(57)【要約】  有効量のインターロイキン（たとえばＩＬ−２）またはその断片もしくは誘導体の粘膜投与を含む、異常な炎症および炎症状態の処置方法をここに提供する。このインターロイキンまたは断片もしくは誘導体を含む、異常な炎症および炎症状態の処置のための粘膜投与用医薬組成物もここに提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効量のインターロイキンまたはその断片もしくは誘導体を対象に粘膜投与するステップを含む、対象における異常な炎症または炎症状態の処置方法。
【請求項２】
前記インターロイキンが組換えヒトインターロイキンである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記インターロイキンがインターロイキン−２（ＩＬ−２）である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記粘膜投与が経口投与である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記投与が頬側または舌下である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記炎症状態が慢性の炎症性疾患である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記炎症状態が、関節炎、副鼻腔炎、アレルギー性障害、乾癬、ざ瘡、炎症性腸疾患、慢性疲労症候群、自己免疫障害、シェーグレン症候群、前立腺の炎症、尿路の炎症、膵炎、血管炎、糖尿病、足の炎症および月経痛から選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記関節炎が関節リウマチである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記アレルギー性障害が喘息である、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
前記自己免疫障害が全身性エリテマトーデスである、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
前記足の炎症が痛風または関連する症状である、請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
前記インターロイキンが１種または複数種の薬学的に許容される担体、添加剤または希釈剤を含む医薬組成物中に配合されている、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記医薬組成物が固形単位剤形である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記固形単位剤形が錠剤またはカプセル剤を含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記医薬組成物がゲルの形態である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
１種または複数種の追加の抗炎症薬剤の投与をさらに含む、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
インターロイキンまたはその断片もしくは誘導体を、任意選択で１種または複数種の薬学的に許容される担体、添加剤および／または希釈剤と一緒に含む、異常な炎症または炎症状態の処置のための粘膜投与用医薬組成物。
【請求項１８】
有効量の第２の態様の組成物を対象に粘膜投与するステップを含む、対象における異常な炎症または炎症状態の処置方法。
【請求項１９】
異常な炎症または炎症状態の処置用であり、粘膜投与される薬剤を製造するための、インターロイキンまたはその断片もしくは誘導体の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、全般的には炎症状態（症状）の処置に使用する方法および組成物に関する。本発明は、特に、インターロイキン、具体的にはインターロイキン−２（ＩＬ−２）の粘膜送達を伴うかかる処置に関する。本発明は、より特定すれば、ＩＬ−２を含む組成物の舌下投与に関する。
【背景技術】
【０００２】
炎症とは、感染および損傷から身体を保護するのを助ける、正常で生命維持に必要な反応機序である。しかし異常なまたは制御の効かない炎症反応によって、急性または慢性の、炎症障害または炎症状態（症状）が発症する恐れがある。慢性の炎症状態は罹患者を衰弱させ、甚大な不快感および痛みの原因となりうる。さらに、関節リウマチなどの炎症状態は、世界中の人々が高齢化するにつれて罹患率が増加している。
【０００３】
従来の化学に基づいた炎症状態の処置の１つの根本的な欠点は、これらの薬剤が、症状の根底にある病態生理に対処するよりも、むしろ症状に関連する痛みの軽減しか目的としていないことである。胃潰瘍および胃の出血を含む重大な副作用も継続的なステロイドの使用に関連している。たとえば、抗炎症治療において非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）が長年使用されてきたが、ＮＳＡＩＤは、処置期間および薬物の種類によっては胃腸管内に病変を発生させることが周知である。この問題は、炎症の症状および関連する痛みを制御するために長期の処置が必要な、関節リウマチを含む慢性の炎症障害の処置など、治療が長期に及ばざるを得ない場合に特に重要である。
【０００４】
したがって、かかる副作用を低減し、疾患の進行を緩慢にし、または抑制しようとする中で、生物学的薬剤に基づいた治療の開発に関心が高まっている。
【０００５】
さらに、ほとんどの炎症性疾患および自己免疫疾患が長期の処置を必要とする慢性疾患であるため、医師または他の医療従事者による投与を必要とする注射による治療および処置は理想的ではない。したがって、これに代わる治療およびこれに代わる投与手法の開発が多くの研究の焦点となっている。
【０００６】
一部のがんの処置に有望であると考えられている１つの生物学的薬剤がサイトカインのインターロイキン−２（ＩＬ−２）である。組換え型のインターロイキン−２、アルデスロイキン（プロロイキン（Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ）（登録商標））は、転移性黒色腫および腎細胞癌の注射による処置用としてＦＤＡの承認を受けた。しかし現在までのところ、治療目的でのＩＬ−２の広範で効果的な使用は、その投与に関連する重大な副作用によって大幅に阻害されている。その理由は、静脈内または皮下の送達方法が必要とされ、それに関連して注射による任意の治療有用性を達成するために高用量が必要であることによるところが大きい。全身ＩＬ−２治療を受けている患者は、インフルエンザ様症状になることが多い。低血圧症、貧血および血小板数の低下も、静脈内投与に必要な高累積用量と関連している。現在利用可能な静脈内または皮下のＩＬ−２投与に関連する最も重度の毒性は、毛細血管透過性を増加させる分子の能力によるものであり、これは、低血圧症、腹水、全身性浮腫および肺水腫を引き起こす恐れがある。毛細血管漏出症候群は、最終的には重篤な低血圧および血流の減少、心臓および肺の異常、体液貯留、精神的変化、腎臓の異常ならびに／または胃腸の異常につながる恐れがある。これらの影響は重大である場合があり、死に至る可能性がある。
