(57)【要約】本発明は、化合物５−クロロ−Ｎ−（（１−（４−（２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）メチル）チオフェン−２−カルボキサミドの塩及び結晶形態、並びにその医薬組成物及び使用方法を提供する。本発明は、その少なくとも一部が結晶形態Ａで存在している化合物Ｉのメシル酸塩、ならびに、結晶形態Ａの化合物Ｉのメシル酸塩を調製するための方法であって、化合物Ｉの遊離塩基を、メチルエチルケトン、及び場合によりテトラヒドロフランを含む溶媒中で少なくとも１当量のメタンスルホン酸と混合するステップを包含する方法を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
約１８．０５、約２０．３０、約２０．９５、約２１．８５、約２３．２０、約２６．１３、及び約２６．８５からなる群から選択される少なくとも６個の２θ°ピークを有するＸ線粉末回折パターンを特徴とする５−クロロ−Ｎ−（（１−（４−（２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）メチル）チオフェン−２−カルボキサミドのメシル酸塩の結晶形態。
【請求項２】
図３ａ又は図３ｂのＸ線粉末回折パターンと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを特徴とする請求項１に記載の結晶形態。
【請求項３】
図５の示差走査熱量測定パターンと実質的に同じ示差走査熱量測定パターン、又は図２８により表されるＧＶＳ分析と実質的に同じＧＶＳ分析をさらに特徴とする請求項１に記載の結晶形態。
【請求項４】
約１６．９６、約１８．９５、約２０．４１、約２１．３４、約２１．８５、約２２．７５、約２５．７５、及び約２６．６５からなる群から選択される少なくとも６個の２θ°ピークを有するＸ線粉末回折パターンを特徴とする５−クロロ−Ｎ−（（１−（４−（２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）メチル）チオフェン−２−カルボキサミドのメシル酸塩の結晶形態。
【請求項５】
図６のＸ線粉末回折パターンと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを特徴とする請求項４に記載の結晶形態。
【請求項６】
図８ａ又は図８ｂの示差走査熱量測定パターンと実質的に同じ示差走査熱量測定パターンを特徴とする請求項４に記載の結晶形態。
【請求項７】
５−クロロ−Ｎ−（（１−（４−（２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）メチル）チオフェン−２−カルボキサミドのメシル酸塩であって、前記塩の少なくとも一部が請求項１〜６のいずれか一項に記載の結晶形態で存在している、塩。
【請求項８】
化合物５−クロロ−Ｎ−（（１−（４−（２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）メチル）チオフェン−２−カルボキサミドの１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩。
【請求項９】
請求項８に記載の塩であって、前記塩の少なくとも一部が、約４．３、約６、約８．４５、約９、約１０．５、約１２．５、約１５．０、約１５．７、約１７．４、約１８．４５、約２４．３、及び約２５．０５からなる群から選択される少なくとも６個の２θ°ピークを有するＸ線粉末回折パターンを特徴とする結晶形態で存在している、塩。
【請求項１０】
前記結晶形態が約４．３、約６、約８．４５、約９、約１０．５、約１２．５、約１５．０、約１５．７、約１７．４、約１８．４５、約２４．３、及び約２５．０５からなる群から選択される少なくとも８個の２θ°ピークを有するＸ線粉末回折パターンを特徴とする、請求項９に記載の塩。
【請求項１１】
前記結晶形態が図１０ａのＸ線粉末回折パターンと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを特徴とする、請求項９に記載の塩。
【請求項１２】
前記結晶形態が図１１に示す示差走査熱量測定パターンと実質的に同じ示差走査熱量測定パターンを特徴とする、請求項９に記載の塩。
【請求項１３】
約６．５、約８、約８．８、約１１．０、約１４．５、約１７．３、及び約１８．２からなる群から選択される少なくとも６個の２θ°ピークを有するＸ線粉末回折パターンを特徴とする、化合物５−クロロ−Ｎ−（（１−（４−（２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）メチル）チオフェン−２−カルボキサミドのリン酸塩の結晶形態。
【請求項１４】
約６．５、約８、約８．８、約１１．０、約１４．５、約１７．３、及び約１８．２からなる群から選択される少なくとも８個の２θ°ピークを有するＸ線粉末回折パターンを特徴とする請求項１３に記載の結晶形態。
【請求項１５】
前記Ｘ線粉末回折パターンが図１３のＸ線粉末回折パターンと実質的に同じである、請求項１４に記載の結晶形態。
【請求項１６】
約４、約６．５、約８．２、約１３．９、約１４．５、約１６、約１７．４５、約１８．２、約１９．１５、約２０．１、約２１．４５、約２２．３５、約２３．５、約２４．０、約２５．２、約２７．６５、及び約２８．２５からなる群から選択される少なくとも６個の２θ°ピークを有するＸ線粉末回折パターンを特徴とする、化合物５−クロロ−Ｎ−（（１−（４−（２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）メチル）チオフェン−２−カルボキサミドのリン酸塩の結晶形態。
【請求項１７】
約４、約６．５、約８．２、約１３．９、約１４．５、約１６、約１７．４５、約１８．２、約１９．１５、約２０．１、約２１．４５、約２２．３５、約２３．５、約２４．０、約２５．２、約２７．６５、及び約２８．２５からなる群から選択される少なくとも８個の２θ°ピークを有するＸ線粉末回折パターンを特徴とする請求項１６に記載の結晶形態。
【請求項１８】
前記Ｘ線粉末回折パターンが図１４のＸ線粉末回折パターンと実質的に同じである、請求項１７に記載の結晶形態。
【請求項１９】
化合物５−クロロ−Ｎ−（（１−（４−（２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）メチル）チオフェン−２−カルボキサミドのリン酸塩であって、前記塩の少なくとも一部が請求項１３〜１８のいずれか一項に記載の結晶形態で存在している、塩。
【請求項２０】
薬学的に許容される担体と、請求項１〜６及び１３〜１８のいずれか一項に記載の結晶形態又は請求項７〜１２及び１９のいずれか一項に記載の塩とを含む組成物。
【請求項２１】
哺乳動物における望ましくない血栓症を特徴とする状態を予防又は治療するための方法であって、治療有効量の請求項１〜６及び１３〜１８のいずれか一項に記載の結晶形態又は請求項７〜１２及び１９のいずれか一項に記載の塩を前記哺乳動物に投与するステップを含む方法。
【請求項２２】
心房細動の患者における脳卒中の予防；医学的疾病の患者における血栓症の予防；深部静脈血栓症の予防及び治療；急性冠動脈症候群患者における動脈血栓症の予防；及び／又は心筋梗塞、脳卒中若しくは他の血栓性事象を経験している患者における先の事象の二次予防のための方法であって、治療有効量の請求項１〜６及び１３〜１８のいずれか一項に記載の結晶形態又は請求項７〜１２及び１９のいずれか一項に記載の塩を前記哺乳動物に投与するステップを含む方法。
【請求項２３】
血液試料の凝固を阻害するための方法であって、前記試料を請求項１〜６及び１３〜１８のいずれか一項に記載の結晶形態又は請求項７〜１２及び１９のいずれか一項に記載の塩と接触させるステップを含む方法。
【請求項２４】
化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態Ａを調製するための方法であって、化合物Ｉの遊離塩基を、メチルエチルケトン、及び場合によりテトラヒドロフランを含む溶媒中で少なくとも１当量のメタンスルホン酸と合わせるステップを含む方法。
【請求項２５】
化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態Ｂを調製するための方法であって、アセトン並びに場合により水及び／又はメチルエチルケトンを含む溶媒中で化合物Ｉのメシル酸塩を再結晶させるステップを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願への相互参照）
本出願は、米国特許法§１１９（ｅ）の下で、２００９年１２月１７日に出願された米国仮特許出願第６１／２８７，６８３号の優先権を主張する。この米国仮特許出願第６１／２８７，６８３号はその全体が、参考として本明細書に援用される。
【０００２】
（発明の背景）
（発明の分野）
本発明は、第Ｘａ因子阻害剤５−クロロ−Ｎ−（（１−（４−（２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）メチル）チオフェン−２−カルボキサミドの塩、該第Ｘａ因子阻害剤の結晶形態、並びにその組成物及び方法を対象としている。
【背景技術】
【０００３】
（技術水準）
【０００４】
【化１】
2013514981.tif 000002
の式を有する５−クロロ−Ｎ−（（１−（４−（２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）メチル）チオフェン−２−カルボキサミド（本明細書においてまとめて「化合物Ｉ」と呼ぶ）は、特許文献１及び特許文献２（これらはその全体が参考として援用される）に記載されている第Ｘａ因子阻害剤であり、ｉｎ  ｖｉｖｏで抗凝血活性を有することが示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】米国特許第７，７６３，６０８号明細書
【特許文献２】米国特許第７，７６７，６９７号明細書
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
一態様において、本発明は、
【０００７】
【化２】
2013514981.tif 000003
の式を有する５−クロロ−Ｎ−（（１−（４−（２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）メチル）チオフェン−２−カルボキサミド（化合物Ｉとも呼ぶ）のメシル酸塩の結晶形態Ａを提供し、この結晶形態は、約１８．０５、約２０．３０、約２０．９５、約２１．８５、約２３．２０、約２６．１３、及び約２６．８５からなる群から選択される少なくとも６個の２θ°ピークを有するＸ線粉末回折パターンを特徴とする。
【０００８】
一態様において、本発明は、その少なくとも一部が結晶形態Ａで存在している化合物Ｉのメシル酸塩を提供する。
【０００９】
一態様において、本発明は、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態Ａを調製するための方法であって、化合物Ｉの遊離塩基を、メチルエチルケトン、及び場合によりテトラヒドロフランを含む溶媒中で少なくとも１当量のメタンスルホン酸と合わせるステップを含む方法を提供する。
【００１０】
一態様において、本発明は、
【００１１】
【化３】
2013514981.tif 000004
の式を有する５−クロロ−Ｎ−（（１−（４−（２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）メチル）チオフェン−２−カルボキサミド（化合物Ｉとも呼ぶ）のメシル酸塩の結晶形態Ｂを提供し、この結晶形態は、約１６．９６、約１８．９５、約２０．４１、約２１．３４、約２１．８５、約２２．７５、約２５．７５、及び約２６．６５からなる群から選択される少なくとも６個の２θ°ピークを有するＸ線粉末回折パターンを特徴とする。
【００１２】
別の態様において、本発明は、その少なくとも一部が結晶形態Ｂで存在している化合物Ｉのリン酸塩を提供する。
【００１３】
一態様において、本発明は、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態Ｂを調製するための方法であって、アセトン並びに場合により水及び／又はメチルエチルケトンを含む溶媒中で化合物Ｉのメシル酸塩を再結晶させるステップを含む方法を提供する。
【００１４】
別の態様において、本発明は、化合物Ｉの１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩を提供する。一部の実施形態において、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩の少なくとも一部は結晶形態で存在している。一部の実施形態において、本発明は、化合物Ｉの１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩の結晶形態を提供する。
【００１５】
別の態様において、本発明は、化合物Ｉのリン酸塩の結晶形態を提供する。一部の実施形態において、化合物Ｉのリン酸塩の結晶形態は、
（１）約６．５、約８．０、約８．８、約１１．０、約１４．５、約１７．３、及び約１８．２からなる群から選択される少なくとも４個の２θ°ピークを有するＸ線粉末回折パターン；又は
