(57)【要約】  局所化粧料組成物中のレスベラトロールの皮膚浸透を向上させるための、必要に応じてポリオールと組み合わせた、ＵＶフィルタの使用。【特許請求の範囲】
【請求項１】
局所化粧料組成物中のレスベラトロールの皮膚浸透を向上させるためのＵＶフィルタの使用。
【請求項２】
皮膚美白用の局所化粧料組成物中における請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記ＵＶフィルタが、ブチルメトキシジベンゾイルエタン；２−（４−エトキシアニリノメチレン）−プロパン二酸ジエチルエステル；エチルヘキシルメトキシシンナメート；サリチル酸エチルヘキシル；オクトクリレン；２−フェニルベンズイミダゾール−５−スルホン酸；ジメチコジエチルベンザルマロネート；２，４−ビス（（４−（エチルヘキシルオキシ）−２−ヒドロキシ）−フェニル）−６−（４−メトキシフェニル）−１，３，５−トリアジン；２，２’−メチレン−ビス（６−（２Ｈ−ベンゾトリアゾール−２−イル）−４−（１，１，３，３−テトラメチルブチル）フェノール；１−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−３−（４−メトキシフェニル）−プロパン−１，３−ジオン；２−シアノ−３，３−ジフェニルアクリル酸２−エチルヘキシルエステル；（Ｅ）−ｒａｃ−１，７，７−トリメチル−３−（４−メチルベンジリデン）−ビシクロ−［２．２．１］−ヘプタン−２−オン；サリチル酸３，３，５−トリメチルシクロヘキシル；２−フェニル−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−スルホン酸；３−（４−メトキシフェニル）−プロピオン酸２−エチルヘキシルエステル；３−（４−メトキシフェニル）−２−プロペン酸２−エチルヘキシル；およびポリシリコーン−１５からなる群から選択される有機サンスクリーン剤である、請求項１または２に記載の使用。
【請求項４】
前記ＵＶフィルタが二酸化チタンおよび酸化亜鉛からなる群から選択される無機サンスクリーン剤である、請求項１または２に記載の使用。
【請求項５】
前記化粧料組成物が、さらに、ソルビトール、ブチレングリコール、グリセロール、ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ＰＥＧ−１８、ＰＰＧ−１８、ジメチコン、ＰＥＧ−４０水添ヒマシ油、ステアリン酸ＰＥＧ−２０、セスキステアリン酸ＰＥＧ−２０メチルグルコース、ジオレイン酸ＰＥＧ−１２０メチルグルコース、セテアレス−１２、コセス−７、ＰＰＧ−１−ＰＥＧ−９ラウリルグリコールエーテル、ステアリン酸ＰＥＧ−３０グリセリル、ヤシ油脂肪酸ＰＥＧ−７グリセリルおよびエトキシグリコールからなる群から選択されるポリオールを含む、請求項１〜４の何れか一項に記載の使用。
【請求項６】
前記ポリオールがポリエチレングリコールである、請求項５に記載の使用。
【請求項７】
前記化粧料組成物がＯ／Ｗ型エマルションまたはゲルの形態である、請求項１〜６の何れか一項に記載の使用。
【請求項８】
前記組成物中のレスベラトロールの量が、それぞれ前記組成物の全重量に対して、０．００１〜５重量％の範囲、好ましくは０．０５〜２重量％の範囲、最も好ましくは０．２〜１重量％の範囲である、請求項１〜７の何れか一項に記載の使用。
【請求項９】
前記組成物中の１種類以上のＵＶフィルタの量が、それぞれ前記組成物の全重量に対して、４〜２７重量％の範囲、好ましくは６〜２０重量％の範囲、最も好ましくは９〜１５重量％の範囲である、請求項１〜８の何れか一項に記載の使用。
【請求項１０】