【０００７】
ＩＬ−２を静脈内または皮下に注射する必要性は、自己投薬を行い、自分自身の処置レジメンを管理する個々の能力も阻害する。したがって、炎症状態の罹患者が、痛みも副作用も伴わず、簡便に自分自身で投薬することができる、簡易で低コストの処置選択肢の開発が求められている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
ＩＬ−２の継続的な治療適用は、現在、その毒性が大きく、臨床的奏功率が比較的高くないことを考慮に入れて、慎重に評価されている最中である。しかし、本発明者は、今や驚くべきことに、予想に反して、ＩＬ−２の粘膜送達が、現在利用可能な注射による送達を上回る実質的な治療有用性をもたらすことを発見した。この治療有用性には、現在利用可能な全身送達に必要な用量と比較してきわめて少ない用量で、有効な処置を達成することができる能力が含まれる。これによって、本発明は、副作用が少なく、患者が自分自身で投薬することができる、コスト効率のよい、炎症状態の有効な治療処置のための、実現性のある新たな選択肢を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
第１の態様によれば、本発明は、有効量のインターロイキンまたはその断片もしくは誘導体を対象に粘膜投与するステップを含む、対象における異常な炎症または炎症状態の処置方法を提供する。
【００１０】
インターロイキンは、組換えヒトインターロイキンとすることができる。典型的には、インターロイキンはインターロイキン−２（ＩＬ−２）である。
【００１１】
典型的には粘膜投与は経口投与であり、より典型的には投与は頬側または舌下である。
【００１２】
炎症状態は、慢性の炎症性疾患であってもよく、たとえば、関節リウマチなどの関節炎、副鼻腔炎、喘息などのアレルギー性障害、乾癬、ざ瘡、炎症性腸疾患、慢性疲労症候群、全身性エリテマトーデスなどの自己免疫障害、シェーグレン症候群、前立腺の炎症、尿路の炎症、膵炎、血管炎、糖尿病、痛風を含む足の炎症、および月経痛から選択されてもよい。
【００１３】
インターロイキンは、経口送達、典型的には舌下または頬側送達に好適な任意の形態、たとえば固体または液体の単位剤形などで投与することができる。
【００１４】
この方法には、１種または複数種の抗炎症薬剤の投与をさらに含めることができる。かかる薬剤は、インターロイキンと同じ経路でも異なる経路でも投与することができる。複数種の薬剤の投与は逐次でも同時でもよい。
【００１５】
第２の態様によれば、本発明は、インターロイキンまたはその断片もしくは誘導体を、任意選択で１種または複数種の薬学的に許容される担体、添加剤および／または希釈剤と一緒に含む、異常な炎症または炎症状態の処置のための粘膜投与用医薬組成物を提供する。
【００１６】
第３の態様によれば、本発明は、有効量の第２の態様の組成物を対象に粘膜投与するステップを含む、対象における異常な炎症または炎症状態の処置方法を提供する。
【００１７】
第４の態様によれば、本発明は、異常な炎症または炎症状態の処置用であり、粘膜投与される薬剤を製造するための、インターロイキンまたはその断片もしくは誘導体の使用を提供する。
【００１８】
異常な炎症または炎症状態の処置方法におけるインターロイキンまたはその断片もしくは誘導体の使用も提供される。
【００１９】
上記の各態様に従って、インターロイキンは、インターロイキンをコードするポリヌクレオチドの形態で投与することができる。ポリヌクレオチドは遺伝子構築物中に配置され、プロモーターに作動可能に連結されていてもよい。
【００２０】
本発明の実施形態を、単に例示として、添付の図面を参照しながら以下に説明する。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】誘発性関節リウマチのラットの右後肢で、組換えヒトＩＬ−２を非経口（Ｉｎｊ）または舌下（Ｓｕｂ）投与した後に測定した腫脹（腫脹スコア）。舌下低用量＝４０００ＩＵ／体重ｋｇ、１日２回、７日間、舌下高用量＝１２０００ＩＵ／体重ｋｇ、１日２回、７日間、注射低用量＝４０００ＩＵ／体重ｋｇ、１日２回、７日間、注射高用量＝１６０００ＩＵ／体重ｋｇ、１日２回、７日間。
【図２】右後肢が誘発性関節リウマチのラットの障害のない３本の肢で、組換えヒトＩＬ−２を３日間（Ａ）または７日間（Ｂ）非経口（Ｉｎｊ）または舌下（Ｓｕｂ）投与した後に測定した腫脹（ＲＡ指数）。舌下低用量＝４０００ＩＵ／体重ｋｇ、１日２回、７日間、舌下高用量＝１２０００ＩＵ／体重ｋｇ、１日２回、７日間、注射低用量＝４０００ＩＵ／体重ｋｇ、１日２回、７日間、注射高用量＝１６０００ＩＵ／体重ｋｇ、１日２回、７日間。
【図３】誘発性副鼻腔炎のラットにおける、組換えヒトＩＬ−２を１４日間舌下（Ｓｕｂ）投与した後の副鼻腔炎の測定値。舌下低用量＝１０００ＩＵ／ｋｇ、１日２回、７日間、その後は１日置き、舌下高用量＝４０００ＩＵ／ｋｇ、１日２回、７日間、その後は１日置き。（Ａ）胸腺指数−体重１００ｇ当たりの胸腺重量（ｇ）。（Ｂ）脾臓指数−体重１００ｇ当たりの脾臓重量（ｇ）。
【図４】誘発性副鼻腔炎のラットの、組換えヒトＩＬ−２を１４日間舌下（Ｓｕｂ）投与した後の、鼻擦りの頻度、くしゃみ、および鼻汁の程度によって測定した行動値。舌下低用量＝１０００ＩＵ／ｋｇ、１日２回、７日間、その後は１日置き、舌下高用量＝４０００ＩＵ／ｋｇ、１日２回、７日間、その後は１日置き。
【図５】ヒト被験者の肘および手を冒している乾癬の、ＩＬ−２、１日５０００ＩＵを２か月舌下投与した後の変化を示す画像。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
ヌクレオチド配列は、配列識別番号（配列番号）で表される。配列番号は、配列識別子＜４００＞１（配列番号１）、＜４００＞２（配列番号２）などに数字で符合する。具体的には、配列番号１で規定されたアミノ酸配列はヒトＩＬ−２の前駆体型を表し、配列番号２で規定されたアミノ酸配列は、ヒトＩＬ−２の成熟型を表す。ヒトＩＬ−２をコードするヌクレオチド配列は配列番号３で規定される。
【００２３】