（２）約４、約６．５、約８．２、約１３．９、約１４．５、約１６、約１７．４５、約１８．２、約１９．１５、約２０．１、約２１．４５、約２２．３５、約２３．５、約２４．０、約２５．２、約２７．６５、及び約２８．２５からなる群から選択される少なくとも４個の２θ°ピークを有するＸ線粉末回折パターン
と実質的に同じＸ線粉末回折パターンを有する結晶形態からなる群から選択される。
【００１６】
一部の実施形態において、リン酸塩の少なくとも一部は結晶形態で存在している。
【００１７】
別の態様において、本発明は、化合物Ｉの塩を含む医薬組成物を提供する。
【００１８】
別の態様において、本発明は、哺乳動物における望ましくない血栓症を特徴とする状態を予防又は治療する方法であって、治療有効量の本明細書に記載の化合物Ｉの塩を前記哺乳動物に投与するステップを含む方法を提供する。
【００１９】
この実施形態及び他の実施形態を、以下の文章でさらに説明する。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】図１は、化合物Ｉのメシル酸塩の核磁気共鳴スペクトルを示す図である。
【図２】図２は、化合物Ｉのメシル酸塩の赤外線スペクトルを示す図である。
【図３ａ】図３ａは、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態ＡのＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンを示す図である。
【図３ｂ】図３ｂは、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態ＡのＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンを示す図である。
【図４】図４は、重量で測定された蒸気収着（ＧＶＳ）の前及び後の化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態ＡのＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンを示す図であり、形態Ａは、２５℃で最大で９０％のＲＨに曝露され、高い湿気に短時間曝露された後に良好な物理的安定性を示した。
【図５】図５は、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態Ａの示差走査熱量測定（ＤＳＣ）の走査を示す図である。
【図６】図６は、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態ＢのＸＲＰＤパターンを示す図である。
【図７】図７は、ＧＶＳ（２５℃で最大で９０％のＲＨに曝露）の前及び後の式Ｉの化合物のメシル酸塩の結晶形態ＢのＸＲＰＤパターンを示す図であり、高い湿気に短時間曝露された後に形態Ｂの良好な物理的安定性を示した。
【図８ａ】図８ａは、式の化合物のメシル酸塩の結晶形態Ｂの異なる試料のＤＳＣの走査を示す図である。図８ａにおける約２０９℃での第２のピークは、一水和物結晶が溶融した後の再結晶に起因する可能性が高い。
【図８ｂ】図８ｂは、式の化合物のメシル酸塩の結晶形態Ｂの異なる試料のＤＳＣの走査を示す図である。
【図９】図９は、化合物Ｉ遊離塩基のＸＲＰＤパターンを示す図である。
【図１０ａ】図１０ａは、化合物Ｉの１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩の結晶形態のＸＲＰＤパターンを示す図である。
【図１０ｂ】図１０ｂは、ＧＶＳの前及び後の化合物Ｉの１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩の結晶形態のＸＲＰＤパターンを示す図である。
【図１１】図１１は、化合物Ｉの１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩の結晶形態の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）の走査を示す図である。
【図１２】図１２は、化合物Ｉのリン酸塩の結晶形態１のＸＲＰＤパターンを示す図である。
【図１３】図１３は、化合物Ｉのリン酸塩の結晶形態２の試料のＸＲＰＤパターンを示す図であり、この試料は特に結晶ではなく、該リン酸塩の形態２を限定的に表すものであり得る。
【図１４】図１４は、化合物Ｉのリン酸塩の結晶形態３のＸＲＰＤパターンを示す図である。
【図１５】図１５は、化合物Ｉのチオシアン酸塩の結晶形態のＸＲＰＤパターンを示す図である。
【図１６】図１６は、化合物Ｉの塩酸塩の結晶形態のＸＲＰＤパターンを示す図である。
【図１７】図１７は、化合物Ｉのマレイン酸塩の結晶形態のＸＲＰＤパターンを示す図である。
【図１８】図１８は、化合物Ｉのリン酸塩の結晶形態３のＴＧＡ分析を示す図である。
【図１９】図１９は、化合物Ｉのリン酸塩の結晶形態３のＤＳＣ分析を示す図である。
【図２０】図２０は、化合物Ｉのリン酸塩の結晶形態３のＧＶＳ等温線プロットを示す図である。
【図２１】図２１は、化合物Ｉの１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩の結晶形態のＴＧＡ分析を示す図である。
【図２２】図２２は、化合物Ｉの１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩の結晶形態のＧＶＳ等温線プロットを示す図である。
【図２３】図２３は、化合物Ｉのリン酸塩の結晶形態２のＴＧＡ分析を示す図である。
【図２４】図２４は、化合物Ｉのリン酸塩の結晶形態２のＤＳＣ分析を示す図である。
【図２５】図２５は、化合物Ｉのリン酸塩の結晶形態２のＧＶＳ等温線プロットを示す図である。
【図２６】図２６は、化合物Ｉのマレイン酸塩の結晶のＤＳＣ分析を示す図である。
【図２７】図２７は、化合物Ｉのマレイン酸塩の結晶のＧＶＳ分析を示す図である。
【図２８】図２８は、化合物Ｉのマレイン酸塩の結晶形態ＡのＧＶＳ分析を示す図である。
【図２９】図２９は、化合物Ｉの塩酸塩の結晶形態のＤＳＣ分析を示す図である。
【図３０】図３０は、化合物Ｉの塩酸塩の結晶形態のＧＶＳ分析を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
（発明の詳細な説明）
本明細書において使用する場合、別段の指示がない限り以下の定義が適用されるものとする。
【００２２】
定義
本明細書及び特許請求の範囲において使用する場合、単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、文脈上明白な別段の指示がない限り複数の指示対象を含む。
【００２３】
本明細書において使用する場合、「を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、その組成物及び方法が列挙した要素を含むが、他の要素を排除するものではないことを意味することを意図したものである。「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」は、組成物及び方法を定義するのに使用する場合、その組合せにとって本質的に重要な他の要素を排除することを意味するものとする。例えば、本明細書に定義される要素から本質的になる組成物は、特許請求する発明の基本的且つ新規の特徴（複数可）に物質的に影響を及ぼさない他の要素を排除しない。「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」は、極微量より多い量の他の成分及び列挙した実質的な方法ステップを排除することを意味するものとする。これらのそれぞれの移行用語（ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ  ｔｅｒｍ）により定義する実施形態は本発明の範囲内である。
【００２４】
５−クロロ−Ｎ−（（１−（４−（２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）メチル）チオフェン−２−カルボキサミド」という用語は、構造：
【００２５】
【化４】
2013514981.tif 000005
の化合物を指し、これを「化合物Ｉ」とも呼ぶ。この化合物は、米国特許第７，７６３，６０８号及び同第７，７６７，６９７号に記載されている。
【００２６】
「互変異性体」とは、エノール−ケト及びイミン−エナミン互変異性体などのプロトンの位置が異なる化合物の交互形態、又はピラゾール、イミダゾール、ベンズイミダゾール、トリアゾール、及びテトラゾールなどの環−ＮＨ−部分及び環＝Ｎ−部分の両方に結合した環原子を含有するヘテロアリール基の互変異性形態を指す。例えば、化合物Ｉの塩のプロトンは、その分子のイミダゾール環の異なる位置にあってもよい。化合物Ｉの塩は、別段の指示がない限り、その塩のプロトンの位置に起因する全ての構造的変化を含む。
【００２７】
「患者」とは、哺乳動物を指し、ヒト及びヒト以外の哺乳動物を含む。
【００２８】
「アモルファス」とは、結晶を含有していない化合物、又はＸＲＰＤ若しくは他の回折技術により識別できるパターンを得るにはその結晶含量が低すぎる化合物を含む組成物を指す。例えば、ガラス質材料はアモルファス材料の一種である。アモルファス材料は真の結晶格子を有しておらず、ガラス質であり、非常に粘性で非晶質の液体に技術的に類似している。ガラスは、より的確には、半固体のアモルファス材料として説明することができる。当技術分野において公知の通り、アモルファス材料とは半固体物質を指す。アモルファスの状態にある化合物は、化合物の溶液から溶媒を急速に蒸発させること、又は結晶状態にある間に化合物を磨砕、微粉砕若しくは他の手段により物理的に加圧若しくは研磨することにより製造することができる。
【００２９】
「結晶」とは、特定の化合物又はその化合物の塩を含有し、水和及び／又は溶媒和することができ、ＸＲＰＤ又は他の回折技術により識別できる回折パターンを示すのに十分な結晶含量を有する材料を指す。結晶は、それらの結晶構造（Ｘ線回折パターン）、（ＤＳＣ及びＴＧＡにより決定する）それらの熱的性質、安定性、溶解度等を特徴とすることができる。Ｘ線回折パターンは、特徴的２θ°ピークとして提示され、当業者は、多形体のＸ線回折パターンの特徴的２θ°ピークに基づいて化合物又は塩の結晶形態を容易に同定することができる。２つのＸ線回折パターンの少なくとも４個、好ましくは少なくとも６個、８個、又は１０個の２θ°ピーク、より好ましくは全てのピークが、±０．２、±０．１、±０．０５又は±０．０２度を超えて変化しない場合、それらのＸ線回折パターンは実質的に同じであると見なされる。一部の実施形態において、特徴的ピークは、２５％以上の相対強度を有するものである。一部の実施形態において、特徴的ピークは、１０％以上の相対強度を有するものである。一部の実施形態において、特徴的ピークは、５％以上の相対強度を有するものである。
【００３０】
化合物又は塩の結晶は、本明細書において詳細に説明する以下の性質の１種又は複数を含めた性質を特徴とし得る。
【００３１】
・そのＸ線粉末回折パターン（ＸＲＰＤ）、
・その赤外線スペクトル（ＩＲ）、
・その示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、
・その熱重量分析（ＴＧＡ）、
・その重量で測定された蒸気収着（ＧＶＳ）などの蒸気収着曲線、及び
・単位セル構造などの結晶構造。
【００３２】
ある場合には、溶媒若しくは溶媒混合物若しくは溶液に溶解した化合物の直接結晶化、又は様々な結晶化条件下で得られた結晶の相互変換により得られる結晶材料は、結晶化において使用した溶媒を含有する結晶を有し得る。そのような組成物は、結晶性溶媒和物と呼ぶことができる。溶媒が水である場合、そのような組成物は、結晶性水和物と呼ぶことができる。また、結晶化を実施する特定の溶媒系及び物理的実施形態（まとめて結晶化条件と呼ぶ）により、その結晶化条件に特有の物理的及び化学的性質を有する結晶材料が生じ得る。これは、化合物の化学的部分の、結晶内での互いに対する配向及び／又は結晶材料中の化合物の特定の多形形態若しくは擬多形形態の優位性に起因し得る。化合物を沈殿及び結晶化させる一般的方法は、本明細書に記載の様々な多形体又は擬多形体の調製に利用することができる。これらの一般的方法は合成有機化学及び医薬製剤の当業者に公知であり、例えば、Ｊ．  Ｍａｒｃｈ、「Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ」、第４版（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｗｉｌｅｙ−ＩｎｔｅｒＳｃｉｅｎｃｅ、１９９２年）及びＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、Ａ．  Ｇｅｎｎａｒｏ編、第２１版、−Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、Ｐａ、２００６年により記載されている。
【００３３】
「多形体」又は「多形形態」とは、ある物質の結晶形態であって、別の結晶形態と異なっているが同じ化学式を共有しているものを指す。同じ化合物の異なる多形形態は、安定性、溶解度、融点、かさ密度、流動性、バイオアベイラビリティーなどの１種又は複数の物理的性質に対して影響を与え得る。
【００３４】
「擬多形体」とは、化合物の水和物又は溶媒和物の結晶形態を指す。多形体とは対照的に、擬多形体は、結晶格子に結合している水又は溶媒の量が異なること以外は化学的に同一である。合成及び／又は結晶化の間に使用する溶媒に応じて、一部の化合物は、異なる化学量論比で（水と）水和物又は（他の溶媒と）溶媒和物を形成する。擬多形体は、多形体に関して公知のものとは異なる、晶相、安定性、溶解速度及びバイオアベイラビリティーのような物理的性質を示し得る。
