(57)【要約】  本発明は、式（Ｉ）のピラゾリンジオン誘導体、その製剤組成物、及び、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸オキシダーゼ（ＮＡＤＰＨオキシダーゼ）に関連する障害又は病態の治療及び／又は予防のための、それらの使用に関する。【化３５】2013505930.tif 000039
2013505930.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化３０】
2013505930.tif 000034
によるピラゾリンジオン誘導体、並びに、その、薬学的に許容可能な塩及び薬学的に活性な誘導体、式中、Ｒ１は、Ｈ；必要に応じて置換されるアルコキシカルボニル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルキニル；必要に応じて置換されるアルコキシ；必要に応じて置換されるアルコキシＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるアミノアルキル；必要に応じて置換されるアシル；必要に応じて置換されるアリール；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるヘテロアリール；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８シクロアルキル；必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロシクロアルキル、及び、必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキルから選ばれ、Ｒ２は、Ｈ；必要に応じて置換されるアルコキシカルボニル；必要に応じて置換されるアシル；必要に応じて置換されるアシルＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルキニル；必要に応じて置換されるアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリール；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるアリールＣ１−Ｃ６アルキル、及び、必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキルから選ばれ；Ｒ３は、Ｈ；必要に応じて置換されるアルコキシカルボニル；必要に応じて置換されるアシル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルキニル；必要に応じて置換されるアリール；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるヘテロアリール；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロシクロアルキル、及び、必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキルから選ばれ；Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８  及びＲ９は、それぞれ独立に、Ｈ；ハロゲン、ニトロ、必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルキニル；必要に応じて置換されるアミノ；必要に応じて置換されるアミノアルキル；必要に応じて置換されるアルコキシ；必要に応じて置換されるアルコキシＣ１−Ｃ６アルキルから選ばれ；Ｒ１０は、Ｈ及び必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルから選ばれ；Ｒ１１  は、Ｈ；必要に応じて置換されるアルコキシカルボニル；必要に応じて置換されるアシル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルキニル；必要に応じて置換されるアルコキシ；必要に応じて置換されるアルコキシＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるアミノアルキル；必要に応じて置換されるアシル；必要に応じて置換されるアリール；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるヘテロアリール；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロシクロアルキル、及び、必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキルから選ばれ；Ｒ１２  は、Ｈ；−Ｚ−ＮＲ１３Ｒ１４；−ＣＨＲ１７Ｒ１８；必要に応じて置換されるアルコキシカルボニル；必要に応じて置換されるアシル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルキニル；必要に応じて置換されるアルコキシ；必要に応じて置換されるアルコキシＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるアミノアルキル；必要に応じて置換されるアシル；必要に応じて置換されるアリール；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるヘテロアリール；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロシクロアルキル、及び必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキルから選ばれ；Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、及びＲ１８は、それぞれ独立に、Ｈ；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルキニル；必要に応じて置換されるアリール；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるヘテロアリール；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロシクロアルキル；及び、必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキルから選ばれ；Ｘは、Ｏ、ＮＲ１２、Ｓ、Ｓ＝Ｏ、及びＳ（Ｏ）２から選ばれ；Ｚは、Ｃ（Ｏ）；Ｃ（Ｓ）；及びＳＯ２から選ばれ；ｎは、０及び１から選ばれる整数である。
【請求項２】
請求項１による誘導体であって、Ｒ１が、必要に応じて置換されるアリール及び必要に応じて置換されるヘテロアリールから選ばれ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎが、該先行請求項において定義される通りである、誘導体。
【請求項３】
請求項１又は２による誘導体であって、Ｘ  がＮＲ１２であり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、及びｎが、該先行請求項のいずれか１項に定義される通りである、誘導体。
