(57)【要約】  低レベルのグリシドールエステルを有する植物油が開示される。食用油中のグリシドールエステル含量を低下させる方法もまた開示される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
グリシジルエステルを油から除去する方法であって、
前記油を吸着材に接触させるステップと、
引き続いて前記油を蒸気精製するステップと
を含むことを特徴とする方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法において、
前記油を蒸気精製するステップが、脱臭および物理精製の少なくとも１つを含んでなることを特徴とする方法。
【請求項３】
請求項１に記載の方法において、
前記吸着材が、ケイ酸マグネシウム、シリカゲル、および漂白土からなる群から選択される少なくとも１つの材料を含んでなることを特徴とする方法。
【請求項４】
グリシジルエステルを油から除去する方法であって
前記油を酵素に接触させるステップと、
引き続いて前記油を蒸気精製するステップと
を含んでなることを特徴とする方法。
【請求項５】
請求項４に記載の方法において、
前記油を酵素に接触させるステップが、加水分解、エステル化、エステル交換、酸分解、エステル交換、およびアルコール分解からなる群から選択される少なくとも１つの反応を含んでなることを特徴とする方法。
【請求項６】
グリシジルエステルを油から除去する方法であって、
前記油を２４０℃以下の温度で脱臭するステップを含んでなることを特徴とする方法。
【請求項７】
請求項６に記載の方法において、
前記油が、パーム油、パーム画分、パームオレイン、パームステアリン、コーンオイル、ダイズ油、エステル化油、エステル交換油、化学的エステル交換油、およびリパーゼ接触油からなる群から選択される少なくとも１つの油を含んでなることを特徴とする方法。
【請求項８】
グリシジルエステルを油から除去する方法であって、
エタノール散布、二酸化炭素散布、および窒素散布からなる群から選択される少なくとも１つの散布によって、前記油を脱臭するステップを含んでなることを特徴とする方法。
【請求項９】
グリシジルエステルを油から除去する方法であって、
前記油を、酸を含んでなる溶液と接触させるステップを含んでなることを特徴とする方法。
【請求項１０】
請求項９に記載の方法において、
前記溶液が、少なくともリン酸を含んでなることを特徴とする方法。
【請求項１１】
請求項９に記載の方法において、
前記油を前記溶液と接触させるステップが、前記油と前記溶液を剪断混合するステップを含んでなることを特徴とする方法。
【請求項１２】
グリシジルエステルを脱色油から除去する方法であって、
前記油を再脱色するステップを含んでなることを特徴とする方法。
【請求項１３】
請求項１２に記載の方法において、
前記脱色油が、精製脱色油、精製脱色脱臭油、および化学的エステル交換油からなる群から選択される少なくとも１つの油を含むことを特徴とする方法。
【請求項１４】
請求項１２に記載の方法において、
前記油を再脱色するステップに引き続いて、前記油を脱臭するステップをさらに含んでなることを特徴とする方法。
【請求項１５】
請求項１４に記載の方法において、
前記油を脱臭するステップが、１５分間以下実施されることを特徴とする方法。
【請求項１６】
請求項１４に記載の方法において、
前記油を脱臭するステップが、２１０℃以下の温度で実施されることを特徴とする方法。
【請求項１７】
グリシジルエステルを油から除去する方法であって、
前記油を吸着材に接触させるステップを含んでなることを特徴とする方法。
【請求項１８】
組成物であって、
０．１ｐｐｍ未満のグリシジルエステルレベルを有する物理精製パーム油を含んでなることを特徴とする組成物。
【請求項１９】
組成物であって、
０．１ｐｐｍ未満のグリシジルエステルレベルを有するパームオレインを含んでなることを特徴とする組成物。
【請求項２０】
組成物であって、
０．３ｐｐｍ未満のグリシジルエステルレベルを有する物理精製パームオレインを含んでなることを特徴とする組成物。
【請求項２１】
組成物であって、
０．１ｐｐｍ未満のグリシジルエステルレベル、
２．０以下のロビボンド赤色値、
２０．０以下のロビボンド黄色値、および
０．１％未満の遊離脂肪酸含量
を含んでなる再脱色再脱臭油を含んでなることを特徴とする組成物。
【請求項２２】
請求項２１に記載の組成物において、
前記再脱色再脱臭油が、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｏｉｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｓ’ＳｏｃｉｅｔｙのＣｇ−２−８３法に合格する香味をさらに含んでなることを特徴とする組成物。
【請求項２３】
組成物であって、
液体クロマトグラフィー飛行時間質量分光分析法による測定で、０．２ｐｐｍ未満のグリシジルエステルレベル、
３．０以下のロビボンド赤色値、および
０．１％未満の遊離脂肪酸
を含んでなる再脱色蒸気蒸留パーム油を含んでなることを特徴とする組成物。
【請求項２４】
組成物であって、
０．２ｐｐｍ未満のグリシジルエステルレベル、
４．０以下のロビボンド赤色値、および
０．１％未満の遊離脂肪酸
を含んでなる再脱色蒸気蒸留パームステアリンを含んでなることを特徴とする組成物。
【請求項２５】
組成物であって、
１．０ｐｐｍ未満のグリシジルエステルレベルを有する脱色リパーゼ接触油を含んでなることを特徴とする組成物。
【請求項２６】
請求項２５に記載の組成物において、
前記脱色リパーゼ接触油が脱臭されていることを特徴とする組成物。
【請求項２７】
組成物であって、
１．０ｐｐｍ未満のグリシジルエステルレベルを有する蒸気精製エステル化油を含んでなることを特徴とする組成物。
【請求項２８】
グリシジルエステルを脱色油から除去する方法であって、
水を前記油中に混合するステップと、
前記油を再脱色するステップと
を含んでなることを特徴とする方法。
【請求項２９】
グリシジルエステルをモノアシルグリセロールに変換する方法であって、
水を前記油中に混合するステップと、
前記油を再脱色するステップと
を含んでなることを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００９年１２月４日に出願された米国仮特許出願第６１／２６６，７８０号明細書および２０１０年７月１２日に出願された米国仮特許出願第６１／３６３，３００号明細書の優先権を主張する。
【０００２】
グリシドールエステルは、植物油中に発見されている。このような植物油の消化中に、グリシドールエステルは、既知の発癌性物質であるグリシドールを放出するかもしれない。本発明は、低レベルのグリシドールエステルを有する植物油、ならびにグリシドールエステルを油から除去する方法を提供する。
【０００３】
本開示の非限定的一態様は、油を吸着材に接触させるステップと、引き続いて油を蒸気精製するステップを含む、グリシジルエステルを油から除去する方法を対象とする。方法の特定の非限定的実施形態では、油を蒸気精製するステップは、脱臭および物理精製の少なくとも１つを含む。また方法の特定の非限定的実施形態では、吸着材は、ケイ酸マグネシウム、シリカゲル、および漂白土から選択される材料の少なくとも１つを含んでなる。
【０００４】