【００３５】
条件又は収率に関して値を列挙する場合、その値は、±５％、±１％、及び±０．２％などの妥当な範囲内で変わり得ることが理解されよう。同様に、「約」という用語は、数値の前で使用する場合、その値が、±５％、±１％、及び±０．２％などの妥当な範囲内で変わり得ることを示す。「約」をＸＲＰＤの２θ°ピークの前で使用する場合、それは、２θ°値が、±０．２、±０．１、±０．０５、又は±０．０２度変わり得ることを示す。
【００３６】
「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」又は「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」は、
・疾患若しくは障害を予防若しくはそれに対して防御すること、すなわち、臨床症状を発現させないこと、
・疾患若しくは障害を阻害すること、すなわち、臨床症状の発現を阻止若しくは抑制すること、及び／又は
・疾患若しくは障害を軽減すること、すなわち、臨床症状を退行させること
を含めた、被験体における疾患又は障害の任意の治療を意味する。
【００３７】
本明細書において使用する場合、「予防すること（ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）」という用語は、予防的（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ）治療を必要としている患者の予防的治療を指す。予防的治療は、病気を患う危険性がある被験体に適切な用量の治療剤を提供し、それにより病気の発症を実質的に防ぐことにより達成することができる。
【００３８】
ヒト医学において、「予防すること」及び「抑制すること（ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｎｇ）」は、最終的に誘発される事象（１種又は複数種）が不明もしくは不顕性である可能性があるか、又は事象（１種又は複数種）が発生してようやく初めて患者が確かめられるので、見分けることが常に可能なわけではないことが当業者により理解されよう。したがって、本明細書において使用する場合、「予防（ｐｒｏｐｈｙｌａｘｉｓ）」という用語は、本明細書に定義の「予防すること（ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）」及び「抑制すること」の両方を包含する「治療」の要素として意図したものである。「防御」という用語は、本明細書において使用する場合、「予防」を含むことを意図したものである。
【００３９】
「治療有効量」とは、以下で定義する治療を必要としている被験体に投与する場合に、そのような治療を行うのに十分な本発明の化合物の量を指す。治療有効量は、治療される被験体及び疾患の状態、被験体の体重及び年齢、疾患の状態の重症度、選択した特定の化合物、従うべき投薬計画、投与のタイミング、投与の方法等（これらの全てを当業者が容易に決定することができる）に応じて変わる。
【００４０】
「疾患の状態」とは、本発明の化合物、組成物及び方法を使用する疾患の状態を指す。
【００４１】
「血液試料」とは、被験体から採取した全血、又は血漿若しくは血清を含めた任意の血液の分画を指す。
【００４２】
塩、多形体及び擬多形体
一態様において、本発明は、化合物Ｉの塩、多形体及び擬多形体を提供する。化合物Ｉのメシル酸塩、リン酸塩、チオシアン酸塩及び１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩を含めた複数の塩の形態を形成した。しかし、化合物Ｉは、試験した条件下で、グルタミン酸及びアスパラギン酸などの特定の酸と塩を形成することができなかった。いかなる理論にも拘束されることを意図したものではないが、このことは、化合物Ｉの遊離塩基の不十分な溶解度に起因し得ると考えられる。さらに、チオシアン酸塩は、スケールアップ時に再現されなかった。
【００４３】
一実施形態において、本発明は、化合物Ｉのメシル酸塩を提供する。該メシル酸塩は、アモルファス形態若しくは結晶形態、或いはアモルファス形態及び結晶形態の混合物、或いは複数の多形及び／又は擬多形形態の混合物で存在し得る。一部の実施形態において、塩の少なくとも一部は結晶形態である。
【００４４】
「化合物Ｉのメシル酸塩」とは、化合物Ｉとメタンスルホン酸（ＣＨ３ＳＯ３Ｈ）の間で、例えば、約１対１の当量比で形成される塩を指す。
【００４５】
一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩は、式：
【００４６】
【化５】
2013514981.tif 000006
のものである。
【００４７】
一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態Ａ又は結晶形態Ｂを提供する。所与の化合物の結晶多形体は、互いに結合している同じ原子を同じように含有している点で、その化合物の任意の他の結晶多形体と化学的に同一であるが、その結晶形態は異なっている。擬多形体は、結晶格子に結合している水又は溶媒の量が異なること以外は化学的に同一である。合成及び／又は結晶化の間に使用する溶媒に応じて、一部の化合物は、異なる化学量論比で（水と）水和物又は（他の溶媒と）溶媒和物を形成する。同じ化合物の異なる結晶形態は、安定性、溶解度、融点、かさ密度、流動性、バイオアベイラビリティーなどの１種又は複数種の物理的性質に対して影響を及ぼし得る。
【００４８】
化合物Ｉのメシル酸塩の形態Ａ及び形態Ｂは、良好な安定性、溶解度、融点、かさ密度、及び流動性を示す。結晶形態Ａは、優れた物理的及び化学的安定性を有し、形態Ｂより高い融点を有する。いずれも「Ｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ  Ｆｏｒｍｓ  ｏｆ  ａ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｘａ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ」と題された２００９年１２月１７日出願の米国仮特許出願第６１／２８７，６８１号、及び２０１０年１２月１６日出願の米国特許出願第１２／＿，＿号（代理人整理番号０７０５４５−２０５１号）（これらの特許出願はその全体が参考として本明細書に援用される）は、他の理由により望ましい化合物Ｉのメシル酸塩のさらなる結晶形態Ｃ、Ｄ及びＥについて記載している。これらの結晶形態の中で形態Ａが最高の融点を有し、それにより、医薬用途に適した組成物の製剤化中のより良好な安定性が提供される。
【００４９】
多形体及び擬多形体は、（Ｘ線回折パターン（ＸＲＰＤ）により決定する）それらの結晶構造、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）及び熱重量分析（ＴＧＡ）により決定するそれらの熱的性質、安定性、溶解度等を特徴とすることができる。一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の形態Ａは、図３ａ、３ｂ若しくは４に示すＸＲＰＤ、図５に示すＤＳＣデータ、及び／又は図２８に示すＧＶＳ分析を特徴とする。一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の形態Ｂは、図６又は７に示すＸ線回折パターン及び図８ａ又は図８ｂに示すＤＳＣデータを特徴とする。
【００５０】
一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態Ａは、以下で表９に列挙するピークから選択される少なくとも４個の２シータ（２θ°）ピークを有するＸＲＰＤパターンを示す。一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態Ａは、以下で表９に列挙するピークから選択される少なくとも６個、８個又は１０個の２θ°ピークを有するＸＲＰＤパターンを示す。一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態Ａは、以下で表９に列挙する、最高の相対強度を有する６個、８個又は１０個の２θ°ピークを有するＸＲＰＤパターンを示す。一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態Ａは、以下で表９に列挙する特徴的２θ°ピークの全てを有するＸＲＰＤパターンを示す。化合物Ｉのメシル酸塩の形態Ａは、４０℃及び７５％のＲＨでの６カ月の保存後に物理的に安定である。
【００５１】
一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態は、以下のピーク：約１４．８５、約１７．０、約１７．３５、約１８．０５、約２０．３、約２０．９５、約２１．８５、約２３．２、約２６．１３、約２６．８５、及び約３１．７５から選択される少なくとも４個、６個、８個若しくは１０個、又は全ての２θ°ピークを有するＸＲＰＤパターンを示す形態Ａである。一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態は、少なくとも以下の２θ°ピーク：約１７．０、約１８．０５、約２０．３、約２０．９５、約２１．８５、約２３．２、約２６．１３、約２６．８５、及び約３１．７５を有するＸＲＰＤパターンを示す形態Ａである。一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態は、少なくとも以下の２θ°ピーク：約６．０５、約１２．０５、約１３．０２、約１４．８５、約１７．０、約１７．３０、約１８．０５、約２０．３、約２０．９５、約２１．８５、約２３．２、約２６．１３、約２６．８５、約２９．５５、及び約３１．７５を有するＸＲＰＤパターンを示す形態Ａである。一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態は、図３のＸＲＰＤパターンと実質的に同じＸＲＰＤパターン及び／又は図５のＤＳＣパターンと実質的に同じＤＳＣパターンを示す形態Ａである。一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態は、図２８により表されるＧＶＳ分析と実質的に同じＧＶＳ分析を示す形態Ａである。
【００５２】
一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態Ｂは水和物である。一部の実施形態において、形態Ｂは、以下で表１０に列挙するピークから選択される少なくとも４個の２θ°ピークを有するＸＲＰＤパターンを示す。一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態Ｂは、以下で表１０に列挙するピークから選択される少なくとも６個、８個又は１０個の２シータ（２θ°）ピークを有するＸＲＰＤパターンを示す。一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態Ｂは、以下で表１０に列挙する、最高の相対強度を有する６個、８個又は１０個の２θ°ピークを有するＸＲＰＤパターンを示す。一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態Ｂは、以下で表１０に列挙する特徴的２θ°ピークを有するＸＲＰＤパターンを示す。
【００５３】
一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態は、以下の２θ°ピーク：約１２．３５、約１３．９７、約１６．９６、約１８．９５、約２０．４１、約２１．８５、約２２．７５、約２５．６５、約２５．７５、及び約２６．６５の少なくとも４個、６個、８個又は１０個を有するＸＲＰＤパターンを示す形態Ｂである。一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態は、少なくとも以下の２θ°ピーク：約１２．３５、約１３．９７、約１６．９６、約１８．９５、約２１．３０、約２１．８５、約２２．７５、約２５．７５、及び約２６．６５を有するＸＲＰＤパターンを示す形態Ｂである。一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態は、少なくとも以下の２θ°ピーク：約１２．３５、約１３．９７、約１６．９６、約１８．９５、約２１．３０、約２１．８５、約２２．７５、約２４．３５、約２５．７５、及び約２６．６５を有するＸＲＰＤパターンを示す形態Ｂである。一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態は、図６のＸＲＰＤパターンと実質的に同じＸＲＰＤパターン及び／又は図８ａ又は８ｂのＤＳＣパターンと実質的に同じＤＳＣパターンを示す形態Ｂである。
【００５４】
当業者は、ピークの高さ及び相対強度が、装置の種類、ビーム強度、取得時間の長さ、試料調製等を含めた多くの実験条件に依存していることを理解するであろう。本明細書において提供する２θ°ピークは、±０．２の２θ°、±０．１の２θ°、±０．０５の２θ°、又は±０．０２の２θ°の範囲内で変わり得る。２つのＸＲＤＰパターンが、位置及び場合により強度が±５％、又は±１％、又は±０．２％を超えて変わらない少なくとも４個、少なくとも６個、８個、又は１０個の２θ°ピークを有する場合、それらのＸＲＤＰパターンは実質的に同じであると見なされる。一実施形態において、４個、６個、８個、又は１０個のピークは最高の強度を有するピークである。