【請求項４】
請求項１から３のいずれか１項による誘導体であって、ＸがＮＨであり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１及びｎが、該先行請求項のいずれか１項に定義される通りである、誘導体。
【請求項５】
請求項１又は２による誘導体であって、ＸがＯであり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１３、Ｒ１４、及びｎが、該先行請求項のいずれか１項に定義される通りである、誘導体。
【請求項６】
請求項１から３のいずれか１項による誘導体であって、Ｒ１２が、必要に応じて置換されるアリールＣ１−Ｃ６、及び必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキルから選ばれ；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｘ及びｎが、該先行請求項のいずれか１項に定義される通りである、誘導体。
【請求項７】
請求項１から３のいずれか１項による誘導体であって、Ｒ１２が、必要に応じて置換されるアルコキシカルボニルであり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｘ及びｎが、該先行請求項のいずれか１項に定義される通りである、誘導体。
【請求項８】
請求項１から７のいずれか１項による誘導体であって、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０及びＲ１１がＨであり；Ｒ１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ  及びｎが、該先行請求項のいずれか１項に定義される通りである、誘導体。
【請求項９】
請求項１から８のいずれか１項による誘導体であって、下記の群：
２−（２−クロロフェニル）−１０−（ピリジン−２−イルメチル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ  ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
１０−ベンジル−２−（２−メトキシフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
１０−ベンジル−２−（２−クロロフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］  ［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
１０−（２−クロロベンジル）−２−（２−クロロフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］  ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
２−（２−クロロフェニル）−１０−（３−メトキシベンジル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］  ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
１０−（３−クロロベンジル）−２−（２−クロロフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］  ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
２−（２−クロロフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］  ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
ｔｅｒｔ−ブチル  ２−（２−クロロフェニル）−１，５−ジオキソ−２，３，５，８，９，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ  ［４’，３’：３，４］  ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（７Ｈ）−カルボキシレート；
１０−（４−クロロベンジル）−２−（２−クロロフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］  ピリド［１，２−ａ］  ［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
２−（２−クロロフェニル）−１０−（２−メトキシベンジル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］  ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
２−（２−クロロフェニル）−１０−（４−メトキシベンジル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］  ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
２−（２−クロロフェニル）−１０−（フラン−３−イルメチル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］  ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
９−ベンジル−２−（２−クロロフェニル）−２，３，７，８，９，１０−ヘキサヒドロピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］  ピラジン−１，５−ジオン；
２−（２−クロロフェニル）−２，３，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−１，５  （１０Ｈ）−ジオン；
２−（２−メトキシフェニル）−１０−（ピリジン−２−イルメチル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ  ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
１０−（３−メトキシベンジル）−２−（２−メトキシフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ  ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
２−（２−クロロフェニル）−１０−［（１−メチル−１Ｈ−ピラゾル−３−イル）メチル］−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；及び
２−（２−クロロフェニル）−１０−（ピリジン−３−イルメチル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ  ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン
から選ばれる、誘導体。
【請求項１０】
請求項１から９のいずれか１項による少なくとも一つの誘導体、及び、その、薬学的に許容可能な担体、希釈剤、又は賦形剤を含む製剤組成物。