本明細書および続く特許請求の範囲を通して、文脈上他の意味が要求されない限り、単語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などの変型は、記載した要素、整数もしくはステップ、または要素、整数もしくはステップの群の包含を意味するが、他の要素、整数もしくはステップ、または要素、整数もしくはステップの群のいずれの排除も意味するものではないことが理解されるであろう。
【００２４】
冠詞「ａ」および「ａｎ」は、本明細書において、１つのまたは２つ以上（すなわち少なくとも１つの）、その冠詞の文法上の目的語に言及するために使用される。例として、「要素（ａｎ  ｅｌｅｍｅｎｔ）」は１つの要素または２つ以上の要素を意味する。
【００２５】
本明細書で使用する場合、用語「有効量」は、その意味の範疇に、薬剤または化合物の、所望の治療効果を提供するために無毒性であるが十分である量を含む。必要とされる厳密な量は、処置されることになる種、対象の年齢および総体的な状態、処置されている症状の重症度、投与されている特定の薬剤ならびに投与方法などの要因によって対象毎に変化するであろう。したがって厳密な「有効量」を特定することは不可能である。しかし、任意の所与のケースについて、当業者は日常の実験のみを使用して適切な「有効量」を決定することができる。
【００２６】
本明細書で使用する場合、用語「処置する（治療する）」および「処置（治療）」は、疾患の状態または症状を治し、疾患の罹患を防止し、あるいはどんな形にせよ疾患または他の望ましくない症状の進行を防止、阻止、遅延または抑制するありとあらゆる慣習を指す。したがって、「処置」は個体において症状を治癒または除去するためにデザインされた処置のみならず、症状の発生を制御および抑制するためにデザインされた進行中の治療のことも指す。処置は一定の期間としてもよいし、任意の所与の個体の特定の事情によっては継続的に提供されてもよい。
【００２７】
本明細書で使用する場合、用語「ポリペプチド」は、ペプチド結合で一緒に結合したアミノ酸でできているポリマーを意味する。用語「ポリペプチド」および「タンパク質」は、本明細書では交換可能に使用されるが、本発明の目的では、「ポリペプチド」は完全長タンパク質の一部を構成する場合がある。本明細書で使用する用語「ポリヌクレオチド」は、一本鎖または二本鎖ポリマーの、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド塩基もしくは既知の類似体もしくは天然のヌクレオチドまたはこれらの混合物のことである。
【００２８】
本発明は、種々の炎症状態のｉｎ  ｖｉｖｏモデルにおいて、組換えＩＬ−２を舌下投与すると、実質的で統計学的に有意な治療有用性があり、明らかな毒性はないという、本発明者の驚くべき発見に基づいている。さらに、本明細書で例示するとおり、この粘膜投与は実質的に用量非依存性である。これは従来技術の注射による投与とは対照的である。従来技術の注射による投与では、類似の治療効果を達成するためにより高用量が通常必要であり、投与されることになる用量で、副作用および毒性が必然的に発生する。
【００２９】
したがって、本発明は、種々の炎症状態のための新規な治療処置の選択肢に、現在利用可能な全身処置では広く観察される副作用をなくす、または軽減するような低投与量を付与する。これまでのところ、炎症状態の処置のためのＩＬ−２治療は静脈内または皮下でのみ試みられている。かかる投与には高用量のインターロイキンが必要であり、そのレベルはＩＬ−２などのサイトカインが作用して細胞応答を自然に仲介するレベルに対して異常なほど高いと考えられる。このような高用量では、患者に重大な副作用が発生する。
【００３０】
治療に有効なインターロイキンの粘膜投与という本発明者の新規な発見は、現在利用可能な注射治療に対して、コスト効率のよい、無毒性の治療選択肢の開発に道を開くものである。
【００３１】
したがって、１つの態様において、本発明は、有効量のインターロイキンまたはその断片もしくは誘導体を対象に粘膜投与するステップを含む、対象における炎症状態の処置方法を提供する。
【００３２】
本発明による使用のために、インターロイキンは、たとえば、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５またはＩＬ−１８から選択することができる。特定の実施形態では、インターロイキンはＩＬ−２であり、典型的にはヒトＩＬ−２であり、より典型的には組換えヒトＩＬ−２である。
【００３３】
本発明の方法および組成物において使用されるインターロイキンは、天然、組換えまたは合成であってもよく、好適な供給源から精製することによって得ることができ、または当業者に周知の、たとえば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ（この開示は参照によって本明細書に組み込まれる）に記載されている技術などの標準的な組換えＤＮＡ技術によって生成することができる。当業者は、本発明に従って使用されることになるインターロイキンの厳密な配列は、複数の要因、たとえば処置されることになる種および／または炎症状態によって変化する場合があることを理解するであろう。「インターロイキン（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ）」または「複数のインターロイキン（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎｓ）」への言及は、すべての形態の当該分子ならびにその機能性誘導体、変異体およびホモログ（同族体）のことであると理解されるべきである。これには、たとえば、対象のインターロイキンｍＲＮＡの選択的スプライシングから生じる任意のアイソフォームまたはこれらのタンパク質の機能性突然変異体もしくは多型変異体が含まれる。本発明の範囲内には、完全長成熟インターロイキンと共通する質的な生物学的活性をもつホモログまたは模倣物も包含される。さらに、本発明は、インターロイキンポリペプチドの使用のみならず、インターロイキンポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの使用も企図する。
【００３４】
