体化することができるように活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）を接触させることが可能である。細胞は、これが十分な数で起こるとき、アポトーシスを起こす可能性がある。
【００３５】
別の類似した実施形態をウイルス性疾患において使用することができる。図３Ａ〜Ｃ中に示したように、検出ドメイン（２ａ、２ｂ）は、ＲＮＡ又はＤＮＡのアンチセンスヌクレオチド鎖を含むことができる。例えばＨＩＶ感染では、細胞中に導入される又は感染の結果として細胞により生成される十分に保存されたＲＮＡ配列が存在する。図７中に示した一実施形態のように、検出ドメイン（２）及び活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）はプラスミド上にコードされ得る。プラスミドは、対象の細胞中への取り込みを高める配列を含有することができる。図８Ａ中に示したように、プラスミドは検出ドメイン（２ａ、２ｂ）及び活性化ドメイン（３）をコードすることができる。この人為的実施形態では、活性化ドメインは、プロカスパーゼ−９サブユニットとリボ核タンパク質サブユニット（１７ａ、ｂ）との融合体を含むことができる。検出ドメインは、ＨＩＶ特異的ヌクレオチド鎖を認識するアンチセンスヌクレオチド鎖と、活性化ドメイン中に見られるリボ核タンパク質サブユニットに対して特異的であるリボ核タンパク質結合鎖（１６ａ、ｂ）との融合体を含むことができる。この人為的実施形態では、プラスミドを含有する細胞は、検出ドメインのリボ核タンパク質結合ヌクレオチド部分（１６ａ、ｂ）と活性化ドメインのリボ核タンパク質サブユニット部分（１７ａ、ｂ）との相互作用により、図８Ｂ中に示したようにセルフアセンブリするドメインを生成する。この人為的実施形態では、ＨＩＶ特異的ヌクレオチド鎖の隣接部分（４）へのアンチセンス鎖（２ａ、２ｂ）の結合によって、それらが二量体化することができるように活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）を接触させることが可能である。細胞は、これが十分な数で起こるとき、アポトーシスを起こす可能性がある。
【００３６】
既存の治療を使用して、ＨＩＶを含むウイルス性疾患と闘うこともできるが、イディオタイプ調節薬理エフェクター（ＩＭＰ）はこれらの治療に優る幾つかの利点を与える。何よりも先に、本開示の様々な実施形態は、回避変異体（ｅｓｃａｐｅ  ｖａｒｉａｎｔ）がウイルスによって生成され得る前に、感染細胞の終結を可能にすることができる。ＩＭＰにより検出されるエピトープは、それらが保存状態であるように選択され得るので、任意の所与のウイルスの広く突然変異した株でさえ、依然としてそれらを発現することができる。さらに、所与の細胞におけるウイルス株は全て（それらを優れた回避変異体にし得る突然変異を有するウイルス株でさえ）、細胞がアポトーシスするとき、破壊される可能性がある。これは、ＩＭＰが、既存の治療と異なり、ウイルスの進化上優れた株を自然に選択する可能性はないことを意味する。これは、ＩＭＰがウイルスにより発達する耐性機構を引き起こす可能性はなく、それらによって影響を受ける可能性もないことをさらに意味することができる。これは、現在利用可能な抗ウイルス薬及び抗生物質とは正に対照的である。ＩＭＰの別の利点は、それらの有効性の範囲であり得る。大部分の現在の抗ウイルス剤はウイルスの増殖に干渉するのみである一方で、ＩＭＰは感染を完全に除去することができる。これは、ＩＭＰは長期の治療を必要とする可能性がないので既存の治療よりはるかにコスト効率が良い可能性があるというさらなる利点を与える。さらに、疾患の完全な除去は、さらなる伝播のリスクを排除することができる。前述の利点の全てと関連して、ＩＭＰは他の治療の望ましくない副作用を回避することができる。これらは特に、リポジストロフィー、肝臓毒性、及び炎症を含むことができる。これらの副作用によって、大部分の患者は治療を差し控える結果となる（例えば、ＨＩＶ感染に関してＨＡＡＲＴを経験する患者の２５％）。これらの副作用無しで、ＩＭＰはより高い治療コンプライアンスをもたらすことができる。
【００３７】
前の例は、ＨＩＶエピトープを標的にし得るＩＭＰを記載するが、これら及び他の実施形態を他のウイルス性疾患のために調節することができる。これは例えば、一般的な風邪を引き起こすウイルス、デング熱、エプスタインバール、ＨＰＶ、ハンタウイルス、様々な型の肝炎、ヘルペス、インフルエンザ、ロタウイルス、及びその他を含み得る。したがって、本実施形態はこれらの例に限定されるべきでない。これらは、ＨＩＶと闘うことができるＩＭＰの唯一の実施形態でもない。様々な実施形態を同時に使用することもできる（即ち、様々な検出ドメイン及び様々な活性化ドメイン）。これは、それが潜在的な耐性機構に対する冗長性をもたらし得る点で利点を与えることができる。
【００３８】
Ｂ．他の感染性細胞内疾患において使用することができる実施形態
ＩＭＰの様々な実施形態は、細菌又は寄生虫のような細胞内病原生物に対して働くことも可能である。リケッチア属（Ｒｉｃｈｅｔｔｓｉａ）及びクラミジア属（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ）種を含むこれらの病原となる病原体は、ウイルスの問題と類似した問題を提起し得る。これらも、正常な非感染細胞中に見ることができない特有なエピトープを発現する。前に記載したように、細胞は感染型及び非感染型のイディオタイプに分類することができる。
【００３９】
クラミジア感染を治療するための特定の実施形態では、レクチンである検出ドメイン（２）が存在してよい。レクチンは天然に見られ、特異的細菌の表面上で頻繁に発現される特異的糖と結合することができる。例えば幾つかのレクチンは、クラミジア種上で発現される糖に対して非常に特異的である。この実施形態における活性化ドメイン（３）は、様々な抗菌剤を含むことができる。図４中に示したパウチベースの実施形態を使用する一実施形態では、エフェクター分子（９）はペプチドグリカンリアーゼのような抗菌剤を含むことができる。ペプチドグリカンリアーゼは、大部分の細菌の表面上に見られる防護壁を消化する酵素である。イディオタイプ細胞中の侵入細菌細胞壁上に見られる特異的糖へのレクチン（２）の結合時に、ペプチドグリカンリアーゼは遊離して細菌細胞防護壁を消化し得る。
【００４０】
前の例はクラミジア感染に対する一実施形態を使用してＩＭＰを記載する一方で多くの異なる実施形態が様々な細胞内病原体に関して可能である。例えば、活性化ドメインは細胞におけるアポトーシスをシグナル伝達することが可能であり、細胞の死は細胞内病原体を排除する可能性もある。
【００４１】
Ｃ．癌の治療において使用することができる実施形態
ＩＭＰの様々な実施形態を使用して、癌を治療及び／又は予防することも可能である。悪性細胞は、これらの細胞に特有又は豊富のいずれかであるエピトープを発現できる点で、イディオタイプであってよい。本明細書中で使用される用語「悪性細胞」又は「癌細胞」は、細胞中の遺伝的及び／又は代謝変化の結果として制御不能に増殖する任意の細胞を指す。これらのエピトープは、状況に応じてそれらの発現レベル及び分布が変わり得る。幾つかのエピトープは全て又は大部分の癌型において発現され、一方他のエピトープは幾つかにのみ存在する。幾つかのエピトープは非悪性細胞において決して発現される可能性はなく、一方他のエピトープは、悪性細胞においてのみ高い発現レベルを有する可能性がある。
