(57)【要約】  シクロスポリンの新規アナログ、それらを含有する医薬組成物、並びに、ドライアイ及び他の状態の処置におけるそれらの使用法が、本明細書で開示される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物：
【化１】
2013544786.tif 000036
（Ｉ）
[式中、
Ａは、―ＣＨ＝ＣＨＲ、―ＣＨ＝ＣＨ―ＣＨ＝ＣＨＲ又は―ＣＨ２ＣＨ２Ｒを表し、
ここで、
Ｒは、―ＣＨ３、―ＣＨ２ＳＨ、―ＣＨ２Ｓ―Ｃｎ（式中、ｎ＝１―６である）、―ＣＨ２―カルボキシル―、カルボキシル、
【化２】
2013544786.tif 000037
（式中、Ｒ＝Ｃ１―Ｃ６アルキル）
又は、
【化３】
2013544786.tif 000038
（式中、Ｒ＝Ｃ１―Ｃ６アルキル）を表し；
Ｂは、−ＣＨ２ＣＨ３、１―ヒドロキシエチル、イソプロピル又はｎ―プロピルを表し；
Ｃは、イソブチル、２―ヒドロキシイソブチル又は１―メチルプロピルを表し；
Ｄは、―ＣＨ３又は―ＣＨ２ＯＨを表し；
Ｒ１及びＲ２は、同一若しくは異なるものであり、独立してＣ１−Ｃ６アルキル又はモノ、ジ、又はトリフッ化アルキルを表すか、
Ｒ１及びＲ２は、これらが結合している窒素原子と共に、
酸素、
Ｓ（Ｏ）ｎ（式中、ｎが０、１、２である）、及び
窒素、から選択されるもう一つのヘテロ原子を含む飽和又は部分的に不飽和の３から７員ヘテロシクロアルキル（所望によりＣ１−Ｃ６アルキル及びフッ化アルキルで置換されていてもよいヘテロシクロアルキル）を形成してもよい]。
【請求項２】
［（Ｒ）―（３―モルホリン―４―イル―プロピルチオ）―Ｓａｒ］３シクロスポリンＡ；
［（Ｒ）―（３―エチルイソプロピルアミノ―プロピルチオ）―Ｓａｒ］３シクロスポリンＡ；
［（Ｒ）―（３―（４―メチル―ピペラジン―１―イル）―プロピルチオ）―Ｓａｒ］３シクロスポリンＡ；及び、前記のあらゆる化合物の薬学的に許容し得る塩からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ａは―ＣＨ＝ＣＨＣＨ３であり、Ｂは―ＣＨ２ＣＨ３であり、Ｃはイソブチルであり、及び、Ｄは―ＣＨ３である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ａは―ＣＨ＝ＣＨＣＨ３であり、Ｂは１―ヒドロキシエチルであり、Ｃはイソブチルであり、及び、Ｄは―ＣＨ３である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ａは―ＣＨ＝ＣＨＣＨ３であり、Ｂはイソプロピルであり、Ｃはイソブチルであり、及び、Ｄは―ＣＨ３である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ａは―ＣＨ＝ＣＨＣＨ３であり、Ｂはｎ―プロピルであり、Ｃはイソブチルであり、及び、Ｄは―ＣＨ３である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ａは―ＣＨ＝ＣＨＣＨ３であり、Ｂは―ＣＨ２ＣＨ３であり、Ｃは１―メチルプロピルであり、及び、Ｄは―ＣＨ３である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
Ａは―ＣＨ＝ＣＨＣＨ３であり、Ｂは―ＣＨ２ＣＨ３であり、Ｃはイソブチルであり、及び、Ｄは―ＣＨ２ＯＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ａは―ＣＨ＝ＣＨＣＨ３であり、Ｂは―ＣＨ２ＣＨ３であり、Ｃは２―ヒドロキシイソブチルであり、及び、Ｄは―ＣＨ３である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
化合物が、単独、又は、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤と組み合わされて存在する、請求項１に記載の化合物の少なくとも１つを含む医薬組成物。
【請求項１１】
化合物が、単独、又は、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤と組み合わされて存在する、請求項１に記載の化合物の少なくとも１つを含む医薬組成物であって、前記組成物中の前記化合物の濃度が、約０．０１から約０．０５重量％である、医薬組成物。
【請求項１２】
ドライアイ、眼瞼炎、マイボーム腺疾患、アレルギー結膜炎、アトピー性角結膜炎及び春季カタル、翼状頸、対宿主性移植片病の眼の症状、眼アレルギー、アトピー性角結膜炎、春季カタル、ブドウ膜炎、前部ブドウ膜炎、ベーチェット病、スティーブンスジョンソン症候群、眼類天疱瘡、ウイルス感染によって引き起こされる慢性眼表面炎症、単純ヘルペス角膜炎、眼酒さ及び結膜脂肪斑から選択される状況を処置するため、角膜移植拒絶反応を防止するため、および角膜又は眼の他の表面の手術により損なわれた角膜感度を回復するため、の方法であって、請求項１から１１のうちのいずれか一項に記載の化合物を哺乳類に投与することを含む、方法。
【請求項１３】
前記哺乳類がヒトである、請求項１２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
相互参照
本出願は、２０１０年１０月１２日に出願された、米国特許仮出願第６１／３９２，４５１号の利益を主張し、その開示内容全体が参照として本明細書に組み込まれる。
【０００２】
シクロスポリンの新規アナログ、それらを含有する医薬組成物、並びに、ドライアイ及び他の状態の処置におけるそれらの使用法が、本明細書で開示される。
【背景技術】
【０００３】
シクロスポリンは、環状ポリ-N-メチル化ウンデカペプチドの１つの部類である。シクロスポリンＡなどの天然に存在するシクロスポリン（「Ｃｓ」）及び非天然のシクロスポリン誘導体がある。
【０００４】
シクロスポリンＡは、例えば、以下の構造を有する。
【化１】
2013544786.tif 000002
【０００５】
以下の構造は、シクロスポリンＡの１１個のアミノ酸残基を示す。
【化２】
2013544786.tif 000003
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、以下の式（Ｉ）の新規化合物又は薬学的に許容しうるこれらの塩に関する。
【化３】
2013544786.tif 000004
（Ｉ）
【０００７】
請求項に記載の式（Ｉ）の新規化合物は、「Ｃｓ骨格」の３位アミノ酸（サルコシン）のα炭素への修飾の結果として生じ、「Ｃｓ骨格」は、本明細書で使用するとき、１つ以上の置換基Ａ、Ｂ、Ｃ及びＤの性質が互いに異なるシクロスポリン（例えば、ＣｓＡ、ＣｓＣ、ＣｓＤ、等）を意味する。換言すると、「Ｃｓ骨格」は、３位アミノ酸のα炭素での部分を除いた、式（Ｉ）の新規化合物を意味する。
