(57)【要約】ＩＡＰ阻害剤化合物を患者に投与する工程と、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬレベルを測定する工程とを含む、どの患者がＩＡＰ阻害化合物に反応するかを予想する方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）ＩＡＰ阻害剤化合物を患者に投与する工程と、
ｂ）ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬレベルを測定する工程と
を含む、どの患者がＩＡＰ阻害化合物に反応するかを予想する方法。
【請求項２】
前記ＩＡＰ阻害化合物が、式Ｉの構造を有し、
【化１】
2013505446.tif 000003
または医薬的に許容されるその塩であって、式中、
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニルまたはＣ３〜Ｃ１０シクロアルキルであり、Ｒ１は、非置換または置換されていてもよく；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルであり、Ｒ２は、非置換または置換されていてもよく；
Ｒ３は、Ｈ、ＣＦ３、Ｃ２Ｆ５、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル、ＣＨ２−Ｚであり、あるいはＲ２およびＲ３はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、複素環を形成し、アルキル、アルケニル、アルキニルまたはｈｅｔ環は、非置換または置換されていてもよく；
Ｚは、Ｈ、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨ３、ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ２ＦまたはＣＨ２ＯＨであり；
Ｒ４は、Ｃ０〜１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルであり、Ｃ０〜１０アルキル、またはシクロアルキル基は、非置換または置換されており；
Ａは、置換されていてもよくまたは非置換でもよいｈｅｔであり；
Ｄは、Ｃ１〜Ｃ７アルキレンまたはＣ２〜Ｃ９アルケニレン、Ｃ（Ｏ）、Ｏ、ＮＲ７、Ｓ（Ｏ）ｒ、Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｓ（Ｏ）ｒ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｃ０〜Ｃ１０アリールアルキルＯＣ０〜Ｃ１０アリールアルキル、またはＳ（Ｏ）ｒＣ０〜Ｃ１０アリールアルキルであり、アルキルおよびアリール基は、非置換または置換されていてもよく；
ｒは、０、１、または２であり；
Ａ１は、置換アリールまたは非置換もしくは置換ｈｅｔであり、アリールおよびｈｅｔ上の置換基は、ハロ、低級アルコキシ、ＮＲ５Ｒ６、ＣＮ、ＮＯ２またはＳＲ５であり；
各Ｑは、独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アリールＣ１〜Ｃ１０アルコキシ、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０−アルキル、（ＣＨ２）０〜６−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、アリール、アリールＣ１〜Ｃ１０アルキル、Ｏ−（ＣＨ２）０〜６アリール、（ＣＨ２）１〜６ｈｅｔ、ｈｅｔ、Ｏ−（ＣＨ２）１〜６ｈｅｔ、−ＯＲ１１、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、ＳＲ１１、Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、Ｓ（Ｏ）２−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、またはＮＲ１１−Ｓ（Ｏ）２−（Ｒ１２）であり、アルキル、シクロアルキルおよびアリールは、非置換または置換されており；
ｎは、０、１、２または３、４、５、６または７であり；
ｈｅｔは、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１〜４個のヘテロ環原子を含有する５〜７員の単環式複素環、またはＮ、ＯおよびＳから選択される１個、２個、もしくは３個のヘテロ環原子を含有する１つの５〜７員の単環式複素環を含む８〜１２員の縮合環系であり、ｈｅｔは、非置換または置換されており；
Ｒ１１およびＲ１２は、独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、（ＣＨ２）０〜６−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、（ＣＨ２）０〜６−（ＣＨ）０〜１（アリール）１〜２、Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）０〜６−アリール、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０〜６−Ｏ−フルオレニル、Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）０〜６−アリール、Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０〜６−アリール、Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１〜６−ｈｅｔ、−Ｃ（Ｓ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、−Ｃ（Ｓ）−Ｏ−（ＣＨ２）０〜６−アリール、−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）０〜６−Ｏ−フルオレニル、Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−（ＣＨ２）０〜６−アリール、−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）０〜６−アリールまたはＣ（Ｓ）−（ＣＨ２）１〜６−ｈｅｔ、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、Ｓ（Ｏ）ｎＲ１１、Ｓ（Ｏ）ｍＮＲ１１Ｒ１２、ｍ＝１または２、Ｃ（Ｓ）Ｒ１１、Ｃ（Ｓ）ＮＲ１１Ｒ１２、Ｃ（Ｓ）ＯＲ１１であり、アルキル、シクロアルキルおよびアリールは、非置換または置換されており；あるいはＲ１１およびＲ１２は、細胞膜を通る分子の輸送を促進する置換基であり；あるいはＲ１１およびＲ１２は、窒素原子と一緒にｈｅｔを形成し；
Ｒ１１およびＲ１２のアルキル置換基は、非置換であるか、またはＣ１〜Ｃ１０アルキル、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＣＦ３もしくはＮＲ１１Ｒ１２から選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；
Ｒ１１およびＲ１２の置換シクロアルキル置換基は、Ｃ２〜Ｃ１０アルケン；Ｃ１〜Ｃ６アルキル；ハロゲン；ＯＨ；Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル；Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＣＦ３；またはＮＲ１１Ｒ１２から選択される１個以上の置換基で置換されており、そして
Ｒ１１およびＲ１２の置換ｈｅｔまたは置換アリールは、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、ニトロ、ＣＮ  Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ４アルキルおよびＣ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキルから選択される１個以上の置換基で置換されており；
Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、独立に、水素、低級アルキル、アリール、アリール低級アルキル、シクロアルキル、またはシクロアルキル低級アルキルであり、そして
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｑ、およびＡおよびＡ１基上の置換基は、独立に、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、低級アルカノイル、低級アルコキシ、アリール、アリール低級アルキル、アミノ、アミノ低級アルキル、ジ低級アルキルアミノ、低級アルカノイル、アミノ低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、シアノ低級アルキル、カルボキシ、低級カルバルコキシ、低級アルカノイル、アリーロイル、低級アリールアルカノイル、カルバモイル、Ｎ−モノもしくはＮ，Ｎ−ジ低級アルキルカルバモイル、低級アルキルカルバミン酸エステル、アミジノ、グアニジン、ウレイド、メルカプト、スルホ、低級アルキルチオ、スルホアミノ、スルホンアミド、ベンゾスルホンアミド、スルホネート、スルファニル低級アルキル、アリールスルホンアミド、ハロゲン置換アリールスルホネート、低級アルキルスルフィニル、アリールスルフィニル；アリール−低級アルキルスルフィニル、低級アルキルアリールスルフィニル、低級アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリール−低級アルキルスルホニル、低級アリールアルキル低級アルキルアリールスルホニル、ハロゲン−低級アルキルメルカプト、ハロゲン−低級アルキルスルホニル、ホスホノ（−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２）、ヒドロキシ−低級アルコキシホスホリルもしくはジ−低級アルコキシホスホリル、（Ｒ９）ＮＣ（Ｏ）−ＮＲ１０Ｒ１３、低級アルキルカルバミン酸エステルまたはカルバメートまたは−ＮＲ８Ｒ１４であり、Ｒ８およびＲ１４は、同じでも、または異なっていてもよく、かつ、独立に、Ｈまたは低級アルキルであり、あるいはＲ８およびＲ１４は、Ｎ原子と一緒になって、窒素ヘテロ環原子を含有する３〜８員の複素環を形成し、かつ窒素、酸素および硫黄から選択される１個または２個のさらなるヘテロ環原子を必要により含有してもよく、複素環は、非置換であるか、または低級アルキル、ハロ、低級アルケニル、低級アルキニル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ニトロ、アミノ、低級アルキル、アミノ、ジ低級アルキルアミノ、シアノ、カルボキシ、低級カルバルコキシ、ホルミル、低級アルカノイル、オキソ、カルバルモイル、Ｎ−低級もしくはＮ，Ｎ−ジ低級アルキルカルバモイル、メルカプト、もしくは低級アルキルチオで置換されていてもよく、そして
Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１３は、独立に、水素、低級アルキル、ハロゲン置換低級アルキル、アリール、アリール低級アルキル、ハロゲン置換アリール、ハロゲン置換アリール低級アルキルである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ａ）ＩＡＰ阻害剤化合物を患者に投与する工程と、
ｂ）ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬレベルを測定する工程と
を含む、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患を有する個体の、ＩＡＰ阻害化合物による治療に対する反応性を決定する方法。
【請求項４】
ａ）ＩＡＰ阻害剤化合物を投与する工程と、
ｂ）ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬレベルを測定する工程と
を含む、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患を治療する方法。
【請求項５】
前記ＩＡＰ阻害化合物が、式Ｉの構造を有し、