本開示の追加的非限定的態様は、油を酵素に接触させるステップと、引き続いて油を蒸気蒸留するステップを含む、グリシジルエステルを油から除去する方法を対象とする。方法の特定の非限定的実施形態では、油を酵素に接触させるステップは、加水分解、エステル化、エステル交換、酸分解、エステル交換、およびアルコール分解から選択される、少なくとも１つの反応を含む。
【０００５】
本開示の別の非限定的態様は、２４０℃以下の温度で油を脱臭するステップを含む、グリシジルエステルを油から除去する方法を対象とする。方法の特定の非限定的実施形態に従って、油は、パーム油、パーム画分、パームオレイン、パームステアリン、コーンオイル、ダイズ油、エステル化油、エステル交換油、化学的エステル交換油、およびリパーゼ接触油から選択される少なくとも１つの油を含む。
【０００６】
本開示のさらに別の非限定的態様は、エタノール散布、二酸化炭素散布、および窒素散布から選択される少なくとも１つの散布を用いて油を脱臭するステップを含む、グリシジルエステルを油から除去する方法を対象とする。
【０００７】
本開示のさらなる非限定的態様は、油を酸を含む溶液と接触させるステップを含む、グリシジルエステルを油から除去する方法を対象とする。方法の特定の非限定的実施形態では、溶液はリン酸を含んでなる。また方法の特定の非限定的実施形態では、油を溶液と接触させるステップは、油と溶液を剪断混合するステップを含む。
【０００８】
本開示のなおもさらなる非限定的態様は、油を再脱色するステップを含む、グリシジルエステルを脱色油から除去する方法を対象とする。方法の特定の非限定的実施形態では、脱色油は、精製脱色油、精製脱色脱臭油、および化学的エステル交換油の少なくとも１つを含む。また方法の特定の非限定的実施形態では、方法は、油を再脱色するステップに引き続いて、油を脱臭するステップを含む。
【０００９】
本開示のなおもさらなる非限定的態様は、油を吸着材に接触させるステップを含む、グリシジルエステルを油から除去する方法を対象とする。
【００１０】
本開示の別の非限定的態様は、液体クロマトグラフィー飛行時間質量分光分析による測定で０．１ｐｐｍ未満のグリシジルエステルレベルを有する物理精製パーム油を含む組成物を対象とする。
【００１１】
本開示の追加的非限定的態様は、液体クロマトグラフィー飛行時間質量分光分析による測定で０．１ｐｐｍ未満のグリシジルエステルレベルを有するパームオレインを含む組成物を対象とする。
【００１２】
本開示のさらなる非限定的態様は、液体クロマトグラフィー飛行時間質量分光分析による測定で０．３ｐｐｍ未満のグリシジルエステルレベルを有する物理精製パームオレインを含む組成物を対象とする。
【００１３】
本開示のなおもさらなる非限定的態様は、液体クロマトグラフィー飛行時間質量分光分析による測定で０．１ｐｐｍ未満のグリシジルエステルレベルと、２．０以下のロビボンド赤色値と、２０．０以下のロビボンド黄色値と、０．１％未満の遊離脂肪酸含量を含む、再脱色再脱臭油を含む組成物を対象とする。組成物の特定の非限定的実施形態では、再脱色再脱臭油はＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｏｉｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｓ’ＳｏｃｉｅｔｙのＣｇ−２−８３法に合格する香味を含む。
【００１４】
本開示のなおもさらなる非限定的態様は、液体クロマトグラフィー飛行時間質量分光分析法による測定で０．２ｐｐｍ未満のグリシジルエステルレベルと、３．０以下のロビボンド赤色値と、０．１％未満の遊離脂肪酸を含む、再脱色蒸気蒸留パーム油を含む組成物を対象とする。
【００１５】
本開示のさらに別の非限定的態様は、液体クロマトグラフィー飛行時間質量分光分析法による測定で０．２ｐｐｍ未満のグリシジルエステルレベルと、４．０以下のロビボンド赤色値と、０．１％未満遊の離脂肪酸を含んでなる、再脱色蒸気蒸留パームステアリンを含む組成物を対象とする。
【００１６】
本開示のさらなる非限定的態様は、液体クロマトグラフィー飛行時間質量分光分析による測定で１．０ｐｐｍ未満のグリシジルエステルレベルを含む、脱色リパーゼ接触油を含む組成物を対象とする。組成物の特定の非限定的実施形態では、脱色リパーゼ接触油は脱臭される。
【００１７】
本開示のなおもさらなる非限定的態様は、液体クロマトグラフィー飛行時間質量分光分析による測定で１．０ｐｐｍ未満のグリシジルエステルレベルを含む、蒸気精製エステル化油組を含んでなる組成物を対象とする。
【００１８】
本開示のさらに別の非限定的態様は、液体クロマトグラフィー飛行時間質量分光分析法による測定で０．２ｐｐｍ未満のグリシジルエステルレベルを含んでなる、再脱色ダイズ油を含む組成物を対象とする。
【００１９】
本開示のなおもさらなる非限定的態様は、油中に水を混合するステップと、油を再脱色するステップを含む、グリシジルエステルを脱色油から除去する方法を対象とする。方法の特定の非限定的実施形態では、脱色油は精製脱色油、精製脱色脱臭油、および化学的エステル交換油の少なくとも１つを含む。また方法の特定の非限定的実施形態では、方法は、油を再脱色するステップに引き続いて、油を脱臭するステップを含む。
【００２０】
本開示の別の非限定的態様は、水を油中に混合するステップと、油を再脱色するステップを含む、油中のグリシジルエステルをモノアシルグリセロールに変換する方法を対象とする。方法の特定の非限定的実施形態では、脱色油は、精製脱色油、精製脱色脱臭油、および化学的エステル交換油の少なくとも１つを含む。また方法の特定の非限定的実施形態では、方法は油を再脱色するステップに引き続いて、油を脱臭するステップを含む。
【００２１】
本明細書の用法では、「脱臭」は、不純物を除去するためのアルカリ精製油の蒸留を意味する。例示的な油としては、ダイズ油、カノーラ油、コーンオイル、ヒマワリ油、およびベニバナ油が挙げられるが、これに限定されるものではない。
【００２２】
本明細書の用法では、「アルカリ精製」または「化学精製」は、油にアルカリ溶液を接触させ、得られた脂肪酸石鹸の大部分をトリアシルグリセロールの大半から除去することで、遊離脂肪酸を油から除去することを意味する。アルカリ精製油は、引き続いて脱臭されることが多いが、脱臭は必須ではない。
【００２３】
本明細書の用法では、「物理精製」は、トリアシルグリセロールの大半を無処理のままに保ちながら、大部分の遊離脂肪酸を除去する条件下における、油の高温蒸留を意味する。
【００２４】
本明細書の用法では、「蒸気精製」および「水蒸気蒸留」は、物理精製および／または脱臭を意味する。
【００２５】
本明細書の用法では、「加水分解」は、遊離酸とアルコールを生じる、エステルと水の反応を意味する。
【００２６】
本明細書の用法では、「エステル化」または「エステル合成」は、エステル形成をもたらす、アルコールと酸との、特に遊離脂肪酸との反応を意味する。本出願に記載されるエステル化反応中に、出発原料中に存在する遊離脂肪酸は、グリセロールまたはモノアシルグリセロールなどの多価アルコール、あるいはジアシルグリセロールなどの一価アルコールと反応してもよい。
【００２７】
本明細書の用法では、「酸分解」は、遊離酸がエステルと反応してエステルに結合する酸を置き換え、新しいエステル分子を形成する反応を意味する。
【００２８】
本明細書の用法では、「エステル交換」は、エステルが、例えば第１のアルコール基から第２のアルコール基へのエステル結合脂肪酸の交換によって、別のエステルに変換される反応を意味する。
【００２９】
本明細書の用法では、「アルコール分解」は、遊離アルコールがエステルと反応してエステルに結合するアルコールを置換し、新しいエステル分子を形成する反応を意味する。