【請求項１１】
薬剤として使用するための、請求項１から９のいずれか１項による誘導体。
【請求項１２】
請求項１から９のいずれか１項によるピラゾリンジオン誘導体であって、循環器障害、呼吸器障害、代謝障害、皮膚障害、骨障害、神経炎症及び／又は神経変性障害、腎臓病、生殖器障害、眼球及び／又は水晶体を冒す疾患及び／又は内耳を冒す病態、炎症性障害、肝臓疾患、痛み、癌、アレルギー障害、外傷、敗血症、出血性及びアナフィラキシーショック、消化器系の障害、血管形成、血管形成依存性病態、及び他の、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（ＮＡＤＰＨ）オキシダーゼ関連性疾患及び／又は障害から選ばれる疾患又は病態を治療するための、誘導体。
【請求項１３】
式（ＩＩ）の中間産物であって：
【化３１】
2013505930.tif 000035
式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎは、前記請求項のいずれか１項に定義される通りであり；Ｒ１５  は、必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６  アルキルである、中間産物。
【請求項１４】
請求項１３による中間産物であって：
メチル［（４Ｚ）−４−（４−ベンジル−１，４−ジアゼパン−２−イリデン）−１−（２−クロロフェニル）−５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾル３−イル］アセテート；及びメチル［（４Ｚ）−４−（４−ベンジル−１，４−ジアゼパン−２−イリデン）−１−（２−メトキシフェニル）−５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾル３−イル］アセテートから成る群から選ばれる中間産物。
【請求項１５】
式（ＩＩ）による中間産物を調製するプロセスであって、式（Ｖ）の化合物を式（ＩＶ）のアミンと反応させる工程であって：
【化３２】
2013505930.tif 000036
式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎが、前記請求項のいずれか１項に定義される通りである工程、を含むプロセス。
【請求項１６】
式（Ｉ）による化合物を調製するプロセスであって、塩基の存在下に式（ＩＩ）の化合物を環化する工程であって：
【化３３】
2013505930.tif 000037
式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎが、前記請求項のいずれか１項に定義される通りであり；Ｒ２がＨである工程、を含むプロセス。
【請求項１７】
式（Ｉ）による化合物を調製するプロセスであって、式（Ｉａ）の化合物を、塩基の存在下にアルキル化剤又はカップリング剤と反応させる工程であって：
【化３４】
2013505930.tif 000038
式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎが、前記請求項のいずれか１項に定義される通りであり；Ｒ２が、前記請求項のいずれか１項に定義される通りであるが、Ｈ以外である工程、を含むプロセス。
【請求項１８】
患者を治療する方法であって、循環器障害、呼吸器障害、代謝障害、皮膚障害、骨障害、神経炎症及び／又は神経変性障害、腎臓病、生殖器障害、眼球及び／又は水晶体を冒す疾患及び／又は内耳を冒す病態、炎症性障害、肝臓疾患、痛み、癌、アレルギー障害、外傷、敗血症、出血性及びアナフィラキシーショック、消化器系の障害、血管形成、及び、血管形成依存性病態、及び／又は、その他の、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸オキシダーゼ関連性疾患及び障害から選ばれる疾患又は病態を患う患者を治療する方法において、請求項１から９のいずれか１項による化合物、並びに、その、薬学的に許容可能な塩及び薬学的に活性な誘導体を、該治療を必要とする患者に対して投与することを含み、前記式において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ  及びｎが、前記請求項のいずれか１項に定義される通りであることを特徴とする、前記方法。
【請求項１９】
血管形成の抑制を必要とする患者において血管形成を抑制する方法であって、請求項１から９のいずれか１項に記載の化合物、並びに、その、薬学的に許容可能な塩及び薬学的に活性な誘導体の血管形成抑制用量を、血管形成の抑制を必要とする患者に投与することを含み、前記式において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎが、該請求項のいずれか１項に定義される通りであることを特徴とする、前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式（Ｉ）のピラゾリンジオン誘導体及びその製剤組成物に関し、並びに、循環器病、呼吸器障害、代謝を乱す障害、皮膚及び／又は骨の疾患、神経変性疾患、腎臓病、生殖器障害、炎症性障害、及び癌の治療及び／又は予防に用いられる薬剤調製のための、その誘導体及び製剤組成物の使用に関する。具体的には、本発明は、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸オキシダーゼ（ＮＡＤＰＨオキシダーゼ）の活性又は機能を変調するための、特に、抑制するための製剤処方の調製に有用なピラゾリンジオン誘導体に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＮＡＤＰＨオキシダーゼ（ＮＯＸ）は、生体膜を横断して電子を転移するタンパクである。一般に、電子受容体は酸素であり、電子転移反応の産物はスーパーオキシドである。従って、ＮＯＸ酵素の生物学的機能は、酸素から活性酸素種（ＲＯＳ）を生成することである。活性酸素種（ＲＯＳ）は、酸素ラジカル（スーパーオキシド陰イオン［●Ｏ２−］、ヒドロキシル［ＨＯ●］、ペルオキシル［ＲＯＯ●］、アルコキシル［ＲＯ●］、及びヒドロペルオキシル［ＨＯＯ●］）、及び、酸化剤であるか、及び／又は簡単にラジカルに変換されるいくつかの非ラジカルを含む、酸素由来小型分子である。窒素含有酸化剤、例えば、一酸化窒素なども活性窒素種（ＲＮＳ）と呼ばれる。ＲＯＳの生成は、一般に、スーパーオキシドの産生から始まる一連のカスケード反応である。スーパーオキシドは、自発的に特に低ｐＨにおいて、又は、スーパーオキシドジスムターゼによる触媒下急速に、不鈞化して過酸化水素になる。ＲＯＳ生成カスケード反応における他の要素としては、スーパーオキシドと一酸化窒素との反応によるペルオキシ亜硝酸の形成、ペルオキシダーゼ触媒による、過酸化水素からの次亜塩素酸の生成、及び、ヒドロキシルラジカルの生成につながる鉄触媒Ｆｅｎｔｏｎ反応を含む。
【０００３】
ＲＯＳは、他の、小型の無機分子の外、ＤＮＡ、タンパク、脂質、炭水化物、及び核酸を含む多数の分子と活発に相互作用を持つ。この初期反応は、第２のラジカルを生成する場合があり、そのため潜在的な損傷が増幅される。ＲＯＳは、細胞損傷及び病原体の殺作用に関与するだけでなく、ほぼ全ての細胞及び組織において、多数の可逆的調節過程にも関わる。一方、ＲＯＳは基本的生理過程の調節において重要であるにも拘わらず、ＲＯＳ産生は、標的分子の機能を不可逆的に破壊又は変更する可能性がある。従って、ＲＯＳを、生体組織損傷における主要原因因子、所謂「酸化ストレス」と見なす傾向が次第に強まっている。
