(57)【要約】  光放射活性が改良されたルシフェラーゼポリペプチドおよびそれらをコードする核酸が開示される。これらの分子は、ルシフェラーゼに基づく遺伝子レポーターアッセイ、生物発光共鳴エネルギー転移アッセイ、タンパク質相補性アッセイおよびルシフェラーゼ酵素を検出可能および/または定量可能な標識として利用するその他の用途を含む一連のアッセイにおいて有用である。ルシフェラーゼが触媒する反応の感度を増加させ、かつ/またはその動態を改良するためならびに望ましくない変動要素の影響を減少させるための方法および組成物も開示される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドと比べてルシフェラーゼ機能の最適温度範囲が上昇した改変カイアシルシフェラーゼポリペプチドを調製する方法であって、改変カイアシルシフェラーゼポリペプチドを、参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドから少なくとも1つのアミノ酸配列改変により区別されるアミノ酸配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になるように調製するステップを含み、少なくとも1つのアミノ酸配列改変が、参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドと比べてルシフェラーゼ機能の最適温度範囲を上昇させることに基づいて選択される方法。
【請求項２】
少なくとも1つの改変が、
(a)85位または98位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)に相当する少なくとも1つの位置でのLまたはその改変形態、
(b)BCモチーフ(式中、Bは、塩基性アミノ酸残基から選択され、Cは、保存システイン、その改変形態である)を得るための、C5、C6、C9およびC10から選択される少なくとも1つの保存システインのすぐ上流にある塩基性アミノ酸残基、ならびに
(c)参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドのアミノ酸配列の全体または一部の欠失であって、該アミノ酸配列が、シグナルペプチド配列の下流および85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)のアミノ酸残基の上流にまたがる欠失
からなる群から選択される、請求項1に記載の方法。
【請求項３】
改変ポリペプチドが、85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)にてLまたはその改変形態を含む、請求項2に記載の方法。
【請求項４】
改変ポリペプチドが、98位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)にてLまたはその改変形態を含む、請求項3に記載の方法。
【請求項５】
改変ポリペプチドが、85および98位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)にてLまたはその改変形態を含む、請求項3に記載の方法。
【請求項６】
改変ポリペプチドが、保存システインC6およびC9に相当する少なくとも1つの位置にてBCモチーフを含む、請求項2に記載の方法。
【請求項７】
改変ポリペプチドが、保存システインC5、C6およびC9に相当する少なくとも1つの位置にてBCΩモチーフ(式中、Ωは、小分子アミノ酸残基または酸性アミノ酸残基から選択される)を含む、請求項2に記載の方法。
【請求項８】
改変ポリペプチドが、保存システインC5、C6およびC9に相当する少なくとも1つの位置にてBCΩΩモチーフ(式中、Ωは、小分子アミノ酸残基または酸性アミノ酸残基から選択される)を含む、請求項2に記載の方法。
【請求項９】
改変ポリペプチドが、保存システインC5、C6、C9およびC10に相当する少なくとも1つの位置にてBCΩDモチーフ(式中、Ωは、小分子アミノ酸残基または酸性アミノ酸残基から選択され、Dは、アスパラギン酸またはその改変形態である)を含む、請求項2に記載の方法。
【請求項１０】
改変ポリペプチドが、保存システインC5、C6、C9およびC10に相当する少なくとも1つの位置にてEBCモチーフ(式中、Eは、グルタミン酸またはその改変形態である)を含む、請求項2に記載の方法。
【請求項１１】
改変ポリペプチドが、保存システインC6、C9およびC10に相当する少なくとも1つの位置にてGBCモチーフ(式中、Gは、グリシンまたはその改変形態である)を含む、請求項2に記載の方法。
【請求項１２】
改変ポリペプチドが、保存システインC5、C6およびC9に相当する少なくとも1つの位置にてBCAモチーフ(式中、Aは、アラニンまたはその改変形態である)を含む、請求項2に記載の方法。
【請求項１３】
改変ポリペプチドが、保存システインC5、C6およびC9に相当する少なくとも1つの位置にてBCAΩモチーフ(式中、Ωは、小分子アミノ酸残基または酸性アミノ酸残基から選択され、Aは、アラニンまたはその改変形態である)を含む、請求項2に記載の方法。
【請求項１４】
改変ポリペプチドが、保存システインC10に相当する位置にてXBCモチーフ(式中、Xは、DまたはP以外である)を含む、請求項2に記載の方法。
【請求項１５】
改変ポリペプチドが、請求項3から5に規定される少なくとも1つのアミノ酸と、請求項6から14のいずれか一項に規定される少なくとも1つのモチーフとを含む、請求項2から14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
改変ポリペプチドが、請求項3から5に規定される少なくとも1つのアミノ酸と、請求項2に規定される欠失とを含む、請求項2から14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
改変ポリペプチドが、請求項6から14のいずれか一項に規定される少なくとも1つのモチーフと、請求項2に規定される欠失とを含む、請求項2から14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
改変ポリペプチドが、請求項3から5に規定される少なくとも1つのアミノ酸と、請求項6から14のいずれか一項に規定される少なくとも1つのモチーフと、請求項2に規定される欠失とを含む、請求項2から14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
少なくとも1つの改変が、ルシフェラーゼ機能の最適温度範囲を少なくとも2℃上昇させる、請求項1から18のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
少なくとも1つの改変が、37℃でのルシフェラーゼ活性の増強をもたらす、請求項1から18のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
少なくとも1つの改変が、室温でのルシフェラーゼ活性の増強をもたらす、請求項1から18のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
85位または98位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)に相当する少なくとも1つの位置にてLまたはその改変形態を含むように参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドを改変するステップをさらに含む、請求項1から14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
C5、C6、C9およびC10から選択される少なくとも1つの保存システインのすぐ上流に塩基性アミノ酸残基を含んでBCモチーフを得るように参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドを改変するステップをさらに含む、請求項1から14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
C5、C6、C9およびC10から選択される少なくとも1つの保存システインのすぐ上流に塩基性アミノ酸残基を含んでBCモチーフを得るように参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドを改変するステップをさらに含む、請求項19に記載の方法。
【請求項２５】
85位または98位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)に相当する少なくとも1つの位置にてLまたはその改変形態を含むように参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドを改変するステップをさらに含む、請求項20に記載の方法。
【請求項２６】
シグナルペプチド配列の下流および85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)のアミノ酸残基の上流にまたがるアミノ酸配列の全体または一部の欠失を含むように参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドを改変するステップをさらに含む、請求項1から14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドが、85位または98位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)に相当する少なくとも1つの位置にてLまたはその改変形態を含み、該方法が、C5、C6、C9およびC10から選択される少なくとも1つの保存システインのすぐ上流に塩基性アミノ酸残基を含んでBCモチーフを得るように参照ポリペプチドを改変するステップをさらに含む、請求項1から14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドが、85位または98位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)に相当する少なくとも1つの位置にてLまたはその改変形態を含み、該方法が、C6およびC9から選択される少なくとも1つの保存システインのすぐ上流に塩基性アミノ酸残基を含んでBCモチーフを得るように参照ポリペプチドを改変するステップをさらに含む、請求項1から14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドが、BCモチーフを得るようにC5、C6、C9およびC10から選択される少なくとも1つの保存システインのすぐ上流に塩基性アミノ酸残基を含み、該方法が、85位または98位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)に相当する少なくとも1つの位置にてLまたはその改変形態を含むように参照ポリペプチドを改変するステップをさらに含む、請求項1から14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドが、BCモチーフを得るようにC6およびC9から選択される少なくとも1つの保存システインのすぐ上流に塩基性アミノ酸残基を含み、該方法が、85位または98位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)に相当する少なくとも1つの位置にてLまたはその改変形態を含むように参照ポリペプチドを改変するステップをさらに含む、請求項1から14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドが、85位または98位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)に相当する少なくとも1つの位置にてLまたはその改変形態を含み、該方法が、シグナルペプチド配列の下流および85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)のアミノ酸残基の上流にまたがるアミノ酸配列の全体または一部の欠失を含むように参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドを改変するステップをさらに含む、請求項1から14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドが、BCモチーフを得るようにC5、C6、C9およびC10から選択される少なくとも1つの保存システインのすぐ上流に塩基性アミノ酸残基を含み、該方法が、シグナルペプチド配列の下流および85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)のアミノ酸残基の上流にまたがるアミノ酸配列の全体または一部の欠失を含むように参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドを改変するステップをさらに含む、請求項1から14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドが、BCモチーフを得るようにC6およびC9から選択される少なくとも1つの保存システインのすぐ上流に塩基性アミノ酸残基を含み、該方法が、シグナルペプチド配列の下流および85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)のアミノ酸残基の上流にまたがるアミノ酸配列の全体または一部の欠失を含むように参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドを改変するステップをさらに含む、請求項1から14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドが、シグナルペプチド配列の下流および85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)のアミノ酸残基の上流にまたがるアミノ酸配列の全体または一部の欠失を含み、該方法が、85位または98位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)に相当する少なくとも1つの位置にてLまたはその改変形態を含むように参照ポリペプチドを改変するステップをさらに含む、請求項1から14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドが、シグナルペプチド配列の下流および85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)のアミノ酸残基の上流にまたがるアミノ酸配列の全体または一部の欠失を含み、該方法が、C5、C6、C9およびC10から選択される少なくとも1つの保存システインのすぐ上流に塩基性アミノ酸残基を含んでBCモチーフを得るように参照ポリペプチドを改変するステップをさらに含む、請求項1から14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドが、シグナルペプチド配列の下流および85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)のアミノ酸残基の上流にまたがるアミノ酸配列の全体または一部の欠失を含み、該方法が、C6およびC9から選択される少なくとも1つの保存システインのすぐ上流に塩基性アミノ酸残基を含んでBCモチーフを得るように参照ポリペプチドを改変するステップをさらに含む、請求項1から14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
Lまたはその改変形態が、85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)に相当する位置にある、請求項27から36のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
細胞と会合したレポーター酵素の活性を評価する方法であって、レポーター酵素が、請求項1から37のいずれか一項に記載の方法により生成されるポリペプチドを含むか、それからなるかまたはそれから本質的になり、該方法が、(a)細胞を、セレンテラジンまたはその類似体もしくは誘導体と接触させるステップと、(b)セレンテラジンまたはその類似体もしくは誘導体から生じるシグナルを検出して、レポーター酵素の活性を評価するステップとを含む方法。
【請求項３９】
検出が、ルシフェラーゼ機能の上昇した最適温度範囲内で行われる、請求項38に記載の方法。
【請求項４０】
請求項1から38のいずれか一項に記載の方法により生成されるポリペプチド、または前記ポリペプチドをコードする核酸分子、または調節ポリヌクレオチドに作動可能につながった前記核酸分子を含む構築物、または前記構築物を含む細胞を含む容器を含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、全般的に、光放射分子に関する。より具体的には、本発明は、光放射活性が改良されたルシフェラーゼポリペプチドおよびそれらをコードする核酸に関する。これらの分子は、ルシフェラーゼに基づく遺伝子レポーターアッセイ、生物発光共鳴エネルギー転移アッセイ、タンパク質相補性アッセイ(protein complementation assay)およびルシフェラーゼ酵素を検出可能および/または定量可能な標識として利用するその他の用途を含む一連のアッセイにおいて有用である。本発明は、ルシフェラーゼが触媒する反応の感度を増加させ、かつ/またはその動態を改良するため望ましくない変動要素の影響を減少させるための方法およびならびに組成物にも関する。
【背景技術】
【０００２】
ルシフェラーゼは、生物学的研究における重要なツールである。例えば、ルシフェラーゼは、特にそれらの感度が高いために、遺伝子レポーターアッセイにおいて用いるための好ましいレポータータイプである。実際に、この高い感度により、これらは、抗体の標識としておよび高いシグナルと低いバックグラウンドとが有利なその他の用途において用いられている。ルシフェラーゼは、タンパク質相補性アッセイ(PCA;例えばWO 2008/049160に開示されるような)のような技術により、青色の光を放射するルシフェラーゼでは特に生物発光共鳴エネルギー転移(BRET)で、タンパク質:タンパク質相互作用を研究するためにも広く用いられている。
【０００３】
遺伝子レポーターアッセイにより、何が対象の遺伝子、例えばDNA配列、転写因子、RNA配列、RNA結合タンパク質、シグナル伝達経路および具体的な刺激の発現を制御するかを理解することが可能になる。特に、レポーターアッセイは、遺伝子調節において重要な核酸領域を同定するために用いることができる。このような領域および/またはそれらに結合するかもしくはそれらを調整する因子は、ヒトの疾患の処置または予防における治療的介入のための可能性のある標的となることができる。レポーターアッセイは、遺伝子発現を改変する能力について薬物をスクリーニングするために用いることもできる。
【０００４】
レポーターアッセイは、遺伝子プロモーター領域または転写因子結合部位もしくはその他の調節エレメントのようなプロモーター内の具体的なエレメントを同定するために用いることができる。代わりに、このようなアッセイは、様々な刺激または薬剤に対するプロモーターまたは調節エレメントの応答を研究するために用いられる。いくつかの用途では、アッセイにおいて用いられるレポーター構築物またはトランスフェクトされた細胞を生物に導入して、in vivoでのプロモーター機能を研究する。さらに、レポーターアッセイは、特定のプロモーターの上流のシグナル伝達経路を研究または測定するために用いることができる。いくつかの場合では、プロモーターは、単一のタイプの転写因子(TF)結合部位を含んでおり、レポーター活性がそのTFの活性化を導く経路の活性を反映する。
【０００５】
例えば、推定プロモーター配列またはその他の転写調節エレメントを調べるために設計されたレポーターアッセイの場合、下流のレポーター遺伝子の転写の調節とそれにより該レポーター遺伝子によりコードされるレポータータンパク質の発現を許容するような位置にてレポータープラスミド中に調べられる核酸をクローニングする。レポータータンパク質は、検出を容易にするために、レポータープラスミドをトランスフェクトする細胞中に存在する内因性タンパク質から区別可能であるべきであり、好ましくは、レポータータンパク質の発現は、容易に定量できるべきである。レポータータンパク質は、適当なアッセイにおいて定量され、例えばプロモーターSV40のような遍在性プロモーターにより駆動される対照レポーターのレベルに対比してしばしば表される。対照レポーターは、試験レポーターから区別可能でなければならず、試験ベクターと同時トランスフェクトされ、トランスフェクション効率を制御するために用いられる別のベクター上に一般的に含まれる。このようなアッセイは、細胞が比例的に等量の両方のベクターを取り込むという前提に基づく。
【０００６】
遺伝子レポーターアッセイの様々に異なる用途は、経時的なまたは薬物、リガンド、ホルモンなどのような化合物の添加の後の遺伝子の発現の変化を測定することを含む。これは、薬物スクリーニングにおいて特に重要である。発現レベルの変化はmRNAを通してタンパク質に伝えられるので、薬物の添加の後に、レポータータンパク質のレベルの測定可能な変化の検出が遅れて弱まることがある。その開示が本明細書に参照によりその全体が組み込まれている米国特許第7,157,272号に記載されるとおり、本出願人により最近行われたこのような用途における重要な進歩は、レポーターベクター中でmRNA-およびタンパク質-不安定化エレメントを組み合わせて用いて、応答の速度および大きさを改良するものである。
【０００７】
異なる検出可能レポータータンパク質を利用する様々なレポーター遺伝子アッセイ系が商業的に利用可能であり、最も一般的なものは、クロラムフェニコールトランスフェラーゼ(CAT)、βガラクトシダーゼ(β-gal)、分泌型アルカリホスファターゼおよび様々な蛍光タンパク質ならびにルシフェラーゼである。
【０００８】
ルシフェラーゼは、in vitroアッセイ系において最も一般的に用いられるレポータータンパク質である。ルシフェラーゼは、生物発光できる酵素であり、一連の生物において自然に見出される。商業的に利用可能なアッセイ系において、ルシフェラーゼは、2つの主要な群に分けることができる;D-ルシフェリンを基質として利用するものおよびセレンテラジンを基質として利用するもの。前者のうちで最も広く採用されている例は、細胞内酵素であるホタルルシフェラーゼである。D-ルシフェリンを利用するルシフェラーゼのさらなる例は、コメツキムシおよびレイルロードワーム(railroad worms)のような甲虫類(Coleoptera)のその他のメンバーを含む。ルシフェラーゼは、それが由来する生物が陸生または水生(典型的に海洋)であるかに基づいて区別することもできる。セレンテラジンを基質として利用するルシフェラーゼは、ソフトコーラルであるレニラ(Renilla)のような海洋動物またはメトリジア(Metridia)およびガウシア(Gaussia)のようなカイアシに典型的に由来するが、D-ルシフェリンを利用するルシフェラーゼは、陸生動物に典型的に由来する。ルシフェラーゼを区別するためのさらなる手段は、それらの天然の状態において、すなわち、それらが由来する生物においてそれらが分泌型または非分泌型であるかに基づく。陸生生物に由来するルシフェラーゼは、典型的に非分泌型(細胞内)であるが、海洋生物に由来するものは、分泌型または非分泌型(細胞内)であり得る。例えば、レニラルシフェラーゼは細胞内であるが、ガウシアルシフェラーゼは、その天然の状態において分泌型酵素である。海洋生物によるルシフェラーゼの分泌は、近づいてくる捕食者の気をそらすために設計された防御応答であると考えられる。その他の分泌型ルシフェラーゼは、メトリジア・ロンガ(Metridia longa)、ヴァーグラ・ヒルゲンドルフィイ(Vargula hilgendorfii)、オプロフォルス・グラキリロストリス(Oplophorus gracilirostris)、プレウロマンマ・シフィアス(Pleuromamma xiphias)、シプリジナ・ノクチルカ(Cypridina noctiluca)およびメトリジア科(Metridinidae)のその他のメンバーからのものを含む。ヴァーグラルシフェラーゼは、セレンテラジンまたはD-ルシフェリンとは異なる基質を利用する。ルシフェラーゼの別のクラスは、渦鞭毛虫類に由来する。
【０００９】
ルシフェラーゼに基づくアッセイ系は、典型的に異なる起源のものであり、それぞれ異なる基質を利用する1より多いルシフェラーゼを採用することがあり、試験および対照レポーターを同じアッセイで測定できるようにする。例えば、推定プロモーターエレメントをホタルルシフェラーゼレポーター遺伝子の上流に、該ルシフェラーゼ遺伝子の発現を駆動するようにクローニングする。このプラスミドを、SV40プロモーターにより駆動されるレニラルシフェラーゼ遺伝子を含有する対照プラスミドとともに、細胞株に一過的にトランスフェクトする。まず、ルシフェリンを加えてホタルルシフェラーゼを活性化し、このレポーターの活性を測定し、次いで「消光および活性化」試薬を加える。この「消光および活性化」試薬は、ルシフェリンシグナルを消光する化合物を含有し、レニラルシフェラーゼを活性化するためのセレンテラジンも含有し、この活性を次いで測定する。ホタルルシフェラーゼ活性のレベルは、プロモーター活性だけでなくトランスフェクション効率にも依存する。これは、DNAの量、DNA調製物の質および細胞の状態に依存して大きく変動する。レニラルシフェラーゼ活性が、細胞に取り込まれたホタルルシフェラーゼをコードするプラスミドの量に比例するという前提に基づいて、同時トランスフェクトした対照プラスミド(SV40プロモーターのような適切なプロモーターにより駆動されるレニラルシフェラーゼ)を用いてこれらの変動要素について補正する。代わりにまたはさらに、レニラルシフェラーゼを用いて、細胞数、細胞生存性および/または全般的な転写活性のようなその他の変動要素を制御できるか、あるいは特定の処置または細胞に施用した化合物が両方のプロモーターに影響するかもしくはそれらのうちの一方に特異的であるかを決定するために用いることができる。
【００１０】
ルシフェラーゼに基づくアッセイ系、特に1または複数の細胞内ルシフェラーゼを利用するものは、2つの緩衝液、すなわち溶解緩衝液およびアッセイ緩衝液をしばしば採用する。溶解緩衝液を細胞に加えてまず細胞を溶解してルシフェラーゼを放出させ、その後の測定を容易にする。ルシフェラーゼ基質および任意の補因子を含有するアッセイ緩衝液を次いで加え、その後、ルシフェラーゼ活性の測定を行う。測定は、アッセイ緩衝液の添加からすぐに(すなわち数秒以内に)行う(いわゆる「フラッシュ」反応)か、またはアッセイ緩衝液中で長時間光シグナルを安定に保つ「グロー」試薬を用いることにより数分もしくは数時間後に行うことができる(いわゆる「グロー」反応)。フラッシュ反応は、最も高いシグナル強度(1秒あたりの光単位)を与え、よって最も高い感度を与えるという利点を有する。グロー反応は、例えば、すぐに利用できる適切なルミノメータ(注入器を備えた)をユーザが有していないような用途、またはバッチプロセシングが注入と測定との間に遅延を必要とするいくつかのハイスループットスクリーニング用途において特に有利である。
【００１１】
分泌型ルシフェラーゼは、試験細胞を取り囲む馴化培地の試料中で測定される。よって、溶解緩衝液は、分泌型ルシフェラーゼには典型的に用いない。メトリジアおよびガウシア種のようなカイアシからの分泌型ルシフェラーゼは、知られている最小のルシフェラーゼであるだけでなく、全ての既知のルシフェラーゼのうちで最高の感度をもたらす。これらの特徴はともに明らかな利点であるが、後者の特徴は、アッセイされるレポーター遺伝子が対象の細胞内で低いレベルのルシフェラーゼだけをもたらす場合、例えば研究しているプロモーターが低い活性だけを有する場合、および/または対象の細胞にレポーターベクターをトランスフェクト/形質移入するのが困難である場合に特に重要である。さらなる感度の増加も、確実に測定できるシグナル強度を得るために必要な細胞の最小限の数を減らすことにより、レポーターアッセイの小型化を容易にする。
【００１２】
米国特許第7,157,272号に記載されるもののような不安定化エレメントを含むアッセイ系を利用する場合、定常状態ルシフェラーゼシグナルが低減される。よって、より高いシグナル強度を提供するルシフェラーゼは、不安定化エレメントを利用するレポーターアッセイ系にとって特に有利である。
【００１３】
上で述べたように、最も高い感度を提供するルシフェラーゼは、メトリジアおよびガウシアのようなカイアシを含むルシフェラーゼのファミリーからの分泌型ルシフェラーゼ(本明細書において「カイアシルシフェラーゼ」、「カイアシファミリーのルシフェラーゼ」などともいう)である。しかし、非分泌型ルシフェラーゼを用いることが好ましいいくつかの用途がある。例えば、タンパク質不安定化エレメントの使用を可能にして、それにより応答性を改良するためである。その結果、例えばWO 2008/049160に開示されるように、例えば機能的シグナルペプチドを除去することにより、カイアシルシフェラーゼの非分泌バージョンが開発された。
【００１４】
このファミリーのルシフェラーゼの共通する特徴は、それらの10の保存システイン(C1〜C10としばしば称する)の間のジスルフィドブリッジの形成によるフォールディングに依存することである。例えばWO 2008/074100に開示されるとおり、この特徴は、DTTのような還元剤を採用してルシフェラーゼをオフにするかまたはその光放射期間を短くし、それにより同じ試料中の異なるルシフェラーゼの測定を可能にする新規なマルチルシフェラーゼアッセイを開発するために最近利用された。
【００１５】
別の用途では、「フラッシュ」および「グロー」緩衝液とルシフェラーゼとの間で現在のところ妥協がある。つまり、強いフラッシュを得るためにグロー段階が犠牲にされ、その逆もまたある。高い感度のフラッシュ反応を提供できるが、長期間のグローも提供できる系に対する必要性が明らかに存在する。ルシフェラーゼが触媒する生物発光反応からの高いフラッシュと長期間のグローとをともに得ることを容易にするルシフェラーゼは、必要であれば高い感度(フラッシュ反応)を提供できるが、高い感度が必要でない用途のためにグロー反応の簡便性も提供できる2重の目的の試薬をユーザに提供する。
【００１６】
ルシフェラーゼに基づくアッセイの正確性を改良するために、ルシフェラーゼの活性についての不要または回避不可能な変動要素の影響を最小限にすることが望ましい。あるこのような変動要素は、温度である。ほとんどのin vitroでのルシフェラーゼに基づくアッセイは、実験台において「室温」で行われる。しかし、試料間に一定の温度を提供することが実際的でないかまたは不可能であることがしばしばある。例えば、測定装置(例えばルミノメータ)は典型的に発熱し、これが測定中に経時的に反応温度を上昇させる。このことは、不正確性をもたらす。なぜなら、例えば、最初に測定した試料よりも最後に測定した試料の反応温度が高くなり、測定したパラメータ(ルミネセンス)は、温度とともに試料中に存在するルシフェラーゼの量に影響されるからである。
【００１７】
さらに、試料およびアッセイ試薬は、測定前に冷蔵庫または冷凍庫にしばしば貯蔵され、反応の開始前の温めの度合いが変動することは、実際上、珍しいことではない。明らかに、室温の上下の温度の変動に応答する活性の変化が最小限であるルシフェラーゼを得ることが望ましい。特に望ましい特徴は、室温を超えての温度上昇(ルミノメータ中で発生する)に応答する活性の変化が最小限であることである。
【００１８】
さらに、測定アッセイの意図する温度またはその付近の最適温度を有するルシフェラーゼを得ることが望ましい。例えば、このことは、より高い感度を提供できる。上で示したように、室温は、多くのin vitroルシフェラーゼアッセイについて一般的である。しかし、生存哺乳動物内で行われるもののように、ある特定のin vivoアッセイについて37℃が好ましいことがある。その他のルシフェラーゼアッセイ(例えば抗体標識として)は、試料および/またはアッセイ試薬中の必須の反応成分の分解を最小限にするために、4℃またはその付近で行われることが好ましいことがある。
【００１９】
よって、その最適温度および温度の影響を、意図するアッセイタイプの好ましいパラメータに応じて調整することによりルシフェラーゼをカスタマイズできることが有利である。
【００２０】
メトリジアおよびガウシアからの既知のカイアシルシフェラーゼに関していくつかの不都合がある。特に、ルシフェラーゼ反応の感度および正確性が改良されたルシフェラーゼに対する必要性が存在する。例えば、現存するルシフェラーゼを用いて達成可能なものよりも大きい強さのフラッシュシグナル強度;ならびに/またはより大きい強さおよび/もしくは経時的により安定なグローシグナル;ならびに/または意図するアッセイタイプについてより適切な温度の影響。
【００２１】
所望の特徴を伝えるこれらのルシフェラーゼにおける構造的変化またはエレメントのタイプを決定することが特に有利である。このような知見は、カイアシルシフェラーゼファミリー内のルシフェラーゼを含むルシフェラーゼのカスタマイゼーションおよび最適化を可能にする。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２２】
【特許文献１】WO 2008/049160
【特許文献２】米国特許第7,157,272号
【特許文献３】WO 2008/074100
【特許文献４】米国特許第4,873,192号
【特許文献５】米国特許出願第2002/0150912号
【特許文献６】欧州特許出願第1262553号
【特許文献７】米国特許第6,113,886号
【特許文献８】米国特許第6,232,107号
【特許文献９】米国特許第6,436,682号
【特許文献１０】WO 2002/072844
【非特許文献】
【００２３】
【非特許文献１】Deverauxら、1984、Nucleic Acids Research12:387〜395頁
【非特許文献２】Altschulら、1997、Nucl. Acids Res.25:3389頁
【非特許文献３】Ausubelら、「Current Protocols in Molecular Biology」、John Wiley & Sons Inc、1994〜1998
【非特許文献４】Kunkel(1985、Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 82:488〜492頁)
【非特許文献５】Kunkelら(1987、Methods in Enzymol、154:367〜382頁)
【非特許文献６】Watson, J. D.ら(「Molecular Biology of the Gene」、第4版、Benjamin/Cummings、Menlo Park、Calif.、1987)
【非特許文献７】Dayhoffら(1978) Atlas of Protein Sequence and Structure (Natl. Biomed. Res. Found.、Washington, D.C.)