【００４２】
癌細胞を排除するための特定の実施形態では、幾つかの癌中に見られるタンパク質ｐ５３（４）の突然変異型に対して特異的な抗体断片である検出ドメイン（２）が存在してよい。活性化ドメイン（３）は不活性カスパーゼ−９単量体を含むことができる。悪性イディオタイプの細胞では、多数のＩＭＰ（１）の検出ドメイン（２）は突然変異型ｐ５３（４）と結合することができる。それらの活性化ドメイン（３）は二量体化して、細胞において下流シグナル伝達を引き起こすことができる。このシグナル伝達が十分なレベルに達したとき、細胞はアポトーシスを起こす可能性がある。
【００４３】
前立腺癌を排除するための別の実施形態では、検出ドメイン（２）はＰＳＡ（前立腺特異的抗原）に対して特異的な抗体断片を含むことができる。ＰＳＡは癌細胞のみではなく全ての前立腺細胞のイディオタイプである一方で、それは診断された後の前立腺癌に対処する際により有効である可能性がある。活性化ドメイン（３）は不活性カスパーゼ−９単量体を含むことができる。少量で投与される場合、実施形態は自然な細胞自殺の閾値を低下させることが可能である。癌細胞では、これは非疾患の細胞中より低いレベルで細胞死を誘導することができる。
【００４４】
慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）を排除するためのさらに別の実施形態では、癌性の未熟な白血球は転座の結果として制御不能に増殖する。この転座は易切断領域とＡｂｌ１との融合体を作り出して、制御されない増殖をもたらす。図１中の実施形態と類似した検出ドメイン（２ａ、２ｂ）は、Ａｂｌ１タンパク質の一部及び易切断領域タンパク質（４）の一部に対する抗体ＦＡｂ断片であってよい。図３Ｃ中の実施形態と類似した検出ドメイン（２ａ、２ｂ）は、Ａｂｌ１ヌクレオチド配列の一部及び易切断領域ヌクレオチド配列の一部に対して特異的なヌクレオチド配列を含むことができる。活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）は不活性カスパーゼ−９単量体を含むことができる。イディオタイプＣＭＬ細胞（即ち、融合タンパク質を発現するもの）では、２つの異なる検出ドメイン（２ａ、２ｂ）は結合して２つの活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）を一緒にすることができる。これらの活性化ドメインは相互作用して、細胞死を引き起こすことができる。これによって癌細胞を排除することができる。
【００４５】
さらに別の実施形態では、図３Ａ〜Ｃ中に示したように、検出ドメイン（２ａ、２ｂ）はＲＮＡ又はＤＮＡのアンチセンスヌクレオチド鎖を含むことができる。例えばＣＭＬでは、癌の一部として細胞により生成される十分に保存された配列が存在する。図７中に示す一実施形態のように、検出ドメイン（２）及び活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）はプラスミド上にコードされ得る。プラスミドは、対象の細胞中への取り込みを高める配列を含有することができる。図８Ａ中に示したように、プラスミドは検出ドメイン（２ａ、２ｂ）及び活性化ドメイン（３）をコードすることができる。この人為的実施形態では、活性化ドメインは、リボ核タンパク質サブユニット（１７ａ、ｂ）とプロカスパーゼ−９サブユニットとの融合体を含むことができる。検出ドメインは、活性化ドメイン中に見られるリボ核タンパク質サブユニットに対して特異的であるリボ核タンパク質結合鎖（１６ａ、ｂ）と、癌の一部として細胞により生成されたヌクレオチド配列を認識する１つ又は複数のアンチセンスヌクレオチド鎖との融合体を含むことができる。この人為的実施形態では、プラスミドを含有する細胞は、検出ドメインのリボ核タンパク質結合ヌクレオチド部分（１６ａ、ｂ）と活性化ドメインのリボ核タンパク質サブユニット部分（１７ａ、ｂ）との相互作用により、図８Ｂ中に示すようにセルフアセンブリするドメインを生成する。この人為的実施形態では、ヌクレオチド鎖の隣接部分（４）へのアンチセンス鎖（２ａ、２ｂ）の結合によって、それらが二量体化することができるように活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）を接触させることが可能である。細胞は、これが十分な数で起こるとき、アポトーシスを起こす可能性がある。
【００４６】
癌の治療においてＩＭＰは、それらが標的イディオタイプ癌細胞のみに実質的に影響を与えることができるという別の利点を有し得る。これによって非悪性細胞は治療の効果から免れることができる。現在の癌治療は、細胞増殖を妨害する薬剤を利用することが多いが、この妨害は重度の二次的損傷及び副作用を引き起こす。非悪性細胞を免れさせることによって、ＩＭＰは化学療法剤及び放射線療法の相当な副作用を防ぐことができる。さらに、化学療法剤及び放射線療法はショットガン法を取り入れて細胞を増殖させる。より新たな療法及びヒト免疫系は、外部でこのような細胞を認識することによりさらに標的化した応答を作り出そうと試みるが、癌細胞は急速に突然変異し、それらの表面抗原は隠れていることが多い。一方ＩＭＰは、隠れている又は突然変異できる可能性が低い細胞内のエピトープを認識することによって、癌細胞のサブセットのみではなく全てを標的にすることができる。治療の特異性と効力とのこの改善された組合せは、一部の患者において癌の完全な撲滅をもたらすことができる。
【００４７】
前の例は特定の癌関連抗原に対する実施形態を使用してＩＭＰを記載する一方で、多くの異なる実施形態が様々な癌及び患者型ために可能である。さらに、異常なヌクレオチド鎖又は他の代謝産物は、同様に効果的な検出されるエピトープをもたらすことができる。前述のこれらの例は、癌を標的にする他の実施形態を限定するとして解釈すべきではない。
【００４８】
Ｄ．細胞外細菌感染の治療において使用することができる実施形態
ＩＭＰの様々な実施形態を使用して、細胞外感染を治療することも可能である。抗ウイルス薬に関して、細菌性疾患ための既存の治療（即ち、抗生物質）は、耐性機構が進化した病原体の自然選択に助力する。抗生物質耐性は、特に抗生物質と多数の病原生物とが頻繁に接触する病院のような環境において、一般的な問題である。抗生物質に関する１つの問題は、毒性細菌に対するそれらの非特異性である。本明細書中で使用される用語「毒性」は、定住生物が宿主生物中で疾患を引き起こすのを手助けする遺伝子を発現する任意の定住生物の状態を指す。ヒト中及び上に見られる大部分の細菌は毒性ではなく、時折「無毒性」株と呼ばれる。残念ながら抗生物質は一般に、毒性及び無毒性生物の両方を標的にする。さらに、ＸＤＲ結核及びＭＲＳＡを含む多くの毒性株は、既存の抗生物質に対する最も強い耐性機構が発達した株である。したがって、抗生物質を用いた個体の治療は、同じ供給源において競合する無毒性株を取り除くことにより、毒性株が分散するのを実際に手助けすることができる。
【００４９】
