(57)【要約】本発明は、式（Ｉ）（式中、Ｒ１は、フェニル、フェノキシ、フェニルアミノ、又はヘテロアリールにより置換されたフェニル（全て、場合によりさらに置換されている）；二環式アリール、場合により置換されているフェニルにより置換されている単環式ヘテロアリール、又は二環式ヘテロアリールであり、Ｒ２は、水素又はメチルであり、そしてＲ３及びＲ４は、明細書に示される意味を有する）の新規アシルアミノ−ヒドロキシ−ベンズアミドに関する。この化合物は、骨格筋萎縮、統合失調症、及びアルツハイマー病の治療及び／又は予防のため、及び向知性薬として有用である。
2013545737.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化４】
2013545737.tif 000014
（式中、
Ｒ１は、フェニル、フェノキシ、フェニルアミノ、又はヘテロアリールにより置換されているフェニル（全て、場合によりさらに置換されている）；二環式アリール、場合により置換されているフェニルにより置換されている単環式ヘテロアリール、又は二環式ヘテロアリールであり；
Ｒ２は、水素又はメチルであり；
Ｒ３は、アルキル、場合により置換されているアミノ−又はヒドロキシ−アルキル；アリール−低級アルキル、又はアリールであり；
Ｒ４は、水素、低級アルキル、カルボキシ−、低級アルコキシカルボニル−、ジメチルカルバモイル−、ヒドロキシ−又は低級アルコキシ−低級アルキルであるか；又は
Ｒ３及びＲ４は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、場合により置換されているピロリジノ、場合により置換されているピペリジノ、テトラヒドロ−キノリル又は−イソキノリル、モルホリノ、又は場合により置換されているピペラジノである）の化合物。
【請求項２】
Ｒ１が、場合により置換されている、ビフェニリル、フェノキシフェニル又はフェニルアミノフェニル、場合により置換されている１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル−フェニル、場合により置換されているベンゾ−Ｃ５−又はＣ６−シクロアルキル又は−シクロアルケニル、場合により置換されているフェニル−チオフェニル又はベンゾチオフェニル、場合により置換されている１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル、場合により置換されているインドリル、場合により置換されているキノリニル、又は場合により置換されているフェニル−１，３−チアゾール−２−イル、又はベンゾ−１，３−チアゾール−２−イルであり；
Ｒ２が、水素又はメチルであり；
Ｒ３が、アルキル、場合により置換されているベンジル、場合により置換されているフェニルエチル、場合により置換されているフェニルであり；そして
Ｒ４が、水素又は低級アルキルであるか；又は
Ｒ３及びＲ４が、それらが結合している窒素原子と一緒になって、場合により置換されているピロリジノ、場合により置換されているピペリジノ、１，２，３，４−テトラヒドロ−キノール−１−イル又は１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノール−２−イル、モルホリノ、又は場合により置換されているピペラジノである、請求項１記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が、１〜３個の置換基で場合により置換されている、ビフェニリル、フェノキシフェニル、又はフェニルアミノフェニル（ここで、置換基は、低級アルキル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロ、又はシアノからなる群より選択される）；窒素でメチル又はカルボキシメチルにより、及びベンゾ残基でカルボキシ、クロロ、又はジクロロにより、場合により置換されている１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル−フェニル；
クロロ及び／又はフェニルにより場合により置換されている、２−インダニル又は１Ｈ−２−インデニル；
低級アルキル、低級アルコキシ、エチレンジオキシ、ハロ、又はシアノにより場合により置換されているフェニル−チオフェニル；
ハロ、ジハロ又はエチレンジオキシにより場合により置換されているベンゾ［ｂ］チオフェン−２−又は−３−イル；
フェニル、ハロ、ジハロ、カルボキシ、又はメトキシカルボニルにより場合により置換されている１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル；
フェニル、低級アルキル、ハロ、又はアセトキシにより場合により置換されている２−又は３−インドリル；
低級アルキル、ハロ、又はアセトキシにより場合により置換されている２−又は３−キノリル；又は
低級アルキル、ハロ、又はアセトキシにより場合により置換されているフェニル−１，３−チアゾール−２−イル、ベンゾ−１，３−チアゾール−２−イル、又はハロベンゾ−１，３−チアゾール−２−イルであり；
Ｒ２が、水素であり；
Ｒ３が、アルキル、特に、低級アルキル；
１〜３個の置換基で場合により置換されているフェニル（ここで、置換基は、ハロ、シアノ、低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、フェニル−ヒドロキシ−低級アルキル、場合によりハロゲン化されているベンジル、メチルアミノ−低級アルキル、ジメチル−アミノ−低級アルキル、カルバミドイル−低級アルキル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ヒドロキシ−低級アルコキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ピリドキシ、フェニル、カルボキシ、フェニルカルボニル、カルバムイミドイル、メチル−スルホニル、Ｎ，Ｎ−ジメチルスルファモイル、及びＮ−カルバムイミドイルスルファモイルであり；
Ｒ４が、水素又は低級アルキルであるか；又は
Ｒ３及びＲ４が、それらが結合している窒素原子と一緒になって、フェニル、クロロフェニル、ベンジル、又はフェノキシにより場合により置換されているピロリジノ；フェニル、クロロフェニル、ベンジル、又はフェノキシにより場合により置換されているピペリジノ；モルホリノ；又は４−低級アルキル又は４−ベンジルにより場合により置換されているピペラジノである、請求項１記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項４】
Ｒ１が、場合により置換されている、ビフェニリル、フェノキシフェニル、又はフェニルアミノフェニル、特に、ハロ−又はジハロ−ビフェニリル、ハロ−又はジハロ−フェノキシフェニル又はハロ−又はジハロ−フェニルアミノ−フェニル；４−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）フェニル又は４−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−３−ヒドロキシ−フェニル（ここで、ベンゾイミダゾリルは、窒素でメチル又はカルボキシメチルにより、及びベンゾ残基でカルボキシ、クロロ、又はジクロロにより、例えば、５−クロロ−、５−カルボキシ−又は５，６−ジクロロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イルとして場合により置換されている）；
場合により置換されているフェニル−チオフェン−２−イル、特に、３−又は５−フェニル−、３−又は５−ｐ−フルオロフェニル−、３−又は５−ｐ−クロロフェニル−又は５−（３，４−エチレンジオキシフェニル）−チオフェン−２−イル；
場合により置換されているベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル、特に、ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル、３−又は６−クロロ−、３，６−ジクロロ−又は５，６−エチレンジオキシ−３−クロロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル；
場合により置換されている１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル、特に、１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル、５−又は６−クロロ、カルボキシ又はメトキシカルボニル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル又は５，６−ジクロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル；
場合により置換されている２−インドリル、特に、２−インドリル、３−フェニル−、１−メチル−、１−メチル−３−フェニル−、５−クロロ−、５−クロロ−３−フェニル−、６−クロロ−又は５，６−ジクロロ−２−インドリル；又は
場合により置換されている２−キノリル、特に、２−キノリル、６−又は７−クロロ−又は６，７−ジクロロ−２−キノリルであり；
Ｒ２が、水素であり；
Ｒ３が、アルキル、特に、メチル、イソ−プロピル、イソ−ブチル、又はイソ−ペンチル；
場合により置換されているフェニル、特に、２−、３−又は４−クロロフェニル、２−又は４−フルオロフェニル、２−、３−又は４−ブロモフェニル、２−フルオロ−４−クロロフェニル、２，４−ジフルオロフェニル、３−又は４−シアノフェニル、３−ヒドロキシメチルフェニル、３−ヒドロキシメチル−４−クロロ−フェニル、４−低級アルキルフェニル、例えば、４−メチル−、４−イソ−プロピル、４−ｎ−ブチル−、４−イソ−ブチル−又は４−tert−ブチル−フェニル、又は４−ジメチルアミノメチル−フェニルであり；
Ｒ４は、水素、低級アルキル、特に、メチル、イソ−プロピル、イソ−ブチル、又はイソ−ペンチルであるか；
又はＲ３及びＲ４が、それらが結合している窒素原子と一緒になって、場合により置換されているピロリジノ、特に、３−フェニル、３−ｐ−クロロフェニル−、３−ベンジル−又は３−フェノキシ−ピロリジノ、場合により置換されているピペリジノ、特に、３−又は４−フェノキシ−ピペリジノ、４−フェニル−、４−ｐ−フルオロフェニル−、４−ｐ−クロロフェニル−、４−ｐ−ヒドロキシフェニル−、４−ｐ−メトキシフェニル−又は４−（２，６−ジメチルフェニル）−ピペリジノ、４−ベンジル−、４−ｐ−フルオロベンジル−、４−ｐ−クロロベンジル−又は４−ｐ−ヒドロキシベンジル−ピペリジノ；モルホリノ；又は場合により置換されているピペラジノ、特に、４−ベンジル−又は４−tert−ブチル−ピペラジノである、請求項１記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項５】
Ｒ１が、ｐ−ビフェニリル、４’−フルオロ−又は４’−クロロ−（ｐ−ビフェニリル）、４−フェノキシフェニル、４−（ｍ−又はｐ−クロロフェノキシ）フェニル、４−（３，４−ジクロロフェノキシ）フェニル、４−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）フェニル、（５−クロロ−又は５，６−ジクロロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）フェニル；３−又は５−フェニル−又は５−ｐ−フルオロフェニル−チオフェン−２−イル；ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル、３−又は６−クロロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル；２−インドリル、５−クロロ−３−フェニル−２−インダニル；２−キノリル、又は６−又は７−クロロ−又は６，７−ジクロロ−２−キノリルであり；
Ｒ２が、水素であり；
Ｒ３が、メチル、イソ−プロピル、又はイソ−ブチル；２−、３−又は４−クロロフェニル、２−又は４−フルオロフェニル、２−フルオロ−４−クロロフェニル、２，４−ジフルオロフェニル、又は４−メチル−、４−イソ−プロピル、４−ｎ−ブチル−、４−イソ−ブチル−又は４−tert−ブチル−フェニルであり；
Ｒ４が、水素、メチル、イソ−プロピル、又はイソ−ブチルであるか；
又はＲ３及びＲ４が、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４−フェノキシ−ピペリジノ、４−フェニル−、４−ｐ−フルオロフェニル−又は４−ｐ−クロロフェニル−ピペリジノ、又は４−ベンジル−ピペリジノである、請求項１記載の式（Ｉ）の化合物。
【請求項６】
シナプスの欠乏により引き起こされる疾患の治療及び／又は予防に用いるための、請求項１記載の化合物。
【請求項７】
骨格筋萎縮、統合失調症、アルツハイマー病、又は認知障害の処置に用いるための、請求項１記載の化合物。
【請求項８】
請求項１記載の化合物を含む、医薬組成物。
【請求項９】
シナプスの欠乏により引き起こされる疾患の治療及び／又は予防方法であって、それを必要とする患者に、治療上有効量の請求項１記載の化合物を投与することを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規アシルアミノ−ヒドロキシ−ベンズアミド、及び骨格筋萎縮、統合失調症及びアルツハイマー病の治療及び／又は予防のため、及び向知性薬としてのかかる化合物の使用に関する。
【０００２】
発明の背景