【非特許文献８】ArkinおよびYourvan(1992)Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:7811〜7815頁
【非特許文献９】Delgraveら、(1993) Protein Engineering、6:327〜331頁
【非特許文献１０】Gonnetら(1992、Science、256(5062):14430〜1445頁
【非特許文献１１】Zubay, G.、Biochemistry、第3版、Wm.C. Brown Publishers (1993)
【非特許文献１２】NeedlemanおよびWunsch(1970、J. Mol. Biol. 48:444〜453頁)
【非特許文献１３】E. MeyersおよびW. Miller(1989、Cabios、4:11〜17頁)
【非特許文献１４】Altschulら(1990、J. Mol. Biol、215:403〜10頁)
【非特許文献１５】Robergeら(1995、Science、269:202頁)
【非特許文献１６】Coliganら、Current Protocols in Protein Science (John Wiley & Sons, Inc. 1995〜1997)、特に第1、5および6章
【非特許文献１７】Dijkemaら(1985、EMBO J. 4:761頁)
【非特許文献１８】Gormanら(1982、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 79:6777頁)
【非特許文献１９】Boshartら(1985、Cell 41:521頁)
【非特許文献２０】RemyおよびMichnick、2006、Nature Methods、3(12):977〜979頁
【非特許文献２１】Kimら、2009、Anal Chem.、81:67〜74頁
【非特許文献２２】Rodaら、2004、Trends in Biotechnology、22(6):295〜303頁
【非特許文献２３】L. J. Kricka、1988、Anal. Biochem.、175:14〜21頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２４】
本発明は、カイアシルシフェラーゼファミリー内のルシフェラーゼを含むルシフェラーゼのある特定の構造エレメントを改変することにより、ルシフェラーゼ機能を調整できることを見出したことに部分的に基づく。特に、本発明者らは、(1)85位もしくは98位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)のL、(2)シグナル(分泌)ペプチド配列の下流および残基約85の上流にまたがる領域の全体もしくは一部の切断、(3)保存システイン(例えばC5、C6、C9およびC10)を含む少なくとも1つの4残基モチーフ、(4)保存システイン(例えばC5、C6、C9およびC10)を含む少なくとも1つの2残基モチーフ、ならびに/または(5)保存システイン(例えばC5、C6、C9およびC10)を含む少なくとも1つの3残基モチーフが、ルミネセンス、フラッシュシグナルの強さ、グローシグナルの強さ、グローシグナル安定性およびルシフェラーゼ機能の最適温度範囲の上昇を含む有効温度範囲から選択される1または複数の光放射の特徴を著しく改良できることを見出した。これらの発見は、以下に記載するように、光放射動態が改良された新規なポリペプチドおよびアッセイにおけるそれらの使用において実行に移されている。
【課題を解決するための手段】
【００２５】
よって、一態様では、本発明は、適切には単離、合成、組換えまたは精製された形態であり、ルシフェラーゼ活性を有するアミノ酸配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になるポリペプチドであって、アミノ酸配列が、
(a)式Iで表されるアミノ酸配列:
LPGKKX1PX2X3VX4X5EX6EANAX7X8AGC1X9RGC2LX10C3LSX11IKC4TX12X13MX14X15
X16IPGB1C5X17X18YX19GDKX20X21X22QX23GIX24X25X26X27IVDX28PEIX29GFKX30X31X32PX33X34QFIAQVX35X36C6X37X38C7X39TGC8LKGLANVX40C9ΣX41LLKKWLPX42B2C10X43
X44FAX45KIQX46X47X48X49X50IKGX51X52GD      (I)
(式中:
X1は、疎水性アミノ酸残基(例えばLもしくはMのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X2は、疎水性アミノ酸残基(例えばLのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X3は、疎水性アミノ酸残基(例えばAのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択され、
X4は、疎水性アミノ酸残基(例えばIもしくはLのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばPまたはその改変形態)から選択され、
X5は、疎水性アミノ酸残基(例えばI、MもしくはVのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X6は、疎水性アミノ酸残基(例えばM、IもしくはLのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X7は、塩基性アミノ酸残基(例えばKもしくはRまたはその改変形態)または疎水性アミノ酸残基(例えばFのような芳香族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X8は、塩基性アミノ酸残基(例えばKもしくはRまたはその改変形態)から選択され、
X9は、小分子アミノ酸残基(例えばTまたはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばHまたはその改変形態)から選択され、
X10は、疎水性アミノ酸残基(例えばIもしくはVのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X11は、塩基性アミノ酸残基(例えばHもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
X12は、小分子アミノ酸残基(例えばPもしくはAまたはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X13は、塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)または中性/極性アミノ酸残基(例えばQまたはその改変形態)から選択され、
X14は、塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)または中性/極性アミノ酸残基(例えばQまたはその改変形態)から選択され、
X15は、任意のアミノ酸残基(例えばKのような塩基性アミノ酸残基もしくはその改変形態、Vのような脂肪族アミノ酸残基を含む疎水性アミノ酸残基もしくはその改変形態、またはQのような中性/極性アミノ酸残基もしくはその改変形態)から選択され、
X16は、疎水性アミノ酸残基(例えばFもしくはYのような芳香族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
B1は、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
X17は、塩基性アミノ酸残基(例えばHまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばAまたはその改変形態)から選択され、
X18は、酸性アミノ酸残基(例えばDまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばTもしくはSまたはその改変形態)から選択され、
X19は、酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはAまたはその改変形態)から選択され、
X20は、酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X21は、小分子アミノ酸残基(例えばSもしくはTまたはその改変形態)から選択され、
X22は、小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはAまたはその改変形態)から選択され、
X23は、小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはAまたはその改変形態)から選択され、
X24は、小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはAまたはその改変形態)または疎水性アミノ酸残基(例えばVのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X25は、存在しないか、または小分子アミノ酸残基(例えばGまたはその改変形態)から選択され、
X26は、酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばGまたはその改変形態)から選択され、
X27は、小分子アミノ酸残基(例えばAまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択され、
X28は、疎水性アミノ酸残基(例えばIもしくはMのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X29は、小分子アミノ酸残基(例えばP、SもしくはAまたはその改変形態)から選択され、
X30は、酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)から選択され、
X31は、疎水性アミノ酸残基(例えばLもしくはMのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X32は、荷電アミノ酸残基(例えばEのような酸性アミノ酸残基もしくはその改変形態、またはKのような塩基性アミノ酸残基もしくはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはAまたはその改変形態)から選択され、
X33は、疎水性アミノ酸残基(例えばMもしくはLのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X34は、酸性アミノ酸残基(例えばEもしくはDまたはその改変形態)から選択され、
X35は、酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)から選択され、
X36は、疎水性アミノ酸残基(例えばLのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばRまたはその改変形態)から選択され、
X37は、任意のアミノ酸残基(例えばVのような脂肪族アミノ酸残基を含む疎水性アミノ酸残基もしくはその改変形態、あるいはAもしくはTのような小分子アミノ酸残基またはその改変形態、あるいはHのような塩基性アミノ酸残基またはその改変形態、あるいはEもしくはDのような酸性アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X38は、酸性アミノ酸残基(例えばDまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばSもしくはTまたはその改変形態)から選択され、
X39は、小分子アミノ酸残基(例えばTまたはその改変形態)または中性/極性アミノ酸残基(例えばNまたはその改変形態)から選択され、
X40は、塩基性アミノ酸残基(例えばK、RもしくはHまたはその改変形態)または中性/極性アミノ酸残基(例えばQまたはその改変形態)から選択され、
Σは、小分子アミノ酸残基(例えばS、AもしくはTまたはその改変形態)から選択され、
X41は、酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばAまたはその改変形態)から選択され、
X42は、任意のアミノ酸残基(例えばP、G、T、SもしくはAのような小分子アミノ酸残基またはその改変形態、あるいはQもしくはNのような中性/極性アミノ酸残基またはその改変形態、H、KもしくはRのような塩基性アミノ酸残基またはその改変形態、あるいはDもしくはEのような酸性アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
B2は、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
X43は、小分子アミノ酸残基(例えばAまたはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X44は、小分子アミノ酸残基(例えばSもしくはTまたはその改変形態)から選択され、
X45は、酸性アミノ酸残基(例えばDまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばSまたはその改変形態)から選択され、
X46は、小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはSまたはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X47は、中性/極性アミノ酸残基(例えばQまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択され、
X48は、疎水性アミノ酸残基(例えばVのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばAまたはその改変形態)から選択され、
X49は、荷電アミノ酸残基(例えばDのような酸性アミノ酸残基もしくはその改変形態またはHのような塩基性アミノ酸残基もしくはその改変形態)から選択され、
X50は、任意のアミノ酸残基(例えばKのような塩基性アミノ酸残基もしくはその改変形態、またはNのような中性/極性アミノ酸残基もしくはその改変形態、またはTのような小分子アミノ酸残基もしくはその改変形態)から選択され、
X51は、小分子アミノ酸残基(例えばAまたはその改変形態)または疎水性アミノ酸残基(例えばLもしくはMのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X52は、小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはAまたはその改変形態)から選択される)、あるいは
(b)式Iで表されるアミノ酸配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列類似性または配列同一性を有し、式Iの1位にLまたはその改変形態を含むアミノ酸配列
から選択されるポリペプチドを提供する。
【００２６】
適切には、ポリペプチドは、
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号2](ガウシア・プリンセプス(Gaussia princeps)Prolumeルシフェラーゼ(本明細書においてProlumeともいう)の全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGDKDEL[配列番号4](ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼ(本明細書においてProlume KDELともいう)の全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEIEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号6](ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼ(本明細書において変異体1ともいう)の全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKELEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPLEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号8](ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼ(本明細書において変異体2ともいう)の全長配列);あるいは
MEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号10](ガウシア・プリンセプスInGaルシフェラーゼ(本明細書においてGSInGaともいう)の全長配列)
から選択されるアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるもの以外である。
【００２７】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、式Iで表される配列の上流(例えばすぐ上流)に、式IIで表されるアミノ酸配列:
X53X54X55X56X57RGO1X58    (II)
(式中:
X53は、存在しないか、または酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)もしくは中性/極性アミノ酸残基(例えばNまたはその改変形態)から選択され、ここで、X53は、X54が存在することを条件としていくつかの実施形態で存在し、
X54は、存在しないか、または任意のアミノ酸残基(例えばLもしくはVのような脂肪族アミノ酸残基を含む疎水性アミノ酸残基またはその改変形態、S、TもしくはAのような小分子アミノ酸残基またはその改変形態、あるいはNのような中性/極性アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、ここで、X54は、X55が存在することを条件としていくつかの実施形態で存在し、
X55は、存在しないか、または酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)から選択され、ここで、X55は、X56が存在することを条件としていくつかの実施形態で存在し、
X56は、存在しないか、または任意のアミノ酸残基(例えばVのような脂肪族アミノ酸残基を含む疎水性アミノ酸残基もしくはその改変形態、あるいはS、TもしくはAのような小分子アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、ここで、X56は、X57が存在することを条件としていくつかの実施形態で存在し、
X57は、酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)または中性/極性アミノ酸残基(例えばNまたはその改変形態)から選択され、ここで、X57は、O1が存在することを条件としていくつかの実施形態で存在し、
O1は、存在しないか、または配列J1J2J3(式中、J1は、小分子アミノ酸残基(例えばGまたはその改変形態)から選択され、J2は、塩基性アミノ酸残基(例えばHまたはその改変形態)から選択され、J3は、小分子アミノ酸残基(例えばGまたはその改変形態)から選択される)であり、ここで、O1は、X58が存在することを条件としていくつかの実施形態で存在し、
X58は、塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態);または小分子アミノ酸残基(例えばGまたはその改変形態)から選択される)
をさらに含む。
【００２８】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、
(a) MGVKLIFAVLCVAAAQAATINENFEDIDVVAIGGSFALDVDANRGGHGGLPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVHCSALLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号12](H50L置換を有する全長メトリジア・パシフィカ(Metridia pacifica)2aルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAAAQAATINENFEDIDLVAIGGSFALDVDANRGGHGGL PGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号14](H50L置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2vb1ルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAAAQAATINENFEDIDLVAIGGSFALDVDANRGGHGGL PGKKMPKEVPVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号16](H50L置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAVAQAATIQENFEDIDLVAIGGSFASDVDANRGGHGGL PGKKMPKEVLMEMEANAKRAGCHRGCLVCLSHIKCTAQMQKFIPGRCHSYAGDKDSAQGGIAGGAIVDIPEIAGFKEMKPMEQFIAQVDLCEDCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号18](H50L置換を有する全長メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼ);
MMEIQVLFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKLPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号20](M71L置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼ);
MMEIKVLFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKLPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号22](M71L置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼ);
MMEVKVVFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKL PGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号24](M71L置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼ)
MDIKVLFALICIALVQANPTENNDHINIVGIEGKFGITDLETDLFTIWETNRMISTDNEQANTDSNRGKLPGKKLPLAVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPDISGFKEMGPMEQFIAQVDRCTDCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQSEVHNIKGLAGDR[配列番号26](M70L置換を有する全長メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼ);
MDIKFIFALVCIALVQANPTVNNDVNRGKLPGKKLPLEVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKQYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEAHNIKGLAGDR[配列番号28](M30L置換を有する全長メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ);
MKTDIADTDRASNFVATETDANRGKLPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号30](M26L置換を有する全長メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAQKTDIADTDRASNFVATETDANRGKLPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号32](M43L置換を有する全長メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVATETDANRGKLPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号34](M80L置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVATETDANRGKLPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVERCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号36](M80L置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼ);
MDMKVIFALIFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKSDIADTDRVSNFVATETDANRGKLPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCTSCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号38](M79L置換を有する全長メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼ);
MDIKVVFALVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARSFVATETDANRGKLPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号40](M79L置換を有する全長メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼ);
MDIKVVFALVFSALVQAKSTEFDPNIDVVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARNFVATETDANRGKLPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCNTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号42](M79L置換を有する全長メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼ);および
MDMRVIFALVFSSLVQAKSTEFDPNINIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMDVIKSDITDTDRVSNFVATETDANRGKLPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDLCATCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPGRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号44](M79L置換を有する全長メトリジア・ロンガALルシフェラーゼ);
から選択されるアミノ酸配列、あるいは
(b) 配列番号12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42または44のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列類似性または配列同一性を有し、式Iの1位に相当する位置にLまたはその改変形態を含むアミノ酸配列、あるいは
(c) atgggngtnaarytnathttygcngtnytntgygtngcngcngcncargcngcnacnathaaygaraayttygargayathgaygtngtngcnathggnggnwsnttygcnytngaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggnytnccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngcnytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号11](H50L置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaarytnathttygcngtngtntgygtngcngcngcncargcngcnacnathaaygaraayttygargayathgayytngtngcnathggnggnwsnttygcnytngaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggnytnccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号13](H50L置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaarytnathttygcngtngtntgygtngcngcngcncargcngcnacnathaaygaraayttygargayathgayytngtngcnathggnggnwsnttygcnytngaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggnytnccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号15](H50L置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaarytnathttygcngtngtntgygtngcngtngcncargcngcnacnathcargaraayttygargayathgayytngtngcnathggnggnwsnttygcnwsngaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggnytnccnggnaaraaratgccnaargargtnytnatggaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytngtntgyytnwsncayathaartgyacngcncaratgcaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygcnggngayaargaywsngcncarggnggnathgcnggnggngcnathgtngayathccngarathgcnggnttyaargaratgaarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygargaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号17](H50L置換を有する全長メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgatggarathcargtnytnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcnaayccnacngaraayaargaygayathgayathgtnggngtngarggnaarttyggnacnacngayytngaracngayytnttyacnathgtngargayatgaaygtnathwsnmgngayacnaayytngcnaaywsngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngcnytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号19](M71L置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v1をコードするヌクレオチド配列);
atgatggarathaargtnytnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcnaayccnacngaraayaargaygayathgayathgtnggngtngarggnaarttyggnacnacngayytngaracngayytnttyacnathgtngargayatgaaygtnathwsnmgngayacnaayytngcnaaywsngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngcnytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号21](M71L置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgatggargtnaargtngtnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcnaayccnacngaraayaargaygayathgayathgtnggngtngarggnaarttyggnacnacngayytngaracngayytnttyacnathgtngargayatgaaygtnathwsnmgngayacnaayytngcnaaywsngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngcnytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号23](M71L置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtnytnttygcnytnathtgyathgcnytngtncargcnaayccnacngaraayaaygaycayathaayathgtnggnathgarggnaarttyggnathacngayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnaaymgnatgathwsnacngayaaygarcargcnaayacngaywsnaaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngcngtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaaraartayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngayathwsnggnttyaargaratgggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgyacngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号25](M70L置換を有する全長メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaarttyathttygcnytngtntgyathgcnytngtncargcnaayccnacngtnaayaaygaygtnaaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaarcartayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargcncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号27](M30L置換を有する全長メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgaaracngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号29](M30L置換を有する全長メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcncaraaracngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号31](M43L置換を有する全長メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnatgathaargcngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号33](M70L置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnatgathaargcngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngarmgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号35](M80L置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayatgaargtnathttygcnytnathttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaarwsngayathgcngayacngaymgngtnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgyacnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号37](M79L置換を有する全長メトリジア・ロンガ16をコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttygcnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaaracngayathgcngayacngaymgngcnmgnwsnttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号39](M79L置換を有する全長メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttygcnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgaygtngtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaaracngayathgcngayacngaymgngcnmgnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyaayacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号41](M79L置換を有する全長メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);もしくは
atggayatgmgngtnathttygcnytngtnttywsnwsnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathaayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggaygtnathaarwsngayathacngayacngaymgngtnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcnacntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccnggnmgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号43](M79L置換を有する全長メトリジア・ロンガALルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
または11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41もしくは43のいずれか1つの相補鎖
のいずれか1つに示すヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列
(d) 配列番号11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41もしくは43またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列同一性を共有するヌクレオチド配列によりコードされ、式Iの1位に相当する位置にLまたはその改変形態を含むアミノ酸配列、あるいは
(e) 配列番号11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41もしくは43またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも中度または高度ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列によりコードされ、式Iの1位に相当する位置にLまたはその改変形態を含むアミノ酸配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる。
【００２９】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、機能的分泌増強配列を欠く。このタイプの説明的な例では、ポリペプチドは、
(a) DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD配列番号46、細胞内ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼ];
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGDKDEL[配列番号48、細胞内ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼ];
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEIEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号50、細胞内ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼ];
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKELEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPLEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号52、細胞内ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼ];
DVDANRGGHGGLPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVHCSALLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号54、H50L置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼ];
DVDANRGGHGGLPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号56、H50L置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼ];
DVDANRGGHGGLPGKKMPKEVPVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号58、H50L置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼ];
DVDANRGGHGGLPGKKMPKEVLMEMEANAKRAGCHRGCLVCLSHIKCTAQMQKFIPGRCHSYAGDKDSAQGGIAGGAIVDIPEIAGFKEMKPMEQFIAQVDLCEDCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号60、H50L置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼ];および
NSDADRGKLPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号62、M71L置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカv1、2および3ルシフェラーゼ];
NTDSNRGKLPGKKLPLAVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPDISGFKEMGPMEQFIAQVDRCTDCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQSEVHNIKGLAGDR[配列番号64、M70L置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼ];
NNDVNRGKLPGKKLPLEVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKQYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEAHNIKGLAGDR[配列番号66、M30L置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ];
ETDANRGKLPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号68]、(M26L置換を有する細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼ);
ETDANRGKLPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号70、全長メトリジア・ロンガ164M3の番号付けに関してM43L置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164M3およびv1ルシフェラーゼ];
ETDANRGKLPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVERCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号72、M80L置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼ];
ETDANRGKLPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCTSCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号74、M79L置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼ];
ETDANRGKLPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号76、M79L置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼ];
ETDANRGKLPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCNTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号78、M79L置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼ];
ETDANRGKLPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDLCATCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPGRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号80、M79L置換を有する細胞内メトリジア・ロンガALルシフェラーゼ];
EAEAERGKLPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPGRCATFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号82、細胞内メトリジア・ロンガGS2ルシフェラーゼ];
から選択されるアミノ酸配列、
(b) 配列番号46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80もしくは82のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列類似性または配列同一性を有し、式Iの1位に相当する位置にLまたはその改変形態を含むアミノ酸配列、あるいは
(c) gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号45](細胞内ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngayaargaygarytn[配列番号47](細胞内ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarathgargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号49](細胞内ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarytngargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnytngarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号51](細胞内ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggnytnccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngcnytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号53](H50L置換を有するメトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggnytnccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号55](H50L置換を有するメトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggnytnccnggnaaraaratgccnaargargtnccngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号57](H50L置換を有するメトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggnytnccnggnaaraaratgccnaargargtnytnatggaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytngtntgyytnwsncayathaartgyacngcncaratgcaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygcnggngayaargaywsngcncarggnggnathgcnggnggngcnathgtngayathccngarathgcnggnttyaargaratgaarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygargaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号59](H50L置換を有するメトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aaywsngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngcnytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号61](M71L置換を有するメトリジア・パシフィカv1、2および3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aayacngaywsnaaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngcngtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaaraartayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngayathwsnggnttyaargaratgggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgyacngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号63](M70L置換を有するメトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aayaaygaygtnaaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaarcartayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargcncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号65](M30L置換を有するメトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号67](M26L置換を有するメトリジア・ロンガGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号69](全長メトリジア・ロンガ164M3の番号付けに関してM43L置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164M3およびv1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngarmgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号71](M80L置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngarmgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号73](M79L置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号75](M79L置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyaayacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号77](M79L置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcnacntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccnggnmgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号79](M79L置換を有する細胞内メトリジア・ロンガALルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);もしくは
gargcngargcngarmgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaaraartayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnaaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号81](細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
または45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79もしくは81のいずれか1つの相補鎖
のいずれか1つに示すヌクレオチド配列によりコードされ、式Iの1位に相当する位置にLまたはその改変形態を含むアミノ酸配列、
(d) 配列番号45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79もしくは81またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも70% (ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列同一性を共有するヌクレオチド配列によりコードされ、式Iの1位に相当する位置にLまたはその改変形態を含むアミノ酸配列、あるいは
(e)配列番号45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79もしくは81またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも中度または高度ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列によりコードされ、式Iの1位に相当する位置にLまたはその改変形態を含むアミノ酸配列
から選択されるアミノ酸配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる。
【００３０】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、式IIIで表されるアミノ酸配列:
Z1-Π-Z2        (III)
(式中:
Πは、式Iで表されるアミノ酸配列または式Iで表されるアミノ酸配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列類似性または配列同一性を共有し、式Iの1位に相当する位置にLまたはその改変形態を含むアミノ酸配列から選択され、
Z1は、存在しないか、または約1から約80までのアミノ酸残基(およびその間の全ての整数の残基)を含むタンパク性部分、in vivoでのタンパク質合成の開始のためのアミノ酸残基(例えばMまたはその改変形態)および保護部分(例えばピログルタメートのようなN末端ブロッキング残基)の少なくとも1つから選択され、
Z2は、存在しないか、または約1から約50までのアミノ酸残基(およびその間の全ての整数の残基)を含むタンパク性部分である)
を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる。
【００３１】
適切には、Z1は、ポリペプチドを細胞外の位置に分泌するためのシグナルペプチドを含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる。いくつかの実施形態では、シグナルペプチドは、式IVで表されるアミノ酸配列:
U1X60X61X62X63X64X65FX66X67X68X69X70X71X72X73X74A    (IV)
(式中:
U1は、存在しないか、またはin vivoでのタンパク質合成の開始のためのアミノ酸残基(例えばMまたはその改変形態)およびN末端ブロッキング残基の少なくとも1つから選択され、
X60は、存在しないか、またはin vivoでのタンパク質合成の開始のためのアミノ酸残基(例えばMまたはその改変形態)であり、
X61は、小分子アミノ酸残基(例えばGまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEもしくはDまたはその改変形態)から選択され、
X62は、疎水性アミノ酸残基(例えばV、IもしくはMのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X63は、塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)または中性/極性アミノ酸残基(例えばQまたはその改変形態)から選択され、
X64は、脂肪族アミノ酸残基(例えばVもしくはLまたはその改変形態)および芳香族アミノ酸残基(例えばFまたはその改変形態)を含む疎水性アミノ酸残基から選択され、
X65は、疎水性アミノ酸残基(例えばL、VもしくはIのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X66は、小分子アミノ酸残基(例えばAもしくはTまたはその改変形態)から選択され、
X67は、疎水性アミノ酸残基(例えばLもしくはVのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X68は、疎水性アミノ酸残基(例えばI、VもしくはLのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X69は、脂肪族アミノ酸残基(例えばCまたはその改変形態)および芳香族アミノ酸残基(例えばFまたはその改変形態)を含む疎水性アミノ酸残基から選択され、
X70は、脂肪族アミノ酸残基(例えばIもしくはVまたはその改変形態)および芳香族アミノ酸残基(例えばFまたはその改変形態)を含む疎水性アミノ酸残基または小分子アミノ酸残基(例えばSまたはその改変形態)から選択され、
X71は、小分子アミノ酸残基(例えばAもしくはSまたはその改変形態)から選択され、
X72は、疎水性アミノ酸残基(例えばVもしくはLのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばAまたはその改変形態)から選択され、
X73は、小分子アミノ酸残基(例えばAまたはその改変形態)または疎水性アミノ酸残基(例えばVのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X74は、酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)または中性/極性アミノ酸残基(例えばQまたはその改変形態)から選択される)
を含む。
【００３２】
代表的なシグナルペプチドは、
(a) MGVKVLFALICIAVAEA[配列番号84、ガウシア・プリンセプス  Prolume、Prolume KDEL、変異体1および変異体2のシグナルペプチド]、MGVKLIFAVLCVAAAQA[配列番号86、メトリジア・パシフィカ2a、2bv1、2bv2およびメトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼのシグナルペプチド]、MMEIQVLFALICFALVQA[配列番号88、メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼのシグナルペプチド]、MMEIKVLFALICFALVQA[配列番号90、メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼのシグナルペプチド]、MMEVKVVFALICFALVQA[配列番号92、メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼのシグナルペプチド]、MDIKVLFALICIALVQA[配列番号94、メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼのシグナルペプチド]、MDIKFIFALVCIALVQA[配列番号96、メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼのシグナルペプチド]、MDIKVVFTLVFSALVQA[配列番号98、メトリジア・ロンガ164M3、v1およびv2ルシフェラーゼのシグナルペプチド]、MDMKVIFALIFSALVQA[配列番号100、メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼのシグナルペプチド]、MDIKVVFALVFSALVQA[配列番号102、メトリジア・ロンガ45および52ルシフェラーゼのシグナルペプチド]またはMDMRVIFALVFSSLVQA[配列番号104、メトリジア・ロンガALルシフェラーゼのシグナルペプチド]、
(b) 配列番号84、86、88、90、92、94、96、98、100、102または104のいずれか1つに示す配列と少なくとも70% (ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列類似性または配列同一性を共有するアミノ酸配列、
(c) atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcn[配列番号83] ガウシア・プリンセプスProlume、Prolume KDEL、変異体1または変異体2ルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaarytnathttygcngtnytntgygtngcngcngcncargcn[配列番号85](メトリジア・パシフィカ2a、2bv1、2bv2またはメトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列);
atgatggarathcargtnytnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcn[配列番号87](メトリジア・パシフィカ1v1シフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列);
atgatggarathaargtnytnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcn[配列番号89](メトリジア・パシフィカ1v2シフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列);
atgatggargtnaargtngtnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcn[配列番号91](メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtnytnttygcnytnathtgyathgcnytngtncargcn[配列番号93](メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaarttyathttygcnytngtntgyathgcnytngtncargcn[配列番号95](メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcn[配列番号97](メトリジア・ロンガ164M3、v1あるいはv2ルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列);
atggayatgaargtnathttygcnytnathttywsngcnytngtncargcn[配列番号99](メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttygcnytngtnttywsngcnytngtncargcn[配列番号101](メトリジア・ロンガ45および52ルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列);もしくは
atggayatgmgngtnathttygcnytngtnttywsnwsnytngtncargcn[配列番号103](メトリジア・ロンガALルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列);
または配列番号83、85、87、89、91、93、95、97、99、101もしくは103のいずれか1つの相補鎖
のいずれか1つに示すヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列、
(d) 配列番号83、85、87、89、91、93、95、97、99、101もしくは103またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列同一性を共有するヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列、あるいは
(e) 配列番号83、85、87、89、91、93、95、97、99、101もしくは103またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも中度または高度ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる。
【００３３】
いくつかの実施形態では、Z1は、分泌増強配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる。分泌増強配列の非限定的な例は、
(a) KPTENNEDFNIVAVASNFATT[配列番号106、ガウシア・プリンセプスProlume、Prolume KDEL、変異体1および変異体2ルシフェラーゼの分泌増強配列]、ATINENFEDIDVVAIGGSFAL[配列番号108、メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼの分泌増強配列]、ATINENFEDIDLVAIGGSFAL[配列番号110、メトリジア・パシフィカ2bv1&2ルシフェラーゼの分泌増強配列]、ATIQENFEDIDLVAIGGSFAS[配列番号112、メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼの分泌増強配列]、NPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLA[配列番号114、メトリジア・パシフィカv1&2&3ルシフェラーゼの分泌増強配列]、NPTENNDHINIVGIEGKFGITDLETDLFTIWETNRMISTDNEQA[配列番号116、メトリジア・ロンガ39の分泌増強配列];NPTV[配列番号118、メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼの分泌増強配列];KTDIADTDRASNFVAT[配列番号120、メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼの分泌増強配列];QKTDIADTDRASNFVAT[配列番号122、メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼの分泌増強配列];KSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVAT[配列番号124、メトリジア・ロンガ164v1&2ルシフェラーゼの分泌増強配列];KSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKSDIADTDRVSNFVAT[配列番号126、メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼの分泌増強配列];KSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARSFVAT[配列番号128、メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼの分泌増強配列];KSTEFDPNIDVVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARNFVAT[配列番号130、メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼの分泌増強配列];KSTEFDPNINIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMDVIKSDITDTDRVSNFVAT[配列番号132、メトリジア・ロンガALルシフェラーゼの分泌増強配列]から選択されるアミノ酸配列、あるいは
(b) 配列番号106、107、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130または132のいずれか1つに示す配列と少なくとも70% (ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列類似性または配列同一性を共有するアミノ酸配列、あるいは
(c) aarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacn[配列番号105](ガウシア・プリンセプスProlume、Prolume KDEL、変異体1および変異体2ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列);
gcnacnathaaygaraayttygargayathgaygtngtngcnathggnggnwsnttygcnytn[配列番号107](メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列);
gcnacnathaaygaraayttygargayathgayytngtngcnathggnggnwsnttygcnytn[配列番号109](メトリジア・パシフィカ2bv1および2ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列);
gcnacnathcargaraayttygargayathgayytngtngcnathggnggnwsnttygcnwsn[配列番号111](メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列);
aayccnacngaraayaargaygayathgayathgtnggngtngarggnaarttyggnacnacngayytngaracngayytnttyacnathgtngargayatgaaygtnathwsnmgngayacnaayytngcn[配列番号113](メトリジア・パシフィカv1、2および3ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列);
aayccnacngaraayaaygaycayathaayathgtnggnathgarggnaarttyggnathacngayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnaaymgnatgathwsnacngayaaygarcargcn[配列番号115](メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列);
