(57)【要約】本発明は、一般に、それを必要とする被験体の免疫応答を刺激または調整することができる低分子免疫増強物質（ＳＭＩＰ）の均一懸濁物に関する。上記均一懸濁物を、ワクチン治療のための種々の抗原またはアジュバントと組み合わせて使用することができる。一局面において、（ａ）式Ｉまたは式ＩＩのベンゾナフチリジン化合物、薬学的に許容されるその塩、薬学的に許容されるその溶媒和物、そのＮ−オキシド誘導体、その保護誘導体、その個々の異性体、またはその異性体の混合物；（ｂ）界面活性剤、および（ｃ）懸濁剤を含む均一懸濁物が提供され、この該懸濁物は４℃で少なくとも約４週間安定である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）式Ｉまたは式ＩＩのベンゾナフチリジン化合物、薬学的に許容されるその塩、薬学的に許容されるその溶媒和物、そのＮ−オキシド誘導体、その保護誘導体、その個々の異性体、またはその異性体の混合物；（ｂ）界面活性剤、および（ｃ）懸濁剤を含む均一懸濁物であって、ここで、該懸濁物が４℃で少なくとも約４週間安定である、均一懸濁物。
【請求項２】
前記均一懸濁物が約０．１％から約１０％の界面活性剤を含む、請求項１に記載の均一懸濁物。
【請求項３】
前記均一懸濁物が約０．１％から約１０％の懸濁剤を含む、請求項１または２に記載の均一懸濁物。
【請求項４】
前記均一懸濁物が約０．５ｍｇ／ｍＬから約５０ｍｇ／ｍＬのベンゾナフチリジン化合物を含む、上記請求項のいずれかに記載の均一懸濁物。
【請求項５】
前記界面活性剤がＴｗｅｅｎ−８０（ポリソルベート８０）である、上記請求項のいずれかに記載の均一懸濁物。
【請求項６】
前記懸濁剤が粘性増強懸濁剤である、上記請求項のいずれかに記載の均一懸濁物。
【請求項７】
粘性増強剤がカルボキシメチルセルロースである、請求項６に記載の均一懸濁物。
【請求項８】
少なくとも約５０％の懸濁粒子の直径が約１０μｍ以下である、上記請求項のいずれかに記載の均一懸濁物。
【請求項９】
少なくとも約５０％の懸濁粒子の直径が約２μｍ以下である、上記請求項のいずれかに記載の均一懸濁物。
【請求項１０】
前記ベンゾナフチリジン化合物が、以下：２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）プロパン−２−オール；２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；エチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾアート；２−（４−（ジメチルアミノ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−メトキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；または２−（２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エトキシ）エタノールである、上記請求項のいずれかに記載の均一懸濁物。
【請求項１１】
抗原および請求項１から１０のいずれか１項に記載の均一懸濁物を含む免疫原性組成物。
【請求項１２】
アジュバントをさらに含む、請求項１１に記載の免疫原性組成物。
【請求項１３】
前記アジュバントがアルミニウム含有アジュバントである、請求項１２に記載の免疫原性組成物。
【請求項１４】
前記アルミニウム含有アジュバントが、水酸化アルミニウム、オキシ水酸化アルミニウム、またはヒドロキシリン酸アルミニウムである、請求項１３に記載の免疫原性組成物。
【請求項１５】
前記アジュバントが水中油型エマルジョンである、請求項１２に記載の免疫原性組成物。
【請求項１６】
前記アジュバントがＭＦ５９である、請求項１２に記載の免疫原性組成物。
【請求項１７】
前記アジュバントがリポソームである、請求項１２に記載の免疫原性組成物。
【請求項１８】
前記リポソームが外膜ベシクルである、請求項１７に記載の免疫原性組成物。
【請求項１９】
前記アジュバントがオリゴヌクレオチドである、請求項１２に記載の免疫原性組成物。
【請求項２０】
前記オリゴヌクレオチドが非メチル化ＣｐＧモチーフを含む、請求項１９に記載の免疫原性組成物。
【請求項２１】
前記抗原が細菌性抗原である、請求項１１から２１のいずれか１項に記載の免疫原性組成物。
【請求項２２】
前記細菌性抗原が髄膜炎菌由来の抗原である、請求項２１に記載の免疫原性組成物。
【請求項２３】
前記抗原がウイルス性抗原である、請求項１１から２１のいずれか１項に記載の免疫原性組成物。
【請求項２４】
前記ウイルス性抗原がＲＳウイルス（ＲＳＶ）由来の抗原である、請求項２３に記載の免疫原性組成物。
【請求項２５】
前記ウイルス性抗原がエボラウイルス由来の抗原である、請求項２３に記載の免疫原性組成物。
【請求項２６】
被験体に免疫応答を引き起こす方法であって、該被験体に請求項１１から２５のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を投与する工程を含む、方法。
【請求項２７】
請求項１に記載の均一懸濁物を生成する方法であって、
（ａ）式Ｉまたは式ＩＩのベンゾナフチリジン化合物、薬学的に許容されるその塩、薬学的に許容されるその溶媒和物、そのＮ−オキシド誘導体、その保護誘導体、その個々の異性体、またはその異性体の混合物を界面活性剤および懸濁剤と混合する工程と、
（ｂ）工程（ａ）の混合物を加圧下で均質化する工程であって、ここで、該圧力が約１５，０００ｐｓｉと約２０，０００ｐｓｉとの間である、均質化する工程と
を含む、方法。
【請求項２８】
（ａ）２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン、薬学的に許容されるその塩、薬学的に許容されるその溶媒和物、そのＮ−オキシド誘導体、その保護誘導体、その個々の異性体、またはその異性体の混合物、（ｂ）界面活性剤、および（ｃ）懸濁剤を含む均一懸濁物であって、ここで、該懸濁物が４℃で少なくとも約４週間安定である、均一懸濁物。
【請求項２９】
前記均一懸濁物が約０．１％から約１０％の界面活性剤を含む、請求項２８に記載の均一懸濁物。
【請求項３０】
前記均一懸濁物が約０．１％から約１０％の懸濁剤を含む、請求項２８または２９に記載の均一懸濁物。
【請求項３１】
前記均一懸濁物が約０．５ｍｇ／ｍＬから約１０ｍｇ／ｍＬの２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを含む、請求項２８から３０のいずれか１項に記載の均一懸濁物。
【請求項３２】
前記界面活性剤がＴｗｅｅｎ−８０である、請求項２８から３１のいずれか１項に記載の均一懸濁物。
【請求項３３】
前記懸濁剤が粘性増強懸濁剤である、請求項２８から３２のいずれか１項に記載の均一懸濁物。
【請求項３４】
粘性増強剤がカルボキシメチルセルロースである、請求項３３に記載の均一懸濁物。
【請求項３５】
少なくとも約５０％の懸濁粒子の直径が約１０μｍ以下である、請求項２８から３４のいずれか１項に記載の均一懸濁物。
【請求項３６】
少なくとも約５０％の懸濁粒子の直径が約２μｍ以下である、請求項２８から３５のいずれか１項に記載の均一懸濁物。
【請求項３７】
抗原および請求項２８から３６のいずれか１項に記載の均一懸濁物を含む免疫原性組成物。
【請求項３８】
アジュバントをさらに含む、請求項３７に記載の免疫原性組成物。
【請求項３９】
前記アジュバントがアルミニウム含有アジュバントである、請求項３８に記載の免疫原性組成物。
【請求項４０】
前記アルミニウム含有アジュバントが、水酸化アルミニウム、オキシ水酸化アルミニウム、またはヒドロキシリン酸アルミニウムである、請求項３９に記載の免疫原性組成物。
【請求項４１】
前記アジュバントが水中油型エマルジョンである、請求項３８に記載の免疫原性組成物。
【請求項４２】
前記アジュバントがＭＦ５９である、請求項４１に記載の免疫原性組成物。
【請求項４３】
前記アジュバントがリポソームである、請求項３８に記載の免疫原性組成物。
【請求項４４】
前記リポソームが外膜ベシクルである、請求項４３に記載の免疫原性組成物。
【請求項４５】
前記アジュバントがオリゴヌクレオチドである、請求項３８に記載の免疫原性組成物。
【請求項４６】
前記オリゴヌクレオチドが非メチル化ＣｐＧモチーフを含む、請求項４５に記載の免疫原性組成物。
【請求項４７】
前記抗原が細菌性抗原である、請求項３７から４６のいずれか１項に記載の免疫原性組成物。
【請求項４８】
前記細菌性抗原が髄膜炎菌由来の抗原である、請求項４７に記載の免疫原性組成物。
【請求項４９】
前記抗原がウイルス性抗原である、請求項３７から４６のいずれか１項に記載の免疫原性組成物。
【請求項５０】
前記ウイルス性抗原がＲＳウイルス（ＲＳＶ）由来の抗原である、請求項４９に記載の免疫原性組成物。
【請求項５１】
前記ウイルス性抗原がエボラウイルス由来の抗原である、請求項４９に記載の免疫原性組成物。
【請求項５２】
被験体に免疫応答を引き起こす方法であって、該被験体に請求項３７から５１のいずれか１項に記載の免疫原性組成物を投与する工程を含む、方法。
【請求項５３】
請求項２８に記載の均一懸濁物を生成する方法であって、
（ａ）２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを界面活性剤および懸濁剤と混合する工程と、
（ｂ）工程（ａ）の混合物を約１５，０００ｐｓｉと約２０，０００ｐｓｉとの間の高圧下で均質化する工程と
を含む、方法。
【請求項５４】
（ａ）２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン、薬学的に許容されるその塩、薬学的に許容されるその溶媒和物、そのＮ−オキシド誘導体、その保護誘導体、その個々の異性体、またはその異性体の混合物、（ｂ）界面活性剤、および（ｃ）懸濁剤を含む均一懸濁物であって、ここで、該懸濁物が４℃で少なくとも約４週間安定である、均一懸濁物。
【請求項５５】
（ａ）２−（２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エトキシ）エタノール、薬学的に許容されるその塩、薬学的に許容されるその溶媒和物、そのＮ−オキシド誘導体、その保護誘導体、その個々の異性体、またはその異性体の混合物、（ｂ）界面活性剤、および（ｃ）懸濁剤を含む均一懸濁物であって、ここで、該懸濁物が４℃で少なくとも約４週間安定である、均一懸濁物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願への相互参照
この出願は、２００９年１２月１５日に出願された米国仮出願第６１／２８６，７５４号（これは、その全体が参考として本明細書に援用される）の利益を主張する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
最近開発された弱毒化病原体ワクチンまたはサブユニットタンパク質ワクチンは、安全性および生成費用に関して伝統的な全病原体ワクチンを超える重要な利点が得られる一方で、一般に、全病原体と比較して免疫原性が制限されている。結果として、これらのワクチンは、典型的には、疾患防止においてその潜在力を十分に発揮するための重要な免疫賦活能力を有するアジュバントが必要である。
【０００３】
ワクチンおよび免疫療法のためのアジュバントとして使用するための新規の免疫修飾物質を同定する試みがなされている。特に、ヒトおよび家畜における広範な抗原に対して強力な細胞媒介性免疫応答および体液性免疫応答を誘発するが、従来のアジュバントおよび他の免疫修飾物質の副作用を欠くアジュバント処方物が非常に望ましい。この要求を、低分子免疫増強物質（「ＳＭＩＰ」）によって満たすことができる。なぜなら、低分子プラットフォームが免疫修飾物質の治療指数の増大に必要な免疫応答を選択的に操作するための多様な化合物を提供するからである。
【０００４】
Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）は、細菌、真菌、原生動物、およびウイルス由来の病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰＳ）に結合し、侵入病原体に対する最初の防御線として作用するパターン認識受容体群である。ＴＬＲは炎症反応に関与する遺伝子発現の誘導に不可欠であり、ＴＬＲおよび先天免疫系は、抗原特異的適応免疫の発現に重要なステップである。
【０００５】
適応（体液性または細胞媒介性）免疫は、先天免疫のＴＬＲシグナル機構に関連する。先天免疫は、環境傷害（ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ  ｉｎｓｕｌｔ）（それだけに限らないが、細菌性因子またはウイルス性因子が挙げられる）と戦うために迅速に機能する防御的免疫細胞応答である。適応免疫はより遅い応答であり、ナイーブＴリンパ球のＴヘルパー１（Ｔｈ１）またはＴヘルパー２（Ｔｈ２）細胞型への分化および活性化に関与する。Ｔｈ１細胞は主に細胞性免疫を促進するのに対して、Ｔｈ２細胞は主に体液性免疫を促進する。
【０００６】
全ＴＬＲは、病原性生物上に存在する特異的または一連の特異的な分子決定基（細菌細胞−表面リポ多糖、リポタンパク質、細菌性フラジェリン、細菌およびウイルスの両方由来のＤＮＡ、およびウイルスＲＮＡが挙げられる）の認識においてホモ二量体またはヘテロ二量体のいずれかとして機能するようである。ＴＬＲ活性化に対する細胞性応答は、１種以上の転写因子の活性化を含み、それにより、侵入した病原体の死滅および排除に寄与するサイトカインおよび共刺激分子（インターフェロン、ＴＮＦ−、インターロイキン、ＭＩＰ−１、およびＭＣＰ−１など）の産生および分泌をもたらす。
【０００７】
１３種のＴＬＲ（ＴＬＲ１からＴＬＲ１３と呼ばれる）がヒトおよびマウスの両方で同定されており、これらの多数の等価な形態が他の哺乳動物種で見出されている。特に、ＴＬＲ７およびＴＬＲ８の役割は、ウイルス侵入に応答する手段として、細胞内の「外来」一本鎖ＲＮＡの存在を検出することである。ＴＬＲ７およびＴＬＲ８の両方は、ウイルス（ヒト免疫不全ウイルス、水疱性口内炎ウイルスおよびインフルエンザウイルスなど）由来のグアノシンまたはウリジンが豊富な一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）を認識する構造的に高度に保存されたタンパク質である。
【０００８】
特許文献１は、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）（ＴＬＲ７およびＴＬＲ８が挙げられる）に結合する一連の化合物を開示している。これらの化合物は免疫増強物質として有用であることが見出されているが、疎水性コアを含み、溶解性が低い。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開第２００９／１１１３３７号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
したがって、本発明の目的は、それを必要とする被験体において免疫応答を刺激または調整することができるＳＭＩＰの均一懸濁物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
（発明の概要）
本発明は、一般に、それを必要とする被験体において免疫応答を刺激または調整することができる低分子免疫増強物質（ＳＭＩＰ；すなわち、式Ｉまたは式ＩＩの化合物）の均一懸濁物に関する。均一懸濁物を、免疫療法のための種々の抗原またはアジュバントと組み合わせて使用することができる。
【００１２】
１つの例示的なアプローチは、界面活性剤および粘性増強剤と共に高圧均質化を使用してμｍのサイズ範囲の粒子を含む安定なＳＭＩＰの均一懸濁物を作製することである。得られた懸濁物は、ＳＭＩＰとミョウバンおよび水中油型エマルジョンベースのワクチンとの同時送達に特に適切である。
【００１３】
１つの態様では、本発明は、（ａ）式Ｉまたは式ＩＩのベンゾナフチリジン化合物、薬学的に許容されるその塩、薬学的に許容されるその溶媒和物、そのＮ−オキシド誘導体、その保護誘導体、その個々の異性体、またはその異性体の混合物；（ｂ）界面活性剤、および（ｃ）懸濁剤（ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ  ａｇｅｎｔ）を含む均一懸濁物であって、ここで、上記懸濁物が４℃で少なくとも約４週間安定である、均一懸濁物を提供する。ある種の実施形態では、均一懸濁物は、約０．５ｍｇ／ｍＬから約５０ｍｇ／ｍＬのベンゾナフチリジン化合物を含む。
【００１４】
ある種の実施形態では、ベンゾナフチリジン化合物は以下である：２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）プロパン−２−オール；２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；エチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾアート；２−（４−（ジメチルアミノ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−メトキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；または２−（２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エトキシ）エタノール。
【００１５】
好ましい実施形態では、均一懸濁物は、（ａ）２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは薬学的に許容されるその溶媒和物、（ｂ）界面活性剤、および（ｃ）懸濁剤を含み、ここで、上記懸濁物は４℃で少なくとも約４週間安定である。
【００１６】
別の好ましい実施形態では、均一懸濁物は、（ａ）２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは薬学的に許容されるその溶媒和物、（ｂ）界面活性剤、および（ｃ）懸濁剤を含み、ここで、上記懸濁物は４℃で少なくとも約４週間安定である。
【００１７】
別の好ましい実施形態では、均一懸濁物は、（ａ）２−（２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エトキシ）エタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは薬学的に許容されるその溶媒和物、（ｂ）界面活性剤、および（ｃ）懸濁剤を含み、ここで、上記懸濁物は４℃で少なくとも約４週間安定である。
【００１８】
例示的な界面活性剤としては、例えば、Ｔｗｅｅｎ−８０が挙げられる。ある種の実施形態では、均一懸濁物は約０．１％から約１０％の界面活性剤を含む。例示的な懸濁剤としては、例えば、粘性増強剤（カルボキシメチルセルロースなど）が挙げられる。ある種の実施形態では、均一懸濁物は約０．１％から約１０％の懸濁剤を含む。
【００１９】
ある種の実施形態では、均一懸濁物の懸濁粒子のうちの少なくとも約５０％が約１０μｍ以下の直径を有する。ある種の実施形態では、均一懸濁物の懸濁粒子のうちの少なくとも約５０％が約２μｍ以下の直径を有する。
【００２０】
本発明の均一懸濁物を使用して、免疫応答を強化し、抗原、免疫原性組成物、またはワクチンとともに同時送達させて、誘導された免疫応答の有効性を増強することができる。アジュバント（例えば、ミョウバンまたは水中油型アジュバント）を、本発明の均一懸濁物と組み合わせて使用することもできる。
（１）抗原および（２）本発明の均一懸濁物を含む免疫原性組成物も本明細書中に提供する。
【００２１】
ある種の実施形態では、免疫原性組成物は、アジュバントをさらに含む。例示的なアジュバントとしては、例えば、アルミニウム含有アジュバント（例えば、水酸化アルミニウム、オキシ水酸化アルミニウム、またはヒドロキシリン酸アルミニウム）、水中油型エマルジョン（例えば、ＭＦ５９）、リポソーム（例えば、外膜ベシクル）、オリゴヌクレオチド（例えば、非メチル化ＣｐＧモチーフを含むオリゴヌクレオチド）が挙げられる。
【００２２】
ある種の実施形態では、免疫原性組成物は、細菌性抗原（例えば、髄膜炎菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓ）由来の抗原）、ウイルス性抗原（例えば、ＲＳウイルス（ＲＳＶ）またはエボラウイルス由来の抗原）である抗原を含む。ある種の実施形態では、免疫原性組成物は、（１）ウイルス性抗原（例えば、エボラウイルス由来の抗原）および（２）２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンまたは２−（２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エトキシ）エタノールを含む。
【００２３】
それを必要とする被験体における免疫応答を強化するための本発明の均一懸濁物の使用方法、および本発明の均一懸濁物の生成方法も本明細書中に提供する。
【００２４】
本発明はまた、式Ｉまたは式ＩＩの化合物、界面活性剤、および懸濁剤を含む、均一懸濁物を生成するための方法に関する。本方法は、式Ｉまたは式ＩＩの化合物、界面活性剤、および懸濁剤を混合する工程、およびその混合物を高圧（１５，０００〜２０，０００ｐｓｉなど）下で均質化して、好ましくは約１０μｍ以下、より好ましくは約２μｍ以下のＤ５０、必要に応じて約１０μｍ以下のＤ９０を有する均一懸濁物を生成する工程を含む。
【００２５】
それを必要とする被験体における免疫応答を生成するための本発明の免疫原性組成物の使用方法も本明細書中に提供する。
【００２６】
本発明はまた、治療で用いるための本明細書に記載の均一懸濁物に関し、そして免疫応答の強化または誘導のための医薬の製造のための均一懸濁物の使用にも関する。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】図１Ａは、３種のＭｅｎＢ抗原の、単独または異なる用量の実施例４７の懸濁物をミョウバン／３ＭｅｎＢ処方物へ添加した後の、電気泳動プロフィール（ＳＤＳ−ＰＡＧＥによる）を示す。記号解：ＳＮ＝非吸着抗原（２０％の用量１０μｇの代表）；Ｔ＝非吸着抗原（２００％の用量２０μｇの代表）；Ｐ＝吸着抗原回収（１０％の用量１０μｇの代表）。図１Ｂは、ミョウバン上への抗原吸着率を示す表である。
【図２】図２は、実施例４７の均一懸濁物が腸外病原性大腸菌（ＥｘＰＥＣ）抗原ＰＫ１−３５２６の吸着に影響を及ぼさなかったことを示す。記号解：１．Ｓｅａ  Ｂｌｕｅ  Ｐｌｕｓ  ＭＷマーカー；２．ｐＫ１−３５２６コントロール２ｕｇ（１００％）；３．ｐＫ１−３５２６コントロール１ｕｇ（５０％）；４．ｐＫ１−３５２６コントロール０．４ｕｇ（２０％）；５．ミョウバン／ｐＫ１−３５２６  ＳＮ（２０％）；６．ミョウバン／ｐＫ１−３５２６＋実施例４７  ＳＮ（２０％）；７．ミョウバン／ｐＫ１−３５２６  ＳＮ  ＴＣＡ（２４０％）；８．ミョウバン／ｐＫ１−３５２６＋実施例４７  ＳＮ  ＴＣＡ（２４０％）；９．−；１０．ｐＫ１−３５２６  ＴＣＡコントロール２．４ｕｇ（２４０％）；１１．ミョウバン／ｐＫ１−３５２６  ペレット脱着（ｐｅｌｌｅｔ  ｄｅｓｏｒｂ）（５０％）；１２．ミョウバン／ｐＫ１−３５２６＋実施例４７  ペレット脱着（５０％）。％値は、単回用量処方物に対する比率を示す。
【図３Ａ】図３Ａは、３ＭｅｎＢ／ミョウバンで示したビヒクルにおいて、４ｍｐｋ（ミリグラム／キログラム）で筋肉内注射した後のマウスにおける実施例４７（不均一／ＤＭＳＯ懸濁物対均一懸濁物）の血清レベルを示す。
【図３Ｂ】図３Ｂは、３ＭｅｎＢ／ミョウバンで示したビヒクルにおいて、４ｍｐｋで筋肉内注射した２４時間後のマウスにおける実施例４７（不均一／ＤＭＳＯ懸濁物対均一懸濁物）の注射部位筋肉でのレベルを示す。
【図３Ｃ】図３Ｃは、３ＭｅｎＢ／ミョウバンと共に示したビヒクルにおいて、４ｍｐｋで筋肉内注射した２４時間後のマウスにおける実施例４７（均一懸濁物）の鼠径節リンパ節でのレベルを示す。
【図４】図４は、実施例４７の不均一／ＤＭＳＯ懸濁物＋３ＭｅｎＢ／ミョウバンおよび実施例４７の均一懸濁物＋３ＭｅｎＢ／ミョウバンのサイトカイン放出プロフィールが類似していたことを示す。サイトカイン放出は、均一懸濁物またはＤＭＳＯで処方した実施例４７を曝露後に、アジュバントＲ８４８と比較して最小であった。
【図５】図５Ａは、２から１００マイクログラム／マウスの範囲の、特定用量の実施例４７の均一懸濁物を使用して処方した、ミョウバン／３ＭｅｎＢについての血清殺菌抗体（ＳＢＡ）力価を示す。図５Ｂは、２から１００マイクログラム／マウスの範囲の、特定用量の実施例４７の均一懸濁物を使用して処方した、ＭＦ５９／３ＭｅｎＢについてのＳＢＡ力価を示す。
【図６】図６は、実施例４７の懸濁物（ミョウバン／３ＭｅｎＢワクチンを使用して処方した場合）が、１６菌株の髄膜炎菌のパネル（その全てが、典型的には、ミョウバン／３ＭｅｎＢ処方物と比較して低い力価を有していた）に対するプール血清のＳＢＡ力価を誘発する能力を示す。グラフは、これら１６菌株に対する適用範囲（ｃｏｖｅｒａｇｅ）の比率を示す。カットオフは、細菌活性を示すと見なされる最低の力価を指す。
【図７Ａ】図７Ａ〜７Ｃは、インビボでのＭｅｎＢマウスモデルにおけるＩｇＧ１／ＩｇＧ２ａ比の評価の結果を示す。図７Ａは、ＧＮＡ２１３２−ＧＮＡ１０３０についてのＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、およびＩｇＧ３力価を示す。
【図７Ｂ】図７Ａ〜７Ｃは、インビボでのＭｅｎＢマウスモデルにおけるＩｇＧ１／ＩｇＧ２ａ比の評価の結果を示す。図７Ｂは、ＧＮＡ２０９１−ＧＮＡ１８７０についてのＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、およびＩｇＧ３力価を示す。
【図７Ｃ】図７Ａ〜７Ｃは、インビボでのＭｅｎＢマウスモデルにおけるＩｇＧ１／ＩｇＧ２ａ比の評価の結果を示す。図７Ｃは、ＮａｄＡについてのＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、およびＩｇＧ３力価を示す。
【図８】図８は、実施例４７の不均一懸濁物（ＤＭＳＯで調製）を使用したＳＢＡアッセイの結果を示す。マウスを、ＭＦ５９／３ＭｅｎＢ＋表示量の実施例４７を使用したｉ．ｍ．で２回免疫した。グラフは、３つの独立したＳＢＡ研究に基づき、第２の注射から２週間後の平均力価±標準偏差を示す。ＳＢＡアッセイを、ＮＺ９８  ＭｅｎＢ株を使用して、標準的なＣＦＵ法を使用して行った。
【図９Ａ】図９Ａは、実施例４７の懸濁物がＲＳＶ  Ｆ−抗原に対する免疫応答を誘発する能力を証明した１つの研究の結果をまとめたグラフである。その表示（ｒｅａｄｏｕｔ）は、総抗Ｆ抗体（κ）および中和抗体（ＰＲＮＴ６０）を表す。
【図９Ｂ】図９Ｂは、別の研究において、実施例４７の懸濁物がＦ特異的抗体（ＩｇＧ２ａへクラススイッチ）および中和抗体を増強したことを示す。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
（発明の詳細な説明）
１．概要
１つの態様では、本発明は、低分子免疫増強物質（ＳＭＩＰ）の均一懸濁物に関する。均一懸濁物を使用して、免疫応答を強化することができる。
【００２９】
本明細書で使用する場合、本発明者らは、例としてＳＭＩＰ（２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン）の均一懸濁物の効力を評価した。これらの研究により、免疫応答の強化においてＳＭＩＰの均一懸濁物が不均一懸濁物（ＤＭＳＯ中）よりも有効であることが証明された。
【００３０】
均一懸濁物を生成するアプローチの一例は、サイズ範囲が１００ｎｍから１０μｍの粒子を含む安定なＳＭＩＰの均一懸濁物を作製するために、界面活性剤および粘性増強剤と一緒の高圧均質化を使用することである。得られた懸濁物は、ＳＭＩＰの、ミョウバンおよび水中油型エマルジョンベースのワクチンとの同時送達に特に適切である。均一懸濁物は、規定のサイズ分布を有し、それにより、用量がより均一である。さらに、得られた粒径は、投与後のＳＭＩＰの、免疫細胞に対する生物学的利用能を増大させる。懸濁物はまた、サイズ分布によって測定した場合に長期間安定であり得る。最後に、ＳＭＩＰの均一懸濁物により、同一投薬量の不均一懸濁物と比較して、より低い用量（例えば、１０μｇ／用量以下）で免疫刺激効果が得られる。
【００３１】
好ましい実施形態では、均一懸濁物は、（ａ）２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは薬学的に許容されるその溶媒和物、（ｂ）界面活性剤、および（ｃ）懸濁剤を含み、ここで、上記懸濁物は４℃で少なくとも約４週間安定である。
【００３２】
別の好ましい実施形態では、均一懸濁物は、（ａ）２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン、または薬学的に許容されるその塩もしくは薬学的に許容されるその溶媒和物、（ｂ）界面活性剤、および（ｃ）懸濁剤を含み、ここで、上記懸濁物は４℃で少なくとも約４週間安定である。
【００３３】
別の好ましい実施形態では、均一懸濁物は、（ａ）２−（２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エトキシ）エタノール、または薬学的に許容されるその塩もしくは薬学的に許容されるその溶媒和物、（ｂ）界面活性剤、および（ｃ）懸濁剤を含み、ここで、上記懸濁物は４℃で少なくとも約４週間安定である。
【００３４】
本発明の均一懸濁物を使用して免疫応答を強化することができ、本発明の均一懸濁物を抗原、免疫原性組成物、またはワクチンと同時送達させて、誘導された免疫応答の有効性を増強することができる。
【００３５】
それを必要とする被験体における免疫応答を強化するための本発明の均一懸濁物の使用方法および本発明の均一懸濁物の生成方法も本明細書中に提供する。
【００３６】
２．定義
本明細書で使用する場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、その内容によって明らかにそうでないと示されない限り、複数への言及を含む。
【００３７】
用語「約」は、本明細書で使用する場合、値の＋／−１０％を指す。
【００３８】
用語「アルケニル」は、本明細書で使用する場合、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する、部分的に不飽和の分枝または直鎖の炭化水素を指す。二重結合を中心に配向される原子は、シス（Ｚ）またはトランス（Ｅ）立体配座にある。アルケニル基は、必要に応じて置換することができる。本明細書で使用する場合、用語「Ｃ２〜Ｃ３アルケニル」、「Ｃ２〜Ｃ４アルケニル」、「Ｃ２〜Ｃ５アルケニル」、「Ｃ２〜Ｃ６アルケニル」、「Ｃ２〜Ｃ７アルケニル」、および「Ｃ２〜Ｃ８アルケニル」は、少なくとも２個、および、それぞれ最大で３、４、５、６、７、または８個の炭素原子を含有するアルケニル基を指す。別段の指定がなければ、アルケニル基は一般に、Ｃ２〜Ｃ６アルケニルである。アルケニル基の非限定的な例としては、本明細書で使用する場合、エテニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニルなどが挙げられる。
【００３９】
用語「アルケニレン」は、本明細書で使用する場合、アルケニル基から得られる、部分的に不飽和の分枝または直鎖の二価の炭化水素ラジカルを指す。アルケニレン基は、必要に応じて置換することができる。本明細書で使用する場合、用語「Ｃ２〜Ｃ３アルケニレン」、「Ｃ２〜Ｃ４アルケニレン」、「Ｃ２〜Ｃ５アルケニレン」、「Ｃ２〜Ｃ６アルケニレン」、「Ｃ２〜Ｃ７アルケニレン」、および「Ｃ２〜Ｃ８アルケニレン」は、少なくとも２個、および、それぞれ最大で３、４、５、６、７、または８個の炭素原子を含有するアルケニレン基を指す。別段の指定がなければ、アルケニレン基は一般に、Ｃ１〜Ｃ６アルケニレンである。アルケニレン基の非限定的な例としては、本明細書で本明細書で、エテニレン、プロペニレン、ブテニレン、ペンテニレン、ヘキセニレン、ヘプテニレン、オクテニレン、ノネニレン、デカニレンなどが挙げられる。
【００４０】
用語「アルキル」は、本明細書で使用する場合、飽和分枝または直鎖炭化水素を指す。アルキル基は、必要に応じて置換することができる。本明細書で本明細書で、用語「Ｃ１〜Ｃ３アルキル」、「Ｃ１〜Ｃ４アルキル」、「Ｃ１〜Ｃ５アルキル」、「Ｃ１〜Ｃ６アルキル」、「Ｃ１〜Ｃ７アルキル」、および「Ｃ１〜Ｃ８アルキル」は、少なくとも１個、および、それぞれ最大で３、４、５、６、７、または８個の炭素原子を含有するアルキル基を指す。別段の指定がなければ、アルキル基は一般に、Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。アルキル基の非限定的な例としては、本明細書で使用する場合、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシルなどが挙げられる。
【００４１】
用語「アルキレン」は、本明細書で使用する場合、アルキル基から得られる、飽和分枝または直鎖の二価の炭化水素ラジカルを指す。アルキレン基は、必要に応じて置換することができる。本明細書で使用する場合、用語「Ｃ１〜Ｃ３アルキレン」、「Ｃ１〜Ｃ４アルキレン」、「Ｃ１〜Ｃ５アルキレン」、「Ｃ１〜Ｃ６アルキレン」、「Ｃ１〜Ｃ７アルキレン」、および「Ｃ１〜Ｃ８アルキレン」は、少なくとも１個、および、それぞれ最大で３、４、５、６、７、または８個の炭素原子を含有するアルキレン基を指す。別段の指定がなければ、アルキレン基は一般に、Ｃ１〜Ｃ６アルキレンである。アルキレン基の非限定的な例としては、本明細書で使用する場合、メチレン、エチレン、ｎ−プロピレン、イソプロピレン、ｎ−ブチレン、イソブチレン、ｓｅｃ−ブチレン、ｔ−ブチレン、ｎ−ペンチレン、イソペンチレン、ヘキシレンなどが挙げられる。
【００４２】
用語「アルキニル」は、本明細書で使用する場合、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有する、部分的に不飽和の分枝または直鎖の炭化水素を指す。アルキニル基は、必要に応じて置換することができる。本明細書で使用する場合、用語「Ｃ２〜Ｃ３アルキニル」、「Ｃ２〜Ｃ４アルキニル」、「Ｃ２〜Ｃ５アルキニル」、「Ｃ２〜Ｃ６アルキニル」、「Ｃ２〜Ｃ７アルキニル」、および「Ｃ２〜Ｃ８アルキニル」は、少なくとも２個、および、それぞれ最大で３、４、５、６、７、または８個の炭素原子を含有するアルキレン基を指す。別段の指定がなければ、アルキレン基は一般に、Ｃ２〜Ｃ６アルキニルである。アルキニル基の非限定的な例としては、本明細書で使用する場合、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル、ヘプチニル、オクチニル、ノニニル、デシニルなどが挙げられる。
【００４３】
用語「アルキニレン」は、本明細書で使用する場合、アルキニル基から得られる、部分的に不飽和の分枝または直鎖の二価の炭化水素ラジカルを指す。アルキニレン基は、必要に応じて置換することができる。本明細書で使用する場合、用語「Ｃ２〜Ｃ３アルキニレン」、「Ｃ２〜Ｃ４アルキニレン」、「Ｃ２〜Ｃ５アルキニレン」、「Ｃ２〜Ｃ６アルキニレン」、「Ｃ２〜Ｃ７アルキニレン」、および「Ｃ２〜Ｃ８アルキニレン」は、少なくとも２個、および、それぞれ最大で３、４、５、６、７、または８個の炭素原子を含有するアルキニレン基を指す。別段の指定がなければ、アルキニレン基は一般に、Ｃ２〜Ｃ６アルキニレンである。アルキニレン基の非限定的な例としては、本明細書で使用する場合、エチニレン、プロピニレン、ブチニレン、ペンチニレン、ヘキシニレン、ヘプチニレン、オクチニレン、ノニニレン、デシニレンなどが挙げられる。
【００４４】
用語「アルコキシ」は、本明細書で使用する場合、基−ＯＲａ（ここでは、Ｒａは、本明細書で定義する通りのアルキル基である）を指す。アルコキシ基は、必要に応じて置換することができる。本明細書で使用する場合、用語「Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ」、「Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ」、「Ｃ１〜Ｃ５アルコキシ」、「Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ」、「Ｃ１〜Ｃ７アルコキシ」、および「Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ」は、そのアルキル部分が、少なくとも１個、および最大で３、４、５、６、７、または８個の炭素原子を含有するアルコキシ基を指す。アルコキシ基の非限定的な例としては、本明細書で使用する場合、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブチルオキシ、ｔ−ブチルオキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、ヘプチルオキシ、オクチルオキシ、ノニルオキシ、デシルオキシなどが挙げられる。
【００４５】
用語「アリール」は、本明細書で使用する場合、合わせて５から１４の環員を有する単環式、二環式、および三環式の環構造（ここでは、構造中の少なくとも１つの環は芳香族であり、構造中の各環は、３から７の環員を含有する）を指す。アリール基は、必要に応じて置換することができる。アリール基の非限定的な例としては、本明細書で使用する場合、フェニル、ナフチル、フルオレニル、インデニル、アズレニル、アントラセニルなどが挙げられる。
【００４６】
用語「アリーレン」は、本明細書で使用する場合、アリール基から得られる二価のラジカルを意味する。アリーレン基は、必要に応じて置換することができる。
【００４７】
用語「シアノ」は、本明細書で使用する場合、−ＣＮ基を指す。
【００４８】
用語「シクロアルキル」は、本明細書で使用する場合、飽和または部分的に不飽和の、単環式、縮合二環式、縮合三環式、または架橋多環式環アセンブリを指す。本明細書で使用する場合、用語「Ｃ３〜Ｃ５シクロアルキル」、「Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル」、「Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル」、「Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル」、「Ｃ３〜Ｃ９シクロアルキル」、および「Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル」は、シクロアルキル基を指す。ここでは、飽和または部分的に不飽和の、単環式、縮合二環式、または架橋多環式環アセンブリは、少なくとも３個、および最大で５、６、７、８、９、または１０個の炭素原子を含有する。シクロアルキル基は、必要に応じて置換することができる。シクロアルキル基の非限定的な例としては、本明細書で使用する場合、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロノニル、シクロデシル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、デカヒドロナフタレニル、２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−１Ｈ−インデニルなどが挙げられる。
【００４９】
用語「ハロゲン」は、本明細書で使用する場合、フッ素（Ｆ）、塩素（Ｃｌ）、臭素（Ｂｒ）、またはヨウ素（Ｉ）を指す。
【００５０】
用語「ハロ」は、本明細書で使用する場合、ハロゲンラジカル：フルオロ（−Ｆ）、クロロ（−Ｃｌ）、ブロモ（−Ｂｒ）、およびヨード（−Ｉ）を指す。
【００５１】
用語「ハロアルキル」または「ハロ置換型アルキル」は、本明細書で使用する場合、１つ以上のハロゲン基（ここでは、ハロゲン基は、同じかまたは異なる）で置換された、本明細書で定義する通りのアルキル基を指す。ハロアルキル基は、必要に応じて置換することができる。こうした分枝または直鎖ハロアルキル基の非限定的な例としては、本明細書で使用する場合、それだけには限らないが、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルなどを含めて、１つ以上のハロゲン基（ここでは、ハロゲン基は、同じかまたは異なる）で置換されたメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、イソブチル、およびｎ−ブチルが挙げられる。
【００５２】
用語「ハロアルケニル」または「ハロ置換型アルケニル」は、本明細書で使用する場合、１つ以上のハロゲン基（ここでは、ハロゲン基は、同じかまたは異なる）で置換された、本明細書で定義する通りのアルケニル基を指す。ハロアルケニル基は、必要に応じて置換することができる。こうした分枝または直鎖ハロアルケニル基の非限定的な例としては、本明細書で使用する場合、１つ以上のハロゲン基（ここでは、ハロゲン基は、同じかまたは異なる）で置換されたエテニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニルなどが挙げられる。
【００５３】
用語「ハロアルキニル」または「ハロ置換型アルキニル」は、本明細書で使用する場合、１つ以上のハロゲン基（ここでは、ハロゲン基は、同じかまたは異なる）で置換された、上で定義した通りのアルキニル基を指す。ハロアルキニル基は、必要に応じて置換することができる。こうした分枝または直鎖ハロアルキニル基の非限定的な例としては、本明細書で使用する場合、１つ以上のハロゲン基（ここでは、ハロゲン基は、同じかまたは異なる）で置換されたエチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル、ヘプチニル、オクチニル、ノニニル、デシニルなどが挙げられる。
【００５４】
用語「ハロアルコキシ」は、本明細書で使用する場合、１つ以上のハロゲン基（ここでは、ハロゲン基は、同じかまたは異なる）で置換された、本明細書で定義する通りのアルコキシ基を指す。ハロアルコキシ基は、必要に応じて置換することができる。こうした分枝または直鎖ハロアルキニル基の非限定的な例としては、本明細書で使用する場合、１つ以上のハロゲン基（ここでは、ハロゲン基は、同じかまたは異なる）で置換されたメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブチルオキシ、ｔ−ブチルオキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、ヘプチルオキシ、オクチルオキシ、ノニルオキシ、デシルオキシなどが挙げられる。
【００５５】
用語「ヘテロアルキル」は、本明細書で使用する場合、１つ以上の炭素原子が、１つ以上の酸素、硫黄、窒素、またはそれらの組み合わせによって独立に置き換えられた、本明細書で定義する通りのアルキル基を指す。
【００５６】
用語「ヘテロアリール」は、本明細書で使用する場合、合わせて５から１４の環員を有する単環式、二環式、および三環式の環構造（ここでは、構造中の少なくとも１つの環は芳香族であり、構造中の少なくとも１つの環は、窒素、酸素、および硫黄から選択される１つ以上のヘテロ原子を含有し、構造中の各環は、３から７の環員を含有する）を指す。ヘテロアリール基は、１つ以上の置換基を含有することができる。ヘテロアリール基は、必要に応じて置換することができる。ヘテロアリール基の非限定的な例としては、本明細書で使用する場合、ベンゾフラニル、ベンゾフラザニル、ベンゾキサゾリル、ベンゾピラニル、ベンズチアゾリル、ベンゾチエニル、ベンズアゼピニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾチオピラニル、ベンゾ［１，３］ジオキソール、ベンゾ［ｂ］フリル、ベンゾ［ｂ］チエニル、シンノリニル、フラザニル、フリル、フロピリジニル、イミダゾリル、インドリル、インドリジニル、インドリン−２−オン、インダゾリル、イソインドリル、イソキノリニル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、１，８−ナフチリジニル、オキサゾリル、オキサインドリル、オキサジアゾリル、ピラゾリル、ピロリル、フタラジニル、プテリジニル、プリニル、ピリジル、ピリダジニル、ピラジニル、ピリミジニル、キノキサリニル、キノリニル、キナゾリニル、４Ｈ−キノリジニル、チアゾリル、チアジアゾリル、チエニル、トリアジニル、トリアゾリル、およびテトラゾリルが挙げられる。
【００５７】
用語「ヘテロシクロアルキル」は、本明細書で使用する場合、１つ以上の環炭素が、−Ｏ−、−Ｎ＝、−ＮＲ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、または−Ｓ（Ｏ）２−から選択される部分によって置き換えられた、本明細書で定義する通りのシクロアルキルを指す。ここでは、前記基の環が、２つの隣接するＯまたはＳ原子を含有しないという条件で、Ｒは、水素、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、または窒素保護基である。ヘテロシクロアルキル基は、必要に応じて置換することができる。ヘテロシクロアルキル基の非限定的な例としては、本明細書で使用する場合、モルホリノ、ピロリジニル、ピロリジニル−２−オン、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリジニロン、１，４−ジオキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デシ−８−イル、２Ｈ−ピロリル、２−ピロリニル、３−ピロリニル、１，３−ジオキソラニル、２−イミダゾリニル、イミダゾリジニル、２−ピラゾリニル、ピラゾリジニル、１，４−ジオキサニル、１，４−ジチアニル、チオモルホリニル、アゼパニル、ヘキサヒドロ−１，４−ジアゼピニル、テトラヒドロフラニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、チオキサニル、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、オキセパニル、チエパニル、１，２，３，６−テトラヒドロピリジニル、２Ｈ−ピラニル、４Ｈ−ピラニル、ジオキサニル、１，３−ジオキソラニル、ジチアニル、ジチオラニル、ジヒドロピラニル、ジヒドロチエニル、ジヒドロフラニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサニル、および３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタニルが挙げられる。
【００５８】
用語「ヘテロ原子」は、本明細書で使用する場合、１つ以上の酸素、硫黄、窒素、リン、またはケイ素を指す。
【００５９】
用語「ヒドロキシル」は、本明細書で使用する場合、基−ＯＨを指す。
【００６０】
用語「ヒドロキシアルキル」は、本明細書で使用する場合、１つ以上のヒドロキシル基で置換された、本明細書で定義する通りのアルキル基を指す。分枝または直鎖「Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル基」の非限定的な例としては、本明細書で使用する場合、１つ以上のヒドロキシル基で置換されたメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、イソブチル、およびｎ−ブチル基が挙げられる。
【００６１】
用語「イソシアネート」は、本明細書で使用する場合、−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ基を指す
用語「イソチオシアネート」は、本明細書で使用する場合、−Ｎ＝Ｃ＝Ｓ基を指す。
【００６２】
用語「メルカプチル」は、本明細書で使用する場合、（アルキル）Ｓ−基を指す。
【００６３】
用語「必要に応じて置換される」は、本明細書で使用する場合、言及される基が、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、アルコキシ、メルカプチル、シアノ、ハロ、カルボニル、チオカルボニル、イソシアネート、チオシアネート、イソチオシアネート、ニトロ、パーハロアルキル、パーフルオロアルキル、およびアミノ（一および二置換型アミノ基を含めて）、およびそれらの保護された誘導体からそれぞれ独立に選択される１つ以上の追加の基で置換されてもされなくてもよいことを意味する。任意選択の置換基の非限定的な例としては、ハロ、−ＣＮ、＝Ｏ、＝Ｎ−ＯＨ、＝Ｎ−ＯＲ、＝Ｎ−Ｒ、−ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨＲ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ２、−ＳＲ−、−Ｓ（Ｏ）Ｒ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ、−ＮＨＲ、−Ｎ（Ｒ）２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ、−ＮＲＣ（Ｏ）ＯＲ、Ｓ（Ｏ）２ＮＨＲ、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ）２、−ＮＨＳ（Ｏ）２ＮＲ２、−ＮＲＳ（Ｏ）２ＮＲ２、−ＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ、−ＮＲＳ（Ｏ）２Ｒ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロ置換型Ｃ１〜Ｃ８アルキル、およびハロ置換型Ｃ１〜Ｃ８アルコキシが挙げられる。ここでは、各Ｒは独立に、Ｈ、ハロ、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ８アルコキシ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロ置換型Ｃ１〜Ｃ８アルキル、およびハロ置換型Ｃ１〜Ｃ８アルコキシから選択される。こうした置換基の配置および数は、各基のよく知られた原子価制限に従って行われる。例えば、＝Ｏは、アルキル基に適した置換基であるが、アリール基に適した置換基ではない。
【００６４】
用語「プロドラッグ」は、本明細書で使用する場合、インビボで親薬物に転換される薬剤を指す。本明細書に述べる化合物のプロドラッグの非限定的な例は、エステルとして投与され、その後、一旦細胞内に入ると、代謝的に加水分解されて、カルボン酸、すなわち活性実体となるような、本明細書に述べる化合物である。プロドラッグのさらなる例は、酸性基が結合した短ペプチドである。この場合、ペプチドが代謝されると、活性部分が現れる。
【００６５】
用語「溶媒和物」は、本明細書で使用する場合、溶質（例として、本明細書に記述する式（Ｉ）の化合物またはその塩）と溶媒によって形成される可変化学量論の複合体を指す。溶媒の非限定的な例は、水、アセトン、メタノール、エタノール、および酢酸である。
【００６６】
「脊椎動物被験体」は、脊椎動物亜門（ｓｕｂｐｈｙｌｕｍ  ｃｈｏｒｄａｔａ）の任意のメンバー（それだけに限らないが、ヒトおよび他の霊長類（非ヒト霊長類（チンパンジーならびに他の類人猿およびサル種など）が挙げられる）；家畜（ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、およびウマなど）；家庭用哺乳動物（イヌおよびネコなど）；実験動物（げっ歯類（マウス、ラット、およびモルモットなど）が挙げられる）；鳥類（家禽、野生の鳥類、および競技用鳥類（ニワトリ、シチメンチョウおよび他のキジ目の鳥類、アヒル、ならびにガチョウなど）が挙げられる）が挙げられる）を意味する。この用語は、特定の年齢を示さない。つまり、成体個体および新生個体の両方を対象とすることを意図する。
【００６７】
本明細書で使用する場合、「処置」は、次のうちのいずれかを指す：（ｉ）問題の状態（例えば、疾患または障害）の予防（例えば、がんまたは病原性の感染（伝統的なワクチンにおけるように））、（ｉｉ）問題の状態に伴う症状の軽減または除去、および（ｉｉｉ）問題の状態の実質的または完全な除去。処置は、予防的に（問題の状態の出現前に）または治療的に（問題の状態の出現後に）行うことができる。
【００６８】
本発明の均一懸濁物の「有効量」または「薬学的に有効な量」という用語は、本明細書中に記載のように、免疫応答を、例えば、少なくとも約１０％増強するのに十分な量を指す。本発明の免疫原性組成物の「有効量」または「薬学的に有効な量」という用語は、本明細書では、問題の状態を処置または診断するのに十分な免疫原性組成物の量を指す。必要とされる厳密な量は、例えば他の因子の中でも特に、被験体の人種、年齢、および全身状態；処置される状態の重症度；目的の特定の抗原；免疫学的応答の場合、例えば、被験体の免疫系が抗体を合成する能力、および必要とされる防護の程度；および投与様式；に応じて、被験体ごとに変動する。いずれの個々の場合にも、適切な「有効」量は、当業者によって決定することができる。つまり、「治療有効量」は一般的に、比較的広範囲に及ぶこととなり、それはルーチン試験を介して決定できる。
【００６９】
「薬学的に許容される」または「薬理学的に許容される」は、生物学的ではないかまたは他の点で望ましくない材料を意味する。例えば、こうした材料を、いかなる過度の望ましくない生物学的作用も引き起こさずに、または、それが含まれる組成物中のいかなる成分とも過度に有害な方式で相互作用せずに、個体に投与することができる。
【００７０】
「生理学的ｐＨ」または「生理学的範囲のｐＨ」は、およそ６．５から８．０（両端含む）の範囲の、より典型的にはおよそ７．２から７．６（両端含む）の範囲のｐＨを意味する。
【００７１】
本明細書で使用する場合、用語「注射用組成物」またはその変種は、脊椎動物被験体への注射に適切な薬学的に許容される組成物を指し、この組成物は、典型的には、無菌で発熱物質を含まず、注射に適切な特定のｐＨおよび等張の値（ｉｓｏｔｏｎｉｃｉｙ  ｖａｌｕｅ）を有する。
【００７２】
本明細書で使用する場合、用語「粒子」は、直径が約１０ｎｍ以下から約１５０μｍ（例えば、１０ｎｍから２５ｎｍから５０ｎｍから１００ｎｍから２５０ｎｍから５００ｎｍから１μｍから２．５μｍから５μｍから１０μｍから２５μｍから５０μｍから１００μｍ（ｆｒｏｍ  １０ｎｍ  ｔｏ  ２５ｎｍ  ｔｏ  ５０ｎｍ  ｔｏ  １００ｎｍ  ｔｏ  ２５０ｎｍ  ｔｏ  ５００ｎｍ  ｔｏ  １μｍ  ｔｏ  ２．５μｍ  ｔｏ  ５μｍ  ｔｏ  １０μｍ  ｔｏ  ２５μｍ  ｔｏ  ５０μｍ  ｔｏ  １００μｍ）の範囲）の粒子を指す。したがって、用語「粒子」としては、本明細書で使用する場合、「ナノ粒子」（本明細書で直径が１０００ｎｍ未満の粒子と定義する）および「微粒子」（本明細書で直径が１μｍから１０００μｍまでの範囲の粒子と定義する）が挙げられる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のポリマー粒子は、一般に、球状であり得る。
【００７３】
用語「ポリペプチド」は、アミノ酸残基のポリマーを指し、その生成物の最小長に制限されない。したがって、全長タンパク質、ペプチド、オリゴペプチド、二量体、および多量体などが定義内に含まれる。
【００７４】
「ポリペプチド含有種」は、その少なくとも一部分がポリペプチドである分子である。例としては、ポリペプチド、タンパク質（糖タンパク質、金属タンパク質、およびリポタンパク質が挙げられる）、およびキャリアタンパク質に結合体化した多糖抗原などが挙げられる。本明細書で用いるタンパク質としては、全長タンパク質およびそのフラグメントが挙げられる。ある種の実施形態では、天然の配列に対する改変（欠失、付加、および置換（一般に、本質的に保存的）など）を使用する。
【００７５】
用語「フラグメント」は、本明細書で使用する場合、生体分子の一次構造の物理学的に連続した部分を指す。タンパク質の場合、フラグメントをそのタンパク質のアミノ酸配列の連続した部分によって定義することができ、それは、少なくとも３〜５アミノ酸、少なくとも６〜１０アミノ酸、少なくとも１１〜１５アミノ酸、少なくとも１６〜２４アミノ酸、少なくとも２５〜３０アミノ酸、および少なくとも３０〜４５アミノ酸であり得る。ポリヌクレオチドの場合、フラグメントを、そのポリヌクレオチドの核酸配列の連続した部分によって定義し、それは、少なくとも９〜１５ヌクレオチド、少なくとも１５〜３０ヌクレオチド、少なくとも３１〜４５ヌクレオチド、少なくとも４６〜７４ヌクレオチド、少なくとも７５〜９０ヌクレオチド、および少なくとも９０〜１３０ヌクレオチドであり得る。いくつかの実施形態では、生体分子のフラグメントは免疫原性フラグメントである。
【００７６】
「ポリヌクレオチド」は、核酸ポリマーである。ポリヌクレオチドとしては、５、６、７、または８個ほどの少数のヌクレオチドを挙げることができる。さらに、「ポリヌクレオチド」としては、二本鎖配列および一本鎖配列の両方を挙げることができ、それだけに限らないが、ウイルス、原核生物、または真核生物のｍＲＮＡ由来のｃＤＮＡ、ゲノムＲＮＡ、およびウイルス（例えば、ＲＮＡウイルスおよびＤＮＡウイルスならびにレトロウイルス）、原核生物、または真核生物由来のＤＮＡ配列、ならびに合成ＤＮＡ配列を指す。この用語はまた、ＤＮＡおよびＲＮＡの公知の塩基アナログのいずれかを含む配列を示す。この用語は、例えば、核酸分子が抗原タンパク質をコードする場合、天然の配列に対する改変（欠失、付加、および置換（一般に、本質的に保存的）など）をさらに含む。これらの改変は意図的（部位特異的変異誘発などによる）または偶発的（抗原を産生する宿主の変異などによる）であり得る。
【００７７】
「ポリヌクレオチド含有種」は、その少なくとも一部分がポリヌクレオチドである分子である。例としては、ＲＮＡベクター構築物およびＤＮＡベクター構築物などが挙げられる。
【００７８】
本明細書で使用する場合、用語「糖」は、単糖、少糖、および多糖を包含する。「糖含有種」は、その少なくとも一部分が糖である分子である。例としては、糖抗原およびキャリアペプチドに結合体化した糖を含む抗原などが挙げられる。
【００７９】
本明細書で使用する場合、用語「単離された」は、化学種が天然に存在する環境と異なる環境にある化学種（ポリヌクレオチド、ポリペプチド、および抗体など）を指す。単離された化学種は、一般に、実質的に精製されている。細胞の単離方法もまた当業者に周知である。
【００８０】
「精製された」タンパク質は、（例えば、組換えまたは合成的に）産生されるか、組成物中のタンパク質の存在量が粗調製物中の存在量よりも実質的に高いように、その天然の宿主から単離されたタンパク質である。一般に、精製されたタンパク質は、少なくとも約５０％均一、より好ましくは少なくとも約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９７％、約９８％、約９９％、またはそれを超えて均一である。
【００８１】
本明細書で使用する場合、「免疫学的応答」または「免疫応答」は、被験体における、免疫原性種に対する体液性および／または細胞性免疫応答の発達である。
【００８２】
免疫応答には、先天性および適応免疫応答が含まれる。先天免疫応答は、免疫系にとっての最初の防御線を提供する、即座に機能する応答である。それに対して、適応免疫は、所与の病原体または障害（例えば腫瘍）からの抗原を認識する、体細胞的に再構成される受容体遺伝子（例えば、ＴおよびＢ細胞受容体）を有する免疫細胞の選択およびクローン増殖を使用し、それによって、特異性および免疫学的記憶を提供する。先天免疫応答は、その多くの効果のうち、炎症性サイトカインの迅速なバーストおよびマクロファージおよび樹状細胞などの抗原提示細胞（ＡＰＣ）の活性化をもたらす。病原体を自己成分と区別するために、先天免疫系は、病原体関連分子パターンすなわちＰＡＭＰとして知られている、病原体からのサインを検出する、様々な比較的変化しない受容体を使用する。実験用ワクチンへの微生物成分の添加は、堅調かつ永続性のある適応免疫応答の発達をもたらすことが知られている。上記免疫応答のこの増強の裏にある機構には、パターン認識受容体（ＰＲＲ）が関与することが報告されている。この受容体は、好中球、マクロファージ、樹状細胞、ナチュラルキラー細胞、Ｂ細胞、およびある種の非免疫細胞（上皮細胞および内皮細胞など）を含めた様々な免疫細胞上に、異なる形で発現される。ＰＲＲの関与は、こうした細胞のある種の活性化、およびサイトカインおよびケモカインの分泌、ならびに他の細胞の成熟および移動をもたらす。同時に、これは炎症環境を作り出し、それによって適応免疫応答が確立される。ＰＲＲとしては、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）およびヌクレオチド結合オリゴマー化ドメイン（ＮＯＤ）タンパク質などの非食作用受容体、ならびに、スカベンジャー受容体、マンノース受容体、およびβ−グルカン受容体などの、食作用を誘発する受容体が挙げられる。報告されているＴＬＲ（本発明の各種の実施形態で免疫原性種として使用され得る、いくつかの報告されたリガンドの例と共に）としては、中でも特に、以下が挙げられる：ＴＬＲ１（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ由来の細菌性リポタンパク質）、ＴＬＲ２（ザイモサン酵母粒子、ペプチドグリカン、リポタンパク質、糖脂質、リポ多糖）、ＴＬＲ３（ウイルス性二本鎖ＲＮＡ、ポリ：ＩＣ）、ＴＬＲ４（細菌性リポ多糖、植物産物タキソール）、ＴＬＲ５（細菌性フラジェリン）、ＴＬＲ６（酵母ザイモサン粒子、リポテイコ酸（ｌｉｐｏｔｅｃｈｏｉｃ  ａｃｉｄ）、マイコプラズマ由来のリポペプチド）、ＴＬＲ７（一本鎖ＲＮＡ、イミキモド、レシミキモド、ならびに、ロキソリビンおよびブロピリミンなどの他の合成化合物）、ＴＬＲ８（一本鎖ＲＮＡ、レシミキモド）、およびＴＬＲ９（ＣｐＧオリゴヌクレオチド）。樹状細胞は、ナイーブＣＤ４＋ヘルパーＴ（ＴＨ）細胞のプライミングを開始するための、また、ＣＤ８＋Ｔ細胞の分化を誘導してキラー細胞にするための、最も重要な細胞タイプのいくつかとして認識されている。ＴＬＲシグナル伝達は、こうしたヘルパーＴ細胞応答の質を決定するのに、例えば、ＴＬＲシグナルの性質を用いて、観察されるＴＨ応答の特異的タイプ（例えば、ＴＨ１応答対ＴＨ２応答）を決定するのに重要な役割を果たすことが報告されて��る。ＴＨ１−タイプの反応の一部として、抗体（体液性）と細胞性免疫の組み合わせが生じるのに対し、ＴＨ２−タイプの反応は、主に抗体反応である。インビトロで免疫細胞からサイトカイン産生を刺激するために、ＣｐＧ  ＤＮＡ（ＴＬＲ９）およびイミダゾキノリン（ＴＬＲ７、ＴＬＲ８）などの様々なＴＬＲリガンドが記述されている。イミダゾキノリンは、ＴＬＲアゴニストであることが示された、最初の薬物様の低分子化合物である。さらなる情報については、例えば、Ａ．Ｐａｓｈｉｎｅ，Ｎ．Ｍ．ＶａｌｉａｎｔｅおよびＪ．Ｂ．Ｕｌｍｅｒ、「Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ」１１、Ｓ６３〜Ｓ６８（２００５）、Ｋ．Ｓ．Ｒｏｓｅｎｔｈａｌ  およびＤ．Ｈ．Ｚｉｍｍｅｒｍａｎ、「Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｖａｃｃｉｎｅ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ」、１３（８）、８２１〜８２９（２００６）、およびその中に引用された参考文献を参照のこと。
【００８３】
本発明の目的では、体液性免疫応答は、抗体分子によって媒介される免疫応答を指すのに対し、細胞性免疫応答は、Ｔ−リンパ球および／または他の白血球によって媒介されるものである。細胞性免疫の１つの重要な態様は、細胞溶解性Ｔ細胞（「ＣＴＬ」）による抗原特異的な応答を含む。ＣＴＬは、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）によってコードされて細胞の表面に発現されるタンパク質と共に提示されるペプチド抗原に対して、特異性を有する。ＣＴＬは、細胞内微生物の細胞内破壊、またはこうした微生物に感染した細胞の溶解を誘発および促進するのを助ける。細胞性免疫の別の態様は、ヘルパーＴ細胞による抗原特異的な応答を含む。ヘルパーＴ細胞は、その表面上でＭＨＣ分子と共にペプチド抗原を表す（ｄｉｓｐｌａｙ）細胞に対する非特異的エフェクター細胞の機能を刺激することを助けるように働き、その活性に集中している。「細胞性免疫応答」はまた、サイトカイン、ケモカイン、ならびに、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞から得られるものを含めて、活性化されたＴ細胞および／または他の白血球によって産生される他のこうした分子の産生を指す。
【００８４】
細胞性免疫応答を誘発する免疫原性組成物またはワクチンなどの組成物は、したがって、細胞表面のＭＨＣ分子と関連する抗原の提示によって脊椎動物被験体を感作させるために働くことができる。細胞媒介性免疫応答は、その表面に抗原を提示する細胞、またはその付近に向けられる。さらに、抗原特異的なＴ−リンパ球が産生され得、免疫された宿主の将来的防護が可能になる。特定の抗原または組成物が、細胞媒介性免疫学的応答を刺激する能力は、当技術分野で知られたいくつかのアッセイによって、例えば、リンパ球増殖（リンパ球活性化）アッセイ、ＣＴＬ細胞傷害性細胞アッセイによって、感作させた被験体における抗原に特異的なＴ−リンパ球について分析することによって、あるいは、抗原での再刺激に応答するＴ細胞によるサイトカイン産生の測定によって決定することができる。こうしたアッセイは、当技術分野でよく知られている。例えば、Ｅｒｉｃｋｓｏｎら（１９９３）「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」１５１：４１８９〜４１９９；Ｄｏｅら（１９９４）「Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」２４：２３６９−２３７６を参照のこと。つまり、免疫学的応答は、本明細書で使用する場合、ＣＴＬの産生および／またはヘルパーＴ細胞の産生もしくは活性化を刺激するものであり得る。目的の抗原はまた、抗体媒介性免疫応答を誘発することができる。したがって、免疫学的応答は、例えば、中でも特に、１つ以上の以下の効果を含むことができる：例えばＢ細胞による、抗体の産生；および／または、目的の組成物またはワクチン中に存在する抗原（１つまたは複数）に特異的に向けられたサプレッサーＴ細胞および／またはγδＴ細胞の活性化。これらの応答は、例えば、感染力を中和し、および／または、抗体−補体、または抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を媒介し、免疫された宿主に対する保護を提供する役割を果たすことができる。こうした応答は、当技術分野でよく知られた標準のイムノアッセイおよび中和アッセイを使用して決定することができる。
【００８５】
「抗原」は、免疫学的応答を誘発する１種以上のエピトープ（線状、立体構造、またはその両方のいずれか）を含有する分子を指す。この用語は、用語「免疫原」と交換可能に使用することができる。「エピトープ」は、免疫学的特異性を決定する、所与の種（例えば抗原性分子または抗原性複合体）の部分である。エピトープは、本発明の抗原の定義の範囲内である。通常、エピトープは、天然に存在する抗原中のポリペプチドまたは多糖である。人工の抗原では、これは、アルサニル酸誘導体などの低分子量の物質であり得る。通常、Ｂ細胞エピトープは、少なくとも約５アミノ酸を含むが、３〜４アミノ酸ほどの小ささであり得る。ＣＴＬエピトープなどのＴ細胞エピトープは、典型的には、少なくとも約７〜９アミノ酸を含み、ヘルパーＴ細胞エピトープは、典型的には、少なくとも約１２〜２０アミノ酸を含む。用語「抗原」は、サブユニット抗原（すなわち、その抗原が本来結合されている完全な生物体または細胞から分離され且つ別個である抗原）、ならびに、死滅、弱毒化、または不活化された細菌、ウイルス、真菌、寄生生物、もしくは他の微生物または腫瘍細胞の両方を指す。抗原または抗原決定基を模倣可能な、抗イディオタイプ抗体またはそのフラグメント、および合成ペプチドミモトープなどの抗体も、本明細書で使用される抗原の定義に包含される。同様に、遺伝子療法およびＤＮＡ免疫の適用におけるなど、インビボで抗原または抗原決定基を発現するオリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドも、本明細書の抗原の定義に包含される。
【００８６】
したがって、本発明の目的のために、抗原は、種々のウイルス、細菌、寄生虫、真菌、および他の微生物のいずれかならびに種々の腫瘍抗原のいずれかに由来し得る。抗原としては、インビボで抗原または抗原決定基を発現する核酸も挙げられる。いくつかの具体例として、抗原は、ヘルペスウイルスファミリーからまたはそれに由来するタンパク質（単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）１型および２型由来のタンパク質（ＨＳＶ−１糖タンパク質およびＨＳＶ−２糖タンパク質であるｇＢ、ｇＤ、およびｇＨなど））；サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）由来のタンパク質（ＣＭＶ  ｇＢおよびｇＨが挙げられる）が挙げられる）；肝炎ウイルスファミリー（Ａ型肝炎ウイルス（ＨＡＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、デルタ肝炎ウイルス（ＨＤＶ）、Ｅ型肝炎ウイルス（ＨＥＶ）、およびＧ型肝炎ウイルス（ＨＧＶ）が挙げられる）由来のタンパク質；ＨＩＶ（ＨＩＶ分離株の種々の遺伝子サブタイプＨＩＶＩＩＩｂ、ＨＩＶＳＦ２、ＨＩＶＬＡＶ、ＨＩＶＬＡＩ、ＨＩＶＭＮ、ＨＩＶ−１ＣＭ２３５、ＨＩＶ−１ＵＳ４、ＨＩＶ−２のメンバーが挙げられる）由来のタンパク質（ｇｐ１２０、ｇｐ１６０、ｇｐ４１、ｐ２４ｇａｇ、およびｐ５５ｇａｇエンベロープタンパク質が挙げられる）；サル免疫不全ウイルス（ＳＩＶ）由来のタンパク質；ならびに髄膜炎菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｙ）、Ｈｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａ  Ｂ型（ＨＩＢ）、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ由来のタンパク質；ヒト血清アルブミンおよびオボアルブミンなどであり得る。
【００８７】
本発明と一致する抗原を含む免疫原性組成物は、異なる送達系を使用して投与した同等量の抗原によって誘発される免疫応答よりも、より大きな免疫応答を誘発する能力を持つ場合、「免疫原性の増強」を示す（例えば、ここでは、抗原は、可溶性タンパク質として投与される）。したがって、免疫原性組成物またはワクチン組成物は、抗原がより強力な免疫原性であるか、抗原が投与される被験体における免疫応答を実現するのに必要とされる抗原の量がより低い用量もしくはより少ない用量であることから、「免疫原性の増強」を示すことができる。こうした免疫原性の増強を、抗原組成物および抗原対照を動物に投与し、本明細書に記載の標準的アッセイを使用して、これら２つに対する抗体力価および／または細胞媒介性免疫を比較することによって決定することができる。
【００８８】
用語「アジュバント」または「免疫アジュバント」は、免疫系における抗原の作用を補助または改変する任意の物質を指す。アジュバントは、体液性および／または細胞性免疫を強化することができる。
【００８９】
用語「賦形剤」は、完成した投薬形態に存在することができる、本質的に補助的ないずれの物質も指す。例えば、用語「賦形剤」としては、ビヒクル、結合剤、崩壊剤、充填剤（希釈剤）、および懸濁化（ｓｕｓｐｅｎｄｉｎｇ）剤／分散剤などが挙げられる。
【００９０】
本明細書で使用する場合、語句「ベクター構築物」は一般に、目的の核酸配列（複数可）または遺伝子（複数可）の発現を誘導する能力があるいずれのアセンブリ（ａｓｓｅｍｂｌｙ）も指す。「ＤＮＡベクター構築物」は目的の核酸配列（複数可）または遺伝子（複数可）の発現を誘導する能力があるＤＮＡ分子を指す。ある特定のタイプのＤＮＡベクター構築物は、宿主細胞内で自律複製する能力がある環状エピソームＤＮＡ分子であるプラスミドである。一般的に、プラスミドは、追加のＤＮＡセグメントがそれに連結され得る、環状二本鎖ＤＮＡループである。ｐＣＭＶは、当技術分野でよく知られた、１つの特定のプラスミドである。ＲＮＡウイルスをベースとする、他のＤＮＡベクター構築物も知られている。これらのＤＮＡベクター構築物は一般的に、真核細胞で機能するプロモーターと、転写産物がＲＮＡベクター構築物（例えば、アルファウイルスＲＮＡベクターレプリコン）であるｃＤＮＡ配列の５’と、３’停止領域とを含む。他のベクター構築物の例としては、ＲＮＡベクター構築物（例えば、アルファウイルスベクター構築物）などが挙げられる。本明細書で使用する場合、「ＲＮＡベクター構築物」、「ＲＮＡベクターレプリコン」および「レプリコン」は、一般的に標的細胞内で、インビボで自己増幅または自己複製を誘導する能力があるＲＮＡ分子を指す。ＲＮＡベクター構築物は、ＤＮＡの細胞への導入や、転写が行われる核への輸送の必要とすることなく、直接使用される。宿主細胞の細胞質への直接送達のためにＲＮＡベクターを使用することによって、異種核酸配列の自律複製および翻訳が効率的に行われる。
【００９１】
用語「均一な」は、一般に、構造および組成が均一であり、混合物全体を通して変動がほとんどない成分の混合物またはブレンドを指す。均一な混合物の異なる部分は、実質的に混合物全体のあらゆる位置で本質的に同一の物理的性質および化学的性質を示す。均一な混合物の化学量論はまた、混合物全体を通して実質的に一定である。
【００９２】
用語「懸濁物」は、液体中に分散された粒子を指す。
【００９３】
用語「水性懸濁物」は、水を含む水（連続）相の液体中に懸濁した粒子を指す。
【００９４】
「安定な」均一懸濁物は、懸濁粒子のサイズが長期間実質的に変化しない（例えば、わずか約１０％の変化）懸濁物である。
【００９５】
３．免疫増強化合物の均一懸濁物
１つの態様では、本発明は、（ａ）式Ｉまたは式ＩＩのベンゾナフチリジン化合物、薬学的に許容されるその塩、薬学的に許容されるその溶媒和物、そのＮ−オキシド誘導体、その保護誘導体、その個々の異性体、またはその異性体の混合物；（ｂ）界面活性剤、および（ｃ）懸濁剤を含む均一懸濁物である。均一懸濁物は、水相を含み、水相は、水または任意の他の適切な水相（緩衝水溶液など）であり得る。
【００９６】
好ましくは、均一懸濁物は、４℃で少なくとも約２週間、少なくとも約４週間、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、少なくとも約１年間、またはそれを超えて安定である。
【００９７】
均一懸濁物は、好ましくは、粒子の５０％（Ｄ５０）が約１０μＭより小さいか、約９μＭより小さいか、約８μＭより小さいか、約７μＭより小さいか、約６μＭより小さいか、約５μＭより小さいか、約４μＭより小さいか、約３μＭより小さいか、約２μＭより小さいか、約１μＭより小さいか、約０．９μＭより小さいサイズ分布を有する。あるいはまたはさらに、均一懸濁物は、粒子の９０％（Ｄ９０）が約１０μＭより小さいか、約９μＭより小さいか、約８μＭより小さいか、約７μＭより小さいか、約６μＭより小さいか、約５μＭより小さいか、約４μＭより小さいか、約３μＭより小さいか、約２μＭより小さいサイズ分布を有し得る。
【００９８】
均一懸濁物は、任意の適切な界面活性剤（陰イオン性界面活性剤、陽イオン性界面活性剤、双性イオン（両性）界面活性剤、または非イオン性界面活性剤など）を含むことができる。例示的な陰イオン性界面活性剤としては、例えば、ペルフルオロオクタノアート（ＰＦＯＡまたはＰＦＯ）、ペルフルオロオクタンスルホナート（ＰＦＯＳ）、アルキル硫酸塩（ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）またはラウリル硫酸アンモニウム、ラウレス硫酸ナトリウム（ラウリルエーテル硫酸ナトリウム（ＳＬＥＳ）としても公知）など）、アルキルベンゼンスルホナート、および脂肪酸塩が挙げられる。例示的な陽イオン性界面活性剤としては、例えば、アルキルトリメチルアンモニウム塩（セチルトリメチルアンモニウムブロミド（ＣＴＡＢまたはヘキサデシルトリメチルアンモニウムブロミド）など）、セチルピリジニウムクロリド（ＣＰＣ）、ポリエトキシル化獣脂アミン（ＰＯＥＡ）、塩化ベンザルコニウム（ＢＡＣ）、塩化ベンゼトニウム（ＢＺＴ）が挙げられる。例示的な双性イオン性（両性）界面活性剤としては、例えば、ドデシルベタイン、コカミドプロピルベタイン、およびココアンフォグリシナートが挙げられる。例示的な非イオン性界面活性剤としては、例えば、アルキルポリ（エチレンオキシド）、アルキルフェノールポリ（エチレンオキシド）、ポリ（エチレンオキシド）とポリ（プロピレンオキシド）とのコポリマー（商業的にはポロクサマーまたはポロキサミンと呼ばれる）、アルキルポリグルコシド（Ａａｙｌ  ｐｏｌｙｇｌｕｃｏｓｉｄｅｓ）（例えば、オクチルグルコシドまたはデシルマルトシド）、脂肪アルコール（例えば、セチルアルコールまたはオレイルアルコール）、コカミドＭＥＡ、コカミドＤＥＡ、プルロニックＦ−６８、およびポリソルベート（Ｔｗｅｅｎ２０（ポリソルベート２０）、Ｔｗｅｅｎ８０（ポリソルベート８０）など）、およびドデシルジメチルアミンオキシドが挙げられる。均一懸濁物は、必要に応じて、任意の組み合わせで２つ以上の界面活性剤を含むことができる。
【００９９】
均一懸濁物は、約０．１％から約１０％の界面活性剤（ｖ／ｖまたはｗ／ｖ）、約０．１％から約５％の界面活性剤、０．１％から約４％の界面活性剤、０．１％から約３％の界面活性剤、０．１％から約２％の界面活性剤、０．１％から約１％の界面活性剤、０．１％から約０．５％の界面活性剤、約０．１％の界面活性剤、約０．２％の界面活性剤、約０．３％の界面活性剤、約０．４％の界面活性剤、約０．５％の界面活性剤、約０．６％の界面活性剤、約０．７％の界面活性剤、約０．８％の界面活性剤、約０．９％の界面活性剤、または約１％の界面活性剤を含むことができる。
【０１００】
本明細書に記載の均一懸濁物で用いるための好ましい界面活性剤はＴｗｅｅｎ８０（ポリソルベート８０）である。好ましくは、均一懸濁物は、約０．１％から約５％、０．１％から約４％、０．１％から約３％、０．１％から約２％、０．１％から約１％、０．１％から約０．５％、約０．１％、約０．２％、約０．３％、約０．４％、約０．５％、約０．６％、約０．７％、約０．８％、約０．９％、または約１％のＴｗｅｅｎ８０を含む。
【０１０１】
均一懸濁物は、任意の適切な懸濁剤（粘性を増大させる懸濁剤など）を含むことができる。種々のこうした剤は当該分野で周知であり、例えば、セルロース誘導体（カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースなど）、キサンタンガム、アルギン酸ナトリウム、カラギーナン、トラガカント、加熱済デンプン（ｃｏｏｋｅｄ  ｓｔａｒｃｈ）（例えば、ジャガイモデンプン）、ガーゴム、ヒュームドシリカ、シトロネロール、ゲラニオール、ジヒドロメルシノール、リナロール、ネロール、ロジナール、αテルピネオール、β−シトロネロール、ロジノール、シトロネラニトリル，カルボン、フェンコン、メントール、およびイソボルネオールが挙げられる。均一懸濁物は、必要に応じて、任意の組み合わせで２つ以上の懸濁剤を含むことができる。
【０１０２】
均一懸濁物は、約０．１％から約１０％の懸濁剤（ｖ／ｖまたはｗ／ｖ）、約０．１％から約５％の懸濁剤、０．１％から約４％の懸濁剤、０．１％から約３％の懸濁剤、０．１％から約２％の懸濁剤、０．１％から約１％の懸濁剤、０．１％から約０．５％の懸濁剤、約０．１％の懸濁剤、約０．２％の懸濁剤、約０．３％の懸濁剤、約０．４％の懸濁剤、約０．５％の懸濁剤、約０．６％の懸濁剤、約０．７％の懸濁剤、約０．８％の懸濁剤、約０．９％の懸濁剤、または約１％の懸濁剤を含むことができる。
【０１０３】
本明細書に記載の均一懸濁物で用いる好ましい懸濁剤は、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）である。好ましくは、均一懸濁物は、約０．１％から約５％、０．１％から約４％、０．１％から約３％、０．１％から約２％、０．１％から約１％、０．１％から約０．５％、約０．１％、約０．２％、約０．３％、約０．４％、約０．５％、約０．６％、約０．７％、約０．８％、約０．９％、または約１％のカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）を含む。
【０１０４】
均一懸濁物はまた、式Ｉまたは式ＩＩのベンゾナフチリジン化合物、薬学的に許容されるその塩、薬学的に許容されるその溶媒和物、そのＮ−オキシド誘導体、その保護誘導体、その個々の異性体、またはその異性体の混合物を含む。均一懸濁物は、ベンゾナフチリジン化合物を約０．１ｍｇ／ｍＬから約５０ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍＬから約４０ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍＬから約３０ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍＬから約２０ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍＬから約１０ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍＬから約５ｍｇ／ｍｌ、約０．５ｍｇ／ｍＬ、約１．０ｍｇ／ｍＬ、約１．５ｍｇ／ｍｌ、約２ｍｇ／ｍｌ、約２．５ｍｇ／ｍｌ、約３ｍｇ／ｍｌ、約３．５ｍｇ／ｍｌ、約４ｍｇ／ｍｌ、約４．５ｍｇ／ｍｌ、約５ｍｇ／ｍｌ、約５．５ｍｇ／ｍｌ、約６ｍｇ／ｍｌ、約６．５ｍｇ／ｍｌ、約７ｍｇ／ｍｌ、約７．５ｍｇ／ｍｌ、約８ｍｇ／ｍｌ、約８．５ｍｇ／ｍｌ、約９ｍｇ／ｍｌ、約９．５ｍｇ／ｍｌ、約１０ｍｇ／ｍｌ、約１５ｍｇ／ｍｌ、または約２０ｍｇ／ｍＬの濃度で含むことができる。
【０１０５】
好ましい実施形態では、均一懸濁物は、２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）プロパン−２−オール；２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；エチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾアート；２−（４−（ジメチルアミノ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン、および２−（４−メトキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンから選択されるベンゾナフチリジン化合物を含む。
【０１０６】
別の好ましい実施形態では、均一懸濁物は、２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）プロパン−２−オール；２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；エチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾアート；２−（４−（ジメチルアミノ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン、２−（４−メトキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン、および２−（２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エトキシ）エタノールから選択されるベンゾナフチリジン化合物を含む。
【０１０７】
特に好ましい実施形態では、均一処方物は、２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを含む。
【０１０８】
別の特に好ましい実施形態では、均一処方物は、２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン、２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンまたは２−（２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エトキシ）エタノールを含む。
【０１０９】
ある種の実施形態では、均一処方物は、（ａ）式Ｉまたは式ＩＩのベンゾナフチリジン化合物、薬学的に許容されるその塩、薬学的に許容されるその溶媒和物、そのＮ−オキシド誘導体、その保護誘導体、その個々の異性体、またはその異性体の混合物；（ｂ）０．１％から約５％のＴｗｅｅｎ８０、および（ｃ）０．１％から約１０％のカルボキシメチルセルロースを含み、それは、安定である。これらの実施形態のある種の例では、均一処方物のＤ５０は約１であり、必要に応じてＤ９０は約２である。好ましくは、均一処方物は、少なくとも約１ヵ月間安定である。例えば、均一処方物は、いくつかの実施形態では、少なくとも約１ヵ月間、少なくとも約２ヵ月間、少なくとも約３ヵ月間、少なくとも約４ヵ月間、少なくとも約５ヵ月間、少なくとも約６ヵ月間、少なくとも約７ヵ月間、少なくとも約８ヵ月間、少なくとも約９ヵ月間、少なくとも約１０ヵ月間、少なくとも約１１ヵ月間、または少なくとも約１２ヵ月間安定であり得る。
【０１１０】
ベンゾナフチリジン化合物
本発明での使用に適切なベンゾナフチリジン化合物としては、式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物、薬学的に許容されるその塩、薬学的に許容されるその溶媒和物（例えば、水和物）、そのＮ−オキシド誘導体、そのプロドラッグ誘導体、その保護誘導体、その個々の異性体、およびその異性体の混合物が挙げられる。