【０００４】
炎症時、ＮＡＤＰＨオキシダーゼは、炎症条件下の血管細胞におけるＲＯＳ産生のもっとも重要な発生源の一つとなる（非特許文献１）。
【０００５】
肺の組織は、内部的に代謝反応によって（例えば、招集された炎症細胞のミトコンドリア呼吸又は活性化によって）生成される酸化剤、又は、外部的に空気中の酸化剤（例えば、煙草の煙又は空気中汚染物）に不断に曝される。更に、肺は、他の組織と比べ高い酸素分圧に不断に暴露され、相当に大きな表面積及び血液補給を有し、且つ、特に、ＲＯＳ介在性損傷に対して敏感である（非特許文献２）。ＮＡＤＰＨオキシダーゼ依存性ＲＯＳ産生は、肺の血管内皮細胞及び平滑筋細胞について記載されている。刺激に対する反応として生じるＮＡＤＰＨオキシダーゼの活性化は、肺高血圧症及び肺血管収縮の亢進などの呼吸器障害の発症に関与すると考えられている（非特許文献３及び４）。更に、肺線維症は、肺の炎症及び過度のＲＯＳ産生によって特徴づけられる。
【０００６】
骨の代謝転換（例えば、骨の再吸収）において決定的役割を担うマクロファージ様細胞である破骨細胞は、ＮＡＤＰＨオキシダーゼ依存性機構を通じてＲＯＳを産生する（非特許文献５）。
【０００７】
糖尿病は、ヒト及び動物において酸化ストレスを増すことが知られており（例えば、グルコースの自動酸化によるＲＯＳ発生の増加）、この酸化ストレスの増大は、糖尿病合併症の発症に重要な役割を果たすと言われている。糖尿病ラットの網膜中心における、局所的ペルオキシドの増大及び内皮細胞の機能不全は、網膜内皮細胞におけるＮＡＤＰＨオキシダーゼ活性の領域と一致することが明らかにされている（非特許文献６）。更に、ミトコンドリア及び／又は炎症部位における酸化ストレス（ＲＯＳ）のコントロールは、糖尿病治療のための有益な対処法であり得ることが示されている（非特許文献７）。
【０００８】
ＲＯＳは更に、アテローム硬化症、細胞増殖、高血圧症、及び、再灌流障害性心臓疾患全体の発現に強く関与する（非特許文献８）。例えば、動脈壁におけるスーパーオキシド産生は、アテローム硬化症の全リスク因子によって強化されるばかりか、ＲＯＳは、多くの「プロアテローム性」体外性細胞反応を誘発する。血管細胞におけるＲＯＳ形成の重要な結果は、一酸化窒素（ＮＯ）の消費である。ＮＯは、血管病の発症を抑えるので、ＮＯの消失は、循環器病の発生において重要である。バルーン損傷後において、血管壁のＮＡＤＰＨオキシダーゼ活性の増加が報告されている（非特許文献９）。
【０００９】
酸化ストレス又はフリーラジカル傷害は更に、神経変性疾患における主要原因因子であると考えられている。そのような傷害として、ミトコンドリア異常、神経の脱髄疾患、アポトーシス、神経細胞死、及び、進行性神経変性障害をもたらす可能性のある認知機能低下を挙げることが可能である（非特許文献１０及び１１）。
【００１０】
更に、精液によるＲＯＳの発生が、多数の動物種において実証され、それが、精子内のＮＡＤＰＨオキシダーゼによるものであることが明らかにされた（非特許文献１２）。過度のＲＯＳ発生は、雄性不妊を含む精子病態、更には、いくつかの陰茎障害及び前立腺癌にも関与することが示唆されている。
【００１１】
ＮＡＤＰＨオキシダーゼは、膜結合シトクロムｂ５５８ドメイン、及び、三つの細胞原形質タンパクサブユニット−−ｐ４７ｐｈｏｘ、ｐ６７ｐｈｏｘ、及び小型のＧＴＰアーゼ、Ｒａｃから構成される、複数サブユニット酵素である。ＮＯＸ酵素については、ＮＯＸ１、ＮＯＸ２、ＮＯＸ３、ＮＯＸ４、ＮＯＸ５、ＤＵＯＸ１、及びＤＵＯＸ２を含む７個の異性形が特定されている（非特許文献１３、１４）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】Ｔｈａｂｕｔ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００２，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，  ２７７：２２８１４−２２８２１
【非特許文献２】Ｂｒｉｇｈａｍ，  １９８６，  Ｃｈｅｓｔ，  ８９（６）：  ８５９−８６３
【非特許文献３】Ｄｊｏｒｄｊｅｖｉｃ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００５，  Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．  Ｔｈｒｏｍｂ．  Ｖａｓｃ．  Ｂｉｏｌ．，  ２５，  ５１９−５２５
【非特許文献４】Ｌｉｕａ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００４，  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  Ｌｕｎｇ，  Ｃｅｌｌ．  Ｍｏｌ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．，  ２８７：  Ｌ１１１−１１８
【非特許文献５】Ｙａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００２，  Ｊ．  Ｃｅｌｌ．  Ｃｈｅｍ．  ８４，  ６４５−６５４
【非特許文献６】Ｅｌｌｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，  ２０００，  Ｆｒｅｅ  Ｒａｄ．  Ｂｉｏｌ．  Ｍｅｄ．，  ２８：９１−１０１
【非特許文献７】Ｐｉｌｌａｒｉｓｅｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００４，  Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．  Ｔｈｅｒ．  Ｔａｒｇｅｔｓ，  ８（５）：４０１−４０８
【非特許文献８】Ｃａｉ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００３，  Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｓｃｉ．，  ２４：４７１−４７８
【非特許文献９】Ｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００１，  Ｔｈｒｏｍ．  Ｖａｓｃ．  Ｂｉｏｌ．，  ２００１，  ２１，  ７３９−７４５
【非特許文献１０】Ｎｕｎｏｍｕｒａ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００１，  Ｊ．  Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ．  Ｅｘｐ．  Ｎｅｕｒｏｌ．，  ６０：７５９−７６７
【非特許文献１１】Ｇｉｒｏｕａｒｄ，  ２００６，  Ｊ．  Ａｐｐｌ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  １００：３２８−３３５