aayccnacngtn[配列番号117](メトリジア・ロンガGSの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列);
aaracngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacn[配列番号119](メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列);
caraaracngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacn[配列番号121](メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列);
aarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnatgathaargcngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacn[配列番号123](メトリジア・ロンガ164v1および2ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列);
aarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaarwsngayathgcngayacngaymgngtnwsnaayttygtngcnacn[配列番号125](メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列);
aarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaaracngayathgcngayacngaymgngcnmgnwsnttygtngcnacn[配列番号127](メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列);
aarwsnacngarttygayccnaayathgaygtngtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaaracngayathgcngayacngaymgngcnmgnaayttygtngcnacn[配列番号129](メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列);
aarwsnacngarttygayccnaayathaayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggaygtnathaarwsngayathacngayacngaymgngtnwsnaayttygtngcnacn[配列番号131](メトリジア・ロンガALルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列)、
または105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129もしくは131のいずれか1つの相補鎖
のいずれか1つに示すヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列、
(d) 配列番号105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129もしくは131またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列同一性を共有するヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列、あるいは
(e) 配列番号105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129もしくは131またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも中度または高度ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列
からなる群から選択される。
【００３４】
いくつかの実施形態では、X17は、H以外である。
【００３５】
いくつかの実施形態では、X17は、小分子アミノ酸残基(例えばA、SもしくはTまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択される。
【００３６】
具体的な実施形態では、X17は、Aまたはその改変形態である。
【００３７】
いくつかの実施形態では、部分配列B1C5X17X18は、式Vで表されるアミノ酸配列:
BCΩΩ        (V)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
Ωは、小分子アミノ酸残基(例えばA、SもしくはTまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)から選択される)
からなる。
【００３８】
具体的な実施形態では、X17は、Aまたはその改変形態である。
【００３９】
いくつかの実施形態では、X18は、小分子アミノ酸残基(例えばTもしくはSまたはその改変形態)から選択される。
【００４０】
いくつかの実施形態では、部分配列B1C5X17X18は、RCAD、KCAD、RCED、KCED、RCSD、KCSD、RCTD、KCTD、RCATおよびRCASから選択される。
【００４１】
いくつかの実施形態では、X36は、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)または中性極性アミノ酸残基(例えばQまたはその改変形態)から選択される。
【００４２】
いくつかの実施形態では、X37は、AもしくはEまたは改変形態から選択される。
【００４３】
いくつかの実施形態では、X38は、Dまたはその改変形態である。
【００４４】
いくつかの実施形態では、部分配列X36C6X37X38は、RCAD、KCAD、RCED、KCED、RCSD、KCSD、RCTDおよびKCTDから、適切にはRCADおよびRCEDから選択される。
【００４５】
いくつかの実施形態では、X40は、塩基性アミノ酸残基(例えばKもしくはRまたはその改変形態)から選択される。
【００４６】
いくつかの実施形態では、Σは、SもしくはTまたはその改変形態から選択される。
【００４７】
いくつかの実施形態では、X41は、Dまたはその改変形態から選択される。
【００４８】
いくつかの実施形態では、部分配列X40C9ΣX41は、KCSDである。
【００４９】
いくつかの実施形態では、B1C5X17X18、X36C6X37X38およびX40C9ΣX41から選択されるポリペプチドの少なくとも1つの部分配列は、式VIで表されるアミノ酸配列:
BCΩD        (VI)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
Ωは、小分子アミノ酸残基(例えばA、SもしくはTまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択される)
からなる。
【００５０】
このタイプの説明的な例では、部分配列B1C5X17X18は、RCAD、KCAD、RCED、KCED、RCSD、KCSD、RCTDおよびKCTDから選択される。
【００５１】
説明的な例では、部分配列X36C6X37X38は、RCAD、KCAD、RCED、KCED、RCSD、KCSD、RCTDおよびKCTDから選択される。
【００５２】
説明的な例では、部分配列X40C9ΣX41は、配列KCSDからなる。
【００５３】
いくつかの実施形態では、X42は、DまたはP以外であり、適切にはRもしくはKまたはその改変形態、より適切にはHまたはその改変形態、さらにより適切にはT、A、SもしくはNまたはその改変形態、好ましくはQまたはその改変形態、より好ましくはGまたはその改変形態、さらにより好ましくはEまたはその改変形態から選択される。
【００５４】
いくつかの実施形態では、B1C5X17X18、X36C6X37X38、X40C9ΣX41およびB2C10X43X44から選択される少なくとも1、2、3または4つ全ての部分配列は、上で定義する式Vで表されるアミノ酸配列(すなわちBCΩΩ)からなる。このタイプの説明的な例では、式Vで表されるアミノ酸配列は、BCAD(例えばRCAD、KCAD)、BCAT(例えばRCAT、KCAT)、BCED(例えばRCED、KCED)、BCSD(例えばRCSD、KCSD)、BCTD(例えばRCTD、KCTD)およびBCAS(例えばRCAS、KCAS)から選択される。
【００５５】
いくつかの実施形態では、X36C6およびX40C9の一方または両方は、式XIIIで表されるアミノ酸配列:
BC    (XIII)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択される)
からなる。
【００５６】
これらの実施形態のいくつかの説明的な例では、B1C5、X36C6、X40C9およびB2C10から選択される少なくとも1、2、3または全ての部分配列は、式XIVで表されるアミノ酸配列:
BCΩ    (XIV)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
Ωは、小分子アミノ酸残基(例えばA、SもしくはTまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択される)
からなる部分配列内に存在する。
【００５７】
これらの例では、BCΩは、適切にはBCAまたはBCEから選択される配列からなる。
【００５８】
いくつかの実施形態では、B1C5X17、X36C6X37、X40C9ΣおよびB2C10X43から選択される少なくとも1、2、3または全ての部分配列は、式XVで表されるアミノ酸配列:
BCA    (XV)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択される)
からなる。
【００５９】
これらの実施形態のいくつかの説明的な例では、アミノ酸配列BCAは、BCADまたはBCATから選択される部分配列内に存在する。これらの例では、部分配列B1C5X17X18は、適切にはBCADまたはBCATで表される。適切には、部分配列B2C10X43は、BCATで表される。
【００６０】
これらの実施形態のいくつかの説明的な例では、アミノ酸配列BCAは、部分配列GBCAT内に存在する。これらの例では、部分配列GBCATは、適切には部分配列GB1C5X17X18およびX42B2C10X43の一方または両方で表される。
【００６１】
いくつかの実施形態では、X42は、DまたはP以外であり、適切にはRもしくはKまたはその改変形態、より適切にはHまたはその改変形態、さらにより適切にはT、A、SもしくはNまたはその改変形態、好ましくはQまたはその改変形態、より好ましくはGまたはその改変形態、さらにより好ましくはEまたはその改変形態から選択される。これらの実施形態のいくつかの説明的な例では、部分配列B2C10X43は、BCAで表されるか、または部分配列B2C10X43X44は、BCATで表される。
【００６２】
いくつかの実施形態では、X35X36C6およびX42B2C10の一方または両方は、式XVIで表されるアミノ酸配列:
EBC    (XVI)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択される)
からなる。
【００６３】
いくつかの実施形態では、X42B2C10は、式XVIIで表されるアミノ酸配列:
GBC    (XVII)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択される)
からなる。
【００６４】
これらの実施形態のいくつかの説明的な例では、GB1CおよびX42B2C10の一方または両方は、式XVIIIで表される部分配列:
GBCΩ    (XVIII)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
Ωは、小分子アミノ酸残基(例えばA、SもしくはTまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択される)
内に存在する。
【００６５】
適切には、GBCΩは、GBCAである。
【００６６】
これらの実施形態のいくつかの説明的な例では、GB1CおよびX42B2C10の一方または両方は、式XIXで表される部分配列:
GBCΩΩ    (XIX)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
Ωは、小分子アミノ酸残基(例えばA、SもしくはTまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択される)
内に存在する。
【００６７】
適切には、GBCΩΩは、GBCATである。
【００６８】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、ポリペプチドを細胞外の位置に分泌するためのシグナル配列および分泌増強配列のいずれか1または複数を場合によって含んでよい。
【００６９】
いくつかの実施形態では、上で広く記載する式Iに従うアミノ酸配列を含むポリペプチドは、85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)にLを有さない参照ルシフェラーゼポリペプチドに対して(例えば以下のいずれか1または複数のルシフェラーゼに比べて:メトリジア・パシフィカ2a、メトリジア・パシフィカ2bv1および2、メトリジア・ロンガ22、メトリジア・パシフィカv1および2および、メトリジア・ロンガ39、メトリジア・ロンガGSメトリジア・ロンガ7、メトリジア・ロンガ164M3、メトリジア・ロンガ164v1および2、メトリジア・ロンガ16、メトリジア・ロンガ45、メトリジア・ロンガ52およびメトリジア・ロンガAL)、増強されたルミネセンス、より強いフラッシュシグナルの強さ、増強されたグローシグナルの強さ、増強されたグローシグナルの安定性および酵素の働きについて上昇した最適温度範囲を含む増強された有効温度範囲からなる群から選択されるいずれか1または複数の活性を有する。
【００７０】
別の態様では、本発明は、式Iに関する実施形態のいずれか1または複数によりさらに定義する式Iに従うポリペプチドを含む、上で広く記載する式Iに従うポリペプチドのアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる単離、合成、組換えまたは精製核酸分子を提供する。いくつかの実施形態では、核酸分子は、
(a) 配列番号12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80または82のいずれか1つから選択されるアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列、
(b) 配列番号11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79もしくは81またはその相補鎖のいずれか1つから選択されるヌクレオチド配列、
(c) 配列番号11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79もしくは81またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列同一性を共有するヌクレオチド配列であって、ヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列が、式Iの1位に相当する位置にLまたはその改変形態を含むヌクレオチド配列、あるいは
(d) 配列番号11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79もしくは81またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも低度、中度または高度ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列であって、ヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列が、式Iの1位に相当する位置にLまたはその改変形態を含むヌクレオチド配列
からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる。
【００７１】
いくつかの実施形態では、核酸分子は、シグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列をさらに含み、その代表的な例は、
(a) 83、85、87、89、91、93、95、97、99、101もしくは103またはその相補鎖のいずれか1つに示すヌクレオチド配列、
(b) 配列番号83、85、87、89、91、93、95、97、99、101もしくは103またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも70% (ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列同一性を共有するヌクレオチド配列、あるいは
(c) 配列番号83、85、87、89、91、93、95、97、99、101もしくは103またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも低度、中度または高度ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列
から選択される。
【００７２】
いくつかの実施形態では、核酸分子は、分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列をさらに含み、その代表的な例は、
(a)配列番号105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129もしくは131またはその相補鎖のいずれか1つに示すヌクレオチド配列、
(b)配列番号105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129もしくは131またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも70% (ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列同一性を共有するヌクレオチド配列、あるいは
(c)配列番号105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129もしくは131またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも低度、中度または高度ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列
から選択される。
【００７３】
いくつかの実施形態では、上で広く記載する核酸分子によりコードされるポリペプチドは、85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)にLを有さない参照ルシフェラーゼポリペプチドに比べて(例えば以下のいずれか1または複数のルシフェラーゼに比べて:メトリジア・パシフィカ2a、メトリジア・パシフィカ2bv1および2、メトリジア・ロンガ22、メトリジア・パシフィカv1および2および、メトリジア・ロンガ39、メトリジア・ロンガGS、メトリジア・ロンガ7、メトリジア・ロンガ164M3、メトリジア・ロンガ164v1および2、メトリジア・ロンガ16、メトリジア・ロンガ45、メトリジア・ロンガ52およびメトリジア・ロンガAL)、増強されたルミネセンス、より強いフラッシュシグナルの強さ、増強されたグローシグナルの強さ、増強されたグローシグナルの安定性および酵素の働きについて上昇した最適温度範囲を含む増強された有効温度範囲からなる群から選択されるいずれか1または複数の活性を有する。
【００７４】
本発明者らは、例えば上で定義するルシフェラーゼの分泌増強ドメインが、ルシフェラーゼ活性のために必須でなく、いくつかの実施形態におけるその機能的欠失が、1または複数のルシフェラーゼ活性を改良することも見出した。つまり、別の態様では、本発明は、適切には単離、合成、組換えまたは精製された形態であり、ルシフェラーゼ活性を有するアミノ酸配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になるポリペプチドであって、アミノ酸配列が、式VII:
Ψ-Θ    (VII)
(式中:
Ψは、in vivoでのタンパク質合成の開始のためのアミノ酸残基(例えばMまたはその改変形態)、保護部分(例えばピログルタメートのようなN末端ブロッキング残基)および場合によってポリペプチドを細胞外の位置に分泌するためのシグナル配列の少なくとも1つを含み、
Θは、
(a) ルシフェラーゼ活性を有するアミノ酸配列であって、式VIII:
ΔX1PGKKX2PX3X4VX5X6EX7EANAX8X9AGC1X10RGC2LX11C3LSX12IKC4TX13X14MX15
X16X17IPGB1C5X18X19YX20GDKX21X22X23QX24GIX25X26X27X28IVDX29PEIX30GFKX31X32
X33PX34X35QFIAQVX36X37C6X38X39C7X40TGC8LKGLANVX41C9ΣX42LLKKWLPX43B2C10X44X45FAX46KIQX47X48X49X50X51IKGX52X53GD      (VIII)
で表されるアミノ酸配列
(式中:
Δは、存在しないか、または約1から約20までのアミノ酸残基(およびその間の全ての整数の残基)を含み、機能的分泌増強配列でないタンパク性部分であり、
X1は、疎水性アミノ酸残基(例えばLもしくはMのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばHまたはその改変形態)から選択され、
X2は、疎水性アミノ酸残基(例えばLもしくはMのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X3は、疎水性アミノ酸残基(例えばLのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X4は、疎水性アミノ酸残基(例えばAのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択され、
X5は、疎水性アミノ酸残基(例えばIもしくはLのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばPまたはその改変形態)から選択され、
X6は、疎水性アミノ酸残基(例えばI、MもしくはVのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X7は、疎水性アミノ酸残基(例えばM、IもしくはLのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X8は、塩基性アミノ酸残基(例えばKもしくはRまたはその改変形態)または疎水性アミノ酸残基(例えばFのような芳香族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X9は、塩基性アミノ酸残基(例えばKもしくはRまたはその改変形態)から選択され、
X10は、小分子アミノ酸残基(例えばTまたはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばHまたはその改変形態)から選択され、
X11は、疎水性アミノ酸残基(例えばIもしくはVのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X12は、塩基性アミノ酸残基(例えばHもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
X13は、小分子アミノ酸残基(例えばPもしくはAまたはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X14は、塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)または中性/極性アミノ酸残基(例えばQまたはその改変形態)から選択され、
X15は、塩基性アミノ酸残基(例えばKもしくはその改変形態)または中性/極性アミノ酸残基(例えばQまたはその改変形態)から選択され、
X16は、任意のアミノ酸残基(例えばKのような塩基性アミノ酸残基もしくはその改変形態、Vのような脂肪族アミノ酸残基を含む疎水性アミノ酸残基もしくはその改変形態、またはQのような中性/極性アミノ酸残基もしくはその改変形態)から選択され、
X17は、疎水性アミノ酸残基(例えばFもしくはYのような芳香族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
B1は、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
X18は、塩基性アミノ酸残基(例えばHまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばAまたはその改変形態)から選択され、
X19は、酸性アミノ酸残基(例えばDまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばTもしくはSまたはその改変形態)から選択され、
X20は、酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはAまたはその改変形態)から選択され、
X21は、酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X22は、小分子アミノ酸残基(例えばSもしくはTまたはその改変形態)から選択され、
X23は、小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはAまたはその改変形態)から選択され、
X24は、小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはAまたはその改変形態)から選択され、
X25は、小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはAまたはその改変形態)または疎水性アミノ酸残基(例えばVのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X26は、存在しないか、または小分子アミノ酸残基(例えばGまたはその改変形態)から選択され、
X27は、酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばGまたはその改変形態)から選択され、
X28は、小分子アミノ酸残基(例えばAまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択され、
X29は、疎水性アミノ酸残基(例えばIもしくはMのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X30は、小分子アミノ酸残基(例えばP、SもしくはAまたはその改変形態)から選択され、
X31は、酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)から選択され、
X32は、疎水性アミノ酸残基(例えばLもしくはMのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X33は、荷電アミノ酸残基(例えばEのような酸性アミノ酸残基もしくはその改変形態、またはKのような塩基性アミノ酸残基もしくはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはAまたはその改変形態)から選択され、
X34は、疎水性アミノ酸残基(例えばMもしくはLのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X35は、酸性アミノ酸残基(例えばEもしくはDまたはその改変形態)から選択され、
X36は、酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)から選択され、
X37は、疎水性アミノ酸残基(例えばLのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばRまたはその改変形態)から選択され、
X38は、任意のアミノ酸残基(例えばVのような脂肪族アミノ酸残基を含む疎水性アミノ酸残基もしくはその改変形態、あるいはAもしくはTのような小分子アミノ酸残基またはその改変形態、あるいはHのような塩基性アミノ酸残基またはその改変形態、あるいはEもしくはDのような酸性アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X39は、酸性アミノ酸残基(例えばDまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばSもしくはTまたはその改変形態)から選択され、
X40は、小分子アミノ酸残基(例えばTまたはその改変形態)または中性/極性アミノ酸残基(例えばNまたはその改変形態)から選択され、
X41は、塩基性アミノ酸残基(例えばK、RもしくはHまたはその改変形態)または中性/極性アミノ酸残基(例えばQまたはその改変形態)から選択され、
Σは、小分子アミノ酸残基(例えばS、AもしくはTまたはその改変形態)から選択され、
X42は、酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばS、TもしくはAまたはその改変形態)から選択され、
X43は、任意のアミノ酸残基(例えばP、G、T、SもしくはAのような小分子アミノ酸残基またはその改変形態、あるいはQもしくはNのような中性/極性アミノ酸残基またはその改変形態、H、KもしくはRのような塩基性アミノ酸残基またはその改変形態、あるいはDもしくはEのような酸性アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
B2は、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
X44は、小分子アミノ酸残基(例えばAまたはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X45は、小分子アミノ酸残基(例えばSもしくはTまたはその改変形態)から選択され、
X46は、酸性アミノ酸残基(例えばDまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばSまたはその改変形態)から選択され、
X47は、小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはSまたはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X48は、中性/極性アミノ酸残基(例えばQまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択され、
X49は、疎水性アミノ酸残基(例えばVのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばAまたはその改変形態)から選択され、
X50は、荷電アミノ酸残基(例えばDのような酸性アミノ酸残基もしくはその改変形態、またはHのような塩基性アミノ酸残基もしくはその改変形態)から選択され、
X51は、任意のアミノ酸残基(例えばKのような塩基性アミノ酸残基もしくはその改変形態、またはNのような中性/極性アミノ酸残基もしくはその改変形態、またはTのような小分子アミノ酸残基もしくはその改変形態)から選択され、
X52は、小分子アミノ酸残基(例えばAまたはその改変形態)または疎水性アミノ酸残基(例えばLもしくはMのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X53は、小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはAまたはその改変形態)から選択される)、あるいは
(b) 式VIIIで表されるアミノ酸配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列類似性または配列同一性を共有するアミノ酸配列
を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる)
で表されるポリペプチドを提供する。
【００７５】
適切には、Θは、機能的分泌増強配列、例えばKPTENNEDFNIVAVASNFATT[配列番号106、ガウシア・プリンセプスProlume、Prolume KDEL、変異体1および変異体2ルシフェラーゼの分泌増強配列]、ATINENFEDIDVVAIGGSFAL[配列番号108、メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼの分泌増強配列]、ATINENFEDIDLVAIGGSFAL[配列番号110、メトリジア・パシフィカ2bv1&2ルシフェラーゼの分泌増強配列]、ATIQENFEDIDLVAIGGSFAS[配列番号112、メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼの分泌増強配列]、NPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLA[配列番号114、メトリジア・パシフィカv1&2&3ルシフェラーゼの分泌増強配列]、NPTENNDHINIVGIEGKFGITDLETDLFTIWETNRMISTDNEQA[配列番号116、メトリジア・ロンガ39の分泌増強配列];NPTV[配列番号118、メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼの分泌増強配列];KTDIADTDRASNFVAT[配列番号120、メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼの分泌増強配列];QKTDIADTDRASNFVAT[配列番号122、メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼの分泌増強配列];KSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVAT[配列番号124、メトリジア・ロンガ164v1&2ルシフェラーゼの分泌増強配列];KSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKSDIADTDRVSNFVAT[配列番号126、メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼの分泌増強配列];KSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARSFVAT[配列番号128、メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼの分泌増強配列];KSTEFDPNIDVVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARNFVAT[配列番号130、メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼの分泌増強配列];およびKSTEFDPNINIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMDVIKSDITDTDRVSNFVAT[配列番号132、メトリジア・ロンガALルシフェラーゼの分泌増強配列]からなる群から選択されるものを欠くか、またはそうでなければ除外する。
【００７６】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、配列:MDIKFIFALVCIALVQANPTVNNDVNRGKMPGKKLPLEVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKQYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEAHNIKGLAGDR [配列番号134](全長野生型メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ)からなるもの以外である。
【００７７】
いくつかの実施形態では、Θに従うアミノ酸配列は、式VIIIで表される配列の上流(例えばすぐ上流)に、式IXで表されるアミノ酸配列:
X54X55X56X57X58RGO1X59    (IX)
(式中:
X54は、存在しないか、または酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)もしくは中性/極性アミノ酸残基(例えばNまたはその改変形態)から選択され、ここで、X54は、X55が存在することを条件としていくつかの実施形態で存在し、
X55は、存在しないか、または任意のアミノ酸残基(例えばLもしくはVのような脂肪族アミノ酸残基を含む疎水性アミノ酸残基またはその改変形態、S、TもしくはAのような小分子アミノ酸残基またはその改変形態、あるいはNのような中性/極性アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、ここで、X55は、X56が存在することを条件としていくつかの実施形態で存在し、
X56は、存在しないか、または酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)から選択され、ここで、X56は、X57が存在することを条件としていくつかの実施形態で存在し、
X57は、存在しないか、または任意のアミノ酸残基(例えばVのような脂肪族アミノ酸残基を含む疎水性アミノ酸残基もしくはその改変形態、あるいはS、TもしくはAのような小分子アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、ここで、X57は、X58が存在することを条件としていくつかの実施形態で存在し、
X58は、酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)または中性/極性アミノ酸残基(例えばNまたはその改変形態)から選択され、ここで、X58は、O1が存在することを条件としていくつかの実施形態で存在し、
O1は、存在しないか、または配列J1J2J3(式中、J1は、小分子アミノ酸残基(例えばGまたはその改変形態)から選択され、J2は、塩基性アミノ酸残基(例えばHまたはその改変形態)から選択され、J3は、小分子アミノ酸残基(例えばGまたはその改変形態)から選択される)であり、ここで、O1は、X59が存在することを条件としていくつかの実施形態で存在し、
X59は、塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態);または小分子アミノ酸残基(例えばGまたはその改変形態)から選択される)
をさらに含む。
【００７８】
いくつかの実施形態では、Θは、
(a) DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号46、細胞内ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼ];
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGDKDEL[配列番号48、細胞内ガウシア・プリンセプスKDELルシフェラーゼ];
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEIEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号50、細胞内ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼ];
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKELEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPLEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号52、細胞内ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼ];
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVHCSALLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号136、細胞内メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼ];
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号138、細胞内メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼ];
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVPVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号140、細胞内メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼ];
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLMEMEANAKRAGCHRGCLVCLSHIKCTAQMQKFIPGRCHSYAGDKDSAQGGIAGGAIVDIPEIAGFKEMKPMEQFIAQVDLCEDCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号142、細胞内メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼ];および
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号144、細胞内メトリジア・パシフィカv1、2および3ルシフェラーゼ];
NTDSNRGKMPGKKLPLAVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPDISGFKEMGPMEQFIAQVDRCTDCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQSEVHNIKGLAGDR[配列番号146、細胞内メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼ];
NNDVNRGKMPGKKLPLEVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKQYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEAHNIKGLAGDR[配列番号148、細胞内メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ];
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号150](細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号152、細胞内メトリジア・ロンガ164M3およびv1ルシフェラーゼ];
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVERCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号154、細胞内メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼ];
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCTSCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号156、細胞内メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼ];
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号158、細胞内メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼ];
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCNTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号160、細胞内メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼ];
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDLCATCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPGRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号162、細胞内メトリジア・ロンガALルシフェラーゼ];
EAEAERGKLPGKKMPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPGRCATFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号82、細胞内メトリジア・ロンガGS2ルシフェラーゼ]
から選択されるアミノ酸配列、
(b) 配列番号46、48、50、52、82、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154、156、158、160もしくは162のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列類似性または配列同一性を共有するアミノ酸配列、あるいは
(c) gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号45](細胞内ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngayaargaygarytn[配列番号47](細胞内ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarathgargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号49](細胞内ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarytngargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnytngarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号51](細胞内ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngcnytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号135](細胞内メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号137](細胞内メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnccngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号139](細胞内メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytnatggaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytngtntgyytnwsncayathaartgyacngcncaratgcaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygcnggngayaargaywsngcncarggnggnathgcnggnggngcnathgtngayathccngarathgcnggnttyaargaratgaarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygargaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号141](細胞内メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngcnytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号143](細胞内メトリジア・パシフィカv1、2および3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aayacngaywsnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaaraartayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngayathwsnggnttyaargaratgggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgyacngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号145](細胞内メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aayaaygaygtnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaarcartayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargcncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号147](細胞内メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号149](細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号151](細胞内メトリジア・ロンガ164M3およびv1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngarmgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号153](細胞内メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgyacnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号155](細胞内メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号157](細胞内メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyaayacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号159](細胞内メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcnacntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccnggnmgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号161](細胞内メトリジア・ロンガALルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、もしくは
gargcngargcngarmgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaaraartayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnaaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号81](細胞内メトリジア・ロンガGS2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、
または45、47、49、51、81、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159もしくは161のいずれか1つの相補鎖
のいずれか1つに示すヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列、
(d) 配列番号45、47、49、51、81、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159もしくは161またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列同一性を共有するヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列、あるいは
(e) 配列番号45、47、49、51、81、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159もしくは161またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも中度または高度ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列
から選択されるアミノ酸配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる。
【００７９】
いくつかの実施形態では、シグナルペプチドは、上で広く記載する式IVで表されるアミノ酸配列を含み、非限定的な例は、(a)配列番号84、86、88、90、92、94、96、98、100、102または104に示すアミノ酸配列、あるいは(b)配列番号84、86、88、90、92、94、96、98、100、102または104のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列類似性または配列同一性を共有するアミノ酸配列、あるいは(c)配列番号83、85、87、89、91、93、95、97、99、101または103のいずれか1つに示すヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列、あるいは(d)配列番号83、85、87、89、91、93、95、97、99、101もしくは103またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列同一性を共有するヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列、あるいは(e) 配列番号83、85、87、89、91、93、95、97、99、101もしくは103またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも中度または高度ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列を含む。
【００８０】
いくつかの実施形態では、式VIIIに従うポリペプチドは、ポリペプチドを細胞外の位置に分泌するためのシグナルペプチドを欠く。
【００８１】
いくつかの実施形態では、式VIII中のX1は、Lまたはその改変形態である。
【００８２】
いくつかの実施形態では、X18は、H以外である。
【００８３】
いくつかの実施形態では、X18は、小分子アミノ酸残基(例えばA、SもしくはTまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択される。
【００８４】
具体的な実施形態では、X18は、Aまたはその改変形態である。
【００８５】
いくつかの実施形態では、部分配列B1C5X18X19は、式Vで表されるアミノ酸配列:
BCΩΩ        (V)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
Ωは、小分子アミノ酸残基(例えばA、SもしくはTまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)から選択される)
からなる。
【００８６】
具体的な実施形態では、X18は、Aまたはその改変形態である。
【００８７】
いくつかの実施形態では、X19は、小分子アミノ酸残基(例えばTもしくはSまたはその改変形態)から選択される。
【００８８】
いくつかの実施形態では、部分配列B1C5X18X19は、RCAD、KCAD、RCED、KCED、RCSD、KCSD、RCTD、KCTD、RCATまたはRCASから選択される。
【００８９】
いくつかの実施形態では、X37は、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)または中性極性アミノ酸残基(例えばQまたはその改変形態)から選択される。
【００９０】
いくつかの実施形態では、X38は、AもしくはEまたは改変形態から選択される。
【００９１】
いくつかの実施形態では、X39は、Dまたはその改変形態である。
【００９２】
いくつかの実施形態では、部分配列X37C6X38X39は、RCADまたはRCEDから選択される。
【００９３】
いくつかの実施形態では、X41は、塩基性アミノ酸残基(例えばKもしくはRまたはその改変形態)から選択される。
【００９４】
いくつかの実施形態では、Σは、SもしくはTまたはその改変形態から選択される。
【００９５】
いくつかの実施形態では、X42は、Dまたはその改変形態から選択される。
【００９６】
いくつかの実施形態では、部分配列X41C9ΣX42は、KCSDである。
【００９７】
いくつかの実施形態では、B1C5X18X19、X37C6X38X39およびX41C9ΣX42から選択されるポリペプチドの少なくとも1つの部分配列は、式VIで表されるアミノ酸配列:
BCΩD        (VI)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
Ωは、小分子アミノ酸残基(例えばA、SもしくはTまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択される)
からなる。
【００９８】
このタイプの説明的な例では、部分配列B1C5X18X19は、RCAD、KCAD、RCED、KCED、RCSD、KCSD、RCTDおよびKCTDから選択される。
【００９９】
説明的な例では、部分配列X37C6X38X39は、RCAD、KCAD、RCED、KCED、RCSD、KCSD、RCTDおよびKCTDから選択される。
【０１００】
説明的な例では、部分配列X41C9ΣX42は、配列KCSDからなる。
【０１０１】
いくつかの実施形態では、X43は、DまたはP以外であり、適切にはRもしくはKまたはその改変形態、より適切にはHまたはその改変形態、さらにより適切にはT、A、SもしくはNまたはその改変形態、好ましくはQまたはその改変形態、より好ましくはGまたはその改変形態、さらにより好ましくはEまたはその改変形態から選択される。
【０１０２】
いくつかの実施形態では、B1C5X18X19、X37C6X38X39、X41C9ΣX42およびB2C10X44X45から選択される少なくとも1、2、3または4つ全ての部分配列は、上で定義する式Vで表されるアミノ酸配列(すなわちBCΩΩ)からなる。このタイプの説明的な例では、式Vで表されるアミノ酸配列は、BCAD(例えばRCAD、KCAD)、BCAT(例えばRCAT、KCAT)、BCED(例えばRCED、KCED)、BCSD(例えばRCSD、KCSD)、BCTD(例えばRCTD、KCTD)およびBCAS(例えばRCAS、KCAS)から選択される。
【０１０３】
いくつかの実施形態では、X37C6およびX41C9の一方または両方は、式XXで表されるアミノ酸配列:
BC    (XX)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択される)
からなる。
【０１０４】
これらの実施形態のいくつかの説明的な例では、B1C5、X37C6、X41C9およびB2C10から選択される少なくとも1、2、3または全ての部分配列は、式XXIで表されるアミノ酸配列:
BCΩ    (XXI)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
Ωは、小分子アミノ酸残基(例えばA、SもしくはTまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択される)
からなる部分配列内に存在する。
【０１０５】
これらの例では、BCΩは、適切にはBCAまたはBCEから選択される配列からなる。
【０１０６】
いくつかの実施形態では、B1C5X18、X37C6X38、X41C9ΣおよびB2C10X44から選択される少なくとも1、2、3または全ての部分配列は、式XXIIで表されるアミノ酸配列:
BCA    (XXII)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択される)
からなる。
【０１０７】
これらの実施形態のいくつかの説明的な例では、アミノ酸配列BCAは、BCADまたはBCATから選択される部分配列内に存在する。これらの例では、部分配列B1C5X18X19は、適切にはBCADまたはBCATで表される。適切には、部分配列B2C10X44は、BCATで表される。
【０１０８】
これらの実施形態のいくつかの説明的な例では、アミノ酸配列BCAは、部分配列GBCAT内に存在する。これらの例では、部分配列GBCATは、適切には部分配列GB1C5X18X19およびX43B2C10X44の一方または両方で表される。
【０１０９】
いくつかの実施形態では、部分配列X42は、DまたはP以外であり、適切にはRもしくはKまたはその改変形態、より適切にはHまたはその改変形態、さらにより適切にはT、A、SもしくはNまたはその改変形態、好ましくはQまたはその改変形態、より好ましくはGまたはその改変形態、さらにより好ましくはEまたはその改変形態から選択される。これらの実施形態のいくつかの説明的な例では、部分配列B2C10X44は、BCAで表されるか、または部分配列B2C10X44X45は、BCATで表される。
【０１１０】
いくつかの実施形態では、X36X37C6およびX43B2C10の一方または両方は、式XXIIIで表されるアミノ酸配列:
EBC    (XXIII)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択される)
からなる。
【０１１１】
いくつかの実施形態では、X43B2C10は、式XXIVで表されるアミノ酸配列:
GBC    (XXIV)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択される)
からなる。
【０１１２】
これらの実施形態のいくつかの説明的な例では、GB1CおよびX43B2C10の一方または両方は、式XXVで表される部分配列:
GBCΩ    (XXV)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
Ωは、小分子アミノ酸残基(例えばA、SもしくはTまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択される)
内に存在する。
【０１１３】
適切には、GBCΩは、GBCAである。
【０１１４】
これらの実施形態のいくつかの説明的な例では、GB1CおよびX43B2C10の一方または両方は、式XXVIで表される部分配列:
GBCΩΩ    (XXVI)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
Ωは、小分子アミノ酸残基(例えばA、SもしくはTまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択される)
内に存在する。
【０１１５】
適切には、GBCΩΩは、GBCATである。
【０１１６】
いくつかの実施形態では、Θに従うアミノ酸配列を含むポリペプチドは、機能的分泌増強配列を含む参照ルシフェラーゼポリペプチドに比べて、増強されたルミネセンス、より強いフラッシュシグナルの強さ、増強されたグローシグナルの強さ、増強されたグローシグナルの安定性および酵素の働きについて上昇した最適温度範囲を含む増強された有効温度範囲からなる群から選択されるいずれか1または複数の活性を有する。
【０１１７】
関連する態様では、本発明は、上で広く記載する式VIIまたは式VIIに関連する実施形態のいずれか1つに従うポリペプチドのアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる単離、合成、組換えまたは精製核酸分子を提供する。いくつかの実施形態では、核酸分子は、
(a) 配列番号46、48、50、52、82、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154、156、158、160または162のいずれか1つから選択されるアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列、
(b) 配列番号45(細胞内ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、配列番号47(細胞内ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、配列番号49(細胞内ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、配列番号51(細胞内ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、配列番号135(細胞内メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、配列番号137(細胞内メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、配列番号139(細胞内メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、配列番号141(細胞内メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、配列番号143(細胞内メトリジア・パシフィカv1および2および3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、配列番号145(細胞内メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、配列番号147(細胞内メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、配列番号149(細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、配列番号151(細胞内メトリジア・ロンガ164M3およびv1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、配列番号153(細胞内メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、配列番号155(細胞内メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、配列番号157(細胞内メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、配列番号159(細胞内メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、配列番号161(細胞内メトリジア・ロンガALルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)もしくは配列番号81(細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)またはその相補鎖から選択されるヌクレオチド配列、
(c) 配列番号45、47、49、51、81、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159もしくは161またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも70% (ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列同一性を共有するヌクレオチド配列、あるいは
(d) 配列番号45、47、49、51、81、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159もしくは161またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも低度、中度または高度ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列
からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる。
【０１１８】
いくつかの実施形態では、核酸分子は、シグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列をさらに含み、その代表的な例は、
(a) 82、84、86、88、90、92、94、96、98、100または102のいずれか1つから選択されるアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列、
(b) 配列番号83(ガウシア・プリンセプスProlume、Prolume KDEL、変異体1または変異体2ルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列)、配列番号85(メトリジア・パシフィカ2a、2bv1、2bv2またはメトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列)、配列番号87(メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列)、配列番号89(メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列)、配列番号91(メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列)、配列番号93(メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列)、配列番号95(メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列)、配列番号97(メトリジア・ロンガ164M3、v1またはv2ルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列)、配列番号99(メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列)、配列番号101(メトリジア・ロンガ45および52ルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列)もしくは配列番号103(メトリジア・ロンガALルシフェラーゼのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列)またはその相補鎖のいずれか1つに示すヌクレオチド配列、
(c) 配列番号83、85、87、89、91、93、95、97、99、101もしくは103またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列同一性を共有するヌクレオチド配列、あるいは
(d) 配列番号83、85、87、89、91、93、95、97、99、101もしくは103またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも低度、中度または高度ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列
から選択される。
【０１１９】
適切には、核酸分子は、分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列を除外し、その代表的な例は、
配列番号105(ガウシア・プリンセプスProlume、Prolume KDEL、変異体1および変異体2ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列)、配列番号107(メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列)、配列番号109(メトリジア・パシフィカ2bv1および2ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列)、配列番号111(メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列)、配列番号113(メトリジア・パシフィカv1および2および3ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列)、配列番号115(メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列)、配列番号117(メトリジア・ロンガGSの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列)、配列番号119(メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列)、配列番号121(メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列)、配列番号123(メトリジア・ロンガ164v1および2ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列)、配列番号125(メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列)、配列番号127(メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列)、配列番号129(メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列)、配列番号131(メトリジア・ロンガALルシフェラーゼの分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列)のいずれか1つに示すヌクレオチド配列
を含む。
【０１２０】
いくつかの実施形態では、上で広く記載する核酸分子によりコードされるポリペプチドは、機能的分泌増強配列を含む参照ルシフェラーゼポリペプチドに比べて、増強されたルミネセンス、より強いフラッシュシグナルの強さ、増強されたグローシグナルの強さ、増強されたグローシグナルの安定性および酵素の働きについて上昇した最適温度範囲を含む増強された有効温度範囲からなる群から選択されるいずれか1または複数の活性を有する。
【０１２１】
本発明者らは、保存システイン(例えばC5、C6、C9およびC10)を含むある特定の4残基モチーフの改変が、ルミネセンス、フラッシュシグナルの強さ、グローシグナルの強さ、グローシグナル安定性およびルシフェラーゼの働きの最適温度範囲の上昇を含む有効温度範囲から選択される、ルシフェラーゼ、特にカイアシルシフェラーゼの1または複数の光放射の特徴を著しく改良できることも見出した。したがって、まださらに別の態様では、本発明は、適切に単離、合成、組換えまたは精製された形であり、ルシフェラーゼ活性を有するアミノ酸配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になるポリペプチドであって、アミノ酸配列が、