【０１１１】
本明細書に提供した免疫原性組成物のある種の実施形態では、ベンゾナフチリジン化合物は、式（Ｉ）：
【０１１２】
【化１】
2013514382.tif 000002
の構造を有する化合物または薬学的に許容されるその塩であり、ここで、
式中、
Ｒ４は、Ｈ、ハロゲン、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１２）、−Ｎ（Ｒ１１Ｒ１２）、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＨＮ（Ｒ９）２、−ＳＲ７、−（ＣＨ２）ｎＯＲ７、−（ＣＨ２）ｎＲ７、−ＬＲ８、−ＬＲ１０、−ＯＬＲ８、−ＯＬＲ１０、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、およびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキルから選択され、ここでは、Ｒ４のＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、およびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル基は、それぞれ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｒ７、−ＯＲ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｎ（Ｒ９）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２、および−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ８から独立に選択される１から３個の置換基で必要に応じて置換され；
各Ｌは、結合、−（Ｏ（ＣＨ２）ｍ）ｔ−、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニレン、およびＣ２〜Ｃ６アルキニレンから独立に選択され、ここでは、ＬのＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニレン、およびＣ２〜Ｃ６アルキニレンは、それぞれ、ハロゲン、−Ｒ８、−ＯＲ８、−Ｎ（Ｒ９）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２から独立に選択される１から４個の置換基で必要に応じて置換され；
Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、およびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキルから選択され、ここでは、Ｒ７のＣ１〜Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、およびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル基は、それぞれ、１から３個のＲ１３基で必要に応じて置換され；
各Ｒ８は、Ｈ、−ＣＨ（Ｒ１０）２、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキルおよびＣ１〜Ｃ６ハロアルコキシから独立に選択され、ここでは、Ｒ８のＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、およびＣ１〜Ｃ６ハロアルコキシ基は、それぞれ、−ＣＮ、Ｒ１１、−ＯＲ１１、−ＳＲ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＯＲ９、−ＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１ＯＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１１Ｒ１２、−ＮＲ１１Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１１）２、および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１１）２から独立に選択される１から３個の置換基で必要に応じて置換され；
各Ｒ９は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、およびＣ３〜Ｃ６シクロアルキルから独立に選択されるか、または、各Ｒ９は独立に、Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、それに付着するＮと共にＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキルを形成し（ここでは、このＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル環は、Ｎ、Ｏ、およびＳから選択される追加のヘテロ原子を必要に応じて含有する）、ここでは、Ｒ９のＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、またはＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル基は、それぞれ、−ＣＮ、Ｒ１１、−ＯＲ１１、−ＳＲ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、−ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１ＯＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１１Ｒ１２、−ＮＲ１１Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１１）２、および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１１）２から独立に選択される１から３個の置換基で必要に応じて置換され；
各Ｒ１０は独立に、アリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリールから選択され、ここでは、このアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリール基は、ハロゲン、−Ｒ８、−ＯＲ８、−ＬＲ９、−ＬＯＲ９、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ９ＣＯ２Ｒ８、−ＣＯ２Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、および−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２から選択される１から３個の置換基で必要に応じて置換され；
Ｒ１１およびＲ１２は独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、およびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキルから選択され、ここでは、Ｒ１１およびＲ１２のＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、およびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル基は、それぞれ、ハロゲン、−ＣＮ、Ｒ８、−ＯＲ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ６ハロアルコキシから独立に選択される１から３個の置換基で必要に応じて置換され；あるいは
Ｒ１１およびＲ１２はそれぞれ独立に、Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、それに付着するＮ原子と共に、Ｎ、Ｏ、およびＳから選択される追加のヘテロ原子を必要に応じて含有する必要に応じて置換されたＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル環を形成し；
各Ｒ１３は独立に、ハロゲン、−ＣＮ、−ＬＲ９、−ＬＯＲ９、−ＯＬＲ９、−ＬＲ１０、−ＬＯＲ１０、−ＯＬＲ１０、−ＬＲ８、−ＬＯＲ８、−ＯＬＲ８、−ＬＳＲ８、−ＬＳＲ１０、−ＬＣ（Ｏ）Ｒ８、−ＯＬＣ（Ｏ）Ｒ８、−ＬＣ（Ｏ）ＯＲ８、−ＬＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＬＯＣ（Ｏ）ＯＲ８、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１１、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ８、−ＬＮ（Ｒ９）２、−ＬＮＲ９Ｒ８、−ＬＮＲ９Ｒ１０、−ＬＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＬＳ（Ｏ）２Ｒ８、−ＬＳ（Ｏ）Ｒ８、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ８ＯＨ、−ＬＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＬＮＲ９Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−ＬＳ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２、−ＯＬＳ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２、−ＬＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ９ＬＮ（Ｒ９）２、−ＬＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＬＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＬＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、および−ＯＬＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２から選択され；
各ＲＡは、−Ｒ８、−Ｒ７、−ＯＲ７、−ＯＲ８、−Ｒ１０、−ＯＲ１０、−ＳＲ８、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ９Ｃ（Ｓ）Ｒ８、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９ＣＯ２Ｒ８、−ＮＲ９ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ９ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９ＮＲ９ＣＯ２Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＣＯ２Ｒ８、−（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｓ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＲ８）Ｒ８、−Ｃ（ＮＯＲ８）Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）３Ｒ８、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ９）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ９ＳＯ２Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９ＳＯ２Ｒ８、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−Ｎ（ＯＲ８）Ｒ８、−ＣＨ＝ＣＨＣＯ２Ｒ８、−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ（Ｒ９）２、および−（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（Ｏ）Ｒ８から独立に選択され；または隣接する２つのＲＡ置換基は、それらが結合した環上で、環員として２個までのヘテロ原子を含有する５〜６員環を形成し；
ｎは、各存在について独立に、０、１、２、３、４、５、６、７、または８であり；
各ｍは独立に、１、２、３、４、５および６から選択され、および、
ｔは、１、２、３、４、５、６、７、または８である。
【０１１３】
他の実施形態では、ベンゾナフチリジン化合物は、式（ＩＩ）：
【０１１４】
【化２】
2013514382.tif 000003
の構造を有する化合物または薬学的に許容されるその塩であり、式中、
Ｒ４は、Ｈ、ハロゲン、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１Ｒ１２）、−Ｎ（Ｒ１１Ｒ１２）、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＨＮ（Ｒ９）２、−ＳＲ７、−（ＣＨ２）ｎＯＲ７、−（ＣＨ２）ｎＲ７、−ＬＲ８、−ＬＲ１０、−ＯＬＲ８、−ＯＬＲ１０、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、およびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキルから選択され、ここで、Ｒ４の上記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、およびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル基は、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｒ７、−ＯＲ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｎ（Ｒ９）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２、および−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ８から独立に選択される１から３個の置換基とそれぞれ必要に応じて置換され、
各Ｌは、結合、−（Ｏ（ＣＨ２）ｍ）ｔ−、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニレン、およびＣ２〜Ｃ６アルキニレンから独立に選択され、ここで、Ｌの上記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニレン、およびＣ２〜Ｃ６アルキニレンは、ハロゲン、−Ｒ８、−ＯＲ８、−Ｎ（Ｒ９）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２から独立に選択される１から４個の置換基とそれぞれ必要に応じて置換され、
Ｒ７は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、およびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキルから選択され、ここで、Ｒ７の上記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、およびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル基は、１から３個のＲ１３基とそれぞれ必要に応じて置換され、
各Ｒ８は、Ｈ、−ＣＨ（Ｒ１０）２、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、およびＣ１〜Ｃ６ハロアルコキシから独立に選択され、ここで、Ｒ８の上記Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、およびＣ１〜Ｃ６ハロアルコキシ基は、−ＣＮ、Ｒ１１、−ＯＲ１１、−ＳＲ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＯＲ９、−ＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１ＯＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１１Ｒ１２、−ＮＲ１１Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１１）２、および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１１）２から独立に選択される１から３個の置換基とそれぞれ必要に応じて置換され、
各Ｒ９は、Ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、およびＣ３〜Ｃ６シクロアルキルから独立に選択されるか、各Ｒ９は独立に、Ｎと共にそれらが結合してＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキルを形成するＣ１〜Ｃ６アルキルであり、ここで、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル環は、Ｎ、Ｏ、およびＳから選択されるさらなるヘテロ原子を必要に応じて含み、ここで、Ｒ９の上記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、またはＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル基は、−ＣＮ、Ｒ１１、−ＯＲ１１、−ＳＲ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、−ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１ＯＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１１Ｒ１２、−ＮＲ１１Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１１）２、および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１１）２から独立に選択される１から３個の置換基とそれぞれ必要に応じて置換され、
各Ｒ１０は、アリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリールから独立に選択され、ここで、上記アリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、およびヘテロアリール基は、ハロゲン、−Ｒ８、−ＯＲ８、−ＬＲ９、−ＬＯＲ９、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ９ＣＯ２Ｒ８、−ＣＯ２Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、および−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２から選択される１から３個の置換基と必要に応じて置換され、
Ｒ１１およびＲ１２は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、およびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキルから独立に選択され、ここで、Ｒ１１およびＲ１２の上記Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、およびＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル基は、ハロゲン、−ＣＮ、Ｒ８、−ＯＲ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、Ｃ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、およびＣ１〜Ｃ６ハロアルコキシから独立に選択される１から３個の置換基とそれぞれ必要に応じて置換されるか、または、
Ｒ１１およびＲ１２はそれぞれ独立にＣ１〜Ｃ６アルキルであり、そして、それらが結合するＮ原子と一緒になって、Ｎ、Ｏ、およびＳから選択されるさらなるヘテロ原子を必要に応じて含む、必要に応じて置換されたＣ３〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル環を形成し、
各Ｒ１３は、ハロゲン、−ＣＮ、−ＬＲ９、−ＬＯＲ９、−ＯＬＲ９、−ＬＲ１０、−ＬＯＲ１０、−ＯＬＲ１０、−ＬＲ８、−ＬＯＲ８、−ＯＬＲ８、−ＬＳＲ８、−ＬＳＲ１０、−ＬＣ（Ｏ）Ｒ８、−ＯＬＣ（Ｏ）Ｒ８、−ＬＣ（Ｏ）ＯＲ８、−ＬＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＬＯＣ（Ｏ）ＯＲ８、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１１、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ８、−ＬＮ（Ｒ９）２、−ＬＮＲ９Ｒ８、−ＬＮＲ９Ｒ１０、−ＬＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＬＳ（Ｏ）２Ｒ８、−ＬＳ（Ｏ）Ｒ８、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ８ＯＨ、−ＬＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＬＮＲ９Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−ＬＳ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２、−ＯＬＳ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２、−ＬＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ９ＬＮ（Ｒ９）２、−ＬＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＬＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＬＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、および−ＯＬＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２から独立に選択され、
ＲＡは、−Ｒ８、−Ｒ７、−ＯＲ７、−ＯＲ８、−Ｒ１０、−ＯＲ１０、−ＳＲ８、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ９Ｃ（Ｓ）Ｒ８、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９ＣＯ２Ｒ８、−ＮＲ９ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ９ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９ＮＲ９ＣＯ２Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＣＯ２Ｒ８、−（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｓ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−Ｃ（Ｓ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ８、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＲ８）Ｒ８、−Ｃ（ＮＯＲ８）Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）３Ｒ８、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ９）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ９ＳＯ２Ｎ（Ｒ９）２、−ＮＲ９ＳＯ２Ｒ８、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、−Ｎ（ＯＲ８）Ｒ８、−ＣＨ＝ＣＨＣＯ２Ｒ８、−Ｃ（＝ＮＨ）−Ｎ（Ｒ９）２、および−（ＣＨ２）ｎＮＨＣ（Ｏ）Ｒ８から選択され、
ｎは、各存在について独立に、０、１、２、３、４、５、６、７、または８であり、
各ｍは、１、２、３、４、５、および６から独立に選択され、
ｔは、１、２、３、４、５、６、７、または８である。
【０１１５】
式Ｉまたは式ＩＩのベンゾナフチリジン化合物のある種の実施形態では、各Ｒ１３は、−ＬＲ９、−ＬＯＲ９、−ＯＬＲ９、−ＬＲ１０、−ＬＯＲ１０、−ＯＬＲ１０、−ＬＲ８、−ＬＯＲ８、−ＯＬＲ８、−ＬＳＲ８、−ＬＳＲ１０、−ＬＣ（Ｏ）Ｒ８、−ＯＬＣ（Ｏ）Ｒ８、−ＬＣ（Ｏ）ＯＲ８、−ＬＣ（Ｏ）Ｒ１０、−ＬＯＣ（Ｏ）ＯＲ８、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１１、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ８、−ＬＮ（Ｒ９）２、−ＬＮＲ９Ｒ８、−ＬＮＲ９Ｒ１０、−ＬＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−ＬＳ（Ｏ）２Ｒ８、−ＬＳ（Ｏ）Ｒ８、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ８ＯＨ、−ＬＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ８、−ＬＮＲ９Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、−ＬＳ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２、−ＯＬＳ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ９）２、−ＬＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−ＬＣ（Ｏ）ＮＲ９ＬＮ（Ｒ９）２、−ＬＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＬＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＬＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、および−ＯＬＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２から選択され、各ＲＡは、−Ｒ７、−ＯＲ７、−Ｒ８、−ＯＲ８、−Ｒ１０、−ＯＲ１０、−ＳＲ８、−Ｎ（Ｒ９）２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ８、−Ｓ（Ｏ）３Ｒ８、−ＳＯ２Ｎ（Ｒ９）２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ８、−ＮＲ９ＳＯ２Ｎ（Ｒ９）２、−ＣＨ＝ＣＨＣＯ２Ｒ８、（ＣＨ２）ｎＣＯ２Ｒ８、−ＮＲ９ＳＯ２Ｒ８、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２から独立に選択される。
【０１１６】
式Ｉまたは式ＩＩのベンゾナフチリジン化合物のある種の実施形態では、各Ｌは、−（Ｏ（ＣＨ２）ｍ）ｔ−およびＣ１〜Ｃ６アルキルから独立に選択され、ここで、Ｌの上記Ｃ１〜Ｃ６アルキルは、ハロゲン、−Ｒ８、−ＯＲ８、−Ｎ（Ｒ９）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ８）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１０）２、および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１０）２から独立に選択される１から４個の置換基と必要に応じて置換される。
【０１１７】
式Ｉまたは式ＩＩのベンゾナフチリジン化合物のある種の実施形態では、ＲＡはＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１１８】
式Ｉまたは式ＩＩのベンゾナフチリジン化合物のある種の実施形態では、ＲＡはＨ、−ＣＨ３、または−ＣＨ２ＣＨ３であり、各Ｒ１３は、Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＦ３、−ＣＨ２ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＣＯＯＣＨ３、−ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、−ＣＨ２ＯＣＨ３、ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２、−（（Ｏ（ＣＨ２）２）２〜４ＯＨ、−Ｏ（ＣＨ２）２〜４−ＯＨ、−Ｏ（ＣＨ２）２〜４−（ＰＯ３Ｈ２）、−Ｏ（ＣＨ２）２〜４−ＣＯＯＨ、−Ｏ（ＣＨ２）２〜４−ＣＨ（ＣＨ３）２、ならびに、−ＯＨ、−ＣＨ３、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣＨ３、シクロプロピル、−Ｏ（ＣＨ２）２〜４−ＣＯＯＨ、−Ｏ（ＣＨ２）２〜４（ＰＯ３Ｈ２）、および−ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３から選択される１から３個の置換基と置換されたＣ２〜Ｃ６アルキルから独立に選択される。
【０１１９】
式Ｉまたは式ＩＩのベンゾナフチリジン化合物のある種の実施形態では、各Ｒ８は、Ｈ、−ＣＨ（Ｒ１０）２、Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、およびＣ１〜Ｃ６ハロアルコキシから独立に選択され、ここで、Ｒ８の上記Ｃ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ２〜Ｃ８アルケン、Ｃ２〜Ｃ８アルキン、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ２〜Ｃ８ヘテロシクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、およびＣ１〜Ｃ６ハロアルコキシ基は、−ＣＮ、Ｒ１１、−ＯＲ１１、−ＳＲ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ９）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｎ（Ｒ９）２、−ＯＲ９、−ＯＲ１０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１ＯＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１１Ｒ１２、−ＮＲ１１Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１１）２、および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ１１）２から独立に選択される１から３個の置換基とそれぞれ必要に応じて置換される。
【０１２０】
式Ｉまたは式ＩＩのベンゾナフチリジン化合物のある種の実施形態では、Ｒ８はＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１２１】
式Ｉまたは式ＩＩのベンゾナフチリジン化合物のある種の実施形態では、Ｒ９はＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１２２】
式Ｉまたは式ＩＩのベンゾナフチリジン化合物のある種の実施形態では、ＲＡはＨまたは−ＣＨ３である。
【０１２３】
式Ｉまたは式ＩＩのベンゾナフチリジン化合物のある種の実施形態では、Ｒ４はＨである。
【０１２４】
ある種の実施形態では、ベンゾナフチリジン化合物は、以下から選択される：
２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）プロパン−２−オール；
２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；
２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；
エチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾアート；
２−（４−（ジメチルアミノ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン、
および２−（４−メトキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン。
【０１２５】
式（Ｉ）または式（ＩＩ）のベンゾナフチリジン化合物を、適切な方法（参照によって本明細書にその内容全体が組み込まれるＷＯ２００９／１１１３３７号に開示の方法など）を使用して調製することができる。当業者は、式（１）または式（ＩＩ）の化合物の生成に適切な例示的スキームである、スキームＩ〜ＸＩＸを開示しているＷＯ２００９／１１１３３７号の７１頁から８３頁を参照する。
【０１２６】
式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物、薬学的に許容されるその塩、その溶媒和物、そのＮ−オキシド、そのプロドラッグ、およびその異性体、ならびに本明細書中に提供された薬学的組成物としては、こうした化合物、および、薬学的に許容されるその塩、その溶媒和物、そのＮ−オキシド、そのプロドラッグ、およびその異性体、ならびに上記薬学的組成物の全ての適切な同位体変種（ｖａｒｉａｔｉｏｎ）も挙げられる。本明細書に提供した化合物または薬学的に許容されるその塩の同位体変種を、少なくとも１種の原子が同一の原子番号を有するが、通常は天然で見い出される原子質量と異なる原子質量を有する原子に置き換えられたものと定義する。本明細書に提供した化合物および薬学的に許容されるその塩に組み込むことができる同位体の例としては、それだけに限らないが、水素、炭素、窒素、および酸素の同位体（２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏ、１８Ｏ、３５Ｓ、１８Ｆ、３６Ｃｌ、および１２３Ｉなど）が挙げられる。本明細書に提供した化合物および薬学的に許容されるその塩のある種の同位体変種（例えば、放射性同位体（３Ｈまたは１４Ｃなど）が組み込まれたもの）は、薬物および／または基質（ｓｕｂｓｔｒａｔｅ）の組織分布研究で有用である。特定の例では、３Ｈおよび１４Ｃ同位体を、その調製および検出性を容易にするために使用することができる。他の例では、同位体（２Ｈなど）との置換により、代謝安定性の増大に起因する一定の治療上の利点（インビボ半減期の増加または必要な投薬量の減少など）を得ることができる。化合物、薬学的に許容されるその塩、その溶媒和物、そのＮ−オキシド、そのプロドラッグ、およびその異性体ならびに本明細書に提供した薬学的組成物の同位体変種を、適切な試薬の適切な同位体変種を使用して従来の手順によって調製する。
【０１２７】
４．免疫強化および免疫原性組成物
本明細書に記載のＳＭＩＰ（すなわち、式Ｉまたは式ＩＩの化合物）の均一懸濁物を、免疫増強物質として使用することができる。式Ｉまたは式ＩＩの化合物は疎水性コアを含み、均一懸濁物により、それを必要とする被験体に有効量のＳＭＩＰを都合よく投与可能であるという利点が得られる。
【０１２８】
１つの態様では、本発明は、有効量の本発明の均一懸濁物を、それを必要とする被験体に投与する工程を含む、免疫応答を強化するための方法である。免疫応答（ｉｍｍｕｎｕｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ）は、天然に存在する免疫応答でありうるか、例えば、免疫によって誘導された誘導免疫応答であり得る。誘導免疫応答（ｉｎｄｕｃｅｄ  ｉｍｍｕｎｕｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ）を強化するために均一懸濁物を投与する場合、免疫応答を誘導する薬剤と実質的に同時に投与することが好ましい。例えば、有効量の均一懸濁物を、免疫原性組成物またはワクチンと同時に投与することができるか、免疫原性組成物またはワクチンの投与の約１日前後の期間以内に投与することができる。
【０１２９】
別の態様では、本発明は、抗原およびＳＭＩＰ（すなわち、式Ｉまたは式ＩＩの化合物）の均一懸濁物を含む免疫原性組成物を提供する。ある種の実施形態では、免疫原性組成物は、別の免疫増強物質（アジュバントなど）をさらに含む。免疫原性組成物は、任意の所望の抗原および／またはアジュバントを含むことができる。例えば、免疫原性組成物は、本明細書に記載のように、細菌性抗原、細菌性ベシクル抗原、ウイルス性抗原、真菌性抗原、原生動物性抗原、植物性抗原、ＳＴＤ抗原、呼吸器系抗原、小児用ワクチン抗原、高齢または免疫低下状態の個体に適切な抗原、青年期用ワクチンでの使用に適切な抗原、または腫瘍抗原を含むことができる。免疫原性組成物はまた、本明細書に記載のアジュバント（例えば、ミョウバン、ＭＦ５９）を含むこともできる。
【０１３０】
ある種の実施形態では、免疫原性組成物は、抗原に対する免疫応答を増強するのに十分な一定量の均一組成物を含む。こうした免疫原性組成物を使用して、ワクチンを産生することができる。ある種の実施形態では、ワクチンは予防用（すなわち、感染を防止するため）であり、一方で、他の実施形態では、こうしたワクチンは治療用（すなわち、感染を処置するため）である。
【０１３１】
本明細書で言及した免疫賦活効果は、しばしば、免疫原性組成物の効果の増強である。ある種の実施形態では、免疫原性組成物の効力の増強は、ＳＭＩＰの均一懸濁物の非存在下での免疫原性組成物の効果と比較して少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、または少なくとも約１００％の増強である。
【０１３２】
ある種の実施形態では、免疫原性組成物の効果の増強を、その防御効果を達成するための免疫原性組成物の有効性の増加によって測定する。ある種の実施形態では、この有効性の増加を、免疫原性組成物を受けた被験体が、免疫原性組成物が防御的と見なされるか、こうした状態の作用の持続時間または重症度を減少させると見なされる状態を経験する確率の低下として測定する。他の実施形態では、この有効性の増加を、処置した被験体における免疫原性組成物によって誘発された抗体の力価の増加として測定する。
【０１３３】
免疫原性組成物は、薬学的に許容されるキャリアをさらに含むことができる。こうしたキャリアとしては、それだけに限らないが、タンパク質、多糖、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、重合体アミノ酸、アミノ酸コポリマー、スクロース、トレハロース、ラクトース、脂質凝集体（油滴またはリポソームなど）、および不活性ウイルス粒子が挙げられる。免疫原性組成物はまた、典型的には、希釈剤（水、食塩水、およびグリセロールなど）を含み、必要に応じて他の賦形剤（湿潤剤または乳化剤およびｐＨ緩衝物質など）含む。
【０１３４】
（ａ）アジュバント
ある種の実施形態では、免疫原性組成物としては、必要に応じて、１種以上の免疫調節剤が挙げられる。ある種の実施形態では、１種以上の免疫調節剤としては、１種以上のアジュバントが挙げられる。こうしたアジュバントとしては、それだけに限らないが、ＴＨ１アジュバントおよび／またはＴＨ２アジュバントが挙げられ、以下でさらに考察する。ある種の実施形態では、免疫原性組成物中で使用されるアジュバントは、本明細書で、それだけに限らないが、以下を提供する：
１．無機物含有組成物；
２．オイルエマルジョン；
３．サポニン処方物；
４．ビロソームおよびウイルス様粒子；
５．細菌または微生物の誘導体；
６．ヒト免疫修飾物質；
７．生体接着剤および粘膜接着剤；
８．微粒子；
９．リポソーム；
１０．ポリオキシエチレンエーテルおよびポリオキシエチレンエステル処方物；
１１．ポリホスファゼン（ＰＣＰＰ）；
１２．ムラミルペプチド、および
１３．イミダゾキノロン化合物。
【０１３５】
アジュバントとしての使用に適切な無機物含有組成物としては、それだけに限らないが、無機塩（アルミニウム塩およびカルシウム塩など）が挙げられる。ほんの一例として、こうした無機塩としては、水酸化物（例えば、オキシ水酸化物（水酸化アルミニウムおよびオキシ水酸化アルミニウムが挙げられる））、リン酸塩（例えば、ヒドロキシホスファートおよびオルソホスファート（リン酸アルミニウム、アルミニウムヒドロキシホスファート、アルミニウムオルソホスファート、およびリン酸カルシウムが挙げられる）、硫酸塩（例えば、硫酸アルミニウム）、または異なる無機化合物の混合物が挙げられる。こうした無機塩は、任意の適切な形態（ほんの一例として、ゲル形態、結晶形態、および非晶質形態など）で存在する。ある種の実施形態では、こうした無機物含有組成物を、金属塩の粒子として処方する。ある種の実施形態では、本明細書に記載の免疫原性組成物の成分を、こうした無機塩に吸着させる。ある種の実施形態では、水酸化アルミニウムアジュバントおよび／またはリン酸アルミニウムアジュバントを、本明細書に記載の免疫原性組成物中で使用する。他の実施形態では、本明細書に記載の免疫原性組成物中で使用した抗原を、こうした水酸化アルミニウムアジュバントおよび／またはリン酸アルミニウムアジュバントに吸着させる。ある種の実施形態では、リン酸カルシウムアジュバントを、本明細書に記載の免疫原性組成物中で使用する。他の実施形態では、本明細書に記載の免疫原性組成物中で使用した抗原を、こうしたリン酸カルシウムアジュバントに吸着させる。
【０１３６】
ある種の実施形態では、リン酸アルミニウムを、本明細書に記載の免疫原性組成物中のアジュバントとして使用する。他の実施形態では、リン酸アルミニウムを、本明細書に記載の免疫原性組成物中でアジュバントとして使用し、ここで、こうした組成物はＨ．ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ糖抗原を含む。ある種の実施形態では、アジュバントは、非晶質アルミニウムヒドロキシホスファートであり、このアジュバントはＰＯ４／Ａｌモル濃度比が０．８４と０．９２との間であり、０．６ｍｇ  Ａｌ３＋／ｍｌを含む。他の実施形態では、低用量のリン酸アルミニウム（ほんの一例として、Ａｌ３＋／コンジュゲート（ｃｏｎｊｕｇａｔｅ）／用量が５０μｇと１００μｇとの間）での吸着を使用する。組成物中に１つを超えるコンジュゲートが存在する場合、全てのコンジュゲートを吸着させる必要はない。
【０１３７】
アジュバントとしての使用に適切なオイルエマルジョンとしては、それだけに限らないが、スクアレン−水エマルジョン（ＭＦ５９（５％スクアレン、０．５％Ｔｗｅｅｎ８０、および０．５％Ｓｐａｎ８５をマイクロフルイダイザーを使用してサブミクロン粒子に処方する）など）、フロイント完全アジュバント（ＣＦＡ）、およびフロイント不完全アジュバント（ＩＦＡ）が挙げられる。
【０１３８】
サポニンは、広範囲の植物種の樹皮、葉、茎、根、さらには花にも見られる、ステロールグリコシドおよびトリテルペノイドグリコシドの異種群である。アジュバントとしての使用に適切なサポニン処方物としては、それだけに限らないが、Ｑｕｉｌｌａｉａ  ｓａｐｏｎａｒｉａ  Ｍｏｌｉｎａ  ｔｒｅｅの樹皮、Ｓｍｉｌａｘ  ｏｒｎａｔａ（ｓａｒｓａｐｒｉｌｌａ）、Ｇｙｐｓｏｐｈｉｌｌａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ（ｂｒｉｄｅｓ  ｖｅｉｌ）、およびＳａｐｏｎａｒｉａ  ｏｆｆｉｃｉａｎａｌｉｓ（ｓｏａｐ  ｒｏｏｔ）由来のサポニンが挙げられる。ある種の実施形態では、アジュバントとしての使用に適切なサポニン処方物としては、それだけに限らないが、精製処方物（それだけに限らないが、ＱＳ７、ＱＳ１７、ＱＳ１８、ＱＳ２１、ＱＨ−Ａ、ＱＨ−Ｂ、およびＱＨ−Ｃが挙げられる）が挙げられる。ＱＳ２１は、ＳＴＩＭＵＬＯＭ（商標）として市販されている。他の実施形態では、サポニン処方物としては、ステロール、コレステロール、および脂質処方物（免疫賦活複合体（ＩＳＣＯＭ）と呼ばれるサポニンとコレステロールとの組み合わせによって形成された固有の粒子など）が挙げられる。ある種の実施形態では、ＩＳＣＯＭとしては、リン脂質（ホスファチジルエタノールアミンまたはホスファチジルコリンなど）も挙げられる。任意の公知のサポニンを、ＩＳＣＯＭで使用することができる。ある種の実施形態では、ＩＳＣＯＭとしては、１種以上のＱｕｉｌＡ、ＱＨＡ、およびＱＨＣが挙げられる。他の実施形態では、ＩＳＣＯＭは、必要に応じてさらなる界面活性剤を欠く。
【０１３９】
アジュバントとしての使用に適切なビロソームおよびウイルス様粒子（ＶＬＰ）としては、それだけに限らないが、リン脂質を使用して必要に応じて組み合わせたか処方したウイルス由来の１種以上のタンパク質が挙げられる。こうしたビロソームおよびＶＬＰは、一般に、非病原性、非複製であり、一般に、いかなる天然のウイルスゲノムも含まない。ある種の実施形態では、ウイルスタンパク質を組換え的に産生する一方で、他の実施形態では、ウイルスタンパク質をウイルス全体から単離する。
【０１４０】
ビロソームまたはＶＬＰでの使用に適切なウイルスタンパク質としては、それだけに限らないが、インフルエンザウイルス（ＨＡまたはＮＡなど）、Ｂ型肝炎ウイルス（コアタンパク質またはキャプシドタンパク質など）、Ｅ型肝炎ウイルス、麻疹ウイルス、シンドビス・ウイルス、ロタウイルス、口蹄疫ウイルス、レトロウイルス、ノーウォークウイルス、ヒト乳頭腫ウイルス、ＨＩＶ、ＲＮＡ−ファージ、Ｑβ−ファージ（コートタンパク質など）、ＧＡ−ファージ、ｆｒ−ファージ、ＡＰ２０５ファージ、およびＴｙ（レトロトランスポゾンＴｙタンパク質ｐ１など）由来のタンパク質が挙げられる。
【０１４１】
アジュバントとしての使用に適切な細菌誘導体または微生物誘導体としては、それだけに限らないが、細菌誘導体または微生物誘導体（腸内細菌リポ多糖（ＬＰＳ）の非毒性誘導体、リピドＡ誘導体、免疫賦活性オリゴヌクレオチド、ならびにＡＤＰ−リボシル化毒素およびその無毒化誘導体など）が挙げられる。こうしたＬＰＳの非毒性誘導体としては、それだけに限らないが、モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ）および３−Ｏ−脱アシル化ＭＰＬ（３ｄＭＰＬ）が挙げられる。３ｄＭＰＬは、３デ−Ｏ−アシル化モノホスホリルリピドＡと、４、５、または６アシル化鎖との混合物である。他の非毒性ＬＰＳ誘導体としては、モノホスホリルリピドＡ模倣体（アミノアルキルグルコサミニドリン酸誘導体（例えば、ＲＣ−５２９）など）が挙げられる。リピドＡ誘導体としては、それだけに限らないが、大腸菌（例えば、ＯＭ−１７４）由来のリピドＡの誘導体が挙げられる。
【０１４２】
アジュバントとして使用される免疫賦活性オリゴヌクレオチドとしては、それだけに限らないが、ＣｐＧモチーフを含むヌクレオチド配列（グアノシンへのリン酸結合によって連結した非メチル化シトシンを含むジヌクレオチド配列）が挙げられる。こうしたＣｐＧ配列は、二本鎖または一本鎖であり得る。ある種の実施形態では、こうしたヌクレオチド配列は、パリンドローム配列またはポリ（ｄＧ）配列を含む二本鎖ＲＮＡまたはオリゴヌクレオチドである。他の実施形態では、ＣｐＧとしては、ヌクレオチド改変物／類似体（ホスホロチオアート改変物など）が挙げられる。
【０１４３】
ある種の実施形態では、ＣｐＧ配列はＴＬＲ９に向けられ、ある種の実施形態では、上記モチーフはＧＴＣＧＴＴまたはＴＴＣＧＴＴである。ある種の実施形態では、ＣｐＧ配列はＴｈ１免疫応答の誘導に特異的であるか（ほんの一例として、ＣｐＧ−Ａ  ＯＤＮなど）、他の実施形態では、ＣｐＧ配列はＢ細胞応答の誘導により特異的である（ほんの一例として、ＣｐＧ−Ｂ  ＯＤＮなど）。ある種の実施形態では、ＣｐＧはＣｐＧ−Ａ  ＯＤＮである。
【０１４４】
ある種の実施形態では、ＣｐＧオリゴヌクレオチドは、受容体認識のために５’末端がアクセスできるように構築される。他の実施形態では、必要に応じて、２つのＣｐＧオリゴヌクレオチド配列を、その３’末端で結合させて、「イムノマー（ｉｍｍｕｎｏｍｅｒ）」を形成する。
【０１４５】
免疫賦活性オリゴヌクレオチドベースの特に有用なアジュバントは、ＩＣ−３１（商標）として公知である。ある種の実施形態では、本明細書に記載の免疫原性組成物と共に使用されるアジュバントとしては、（ｉ）オリゴヌクレオチド（ほんの一例として、１５〜４０ヌクレオチドの間など）（少なくとも１種の（好ましくは複数の）ＣｐＩモチーフ（ほんの一例として、イノシンと連結してジヌクレオチドを形成するシトシンなど）が挙げられる）および（ｉｉ）ポリカチオン性ポリマー（ほんの一例として、オリゴペプチド（ほんの一例として、５〜２０アミノ酸の間など）（少なくとも１種の（好ましくは複数の）Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓトリペプチド配列（複数可）が挙げられる）など）との混合物が挙げられる。ある種の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、２６マー（ｍｅｒ）配列５’−（ＩＣ）１３−３’を含むデオキシヌクレオチドである。他の実施形態では、ポリカチオン性ポリマーは、１１マーアミノ酸配列ＫＬＫＬＬＬＬＬＫＬＫを含むペプチドである。
【０１４６】
ある種の実施形態では、細菌性ＡＤＰ−リボシル化毒素およびその無毒化誘導体を、本明細書に記載の免疫原性組成物中のアジュバントとして使用する。ある種の実施形態では、こうしたタンパク質は、大腸菌（大腸菌熱不安定性エンテロトキシン「ＬＴ」）、コレラ（「ＣＴ」）、または百日咳（「ＰＴ」）に由来する。他の実施形態では、毒素またはトキソイドは、ＡサブユニットおよびＢサブユニットの両方を含むホロ毒素の形態である。他の実施形態では、Ａサブユニットは解毒変異を含むのに対して、Ｂサブユニットは変異されていない。他の実施形態では、アジュバントは、解毒ＬＴ変異体（ＬＴ−Ｋ６３、ＬＴ−Ｒ７２、およびＬＴ−Ｇ１９２など）である。
【０１４７】
アジュバントとしての使用に適切なヒト免疫修飾物質としては、それだけに限らないが、サイトカイン（ほんの一例として、インターロイキン（ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−１２）、インターフェロン（ほんの一例として、インターフェロン−γなど）、マクロファージコロニー刺激因子、および腫瘍壊死因子など）が挙げられる。
【０１４８】
本明細書に記載の免疫原性組成物中でアジュバントして使用される生体接着剤および粘膜接着剤としては、それだけに限らないが、エステル化ヒアルロン酸ミクロスフィアならびにポリ（アクリル酸）、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、多糖、およびカルボキシメチルセルロースの架橋誘導体が挙げられる。ある種の実施形態では、キトサンおよびその誘導体を、本明細書に記載のワクチン組成物中でアジュバントとして使用する。
【０１４９】
アジュバントとしての使用に適切な微粒子としては、それだけに限らないが、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）を用いた、生分解性且つ非毒性の材料（例えば、ポリ（α−ヒドロキシ酸）、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルソエステル、ポリ酸無水物、ポリカプロラクトンなど）から形成された微粒子が挙げられる。ある種の実施形態では、こうした微粒子を、負電荷の表面（例えば、ＳＤＳを使用）または正電荷の表面（例えば、ＣＴＡＢなどのカチオン性界面活性剤を使用）を有するように処理する。アジュバントとしての使用に適切な微粒子の粒径は、直径約１００ｎｍから約１５０μｍである。ある種の実施形態では、粒径は約２００ｎｍから約３０μｍであり、他の実施形態では、粒径は約５００ｎｍから１０μｍである。
【０１５０】
アジュバントとしての使用に適切なポリオキシエチレンエーテル処方物およびポリオキシエチレンエステル処方物としては、それだけに限らないが、オクトキシノールと組み合わせたポリオキシエチレンソルビタンエステル界面活性剤および、少なくとも１種のさらなる非イオン性界面活性剤（オクトキシノールなど）と組み合わせたポリオキシエチレンアルキルエーテルまたはエステル界面活性剤が挙げられる。ある種の実施形態では、ポリオキシエチレンエーテルは、ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテル（ラウレス９）、ポリオキシエチレン−９−ステアリル（ｓｔｅｏｒｙｌ）エーテル、ポリオキシエチレン（ｐｏｌｙｏｘｙｔｈｅｙｌｅｎｅ）−８−ステアリル（ｓｔｅｏｒｙｌ）エーテル、ポリオキシエチレン−４−ラウリルエーテル、ポリオキシエチレン−３５−ラウリルエーテル、およびポリオキシエチレン−２３−ラウリルエーテルから選択される。
【０１５１】
アジュバントとしての使用に適切なムラミルペプチドとしては、それだけに限らないが、Ｎ−アセチル−ムラミル−Ｌ−トレオニル−Ｄ−イソグルタミン（ｔｈｒ−ＭＤＰ）、Ｎ−アセチル−ノルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミン（ｎｏｒ−ＭＤＰ）、およびＮ−アセチルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミニル−Ｌ−アラニン−２−（１’−２’−ジパルミトイル−ｓ−ｎ−グリセロ−３−ヒドロキシホスホリルオキシ）−エチルアミンＭＴＰ−ＰＥ）が挙げられる。
【０１５２】
ある種の実施形態では、免疫増強物質として使用される１種以上の式（Ｉ）の化合物は、上で特定した１種以上のアジュバントの組み合わせを有する組成物中に含まれる。こうした組み合わせとしては、それだけに限らないが、以下が挙げられる。
（１）サポニンおよび水中油型エマルジョン；
（２）サポニン（例えば、ＱＳ２１）＋非毒性のＬＰＳ誘導体（例えば、３ｄＭＰＬ）；
（３）サポニン（例えば、ＱＳ２１）＋非毒性のＬＰＳ誘導体（例えば、３ｄＭＰＬ）＋コレステロール；
（４）サポニン（例えば、ＱＳ２１）＋３ｄＭＰＴＬ＋ＩＬ−１２（必要に応じてステロールを含む）；
（５）３ｄＭＰＬと、例えば、ＱＳ２１および／または水中油型エマルジョンとの組み合わせ；
（６）１０％スクアラン、０．４％Ｔｗｅｅｎ８０（商標）、５％プルロニック−ブロックポリマーＬ１２１、およびｔｈｒ−ＭＤＰを含むＳＡＦ（サブミクロンエマルジョンにマイクロフルイダイズされるか、またはボルテックス処理を行い、より大きな粒径のエマルジョンを生成する）。
（７）２％スクアレン、０．２％Ｔｗｅｅｎ８０、ならびにモノホスホリルリピドＡ（ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｉｐｉｄ  Ａ）（ＭＰＬ）、トレハロースジミコール酸（ＴＤＭ）、および細胞壁骨格（ＣＷＳ）からなる群からの１種以上の細菌の細胞壁成分（好ましくはＭＰＬ＋ＣＷＳ（Ｄｅｔｏｘ（商標）））を含むＲＩＢＩ（商標）アジュバントシステム（ＲＡＳ）（Ｒｉｂｉ  Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍ）；および
（８）１種以上の無機塩（アルミニウム塩など）＋ＬＰＳの非毒性誘導体（３ｄＭＰＬなど）。
【０１５３】
他の実施形態では、本明細書に提供した免疫原性組み合わせで使用されるアジュバントの組み合わせとしては、Ｔｈ１アジュバントとＴｈ２アジュバントとの組み合わせ（ほんの一例として、ＣｐＧおよびミョウバンまたはレシキモドおよびミョウバンなど）が挙げられる。
【０１５４】
ある種の実施形態では、本明細書に提供した免疫原性組成物は、細胞媒介性免疫応答および体液性免疫応答の両方を誘発する。他の実施形態では、免疫応答は、持続性（例えば、中和）抗体および感染性因子への曝露の際に迅速に応答する細胞媒介性免疫を誘導する。
【０１５５】
ＴＨ１アジュバントを使用して、ＴＨ１免疫応答を誘発することができる。ＴＨ１アジュバントは、一般に、アジュバントを使用しない抗原の免疫と比較して、増加したレベルのＩｇＧ２ａ産生を誘発する。本明細書に提供した免疫原性組成物での使用に適切なＴＨ１アジュバントとしては、それだけに限らないが、サポニン処方物、ビロソーム、およびウイルス様粒子、腸内細菌リポ多糖（ＬＰＳ）の非毒性誘導体、免疫賦活性オリゴヌクレオチドが挙げられる。ある種の実施形態では、本明細書に提供した免疫原性組成物中のＴＨ１アジュバントとして使用される免疫賦活性オリゴヌクレオチドは、ＣｐＧモチーフを含む。
【０１５６】
ＴＨ２アジュバントを使用して、ＴＨ２免疫応答を誘発することができる。ＴＨ２アジュバントは、一般に、アジュバントを使用しない抗原の免疫と比較して、増加したレベルのＩｇＧ１産生を誘発する。本明細書に提供した免疫原性組成物での使用に適切なＴＨ２アジュバントとしては、それだけに限らないが、無機物含有組成物、オイルエマルジョン、ならびにＡＤＰ−リボシル化毒素およびその無毒化誘導体が挙げられる。ある種の実施形態では、本明細書に提供した免疫原性組成物中でＴＨ２アジュバントとして使用される無機物含有組成物はアルミニウム塩である。
【０１５７】
ある種の実施形態では、本明細書に提供した免疫原性組成物としては、ＴＨ１アジュバントおよびＴＨ２アジュバントが挙げられる。他の実施形態では、こうした組成物は、アジュバントを使用しない免疫と比較して、増強されたＴＨ１応答および増強されたＴＨ２応答（ＩｇＧ１産生およびＩｇＧ２ａ産生の両方の増加など）を誘発する。さらに他の実施形態では、ＴＨ１アジュバントおよびＴＨ２アジュバントの組み合わせを含むこうした組成物は、単一のアジュバントでの免疫と比較して（すなわち、ＴＨ１アジュバントのみでの免疫またはＴＨ２アジュバントのみでの免疫と比較して）、増加したＴＨ１免疫応答および／または増加したＴＨ２免疫応答を誘導する。
【０１５８】
ある種の実施形態では、免疫応答は、ＴＨ１免疫応答およびＴＨ２応答の一方または両方である。他の実施形態では、免疫応答は、ＴＨ１応答の増強およびＴＨ２応答の増強の一方または両方をもたらす。
【０１５９】
ある種の実施形態では、免疫応答の増強は、全身および粘膜の免疫応答の一方または両方である。他の実施形態では、免疫応答は、全身免疫応答の増強および粘膜免疫応答の増強の一方または両方をもたらす。ある種の実施形態では、粘膜免疫応答は、ＴＨ２免疫応答である。ある種の実施形態では、粘膜免疫応答としては、ＩｇＡ産生の増加が挙げられる。
【０１６０】
（ｂ）抗原
ある種の実施形態では、免疫原性組成物は少なくとも１種の抗原を含み、この抗原は、細菌性抗原、癌関連抗原、またはウイルス性抗原であり得る。ある種の実施形態では、本明細書に提供した均一懸濁物を予防ワクチン中に含めるか、予防ワクチンと組み合わせて使用する。ある種の実施形態では、本明細書に提供した均一懸濁物を、治療ウイルスワクチン中に含めるか、治療ウイルスワクチンと組み合わせて使用する。ある種の実施形態では、本明細書に提供した均一懸濁物を、癌ワクチン中に含めるか、癌ワクチンと組み合わせて使用する。
【０１６１】
本明細書に提供した免疫原性組成物と共に使用するための抗原としては、それだけに限らないが、１種以上の以下に記載の抗原または以下に記載の１種以上の病原体由来の抗原が挙げられる。
【０１６２】
（細菌性抗原）
本明細書で提供される免疫原性組成物において使用するのに適した細菌性抗原としては、それだけには限らないが、細菌から単離、精製、または誘導された、タンパク質、多糖、リポ多糖、および外膜ベシクルが挙げられる。ある種の実施形態では、細菌性抗原としては、細菌溶解物および不活化された細菌処方物が挙げられる。ある種の実施形態では、細菌性抗原は、組み換え発現によって産生される。ある種の実施形態では、細菌性抗原は、その生活環の少なくとも１つの段階中に細菌の表面に露出されるエピトープを含む。細菌性抗原は、複数の血清型を通して保存されることが好ましい。ある種の実施形態では、細菌性抗原は、以下で述べる１種以上の細菌から得られる抗原、ならびに以下に特定される具体的な抗原例を含む。
【０１６３】
髄膜炎菌：髄膜炎抗原としては、それだけには限らないが、Ａ、Ｃ、Ｗ１３５、Ｙ、Ｘ、および／またはＢなどの髄膜炎菌血清型から精製または誘導されたタンパク質、糖（多糖、少糖、リポ少糖、もしくはリポ多糖を含めて）、または外膜ベシクルが挙げられる。ある種の実施形態では、髄膜炎タンパク質抗原は、接着因子（ａｄｈｅｓｉｏｎｓ）、オートトランスポーター（ａｕｔｏｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ）、毒素、Ｆｅ捕捉タンパク質（ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ  ｐｒｏｔｅｉｎ）、および膜関連タンパク質（好ましくは内在性外膜タンパク質）から選択される。
【０１６４】
肺炎レンサ球菌：肺炎レンサ球菌抗原としては、それだけには限らないが、肺炎レンサ球菌由来の糖（多糖または少糖を含めて）および／またはタンパク質が挙げられる。糖は、細菌からの糖の精製中に生じる大きさの多糖であり得、または、こうした多糖の断片化によって得られる少糖であり得る。７価のＰＲＥＶＮＡＲＴＭ製品では、例えば、糖のうちの６つは、完全な多糖として提示されるのに対して、１つ（１８Ｃ血清型）は、少糖として提示される。ある種の実施形態では、糖抗原は、１つ以上の次の肺炎球菌血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２０、２２Ｆ、２３Ｆ、および／または３３Ｆから選択される。免疫原性組成物は、複数の血清型、例えば２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３またはそれ以上の血清型を含むことができる。７価、９価、１０価、１１価、および１３価の結合体型複合体は、２３価の非結合体型複合体と同様に、当技術分野で既に知られている。例えば、１０価の複合体は、血清型１、４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆ、および２３Ｆ由来の糖を含むことができる。１１価の複合体は、血清型３由来の糖をさらに含むことができる。１２価の複合体は、１０価の混合物に、血清型６Ａおよび１９Ａ；６Ａおよび２２Ｆ；１９Ａおよび２２Ｆ；６Ａおよび１５Ｂ；１９Ａおよび１５Ｂ；ｒ２２Ｆおよび１５Ｂを追加することができ；１３価の複合体は、１１価の混合物に、血清型１９Ａおよび２２Ｆ；８および１２Ｆ；８および１５Ｂ；８および１９Ａ；８および２２Ｆ；１２Ｆおよび１５Ｂ；１２Ｆおよび１９Ａ；１２Ｆおよび２２Ｆ；１５Ｂおよび１９Ａ；１５Ｂおよび２２Ｆなどを追加することができる。ある種の実施形態では、タンパク質抗原は、以下に特定されるタンパク質から選択することができる：ＷＯ９８／１８９３１号、ＷＯ９８／１８９３０号、米国特許第６，６９９，７０３号、米国特許第６，８００，７４４号、ＷＯ９７／４３３０３号、ＷＯ９７／３７０２６号、ＷＯ０２／０７９２４１号、ＷＯ０２／３４７７３号、ＷＯ００／０６７３７号、ＷＯ００／０６７３８号、ＷＯ００／５８４７５号、ＷＯ２００３／０８２１８３号、ＷＯ００／３７１０５号、ＷＯ０２／２２１６７号、ＷＯ０２／２２１６８号、ＷＯ２００３／１０４２７２号、ＷＯ０２／０８４２６号、ＷＯ０１／１２２１９号、ＷＯ９９／５３９４０号、ＷＯ０１／８１３８０号、ＷＯ２００４／０９２２０９号、ＷＯ００／７６５４０号、ＷＯ２００７／１１６３２２号、ＬｅＭｉｅｕｘら、「Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍ．」（２００６）７４：２４５３〜２４５６、Ｈｏｓｋｉｎｓら、「Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．」（２００１）１８３：５７０９〜５７１７、Ａｄａｍｏｕら、「Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．」（２００１）６９（２）：９４９〜９５８、Ｂｒｉｌｅｓら、「Ｊ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．」（２０００）１８２：１６９４〜１７０１、Ｔａｌｋｉｎｇｔｏｎら、「Ｍｉｃｒｏｂ．Ｐａｔｈｏｇ．」（１９９６）２１（１）：１７〜２２、Ｂｅｔｈｅら、「ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｌｅｔｔ．」（２００１）２０５（１）：９９〜１０４、Ｂｒｏｗｎら、「Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．」（２００１）６９：６７０２〜６７０６、Ｗｈａｌｅｎら、「ＦＥＭＳ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｄ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．」（２００５）４３：７３〜８０、Ｊｏｍａａら、「Ｖａｃｃｉｎｅ」（２００６）２４（２４）：５１３３〜５１３９。他の実施形態では、肺炎レンサ球菌タンパク質は、ポリヒスチジントリアドファミリー（Ｐｏｌｙ  Ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ  Ｔｒｉａｄ  ｆａｍｉｌｙ）（ＰｈｔＸ）、コリン結合タンパク質ファミリー（ＣｂｐＸ）、ＣｂｐＸ切断体、ＬｙｔＸファミリー、ＬｙｔＸ切断体、ＣｂｐＸ切断体−ＬｙｔＸ切断体キメラタンパク質、ニューモリシン（Ｐｌｙ）、ＰｓｐＡ、ＰｓａＡ、Ｓｐｌ２８、ＳｐＩＯｌ、Ｓｐｌ３０、Ｓｐｌ２５、Ｓｐｌ３３、肺炎球菌線毛サブユニットから選択することができる。
【０１６５】
化膿性レンサ球菌（Ａ群レンサ球菌）：Ａ群レンサ球菌抗原としては、それだけには限らないが、ＷＯ０２／３４７７１またはＷＯ２００５／０３２５８２で特定されるタンパク質（ＧＡＳ４０を含めて）、ＧＡＳ  Ｍタンパク質のフラグメントの融合体（ＷＯ０２／０９４８５１、およびＤａｌｅ、「Ｖａｃｃｉｎｅ」（１９９９）１７：１９３〜２００、およびＤａｌｅ、「Ｖａｃｃｉｎｅ」１４（１０）：９４４〜９４８に記載されているものを含めて）、フィブロネクチン結合タンパク質（Ｓｆｂ１）、レンサ球菌ヘム結合タンパク質（Ｓｈｐ）、およびストレプトリシンＳ（ＳａｇＡ）が挙げられる。
【０１６６】
Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ：Ｍｏｒａｘｅｌｌａ抗原としては、それだけには限らないが、ＷＯ０２／１８５９５号およびＷＯ９９／５８５６２号に特定される抗原、外膜タンパク質抗原（ＨＭＷ−ＯＭＰ）、Ｃ−抗原、および／またはＬＰＳが挙げられる。
【０１６７】
百日咳菌：百日咳抗原としては、それだけには限らないが、必要に応じてペルタクチンおよび／または凝集原２および３とも組み合わせた、百日咳菌由来の百日咳ホロ毒素（ＰＴ）および線維状赤血球凝集素（ＦＨＡ）が挙げられる。
【０１６８】
Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ：Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ抗原としては、それだけには限らないが、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｍａｌｌｅｉ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ、およびＢｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｃｅｐａｃｉａが挙げられる。
【０１６９】
黄色ブドウ球菌：黄色ブドウ球菌抗原としては、それだけには限らないが、黄色ブドウ球菌由来の多糖および／またはタンパク質が挙げられる。黄色ブドウ球菌多糖としては、それだけには限らないが、非毒性の組み換え型緑膿菌外毒素Ａと必要に応じて結合させた５型および８型の莢膜多糖（ＣＰ５およびＣＰ８）（ＳｔａｐｈＶＡＸＴＭなど）；３３６型多糖（３３６ＰＳ）；多糖細胞間接着体（ＰＩＡ；ＰＮＡＧとしても知られている）が挙げられる。黄色ブドウ球菌タンパク質としては、それだけには限らないが、表面タンパク質から得られる抗原、インベイシン（ロイコシジン、キナーゼ、ヒアルロニダーゼ）、食細胞の貪食を抑制する表面因子（莢膜、プロテインＡ）、カロテノイド、カタラーゼ産生物、プロテインＡ、コアグラーゼ、凝固因子、および／または真核生物の細胞膜を溶解する膜損傷毒素（必要に応じて無毒化される）（溶血素、ロイコトキシン、ロイコシジン）が挙げられる。ある種の実施形態では、黄色ブドウ球菌抗原は、ＷＯ０２／０９４８６８号、ＷＯ２００８／０１９１６２号、ＷＯ０２／０５９１４８号、ＷＯ０２／１０２８２９号、ＷＯ０３／０１１８９９号、ＷＯ２００５／０７９３１５号、ＷＯ０２／０７７１８３号、ＷＯ９９／２７１０９号、ＷＯ０１／７０９５５号、ＷＯ００／１２６８９号、ＷＯ００／１２１３１号、ＷＯ２００６／０３２４７５号、ＷＯ２００６／０３２４７２号、ＷＯ２００６／０３２５００号、ＷＯ２００７／１１３２２２号、ＷＯ２００７／１１３２２３号、ＷＯ２００７／１１３２２４号で特定されるタンパク質から選択することができる。他の実施形態では、黄色ブドウ球菌抗原は、ＩｓｄＡ、ＩｓｄＢ、ＩｓｄＣ、ＳｄｒＣ、ＳｄｒＤ、ＳｄｒＥ、ＣｌｆＡ、ＣｌｆＢ、ＳａｓＦ、ＳａｓＤ、ＳａｓＨ（ＡｄｓＡ）、Ｓｐａ、ＥｓａＣ、ＥｓｘＡ、ＥｓｘＢ、Ｅｍｐ、ＨｌａＨ３５Ｌ、ＣＰ５、ＣＰ８、ＰＮＡＧ、３３６ＰＳから選択することができる。
【０１７０】
表皮ブドウ球菌：表皮ブドウ球菌抗原としては、それだけには限らないが、粘液結合抗原（ＳＡＡ）が挙げられる。
【０１７１】
破傷風菌（破傷風）：破傷風抗原としては、それだけには限らないが、破傷風トキソイド（ＴＴ）が挙げられる。ある種の実施形態では、こうした抗原は、本明細書に提供される免疫原性組成物と組み合わせて／結合させてキャリアタンパク質として使用される。
【０１７２】
Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ：抗原としては、それだけには限らないが、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎ由来のイプシロン毒素が挙げられる。
【０１７３】
ボツリヌス菌（ボツリヌス中毒）：ボツリヌス中毒抗原としては、それだけには限らないが、ボツリヌス菌から得られるものが挙げられる。
【０１７４】
Ｃｏｒｎｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ（ジフテリア）：ジフテリア抗原としては、それだけには限らないが、好ましくは無毒化されたジフテリア毒素（ＣＲＭ１９７など）が挙げられる。さらに、ＡＤＰリボシル化を調節、抑制できるか、またはそれに関与する抗原は、本明細書に提供される免疫原性組成物と組み合わせられる／共投与（ｃｏ−ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）される／結合させられることが意図される。ある種の実施形態では、ジフテリア毒素は、キャリアタンパク質として使用される。
【０１７５】
Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ  Ｂ（Ｈｉｂ）：Ｈｉｂ抗原としては、それだけには限らないが、Ｈｉｂ糖抗原が挙げられる。
【０１７６】
緑膿菌：シュードモナス抗原としては、それだけには限らないが、内毒素Ａ、Ｗｚｚタンパク質、緑膿菌ＬＰＳ、ＰＡＯ１（Ｏ５血清型）から単離されたＬＰＳ、および／または外膜タンパク質Ｆ（ＯｐｒＦ）を含めた外膜タンパク質が挙げられる。
【０１７７】
Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ。Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａから得られる細菌性抗原。
【０１７８】
Ｃｏｘｉｅｌｌａ  ｂｕｒｎｅｔｉｉ。Ｃｏｘｉｅｌｌａ  ｂｕｒｎｅｔｉｉから得られる細菌性抗原。
【０１７９】
Ｂｒｕｃｅｌｌａ。それだけには限らないが、Ｂ．ａｂｏｒｔｕｓ、Ｂ．ｃａｎｉｓ、Ｂ．ｍｅｌｉｔｅｎｓｉｓ、Ｂ．ｎｅｏｔｏｍａｅ、Ｂ．ｏｖｉｓ、Ｂ．ｓｕｉｓ、およびＢ．ｐｉｎｎｉｐｅｄｉａｅを含めたＢｒｕｃｅｌｌａから得られる細菌性抗原。
【０１８０】
Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ。それだけには限らないが、Ｆ．ｎｏｖｉｃｉｄａ、Ｆ．ｐｈｉｌｏｍｉｒａｇｉａ、およびＦ．ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓを含めたＦｒａｎｃｉｓｅｌｌａから得られる細菌性抗原。
【０１８１】
Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｇａｌａｃｔｉａｅ（Ｂ群レンサ球菌）：Ｂ群レンサ球菌抗原としては、それだけには限らないが、（タンパク質ＧＢＳ８０、ＧＢＳ１０４、ＧＢＳ２７６、およびＧＢＳ３２２を含めて、また、血清型Ｉａ、Ｉｂ、Ｉａ／ｃ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、およびＶＩＩＩから得られる糖抗原を含めて）ＷＯ０２／３４７７１号、ＷＯ０３／０９３３０６号、ＷＯ０４／０４１１５７号、またはＷＯ２００５／００２６１９号に特定されるタンパク質または糖抗原が挙げられる。
【０１８２】
Ｎｅｉｓｅｒｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ：Ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ抗原としては、それだけには限らないが、ＰｏｒＢなどのＰｏｒ（またはポリン）タンパク質（Ｚｈｕら、「Ｖａｃｃｉｎｅ」（２００４）２２：６６０〜６６９を参照のこと）、ＴｂｐＡおよびＴｂｐＢなどのトランスフェリン（ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎｇ）結合タンパク質（Ｐｒｉｃｅら、「Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ」（２００４）７１（１）：２７７〜２８３を参照のこと）、不透明タンパク質（ｏｐａｃｉｔｙ  ｐｒｏｔｅｉｎ）（Ｏｐａなど）、還元−修飾可能（ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ−ｍｏｄｉｆｉａｂｌｅ）タンパク質（Ｒｍｐ）、および外膜ベシクル（ＯＭＶ）調製物（Ｐｌａｎｔｅら、「Ｊ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ」（２０００）１８２：８４８〜８５５を参照のこと、また例えば、ＷＯ９９／２４５７８、ＷＯ９９／３６５４４、ＷＯ９９／５７２８０、ＷＯ０２／０７９２４３を参照のこと）が挙げられる。
【０１８３】
Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ：Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ抗原としては、それだけには限らないが、血清型Ａ、Ｂ、Ｂａ、およびＣ（トラコーマの因子、失明を引き起こす）、血清型Ｌ１、Ｌ２およびＬ３（性病性リンパ肉芽腫に関連する）、および血清型Ｄ〜Ｋから得られる抗原が挙げられる。ある種の実施形態では、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｓ抗原としては、それだけには限らないが、ＰｅｐＡ（ＣＴ０４５）、ＬｃｒＥ（ＣＴ０８９）、ＡｒｔＪ（ＣＴ３８１）、ＤｎａＫ（ＣＴ３９６）、ＣＴ３９８、ＯｍｐＨ様（ＣＴ２４２）、Ｌ７／Ｌ１２（ＣＴ３１６）、ＯｍｃＡ（ＣＴ４４４）、ＡｔｏｓＳ（ＣＴ４６７）、ＣＴ５４７、Ｅｎｏ（ＣＴ５８７）、ＨｒｔＡ（ＣＴ８２３）、およびＭｕｒＧ（ＣＴ７６１）を含めて、ＷＯ００／３７４９４号、ＷＯ０３／０４９７６２号、ＷＯ０３／０６８８１１号、またはＷＯ０５／００２６１９号に特定される抗原が挙げられる。
【０１８４】
Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｐａｌｌｉｄｕｍ（梅毒）：梅毒抗原としては、それだけには限らないが、ＴｍｐＡ抗原が挙げられる。
【０１８５】
Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｄｕｃｒｅｙｉ（軟性下疳を引き起こす）：Ｄｕｃｒｅｙｉ抗原としては、それだけには限らないが、外膜タンパク質（ＤｓｒＡ）が挙げられる。
【０１８６】
Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓまたはＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍ：抗原としては、それだけには限らないが、三糖反復または他のＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓから得られる抗原が挙げられる。
【０１８７】
Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ：Ｈ  ｐｙｌｏｒｉ抗原としては、それだけには限らないが、Ｃａｇ、Ｖａｃ、Ｎａｐ、ＨｏｐＸ、ＨｏｐＹ、および／またはウレアーゼ抗原が挙げられる。
【０１８８】
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ：抗原としては、それだけには限らないが、Ｓ．ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ抗原の１６０ｋＤａ赤血球凝集素が挙げられる。
【０１８９】
Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ  抗原としては、それだけには限らないが、ＬＰＳが挙げられる。
【０１９０】
大腸菌：大腸菌抗原は、腸毒性大腸菌（ＥＴＥＣ）、腸管凝集性大腸菌（ＥＡｇｇＥＣ）、拡散付着性（ｄｉｆｆｕｓｅｌｙ  ａｄｈｅｒｉｎｇ）大腸菌（ＤＡＥＣ）、腸管病原性大腸菌（ＥＰＥＣ）、腸管外病原性大腸菌（ＥｘＰＥＣ）、および／または腸管出血性大腸菌（ＥＨＥＣ）から得ることができる。ＥｘＰＥＣ抗原としては、それだけには限らないが、副コロニー形成因子（ａｃｃｅｓｓｏｒｙ  ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ  ｆａｃｔｏｒ）（ｏｒｆ３５２６）、ｏｒｆ３５３、細菌性Ｉｇ様ドメイン（グループ１）タンパク質（ｏｒｆ４０５）、ｏｒｆ１３６４、ＮｏｄＴ−ファミリー外膜因子リポタンパク質排出トランスポーター（ｏｒｆ１７６７）、ｇｓｐＫ（ｏｒｆ３５１５）、ｇｓｐＪ（ｏｒｆ３５１６）、ｔｏｎＢ依存性シデロホア受容体（ｏｒｆ３５９７）、線毛タンパク質（ｆｉｍｂｒｉａｌ  ｐｒｏｔｅｉｎ）（ｏｒｆ３６１３）、ｕｐｅｃ−９４８、ｕｐｅｃ−１２３２、１型線毛タンパク質のＡ鎖前駆体（ｕｐｅｃ−１８７５）、ｙａｐ  Ｈ相同体（ｕｐｅｃ−２８２０）、および溶血素Ａ（ｒｅｃｐ−３７６８）が挙げられる。
【０１９１】
炭疽菌（炭疽）：炭疽菌抗原としては、それだけには限らないが、Ａ成分（致死因子（ＬＦ）および浮腫因子（ＥＦ））が挙げられ、これらはどちらも、防御抗原（ＰＡ）として知られている共通のＢ成分を有する可能性がある。ある種の実施形態では、炭疽菌抗原は、必要に応じて無毒化される。
【０１９２】
Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ（ペスト）：ペスト抗原としては、それだけには限らないが、Ｆ１莢膜抗原、ＬＰＳ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ  Ｖ抗原が挙げられる。
【０１９３】
結核菌：結核抗原としては、それだけには限らないが、リポタンパク質、ＬＰＳ、ＢＣＧ抗原、抗原８５Ｂ（Ａｇ８５Ｂ）の融合タンパク質、陽イオン性脂質ベシクル中に必要に応じて処方されたＥＳＡＴ−６、結核菌（Ｍｔｂ）イソクエン酸脱水素酵素関連抗原、およびＭＰＴ５１抗原が挙げられる。
【０１９４】
Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ：抗原としては、それだけには限らないが、外膜タンパク質Ａおよび／またはＢ（ＯｍｐＢ）、ＬＰＳ、および表面タンパク質抗原（ＳＰＡ）を含めた、外膜タンパク質が挙げられる。
【０１９５】
Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ：細菌性抗原としては、それだけには限らないが、Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓから得られるものが挙げられる。
【０１９６】
Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ：抗原としては、それだけには限らないが、ＷＯ０２／０２６０６号に特定されるものが挙げられる。
【０１９７】
コレラ菌：抗原としては、それだけには限らないが、プロテイナーゼ抗原、ＬＰＳ、特に、コレラ菌ＩＩのリポ多糖、Ｏ１  Ｉｎａｂａ  Ｏ−特異的多糖、コレラ菌Ｏ１３９、ＩＥＭ１０８ワクチンの抗原、および閉鎖帯毒素（Ｚｏｔ）が挙げられる。
【０１９８】
Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉ（腸チフス）：抗原としては、それだけには限らないが、莢膜多糖、好ましくは結合体（Ｖｉ、すなわちｖａｘ−ＴｙＶｉ）が挙げられる。
【０１９９】
Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ（ライム病）：抗原としては、それだけには限らないが、リポタンパク質（ＯｓｐＡ、ＯｓｐＢ、ＯｓｐＣ、およびＯｓｐＤなど）、ＯｓｐＥ関連タンパク質（Ｅｒｐｓ）などの他の表面タンパク質、デコリン結合タンパク質（ＤｂｐＡなど）、および、Ｐ３９およびＰ１３（内在性膜タンパク質）に関連する抗原などの抗原可変性ＶＩタンパク質、ＶｌｓＥ抗原変異タンパク質（Ａｎｔｉｇｅｎｉｃ  Ｖａｒｉａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ）が挙げられる。
【０２００】
Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ：抗原としては、それだけには限らないが、Ｐ．ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ外膜タンパク質（ＯＭＰ）が挙げられる。
【０２０１】
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ：抗原としては、それだけには限らないが、ＯＭＰ  Ａを含めたＯＭＰ、または破傷風トキソイドに必要に応じて結合させた多糖が挙げられる。
【０２０２】
本明細書に提供される免疫原性組成物に使用される他の細菌性抗原としては、それだけには限らないが、上で述べたいずれかの莢膜抗原、多糖抗原、またはタンパク質抗原が挙げられる。本明細書に提供される免疫原性組成に使用される他の細菌性抗原としては、それだけには限らないが、外膜ベシクル（ＯＭＶ）調製物が挙げられる。さらに、本明細書で提供される免疫原性組成物に使用される他の細菌性抗原としては、それだけには限らないが、前述の細菌のいずれかの、生きている型、弱毒化および／または精製された型が挙げられる。ある種の実施形態では、本明細書に提供される免疫原性組成物に使用される細菌性抗原は、グラム陰性菌から得られるのに対して、他の実施形態では、グラム陽性菌から得られる。ある種の実施形態では、本明細書に提供される免疫原性組成物に使用される細菌性抗原は、好気性細菌から得られるのに対して、他の実施形態では、嫌気性細菌から得られる。
【０２０３】
ある種の実施形態では、上の細菌由来の糖（多糖、ＬＰＳ、ＬＯＳ、または少糖）のいずれかは、キャリアタンパク質（例えばＣＲＭ１９７）などの別の作用物質または抗原と結合させられる。ある種の実施形態では、こうした結合は、糖上のカルボニル部分の、タンパク質上のアミノ基への還元的アミノ化によって実施される直接的結合である。他の実施形態では、糖は、リンカーを介して、例えば、コハク酸アミド、または、「Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ」、１９９６および「ＣＲＣ、Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｒｏｓｓ−Ｌｉｎｋｉｎｇ」、１９９３に提供される他の連結を用いて結合される。
【０２０４】
Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ感染症ならびに関連疾患および障害の処置または予防に有用な、ある種の実施形態では、本明細書に提供される免疫原性組成物に使用するための、髄膜炎菌由来の組み換え型タンパク質は、ＷＯ９９／２４５７８号、ＷＯ９９／３６５４４号、ＷＯ９９／５７２８０号、ＷＯ００／２２４３０号、ＷＯ９６／２９４１２号、ＷＯ０１／６４９２０号、ＷＯ０３／０２０７５６号、ＷＯ２００４／０４８４０４号、およびＷＯ２００４／０３２９５８号に見出され得る。こうした抗原は、単独で、または組み合わせて使用することができる。複数の精製タンパク質が合わせられる場合には、１０種以下（例えば９、８、７、６、５、４、３、２種）の精製抗原の混合物を使用すると有益である。
【０２０５】
本明細書に提供される免疫原性組成物に使用するのに特に有用な抗原の組み合わせは、Ｇｉｕｌｉａｎｉら（２００６）「Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ」１０３（２９）：１０８３４〜９およびＷＯ２００４／０３２９５８号に開示されており、免疫原性組成物は、以下のうちの１、２、３、４、または５種を含み得る：（１）「ＮａｄＡ」タンパク質（ＧＮＡ１９９４およびＮＭＢ１９９４としても知られている（ａｋａ））；（２）「ｆＨＢＰ」タンパク質（「７４１」、ＬＰ２０８６、ＧＮＡ１８７０、およびＮＭＢ１８７０としても知られている）；（３）「９３６」タンパク質（ＧＮＡ２０９１およびＮＭＢ２０９１としても知られている）；（４）「９５３」タンパク質（ＧＮＡ１０３０およびＮＭＢ１０３０としても知られている）；および（５）「２８７」タンパク質（ＧＮＡ２１３２およびＮＭＢ２１３２としても知られている）。可能性のある他の抗原の組み合わせは、トランスフェリン結合タンパク質（例えばＴｂｐＡおよび／またはＴｂｐＢ）、ならびにＨｓｆ抗原を含み得る。本明細書に提供される免疫原性組成物中に使用するための、可能性のある他の精製抗原としては、以下のアミノ酸配列のうちの１つを含むタンパク質：ＷＯ９９／２４５７８の配列番号：６５０；ＷＯ９９／２４５７８の配列番号：８７８；ＷＯ９９／２４５７８の配列番号：８８４；ＷＯ９９／３６５４４の配列番号：４；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：５９８；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：８１８；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：８６４；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：８６６；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：１１９６；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：１２７２；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：１２７４；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：１６４０；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：１７８８；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：２２８８；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：２４６６；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：２５５４；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：２５７６；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：２６０６；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：２６０８；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：２６１６；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：２６６８；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：２７８０；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：２９３２；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：２９５８；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：２９７０；ＷＯ９９／５７２８０の配列番号：２９８８（前述のアミノ酸配列はそれぞれ、引用された文献からの参照によって、本明細書に組み込む）、あるいは、（ａ）前記配列と５０％以上（例えば、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％、またはそれ以上）の同一性を有する；および／または（ｂ）前記配列由来の少なくともｎ個の連続するアミノ酸のフラグメントを含む（ここでは、ｎは、７以上、例えば、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２５、３０、３５、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００、２５０、またはそれ以上である）；アミノ酸配列を含むポリペプチドが挙げられる。（ｂ）の好ましいフラグメントは、該当する配列由来のエピトープを含む。２つ以���（例えば、２、３、４、５、６個）のこうしたポリペプチドも、該免疫原性組成物に含めることができる。
【０２０６】
ｆＨＢＰ抗原は、異なる３つの改変体に分類される（ＷＯ２００４／０４８４０４号）。本明細書に開示される化合物のうちの１つを利用する、本明細書に開示される免疫原性組成物に基づく髄膜炎菌血清型ワクチンは、単一のｆＨＢＰ改変体を含み得るが、２種または３種すべての改変体の各々から得られるｆＨＢＰを有用に含む。したがって、該免疫原性組成物は、以下から選択される、２種または３種の様々な精製ｆＨＢＰの組み合わせを含むことができる：（ａ）配列番号：１と少なくともａ％の配列同一性を有するアミノ酸配列、および／または配列番号：１由来の少なくともｘ個の連続的なアミノ酸のフラグメントからなるアミノ酸配列を含む、第１のタンパク質；（ｂ）配列番号：２と少なくともｂ％の配列同一性を有するアミノ酸配列、および／または配列番号：２由来の少なくともｙ個の連続的なアミノ酸のフラグメントからなるアミノ酸配列を含む、第２のタンパク質；および／または（ｃ）配列番号：３と少なくともｃ％の配列同一性を有するアミノ酸配列、および／または配列番号：３由来の少なくともｚ個の連続的なアミノ酸のフラグメントからなるアミノ酸配列を含む、第３のタンパク質。
【０２０７】
【化３】
2013514382.tif 000004
ａの値は、少なくとも８５、例えば、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、９９．５、またはそれ以上である。ｂの値は、少なくとも８５、例えば、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、９９．５、またはそれ以上である。ｃの値は、少なくとも８５、例えば、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、９９．５、またはそれ以上である。ａ、ｂ、およびｃの値は、互いに本質的に関連しない。
【０２０８】
ｘの値は、少なくとも７、例えば、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３５、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１２０、１４０、１６０、１８０、２００、２２５、２５０である。ｙの値は、少なくとも７、例えば、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３５、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１２０、１４０、１６０、１８０、２００、２２５、２５０である。ｚの値は、少なくとも７、例えば、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３５、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１２０、１４０、１６０、１８０、２００、２２５、２５０である。ｘ、ｙ、およびｚの値は、互いに本質的に関連しない。
【０２０９】
ある実施形態では、本明細書に開示される通りの免疫原性組成物は、例えば、Ｎ末端システインに脂質付加されたｆＨＢＰタンパク質（１種以上）を含む。他の実施形態では、これらは、脂質付加されない。
【０２１０】
本明細書に開示の有用な免疫原性組成物としては、以下：（ｉ）配列番号４のアミノ酸配列を有する第１のポリペプチド；（ｉｉ）配列番号５のアミノ酸配列を有する第２のポリペプチド；および（ｉｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列を有する第３のポリペプチドの混合物を含む精製タンパク質が挙げられる。Ｇｉｕｌｉａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ  １０３（２９）：１０８３４−９およびＷＯ２００４／０３２９５８号を参照のこと。本明細書に開示の有用な免疫原性組成物としては、以下：（ｉ）配列番号４のアミノ酸配列と少なくともａ％の配列同一性を有する第１のポリペプチド；（ｉｉ）配列番号５のアミノ酸配列と少なくともｂ％の配列同一性を有する第２のポリペプチド；および（ｉｉｉ）配列番号６のアミノ酸配列と少なくともａ％の配列同一性を有する第３のポリペプチドの混合物を含む精製タンパク質が挙げられる。
【０２１１】
【化４】
2013514382.tif 000005
（細菌性ベシクル抗原）
本明細書に開示される通りの免疫原性組成物は、外膜ベシクルを含むことができる。こうした外膜ベシクルは、幅広い病原性細菌から得ることができ、また、本明細書に開示される通りの免疫原性組成物の抗原成分として使用することができる。こうした免疫原性組成物の抗原成分として使用するためのベシクルとしては、細菌の外膜を破壊し、そこから、外膜のタンパク質成分を含むベシクルを形成することによって得られる、任意のプロテオリポソームベシクルが挙げられる。したがって、この用語には、ＯＭＶ（時として「ブレブ（ｂｌｅｂ）」とも呼ばれる）、マイクロベシクル（ＭＶ、例えばＷＯ０２／０９６４３号を参照のこと）、および「天然のＯＭＶ」（「ＮＯＭＶ」、例えば、Ｋａｔｉａｌら（２００２）「Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．」７０：７０２〜７０７を参照のこと）が含まれる。１種以上の病原性細菌由来のベシクルを含む、本明細書で開示された免疫原性組成物は、こうした病原性細菌の感染ならびに関連疾患および障害の処置または予防に使用することができる。
【０２１２】
ＭＶおよびＮＯＭＶは、細菌の増殖中に自然に形成され、培地中に放出される、天然に存在する膜ベシクルである。ＭＶは、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａなどの細菌をブロス培地で培養し、ブロス培地中で（例えば、ろ過によって、または低速遠心分離を行い、より小さなベシクルではなく細胞のみをペレット化することによって）より小さいＭＶから全細胞を分離し、次いで、（例えば、ろ過によって、ＭＶの分画沈殿または凝集によって、ＭＶをペレット化するための高速遠心分離によって）細胞を欠乏させた培地からＭＶを収集することによって得ることができる。ＭＶの産生に使用するための系統は、一般に、培地中で産生されるＭＶの量に基づいて選択することができる（例えば、ＭＶ産生量の高いＮｅｉｓｓｅｒｉａを記載している米国特許第６，１８０，１１１号およびＷＯ０１／３４６４２号を参照のこと）。
【０２１３】
ＯＭＶは、細菌から人工的に調製することができ、（例えばデオキシコール酸塩を用いる）界面活性剤処理を使用して、または、非界面活性剤手段によって調製することができる（例えば、ＷＯ０４／０１９９７７を参照のこと）。適切なＯＭＶ調製物を得るための方法は、当技術分野でよく知られている。ＯＭＶを形成するための技術は、細菌を、胆汁酸塩の界面活性剤（例えば、リトコール酸、ケノデオキシコール酸、ウルソデオキシコール酸、デオキシコール酸、コール酸、ウルソコール酸などの塩）で、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａの処理に好ましいデオキシコール酸ナトリウム（ＥＰ００１１２４３号、およびＦｒｅｄｒｉｋｓｅｎら（１９９１）「ＮＩＰＨ  Ａｎｎ．」１４（２）：６７〜８０）で、界面活性剤を沈殿させないような十分に高いｐＨで処理することを含む（例えば、ＷＯ０１／９１７８８号を参照のこと）。超音波処理、均質化、マイクロフルイダイゼーション、キャビテーション、浸透圧ショック、粉砕、フレンチプレス、ブレンディングなどの技術を使用して、実質的に界面活性剤が存在しない、他の技術を実施することもできる（例えば、ＷＯ０４／０１９９７７号を参照のこと）。界面活性剤を少ししかまたはまったく使用しない方法は、ＮｅｉｓｓｅｒｉａのＯＭＶにおけるＮｓｐＡなどの有用な抗原を維持することができる。したがって、ある方法は、約０．５％以下（例えば、約０．２％、約０．１％、＜０．０５％、またはゼロ）のデオキシコール酸塩を用いるＯＭＶ抽出緩衝液を使用することができる。
【０２１４】
ＯＭＶ調製のための有用なプロセスは、ＷＯ０５／００４９０８号に記載されており、これは、高速遠心分離ではなく、未精製のＯＭＶに対する限外ろ過を含む。このプロセスは、限外ろ過実施後の超遠心のステップを含むことができる。
【０２１５】
ベシクルは、本発明と共に使用するための髄膜炎菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｉｎｉｇｔｉｄｉｓ）などの任意の病原性系統から調製することができる。髄膜炎菌血清型Ｂからのベシクルは、任意の血清型（例えば、１、２ａ、２ｂ、４、１４、１５、１６など）、任意の血清亜型、および任意の免疫型（例えば、Ｌ１；Ｌ２；Ｌ３；Ｌ３，３，７；Ｌ１０；など）のものであり得る。髄膜炎菌は、高侵襲性および高毒性の系統（例えば、以下の７つの高毒性系統のいずれか：亜群Ｉ；亜群ＩＩＩ；亜群ＩＶ  １；ＥＴ５複合体；ＥＴ３７複合体；Ａ４クラスター；第３系統）を含めた、任意の適切な系統由来であり得る。これらの系統は、多座位酵素電気泳動（ＭＬＥＥ）によって定義されているが、髄膜炎菌を分類するために、多座位配列タイピング（ＭＬＳＴ）も使用されている（例えば、ＥＴ３７複合体は、ＭＬＳＴによりＳＴ１１複合体であり、ＥＴ５複合体はＳＴ−３２（ＥＴ−５）であり、第３系統はＳＴ４１／４４である、など）。ベシクルは、以下の亜型のうちの１つを有する系統から調製することができる：Ｐ１．２；Ｐ１．２，５；Ｐ１．４；Ｐ１．５；Ｐ１．５，２；Ｐ１．５，ｃ；Ｐ１．５ｃ，１０；Ｐ１．７，１６；Ｐ１．７，１６ｂ；Ｐ１．７ｈ，４；Ｐ１．９；Ｐ１．１５；Ｐ１．９，１５；Ｐ１．１２，１３；Ｐ１．１３；Ｐ１．１４；Ｐ１．２１，１６；Ｐ１．２２，１４。
【０２１６】
本明細書に開示される免疫原性組成物に含まれるベシクルは、髄膜炎菌系統などの野生型の病原性系統から、または変異系統から調製することができる。例として、ＷＯ９８／５６９０１号は、修飾ｆｕｒ遺伝子を有する髄膜炎菌から得られるベシクルの調製を開示している。ＷＯ０２／０９７４６号は、ｎｓｐＡ発現が、ｐｏｒＡとｃｐｓの同時ノックアウトで上方調節されるであろうことを教示している。ＯＭＶ産生のための髄膜炎菌のさらなるノックアウト変異体は、ＷＯ０２／０９７４号、ＷＯ０２／０６２３７８号、およびＷＯ０４／０１４４１７号に開示されている。ＷＯ０６／０８１２５９号は、ｆＨＢＰが上方調節されるベシクルを開示している。Ｃｌａａｓｓｅｎら（１９９６）１４（１０）：１００１〜８は、６つの様々なＰｏｒＡ亜型を発現するように修飾された系統からのベシクルの構築を開示している。ＬＰＳ生合成に関与する酵素のノックアウトによって得られる、内毒素レベルが低い変異型Ｎｅｉｓｓｅｒｉａも、使用することができる（例えば、ＷＯ９９／１０４９７号、およびＳｔｅｅｇｈｓら（２００１）ｉ２０：６９３７〜６９４５を参照のこと）。これらの変異体または他の変異体はすべて、本発明と共に使用することができる。
【０２１７】
したがって、本明細書に開示される免疫原性組成物に含まれる髄膜炎菌血清型Ｂ系統は、ある実施形態では、２つ以上のＰｏｒＡ亜型を発現することができる。６価および９価のＰｏｒＡ系統が、これまでに構築されている。この系統は、２、３、４、５、６、７、８、または９個のＰｏｒＡ亜型：Ｐ１．７，１６；Ｐ１．５−１，２−２；Ｐ１．１９，１５−１；Ｐ１．５−２，１０；Ｐ１．１２  １，１３；Ｐ１．７−２，４；Ｐ１．２２，１４；Ｐ１．７−１，１、および／またはＰ１．１８−１，３，６を発現することができる。他の実施形態では、系統は、ＰｏｒＡ発現について下方調節されていることがあり、例えば、ＰｏｒＡの量が、野生型レベルに対して（例えば、ＷＯ０３／１０５８９０号に開示されている通りのＨ４４／７６系統に対して）、少なくとも２０％（例えば、＞３０％、＞４０％、＞５０％、＞６０％、＞７０％、＞８０％、＞９０％、＞９５％など）低下させられているかまたはノックアウトさえ行われている。
【０２１８】
ある実施形態では、髄膜炎菌血清型Ｂ系統は、ある種のタンパク質を（相当する野生型系統に対して）過剰発現することができる。例えば、系統は、ＮｓｐＡ、タンパク質２８７（ＷＯ０１／５２８８５号−ＮＭＢ２１３２およびＧＮＡ２１３２とも呼ばれている）、１種以上のｆＨＢＰ（ＷＯ０６／０８１２５９号および米国特許公開２００８／０２４８０６５号−タンパク質７４１、ＮＭＢ１８７０、およびＧＮＡ１８７０とも呼ばれている）、ＴｂｐＡおよび／またはＴｂｐＢ（ＷＯ００／２５８１１号）、Ｃｕ，Ｚｎ−スーパーオキシドジスムターゼ（ＷＯ００／２５８１１号）などを過剰発現することができる。
【０２１９】
ある実施形態では、髄膜炎菌血清型Ｂ系統は、１つ以上のノックアウトおよび／または過剰発現変異を含むことができる。下方調節および／またはノックアウトのために好ましい遺伝子としては、以下が挙げられる：（ａ）Ｃｐｓ、ＣｔｒＡ、ＣｔｒＢ、ＣｔｒＣ、ＣｔｒＤ、ＦｒｐＢ、ＧａｌＥ、ＨｔｒＢ／ＭｓｂＢ、ＬｂｐＡ、ＬｂｐＢ、ＬｐｘＫ、Ｏｐａ、Ｏｐｃ、ＰｉｌＣ、ＰｏｒＢ、ＳｉａＡ、ＳｉａＢ、ＳｉａＣ、ＳｉａＤ、ＴｂｐＡ、および／またはＴｂｐＢ（ＷＯ０１／０９３５０号）；（ｂ）ＣｔｒＡ、ＣｔｒＢ、ＣｔｒＣ、ＣｔｒＤ、ＦｒｐＢ、ＧａｌＥ、ＨｔｒＢ／ＭｓｂＢ、ＬｂｐＡ、ＬｂｐＢ、ＬｐｘＫ、Ｏｐａ、Ｏｐｃ、ＰｈｏＰ、ＰｉｌＣ、ＰｍｒＥ、ＰｍｒＦ、ＳｉａＡ、ＳｉａＢ、ＳｉａＣ、ＳｉａＤ、ＴｂｐＡ、および／またはＴｂｐＢ（ＷＯ０２／０９７４６号）；（ｃ）ＥｘｂＢ、ＥｘｂＤ、ｒｍｐＭ、ＣｔｒＡ、ＣｔｒＢ、ＣｔｒＤ、ＧａｌＥ、ＬｂｐＡ、ＬｐｂＢ、Ｏｐａ、Ｏｐｃ、ＰｉｌＣ、ＰｏｒＢ、ＳｉａＡ、ＳｉａＢ、ＳｉａＣ、ＳｉａＤ、ＴｂｐＡ、および／またはＴｂｐＢ（ＷＯ０２／０６２３７８号）；および（ｄ）ＣｔｒＡ、ＣｔｒＢ、ＣｔｒＤ、ＦｒｐＢ、ＯｐＡ、ＯｐＣ、ＰｉｌＣ、ＰｏｒＢ、ＳｉａＤ、ＳｙｎＡ、ＳｙｎＢ、および／またはＳｙｎＣ（ＷＯ０４／０１４４１７号）。
【０２２０】
変異系統が使用される場合、ある実施形態では、これは、以下の特性のうちの１つ以上、またはすべてを有し得る：（ｉ）髄膜炎菌のＬＯＳを切断するために、下方調節またはノックアウトされたＬｇｔＢおよび／またはＧａｌＥ；（ｉｉ）上方調節されたＴｂｐＡ；（ｉｉｉ）上方調節されたＨｓｆ；（ｉｖ）上方調節されたＯｍｐ８５；（ｖ）上方調節されたＬｂｐＡ；（ｖｉ）上方調節されたＮｓｐＡ；（ｖｉｉ）ノックアウトされたＰｏｒＡ；（ｖｉｉｉ）下方調節またはノックアウトされたＦｒｐＢ；（ｉｘ）下方調節またはノックアウトされたＯｐａ；（ｘ）下方調節またはノックアウトされたＯｐｃ；（ｘｉｉ）欠失ｃｐｓ遺伝子複合体。切断されたＬＯＳは、シアリル−ラクト−Ｎ−ネオテトラオースエピトープを含まないものであり得る。例えば、これは、ガラクトースを欠くＬＯＳであり得る。このＬＯＳは、α鎖を持たない可能性がある。
【０２２１】
ベシクル中にＬＯＳが存在する場合、そのＬＯＳとタンパク質成分が連結するようにベシクルを処理することができる（「ブレブ内」結合（ＷＯ０４／０１４４１７号））。
【０２２２】
本明細書に開示される通りの免疫原性組成物は、様々な系統からのベシクルの混合物を含むことができる。例として、ＷＯ０３／１０５８９０号は、使用国で流行している血清亜型を有する髄膜炎菌系統から得られる第１のベシクルと、使用国で流行している血清亜型を必ずしも有していない系統から得られる第２のベシクルとを含む、多価の髄膜炎菌ベシクル組成物を含むワクチンを開示している。ＷＯ０６／０２４９４６号は、様々なベシクルの有用な組み合わせを開示している。Ｌ２およびＬ３免疫型のそれぞれにおける系統から得られるベシクルの組み合わせを、ある実施形態では、使用することができる。
【０２２３】
ベシクルベースの抗原は、血清型Ｂでない髄膜炎菌血清型から調製することができる（例えば、ＷＯ０１／９１７８８号は、血清型Ａのためのプロセスを開示している）。したがって、本明細書に開示される免疫原性組成物は、Ｂでない血清型（例えばＡ、Ｃ、Ｗ１３５、および／またはＹ）から、また、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａでない細菌性病原体から調製されたベシクルを含むことができる。
【０２２４】
（ウイルス性抗原）
本明細書に提供される免疫原性組成物に使用するのに適したウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、不活化された（または死滅させられた）ウイルス、弱毒化ウイルス、スプリットウイルス処方物、精製されたサブユニット処方物、ウイルスから単離、精製、または誘導され得るウイルス性タンパク質、およびウイルス様粒子（ＶＬＰ）が挙げられる。ある種の実施形態では、ウイルス性抗原は、細胞培養株または他の基質上で増殖させたウイルスから得られる。他の実施形態では、ウイルス性抗原は、組換えにより発現される。ある種の実施形態では、ウイルス性抗原は、その生活環の少なくとも１つの段階中にウイルスの表面に露出されるエピトープを含むことが好ましい。ウイルス性抗原は、複数の血清型または単離物を通して保存されることが好ましい。本明細書に提供される免疫原性組成物に使用するのに適したウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、下に述べる１種以上のウイルスから得られる抗原、ならびに、下で定義する特定の抗原例が挙げられる。
【０２２５】
オルトミクソウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、インフルエンザＡ、Ｂ、およびＣなどのオルトミクソウイルスから得られるものが挙げられる。ある種の実施形態では、オルトミクソウイルス抗原は、赤血球凝集素（ＨＡ）、ノイラミニダーゼ（ＮＡ）、核タンパク質（ＮＰ）、基質タンパク質（Ｍ１）、膜タンパク質（Ｍ２）、１種以上の転写酵素成分（ＰＢ１、ＰＢ２、およびＰＡ）を含めた１種以上のウイルス性タンパク質から選択される。ある種の実施形態では、ウイルス性抗原は、ＨＡおよびＮＡを含む。ある種の実施形態では、インフルエンザ抗原は、パンデミック間期（毎年）型のｆｌｕ系統から得られるのに対して、他の実施形態では、インフルエンザ抗原は、パンデミックアウトブレイクを引き起こす潜在的可能性を有する系統（すなわち、現在流行している系統における赤血球凝集素と比べて新しい赤血球凝集素を有するインフルエンザ系統、または、鳥類被験体において病原性を持ち、ヒト集団において水平伝播する潜在的可能性を有するインフルエンザ系統、または、ヒトに対する病原性を持つインフルエンザ系統）から得られる。
【０２２６】
Ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、ニューモウイルス（ＲＳＶ）、パラミクソウイルス（ＰＩＶ）、メタニューモウイルス、およびモルビリウイルス（麻疹）などのＰａｒａｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅウイルスから得られるものが挙げられる。
【０２２７】
ニューモウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、ＲＳウイルス（ＲＳＶ）、ウシＲＳウイルス、マウス肺炎ウイルス、および七面鳥鼻気管炎ウイルスなどのニューモウイルスから得られるものが挙げられる。好ましくは、ニューモウイルスは、ＲＳＶである。ある種の実施形態では、ニューモウイルス抗原は、以下、表面タンパク質融合体（Ｆ）、糖タンパク質（Ｇ）および低分子疎水性タンパク質（ＳＨ）、基質タンパク質ＭおよびＭ２、ヌクレオカプシドタンパク質Ｎ、Ｐ、およびＬ、ならびに非構造タンパク質ＮＳ１およびＮＳ２を含めたタンパク質の１つ以上から選択される。他の実施形態では、ニューモウイルス抗原としては、Ｆ、Ｇ、およびＭが挙げられる。ある種の実施形態では、ニューモウイルス抗原はまた、キメラウイルスに処方されるか、またはキメラウイルスから得られる（例えば、例にすぎないが、キメラＲＳＶ／ＰＩＶウイルスは、ＲＳＶとＰＩＶの両成分を含む）。
【０２２８】
パラミクソウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、パラインフルエンザウイルス１〜４型（ＰＩＶ）、ムンプス、センダイウイルス、シミアンウイルス５、ウシパラインフルエンザウイルス、Ｎｉｐａｈｖｉｒｕｓ、Ｈｅｎｉｐａｖｉｒｕｓ、およびニューカッスル病ウイルスなどのパラミクソウイルスから得られるものが挙げられる。ある種の実施形態では、パラミクソウイルスは、ＰＩＶまたはムンプスである。ある種の実施形態では、パラミクソウイルス抗原は、以下のタンパク質の１つ以上から選択される：赤血球凝集素−ノイラミニダーゼ（ＨＮ）、融合タンパク質Ｆ１およびＦ２、核タンパク質（ＮＰ）、ホスホタンパク質（Ｐ）、巨大タンパク質（Ｌ）、および基質タンパク質（Ｍ）。他の実施形態では、パラミクソウイルスタンパク質としては、ＨＮ、Ｆ１、およびＦ２が挙げられる。ある種の実施形態では、パラミクソウイルス抗原はまた、キメラウイルスに処方されるか、またはキメラウイルスから得られる（例えば、例にすぎないが、キメラＲＳＶ／ＰＩＶウイルスは、ＲＳＶとＰＩＶの両成分を含む）。市販品として入手できるムンプスワクチンは、一価の形で、または、麻疹および風疹ワクチンと組み合わせて（ＭＭＲ）、生きている弱毒化ムンプスウイルスを含む。他の実施形態では、パラミクソウイルスは、ＮｉｐａｈｖｉｒｕｓまたはＨｅｎｉｐａｖｉｒｕｓであり、抗原は、以下のタンパク質の１つ以上から選択される：融合（Ｆ）タンパク質、糖タンパク質（Ｇ）タンパク質、基質（Ｍ）タンパク質、ヌクレオカプシド（Ｎ）タンパク質、巨大（Ｌ）タンパク質、およびホスホタンパク質（Ｐ）。
【０２２９】
Ｐｏｘｖｉｒｉｄａｅ：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、Ｖａｒｉｏｌａ  ｍａｊｏｒおよびＶａｒｉｏｌａ  ｍｉｎｏｒ（それだけには限らないが）を含めた、Ｖａｒｉｏｌａ  ｖｅｒａなどのオルトポックスウイルスから得られるものが挙げられる。
【０２３０】
メタニューモウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、ヒトメタニューモウイルス（ｈＭＰＶ）およびトリメタニューモウイルス（ａＭＰＶ）などのメタニューモウイルスが挙げられる。ある種の実施形態では、メタニューモウイルス抗原は、以下、表面タンパク質融合体（Ｆ）、糖タンパク質（Ｇ）および低分子疎水性タンパク質（ＳＨ）、基質タンパク質ＭおよびＭ２、ヌクレオカプシドタンパク質Ｎ、Ｐ、およびＬを含めたタンパク質の１つ以上から選択される。他の実施形態では、メタニューモウイルス抗原としては、Ｆ、Ｇ、およびＭが挙げられる。ある種の実施形態では、メタニューモウイルス抗原はまた、キメラウイルスに処方されるか、またはキメラウイルスから得られる。
【０２３１】
モルビリウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、麻疹などのモルビリウイルスから得られるものが挙げられる。ある種の実施形態では、モルビリウイルス抗原は、１種以上の以下のタンパク質から選択される：赤血球凝集素（Ｈ）、糖タンパク質（Ｇ）、融合因子（Ｆ）、巨大タンパク質（Ｌ）、核タンパク質（ＮＰ）、ポリメラーゼホスホタンパク質（Ｐ）、および基質（Ｍ）。市販品として入手できる麻疹ワクチンは、一般的にムンプスおよび風疹と組み合わせた（ＭＭＲ）、生きている弱毒化麻疹ウイルスを含む。
【０２３２】
ピコルナウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、エンテロウイルス、ライノウイルス、Ｈｅｐａｒｎａｖｉｒｕｓ、カルジオウイルス、およびアフトウイルスなどのピコルナウイルスから得られるものが挙げられる。ある種の実施形態では、抗原は、エンテロウイルスから得られるのに対して、他の実施形態では、エンテロウイルスはポリオウイルスである。さらに他の実施形態では、抗原は、ライノウイルスから得られる。ある種の実施形態では、抗原は、ウイルス様粒子（ＶＬＰ）に処方される。
【０２３３】
エンテロウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、ポリオウイルス１、２、または３型、コクサッキーＡウイルス１から２２および２４型、コクサッキーＢウイルス１から６型、エコーウイルス（ＥＣＨＯ）ウイルス１から９、１１から２７、および２９から３４型、およびエンテロウイルス６８から７１などのエンテロウイルスから得られるものが挙げられる。ある種の実施形態では、抗原が、エンテロウイルスから得られるのに対して、他の実施形態では、エンテロウイルスは、ポリオウイルスである。ある種の実施形態では、エンテロウイルス抗原は、１種以上の以下のキャプシドタンパク質ＶＰ０、ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３、およびＶＰ４から選択される。市販品として入手できるポリオワクチンとしては、不活化されたポリオワクチン（ＩＰＶ）および経口ポリオウイルスワクチン（ＯＰＶ）が挙げられる。ある種の実施形態では、抗原は、ウイルス様粒子に処方される。
【０２３４】
ブンヤウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、カリフォルニア脳炎ウイルス、フレボウイルス（リフトバレー熱ウイルスなど）、またはナイロウイルス（クリミア−コンゴ出血熱ウイルスなど）などのオルトブンヤウイルスから得られるものが挙げられる。
【０２３５】
ライノウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、ライノウイルスから得られるものが挙げられる。ある種の実施形態では、ライノウイルス抗原は、１種以上の以下のキャプシドタンパク質：ＶＰ０、ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ２、およびＶＰ４から選択される。ある種の実施形態では、抗原は、ウイルス様粒子（ＶＬＰ）に処方される。
【０２３６】
Ｈｅｐａｒｎａｖｉｒｕｓ：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、例にすぎないがＡ型肝炎ウイルス（ＨＡＶ）などのＨｅｐａｒｎａｖｉｒｕｓから得られるものが挙げられる。市販品として入手できるＨＡＶワクチンとしては、不活化されたＨＡＶワクチンが挙げられる。
【０２３７】
トガウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、ルビウイルス、アルファウイルス、またはアルテリウイルスなどのトガウイルスから得られるものが挙げられる。ある種の実施形態では、抗原は、例にすぎないが風疹ウイルスなどのルビウイルスから得られる。ある種の実施形態では、トガウイルス抗原は、Ｅ１、Ｅ２、Ｅ３、Ｃ、ＮＳＰ−１、ＮＳＰＯ−２、ＮＳＰ−３、またはＮＳＰ−４から選択される。ある種の実施形態は、トガウイルス抗原は、Ｅ１、Ｅ２、またはＥ３から選択される。市販品として入手できる風疹ワクチンとしては、一般的にムンプスおよび麻疹ワクチンと組み合わせた（ＭＭＲ）、生きている低温適合型ウイルスが挙げられる。
【０２３８】
フラビウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、ダニ媒介脳炎（ＴＢＥ）ウイルス、デング熱（１、２、４、または４型）ウイルス、黄熱ウイルス、日本脳炎ウイルス、キャサヌール森林病ウイルス、ウエストナイル脳炎ウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、ロシア春夏脳炎ウイルス、ポワッサン脳炎ウイルスなどのフラビウイルスから得られるものが挙げられる。ある種の実施形態では、フラビウイルス抗原は、ＰｒＭ、Ｍ、Ｃ、Ｅ、ＮＳ−１、ＮＳ−２ａ、ＮＳ２ｂ、ＮＳ３、ＮＳ４ａ、ＮＳ４ｂ、およびＮＳ５から選択される。ある種の実施形態では、フラビウイルス抗原は、ＰｒＭ、Ｍ、およびＥから選択される。市販品として入手できるＴＢＥワクチンとしては、不活化されたウイルスワクチンが挙げられる。ある種の実施形態では、抗原は、ウイルス様粒子（ＶＬＰ）に処方される。
【０２３９】
ペスチウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、ウシウイルス性下痢（ＢＶＤＶ）、ブタコレラ（ＣＳＦＶ）、またはボーダー病（ＢＤＶ）などのペスチウイルスから得られるものが挙げられる。
【０２４０】
ヘパドナウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、Ｂ型肝炎ウイルスなどのヘパドナウイルスから得られるものが挙げられる。ある種の実施形態では、ヘパドナウイルス抗原は、表面抗原（Ｌ、Ｍ、およびＳ）、コア抗原（ＨＢｃ、ＨＢｅ）から選択される。市販品として入手できるＨＢＶワクチンとしては、表面抗原Ｓタンパク質を含むサブユニットワクチンが挙げられる。
【０２４１】
Ｃ型肝炎ウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）から得られるものが挙げられる。ある種の実施形態では、ＨＣＶ抗原は、１種以上のＥ１、Ｅ２、Ｅ１／Ｅ２、ＮＳ３４５ポリタンパク質、ＮＳ３４５−コアポリタンパク質、コア、および／または非構造領域からのペプチドから選択される。ある種の実施形態では、Ｃ型肝炎ウイルス抗原としては、１種以上の以下のものが挙げられる：ＨＣＶ  Ｅ１およびまたはＥ２タンパク質、Ｅ１／Ｅ２ヘテロ二量体複合体、コアタンパク質および非構造タンパク質、またはこれらの抗原のフラグメント。ここでは、非構造タンパク質は、免疫原性を保持しながら酵素活性を除去するために必要に応じて修飾することができる。ある種の実施形態では、抗原は、ウイルス様粒子（ＶＬＰ）に処方される。
【０２４２】
ラブドウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、リッサウイルス（狂犬病ウイルス）およびベシクロウイルス（ＶＳＶ）などのラブドウイルスから得られるものが挙げられる。ラブドウイルス抗原は、糖タンパク質（Ｇ）、核タンパク質（Ｎ）、巨大タンパク質（Ｌ）、非構造タンパク質（ＮＳ）から選択することができる。市販品として入手できる狂犬病ウイルスワクチンとしては、ヒトの二倍体細胞またはアカゲザル胎仔肺細胞上で増殖させた、死滅させたウイルスを含む。
【０２４３】
カリシウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、ノーウォークウイルス、およびノーウォーク様ウイルス（ハワイウイルスおよびスノーマウンテンウイルスなど）などのカリシウイルス（Ｃａｌｃｉｖｉｒｉｄａｅ）から得られるものが挙げられる。ある種の実施形態では、抗原は、ウイルス様粒子（ＶＬＰ）に処方される。
【０２４４】
コロナウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、コロナウイルス、ＳＡＲＳ、ヒトの呼吸器コロナウイルス、トリ伝染性気管支炎（ＩＢＶ）、マウス肝炎ウイルス（ＭＨＶ）、およびブタ伝染性胃腸炎ウイルス（ＴＧＥＶ）から得られるものが挙げられる。ある種の実施形態では、コロナウイルス抗原は、スパイク（Ｓ）、エンベロープ（Ｅ）、基質（Ｍ）、ヌクレオカプシド（Ｎ）、および赤血球凝集素−エステラーゼ糖タンパク質（ＨＥ）から選択される。ある種の実施形態では、コロナウイルス抗原は、ＳＡＲＳウイルスから得られる。ある種の実施形態では、コロナウイルスは、ＷＯ０４／９２３６０号に記載されている通りのＳＡＲＳウイルス性抗原から得られる。
【０２４５】
レトロウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、オンコウイルス、レンチウイルス、またはスプマウイルスなどのレトロウイルスから得られるものが挙げられる。ある種の実施形態では、オンコウイルス抗原は、ＨＴＬＶ−１、ＨＴＬＶ−２、またはＨＴＬＶ−５から得られる。ある種の実施形態では、レンチウイルス抗原は、ＨＩＶ−１またはＨＩＶ−２から得られる。ある種の実施形態では、抗原は、それだけには限らないがＨＩＶ−１亜型（またはクレード）Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｊ、Ｋ、Ｏを含めた、ＨＩＶ−１亜型（またはクレード）から得られる。他の実施形態では、抗原は、それだけには限らないが、Ａ／Ｂ、Ａ／Ｅ、Ａ／Ｇ、Ａ／Ｇ／Ｉなどを含めた、ＨＩＶ−１循環組み換え型（ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ｆｏｒｍ）（ＣＲＦ）から得られる。ある種の実施形態では、レトロウイルス抗原は、ｇａｇ、ｐｏｌ、ｅｎｖ、ｔａｘ、ｔａｔ、ｒｅｘ、ｒｅｖ、ｎｅｆ、ｖｉｆ、ｖｐｕ、およびｖｐｒから選択される。ある種の実施形態では、ＨＩＶ抗原は、ｇａｇ（ｐ２４ｇａｇおよびｐ５５ｇａｇ）、ｅｎｖ（ｇｐ１６０およびｇｐ４１）、ｐｏｌ、ｔａｔ、ｎｅｆ、ｒｅｖ  ｖｐｕ、ミニタンパク質（好ましくはｐ５５ｇａｇおよびｇｐ１４０ｖ欠失）から選択される。ある種の実施形態では、ＨＩＶ抗原は、１種以上の次の系統：ＨＩＶＩＩＩｂ、ＨＩＶＳＦ２、ＨＩＶＬＡＶ、ＨＩＶＬＡＩ、ＨＩＶＭＮ、ＨＩＶ−１ＣＭ２３５、ＨＩＶ−１ＵＳ４、ＨＩＶ−１ＳＦ１６２、ＨＩＶ−１ＴＶ１、ＨＩＶ−１ＭＪ４から得られる。ある種の実施形態では、抗原は、それだけには限らないが、ＨＥＲＶ−Ｋ（「古い」ＨＥＲＶ−Ｋおよび「新しい」ＨＥＲＶ−Ｋ）を含めた、ヒト内在性レトロウイルスから得られる。
【０２４６】
レオウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、オルトレオウイルス、ロタウイルス、オルビウイルス、またはコルチウイルスなどのレオウイルスから得られるものが挙げられる。ある種の実施形態では、レオウイルス抗原は、構造タンパク質λ１、λ２、λ３、μ１、μ２、σ１、σ２、もしくはσ３、または非構造タンパク質σＮＳ、μＮＳ、もしくはσ１ｓから選択される。ある種の実施形態では、レオウイルス抗原は、ロタウイルスから得られる。ある種の実施形態では、ロタウイルス抗原は、ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３、ＶＰ４（またはＶＰ５およびＶＰ８切断産物）、ＮＳＰ１、ＶＰ６、ＮＳＰ３、ＮＳＰ２、ＶＰ７、ＮＳＰ４、またはＮＳＰ５から選択される。ある種の実施形態では、ロタウイルス抗原としては、ＶＰ４（またはＶＰ５およびＶＰ８切断産物）、およびＶＰ７が挙げられる。
【０２４７】
パルボウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、パルボウイルスＢ１９などのパルボウイルスから得られるものが挙げられる。ある種の実施形態では、パルボウイルス抗原は、ＶＰ−１、ＶＰ−２、ＶＰ−３、ＮＳ−１、およびＮＳ−２から選択される。ある種の実施形態では、パルボウイルス抗原は、キャプシドタンパク質ＶＰ１またはＶＰ−２である。ある種の実施形態では、抗原は、ウイルス様粒子（ＶＬＰ）に処方される。
【０２４８】
デルタ肝炎ウイルス（ＨＤＶ）：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、ＨＤＶから得られるもの、特にＨＤＶ由来のδ抗原が挙げられる。
【０２４９】
Ｅ型肝炎ウイルス（ＨＥＶ）：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、ＨＥＶから得られるものが挙げられる。
【０２５０】
Ｇ型肝炎ウイルス（ＨＧＶ）：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、ＨＧＶから得られるものが挙げられる。
【０２５１】
ヒトヘルペスウイルス：ウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、例にすぎないが単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、水痘−帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、エプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、ヒトヘルペスウイルス６（ＨＨＶ６）、ヒトヘルペスウイルス７（ＨＨＶ７）、およびヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）などの、ヒトヘルペスウイルスから得られるものが挙げられる。ある種の実施形態では、ヒトヘルペスウイルス抗原は、前初期タンパク質（α）、初期タンパク質（β）、および後期タンパク質（γ）から選択される。ある種の実施形態では、ＨＳＶ抗原は、ＨＳＶ−１またはＨＳＶ−２系統から得られる。ある種の実施形態では、ＨＳＶ抗原は、糖タンパク質ｇＢ、ｇＣ、ｇＤ、およびｇＨ、融合タンパク質（ｇＢ）、または免疫回避タンパク質（ｇＣ、ｇＥ、またはｇＩ）から選択される。ある種の実施形態では、ＶＺＶ抗原は、コア、ヌクレオカプシド、テグメント、またはエンベロープタンパク質から選択される。生きている弱毒化ＶＺＶワクチンが、市販品として入手できる。ある種の実施形態では、ＥＢＶ抗原は、初期抗原（ＥＡ）タンパク質、ウイルス性キャプシド抗原（ＶＣＡ）、および膜抗原（ＭＡ）糖タンパク質から選択される。ある種の実施形態では、ＣＭＶ抗原は、キャプシドタンパク質、エンベロープ糖タンパク質（ｇＢおよびｇＨなど）、およびテグメントタンパク質から選択される。他の実施形態では、ＣＭＶ抗原は、１種以上の次のタンパク質から選択することができる：ｐｐ６５、ＩＥ１、ｇＢ、ｇＤ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１２９、ｇＵＬ１３０、ＵＬ１５０、ＵＬ１３１、ＵＬ３３、ＵＬ７８、ＵＳ２７、ＵＳ２８、ＲＬ５Ａ、ＲＬ６、ＲＬ１０、ＲＬ１１、ＲＬ１２、ＲＬ１３、ＵＬ１、ＵＬ２、ＵＬ４、ＵＬ５、ＵＬ６、ＵＬ７、ＵＬ８、ＵＬ９、ＵＬ１０、ＵＬ１１、ＵＬ１４、ＵＬ１５Ａ、ＵＬ１６、ＵＬ１７、ＵＬ１８、ＵＬ２２Ａ、ＵＬ３８、ＵＬ４０、ＵＬ４１Ａ、ＵＬ４２、ＵＬ１１６、ＵＬ１１９、ＵＬ１２０、ＵＬ１２１、ＵＬ１２４、ＵＬ１３２、ＵＬ１４７Ａ、ＵＬ１４８、ＵＬ１４２、ＵＬ１４４、ＵＬ１４１、ＵＬ１４０、ＵＬ１３５、ＵＬ１３６、ＵＬ１３８、ＵＬ１３９、ＵＬ１３３、ＵＬ１３５、ＵＬ１４８Ａ、ＵＬ１４８Ｂ、ＵＬ１４８Ｃ、ＵＬ１４８Ｄ、ＵＳ２、ＵＳ３、ＵＳ６、ＵＳ７、ＵＳ８、ＵＳ９、ＵＳ１０、ＵＳ１１、ＵＳ１２、ＵＳ１３、ＵＳ１４、ＵＳ１５、ＵＳ１６、ＵＳ１７、ＵＳ１８、ＵＳ１９、ＵＳ２０、ＵＳ２１、ＵＳ２９、ＵＳ３０、およびＵＳ３４Ａ。ＣＭＶ抗原はまた、例にすぎないがｐｐ６５／ＩＥ１などの、１つ以上のＣＭＶタンパク質の融合体であり得る（Ｒｅａｐら、「Ｖａｃｃｉｎｅ」（２００７）２５：７４４１〜７４４９）。ある種の実施形態では、抗原は、ウイルス様粒子（ＶＬＰ）に処方される。
【０２５２】
パポーバウイルス：抗原としては、それだけには限らないが、パピローマウイルスおよびポリオーマウイルスなどのパポーバウイルスから得られるものが挙げられる。ある種の実施形態では、パピローマウイルスとしては、ＨＰＶ血清型１、２、４、５、６、８、１１、１３、１６、１８、３１、３３、３５、３９、４１、４２、４７、５１、５７、５８、６３、および６５が挙げられる。ある種の実施形態では、ＨＰＶ抗原は、血清型６、１１、１６、または１８から得られる。ある種の実施形態では、ＨＰＶ抗原は、キャプシドタンパク質（Ｌ１）および（Ｌ２）、もしくはＥ１〜Ｅ７、またはそれらの融合体から選択される。ある種の実施形態では、ＨＰＶ抗原は、ウイルス様粒子（ＶＬＰ）に処方される。ある種の実施形態では、ポリオーマウイルス（Ｐｏｌｙｏｍｙａｖｉｒｕｓ）としては、ＢＫウイルスおよびＪＫウイルスが挙げられる。ある種の実施形態では、ポリオーマウイルス抗原は、ＶＰ１、ＶＰ２、またはＶＰ３から選択される。
【０２５３】
アデノウイルス：抗原としては、アデノウイルスから得られるものが挙げられる。ある種の実施形態では、アデノウイルス抗原は、アデノウイルス血清型３６（Ａｄ−３６）から得られる。ある種の実施形態では、抗原は、Ａｄ−３６コートタンパク質をコードするタンパク質またはペプチド配列あるいはそのフラグメントから得られる（ＷＯ２００７／１２０３６２号）。
【０２５４】
さらに提供されるのは、「Ｖａｃｃｉｎｅｓ」、第４版（ＰｌｏｔｋｉｎおよびＯｒｅｎｓｔｅｉｎ編  ２００４）；「Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ」第４版（Ｍｕｒｒａｙら編  ２００２）；「Ｖｉｒｏｌｏｇｙ」、第３版（Ｗ．Ｋ．Ｊｏｋｌｉｋ編  １９８８）；「Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｖｉｒｏｌｏｇｙ」、第２版（Ｂ．Ｎ．ＦｉｅｌｄｓおよびＤ．Ｍ．Ｋｎｉｐｅ編  １９９１）に挙げられる抗原、組成物、方法、および微生物であり、これらは、本明細書に提供される免疫原性組成物と組み合わせることが意図される。
【０２５５】
（真菌抗原）
本明細書に提供される免疫原性組成物に使用するための真菌抗原としては、それだけには限らないが、以下に記述される１種以上の真菌から得られるものが挙げられる。
【０２５６】
真菌抗原は、
【０２５７】
【化５】
2013514382.tif 000006
を含めたＤｅｒｍａｔｏｐｈｙｔｒｅｓから得られる。
【０２５８】
また、真菌病原体は、
【０２５９】
【化６】
2013514382.tif 000007
から得られ、あまり一般的でないものは、
【０２６０】
【化７】
2013514382.tif 000008
である。
【０２６１】
ある種の実施形態では、真菌抗原を産生するプロセスは、細胞壁が実質的に除去されたかまたは少なくとも部分的に除去された真菌細胞から得られる不溶性画分から、可溶化された画分が抽出および分離される方法を含み、該プロセスは、以下のステップを含むことを特徴とする：生きている真菌細胞を得るステップと；細胞壁が実質的に除去されたかまたは少なくとも部分的に除去された真菌細胞を得るステップと；細胞壁が実質的に除去されたかまたは少なくとも部分的に除去された該真菌細胞を破裂させるステップと；不溶性画分を得るステップと；該不溶性画分から可溶化された画分を抽出および分離するステップ。
【０２６２】
（原生動物（ｐｒｏｔａｚｏａｎ）抗原／病原体）
本明細書に提供される免疫原性組成物に使用するための原生動物（ｐｒｏｔａｚｏａｎ）抗原／病原体としては、それだけには限らないが、１種以上の次の原生動物：Ｅｎｔａｍｏｅｂａ  ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ、Ｇｉａｒｄｉａ  ｌａｍｂｌｉ、Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ  ｐａｒｖｕｍ、Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒａ  ｃａｙａｔａｎｅｎｓｉｓ、およびトキソプラズマから得られるものが挙げられる。
【０２６３】
（植物抗原／病原体）
本明細書に提供される免疫原性組成物に使用するための植物抗原／病原体としては、それだけには限らないが、Ｒｉｃｉｎｕｓ  ｃｏｍｍｕｎｉｓから得られるものが挙げられる。
【０２６４】
（ＳＴＤ抗原）
ある種の実施形態では、本明細書に提供される免疫原性組成物は、性行為感染症（ＳＴＤ）から得られる１種以上の抗原を含む。ある種の実施形態では、こうした抗原は、クラミジア、陰部ヘルペス、肝炎（ＨＣＶなど）、陰部疣贅、淋病、梅毒、および／または軟性下疳などのＳＴＤの予防を提供する。他の実施形態では、こうした抗原は、クラミジア、陰部ヘルペス、肝炎（ＨＣＶなあど）、陰部疣贅、淋病、梅毒、および／または軟性下疳などのＳＴＤの治療を提供する。こうした抗原は、１種以上のウイルスまたは細菌性ＳＴＤから得られる。ある種の実施形態では、ウイルス性ＳＴＤ抗原は、ＨＩＶ、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ−１およびＨＳＶ−２）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、および肝炎（ＨＣＶ）から得られる。ある種の実施形態では、細菌性ＳＴＤ抗原は、Ｎｅｉｓｅｒｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｐａｌｌｉｄｕｍ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｄｕｃｒｅｙｉ、大腸菌、およびＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｇａｌａｃｔｉａｅから得られる。こうした病原体から得られる特定の抗原の例は、上に記述済みである。
【０２６５】
（呼吸器系抗原）
ある種の実施形態では、本明細書に提供される免疫原性組成物は、呼吸器疾患を引き起こす病原体から得られる１種以上の抗原を含む。例にすぎないが、こうした呼吸器系抗原は、オルトミクソウイルス（インフルエンザ）、ニューモウイルス（ＲＳＶ）、パラミクソウイルス（ＰＩＶ）、モルビリウイルス（麻疹）、トガウイルス（風疹）、ＶＺＶ、およびコロナウイルス（ＳＡＲＳ）などの呼吸器系ウイルスから得られる。ある種の実施形態では、呼吸器系抗原は、例にすぎないが、肺炎レンサ球菌、緑膿菌、百日咳菌、結核菌、肺炎マイコプラズマ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、炭疽菌、およびＭｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓなどの、呼吸器疾患を引き起こす細菌から得られる。こうした病原体から得られる特定の抗原の例は、上に記述済みである。
【０２６６】
（小児ワクチン抗原）
ある種の実施形態では、本明細書に提供される免疫原性組成物は、小児被験体に使用するのに適した１種以上の抗原を含む。小児被験体は一般的に、約３歳未満、または約２歳未満、または約１歳未満である。小児抗原は、６ヶ月、１年、２年，または３年の期間にわたって、複数回投与される。小児抗原は、小児集団を標的とし得るウイルスおよび／または小児集団が感染しやすいウイルスから得られる。小児のウイルス性抗原としては、それだけには限らないが、１種以上のオルトミクソウイルス（インフルエンザ）、ニューモウイルス（ＲＳＶ）、パラミクソウイルス（ＰＩＶおよびムンプス）、モルビリウイルス（麻疹）、トガウイルス（風疹）、エンテロウイルス（ポリオ）、ＨＢＶ、コロナウイルス（ＳＡＲＳ）、および水痘−帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、エプスタインバーウイルス（ＥＢＶ）から得られる抗原が挙げられる。小児の細菌性抗原としては、１種以上の肺炎レンサ球菌、髄膜炎菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓ）、化膿性レンサ球菌（Ａ群レンサ球菌）、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、百日咳菌、黄色ブドウ球菌、破傷風菌（破傷風）、ジフテリア菌（Ｃｏｒｎｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）（ジフテリア）、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ  Ｂ（Ｈｉｂ）、緑膿菌、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｇａｌａｃｔｉａｅ（Ｂ群レンサ球菌）、および大腸菌から得られる抗原が挙げられる。こうした病原体から得られる特定の抗原の例は、上に記述済みである。
【０２６７】
（高齢者または免疫無防備状態の個体に使用するのに適した抗原）
ある種の実施形態では、本明細書に提供される免疫原性組成物は、高齢者または免疫無防備状態の個体に使用するのに適した１種以上の抗原を含む。こうした個体は、標的化される抗原に対するその免疫応答を向上させるために、より高用量で、またはアジュバント化された処方物で、より頻繁にワクチン接種される必要があり得る。高齢者または免疫無防備状態の個体での使用を標的とした抗原としては、１種以上の次の病原体から得られる抗原が挙げられる：髄膜炎菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓ）、肺炎レンサ球菌、化膿性レンサ球菌（Ａ群レンサ球菌）、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、百日咳菌、黄色ブドウ球菌、表皮ブドウ球菌、破傷風菌（破傷風）、ジフテリア菌（Ｃｏｒｎｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）（ジフテリア）、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ  Ｂ（Ｈｉｂ）、緑膿菌、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｇａｌａｃｔｉａｅ（Ｂ群レンサ球菌）、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、オルトミクソウイルス（インフルエンザ）、ニューモウイルス（ＲＳＶ）、パラミクソウイルス（ＰＩＶおよびムンプス）、モルビリウイルス（麻疹）、トガウイルス（風疹）、エンテロウイルス（ポリオ）、ＨＢＶ、コロナウイルス（ＳＡＲＳ）、水痘−帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、エプスタインバーウイルス（ＥＢＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）。こうした病原体から得られる特定の抗原の例は、上に記述済みである。
【０２６８】
（青年期のワクチンに使用するのに適した抗原）
ある種の実施形態では、本明細書に提供される免疫原性組成物は、青年期被験体に使用するのに適した１種以上の抗原を含む。青年期は、以前に投与された小児抗原の追加免疫の必要がある。青年期に使用するのに適した小児抗原は、上に記述済みである。さらに、青年期は、性行動の開始前に予防または治療的免疫を確実にするために、ＳＴＤ病原体から得られた抗原を受けるターゲットとなる。青年期に使用するのに適したＳＴＤ抗原は、上に記述済みである。
【０２６９】
（腫瘍抗原）
ある種の実施形態では、本明細書に提供される免疫原性組成物と組み合わせて、腫瘍抗原またはがん抗原が使用される。ある種の実施形態では、腫瘍抗原は、ポリペプチド腫瘍抗原または糖タンパク質腫瘍抗原などのペプチド含有腫瘍抗原である。ある種の実施形態では、腫瘍抗原は、糖脂質腫瘍抗原またはガングリオシド腫瘍抗原などの糖含有腫瘍抗原である。ある種の実施形態では、腫瘍抗原は、ポリペプチド含有腫瘍抗原を発現するポリヌクレオチド含有腫瘍抗原、例えば、ＲＮＡベクター構築物またはＤＮＡベクター構築物（プラスミドＤＮＡなど）である。
【０２７０】
本明細書に提供される免疫原性組成物と組み合わせて使用するのに適した腫瘍抗原は、（ａ）ポリペプチド（これは、例えば、８〜２０アミノ酸の範囲の長さであり得るが、この範囲外の長さも一般的である）、リポポリペプチド、および糖タンパク質を含めた、ポリペプチド含有腫瘍抗原、（ｂ）多糖、ムチン、ガングリオシド、糖脂質、および糖タンパク質を含めた、糖含有腫瘍抗原、ならびに（ｃ）抗原性ポリペプチドを発現するポリヌクレオチド、などの非常に様々な分子を包含する。
【０２７１】
ある種の実施形態では、腫瘍抗原は、例えば、（ａ）がん細胞に関連する完全長の分子、（ｂ）欠失、付加、および／または置換部分を伴う分子を含めた、その相同および改変物、ならびに（ｃ）そのフラグメントである。ある種の実施形態では、腫瘍抗原は、組み換え形で提供される。ある種の実施形態では、腫瘍抗原としては、例えば、ＣＤ８＋リンパ球によって認識されるクラスＩ−拘束性抗原（ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ  ａｎｔｉｇｅｎ）、または、ＣＤ４＋リンパ球によって認識されるクラスＩＩ−拘束性抗原が挙げられる。
【０２７２】
ある種の実施形態では、腫瘍抗原としては、それだけには限らないが、以下が挙げられる：（ａ）がん精巣抗原、例えば、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＳＳＸ２、ＳＣＰ１、ならびにＲＡＧＥ、ＢＡＧＥ、ＧＡＧＥ、およびＭＡＧＥファミリーポリペプチド、例えば、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−２、ＭＡＧＥ−３、ＭＡＧＥ−４、ＭＡＧＥ−５、ＭＡＧＥ−６、およびＭＡＧＥ−１２（これらは、例えば、黒色腫、肺、頭頸部、ＮＳＣＬＣ、乳房、消化器、および膀胱腫瘍に対処するために使用することができる）、（ｂ）変異型抗原、例えば、ｐ５３（様々な固形腫瘍、例えば、直腸結腸、肺、頭頸部のがんに関連する）、ｐ２１／Ｒａｓ（例えば、黒色腫、膵臓がん、および直腸結腸がんに関連する）、ＣＤＫ４（例えば黒色腫に関連する）、ＭＵＭ１（例えば黒色腫に関連する）、ｃａｓｐａｓｅ−８（例えば頭頸部がんに関連する）、ＣＩＡ０２０５（例えば膀胱がんに関連する）、ＨＬＡ−Ａ２−Ｒ１７０１、ベータカテニン（例えば黒色腫に関連する）、ＴＣＲ（例えばＴ細胞性非ホジキンリンパ腫に関連する）、ＢＣＲ−ａｂｌ（例えば慢性骨髄性白血病に関連する）、トリオースホスフェートイソメラーゼ、ＫＩＡ０２０５、ＣＤＣ−２７、およびＬＤＬＲ−ＦＵＴ、（ｃ）過剰発現される抗原、例えば、ガレクチン４（例えば直腸結腸がんに関連する）、ガレクチン９（例えばホジキン病に関連する）、プロテイナーゼ３（例えば慢性骨髄性白血病に関連する）、ＷＴ１（例えば様々な白血病に関連する）、炭酸脱水酵素（例えば腎がんに関連する）、アルドラーゼＡ（例えば肺がんに関連する）、ＰＲＡＭＥ（例えば黒色腫に関連する）、ＨＥＲ−２／ｎｅｕ（例えば、乳房、結腸、肺、および卵巣がんに関連する）、アルファ−フェトプロテイン（例えば肝細胞腫に関連する）、ＫＳＡ（例えば直腸結腸がんに関連する）、ガストリン（例えば、膵臓および胃がんに関連する）、テロメラーゼ触媒タンパク質、ＭＵＣ−１（例えば、乳房および卵巣がんに関連する）、Ｇ−２５０（例えば腎細胞癌腫に関連する）、ｐ５３（例えば、乳房、結腸がんに関連する）、および癌胎児抗原（例えば、乳がん、肺がん、および、直腸結腸がんなどの消化管のがんに関連する）、（ｄ）共通抗原（ｓｈａｒｅｄ  ａｎｔｉｇｅｎ）、例えば、黒色腫−メラニン細胞分化抗原、例えば、ＭＡＲＴ−１／ＭｅｌａｎＡ、ｇｐ１００、ＭＣ１Ｒ、メラニン細胞刺激ホルモン受容体、チロシナーゼ、チロシナーゼ関連タンパク質−１／ＴＲＰ１、およびチロシナーゼ関連タンパク質−２／ＴＲＰ２（例えば黒色腫に関連する）、（ｅ）例えば前立腺がんに関連する、ＰＡＰ、ＰＳＡ、ＰＳＭＡ、ＰＳＨ−Ｐ１、ＰＳＭ−Ｐ１、ＰＳＭ−Ｐ２などの、前立腺関連抗原、（ｆ）免疫グロブリンイディオタイプ（例えば骨髄腫およびＢ細胞リンパ腫に関連する）、ならびに（ｇ）（ｉ）シアリルＴｎおよびシアリルＬｅｘ（例えば乳房および直腸結腸がんに関連する）ならびに様々なムチンなどの糖タンパク質（糖タンパク質は、キャリアタンパク質と結合される、例えば、ＭＵＣ−１は、ＫＬＨと結合される）；（ｉｉ）リポポリペプチド（例えば、脂質部分に連結されたＭＵＣ−１）；（ｉｉｉ）多糖（例えば���ｌｏｂｏ  Ｈ合成六糖）（これは、キャリアタンパク質と（例えばＫＬＨと）結合される）；（ｉｖ）ＧＭ２、ＧＭ１２、ＧＤ２、ＧＤ３などのガングリオシド（例えば、脳、肺がん、黒色腫に関連する）（また、これは、キャリアタンパク質と（例えばＫＬＨと）結合される）を含めたポリペプチド−および糖−含有抗原などの、他の腫瘍抗原。
【０２７３】
ある種の実施形態では、腫瘍抗原としては、それだけには限らないが、以下が挙げられる：ｐ１５、Ｈｏｍ／Ｍｅｌ−４０、Ｈ−Ｒａｓ、Ｅ２Ａ−ＰＲＬ、Ｈ４−ＲＥＴ、ＩＧＨ−ＩＧＫ、ＭＹＬ−ＲＡＲ、エプスタインバーウイルス抗原、ＥＢＮＡ、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）抗原（Ｅ６およびＥ７を含めて）、Ｂ型およびＣ型肝炎ウイルス抗原、ヒトＴ細胞白血病ウイルス抗原、ＴＳＰ−１８０、ｐ１８５ｅｒｂＢ２、ｐ１８０ｅｒｂＢ−３、ｃ−ｍｅｔ、ｍｎ−２３Ｈ１、ＴＡＧ−７２−４、ＣＡ１９−９、ＣＡ７２−４、ＣＡＭ１７．１、ＮｕＭａ、Ｋ−ｒａｓ、ｐ１６、ＴＡＧＥ、ＰＳＣＡ、ＣＴ７、４３−９Ｆ、５Ｔ４、７９１  Ｔｇｐ７２、ベータ−ＨＣＧ、ＢＣＡ２２５、ＢＴＡＡ、ＣＡ１２５、ＣＡ１５−３（ＣＡ２７．２９＼ＢＣＡＡ）、ＣＡ１９５、ＣＡ２４２、ＣＡ−５０、ＣＡＭ４３、ＣＤ６８＼ＫＰ１、ＣＯ−０２９、ＦＧＦ−５、Ｇａ７３３（ＥｐＣＡＭ）、ＨＴｇｐ−１７５、Ｍ３４４、ＭＡ−５０、ＭＧ７−Ａｇ、ＭＯＶ１８、ＮＢ／７０Ｋ、ＮＹ−ＣＯ−１、ＲＣＡＳ１、ＳＤＣＣＡＧ１６、ＴＡ−９０（Ｍａｃ−２結合タンパク質＼サイクロフィリンＣ関連タンパク質）、ＴＡＡＬ６、ＴＡＧ７２、ＴＬＰ、ＴＰＳ、など。
【０２７４】
本明細書に提供される免疫原性組成物と組み合わせて使用されるポリヌクレオチド含有抗原としては、上に列挙したものなどのポリペプチドがん抗原をコードするポリヌクレオチドが挙げられる。ある種の実施形態では、ポリヌクレオチド含有抗原としては、それだけには限らないが、インビボでポリペプチドがん抗原を発現する能力がある、プラスミドベクター（例えばｐＣＭＶ）などのＤＮＡまたはＲＮＡベクター構築物が挙げられる。
【０２７５】
ある種の実施形態では、腫瘍抗原は、変異または改変された細胞成分から得られる。改変後、細胞成分は、もはやその調節機能を果たすことはなく、細胞は、制御されない増殖を経験する可能性がある。改変された細胞成分の典型的な例としては、それだけには限らないが、ｒａｓ、ｐ５３、Ｒｂ、ウィルムス腫瘍遺伝子によってコードされる改変されたタンパク質、ユビキチン、ムチン、ＤＣＣ、ＡＰＣ、およびＭＣＣ遺伝子によってコードされるタンパク質、ならびに、ｎｅｕ、甲状腺ホルモン受容体、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）受容体、インスリン受容体、上皮成長因子（ＥＧＦ）受容体、およびコロニー刺激因子（ＣＳＦ）受容体などの受容体または受容体様構造が挙げられる。
【０２７６】
さらに、細菌性およびウイルス性抗原は、がんの処置のために本明細書で提供される免疫原性組成物と組み合わせて使用される。ある種の実施形態において、ＣＲＭ１９７、破傷風トキソイド、またはＳａｌｍｏｎｅｌｌａ  Ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ抗原などのキャリアタンパク質を、がんの処置のために本明細書で提供される化合物と組み合わせて／結合させて使用する。がん抗原の組み合わせ療法は、既存の治療法と比較すると、効力およびバイオアベイラビリティの増大を示す。
【０２７７】
ある種の実施形態では、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物を含む免疫原性組成物は、髄膜炎菌の血清群Ａ、Ｃ、Ｗ１３５、およびＹのうちの少なくとも２種由来の莢膜糖を含む。他の実施形態では、こうしたワクチンは、１種以上の以下：（ａ）血清群Ｂ髄膜炎菌、（ｂ）Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅＢ型、および／または（ｃ）肺炎レンサ球菌由来の抗原をさらに含む。
【０２７８】
ある種の実施形態では、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物を含む免疫原性組成物は、髄膜炎菌（Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓ）の血清群Ｃ、Ｗ１３５、およびＹを含む。ある種の実施形態では、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物を含む免疫原性組成物は、髄膜炎菌の血清群Ａ、Ｃ、Ｗ１３５、およびＹを含む。ある種の実施形態では、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物を含む免疫原性組成物は、髄膜炎菌の血清群Ｂ、Ｃ、Ｗ１３５、およびＹを含む。ある種の実施形態では、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物を含む免疫原性組成物は、髄膜炎菌の血清群Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｗ１３５、およびＹを含む。ある種の実施形態では、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物を含む免疫原性組成物は、Ｈ．ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅＢ型および髄膜炎菌の血清群Ｃ、Ｗ１３５、およびＹを含む。ある種の実施形態では、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物を含む免疫原性組成物は、Ｈ．ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅＢ型および髄膜炎菌の血清群Ａ、Ｃ、Ｗ１３５、およびＹを含む。ある種の実施形態では、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物を含む免疫原性組成物は、Ｈ．ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅＢ型および髄膜炎菌の血清群Ｂ、Ｃ、Ｗ１３５、およびＹを含む。ある種の実施形態では、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物を含む免疫原性組成物は、Ｈ．ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅＢ型および髄膜炎菌の血清群Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｗ１３５、およびＹを含む。ある種の実施形態では、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物を含む免疫原性組成物は、肺炎レンサ球菌および髄膜炎菌の血清群Ｃ、Ｗ１３５、およびＹを含む。ある種の実施形態では、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物を含む免疫原性組成物は、肺炎レンサ球菌および髄膜炎菌の血清群Ａ、Ｃ、Ｗ１３５、およびＹを含む。ある種の実施形態では、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物を含む免疫原性組成物は、肺炎レンサ球菌および髄膜炎菌の血清群Ｂ、Ｃ、Ｗ１３５、およびＹを含む。ある種の実施形態では、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物を含む免疫原性組成物は、肺炎レンサ球菌および髄膜炎菌の血清群Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｗ１３５、およびＹを含む。ある種の実施形態では、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物を含む免疫原性組成物は、Ｈ．ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅＢ型、肺炎レンサ球菌、および髄膜炎菌の血清群Ｃ、Ｗ１３５、およびＹを含む。ある種の実施形態では、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物を含む免疫原性組成物は、Ｈ．ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅＢ型、肺炎レンサ球菌、および髄膜炎菌の血清群Ａ、Ｃ、Ｗ１３５、およびＹを含む。ある種の実施形態では、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物を含む免疫原性組成物は、Ｈ．ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅＢ型、肺炎レンサ球菌、および髄膜炎菌の血清群Ｂ、Ｃ、Ｗ１３５、およびＹを含む。ある種の実施形態では、少なくとも１種の式（Ｉ）の化合物を含む免疫原性組成物は、Ｈ．ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅＢ型、肺炎レンサ球菌、および髄膜炎菌の血清群Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｗ１３５、およびＹを含む。
【０２７９】
５．薬学的組成物および投与
別の態様では、本発明は、ＳＭＩＰの均一懸濁物を含む薬学的組成物を提供し、１種以上の薬学的に許容されるキャリア、希釈剤、または賦形剤をさらに含むことができる。
【０２８０】
本明細書に提供した薬学的組成物を、単独または１種以上のさらなる治療薬と組み合わせて投与することができる。投与方法としては、それだけに限らないが、経口投与、直腸投与、非経口、静脈内投与、硝子体内投与、筋肉内投与、吸入、鼻腔内投与、局所投与、眼投与、または耳投与が挙げられる。
【０２８１】
ＳＭＩＰの治療有効量は、中でも特に、示された疾患、疾患の重症度、被験体の年齢および相対的健康状態、投与される化合物の効力（ｐｏｔｅｎｃｙ）、投与様式、および所望の処置に応じて変化する。
【０２８２】
他の実施形態では、本明細書に記載の均一懸濁物、本明細書に記載の免疫原性組成物、またはその薬学的組成物を、１種以上のさらなる治療薬と組み合わせて投与する。さらなる治療薬としては、それだけに限らないが、抗生物質または抗菌薬、制吐剤、抗真菌薬、抗炎症薬、抗ウイルス薬、免疫修飾剤（ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ  ａｇｅｎｔ）、サイトカイン、抗鬱薬、ホルモン、アルキル化剤、代謝拮抗物質、抗腫瘍抗生物質、有糸分裂阻害剤、トポイソメラーゼインヒビター、細胞増殖抑制薬、抗浸潤薬（ａｎｔｉ−ｉｎｖａｔｉｏｎ  ａｇｅｎｔ）、抗血管新生薬、成長因子機能のインヒビター、ウイルス複製のインヒビター、ウイルス酵素インヒビター、抗癌剤、α−インターフェロン、β−インターフェロン、リバビリン、ホルモン、および他のＴｏｌｌ様受容体調節因子、免疫グロブリン（Ｉｇ）、およびＩｇ機能を調整する抗体（抗ＩｇＥ（オマリズマブ）など）を挙げることができる。
【０２８３】
ある種の実施形態では、本明細書に提供した薬学的組成物を、感染症（それだけに限らないが、ウイルス疾患（陰部疣贅、尋常性疣贅、足底疣贅、ＲＳウイルス（ＲＳＶ）、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、デングウイルス、単純ヘルペスウイルス（ほんの一例として、ＨＳＶ−Ｉ、ＨＳＶ−ＩＩ、ＣＭＶ、またはＶＺＶ）、伝染性軟属腫、ワクシニア、痘瘡、レンチウイルス、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、ライノウイルス、エンテロウイルス、アデノウイルス、コロナウイルス（例えば、ＳＡＲＳ）、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ムンプスウイルス、麻疹ウイルス、パポーバウイルス、ヘパドナウイルス、フラビウイルス、レトロウイルス、アレナウイルス（ほんの一例として、ＬＣＭ、フニンウイルス、マチュポウイルス、グアナリトウイルス、およびラッサ熱）、およびフィロウイルス（ほんの一例として、エボラウイルス、またはマールブルグウイルス）など）が挙げられる）の処置で使用する。
【０２８４】
ある種の実施形態では、本明細書に提供した薬学的組成物を、細菌、真菌、および原生動物の感染症（それだけに限らないが、結核およびｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ、癩病；ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｃａｒｎｉｉ、クリプトスポリジウム症、ヒストプラスマ症、トキソプラズマ症、トリパノソーマ感染症、リーシュマニア症、属である、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｐｒｏｔｅｕｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、およびＣｈｌａｍｙｄｉａの細菌に原因する感染症、および真菌感染症（カンジダ症、アスペルギルス症、ヒストプラスマ症、クリプトコッカス髄膜炎など）が挙げられる）の処置で使用する。
【０２８５】
ある種の実施形態では、本明細書に提供した免疫原性組成物（ｃｏｍｐｏｓｏｔｉｏｎ）を、呼吸器疾患および／または障害、皮膚科障害、眼疾患および／または障害、尿生殖器疾患および／または障害（同種移植片拒絶、自己免疫およびアレルギー、癌、または損傷または老化した皮膚（瘢痕および皺など）が挙げられる）の処置で使用する。
【０２８６】
別の態様では、本発明は、有効量の本明細書に開示の免疫原性組成物を投与する工程を含む、それを必要とする被験体（哺乳動物など）において免疫応答を引き起こすための方法を提供する。免疫応答は、好ましくは予防的であり、好ましくは抗体および／または細胞媒介免疫を含む。本方法は、追加免疫応答を惹起することができる。
【０２８７】
他の態様では、本明細書に提供した均一懸濁物および／または免疫原性組成物を使用して、例えば、細菌、真菌、および原生動物の感染症（それだけに限らないが、髄膜炎菌血症（ｍｅｎｅｉｎｇｏｃｏｃｃｅｍｉａ）、髄膜炎、髄膜炎菌性肺炎（ｍｅｎｉｎｇｏｃｏｃｃａｌ  ｐｈｅｕｍｏｎｉａ）、髄膜炎菌性心外膜炎、髄膜炎菌性心筋炎、髄膜炎菌性咽頭炎、髄膜炎菌性結膜炎、髄膜炎菌性骨髄炎、髄膜炎菌性眼内炎、髄膜炎菌性尿道炎、髄膜炎菌感染、結核、およびｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ、癩病；ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｃａｒｎｉｉ、クリプトスポリジウム症、ヒストプラスマ症、トキソプラズマ症、トリパノソーマ感染症、リーシュマニア症、属である、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｐｒｏｔｅｕｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、およびＣｈｌａｍｙｄｉａの細菌に原因する感染、および真菌感染（カンジダ症、アスペルギルス症、ヒストプラスマ症、クリプトコッカス髄膜炎など）が挙げられる）の処置における免疫応答を誘導または強化する。
【０２８８】
ある種の実施形態では、本明細書に提供した均一懸濁物および／または免疫原性組成物を使用して、例えば、呼吸器疾患および／または障害（例えば、ＲＳＶ）、髄膜炎菌性疾患（例えば、髄膜炎菌血症（ｍｅｎｅｉｎｇｏｃｏｃｃｅｍｉａ）、髄膜炎、髄膜炎菌性肺炎（ｍｅｎｉｎｇｏｃｏｃｃａｌ  ｐｈｅｕｍｏｎｉａ）、髄膜炎菌性心外膜炎、髄膜炎菌性心筋炎、髄膜炎菌性咽頭炎、髄膜炎菌性結膜炎、髄膜炎菌性骨髄炎、髄膜炎菌性眼内炎、髄膜炎菌性尿道炎）、皮膚科障害、眼疾患および／または障害、尿生殖器疾患および／または障害（同種移植片拒絶、自己免疫およびアレルギー、癌、または損傷または老化した皮膚（瘢痕および皺など）が挙げられる）の処置における免疫応答を誘導または強化する。
【０２８９】
いくつかの好ましい実施形態では、本明細書に提供した均一懸濁物および／または免疫原性組成物を使用して、免疫応答（例えば、ＲＳＶ、エボラ、または髄膜炎菌に対する防御免疫応答）を誘導または強化する。
【０２９０】
いくつかの実施形態では、本発明は、有効量の本明細書に記載の免疫原性組成物または均一懸濁物を、それを必要とする被験体に投与する工程を含む、免疫応答を引き起こすか強化するための方法を提供する。免疫応答（ｉｍｍｕｎｕｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ）は、天然に存在する免疫応答または誘導された免疫応答（例えば、免疫による誘導）であり得る。
【０２９１】
式ＩおよびＩＩのベンゾナフチリジン化合物の均一懸濁物を、誘導された免疫応答（ｉｍｍｕｎｕｅ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ）を強化するために投与する場合，免疫応答を誘導する薬剤と実質的に同時に投与することが好ましい。例えば、有効量の均一懸濁物を、免疫原性組成物またはワクチンと同時に投与することができるか、免疫原性組成物またはワクチンの投与の約１日前後の期間以内に投与することができる。
【０２９２】
ある種の実施形態では、アルミニウム含有アジュバントを使用する場合、ミョウバン吸着抗原および式ＩおよびＩＩのベンゾナフチリジン化合物の均一懸濁物を個別に包装することが望ましい場合がある。２つの成分を、例えば、アルミニウム含有アジュバントからの抗原の脱離が減少するように、投与の約７２時間前以内に合わせることができる。例えば、ミョウバン吸着抗原および均一懸濁物を、患者のベッドサイドで組み合わせることができる。好ましくは、ミョウバン吸着抗原および均一懸濁物を、投与の約７２時間前以内、約４８時間前以内、約２４時間前以内、約１２時間前以内、約１０時間前以内、約９時間前以内、約８時間前以内、約７時間前以内、約６時間前以内、約５時間前以内、約４時間前以内、約３時間前以内、約２時間前以内、約１時間前以内、約４５分前以内、約３０分前以内、約１５分前以内、約１０分前以内、または約５分前以内に組み合わせる。
【０２９３】
ある種の実施形態（ｅｍｂｏｄｉｍｅｎｔｓｅｍｂｏｄｉｍｅｎｔｓ）では、本明細書に開示の免疫原性組成物を、例えば、それを必要とする被験体（哺乳動物など）における免疫応答の惹起または増強で用いるための医薬として使用することができる。
【０２９４】
ある種の実施形態では、本明細書に開示の免疫原性組成物を、それを必要とする被験体（哺乳動物など）における免疫応答を惹起するのための医薬の製造において使用することができる。本発明はまた、本明細書に開示の免疫原性組成物を予め充填した送達デバイスを提供する。
【０２９５】
哺乳動物は、ヒトが好ましいが、本明細書で対象とされる病原体が広範な種にわたって問題であり得るので、例えば、ウシ、ブタ、ニワトリ、ネコ、またはイヌであり得る。ワクチンを予防的に使用する場合、ヒトは、好ましくは、小児（例えば、幼児または乳児）またはティーンエイジャーであり、ワクチンを治療的に使用する場合、ヒトは、好ましくは、ティーンエイジャーまたは成人である。小児用ワクチンを、例えば、安全性、投薬量、免疫原性などを評価するために成人に投与することもできる。
【０２９６】
治療上の処置の効力をチェックする１つの方法は、本明細書に開示の免疫原性組成物の投与後に病原体感染をモニタリングする工程を含む。予防的処置の効力をチェックする１つの方法は、免疫原性組成物（および、個別に投与する場合、抗原）の投与後に本明細書に開示の免疫原性組成物中に含めるかこれと組み合わせて投与した抗原に対する免疫応答を、全身的に（ＩｇＧ１およびＩｇＧ２ａ産生レベルのモニタリングなど）および／または粘膜的に（ＩｇＡ産生レベルのモニタリングなど）モニタリングする工程を含む。典型的には、抗原特異的血清抗体応答を、免疫後であるが攻撃誘発前に決定するのに対して、抗原特異的粘膜抗体応答を免疫後および攻撃誘発後に決定する。
【０２９７】
抗原がタンパク質である場合に、本明細書に開示の免疫原性組成物の免疫原性を評価する別の方法は、タンパク質を組換え的に発現させて免疫ブロットおよび／またはマイクロアレイによって患者の血清または粘膜分泌物をスクリーニングすることである。タンパク質と患者サンプルとの間の陽性反応は、患者が問題のタンパク質に対する免疫応答を開始していることを示す。本方法を使用して、タンパク質抗原内の免疫優性抗原および／またはエピトープを同定することもできる。
【０２９８】
免疫原性組成物の効力を、目的の病原体感染の適切な動物モデルの攻撃誘発によってインビボで決定することもできる。
【０２９９】
投薬は、単回用量スケジュールまたは複数回用量スケジュールによることができる。複数回用量を、一次免疫スケジュールおよび／または追加免疫スケジュールで使用することができる。複数回用量スケジュールでは、種々の用量を、同一または異なる経路（例えば、非経口での初回刺激（ｐｒｉｍｅ）および粘膜への追加免疫（ｂｏｏｓｔ）、粘膜への初回刺激および非経口での追加免疫など）によって投与することができる。複数回用量を、典型的には、少なくとも１週間間隔（例えば、約２週間、約３週間、約４週間、約６週間、約８週間、約１０週間、約１２週間、約１６週間など）で投与する。
【０３００】
１種以上の抗原を含むか、１種以上の抗原と併せて使用される本明細書に開示の免疫原性組成物を使用して、小児および成人の両方を処置することができる。したがって、ヒト被験体は、１歳未満、１〜５歳、５〜１５歳、１５〜５５歳、または少なくとも５５歳であり得る。こうした免疫原性組成物の投与に好ましい被験体は、高齢者（例えば、５０歳超、６０歳超、好ましくは６５歳超）、若年者（例えば、５歳未満）、入院患者、健康管理従事者、軍人および軍関係者、妊婦、慢性疾患患者、または免疫不全患者である。免疫原性組成物は、しかし、ただこれらの群のためだけでは適当でなく、より一般に、集団内で使用することができる。
【０３０１】
１種以上の抗原を含むか、１種以上の抗原と併せて使用される本明細書に開示の免疫原性組成物を、（例えば、同じ医学的対診の間または医療従事者もしくはワクチン接種センターへの訪問中に）他のワクチンと実質的に同時に（例えば、麻疹ワクチン、ムンプスワクチン、風疹ワクチン、ＭＭＲワクチン、水痘ワクチン、ＭＭＲＶワクチン、ジフテリアワクチン、破傷風ワクチン、百日咳ワクチン、ＤＴＰワクチン、コンジュゲートＨ．ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ  ｂ型ワクチン、不活化ポリオウイルスワクチン、Ｂ型肝炎ウイルスワクチン、髄膜炎菌コンジュゲートワクチン（４価ＡＣＷ１３５Ｙワクチンなど）、ＲＳウイルスワクチンなどと実質的に同時に）患者に投与することができる。
【０３０２】
６．キット
本発明はまた、個別の容器に均一懸濁物および抗原を含む組成物を含むキットを提供する。例えば、キットは、均一懸濁物を含む第１の容器および抗原を含む組成物を含む第２の容器を含むことができる。抗原を含む組成物は、液体形態であり得るか、固体形態（例えば、凍結乾燥形態）であり得、個別の抗原でもあり得る。組成物に適切な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、シリンジ、および試験管が挙げられる。容器を、種々の材料（ガラスまたはプラスチックが挙げられる）から形成することができる。容器は、滅菌アクセスポートを有することができる（例えば、容器は、皮下注射針によって突き通すことができるストッパーを有する静脈内溶液バッグまたはバイアルであり得る）。
【０３０３】
キットは、薬学的に許容されるバッファー（リン酸緩衝食塩水、リンゲル液、またはデキストロース液など）を含む第３の容器をさらに含むことができる。キットはまた、最終使用者に有用な他の材料（他の薬学的に許容される処方用溶液（バッファーなど）、希釈剤、フィルター、針、およびシリンジまたは他の送達デバイスが挙げられる）を含むことができる。キットは、アジュバント（アルミニウムを含むアジュバントまたはＭＦ５９など）を含む第４の容器をさらに含むことができる。
【０３０４】
キットはまた、免疫の誘導方法のためのまたは感染症の処置のための指示書を含む添付文書を含むことができる。添付文書は、未承認のドラフトの添付文書であり得るか、食品医薬品局（ＦＤＡ）または他の規制機関によって承認された添付文書であり得る。
【実施例】
【０３０５】
本発明を、ここに一般的に記載し、本発明は、以下の実施例を参照してより容易に理解される。これらの実施例は、本発明のある種の態様および実施形態の例示のみを目的として含まれ、本発明を制限することを意図しない。
【０３０６】
実施例（Ｉ）：選択されたベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンアナログの調製
以下の実施例は、本発明の組成物および方法で有用なある種の化合物を調製するための方法を例証している。当業者は、これらの実施例に基づいて本発明の方法で用いる広範な他の化合物を作製することができる。