【００５５】
一部の実施形態において、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態は、図５、８ａ又は８ｂのＤＳＣパターンと実質的に同じＤＳＣパターンを示す。２つのＤＳＣパターンが、位置（℃）及び場合により強度が±５％、又は±１％、又は±０．２％を超えて変わらないピークを有する場合、それらのＤＳＣパターンは実質的に同じであると見なされる。
【００５６】
一態様において、本発明は、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態Ａを調製するための方法であって、化合物Ｉの遊離塩基を、メチルエチルケトン、及び場合によりテトラヒドロフランを含む溶媒中で少なくとも１当量のメタンスルホン酸と混合するステップを含む方法を提供する。一部の実施形態において、該方法は、混合物を約５０℃以上の温度まで加熱するステップ、及び約２０℃の温度まで冷却するステップをさらに含む。一部の実施形態において、該方法は、結晶形態Ａを回収するステップをさらに含む。
【００５７】
一態様において、本発明は、化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態Ｂを調製するための方法であって、アセトン及び場合により水を含む溶媒中で化合物Ｉのメシル酸塩を再結晶させるステップを含む方法を提供する。一部の実施形態において、該方法は、混合物を約５５〜６０℃以上の温度まで加熱するステップ、及び約２０±５℃の温度まで冷却するステップをさらに含む。一部の実施形態において、該方法は、結晶形態Ｂを回収するステップをさらに含む。
【００５８】
別の態様において、メシル酸塩の少なくとも一部が結晶形態Ａ及び／又は結晶形態Ｂである化合物Ｉのメシル酸塩を提供している。一部の実施形態において、約５０重量％又は５０重量％超の化合物Ｉのメシル酸塩が多形形態Ａ及び／又はＢとして存在している。一部の実施形態において、約６０重量％又は６０重量％超、約６５重量％又は６５重量％超、約７０重量％又は７０重量％超、約７５重量％又は７５重量％超、約８０重量％又は８０重量％超、約８５重量％又は８５重量％超、約９０重量％又は９０重量％超、約９５重量％又は９５重量％超、あるいは約９９重量％又は９９重量％超の化合物Ｉのメシル酸塩が、結晶形態Ａ及び／又はＢとして組成物中に存在している。
【００５９】
別の態様において、本発明は、化合物Ｉの１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩を対象としている。
【００６０】
一実施形態において、化合物Ｉの１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩は、式：
【００６１】
【化６】
2013514981.tif 000007
のものである。
【００６２】
「化合物Ｉの１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩」とは、化合物Ｉと１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸の間で、例えば、約１対１の当量比で形成される塩を指す。
【００６３】
１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩は、アモルファス形態若しくは結晶形態、又はアモルファス形態及び結晶形態の混合物又は複数の多形若しくは擬多形形態の混合物で存在し得る。一部の実施形態において、化合物Ｉの１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩の結晶形態は、以下の２θ°ピーク：約４．３、約６、約８．４５、約９、約１０．５、約１２．５、約１５．０、約１５．７、約１７．４、約１８．４５、約２４．３、及び約２５．０５の少なくとも４個、６個、８個、若しくは１０個、又は全てを有するＸＲＰＤパターンを示す。一部の実施形態において、該塩の少なくとも一部は結晶形態である。一部の実施形態において、化合物Ｉの１−ヒドロキシ−２−ナフトエ塩の結晶形態は、図１０ａのＸＲＰＤパターンと実質的に同じＸＲＰＤパターンを示す。図１０ｂは、ＧＶＳの前及び後のＸＲＰＤパターンのオーバーレイを示し、それは、化合物Ｉの１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩の結晶形態が、湿気に曝露された後に実質的に安定であることを示している。一部の実施形態において、化合物Ｉの１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩の結晶形態は、図２１、１１、及び２２のそれぞれにより表されるＴＧＡ、ＤＳＣ、及びＧＶＳ分析と実質的に同じＴＧＡ、ＤＳＣ、及び／又はＧＶＳ分析を示す。
【００６４】
別の態様において、化合物Ｉの１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩の少なくとも一部は結晶形態である。一部の実施形態において、約５０重量％又は５０重量％超の化合物Ｉの１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩が結晶形態である。一部の実施形態において、約６０重量％又は６０重量％超、約６５重量％又は６５重量％超、約７０重量％又は７０重量％超、約７５重量％又は７５重量％超、約８０重量％又は８０重量％超、約８５重量％又は８５重量％超、約９０重量％又は９０重量％超、約９５重量％又は９５重量％超、あるいは約９９重量％又は９９重量％超の化合物Ｉの１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩が結晶形態である。
【００６５】
別の態様において、本発明は、化合物Ｉのリン酸塩の結晶形態を提供する。一部の実施形態において、化合物Ｉのリン酸塩は、式：
【００６６】
【化７】
2013514981.tif 000008
のものである。
【００６７】
一部の実施形態において、化合物Ｉのリン酸塩は、式：
【００６８】
【化８】
2013514981.tif 000009
のものである。
【００６９】
「化合物Ｉのリン酸塩」とは、化合物Ｉとリン酸（Ｈ３ＰＯ４）の間で、例えば、約１対１の当量比で形成される塩を指す。
【００７０】
該リン酸塩は、アモルファス形態若しくは結晶形態、或いはアモルファス形態及び結晶形態の混合物或いは複数の多形及び／又は擬多形形態の混合物で存在し得る。一部の実施形態において、該塩の少なくとも一部は結晶形態である。
【００７１】
一部の実施形態において、化合物Ｉのリン酸塩の結晶形態は、形態１であり、以下の２θ°ピーク：約５．４、約６．５、約９．５、約１４．７、約１５．６、約１６．８、約１７．９、約１９．２、約２２．２、約２２．８、約２３．６５の少なくとも４個、６個、８個、若しくは１０個、又は全てを有するＸＲＰＤパターンを示す。一部の実施形態において、化合物Ｉのリン酸塩の結晶形態は、形態１であり、図１２のＸＲＰＤパターンと実質的に同じＸＲＰＤパターンを示す。形態１はスケールアップ時に再現されなかった。
【００７２】
一部の実施形態において、化合物Ｉのリン酸塩の結晶形態は、形態２であり、以下の２θ°ピーク：約６．５、約８、約８．８、約１１．０、約１４．５、約１７．３、及び約１８．２の少なくとも４個、６個、又は全てを有するＸＲＰＤパターンを示す。一部の実施形態において、化合物Ｉのリン酸塩の結晶形態は、形態２であり、図１３のＸＲＰＤパターンと実質的に同じＸＲＰＤパターンを示す。一部の実施形態において、化合物Ｉリン酸塩の結晶形態２は、それぞれ図２３、２４及び２５により表されるＴＧＡ、ＤＳＣ及びＧＶＳ分析と実質的に同じＴＧＡ、ＤＳＣ及び／又はＧＶＳ分析を示す。
【００７３】
一部の実施形態において、化合物Ｉのリン酸塩の結晶形態は、形態３であり、以下の２θ°ピーク：約４、約６．５、約８．２、約１３．９、約１４．５、約１６、約１７．４５、約１８．２、約１９．１５、約２０．１、約２１．４５、約２２．３５、約２３．５、約２４．０、約２５．２、約２７．６５、及び約２８．２５の少なくとも４個、６個、８個、若しくは１０個、又は全てを有するＸＲＰＤパターンを示す。一部の実施形態において、化合物Ｉのリン酸塩の結晶形態は、形態３であり、図１４のＸＲＰＤパターンと実質的に同じＸＲＰＤパターンを示す。一部の実施形態において、化合物Ｉのリン酸塩の結晶形態３は、それぞれ図１８、１９及び２０により表されるＴＧＡ、ＤＳＣ及びＧＶＳ分析と実質的に同じＴＧＡ、ＤＳＣ及び／又はＧＶＳ分析を示す。
【００７４】
別の態様において、本発明は、リン酸塩の少なくとも一部が結晶形態１、２、及び／又は３である化合物Ｉのリン酸塩を対象としている。一部の実施形態において、約５０重量％又は５０重量％超の化合物Ｉのリン酸塩が多形形態１、２及び／又は３として存在している。一部の実施形態において、約６０重量％又は６０重量％超、約６５重量％又は６５重量％超、約７０重量％又は７０重量％超、約７５重量％又は７５重量％超、約８０重量％又は８０重量％超、約８５重量％又は８５重量％超、約９０重量％又は９０重量％超、約９５重量％又は９５重量％超、あるいは約９９重量％又は９９重量％超の化合物Ｉのリン酸塩が、結晶形態１、２及び／又は３として組成物中に存在している。
【００７５】
別の実施形態において、化合物Ｉのチオシアン酸塩は、式：
【００７６】
【化９】
2013514981.tif 000010
のものである。
【００７７】
「化合物Ｉのチオシアン酸塩」とは、化合物Ｉとチオシアン酸（ＮＣＳＨ）の間で、例えば、約１対１の当量比で形成される塩を指す。
【００７８】
別の実施形態において、本発明は、化合物Ｉのチオシアン酸塩を提供する。該チオシアン酸塩は、アモルファス形態若しくは結晶形態、又はアモルファス形態及び結晶形態の混合物又は複数の多形形態の混合物で存在し得る。一部の実施形態において、化合物Ｉのチオシアン酸塩の結晶形態は、以下の２θ°ピーク：約５．０、約１０．５、約１１．８、約１３．５、約１４．０、約１７．４５、約１８．３、約２１．９５、約２３．０、約２４．５、約２５．０、約２６．２、約２８．５、及び約２９．０の少なくとも４個、６個、８個、若しくは１０個、又は全てを有するＸＲＰＤパターンを示す。一部の実施形態において、該塩の少なくとも一部は結晶形態である。一部の実施形態において、化合物Ｉのチオシアン酸塩の結晶形態は、図１５のＸＲＰＤパターンと実質的に同じＸＲＰＤパターンを示す。
【００７９】
別の態様において、化合物Ｉのチオシアン酸塩の少なくとも一部は結晶形態である。一部の実施形態において、約５０重量％又は５０重量％超の化合物Ｉのチオシアン酸塩が結晶形態である。一部の実施形態において、約６０重量％又は６０重量％超、約６５重量％又は６５重量％超、約７０重量％又は７０重量％超、約７５重量％又は７５重量％超、約８０重量％又は８０重量％超、約８５重量％又は８５重量％超、約９０重量％又は９０重量％超、約９５重量％又は９５重量％超、あるいは約９９重量％又は９９重量％超の化合物Ｉのチオシアン酸塩が結晶形態である。
【００８０】
別の実施形態において、本発明は、化合物Ｉのマレイン酸塩の結晶形態を提供する。一部の実施形態において、化合物Ｉのマレイン酸塩の結晶形態は、図１７のＸＲＰＤパターンと実質的に同じＸＲＰＤパターンを示す。一部の実施形態において、化合物Ｉのマレイン酸塩の結晶形態は、それぞれ図２６及び２７により表されるＤＳＣ及びＧＶＳ分析と実質的に同じＤＳＣ及び／又はＧＶＳ分析を示す。
【００８１】
別の態様において、化合物Ｉのマレイン酸塩の少なくとも一部は結晶形態である。一部の実施形態において、約５０重量％又は５０重量％超の化合物Ｉのマレイン酸塩が結晶形態である。一部の実施形態において、約６０重量％又は６０重量％超、約６５重量％、約７０重量％又は７０重量％超、約７５重量％又は７５重量％超、約８０重量％又は８０重量％超、約８５重量％又は８５重量％超、約９０重量％又は９０重量％超、約９５重量％又は９５重量％超、あるいは約９９重量％又は９９重量％超の化合物Ｉのマレイン酸塩が結晶形態である。
【００８２】
別の実施形態において、本発明は、化合物Ｉの塩酸塩の結晶形態を提供する。一部の実施形態において、化合物Ｉの塩酸塩の結晶形態は、図１６のＸＲＰＤパターンと実質的に同じＸＲＰＤパターンを示す。一部の実施形態において、化合物Ｉ塩酸塩の結晶形態は、それぞれ図２９及び３０により表されるＤＳＣ及びＧＶＳ分析と実質的に同じＤＳＣ及び／又はＧＶＳ分析を示す。
【００８３】
別の態様において、化合物Ｉの塩酸塩の少なくとも一部は結晶形態である。一部の実施形態において、約５０重量％又は５０重量％超の化合物Ｉの塩酸塩が結晶形態である。一部の実施形態において、約６０重量％又は６０重量％超、約６５重量％又は６５重量％超、約７０重量％又は７０重量％超、約７５重量％又は７５重量％超、約８０重量％又は８０重量％超、約８５重量％又は８５重量％超、約９０重量％又は９０重量％超、約９５重量％又は９５重量％超、あるいは約９９重量％又は９９重量％超の化合物Ｉの塩酸塩が結晶形態である。
【００８４】