【化２】
2013505446.tif 000004
または医薬的に許容されるその塩であって、式中、
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニルまたはＣ３〜Ｃ１０シクロアルキルであり、Ｒ１は、非置換または置換されていてもよく；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルであり、Ｒ２は、非置換または置換されていてもよく；
Ｒ３は、Ｈ、ＣＦ３、Ｃ２Ｆ５、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル、ＣＨ２−Ｚであり、あるいはＲ２およびＲ３はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、複素環を形成し、アルキル、アルケニル、アルキニルまたはｈｅｔ環は、非置換または置換されていてもよく；
Ｚは、Ｈ、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨ３、ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ２ＦまたはＣＨ２ＯＨであり；
Ｒ４は、Ｃ０〜１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルであり、Ｃ０〜１０アルキル、またはシクロアルキル基は、非置換または置換されており；
Ａは、置換されていてもよくまたは非置換でもよいｈｅｔであり；
Ｄは、Ｃ１〜Ｃ７アルキレンまたはＣ２〜Ｃ９アルケニレン、Ｃ（Ｏ）、Ｏ、ＮＲ７、Ｓ（Ｏ）ｒ、Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｓ（Ｏ）ｒ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｃ０〜Ｃ１０アリールアルキルＯＣ０〜Ｃ１０アリールアルキル、またはＳ（Ｏ）ｒＣ０〜Ｃ１０アリールアルキルであり、アルキルおよびアリール基は、非置換または置換されていてもよく；
ｒは、０、１、または２であり；
Ａ１は、置換アリールまたは非置換もしくは置換ｈｅｔであり、アリールおよびｈｅｔ上の置換基は、ハロ、低級アルコキシ、ＮＲ５Ｒ６、ＣＮ、ＮＯ２またはＳＲ５であり；
各Ｑは、独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アリールＣ１〜Ｃ１０アルコキシ、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０−アルキル、（ＣＨ２）０〜６−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、アリール、アリールＣ１〜Ｃ１０アルキル、Ｏ−（ＣＨ２）０〜６アリール、（ＣＨ２）１〜６ｈｅｔ、ｈｅｔ、Ｏ−（ＣＨ２）１〜６ｈｅｔ、−ＯＲ１１、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、ＳＲ１１、Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、Ｓ（Ｏ）２−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、またはＮＲ１１−Ｓ（Ｏ）２−（Ｒ１２）であり、アルキル、シクロアルキルおよびアリールは、非置換または置換されており；
ｎは、０、１、２または３、４、５、６または７であり；
ｈｅｔは、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１〜４個のヘテロ環原子を含有する５〜７員の単環式複素環、またはＮ、ＯおよびＳから選択される１個、２個、もしくは３個のヘテロ環原子を含有する１つの５〜７員の単環式複素環を含む８〜１２員の縮合環系であり、ｈｅｔは、非置換または置換されており；
Ｒ１１およびＲ１２は、独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、（ＣＨ２）０〜６−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、（ＣＨ２）０〜６−（ＣＨ）０〜１（アリール）１〜２、Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）０〜６−アリール、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０〜６−Ｏ−フルオレニル、Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）０〜６−アリール、Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０〜６−アリール、Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１〜６−ｈｅｔ、−Ｃ（Ｓ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、−Ｃ（Ｓ）−Ｏ−（ＣＨ２）０〜６−アリール、−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）０〜６−Ｏ−フルオレニル、Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−（ＣＨ２）０〜６−アリール、−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）０〜６−アリールまたはＣ（Ｓ）−（ＣＨ２）１〜６−ｈｅｔ、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、Ｓ（Ｏ）ｎＲ１１、Ｓ（Ｏ）ｍＮＲ１１Ｒ１２、ｍ＝１または２、Ｃ（Ｓ）Ｒ１１、Ｃ（Ｓ）ＮＲ１１Ｒ１２、Ｃ（Ｓ）ＯＲ１１であり、アルキル、シクロアルキルおよびアリールは、非置換または置換されており；あるいはＲ１１およびＲ１２は、細胞膜を通る分子の輸送を促進する置換基であり；あるいはＲ１１およびＲ１２は、窒素原子と一緒にｈｅｔを形成し；
Ｒ１１およびＲ１２のアルキル置換基は、非置換であるか、またはＣ１〜Ｃ１０アルキル、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＣＦ３もしくはＮＲ１１Ｒ１２から選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；
Ｒ１１およびＲ１２の置換シクロアルキル置換基は、Ｃ２〜Ｃ１０アルケン；Ｃ１〜Ｃ６アルキル；ハロゲン；ＯＨ；Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル；Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＣＦ３；またはＮＲ１１Ｒ１２から選択される１個以上の置換基で置換されており、そして
Ｒ１１およびＲ１２の置換ｈｅｔまたは置換アリールは、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、ニトロ、ＣＮ  Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ４アルキルおよびＣ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキルから選択される１個以上の置換基で置換されており；
Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、独立に、水素、低級アルキル、アリール、アリール低級アルキル、シクロアルキル、またはシクロアルキル低級アルキルであり、そして
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｑ、およびＡおよびＡ１基上の置換基は、独立に、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、低級アルカノイル、低級アルコキシ、アリール、アリール低級アルキル、アミノ、アミノ低級アルキル、ジ低級アルキルアミノ、低級アルカノイル、アミノ低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、シアノ低級アルキル、カルボキシ、低級カルバルコキシ、低級アルカノイル、アリーロイル、低級アリールアルカノイル、カルバモイル、Ｎ−モノもしくはＮ，Ｎ−ジ低級アルキルカルバモイル、低級アルキルカルバミン酸エステル、アミジノ、グアニジン、ウレイド、メルカプト、スルホ、低級アルキルチオ、スルホアミノ、スルホンアミド、ベンゾスルホンアミド、スルホネート、スルファニル低級アルキル、アリールスルホンアミド、ハロゲン置換アリールスルホネート、低級アルキルスルフィニル、アリールスルフィニル；アリール−低級アルキルスルフィニル、低級アルキルアリールスルフィニル、低級アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリール−低級アルキルスルホニル、低級アリールアルキル低級アルキルアリールスルホニル、ハロゲン−低級アルキルメルカプト、ハロゲン−低級アルキルスルホニル、ホスホノ（−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２）、ヒドロキシ−低級アルコキシホスホリルもしくはジ−低級アルコキシホスホリル、（Ｒ９）ＮＣ（Ｏ）−ＮＲ１０Ｒ１３、低級アルキルカルバミン酸エステルまたはカルバメートまたは−ＮＲ８Ｒ１４であり、Ｒ８およびＲ１４は、同じでも、または異なっていてもよく、かつ、独立に、Ｈまたは低級アルキルであり、あるいはＲ８およびＲ１４は、Ｎ原子と一緒になって、窒素ヘテロ環原子を含有する３〜８員の複素環を形成し、かつ窒素、酸素および硫黄から選択される１個または２個のさらなるヘテロ環原子を必要により含有してもよく、複素環は、非置換であるか、または低級アルキル、ハロ、低級アルケニル、低級アルキニル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ニトロ、アミノ、低級アルキル、アミノ、ジ低級アルキルアミノ、シアノ、カルボキシ、低級カルバルコキシ、ホルミル、低級アルカノイル、オキソ、カルバルモイル、Ｎ−低級もしくはＮ，Ｎ−ジ低級アルキルカルバモイル、メルカプト、もしくは低級アルキルチオで置換されていてもよく、そして
Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１３は、独立に、水素、低級アルキル、ハロゲン置換低級アルキル、アリール、アリール低級アルキル、ハロゲン置換アリール、ハロゲン置換アリール低級アルキルである、請求項３または４に記載の方法。
【請求項６】
前記ＩＡＰ阻害剤化合物が、Ｎ−１−シクロヘキシル−２−｛２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド；Ｎ−［シクロヘキシル−（エチル−｛１−［５−（４−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−３−イル］−プロピル｝カルバモイル）−メチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド；Ｎ−（１−シクロヘキシル−２−｛２−［５−（４−フルオロ−フェノキシ）−ピリジン−３−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド；およびＮ−［１−シクロヘキシル−２−（２−｛２−［（４−フルオロフェニル）−メチル−アミノ］−ピリジン−４−イル｝ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−２−メチルアミノ−プロピンアミドおよび医薬的に許容されるその塩から選択される、請求項１、３または４に記載の方法。
【請求項７】
ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる増殖性疾患の治療における、ＩＡＰ阻害剤化合物の使用。
【請求項８】
ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患の治療における、式Ｉの化合物、またはそのＮ−オキシドもしくは医薬的に許容される塩の使用であって、式Ｉの化合物が、下記の構造を有し、
【化３】
2013505446.tif 000005