【０３０７】
実施例１
ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３０８】
【化８】
2013514382.tif 000009
２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニルボロン酸（１．０当量）および３−ブロモピコリノ−ニトリル（１．０当量）を含むトルエン（０．４４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下（ｅｎ  ｖａｃｕｏ）濃縮した。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、白色固体を得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 9.04(d, 1H),8.91(d, 1H), 8.45(d, 1H), 7.86(dd, 1H), 7.53-7.62(m, 2H), 7.35(t, 1H), 6.65(br,2H). LRMS [M+H] = 196.1。
【０３０９】
実施例３
９−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３１０】
【化９】
2013514382.tif 000010
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−４−クロロフェニルカルバマート
０℃でＮ２雰囲気下の２−ブロモ−４−クロロアニリン（１．０当量）を含むテトラヒドロフラン（０．２Ｍ）の溶液に、１Ｍ  ＮａＨＭＤＳ（２．５当量）を滴下して添加した。反応物を０℃で１５分間撹拌し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナートを含むテトラヒドロフラン溶液を添加した。反応物を室温に一晩加温した。溶媒を蒸発させ、得られた残渣を０．１Ｎ  ＨＣｌ水溶液でクエンチした。水性懸濁物を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、淡黄色オイルとして生成物を得た。
【０３１１】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル４−クロロ−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル−カルバマート
ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−４−クロロフェニルカルバマート（工程１由来）（１．０当量）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１．５当量）、ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）（５％）、および酢酸ナトリウム（４．５当量）を、Ｎ２雰囲気下にてジオキサン（０．２Ｍ）中で混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。得られた懸濁物を周囲温度に冷却し、エーテルで希釈し、セライトで濾過し、濾液を減圧下濃縮した。粗混合物を、０〜１０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−クロロ−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル−カルバマートを得た。
【０３１２】
工程３：９−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
ｔｅｒｔ−ブチル４−クロロ−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル−カルバマート（工程２由来）（１．０当量）および３−ブロモピコリノ−ニトリル（１．０当量）を含むトルエン（０．４４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、０〜５０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製し、次いで、０〜５％メタノールを含むジクロロメタンを使用して再度精製して、固体を得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 9.08(d, 1H),8.96(d, 1H), 8.45(s, 1H), 7.86-7.89(dd, 1H), 7.60(d, 1H), 7.54(d, 1H), 6.78(br,2H). LRMS [M+H] = 230.1。
【０３１３】
実施例４
８−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３１４】
【化１０】
2013514382.tif 000011
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−５−クロロフェニルカルバマート
０℃でＮ２雰囲気下の２−ブロモ−５−クロロアニリン（１．０当量）を含むテトラヒドロフラン（０．２Ｍ）の溶液に、１Ｍ  ＮａＨＭＤＳ（２．５当量）を滴下して添加した。反応物を０℃で１５分間撹拌し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナートを含むテトラヒドロフラン溶液を添加した。反応物を室温に一晩加温した。溶媒を蒸発させ、得られた残渣を０．１Ｎ  ＨＣｌ水溶液でクエンチした。水性懸濁物を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下（ｅｎ  ｖａｃｕｏ）濃縮した。粗材料を、０〜５％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、淡黄色オイルとして生成物を得た。
【０３１５】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル５−クロロ−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル−カルバマート
ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−５−クロロフェニルカルバマート（工程１由来）（１．０当量）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１．５当量）、ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）（５％）、および酢酸ナトリウム（４．５当量）を、Ｎ２雰囲気下にてジオキサン（０．２Ｍ）中で混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。得られた懸濁物を周囲温度に冷却し、エーテルで希釈し、セライトで濾過し、濾液を減圧下濃縮した。粗混合物を、０〜５％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル５−クロロ−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル−カルバマートを得た。
【０３１６】
工程３：８−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
ｔｅｒｔ−ブチル５−クロロ−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル−カルバマート（工程２由来）（１．０当量）および３−ブロモピコリノ−ニトリル（１．０当量）を含むトルエン（０．４４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、０〜５％メタノールを含むジクロロメタンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して半純粋固体を得た。次いで、これを温（ｈｏｔ）１０％酢酸エチルを含むヘキサン中で撹拌し、濾過し、乾燥させて純粋固体を得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 9.03(d, 1H),8.93(d, 1H), 8.46(d, 1H), 7.85-7.88(dd, 1H), 7.57(s, 1H), 7.32(d, 1H), 6.94(br,2H). LRMS [M+H] = 230.1。
【０３１７】
実施例５
８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３１８】
【化１１】
2013514382.tif 000012
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−５−メチルフェニルカルバマート
０℃でＮ２雰囲気下の２−ブロモ−５−メチルアニリン（１．０当量）を含むテトラヒドロフラン（０．２Ｍ）の溶液に、１Ｍ  ＮａＨＭＤＳ（２．５当量）を滴下して添加した。反応物を０℃で１５分間撹拌し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナートを含むテトラヒドロフラン溶液を添加した。反応物を室温に一晩加温した。溶媒を蒸発させ、得られた残渣を０．１Ｎ  ＨＣｌ水溶液でクエンチした。水性懸濁物を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、生成物を淡黄色オイルとして得た。
【０３１９】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル５−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート
ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−５−メチルフェニルカルバマート（工程１由来）（１．０当量）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１．５当量）、ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）（５％）、および酢酸ナトリウム（４．５当量）を、Ｎ２雰囲気下にてジオキサン（０．２Ｍ）中で混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。得られた懸濁物を周囲温度に冷却し、エーテルで希釈し、セライトで濾過し、濾液を減圧下濃縮した。粗材料を、０〜８％エーテルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル５−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマートを得た。
【０３２０】
工程３：８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
ｔｅｒｔ−ブチル５−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（工程２由来）（１．０当量）および３−ブロモピコリノ−ニトリル（１．０当量）を含むトルエン（０．４４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、０〜４０％酢酸エチルを含むトルエンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、純粋固体を得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 8.98(d, 1H),8.87(d, 1H), 8.32(d, 1H), 7.79-7.82(dd, 1H), 7.42(s, 1H), 7.18(d, 1H), 6.6(br,2H), 2.45(s, 3H). LRMS [M+H] = 210.1。
【０３２１】
実施例６
９−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３２２】
【化１２】
2013514382.tif 000013
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−４−メチルフェニルカルバマート
０℃でＮ２雰囲気下の２−ブロモ−４−メチルアニリン（１．０当量）を含むテトラヒドロフラン（０．２Ｍ）の溶液に、１Ｍ  ＮａＨＭＤＳ（２．５当量）を滴下して添加した。反応物を０℃で１５分間撹拌し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナートを含むテトラヒドロフラン溶液を添加した。反応物を室温に一晩加温した。溶媒を蒸発させ、得られた残渣を０．１Ｎ  ＨＣｌ水溶液でクエンチした。水性懸濁物を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、生成物を淡黄色オイルとして得た。
【０３２３】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル４−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート
ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−４−メチルフェニルカルバマート（工程１由来）（１．０当量）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１．５当量）、ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）（５％）、および酢酸ナトリウム（４．５当量）を、Ｎ２雰囲気下にてジオキサン（０．２Ｍ）中で混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。得られた懸濁物を周囲温度に冷却し、エーテルで希釈し、セライトで濾過し、濾液を減圧下濃縮した。粗材料を、０〜８％エーテルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマートを得た。
【０３２４】
工程３：９−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
ｔｅｒｔ−ブチル４−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（工程２由来）（１．０当量）および３−ブロモピコリノ−ニトリル（１．０当量）を含むトルエン（０．４４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、０〜５％メタノールを含むジクロロメタンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して半純粋固体を得た。次いで、これを温酢酸エチル中で旋回させ、濾過し、乾燥させて純粋固体を得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 9.02(d, 1H),8.89(d, 1H), 8.25(s, 1H), 7.80-7.84(dd, 1H), 7.52(d, 1H), 7.40(d, 1H), 6.5(br, 2H),2.48(s, 3H). LRMS [M+H] = 210.2。
【０３２５】
実施例７
１０−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３２６】
【化１３】
2013514382.tif 000014
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−３−メチルフェニルカルバマート
０℃でＮ２雰囲気下の２−ブロモ−３−メチルアニリン（１．０当量）を含むテトラヒドロフラン（０．２Ｍ）の溶液に、１Ｍ  ＮａＨＭＤＳ（２．５当量）を滴下して添加した。反応物を０℃で１５分間撹拌し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナートを含むテトラヒドロフラン溶液を添加した。反応物を室温に一晩加温した。溶媒を蒸発させ、得られた残渣を０．１Ｎ  ＨＣｌ水溶液でクエンチした。水性懸濁物を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、生成物を淡黄色オイルとして得た。
【０３２７】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル３−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート
ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−３−メチルフェニルカルバマート（工程１由来）（１．０当量）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１．５当量）、ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）（５％）、および酢酸ナトリウム（４．５当量）を、Ｎ２雰囲気下にてジオキサン（０．２Ｍ）中で混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。得られた懸濁物を周囲温度に冷却し、エーテルで希釈し、セライトで濾過し、濾液を減圧下濃縮した。粗材料を、０〜１０％エーテルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマートを得た。
【０３２８】
工程３：１０−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
ｔｅｒｔ−ブチル３−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（工程２由来）（１．０当量）および３−ブロモピコリノ−ニトリル（１．０当量）を含むトルエン（０．４４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、０〜４０％酢酸エチルを含むトルエンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して半純粋固体を得た。次いで、これを温１０％酢酸エチルを含むヘキサン中で旋回させ、濾過し、乾燥させて純粋固体を得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 9.22(d, 1H),8.90(d, 1H), 7.82-7.85(dd, 1H), 7.54(d, 1H), 7.45(t, 1H), 7.19(d, 1H), 6.6(br,2H), 2.98(s, 3H). LRMS [M+H] = 210.2。
【０３２９】
実施例８
エチル５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−９−カルボキシラート
【０３３０】
【化１４】
2013514382.tif 000015
工程１：エチル３−ブロモ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ベンゾアート
０℃でＮ２雰囲気下の４−アミノ−３−ブロモベンゾアート（１．０当量）を含むテトラヒドロフラン（０．２Ｍ）の溶液に、１Ｍ  ＮａＨＭＤＳ（２．５当量）を滴下して添加した。反応物を０℃で１５分間撹拌し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナートを含むテトラヒドロフラン溶液を添加した。反応物を室温に一晩加温した。溶媒を蒸発させ、得られた残渣を０．１Ｎ  ＨＣｌ水溶液でクエンチした。水性懸濁物を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、生成物を淡黄色オイルとして得た。
【０３３１】
工程２：エチル４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾアート
エチル３−ブロモ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ベンゾアート（工程１由来）（１．０当量）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１．５当量）、ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）（５％）、および酢酸ナトリウム（４．５当量）を、Ｎ２雰囲気下にてジオキサン（０．２Ｍ）中で混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。得られた懸濁物を周囲温度に冷却し、エーテルで希釈し、セライトで濾過し、濾液を減圧下濃縮した。粗材料を、０〜１０％エーテルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、エチル４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾアートを得た。
【０３３２】
工程３：エチル５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−９−カルボキシラート
エチル４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾアート（工程２由来）（１．０当量）および３−ブロモピコリノ−ニトリル（１．０当量）を含むトルエン／エタノール（１０：１、０．２３Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および無水炭酸カリウム（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜４０％酢酸エチルを含むトルエンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して半純粋固体を得た。次いで、これを温１０％酢酸エチルを含むヘキサン中で旋回させ、濾過し、乾燥させて純粋固体を得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 9.11(d, 1H),9.05(s, 1H), 8.95(d, 1H), 8.14(d, 1H), 7.89-7.92(dd, 1H), 7.63(d, 1H), 4.38(q,2H), 1.40(t, 3H). LRMS [M+H] = 268.2。
【０３３３】
実施例９
５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−９−カルボン酸
【０３３４】
【化１５】
2013514382.tif 000016
エチル５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−９−カルボキシラート（実施例８）（１．０当量）を、１Ｎ  ＮａＯＨ（２．０当量）を含むエタノール（０．１２Ｍ）と混合した。反応物を８０℃に加熱し、３６時間撹拌した。溶媒を減圧下除去した。残渣を水に懸濁し、５％クエン酸水溶液を使用してｐＨを中性に調整した。懸濁物を遠心分離し（２５００ｒｐｍ、５分）、上清を除去した。得られた固体を、ボルテックスによって水に再懸濁し、遠心分離し（２５００ｒｐｍ、５分）、上清を除去した。再懸濁、遠心分離、および上清除去の工程を、温メタノール、温酢酸エチル、およびエーテルを使用して繰り返して、純粋固体を得た。1H NMR(DMSO):δ 12.86(s, 1H), 9.15(d,1H), 9.00(s, 1H), 8.97(d, 1H), 8.07(d, 1H), 7.88-7.91(dd, 1H), 7.56-7.59(m,3H). LRMS [M+H] = 240.1。
【０３３５】
実施例１０
８−メトキシベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３３６】
【化１６】
2013514382.tif 000017
工程１：２−ブロモ−５−メトキシアニリン
１−ブロモ−４−メトキシ−２−ニトロベンゼン（１．０当量）、鉄粉（３．０当量）、および濃ＨＣｌ（１．０４当量）の溶液を共に、エタノール（０．６４Ｍ）中で混合し、加熱還流した。反応物を２４時間撹拌し、溶媒を蒸発させた。得られた残渣を、酢酸エチルおよび飽和塩化アンモニウム水溶液で希釈した。水層を酢酸エチルで３回抽出し、合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜１５％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、生成物をオイルとして得た。
【０３３７】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−５−メトキシフェニルカルバマート
０℃でＮ２雰囲気下の２−ブロモ−５−メトキシアニリン（１．０当量）（工程１由来）を含むテトラヒドロフラン（０．２Ｍ）の溶液に、１Ｍ  ＮａＨＭＤＳ（２．５当量）を滴下して添加した。反応物を０℃で１５分間撹拌し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナートを含むテトラヒドロフラン溶液を添加した。反応物を室温に一晩加温した。溶媒を蒸発させ、得られた残渣を０．１Ｎ  ＨＣｌ水溶液でクエンチした。水性懸濁物を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、生成物を淡黄色オイルとして得た。
【０３３８】
工程３：ｔｅｒｔ−ブチル５−メトキシ−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート
ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−５−メトキシフェニルカルバマート（工程２由来）（１．０当量）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１．５当量）、ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）（５％）、および酢酸ナトリウム（４．５当量）を、Ｎ２雰囲気下にてジオキサン（０．２Ｍ）中で混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。得られた懸濁物を周囲温度に冷却し、エーテルで希釈し、セライトで濾過し、濾液を減圧下濃縮した。粗材料を、０〜１５％エーテルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル５−メトキシ−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマートを得た。
【０３３９】
工程４：８−メトキシベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
ｔｅｒｔ−ブチル５−メトキシ−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（工程３由来）（１．０当量）および３−ブロモピコリノ−ニトリル（１．０当量）を含むトルエン／エタノール（１０：１、０．２３Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および無水炭酸カリウム（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、０〜５％メタノールを含むジクロロメタンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して半純粋固体を得た。次いで、これを酢酸エチル中で再結晶させ、濾過し、乾燥させて純粋固体を得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 8.91(d, 1H), 8.82(d,1H), 8.33(d, 1H), 7.76-7.79(dd, 1H), 7.07(s, 1H), 6.96(d, 1H), 6.6(br, 2H),3.90(s, 3H). LRMS [M+H] = 226.1。
【０３４０】
実施例１１
７−フルオロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３４１】
【化１７】
2013514382.tif 000018
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル２−フルオロフェニルカルバマート
０℃でＮ２雰囲気下の２−フルオロアニリン（１．０当量）を含むテトラヒドロフラン（０．２Ｍ）の溶液に、１Ｍ  ＮａＨＭＤＳ（２．５当量）を滴下して添加した。反応物を０℃で１５分間撹拌し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナートを含むテトラヒドロフラン溶液を添加した。反応物を室温に一晩加温した。溶媒を蒸発させ、得られた残渣を０．１Ｎ  ＨＣｌ水溶液でクエンチした。水性懸濁物を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、生成物を淡黄色オイルとして得た。
【０３４２】
工程２：２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−フルオロフェニルボロン酸
−７８℃でＮ２雰囲気下のｔｅｒｔ−ブチル２−フルオロフェニルカルバマート（工程１由来）（１．０当量）を含むテトラヒドロフラン（０．２５Ｍ）の溶液に、１．７Ｍ  ｔｅｒｔ−ブチルリチウム（２．４当量）を滴下して添加した。反応物を２時間にわたって−４０℃にゆっくり加温し、ホウ酸トリメチル原液（３．８当量）を添加した。反応物を３０分間にわたって室温に加温した。１Ｎ  ＮａＯＨ水溶液を反応物にゆっくり添加し、１５分間撹拌した。混合物を酢酸エチルに注ぎ、３Ｎ  ＨＣｌで酸性化して固体を溶解させた。水層を酢酸エチルで２回抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。得られた固体を、１：１エーテル／ヘキサン中で撹拌し、濾過し、乾燥させた。固体をさらに精製せずに次の工程で使用した。
【０３４３】
工程３：７−フルオロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−フルオロフェニルボロン酸（工程２由来）（１．０当量）および３−ブロモピコリノ−ニトリル（１．０当量）を含むトルエン（０．４４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。処理（ｗｏｒｋｕｐ）後、粗生成物を温トルエンに懸濁し、遠心分離し（２５００ｒｐｍ、５分）、上清を除去した。懸濁、遠心分離、および上清除去の工程を、温酢酸エチル、エーテル、およびヘキサンを使用して繰り返して、純粋固体を得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 9.04(d, 1H),8.96(d, 1H), 8.27(d, 1H), 7.86-7.90(dd, 1H), 7.28-7.34(m, 2H), 6.9(br, 2H).LRMS [M+H] = 214.1。
【０３４４】
実施例１２
８−（メチルスルホニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３４５】
【化１８】
2013514382.tif 000019
工程１：２−ブロモ−５−（メチルスルホニル）アニリン
１−ブロモ−４−（メチルスルホニル）−２−ニトロベンゼン（１．０当量）、鉄粉（３．０当量）、および濃ＨＣｌ（１．０４当量）の溶液を共に、エタノール（０．６４Ｍ）中で混合し、加熱還流した。反応物を２４時間撹拌し、溶媒を蒸発させた。得られた残渣を、酢酸エチルおよび飽和塩化アンモニウム水溶液で希釈した。水層を酢酸エチルで３回抽出し、合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を１：１ヘキサン／エーテル中で摩砕すること（ｔｒｉｔｕｒａｔｉｎｇ）によって精製して、淡黄色固体を得た。
【０３４６】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−５−（メチルスルホニル）フェニルカルバマート
０℃でＮ２雰囲気下の２−ブロモ−５−（メチルスルホニル）アニリン（工程１由来）（１．０当量）を含むテトラヒドロフラン（０．２Ｍ）の溶液に、１Ｍ  ＮａＨＭＤＳ（２．５当量）を滴下して添加した。反応物を０℃で１５分間撹拌し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナートを含むテトラヒドロフラン溶液を添加した。反応物を室温に一晩加温した。溶媒を蒸発させ、得られた残渣を０．１Ｎ  ＨＣｌ水溶液でクエンチした。水性懸濁物を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−５−（メチルスルホニル）フェニルカルバマートを得た。
【０３４７】
工程３：ｔｅｒｔ−ブチル５−（メチルスルホニル）−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート
ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−５−（メチルスルホニル）フェニルカルバマート（工程２由来）（１．０当量）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１．５当量）、ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）（５％）、および酢酸ナトリウム（４．５当量）を、Ｎ２雰囲気下にてジオキサン（０．２Ｍ）中で混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。得られた懸濁物を周囲温度に冷却し、エーテルで希釈し、セライトで濾過し、濾液を減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して固体を得た。次いで、これを１０％エーテル／ヘキサン中で摩砕して、ｔｅｒｔ−ブチル５−（メチルスルホニル）−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマートを白色固体として得た。
【０３４８】
工程４：８−（メチルスルホニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
ｔｅｒｔ−ブチル５−（メチルスルホニル）−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（工程３由来）（１．０当量）および３−ブロモピコリノ−ニトリル（１．０当量）を含むトルエン（０．２４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（４．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５％メタノールを含むジクロロメタンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して固体を得た。次いで、これを１：１ヘキサン／酢酸エチル中で摩砕して、８−（メチルスルホニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 9.16(d, 1H),9.03(d, 1H), 8.71(d, 1H), 8.11(s, 1H), 7.93-7.96(dd, 1H), 7.81(d, 1H), 7.0(br,2H), 3.19(s, 3H). LRMS [M+H] = 274.1。
【０３４９】
実施例１３
８−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３５０】
【化１９】
2013514382.tif 000020
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）フェニルカルバマート
０℃でＮ２雰囲気下の２−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）アニリン（１．０当量）を含むテトラヒドロフラン（０．２Ｍ）の溶液に、１Ｍ  ＮａＨＭＤＳ（２．５当量）を滴下して添加した。反応物を０℃で１５分間撹拌し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナートを含むテトラヒドロフラン溶液を添加した。反応物を室温に一晩加温した。溶媒を蒸発させ、得られた残渣を０．１Ｎ  ＨＣｌ水溶液でクエンチした。水性懸濁物を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、生成物を淡黄色オイルとして得た。
【０３５１】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニルカルバマート
ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）フェニルカルバマート（工程１由来）（１．０当量）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１．５当量）、ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）（５％）、および酢酸ナトリウム（４．５当量）を、Ｎ２雰囲気下にてジオキサン（０．２Ｍ）中で混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。得られた懸濁物を周囲温度に冷却し、エーテルで希釈し、セライトで濾過し、濾液を減圧下濃縮した。粗材料を、０〜１０％エーテルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して不純生成物を得た。これをさらに精製せずに次の工程で使用した。
【０３５２】
工程３：８−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
ｔｅｒｔ−ブチル２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニルカルバマート（工程２由来）（１．０当量）および３−ブロモピコリノ−ニトリル（１．０当量）を含むトルエン（０．２４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（４．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、０〜４０％酢酸エチルを含むトルエンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して固体を得た。次いで、これを１０％酢酸エチルを含むヘキサン中で摩砕して、８−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 9.13(d, 1H),9.00(d, 1H), 8.67(d, 1H), 7.91-7.94(dd, 1H), 7.86(s, 1H), 7.58(d, 1H), 6.9(br,2H). LRMS [M+H] = 264.1。
【０３５３】
実施例１４
８−フルオロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３５４】
【化２０】
2013514382.tif 000021
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−５−フルオロフェニルカルバマート
０℃でＮ２雰囲気下の２−ブロモ−５−フルオロアニリン（１．０当量）を含むテトラヒドロフラン（０．２Ｍ）の溶液に、１Ｍ  ＮａＨＭＤＳ（２．５当量）を滴下して添加した。反応物を０℃で１５分間撹拌し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナートを含むテトラヒドロフラン溶液を添加した。反応物を室温に一晩加温した。溶媒を蒸発させ、得られた残渣を０．１Ｎ  ＨＣｌ水溶液でクエンチした。水性懸濁物を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、淡黄色オイルとして生成物を得た。
【０３５５】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル５−フルオロ−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート
ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−５−フルオロフェニルカルバマート（工程１由来）（１．０当量）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１．５当量）、ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）（５％）、および酢酸ナトリウム（４．５当量）を、Ｎ２雰囲気下にてジオキサン（０．２Ｍ）中で混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。得られた懸濁物を周囲温度に冷却し、エーテルで希釈し、セライトで濾過し、濾液を減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５％エーテルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、生成物を黄色固体として得た。
【０３５６】
工程３：８−フルオロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
ｔｅｒｔ−ブチル５−フルオロ−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（工程２由来）（１．０当量）および３−ブロモピコリノ−ニトリル（１．０当量）を含むトルエン（０．２４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（４．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、０〜４０％酢酸エチルを含むトルエンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して固体を得た。次いで、これを１０％酢酸エチルを含むヘキサン中で摩砕して、８−フルオロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 9.00(d, 1H),8.90(d, 1H), 8.46-8.50(dd, 1H), 7.83-7.87(dd, 1H), 7.26(d, 1H), 7.15(t, 1H),6.9(br, 2H). LRMS [M+H] = 214.1。
【０３５７】
実施例１６
３−メトキシベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３５８】
【化２１】
2013514382.tif 000022
工程１：３−ブロモ−６−メトキシピコリノニトリル
３−ブロモ−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−２−カルボニトリル（実施例１５／工程２由来）（１．０当量）、炭酸銀（１．３当量）、およびヨードメタン（１．２当量）を含むトルエン（０．２Ｍ）の溶液を、室温の暗所で一晩撹拌した。溶媒を減圧下濃縮し、得られた残渣を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、３−ブロモ−６−メトキシピコリノニトリルを得た。
【０３５９】
工程２：３−メトキシベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニルボロン酸（１．０当量）および３−ブロモ−６−メトキシピコリノニトリル（工程１由来）（１．０当量）を含むトルエン（０．４４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、０〜５０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、３−メトキシベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを黄色固体として得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 8.91(d, 1H),8.34(d, 1H), 7.63(d, 1H), 7.51-7.53(dd, 1H), 7.27-7.33(m, 2H), 6.65(br, 2H),4.11(s, 3H). LRMS [M+H] = 226.1。
【０３６０】
実施例１７
３−ブトキシベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３６１】
【化２２】
2013514382.tif 000023
工程１：３−ブロモ−６−ブトキシピコリノニトリル
３−ブロモ−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−２−カルボニトリル（実施例１５／工程２由来）（１．０当量）、炭酸カリウム（１．３当量）、および１−ヨードブタン（１．２当量）を含むアセトン（０．３Ｍ）の溶液を、７０℃で一晩撹拌した。溶媒を減圧下濃縮し、得られた残渣を水および酢酸エチル中に取った。水層を酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、０〜３０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、無色固体を得た。
【０３６２】
工程２：３−ブトキシベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニルボロン酸（１．０当量）および３−ブロモ−６−ブトキシピコリノニトリル（工程１由来）（１．０当量）を含むトルエン（０．４４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、０〜５％酢酸エチルを含むメタノールを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、３−ブトキシベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを白色固体として得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 8.91(d, 1H),8.34(d, 1H), 7.61(d, 1H), 7.48-7.52(dd, 1H), 7.27-7.33(m, 2H), 6.51(br, 2H),6.55(t, 2H), 1.81-1.88(m, 2H), 1.50-1.59(m, 2H), 1.00(t, 3H). LRMS [M+H] =268.1。
【０３６３】
実施例１８
３−（ベンジルオキシ）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３６４】
【化２３】
2013514382.tif 000024
工程１：６−（ベンジルオキシ）−３−ブロモピコリノニトリル
３−ブロモ−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−２−カルボニトリル（実施例１５／工程２由来）（１．０当量）、炭酸銀（１．３当量）、および臭化ベンジル（１．２当量）を含むトルエン（０．１６Ｍ）の溶液を、暗所にて５０℃で一晩撹拌した。溶媒を減圧下濃縮し、得られた残渣を、０〜２０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、６−（ベンジルオキシ）−３−ブロモピコリノニトリルを得た。
【０３６５】
工程２：３−（ベンジルオキシ）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニルボロン酸（１．０当量）および６−（ベンジルオキシ）−３−ブロモピコリノニトリル（工程１由来）（１．０当量）を含むトルエン（０．４４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、０〜５０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、３−（ベンジルオキシ）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを黄色固体として得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 8.95(d, 1H),8.35(d, 1H), 7.58-7.63(m, 2H), 7.49-7.53(dd, 1H), 7.30-7.44(m, 5H), 6.61(br,2H), 5.64(s, 2H). LRMS [M+H] = 302.1。
【０３６６】
実施例１９
３−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３６７】
【化２４】
2013514382.tif 000025
工程１：５−ブロモ−２−メチルピリジン１−オキシド
５−ブロモ−２−メチルピリジン（１．０当量）を含むクロロホルム（０．３８Ｍ）の溶液に、７７％メタ−クロロ過安息香酸（ｍＣＰＢＡ）（４．０当量）を添加し、６０℃で２０時間加熱した。室温への冷却後、Ｃａ（ＯＨ）２（５．３当量）を添加し、得られた沈殿物を３０分間撹拌した。沈殿物を濾過し、３：１のＣＨＣｌ３／メタノールで洗浄した。濾液を減圧下濃縮して固体を得た。これを３０％酢酸エチルを含むヘキサン中で撹拌し、濾過して所望のＮ−オキシドを得た。濾液を減圧下濃縮し、残渣を、０〜１００％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、より多くの所望のＮ−オキシドを得た。２つのバッチを合わせ、次の工程で使用した。
【０３６８】
工程２：３−ブロモ−６−メチルピコリノニトリル
５−ブロモ−２−メチルピリジン１−オキシド（工程１由来）（１．０当量）を含むアセトニトリル（０．２Ｍ）の溶液に、トリメチルシリルシアニド（ＴＭＳＣＮ）（４．０当量）およびトリエチルアミン（３．０当量）を添加した。反応物を１００℃で一晩加熱した。室温への冷却後、溶媒を減圧下濃縮し、残渣を、０〜５０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、３−ブロモ−６−メチルピコリノニトリルを得た。
【０３６９】
工程３：３−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニルボロン酸（１．０当量）および３−ブロモ−６−メチルピコリノニトリル（工程２由来）（１．０当量）を含むトルエン（０．４４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、０〜７０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、３−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを黄色固体として得た。1H NMR(メタノール d-4):δ 8.85(d, 1H),8.38(d, 1H), 7.72(d, 1H), 7.53-7.61(m, 2H), 7.34-7.38(dd, 1H), 2.76(s, 3H).LRMS [M+H] = 210.1。
【０３７０】
実施例２０
３−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３７１】
【化２５】
2013514382.tif 000026
工程１：５−ブロモ−２−クロロピリジン１−オキシド
５−ブロモ−２−クロロピリジン（１．０当量）を含むクロロホルム（０．３８Ｍ）の溶液に、７７％メタ−クロロ過安息香酸（ｍＣＰＢＡ）（４．０当量）を添加し、６０℃で２０時間加熱した。室温への冷却後、Ｃａ（ＯＨ）２（５．３当量）を添加し、得られた沈殿物を３０分間撹拌した。沈殿物を濾過し、３：１のＣＨＣｌ３／メタノールで洗浄した。濾液を減圧下濃縮して固体を得た。これを３０％酢酸エチルを含むヘキサン中で撹拌し、濾過して所望のＮ−オキシドを得た。濾液を減圧下濃縮し、残渣を、０〜１００％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、より多くの所望のＮ−オキシドを得た。２つのバッチを合わせ、次の工程で使用した。
【０３７２】
工程２：３−ブロモ−６−クロロピコリノニトリル
５−ブロモ−２−クロロピリジン１−オキシド（工程１由来）（１．０当量）を含むアセトニトリル（０．２Ｍ）溶液に、トリメチルシリルシアニド（ＴＭＳＣＮ）（４．０当量）およびトリエチルアミン（３．０当量）を添加した。反応物を１００℃で一晩加熱した。室温への冷却後、溶媒を減圧下濃縮し、残渣を、０〜４０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、３−ブロモ−６−クロロピコリノニトリルを得た。
【０３７３】
工程３：３−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニルボロン酸（１．０当量）および３−ブロモ−６−クロロピコリノニトリル（工程２由来）（１．０当量）を含むトルエン（０．４４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、０〜５０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して固体を得た。次いで、これを１０％酢酸エチルを含むヘキサン中で摩砕して、３−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 9.10(d, 1H),8.45(d, 1H), 7.89(d, 1H), 7.58-7.65(m, 2H), 7.35-7.39(dd, 1H), 6.67(br, 2H).LRMS [M+H] = 230.1。
【０３７４】
実施例２１
Ｎ３，Ｎ３−ジメチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−３，５−ジアミン
【０３７５】
【化２６】
2013514382.tif 000027
３−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（実施例２０）（１．０当量）溶液を、４０％ジメチルアミン水溶液（０．２６Ｍ）に溶解し、マイクロ波反応器中にて１００℃で３０分間加熱した。反応混合物を減圧下濃縮し、残渣を、０〜９０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、Ｎ３，Ｎ３−ジメチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−３，５−ジアミンを得た。1H NMR(メタノール d-4):δ 8.63(d, 1H),8.20(d, 1H), 7.55(d, 1H), 7.41-7.45(dd, 1H), 7.29-7.33(dd, 1H), 7.27(d, 1H),3.26(s, 6H). LRMS [M+H] = 239.1。
【０３７６】
実施例２２
Ｎ３−ブチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−３，５−ジアミン
【０３７７】
【化２７】
2013514382.tif 000028
３−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（実施例２０）（１．０当量）の溶液を、ｎ−ブチルアミン（０．１Ｍ）に溶解し、１１０℃で一晩加熱した。反応混合物を減圧下濃縮し、残渣を、０〜９０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、Ｎ３−ブチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−３，５−ジアミンを得た。1H NMR(メタノール d-4):δ 8.42(d, 1H),8.13(d, 1H), 7.53(d, 1H), 7.38-7.42(dd, 1H), 7.25-7.29(dd, 1H), 6.96(d, 1H),3.48(t, 2H), 1.63-1.71(m, 2H), 1.43-1.52(m, 2H), 0.99(t, 3H). LRMS [M+H] = 267.2。
【０３７８】
実施例２３
３−ビニルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３７９】
【化２８】
2013514382.tif 000029
３−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（実施例２０）（１．０当量）、４，４，５，５−テトラメチル−２−ビニル−１，３，２−ジオキサボロラン（１．２当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（２．０当量）を含むトルエン／エタノール（４：１、０．１Ｍ）の溶液を、１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して固体を得た。次いで、これを１０％酢酸エチルを含むヘキサン中で摩砕して、３−ビニルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 8.99(d, 1H), 8.42(d,1H), 8.01(d, 1H), 7.53-7.62(m, 2H), 7.30-7.35(dd, 1H), 7.03-7.10(dd, 1H),6.77(br, 2H), 6.56(d, 1H), 5.66(d, 1H). LRMS [M+H] = 222.1。
【０３８０】
実施例２４
３−エチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３８１】
【化２９】
2013514382.tif 000030
３−ビニルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（実施例２３）を含む酢酸エチル／エタノール（１：１、０．０７Ｍ）の溶液に、１０重量％パラジウム炭素（ｐａｌｌａｄｉｕｍ  ｏｎ  ｃａｒｂｏｎ）（０．２当量）を添加した。水素ガスをバルーンによって導入し、反応物を一晩撹拌した。混合物をセライトパッドで濾過し、ジクロロメタンで洗浄した。濾液を減圧下濃縮して、３−エチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを白色固体として得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 8.93(d, 1H), 8.41(d,1H), 7.76(d, 1H), 7.61(d, 1H), 7.51-7.55(dd, 1H), 7.30-7.34(dd, 1H), 6.55(br,2H), 6.03(q, 2H), 1.41(t, 3H). LRMS [M+H] = 224.1。
【０３８２】
実施例２５
３−フルオロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３８３】
【化３０】
2013514382.tif 000031
３−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（実施例２０）（１．０当量）、フッ化カリウム（３．０当量）、および１８−クラウン−６（０．２当量）を含むＮ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）（０．４Ｍ）の溶液を、マイクロ波反応器中にて２１０℃で８０分間加熱した。室温への冷却後、粗反応混合物を、１０〜５０％アセトニトリル水溶液を使用したＨＰＬＣによって精製して、３−フルオロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 11.40(br, 2H),9.38-9.42(dd, 1H), 8.60(d, 1H), 7.89-7.92(dd, 1H), 7.81-7.83(m, 2H),7.59-7.66(m, 1H). LRMS [M+H] = 214.1。
【０３８４】
実施例２６
２−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３８５】
【化３１】
2013514382.tif 000032
工程１：３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアルデヒドオキシム
３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアルデヒド（１．０当量）、ヒドロキシルアミン塩酸塩（５．０当量）、およびピリジン（４．０当量）を含むエタノールの溶液を９５℃に加熱し、１時間撹拌した。反応物を室温に冷却し、酢酸エチルおよび水で希釈した。有機層をブライン、水で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮して固体を得た。これをさらに精製せずに次の工程で使用した。
【０３８６】
工程２：３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリノニトリル
３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアルデヒドオキシム（１．０当量）およびバージェス試薬（１．５当量）を含むテトラヒドロフラン（０．５Ｍ）の溶液を６５℃に加熱し、１時間撹拌した。反応物を室温に冷却し、酢酸エチルおよび水で希釈した。有機層を水、ブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮して、固体を得た。これをさらに精製せずに次の工程で使用した。
【０３８７】
工程３：２−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニルボロン酸（１．０当量）および３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリノニトリル（工程２由来）（１．０当量）を含むトルエン（０．４４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、０〜５０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、２−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 9.44(s, 1H),9.20(s, 1H), 8.65-8.63(d, 1H), 7.70-7.61(m, 2H), 7.44-7.36(m, 1H), 6.84(br,2H). LRMS [M+H] = 264.2。
【０３８８】
実施例２７
２−メトキシベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３８９】
【化３２】
2013514382.tif 000033
工程１：３−クロロ−５−メトキシピコリノニトリル
３，５−ジクロロピコリノニトリル（１．０当量）を含むジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（０．５Ｍ）溶液に、ナトリウムメトキシド（１．５当量）を添加し、７５℃に加熱した。１４時間の撹拌後、反応物を酢酸エチルおよび水で希釈した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で３回、水で２回洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗残渣を、１５％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、２種のメトキシ位置異性体（一方は所望の生成物であった）の混合物を得た。混合物を、さらに精製せずに次の工程で使用した。
【０３９０】
工程２：２−メトキシベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニルボロン酸（１．０当量）および３−クロロ−５−メトキシピコリノニトリル（工程１由来）（１．０当量）を含むトルエン（０．４４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、５０〜１００％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、２−メトキシベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを得た。
【０３９１】
実施例２８
２−（ベンジルオキシ）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３９２】
【化３３】
2013514382.tif 000034
工程１：３−（ベンジルオキシ）−５−ブロモピリジン
５−ブロモピリジン−３−オール（１．０当量）、臭化ベンジル（１．２当量）、および炭酸銀（１．３当量）を含むトルエン（０．１Ｍ）の溶液を５０℃に加熱し、１８時間撹拌した。室温への冷却後、反応混合物を濾過し、酢酸エチルで溶離した。濾液を減圧下残渣に濃縮し、これを、２０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、３−（ベンジルオキシ）−５−ブロモピリジンを得た。
【０３９３】
工程２：３−（ベンジルオキシ）−５−ブロモピリジン１−オキシド
３−（ベンジルオキシ）−５−ブロモピリジン（工程１由来）（１．０当量）およびメタ−クロロ過安息香酸（ｍＣＰＢＡ）（４．０当量）を含むジクロロメタン（０．１Ｍ）の溶液を、室温で１８時間撹拌した。反応物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液でクエンチし、ジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機層を無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗残渣を、０〜１００％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、３−（ベンジルオキシ）−５−ブロモピリジン１−オキシドを得た。
【０３９４】
工程３：５−（ベンジルオキシ）−３−ブロモピコリノニトリル
５３−（ベンジルオキシ）−５−ブロモピリジン１−オキシド（工程２由来）（１．０当量）を含むアセトニトリル（０．２Ｍ）の溶液に、トリメチルシリルシアニド（ＴＭＳＣＮ）（４．０当量）およびトリエチルアミン（３．０当量）を添加した。反応物を１００℃で一晩加熱した。室温への冷却後、溶媒を減圧下濃縮し、残渣を、０〜４０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、２種のベンゾキシ位置異性体（一方は所望の生成物であった）の混合物を得た。混合物を、さらに精製せずに次の工程で使用した。
【０３９５】
工程４：２−（ベンジルオキシ）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニルボロン酸（１．０当量）および５−（ベンジルオキシ）−３−ブロモピコリノニトリル（工程３由来）（１．０当量）を含むトルエン（０．４４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を、２％メタノールを含むジクロロメタンおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％メタノールを含むジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、５０〜１００％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、２−（ベンジルオキシ）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを得た。1H NMR(アセトン d-6):δ 8.36(s, 1H),7.86(s, 1H), 7.59-7.56(d, 2H), 7.46-7.42(dd, 2H), 7.40-7.37(d, 1H),7.20-7.15(dd, 1H), 7.12-7.09(d, 1H), 6.88-6.86(d, 1H), 6.77-6.73(dd, 1H),5.51(s, 2H), 4.74(br, 2H). LRMS [M+H] = 302.3。
【０３９６】
実施例２９
２−ビニルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０３９７】
【化３４】
2013514382.tif 000035
工程１：３−クロロ−５−ビニルピコリノニトリル
３，５−ジクロロピコリノニトリル（１．０当量）、４，４，５，５−テトラメチル−２−ビニル−１，３，２−ジオキサボロラン（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（３．４当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０４Ｍ）の溶液を、９５℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、白色固体を得た。
【０３９８】
工程２：２−ビニルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニルボロン酸（１．０当量）および３−クロロ−５−ビニルピコリノニトリル（工程１由来）（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（２．０当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０３Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物をメタノールで希釈した。不溶性固体を濾過して除去し、濾液を減圧下で濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、２−ビニルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを黄色固体として得た。1H NMR(メタノール-d4 - CDCl3):δ8.87(d, 1H), 8.69(d, 1H), 8.28(d, 1H), 7.49-7.58(m, 2H), 7.32(dt, 1H), 6.90(dd,1H), 6.09(d, 1H), 5.54(d, 1H).LRMS [M+H] = 222.1。
【０３９９】
実施例３０
２−エチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０４００】
【化３５】
2013514382.tif 000036
２−ビニルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（実施例２９）を含む酢酸エチル／メタノール（１：４、０．０５Ｍ）の溶液に、１０重量％パラジウム炭素（０．２当量）を添加した。水素ガスをバルーンによって導入し、反応物を３時間撹拌した。混合物をセライトパッドで濾過し、ジクロロメタンで洗浄した。濾液を減圧下濃縮し、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、２−エチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを固体として得た。1H NMR(メタノール-d4):δ8.78-8.81(m, 2H), 8.45(d, 1H), 7.55 - 7.63(m, 2H), 7.35 - 7.40(m, 1H), 2.97(q,2H), 1.43(t, 2H).LRMS [M+H] = 224.1。
【０４０１】
実施例３１
２−フェニルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０４０２】
【化３６】
2013514382.tif 000037
工程１：３−クロロ−５−フェニルピコリノニトリル
３，５−ジクロロピコリノニトリル（１．０当量）、４，４，５，５−テトラメチル−２−フェニル−１，３，２−ジオキサボロラン（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（３．４当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０４Ｍ）の溶液を、１００℃で２時間撹拌し、次いで、８０℃で４時間撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、白色固体を得た。
【０４０３】
工程２：２−フェニルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニルボロン酸（１．０当量）および３−クロロ−５−フェニルピコリノニトリル（工程１由来）（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（２．０当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０３Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物をメタノールで希釈した。不溶性固体を濾過して除去し、濾液を減圧下で濃縮して粗残渣を得た。粗生成物を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、２−フェニルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを白色固体として得た。1H NMR(dmso-d6):δ 9.13(d, 1H), 9.03(d,1H), 8.56(d, 1H), 7.98(d, 2H), 7.43- 7.56(m, 5H), 7.27(m, 1H), 7.13(bs,2H).LRMS [M+H] = 272.2。
【０４０４】
実施例３２
（Ｅ）−２−スチリルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０４０５】
【化３７】
2013514382.tif 000038
工程１：（Ｅ）−３−クロロ−５−スチリルピコリノニトリル
３，５−ジクロロピコリノニトリル（１．０当量）、（Ｅ）−４，４，５，５−テトラメチル−２−スチリル−１，３，２−ジオキサボロラン（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（３．４当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０４Ｍ）の溶液を、１００℃で２時間撹拌し、次いで、８０℃で４時間撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、白色固体を得た。
【０４０６】
工程２：（Ｅ）−２−スチリルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニルボロン酸（１．０当量）および（Ｅ）−３−クロロ−５−スチリルピコリノニトリル（工程１由来）（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（２．０当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０３Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物をメタノールで希釈した。不溶性固体を濾過して除去し、濾液を減圧下で濃縮して粗残渣を得た。粗生成物を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、（Ｅ）−２−スチリルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを褐色固体として得た。1H NMR(dmso-d6):δ 9.22(d, 1H), 9.06(d,1H), 8.51(d, 1H), 7.78(d, 1H), 7.66(d, 2H), 7.46- 7.56(m, 3H), 7.70(t, 2H), 7.26-7.32(m, 2H), 7.08(bs, 2H).LRMS [M+H] = 298.2。
【０４０７】
実施例３３
２−フェネチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０４０８】
【化３８】
2013514382.tif 000039
（Ｅ）−２−スチリルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（実施例３２）を含む酢酸エチル／メタノール（１：４、０．０５Ｍ）溶液に、１０重量％パラジウム炭素（０．２当量）を添加した。水素ガスをバルーンによって導入し、反応物を３時間撹拌した。混合物をセライトパッドで濾過し、ジクロロメタンで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、粗生成物を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、２−フェネチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを黄色固体として得た。1H NMR(CDCl3):δ 8.54(d,1H), 8.32(d, 1H), 8.10(dd, 1H), 7.63(dd, 1H), 7.51(m, 1H), 7.03 - 7.32(m, 6H),6.16(bs, 2H), 3.11(t, 2H), 2.97(t, 2H).LRMS [M+H] = 300.1。
【０４０９】
実施例３４
（Ｅ）−２−（３−メトキシプロパ−１−エニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０４１０】
【化３９】
2013514382.tif 000040
工程１：（Ｅ）−３−クロロ−５−（３−メトキシプロパ−１−エニル）ピコリノニトリル
３，５−ジクロロピコリノニトリル（１．０当量）、（Ｅ）−２−（３−メトキシプロパ−１−エニル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（３．４当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０４Ｍ）の溶液を、１００℃で２時間撹拌し、次いで、８０℃で４時間撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、（Ｅ）−３−クロロ−５−（３−メトキシプロパ−１−エニル）ピコリノニトリルを白色固体として得た。
【０４１１】
工程２：（Ｅ）−２−（３−メトキシプロパ−１−エニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニルボロン酸（１．０当量）および（Ｅ）−３−クロロ−５−（３−メトキシプロパ−１−エニル）ピコリノニトリル（工程１由来）（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（２．０当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０３Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物をメタノールで希釈した。不溶性固体を濾過して除去し、濾液を減圧下で濃縮して粗残渣を得た。粗生成物を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、（Ｅ）−２−（３−メトキシプロパ−１−エニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを黄色固体として得た。1H NMR(dmso-d6):δ 9.24(d, 1H), 9.18(d,1H), 8.54(d, 1H), 7.52- 7.58(m, 2H), 7.31(m, 1H), 7.11(bs, 2H), 6.86 - 7.00(m,2H), 4.18(d, 2H), 3.36(s, 3H).LRMS [M+H] = 266.2。
【０４１２】
実施例３５
２−（３−メトキシプロピル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０４１３】
【化４０】
2013514382.tif 000041
（Ｅ）−２−（３−メトキシプロパ−１−エニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（実施例３４）を含む酢酸エチル／メタノール（１：４、０．０５Ｍ）の溶液に、１０重量％パラジウム炭素（０．２当量）を添加した。水素ガスをバルーンによって導入し、反応物を３時間撹拌した。混合物をセライトパッドで濾過し、ジクロロメタンで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、粗生成物を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、２−（３−メトキシプロピル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを白色固体として得た。1H NMR(CDCl3):δ 8.64(d,1H), 8.46(d, 1H), 8.19(d, 1H), 7.66(d, 1H), 7.53(m, 1H), 7.31(m, 1H), 6.56(bs,2H), 3.37(t, 2H), 3.31(s, 3H), 2.91(t, 2H), 1.93 - 2.00(m, 2H).LRMS [M+H] =268.1。
【０４１４】
実施例３６
２−（プロパ−１−エン−２−イル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０４１５】
【化４１】
2013514382.tif 000042
工程１：３−クロロ−５−（プロパ−１−エン−２−イル）ピコリノニトリル
３，５−ジクロロピコリノニトリル（１．０当量）、４，４，５，５−テトラメチル−２−（プロパ−１−エン−２−イル）−１，３，２−ジオキサボロラン（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（３．４当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０４Ｍ）の溶液を、１００℃で２時間撹拌し、次いで、８０℃で４時間撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、３−クロロ−５−（プロパ−１−エン−２−イル）ピコリノニトリルを白色固体として得た。
【０４１６】
工程２：２−（プロパ−１−エン−２−イル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニルボロン酸（１．０当量）および３−クロロ−５−（プロパ−１−エン−２−イル）ピコリノニトリル（工程１由来）（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（２．０当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０３Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物をメタノールで希釈した。不溶性固体を濾過して除去し、濾液を減圧下で濃縮して粗残渣を得た。粗生成物を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、２−（プロパ−１−エン−２−イル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを白色固体として得た。1H NMR(dmso-d6):δ 9.03(d, 1H), 8.96(d,1H), 8.55(d, 1H), 7.47- 7.53(m, 2H), 7.25(m, 1H), 7.07(bs, 2H)5.80(s, 1H),5.36(s, 1H), 2.27(s, 3H).LRMS [M+H] = 236.2。
【０４１７】
実施例３７
２−イソプロピルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０４１８】
【化４２】
2013514382.tif 000043
２−（プロパ−１−エン−２−イル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（実施例３６）を含む酢酸エチル／メタノール（１：４、０．０５Ｍ）の溶液に、１０重量％パラジウム炭素（０．２当量）を添加した。水素ガスをバルーンによって導入し、反応物を３時間撹拌した。混合物をセライトパッドで濾過し、ジクロロメタンで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、粗生成物を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、２−イソプロピルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを黄色固体として得た。1H NMR(CDCl3):δ 8.69(d,1H), 8.49(d, 1H), 8.25(dd, 1H), 7.65(dd, 1H), 7.53(m, 1H), 7.31(m, 1H),6.02(bs, 2H), 3.15(septet, 1H), 1.37(d, 6H).LRMS [M+H] = 238.2。