前記組成物中の１種類以上のポリオールの量が、それぞれ前記組成物の全重量に対して、１〜３０重量％の範囲、好ましくは３〜２０重量％の範囲、最も好ましくは５〜１７重量％の範囲である、請求項５〜９の何れか一項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明はその最も広い意味において、レスベラトロール、即ち、３，４’，５−トリヒドロキシスチルベン、特にｔｒａｎｓ−レスベラトロールを含む局所化粧料組成物に、とりわけ皮膚美白用のこのような局所化粧料組成物に関する。本発明の局所化粧料組成物は、レスベラトロールの溶解性および皮膚浸透を向上させるために、レスベラトロールを、少なくとも１種のＵＶフィルタ、および必要に応じて少なくとも１種のポリオールと組み合わせて含む。本発明の重要な態様の１つは、局所化粧料組成物、特に皮膚美白用組成物中のレスベラトロールの皮膚浸透を向上させるための、必要に応じてポリオールと組み合わせたＵＶフィルタの使用である。
【０００２】
レスベラトロールはＵＶ感受性であり、化粧料用溶媒に対する溶解度が低く、そのため、デイケア化粧料組成物中におけるその安定性および有効性が低下する可能性がある。レスベラトロールを、ＵＶフィルタ、および必要に応じてポリオールと組み合わせると、次の利点があることが分かった：
ａ）ＵＶにより誘導されるレスベラトロールの分解が防止されるまたは減少する、
ｂ）皮膚浸透が向上する、従って、生物学的利用能が改善される、
ｃ）レスベラトロールの再結晶化が回避される、そして
ｄ）化粧料製剤の安定性が向上する。
【０００３】
「分解」という用語は、ｔｒａｎｓ−レスベラトロールが受ける可能性があり、その生物活性に悪影響を及ぼす任意の化学的変化、例えば、酸化、水素化、および特に異性化に関する。
【０００４】
消費者は、均一でより明るい肌色を達成することに強い関心を示しているため、スキンケア市場の最も重要な分野の１つは高い皮膚美白特性を有する化粧料組成物に関する。日光黒子、炎症後色素沈着過剰症および肝斑は、ヒト集団に一般的に見られる皮膚障害である。さらに、皮膚の淡色化は、最も大きい成長を示し；主として、拡大するアジア市場により、ならびに特定の消費者区分（即ち、男性用ケア）への皮膚美白製品の拡大により推進されている化粧品市場区分の１つである。皮膚美白活性を示す様々な製品が市場に存在する（例えば、アスコルビルグルコシド、アルブチン、植物抽出物、コウジ酸、ビタミンＣ誘導体）が、これらは、配合または浸透に制約がある、ｉｎ−ｖｉｖｏにおける有効性が低い、および／または安全上の問題を生じることが多い。これらの美白剤の一部に関する毒性の問題に対する消費者の認識が高まっているため、有効且つ安全な美白活性成分が求められている。
【０００５】
例えば、オオイタドリ（ｇｉａｎｔ  ｋｎｏｔｗｅｅｄ）、ブドウ、および、従って赤ワイン中に見られる天然分子であるレスベラトロールの研究が、近年、精力的に行われてきた。レスベラトロールの多機能効果を証明する科学報告書が相次いでいる。レスベラトロールは、極めて強力な抗酸化剤、シグナル伝達による遺伝子発現の調節剤、炎症伝達物質の阻害剤であり、植物ホルモン様効果を有し、メラニンの合成を低下させることが報告されている。レスベラトロールは、このように生物学的機能と化粧効果とを兼ね備えているため、パーソナルケア製品用の非常に優れた有効成分となる。
【０００６】
１９８９年２月８日に公開された特開昭６４−３８００９号明細書は、０．００００１〜１０重量％の濃度の、１種類以上のヒドロキシスチルベン、例えば、レスベラトロールだけをベースにする皮膚淡色化化粧料組成物を開示している。この組成物は、通常の化粧料用補助剤および添加剤／担体、例えば、油、保存剤、香料、および乳化剤；例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含む。
【０００７】
上記の全ての生物学的特性およびその優れた皮膚美白効果にもかかわらず、レスベラトロールには、化粧料組成物を開発する際に、一連の課題がある。レスベラトロールは、その溶解性が低いため、水を含有する化粧料組成物中で結晶として析出する傾向がある。高含有量のレベラトロールは、実質的に水非含有の化粧料組成物中でのみ実現可能であると考えられる。所与の化粧料組成に応じたレスベラトロールの皮膚浸透については、ほとんど知られていない。ｔｒａｎｓ−レスベラトロール（活性型）の化学的安定性に関する公開データはばらつきが大きかった。ｃｉｓ／ｔｒａｎｓ形成に影響を及ぼす条件に関しては様々な見解がある。