さらに事を複雑にするのは、任意の所与の細菌は、毒性遺伝子が発現することにより、無毒性状態から毒性状態に切り替わる可能性があることである。本明細書中で使用される用語「毒性遺伝子」及び「毒性因子」は、定住生物が宿主生物中で疾患を引き起こすのを手助けする定住生物の遺伝子及び遺伝子産物を指す。毒性因子は、数例挙げると、様々な毒素、接着性分子（インバシン）、分泌系タンパク質、酵素、カプセルタンパク質、及び免疫抑制物質を含むことができる。所与の種における細菌の全ての株が、任意の所与の時期に毒性遺伝子を発現する、又はさらに有するわけではない。しかしながら、任意の所与の時期に毒性である全ての生物は、幾つかの毒性遺伝子を発現する。これらの毒性遺伝子からのｍＲＮＡ及びタンパク質の高レベルでの発現は毒性細胞に特有であり、これによってそれらをイディオタイプにする可能性がある。これらの特定のイディオタイプ細胞はヒトではなく、むしろ細菌細胞であることに留意されたい。
【００５０】
毒性黄色ブドウ球菌を標的とするＩＭＰ（１ａ、２ｂ）の特定の実施形態では、検出ドメイン（２ａ、２ｂ）はα−ヘモリシン又はＨｌａに対して特異的である抗体断片（４）を含み得る。Ｈｌａは、同じ細菌の無毒性株ではなく毒性黄色ブドウ球菌においてのみ発現される特に強力な毒素である。活性化ドメイン（３）は、二量体としてのみ有効である抗菌性毒素の単量体を含み得る。α−ヘモリシン上の隣接エピトープが毒性イディオタイプの黄色ブドウ球菌細胞の内部で検出ドメイン（２ａ、２ｂ）によって検出される場合、活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）が接触して二量体化する可能性がある。これは毒性細菌の死を引き起こすことができるが、無毒性株及び種を免れさせることができる。
【００５１】
ＩＭＰの前述の実施形態及び他の実施形態は、既存の抗生物質に優る幾つかの利点を有し得る。第１にＩＭＰは、現在耐性がある細菌の耐性機構を迂回することができる。第２に、潜在的に毒性である株では、ＩＭＰは毒性因子を発現しない変異株を自然に選択するのを手助けすることができる。これは、ＩＭＰによって及ぼされる進化圧は、古典的な抗生物質のそれと正反対であり得ることを意味する。古典的な抗生物質は、抗生物質を直接不活性化する毒性遺伝子を発現することができる株を選択し、一方ＩＭＰは、毒性因子の発現を完全に回避する株を選択することができる。第３にＩＭＰが、無毒の片利共生生物に影響を与える可能性はない。これは、ＩＭＰを使用する患者が、抗生物質を摂取したときのように他の感染の影響を受けやすくなる可能性はないことを意味する。ＩＭＰは、毒性生物に優る進化上の利点を無毒の片利共生生物に実際に与えて、患者の細菌フローラのバランスを好ましい平衡状態で保つことができる。
【００５２】
Ｅ．ベクター媒介性寄生虫の撲滅において使用することができる実施形態
ＩＭＰの様々な実施形態を使用して、ベクター媒介性寄生虫を治療することも可能である。本明細書中で使用される用語「ベクター媒介性寄生虫」は、蚊、ダニ、又は幾つかの他の媒介物のような「ベクター」生物によりヒト及び／又は他の動物に運ばれる寄生生物を指す。これらの寄生虫は、細菌、真菌、酵母、及び原生動物を含むことができる。これらの疾患は、多数の感染保有宿主が存在することがよくある点で特定の問題を提示する。本明細書中で使用される用語「保有宿主」は、寄生生物が増殖及び繁殖し、最終的にはベクターにより他の動物又はヒトに運ばれ得るヒト以外の動物を指す。保有宿主は病状を寄生虫により経験することがある又は経験することがない。このような寄生虫及びそれらの疾患の例には、数例挙げると、（それぞれ、ツェツェバエ及びアサシンバグ由来のトリパノソームによって引き起こされる）睡眠病及びシャーガス病、（ダニ由来のボレリア・ブルグドフェリ（Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ）によって引き起こされる）ライム病、及び（様々な節足動物由来の野兎病菌（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ  ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ）によって引き起こされる）野兎病がある。
【００５３】
ベクター減少プログラムが、このような寄生虫、特にマラリアを引き起こす原生動物寄生虫である熱帯熱マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）に対して使用されている。マラリアを保有する蚊が、化学物質を使用して潜在的保因者の集団を枯渇させる、このようなプログラムの標的となっている。残念ながら、これによって疾患は撲滅していない。第１に、所与の種の全ての蚊を死滅させることは、非常に困難であると思われる。第２に、所与の種の大部分の蚊を死滅させても、蚊が占める生態的地位のため、予想外で潜在的に危険な環境上の結果をもたらし得る。そこからベクターが疾患にかかる保有宿主動物の死滅は、同様に恐ろしい結果をもたらし得る。
【００５４】
ＩＭＰの特定の一実施形態では、マラリアを保有する蚊を標的とすることができる。全体の生物（蚊）は２つの指定イディオタイプ、保因者と非保因者とにグループ分けすることができることにここで留意されたい。検出ドメイン（２）は、原生動物の表面上で豊富に発現されるｖａｒ遺伝子産物に対して特異的な抗体断片を含むことができる。活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）は、節足動物特異的毒素の不活性サブユニットを含むことができる。この実施形態では、ヘテロ二量体化又はヘテロ多量体化によって活性毒素を生成することができる。このような実施形態は、ベクターである蚊が一般に血を吸う種にそれを注入することによって、蚊に導入することができる。蚊が動物の血を摂取するとき、それはＩＭＰ（１）も摂取する。それを利用可能な水源中に提供することによって、それを導入することもできる。プラスモジウム（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ）によってコロニー形成されていない蚊（即ち、非保因者イディオタイプ）では、ＩＭＰ（１）は結合するエピトープ（４）を有しておらず、したがって不活性状態であり得る。しかしながら、保因者である蚊では、活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）が二量体化又は多量体化して完全な毒素を形成することができる。十分な毒素の存在下では、保因者である蚊は死に至る可能性がある。
【００５５】
マラリアを保有する蚊を標的とするための同様の実施形態は、同じ検出ドメイン（２）を有し得るが、毒素をその活性型に変換するための、毒素前駆体又は弱性酵素のいずれかで構成される異なるＩＭＰ上に活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）を有する。２つの異なるＩＭＰ（１ａ、１ｂ）の検出ドメイン（２）が隣接エピトープ（４）に結合すると、酵素の相対的な非特異性のため溶液中では不可能であり得るように、毒素前駆体（３ａ）と弱性酵素（３ｂ）とが相互作用する。毒素前駆体が十分な量で変換された後、保因者は死に至る可能性がある。
【００５６】