インターロイキンの「誘導体」には、天然または非天然の供給源の類似体、機能性断片、部分、一部または変異体が含まれる。非天然の供給源には、たとえば、組換えまたは合成の供給源が含まれる。「組換え供給源」は、対象の分子が採取される細胞供給源が遺伝子改変されていることを意味する。「類似体」はインターロイキンの誘導体であるポリペプチドを意味し、誘導体は、ポリペプチドがその誘導元である原インターロイキンと実質的に同一の機能を維持するように、１つまたは複数のアミノ酸を付加、欠失、置換することを含む。修飾は、インターロイキンの生物学的活性もしくは発現レベルを高めたり、またはポリペプチドの効力を増加させたりして、所望の結果を達成するために行うことができる。用語「保存的アミノ酸置換」は、ポリペプチド鎖（タンパク質の一次配列）内で、１つのアミノ酸を、類似の特性を有する別のアミノ酸と置換または交換することを指す。たとえば、荷電したアミノ酸のグルタミン酸（Ｇｌｕ）と、同様に荷電したアミノ酸のアスパラギン酸（Ａｓｐ）との置換は、保存的アミノ酸置換ということになる。アミノ酸挿入誘導体には、アミノ末端融合および／またはカルボキシル末端融合ならびに単一アミノ酸または複数のアミノ酸の配列内挿入も含まれる。挿入アミノ酸配列変異体は、１つまたは複数のアミノ酸残基がタンパク質中の所定の部位に導入されているものであるが、得られる生成物の好適なスクリーニングによって、ランダムな挿入も可能である。欠失変異体は、１つまたは複数のアミノ酸を配列から除去することによって特徴づけられる。置換アミノ酸変異体は、配列中の少なくとも１つの残基が除去され、異なる残基がその場所に挿入されているものである。
【００３５】
用語「断片」は完全長インターロイキンの構成要素であるポリペプチドを指す。断片は、通常、完全長インターロイキンと共通する質的な生物学的活性を備えている。断片は、完全長インターロイキンポリペプチドから誘導することができ、または何らかの他の手段、たとえば化学合成によって合成することができる。本明細書で使用する場合、インターロイキンの「変異体」は、変異体の元であるインターロイキンと実質的に類似の配列の分子であって、変異体の元であるインターロイキンの少なくとも一部の機能活性を呈する分子を意味する。変異体は任意の形態をとることができ、天然でも非天然でもよい。概して、変異体ポリペプチドは、少なくとも２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の配列同一性を共有することができる。
【００３６】
本明細書で使用する場合、「ホモログ（同族体）」は、インターロイキンが、本発明に従って処置されている種以外の種から誘導されていることを意味する。これは、たとえば、処置されている種以外の種が、処置を受けている対象が自然に生成するインターロイキンの特徴と類似した好適な機能的特徴を呈するある形態のインターロイキンを生成することが確認された場合に起こり得る。
【００３７】
本発明の特定の実施形態によれば、投与されることになるインターロイキンは、組換えヒトＩＬ−２などのヒトＩＬ−２である。完全長ヒトＩＬ−２は、配列番号１（前駆体型）または配列番号２（成熟型）に規定されているアミノ酸配列を有し、その原形態では約１５，５００Ｄａのグリコシル化タンパク質である。
【００３８】
本発明の実施形態は、上記のインターロイキンポリペプチドをコードするポリヌクレオチドの形態でのインターロイキンの投与も提供する。典型的には、ポリヌクレオチドはヒトＩＬ−２をコードしている。たとえば、本発明のＩＬ−２ポリヌクレオチドは、配列番号３に規定されているヌクレオチド配列を有することができる。完全長ヒトポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに加えて、本発明は、そのホモログ、断片および変異体をコードするポリヌクレオチドの使用も企図している。
【００３９】
本発明の特定の実施形態において、ポリヌクレオチドはベクターで投与することができる。ベクターは、外来性配列の挿入ならびに真核細胞への導入に適した、プラスミドベクター、ウイルスベクター、または他の任意の好適なビヒクルとすることができる。通常、ベクターは、所望のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドのＤＮＡ配列の、ｍＲＮＡへの転写を指示することができる発現ベクターである。ベクターには、プロモーター、エンハンサー、リボソーム結合部位、ポリアデニル化シグナルおよび転写終結配列などの、発現調節およびプロセシング配列を含めることができる。好適なウイルス発現ベクターの例には、たとえば、エプスタイン・バーウイルス（Ｅｐｓｔｅｉｎ−ｂａｒｒ  ｖｉｒｕｓ）、ウシパピローマウイルス（ｂｏｖｉｎｅ  ｐａｐｉｌｌｏｍａ  ｖｉｒｕｓ）、アデノウイルス（ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ）およびアデノ随伴ウイルス（ａｄｅｎｏ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｖｉｒｕｓ）ベースのベクターが含まれる。ベクターはエピソーム性とすることができる。
【００４０】
本発明の方法および組成物には、慢性の炎症性疾患を含む一連の炎症状態の処置において用途が見出される。炎症状態は、単に例示として、関節リウマチなどの関節炎、副鼻腔炎、喘息などのアレルギー性障害、乾癬、ざ瘡、炎症性腸疾患、慢性疲労症候群、全身性エリテマトーデスなどの自己免疫障害、シェーグレン症候群、前立腺の炎症、尿路の炎症、足の炎症、膵炎、血管炎、糖尿病、痛風を含む足の炎症、および月経痛から選択されてもよい。しかし、本発明は本明細書に明示的に列挙したこれらの症状に限定されるものではなく、活性剤の粘膜投与による処置をする余地のある任意の炎症状態の処置に適用可能であることを、当業者は容易に理解するであろう。
【００４１】
本発明は、インターロイキンの粘膜送達のための方法および組成物を提供する。インターロイキンの粘膜投与は好ましくは経口投与であるが、他の鼻腔内の投与、たとえば吸入も企図する。経口投与は、典型的には舌下または頬側投与を含み、これによって組成物が舌下または頬嚢の中に置かれて頬側粘膜と接触し、活性剤は吸収によって直接血流に入ることができる。経口投与剤の好適な形態には、固形剤、液剤、乳剤、ゲル剤および懸濁剤が含まれる。特定の実施形態では、本発明の組成物は固形単位剤形、たとえば錠剤、カプセル剤、カプレットまたはトローチ剤の形態で投与される。１つの実施形態では、投与剤には、鼻、頬側または舌下領域に投与されるゲル剤を含めることができる。たとえば、インターロイキンが所与の液剤中で不安定である場合、これは、凍結乾燥したインターロイキンの粉末を、希釈剤、たとえばハチミツまたはカルボキシメチルセルロース、デキストラン、マルトデキストリン、ゴム、アルブミン、糖、たとえばデキストロース、マルトース、マンニトールなどを加えた水の中に溶解することによって克服することができる。ハチミツは、インターロイキンの免疫応答を助けることができる多くの抗原を含有するため、特に有用である。
【００４２】
一般的に、好適な組成物は、当業者に公知の方法によって調製することができ、薬学的に許容される希釈剤、補助剤および／または添加剤を含めることができる。希釈剤、補助剤および添加剤は組成物の他の成分と適合性があり、その受け手に対して有害でないという観点で「許容される」ものでなければならない。
【００４３】