【０００８】
従って、本発明の目的は、安定化された活性型のレスベラトロールが皮膚に十分な量で浸透することができるレスベラトロール含有美白化粧料組成物、ならびにこのような組成物の浸透方法を見出すことであった。
【０００９】
本発明により、レスベラトロールを含む、局所化粧料組成物、特に皮膚美白用の局所化粧料組成物中に、１種類以上のＵＶフィルタを、必要に応じて１種類以上のポリオールと組み合わせて使用することが有利であると分かった。このような組成物中では、レスベラトロール、特にｔｒａｎｓ−異性体は安定化され、より十分に皮膚に浸透することができ、改善された美白効果を示す。
【００１０】
本発明によれば、組成物中のレスベラトロールの量は、それぞれ組成物の全重量に対して、０．００１〜５重量％の範囲、好ましくは０．０５〜２重量％の範囲、最も好ましくは０．２〜１重量％の範囲である。
【００１１】
本発明のＵＶフィルタは、紫外線を遮断するのに一般的に使用される有機化合物または無機化合物を含む。有機ＵＶフィルタ物質の好ましい例は、
ブチルメトキシジベンゾイルエタン；２−（４−エトキシアニリノメチレン）−プロパン二酸ジエチルエステル；エチルヘキシルメトキシシンナメート；サリチル酸エチルヘキシル；オクトクリレン；２−フェニルベンズイミダゾール−５−スルホン酸；ジメチコジエチルベンザルマロネート；２，４−ビス（（４−（エチルヘキシルオキシ）−２−ヒドロキシ）−フェニル）−６−（４−メトキシフェニル）−１，３，５−トリアジン；２，２’−メチレン−ビス（６−（２Ｈ−ベンゾトリアゾール−２−イル）−４−（１，１，３，３−テトラメチルブチル）フェノール；１−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−３−（４−メトキシフェニル）−プロパン−１，３−ジオン；２−シアノ−３，３−ジフェニルアクリル酸２−エチルヘキシルエステル；（Ｅ）−ｒａｃ−１，７，７−トリメチル−３−（４−メチルベンジリデン）−ビシクロ−［２．２．１］−ヘプタン−２−オン；サリチル酸３，３，５−トリメチルシクロヘキシル；２−フェニル−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−スルホン酸；３−（４−メトキシフェニル）−プロピオン酸２−エチルヘキシルエステル；３−（４−メトキシフェニル）−２−プロペン酸２−エチルヘキシル；およびポリシリコーン−１５からなる群から選択される。ブチルメトキシジベンゾイルメタンおよび／またはオクトクリレンが最も好ましい。
【００１２】
無機ＵＶフィルタ物質は、好ましくは、二酸化チタンおよび酸化亜鉛からなる群から選択される。
【００１３】
使用されるＵＶフィルタ物質（１種類以上）の量は、所望の紫外線防御度および化粧料組成物に使用されるｔｒａｎｓ−レスベラトロールの濃度に応じて変わり得る。それは、それぞれ組成物の全重量に対して、通常、４〜２７重量％の範囲、好ましくは６〜２０重量％の範囲、最も好ましくは９〜１５重量％の範囲である。
【００１４】
（１種類以上の）ＵＶフィルタ物質対レスベラトロールの重量比は、１５０：１未満、好ましくは１００：１〜１０：１、最も好ましくは５０：１〜１０：１である。
【００１５】
本発明のポリオールは、レスベラトロールを可溶化することができる非水性極性有機溶媒である。直鎖および分岐鎖アルキルポリヒドロキシル化合物であるポリオールの中で、実例としてプロピレングリコール、ソルビトール、ブチレングリコール、およびグリセリンがある。高分子ポリオール、例えば、ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコールおよびこれらの誘導体が特に好ましい。高分子ポリオールの例としては、ＰＥＧ−１８、ＰＰＧ−１８、ジメチコン、ＰＥＧ−４０水添ヒマシ油、ステアリン酸ＰＥＧ−２０、セスキステアリン酸ＰＥＧ−２０メチルグルコース、ジオレイン酸ＰＥＧ−１２０メチルグルコース、セテアレス−１２、コセス−７（ｃｏｃｅｔｈ−７）、ＰＰＧ−１−ＰＥＧ−９ラウリルグリコールエーテル、ステアリン酸ＰＥＧ−３０グリセリル、ヤシ油脂肪酸ＰＥＧ−７グリセリルおよびエトキシグリコールが挙げられる。