【０００８】
Ａは、
（ａ）―ＣＨ＝ＣＨＲ、
（ｂ）―ＣＨ＝ＣＨ―ＣＨ＝ＣＨＲ又は
（ｃ）―ＣＨ２ＣＨ２Ｒを表し、
式中、Ｒは
（ａ）―ＣＨ３、
（ｂ）―ＣＨ２ＳＨ、
（ｃ）―ＣＨ２Ｓ―Ｃｎ、式中ｎ＝１〜６、
（ｄ）―ＣＨ２―カルボキシル、
【化４】
2013544786.tif 000005
（ｅ）カルボキシル、
【化５】
2013544786.tif 000006
（ｆ）アルコキシカルボニル、
【化６】
2013544786.tif 000007
（式中、Ｒ＝Ｃ１―Ｃ６アルキル）
又は
（ｇ）―ＣＨ２―アルコキシカルボニル、
【化７】
2013544786.tif 000008
（式中、Ｒ＝Ｃ１―Ｃ６アルキル）
を表す；
Ｂは、
（ａ）−ＣＨ２ＣＨ３、
（ｂ）１―ヒドロキシエチル、
【化８】
2013544786.tif 000009
（ｃ）イソプロピル、
【化９】
2013544786.tif 000010
若しくは、
（ｄ）ｎ―プロピル、
【化１０】
2013544786.tif 000011
を表す；
Ｃは、
（ａ）イソブチル、
【化１１】
2013544786.tif 000012
（ｂ）２―ヒドロキシイソブチル、
【化１２】
2013544786.tif 000013
又は、
（ｃ）１―メチプロピル、
【化１３】
2013544786.tif 000014
を表す；
Ｄは、
（ａ）―ＣＨ３
又は
（ｂ）―ＣＨ２ＯＨを表す。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明の一実施形態では、式（ＩＡ）で以下に示されるように、Ａは―ＣＨ＝ＣＨＣＨ３、Ｂは―ＣＨ２ＣＨ３、Ｃはイソブチル、及び、Ｄは―ＣＨ３である。
【００１０】
【化１４】
2013544786.tif 000015
（ＩＡ）
【００１１】
一実施形態では、式（ＩＢ）で以下に示されるように、Ａは―ＣＨ＝ＣＨＣＨ３、Ｂは１―ヒドロキシエチル、Ｃはイソブチル、及び、Ｄは―ＣＨ３である。
【化１５】
2013544786.tif 000016
（ＩＢ）
【００１２】
一実施形態では、式（ＩＣ）で以下に示されるように、Ａは―ＣＨ＝ＣＨＣＨ３、Ｂはイソプロピル、Ｃはイソブチル、及び、Ｄは―ＣＨ３である。
【化１６】
2013544786.tif 000017
（ＩＣ）
【００１３】
一実施形態では、式（ＩＤ）で以下に示されるように、Ａは―ＣＨ＝ＣＨＣＨ３、Ｂはｎ―プロピル、Ｃはイソブチル、及び、Ｄは―ＣＨ３である。
【化１７】
2013544786.tif 000018
（ＩＤ）
【００１４】
一実施形態では、式（ＩＥ）で以下に示されるように、Ａは―ＣＨ＝ＣＨＣＨ３、Ｂは―ＣＨ２ＣＨ３、Ｃは１―メチルプロピル、及び、Ｄは―ＣＨ３である。
【化１８】
2013544786.tif 000019
（ＩＥ）
【００１５】
一実施形態では、式（ＩＦ）で以下に示されるように、Ａは―ＣＨ＝ＣＨＣＨ３、Ｂは―ＣＨ２ＣＨ３、Ｃはイソブチル、及び、Ｄは―ＣＨ２ＯＨである。
【化１９】
2013544786.tif 000020
（ＩＦ）
【００１６】
一実施形態では、式（ＩＧ）で以下に示されるように、Ａは―ＣＨ＝ＣＨＣＨ３、Ｂは―ＣＨ２ＣＨ３、Ｃは２―ヒドロキシイソブチル、及び、Ｄは―ＣＨ３である。
【化２０】
2013544786.tif 000021
（ＩＧ）
【００１７】
式（Ｉ）では、さまざまなタイプのシクロスポリン骨格のアミノ酸に、１から１１までの数字で表したラベルがつけられる。前記修飾は、Ｃｓ骨格の位置３のアミノ酸（３位のサルコシン）のα炭素で生じる。修飾は、式（Ｉ）の一部の、位置３のアミノ酸のα炭素での、水素原子の置換を一般に含む。
式中、Ｒ１及びＲ２は、同一又は異なって、独立に
（ａ）Ｃ１−Ｃ６アルキル
若しくは
（ｂ）モノ、ジ、又はトリフッ化アルキル、
を表し、
（ｃ）Ｒ１及びＲ２は、これらが結合している窒素原子と共に、
酸素；
Ｓ（Ｏ）ｎ（式中、ｎが０、１、２である）；及び
窒素、から選択されるもう一つのヘテロ原子を含む飽和又は部分的に不飽和の３から７員ヘテロシクロアルキル（所望によりＣ１−Ｃ６アルキル及びフッ化アルキルで置換されていてもよいヘテロシクロアルキル）を形成してもよい。
【００１８】
化合物の実施例
式（Ｉ）の実施形態としては、以下の式（Ｉ）の化合物（位置３のアミノ酸のα炭素の部分のみが示される。波線は式（Ｉ）のＣｓ化合物の残りを表す）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００１９】
化合物の実施例１
【化２１】
2013544786.tif 000022
【００２０】
化合物の実施例２
【化２２】
2013544786.tif 000023
【００２１】
化合物の実施例３
【化２３】
2013544786.tif 000024
【００２２】
定義
「アルキル」とは、１から６個の炭素原子を有する一価の直鎖又は分枝鎖状の炭化水素基を意味する。例としては、メチル、エチル、プロピル（例えば、１―プロピル、イソプロピル）、ブチル（例えば、１―ブチル、イソブチル、ｓｅｃ―ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル）、ペンチル（例えば、１―ペンチル、ネオペンチル）及びヘキシル（例えば、３―ヘキシル）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２３】
「フッ化アルキル又はフッ素化アルキル」とは、本明細書で定義される、一つ以上のフッ素基により置換されたアルキルを意味する。
【００２４】
「アルケニル」とは、２から６個の炭素原子及び１つ以上の二重結合を有する一価の直鎖又は分枝鎖状の炭化水素基を意味する。例としては、エテニル、プロペニル及びブテニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２５】
「アルキニル」とは、２から６個の炭素原子及び１つ以上の三重結合を有する一価の直鎖又は分枝鎖状の炭化水素基を意味する。例としては、エチニル、プロピニル及びブチニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２６】
「シクロアルキル」とは、３から６個の炭素原子を有する一価の飽和又は部分的に不飽和な、環状の炭化水素基を意味する。例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２７】