薬学的に許容される希釈剤の例は、脱塩水または蒸留水；食塩水；植物系の油、たとえばピーナッツ油、サフラワー油、オリーブ油、綿実油、トウモロコシ油、ゴマ油、たとえばピーナッツ油、サフラワー油、オリーブ油、綿実油、トウモロコシ油、ゴマ油、ラッカセイ油またはヤシ油；ポリシロキサンを含むシリコーン油、たとえばメチルポリシロキサン、フェニルポリシロキサンおよびメチルフェニルポリシロキサン；揮発性シリコーン；鉱油、たとえば流動パラフィン、軟パラフィンまたはスクアラン；セルロース誘導体、たとえばメチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース；低級アルカノール、たとえばエタノールまたはイソ−プロパノール；低級アラルカノール（ａｒａｌｋａｎｏｌ）；低級ポリアルキレングリコールまたは低級アルキレングリコール、たとえばポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコールまたはグリセリン；脂肪酸エステル、たとえばパルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピルまたはオレイン酸エチル；ポリビニルピロリドン；カンテン；カラゲナン；トラガントゴムまたはアラビアゴムおよびワセリンである。希釈剤は、デキストラン、デキストリン、デキストロース、スクロース、マルトース、マンニトール、ゼラチン、アルファ化デンプン、デンプン、アミノ酸トレハロース、カルボキシメチルセルロース、セルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、アルブミンおよびプロピレングリコールでもよい。通常、１種または複数種の担体は、組成物の０．１重量％〜９９．９重量％を形成することになろう。
【００４４】
本発明の特定の実施形態では、インターロイキン、たとえばＩＬ−２は、経口投与、最も典型的には舌下投与に好適な、錠剤、カプセル剤またはトローチ剤などの固形単位剤形の形態で投与される。好適な固体組成物には、薬学的に許容される水溶性または水分散性の担体材料中にインターロイキンを含む、急速崩壊性または緩慢崩壊性組成物を含めることができる。かかる組成物は、舌下に置いたり頬嚢の中に挿入したりすると、口の中で崩壊または溶解することができる。組成物は、インターロイキンの速放性もしくは即放性または遅延放出もしくは制御放出用に配合されうる。活性剤の遅延放出または制御放出を達成するための技術およびプロセスは当業者に周知である。
【００４５】
かかる剤形の広範囲な調製プロセスは、当業者に周知であり、本発明によって企図されている。たとえば、好適な製剤は、真空下での凍結乾燥、超臨界流体乾燥、熱を使用する噴霧乾燥および流動床噴霧乾燥を含むプロセスによって調製することができる。本発明の特定の実施形態の文脈で適用可能なものは、通常溶媒を使用して活性成分が顆粒剤、錠剤または微粒子剤上に被覆されるマイクロカプセル化を伴うプロセスである。１つの特に好適なプロセスは、国際公開第０２／０５８７３５号パンフレット（この開示はその内容全体において参照によって本明細書に組み込まれる）に記載されているとおり、室温で、ポリペプチドを含む活性物を、水可溶性の被覆剤で顆粒剤上に被覆するのを容易にする流動床噴霧プロセスを使用するというものである。水溶性の糖またはゲル形成粒子などの微粒子はこのようにして被覆されうる。あるいはブランク錠剤、トローチ剤またはカプセル剤の核は噴霧被覆されうる。頬側粘膜および舌下粘膜の活性剤の透過性を増強するために、透過促進剤として発砲剤を組み入れている経口用組成物の調製手段も当該技術分野において公知である（たとえば米国特許第６，９７４，５９０号明細書を参照されたい。この開示はその内容全体において参照によって本明細書に組み込まれる）。本発明が企図する他の送達方式には、生体付着剤、粘膜付着剤およびリポソームの使用が含まれる。
【００４６】
本発明の組成物は、リポソームの形態で投与することもできる。リポソームはリン脂質または他の脂質物質から誘導することができ、水性媒体中に分散した単層または多層の水和液晶によって形成される。標的細胞に組成物を投与または送達するのに使用されるリポソームの具体的な例は、ＤＯＤＭＡ、合成コレステロール、ＤＳＰＣ、ＰＥＧ−ｃＤＭＡ、ＤＬｉｎＤＭＡまたは任意の他の、リポソームを形成することができる無毒性で生理学的に許容される代謝可能な脂質である。リポソーム形態の組成物は、安定化剤、防腐剤および／または添加剤を含有することができる。リポソームの調製方法は当該技術分野において周知であり、たとえばＭｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌｕｍｅ  ＸＩＶ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．（１９７６），ｐ．３３ｆｆ．を参照されたく、その内容は参照によって本明細書に組み込まれる。
【００４７】
本発明の組成物は、微粒子の形態で投与することもできる。ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリ乳酸−ｃｏ−グリコリド（ＰＬＧＡ）およびイプシロン−カプロラクトン（ε−カプロラクトン）から形成される生分解性の微粒子を使用することができる。
【００４８】
本発明の組成物は、スクロースアセタートイソブチラート（ＳＡＩＢ）と有機溶媒または有機溶媒の混合物とから構成される制御放出マトリックスを組み入れることができる。放出速度を低減するためにポリマー添加物を添加して粘度をさらに高めてもよい。
【００４９】
当業者は、本発明による好適な経口用組成物を製造するために複数の好適なプロセスおよび技術が存在すること、および本発明はいずれか１つの特定のプロセスまたは技術を参照することによって限定されるものではないことを容易に理解するであろう。
【００５０】
経口投与用の固体形態はヒトおよび動物の薬務において許容される結合剤、甘味料、崩壊剤、希釈剤、香味料、被覆剤、防腐剤、滑沢剤および／または時間遅延剤（ｔｉｍｅ  ｄｅｌａｙ  ａｇｅｎｔ）を含有することができる。好適な結合剤には、アラビアゴム、ゼラチン、トウモロコシデンプン、アルファ化デンプン、トラガントガム、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースまたはポリエチレングリコールが含まれる。好適な甘味料には、スクロース、ラクトース、グルコース、アスパルテームまたはサッカリンが含まれる。好適な崩壊剤には、トウモロコシデンプン、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、グアーガム、キサンタンガム、ベントナイト、アルギン酸またはカンテンが含まれる。好適な希釈剤には、ラクトース、ソルビトール、マンニトール、デキストロース、カオリン、セルロース、炭酸カルシウム、ケイ酸カルシウムまたはリン酸二カルシウムが含まれる。好適な香味剤には、ハッカ油、ウインターグリーン、チェリー、オレンジまたはラズベリーの香味の油が含まれる。好適な被覆剤には、アクリル酸および／もしくはメタクリル酸のポリマーもしくはコポリマーおよび／またはそれらのエステル、ワックス、脂肪族アルコール、ゼイン、セラックまたはグルテンが含まれる。好適な防腐剤には、安息香酸ナトリウム、ビタミンＥ、α−トコフェロール、アスコルビン酸、メチルパラベン、プロピルパラベンまたは重亜硫酸ナトリウムが含まれる。好適な滑沢剤には、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、オレイン酸ナトリウム、塩化ナトリウムまたはタルクが含まれる。好適な時間遅延剤には、モノステアリン酸グリセリンまたはジステアリン酸グリセリンが含まれる。
