(57)【要約】  心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって、(i) 患者のTnIまたはCK-MBの循環レベルをモニターするステップ; および(ii) TnIまたはCK-MBの循環レベルが、移植後の最初の24時間、指定の閾値を超えないようにするために十分な量のSERP-Iを、患者に投与するステップを含む方法を開示する。SERP-Iについての指定の値は、TnIまたはCK-MBの循環レベルが、移植後の最初の24時間の期間に指定の閾値を超えないようにするために十分な値である。移植後の24時間以内に開始される患者へのSERP-Iの投与計画も開示される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって、以下のステップ:
(i) 患者のトロポニンI (TnI)の循環レベルをモニターするステップ; および
(ii) TnIの循環レベルが、患者のステント移植後の最初の24時間、閾値0.5 ng/mlを超えないようにするために十分な量のSERP-1を、患者に投与するステップ
を含む、方法。
【請求項２】
SERP-1の量が、患者のステント移植後の最初の24時間、TnIの循環レベルが閾値0.5 ng/mlを超えないようにするために十分なSERP-1の最小用量の3倍以下である、請求項１の方法。
【請求項３】
心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって、以下のステップ:
(i) 患者のTnIの循環レベルをモニターするステップ; および
(ii) 患者のステント移植後の最初の24時間の期間に少なくとも8.5 ng・h/mlのSERP-1の曝露を達成するために十分な量のSERP-1を、患者に投与するステップ
を含む、方法。
【請求項４】
SERP-1の量が、患者のステント移植後の最初の24時間の期間に少なくとも8.5 ng・h/mlのSERP-1の曝露を達成するために十分なSERP-1の最小用量の3倍以下である、請求項３の方法。
【請求項５】
心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって、以下のステップ:
(i) 患者のTnIの循環レベルをモニターするステップ; および
(ii) 患者のステント移植の24時間以内に5μg/kg/日を超える量のSERP-1を、患者に投与するステップ
を含む、方法。
【請求項６】
SERP-1の量が約15μg/kg/日〜約250μg/kg/日である、請求項５の方法。
【請求項７】
SERP-1の量が約15μg/kg/日〜約150μg/kg/日である、請求項６の方法。
【請求項８】
SERP-1の量が約15μg/kg/日である、請求項７の方法。
【請求項９】
ステント移植後の最初の24時間の期間にステップ(ii)の後でステップ(i)を実施し、かつ、TnIの循環レベルが0.40 ng/mlを超えた場合、ステップ(ii)を繰り返す、請求項１〜８のいずれか一項の方法。
【請求項１０】
心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって、以下のステップ:
(i) 患者のクレアチニンキナーゼMBフラクション(CK-MB)の循環レベルをモニターするステップ; および
(ii) CK-MBの循環レベルが、患者のステント移植後の最初の24時間、閾値5.0 ng/mlを超えないようにするために十分な量のSERP-1を、患者に投与するステップ
を含む、方法。
【請求項１１】
SERP-1の量が、患者のステント移植後の最初の24時間、CK-MBの循環レベルが閾値5.0 ng/mlを超えないようにするために十分なSERP-1の最小用量の3倍以下である、請求項１０の方法。
【請求項１２】
心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって、以下のステップ:
(i) 患者のCK-MBの循環レベルをモニターするステップ; および
(ii) 患者のステント移植後の最初の24時間の期間に少なくとも8.5 ng・h/mlのSERP-1の曝露を達成するために十分な量のSERP-1を、患者に投与するステップ
を含む、方法。
【請求項１３】
SERP-1の量が、患者のステント移植後の最初の24時間の期間に少なくとも8.5 ng・h/mlのSERP-1の曝露を達成するために十分なSERP-1の最小用量の3倍以下である、請求項１２の方法。
【請求項１４】
心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって、以下のステップ:
(i) 患者のCK-MBの循環レベルをモニターするステップ; および
(ii) 患者のステント移植の24時間以内に5μg/kg/日を超える量のSERP-1を患者に投与するステップ
を含む、方法。
【請求項１５】
SERP-1の量が約15μg/kg/日〜約250μg/kg/日である、請求項１４の方法。
【請求項１６】
SERP-1の量が約15μg/kg/日〜約150μg/kg/日である、請求項１５の方法。
【請求項１７】
SERP-1の量が約15μg/kg/日である、請求項１６の方法。
【請求項１８】
ステップ(ii)の後でかつステント移植後の最初の24時間の期間にステップ(i)を実施し、かつ、CK-MBの循環レベルが4.0 ng/mlを超えた場合、ステップ(ii)を繰り返す、請求項１０〜１７のいずれか一項の方法。
【請求項１９】
患者のステント移植前にSERP-1を投与する、請求項１〜８または１０〜１７のいずれか一項の方法。
【請求項２０】
患者のステント移植前6時間未満にSERP-1を投与する、請求項１９の方法。
【請求項２１】
患者のステント移植後の最初の24時間の期間にSERP-1を投与しない、請求項１９または２０の方法。
【請求項２２】
約24時間ごとに1回SERP-1を投与する、請求項１〜２１のいずれか一項の方法。
【請求項２３】
3日間、約24時間ごとに1回SERP-1を投与する、請求項２２の方法。
【請求項２４】
ステントが地金ステントである、請求項１〜２３のいずれか一項の方法。
【請求項２５】
ステントが薬剤溶出性ステントである、請求項１〜２３のいずれか一項の方法。
【請求項２６】
SERP-1を静脈内投与する、請求項１〜２５のいずれか一項の方法。
【請求項２７】
SERP-1が、配列番号２のアミノ酸16〜369と少なくとも90%同一のアミノ酸配列を含む、請求項１〜２６のいずれか一項の方法。
【請求項２８】
SERP-1が、配列番号２のアミノ酸16〜369と少なくとも95%同一のアミノ酸配列を含む、請求項２７の方法。
【請求項２９】
SERP-1が配列番号２のアミノ酸16〜369を含む、請求項２８の方法。
【請求項３０】
SERP-1のアミノ酸配列が、配列番号２のアミノ酸16〜369と少なくとも90%同一のアミノ酸配列からなる、請求項２７の方法。
【請求項３１】
SERP-1のアミノ酸配列が、配列番号２のアミノ酸16〜369と少なくとも95%同一のアミノ酸配列からなる、請求項３０の方法。
【請求項３２】
SERP-1のアミノ酸配列が配列番号２のアミノ酸16〜369からなる、請求項３１の方法。
【請求項３３】
SERP-1が、配列番号１を含む核酸分子の少なくとも一部に高ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズする核酸分子によってコードされる、請求項１〜３２のいずれか一項の方法。
【請求項３４】
SERP-1が少なくとも90%純粋である、請求項１〜３３のいずれか一項の方法。
【請求項３５】
SERP-1が少なくとも99%純粋である、請求項３４の方法。
【請求項３６】
SERP-1がグリコシル化されている、請求項１〜３５のいずれか一項の方法。
【請求項３７】
患者がヒトである、請求項１〜３６のいずれか一項の方法。
【請求項３８】
患者のステント移植後の最初の6か月間、主要有害心臓イベント(MACE)の発生の可能性を減少させる、請求項１〜３７のいずれか一項の方法。
【請求項３９】
患者でのMACEの発生の可能性を少なくとも25%減少させる、請求項３８の方法。
【請求項４０】
MACEが心血管死である、請求項３８または３９の方法。
【請求項４１】
MACEが心筋梗塞である、請求項３８または３９の方法。
【請求項４２】
MACEが標的病変血行再建である、請求項３８または３９の方法。
【請求項４３】
標的病変血行再建が経皮的冠動脈インターベンションを含む、請求項４２の方法。
【請求項４４】
MACEが冠動脈バイパス移植(CABG)である、請求項３８または３９の方法。
【請求項４５】
製薬的に許容される賦形剤を含む医薬組成物へとSERP-1を製剤化する、請求項１〜４４のいずれかの方法。
【請求項４６】
心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって、以下のステップ:
(i) 患者のトロポニンI (TnI)の循環レベルをモニターするステップ; および
(ii) TnIの循環レベルが、患者のステント移植後の最初の24時間、閾値0.5 ng/mlを超えないようにするために十分な量のSERP-1の初回投与量を、ステント移植前に患者に投与するステップ
を含む、方法。
【請求項４７】
心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって、以下のステップ:
(i) 患者のTnIの循環レベルをモニターするステップ; および
(ii) 患者のステント移植後の最初の24時間の期間に少なくとも8.5 ng・h/mlのSERP-1の曝露を達成するために十分な量のSERP-1の初回投与量を、ステントの移植前に患者に投与するステップ
を含む、方法。
【請求項４８】
心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって、以下のステップ:
(i) 患者のTnIの循環レベルをモニターするステップ; および
(ii) 5μg/kg/日を超える量のSERP-1の初回投与量を、ステントの移植前に患者に投与するステップ
を含む、方法。
【請求項４９】
患者のステント移植後の最初の6か月間、主要有害心臓イベント(MACE)の発生の可能性を減少させる、請求項４６〜４８のいずれか一項の方法。
【請求項５０】
患者のステント移植の24時間後にSERP-1の第2の投与量を患者に投与するステップをさらに含む、請求項４６〜４９のいずれか一項の方法。
【請求項５１】
心臓ステント移植を受ける患者のトロポニンI (TnI)の循環レベルが、患者のステント移植後の最初の24時間、閾値0.5 ng/ml超えないようにする方法であってTnIの循環レベルがその閾値を超えないようにするために十分な量のSERP-1を患者に投与するステップを含む方法での使用のための、SERP-1。
【請求項５２】
前記方法が、患者のTnIの循環レベルをモニターするステップをさらに含む、請求項５１の使用のためのSERP-1。
【請求項５３】
SERP-1の量が、患者のステント移植後の最初の24時間、TnIの循環レベルが閾値0.5 ng/mlを超えないようにするために十分なSERP-1の最小用量の3倍以下である、請求項５１または５２の使用のためのSERP-1。
【請求項５４】
心臓ステント移植を受ける患者のクレアチニンキナーゼMBフラクション(CK-MB)の循環レベルが、患者のステント移植後の最初の24時間、閾値5.0 ng/ml超えないようにする方法であってCK-MBの循環レベルがその閾値を超えないようにするために十分な量のSERP-1を患者に投与するステップを含む方法での使用のための、SERP-1。
【請求項５５】
前記方法が、患者のCK-MBの循環レベルをモニターするステップをさらに含む、請求項５４の使用のためのSERP-1。
【請求項５６】
SERP-1の量が、患者のステント移植後の最初の24時間、CK-MBの循環レベルが閾値5.0 ng/mlを超えないようにするために十分なSERP-1の最小用量の3倍以下である、請求項５４または５５の使用のためのSERP-1。
【請求項５７】
患者のステント移植後の最初の24時間の期間に心臓ステント移植を受ける患者での少なくとも8.5 ng・h/mlのSERP-1の曝露を達成する方法であってSERP-1の曝露を達成するために十分な量のSERP-1を患者に投与するステップを含む方法での使用のための、SERP-1。
【請求項５８】
前記方法が患者のTnIの循環レベルをモニターするステップをさらに含む、請求項５７の使用のためのSERP-1。
【請求項５９】
前記方法が患者のCK-MBの循環レベルをモニターするステップをさらに含む、請求項５７の使用のためのSERP-1。
【請求項６０】
SERP-1の量が、患者のステント移植後の最初の24時間の期間に少なくとも8.5 ng・h/mlのSERP-1の曝露を達成するために十分なSERP-1の最小用量の3倍以下である、請求項５７〜５９のいずれか一項の使用のためのSERP-1。
【請求項６１】
心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって患者のステント移植の24時間以内に5μg/kg/日を超える量のSERP-1を患者に投与するステップを含む方法での使用のための、SERP-1。
【請求項６２】
前記方法が、患者のTnIの循環レベルをモニターするステップをさらに含む、請求項６１の使用のためのSERP-1。
【請求項６３】