【００３０】
本明細書の用法では、「エステル交換」反応は、以下の反応を意味する。酸分解、エステル交換、およびアルコール分解。
【００３１】
本明細書の用法では、「リパーゼと接触させた」「リパーゼ触媒反応」「油を酵素と接触させる」、および「油を酵素とインキュベートする」は、以下の反応の１つ以上をそれぞれ意味する。加水分解、エステル化、エステル交換、酸分解、エステル交換、およびアルコール分解。
【００３２】
本明細書の用法では、「アシルグリセロール」は、一般に油中に見られるモノアシルグリセロール、ジアシルグリセロール、およびトリアシルグリセロールなどのグリセロールエステルを意味する。本明細書の用法では、「部分的グリセリド」という用語は、モノアシルグリセロールおよびジアシルグリセロールなどの１つまたは２つの遊離水酸基を有するグリセロールエステルを意味する。
【００３３】
本明細書の用法では、「パーム画分」は、パーム油分画から得られるパーム油構成要素を意味する。
【００３４】
本明細書の用法では、「パームオレイン」は、非分画パーム油またはパームステアリンのいずれよりも低い融点を有するパーム油構成要素に富んだパーム画分、または室温で主に液体の油を意味する。
【００３５】
本明細書の用法では、「パームステアリン」は、非分画パーム油またはパームオレインのいずれよりも高い融点を有するパーム油構成要素に富んだパーム画分、または室温で主に固体の油を意味する。
【００３６】
本明細書の用法では、「散布」は、液相内への気相の装入を意味する。
【００３７】
本明細書の用法では、「化学的エステル交換」は、例えばナトリウムメトキシドなどの化学（非生物）触媒によって触媒される、油中の脂肪酸再配置を意味する。
【００３８】
油中のグリシジルエステルレベルを測定する利用できる間接的方法の不正確さに考慮して、油中のグリシジルエステルレベルを測定する直接的方法が開発された。グリシジルエステルを定量化する既存の間接的方法は、ナトリウムメトキシドを用いて、グリシジルエステルを実際に測定される化合物であるモノクロロプロパンジオールに化学変換することに依存する。しかしこれは、グリシジルエステルが、実際に測定される化合物に変換され得る唯一の化学種であるという、不正確な仮定を組み入れている。したがってこの間接的方法は、不正確なレベルのモノクロロプロパンジオールエステルおよびグリシジルエステルを報告しがちである。
【００３９】
下で説明される、本明細書で「液体クロマトグラフィー飛行時間質量分光分析」または「ＬＣ−ＴＯＦＭＳ」と言及される、新しいより正確な方法を使用して、本明細書で述べるグリシジルエステルのレベルを測定した。サンプルを移動相で希釈し、液体クロマトグラフィーによって分離して調製した。検出は、飛行時間質量分析法を使用して実施した。サンプルを毎日測定して、正確な同定と定量化を確認した。
【００４０】
ＭＣＰＤ脂肪酸エステルおよびグリシジル脂肪酸エステルは、飛行時間質量分光分析（ＴＯＦＳ）と連結している高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって、植物油中で測定した。サンプルを希釈して、先行する化学的改変なしに注入し、逆相ＨＰＬＣによって分離した。一定レベルの微量ナトリウム塩をクロマトグラフィー中に含めることで改善された、エレクトロスプレーイオン化を利用した。ナトリウムレベルの変動は、異常な結果をもたらすかもしれないので、一定のナトリウムレベルを確保することが重要である。分析物は、［Ｍ＋Ｎａ（＋）］イオンとして検出された。ＨＰＬＣ分離では、Ａｇｉｌｅｎｔ  １２００  ｓｅｒｉｅｓ（商標）ＨＰＬＣを使用した。溶出物は、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ（商標）３ミクロンＣ１８カラム（孔径１００Å、５０ｍｍ×３．０ｍｍのカラム）を使用して、Ａｇｉｌｅｎｔ  ６２１０（商標）ＴＯＦＭＳによって分析した。表２に記載する二溶媒勾配を適用した。
【００４１】
2013512998.tif 000002
【００４２】
標準を使用して、検出された分析物のアイデンティティおよび量を検証した。いくつかの標準は、表３に示されるように商業的に得られた。これもまた表３に列挙されるいくつかの標準は市販されておらず、Ａｒｃｈｅｒ  Ｄａｎｉｅｌｓ  Ｍｉｄｌａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ  ｉｎ  Ｄｅｃａｔｕｒ，ＩＬの研究所で合成された。
【００４３】
2013512998.tif 000003
【００４４】
分析物の名称、滞留時間、分子式、および検出イオンを表４に示す。
【００４５】
2013512998.tif 000004
【００４６】
市販されない標準は、次のようにして合成した。
【００４７】
オレイン酸の重水素化３−ＭＣＰＤジエステルは、次のように合成した。４５℃で５ｍｍＨｇの真空下において７０時間激しく撹拌（４５０ｒｐｍ）して、オレイン酸（３０．７グラム、９９％＋、Ｎｕ  Ｃｈｅｋ  Ｐｒｅｐ，Ｉｎｃ．，Ｅｌｙｓｉａｎ，ＭＮ）および５．０７ｇの重水素化３−ＭＣＰＤ（±−３−クロロ−１，２−プロパン−ｄ５−ジオール、９８ａｔｏｍ％Ｄ、Ｃ／Ｄ／Ｎ  Ｉｓｏｐｏｔｅｓ  Ｉｎｃ，Ｐｏｉｎｔｅ−Ｃｌａｉｒｅ，Ｑｕｅｂｅｃ，Ｃａｎａｄａ）と、３．１ｇのＮｏｖｏｚｙｍ  ４３５固定化リパーゼ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ，Ｂａｇｓｖａｅｒｄ，Ｄｅｎｍａｒｋ）を反応させた。モル基準で２５％の過剰なオレイン酸があった。ＴＬＣ分析は、７０時間後にほぼ全てのモノエステルがジエステルに変換されたことを示した。室温への冷却後、１５０ｍｌのヘキサンを反応混合物に添加して、４０号濾紙（Ｗｈａｔｍａｎ  Ｉｎｃ．，Ｆｌｏｒｈａｍ  Ｐａｒｋ，ＮＪ）を通過させて反応混合物を濾過し、酵素顆粒を回収した。５００ｍｌの分液漏斗内でヘキサン／反応混合物溶液を苛性溶液によって洗浄し、過剰な遊離脂肪酸を除去した。１８ｍｌの９．５ｗｔ／ｖ％ＮａＯＨ溶液を中和のために分液漏斗に添加して、３分間振盪した。より下方の石鹸相を除去した後、洗浄水のｐＨが中性になるまで、上相を１００ｍｌの温水で数回洗浄した。次に機械的真空ポンプによってヘキサンを回転蒸発器内で蒸発させ、残留ヘキサンと水分を完全に除去した。ヘキサン除去後、２０．６ｇの物質が回収された。完成物は、滴定によって０．１％未満の遊離脂肪酸を有しており、９５％のオレイン酸重水素化３−ＭＣＰＤジエステルを有することが予期された。リノール酸重水素化３−ＭＣＰＤジエステルは、リノール酸（９９％＋、Ｎｕ  Ｃｈｅｋ  Ｐｒｅｐ，Ｉｎｃ．，Ｅｌｙｓｉａｎ，ＭＮ）を使用して同様に調製した。
【００４８】
オレイン酸重水素化３−ＭＣＰＤモノエステルは、反応時間が４５分間に短縮されたこと以外は、実質的にオレイン酸重水素化３−ＭＣＰＤジエステルのように調製した。エマルションが形成され、９．６％の遊離脂肪酸を含有する１グラムのオレイン酸重水素化３−ＭＣＰＤモノエステルが、それから回収された。
【００４９】
