(57)【要約】ＣＨＫ１阻害剤とＷＥＥ１阻害剤の組み合わせを提供する。一局面において、ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせた、’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤の使用が提供される。別の局面において、癌を治療するための、ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせた、’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤の使用が提供される。別の局面において、癌等の過剰増殖性疾患を治療するための、ＷＥＥ１阻害剤を含む薬学的組成物と組み合わせた、’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤を含む薬学的組成物の使用が提供される。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせた、’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤の使用。
【請求項２】
癌を治療するための、ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせた、’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤の使用。
【請求項３】
癌等の過剰増殖性疾患を治療するための、ＷＥＥ１阻害剤を含む薬学的組成物と組み合わせた、’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤を含む薬学的組成物の使用。
【請求項４】
癌を治療するための、ＷＥＥ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物と組み合わせた、’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物の使用。
【請求項５】
癌等の過剰増殖性疾患の治療における、ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせた使用のための薬剤の製造のための、’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤の使用。
【請求項６】
’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤と、ＷＥＥ１阻害剤とを含む、薬学的組成物。
【請求項７】
’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤の有効量と、ＷＥＥ１阻害剤の有効量とを含む、薬学的組成物。
【請求項８】
’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤と、ＷＥＥ１阻害剤とを含む、癌の治療または予防のための薬学的組成物。
【請求項９】
’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤の有効量と、ＷＥＥ１阻害剤の有効量とを含む、癌の治療または予防のための薬学的組成物。
【請求項１０】
’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤を、ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせて投与することによって、癌を治療または予防するための方法。
【請求項１１】
’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤の有効量を、ＷＥＥ１阻害剤の有効量と組み合わせて投与することによって、癌を治療または予防するための方法。
【請求項１２】
’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤を、ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせて投与することによって、癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するための方法であって、前記ＣＨＫ１阻害剤は、生物学的有効用量かつ最大耐量で、またはそれらの間で投与され、前記ＷＥＥ１阻害剤は、生物学的有効用量から最大耐量の間で投与される、方法。
【請求項１３】
’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤の有効量を、必要とする哺乳動物に、ＷＥＥ１阻害剤の有効量と組み合わせて投与することを含む、癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するための方法。
【請求項１４】
’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤と、ＷＥＥ１阻害剤とを含む、キット。
【請求項１５】
（ａ）’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤と、
（ｂ）ＷＥＥ１阻害剤と、を含む、
癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するためのキット。
【請求項１６】
（ａ）’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤と、
（ｂ）ＷＥＥ１阻害剤と、
（ｃ）ＤＮＡ損傷剤と、を含む、
癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するためのキット。
【請求項１７】
（ａ）’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤を含む薬学的組成物と、
（ｂ）ＷＥＥ１阻害剤を含む薬学的組成物と、を含む、
癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するためのキット。
【請求項１８】
（ａ）’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤を含む薬学的組成物と、
（ｂ）ＷＥＥ１阻害剤を含む薬学的組成物と、
（ｃ）ＤＮＡ損傷剤を含む薬学的組成物と、を含む、
癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するためのキット。
【請求項１９】
（ａ）’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物と、
（ｂ）ＷＥＥ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物と、を含む、
癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するためのキット。
【請求項２０】
（ａ）’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択されるＣＨＫ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物と、
（ｂ）ＷＥＥ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物と、
（ｃ）ＤＮＡ損傷剤の有効量を含む薬学的組成物と、を含む、
癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するためのキット。
【請求項２１】
前記ＷＥＥ１阻害剤は、ＭＫ−１７７５である、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項２２】
前記’９２６ＣＨＫ１阻害剤は、化合物１である、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項２３】
前記’９２６ＣＨＫ１阻害剤は、化合物２である、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項２４】
前記’９２６ＣＨＫ１阻害剤は、化合物３である、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項２５】
前記’９２６ＣＨＫ１阻害剤は、化合物４である、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項２６】
前記’９２６ＣＨＫ１阻害剤は、化合物５である、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項２７】
前記’９２６ＣＨＫ１阻害剤は、化合物６である、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項２８】
前記’９２６ＣＨＫ１阻害剤は、化合物７である、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項２９】
前記ＣＨＫ１阻害剤は、前記阻害剤の生物学的有効用量かつ最大耐量で、またはそれらの間で投与される、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項３０】
前記ＣＨＫ１阻害剤は、前記阻害剤の最大耐量で投与される、請求項２９に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項３１】
前記ＷＥＥ１阻害剤は、前記阻害剤の生物学的有効用量かつ最大耐量で、またはそれらの間で投与される、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項３２】
前記ＷＥＥ１阻害剤は、前記阻害剤の最大耐量で投与される、請求項３１に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項３３】
前記癌は、固形腫瘍癌である、請求項１〜３２のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項３４】
前記癌は、軟組織癌：肉腫（血管肉腫、線維肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫）、粘液種、横紋筋腫、線維腫、脂肪腫、および奇形腫、肺：気管支癌（扁平上皮細胞、未分化小細胞、未分化大細胞、腺癌）、肺胞（細気管支）癌腫、気管支線種、肉腫、リンパ腫、軟骨性過誤腫、中皮腫、胃腸：食道（扁平上皮細胞癌、腺癌、平滑筋肉腫、リンパ腫）、胃（癌腫、リンパ腫、平滑筋肉腫）、膵臓（膵管腺癌、膵島細胞腺腫、グルカゴノーマ、ガストリノーマ、カルチノイド腫瘍、ビポーマ）、小腸（腺癌、リンパ腫、カルチノイド腫瘍、カポジ肉腫、平滑筋腫、血管腫、脂肪腫、神経線維腫、線維腫）、大腸（腺癌、管状腺腫、絨毛腺腫、過誤腫、平滑筋腫）、泌尿生殖器：腎臓（腺癌、ウィルムス腫瘍［腎芽細胞腫］、リンパ腫、白血病）、膀胱および尿道（扁平上皮細胞癌、移行細胞癌、腺癌）、前立腺（腺癌、肉腫）、精巣（セミノーマ、奇形腫、胎生期癌、奇形癌、絨毛腫、肉腫、間質細胞癌腫、線維腫、線維腺腫、類腺腫瘍、脂肪腫）、肝臓：肝臓癌（肝細胞癌腫）、胆管癌腫、肝芽腫、血管肉腫、肝細胞腺腫、血管腫、骨：骨原性肉腫（骨肉腫）、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性リンパ腫（細網肉腫）、多発性骨髄腫、悪性巨細胞腫、脊索腫、骨軟骨腫（ｏｓｔｅｏｃｈｒｏｎｆｒｏｍａ）（骨軟骨性外骨腫）、良性軟骨腫、軟骨芽細胞腫、軟骨粘液線維腫、類骨骨腫、および巨細胞腫瘍、神経系：頭蓋（骨腫、血管腫、肉芽腫、黄色腫、変形性骨炎）、髄膜（髄膜腫、髄膜肉腫、神経膠腫症）、脳（星状細胞腫、髄芽細胞腫、神経膠腫、上衣腫、胚細胞腫［松果体腫］、多形性神経膠芽腫、乏突起神経膠腫、神経鞘腫、網膜芽細胞腫、先天性腫瘍）、脊髄神経線維腫、髄膜腫、神経膠腫、肉腫）、婦人科：子宮（子宮内膜癌）、頸部（子宮頸癌、前癌性子宮頸部異形成）、卵巣（卵巣癌腫［漿液性嚢胞腺癌、粘液性嚢胞腺癌、未分類の癌腫］、顆粒膜−莢膜細胞腫、セルトリ−ライディッヒ細胞腫、未分化胚細胞腫、悪性奇形腫）、外陰部（扁平上皮細胞癌、上皮内癌、腺癌、線維肉腫、黒色腫）、膣（明細胞癌、扁平上皮細胞癌、ブドウ状肉腫［胎児性横紋筋肉腫］、卵管（癌腫））、血液学的：骨および骨髄（骨髄性白血病［急性および慢性］、急性リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病、骨髄増殖性疾患、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群）、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫［悪性リンパ腫］、皮膚：悪性黒色腫、基底細胞腫、扁平上皮細胞癌、カポジ肉腫、異形成母斑（ｍｏｌｅｓ  ｄｙｓｐｌａｓｔｉｃ  ｎｅｖｉ）、脂肪腫、血管腫、皮膚線維腫、ケロイド、乾癬、ならびに副腎：神経芽細胞腫から選択される、請求項１〜３２のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項３５】