酵素のニューロトリプシン（国際公開公報第９８／４９３２２号）は、キモトリプシンファミリーに属し、そのメンバーはほぼ完全に動物に限られている。ニューロトリプシンのアミノ酸配列は、クリングルドメイン、続いて４つのスカベンジャー受容体システインリッチリピート（マウスでは３つ）、及びセリンプロテアーゼドメインからなる８７５個のアミノ酸のモザイクタンパク質を定めている。ニューロトリプシンは、トロンビン様、ｔＰＡ、トリプシン及び幾つかのその他の酵素、Ｓ１ポケットの底部にアスパラギン酸残基を含有し、それゆえ、結合部位で塩基性アミノ酸に対する特異性を示す。ニューロトリプシンの、血液凝固カスケード及び線維素溶解系のプロテアーゼ（例えば、第Ｘ因子、第ＩＸ因子、トロンビン、組織プラスミノーゲンアクチベーター、及びプラスミン）に対する構造上の類似性は、それが神経系においてプロテアーゼ主導の細胞外シグナル伝達メカニズムの要素であり得ることを示唆している。
【０００３】
国際公開公報第２００６／１０３２６１号にて示されるように、ニューロトリプシンは、中枢神経系（ＣＮＳ）シナプスのシナプス前神経終末及び神経筋接合部（ＮＭＪ）に位置する。シナプスは、メッセージが神経伝達物質と呼ばれる化学物質の形で伝達される神経細胞（ニューロン）間の接合である。シナプスは、シグナル放出細胞により形成されたシナプス前終末、及びシグナル受容細胞のシナプス後膜特異化（postsynaptic specialization）からなる。シナプス前終末から放出された神経伝達物質は、シナプスの間隙を渡り、シナプス後膜特異化における神経伝達物質受容体に結合する。神経伝達物質が結合するとすぐに、受容体は、シナプス後細胞における電気パルスの発生を誘導する。２つのニューロン間のシグナル伝達は、ニューロン機能の基礎である。脳の機能は、膨大な数のニューロンの情報処理ネットワークに特有の集合の結果である。
【０００４】
シナプスの大部分は、中枢神経系（ＣＮＳ、脳、及び脊椎）において見出され、ここで、どのシナプスも２つのニューロンを接合させる。かかる２者間の点と点の接合により、どのニューロンも、何千もの他のニューロンに接合し得る。しかしながら、シナプスはまた、ニューロンを腺又は筋肉細胞にも接合させる。神経筋接合部（ＮＭＪ，筋終板）は、神経細胞を横紋筋細胞と接合させるシナプスである。脳、脳幹、及び脊髄の外側に位置するシナプスは、末梢神経系（ＰＮＳ）シナプスと呼ばれる。ＣＮＳシナプス及びＰＮＳシナプスは、多くの構造上及び機能上の共通点を示し、かつその分子成分（シナプス分子）の多くを共有する。それゆえ、シナプス標的分子は、ＣＮＳとＰＮＳの両方のシナプス機能を標的にするのに有用であり得る。
【０００５】
骨格筋萎縮（サルコペニア）は、筋肉の量及び強度の喪失として定義され、高齢に伴って生じる虚弱及び機能障害の病因の主要な一因となる。それは、筋力強度の喪失、新陳代謝率の減少、骨密度の段階的低下、及び有酸素能力の減少の主要な一因となる（Doherty, T.J., J. Appl. Physiol. 95: 1717-1727, 2003）。筋肉量の喪失は、年齢に伴った筋肉の断面積の減少として現れ、そしてそれは、筋繊維の数と個々の残存する繊維の太さの両方の低下の複合した結果に起因することが究明された。
【０００６】
過去数年に渡り、かなりの進展が、筋肉量の減少に寄与する因子の同定及び特徴付けにおいて成されてきた。これらの過程に関連する重大な遺伝子は、萎縮筋肉において増加することが見出されたユビキチンタンパク質リガーゼをコードする。肥厚活性を有し、及びそれ自体萎縮を遮断する因子のうち、インスリン様成長因子１（ＩＧＦ−１）は、本質的な役割を果たすことが見出された。骨格筋の量を制御するこの、いくつかの他の制御経路は、集中して調査された（レビューについては、以下を参照のこと： Glass, D.J., Nature Cell Biol. 5: 87-90, 2003）。萎縮を引き起こす筋肉の減少を制御する分子機序の同定、及びインスリン様成長因子の肥厚効果の両方における重要な進展、及び幾つかの企業が、筋肉量の増加を刺激することを可能とする薬物の開発に取り組んでいるという事実にも関わらず、現在まで認可された薬物はない。
【０００７】
高齢で見られる骨格筋萎縮（サルコペニア）の形態学的特徴は、筋繊維数のかなりの減少である。多数の独立した研究由来の十分な証拠は、筋繊維の画分への神経入力が、年齢に伴い破壊され、これにより、その後の萎縮、及び最終的に、除神経された繊維の消失を生じることを支持している（Kamal, H.K., Nutrition Reviews 61: 157-167, 2003）。高齢で見られる骨格筋萎縮の別の特徴的な特性は、運動ニューロン数のかなりの低減を伴った筋萎縮の併発（Welle, S., Can. J. Appl. Physiol. 27: 19-41, 2002）、及び神経筋接合部の顕著な構造変化（Tapia, J.C. et al., Abstract Viewer/Itinerary Planner, Washington DC: Society for Neuroscience）である。これらの特徴は、神経筋接合部の構造及び機能の年齢に関連した有意な劣化が、構造上及び機能上の除神経を最終的に生じる過程に主に寄与する因子であることを示す。数週間以内に代償性神経再支配を受けない除神経された筋繊維は、除々に萎縮し、最終的に消失する。
【０００８】
統合失調症は、慢性的な、重度、かつ脳障害を引き起こす疾患である。世界人口の約１％が、一生のうちに統合失調症を発症する。統合失調症を発症する個人は、重度の苦しみを経験する。約１０％が、自殺を図る。統合失調症は、男性と女性を同等の頻度で冒すが、障害は大抵、女性（一般に２０代から３０代前半に冒される）より男性（通常１０代後半か、又は２０代前半）においてより早く出現する。統合失調症を有する人々は、大抵恐ろしい症状（例えば、他人には聞こえない意識内の声が聞こえること、又は他人が彼らの心を読み、彼らの考えを制御し、又は彼らに危害を加えることを企ていると信じること）に苦しむ。これらの症状は、彼らをおびえさせ、引きこもった状態にさせ得る。彼らの話し方及び振る舞いはあまりにも混乱しており、他人にとって不可解であるか、又は恐ろしいかもしれない。統合失調症の現在利用可能な処置は、苦痛をかなり低減するが、統合失調症に冒された人々の約２／３は、発病後数年以内に公的支援を必要とする。彼らの大部分は、仕事又は学校に復帰することができず、社会的交流を比較的にほとんどないか又は全く持たず、そして統合失調症を有する大半の人々が、一生ある種の症状に苦しみ続ける。５個人のうちわずか１人が、完全に回復すると推定される。それゆえ、統合失調症は、世界中で最も重要な公衆衛生問題の１つであり、社会に与えるコストは、数十億ドルと見られている。
【０００９】
アルツハイマー病（ＡＤ）は、最も一般的な症状が、新規記憶の獲得が不可能であること、最近観察した事実を思い出す際の困難さ、混乱、易刺激性、及び攻撃性、気分変動、言語の破綻、及び長期記憶の喪失を含んでいる、最も一般的な痴呆形態である。アルツハイマー病の原因及び進行は、十分には分かっていない。研究により、疾患が脳のプラーク及びもつれ（tangle）と関連することが示されている。最近、脂肪のない筋肉量（lean mass）の喪失は、おそらく、ＡＤの病態生理の直接又は間接的結果として、又はＡＤとサルコペニアの両方に共通する共有されたメカニズムを通じて、ＡＤで加速され、脳萎縮及び認識能力と関連することが示された（Burns et al., Arch Neurol. 67: 428-33, 2010）。それゆえ、ニューロトリプシンの阻害剤は、アルツハイマー病を処置するか、又はその症状を低減する際に効果的でもあり得る。
【００１０】
統合失調症患者の脳における現在最も一貫した神経病理学的所見は、神経網の容量（シナプス領域）の低減に反映される、中枢神経系の灰白質におけるシナプス数の減少である。ニューロンの変性の証拠は全く観察されていない。典型的には、組織１領域当たりカウントされるニューロン数はむしろ増加し、観察により明らかになるのは、ニューロン間の神経網領域におけるシナプス数は選択的に減少するが、一方、ニューロン細胞の細胞体は一定のままであるということである。この現象は、検死材料での幾つかの独立した研究により、過去２０年間に渡り報告されており、前頭前野皮質において最も広範に見られる。この観察を記録している文献は、Selemon, L.D.及びGoldman-Rakic, P.S.（Psychiatry 45: 17-25, 1999）によって慎重に精査されてきた。McGlashan, T.H.及びHoffman, R.E.（Arch. Gen. Psychiatry 57: 637-648, 2000）は、「過剰のシナプス刈り込み」仮説の観点から、統合失調症における本質的な形態学的観察、発達の観察、電気生理学的観察、及び代謝の観察を要約し、「過剰のシナプス刈り込み」又は「発達上低減したシナプス接合性」が、次第に興味をそそる統合失調症の病理生理学的モデルであるという結論に至った。このモデルに基づくと、統合失調症は、妊娠及び幼児期のシナプス形成の発達の障害、及び／又は青年期の過剰なシナプス刈り込みの結果として、決定的に低減したシナプス接合性から生じる。該モデルにより、障害の現象学、症状、発病、神経発達の不足、痴呆の窓（window）、臨床症状における性差、発病年齢により決定される経過、及び低下した表現型生殖能力にも関わらず、集団における統合失調症遺伝子型の保存が説明せれる。
【００１１】
向知性薬は、臨床レベルと無症状レベルの両方で認知障害を予防し、改善し、又は処置する目的の薬物である。かかる薬物は、アルツハイマー病まで進行しなかった高齢者の記憶困難（軽い認知機能障害）の処置に有用でる。しかしながら、かかる薬物はまた、アルツハイマー病又は痴呆と関連する他の疾患と確定診断された患者における認知機能の改善、又は外傷後認知障害における認知機能の改善、並びに加齢の過程の正常な特性と考えられる年齢に関係した機能障害の改善にも有用である。
【００１２】
軽い認知機能障害は、年齢に関連する認知障害についての臨床研究において広く引用されている概念である（Ritchie, K. and Touchon, J., The Lancet 355: 225-228, 2000）。これは、一般的には、アルツハイマー病に進行する高い可能性を有すると判断されている、高齢者における無症状の記憶機能の状態に言及する。患者と家族の両方にとっての苦悩を減らし、事故のリスクを最小限にし、自立を引き延ばし、そして最終的には痴呆自体を導く過程の開始を防ぐかもしれないので、早期の治療介入を視野に入れた痴呆の潜在的なリスクのある人々の同定が重要である。
【００１３】
痴呆のない認知機能障害は、高齢者の間であまりに良く起こるので、加齢の過程の避けられない特性と多くの人に見なされている。それにも関わらず、これは、患者が毎日の活動の実行に伴い有し得る困難さのため、臨床的意義を獲得している。痴呆のない集団において見られる障害の範囲は極端に広いが、正常な認知範囲の末端を表すための幾つかの臨床分類が提案されてきた。初期の１つは、健康を損なう可能性のない老化現象である健忘症であった。その臨床的特徴は、取るに足りない詳細を思い出す能力がないこと、最近の出来事とは対照的に遠い昔のことを忘れること、及び記憶の問題に気づいていることを含む。用語、加齢に関連する認知低下は、広範な認知機能（注意、記憶、学習、思考、言語、及び視空間機能）に言及し、高齢者の標準的な状態を参照することにより診断される。向知性薬の処方は、日常行動を実行する罹患者の能力を延長させ、故に、自立を延長させ得る。最終的に痴呆を導き得る認知機能障害を有する罹患者の少なくとも一部に関連する他の障害は、パーキンソン病、多発性硬化症、脳卒中、及び頭部外傷を含む。向知性薬の処方はまた、これらの患者において認知機能を改善し得る。
【００１４】
発明の概要
本発明は、式（Ｉ）
【化１】
2013545737.tif 000003
（式中、
Ｒ１は、フェニル、フェノキシ、フェニルアミノ、又はヘテロアリールにより置換されているフェニル（全てが、場合によりさらに置換されている）；二環式アリール、場合により置換されているフェニルにより置換されている単環式ヘテロアリール、又は二環式ヘテロアリールであり；
Ｒ２は、水素又はメチルであり；
Ｒ３は、アルキル、場合により置換されているアミノ−又はヒドロキシ−アルキル；アリール−低級アルキル、又はアリールであり；
Ｒ４は、水素、低級アルキル、カルボキシ−、低級アルコキシカルボニル−、ジメチルカルバモイル−、ヒドロキシ−又は低級アルコキシ−低級アルキルであるか；又は
Ｒ３及びＲ４は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、場合により置換されているピロリジノ、場合により置換されているピペリジノ、テトラヒドロ−キノリル又は−イソキノリル、モルホリノ、又は場合により置換されているピペラジノである）の化合物に関する。
【００１５】
本発明はさらに、医薬として使用するため、特に、シナプスの欠乏により引き起こされる疾患（例えば、骨格筋萎縮、統合失調症、アルツハイマー病、及び認知障害）の治療及び／又は予防に使用するための、本明細書において先に定義されたとおりの化合物、この化合物を含有する医薬製剤、及びシナプスの欠乏により引き起こされる疾患（例えば、骨格筋萎縮、統合失調症、アルツハイマー病、及び認知障害）の治療及び／又は予防方法に関する。
【００１６】
発明の詳細な説明
本発明は、ニューロトリプシンの阻害が、前シナプス（シナプスの形成、シナプスの分化、シナプスの組織形成、シナプスの保護、シナプスの強化）活性の増強を可能にするという事実に基づく。ニューロトリプシン遺伝子は、脊髄の運動ニューロンを含む中枢神経系のニューロンの多くで発現しており、そしてニューロトリプシンタンパク質は、多くのＣＮＳシナプス内、並びに神経筋接合部で見られる。ニューロトリプシンは、バランスのとれたシナプス機能の発達及び／又は維持において重要な役割を果たす。あまりに多くのニューロトリプシン（過剰発現）は、少なすぎる接合と相関する。ＣＮＳニューロンにおいてニューロトリプシンを過剰発現しているトランスジェニックマウスは、認知機能（例えば、記憶及び学習）に非常に重要である２つの脳の構造である大脳皮質及び海馬におけるシナプス数の低減を示す。同様に、脊椎運動神経においてニューロトリプシンを過剰発現しているトランスジェニックマウスは、神経筋接合部の低減、筋肉活性の神経制御を仲介するシナプスの低減を示す（国際公開公報第２００６／１０３２６１号）。