【００１６】
本発明によれば、組成物中の１種類以上のポリオールの量は、それぞれ組成物の全重量に対して、１〜３０重量％の範囲、好ましくは３〜２０重量％の範囲、最も好ましくは５〜１７重量％の範囲である。
【００１７】
本発明の組成物中の１種類以上のポリオール対レスベラトロールの重量比は、５０：１未満、好ましくは３０：１〜２０：１の範囲、より好ましくは１５：１〜５：１の範囲である。
【００１８】
本発明の局所化粧料組成物は、通常の化粧料用補助剤および添加剤、例えば、保存剤／抗酸化剤、脂肪物質／油、水、有機溶媒、シリコーン、増粘剤、柔軟剤、乳化剤、サンスクリーン剤、消泡剤、保湿剤、香料などの美的成分、界面活性剤、充填剤、金属イオン封鎖剤、アニオン性、カチオン性、非イオン性もしくは両性ポリマーもしくはこれらの混合物、噴射剤、酸性化剤もしくは塩基性化剤、色素、着色剤／着色料、研磨剤、吸収剤、精油、皮膚感覚剤（ｓｋｉｎ  ｓｅｎｓａｔｅｓ）、収斂剤、消泡剤、顔料もしくはナノ顔料、または化粧料組成物に通常配合される他の成分も含有することができる。本発明の組成物に使用するのに好適な、スキンケア業界で一般的に使用されるこのような化粧料成分は、例えば、ＣＴＦＡ  Ｃｏｓｍｅｔｉｃ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（１９９２）に記載されているが、これらに限定されるものではない。
【００１９】
本明細書で使用される「局所組成物」という用語は、哺乳動物のケラチン組織に局所塗布することができる化粧料組成物を指す。本願で使用する「化粧料製剤」または「化粧料組成物」という用語は、Ｒｏｅｍｐｐ  Ｌｅｘｉｋｏｎ  Ｃｈｅｍｉｅ，１０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ  １９９７，Ｇｅｏｒｇ  Ｔｈｉｅｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ  Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋの項目「Ｋｏｓｍｅｔｉｋａ」に定義されている化粧料組成物を指す。
【００２０】
好ましくは、本発明の局所組成物は、溶媒もしくは脂肪物質中に懸濁もしくは分散した懸濁液もしくは分散体の形態、あるいは、エマルションもしくはマイクロエマルション（特にＯ／Ｗ型もしくはＷ／Ｏ型）、ＰＩＴ−エマルション、多相エマルション（例えば、Ｏ／Ｗ／Ｏ型もしくはＷ／Ｏ／Ｗ型）、ピッカリング（ｐｉｃｋｅｒｉｎｇ）エマルション、ハイドロゲル、アルコールゲル、リポゲル、一相もしくは多相溶液またはベシクル分散体（ｖｅｓｉｃｕｌａｒ  ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ）、またはペンで、マスクとしてもしくはスプレーとして塗布することもできる他の通常の形態である。局所組成物がエマルションであるまたはエマルションを含む場合、それは、１種類以上のアニオン性、非イオン性、カチオン性または両性界面活性剤を含有することもできる。水中油型、油中水型またはシリコーン−水型のエマルション、ナノエマルション、マイクロエマルション、多相エマルション、水性または無水ゲルおよび溶液が好ましい。Ｏ／Ｗ型エマルションおよび／またはゲルが最も好ましい。
【００２１】
本発明の好ましい局所組成物は、スキンケア製剤、装飾用製剤、光防御製剤、および機能性製剤である。
【００２２】