「ヘテロシクリル」とは、３から６個の環原子を有する一価の飽和又は部分的に不飽和な、環状の炭化水素基を意味し、環原子の少なくとも１つが、窒素、酸素及び硫黄から選択されるヘテロ原子である。ラジカルは、炭素又はヘテロ原子にある。例としては、モルホリニル、ピペリジニル、ピロリジニル、ピラニル及びピラゾリニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２８】
「ヘテロアリール」とは、窒素、硫黄及び酸素から選択される１つ以上のヘテロ原子を有した一価の５から７員芳香族炭化水素基を意味する。例としては、イミダゾリル、ピリジニル、フリル、ピリミジニル及びピラジニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２９】
前記のアルキル、シクロアルキル、及びヘテロシクリル基は、本明細書で説明される１つ以上の置換基によって、独立して置換されてもよい。
【００３０】
「アミノ」とは、―ＮＨ２又はアミドゲン基を意味する。
【００３１】
「モノアルキルアミノ」とは、―ＮＨＲ´基を意味し、式中、Ｒ´は本明細書で定義されるアルキルを表す。
【００３２】
「ジアルキルアミノ」とは、―ＮＲＲ´基を意味し、式中、Ｒ及びＲ´は、独立して、本明細書で定義されるアルキルを表す。
【００３３】
「ヒドロキシル」とは、―ＯＨ基を意味する。
【００３４】
「カルボキシル」とは、以下の基を意味する。
【化２４】
2013544786.tif 000025
【００３５】
「アルコキシカルボニル」とは、以下の基を意味する。
【化２５】
2013544786.tif 000026
【００３６】
式中、Ｒは、本明細書で定義されるアルキルを表す。
【００３７】
「薬学的に許容しうる塩」とは、化合物に対する生物学的効果を保持した、毒性がないか又はその反対に薬学的な使用に対して有害な、前記化合物の任意の塩を意味し、これらの塩は、当該技術分野において公知の有機及び無機対イオンから誘導可能である。
【実施例】
【００３８】
合成実施例
本発明を、以下の非限定的な合成実施例により説明する。
【００３９】
特に明記しない限り、合成実施例において、以下の化学略語を使用する：
Ａｃ：アセトン
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＬＤＡ：リチウムジイソプロピルアミド
Ｍｅ：メチル
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
【００４０】
特許請求される式（Ｉ）の化合物の出発材料である、Ｃｓ骨格は、当該技術分野において利用可能な合成スキームおよび試薬を使用して調製することができ、商業的な供給業者から入手してもよい。本発明の新規化合物の合成のために使用する試薬もまた、商業的な供給業者から入手することができる。
【００４１】
合成実施例１
［（Ｒ）−（３−モルホリン−４−イル−プロピルチオ）−Ｓａｒ］３シクロスポリンＡ
ステップ１：トルエン−４−チオスルホン酸Ｓ−（３−クロプロピル）エステルの合成：
【化２６】
2013544786.tif 000027
チオトシル酸カリウム（５０．０ｇ、２２１ｍｍｏｌ、１．０当量）および１−ブロモ−３−クロロプロパン（３８．０ｇ、２４１ｍｍｏｌ、１．０９当量）を、室温で７２時間、アセトン（１Ｌ）中で、ともに撹拌した。次いで混合物を濃縮した。次に、混合物をジクロロメタンと水の間に分配した。有機溶液をブラインで洗浄し（２×）、ＭｇＳＯ４を使用して乾燥し、濃縮し、トルエンとともに共沸させ、重量５４ｇ（９２％）の、淡黄色の油を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣＬ３、ｐｐｍ）δ７．８４（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．３７（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．５９（ｔ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、２Ｈ）、３．１５（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、２Ｈ）、２．４８（ｓ、３Ｈ）、２．１４（ｍ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、２Ｈ）。
【００４２】
ステップ２：トルエン−４−チオスルホン酸Ｓ−（３−モルホリン−４−イル−プロピル）エステルの合成
【化２７】
2013544786.tif 000028
トルエン−４−チオスルホン酸Ｓ−（３−クロロ−プロピル）エステル（６１．７ｇ、２３３ｍｍｏｌ、１．００当量）、モルホリン（２２．２ｇ、２５５ｍｍｏｌ、１．０９当量）および炭酸カリウム（３３．８ｇ、２４０ｍｍｏｌ、１．０６当量）を、アセトニトリル（１Ｌ）中、５０℃で６４時間、ともに撹拌した。混合物を濃縮し、次いで酢酸エチルと水の間に分配した。有機溶液を水で洗浄し（２×）、ＭｇＳＯ４を使用して乾燥し、濃縮して、重量６１．５ｇ（８４％）の淡黄色の油を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３、ｐｐｍ）δ７．８３（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、７．３６（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．６８（ｔ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、４Ｈ）、３．０７（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、２Ｈ）、２．４７（ｓ、３Ｈ）、２．３９−２．３３（ｍ、６Ｈ）、１．８４（ｍ．６．７Ｈｚ、２Ｈ）。
【００４３】
ステップ３：［（Ｒ）−（３−モルホリン−４−イル−プロピルチオ）−Ｓａｒ］３シクロスポリンＡの合成
【化２８】
2013544786.tif 000029