パルミチン酸グリシドールは、次のように調製した。塔頂撹拌機、ディーン・スターク・トラップ、および冷却管を装着した２５０ｍＬの三つ口丸底フラスコに、１０ｇのパルミチン酸メチル（９９％＋、Ｎｕ  Ｃｈｅｋ  Ｐｒｅｐ，Ｉｎｃ．，Ｅｌｙｓｉａｎ，ＭＮ）、１３．７ｇのグリシドール（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）、および１ｇのＮｏｖｏｚｙｍｅｓ  ４３５固定化リパーゼを装填した。油浴を使用して反応混合物を７０℃に加熱し、窒素でパージして、反応中に形成されたメタノールを除去した。反応の進行は、ＴＬＣ（８０：２０（ｖ／ｖ）のヘキサン：酢酸エチル）でモニターした。２４時間後に反応を停止させた。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、濾過して固定化酵素を除去した。溶剤および過剰なグリシドールを真空内で除去して無色の油を得て、それは冷却すると粗生成物（１３ｇ）に凝固した。カラムクロマトグラフィー（０〜２０％の酢酸エチル：ヘキサン（ｖ／ｖ））を使用して、粗生成物（５グラム）を精製した。パルミチン酸メチルをヘキサンで溶出した。生成物パルミチン酸グリシジルを５〜１０％の酢酸エチル：ヘキサン（ｖ／ｖ）で溶出した。生成物を含有する画分をプールして、真空内で濃縮し、白色固体（２ｇ）を得た。Ｈａｎｅｓｓｉａｎ染色液を噴霧し、続いて１１０℃で１５分間加熱して、ＴＬＣプレートを可視化した。
【００５０】
オレイン酸グリシジルは、１０グラムのオレイン酸メチル（９９％＋、Ｎｕ  Ｃｈｅｋ  Ｐｒｅｐ，Ｉｎｃ．、Ｅｌｙｓｉａｎ、ＭＮ）と１３．１グラムのグリシドールを使用したこと以外は、パルミチン酸グリシドールと同様に調製した。
【００５１】
ＥＳＩ  Ｓｏｕｒｃｅを使用した質量分析法によって、ＬＣ−ＴＯＦＭＳによる検出を実施した。ガス温度３００℃、乾燥ガス５Ｌ／分、ネブライザー圧力５０ｐｓｉ。質量分光計パラメータは、次のとおりであった。ＭＳ質量範囲は３００〜７００ｍ／ｚ、極性は陽性、計器モードは２ＧＨｚ、データ保存は質量中心およびプロフィール。分析日毎に、標準をサンプルセットに含めた。グリシジルエステル量はｐｐｍで報告された。ＬＣ−ＴＯＦＭＳは、０．１ｐｐｍ程度に低い濃度で各グリシジルエステルの存在を検出できた。各サンプルセット中で、グリシジルエステルが検出されない場合は、そのサンプルについて検出限界を推定した。構成要素の数および構成要素の比率はサンプル毎に均一でないので、得られる検出限界は、常に同じではない。計器条件（どの程度最近、クリーニングされ調製されたか）、および分析されるサンプルタイプの双方が、得られる検出限界に影響を及ぼす。得られた実際の検出限界は、下の各実施例で報告される。
【００５２】
下述するようにいくつかのサンプルでは、ＬＣ−ＴＯＦＭＳを使用したグリシジルエステルレベルの測定に加えて、色および香味もまた判定した。植物油のロビボンド色値は、比色計内において、既知の色特性があるガラスとの比較によって油の色が判定される、ＡＯＣＳ公定法Ｃｃ  １３ｂ−４５に従って測定された。植物油の遊離脂肪酸含量は、遊離脂肪酸が滴定によって測定され、パーセントオレイン酸として報告される、ＡＯＣＳ公定法Ｃａ  ５ａ−４０に従って測定された。
【００５３】
植物油の香味は、実質的にＡ．Ｏ．Ｃ．Ｓ法Ｃｇ  ２−８３（植物油のパネル評価）に従って、２人の熟練した油食味検査員によって判定された。試食前に、約１５ｍｌの油を３０ｍｌのＰＥＴ容器に入れて、電子レンジ内で約５０℃に加熱した。総合的香味質スコアを１０を最良とする１〜１０の尺度で格付けした。サンプルは、スコアが７以上でなければ合格しなかった。ＡＯＣＳ法は全て、“Ｏｆｆｉｃｉａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＡＯＣＳ，”Ｕｒｂａｎａ，ＩＬ．の第６版から採用した。  
【図面の簡単な説明】
【００５４】
【図１】図１は、食用油加工を描写し、“Ｅｄｉｂｌｅ  ｏｉｌ  ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ,”  Ｄｅ  Ｇｒｅｙｔ  ＆  Ｋｅｌｌｅｎｓ，Ｃｈａｐｔｅｒ８，“Ｄｅｏｄｏｒｉｚａｔｉｏｎ，”ｉｎ  Ｂａｉｌｅｙ’ｓ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｏｉｌ  ａｎｄ  Ｆａｔ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｓｉｘｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｖｏｌｕｍｅ  ５，ｐ３４１−３８２，２００５，Ｆ．Ｓｈａｈｉｄｉ，ｅｄｉｔｏｒからの引用である。
【実施例】
【００５５】
以下の実施例は、本発明に従った、グリシジルエステルを油から除去する方法と、低濃度のグリシジルエステルを含有する油組成物とを例証する。以下の実施例は単に例証的であり、添付の特許請求の範囲によって定義される本発明の範囲を限定することは意図されない。
【００５６】
実施例１Ａ
対照実験では、０．８ｐｐｍのグリシジルエステルを含有する脱色パーム油（Ａｒｃｈｅｒ  Ｄａｎｉｅｌｓ  Ｍｉｄｌａｎｄ（ＡＤＭ），Ｈａｍｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を実質的に次のように、３ｍｍＨｇの真空下で３％蒸気を用いた、２６０℃で３０分間の物理精製によって蒸気精製した。その一方の開口部が油の表面より下にある散布管を装着した１リットル丸底ガラス蒸留容器に、パーム油を装填した。散布管の他方の開口部は、脱イオン水を含有する容器と連絡していた。散布管は、容器頭隙に生じさせた真空によって水を油中に引き込むことによる脱臭工程全体を通じて、所望の蒸気対油の重量百分率の散布蒸気の総含量を提供するように設定された。容器には、断熱アダプターを通じて冷却管もまた装着した。冷却管と真空供給源の間に冷却トラップを配置させ、冷却管を通じて真空ラインを容器頭隙に取り付けた。真空（３ｍｍＨｇ）にして、油を１０℃／分の速度で２６０℃に加熱した。この温度を３０分間維持した。脱イオン水を含有する容器に加熱ランプをあて、蒸気を発生させた。真空により散布管を通じて蒸気が熱い油中に引き込まれ、散布蒸気が提供された。３０分間後に容器を熱源から除去した。油が８０℃未満に冷却したら、窒素ガスによって真空を破った。
【００５７】
常態ではパーム油に対して実施されない、パーム油のアルカリ精製（化学精製）効果を調べるために、０．８ｐｐｍのグリシジルエステルを含有する脱色パーム油の第２のサンプルに、次のようにアルカリ精製を実施した。５．９％遊離脂肪酸を含有する６００グラムの精製脱色（ＲＢ）パーム油を４０℃に加熱し、２９ｍＬの２０％水酸化ナトリウム溶液と共に、２００ＲＰＭ撹拌で３０分間４０℃で撹拌した。混合物を６５℃に加熱し、１１０ＲＰＭ混合で６５℃で１０分間撹拌した。加熱混合物を３０００ＲＰＭで１０分間遠心分離し、次に８０℃に加熱して１５分間撹拌した。加熱水（１００ｍＬ、８０℃）を添加して、混合物を３００ＲＰＭで１時間撹拌した。混合物を遠心分離してパーム油層を回収し、真空下９０℃で乾燥させ、物理精製した（表１Ａ）。別の実験では、以下に概略を説明するように、アルカリ精製脱色パーム油をＴｒｉＳｙｌ（商標）吸着材と接触させて物理精製を実施した。０．８ｐｐｍのグリシジルエステルを含有する脱色パーム油の第３のサンプルをＴｒｉＳｙｌ  ５００（商標）（Ｗ．Ｒ．Ｇｒａｃｅ，Ｃｏｌｕｍｂｉａ，Ｍａｒｙｌａｎｄ）シリカ吸着材と次のように接触させた。脱色パーム油を７０℃に加熱して、ＴｒｉＳｙｌ（商標）シリカ（３重量％）を油に添加した。スラリーを１０分間混合した。４０号濾紙を通過させる濾過によって吸着材を除去する前に、スラリーを乾燥のために真空下で（１２５ｍｍＨｇ）９０℃に２０分間加熱した。吸着材処理油を３ｍｍＨｇ真空下で３％蒸気によって、２６０℃で３０分間物理精製した。