または医薬的に許容されるその塩であって、式中、
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニルまたはＣ３〜Ｃ１０シクロアルキルであり、Ｒ１は、非置換または置換されていてもよく；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルであり、Ｒ２は、非置換または置換されていてもよく；
Ｒ３は、Ｈ、ＣＦ３、Ｃ２Ｆ５、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル、ＣＨ２−Ｚであり、あるいはＲ２およびＲ３はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、複素環を形成し、アルキル、アルケニル、アルキニルまたはｈｅｔ環は、非置換または置換されていてもよく；
Ｚは、Ｈ、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨ３、ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ２ＦまたはＣＨ２ＯＨであり；
Ｒ４は、Ｃ０〜１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルであり、Ｃ０〜１０アルキル、またはシクロアルキル基は、非置換または置換されており；
Ａは、置換されていてもよくまたは非置換でもよいｈｅｔであり；
Ｄは、Ｃ１〜Ｃ７アルキレンまたはＣ２〜Ｃ９アルケニレン、Ｃ（Ｏ）、Ｏ、ＮＲ７、Ｓ（Ｏ）ｒ、Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｓ（Ｏ）ｒ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｃ０〜Ｃ１０アリールアルキルＯＣ０〜Ｃ１０アリールアルキル、またはＳ（Ｏ）ｒＣ０〜Ｃ１０アリールアルキルであり、アルキルおよびアリール基は、非置換または置換されていてもよく；
ｒは、０、１、または２であり；
Ａ１は、置換アリールまたは非置換もしくは置換ｈｅｔであり、アリールおよびｈｅｔ上の置換基は、ハロ、低級アルコキシ、ＮＲ５Ｒ６、ＣＮ、ＮＯ２またはＳＲ５であり；
各Ｑは、独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アリールＣ１〜Ｃ１０アルコキシ、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０−アルキル、（ＣＨ２）０〜６−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、アリール、アリールＣ１〜Ｃ１０アルキル、Ｏ−（ＣＨ２）０〜６アリール、（ＣＨ２）１〜６ｈｅｔ、ｈｅｔ、Ｏ−（ＣＨ２）１〜６ｈｅｔ、−ＯＲ１１、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、ＳＲ１１、Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、Ｓ（Ｏ）２−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、またはＮＲ１１−Ｓ（Ｏ）２−（Ｒ１２）であり、アルキル、シクロアルキルおよびアリールは、非置換または置換されており；
ｎは、０、１、２または３、４、５、６または７であり；
ｈｅｔは、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１〜４個のヘテロ環原子を含有する５〜７員の単環式複素環、またはＮ、ＯおよびＳから選択される１個、２個、もしくは３個のヘテロ環原子を含有する１つの５〜７員の単環式複素環を含む８〜１２員の縮合環系であり、ｈｅｔは、非置換または置換されており；
Ｒ１１およびＲ１２は、独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、（ＣＨ２）０〜６−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、（ＣＨ２）０〜６−（ＣＨ）０〜１（アリール）１〜２、Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）０〜６−アリール、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０〜６−Ｏ−フルオレニル、Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）０〜６−アリール、Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０〜６−アリール、Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１〜６−ｈｅｔ、−Ｃ（Ｓ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、−Ｃ（Ｓ）−Ｏ−（ＣＨ２）０〜６−アリール、−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）０〜６−Ｏ−フルオレニル、Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−（ＣＨ２）０〜６−アリール、−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）０〜６−アリールまたはＣ（Ｓ）−（ＣＨ２）１〜６−ｈｅｔ、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、Ｓ（Ｏ）ｎＲ１１、Ｓ（Ｏ）ｍＮＲ１１Ｒ１２、ｍ＝１または２、Ｃ（Ｓ）Ｒ１１、Ｃ（Ｓ）ＮＲ１１Ｒ１２、Ｃ（Ｓ）ＯＲ１１であり、アルキル、シクロアルキルおよびアリールは、非置換または置換されており；あるいはＲ１１およびＲ１２は、細胞膜を通る分子の輸送を促進する置換基であり；あるいはＲ１１およびＲ１２は、窒素原子と一緒にｈｅｔを形成し；
Ｒ１１およびＲ１２のアルキル置換基は、非置換であるか、またはＣ１〜Ｃ１０アルキル、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＣＦ３もしくはＮＲ１１Ｒ１２から選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；
Ｒ１１およびＲ１２の置換シクロアルキル置換基は、Ｃ２〜Ｃ１０アルケン；Ｃ１〜Ｃ６アルキル；ハロゲン；ＯＨ；Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル；Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＣＦ３；またはＮＲ１１Ｒ１２から選択される１個以上の置換基で置換されており、そして
Ｒ１１およびＲ１２の置換ｈｅｔまたは置換アリールは、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、ニトロ、ＣＮ  Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ４アルキルおよびＣ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキルから選択される１個以上の置換基で置換されており；
Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、独立に、水素、低級アルキル、アリール、アリール低級アルキル、シクロアルキル、またはシクロアルキル低級アルキルであり、そして
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｑ、およびＡおよびＡ１基上の置換基は、独立に、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、低級アルカノイル、低級アルコキシ、アリール、アリール低級アルキル、アミノ、アミノ低級アルキル、ジ低級アルキルアミノ、低級アルカノイル、アミノ低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、シアノ低級アルキル、カルボキシ、低級カルバルコキシ、低級アルカノイル、アリーロイル、低級アリールアルカノイル、カルバモイル、Ｎ−モノもしくはＮ，Ｎ−ジ低級アルキルカルバモイル、低級アルキルカルバミン酸エステル、アミジノ、グアニジン、ウレイド、メルカプト、スルホ、低級アルキルチオ、スルホアミノ、スルホンアミド、ベンゾスルホンアミド、スルホネート、スルファニル低級アルキル、アリールスルホンアミド、ハロゲン置換アリールスルホネート、低級アルキルスルフィニル、アリールスルフィニル；アリール−低級アルキルスルフィニル、低級アルキルアリールスルフィニル、低級アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリール−低級アルキルスルホニル、低級アリールアルキル低級アルキルアリールスルホニル、ハロゲン−低級アルキルメルカプト、ハロゲン−低級アルキルスルホニル、ホスホノ（−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２）、ヒドロキシ−低級アルコキシホスホリルもしくはジ−低級アルコキシホスホリル、（Ｒ９）ＮＣ（Ｏ）−ＮＲ１０Ｒ１３、低級アルキルカルバミン酸エステルまたはカルバメートまたは−ＮＲ８Ｒ１４であり、Ｒ８およびＲ１４は、同じでも、または異なっていてもよく、かつ、独立に、Ｈまたは低級アルキルであり、あるいはＲ８およびＲ１４は、Ｎ原子と一緒になって、窒素ヘテロ環原子を含有する３〜８員の複素環を形成し、かつ窒素、酸素および硫黄から選択される１個または２個のさらなるヘテロ環原子を必要により含有してもよく、複素環は、非置換であるか、または低級アルキル、ハロ、低級アルケニル、低級アルキニル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ニトロ、アミノ、低級アルキル、アミノ、ジ低級アルキルアミノ、シアノ、カルボキシ、低級カルバルコキシ、ホルミル、低級アルカノイル、オキソ、カルバルモイル、Ｎ−低級もしくはＮ，Ｎ−ジ低級アルキルカルバモイル、メルカプト、もしくは低級アルキルチオで置換されていてもよく、そして
Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１３は、独立に、水素、低級アルキル、ハロゲン置換低級アルキル、アリール、アリール低級アルキル、ハロゲン置換アリール、ハロゲン置換アリール低級アルキルである、使用。
【請求項９】
ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患の治療のための医薬組成物の製造のための、請求項９に記載の式Ｉの化合物、または医薬的に許容されるその塩の使用。
【請求項１０】
ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患を治療する方法であって、このような治療を必要としている温血動物、特にヒトに、医薬的有効量の請求項９に記載の式Ｉの化合物、または医薬的に許容されるその塩を投与する工程を含む、方法。
【請求項１１】
式Ｉの化合物が、Ｎ−１−シクロヘキシル−２−｛２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド；Ｎ−［シクロヘキシル−（エチル−｛１−［５−（４−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−３−イル］−プロピル｝カルバモイル）−メチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド；Ｎ−（１−シクロヘキシル−２−｛２−［５−（４−フルオロ−フェノキシ）−ピリジン−３−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド；およびＮ−［１−シクロヘキシル−２−（２−｛２−［（４−フルオロフェニル）−メチル−アミノ］−ピリジン−４−イル｝ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−２−メチルアミノ−プロピンアミドおよび医薬的に許容されるその塩から選択される、請求項９に記載の使用。