本発明の塩形態の同一性は、核磁気共鳴（ＮＭＲ）、フーリエ変換赤外（ＦＴＩＲ）及び質量分析（ＭＳ）によって確認することもできる。純度及び含水率は、それぞれ、逆相高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）及びカールフィッシャー滴定法により決定することができる。残留溶媒含量は、ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）により決定することができる。以下のものは、本発明の塩又は結晶形態の同一性、純度及び性質を決定するために採用することができる特定の分析方法である。これらの分析方法の代表的な手順は、以下で実施例１０において説明する。
【００８５】
・プロトンＮＭＲ、
・ＦＴＩＲ、
・質量分光分析法、
・メシル酸塩含量についてはＨＰＬＣ、
・純度は関連物質に基づいて決定した、
・含水率についてはカールフィッシャー、
・微量金属及びケイ素分析（誘導結合プラズマ（ＩＣＰ）法）、
・炭素、水素、窒素については燃焼、硫黄については比色滴定、塩素についてはイオンクロマトグラフィーによる元素分析、
・残留溶媒についてはＧＣ。
【００８６】
多数の方法が上記の塩の調製に有用であり、当業者に公知である。例えば、化合物Ｉと、１種又は複数種のモル当量の所望の酸（例えば、塩酸、マレイン酸、チオシアン酸、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、メタンスルホン酸、又はリン酸など）とを、その塩が不溶性である溶媒若しくは溶媒混合物中、又は水のような溶媒中で反応させ、その後、蒸発、蒸留又は凍結乾燥により溶媒を除去する。或いは、化合物Ｉをイオン交換樹脂に通して所望の塩を形成してもよく、同じ一般的プロセスを使用して生成物の１種の塩形態を別の塩形態に転換してもよい。本明細書において提供する結晶形態は、化合物Ｉの塩を直接結晶化することにより、又は化合物Ｉの塩を結晶化し、その後、別の結晶形態若しくはアモルファスの状態から相互変換することにより得ることができる。例示的手順は各実施例において示す。
【００８７】
治療方法
化合物Ｉの塩又は化合物Ｉの塩の結晶形態は、哺乳動物における望ましくない血栓症を特徴とする状態を予防又は治療するために使用することができる。一部の実施形態において、治療有効量の化合物Ｉの塩又は化合物Ｉの塩の結晶形態を、そのような治療を必要としている哺乳動物に投与する。化合物Ｉの塩又は化合物Ｉの塩の結晶形態は、望ましくない血栓症を特徴とする状態の発症を予防するために単独で、又は薬学的に許容される添加剤と併せて使用することができる。予防的治療は、医学的治療、並びにそれらに付随する精神的及び物理的費用の減少、並びに患者の長期の治療を回避することによる直接的な金銭的節約を通して、病気の危険性がある患者にとって実質的に有益なものとなり得る。発症を予防するほど十分に早くその状態が検出されない患者については、本発明により調製することができる化合物又は塩、例えば化合物Ｉの塩を、その状態を治療するために単独で、又は薬学的に許容される添加剤と併せて使用することができる。
【００８８】
化合物Ｉは、血栓形成を阻害するその能力を特徴とし、その阻害には、古典的な尺度の凝固パラメーター、血小板、及び血小板機能に対しての許容される影響、並びにそれらの使用に付随する許容されるレベルの出血性合併症が伴う。望ましくない血栓症を特徴とする状態としては、動脈及び静脈血管系が関与する状態が挙げられる。
【００８９】
冠動脈血管系に関しては、異常な血栓形成が、急性心筋梗塞及び不安定狭心症の主要な原因である既存のアテローム性動脈硬化プラークの破裂の特徴となっており、さらには、血栓溶解治療又は経皮経管冠動脈形成術（ＰＴＣＡ）により生じる閉塞性冠動脈血栓形成の特徴となっている。
【００９０】
静脈血管系に関しては、異常な血栓形成が、静脈血管系における血栓形成（この血管形成は、影響を受けている肢への血流低下及び肺塞栓症に対する素因をもたらす）を患う場合が多い下肢又は腹部の大手術を受ける患者において観察される状態の特徴となっている。異常な血栓形成は、さらに、一般に、凝固因子の急速な消費及び全身性凝固が起きている状態であって、それにより微小血管系全体に命に関わる血栓が形成されて広範な臓器不全につながる状態、敗血症性ショック、特定のウイルス感染、癌である間に両方の血管系内で発生する播種性血管内凝固異常症の特徴となっている。
【００９１】
本明細書に開示の通りに選択及び使用される本発明の化合物Ｉの塩又は化合物Ｉの塩の結晶形態は、（ａ）心筋梗塞、不安定狭心症、難治性狭心症、血栓溶解治療後又は冠動脈形成術後に発生する閉塞性冠動脈血栓を含めた任意の血栓症媒介性急性冠動脈症候群の治療又は予防、（ｂ）塞栓性脳卒中、血栓性脳卒中又は一過性虚血発作を含めた任意の血栓症媒介性脳血管性症候群の治療又は予防、（ｃ）自然発症的に、又は悪性腫瘍、外科手術若しくは外傷の状況で発生する深部静脈血栓症又は肺塞栓症を含めた静脈系において発生する任意の血栓性症候群の治療又は予防、（ｄ）播種性血管内凝固（敗血症性ショック又は他の感染、外科手術、妊娠、外傷又は悪性腫瘍の状況を含み、多臓器不全に付随するかどうかを問わない）、血栓性血小板減少性紫斑病、閉塞性血栓血管炎、又はヘパリン起因性血小板減少症に付随する血栓性疾患を含めた任意の凝血異常の治療又は予防、（ｅ）体外循環（例えば腎臓透析、心肺バイパス又は他の酸素供給手順、血漿交換治療）に付随する血栓性合併症の治療又は予防、（ｆ）器具使用（例えば心臓又は他の血管内カテーテル法、大動脈内バルーンポンプ、冠状動脈ステント又は心臓弁）に付随する血栓性合併症の治療又は予防、及び（ｇ）補綴具の装着に関連した血栓性合併症などの望ましくない血栓症を特徴とする状態を予防又は治療するのに有用であると考えられている。
【００９２】
一部の実施形態において、化合物Ｉの塩及び結晶形態は、血栓症及び血栓症に付随する状態の治療において有用である。したがって、哺乳動物における望ましくない血栓症を特徴とする状態を予防又は治療する方法は、治療有効量の本発明の化合物Ｉの塩又は化合物Ｉの塩の結晶形態を哺乳動物に投与するステップを含む。化合物Ｉの塩及び結晶形態は、急性冠動脈症候群、心筋梗塞、不安定狭心症、難治性狭心症、血栓溶解治療後若しくは冠動脈形成術後に発生する閉塞性冠動脈血栓、血栓症媒介性脳血管性症候群、塞栓性脳卒中、血栓性脳卒中、一過性虚血発作、静脈血栓症、深部静脈血栓症、肺塞栓症、凝血異常、播種性血管内凝固、血栓性血小板減少性紫斑病、閉塞性血栓性脈管炎（ｔｈｒｏｍｂｏａｎｇｌｉｔｉｓ  ｏｂｌｉｔｅｒａｎｓ）、ヘパリン起因性血小板減少症に付随する血栓性疾患、体外循環に付随する血栓性合併症、器具使用に付随する血栓性合併症、補綴具の装着に付随する血栓性合併症、血栓溶解治療又は経皮経管冠動脈形成術により生じる閉塞性冠動脈血栓形成、静脈血管系における血栓形成、播種性血管内凝固異常症、凝固因子の急速な消費及び全身性凝固が起きていて、それにより微小血管系全体に命に関わる血栓が形成され広範な臓器不全につながる状態、出血性脳卒中、腎臓透析、血液酸素供給、及び心臓カテーテル法が挙げられるがこれらに限定されない、望ましくない血栓症及び／又は付随する状態の治療において有用である。
【００９３】
一部の実施形態において、状態は、塞栓性脳卒中、血栓性脳卒中、静脈血栓症、深部静脈血栓症、急性冠動脈症候群、及び心筋梗塞からなる群から選択される。
【００９４】
一部の実施形態において、化合物Ｉの塩及び結晶形態は、心房細動の患者における脳卒中の予防；医学的疾患の患者における血栓症の予防；深部静脈血栓症の予防及び治療；急性冠動脈症候群患者における動脈血栓症の予防；並びに／或いは心筋梗塞、脳卒中又は他の血栓性事象を経験している患者における先の事象の二次予防において有用である。
【００９５】
本発明の化合物Ｉの塩又は化合物Ｉの塩の結晶形態は、また、保存全血の凝固を予防するため、及び試験又は保存用の他の生物学的試料における凝固を予防するためなど血液凝固の阻害が必要とされる場合も常に使用することができる。したがって、本阻害の凝固阻害剤は、血漿凝固因子を含有しているか含有していると疑われる任意の媒体及び保存全血に添加するか、又はそれらと接触させることができ、ここで、例えば、哺乳動物の血液と、移植血管、ステント、整形外科的補綴物、心臓補綴物、及び体外循環系からなる群から選択される材料とを接触させる場合に、血液凝固が阻害されることが望ましい。
【００９６】
化合物Ｉの塩又は化合物Ｉの塩の結晶形態は、ヒトの治療に有用である上に、哺乳動物、齧歯類等を含めたペット、珍しい動物及び家畜の獣医学的治療にも有用である。より好ましい動物としては、ウマ、イヌ、及びネコが挙げられる。
【００９７】
医薬組成物及び投与
本明細書に記載の化合物Ｉの塩又は化合物Ｉの塩の結晶形態を含む医薬組成物は、望ましくない血栓症を特徴とする疾患の状態を患う被験体の予防又は治療のために使用することができる。一部の実施形態において、該医薬組成物は、薬学的に許容される担体、及び治療有効量の化合物Ｉ、場合により結晶多形形態の化合物Ｉのメシル酸塩、リン酸塩、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩又はチオシアン酸塩から構成される。
【００９８】
血栓性障害の管理において、化合物Ｉの塩又は化合物Ｉの塩の結晶形態は、経口投与用の錠剤、カプセル剤、ロゼンジ剤若しくはエリキシル剤、坐剤、滅菌液又は懸濁剤又は注射投与などの組成物中で利用してもよく、造型品に組み込んでもよい。本発明の化合物Ｉの塩又は化合物Ｉの塩の結晶形態を使用する治療を必要としている被験体（一般に哺乳類）には、最適な有効性をもたらす投薬量で投与することができる。用量及び投与の方法は、被験体毎に変わり、治療される哺乳動物の種類、その性別、体重、食事、併用薬物、全体的な臨床症状、採用される特定の化合物、これらの塩又は結晶形態が採用される特定の用途のような因子、及び医療分野の当業者が認識する他の因子に依存する。
【００９９】
錠剤、カプセル剤、ロゼンジ剤等に組み込むことができる一般的アジュバントは、アラビアゴム、トウモロコシデンプン若しくはゼラチンなどの結合剤、及び微結晶性セルロースなどの添加剤、トウモロコシデンプン若しくはアルギン酸のような崩壊剤、ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤、スクロース若しくはラクトースなどの甘味剤、又は香味剤である。注射用の滅菌組成物は、従来の製薬法に従って製剤化することができる。
【０１００】
本発明において有用なカプセル剤は、Ｓｔｒｏｕｄら、米国特許第５，７３５，１０５号に記載されているものなどの従来の公知のカプセル化技術を使用して調製することができる。カプセル剤は、一般に、適切な用量の活性薬剤を含有する医薬組成物がカプセル剤の中に収まるのに十分な直径及び長さを有するほぼ円筒形の中空の殻である。カプセル剤の内部は、可塑剤、ゼラチン、加工デンプン、ガム、カラギーナン及びそれらの混合物を含むことができる。水、生理的食塩水、又は脂肪油などの液体担体も存在することができる。当業者は、いずれの組成物が好適であるか理解しよう。
【０１０１】
活性薬剤に加えて、本発明において有用な錠剤は、充填剤、結合剤、圧縮剤、滑沢剤、崩壊剤、着色剤、水、タルク及び当業者が認識している他の要素を含むことができる。錠剤は、コアが単一層で均一であってもよく、好ましい放出プロファイルを実現するために複数の層を有していてもよい。ある場合には、本発明の錠剤は、腸溶コーティングなどでコーティングすることができる。当業者は、他の添加剤が本発明の錠剤において有用であることを理解しよう。
【０１０２】
本発明において有用なロゼンジ剤は、適切な量の活性薬剤並びに任意の充填剤、結合剤、崩壊剤、溶媒、可溶化剤、甘味剤、着色剤及び当業者が必要だと理解するであろう任意の他の成分を含む。本発明のロゼンジ剤は、患者の口に接触したときに活性薬剤が溶解して放出されるように設計されている。当業者は、他の送達方法が本発明において有用であることを理解しよう。
【０１０３】
本発明の塩の製剤は、生理学的に許容される担体、添加剤、安定剤等と、所望の純度の程度を有する化合物とを混合することにより保存又は投与のために調製され、持続放出性又は徐放性製剤で提供することができる。治療用途に許容される担体又は賦形剤は医薬分野において周知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．（Ａ．Ｒ．  Ｇｅｎｎａｒｏ編、１９８５年）に記載されている。そのような材料は、採用される投薬量及び濃度でレシピエントに無害であり、リン酸塩、クエン酸塩、酢酸塩及び他の有機酸塩などの緩衝剤、アスコルビン酸などの抗酸化剤、ポリアルギニンなどの低分子量（約１０残基未満の）ペプチド、血清アルブミン、ゼラチン、又は免疫グロブリンなどのタンパク質、ポリビニルピロリジノンなどの親水性ポリマー、グリシン、グルタミン酸、アスパラギン酸、若しくはアルギニンなどのアミノ酸、単糖類、二糖類、及びセルロース若しくはその誘導体、グルコース、マンノース若しくはデキストリンを含めた他の炭水化物、ＥＤＴＡなどのキレート化剤、マンニトール若しくはソルビトールなどの糖アルコール、ナトリウムなどの対イオン及び／又はＴｗｅｅｎ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ若しくはポリエチレングリコールなどの非イオン性界面活性剤を含む。
【０１０４】