まず、ジイソプロピルアミン（１３．３ｍｌ、９５ｍｍｏｌ、１０当量）を、−７８℃、窒素雰囲気下で、ＴＨＦ（２３８ｍｌ）中ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン類中２．５Ｍ、３８ｍｌ、９５ｍｍｏｌ、１０当量）溶液に添加し；得られた混合物を９０分間撹拌した。次に、ＴＨＦ（３８ｍｌ）中のシクロスポリンＡ（１１．４ｇ、９．５ｍｍｏｌ、１．０当量；トルエンとともに使用する直前に共沸乾燥した）溶液を混合物に添加し、それを次いで、同一の条件下（−７８℃、窒素雰囲気下にて）、２．５時間撹拌した。次いで、ＴＨＦ（５ｍｌ）中のトルエン−４−チオスルホン酸Ｓ−（３−モルホリン−４−イル−プロピル）エステル（１３．５ｇ、４２．８ｍｍｏｌ、４．５当量）を添加し；得られた混合物を、２時間撹拌しながら、室温まで昇温させた。続いて、混合物を−２０℃まで冷却し、酢酸（６．０ｍｌ、１０５ｍｍｏｌ、１１当量）を添加した。混合物を一晩、室温まで昇温させた。混合物から溶媒を蒸発させた後、得られた混合物を、酢酸エチルと飽和塩化アンモニウム溶液の間に分配した。有機相を、最初に塩化アンモニウム溶液で、次いでブラインで洗浄し；ＭｇＳＯ４を使用して乾燥し、濃縮した。粗成生物を、ＭＰＬＣ（ＳｉＯ２、ジエチルエーテル、次いで５％メタノール／９５％ジエチルエーテル、次いで５％（１０％アンモニア水／９０％メタノール）／９５％ジエチルエーテル）により精製した。得られた材料を、ＨＰＬＣ（ＳｉＯ２、４．５％ＭｅＯＨ／９５．５％ジクロロメタン）によりさらに精製し、８００ｍｇ（６％）の白色非晶質の固体を得た。
ＥＳＭＳＭＨ＋１３６１．９．
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、ｐｐｍ、診断用プロトン）δ７．９５（ｄ、Ｊ＝１０Ｈｚ、１Ｈ、アミド  ＮＨ）、７．６９（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、１Ｈ、アミド  ＮＨ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、１Ｈ、アミド  ＮＨ）、７．１７（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、１Ｈ、アミド  ＮＨ）、５．９７（ｓ、１Ｈ、サルコシン  Ｈ）。
【００４４】
合成実施例２
［（Ｒ）−（３−エチルイソプロピルアミノ−プロピルチオ）−Ｓａｒ］３シクロスポリンＡ
ステップ１：トルエン−４−チオスルホン酸Ｓ−［３（エチルイソプロピルアミノ）−プロピル］エステルの合成
【化２９】
2013544786.tif 000030
トルエン−４−チオスルホン酸Ｓ−（３−クロロ−プロピル）エステル（１２．０ｇ、４５．３ｍｏｌ、１．００当量）、Ｎ−エチルイソプロピルアミン（４．２ｇ、４８．０ｍｍｏｌ、１．０５当量）および炭酸カリウム（６．９ｇ、４９．９ｍｍｏｌ、１．１０当量）を、アセトニトリル（１６０ｍＬ）中、６０℃で１８時間、ともに撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、残渣を、酢酸エチル（５００ｍＬ）と水（２５０ｍＬ）の間に分配した。有機溶液をブライン（２５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、得られた油を、ＭＰＬＣクロマトグラフィーにより精製して、重量２．９８ｇ（２１％）の油を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、ｐｐｍ）δ７．８３（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、２Ｈ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、２Ｈ）、３．０８（ｔ、Ｊ＝７Ｈｚ、２Ｈ）、２．８８（ｍ、Ｊ＝７Ｈｚ、１Ｈ）、２．４８（ｓ、３Ｈ）、２．３９（ｍ、４Ｈ）、１．７５（ｍ、Ｊ＝７Ｈｚ、２Ｈ）、０．９５（ｔ、７Ｈｚ、２Ｈ）、０．９０（ｄ．７Ｈｚ、６Ｈ）。
【００４５】
ステップ２：［（Ｒ）−（３−エチルイソプロピルアミノ−プロピルチオ）−Ｓａｒ］３シクロスポリンＡ
【化３０】
2013544786.tif 000031
まず、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン類中１．６Ｍ、１７．５ｍｌ、２８ｍｍｏｌ、１０当量）を、ＴＨＦ（７０ｍｌ）中ジイソプロピルアミン（３．９２ｍｌ、２８ｍｍｏｌ、１０当量）溶液に、０℃で滴加した（窒素雰囲気下にて）。混合物を、−１０℃で３０分間撹拌し、窒素雰囲気下で−７８℃まで冷却した。
【００４６】
次に、ＴＨＦ（１０ｍｌ）中のシクロスポリンＡ（３．３５ｇ、２．８ｍｍｏｌ、１．０当量；トルエンとともに使用する直前に共沸乾燥した）溶液を添加し、反応混合物を、同一の条件下で、２．５時間撹拌した。次いで、ＴＨＦ（１０ｍｌ）中のトルエン−４−チオスルホン酸Ｓ−［３−（エチルイソプロピルアミノ）−プロピル］エステル（４．４ｇ、１３．９ｍｍｏｌ、５．０当量）を添加し、得られた混合物を室温まで昇温させ、１時間撹拌した。混合物を−７８℃まで冷却し、その後酢酸（１．８ｍｌ、３１ｍｍｏｌ、１１当量）をそれに添加し；混合物を一晩、室温まで昇温させた。溶媒を蒸発させ、得られた混合物を、酢酸エチル（６００ｍＬ）および飽和塩化アンモニウム溶液（３００ｍｌ）の間に分配した。有機相を、最初に塩化アンモニウム溶液（２×２００ｍｌ）で、次いで水（２００ｍｌ）で洗浄し；ＭｇＳＯ４を使用して乾燥し、減圧下で濃縮して、粘性油を得た。
【００４７】
粗成生物を、ＭＰＬＣ（ＳｉＯ２、酢酸エチル、次いで１０％メタノール／９０％酢酸エチル、次いで１０％（メタノール中７Ｍアンモニア）／９０％酢酸エチル）、ヘキサンを用いた摩砕（過剰な試薬の除去）、ＳＣＸカラムの使用（残存ＣｓＡの除去）、および最終的にＨＰＬＣ（ＳｉＯ２、４．５％ＭｅＯＨ／９５．５％ジクロロメタン）により精製し、３８５ｍｇ（１０％）の白色非晶質の固体を得た。
ＥＳＭＳ  ＭＨ＋１３６２．１
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３、ｐｐｍ、診断用プロトン）δ７．９５（ｄ、Ｊ＝１０Ｈｚ、１Ｈ、アミド  ＮＨ）、７．６８（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、１Ｈ、アミド  ＮＨ）、７．３２（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、１Ｈ、アミド  ＮＨ）、７．１８（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、１Ｈ、アミド  ＮＨ）、５．８７（ｓ、１Ｈ、サルコシン  Ｈ）。
【００４８】
合成実施例３
［（Ｒ）−（３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−プロピルチオ）−Ｓａｒ］３シクロスポリンＡ
ステップ１：トルエン−４−チオスルホン酸Ｓ−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−プロピル］エステルの合成
【化３１】
2013544786.tif 000032