【請求項１２】
式Ｉの化合物が、Ｎ−（１−シクロヘキシル−２−｛２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド；Ｎ−［シクロヘキシル−（エチル−｛１−［５−（４−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−３−イル］−プロピル｝カルバモイル）−メチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド；Ｎ−（１−シクロヘキシル−２−｛２−［５−（４−フルオロ−フェノキシ）−ピリジン−３−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド；およびＮ−［１−シクロヘキシル−２−（２−｛２−［（４−フルオロフェニル）−メチル−アミノ］−ピリジン−４−イル｝ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−２−メチルアミノ−プロピンアミドおよび医薬的に許容されるその塩から選択される、請求項１０に記載の使用。
【請求項１３】
式Ｉの化合物が、Ｎ−（１−シクロヘキシル−２−｛２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド；Ｎ−［シクロヘキシル−（エチル−｛１−［５−（４−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−３−イル］−プロピル｝カルバモイル）−メチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド；Ｎ−（１−シクロヘキシル−２−｛２−［５−（４−フルオロ−フェノキシ）−ピリジン−３−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド；およびＮ−［１−シクロヘキシル−２−（２−｛２−［（４−フルオロフェニル）−メチル−アミノ］−ピリジン−４−イル｝ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−２−メチルアミノ−プロピンアミドおよび医薬的に許容されるその塩から選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
前記疾患が、増殖性疾患である、請求項９に記載の使用。
【請求項１５】
前記疾患が、がん、例えば固形腫瘍および血液由来の腫瘍（blood-born tumor）など；心疾患、例えばうっ血性心不全など；ならびにウイルス性、遺伝性、炎症性、アレルギー性、および自己免疫性の疾患から選択される、請求項９に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
開示の分野
本開示は、どの患者がＩＡＰ阻害化合物（IAP inhibiting compound）に反応するかを予想する方法に関する。このような方法は、ＩＡＰ阻害剤化合物（IAP inhibitor compound）を患者に投与する工程と、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαおよび／またはＴＲＡＩＬレベルを測定する工程とを含む。
【背景技術】
【０００２】
開示の背景
ＩＡＰ阻害剤化合物は、サイトカインであるＴＮＦの上昇した基礎発現レベルを有することが知られている腫瘍細胞系のサブセットに対して単剤活性（single agent activity）を示す。この活性についての分子的基盤は、ＩＡＰ阻害剤化合物がＣＩＡＰ１タンパク質の急速な分解を誘発する能力にある。ＣＩＡＰ１は通常ＴＮＦシグナル伝達カスケードにおいて機能し、ＲＩＰＫをトランスユビキチン化するが、これはＮＦＫＢシグナル伝達のために必須な修飾である。ＣＩＡＰ１の非存在下で、ＲＩＰＫはこれらの修飾を喪失し、ＴＮＦは強力にアポトーシス促進性となる。ＴＲＡＩＬリガンドはまた、ＩＡＰ阻害剤化合物についての強力な相乗的組合せパートナーであることが報告されてきた。ＴＮＦおよびＴＲＡＩＬ以外に、腫瘍細胞の死滅においてＩＡＰ阻害剤化合物と相乗作用を示すサイトカインは定義されてこなかった。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
開示の要旨
本開示は、ＩＡＰ阻害剤化合物が媒介する細胞死を増強する能力について、全ＴＮＦスーパーファミリー、およびさらなるサイトカインを評価する。本開示は、本明細書に下記で記載されているように、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患を有するどの個体がＩＡＰ阻害剤化合物による治療に反応するかを決定する方法を提供することによって、ＩＡＰ阻害剤化合物の使用の欠点を克服する。
【０００４】
別の実施形態において、本開示は、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患の治療のための、ＩＡＰへのＳｍａｃタンパク質の結合を阻害する化合物（「ＩＡＰ阻害剤」）の使用、ならびにＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患を治療するための医薬を製造するための方法、ならびにＩＡＰ阻害剤が、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患、特に、サイトカイン産生によってもたらされる増殖性疾患（がん、関節炎、敗血症、がんが関連する悪液質、クローン病および他の炎症性障害など）を患っている温血動物に投与される、ヒトを含めた温血動物を治療する方法に関する。
【０００５】
一実施形態において、ＩＡＰ阻害剤は、本出願において化合物Ａとも称される（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドである。
【図面の簡単な説明】
【０００６】
【図１】図１は、化合物Ａの存在下および非存在下での細胞増殖に対する、ＬＴａによるＡ２０５８メラノーマ細胞の処理の影響を例示する図である。
【図２】図２は、ＩＡＰ阻害剤化合物Ａの存在下および非存在下での細胞増殖に対する、ＴＷＥＡＫによるＡ２０５８メラノーマ細胞の処理の影響を例示する図である。
【図３】図３は、ＩＡＰ阻害剤化合物Ａの存在下および非存在下での細胞増殖に対する、ＬＩＧＨＴによるＡ２０５８メラノーマ細胞の処理の影響を例示する図である。
【図４】図４は、ＩＡＰ阻害剤化合物Ａの存在下および非存在下での細胞増殖に対する、ＦａｓによるＡ２０５８メラノーマ細胞の処理の影響を例示する図である。
【図５】図５は、ＩＡＰ阻害剤化合物Ａの存在下および非存在下での細胞増殖に対する、ＩＬ−１ＢによるＡ２０５８メラノーマ細胞の処理の影響を例示する図である。
【図６】図６は、ＩＡＰ阻害剤化合物Ａの存在下および非存在下での細胞増殖に対する、ＴＲＡＩＬによるＡ２０５８メラノーマ細胞の処理の影響を例示する図である。
【図７】図７は、ＩＡＰ阻害剤化合物Ａの存在下および非存在下での細胞増殖に対する、ＴＮＦαによるＡ２０５８メラノーマ細胞の処理の影響を例示する図である。
【図８】図８は、非感受性がん細胞系ではなく感受性がん細胞系における化合物Ａが誘発するＴＮＦ−αを例示する図である。
【図９】図９は、ＲｅｌＢではなくＲｅｌＡが、化合物Ａが誘発するＴＮＦαのために必要であることを例示する図である。
【図１０】図１０は、乳がん腫瘍細胞系異種移植片における化合物Ａによる処理が誘発するＴＮＦαを例示する図である。
【図１１】図１１は、ＴＮＦα発現が、ヒト原発性の乳房および肺の腫瘍異種移植片における化合物Ａに対する反応と相関することを例示する図である。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
開示の詳細な説明
この開示の一実施形態は、
ａ）ＩＡＰ阻害剤化合物を患者に投与する工程と、
ｂ）前記患者において、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαおよび／またはＴＲＡＩＬレベルを測定する工程と
を含む、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患を有する患者中で、どの患者がＩＡＰ阻害剤化合物に反応するかを予想する方法を提供する。
【０００８】
患者における上記レベル（複数可）がＩＡＰ阻害剤化合物の投与によって増加した場合、これは化合物が作用していることを示す。
【０００９】
この開示の別の実施形態は、
ａ）ＩＡＰ阻害剤化合物を患者に投与する工程と、
ｂ）前記患者において、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαおよびＴＲＡＩＬレベルからなる群の少なくとも１つのレベルを測定する工程と
を含む、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患を有する患者中で、どの患者がＩＡＰ阻害剤化合物に反応するかを予想する方法を提供する。
【００１０】
患者において測定したレベル（複数可）のうちの少なくとも１つがＩＡＰ阻害剤化合物の投与によって増加した場合、これは化合物が作用していることを示す。
【００１１】
この開示の別の実施形態は、
ａ）ＩＡＰ阻害剤化合物を患者に投与する工程と、
ｂ）前記患者において、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαおよびＴＲＡＩＬレベルからなる群の少なくとも２つのレベルを測定する工程と
を含む、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患を有する患者中で、どの患者がＩＡＰ阻害剤化合物に反応するかを予想する方法を提供する。
【００１２】
患者において測定したレベルのうちの少なくとも２つがＩＡＰ阻害剤化合物の投与によって増加した場合、これは化合物が作用していることを示す。
【００１３】
この開示の別の実施形態は、
ａ）ＩＡＰ阻害剤化合物を患者に投与する工程と、
ｂ）前記患者において、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαおよびＴＲＡＩＬレベルからなる群の少なくとも３つのレベルを測定する工程と
を含む、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患を有する患者中で、どの患者がＩＡＰ阻害剤化合物に反応するかを予想する方法を提供する。
【００１４】
患者において測定したレベルのうちの少なくとも３つがＩＡＰ阻害剤化合物の投与によって増加した場合、これは化合物が作用していることを示す。
【００１５】
この開示の別の実施形態は、
ａ）ＩＡＰ阻害剤化合物を患者に投与する工程と、
ｂ）前記患者において、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαおよびＴＲＡＩＬレベルからなる群の少なくとも４つのレベルを測定する工程と
を含む、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患を有する患者中で、どの患者がＩＡＰ阻害剤化合物に反応するかを予想する方法を提供する。
【００１６】
患者において測定したレベルのうちの少なくとも４つがＩＡＰ阻害剤化合物の投与によって増加した場合、これは化合物が作用していることを示す。
【００１７】
この開示の別の実施形態は、
ａ）ＩＡＰ阻害剤化合物を患者に投与する工程と、
ｂ）前記患者において、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαおよびＴＲＡＩＬレベルからなる群の少なくとも５つのレベルを測定する工程と
を含む、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患を有する患者中で、どの患者がＩＡＰ阻害剤化合物に反応するかを予想する方法を提供する。
【００１８】
患者において測定したレベルのうちの少なくとも５つがＩＡＰ阻害剤化合物の投与によって増加した場合、これは化合物が作用していることを示す。
【００１９】
この開示の別の実施形態は、
ａ）ＩＡＰ阻害剤化合物を患者に投与する工程と、
ｂ）前記患者において、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαおよびＴＲＡＩＬレベルからなる群の少なくとも６つのレベルを測定する工程と