【００５１】
経口投与用の液体形態は、上記の薬剤に加えて、液体担体を含有することができる。好適な液体担体には、水、油、たとえばオリーブ油、ピーナッツ油、ゴマ油、ヒマワリ油、サフラワー油、ラッカセイ油、ヤシ油、流動パラフィン、エチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、グリセロール、脂肪族アルコール、トリグリセリドまたはこれらの混合物が含まれる。
【００５２】
経口投与用の懸濁剤には、分散剤および／または懸濁化剤をさらに含めることができる。好適な懸濁化剤には、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース、ポリ−ビニル−ピロリドン、アルギン酸ナトリウムまたはアセチルアルコールが含まれる。好適な分散剤には、レシチン、ステアリン酸などの脂肪酸のポリオキシエチレンエステル、モノオレイン酸もしくはジオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール、モノステアリン酸もしくはジステアリン酸ポリオキシエチレンソルビトールまたはモノラウリン酸もしくはジラウリン酸ポリオキシエチレンソルビトール、モノオレイン酸もしくはジオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン、モノステアリン酸もしくはジステアリン酸ポリオキシエチレンソルビタンまたはモノラウリン酸もしくはジラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタンなどが含まれる。
【００５３】
経口投与用の乳剤には、１種または複数種の乳化剤をさらに含めることができる。好適な乳化剤には、上記に例示した分散剤、またはグアーガム、アカシアゴムもしくはトラガントガムなどの天然ゴムが含まれる。
【００５４】
本発明の組成物の治療有効量レベルは、いずれの特定の患者に対しても、医療において周知の他の関連要因とともに、以下のいずれか１つまたは複数を含む種々の要因に依存するであろう。処置されている炎症状態の種類および炎症状態の段階、使用する活性剤の活性、使用する組成物、年齢、体重、患者の総体的な健康、性別および食習慣、投与時間、化合物の金属イオン封鎖速度、処置期間、処置と組み合わせてまたは同時に使用する薬物。
【００５５】
当業者であれば、日常の実験によって、適用可能な腫瘍の処置に必要とされることになる有効な無毒性の投与量を決定することができるであろう。これは個別に決められることがきわめて多いであろう。
【００５６】
本発明の特定の実施形態では、インターロイキン、たとえばＩＬ−２の好ましい用量は、１日当たり約１ＩＵ〜約３００万ＩＵほどであるが、この範囲を超える用量および下回る用量も企図される。本発明の特徴は、インターロイキンの粘膜投与が、使用されることになるインターロイキンの用量を、治療有用性を維持しながら、従来技術の手法で考えられる用量より大幅に低くすることを可能にするということである。したがって、本発明に従って使用することができるインターロイキンの最小用量は、その用量が治療有用性を達成するのに十分であるという条件で、当業者が決定することができる。最高用量については、これも本明細書に記載したものなどの要因を考慮に入れて当業者が決定することができる。たとえば１日当たり数百万ＩＵまでの用量が、事情によっては適切である場合がある。典型的には、本発明に従って使用されるインターロイキンの用量は、１日当たり約１ＩＵ〜約１００，０００ＩＵの間、１日当たり約１０ＩＵ〜約５０，０００ＩＵの間、１日当たり約１００ＩＵ〜約２０，０００ＩＵの間、または１日当たり約５００ＩＵ〜約１０，０００ＩＵの間である。処置されることになる炎症状態の性質および重症度を含む、本明細書に記載した種々の要因によって、これを必要とする患者に投与される１日用量は、約１００ＩＵ、２００ＩＵ、３００ＩＵ、４００ＩＵ、５００ＩＵ、６００ＩＵ、７００ＩＵ、８００ＩＵ、９００ＩＵ、１，０００ＩＵ、２，０００ＩＵ、３，０００ＩＵ、４，０００ＩＵ、５，０００ＩＵ、６，０００ＩＵ、７，０００ＩＵ、８，０００ＩＵ、９，０００ＩＵ、１０，０００ＩＵ、１１，０００ＩＵ、１２，０００ＩＵ、１３，０００ＩＵ、１４，０００ＩＵ、１５，０００ＩＵ、１８，０００ＩＵ、２０，０００ＩＵ、２５，０００ＩＵ、３０，０００ＩＵ、３５，０００ＩＵ、４０，０００ＩＵ、４５，０００ＩＵおよび約５０，０００ＩＵほどとすることができる。
【００５７】
個別の至適投与量および投与間隔は、処置されている炎症状態の性質および程度、投与の形態、経路および部位、ならびに処置されている特定の個体の性質によって決定されるであろうということも、当業者には明白であろう。かかる至適条件も、当業者に公知の従来技術によって決定することができる。たとえば、所望の１日用量を、１日１回１つの単位剤形で、または１日２回投与される２つの単位剤形で対象に投与することができる。
【００５８】
所定の日数での１日当たりに施される組成物の投与回数などの至適処置コースは、当業者が従来の処置コース決定試験を使用して確定することができることも、当業者には明白であろう。
【００５９】
本発明の方法および組成物は、炎症状態を処置するための他の治療と組み合わせて使用することができる。たとえばＩＬ−２は、たとえばコルチコステロイドなどの他の免疫調節薬または他のサイトカインもしくはケモカイン、たとえばインターロイキンまたはインターフェロンを含む、１種または複数種の追加の治療薬と組み合わせることができる。本発明の組成物と組み合わせて使用することができる好適な薬剤は当業者に公知であろう。
【００６０】
かかる組合せ治療については、所望の治療効果を提供するために、組合せの各構成成分を、同時に、もしくは任意の順序で逐次に、または異なる時間に投与することができる。別個に投与する場合、構成成分を同一の投与経路で投与することが好ましい場合があるが、そのとおりにする必要はない。または構成成分を、組合せ製品として１つの剤形単位中に一緒に配合することができる。
【００６１】