ベクター媒介性寄生虫の保因者に対するＩＭＰの前述の実施形態及び他の実施形態は、幾つかの利点を有することができる。ＩＭＰは、実際に保因者のイディオタイプのものであるベクターのみを標的にすることができる。これはベクター集団のごく一部分であり得るので、それは、死に至った保因者によって空けられる可能性がある生態的地位が、同じ種の非保因者によって継ぎ目なく占められる可能性がある。これによって、治療の環境的影響を最小にすることができる。さらに、この例におけるＩＭＰは、寄生虫によるコロニー形成にそれら自体で耐性がある、任意の所与の種のベクターの自然選択を促進することができる。幾つかの疾患では、コロニー形成に耐性がある種が既に記載されている。これらの集団は、保因者が追加的な進化上の利点のため選択される領域において豊富であり得る。これらの治療の最終的な目的は、ヒト宿主への伝播を排除することであってよい。寄生虫のベクター源を断つことによって、寄生虫が伝播する可能性はもはやなくなる。このような伝播がない状態で、疾患を単一の地域から、又は世界全体から完全に撲滅することができる。追加的に、これらは全て、ヒト集団の免疫処置無しで実施することができる。
【００５７】
前の例は、ベクター媒介性マラリアに対するＩＭＰの使用を例示するものである。しかしながら、様々な方法で様々な寄生虫の疾患を標的とする、ＩＭＰの多くの他の実施形態が可能である。さらに、他の実施形態を使用してマラリアを標的とすることができる。例えば、一実施形態は、ベクターにＩＭＰを含有する溶液を直接与える手段を含む様々な他の手段によって、潜在的保因者ベクター集団に導入することができる。これらの供給物は、餌場自体が寄生虫によりコロニー形成された状態になり得ないように保護されてもよい。したがって、前の例は限定的であると考えるべきではない。
【００５８】
Ｆ．自己免疫障害において使用することができる実施形態
ＩＭＰの様々な実施形態を使用して、様々な自己免疫障害を治療することも可能である。本明細書中で使用される用語「自己免疫障害」、「自己免疫疾患」、又は「自己免疫症候群」は、ヒト免疫系が疾患を引き起こす又は悪化させる任意の疾患を指す。これは、主な害悪が免疫系によって引き起こされる、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、関節リウマチ（ＲＡ）、及びＩ型糖尿病、並びに免疫増殖性障害（免疫細胞を伴う癌）、移植のシナリオ、アレルギー、及び感染性疾患のような、古典的な自己免疫障害を含むことができる。
【００５９】
免疫系のＢ細胞及びＴ細胞は両方とも、ヒトの身体中の主要で特有な細胞である。それらは抗原受容体と呼ばれる広く様々な受容体を発現し、抗原受容体は身体全体で様々な抗原と結合する。本明細書中で使用される用語「抗原受容体」は、しばしばＢ細胞受容体（ＢＣＲ）とも呼ばれるＢ細胞上の受容体、膜結合Ｉｇ（ｍＩｇ）、及び抗体（Ａｂ）、並びにＴ細胞受容体（ＴＣＲ）とも呼ばれるＴ細胞上の受容体を指す。Ｂ又はＴ細胞の各々のクローン集団は、特定の抗原に対して特異的である１つの抗原受容体のみを発現する。本明細書中で使用される用語「クローン」は、同じ親Ｂ又はＴ細胞に由来する一群の細胞を指す。クローン細胞は単一のイディオタイプの細胞であってよく、これは類似したエピトープ（例えば、抗原受容体）を発現する細胞を意味する。
【００６０】
図５は、一実施形態による、リンカー（１０）により活性化ドメイン（３）に連結した検出ドメイン（２）を示す。検出ドメイン（２）は、細胞のクローン（及びイディオタイプ）亜集団が特定の抗原受容体を発現する抗原であってよい。活性化ドメイン（３）はＦａｓＬであってよい。ＦａｓＬは、三量体化すると、核細胞の表面上の受容体Ｆａｓと相互作用して、細胞の死を引き起こす下流シグナルを誘導することができる分子である。
【００６１】
図６は、一実施形態による、イディオタイプ病原Ｂ細胞（１１）の表面抗原受容体（４）への複数のイディオタイプ調節薬理エフェクター（１）の結合を示す。図５中と同様に、検出ドメイン（２）は、細胞のクローンイディオタイプ亜集団が特定の抗原受容体を発現する抗原であってよく、活性化ドメイン（３）はＦａｓＬであってよい。検出ドメイン（２）は、病原細胞（１１）の抗原受容体（４）と結合することができる。複数のイディオタイプ調節薬理エフェクターが結合すると、ＦａｓＬ活性化ドメイン（３）は三量体化する。ＦａｓＬが三量体化すると、それは細胞の表面上の受容体Ｆａｓ（１２）と相互作用して、下流シグナルを誘導することができる。これらの下流シグナルは細胞の死を引き起こすことができる。
【００６２】
バーキットリンパ腫のような免疫増殖性障害を治療するための特定のＩＭＰの実施形態では、悪性のＢ又はＴ細胞集団は単細胞に由来する。これは、悪性細胞集団がクローンであり、これらの細胞の各々が同じ又は密接に関連した抗原受容体を発現すること（即ち、同じイディオタイプを有する）を意味する。実施形態の検出ドメイン（２）は、癌細胞の抗原受容体（４）が特異的である抗原であってよい。免疫増殖性障害の場合、潜在的抗原のＥＬＩＳＡスクリーニングによって、これがどの抗原であるか解明することができる。実施形態の活性化ドメイン（３）は、三量体化すると、全ての核細胞の表面上に見られるＦａｓ受容体と相互作用することができるリガンドであるＦａｓＬであってよい。標的抗原受容体（４）は、検出ドメイン（２）を介してイディオタイプ病原細胞上のＩＭＰと相互作用することができる。これによって複数の活性化ドメイン（３）を密接にすることができ、それらが三量体化することができる。この三量体化の結果として、これらの活性化ドメインは前記細胞の表面上のＦａｓ受容体（１２）と相互作用して、細胞におけるアポトーシスを誘導する下流シグナル伝達を引き起こすことができる。これらの細胞の死によって疾患が除去される可能性がある。
【００６３】
前の実施形態及び以下の幾つかの実施形態を参照すると、実施形態がＢ細胞悪性腫瘍に対するものである場合、前記Ｂ細胞の表面上の抗体（抗原受容体）は、検出ドメイン（２）が結合するエピトープ（４）を実際にもたらすことができる。一方、前述の他の実施形態では、抗体は実施形態の検出ドメインの一部分であり得る。しかしながらこの例では、検出ドメイン（２）は、前記抗原受容体（４）が特異的である抗原を含むことができる。Ｂ細胞悪性腫瘍に対する一実施形態では、検出ドメイン（２）は、膜結合抗体に対して特異的である抗体も含むことができる。他のＩＭＰの実施形態を使用して、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）のような古典的な自己免疫障害を有する患者を治療することができる。古典的に定義される自己免疫疾患は、自己抗原に反応性であるＢ及びＴ細胞のスクリーニングにおいて、誤りのパターンを一般にたどる。本明細書中で使用される用語「自己抗原」は、ヒトの身体によって産生されるタンパク質及び他の代謝産物を指す。Ｂ及びＴ細胞が自己抗原に反応性であるとき、このような細胞は「自己反応性」と呼ばれる。これらの細胞が身体のスクリーニングプロセスを逃れるとき、それらは損傷を引き起こし、身体中の重要なプロセスを妨害する可能性がある。ＳＬＥを有する患者では、例えば、疾患関連のＢ及びＴ細胞は核抗原に自己反応性である。一実施形態の検出ドメイン（２）はこのような核抗原を含むことができる。これらはＥＬＩＳＡによって決定することが可能である。幾つかの前の実施形態と同様に、一実施形態の活性化ドメイン（３）はＦａｓＬを含むことができる。血流又はリンパ中に導入された後、複数のＩＭＰ（１）は自己反応性細胞イディオタイプ（１１）の抗原受容体（４）と結合し得る。これによって、多数のＩＭＰ（１）の活性化ドメイン（３）が一緒になって三量体化し得る。三量体化した活性化ドメイン（３）は前記細胞上のＦａｓ受容体（１２）と相互作用して、細胞のアポトーシスを誘導することができる。エピトープ（即ち、検出ドメインに対して特異的な抗原受容体）は、疾患に寄与しない細胞の表面上に存在し得ないので、これらの細胞を免れさせ得る。幾つかの自己免疫障害では、多数のイディオタイプが存在する可能性があり、別個の実施形態で標的とすることができる。