【００５８】
2013512998.tif 000005
【００５９】
対照実験におけるパーム油の物理精製は、パーム油中のグリシジルエステル含量の望ましくない増大を引き起こした。出発パーム油は、０．８ｐｐｍのグリシジルエステルを含有したが、それに物理精製を実施すると、パーム油のグリシジルエステル含量は、０．８ｐｐｍから１５．６ｐｐｍのグリシジルエステルに増大した。
【００６０】
次の実験でアルカリ精製されたパーム油を次に物理精製すると、グリシジルエステル含量は、０．８ｐｐｍから３１．８ｐｐｍになおもより好ましくなく増大する。
【００６１】
パーム油をアルカリ精製して、次にＴｒｉＳｙｌ（商標）吸着材と接触させ、次に物理精製すると、グリシジルエステル含量はそれほどまでは増大しなかったが、それは０．８ｐｐｍから２４．３ｐｐｍに増大し、なおも好ましくなく高かった。
【００６２】
しかしパーム油をＴｒｉＳｙｌ（商標）吸着材と接触させ、次に物理精製すると、グリシジルエステルは最初の０．８ｐｍから、０．１ｐｐｍ未満のグリシジルエステルに低下した。
【００６３】
実施例１Ｂ
追加的なアルコール、脂肪酸、または油のいずれもの不在下で、３５．０ｐｐｍのグリシジルエステルを含有する脱色パームオレイン（ＡＤＭ，Ｑｕｉｎｃｙ，ＩＬ）を５重量％Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  ＴＬ  ＩＭ（商標）リパーゼと共に、７０℃で４時間インキュベートした。Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  ＴＬ  ＩＭ（商標）リパーゼは、これらの条件下でパームオレインと接触させると、パームオレイン中のエステルのエステル交換を触媒する固定化酵素である。反応後、エステル交換（リパーゼ接触）パームオレインを３ｍｍＨｇ真空下で３％散布蒸気によって、２４０℃で３０分間物理精製した（表１Ｂ）。
【００６４】
2013512998.tif 000006
【００６５】
脱色パームオレインと酵素の接触は、パームオレイン中のグリシジルエステルの約１０〜２０％の低下をもたらした（表１Ｂ）。エステル交換（リパーゼ接触）油の２４０℃での物理精製後、リパーゼ接触蒸気精製パームオレイン中のグリシドールエステルレベルは、物理精製前のパームオレイン中のレベルの約３分の１に低下した（３５．０ｐｐｍから８．４ｐｐｍ）。
【００６６】
実施例１Ｃ
７．９％の遊離脂肪酸（ＦＦＡ）と０．２ｐｐｍのグリシジルエステルを含有する粗製パーム油（ＡＤＭ，Ｈａｍｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）サンプルに、３ｍｍ真空で３％蒸気を用いて、２６０℃で３０分間の蒸気蒸留によって物理精製を実施した。グリシジルエステル含量は、物理精製パーム油中で０．２ｐｐｍから１５．９ｐｐｍに好ましくなく増大した。
【００６７】
同一粗製パーム油の第２のサンプルをＮｏｖｏｚｙｍｅｓ  ４３５（商標）リパーゼ（１０％）と共に、真空下７０℃で一晩インキュベートした。これらの条件下で、リパーゼはパーム油中の遊離脂肪酸のエステル化を触媒した。インキュベーション後、遊離脂肪酸含量は７．９％から１．９％に低下し、油中のグリシジルエステル含量は０．２ｐｐｍから０．１ｐｐｍ未満に低下した。インキュベートした油に、３ｍｍ真空で３％蒸気を用いて、２６０℃で３０分間の水蒸気蒸留によって物理精製を実施し、０．９％の遊離脂肪酸と、わずか０．９ｐｐｍのグリシジルエステルを含有するリパーゼ接触（エステル化）蒸気蒸留油を得た。検出限界：０．１ｐｐｍ  ＧＥ。
【００６８】
実施例１Ｄ
１６．４ｐｐｍのグリシジルエステルを含有する脱色パームオレイン（ＡＤＭ，Ｑｕｉｎｃｙ  ＩＬ）に、次のようにして０．２％または０．４％ＳＦ１０５（商標）漂白土を用いて、１２５ｍｍＨｇ真空下で１１０℃で３０分間、再脱色を実施した。パドル撹拌機によって４００〜５００ｒｐｍで撹拌しながら、油温度が７０℃に達するまでパームオレインを加熱した。漂白土（ＳＦ１０５（商標）、０．２％または０．４重量％、Ｅｎｇｅｌｈａｒｄ  ＢＡＳＦ，ＮＪ）を油に添加して、撹拌を７０℃で５分間継続した。真空（最大５トル）にして、混合物を２〜５℃／分の速度で１１０℃に加熱した。１１０℃に達したら、撹拌と真空を２０分間継続した。２０分間後、撹拌を停止して熱源を除去した。活性化漂白土を５分間沈降させた後、油温度が１００℃未満になるまで冷却した。真空を開放し、ブフナー漏斗およびＷｈａｔｍａｎ  ２号濾紙を使用して、油サンプルを真空濾過した。
【００６９】
二重反復試験を実施して、温度が低く持続時間が短かった（５分間の２００℃、３％蒸気、３ｍｍＨｇ真空、表１Ｄ）こと以外は、実質的に１Ａの物理精製について記載されるようにして、各セットの第２の実施例に低温短時間の脱臭を実施した。
【００７０】
2013512998.tif 000007
【００７１】
パームオレインを０．２％ＳＦ１０５（商標）で再脱色することは、グリシジルエステル含量を元のレベルの約３分の１に低下させた。再脱色パームオレインを２００℃で５分間脱臭した後、油のグリシジルエステル含量は増大しなかった。パームオレインを０．４％ＢＡＳＦ  ＳＦ１０５（商標）で再脱色することは、グリシジルエステル含量を検出不能にまで低下させた。低温脱臭（２００℃で５分間）後、油のグリシジルエステル含量は、０．２ｐｐｍにわずかに増大した。
【００７２】
実施例１Ｅ
１８．８ｐｐｍのグリシドールエステルを含有する脱臭パーム油（ＡＤＭ，Ｈａｍｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を実質的に実施例１Ｄに記載されるようにして、実験室で再脱臭した。
【００７３】
脱色パーム油の脱臭前の処理が、脱臭中のグリシジルエステル形成に影響するかどうかを判定するために、脱臭パーム油を吸着材と接触させて再脱臭した（表１Ｅ）。脱臭パーム油を吸着材と共に１２５ｍｍＨｇ真空下７０℃で３０分間インキュベートした。吸着材は、ケイ酸マグネシウム（Ｍａｇｎｅｓｏｌ  Ｒ６０（商標），Ｄａｌｌａｓ  Ｇｒｏｕｐ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ，ＮＪ）、シリカゲル（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｎｏ．Ｓ７３６−１）、酸性アルミナ（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｎｏ．Ａ９４８−５００）、および酸洗浄活性炭（ＡＤＰ（商標）カーボン，Ｃａｌｇｏｎ  Ｃｏｒｐ．，Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇ，ＰＡ）を含んだ。
【００７４】
2013512998.tif 000008
【００７５】
脱臭パーム油を再脱臭する前に、油をＭａｇｎｅｓｏｌ（商標）カーボン、またはアルミナと接触させることは、グリシドールエステルの増大を引き起こす。油を再脱臭する前に油をシリカゲルに接触させることは、形成されたグリシジルエステルレベルに非常にわずかな低下を引き起こす。
【００７６】
実施例２Ａ