を含む、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患を有する患者中で、どの患者がＩＡＰ阻害剤化合物に反応するかを予想する方法を提供する。
【００２０】
患者において測定したレベルのうちの少なくとも６つがＩＡＰ阻害剤化合物の投与によって増加した場合、これは化合物が作用していることを示す。
【００２１】
別の実施形態において、本開示は、構成的なＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患を治療するための医薬の製造のための、ＩＡＰへのＳｍａｃタンパク質の結合を阻害する化合物（「ＩＡＰ阻害剤」）の使用に関する。
【００２２】
本開示はまた、ＴＮＦ−α、インターフェロン−αもしくはインターフェロン−γ、またはＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達をモジュレートする他の薬剤と組み合わせてＩＡＰ阻害剤を投与することによって、構成的なＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患を治療する方法に関する。
【００２３】
本開示において使用するためのＩＡＰ阻害剤の例には、式Ｉの化合物、
【化４】
2013505446.tif 000002
または医薬的に許容されるその塩が含まれ、式中、
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニルまたはＣ３〜Ｃ１０シクロアルキルであり、Ｒ１は、非置換または置換されていてもよく；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルであり、Ｒ２は、非置換または置換されていてもよく；
Ｒ３は、Ｈ、ＣＦ３、Ｃ２Ｆ５、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル、ＣＨ２−Ｚであり、あるいはＲ２およびＲ３はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、複素環を形成し、アルキル、アルケニル、アルキニルまたはｈｅｔ環は、非置換または置換されていてもよく；
Ｚは、Ｈ、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨ３、ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ２ＦまたはＣＨ２ＯＨであり；
Ｒ４は、Ｃ０〜１０アルキル、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキルであり、Ｃ０〜１０アルキル、またはシクロアルキル基は、非置換または置換されており；
Ａは、置換されていてもよくまたは非置換でもよいｈｅｔであり；
Ｄは、Ｃ１〜Ｃ７アルキレンまたはＣ２〜Ｃ９アルケニレン、Ｃ（Ｏ）、Ｏ、ＮＲ７、Ｓ（Ｏ）ｒ、Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｓ（Ｏ）ｒ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｃ０〜Ｃ１０アリールアルキルＯＣ０〜Ｃ１０アリールアルキル、またはＳ（Ｏ）ｒＣ０〜Ｃ１０アリールアルキルであり、アルキルおよびアリール基は、非置換または置換されていてもよく；
ｒは、０、１、または２であり；
Ａ１は、置換アリールまたは非置換もしくは置換ｈｅｔであり、アリールおよびｈｅｔ上の置換基は、ハロ、低級アルコキシ、ＮＲ５Ｒ６、ＣＮ、ＮＯ２またはＳＲ５であり；
各Ｑは、独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、アリールＣ１〜Ｃ１０アルコキシ、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０−アルキル、（ＣＨ２）０〜６−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、アリール、アリールＣ１〜Ｃ１０アルキル、Ｏ−（ＣＨ２）０〜６アリール、（ＣＨ２）１〜６ｈｅｔ、ｈｅｔ、Ｏ−（ＣＨ２）１〜６ｈｅｔ、−ＯＲ１１、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、ＳＲ１１、Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、Ｓ（Ｏ）２−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、またはＮＲ１１−Ｓ（Ｏ）２−（Ｒ１２）であり、アルキル、シクロアルキルおよびアリールは、非置換または置換されており；
ｎは、０、１、２または３、４、５、６または７であり；
ｈｅｔは、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１〜４個のヘテロ環原子を含有する５〜７員の単環式複素環、またはＮ、ＯおよびＳから選択される１個、２個、もしくは３個のヘテロ環原子を含有する１つの５〜７員の単環式複素環を含む８〜１２員の縮合環系であり、ｈｅｔは、非置換または置換されており；
Ｒ１１およびＲ１２は、独立に、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、（ＣＨ２）０〜６−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、（ＣＨ２）０〜６−（ＣＨ）０〜１（アリール）１〜２、Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）０〜６−アリール、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０〜６−Ｏ−フルオレニル、Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）０〜６−アリール、Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０〜６−アリール、Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１〜６−ｈｅｔ、−Ｃ（Ｓ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）１〜６−Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、−Ｃ（Ｓ）−Ｏ−（ＣＨ２）０〜６−アリール、−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）０〜６−Ｏ−フルオレニル、Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−（ＣＨ２）０〜６−アリール、−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）０〜６−アリールまたはＣ（Ｓ）−（ＣＨ２）１〜６−ｈｅｔ、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、Ｓ（Ｏ）ｎＲ１１、Ｓ（Ｏ）ｍＮＲ１１Ｒ１２、ｍ＝１または２、Ｃ（Ｓ）Ｒ１１、Ｃ（Ｓ）ＮＲ１１Ｒ１２、Ｃ（Ｓ）ＯＲ１１であり、アルキル、シクロアルキルおよびアリールは、非置換または置換されており；あるいはＲ１１およびＲ１２は、細胞膜を通る分子の輸送を促進する置換基であり；あるいはＲ１１およびＲ１２は、窒素原子と一緒にｈｅｔを形成し；
Ｒ１１およびＲ１２のアルキル置換基は、非置換であるか、またはＣ１〜Ｃ１０アルキル、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＣＦ３もしくはＮＲ１１Ｒ１２から選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；
Ｒ１１およびＲ１２の置換シクロアルキル置換基は、Ｃ２〜Ｃ１０アルケン；Ｃ１〜Ｃ６アルキル；ハロゲン；ＯＨ；Ｏ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル；Ｓ−Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＣＦ３；またはＮＲ１１Ｒ１２から選択される１個以上の置換基で置換されており、そして、
Ｒ１１およびＲ１２の置換ｈｅｔまたは置換アリールは、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、ニトロ、ＣＮ  Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ４アルキルおよびＣ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ４−アルキルから選択される１個以上の置換基で置換されており、
Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、独立に、水素、低級アルキル、アリール、アリール低級アルキル、シクロアルキル、またはシクロアルキル低級アルキルであり、そして、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｑ、およびＡおよびＡ１基上の置換基は、独立に、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、低級アルカノイル、低級アルコキシ、アリール、アリール低級アルキル、アミノ、アミノ低級アルキル、ジ低級アルキルアミノ、低級アルカノイル、アミノ低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、シアノ低級アルキル、カルボキシ、低級カルバルコキシ（lower carbalkoxy）、低級アルカノイル、アリーロイル（aryloyl）、低級アリールアルカノイル、カルバモイル、Ｎ−モノもしくはＮ，Ｎ−ジ低級アルキルカルバモイル、低級アルキルカルバミン酸エステル、アミジノ、グアニジン、ウレイド、メルカプト、スルホ、低級アルキルチオ、スルホアミノ、スルホンアミド、ベンゾスルホンアミド、スルホネート、スルファニル低級アルキル、アリールスルホンアミド、ハロゲン置換アリールスルホネート、低級アルキルスルフィニル、アリールスルフィニル；アリール−低級アルキルスルフィニル、低級アルキルアリールスルフィニル、低級アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリール−低級アルキルスルホニル、低級アリールアルキル低級アルキルアリールスルホニル、ハロゲン−低級アルキルメルカプト、ハロゲン−低級アルキルスルホニル、ホスホノ（−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２）、ヒドロキシ−低級アルコキシホスホリルもしくはジ−低級アルコキシホスホリル、（Ｒ９）ＮＣ（Ｏ）−ＮＲ１０Ｒ１３、低級アルキルカルバミン酸エステルまたはカルバメートまたは−ＮＲ８Ｒ１４であり、Ｒ８およびＲ１４は、同じでも、または異なっていてもよく、かつ、独立に、Ｈまたは低級アルキルであり、あるいはＲ８およびＲ１４は、Ｎ原子と一緒になって、窒素ヘテロ環原子を含有する３〜８員の複素環を形成し、かつ窒素、酸素および硫黄から選択される１個または２個のさらなるヘテロ環原子を必要により含有してもよく、複素環は、非置換であっても、または低級アルキル、ハロ、低級アルケニル、低級アルキニル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ニトロ、アミノ、低級アルキル、アミノ、ジ低級アルキルアミノ、シアノ、カルボキシ、低級カルバルコキシ、ホルミル、低級アルカノイル、オキソ、カルバルモイル（carbarmoyl）、Ｎ−低級もしくはＮ，Ｎ−ジ低級アルキルカルバモイル、メルカプト、もしくは低級アルキルチオで置換されていてもよく、そして、