前記癌は、結腸直腸癌（Ｒａｓ突然変異を含む）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、神経膠腫、卵巣癌、転移性乳癌、膵臓癌、肝胆道癌（肝細胞癌、胆管癌、および胆管癌腫を含む）、胃癌、精巣癌、頭頸部扁平上皮細胞癌、白血病（急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、および慢性リンパ性白血病を含む）、リンパ腫（マントル細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、および非ホジキンリンパ腫を含む）、ならびに前立腺癌から選択される、請求項１〜３２のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項３６】
前記癌は、膵臓癌、卵巣癌、および結腸直腸癌から選択される、請求項１〜３２のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項３７】
前記癌は、結腸直腸癌（Ｒａｓ突然変異を含む）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、および神経膠腫から選択される、請求項１〜３２のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項３８】
前記癌は、非小細胞肺癌、卵巣癌、転移性乳癌、膵臓癌、肝胆道癌（肝細胞癌、胆管癌、および胆管癌腫を含む）、ならびに胃癌から選択される、請求項１〜３２のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項３９】
前記癌は、結腸直腸癌（Ｒａｓ突然変異を含む）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、卵巣癌、肝胆道癌（肝細胞癌、胆管癌、および胆管癌腫を含む）、胃癌、精巣癌、ならびに頭頸部扁平上皮細胞癌から選択される、請求項１〜３２のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項４０】
前記癌は、白血病（急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、および慢性リンパ性白血病を含む）、リンパ腫（マントル細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、および非ホジキンリンパ腫を含む）、ならびに前立腺癌から選択される、請求項１〜３２のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項４１】
ＤＮＡ損傷剤をさらに含む、請求項１〜４０のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項４２】
前記ＤＮＡ損傷剤は、ゲムシタビン、イリノテカン、テモゾロミド、カペシタビン、トポテカン、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、カンプトセシン、シタラビン、フルオロウラシル、シクロホスファミド、リン酸エトポシド、テニポシド、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ペメトレキセド、および放射線から選択される、請求項４１に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項４３】
前記ＤＮＡ損傷剤は、ゲムシタビン、イリノテカン、テモゾロミド、カペシタビン、カンプトセシン、シスプラチン、シタラビン、およびフルオロウラシルから成る群から選択される、請求項４１または４２に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項４４】
前記ＤＮＡ損傷剤は、ゲムシタビン、イリノテカン、テモゾロミド、およびカペシタビンから成る群から選択される、請求項４１〜４３のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項４５】
前記ＤＮＡ損傷剤は、ゲムシタビン、イリノテカン、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、およびシタラビンから成る群から選択される、請求項４１に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項４６】
前記ＤＮＡ損傷剤は、ゲムシタビンおよびイリノテカンから成る群から選択される、請求項４１〜４５のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項４７】
前記ＤＮＡ損傷剤は、シスプラチン、オキサリプラチン、およびカルボプラチンから成る群から選択される、請求項４１に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項４８】
前記ＤＮＡ損傷剤は、ゲムシタビンである、請求項４１に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項４９】
前記ＤＮＡ損傷剤は、シタラビンである、請求項４１に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項５０】
ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせたＣＨＫ１阻害剤の使用。
【請求項５１】
癌を治療するための、ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせたＣＨＫ１阻害剤の使用。
【請求項５２】
癌等の過剰増殖性疾患を治療するための、ＷＥＥ１阻害剤を含む薬学的組成物と組み合わせた、ＣＨＫ１阻害剤を含む薬学的組成物の使用。
【請求項５３】
癌を治療するための、ＷＥＥ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物と組み合わせた、ＣＨＫ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物の使用。
【請求項５４】
癌等の過剰増殖性疾患の治療における、ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせた使用のための薬剤の製造のためのＣＨＫ１阻害剤の使用。
【請求項５５】
ＣＨＫ１阻害剤と、ＷＥＥ１阻害剤とを含む、薬学的組成物。
【請求項５６】
ＣＨＫ１阻害剤の有効量と、ＷＥＥ１阻害剤の有効量とを含む、薬学的組成物。
【請求項５７】
ＣＨＫ１阻害剤と、ＷＥＥ１阻害剤とを含む、癌の治療または予防のための薬学的組成物。
【請求項５８】
ＣＨＫ１阻害剤の有効量と、ＷＥＥ１阻害剤の有効量とを含む、癌の治療または予防のための薬学的組成物。
【請求項５９】
ＣＨＫ１阻害剤をＷＥＥ１阻害剤と組み合わせて投与することによって、癌を治療または予防するための方法。
【請求項６０】
ＣＨＫ１阻害剤の有効量をＷＥＥ１阻害剤の有効量と組み合わせて投与することによって、癌を治療または予防するための方法。
【請求項６１】
ＣＨＫ１阻害剤をＷＥＥ１阻害剤と組み合わせて投与することによって、癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するための方法であって、前記ＣＨＫ１阻害剤は、生物学的有効用量かつ最大耐量で、またはそれらの間で投与され、前記ＷＥＥ１阻害剤は、生物学的有効用量から最大耐量の間で投与される、方法。
【請求項６２】
ＣＨＫ１阻害剤の有効量を、必要とする哺乳動物に、ＷＥＥ１阻害剤の有効量と組み合わせて投与することを含む、癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するための方法。
【請求項６３】
ＣＨＫ１阻害剤と、ＷＥＥ１阻害剤とを含む、キット。
【請求項６４】
（ａ）ＣＨＫ１阻害剤と、
（ｂ）ＷＥＥ１阻害剤と、を含む、
癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するためのキット。
【請求項６５】
（ａ）ＣＨＫ１阻害剤と、
（ｂ）ＷＥＥ１阻害剤と、
（ｃ）ＤＮＡ損傷剤と、を含む、
癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するためのキット。
【請求項６６】
（ａ）ＣＨＫ１阻害剤を含む薬学的組成物と、
（ｂ）ＷＥＥ１阻害剤を含む薬学的組成物と、を含む、
癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するためのキット。
【請求項６７】
（ａ）ＣＨＫ１阻害剤を含む薬学的組成物と、
（ｂ）ＷＥＥ１阻害剤を含む薬学的組成物と、
（ｃ）ＤＮＡ損傷剤を含む薬学的組成物と、を含む、
癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するためのキット。
【請求項６８】
（ａ）ＣＨＫ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物と、
（ｂ）ＷＥＥ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物と、を含む、
癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するためのキット。
【請求項６９】
（ａ）ＣＨＫ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物と、
（ｂ）ＷＥＥ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物と、
（ｃ）ＤＮＡ損傷剤の有効量を含む薬学的組成物と、を含む、
癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するためのキット。
【請求項７０】
前記ＣＨＫ１阻害剤は、ＰＦ−００４７７７３６、ＡＺＤ７７６２、ＸＬ８４４、ＩＣ−８３、ＣＨＩＲ−１２４、ＰＤ−３２１８５２、ＬＹ２６０３６１８、ＬＹ２６０６３６８、およびＳＣＨ９００７７６から成る群から選択される、請求項５０〜６９のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項７１】
前記ＷＥＥ１阻害剤は、ＭＫ−１７７５、ＰＤ−１６６２８５、およびＰＦ−００１２０１３０から成る群から選択される、請求項５０〜７０のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項７２】
前記ＷＥＥ１阻害剤は、ＭＫ−１７７５である、請求項５０〜７１のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項７３】
前記ＣＨＫ１阻害剤は、前記阻害剤の生物学的有効用量かつ最大耐量で、またはそれらの間で投与される、請求項５０〜７２のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項７４】
前記ＣＨＫ１阻害剤は、前記阻害剤の最大耐量で投与される、請求項７３に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項７５】
前記ＷＥＥ１阻害剤は、前記阻害剤の生物学的有効用量かつ最大耐量で、またはそれらの間で投与される、請求項５０〜７４のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項７６】
前記ＷＥＥ１阻害剤は、前記阻害剤の最大耐量で投与される、請求項７５に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項７７】
前記癌は、固形腫瘍癌である、請求項５０〜７６のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項７８】