【０４１９】
実施例３８
１−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０４２０】
【化４３】
2013514382.tif 000044
工程１：５−ブロモ−２−クロロ−４−メチルピリジン１−オキシド
５−ブロモ−２−クロロ−４−メチルピリジン（１．０当量）およびメタ−クロロ過安息香酸（ｍＣＰＢＡ）（２．５当量）を含むクロロホルム（０．１Ｍ）の溶液を、５０℃で一晩撹拌した。室温への冷却後、Ｃａ（ＯＨ）２（２．５当量）を反応混合物に添加した。沈殿物を濾過し、５％メタノールを含むジクロロメタンおよび酢酸エチルで洗浄した。濾液を、飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液および飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下蒼白色固体に濃縮した。これをさらに精製せずに次の工程で使用した。
【０４２１】
工程２：３−ブロモ−６−クロロ−４−メチルピコリノニトリル
５−ブロモ−２−クロロ−４−メチルピリジン１−オキシド（工程１由来）（１．０当量）を含むアセトニトリル（０．２Ｍ）の溶液に、ＴＭＳＣＮ（４．０当量）およびトリエチルアミン（３．０当量）を添加した。反応物を１００℃で一晩加熱した。室温への冷却後、溶媒を減圧下濃縮し、残渣を、０〜５０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、３−ブロモ−６−クロロ−４−メチルピコリノニトリルを得た。
【０４２２】
工程３：３−クロロ−１−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）フェニルボロン酸（１．０当量）および３−ブロモ−６−クロロ−４−メチルピコリノニトリル（工程２由来）（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（２．０当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０３Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物をメタノールで希釈した。不溶性固体を濾過して除去し、濾液を減圧下で濃縮して粗残渣を得た。粗生成物を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、３−クロロ−１−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを白色固体として得た。1H NMR(dmso-d6):δ 8.44(d, 1H), 7.83(s,1H), 7.50- 7.58(m, 2H), 7.02(bs, 2H), 2.98(s, 3H).LRMS [M+H] = 244.1.
工程４：１−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
３−クロロ−１−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（工程３由来）を含む酢酸エチル／メタノール（１：２、０．０３Ｍ）の溶液に、１０重量％パラジウム炭素（０．２当量）を添加した。反応容器を、Ｐａｒｒ水素添加装置（ｈｙｄｒｏｇｅｎ  Ｐａｒｒ  ａｐｐａｒａｔｕｓ）にて５０ｐｓｉの水素下で一晩震盪させた。混合物をセライトパッドで濾過し、ジクロロメタンで洗浄した。濾液を減圧下濃縮し、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、１−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを白色固体として得た。1H NMR(CDCl3):δ 8.63(d,1H), 8.44(d, 1H), 7.71(dd, 1H), 7.54(m, 1H), 7.45(d, 1H), 7.30(m, 1H), 6.20(bs,2H), 3.01(s, 3H).LRMS [M+H] = 210.1。
【０４２３】
実施例４０
ピリド［３，２−ｆ］［１，７］ナフチリジン−６−アミン
【０４２４】
【化４４】
2013514382.tif 000045
ｔｅｒｔ−ブチル３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イルカルバマート（１．０当量）および３−ブロモピコリノニトリル（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（２．０当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０３Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物をメタノールで希釈した。不溶性固体を濾過して除去し、濾液を減圧下で濃縮して粗残渣を得た。粗生成物を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、ピリド［３，２−ｆ］［１，７］ナフチリジン−６−アミンを白色固体として得た。1H NMR(dmso-d6):δ 9.14(dd, 1H),8.98(dd, 1H), 8.90(dd, 1H), 7.93(dd, 1H), 7.60(bs, 2H), 7.30(dd, 1H).LRMS [M+H]= 197。
【０４２５】
実施例４１
２−エチル−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０４２６】
【化４５】
2013514382.tif 000046
工程１：８−メチル−２−ビニルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
ｔｅｒｔ−ブチル５−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（実施例５／工程２由来）（１．０当量）および３−クロロ−５−ビニルピコリノニトリル（実施例２９／工程１由来）（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（２．０当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０３Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物をメタノールで希釈した。不溶性固体を濾過して除去し、濾液を減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、８−メチル−２−ビニルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを黄色固体として得た。
【０４２７】
工程２：２−エチル−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
８−メチル−２−ビニルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）を含む酢酸エチル／メタノール（１：４、０．０５Ｍ）の溶液に、１０重量％パラジウム炭素（０．２当量）を添加した。水素ガスをバルーンを介して導入し、反応物を３時間撹拌した。混合物をセライトパッドによって濾過し、ジクロロメタンで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、２−エチル−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンをオフホワイトの固体として得た。1H NMR(CDCl3):δ 8.61(d,1H), 8.42(d, 1H), 8.10(d, 1H), 7.44(s, 1H), 7.12(dd, 1H), 6.00 (bs, 2H),2.84(q, 2H), 2.45(s, 3H), 1.33(t, 3H).LRMS [M+H] = 238.1。
【０４２８】
実施例４２
（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）メタノール
【０４２９】
【化４６】
2013514382.tif 000047
工程１：エチル５−クロロ−６−シアノニコチナート
エチル５，６−ジクロロニコチナート（１当量）、シアン化亜鉛（０．７５当量）およびテトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（０．１０当量）を含むＤＭＦ（０．３Ｍ）の溶液を脱気し、次いで、１００℃で３時間加熱した。溶媒を減圧下除去して粗残渣を得た。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、エチル５−クロロ−６−シアノニコチナートを白色固体として得た。
【０４３０】
工程２：エチル５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−カルボキシラート
ｔｅｒｔ−ブチル５−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（実施例５／工程２由来）（１．０当量）およびエチル５−クロロ−６−シアノニコチナート（前工程由来）（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（２．０当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０３Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物をメタノールで希釈した。不溶性固体を濾過して除去し、濾液を減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、エチル５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−カルボキシラートを得た。
【０４３１】
工程３：２−エチル−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
氷水浴中で冷却したエチル５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−カルボキシラート（前工程由来）を含むＴＨＦ（０．２Ｍ）の撹拌溶液に、１Ｎスーパーヒドリドを含むＴＨＦ（１０当量）溶液を添加した。反応完了の際、１Ｎ  ＨＣｌで反応物をクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）メタノールを白色固体として得た。1H NMR(CDCl3):δ 8.68(d,1H), 8.52(d, 1H), 8.04(d, 1H), 7.44(s, 1H), 7.12(dd, 1H), 6.00 (bs, 2H),4.90(s, 2H), 2.45(s, 3H).LRMS [M+H] = 240.1。
【０４３２】
実施例４３
８−メチル−２−プロピルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０４３３】
【化４７】
2013514382.tif 000048
工程１：（Ｅ）−３−クロロ−５−（プロパ−１−エニル）ピコリノニトリル
３，５−ジクロロピコリノニトリル（１．０当量）、（Ｅ）−４，４，５，５−テトラメチル−２−（プロパ−１−エニル）−１，３，２−ジオキサボロラン（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（３．４当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０４Ｍ）の溶液を、９５℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物を酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、白色固体（Ｅ）−３−クロロ−５−（プロパ−１−エニル）ピコリノニトリルを得た。
【０４３４】
工程２：（Ｅ）−８−メチル−２−（プロパ−１−エニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
ｔｅｒｔ−ブチル５−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（実施例５／工程２由来）（１．０当量）および（Ｅ）−３−クロロ−５−（プロパ−１−エニル）ピコリノニトリル（前工程由来）（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（２．０当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０３Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応内容物をメタノールで希釈した。不溶性固体を濾過して除去し、濾液を減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、（Ｅ）−８−メチル−２−（プロパ−１−エニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを黄色固体として得た。
【０４３５】
工程３：８−メチル−２−プロピルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
（Ｅ）−８−メチル−２−（プロパ−１−エニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）を含む酢酸エチル／メタノール（１：４、０．０５Ｍ）の溶液に、１０重量％パラジウム炭素（０．２当量）を添加した。水素ガスをバルーンを介して導入し、反応物を３時間撹拌した。混合物をセライトパッドで濾過し、ジクロロメタンで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、８−メチル−２−プロピルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンをオフホワイトの固体として得た。1H NMR(CDCl3):δ 8.59(d,1H), 8.41(d, 1H), 8.10(d, 1H), 7.43(s, 1H), 7.13(dd, 1H), 5.94 (bs, 2H),2.78(t, 2H), 2.44(s, 3H), 1.75(m, 2H), 0.95(t, 3H).LRMS [M+H] = 252.1。
【０４３６】
実施例４４
２−（２−（１Ｈ−インドール−５−イル）エチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０４３７】
【化４８】
2013514382.tif 000049
工程１：５−（（トリエチルシリル）エチニル）−１Ｈ−インドール
シンチレーションバイアルに、−ヨード−１Ｈ−インドール（１．１当量）、トリエチル（エチニル）シラン（１当量）、トリエチルアミン（５当量）、および無水ＤＭＦ（０．２Ｍ）を添加した。吸引し、そして窒素を３回流した。ＣｕＩ（０．１当量）およびビス（トリフェニルホスフィン）ジクロロ−パラジウム（ＩＩ）（０．１当量）を添加した。バイアルを密閉し、６０℃で一晩加熱した。ＴＬＣによってモニタリングした場合の反応完了の際、バイアルの内容物を、ヘキサンで予め処理したシリカゲルカラムにロードした。生成物を含む全溶離物が回収されるまで、カラムをヘキサンおよびジエチルエーテルで洗浄した。最小限加熱したロータリーエバポレーターを使用してヘキサンおよびエーテルを慎重に蒸留によって除去して、生成物５−（（トリエチルシリル）エチニル）−１Ｈ−インドールを無色オイルとして得た。これを次の工程で直接使用した。
【０４３８】
工程２：５−エチニル−１Ｈ−インドール
０℃に冷却した５−（（トリエチルシリル）エチニル）−１Ｈ−インドール（前工程由来）を含むＴＨＦ（０．２Ｍ）の撹拌溶液に対して、テトラブチルアンモニウムフルオリド溶液（０．５当量）を滴下して処理した。反応混合物が黒色になり、室温に加温する前に３０分間撹拌し続けた。ＴＬＣは完全な変換を示した。水で反応物をクエンチし、ジエチルエーテルで抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、最小限加熱したロータリーエバポレーターを使用して濃縮した。クロマトグラフィ（シリカゲル、ジエチルエーテル）により、生成物５−エチニル−１Ｈ−インドールを無色オイルとして得た。
【０４３９】
工程３：５−（（１Ｈ−インドール−５−イル）エチニル）−３−クロロピコリノニトリル
セプタムで蓋をした丸底フラスコに、５−エチニル−１Ｈ−インドール（前工程由来）（１．１当量）、３，５−ジクロロピコリノニトリル（１当量）、トリエチルアミン（５当量）、および無水ＤＭＦ（０．２Ｍ）を添加した。吸引し、そして窒素を３回流した。ＣｕＩ（０．０５当量）およびビス（トリフェニルホスフィン）ジクロロ−パラジウム（ＩＩ）（０．０５当量）を添加した。セプタムを還流冷却器と交換し、フラスコを窒素雰囲気下にて６０℃で一晩加熱した。ＴＬＣによってモニタリングした場合の反応完了の際、フラスコの内容物を、ヘキサンで予め処理した大きなシリカゲルカラムにロードした。フラッシュクロマトグラフィ（シリカゲル、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（１：４％））により、生成物５−（（１Ｈ−インドール−５−イル）エチニル）−３−クロロピコリノニトリルを得た。
【０４４０】
工程４：２−（（１Ｈ−インドール−５−イル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
還流凝縮器を備えた丸底フラスコに、５−（（１Ｈ−インドール−５−イル）エチニル）−３−クロロピコリノニトリル（前工程由来）（１当量）、ｔｅｒｔ−ブチル２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（実施例５／工程２由来）（１．２５当量）、Ｋ３ＰＯ４（２当量）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（０．０５当量）、および２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，６’−ジメトキシビフェニル（０．１当量）を添加した。ｎ−ブタノールおよび水（５：２、０．２Ｍ）を添加し、内容物を３回脱気（吸引後窒素を流すことにより）した。反応混合物を、油浴中窒素下にて１００℃で一晩強く撹拌した。内容物を冷却し、２００ｍＬの水に溶解し（ｔａｋｅｎ  ｕｐ）、その後に塩化メチレンで抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィ（シリカゲル、０〜５０％ＥｔＯＡｃを含むＣＨ２Ｃｌ２）により、生成物２−（（１Ｈ−インドール−５−イル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを黄色固体として得た。
【０４４１】
工程５：２−（２−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）エチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
丸底フラスコに、撹拌子を使用して２−（（１Ｈ−インドール−５−イル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）（１当量）を添加した。エタノールおよび塩化メチレン（１：２、０．２Ｍ）を添加し、その後にパラジウム炭素（ｐａｌｌａｄｉｕｍ  ｉｎ  ｃａｒｂｏｎ）（活性化粉末、湿式、炭素上１０％（１０％  ｏｎ  ｃａｒｂｏｎ）、０．１当量）を添加した。内容物を吸引し、そしてその後に水素を３回流した。反応混合物を、水素バルーン下にて室温で一晩強く撹拌した。その後、反応混合物をセライトパッドで濾過し、次に濾液がＵＶ吸収を持たなくなるまでセライトパッドを塩化メチレンおよびＥｔＯＡｃで洗浄した。合わせた有機洗浄物を濃縮した。フラッシュクロマトグラフィ（シリカゲル、０〜５０％ＥｔＯＡｃを含むＣＨ２Ｃｌ２）により、生成物２−（２−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）エチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを黄色固体として得た。1H NMR(CDCl3):δ 8.54(d,1H), 8.34(d, 1H), 8.28(s, 1H), 7.99(d, 1H), 7.64 - 7.56(m, 1H), 7.50 - 7.35(m,1H), 7, 24(d, 1H), 7.12(t, 1H), 7.08(dd, 1H), 6.92(dd, 1H), 6.41(s, 1H), 6.01(bs,2H), 3.16 - 3.12(m, 2H), 3.10 - 3.05(m, 2H), 2.43(s, 3H). LRMS [M+H] = 353.2。
【０４４２】
実施例４５
２−（４−エトキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０４４３】
【化４９】
2013514382.tif 000050
工程１：３−クロロ−５−（（４−エトキシフェニル）エチニル）ピコリノニトリル
セプタムで蓋をした丸底フラスコに、１−エトキシ−４−エチニルベンゼン（１．１当量）、３，５−ジクロロピコリノニトリル（１当量）、トリエチルアミン（５当量）、および無水ＤＭＦ（０．２Ｍ）を添加した。吸引し、そして窒素を３回流した。ＣｕＩ（０．０５当量）およびビス（トリフェニルホスフィン）ジクロロ−パラジウム（ＩＩ）（０．０５当量）を添加した。セプタムを還流凝縮器と交換し、フラスコを窒素雰囲気下にて６０℃で一晩加熱した。ＴＬＣによってモニタリングした場合の反応完了の際、フラスコの内容物を、ヘキサンで予め処理した大きなシリカゲルカラムにロードした。フラッシュクロマトグラフィ（シリカゲル、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ（１：４％））により、生成物３−クロロ−５−（（４−エトキシフェニル）エチニル）ピコリノニトリルを得た。
【０４４４】
工程２：２−（（４−エトキシフェニル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
還流冷却器を備えた丸底フラスコに、３−クロロ−５−（（４−エトキシフェニル）エチニル）ピコリノニトリル（前工程由来）（１当量）、ｔｅｒｔ−ブチル５−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（実施例５／工程２由来）（１．２５当量）、Ｋ３ＰＯ４（２当量）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（０．０５当量）、および２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，６’−ジメトキシビフェニル（０．１当量）を添加した。ｎ−ブタノールおよび水（５：２、０．２Ｍ）を添加し、内容物を３回脱気（吸引後窒素を流すことにより）した。反応混合物を、油浴中窒素下にて１００℃で一晩強く撹拌した。内容物を冷却し、２００ｍＬの水に溶解し、その後に塩化メチレンで抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィ（シリカゲル、０〜５０％ＥｔＯＡｃを含むＣＨ２Ｃｌ２）により、生成物２−（（４−エトキシフェニル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを得た。
【０４４５】
工程３：２−（４−エトキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
丸底フラスコに、撹拌子を使用して２−（（４−エトキシフェニル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）（１当量）を添加した。エタノールおよび塩化メチレン（１：２、０．２Ｍ）を添加し、その後にパラジウム炭素（活性化粉末、湿式、炭素上１０％、０．１当量）を添加した。内容物を真空下で脱気し、その後に水素を流した（３回）。反応混合物を、水素バルーン下にて室温で一晩強く撹拌した。その後、反応混合物をセライトパッドで濾過し、次に濾液がＵＶ吸収を持たなくなるまでセライトパッドを塩化メチレンおよびＥｔＯＡｃで洗浄した。合わせた有機洗浄物を濃縮した。フラッシュクロマトグラフィ（シリカゲル、０〜５０％ＥｔＯＡｃを含むＣＨ２Ｃｌ２）により、生成物を黄色固体として得た。トルエンを使用したさらなる再結晶により、生成物２−（４−エトキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを白色微細結晶として得た。1H NMR(CDCl3):δ 8.52(d,1H), 8.30(d, 1H), 8.10(d, 1H), 7.46(s, 1H), 7.12(dd, 1H), 7.06(d, 2H), 6.75(d,2H), 5.95(bs, 2H), 3.93(q, 2H), 3.11 - 3.05(dd, 2H), 2.95 - 2.90(dd, 2H),2.44(s, 3H), 1.33(t, 3H). LRMS [M+H] = 358.2。
【０４４６】
実施例４６
８−メチル−２−（４−フェノキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０４４７】
【化５０】
2013514382.tif 000051
工程１：３−クロロ−５−（（４−フェノキシフェニル）エチニル）ピコリノニトリル
３−クロロ−５−（（４−フェノキシフェニル）エチニル）ピコリノニトリルを、実施例４５の工程１について記載の手順にしたがって、１−エチニル−４−フェノキシベンゼン（市販品）から調製した。
【０４４８】
工程２：８−メチル−２−（（４−フェノキシフェニル）エチニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
８−メチル−２−（（４−フェノキシフェニル）エチニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４５の工程２について記載の手順にしたがって、３−クロロ−５−（（４−フェノキシフェニル）エチニル）ピコリノニトリル（前工程由来）から調製した。
【０４４９】
工程３：８−メチル−２−（４−フェノキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
８−メチル−２−（４−フェノキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４５の工程３について記載の手順にしたがって、８−メチル−２−（（４−フェノキシフェニル）エチニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）から調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.54(d,1H), 8.30(d, 1H), 8.01(d, 1H), 7.45(s, 1H), 7.25 - 7.20(m, 2H), 7.12(dd, 1H),7.07 - 6.84(m, 8H), 6.00(bs, 2H), 3.13 - 3.08(dd, 2H), 2.99 - 2.94(dd, 2H),2.44(s, 3H). LRMS [M+H] = 406.2。
【０４５０】
実施例４７
２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０４５１】
【化５１】
2013514382.tif 000052
工程１：（（２，４−ジメチルフェニル）エチニル）トリエチルシラン
（（２，４−ジメチルフェニル）エチニル）トリエチルシランを、実施例４４の工程１について記載の手順にしたがって、１−ヨード−２，４−ジメチルベンゼン（市販品）から調製した。
【０４５２】
工程２：１−エチニル−２，４−ジメチルベンゼン
１−エチニル−２，４−ジメチルベンゼンを、実施例４４の工程２について記載の手順にしたがって、（（２，４−ジメチルフェニル）エチニル）トリエチルシラン（前工程由来）から調製した。
【０４５３】
工程３：３−クロロ−５−（（２，４−ジメチルフェニル）エチニル）ピコリノニトリル
３−クロロ−５−（（２，４−ジメチルフェニル）エチニル）ピコリノニトリルを、実施例４４の工程３について記載の手順にしたがって、１−エチニル−２，４−ジメチルベンゼン（前工程由来）から調製した。
【０４５４】
工程４：２−（（２，４−ジメチルフェニル）エチニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（（２，４−ジメチルフェニル）エチニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４４の工程４について記載の手順にしたがって、３−クロロ−５−（（２，４−ジメチルフェニル）エチニル）−ピコリノニトリル（前工程由来）から調製した。
【０４５５】
工程５：２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４４の工程５について記載の手順にしたがって、２−（（２，４−ジメチルフェニル）エチニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）から調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.60(d, 1H),8.33(d, 1H), 8.14(d, 1H), 7.67(d, 1H), 7.54(t, 1H), 7.31(t, 1H), 6.96 - 6.86(m,3H), 6.29(bs, 2H), 3.04 - 3.10(dd, 2H), 2.97 - 2.91(dd, 2H), 2.24(s, 3H),2.20(s, 3H). LRMS [M+H] = 328.2。
【０４５６】
実施例４８
２−（２，４−ジメチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０４５７】
【化５２】
2013514382.tif 000053
工程１：２−（（２，４−ジメチルフェニル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（（２，４−ジメチルフェニル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４４の工程４について記載の手順にしたがって、３−クロロ−５−（（２，４−ジメチルフェニル）エチニル）ピコリノニトリル（実施例４７／工程３由来）およびｔｅｒｔ−ブチル５−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（実施例５／工程２由来）から調製した。
【０４５８】
工程２：２−（２，４−ジメチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（２，４−ジメチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４４の工程５について記載の手順にしたがって、１−エチニル−４−フェノキシベンゼン（前工程由来）から調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.56(d,1H), 8.28(d, 1H), 8.00(d, 1H), 7.46(s, 1H), 7.14(dd, 1H), 6.95 - 6.85(m, 3H),6.26(bs, 2H), 3.08 - 3.02(dd, 2H), 2.96 - 2.90(dd, 2H), 2.45(s, 3H), 2.23(s,3H), 2.19(s, 3H). LRMS [M+H] = 342.2。
【０４５９】
実施例４９
２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０４６０】
【化５３】
2013514382.tif 000054
工程１：３−クロロ−５−（（４−メトキシ−２−メチルフェニル）エチニル）ピコリノニトリル
３−クロロ−５−（（４−メトキシ−２−メチルフェニル）エチニル）ピコリノニトリルを、実施例４４／工程３について記載の手順にしたがって、１−エチニル−４−メトキシ−２−メチルベンゼン（市販品）から調製した。
【０４６１】
工程２：２−（（４−メトキシ−２−メチルフェニル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（（４−メトキシ−２−メチルフェニル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４４の工程４について記載の手順にしたがって、３−クロロ−５−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ピコリノニトリル（前工程由来）から調製した。
【０４６２】
工程３：２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４４の工程５について記載の手順にしたがって、２−（（４−メトキシ−２−メチルフェニル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）から調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.53(d,1H), 8.29(d, 1H), 8.01(d, 1H), 7.44(s, 1H), 7.12(dd, 1H), 6.93(d, 1H), 6.67(d,1H), 6.60(dd, 1H), 5.93(bs, 2H), 3.70(s, 3H), 3.05 - 3.00(dd, 2H), 2.93 -2.88(dd, 2H), 2.44(s, 3H), 2.19(s, 3H). LRMS [M+H] = 358.2。
【０４６３】
実施例５０
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノール
【０４６４】
【化５４】
2013514382.tif 000055
氷水浴中の２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（実施例４９）を含む塩化メチレン（０．２Ｍ）の撹拌溶液に、１ＮのＢＢｒ３溶液（２当量）を含むＣＨ２Ｃｌ２を滴下して添加した。３０分後、メタノールで反応物をクエンチし、減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜２０％メタノールを含むジクロロメタンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノールを白色固体として得た。1H NMR(DMSO-d6):δ 8.99(s,1H), 8.75(d, 1H), 8.60(d, 1H), 8.27(d, 1H), 7.28(s, 1H), 7.09(dd, 1H), 6.99(bs,2H), 6.88(d, 1H), 6.49(d, 1H), 6.42(dd, 1H), 3.02 - 2.96(dd, 2H), 2.86 -2.81(dd, 2H), 2.38(s, 3H), 2.13(s, 3H). LRMS [M+H] = 344.2。
【０４６５】
実施例５１
２−（２−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）エチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０４６６】
【化５５】
2013514382.tif 000056
工程１：（（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）エチニル）トリエチルシラン
（（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）エチニル）トリエチルシランを、実施例４４の工程１について記載の手順にしたがって、５−ヨード−２，３−ジヒドロベンゾフラン（市販品）から調製した。
【０４６７】
工程２：５−エチニル−２，３−ジヒドロベンゾフラン
５−エチニル−２，３−ジヒドロベンゾフランを、実施例４４／工程２について記載の手順にしたがって、（（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）エチニル）トリエチルシラン（前工程由来）から調製した。
【０４６８】
工程３：３−クロロ−５−（（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）エチニル）ピコリノニトリル
３−クロロ−５−（（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）エチニル）ピコリノニトリルを、実施例４４／工程３について記載の手順にしたがって、５−エチニル−２，３−ジヒドロベンゾフラン（前工程由来）から調製した。
【０４６９】
工程４：２−（（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４４／工程４について記載の手順にしたがって、３−クロロ−５−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ピコリノニトリル（前工程由来）から調製した。
【０４７０】
工程５：２−（２−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）エチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（２−（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）エチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４４／工程５について記載の手順にしたがって、２−（（２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）から調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.62(d,1H), 8.40(d, 1H), 8.11(d, 1H), 7.53(s, 1H), 7.21(dd, 1H), 6.99(s, 1H), 6.95(dd,1H), 6.74(d, 1H), 6.05(bs, 2H), 4.57(t, 2H), 3.19 - 3.13(m, 4H), 3.03 -2.98(dd, 2H), 2.54(s, 3H). LRMS [M+H] = 356.2。
【０４７１】
実施例５２
２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エタノール
【０４７２】
【化５６】
2013514382.tif 000057
工程１：（Ｚ）−３−クロロ−５−（２−エトキシビニル）ピコリノニトリル
（Ｚ）−３−クロロ−５−（２−エトキシビニル）ピコリノニトリルを、実施例４３／工程１について記載の手順にしたがって、（Ｚ）−２−（２−エトキシビニル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（市販品）から調製した。
【０４７３】
工程２：（Ｚ）−２−（２−エトキシビニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
（Ｚ）−２−（２−エトキシビニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４３／工程２について記載の手順にしたがって、（Ｚ）−３−クロロ−５−（２−エトキシビニル）ピコリノニトリル（前工程由来）から調製した。
【０４７４】
工程３：２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エタノール
（Ｚ）−２−（２−エトキシビニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）を含む濃ＨＣｌおよびジオキサン（０．１Ｍ）の２：５混合物の溶液を、６０℃で一晩加熱した。室温への冷却の際、反応混合物を過剰量の飽和ＮａＨＣＯ３溶液で処理し、その後にＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を濃縮し、ＴＨＦ（０．２Ｍ）中に溶解し、１ＮスーパーヒドリドのＴＨＦ溶液（１０当量）で０℃にて処理した。反応混合物を室温に加温し、一晩撹拌した。反応物を実施例４２／工程３について記載の手順にしたがって処理して、２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エタノールを白色固体として得た。1H NMR(CDCl3):δ 8.61(d,1H), 8.47(d, 1H), 8.01(d, 1H), 7.41(s, 1H), 7, 10(d, 1H), 6.40(s, 1H), 6.01(bs,2H), 4.01(t, 2H), 3.06(t, 2H), 2.43(s, 3H). LRMS [M+H] = 254.1。
【０４７５】
実施例５３
３−メチル−９−フェニル−９，１０−ジヒドロベンゾ［ｆ］フロ［２，３−ｂ］［１，７］ナフチリジン−６−アミン
【０４７６】
【化５７】
2013514382.tif 000058
工程１：５−ブロモ−２−クロロ−３−メチルピリジン１−オキシド
５−ブロモ−２−クロロ−３−メチルピリジン１−オキシドを、実施例１９／工程１について記載の手順にしたがって、５−ブロモ−２−クロロ−３−メチルピリジン（市販品）から調製した。
【０４７７】
工程２：３−ブロモ−６−クロロ−５−メチルピコリノニトリル
３−ブロモ−６−クロロ−５−メチルピコリノニトリルを、実施例１９／工程２について記載の手順にしたがって、（Ｚ）−３−クロロ−５−（２−エトキシビニル）ピコリノニトリル（前工程由来）から調製した。
【０４７８】
工程３：３−ブロモ−６−クロロ−５−（２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）ピコリノニトリル
３−ブロモ−６−クロロ−５−メチルピコリノニトリル（前工程由来）を含むＴＨＦ（０．２Ｍ）の溶液を、−７８℃に冷却した。ＬＤＡ（２Ｎ溶液、２当量）を滴下して添加した。反応物を−７８℃で１時間撹拌し続け、その後にベンズアルデヒド（１当量）を添加した。反応物を−７８℃でさらに３０分間撹拌し続け、その後に室温にゆっくり加温した。飽和ＮＨ４Ｃｌで反応物をクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機洗浄物を濃縮した。フラッシュクロマトグラフィ（シリカゲル、２０〜５０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン）により、生成物３−ブロモ−６−クロロ−５−（２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル）ピコリノニトリルを黄色固体として得た。
【０４７９】
工程４：３−メチル−９−フェニル−９，１０−ジヒドロベンゾ［ｆ］フロ［２，３−ｂ］［１，７］ナフチリジン−６−アミン
３−メチル−９−フェニル−９，１０−ジヒドロベンゾ［ｆ］フロ［２，３−ｂ］［１，７］ナフチリジン−６−アミンを、実施例４４／工程４について記載の手順にしたがって、３−ブロモ−６−クロロ−５−メチルピコリノニトリル（前工程由来）から調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.45(s,1H), 7.98(d, 1H), 7.45(s, 1H), 7.40 - 7.28(m, 5H), 7.12(d, 1H), 5.93(t, 1H),5.93(brs, 2H), 3.86(dd, 1H), 3.40(dd, 1H), 2.44(s, 3H). LRMS [M+H] = 328.1。
【０４８０】
実施例５４
８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２，５−ジアミン
【０４８１】
【化５８】
2013514382.tif 000059
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル５，６−ジクロロピリジン−３−イルカルバマート
０℃で撹拌した５，６−ジクロロピリジン−３−アミン（市販品）を含むＴＨＦ（０．２Ｍ）の溶液に、（ＢＯＣ）２Ｏ（１．２当量）を添加した。ＴＬＣによってモニタリングした場合に完全に変換されるまで反応混合物を４０℃で加熱した。次いで、反応混合物を濃縮した。粗物質のフラッシュクロマトグラフィ（シリカゲル、２０〜５０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン）により、ｔｅｒｔ−ブチル５，６−ジクロロピリジン−３−イルカルバマートを得た。
【０４８２】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イルカルバマート
ｔｅｒｔ−ブチル５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イルカルバマートを、実施例４２／工程１について記載の手順にしたがって、ｔｅｒｔ−ブチル５，６−ジクロロピリジン−３−イルカルバマート（前工程由来）から調製した。
【０４８３】
工程３：８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２，５−ジアミン
８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２，５−ジアミン（副生成物として）を、実施例５／工程２について記載の手順にしたがって、ｔｅｒｔ−ブチル５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イルカルバマート（前工程由来）からｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イルカルバマート（主要生成物として）と共に調製した。1H NMR(DMSO-d6):δ 10.11(s,1H), 9.02(s, 1H), 8.82(d, 1H), 8.06(d, 1H), 7.34(s, 1H), 7, 15(dd, 1H), 6.99(s,2H), 2.44(s, 3H). LRMS [M+H] = 225.1。
【０４８４】
実施例５５
１−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）プロパン−２−オール
【０４８５】
【化５９】
2013514382.tif 000060
工程１：３−ブロモ−５−メチルピコリノニトリル
３−ブロモ−５−メチルピコリノニトリルを、実施例４２／工程１について記載の手順にしたがって、２，３−ジブロモ−５−メチルピリジン（市販品）から調製した。
【０４８６】
工程２：３−ブロモ−５−（２−ヒドロキシプロピル）ピコリノニトリル
３−ブロモ−５−（２−ヒドロキシプロピル）ピコリノニトリルを、実施例５３／工程３について記載の手順にしたがって、３−ブロモ−５−メチルピコリノニトリル（前工程由来）およびアセトアルデヒドから調製した。
【０４８７】
工程３：１−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）プロパン−２−オール
１−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）プロパン−２−オールを、実施例５３の工程４について記載の手順にしたがって、３−ブロモ−５−（２−ヒドロキシプロピル）ピコリノニトリル（前工程由来）から調製した。1H NMR(メタノール-d4):δ 8.72(d,1H), 8.68(d, 1H), 8.24(d, 1H), 7.38(s, 1H), 7, 18(dd, 1H), 4.16 - 4.07(m, 1H),3.05 - 2.99(m, 2H), 2.97 - 2.90(m, 2H), 2.47(s, 3H), 1.28(d, 3H). LRMS [M+H] =268.1。
【０４８８】
実施例５６
２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）アセトニトリル
【０４８９】
【化６０】
2013514382.tif 000061
工程１：２，３−ジクロロ−５−（（メトキシメトキシ）メチル）ピリジン
０℃の（５，６−ジクロロピリジン−３−イル）メタノール（市販品）を含むＣＨ２Ｃｌ２（０．２Ｍ）の撹拌溶液に、トリエチルアミン（３当量）およびクロロ（メトキシ）メタン（２当量）を添加した。０℃で３時間の撹拌後、反応混合物を濃縮し、粗物質をクロマトグラフィ（シリカゲル、２０〜５０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン）によって精製して、２，３−ジクロロ−５−（（メトキシメトキシ）メチル）ピリジンを無色オイルとして得た。
【０４９０】
工程２：３−クロロ−５−（（メトキシメトキシ）メチル）ピコリノニトリル
３−クロロ−５−（（メトキシメトキシ）メチル）ピコリノニトリルを、実施例４２／工程１について記載の手順にしたがって、２，３−ジクロロ−５−（（メトキシメトキシ）メチル）ピリジン（前工程由来）から調製した。
【０４９１】
工程３：３−クロロ−５−（ヒドロキシメチル）ピコリノニトリル
２，３−ジクロロ−５−（（メトキシメトキシ）メチル）ピリジン（前工程由来）を含むメタノール（０．２Ｍ）の撹拌溶液に、濃ＨＣｌ（１０当量）を添加した。室温で一晩の撹拌後、反応混合物を真空下で濃縮し、得られた粗物質をクロマトグラフィ（シリカゲル、２０〜５０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン）によって精製して、３−クロロ−５−（ヒドロキシメチル）ピコリノニトリルを得た。
【０４９２】
工程４：３−クロロ−５−（クロロメチル）ピコリノニトリル
０℃の３−クロロ−５−（ヒドロキシメチル）ピコリノニトリル（前工程由来）を含むＣＨ２Ｃｌ２（０．２Ｍ）の撹拌溶液に、塩化チオニル（１０当量）を添加した。室温で一晩の撹拌後、反応混合物を真空下で濃縮し、得られた粗物質をクロマトグラフィ（シリカゲル、２０〜５０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン）によって精製して、３−クロロ−５−（クロロメチル）ピコリノニトリルを無色オイルとして得た。
【０４９３】
工程５：３−クロロ−５−（シアノメチル）ピコリノニトリル
３−クロロ−５−（クロロメチル）ピコリノニトリル（前工程由来）を含むＤＭＳＯ（０．２Ｍ）の溶液に、シアン化ナトリウム（１．２５当量）を添加した。反応混合物を、マイクロ波照射下にて１３０℃で加熱した。反応混合物を水およびＥｔＯＡｃ中に溶解し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗物質のフラッシュクロマトグラフィ（シリカゲル、２０〜５０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン）により、３−クロロ−５−（シアノメチル）ピコリノニトリルを得た。
【０４９４】
工程６：２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）アセトニトリル
２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）アセトニトリルを、実施例４４／工程４について記載の手順にしたがって、３−クロロ−５−（シアノメチル）ピコリノニトリル（前工程由来）から調製した。1H NMR(メタノール-d4):δ 8.79(d,1H), 8.78(d, 1H), 8.20(d, 1H), 7.66(s, 2H), 7.36(s, 1H), 7, 18(dd, 1H), 4.15(d,2H), 2.43(s, 3H). LRMS [M+H] = 249.1。
【０４９５】
実施例５７
Ｎ−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）アセトアミド
【０４９６】
【化６１】
2013514382.tif 000062
工程１：Ｎ−（５，６−ジクロロピリジン−３−イル）アセトアミド
０℃の５，６−ジクロロピリジン−３−アミン（市販品）およびトリエチルアミン（３当量）を含むＣＨ２Ｃｌ２（０．２Ｍ）の撹拌溶液に、塩化アセチル（２当量）を添加した。室温で一晩の撹拌後、反応混合物を真空下で濃縮し、得られた粗残渣を、クロマトグラフィ（シリカゲル、２０〜５０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン）によって精製して、Ｎ−（５，６−ジクロロピリジン−３−イル）アセトアミドを得た。
【０４９７】
工程２：Ｎ−（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）アセトアミド
Ｎ−（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）アセトアミドを、実施例４２／工程１について記載の手順にしたがって、Ｎ−（５，６−ジクロロピリジン−３−イル）アセトアミド（前工程由来）から調製した。
【０４９８】
工程３：Ｎ−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）アセトアミド
Ｎ−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）アセトアミドを、実施例４４／工程４について記載の手順にしたがって、Ｎ−（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）アセトアミド（前工程由来）から調製した。1H NMR(DMSO-d6):δ 10.99(s,1H), 8.18(d, 1H), 8.95(d, 1H), 8.12(d, 1H), 7.44(s, 1H), 7, 35(dd, 1H), 2.43(s,3H), 2.16(s, 3H). LRMS [M+H] = 267.1。
【０４９９】
実施例５８
２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）−１−（２，４−ジメチルフェニル）エタノール
【０５００】
【化６２】
2013514382.tif 000063
工程１：３−ブロモ−５−（２−（２，４−ジメチルフェニル）−２−ヒドロキシエチル）ピコリノニトリル
３−ブロモ−５−（２−（２，４−ジメチルフェニル）−２−ヒドロキシエチル）ピコリノニトリルを、実施例５３／工程３について記載の手順にしたがって、３−ブロモ−５−メチルピコリノニトリル（実施例５５／工程１）および２，４−ジメチルベンズアルデヒドから調製した。
【０５０１】
工程２：２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）−１−（２，４−ジメチルフェニル）エタノール
２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）−１−（２，４−ジメチルフェニル）エタノールを、実施例５３／工程４について記載の手順にしたがって、３−ブロモ−５−（２−（２，４−ジメチルフェニル）−２−ヒドロキシエチル）ピコリノニトリル（前工程由来）から調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.67(d,1H), 8.45(d, 1H), 8.06(d, 1H), 7.57(s, 1H), 7.42(d, 1H), 7.23(d, 1H), 7.11(d,1H), 7.01(s, 1H), 5.31(dd, 1H), 3.28 - 3.25(m, 2H), 2.53(s, 3H), 2.35(s, 3H),2.33(s, 3H). LRMS [M+H] = 358.2。
【０５０２】
実施例５９
２−（２−（６−メトキシ−４−メチルピリジン−３−イル）エチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０５０３】
【化６３】
2013514382.tif 000064
工程１：２−メトキシ−４−メチル−５−（（トリエチルシリル）エチニル）ピリジン
２−メトキシ−４−メチル−５−（（トリエチルシリル）エチニル）ピリジンを、実施例４４／工程１について記載の手順にしたがって、５−ブロモ−２−メトキシ−４−メチルピリジン（市販品）から調製した。
【０５０４】
工程２：５−エチニル−２−メトキシ−４−メチルピリジン
５−エチニル−２−メトキシ−４−メチルピリジンを、実施例４４／工程２について記載の手順にしたがって、２−メトキシ−４−メチル−５−（（トリエチルシリル）エチニル）ピリジン（前工程由来）から調製した。
【０５０５】
工程３：３−クロロ−５−（（６−メトキシ−４−メチルピリジン−３−イル）エチニル）ピコリノニトリル
３−クロロ−５−（（６−メトキシ−４−メチルピリジン−３−イル）エチニル）ピコリノニトリルを、実施例４４／工程３について記載の手順にしたがって、５−エチニル−２−メトキシ−４−メチルピリジン（前工程由来）から調製した。
【０５０６】
工程４：２−（（６−メトキシ−４−メチルピリジン−３−イル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（（６−メトキシ−４−メチルピリジン−３−イル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４４／工程４について記載の手順にしたがって、３−クロロ−５−（（６−メトキシ−４−メチルピリジン−３−イル）エチニル）ピコリノニトリル（前工程由来）から調製した。
【０５０７】
工程５：２−（２−（６−メトキシ−４−メチルピリジン−３−イル）エチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（２−（６−メトキシ−４−メチルピリジン−３−イル）エチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４４／工程５について記載の手順にしたがって、２−（（６−メトキシ−４−メチルピリジン−３−イル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）から調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.65(d,1H), 8.43(d, 1H), 8.13(d, 1H), 7.87(s, 1H), 7.57(s, 1H), 7.24(dd, 1H), 6.60(s,1H), 6.39(bs, 2H), 3.91(s, 3H), 3.17 - 3.11(dd, 2H), 3.03 - 2.98(dd, 2H),2.54(s, 3H), 2.28(s, 3H). LRMS [M+H] = 359.2。
【０５０８】
実施例６０
４−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）ブタン−１−オール
【０５０９】
【化６４】
2013514382.tif 000065
工程１：４−（４−（（トリメチルシリル）エチニル）フェニル）ブタ−３−イン−１−オール
４−（４−（（トリメチルシリル）エチニル）フェニル）ブタ−３−イン−１−オールを、実施例４４／工程１について記載の手順にしたがって、（（４−ブロモフェニル）エチニル）トリメチルシラン（市販品）およびブタ−３−イン−１−オール（市販品）から調製した。
【０５１０】
工程２：４−（４−エチニルフェニル）ブタ−３−イン−１−オール
４−（４−エチニルフェニル）ブタ−３−イン−１−オールを、実施例４４／工程２について記載の手順にしたがって、４−（４−（（トリメチルシリル）エチニル）フェニル）ブタ−３−イン−１−オールから調製した。
【０５１１】
工程３：５−（（４−（４−ヒドロキシブタ−１−イニル）フェニル）エチニル）−３−メチルピコリノニトリル
５−（（４−（４−ヒドロキシブタ−１−イニル）フェニル）エチニル）−３−メチルピコリノニトリルを、実施例４４／工程３について記載の手順にしたがって、４−（４−エチニルフェニル）ブタ−３−イン−１−オール（前工程由来）から調製した。
【０５１２】
工程４：４−（４−（（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチニル）フェニル）ブタ−２−イン−１−オール
４−（４−（（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチニル）フェニル）ブタ−２−イン−１−オールを、実施例４４／工程４について記載の手順にしたがって、５−（（４−（４−ヒドロキシブタ−１−イニル）フェニル）エチニル）−３−メチルピコリノニトリル（前工程由来）から調製した。
【０５１３】
工程５：４−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）ブタン−１−オール
４−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）ブタン−１−オールを、実施例４４／工程５について記載の手順にしたがって、４−（４−（（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチニル）フェニル）ブタ−２−イン−１−オール（前工程由来）から調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.58(d,1H), 8.36(d, 1H), 8.07(d, 1H), 7.53(s, 1H), 7.20(dd, 1H), 7.10(dd, 4H),6.20(bs, 2H), 3.68(t, 2H), 3.20 - 3.15(dd, 2H), 3.06 - 3.01(dd, 2H), 2.64(t,2H), 2.52(s, 3H), 1.75 - 1.57(m, 4H). LRMS [M+H] = 386.2。
【０５１４】
実施例６１
メチル３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）プロパノアート
【０５１５】
【化６５】
2013514382.tif 000066
工程１：メチル３−（４−ヨードフェニル）プロパノアート
０℃の３−（４−ヨードフェニル）プロパン酸（市販品）を含むトルエンおよびメタノール（９：１、０．２Ｍ）の撹拌溶液に、（ジアゾメチル）トリメチルシラン（１ＮのＥｔ２Ｏ溶液、２当量）を添加した。室温で一晩の撹拌後、反応混合物を真空下で濃縮し、得られた粗残渣を、クロマトグラフィ（シリカゲル、２０〜５０％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン）によって精製して、メチル３−（４−ヨードフェニル）プロパノアートを得た。
【０５１６】
工程２：メチル３−（４−エチニルフェニル）プロパノアート
メチル３−（４−エチニルフェニル）プロパノアートを、実施例４４／工程１および２について記載の手順にしたがって、メチル３−（４−ヨードフェニル）プロパノアート（前工程由来）から調製した。
【０５１７】
工程３：メチル３−（４−（（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）エチニル）フェニル）プロパノアート
メチル３−（４−（（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）エチニル）フェニル）プロパノアートを、実施例４４／工程３について記載の手順にしたがって、メチル３−（４−エチニルフェニル）プロパノアート（前工程由来）から調製した。
【０５１８】
工程４：メチル３−（４−（（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチニル）フェニル）プロパノアート
メチル３−（４−（（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチニル）フェニル）プロパノアートを、実施例４４／工程４について記載の手順にしたがって、メチル３−（４−（（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）エチニル）フェニル）プロパノアート（前工程由来）から調製した。
【０５１９】
工程５：メチル３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）プロパノアート
メチル３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）プロパノアートを、実施例４４／工程５について記載の手順にしたがって、メチル３−（４−（（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチニル）フェニル）プロパノアート（前工程由来）から調製した。1H NMR(DMSO-d6):δ 8.83(d,1H), 8.72(d, 1H), 8.32(d, 1H), 7.35(s, 1H), 7.21-7.12(m, 5H), 7.05(br s, 2H),7.05(dd, 2H), 3.57(s, 3H), 3.19 - 3.13(dd, 2H), 3.06 - 3.00(dd, 2H), 2.81(t,2H), 2.60(t, 2H), 2.45(s, 3H). LRMS [M+H] = 400.2。
【０５２０】
実施例６２
３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）プロパン−１−オール
【０５２１】
【化６６】
2013514382.tif 000067
３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）プロパン−１−オールを、実施例４２／工程３について記載の手順にしたがって、メチル３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）プロパノアート（実施例６１由来）から調製した。ＴＦＡ塩の1H NMR:(DMSO-d6):δ 9.56(s,1H), 9.24(s, 1H), 8.92(d, 1H), 8.81(d, 1H), 8.43(d, 1H), 7.44(d, 1H), 7.35(d,1H), 7.13(dd, 2H), 7.05(dd, 2H), 3.32(t, 2H), 3.18 - 3.12(dd, 2H), 3.02 -2.95(dd, 2H), 2.50(t, 2H), 2.44(s, 3H), 1.65 - 1.57(m, 2H). LRMS [M+H] = 372.2。
【０５２２】
実施例６３
４−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）−２−メチルブタン−２−オール
【０５２３】
【化６７】
2013514382.tif 000068
０℃のメチル３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）プロパノアート（実施例６１由来）を含むＴＨＦ（０．２Ｍ）の溶液に、メチルマグネシウムブロミドを含むＴＨＦ（１．０Ｍ、２当量）の溶液を滴下して添加した。室温で一晩の撹拌後、反応混合物を真空下で濃縮し、得られた粗残渣を、クロマトグラフィ（シリカゲル、５０〜１００％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン）によって精製して、４−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）−２−メチルブタン−２−オールを得た。1H NMR(CDCl3):δ 8.64(d,1H), 8.34(d, 1H), 8.06(t, 1H), 7.57(d, 1H), 7.30 - 7.20(m, 2H), 7.18 - 7.07(m,4H), 6.67(bs, 2H), 3.24 - 3.16(dd, 2H), 3.08 - 3.01(dd, 2H), 2.73 - 2.66(m,2H), 2.53(s, 3H), 1.82 - 1.75(m, 2H), 1.31(s, 3H), 1.29(s, 3H). LRMS [M+H] =400.2。
【０５２４】
実施例６４
２−（４−（アミノメチル）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０５２５】
【化６８】
2013514382.tif 000069
工程１：４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）ベンゾニトリル
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）ベンゾニトリルを、実施例４４／工程３から５について記載の手順にしたがって、４−エチニルベンゾニトリル（市販品）から調製した。
【０５２６】
工程２：２−（４−（アミノメチル）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
室温で撹拌した４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）ベンゾニトリル（前工程由来）を含むエタノールおよび水酸化アンモニウム（４：１、０．２Ｍ）の溶液に、ラネーニッケル（１０当量）を添加した。ＴＬＣによって示されるように変換が完了するまで、反応混合物を水素雰囲気下で撹拌した。反応混合物を、ショートセライトパッドで濾過した。セライトパッドをＥｔＯＡｃで洗浄した。合わせた有機抽出物を真空下で濃縮し、得られた粗残渣を、クロマトグラフィ（シリカゲル、５０〜１００％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン）によって精製して、生成物２−（４−（アミノメチル）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを得た。ＴＦＡ塩の1H NMR:(メタノール-d4):δ 8.81(d,1H), 8.79(d, 1H), 8.38(d, 1H), 7.51(s, 1H), 7.44(dd, 1H), 7.36(dd, 4H), 4.07(s,2H), 3.29(s, 2H), 3.20 - 3.14(dd, 2H), 2.55(s, 3H). LRMS [M+H] = 343.2。
【０５２７】
実施例６５
（Ｅ）−エチル３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）アクリラート
【０５２８】
【化６９】
2013514382.tif 000070
工程１：（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）メタノール
（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）メタノールを、実施例４２／工程３について記載の手順にしたがって、メチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾアート（実施例１１５）から調製した。
【０５２９】
工程２：４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンズアルデヒド
（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）メタノール（前工程由来）を含むＤＭＳＯの溶液に、２−ヨードキシ安息香酸（ＩＢＸ、２．５当量）を添加した。反応物を室温で３時間撹拌し、その後に水で希釈した。ＥｔＯＡｃでの抽出後に濃縮して粗残渣を得た。これを、クロマトグラフィ（シリカゲル、５０〜１００％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン）によって精製して、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンズアルデヒドを得た。
【０５３０】
工程３：（Ｅ）−エチル３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）アクリラート
０℃で撹拌したＮａＨ（３当量）を含むＴＨＦ（０．２Ｍ）の懸濁物に、エチル２−（ジエトキシホスホリル）アセタート（市販品）（３当量）を添加した。３０分間の撹拌後、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンズアルデヒド（前工程由来）を含むＴＨＦ（０．２Ｍ）の溶液を滴下して添加した。反応物を室温に加温し、一晩撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液で反応物をクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥および濃縮して粗残渣を得た。これを、クロマトグラフィ（シリカゲル、５０〜１００％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン）によって精製して、（Ｅ）−エチル３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）アクリラートを白色固体として得た。1H NMR:(CDCl3):δ 8.54(d,1H), 8.29(d, 1H), 7.99(d, 1H), 7.57(d, 1H), 7.44(s, 1H), 7.23(dd, 1H), 7.11(dd,1H), 7.05(d, 1H), 6.33(d, 1H), 5.93(s, 2H), 4.19(q, 2H), 3.10 - 2.95(m, 4H),2.44(s, 3H), 2.23(s, 3H), 1.26(t, 3H). LRMS [M+H] = 426.2。
【０５３１】
実施例６６
エチル３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）プロパノアート
【０５３２】
【化７０】
2013514382.tif 000071
エチル３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）プロパノアートを、実施例４４／工程５について記載の手順にしたがって、（Ｅ）−エチル３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）アクリラート（実施例６５由来）から調製した。1H NMR:(CDCl3):δ 8.55(d,1H), 8.26(d, 1H), 7.99(d, 1H), 7.45(s, 1H), 7.12(dd, 1H), 6.98 -6.88(m, 3H),6.02(s, 2H), 4.06(q, 2H), 3.04(dd, 2H), 2.93(dd, 2H), 2.83(t, 2H), 2.53(t, 2H),2.44(s, 3H), 2.19(s, 3H), 1.17(t, 3H). LRMS [M+H] = 428.2。
【０５３３】
実施例６７
２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンジル）プロパン−１，３−ジオール
【０５３４】
【化７１】
2013514382.tif 000072
工程１：ジエチル２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンジル）マロナート
（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）メタノール（実施例６５／工程１由来）（０．２Ｍ）およびマロン酸ジエチル（２当量）を含む乾燥トルエンの撹拌溶液に、トリブチルホスフィン（２当量）およびＮ１，Ｎ１，Ｎ２，Ｎ２−テトラメチルジアゼン−１，２−ジカルボキサミド（２当量）を添加した。反応混合物を１２０℃で一晩撹拌した。反応完了の際、反応混合物を真空下で濃縮し、得られた粗残渣を、クロマトグラフィ（シリカゲル、５０〜１００％ＥｔＯＡｃを含むヘキサン）によって精製して、ジエチル２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンジル）マロナートを白色固体として得た。
【０５３５】
工程２：２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンジル）プロパン−１，３−ジオール
２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンジル）プロパン−１，３−ジオールを、実施例４２／工程３について記載の手順にしたがって、ジエチル２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンジル）マロナート（前工程由来）から調製した。1H NMR:(メタノール- d4):δ8.51(d, 1H), 8.39(d, 1H), 8.05(d, 1H), 7.45(s, 1H), 7.10(dd, 1H), 6.91 -6.87(m,2H), 6.83(dd, 1H), 3.42(d, 4H), 3.08 - 3.02(m, 2H), 2.96 - 2.91(m, 2H), 2.47(d,2H), 2.38(s, 3H), 2.13(s, 3H). LRMS [M+H] = 416.2。
【０５３６】
実施例６８
３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）プロパン酸
【０５３７】
【化７２】
2013514382.tif 000073
エチル３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）プロパノアート（実施例６６由来）を含む１Ｎ  ＮａＯＨ、ＴＨＦ、およびメタノール（１：５：２、０．１Ｎ）の溶液を、６０℃で３時間加熱した。室温への冷却後、反応混合物を１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ７に中和し、濃縮して粗残渣を得た。これを、クロマトグラフィ（シリカゲル、０〜２０％メタノールを含むジクロロメタン）によって精製して、（Ｅ）−エチル３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）アクリラートを白色固体として得た。1H NMR:(メタノール- d4):δ8.73(d, 1H), 8.54(d, 1H), 8.20(d, 1H), 7.45(s, 1H), 7.37(d, 1H), 7.00 -6.97(m,2H), 6.92(d, 1H), 3.19(t, 2H), 3.04(t, 2H), 2.81(t, 2H), 2.53(t, 2H), 2.50(s,3H), 2.25(s, 3H). LRMS [M+H] = 400.2。
【０５３８】
実施例６９
５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボアルデヒド
【０５３９】
【化７３】
2013514382.tif 000074
５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボアルデヒドを、実施例６５／工程２について記載の手順にしたがって、（５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール（実施例１０８由来）から調製した。1H NMR:(CDCl3):δ 10.19(s, 1H),8.74(d, 1H), 8.43(d, 1H), 8.32(d, 1H), 8.18(d, 1H), 7.88(dd, 1H), 7.00(d, 1H),6.76(d, 1H), 6.70(dd, 1H), 6.30(s, 2H), 3.80(s, 3H), 3.16(dd, 2H), 3.02(dd,2H), 2.29(s, 3H). LRMS [M+H] = 372.2。
【０５４０】
実施例７０
エチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）ベンゾアート
【０５４１】
【化７４】
2013514382.tif 000075
工程１：エチル４−（（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）エチニル）ベンゾアート
３，５−ジクロロピコリノニトリル（市販品）（１．０当量）、エチル４−エチニルベンゾアート（市販品）（１．０当量）、ｔｒａｎｓ−ジクロロ（ｃｈｌｏｒｏｒ）ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（１０モル％）、ヨウ化銅（Ｉ）（２０モル％）、およびトリエチルアミン（５．０当量）を含むＤＭＦ（０．３Ｍ）の溶液を、５０℃で３時間撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、酢酸エチルおよび１０％水性水酸化アンモニウムで希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜２０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、エチル４−（（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）エチニル）ベンゾアートを白色固体として得た。
【０５４２】
工程２：エチル４−（（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチニル）ベンゾアート
エチル４−（（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）エチニル）ベンゾアート（前工程由来）（１．０当量）、ｔｅｒｔ−ブチル５−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（実施例５／工程２由来）（２．６当量）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１０モル％）、および炭酸カリウム（５．３当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．２Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、２％ＭｅＯＨを含むＤＣＭで希釈した。２相を分離した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜４０％酢酸エチルを含むトルエンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、エチル４−（（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチニル）ベンゾアートを得た。
【０５４３】
工程３：エチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）ベンゾアート
エチル４−（（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチニル）ベンゾアート（前工程由来）（１．０当量）を含むＴＨＦ／酢酸エチル（１：１、０．０５Ｍ）の溶液に、窒素を流し、パラジウム炭素（１０重量％）を添加した。反応容器を排気し、水素を流し、室温で一晩撹拌した。反応混合物をセライトで濾過し、２％ＭｅＯＨを含むＤＣＭで洗浄し、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、エチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）ベンゾアートを得た。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.80(s,1H), 8.69(s, 1H), 8.25(d, 1H), 7.90(d, 2H), 7.40-7.42(m, 3H), 7.12(d, 1H),6.55(br, 2H), 4.28(q, 2H), 3.2-3.3(m, 4H), 2.44(s, 3H), 1.31(t, 3H). LRMS [M+H]= 386.2。
【０５４４】
実施例７１
８−メチル−２−（４−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０５４５】
【化７５】
2013514382.tif 000076
工程１：３−クロロ−５−（ｐ−トリルエチニル）ピコリノニトリル
３，５−ジクロロピコリノニトリル（市販品）（１．０当量）、１−エチニル−４−メチルベンゼン（市販品）（１．０当量）、ｔｒａｎｓ−ジクロロ（ｃｈｌｏｒｏｒ）ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（１０モル％）、ヨウ化銅（Ｉ）（２０モル％）、およびトリエチルアミン（５．０当量）を含むＤＭＦ（０．３Ｍ）の溶液を、５０℃で３時間撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、酢酸エチルおよび１０％水性水酸化アンモニウムで希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を温エーテル／ヘキサン混合物中での撹拌によって精製し、濾過して３−クロロ−５−（ｐ−トリルエチニル）ピコリノニトリルを得た。