実質的に実施例１Ａのようにして、表２Ａで概説するように、検出可能なグリシジルエステルを含まない精製脱色ダイズ油（「ＲＢダイズ」）（ＡＤＭ，Ｄｅｃａｔｕｒ，ＩＬ）、および０．１ｐｐｍのグリシジルエステルを含有する脱色パーム油（ＡＤＭ，Ｈａｍｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を３ｍｍＨｇ真空下で３％散布蒸気によって、様々な温度で３０分間それぞれ蒸気蒸留した。
【００７７】
2013512998.tif 000009
【００７８】
２３０℃での脱臭は、０．１ｐｐｍ未満のグリシジルエステルを有するＲＢＤダイズ油をもたらした（表２Ａ）。２４０℃での脱臭中に水蒸気を散布されたダイズ油中にはグリシジルエステルが形成され、３００℃での脱臭中により高いレベルが形成された。２３０℃で脱臭されたダイズ油とは違って、２３０℃で脱臭された脱色パーム油中では、グリシジルエステルレベルが増大した。２４０℃で脱臭された脱色パーム油中では、グリシジルエステルがより高いレベルに増大した。
【００７９】
実施例２Ｂ
実質的に実施例１のようにして、表２Ｂで概説するように、検出可能なグリシジルエステルを含まない精製脱色ダイズ油（ＡＤＭ，Ｄｅｃａｔｕｒ，ＩＬ）、または検出可能なグリシジルエステルを含まない脱色パーム油（ＡＤＭ，Ｈａｍｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を３ｍｍＨｇ真空下で３０分間、実験室脱臭（ダイズ油）または物理精製（パーム油）した。１試験では、３％水蒸気による脱臭前に、３５ｐｐｍのＳＦ１０５（商標）漂白土をダイズ油に添加した。２試験では、無水エタノール（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を水で９５％に希釈して調製された９５％エタノール散布（油体積の９％および１０．８％）によってＲＢダイズ油を脱臭し、従来の水（蒸気）散布をエタノール散布で置換した。２試験では、水（蒸気）散布をガス散布（窒素または二酸化炭素）で置換した。
【００８０】
2013512998.tif 000010
【００８１】
脱臭容器内のＲＢダイズ油に漂白土を添加すると、２４０℃での脱臭中にグリシジルエステルが形成された。しかし水蒸気スパージをエタノールで置換すると、２４０℃であってさえもグリシジルエステルが除去された脱臭油がもたらされた。脱色パーム油を２６０℃で物理精製すると、ＧＥ含量は１５．３ｐｐｍであった。脱色パーム油の物理精製において従来の水を窒素または二酸化炭素で置換すると、より低レベルのグリシジルエステルがもたらされた。この試験では、ガスの散布速度は測定および制御が困難であった。エタノール散布によってダイズ油を脱臭することは、０．１ｐｐｍ未満のグリシジルエステルを含有する精製脱色脱臭ダイズ油を含んでなる組成物をもたらした。二酸化炭素散布または窒素散布によって脱色パーム油を蒸気精製することは、物理精製によって精製された同一脱色パーム油よりもグリシジルエステル含量が低い、脱色物理精製パーム油を含んでなる組成物をもたらした。
【００８２】
実施例３Ａ
２．２ｐｐｍのグリシジルエステルを含有する精製脱色脱臭（ＲＢＤ）コーンオイル（ＡＤＭ，Ｄｅｃａｔｕｒ，ＩＬ）を表３Ａに概説する酸溶液と接触させた。表３Ｂに概説される時間にわたり剪断混合することで、酸性溶液（１部）をコーンオイル（１０００部）と接触させた。次に混合物を３０分撹拌し、洗浄水のｐＨが洗浄後に中性になるまで、水で繰り返し洗浄した。
【００８３】
2013512998.tif 000011
【００８４】
ＲＢＤコーンオイルと有機酸性溶液またはＥＤＴＡ溶液との接触がもたらすグリシジルエステルの低下は、わずかまたは皆無であった。ＲＢＤコーンオイルを８５％リン酸溶液に接触させて４分間剪断混合することは、グリシジルエステル含量を低下させ、０．３ｐｐｍのグリシジルエステルを含有するＲＢＤコーンオイルが生成された。
【００８５】
実施例３Ｂ
検出可能なグリシジルエステルを含まない精製脱色脱臭ダイズ油（ＡＤＭ，Ｄｅｃａｔｕｒ，ＩＬ）にグリシジルステアリン酸を添加して、１３．６ｐｐｍのグリシジルステアリン酸を含有するＲＢＤダイズ油を得た。実質的に実施例３Ａおよび表３Ｂに概説するようにして、添加ＲＢＤ油に酸性溶液処理を実施した。添加ＲＢＤ油はまた、ケイ酸マグネシウム（Ｍａｇｎｅｓｏｌ  Ｒ６０（商標），Ｄａｌｌａｓ  Ｇｒｏｕｐ，Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ，ＮＪ；油の１％、１５０℃で５分間）とも接触させた。
【００８６】
2013512998.tif 000012
【００８７】
クエン酸溶液による油の処理は、ＲＢＤ油中のグリシジルエステルレベルを増大させた。リン酸処理は、ＲＢＤダイズ油中のグリシジルエステルの低下を引き起こした。Ｍａｇｎｅｓｏｌ  Ｒ６０（商標）による処理だけが、グリシジルエステルを０．１ｐｐｍ未満に低下させた。
【００８８】
実施例４Ａ
検出可能なグリシジルエステルを含まない、０．０２％の遊離脂肪酸（ＦＦＡ）を含有する精製脱色脱臭ダイズ油（ＡＤＭ，Ｄｅｃａｔｕｒ，ＩＬ）にグリシジルステアリン酸を添加して、１１．１ｐｐｍグリシジルステアリン酸を含有するＲＢＤダイズ油を得た。表４Ａ１に列挙する投入量および時間で、実質的に実施例１Ｄに記載されるようにして、漂白（ｂｅａｃｈｉｎｇ）土を用いて、１２５ｍｍＨｇの真空で３０分間にわたって、添加ＲＢＤダイズ油に再脱色を実施した。引き続いて、グリシジルエステルについて再脱色油を試験し、実質的にＡ．Ｏ．Ｃ．Ｓ法Ｃｇ  １３ｂ−４５に従って色を評価した（表４Ａ１）。添加ＲＢＤダイズ油は、再脱色前に良好な色（０．５Ｒおよび４．５Ｙ）を有した。
【００８９】
2013512998.tif 000013
【００９０】
再脱色中のグリシジルエステル除去に対する用量依存および温度依存効果が、観察された。０．１％および０．４％のＳＦ１０５（商標）漂白土による７０℃での再脱色、および０．１％で用いられたＳＦ１０５（商標）漂白土による１１０℃での再脱色は、グリシジルエステルの低下を引き起こしたが、消失は引き起こさなかった。１１０℃においてＳＦ１０５（商標）漂白土のレベルを０．２％および０．４％に増大すると、グリシジルエステルが油から除去され、検出可能なグリシジルエステルを含まない再脱色油が生成された。１１０℃における試験されたレベルでのＢｉｏｓｉｌ（商標）およびＴｏｎｓｉｌ（商標）１２６ＦＦによる脱色もまた０．１ｐｐｍ未満のグリシジルエステルを有する油をもたらした。ＲＢＤ油および全ての再脱色ＲＢＤ油サンプル中の遊離脂肪酸のレベルは０．０２％で、変化しなかった。１１．１ｐｐｍのグリシジルエステルを含有するＲＢＤ油の再脱色は、グリシジルエステルの一部または全部を除去して、良好な色の油を与えた。しかし全ての再脱色油の香味および臭気は、不快であった。
【００９１】
実質的に実施例１に概説されるようにして、表４Ａ２に概説する条件下で、検出可能なグリシジルエステルを含まないが、不快な臭気と香味を有する表４Ａ１からの再脱色油に、再脱色後に低温短時間脱臭を実施した。再脱色再脱臭油をグリシジルエステルについて試験し、実質的にＡ．Ｏ．Ｃ．Ｓ法Ｃｇ  ２−８３に従って香味を評価した。
【００９２】
2013512998.tif 000014
【００９３】
再脱色され、再脱色後に低温短時間脱臭されたいずれのＲＢＤダイズ油サンプル中にも、グリシジルエステルは検出されなかった（表４Ａ２）。
【００９４】