前記癌は、軟組織癌：肉腫（血管肉腫、線維肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫）、粘液種、横紋筋腫、線維腫、脂肪腫、および奇形腫、肺：気管支癌（扁平上皮細胞、未分化小細胞、未分化大細胞、腺癌）、肺胞（細気管支）癌腫、気管支線種、肉腫、リンパ腫、軟骨性過誤腫、中皮腫、胃腸：食道（扁平上皮細胞癌、腺癌、平滑筋肉腫、リンパ腫）、胃（癌腫、リンパ腫、平滑筋肉腫）、膵臓（膵管腺癌、膵島細胞腺腫、グルカゴノーマ、ガストリノーマ、カルチノイド腫瘍、ビポーマ）、小腸（腺癌、リンパ腫、カルチノイド腫瘍、カポジ肉腫、平滑筋腫、血管腫、脂肪腫、神経線維腫、線維腫）、大腸（腺癌、管状腺腫、絨毛腺腫、過誤腫、平滑筋腫）、泌尿生殖器：腎臓（腺癌、ウィルムス腫瘍［腎芽細胞腫］、リンパ腫、白血病）、膀胱および尿道（扁平上皮細胞癌、移行細胞癌、腺癌）、前立腺（腺癌、肉腫）、精巣（セミノーマ、奇形腫、胎生期癌、奇形癌、絨毛腫、肉腫、間質細胞癌腫、線維腫、線維腺腫、類腺腫瘍、脂肪腫）、肝臓：肝臓癌（肝細胞癌腫）、胆管癌腫、肝芽腫、血管肉腫、肝細胞腺腫、血管腫、骨：骨原性肉腫（骨肉腫）、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性リンパ腫（細網肉腫）、多発性骨髄腫、悪性巨細胞腫、脊索腫、骨軟骨腫（ｏｓｔｅｏｃｈｒｏｎｆｒｏｍａ）（骨軟骨性外骨腫）、良性軟骨腫、軟骨芽細胞腫、軟骨粘液線維腫、類骨骨腫、および巨細胞腫瘍、神経系：頭蓋（骨腫、血管腫、肉芽腫、黄色腫、変形性骨炎）、髄膜（髄膜腫、髄膜肉腫、神経膠腫症）、脳（星状細胞腫、髄芽細胞腫、神経膠腫、上衣腫、胚細胞腫［松果体腫］、多形性神経膠芽腫、乏突起神経膠腫、神経鞘腫、網膜芽細胞腫、先天性腫瘍）、脊髄神経線維腫、髄膜腫、神経膠腫、肉腫）、婦人科：子宮（子宮内膜癌）、頸部（子宮頸癌、前癌性子宮頸部異形成）、卵巣（卵巣癌腫［漿液性嚢胞腺癌、粘液性嚢胞腺癌、未分類の癌腫］、顆粒膜−莢膜細胞腫、セルトリ−ライディッヒ細胞腫、未分化胚細胞腫、悪性奇形腫）、外陰部（扁平上皮細胞癌、上皮内癌、腺癌、線維肉腫、黒色腫）、膣（明細胞癌、扁平上皮細胞癌、ブドウ状肉腫［胎児性横紋筋肉腫］、卵管（癌腫））、血液学的：骨および骨髄（骨髄性白血病［急性および慢性］、急性リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病、骨髄増殖性疾患、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群）、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫［悪性リンパ腫］、皮膚：悪性黒色腫、基底細胞腫、扁平上皮細胞癌、カポジ肉腫、異形成母斑（ｍｏｌｅｓ  ｄｙｓｐｌａｓｔｉｃ  ｎｅｖｉ）、脂肪腫、血管腫、皮膚線維腫、ケロイド、乾癬、ならびに副腎：神経芽細胞腫から選択される、請求項５０〜７６のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項７９】
前記癌は、結腸直腸癌（Ｒａｓ突然変異を含む）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、神経膠腫、卵巣癌、転移性乳癌、膵臓癌、肝胆道癌（肝細胞癌、胆管癌、および胆管癌腫を含む）、胃癌、精巣癌、頭頸部扁平上皮細胞癌、白血病（急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、および慢性リンパ性白血病を含む）、リンパ腫（マントル細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、および非ホジキンリンパ腫を含む）、ならびに前立腺癌から選択される、請求項５０〜７６のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項８０】
前記癌は、膵臓癌、卵巣癌、および結腸直腸癌から選択される、請求項５０〜７６のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項８１】
前記癌は、結腸直腸癌（Ｒａｓ突然変異を含む）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、および神経膠腫から選択される、請求項５０〜７６のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項８２】
前記癌は、非小細胞肺癌、卵巣癌、転移性乳癌、膵臓癌、肝胆道癌（肝細胞癌、胆管癌、および胆管癌腫を含む）、ならびに胃癌から選択される、請求項５０〜７６のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項８３】
前記癌は、結腸直腸癌（Ｒａｓ突然変異を含む）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、卵巣癌、肝胆道癌（肝細胞癌、胆管癌、および胆管癌腫を含む）、胃癌、精巣癌、ならびに頭頸部扁平上皮細胞癌から選択される、請求項５０〜７６のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項８４】
前記癌は、白血病（急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、および慢性リンパ性白血病を含む）、リンパ腫（マントル細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、および非ホジキンリンパ腫を含む）、ならびに前立腺癌から選択される、請求項５０〜７６のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項８５】
ＤＮＡ損傷剤をさらに含む、請求項５０〜８４のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項８６】
前記ＤＮＡ損傷剤は、ゲムシタビン、イリノテカン、テモゾロミド、カペシタビン、トポテカン、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、カンプトセシン、シタラビン、フルオロウラシル、シクロホスファミド、リン酸エトポシド、テニポシド、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ペメトレキセド、および放射線から選択される、請求項８５に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項８７】
前記ＤＮＡ損傷剤は、ゲムシタビン、イリノテカン、テモゾロミド、カペシタビン、カンプトセシン、シスプラチン、シタラビン、およびフルオロウラシルから成る群から選択される、請求項８５または８６に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項８８】
前記ＤＮＡ損傷剤は、ゲムシタビン、イリノテカン、テモゾロミド、およびカペシタビンから成る群から選択される、請求項８５〜８７のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項８９】
前記ＤＮＡ損傷剤は、ゲムシタビン、イリノテカン、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、およびシタラビンから成る群から選択される、請求項８５に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項９０】
前記ＤＮＡ損傷剤は、ゲムシタビンおよびイリノテカンから成る群から選択される、請求項８５〜８９のいずれか一項に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項９１】
前記ＤＮＡ損傷剤は、シスプラチン、オキサリプラチン、およびカルボプラチンから成る群から選択される、請求項８５に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項９２】
前記ＤＮＡ損傷剤は、ゲムシタビンである、請求項８５に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【請求項９３】
前記ＤＮＡ損傷剤は、シタラビンである、請求項８５に記載の使用、組成物、方法、またはキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＣＨＫ１キナーゼ阻害剤とＷＥＥ１キナーゼ阻害剤との組み合わせ、およびその使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
（従来技術の説明）
チェックポイントキナーゼ１（「ＣＨＫ１」）は、セリン／トレオニンキナーゼである。ＣＨＫ１は、細胞周期の進行を制御し、細胞内のＤＮＡ損傷応答における主要因子である。ＣＨＫ１阻害剤は、腫瘍細胞を、化学療法および放射線等の種々の遺伝毒性剤に対して感受性にすることが示されている。（Ｔｓｅ，Ａｒｃｈｉｅ  Ｎ．，ｅｔ  ａｌ．，“Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  Ｋｉｎａｓｅ  １  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ．”Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１３（７）（２００７）１９５５−１９６０）。多くの腫瘍は、Ｇ１  ＤＮＡ損傷チェックポイント経路が欠損しており、その結果、ＤＮＡ損傷を修復して生存するために、ＳおよびＧ２チェックポイントに依存することが観察されている。（Ｊａｎｅｔｋａ，Ｊａｍｅｓ  Ｗ．，ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  ｋｉｎａｓｅｓ：Ｆｒｏｍ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｃｌｉｎｉｃ．”Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ＆Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｖｏｌ．１０，Ｎｏ．４（２００７）４７３−４８６）。ＳおよびＧ２チェックポイントは、ＣＨＫ１によって制御される。ＣＨＫ１の阻害は、ＳおよびＧ２チェックポイントを解除し、それによって、ＤＮＡ修復を妨げ、腫瘍細胞死の増加をもたらすことが示されている。しかしながら、非癌性細胞は、機能的なＧ１チェックポイントを有し、ＤＮＡの修復および生存が可能である。ＣＨＫ１の主要な標的は、ＣＤＣ２５Ａホスファターゼであり、それは、サイクリン依存性キナーゼ（「ＣＤＫ」）の活性化因子である。ＣＨＫ１がＣＤＣ２５Ａをリン酸化すると、ＣＤＣ２５Ａの分解が加速され、次に、ＤＮＡ複製を減速させ、損傷が修復されるまで、有糸分裂に移行することを妨げる（Ｂｅｃｋ，Ｈａｌｄａｎ，ｅｔ  ａｌ．，“Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ  ｏｆ  ｃｙｃｌｉｎ  ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｋｉｎａｓｅｓ  ａｒｅ  ｃｒｕｃｉａｌ  ｆｏｒ  ｍａｉｎｔａｉｎｉｎｇ  ｇｅｎｏｍｅ  ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ  ｉｎ  Ｓ  ｐｈａｓｅ．”Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．Ｖｏｌ．１８８，Ｎｏ．５（２０１０）６２９−６３８）。
【０００３】
ＣＨＫ１阻害剤は既知であり、例えば、特許文献１、特許文献２、特許文献３、特許文献４、特許文献５、特許文献６、特許文献７、特許文献８、および特許文献９を参照されたい。
【０００４】
ＣＨＫ１阻害剤には、ＰＦ−００４７７７３６（ＰＦ−４７７７３６としても既知）、ＡＺＤ７７６２、ＸＬ８４４、ＩＣ−８３、ＣＨＩＲ−１２４、ＰＤ−３２１８５２、ＬＹ２６０３６１８、ＬＹ２６０６３６８、およびＳＣＨ９００７７６が挙げられる。
【０００５】
国際公開第ＷＯ２００９／１４０３２０号は、（Ｒ）−Ｎ−（４−（３−アミノピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）ニコチンアミド（以下、「化合物１」）および（Ｒ）−Ｎ−（４−（３−アミノピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）イソブチルアミド（以下、「化合物２」）、（Ｒ）−Ｎ−（５−ブロモ−４−（３−（メチルアミノ）ピペリジン−１−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）ニコチンアミド（以下、「化合物３」）、（Ｒ）−Ｎ−（４−（３−アミノピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−５−メチルニコチンアミド（以下、「化合物４」）、（Ｒ）−Ｎ−（４−（３−アミノピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）シクロプロパンカルボキサミド（以下、「化合物５」）、（Ｒ）−Ｎ−（４−（３−アミノピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−３−メチルブタンアミド（以下、「化合物６」）、ならびに（Ｒ）−Ｎ−（４−（３−アミノピペリジン−１−イル）−５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）−２−シクロプロピルアセトアミド（以下、「化合物７」）を含む、化合物を記載する。化合物１、２、３、４、５、６、および７（まとめて、「’９２６ＣＨＫ１阻害剤」）は、経口ＣＨＫ１阻害剤である。
【０００６】
国際公開第ＷＯ２００９／１５１５８９号は、ＣＨＫ１阻害剤（以下、「’５８９出願のＣＨＫ１阻害剤」）を記載する。国際公開第ＷＯ２００９／１５１５９８号は、ＣＨＫ１阻害剤（以下、「’５９８出願のＣＨＫ１阻害剤」）を記載する。