【非特許文献１２】Ｖｅｒｎｅｔ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｌ．  Ｒｅｐｒｏｄ．，  ２００１，  ６５：１１０２−１１１３
【非特許文献１３】Ｌｅｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００６，  Ａｎｔｉｏｘｉｄ  Ｒｅｄｏｘ  Ｓｉｇｎａｌ，  ８（９−１０）：１５４９−６１
【非特許文献１４】Ｃｈｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００１，  Ｇｅｎｅ，  １６；２６９（１−２）：１３１−４０
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
従って、ＮＡＤＰＨ由来のＲＯＳは、多数の疾患、特に、循環器病又は障害、呼吸器障害又は疾患、代謝を乱す疾患又は障害、骨の障害、神経変性疾患、腎臓病、生殖器障害、炎症疾患、生殖器障害又は疾患、痛み、及び、消化器系の癌及び疾患又は障害の発生に寄与する。従って、ＲＯＳ信号伝達カスケード、特に、ＮＡＤＰＨオキシダーゼ（ＮＯＸ）を標的とする新規活性製剤を開発することができたならば、それはきわめて望ましいと考えられる。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明は、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸オキシダーゼ（ＮＡＤＰＨオキシダーゼ）関連障害、例えば、循環器病、呼吸器障害、代謝を乱す障害、皮膚及び／又は骨の疾患、神経変性疾患、腎臓病、生殖器障害、炎症性障害、癌、アレルギー障害、外傷、敗血症、出血性及びアナフィラキシーショック、消化器系の疾患又は障害、新脈管形成、及び、新脈管形成依存性病態の治療及び／又は予防に有用な新規分子をその主題とする。特に、本発明は、細胞におけるＲＯＳ産生の抑制又は低減に有用な新規分子に関する。
【００１５】
本発明の第１態様は、式（Ｉ）によるピラゾリンジオン誘導体［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎは下記に定義する通りである］並びに、その薬学的に許容可能な塩及び薬学的に活性な誘導体を提供する。
【００１６】
本発明の第２態様は、式（Ｉ）によるピラゾリンジオン誘導体［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎは下記に定義する通りである］並びに、薬物として使用される、その薬学的に許容可能な塩及び薬学的に活性な誘導体に関する。
【００１７】
本発明の第３態様は、本発明による少なくとも一つのピラゾリンジオン誘導体を含む製剤組成物、並びに、その薬学的に許容可能な塩及び薬学的に活性な誘導体、及びその薬学的に許容可能な担体、希釈剤、又は賦形剤に関する。
【００１８】
本発明の第４態様は、循環器障害、呼吸器障害、代謝障害、皮膚障害、骨障害、神経炎症及び／又は神経変性障害、腎臓障害、生殖器障害、眼球及び／又は水晶体を冒す疾患及び／又は内耳を冒す病態、炎症性障害、肝臓疾患、痛み、癌、アレルギー障害、外傷、敗血症、出血性及びアナフィラキシーショック、消化器系の疾患又は障害、新脈管形成、及び、新脈管形成依存性の、及び／又は、その他の、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸オキシダーゼ（ＮＡＤＰＨオキシダーゼ）関連性疾患及び障害から選ばれる疾患又は病態の治療又は予防に有用な製剤組成物調製のための、本発明によるピラゾリンジオン誘導体、並びに、その薬学的に許容可能な塩及び薬学的に活性な誘導体の使用に認められる。
【００１９】
本発明の第５態様は、循環器障害、呼吸器障害、代謝障害、皮膚障害、骨障害、神経炎症及び／又は神経変性障害、腎臓障害、生殖器障害、眼球及び／又は水晶体を冒す疾患及び／又は内耳を冒す病態、炎症性障害、肝臓疾患、痛み、癌、アレルギー障害、外傷、敗血症、出血性及びアナフィラキシーショック、消化器系の疾患又は障害、新脈管形成、及び、新脈管形成依存性の、及び／又は、その他の、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸オキシダーゼ（ＮＡＤＰＨオキシダーゼ）関連性疾患及び障害から選ばれる疾患又は病態に罹患する患者を治療する方法に関する。この方法は、式（Ｉ）によるピラゾリンジオン誘導体［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎは下記に定義する通りである］並びに、その薬学的に許容可能な塩及び薬学的に活性な誘導体を投与することを含む。
【００２０】
本発明の第６態様は、循環器障害、呼吸器障害、代謝障害、皮膚障害、骨障害、神経炎症及び／又は神経変性障害、腎臓障害、生殖器障害、眼球及び／又は水晶体を冒す疾患及び／又は内耳を冒す病態、炎症性障害、肝臓疾患、痛み、癌、アレルギー障害、外傷、敗血症、出血性及びアナフィラキシーショック、消化器系の疾患又は障害、新脈管形成、及び、新脈管形成依存性の、及び／又は、その他の、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸オキシダーゼ（ＮＡＤＰＨオキシダーゼ）関連性疾患及び障害から選ばれる疾患又は病態を治療するための、式（Ｉ）によるピラゾリンジオン誘導体［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎは下記に定義する通りである］並びに、薬物として使用される、その薬学的に許容可能な塩及び薬学的に活性な誘導体に関する。
【００２１】
本発明の第７態様は、本発明による式（ＩＩ）に従う、ピラゾリンジオン誘導体中間産物に関する。
【００２２】
本発明の第８態様は、本発明による式（ＩＩ）の中間産物を調製するためのプロセスに関する。
【００２３】
本発明の第９態様は、式（Ｉ）によるピラゾリンジオン誘導体［式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎは下記に定義する通りであり、Ｒ２はＨである］を調製するためのプロセスに関する。
【００２４】
本発明の第１０態様は、式（Ｉ）によるピラゾリンジオン誘導体［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎは下記に定義する通りである］を調製するためのプロセスに関する。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
（発明の詳細な説明）
本発明の他の特徴及び利点は、下記の詳細な説明から明らかとなろう。
下記のパラグラフは、本発明による化合物を構成する各種化学成分の定義を提供するものであるが、別に明白に設定される定義によって更に広い定義が提示されない限り、本明細書及び特許請求の範囲を通じて等しく適用されることが意図される。