スキンケア製剤の例としては、特に、フェイスクリーム、ボディオイル、ボディローション、ボディジェル、トリートメントクリーム、皮膚保護用軟膏、髭剃り用製剤、例えば、シェービングフォームまたはジェル、スキンパウダー、例えば、ベビーパウダー、保湿ジェル、保湿スプレー、リバイタライジングボディスプレー、セルライトジェル、顔および／または身体用保湿剤、顔および／または身体用洗浄剤、フェイスマスク、抗ニキビ製剤および／または皮膚剥脱用製剤がある。フェイスケア製品が最も好ましい。
【００２３】
装飾用製剤の例としては、特に、リップスティック、アイシャドウ、マスカラ、乾燥および湿潤メーキャップ製剤、ルージュ、粉おしろい、および／または日焼け用ローションがある。
【００２４】
機能性製剤の例としては、他の有効成分、例えば、ホルモン製剤、ビタミン製剤、植物および／または果実抽出物、アンチエイジング製剤、および／または抗微生物（抗菌または抗真菌）製剤を含有する化粧料組成物があるが、これらに限定されるものではない。
【００２５】
本発明の局所組成物は、液体、ローション、高粘度ローション、ゲル、クリーム、乳液、軟膏、ペースト、粉末、メーキャップ、または固体チューブスティックの形態であってもよく、任意選択によりエアゾールとして包装することができ、ムース、例えば、エアゾールムース、フォームまたはスプレーフォーム、スプレー、スティック、硬膏、洗浄剤、石鹸、またはワイプの形態で提供することができる。
【００２６】
本発明により、局所組成物は、好ましくは、他の１種類以上の化粧料有効成分、特に、皮膚淡色化；日焼け防止；色素沈着過剰症の治療；ニキビ、皺（ｗｒｉｎｋｌｅｓ）、線状皺（ｌｉｎｅｓ）、委縮および／または炎症の予防または減少のための有効成分；ならびに、局所抗微生物剤および／または抗真菌剤；キレート剤および／または金属イオン封鎖剤；抗セルライト剤（例えば、フィタン酸）および／または局所組成物に通常使用される担体および／または賦形剤または希釈剤を含有してもよい。当業者は、化粧料用および皮膚科用補助剤および添加剤の必要量を、所望の製品に基づき、容易に決定することができる。
【００２７】
以下の特定の組成物および実験に関する説明で、本発明をより詳細に説明する。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】ＵＶフィルタを含まないもの（Ｉ）とＵＶフィルタを含むもの（ＩＩ）の２種類の化粧料用担体中におけるｔｒａｎｓ−レスベラトロールの含有量に対する紫外線の影響。
【図２】標準的なＯ／Ｗ型化粧料組成物での有効成分濃度に応じたレスベラトロールの皮膚浸透（Ａ）０．０１％レスベラトロール（ドナー４匹、反復試験１３回、回収９７．５％±６．２％）および（Ｂ）０．０５％レスベラトロール（ドナー４匹、反復試験１２、回収９２．１％±６．３％）。浸透は、塗布した用量の％として示す。
【図３】レスベラトロール皮膚浸透に対するＵＶフィルタの影響。（Ｂ）０．０５％レスベラトロールを含むＯ／Ｗ型化粧料組成物（ドナー４匹、反復試験１２、回収９２．１％±６．３％）；および（Ｃ）ＵＶフィルタおよび０．０５％レスベラトロールを含有するＯ／Ｗ型化粧料組成物（ドナー４匹、反復試験８、回収９７．３％±２．７％）。浸透は、塗布した用量の％として示す。
【００２９】
［実施例］
［レスベラトロールの安定性］
レスベラトロールを含有する化粧料組成物は、ｐＨとは無関係に、長期貯蔵条件下で昼光に暴露されると暗色に着色することが観察された。この観察に基づき、レスベラトロールの光安定性をより詳細に調べることにした。この目的のため、レスベラトロール１重量％を２種類の異なる化粧料用担体：
Ｉ）Ｍｉｒｙｔｏｌ（２９重量％）およびイソプロパノール（７０重量％）；
ＩＩ）Ｍｉｒｙｔｏｌ（２９重量％）、ブチルメトキシジベンゾイルメタン（４重量％）、オクトクリレン（１０重量％）およびイソプロパノール（７０重量％）；
へ溶解させた。
【００３０】
化粧料溶液ＩおよびＩＩ、各６×２０μｌずつをガラス板上に分配し、１０ＭＥＤを照射した。照射後、ＨＬＰＣでレスベラトロール含有量を測定した。