【０５４６】
工程２：８−メチル−２−（ｐ−トリルエチニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
３−クロロ−５−（ｐ−トリルエチニル）ピコリノニトリル（前工程由来）（１．０当量）、ｔｅｒｔ−ブチル５−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（実施例５／工程２由来）（１．２当量）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１０モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（４．０当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．２Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、２％ＭｅＯＨを含むＤＣＭで希釈した。２相を分離し、水層を、２％ＭｅＯＨを含むＤＣＭで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜４０％酢酸エチルを含むトルエンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、８−メチル−２−（ｐ−トリルエチニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを得た。
【０５４７】
工程３：８−メチル−２−（４−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
８−メチル−２−（ｐ−トリルエチニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）（１．０当量）を含むＥｔＯＨ／酢酸エチル（１：１、０．０５Ｍ）の溶液に、窒素を流し、パラジウム炭素（１０重量％）を添加した。反応容器を排気し、水素を流し、室温で一晩撹拌した。反応混合物をセライトで濾過し、２％ＭｅＯＨを含むＤＣＭで洗浄し、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、８−メチル−２−（４−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを得た。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.74(s,1H), 8.68(s, 1H), 8.24(d, 1H), 7.41(s, 1H), 7.13-7.15(m, 3H), 7.06(d, 2H),6.6(br, 2H), 3.19(t, 2H), 3.06(t, 2H), 2.44(s, 3H), 2.25(s, 3H). LRMS [M+H] =328.1。
【０５４８】
実施例７２
２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）プロパン−２−オール
【０５４９】
【化７６】
2013514382.tif 000077
０℃のエチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）ベンゾアート（実施例７０由来）（１．０当量）を含むＤＣＭの溶液に、３．０Ｍヨウ化メチルマグネシウム（１０当量）を含むエーテルを添加し、室温に一晩加温した。反応物を０℃に冷却し、１Ｎ  ＨＣｌ水溶液およびエーテルで反応物をクエンチした。１５分間の撹拌後、反応混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液で中和した。２相を分離し、水層をエーテルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、水中１０〜５０％ＭｅＣＮの勾配を使用したＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し、ＤＣＭ中で抽出して、２−（４−（２−（５−アミノ−８メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）プロパン−２−オールを得た。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.73(m,2H), 8.22(d, 1H), 7.40-7.44(m, 3H), 7.20(d, 2H), 7.12(d, 1H), 6.5(br, 2H), 3.94(s,1H), 3.21(t, 2H), 3.08(t, 2H), 2.44(s, 3H), 1.47(s, 6H). LRMS [M+H] = 372.2。
【０５５０】
実施例７３
（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）メタノール
【０５５１】
【化７７】
2013514382.tif 000078
０℃のエチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）ベンゾアート（実施例７０）（１．０当量）を含むＴＨＦ（０．１Ｍ）の溶液に、１．０Ｍ水素化トリエチルホウ素リチウムを含むＴＨＦ（１０当量）を添加し、２時間にわたって室温に加温した。１Ｎ  ＨＣｌ水溶液をゆっくり添加して反応物をクエンチし、混合物を３０分間加熱還流した。反応混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液で中和した。２相を分離し、水層を酢酸エチル（ＥＡ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、水中１０〜５０％ＭｅＣＮの勾配を使用したＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し、ＤＣＭ中で抽出して、（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）メタノールを得た。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.77(s,1H), 8.69(s, 1H), 8.26(d, 1H), 7.40(s, 1H), 7.21-7.28(m, 4H), 7.13(d, 1H),6.5(br, 2H), 4.56(s, 2H), 4.1(br t, 1H), 3.10-3.23(m, 4H), 2.44(s, 3H). LRMS[M+H] = 344.2。
【０５５２】
実施例７４
エチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾアート
【０５５３】
【化７８】
2013514382.tif 000079
工程１：エチル４−ブロモ−３−メチルベンゾアート
４−ブロモ−３−メチル安息香酸（市販品）（１．０当量）を含むＥｔＯＨ（０．３Ｍ）の溶液に、塩化チオニル（１．５当量）を添加し、２時間加熱還流した。溶媒を減圧下濃縮し、残渣をエーテルで希釈し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で中和した。２相を分離し、水層をエーテルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮して、エチル４−ブロモ−３−メチルベンゾアートを得た。
【０５５４】
工程２：エチル３−メチル−４−（（トリエチルシリル）エチニル）ベンゾアート
エチル４−ブロモ−３−メチルベンゾアート（前工程由来）（１．０当量）、トリエチル（エチニル）シラン（１．１当量）、ｔｒａｎｓ−ジクロロ（ｃｈｌｏｒｏｒ）ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（１０モル％）、ヨウ化銅（Ｉ）（２０モル％）、およびトリエチルアミン（５．０当量）を含むＤＭＦ（０．３Ｍ）の溶液を、６０℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、酢酸エチルおよび１０％水性水酸化アンモニウムで希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、エチル３−メチル−４−（（トリエチルシリル）エチニル）ベンゾアートを黄色オイルとして得た。
【０５５５】
工程３：エチル４−エチニル−３−メチルベンゾアート
０℃のエチル３−メチル−４−（（トリエチルシリル）エチニル）ベンゾアート（前工程由来）（１．０当量）を含むＴＨＦ（０．３Ｍ）の溶液に、１．０Ｍ  ＴＢＡＦを含むＴＨＦ（１．２当量）を滴下して添加した。０℃で１０分間の撹拌後、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で反応物をクエンチした。２相を分離し、水層をエーテルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、エチル４−エチニル−３−メチルベンゾアートを白色固体として得た。
【０５５６】
工程４：エチル４−（（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）エチニル）−３−メチルベンゾアート
３，５−ジクロロピコリノニトリル（１．０当量）、エチル４−エチニル−３−メチルベンゾアート（前工程由来）（１．０当量）、ｔｒａｎｓ−ジクロロ（ｃｈｌｏｒｏｒ）ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（１０モル％）、ヨウ化銅（Ｉ）（２０モル％）、およびトリエチルアミン（５．０当量）を含むＤＭＦ（０．３Ｍ）の溶液を、５０℃で３時間撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、酢酸エチルおよび１０％水性水酸化アンモニウムで希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜１０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、エチル４−（（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）エチニル）−３−メチルベンゾアートを白色固体として得た。
【０５５７】
工程５：エチル４−（（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチニル）−３−メチルベンゾアート
エチル４−（（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）エチニル）−３−メチルベンゾアート（前工程由来）（１．０当量）、ｔｅｒｔ−ブチル５−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（実施例５／工程２由来）（１．１当量）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（８モル％）、および炭酸カリウム（３．０当量）を含むトルエン／エタノール（９：１、０．２Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、２％ＭｅＯＨを含むＤＣＭで希釈した。２相を分離した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜４０％酢酸エチルを含むトルエンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、エチル４−（（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチニル）−３−メチルベンゾアートを得た。
【０５５８】
工程６：エチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾアート
エチル４−（（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチニル）−３−メチルベンゾアート（前工程由来）（１．０当量）を含むＴＨＦ／酢酸エチル（１：１、０．０５Ｍ）の溶液に、窒素を流し、１０％  パラジウム炭素（１０重量％）を添加した。反応容器を排気し、水素を流し、室温で一晩撹拌した。反応混合物をセライトで濾過し、２％ＭｅＯＨを含むＤＣＭで洗浄し、減圧下濃縮した。粗材料を、３０〜１００％ＥＡを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、エチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾアートを得た。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.79(s,1H), 8.71(s, 1H), 8.24(d, 1H), 7.80(s, 1H), 7.73(d, 1H), 7.40(s, 1H), 7.31(d,1H), 7.12(d, 1H), 6.5(br, 2H), 4.29(q, 2H), 3.19-3.22(m, 4H), 2.44(s, 3H),2.39(s, 3H), 1.31(t, 3H). LRMS [M+H] = 400.2。
【０５５９】
実施例７５
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチル安息香酸
【０５６０】
【化７９】
2013514382.tif 000080
エチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾアート（実施例７４由来）（１．０当量）を含むＥｔＯＨの溶液に１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１．５当量）を添加し、８０℃に５時間加熱した。反応混合物を、１Ｎ  ＨＣｌ水溶液（１．５当量）の添加によって中和し、減圧下濃縮した。粗材料を、水中１０〜５０％ＭｅＣＮの勾配を使用したＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し、その後に減圧下濃縮してＴＦＡ塩を得た。ＴＦＡ塩の1H NMR(DMSO- d6):δ 7.94-7.96(m,2H), 7.55(d, 1H), 7.00(s, 1H), 6.91(d, 1H), 6.62-6.66(m, 2H), 6.39(d, 1H),2.36-2.5(m, 4H), 1.73(s, 3H), 1.54(s, 3H). LRMS [M+H] = 372.2。
【０５６１】
実施例７６
（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）メタノール
【０５６２】
【化８０】
2013514382.tif 000081
−７８℃のエチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾアート（実施例７４由来）（１．０当量）を含むＴＨＦ（０．１Ｍ）の溶液に、１．０Ｍ  ＤＩＢＡＬ−Ｈを含むトルエン（１０当量）を添加し、２時間にわたって室温に加温した。１．５Ｍロッシェル塩水溶液をゆっくり添加して反応物をクエンチし、その後にＥＡを添加し、混合物を４５分間撹拌した。２相を分離し、水層をＥＡで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、水中１０〜５０％ＭｅＣＮの勾配を使用したＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し、ＤＣＭ中で抽出して、（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）メタノールを得た。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.77(s,1H), 8.71(s, 1H), 8.25(d, 1H), 7.41(s, 1H), 7.10-7.15(m, 4H), 6.5(br, 2H),4.54(s, 2H), 4.05(br, 1H), 3.08-3.18(m, 4H), 2.44(s, 3H), 2.31(s, 3H). LRMS[M+H] = 358.2。
【０５６３】
実施例７７
８−メチル−２−（２，４，６−トリメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０５６４】
【化８１】
2013514382.tif 000082
工程１：３−クロロ−５−（メシチルエチニル）ピコリノニトリル
３，５−ジクロロピコリノニトリル（１．０当量）、２−エチニル−１，３，５−トリメチルベンゼン（市販品）（１．０当量）、ｔｒａｎｓ−ジクロロ（ｃｈｌｏｒｏｒ）ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（１０モル％）、ヨウ化銅（Ｉ）（２０モル％）、およびトリエチルアミン（５．０当量）を含むＤＭＦ（０．３Ｍ）の溶液を、５０℃で３時間撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、酢酸エチルおよび１０％水性水酸化アンモニウムで希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜１０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、３−クロロ−５−（メシチルエチニル）ピコリノニトリルを白色固体として得た。
【０５６５】
工程２：２−（メシチルエチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
３−クロロ−５−（メシチルエチニル）ピコリノニトリル（前工程由来）（１．０当量）、ｔｅｒｔ−ブチル５−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（実施例５／工程２由来）（１．１当量）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（８モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（３．０当量）を含むトルエン／エタノール（４：１、０．２Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、２％ＭｅＯＨを含むＤＣＭで希釈した。２相を分離した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜４０％酢酸エチルを含むトルエンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、２−（メシチルエチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを得た。
【０５６６】
工程３：８−メチル−２−（２，４，６−トリメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（メシチルエチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）（１．０当量）を含むＥｔＯＨ（０．０５Ｍ）の溶液に、窒素を流し、パラジウム炭素（１０重量％）を添加した。反応容器を排気し、水素を流し、室温で一晩撹拌した。反応混合物をセライトで濾過し、２％ＭｅＯＨを含むＤＣＭで洗浄し、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、８−メチル−２−（２，４，６−トリメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを得た。1H NMR(アセトン- d6):δ8.73-8.74(m, 2H), 8.25(d, 1H), 7.42(s, 1H), 7.14(d, 1H), 6.83(s, 2H), 6.55(br,2H), 3.07(m, 4H), 2.47(s, 3H), 2.29(s, 6H), 2.22(s, 3H). LRMS [M+H] = 356.2。
【０５６７】
実施例７８
２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）プロパン−２−オール
【０５６８】
【化８２】
2013514382.tif 000083
０℃のエチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾアート（実施例７４由来）（１．０当量）を含むＤＣＭの溶液に、３．０Ｍヨウ化メチルマグネシウム（１０当量）を含むエーテルを添加し、室温に一晩加温した。反応物を０℃に冷却し、水で反応物をクエンチした。１５分間の撹拌後、反応混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液で中和し、ＥＡを添加した。２相を分離し、水層をＥＡで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５％ＭｅＯＨを含むＤＣＭを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）プロパン−２−オールを得た。1H NMR(アセトン- d6):δ8.72-8.75(m, 2H), 8.23(d, 1H), 7.41(s, 1H), 7.32(s, 1H), 7.25(d, 1H),7.12-7.14(m, 2H), 6.6(br, 2H), 3.91(s, 1H), 3.07-3.18(m, 4H), 2.44(s, 3H),2.31(s, 3H), 1.48(s, 6H). LRMS [M+H] = 386.2。
【０５６９】
実施例７９
８−メチル−２−（４−プロポキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０５７０】
【化８３】
2013514382.tif 000084
工程１：３−クロロ−５−（（４−プロポキシフェニル）エチニル）ピコリノニトリル
３，５−ジクロロピコリノニトリル（１．０当量）、１−エチニル−４−プロポキシベンゼン（市販品）（１．０当量）、ｔｒａｎｓ−ジクロロ（ｃｈｌｏｒｏｒ）ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（１０モル％）、ヨウ化銅（Ｉ）（２０モル％）、およびトリエチルアミン（５．０当量）を含むＤＭＦ（０．３Ｍ）の溶液を、５０℃で３時間撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、酢酸エチルおよび１０％水性水酸化アンモニウムで希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜１０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、３−クロロ−５−（（４−プロポキシフェニル）エチニル）ピコリノニトリルを白色固体として得た。
【０５７１】
工程２：３−クロロ−５−（４−プロポキシフェネチル）ピコリノニトリル
３−クロロ−５−（（４−プロポキシフェニル）エチニル）ピコリノニトリル（前工程由来）（１．０当量）を含むＥｔＯＨ（０．０５Ｍ）の溶液に、窒素を流し、酸化白金（ＶＩ）（０．５当量）を添加した。反応容器を排気し、水素を流し、室温で５時間撹拌した。反応混合物をセライトで濾過し、２％ＭｅＯＨを含むＤＣＭで洗浄し、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜１５％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、３−クロロ−５−（４−プロポキシフェネチル）ピコリノニトリルを得た。
【０５７２】
工程３：８−メチル−２−（４−プロポキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
３−クロロ−５−（４−プロポキシフェネチル）ピコリノニトリル（前工程由来）（１．０当量）、ｔｅｒｔ−ブチル５−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（実施例５／工程２由来）（１．１当量）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（８モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（３．０当量）を含むトルエン（０．２Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、２％ＭｅＯＨを含むＤＣＭで希釈した。２相を分離した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜４０％酢酸エチルを含むトルエンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、８−メチル−２−（４−プロポキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを得た。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.74(s,1H), 8.67(s, 1H), 8.24(d, 1H), 7.41(s, 1H), 7.15-7.17(m, 3H), 6.81(d, 2H),6.5(br, 2H), 3.87(t, 2H), 3.18(t, 2H), 3.04(t, 2H), 2.44(s, 3H), 1.73(m, 2H),0.99(t, 3H). LRMS [M+H] = 372.2。
【０５７３】
実施例８０
（Ｅ）−エチル３−（５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）アクリラート
【０５７４】
【化８４】
2013514382.tif 000085
（Ｅ）−エチル３−（５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）アクリラートを、実施例６５／工程３について記載の手順にしたがって、５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボアルデヒド（実施例６９由来）およびエチル２−（ジエトキシホスホリル）アセタート（市販品）から調製した。LRMS [M+H] = 442.2。
【０５７５】
実施例８１
（Ｅ）−３−（５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）アクリル酸
【０５７６】
【化８５】
2013514382.tif 000086
（Ｅ）−３−（５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）アクリル酸を、実施例６８について記載の手順にしたがって、（Ｅ）−エチル３−（５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）アクリラート（実施例８０由来）から調製した。ＴＦＡ塩の1H NMR(DMSO- d6):δ 12.66(s,1H), 9.09(s, 1H), 8.88(s, 1H), 8.66(d, 1H), 7.95(d, 1H), 7.91(s, 1H), 7.75(d,1H), 7.10(d, 1H), 6.77 - 6.71(m, 2H), 6.68(dd, 1H), 3.70(s, 3H), 3.16(t, 2H),3.00(t, 2H), 2.30(s, 3H). LRMS [M+H] = 414.2。
【０５７７】
実施例８２
エチル３−（５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）プロパノアート
【０５７８】
【化８６】
2013514382.tif 000087
エチル３−（５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）プロパノアートを、実施例４４／工程５について記載の手順にしたがって、（Ｅ）−エチル３−（５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）アクリラート（実施例８０由来）から調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.63(d,1H), 8.37(d, 1H), 8.13(d, 1H), 7.56(d, 1H), 7.24(dd, 1H), 7.02(d, 1H), 6.75(d,1H), 6.69(dd, 1H), 6.15(br s, 2H), 4.17(q, 2H), 3.79(s, 3H), 3.12(dd, 4H),2.99(dd, 2H), 2.75(t, 2H), 2.29(s, 3H), 1.27(t, 2H), 0.99(t, 3H). LRMS [M+H] = 444.2。
【０５７９】
実施例８３
３−（５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）プロパン酸
【０５８０】
【化８７】
2013514382.tif 000088
３−（５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）プロパン酸を、実施例６８について記載の手順にしたがって、エチル３−（５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）プロパノアート（実施例８２由来）から調製した。1H NMR(DMSO- d6):δ 12.18(s,1H), 8.84(d, 1H), 8.70(d, 1H), 8.36(d, 1H), 7.39(d, 1H), 7.20(dd, 1H), 7.09(m,2H), 6.74(d, 1H), 6.68(dd, 1H), 3.70(s, 3H), 3.09(dd, 2H), 2.96(dd, 4H),2.63(t, 2H), 2.27(s, 3H). LRMS [M+H] = 416.2。
【０５８１】
実施例８４
３−（５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）プロパン−１−オール
【０５８２】
【化８８】
2013514382.tif 000089
３−（５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）プロパン−１−オールを、実施例４２／工程３について記載の手順にしたがって、エチル３−（５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）プロパノアート（実施例８２由来）から調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.54(d,1H), 8.30(d, 1H), 8.05(d, 1H), 7.48(d, 1H), 7.15(dd, 1H), 6.93(d, 1H), 6.66(d,1H), 6.61(dd, 1H), 5.98(br s, 2H), 3.71(s, 3H), 3.66(t, 2H), 3.03(dd, 2H),2.91(dd, 2H), 2.81(t, 2H), 2.20(s, 3H), 1.98 - 1.90(m, 2H). LRMS [M+H] = 402.2。
【０５８３】
実施例８５
（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール
【０５８４】
【化８９】
2013514382.tif 000090
工程１：２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−（メトキシカルボニル）フェニルボロン酸
２−アミノ−４−（メトキシカルボニル）フェニルボロン酸・塩酸塩（市販品）（１．０当量）、トリエチルアミン（３．０当量）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナート（１．１当量）、およびＤＭＡＰ（０．１当量）を含むＣＨ３ＣＮ（０．３Ｍ）の溶液を、４０℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜３０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−（メトキシカルボニル）フェニルボロン酸を褐色固体として得た。
【０５８５】
工程２：メチル５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボキシラート
２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−（メトキシカルボニル）フェニルボロン酸（前工程由来）（１．０当量）および３−ブロモピコリノニトリル（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（２．０当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０３Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を濾過して沈殿物を回収した。沈殿物をＥｔＯＡｃでリンスして、メチル５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボキシラートを淡褐色固体として得た。
【０５８６】
工程３：（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール
メチル５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボキシラート（前工程由来）（１．０当量）を含むＥｔＯＨ（０．０３Ｍ）の溶液に、２５℃でＮａＢＨ４（１０当量）を添加した。溶液を８０℃に５時間加熱した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、減圧下濃縮した。残渣を、飽和ＮａＨＣＯ３とＥｔＯＡｃとの間で分配した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノールをオフホワイトの固体として得た：1H NMR(メタノール- d4): δ 8.82(dd, 1H), 8.77(dd, 1H), 7.26(d, 1H), 7.70(dd, 1H), 7.50(d, 1H), 7.27(dd,1H),  4.66(s, 2H). LRMS [M+H] = 226.1。
【０５８７】
実施例８６
５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−オール
【０５８８】
【化９０】
2013514382.tif 000091
８−メトキシベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（実施例１０由来）（１．０当量）を含むＤＣＭ（０．０４Ｍ）の溶液に、ＢＢｒ３（２．５当量）をＮ２下にて−２０℃で滴下添加した。反応物を、３０分間にわたって周囲温度に加温した。次いで、反応物を一晩撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３で反応物をクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−オールを黄色固体として得た：1H NMR(アセトン- d6):δ 8.90(dd,1H), 8.83(dd, 1H), 8.32(d, 1H), 7.83(dd, 1H), 7.11(br s, 2H), 7.10(d, 1H),6.96(dd, 1H), 5.86(br s, 1H). LRMS [M+H] = 212.1。
【０５８９】
実施例８７
５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボアルデヒド
【０５９０】
【化９１】
2013514382.tif 000092
（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール（実施例８５由来）（１．０当量）および活性化ＭｎＯ２（２０当量）を含むＤＣＭ（０．１Ｍ）の溶液を、周囲温度で一晩撹拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈した。ＭｎＯ２を濾過して除去し、濾液を減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボアルデヒドを黄色固体として得た：1H NMR(アセトン- d6):δ 10.19(s,1H), 9.14(dd, 1H), 9.01(dd, 1H), 8.63(d, 1H), 8.14(d, 1H), 7.93(dd, 1H),7.81(dd, 1H),  6.96(br s, 2H). LRMS [M+H] = 224.1。
【０５９１】
実施例８８
１−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）エタノール
【０５９２】
【化９２】
2013514382.tif 000093
５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボアルデヒド（実施例８７由来）（１．０当量）を含むＴＨＦ（０．０２Ｍ）の溶液に、ＭｅＬｉ（２．５当量）を−７８℃で添加した。反応物を周囲温度に一晩加温した。飽和ＮＨ４Ｃｌによって反応物をクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、１−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）エタノールを黄色固体として得た：1H NMR(メタノール- d4): δ8.94(dd, 1H), 8.88(dd, 1H), 8.38(d, 1H), 7.81(dd, 1H), 7.62(d, 1H), 7.41(dd,1H), 4.97(q, 1H), 1.53(d, 3H). LRMS [M+H] = 240.1。
【０５９３】
実施例８９
１−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）エタノン
【０５９４】
【化９３】
2013514382.tif 000094
１−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）エタノール（実施例８８由来）（１．０当量）および活性化ＭｎＯ２（２０当量）を含むＤＣＭ（０．１Ｍ）の溶液を、周囲温度で一晩撹拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈した。ＭｎＯ２を濾過して除去し、濾液を減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、１−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）エタノンを黄色固体として得た：1H NMR(アセトン- d6):δ 9.11(dd,1H), 8.99(dd, 1H), 8.56(d, 1H), 8.20(d, 1H), 7.94-7.88(m, 2H), 6.90(br s, 2H),2.70(s, 3H). LRMS [M+H] = 238.1。
【０５９５】
実施例９０
８−イソプロピルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０５９６】
【化９４】
2013514382.tif 000095
工程１：２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）プロパン−２−オール
メチル５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボキシラート（実施例８５／工程２由来）（１．０当量）を含むＴＨＦ（０．０２Ｍ）の溶液に、ＭｅＬｉ（１０当量）を−７８℃で添加した。反応物を周囲温度に一晩加温した。飽和ＮＨ４Ｃｌによって反応物をクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）プロパン−２−オールを黄色オイルとして得た。
【０５９７】
工程２：８−（プロパ−１−エン−２−イル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）プロパン−２−オール（前工程由来）（１．０当量）およびｐ−ＴｓＯＨ（２当量）を含むトルエン（０．０１Ｍ）の溶液を、９０℃で６時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３によって反応物をクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、８−（プロパ−１−エン−２−イル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを黄色固体として得た。
【０５９８】
工程３：８−イソプロピルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
８−（プロパ−１−エン−２−イル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）（１．０当量）とＰｄ／Ｃ（湿式、１０重量％）とを含むＥｔＯＨの混合物を、Ｈ２バルーン下で一晩撹拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈した。Ｐｄ／Ｃをセライトによって濾過して除去し、濾液を減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、８−イソプロピルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを黄色固体として得た：1H NMR(アセトン- d6):δ 8.98(dd,1H), 8.88(dd, 1H), 8.37(d, 1H), 7.83(dd, 1H), 7.49(d, 1H), 7.27(dd, 1H),6.66(br s, 2H), 3.10-3.00(m, 1H), 1.33(d, 6H). LRMS [M+H] = 238.1。
【０５９９】
実施例９１
８−ビニルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０６００】
【化９５】
2013514382.tif 000096
メチルトリフェニルホスホニウムヨージド（６．０当量）溶液に、ｎＢｕＬｉ（７．０当量）を−７８℃で添加した。反応混合物を０℃に加温し、３０分間撹拌した（暗橙色）。反応物を再度−７８℃に冷却し、５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボアルデヒド（実施例８７由来）（１．０当量）を含むＴＨＦを反応物に滴下導入した。反応物を周囲温度に一晩加温した。飽和ＮＨ４Ｃｌによって反応物をクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、８−ビニルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを白色固体として得た：1H NMR(アセトン- d6):1HNMR(アセトン- d6):δ 9.00(dd, 1H), 8.90(dd, 1H), 8.41(d, 1H), 7.84(dd,1H), 7.65(d, 1H), 7.52(dd, 1H), 6.91(dd, 1H), 6.77(br s, 2H), 5.97(dd, 1H),5.34(dd, 1H). LRMS [M+H] = 222.1。
【０６０１】
実施例９２
８−エチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０６０２】
【化９６】
2013514382.tif 000097
８−ビニルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（１．０当量）（実施例９１由来）とＰｄ／Ｃ（湿式、１０重量％）とを含むＥｔＯＨの混合物を、Ｈ２バルーン下で一晩撹拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈した。Ｐｄ／Ｃをセライトによって濾過して除去し、濾液を減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、８−エチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを白色泡として得た：1H NMR(アセトン- d6):δ 8.98(dd,1H), 8.88(dd, 1H), 8.35(d, 1H), 7.82(dd, 1H), 7.46(d, 1H), 7.22(dd, 1H),6.63(br s, 2H), 2.78(q, 2H), 1.30(t, 3H). LRMS [M+H] = 224.1。
【０６０３】
実施例９３
８−（メトキシメチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０６０４】
【化９７】
2013514382.tif 000098
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル２−クロロ−５−（メトキシメチル）フェニルカルバマート
０℃でＮ２雰囲気下の２−クロロ−５−（メトキシメチル）アニリン（市販品）（１．０当量）を含むＴＨＦ（０．２Ｍ）の溶液に、１Ｍ  ＮａＨＭＤＳ（２．５当量）を滴下して添加した。反応物を０℃で１５分間撹拌し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナートを含むＴＨＦの溶液を添加した。反応物を周囲温度に一晩加温した。溶媒を蒸発させ、得られた残渣を０．１Ｎ  ＨＣｌ水溶液でクエンチした。水性懸濁物をＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル２−クロロ−５−（メトキシメチル）フェニルカルバマートを無色オイルとして得た。
【０６０５】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル５−（メトキシメチル）−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート
ｔｅｒｔ−ブチル２−クロロ−５−（メトキシメチル）フェニルカルバマート（前工程由来）（１．０当量）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（３．０当量）、Ｐｄ２ｄｂａ３（２．５％）、ＸＰｈｏｓ（１０％）、およびＫＯＡｃ（３当量）を、Ｎ２雰囲気下にてジオキサン（０．２Ｍ）中で混合した。反応物を１１０℃に加熱し、一晩撹拌した。得られた懸濁物を周囲温度に冷却し、エーテルで希釈し、セライトで濾過し、濾液を減圧下濃縮した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル５−（メトキシメチル）−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマートを白色泡として得た。
【０６０６】
工程３：８−（メトキシメチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
ｔｅｒｔ−ブチル５−（メトキシメチル）−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（前工程由来）（１．０当量）および３−ブロモピコリノ−ニトリル（１．０当量）を含むトルエン（０．４４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、２％ＭｅＯＨを含むＤＣＭおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を、２％ＭｅＯＨを含むＤＣＭで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、８−（メトキシメチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを白色固体として得た：1H NMR(メタノール- d4):δ8.97(dd, 1H), 8.91(dd, 1H), 8.41(dd, 1H), 7.83(dd, 1H), 7.59(d, 1H), 7.37(dd,1H), 4.62(s, 2H), 3.45(s, 3H). LRMS [M+H] = 240.1。
【０６０７】
実施例９４
（５−アミノ−２−フェネチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール
【０６０８】
【化９８】
2013514382.tif 000099
工程１：メチル５−アミノ−２−フェネチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボキシラート
２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−（メトキシカルボニル）フェニルボロン酸（実施例８５／工程１由来）（１．０当量）および２−クロロ−６−フェネチルニコチノニトリル（実施例１１４／工程３に記載の手順にしたがって、（Ｅ）−３−クロロ−５−スチリルピコリノニトリル（実施例３２／工程１由来）から調製）（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（２．０当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０３Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物をＥｔＯＡｃおよび水で希釈した。２相を分離し、水層をＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、メチル５−アミノ−２−フェネチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボキシラートを白色固体として得た。
【０６０９】
工程２：（５−アミノ−２−フェネチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール
メチル５−アミノ−２−フェネチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボキシラート（前工程由来）（１．０当量）を含むＴＨＦ（０．０３Ｍ）の溶液に、スーパー−Ｈ（１０当量）を０℃で添加した。溶液を周囲温度に３０分間にわたって加温した。発砲しなくなるまで水で反応物をクエンチした。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、（５−アミノ−２−フェネチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノールをオフホワイトの固体として得た：1H NMR(メタノール- d4):δ8.63(dd, 1H), 8.56(dd, 1H), 8.24(d, 1H), 7.57(d, 1H), 7.35(dd, 1H),7.27-7.15(m, 5H), 4.75(s, 2H), 3.20(t, 2H), 3.06(t, 2H). LRMS [M+H] = 330.1。
【０６１０】
実施例９５
（５−アミノ−２−（４−メトキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール
【０６１１】
【化９９】
2013514382.tif 000100
工程１：メチル５−アミノ−２−（４−メトキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボキシラート
２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−（メトキシカルボニル）フェニルボロン酸（実施例８５／工程１由来）（１．０当量）および２−クロロ−６−（４−メトキシフェネチル）ニコチノニトリル（実施例４４／工程３に記載の手順にしたがった３，５−ジクロロピコリノニトリルの１−エチニル−４−メトキシベンゼンとの反応および実施例１１４／工程３に記載の手順にしたがった生成物の還元によって調製）（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（２．０当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０３Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物をＥｔＯＡｃおよび水で希釈した。２相を分離し、水層をＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜８０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、メチル５−アミノ−２−（４−メトキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボキシラートを白色固体として得た。
【０６１２】
工程２：（５−アミノ−２−（４−メトキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール
メチル５−アミノ−２−（４−メトキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボキシラート（前工程由来）（１．０当量）を含むＴＨＦ（０．０３Ｍ）の溶液に、スーパー−Ｈ（１０当量）を０℃で添加した。溶液を、周囲温度に３０分間にわたってに加温した。発砲しなくなるまで水で反応物をクエンチした。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、（５−アミノ−２−（４−メトキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノールをオフホワイトの固体（３１％）として得た：1H NMR(アセトン- d6):δ 8.79(d,1H), 8.70(d, 1H), 8.35(d, 1H), 7.61(d, 1H), 7.33(dd, 1H), 7.13(d, 2H), 6.83(d,2H), 6.62(br s, 2H), 4.47(s, 2H), 4.40(br s, 1H), 3.75(s, 3H), 3.22(t, 2H),3.06(t, 2H). LRMS [M+H] = 360.2。
【０６１３】
実施例９６
ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５，８−ジアミン
【０６１４】
【化１００】
2013514382.tif 000101
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−５−ニトロフェニルカルバマート
０℃でＮ２雰囲気下の２−ブロモ−５−ニトロアニリン（市販品）（１．０当量）を含むＴＨＦ（０．２Ｍ）溶液に、１Ｍ  ＮａＨＭＤＳ（２．５当量）を滴下して添加した。反応物を０℃で１５分間撹拌し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナートを含むＴＨＦの溶液を添加した。反応物を周囲温度に一晩加温した。溶媒を蒸発させ、得られた残渣を０．１Ｎ  ＨＣｌ水溶液でクエンチした。水性懸濁物をＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−５−ニトロフェニルカルバマートを無色オイルとして得た。
【０６１５】
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル５−ニトロ−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート
ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモ−５−ニトロフェニルカルバマート（前工程由来）（１．０当量）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１．８当量）、ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）（５％）、および酢酸ナトリウム（４．５当量）を、Ｎ２雰囲気下にてジオキサン（０．２Ｍ）中で混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。得られた懸濁物を周囲温度に冷却し、エーテルで希釈し、セライトで濾過し、濾液を減圧下濃縮した。残渣を、０〜３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル５−ニトロ−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマートを白色泡として得た。
【０６１６】
工程３：８−ニトロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
ｔｅｒｔ−ブチル５−ニトロ−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（前工程由来）（１．０当量）および３−ブロモピコリノニトリル（１．０当量）を含むトルエン（０．４４Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を濾過して沈殿物を回収した。沈殿物をＥｔＯＡｃでリンスして、８−ニトロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを黄色固体として得た。
【０６１７】
工程４：ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５，８−ジアミン
８−ニトロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）（１．０当量）とＰｄ／Ｃ（湿式、１０重量％）とを含むＥｔＯＨの混合物を、Ｈ２バルーン下で一晩撹拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈した。不溶性固体をセライトで濾過して除去し、濾液を減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料をアセトンで洗浄して、ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５，８−ジアミンをオフホワイトの固体として得た：1H NMR(メタノール- d4):δ8.73(dd, 1H), 8.71(dd, 1H), 8.11(d, 1H), 7.69(dd, 1H), 6.86(d, 1H), 6.82(dd,1H). LRMS [M+H] = 211.1。
【０６１８】
実施例９７
８−（アミノメチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０６１９】
【化１０１】
2013514382.tif 000102
工程１：２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−シアノフェニルボロン酸
表題化合物を、実施例８５／工程１に記載の手順に従うが、２−アミノ−４−シアノフェニルボロン酸・塩酸塩（市販品）を出発物質として使用して調製した。粗材料を、０〜３０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−シアノフェニルボロン酸をオフホワイトの固体として得た。
【０６２０】
工程２：５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボニトリル
表題化合物を、実施例９６／工程３に記載の手順に従うが、２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−シアノフェニルボロン酸（前工程由来）を出発物質として使用して調製した。粗材料を１：１  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンでリンスして、５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボニトリルを淡黄色固体として得た。
【０６２１】
工程４：ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５，８−ジアミン
８−ニトロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）（１．０当量）とラネーニッケル（湿式、１０重量％）とを含むＥｔＯＨ／アンモニア（２：１）の混合物を、Ｈ２バルーン下で一晩撹拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈した。不溶性固体をセライトで濾過して除去し、濾液を減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭおよび７０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで洗浄して、ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５，８−ジアミンをオフホワイトの固体として得た：1H NMR(メタノール- d4):δ8.97(dd, 1H), 8.90(dd, 1H), 8.41(d, 1H), 7.83(dd, 1H), 7.57(d, 1H), 7.39(dd,1H), 3.96(s, 2). LRMS [M+H] = 229.1。
【０６２２】
実施例９８
３−フルオロ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０６２３】
【化１０２】
2013514382.tif 000103
工程１：３−クロロ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
ｔｅｒｔ−ブチル５−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（実施例５／工程２由来）（１．０当量）および３−ブロモ−６−クロロピコリノニトリル（実施例２０／工程２由来）（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（２．０当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．０３Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物をＥｔＯＡｃおよび水で希釈した。２相を分離し、水層をＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、３−クロロ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを淡黄色固体として得た。
【０６２４】
工程２：３−フルオロ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
３−クロロ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）（１．０当量）、フッ化カリウム（４．０当量）、および１８−クラウン−６（０．４当量）を含むＮＭＰ（０．１Ｍ）の混合物を、マイクロ波反応器中にて２１０℃で２時間加熱した。周囲温度への冷却後、反応残渣を、０〜３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、３−フルオロ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを白色固体として得た。1H NMR(アセトン- d6):δ 9.20(dd,1H), 8.32(d, 1H), 7.58(dd, 1H), 7.46(d, 1H), 7.21(dd, 1H), 6.51(br s, 2H),2.47(s, 3H). LRMS [M+H] = 228.1。
【０６２５】
実施例９９
（５−アミノ−３−フルオロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール
【０６２６】
【化１０３】
2013514382.tif 000104
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル５−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート
表題化合物を、実施例９３／工程１および２に記載の手順に従うが、５−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−２−クロロアニリン（市販品）を出発物質として使用して調製した。粗材料を、０〜２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル５−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマートを白色泡として得た。
【０６２７】
工程２：８−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−３−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
表題化合物を、実施例９８／工程１に記載の手順に従うが、ｔｅｒｔ−ブチル５−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（前工程由来）を出発物質として使用して調製した。粗材料を、０〜１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、８−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−３−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを淡黄色固体として得た。
【０６２８】
工程３：（５−アミノ−３−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール
８−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−３−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）（１．０当量）およびＴＢＡＦ（１．１当量）を含むＴＨＦの溶液を、周囲温度で一晩撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３で反応物をクエンチした。２相を分離し、水層をＥｔ２Ｏで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、（５−アミノ−３−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノールを白色固体として得た。
【０６２９】
工程４：（５−アミノ−３−フルオロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール
表題化合物を、実施例９８／工程２に記載の手順に従うが、（５−アミノ−３−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール（前工程由来）を出発物質として使用して調製した。粗材料を、０〜４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、（５−アミノ−３−フルオロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノールを白色固体として得た。1H NMR(メタノール- d4):δ9.15(dd, 1H), 8.38(d, 1H), 7.64(d, 1H), 7.55(dd, 1H), 7.41(dd, 1H), 4.77(s,2H). LRMS [M+H] = 244.1。
【０６３０】
実施例１００
３−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５，８−ジアミン
【０６３１】
【化１０４】
2013514382.tif 000105
工程１：３−クロロ−８−ニトロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
表題化合物を、実施例９８／工程１に記載の手順に従うが、ｔｅｒｔ−ブチル５−ニトロ−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（市販品）を出発物質として使用して調製した。粗材料を、０〜４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、３−クロロ−８−ニトロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを淡黄色固体として得た。
【０６３２】
工程２：３−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５，８−ジアミン
８−ニトロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）（１．０当量）とラネーニッケル（湿式、１０重量％）とを含むＥｔＯＨの混合物を、Ｈ２バルーン下で一晩撹拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈した。不溶性固体をセライトで濾過して除去し、濾液を減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、３−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５，８−ジアミンを白色固体として得た。1H NMR(メタノール- d4):δ 8.75(d,1H), 8.08(dd, 1H), 7.70(d, 1H), 6.84-6.81(m, 2H). LRMS [M+H] = 245.1。
【０６３３】
実施例１０１
３−フルオロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５，８−ジアミン
【０６３４】
【化１０５】
2013514382.tif 000106
表題化合物を、実施例９８／工程２に記載の手順に従うが、３−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５，８−ジアミン（実施例１００由来）を出発物質として使用して調製した。粗材料を、０〜７％ＭｅＯＨ／ＤＣＭを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、３−フルオロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５，８−ジアミンを白色固体として得た。1H NMR(メタノール- d4):δ8.93(dd, 1H), 8.09(d, 1H), 7.44(dd, 1H), 6.86-6.83(m, 2H). LRMS [M+H] = 229.1。
【０６３５】
実施例１０２
８−イソブチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０６３６】
【化１０６】
2013514382.tif 000107
８−イソブチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例９１（ウィティッヒ反応）および実施例９２（還元）について記載の手順にしたがって、イソプロピル（トリフェニル）ホスホニウムブロミドを使用して、５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボアルデヒド（実施例８７由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.98(dd,1H), 8.88(dd, 1H), 8.35(d, 1H), 7.82(dd, 1H), 7.44(d, 1H), 7.18(dd, 1H), 6.73(brs, 2H), 2.63(d, 2H), 2.04-1.94(m, 1H), 0.94(d, 6H). LRMS [M+H] = 252.1。
【０６３７】
実施例１０３
（Ｅ）−８−（プロパ−１−エニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０６３８】
【化１０７】
2013514382.tif 000108
（Ｅ）−８−（プロパ−１−エニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例９１について記載の手順にしたがって、エチル（トリフェニル）ホスホニウムブロミドを使用して５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボアルデヒド（実施例８７由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.98(dd,1H), 8.88(dd, 1H), 8.36(d, 1H), 7.83(dd, 1H), 7.54(d, 1H), 7.43(dd, 1H),6.67(br s, 2H), 6.60-6.42(m, 2H), 1.92(dd, 3H). LRMS [M+H] = 236.1。
【０６３９】
実施例１０４
８−プロピルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０６４０】
【化１０８】
2013514382.tif 000109
８−プロピルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例９２について記載の手順にしたがって、（Ｅ）−８−（プロパ−１−エニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（実施例１０３由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.99(dd,1H), 8.88(dd, 1H), 8.35(d, 1H), 7.83(dd, 1H), 7.45(d, 1H), 7.21(dd, 1H),6.64(br s, 2H), 2.74(t, 2H), 1.74(qt, 2H), 0.98(t, 3H). LRMS [M+H] = 238.1。
【０６４１】
実施例１０５
８−（２−シクロプロピルエチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０６４２】
【化１０９】
2013514382.tif 000110
８−（２−シクロプロピルエチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例９１（ウィティッヒ反応）および実施例９２（還元）について記載の手順にしたがって、（シクロプロピルメチル）トリフェニルホスホニウムブロミドを使用して、５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボアルデヒド（実施例８７由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.99(dd,1H), 8.88(dd, 1H), 8.35(d, 1H), 7.83(dd, 1H), 7.47(d, 1H), 7.23(dd, 1H),6.64(br s, 2H), 1.60(q, 2H), 1.34-1.25(m, 1H), 0.91-0.72(m, 2H), 0.45-0.41(m,2H), 0.11-0.07(m, 2H). LRMS [M+H] = 264.1。
【０６４３】
実施例１０６
８−フェネチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０６４４】
【化１１０】
2013514382.tif 000111
８−フェネチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例９１（ウィティッヒ反応）および実施例９２（還元）について記載の手順にしたがって、ベンジルトリフェニルホスホニウムブロミドを使用して、５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボアルデヒド（実施例８７由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.99(dd,1H), 8.88(dd, 1H), 8.35(d, 1H), 7.83(dd, 1H), 7.49(d, 1H), 7.29-7.15(dd, 6H),6.70(br s, 2H), 3.10-3.00(m, 4H). LRMS [M+H] = 300.1。
【０６４５】
実施例１０７
（５−アミノ−２−（４−ブロモフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール
【０６４６】
【化１１１】
2013514382.tif 000112
（５−アミノ−２−（４−ブロモフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノールを、実施例８６について記載の手順にしたがって、（５−アミノ−２−（４−メトキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール（実施例９５由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.81(d,1H), 8.72(d, 1H), 8.40(d, 1H), 7.68(d, 1H), 7.39(dd, 1H), 7.08(d, 2H), 6.74(d,2H), 6.66(br s, 2H), 4.49(s, 2H), 3.21(t, 2H), 3.03(t, 2H). LRMS [M+H] = 408.1。
【０６４７】
実施例１０８
（５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール
【０６４８】
【化１１２】
2013514382.tif 000113
（５−アミノ−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノールを、実施例４４／工程４について記載の手順にしたがい、且つ実施例９９／工程３に記載の手順にしたがったＴＢＳ基の脱保護を使用して、ｔｅｒｔ−ブチル５−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（実施例９９／工程１）および３−クロロ−５−（（４−メトキシ−２−メチルフェニル）エチニル）ピコリノニトリル（実施例４９／工程１由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.79(s,1H), 8.73(s, 1H), 8.35(d, 1H), 7.61(s, 1H), 7.33(d, 1H), 7.09(d, 1H), 6.75(d,1H), 6.68(dd, 1H), 6.57(br s, 2H), 4.47(d, 2H), 4.32(t, 1H), 3.58(s, 3H),3.17(t, 2H), 3.04(t, 2H), 2.30(s, 3H). LRMS [M+H] = 374.2。
【０６４９】
実施例１０９
２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）−８−ペンチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０６５０】
【化１１３】
2013514382.tif 000114
および
実施例１１０
８−（２−シクロプロピルエチル）−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０６５１】
【化１１４】
2013514382.tif 000115
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル５−ブロモ−２−クロロフェニルカルバマート
表題化合物を、実施例５／工程１に記載の手順に従うが、５−ブロモ−２−クロロアニリン（市販品）を出発物質として使用して調製した。粗材料を、０〜４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル５−ブロモ−２−クロロフェニルカルバマートを淡黄色固体として得た。
【０６５２】
工程２：（Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−クロロ−５−（２−シクロプロピルビニル）フェニルカルバマート
ｔｅｒｔ−ブチル５−ブロモ−２−クロロフェニルカルバマート（前工程由来）（１．０当量）および（Ｅ）−２−（２−シクロプロピルビニル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（市販品）（１．０当量）を含むトルエン（０．２Ｍ）の溶液を、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（５モル％）および２Ｎ炭酸カリウム水溶液（２．０当量）と混合した。反応物を１００℃に加熱し、一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物をＥｔＯＡｃおよび水で希釈した。２相を分離し、水層をＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗生成物を、０〜５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、（Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−クロロ−５−（２−シクロプロピルビニル）フェニルカルバマートを淡黄色固体として得た。
【０６５３】
工程３：（Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（２−シクロプロピルビニル）−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート
表題化合物を、実施例９３／工程２に記載の手順に従うが、（Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−クロロ−５−（２−シクロプロピルビニル）フェニルカルバマート（前工程由来）を出発物質として使用して調製した。粗生成物を、０〜１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、（Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（２−シクロプロピルビニル）−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマートを淡黄色固体として得た。
【０６５４】
工程４：２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）−８−ペンチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンおよび８−（２−シクロプロピルエチル）−２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
表題化合物を、実施例４４／工程４（スズキカップリング）および５（還元）に記載の手順に従うが、（Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（２−シクロプロピルビニル）−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（前工程由来）および３−クロロ−５−（（４−メトキシ−２−メチルフェニル）エチニル）ピコリノニトリル（実施例４９／工程１由来）を出発物質として使用して調製した。粗生成物を、０〜４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、実施例１０９を白色固体として得た：1H NMR(アセトン- d6):δ 8.76(d,1H), 8.70(d, 1H), 8.29(d, 1H), 7.44(d, 1H), 7.18(dd, 1H), 7.08(d, 1H), 6.74(d,1H), 6.68(dd, 1H), 6.59(br s, 2H), 3.74(s, 3H), 3.18(t, 2H), 3.04(t, 2H),2.75(t, 2H), 2.29(s, 3H), 1.75-1.68(m, 2H), 1.40-1.35(m, 4H), 0.90(s, 3H);LRMS[M+H] = 414.3;およびオフホワイトの固体としての実施例110:1H NMR(アセトン- d6):δ8.76(d, 1H), 8.70(d, 1H), 8.28(d, 1H), 7.45(d, 1H), 7.19(dd, 1H), 7.08(d, 1H),6.74(d, 1H), 6.67(dd, 1H), 6.55(br s, 2H), 3.73(s, 3H), 3.16(t, 2H), 3.03(t,2H), 2.29(s, 3H), 1.60(q, 2H), 1.29-1.28(m, 1H), 0.89-0.74(m, 2H), 0.44-0.41(m,2H), 0.10-0.07(m, 2H). LRMS [M+H] = 412.3. 