「アルキル」という用語は、単独で、又は他の用語と組み合わせて使用される場合、直鎖又は分枝鎖のＣ１−Ｃ２０アルキルであって、１から２０個の炭素原子を有する一価のアルキル基を指すアルキルを含む。本用語は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、ｉ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、１−エチルプロピル、２−メチルブチル、３−メチルブチル、２，２−ジメチルプロピル、ｎ−ヘキシル、２−メチルペンチル、３−メチルペンチル、４−メチルペンチル、ｎ−ヘプチル、２−メチルヘキシル、３−メチルヘキシル、４−メチルヘキシル、５−メチルヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシル、テトラヒドロゲラニル、ｎ−ドデシル、ｎ−テトラデシル、ｎ−ペンタデシル、ｎ−ヘキサデシル、ｎ−オクタデシル、ｎ−ノナデシル、及びｎ−エイコサニルなどの基によって例示される。これらの基は、好ましくはＣ１−Ｃ９アルキル、より好ましくはＣ１−Ｃ６アルキル、特に好ましくはＣ１−Ｃ４アルキルを含み、それらは、同様に、それぞれ、１から９個の炭素原子を有する一価のアルキル基、１から６個の炭素原子を有する一価のアルキル基、及び、１から４個の炭素原子を有する一価のアルキル基を指す。これらの基は、特に、Ｃ１−Ｃ６アルキルを含む。
【００２６】
「アルケニル」という用語は、単独で、又は他の用語と組み合わせて使用される場合、直鎖又は分枝鎖のＣ２−Ｃ２０アルケニルを含む。それは、実現可能な任意の位置において実現可能な任意の数の二重結合を有していてもよく、二重結合の形態は、（Ｅ）又は（Ｚ）形態であってもよい。本用語は、ビニール、アリール、イソプロペニル、１−プロペニル、２−メチル−１−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニル、３−ブテニル、２−エチル−１−ブテニル、３−メチル−２−ブテニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、４−ペンテニル、４−メチル−３−ペンテニル、１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、４−ヘキセニル、５−ヘキセニル、１−ヘプテニル、１−オクテニル、ゲラニル、１−デセニル、１−テトラデセニル、１−オクタデセニル、９−オクタデセニル、１−エイコセニル、及び３，７，１１，１５−テトラメチル−１−ヘキサデセニルなどの基によって例示される。これらの基は、好ましくはＣ２−Ｃ８アルケニル、より好ましくはＣ２−Ｃ６アルケニルを含む。中でも特に好ましいのは、ビニール又はエテニル（−ＣＨ＝ＣＨ２）、ｎ−２−プロペニル（アリール、−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２）、イソプロペニル、１−プロペニル、２−メチル−１−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニル、及び３−メチル−２−ブテニルなどである。
「アルキニル」という用語は、単独で、又は他の用語と組み合わせて使用される場合、直鎖又は分枝鎖のＣ２−Ｃ２０アルキニルを含む。それは、実現可能な任意の位置において実現可能な任意の数の三重結合を有していてもよい。本用語は、２−２０の炭素数、及び必要に応じて二重結合を有してもよいアルキニル基、例えば、エチニル（−ＣoＣＨ）、１−プロピニル、２−プロピニル（プロパルジル、−ＣＨ２ＣoＣＨ）、２−ブチニル、２−ペンテン−４−イルニルなどの基によって例示される。これらの基は、特に、Ｃ２−Ｃ８アルキニル、より好ましくはＣ２−Ｃ６アルキニルなどを含む。
それらの基は、好ましくはＣ２−Ｃ６アルキニルを含み、２から６個の炭素原子を有し、少なくとも１から２個の、アルキニル不飽和部位を有する基を指す。
「ヘテロアルキル」という用語は、Ｃ１−Ｃ１２  -アルキル、好ましくはＣ１−Ｃ６  -アルキルにを意味し、ここで、少なくとも一つの炭素が、Ｏ、Ｎ、又はＳから選ばれるヘテロ原子によって置換されるており、２−メトキシエチルなどを含む。
【００２７】
「アリール」という用語は、不飽和芳香族炭素環基であって、単環（例えば、フェニル）、又は、多数の縮合環（例えば、インデニル、ナフチル）を有する、６から１４個の炭素原子から成る基を指す。アリールとしては、フェニル、ナフチル、アントリル、フェナントリルなどが挙げられる。
「Ｃ１−Ｃ６アルキルアリール」という用語は、Ｃ１−Ｃ６アルキル置換基を有するアリール基を意味し、メチルフェニル、エチルフェニルなどを含む。
「アリールＣ１−Ｃ６アルキル」という用語は、アリール置換基を有するＣ１−Ｃ６基を意味し、３−フェニルプロパニル、ベンジルなどを含む。
「ヘテロアリール」という用語は、単環のヘテロ芳香族基、又は、２環又は３環の融合環ヘテロ芳香族基を指す。ヘテロ芳香族基の特定例としては、必要に応じて置換されるピリジル、ピロリル、ピリミジニル、フリル、チエニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、ピラゾリル、１，２，３−トリアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、１，２，３−オキサジアゾリル、１，２，４−オキサジア−ゾリル、１，２，５−オキサジアゾリル、１，３，４−オキサジアゾリル、１，３，４−トリアジニル、１，２，３−トリアジニル、ベンゾフリル、［２，３−ジヒドロ］ベンゾフリル、イソベンゾフリル、ベンゾチエニル、ベンゾトリアゾリル、イソベンゾチエニル、インドリル、イソインドリル、３Ｈ−インドリル、ベンジミダゾリル、イミダゾ［１，２−ａ］ピリジル、ベンゾチアゾリル、ベンゾキサ−ゾリル、キノリジニル、キナゾリニル、フタラジニル、キノキサリニル、シノリニル、ナフチリジニル、ピリド［３，４−ｂ］ピリジル、ピリド［３，２−ｂ］ピリジル、ピリド［４，３−ｂ］ピリジル、キノリル、イソキノリル、テトラゾリル、５，６，７，８−テトラヒドロキノリル、５，６，７，８−テトラヒドロイソキノリル、プリニル、プテリジニル、カルバゾリル、キサンテニル、又はベンゾキノリルが挙げられる。
「Ｃ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール」という用語は、Ｃ１−Ｃ６アルキル置換基を有するヘテロアリール基を意味し、メチルフリルなどの基を含む。
「ヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル」という用語は、ヘテロアリール置換基を有するＣ１−Ｃ６アルキル基を意味し、フリルメチルなどの基を含む。
「Ｃ２−Ｃ６アルケニルアリール」という用語は、Ｃ２−Ｃ６アルケニル置換基を有するアリール基を意味し、フェニルビニールなどを含む。
【００２８】
「アリールＣ２−Ｃ６アルケニル」という用語は、アリール置換基を有するＣ２−Ｃ６アルケニル基を意味し、フェニルビニールなどを含む。
「Ｃ２−Ｃ６アルケニルヘテロアリール」という用語は、Ｃ２−Ｃ６アルケニル置換基を有するヘテロアリール基を意味し、ビニールピリジニルなどを含む。
「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル」という用語は、ヘテロアリール置換基を有するＣ１−Ｃ６アルケニル基を意味し、ピリジニルビニールなどを含む。
「Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキル」という用語は、飽和炭素環基であって、単環（例えば、シクロヘキシル）、又は、多数の縮合環（例えば、ノルボルニル）を有する、３から８個の炭素原子から成る基を指す。Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキルとしては、シクロペンチル、シクロヘキシル、ノルボルニルなどが挙げられる。
「ヘテロシクロアルキル」という用語は、上述の定義によるＣ３−Ｃ８シクロアルキル基において、最大３個の炭素原子が、Ｏ、Ｓ、ＮＲ、［Ｒは水素又はメチルと定義される］から成る群から選ばれるヘテロ原子によって置換される基を指す。ヘテロシクロアルキルとしては、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルフォリニル、テトラヒドロフラニルなどが挙げられる。
「Ｃ１−Ｃ６アルキルＣ３−Ｃ８−シクロアルキル」という用語は、Ｃ１−Ｃ６アルキル置換基を有するＣ３−Ｃ８−シクロアルキル基を意味し、メチルシクロペンチルなどを含む。
「Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」という用語は、Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキル置換基を有するＣ１−Ｃ６アルキル基を意味し、３−シクロペンチルプロピルなどを含む。
「Ｃ１−Ｃ６アルキルヘテロシクロアルキル」という用語は、Ｃ１−Ｃ６アルキル置換基を有するヘテロシクロアルキル基を意味し、４−メチルピリジニルなどを含む。
「ヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」という用語は、ヘテロシクロアルキル置換基を有するＣ１−Ｃ６アルキル基を意味し、（１−メチルピペリジン−４−イル）メチルなどを含む。
「カルボキシ」という用語は、基−Ｃ（Ｏ）ＯＨを指す。
「カルボキシＣ１−Ｃ６アルキル」という用語は、カルボキシ置換基を有するＣ１−Ｃ６アルキル基を意味し、２−カルボキシエチルなどを含む。
【００２９】
「アシル」という用語は、基−Ｃ（Ｏ）Ｒにおいて、Ｒが、Ｈ、「アルキル」、好ましくは「Ｃ１−Ｃ６アルキル」、「アリール」、「ヘテロアリール」、「Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキル」、「ヘテロシクロアルキル」、「アリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「ヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」、又は「ヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」を含む基を意味し、アセチルなどを含む。
「アシルＣ１−Ｃ６アルキル」という用語は、アシル置換基を有するＣ１−Ｃ６アルキル基を意味し、２−アセチルエチルなどを含む。
「アシルアリール」という用語は、アシル置換基を有するアリール基を意味し、２−アセチルフェニルなどを含む。
「アシルオキシ」という用語は、基−ＯＣ（Ｏ）Ｒにおいて、Ｒが、Ｈ、「Ｃ１−Ｃ６アルキル」、「Ｃ２−Ｃ６アルケニル」、「Ｃ２−Ｃ６アルキニル」、「Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキル」、「ヘテロシクロアルキル」、「アリール」、「ヘテロアリール」、「アリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「ヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「アリールＣ２−Ｃ６アルケニル」、「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６  アルケニル」、「アリールＣ２−Ｃ６アルキニル」、「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルキニル」、「Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」、又は「ヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」を含む基を意味し、アセチルオキシなどを含む。
「アシルオキシＣ１−Ｃ６アルキル」という用語は、アシルオキシ置換基を有するＣ１−Ｃ６アルキル基を意味し、２−（エチルカルボニルオキシ）エチルなどを含む。
「アルコキシ」という用語は、基−Ｏ−Ｒにおいて、Ｒが、「Ｃ１−Ｃ６アルキル」、「アリール」、「ヘテロアリール」、「アリールＣ１−Ｃ６アルキル」、又は「ヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル」を含む基を指す。好ましいアルコキシ基としては、例えば、メトキシ、エトキシ、フェノキシなどが挙げられる。
【００３０】
「アルコキシＣ１−Ｃ６アルキル」という用語は、アルコキシ置換基を有するＣ１−Ｃ６アルキル基を意味し、メトキシエチルなどを含む。
「アルコキシカルボニル」という用語は、−Ｃ（Ｏ）ＯＲにおいて、Ｒが、「Ｃ１−Ｃ６アルキル」、「アリール」、「ヘテロアリール」、「アリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「ヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル」、又は「ヘテロアルキル」を含む基を指す。
「アルコキシカルボニルＣ１−Ｃ６アルキル」という用語は、アルコキシカルボニル置換基を有するＣ１−Ｃ６アルキル基を意味し、２−（ベンジルオキシカルボニル）エチルなどを含む。
「アミノカルボニル」という用語は、基−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ’において、Ｒ及びＲ’が、それぞれ独立に、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリール、ヘテロアリール、「アリールＣ１−Ｃ６アルキル」、又は「ヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル」である基を意味し、Ｎ−フェニルカルボニルなどを含む。
「アミノカルボニルＣ１−Ｃ６アルキル」という用語は、アミノカルボニル置換基を有するアルキル基を意味し、２−（ジメチルアミノカルボニル）エチル、Ｎ−エチルアセトアジル、Ｎ，Ｎ−ジエチル−アセトアジルなどを含む。
「アシルアミノ」という用語は、−ＮＲＣ（Ｏ）Ｒ’において、Ｒ及びＲ’が、それぞれ独立に、Ｈ、「Ｃ１−Ｃ６アルキル」、「Ｃ２−Ｃ６アルケニル」、「Ｃ２−Ｃ６アルキニル」、「Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキル」、「ヘテロシクロアルキル」、「アリール」、「ヘテロアリール」、「アリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「ヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「アリールＣ２−Ｃ６アルケニル」、「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル」、「アリールＣ２−Ｃ６アルキニル」、「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルキニル」、「シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」、又は「ヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」である基を意味し、アセチルアミノなどを含む。