【００１７】
ニューロトリプシン活性の医薬的な調整は、シナプス機能の調節機構への前例のないアクセスを提供する。ニューロトリプシンのタンパク質分解活性を阻害することは、抗シナプス活性を犠牲にして前シナプス活性を増強し、故にシナプスの数、及び／又は大きさ、及び／又は強度を増大させることに、シナプスのバランスを変える。
【００１８】
本発明は、式（Ｉ）
【化２】
2013545737.tif 000004
（式中、
Ｒ１は、フェニル、フェノキシ、フェニルアミノ、又はヘテロアリールにより置換されているフェニル（全てが、場合によりさらに置換されている）；二環式アリール、場合により置換されているフェニルにより置換されている単環式ヘテロアリール、又は二環式ヘテロアリールであり；
Ｒ２は、水素又はメチルであり；
Ｒ３は、アルキル、場合により置換されているアミノ−又はヒドロキシ−アルキル；アリール−低級アルキル、又はアリールであり；
Ｒ４は、水素、低級アルキル、カルボキシ−、低級アルコキシカルボニル−、ジメチルカルバモイル−、ヒドロキシ−又は低級アルコキシ−低級アルキルであるか；又は
Ｒ３及びＲ４は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、場合により置換されているピロリジノ、場合により置換されているピペリジノ、テトラヒドロ−キノリル又は−イソキノリル、モルホリノ、又は場合により置換されているピペラジノである）の化合物、及びその医薬的に許容される塩に関する。
【００１９】
本明細書において先に、及び後に用いる一般的な用語は、特に示さない限り、好ましくは、この開示の脈絡の中で、以下の意味を有する：
【００２０】
接頭語「低級」は、最大７個以下、本質的には最大４個以下の炭素原子を有するラジカルを示し、当該ラジカルは、直鎖又は１個もしくは複数の分岐を有する分岐のいずれかである。
【００２１】
複数形を化合物、塩などについて用いる場合、これは、単一の化合物、塩なども意味すると受け取られる。
【００２２】
二重結合は、原則、Ｅ−又はＺ−配置を有することができる。それゆえ、本発明の化合物は、異性体混合物又は単一の異性体として存在し得る。特定していなければ、両方の異性体形を意図している。
【００２３】
任意の不斉炭素原子は、（Ｒ）−、（Ｓ）−又は（Ｒ，Ｓ）−配置、好ましくは、（Ｒ）−又は（Ｓ）−配置にて存在し得る。従って、化合物は、異性体の混合物として、又は純粋な異性体として、好ましくは、光学異性体である純粋なジアステレオマーとして存在し得る。
【００２４】
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物の可能性のある互変異性体に関する。
【００２５】
アルキルは、１〜１２個、好ましくは、１〜７個の炭素原子を有し、かつ直鎖又は分岐である。アルキルは、好ましくは、低級アルキルである。
【００２６】
低級アルキルは、１〜７個、好ましくは、１〜４個の炭素原子を有し、かつブチル（例えば、ｎ−ブチル、sec−ブチル、イソ−ブチル、tert−ブチル）、プロピル（例えば、ｎ−プロピル、又はイソ−プロピル）、エチル、又はメチルである。好ましくは、低級アルキルは、メチル、又はエチルである。低級アルキルはまた、Ｃ１−Ｃ７−アルキル、好ましくは、Ｃ１−Ｃ４−アルキルとして指定されてもよい。
【００２７】
シクロアルキルは、好ましくは、３〜７個の環の炭素原子を有し、かつ非置換であるか、又は例えば、低級アルキル又は低級アルコキシにより置換されていてもよい。シクロアルキルは、例えば、シクロヘキシル、シクロペンチル、メチルシクロペンチル、シクロヘプチル、又はシクロプロピルである。
【００２８】
アリールは、５〜１０個の炭素原子を有する単環又は二環式融合環芳香族基（例えば、フェニル、１−ナフチル又は２−ナフチル）、又はフェニル基を含む部分的に飽和の二環式融合環（例えば、インダニル、インデニル、ジヒドロ−又はテトラヒドロナフチルなどのベンゾ−Ｃ５−又は−Ｃ６−シクロアルキル又は−シクロアルケニル）を表す。好ましくは、アリールは、フェニル、又はベンゾ−Ｃ５−又は−Ｃ６−シクロアルキルであり、特に、フェニルである。
【００２９】
アリールは、非置換であるか、又は置換されている。アリールは、低級アルキル、ハロ−低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、カルボキシ−低級アルキル、低級アルコキシカルボニル−低級アルキル；アリールアルキル又はヘテロアリールアルキル（ここで、アリール又はヘテロアリールは、非置換であるか、又は低級アルキル、ハロ−低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲン、アミノ、シアノ、及びニトロから選択される最大３個の置換基により置換されている）；ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、アリールオキシ−低級アルキル、ヘテロアリールオキシ−低級アルキル、アリール−低級アルコキシ−低級アルキル、ヘテロアリール−低級アルコキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルコキシ−低級アルキル；アミノアルキル（ここで、アミノは、非置換であるか、又は低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、アルコキシ−低級アルキル、アミノ−低級アルキル、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノ−低級アルコキシカルボニル、低級アルコキシ−低級アルコキシ−カルボニル、及びカルバモイル（すなわち、アミノカルボニル）から選択される１個又は２個の置換基により置換されているか、又は窒素上の２個の置換基は、窒素と一緒にヘテロシクリルを形成する）；場合により置換されているアルケニル、場合により置換されているアルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロ−低級アルコキシ、低級アルコキシ−低級アルコキシ、シクロアルキル−低級アルコキシ、アリールオキシ、アリール−低級アルコキシ、アリールオキシ−低級アルコキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリール−低級アルコキシ、ヘテロアリールオキシ−低級アルコキシ、場合により置換されているアルケニルオキシ、場合により置換されているアルキニルオキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクリルオキシ、アルキルメルカプト、アルキルスルフィニル、ハロ−低級アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ヘテロアリールスルホニル、グアニジノスルホニル；スルファモイル（ここで、窒素原子は、非置換であるか、又は低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、シクロアルキル、場合により置換されているフェニル、場合により置換されているフェニル−低級アルキル、場合により置換されているヘテロアリール、及び場合により置換されているヘテロアリール−低級アルキルから選択される１個又は２個の置換基により置換されているか、又は窒素上の２個の置換基は、窒素と一緒になって、ヘテロシクリルを形成する）；低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、ジ−低級アルキルアミノ−低級アルキル、シクロアルキル、場合により置換されているフェニル、場合により置換されているフェニル−低級アルキル、場合により置換されているヘテロアリール、場合により置換されているヘテロアリール−低級アルキル、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、又はカルバモイルから選択される１個又は２個の置換基により場合により置換されているアミノ（ここで、それぞれの場合のアルキル又は低級アルキルは、ハロゲン、低級アルコキシ、アリール、ヘテロアリール、又は場合により置換されているアミノにより置換されていてもよいか、又は窒素上の２個の置換基は、窒素と一緒にヘテロシクリルを形成する）；低級アルキルカルボニル、ハロ−低級アルキルカルボニル、場合により置換されているフェニルカルボニル、場合により置換されているヘテロアリールカルボニル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、低級アルコキシ−低級アルコキシカルボニル；カルバモイル（ここで、窒素原子は、非置換であるか、又は低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、シクロアルキル、場合により置換されているフェニル、場合により置換されているフェニル−低級アルキル、場合により置換されているヘテロアリール、及び場合により置換されているヘテロアリール−低級アルキルから選択される１個又は２個の置換基により置換されているか、又は窒素上の２個の置換基は、窒素と一緒にヘテロシクリルを形成する）；シアノ、ハロゲン、及びニトロから独立して選択される最大４個の置換基（ここで、互いにオルト位の２個の置換基は、１個、２個、又は３個の酸素原子、１個又は２個の窒素原子、及び／又は１個の硫黄原子を含有する５−、６−、又は７−員の炭素環又は複素環を形成することができる）により置換されていてもよい。
【００３０】
特に、置換基は、低級アルキル、ハロ−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、場合により置換されているアルケニル、場合により置換されているアルキニル、シクロヘキシル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロ−低級アルコキシ、低級アルコキシ−低級アルコキシ、シクロアルキルオキシ、場合により置換されているフェニルオキシ、場合により置換されているフェニル−低級アルコキシ；低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、ジ−低級アルキルアミノ−低級アルキル、シクロアルキル、場合により置換されているヘテロアリール、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、又はカルバモイルから選択される１個又は２個の置換基により場合により置換されているアミノ（或は、ここで、窒素上の２個の置換基は、窒素と一緒にヘテロシクリルを形成する）；低級アルキルカルボニル、ハロ−低級アルキルカルボニル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、低級アルコキシ−低級アルコキシカルボニル；カルバモイル（ここで、窒素原子は、非置換であるか、又は低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、場合により置換されているフェニル、場合により置換されているフェニル−低級アルキル、場合により置換されているヘテロアリール、及び場合により置換されているヘテロアリール−低級アルキルから選択される１個又は２個の置換基により置換されているか、又は窒素上の２個の置換基は、窒素と一緒にヘテロシクリルを形成する）；アリールスルホニル、ヘテロアリールスルホニル、グアニジノスルホニル、スルファモイル、シアノ、ハロゲン、及びニトロから独立して選択されてもよい（ここで、互いにオルト位の２個の置換基は、１個又は２個の酸素原子、及び／又は１個の窒素原子を含有する５−又は６−員の複素環を形成することができる）。
【００３１】
場合により置換されているフェニル、フェノキシ、又はフェニルアミノにおいて、置換基は、好ましくは、低級アルキル、ハロ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロ−低級アルコキシ、低級アルコキシ−低級アルコキシ、メチレンジオキシ又はエチレンジオキシ、スルファモイル、低級アルキル−又はジ−低級アルキル−スルファモイル、グアニジノスルホニル、ハロ、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、シアノ、又はニトロである。
【００３２】
ヘテロアリールは、窒素、酸素、及び硫黄から選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含有する芳香族基を表し、かつ単環式又は二環式である。単環式ヘテロアリールは、窒素、硫黄及び酸素から選択される１個、２個、３個又は４個のヘテロ原子を含有する５又は６員のヘテロアリール基を含む。二環式ヘテロアリールは、９又は１０員の融合環ヘテロアリール基を含む。ヘテロアリールの例は、ピロリル、チオフェニル（すなわち、チエニル）、フリル、ピラゾリル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、及びかかる単環式ヘテロアリール基のベンゾ融合誘導体（例えば、インドリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチオフェニル又はベンゾチアゾリル、キノリニル、イソキノリニル、キナゾリニル、又はプリニル）を含む。好ましくは、ヘテロアリールは、ピロリル、チオフェニル、ピラゾリル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、又はピラジニルであり、特に、チオフェニル、ベンゾチオフェニル、ピラゾリル、イミダゾリル、ベンゾイミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、ベンゾ−チアゾリル、ピリジル、又はピリダジニルである。