【００３１】
図１に示すように、化粧料用担体（Ｉ）中ではＵＶ照射のため、初期ｔｒａｎｓ−レスベラトロールの約７０％が損失することが分かった。図示するように溶液（ＩＩ）中にＵＶフィルタを使用すると、このような損失はほぼ７０％から１０％に減少した。
【００３２】
［ＵＶフィルタを含有する化粧料組成物中におけるｔｒａｎｓ−レスベラトロールの溶解性、相溶性および安定性］
安定性ならびに有機および無機ＵＶフィルタとの相溶性を評価するために、レスベラトロールを表１および表２に示す化粧料組成物中に配合した。アボベンゾンおよびオクトクリレンはデイケア化粧料組成物中に最も広範に使用されているＵＶフィルタであるため、有機ＵＶフィルタからはこれらを選択した。無機ＵＶフィルタからは、コーティングされた形態または二酸化チタンを選択した。
【００３３】
【表１】
2013542969.tif 000002
【００３４】
【表２】
2013542969.tif 000003
【００３５】
表３に示すように、レスベラトロールは有機および無機サンスクリーン剤と相溶性がある。それは試験する両方の製剤に十分溶解する。広い温度範囲で長期間貯蔵した後、結晶も変色も観察されなかった。様々な貯蔵条件で示されるｔｒａｎｓ−レスベラトロール含有量で判断した場合、これらの製剤は安定であった。
【００３６】
【表３】
2013542969.tif 000004
【００３７】
［レスベラトロールの皮膚浸透］
切除したばかりのブタの耳の皮膚（ダーマトームで剥皮、厚さ約３００μｍ）を使用して、レスベラトロールのｉｎ  ｖｉｔｒｏ経皮浸透を測定した。流通式拡散セルを有するシステムで［フェニル−１４Ｃ］−レスベラトロールの皮膚浸透を調べた。
【００３８】
試験物質は、ブリッジ（Ｂｒｉｊ）−７２およびブリッジ−７２１乳化剤を使用し、０．０１％および０．０５％Ｏ／Ｗ型クリームとして（製剤ＡおよびＢ、表５）、ならびにＵＶフィルタも含有し、乳化剤ｌｍｗｉｔｏｒ  ３７２  ＰおよびＬｉｃｏｃｉｒｅ  ＮＡを使用する０．０５％Ｏ／Ｗクリームとして（製剤Ｃ、表６）配合した。実際のレスベラトロール含有量は、製剤Ａ、ＢおよびＣ中でそれぞれ０．００９％、０．０５５％および０．０６１％と測定された。クリームを、室温３２℃にて非閉塞条件で皮膚１ｃｍ２当たり製剤４．３〜６．７ｍｇの用量レベルで塗布した。１製剤当たり４匹の異なるドナー動物を使用した。
【００３９】
３Ｈ２Ｏ透過測定で皮膚の完全性を試験し、その後のレスベラトロール透過実験に含まれ得る皮膚サンプルの基準は：（ａ）Ｋｐ＜２．５×１０３ｃｍ／ｈ、および（ｂ）６時間以内で全透過＜用量の２５％である。試験した１製剤当たり認可された（ｑｕａｌｉｆｉｅｄ）個々の拡散セルを８〜１３個使用した。
【００４０】
レセプター溶液を回収することにより、２４時間にわたり試験物質の浸透を測定した。レセプター液は、１％ペニシリン／ストレプトマイシンおよび５％ウシ血清アルブミンを補った細胞培養培地（ＤＭＥＭ）であり、回収間隔は、製剤Ｂでは塗布の０〜０．５時間後、０．５〜１時間後、１〜３時間後、３〜５時間後、５〜７時間後、７〜９時間後、および９〜２４時間後であり、製剤ＡおよびＣでは、塗布の０〜３時間後、３〜６時間後、６〜１２時間後、１２〜１８時間後、および１８〜２４時間後であった。試験物質を塗布して２４時間後に皮膚をマイルドな石鹸溶液で洗い流し、テープ剥離で角質層を除去し、残りの皮膚を表皮と真皮に分離した。回収した全サンプル中の液体シンチレーション計数により、全放射能を測定した。
【００４１】
以下の国際的に認められた指針および推奨に示される手順に従って試験を行った：
−ＯＥＣＤ  ４２８：Ｓｋｉｎ  Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ：Ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  Ｍｅｔｈｏｄ、２００４年４月１３日採択。