前記方法が、患者のCK-MBの循環レベルをモニターするステップをさらに含む、請求項６１の使用のためのSERP-1。
【請求項６４】
SERP-1の量が約15μg/kg/日〜約250μg/kg/日である、請求項６１〜６３のいずれか一項の使用のためのSERP-1。
【請求項６５】
SERP-1の量が約15μg/kg/日〜約150μg/kg/日である、請求項６４の使用のためのSERP-1。
【請求項６６】
SERP-1の量が約15μg/kg/日である、請求項６５の使用のためのSERP-1。
【請求項６７】
患者のTnIの循環レベルをモニターするステップを、投与ステップの後でかつステント移植後の最初の24時間の期間に実施し、かつ、TnIの循環レベルが0.40 ng/mlを超える場合、投与ステップを繰り返す、請求項５１〜５３、５７〜５８、６０〜６２、または６４〜６６のいずれか一項の使用のためのSERP-1。
【請求項６８】
患者のCK-MBの循環レベルをモニターするステップを、投与ステップの後でかつステント移植後の最初の24時間の期間に実施し、かつ、CK-MBの循環レベルが4.0 ng/mlを超える場合、投与ステップを繰り返す、請求項５４〜５６、５７、５９〜６１、または６３〜６６のいずれか一項の使用のためのSERP-1。
【請求項６９】
SERP-1が患者のステント移植前に投与される、請求項５１〜６８のいずれか一項の使用のためのSERP-1。
【請求項７０】
SERP-1が、患者のステント移植前6時間未満に投与される、請求項６９の使用のためのSERP-1。
【請求項７１】
SERP-1が、患者のステント移植後の最初の24時間の期間に投与されない、請求項６９または７０の使用のためのSERP-1。
【請求項７２】
SERP-1が約24時間ごとに1回投与される、請求項５１〜７１のいずれか一項の使用のためのSERP-1。
【請求項７３】
SERP-1が、3日間、約24時間ごとに1回投与される、請求項７２の使用のためのSERP-1。
【請求項７４】
ステントが地金ステントである、請求項５１〜７３のいずれか一項の使用のためのSERP-1。
【請求項７５】
ステントが薬剤溶出性ステントである、請求項５１〜７３のいずれか一項の使用のためのSERP-1。
【請求項７６】
SERP-1が静脈内投与される、請求項５１〜７５のいずれか一項の使用のためのSERP-1。
【請求項７７】
SERP-1が、配列番号２のアミノ酸16〜369と少なくとも90%同一のアミノ酸配列を含む、請求項５１〜７６のいずれか一項の使用のためのSERP-1。
【請求項７８】
SERP-1が、配列番号２のアミノ酸16〜369と少なくとも95%同一のアミノ酸配列を含む、請求項７７の使用のためのSERP-1。
【請求項７９】
SERP-1が、配列番号２のアミノ酸16〜369を含む、請求項７８の使用のためのSERP-1。
【請求項８０】
SERP-1のアミノ酸配列が、配列番号２のアミノ酸16〜369と少なくとも90%同一のアミノ酸配列からなる、請求項７７の使用のためのSERP-1。
【請求項８１】
SERP-1のアミノ酸配列が、配列番号２のアミノ酸16〜369と少なくとも95%同一のアミノ酸配列からなる、請求項８０の使用のためのSERP-1。
【請求項８２】
SERP-1のアミノ酸配列が配列番号２のアミノ酸16〜369からなる、請求項８１の使用のためのSERP-1。
【請求項８３】
SERP-1が、配列番号１を含む核酸分子の少なくとも一部に高ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズする核酸分子によってコードされる、請求項５１〜８２のいずれか一項の使用のためのSERP-1。
【請求項８４】
SERP-1が少なくとも90%純粋である、請求項５１〜８３のいずれか一項の使用のためのSERP-1。
【請求項８５】
SERP-1が少なくとも99%純粋である、請求項８４の使用のためのSERP-1。
【請求項８６】
SERP-1がグリコシル化されている、請求項５１〜８５のいずれか一項の使用のためのSERP-1。
【請求項８７】
患者がヒトである、請求項５１〜８６のいずれか一項の使用のためのSERP-1。
【請求項８８】
前記方法が、患者のステント移植後の最初の6か月間、主要有害心臓イベント(MACE)の発生の可能性を減少させる、請求項５１〜８７のいずれか一項の使用のためのSERP-1。
【請求項８９】
前記方法が、患者でのMACEの発生の可能性を少なくとも25%減少させる、請求項８８の使用のためのSERP-1。
【請求項９０】
MACEが心血管死である、請求項８８または８９の使用のためのSERP-1。
【請求項９１】
MACEが心筋梗塞である、請求項８８または８９の使用のためのSERP-1。
【請求項９２】
MACEが標的病変血行再建である、請求項８８または８９の使用のためのSERP-1。
【請求項９３】
標的病変血行再建が経皮的冠動脈インターベンションを含む、請求項９２の使用のためのSERP-1。
【請求項９４】
MACEが冠動脈バイパス移植(CABG)である、請求項８８または８９の使用のためのSERP-1。
【請求項９５】
SERP-1が、製薬的に許容される賦形剤を含む医薬組成物へと製剤化される、請求項５１〜９４のいずれかの使用のためのSERP-1。
【請求項９６】
心臓ステント移植を受ける患者のトロポニンI (TnI)の循環レベルが、患者のステント移植後の最初の24時間、閾値0.5 ng/mlを超えないようにする方法であってTnIの循環レベルが閾値を超えないようにするために十分な量のSERP-1の初回投与量をステントの移植前に患者に投与するステップを含む方法での使用のための、SERP-1。
【請求項９７】
前記方法が、患者のTnIの循環レベルをモニターするステップをさらに含む、請求項９６の使用のためのSERP-1。
【請求項９８】
患者のステント移植後の最初の24時間の期間に少なくとも8.5 ng・h/mlの、心臓ステント移植を受ける患者でのSERP-1の曝露を達成する方法であってSERP-1の曝露を達成するために十分な量のSERP-1の初回投与量をステントの移植前に患者に投与するステップを含む方法での使用のための、SERP-1。
【請求項９９】
前記方法が、患者のTnIの循環レベルをモニターするステップをさらに含む、請求項９８の使用のためのSERP-1。
【請求項１００】
心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって患者のステント移植の24時間以内に5μg/kg/日を超える量のSERP-1の初回投与量をステントの移植前に患者に投与するステップを含む方法での使用のための、SERP-1。
【請求項１０１】
前記方法が、患者のTnIの循環レベルをモニターするステップをさらに含む、請求項１００の使用のためのSERP-1。
【請求項１０２】
前記方法が、患者のステント移植後の最初の6か月間、主要有害心臓イベント(MACE)の発生の可能性を減少させる、請求項９６〜１０１のいずれか一項の使用のためのSERP-1。
【請求項１０３】
前記方法が、患者のステント移植の24時間後にSERP-1の第2の投与量を患者に投与するステップをさらに含む、請求項９６〜１０２のいずれか一項の使用のためのSERP-1。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の属する分野
概して、本発明は、心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
心臓ステント移植の留置は心筋組織損傷を生じさせることがよくあり、その結果、心筋酵素、例えば、心筋トロポニンI (TnI)およびクレアチニンキナーゼMBフラクション(CK-MB)のレベルが上昇する。ステント移植後の最初の24時間に、あらかじめ決められた閾値を超える前記酵素の循環濃度(例えば、0.5または0.8 ng/mlを超えるTnI)と、それに続く主要有害心臓イベント(MACE)の可能性との間に統計学的に非常に有意な相関が存在することが文献で確立されている。例えば、Cantor et al., J. Am. Coll. Cardiol. 39(11):1738-1744 (2002), およびRamirez-Moreno et al., Int. J. Cardiol. 97(2):193-198 (2004)を参照のこと。当技術分野では、例えば、TnIなどの心筋酵素のレベルが、あらかじめ決められた閾値を超えないようにすることによって、MACE発生の可能性を減少させる、心臓ステント移植患者の治療方法が必要とされている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
発明の要旨
心臓ステント移植を受ける患者へのSERP-1の投与は、TnIおよびCK-MBの循環レベルが、主要有害心臓イベント(MACE)の発生についての高い可能性に関連する閾値を超えないようにするために有効であることが発見された。本発明の方法では、SERP-1のそのような投与は、例えば、心臓ステント移植を受ける患者での主要有害心臓イベント(MACE)の発生についての可能性を減少させるために有用である。
【０００４】
したがって、本発明は、心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって、以下のステップ: (i) 患者のTnIの循環レベルをモニターするステップ; および(ii) TnIの循環レベルが、患者のステント移植後の最初の、例えば、6時間、12時間、18時間、24時間、36時間、2日間、3日間、または1週間、例えば、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、または1.5 ng/mlの閾値を超えないようにするために十分な量のSERP-1を患者に投与するステップを含む方法を特徴とする。一部の実施形態では、患者に投与されるSERP-1の量は、TnIの循環レベルが、患者のステント移植後の最初の、例えば24時間、指定の閾値、例えば0.5 ng/mlを超えないようにするために十分なSERP-1の最小用量の、例えば、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、6、7、8、9、または10倍以下である。SERP-1の初回投与はステント移植前に提供してよい。
【０００５】
本発明は、さらに、心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって、以下のステップ: (i) 患者のTnIの循環レベルをモニターするステップ; および(ii) 患者のステント移植後の最初の、例えば、6時間、12時間、18時間、24時間、36時間、2日間、3日間、または1週間の期間に、少なくとも、例えば、8.5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、225、250、275、300、350、400、または500 ng・h/mlのSERP-1の曝露を達成するために十分な量のSERP-1を、患者に投与するステップを含む方法を特徴とする。一部の実施形態では、患者に投与されるSERP-1の量は、患者のステント移植後の最初の、例えば24時間の期間に、少なくとも指定のSERP-1曝露、例えば8.5 ng・h/mlを達成するために十分なSERP-1の最小用量の、例えば、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、6、7、8、9、または10倍以下である。SERP-1の初回投与はステント移植前に提供してよい。
【０００６】
本発明は、さらに、心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって、以下のステップ: (i) 患者のTnIの循環レベルをモニターするステップ; および(ii) 患者のステント移植の、例えば、6時間、12時間、18時間、24時間、36時間、2日間、3日間、または1週間以内に、例えば、0.5、1.0、2.5、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、75、100、125、150、200、250、300、400、または500μg/kg/日を超える量のSERP-1を患者に投与するステップを含む方法を特徴とする。一部の実施形態では、SERP-1の量は、例えば、約15μg/kg/日〜約250μg/kg/日、約15μg/kg/日〜約150μg/kg/日、約15μg/kg/日〜約30μg/kg/日、または約15μg/kg/日である。SERP-1の初回投与はステント移植前に提供してよい。
【０００７】
TnIのモニタリングを特徴とする任意の上記方法では、ステップ(ii)の後、かつステント移植後の最初の、例えば、6時間、12時間、18時間、24時間、36時間、2日間、3日間、または1週間の期間にステップ(i)を実施してよい。場合により、TnIの循環レベルが指定のTnI閾値の、例えば、20%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、または99%さえも超える場合、例えば、TnIの循環レベルが、閾値0.50 ng/mlの80%である0.40 ng/mlを超える場合、ステップ(ii)を繰り返してよい。
【０００８】