【０００７】
Ｗｅｅ１様タンパク質キナーゼ（「ＷＥＥ１」）は、チロシンキナーゼである。ＷＥＥ１は、Ｍ期の間に、リン酸化および分解を通じて、正常細胞中で不活性化される。ＷＥＥ１は、Ｃｄｃ２のリン酸化によって、有糸分裂への移行を逆方向に制御する（Ｓｔａｔｈｉｓ，Ａｎａｓｔａｓｌｏｓ  ａｎｄ  Ａｍｉｔ  Ｏｚａ，“Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｗｅｅ１−ｌｉｋｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｋｉｎａｓｅ  Ｔｏ  Ｔｒｅａｔ  Ｃａｎｃｅｒ．”Ｄｒｕｇ  Ｎｅｗｓ＆Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ．２３（７）（２０１０）４２５−４２９）。有糸分裂への移行は、ＣＤＣ２５によって引き起こされ、それがＣｄｃ２を脱リン酸化させる。ＷＥＥ１の阻害は、ＤＮＡ損傷に関わらず、Ｇ２／Ｍの抑止、および有糸分裂への制御不能な移行をもたらし得る。Ｇ２／Ｍチェックポイントが不活性の状態では、細胞は、ＤＮＡ損傷剤に対してより活性になり得る。さらに、正常なＧ１／Ｓチェックポイントを有する正常細胞は、依然として生存することができる。
【０００８】
ＷＥＥ１阻害剤は既知であり、例えば、国際公開第ＷＯ２０１０／０９８３６７号、国際公開第ＷＯ２０１０／０６７８８６号、国際公開第ＷＯ２００８／１１５７４２号、国際公開第ＷＯ２００８／１１５７３８号、国際公開第ＷＯ２００７／１２６１２２号、国際公開第ＷＯ２００７／１２６１２８号、国際公開第ＷＯ２００４／００７４９９号、および米国特許出願公開第２００５／００３７４７６号を参照されたい。
【０００９】
ＷＥＥ１阻害剤には、ＭＫ−１７７５、ＰＤ−１６６２８５（ＰＤ０１６６２８５としても既知）、およびＰＦ−００１２０１３０が含まれる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】国際公開第２００９／００４３２９号
【特許文献２】国際公開第２００８／０１２６３５号
【特許文献３】国際公開第２００７／０９０４９３号
【特許文献４】国際公開第２００７／０９０４９４号
【特許文献５】国際公開第２００６／１０６３２６号
【特許文献６】国際公開第２００６／１２０５７３号
【特許文献７】国際公開第２００５／１０３０３６号
【特許文献８】国際公開第２００５／０６６１６３号
【特許文献９】国際公開第２００３／０２８７２４号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
疾患、特に、癌等の過剰増殖性疾患の治療に対する必要性が残る。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
ＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤を組み合わせた投与を、癌の治療に使用することができることがわかった。驚くべきことに、この組み合わせは相乗的な潜在能力を示し、この組み合わせが、いずれかの阻害剤の単独での投与よりも、さらに優れたものになることを可能にする。
【００１３】
一態様において、本発明は、ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせたＣＨＫ１阻害剤の使用を提供する。
【００１４】
別の態様において、本発明は、癌等の過剰増殖性疾患の治療のための、ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせたＣＨＫ１阻害剤の使用を提供する。
【００１５】
本発明の別の態様は、癌等の過剰増殖性疾患の治療における、ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせた使用のための薬剤の製造のためのＣＨＫ１阻害剤の使用を提供する。
【００１６】
本発明の別の態様は、ＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤を含む、薬学的組成物を提供する。
【００１７】
本発明の別の態様は、ＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤を含む、癌等の過剰増殖性疾患の治療または予防のための薬学的組成物を提供する。
【００１８】
本発明の別の態様は、ＣＨＫ１阻害剤を、ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせて投与することによって、癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するための方法を提供する。
【００１９】
本発明の別の態様は、ＣＨＫ１阻害剤を、ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせて投与することによって、癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するための方法であって、ＣＨＫ１阻害剤は、生物学的有効用量から最大耐量の間で投与され、ＷＥＥ１阻害剤は、生物学的有効用量から最大耐量の間で投与される、方法を提供する。
【００２０】
本発明の別の態様は、ＣＨＫ１阻害剤の有効量を、必要とする哺乳動物に、ＷＥＥ１阻害剤の有効量と組み合わせて投与することを含む、癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するための方法を提供する。
【００２１】
本発明の別の態様は、ＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤を含む、キットを提供する。
【００２２】
本発明の別の態様は、癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するための、ＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤を含む、キットを提供する。
【００２３】
本発明の別の態様は、癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するための、別個の容器のＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤を含む、キットを提供する。
【００２４】
本発明の別の態様は、癌等の過剰増殖性疾患の治療または予防のために、組み合わせて使用するための薬学的組成物を、単一パッケージ中の別個の容器に含むキットであって、１つの容器にＣＨＫ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物を含み、２つ目の容器にＷＥＥ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物を含む、キットを提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】ＣＨＫ１阻害剤で治療した後のＨＥＬ９２．１．７細胞の細胞生存率を示す。
【図２】ＷＥＥ１阻害剤で治療した後のＨＥＬ９２．１．７細胞の細胞生存率を示す。
【図３】ＣＨＫ１阻害剤で治療した後のカスパーゼ３／７活性を示す。
【図４】ＷＥＥ１阻害剤で治療した後のカスパーゼ３／７活性を示す。
【図５】Ｃｄｋ２  ｐＹ１５のリン酸化実験を示す。
【図６】Ｃｄｃ２  ｐＴ１４／Ｙ１５のリン酸化実験を示す。
【図７】Ｈ２Ａ．Ｘ  ｐＳ１３９のリン酸化実験を示す。
【図８】ＣＨＫ１  ｐＳ３４５のリン酸化実験を示す。
【図９】ＨＥＬ９２．１．７細胞のヌクレオシド取り込み実験を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
以下、本発明のある特定の実施形態について詳細に述べる。本発明は、列挙された実施形態とともに説明されるが、それらは本発明をこれらの実施形態に限定することを意図したものではないことが理解されるであろう。逆に、本発明は、全ての代替例、変形例、および同等物を対象とすることを意図し、これらは特許請求の範囲によって定義される本発明の範囲内に含まれ得る。当業者は、本発明の実施に使用され得る、本明細書で説明されている方法および材料に類似または相当する、多数の方法および材料を認識するであろう。本発明は、説明されている方法および材料に一切限定されない。定義された用語、用語の用法、説明される技術等が含まれるが、これらに限定されない、組み込まれる文献および類似する資料のうちの１つもしくは複数が、本出願と異なる、または矛盾する場合は、本出願が優先される。
定義
【００２７】
「癌」および「癌性」という用語は、典型的に、制御不能な細胞成長によって特徴付けられる、哺乳動物における生理学的状態を指すか、または表す。「腫瘍」は、１つ以上の癌性細胞を含む。癌の例には、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、および白血病またはリンパ性悪性腫瘍が挙げられるが、これらに限定されない。このような癌のより具体的な例には、扁平上皮細胞癌（例えば、上皮性扁平上皮細胞癌）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌（「ＮＳＣＬＣ」）、肺腺癌、および肺扁平上皮細胞癌を含む、肺癌、腹膜癌、肝細胞癌、胃腸癌を含む胃（ｇａｓｔｒｉｃ）または胃（ｓｔｏｍａｃｈ）癌、膵臓癌、膠芽細胞腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝細胞癌、乳癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜または子宮癌腫、唾液腺癌、腎臓（ｋｉｄｎｅｙ）または腎臓（ｒｅｎａｌ）癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝臓癌腫、肛門癌腫、陰茎癌腫、黒色腫を含む皮膚癌、ならびに頭頸部癌が挙げられる。
【００２８】
「哺乳動物」という用語は、本明細書に記載の疾患を有するか、またはそれを発症する危険性のある温血動物を指し、モルモット、イヌ、ネコ、ラット、マウス、ハムスター、およびヒトを含む霊長類が含まれるが、これらに限定されない。
【００２９】
「薬学的に許容される」という語句は、物質または組成物が、製剤に含まれる他の成分および／またはそれを用いて治療される哺乳動物と、化学的および／または毒物学的に適合性があることを示す。
【００３０】
「治療有効量」または「有効量」という語句は、このような治療を必要とする哺乳動物に投与した際に、（ｉ）特定の疾患、状態、もしくは障害を治療もしくは予防するのに十分であるか、（ｉｉ）特定の疾患、状態、もしくは障害の１つ以上の症状を緩和、改善、もしくは排除するのに十分であるか、または（ｉｉｉ）本明細書に記載の特定の疾患、状態、もしくは障害の１つ以上の症状の発生を予防もしくは遅延するのに十分である、本明細書に記載の化合物の量を意味する。このような量に相当するであろう化合物の量は、具体的な化合物、疾患状態およびその重症度、治療を必要とする哺乳動物の固有性（例えば、体重）等の要因に応じて変化することになるが、それでもなお、当業者によってごく普通に決定することができる。有効量は、生物学的有効量以上であるが、最大耐量以下である。有効量は、最大耐量であり得る。癌の場合、阻害剤の有効量は、癌細胞の数を減少させる、腫瘍寸法を縮小する、末梢器官への癌細胞浸潤を阻害する（すなわち、ある程度遅延させ、好ましくは停止する）、腫瘍転移を阻害する（すなわち、ある程度遅延させ、好ましくは停止する）、腫瘍成長をある程度阻害する、および／または癌に関係する症状の１つ以上をある程度軽減することができる。阻害剤が、成長を予防する、および／または既存の癌細胞を殺滅することができる限り、それは、細胞増殖抑制性および／または細胞毒性であることができる。癌療法について、効果は、例えば、疾患進行の時間（「ＴＴＰ」）を評価すること、および／または反応速度（「ＲＲ」）を判定することによって、測定することができる。
【００３１】
「治療する」または「治療」という用語は、療法的、予防的、緩和的、または防止的な処置を指す。本発明の目的で、有益な、または所望の臨床的結果としては、症状の緩和、疾病の程度の減少、疾病の安定した（すなわち、悪化しない）状態、疾病進行の遅延または鈍化、疾病状態の改善または緩和、および検出可能または検出不可能に関わらない寛解（部分的または全体的を問わない）が挙げられるが、これらに限定されない。「治療」はまた、治療を受けなかった場合に予想される生存と比較して、生存を延長することを意味し得る。治療を必要とする者には、既にその状態もしくは疾患を有している者、ならびにその状態もしくは疾患を有し易い者、またはその状態もしくは疾患を予防すべき者が含まれる。
【００３２】
ＣＨＫ１とＷＥＥ１の組み合わせ
【００３３】
本発明は、過剰増殖性疾患の治療における、ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせたＣＨＫ１阻害剤の使用を提供する。ある特定の実施形態において、過剰増殖性疾患は、癌である。
【００３４】