本明細書に挙げたすべての文献は、参照によって本明細書に組み込まれる。本明細書におけるいかなる従来の文献（またはそこから得られる情報）またはいかなる既知の事項の参照も、従来の文献（またはそこから得られる情報）または既知の事項が、本明細書が関与する努力の分野において共通一般知識の一部を形成するという承諾ではなく、容認でもなく、いかなる形態での示唆でもないのであり、そのように解釈されるべきではない。
【００６２】
大筋で記載した本発明の趣旨または範囲から逸脱することなく、多数の変型形態および／または変更形態が本発明に対してなされうることは当業者に理解されるであろう。したがって本実施形態は、すべての点で、説明のためであり、限定するものではないとみなされるべきである。
【００６３】
ここからは、本発明を、以下の具体的な実施例を参照しながらより詳細にさらに説明することにする。これらの実施例は、決して本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。
【実施例】
【００６４】
実施例１
粘膜投与した組換えヒトＩＬ−２および関節リウマチ
関節リウマチの処置におけるＩＬ−２の粘膜投与の有効性を判定するために、雄のラット（体重２１０〜２４０ｇ）の右後肢に０．１ｍｌのフロイント完全アジュバントを投与して関節リウマチを誘発したラットモデルを使用した。ラットはアジュバントでの関節炎の誘発にきわめて感受性が高いため、ラットモデルは関節リウマチ（ＲＡ）の病理発生の研究に有用である。
【００６５】
組換えヒトＩＬ−２を北京四環生物製薬有限公司（Ｂｅｉｊｉｎｇ  Ｆｏｕｒ  Ｒｉｎｇｓ  Ｂｉｏ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）（中華人民共和国、北京）から購入した。これを各錠剤がＩＬ−２を１錠当たり１２０万ＩＵで含有する錠剤形態にし、２５℃で保管した。水を添加することによって、ＩＬ−２錠剤を溶解してペースト剤を形成した。次いで、使用する前に種々の量の水を添加して、実験に必要な様々な濃度のＩＬ−２を調製した。ラットを下の表１および表２に示すとおり、動物１０匹ずつの５つの群に無作為化した。表１および表２に列挙したとおり、２種の用量（高用量および低用量）のＩＬ−２を、尾に静脈内注射または舌下に錠剤のペースト形態でのいずれかで、１６日目から投与した。ラットの肢の腫脹を、関節炎を誘発するためのフロイントアジュバントの投与後１９日目および２３日目に測定した。腫脹を測定した肢によって腫脹スコアを分けた。表１および図１はラットの右後肢（関節炎を誘発した肢）における腫脹スコアを示し、表２および図２はラットのそれ以外の３本の肢における腫脹スコア（「ＲＡ指数」）を示す。
【００６６】
表１、表２および図１、図２からわかるように、舌下投与したＩＬ−２および注射したＩＬ−２は関節リウマチによる腫脹を有意に低減した（ｐ＜０．０１）。ＲＡ指数（表２および図２Ａ）から、舌下投与の方が注射による投与より腫脹の軽減が早い（１９日目）ことがわかる。毒性はいずれの処置群にも観察されなかった。
【００６７】
【表１】
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【００６８】
【表２】
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【００６９】
実施例２
組換えヒトＩＬ−２の舌下投与および副鼻腔炎
やはりラットモデルを使用して、本発明者は、舌下投与した組換えヒトＩＬ−２が副鼻腔炎の症状を軽減し、副鼻腔炎によって誘発される特有の生理学的な変化を抑制する能力についても調査した。このケースでは、体重１３０〜１５０ｇのラットにオリーブ油１０μｌ中１０％トルエン−２，４−ジイソシアナート（ＴＤＩ）を７日間毎日、その後１日置きに鼻腔内投与して副鼻腔炎を誘発した。対照動物には同一期間オリーブ油１０μｌのみを鼻腔内に投与した。
【００７０】
ラットを下の表３に示すとおり、動物５匹ずつの４つの群に無作為化した。表３に列挙したとおり、２種の用量（高用量および低用量）のＩＬ−２を錠剤のペースト形態で、１日２回、８日目から開始して１４日間舌下投与した。ラットを実験最終日（投薬後１５日目）に犠牲にし、胸腺および脾臓を除去して重量を測定した。
【００７１】
表３および図３に示すように、１０００ＩＵのＩＬ−２は胸腺指数（胸腺重量、単位はｇ／体重１００ｇ）を有意に（ｐ＜０．０５）低下させ、４０００ＩＵのＩＬ−２は脾臓指数（脾臓重量、単位はｇ／体重１００ｇ）を有意に（ｐ＜０．０５）低下させた。毒性はいずれの処置群にも観察されなかった。
【００７２】
【表３】
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【００７３】
同じ処置群を使用して、ラットの副鼻腔炎に関連する種々の行動の発生、具体的には鼻擦りの頻度、くしゃみ、および鼻汁の程度を観察した。ＴＤＩ投与の直後に、ラットの行動変数を３０分間観察し、スコアをつけた。上記の行動の組合せに基づいて行動スコアを決定し、７日目、９日目および１５日目について下の表４に示している。この表および図４に示す１５日目のグラフで見る結果からわかるように、４０００ＩＵのＩＬ−２は、観察されたＴＤＩ誘発性副鼻腔炎の症状を有意に（ｐ＜０．０１）軽減した。
【００７４】
【表４】
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【００７５】
実施例３
ヒトにおける組換えヒトＩＬ−２の舌下投与の事例研究
（ｉ）Ｐ１：乾癬
両肘および両手の甲が重症の乾癬に罹患しているヒト被験者（Ｐ１）に、５０００ＩＵの組換えヒトＩＬ−２を２か月間にわたって錠剤形態で舌下投与する毎日のレジメンを施した。図５に示す画像はＰ１の肘および手の両方の乾癬の重症度および程度における軽減を明快に示す。
【００７６】
（ｉｉ）Ｐ２：関節リウマチ
関節リウマチと診断されたヒト被験者（Ｐ２）は、メトトレキサートを含む種々の抗炎症薬で長年処置を受けた。炎症が突発してから、Ｐ２は「メトトレキサート」および「モービック（Ｍｏｂｉｃ）」に加えて「レフルノミド」（アラバ（Ａｒａｖａ））のレジメンを施された。炎症レベルは明らかに低下したが、白血球数が正常レベル未満に減少したため、メトトレキサートを１週当たり２０ｍｇから１０ｍｇに低減し、ついにはレフルノミドを１週当たり１００ｍｇから８０ｍｇに低減する必要が生じた。Ｐ２に５０００ＩＵの組換えヒトＩＬ−２を錠剤形態で舌下投与する毎日のレジメンを開始した。Ｐ２は両手の腫脹、具体的には肥大した指関節において軽減を認め、指関節の骨の形がよりくっきりしてきている。このほか、Ｐ２は右足の母指球に大きな胼胝（「リウマチ足」）ができていた。そこでは骨が下がってしまっている。これが原因で大いなる不快感および痛みが長年にわたっている。胼胝の下の炎症が感染を起こし、切開とその後の抗生物質が必要になることも何度かあった。２００８年にＰ２は両足のＸ線検査および２人の外科医の診察を受け、Ｄｗｙｅｒ中間物挿入（ＭＴＰ）関節形成術と呼ばれる外科的処置を勧められた。なぜなら、中足指節関節の軟骨が破壊され、このため胼胝が形成されていたからである。舌下用ＩＬ−２錠剤の服用以降、胼胝は治まり、その根底にある痛みを伴う炎症が鎮まった。同様のことが各足の母趾付近のバニオンに認められた。現在これらは反応および腫れが大幅に減少している。さらに、歯がぼろぼろになり、複数の歯根が垂直方向に破壊するという問題を長期間抱えた後に、Ｐ２は１０本抜歯する手術を受けた。歯科医は術後の回復の進展が優れていることに驚きを表明したが、これはＩＬ−２治療が導き出したものであった。ＩＬ−２を使用して観察された改善には、明らかな副作用の徴候は見られなかった。