Ｒ９、Ｒ１０、およびＲ１３は、独立に、水素、低級アルキル、ハロゲン置換低級アルキル、アリール、アリール低級アルキル、ハロゲン置換アリール、ハロゲン置換アリール低級アルキルである。式（Ｉ）の範囲内の化合物およびそれらの製造プロセスは、参照により本出願に組み込まれているＵＳ６０／８３５，０００に開示されている。好ましい化合物は、（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物ＩＩ）；（Ｓ）−Ｎ−［（Ｓ）−シクロヘキシル−（エチル−｛（Ｓ）−１−［５−（４−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−３−イル］−プロピル｝カルバモイル）−メチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物ＩＩＩ）；（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［５−（４−フルオロ−フェノキシ）−ピリジン−３−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド；およびＮ−［１−シクロヘキシル−２−（２−｛２−［（４−フルオロフェニル）−メチル−アミノ］−ピリジン−４−イル｝ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−２−メチルアミノ−プロピンアミドおよび医薬的に許容されるその塩からなる群から選択される。
【００２４】
他のＩＡＰ阻害剤の例には、参照により本出願に組み込まれている２００５年１０月２０日に公表されたＷＯ０５／０９７７９１に開示されている化合物が含まれる。式（Ｉ）の範囲内の好ましい化合物は、本明細書において下記で化合物ＩＩであるＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドである。
【００２５】
さらなるＩＡＰ阻害剤には、全てが参照により本出願に組み込まれているＷＯ０４／００５２８４、ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０１３９８４、ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０２１８５０に開示されている化合物が含まれる。
【００２６】
本開示に使用するための他のＩＡＰ阻害剤化合物には、ＷＯ０６／０６９０６３、ＷＯ０５／０６９８８８、ＵＳ２００６／００１４７００、ＷＯ０４／００７５２９、ＵＳ２００６／００２５３４７、ＷＯ０６／０１０１１８、ＷＯ０５／０６９８９４、ＷＯ０６／０１７２９５、ＷＯ０４／００７５２９、ＷＯ０５／０９４８１８に開示されているものが含まれる。
【００２７】
一実施形態において、ＩＡＰ阻害剤は、本出願において化合物Ａとも称される、（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドである。
【００２８】
特許出願の引用が上記で示されている各場合において、化合物に関する主題は、参照により本出願に組み込まれる。含まれているのは、本明細書に開示されている、同様に、医薬的に許容されるその塩、相当するラセミ化合物、ジアステレオ異性体、エナンチオマー、互変異性体、ならびに上記の開示された化合物の相当する結晶変態（存在する場合）、例えば、溶媒和物、水和物および多形である。本開示の組合せにおける活性成分として使用される化合物は、各々、引用文献に記載されているように調製および投与することができる。またこの開示の範囲内であるのは、上記に記載の２種を超える別々の活性成分の組合せであり、すなわち、この開示の範囲内の医薬品の組合せ（pharmaceutical combination）には、３種以上の活性成分が含まれてもよい。
【００２９】
（特に、チロシンタンパク質キナーゼ依存性疾患または障害の）「治療（treatment）」または「療法（therapy）」という用語は、前記疾患、特に下記の疾患の予防的、または好ましくは治療的（待機的（palliative）、治癒的、症状緩和的、症状軽減的、キナーゼ調節的および／もしくはキナーゼ阻害的なものが挙げられるが、これらに限定されない）な治療を意味する。
【００３０】
温血動物（または患者）は、好ましくは哺乳動物、特に、ヒトである。
【００３１】
下記または上記で「使用」という用語が（ＩＡＰ阻害剤の使用に関して）（動詞または名詞として）言及される場合、これには（異なって示され、または文脈によって異なって示唆されない場合）、（別の言及がなければ）開示の下記の実施形態の任意の１つ以上が各々含まれる：別の言及がなければ必要に応じて都合よく、疾患（特に、過剰なＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬによって媒介され、または増悪し、あるいは構成的なＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患）の治療における使用、過剰なＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬによって媒介され、または増悪し、あるいは構成的なＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患の治療における使用のための医薬組成物の製造のための使用、過剰なＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬによって媒介され、または増悪し、あるいは構成的なＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患の治療における１種以上のＩＡＰ阻害剤の使用方法、過剰なＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬによって媒介され、または増悪し、あるいは構成的なＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる前記疾患の治療のための１種以上のＩＡＰ阻害剤を含む医薬調製物、ならびに過剰なＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬによって媒介され、または増悪し、あるいは構成的なＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる前記疾患の治療における１種以上のＩＡＰ阻害剤。特に、治療される疾患、したがってＩＡＰ阻害剤の「使用」のために好ましい疾患は、過剰なＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬによって媒介され、または増悪し、あるいは構成的なＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられる疾患から選択される。
【００３２】
好ましいのは、腫瘍またはがん疾患、特に、好ましくは、良性腫瘍、または特に、悪性腫瘍もしくはがん疾患、さらに好ましくは固形腫瘍、例えば、脳、腎臓、肝臓、副腎、膀胱、乳房、胃（特に、胃腫瘍）、卵巣、結腸、直腸、前立腺、膵臓、肺（例えば、肺小細胞癌または肺大細胞癌）、膣、甲状腺の癌腫、肉腫、神経膠芽腫、多発性骨髄腫（ＭＭ）または胃腸がん、特に、結腸癌または結腸直腸腺腫、または頭頸部の腫瘍、例えば、頭頸部の扁平上皮癌（squameous carcinoma）、特に上皮性の新生物を含めた、例えば、乳癌の場合；表皮性過剰増殖（がん以外）、特に、乾癬；前立腺肥大；または白血病、特に、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）および慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）から選択される増殖性障害（特に、構成的なＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬシグナル伝達によって特徴付けられるもの）の治療（予防を含めた）におけるＩＡＰ阻害剤の使用である。
【００３３】
用いられるＩＡＰ阻害剤化合物の正確な投与量は、宿主、治療を受けている状態の性質および重症度、投与方法を含めていくつかの要因に依存する。ＩＡＰ阻害剤化合物は、経口的、非経口的、例えば、腹腔内、静脈内、筋肉内、皮下、腫瘍内、または直腸、または経腸的を含めて、任意の経路によって投与することができる。好ましくは、ＩＡＰ阻害剤化合物は、経口的に、好ましくは１〜３００ｍｇ／ｋｇ体重の１日投与量で、または大部分のより大きな霊長類については、５０〜５０００ｍｇ、好ましくは５００〜３０００ｍｇの１日投与量で投与する。好ましい経口１日投与量は、単回用量として、または１日２回投与などの多回用量に分割して投与する、１〜７５ｍｇ／ｋｇ体重、または大部分のより大きな霊長類については、１０〜２０００ｍｇの１日投与量である。
【００３４】
通常、小用量を最初に投与し、治療を受けている宿主についての最適な投与量が決定されるまで投与量を徐々に増加させる。投与量の上限は、副作用によって決まるものであり、治療を受けている宿主についての治験によって決定することができる。
【００３５】
投与レジメン（dosage regimen）は、特定の徴候、患者の年齢、体重、および全身の健康状態、ならびに所望の反応に対して用量設定しなくてはならないが、一般に用量は、単一または複数の１日当たりの投与において必要に応じて約１０〜約５００ｍｇ／日である。一般に、最初の治療レジメンは、本開示の化合物による他のＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬが媒介する病態についてのＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαまたはＴＲＡＩＬ活性を妨害するのに有効であることが知られているものから複製することができる。治療を受けている個体は、Ｔ細胞数およびＴ４／Ｔ８比および／またはウイルス血症の基準（リバーストランスクリプターゼまたはウイルスタンパク質のレベルなど）について、ならびに／あるいはサイトカインが媒介する疾患に関連する問題（悪液質または筋変性など）の進行について定期的にチェックを受ける。通常の治療レジメンのすぐ後に効果がない場合、投与されるサイトカイン活性阻害剤の量を、例えば、１週間に５０パーセント上昇させる。
【００３６】
ＩＡＰ阻害剤化合物は、１種以上の医薬的に許容される担体、および必要により、１種以上の他の通常の医薬アジュバントと合わせて、錠剤、カプセル剤、カプレットなどの形態で経腸的に、例えば経口的に、あるいは無菌の注射可能な溶液剤または懸濁剤の形態で非経口的に、例えば、腹腔内または静脈内に投与し得る。経腸および非経口用の組成物は、通常の手段によって調製し得る。
【００３７】
下記の実施例は例示として提供し、本開示の範囲を制限することを意図しない。これらの実施例において同定したサイトカインは、単独療法に反応しそうな患者を選択する目的のために、化合物Ａとして知られる（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドを使用して、一般がん患者集団において血漿および／または腫瘍中で潜在的にモニターすることができる（potentially be monitoresd）。この開示は、化合物Ａについての可能性のあるコンパニオン診断マーカー（potential companion diagnostic markers）として、ＩＬ１Ｂ、リンホトキシンα（ＬＴａ）、ＴＷＥＡＫ、ＬＩＧＨＴ、Ｆａｓ、ＴＮＦαおよびＴＲＡＩＬを同定する。
【実施例】
【００３８】
実施例１：  化合物Ａの存在下および非存在下での細胞増殖に対する、ＬＴａによるＡ２０５８メラノーマ細胞の処理
１日目に、Ａ２０５８接着性メラノーマ細胞（adherent melanoma cell）を、２つの９６ウェルクリアフラットボトムプレートに蒔く。Ａ列の全てのウェルは、９０ｕＬの培地を含有する。Ｂ〜Ｇ列の全てのウェルは、ウェル毎に９０ｕＬの培地中３０００個の細胞を含有する。次いで、プレートを３７℃、５％ＣＯ２にて一晩１８時間インキュベートする。
【００３９】
２日目に、細胞を化合物ＡおよびＬＴαで処理する。処理は３連で行う。プレート１において、細胞を１０ｕＬの化合物Ａによって１ｕＭの最終濃度で最初に処理する。化合物ＡをＤＭＳＯ、次いで培地に希釈し、処理ウェルにおいて０．２％最終濃度のＤＭＳＯを得る。次いで、細胞を１０ｕＬの段階希釈したＬＴαによって１０ｎｇ、５ｎｇ、２．５ｎｇ、１．２５ｎｇ、０．６２５ｎｇ、３１２．５ｐｇ、１５６．２５ｐｇ、７８．１２５ｐｇ、３９．０６２５ｐｇの最終濃度で処理する（および１つの未処理ウェル）。残りの細胞を１０ｕＬの段階希釈したＬＴαで処理する（化合物Ａで処理しない）。プレート２を、０時間プレートとして使用する。細胞生存率を測定するために、５０ｕＬのＣｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏ（ＣＴＧ）をＡ列（培地のみ）ならびにＢ列（細胞および培地）に加える。ＣＴＧは、発光リーダーによって測定することができる生存細胞から放出されるＡＴＰの量を測定する。ＣＴＧを有する細胞を、室温で１０分間インキュベートし、次いで読み取る。