細胞周期制御の利用は、腫瘍細胞が成長のために依存する、基本的特徴である。これを達成することができる１つの機構は、細胞周期チェックポイントおよびＤＮＡ損傷修復の操作である。腫瘍細胞が、ＣＨＫ１に依存する細胞過程であるＧ２／Ｍチェックポイントにおいて、ＤＮＡ損傷修復の過剰活性化によって化学療法に耐性となるように進化し得ることが、証拠により示唆されている。ＣＨＫ１の阻害は、この生存手段を排除する。
【００３５】
ＣＨＫ１キナーゼは、細胞周期チェックポイント活性化およびＤＮＡ損傷に応じたＤＮＡ修復に関与する。したがって、ＣＨＫ１の阻害剤は、ＤＮＡ損傷剤との組み合わせにおいて前臨床活性を示している。ＣＨＫ１はまた、非摂動細胞において（すなわち、外因性ＤＮＡ損傷の非存在下において）、細胞周期の進行に非常に重要であることが既知であり、ＣＨＫ１の単剤阻害は、インビトロの培養癌細胞系において抗増殖性である（実施例２、ならびに図１および２を参照されたい）。合成致死性ｓｉＲＮＡのスクリーニングを、ＣＨＫ１阻害剤と組み合わせて行った。ＰＣ３、ＬＮＣａＰ、およびＡ５４９細胞系に行ったこのスクリーニングの実行中に、Ｗｅｅ１キナーゼに対するｓｉＲＮＡは、ＣＨＫ１阻害剤の抗増殖効果を強化する能力を示した（実施例１を参照されたい）。
【００３６】
追跡研究を、ＨＥＬ９２．１．７細胞系に行った。この系は、細胞増殖に関して、ＣＨＫ１阻害およびＷＥＥ１阻害の両方に対して感受性であることを示した（実施例２、ならびに図１および２を参照されたい）。ＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤を、マトリックス形式で組み合わせて、相乗効果を観察した（実施例２を参照されたい）。２つの阻害剤の組み合わせは、純粋な加法から予測されるであろうものと比較して、最大でおおよそ４倍の抗増殖活性の強化をもたらした。さらに、ＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤の両方が、単剤として投与した場合に、アポトーシスを誘発した（実施例３、ならびに図３および４を参照されたい）。抗増殖性相乗作用との相関関係において、阻害剤の組み合わせは、加法から予測されるであろうものと比較して、最大でおおよそ５倍のアポトーシスの強化をもたらした（実施例３を参照されたい）。
【００３７】
ＣＨＫ１活性は、ＣＤＣ２５ホスファターゼの隔離および分解をもたらし、したがって、ＣＤＫの阻害的リン酸化を促進する。Ｗｅｅ１キナーゼは、同じ残基で、ＣＤＫを直接リン酸化する。Ｃｄｋ２およびＣｄｃ２は、主として、それぞれ、Ｓ期の進行および有糸分裂への移行を制御すると見られているＣＤＫである。予想されるとおり、ＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤の両方が、Ｃｄｋ２およびＣｄｃ２の阻害的リン酸化の減少をもたらし、組み合わせたものは、さらにリン酸化を減少させた（実施例４ならびに図５および６を参照されたい）。したがって、ＣＨＫ１阻害剤とＷＥＥ１阻害剤との組み合わせは、Ｃｄｋ２およびＣｄｃ２の強力な阻害解除につながる。
【００３８】
ＣＤＫの阻害解除は、Ｓ期におけるＤＮＡ損傷をもたらすことが示されており、ＤＮＡ複製起点の開始の脱制御の結果である可能性が高い（Ｂｅｃｋ、上記）。これに基づいて、ＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤の両方が、Ｈ２Ａ．Ｘ  Ｓ１３９のリン酸化（ＤＮＡ損傷の生物学的マーカー）の増加をもたらし、阻害剤の組み合わせは、さらにリン酸化を増加させた（実施例５および図７を参照されたい）。ＤＮＡ損傷は、細胞周期チェックポイントの活性化をもたらす。観察されたＤＮＡ損傷との相関関係において、ＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤の両方が、ＣＨＫ１  Ｓ３４５のリン酸化を増加させた（実施例５および図８を参照されたい）。さらに、ＣＨＫ１阻害剤とＷＥＥ１阻害剤との低濃度の組み合わせは、ＣＨＫ１  Ｓ３４５のリン酸化の強化をもたらした。
【００３９】
ＣＤＫの阻害解除と関連するＤＮＡ損傷は、複製フォークの崩壊および／または有糸分裂への早期移行の結果であることが示唆されている。これらの事象の両方が、Ｓ期におけるＤＮＡ合成の阻害をもたらす。この裏付けとして、ＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤の両方がＳ期の細胞においてＤＮＡ合成の阻害をもたらし、この作用は、阻害剤が組み合わされた場合に強化された（図９を参照されたい）。
【００４０】
一実施形態は、ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせたＣＨＫ１阻害剤の使用を提供する。
【００４１】
別の実施形態は、癌等の過剰増殖性疾患の治療のための、ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせたＣＨＫ１阻害剤の使用を提供する。さらなる実施形態において、本使用には、ＤＮＡ損傷剤の使用が含まれる。
【００４２】
別の実施形態は、癌等の過剰増殖性疾患を治療するための、ＷＥＥ１阻害剤を含む薬学的組成物と組み合わせた、ＣＨＫ１阻害剤を含む薬学的組成物の使用を提供する。別の実施形態は、癌等の過剰増殖性疾患を治療するための、ＷＥＥ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物と組み合わせた、ＣＨＫ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物の使用を提供する。さらなる実施形態において、本使用には、ＤＮＡ損傷剤の使用が含まれる。
【００４３】
別の実施形態は、癌等の過剰増殖性疾患の治療における、ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせた使用のための薬剤の製造のためのＣＨＫ１阻害剤の使用を提供する。
【００４４】
別の実施形態は、ＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤を含む薬学的組成物を提供する。別の実施形態は、ＣＨＫ１阻害剤の有効量およびＷＥＥ１阻害剤の有効量を含む、薬学的組成物を提供する。さらなる実施形態において、薬学的組成物はまた、ＤＮＡ損傷剤の有効量を含む。
【００４５】
別の実施形態は、ＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤を含む、癌等の過剰増殖性疾患の治療または予防のための薬学的組成物を提供する。別の実施形態は、ＣＨＫ１阻害剤の有効量およびＷＥＥ１阻害剤の有効量を含む、癌等の過剰増殖性疾患の治療または予防のための薬学的組成物を提供する。さらなる実施形態において、薬学的組成物はまた、ＤＮＡ損傷剤の有効量を含む。
【００４６】
本発明の別の態様は、ＣＨＫ１阻害剤を、ＷＥＥ１阻害剤と組み合わせて投与することによって、癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するための方法を提供する。本発明の別の態様は、ＣＨＫ１阻害剤の有効量を、ＷＥＥ１阻害剤の有効量と組み合わせて投与することによって、癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するための方法を提供する。さらなる実施形態において、本方法はまた、ＤＮＡ損傷剤の有効量を投与することを含む。
【００４７】
別の実施形態は、ＣＨＫ１阻害剤をＷＥＥ１阻害剤と組み合わせて投与することによって、癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するための方法であって、ＣＨＫ１阻害剤は、生物学的有効用量かつ最大耐量で、またはそれらの間で投与され、ＷＥＥ１阻害剤は、生物学的有効用量から最大耐量の間で投与される、方法を提供する。さらなる実施形態において、本方法はまた、ＤＮＡ損傷剤の有効量を投与することを含む。
【００４８】
別の実施形態は、ＣＨＫ１阻害剤の有効量を、必要とする哺乳動物に、ＷＥＥ１阻害剤の有効量と組み合わせて投与することを含む、癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するための方法を提供する。さらなる実施形態において、本方法はまた、ＤＮＡ損傷剤の有効量を投与することを含む。
【００４９】
一実施形態は、ＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤を含む、キットを提供する。さらなる実施形態において、キットはまた、ＤＮＡ損傷剤を含む。
【００５０】
キットは、本組み合わせを含む容器を含んでもよい。好適な容器には、例えば、瓶、バイアル、注射器、ブリスターパック等が挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチック等、種々の材料から形成することができる。容器は、状態を治療するために効果的な組み合わせを保持することが可能であり、滅菌のアクセスポートを有し得る（例えば、容器は、静脈注射用溶液バッグまたは皮下注射針で貫通することができる栓を有するバイアルであり得る）。
【００５１】
キットは、さらに、容器の上またはそれに付随して、ラベルまたはパッケージ添付文書を含んでもよい。「パッケージ添付文書」という用語は、通常、治療薬の市販のパッケージに含まれ、適応症、用法、用量、投与、禁忌、および／またはこのような治療薬の使用に関する注意についての情報を有する、使用説明書を指して使用される。一実施形態において、ラベルまたはパッケージ添付文書は、ＣＨＫ１阻害剤および／またはＷＥＥ１阻害剤を含む組成物が、障害を治療するために使用可能であることを示す。ラベルまたはパッケージ添付文書はまた、本組成物が、他の障害を治療するために使用可能であることを示す。
【００５２】
ある特定の実施形態において、キットは、ＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤の固体経口形態、例えば、錠剤またはカプセル等の送達に好適である。このようなキットは、好ましくは、多数の単位用量を含む。このようなキットは、用量をそれらの使用目的の順に配向したカードを含んでもよい。このようなキットの例は、「ブリスターパック」である。ブリスターパックは、パッケージ業界で周知であり、薬学的な単位用量形態のパッケージ化に広く使用されている。所望であれば、用量が投与され得る治療スケジュール中の日程を示す、例えば、数字、文字、もしくは他の印の形態で、またはカレンダー挿入物を伴う、記憶補助が提供されてもよい。
【００５３】
別の実施形態によると、キットは、（ａ）ＣＨＫ１阻害剤が中に含まれた第１の容器、および（ｂ）ＷＥＥ１阻害剤が中に含まれた第２の容器、を含み得る。あるいは、または加えて、キットは、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝食塩水、リンガー溶液、およびデキストロース溶液等の、薬学的に許容される緩衝液を含む、第３の容器をさらに含んでもよい。それは、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、針、および注射器を含む、商業的および使用者の観点から望ましい他の材料をさらに含んでもよい。
【００５４】
キットは、さらに、ＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤の投与のための説明書を含んでもよい。例えば、キットは、ＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤を、それを必要とする患者に、同時、順次、または別個に投与するための説明書をさらに含んでもよい。
【００５５】
特定の他の実施形態において、キットは、別々の瓶または別々のホイル包等、別個の組成物を含むための容器を含み得るが、しかしながら、別個の組成物はまた、単一の分割されていない容器内に含まれてもよい。ある特定の実施形態において、キットは、別個の構成成分の投与のための説明書を含む。キットの形態は、別個の構成成分が、好ましくは、異なる投与形態（例えば、経口および非経口）で投与される場合、異なる投与間隔で投与される場合、または、組み合わせの個々の構成成分の滴定が、処方医師により所望される場合に、特に有利である。
【００５６】
本発明の別の態様は、癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するための、別個の容器のＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤を含む、キットを提供する。さらなる実施形態において、キットはまた、ＤＮＡ損傷剤を含む。
【００５７】
本発明の別の態様は、癌等の過剰増殖性疾患の治療または予防のために、組み合わせて使用するための薬学的組成物を、単一パッケージ中の別個の容器に含むキットであって、１つの容器にＣＨＫ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物を含み、２つ目の容器にＷＥＥ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物を含む、キットを提供する。さらなる実施形態において、キットはまた、ＤＮＡ損傷剤を含む。