心筋酵素CK-MBのレベルが指定の閾値を超えないようにすることは本発明の追加の特徴である。一部の実施形態では、前記方法は、さらに、(iii) 患者のCK-MBの循環レベルをモニターするステップ; および/または(iv) CK-MBの循環レベルが、患者のステント移植後の最初の、例えば、6時間、12時間、18時間、24時間、36時間、2日間、3日間、または1週間、例えば、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10、11、12、13、14、または15 ng/mlの閾値を超えないようにするために十分な量のSERP-1を、患者に投与するステップを含む。
【０００９】
本発明は、さらに、心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって、以下のステップ: (i) 患者のCK-MBの循環レベルをモニターするステップ; および(ii) CK-MBの循環レベルが、患者のステント移植後の最初の、例えば、6時間、12時間、18時間、24時間、36時間、2日間、3日間、または1週間、例えば、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10、11、12、13、14、または15 ng/mlの閾値を超えないようにするために十分な量のSERP-1を患者に投与するステップを含む方法を特徴とする。一部の実施形態では、患者に投与されるSERP-1の量は、CK-MBの循環レベルが、患者のステント移植後の最初の、例えば24時間、指定の閾値、例えば5.0 ng/mlを超えないようにするために十分なSERP-1の最小用量の、例えば、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、6、7、8、9、または10倍以下である。SERP-1の初回投与はステント移植前に提供してよい。
【００１０】
本発明は、さらに、心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって、以下のステップ: (i) 患者のCK-MBの循環レベルをモニターするステップ; および(ii) 患者のステント移植後の最初の、例えば、6時間、12時間、18時間、24時間、36時間、2日間、3日間、または1週間の期間に、少なくとも、例えば、8.5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、225、250、275、300、350、400、または500 ng・h/mlのSERP-1の曝露を達成するために十分な量のSERP-1を患者に投与するステップを含む方法を特徴とする。一部の実施形態では、患者に投与されるSERP-1の量は、患者のステント移植後の最初の、例えば24時間の期間に、少なくとも指定のSERP-1曝露、例えば8.5 ng・h/mlを達成するために十分なSERP-1の最小用量の、例えば、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、6、7、8、9、または10倍以下である。SERP-1の初回投与はステント移植前に提供してよい。
【００１１】
本発明は、さらに、心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって、以下のステップ: (i) 患者のCK-MBの循環レベルをモニターするステップ; および(ii) 患者のステント移植の、例えば、6時間、12時間、18時間、24時間、36時間、2日間、3日間、または1週間以内に、例えば、0.5、1.0、2.5、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、75、100、125、150、200、250、300、400、または500μg/kg/日を超える量のSERP-1を患者に投与するステップを含む方法を特徴とする。一部の実施形態では、SERP-1の量は、例えば、約15μg/kg/日〜約250μg/kg/日、約15μg/kg/日〜約150μg/kg/日、約15μg/kg/日〜約30μg/kg/日、または約15μg/kg/日である。
【００１２】
CK-MBのモニタリングを特徴とする任意の上記方法では、ステップ(ii)の後、かつステント移植後の最初の、例えば、6時間、12時間、18時間、24時間、36時間、2日間、3日間、または1週間の期間にステップ(i)を実施してよく、CK-MBの循環レベルが指定のCK-MB閾値の、例えば、20%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、または99%さえも超える場合、例えば、CK-MBの循環レベルが、閾値5.0 ng/mlの80%である4.0 ng/mlを超える場合、ステップ(ii)を繰り返してよい。
【００１３】
一部の実施形態では、ステップ(i)および(ii)は、いずれかの順序でまたは同時に実施してよく、1回、2回、3回、4回、またはそれ以上、繰り返してよい。
【００１４】
一部の実施形態では、患者のステント移植前に、例えば、患者のステント移植に3日、2日、24時間、18時間、12時間、6時間、5時間、4時間、3時間、2時間、1時間、30分、20分、10分、5分、1分未満、またはそれ未満、先立って、SERP-1を投与してよい。
【００１５】
一部の実施形態では、SERP-1を、例えば、約1週、3日、2日、24時間、18時間、12時間、6時間、5時間、4時間、3時間、2時間、1時間、または30分ごとに1回投与してよく、例えば、1日、2日、3日、4日、5日、6日、1週間、2週間、またはさらに長期の期間にわたって投与してよい。
【００１６】
一部の実施形態では、患者のステント移植後の最初の、例えば、1週、3日、2日、24時間、18時間、12時間、6時間、5時間、4時間、3時間、2時間、1時間、または30分の期間に二度目のSERP-1を投与しない。例えば、一部の実施形態では、ステント移植の前にのみSERP-1を投与し、その後、ステント移植の24時間後まで投与しない。
【００１７】
一部の実施形態では、ステントは、例えば、地金ステントまたは薬剤溶出性ステントである。
【００１８】
一部の実施形態では、SERP-1を、例えば静脈内に投与する。
【００１９】
一部の実施形態では、SERP-1のアミノ酸配列は、配列番号２のアミノ酸16〜369に対して、少なくとも、例えば、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、または100%さえも同一のアミノ酸配列、またはSERP-1の生物学的活性を有するそのフラグメントもしくはアナログを含むかまたはそれからなる。
【００２０】
一部の実施形態では、SERP-1は、配列番号１を含む核酸分子の少なくとも一部、例えば、20%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、または100%にさえ、高ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズする核酸分子によってコードされる。
【００２１】
一部の実施形態では、SERP-1は、少なくとも、例えば、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、99.5%、または99.9%純粋である。
【００２２】
一部の実施形態では、SERP-1はグリコシル化されている。
【００２３】
一部の実施形態では、患者はヒトである。
【００２４】
一部の実施形態では、本明細書中に記載の方法は、患者のステント移植後の最初の、例えば、24時間、2日、3日、1週、2週、1か月、2か月、3か月、4か月、5か月、または6か月間、MACE発生の可能性を減少させることができる。ステント移植後の6か月以内に発生するMACEイベントのみが本発明の目的上で考慮される。一部の実施形態では、本発明の方法は、ステント移植後の最初の6か月以内に、患者のMACE発生の可能性を、少なくとも、例えば、10%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、99%、またはそれ以上、減少させることができる。
【００２５】
一部の実施形態では、MACEは、心血管死、心筋梗塞、標的病変血行再建、例えば、経皮的冠動脈インターベンション(PCI)、または冠動脈バイパス移植(CABG)である。
【００２６】
一部の実施形態では、製薬的に許容される賦形剤を含む医薬組成物へとSERP-1を製剤化する。
【００２７】
本発明は、さらに、心臓ステント移植を受ける患者のトロポニンI (TnI)の循環レベルが、患者のステント移植後の最初の24時間、閾値0.5 ng/mlを超えないようにする方法であってTnIの循環レベルが閾値を超えないようにするために十分な量のSERP-1を患者に投与するステップを含む方法で使用するための、SERP-1を特徴とする。
【００２８】
本発明は、さらに、心臓ステント移植を受ける患者のクレアチニンキナーゼMBフラクション(CK-MB)の循環レベルが、患者のステント移植後の最初の24時間、閾値5.0 ng/mlを超えないようにする方法であってCK-MBの循環レベルが閾値を超えないようにするために十分な量のSERP-1を患者に投与するステップを含む方法で使用するための、SERP-1を特徴とする。
【００２９】
本発明は、さらに、心臓ステント移植を受ける患者において、患者のステント移植後の最初の24時間の期間に少なくとも8.5 ng・h/mlのSERP-1の曝露を達成する方法であってSERP-1の曝露を達成するために十分な量のSERP-1を患者に投与するステップを含む方法で使用するための、SERP-1を特徴とする。
【００３０】
本発明は、さらに、心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって患者のステント移植の24時間以内に5μg/kg/日を超える量のSERP-1を患者に投与するステップを含む方法で使用するための、SERP-1を特徴とする。
【００３１】
本発明は、さらに、心臓ステント移植を受ける患者のトロポニンI (TnI)の循環レベルが、患者のステント移植後の最初の24時間、閾値0.5 ng/mlを超えないようにする方法であってTnIの循環レベルが閾値を超えないようにするために十分な量のSERP-1の初回投与量をステントの移植前に患者に投与するステップを含む方法で使用するための、SERP-1を特徴とする。
【００３２】
本発明は、さらに、心臓ステント移植を受ける患者において、患者のステント移植後の最初の24時間の期間に少なくとも8.5 ng・h/mlのSERP-1の曝露を達成する方法であってSERP-1の曝露を達成するために十分な量のSERP-1の初回投与量をステントの移植前に患者に投与するステップを含む方法で使用するための、SERP-1を特徴とする。
【００３３】
本発明は、さらに、心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって患者のステント移植の24時間以内に5μg/kg/日を超える量のSERP-1の初回投与量をステントの移植前に患者に投与するステップを含む方法で使用するための、SERP-1を特徴とする。
【００３４】
本明細書中に記載の任意かつすべての方法は、本明細書中に記載のSERP-1の任意の用途とともに用いてよい。さらに、SERP-1は、本明細書中に記載の任意かつすべての方法または使用に関連する医薬品の製造において使用してよい。
【００３５】
「約」とは、列挙される値の±10%を意味する。
【００３６】
SERP-1の関連で「アナログ」とは、SERP-1ポリペプチドのアミノ酸配列の置換または改変を含むことを意味し、該置換または改変(例えば付加および欠失)は、ポリペプチドの少なくとも1つの生物学的活性を維持し、例えば、炎症の部位に送達されるか、いずれか、すなわち局所的、または全身的に、該部位に向けられた場合のポリペプチドの抗炎症特性を維持する。用語「アナログ」には、単一または複数アミノ酸のアミノおよび/またはカルボキシル末端融合物、ならびに配列内挿入物などのSERP-1のアミノ酸挿入誘導体が含まれる。挿入アミノ酸配列変異体は、タンパク質中のあらかじめ決められた部位に1個以上のアミノ酸残基が導入されている変異体である。ランダムに挿入して、得られた産物を好適にスクリーニングすることも可能である。欠失変異体は配列からの1個以上のアミノ酸の除去によって特徴付けられる。置換アミノ酸変異体は、少なくとも1個の残基がその位置に挿入されている変異体である。タンパク質をアミノ酸置換によって誘導体化する場合、概して、アミノ酸を、類似の物理化学的性質、例えば、疎水性、親水性、電気陰性度、かさ高い側鎖などを有する他のアミノ酸によって置換する。保存的置換の例には、非極性(疎水性)残基、例えばイソロイシン、バリン、ロイシンまたはメチオニンを別の非極性残基の代わりに用いることが含まれる。同様に、本発明は、アルギニンとリシンとの、グルタミンとアスパラギンとの、およびグリシンとセリンとの置換のような無極性(apolar)(親水性)残基の置換を想定する。さらに、塩基性残基、例えばリシン、アルギニンまたはヒスチジンを別の塩基性残基の代わりに用いることまたは酸性残基、例えばアスパラギン酸またはグルタミン酸を別の酸性残基の代わりに用いることも想定される。用語「アナログ」はまた、SERP-1のホモログ、例えば、他のセルピン由来でかつ同一または実質的に同一の生物学的活性または特性を有する、対応するアミノ酸配列を包含する。本発明の目的上、SERP-1のアナログには、SERP-1に天然にまたは人工的に結合された、炭水化物、脂質および/または他のタンパク質性部分などの任意の成分(群)の単一または複数の置換、欠失および/または付加も含まれる。すべてのそのような分子は用語「アナログ」に包含される。