【００４０】
５日目に、５０ｕＬのＣＴＧをプレート１のＡ〜Ｇ列に加え、室温で１０分間インキュベートし、発光プログラムで読み取る。生データは、０時間プレートおよびバックグラウンドノイズを説明するために調整する。３連の値を平均し、対照増殖パーセントを計算する。データを折れ線グラフによって表す（図１に例示するように、ｘ軸上にサイトカインの濃度およびｙ軸上に対照増殖パーセント）。
【００４１】
実施例２：  化合物Ａの存在下および非存在下での細胞増殖に対する、ＴＷＥＡＫによるＡ２０５８メラノーマ細胞の処理
１日目に、Ａ２０５８接着性メラノーマ細胞を、２つの９６ウェルクリアフラットボトムプレートに蒔く。Ａ列の全てのウェルは、９０ｕＬの培地を含有する。Ｂ〜Ｇ列の全てのウェルは、ウェル毎に９０ｕＬの培地中３０００個の細胞を含有する。次いで、プレートを３７℃、５％ＣＯ２にて一晩１８時間インキュベートする。
【００４２】
２日目に、細胞を化合物ＡおよびＴＷＥＡＫで処理する。処理は３連で行う。プレート１において、細胞を１０ｕＬの化合物Ａによって１ｕＭの最終濃度で最初に処理する。化合物ＡをＤＭＳＯ、次いで培地に希釈し、処理ウェルにおいて０．２％最終濃度のＤＭＳＯを得る。次いで、細胞を１０ｕＬの段階希釈したＴＷＥＡＫによって１５６．２５ｎｇ、７８．１２５ｎｇ、３９．０６ｎｇ、１９．５３ｎｇ、９．７７ｎｇ、４．８８ｎｇ、２．４４ｎｇ、１．２２ｎｇ、６１０．３５ｐｇｎｇの最終濃度で処理する（および１つの未処理ウェル）。残りの細胞を１０ｕＬの段階希釈したＴＷＥＡＫで処理する（化合物Ａで処理しない）。プレート２を、０時間プレートとして使用する。細胞生存率を測定するために、５０ｕＬのＣｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏ（ＣＴＧ）をＡ列（培地のみ）ならびにＢ列（細胞および培地）に加える。ＣＴＧは、発光リーダーによって測定することができる生存細胞から放出されるＡＴＰの量を測定する。ＣＴＧを有する細胞を、室温で１０分間インキュベートし、次いで読み取る。
【００４３】
５日目に、５０ｕＬのＣＴＧをプレート１のＡ〜Ｇ列に加え、室温で１０分間インキュベートし、発光プログラムで読み取る。生データは、０時間プレートおよびバックグラウンドノイズを説明するために調整する。３連の値を平均し、対照増殖パーセントを計算する。データを折れ線グラフによって表す（図２に例示するように、ｘ軸上にサイトカインの濃度およびｙ軸上に対照増殖パーセント）。
【００４４】
実施例３：  化合物Ａの存在下および非存在下での細胞増殖に対する、ＬＩＧＨＴによるＡ２０５８メラノーマ細胞の処理
１日目に、Ａ２０５８接着性メラノーマ細胞を、２つの９６ウェルクリアフラットボトムプレートに蒔く。Ａ列の全てのウェルは、９０ｕＬの培地を含有する。Ｂ〜Ｇ列の全てのウェルは、ウェル毎に９０ｕＬの培地中３０００個の細胞を含有する。次いで、プレートを３７℃、５％ＣＯ２にて一晩１８時間インキュベートする。
【００４５】
２日目に、細胞を化合物ＡおよびＬＩＧＨＴで処理する。処理は３連で行う。プレート１において、細胞を１０ｕＬの化合物Ａによって１ｕＭの最終濃度で最初に処理する。化合物ＡをＤＭＳＯ、次いで培地に希釈し、処理ウェルにおいて０．２％最終濃度のＤＭＳＯを得る。次いで、細胞を１０ｕＬの段階希釈したＬＩＧＨＴによって４００ｎｇ、８０ｎｇ、１６ｎｇ、３．２ｎｇ、６４０ｐｇ、１２８ｐｇ、２５．６ｐｇ、５．１２ｐｇ、１．０２４ｐｇの最終濃度で処理する（および１つの未処理ウェル）。残りの細胞を１０ｕＬの段階希釈したＬＩＧＨＴで処理する（化合物Ａで処理しない）。プレート２を、０時間プレートとして使用する。細胞生存率を測定するために、５０ｕＬのＣｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏ（ＣＴＧ）をＡ列（培地のみ）ならびにＢ列（細胞および培地）に加える。ＣＴＧは、発光リーダーによって測定することができる生存細胞から放出されるＡＴＰの量を測定する。ＣＴＧを有する細胞を、室温で１０分間インキュベートし、次いで読み取る。
【００４６】
５日目に、５０ｕＬのＣＴＧをプレート１のＡ〜Ｇ列に加え、室温で１０分間インキュベートし、発光プログラムで読み取る。生データは、０時間プレートおよびバックグラウンドノイズを説明するために調整する。３連の値を平均し、対照増殖パーセントを計算する。データを折れ線グラフによって表す（図３に例示するように、ｘ軸上にサイトカインの濃度およびｙ軸上に対照増殖パーセント）。
【００４７】
実施例４：  化合物Ａの存在下および非存在下での細胞増殖に対する、ＦａｓによるＡ２０５８メラノーマ細胞の処理
１日目に、Ａ２０５８接着性メラノーマ細胞を、２つの９６ウェルクリアフラットボトムプレートに蒔く。Ａ列の全てのウェルは、９０ｕＬの培地を含有する。Ｂ〜Ｇ列の全てのウェルは、ウェル毎に９０ｕＬの培地中３０００個の細胞を含有する。次いで、プレートを３７℃、５％ＣＯ２にて一晩１８時間インキュベートする。
【００４８】
２日目に、細胞を化合物ＡおよびＦａｓで処理する。処理は３連で行う。プレート１において、細胞を１０ｕＬの化合物Ａによって１ｕＭの最終濃度で最初に処理する。化合物ＡをＤＭＳＯ、次いで培地に希釈し、処理ウェルにおいて０．２％最終濃度のＤＭＳＯを得る。次いで、細胞を１０ｕＬの段階希釈したＦａｓによって３０ｎｇ、１５ｎｇ、７．５ｎｇ、３．７５ｎｇ、１．８７５ｎｇ、９３７．５ｐｇ、４６８．７５ｐｇ、２３４．３７５ｐｇ、１１７．２ｐｇの最終濃度で処理する（および１つの未処理ウェル）。残りの細胞を１０ｕＬの段階希釈したＦａｓで処理する（化合物Ａで処理しない）。プレート２を、０時間プレートとして使用する。細胞生存率を測定するために、５０ｕＬのＣｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏ（ＣＴＧ）をＡ列（培地のみ）ならびにＢ列（細胞および培地）に加える。ＣＴＧは、発光リーダーによって測定することができる生存細胞から放出されるＡＴＰの量を測定する。ＣＴＧを有する細胞を、室温で１０分間インキュベートし、次いで読み取る。
【００４９】
５日目に、５０ｕＬのＣＴＧをプレート１のＡ〜Ｇ列に加え、室温で１０分間インキュベートし、発光プログラムで読み取る。生データは、０時間プレートおよびバックグラウンドノイズを説明するために調整する。３連の値を平均し、対照増殖パーセントを計算する。データを折れ線グラフによって表す（図４に例示するように、ｘ軸上にサイトカインの濃度およびｙ軸上に対照増殖パーセント）。
【００５０】
実施例５：  化合物Ａの存在下および非存在下での細胞増殖に対する、ＩＬ−１ＢによるＡ２０５８メラノーマ細胞の処理
１日目に、Ａ２０５８接着性メラノーマ細胞を、２つの９６ウェルクリアフラットボトムプレートに蒔く。Ａ列の全てのウェルは、９０ｕＬの培地を含有する。Ｂ〜Ｇ列の全てのウェルは、ウェル毎に９０ｕＬの培地中３０００個の細胞を含有する。次いで、プレートを３７℃、５％ＣＯ２にて一晩１８時間インキュベートする。
【００５１】
２日目に、細胞を化合物ＡおよびＩＬ−１Ｂで処理する。処理は３連で行う。プレート１において、細胞を１０ｕＬの化合物Ａによって１ｕＭの最終濃度で最初に処理する。化合物ＡをＤＭＳＯ、次いで培地に希釈し、処理ウェルにおいて０．２％最終濃度のＤＭＳＯを得る。次いで、細胞を１０ｕＬの段階希釈したＩＬ−１Ｂによって１０ｎｇ、２ｎｇ、０．４ｎｇ、８０ｐｇ、１６ｐｇ、３．２ｐｇ、０．６４ｐｇ、０．１２８ｐｇ、０．０２５６ｐｇの最終濃度で処理する（および１つの未処理ウェル）。残りの細胞を１０ｕＬの段階希釈したＩＬ−１Ｂで処理する（化合物Ａで処理しない）。プレート２を、０時間プレートとして使用する。細胞生存率を測定するために、５０ｕＬのＣｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏ（ＣＴＧ）をＡ列（培地のみ）ならびにＢ列（細胞および培地）に加える。ＣＴＧは、発光リーダーによって測定することができる生存細胞から放出されるＡＴＰの量を測定する。ＣＴＧを有する細胞を、室温で１０分間インキュベートし、次いで読み取る。
【００５２】
５日目に、５０ｕＬのＣＴＧをプレート１のＡ〜Ｇ列に加え、室温で１０分間インキュベートし、発光プログラムで読み取る。生データは、０時間プレートおよびバックグラウンドノイズを説明するために調整する。３連の値を平均し、対照増殖パーセントを計算する。データを折れ線グラフによって表す（ｘ軸上にサイトカインの濃度およびｙ軸上に対照増殖パーセント）。
【００５３】
実施例６：  化合物Ａの存在下および非存在下での細胞増殖に対する、ＴＲＡＩＬによるＡ２０５８メラノーマ細胞の処理
１日目に、Ａ２０５８接着性メラノーマ細胞を、２つの９６ウェルクリアフラットボトムプレートに蒔く。Ａ列の全てのウェルは、９０ｕＬの培地を含有する。Ｂ〜Ｇ列の全てのウェルは、ウェル毎に９０ｕＬの培地中３０００個の細胞を含有する。次いで、プレートを３７℃、５％ＣＯ２にて一晩１８時間インキュベートする。
【００５４】
２日目に、細胞を化合物ＡおよびＴＲＡＩＬで処理する。処理は３連で行う。プレート１において、細胞を１０ｕＬの化合物Ａによって１ｕＭの最終濃度で最初に処理する。化合物ＡをＤＭＳＯ、次いで培地に希釈し、処理ウェルにおいて０．２％最終濃度のＤＭＳＯを得る。次いで、細胞を１０ｕＬの段階希釈したＴＲＡＩＬによって３０ｎｇ、１５ｎｇ、７．５ｎｇ、３．７５ｎｇ、１．８７５ｎｇ、９３７．５ｐｇ、４６８．７５ｐｇ、２３４．３７５ｐｇ、１１７．２ｐｇの最終濃度で処理する（および１つの未処理ウェル）。残りの細胞を１０ｕＬの段階希釈したＴＲＡＩＬで処理する（化合物Ａで処理しない）。プレート２を、０時間プレートとして使用する。細胞生存率を測定するために、５０ｕＬのＣｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏ（ＣＴＧ）をＡ列（培地のみ）ならびにＢ列（細胞および培地）に加える。ＣＴＧは、発光リーダーによって測定することができる生存細胞から放出されるＡＴＰの量を測定する。ＣＴＧを有する細胞を、室温で１０分間インキュベートし、次いで読み取る。
【００５５】
５日目に、５０ｕＬのＣＴＧをプレート１のＡ〜Ｇ列に加え、室温で１０分間インキュベートし、発光プログラムで読み取る。生データは、０時間プレートおよびバックグラウンドノイズを説明するために調整する。３連の値を平均し、対照増殖パーセントを計算する。データを折れ線グラフによって表す（図６に例示するように、ｘ軸上にサイトカインの濃度およびｙ軸上に対照増殖パーセント）。
【００５６】
実施例７：  化合物Ａの存在下および非存在下での細胞増殖に対する、ＴＮＦαによるＡ２０５８メラノーマ細胞の処理
１日目に、Ａ２０５８接着性メラノーマ細胞を、２つの９６ウェルクリアフラットボトムプレートに蒔く。Ａ列の全てのウェルは、９０ｕＬの培地を含有する。Ｂ〜Ｇ列の全てのウェルは、ウェル毎に９０ｕＬの培地中３０００個の細胞を含有する。次いで、プレートを３７℃、５％ＣＯ２にて一晩１８時間インキュベートする。
【００５７】
２日目に、細胞を化合物ＡおよびＴＮＦ−αで処理する。処理は３連で行う。プレート１において、細胞を１０ｕＬの化合物Ａによって１ｕＭの最終濃度で最初に処理する。化合物ＡをＤＭＳＯ、次いで培地に希釈し、処理ウェルにおいて０．２％最終濃度のＤＭＳＯを得る。次いで、細胞を１０ｕＬの段階希釈したＴＮＦ−αによって２０ｎｇ、４ｎｇ、０．８ｎｇ、０．１６ｎｇ、３２ｐｇ、６．４ｐｇ、１．２８ｐｇ、０．２５６ｐｇ、０．０５１２ｐｇの最終濃度で処理する（および１つの未処理ウェル）。残りの細胞を１０ｕＬの段階希釈したＴＮＦ−αで処理する（化合物Ａで処理しない）。プレート２を、０時間プレートとして使用する。細胞生存率を測定するために、５０ｕＬのＣｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏ（ＣＴＧ）をＡ列（培地のみ）ならびにＢ列（細胞および培地）に加える。ＣＴＧは、発光リーダーによって測定することができる生存細胞から放出されるＡＴＰの量を測定する。ＣＴＧを有する細胞を、室温で１０分間インキュベートし、次いで読み取る。