治療投与に使用される本発明の化合物Ｉの塩又は化合物Ｉの塩の結晶形態の投薬製剤は滅菌されていてもよい。滅菌性は、０．２ミクロンの膜などの滅菌膜を通した濾過、又は他の従来の方法により容易に達成される。製剤は、一般に、凍結乾燥形態で又は水溶液として保存される。本発明の調製物のｐＨは、一般に、３と１１の間、より好ましくは５〜９、最も好ましくは７〜８となろう。前述の添加剤、担体、又は安定剤の特定のものの使用により、環状ポリペプチド塩の形成がもたらされることが理解されよう。投与の経路は、静脈内（ボーラス及び／又は点滴）、皮下、筋肉内、結腸、直腸、経鼻若しくは腹腔内などの注射によるもの、又は坐剤、移植ペレット若しくは小型シリンダー、エアロゾル、経口投薬製剤（錠剤、カプセル剤及びロゼンジ剤など）及び軟膏剤、ドロップ剤及び皮膚貼付剤などの局所製剤などの様々な剤形を採用するものであり得る。本発明の滅菌は、生分解性ポリマー又は合成シリコーン、例えば、Ｓｉｌａｓｔｉｃ、シリコーンゴム若しくは他の市販されているポリマーなどの不活性材料を採用し得る移植材料などの造型品に組み込むことが望ましい。
【０１０５】
本発明の化合物Ｉの塩又は化合物Ｉの塩の結晶形態は、小型単ラメラ小胞、大型単ラメラ小胞及び多重ラメラ小胞などのリポソーム送達系の形態で投与することもできる。リポソームは、コレステロール、ステアリルアミン又はホスファチジルコリンなどの様々なリピドから形成することができる。
【０１０６】
本発明の化合物Ｉの塩又は化合物Ｉの塩の結晶形態は、塩分子がカップリングする抗体、抗体フラグメント、増殖因子、ホルモン、又は他の標的部分の使用によっても送達することができる。本発明の化合物Ｉの塩又は化合物Ｉの塩の結晶形態は、標的設定可能な薬物担体として好適なポリマーともカップリングすることができる。そのようなポリマーとしては、ポリビニルピロリジノン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシ−プロピル−メタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチル−アスパルトアミド−フェノール、又はパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシド−ポリリジンが挙げられる。さらに、本発明の塩又は結晶形態は、薬物の放出制御を達成するのに有用なある種の生分解性ポリマー、例えば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸及びポリグリコール酸のコポリマー、ポリε‐カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート、及びヒドロゲルの架橋型又は両親媒性ブロックコポリマーとカップリングすることができる。ポリマー及び半透性ポリマーマトリックスは、バルブ、ステント、管、補綴物などの造型品に形成することができる。
【０１０７】
一部の実施形態において、医薬組成物は、薬学的に許容される担体及び化合物Ｉのメシル酸塩、リン酸塩、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩若しくはチオシアン酸塩又はその結晶形態を含み、医薬組成物は固体形態又は液体添加剤中の懸濁液であり、化合物Ｉの塩又は化合物Ｉの塩の結晶形態が、改善された有効性及び／又は安全性プロファイルをもたらす改善された熱及び／又は加水分解安定性、取扱、純度を示す。
【０１０８】
一部の実施形態において、医薬組成物は、薬学的に許容される担体を含み、化合物Ｉの塩又は化合物Ｉの塩の結晶形態から調製され、医薬組成物は溶液の形態であり、化合物Ｉの塩又は結晶形態が、改善された有効性及び／又は安全性プロファイルをもたらす改善された熱及び加水分解安定性、取扱、純度並びに溶解度を示す。化合物Ｉの塩及び結晶形態の液体製剤は、例えば、油などのビヒクル又はオレイン酸エチルのような合成脂肪ビヒクル、又はリポソーム中への活性化合物の溶解又は懸濁により調製することができる。このことが所望され得る。緩衝剤、保存剤、抗酸化剤等は、一般に認められた製薬法により組み込むことができる。
【０１０９】
治療化合物の液体製剤は、一般に、滅菌アクセスポートを有する容器、例えば、皮下注射針により突き刺すことができる栓を有する静注液バッグ又はバイアルに入れられる。
【０１１０】
一般に、約０．５〜５００ｍｇの化合物Ｉの塩又は化合物Ｉの塩の結晶形態を、一般に認められた製薬法で要求される通りに、生理学的に許容されるビヒクル、担体、添加剤、結合剤、保存剤、安定剤、染料、香料等と配合する。これらの組成物中の活性成分の量は、示す範囲の好適な投薬量が得られるような量である。
【０１１１】
化合物Ｉの一般的投薬量は、約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは約０．１０ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇの範囲であると考えられる。有益なことに、本発明の塩又は結晶形態は、１日に複数回投与することができ、他の投薬計画も有用であり得る。
【０１１２】
治療上有効な投薬量は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｖｉｖｏの方法により決定することができる。治療上有効な投薬量の範囲は、投与の経路、治療目標及び患者の状態により影響を受ける。皮下注射針による注射については、その投薬量が体液に送達されると考えることができる。他の投与の経路については、薬理学において周知の方法により、各塩又は各結晶形態について吸収効率を個々に決定する必要がある。したがって、治療家は、最適な治療効果を得るために、必要に応じて、投薬量を滴定し、投与の経路を変更する必要がある可能性がある。有効な投薬量レベル、すなわち、所望の結果を達成するのに必要な投薬量レベルの決定は、当業者が容易に決定しよう。一般に、化合物Ｉの適用は、より低い投薬量レベルで開始され、所望の効果が達成されるまで投薬量レベルを増大させる。
【実施例】
【０１１３】
別段の定めのない限り、本明細書を通して使用する略語は以下の意味を有する。
【０１１４】
Ａ％＝全面積パーセント
ｍＡ＝ミリアンペア
ａｑ．＝水性
ＡＵＣ＝曲線下面積
ＣＨ３ＳＯ３Ｈ＝メタンスルホン酸
ｃｍ＝センチメートル
ＣｕＩ＝ヨウ化銅（Ｉ）
ｄ＝二重線
ｄｅｇ＝度
ＤＩＰＥＡ＝ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド
ＤＳＣ＝示差走査熱量測定
ＥＤＴＡ＝エチレンジアミン四酢酸
ｅｑ．又はｅｑｕｉｖ＝当量
Ｅｔ３ＳｉＨ＝トリエチルシラン
ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル
ＥｔＯＨ＝エタノール
ｇ＝グラム
Ｈ２ＳＯ４＝硫酸
ＨＰＬＣ＝高速液体クロマトグラフィー
ｈｒ＝時間
Ｈｚ＝ヘルツ
ＦＴＩＲ＝フーリエ変換赤外
ＩＣ＝イオンクロマトグラフィー
ＩＣＰ＝誘導結合プラズマ
ＩＰＡ＝イソプロパノール
ＩＲ＝赤外線
Ｊ＝結合定数
Ｋ２ＣＯ３＝炭酸カリウム
ｋｇ＝キログラム
Ｌ＝リットル
ＬＯＤ＝検出限界
Ｍ＝モル濃度
ｍ＝多重線
Ｍｅ＝メチル
ＭｅＣＮ＝アセトニトリル
ＭＥＫ＝メチルエチルケトン
ＭｅＯ＝メトキシ
ＭｅＯＨ＝メタノール
ＭｅＴＨＦ＝メチルテトラヒドロフラン
ｍｇ＝ミリグラム
ｍｉｎ．＝分
ｍＬ＝ミリリットル
ｍｍ＝ミリメートル
ｍｍＨｇ＝水銀柱ミリメートル
ＭＴＢＥ＝メチルｔｅｒｔブチルエーテル
Ｎ＝規定
Ｎａ２ＳＯ４＝硫酸ナトリウム
ＮＨ３＝アンモニア
ｎＭ＝ナノモル濃度
ＮＭＲ＝核磁気共鳴
ＰｈＭｅ＝トルエン
ｐｐｍ＝百万分率
ＲＨ＝相対湿度
ｒｐｍ＝毎分回転数
ｒ．ｔ．＝室温
ｓ＝一重線
ＴＧＡ＝熱重量分析
ＴＤＳ＝全溶解固体
ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン
Ｗｔ＝重量
μＭ＝マイクロモル濃度
いずれも「Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｏｆ  Ｐｒｅｐａｒｉｎｇ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｘａ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  Ａｎｄ  Ｓａｌｔｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」と題された２００９年１２月１７日出願の米国仮特許出願第６１／２８７，６７９号、及び２０１０年１２月１６日出願の米国特許出願第１２／９７０，５３１号、並びに米国特許第７，７６３，６０８号は化合物Ｉを調製する方法について記載しており、これら全ての全体が参考として援用される。
【０１１５】
（実施例１）
化合物Ｃの調製
【０１１６】
【化１０】
2013514981.tif 000011
ＤＭＳＯを含有する２００ガロンの反応器に１２１．１ｋｇの１，４−ジヨードベンゼンＢ（０．３６７ｍｏｌ）を固体として投入し、その後、３５ｋｇの２−ヒドロキシピリジンＡ（０．３６８ｍｏｌ）、１２３ｋｇのＫ２ＣＯ３（４．８ｅｑｕｉｖ）、及び７．３ｋｇのＣｕＩ（０．１ｅｑｕｉｖ）を投入した。混合物を１２０±５℃まで３時間加熱した。ＨＰＬＣにより反応の完了をモニターした。冷却後、反応を水及び酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）でクエンチした。有機層をブラインで洗浄し、その後、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。濾過後、ＥｔＯＡｃ層を８５℃で濃縮し、その後、ヘプタンを添加した。次いで、スラリーを２０℃まで１時間冷却し、清浄で乾燥した遠心分離機を介して単離した。生成物を収集し、約２８ｍｍＨｇ下、３５℃で１６時間乾燥させた。５５．１ｋｇ（収率５０％）の化合物Ｃを８５．９％のＡＵＣ純度で回収した。
【０１１７】
（実施例２）
化合物Ｅの調製
【０１１８】
【化１１】
2013514981.tif 000012
ＣｕＩ（２．９５ｋｇ、０．２０ｅｑｕｉｖ）及びＬ−プロリン（１．８８ｋｇ、０．２０ｅｑｕｉｖ）をＤＭＳＯ（２５３ｋｇ）中で１５分間混合した。ここに、化合物Ｃ（２４ｋｇ、１．０ｅｑｕｉｖ）、Ｋ２ＣＯ３（２２．８ｋｇ、４．１ｅｑｕｉｖ）、及び４−ホルミルイミダゾールＤ（８．３０ｋｇ、１．０７ｅｑｕｉｖ）を添加した。次いで、反応混合物を１２０±５℃まで３．５時間加熱した。ＨＰＬＣ分析によって反応が完了したと結論づけられると、混合物を２０±５℃まで冷却した。反応を水（４０倍容）及びジクロロメタン（ＤＣＭ）（２０倍容）で希釈し、１時間撹拌し、遠心分離した。不溶性不純物を除去するために、次いで、１ミクロンの紙をはめ込んだプレスで遠心分離濾液をポリッシュ濾過した（ｐｏｌｉｓｈｅｄ  ｆｉｌｔｅｒｅｄ）。各層を分離し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過した。有機濾液を大気中で蒸留して体積を低減し、ＥｔＯＡｃを投入し、内部温度が約７２℃になるまで蒸留し続けた。生成物スラリーを約２０℃まで２時間冷却し、６．５ｋｇのアルデヒド中間体化合物Ｅ（収率３０．４％）を単離した。
【０１１９】
（実施例３）
化合物Ｇの調製
【０１２０】
【化１２】
2013514981.tif 000013
２００ガロンの反応器に窒素下でメタノール（１３５ｋｇ）、５−クロロチオフェン−２−カルボン酸Ｆ（１２ｋｇ、７３．８１ｍｏｌ、１．０ｅｑｕｉｖ）、及び硫酸（６．７ｋｇ、６８．３１ｍｏｌ）を投入した。内容物を１６時間加温還流（６４℃）し、ＨＰＬＣにより反応の完了をモニターした。該反応器を４０℃まで冷却し、混合物を＜５０℃で油となるまで真空蒸留した。得られたメチルエステルを２０℃まで冷却し、水酸化アンモニウム（１５７ｋｇ、２５８６ｍｏｌ、３５．２ｅｑｕｉｖ）をヘプタン（１０ｋｇ）と共に該反応器に投入した。該反応器の内容物を周囲温度で３６時間混合した。ＨＰＬＣによりメチルエステル中間体の消滅について反応の完了をモニターした。沈殿した固体を遠心分離し、水で洗浄し、その後、ヘプタンで洗浄した。単離した固体を４５℃で１４時間乾燥させて化合物Ｇ（８．４２ｋｇ、収率７７．１％）を得た。
【０１２１】
（実施例４）
化合物Ｉの調製
【０１２２】
【化１３】
2013514981.tif 000014
窒素で不活性化した２００ガロンの反応器にトルエン（２０２．４ｋｇ）、１−（４−（２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−カルボアルデヒド（化合物Ｅ、１１．７ｋｇ、１．０ｅｑｕｉｖ）及び２−アミド−５−クロロチオフェン（化合物Ｇ、７．８ｋｇ、１．０９ｅｑｕｉｖ）を投入した。内容物を１５分間一緒に混合し、その後、トリエチルシラン（Ｅｔ３ＳｉＨ）（１５．３ｋｇ、３．０ｅｑｕｉｖ）及びトリフルオロ酢酸（１５．３ｋｇ、３．０ｅｑｕｉｖ）を添加した。反応混合物を１００±５℃で４時間加熱し、ＨＰＬＣ分析により反応をモニターした。化合物Ｅが１％未満となったときに反応が完了した。反応混合物を４０±５℃まで冷却し、アセトニトリル（１３９．２ｋｇ）を添加し、反応を１５±５℃までさらに冷却した。温度を約３５℃以下に維持しながら、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）（１８．７ｋｇ、３．３ｅｑｕｉｖ）を１５分間にわたって添加した。反応内容物を２０℃で１時間撹拌し、固体の化合物Ｉを遠心分離機で単離した。収集した化合物Ｉの遊離塩基を４５℃及び２８ｍｍＨｇで３２時間真空乾燥した。化合物Ｉ（１０．８９ｋｇ、収率６０．２％）を淡褐色の固体として収集した。ＨＰＬＣが面積％として記録した純度：９３．５％。赤外線（ＩＲ）スペクトルにより構造を確認した。
【０１２３】