【００５８】
別の実施形態は、
（ａ）ＣＨＫ１阻害剤と、
（ｂ）ＷＥＥ１阻害剤と、を含む、
癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するための、キットを提供する。
【００５９】
別の実施形態は、
（ａ）ＣＨＫ１阻害剤と、
（ｂ）ＷＥＥ１阻害剤と、
（ｃ）ＤＮＡ損傷剤と、を含む、
癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するための、キットを提供する。
【００６０】
別の実施形態は、
（ａ）ＣＨＫ１阻害剤を含む薬学的組成物と、
（ｂ）ＷＥＥ１阻害剤を含む薬学的組成物と、を含む、
癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するための、キットを提供する。
【００６１】
別の実施形態は、
（ａ）ＣＨＫ１阻害剤を含む薬学的組成物と、
（ｂ）ＷＥＥ１阻害剤を含む薬学的組成物と、
（ｃ）ＤＮＡ損傷剤を含む薬学的組成物と、を含む、
癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するための、キットを提供する。
【００６２】
別の実施形態は、
（ａ）ＣＨＫ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物と、
（ｂ）ＷＥＥ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物と、を含む、
癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するための、キットを提供する。
【００６３】
別の実施形態は、
（ａ）ＣＨＫ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物と、
（ｂ）ＷＥＥ１阻害剤の有効量を含む薬学的組成物と、
（ｃ）ＤＮＡ損傷剤の有効量を含む薬学的組成物と、を含む、
癌等の過剰増殖性疾患を治療または予防するために、組み合わせて使用するための、キットを提供する。
【００６４】
本発明のある特定の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤は、’９２６ＣＨＫ１阻害剤から成る群から選択される。本発明のある特定の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤は、化合物１、化合物２、化合物３、化合物４、化合物５、化合物６、および化合物７からなる群から選択される。本発明のある特定の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤は、化合物１である。本発明のある特定の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤は、化合物２である。本発明のある特定の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤は、化合物３である。本発明のある特定の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤は、化合物４である。本発明のある特定の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤は、化合物５である。本発明のある特定の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤は、化合物６である。本発明のある特定の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤は、化合物７である。
【００６５】
本発明のある特定の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤は、’９２６ＣＨＫ１阻害剤、ＰＦ−００４７７７３６、ＡＺＤ７７６２、ＸＬ８４４、ＩＣ−８３、ＣＨＩＲ−１２４、ＰＤ−３２１８５２、ＬＹ２６０３６１８、ＬＹ２６０６３６８、およびＳＣＨ９００７７６から成る群から選択される。本発明のある特定の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤は、ＰＦ−００４７７７３６、ＡＺＤ７７６２、ＸＬ８４４、ＩＣ−８３、ＣＨＩＲ−１２４、ＰＤ−３２１８５２、ＬＹ２６０３６１８、ＬＹ２６０６３６８、およびＳＣＨ９００７７６から成る群から選択される。本発明のある特定の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤は、’９２６ＣＨＫ１阻害剤、ＰＦ−００４７７７３６、ＡＺＤ７７６２、ＸＬ８４４、ＩＣ−８３、およびＣＨＩＲ−１２４から成る群から選択される。本発明のある特定の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤は、ＰＦ−００４７７７３６、ＡＺＤ７７６２、ＸＬ８４４、ＩＣ−８３、およびＣＨＩＲ−１２４から成る群から選択される。ある特定の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤は、’９２６ＣＨＫ１阻害剤を除外する。
【００６６】
ある特定の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤は、’５８９出願のＣＨＫ１阻害剤および’５９８出願のＣＨＫ１阻害剤から選択される。ある特定の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤は、’５８９出願のＣＨＫ１阻害剤である。ある特定の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤は、’５９８出願のＣＨＫ１阻害剤である。
【００６７】
経口ＣＨＫ１阻害剤は、経口で投与することができるＣＨＫ１阻害剤である。ＣＨＫ１阻害剤を経口で投与する場合、それは、薬学的に許容される担体または賦形剤とともに、丸剤、硬または軟カプセル、錠剤、トローチ剤、水性または油性懸濁液、エマルジョン、分散粉末または顆粒、シロップ、エリキシル等として、製剤化することができる。’９２６ＣＨＫ１阻害剤は、経口ＣＨＫ１阻害剤である。
【００６８】
本発明のある特定の実施形態において、ＷＥＥ１阻害剤は、ＭＫ−１７７５、ＰＤ−１６６２８５、およびＰＦ−００１２０１３０から成る群から選択される。本発明のある特定の実施形態において、ＷＥＥ１阻害剤は、ＭＫ−１７７５およびＰＤ−１６６２８５から成る群から選択される。本発明のある特定の実施形態において、ＷＥＥ１阻害剤は、ＭＫ−１７７５である。本発明のある特定の実施形態において、ＷＥＥ１阻害剤は、ＰＤ−１６６２８５である。本発明のある特定の実施形態において、ＷＥＥ１阻害剤は、ＰＦ−００１２０１３０である。
【００６９】
経口ＷＥＥ１阻害剤は、経口で投与することができるＷＥＥ１阻害剤である。ＷＥＥ１阻害剤を経口で投与する場合、それは、薬学的に許容される担体または賦形剤とともに、丸剤、硬または軟カプセル、錠剤、トローチ剤、水性または油性懸濁液、エマルジョン、分散粉末または顆粒、シロップ、エリキシル等として、製剤化することができる。ＭＫ−１７７５は、経口ＷＥＥ１阻害剤である。
【００７０】
ＣＨＫ１およびＷＥＥ１阻害剤は、互いの投与の前、同時に、または後に、投与することができる。各薬剤の順次投与は、近接した時間であってもよく、または離れた時間であってもよい。
【００７１】
典型的に、ＣＨＫ１およびＷＥＥ１阻害剤は、周囲温度で、適切なｐＨにおいて、所望の純度で、生理学的に許容される担体、すなわち、製剤学的投与形態に採用される用量および濃度において受容者に非毒性である担体と、混合することによって個々に製剤化される。製剤のｐＨは、主に、化合物の特定の使用および濃度に依存するが、約３〜約８の範囲内のいずれかであり得る。ｐＨ５の酢酸緩衝液中の製剤は、好適な実施形態である。一実施形態において、本発明の化合物を含む製剤は、滅菌である。凍結乾燥製剤または水性溶液が許容されるが、化合物は、通常、固体組成物として保管される。
【００７２】
ＣＨＫ１およびＷＥＥ１阻害剤を含む組成物は、優れた医療行為と一貫した方法で、製剤化、投薬、および投与されることになる。この点に関する考慮すべき要因には、治療されている具体的な障害、治療されている具体的な哺乳動物、個々の患者の臨床条件、障害の原因、投与の部位、投与の方法、投与のスケジュール、および開業医に既知の他の要因が挙げられる。
【００７３】
阻害剤は、任意の簡便な投与形態、例えば、錠剤、粉末、カプセル、溶液、分散、懸濁液、シロップ、スプレー、坐薬、ゲル、エマルジョン、パッチ等で投与することができる。このような組成物は、薬学的調製物において従来的な構成成分、例えば、希釈剤、担体、ｐＨ調整剤、甘味剤、充填剤、およびさらなる活性剤を含んでもよい。非経口投与が所望される場合、組成物は、滅菌の、注射または注入に好適な溶液または懸濁液の形態となるであろう。
【００７４】
一般的に、非経口で投与される阻害剤の、１用量当たりの初期薬学的有効量は、約０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲内となり、例えば、１日当たり、約０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ（患者の体重）であり、使用される阻害剤化合物の典型的な初期範囲が０．３〜１５ｍｇ／ｋｇ／日である。このような錠剤およびカプセル等の経口単位投与形態は、約２５〜約１０００ｍｇの阻害剤を含有し得る。
【００７５】
ＣＨＫ１およびＷＥＥ１阻害剤は、経口、舌下、口腔、局所、経皮、非経口、皮下、腹腔内、肺内、および鼻腔内、ならびに局所治療に所望される場合の病巣内投与を含む、任意の好適な手段によって個々に投与することができる。非経口注入には、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、または皮下の投与が含まれる。好適な経口投与形態の例は、約９０〜３０ｍｇの無水ラクトース、約５〜４０ｍｇのクロスカルメロースナトリウム、約５〜３０ｍｇのポリビニルピロリドン（「ＰＶＰ」）Ｋ３０、および約１〜１０ｍｇのステアリン酸マグネシウムと調合された、約２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２５０ｍｇ、または５００ｍｇの阻害剤を含有する錠剤である。粉末成分を、まず一緒に混合し、続いてＰＶＰの溶液と混合する。結果として得られる組成物を、乾燥させ、粉砕し、ステアリン酸マグネシウムと混合し、従来の器具を使用して、錠剤形態に圧縮した。エアロゾール製剤は、例えば、５〜４００ｍｇの阻害剤を、好適な緩衝溶液、例えば、リン酸緩衝液中に溶解し、所望であれば、等張化剤、例えば、このような塩化ナトリウムの塩を添加することによって、調製することができる。溶液を、典型的に、例えば、０．２ミクロンのフィルターを使用して濾過し、不純物および汚染物質を除去する。
【００７６】
別の製剤は、阻害剤と、担体または賦形剤とを混合することによって調製することができる。好適な担体および賦形剤は、当業者に周知であり、例えば、Ａｎｓｅｌ，Ｈｏｗａｒｄ  Ｃ．，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｓｅｌ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ．Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，２００４、Ｇｅｎｎａｒｏ，Ａｌｆｏｎｓｏ  Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ．Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，２０００、およびＲｏｗｅ，Ｒａｙｍｏｎｄ  Ｃ．Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ．Ｃｈｉｃａｇｏ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，２００５に詳細に記載される。製剤はまた、薬物（すなわち、ＣＨＫ１阻害剤および／もしくはＷＥＥ１阻害剤、またはその薬学的組成物）の美しい外観を提供するため、あるいは薬学的生成物（薬剤）の製造を補助するために、１つ以上の緩衝液、安定剤、界面活性剤、湿潤剤、潤滑剤、乳化剤、懸濁化剤、保存剤、酸化防止剤、不透明化剤、滑剤、加工補助剤、着色剤、甘味剤、芳香剤、香味剤、希釈剤、および他の既知の添加剤を含んでもよい。
【００７７】
ＣＨＫ１阻害剤およびＷＥＥ１阻害剤は、少なくとも所望の生物学的効果を達成するレベルで、投与されるべきである。したがって、効果的な投与レジメンは、少なくとも所望の生物学的効果を達成する最低量、または生物学的有効用量で投与を行うことになる。
【００７８】