【００５８】
５日目に、５０ｕＬのＣＴＧをプレート１のＡ〜Ｇ列に加え、室温で１０分間インキュベートし、発光プログラムで読み取る。生データは、０時間プレートおよびバックグラウンドノイズを説明するために調整する。３連の値を平均し、対照増殖パーセントを計算する。データを折れ線グラフによって表す（図７に例示するように、ｘ軸上にサイトカインの濃度およびｙ軸上に対照増殖パーセント）。
【００５９】
実施例８：  非感受性がん細胞系ではなく感受性がん細胞系における化合物Ａが誘発するＴＮＦ−α
ＴＮＦαシグナル伝達経路の関与がインビトロで単剤活性のために不可欠であるかを試験するために、一団のがん細胞系を、化合物Ａに対する感受性について評価し、一方平行して、分泌されたＴＮＦα発現レベルを、化合物の添加の前および２４時間後にＥＬＩＳＡによって評価する。３日間の生存率アッセイにおいて化合物Ａ（１０ｕＭの濃度まで）に反応しない細胞系を、非感受性として標識する。一貫して、化合物Ａによる処理の後にＴＮＦαをアップレギュレートした細胞系は、ＴＮＦαをアップレギュレートしない細胞系よりも、化合物Ａに対してより感受性である（３日間の生存率アッセイにおいて評価したように、ＩＣ５０を図８において報告する）（図８）。基礎ＴＮＦαレベルの増加はまた、化合物Ａに対する感受性と正に相関する（図８）。
【００６０】
ＴＮＦα  ＥＬＩＳＡ法：
１日目に、がん細胞を、２つの９６ウェルクリアフラットボトムプレートに蒔く。Ａ列の全てのウェルは、２００ｕＬの培地を含有する。Ｂ〜Ｇ列の全てのウェルは、ウェル毎に１０％ＦＢＳを有する１８０ｕｌのＲＰＭＩ培地中５０００個の細胞を含有する。次いで、プレートを３７Ｃ、５％ＣＯ２にて一晩１８時間インキュベートする。２日目に、細胞を２０ｕＬの段階希釈した化合物Ａで処理する。化合物ＡをＤＭＳＯ、次いで培地に希釈し、０．２％最終濃度のＤＭＳＯを得る。対照ウェルをＤＭＳＯで処理する（化合物で処理しない）。プレート２を平行して処理し、生存率を測定するために使用する。細胞を化合物と共に２４時間インキュベートした後、２００ｕＬの培地を全ての処理したウェルから取り出し、新しい９６ウェルクリアフラットボトムプレートに移す。培地中のＴＮＦαレベルを、Ｒ＆Ｄ  ＱｕａｎｔｉｋｉｎｅヒトＴＮＦα高感度ＥＬＩＳＡアッセイ、カタログ番号ＨＳＴＡ００Ｄを使用して測定する。キット中に提供される試薬を示されたように調製し、提供されたアッセイプロトコルに指示通りに従う。比色分析読み出しを、停止液の添加の３０分以内に４９０ｎＭにて分光計で測定する。バックグラウンドノイズを説明するために生データをノーマライズし、２連の値を平均し、濃度を標準曲線から計算する（図８）。細胞生存率を測定するために、５０ｕＬの培地をプレート２の処理ウェルから取り出し、５０ｕＬのＣｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏ（ＣＴＧ）を加える。ＣＴＧは、発光プレートリーダーによって測定することができる生存細胞から放出されるＡＴＰの量を測定する。ＣＴＧを有する細胞を、室温で１０分間インキュベートし、発光プレートリーダーで読み取る。バックグラウンドノイズを説明するために生データをノーマライズし、２連の値を平均し、対照増殖パーセントを計算する。これらの値を使用して、図８において報告する相当するＴＮＦαのＥＬＩＳＡ値をノーマライズする。
【００６１】
ＩＣ５０決定のための３日間の生存率アッセイ法：
１日目に、がん細胞系を、２つの９６ウェルクリアフラットボトムプレートに蒔く。Ａ列の全てのウェルは、２００ｕＬの培地を含有する。Ｂ〜Ｇ列の全てのウェルは、ウェル毎に１８０ｕｌの培地中５０００個の細胞を含有する。次いで、プレートを３７Ｃ、５％ＣＯ２にて一晩１８時間インキュベートする。２日目に、細胞を段階希釈した化合物Ａで処理する。化合物ＡをＤＭＳＯ、次いで培地に希釈し、０．２％最終濃度のＤＭＳＯを得る。対照ウェルをＤＭＳＯで処理する（化合物で処理しない）。プレート２を、０時間プレートとして使用する。細胞生存率を測定するために、５０ｕＬの培地を全てのウェルから取り出し、５０ｕＬのＣｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏ（ＣＴＧ）をＡ列（培地のみ）、ならびにＢ列（細胞および培地）に加える。ＣＴＧを有する細胞を、室温で１０分間インキュベートし、次いで読み取る。ＣＴＧは、発光プレートリーダーによって測定することができる生存細胞から放出されるＡＴＰの量を測定する。５日目に、５０ｕＬの培地を全てのウェルから取り出し、５０ｕＬのＣＴＧをプレート１のＡ〜Ｇ列に加え、室温で１０分間インキュベートし、発光プレートリーダーで読み取る。０時間プレートおよびバックグラウンドノイズを説明するために生データをノーマライズする。３連の値を平均し、対照増殖パーセントを計算する。ビヒクル処理した対照細胞に対して、がん細胞系（cancer line）の増殖を５０％阻害するのに必要な化合物Ａの用量を決定し、図８において報告する。
【００６２】
実施例９：  ＲｅｌＢではなくＲｅｌＡは、化合物Ａが誘発するＴＮＦαのために必要である
ＣＩＡＰ１の自己ユビキチン化およびプロテオソームが媒介する分解を刺激することによって、Ｓｍａｃ模倣物は、腫瘍細胞をＴＮＦαが媒介するアポトーシスに対して過敏化する。実際に、Ｓｍａｃ模倣物は、非感受性腫瘍細胞系ではなく感受性腫瘍細胞系においてＴＮＦαの産生を誘発する。ＮＦｋＢ活性化およびそれに続くＴＮＦα誘発の正確な機序はよく理解されておらず、化合物ＡがＴＮＦαを誘発する機序を同定することは、患者の層別化のための可能性のあるバイオマーカー（potential biomarker）を提供する。
【００６３】
この機序を解明するために、カノニカルおよび非カノニカルＮＦｋＢ経路（canonical and non-canonical NFkB pathway）のノード（nodes）をノックダウンし、Ｓｍａｃ模倣化合物である化合物Ａによる処理後の、ＮＦｋＢ活性化のマーカーであるＴＮＦα発現の誘発を評価する。カノニカルＮＦｋＢ経路において、ＳＫ−ＯＶ−３卵巣癌細胞系（ＳＫＯＶ）におけるＲｅｌＡのｓｈＲＮＡが媒介するノックダウンはＴＮＦ誘発を遮断した(ablate)が（ＥＬＩＳＡによって測定、図９）、これはカノニカル経路の活性化が化合物Ａの活性のために必要であることを示唆する。非カノニカルＮＦｋＢ経路において、ＲｅｌＢのｓｈＲＮＡが媒介するノックダウンは、化合物Ａが媒介するＴＮＦαの誘発に影響を与えない（図９）。全体的に、化合物ＡによるＴＮＦαの誘発はカノニカルＮＦｋＢシグナル伝達を必要とすることをこれらの結果は示す。したがって、活性または機能的カノニカルＮＦｋＢシグナル伝達を伴う腫瘍は、ＴＮＦα発現または活性ＮＦｋＢシグナル伝達の他のマーカーからも明らかなように、化合物Ａに反応する可能性が高い。
【００６４】
ＴＮＦα  ＥＬＩＳＡ法：
１日目に、ＳＫＯＶがん細胞を、２つの９６ウェルクリアフラットボトムプレートに蒔く。Ａ列の全てのウェルは、２００ｕＬの培地を含有する。Ｂ〜Ｇ列の全てのウェルは、１０％ＦＢＳおよび１ｕｇ／ｍＬのピューロマイシンと共に、ウェル毎に１８０ｕｌのＲＰＭＩ培地中５０００個の細胞を含有する。次いで、プレートを３７Ｃ、５％ＣＯ２にて一晩１８時間インキュベートする。２日目に、細胞を２０ｕＬの段階希釈した化合物Ａで処理する。化合物ＡをＤＭＳＯ、次いで培地に希釈し、０．２％最終濃度のＤＭＳＯを得る。対照ウェルをＤＭＳＯで処理する（化合物で処理しない）。プレート２を平行して処理し、生存率を測定するために使用する。細胞を化合物と共に２４時間インキュベートした後、２００ｕＬの培地を全ての処理したウェルから取り出し、新しい９６ウェルクリアフラットボトムプレートに移す。培地中のＴＮＦαレベルを、Ｒ＆Ｄ  ＱｕａｎｔｉｋｉｎｅヒトＴＮＦα高感度ＥＬＩＳＡアッセイ、カタログ番号ＨＳＴＡ００Ｄを使用して測定する。キット中に提供される試薬を示されたように調製し、提供されたアッセイプロトコルに指示通りに従う。比色分析読み出しを、停止液の添加の３０分以内に４９０ｎＭにて分光計で測定する。バックグラウンドノイズを説明するために生データをノーマライズし、２連の値を平均し、濃度を標準曲線から計算する（図９）。細胞生存率を測定するために、５０ｕＬの培地をプレート２の処理ウェルから取り出し、５０ｕＬのＣｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏ（ＣＴＧ）を加える。ＣＴＧは、発光プレートリーダーによって測定することができる生存細胞から放出されるＡＴＰの量を測定する。ＣＴＧを有する細胞を、室温で１０分間インキュベートし、発光プレートリーダーで読み取る。バックグラウンドノイズを説明するために生データをノーマライズし、２連の値を平均し、対照増殖パーセントを計算する。これらの値を使用して、図９において報告する相当するＴＮＦαＥＬＩＳＡ値をノーマライズする。
【００６５】
実施例１０：  乳がん腫瘍細胞系異種移植片における化合物Ａによる処理によって誘発されるＴＮＦα
インビトロのアッセイにおいて、化合物Ａは、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳がん細胞系を含めた種々の腫瘍細胞系においてＴＮＦαの誘発、カスパーゼの活性化およびそれに続く細胞死を誘発する。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳房腫瘍細胞系において観察されるＴＮＦαの誘発がインビボの設定に変換されるかを評価するために、実験を、同所性移植したＭＢＡ−ＭＤ−２３１腫瘍を有するマウスにおいて行う。
【００６６】
化合物Ａの単一の経口用量を、平均腫瘍容積（mean tumor volume）が概ね１４１ｍｍ３に達したときに腫瘍細胞移植の３９日後に投与した。腫瘍を各動物から収集し、溶解し、ＥＬＩＳＡによって分析し、ＴＮＦα濃度を決定する。
【００６７】
化合物Ａの単一の経口用量に続いて、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１腫瘍ライセート中でＴＮＦαが概ね１０倍増加する（図１０）。
【００６８】
実施例１１：  ＴＮＦα発現は、ヒト原発性の乳房および肺腫瘍異種移植片における化合物Ａに対する反応と相関する
ヒト腫瘍を外科的に切除し、次いでヌードマウスにおいて直接移植、続いて継代した患者由来の異種移植片モデルは、プラスチック層上での二次元の増殖について選択圧がないため、細胞系モデルより潜在的により臨床的に関連性がある。
【００６９】
化合物Ａを、三重陰性乳がん（triple negative brest cancer）および非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）モデルの両方を表す１８人の患者由来の腫瘍モデルにおいて単剤活性について試験した。化合物Ａによる腫瘍増殖阻害を、％Ｔ／Ｃ（対照ビヒクルで処理したマウスにおける腫瘍の増殖に対する、化合物Ａで処理したマウスにおける腫瘍の増殖割合）として報告する。腫瘍の完全な退縮は−１００％Ｔ／Ｃとして報告し、静止状態の腫瘍（tumor stasis）（増殖なし）は０％Ｔ／Ｃとして報告し、効果なしは１００％Ｔ／Ｃとして報告する。化合物Ａについて腫瘍退縮から効果なしまでの範囲の反応が観察された。静止状態（Ｔ／Ｃ≦４０％）は、評価した原発性モデルの２５％において観察された。化合物Ａに対してインビトロで感受性を示す腫瘍細胞系は自己分泌ＴＮＦシグナル伝達によって特徴付けられるという観察に一致して、大部分の感受性原発性腫瘍モデルはまた、Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ  ｍＲＮＡ転写プロファイリングデータに基づいて高いＴＮＦα発現を示した（図１１）。
【００７０】
本明細書に記載されているものの変形形態、修正形態、および他の実装形態は、本発明の教示の精神および本質的な特徴から逸脱することなく、当業者であれば思いつくであろう。したがって、本開示の範囲は、前述の例示的記載によってではなく、代わりに下記の特許請求の範囲によって定義され、特許請求の範囲と同等のものの意味および範囲内にある全ての変更は、本明細書中に包含されることが意図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【国際調査報告】
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