【００３７】
SERP-1の投与の関連で「十分な量」とは、臨床的に意義のある様式で治療または予防するために必要とされるSERP-1の量を意味する。MACEに起因するかまたはMACEに寄与する症状の治療的処置のために十分な、本発明を実施するために使用されるSERP-1の量は、投与様式、患者の年齢、体重、および全般的健康に応じて変動する。最終的に、処方者が適切な量および投与計画を決定する。
【００３８】
用語「循環レベル」および「血漿中濃度」は互換的に使用され、血液の血漿部分に存在する化合物の濃度を表す。
【００３９】
「曝露」とは、標準薬物動態分析技術を使用して決定される曲線下面積(AUC0-∞)を意味する。
【００４０】
「フラグメント」とは、参照核酸分子またはポリペプチドの全長の、好ましくは、少なくとも10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、またはそれ以上を含むポリペプチドまたは核酸分子の部分を意味する。フラグメントは、例えば、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、350、360、370、380、390、400、500、600、700、800、900、1,000、1,100、もしくはそれ以上のヌクレオチド、核酸分子の全長まで、または10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、350、354、もしくはそれ以上のアミノ酸、ポリペプチドの全長までを含んでよい。SERP-1の典型的なフラグメントはSERP-1の生物学的活性を有し、かつ、例えば、配列番号２の残基16〜369の全体または部分を含んでよい。
【００４１】
「異種性」とは、天然に互いに同一の関連性で通常は見出されない任意の2以上の核酸またはポリペプチド配列を意味する。例えば、異種核酸は、典型的に組み換えによって生産され、新規機能的核酸を作製するよう配置された、例えば無関係の遺伝子由来の、2以上の配列、例えば1供給源由来のプロモーターおよび別の供給源由来のコード領域を有する。同様に、異種ポリペプチドは、天然に互いに同一の関連で見出されない2以上の部分配列(例えば融合タンパク質)を表すことが多い。
【００４２】
「ホモログ」とは、参照アミノ酸配列(例えば配列番号２)または核酸配列(例えば配列番号１)に対して少なくとも50%の同一性を示すポリペプチドまたは核酸分子を意味する。そのような配列は、概して、参照配列に対して、アミノ酸レベルまたは核酸で、少なくとも、例えば、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、または99%同一である。ポリペプチドの場合、比較配列の長さは、概して、少なくとも、例えば、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、350、354、またはそれ以上のアミノ酸である。核酸の場合、比較配列の長さは、概して、少なくとも、例えば、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、350、400、500、600、700、800、900、1,000、1,100、またはそれ以上のヌクレオチドである。
【００４３】
「ハイブリダイズする」とは、種々のストリンジェンシー条件下で相補的ポリヌクレオチド、またはその部分、の間で対形成して二本鎖分子を形成することを意味する。(例えば、Wahl, G. M. and S. L. Berger (1987) Methods Enzymol. 152:399; Kimmel, A. R. (1987) Methods Enzymol. 152:507を参照のこと。) 例えば、高ストリンジェンシー塩濃度は、通常、約750 mM NaClおよび75 mMクエン酸三ナトリウム未満、約500 mM NaClおよび50 mMクエン酸三ナトリウム未満、または約250 mM NaClおよび25 mMクエン酸三ナトリウム未満である。低ストリンジェンシーハイブリダイゼーションは、有機溶媒、例えばホルムアミドの不存在下で達成することができる一方、高ストリンジェンシーハイブリダイゼーションは少なくとも約35%ホルムアミドまたは少なくとも約50%ホルムアミドの存在下で達成することができる。高ストリンジェンシー温度条件は、通常、少なくとも約30℃、37℃、または42℃の温度を含む。ハイブリダイゼーション時間、界面活性剤の例えばドデシル硫酸ナトリウム(SDS)の濃度、および担体DNAを含ませるか除外するか、などの種々の追加のパラメータは当業者に周知である。必要に応じて前記種々の条件を組み合わせることによって種々のストリンジェンシーレベルが達成される。一実施形態では、ハイブリダイゼーションは、750 mM NaCl、75 mMクエン酸三ナトリウム、および1% SDS中で30℃で行われる。代替の実施形態では、ハイブリダイゼーションは、500 mM NaCl、50 mMクエン酸三ナトリウム、1% SDS、35%ホルムアミド、および100μg/ml変性サケ精子DNA (ssDNA)中で37℃で行われる。さらなる代替の実施形態では、ハイブリダイゼーションは、250 mM NaCl、25 mMクエン酸三ナトリウム、1% SDS、50%ホルムアミド、および200μg/ml ssDNA中で42℃で行われる。前記条件の有用なバリエーションは当業者に容易に明らかである。
【００４４】
ほとんどの適用で、ハイブリダイゼーション後の洗浄ステップもストリンジェンシーの点で様々である。洗浄ストリンジェンシー条件は塩濃度および温度によって規定することができる。上記のように、塩濃度を減少させるかまたは温度を高めることによって洗浄ストリンジェンシーを高めることができる。例えば、洗浄ステップの高ストリンジェンシー塩濃度は、例えば、約30 mM NaClおよび3 mMクエン酸三ナトリウム未満、または約15 mM NaClおよび1.5 mMクエン酸三ナトリウム未満である。洗浄ステップの高ストリンジェンシー温度条件は、通常、例えば、少なくとも約25℃、42℃、または68℃の温度を含む。一実施形態では、洗浄ステップは、30 mM NaCl、3 mMクエン酸三ナトリウム、および0.1% SDS中で25℃で行われる。代替の実施形態では、洗浄ステップは、15 mM NaCl、1.5 mMクエン酸三ナトリウム、および0.1% SDS中で42℃で行われる。さらなる代替の実施形態では、洗浄ステップは、15 mM NaCl、1.5 mMクエン酸三ナトリウム、および0.1% SDS中で68℃で行われる。前記条件の追加のバリエーションは当業者に容易に明らかである。ハイブリダイゼーション技術は当業者に周知であり、例えば、Benton and Davis (Science 196:180, 1977); Grunstein and Hogness (Proc. Natl. Acad. Sci., USA 72:3961, 1975); Ausubel et al. (Current Protocols in Molecular Biology, Wiley Interscience, New York, 2001); Berger and Kimmel (Guide to Molecular Cloning Techniques, 1987, Academic Press, New York); およびSambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, New Yorkに記載されている。
【００４５】
「主要有害心臓イベント」または「MACE」とは、心血管死、心筋梗塞、標的病変血行再建、例えば、経皮的冠動脈インターベンション(PCI)、または冠動脈バイパス移植(CABG)を意味する。
【００４６】
「核酸分子」とは、2個以上の共有結合している、天然に存在するかまたは改変されたヌクレオチドの配列を有する分子、例えばRNAまたはDNAを意味する。核酸分子は、例えば、一本鎖または二本鎖であってよく、修飾または無修飾ヌクレオチド、または混合物もしくはその組み合わせを含んでよい。種々の塩、混合塩、および遊離酸型も含まれる。
【００４７】
「患者」または「被験体」とは、ヒトまたは非ヒト哺乳類、例えばウシ、ウマ、イヌ、ヒツジ、またはネコを非限定的に含む哺乳類を意味する。
【００４８】
用語「ペプチド」、「ポリペプチド」、および「タンパク質」は互換的に使用され、翻訳後修飾(例えばグリコシル化またはリン酸化)にかかわらず、本明細書中に記載の、天然に存在するかまたは非天然に存在するポリペプチドまたはペプチドの全体または部分を構成する、2個以上の天然または非天然アミノ酸の任意の鎖を表す。
【００４９】
本明細書中で使用される天然アミノ酸は、天然ポリペプチド中に通常存在するようなL配置を有する天然α-アミノ酸である。非天然アミノ酸とは、ポリペプチド中に通常存在しないアミノ酸を表し、例えば、L配置を有する天然α-アミノ酸のエピマー、すなわち非天然のD配置を有するアミノ酸; またはその(D,L)-異性体混合物; またはそのようなアミノ酸のホモログ、例えば、β-アミノ酸、α,α-二置換アミノ酸、またはアミノ酸側鎖が1または2メチレン基短縮されているか、または10炭素原子まで延長されているα-アミノ酸、例えば、直鎖中に5〜10個まで(10個を含む)の炭素原子を有するα-アミノアルカン酸、非置換または置換芳香族(α-アリールまたはα-アリール低級アルキル)、例えば置換フェニルアラニンまたはフェニルグリシンを表す。
【００５０】
「製薬的に許容される担体」または「製薬的に許容される賦形剤」とは、治療される患者に対して生理学的に許容される一方、それとともに投与される化合物の治療特性を保持する、担体または賦形剤を意味する。典型的な製薬的に許容される担体物質の1つは生理食塩水である。他の生理学的に許容される担体およびその製剤は当業者に公知であり、例えばRemington's Pharmaceutical Sciences, (20th edition), ed. A. Gennaro, 2000, Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia, PAに記載されている。
【００５１】
「医薬組成物」とは、製薬的に許容される賦形剤とともに製剤化され、かつ哺乳類の疾患またはイベントの治療または予防のための治療計画の一部として政府規制当局の認可を得て製造または販売される、SERP-1を含む組成物を意味する。医薬組成物は、例えば、静脈内投与用(例えば粒子状栓子を含まない滅菌溶液として、および静脈内使用に好適な溶媒系中で)、経口投与用(例えば、錠剤、カプセル、カプレット、ジェルキャップ、またはシロップ)、または本明細書中に記載の任意の他の製剤用に、例えば単位剤形で、製剤化することができる。
【００５２】
「精製された」とは、他の天然に付随する成分から分離されていることを意味する。典型的に、化合物(例えば、核酸、ポリペプチド、または小分子)は、それが天然に伴うタンパク質、抗体、および天然に存在する有機分子から、少なくとも、例えば、重量に基づいて50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、99.5%、または99.9%遊離されている場合に実質的に純粋である。一部の事例では、因子は、少なくとも、重量に基づいて99%純粋、99.5%純粋、99.9%純粋、または99.99%純粋でさえある。実質的に純粋な因子は、化学合成、天然供給源からの因子の分離、または該因子を天然に生産しない組み換え宿主細胞での因子の生産によって得ることができる。当業者は、Ausubel et al. (Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, New York, 2000)によって記載される技術などの標準的技術を使用してタンパク質および小分子を精製することができる。因子は、好ましくは、ポリアクリルアミドゲル電気泳動、カラムクロマトグラフィー、光学密度、HPLC分析、またはウエスタン分析(Ausubel et al., 上記)を使用して測定された場合に出発材料の少なくとも、例えば、2、5、または10倍純粋である。好ましい精製方法には、免疫沈降、カラムクロマトグラフィー、例えば免疫親和性クロマトグラフィー、磁性ビーズ免疫親和性精製、およびプレート結合抗体を用いるパニングが含まれる。
【００５３】
「SERP-1」とは、配列番号２のアミノ酸1〜369または16〜369に対して、少なくとも50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、または100%さえも同一のアミノ酸配列を含むか、もしくはそれからなる、アミノ酸配列を有するポリペプチド、またはSERP-1の生物学的活性を有するそのフラグメントもしくはアナログを意味する。例えば、SERP-1は、配列番号２のアミノ酸16〜369からなるアミノ酸配列を有してよく、それはN末端シグナル配列を欠く成熟型SERP-1を構成する。あるいは、SERP-1は、配列番号２のアミノ酸1〜369からなるアミノ酸配列を有してよく、それはN末端シグナル配列を含む未成熟型SERP-1を構成する。SERP-1ポリペプチドの任意の誘導体または改変体もまた含まれ、それには、非限定的に、本明細書中に記載された改変体が含まれる。一例では、配列番号２のアミノ酸1〜15 (シグナル配列)を改変するかまたは置換して、SERP-1の発現を向上させる。一部の実施形態では、SERP-1は、配列番号１を含む核酸分子の少なくとも一部、例えば、20%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、または100%にさえ、高ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズする核酸分子によってコードされる。