【００６４】
Ｔ細胞抗原受容体（ＴＣＲ）は、それらが他の細胞上のＭＨＣ分子という状況で抗原を認識する点で、Ｂ細胞受容体（ＢＣＲ）と異なる。したがって自己反応性Ｔ細胞を標的とすることにおいて、この違いに適応するために、検出ドメインのある程度の調節が必要とされる可能性がある。これは、ＭＨＣモチーフを検出ドメイン（２）に加えることを含み得る。
【００６５】
自己免疫障害を治療するためのさらに別の実施形態では、検出ドメイン（２ａ、２ｂ）は、図３Ａ〜Ｃ中に示したように、自己免疫Ｂ及び／又はＴ細胞中に見られる配列に対して特異的なＲＮＡ又はＤＮＡのアンチセンスヌクレオチド鎖を含むことができる。自己免疫Ｂ及びＴ細胞は、ウイルスによる変化又は体細胞組換えの結果として、特有なヌクレオチド配列を有する。本明細書中で使用される用語「体細胞組換え」は、Ｂ及びＴ細胞受容体の成熟中に起こるＶ（Ｄ）Ｊ組換えを指す。これらの特有な配列は、ＩＭＰを相補的ヌクレオチド鎖と共に使用して利用可能であるイディオタイプ変化である。任意の所与のイディオタイプの自己免疫Ｂ又はＴ細胞に関するこれらの配列の決定は、遺伝子配列決定及びサブトラクティブハイブリダイゼーションなどの簡潔で十分理解された技法を使用して実施することができる。このような細胞は、これらの試験のために患者から又は細胞培養物から抽出することができる。検出ドメインは、これらの特有な配列から簡単に逆方向に遺伝子工学的に作製することができる。図７中に示した一実施形態中のように、検出ドメイン（２）及び活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）をプラスミド上にコードすることができる。プラスミドは、対象の細胞中への取り込みを高める配列を含有することができる。図８Ａ中に示したように、プラスミドは検出ドメイン（２ａ、２ｂ）及び活性化ドメイン（３）をコードすることができる。この人為的実施形態では、活性化ドメインは、リボ核タンパク質サブユニット（１７ａ、ｂ）とプロカスパーゼ−９サブユニットとの融合体を含むことができる。検出ドメインは、活性化ドメイン中に見られるリボ核タンパク質サブユニットに対して特異的であるリボ核タンパク質結合鎖（１６ａ、ｂ）と、標的細胞中の前に論じたヌクレオチド配列を認識する１つ又は複数のアンチセンスヌクレオチド鎖との融合体を含むことができる。この人為的実施形態では、プラスミドを含有する細胞は、検出ドメインのリボ核タンパク質結合ヌクレオチド部分（１６ａ、ｂ）と活性化ドメインのリボ核タンパク質サブユニット部分（１７ａ、ｂ）との相互作用により、図８Ｂ中に示したようにセルフアセンブリするドメインを生成する。この人為的実施形態では、ヌクレオチド鎖の隣接部分（４）へのアンチセンス鎖（２ａ、２ｂ）の結合によって、それらが二量体化することができるように活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）を接触させることが可能である。細胞は、これが十分な数で起こるとき、アポトーシスを起こす可能性がある。他のＩＭＰの実施形態を使用してアレルギーと闘うことができる。本明細書中で使用される用語「アレルギー（ａｌｌｅｒｇｙ）」及び「アレルギー（ａｌｌｅｒｇｉｅｓ）」は、他の場合無害な外来抗原に対する免疫応答を指す。用語「外来抗原」は、身体によって産生されなかった代謝産物（例えばタンパク質、脂質、炭水化物）を指す。無害な外来抗原はしばしば身体中に見られ、通常は免疫応答を引き起こすべきでない。これらの抗原に対するあるクラスの抗体を産生するＢ細胞は、多くのこれらの過敏症の大部分である。前述の実施形態のように、アレルギーを引き起こすイディオタイプのＢ細胞を除去する目的の実施形態は、外来抗原である検出ドメイン（２）を有する可能性がある。前述のように、活性化ドメイン（３）はＦａｓＬであってよい。前と同様に、検出ドメイン（２）は、イディオタイプ病原細胞（１１）の抗原受容体（即ちエピトープ）のみと結合することができる。活性化ドメイン（３）は三量体化し、細胞の表面上のＦａｓ受容体（１２）と相互作用して、アポトーシスを引き起こすことができる。
【００６６】
他のＩＭＰの実施形態をさらに使用して、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）と闘うことができる。ＧＶＨＤでは、移植組織が新たな宿主中でそれらの免疫原性を保持し、宿主の既存の組織に対して損傷を引き起こす。これは一般に、移植片が宿主を実際に拒絶する移植片拒絶の逆であると考えられる。ドナー細胞の特有なＭＨＣ分子のＫＩＲと呼ばれる特異的抗原受容体を有する、ドナー組織のナチュラルキラー及びＮＫ  Ｔ細胞は新たな宿主組織を認識することができず、したがってそれが外来であると決定する。これがドナー組織による宿主の「拒絶」をもたらし、免疫応答が宿主に対して開始される。一実施形態では、検出ドメイン（２）はドナー細胞のＭＨＣ分子であってよい。活性化ドメイン（３）はＦａｓＬであってよい。前の例中と同様に、イディオタイプ調節薬理エフェクター（１）は、病原（ＮＫ及びＮＫ  Ｔ）細胞（１１）の抗原受容体と結合することができる。活性化ドメイン（３）は次いで三量体化し、Ｆａｓ受容体（１２）を介して死をシグナル伝達することができる。これによって望ましくない免疫細胞のドナー組織を除去することができ、ＧＶＨＤを防ぐことができる。
【００６７】
一方、他のＩＭＰの実施形態を使用して移植片拒絶と闘うこともできる。移植片拒絶は宿主によるドナー組織の拒絶であり、それは宿主細胞の少なくとも２つのイディオタイプセットによって扱われる。１つのサブセットは、ドナー組織の特有なＭＨＣを認識する抗原受容体（ＴＣＲ）を有する宿主Ｔ細胞である。別のサブセットは、抗ドナーＭＨＣ抗体を産生する宿主Ｂ細胞である。これらの抗体は、前回の拒絶後に移植片を受ける患者のためのドナー待機リストにおける長い間の待機の一般的な原因である。ドナー組織のＭＨＣが宿主のＭＨＣと一致しないとき、これらの細胞はドナー細胞において死を誘導する。移植片拒絶と闘うためのＩＭＰの実施形態は、ドナーのＭＨＣ分子の模倣体である検出ドメイン（２）を有することができる。活性化ドメイン（３）はＦａｓＬであってよい。検出ドメイン（２）は、ＴＣＲ又はＢＣＲであれ、宿主Ｔ及びＢ細胞の抗原受容体（４）と結合することができる。活性化ドメイン（３）は三量体化し、損ねているＴ及びＢ細胞（１１）上のＦａｓ受容体（１２）と相互作用することができる。これによって細胞アポトーシスをシグナル伝達することができる。宿主細胞のこれらのサブセットが除去される場合、移植片拒絶を回避することができる。
【００６８】