【００３３】
ヘテロアリールは、非置換であるか、又は置換されている。ヘテロアリールは、低級アルキル、ハロ−低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、アリールオキシ−低級アルキル、ヘテロアリールオキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルコキシ−低級アルキル；アミノアルキル（ここで、アミノは、非置換であるか、又は低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、アルコキシ−低級アルキル、アミノ−低級アルキル、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノ−低級アルコキシカルボニル、低級アルコキシ−低級アルコキシカルボニル、及びカルバモイルから選択される１個又は２個の置換基により置換されている）；場合により置換されているアルケニル、場合により置換されているアルキニル、シクロアルキル；アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、又はヘテロアリールアルキル（ここで、アリール又はヘテロアリールは、非置換であるか、又は低級アルキル、ハロ−低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲン、アミノ、シアノ、及びニトロから選択される最大３個の置換基により置換されている）；ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロ−低級アルコキシ、低級アルコキシ−低級アルコキシ、シクロアルキルオキシ、シクロアルキル−低級アルコキシ、アリールオキシ、アリール−低級アルコキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリール−低級アルコキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アルキルメルカプト、アルキルスルフィニル、ハロ−低級アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ヘテロアリールスルホニル、スルファモイル（ここで、窒素原子は、非置換であるか、又は低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、シクロアルキル、場合により置換されているフェニル、場合により置換されているフェニル−低級アルキル、場合により置換されているヘテロアリール、及び場合により置換されているヘテロアリール−低級アルキルから選択される１個又は２個の置換基により置換されているか、又は窒素上の２個の置換基は、窒素と一緒にヘテロシクリルを形成する）；低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、ジ−低級アルキルアミノ−低級アルキル、シクロアルキル、場合により置換されているフェニル、場合により置換されているフェニル−低級アルキル、場合により置換されているヘテロアリール、場合により置換されているヘテロアリール−低級アルキル、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、又はカルバモイルから選択される１個又は２個の置換基により場合により置換されているアミノ（ここで、それぞれの場合のアルキル又は低級アルキルは、ハロゲン、低級アルコキシ、アリール、ヘテロアリール、又は場合により置換されているアミノにより置換されていてもよいか、又は窒素上の２個の置換基は、窒素と一緒にヘテロシクリルを形成する）；低級アルキルカルボニル、ハロ−低級アルキルカルボニル、場合により置換されているフェニルカルボニル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、低級アルコキシ−低級アルコキシカルボニル；カルバモイル（ここで、窒素原子は、非置換であるか、又は低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、シクロアルキル、場合により置換されているフェニル、場合により置換されているフェニル−低級アルキル、場合により置換されているヘテロアリール、及び場合により置換されているヘテロアリール−低級アルキルから選択される１個又は２個の置換基により置換されているか、又は窒素上の２個の置換基は、窒素と一緒にヘテロシクリルを形成する）；シアノ、ハロゲン、及びニトロから独立して選択される最大３個の置換基により置換されていてもよい。
【００３４】
特に、ヘテロアリール上の置換基は、低級アルキル、ハロ−低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルコキシ−低級アルキル、場合により置換されているアルケニル、場合により置換されているアルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヒドロキシ、低級アルコキシ、シクロアルキルオキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アルキル−メルカプト、アルキルスルフィニル、ハロ−低級アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル；低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、ジ−低級アルキルアミノ−低級アルキル、シクロアルキル、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、又はカルバモイルから選択される１個又は２個の置換基により場合により置換されているアミノ（ここで、それぞれの場合のアルキル又は低級アルキルは、低級アルコキシ、又は場合により置換されているアミノにより置換されていてもよいか、又は窒素上の２個の置換基は、窒素と一緒にヘテロシクリルを形成する）；低級アルキルカルボニル、ハロ−低級アルキルカルボニル、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、低級アルコキシ−低級アルコキシ−カルボニル；カルバモイル（ここで、窒素原子は、非置換であるか、又は低級アルキル、シクロアルキル−低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、又はシクロアルキルから選択される１個又は２個の置換基により置換されているか、又は窒素上の２個の置換基は、窒素と一緒にヘテロシクリルを形成する）；シアノ、ハロゲン、及びニトロから独立して選択されてもよい。
【００３５】
ヘテロアリールにおける好ましい置換基は、低級アルキル、ハロ−低級アルキル、低級アルコキシ−低級アルキル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロ−低級アルコキシ、低級アルコキシ−低級アルコキシ、メチレンジオキシ、ハロ、カルボキシ、シアノ、ニトロ、又は場合により置換されているフェニルである。
【００３６】
アルケニルは、１個又は複数（例えば、２個又は３個）の二重結合を含有し、好ましくは、低級アルケニル（例えば、１−又は２−ブテニル、１−プロペニル、アリル又はビニル）である。
【００３７】
アルキニルは、好ましくは、低級アルキニル（例えば、プロパルギル又はアセチレニル）である。
【００３８】
場合により置換されているアルケニル又はアルキニルにおいて、置換基は、好ましくは、低級アルキル、低級アルコキシ、ハロ、場合により置換されているアリール、又は場合により置換されているヘテロアリールであり、アルケニル又はアルキニルの飽和又は不飽和炭素原子と関連する。
【００３９】
ヘテロシクリルは、窒素、酸素、及び硫黄から選択される１個、２個、又は３個のヘテロ原子を含む４〜１０個の原子を含有する飽和、部分的に飽和、又は不飽和の単環式又は二環式環を指し、それらは、特に特定されない限り、炭素又は窒素連結であってもよい（ここで、環の窒素原子は、低級アルキル、アミノ−低級アルキル、アリール、アリール−低級アルキル、及びアシルから選択される基により場合により置換されていてもよく、かつ環の炭素原子は、低級アルキル、アミノ−低級アルキル、アリール、アリール−低級アルキル、ヘテロアリール、低級アルコキシ、ヒドロキシ、又はオキソにより置換されていてもよい）。ヘテロシクリルの例は、ピロリジニル、オキサゾリジニル、チアゾリジニル、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニル、ジオキソラニル、テトラヒドロ−フラニル、及びテトラヒドロピラニルである。
【００４０】
アシルは、例えば、アルキルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、アリールカルボニル、アリール−低級アルキルカルボニル、又はヘテロアリールカルボニルを指す。低級アシルは、好ましくは、低級アルキルカルボニルであり、特に、プロピオニル又はアセチルである。
【００４１】
ヒドロキシアルキルは、特に、ヒドロキシ−低級アルキルであり、好ましくは、ヒドロキシメチル、２−ヒドロキシエチル、又は２−ヒドロキシ−２−プロピルである。
【００４２】
シアノアルキルは、好ましくは、シアノメチル、及びシアノエチルを指す。
【００４３】
ハロアルキルは、好ましくは、フルオロアルキルであり、特に、トリフルオロメチル、３，３，３−トリフルオロエチル、又はペンタフルオロエチルである。
【００４４】
ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素であり、特に、フッ素又は塩素である。
【００４５】
低級アルコキシは、特に、メトキシ、エトキシ、イソ−プロピルオキシ、又はtert−ブチルオキシである。
【００４６】
アリールアルキルは、本明細書において先に定義されたとおりのアリール及びアルキルを含み、例えば、ベンジル、クロロベンジル、メトキシベンジル、１−フェネチル、又は２−フェネチルである。
【００４７】
ヘテロアリールアルキルは、本明細書において先に定義されたとおりのヘテロアリール及びアルキルを含み、例えば、２−、３−又は４−ピリジルメチル、１−又は２−ピロリルメチル、２−又は３−チオフェニルメチル、１−ピラゾリルメチル、又は１−イミダゾリルメチルであるか、又はヘテロアリールが、例えば、クロロ又はメチルにより置換されている化合物である。
【００４８】
置換されているアミノにおいて、置換基は、好ましくは、本明細書において先に置換基として述べられたものである。特に、置換されているアミノは、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、場合により置換されているアリールアミノ、場合により置換されているアリールアルキルアミノ、低級アルキルカルボニルアミノ、低級アルコキシカルボニルアミノ、又は場合により置換されているカルバモイルアミノである。
【００４９】
式（Ｉ）の化合物の塩は、特に、医薬的に許容される塩である。
【００５０】
かかる医薬的に許容される塩は、例えば、酸性官能基（例えば、カルボン酸官能基）を含有する式（Ｉ）の化合物において、有機又は無機陽イオンを用いて形成される。適当な無機陽イオンは、例えば、アルカリ陽イオン（例えば、リチウム、ナトリウム、又はカリウム陽イオン）、又はアルカリ土類陽イオン（例えば、マグネシウム、カルシウム、ストロンチウム、及びバリウム陽イオン）、又は金属陽イオン（例えば、アルミニウム、又は遷移金属陽イオン）である。好ましい無機陽イオンは、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、及びカルシウム陽イオンである。適当な有機陽イオンは、例えば、四置換アンモニウム陽イオン（例えば、テトラメチルアンモニウム、プロトン化三、二及び一置換アミン、又はアンモニウム）である。適当な陽イオンは、例えば、低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、又はヒドロキシ−低級アルコキシ−低級アルキル基を含有する１級、２級、又は３級アミン（例えば、２−ヒドロキシエチルアンモニウム、２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチルジメチル−アンモニウム、ジエチルアンモニウム、ジ（２−ヒドロキシエチル）アンモニウム、トリメチルアンモニウム、トリエチルアンモニウム、２−ヒドロキシエチルジメチルアンモニウム、又はジ（２−ヒドロキシエチル）メチル−アンモニウム）、同様に、対応する置換環状２級及び３級アミン（例えば、Ｎ−メチルピロリジニウム、Ｎ−メチルピペリジニウム、Ｎ−メチルモルホリニウム、Ｎ−２−ヒドロキシ−エチルピロリジニウム、Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペリジニウム、又はＮ−２−ヒドロキシエチルモルホリニウムなど）からのプロトン化により誘導される。好ましい有機陽イオンは、２−ヒドロキシエチルアンモニウム、ジエチルアンモニウム、又はジ（２−ヒドロキシエチル）アンモニウムである。
【００５１】