【００５４】
粘液腫ウイルスから最初に同定されたSERP-1、セリンプロテイナーゼインヒビターは、バルーン傷害後にウサギおよびラットモデルにおいて炎症およびアテローム発生を阻害し、かつ血管形成術傷害(angioplasty injury)後のコレステロール摂食ウサギでのマクロファージ浸潤およびアテローム硬化プラークの増殖を劇的に減少させることが可能である(Lucas et al., Circulation 94:2890-2900 (1996))。ラット大動脈同種移植モデルでの予備研究では、SERP-1の注入後の単核細胞浸潤および移植脈管障害の両者の有意な減少も示された(例えばMiller et al., Circulation 101(13):1598-1605 (2000)(該文献は参照によりここに組み入れられる)を参照のこと)。
【００５５】
一実施形態では、SERP-1は、炎症反応を制御する種々のセリンプロテイナーゼを阻害する55kD糖タンパク質である。SERP-1は、血栓溶解性タンパク質、プラスミン、組織プラスミノゲンアクチベーター(tPA)、およびウロキナーゼを制御する。クローニングされワクシニアベクターから発現されたSERP-1タンパク質の、バルーン傷害部位での1回の局所注入により、以後のプラーク増殖およびマクロファージ浸潤が劇的に減少する(例えばLucas, et al. (1996)を参照のこと)。SERP-1は内皮傷害直後の血栓溶解カスケードの要素の転写をモジュレートする。SERP-1は多数の米国特許の主題であり、該米国特許には、米国特許第5,686,409号, タイトル"Antirestenosis Protein"; 米国特許第5,917,014号および第5,939,525号, ともにタイトル"Methods of Treating Inflammation and Compositions Therefor"; 米国特許第7,285,530号, タイトル"Use of SERP-1 as an Antiplatelet Agent"; 米国特許第7,419,670号, タイトル"Method of Treating Arthritis with SERP-1 and an Immunosuppressant"; および米国特許第7,514,405号, タイトル"Methods for Treating Transplant Rejection"が含まれる。各米国特許は参照によりここに組み入れられる。
【００５６】
「SERP-1の生物学的活性」とは、配列番号２の残基16〜369を有する成熟型SERP-1の生物学的特性を意味し、それには、非限定的に、抗炎症活性; 臓器移植の関連での抗拒絶活性; 血小板粘着/凝集または血栓形成を治療する能力; または例えばTnIまたはCK-MBの、指定の閾値未満での維持が含まれる。SERP-1活性のアッセイは当技術分野で公知であるか、または本明細書中に記載される。
【００５７】
「SERP-1核酸分子」とは、SERP-1ポリペプチドをコードし、かつ配列番号１に記載の核酸配列に、少なくとも、例えば、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%またはそれ以上、同一である核酸分子を意味する。TとUの置換によって配列番号１と異なる配列を有する任意の核酸分子; 配列番号１の全長に相補的、またはそれに由来する核酸フラグメントに相補的な配列を有する核酸分子; 配列番号１の範囲内で表される核酸配列とハイブリダイズする核酸分子; および遺伝暗号の縮重のせいで配列番号１の全長と異なる配列を有する核酸分子もまた定義に含まれる。
【００５８】
「シグナル配列」とは、ポリペプチドを細胞膜に向けて、該ポリペプチドが分泌されるようにするアミノ酸配列を意味する。あるいは、シグナル配列は、ポリペプチドを細胞内区画または細胞小器官、例えばゴルジ体へ向けることができる。シグナル配列は、ポリペプチドを特定の細胞領域にターゲティングする公知の機能を有するペプチド配列へのホモロジー、または生物学的活性によって特定することができる。当業者は、容易に利用可能なソフトウェア(例えば、Sequence Analysis Software Package of the Genetics Computer Group, University of Wisconsin Biotechnology Center, 1710 University Avenue, Madison, WI 53705, BLAST, またはPILEUP/PRETTYBOXプログラム)を使用することによってシグナル配列を特定することができる。シグナル配列は、例えば、配列番号２のアミノ酸１〜１５に実質的に同一の配列であってよい。
【００５９】
「実質的に同一」とは、例えば以下に記載の方法を使用して、最適にアライメントされた場合に、第2の核酸またはアミノ酸配列、例えばSERP1核酸配列またはアミノ酸配列と少なくとも50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%、または100%さえの配列同一性を共有する核酸またはアミノ酸配列を意味する。「実質的同一性」とは、全長配列、エピトープまたは免疫原性ペプチド、機能ドメイン、コード配列および/または調節配列、エキソン、イントロン、プロモーター、およびゲノム配列などの種々のタイプおよび長さの配列に言及するために使用される。2つのポリペプチドまたは核酸配列間の同一性パーセントは、当分野の技術の範囲内である種々の方法で決定され、例えば、公的に利用可能なコンピュータソフトウェア、例えば、Smith Waterman Alignment (Smith and Waterman J. Mol. Biol. 147:195-7, 1981); GeneMatcher PlusTMに組み込まれている"BestFit" (Smith and Waterman, Advances in Applied Mathematics, 482-489, 1981), Schwarz and Dayhof "Atlas of Protein Sequence and Structure," Dayhof, M.O., Ed pp 353-358, 1979; BLASTプログラム(Basic Local Alignment Search Tool; (Altschul, S. F., W. Gish, et al., J. Mol. Biol. 215: 403-410, 1990), BLAST-2, BLAST-P, BLAST-N, BLAST-X, WU-BLAST-2, ALIGN, ALIGN-2, CLUSTAL, またはMegalign (DNASTAR)ソフトウェアを使用して決定される。さらに、当業者は、比較される配列の長さにわたって最大アライメントを達成するために必要な任意のアルゴリズムを含め、アライメントの測定に適切なパラメータを決定することができる。ポリペプチドの場合、比較配列の長さは、概して、少なくとも、例えば、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、350、354、またはそれ以上のアミノ酸、またはそれ以上〜ポリペプチドの全長までである。核酸の場合、比較配列の長さは、概して、少なくとも、例えば、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、350、400、500、600、700、800、900、1,000、1,100、またはそれ以上のヌクレオチド、核酸分子の全長までである。DNA配列をRNA配列と比較する場合の配列同一性を決定する目的では、チミンヌクレオチドはウラシルヌクレオチドと等価であることが理解される。保存的置換には、典型的に、以下の群内の置換が含まれる: グリシン、アラニン; バリン、イソロイシン、ロイシン; アスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、グルタミン; セリン、スレオニン; リシン、アルギニン; およびフェニルアラニン、チロシン。
【００６０】
「被験体」とは、非限定的に、ヒトまたは非ヒト哺乳類、例えばサル、ウサギ、ラット、ウシまたはウマを含む哺乳類を意味する。
【００６１】
「持続放出」または「制御放出」とは、治療上有益な血中レベル(であるが毒性レベル未満)のSERP-1が、例えば約12〜約24時間の範囲の長期間にわたって維持され、例えば12時間または24時間剤形を提供するよう、制御された速度でSERP-1が製剤から放出されることを意味する。
【００６２】
「治療する」または「治療」とは、疾患、病的状態、障害、またはイベント、例えばMACEの治癒、改善、安定化、可能性の減少、または予防の意図での、例えば医薬組成物を投与することによる患者の医学的管理を意味する。この用語には、積極療法、すなわち、特に、疾患、病的状態、障害、またはイベントの改善のために行われるか、または疾患、病的状態、障害、またはイベントの治癒に関連する治療が含まれ、また、原因療法、すなわち、関連する疾患、病的状態、障害、またはイベントの原因の除去のために行われる治療も含まれる。さらに、この用語には、緩和療法、すなわち、疾患、病的状態、障害、またはイベントの治癒ではなく症状の軽減のために設計された治療; 対症療法、すなわち、関連する疾患、病的状態、障害、またはイベントの全身症状に対して行われる治療; 予防処置、すなわち、例えば、まだ病気でないが、特定の疾患、病的状態、障害、またはイベントを被りやすいか、またはその他の点でそのリスクがある患者において、関連する疾患、病的状態、障害、またはイベントの発生を最小にするかまたは部分的もしくは完全に阻害するために行われる処置; および支持療法、すなわち、関連する疾患、病的状態、障害、またはイベントの改善のために行われる別の特異療法を補うために用いられる治療が含まれる。
【００６３】
「ベクター」とは、通常プラスミドまたはバクテリオファージに由来するDNA分子であって、該分子内にDNAのフラグメントが挿入またはクローニングされる、DNA分子を意味する。組み換えベクターは、1以上の固有の制限部位を含み、クローニングされた配列が再現可能であるよう特定の宿主またはビヒクル生物中で自律増殖可能であってよい。ベクターは、レシピエント細胞内へトランスフェクトされるとRNAが発現されるように、遺伝子またはコード領域に作動可能に連結されたプロモーターを含む。
【００６４】
時間的関係に関連して「以内」とは、指定の時間窓の前、間または後を意味する。例えば、「24時間以内」とは、指定イベントの24時間後より前の24時間の任意の時点で、を意味する。
【００６５】
本発明の他の特徴および利点は詳細な説明および特許請求の範囲から明らかになる。
【図面の簡単な説明】
【００６６】
【図１】図１は、当技術分野で公知でありかつGenBankアクセッション番号M35233.1として登録されている粘液腫ウイルスSERP-1の未成熟型をコードする核酸配列を収載する(配列番号１)。
【図２】図２は、当技術分野で公知でありかつGenBankアクセッション番号AAA46629.1として登録されている、15アミノ酸N末端シグナル配列を含む粘液腫ウイルスSERP-1の未成熟型のアミノ酸配列を収載する(配列番号２)。成熟型SERP-1は配列番号２のアミノ酸16〜369におよぶ。
【図３】図３は、急性冠動脈症候群(ACS)患者のTnIの血漿中濃度を示すグラフである。ステント移植直前に開始する、3日間毎日のSERP-1 IV注射の、ACS患者のTnIレベルへの影響を、ベースライン、ステント移植後の8、16、24、48、および54時間、および14および28日の時点で測定した。補正された幾何学的平均を示す。*p<0.05, 15μg/kg vs. プラセボ; **p<0.05 15μg/kg vs. プラセボ; および15μg/kg vs. 5μg/kg。点線は閾値TnIレベル0.5 ng/mlを示す。
【図４】図４は、ACS患者のCK-MBの血漿中濃度を示すグラフである。ステント移植直前に開始する、3日毎日のSERP-1 IV注射の、ACS患者のCK-MBレベルへの影響を、ベースライン、ステント移植後の8、16、24、48、および54時間、および14および28日の時点で測定した。補正された幾何学的平均を示す。*p<0.05, 15μg/kg vs. プラセボ; **p<0.05 15μg/kg vs. プラセボ; および15μg/kg vs. 5μg/kg。点線は閾値CK-MBレベル5.0 ng/mlを示す。
【発明を実施するための形態】
【００６７】
発明の詳細な説明