前述の実施形態のいずれか又は抗原受容体を取り扱う他の実施形態において、可溶性Ｂ細胞受容体（即ち、分泌抗体）は、血漿分離又は幾つかの他の方法による処理の前に、一実施形態に膜結合受容体への完全なアクセスを与えるために除去される必要があり得ることに留意されたい。
【００６９】
移植関連の罹患を治療又は予防するためのさらに別の実施形態では、検出ドメイン（２ａ、２ｂ）は、図３Ａ〜Ｃ中に示したように、拒絶Ｂ及び／又はＴ細胞中に見られる配列に対して特異的であるＲＮＡ又はＤＮＡのアンチセンスヌクレオチド鎖を含むことができる。拒絶Ｂ及びＴ細胞は、ウイルスによる変化又は体細胞組換えの結果として、特有なヌクレオチド配列を有する。本明細書中で使用される用語「体細胞組換え」は、Ｂ及びＴ細胞受容体の成熟中に起こるＶ（Ｄ）Ｊ組換えを指す。これらの特有な配列は、ＩＭＰを相補的ヌクレオチド鎖と共に使用して利用可能であるイディオタイプ変化である。任意の所与のイディオタイプの拒絶Ｂ又はＴ細胞に関するこれらの配列の決定は、遺伝子配列決定及びサブトラクティブハイブリダイゼーションなどの簡潔で十分理解された技法を使用して実施することができる。このような細胞は、これらの試験のために患者から又は細胞培養物から抽出することができる。検出ドメインは、これらの特有な配列から簡単に逆方向に遺伝子工学的に作製することができる。図７中に示した一実施形態中のように、検出ドメイン（２）及び活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）をプラスミド上にコードすることができる。プラスミドは、対象の細胞中への取り込みを高める配列を含有することができる。図８Ａ中に示したように、プラスミドは検出ドメイン（２ａ、２ｂ）及び活性化ドメイン（３）をコードすることができる。この人為的実施形態では、活性化ドメインは、リボ核タンパク質サブユニット（１７ａ、ｂ）とプロカスパーゼ−９サブユニットとの融合体を含むことができる。検出ドメインは、活性化ドメイン中に見られるリボ核タンパク質サブユニットに対して特異的であるリボ核タンパク質結合鎖（１６ａ、ｂ）と、標的細胞中の前に論じたヌクレオチド配列を認識する１つ又は複数のアンチセンスヌクレオチド鎖との融合体を含むことができる。この人為的実施形態では、プラスミドを含有する細胞は、検出ドメインのリボ核タンパク質結合ヌクレオチド部分（１６ａ、ｂ）と活性化ドメインのリボ核タンパク質サブユニット部分（１７ａ、ｂ）との相互作用により、図８Ｂ中に示したようにセルフアセンブリするドメインを生成する。この人為的実施形態では、ヌクレオチド鎖の隣接部分（４）へのアンチセンス鎖（２ａ、２ｂ）の結合によって、それらが二量体化することができるように活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）を接触させることが可能である。細胞は、これが十分な数で起こるとき、アポトーシスを起こす可能性がある。
【００７０】
様々な自己免疫障害のための実施形態の前の例は、限定的なものとして解釈すべきではない。異なる検出ドメイン（２）と活性化ドメイン（３）との組合せを使用することができ、異なる実施形態及び適用が可能である。これらの例示的な実施形態の各々及びここに列挙されていない他の実施形態は幾つかの利点を与えることができ、大部分は治療特異性及び効力と関係がある。免疫増殖性障害の場合、ＩＭＰの実施形態は悪性腫瘍を除去し、化学療法及び放射線療法の副作用無しで、患者を正常な状態に回復させることが可能である。自己免疫障害の場合、実施形態は障害の中心で損ねている自己反応性Ｂ及び／又はＴ細胞を除去して、症状を緩和すること又は疾患を治癒することのいずれかが可能である。ＧＶＨＤと移植片拒絶との２つの疾患の場合、これらの組合せ実施形態は、移植成功の可能性を増大させることができる。これらは全て、この群の疾患のための大部分の治療の一般的特徴である免疫抑制無しで実施することができる。これは、これらの患者の多くは既に免疫無防備状態であるので特に重要である可能性がある。
【００７１】
Ｇ．細胞性疾患の緩和及び／又は細胞機能の増強において使用することができる実施形態
幾つかの細胞性疾患では、細胞のあるサブセットは機能することができない。これらの細胞は、構造強度を周辺組織に与えること、又は重要なホルモン又は代謝産物を身体の他の部分に与えることのような、所与のタスクを有し得る。幾つかの実施形態は、このような細胞中で代謝産物の産生を誘導してそれらの機能を改善することができる。例えば、筋萎縮が幾つかの疾患において生じる。一実施形態は、筋細胞中で多量に産生される代謝産物であるトロポニン（４）のための検出ドメイン（２）を有し得る。活性化ドメイン（３）は、アクチンサブユニットのアセンブリを手助けするための酵素のサブユニットであってよく、これによって活性化ドメインが一緒になると前記筋肉に強度を加える。
【００７２】
幾つかの実施形態は、ＩＩ型糖尿病を有する患者において有効であり得る。この型の糖尿病では、インスリンを産生する膵臓β細胞は、血中の高い糖及び脂質レベルによって生じる産生需要に圧倒される。ＩＭＰは、これらのイディオタイプの膵臓β細胞若しくはそれらの幹細胞前駆細胞が増殖するのを助長することにより、又はおそらく既存のβ細胞中の抗アポトーシス経路を増大させることによって手助けすることができる。これらのＩＭＰはこれらの細胞の寿命を延長することができ、疾患の重大な合併症の発症を防ぐ又は延期することができる。
【００７３】
脂肪細胞は、リポジストロフィー疾患と闘うための幾つかの実施形態の良い標的をもたらす可能性もある。このような疾患において脂肪細胞は、血流中の脂肪の体積を扱うことができない。これが疾患をもたらす。このような細胞と特異的に相互作用することによって、それらの能力を調節することができ、又はそれらの生存経路を強化することができる。幾つかのＩＭＰの実施形態の活性化ドメイン（３）は細胞経路と相互作用して、細胞中のエネルギー消費の効率を低下させる、過剰なエネルギー蓄積を枯渇させる可能性がある。
【００７４】
細胞性疾患のための幾つかの現在の治療は、特に細胞のあるサブセット中の二次的損傷の結果として、非最適成功率を有する。幾つかの実施形態は、治療の効果から特定の細胞サブセット（即ちニューロン、筋細胞など）を強化することにより他の治療と共に、これらの副作用の緩和を手助けすることができる。様々な細胞用途のための実施形態の前の例は、限定的なものとして解釈すべきではない。これらの例示的な実施形態の各々及びここに列挙されていない他の実施形態は幾つかの利点を与えることができ、大部分は治療特異性及び効力と関係がある。
【００７５】
Ｈ．研究用途において使用することができる実施形態
ＩＭＰの様々な実施形態は研究用途において使用することができる。例えば、一実施形態は、細胞分化に関与するタンパク質に対して特異的である検出ドメインを有することができる。活性化ドメイン（３）は、蛍光タンパク質の不活性単量体であってよい。実施形態は細胞組織培養物に導入することができる。タンパク質（４）が任意の所与の細胞中に存在するとき、検出ドメイン（２）はそれと結合することができる。隣接活性化ドメインは二量体化して活性蛍光二量体を形成することができ、これによって細胞中でのタンパク質の位置及び濃度の可視化、並びにタンパク質を発現する細胞の可視化を可能にする。
【００７６】