(a) 式Xで表されるアミノ酸配列:
X1PGKKX2PX3X4VX5X6EX7EANAX8X9AGC1X10RGC2LX11C3LSX12IKC4TX13X14MX15
X16X17IPGB1C5X18X19YX20GDKX21X22X23QX24GIX25X26X27X28IVDX29PEIX30GFKX31X32
X33PX34X35QFIAQVX36X37C6X38X39C7X40TGC8LKGLANVX41C9ΣX42LLKKWLPX43B2C10X44X45FAX46KIQX47X48X49X50X51IKGX52X53GD      (X)
(式中:
X1は、疎水性アミノ酸残基(例えばLもしくはMのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばHまたはその改変形態)から選択され、
X2は、疎水性アミノ酸残基(例えばLもしくはMのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X3は、疎水性アミノ酸残基(例えばLのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X4は、疎水性アミノ酸残基(例えばAのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択され、
X5は、疎水性アミノ酸残基(例えばIもしくはLのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばPまたはその改変形態)から選択され、
X6は、疎水性アミノ酸残基(例えばI、MもしくはVのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X7は、疎水性アミノ酸残基(例えばM、IもしくはLのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X8は、塩基性アミノ酸残基(例えばKもしくはRまたはその改変形態)または疎水性アミノ酸残基(例えばFのような芳香族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X9は、塩基性アミノ酸残基(例えばKもしくはRまたはその改変形態)から選択され、
X10は、小分子アミノ酸残基(例えばTまたはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばHまたはその改変形態)から選択され、
X11は、疎水性アミノ酸残基(例えばIもしくはVのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X12は、塩基性アミノ酸残基(例えばHもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
X13は、小分子アミノ酸残基(例えばPもしくはAまたはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X14は、塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)または中性/極性アミノ酸残基(例えばQまたはその改変形態)から選択され、
X15は、塩基性アミノ酸残基(例えばKもしくはその改変形態)または中性/極性アミノ酸残基(例えばQまたはその改変形態)から選択され、
X16は、任意のアミノ酸残基(例えばKのような塩基性アミノ酸残基もしくはその改変形態、Vのような脂肪族アミノ酸残基を含む疎水性アミノ酸残基もしくはその改変形態、またはQのような中性/極性アミノ酸残基もしくはその改変形態)から選択され、
B1は、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
X17は、疎水性アミノ酸残基(例えばFもしくはYのような芳香族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X18は、塩基性アミノ酸残基(例えばHまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばAまたはその改変形態)から選択され、
X19は、酸性アミノ酸残基(例えばDまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばTもしくはSまたはその改変形態)から選択され、
X20は、酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはAまたはその改変形態)から選択され、
X21は、酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X22は、小分子アミノ酸残基(例えばSもしくはTまたはその改変形態)から選択され、
X23は、小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはAまたはその改変形態)から選択され、
X24は、小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはAまたはその改変形態)から選択され、
X25は、小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはAまたはその改変形態)または疎水性アミノ酸残基(例えばVのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X26は、存在しないか、または小分子アミノ酸残基(例えばGまたはその改変形態)から選択され、
X27は、酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばGまたはその改変形態)から選択され、
X28は、小分子アミノ酸残基(例えばAまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択され、
X29は、疎水性アミノ酸残基(例えばIもしくはMのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X30は、小分子アミノ酸残基(例えばP、SもしくはAまたはその改変形態)から選択され、
X31は、酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)から選択され、
X32は、疎水性アミノ酸残基(例えばLもしくはMのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X33は、荷電アミノ酸残基(例えばEのような酸性アミノ酸残基もしくはその改変形態、またはKのような塩基性アミノ酸残基もしくはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはAまたはその改変形態)から選択され、
X34は、疎水性アミノ酸残基(例えばMもしくはLのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X35は、酸性アミノ酸残基(例えばEもしくはDまたはその改変形態)から選択され、
X36は、酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)から選択され、
X37は、疎水性アミノ酸残基(例えばLのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばRまたはその改変形態)から選択され、
X38は、任意のアミノ酸(例えばVのような脂肪族アミノ酸残基を含む疎水性アミノ酸残基もしくはその改変形態、あるいはAもしくはTのような小分子アミノ酸残基またはその改変形態、あるいはHのような塩基性アミノ酸残基またはその改変形態、あるいはEもしくはDのような酸性アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X39は、酸性アミノ酸残基(例えばDまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばSもしくはTまたはその改変形態)から選択され、
X40は、小分子アミノ酸残基(例えばTまたはその改変形態)または中性/極性アミノ酸残基(例えばNまたはその改変形態)から選択され、
X41は、塩基性アミノ酸残基(例えばK、RもしくはHまたはその改変形態)または中性/極性アミノ酸残基(例えばQまたはその改変形態)から選択され、
Σは、小分子アミノ酸残基(例えばS、AもしくはTまたはその改変形態)から選択され、
X42は、酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばAまたはその改変形態)から選択され、
X43は、任意のアミノ酸残基(例えばP、G、T、SもしくはAのような小分子アミノ酸残基またはその改変形態、あるいはQもしくはNのような中性/極性アミノ酸残基またはその改変形態、H、KもしくはRのような塩基性アミノ酸残基またはその改変形態、あるいはDもしくはEのような酸性アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
B2は、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
X44は、小分子アミノ酸残基(例えばAまたはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X45は、小分子アミノ酸残基(例えばSもしくはTまたはその改変形態)から選択され、
X46は、酸性アミノ酸残基(例えばDまたはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばSまたはその改変形態)から選択され、
X47は、小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはSまたはその改変形態)または塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態)から選択され、
X48は、中性/極性アミノ酸残基(例えばQまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択され、
X49は、疎水性アミノ酸残基(例えばVのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)または小分子アミノ酸残基(例えばAまたはその改変形態)から選択され、
X50は、荷電アミノ酸残基(例えばDのような酸性アミノ酸残基もしくはその改変形態、またはHのような塩基性アミノ酸残基もしくはその改変形態)から選択され、
X51は、任意のアミノ酸残基(例えばKのような塩基性アミノ酸残基もしくはその改変形態、またはNのような中性/極性アミノ酸残基もしくはその改変形態、またはTのような小分子アミノ酸残基もしくはその改変形態)から選択され、
X52は、小分子アミノ酸残基(例えばAまたはその改変形態)または疎水性アミノ酸残基(例えばLもしくはMのような脂肪族アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、
X53は、小分子アミノ酸残基(例えばGもしくはAまたはその改変形態)から選択され、
但し、B1C5X18X19、X37C6X38X39またはX41C9ΣX42から選択される少なくとも1つの部分配列が、式XIで表されるアミノ酸配列:
BCΩD    (XI)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
Ωは、小分子アミノ酸残基(例えばA、SもしくはTまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択される)
からなる)、あるいは
(b)式Xで表されるアミノ酸配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列類似性または配列同一性を共有し、B1C5X18X19、X37C6X38X39またはX41C9ΣX42から選択される少なくとも1つの部分配列(ここで、個別の部分配列は、上で定義する式XIで表されるアミノ酸配列からなる)を含むアミノ酸配列
から選択されるポリペプチドを提供する。
【０１２２】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、
(1) MGVKLIFAVVCVAAAQAATINENFEDIDLVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号166](全長メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼ);
(2) MGVKLIFAVVCVAAAQAATINENFEDIDLVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVPVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号168](全長メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼ);および
(3) MGVKLIFAVVCVAVAQAATIQENFEDIDLVAIGGSFASDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLMEMEANAKRAGCHRGCLVCLSHIKCTAQMQKFIPGRCHSYAGDKDSAQGGIAGGAIVDIPEIAGFKEMKPMEQFIAQVDLCEDCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号170](全長メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼ);
(4) MDIKVLFALICIALVQANPTENNDHINIVGIEGKFGITDLETDLFTIWETNRMISTDNEQANTDSNRGKMPGKKLPLAVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPDISGFKEMGPMEQFIAQVDRCTDCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQSEVHNIKGLAGDR[配列番号172](全長メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼ)
から選択されるアミノ酸配列からなるもの以外である。
【０１２３】
いくつかの実施形態では、B1C5X18X19、X37C6X38X39またはX41C9ΣX42から選択される少なくとも2つの部分配列のそれぞれは、式XIで表されるアミノ酸配列からなる。他の実施形態では、B1C5X18X19、X37C6X38X39またはX41C9ΣX42から選択されるそれぞれの部分配列は、式XIで表されるアミノ酸配列からなる。
【０１２４】
いくつかの実施形態では、式XIのBは、RもしくはKまたはその改変形態から選択される。
【０１２５】
いくつかの実施形態では、式XIのΩは、A、S、TもしくはEまたはその改変形態から選択される。具体的な実施形態では、X18は、Aまたはその改変形態である。具体的な実施形態では、X38は、A、T、DもしくはEまたはその改変形態から選択される。具体的な実施形態では、Σは、S、TもしくはAまたはその改変形態から選択される。
【０１２６】
いくつかの実施形態では、式XIのBは、RもしくはKまたはその改変形態から選択され、式XIのΩは、A、S、TもしくはEまたはその改変形態から選択される。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、式Xで表される配列の上流(例えばすぐ上流)に、式IXで表されるアミノ酸配列:
X54X55X56X57X58RGO1X59    (IX)
(式中:
X54は、存在しないか、または酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)もしくは中性/極性アミノ酸残基(例えばNまたはその改変形態)から選択され、ここで、X54は、X55が存在することを条件としていくつかの実施形態で存在し、
X55は、存在しないか、または任意のアミノ酸残基(例えばLもしくはVのような脂肪族アミノ酸残基を含む疎水性アミノ酸残基またはその改変形態、S、TもしくはAのような小分子アミノ酸残基またはその改変形態、あるいはNのような中性/極性アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、ここで、X55は、X56が存在することを条件としていくつかの実施形態で存在し、
X56は、存在しないか、または酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)から選択され、ここで、X56は、X57が存在することを条件としていくつかの実施形態で存在し、
X57は、存在しないか、または任意のアミノ酸残基(例えばVのような脂肪族アミノ酸残基を含む疎水性アミノ酸残基もしくはその改変形態、あるいはS、TもしくはAのような小分子アミノ酸残基またはその改変形態)から選択され、ここで、X57は、X58が存在することを条件としていくつかの実施形態で存在し、
X58は、酸性アミノ酸残基(例えばDもしくはEまたはその改変形態)または中性/極性アミノ酸残基(例えばNまたはその改変形態)から選択され、ここで、X58は、O1が存在することを条件としていくつかの実施形態で存在し、
O1は、存在しないか、または配列J1J2J3(式中、J1は、小分子アミノ酸残基(例えばGまたはその改変形態)から選択され、J2は、塩基性アミノ酸残基(例えばHまたはその改変形態)から選択され、J3は、小分子アミノ酸残基(例えばGまたはその改変形態)から選択される)であり、ここで、O1は、X59が存在することを条件としていくつかの実施形態で存在し、
X59は、塩基性アミノ酸残基(例えばKまたはその改変形態);または小分子アミノ酸残基(例えばGまたはその改変形態)から選択される)
をさらに含む。
【０１２８】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、式XIIで表されるアミノ酸配列:
Z1-Π-Z2    (XII)
(式中:
Πは、式Xで表されるアミノ酸配列または式Xで表されるアミノ酸配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列類似性または配列同一性を共有するアミノ酸配列から選択され、
Z1は、存在しないか、または約1から約80までのアミノ酸残基(およびその間の全ての整数の残基)を含むタンパク性部分、in vivoでのタンパク質合成の開始のためのアミノ酸残基(例えばMまたはその改変形態)および保護部分(例えばピログルタメートのようなN末端ブロッキング残基)の少なくとも1つから選択され、
Z2は、存在しないか、または約1から約50までのアミノ酸残基(およびその間の全ての整数の残基)を含むタンパク性部分である)
を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる。
【０１２９】
適切には、Z1は、ポリペプチドを細胞外の位置に分泌するためのシグナルペプチドを含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる。いくつかの実施形態では、シグナルペプチドは、上で広く定義する式IVで表されるアミノ酸配列を含む。代表的なシグナルペプチドは、
(a) 配列番号84、86、88、90、92、94、96、98、100、102または104から選択されるアミノ酸配列、
(b) 配列番号84、86、88、90、92、94、96、98、100、102または104のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列類似性または配列同一性を共有するアミノ酸配列、
(c) 配列番号83、85、87、89、91、93、95、97、99、101または103のいずれか1つに示すヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列、
(d) 配列番号83、85、87、89、91、93、95、97、99、101もしくは103またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列同一性を共有するヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列、あるいは
(e) 配列番号83、85、87、89、91、93、95、97、99、101もしくは103またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも中度または高度ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる。
【０１３０】
いくつかの実施形態では、Z1は、分泌増強配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になり、その非限定的な例は、
(a) 配列番号106、107、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130または132のいずれか1つに示すアミノ酸配列、あるいは
(b) 配列番号106、107、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130または132のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列類似性または配列同一性を共有するアミノ酸配列、
(c) 配列番号105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129もしくは131またはその相補鎖のいずれか1つに示すヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列、
(d) 配列番号105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129もしくは131またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列同一性を共有するヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列、あるいは
(e) 配列番号105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129もしくは131またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも中度または高度ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列
から選択される。
【０１３１】
いくつかの実施形態では、式Xに従うポリペプチドは、
(a) MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号174](C5にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGDKDEL[配列番号176](C5にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEIEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号178](C5にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKELEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPLEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号180](C5にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼの全長配列);
MEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号182](C5にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼの全長配列);
MGVKLIFAVLCVAAAQAATINENFEDIDVVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVHCSALLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号184](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAAAQAATINENFEDIDLVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号186](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAAAQAATINENFEDIDLVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVPVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号188](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAVAQAATIQENFEDIDLVAIGGSFASDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLMEMEANAKRAGCHRGCLVCLSHIKCTAQMQKFIPGRCADYAGDKDSAQGGIAGGAIVDIPEIAGFKEMKPMEQFIAQVDLCEDCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号190](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼ);
MMEIQVLFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号192](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼ);
MMEIKVLFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号194](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼ);
MMEVKVVFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号196](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼ);
MDIKVLFALICIALVQANPTENNDHINIVGIEGKFGITDLETDLFTIWETNRMISTDNEQANTDSNRGKMPGKKLPLAVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPDISGFKEMGPMEQFIAQVDRCTDCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQSEVHNIKGLAGDR[配列番号198](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼ);
MDIKFIFALVCIALVQANPTVNNDVNRGKMPGKKLPLEVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKQYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEAHNIKGLAGDR[配列番号200](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ);
MKTDIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号202](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAQKTDIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号204](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号206](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVERCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号208](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼ);
MDMKVIFALIFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKSDIADTDRVSNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCTSCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号210](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼ);
MDIKVVFALVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARSFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号212](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼ);
MDIKVVFALVFSALVQAKSTEFDPNIDVVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCNTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号214](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼ);および
MDMRVIFALVFSSLVQAKSTEFDPNINIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMDVIKSDITDTDRVSNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDLCATCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPGRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号216](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガALルシフェラーゼ);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号218](C6にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGDKDEL[配列番号220](C6にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEIEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号222(C6にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKELEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPLEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号224](C6にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼの全長配列);
MEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号226](C6にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼの全長配列);
MGVKLIFAVLCVAAAQAATINENFEDIDVVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVHCSALLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号228](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAAAQAATINENFEDIDLVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号230](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAAAQAATINENFEDIDLVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVPVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号232](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAVAQAATIQENFEDIDLVAIGGSFASDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLMEMEANAKRAGCHRGCLVCLSHIKCTAQMQKFIPGRCHSYAGDKDSAQGGIAGGAIVDIPEIAGFKEMKPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号234](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼ);
MMEIQVLFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号236](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼ);
MMEIKVLFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号238](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼ);
MMEVKVVFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号240](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼ);
MDIKVLFALICIALVQANPTENNDHINIVGIEGKFGITDLETDLFTIWETNRMISTDNEQANTDSNRGKMPGKKLPLAVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPDISGFKEMGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQSEVHNIKGLAGDR[配列番号242](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼ);
MDIKFIFALVCIALVQANPTVNNDVNRGKMPGKKLPLEVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKQYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEAHNIKGLAGDR[配列番号244](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ);
MKTDIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号246](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAQKTDIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号248](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号250](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVERCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号252](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼ);
MDMKVIFALIFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKSDIADTDRVSNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号254](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼ);
MDIKVVFALVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARSFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号256](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼ);
MDIKVVFALVFSALVQAKSTEFDPNIDVVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCNTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号258](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼ);
MDMRVIFALVFSSLVQAKSTEFDPNINIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMDVIKSDITDTDRVSNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPGRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号260](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガALルシフェラーゼ);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号262](C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGDKDEL[配列番号264](C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEIEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号266](C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKELEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPLEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号268](C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼの全長配列);
MEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号270](C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼの全長配列);
MGVKLIFAVLCVAAAQAATINENFEDIDVVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号272](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAAAQAATINENFEDIDLVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号274](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAAAQAATINENFEDIDLVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVPVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号276](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAVAQAATIQENFEDIDLVAIGGSFASDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLMEMEANAKRAGCHRGCLVCLSHIKCTAQMQKFIPGRCHSYAGDKDSAQGGIAGGAIVDIPEIAGFKEMKPMEQFIAQVDLCEDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号278](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼ);
MMEIQVLFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号280](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼ);
MMEIKVLFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号282](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼ);
MMEVKVVFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号284](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼ);
MDIKVLFALICIALVQANPTENNDHINIVGIEGKFGITDLETDLFTIWETNRMISTDNEQANTDSNRGKMPGKKLPLAVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPDISGFKEMGPMEQFIAQVDRCTDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVHNIKGLAGDR[配列番号286](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼ);
MDIKFIFALVCIALVQANPTVNNDVNRGKMPGKKLPLEVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKQYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEAHNIKGLAGDR[配列番号288](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ);
MKTDIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号290](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAQKTDIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号292](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号294](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVERCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号296](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼ);
MDMKVIFALIFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKSDIADTDRVSNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCTSCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号298](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼ);
MDIKVVFALVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARSFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号300](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼ);
MDIKVVFALVFSALVQAKSTEFDPNIDVVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCNTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号302](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼ);
MDMRVIFALVFSSLVQAKSTEFDPNINIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMDVIKSDITDTDRVSNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDLCATCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPGRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号304](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガALルシフェラーゼ);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号306](C5およびC6にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGDKDEL[配列番号308](C5およびC6にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEIEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号310](C5およびC6にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKELEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPLEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号312](C5にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼの全長配列);
MEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号314](C5およびC6にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼの全長配列);
MGVKLIFAVLCVAAAQAATINENFEDIDVVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVHCSALLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号316](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAAAQAATINENFEDIDLVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号318](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAAAQAATINENFEDIDLVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVPVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号320](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAVAQAATIQENFEDIDLVAIGGSFASDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLMEMEANAKRAGCHRGCLVCLSHIKCTAQMQKFIPGRCADYAGDKDSAQGGIAGGAIVDIPEIAGFKEMKPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号322](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼ);
MMEIQVLFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号324](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼ);
MMEIKVLFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号326](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼ);
MMEVKVVFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号328](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼ);
MDIKVLFALICIALVQANPTENNDHINIVGIEGKFGITDLETDLFTIWETNRMISTDNEQANTDSNRGKMPGKKLPLAVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPDISGFKEMGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQSEVHNIKGLAGDR[配列番号330](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼ);
MDIKFIFALVCIALVQANPTVNNDVNRGKMPGKKLPLEVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKQYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEAHNIKGLAGDR[配列番号332](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ);
MKTDIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号334](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAQKTDIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号336](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号338](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVERCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号340](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼ);
MDMKVIFALIFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKSDIADTDRVSNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号342](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼ);
MDIKVVFALVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARSFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号344](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼ);
MDIKVVFALVFSALVQAKSTEFDPNIDVVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCNTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号346](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼ);
MDMRVIFALVFSSLVQAKSTEFDPNINIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMDVIKSDITDTDRVSNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPGRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号348](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガALルシフェラーゼ);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号350](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGDKDEL[配列番号352](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEIEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号354](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKELEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPLEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号356](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼの全長配列);
MEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号358](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼの全長配列);
MGVKLIFAVLCVAAAQAATINENFEDIDVVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号360](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAAAQAATINENFEDIDLVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号362](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAAAQAATINENFEDIDLVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVPVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号364](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAVAQAATIQENFEDIDLVAIGGSFASDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLMEMEANAKRAGCHRGCLVCLSHIKCTAQMQKFIPGRCADYAGDKDSAQGGIAGGAIVDIPEIAGFKEMKPMEQFIAQVDLCEDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号366](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼ);
MMEIQVLFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号368](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼ);
MMEIKVLFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号370](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼ);
MMEVKVVFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号372](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼ);
MDIKVLFALICIALVQANPTENNDHINIVGIEGKFGITDLETDLFTIWETNRMISTDNEQANTDSNRGKMPGKKLPLAVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPDISGFKEMGPMEQFIAQVDRCTDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVHNIKGLAGDR[配列番号374](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼ);
MDIKFIFALVCIALVQANPTVNNDVNRGKMPGKKLPLEVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKQYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEAHNIKGLAGDR[配列番号376](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ);
MKTDIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号378](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAQKTDIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号380](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号382](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVERCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号384](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼ);
MDMKVIFALIFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKSDIADTDRVSNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCTSCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号386](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼ);
MDIKVVFALVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARSFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号388](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼ);
MDIKVVFALVFSALVQAKSTEFDPNIDVVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCNTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号390](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼ);および
MDMRVIFALVFSSLVQAKSTEFDPNINIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMDVIKSDITDTDRVSNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDLCATCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPGRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号392](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガALルシフェラーゼ);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号394](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGDKDEL[配列番号396](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEIEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号398]( C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKELEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPLEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号400](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼの全長配列);
MEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号402](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼの全長配列);
MGVKLIFAVLCVAAAQAATINENFEDIDVVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号404](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAAAQAATINENFEDIDLVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号406](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAAAQAATINENFEDIDLVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVPVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号408](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAVAQAATIQENFEDIDLVAIGGSFASDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLMEMEANAKRAGCHRGCLVCLSHIKCTAQMQKFIPGRCHSYAGDKDSAQGGIAGGAIVDIPEIAGFKEMKPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号410](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼ);
MMEIQVLFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号412](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼ);
MMEIKVLFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号414](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼ);
MMEVKVVFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号416](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼ);
MDIKVLFALICIALVQANPTENNDHINIVGIEGKFGITDLETDLFTIWETNRMISTDNEQANTDSNRGKMPGKKLPLAVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPDISGFKEMGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVHNIKGLAGDR[配列番号418](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼ);
MDIKFIFALVCIALVQANPTVNNDVNRGKMPGKKLPLEVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKQYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEAHNIKGLAGDR[配列番号420](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ);
MKTDIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号422](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAQKTDIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号424](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号426](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVERCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号428](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼ);
MDMKVIFALIFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKSDIADTDRVSNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号430](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼ);
MDIKVVFALVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARSFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号432](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼ);
MDIKVVFALVFSALVQAKSTEFDPNIDVVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCNTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号434](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼ);
MDMRVIFALVFSSLVQAKSTEFDPNINIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMDVIKSDITDTDRVSNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPGRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号436](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガALルシフェラーゼ);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号438](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGDKDEL[配列番号440](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEIEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号442](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼの全長配列);
MGVKVLFALICIAVAEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKELEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPLEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号444](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼの全長配列);
MEAKPTENNEDFNIVAVASNFATTDLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号446](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼの全長配列);
MGVKLIFAVLCVAAAQAATINENFEDIDVVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号448](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAAAQAATINENFEDIDLVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号450](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAAAQAATINENFEDIDLVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVPVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号452](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼ);
MGVKLIFAVVCVAVAQAATIQENFEDIDLVAIGGSFASDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLMEMEANAKRAGCHRGCLVCLSHIKCTAQMQKFIPGRCADYAGDKDSAQGGIAGGAIVDIPEIAGFKEMKPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号454](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼ);
MMEIQVLFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号456](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼ);
MMEIKVLFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号458](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼ);
MMEVKVVFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号460](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼ);
MDIKVLFALICIALVQANPTENNDHINIVGIEGKFGITDLETDLFTIWETNRMISTDNEQANTDSNRGKMPGKKLPLAVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPDISGFKEMGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVHNIKGLAGDR[配列番号462](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼ);
MDIKFIFALVCIALVQANPTVNNDVNRGKMPGKKLPLEVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKQYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEAHNIKGLAGDR[配列番号464](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ);
MKTDIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号466](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAQKTDIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号468](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号470](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼ);
MDIKVVFTLVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVERCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号472](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼ);
MDMKVIFALIFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKSDIADTDRVSNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号474](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼ);
MDIKVVFALVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARSFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号476](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼ);
MDIKVVFALVFSALVQAKSTEFDPNIDVVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCNTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号478](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼ);
MDMRVIFALVFSSLVQAKSTEFDPNINIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMDVIKSDITDTDRVSNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPGRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号480](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガALルシフェラーゼ)
から選択されるアミノ酸配列、あるいは
(b) 配列番号174、176、178、180、182、184、186、188、190、192、194、196、198、200、202、204、206、208、210、212、214、216、218、220、222、224、226、228、230、232、234、236、238、240、242、244、246、248、250、252、254、256、258、260、262、264、266、268、270、272、274、276、278、280、282、284、286、288、290、292、294、296、298、300、302、304、306、308、310 312、314、316、318、320 322、324、326、328、330、332、334、336、338、340、34、344、346、348、350、352、354、356、358、360、362、364、366、368、370、372、374、376、378、380、382、384、386、388、390、392、394、396、398、400、402、404、406、408、410、412、414、416、418、420、422、424、426、428、430、432、434、436、438、440、442、444、446、448、450、452、454、456、458、460、462、464、466、468、470、472、474、476、478または480のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列類似性または配列同一性を共有し、式XのB1C5X18X19、X37C6X38X39またはX41C9ΣX42に相当する少なくとも1つの部分配列(ここで、個別の部分配列は、上で定義する式XIで表されるアミノ酸配列からなる)を含むアミノ酸配列、あるいは
(c) atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号173](C5にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngayaargaygarytn[配列番号175](C5にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarathgargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号177](C5にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarytngargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnytngarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号179](C5にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atggargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号181](C5にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaarytnathttygcngtnytntgygtngcngcngcncargcngcnacnathaaygaraayttygargayathgaygtngtngcnathggnggnwsnttygcnytngaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngcnytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号183](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaarytnathttygcngtngtntgygtngcngcngcncargcngcnacnathaaygaraayttygargayathgayytngtngcnathggnggnwsnttygcnytngaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号185](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaarytnathttygcngtngtntgygtngcngcngcncargcngcnacnathaaygaraayttygargayathgayytngtngcnathggnggnwsnttygcnytngaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnccngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号187](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaarytnathttygcngtngtntgygtngcngtngcncargcngcnacnathcargaraayttygargayathgayytngtngcnathggnggnwsnttygcnwsngaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytnatggaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytngtntgyytnwsncayathaartgyacngcncaratgcaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygcnggngayaargaywsngcncarggnggnathgcnggnggngcnathgtngayathccngarathgcnggnttyaargaratgaarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygargaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号189](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgatggarathcargtnytnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcnaayccnacngaraayaargaygayathgayathgtnggngtngarggnaarttyggnacnacngayytngaracngayytnttyacnathgtngargayatgaaygtnathwsnmgngayacnaayytngcnaaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngcnytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号191](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgatggarathaargtnytnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcnaayccnacngaraayaargaygayathgayathgtnggngtngarggnaarttyggnacnacngayytngaracngayytnttyacnathgtngargayatgaaygtnathwsnmgngayacnaayytngcnaaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngcnytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号193](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgatggargtnaargtngtnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcnaayccnacngaraayaargaygayathgayathgtnggngtngarggnaarttyggnacnacngayytngaracngayytnttyacnathgtngargayatgaaygtnathwsnmgngayacnaayytngcnaaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngcnytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号195](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtnytnttygcnytnathtgyathgcnytngtncargcnaayccnacngaraayaaygaycayathaayathgtnggnathgarggnaarttyggnathacngayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnaaymgnatgathwsnacngayaaygarcargcnaayacngaywsnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaaraartayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngayathwsnggnttyaargaratgggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgyacngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号197](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaarttyathttygcnytngtntgyathgcnytngtncargcnaayccnacngtnaayaaygaygtnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaarcartayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargcncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号199](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgaaracngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号201](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcncaraaracngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号203](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnatgathaargcngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号205](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnatgathaargcngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngarmgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号207](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayatgaargtnathttygcnytnathttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaarwsngayathgcngayacngaymgngtnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgyacnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号209](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttygcnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaaracngayathgcngayacngaymgngcnmgnwsnttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号211](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttygcnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgaygtngtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaaracngayathgcngayacngaymgngcnmgnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyaayacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号213](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、
atggayatgmgngtnathttygcnytngtnttywsnwsnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathaayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggaygtnathaarwsngayathacngayacngaymgngtnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcnacntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccnggnmgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[[配列番号215](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガALルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号217](C6にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngayaargaygarytn[配列番号219](C6にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarathgargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号221](C6にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarytngargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnytngarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号223](C6にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atggargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号225](C6にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaarytnathttygcngtnytntgygtngcngcngcncargcngcnacnathaaygaraayttygargayathgaygtngtngcnathggnggnwsnttygcnytngaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngcnytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号227](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
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atgggngtnaarytnathttygcngtngtntgygtngcngcngcncargcngcnacnathaaygaraayttygargayathgayytngtngcnathggnggnwsnttygcnytngaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnccngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号231](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaarytnathttygcngtngtntgygtngcngtngcncargcngcnacnathcargaraayttygargayathgayytngtngcnathggnggnwsnttygcnwsngaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytnatggaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytngtntgyytnwsncayathaartgyacngcncaratgcaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygcnggngayaargaywsngcncarggnggnathgcnggnggngcnathgtngayathccngarathgcnggnttyaargaratgaarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号233](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgatggarathcargtnytnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcnaayccnacngaraayaargaygayathgayathgtnggngtngarggnaarttyggnacnacngayytngaracngayytnttyacnathgtngargayatgaaygtnathwsnmgngayacnaayytngcnaaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngcnytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号235](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgatggarathaargtnytnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcnaayccnacngaraayaargaygayathgayathgtnggngtngarggnaarttyggnacnacngayytngaracngayytnttyacnathgtngargayatgaaygtnathwsnmgngayacnaayytngcnaaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngcnytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号237](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgatggargtnaargtngtnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcnaayccnacngaraayaargaygayathgayathgtnggngtngarggnaarttyggnacnacngayytngaracngayytnttyacnathgtngargayatgaaygtnathwsnmgngayacnaayytngcnaaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngcnytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号239](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtnytnttygcnytnathtgyathgcnytngtncargcnaayccnacngaraayaaygaycayathaayathgtnggnathgarggnaarttyggnathacngayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnaaymgnatgathwsnacngayaaygarcargcnaayacngaywsnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaaraartayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngayathwsnggnttyaargaratgggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号241](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaarttyathttygcnytngtntgyathgcnytngtncargcnaayccnacngtnaayaaygaygtnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaarcartayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargcncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号243](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
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atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcncaraaracngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号247](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnatgathaargcngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号249](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnatgathaargcngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngarmgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号251](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayatgaargtnathttygcnytnathttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaarwsngayathgcngayacngaymgngtnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号253](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttygcnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaaracngayathgcngayacngaymgngcnmgnwsnttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号255](C5にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttygcnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgaygtngtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaaracngayathgcngayacngaymgngcnmgnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyaayacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号257](C6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
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atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号261](C9にてKCSD置換を有する全長ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
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atggargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号269](C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列)
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atgatggarathaargtnytnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcnaayccnacngaraayaargaygayathgayathgtnggngtngarggnaarttyggnacnacngayytngaracngayytnttyacnathgtngargayatgaaygtnathwsnmgngayacnaayytngcnaaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号281](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgatggargtnaargtngtnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcnaayccnacngaraayaargaygayathgayathgtnggngtngarggnaarttyggnacnacngayytngaracngayytnttyacnathgtngargayatgaaygtnathwsnmgngayacnaayytngcnaaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号283](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtnytnttygcnytnathtgyathgcnytngtncargcnaayccnacngaraayaaygaycayathaayathgtnggnathgarggnaarttyggnathacngayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnaaymgnatgathwsnacngayaaygarcargcnaayacngaywsnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaaraartayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngayathwsnggnttyaargaratgggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgyacngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号285](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaarttyathttygcnytngtntgyathgcnytngtncargcnaayccnacngtnaayaaygaygtnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaarcartayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargcncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号287](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgaaracngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号289](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcncaraaracngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号291](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnatgathaargcngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号293](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnatgathaargcngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngarmgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号295](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayatgaargtnathttygcnytnathttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaarwsngayathgcngayacngaymgngtnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgyacnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号297](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttygcnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaaracngayathgcngayacngaymgngcnmgnwsnttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号299](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttygcnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgaygtngtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaaracngayathgcngayacngaymgngcnmgnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyaayacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号301](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayatgmgngtnathttygcnytngtnttywsnwsnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathaayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggaygtnathaarwsngayathacngayacngaymgngtnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcnacntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnggnmgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号303](C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガALルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号305](C5およびC6にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngayaargaygarytn[配列番号307](C5およびC6にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarathgargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号309](C5およびC6にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarytngargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnytngarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号311](C5にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atggargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号313](C5およびC6にてRCAD置換を有するガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
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atggayathaargtnytnttygcnytnathtgyathgcnytngtncargcnaayccnacngaraayaaygaycayathaayathgtnggnathgarggnaarttyggnathacngayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnaaymgnatgathwsnacngayaaygarcargcnaayacngaywsnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaaraartayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngayathwsnggnttyaargaratgggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号329](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaarttyathttygcnytngtntgyathgcnytngtncargcnaayccnacngtnaayaaygaygtnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaarcartayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargcncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号331](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgaaracngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号333](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcncaraaracngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号335](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnatgathaargcngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号337](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnatgathaargcngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngarmgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号339](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayatgaargtnathttygcnytnathttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaarwsngayathgcngayacngaymgngtnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号341](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
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atggayathaargtngtnttygcnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgaygtngtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaaracngayathgcngayacngaymgngcnmgnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyaayacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号345](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayatgmgngtnathttygcnytngtnttywsnwsnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathaayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggaygtnathaarwsngayathacngayacngaymgngtnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccnggnmgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号347](C5およびC6にてRCAD置換を有する全長メトリジア・ロンガALルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号349](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngayaargaygarytn[配列番号351](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarathgargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号353](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarytngargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnytngarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号355](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atggargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号357](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
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atggayathaarttyathttygcnytngtntgyathgcnytngtncargcnaayccnacngtnaayaaygaygtnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaarcartayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargcncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号375](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgaaracngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号377](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcncaraaracngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号379](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnatgathaargcngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号381](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnatgathaargcngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngarmgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号383](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayatgaargtnathttygcnytnathttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaarwsngayathgcngayacngaymgngtnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgyacnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号385](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttygcnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaaracngayathgcngayacngaymgngcnmgnwsnttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号387](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttygcnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgaygtngtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaaracngayathgcngayacngaymgngcnmgnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyaayacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号389](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)
atggayatgmgngtnathttygcnytngtnttywsnwsnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathaayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggaygtnathaarwsngayathacngayacngaymgngtnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcnacntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnggnmgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号391](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガALルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号393](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngayaargaygarytn[配列番号395](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarathgargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号397](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarytngargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnytngarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号399](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atggargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号401](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaarytnathttygcngtnytntgygtngcngcngcncargcngcnacnathaaygaraayttygargayathgaygtngtngcnathggnggnwsnttygcnytngaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号403](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaarytnathttygcngtngtntgygtngcngcngcncargcngcnacnathaaygaraayttygargayathgayytngtngcnathggnggnwsnttygcnytngaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号405](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaarytnathttygcngtngtntgygtngcngcngcncargcngcnacnathaaygaraayttygargayathgayytngtngcnathggnggnwsnttygcnytngaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnccngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号407](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaarytnathttygcngtngtntgygtngcngtngcncargcngcnacnathcargaraayttygargayathgayytngtngcnathggnggnwsnttygcnwsngaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytnatggaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytngtntgyytnwsncayathaartgyacngcncaratgcaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygcnggngayaargaywsngcncarggnggnathgcnggnggngcnathgtngayathccngarathgcnggnttyaargaratgaarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号409](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgatggarathcargtnytnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcnaayccnacngaraayaargaygayathgayathgtnggngtngarggnaarttyggnacnacngayytngaracngayytnttyacnathgtngargayatgaaygtnathwsnmgngayacnaayytngcnaaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号411](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgatggarathaargtnytnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcnaayccnacngaraayaargaygayathgayathgtnggngtngarggnaarttyggnacnacngayytngaracngayytnttyacnathgtngargayatgaaygtnathwsnmgngayacnaayytngcnaaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号413](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgatggargtnaargtngtnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcnaayccnacngaraayaargaygayathgayathgtnggngtngarggnaarttyggnacnacngayytngaracngayytnttyacnathgtngargayatgaaygtnathwsnmgngayacnaayytngcnaaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号415](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtnytnttygcnytnathtgyathgcnytngtncargcnaayccnacngaraayaaygaycayathaayathgtnggnathgarggnaarttyggnathacngayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnaaymgnatgathwsnacngayaaygarcargcnaayacngaywsnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaaraartayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngayathwsnggnttyaargaratgggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号417](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaarttyathttygcnytngtntgyathgcnytngtncargcnaayccnacngtnaayaaygaygtnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaarcartayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargcncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号419](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgaaracngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号421](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcncaraaracngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号423](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnatgathaargcngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号425](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnatgathaargcngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngarmgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号427](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayatgaargtnathttygcnytnathttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaarwsngayathgcngayacngaymgngtnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号429](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttygcnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaaracngayathgcngayacngaymgngcnmgnwsnttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号431](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttygcnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgaygtngtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaaracngayathgcngayacngaymgngcnmgnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyaayacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号433](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayatgmgngtnathttygcnytngtnttywsnwsnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathaayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggaygtnathaarwsngayathacngayacngaymgngtnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnggnmgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号435](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガALルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号437](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngayaargaygarytn[配列番号439](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarathgargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号441](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaargtnytnttygcnytnathtgyathgcngtngcngargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarytngargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnytngarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号443](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atggargcnaarccnacngaraayaaygargayttyaayathgtngcngtngcnwsnaayttygcnacnacngayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号445](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有するガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼの全長配列をコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaarytnathttygcngtnytntgygtngcngcngcncargcngcnacnathaaygaraayttygargayathgaygtngtngcnathggnggnwsnttygcnytngaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号447](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaarytnathttygcngtngtntgygtngcngcngcncargcngcnacnathaaygaraayttygargayathgayytngtngcnathggnggnwsnttygcnytngaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号449](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaarytnathttygcngtngtntgygtngcngcngcncargcngcnacnathaaygaraayttygargayathgayytngtngcnathggnggnwsnttygcnytngaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnccngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号451](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgggngtnaarytnathttygcngtngtntgygtngcngtngcncargcngcnacnathcargaraayttygargayathgayytngtngcnathggnggnwsnttygcnwsngaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytnatggaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytngtntgyytnwsncayathaartgyacngcncaratgcaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygcnggngayaargaywsngcncarggnggnathgcnggnggngcnathgtngayathccngarathgcnggnttyaargaratgaarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号453](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgatggarathcargtnytnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcnaayccnacngaraayaargaygayathgayathgtnggngtngarggnaarttyggnacnacngayytngaracngayytnttyacnathgtngargayatgaaygtnathwsnmgngayacnaayytngcnaaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号455](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgatggarathaargtnytnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcnaayccnacngaraayaargaygayathgayathgtnggngtngarggnaarttyggnacnacngayytngaracngayytnttyacnathgtngargayatgaaygtnathwsnmgngayacnaayytngcnaaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号457](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgatggargtnaargtngtnttygcnytnathtgyttygcnytngtncargcnaayccnacngaraayaargaygayathgayathgtnggngtngarggnaarttyggnacnacngayytngaracngayytnttyacnathgtngargayatgaaygtnathwsnmgngayacnaayytngcnaaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号459](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtnytnttygcnytnathtgyathgcnytngtncargcnaayccnacngaraayaaygaycayathaayathgtnggnathgarggnaarttyggnathacngayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnaaymgnatgathwsnacngayaaygarcargcnaayacngaywsnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaaraartayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngayathwsnggnttyaargaratgggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号461](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaarttyathttygcnytngtntgyathgcnytngtncargcnaayccnacngtnaayaaygaygtnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaarcartayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargcncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号463](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atgaaracngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号465](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcncaraaracngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号467](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnatgathaargcngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号469](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttyacnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnatgathaargcngayathgcngayacngaymgngcnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngarmgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号471](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayatgaargtnathttygcnytnathttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaarwsngayathgcngayacngaymgngtnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号473](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttygcnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaaracngayathgcngayacngaymgngcnmgnwsnttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号475](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
atggayathaargtngtnttygcnytngtnttywsngcnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathgaygtngtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggargtnathaaracngayathgcngayacngaymgngcnmgnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyaayacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号477](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、もしくは
atggayatgmgngtnathttygcnytngtnttywsnwsnytngtncargcnaarwsnacngarttygayccnaayathaayathgtnggnytngarggnaarttyggnathacnaayytngaracngayytnttyacnathtgggaracnatggaygtnathaarwsngayathacngayacngaymgngtnwsnaayttygtngcnacngaracngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnggnmgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号479](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する全長メトリジア・ロンガALルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)
またはその相補鎖
のいずれか1つに示すヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列
(d) 配列番号173、175、177、179、181、183、185、187、189、191、193、195、197、199、201、203、205、207、209、211、213、215、217、219、221、223、225、227、229、231、233、235、237、239、241、243、245、247、249、251、253 255、257、259、261、263、265、267、269、271、273、275、277、279、281、283、285、287、289、291、293、295、297、299、301、303、305、307、309、311、313、315、317、319、321、323、325、327、329、331、333、335、337、339、341、343、345、347、349、351、353、355、357、359、361、363、365、367、369、371、373、375、377、379、381、383、385、387、389、391、393、395、397、399、401、403、405、407、409、411、413、415、417、419、421、423、425、427、429、431、433、435、437、439、441、443、445、447、449、451、453、455、457、459、461、463、465、467、469、471、473、475、477もしくは479、またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列同一性を共有するヌクレオチド配列によりコードされ、式XのB1C5X18X19、X37C6X38X39またはX41C9ΣX42に相当する少なくとも1つの部分配列(ここで、個別の部分配列は、上で定義する式XIで表されるアミノ酸配列からなる)を含むアミノ酸配列、あるいは
(e) 配列番号173、175、177、179、181、183、185、187、189、191、193、195、197、199、201、203、205、207、209、211、213、215、217、219、221、223、225、227、229、231、233、235、237、239、241、243、245、247、249、251、253 255、257、259、261、263、265、267、269、271、273、275、277、279、281、283、285、287、289、291、293、295、297、299、301、303、305、307、309、311、313、315、317、319、321、323、325、327、329、331、333、335、337、339、341、343、345、347、349、351、353、355、357、359、361、363、365、367、369、371、373、375、377、379、381、383、385、387、389、391、393、395、397、399、401、403、405、407、409、411、413、415、417、419、421、423、425、427、429、431、433、435、437、439、441、443、445、447、449、451、453、455、457、459、461、463、465、467、469、471、473、475、477もしくは479、またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも中度または高度ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列によりコードされ、式XのB1C5X18X19、X37C6X38X39またはX41C9ΣX42に相当する少なくとも1つの部分配列(ここで、個別の部分配列は、上で定義する式XIで表されるアミノ酸配列からなる)を含むアミノ酸配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる。