しかしながら、用量は、生物学的効果の利益を上回り、許容できない副作用を伴うほどに高くあるべきではない。したがって、効果的な投与レジメンは、最大耐量（「ＭＴＤ」）以下で投与を行うことになる。最大耐量は、許容される用量制限毒性（「ＤＬＴ」）の発生をもたらす、最高用量として定義される。許容されない割合のＤＬＴをもたらす用量は、非耐容性とみなされる。典型的に、特定のスケジュールに対するＭＴＤは、第１相臨床試験で確立される。これらは、通常、患者において、げっ歯類において重度の毒性を生じる量（ｍｇ／ｍ２単位で）の１０分の１（「ＳＴＤ１０」）の安全な開始用量で開始し、３人のコホートに患者を集め、漸増ステップが高くなるにつれて、相対的増加量が減少する（例えば、用量の増加が１００％、６５％、５０％、４０％、および３０％、それ以降は３５％）修正されたフィボナッチ数列に従って、用量を増加させることによって行う。用量漸増は、耐容できない用量に達するまで、３人の患者のコホートにおいて継続する。許容される割合のＤＬＴをもたらす、次に低い用量レベルを、ＭＴＤとみなす。
【００７９】
さらに、ＭＴＤは、特定の阻害剤、種、および投与スケジュールに応じて変化する。例えば、７、１４、２１、または２８日の投与周期にわたって、１日目のみ、１日目および２日目、ならびに１日目から３日目の投与を対比すると、全てが異なるＭＴＤを有し得る。さらに、ＣＨＫ１阻害剤を、単独またはＤＮＡ損傷剤と組み合わせて投与すると、異なるＭＴＤを有し得、ＣＨＫ１阻害剤をＷＥＥ１阻害剤と組み合わせて投与した場合も同様である。ＷＥＥ１阻害剤を、単独またはＤＮＡ損傷剤と組み合わせて投与すると、異なるＭＴＤを有し得、ＷＥＥ１阻害剤をＣＨＫ１阻害剤と組み合わせて投与した場合も同様である。しかしながら、上述のように、効果的な投与スケジュールは、生物学的に有効であるために十分に高い阻害剤の投与を行う必要がある。１日目のみの投与は、生物学的有効用量に達することは可能であるが、損傷した細胞のＤＮＡ修復を防ぐためには十分に長くない可能性がある。あるいは、１日目から３日目の投与は、十分に長くあり得るが、生物学的有効用量に達するために十分に高くない可能性がある。これは、３日間の投与のＭＴＤが、生物学的有効用量よりも低いことに起因し得る。したがって、効果的な投与スケジュールは、生物学的有効用量以上のＭＴＤを有することになる。典型的に、癌を治療する際、患者は、治療中に最大限の利益が達成されるように、特定の化合物のＭＴＤで投与される。
【００８０】
本発明の一実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤の所望の生物学的効果は、ｐＣＨＫ１における８０％以上の阻害である。本発明の別の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤の所望の生物学的効果は、ＤＮＡ損傷剤の投与後のｐＣＨＫ１における８０％以上の阻害（ＤＮＡ損傷剤単独の投与と比較して）である。
【００８１】
本発明の別の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤の所望の生物学的効果は、ｐＣＨＫ１における９０％以上の阻害である。本発明の別の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤の所望の生物学的効果は、ＤＮＡ損傷剤の投与後のｐＣＨＫ１における９０％以上の阻害（ＤＮＡ損傷剤単独の投与と比較して）である。
【００８２】
本発明の別の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤の所望の生物学的効果は、ｐＣＨＫ１における９５％以上の阻害である。本発明の別の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤の所望の生物学的効果は、ＤＮＡ損傷剤の投与後のｐＣＨＫ１における９５％以上の阻害（ＤＮＡ損傷剤単独の投与と比較して）である。
【００８３】
本発明の別の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤の所望の生物学的効果は、ｐ−ｃｄｃ２における６６％以上の阻害である。本発明の別の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤の所望の生物学的効果は、ＷＥＥ１阻害剤の投与後のｐ−ｃｄｃ２における６６％以上の阻害（ＷＥＥ１阻害剤単独の投与と比較して）である。本発明の別の実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤の所望の生物学的効果は、ＤＮＡ損傷剤の投与後のｐ−ｃｄｃ２における６６％以上の阻害（ＤＮＡ損傷剤単独の投与と比較して）である。
【００８４】
本発明の一実施形態において、ＷＥＥ１阻害剤の所望の生物学的効果は、ｐ−ｃｄｃ２における８０％以上の阻害である。本発明の別の実施形態において、ＷＥＥ１阻害剤の所望の生物学的効果は、ＤＮＡ損傷剤の投与後のｐ−ｃｄｃ２における８０％以上の阻害（ＤＮＡ損傷剤単独の投与と比較して）である。
【００８５】
本発明の別の実施形態において、ＷＥＥ１阻害剤の所望の生物学的効果は、ｐ−ｃｄｃ２における９０％以上の阻害である。本発明の別の実施形態において、ＷＥＥ１阻害剤の所望の生物学的効果は、ＤＮＡ損傷剤の投与後のｐ−ｃｄｃ２における９０％以上の阻害（ＤＮＡ損傷剤単独の投与と比較して）である。
【００８６】
本発明の別の実施形態において、ＷＥＥ１阻害剤の所望の生物学的効果は、ｐ−ｃｄｃ２における９５％以上の阻害である。本発明の別の実施形態において、ＷＥＥ１阻害剤の所望の生物学的効果は、ＤＮＡ損傷剤の投与後のｐ−ｃｄｃ２における９５％以上の阻害（ＤＮＡ損傷剤単独の投与と比較して）である。
【００８７】
本発明の別の実施形態において、ＷＥＥ１阻害剤の所望の生物学的効果は、ｐ−ｃｄｃ２における６６％以上の阻害である。本発明の別の実施形態において、ＷＥＥ１阻害剤の所望の生物学的効果は、ＣＨＫ１阻害剤の投与後のｐ−ｃｄｃ２における６６％以上の阻害（ＣＨＫ１阻害剤単独の投与と比較して）である。本発明の別の実施形態において、ＷＥＥ１阻害剤の所望の生物学的効果は、ＤＮＡ損傷剤の投与後のｐ−ｃｄｃ２における６６％以上の阻害（ＤＮＡ損傷剤単独の投与と比較して）である。
【００８８】
一実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤は、阻害剤の生物学的有効用量かつ最大耐量で、またはそれらの間で投与される。一実施形態において、ＣＨＫ１阻害剤は、阻害剤の最大耐量で投与される。
【００８９】
一実施形態において、ＷＥＥ１阻害剤は、阻害剤の生物学的有効用量かつ最大耐量で、またはそれらの間で、投与される。一実施形態において、ＷＥＥ１阻害剤は、阻害剤の最大耐量で投与される。
【００９０】
ゲムシタビン、カルボプラチン、およびシスプラチンと組み合わせた、ＭＫ−１７７５のＭＴＤについて、いくらかのデータが、公開されている（Ｌｅｉｊｅｎ，Ｓ．，ｅｔ  ａｌ．“Ａ  ｐｈａｓｅ  Ｉ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｎｄ  ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃ  ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ＭＫ−１７７５，ａ  Ｗｅｅ１  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，ｉｎ  ｍｏｎｏｔｈｅｒａｐｙ  ａｎｄ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ，ｃｉｓｐｌａｔｉｎ，ｏｒ  ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｒｓ．”Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２８：１５ｓ（２０１０）（ｓｕｐｐｌ；ａｂｓｔｒ  ３０６７）；２０１０  ＡＳＣＯ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ、およびＳｃｈｅｌｌｅｎｓ，Ｊ．Ｈ．，ｅｔ  ａｌ．“Ａ  ｐｈａｓｅ  Ｉ  ａｎｄ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ＭＫ−１７７５，ａ  Ｗｅｅ１  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，ｉｎ  ｂｏｔｈ  ｍｏｎｏｔｈｅｒａｐｙ  ａｎｄ  ｉｎ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ，ｃｉｓｐｌａｔｉｎ，ｏｒ  ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｒｓ．”Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２７：１５ｓ（２００９）（ｓｕｐｐｌ；ａｂｓｔｒ  ３５１０）；２００９  ＡＳＣＯ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇを参照されたい）。ゲムシタビン（１０００ｍｇ／ｍ２）と組み合わせての単回投与としてのＭＫ−１７７５のＭＴＤは、２００ｍｇとして報告された。シスプラチン（７５ｍｇ／ｍ２）と組み合わせての単回投与としてのＭＫ−１７７５のＭＴＤは、２００ｍｇとして報告された。カルボプラチン（ＡＵＣ５）と組み合わせての単回投与としてのＭＫ−１７７５のＭＴＤは、３２５ｍｇでとして報告された。ゲムシタビン（１０００ｍｇ／ｍ２）と組み合わせての複数回投与（１日目１日２回、２日目１日２回、および３日目１日１回）としてのＭＫ−１７７５のＭＴＤは、１日目１日２回５０ｍｇ、２日目１日２回２５ｍｇ、および３日目１日１回２５ｍｇとして報告された。シスプラチン（７５ｍｇ／ｍ２）と組み合わせての複数回投与（１日２回５用量の投与）としてのＭＫ−１７７５のＭＴＤは、１２５ｍｇとして報告され、試験は進行中である。カルボプラチン（ＡＵＣ５）と組み合わせての複数回投与（１日２回５日間の投与）としてのＭＫ−１７７５のＭＴＤは、２２５ｍｇとして報告され、試験は進行中である。
【００９１】
本発明のある特定の実施形態において、ＣＨＫ１および／またはＷＥＥ１阻害剤の用量は、２回以上の連日投与に分割されてもよい（すなわち、ＢＩＤ投与は、１日に２回を意味する）。複数回投与は、その日のうちで間隔をあけられてもよい。これにはまた、複数の日における複数回の投与が含まれてもよい。
【００９２】
ある特定の実施形態において、本発明は、癌を治療するための使用または組成物を提供する。ある特定の実施形態において、本発明は、癌を治療するための方法を提供する。より具体的には、本発明の組成物および方法によって治療することができる癌には、軟組織癌：肉腫（血管肉腫、線維肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫）、粘液種、横紋筋腫、線維腫、脂肪腫、および奇形腫、肺：気管支癌（扁平上皮細胞、未分化小細胞、未分化大細胞、腺癌）、肺胞（細気管支）癌腫、気管支線種、肉腫、リンパ腫、軟骨性過誤腫、中皮腫、胃腸：食道（扁平上皮細胞癌、腺癌、平滑筋肉腫、リンパ腫）、胃（癌腫、リンパ腫、平滑筋肉腫）、膵臓（膵管腺癌、膵島細胞腺腫、グルカゴノーマ、ガストリノーマ、カルチノイド腫瘍、ビポーマ）、小腸（腺癌、リンパ腫、カルチノイド腫瘍、カポジ肉腫、平滑筋腫、血管腫、脂肪腫、神経線維腫、線維腫）、大腸（腺癌、管状腺腫、絨毛腺腫、過誤腫、平滑筋腫）、泌尿生殖器：腎臓（腺癌、ウィルムス腫瘍［腎芽細胞腫］、リンパ腫、白血病）、膀胱および尿道（扁平上皮細胞癌、移行細胞癌、腺癌）、前立腺（腺癌、肉腫）、精巣（セミノーマ、奇形腫、胎生期癌、奇形癌、絨毛腫、肉腫、間質細胞癌腫、線維腫、線維腺腫、類腺腫瘍、脂肪腫）、肝臓：肝臓癌（肝細胞癌腫）、胆管癌腫、肝芽腫、血管肉腫、肝細胞腺腫、血管腫、骨：骨原性肉腫（骨肉腫）、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性リンパ腫（細網肉腫）、多発性骨髄腫、悪性巨細胞腫、脊索腫、骨軟骨腫（ｏｓｔｅｏｃｈｒｏｎｆｒｏｍａ）（骨軟骨性外骨腫）、良性軟骨腫、軟骨芽細胞腫、軟骨粘液線維腫、類骨骨腫、および巨細胞腫瘍、神経系：頭蓋（骨腫、血管腫、肉芽腫、黄色腫、変形性骨炎）、髄膜（髄膜腫、髄膜肉腫、神経膠腫症）、脳（星状細胞腫、髄芽細胞腫、神経膠腫、上衣腫、胚細胞腫［松果体腫］、多形性神経膠芽腫、乏突起神経膠腫、神経鞘腫、網膜芽細胞腫、先天性腫瘍）、脊髄神経線維腫、髄膜腫、神経膠腫、肉腫）、婦人科：子宮（子宮内膜癌）、頸部（子宮頸癌、前癌性子宮頸部異形成）、卵巣（卵巣癌腫［漿液性嚢胞腺癌、粘液性嚢胞腺癌、未分類の癌腫］、顆粒膜−莢膜細胞腫、セルトリ−ライディッヒ細胞腫、未分化胚細胞腫、悪性奇形腫）、外陰部（扁平上皮細胞癌、上皮内癌、腺癌、線維肉腫、黒色腫）、膣（明細胞癌、扁平上皮細胞癌、ブドウ状肉腫［胎児性横紋筋肉腫］、卵管（癌腫））、血液学的：骨および骨髄（骨髄性白血病［急性および慢性］、急性リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病、骨髄増殖性疾患、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群）、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫［悪性リンパ腫］、皮膚：悪性黒色腫、基底細胞腫、扁平上皮細胞癌、カポジ肉腫、異形成母斑（ｍｏｌｅｓ  ｄｙｓｐｌａｓｔｉｃ  ｎｅｖｉ）、脂肪腫、血管腫、皮膚線維腫、ケロイド、乾癬、ならびに副腎：神経芽細胞腫が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書に提供される際の「癌性細胞」という用語は、上で特定された状態の任意のものに侵された細胞を含む。