１１．１ｐｐｍのグリシジルエステルを含有する添加ダイズ油の再脱色は、検出可能なグリシジルエステルを含まない油を製造する上で効果的であり、再脱色後の低温（１８０〜２１０℃）短時間（５〜１０分間）の脱臭は、グリシジルエステルの増大なしに、再脱色処理から不快な香味を除去する上で効果的であった。良好な香味を有し、検出可能なグリシジルエステルを含まない油が、再脱色とそれに続く低温短時間の再脱臭によって得られた。
【００９５】
実施例４Ｂ
赤色３．８および黄色２６のロビボンド色値を有するパームステアリン（ＡＤＭ、Ｑｕｉｎｃｙ、ＩＬ）は、１１．３ｐｐｍのグリシジルエステル（ＧＥ）を含有した。原料パーム油が、分画および輸送前に原産国で脱色され蒸気蒸留されていたにも関わらず、パームステアリンは、高い遊離脂肪酸（０．３０％ＦＦＡ）を有した。
【００９６】
パームステアリンを再脱色および低温短時間の脱臭によって処理した。表４Ｂ１に概説される異なるレベル、温度、および時間で、ＢＡＳＦ  ＳＦ１０５（商標）漂白土によってパームステアリンを再脱色した。再脱色油中のグリシジルエステルレベルを測定し、再脱色油を低温で短時間脱臭した（表４Ｂ１）。対照実験では、再脱色油に２６０℃で３０分間の物理精製が実施され（表４Ｂ２）、グリシジルエステルの顕著な増大がもたらされた。
【００９７】
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【００９８】
2013512998.tif 000016
【００９９】
再脱色脱臭されたまたは物理精製されたパームステアリンサンプルは全て、香味スクリーニングに合格した。パームステアリンの再脱色とそれに続く低温脱臭は、グリシジルエステルをパームステアリンから除去する上で効果的であった。しかし低温脱臭は、ＲＢＤパームステアリン中のＦＦＡを満足できるレベルに低下できなかった。
【０１００】
実施例４Ｃ
赤色３．２および黄色３８のロビボンド色値および４０．１ｐｐｍのグリシジルエステルを有するパームオレイン（ＡＤＭ、Ｑｕｉｎｃｙ、ＩＬ）を再脱色および脱臭または物理精製によって処理した。原料パーム油が、分画および輸送前に原産国で脱色され物理精製されていたにも関わらず、納入パームオレインは高い遊離脂肪酸（０．１６％ＦＦＡ）を有した。
【０１０１】
ＢＡＳＦ  ＳＦ１０５（商標）漂白土によって、異なる粘土レベル、温度、および時間で、パームオレインを再脱色した（表４Ｃ１）。再脱色パームオレイン中のグリシジルエステルレベルを測定し、次に再脱色パームオレインを低温で様々な時間にわたって脱臭した（表４Ｃ１）。比較のために、パームオレインを再脱色および物理精製した（表４Ｃ２）。
【０１０２】
2013512998.tif 000017
【０１０３】
2013512998.tif 000018
【０１０４】
再脱色油は、再脱色および脱臭または物理精製後に、全て良好な色を有し、香味試験に合格した。パームオレインを再脱色し、脱色後にパームオレインを低温で短時間脱臭するこの方法は、出発（物理精製）パームオレインよりも低いグリシジルエステルレベルを有する、脱臭パームオレインを含んでなる組成物をもたらした。
【０１０５】
実施例５Ａ
エステル交換反応において、脱色パーム油（ＡＤＭ，Ｈａｍｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ、６００グラム）をＮｏｖｏｚｙｍｅｓ  ＴＬ  ＩＭ（商標）リパーゼ（６０グラム、１０％）と７０℃で２時間接触させ、エステル交換油を生成した。実質的に実施例１Ａのように、エステル交換油（２００グラム）の一部に３ｍｍ真空で３％蒸気を用いて、２６０℃で３０分間の水蒸気蒸留による物理精製を実施し、物理精製リパーゼ接触（エステル交換）油を得た。実質的に実施例１Ｄに記載されるようにして、エステル交換油の一部（２５０グラム）をＳＦ１０５（商標）漂白土（２％）に接触させることで、それに再脱色を実施し、次に実質的に実施例１Ａのように、３ｍｍ真空で３％蒸気を用いて、２６０℃で３０分間の水蒸気蒸留による物理精製を実施して、再脱色物理精製リパーゼ接触（エステル交換）油を得た。様々な加工段階後に採取されたサンプル中のグリシジルエステル含量を測定した表５Ａ）。
【０１０６】
2013512998.tif 000019
【０１０７】
出発パーム油は、１５．９ｐｐｍのグリシジルエステルを含有した。リパーゼとの接触後、グリシジルエステル含量はほとんど変化しなかった。エステル交換油を物理精製すると、グリシジルエステル含量は劇的に増大した。 エステル交換油の脱色は必要でないという当該技術分野の教示にもかかわらず、リパーゼ接触油の脱色は、グリシジルエステル含量を１５．９ｐｐｍから７．３ｐｐｍに低下させた。追加的工程は、追加的工程がない場合よりも高品質の油を提供した。引き続く物理精製は、グリシジルエステルの増大を引き起こした。
【０１０８】
油とリパーゼの接触によるエステル交換生成物は、化学処理生成物よりもはるかに純粋であるため、エステル交換を触媒する酵素の使用が、脱色に対する必要性をなくすることは、油のエステル交換の当該技術分野で広く教示されている。したがって精製工程が回避される。Ｏｉｌ  Ｍｉｌｌ  Ｇａｚｅｔｔｅｅｒ（Ｖｏｌ．１０９，Ｊｕｎｅ  ２００４）で報告されるように、『化学システムでは、反応装置もまた必要であるが、酵素よりもはるかに高い温度が必要である。化学処理中に黒ずみが生じるので、油の大がかりな精製が必要である。これは酵素を使用する場合には当てはまらない』。Ｐａｌｍ  Ｏｉｌ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ（３９ｐ  ７−１０，ｈｔｔｐ：／／ｐａｌｍｏｉｌｉｓ．ｍｐｏｂ．ｇｏｖ．ｍｙ／ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ／ｐｏｄ３９−ｐ７．ｐｄｆ；２００９年１０月３０日にアクセス）で報告されるように、『酵素的エステル交換を用いれば、処理はより穏やかで、油が黒ずむことがなく、高価な後脱色操作が排除される』。食用脂肪を製造するためのリパーゼエステル交換を使用した脱色工程の排除は、広く認識されている。『酵素処理は、化学処理よりはるかに単純で、その後、エステル交換油にはいかなる後処理も必要ない』。ＢｉｏＴｉｍｅｓ（Ｄｅｃｅｍｂｅｒ  ２００６，Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ  ＢＶ，Ｂａｇｓｖａｅｒｄ，Ｄｅｎｍａｒｋ，出版社）で報告されるように、『酵素処理の主要な利点は、穏やかな温度、中和または脱色のどちらも不要であること、液体溶出物が発生しないこと、および非常に反応性で不安定な化学物質よりも酵素は取り扱いが安全なことである』。
【０１０９】
しかしこの教示にもかかわらず、リパーゼ接触油を脱色することが、グリシジルエステル含量を低下させることが発見された。
【０１１０】
実施例５Ｂ
実質的に実施例１Ｂに記載されるように、精製脱色ダイズ油（８０部）を完全水素化ダイズ油（２０部、ＡＤＭ，Ｄｅｃａｔｕｒ，ＩＬ）と混合し、ＴＬ  ＩＭ（商標）リパーゼ（５％）と４時間接触させて酵素的エステル交換し、酵素的エステル交換油を生成した。ＲＢダイズ油、完全水素化ダイズ油、および酵素的エステル交換油は、検出可能なレベルのグリシジルエステル（検出限界：０．１  ｐｐｍＧＥ）を含有しなかった。実質的に実施例１Ａで概説されるように、酵素的エステル交換油に２６０℃で物理精製を実施して、４．６ｐｐｍのグリシジルエステルを含有するエステル交換油を得た。酵素的エステル交換油に２４０℃で物理精製を実施すると、エステル交換ダイズ油は０．３ｐｐｍのグリシジルエステルを含有した。
【０１１１】
実施例６