実施例１１１
（５−アミノ−２−（２，４，６−トリメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール
【０６５５】
【化１１５】
2013514382.tif 000116
（５−アミノ−２−（２，４，６−トリメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノールを、実施例４４／工程４、実施例９９／工程３（ＴＢＳの脱保護）、および実施例７７／工程３（還元）について記載の手順にしたがって、ｔｅｒｔ−ブチル５−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（実施例９９／工程１由来）、２−エチニル−１，３，５−トリメチルベンゼン（市販品）、および３−クロロ−５−（メシチルエチニル）ピコリノニトリル（実施例７７／工程１由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.77(s,2H), 8.34(d, 1H), 7.61(s, 1H), 7.33(d, 1H), 6.84(s, 2H), 6.60(br s, 2H),4.77(d, 2H), 4.35(t, 1H), 3.08(s, 3H), 2.84(s, 6H), 2.30-2.29(m, 4H). LRMS [M+H]= 372.2。
【０６５６】
実施例１１２
（５−アミノ−２−（４−プロポキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール
【０６５７】
【化１１６】
2013514382.tif 000117
（５−アミノ−２−（４−プロポキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノールを、実施例４４／工程４および実施例９９／工程３（ＴＢＳの脱保護）について記載の手順にしたがって、８−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−３−クロロベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（実施例９９／工程１由来）および３−クロロ−５−（４−プロポキシフェネチル）ピコリノニトリル（実施例７９／工程２由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.79(d,1H), 8.70(d, 1H), 8.35(d, 1H), 7.61(d, 1H), 7.33(dd, 1H), 7.17(d, 2H), 6.83(d,2H), 6.57(br s, 2H), 4.77(d, 2H), 4.34(t, 1H), 3.89(t, 2H), 3.22(t, 2H),3.06(t, 2H), 1.83-1.70(m, 2H), 1.00(t, 3H). LRMS [M+H] = 388.2。
【０６５８】
実施例１１３
（２−（２−（１Ｈ−インドール−５−イル）エチル）−５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール
【０６５９】
【化１１７】
2013514382.tif 000118
（２−（２−（１Ｈ−インドール−５−イル）エチル）−５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノールを、実施例４４／工程４および実施例９９／工程３（ＴＢＳの脱保護）について記載の手順にしたがって、ｔｅｒｔ−ブチル５−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（実施例９９／工程１由来）および５−（（１Ｈ−インドール−５−イル）エチニル）−３−クロロピコリノニトリル（実施例４４／工程３由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 10.19(t,1H), 8.83(d, 1H), 8.71(d, 1H), 8.35(d, 1H), 7.60(d, 1H), 7.46(d, 1H),7.36-7.27(m, 3H), 7.04(dd, 1H), 6.57(br s, 2H), 6.38(dt, 1H), 4.77(d, 2H),4.36(t, 1H), 3.29(t, 2H), 3.19(t, 2H). LRMS [M+H] = 369.2。
【０６６０】
実施例１１４
Ｎ−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）アセトアミド
【０６６１】
【化１１８】
2013514382.tif 000119
工程１：Ｎ−（４−エチニルフェニル）アセトアミド
４−エチニルアニリン（市販品）（１．０当量）およびトリエチルアミン（１．０当量）を含む塩化メチレン（０．０４Ｍ）の溶液に、塩化アセチル（１．５当量）をゆっくり添加した。次いで、反応混合物を０℃で１時間撹拌した。周囲温度への加温後、反応混合物を、酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、Ｎ−（４−エチニルフェニル）アセトアミドを白色固体として得た。
【０６６２】
工程２：Ｎ−（４−（（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）エチニル）フェニル）アセトアミド
３，５−ジクロロピコリノニトリル（１．０当量）、Ｎ−（４−エチニルフェニル）アセトアミド（前工程由来）（１．０当量）、ビス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウムクロリド（１０モル％）、ヨウ化銅（１０モル％）、およびトリエチルアミン（５．０当量）を含むＤＭＦ（０．０４Ｍ）の溶液を、６０℃で４時間撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離した。有機層を水で２回洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、Ｎ−（４−（（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）エチニル）フェニル）アセトアミドを白色固体として得た。
【０６６３】
工程３：Ｎ−（４−（２−（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）エチル）フェニル）アセトアミド
Ｎ−（４−（（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）エチニル）フェニル）アセトアミド（前工程由来）を含む酢酸エチル／メタノール（１：４、０．０５Ｍ）の溶液に、１０重量％パラジウム炭素（０．２当量）を添加した。水素ガスをバルーンを介して導入し、反応物を３時間撹拌した。混合物をセライトパッドで濾過し、ジクロロメタンで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、Ｎ−（４−（２−（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）エチル）フェニル）アセトアミドを得た。
【０６６４】
工程４：Ｎ−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）アセトアミド
Ｎ−（４−（２−（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（前工程由来）（１．０当量）、ｔｅｒｔ−ブチル４−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（実施例５／工程２由来）（１．５当量）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（１０モル％）、ジシクロヘキシル（２’，６’−ジメトキシビフェニル−２−イル）ホスフィン（２０モル％）、およびリン酸カリウム（２．０当量）を含むｎ−ブタノール／Ｈ２Ｏ（２．５：１、０．０４Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、Ｎ−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）アセトアミドを白色固体として得た。1H NMR(CDCl3):δ 8.51(s, 1H),8.32(s, 1H), 8.01(d, 1H), 7.44(s, 1H), 7.33-7.36(m, 2H), 7.03-7.19(m, 3H),5.98(br, 2H), 3.07-3.11(m, 2H), 2.94-2.98(m, 2H), 2.44(s, 3H), 2.10(s, 3H).LRMS [M+H] = 371.2。
【０６６５】
実施例１１５
メチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾアート
【０６６６】
【化１１９】
2013514382.tif 000120
工程１：メチル３−メチル−４−（（トリエチルシリル）エチニル）ベンゾアート
メチル４−ブロモ−３−メチルベンゾアート（１．０当量）、トリエチル（エチニル）シラン（１．０当量）、ビス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウムクロリド（１０モル％）、ヨウ化銅（１０モル％）、およびトリエチルアミン（５．０当量）を含むＤＭＦ（０．０４Ｍ）の溶液を、６０℃で４時間撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離した。有機層を水で２回洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、メチル３−メチル−４−（（トリエチルシリル）エチニル）ベンゾアートを白色固体として得た。
【０６６７】
工程２：メチル４−エチニル−３−メチルベンゾアート
メチル３−メチル−４−（（トリエチルシリル）エチニル）ベンゾアート（前工程由来）（１．０当量）を含むＴＨＦ（０．２Ｍ）の溶液に、ＴＢＡＦ（０．２当量）を０℃でゆっくり添加した。次いで、反応混合物を０℃で１時間撹拌した。周囲温度への加温後、反応混合物を、酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、メチル４−エチニル−３−メチルベンゾアートを白色固体として得た。
【０６６８】
工程３：メチル４−（（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）エチニル）−３−メチルベンゾアート
３，５−ジクロロピコリノニトリル（１．０当量）、メチル４−エチニル−３−メチルベンゾアート（前工程由来）（１．０当量）、ビス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウムクロリド（１０モル％）、ヨウ化銅（１０モル％）、およびトリエチルアミン（５．０当量）を含むＤＭＦ（０．０４Ｍ）の溶液を、６０℃で４時間撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離した。有機層を水で２回洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、メチル４−（（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）エチニル）−３−メチルベンゾアートを白色固体として得た。
【０６６９】
工程４：メチルメチル４−（（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチニル）−３−メチルベンゾアート
メチル４−（（５−クロロ−６−シアノピリジン−３−イル）エチニル）−３−メチルベンゾアート（前工程由来）（１．０当量）、ｔｅｒｔ−ブチル４−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（実施例５／工程２由来）（１．５当量）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（１０モル％）、ジシクロヘキシル（２’，６’−ジメトキシビフェニル−２−イル）ホスフィン（２０モル％）、およびリン酸カリウム（２．０当量）を含むｎ−ブタノール／Ｈ２Ｏ（２．５：１、０．０４Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、メチルメチル−４−（（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチニル）−３−メチルベンゾアートを白色固体として得た。
【０６７０】
工程５：メチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾアート
メチルメチル４−（（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチニル）−３−メチルベンゾアート（前工程由来）を含む酢酸エチル／メタノール（１：４、０．０５Ｍ）の溶液に、１０重量％パラジウム炭素（０．２当量）を添加した。水素ガスをバルーンを介して導入し、反応物を３時間撹拌した。混合物をセライトパッドで濾過し、ジクロロメタンで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、メチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾアートを得た。1H NMR(CDCl3):δ 8.61(s,1H), 8.40(s, 1H), 8.09(d, 1H), 7.83(s, 1H), 7.81(d, 1H), 7.54(s, 1H),7.18-7.20(m, 2H), 6.17(br, 2H), 3.92(s, 3H), 3.10-3.16(m, 4H), 2.53(s, 3H),2.36(s, 3H). LRMS [M+H] = 386.2。
【０６７１】
実施例１１６
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ，３−ジメチルベンズアミド
【０６７２】
【化１２０】
2013514382.tif 000121
工程１：４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチル安息香酸
メチル４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾアート（実施例１１５由来）（１．０当量）、および１Ｎ水酸化ナトリウム（１．５当量）を含むメタノール（０．０４Ｍ）の溶液を、６０℃で４時間撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離した。有機層を水で２回洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜５０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチル安息香酸を白色固体として得た。
【０６７３】
工程２：４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾイルクロリド
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチル安息香酸（前工程由来）を含む塩化チオニルの溶液を、６０℃で３時間撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を、減圧下濃縮した。粗材料を精製せずに次の工程のために使用した。
【０６７４】
工程３：４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ，３−ジメチルベンズアミド
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾイルクロリド（前工程由来）（実施例５）およびトリエチルアミン（２．５当量）を含むエーテル（０．０５Ｍ）の溶液に、メタンアミン（５．０当量）を添加した。反応混合物を一晩撹拌した。次いで、反応混合物を、酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ，３−ジメチルベンズアミドを白色固体として得た。1H NMR(CDCl3):δ 8.62(s,1H), 8.32(s, 1H), 8.04(d, 1H), 7.60(s, 1H), 7.46-7.52(m, 2H), 7.09-7.11(m, 2H),6.05(br, 2H), 3.09-3.17(m, 4H), 3.00(d, 3H), 2.52(s, 3H), 2.33(s, 3H). LRMS[M+H] = 385.2。
【０６７５】
実施例１１７
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−Ｎ，３−ジメチルベンズアミド
【０６７６】
【化１２１】
2013514382.tif 000122
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾイルクロリド（実施例１１６／工程２）およびトリエチルアミン（２．５当量）を含むエーテル（０．０５Ｍ）の溶液に、Ｎ１，Ｎ１，Ｎ２−トリメチルエタン−１，２−ジアミン（５．０当量）を添加した。反応混合物を一晩撹拌した。次いで、反応混合物を、酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−Ｎ，３−ジメチルベンズアミドを白色固体として得た。1H NMR(CDCl3):δ 8.66(s,1H), 8.37(s, 1H), 8.07(d, 1H), 7.63(s, 1H), 7.09-7.30(m, 4H), 3.90(br, 2H),3.01-3.19(m, 4H), 3.08(s, 6H), 2.72(br, 5H), 2.52(s, 3H), 2.33(s, 3H).LRMS[M+H] = 456.3。
【０６７７】
実施例１１８
２−（４−メトキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０６７８】
【化１２２】
2013514382.tif 000123
２−（４−メトキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４５／工程１から３について記載の手順にしたがって、１−エチニル−４−メトキシベンゼン（実施例１１６／工程２）から調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.69(s,1H), 8.47(s, 1H), 8.27(d, 1H), 7.80(d, 2H), 7.58-7.66(m, 1H), 7.33-7.42(m, 1H),7.15(d, 2H), 6.90(d, 2H), 6.25(br, 2H), 3.86(s, 3H), 3.13-3.23(m, 2H),2.97-3.10(m, 2H). LRMS [M+H] = 330.2。
【０６７９】
実施例１１９
２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０６８０】
【化１２３】
2013514382.tif 000124
２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４５／工程１から３について記載の手順にしたがって、１−エチニル−４−メトキシ−２−メチルベンゼン（市販品）から調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.60(s,1H), 8.37(s, 1H), 8.18(d, 1H), 7.69(d, 1H), 7.49-7.57(m, 1H), 7.24-7.34(m, 1H),6.98(d, 1H), 6.56-6.70(m, 2H), 6.00(br, 2H), 3.70(s, 3H), 3.00-3.09(m, 2H),2.83-2.96(m, 2H), 2.20(s, 3H). LRMS [M+H] = 344.2。
【０６８１】
実施例１２０
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンズアミド
【０６８２】
【化１２４】
2013514382.tif 000125
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンズアミドを、実施例１１７について記載の手順にしたがって、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾイルクロリド（実施例１１６／工程２）およびアンモニアから調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.60(s,1H), 8.35(s, 1H), 8.05(d, 1H), 7.65(s, 1H), 7.51-7.53(m, 2H), 7.13-7.21(m, 2H),3.09-3.16(m, 4H), 2.51(s, 3H), 2.34(s, 3H). LRMS [M+H] = 371.2。
【０６８３】
実施例１２１
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ，Ｎ，３−トリメチルベンズアミド
【０６８４】
【化１２５】
2013514382.tif 000126
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ，Ｎ，３−トリメチルベンズアミドを、実施例１１７について記載の手順にしたがって、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾイルクロリド（実施例１１６／工程２）およびジメチルアミンから調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.68(s,1H), 8.32(s, 1H), 8.04(d, 1H), 7.66(s, 1H), 7.31(d, 1H), 7.06-7.18(m, 3H),3.08-3.19(m, 4H), 2.96(d, 3H), 2.54(s, 3H), 2.33(s, 3H), 2.05(s, 3H). LRMS[M+H] = 399.2。
【０６８５】
実施例１２２
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−３−メチルベンズアミド
【０６８６】
【化１２６】
2013514382.tif 000127
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−３−メチルベンズアミドを、実施例１１７について記載の手順にしたがって、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾイルクロリド（実施例１１６／工程２）および２−アミノエタノールから調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.59(s,1H), 8.34(s, 1H), 8.04(d, 1H), 7.50-7.62(m, 3H), 7.08-7.25(m, 2H), 3.80(t, 2H),3.63(t, 2H), 3.07-3.16(m, 4H), 2.51(s, 3H), 2.32(s, 3H).LRMS [M+H] = 415.2。
【０６８７】
実施例１２３
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−３−メチルベンズアミド
【０６８８】
【化１２７】
2013514382.tif 000128
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−３−メチルベンズアミドを、実施例１１７について記載の手順にしたがって、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾイルクロリド（実施例１１６／工程２）およびＮ１，Ｎ１−ジメチルエタン−１，２−ジアミンから調製した。1H NMR(メタノール- d4):δ 8.60(s,1H), 8.39(s, 1H), 8.08(d, 1H), 7.68(s, 1H), 7.57-7.59(m, 2H), 7.19-7.22(m, 2H),3.57-3.61(m, 2H), 3.07-3.16(m, 4H), 2.64-2.67(m, 2H), 2.52(s, 3H), 2.38(s, 6H),2.35(s, 3H).LRMS [M+H] = 442.3。
【０６８９】
実施例１２４
（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）（ピロリジン−１−イル）メタノン
【０６９０】
【化１２８】
2013514382.tif 000129
（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）（ピロリジン−１−イル）メタノンを、実施例１１７について記載の手順にしたがって、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾイルクロリド（実施例１１６／工程２）およびピロリジンから調製した。1H NMR(メタノール- d4):δ 8.60(s,1H), 8.42(s, 1H), 8.09(d, 1H), 7.34(s, 1H), 7.23(s, 1H), 7.05-7.15(m, 3H),3.49(t, 2H), 3.27(t, 2H), 3.05-3.17(m, 4H), 2.42(s, 3H), 2.26(s, 3H),1.88-1.91(m, 2H), 1.73-1.77(m, 2H).LRMS [M+H] = 425.2。
【０６９１】
実施例１２５
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ−（２−（ジエチルアミノ）エチル）−３−メチルベンズアミド
【０６９２】
【化１２９】
2013514382.tif 000130
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ−（２−（ジエチルアミノ）エチル）−３−メチルベンズアミドを、実施例１１７について記載の手順にしたがって、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾイルクロリド（実施例１１６／工程２）およびＮ１，Ｎ１−ジエチルエタン−１，２−ジアミンから調製した。1H NMR(メタノール- d4):δ 8.55(s,1H), 8.48(s, 1H), 8.10(d, 1H), 7.56(s, 1H), 7.47-7.50(m, 1H), 7.33(s, 1H),7.10-7.14(m, 2H), 3.44(t, 2H), 3.25(t, 2H), 3.08-3.14(m, 4H), 2.62-2.72(m, 4H),2.42(s, 3H), 2.27(s, 3H), 1.05(t, 6H).LRMS [M+H] = 470.3。
【０６９３】
実施例１２６
（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）（４−エチルピペラジン−１−イル）メタノン
【０６９４】
【化１３０】
2013514382.tif 000131
（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）（４−エチルピペラジン−１−イル）メタノンを、実施例１１７について記載の手順にしたがって、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾイルクロリド（実施例１１６／工程２）および１−エチルピペラジンから調製した。1H NMR(メタノール- d4):δ 8.59(s,1H), 8.37(s, 1H), 8.06(d, 1H), 7.32(s, 1H), 7.00-7.12(m, 4H), 3.67(br, 2H),3.06-3.13(m, 4H), 2.45(br, 4H), 2.37(q, 2H), 2.41(s, 3H), 2.26(s, 3H), 2.19(br,2H), 1.04(t, 3H).LRMS [M+H] = 468.3。
【０６９５】
実施例１２７
（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）（ピペラジン−１−イル）メタノン
【０６９６】
【化１３１】
2013514382.tif 000132
（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）（ピペラジン−１−イル）メタノンを、実施例１１７について記載の手順にしたがって、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾイルクロリド（実施例１１６／工程２）およびピペラジンから調製した。1H NMR(メタノール- d4):δ 8.66(s,1H), 8.55(s, 1H), 8.19(d, 1H), 7.38(s, 1H), 7.21-7.23(m, 2H), 7.10-7.15(m, 2H),3.66(br, 6H), 3.08-3.18(m, 6H), 2.45(s, 3H), 2.30(s, 3H).LRMS [M+H] = 440.2。
【０６９７】
実施例１２８
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチル−Ｎ−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）ベンズアミド
【０６９８】
【化１３２】
2013514382.tif 000133
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチル−Ｎ−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）ベンズアミドを、実施例１１７について記載の手順にしたがって、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾイルクロリド（実施例１１６／工程２）および２−（ピロリジン−１−イル）エタンアミンから調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.58(s,1H), 8.38(s, 1H), 8.07(d, 1H), 7.64(s, 1H), 7.51-7.55(m, 2H), 7.12-7.20(m, 2H),6.26(br, 2H), 3.61(dd, 2H), 3.05-3.12(m, 4H), 2.81(t, 2H), 2.69(br, 4H),2.50(s, 3H), 2.33(s, 3H), 1.83-1.85(m, 4H).LRMS [M+H] = 468.3。
【０６９９】
実施例１２９
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ−（２−アミノエチル）−３−メチルベンズアミド
【０７００】
【化１３３】
2013514382.tif 000134
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ−（２−アミノエチル）−３−メチルベンズアミドを、実施例１１７について記載の手順にしたがって、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾイルクロリド（実施例１１６／工程２）およびエタン−１，２−ジアミンから調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.59(s,1H), 8.37(s, 1H), 8.07(d, 1H), 7.63(s, 1H), 7.51(br, 2H), 7.12-7.21(m, 2H),6.25(br, 2H), 3.48-3.52(m, 2H), 3.08-3.15(m, 4H), 2.94(t, 2H), 2.51(s, 3H),2.34(s, 3H).LRMS [M+H] = 414.2。
【０７０１】
実施例１３０
４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−Ｎ，３−ジメチルベンズアミド
【０７０２】
【化１３４】
2013514382.tif 000135
４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−Ｎ，３−ジメチルベンズアミドを、実施例１１７について記載の手順にしたがって、４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾイルクロリド（実施例１１６／工程２）およびＮ１，Ｎ１，Ｎ２−トリメチルエタン−１，２−ジアミンから調製した。1H NMR(メタノール- d4):δ 8.84(s,1H), 8.63(s, 1H), 8.39(d, 1H), 7.76-7.83(m, 2H), 7.60-7.64(m, 1H), 7.37(s, 1H),7.19-7.29(m, 2H), 3.96(t, 2H), 3.48(t, 2H), 3.32(t, 2H), 3.20(t, 2H), 3.09(s,3H), 3.06(s, 6H), 2.42(s, 3H).LRMS [M+H] = 442.3。
【０７０３】
実施例１３１
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−Ｎ−メチルベンズアミド
【０７０４】
【化１３５】
2013514382.tif 000136
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）−Ｎ−メチルベンズアミドを、実施例１１７について記載の手順にしたがって、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾイルクロリド（実施例１１６／工程２）およびＮ１，Ｎ１，Ｎ２−トリメチルエタン−１，２−ジアミンから調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.64(s, 1H),8.36(s, 1H), 8.05(d, 1H), 7.60(s, 1H), 7.41(d, 2H), 7.31(d, 1H), 7.21(d, 2H),3.91(t, 2H), 3.44(t, 2H), 3.25(t, 2H), 3.12(t, 2H), 3.03(s, 3H), 3.01(s, 6H),2.53(s, 3H).LRMS [M+H] = 442.3。
【０７０５】
実施例１３２
２−（４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）プロパン−２−オール
【０７０６】
【化１３６】
2013514382.tif 000137
２−（４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）プロパン−２−オールを、実施例７８について記載の手順に従うが、実施例１１５に類似するが工程４でｔｅｒｔ−ブチル２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマートを使用して調製したメチル４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾアートを使用して、調製した。LRMS [M+H] = 372.2。
【０７０７】
実施例１３３
２−（４−ブトキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０７０８】
【化１３７】
2013514382.tif 000138
２−（４−ブトキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４５／工程１から３について記載の手順に従うが、工程１で３，５−ジクロロピコリノニトリル（市販品）と共に１−ブトキシ−４−エチニルベンゼン（市販品）を使用して調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.75(s,1H), 8.68(s, 1H), 8.28(d, 1H), 7.42(s, 1H), 7.10-7.18(m, 3H), 6.84(d, 2H),6.58(br, 2H), 3.94(t, 2H), 3.21(t, 2H), 3.05(t, 2H), 2.46(s, 3H), 1.65-1.75(m,2H), 1.41-1.58(m, 2H), 0.94(s, 3H).LRMS [M+H] = 386.2。
【０７０９】
実施例１３４
２−（２−（ビフェニル−４−イル）エチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０７１０】
【化１３８】
2013514382.tif 000139
２−（２−（ビフェニル−４−イル）エチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４５／工程１から３について記載の手順に従うが、工程１で３，５−ジクロロピコリノニトリル（市販品）と共に４−エチニルビフェニル（市販品）を使用して調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.80(s,1H), 8.75(s, 1H), 8.26(d, 2H), 7.55-7.69(m, 4H), 7.30-7.46(m, 4H), 7.13(d, 2H),6.58(br, 2H), 3.30(t, 2H), 3.18(t, 2H), 2.45(s, 3H). LRMS [M+H] = 390.2。
【０７１１】
実施例１３５
２−（（１，３−ジヒドロイソベンゾフラン−１−イル）メチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０７１２】
【化１３９】
2013514382.tif 000140
工程１：２−（（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチニル）フェニル）メタノール
２−（（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチニル）フェニル）メタノールを、実施例４５／工程１から２について記載の手順に従うが、工程１で３，５−ジクロロピコリノニトリル（市販品）と共に（２−エチニルフェニル）メタノール（市販品）を使用して調製した。
【０７１３】
工程２：２−（（１，３−ジヒドロイソベンゾフラン−１−イル）メチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチニル）フェニル）メタノール（１．０当量）（前工程由来）を含むエタノール（０．０５Ｍ）の溶液に、１０重量％パラジウム炭素（０．２当量、重量による）を添加した。次いで水素ガスをバルーンを介して導入し、反応物を１８時間撹拌した。この時点で、混合物をセライトパッドで濾過し、メタノールで洗浄した。揮発物を真空下で除去し、得られた残渣を、０〜６０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、２−（（１，３−ジヒドロイソベンゾフラン−１−イル）メチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを固体として得た。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.78(s,1H), 8.74(s, 1H), 8.24(d, 2H), 7.40-7.44(m, 2H), 7.20-7.34(m, 3H), 6.61(br,2H), 5.63-5.69(m, 1H), 4.89-5.00(dd, 2H), 3.51-3.56(dd, 1H), 3.28-3.34(dd, 1H),2.46(s, 3H). LRMS [M+H] = 342.1。
【０７１４】
実施例１３６
８−メチル−２−（４−（２−メチルアリルオキシ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０７１５】
【化１４０】
2013514382.tif 000141
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノール（実施例１７０由来）（１．０当量）を含むジメチルホルムアミド（０．１０Ｍ）の溶液に、無水炭酸カリウム（１．５当量）を添加し、その後にメタリルブロミド（１．２当量）を添加した。得られた混合物を１００℃で１８時間撹拌した。周囲温度への冷却後、混合物を酢酸エチルおよび水で希釈した。２相の層を分離し、水層を酢酸エチルで２回洗浄した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、揮発物を真空下で除去した。得られた残渣を、０〜６０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、８−メチル−２−（４−（２−メチルアリルオキシ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを固体として得た。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.75(s,1H), 8.68(s, 1H), 8.27(d, 1H), 7.41(s, 1H), 7.12-7.19(m, 3H), 6.87(d, 2H),6.60(br, 2H), 5.06(s, 1H), 4.93(s, 1H), 4.43(s, 2H), 3.20(t, 2H), 3.05(t, 2H),2.45(s, 3H), 1.79(s, 3H). LRMS [M+H] = 384.2。
【０７１６】
実施例１３７
２−（４−（イソペンチルオキシ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０７１７】
【化１４１】
2013514382.tif 000142
２−（４−（イソペンチルオキシ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例１３６について記載の手順に従うが、１−ブロモ−３−メチルブタンを使用して、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノール（実施例１７０由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.72(s,1H), 8.69(s, 1H), 8.26(d, 1H), 7.43(s, 1H), 7.12-7.18(m, 3H), 6.84(d, 2H),6.50(br, 2H), 3.98(t, 2H), 3.21(t, 2H), 3.06(t, 2H), 2.46(s, 3H), 1.78-1.87(m,1H), 1.61-1.67(dd, 2H), 0.96(s, 3H), 0.95(3H). LRMS [M+H] = 400.2。
【０７１８】
実施例１３８
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニルプロピルカルボナート
【０７１９】
【化１４２】
2013514382.tif 000143
０℃の４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノール（実施例１７０由来）（１．０当量）およびトリエチルアミン（２当量）を含むジクロロメタン（０．１０Ｍ）の溶液に、クロロギ酸エチル（１．２当量）を添加した。得られた混合物を、０℃で３０分間撹拌し、その後に水およびジクロロメタンで希釈した。２相の層を分離し、水層をジクロロメタンで２回洗浄した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、揮発物を真空下で除去した。得られた残渣を、０〜５０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニルエチルカルボナートを固体として得た。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.78(s,1H), 8.73(s, 1H), 8.28(d, 1H), 7.43(s, 1H), 7.33(d, 2H), 7.10-7.17(m, 3H),6.64(br, 2H), 4.18(t, 2H), 3.25(t, 2H), 3.14(t, 2H), 2.45(s, 3H), 1.68-1.77(m,2H), 0.97(t, 3H). LRMS [M+H] = 416.2。
【０７２０】
実施例１３９
エチル５−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノキシ）ペンタノアート
【０７２１】
【化１４３】
2013514382.tif 000144
２２℃の４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノール（実施例１７０由来）（１．０当量）を含むジメチルホルムアミド（０．１０Ｍ）の溶液に、水素化ナトリウムの６０％分散物を含む鉱物油（１．５当量）を添加し、得られた混合物を３０分間撹拌した。この時点で、エチル５−ブロモペンタノアート（１．２当量）をこの混合物に添加した。次いで、反応混合物を１８時間撹拌し、その後に酢酸エチルおよび水で希釈した。２相の層を分離し、有機層を水で２回洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、揮発物を真空下で除去した。得られた残渣を、水中１０〜５０％ＭｅＣＮの勾配を使用したＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した。次いで、得られたトリフルオロ酢酸塩を、ＳｔｒａｔｏＳｐｈｅｒｅｓ（商標）ＰＬ−ＳＯ３Ｈ  ＳＰＥイオン交換樹脂の使用によって遊離塩基形態に変換して、エチル５−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノキシ）ペンタノアートを固体として得た。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.80(s,1H), 8.74(s, 1H), 8.33(d, 1H), 7.47(s, 1H), 7.24(d, 1H), 7.17(d, 2H), 6.85(d,2H), 4.10(q, 2H), 3.97(t, 2H), 3.25(t, 2H), 3.07(t, 2), 2.50(s, 3H), 2.37(t,3H), 1.74-1.84(m, 4H), 1.21(t, 3H). LRMS [M+H] = 458.2。
【０７２２】
実施例１４０
２−（４−（シクロペンチルオキシ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０７２３】
【化１４４】
2013514382.tif 000145
２−（４−（シクロペンチルオキシ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例１３６について記載の手順に従うが、ブロモシクロペンタンを使用して、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノール（実施例１７０由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.75(d,2H), 8.30(d, 1H), 7.45(s, 1H), 7.20(d, 1H), 7.14(d, 2H), 6.79(d, 2H),4.73-4.81(m, 1H), 3.22(t, 2H), 3.05(t, 2H), 2.47(s, 3H), 1.85-1.96(m, 2H),1.70-1.79(m, 4H), 1.56-1.64(m, 2H). LRMS [M+H] = 398.2。
【０７２４】
実施例１４１
２−（４−（シクロブチルメトキシ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０７２５】
【化１４５】
2013514382.tif 000146
２−（４−（シクロブチルメトキシ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例１３６について記載の手順に従うが、（ブロモメチル）シクロブタンを使用して、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノール（実施例１７０由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.79(s,1H), 8.73(s, 1H), 8.33(d, 1H), 7.47(s, 1H), 7.26(d, 1H), 7.16(d, 2H), 6.82(d,2H), 3.90(d, 2H), 3.23(t, 2H), 3.06(t, 2H), 2.68-2.79(m, 1H), 2.49(s, 3H),2.05-2.14(m, 2H), 1.80-1.98(m, 4H). LRMS [M+H] = 398.2。
【０７２６】
実施例１４２
８−メチル−２−（４−（２−モルホリノエトキシ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０７２７】
【化１４６】
2013514382.tif 000147
８−メチル−２−（４−（２−モルホリノエトキシ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例１３９について記載の手順に従うが４−（２−ブロモエチル）モルホリンを使用して、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノール（実施例１７０由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.78(s,1H), 8.72(s, 1H), 8.30(d, 1H), 7.46(s, 1H), 7.17-7.24(m, 3H), 6.85(d, 2H),4.08(t, 2H), 3.56-3.62(m, 4H), 3.45-3.53(m, 2H), 3.24(t, 2H), 3.07(t, 2H),2.73(t, 2H), 2.52-2.56(m, 2H), 2.49(s, 3H). LRMS [M+H] = 443.2。
【０７２８】
実施例１４３
２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノキシ）−１−フェニルエタノン
【０７２９】
【化１４７】
2013514382.tif 000148
２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノキシ）−１−フェニルエタノンを、実施例１３９について記載の手順に従うが、２−ブロモ−１−フェニルエタノンを使用して、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノール（実施例１７０由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.76(s,1H), 8.71(s, 1H), 8.27(d, 1H), 8.06(d, 2H), 7.67(t, 1H), 7.57(t, 2H), 7.43(s,1H), 7.17(d, 3H), 6.90(d, 2H), 5.45(s, 2H), 3.21(t, 2H), 3.06(t, 2H), 2.45(s,3H). LRMS [M+H] = 448.2。
【０７３０】
実施例１４４
５−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノキシ）ペンタン酸
【０７３１】
【化１４８】
2013514382.tif 000149
エチル５−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノキシ）ペンタノアート（１．０当量）（実施例１３９由来）を含むエタノール（０．１０Ｍ）の溶液に、無水水酸化ナトリウム（２．０当量）を添加し、得られた混合物を８０℃で２時間撹拌した。周囲温度への冷却後、混合物を酢酸エチルおよび水で希釈した。２相の層を分離し、水層を酢酸エチルで２回洗浄した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、揮発物を真空下で除去した。得られた残渣を、０〜１０％メタノールを含むジクロロメタンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、５−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノキシ）ペンタン酸を固体として得た。1H NMR(メタノール- d4):δ 8.61(s,1H), 8.57(s, 1H), 8.20(d, 1H), 7.40(s, 1H), 7.20(d, 1H), 7.07(d, 2H), 6.81(d, 2H),3.93(t, 2H), 3.18(t, 2H), 3.00(t, 2H), 2.48(s, 3H), 2.25(t, 2H), 1.74-1.81(m,2H), 0.86-0.96(m, 2H). LRMS [M+H] = 430.2。
【０７３２】
実施例１４５
２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノキシ）エタノール
【０７３３】
【化１４９】
2013514382.tif 000150
工程１：２−（４−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）エトキシ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（４−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）エトキシ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例１３９について記載の手順に従うが、（２−ブロモエトキシ）（ｔｅｒｔ−ブチル）ジメチルシランを使用して、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノール（実施例１７０由来）から調製した。
【０７３４】
工程２：２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノキシ）エタノール
２−（４−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）エトキシ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）（１．０当量）を含むテトラヒドロフラン（０．１０Ｍ）の溶液に、１．０Ｍテトラブチルアンモニウムフルオリド（５当量）を含むＴＨＦ溶液を添加し、得られた混合物を２２℃で２時間撹拌した。この時点で、混合物を酢酸エチルおよび水で希釈した。２相の層を分離し、水層を酢酸エチルで２回洗浄した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、揮発物を真空下で除去した。得られた残渣を、０〜１０％メタノールを含むジクロロメタンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）によって精製して、２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノキシ）エタノールを固体として得た。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.76(s,1H), 8.67(s, 1H), 8.28(d, 1H), 7.40(s, 1H), 7.15(t, 3H), 6.84(d, 2H), 6.54(br,2H), 4.00(t, 2H), 3.83(t, 2H), 3.21(t, 2H), 3.05(t, 2H), 2.45(s, 3H).LRMS [M+H]= 374.2。
【０７３５】
実施例１４６
２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノキシ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド
【０７３６】
【化１５０】
2013514382.tif 000151
２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノキシ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドを、実施例１３９について記載の手順に従うが、２−ブロモ−Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドを使用して、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノール（実施例１７０由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.75(s,1H), 8.70(s, 1H), 8.28(d, 1H), 7.40(s, 1H), 7.18(t, 3H), 6.87(d, 2H), 6.56(br,2H), 4.72(s, 2H), 3.20(t, 2H), 3.07(s, 3H), 3.05(t, 2H), 2.87(s, 3H), 2.45(s,3H).LRMS [M+H] = 415.2。
【０７３７】
実施例１４７
８−メチル−２−（２−メチル−４−（２−モルホリノエトキシ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０７３８】
【化１５１】
2013514382.tif 000152
８−メチル−２−（２−メチル−４−（２−モルホリノエトキシ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例１３９に記載の調製に類似の手順に従うが、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノール（実施例５０由来）および４−（２−ブロモエチル）モルホリンを使用して調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.73(d,2H), 8.26(d, 1H), 7.44(s, 1H), 7.17(d, 1H), 7.05(d, 1H), 6.76(s, 1H), 6.67(d,1), 4.04-4.08(m, 3H), 3.60-3.62(m, 4H), 3.30(s, 1H), 3.16(t, 2H), 3.04(t, 2H),2.71(t, 2H), 2.50-2.52(m, 2H), 2.47(s, 3H), 2.28(s, 3H). LRMS [M+H] = 457.3。
【０７３９】
実施例１４８
２−（２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エトキシ）エタノール
【０７４０】
【化１５２】
2013514382.tif 000153
工程１：２−（４−（２−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）エトキシ）エトキシ）−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（４−（２−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）エトキシ）エトキシ）−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例１４５／工程１に記載の調製に類似の手順に従うが、ｔｅｒｔ−ブチル（２−（２−クロロエトキシ）エトキシ）ジメチルシランと共に４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノール（実施例５０由来）を使用して調製した。
【０７４１】
工程２：２−（２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エトキシ）エタノール
２−（２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エトキシ）エタノールを、実施例１４５／工程２について記載の手順にしたがって、２−（４−（２−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）エトキシ）エトキシ）−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.74(s, 1H),8.69(s, 1H), 8.27(d, 1H), 7.41(s, 1H), 7.14(d, 1H), 7.06(d, 1H), 6.75(s, 1H),6.69(d, 1), 6.54(br, 2H), 4.07(t, 2H), 3.79(t, 2H), 3.64(t, 2H), 3.59(t, 2H),3.16(t, 2H), 3.03(t, 2H), 2.45(s, 3H), 2.29(s, 3H). LRMS [M+H] = 432.2。
【０７４２】
実施例１４９
ジエチル３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）プロピルホスホナート
【０７４３】
【化１５３】
2013514382.tif 000154
ジエチル３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）プロピルホスホナートを、実施例１３９に記載の調製に類似の手順に従うが、ジエチル３−ブロモプロピルホスホナートと共に４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノール（実施例５０由来）を使用して調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 9.52(s,1H), 9.47(s, 1H), 9.03(d, 1H), 8.21(s, 1H), 7.93(d, 1H), 7.84(d, 1H), 7.60(br,2H), 7.53(s, 1), 7.45(d, 1H), 4.76-4.91(m, 6H), 3.93(t, 2H), 3.81(t, 2H),3.24(s, 3H), 3.06(s, 3H), 2.76-2.86(m, 2H), 2.61-2.72(m, 2H), 2.07(t, 6H). LRMS[M+H] = 522.2。
【０７４４】
実施例１５０
３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）プロピルホスホン酸
【０７４５】
【化１５４】
2013514382.tif 000155
１２Ｎ塩酸（ｈｙｃｒｏｃｈｌｏｒｉｃ  ａｃｉｄ）溶液（０．１０Ｍ）を、ジエチル３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）プロピルホスホナート（実施例１４９由来）に添加し、得られた混合物を１００℃で１８時間撹拌した。この時点で、減圧下で塩酸を除去し、得られた残渣を、水中１０〜５０％ＭｅＣＮの勾配を使用したＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した。次いで、得られたトリフルオロ酢酸塩を、飽和重炭酸ナトリウム水溶液の添加によって遊離塩基形態に変換し、その後に酢酸エチルで３回洗浄した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、揮発物を真空下で除去して、３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）プロピルホスホン酸を固体として得た。1H NMR(シ゛メチルスルホキシト゛- d6):δ9.72(br, 1H), 9.01(s, 1H), 8.96(br, 1H), 8.85(s, 1H), 8.54(d, 1H), 7.54(s, 1H),7.42(d, 1H), 7.08(d, 1), 6.74(s, 1H), 6.66(d, 1H), 3.95(t, 2H), 3.14(t, 2H),2.97(t, 2H), 2.50(s, 3H), 2.27(s, 3H), 1.81-1.91(m, 2H), 1.56-1.67(m, 2H). LRMS[M+H] = 466.2。
【０７４６】
実施例１５１
２−（４−ブトキシ−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０７４７】
【化１５５】
2013514382.tif 000156
２−（４−ブトキシ−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例１３９に記載の調製に類似の手順に従うが、１−ブロモブタンと共に４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノール（実施例５０由来）を使用して調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.75(s,1H), 8.71(s, 1H), 8.28(d, 1H), 7.43(s, 1H), 7.15(d, 1H), 7.07(d, 1H), 6.75(s,1H), 6.69(d, 1H), 6.54(br, 2H)3.95(t, 2H), 3.16(t, 2H), 3.04(t, 2H), 2.47(s,3H), 2.30(s, 3H), 1.69-1.77(m, 2H), 1.43-1.54(m, 2H), 0.97(t, 3H). LRMS [M+H] =400.2。
【０７４８】
実施例１５２
２−（４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エタノール
【０７４９】
【化１５６】
2013514382.tif 000157
工程１：４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノール
４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノールを、実施例１４５に記載の調製に類似の手順に従うが、２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（実施例１１９由来）を使用して調製した。
【０７５０】
工程２：２−（４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エタノール
２−（４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エタノールを、実施例１４５／工程１から２について記載の手順にしたがって、４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノール（前工程由来）から調製した。LRMS [M+H] = 374.2。
【０７５１】
実施例１５３
２−（４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エタノール
【０７５２】
【化１５７】
2013514382.tif 000158
工程１：４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノール
４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノールを、実施例５０に記載の調製に類似の手順に従うが、２−（４−メトキシ−２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（実施例１１９由来）を使用して調製した。
【０７５３】
工程２：２−（４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エタノール
２−（４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エタノールを、実施例１４８／工程１から２について記載の手順にしたがって調製した。LRMS [M+H] = 418.2。
【０７５４】
実施例１５４
エチル５−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）ペンタノアート
【０７５５】
【化１５８】
2013514382.tif 000159
エチル５−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）ペンタノアートを、実施例１３９について記載の手順に従うが、エチル５−ブロモペンタノアートを使用して、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノール（実施例５０由来）から調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.64(s, 1H),8.27(s, 1H), 8.02(d, 1H), 7.66(s, 1H), 7.32(d, 1H), 6.91(d, 1H), 6.66(s, 1H),6.63(d, 1H), 4.13(q, 2H), 3.93(t, 2H), 3.14(t, 2H), 2.99(t, 2H), 2.54(s, 3H),2.38(t, 2H), 2.25(s, 3H), 1.79-1.83(m, 4H), 1.26(t, 3H).LRMS [M+H] = 472.3。
【０７５６】
実施例１５５
５−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）ペンタン酸
【０７５７】
【化１５９】
2013514382.tif 000160
５−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）ペンタン酸を、実施例１４４について記載の手順にしたがって、エチル５−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）ペンタノアート（前工程由来）から調製した。1H NMR(CDCl3):δ 8.52(s,1H), 8.27(s, 1H), 8.02(d, 1H), 7.65(s, 1H), 7.32(d, 1H), 6.86(d, 1H), 6.72(s,1H), 6.63(d, 1H), 3.95(t, 2H), 3.15(t, 2H), 2.99(t, 2H), 2.54(s, 3H), 2.45(t,2H), 2.23(s, 3H), 1.79-1.83(m, 4H).LRMS [M+H] = 444.2。
【０７５８】
実施例１５６
２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エタノール
【０７５９】
【化１６０】
2013514382.tif 000161
２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エタノールを、実施例１４５／工程１から２について記載の手順に従うが、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノール（実施例５０由来）を使用して調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.76(s,1H), 8.69(s, 1H), 8.28(d, 1H), 7.40(s, 1H), 7.15(d, 1H), 7.09(d, 1H), 6.75(s,1H), 6.68(d, 1H), 6.57(br, 2H), 4.00(t, 2H), 3.79-3.88(m, 2H), 3.17(t, 2H),3.04(t, 2H), 2.46(s, 2H), 2.29(s, 2H).LRMS [M+H] = 388.5。
【０７６０】
実施例１５７
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニルエチルカルボナート
【０７６１】
【化１６１】
2013514382.tif 000162
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニルエチルカルボナートを、実施例１３８について記載の手順に従うが、エチルカルボノクロリダートを使用して、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノール（実施例１７０由来）から調製した。LRMS [M+H] = 402.2。
【０７６２】
実施例１５８
メチル４−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノキシ）ブタノアート
【０７６３】
【化１６２】
2013514382.tif 000163
メチル４−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノキシ）ブタノアートを、実施例１３９の調製について記載の手順に従うが、メチル４−ブロモブタノアートを使用して、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノール（実施例１７０由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.74(s,1H), 8.67(s, 1H), 8.24(d, 1H), 7.39(s, 1H), 7.09-7.19(m, 3H), 6.82(d, 2H),6.53(br, 2H), 3.97(t, 2H), 3.60(s, 3H), 3.19(t, 2H), 3.04(t, 2H), 2.48(t, 2H),2.44(s, 3H), 0.84-0.91(m, 2H).LRMS [M+H] = 430.2。
【０７６４】
実施例１５９
４−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノキシ）ブタン酸
【０７６５】
【化１６３】
2013514382.tif 000164
４−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノキシ）ブタン酸を、実施例１４４について記載の手順にしたがって、メチル４−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノキシ）ブタノアート（前工程由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 7.47(s,1H), 7.41(s, 1H), 7.09(d, 1H), 6.21(s, 1H), 6.18(d, 1H), 5.82(d, 2H), 5.52(d,2H), 2.66(t, 2H), 1.99(t, 2H), 1.77(t, 2H), 1.28(s, 3H), 1.17(t, 2H),0.70-0.79(m, 2H). LRMS [M+H] = 416.2。
【０７６６】
実施例１６０
４−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）ブタン酸
【０７６７】
【化１６４】
2013514382.tif 000165
工程１：メチル４−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）ブタノアート
メチル４−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）ブタノアートを、実施例１５８の調製について記載の手順に従うが、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノール（実施例５０由来）を使用して調製した。
【０７６８】
工程２：４−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）ブタン酸
４−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）ブタン酸を、実施例１４４について記載の手順にしたがって、メチル４−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）ブタノアート（前工程由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.38(s,1H), 8.24(s, 1H), 7.90(d, 1H), 6.90(s, 1H), 6.68(d, 1H), 6.54-6.63(m, 2H),6.27(d, 1H), 6.20(d, 1H), 3.40(t, 2H), 2.62(t, 2H), 2.47(t, 2H), 1.99(s, 3H),1.80(s, 2H), 1.45(t, 2H), 1.27-1.39(m, 2H). LRMS [M+H] = 430.2。
【０７６９】
実施例１６１
２−（４−（イソペンチルオキシ）−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０７７０】
【化１６５】
2013514382.tif 000166
２−（４−（イソペンチルオキシ）−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例１３６について記載の手順に従うが、１−ブロモ−３−メチルブタンを使用して、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノール（実施例５０由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.75(s,1H), 8.72(s, 1H), 8.29(d, 1H), 7.43(s, 1H), 7.17(D, 1H), 7.10(d, 1H), 6.76(d,1H), 6.68(d, 1H), 6.56(br, 2H), 4.00(t, 2H), 3.17(t, 2H), 3.07(t, 2H), 2.48(s,3H), 1.76-1.91(m, 1H), 1.60-1.71(m, 2H), 0.96(s, 6H). LRMS [M+H] = 414.2。
【０７７１】
実施例１６２
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニルヘキシルカルボナート
【０７７２】
【化１６６】
2013514382.tif 000167
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニルヘキシルカルボナートを、実施例１３８について記載の手順に従うが、ヘキシルカルボノクロリダートを使用して、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノール（実施例１７０由来）から調製した。LRMS [M+H] = 458.2。
【０７７３】
実施例１６３
２−（２，４，６−トリメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０７７４】
【化１６７】
2013514382.tif 000168
工程１：２−（メシチルエチニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（メシチルエチニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４５／工程１について記載の手順にしたがって、３−クロロ−５−（メシチルエチニル）ピコリノニトリル（実施例７７／工程１）およびｔｅｒｔ−ブチル２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（市販品）から調製した。
【０７７５】
工程２：２−（２，４，６−トリメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（２，４，６−トリメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４５／工程２から３について記載の手順にしたがって、２−（メシチルエチニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.80(s,2H), 8.38(d, 1H), 7.60(d, 2H), 7.54(d, 2H), 7.31(t, 1H), 6.84(s, 2H), 6.61(br,2H), 3.08(s, 2H), 2.30(s, 6H), 2.23(s, 3H).LRMS [M+H] = 342.2。
【０７７６】
実施例１６４
（５−アミノ−２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール
【０７７７】
【化１６８】
2013514382.tif 000169
工程１：メチル５−アミノ−２−（（２，４−ジメチルフェニル）エチニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボキシラート
メチル５−アミノ−２−（（２，４−ジメチルフェニル）エチニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボキシラートを、実施例９５／工程１に記載の手順にしたがって、３−クロロ−５−（（２，４−ｄメチルフェニル）エチニル）ピコリノニトリル（実施例４７／工程３由来）および２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−（メトキシカルボニル）フェニルボロン酸（実施例８５／工程１由来）から調製した。
【０７７８】
工程２：メチル５−アミノ−２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボキシラート
メチル５−アミノ−２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボキシラートを、実施例４４／工程５に記載の手順にしたがって、メチル５−アミノ−２−（（２，４−ジメチルフェニル）エチニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボキシラート（前工程由来）から調製した。
【０７７９】
工程３：（５−アミノ−２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール
（５−アミノ−２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノールを、実施例９５／工程２に記載の手順にしたがって、メチル５−アミノ−２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−カルボキシラート（前工程由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.79(s,1H), 8.73(s, 1H), 8.35(d, 1H), 7.61(s, 1H), 7.34(d, 1H), 7.08(d, 1H), 6.97(s,1H), 6.91(d, 1H), 6.51(br.2H), 4.77(s, 2H), 3.16-3.20(m, 2H), 3.04-3.10(m, 2H),2.28(s, 3H), 2.25(s, 3H).LRMS [M+H] = 358.2。
【０７８０】
実施例１６５
ジエチル３−（２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エトキシ）プロピルホスホナート
【０７８１】
【化１６９】
2013514382.tif 000170
ジエチル３−（２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エトキシ）プロピルホスホナートを、実施例１３９について記載の手順に従うが、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノール（実施例１５６由来）およびジエチル３−（２−ブロモエトキシ）プロピルホスホナートを使用して調製した。LRMS [M+H] = 566.3。
【０７８２】
実施例１６６
ジエチル３−（２−（２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エトキシ）エトキシ）プロピルホスホナート
【０７８３】
【化１７０】
2013514382.tif 000171
ジエチル３−（２−（２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）エトキシ）エトキシ）プロピルホスホナートを、実施例１３９について記載の手順に従うが、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノール（実施例１４８由来）およびジエチル３−（２−（２−ブロモエトキシ）エトキシ）プロピルホスホナートを使用して調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.75(s,1H), 8.70(s, 1H), 8.26(d, 1H), 7.42(s, 1H), 7.16(d, 1H), 7.09(d, 1H), 6.77(s,1H), 6.71(d, 1H), 6.58(br, 2H), 3.95-4.11(m, 6H), 3.76-3.80(m, 2H),3.63-3.67(m, 2H), 3.55-3.58(m, 2H), 3.57-3.51(m, 2H), 3.14-3.18(m, 2H),3.04-3.05(m, 2H),  2.46(s, 3H), 2.29(s, 3H), 1.71-1.87(m, 4H),1.22-1.29(m, 8H).LRMS [M+H] = 610.3。
【０７８４】
実施例１６７
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニルジメチルスルファマート
【０７８５】
【化１７１】
2013514382.tif 000172
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニルジメチルスルファマートを、実施例１３８について記載の手順に従うが、ジメチルスルファモイルクロリドを使用して、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノール（実施例５０由来）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.79(s,1H), 8.72(s, 1H), 8.28(d, 1H), 7.42(s, 1H), 7.27(d, 1H), 7.17(s, 1H), 7.14(t,1H), 7.05-7.10(d, 1H), 3.19-3.25(m, 2H), 3.11-3.17(m, 2H), 2.92(s, 6H), 2.46(s,3H), 2.37(s, 3H).LRMS [M+H] = 451.2。
【０７８６】
実施例１６８
（５−アミノ−２−（４−（ジメチルアミノ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノール
【０７８７】
【化１７２】
2013514382.tif 000173
（５−アミノ−２−（４−（ジメチルアミノ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−８−イル）メタノールを、実施例４５／工程１から４に記載の手順に従い、そしてその後の実施例９９／工程３におけるなどのＴＢＳ基の脱保護によって、ｔｅｒｔ−ブチル５−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）メチル）−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（実施例９９／工程１由来）および４−エチニル−Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン（市販品）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ 8.78(s,1H), 8.73(s, 1H), 8.35(d, 1H), 7.61(s, 1H), 7.31-7.35(d, 1H), 7.08(d, 1H),6.68(d, 2H), 6.50(br, 2H), 4.78(s, 2H), 4.34(s, 1H), 3.16-3.20(m, 2H),3.03-3.10(m, 2H), 2.83(s, 3H), 2.80(s, 3H).LRMS [M+H] = 373.2。
【０７８８】
実施例１６９
２−（４−（ジメチルアミノ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０７８９】
【化１７３】
2013514382.tif 000174
２−（４−（ジメチルアミノ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４５／工程１から３について記載の手順に従うが、工程１で４−エチニル−Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリンを使用して調製した。1H NMR(アセトン- d6)遊離塩基:δ8.60(s, 1H), 8.55(s, 1H), 8.15(d, 1H), 7.28(s, 1H), 7.03(d, 1H), 6.96(d, 2H),6.56(d, 2H), 6.55(br s, 2H),  3.05(t, 2H), 2.88(t, 2H), 2.75(s, 6H),2.33(s, 3H). LRMS [M+H] = 357.2。
【０７９０】
実施例１７０
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノール
【０７９１】
【化１７４】
2013514382.tif 000175
工程１：２−（４−メトキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（４−メトキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例７９／工程１から３について記載の手順に従うが、工程１で１−エチニル−４−メトキシベンゼンを使用して調製した。
【０７９２】
工程２：４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノール
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノールを、実施例５０について記載の手順にしたがって、２−（４−メトキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（前工程由来）から調製した。1H NMR(メタノール- d4):δ 8.59。
【０７９３】
実施例１７１
１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノン
【０７９４】
【化１７５】
2013514382.tif 000176
工程１：５−（（４−アセチルフェニル）エチニル）−３−クロロピコリノニトリル
１−（４−エチニルフェニル）エタノン（市販品）（１当量）３，５−ジクロロピコリノニトリル（１当量）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）（２０モル％）、ヨウ化銅（１０モル％）、およびＤＭＦ：トリエチルアミン（１０：１）（０．１３Ｍ）の溶液を、周囲温度で一晩撹拌した。次いで、反応混合物を、酢酸エチルおよび重炭酸ナトリウム溶液で希釈した。２相を分離し、水相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜１００％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製し、５−（（４−アセチルフェニル）エチニル）−３−クロロピコリノニトリルを黄色固体として単離した。
【０７９５】
工程２：５−（４−アセチルフェネチル）−３−クロロピコリノニトリル
５−（（４−アセチルフェニル）エチニル）−３−クロロピコリノニトリル（前工程由来）（１当量）を含むエタノール（０．１Ｍ）の溶液に、酸化白金（３０モル％）を添加した。水素ガスをバルーンによって導入し、反応物を０．５時間撹拌した。混合物をセライトパッドで濾過し、ジクロロメタンで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、０〜１００％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、５−（４−アセチルフェネチル）−３−クロロピコリノニトリルをオフホワイトの固体として得た。
【０７９６】
工程３：１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノン
５−（４−アセチルフェネチル）−３−クロロピコリノニトリル（前工程由来）（１当量）およびｔｅｒｔ−ブチル５−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（１０モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（２．０当量）を含むトルエン／エタノール（１：１、０．０９Ｍ）の溶液を、ＢＩＯＴＡＧＥ  ＩＮＩＴＩＡＴＯＲ２．０を使用してマイクロ波条件下にて１５０℃で２０分間加熱した。周囲温度への冷却後、反応混合物をエタノール／水で希釈した。不溶性固体を濾過して除去し、濾液を減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノンを黄色固体として得た。1H NMR(メタノール- d4)TFA塩:δ8.69(d, 2H), 8.30(d, 1H), 7.80(d, 2H), 7.3 8(s, 1H), 7.36(d, 1H), 7.28(d, 2H),3.25(t, 2H), 3.13(t, 2H), 2.47(s, 3H), 2.45(s, 3H).