塩基性窒素官能基を含有する式（Ｉ）の化合物において、医薬的に許容される塩は、有機酸又は無機酸を用いて形成される。適当な無機酸は、例えば、ハロゲン酸（例えば、塩酸）、硫酸、又はリン酸である。適当な有機酸は、例えば、カルボン酸、ホスホン酸、スルホン酸又はスルファミン酸（例えば、酢酸、プロピオン酸、オクタン酸、デカン酸、ドデカン酸、グリコール酸、乳酸、フマル酸、コハク酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アミノ酸（例えば、グルタミン酸又はアスパラギン酸）、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、メチルマレイン酸、シクロヘキサンカルボン酸、アダマンタンカルボン酸、安息香酸、サリチル酸、４−アミノサリチル酸、フタル酸、フェニル酢酸、マンデル酸、桂皮酸、メタン−又はエタン−スルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、１，５−ナフタレン−ジスルホン酸、２−、３−又は４−メチル−ベンゼンスルホン酸、メチル硫酸、エチル硫酸、ドデシル硫酸、Ｎ−シクロヘキシルスルファミン酸、Ｎ−メチル−、Ｎ−エチル−又はＮ−プロピル−スルファミン酸）、又は他の有機プロトン酸（例えば、アスコルビン酸）である。単離又は精製の目的のため、医薬的に許容されない塩（例えば、ピクリン酸塩又は過塩素酸塩）を使用することも可能である。
【００５２】
治療上の使用には、医薬的に許容される塩又は遊離化合物のみが使用され（医薬製剤の形で適用可能）、それゆえ、これらが好ましい。
【００５３】
遊離形態の新規化合物とその塩の形態のものとの密接な関係を考慮して、本明細書において先の、及び後の遊離の化合物への任意の言及は、適切かつ目的にかなったものとして、対応する塩への言及としても理解されるべきである。式（Ｉ）の化合物（塩を含む）はまた、水和物の形で得ることも可能であるか、又はその結晶物は、例えば、結晶化のために用いられる溶媒を含むこと、すなわち、溶媒和物として存在することができる。本明細書において先の、及び後の遊離化合物への任意の言及はまた、対応する水和物及び溶媒和物への言及としても理解されるべきである。
【００５４】
式（Ｉ）の化合物は、ヒト又は動物の体内で分解されて、式（Ｉ）の化合物をもたらすプロドラッグの形態で投与されてもよい。プロドラッグの例は、式（Ｉ）の化合物のインビボで加水分解可能なエステル及びアミド（例えば、天然に生じるα−アミノ酸、又は天然に生じるα−アミノ酸から形成されるジ−又はトリペプチドのエステル又はアミド）を含む。
【００５５】
式（Ｉ）の化合物は、当該技術分野で既知の方法、特に、カルボン酸又は適当な活性酸誘導体のアミン又はアミン誘導体との縮合反応により、調製される。１個又は複数の他の官能基（例えば、カルボキシ、ヒドロキシ、又はアミノ）は、反応に携わるべきではないため、出発化合物又は中間体において保護されているか、又は保護される必要があり、それらは、通常、アミド、特に、ペプチド化合物の合成に適用されるような保護基である。特定の合成スキーム、及び反応条件は、実施例において詳細に説明される。
【００５６】
式（Ｉ）の化合物は、有益な薬理学的特性を有する。特に、本発明の化合物、及びそれを含有する医薬組成物は、ニューロトリプシン阻害剤として有用である。
【００５７】
骨格筋萎縮は、筋肉強度の実質的な喪失に付随して起こり、年齢が進むに伴い生じる虚弱及び機能障害の発病の主要な一因となる。下肢の弱さは、多くの機能障害（例えば、椅子から立ち上がる又はベッドから起き上がる際の困難さ、歩行及び他の動作のスピードが遅いこと、及びバランスを維持することの困難さ（結果として転倒または怪我に終わる））に関与してきた。骨格筋繊維の喪失は、筋肉が発達できる絶対強度と筋肉が強さを発達することができるスピードの両方に負の作用をする。
【００５８】
年をとることは、新陳代謝率の進行的な減少と関連し、そして順に、暑さ及び寒さに対する耐性の低減、並びに肥満症を発症する傾向の増大を含む実質的な生理学的結果となる。骨格筋は、脂肪を含まない体重の約４０％を含み、体の代謝において恒常的な役割を果たす。それゆえ、加齢に伴った骨格筋肉の量の低減は、新陳代謝率の減少に主に寄与する。進行性の繊維喪失を予防することにより、ニューロトリプシンの阻害は、これらの代謝性及び生理学的結果に対して作用する。
【００５９】
年齢に伴った骨格筋肉量及び強度の進行的な喪失は、年をとるにつれ観察される骨密度の段階的な減少に主に寄与するものとして認識されてきた。反対に、筋肉活性により骨上に及ぼされる力が、骨形成を刺激することが良く知られている。従って、筋肉収縮により生み出される力は、骨の質の重要な決定因子である。それゆえ、抹消ニューロトリプシン活性の阻害により筋繊維喪失を防ぐことは、骨格筋の質への副作用を防ぐか、又は低減させ(linder)、骨粗鬆症の進行を間接的に遮断する。
【００６０】
ニューロトリプシン阻害の有益な効果はまた、癌、ＡＩＤＳ、及び敗血症を含む、多数の臨床的状況（ここで、筋肉の消耗が付随して起こる問題である）において生じる骨格筋萎縮に対しても期待され得る。
【００６１】
ニューロトリプシンの抗シナプス活性を低減し、それにより抗シナプス活性を犠牲にして前シナプス活性を増強することによる、シナプス調整の概念は、障害された認知脳機能の分野において広範囲の適用を提供する。特に、ニューロトリプシンの阻害は、シナプス形成及びサイズの増加、並びに存在するシナプスの強度を必要とする疾患及び無症状の状況において有益である。
【００６２】
ニューロトリプシンの阻害は、統合失調症の処置に有用である。シナプスでの過剰のニューロトリプシンは、シナプス刈り込みをもたらし、故に、統合失調症を有する患者の脳において見られるシナプス表現型と一致したシナプス表現型を生じる。この経験に基づいた観察により、ニューロトリプシンは、シナプス刈り込みをもたらす因子の１つであるとみなされる。過剰のシナプス刈り込みが、複数の刈り込み促進因子の収束性作用に起因して生じる状況において、ニューロトリプシンの制御されかつ微妙な部分的阻害は、シナプス刈り込みの流れを損なう。これにより、「統合失調症のシナプス表現型」からの回復が可能になり、統合失調症の症状の軽減がもたらされる。ニューロトリプシンを過剰発現するマウスのＣＮＳにおけるシナプス数の低減は、ニューロトリプシンの阻害が、シナプス刈り込みの程度を低くし、故に、シナプス数の増加及び神経接合性及び伝達の増強をもたらすことを示す。それゆえ、ニューロトリプシンの酵素機能を阻害する本発明による化合物は、統合失調症及び再構築している正常シナプス構造及び機能におけるシナプス変化を元に戻すのに有用であり、故に、統合失調症の発症を食い止めるか又は短くし、かつ新たな発症から守る。
【００６３】
ニューロトリプシンは、認知障害の発症及び精神遅滞に関与する。ヒトにおけるニューロトリプシン遺伝子のノックアウトは、精神遅滞を引き起こす。ニューロトリプシン遺伝子の重複は、自閉症疾患の発症に関与する。アグリンフラグメントは、ＡＤ患者において老人性プラークに見られるので、恐らく、ニューロトリプシンは、アルツハイマー病（ＡＤ）の発症の一因となるのであろう（Van Horssen, J. et al., Acta Neuropathol. 2001, 102:604-14）。脂肪分の少ない筋肉質量の喪失（すなわち、サルコペニア）は、アルツハイマー病（ＡＤ）の初期ステージにおいて特に加速され、かつ脳の萎縮と認識機能障害と関連することは、周知である。これらの知見について可能性のある説明は、ＡＤとサルコペニアは共通する根本的な発病メカニズムを共有しているということである（Burns et al., Arch Neurol. 2010, 67（4）:428-433）。アセチルコリン含有ニューロンの機能障害は、高齢及びアルツハイマー病（ＡＤ）を有する者で観察される認知低下に実質的に関与することは、十分に容認されている。この前提は、これまでずっとＡＤに対する処置方法及び薬物開発アプローチの主要な基礎となってきた。ニューロトリプシンは、脳及び神経筋接合部中のコリン作動性シナプスに存在する。ニューロトリプシンの過剰産生は、ＡＤとサルコペニア両方の発症及び／又は進行に関与し得る。
【００６４】
ニューロトリプシンの阻害はまた、軽い認知機能障害、及び低減した認知機能を有する他の臨床状態及び無症状の状態における認知促進も維持する。軽い認知機能障害、並びに障害された認知機能の他の臨床状態及び無症状の状態は、いくつかのＣＮＳ領域における中枢組織の萎縮の証拠と関連することが見出された。ニューロトリプシンを過剰発現するマウスのＣＮＳにおけるシナプス数の低減は、ニューロトリプシンの阻害が、シナプス数の増加、及びニューロンの接合性及び伝達の増強をもたらすことを示している。それ故、ニューロトリプシンの酵素機能を阻害する本発明による化合物は、シナプス数の低減又はシナプスの機能の低減が関与している全ての臨床上の障害及び無症状の障害におけるシナプス変化を元に戻す際、及び正常シナプス構造及び機能を再構築する際に有用である。これにより、ニューロトリプシンの医薬阻害は、異種起源の低減した認知機能と異なる状態において、認知機能を改善し得る。
【００６５】
これらの事実に基づき、本発明はさらに、シナプスの欠乏により引き起こされる疾患（例えば、骨格筋萎縮、統合失調症、及び認知障害）の治療及び／又は予防に用いるための、上述及び後述の式（Ｉ）のニューロトリプシン阻害剤に関する。処置されるべき骨格筋萎縮は、特に、いわゆるサルコペニア、すなわち、高齢に起因する骨格筋萎縮、骨粗鬆症に付随する骨格筋萎縮、及び重度の疾患（例えば、癌、ＡＩＤＳ及び敗血症）と関連する筋肉疲労に起因する骨格筋萎縮、又は同様に重度の傷害又は重度の疾患に起因する運動不足及び／又はベッドでの療養の結果としての骨格筋萎縮である。処置されるべき統合失調症は、慢性的統合失調症、慢性的統合失調感情障害、具体化されていない疾患、種々の総体症状の急性及び慢性的統合失調症（例えば、重度、非寛解「クレペリン（Kraepelinic）」統合失調症又は統合失調症様障害のＤＳＭ−ＩＩＩ−Ｒ−プロトタイプ）、突発性統合失調症障害、妄想性統合失調症様障害、統合失調症様人格障害（例えば、穏やかな症状を有する統合失調症様人格障害、統合失調症型人格障害）、統合失調症障害又は統合失調症様障害の潜在形、及び非器官性（non-organic）精神病性障害を含む、全分野の統合失調症及び統合失調症様疾患における障害である。さらに、本明細書に記載されるニューロトリプシン阻害剤は、脳の性能の改善、及び学習及び記憶機能の改善のための向知性薬として用いられてもよい。処置されるべき認知欠損は、例えば、潜在的なアルツハイマー病の初期、高齢者における痴呆を伴わない認知機能障害、及びアルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、脳卒中、及び頭部外傷を有する患者における認知機能障害における、軽い認識機能障害である。
【００６６】
同様に、本発明は、本明細書において先に定義されたとおりの、シナプスの欠乏により引き起こされる疾患の治療及び／又は予防用医薬の製造のための式（Ｉ）のニューロトリプシン阻害剤の使用に関する。
【００６７】
さらに、本発明は、シナプスの欠乏により引き起こされる疾患（例えば、骨格筋萎縮、統合失調症、アルツハイマー病、及び認知障害）の治療及び／又は予防であって、式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩を、該疾患に対して有効な量で、かかる処置を必要とする温血動物に投与することを含む、治療及び／又は予防に関する。式（Ｉ）の化合物は、それ自体又は特に医薬組成物の形で、予防上又は治療上、好ましくは、該疾患に対して有効な量で、かかる処置を必要とする温血動物（例えば、ヒト）に投与することができる。体重約７０kgを有する個体の場合、投与される１日用量は、本発明の化合物約０．０５ｇ〜約５ｇであり、好ましくは、約０．２５ｇ〜約１．５ｇである。
【００６８】
式（Ｉ）の化合物は、単独で、又は１個又は複数の他の治療剤と併用して投与することができ、可能性のある併用療法は固定した組み合わせの形態をとるか、又は本発明の化合物と１又は複数の他の治療剤との投与は、交互であるか、又は互いに独立して、若しくは固定した組み合わせと１個又は複数の他の治療剤との併用投与で与えられる。
【００６９】
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物を有効成分として含み、本明細書において上述の疾患の処置に特に用いられ得る医薬組成物に関する。温血動物（特に、ヒト）への経腸投与用組成物（例えば、経鼻、口腔、直腸）、又は特に経口投与、及び非経腸投与（例えば、静脈内、筋肉内、又は皮下投与）用組成物が、特に好ましい。組成物は、有効成分を単独で、又は好ましくは、医薬的に許容される担体と一緒に含む。有効成分の投薬量は、処置されるべき疾患、及び種、その年齢、体重及び個々の状態、個々の薬物動態データ、及び投与方法に依存する。
【００７０】
本発明は、特に、式（Ｉ）の化合物、その互変異性体、プロドラッグ、又は医薬的に許容される塩、又は水和物、又は溶媒和物、及び少なくとも１つの医薬的に許容される担体を含む医薬組成物に関する。
【００７１】
医薬組成物は、約１％〜約９５％の有効成分を含み、単回投与形態は、好ましい実施態様において約２０％〜約９０％の有効成分を含み、単回投与型ではない形態は、好ましい実施態様において約５％〜約２０％の有効成分を含む。単位用量形態は、例えば、被覆及び非被覆錠剤、アンプル剤、バイアル、座剤、又はカプセル剤である。さらなる投薬形態は、例えば、軟膏、クリーム剤、ペースト剤、フォーム剤、チンキ剤、リップスティック、点滴薬、噴霧剤、分散剤などである。例として、約０．０５ｇ〜約１．０ｇの有効成分を含有するカプセル剤である。
【００７２】
本発明の医薬組成物は、それ自体既知の方法、例えば、通常の混合、造粒、被覆、溶解、又は凍結乾燥過程により調製される。
【００７３】
例えば、有効成分を単独で、又は担体（例えば、マンニトール）と一緒に含む凍結乾燥された組成物の場合、使用前に調製されることができる、有効成分の溶液、及び同様に懸濁液又は分散液（特に、等調水溶液、分散液又は懸濁液）の使用が優先される。医薬組成物は、滅菌されていてもよく、及び／又は賦形剤、例えば、保存剤、安定剤、湿潤剤及び／又は乳化剤、可溶化剤、浸透圧を調整するための塩、及び／又は緩衝剤を含むことができ、それ自体既知の方法、例えば、通常の溶解及び凍結乾燥過程により調製される。該溶液又は懸濁液は、粘度増加剤、典型的には、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルピロリドン、又はゼラチン、又は同様に可溶化剤、例えば、Ｔｗｅｅｎ８０（登録商標）（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレアート）を含んでもよい。