トルエン−４−チオスルホン酸Ｓ−（３−クロロ−プロピル）エステル（４．９ｇ、１８．４ｍｏｌ、１．００当量）、Ｎ−メチルピペラジン（１．９ｇ、１９．３ｍｍｏｌ、１．０５当量）および炭酸カリウム（２．７ｇ、１９．４ｍｍｏｌ、１．０５当量）を、室温で６４時間、アセトニトリル（１００ｍＬ）中で一緒に撹拌した。混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチル（５００ｍｌ）と水（２５０ｍｌ）の間に分配した。有機溶液を水で洗浄し（２×２００ｍＬ）、ＭｇＳＯ４を使用して乾燥し、濃縮し、ＭＰＬＣにより精製して、重量２．１ｇ（３６％）の淡黄色の油を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、ｐｐｍ）δ７．８３（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、２Ｈ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、２Ｈ）、３．０５（ｔ、Ｊ＝７Ｈｚ、２Ｈ）、２．４７（ｓ、３Ｈ）、２．４１（広い、４Ｈ）、２．３５（ｔ、Ｊ＝７Ｈｚ、２Ｈ）、２．２９（ｓ、３Ｈ）、２．４７（ｓ、３Ｈ）、２．３９−２．３３（ｍ、６Ｈ）、１．８２（ｍ、７Ｈｚ、２Ｈ）。
【００４９】
ステップ２：［（Ｒ）−（３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−プロピルチオ）−Ｓａｒ］３シクロスポリンＡの合成
【化３２】
2013544786.tif 000033
まず、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン類中２．５Ｍ、１０．５ｍｌ、２６ｍｍｏｌ、１０当量）を、ＴＨＦ（７０ｍｌ）中ジイソプロピルアミン（３．７ｍｌ、２６ｍｍｏｌ、１０当量）溶液に、−７８℃で滴加した（窒素雰囲気下にて）。これらの同一条件下で、混合物を１時間撹拌した。
【００５０】
ＴＨＦ（１５ｍｌ）中のシクロスポリンＡ（３．２ｇ、２．６ｍｍｏｌ、１．０当量；トルエンとともに使用する直前に共沸的に乾燥した）溶液を混合物に添加し、混合物を同一の条件下で、２時間撹拌した。次いでＴＨＦ（１５ｍｌ）中のトルエン−４−チオスルホン酸Ｓ−［３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−プロピル］エステル（４．３ｇ、１３ｍｍｏｌ、５当量）を添加し、得られた混合物を室温まで昇温させ、９０分間撹拌した。混合物を−７０℃まで冷却し、その後、酢酸（１．６６ｍｌ、３０ｍｍｏｌ、１１当量）を添加した。混合物を一晩、室温まで昇温させた。次に、混合物から溶媒を蒸発させ、得られた混合物を、酢酸エチル（５００ｍＬ）と飽和塩化アンモニウム溶液（２５０ｍＬ）の間に分配した。有機相を、最初に塩化アンモニウム溶液（２００ｍＬ）で、次いでブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４を使用して乾燥し、減圧下で濃縮した。
【００５１】
粗成生物を、ＭＰＬＣ（ＳｉＯ２、ジエチルエーテル、次いで１０％メタノール／９０％ジエチルエーテル、次いで１０％（１０％アンモニア水／９０％メタノール）／９０％ジエチルエーテル）、ヘキサンを用いた摩砕（過剰な試薬の除去）、ＳＣＸカラムの使用（残存ＣｓＡの除去）、および最終的にＨＰＬＣ（ＳｉＯ２、６％ＭｅＯＨ／９４％ジクロロメタン）により精製し、白色非晶質の固体を得た。
ＥＳＭＳ  ＭＨ＋１３７４．８９．
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３、ｐｐｍ、診断用プロトン）δ７．９２（ｄ、Ｊ＝１０Ｈｚ、１Ｈ、アミド  ＮＨ）、７．６７（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、１Ｈ、アミド  ＮＨ）、７．３０（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、１Ｈ、アミド  ＮＨ）、）、７．１８（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、１Ｈ、アミド  ＮＨ）、５．８６（ｓ、１Ｈ、サルコシン  Ｈ）。
【００５２】
試験データ
安定性データ
式（Ｉ）の化合物は、メタノール性溶液中で安定を維持するという優位性を示す。これは、式（Ｉ）の化合物を含む製剤が、望ましい保存可能期間を有することを示し、これは、このような薬剤が、通常、液剤、ゲル剤等として製剤されるため、眼用薬剤にとって重要である。本発明の化合物の実施例１〜３の安定性を示すために、それらのＭｅＯＨ中でのエピマー化のデータを、以下の表１の［（Ｒ）−（３−ジエチルアミノエチルチオ−Ｓａｒ］３シクロスポリンＡのデータと比較した。
【００５３】
表１
【表１】
2013544786.tif 000034
【００５４】
［（Ｒ）−（３−ジエチルアミノエチルチオ−Ｓａｒ］３シクロスポリンＡが、本発明の実施例１〜３と類似する生物活性（以下の表２を参照）を有するにもかかわらず、ここに提示されるデータは、実施例１〜３の化合物が、溶液中において、有意により安定であることを示している。［（Ｒ）−（３−ジエチルアミノエチルチオ）−Ｓａｒ］３シクロスポリンＡは、水性およびメタノール性溶液の両方において不安定であり、急速にエピマー化して、Ｒ−およびＳ−異性体の混合物を生じることがわかった。メタノール性溶液中、平衡比は約４：１  Ｒ／Ｓである。エピマー化の相対的比率の分析は、５００ＭＨｚ  ｎｍｒスペクトルの比較により実施した。サルコシン中心（硫黄原子に隣接した）に結合したプロトンは、Ｒ−異性体中では約δ５．９で出現し、一方Ｓ−異性体中では、約δ６．５まで低磁場移動する。
【００５５】
表２
【表２】
2013544786.tif 000035
【００５６】
データ取得のために行った基本手順：
＊メタノール中、５０℃にて実施した。変換率は５００ＭＨｚ  ＮＭＲにより測定した。
**プロテアーゼ不含ＰＰｌａｓｅアッセイ
プロテアーゼ不含ＰＰｌａｓｅアッセイは、酵素シクロフィリンＡによって触媒されたペプチド基質のシスからトランスへの変換率を測定する。阻害剤の添加が触媒される速度を遅らせ、Ｋｉ値が獲得される。
【００５７】
材料
アッセイ緩衝液：０．２μｍフィルタで濾過した、ｐＨ７．８の３５ｍＭ ＨＥＰＥＳ。５０μＭのＤＴＴを毎日使用前に加えて、緩衝液を氷蔵した。
酵素：ヒト組換えＣｙｐＡ（Ｓｉｇｍａ社  Ｃ３８０５）酵素を、酵素希釈緩衝液（ｐＨ７．８のＨＥＰＥＳ  ２０ｍＭ、４０％のグリセロール、５０μＭのＤＴＴ及び１μＭのＢＳＡ）で１Ｍに希釈して、−２０℃で保存した。