（実施例５）
化合物Ｉの塩の一次スクリーニング
化合物Ｉの塩形成のスクリーニングにおいて、５種の溶媒中で５種の酸を調査した。様々な有機溶媒への化合物Ｉの遊離塩基の溶解度が低いので、塩形成はスラリーとして実施した。化合物Ｉの遊離塩基（２０ｍｇ、４８μｍｏｌ）を溶媒（５００μＬ）で処理し、次いで、表１に示した酸（溶媒中の溶液又は固体として１．１当量）を添加し、反応物を熟成チャンバに１６時間入れた。詳細な条件及び結果は表２及び表３に列挙する。
【０１２４】
ＸＲＰＤの結果に基づいて結晶性固体を確認すると、チオシアン酸塩の１種の固体形態、リン酸塩の３種の固体形態及び１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩の１種の固体形態が同定された。以下で示している通り、グルタミン酸及びアスパラギン酸の反応では、各反応条件下で一貫して遊離塩基が戻った。このことは、遊離塩基及び遊離酸の両方の溶解度の低さに起因すると考えられる。イオンクロマトグラフィー及びＩＣＰ分析を使用して、存在している無機アニオンの化学量論比を数量化し、さらに、形成した塩を秤量することができる。
表１．一次スクリーニングにおいて使用した溶媒及び酸の配列
【０１２５】
【表１】
2013514981.tif 000015
表２．一次塩スクリーニングの結果の概要
【０１２６】
【表２】
2013514981.tif 000016
表３に従って別の塩スクリーニング実験を行った。
表３
【０１２７】
【表３】
2013514981.tif 000017
（実施例６）
化合物Ｉの塩の形成の熟成実験
選択した化合物Ｉの塩の形成を表４に示す通り１００ｍｇスケールで繰り返した。チオシアン酸塩の形成は繰り返さなかった。チオシアン酸塩形成実験２−１は、上記の一次スクリーニングと異なる結果となった。少量の残渣が得られたが、それは先に同定した遊離塩基でも結晶形態でもないことが分かった。溶剤を蒸発させると、プロジェクトの過程で結晶化しなかったガム様のペーストが残った。各熟成実験において、リン酸塩の形態１は再現することができなかった。２つの実験においてリン酸塩の形態３を得た。１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩の形態１は１００ｍｇスケールで再現可能である。結果は表５にまとめる。
表４．１００ｍｇ熟成実験において使用した酸及び溶媒
【０１２８】
【表４】
2013514981.tif 000018
表５．１００ｍｇ熟成実験の分析データの概要
【０１２９】
【表５】
2013514981.tif 000019
各塩の高い温度及び湿度に対する安定性を評価するために、リン酸塩及び１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩の試料を４０℃／７５％のＲＨで、合計で１７日間保存し、その時点でそれらをＸＲＰＤにより分析した。それらの化学純度もＨＰＬＣにより評価し、表６に示す。リン酸塩及び１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩のいずれの場合も、分解が始まる前に重大な熱的事象は見られなかった。
表６．４０℃／７５％のＲＨの前及び後のＨＰＬＣ純度
【０１３０】
【表６】
2013514981.tif 000020
リン酸塩形態２、及び１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩形態１の両方でＧＶＳを実施した。いずれの塩も吸湿性を示さず、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩形態１のみがヒステリシスを示した。
【０１３１】
リン酸塩形態２での４０℃／７５％のＲＨの研究は、固体形態及び化学純度については、該材料がこれらの条件に対して安定であることを示していた。１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩もこれらの条件下で安定である。リン酸塩形態３において、４０℃／７５％のＲＨで保存すると結晶化度が低下し、その化学純度が０．７％低下したが、その固体形態は変化しなかった。１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩も結晶化度の低下、及び化学純度の０．５％の低下を示したが、その固体形態は変化しなかった。
【０１３２】
５種の薬学的に許容される対イオンによる化合物Ｉの塩形成の試みが、再現可能なモノリン酸塩及びモノ１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩の形成につながった。
【０１３３】
これらの実験においてリン酸塩の３種の固体形態を同定した。形態１は再現されなかった。形態２及び３は熱及び１Ｈ  ＮＭＲ分析により無水物であると結論づけられた。
【０１３４】
或いは、塩形成を還流条件下で実施した。化合物Ｉ（３００ｍｇ）を溶媒（１３ｍＬ）で処理し、穏やかに還流させた。酸（１．１ｅｑ）を添加し、反応を１０分間還流させた。加熱を止め、反応物を撹拌しながら周囲温度まで冷却した。結果は表７にまとめる。
表７
【０１３５】
【表７】
2013514981.tif 000021
各塩の熱的挙動は、熟成及び還流方法の両方から分析した形態については一貫している。ＴＧＡにおいて分解の前に観察された低下は非常に小さく、ＤＳＣにおける事象は分解が始まった後に発生する。
【０１３６】
（実施例７）
選択した化合物Ｉの塩の溶解度データ
実施例１０に記載の濾過方法を使用して、選択した塩形態の熱力学的水溶解度を測定した。結果は表８に詳述する。
表８
【０１３７】
【表８】
2013514981.tif 000022
メシル酸塩がｐＨ１．８で５．１ｍｇ／ｍＬの最大の溶解度の改善を示したことが観察された。ＧＶＳデータは、９０％のＲＨで２．８ｗｔ％の吸収量を示し、メシル酸塩のヒステリシスの証拠は存在しなかった。一塩化物及びマレイン酸塩が示した吸収量はより低く、それぞれ１．１及び０．４５ｗｔ％であった。リン酸塩のいずれの固体形態もメシル酸塩形態Ａに匹敵する水溶解度を有する。しかし、リン酸塩の多形性の傾向を示す証拠が存在する。１種の固体形態のみを示した１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩は、メシル酸塩形態Ａの、この対イオンに期待される水溶解度よりずっと低い水溶解度を示す。リン酸塩形態２及び３並びに１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩形態１は、固体形態及び化学純度については高い湿度及び温度に対して安定である。
【０１３８】
（実施例８）
化合物Ｉのメタンスルホン酸（メシル酸）塩の調製
【０１３９】
【化１４】
2013514981.tif 000023
メチルエチルケトン（ＭＥＫ、２１７ｋｇ）中の化合物Ｉの遊離塩基のスラリー（１０．８９ｋｇ、１．０ｅｑｕｉｖ）を３０分間混合した。このスラリーにメタンスルホン酸（ＭｅＳＯ３Ｈ）（２．７２ｋｇ、１．０７ｅｑｕｉｖ）のＴＨＦ溶液（２７．２ｋｇ、２．８倍容）を添加し、混合物を５０℃で１時間加熱した。混合物を２０℃まで冷却し、３０分間撹拌した。メシル酸塩を遠心分離し、ＭＥＫ（３２．７ｋｇ）で洗浄した。生成物を２８ｍｍＨｇの減圧下、４５℃で１１６時間乾燥させ、６１℃で６０時間さらに乾燥させた。乾燥後、１２．５０ｋｇの化合物Ｉのメシル酸塩（収率９５．０％）を結晶形態Ａで単離した。
【０１４０】
（実施例９）
化合物Ｉのメタンスルホン酸（メシル酸）塩の調製
化合物Ｉのメシル酸塩２．７０ｋｇをガラス内張反応器に投入し、その後、アセトン（３９．７０ｋｇ）、及びＵＳＰ水（４．３５ｋｇ）を投入した。溶液を５８℃で約１時間還流し、その後、０．２ミクロンのカートリッジフィルターを通して熱ポリッシュ濾過した。ポリッシュした濾液（ｐｏｌｉｓｈｅｄ  ｆｉｌｔｒａｔｅ）を２０±５℃まで冷却し、その後、メチルエチルケトン（ＭＥＫ）（３２．８０ｋｇ）を添加し、周囲温度で１２時間撹拌した。スラリーを０〜５℃まで２時間超冷却し、次いで、濾過漏斗を通して濾過した。単離した固体を減圧下及び５０±５℃で少なくとも１６時間乾燥させて、化合物Ｉのメシル酸塩（１．７ｋｇ）を淡褐色の結晶形態Ｂとして得た。
【０１４１】
（実施例１０）
化合物Ｉのメシル酸塩の分析
化合物Ｉのメシル酸塩の構造を証明するために、以下に列挙する一連の分析を実施した。ＮＭＲ、フーリエ変換赤外（ＦＴＩＲ）及び質量分析により同一性を確認した。
【０１４２】
・プロトンＮＭＲ、
・ＦＴＩＲ分光分析法、
・質量分光分析法（ＭＳ）、
・メシル酸塩含量についてはＨＰＬＣ、
・純度は関連する物質に基づいて決定した（ＨＰＬＣ）、及び
・炭素、水素、窒素については燃焼、硫黄については比色滴定、塩素についてはイオンクロマトグラフィーによる元素分析。
【０１４３】
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）
Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＸＳ  Ｉｎｃ．（Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ、ＵＳＡ）によるＢｒｕｋｅｒ  ＡＸＳ  Ｃ２  ＧＡＤＤＳ回折計で、Ｃｕ  Ｋα線（４０ｋＶ、４０ｍＡ）、自動ＸＹＺステージ、試料の自動位置決め用のレーザービデオ顕微鏡及びＨｉＳｔａｒ２次元面積検出器を使用してＸ線粉末回折パターンを収集した。Ｘ線光学素子は、０．３ｍｍのピンホールコリメーターと一体となった単一のＧｏｅｂｅｌ多層ミラーからなる。
【０１４４】
ビーム広がり、すなわち、試料上のＸ線ビームの有効なサイズは、約４ｍｍであった。試料−検出器の距離を２０ｃｍとしてθ−θ連続走査モードを採用すると、有効な２θ範囲は３．２°〜２９．７°となった。一般に、試料をＸ線ビームに１２０秒間曝露する。
【０１４５】
化合物Ｉのメシル酸塩の結晶形態Ａ及びＢのＸＲＰＤパターンを図３、４、６及び７、並びに表９及び１０に示す。
表９：メシル酸塩形態ＡのＸＲＰＤピーク（２θ°）及び強度％
【０１４６】
【表９】
2013514981.tif 000024
表１０：メシル酸塩形態ＢのＸＲＰＤピーク（２θ°）及び強度％。
【０１４７】
【表１０】
2013514981.tif 000025
化合物Ｉのリン酸塩、チオシアン酸塩及び１−ヒドロキシ−ナフトエート塩の結晶形態のＸＲＰＤを図１４、及び１６〜１９に示す。表１１は、化合物Ｉのリン酸塩、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸塩及びチオシアン酸塩の結晶形態の最も強いピークを示す。
表１１
【０１４８】
【表１１】
2013514981.tif 000026
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）
位置が５０個あるオートサンプラーを備えたＭｅｔｔｌｅｒ−Ｔｏｌｅｄｏ  Ｉｎｃ．（Ｃｏｌｕｍｂｕｓ、ＯＨ、ＵＳＡ）によるＭｅｔｔｌｅｒ  ＤＳＣ  ８２３ｅでＤＳＣデータを収集した。認証インジウムを使用して、該装置をエネルギー及び温度について較正した。一般に、ピンホール付きアルミニウムパンの中で、０．５〜３ｍｇの各試料を１０℃／ｍｉｎで２５℃から３５０℃まで加熱した。５０ｍＬ／ｍｉｎでの窒素パージを試料の上で維持した。形態Ａ及び形態Ｂの示差走査熱量測定（ＤＳＣ）の走査をそれぞれ図５、８ａ、及び８ｂで示す。該装置の制御ソフトウェアはＴＡ  Ｉｎｓｔｍｍｅｎｔｓ  Ｑ１０００であり、データ分析はＵｎｉｖｅｒｓａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ２０００  ｖ  ４．３Ａ  Ｂｕｉｌｄ  ４．３．０．６であった。
【０１４９】
物理化学的特性決定
以下の手順に従って形態Ａ及びＢの物理的化学的性質を決定し、そのデータを表１２にまとめる。
【０１５０】
ＨＰＬＣによる熱力学的水溶解度（濾過方法）
親化合物の遊離形態の最大最終濃度を≧１０ｍｇ／ｍＬとするのに十分な化合物を水に懸濁することにより水溶解度を決定した。懸濁液を２５℃で２４時間平衡化させ、次いで、ｐＨを測定した。次いで、懸濁液をガラス繊維Ｃフィルターに通して濾過して９６ウェルプレートに入れた。次いで、濾液を１０１倍に希釈した。定量は、ＤＭＳＯ中の約０．１ｍｇ／ｍＬの標準液を基準にしてＨＰＬＣにより実施した。異なる体積の標準、希釈及び未希釈の試料溶液を注入した。標準注入において主ピークと同じ保持時間で見られたピークの積分により決定したピーク面積を使用して溶解度を計算した。
【０１５１】
ＨＰＬＣによる熱力学的水溶解度（超遠心分離方法）
親化合物の遊離形態の最大最終濃度を≧１０ｍｇ／ｍＬとするのに十分な化合物を水に懸濁することにより水溶解度を決定した。混合物を穏やかに撹拌しながら３７℃で少なくとも４８時間平衡化させた。２４〜４８時間毎にアリコートを除去し、＞６０，０００ｒｐｍで２０分間の超遠心分離によって溶液を固体から分離し、次いで、ＨＰＬＣにより上澄み中の化合物の濃度を分析した。平衡化した（濃度プラトーに達した）時点で、濃度を溶解度として報告した。この方法は、これにより平衡が達成され、熱力学的溶解度の測定であるので、溶解度を決定するのに好ましい方法である。
表１２：化合物Ｉのメシル酸塩の２種の結晶形態の物理的及び化学的特徴
【０１５２】
【表１２】
2013514981.tif 000027
ｐＫａ決定及び予測：