【０１３２】
他の実施形態では、式Xに従うポリペプチドは、
(a) DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号482](C5にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGDKDEL[配列番号484](C5にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEIEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号486](C5にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKELEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPLEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号488](C5にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号490](C5にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVHCSALLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号492](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号494](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVPVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号496](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLMEMEANAKRAGCHRGCLVCLSHIKCTAQMQKFIPGRCADYAGDKDSAQGGIAGGAIVDIPEIAGFKEMKPMEQFIAQVDLCEDCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号498](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号500](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号502](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号504](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼ);
NTDSNRGKMPGKKLPLAVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPDISGFKEMGPMEQFIAQVDRCTDCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQSEVHNIKGLAGDR[配列番号506](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼ);
NNDVNRGKMPGKKLPLEVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKQYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEAHNIKGLAGDR[配列番号508](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号510](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号512](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号514](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVERCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号516](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCTSCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号518](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号520](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCNTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号522](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼ);および
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDLCATCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPGRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号524](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガALルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号526](C6にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGDKDEL[配列番号528](C6にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEIEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号530](C6にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKELEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPLEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号532](C6にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号534](C6にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVHCSALLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号536](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号538](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVPVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号540](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLMEMEANAKRAGCHRGCLVCLSHIKCTAQMQKFIPGRCHSYAGDKDSAQGGIAGGAIVDIPEIAGFKEMKPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号542](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号544](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号546](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号548](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼ);
NTDSNRGKMPGKKLPLAVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPDISGFKEMGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQSEVHNIKGLAGDR[配列番号550](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼ);
NNDVNRGKMPGKKLPLEVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKQYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEAHNIKGLAGDR[配列番号552](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号554](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号556](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号558](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVERCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号560](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号562](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号564](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCNTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号566](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPGRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号568](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガALルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号570](C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGDKDEL[配列番号572](C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEIEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号574](C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKELEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPLEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号576](C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号578](C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号580](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号582](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVPVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号584](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLMEMEANAKRAGCHRGCLVCLSHIKCTAQMQKFIPGRCHSYAGDKDSAQGGIAGGAIVDIPEIAGFKEMKPMEQFIAQVDLCEDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号586](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号588](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号590](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号592](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼ);
NTDSNRGKMPGKKLPLAVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPDISGFKEMGPMEQFIAQVDRCTDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVHNIKGLAGDR配列番号594](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼ);
NNDVNRGKMPGKKLPLEVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKQYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEAHNIKGLAGDR[配列番号596](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号598](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号600](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号602](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVERCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号604](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCTSCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号606](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号608](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCNTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号610](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDLCATCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPGRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号612](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガALルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号614](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGDKDEL[配列番号616](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEIEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号618](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKELEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPLEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号620](C5にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVQCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号622](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVHCSALLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号624](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号626](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVPVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号628](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLMEMEANAKRAGCHRGCLVCLSHIKCTAQMQKFIPGRCADYAGDKDSAQGGIAGGAIVDIPEIAGFKEMKPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVHCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号630](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号632](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号634](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号636](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼ);
NTDSNRGKMPGKKLPLAVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPDISGFKEMGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQSEVHNIKGLAGDR[配列番号638](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼ);
NNDVNRGKMPGKKLPLEVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKQYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEAHNIKGLAGDR[配列番号640](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号642](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号644](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号646](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVERCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号648](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号650](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号652](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCNTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号654](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPGRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号656](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガALルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号658](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGDKDEL[配列番号660](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEIEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号662](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKELEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPLEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号664](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号666](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号668](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号670](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVPVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号672](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLMEMEANAKRAGCHRGCLVCLSHIKCTAQMQKFIPGRCADYAGDKDSAQGGIAGGAIVDIPEIAGFKEMKPMEQFIAQVDLCEDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号674](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号676](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号678](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号680](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼ);
NTDSNRGKMPGKKLPLAVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPDISGFKEMGPMEQFIAQVDRCTDCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVHNIKGLAGDR[配列番号682](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼ);
NNDVNRGKMPGKKLPLEVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKQYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEAHNIKGLAGDR[配列番号684](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号686](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号688](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号690](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVERCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号692](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCTSCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号694](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号696](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCNTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号698](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼ);および
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDLCATCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPGRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号700](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガALルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号702](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGDKDEL[配列番号704](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEIEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号706](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKELEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPLEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号708](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCHTYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号710](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号712](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号714](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVPVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR配列番号716](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLMEMEANAKRAGCHRGCLVCLSHIKCTAQMQKFIPGRCHSYAGDKDSAQGGIAGGAIVDIPEIAGFKEMKPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号718](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号720](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号722](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号724](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼ);
NTDSNRGKMPGKKLPLAVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPDISGFKEMGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVHNIKGLAGDR[配列番号726](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼ);
NNDVNRGKMPGKKLPLEVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKQYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEAHNIKGLAGDR[配列番号728](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号730](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号732](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号734](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVERCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号736](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号738](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号740](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCNTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号742](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPGRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号744](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガALルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号746](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGDKDEL[配列番号748](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEIEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号750](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKELEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPLEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号752](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼ);
DLDADRGKLPGKKLPLEVLKEMEANARKAGCTRGCLICLSHIKCTPKMKKFIPGRCADYEGDKESAQGGIGEAIVDIPEIPGFKDLEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPQRCATFASKIQGQVDKIKGAGGD[配列番号754](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号756](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号758](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVPVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCADYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号760](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼ);
DVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLMEMEANAKRAGCHRGCLVCLSHIKCTAQMQKFIPGRCADYAGDKDSAQGGIAGGAIVDIPEIAGFKEMKPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号762](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号764](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号766](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼ);
NSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号768](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼ);
NTDSNRGKMPGKKLPLAVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKKYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPDISGFKEMGPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQSEVHNIKGLAGDR[配列番号770](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼ);
NNDVNRGKMPGKKLPLEVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKQYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEAHNIKGLAGDR[配列番号772](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号774](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号776](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号778](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVERCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号780](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号782](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号784](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCADCNTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号786](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼ);
ETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCADYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCADCTTGCLKGLANVKCSDLLKKWLPGRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号788](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガALルシフェラーゼ)
から選択されるアミノ酸配列、あるいは
(b) 配列番号482、484、486、488、490、492、494、496、498、500、502、504、506、508、510、512、514、516、518、520、522、524、526、528、530、532、534、536、538、540、542、544、546、548、550、552、554、556、558、560、562、564、566、568、570、572、574、576、578、580、582、584、586、588、590、592、594、596、598、600、602、604、606、608、610、612、614、616、618、620、622、624、626、628、630、632、634、636、638、640、642、644、646、648、650、652、654、656、658、660、662、664、666、668、670、672、674、676、678、680、682、684、686、688、690、692、694、696、698、700、702、704、706、708、710、712、714、716、718、720、722、724、726、728、730、732、734、736、738、740、742、744、746、748、750、752、754、756、758、760、762、764、766、768、780、782、784、786または788のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列類似性または配列同一性を共有し、式XのB1C5X18X19、X37C6X38X39またはX41C9ΣX42に相当する少なくとも1つの部分配列(ここで、個別の部分配列は、上で定義する式XIで表されるアミノ酸配列からなる)を含むアミノ酸配列、あるいは
(c) gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号481](C5にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngayaargaygarytn[配列番号483](C5にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarathgargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号485](C5にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarytngargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnytngarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号487](C5にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号489](C5にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngcnytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号491](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号493](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnccngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号495](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytnatggaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytngtntgyytnwsncayathaartgyacngcncaratgcaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygcnggngayaargaywsngcncarggnggnathgcnggnggngcnathgtngayathccngarathgcnggnttyaargaratgaarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygargaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号497](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngcnytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号499](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngcnytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号501](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngcnytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号503](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aayacngaywsnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaaraartayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngayathwsnggnttyaargaratgggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgyacngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号505](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aayaaygaygtnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaarcartayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargcncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号507](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号509](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号511](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号513](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngarmgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号515](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgyacnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号517](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号519](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyaayacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号521](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcnacntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccnggnmgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号523](C5にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガALルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号525](C6にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngayaargaygarytn[配列番号527](C6にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarathgargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号529](C6にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarytngargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnytngarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号531](C6にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号533](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngcnytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号535](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号537](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnccngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号539](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
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aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngcnytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号543](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngcnytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号545](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
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aayaaygaygtnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaarcartayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargcncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号551](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号553](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号555](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号557](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngarmgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号559](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号561](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号563](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyaayacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号565](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccnggnmgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号567](C6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガALルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号569](C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngayaargaygarytn[配列番号571](C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarathgargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号573](C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarytngargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnytngarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号575](C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号577](C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号579](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号581](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnccngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号583](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytnatggaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytngtntgyytnwsncayathaartgyacngcncaratgcaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygcnggngayaargaywsngcncarggnggnathgcnggnggngcnathgtngayathccngarathgcnggnttyaargaratgaarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygargaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号585](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号587](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号589](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号591](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aayacngaywsnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaaraartayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngayathwsnggnttyaargaratgggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgyacngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号593](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aayaaygaygtnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaarcartayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargcncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号595](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号597](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号599](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号601](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngarmgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号603](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgyacnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号605](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号607](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyaayacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号609](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcnacntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnggnmgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号611](C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガALルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号613](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngayaargaygarytn[配列番号615](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarathgargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号617](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarytngargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnytngarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号619](C5にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号621](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngcnytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号623](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号625](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnccngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号627](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytnatggaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytngtntgyytnwsncayathaartgyacngcncaratgcaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygcnggngayaargaywsngcncarggnggnathgcnggnggngcnathgtngayathccngarathgcnggnttyaargaratgaarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtncaytgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号629](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngcnytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号631](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngcnytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号633](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngcnytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号635](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aayacngaywsnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaaraartayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngayathwsnggnttyaargaratgggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号637](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aayaaygaygtnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaarcartayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargcncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号639](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号641](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号643](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号645](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngarmgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号647](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号649](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号651](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyaayacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号653](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngarytnytnaaraartggytnccnggnmgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号655](C5およびC6にてRCAD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガALルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号657](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngayaargaygarytn[配列番号659](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarathgargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号661](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarytngargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnytngarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号663](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号665](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
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gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngayytntgygtngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号669](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
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aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号677](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号679](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aayacngaywsnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaaraartayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngayathwsnggnttyaargaratgggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgyacngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号681](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aayaaygaygtnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaarcartayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargcncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号683](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号685](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号687](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号689](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngarmgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号691](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgyacnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号693](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号695](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcnwsntgyaayacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号697](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngayytntgygcnacntgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnggnmgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号699](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガALルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号701](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngayaargaygarytn[配列番号703](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarathgargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号705](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarytngargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnytngarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号707](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgycayacntaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号709](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号711](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号713](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnccngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号715](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytnatggaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytngtntgyytnwsncayathaartgyacngcncaratgcaraarttyathccnggnmgntgycaywsntaygcnggngayaargaywsngcncarggnggnathgcnggnggngcnathgtngayathccngarathgcnggnttyaargaratgaarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号717](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号719](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号721](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号723](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aayacngaywsnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaaraartayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngayathwsnggnttyaargaratgggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号725](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aayaaygaygtnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaarcartayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargcncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号727](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号729](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号731](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号733](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngarmgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号735](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号737](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号739](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyaayacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号741](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgycaygaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnggnmgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号743](C6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガALルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号745](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngayaargaygarytn[配列番号747](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarathgargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号749](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargarytngargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnytngarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号751](C5にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gayytngaygcngaymgnggnaarytnccnggnaaraarytnccnytngargtnytnaargaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnccnaaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargarwsngcncarggnggnathggngargcnathgtngayathccngarathccnggnttyaargayytngarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccncarmgntgygcnacnttygcnwsnaarathcarggncargtngayaarathaarggngcnggnggngay[配列番号753](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内ガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号755](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号757](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnccngtngaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytnathtgyytnwsncayathaartgyacnaaraaratgaaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygarggngayaargaywsngcncarggnggnathggngargarathgtngayatgccngarathccnggnttyaargayaargarccnatggaycarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号759](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