基質：ＳＵＣ―ＡＡＰＦ―ｐＮＡ（Ｂａｃｈｅｍ  ＡＧ社、Ｌ―１４００）２０ｍｇ／ｍｌを、０．５ＭのＬｉＣｌのトリフルオロエタノール溶液で調製した。
【００５８】
方法
攪拌されるキュベットの温度を１０．０±０．１℃に維持するために、キュベットホルダ、攪拌機及びチラーからなるＡｇｉｌｅｎｔ  ８４５３  Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒによって、すべての測定値を獲得した。温度は、温度プローブを用いてモニターされる。検査化合物のＵＶ劣化を防止するために、光路にガラススライドを使用して、２９０nm未満の光を遮断した。１．５ｍｌのアッセイ緩衝液を３ｍｌ石英キュベットに入れ、攪拌（活発だが、キャビテーションを生成するほど高速ではない）しながら１０．０の±０．１℃に冷却した。阻害剤を、１００％のＤＭＳＯで希釈し、続いて、ＤＭＳＯの最大最終濃度が分析物中０．５％となるまで、分析物に添加した。空試験のスペクトルを獲得し、続いて、３μＬの酵素を添加（２ｎＭの最終濃度）してから、３μＬの基質を添加（６０μＭの最終濃度）した。空試験用に、３００ｓ又は５００ｓの間、３３０nmで吸光度が測定された（注：混合誤差を最小にするため、１回の素早い注入で基質を添加し、直ちに測定が開始されなければならない）。
【００５９】
反応速度定数を得るために、一次反応速度式を、阻害剤のそれぞれの濃度に対する、吸光度データと適合させた（混合により、曲線の最初の誤差が生じるので、最初の１０から１５秒を除外した）。触媒反応速度を、酵素反応速度定数マイナスバックグラウンド反応速度定数で算出した。阻害剤濃度に対する触媒反応速度定数を使用して、指数曲線を作成し、阻害剤に対するＫｉ値を得た。
【００６０】
***カルシニューリンフォスファターゼ（ＣａＮ）アッセイ
カルシニューリンは、活性化すると活性化Ｔ細胞の核因子（ＮＦＡＴ）を脱リン酸化する、セリン―スレオニンタンパク質ホスファターゼであり、Ｔリンパ球の活性化において重要である。シクロフィリンＡ（「ＣｙｐＡ」）に結合したＣｓＡは、カルシニューリン活性を阻害し、結果として免疫抑制効果をもたらす。ＣｙｐＡに結合した場合にＣｓＡがカルシニューリンを阻害するだけでなく、いくつかのＣｓＡアナログは、ＣｙｐＡの不在下でカルシニューリンを結合する。シクロスポリンアナログである、式（Ｉ）の例示的な化合物の免疫抑制可能性を調べるために、カルシニューリンの活性を阻害する能力を、ＣｙｐＡの存在下及び不在下で測定した。
【００６１】
使用されるＣａＮアッセイキットは、カルシニューリンフォスファターゼの活性を測定するための比色アッセイに基づいており、市販されている（Ｅｎｚｏ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ社及びＣａｌｂｉｏｃｈｅｍ社）。カルモジュリンもまたカルシニューリンの活性のために必要とされ、ＲＩＩリンペプチドはカルシニューリンに効力のあるペプチド基質として使用される。阻害剤との１：１の複合体にＣｙｐＡを添加してＣｙｐＡ―依存性及びＣｙｐＡ―非依存性のカルシニューリン阻害の測定を可能にするために、我々は方法を修飾した。放出した遊離リン酸塩の検出は、標準的なマラカイトグリーンアッセイに基づく。
【００６２】
使用した材料
Ｅｎｚｏ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ社、ＣａＮアッセイキット：ＢＭＬ―ＡＫ８０４
２Ｘアッセイ緩衝液：ｐＨ７．５のトリス１００ｍＭ、２００ｍＭのＮａＣｌ、１２ｍＭのＭｇＣｌ２、１ｍＭのＤＴＴ、０．０５％のＮＰ―４０、１ｍＭのＣａＣｌ２）
マラカイトグリーン：ＢＩＯＭＯＬ  Ｇｒｅｅｎ（商標）試薬
カルモジュリン（ヒト、組換え体）：氷上で解凍して、２Ｘアッセイ緩衝液と１：５０で希釈してから、氷蔵した。
カルシニューリン：素早く解凍し、直ちに氷蔵してから、１Ｘアッセイ緩衝液と１：１２．５で希釈し、続いて氷蔵した。
ＲＩＩ基質：９１５μＬの超純水（ＵＰＷ）を、０．７５ｍＭの最終濃度まで、１．５ｍｇのバイアル基質に添加した。
阻害剤：１００％のＤＭＳＯ中に２．５ｍＭの阻害剤。
ＣｙｐＡ：組換え体ヒトＣｙｐ  Ａ（Ｓｉｇｍａ社  Ｃ３８０５）、１ｍｇ／ｍｌ
【００６３】
方法
阻害剤希釈；阻害剤化合物を、ポリプロピレン低結合性９６穴プレートで、ＵＰＷによって、最終アッセイ濃度５ｘで希釈した。『ＣｙｐＡなし』試料用に、１０、１、０.１及び０．０１μＭの最終アッセイ濃度を得るために、阻害剤の４点希釈列を２連で調整した。『ＣｙｐＡあり』試料用に、ＣｙｐＡと１：１の阻害剤の複合体を得るために、７点希釈列、つまり、１０、３．３３、１．１１、０．３７、０．１２、０．０４、０．０１４μＭの阻害剤とＣｙｐＡの最終アッセイ濃度を調整した。ＣｓＡ阻害剤コントロールも、１０μＭのＣｙｐＡありとなしで、１０μＭのＣｓＡの最終濃度を得るために、調整した。
【００６４】
アッセイの設置；キットに付属の９６穴プレートの半分のエリアを使用して、１０μｌのＵＰＷを、２つの穴に加えて、非阻害コントロールを提供する。１０μｌの阻害剤又は阻害剤／ＣｙｐＡ複合体を、適切な試料穴に加えた。２５μｌのＣａＭを有する２ｘアッセイ緩衝液を全ての穴に加えて、続いて５μｌの１ｘアッセイ緩衝液に加えた『カルシニューリンなしブランク』の２つの穴を除く全ての穴（穴当たり４０Ｕの最終濃度）に、５μｌのＣａＮを加えた。反応温度を平衡化するために、３０℃で１５分間オーブンにアッセイプレートを置いた。１０μｌのＲＩＩ―ペプチド（０．１５ｍＭの最終濃度）の添加によって、反応が開始した。反応が線形である約６０分間３０℃にて、この反応を進行させた。続いて、１００μｌのマラカイトグリーン試薬を加えることによって、反応を終了させた。室温で１５分から３０分間で発色させた後、プレートリーダ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ―ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ  Ｍ５）を使用して、６２０nmの吸光度を測定した。すべての吸光度の記録から『カルシニューリンなしブランク』を減算し、Ｌｏｇ１０阻害剤濃度に対するバックグラウンド修正吸光度をプロットして、データを分析した。 ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｓｏｆｔｗａｒｅを使用して、データをＳ字応答曲線に当てはめた(fitted)。
【００６５】