【００７４】
油中懸濁液は、注射用途用に通常の植物油、合成油、又は半合成油を油成分として含む。かかる点で、特記事項は、８〜２２個、特に、１２〜２２個の炭素原子を有する長鎖脂肪酸を酸成分として含有する液体脂肪酸エステルと考えられ得る。これらの脂肪酸エステルのアルコール成分は、最大６個の炭素原子を有し、１価又は多価、例えば、１価、２価、又は３価のアルコール、特に、グリコール及びグリセロールである。脂肪酸エステルの混合物として、植物油、例えば、綿実油、アーモンドオイル、オリーブオイル、ヒマシ油、ゴマ油、大豆油、及び落花生油は、特に有用である。
【００７５】
注射可能な製剤の製造は、通常、無菌条件下で行われ、例えば、アンプル剤又はバイアルへ充填すること、及び容器を密封することである。
【００７６】
適当な担体は、特に、充填剤、例えば、糖、例えば、ラクトース、サッカロース、マンニトール、又はソルビトール、セルロース調製剤、及び／又はリン酸カルシウム、例えば、リン酸三カルシウム又はリン酸水素カルシウム、及び同様に結合剤、例えば、スターチ、例えば、コーン、小麦、米、又はジャガイモでんぷん、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、及び／又はポリビニルピロリドン、及び／又は、所望なら、崩壊薬、例えば、上述のスターチ、同様にカルボキシメチルスターチ、架橋ポリビニルピロリドン、アルギン酸、又はその塩、例えば、アルギン酸ナトリウムである。さらなる賦形剤は、特に、流量調整剤及び滑沢剤、例えば、ケイ酸、タルク、ステアリン酸、又はその塩、例えば、ステアリン酸マグネシウム又はカルシウム、及び／又はポリエチレングリコール、又はその誘導体である。
【００７７】
錠剤コアは、適当な、場合により腸溶性のコーティングを用いて、特に、アラビアゴム、タルク、ポリビニル−ピロリドン、ポリエチレングリコール及び／又は二酸化チタンを含んでもよい濃縮糖溶液、又は適当な有機溶媒又は溶媒混合物中のコーティング溶液の使用を介して提供されることができるか、又は、腸溶性コーティング、適当なセルロース調整剤の溶液、例えば、フタル酸アセチルセルロース又はフタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロースの調整のため、提供されることができる。染料又は色素は、例えば、同定の目的のため、又は異なる用量の有効成分を示すために、錠剤又は錠剤コーティングに加えられてもよい。
【００７８】
経口投与用医薬組成物はまた、ゼラチンからなる硬カプセル剤、及び同様に、ゼラチンからなる軟密封カプセル剤、及び可塑剤、例えば、グリセロール又はソルビトールを含む。硬カプセル剤は、有効成分を小粒の形態（例えば、充填剤、例えば、コーンスターチ、結合剤、及び／又は滑剤、例えば、タルク又はステアリン酸マグネシウム、及び場合により安定剤との混合物中）で含んでいてもよい。軟カプセル剤において、有効成分は、好ましくは、適当な液体賦形剤、例えば、脂肪油、パラフィン油、又は液体ポリエチレングリコール、又はエチレン又はプロピレングリコールの脂肪酸エステル中に溶解又は懸濁されており、そしてそれに、例えば、ポリオキシ−エチレンソルビタン脂肪酸エステル種である安定剤及び界面活性剤が加えられてもよい。
【００７９】
直腸投与に適当な医薬組成物は、例えば、有効成分と座剤基剤との組み合わせからなる座剤である。適当な座剤基剤は、例えば、天然又は合成トリグリセリド、パラフィン系炭化水素、ポリエチレングリコール、又は高級アルコールである。
【００８０】
非経腸投与のため、水に溶解可能な形態（例えば、水溶性の塩の形態）の有効成分の水溶液、粘度増加剤（例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ソルビトール及び／又はデキストラン）、及び所望なら、安定剤を含有する水性注射懸濁液が、特に適している。有効成分は、場合により賦形剤と一緒に、凍結乾燥物の形であることもでき、非経腸投与の前に、適当な溶媒の添加により溶液に調製することもできる。
【００８１】
例えば、非経腸投与に用いられる液剤はまた、輸液として利用することもできる。
【００８２】
好ましい保存剤は、例えば、酸化防止剤（例えば、アスコルビン酸）、又は殺菌剤（例えば、ソルビン酸又は安息香酸）である。
【００８３】
後述の一群の好ましい式（Ｉ）の化合物と共に、上述の一般的な定義に由来する置換基の定義を合理的に用いて、例えば、より一般的な定義をより具体的な定義、又は特に、好ましいとして特徴付けられた定義に置き換えてもよい。
【００８４】
式（Ｉ）（式中、
Ｒ１は、場合により置換されている、ビフェニリル、フェノキシフェニル又はフェニルアミノフェニル、場合により置換されている１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル−フェニル、場合により置換されているベンゾ−Ｃ５−又はＣ６−シクロアルキル又は−シクロアルケニル、場合により置換されているフェニル−チオフェニル又はベンゾチオフェニル、場合により置換されている１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル、場合により置換されているインドリル、場合により置換されているキノリニル、又は場合により置換されているフェニル−１，３−チアゾール−２−イル、又はベンゾ−１，３−チアゾール−２−イルであり；
Ｒ２は、水素又はメチルであり；
Ｒ３は、アルキル、場合により置換されているベンジル、場合により置換されているフェニルエチル、場合により置換されているフェニルであり；
Ｒ４は、水素又は低級アルキルであるか；
Ｒ３及びＲ４は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、場合により置換されているピロリジノ、場合により置換されている、ピペリジノ、１，２，３，４−テトラヒドロ−キノール−１−イル、又は１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノール−２−イル、モルホリノ、又は場合により置換されているピペラジノである）の化合物が好ましい。
【００８５】
式（Ｉ）（式中、
Ｒ１は、１〜３個の置換基を有する場合により置換されている、ビフェニリル、フェノキシフェニル、又はフェニルアミノフェニルであり（ここで、置換基は、低級アルキル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ハロ又はシアノからなる群から選択される）；メチル又はカルボキシメチルにより窒素で、及びカルボキシ、クロロ又はジクロロによりベンゾ残基で場合により置換されている１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル−フェニル；
クロロ及び／又はフェニルにより場合により置換されている、２−インダニル又は１Ｈ−２−インデニル；
低級アルキル、低級アルコキシ、エチレンジオキシ、ハロ、又はシアノにより場合により置換されているフェニル−チオフェニル；
ハロ、ジハロ、又はエチレンジオキシにより場合により置換されているベンゾ［ｂ］チオフェン−２−又は−３−イル；
フェニル、ハロ、ジハロ、カルボキシ、又はメトキシカルボニルにより場合により置換されている１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル；
フェニル、低級アルキル、ハロ、又はアセトキシにより場合により置換されている２−又は３−インドリル；
低級アルキル、ハロ、又はアセトキシにより場合により置換されている２−又は３−キノリル；又は
低級アルキル、ハロ又はアセトキシにより場合により置換されているフェニル−１，３−チアゾール−２−イル、ベンゾ−１，３−チアゾール−２−イル、又はハロベンゾ−１，３−チアゾール−２−イルであり；
Ｒ２は、水素であり；
Ｒ３は、アルキル、特に、低級アルキル；
１〜３個の置換基で場合により置換されているフェニルであり（ここで、置換基は、ハロ、シアノ、低級アルキル、ヒドロキシ−低級アルキル、フェニル−ヒドロキシ−低級アルキル、場合によりハロゲン化されているベンジル、メチルアミノ−低級アルキル、ジメチル−アミノ−低級アルキル、カルバミドイル−低級アルキル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ヒドロキシ−低級アルコキシ、フェノキシ、ベンジルオキシ、ピリドキシ、フェニル、カルボキシ、フェニルカルボニル、カルバムイミドイル、メチル−スルホニル、Ｎ，Ｎ−ジメチルスルファモイル、及びＮ−カルバムイミドイルスルファモイルからなる群より選択される）；
Ｒ４は、水素、又は低級アルキルであるか；又は
Ｒ３及びＲ４は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、フェニル、クロロフェニル、ベンジル、又はフェノキシにより場合により置換されているピロリジノ；フェニル、クロロフェニル、ベンジル、又はフェノキシにより場合により置換されているピペリジノ；モルホリノ；又は４−低級アルキル又は４−ベンジルにより場合により置換されているピペラジノである）の化合物が、より好ましい。
【００８６】
式（Ｉ）（式中、
Ｒ１は、場合により置換されている、ビフェニリル、フェノキシフェニル、又はフェニルアミノフェニル、特に、ハロ−又はジハロ−ビフェニリル、ハロ−又はジハロ−フェノキシフェニル又はハロ−又はジハロ−フェニルアミノ−フェニル；４−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）フェニル又は４−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）−３−ヒドロキシ−フェニル（ここで、ベンゾイミダゾリルは、メチル又はカルボキシメチルにより窒素で、及びカルボキシ、クロロ、又はジクロロによりベンゾ残基で、例えば、５−クロロ−、５−カルボキシ−又は５，６−ジクロロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イルとして場合により置換されている）；
場合により置換されているフェニル−チオフェン−２−イル、特に、３−又は５−フェニル−、３−又は５−ｐ−フルオロフェニル−、３−又は５−ｐ−クロロフェニル−又は５−（３，４−エチレンジオキシフェニル）−チオフェン−２−イル；
場合により置換されているベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル、特に、ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル、３−又は６−クロロ−、３，６−ジクロロ−又は５，６−エチレンジオキシ−３−クロロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル；
場合により置換されている１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル、特に、１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル、５−又は６−クロロ、カルボキシ又はメトキシカルボニル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル又は５，６−ジクロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル；
場合により置換されている２−インドリル、特に、２−インドリル、３−フェニル−、１−メチル−、１−メチル−３−フェニル−、５−クロロ−、５−クロロ−３−フェニル−、６−クロロ−又は５，６−ジクロロ−２−インドリル；又は
場合により置換されている２−キノリル、特に、２−キノリル、６−又は７−クロロ−又は６，７−ジクロロ−２−キノリルであり；
Ｒ２は、水素であり；
Ｒ３は、アルキル、特に、メチル、イソ−プロピル、イソ−ブチル又はイソ−ペンチル；
場合により置換されているフェニル、特に、２−、３−又は４−クロロフェニル、２−又は４−フルオロフェニル、２−、３−又は４−ブロモフェニル、２−フルオロ−４−クロロフェニル、２，４−ジフルオロフェニル、３−又は４−シアノフェニル、３−ヒドロキシメチルフェニル、３−ヒドロキシメチル−４−クロロ−フェニル、４−低級アルキルフェニル、例えば、４−メチル−、４−イソ−プロピル、４−ｎ−ブチル−、４−イソ−ブチル−又は４−tert−ブチル−フェニル、又は４−ジメチルアミノメチル−フェニルであり；
Ｒ４は、水素、低級アルキル、特に、メチル、イソ−プロピル、イソ−ブチル、又はイソ−ペンチルであるか；
又はＲ３及びＲ４は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、場合により置換されているピロリジノ、特に、３−フェニル、３−ｐ−クロロフェニル−、３−ベンジル−又は３−フェノキシ−ピロリジノ、場合により置換されているピペリジノ、特に、３−又は４−フェノキシ−ピペリジノ、４−フェニル−、４−ｐ−フルオロフェニル−、４−ｐ−クロロフェニル−、４−ｐ−ヒドロキシフェニル−、４−ｐ−メトキシフェニル−又は４−（２，６−ジメチルフェニル）−ピペリジノ、４−ベンジル−、４−ｐ−フルオロベンジル−、４−ｐ−クロロベンジル−又は４−ｐ−ヒドロキシベンジル−ピペリジノ；モルホリノ；又は場合により置換されているピペラジノ、特に、４−ベンジル−又は４−tert−ブチル−ピペラジノである）
の化合物が特に好ましい。
【００８７】
式（Ｉ）（式中、