本発明は、心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって、(i) 患者のTnIおよび/またはCK-MBの循環レベルをモニターするステップ; および(ii) SERP-1を患者に投与するステップを含む方法を特徴とする。一部の事例では、TnIおよび/またはCK-MBの循環レベルが、患者のステント移植後の最初の例えば24時間、指定の閾値、例えばそれぞれ0.5 ng/mlおよび/または5.0 ng/mlを超えないようにするために十分な量のSERP-1を投与するか、または患者のステント移植後の最初の例えば24時間の期間に、少なくとも指定の値、例えば8.5 ng・h/mlのSERP-1の曝露を達成するために十分な量のSERP-1を投与するか、または患者のステント移植後の指定の期間、例えば24時間以内に、指定の用量レベル、例えば約15〜約250μg/kg/日で投与するが、ここで場合により、該期間はステント移植前から開始する。本明細書中に記載の結果によって示されるように、SERP-1のそのような投与は、例えば、心臓ステント移植を受ける患者での主要有害心臓イベント(MACE)の発生についての可能性を減少させるために有用である。
【００６８】
治療
本発明に基づく治療は、単独でまたは別の療法とともに実施することができ、自宅、医院、クリニック、病院外来、または病院で提供することができる。治療は、一般に、医師が治療効果を近くで観察し、必要な任意の調整を施すことができるように病院で開始される。治療の期間は、患者の年齢および症状、心臓ステント移植の性質、および患者が治療にどう反応するかに依存する。さらに、MACEを発生する高いリスクを有する人は、その発生を阻害するか、遅延させるか、または妨げるために予防的治療を受ける。
【００６９】
医薬組成物の製剤化
本発明の医薬組成物は、当業者に公知の様式で、例えば慣用の溶解、凍結乾燥、混合、造粒、または糖剤化プロセス(confectioning processes)を用いて調製される。当技術分野で周知の、製剤の作製方法は、例えば、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th ed., ed. A.R. Gennaro, 2000, Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, およびEncyclopedia of Pharmaceutical Technology, eds. J. Swarbrick and J. C. Boylan, 1988-1999, Marcel Dekker, New Yorkに見出せる。
【００７０】
好適な投与様式には、非限定的に、静脈内、非経口、経口、皮下、筋肉内、および経皮が含まれる。
【００７１】
本発明の組成物の投与は、患者の治療に有効なSERP-1濃度を生じさせる任意の好適な手段による投与であってよい。SERP-1を、好適な担体物質、例えば、SERP-1の治療特性を保存する製薬的に許容される賦形剤と混合することができる。典型的な製薬的に許容される賦形剤の1つは生理食塩水である。好適な担体物質は、概して、組成物の総重量の0.1〜99.9重量%の量で存在する。静脈内、非経口、経口、皮下、筋肉内、または経皮投与に好適な剤形で組成物を提供することができる。ゆえに、該組成物は、例えば、静脈内輸液、錠剤、カプセル、丸剤、粉末、顆粒、懸濁液、エマルジョン、溶液、ゲル、例えばヒドロゲル、ペースト、軟膏、クリーム、硬膏、送達デバイス、例えばポンプおよび被覆ステント、注射剤、移植物、などの形式であってよい。
【００７２】
本発明の医薬組成物は、投与されると実質的に即時に、または、制御放出製剤を使用して、投与後の任意のあらかじめ決められた期間の時点でSERP-1を放出するように製剤化することができる。
【００７３】
SERP-1は、例えば、15アミノ酸N末端シグナル配列および354アミノ酸成熟部分を含む未成熟ポリペプチドとして発現させてよい。成熟SERP-1ポリペプチドは、シグナル配列の、翻訳と同時または翻訳後の切断によって、または他の方法、例えば組み換え法によって得ることができる。SERP-1核酸およびポリペプチドの典型的な核酸およびアミノ酸配列は、それぞれ配列番号１および２に示される。ゆえに、SERP-1のシグナル配列は配列番号２のアミノ酸1〜15に相当し、一方、成熟部分は配列番号２のアミノ酸16〜369に相当する。
【００７４】
SERP-1アミノ酸変異体は、固相ペプチド合成(Merrifield合成)などの当技術分野で周知のペプチド合成技術を使用して、または当技術分野で周知の組み換えDNA技術によって容易に作製することができる。置換、挿入、または欠失変異体を作製するためのDNA配列の操作は、Sambrook and Russell, 2001, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd Ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.などの他の箇所に好都合に記載されている。
【００７５】
用量
本発明の方法で使用されるSERP-1の適切な用量は、投与経路、患者の症状の重症度、ならびに治療対象の患者の年齢、体重、および健康を含むいくつかの要因に依存する。さらに、特定の患者についてのファーマコゲノミック(pharmacogenomic) (治療薬の薬物動態学的、薬力学的または効力プロファイルに対する遺伝子型の影響)情報は、使用される用量に影響する。
【００７６】
継続的な日々のSERP-1投薬は必要とされないかもしれない。治療計画は、SERP-1を投与しない期間のあるサイクルを必要とするか、または治療を必要に応じて提供してよい。
【００７７】
本明細書中に記載されるように、典型的に、SERP-1は静脈内投与されるが、代わりに、非経口、経口、皮下、または他の経路によって投与してもよい。本発明の方法に基づいて、例えば静脈内投与に適切なSERP-1用量は、患者のステント移植の、例えば24時間以内に、例えば、0.5、1.0、2.5、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、75、100、125、150、200、250、300、400、または500μg/kg/日を超える用量、または該用量の中間の任意の範囲を含む。SERP-1は、最初に、ステントの移植前に投与してよく; 場合により、SERP-1は、その後、ステント移植の24時間後まで投与されない。用量は患者の実際またはおおよその体重に基づいて算出するか、または子供または成人の基準体重、例えば、1、2、5、10、15、20、25、30、40、50、60、70、80、90、100、125、150、または、さらには200 kgに基づいて算出してよい。一部の事例では、SERP-1の量は、例えば、約15μg/kg/日〜約250μg/kg/日、約15μg/kg/日〜約150μg/kg/日、約15μg/kg/日〜約30μg/kg/日、または約15μg/kg/日である。SERP-1は、約、例えば、1週、3日、2日、24時間、18時間、12時間、6時間、5時間、4時間、3時間、2時間、1時間、または30分ごとに1回投与してよく、例えば、1日、2日、3日、4日、5日、6日、1週間、2週間、またはさらに長期の期間にわたって投与してよい。
【００７８】
一部の事例では、例えば0.9%生理食塩水中のSERP-1を5μg/kg/日または15μg/kg/日の用量レベルで3日間毎日の静脈内ボーラス注射によって投与し、患者のステント移植の直前に初回投与量を投与し、その後の投与はそれぞれ約24および48時間後の時点で投与する。
【００７９】
一部の事例では、ステント移植手順の直前にSERP-1を患者に投与して、組織損傷が発生する前に患者の体内にSERP-1の循環レベルがすでに存在するようにする。この様式で、TnIおよび/またはCK-MBのレベルはそのそれぞれの閾値を超えないようにすることができる。
【００８０】
TnIの循環レベルが、患者のステント移植後の最初の例えば24時間、例えば、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、または1.5 ng/mlの閾値を超えないようにするために十分な量のSERP-1を投与することもできる。一部の事例では、患者に投与されるSERP-1の量は、TnIの循環レベルが、患者のステント移植後の最初の例えば24時間、指定の閾値、例えば0.5 ng/mlを超えないようにするために十分なSERP-1の最小用量の、例えば、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、6、7、8、9、または10倍以下である。
【００８１】
さらに、患者のステント移植後の最初の例えば24時間の期間に、少なくとも、例えば、8.5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、225、250、275、300、350、400、または500 ng・h/mlのSERP-1の曝露を達成するために十分な量のSERP-1を投与することができる。一部の事例では、患者に投与されるSERP-1の量は、患者のステント移植後の最初の、例えば24時間の期間に、少なくとも指定のSERP-1曝露、例えば8.5 ng・h/mlを達成するために十分なSERP-1の最小用量の、例えば、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、6、7、8、9、または10倍以下である。
【００８２】
CK-MBの循環レベルが、患者のステント移植後の最初の例えば24時間、例えば、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10、11、12、13、14、または15 ng/mlの閾値を超えないようにするために十分な量のSERP-1を、さらに、投与することができる。一部の事例では、患者に投与されるSERP-1の量は、CK-MBの循環レベルが、患者のステント移植後の最初の例えば24時間、指定の閾値、例えば5.0 ng/mlを超えないようにするために十分なSERP-1の最小用量の、例えば、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、6、7、8、9、または10倍以下である。
【００８３】
SERP-1の任意の投与経路で、上記用量が適切でありうるし、または約、例えば、0.005〜0.05μg/kg/日、0.05〜0.5μg/kg/日、0.5〜5.0μg/kg/日、5.0〜50μg/kg/日、50〜500μg/kg/日、または500〜5,000μg/kg/日の範囲、またはその中間の任意の他の範囲の他の用量を使用することができ、ただし、閾値レベルを超えず、かつ/または所望の曝露レベルに達することを条件とする。
【００８４】
SERP-1は、例えば本明細書中に記載の実施例で利用される、例えば不十分なシアル酸付加型で投与するか、または、より高度なシアル酸付加型で投与してもよい。SERP-1のグリコシル化プロファイル、特にそのシアル酸付加プロファイルは適切な用量に影響を有するかもしれない。
【００８５】
TnIおよびCK-MBのモニタリング
任意の、当技術分野で認められている、TnIおよび/またはCK-MBの循環レベルをモニターする方法は本明細書中に記載の方法において適切である。典型的に、患者の血液を各時点で採取し、当技術分野で公知の慣用のアッセイ方法を使用して、TnIおよび/またはCK-MBの血漿中濃度を測定する。モニタリングステップは、患者のステントの移植前、移植中、および/または移植後に実施してよく、患者へのSERP-1の投与前、投与中、および/または投与後に実施してもよい。モニタリングは継続的または断続的であってよい。モニタリングの結果に基づいて、SERP-1の投与を増加させるか、減少させるか、または中断する決定を行うことができる。例えば、ステント移植後に、TnIの循環レベルを測定して、TnIの指定の閾値の、例えば、20%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、または99%さえも超えることが観察される場合、例えば、TnIの循環レベルが、閾値0.50 ng/mlの80%である0.40 ng/mlを超える場合、追加のSERP-1を投与してよい。同様に、ステント移植後に、CK-MBの循環レベルを測定して、CK-MBの指定の閾値の、例えば、20%、30%、40%、50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、または99%さえも超えることが観察される場合、例えば、CK-MBの循環レベルが、閾値5.0 ng/mlの80%である4.0 ng/mlを超える場合、追加のSERP-1を投与してよい。
【００８６】
一部の実施形態では、モニタリングステップを省略してよい。
【実施例】
【００８７】
実施例
以下の実施例は本発明を説明するためのものである。それは、いかなる意味においても本発明を限定するためのものではない。
【００８８】
臨床試験
2005年10月から2008年12月まで第2相臨床試験を行った。該試験はSerp-1-01-002と表示され、表題「急性冠動脈症候群(非ST上昇心筋梗塞または不安定狭心症)患者の従来治療に加えた場合の、連続3日間のSerp-1投与の安全性、薬物動態、および生物学的活性についての第2相多施設二重盲検プラセボ対照による用量増加試験」であった。
【００８９】