****混合リンパ球反応（「ＭＬＲ」）アッセイ
ＭＬＲアッセイは、検査化合物の免疫抑制可能性を推定する別の手段である。生後６週間から８週間目のＣ５７ＢＬ／６及びＢＡＬＢ／ｃ雌マウスを、国立癌研究所のＦｒｅｄｅｒｉｃｋ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ（フレデリック、メリーランド州）から入手した。脾臓をすべてのマウスから無菌で採取して、すりガラススライドを用いて細胞を分解し、破片を沈殿させて、完全培地を用いて細胞を２回洗浄することによって、単個細胞浮遊液を調製した。完全培地は、１０％の熱不活化ウシ胎児血清（ＦＢＳ；Ａｔｌａｎｔａ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ社、ローレンスヴィル、ジョージア州）、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン、１００Ｕ／ｍＬペニシリンＧ、０．２５μｇ／ｍＬアンフォテリシンＢ（ＨｙＣｌｏｎｅ社）、２ｍＭのＬグルタミンジペプチド（ＨｙＣｌｏｎｅ社）及び２×１０-５Ｍの２―メルカプトエタノール（シグマ社）を添加した２５ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液（ＨｙＣｌｏｎｅ社、ローガン、ユタ州）を含有しているＲＰＭＩ１６４０培地からなる。細胞を２回洗浄し、完全培地で再懸濁した。細胞数は、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｚー１粒子計数器（フラートン、カリフォルニア州）を使用して、計測された。細胞生存度は、ＡｃｃｕｒｉＣ６フローサイトメーター（アナーバー、ミシガン州）を使用したヨウ化プロピジウム（ＰＩ）染色によって、決定した。
【００６６】
Ｃ５７ＢＬ／６（Ｈ―２ｂ）及びＢＡＬＢ／ｃ（Ｈ―２ｄ）の脾細胞を、キラー（Ｒ）及び刺激（Ｓ）細胞として、それぞれ使用した。それぞれの穴が２×１０５個のＲ及び８×１０５個のＳ細胞を含有するように、細胞を、３連で９６穴平底ミクロタイタープレート（Ｃｏｓｔａｒ社、ケンブリッジ、マサチューセッツ州）にて培養した。培養物を、さまざまな濃度の検査化合物、ＣｓＡ又は培地の存在又は不在下で、３７℃で５日間、湿気を含む５％のＣＯ２中でインキュベートして、培養の最後の１６時間、３Ｈ―チミジン（３Ｈ―ＴｄＲ）でパルスラベルをしてから、Ｂｒａｎｄｅｌ  ９６穴細胞ハーベスタ（ゲイザースバーグ、メリーランド州）を使用して収集した。該増殖を、Ｗａｌｌａｃ  １４５０  Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ  ＴｒｉＬｕｘシンチレーションカウンタ（トゥルク、フィンランド）のフィルターマット上の放射活性を計算することで測定した。Ｘ線照射による効果的な失活を確認するためのコントロールは、２×１０５細胞／穴で５μｇ／ｍＬのＰＨＡと共にＳ細胞を培養することにより、実施された。これらのコントロール培養を、ＭＬＲのために説明された条件と同じ条件で、３日間行った。つまり、リンパ球増殖を、上記した方法と同様に決定した。
【００６７】
処置方法
本発明の組成物は、ドライアイに苦しんでいる患者を治療するため、眼瞼炎及びマイボーム腺疾患を処置するため、角膜又は眼の他の表面の手術により損なわれた角膜感度を復元するため、アレルギー結膜炎並びにアトピー性角結膜炎及び春季カタルを処置するため、翼状頸、対宿主性移植片病の眼の症状、眼アレルギー、アトピー性角結膜炎、春季カタル、ブドウ膜炎、前部ブドウ膜炎、ベーチェット病、スティーブンスジョンソン症候群、眼類天疱瘡、ウイルス感染によって引き起こされる慢性眼表面炎症、単純ヘルペス角膜炎、眼酒さ、結膜脂肪斑を処置するため、および角膜移植拒絶反応を防止するために用いられてもよい。
【００６８】
国際ドライアイワークショップ（ＤＥＷＳ）は、ドライアイを「不安、視覚障害、及び、眼表面への潜在的損害を伴う涙液膜の不安定の症状を引き起こす、涙液及び眼表面の多因子病。涙液膜の増加したモル浸透圧濃度及び眼表面の炎症を伴う」と定義する。涙液の欠乏又は涙液の過度の蒸発によって引き起こされる乾性角結膜炎などの状態も含まれる。
【００６９】
眼瞼炎は、皮膚、それと関係した構造（毛髪及び皮脂腺）、粘膜皮膚移行部及びマイボーム腺を含んだ、上及び下まぶた辺縁の炎症を引き起こす慢性疾患である。進行期には、結膜、涙液膜及び角膜面に影響を及ぼすことも可能で、ドライアイと関連する場合がある。眼瞼の睫毛を支える領域に影響を及ぼしている上部、及び、主としてマイボーム腺開口部に影響を及ぼしている下部を有する、上部又は下部眼瞼炎に、眼瞼炎は一般に分類される。
【００７０】
マイボーム腺疾患は、ほとんどの場合、一次性マイボーム腺炎、二次性マイボーム腺炎及びマイボーム脂漏症の、３つの形のうちの１つとして生じる。マイボーム脂漏症は、炎症のない、過度のマイボーム分泌によって特徴づけられる（分泌過剰マイボーム腺疾患）。一次性マイボーム腺炎は、対照的に、停滞して濃化したマイボーム分泌によって特徴づけられる（閉塞性分泌過剰マイボーム腺疾患）。二次性マイボーム腺炎は、マイボーム腺が上部蓋辺縁眼瞼炎から二次的に、炎症を斑状に起こす限局性炎症反応を表す。
【００７１】
角膜感度障害は、多くの場合、光反応角膜整形手術、レーザーアシスト上皮下角膜曲率形成術（ＬＡＳＥＫ）、ＥＰＩ―ＬＡＳＥＫ、カスタマイズされた経上皮非接触切除又は角膜神経が切断される他の方法などの、屈折矯正手術の後に生じる。角膜感度障害は、ＨＳＶ―１、ＨＳＶ―２及びＶＺＶウイルスなどによる、ウイルス感染の後生じる場合もある。角膜感度障害を有する患者は、涙液産生及び蒸発が正常な場合であっても、眼が乾燥すると感じると多くの場合訴える。これは、角膜神経が手術によって切断されるか又はウイルス感染の後炎症を起こす場合に生じるこのような患者の「乾燥」が、実際に角膜神経障害の場合があることを示唆している。
【００７２】
アレルギー結膜炎は、１つ以上のアレルゲンに対する過敏症から生じる結膜の炎症である。これは、急性、間欠性又は慢性の場合がある。これは、季節的に、つまり年の一定の時にだけ生じるか、又は、絶え間なく、つまり年の全体にわたって慢性的に生じる。季節的及び永続的なアレルギー結膜炎の症状としては、結膜の炎症に加えて、催涙、流涙、結膜血管の拡張、痒み、乳頭状過形成、結膜水腫、眼瞼の浮腫及び眼からの分泌が挙げられる。分泌は、一晩の睡眠の後、眼の上に痂皮を形成する場合がある。
【００７３】