Ｒ１は、ｐ−ビフェニリル、４’−フルオロ−又は４’−クロロ−（ｐ−ビフェニリル）、４−フェノキシフェニル、４−（ｍ−又はｐ−クロロフェノキシ）フェニル、４−（３，４−ジクロロフェノキシ）フェニル、４−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）フェニル、（５−クロロ−又は５，６−ジクロロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）フェニル；３−又は５−フェニル−又は５−ｐ−フルオロフェニル−チオフェン−２−イル；ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル、３−又は６−クロロ−ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル；２−インドリル、５−クロロ−３−フェニル−２−インダニル；２−キノリル、又は６−又は７−クロロ−又は６，７−ジクロロ−２−キノリルであり；
Ｒ２は、水素であり；
Ｒ３は、メチル、イソ−プロピル、又はイソ−ブチル；２−、３−又は４−クロロフェニル、２−又は４−フルオロフェニル、２−フルオロ−４−クロロフェニル、２，４−ジフルオロフェニル、又は４−メチル−、４−イソ−プロピル、４−ｎ−ブチル−、４−イソ−ブチル−又は４−tert−ブチル−フェニルであり；
Ｒ４は、水素、メチル、イソ−プロピル、又はイソ−ブチルであるか；
又はＲ３及びＲ４は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４−フェノキシ−ピペリジノ、４−フェニル−、４−ｐ−フルオロフェニル−又は４−ｐ−クロロフェニル−ピペリジノ、又は４−ベンジル−ピペリジノである）
の化合物が最も好ましい。
【００８８】
実施例の化合物、特に、実施例１、３、６、９、１１、１２、及び１４の化合物も最も好ましい。
【００８９】
実施例
略語：
ＤＣＭ＝ジクロロメタン
ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド
ｅｑ．＝当量
Ｅｔ２Ｏ＝ジエチルエーテル
ＥｔＯＨ＝エタノール
ｈ＝時間
ＮＭＲ＝核磁気共鳴
ＭｅＯＨ＝メタノール
ｍｉｎ＝分
ＭＰ＝融点
ＭＳ＝質量スペクトル
ＲＴ＝室温
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン
ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸
ＴＭＳ＝テトラメチルシラン
【００９０】
１Ｈ  ＮＭＲスペクトルをＢｒｕｋｅｒ  ＡＶＡＮＣＥ  ４００ＭＨｚ装置上で記録した。１Ｈ化学シフトを、内部標準として、ＴＭＳに対するｐｐｍにて報告した。質量スペクトルを、ＭＤＳ  ＳＣＩＥＸ−ＡＰＩ−２０００装置上で実行した。
【００９１】
調製１：４−アミノ−Ｎ−（２−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシベンズアミド
トルエン１００ml中２−ヒドロキシ−４−ニトロ安息香酸（２．５ｇ，１３．６５mmol）、ＳＯＣｌ２（１．９９３ml，２７．３mmol）、及びＤＭＦ１滴の混合物を、９０℃で６時間撹拌し；さらなる量のＳＯＣｌ２（１ml，１３．７０mmol）及びＤＭＦ２滴を加え、９０℃での撹拌を１．５時間続けて、反応を完了させた。溶媒を真空下で蒸発させ、残渣自体を、続く反応に用いた。
【００９２】
乾燥ＴＨＦ中２−ヒドロキシ−４−ニトロベンゾイル塩酸塩（３９３mg，１．９５mmol）溶液を、乾燥ＴＨＦ７〜８ml中２−フルオロアニリン（２３８mg，２．１４５mmol）溶液に加え、次に、ピリジン（２３７μl，２．９３mmol）を加え、混合物を一晩室温で撹拌した。所望の生成物を、ＬＣ−ＭＳトレースにて検出したが、多くの不純物も存在していた。混合物を、ＡｃＯＥｔで希釈し、水性希ＮａＨＣＯ３、１Ｎ  ＨＣｌで２回、次に、塩水で洗浄し、そして最終的に乾燥させ、蒸発させた。固形残渣を、少量のＡｃＯＥｔで粉砕し、濾取し、次に再度熱ＡｃＯＥｔで２回、ＤＣＭで２回洗浄した。乾燥後、Ｎ−（２−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシ−４−ニトロベンズアミド（１１４mg，０．４１３mmol，収率２１．１６％）を得た。
【００９３】
ＡｃＯＥｔ／ＭｅＯＨ〜９：１約４０ml中Ｎ−（２−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシ−４−ニトロベンズアミド（１１４mg，０．４１３mmol）、及び１０％  Ｐｄ／Ｃ（６５．９mg，０．０６２mmol）の混合物を、パール装置（Parr apparatus）にて４０psiで４時間、水素化し：反応を完了させた。混合物を、セライト及びＮａ２ＳＯ４を通して濾過し、蒸発させ；残渣を、Ｅｔ２Ｏ／Ｈｅｘで洗浄し、濾取し：４−アミノ−Ｎ−（２−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシベンズアミド（６０mg，０．２４４mmol，収率５９．０％）を得た。
【００９４】
同一の方法を用いて、以下も調製した：
４−アミノ−Ｎ−（４−クロロフェニル）−２−ヒドロキシベンズアミド
４−アミノ−Ｎ，Ｎ−ジイソブチル−２−ヒドロキシベンズアミド
４−アミノ−Ｎ−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）−２−ヒドロキシベンズアミド
４−アミノ−Ｎ−（２，４−ジフルオロフェニル）−２−ヒドロキシベンズアミド
４−アミノ−Ｎ−（４−ブチルフェニル）−２−ヒドロキシベンズアミド。
【００９５】
調製２：４−ベンジル−１−（２−ヒドロキシ−４−アミノベンゾイル）ピペリジン
乾燥ＴＨＦ中２−ヒドロキシ−４−ニトロベンゾイルクロリド（３９３mg，１．９５mmol）の溶液を、乾燥ＴＨＦ７〜８ml中４−ベンジルピペリジン（７５２mg，４．２９mmol）溶液に加え、次に混合物を、反応が完了するまで、一晩室温で撹拌した。混合物をＡｃＯＥｔで希釈し、水性希ＮａＨＣＯ３、１Ｎ  ＨＣｌで２回、次に塩水で洗浄し、最後に乾燥させ、蒸発させた。固形残渣を、少量のＨｅｘ／ＤＣＭ〜７：３で粉砕し、濾取し、次に再度同じ混合物で洗浄した。乾燥後、４−ベンジル−１−（２−ヒドロキシ−４−ニトロベンゾイル）ピペリジン（２３９mg，０．７０２mmol，収率３６．０％）を得た。
【００９６】
ＡｃＯＥｔ／ＭｅＯＨ〜９：１約４０ml中のこの化合物の溶液を、パール装置にて３５psiで７時間、Ｐｄ／Ｃ（１２７．４mg，０．１１９mmol）の存在下で水素化した。混合物を、セライト及びＮａ２ＳＯ４を通して濾過し、蒸発させ；残渣を、分取ＨＰＬＣ（中性ＭｅＣＮ／水移動相）により精製して、表題化合物（１８２mg，０．５８６mmol，収率８４％）を得た。
【００９７】
４−フェノキシ−１−（２−ヒドロキシ−４−アミノベンゾイル）ピペリジンを同様に調製した。
【００９８】
調製３：２−ヒドロキシ−４−ニトロベンゾイルクロリド
トルエン１００ml中２−ヒドロキシ−４−ニトロ安息香酸（２．５ｇ，１３．６５mmol）、ＳＯＣｌ２（１．９９３ml，２７．３mmol）、及びＤＭＦ１滴の混合物を、９０℃で６時間撹拌し；さらなる量のＳＯＣｌ２（１ml，１３．７０mmol）、及びＤＭＦ２滴を加え、９０℃での撹拌を、１．５時間続けて、反応を完了させた。溶媒を、真空下で蒸発させ、残渣自体を、続く反応に用いた。
【００９９】
調製４：４’−フルオロビフェニル−４−カルボニルクロリド
ＭｅＯＨ１０ml中４−ブロモ安息香酸（３００mg，１．４９２mmol）、４−フルオロフェニルボロン酸（２５１mg，１．７９１mmol）、フッ化カリウム（２１７mg，３．７３mmol）、及びＰｄ（ＯＡｃ）２（３３．５mg，０．１４９mmol）の混合物を、１１０℃で２時間、電子レンジで加熱した。冷却後、沈殿物を濾取し、ＡｃＯＥｔに溶解し、水及び塩水で洗浄し；乾燥及び蒸発後、４’−フルオロビフェニル−４−カルボン酸（２６３mg，１．２１６mmol，収率８２％）を得た。
【０１００】
乾燥ＤＣＭ１０ml中の４’−フルオロビフェニル−４−カルボン酸（１８０mg，０．８３３mmol）、ＤＭＦ１滴、及び（ＣＯＣｌ）２（１８２μl，２．０８１mmol）の混合物を、室温で５時間、転換が完了するまで、撹拌した。混合物を完全に蒸発させ；残渣を、無水ＴＨＦ１０mlに溶解し、それ自体を、続く反応に用いた。
【０１０１】
調製５：５−（４−フルオロフェニル）チオフェン−２−カルボニルクロリド
ＥｔＯＨ１０ml中４−フルオロフェニルボロン酸（２１４mg，１．５３１mmol）、エチル  ５−ブロモチオフェン−２−カルボキシラート（３００mg，１．２７６mmol）、フッ化カリウム（１８５mg，３．１９mmol）、及びＰｄ（ＯＡｃ）２（２８．６mg，０．１２８mmol）の混合物を、１１０℃で２時間、反応が完了するまで、電子レンジで加熱した。混合物を、ＡｃＯＥｔで希釈し、水及び塩水で洗浄し、次に、乾燥させ、蒸発させた；残渣を、フラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／Ｅｔ２Ｏ  ９５：５〜９：１）により精製して、エチル  ５−（４−フルオロフェニル）チオフェン−２−カルボキシラート（２１７mg，０．８６７mmol，収率６７．９％）を得た。
【０１０２】
ＥｔＯＨ１５ml中エチル  ５−（４−フルオロフェニル）チオフェン−２−カルボキシラート（２１７mg，０．８６７mmol）、及び６Ｎ  ＮａＯＨ（４３３μl，２．６０mmol）の混合物を、７０℃で４時間撹拌した。冷却後、混合物を酸性化し、真空下で乾燥するまで蒸発させ；残渣を、ＡｃＯＥｔに溶解し、水及び塩水で洗浄し、次に乾燥させ、蒸発させて、５−（４−フルオロフェニル）チオフェン−２−カルボン酸（１２４mg，０．５５８mmol，収率６４．４％）を得た。
【０１０３】
乾燥ＤＣＭ１０ml中５−（４−フルオロフェニル）チオフェン−２−カルボン酸（１２４mg，０．５５８mmol）、ＤＭＦ１滴、及び（ＣＯＣｌ）２（１２２μl，１．３９５mmol）の混合物を、室温で５時間撹拌した。混合物を、真空下で乾燥するまで蒸発させた；残渣を、無水ＴＨＦ１０mlに溶解し、それ自体を、続く反応に用いた。
【０１０４】
調製６：４−（３，４−ジクロロフェノキシ）ベンゾイルクロリド
ＤＭＦ１５ml中の３，４−ジクロロフェノール（３００mg，１．８４０mmol）、エチル４−フルオロベンゾエート（３１０mg，１．８４０mmol）、及びＣｓ２ＣＯ３（６６０mg，２．０２５mmol）の混合物を、一晩１２０℃で撹拌した。冷却した混合物を、氷／水に注ぎ、次に、ＡｃＯＥｔで２回抽出した；合わせた有機相を、水、塩水で３回洗浄し、最後に乾燥させて、蒸発させた。残渣を、フラッシュクロマトグラフィーにより精製して、エチル  ４−（３，４−ジクロロフェノキシ）ベンゾエート（１７５mg，０．５６２mmol，収率３０．６％）を得た。
【０１０５】
ＥｔＯＨ８ml中エチル  ４−（３，４−ジクロロフェノキシ）ベンゾエート（１７５mg，０．５６２mmol）、及び６Ｎ  ＮａＯＨ（１８７μl，１．１２５mmol）の混合物を、一晩室温で、反応が完了するまで、撹拌した。混合物を酸性化し、ほぼ完全に蒸発させ；残渣を水で希釈し、沈殿物を、濾取し、水と少量のＥｔ２Ｏ／ヘキサンで洗浄した。乾燥後、４−（３，４−ジクロロフェノキシ）安息香酸（１２８mg，０．４５２mmol，収率８０％）を得た。
【０１０６】
乾燥ＤＣＭ１０ml中の４−（３，４−ジクロロフェノキシ）安息香酸（１２８mg，０．４５２mmol）、ＤＭＦ１滴、及び（ＣＯＣｌ）２（９９μl，１．１３０mmol）の混合物を、室温で５時間、転換が完了するまで、撹拌した。混合物を、真空下で乾燥するまで蒸発させ；残渣を、無水ＴＨＦ１０mlに溶解し、それ自体を続く反応に用いた。
【０１０７】
調製７：６，７−ジクロロキノリン−２−カルボニルクロリド
溶媒を全く含まない、６，７−ジクロロ−２−メチルキノリン（２３１mg，１．０８９mmol）、ベンズアルデヒド（２７０μl，２．６７mmol）、及びＡｃ２Ｏ（５１．４μl，０．５４５mmol）の混合物を、１８０℃で１時間電子レンジで加熱した。混合物を、水／ＥｔＯＨ〜９：１において粉砕し、生じた固形物を濾取し、Ｅｔ２Ｏ及びヘキサンで洗浄した。乾燥後、純品（Ｅ）−６，７−ジクロロ−２−スチリルキノリン（２０３mg，０．６７６mmol，収率６２．１％）を得た。
【０１０８】
５℃に冷却したピリジン８ml及び水２．５ml中（Ｅ）−６，７−ジクロロ−２−スチリルキノリン（２０１mg，０．６７０mmol）溶液に、ＫＭｎＯ４（２２２mg，１．４０６mmol）を、温度を１０℃未満に維持しながら、少しずつ加えた。約１時間激しく撹拌した後、反応を完了させ；混合物を、セライトを通して濾過して、酸化マンガンを取り除き、パッドを、２Ｎ  ＮａＯＨでさらに洗浄し；生じた溶液を、蒸発させ；残渣を水性ＨＣｌで酸性化し、ＡｃＯＥｔで抽出し、次にそれを、水、塩水で洗浄し、最後に乾燥させ、蒸発させ；生じた固形物をＤＣＭで洗浄して、純品６，７−ジクロロキノリン−２−カルボン酸（１１２mg，０．４６３mmol，収率６９．１％）を得た。
【０１０９】
乾燥ＤＣＭ１０ml中６，７−ジクロロキノリン−２−カルボン酸（１１２mg，０．４６３mmol）、ＤＭＦ１滴、及び（ＣＯＣｌ）２（１０１μl，１．１５７mmol）の混合物を、室温で２０分間、転換が完了するまで撹拌した。混合物を完全に蒸発させ；残渣を、無水ＴＨＦ１０mlに溶解し、それ自体を、続く反応に用いた。
【０１１０】
調製８：４−（５，６−ジクロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）ベンゾイルクロリド