【００９３】
本発明のある特定の実施形態において、癌は、結腸直腸癌（Ｒａｓ突然変異を含む）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、神経膠腫、卵巣癌、転移性乳癌、膵臓癌、肝胆道癌（肝細胞癌、胆管癌、および胆管癌腫を含む）、胃癌、精巣癌、頭頸部扁平上皮細胞癌、白血病（急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、および慢性リンパ性白血病を含む）、リンパ腫（マントル細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、および非ホジキンリンパ腫を含む）、ならびに前立腺癌から選択される。
【００９４】
本発明のある特定の実施形態において、癌は、固形腫瘍癌である。
【００９５】
本発明のある特定の実施形態において、癌は、膵臓癌、卵巣癌、および結腸直腸癌から選択される。
【００９６】
本発明のある特定の実施形態において、癌は、結腸直腸癌（Ｒａｓ突然変異を含む）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、および神経膠腫から選択される。
【００９７】
本発明のある特定の実施形態において、癌は、非小細胞肺癌、卵巣癌、転移性乳癌、膵臓癌、肝胆道癌（肝細胞癌、胆管癌、および胆管癌腫を含む）、ならびに胃癌から選択される。
【００９８】
本発明のある特定の実施形態において、癌は、結腸直腸癌（Ｒａｓ突然変異を含む）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、卵巣癌、肝胆道癌（肝細胞癌、胆管癌、および胆管癌腫を含む）、胃癌、精巣癌、ならびに頭頸部扁平上皮細胞癌から選択される。
【００９９】
本発明のある特定の実施形態において、癌は、白血病（急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、および慢性リンパ性白血病を含む）、リンパ腫（マントル細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、および非ホジキンリンパ腫を含む）、ならびに前立腺癌から選択される。
【０１００】
ある特定の実施形態において、組み合わせは、ＤＮＡ損傷剤と組み合わせることをさらに含む。ＤＮＡ損傷剤には、Ｇｅｍｚａｒ（登録商標）（ゲムシタビン）、Ｃａｍｐｔｏｓａｒ（登録商標）（イリノテカンまたはＣＰＴ−１１）、Ｔｅｍｏｄａｒ（登録商標）（テモゾロミド）、Ｘｅｌｏｄａ（登録商標）（カペシタビン）、Ｈｙｃａｍｔｉｎ（登録商標）（トポテカン）、シスプラチン、Ｅｌｏｘａｔｉｎ（登録商標）（オキサリプラチン）、Ｐａｒａｐｌａｔｉｎ（登録商標）（カルボプラチン）、カンプトセシン、ａｒａ−Ｃ（シタラビン）、５−ＦＵ（フルオロウラシル）、Ｃｙｔｏｘａｎ（登録商標）（シクロホスファミド）、Ｅｔｏｐｏｐｈｏｓ（登録商標）またはＶｅｐｅｓｉｄ（登録商標）（リン酸エトポシド）、Ｖｕｍｏｎ（登録商標）（テニポシド）、Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ  ＰＦＳ（登録商標）またはＡｄｒｉａｍｙｃｉｎ  ＲＤＦ（登録商標）（ドキソルビシン）、ダウノルビシン、Ａｌｉｍｔａ（登録商標）（ペメトレキセド）、および放射線が含まれる。ある特定の実施形態において、ＤＮＡ損傷剤は、ゲムシタビン、イリノテカン、テモゾロミド、カペシタビン、カンプトセシン、シスプラチン、ａｒａ−Ｃ、および５−ＦＵから成る群から選択される。ある特定の実施形態において、ＤＮＡ損傷剤は、ゲムシタビン、イリノテカン、テモゾロミド、およびカペシタビンから選択される。ある特定の実施形態において、ＤＮＡ損傷剤は、ゲムシタビン、イリノテカン、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、およびシタラビンから選択される。ある特定の実施形態において、ＤＮＡ損傷剤は、ゲムシタビンおよびイリノテカンから選択される。ＤＮＡ損傷剤は、その承認または推奨用量で投与される。一実施形態において、ＤＮＡ損傷剤は、最大耐量で投与される。
【０１０１】
ある特定の実施形態において、ＤＮＡ損傷剤は、シスプラチン、オキサリプラチン、およびカルボプラチンから成る群から選択される。
【０１０２】
ある特定の実施形態において、ＤＮＡ損傷剤は、ゲムシタビンである。
【０１０３】
さらなる実施形態において、ＤＮＡ損傷剤は、シタラビンである。
【実施例】
【０１０４】
本発明を例示するために、以下の実施例が含まれる。しかしながら、これらの実施例は、本発明を制限することはなく、本発明を実践する方法を提示する目的のみであることを理解されたい。
実施例１
Ｗｅｅ１に対するｓｉＲＮＡはＣｈｋ１阻害の抗増殖性活性を強化する
【０１０５】
１９７個の遺伝子に対するｓｉＲＮＡ（１個の遺伝子当たり３個のｓｉＲＮＡ）を使用して、合成致死性スクリーニングを、ＰＣ３、ＬＮＣａＰ（２つの独立した実験）、およびＡ５４９細胞系において行った。細胞に、９６ウェルプレート中でｓｉＲＮＡを逆トランスフェクトし、１日後に化合物２またはビヒクルで治療し、次に、治療の３日後にＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｂｌｕｅ生存率アッセイによって分析した。示されるデータは、ＷＥＥ１キナーゼに対する３つのｓｉＲＮＡ（Ａ、Ｂ、およびＣと標識付けした）から得られた結果である。値は、それぞれの個別のプレートに対する全ての値の平均を対照とした、対照のパーセントを表す。
【表１】
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実施例２
Ｃｈｋ１阻害およびＷｅｅ１阻害を組み合わせて細胞増殖を阻害する
【０１０６】
ＨＥＬ９２．１．７細胞を、９６ウェルプレートに蒔き、続いて、単剤として化合物２またはＭＫ−１７７５で治療した。治療の３日後、細胞生存率をＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｂｌｕｅアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）によって評価した。データは、平均±標準誤差を表す（化合物２についてはｎ＝５、ＭＫ−１７７５についてはｎ＝２）。ＩＣ５０は、化合物２については３０ｎＭであり、ＭＫ−１７７５については１０３ｎＭであった。図１および２を参照されたい。ＨＥＬ９２．１．７細胞を、９６ウェルプレートに蒔き、次いで、表示濃度のマトリックス形式で化合物２とＭＫ−１７７５との組み合わせで治療した。治療の３日後、細胞生存率をＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｂｌｕｅアッセイによって評価した。各組み合わせに対する報告値は、組み合わせ指数（実際の読み出しを、化合物が加算された場合に予測されるであろうもので除したものであり、予測値は、互いを乗じた単剤の分画効果である、例えば、それぞれの単剤が、成長を５０％阻害する場合、予測値は、０．５×０．５＝０．２５となる）を表す。データは、２つの独立した実験の平均を表す（３通りのプレートを各独立した実験のために平均化した）。
【表２】
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実施例３
Ｃｈｋ１阻害およびＷｅｅ１阻害を組み合わせてアポトーシスを誘発する
【０１０７】
ＨＥＬ９２．１．７細胞を、２通りの９６ウェルプレートに蒔き、続いて、化合物２またはＭＫ−１７７５で治療した。治療の２日後、１つのプレートを、Ｃａｓｐａｓｅ−Ｇｌｏ３／７アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）によって、もう１つをＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｂｌｕｅアッセイによって、分析した。カスパーゼ活性を細胞数の近似値に対して正規化できるように、Ｃａｓｐａｓｅ−Ｇｌｏ３／７アッセイからの読み出しを、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｂｌｕｅアッセイからの読み出しで除した。グラフは、化合物２およびＭＫ−１７７５の単剤治療によるカスパーゼ３／７の活性化を表す（図３および４を参照されたい）。化合物２およびＭＫ−１７７５を、マトリックス形式で組み合わせた。値は、実際の値を、化合物が加算法で機能した場合に予測されるもので除したものを表す（予測値は、互いを乗じた単剤の分画効果である）。
【表３】
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実施例４
Ｃｈｋ１阻害およびＷｅｅ１阻害は、サイクリン依存性キナーゼの阻害的リン酸化の減少につながる
【０１０８】
ＨＥＬ９２．１．７細胞を、化合物２、ＭＫ−１７７５、または両方の組み合わせ（低濃度の組み合わせ＝３０ｎＭ  化合物２＋７５ｎＭ  ＭＫ−１７７５、中濃度の組み合わせ＝１５０ｎＭ  化合物２＋３７５ｎＭ  ＭＫ−１７７５、高濃度の組み合わせ＝３００ｎＭ  化合物２＋７５０ｎＭ  ＭＫ−１７７５）で、８時間治療した。細胞の溶解物を、次に、チロシン１５でリン酸化されたＣｄｋ２（ＣＤＫ２  ｐＹ１５）およびトレオニン１４およびチロシン１５でリン酸化されたＣｄｃ２（Ｃｄｃ２  ｐＴ１４／Ｙ１５）に特異的な抗体を使用して、ウェスタンブロットによって分析した。バンド強度を、ＧＡＰＤＨローディング対照に対して正規化した。値を、ビヒクル対照に対して正規化して報告する。図５および６を参照されたい。
実施例５
Ｃｈｋ１阻害およびＷｅｅ１阻害は、ＤＮＡ損傷および細胞周期チェックポイント活性化に対する生物学的マーカーの増加につながる
【０１０９】
ＨＥＬ９２．１．７細胞を、化合物２、ＭＫ−１７７５、または両方の組み合わせ（低濃度の組み合わせ＝３０ｎＭ  化合物２＋７５ｎＭ  ＭＫ−１７７５、中濃度の組み合わせ＝１５０ｎＭ  化合物２＋３７５ｎＭ  ＭＫ−１７７５、高濃度の組み合わせ＝３００ｎＭ  化合物２＋７５０ｎＭ  ＭＫ−１７７５）で、８時間治療した。細胞の溶解物を、続いて、セリン１３９でリン酸化されたＨ２Ａ．Ｘ（Ｈ２Ａ．Ｘ  ｐＳ１３９）およびセリン３４５でリン酸化されたＣｈｋ１（Ｃｈｋ１  ｐ３４５）に特異的な抗体を使用して、ウェスタンブロットによって分析した。バンド強度を、ＧＡＰＤＨローディング対照に対して正規化した。値を、ビヒクル対照に対して正規化して報告する。図７および８を参照されたい。
実施例６
Ｃｈｋ１阻害およびＷｅｅ１阻害は、ＤＮＡ複製の崩壊をもたらす
【０１１０】
ＨＥＬ９２．１．７細胞を、化合物２、ＭＫ−１７７５、または両方の組み合わせで、１６時間治療した。細胞を、次いで、製造業者の説明書に従って、Ｃｌｉｃｋ−ｉＴ  ＥｄＵフローサイトメトリーアッセイキット（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）によって分析した。ＤＮＡ複製が崩壊した細胞は、Ｓ期のＤＮＡ量を有するが、ＥｄＵに対する染色は陰性であるとして定義される。図９を参照されたい。
【０１１１】
本発明を、列挙された実施形態とともに説明したが、それらは本発明をこれらの実施形態に限定することを意図したものではないことが理解されるであろう。逆に、本発明は、特許請求の範囲によって定義される本発明の範囲内に含まれ得る、全ての代替例、変形例、および同等物を対象とすることを意図している。したがって、上述の説明は、本発明の原理を例示したものに過ぎない。
【０１１２】
「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、および「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」という用語は、本明細書および以下の特許請求の範囲で使用される場合、明示された特徴、整数、構成要素、またはステップの存在を特定することを意図しているが、１つもしくは複数の他の特徴、整数、構成要素、ステップ、またはそれらの群の存在または追加を排除するものではない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【国際調査報告】
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