gaygtngaygcnaaymgnggnggncayggnggncayccnggnaaraaratgccnaargargtnytnatggaratggargcnaaygcnaarmgngcnggntgycaymgnggntgyytngtntgyytnwsncayathaartgyacngcncaratgcaraarttyathccnggnmgntgygcngaytaygcnggngayaargaywsngcncarggnggnathgcnggnggngcnathgtngayathccngarathgcnggnttyaargaratgaarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnwsnmgntgyaaracnttygcnwsnaarathcarwsncargtngayacnathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号761](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号763](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号765](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aaywsngaygcngaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnmgnaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargarytnggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtngayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号767](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aayacngaywsnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaaraartayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngayathwsnggnttyaargaratgggnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcarwsngargtncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号769](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
aayaaygaygtnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngargtnytnathgaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaarcartayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargcncayaayathaarggnytngcnggngaymgn[配列番号771](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号773](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号775](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号777](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngarmgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号779](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号781](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号783](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggarccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyaayacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccngaymgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号785](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列);もしくは
garacngaygcnaaymgnggnaaratgccnggnaaraarytnccnytngcngtnathatggaratggargcnaaygcnttyaargcnggntgyacnmgnggntgyytnathtgyytnwsnaarathaartgyacngcnaaratgaargtntayathccnggnmgntgygcngaytayggnggngayaaraaracnggncargcnggnathgtnggngcnathgtngayathccngarathwsnggnttyaargaratggcnccnatggarcarttyathgcncargtngaymgntgygcngaytgyacnacnggntgyytnaarggnytngcnaaygtnaartgywsngayytnytnaaraartggytnccnggnmgntgygcnwsnttygcngayaarathcaraargargtncayaayathaarggnatggcnggngaymgn[配列番号787](C5およびC6にてRCAD置換を有し、C9にてKCSD置換を有する細胞内メトリジア・ロンガALルシフェラーゼをコードするヌクレオチド配列)、またはその相補鎖
のいずれか1つに示すヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列
(d) 配列番号481、483、485、487、489、491、493、495、497、499、501、503、505、507、509、511、513、515、517、519、521、523、525、527、529、531、533、535、537、539、541、543、545、547、549、551、553 555、557、559、561、563、565、567、569、571、573、575、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627、629、631、633、635、637、639、641、643、645、647、649、651、653、655、657、659、661、663、665、667、669、671、673、675、677、679、681、683、685、687、689、691、693、695、697、699、701、703、705、707、709、711、713、715、717、719、721、723、725、727、729、731、733、735、737、739、741、743、745、747、749、751、753、755、757、759、761、763、765、767、769、781、783、785もしくは787、またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列同一性を共有するヌクレオチド配列によりコードされ、式XのB1C5X18X19、X37C6X38X39またはX41C9ΣX42に相当する少なくとも1つの部分配列(ここで、個別の部分配列は、上で定義する式XIで表されるアミノ酸配列からなる)を含むアミノ酸配列、あるいは
(e) 配列番号481、483、485、487、489、491、493、495、497、499、501、503、505、507、509、511、513、515、517、519、521、523、525、527、529、531、533、535、537、539、541、543、545、547、549、551、553 555、557、559、561、563、565、567、569、571、573、575、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627、629、631、633、635、637、639、641、643、645、647、649、651、653、655、657、659、661、663、665、667、669、671、673、675、677、679、681、683、685、687、689、691、693、695、697、699、701、703、705、707、709、711、713、715、717、719、721、723、725、727、729、731、733、735、737、739、741、743、745、747、749、751、753、755、757、759、761、763、765、767、769、781、783、785または787、またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも中度または高度ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列によりコードされ、式XのB1C5X18X19、X37C6X38X39またはX41C9ΣX42に相当する少なくとも1つの部分配列(ここで、個別の部分配列は、上で定義する式XIで表されるアミノ酸配列からなる)を含むアミノ酸配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる。
【０１３３】
いくつかの実施形態では、式XのX1は、Lまたはその改変形態である。
【０１３４】
いくつかの実施形態では、X43は、DまたはP以外であり、適切にはRもしくはKまたはその改変形態、より適切にはHまたはその改変形態、さらにより適切にはT、A、SもしくはNまたはその改変形態、好ましくはQまたはその改変形態、より好ましくはGまたはその改変形態、さらにより好ましくはEまたはその改変形態から選択される。
【０１３５】
いくつかの実施形態では、式Xに従うアミノ酸配列を含むポリペプチドは、ポリペプチドを細胞外の位置に分泌するためのシグナル配列および分泌増強配列のいずれか1または複数を場合によって含んでよい。
【０１３６】
いくつかの実施形態では、式Xに従うアミノ酸配列を含むポリペプチドは、式XIで表される1、2または3少ないアミノ酸配列を有する参照ルシフェラーゼポリペプチドと比較して、増強されたルミネセンス、より強いフラッシュシグナルの強さ、増強されたグローシグナルの強さ、増強されたグローシグナルの安定性および酵素の働きについて上昇した最適温度範囲を含む増強された有効温度範囲からなる群から選択されるいずれか1または複数の活性を有する。
【０１３７】
関連する態様では、本発明は、上で広く記載する式VIIIに従うポリペプチドのアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる単離、合成、組換えまたは精製核酸分子を提供する。いくつかの実施形態では、核酸分子は、
(a) 配列番号174、176、178、180、182、184、186、188、190、192、194、196、198、200、202、204、206、208、210、212、214、216、218、220、222、224、226、228、230、232、234、236、238、240、242、244、246、248、250、252、254、256、258、260、262、264、266、268、270、272、274、276、278、280、282、284、286、288、290、292、294、296、298、300、302、304、306、308、310 312、314、316、318、320 322、324、326、328、330、332、334、336、338、340、34、344、346、348、350、352、354、356、358、360、362、364、366、368、370、372、374、376、378、380、382、384、386、388、390、392、394、396、398、400、402、404、406、408、410、412、414、416、418、420、422、424、426、428、430、432、434、436、438、440、442、444、446、448、450、452、454、456、458、460、462、464、466、468、470、472、474、476、478、480、482、484、486、488、490、492、494、496、498、500、502、504、506、508、510、512、514、516、518、520、522、524、526、528、530、532、534、536、538、540、542、544、546、548、550、552、554、556、558、560、562、564、566、568、570、572、574、576、578、580、582、584、586、588、590、592、594、596、598、600、602、604、606、608、610、612、614、616、618、620、622、624、626、628、630、632、634、636、638、640、642、644、646、648、650、652、654、656、658、660、662、664、666、668、6
70、672、674、676、678、680、682、684、686、688、690、692、694、696、698、700、702、704、706、708、710、712、714、716、718、720、722、724、726、728、730、732、734、736、738、740、742、744、746、748、750、752、754、756、758、760、762、764、766、768、780、782、784、786または788のいずれか1つから選択されるアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列、
(b) 配列番号173、175、177、179、181、183、185、187、189、191、193、195、197、199、201、203、205、207、209、211、213、215、217、219、221、223、225、227、229、231、233、235、237、239、241、243、245、247、249、251、253 255、257、259、261、263、265、267、269、271、273、275、277、279、281、283、285、287、289、291、293、295、297、299、301、303、305、307、309、311、313、315、317、319、321、323、325、327、329、331、333、335、337、339、341、343、345、347、349、351、353、355、357、359、361、363、365、367、369、371、373、375、377、379、381、383、385、387、389、391、393、395、397、399、401、403、405、407、409、411、413、415、417、419、421、423、425、427、429、431、433、435、437、439、441、443、445、447、449、451、453、455、457、459、461、463、465、467、469、471、473、475、477、479、481、483、485、487、489、491、493、495、497、499、501、503、505、507、509、511、513、515、517、519、521、523、525、527、529、531、533、535、537、539、541、543、545、547、549、551、553 555、557、559、561、563、565、567、569、571、573、575、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627、629、631、633、635、637、639、641、643、645、647、649、651、653、655、657、659、661、663、665、667、
669、671、673、675、677、679、681、683、685、687、689、691、693、695、697、699、701、703、705、707、709、711、713、715、717、719、721、723、725、727、729、731、733、735、737、739、741、743、745、747、749、751、753、755、757、759、761、763、765、767、769、781、783、785または787のいずれか1つから選択されるヌクレオチド配列、
(c) 配列番号173、175、177、179、181、183、185、187、189、191、193、195、197、199、201、203、205、207、209、211、213、215、217、219、221、223、225、227、229、231、233、235、237、239、241、243、245、247、249、251、253 255、257、259、261、263、265、267、269、271、273、275、277、279、281、283、285、287、289、291、293、295、297、299、301、303、305、307、309、311、313、315、317、319、321、323、325、327、329、331、333、335、337、339、341、343、345、347、349、351、353、355、357、359、361、363、365、367、369、371、373、375、377、379、381、383、385、387、389、391、393、395、397、399、401、403、405、407、409、411、413、415、417、419、421、423、425、427、429、431、433、435、437、439、441、443、445、447、449、451、453、455、457、459、461、463、465、467、469、471、473、475、477、479、481、483、485、487、489、491、493、495、497、499、501、503、505、507、509、511、513、515、517、519、521、523、525、527、529、531、533、535、537、539、541、543、545、547、549、551、553 555、557、559、561、563、565、567、569、571、573、575、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627、629、631、633、635、637、639、641、643、645、647、649、651、653、655、657、659、661、663、665、667、
669、671、673、675、677、679、681、683、685、687、689、691、693、695、697、699、701、703、705、707、709、711、713、715、717、719、721、723、725、727、729、731、733、735、737、739、741、743、745、747、749、751、753、755、757、759、761、763、765、767、769、781、783、785もしくは787、またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列同一性を共有するヌクレオチド配列であって、ヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列が、式XのB1C5X18X19、X37C6X38X39またはX41C9ΣX42に相当する少なくとも1つの部分配列(ここで、個別の部分配列は、上で定義する式XIで表されるアミノ酸配列からなる)を含むヌクレオチド配列、あるいは
(d)配列番号11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79もしくは81またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも低度、中度または高度ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列であって、ヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列が、式XのB1C5X18X19、X37C6X38X39またはX41C9ΣX42に相当する少なくとも1つの部分配列(ここで、個別の部分配列は、上で定義する式XIで表されるアミノ酸配列からなる)を含むヌクレオチド配列
からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、上で広く記載する核酸分子によりコードされるポリペプチドは、式XIで表される1、2または3少ないアミノ酸配列を有する参照ルシフェラーゼポリペプチドと比較して、増強されたルミネセンス、より強いフラッシュシグナルの強さ、増強されたグローシグナルの強さ、増強されたグローシグナルの安定性および酵素の働きについて上昇した最適温度範囲を含む増強された有効温度範囲からなる群から選択されるいずれか1または複数の活性を有する。
【０１３９】
いくつかの実施形態では、核酸分子は、シグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列をさらに含み、その代表的な例は、
(a)配列番号84、86、88、90、92、94、96、98、100、102または104から選択されるアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列、
(b)配列番号83、85、87、89、91、93、95、97、99、101もしくは103またはその相補鎖のいずれか1つに示すヌクレオチド配列、
(c)配列番号83、85、87、89、91、93、95、97、99、101もしくは103またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列同一性を共有するヌクレオチド配列、あるいは
(d)配列番号83、85、87、89、91、93、95、97、99、101もしくは103またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも低度、中度または高度ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列
から選択される。
【０１４０】
いくつかの実施形態では、核酸分子は、分泌増強配列をコードするヌクレオチド配列をさらに含み、その代表的な例は、
(a)配列番号106、107、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130または132のいずれか1つに示すアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列、あるいは
(b)配列番号105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129もしくは131またはその相補鎖のいずれか1つに示すヌクレオチド配列、
(c)配列番号105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129もしくは131またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも70% (ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列同一性を共有するヌクレオチド配列、あるいは
(d)配列番号105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129もしくは131またはその相補鎖のいずれか1つに示す配列と少なくとも低度、中度または高度ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列
から選択される。
【０１４１】
別の態様では、本発明は、適切には単離、合成、組換えまたは精製された形態であり、ルシフェラーゼ活性を有するアミノ酸配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になるポリペプチドであって、アミノ酸配列が、以下の最適温度範囲上昇アミノ酸:
85位または98位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)に相当する少なくとも1つの位置のLまたはその改変形態、および
BCモチーフを得るための、C5、C6、C9およびC10から選択される少なくとも1つの保存システインのすぐ上流にある塩基性アミノ酸残基
を含むかまたはそれから本質的になるカイアシルシフェラーゼアミノ酸配列に相当するポリペプチドを提供する。
【０１４２】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、(1)85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)にてLまたはその改変形態を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、(2)98位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)にてLまたはその改変形態を含む。適切には、ポリペプチドは、(3)85位および98位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)にてLまたはその改変形態を含む。
【０１４３】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、(4)保存システインC6およびC9に相当する少なくとも1つの位置にてBCモチーフを含む。このタイプの代表的な例では、ポリペプチドは、(5)保存システインC6に相当する位置にてBCモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(6)保存システインC9に相当する位置にてBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(7)保存システインC6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCモチーフを含む。
【０１４４】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、(8)保存システインC5、C6およびC9に相当する少なくとも1つの位置にてBCΩモチーフを含む。このタイプの代表的な例では、ポリペプチドは、(9)保存システインC5に相当する位置にてBCΩモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(10)保存システインC6に相当する位置にてBCΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(11)保存システインC9に相当する位置にてBCΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(12)保存システインC5およびC6のそれぞれに相当する位置にてBCΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(13)保存システインC5およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(14)保存システインC6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(15)保存システインC5、C6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCΩモチーフを含む。
【０１４５】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、(16)保存システインC5、C6およびC9に相当する少なくとも1つの位置にてBCΩΩモチーフを含む。このタイプの代表的な例では、ポリペプチドは、(17)保存システインC5に相当する位置にてBCΩΩモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(18)保存システインC6に相当する位置にてBCΩΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(19)保存システインC9に相当する位置にてBCΩΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(20)保存システインC5およびC6のそれぞれに相当する位置にてBCΩΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(21)保存システインC5およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCΩΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(22)保存システインC6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCΩΩモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(23)保存システインC5、C6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCΩΩモチーフを含む。
【０１４６】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、(24)保存システインC5、C6、C9およびC10に相当する少なくとも1つの位置にてBCΩDモチーフを含む。このタイプの代表的な例では、ポリペプチドは、(25)保存システインC5に相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(26)保存システインC6に相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(27)保存システインC9に相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(28)保存システインC10に相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(29)保存システインC5およびC6のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(30)保存システインC5およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(31)保存システインC5およびC10のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(32)保存システインC6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(33)保存システインC6およびC10のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(34)保存システインC9およびC10のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(35)保存システインC5、C6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(36)保存システインC5、C6およびC10のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(37)保存システインC5、C9およびC10のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(38)保存システインC6、C9およびC10のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(39)保存システインC5、C6、C9およびC10のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。
【０１４７】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、(40)保存システインC5、C6、C9およびC10に相当する少なくとも1つの位置にてEBCモチーフを含む。このタイプの代表的な例では、ポリペプチドは、(41)保存システインC5に相当する位置にてEBCモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(42)保存システインC6に相当する位置にてEBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(43)保存システインC9に相当する位置にてEBCモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(44)保存システインC10に相当する位置にてEBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(45)保存システインC5およびC6のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(46)保存システインC5およびC9のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(47)保存システインC5およびC10のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(48)保存システインC6およびC9のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(49)保存システインC6およびC10のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(50)保存システインC9およびC10のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(51)保存システインC5、C6およびC9のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(52)保存システインC5、C6およびC10のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(53)保存システインC5、C9およびC10のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(54)保存システインC6、C9およびC10のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(55)保存システインC5、C6、C9およびC10のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。
【０１４８】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、(56)保存システインC6、C9およびC10に相当する少なくとも1つの位置にてGBCモチーフを含む。このタイプの代表的な例では、ポリペプチドは、(57)保存システインC6に相当する位置にてGBCモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(58)保存システインC9に相当する位置にてGBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(59)保存システインC10に相当する位置にてGBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(60)保存システインC6およびC9のそれぞれに相当する位置にてGBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(61)保存システインC6およびC10のそれぞれに相当する位置にてGBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(62)保存システインC9およびC10のそれぞれに相当する位置にてGBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(63)保存システインC6、C9およびC10のそれぞれに相当する位置にてGBCモチーフを含む。
【０１４９】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、(64)保存システインC5、C6およびC9に相当する少なくとも1つの位置にてBCAモチーフを含む。このタイプの代表的な例では、ポリペプチドは、(65)保存システインC5に相当する位置にてBCAモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(66)保存システインC6に相当する位置にてBCAモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(67)保存システインC9に相当する位置にてBCAモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(68)保存システインC5およびC6のそれぞれに相当する位置にてBCAモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(69)保存システインC5およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCAモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(70)保存システインC6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCAモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(71)保存システインC5、C6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCAモチーフを含む。
【０１５０】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、(72)保存システインC5、C6およびC9に相当する少なくとも1つの位置にてBCAΩモチーフを含む。このタイプの代表的な例では、ポリペプチドは、(73)保存システインC5に相当する位置にてBCAΩモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(74)保存システインC6に相当する位置にてBCAΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(75)保存システインC9に相当する位置にてBCAΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(76)保存システインC5およびC6のそれぞれに相当する位置にてBCAΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(77)保存システインC5およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCAΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(78)保存システインC6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCAΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(79)保存システインC5、C6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCAΩモチーフを含む。
【０１５１】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、(80)保存システインC10に相当する位置にてXBCモチーフ(ここで、Xは、DまたはP以外であり、例えばRもしくはKまたはその改変形態、より適切にはHまたはその改変形態、さらにより適切にはT、A、SもしくはNまたはその改変形態、好ましくはQまたはその改変形態、より好ましくはGまたはその改変形態、さらにより好ましくはEまたはその改変形態から選択される)を含む。
【０１５２】
適切には、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(4)〜(7)のいずれか1つで定義するモチーフとを含む。他の実施形態では、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(8)〜(15)のいずれか1つで定義するモチーフとを含む。さらに別の実施形態では、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(16)〜(23)のいずれか1つで定義するモチーフとを含む。さらに別の実施形態では、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(24)〜(39)のいずれか1つで定義するモチーフとを含む。さらに別の実施形態では、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(40)〜(55)のいずれか1つで定義するモチーフとを含む。さらに別の実施形態では、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(56)〜(63)のいずれか1つで定義するモチーフとを含む。他の実施形態では、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(64)〜(71)のいずれか1つで定義するモチーフとを含む。さらに別の実施形態では、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(72)〜(79)のいずれか1つで定義するモチーフとを含む。さらに別の実施形態では、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(80)で定義するモチーフとを含む。
【０１５３】
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、参照カイアシルシフェラーゼアミノ酸配列の全体または一部の欠失をさらに含み、ここで、アミノ酸配列は、シグナルペプチド配列の下流および85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)のアミノ酸残基の上流、適切には残基約84、83、82、81、80、79、78、77、76、75、74、73、72、71(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)の上流にまたがる。
【０１５４】
いくつかの実施形態では、カイアシアミノ酸配列は、式Iで定義するアミノ酸配列または式Iで表されるアミノ酸配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列類似性または配列同一性を共有する配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる。
【０１５５】
本発明のさらに別の態様は、光放射の特徴が改良された(例えばルミネセンスの改良、フラッシュシグナルの強さの改良、グローシグナルの強さの改良、グローシグナル安定性の改良およびルシフェラーゼ機能の最適温度範囲の上昇を含む有効温度範囲の改良)ルシフェラーゼポリペプチドを調製する方法を提供する。これらの方法は、全般的に、参照ルシフェラーゼポリペプチド配列、適切にはカイアシルシフェラーゼポリペプチド配列から、
i)85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)のアミノ酸残基のLまたはその改変形態での置換、
ii)参照ルシフェラーゼポリペプチドの、シグナルペプチド配列の下流および85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)のアミノ酸残基の上流、適切には残基約84、83、82、81、80、79、78、77、76、75、74、73、72、71(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)の上流にまたがるアミノ酸配列の全体または一部の欠失、
iii)式XIで表されるアミノ酸部分配列:
BCΩD    (XI)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
Cは、C5、C6およびC9から選択される保存システインまたはその改変形態であり、
Ωは、小分子アミノ酸残基(例えばA、SもしくはTまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEもしくはその改変形態)から選択され、
Dは、アスパラギン酸またはその改変形態である)
を生成するための、参照ルシフェラーゼポリペプチドの少なくとも1つの保存システインに隣接する1または複数のアミノ酸残基の置換、
iv)配列XRCAS(式中、Xは、適切にはDまたはP以外であり、適切にはRもしくはKまたはその改変形態、より適切にはHまたはその改変形態、さらにより適切にはT、A、SもしくはNまたはその改変形態、好ましくはQまたはその改変形態、より好ましくはGまたはその改変形態、さらにより好ましくはEまたはその改変形態から選択される)で表されるアミノ酸部分配列を生成するための、参照ルシフェラーゼポリペプチドの保存システインC10に隣接する1または複数のアミノ酸残基の置換、
v)参照ルシフェラーゼポリペプチドのC5、C6、C9およびC10から選択される少なくとも1つの保存システインに隣接する1または複数のアミノ酸残基の置換であって、個別の保存システインでの置換が、式XXで表されるアミノ酸配列:
BC    (XX)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
Cは、C5、C6、C9およびC10から選択される保存システインもしくはその改変形態であるか、または具体的な実施形態では、C6およびC9から選択される)
を生成し、
ここで、個別の保存システインでの置換は、具体的な実施形態では、式XXIで表されるアミノ酸配列:
BCΩ    (XXI)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
Cは、C5、C6、C9およびC10から選択される保存システインもしくはその改変形態であり、
Ωは、小分子アミノ酸残基(例えばA、SもしくはTまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択される)
を生成し、
ここで、式XXIで表されるアミノ酸配列は、適切にはBCAまたはBCEから選択され、
ここで、個別の保存システインでの置換は、具体的な実施形態では、式Vで表されるアミノ酸配列:
BCΩΩ        (V)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
Cは、C5、C6、C9およびC10から選択される保存システインもしくはその改変形態であり、
Ωは、小分子アミノ酸残基(例えばA、SもしくはTまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択される)
を生成し、
ここで、式Vで表されるアミノ酸配列は、例えばBCAD(例えばRCAD、KCAD)、BCAT(例えばRCAT、KCAT)、BCED(例えばRCED、KCED)、BCSD(例えばRCSD、KCSD)、BCTD(例えばRCTD、KCTD)およびBCAS(例えばRCAS、KCAS)から選択され、
ここで、保存システインC5またはC6に隣接する置換は、例えばRCAD、KCAD、RCED、KCED、RCSD、KCSD、RCTDおよびKCTDから選択されるアミノ酸配列をもたらし、
ここで、C9に隣接する置換は、例えばKCSDからなるアミノ酸配列をもたらし、
ここで、C6およびC10から選択される一方または両方の保存システインに隣接する置換は、具体的な実施形態では、式XXIIIで表されるアミノ酸配列:
EBC    (XXIII)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
Cは、C6およびC9から選択される保存システインまたはその改変形態である)
を生成し、
ここで、保存システインC10に隣接する置換は、具体的な実施形態では、式XXIVで表されるアミノ酸配列:
GBC    (XXIV)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
Cは、保存システインC10またはその改変形態である)
を生成し、
ここで、C5およびC10から選択される一方または両方の保存システインに隣接する置換は、具体的な実施形態では、式XXVで表されるアミノ酸配列:
GBCΩ    (XXV)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
Cは、C5およびC10から選択される保存システインまたはその改変形態であり、
Ωは、小分子アミノ酸残基(例えばA、SもしくはTまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択される)
を生成し、
ここで、GBCΩは、例えばGBCAで表され、
ここで、C5およびC10から選択される一方または両方の保存システインに隣接する置換は、具体的な実施形態では、式XXVIで表されるアミノ酸配列:
GBCΩΩ    (XXVI)
(式中:
Bは、塩基性アミノ酸残基(例えばRもしくはKまたはその改変形態)から選択され、
Cは、C5およびC10から選択される保存システインまたはその改変形態であり、
Ωは、小分子アミノ酸残基(例えばA、SもしくはTまたはその改変形態)または酸性アミノ酸残基(例えばEまたはその改変形態)から選択される)
を生成し、
ここで、GBCΩΩは、例えばGBCATで表される、
置換
からなる群から選択される少なくとも1つの改変により区別されるアミノ酸配列を調製するステップを含む。
【０１５６】
有利な実施形態では、本明細書で定義するi)〜v)のいずれか1つに従う改変は、ルシフェラーゼ機能の最適温度を含む最適温度範囲を上昇させ、本明細書において「最適温度範囲上昇改変」または「最適温度上昇改変」ともいう。
【０１５７】
適切には、方法は、参照ポリペプチドを改変するステップを含み、該改変は、上のi)〜v)で定義する少なくとも1、2、3、4、5の改変を含む改変ルシフェラーゼの調製をもたらす。改変の説明的な組み合わせを、以下のTable A(表1)に示す。
【０１５８】
【表１】
2013544100.tif 000002
【０１５９】
いくつかの実施形態では、カイアシアミノ酸配列は、改変の基礎として用い、適切には、式Iで定義するアミノ酸配列または式Iで表されるアミノ酸配列と少なくとも70%(ならびに少なくとも71%から少なくとも99%およびその間の全ての整数のパーセンテージ)の配列類似性または配列同一性を共有する配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる。
【０１６０】
具体的な実施形態では、少なくとも1つの改変は、
85位または98位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)に相当する少なくとも1つの位置でのLまたはその改変形態、
BCモチーフを得るための、C5、C6、C9およびC10から選択される少なくとも1つの保存システインのすぐ上流にある塩基性アミノ酸残基、ならびに
シグナルペプチド配列の下流および85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)のアミノ酸残基の上流、適切には残基約84、83、82、81、80、79、78、77、76、75、74、73、72、71(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)の上流にまたがる参照カイアシルシフェラーゼアミノ酸配列の全体または一部の欠失
からなる群から選択される。
【０１６１】
これらの実施形態のいくつかでは、ポリペプチドは、(1)85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)にてLまたはその改変形態を含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、(2)98位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)にてLまたはその改変形態を含む。適切には、ポリペプチドは、(3)85位および98位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)にてLまたはその改変形態を含む。
【０１６２】
これらの実施形態のいくつかでは、ポリペプチドは、(4)保存システインC6およびC9に相当する少なくとも1つの位置にてBCモチーフを含む。このタイプの代表的な例では、ポリペプチドは、(5)保存システインC6に相当する位置にてBCモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(6)保存システインC9に相当する位置にてBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(7)保存システインC6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCモチーフを含む。
【０１６３】
これらの実施形態のいくつかでは、ポリペプチドは、(8)保存システインC5、C6およびC9に相当する少なくとも1つの位置にてBCΩモチーフを含む。このタイプの代表的な例では、ポリペプチドは、(9)保存システインC5に相当する位置にてBCΩモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(10)保存システインC6に相当する位置にてBCΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(11)保存システインC9に相当する位置にてBCΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(12)保存システインC5およびC6のそれぞれに相当する位置にてBCΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(13)保存システインC5およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(14)保存システインC6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(15)保存システインC5、C6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCΩモチーフを含む。
【０１６４】
これらの実施形態のいくつかでは、ポリペプチドは、(16)保存システインC5、C6およびC9に相当する少なくとも1つの位置にてBCΩΩモチーフを含む。このタイプの代表的な例では、ポリペプチドは、(17)保存システインC5に相当する位置にてBCΩΩモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(18)保存システインC6に相当する位置にてBCΩΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(19)保存システインC9に相当する位置にてBCΩΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(20)保存システインC5およびC6のそれぞれに相当する位置にてBCΩΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(21)保存システインC5およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCΩΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(22)保存システインC6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCΩΩモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(23)保存システインC5、C6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCΩΩモチーフを含む。
【０１６５】
これらの実施形態のいくつかでは、ポリペプチドは、(24)保存システインC5、C6、C9およびC10に相当する少なくとも1つの位置にてBCΩDモチーフを含む。このタイプの代表的な例では、ポリペプチドは、(25)保存システインC5に相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(26)保存システインC6に相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(27)保存システインC9に相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(28)保存システインC10に相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(29)保存システインC5およびC6のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(30)保存システインC5およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(31)保存システインC5およびC10のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(32)保存システインC6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(33)保存システインC6およびC10のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(34)保存システインC9およびC10のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(35)保存システインC5、C6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(36)保存システインC5、C6およびC10のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(37)保存システインC5、C9およびC10のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(38)保存システインC6、C9およびC10のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(39)保存システインC5、C6、C9およびC10のそれぞれに相当する位置にてBCΩDモチーフを含む。
【０１６６】
これらの実施形態のいくつかでは、ポリペプチドは、(40)保存システインC5、C6、C9およびC10に相当する少なくとも1つの位置にてEBCモチーフを含む。このタイプの代表的な例では、ポリペプチドは、(41)保存システインC5に相当する位置にてEBCモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(42)保存システインC6に相当する位置にてEBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(43)保存システインC9に相当する位置にてEBCモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(44)保存システインC10に相当する位置にてEBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(45)保存システインC5およびC6のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(46)保存システインC5およびC9のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(47)保存システインC5およびC10のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(48)保存システインC6およびC9のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(49)保存システインC6およびC10のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(50)保存システインC9およびC10のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(51)保存システインC5、C6およびC9のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(52)保存システインC5、C6およびC10のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(53)保存システインC5、C9およびC10のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(54)保存システインC6、C9およびC10のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(55)保存システインC5、C6、C9およびC10のそれぞれに相当する位置にてEBCモチーフを含む。
【０１６７】
これらの実施形態のいくつかでは、ポリペプチドは、(56)保存システインC6、C9およびC10に相当する少なくとも1つの位置にてGBCモチーフを含む。このタイプの代表的な例では、ポリペプチドは、(57)保存システインC6に相当する位置にてGBCモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(58)保存システインC9に相当する位置にてGBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(59)保存システインC10に相当する位置にてGBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(60)保存システインC6およびC9のそれぞれに相当する位置にてGBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(61)保存システインC6およびC10のそれぞれに相当する位置にてGBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(62)保存システインC9およびC10のそれぞれに相当する位置にてGBCモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(63)保存システインC6、C9およびC10のそれぞれに相当する位置にてGBCモチーフを含む。
【０１６８】
これらの実施形態のいくつかでは、ポリペプチドは、(64)保存システインC5、C6およびC9に相当する少なくとも1つの位置にてBCAモチーフを含む。このタイプの代表的な例では、ポリペプチドは、(65)保存システインC5に相当する位置にてBCAモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(66)保存システインC6に相当する位置にてBCAモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(67)保存システインC9に相当する位置にてBCAモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(68)保存システインC5およびC6のそれぞれに相当する位置にてBCAモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(69)保存システインC5およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCAモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(70)保存システインC6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCAモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(71)保存システインC5、C6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCAモチーフを含む。
【０１６９】
これらの実施形態のいくつかでは、ポリペプチドは、(72)保存システインC5、C6およびC9に相当する少なくとも1つの位置にてBCAΩモチーフを含む。このタイプの代表的な例では、ポリペプチドは、(73)保存システインC5に相当する位置にてBCAΩモチーフを含む。別の代表的な例では、ポリペプチドは、(74)保存システインC6に相当する位置にてBCAΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(75)保存システインC9に相当する位置にてBCAΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(76)保存システインC5およびC6のそれぞれに相当する位置にてBCAΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(77)保存システインC5およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCAΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(78)保存システインC6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCAΩモチーフを含む。さらに別の代表的な例では、ポリペプチドは、(79)保存システインC5、C6およびC9のそれぞれに相当する位置にてBCAΩモチーフを含む。
【０１７０】
これらの実施形態のいくつかでは、ポリペプチドは、(80)保存システインC10に相当する位置にてXBCモチーフ(ここで、Xは、DまたはP以外であり、例えばRもしくはKまたはその改変形態、より適切にはHまたはその改変形態、さらにより適切にはT、A、SもしくはNまたはその改変形態、好ましくはQまたはその改変形態、より好ましくはGまたはその改変形態、さらにより好ましくはEまたはその改変形態から選択される)を含む。
【０１７１】
これらの実施形態のいくつかでは、ポリペプチドは、参照カイアシルシフェラーゼアミノ酸配列の全体または一部の欠失(81)を含み、ここで、アミノ酸配列は、シグナルペプチド配列の下流および85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)のアミノ酸残基の上流、適切には残基約84、83、82、81、80、79、78、77、76、75、74、73、72、71(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)の上流にまたがる。
【０１７２】
適切には、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(4)〜(7)のいずれか1つで定義するモチーフとを含む。他の実施形態では、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(8)〜(15)のいずれか1つで定義するモチーフとを含む。さらに別の実施形態では、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(16)〜(23)のいずれか1つで定義するモチーフとを含む。さらに別の実施形態では、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(24)〜(39)のいずれか1つで定義するモチーフとを含む。さらに別の実施形態では、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(40)〜(55)のいずれか1つで定義するモチーフとを含む。さらに別の実施形態では、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(56)〜(63)のいずれか1つで定義するモチーフとを含む。他の実施形態では、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(64)〜(71)のいずれか1つで定義するモチーフとを含む。さらに別の実施形態では、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(72)〜(79)のいずれか1つで定義するモチーフとを含む。さらに別の実施形態では、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(80)で定義するモチーフとを含む。さらに別の実施形態では、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(81)で定義する欠失とを含む。他の実施形態では、ポリペプチドは、(4)〜(8)のいずれか1つで定義するモチーフと(81)で定義する欠失とを含む。さらに別の実施形態では、ポリペプチドは、(1)〜(3)で定義する少なくとも1つのアミノ酸と(4)〜(8)のいずれか1つで定義するモチーフと(81)で定義する欠失とを含む。
【０１７３】
関連する態様では、本発明は、ルシフェラーゼ機能の最適温度の上昇を含む最適温度範囲が上昇した改変カイアシルシフェラーゼポリペプチドを調製する方法を提供する。これらの方法は、全般的に、参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドから、少なくとも1つのアミノ酸配列改変により区別されるアミノ酸配列を含むか、それからなるかまたはそれから本質的になるような改変カイアシルシフェラーゼポリペプチドを調製するステップであって、少なくとも1つのアミノ酸配列改変が、参照カイアシルシフェラーゼポリペプチドに対して、ルシフェラーゼ機能の最適温度範囲を上昇させることに基づいて選択されるステップを含む。
【０１７４】
適切には、少なくとも1つの有効温度範囲上昇改変は、下で定義する改変i)〜v)からなる群から選択される。このタイプの説明的な例では、参照ポリペプチドは、本明細書で定義し、例えばTable A(表1)に示すi)〜xi)に従う少なくとも1、2、3、4、5つの改変を含むように改変される。
【０１７５】
いくつかの実施形態では、少なくとも1つの改変は、ルシフェラーゼ機能の最適温度を含む最適温度範囲を、少なくとも2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30℃上昇させる。このタイプの説明的な例では、少なくとも1つの改変は、ルシフェラーゼ機能の最適温度範囲を、上昇させる。適切には、少なくとも1つの改変は、ルシフェラーゼ機能の最適温度を20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39または40℃に上昇させる。具体的な実施形態では、少なくとも1つの改変は、37℃でのルシフェラーゼ活性の増強をもたらす。別の具体的な実施形態では、少なくとも1つの改変は、室温(例えば22℃)でのルシフェラーゼ活性の増強をもたらす。
【０１７６】
いくつかの実施形態では、方法は、85位(図1に示すコンセンサス番号付けに対して)にLまたはその改変形態を含むように参照ポリペプチドを改変するステップを含む。
【０１７７】
適切には、方法は、調製されたポリペプチドの活性(例えばフラッシュシグナルの強さの強度、グローシグナルの強さの強度、グローシグナル安定性およびルシフェラーゼ機能の最適温度範囲の上昇を含む有効温度範囲)を決定するステップをさらに含む。
【０１７８】
いくつかの実施形態では、方法は、ポリペプチドの活性を、参照ルシフェラーゼポリペプチドの活性と比較するステップをさらに含む。
【０１７９】
非限定的な参照ルシフェラーゼポリペプチド配列は、
[配列番号2] (ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼの全長配列);
[配列番号4] (ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼの全長配列);
[配列番号6] (ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼの全長配列);
[配列番号8] (ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼの全長配列);
[配列番号10] (ガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼの全長配列);
[配列番号166] (メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼの全長配列);
[配列番号168] (メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼの全長配列);
[配列番号170] (メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼの全長配列);
[配列番号172] (メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼの全長配列);
MGVKLIFAVLCVAAAQAATINENFEDIDVVAIGGSFALDVDANRGGHGGHPGKKMPKEVLVEMEANAKRAGCHRGCLICLSHIKCTKKMKKFIPGRCHSYEGDKDSAQGGIGEEIVDMPEIPGFKDKEPMDQFIAQVDLCVDCTTGCLKGLANVHCSALLKKWLPSRCKTFASKIQSQVDTIKGLAGDR[配列番号790](メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼ(本明細書においてMP2aともいう)の全長配列);
MMEIQVLFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号792](メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼ(本明細書においてMP1v1ともいう)の全長配列);
MMEIKVLFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号794](メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼ(本明細書においてMP1v2ともいう)の全長配列);
MMEVKVVFALICFALVQANPTENKDDIDIVGVEGKFGTTDLETDLFTIVEDMNVISRDTNLANSDADRGKMPGKKLPLEVLIEMEANARKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKELGPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSALLKKWLPDRCASFADKIQSEVDNIKGLAGDR[配列番号796](メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼ(本明細書においてMP1v3ともいう)の全長配列);
MDIKFIFALVCIALVQANPTVNNDVNRGKMPGKKLPLEVLIEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKQYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDLCADCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEAHNIKGLAGDR[配列番号798](メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ(本明細書においてML7ともいう)の全長配列);
MKTDIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号800](メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼ(本明細書においてMLGSともいう)の全長配列);
MDIKVVFTLVFSALVQAQKTDIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR配列番号802](メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼ(本明細書においてML164M3ともいう)の全長配列);
MDIKVVFTLVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号804](メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼ(本明細書においてML164v1ともいう)の全長配列);
MDIKVVFTLVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVMIKADIADTDRASNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVERCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号806](メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼ(本明細書においてML164v2ともいう)の全長配列);
MDMKVIFALIFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKSDIADTDRVSNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDRCTSCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号808](メトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼ(本明細書においてML16ともいう)の全長配列);
MDIKVVFALVFSALVQAKSTEFDPNIDIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARSFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号810](メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼ(本明細書においてML45ともいう)の全長配列);
MDIKVVFALVFSALVQAKSTEFDPNIDVVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMEVIKTDIADTDRARNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMEPMEQFIAQVDRCASCNTGCLKGLANVKCSELLKKWLPDRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号812](メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼ(本明細書においてML52ともいう)の全長配列);および
MDMRVIFALVFSSLVQAKSTEFDPNINIVGLEGKFGITNLETDLFTIWETMDVIKSDITDTDRVSNFVATETDANRGKMPGKKLPLAVIMEMEANAFKAGCTRGCLICLSKIKCTAKMKVYIPGRCHDYGGDKKTGQAGIVGAIVDIPEISGFKEMAPMEQFIAQVDLCATCTTGCLKGLANVKCSELLKKWLPGRCASFADKIQKEVHNIKGMAGDR[配列番号814](メトリジア・ロンガALルシフェラーゼ(本明細書においてMLALともいう)の全長配列)
から選択できる。
【０１８０】
関連する態様では、本発明は、を提供する。
【０１８１】
本発明の別の関連する態様は、調節配列に作動可能につながった、上で広く記載する核酸分子を含む構築物を提供する。
【０１８２】
まだ別の態様では、本発明は、上で広く記載する構築物を含有する宿主細胞を提供する。
【０１８３】
さらに別の態様では、本発明は、細胞と会合したレポーター酵素の活性を評価する方法であって、レポーター酵素が、光放射の特徴が改良されている(例えばルミネセンスの改良、フラッシュシグナルの強さの改良、グローシグナルの強さの改良、グローシグナル安定性の改良およびルシフェラーゼ機能の最適温度範囲の上昇を含む有効温度範囲の改良)上で広く記載するポリペプチドを含むか、それからなるかまたはそれから本質的になる方法を提供する。これらの方法は、全般的に、(a)細胞を、セレンテラジンまたはその類似体もしくは誘導体(例えばベンジル-セレンテラジン;ビスデオキシセレンテラジン;セレンテラジン、h-セレンテラジン、f-セレンテラジン、cl-セレンテラジン、n-セレンテラジン、cp-セレンテラジン、ch-セレンテラジン、hch-セレンテラジン、fch-セレンテラジン、e-セレンテラジン、ef-セレンテラジン、ech-セレンテラジン、hcp-セレンテラジンなど)と接触させるステップと、(b)セレンテラジンまたはその類似体もしくは誘導体から生じるシグナルを検出して、レポーター酵素の活性を評価するステップとを含む。いくつかの実施形態では、検出は、ルシフェラーゼ機能の上昇した最適温度範囲を含む改良された有効温度範囲内で行われる。いくつかの実施形態では、細胞は、上で広く記載する核酸分子を含有する。
【０１８４】
まだ別の態様では、本発明は、上で広く記載するポリペプチドまたは上で広く記載する核酸分子または上で広く記載する構築物または上で広く記載する細胞を含む容器を含むキットを提供する。いくつかの実施形態では、キットは、適切に凍結乾燥されたルシフェリンを含む容器をさらに含む。
【図面の簡単な説明】
【０１８５】
【図１−１】以下の推定全長ルシフェラーゼアミノ酸配列の配列アラインメントの結果を示す図である:[配列番号2](ガウシア・プリンセプスProlumeルシフェラーゼ);[配列番号4](ガウシア・プリンセプスProlume KDELルシフェラーゼ);[配列番号6](ガウシア・プリンセプス変異体1ルシフェラーゼ);[配列番号8](ガウシア・プリンセプス変異体2ルシフェラーゼ);[配列番号10](ガウシア・プリンセプスGSルシフェラーゼ);[配列番号166](メトリジア・パシフィカ2bv1ルシフェラーゼ);[配列番号168](メトリジア・パシフィカ2bv2ルシフェラーゼ);[配列番号170](メトリジア・ロンガ22ルシフェラーゼ);[配列番号172](メトリジア・ロンガ39ルシフェラーゼ);[配列番号790](メトリジア・パシフィカ2aルシフェラーゼ);[配列番号792](メトリジア・パシフィカ1v1ルシフェラーゼ);[配列番号794](メトリジア・パシフィカ1v2ルシフェラーゼ);[配列番号796](メトリジア・パシフィカ1v3ルシフェラーゼ);[配列番号798](メトリジア・ロンガ7ルシフェラーゼ);[配列番号800](メトリジア・ロンガGSルシフェラーゼ);[配列番号802](メトリジア・ロンガ164M3ルシフェラーゼ);[配列番号804](メトリジア・ロンガ164v1ルシフェラーゼ);[配列番号806](メトリジア・ロンガ164v2ルシフェラーゼ);[配列番号808](ルシフェラーゼメトリジア・ロンガ16ルシフェラーゼ);[配列番号810](メトリジア・ロンガ45ルシフェラーゼ);[配列番号812](メトリジア・ロンガ52ルシフェラーゼ)および[配列番号814](メトリジア・ロンガALルシフェラーゼ)。
【図１−２】図１−１の続きである。
【図２】冷蔵庫-RT-オーブンからの溶解物のGlow F&G(対照RTプレートに対する)を示すグラフである。
【図３】冷蔵庫からRTアッセイ緩衝液の注入のための機械までの溶解物のFlash DLAプレートを示すグラフである。
【図４】21℃での機械中(最終温度は0.5℃増加)へのGlow F&Gを示すグラフである。
【図５】冷蔵庫-RT-オーブンからの馴化培地のGlow F&G(対照RTプレートに対する)を示すグラフである。
【図６】一連の温度にわたるGlow F&Gルシフェラーゼデータを示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０１８６】
1.定義
別途定義しない限り、本明細書で用いる全ての技術的および科学的用語は、本発明が属する技術分野の当業者により通常理解されるのと同じ意味を有する。本明細書に記載するものと類似または等価ないずれの方法および材料も本発明を実施または試験するために用いることができるが、好ましい方法および材料は、記載される。本発明の目的のために、以下の用語を以下で定義する。
【０１８７】
冠詞「a」および「an」は、冠詞の文法上の目的語の1つまたは1つより多く(すなわち少なくとも1つ)のことをいうために用いられる。例えば、「エレメント」は、1つのエレメントまたは1つより多いエレメントを意味する。
【０１８８】
「約」により、参照分量、レベル、値、数、頻度、パーセンテージ、寸法、サイズ、量、重量、位置または長さに対して15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2または1%ほど変動する分量、レベル、値、数、頻度、パーセンテージ、寸法、サイズ、量、重量、位置または長さを意味する。
【０１８９】
参照もしくは全長ポリヌクレオチドまたはポリペプチド配列の断片に対して用いられる用語「生物活性断片」は、参照配列の活性の少なくとも約0.1、0.5、1、2、5、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、96、97、98、99%を有する断片のことをいう。本発明の範囲内には、長さが少なくとも約40、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105、110、115、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、180、185、190、195、200残基または長さが120、150、180、210、240、270、300、330、360、390、420、450、480、510、540、570、600ヌクレオチドの生物活性断片を含み、該断片は、参照ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの活性を含むかまたはコードする。代表的な生物活性断片は、全般的に、相互作用、例えば分子内または分子間相互作用に参加する。例えば、本発明によるルシフェラーゼポリペプチド(例えばペプチドまたはポリペプチド)の生物活性部分は、本発明のルシフェラーゼポリペプチドのアミノ酸配列と十分な類似性もしくは同一性を有するかまたはそれに由来するアミノ酸配列を含むポリペプチドを含み、ルミネセンス、フラッシュシグナル、グローシグナル、グローシグナルの安定性および酵素の最適温度範囲の上昇を含む有効温度範囲の増強から選択される少なくとも1つの活性を含む。
【０１９０】
本明細書で用いる場合、用語「シス作用配列」もしくは「シス調節領域」または類似の用語は、発現可能な遺伝子配列に由来する任意の配列のヌクレオチドであって、遺伝子配列の発現が、少なくとも部分的に、ヌクレオチドの配列により調節されるヌクレオチドを意味すると理解される。当業者は、シス調節領域が、任意の構造的遺伝子配列の発現のレベルおよび/または細胞型特異性および/または発達特異性を活性化し、発現停止させ、増強し、抑制し、そうでなければ変更することができることを認識している。
【０１９１】
本明細書で用いる場合、「キメラ構築物」は、異種核酸エレメントを有するポリヌクレオチドのことをいう。キメラ構築物は、対象の配列または遺伝子(例えばルシフェラーゼコード配列)の発現を駆動できるアセンブリのことをいう「発現カセット」または「発現構築物」を含む。発現カセットは、全般的に、本発明の合成ポリヌクレオチドに(転写を駆動するように)作動可能に連結したプロモーターのような制御エレメントを含み、ポリアデニル化配列もしばしば含む。本発明のある特定の実施形態のうちでは、キメラ構築物は、ベクター内に含まれてよい。キメラ構築物の成分に加えて、ベクターは、1または複数の選択マーカー、ベクターが1本鎖DNAとして存在することを可能にするシグナル(例えばM13複製起点)、少なくとも1つのマルチクローニングサイトおよび「哺乳動物」の複製起点(例えばSV40またはアデノウイルスの複製起点)を含んでよい。
【０１９２】
「コード配列」により、遺伝子のポリペプチド生成物のコードに貢献する任意の核酸配列を意味する。これとは対照的に、用語「非コード配列」は、遺伝子のポリペプチド生成物のコードに貢献しない任意の核酸配列のことをいう。
【０１９３】
用語「相補的」および「相補性」は、塩基対形成の規則により関連するポリヌクレオチド(すなわちヌクレオチドの配列)のことをいう。例えば、配列「A-G-T」は、配列「T-C-A」と相補的である。相補性は、いくつかの核酸塩基だけが塩基対形成の規則に従ってマッチする「部分的」であってよい。または核酸間の「完全」または「全体的」相補性が存在し得る。核酸の鎖の間の相補性の程度は、核酸の鎖の間のハイブリダイゼーションの効率および強度に著しく影響する。
【０１９４】
本明細書を通して、文脈がそうでないことを要さない限り、語句「含む(comprise)」、「含む(comprises)」および「含み(comprising)」は、述べられたステップもしくは要素またはステップもしくは要素の群を含むが、いずれのその他のステップもしくは要素またはステップもしくは要素の群を排除しないことを意味すると理解される。つまり、用語「含み」などを用いることは、列挙される要素が必要であるかまたは義務付けられるが、その他の要素は任意選択であり、存在してもしなくてもよいことを示す。「からなる」により、句「からなる」の後に続くものを含み、それに限定されることを意味する。よって、句「からなる」は、列挙される要素が必要であるかまたは義務付けられ、その他の要素は存在しないことを示す。「から本質的になる」により、この句の後に列挙されるいずれの要素も含み、列挙される要素について本開示で特定される活性または作用に干渉しないかまたは貢献しないその他の要素に限定されることを意味する。よって、句「から本質的になる」は、列挙される要素が必要であるかまたは義務付けられるが、その他の要素は、それらが列挙される要素の活性または作用に影響するかしないかに応じて任意選択であり、存在してもしなくてもよいことを示す。
【０１９５】
「・・に相当する」または「・・に相当し」により、参照アミノ酸配列に対して実質的な配列類似性または同一性を示すアミノ酸配列を意味する。一般的に、参照アミノ酸配列に相当するアミノ酸配列は、参照アミノ酸配列の少なくとも一部分に対して少なくとも約50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99%または100%さえまでの配列類似性または同一性を示す。
【０１９６】
「遺伝子」により、染色体上の特定の遺伝子座を占め、転写および/もしくは翻訳調節配列ならびに/またはコード領域ならびに/または非翻訳配列(すなわちイントロン、5'および3'非翻訳配列)からなる遺伝の単位を意味する。
【０１９７】
用語「宿主細胞」は、本発明の任意の組換え構築物または単離ポリヌクレオチドのレシピエントになり得るかまたはレシピエントになった個別の細胞または細胞培養物を含む。宿主細胞は、単一宿主細胞の子孫を含み、この子孫は、自然、偶発的または意図的な変異および/または変化により(形態学的にまたは全体的DNA相補性において)元の親細胞と完全に同一である必要はない。宿主細胞は、in vivoまたはin vitroにて本発明の組換え構築物またはポリヌクレオチドをトランスフェクトされたかまたはそれに感染した細胞を含む。本発明の組換え構築物を含む宿主細胞は、組換え宿主細胞である。
【０１９８】
「ハイブリダイゼーション」は、本明細書において、相補的ヌクレオチド配列の対形成によりDNA-DNAハイブリッドまたはDNA-RNAハイブリッドが形成されることを示す。相補的塩基配列は、塩基対形成の規則により関連する配列である。DNAでは、AはTと対形成し、CはGと対形成する。RNAでは、UはAと対形成し、CはGと対形成する。これに関して、用語「マッチ」および「ミスマッチ」は、本明細書で用いる場合、相補的核酸鎖における対になったヌクレオチドのハイブリダイゼーション能力のことをいう。マッチしたヌクレオチドは、上記の慣習的なA-TおよびG-C塩基対のように効率的にハイブリダイズする。ミスマッチは、効率的にハイブリダイズしないヌクレオチドの他の組み合わせである。
【０１９９】
「単離」により、物質の天然の状態において通常随伴している成分を実質的または本質的に含まない物質を意味する。例えば、「単離ポリヌクレオチド」は、本明細書で用いる場合、自然に存在する状態において該ポリヌクレオチドを挟む配列から精製されたポリヌクレオチド、例えば断片に通常隣接している配列から除去したDNA断片のことをいう。代わりに、「単離ペプチド」または「単離ポリペプチド」などは、本明細書で用いる場合、その自然の細胞環境からおよび細胞の他の成分との会合からのポリペプチド分子のin vitro単離および/または精製のことをいい、すなわち、それがin vivo物質と会合していないことをいう。同様に、「単離」または「精製」タンパク性分子(例えばペプチド、ポリペプチド、タンパク質など)は、細胞性物質またはタンパク性分子が由来する細胞もしくは組織源からの他の混入分子を実質的に含まないか、あるいは化学的に合成された場合は、化学的前駆体またはその他の化学物質を実質的に含まない。「実質的に含まない」は、本発明によるルシフェラーゼポリペプチドの調製物が、少なくとも10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98または99%純粋であることを意味する。好ましい実施形態では、ルシフェラーゼポリペプチドの調製物は、約30、25、20、15、10、9、8、7、6、5、4、3、2もしくは1%(乾燥重量)未満の非ルシフェラーゼポリペプチド(本明細書において「混入分子」ともいう)または化学的前駆体もしくは非ルシフェラーゼ化学物質を有する。ルシフェラーゼポリペプチドが組換え生成される場合、これは、培養培地を実質的に含まないことも望ましく、すなわち培養培地は、ルシフェラーゼ調製物の容量の約20、15、10、5、4、3、2、1%未満である。本発明は、乾燥重量で少なくとも0.01、0.1、1.0および10ミリグラムの単離または精製調製物を含む。
【０２００】
用語「ルミネセンス」は、適当な条件下、例えばセレンテラジンのような適切な基質の存在下でのルシフェラーゼポリペプチドの光出力のことをいう。光出力は、ルミネセンス反応の開始(これは、セレンテラジン基質の添加の際に開始し得る)の際の光出力の即時またはほぼ即時の尺度(典型的には数秒で、これは「T=0」ルミネセンスまたは「フラッシュ」と時折よばれる)として測定できる。様々な実施形態でのルミネセンス反応は、例えば原核または真核発現系の細胞からの溶解物を含有する溶液中で行われ、別の実施形態では、発現は、in vitro系で生じるか、またはルシフェラーゼタンパク質は、細胞外培地に分泌され、後者の場合、溶解物を生成する必要がない。いくつかの実施形態では、反応は、適当な物質(例えばセレンテラジン)を、ルシフェラーゼタンパク質を含有する反応チャンバ(例えば96ウェルプレートのようなマルチウェルプレートのウェル)に注入することにより開始される。反応チャンバは、例えばルミノメータまたは光電子倍増管を用いる、光出力を測定できる読み取り装置の中にあってよい。光出力またはルミネセンスは、経時的に、例えば同じ反応チャンバ中で数分、数時間などにわたって測定してもよい(これは、「グロー」と時折よばれる)。光出力またはルミネセンスは、経時的な平均値、シグナルの減衰の半減期、経時的なシグナルの総計またはピーク出力として報告してよい。ルミネセンスの増強は、比較により得られた測定との適切な比較により決定される、光出力またはルミネセンスの増加を含む。本明細書で開示する場合、カイアシルシフェラーゼ配列に対する1または複数の適切なアミノ酸改変は、ルミネセンスが増強された改変ルシフェラーゼポリペプチドをもたらす。野生型またはその他の親のカイアシルシフェラーゼヌクレオチド配列からのヌクレオチド配列の変化は、アミノ酸置換を導くことおよび/またはタンパク質発現を増強することによりルミネセンスの増強に貢献し得る。シグナル安定性の増強は、例えば時間経過におけるシグナルの減衰の半減期により測定されるようなルシフェラーゼからのシグナルがルミネセンスを示し続ける(「グロー」)長さの増加を含む。ルシフェラーゼの働きについての有効温度範囲の増強は、適切なシグナル強度を維持しながら、ルミネセンスアッセイを行うことができる温度範囲がより広いこと、すなわち、シグナル強度の温度依存的喪失が実質的にないことを含む。例えば、ルシフェラーゼは、より広い範囲の温度(例えば室温より上または室温より下)にわたって温度変動に応答する活性の変化が最小限または微弱である。有効温度範囲の増強は、アッセイを意図する温度またはほぼその温度(例えば生存哺乳動物内で行うin vivoアッセイについて37℃もしくは約37℃、または実験台でのアッセイについて室温もしくはほぼ室温(RT;約22℃)、または試料および/またはアッセイ試薬中の必須反応成分の分解を最小限にするために冷蔵庫または低温室で行われるイムノアッセイのようなアッセイについて4℃もしくは約4℃)にて行うことができるようにルシフェラーゼの温度範囲を改変することもその範囲に含む。このタイプの有利な実施形態では、ルシフェラーゼの温度範囲(最適温度を含む)は、改変前のその温度範囲(または最適温度)または対照もし���は参照ルシフェラーゼと比較して、同じ反応条件下で測定した場合に、上昇する。精密な最適温度は、反応溶液のような反応条件により変動することがあるが、ルシフェラーゼの温度範囲(最適温度を含む)の上昇は、本明細書に記載するような所定の緩衝液条件下で測定した場合に、当業者にすぐに明らかである。用語「最適温度範囲」は、本明細書で用いる場合、ルシフェラーゼが、その最適温度でのシグナル強度の少なくとも80%のシグナル強度を示す温度の範囲のことをいう。「最適温度範囲の上昇」は、参照ルシフェラーゼの最適温度範囲の上限温度と比較してより高い上限温度を含む温度範囲を意味する。
【０２０１】
用語「5'非コード領域」は、本明細書においてその最も広い意味で用いられ、遺伝子のポリペプチド生成物を含むアミノ酸残基をコードする配列以外の、発現可能遺伝子の上流領域に由来する全てのヌクレオチド配列を含み、5'非コード領域は、少なくとも部分的に、遺伝子の発現を授けるか、または活性化するか、またはそうでなければ容易にする。
【０２０２】
用語「作動可能につながった」または「作動可能に連結した」は、本明細書で用いる場合、構造遺伝子を、それらに限定されないがプロモーターを含む調節エレメント(これは、次いで、遺伝子の転写および場合によって翻訳を制御する)の調節性制御の元に置くことを意味する。異種プロモーター/構造遺伝子の組み合わせの構築において、遺伝子配列またはプロモーターを、遺伝子配列またはプロモーターと自然の環境においてそれが制御する遺伝子、すなわち、遺伝子配列またはプロモーターが由来する遺伝子との間の距離とほぼ同じ距離だけ遺伝子転写開始部位から離れた位置に置くことが好ましい。当該技術分野において知られるように、この距離におけるいくらかの変動は、機能を喪失することなく適応できる。同様に、その制御下に置かれる異種遺伝子に対する調節配列エレメントの好ましい配置は、その自然の環境、すなわちそれが由来する遺伝子におけるエレメントの配置により定義される。
【０２０３】
用語「オリゴヌクレオチド」は、本明細書で用いる場合、ホスホジエステル結合(またはその関連する構造バリアントもしくは合成類似体)を介して連結される多重のヌクレオチド残基(デオキシリボヌクレオチドもしくはリボヌクレオチドまたはその関連する構造バリアントもしくは合成類似体)で構成されるポリマーのことをいう。よって、用語「オリゴヌクレオチド」は、ヌクレオチド残基およびそれらの間の連結が自然に存在するヌクレオチドポリマーのことを典型的にいうが、この用語は、それらに限定されないが、ペプチド核酸(PNA)、ホスホロアミデート、ホスホロチオエート、メチルホスホネート、2-O-メチルリボ核酸などを含む様々な類似体もその範囲内に含むことが理解される。分子の正確なサイズは、具体的な用途に応じて変動できる。オリゴヌクレオチドは、典型的には長さが比較的短く、一般的に、約10から30までのヌクレオチド残基であるが、この用語は、任意の長さの分子のことをいうことができ、とはいえ用語「ポリヌクレオチド」または「核酸」は典型的には大きいオリゴヌクレオチドについて用いられる。
【０２０４】
用語「ポリヌクレオチド」または「核酸」は、本明細書で用いる場合、mRNA、RNA、cRNA、cDNAまたはDNAを示す。この用語は、典型的に、リボヌクレオチドもしくはデオキシヌクレオチドまたはいずれかのタイプのヌクレオチドの改変形態の、少なくとも10塩基の長さのヌクレオチドのポリマー形態のことをいう。この用語は、DNAの1本鎖および2本鎖の形態を含む。
【０２０５】
用語「ポリヌクレオチドバリアント」および「バリアント」などは、参照ポリヌクレオチド配列と実質的な配列同一性を示すポリヌクレオチド、または以下で定義するストリンジェント条件下で参照配列とハイブリダイズするポリヌクレオチドのことをいう。これらの用語は、参照ポリヌクレオチドから、少なくとも1つのヌクレオチドの付加、欠失または置換により区別されるポリヌクレオチドも包含する。したがって、用語「ポリヌクレオチドバリアント」および「バリアント」は、1つもしくは複数のヌクレオチドが付加または欠失されたかあるいは異なるヌクレオチドに置き換えられたポリヌクレオチドを含む。これに関して、変異、付加、欠失および置換を含むある特定の変更を参照ポリヌクレオチドに対して行って、それにより変更されたポリヌクレオチドが参照ポリヌクレオチドの生物学的機能または活性を保持できることが当技術分野においてよく理解されている。用語「ポリヌクレオチドバリアント」および「バリアント」は、自然に存在する対立遺伝子バリアントも含む。
【０２０６】
「ポリペプチド」、「ペプチド」、「タンパク質」および「タンパク性分子」は、アミノ酸残基のポリマーを含むかまたはそれからなる分子ならびにそのバリアントおよび合成類似体のことをいうために本明細書において交換可能に用いられる。よって、これらの用語は、1または複数のアミノ酸残基が、対応する自然に存在するアミノ酸の化学的類似体のような合成の自然に存在しないアミノ酸であるアミノ酸ポリマー、ならびに自然に存在するアミノ酸ポリマーの両方に用いられる。この用語は、本発明のルシフェラーゼポリペプチドの異なる部分(parts)または部分(portions)(例えばポリペプチドドメイン、ポリペプチド鎖など)を含む2つ以上の相補性または相互作用性ポリペプチドであって、個別の相補性ポリペプチドが一緒に、異なる部分(parts)または部分(portions)の活性を再構築して、機能的ルシフェラーゼポリペプチドを形成するものもその範囲内に含む。このような相補性ポリペプチドは、当業者に公知であるタンパク質相補性アッセイにおいて日常的に用いられる。
【０２０７】
用語「ペプチドバリアント」および「ポリペプチドバリアント」などは、参照ポリペプチドから、少なくとも1つのアミノ酸残基の付加、欠失または置換により区別されるポリペプチドのことをいう。ある特定の実施形態では、ポリペプチドバリアントは、参照ポリペプチドから、保存的または非保存的であり得る1または複数の置換により区別される。ある特定の実施形態では、ポリペプチドバリアントは、保存的置換を含み、これに関して、あるアミノ酸を、広く同様の特性を有する別のアミノ酸に、ポリペプチドの活性の性質を変化させることなく変化できることが当技術分野においてよく理解されている。ペプチドおよびポリペプチドバリアントは、1つもしくは複数のアミノ酸が付加または欠失されたかあるいは異なるアミノ酸残基に置き換えられたポリペプチドも包含する。
【０２０８】
「プライマー」により、DNAの鎖と対形成させた場合に、適切な重合試薬の存在下でプライマー伸長生成物の合成を開始できるオリゴヌクレオチドを意味する。プライマーは、増幅の最大限の効率のために1本鎖であることが好ましいが、代わりに2本鎖であることもできる。プライマーは、重合試薬の存在下で伸長生成物の合成を刺激するために十分長くなければならない。プライマーの長さは、用途、採用する温度、鋳型反応条件、その他の試薬およびプライマーの供給源を含む多くの因子に依存する。例えば、標的配列の複雑さに応じて、オリゴヌクレオチドプライマーは、15〜35またはそれより多いヌクレオチド残基を典型的に含むが、より少ないヌクレオチド残基を含有することもできる。プライマーは、約200ヌクレオチド残基から数キロ塩基以上までのような大きいポリヌクレオチドであり得る。プライマーは、それがハイブリダイズするように設計された鋳型上の配列に「実質的に相補的」になり、合成の開始のための部位として働くように選択できる。「実質的に相補的」により、プライマーが、標的ポリヌクレオチドとハイブリダイズするために十分に相補的であることを意味する。好ましくは、プライマーは、それがハイブリダイズするように設計された鋳型とのミスマッチを含有しないが、このことは必須でない。例えば、非相補的ヌクレオチド残基をプライマーの5'端に結合させ、プライマー配列の残りは鋳型に相補的であるようにすることができる。代わりに、非相補的ヌクレオチド残基またはひと続きの非相補ヌクレオチド残基は、プライマー中に散在させることができ、但し、プライマー配列は鋳型の配列と十分な相補性を有してそれとハイブリダイズし、それによりプライマーの伸長生成物の合成のための鋳型を形成する。
【０２０９】
「プローブ」は、別の分子の特定の配列もしくは部分配列またはその他の部分と結合する分子のことをいう。そうでないと示さない限り、用語「プローブ」は、典型的に、相補的塩基対形成により「標的ヌクレオチド」としばしばよばれる別のポリヌクレオチドと結合するポリヌクレオチドプローブのことをいう。プローブは、プローブとの完全配列相補性を欠く標的ポリヌクレオチドと、ハイブリダイゼーション条件のストリンジェンシーに依存して結合できる。プローブは、直接的または間接的に標識できる。
【０２１０】
用語「組換えポリヌクレオチド」は、本明細書で用いる場合、核酸を自然では通常見出されない形態に操作することによりin vitroで形成されたポリヌクレオチドのことをいう。例えば、組換えポリヌクレオチドは、発現ベクターの形態であってよい。一般的に、このような発現ベクターは、ヌクレオチド配列に作動可能に連結した転写および翻訳調節核酸を含む。
【０２１１】
「組換えポリペプチド」により、組換え技術を用いて、すなわち組換えポリヌクレオチドの発現により作製されるポリペプチドを意味する。
【０２１２】
「調節エレメント」または「調節配列」により、特定の宿主細胞において作動可能に連結したコード配列の発現のために必要な核酸配列(例えばDNA)を意味する。例えば原核細胞に適切な調節配列は、プロモーターならびに場合によってオペレータ配列およびリボソーム結合部位のようなシス作用配列を含む。真核細胞に適切な制御配列は、プロモーター、ポリアデニル化シグナル、転写エンハンサー、翻訳エンハンサー、mRNA安定性を調整するリーダーまたはトレイリング配列、および転写されたポリヌクレオチドによりコードされる生成物を細胞内の細胞内区画または細胞外環境に向けるターゲティング配列を含む。
【０２１３】
用語「配列同一性」は、本明細書で用いる場合、ヌクレオチド毎のベースまたはアミノ酸毎のベースで比較ウィンドウにわたって配列が同一である度合いのことをいう。よって、「配列同一性のパーセンテージ」は、2つの最適にアラインメントした配列を比較ウィンドウにわたって比較し、両方の配列中の同一核酸塩基(例えばA、T、C、G、I、U)または同一アミノ酸残基(例えばAla、Pro、Ser、Thr、Gly、Val、Leu、Ile、Phe、Tyr、Trp、Lys、Arg、His、Asp、Glu、Asn、Gln、CysおよびMet)がある位置の数を決定してマッチした位置の数を得て、マッチした位置の数を、比較ウィンドウ中の位置の総数(すなわちウィンドウサイズ)で除し、その解に100を乗じて配列同一性のパーセンテージを得ることにより算出される。本発明は、本発明の方法および系において全長ルシフェラーゼポリペプチドおよびそれらの生物活性断片を用いることを企図する。典型的に、全長ルシフェラーゼポリペプチドの生物活性断片は、相互作用、例えば分子内または分子間相互作用に参加し得る。分子間相互作用は、特異的結合相互作用または酵素相互作用(例えば相互作用は、一過性であり得、共有結合が形成されるかまたは破壊される)であり得る。全長ルシフェラーゼポリペプチドの生物活性断片は、(推定)全長ルシフェラーゼポリペプチドのアミノ酸配列と十分に類似するかまたはそれに由来するアミノ酸配列を含むペプチドを含む。典型的に、生物活性断片は、ルミネセンス、フラッシュシグナル、グローシグナル、グローシグナルの安定性およびフラッシュシグナルまたはグローシグナルの最適温度範囲の上昇を含む有効温度範囲から選択される少なくとも1つの活性を有するドメインまたはモチーフを含む。全長ルシフェラーゼポリペプチドの生物活性断片は、例えば長さが40、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105、110、115、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、180、185、190、195、200以上のアミノ酸残基のポリペプチドであり得る。適切には、生物活性断片は、それが由来する全長ポリペプチドの活性の約1%、10%、25%、50%以上を有する。
【０２１４】
「類似性」は、同一であるかまたは下記のTables 2および3(表3および4)で定義する保存的置換を構成するアミノ酸のパーセンテージ数のことをいう。類似性は、GAP(Deverauxら、1984、Nucleic Acids Research12:387〜395頁)のような配列比較プログラムを用いて決定できる。このようにして、本明細書に示すものと類似のまたは実質的に長さが異なる配列を、アラインメント中にギャップを挿入することにより比較でき、このようなギャップは、例えばGAPにより使用される比較アルゴリズムにより決定される。
【０２１５】
2つ以上のポリヌクレオチドまたはポリペプチド間の配列の関係について記載するために用いる用語は、「参照配列」、「比較ウィンドウ」、「配列同一性」、「配列同一性のパーセンテージ」および「実質的同一性」を含む。「参照配列」は、少なくとも12、頻繁に15〜18およびしばしば少なくとも25のモノマー単位(ヌクレオチドおよびアミノ酸残基を含む)の長さである。2つのポリヌクレオチドはそれぞれ(1)2つのポリヌクレオチド間で類似の配列(すなわち完全ポリヌクレオチド配列の一部分だけ)、および(2)2つのポリヌクレオチド間で異なる配列を含み得るので、2つ(またはそれより多い)のポリヌクレオチド間の配列比較は、2つのポリヌクレオチドの配列を「比較ウィンドウ」にわたって比較して、配列類似性の局所的領域を同定して比較することにより典型的に行われる。「比較ウィンドウ」は、少なくとも6の連続する位置、通常約50〜約100、より通常には約100〜約150の概念的区域のことをいい、この中で、配列を、2つの配列を最適にアラインメントした後に同数の連続する位置の参照配列と比較する。比較ウィンドウは、2つの配列の最適アラインメントについて参照配列(付加または欠失を含まない)と比較して約20%以下の付加または欠失(すなわちギャップ)を含み得る。比較ウィンドウをアラインメントするための配列の最適アラインメントは、アルゴリズムのコンピュータによる実行(Wisconsin Genetics Software Package Release 7.0中のGAP、BESTFIT、FASTAおよびTFASTA、Genetics Computer Group、575 Science Drive Madison、WI、USA)または検査および選択された種々の方法のいずれかにより得られる最良アラインメント(すなわち比較ウィンドウにわたって最高のパーセンテージ相同性が得られる)により行うことができる。例えばAltschulら、1997、Nucl. Acids Res.25:3389頁に開示されるようなBLASTファミリーのプログラムを参照してもよい。配列解析の詳細な議論は、Ausubelら、「Current Protocols in Molecular Biology」、John Wiley & Sons Inc、1994〜1998、第15章のユニット19.3において見出すことができる。
【０２１６】
「ストリンジェンシー」は、本明細書で用いる場合、ハイブリダイゼーションおよび洗浄手順中の温度およびイオン強度条件ならびにある有機溶媒の存在または非存在のことをいう。ストリンジェンシーが高いほど、固定化された標的ヌクレオチド配列と、洗浄の後に標的とハイブリダイズしたままである標識プローブポリヌクレオチド配列との間の相補性の程度がより高い。用語「高度のストリンジェンシー」は、相補性塩基の頻度が高いヌクレオチド配列だけがハイブリダイズする温度およびイオン条件のことをいう。要求されるストリンジェンシーは、ヌクレオチド配列依存性であり、ハイブリダイゼーション中に存在する様々な成分に依存する。一般的に、ストリンジェント条件は、規定されたイオン強度およびpHでの具体的な配列についての熱融解温度(Tm)より約10〜20℃低くなるように選択される。Tmは、標的配列の50%が相補的プローブとハイブリダイズする温度(規定されたイオン強度およびpHの下で)である。
【０２１７】
用語「同義コドン」は、本明細書で用いる場合、別のコドンとは異なるヌクレオチド配列を有するが、その別のコドンと同じアミノ酸をコードするコドンのことをいう。
【０２１８】
「ベクター」により、例えばプラスミド、バクテリオファージ、酵母またはウイルスに由来し、その中にポリヌクレオチドを挿入またはクローニングできるポリヌクレオチド分子、適切にはDNA分子を意味する。ベクターは、1または複数のユニーク制限部位を含有してよく、標的細胞もしくは組織または前駆細胞もしくはその組織を含む規定された宿主細胞中で自己複製できるか、あるいはクローニングされた配列が再生されるように、規定された宿主のゲノム内に組み込み可能である。したがって、ベクターは、その複製が染色体複製から独立している自己複製ベクター、すなわち染色体外の実体として存在するベクター、例えば線状または閉鎖環状プラスミド、染色体外エレメント、ミニ染色体、または人工染色体であり得る。ベクターは、自己複製を確実にするための任意の手段を含有できる。代わりに、ベクターは、宿主細胞に導入された場合に、ゲノムに組み込まれ、それが組み込まれた染色体と一緒に複製されるものであり得る。ベクター系は、宿主細胞のゲノムに導入される全DNAを一緒に含有する単一のベクターもしくはプラスミド、2つ以上のベクターもしくはプラスミドまたはトランスポゾンを含み得る。ベクターの選択は、ベクターを導入する宿主細胞とベクターとの適合性に典型的に依存する。本発明の場合、ベクターは、好ましくは、ウイルスまたはウイルス由来ベクターであり、これは、動物、好ましくは哺乳動物細胞において作動可能に機能的である。このようなベクターは、ポックスウイルス、アデノウイルスまたは酵母から導くことができる。ベクターは、適切な形質転換体の選択のために用いることができる抗生物質耐性遺伝子のような選択マーカーも含むことができる。このような耐性遺伝子の例は、当業者に知られて臣誂胣鞊铧ꦉ돨ꮂ菣麃苣랂菣誁苣뎁㑇㠱䜨湥瑥捩湩뮙賩蚕꣦⦙ꮁ꿥馁苣邀胦銂軦醁苣溋瑰䥉臩鶼귥膀臣覂臣ꮁ諦龔觧ꪳ菣ꒂ苣궃菣ꒂ苣뎃ꮁ꿥馁苣邀胦銂軦醁苣梋桰臩鶼귥銂郥肂胣ં⼼䥄㹖㰊䥄㹖䐼噉邀볯銼볯馼胣㲑䐯噉ਾ†铧麪胣躇铧讞胣誁苣뎁胣ꪇ蓧ꮁ귥ꢜ臣讂胣꾁胣ꪇ蓧ꮁ귥ꢜ臣讂뻤ꚵ뫦讁苣颍鯩鞁臣뒠郥ꮁ胣몁볤邭臣龁臣몁볤邭铧邈觧꺁觧뒾苣覜臣讂臩鶼귥뺁臣꾁臩鶼귥龔裦ꦉ臣鎁臣銂臣蚁臣膂臣꒺迦꾏菨ꮁ铧蒁苣貂苣芀蟩龔黥몁볤邭臣龁臣몁볤邭铧邈觧⢩뻤袁臣鶃菣骃菣膃菣⦉臣膀鯩ꎛ룤ꞁ鳦节ꃩ膹臣뎦꿥閁苣膀苣ꎁ臣몁볤邭臣貀胩뢸胣뺁臣꾁胣躇铧讞胣꺁뷥讅苣뮻蓦ꮁ꣨袨臣讂苣꺁臣芁苣芀㰊䐯噉ਾ䐼噉㰾䥄㹖胣邼볯銼볯醀⼼䥄㹖㈊ꖕꫨ㲞牢ਾ†믤许臣ꖕꫨ銂胣겜蟥颡苣骀臣ꚁ铧蒁苣芀戼㹲渊㵴菣꾂菣ꪂ菣覃戼㹲渊獴貃苣것苣膃菣㲉牢ਾ慡ꊂ菣躃藩㲸牢ਾ扫궂菣馃菣릂臣龁臣궂菣ꦡ鿥뺯戼㹲權慄궂菣肃菣袃菣㲳牢ਾ㵤韦㲥牢ਾ㵨駦鎖戼㹲猊銧戼㹲眊琮㴮蟩龔黥ઋ⼼䥄㹖㰊䥄㹖䐼噉邀볯銼볯醼胣㲑䐯噉ਾ⸳铦覤菣랂菣Ꞃ菣벃苣㲼牢ਾ†鳦몙飦꾁胣ꮂ苣ꊂ苣ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂菣ꆂ菣ꪃ菣薆臣ꮃ���閃苣ꦃ菣벂苣ꮐ苣ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂臣芁苣릉껥꺁꟦ꂀ苣것菣뎃菣貁胣ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂ꧦ붃臣뾪闦ꮁ臣ꎁ臣趇ꛨꞁ臣誂胣鎁苣覂臣릉뻥꺁臣讂觧骮臣릔ꓥ貁胣ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂臣覅铦蒰臣릉뻥ꮁ꿥馁苣鞑臣蒁铦꾉苣躰臣鞾苣鎁臣銂뇦骮臣龁臣ꢁ臣ꢃ裥蒚臣몟臣辁胣릉臣膀鳦몙飦薀苣꾁胣⢁⤱㔸뷤节臣辁臣㦯趽뎛ꮁꓧ馁苣뎃苣뎃苣릂闧랏믤醁臣뺯臣ꚁ꺁膀㈨랂苣誃菣骃菣膃菣超裥꺁룤膵臣袂臣议鿥蒴㔸臣誸뗦ꮁ臣龁臣讂ꃩ龟臣ꢅ뷤节臣辁臣肸菩꺁裥궖胣⢁⤳뿤颭苣릂菣ꒂ菣⢳뻤袁臣䎰猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾⼼畳㹢胣䎁猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㘾⼼畳㹢胣䎁猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㤾⼼畳㹢臣袂臣䎳猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾ㰰猯扵⤾苣ꮐ苣醰臣辁臣节ꒁ臣㒮껦몟菣膃菣閃胣⢁⤴鶿귥랂苣蚃苣뎃设臣낁㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰵猯扵膀㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰶猯扵膀㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰹猯扵誁苣뎁㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〱⼼畳㹢銂郥肂냥ꪁ臣ꢁ苣ㆂ臣꺁议鿥ꊃ菣벃菣膀臣覂臣ꮁ뺁臣꾁㔨鶿귥랂苣蚃苣뎃设臣낁㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰵猯扵膀㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰶猯扵膀㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰹猯扵誁苣뎁㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〱⼼畳㹢銂郥肂냥ꪁ臣ꢁ苣ㆂ臣꺁议鿥ꊃ菣벃菣貁胣ꮂ苣ꊂ苣ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂苣ꮐ苣ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂臣ㆮ臣龁臣螤闦꺁藥뺔냥꺁觧뒾臣龁臣릉胦銂釨鞁臣릔觨ꞁ臣讂臣ꢁ苣讦蟥鞁臣芀臣龁臣ꎁ臣膀鳦몙飦꾁胣ꮃ菣趃苣뎃苣膀菣ꦃ菣랂菣랂苣誃菣꺁볥閁胣낂菣벃苣낂菣ꮃ臣랼臣膀苣궃菣랂苣誃菣覮껥Ꞁ臣袂臣ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂ꧦ붃臣ꦸ뫥蒯鯥꺁룤螘苣ꮐ苣覜諥ꦸ뫥蒯鯥銂郥肂菣랂菣Ꞃ菣벃苣꺁냥ꪁ臣ꢁ苣ㆂ臣꺁藥뺔냥꺁觧뒾苣릔觨馁苣릖돦銂迦鮾臣讂胣鎁苣覂臣릖돦꾁胣ꢅ裨蒚臣膀迥ꞅ菣랂菣Ꞃ菣벃苣鶃菣骃菣膃菣超裥讁苣膀戼㹲椊㠩趽뎛ꮁꓧ馁苣뎃苣뎃苣릂闧랏믤醁臣뺯臣ꚁ꺁苣龃菣뢅껦몟臣䲮臣龁臣鶁臣릔ꓥꊽ藦ꞁ臣꺽迦膀戼㹲椊⥩迥ꞅ菣랂菣Ꞃ菣벃苣鶃菣骃菣膃菣꺁胣랂苣誃菣骃菣膃菣超裥꺁룤膵臣袂臣㢳趽뎛ꮁꓧ馁苣뎃苣뎃苣릂闧랏믤醁臣뺯臣ꚁ꺁苣龃菣뢅껦몟臣誸뗦膀臩螈臣꾁껦몟듧㢄膀㌸胣㢁膀ㄸ胣㢁膀㤷胣㞁膀㜷胣㞁膀㔷胣㞁膀㌷胣㞁膀ㄷ뎛ꮁꓧ馁苣뎃苣뎃苣릂闧랏믤醁臣뺯臣ꚁ꺁룤膵臣뺁臣貁苣ꊂ菣躃藩超裥꺁藥鎽臣龁臣肸菩꺁곦놤胣㲁牢ਾ楩⥩볥墏ꞁꇨ閁苣讂苣龃菣뢅菩蚈藩鞈㰺牢ਾ䍂꧎⁄†⠠䥘㰩���ਾ込룤㪭戼㹲䈊臣膀ꇥ몟胦ꊂ菣躃藩议鿥⢺뻤袁臣劰苣鞁臣꾁뺁臣꾁臣꺁铦覤뷥讅讁苣뢁諦閁苣膀戼㹲䌊臣膀뿤颭苣릂菣ꒂ菣뺁臣꾁臣꺁铦覤뷥讅臣芁苣⢊뿤颭苣릂菣ꒂ菣꾁胣蒁臣ꒁ臣꺁껥붖뷥讅臣꾁胣䎁猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾⼼畳㹢胣䎁猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㘾⼼畳㹢臣袂臣䎳猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㤾⼼畳㹢臣覂臩麊臣貂苣⦋胣㲁牢ਾ꧎臣膀냥蚈귥ꊂ菣躃藩议鿥⢺뻤袁臣䆰胣厁苣鞁臣꾁뺁臣꾁臣꺁铦覤뷥讅뺁臣꾁藩Ꞁ苣龃菣뢅껦몟设臣낁节臣辁臣鶁臣릔ꓥꊽ藦⦋臣覂臩麊臣貂胣㲁牢ਾ꾁胣ꊂ苣醃菣꺂菣뢅臣龁臣鶁臣릔ꓥꊽ藦ꞁ臣讂㰩牢ਾ苣龔裦馁苣龁苣꺁胣芏藧ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂菣ꪃ菣鞃菣覃臣醰臣辁臣节ꒁ臣鶿귥랂苣蚃苣뎃臣ꎚ軦馁苣ㆋ臣龁臣螤闦꺁苣龃菣뢅껦몟臣꺽迦⢛뻤袁臣膀㐱趽胣ㆁ㔴뷤膀㐱趽胣ㆁ㌹뷤膀㤱趽胣ㆁ㘹뷤膀ㄲ趽胣㊁㈱뷤誁苣뎁ㄲ趽臣ꊂ菣躃藩议鿥讁苣뢁諦閁苣讂臣骁苣讁膀膀膀膀膀膀膀뺁臣꾁ꊂ菣躃藩议鿥⦺戼㹲椊⥶藩鞈剘䅃⡓볥궸胣墁臣膀臩螈臣꾁뺁臣꾁ꖻꓥꞁ臣誂胣ꦁ裥ꮁ臣劯苣鞁臣꾁뺁臣꾁臣꺁铦覤뷥讅胣袂苣ꦁ裥ꮁ臣䢯臣龁臣鶁臣릔ꓥꊽ藦膀臣覂臣袂苣ꦁ裥ꮁ臣咯胣䆁胣厁苣鞁臣꾁뺁臣꾁臣꺁铦覤뷥讅胣붥臣鞁臣꾁뺁臣꾁臣꺁铦覤뷥讅胣袂苣붥臣鞁臣꾁뺁臣꾁臣꺁铦覤뷥讅胣閁苣ꮁ苣誂ꗥ뺁臣辁臣䖯臣龁臣鶁臣릔ꓥꊽ藦讁苣뢁諦閁苣讂ꞁꇨ閁苣讂苣龃菣뢅菩蚈藩鞈苣龔裦馁苣龁苣꺁胣芏藧ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂菣ꪃ菣鞃菣覃臣鶿귥랂苣蚃苣뎃㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〱⼼畳㹢臣ꎚ軦馁苣ㆋ臣龁臣螤闦꺁苣龃菣뢅껦몟臣꺽迦膀戼㹲瘊芏藧ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂菣ꪃ菣鞃菣覃臣䎮猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾⼼畳㹢胣䎁猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㘾⼼畳㹢胣䎁猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㤾⼼畳㹢臣袂臣䎳猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾ㰰猯扵讁苣뢁諦閁苣讂냥ꪁ臣ꢁ苣ㆂ臣꺁뿤颭苣릂菣ꒂ菣ꮁ髩ꖎ臣讂뺁臣꾁ꓨ낕臣ꊂ菣躃藩议鿥꺁뷧鮏臣芁臣ꚁ胣讀裥꺁뿤颭苣릂菣ꒂ菣ꞁ臣꺽迦貁胣込塘臣ꢡ臣貂苣ꊂ菣躃藩超裥㪗戼㹲䈊⁃†⠠塘㰩牢ਾ込룤㪭戼㹲䈊臣膀ꇥ몟胦ꊂ菣躃藩议鿥⢺뻤袁臣劰苣鞁臣꾁뺁臣꾁臣꺁铦覤뷥讅讁苣뢁諦閁苣膀戼㹲䌊臣膀㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰵猯扵膀㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰶猯扵膀㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰹猯扵誁苣뎁㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〱⼼畳㹢臣覂臩麊臣貂苣讁胣뺁臣꾁藥鎽髧ꪁ껥붖뷥讅臣꾁胣䎁猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㘾⼼畳㹢臣袂臣䎳猼扵砠汭獮樺���栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㤾⼼畳㹢臣覂臩麊臣貂苣鶿귥랂苣蚃苣뎃苣鞁臣꾁臣꺁铦覤뷥讅臣芁苣⦋戼㹲銂铧邈臣膀戼㹲鎁臣ꞁ胣讀裥꺁뿤颭苣릂菣ꒂ菣ꞁ臣꺽迦꾁胣랅뷤蒚臣龮雦ꊽ藦ꞁ臣膀볥墏䥘臣ꢡ臣貂苣ꊂ菣躃藩超裥㪗戼㹲䈊칃₩†⠠塘⥉戼㹲⠊볥궸㰺牢ਾ꾁胣ꦡ鿥Ꞁ苣龃菣뢅껦몟设臣낁节臣辁臣䮯臣龁臣鶁臣릔ꓥꊽ藦⦋臣覂臩麊臣貂胣㲁牢ਾ꾁胣䎁猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㔾⼼畳㹢胣䎁猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㘾⼼畳㹢胣䎁猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㤾⼼畳㹢臣袂臣䎳猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾ㰰猯扵讁苣뢁諦閁苣讂뿤颭苣릂菣ꒂ菣节臣辁臣鶁臣릔ꓥꊽ藦ꞁ臣誂胣㲁牢ਾ꧎臣膀냥蚈귥ꊂ菣躃藩议鿥⢺뻤袁臣䆰胣厁苣鞁臣꾁뺁臣꾁臣꺁铦覤뷥讅뺁臣꾁藩Ꞁ苣龃菣뢅껦몟设臣낁뺁臣꾁臣꺁铦覤뷥讅讁苣뢁諦閁苣讂㰩牢ਾ苣龔裦鞁胣㲁牢ਾ臣鎁臣膀볥墏䥘臣ꢡ臣貂苣ꊂ菣躃藩超裥꾁胣ꦁ裥ꮁ臣䊯䅃臣龁臣䊯䕃臣覂臩麊臣貂胣㲁牢ਾ臣鎁臣膀胥ꖈ臣鶿귥랂苣蚃苣뎃臣꺁뷧鮏臣膀藥鎽髧ꪁ껥붖뷥讅臣꾁胣込ꞁꇨ閁苣讂苣龃菣뢅藩鞈㰺牢ਾ䍂꧎꧎††††嘨㰩牢ਾ込룤㪭戼㹲䈊臣膀ꇥ몟胦ꊂ菣躃藩议鿥⢺뻤袁臣劰苣鞁臣꾁뺁臣꾁臣꺁铦覤뷥讅讁苣뢁諦閁苣膀戼㹲䌊臣膀㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰵猯扵膀㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰶猯扵膀㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰹猯扵誁苣뎁㱃畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢〱⼼畳㹢臣覂臩麊臣貂苣鶿귥랂苣蚃苣뎃苣鞁臣꾁臣꺁铦覤뷥讅臣芁苣膀戼㹲츊꾁胣辰裥邭苣龃菣뢅껦몟设臣낁膀节臣辁臣咯臣龁臣鶁臣릔ꓥꊽ藦⦋臣龁臣뢅胦ꊂ菣躃藩议鿥⢺뻤袁臣䖰臣龁臣鶁臣릔ꓥꊽ藦⦋臣覂臩麊臣貂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杴慧杲湣慡杹湣瑴慹牡捧杮湧杴慹湣杭杮湧杴祹湴瑡瑨祧瑹睮湳慡慲桴慡瑲祧捡杮湣慡慲杴慡杲湴慴慹桴捣杮湧杭瑮祧慣杹祡慴杹湧杧杮祡慡慲牡捡杮湧慣杲湣杧慮桴瑧杮湧捧慮桴瑧杮祡瑡捨湣慧慲桴獷杮湧瑴慹牡慧慲杴捧据湣瑡杧牡慣瑲祴瑡杨湣慣杲湴慧浹湧杴杹湣獷瑮祧捡慮湣杧瑮祧瑹慮牡杧祮湴捧慮祡瑧慮牡杴睹湳慧祲湴瑹慮牡慡瑲杧瑹据湣慧浹湧杴杹湣獷瑮祴捧杮祡慡慲桴慣慲牡慧杲湴慣慹祡瑡慨牡杧慮杴捧杮湧慧浹湧超裥ꪕ迥㚷崷䴨㘲꺽迦銂鳦馁苣ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂升菣랂菣Ꞃ菣벃苣銂苣벃菣馁苣貃苣것苣膃菣超裥⦗㰻牢ਾ†慧慲湣慧杹湣慡浹湧杧慮牡瑹据湣杧慮牡慡祲湴捣祮湴捧杮湴瑡慨杴慧慲杴慧杲湣慡杹湣瑴慹牡捧杮湧杴慹湣杭杮湧杴祹湴瑡瑨祧瑹睮湳慡慲桴慡瑲祧捡杮湣慡慲杴慡杲湴慴慹桴捣杮湧杭瑮祧慣杹祡慴杹湧杧杮祡慡慲牡捡杮湧慣杲湣杧慮桴瑧杮湧捧慮桴瑧杮祡瑡捨湣慧慲桴獷杮湧瑴慹牡慧慲杴捧据湣瑡杧牡慣瑲祴瑡杨湣慣杲湴慧浹湧杴杹湣獷瑮祧捡慮湣杧瑮祧瑹慮牡杧祮湴捧慮祡瑧慮牡杴睹湳慧祲湴瑹慮牡慡瑲杧瑹据湣慧浹湧杴杹湣獷瑮祴捧杮祡慡慲桴慣慲牡慧杲湴慣慹祡瑡慨牡杧慮杴捧杮湧慧浹湧超裥ꪕ迥㚷崹ꢅ闩ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂㘱䴴꺁闧랏믤醁臣ꊖ臣ꚁ㑍䰳뷧鮏苣覜臣讂듧麃蛥ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂㘱䴴誁苣뎁ㅶ菣랂菣Ꞃ菣벃苣銂苣벃菣馁苣貃苣것苣膃菣超裥⦗㰻牢ਾ†慧慲湣慧杹湣慡浹湧杧慮牡瑹据湣杧慮牡慡祲湴捣祮湴捧杮湴瑡慨杴慧慲杴慧杲湣慡杹湣瑴慹牡捧杮湧杴慹湣杭杮湧杴祹湴瑡瑨祧瑹睮湳慡慲桴慡瑲祧捡杮湣慡慲杴慡杲湴慴慹桴捣杮湧杭瑮祧慣杹祡慴杹湧杧杮祡慡慲牡捡杮湧慣杲湣杧慮桴瑧杮湧捧慮桴瑧杮祡瑡捨湣慧慲桴獷杮湧瑴慹牡慧慲杴捧据湣瑡杧牡慣瑲祴瑡杨湣慣杲湴慧浲湧杴杹湣獷瑮祧捡慮湣杧瑮祧瑹慮牡杧祮湴捧慮祡瑧慮牡杴睹湳慧祲湴瑹慮牡慡瑲杧瑹据湣慧浹湧杴杹湣獷瑮祴捧杮祡慡慲桴慣慲牡慧杲湴慣慹祡瑡慨牡杧慮杴捧杮湧慧浹湧超裥ꪕ迥㞷崱䴨〸꺽迦銂鳦馁苣내菨薆菣袃菣뢂苣뮃菣뎃苣ㆬ㐶㉶菣랂菣Ꞃ菣벃苣銂苣벃菣馁苣貃苣것苣膃菣超裥⦗㰻牢ਾ†慧慲湣慧杹湣慡浹湧杧慮牡瑹据湣杧慮牡慡祲湴捣祮湴捧杮湴瑡慨杴慧慲杴慧杲湣慡杹湣瑴慹牡捧杮湧杴慹湣杭杮湧杴祹湴瑡瑨祧瑹睮湳慡慲桴慡瑲祧捡杮湣慡慲杴慡杲湴慴慹桴捣杮湧杭瑮祧慣杹祡慴杹湧杧杮祡慡慲牡捡杮湧慣杲湣杧慮桴瑧杮湧捧慮桴瑧杮祡瑡捨湣慧慲桴獷杮湧瑴慹牡慧慲杴捧据湣瑡杧牡慣瑲祴瑡杨湣慣杲湴慧浲湧杴杹湣獷瑮祧捡慮湣杧瑮祧瑹慮牡杧祮湴捧慮祡瑧慮牡杴睹湳慧祲湴瑹慮牡慡瑲杧瑹据湣慧浹湧杴杹湣獷瑮祴捧杮祡慡慲桴慣慲牡慧杲湴慣慹祡瑡慨牡杧慮杴捧杮湧慧浹湧超裥ꪕ迥㞷崳䴨㤷꺽迦銂鳦馁苣내菨薆菣袃菣뢂苣뮃菣뎃苣ㆬꮃ苣閃苣ꦃ菣벂苣뎂菣覃臣讂菣꾂菣ꪂ菣覃藩鞈㬩戼㹲 朠牡捡杮祡捧慮祡���杮湧慡祲湴捣杮湧慡慲牡瑹据湣瑹杮湣瑧慮桴瑡杧牡瑡杧牡捧慮祡捧瑮祴慡杲湣杧瑮祧捡浮湧杧瑮祧瑹慮桴杴祹湴獷慮牡瑡慨牡杴慹湣捧慮牡瑡慧牡瑧瑮祡瑡捨湣杧浮湧杴捹祡慧瑹祡杧杮湧慧慹牡慡慲湣杧据牡捧杮湧瑡杨湴杧杮湣瑡杨湴慧慹桴捣杮牡瑡睨湳杧瑮祴慡杲牡瑡杧牡捣慮杴慧捲牡瑴慹桴捧据牡瑧杮祡杭瑮祧捧睮湳杴慹湣捡杮湧杴祹湴慡杲湧瑹杮湣慡杹湴慡瑲祧獷杮牡瑹祮湴慡慲牡杴祧湴捣杮祡杭瑮祧捧睮湳瑴杹湣慧慹牡瑡捨牡慡杲牡瑧据祡慡慹桴慡杲湧瑡杧湣杧杮祡杭孮藩鞈闧랏㔷⡝㝍䰹뷧鮏苣覜臣讂듧麃蛥ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂㔴菣랂菣Ꞃ菣벃苣銂苣벃菣馁苣貃苣것苣膃菣超裥⦗㰻牢ਾ†慧慲湣慧杹湣慡浹湧杧慮牡瑹据湣杧慮牡慡祲湴捣祮湴捧杮湴瑡慨杴慧慲杴慧杲湣慡杹湣瑴慹牡捧杮湧杴慹湣杭杮湧杴祹湴瑡瑨祧瑹睮湳慡慲桴慡瑲祧捡杮湣慡慲杴慡杲湴慴慹桴捣杮湧杭瑮祧慣杹祡慴杹湧杧杮祡慡慲牡捡杮湧慣杲湣杧慮桴瑧杮湧捧慮桴瑧杮祡瑡捨湣慧慲桴獷杮湧瑴慹牡慧慲杴慧捲湣瑡杧牡慣瑲祴瑡杨湣慣杲湴慧浹湧杴杹湣獷瑮祧慡慹湣杧瑮祧瑹慮牡杧祮湴捧慮祡瑧慮牡杴睹湳慧祲湴瑹慮牡慡瑲杧瑹据湣慧浹湧杴杹湣獷瑮祴捧杮祡慡慲桴慣慲牡慧杲湴慣慹祡瑡慨牡杧慮杴捧杮湧慧浹湧超裥ꪕ迥㞷崷䴨㤷꺽迦銂鳦馁苣내菨薆菣袃菣뢂苣뮃菣뎃苣㖬ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂苣뎂菣覃臣讂菣꾂菣ꪂ菣覃藩鞈㬩戼㹲 朠牡捡杮祡捧慮祡杭杮湧慡祲湴捣杮湧慡慲牡瑹据湣瑹杮湣瑧慮桴瑡杧牡瑡杧牡捧慮祡捧瑮祴慡杲湣杧瑮祧捡浮湧杧瑮祧瑹慮桴杴祹湴獷慮牡瑡慨牡杴慹湣捧慮牡瑡慧牡瑧瑮祡瑡捨湣杧浮湧杴捹祡慧瑹祡杧杮湧慧慹牡慡慲湣杧据牡捧杮湧瑡杨湴杧杮湣瑡杨湴慧慹桴捣杮牡瑡睨湳杧瑮祴慡杲牡瑡杧湣捣慮杴慧捲牡瑴慹桴捧据牡瑧杮祡瑹瑮祧捧慮湣杴慹湣捡杮湧杴祹湴慡杲湧瑹杮湣慡杹湴慡瑲祧獷杮牡瑹祮湴慡慲牡杴祧湴捣杮湧杭瑮祧捧睮湳瑴杹湣慧慹牡瑡捨牡慡杲牡瑧据祡慡慹桴慡杲湧瑡杧湣杧杮祡杭孮藩鞈闧랏㤷⡝㝍䰹뷧鮏苣覜臣讂듧麃蛥ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂䱁菣랂菣Ꞃ菣벃苣銂苣벃菣馁苣貃苣것苣膃菣超裥⦗节臣辁臣㲯牢ਾ†慧杲湣慧杲湣慧浲湧杧慮牡瑹据湣杧慮牡慡祲湴捣祮湴慧杲湴瑹慮桴慧慲杴慧杲湣慡杹湣杭慮牡捧杮湧杴慹湣杭杮湧杴祹湴瑡瑨祧瑹睮湳慡慲桴慡瑲祧捡杮湣慡慲杴慡慲牡慴慹桴捣杮湧杭瑮祧捧杮祡慴杹湧杧杮祡慡慲牡捡杮湧慣杲湣杧慮桴瑧杮湧捧慮桴瑧杮祡瑡捨湣慧慲桴獷杮湧瑴慹牡慧慲杴慧捲湣瑡杧牡慣瑲祴瑡杨湣慣杲湴慧浹湧杴杹湣慧瑹祧捡慮湣杧瑮祧瑹慮牡杧祮湴捧慮祡瑧慮牡杴睹湳慧祹湴瑹慮牡慡瑲杧瑹据湣慡浹湧杴杹湣獷瑮祴捧杮祡慡慲桴慣睲湳慧杲湴慧慹祡瑡慨牡杧祮湴捧杮湧慧浹湧超裥ꪕ迥㢷崱내菨薆菣袃菣뢂苣뮃菣뎃苣䞬㱓⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰲甯ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂苣뎂菣覃臣讂菣꾂菣ꪂ菣覃藩鞈㬩戼㹲뺁臣꾁㔴胣㒁膀㤴胣㖁膀㌵胣㖁膀㜵胣㖁膀ㄶ胣㚁膀㔶胣㚁膀㤶胣㞁膀㌷胣㞁膀㜷胣㞁节臣辁臣㢯꺁臣骁苣讁ꒁ臣뢛ꏨ階戼㹲꺁臣骁苣讁ꒁ臣몤臣貃苣것苣膃菣超裥ꮁ苣誂苣벃菣閁苣膀볥䦏臣ㆮ뷤ꮁ鯧鎽臣讂뷤꺽臣䲫臣龁臣鶁臣릔ꓥꊽ藦銂郥肂苣龃菣뢅藩鞈胣㲁牢ਾ搨 藩鞈闧랏㔴胣㒁���膀㤴胣㖁膀㌵胣㖁膀㜵胣㖁膀ㄶ胣㚁膀㔶胣㚁膀㤶胣㞁膀㌷胣㞁膀㜷胣㞁节臣辁臣㢯뺁臣꾁臣꺁鯧鲣軩꺁臣骁苣讁ꒁ臣몤臣超裥ꢁ냥ꪁ臣ꢁ苣㞂┰⠠臣覂臣ꮁ냥ꪁ臣ꢁ苣㞂┱臣覂냥ꪁ臣ꢁ苣㦂┹臣袂臣鶁臣鎖臣ꢅ臣꺁闦낕臣醃菣뮂菣蚃菣뢂꺁藩鞈郥肸胦銂藥覜臣讂菣꾂菣ꪂ菣覃藩鞈臣袂苣뎂菣覃臣貂胣込꺁趽臣뢛뷥馁苣趽뷧ꮁ뺁臣꾁臣꺁铦覤뷥讅苣ꮐ苣ꊂ菣躃藩超裥膀臣讂臣꾁戼㹲⠊⥥藩鞈闧랏㔴胣㒁膀㤴胣㖁膀㌵胣㖁膀㜵胣㖁膀ㄶ胣㚁膀㔶胣㚁膀㤶胣㞁膀㌷胣㞁膀㜷胣㞁节臣辁臣㢯뺁臣꾁臣꺁鯧鲣軩꺁臣骁苣讁ꒁ臣몤臣超裥ꢁ냥ꪁ臣ꢁ苣궸뫥뺁臣꾁ꯩꚺ苣袃菣뎃苣Ꞃ菣랂菣ꆝ믤许臣较苣隃菣肃苣몂臣讂菣꾂菣ꪂ菣覃藩鞈臣袂苣뎂菣覃臣貂胣込꺁趽臣뢛뷥馁苣趽뷧ꮁ뺁臣꾁臣꺁铦覤뷥讅苣ꮐ苣ꊂ菣躃藩超裥㲗牢ਾ臣覂臩麊臣貂苣ꊂ菣躃藩超裥銂郥肂臣膀臣貂臣覂臣讂臣뺁臣꾁臣貂臣覂鳦ꪳ髧ꮁ臣讂胣ં㰊䥄㹖胣讉뛧鲣귦鎼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉邀ꏨꎭ꿥ꆱ鯦麡郥醀飦내鯦㲸䐯噉ਾ䐼噉邀ꏨꎭ꿥ꆱꃩ꺛郥醀볯邼볯颼⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣鲣귦릖돦醀ꓥ뒛⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣鲣귦꺁蛥릮胣㲑䐯噉ਾ䐼噉邀볯邼볯颼胣㲑䐯噉ਾ†臣辁臣讁臣龮雦ꊽ藦ꞁ臣膀风臣膀戼㹲⠊⥡䐠䑌䑁䝒䱋䝐䭋偌䕌䱖䕋䕍乁剁䅋䍇剔䍇䥌䱃䡓䭉呃䭐䭍䙋偉則䡃奔䝅䭄卅允䝇䝉䅅噉䥄䕐偉䙇䑋䕌䵐充䥆允䑖䍌䑖呃䝔䱃䝋䅌噎䍑䑓䱌䭋䱗児䍒呁䅆䭓光兇䑖䥋䝋䝁䑇超裥ꪕ迥㒷膀듧麃蛥겂苣랂苣뮃菣ꪃ菣뮂菣릂牐汯浵ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂㭝戼㹲 䐠䑌䑁䝒䱋䝐䭋偌䕌䱖䕋䕍乁剁䅋䍇剔䍇䥌䱃䡓䭉呃䭐䭍䙋偉則䡃奔䝅䭄卅允䝇䝉䅅噉䥄䕐偉䙇䑋䕌䵐充䥆允䑖䍌䑖呃䝔䱃䝋䅌噎䍑䑓䱌䭋䱗児䍒呁䅆䭓光兇䑖䥋䝋䝁䑇䑋䱅超裥ꪕ迥㒷膀듧麃蛥겂苣랂苣뮃菣ꪃ菣뮂菣릂䑋䱅菣랂菣Ꞃ菣벃苣嶼㰻牢ਾ†䱄䅄剄䭇偌䭇䱋䱐噅䭌䥅䅅䅎䭒䝁呃䝒䱃䍉卌䥈䍋偔䵋䭋䥆䝐䍒呈䕙䑇䕋䅓䝑䥇䕇䥁䑖偉䥅䝐䭆䱄偅䕍䙑䅉噑䱄噃䍄呔䍇䭌䱇乁兖千䱄䭌坋偌剑䅃䙔十䥋䝑噑䭄䭉䅇䝇孄藩鞈闧랏〵胣내菨薆苣Ꚃ苣ꊂ菣鞃菣뎃苣鞃苣覤闧鎽ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂㭝戼㹲 䐠䑌䑁䝒䱋䝐䭋偌䕌䱖䕋䕌乁剁䅋䍇剔䍇䥌䱃䡓䭉呃䭐䭍䙋偉則䡃奔䝅䭄卅允䝇䝉䅅噉䥄䕐偉䙇䑋䕌䱐充䥆允䑖䍌䑖呃䝔䱃䝋䅌噎䍑䑓䱌䭋䱗児䍒呁䅆䭓光兇䑖䥋䝋䝁䑇超裥ꪕ迥㖷膀듧麃蛥겂苣랂苣뮃菣ꪃ菣뮂菣릂ꓥ낕뷤㊓菣랂菣Ꞃ菣벃苣嶼㰻牢ਾ†噄䅄剎䝇䝈䡇䝐䭋偍䕋䱖䕖䕍乁䭁䅒䍇剈䍇䥌䱃䡓䭉呃䭋䭍䙋偉則䡃奓䝅䭄卄允䝇䝉䕅噉䵄䕐偉䙇䑋䕋䵐兄䥆允䑖䍌䑖呃䝔䱃䝋䅌噎䍈䅓䱌䭋䱗卐䍒呋䅆䭓光兓䑖䥔䝋䅌䑇孒藩鞈闧랏㌱膀듧麃蛥ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣醃苣閃苣ꮂ愲菣랂菣Ꞃ菣벃苣嶼㰻牢ਾ†噄䅄剎䝇䝈䡇䝐䭋偍䕋䱖䕖䕍乁䭁䅒䍇剈䍇䥌䱃䡓䭉呃䭋䭍䙋偉則䡃奓䝅䭄卄允䝇䝉䕅噉䵄䕐偉䙇䑋䕋䵐兄䥆允䑖䍌䑖呃䝔䱃䝋䅌噎䍈䑓䱌䭋䱗卐䍒呋䅆䭓光兓䑖䥔䝋䅌䑇孒藩鞈闧랏㌱膀듧麃蛥ꆃ菣ꪃ���ꊂ菣醃苣閃苣ꮂ戲ㅶ菣랂菣Ꞃ菣벃苣嶼㰻牢ਾ†噄䅄剎䝇䝈䡇䝐䭋偍䕋偖䕖䕍乁䭁䅒䍇剈䍇䥌䱃䡓䭉呃䭋䭍䙋偉則䡃奓䝅䭄卄允䝇䝉䕅噉䵄䕐偉䙇䑋䕋䵐兄䥆允䑖䍌䑖呃䝔䱃䝋䅌噎䍈䑓䱌䭋䱗卐䍒呋䅆䭓光兓䑖䥔䝋䅌䑇孒藩鞈闧랏㐱膀듧麃蛥ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣醃苣閃苣ꮂ戲㉶菣랂菣Ꞃ菣벃苣嶼㰻牢ਾ†噄䅄剎䝇䝈䡇䝐䭋偍䕋䱖䕍䕍乁䭁䅒䍇剈䍇噌䱃䡓䭉呃允免䙋偉則䡃奓䝁䭄卄允䝇䅉䝇䥁䑖偉䥅䝁䭆䵅偋䕍䙑䅉噑䱄䕃䍄呔䍇䭌䱇乁䡖千䱄䭌坋偌剓䭃䙔十䥋卑噑呄䭉䱇䝁剄超裥ꪕ迥ㆷ㈴胣내菨薆菣袃菣뢂苣뮃菣뎃苣㊬ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂㭝臣袂臣㲳牢ਾ†华䅄剄䭇偍䭇䱋䱐噅䥌䵅䅅䅎䭒䝁呃䝒䱃䍉卌䥋䍋䅔䵋噋䥙䝐䍒䑈䝙䑇䭋䝔䅑䥇䝖䥁䑖偉䥅䝓䭆䱅假䕍䙑䅉噑䱄䅃䍄呔䍇䭌䱇乁䭖千䱁䭌坋偌剄䅃䙓䑁䥋卑噅乄䭉䱇䝁剄超裥ꪕ迥ㆷ㐴胣내菨薆菣袃菣뢂苣뮃菣랂菣ꎂ苣皫膀誁苣뎁ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂㭝戼㹲 丠䑔乓䝒䵋䝐䭋偌䅌䱖䕉䕍乁䙁䅋䍇剔䍇䥌䱃䭓䭉呃䭁䭍奋偉則䡃奄䝇䭄呋兇䝁噉䅇噉䥄䑐卉䙇䕋䝍䵐充䥆允䑖䍒䑔呃䝔䱃䝋䅌噎䍋䕓䱌䭋䱗䑐䍒十䅆䭄光䕓䡖䥎䝋䅌䑇孒藩鞈闧랏㐱膀듧麃蛥ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂㤳菣랂菣Ꞃ菣벃苣嶼㰻牢ਾ†乎噄剎䭇偍䭇䱋䱐噅䥌䵅䅅䅎䭆䝁呃䝒䱃䍉卌䥋䍋䅔䵋克䥙䝐䍒䑈䝙䑇䭋䝔䅑䥇䝖䥁䑖偉䥅䝓䭆䵅偅䕍䙑䅉噑䱄䅃䍄呔䍇䭌䱇乁䭖千䱅䭌坋偌剄䅃䙓䑁䥋䭑䅅么䭉䱇䝁剄超裥ꪕ迥ㆷ㠴胣내菨薆菣袃菣뢂苣뮃菣뎃苣㞬菣랂菣Ꞃ菣벃苣嶼㰻牢ਾ†呅䅄剎䭇偍䭇䱋䱐噁䵉䵅䅅䅎䭆䝁呃䝒䱃䍉卌䥋䍋䅔䵋噋䥙䝐䍒䑈䝙䑇䭋䝔䅑䥇䝖䥁䑖偉䥅䝓䭆䵅偁䕍䙑䅉噑剄䅃䍓呔䍇䭌䱇乁䭖千䱅䭌坋偌剄䅃䙓䑁䥋䭑噅么䭉䵇䝁剄超裥ꪕ迥ㆷ〵⡝듧麃蛥ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂升菣랂菣Ꞃ菣벃苣⦼㰻牢ਾ†呅䅄剎䭇偍䭇䱋䱐噁䵉䵅䅅䅎䭆䝁呃䝒䱃䍉卌䥋䍋䅔䵋噋䥙䝐䍒䑈䝙䑇䭋䝔䅑䥇䝖䥁䑖偉䥅䝓䭆䵅偁䕍䙑䅉噑剄䅃䍓呔䍇䭌䱇乁䭖千䱅䭌坋偌剄䅃䙓䑁䥋䭑噅么䭉䵇䝁剄超裥ꪕ迥ㆷ㈵胣내菨薆菣袃菣뢂苣뮃菣뎃苣ㆬ㐶㍍臣袂臣皳ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂㭝戼㹲 䔠䑔乁䝒䵋䝐䭋偌䅌䥖䕍䕍乁䙁䅋䍇剔䍇䥌䱃䭓䭉呃䭁䭍奖偉則䡃奄䝇䭄呋兇䝁噉䅇噉䥄䕐卉䙇䕋䅍䵐充䥆允䕖䍒十呃䝔䱃䝋䅌噎䍋䕓䱌䭋䱗䑐䍒十䅆䭄光䕋䡖䥎䝋䅍䑇孒藩鞈闧랏㔱膀듧麃蛥ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂㘱瘴ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂㭝戼㹲 䔠䑔乁䝒䵋䝐䭋偌䅌䥖䕍䕍乁䙁䅋䍇剔䍇䥌䱃䭓䭉呃䭁䭍奖偉則䡃奄䝇䭄呋兇䝁噉䅇噉䥄䕐卉䙇䕋䅍䵐充䥆允䑖䍒協呃䝔䱃䝋䅌噎䍋䕓䱌䭋䱗䑐䍒十䅆䭄光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祧捡慮湣杧瑮祧瑹慮牡杧祮湴捧慮祡瑧慮牡杴睹湳慧祲湴瑹慮牡慡瑲杧瑹据湣慧浹湧杴杹湣獷瑮祴捧杮祡慡慲桴慣慲牡慧杲湴慣慹祡瑡慨牡杧慮杴捧杮湧慧浹湧超裥ꪕ迥ㆷ㔵⡝듧麃蛥ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂㘱菣랂菣Ꞃ菣벃苣銂苣벃菣馁苣貃苣것苣膃菣超裥⦗㰻牢ਾ†慧慲湣慧杹湣慡浹湧杧慮牡瑡捧湣杧慮牡慡祲湴捣祮湴捧杮湴瑡慨杴慧慲杴慧杲湣慡杹湣瑴慹牡捧杮湧杴慹湣杭杮湧杴祹湴瑡瑨祧瑹睮湳慡慲桴慡瑲祧捡杮湣慡慲杴慡杲湴慴慹桴捣杮湧杭瑮祧慣杹祡慴杹湧杧杮祡慡慲牡捡杮湧慣杲湣杧慮桴瑧杮湧捧慮桴瑧杮祡瑡捨湣慧慲桴獷杮湧瑴慹牡慧慲杴慧捲湣瑡杧牡慣瑲祴瑡杨湣慣杲湴慧浹湧杴杹湣獷瑮祧捡慮湣杧瑮祧瑹慮牡杧祮湴捧慮祡瑧慮牡杴睹湳慧祲湴瑹慮牡慡瑲杧瑹据湣慧浹湧杴杹湣獷瑮祴捧杮祡慡慲桴慣慲牡慧杲湴慣慹祡瑡慨牡杧慮杴捧杮湧慧浹湧超裥ꪕ迥ㆷ㜵⡝듧麃蛥ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂㔴菣랂菣Ꞃ菣벃苣銂苣벃菣馁苣貃苣것苣膃菣超裥⦗㰻牢ਾ†慧慲湣慧杹湣慡浹湧杧慮牡瑡捧湣杧慮牡慡祲湴捣祮湴捧杮湴瑡慨杴慧慲杴慧杲湣慡杹湣瑴慹牡捧杮湧杴慹湣杭杮湧杴祹湴瑡瑨祧瑹睮湳慡慲桴慡瑲祧捡杮湣慡慲杴慡杲湴慴慹桴捣杮湧杭瑮祧慣杹祡慴杹湧杧杮祡慡慲牡捡杮湧慣杲湣杧慮桴瑧杮湧捧慮桴瑧杮祡瑡捨湣慧慲桴獷杮湧瑴慹牡慧慲杴慧捲湣瑡杧牡慣瑲祴瑡杨湣慣杲湴慧浹湧杴杹湣獷瑮祧慡慹湣杧瑮祧瑹慮牡杧祮湴捧慮祡瑧慮牡杴睹湳慧祲湴瑹慮牡慡瑲杧瑹据湣慧浹湧杴杹湣獷瑮祴捧杮祡慡慲桴慣慲牡慧杲湴慣慹祡瑡慨牡杧慮杴捧杮湧慧浹湧超裥ꪕ迥ㆷ㤵⡝듧麃蛥ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂㈵菣랂菣Ꞃ菣벃苣銂苣벃菣馁苣貃苣것苣膃菣超裥⦗㰻牢ਾ†慧慲湣慧杹湣慡浹湧杧慮牡瑡捧湣杧慮牡慡祲湴捣祮湴捧杮湴瑡慨杴慧慲杴慧杲湣慡杹湣瑴慹牡捧杮湧杴慹湣杭杮湧杴祹湴瑡瑨祧瑹睮湳慡���桴慡瑲祧捡杮湣慡慲杴慡杲湴慴慹桴捣杮湧杭瑮祧慣杹祡慴杹湧杧杮祡慡慲牡捡杮湧慣杲湣杧慮桴瑧杮湧捧慮桴瑧杮祡瑡捨湣慧慲桴獷杮湧瑴慹牡慧慲杴捧据湣瑡杧牡慣瑲祴瑡杨湣慣杲湴慧祹湴杴杹湣捡瑮祧捡慮湣杧瑮祧瑹慮牡杧祮湴捧慮祡瑧慮牡杴睹湳慧祲湴瑹慮牡慡瑲杧瑹据湣杧浮湧杴杹湣獷瑮祴捧杮祡慡慲桴慣慲牡慧杲湴慣慹祡瑡慨牡杧慮杴捧杮湧慧浹湧超裥ꪕ迥ㆷㄶ⡝듧麃蛥ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂䱁菣랂菣Ꞃ菣벃苣銂苣벃菣馁苣貃苣것苣膃菣超裥⦗胣节臣辁臣㲯牢ਾ†慧杲湣慧杲湣慧浲湧杧慮牡瑹据湣杧慮牡慡祲湴捣祮湴慧杲湴瑹慮桴慧慲杴慧杲湣慡杹湣杭慮牡捧杮湧杴慹湣杭杮湧杴祹湴瑡瑨祧瑹睮湳慡慲桴慡瑲祧捡杮湣慡慲杴慡慲牡慴慹桴捣杮湧杭瑮祧捧杮祡慴杹湧杧杮祡慡慲牡捡杮湧慣杲湣杧慮桴瑧杮湧捧慮桴瑧杮祡瑡捨湣慧慲桴獷杮湧瑴慹牡慧慲杴慧捲湣瑡杧牡慣瑲祴瑡杨湣慣杲湴慧浹湧杴杹湣慧瑹祧捡慮湣杧瑮祧瑹慮牡杧祮湴捧慮祡瑧慮牡杴睹湳慧祹湴瑹慮牡慡瑲杧瑹据湣慡浹湧杴杹湣獷瑮祴捧杮祡慡慲桴慣睲湳慧杲湴慧慹祡瑡慨牡杧祮湴捧杮湧慧浹湧超裥ꪕ迥㢷崱내菨薆菣袃菣뢂苣뮃菣뎃苣䞬㉓菣랂菣Ꞃ菣벃苣銂苣벃菣馁苣貃苣것苣膃菣超裥⦗胣㲁牢ਾ臣龁臣㒯膀㜴胣㒁膀ㄵ胣㢁膀㌱膀㌱膀㌱膀㐱膀㐱膀㐱膀㐱膀㐱膀㔱膀㔱膀㔱膀㔱膀㔱节臣辁臣ㆯㄶ臣蒁臣貂臣ㆋ臣꺁鯧鲣軩㲖牢ਾ臣蒁臣貂臣ㆋ臣ꮁꓧ馁菣꾂菣ꪂ菣覃藩鞈臣袂苣뎂菣覃臣貂苣ꊂ菣躃藩超裥膀戼㹲⠊⥤超裥ꪕ迥㒷膀㜴胣㒁膀ㄵ胣㢁膀㌱膀㌱膀㌱膀㐱膀㐱膀㐱膀㐱膀㐱膀㔱膀㔱膀㔱膀㔱膀㔱节臣辁臣ㆯㄶ臣龁臣鶁臣뢛ꏨ階臣蒁臣貂臣ㆋ臣ꮁꓧ馁藩鞈臣醰臣辁臣节〷⠥臣覂臣ꮁ냥ꪁ臣ꢁ苣㞂┱臣覂냥ꪁ臣ꢁ苣㦂┹臣袂臣鶁臣鎖臣ꢅ臣꺁闦낕臣醃菣뮂菣蚃菣뢂꺁藩鞈郥肸胦銂藥覜臣讂菣꾂菣ꪂ菣覃藩鞈臣袂苣뎂菣覃臣貂苣ꊂ菣躃藩超裥膀臣讂臣꾁戼㹲⠊⥥超裥ꪕ迥㒷膀㜴胣㒁膀ㄵ胣㢁膀㌱膀㌱膀㌱膀㐱膀㐱膀㐱膀㐱膀㐱膀㔱膀㔱膀㔱膀㔱膀㔱节臣辁臣ㆯㄶ臣龁臣鶁臣뢛ꏨ階臣蒁臣貂臣ㆋ臣ꮁꓧ馁藩鞈臣醰臣辁臣节룤ꚺ臣龁臣颫뫥릂菣ꪃ菣뢂苣뎃苣벃鷦뚻룤ꞁ菣ꒂ菣ꪃ菣ꒂ苣馁苣貃苣것苣膃菣超裥ꮁ苣誂苣벃菣閁苣讂苣龃菣뢅藩鞈戼㹲讁苣뢁諦閁苣讂苣龃菣뢅藩鞈苣ꮐ苣讁胣鶁苣讁苣ꪁ苣讁臣龁臣鶁苣讁苣겜돨蒚臣ꪁ苣芀ਊ䐼噉邀触骶ꏨꎭ볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣鲣귦뺯뇨뢛ꇩ趐胣躘듧뢛⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣鲣귦뺯뇨薠鯧趐胣邼볯颼볯㲕䐯噉ਾ䐼噉邀ꏨꎭ雦閳胣覤鯦㲴䐯噉ਾ䐼噉邀ꏨꎭ臣薆껥醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣邼볯颼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣뎛볯銈볯醀믤许臣ꢎ껥ꢅ闩ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂苣龃菣뢅藩鞈臣超裥ꊂ菣ꒂ菣ꆃ菣袃臣邵黦銂ꓧ馁鯥ꞁ臣讂嬺藩鞈闧랏崲겂苣랂苣뮃菣ꪃ菣뮂菣릂牐汯浵ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂㬩超裥ꪕ迥㒷⡝苣Ꚃ苣ꊂ菣鞃菣뎃���鞃苣傹潲畬敭䬠䕄ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂㬩超裥ꪕ迥㚷⡝苣Ꚃ苣ꊂ菣鞃菣뎃苣鞃苣覤闧鎽ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂㬩超裥ꪕ迥㢷⡝苣Ꚃ苣ꊂ菣鞃菣뎃苣鞃苣覤闧鎽ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂㬩超裥ꪕ迥ㆷ崰겂苣랂苣뮃菣ꪃ菣뮂菣릂升菣랂菣Ꞃ菣벃苣⦼嬻藩鞈闧랏㘱崶ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣醃苣閃苣ꮂ戲ㅶ菣랂菣Ꞃ菣벃苣⦼嬻藩鞈闧랏㘱崸ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣醃苣閃苣ꮂ戲㉶菣랂菣Ꞃ菣벃苣⦼嬻藩鞈闧랏㜱崰ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂㈲菣랂菣Ꞃ菣벃苣⦼嬻藩鞈闧랏㜱崲ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂㤳菣랂菣Ꞃ菣벃苣⦼嬻藩鞈闧랏㤷崰ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣醃苣閃苣ꮂ愲菣랂菣Ꞃ菣벃苣⦼嬻藩鞈闧랏㤷崲ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣醃苣閃苣ꮂ瘱ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂㬩超裥ꪕ迥㞷㐹⡝菣袃菣뢂苣뮃菣랂菣ꎂ苣ㆫ㉶菣랂菣Ꞃ菣벃苣⦼嬻藩鞈闧랏㤷崶ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣醃苣閃苣ꮂ瘱ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂㬩超裥ꪕ迥㞷㠹⡝菣袃菣뢂苣뮃菣뎃苣㞬菣랂菣Ꞃ菣벃苣⦼嬻藩鞈闧랏〸崰ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂升菣랂菣Ꞃ菣벃苣⦼嬻藩鞈闧랏〸崲ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂㘱䴴ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂㬩超裥ꪕ迥㢷㐰⡝菣袃菣뢂苣뮃菣뎃苣ㆬ㐶ㅶ菣랂菣Ꞃ菣벃苣⦼嬻藩鞈闧랏〸崶ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂㘱瘴ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂㬩超裥ꪕ迥㢷㠰⡝菣랂菣Ꞃ菣벃苣ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂㘱菣랂菣Ꞃ菣벃苣⦼嬻藩鞈闧랏ㄸ崰ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂㔴菣랂菣Ꞃ菣벃苣⦼嬻藩鞈闧랏ㄸ崲ꆃ菣ꪃ苣ꊂ菣궃菣겂㈵菣랂菣Ꞃ菣벃苣⦼甼砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㬾⼼㹵超裥ꪕ迥㢷㐱⡝菣袃菣뢂苣뮃菣뎃苣䆬ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂㰩⁵浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢臣袂臣뎂菣뮂菣떂苣超裥ꞁ臣讂藩鞈闧랏〹㰵甯芀⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣뎛볯銈볯醀鯥醼裢醼臣骶臣ꞁ臣讂胣㲂䐯噉ਾ䐼噉邀鯥銼胣랆铨ꮺ刭ⵔ苣벃菣뎃臣覂臣뚺꟨ꦉ臣䞮潬⁷♆浡㭰⡇꿥ꞅ呒菣것菣袃臣뺯臣讂銂ꓧ馁苣ꦃ菣ꞁ臣讂胣㲂䐯噉ਾ䐼噉邀鯥鎼胣랆铨ꮺ臣覂呒苣莃苣ꒂ럧鶡뛦꺁돦ꖅ臣龁苣꺁ꧦ낢臣ꞁ臣뚺꟨ꦉ臣䚮慬桳䐠䅌菣것菣袃苣몤臣낂菣閃臣芁苣芀⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣뎛볯醀ㄲ蓢ꞁ臣龩ꋦ궸肜뗧ꦸ뫥꾁⸰莄ꋥꂊ뢁臣䞮潬⁷♆浡㭰銂ꓧ馁苣ꦃ菣ꞁ臣讂胣㲂䐯噉ਾ䐼噉邀鯥閼胣랆铨ꮺ刭ⵔ苣벃菣뎃臣覂臣뒦賥릟鳥꺁汇睯䘠愦灭䜻뺯藧劧鞃菣벃菣ꮁ꿥馁苣⦋苣몤臣낂菣閃臣芁苣芀⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣뎛볯醀룤ꎀ臣ꦸ뫥ꮁ苣龁苣䞋潬⁷♆浡㭰ꮃ苣閃苣ꦃ菣벂菣벃苣銂ꓧ馁苣ꦃ菣ꞁ臣讂胣㲂䐯噉ਾ㰊䥄㹖胣讉뛧鲣귦閼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉邀ꏨꎭ꿥ꆱ鯦麡郥醀飦내鯦㲸䐯噉ਾ䐼噉邀ꏨꎭ꿥ꆱꃩ꺛郥醀볯鎼볯钼⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣鲣귦릖돦醀ꓥ뒛⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣鲣귦꺁蛥릮胣㲑䐯噉ਾ䐼噉邀볯鎼볯钼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉邀ꇨ銼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㄰㔳���〱⸰楴≦㈾㄰㔳㐴〱⸰楴쉦゠〰㘰㰱愯㰾䐯噉ਾਊ䐼噉邀触骶ꏨꎭ볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣鲣귦뺯뇨뢛ꇩ趐胣躘듧뢛⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣鲣귦뺯뇨薠鯧趐胣邼볯邼볯㲖䐯噉ਾ䐼噉邀ꏨꎭ雦閳胣覤鯦㲴䐯噉ਾ䐼噉邀ꏨꎭ臣薆껥醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣邼볯邼볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣ꢡ볯隼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲㌱㐵ㄴ〰琮晩㸢〲㌱㐵ㄴ〰琮晩ꃂ〰〰㈶⼼㹡⼼䥄㹖ਊ㰊䥄㹖胣讉뛧鲣귦鞼胣㲑䐯噉ਾ䐼噉邀ꏨꎭ꿥ꆱ鯦麡郥醀鯥ꊝ⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣鲣귦뺯뇨薠鯧趐胣뎛볯銈볯㲒䐯噉ਾ䐼噉邀ꏨꎭ雦閳胣覤鯦㲴䐯噉ਾ䐼噉邀ꏨꎭ臣薆껥醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖胣뎛볯銈볯醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㄰㔳㐴〱⸰楴≦㈾㄰㔳㐴〱⸰楴쉦゠〰㘰㰳愯㰾䐯噉ਾ㰊䥄㹖胣붛髩뾪鿦놠釥醀⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㄰㔳㐴〱⸰楴≦㈾㄰㔳㐴〱⸰楴쉦゠〰㘰㰴愯㰾䐯噉ਾ䐼噉㰾⁡牨晥∽〲㌱㐵ㄴ〰琮晩㸢〲㌱㐵ㄴ〰琮晩ꃂ〰〰㔶⼼㹡⼼䥄㹖㰊䥄㹖愼栠敲㵦㈢㄰㔳㐴〱⸰楴≦㈾㄰㔳㐴〱⸰楴쉦゠〰㘰㰶愯㰾䐯噉ਾ⼼潢祤ਾ⼼瑨汭ਾ