LRMS [M+H] =356.2。
【０７９７】
実施例１７２
２−（４−（（ジメチルアミノ）メチル）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０７９８】
【化１７６】
2013514382.tif 000177
工程１：４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）ベンズアルデヒド
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）ベンズアルデヒドを、実施例１７１／工程１から３について記載の手順にしたがって、４−エチニルベンズアルデヒド（市販品）から調製した。
【０７９９】
工程２：２−（４−（（ジメチルアミノ）メチル）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
１，２−ジクロロエタン（１−２，ｄｉｃｈｌｏｒｏｅｔｈａｎｅ）（０．０４Ｍ）に溶解した４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）ベンズアルデヒド（前工程由来）（１当量）、酢酸ナトリウム（３．５当量）、およびＮ、Ｎ’−ジメチルアミン塩酸塩（３．５当量）の溶液を、密封バイアル中にて８０℃で２時間加熱した。周囲温度への冷却後、反応混合物を０℃にさらに冷却し、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１．２５当量）を添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌した。混合物を酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、勾配として１０〜９０％アセトニトリル／水を使用した分取ＨＰＬＣによって精製し、２−（４−（（ジメチルアミノ）メチル）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、オフホワイトの粉末でＴＦＡ塩として単離した。1H NMR(メタノール- d4)TFA塩:δ8.83(s, 1H), 8.81(s, 1H), 8.41(d, 1H), 7.52(s, 1H), 7.45(d, 1H), 7.43(s, 1H),7.40(m, 3H), 4.29(s, 2H), 3.30-3.24(m, 4H), 2.79(s, 6H), 2.60(s, 3H). LRMS[M+H] = 371.2。
【０８００】
実施例１７３
２−（４−（１−（ジメチルアミノ）エチル）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０８０１】
【化１７７】
2013514382.tif 000178
２−（４−（１−（ジメチルアミノ）エチル）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例１７２／工程２について記載の手順にしたがって、１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノン（実施例１７１由来）から調製した。1H NMR(メタノール- d4)TFA塩:δ8.84(s, 1H), 8.79(s, 1H), 8.40(d, 1H), 7.52(s, 1H), 7.44 -7.46(m, 2H),7.38-7.42(m, 3H), 4.45(m, 1H), 3.31(t, 2H), 3.19(t, 2H), 2.83(s, 3H), 2.66(s,3H), 2.56(s, 3H), 1.70(d, 3H). LRMS [M+H] = 385.2。
【０８０２】
実施例１７４
１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノンオキシム
【０８０３】
【化１７８】
2013514382.tif 000179
無水エタノール（０．０２８Ｍ）に溶解した１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノン（実施例１７１由来）（１当量）、ヒドロキシルアミン塩酸塩（２当量）、および１滴のＨＯＡｃの溶液を、室温で１．５時間撹拌した。混合物を酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、１０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノンオキシムを白色固体として得た。1H NMR(メタノール- d4):δ8.56(s,1H), 8.52(s, 1H), 8.12(d, 1H), 7.45(d, 2H), 7.31(s, 1H), 7.12(m, 3H), 4.51(s,OH), 3.15(t, 2H), 3.01(t, 2H), 2.39(s, 3H), 2.09(s, 3H). LRMS [M+H] = 371.2。
【０８０４】
実施例１７５
８−メチル−２−（４−（（メチルアミノ）メチル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０８０５】
【化１７９】
2013514382.tif 000180
８−メチル−２−（４−（（メチルアミノ）メチル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例１７２の工程２について記載の手順にしたがって、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）ベンズアルデヒド（実施例１７２／工程１由来）およびメチルアミンから調製した。1H NMR(アセトン- d6)TFA塩:δ8.95(s, 1H), 8.88(s, 1H), 8.43(d, 1H), 7.58(s, 1H), 7.54(d, 2H), 7.42(d, 1H),7.37(d, 2H), 4.30(s, 2H), 3.32-3.37(m, 4H), 2.75(s, 3H), 2.55(s, 3H). LRMS[M+H] = 357.2。
【０８０６】
実施例１７６
（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）ベンジルアミノ）エタノール
【０８０７】
【化１８０】
2013514382.tif 000181
無水エタノール（０．０１８Ｍ）に溶解した４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）ベンズアルデヒド（実施例１７２／工程１由来）（１当量）、エタノールアミン（８当量）、および１滴のＨＯＡｃの溶液を、８０℃で２時間撹拌した。混合物を０℃に冷却し、ＮａＢＨ４（３．５当量）を添加し、反応混合物を室温でさらに１時間撹拌した。混合物を酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、水（０．０５％ＴＦＡ）中１０〜９０％アセトニトリル（０．０３５％ＴＦＡ）を使用した１９×５０ｍｍのＡＴＬＡＮＴＩＳ（登録商標）１０ミクロンＣ１８（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐ．）システムでの分取ＨＰＬＣによって精製して、淡黄色固体をＴＦＡ塩として得た。1H NMR(アセトン- d6)TFA塩:δ8.82(s,1H), 8.75(s, 1H), 8.30(d, 1H), 7.44(m, 3H), 7.28(d, 1H), 7.21(d, 2H), 4.22(s,2H), 3.72(t, 2H), 3.22(t, 2H), 3.09(m, 2H), 3.07(t, 2H), 3.01(bs, OH), 2.41(s,3H),  LRMS [M+H] = 387.2。
【０８０８】
実施例１７７
８−メチル−２−（４−（ピロリジン−１−イルメチル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０８０９】
【化１８１】
2013514382.tif 000182
８−メチル−２−（４−（ピロリジン−１−イルメチル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例１７２の工程２について記載の手順にしたがって、４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）ベンズアルデヒド（実施例１７２／工程１由来）およびピロリジンから調製した。1H NMR(アセトン- d6)TFA塩:δ8.88(s,1H), 8.82(s, 1H), 8.82(s, 1H), 8.43(d, 1H), 8.38(d, 1H), 7.58(s, 1H), 7.51(m,1H), 7.33(d, 2H), 4.16(s, 2H), 3.32-3.38(m, 4H), 2.55(s, 3H), 2.20-2.32(m, 4H),1.90-1.99(m, 4H). LRMS [M+H] = 397.2。
【０８１０】
実施例１７８
２−（３，４−ジメトキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０８１１】
【化１８２】
2013514382.tif 000183
２−（３，４−ジメトキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４５／工程１から３について記載の手順にしたがって、４−エチニル−１，２−ジメトキシベンゼン（市販品）から調製した。1H NMR(アセトン- d6): δ 8.64(s,1H), 8.56(s, 1H), 8.14(d, 1H), 7.29(s, 1H), 7.03(d, 1H), 6.77(s, 1H), 6.71(s,1H), 6.62(d, 1H), 6.45(bs, 2H), 3.62(s, 6H), 3.12(t, 2H), 2.94(t, 2H), 2.33(s,3H). LRMS [M+H] = 374.2。
【０８１２】
実施例１７９
２−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチルアミノ）エタノール
【０８１３】
【化１８３】
2013514382.tif 000184
２−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチルアミノ）エタノール（実施例１７１由来）を、実施例１７６について記載の手順にしたがって、１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノンおよびエタノールアミン（市販品）から調製した。ＴＦＡ塩の1H NMR(アセトン- d6):δ8.78(d,1H), 8.29(d, 1H), 7.83(s, 1H), 7.45(m, 3H), 7.28(m, 3H), 4.22(m, 1H), 3.52(m,2H), 3.23(t, 2H), 3.09(t, 2H), 2.85(m, 1H), 2.65(m, 1H), 2.41(s, 3H), 1.61(d,3H). LRMS [M+H] = 401.2。
【０８１４】
実施例１８０
１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノール
【０８１５】
【化１８４】
2013514382.tif 000185
１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノール（実施例１７１由来）を、実施例１７３に示すように、還元的アミノ化の間の副生成物として単離した。ＴＦＡ塩の1H NMR(アセトン- d6):δ 8.90(s,1H), 8.88(s, 1H), 8.42(d, 1H), 7.57(s, 1H), 7.43(d, 1H), 7.33(d, 2H), 7.26(d,2H), 4.82(q, 1H), 3.32(t, 2H), 3.17(t, 2H), 3.01 2.55(s, 3H), 1.41(s, 3H). LRMS[M+H] = 358.2。
【０８１６】
実施例１８１
８−メチル−２−（４−（オキサゾール−５−イル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０８１７】
【化１８５】
2013514382.tif 000186
８−メチル−２−（４−（オキサゾール−５−イル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例４５／工程１から３について記載の手順にしたがって、５−（４−エチニルフェニル）オキサゾール（市販品）から調製した。ＴＦＡ塩の1H NMR(アセトン- d6):8.69(s,1H), 8.59(s, 1H), 8.16(d, 1H), 8.04(s, 1H), 7.55(m, 2H), 7.38(s, 1H), 7.28(m,2H), 7.01(m, 2H), 3.16(t, 2H), 3.07(t, 2H), 2.33(s, 3H). LRMS [M+H] = 381.2。
【０８１８】
実施例１８２
３−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチルアミノ）プロパンニトリル
【０８１９】
【化１８６】
2013514382.tif 000187
無水エタノール（０．０１４Ｍ）に溶解した１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノン（実施例１７１由来）（１当量）、３−アミノプロパンニトリル（市販品）（２．５当量）の溶液を、８０℃で２時間撹拌した。混合物を０℃に冷却し、ＮａＣＮＢＨ３（２当量）を添加し、反応混合物を室温でさらに１時間撹拌した。混合物を、酢酸エチルおよび塩化アンモニウムで希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、水（０．０５％ＴＦＡ）中１０〜９０％アセトニトリル（０．０３５％ＴＦＡ）を使用した１９×５０ｍｍのＡＴＬＡＮＴＩＳ（登録商標）１０ミクロンＣ１８（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐ．）システムでの分取ＨＰＬＣによって精製して、３−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチルアミノ）プロパンニトリルを淡黄色固体でＴＦＡ塩として得た。1H NMR(アセトン- d6): δ8.60(s,1H), 8.59(s, 1H), 8.11(d, 1H), 7.29(s, 1H), 7.16(d, 2H), 7.09(d, 2H), 7.03(d,1H), 6.43(bs, 2H), 3.65(m, 1H), 3.12(t, 2H), 2.99(t, 2H), 2.56(m, 2H), 2.35(m,2H), 2.32(s, 3H), 1.16(d, 3H). LRMS [M+H] = 410.2。
【０８２０】
実施例１８３
（２Ｒ）−２−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチルアミノ）プロパン−１−オール
【０８２１】
【化１８７】
2013514382.tif 000188
（２Ｒ）−２−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチルアミノ）プロパン−１−オールを、実施例１８２について記載の手順にしたがって、１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノン（実施例１７１由来）および（Ｒ）−２−アミノプロパン−１−オール（市販品）から調製した。1H NMR(アセトン- d6):δ:8.94(m,2H), 8.45(m, 1H), 7.64(d, 2H), 7.59(s, 1H), 7.55(br s, 2H), 7.41(m, 3H),4.65(m, 1H), 3.81(m, 1H), 3.35(t, 2H), 3.25(t, 2H), 2.56(s, 3H), 1.73(m, 3H),1.29(d, 3H), 1.23(d, 3H). LRMS [M+H] = 415.2。
【０８２２】
実施例１８４
８−メチル−２−（４−（１−（ピペラジン−１−イル）エチル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０８２３】
【化１８８】
2013514382.tif 000189
８−メチル−２−（４−（１−（ピペラジン−１−イル）エチル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例１８２について記載の手順にしたがって、１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノン（実施例１７１由来）およびピペラジン（市販品）から調製した。1H NMR(メタノール- d4)TFA塩:δ8.83(s,1H), 8.75(s, 1H), 8.39(d, 1H), 7.51(s, 1H), 7.46(d, 1H), 7.26(m, 4H), 3.62(m,1H), 3.25(t, 2H), 3.12(t, 2H), 2.80(m, 4H), 2.69(m, 4H), 2.56(s, 3H), 1.42(d,3H). LRMS [M+H] = 426.2。
【０８２４】
実施例１８５
（（２Ｓ）−１−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチル）ピロリジン−２−イル）メタノール
【０８２５】
【化１８９】
2013514382.tif 000190
（（２Ｓ）−１−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチル）ピロリジン−２−イル）メタノールを、実施例１８２について記載の手順にしたがって、１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノン（実施例１７１由来）および（Ｓ）−ピロリジン−２−イルメタノール（市販品）から調製した。1H NMR(アセトン- d6)TFA塩:δ8.83(s,1H), 8.80(s, 1H), 8.43(d, 1H), 7.36-7.53(m, 6H), 4.68(m, 1H), 3.69(m, 2H),3.19-3.21(m, 4H), 2.55(m, 4H), 1.75-1.78(m, 6H), 1.74(d, 3H). LRMS [M+H] =441.2。
【０８２６】
実施例１８６
Ｎ１−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチル）−Ｎ２，Ｎ２−ジメチルエタン−１，２−ジアミン
【０８２７】
【化１９０】
2013514382.tif 000191
Ｎ１−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチル）−Ｎ２，Ｎ２−ジメチルエタン−１，２−ジアミンを、実施例１８２について記載の手順にしたがって、１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノン（実施例１７１由来）およびＮ１，Ｎ１−ジメチルエタン−１，２−ジアミン（市販品）から調製した。1H NMR(アセトン- d6)TFA塩:δ8.85(m,2H), 8.43(d, 1H), 7.52(s, 1H), 7.48(m, 2H), 7.40(m, 2H), 6.69(m, 1H), 4.39(m,1H), 3.42(m, 2H), 3.18-3.25(m, 6H), 2.87(s, 6H), 2.56(s, 3H), 1.69(d, 3H). LRMS[M+H] = 428.2。
【０８２８】
実施例１８７
３−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチルアミノ）プロパン酸
【０８２９】
【化１９１】
2013514382.tif 000192
無水エタノール（０．０４２Ｍ）に溶解した１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノン（実施例１７１由来）（１当量）、３−アミノプロパン酸（市販品）（５当量）、トリエチルアミン（３当量）の溶液を、５０℃で３時間撹拌した。混合物を０℃に冷却し、ＮａＣＮＢＨ３（１当量）を添加し、反応混合物を室温でさらに６時間撹拌した。次いで、第２の１当量のＮａＣＮＢＨ３を添加し、反応混合物を５０℃でさらに１時間撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物を酢酸エチルおよび飽和塩化アンモニウムで希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、水（０．０５％ＴＦＡ）中１０〜９０％アセトニトリル（０．０３５％ＴＦＡ）を使用した１９×５０ｍｍのＡＴＬＡＮＴＩＳ（登録商標）１０ミクロンＣ１８（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐ．）システムでの分取ＨＰＬＣによって精製して、３−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチルアミノ）プロパン酸（白色固体）をＴＦＡ塩として得た。1H NMR(メタノール- d4)TFA塩:δ8.74(s,1H), 8.42(d, 1H), 7.66(m, 2H), 7.50(m, 1H), 7.31(d, 2H), 7.23(m, 2H), 4.24(m, 1H),3.21(t, 2H), 3.14(t, 2H), 2.75-3.10(m, 2H), 2.51(t, 2H), 2.10(s, 3H), 1.55(d,3H). LRMS [M+H] = 429.2。
【０８３０】
実施例１８８
８−メチル−２−（４−（１−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０８３１】
【化１９２】
2013514382.tif 000193
８−メチル−２−（４−（１−（４−メチルピペラジン−１−イル）エチル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例１８２について記載の手順にしたがって、１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノン（実施例１７１由来）および１−メチルピペラジン（市販品）から調製した。1H NMR(アセトン- d6)TFA塩:δ8.84(s, 1H), 8.80(s, 1H), 8.41(d, 1H), 7.52(s, 1H), 7.42-7.46(m, 3H),7.36-7.38(m, 2H), 3.53(m, 1H), 3.18(m, 2H), 3.12(m, 2H), 2.92(s, 2H), 2.66(s,2H), 2.56(s, 2H), 2.16(s, 3H), 1.99(m, 2H), 1.69(d, 3H), 1.30(s, 3H). LRMS[M+H] = 440.2。
【０８３２】
実施例１８９
Ｎ２−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチル）−Ｎ１，Ｎ１−ジメチルプロパン−１，２−ジアミン
【０８３３】
【化１９３】
2013514382.tif 000194
Ｎ２−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチル）−Ｎ１，Ｎ１−ジメチルプロパン−１，２−ジアミンを、実施例１８２について記載の手順にしたがって、１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノン（実施例１７１由来）およびＮ１，Ｎ１−ジメチルプロパン−１，２−ジアミン（市販品）から調製した。1H NMR(アセトン- d6)TFA塩:δ8.83(m, 2H), 8.40(d, 1H), 7.46-7.51(m, 3H), 7.43(m, 1H), 7.37(d, 2H), 4.54(m,1H), 3.74(m, 1H), 3.19(m, 4H), 2.90(s, 3H), 2.77(s, 3H), 2.55(s, 3H), 2.41(d,2H), 1.66(d, 3H), 1.39(d, 3H). LRMS [M+H] = 442.2。
【０８３４】
実施例１９０
８−メチル−２−（４−（１−（２−（ピリジン−４−イル）エチルアミノ）エチル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０８３５】
【化１９４】
2013514382.tif 000195
８−メチル−２−（４−（１−（２−（ピリジン−４−イル）エチルアミノ）エチル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを、実施例１８２について記載の手順にしたがって、１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノン（実施例１７１由来）および２−（ピリジン−４−イル）エタンアミン（市販品）から調製した。1H NMR(アセトン- d6)TFA塩:δ8.94(m,2H), 8.92(d, 2H), 8.73(s, 1H),  8.43(d, 1H), 7.60(m, 2H), 7.40(m, 2H),7.16-7.26(m, 3H), 4.55(m, 1H), 3.55(m, 4H), 2.56(m, 4H), 2.12(s, 3H), 1.73(d,3H) LRMS [M+H] = 462.2。
【０８３６】
実施例１９１
Ｎ１−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチル）−Ｎ２，Ｎ２−ジエチルエタン−１，２−ジアミン
【０８３７】
【化１９５】
2013514382.tif 000196
Ｎ１−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチル）−Ｎ２，Ｎ２−ジエチルエタン−１，２−ジアミンを、実施例１８２について記載の手順にしたがって、１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノン（実施例１７１由来）およびＮ１，Ｎ１−ジエチルエタン−１，２−ジアミン（市販品）から調製した。1H NMR(アセトン- d6)TFA塩:δ:8.81(s,1H), 8.75(s, 1H), 8.23(d, 1H), 7.60(d, 2H), 7.39(d, 2H), 7.28(m, 2H), 4.51(m,1H), 3.82(m, 1H), 3.62(m, 1H), 3.34(m, 4H), 3.20(t, 2H), 2.46(s, 3H), 2.10(m,4H), 1.74(d, 3H), 1.34(t, 6H). LRMS [M+H] = 456.2。
【０８３８】
実施例１９２
２−（４−（ジメチルアミノ）−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０８３９】
【化１９６】
2013514382.tif 000197
工程１：４−ヨード−Ｎ，Ｎ，３−トリメチルアニリン
４−ヨード−３−メチルアニリン（市販品）（１当量）、ＮａＨＣＯ３（２．５当量）、およびヨードメタン（２．５当量）を含むＤＭＦ（０．２Ｍ）の溶液を、周囲温度で一晩撹拌した。次いで、反応混合物を酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離し、水相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製し、４−ヨード−Ｎ，Ｎ，３−トリメチルアニリンを黄色固体として単離した。
【０８４０】
工程２：Ｎ，Ｎ，３−トリメチル−４−（（トリメチルシリル）エチニル）アニリンの合成
４−ヨード−Ｎ，Ｎ−３−トリメチルアニリン（前工程由来）（１当量）、エチニルトリメチルシラン（１．５当量）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）（２０モル％）、ヨウ化銅（２０モル％）、およびトリエチルアミン（０．４Ｍ）の溶液を、周囲温度で一晩撹拌した。次いで、反応混合物を酢酸エチルおよび塩化アンモニウム溶液で希釈した。２相を分離し、水相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜１００％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製し、Ｎ，Ｎ，３−トリメチル−４−（（トリメチルシリル）エチニル）アニリンを黄色固体として単離した。
【０８４１】
工程３：４−エチニル−Ｎ，Ｎ，３−トリメチルアニリン
Ｎ，Ｎ−３−トリメチル−４−（（トリメチルシリル）エチニル）アニリン（前工程由来）（１当量）、Ｋ２ＣＯ３（２．５当量）を含むＭｅＯＨ（（０．１５Ｍ）の溶液を、周囲温度で６時間撹拌した。固体を濾過して除去し、液体を減圧下濃縮した。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製し、４−エチニル−Ｎ，Ｎ−３−トリメチルアニリンを黄色固体として単離した。
【０８４２】
工程４：３−クロロ−５−（（４−（ジメチルアミノ）−２−メチルフェニル）エチニル）ピコリノニトリル
４−エチニル−Ｎ，Ｎ−３−トリメチルアニリン（前工程由来）（１当量）３，５−ジクロロピコリノニトリル（１．２当量）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）（１０モル％）、ヨウ化銅（１０モル％）、およびＤＭＦ：トリエチルアミン（０．２８Ｍ）の溶液を、周囲温度で一晩撹拌した。次いで、反応混合物を酢酸エチルおよび塩化アンモニウム溶液で希釈した。２相を分離し、水相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜１００％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製し、３−クロロ−５−（（４−（ジメチルアミノ）−２−メチルフェニル）エチニル）ピコリノニトリルをオフイエローの固体として単離した。
【０８４３】
工程５：２−（（４−（ジメチルアミノ）−２−メチルフェニル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
ｔｅｒｔ−ブチル５−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニルカルバマート（１．３当量）および３−クロロ−５−（（４−（ジメチルアミノ）−２−メチルフェニル）エチニル）ピコリノニトリル（前工程由来）（１．０当量）、テトラキス（トリフェニル−ホスフィン）パラジウム（１０モル％）、および２Ｎ炭酸ナトリウム水溶液（２．０当量）を含むトルエン／エタノール（２：１、０．１７Ｍ）の溶液を、１００℃で一晩撹拌した。周囲温度への冷却後、反応混合物をメタノールで希釈した。不溶性固体を濾過して除去し、濾液を減圧下濃縮して粗残渣を得た。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、２−（（４−（ジメチルアミノ）−２−メチルフェニル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを黄色固体として得た。
【０８４４】
工程６：２−（４−（ジメチルアミノ）−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
２−（（４−（ジメチルアミノ）−２−メチルフェニル）エチニル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン（１当量）（前工程由来）を含む酢酸エチル／エタノール（１：５、０．０３５Ｍ）の溶液に、１０重量％パラジウム炭素（０．２当量）を添加した。水素ガスをバルーンを介して導入し、反応物を３．５時間撹拌した。混合物をセライトパッドで濾過し、ジクロロメタンで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、水（０．０５％ＴＦＡ）中１０〜９０％アセトニトリル（０．０３５％  ＴＦＡ）を使用した１９×５０ｍｍのＡＴＬＡＮＴＩＳ（登録商標）１０ミクロンＣ１８（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐ．）システムでの分取ＨＰＬＣによって精製して、２−（４−（ジメチルアミノ）−２−メチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンを白色固体のＴＦＡ塩として得た。1H NMR(アセトン- d6)TFA塩:δ8.81(s, 1H), 8.74(s, 1H), 8.34(d, 1H), 7.89(s, 1H), 7.47(m, 2H), 7.38(m, 2H),3.34(s, 6H), 3.32(t, 2H), 3.28(t, 2H), 2.57(s, 3H), 2.34(s, 3H). LRMS [M+H] =371.2。
【０８４５】
実施例１９３
１−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチル）ピロリジン−３−カルボン酸
【０８４６】
【化１９７】
2013514382.tif 000198
１−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチル）ピロリジン−３−カルボン酸を、この場合、酢酸をトリエチルアミン（３０％）の代わりに使用したことを除いて、実施例１８７について記載の手順にしたがって、１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノン（実施例１７１由来）およびピロリジン−３−カルボン酸（市販品）から調製した。1H NMR(アセトン- d6)TFA塩:δ8.81(s, 1H), 8.75(s, 1H), 8.70(s, 1H), 8.28(d, 1H), 7.59(d, 2H), 7.37(m, 3H),4.46(m, 1H), 4.21(m 1H), 3.45(m, 2H), 3.32(m, 2H), 3.21(m, 2H), 3.17(m, 2H),2.27(m, 2H), 2.07(s, 3H)1.77(d, 3H). LRMS [M+H] = 455.2。
【０８４７】
実施例１９４
４−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチルアミノ）フェノール
【０８４８】
【化１９８】
2013514382.tif 000199
４−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチルアミノ）フェノールを、この場合、酢酸をトリエチルアミン（２８％）の代わりに使用したことを除いて、実施例１８７について記載の手順にしたがって、１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノン（実施例１７１由来）および４−アミノフェノールから調製した。1H NMR(アセトン- d6)TFA塩:δ8.83(s, 1H), 8.73(s, 1H), 8.33(d, 1H), 7.44(s, 1H), 7.40(d, 2H), 7.36(d, 1H),7.24(d, 2H), 7.10(d, 2H), 6.76(d, 2H), 4.72(m, 1H)3.27(t, 2H), 3.12(t, 2H),2.50(s, 3H), 2.06(d, 3H). LRMS [M+H] = 449.2。
【０８４９】
実施例１９５
１−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２イル）エチル）フェニル）エチル）ピロリジン−３−オール
【０８５０】
【化１９９】
2013514382.tif 000200
１−（１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２イル）エチル）フェニル）エチル）ピロリジン−３−オールを、この場合、酢酸をトリエチルアミン（２０％）の代わりに使用したことを除いて、実施例１８７について記載の手順にしたがって、１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エタノン（実施例１７１由来）およびピロリジン−３−オールから調製した。1H NMR(アセトン- d6)TFA塩:δ8.83(s, 1H), 8.76(s, 1H), 8.72(s, 1H), 8.29(d, 1H), 7.57(s, 1H), 7.42(s, 1H),7.33-7.38(m, 3H), 4.41(m, 2H), 3.77(m, 2H), 3.33(t, 2H), 3.21(t, 2H), 3.19(m,2H), 3.10(m, 2H), 2.10(s, 3H),  1.75(d, 3H). LRMS [M+H] = 427.2。
【０８５１】
実施例１９６
２−（４−（２−アミノプロパン−２−イル）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン
【０８５２】
【化２００】
2013514382.tif 000201
乾燥ＴＨＦ（０．０２９Ｍ）に溶解した４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）ベンゾニトリル（実施例６４、工程１由来）（１当量）の溶液に、メチルマグネシウムブロミド（６当量）を非常にゆっくり添加し、反応混合物を室温で半時間撹拌した。次いで、反応フラスコにチタンテトライソプロポキシド（３当量）を１０分間にわたって添加した。反応混合物を、１６時間還流した。周囲温度への冷却後、反応混合物を酢酸エチルおよび飽和塩化アンモニウムで希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、水（０．０５％ＴＦＡ）中１０〜９０％アセトニトリル（０．０３５％ＴＦＡ）を使用した１９×５０ｍｍのＡＴＬＡＮＴＩＳ（登録商標）１０ミクロンＣ１８（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐ．）システムでの分取ＨＰＬＣによって精製して、２−（４−（２−アミノプロパン−２−イル）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミンをＴＦＡ塩の白色固体として得た。1H NMR(メタノール- d4)TFA塩 δ:9.01(s,2H), 8.92(s, 1H), 8.42(s, 1H), 7.65(d, 2H), 7.56(s, 1H), 7.39(m, 2H), 3.19(m,4H), 2.54(s, 3H), 1.82(6H). LRMS [M+H] = 371.2。
【０８５３】
実施例１９７
Ｎ−（２−アセトアミドエチル）−４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンズアミド
【０８５４】
【化２０１】
2013514382.tif 000202
４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾイルクロリド（実施例１１６／工程２）およびトリエチルアミン（２．５当量）を含むエーテル（０．０５Ｍ）の溶液に、Ｎ−（２−アミノエチル）アセトアミド（５．０当量）を添加した。反応混合物を一晩撹拌した。次いで、反応混合物を、酢酸エチルおよび水で希釈した。２相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下濃縮した。粗材料を、０〜８０％酢酸エチルを含むヘキサンを使用したＣＯＭＢＩＦＬＡＳＨ（登録商標）システム（ＩＳＣＯ）でのフラッシュクロマトグラフィによって精製して、Ｎ−（２−アセトアミドエチル）−４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンズアミドを白色固体として得た。1H NMR(CDCl3):δ 8.61(s,1H), 8.38(s, 1H), 8.07(d, 1H), 7.65(s, 1H), 7.51-7.56(m, 2H), 7.10-7.16(m, 2H),6.25(br, 2H),  3.50-3.59(m, 4H), 3.08-3.16(m, 4H), 2.62(s, 3H), 2.52(s,3H), 2.35(s, 3H).LRMS [M+H] = 455.2。
【０８５５】
本発明の実施のための他の化合物としては、以下が挙げられる：
２−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−プロピルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（３−メトキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；８−メチル−２−フェネチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；メチル−５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−３−カルボキシラート；（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−３−イル）メタノール；２−（２−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（３−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン、８−メチル−２−（２−（ナフタレン−１−イル）エチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；８−メチル−２−（２−（ナフタレン−２−イル）エチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）安息香酸；３−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）安息香酸；２−（３−クロロフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（２−クロロフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；（３−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）メタノール；２−（４−クロロフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−ブチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−ブチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−プロピルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−（トリフルオロメチル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（２，５−ジメチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；８−メチル−２−（４−プロピルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；８−メチル−２−（２，４，５−トリメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（２，５−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−イソプロピルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−ヘプチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−イソブトキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−（（２−メトキシエトキシ）メトキシ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；８−メチル−２−（４−（２−フェノキシエトキシ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；８−メチル−２−（４−（４−フェニルブトキシ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−（アリルオキシ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；８−メチル−２−（４−（３−フェニルプロポキシ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−（ヘプタン−４−イルオキシ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；８−メチル−２−（４−（４−メチルペンタ−３−エニルオキシ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−（２−シクロヘキシルエトキシ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−イソプロポキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−（３，３−ジメチルブトキシ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；８−（２−シクロプロピルエチル）−２−（４−（ジメチルアミノ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；８−（２−シクロプロピルエチル）−２−（２，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；Ｎ−（４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）アセトアミド；Ｎ−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）−４−メチルベンゼンスルホンアミド；３−メチル−９−ｐ−トリル−９，１０−ジヒドロベンゾ［ｆ］フロ［２，３−ｂ］［１，７］ナフチリジン−６−アミン；４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンゾニトリル；４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−Ｎ−（２−アミノエチル）−３−メチルベンズアミド；８−メチル−２−（２−メチル−４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；メチル２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンズアミド）−４−メチルペンタノアート；メチル２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンズアミド）アセタート；２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンズアミド）−４−メチルペンタン酸；２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルベンズアミド）酢酸；６−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）ヘキサン−１−オール；７−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）ヘプタン酸；１１−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）ウンデカン−１−オール；エチル２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）アセタート；２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）酢酸；３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）プロパン酸；６−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェノキシ）ヘキサン酸；８−メチル−２−（２−メチル−４−（メチルチオ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；８−メチル−２−（４−（メチルスルホニル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−（ヘキシルオキシ）フェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；８−メチル−２−（４−フェネトキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；８−メチル−２−（４−（ペンチルオキシ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；８−メチル−２−（４−（４−メチルペンチルオキシ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（２−フルオロフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（３−フルオロフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−フルオロフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（２−（チオフェン−３−イル）エチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）メタノール；２−（３，４−ジメチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（３，４−ジメチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（３，５−ジメチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（２−（ベンゾフラン−５−イル）エチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；８−メチル−２−（２−ニトロエチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（アミノメチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；Ｎ２，８−ジメチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２，５−ジアミン；２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）−１−フェニルエタノール；２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）−１−（４−メトキシフェニル）エタノール；２−（ビフェニル−２−イル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（２−（２，６−ジメチルピリジン−３−イル）エチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（２−（５−メトキシピリジン−２−イル）エチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）プロパン酸；５−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−４−メチルピリジン−２（１Ｈ）−オン；６−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）ピリジン−３−オール；８−メチル−２−（４−（トリフルオロメトキシ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−５−イル）エチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（２−（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−５−イル）エチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；（Ｅ）−３−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）−３−メチルフェニル）アクリル酸；（Ｅ）−８−（２−シクロプロピルビニル）−２−フェネチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；８−ペンチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；（Ｅ）−８−（２−シクロプロピルビニル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；８−（２−シクロプロピルエチル）−２−フェネチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；３−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェノール；２−（２−メトキシフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−エチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−エチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−（ジメチルアミノ）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−（ピペリジン−１−イル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；８−メチル−２−（４−（ピペリジン−１−イル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−メトキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（３，５−ジメトキシフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；８−メチル−２−（２−（トリフルオロメチル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン
−２−イル）エチル）−Ｎ−ヒドロキシベンズイミドアミド；４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）ベンゾニトリル；８−メチル−２−（４−（１−モルホリノエチル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−アミノフェネチル）−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；１−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）グアニジン；８−メチル−２−（４−（１−（フェネチルアミノ）エチル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−（２−（５−アミノ−８−メチルベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）アセトニトリル；２−（４−（ピペリジン−１−イルメチル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；１−（４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）ベンジル）ピペリジン−４−オール；２−（４−（アミノメチル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−（（エチルアミノ）メチル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；２−（４−（２−アミノプロパン−２−イル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン；１−（１−（４−（２−（５−アミノベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−２−イル）エチル）フェニル）エチル）ピロリジン−３−カルボン酸、および８−メチル−２−（４−（１−（フェニルアミノ）エチル）フェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン−５−アミン。
【０８５６】
実施例（ＩＩ）：実施例４７の均一懸濁物の開発
低分子免疫増強物質（ＳＭＩＰ）の処方物を、細菌感染症およびウイルス感染症に対するワクチンアジュバントまたは免疫修飾剤としての安定性および活性について評価した。
【０８５７】
実施例４７は、非常に良好な化学的安定性を有する高結晶質薬物物質である。全ｐＨ範囲にわたるその極度に低い水溶性（０．５μｇ／ｍｌ未満）およびその高疎水性コア構造により、ミョウバン（米国で認可された唯一のワクチンアジュバント）を使用した処方は困難である。しかし、ＴＬＲ７アゴニスト−ミョウバンベースのワクチンにより、利点（例えば、Ｔｈ１偏向応答（ｐｏｌａｒｉｚｅｄ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ）の誘導ならびに血清殺菌活性（ＳＢＡ）およびわずかな範囲（例えば、ＭｅｎＢ）の増強）を得ることができる。
【０８５８】
本実施例は、ミクロン範囲の粒径を持つ、インビボで分子を送達させるためのビヒクルとしての、安定且つ再現性のある実施例４７の均一懸濁物の開発を記載している。
界面活性剤、懸濁剤、および均質化方法の評価
一群の均質化方法（ボルテックス、超音波処理、および乳鉢と乳棒を使用した方法が挙げられる）を評価した。
【０８５９】
ボルテックスのために、実施例４７を、２．５ｍｇ／ｍＬで０．１％Ｔｗｅｅｎ８０および０．５％カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）に懸濁し、その後にボルテックスした。平均粒径は約１００μｍであった。
【０８６０】
超音波処理のために、実施例４７を、２．５ｍｇ／ｍＬで０．１％Ｔｗｅｅｎ８０および０．５％ＣＭＣに懸濁し、その後にボルテックスした。次いで、混合物を、プローブ超音波処理（ｐｒｏｂｅ  ｓｏｎｉｃａｔｉｏｎ）に５分間供した（氷使用、３Ｗ（バイアルサイズに基づいた最大出力））。最後に、混合物を、ハンドヘルドホモジナイザーによって数分間均質化した。平均粒径は約８０μｍであった。
【０８６１】
乳鉢と乳棒を使用した方法では、１０ｍｇの実施例４７を、乳鉢と乳棒を使用して５分間粉砕し、次いで、０．５％Ｔｗｅｅｎ８０に懸濁した。２つの粒径ピーク（粒径０．１μｍおよび約８μｍ）が認められた。大きな方のピークのサイズ範囲は、１〜１００μｍであった。
【０８６２】
一群の界面活性剤および懸濁剤も評価した。界面活性剤と懸濁化剤とのマトリックスおよび懸濁粒子の対応するサイズ分布を、以下の表１に示す（Ｄ５０、Ｄ９０（μｍ））。
【０８６３】
【表１】
2013514382.tif 000203
各実験では、１０ｍｇの実施例４７を、２ｍＬ界面活性剤および２ｍＬ懸濁化剤と混合した。混合物を５分間ボルテックスし、３Ｗでプローブ超音波処理を行い、２〜４分間均質化した。サンプルのサイズ分布を、マスターサイザーを使用して測定した。
【０８６４】
全サンプルは、一連のプローブ超音波処理中でさえも迅速に沈殿することが認められた。超音波処理後に視覚的なサイズの減少は認められなかった。均質化後にいくらかのサイズの減少が認められた。
【０８６５】
高圧均質化
一群の界面活性剤および懸濁剤の評価により、界面活性剤Ｔｗｅｅｎ−８０および懸濁剤カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）を使用した実施例４７の高圧均質化後に安定な均一懸濁物が同定された。均質化を、高圧下にて氷上で最大３０分間行った。
【０８６６】
１％ＣＭＣ（カルボキシメチルセルロース、ナトリウム塩；ｓｉｇｍａ  ４１９２７３、Ｍ５０１３）保存液を含むｍｉｌｌｉＱ水および１％Ｔｗｅｅｎ８０溶液を含むＭｉｌｌｉＱ水を調製した。結晶の実施例４７（８０ｍｇ）を、等体積（各１０ｍＬ）の１％ＣＭＣおよび１％Ｔｗｅｅｎ８０と混合し、最終化合物濃度４ｍｇ／ｍｌ（０．５％ＣＭＣおよび０．５％Ｔｗｅｅｎ８０中）にした。混合物を最初に充分にボルテックスし、ＩＫＡ  Ｔ−２５ホモジナイザーを使用して２４０００ｒｐｍで１分間均質化し、次いで、高圧ホモジナイザー（Ａｖｅｓｔｉｎ  Ｅｍｕｌｓｉｆｅｘ−Ｃ３）によって高圧にて（１５，０００〜２０，０００ｐｓｉ）氷上で２０〜３０分間処理した。サンプルのサイズ分布を測定した。一旦少なくとも約５０％の懸濁粒子の直径（Ｄ５０）のサイズ分布が約２マイクロメートル以下となり、少なくとも約９０％の懸濁粒子の直径（Ｄ９０）が約１０マイクロメートル以下、好ましくは約５マイクロメートル以下となった場合、均質化手順が完了したと見なした。均質化した懸濁物を４℃で保存した。
【０８６７】
実施例４７の均一懸濁物を、同一のプロトコールを使用して２つの個別の場所で独立に再現した（「懸濁物Ｓ」および「懸濁物Ｃ」）。Ｈｏｒｉｂａ粒径測定器によって測定したところ、実施例４７の均一懸濁物（高圧下で作製）の粒径はμｍの範囲であった。２つの懸濁物の粒径分布は非常に類似している。さらに、懸濁物は、長期間にわたって良好な安定性を示した−粒子のサイズ分布は、Ｄ５０およびＤ９０によって示されるように、３０日後および５６日後に有意に変化しなかった。表２は、懸濁物Ｓが４℃で４週間にわたって安定であったことを示す（Ｂｅｃｋｍａｎコールター粒径測定器によって測定）。
【０８６８】
【表２】
2013514382.tif 000204
表３は、サイズ分布によって測定したところ、実施例４７の均一懸濁物が４℃で１２ヶ月にわたって安定であったことを示す。
【０８６９】
【表３】
2013514382.tif 000205
実施例（ＩＩＩ）：ミョウバンベースのワクチンを使用した実施例４７の均一懸濁物の処方物：抗原吸着に及ぼす影響
髄膜炎菌Ｂ
Ｇｉｕｌｉａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０３：１０８３４−１０８３９（２００６））は、３つの個別のポリペプチド（「５ＣＶＭＢ」）から作製した血清群Ｂ髄膜炎菌（「ＭｅｎＢ」）用ワクチンを開示している。これらのポリペプチドは、水酸化アルミニウム（「Ａｌ−Ｈ」）を吸着することができ、ＳＤＳ−ＰＡＧＥを使用してこの吸着が起こるかどうかをチェックする。
【０８７０】
本研究では、ＭｅｎＢ抗原（「５ＣＶＭＢ」）＋Ａｌ−Ｈ（３ｍｇ／ｍｌ）（「ミョウバン／３ＭｅｎＢ」）を使用して、異なる用量の実施例４７の懸濁物の処方の影響を評価した。図１Ａおよび１Ｂに示すように、懸濁物を添加しなかった（０μｇ／用量）場合、試験した３つの抗原は、Ａｌ−Ｈ上に完全に吸着した。懸濁物の用量が増加するにつれて、少量の抗原が、時間依存様式でＡｌ−Ｈから脱着した。図１Ｂは、水酸化アルミニウム上の抗原吸着率を示す表である。実施例４７の懸濁物を使用した処方後にＭｅｎＢ抗原のいくらかの用量依存性脱着が認められたにもかかわらず７、３つの各抗原は、４℃で２時間後に６０％超が抗原を吸着したままであった。
【０８７１】
腸外病原性大腸菌（「ＥｘＰＥＣ」）
本研究では、ＥｘＰＥＣ抗原ｐＫ１−３５２６＋Ａｌ−Ｈを使用して、異なる用量の実施例４７の処方の影響を評価した。実施例４７の懸濁物を４℃で１６時間保存し、次いで、種々のｐＫ１−３５２６処方物に添加した。図２に示すように、ｐＫ１−３５２６抗原は高効率（９０％超）で吸着したままであり、脱着の際の抗原の完全性の変化は検出されなかった。
【０８７２】
ＲＳウイルス（ＲＳＶ）抗原を使用した研究も行い、類似の結果を得た。
【０８７３】
ＭｅｎＢ、ＥｘＰＥＣ、およびＲＳＶの研究は、実施例４７の懸濁物の、抗原／Ａｌ−Ｈ処方物との組み合わせがＭｅｎＢ、ＥｘＰＥＣ、およびＲＳＶ抗原の吸着に影響を及ぼさなかったことを示す。Ａｌ−ＨからのＭｅｎＢ抗原のいくらかの脱着が高用量の実施例４７の懸濁物の使用の際に認められたが、この影響は、時間依存性のものであり、免疫の直前に懸濁物をワクチンと混合した場合に減少した。
【０８７４】
実施例（ＩＶ）：実施例４７の均一懸濁物の薬物動態学的パラメーターおよび薬力学的パラメーター
本研究では、実施例４７の均一懸濁物＋ミョウバン／３ＭｅｎＢの薬物動態学的（ＰＫ）パラメーターおよび薬力学的（ＰＤ）パラメーターを研究し、それらが、不均一懸濁物を含むＤＭＳＯ／食塩水として調製した実施例４７に類似することが見い出された（図３Ａ、３Ｂ、および４）。均一懸濁物中に処方した実施例４７の検出可能な全身レベルのわずかな増加が同定された（図３Ａ）。ＰＫ研究は、実施例４７を含むＤＭＳＯ（不均一）懸濁物および均一懸濁物の両方の局所曝露を証明しているが、全身曝露は低い。均一懸濁物は、局所筋肉曝露の変動性を減少させた。均一懸濁物は、局所流入領域リンパ節における曝露を改善する（図３Ｂおよび３Ｃ）。
【０８７５】
図４は、実施例４７の不均一／ＤＭＳＯ懸濁物＋ミョウバン／３ＭｅｎＢおよび実施例４７の均一懸濁物＋ミョウバン／３ＭｅｎＢとの薬力学的比較を示す。実施例４７の不均一／ＤＭＳＯ懸濁物および均一懸濁物のサイトカイン放出プロフィールは類似していた。サイトカイン放出は、均一懸濁物で処方した実施例４７またはＤＭＳＯで処方した実施例４７を曝露した後のものでは、アジュバントＲ８４８によって誘導されたサイトカイン放出と比較して最小であった。
【０８７６】
実施例（Ｖ）：インビボＭｅｎＢモデルにおける実施例４７の均一懸濁物の効力
１．実施例４７の均一懸濁物は、髄膜炎菌に対する免疫応答を増強させた。
【０８７７】
本研究では、２μｇ／マウスと１００μｇ／マウスとの間の範囲の用量で均一懸濁物として送達させた実施例４７のインビボ効力を、ＭｅｎＢマウスモデルを使用して評価した。Ａｌ−Ｈ上に吸着させたか（「ミョウバン／３ＭｅｎＢ」）、ＭＦ５９を使用して送達させた（「ＭＦ５９／３ＭｅｎＢ」）３つのＭｅｎＢポリペプチド（「５ＣＶＭＢ」）を使用して評価した。血清殺菌抗体（ＳＢＡ）アッセイを使用して、ＭｅｎＢ抗原をインビボ免疫原性潜在力について試験した。図５Ａは、（ａ）Ａｌ−Ｈのみ、（ｂ）Ａｌ−Ｈ＋２μｇの実施例４７、（ｃ）Ａｌ−Ｈ＋１０μｇの実施例４７、（ｃ）Ａｌ−Ｈ＋２５μｇの実施例４７、（ｄ）Ａｌ−Ｈ＋１００μｇの実施例４７、または（ｅ）Ａｌ−ＨおよびＭｅｎＢ外膜ベシクルと組み合わせた５ＣＶＭＢでの免疫後に得た血清の、ＮＺ９８株に対する殺菌力価を示す。図５Ｂは、（ａ）ＭＦ５９のみ、（ｂ）ＭＦ５９＋２μｇの実施例４７、（ｃ）ＭＦ５９＋１０μｇの実施例４７、（ｃ）ＭＦ５９＋２５μｇの実施例４７、（ｄ）ＭＦ５９＋１００μｇの実施例４７、または（ｅ）ＭＦ５９および２５μｇＣｐＧ１８２６と組み合わせた５ＣＶＭＢでの免疫後に得た血清の、ＮＺ９８株に対する殺菌力価を示す。
【０８７８】
ミョウバン／３ＭｅｎＢ処方物（図５Ａ）を体積の７５％で調製し、実施例４７の均一懸濁物（４ｍｇ／ｍＬ）を、それぞれ０、２、１０、２５、および１００μｇの用量で、免疫の２時間前に添加した。ＣＤ１マウスを、０日目および１４日目に１０μｇの各ＭｅｎＢ抗原および特定の用量の実施例４７の均一（ｈｏｍｏｇｅｎｏｕｓ）懸濁物を含む免疫体積１００μＬ（５０μＬ／脚）で筋肉内に免疫した。２８日目にマウスの眼窩後から採血し、アラマーブルーアッセイを使用してＳＢＡ力価を測定した。ミョウバン／３ＭｅｎＢ／ＯＭＶをベンチマークとして使用した。
【０８７９】
ＭＦ５９／３ＭｅｎＢ処方物（図５Ｂ）を、ＭｅｎＢ抗原（５ＣＶＭＢ）（各１００μｇ／ｍＬ）およびＭＦ５９を、それぞれ０、２０、１００、２５０、および１，０００μｇ／ｍＬの濃度の実施例４７の均一懸濁物（４ｍｇ／ｍＬ）に添加することによって調製した。ＣＤ１マウスを、０日目および１４日目に、１０μｇの各ＭｅｎＢ抗原および特定の用量の実施例４７の均一懸濁物を含む免疫体積１００ｕＬ（５０μＬ／脚）で筋肉内に免疫した。２８日目にマウスの眼窩後から採血し、アラマーブルーアッセイを使用してＳＢＡ力価を測定した。ＭＦ５９／３ＭｅｎＢ＋２５μｇ  ＣｐＧ１８２６をベンチマークとして使用した。
【０８８０】
図５Ａに示すように、ミョウバン／３ＭｅｎＢ＋実施例４７の均一懸濁物（１０μｇ、２５μｇ、および１００μｇ）により、ミョウバン／３ＭｅｎＢのみを使用して認められたＳＢＡ力価と比較して有意に増強された力価が得られ、ＳＢＡ力価は、ミョウバン／３ＭｅｎＢ／ＯＭＶを使用して得たＳＢＡ力価に匹敵するかそれより良好であった。ＭＦ５９／３ＭｅｎＢ処方物を使用して類似の結果が得られた。
【０８８１】
２．実施例４７の均一懸濁物は、Ａｌ−Ｈのみと比較して菌株適用範囲が改善された。
【０８８２】
（ａ）Ａｌ−Ｈのみ、（ｂ）Ａｌ−Ｈ＋１００μｇの実施例４７（ＤＭＳＯ）、（ｃ）Ａｌ−Ｈ＋２５μｇの実施例４７の均一懸濁物、（ｃ）Ａｌ−Ｈ＋１００μｇの実施例４７の均一（ｈｏｍｏｇｅｎｏｕｓ）懸濁物、および（ｄ）Ａｌ−ＨおよびＭｅｎＢ外膜ベシクルと組み合わせた５ＣＶＭＢでのマウスの筋肉内免疫後および、（ｅ）Ａｌ−ＨおよびＭｅｎＢ外膜ベシクルと組み合わせた５ＣＶＭＢでのマウスの腹腔内免疫後に得た血清の菌株適用範囲（ｓｔｒａｉｎ  ｃｏｖｅｒａｇｅ）を評価した。ミョウバン／３ＭｅｎＢ／ＯＭＶをベンチマークとして使用した。効力の表示は、ＭｅｎＢマウスモデルにおけるＳＢＡアッセイでの定義された殺菌（ｋｉｌｌｉｎｇ）の閾値に到達する菌株の比率として示す。
【０８８３】
表４は、これらの研究で使用した１６種の（１６）異なる髄膜炎菌株を示す。１６菌株を、（１）５ＣＶＭＢの唯一の抗原性成分についての特異的標的および（２）ミョウバン／３ＭｅｎＢを使用して歴史的に低いか陰性のＳＢＡ力価を示すように選択した。１０８４を超えるＳＢＡ力価を、特定の菌株に対する適用範囲を示すためのカットオフとして使用した。
【０８８４】
【表４】
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ＣＤ１マウスを、１日および１４日間の免疫スケジュールに従って免疫した。各免疫では、用量０．１ｍｌの各処方物を、筋肉内経路を介して０．０５ｍｌを２脚のそれぞれに送達させた。２８日目にマウスから採血し、ＳＢＡアッセイを使用して血清を分析した。１日目および１４日目に腹腔内経路を介して送達させた０．２ｍｌミョウバン／３ＭｅｎＢ＋ＯＭＶからなるさらなるコントロール群を含めた。類似の免疫スキームを使用した２つの研究を行い（「ＭｅｎＢ研究１」および「ＭｅｎＢ研究２」）、共に類似のデータが得られた。
【０８８５】
表５は、２つの個別の研究におけるＮＺ９８／２５４株に対するＳＢＡ力価を示す。
【０８８６】
【表５】
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図６に示すように、実施例４７の均一（ｈｏｍｏｇｅｎｏｕｓ）懸濁物（筋肉内、ｉ．ｍ．）を使用して処方したミョウバン／３ＭｅｎＢは、本実験で使用した菌株の７５％を包含することができた一方で、ミョウバン／３ＭｅｎＢのみでは１９％しか包含することができなかった。ミョウバン／３ＭｅｎＢ／ＯＭＶは、Ａｌ−Ｈ中で処方し、且つｉ．ｍ．送達させた場合に菌株の約５０％を包含することができ、腹腔内（ｉ．ｐ．）経路を介して送達させた場合に菌株の８０％を包含することができた。用量依存性の結果は明らかとならなかった。したがって、ミョウバン／３ＭｅｎＢ＋実施例４７の均一懸濁物（２５μｇおよび１００μｇ）は、ミョウバン／３ＭｅｎＢのみと比較して菌株適用範囲が改善された。
【０８８７】
図７Ａ〜７Ｃは、インビボでのＭｅｎＢマウスモデルにおけるＩｇＧ１／ＩｇＧ２ａ比を示す。総ＩｇＧ力価を、ＥＬＩＳＡによって計算した。図７Ａは、ＧＮＡ２１３２−ＧＮＡ１０３０についてのＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、およびＩｇＧ３力価を示す。図７Ｂは、ＧＮＡ２０９１−ＧＮＡ１８７０についてのＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、およびＩｇＧ３力価を示す。図７Ｃは、ＮａｄＡについてのＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、およびＩｇＧ３力価を示す。表６は、ミョウバン／３ＭｅｎＢに添加した場合の、実施例４７の懸濁物がＩｇＧ２ａを誘導する能力を実証したＥＬＩＳＡアッセイの結果をまとめている。実施例４７は、ミョウバン／３ＭｅｎＢを使用して処方した場合にＩｇＧ２ａアイソタイプスイッチングを増強させた（ＩｇＧ１／ＩｇＧ２ａ比の減少）（数字が小さいほど、より大きな増加倍率のＩｇＧ２ａが実施例４７の懸濁物によって誘導された）。ＩｇＧ２ａは、誘発するのが望ましいＴｈ１応答の代用物と見なされる。
【０８８８】
【表６】
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本実施例は、実施例４７の均一（ｈｏｍｏｇｅｎｏｕｓ）懸濁物がミョウバン／３ＭｅｎＢに対する免疫応答を有意に増強することができ、ＳＢＡ力価が１０μｇ／用量、２５μｇ／用量、または１００μｇ／用量の実施例４７の懸濁物で、ミョウバン／３ＭｅｎＢ／ＯＭＶに匹敵するかそれより良好であることを証明している。さらに、実施例４７の懸濁物は、種々の髄膜炎菌株に対する防御の幅の増加によって示されるように、免疫応答の幅を増大させることができる。
【０８８９】
重要なことに、実施例４７の不均一懸濁物（ＤＭＳＯ中で調製）をアルミニウムベースのワクチンおよびＭＦ５９ベースのワクチンと併せて使用した場合、不均一懸濁物は、同用量の均一懸濁物の効果と比較して、ＳＢＡ力価が低かった。ＭｅｎＢマウスモデルを使用した一組の研究では、１０μｇ／用量の実施例４７の不均一懸濁物を添加した際のＳＢＡ力価は、ＭＦ５９／３ＭｅｎＢのみのそれと類似していた（図８）。別の組の研究では、実施例４７の不均一懸濁物は、ボーダーラインのアジュバント効果しか示さなかった。したがって、本発明に記載の均一懸濁物は、複製動物間の変動性の高さを減少させて免疫後の免疫細胞に対する分子の生物学的利用能を増大させるだけでなく、より低い用量（例えば、１０μｇ／用量以下）で免疫刺激効果が得られる。
【０８９０】
実施例（ＶＩ）：インビボＲＳＶモデルにおける実施例４７の均一懸濁物の効力
本実施例では、均一懸濁物として送達させた実施例４７のインビボ効力を、ＲＳＶモデルを使用して評価した。
【０８９１】
Ａ．研究１
１つの研究では、ＲＳＶ  Ｆ−サブユニット抗原を、１０ｍＭヒスチジン緩衝液中５０μｇ／ｍＬまたは１０μｇ／ｍＬの標的濃度でＡｌ−Ｈ上に吸着させた。これらのミョウバン処方物を、種々のアジュバントの添加を可能にするために体積７５％で調製した。実施例４７の均一懸濁物（４ｍｇ／ｍＬ）（用量２５および１００μｇ）、Ｒ８４８（１ｍｇ／ｍＬ）（用量２５μｇ）、およびＣｐＧ１８２６（１０ｍｇ／ｍＬ）（用量２５μｇ）を、免疫の２時間前以内にミョウバン処方物またはＦ−サブユニットタンパク質に添加した。Ｂａｌｂ／ｃマウスを、０日目および１４日目に免疫体積１００μＬ（５０μＬ／脚）で筋肉内に免疫した。２８日目にマウスの眼窩後から採血した。基質（ｓｕｂｓｔｒａｔｅ）に吸着したＦ−サブユニットタンパク質について、ＥＬＩＳＡ力価を、血清の連続希釈によって測定した。ＲＳＶウイルスに対する中和力価を、種々の血清希釈物とインキュベートした場合のプラーク数の減少に基づいて測定した。ＦＩＲＳＶ、Ｒ８４８、およびＣｐＧを、本研究におけるベンチマークとして使用した。
【０８９２】
図９Ａに示すように、実施例４７の懸濁物は、全サンプルの総抗体力価を増加させ、Ｆ−抗原をＡｌ−Ｈに吸着させた場合に中和力価が増加する。図９Ａは、総抗Ｆ抗体（ＥＬＩＳＡ−κ）および中和抗体（ＰＲＮＴ６０）の力価の両方を示す。用量２５μｇの実施例４７について最高の中和力価が認められた。さらに、実施例４７の均一懸濁物の添加により、ＲＳＶ  Ｆ抗原単独によるかまたはＡｌ−Ｈで処方したものによるＩｇＧ２ａアイソタイプスイッチングも増強された。
【０８９３】
Ｂ．研究２
別の研究から類似の結果が得られた。図９Ｂに示すように、実施例４７の均一懸濁物は、全サンプルの総抗体力価を増加させ、Ｆ−抗原をＡｌ−Ｈに吸着させた場合に中和力価を増加させた。さらに、実施例４７の懸濁物の添加により、ＲＳＶ  Ｆ抗原単独によるかまたはＡｌ−Ｈで処方したものによるＩｇＧ２ａアイソタイプスイッチングも増強された。
【０８９４】
実施例（ＶＩＩ）：ＭｅｎＢ処方物についての菌株適用範囲の調査
用量２５μｇ／マウスで均一懸濁物として送達させた実施例４７のインビボ効力を、ＭｅｎＢモデルを使用して評価した。２つのマウス系統を使用して研究を行い、一方の研究はＣＤ１マウスを使用し、他方はＣ５７／ＢＬ６マウスを使用した。ＧＮＡ２０９１−ＧＮＡ１８７０融合タンパク質を国際特許出願番号ＰＣＴ／ＩＢ２０１０／００２２６０号（２０１０年８月２７日出願、ＵＳＳＮ  ６１／２３７，５７６号の優先権を主張）に開示の「９３６−１０Ａ−１０Ａ」タンパク質（その明細書中の配列番号１２６；本明細書中の配列番号４）に置き換えた改変５ＣＶＭＢを使用して評価した。改変５ＣＶＭＢを、Ａｌ−Ｈと共に送達させた。ＭｅｎＢ抗原を、ＳＢＡアッセイを使用してインビボ免疫原性潜在力について試験した。
【０８９５】
ＣＤ１マウス（実験Ｉ）またはＣＤ５７／ＢＬ６マウス（実験ＩＩ）を、０日目および１４日目に、１０μｇの３つのＭｅｎＢポリペプチドおよび２５．０μｇの実施例４７の均一（ｈｏｍｏｇｅｎｏｕｓ）懸濁物を含む免疫体積１００μＬ（５０μＬ／脚）で筋肉内に免疫した。２８日目にマウスの眼窩後から採血し、ＳＢＡ力価を測定した。標準的な臨床ＯＭＶ用量の２５％を使用したミョウバン／３ＭｅｎＢ＊をベンチマークとして使用した。本実施例では、３ＭｅｎＢ＊は、以下の３つの個別のポリペプチドから作製したＭｅｎＢワクチンを指す：ＧＮＡ２１３２−ＧＮＡ１０３０、９３６−１０Ｃ−１０Ｃ、およびＮａｄＡ。
【０８９６】
表７は、ＣＤ１マウスの免疫をまとめている（実験Ｉ）。
【０８９７】
【表７】
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表８は、Ｃ５７／ＢＬ６マウスの免疫をまとめている（実験ＩＩ）。
【０８９８】
【表８】
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ミョウバン／３ＭｅｎＢ＊処方物（表９中のＧ２、Ｇ３、Ｇ５群）を体積７５％で調製し、実施例４７の均一懸濁物を、免疫の２時間前以内に用量２０μｇに到達するように添加した。値が一貫して前臨床評価および臨床評価の許容範囲内であるので、実施例４７の均一懸濁物のミョウバン／３ＭｅｎＢ＊への添加は、ｐＨおよび容量オスモル濃度に関して処方物の品質を変化させなかった。実施例４７の均一懸濁物は使用抗原と適合し、内毒素含有量は５ＥＵ／用量未満であった。表９は、ＭｅｎＢの標準的処方物が単独およびＯＭＶを使用して処方した両方のミョウバン上に十分に（９５％超）吸着したことを示す。実施例４７を使用した処方物は、実施例４７の均一懸濁物の添加後に抗原の脱着を示したが、吸着は９０％超残存した。
【０８９９】
【表９】
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表１０〜１３は、（２）Ａｌ−Ｈのみ、（３）Ａｌ−Ｈ＋２５０ｍｃｇ／ｍｌ実施例４７、または（５）Ａｌ−ＨおよびＭｅｎＢ外膜ベシクルと組み合わせた３つのポリペプチドを含む処方物での免疫後の５つの異なる髄膜炎菌株に対する殺菌力価を示す。
【０９００】
【表１０】
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【０９０１】
【表１１】
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【０９０２】
【表１２】
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【０９０３】
【表１３】
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実施例４７の処方物のＳＢＡ力価はミョウバン／３ＭｅｎＢベースラインより高く、ミョウバン／３ＭｅｎＢ＋Ｄ−ＯＭＶに類似していた。表１０〜１３に示すように、実施例４７の均一懸濁物（群３）の添加により、ミョウバン／３ＭｅｎＢ群（群２）と比較した場合に優れた幅のワクチン適用範囲が得られ、ＯＭＶを使用して処方した群（群５）と比較してより良好であるか類似する適用範囲を示した。
【０９０４】
ＮａｄＡ、ＧＮＡ２１３２−ＧＮＡ１０３０、ＧＮＡ２０９１−ＧＮＡ１８７０、および９３６−１０Ａ−１０Ａのアミノ酸配列を以下に示す。
【０９０５】
【化２０２】
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当業者は、慣用の試験のみ使用して本明細書に記載の本発明の特定の実施形態の多数の等価物を認識するか確認することができる。こうした等価物は、以下の実施形態に含まれることが意図される。
【０９０６】
本明細書は、本明細書内に引用された参考文献の教示に照らして最も完全に理解される。本明細書内の実施形態は、本発明の実施形態を例示するものであり、本発明の範囲を制限すると解釈すべきではない。当業者は、多数の他の実施形態が本発明に包含されることを容易に認識する。本開示で引用した全ての刊行物および特許は、参照によって本明細書にその全体が組み込まれる。参照によって組み込まれた構成要素が本明細書と矛盾するか一致しない場合に限り、本明細書がいかなるこうした構成要素より優先される。本明細書の任意の参考文献の引用は、かかる参考文献が本発明に先行する技術であることを承認するものではない。
【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
2013514382.tif 000224
【図７Ａ】
2013514382.tif 000225
【図７Ｂ】
2013514382.tif 000226
【図７Ｃ】
2013514382.tif 000227
【図８】
2013514382.tif 000228
【図９Ａ】
2013514382.tif 000229
【図９Ｂ】
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【手続補正書】
【提出日】平成24年8月30日(2012.8.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2013514382000001.app
【国際調査報告】
2013514382.tif 000231
2013514382.tif 000232
2013514382.tif 000233