別の実施形態は、あるタンパク質をコードするｍＲＮＡのための検出ドメインを有することができる。検出ドメイン（２）は、ｍＲＮＡに対するアンチセンスヌクレオチド鎖（４）であってよい。活性化ドメイン（３）は、ｍＲＮＡを切断する酵素の不活性サブユニットであってよい。この場合、ｍＲＮＡが細胞中で生成されると、検出ドメインは隣接ＲＮＡ配列に結合することができる。これによりサブユニットを一緒にすることができ、次いでこれは進んでｍＲＮＡを切断し細胞中でのその発現を制限することができる。
【００７７】
前の例は、ＩＭＰを研究室設定で使用することができる方法の幾つかのみを例示するものである。研究における様々な他の潜在的な用途のための多くの他の実施形態が存在し得る。
【００７８】
Ｉ．新興又は兵器化疾患において使用することができる実施形態
ＩＭＰの様々な実施形態は、新興又は兵器化疾患との闘いにおいて使用することが可能である。例えば、ウイルス性疾患の様々な突発が、以前は定住者のいなかった領域におけるヒト侵入の結果として出現している。関連して、様々なテロ組織が兵器化及び都市部の集団に対する攻撃の目的で、既存の作用物質に突然変異させることへの関心及び／又は能力を示している。
【００７９】
既存のツールを使用して新興及び兵器化疾患と闘うこともできるが、イディオタイプ調節薬理エフェクター（ＩＭＰ）は、これらの治療に優る幾つかの重要な利点を与える。例えば、新興疾患の急速な突然変異、及び兵器化疾患の人為的突然変異は、新たな治療剤の生成を、現在利用可能な方法を使用して得るのを困難にする。しかしながら、ＩＭＰのある実施形態を使用して、これらの疾患と闘う個体は検出ドメインの容易に変更された特異性を利用して、ＩＭＰの一実施形態を変化する脅威に対する使用に適合させることが可能である。さらにこれらの実施形態は緊急事態における使用のために迅速に生成することができ、必要に応じて調節することができる。
【００８０】
軍事団体により兵器化された及び突然変異したウイルス性因子を処理するための例示的な実施形態として、図７中に示した実施形態は、様々なドメインをコードするプラスミドを含むことができる。検出ドメイン（２ａ、２ｂ）は、図３Ａ〜Ｃ中に示したように、標的兵器化ウイルスに対して特異的であるＲＮＡ又はＤＮＡのアンチセンスヌクレオチドを含むことができる。任意の所与のイディオタイプの兵器化ウイルスに関するこれらの配列の決定は、遺伝子配列決定及びサブトラクティブハイブリダイゼーションなどの簡潔で十分理解された技法を使用して実施することができる。このような細胞は、これらの試験のために患者から又は細胞培養物から抽出することができる。検出ドメインは、これらの特有な配列から簡単に逆方向に遺伝子工学的に作製することができる。図７中に示した一実施形態中のように、検出ドメイン（２）及び活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）をプラスミド上にコードすることができる。プラスミドは、対象の細胞中への取り込みを高める配列を含有することができる。図８Ａ中に示したように、プラスミドは検出ドメイン（２ａ、２ｂ）及び活性化ドメイン（３）をコードすることができる。この人為的実施形態では、活性化ドメインは、リボ核タンパク質サブユニット（１７ａ、ｂ）とプロカスパーゼ−９サブユニットとの融合体を含むことができる。検出ドメインは、活性化ドメイン中に見られるリボ核タンパク質サブユニットに対して特異的であるリボ核タンパク質結合鎖（１６ａ、ｂ）と、標的細胞中の前に論じたヌクレオチド配列を認識する１つ又は複数のアンチセンスヌクレオチド鎖との融合体を含むことができる。この人為的実施形態では、プラスミドを含有する細胞は、検出ドメインのリボ核タンパク質結合ヌクレオチド部分（１６ａ、ｂ）と活性化ドメインのリボ核タンパク質サブユニット部分（１７ａ、ｂ）との相互作用により、図８Ｂ中に示したようにセルフアセンブリするドメインを生成する。この人為的実施形態では、ヌクレオチド鎖の隣接部分（４）へのアンチセンス鎖（２ａ、２ｂ）の結合によって、それらが二量体化することができるように活性化ドメイン（３ａ、３ｂ）を接触させることが可能である。細胞は、これが十分な数で起こるとき、アポトーシスを起こす可能性がある。ＩＭＰの任意の特定の実施形態に対する標的生物の耐性を引き起こし得る突然変異の場合、耐性を迂回するための簡単な技法を使用して、検出ドメインの調節を容易に行うことができる。
【００８１】
Ｊ．例示的な実施形態の概要
前述の記載は幾つかの具体的な用途を含むが、これらは限定的であると考えるべきではない。様々な技法を異なる状況で使用することができ、様々な状況が異なる技法及び実施形態から利益を得ることができる。例えば、図４中のパウチベースの実施形態は、クラミジア感染の治療を手助けすることができる実施形態の例において言及されているが、パウチベースの実施形態は、マラリアのような疾患のイディオタイプ保因者ベクターに対して利用することもできる。同様に、検出ドメイン（２）に関してヌクレオチド配列を含む実施形態は、ＨＩＶ感染の治療を手助けすることができる実施形態の例において言及されているが、ヌクレオチド配列検出ドメイン（２）を含む実施形態は、細胞中に特徴的又は豊富なヌクレオチド配列（４）を含む癌の治療において使用することができる。したがって幾つかの変形を、本開示の範囲から逸脱せずに適用することができる。さらに、全ての適用がここに提示された実施形態の一部というわけではない。したがって本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲に従って評価されるべきである。
【００８２】
よく知られているプロセスは詳細に記載されておらず、簡潔性のため省略されていることが理解されよう。具体的なステップ、構造及び物質を記載しているが、本開示はこれらの具体的なものに限定される可能性がなく、当業者により十分理解されているように他のもので代用することができ、様々なステップは必ずしも示した順序で実行されなくてもよい。
【００８３】
単なる一例として、細胞集団中へのＩＭＰの導入は身体内であってよい。例えば、特定の実施形態では、ＩＭＰの製造に関する指示を最初に身体中に導入することができる。したがって、このようなＩＭＰが身体内で細胞により生成されると、ＩＭＰを身体内の細胞集団に導入することができる。代替として、ＩＭＰを身体外で生成し身体中に導入することができる。例えばＩＭＰを、培養細胞集団中に導入することができる。
【００８４】
本開示はある実施形態及び一般に関連する方法を記載している一方で、これらの実施形態及び方法の変更及び置換は当業者には明らかである。したがって、例示的な実施形態の前述の記載は、本開示を定義又は制約するものではない。他の変化、置換、及び変更も、以下の特許請求の範囲によって定義される本開示の精神及び範囲から逸脱せずに可能である。
【図１】
2013534913.tif 000003
【図２Ａ】
2013534913.tif 000004
【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
2013534913.tif 000009
【図４】
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【図５】
2013534913.tif 000011
【図６】
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【図７】