Ｓｉｒｉｕｓ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｌｔｄ．（ＵＫ）によるＤ−ＰＡＳアタッチメントを備えたＳｉｒｉｕｓ  ＧｌｐＫａ装置でデータを収集した。水溶液中でＵＶにより、及びメタノール水混合物中で電位差測定により２５℃で測定を行った。０．１５Ｍ  ＫＣｌ（ａｑ）で滴定媒体のイオン強度を調整した（ＩＳＡ）。Ｙａｓｕｄａ−Ｓｈｅｄｌｏｖｓｋｙ外挿法によって、メタノール水混合物中で得られた値を０％共溶媒に補正した。Ｒｅｆｉｎｅｍｅｎｔ  Ｐｒｏソフトウェアｖ１．０を使用してデータを改良した。ＡＣＤ  ｐＫａ予測ソフトウェアｖ９を使用してｐＫａ値の予測を行った。
【０１５３】
ＬｏｇＰ＆ＬｏｇＤ決定
３つの比のオクタノール：イオン強度調整（ＩＳＡ）水を使用してＳｉｒｉｕｓ  ＧｌｐＫａ装置での電位差滴定によりデータを収集して、ＬｏｇＰ、ＬｏｇＰｉｏｎ、及びＬｏｇＤ値を得た。Ｒｅｆｉｎｅｍｅｎｔ  Ｐｒｏソフトウェアｖ１．０を使用してデータを改良した。ＡＣＤｖ９及びＳｙｒａｃｕｓｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｒｐ．（Ｓｙｒａｃｕｓｅ、ＮＹ、ＵＳＡ）によるＳｙｒａｃｕｓｅ  ＫＯＷＷＩＮ（商標）ｖ１．６７ソフトウェアを使用してＬｏｇＰ値の予測を行った。
【０１５４】
重量蒸気収着（ＧＶＳ）
Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｌｉｍｉｔｅｄ（Ｍｉｄｄｌｅｓｅｘ、ＵＫ）による、ＳＭＳ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｓｕｉｔｅソフトウェアにより制御されるＳＭＳ  ＨＴ−ＤＶＳ水分収着分析装置を使用して収着等温線を得た。該装置を制御して試料温度を２５℃で維持した。全流量を４００ｍＬ／ｍｉｎで、乾燥及び湿潤窒素の流れを混合することにより湿度を制御した。試料の近くに配置した較正済みの光学露点トランスミッター（０．５〜１００％のＲＨのダイナミックレンジ）により相対湿度を測定した。微量天秤（精度±０．００５ｍｇ）により、ＲＨ％の関数としての試料の重量変化（質量緩和）を常にモニターした。
【０１５５】
一般に５〜２０ｍｇの試料を周囲条件下でステンレス鋼パン内の風袋を量ったメッシュステンレス鋼ライナーに置いた。４０％のＲＨ及び２５℃（一般的室内条件）で試料を載せ、取り出した。
【０１５６】
表１３で概説するように水分収着等温線を作成した（２回の走査で完全な１サイクル）。２５℃及び１０％のＲＨ間隔で０．５〜９０％のＲＨ範囲にわたって標準等温線を作成した。
表１３
【０１５７】
【表１３】
2013514981.tif 000028
等温線作成の完了後に試料を回収し、ＸＲＰＤにより再度分析した。化合物Ｉ遊離塩基及びメシル酸塩形態Ａは４０℃／７５％のＲＨで６カ月の保存後に物理的に安定である。図４は、ＤＶＳ分析（２５℃で最大で９０％のＲＨに曝露）の前及び後の化合物Ｉのメシル酸塩形態ＡのＸＲＰＤパターンを示す。図７は、ＤＶＳ分析（２５℃で最大で９０％のＲＨに曝露）の前及び後の化合物Ｉのメシル酸塩形態ＢのＸＲＰＤパターンを示す。これらの図は、形態Ａ及び形態Ｂのいずれも高い湿気に短時間曝露された後に良好な物理的安定性を有することを示す。
【０１５８】
熱重量分析（ＴＧＡ）
ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ（Ｎｅｗ  Ｃａｓｔｌｅ、ＤＥ、ＵＳＡ）による、位置が１６個あるオートサンプラーを備えたＱ５００  ＴＧＡでＴＧＡデータを収集した。認証アルメルを使用して該装置を温度較正した。一般に５〜３０ｍｇの各試料を、予め風袋を量った白金るつぼ及びアルミニウムＤＳＣパンに載せ、１０℃・ｍｉｎ−１で周囲温度から３５０℃まで加熱した。６０ｍｌ・ｍｉｎ−１の窒素パージを試料の上で維持した。
【０１５９】
該装置の制御ソフトウェアはＴｈｅｒｍａｌ  Ａｄｖａｎｔａｇｅ  ｖ４．６．６であり、Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｖ４．３Ａを使用してデータを分析した。
【０１６０】
本発明の塩又は結晶形態を特徴付けるために当技術分野において公知の他の方法も使用することができる。
【０１６１】
（実施例１１）
その全体が参考として援用される米国特許第７，７６３，６０８号に開示されている方法により調製した化合物Ｉの試料を使用して以下の実験を実施した。
【０１６２】
ラットの調査において化合物Ｉを使用した。化合物Ｉの静脈内（ＩＶ）及び経口（ＰＯ）用量（それぞれ１．０及び１０ｍｇ／ｋｇ）を調製した。ＩＶ用量を５０％ＰＥＧ３００に溶解させて最終濃度１．０ｍｇ／ｍＬ及び最終ｐＨ５．１３を得た。ＰＯ用量を２．０ｍｇ／ｍＬの濃度及び最終ｐＨ２．７０で０．５％メチルセルロースに懸濁した。
【０１６３】
イヌ及びサルの研究のために、やはり化合物Ｉを使用した。化合物ＩのＩＶ及びＰＯ用量（それぞれ１．０及び５．０ｍｇ／ｋｇ）を調製した。ＩＶ用量はラットの研究で使用したものと同様に製剤化した（水中の５０％ＰＥＧ３００）。ＰＯ用量を１．０ｍｇ／ｍＬの濃度及び最終ｐＨ約３．５０で０．５％メチルセルロースに懸濁した。
【０１６４】
研究デザイン
Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｈｏｌｌｉｓｔｅｒ、ＣＡ）からの合計で６匹の雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（ｎ＝３／投薬群）、Ｍａｒｓｈａｌｌ  ＢｉｏＲｅｓｏｕｒｃｅｓ（Ｎｏｒｔｈ  Ｒｏｓｅ、ＮＹ）からの３匹の雄のビーグル犬及び３匹の雄のアカゲザルを利用した。ラットにおける全ての外科的処置（大腿及び頸部静脈カテーテル法）は、研究での利用の８日間前に実施し、ラットは利用の前にインハウスで５日間順化させた。イヌは利用の前にインハウスで少なくとも７日間順化させ、研究が完了した時点でコロニーに戻した。サルの研究はオフサイトの契約実験室で実施した。
【０１６５】
研究開始前の午後から投与後２時間まで（約１８時間）全ての動物を絶食させた。水は制約なく与えた。全ての動物の部屋は１２時間の明暗サイクル（６Ａ．Ｍ．〜６Ｐ．Ｍ．）とした。実験の朝、動物を秤量した。ラットの大腿及び頸部（ＩＶのみ）静脈血液ラインを体外に取り出し、アクセスポートに付着させた。イヌを秤量し、採血部位とＩＶ投薬部位の毛を（頭部及び伏在静脈の両方に沿って）剃った。
【０１６６】
個々の体重に基づいて全ての動物に５．０ｍＬ／ｋｇのＰＯ強制給餌量及び１．０ｍＬ／ｋｇのＩＶボーラス投与量を投与した。３．８％のＴＳＣ（１：１０希釈）で、投薬後２４、５６、及び９６時間の期間でラット、イヌ、及びサルのそれぞれについて血液試料を得た。乏血小板血漿を得るために血液試料を遠心分離し、得られた血漿を試料分析まで−２０℃で保存した。ＩＶ群の動物から投与後０（終夜）、１０、及び２４時間の時点で、２００μＬの２％ホウ酸に対してラット尿試料を収集した。収集時に、尿量及び水消費量を記録した。尿試料を試料分析まで−２０℃で保存した。
【０１６７】
試料分析
液体クロマトグラフィータンデム型質量分析（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）を使用して化合物Ｉの濃度について血漿試料及び尿試料を分析した。要するに、血漿試料及び尿試料を９６ウェルＣａｐｔｉｖａ（商標）フィルタープレート（０．２μｍ、Ｖａｒｉａｎ、Ｉｎｃ．、Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ、ＣＡ）で処理した。５００ｎｇ／ｍＬのＮ−（２−（５−クロロピリジン−２−イルカルバモイル）−４−メトキシフェニル）−４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルカルバミミドイル）−２−フルオロベンズアミド（内標準）を含有するアセトニトリルで血漿試料のアリコートを沈殿させた。尿試料のアリコートを血漿で希釈した後、内標準を含有するアセトニトリルと混合した。混合物をボルテックスし、４℃で３０分間冷凍して、タンパク質を完全に沈殿させた。混合物を濾過して９６ウェル収集プレートに入れた。ターボイオンスプレー源を備えたＳｃｉｅｘ  ＡＰＩ３０００  ＬＣ／ＭＳ／ＭＳに濾液を注入した。化合物Ｉ及びＮ−（２−（５−クロロピリジン−２−イルカルバモイル）−４−メトキシフェニル）−４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルカルバミミドイル）−２−フルオロベンズアミドをＴｈｅｒｍｏ  Ｈｙｐｅｒｓｉｌ−Ｋｅｙｓｔｏｎｅ  Ｂｅｔａｓｉｌ  Ｃ１８カラム（４．６×１００ｍｍ、５μｍ；Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｈｏｕｓｔｏｎ、ＴＸ）で分離した。９０％移動相Ａ（水中の０．５％ギ酸）及び１０％移動相Ｂ（９０％アセトニトリル中の０．５％ギ酸）の４０％移動相Ｂへの移動相混合物の勾配（２．８分にわたるプログラム）。陽イオンモードでのｍ／ｚ  ４７０→３４２生成物イオン（Ｎ−（２−（５−クロロピリジン−２−イルカルバモイル）−４−メトキシフェニル）−４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルカルバミミドイル）−２−フルオロベンズアミド）のピーク面積に対するｍ／ｚ  ４１１→２５０生成物イオン（化合物Ｉ）のピーク面積を測定した。分析的範囲は０．５００〜１０，０００ｎｇ／ｍＬであった。
【０１６８】
データ分析
定量下限（ＬＬＱ）より低い試料化合物Ｉ濃度は＜０．５００ｎｇ／ｍＬと報告した。薬物動態の計算のためにこれらの値はゼロとして処理した。
【０１６９】
Ｗａｔｓｏｎ  ＬＩＭＳソフトウェア（バージョン７．１）を使用して、血漿濃度−時間データのノンコンパートメント解析により化合物Ｉの薬物動態パラメーター値を計算した。血漿濃度−時間プロファイルの終末相中の時間に対する血漿濃度の自然対数（ｌｎ）の線形回帰の傾きの絶対値として終末消失速度定数（ｋ）を計算した。ｌｎ（２）／ｋとして見かけの終末半減期（Ｔ１／２）の値を計算した。線形台形法則を使用して血漿濃度−時間プロファイル下面積（ＡＵＣ）の値を推定した。時間０から最後の検出可能な濃度の時間までＡＵＣａｌｌの値を計算した。対応するＡＵＣａｌｌとｋで除算した最後の検出可能な濃度との合計としてＡＵＣ（０〜ｉｎｆ）の値を計算した。ＩＶ用量／ＡＵＣ（０〜ｉｎｆ）から全身クリアランス（ＣＬ）を計算した。ＩＶ用量／［ｋ・ＡＵＣ（０〜ｉｎｆ）］から分布容積（Ｖｚ）を計算した。ＣＬ×平均滞留時間から定常状態での分布容積（Ｖｓｓ）を計算した。最大血漿濃度（Ｃｍａｘ）及びＣｍａｘに達する時間（Ｔｍａｘ）を観察した通りに記録した。ＰＯ及びＩＶ投与後の用量で正規化したＡＵＣ（０〜ｉｎｆ）値（ＡＵＣ／Ｄ）の比をとることにより経口バイオアベイラビリティー百分率を計算した。結果を表１４及び表１５に示す。
表１４．ノンコンパートメント解析により決定するラット、イヌ、及びサルにおける静脈内  投与後の化合物Ｉの薬物動態パラメーター
【０１７０】
【表１４】
2013514981.tif 000029
ノンコンパートメント解析はＷａｔｓｏｎ  ＬＩＭＳソフトウェア（バージョン７．１）を使用して実施した。
Ｔ１／２：終末半減期
ＡＵＣ：血漿濃度対時間曲線下面積
Ｖｚ：分布容積
ＣＬ：全身クリアランス
Ｖｓｓ：定常状態での分布容積
表１５．ノンコンパートメント解析により決定するラット、イヌ、及びサルにおける経口投与後の化合物Ｉの薬物動態パラメーター
【０１７１】
【表１５】
2013514981.tif 000030
ノンコンパートメント解析はＷａｔｓｏｎ  ＬＩＭＳソフトウェア（バージョン７．１）を使用して実施した。
Ｔ１／２：終末半減期
Ｔｍａｘ：最大血漿濃度に達する時間
Ｃｍａｘ：最大血漿濃度
ＡＵＣ：血漿濃度対時間曲線下面積
％Ｆ：絶対バイオアベイラビリティー
理解を明確にする目的で前述の発明について例示及び実施例により多少詳しく説明してきたが、当業者は、添付の特許請求の範囲の範囲内で特定の変更及び改変を実施できることを理解しよう。さらに、本明細書において示す各参考文献は、それらを個々に参考として援用するかのようにその全体を参考として援用するものである。
【図１】
2013514981.tif 000031
【図２】
2013514981.tif 000032
【図３ａ】
2013514981.tif 000033
【図３ｂ】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
2013514981.tif 000037
【図７】
2013514981.tif 000038
【図８ａ】
2013514981.tif 000039
【図８ｂ】
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【図９】
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【図１０ａ】
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【図１０ｂ】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【国際調査報告】
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