精製脱色ダイズ油（８０部）を完全水素化ダイズ油（２０部、ＡＤＭ，Ｄｅｃａｔｕｒ，ＩＬ）と混合し、実質的に次のようにして化学的エステル交換を実施した。油混合物（６００グラム）を真空下で２０分間加熱して９０℃で撹拌して、乾燥させた。乾燥後、油を８５℃に冷却し、２．１グラム（０．３５）％のナトリウムメトキシド（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）と混合して、真空下８５℃で１時間撹拌し化学的エステル交換油を生成した。洗浄水（４８ｍＬ）を添加して触媒を不活性化し、反応を停止させ、２００ＲＰＭで１５分間撹拌した。撹拌を停止して、油をデカントする前に油を５分間インキュベートさせた。油を水でさらに２回、同様に洗浄した。油を９０℃でインキュベートして乾燥させた。実質的に実施例１Ａで概説されるようにして、化学的エステル交換油（２００グラム）の一部を２４０℃で３０分間脱臭し、脱臭化学的エステル交換油を提供した。実質的に実施例１Ｄで概説されるようにして、１２５ｍｍＨｇ真空下で１．５％ＳＦ１０５粘土を用いて、１１０℃で３０分間にわたり、化学的エステル交換油（２００グラム）の一部を再脱色して、再脱色化学的エステル交換油を提供した。実質的に実施例１Ａに概説されるようにして、再脱色化学的エステル交換油を脱臭し、脱臭再脱色化学的エステル交換油を提供した（表６）。
【０１１２】
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【０１１３】
化学的エステル交換後、油中のグリシジルエステルレベルは、実質的に増大した。脱臭化学的エステル交換油中のグリシジルエステルレベルは、実質的に化学的エステル交換油中のグリシジルエステルレベルの約半分に低下した。脱色化学的エステル交換油中のグリシジルエステルレベルは、検出可能レベル未満に低下した。脱臭再脱色化学的エステル交換油中のグリシジルエステルレベルは、１２．１ｐｐｍのグリシジルエステルに増大した。
【０１１４】
実施例７Ａ
グリシジルステアリン酸を精製脱色脱臭ダイズ油（ＡＤＭ、Ｄｅｃａｔｕｒ  ＩＬ）に混合して、５１３ｐｐｍのグリシジルエステルを含有する添加油を得た。油中に３−モノクロロプロパンジオールモノエステルまたはジエステルのどちらも検出されなかった（＜０．１ｐｐｍ）。１０グラムの出発油サンプルを対照として除去して試験し、グリシジルエステルおよびモノグリセリドの含量を測定した。５重量％ＳＦ１０５（商標）漂白土を使用して、１２５ｍｍＨｇ真空下１５０℃で３０分間、残りの油を次のように再脱色した。油の温度が７０℃に達するまで、パドル撹拌機によって４００〜５００ｒｐｍで撹拌しながら油を加熱した。漂白土（ＳＦ１０５（商標）、Ｅｎｇｅｌｈａｒｄ  ＢＡＳＦ，ＮＪ、油の５重量％）を油に添加して、撹拌を７０℃で５分間継続した。真空（１２５トル）を生じさせ、混合物を２〜５℃／分の速度で１５０℃に加熱した。１５０℃に達したら、撹拌および真空を２０分間継続した。２０分間後、撹拌を停止して熱源を除去した。活性化漂白土を５分間沈降させた後、油の温度が１００℃未満になるまで冷却した。真空を開放して、ブフナー漏斗とＷｈａｔｍａｎ  ４０号濾紙を使用して、脱色油を真空濾過した。再脱色油を秤量した。
【０１１５】
使用済み濾過粘土を濾紙から回収し、時折撹拌しながら１時間１００ｍｌヘキサンで抽出した。スラリーを濾過して、時折撹拌しながら粘土を１００ｍｌクロロホルムで１時間抽出した。スラリーを濾過して、時折撹拌しながら粘土を１００ｍｌメタノールで１時間抽出し、次にスラリーを濾過して、時折撹拌しながら粘土を１００ｍｌメタノールで１時間再度抽出した。抽出後、溶液を合わせて溶剤を蒸発させ、粘土から抽出された５．５８グラムの油が回収された。
【０１１６】
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【０１１７】
再脱色油中ではグリシジルエステルは検出レベル未満に低下し、使用済み粘土からグリシジルエステルは抽出されなかった。再脱色後のグリシジルエステルの不在は、漂白土への不可逆的吸着に起因したかもしれないが、モノステアリンの同時出現は、ＧＥが再脱色中に恐らくはモノステアリンに変換されたことを示唆する。グリシジルステアリン酸の約半分（４７モル％）がモノステアリンの形態で回収された。
【０１１８】
実施例７Ｂ
実質的に実施例７Ａのように、第２の添加油を調製して脱色し、５０６ｐｐｍのグリシジルエステルを含有する添加ＲＢＤダイズ油を得た。３−モノクロロプロパンジオールは、油中に検出されなかった（＜０．１ｐｐｍ）。油を７０℃に加熱した後、５分間激しく撹拌（４７５ｒｐｍ）しながら、１．５ｍｌ（油を基準にして０．５％）の脱イオン水を油に添加したこと以外は、実質的に実施例６Ａのようにして添加油（３００グラム）を再脱色した。次に漂白土（ＳＦ１０５（商標）、１５グラム、５％）を添加して、スラリーを５分間混合した。真空にしないでスラリーを９０℃に加熱し、２０分間保持した。次に真空にしてスラリーを１１０℃に加熱し、１１０℃に２０分間保った。再脱色油を冷却し、４０号濾紙を通過させて濾過した。再脱色油２８４．４グラム）を回収し、モノステアリン含量を測定した。実質的に実施例７Ａのようにして使用済み粘土を抽出し、漂白土から６．８８グラムの油を回収した。
【０１１９】
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【０１２０】
水を油中に混合し、次に再脱色することで、油中のグリシジルエステル含量は５０６ｐｐｍから検出限界未満に低下した。モノステアリンが漂白土から回収され、再脱色前には実質的にモノステアリンを含まなかったＲＢＤダイズ油が、０．５％の水を油中に混合した後の再脱色後には、顕著な量を含有した。モノステアリンの同時の出現は、添加水の存在下で再脱色することで、ＧＥがモノステアリンに変換されたことを示唆する。さらに、再脱色油または漂白土からの抽出油中に、ＭＣＰＤモノエステルまたはＭＣＰＤジエステルのどちらも検出されなかった。大量（８５モル％）のグリシジルステアリン酸が、モノステアリンの形態で回収された。
【０１２１】
実施例７Ｃ
実質的に実施例７Ａのようにして、第３の添加油を調製して脱色し、７２．６ｐｐｍのグリシジルエステルを含有する添加ＲＢＤダイズ油を得た。油中に３−モノクロロプロパンジオールエステルは検出されなかった（＜０．１ｐｐｍ）。２重量％のみの漂白土を添加したこと以外は、実質的に実施例７Ｂに概説されるようにして、様々な量の水（油を基準にして０％、０．２５％、０．５％または１．０％）を添加して、３００グラムの添加油ロットに再脱色を実施した。実質的に実施例７Ａに概説されるようにして、各使用済み漂白土から油を回収した。
【０１２２】
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【０１２３】
水の不在下または存在下で脱色した後に、漂白土からモノステアリンを回収した。再脱色前に実質的にモノステアリンを含まなかったＲＢＤダイズ油は、添加水なしでは、脱色後にも実質的にモノステアリンを含まなかったが、０．２５％〜１．０％の添加水の存在下では、再脱色後に約１０グラムを含有した。脱色前に水を油に添加することは、再脱色油中のモノステアリンとしてのＧＥの回収を助けた。
【図１】
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【国際調査報告】
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