本研究の主目的は、早期介入を必要とする急性冠動脈症候群(ACS)の従来治療を受ける患者に3日の一日量で投与された場合のSERP-1注射の安全性を評価することであった。患者集団は、最低でも、参加前の最後の24時間に1回以上の少なくとも5分間続く狭心症エピソードとして定義される、ACS (不安定狭心症または非ST上昇MI)を示した18〜80歳の男性および女性であり、確認的血管造影にしたがって、経皮的冠動脈血管形成術の計画が進められている患者であった。患者を2つのコホート(5および15μg/kg SERP-1)に登録した。トータルで48人の患者を研究に登録し、プラセボ群の患者12人、5μg/kg SERP-1群に患者19人、および15μg/kg SERP-1群の患者17人であった。
【００９０】
手順
登録時に、各被験体は、治療期間の3日間、研究センターにとどまり、次いで、治療後、14日、28日、および3か月および6か月の時点で研究センターを再訪した。被験体は、医師の指示するACS治療に加えて5または15μg/kg/用量(またはプラセボ、0.9%生理食塩水)の用量レベルで、3日間毎日、静脈内(IV)ボーラス注射によるSERP-1の投与を受けた。SERP-1を1回のIVボーラス注射として投与した。最初のIVボーラス用量を、血管造影が実施されて緊急PCIが予定される患者のPCI手順の直前に投与し、その後の用量を24±2および48±2時間後に投与した。
【００９１】
2つのコホートで連続して用量レベルを投与した。低用量(5.0μg/kg/用量)レベルで登録された患者から得られたデータのデータ安全性モニタリニング委員会(Data Safety Monitoring Board)による安全審査後に、15μg/kg/用量の第2のコホートを開始した。データ安全性モニタリニング委員会は、投与後28日まで(28日目を含む)に収集されたデータを審査した。
【００９２】
治療期間中、以下の臨床手順にしたがった。
【００９３】
・生命徴候、脈拍、および血圧を含む身体検査
・臨床検査室評価(化学、凝固パラメータを含む血液学、検尿)
・SERP-1薬物動態解析
・炎症マーカー分析
・参加後48時間にわたるCK-MBおよび/またはトロポニン(TまたはI)放出モニタリング。
【００９４】
最初の投与後14日、および28日の時点で、被験体は以下の安全性評価を受けた。
【００９５】
・生命徴候、脈拍、および血圧を含む身体検査
・臨床検査室評価(化学、血液学、凝固パラメータ)
・炎症マーカー
・CK-MBおよび/またはトロポニン(TまたはI)レベル
・12誘導ECG
・抗体解析(さらに3か月および6か月の時点でも)。
【００９６】
本研究で採用された安全性パラメータエンドポイントは以下の通りであった。
【００９７】
・凝固パラメータの顕著な変化
・中和抗SERP-1および抗PAI-1抗体を含むSERP-1の免疫原性
・白血球数の顕著な変化(好中球減少、白血球減少、または熱病を伴う敗血症の徴候)
・アレルギー反応。
【００９８】
本研究で採用された生物学的活性エンドポイントは以下の通りであった。
【００９９】
一次:
・生化学的炎症マーカー(C反応性タンパク質、ミエロペルオキシダーゼ、ミオグロビン、D-ダイマーおよびBNP)のレベルの減少
二次:
・IVUS測定を使用する6か月追跡検査の時点での標的血管再狭窄の割合
・6か月にわたる主要有害心臓イベント(心血管死、MI、または標的病変血行再建、例えば介入)の発生率。
【０１００】
本研究の目的は、この集団での3日の一日量のSERP-1の投与の安全性を決定することであるため、統計解析を実施して、炎症マーカー、MACEの発生率、および再狭窄率の有意な減少を検出した。
【０１０１】
結果:
安全性
凝固パラメータ(プロトロンビン(prothombin)時間-国際標準比(PT-INR)および活性化部分トロンボプラスチン時間(aPTT))、白血球数(好中球減少、白血球減少、または熱病を伴う敗血症の徴候)またはアレルギー反応の発生率を含む重要な安全性エンドポイントに対するSERP-1の影響はなかった。さらに、生命徴候、ECGおよび胸部X線像、または標準臨床検査室評価(化学、血液学、検尿)に対するSERP-1の影響はなかった。
【０１０２】
抗体
抗SERP-1および抗PAI-1抗体に関して、ベースライン、治療後の14および28日ならびに3および6か月の時点で血漿サンプルを分析した。これらの解析での全体偽陽性率(陰性と確認された研究サンプル/全研究サンプル)は、SERP-1解析で7.9%であり、PAI-1解析で4.7%であった。SERP-1の免疫原性は非常に低かった; 5μg/kg用量群の1患者が抗SERP-1抗体に関して陽性であり、15μg/kg用量群の3患者が抗SERP-1抗体に関して陽性であった。中和活性は、これらの患者サンプルで検出されなかった。すべての患者で抗PAI抗体は検出されなかった。
【０１０３】
薬物動態
SERP-1の各投与後にSERP-1の薬物動態を評価した。コホート1 (5μg/kg)被験体でのSERP-1の最大血漿中濃度(Cmax)は7.13〜203 ng/mlの範囲であった。曲線下面積(AUC0-∞)として定義される曝露は9.92〜82.3 ng・h/mlの範囲であった。コホート2 (15μg/kg)の被験体では、Cmaxは11.1〜354 ng/mlの範囲であった。曲線下面積(AUC0-∞)として定義される曝露は18.3〜76.7 ng・h/mlの範囲であった。
【０１０４】
連続3回の投与後のSERP-1の全身曝露は用量レベルおよび場合によって変動した。SERP-1薬物動態の性差は、本研究から結論することができなかった。
【０１０５】
バイオマーカー分析
SERP-1の生物学的活性を、最初に、いくつかの時点(ベースライン、投与後8、16、24、48および54時間ならびに14および28日の時点)で、血漿バイオマーカー(PAI-1、MCP-1、MPO、CRP、D-ダイマー、ミオグロビン、BNP、CK-MBおよびTNI)に対するSERP-1の影響を調査することによって測定した。分析の結果は、ベースライン値の項、ならびに処理、時間および処理x時間交互作用(interaction)の項を含む、共分散反復測定分析(ANCOVA)モデルによって無関係の統計学者が解析した。統計学的に有意な処理x時間交互作用はSERP-1の治療効果の可能性を示唆する。有意な処理x時間交互作用は反復測定ANCOVAモデル下で治療規約(treatment contracts)によって続き、各時点での処理効果の調査を可能にした。
【０１０６】
すべての分析前に、計画されたモデルの基礎をなす基本仮定を確かめ、対数変換を使用して全バイオマーカーの正規性を近似した。すべての検定は両側検定であり、0.05有意水準で行われた。SASリリース9.1 (SAS Institute Inc. Cary, NC, USA)によって分析を実施した。
【０１０７】
重要な心臓マーカー、TnIおよびCK-MBに関する有意な用量依存的効果が見出された。複数の時点でプラセボと15μg/kgの間および15μg/kgと5μg/kgとの間の有意差が観察された(表1ならびに図３および４を参照のこと)。
【０１０８】
CK-MBはまた、MACEイベントに対する予測的効果を有することが文献で示唆されている。SERP-1はCK-MBに対する用量依存的効果を有したが、このマーカーに対するその効果はTnIの場合に得られた観察を支持する。
【表１】
2013527125.tif 000002
【０１０９】
6か月の時点の標的血管再狭窄の割合:
標的血管再狭窄の割合に対するSERP-1の効果を血管内超音波(IVUS)評価によってベースラインおよび6か月の時点で評価した。病変ならびに参照セグメントでIVUSパラメータを評価した。
【０１１０】
以下のパラメータを評価した。
【０１１１】
病変(ステント領域)内:
・3D IVUSによる15 mm病変に関して指標化された(indexed)内腔容積、ステント容積およびステント内新生内膜容積;
・追跡調査時に最小の内腔面積を有するステント部位での2D IVUSによる内腔面積、ステント面積および内膜プラーク面積;
・3D IVUSによる全分析セグメントにわたる平均内腔面積、平均ステント面積および平均新生内膜面積
参照セグメント内:
・3D IVUSよる10 mmセグメントに関して指標化された内腔容積、外弾性膜(血管)容積およびプラーク容積
・コントロール群と治療群との間でステント内プラークまたは内腔面積の統計学的有意差は検出されなかった。
【０１１２】
主要心臓イベントの発生率:
最後の6か月追跡調査訪問まで、すべての「包括解析」患者に関して主要有害心臓イベント(MACE)の発生率を捕捉した。「包括解析(intent-to-treat)」集団は、研究期間中に任意の用量の治験薬物(またはプラセボ)を服用し、ベースラインおよびベースライン後の両方の時点で炎症バイオマーカーの測定を行った、すべてのランダム化患者を含む、安全性集団のサブセットであった。MACEは、心血管死、心筋梗塞(MI)、標的病変血行再建、またはCABGであると定義された。
【０１１３】
表2を参照すると、15μg/kg用量のSERP-1を投与された17患者はいずれも、6か月追跡調査までにMACEの発生を示さなかったが、プラセボまたは5μg/kg用量を投与された28患者のうち7人は6か月追跡調査までにMACEの発生を示した。これらの結果は、ステント移植後にTnIおよびCK-MBがそのそれぞれの閾値を超えないようにする上での観察されるSERP-1の効力と矛盾しない。特に、図３に示されるように、概して、より高いSERP-1用量を投与された患者は、ステント移植後の重要な24時間の期間を通して実質的に閾値0.5 ng/ml未満のTnIの血漿中濃度を維持することができたが、プラセボまたはより低いSERP-1用量を投与された患者はそうではなかった。同様に、図４に示されるように、概して、より高いSERP-1用量を投与された患者は、ステント移植後の重要な24時間の期間を通して実質的に閾値5.0 ng/ml未満のCK-MBの血漿中濃度を維持することができたが、プラセボまたはより低いSERP-1用量を投与された患者はそうではなかった。
【表２】
2013527125.tif 000003
【０１１４】
表3は、表2に示される結果を要約するが、安全性集団の患者に関して算出されたN値およびパーセンテージを用いる。
【表３】
2013527125.tif 000004
【０１１５】
考察
心臓損傷の重要なマーカーであるTnIおよびCK-MBを含む血漿バイオマーカーに対するSERP-1の影響を調査することによって、SERP-1の生物学的活性を測定した。統計学的に有意な、ステント移植およびSERP-1投与後の最初の24時間においてTnIおよびCK-MBに関して用量依存的効果が観察された。さらに、高用量患者はいずれも、6か月追跡調査までにMACEの発生を示さなかったが、プラセボ/低用量患者の約1/4はその発生を示した。一方の高用量群と、他方のプラセボ/低用量群との間のMACE発生率の相違は、TnIおよびCK-MBの循環レベルがそのそれぞれの閾値を超えないようにするだけでなく、ステント移植後のMACEの可能性を顕著に減少させる、例えば15μg/kg SERP-1の、投与の効力を示す。
【０１１６】
いくつかの臨床研究は、ステント移植後の上昇したTnIおよび/またはCK-MBが心筋梗塞および心血管死を含むMACEイベントと有意に関連することを示唆する(Cantor et al., 2002, Ramirez-Moreno et al., 2004)。この関連の患者でのTnIのカットオフレベルは0.5〜1.5 ng/mlの範囲であると報告され、一部の研究では、0.5〜0.8 ng/mlの範囲がMACEイベントの増加についての予測可能性に必要とされるTnIの閾値レベルを、より反映していると示唆されている。同様に、CK-MBと有害イベントとの間の関係の閾値は約5.0 ng/mlであるようである。
【０１１７】
本研究では、SERP-1投与後のTnIおよびCK-MBの用量依存的減少が観察された。MACEイベントの減少も観察された。TnIのレベルが0.5 ng/mLを超えないようにし、かつ/またはCK-MBのレベルが5 ng/mLを超えないようにするSERP-1の用量は、MACEに対する最大の効果を有することが見出された。
【０１１８】
本明細書中に記載の試験での患者集団が比較的小さいことを考慮すると、少しでも効果が観察されたことは驚くべきことである。SERP-1が心筋酵素TnIおよびCK-MBに対して用量依存的影響を有したことはさらに驚くべきことである。文献では、もし超えればMACEの予測になるTnIおよびCK-MBの閾値レベルの存在が予測されているが、SERP-1を投与すると、そのレベルがこの閾値を超えないようにすることができることは明らかではなく、SERP-1の投与がMACEに対する統計学的に有意な効果を有することも明らかではなかった。ステント移植を受ける患者でのSERP-1の投与がMACEの発生率を劇的に減少させてゼロにすることができた事実は特に際立っている。MACEに対するSERP-1の効果についてのこれらの観察は、ステント移植手順の結果を顕著に改善し、かつさもなければ該手順後に心臓発作で亡くなるかもしれなかった患者の命を救う潜在可能性を有する。
【０１１９】
参考文献
Cantor W, Newby L, Christenson R, Tuttle R, Hasselblad V, Armstrong P, Moliterno D, Califf R, Topol E, Ohman E. Prognostic significance of elevated troponin I after percutaneous coronary intervention. J. Am. Coll. Cardiol. 2002;39:1738-1744.