１リットルのエレンマイヤーフラスコにて、４−ホルミル安息香酸（１０ｇ，６６．６mmol）を、ＥｔＯＨ４００mlに溶解し、次に、水４５ml中ＮａＨＳＯ３（６．９３ｇ，６６．６mmol）溶液を加え、混合物を、氷浴にて冷却しながら、約１時間撹拌した。白色の沈殿物を回収し、少量のＥｔＯＨで洗浄した。乾燥後、ナトリウム（４−カルボキシフェニル）（ヒドロキシ）メタンスルホン酸塩１５．８ｇ（６２．３mmol，収率９４％）を得た。コンデンサーを備えた２５０mlの丸底フラスコにおいて、ＤＭＦ６０ml中ナトリウム（４−カルボキシフェニル）（ヒドロキシ）メタンスルホン酸塩（６．７７ｇ，２６．６mmol）及び４，５−ジクロロベンゼン−１，２−ジアミン（４．７１ｇ，２６．６mmol）の混合物を、１７０℃で一晩撹拌した。混合物を室温まで冷却し、氷中に注ぎ、２Ｎ  ＨＣｌで酸性化した。黒色の沈殿物を濾取した。固形物をメタノール４００mlにて撹拌し、不溶性のタール状の部分を、セライトパッドを通した濾過により廃棄した。溶媒を真空下で蒸発させ、生じた暗褐色の固形物を、ＤＣＭで洗浄して、純品４−（５，６−ジクロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）安息香酸７．０ｇ（２２．７９mmol，収率８６％）を薄茶色の固形物として得た。
【０１１１】
４−（５，６−ジクロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）安息香酸（１．０ｇ，３．２６mmol）を、塩化チオニル１８mlに懸濁した。ＤＭＦ１滴も加え、反応物を７０℃で一晩撹拌した。揮発性分画を真空下で除去し、得られた淡黄色の４−（５，６−ジクロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）ベンゾイルクロリド（１．０６０ｇ，３．２６mmol，収率１００％）を、さらに精製することなく、続く工程に用いた。
【０１１２】
調製９：５−クロロ−３−フェニル−１Ｈ−インドール−２−カルボニルクロリド
ＥｔＯＨ２５ml中エチル  ５−クロロ−３−フェニル−１Ｈ−インドール−２−カルボキシラート（６９７mg，２．３２５mmol）、及び６Ｎ  ＮａＯＨ（７７５μl，４．６５mmol）の混合物を、７０℃で３時間、反応が完了するまで、撹拌し；混合物を酸性化し、ほぼ完全に蒸発させた。さらなる水を加え、沈殿物を、濾取し、真空オーブンにて乾燥させた。５−クロロ−３−フェニル−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸（６２０mg，２．２８２mmol，収率９８％）を、橙色の固形物として得た。
【０１１３】
ＤＣＭ１０ml中５−クロロ−３−フェニル−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸（２５０mg，０．９２０mmol）懸濁液に、ＤＭＦ１小滴を、続いて（ＣＯＣｌ）２（１６１μl，１．８４０mmol）を加え；混合物を、反応が完了するまで、室温で３．５時間撹拌した（試料をＭｅＯＨでクエンチする）。混合物を、低温で完全に蒸発させ、残渣自体を、続く反応のために用いた。
【０１１４】
実施例１：Ｎ−（４−クロロフェニル）−４−（４−（５，６−ジクロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）ベンズアミド）−２−ヒドロキシベンズアミド
【化３】
2013545737.tif 000005
【０１１５】
乾燥ＴＨＦ１００ml中４−（５，６−ジクロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）ベンゾイルクロリド（０．８４０ｇ，２．５８mmol）、及び４−アミノ−Ｎ−（４−クロロフェニル）−２−ヒドロキシベンズアミド（１．３５５ｇ，５．１６mmol）の混合物を、一晩室温で、反応が完了するまで、撹拌した。水数mlを加え、次に、混合物を真空下で蒸発させ；残渣を、水数mlを含有するメタノール１２０mlにて２時間撹拌し、次に濾取し、メタノールで完全に洗浄し；真空オーブンにおいて乾燥後、粗Ｎ−（４−クロロフェニル）−４−（４−（５，６−ジクロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）ベンズアミド）−２−ヒドロキシベンズアミド（１．０９ｇ，１．９７５mmol，収率７７％）を、黄色の固形物として得た。
【０１１６】
粗化合物を、ＭｅＯＨ／ＤＭＳＯ  ９５：５  １００mlに懸濁し、還流温度で約２時間撹拌した。冷却後、沈殿物を、吸引濾過により回収し、水及びメタノールで洗浄した。真空オーブンにて乾燥後、純品Ｎ−（４−クロロフェニル）−４−（４−（５，６−ジクロロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）ベンズアミド）−２−ヒドロキシベンズアミド（０．８５ｇ，７８％）を得た。融点＞２２０℃。
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6, 300°K), δ ppm: 13.43 (br.s, 1H), 11.99 (s, 1H), 10.56 (s, 1H), 10.38 (s, 1H), 8.28-8.41 (m, 2H), 8.10-8.23 (m, 2H), 7.99 (d, 1H), 7.97 (br.s, 1H), 7.84 (br.s, 1H), 7.72-7.81 (m, 2H), 7.67 (d, 1H), 7.42-7.47 (m, 2H), 7.39 (dd, 1H)
MS: m/z = 550.9 [M-H]+
【０１１７】
同様に、以下の実施例の化合物を調製した：
【０１１８】
【表１】
2013545737.tif 000006
2013545737.tif 000007
【０１１９】
ヒトニューロトリプシンについてのＩＣ５０の測定
ヒトニューロトリプシンの酵素活性の阻害における実施例１〜１４の化合物の効能の評価を、特許出願国際公開公報第２００６／１１０３２６１号に記載の方法に従い行った。
【０１２０】
種々のプロテアーゼについてＩＣ５０の測定：
ＤＭＳＯ中６mMの試験化合物溶液を調製した。Ｖ底マイクロプレートにおいて、６mM化合物溶液を、ＤＭＳＯ中に６倍希釈して、以下の濃度を有する濃度列を得た：６mM、１．８mM、５４０μM、１６２μM、４８．８μM、１４．４μM、及び４μM。このＤＭＳＯマスタープレートから、１０mM  ＭＯＰＳ中の１：２０希釈（ｐＨ８．３）を調製して、ＭＯＰＳバッファー及び５％ＤＭＳＯ中３００、９０、２７、８．１、２．４４、０．７２、及び０．２２μMの溶液を得た。
【０１２１】
この溶液１００μlを、平底９６ウェルマイクロプレートにピペットで入れ、テカンインフィニテ（Tecan infinite）２００プレートリーダーに入れた。測定前に、プロテアーゼ溶液５０μl、続いて基質溶液５０μlを、マシーンにより加えた。フリーのパラニトロアニリドの遊離を４０５nmで検出した。プロテアーゼ溶液を、６０mM  ＭＯＰＳ；６００mM  ＮａＣｌ；２０mM  ＣａＣｌ２；１０％  ＤＭＳＯ；０．４％  ＰＥＧ  ６０００  ｐＨ  ８．３中のストック溶液から所望の濃度に希釈することにより、新たに調製した。基質溶液を、十分量の水に固形基質を溶解して、所望の濃度を得ることにより、調製した。用いたプロテアーゼ及び基質溶液を以下に示す：
【０１２２】
【表２】
2013545737.tif 000008
【０１２３】
トリプシンを除く全ての酵素は、ヒト由来（American diagnostic）のものであった。トリプシンは、ブタトリプシン（Sigma Aldrich）であった。基質は、Chromogenixから購入した。Ｓ−２２２２は、Ｎ−ベンゾイル−Ｌ−イソロイシル−Ｌ−グルタミルグリシル−Ｌ−アルギニン−ｐ−ニトロアニリン塩酸塩、及びそのメチルエステル（Ｐｈｅ−ＣＯ−ｌｌｅ−Ｇｌｕ−（−ＯＲ）−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ｐＮＡ．ＨＣｌ；５０％が、ＲはＨであり、５０％が、ＲはＣＨ３である）であり、Ｓ−２２６６は、Ｈ−Ｄ−バリル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−アルギニン−ｐ−ニトロアニリン二塩酸塩（Ｈ−Ｄ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−ｐＮＡ．２ＨＣｌ）であり、及びＳ−２２８８は、Ｈ−Ｄ−イソロイシル−Ｌ−プロピル−Ｌ−アルギニン−ｐ−ニトロアニリン二塩酸塩（Ｈ−Ｄ−ｌｌｅ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ｐＮＡ．２ＨＣｌ）である。反応を２０〜３０分間行い、初期速度を、試験化合物の濃度に対してプロットした。
【０１２４】
ＩＣ５０を得るために、方程式
【数１】
2013545737.tif 000009
（式中、「Ｉ」は、試験化合物の濃度であり、ｈは、ヒル係数を表す）を有する曲線を、データポイントにフィットさせた。実施例１の化合物について、生じたＩＣ５０値を、以下に要約する：
【０１２５】
【表３】
2013545737.tif 000010
【０１２６】
Ｃ−末端アグリンフラグメント（ＣＡＦ）の体重及び血漿レベルに対する実施例１の化合物インビボ有効性の試験
実験動物
成体（Ｐ５０）Ｃ５７／ＢＬ６マウス（Charles Riverより）を実験に用いた。全ての動物実験を、動物実験の適切な実施についての国際ガイドラインに従って、スイス法（許可番号ＺＨ−１８／２００８）の権限の下、行った。実験中の全動物について、介入中の安寧をスコアシートに文書化した。
【０１２７】
最適な衛生条件（ＯＨＢ）下、制御した空調及び照明（温度：２０〜２４℃、湿度：５５〜６５％、日／夜サイクル：１２時間／１２時間、午前７時に点灯）を用いて、マウスを飼育した。標準的な寝わらを含む、タイプＩＩ、Ｌ（床面積５３０cm２）の個々に換気したケージを用いた。最大６匹のマウスを、各ケージにて維持した。マウスには、標準的なげっ歯動物用固形飼料（Extrudat、KLIBA NAFAG）を自由に与え、飲料水に自由にアクセスさせた。動物の集団を、BioSupport（Schlieren）で管理し、維持した。
【０１２８】
処置スケジュール
３匹の成体マウスを、１００％ＤＭＳＯ中の１０mg／mlの実施例１の化合物溶液２．５ml／kgを用いて処置した。これは、２５mg／kgの有効成分の用量に対応するものであった。ビークル対照として、３匹のマウスを１００％ＤＭＳＯ２．５ml／kgを用いて処置した。それぞれのマウスは、３回皮下注射を受けた。投与１と投与２の間は、８時間であり、投与２と投与３の間は１６時間であった。最後の注射の５時間後、ＣＯ２を用いて、マウスを安楽死させた。
【０１２９】
試料採取及び調製
最初の注射前に、マウスの体重を測定し、血液〜１００μlを側面尾静脈から採取した。Microvette 500 Z-Gelチューブ中の血液試料を遠心分離（１０，０００ｇ、２０℃、５分）することにより、血清を調製した。上清を、エッペンドルフ（Eppendorf）反応チューブに移し、再度遠心した（２１，０００ｇ、２０℃、５分）。上清をスクリュートップの反応チューブに移し、分析まで血清を−２０℃で貯蔵した。
【０１３０】
体重に対する化合物の効果
全ての動物について、処置により引き起こされる体重喪失を、処置後／処置前の体重の比として計算した。実施例１の化合物及びビークルで処置したマウスそれぞれについて、値を平均した。試料平均を、標準偏差を用いて示した。
【０１３１】
マウスの両群における体重喪失は、１０％閾値未満であった。実施例１の化合物は、ビークル対照と比較して重量の喪失の増加を全く生じなかった。
【０１３２】
【表４】
2013545737.tif 000011
【０１３３】
ウエスタンブロッティングによる血清ＣＡＦレベルの分析
ウエスタンブロット分析のため、２つの群（ビークル及び実施例１）及び２回の試料採取時（０及び１）からの血液試料をプールし（個々の試料毎に１０μl）、次の２つのプールとした：ビークル及び実施例１。ＰＢＳ５０μlを各プールに加え、希釈した試料を、１００kDaサイズのカットオフフィルターを用いて遠心分離した（Microcon、１４，０００ｇ、室温、３０分）。濾液を、４×ラエンムリ（Lammli）バッファーと混合し、電気泳動用の４〜１２％勾配ＮＵＰＡＧＥゲル上に、ハミルトン（Hamilton）シリンジを用いてロードした。野生型のマウス由来のプール血清、及び上述のとおり処理したニューロトリプシンノックアウトマウス由来のプール血清を、対照としてロードした。電気泳動後、タンパク質を、セミドライブロッティングを用いてＰＶＤＦ膜上に移した。次に、膜を、アフィニティー精製（組み換えＣ−末端アグリンフラグメントに対する）ポリクローナルアグリン抗体を用いて染色した。ＨＲＰ結合２次抗体を、ルミノール／ペルオキシド化学発光システム（ChemiGlow West、Alpha Innotech）を用いて、ＣＡＦシグナルを検出した。
【０１３４】
ＣＡＦについて染色後、メンブレンを十分に洗浄し、ロードの対照として働いた内在性マウス抗体に対する染色に再利用した。ＨＲＰ結合ウサギ抗マウス抗体を、上述の化学発光システムと一緒に用いた。ステラ（Stella）イメージングシステム（Raytest）を用いたイメージング後、ＣＡＦバンドの強度を、ＡＩＤＡ画像分析ソフトウエア（Raytest）を用いて測定し、マウス抗体軽鎖から決定したロードレベルに対して標準化した。次に、ＫＯマウスに存在するバックグラウンドを、全試料から引いた。ウエスタンブロットをもう１度繰り返し、ＣＡＦレベルの値を平均化し、次に、ビークルレベルに対して標準化した。標準平均を、標準偏差と共に、以下に表す。実施例１の化合物での処置は、ビークル対照の６６．６％±１２．９％のＣＡＦレベルの減少を導いた。
【０１３５】
【表５】
2013545737.tif 000012
【０１３６】
ＩＣ５０を、ニューロトリプシンに関して全１４試料について測定し、結果を、以下の表に集めた：
【０１３７】
【表６】
2013545737.tif 000013
【国際調査報告】
2013545737.tif 000015
2013545737.tif 000016