−ＯＥＣＤ  Ｇｕｉｄａｎｃｅ  Ｄｏｃｕｍｅｎｔ  Ｎｏ．２８：Ｇｕｉｄａｎｃｅ  Ｄｏｃｕｍｅｎｔ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｃｏｎｄｕｃｔ  ｏｆ  Ｓｋｉｎ  Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  Ｓｔｕｄｉｅｓ，ＥＮＶ／ＪＭ／ＭＯＮＯ（２００４）２、２００４年３月５日採択。
−ＳＣＣＰ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｏｎ  Ｂａｓｉｃ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｄｅｒｍａｌ  Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｏｓｍｅｔｉｃ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ−２００６年３月更新、ＳＣＣＰ／０９７０／０６、２００６年３月２８日採択。
【００４２】
放射能の全回収は、製剤Ａ、ＢおよびＣそれぞれについて、塗布した用量の９３．６％、９１．８％、および９７．３％であった。放射能の大部分（＞９１％）は洗い流すことができた。少量の放射能を角質層、表皮、真皮、およびレセプター液から回収することができた。
【００４３】
【表４】
2013542969.tif 000005
【００４４】
［手順］
・Ａ部を８０℃に加熱する。全て溶解したら、撹拌しながらＢ部を添加する。
・Ｃ部を８０℃に加熱し、Ａ／Ｂ部に添加し、ホモジナイズする。
・エマルションを室温に冷却する（ｐＨ約５．１）。
・Ｄ部（エタノール中１４Ｃ−レスベラトロール）を添加し終夜撹拌する。
【００４５】
【表５】
2013542969.tif 000006
【００４６】
［手順］
・Ａ部とＢ部を８０℃に加熱する。
・均質化するまで撹拌しながらＢ部をＡ部に添加する。
・エマルションを室温に冷却する。
・Ｃ部（トリエタノールアミン）を使用してｐＨを５〜５．５に調節する。
・Ｄ部（エタノール中１４Ｃ−レスベラトロール）を添加し終夜撹拌する。
【００４７】
図２に示すように、期待に反して、レスベラトロール含有量の低い（０．１％）製剤は、特に表皮層で、高い浸透率を示した。抽出物の評価から、製剤は両方とも放射性純度は高いが、ｃｉｓ−異性体が検出された（表６）ことが分かった。興味深いことに、表皮浸透率の低い製剤（Ｂ）は２倍のｃｉｓ−異性体含有量を示し、分子の完全性と浸透率との強い相関が示唆された。異性化度の差は、クリーム調製中のおよび／または一連の実験過程の抽出手順中の露光の程度で説明することができた。
【００４８】
このような相関を確認するために、０．０５％レスベラトロール（製剤Ｂ）を含有する組成物に、アボベンゾンとオクトクリレンの組み合わせを強化した（製剤Ｃ）。驚くべきことに、ｃｉｓ−異性体は検出されず（表６）、最も驚いたことには；レスベラトロールの表皮浸透は約２５０％増加した（図３）。
【００４９】
【表６】
2013542969.tif 000007
【００５０】
［安定な化粧料組成物中にレスベラトロールを高含有量で含むことを可能にすること］
レスベラトロールの安定性および浸透に影響を及ぼす条件に関する理解が改善されたため、レスベラトロールの含有量を０．０５％から２０倍増加することを試みた。これは、表７に示すようにＵＶフィルタ、ＰＥＧ／ＰＰＧ−１８／１８ジメチコンおよびプロピレングリコールの組み合わせを微調整することにより達成された。この製剤は、６カ月より長期間安定であることが分かった。
【００５１】
【表７】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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