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【図８Ａ】
2013534913.tif 000014
【図８Ｂ】
2013534913.tif 000015
【手続補正書】
【提出日】平成24年3月8日(2012.3.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞集団中に、複数のイディオタイプ調節薬理エフェクター（ＩＭＰ）の製造に関する指示を導入するステップを含み、複数の製造されるＩＭＰの各々が、
隣接する配列に対して親和性を有する１つ又は複数のヌクレオチド配列の検出ドメイン、及び検出ドメインに結合した活性化ドメイン
を含み、複数の製造されるＩＭＰのサブセットの各ＩＭＰの検出ドメインが、１つ又は複数の配列に結合するように構成されており、
複数の製造されるＩＭＰのサブセットの各ＩＭＰの活性化ドメインが、活性化し細胞集団において下流効果を引き起こすように構成されている、方法。
【請求項２】
前記指示がプラスミド上にコードされている、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
細胞集団が血流を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
細胞集団が組織培養物を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
活性化ドメインがアポトーシス促進性カスパーゼを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
複数の遺伝子工学的に作製されたイディオタイプ調節薬理エフェクター（ＩＭＰ）を細胞集団中に導入するステップであって、各ＩＭＰが
隣接する配列に対して親和性を有する１つ又は複数のヌクレオチド配列の検出ドメイン、及び検出ドメインに結合した活性化ドメイン
を含む、前記導入ステップ、
複数のＩＭＰのサブセットの各ＩＭＰの検出ドメインを１つ又は複数の配列に結合させるステップ、及び
複数のＩＭＰのサブセットの各ＩＭＰの活性化ドメインを活性化するステップであって、活性化が、細胞集団の少なくとも１つのサブセットの各細胞において下流効果を引き起こす、前記活性化ステップ
を含む、方法。
【請求項７】
下流効果が複数の細胞のサブセットの各細胞の終結を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
細胞集団が血流を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
細胞集団が組織培養物を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
リンカー分子を使用して検出ドメインを活性化ドメインとコンジュゲートするステップをさらに含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１１】
イディオタイプ特異的治療のためのシステムであって、
複数の遺伝子工学的に作製された非天然イディオタイプ調節薬理エフェクター（ＩＭＰ）を含み、各ＩＭＰが、
隣接する配列に対して親和性を有する１つ又は複数のヌクレオチド配列の検出ドメイン、及び
検出ドメインに結合した活性化ドメインを含み、活性化ドメインが、活性化されると細胞集団において下流効果を引き起こすように構成されている、上記システム。
【請求項１２】
検出ドメインと活性化ドメインとをコンジュゲートするリンカー分子をさらに含む、請求項１１に記載のシステム。
【請求項１３】
各ＩＭＰの活性化ドメインがアポトーシス促進性カスパーゼを含む、請求項１１に記載のシステム。
【請求項１４】
各ＩＭＰの活性化ドメインが生体活性分子のサブユニットを含む、請求項１１に記載のシステム。
【請求項１５】
各ＩＭＰの活性化ドメインが毒素前駆体又は毒素変換酵素のいずれかを含む、請求項１１に記載のシステム。
【請求項１６】
イディオタイプ特異的治療のためのシステムであって、
複数のイディオタイプ調節薬理エフェクター（ＩＭＰ）の製造に関する指示を含み、複数の製造されるＩＭＰの各々が、
隣接する配列に対して親和性を有する１つ又は複数のヌクレオチド配列の検出ドメイン、及び
検出ドメインに結合した活性化ドメイン
を含み、複数の製造されるＩＭＰのサブセットの各ＩＭＰの検出ドメインが、１つ又は複数の配列に結合するように構成されており、
複数の製造されるＩＭＰのサブセットの各ＩＭＰの活性化ドメインが、活性化し細胞集団において下流効果を引き起こすように構成されている、上記システム。
【請求項１７】
指示がプラスミド上にコードされている、請求項１６に記載のシステム。
【請求項１８】
検出ドメイン（単数又は複数）及び活性化ドメイン（単数又は複数）がセルフアセンブリして機能的ＩＭＰを生成する、請求項１６に記載のシステム。
【請求項１９】
ＩＭＰのセルフアセンブリが、特異的ヌクレオチド配列に対するリボ核タンパク質サブユニットの親和性により達成される、請求項１６に記載のシステム。
【請求項２０】
活性化ドメインの活性化が、複数のＩＭＰのサブセットを隣接エピトープに結合させるステップを含み、複数のＩＭＰのサブセットの結合が、複数のＩＭＰのサブセットの活性化ドメインを互いに相互作用させる、請求項１６に記載のシステム。
【請求項２１】
検出ドメインが、生成されるＩＭＰが突然変異した標的に対して利用可能となるようにその親和性が変更されてもよい、請求項１６に記載のシステム。
【請求項２２】
複数の遺伝子工学的に作製されたイディオタイプ調節薬理エフェクター（ＩＭＰ）を細胞外から細胞集団中に導入するステップであって、各ＩＭＰが
隣接するエピトープに対して親和性を有する検出ドメイン、及び検出ドメインに結合した活性化ドメイン
を含む、前記導入ステップ、
複数のＩＭＰのサブセットの各ＩＭＰの検出ドメインを１つ又は複数の隣接するエピトープに結合させるステップ、及び
複数のＩＭＰのサブセットの各ＩＭＰの活性化ドメインを活性化するステップであって、活性化が、細胞集団の少なくとも１つのサブセットの各細胞において下流効果を引き起こす、前記活性化ステップ
を含む、方法。
【請求項２３】
前記各ＩＭＰの検出ドメインがヌクレオチド配列を含む、請求項２２の方法。
【請求項２４】
前記各ＩＭＰの検出ドメインが抗体を含む、請求項２２の方法。
【請求項２５】
前記各ＩＭＰの活性化ドメインがアポトーシス促進性カスパーゼを含む、請求項２２の方法。
【請求項２６】
前記各ＩＭＰの活性化ドメインが毒素前駆体又は毒素変換酵素のいずれかを含む、請求項２２の方法。
【請求項２７】
前記各ＩＭＰの活性化ドメインが生体活性分子のサブユニットを含む、請求項２２の方法。
【請求項２８】
リンカー分子を使用して検出ドメインを活性化ドメインとコンジュゲートするステップをさらに含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２９】
前記細胞集団がベクター種を含む、請求項２２に記載の方法。
【国際調査報告】
2013534913.tif 000016
2013534913.tif 000017
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