アトピー性角結膜炎は、アレルギー結膜炎の慢性、重度な形で、多くの場合視覚的な障害をもたらす。症状としては、痒み、灼熱感、疼痛、発赤、異物感、光感受性及び視界不良が挙げられる。特に一晩の睡眠から目ざめると、多くの場合、分泌をし、この分泌は、粘状、糸状そして粘液状となり得る。下結膜は、多くの場合、上結膜より顕著に影響を受ける。結膜は、蒼白色、浮腫状及び特徴のない状態から、乳頭増殖、上皮下の繊維増多、結膜嚢短縮、逆さ睫毛、眼瞼内反及び睫毛禿といった、進行疾患の特徴を有する場合まで変化する。患者によっては、斑点状上皮糜爛、角膜血管新生及び視野を損なう可能性のある角膜症の他の特性にまで、疾患は進行する。通常は、結膜の杯状細胞増殖、上皮偽管形成、並びに、増加した上皮の脱顆粒した好酸球及び肥満細胞が認められる。ＣＤ２５＋Ｔリンパ球、マクロファージ及び樹状細胞（ＨＬＡ―ＤＲ．ｓｕｐ．＋、ＨＬＡ―ＣＤ１＋）が、角膜固有質において著しく上昇する。
【００７４】
アトピー性角結膜炎のように、春季カタルは、アレルギー結膜炎の重度な形であるが、下結膜より上結膜に顕著に影響を及ぼす傾向にある。それは、２つの型で生じる。眼瞼型では、四角で、硬質な、平らに、密接して詰め込まれた乳頭突起が現れる。眼球（角膜輪部）型では、角膜周囲の結膜が、肥大し、灰色がかる。両方の型とも、多くの場合、粘液様分泌物を伴う。疼痛及び羞明、場合によっては中央の角膜プラーク及びトランタス斑点を伴って、角膜上皮の喪失が生じる場合がある。
【００７５】
ブドウ膜炎（ブドウ膜の炎症）は、米国の視覚障害の約１０％の原因となる。水晶体過敏性眼内炎は、ヒト自己免疫性疾患である。全ブドウ膜炎は、眼のすべてのブドウ膜（血管）層の炎症を意味する。後部ブドウ膜炎は網脈絡膜炎を一般に意味し、前部ブドウ膜炎は虹彩毛様体炎を意味する。これらの炎症の炎症産物（すなわち、細胞、フィブリン、過剰タンパク質）は、眼の場合には、流体空間内、すなわち、前房、後房及び硝子体空間内に一般に見いだされ、炎症反応に密に関係した組織を浸潤する。ブドウ膜炎は、眼に対する外科手術又は外傷による傷害後に、関節リウマチ、ベーチェット病、強直性脊椎炎、サルコイドーシスなどの、自己免疫疾患の構成要素として、既知の病因に関連していない、扁平部炎、虹彩毛様体炎などの、孤立した免疫介在性眼疾患として、そして、抗体抗原複合体をブドウ膜組織内に堆積させる以下の一定の全身性疾患後に、生じ得る。これらの疾患は、合わせて、非伝染性ブドウ膜炎を表す。
【００７６】
水晶体アナフィラキシーは、水晶体が原因抗原であるブドウ膜炎の重度の形である。水晶体タンパク質は、一般に、出生前から水晶体嚢によって隔離されている。これらのタンパク質が、損傷若しくは手術によって、又は、稀に白内障発症のときに眼内に放出された場合、これらのタンパク質は抗原性が激しくなり、自己免疫反応を刺激し得る。反応が中程度である場合、慢性ブドウ膜炎とみなされる。反応が非常に早く進行する場合、眼は、すべての部分において重度の炎症を起こす。この後者の反応が、水晶体アナフィラキシーと呼ばれている。
【００７７】
ブドウ膜炎は、ベーチェット病の顕著な特徴で、口腔及び生殖器潰瘍、皮膚、血管、関節及び神経の兆候によっても特徴づけられる多系統炎症性疾患である。
【００７８】
酒さは、特定の原因又は治療法のない、慢性及び一般的な外皮疾患である。
酒さの発生は、複数の要因があると考えられる。可能性のある要因としては、ニキビダニとの接触、胃腸疾患又は血管拡張疾患、及び、食餌又は日光などの他のトリガが挙げられる。患者は、炎症性丘疹、浮腫、毛細血管拡張、鼻瘤及び眼の症状といった、さまざまな症状を呈する。酒さの眼の兆候としては、前部眼瞼炎といった眼瞼炎、結膜炎、虹彩炎、虹彩毛様体炎、角膜炎、マイボーム腺機能不全、毛細血管拡張、紅斑、霰粒腫、麦粒腫、眼瞼間充血、結膜充血、毛様体充血、眼球充血、痂皮、スリーブ及び表面的で断続的な角膜症が挙げられる。眼の症状は非特異的で、灼熱感、流涙、涙液分泌の低下、発赤、及び、異物感又はざらつき感又は乾燥感、刺激、痒み、霧視、光線過敏、涙目、充血した眼、灼熱感、毛細血管拡張、眼瞼縁の不規則性並びにマイボーム腺機能不全が挙げられる。
【００７９】
結膜脂肪斑は、結膜に生じる、良性の、黄褐色の増殖成長である。結膜脂肪斑は、眼の刺激及び痒み、ドライアイ、結膜の炎症を引き起こし、眼の外見に影響を与える場合がある。炎症を起こした結膜脂肪斑は、眼の刺激を引き起こすか又は見苦しくなり、外科的な除去を必要とする場合もある。しかしながら、術後の瘢痕は結膜脂肪斑と同じように美容的に好ましくなく、外科的な除去後に結膜脂肪斑再生物が生じる場合がある。
【００８０】
同種骨髄移植（ＢＭＴ）は、悪性及び非悪性血液病のための確立した処置で、何万もの患者に毎年実施される。幹細胞移植片中の成熟したドナーＴ細胞は、有益な免疫効果の主要な媒介物であるが、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）の誘発、ＢＭＴ患者の罹患率及び死亡率の大きな原因ともなる。寛容する抗原提供細胞によって発現されたタンパク質を、移植されたドナー由来Ｔ細胞が認識するときに、ＧＶＨＤは生じる。したがって、この認識は、ドナーＴ細胞の活性化、増殖及び分化を誘発し、結果として寛容する標的組織への細胞性及び炎症性の攻撃をもたらす。皮膚炎、腸炎及び肝炎をもたらす急性又は慢性ＧＶＨＤが、ＢＭＴ後１００日以内に、生じる。眼の症状としては、視覚不良、異物感、灼熱感、重度の光過敏、慢性結膜炎、ドライアイ及び眼痛が挙げられる。
【００８１】
医薬組成物
本発明は、また、少なくとも１つの一般式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物に関する。この化合物は、単独、又は、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤と組み合わされて存在する。「薬学的に許容される賦形剤」は、組成物の有効成分と両立し、医薬組成物を投与される人に有害でないものである。このような適した賦形剤が２つ以上の混合物が、使用されてもよい。
【００８２】
局所的な眼での適用のために、活発成分として、治療上有効量の本発明の化合物、又は、薬学的に許容されるこれらの塩を、従来の眼科学的に許容できる医薬品賦形剤と組み合わせて、局所的な眼での使用に適したユニット剤形での調製により、医薬組成物を調製することができる。治療上有効量は、通常、液体製剤中約０.０００１から５％（ｗ／ｖ）の間、好ましくは約０.００１から１.０％（ｗ／ｖ）である。本発明の有効な化合物の有効量は、特定の化合物、及び、処置される状態に依存する。適切な量の選択は、十分に、当業者の知識の範囲内である。
【００８３】
米国特許Ｎｏ．５，４７４，９７９は、そのすべての内容が参照により本明細書に組み込まれるが、眼科学的に許容できる医薬品賦形剤の例を提供する。この特許は、Ａｌｌｅｒｇａｎ社によって製造されたＲｅｓｔａｓｉｓ（登録商標）、シクロスポリンＡ ０．０５％で使用される賦形剤を開示する。
【国際調査報告】
2013544786.tif 000039
2013544786.tif 000040