Davies B. and Morris T. Physiological parameters in laboratory animals and humans. Pharm. Res.1993;10:1093-1095.
Jiang J, Arp J, Kubelik D, Zassoko R, Liu W, Wise Y, Macaulay C, Garcia B, McFadden G, Lucas A, Wang H. Induction of indefinite cardiac allograft survival correlates with toll-like receptor 2 and 4 downregulation after serine protease inhibitor-1 (SERP-1) treatment. Transplantation 2007;84:1158-1167.
Lucas A, Dai E, Liu L, Guan H, Nash P, McFadden G, Miller L. Transplant vasculopathy: viral anti-inflammatory serpin regulation of atherogenesis. J Heart Lung Transplant 2000;19:1029-1038.
Lucas A, Liu L, Macen J, Nash P, Dai E, Stewart M, Graham K, Etches W, Boshkov L, Nation P, Humen D, Hobman M, McFadden G. Virus-encoded serine proteinase inhibitor SERP-1 inhibits atherosclerotic plaque development after balloon angioplasty. Circulation 1996;94:2890-2900.
Miller L, Dai E, Nash P, Liu L, Icton C, Klironomos D, Fan L, Nation P, Zhong R, McFadden G, Lucas A. Inhibition of transplant vasculopathy in a rat aortic allograft model after infusion of anti-inflammatory viral serpin. Circulation. 2000;101:1598-1605.
Ramirez-Moreno A, Cardenal R, Pera C, Pagola C, Guzman M, Vazquez E, Fajardo A, Lozano C, Solis J, Gasso M. Predictors and prognostic value of myocardial injury following stent implantation. Int. J. Cardiol. 2004;97:194-198.
他の実施形態
上記明細書中に記載のすべての刊行物、特許、および特許出願は、参照によりここに組み入れられる。本発明の範囲および思想から逸脱することなく、上記本発明の方法の種々の改変およびバリエーションが当業者に明らかになる。本発明は特定の実施形態に関連して記載されているが、特許請求されている発明は、そのような特定の実施形態に不当に限定されるべきではないことが理解されるべきである。実際、当業者に自明の、本発明を実施するための上記様式の種々の改変は、本発明の範囲内であるものとする。
【０１２０】
他の実施形態は特許請求の範囲内である。
【図１】
2013527125.tif 000005
【図２】
2013527125.tif 000006
【図３】
2013527125.tif 000007
【図４】
2013527125.tif 000008
【配列表】
2013527125000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成24年5月18日(2012.5.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
心臓ステント移植を受ける患者のトロポニンI (TnI)の循環レベルが、患者のステント移植後の最初の24時間にわたり閾値0.5 ng/mlを超えないようにする方法であってTnIの循環レベルがその閾値を超えないようにするために十分な量のSERP-1を患者に投与するステップを含む方法において、使用されることを特徴とする、SERP-1を含む医薬。
【請求項２】
前記方法が、患者のTnIの循環レベルをモニターするステップをさらに含む、請求項１の医薬。
【請求項３】
SERP-1の量が、患者のステント移植後の最初の24時間にわたりTnIの循環レベルが閾値0.5 ng/mlを超えないようにするために十分なSERP-1の最小用量の3倍以下である、請求項１または２の医薬。
【請求項４】
心臓ステント移植を受ける患者のクレアチニンキナーゼMBフラクション(CK-MB)の循環レベルが、患者のステント移植後の最初の24時間にわたり閾値5.0 ng/ml超えないようにする方法であってCK-MBの循環レベルがその閾値を超えないようにするために十分な量のSERP-1を患者に投与するステップを含む方法において、使用されることを特徴とする、SERP-1を含む医薬。
【請求項５】
前記方法が、患者のCK-MBの循環レベルをモニターするステップをさらに含む、請求項４の医薬。
【請求項６】
SERP-1の量が、患者のステント移植後の最初の24時間にわたりCK-MBの循環レベルが閾値5.0 ng/mlを超えないようにするために十分なSERP-1の最小用量の3倍以下である、請求項４または５の医薬。
【請求項７】
患者のステント移植後の最初の24時間の期間に心臓ステント移植を受ける患者での少なくとも8.5 ng・h/mlのSERP-1の曝露を達成する方法であってSERP-1のその曝露を達成するために十分な量のSERP-1を患者に投与するステップを含む方法において、使用されることを特徴とする、SERP-1を含む医薬。
【請求項８】
前記方法が患者のTnIの循環レベルをモニターするステップをさらに含む、請求項７の医薬。
【請求項９】
前記方法が患者のCK-MBの循環レベルをモニターするステップをさらに含む、請求項７の医薬。
【請求項１０】
SERP-1の量が、患者のステント移植後の最初の24時間の期間に少なくとも8.5 ng・h/mlのSERP-1の曝露を達成するために十分なSERP-1の最小用量の3倍以下である、請求項７〜９のいずれか一項の医薬。
【請求項１１】
心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって患者のステント移植の24時間以内に5μg/kg/日を超える量のSERP-1を患者に投与するステップを含む方法において、使用されることを特徴とする、SERP-1を含む医薬。
【請求項１２】
前記方法が、患者のTnIの循環レベルをモニターするステップをさらに含む、請求項１１の医薬。
【請求項１３】
前記方法が、患者のCK-MBの循環レベルをモニターするステップをさらに含む、請求項１１の医薬。
【請求項１４】
SERP-1の量が約15μg/kg/日〜約250μg/kg/日である、請求項１１〜１３のいずれか一項の医薬。
【請求項１５】
SERP-1の量が約15μg/kg/日〜約150μg/kg/日である、請求項１４の医薬。
【請求項１６】
SERP-1の量が約15μg/kg/日である、請求項１５の医薬。
【請求項１７】
前記方法において、患者のTnIの循環レベルをモニターするステップを、投与ステップの後でかつステント移植後の最初の24時間の期間に実施し、かつ、TnIの循環レベルが0.40 ng/mlを超える場合、投与ステップを繰り返す、請求項１〜３、７〜８、１０〜１２、および１４〜１６のいずれか一項の医薬。
【請求項１８】
前記方法において、患者のCK-MBの循環レベルをモニターするステップを、投与ステップの後でかつステント移植後の最初の24時間の期間に実施し、かつ、CK-MBの循環レベルが4.0 ng/mlを超える場合、投与ステップを繰り返す、請求項４〜６、７、９〜１１、および１３〜１６のいずれか一項の医薬。
【請求項１９】
SERP-1が患者のステント移植前に投与される、請求項１〜１８のいずれか一項の医薬。
【請求項２０】
SERP-1が、患者のステント移植前6時間未満に投与される、請求項１９の医薬。
【請求項２１】
SERP-1が、患者のステント移植後の最初の24時間の期間に投与されない、請求項１９または２０の医薬。
【請求項２２】
SERP-1が約24時間ごとに1回投与される、請求項１〜２１のいずれか一項の医薬。
【請求項２３】
SERP-1が、3日間、約24時間ごとに1回投与される、請求項２２の医薬。
【請求項２４】
ステントが地金ステントである、請求項１〜２３のいずれか一項の医薬。
【請求項２５】
ステントが薬剤溶出性ステントである、請求項１〜２３のいずれか一項の医薬。
【請求項２６】
SERP-1が静脈内投与される、請求項１〜２５のいずれか一項の医薬。
【請求項２７】
SERP-1が、配列番号２のアミノ酸16〜369と少なくとも90%同一のアミノ酸配列を含む、請求項１〜２６のいずれか一項の医薬。
【請求項２８】
SERP-1が、配列番号２のアミノ酸16〜369と少なくとも95%同一のアミノ酸配列を含む、請求項２７の医薬。
【請求項２９】
SERP-1が、配列番号２のアミノ酸16〜369を含む、請求項２８の医薬。
【請求項３０】
SERP-1のアミノ酸配列が、配列番号２のアミノ酸16〜369と少なくとも90%同一のアミノ酸配列からなる、請求項２７の医薬。
【請求項３１】
SERP-1のアミノ酸配列が、配列番号２のアミノ酸16〜369と少なくとも95%同一のアミノ酸配列からなる、請求項３０の医薬。
【請求項３２】
SERP-1のアミノ酸配列が配列番号２のアミノ酸16〜369からなる、請求項３１の医薬。
【請求項３３】
SERP-1が、配列番号１を含む核酸分子の少なくとも一部に高ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズする核酸分子によってコードされる、請求項１〜３２のいずれか一項の医薬。
【請求項３４】
SERP-1が少なくとも90%純粋である、請求項１〜３３のいずれか一項の医薬。
【請求項３５】
SERP-1が少なくとも99%純粋である、請求項３４の医薬。
【請求項３６】
SERP-1がグリコシル化されている、請求項１〜３５のいずれか一項の医薬。
【請求項３７】
患者がヒトである、請求項１〜３６のいずれか一項の医薬。
【請求項３８】
前記方法が、患者のステント移植後の最初の6か月間、主要有害心臓イベント(MACE)の発生の可能性を減少させる、請求項１〜３７のいずれか一項の医薬。
【請求項３９】
前記方法が、患者でのMACEの発生の可能性を少なくとも25%減少させる、請求項３８の医薬。
【請求項４０】
MACEが心血管死である、請求項３８または３９の医薬。
【請求項４１】
MACEが心筋梗塞である、請求項３８または３９の医薬。
【請求項４２】
MACEが標的病変血行再建である、請求項３８または３９の医薬。
【請求項４３】
標的病変血行再建が経皮的冠動脈インターベンションを含む、請求項４２の医薬。
【請求項４４】
MACEが冠動脈バイパス移植(CABG)である、請求項３８または３９の医薬。
【請求項４５】
SERP-1が、製薬的に許容される賦形剤を含む医薬組成物へと製剤化される、請求項１〜４４のいずれかの医薬。
【請求項４６】
心臓ステント移植を受ける患者のトロポニンI (TnI)の循環レベルが、患者のステント移植後の最初の24時間にわたり閾値0.5 ng/mlを超えないようにする方法であってTnIの循環レベルが閾値を超えないようにするために十分な量のSERP-1の初回投与量をステントの移植前に患者に投与するステップを含む方法において、使用されることを特徴とする、SERP-1を含む医薬。
【請求項４７】
前記方法が、患者のTnIの循環レベルをモニターするステップをさらに含む、請求項４６の医薬。
【請求項４８】
患者のステント移植後の最初の24時間の期間に少なくとも8.5 ng・h/mlの、心臓ステント移植を受ける患者でのSERP-1の曝露を達成する方法であってSERP-1の曝露を達成するために十分な量のSERP-1の初回投与量をステントの移植前に患者に投与するステップを含む方法において、使用されることを特徴とする、SERP-1を含む医薬。
【請求項４９】
前記方法が、患者のTnIの循環レベルをモニターするステップをさらに含む、請求項４８の医薬。
【請求項５０】
心臓ステント移植を受ける患者を治療する方法であって患者のステント移植の24時間以内に5μg/kg/日を超える量のSERP-1の初回投与量をステントの移植前に患者に投与するステップを含む方法において、使用されることを特徴とする、SERP-1を含む医薬。
【請求項５１】
前記方法が、患者のTnIの循環レベルをモニターするステップをさらに含む、請求項５０の医薬。
【請求項５２】
前記方法が、患者のステント移植後の最初の6か月間、主要有害心臓イベント(MACE)の発生の可能性を減少させる、請求項４６〜５１のいずれか一項の医薬。
【請求項５３】
前記方法が、患者のステント移植の24時間後にSERP-1の第2の投与量を患者に投与するステップをさらに含む、請求項４６〜５２のいずれか一項の医薬。
【国際調査報告】
2013527125.tif 000009
2013527125.tif 000010