【００７７】
（ｉｉｉ）Ｐ３：関節炎および過敏性腸症候群
ヒト被験者（Ｐ３）は、関節炎痛、湿疹および過敏性腸症候群を含む種々の病気に罹患し、約１０年にわたってこれらの症状に対する種々の処置を受けたが、結果はさまざまであった。その後Ｐ３は、５０００ＩＵの組換えヒトＩＬ−２を錠剤形態で舌下投与する毎日のレジメンを伴う処置コースを開始した。Ｐ３は、ＩＬ−２治療の開始日のうちに、すべてのタイプの関節炎痛の軽減を即座に認めた。最も際立っていたのは左手の親指であった。ＩＬ−２処置前は親指の付け根に痛みがあり、親指に力が入らないためにＰ３は左手の握力を失っていた。ＩＬ−２治療開始から数日以内に痛みが消失し、親指の正常な機能および使用が回復した。数か月間のコースで改善が継続し、ほとんどの形態の関節炎痛は消失し、または顕著に鎮まり、明らかな副作用の徴候はなかった。約５か月間にわたって、可動性の改善および関節炎の症状の軽減は、Ｐ３がそれ以前に経験したどれよりもきわめて顕著であり、Ｐ３に少なくとも１７年間なかったレベルの可動性が回復した。ＩＬ−２舌下治療の最中および後に、Ｐ３が以前与えられていた食事の注意事項は無視されたが、障害はなかった。
【００７８】
Ｐ３はしばらくの間セリアック病の状態を理由としてダプソンを投与していた。これは後に誤診であることが判明したが（むしろ症状は過敏性腸症候群である）、ダプソンの処置は下痢症に効果的であった。これはダプソンの抗炎症性質によるものであると処方医師は考えた。舌下ＩＬ−２治療は、ダプソンが提供する保護期間を大幅に延長することができた。ＩＬ−２治療前は、必要なダプソンの投与量は７日毎に１錠（おおよそ）であった。ＩＬ−２では、有益な効果が約１０日に延長した。ＩＬ−２治療の中止以降、Ｐ３は７日毎またはそれより少ない日数毎のダプソンの投与を再開する必要が生じた。
【００７９】
（ｉｖ）Ｐ４：関節リウマチ
Ｐ４は関節リウマチに罹患して２０年を超え、炎症を制御するためにメトトレキサートを含む種々の処置を受けてきた。しかしＰ４は激しい痛みおよび疲労に苦しみ続けていた。錠剤形態で毎日５０００ＩＵのＩＬ−２を用いた舌下治療の開始から数か月以内に、Ｐ４から痛みのレベルが劇的に軽減し、関節リウマチによって何の問題も起こっていないと報告された。
【００８０】
（ｖ）Ｐ５全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）
Ｐ５はＳＬＥに罹患し、このため、両手、両足およびいくつかの関節に腫脹があった。錠剤形態で毎日５０００ＩＵのＩＬ−２を用いた舌下治療の開始から１０日以内に、Ｐ５から両手および両足の腫脹の劇的な軽減が報告された。
【００８１】
実施例４
例示的な処置用組成物
本明細書に開示する本発明の実施形態によれば、ＩＬ−２は、典型的には、経口投与、最も典型的には舌下投与に好適な医薬組成物の形態で投与される。本発明による組成物の例を以下に概説する。以下の記載は単に説明のための例と解釈されるべきであり、本発明の範囲を限定するものとは決して解釈されるべきではない。
【００８２】
実施例４Ａ
錠剤形態の経口投与用組成物
錠剤形態でＩＬ−２を含む組成物は、ゼラチン、マルトデキストリン、カルボキシメチルセルロース、グルコース、カーボマーのうち１つまたは複数を含むフィルムの中にＩＬ−２を組み入れ、デンプン、リン酸カルシウム、カルボキシメチルエチルセルロース、マンニトール、マルトース、タルクおよびステアリン酸マグネシウムから選択される既知の薬学的に許容される成分でできているブランク錠剤の核の上に当該フィルムを被覆することによって調製することができる。
【００８３】
実施例４Ｂ
カプセル剤形態の経口投与用組成物
カプセル剤の形態でＩＬ−２を含む組成物は、標準的な２ピースの硬ゼラチンカプセルに、粉末形態のＩＬ−２、ラクトース１００ｍｇ、タルク３５ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム１０ｍｇを充填することによって調製することができる。
【００８４】
実施例５
ラットに舌下投与したｒｈＩＬ−２の薬物動態
組換えヒトＩＬ−２（ｒｈＩＬ−２）の組織内分布を、１２５Ｉ標識ｒｈＩＬ−２およびＴＣＡ（トリクロロ酢酸）沈降アッセイを使用して確認した。単回用量３２０００ＩＵの１２５Ｉ標識ｒｈＩＬ−２を、健康な成熟ウィスターラットの雄１３匹、雌１３匹に舌下投与した。投与後、１０分、３０分、１時間および３時間時点でラットを安楽死させ、種々の組織および臓器中のｒｈＩＬ−２の分布を確認した。定量下限（ＬＬＯＱ）は６ＩＵ当量／ｇ（ｍｌ）であった。
【００８５】
１２５Ｉ標識ｒｈＩＬ＿２は、降順に、胃、舌下組織、十二指腸、空腸、尿、血清、腎臓、下顎リンパ節、顎下線、腸骨リンパ節、膵臓、骨関節、肝臓、胸腺、副腎、腹腔リンパ節、心臓、脾臓および脳に見られた。したがって、最高濃度は胃腸管、舌下組織、尿路系、投与部位付近のリンパ節および下顎リンパ節に見られた。脳に見られた１２５Ｉ−ｒｈＩＬ−２の濃度はきわめて低く、血液脳関門を通る分子輸送の欠如を示している。
【００８６】
放射標識ＩＬ−２は、液体形態で、液体をラットの舌下に置くことによってラットに投与したことに留意すべきである。液体が舌下吸収されるようにすべての液体がラットの舌下に残っていることを確認するのは不可能であり、結果として多くの液体が飲み込まれている。これは、胃腸管で１２５Ｉ−ｒｈＩＬ−２の濃度が高いことの説明になる。血清中でのＩＬ−２の半減期はわずか１５分である（ヒトの場合）。したがって、身体中に吸収されるＩＬ−２はいずれも腎臓によって迅速に除去されるであろう。これは、尿および腎臓でＩＬ−２の濃度が高いことの説明になる。それにもかかわらず、リンパ節中の１２５Ｉ−ｒｈＩＬ−２の実質的な量は、分子が成功裏に粘膜表面を通過してリンパ組織およびリンパ節に入り、そこで免疫応答を開始することができることを示している。
【００８７】
これらの実験中に、放射標識ｒｈＩＬ−２の比放射能および免疫能を非放射標識分子のそれと比較したが、有意差は見られなかった（データは示さず）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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