【００３１】
「アシルアミノＣ１−Ｃ６アルキル」という用語は、アシルアミノ置換基を有するＣ１−Ｃ６アルキル基を意味し、２−（プロピオニルアミノ）エチルなどを含む。
「ウレイド」という用語は、基−ＮＲＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’において、Ｒ、Ｒ’、及びＲ’’が、それぞれ独立に、Ｈ、「Ｃ１−Ｃ６アルキル」、「アルケニル」、「アルキニル」、「Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキル」、「ヘテロシクロアルキル」、「Ｃ１−Ｃ６アリール」、「ヘテロアリール」、「アリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「ヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「アリールＣ２−Ｃ６アルケニル」、「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル」、「アリールＣ２−Ｃ６アルキニル」、「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルキニル」、「シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」、又は「ヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」であり、且つ、Ｒ’及びＲ’’が、必要に応じて、それらが結合する窒素原子と一緒になって３−８員のヘテロシクロアルキル環を形成することが可能な基を指す。
「ウレイドＣ１−Ｃ６アルキル」という用語は、ウレイド置換基を有するＣ１−Ｃ６アルキル基を意味し、２−（Ｎ’−メチルウレイド）エチルなどを含む。
「カルバメート」という用語は、基−ＮＲＣ（Ｏ）ＯＲ’において、Ｒ及びＲ’が、それぞれ独立に、「Ｃ１−Ｃ６アルキル」、「Ｃ２−Ｃ６アルケニル」、「Ｃ２−Ｃ６アルキニル」、「Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキル」、「ヘテロシクロアルキル」、「アリール」、「ヘテロアリール」、「Ｃ１−Ｃ６アルキルアリール」、「ヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「アリールＣ２−Ｃ６アルケニル」、「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル」、「アリールＣ２−Ｃ６アルキニル」、「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルキニル」、「シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」、又は「ヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」であり、且つ、Ｒが、必要に応じて、水素であることも可能な基を指す。
【００３２】
「アミノ」という用語は、基−ＮＲＲ’において、Ｒ及びＲ’が、それぞれ独立に、「Ｃ１−Ｃ６アルキル」、「アリール」、「ヘテロアリール」、「Ｃ１−Ｃ６アルキルアリール」、「Ｃ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール」、「シクロアルキル」、又は「ヘテロシクロアルキル」であり、且つ、Ｒ及びＲ’が、必要に応じて、それらが結合する窒素原子と一緒になって３−８員のヘテロシクロアルキル環を形成することが可能な基を指す。
「アミノアルキル」という用語は、アミノ置換基を有するアルキル基を意味し、２−（１−ピロリジニル）エチルなどを含む。
「アンモニウム」という用語は、正電荷の基-Ｎ＋ＲＲ’Ｒ’’において、Ｒ、Ｒ’、及びＲ’’が、それぞれ独立に、「Ｃ１−Ｃ６アルキル」、「Ｃ１−Ｃ６アルキルアリール」、「Ｃ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール」、「シクロアルキル」、又は「ヘテロシクロアルキル」であり、且つ、Ｒ及びＲ’が、必要に応じて、それらが結合する窒素原子と一緒になって３−８員のヘテロシクロアルキル環を形成することが可能な基を指す。
「アンモニウムアルキル」という用語は、アンモニウム置換基を有するアルキル基を意味し、１−エチルピロリジニウムなどを含む。
「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素、及びヨウ素原子を指す。
「スルホニルオキシ」という用語は、基−ＯＳＯ２−Ｒにおいて、Ｒが、「Ｃ１−Ｃ６アルキル」、ハロゲン例えば-ＯＳＯ２−ＣＦ３基によって置換される「Ｃ１−Ｃ６アルキル」、「Ｃ２−Ｃ６アルケニル」、「アルキニル」、「Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル」、「ヘテロシクロアルキル」、「アリール」、「ヘテロアリール」、「アリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「ヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「アリールＣ２−Ｃ６アルケニル」、「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル」、「アリールＣ２−Ｃ６アルキニル」、「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルキニル」、「シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」、又は「ヘテロシクロアルキルアルキル」から選ばれる基を指す。
「スルホニルオキシＣ１−Ｃ６アルキル」という用語は、スルホニルオキシ置換基を有するアルキル基を意味し、２−（メチルスルホニルオキシ）エチルなどを含む。
【００３３】
「スルホニル」という用語は、基「−ＳＯ２−Ｒ」において、Ｒが、「アリール」、「ヘテロアリール」、「Ｃ１−Ｃ６アルキル」、ハロゲンによって置換される「Ｃ１−Ｃ６アルキル」例えば−ＳＯ２−ＣＦ３基、「Ｃ２−Ｃ６アルケニル」、「Ｃ２−Ｃ６アルキニル」、「Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキル」、「ヘテロシクロアルキル」、「アリール」、「ヘテロアリール」、「アリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「ヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「アリールＣ２−Ｃ６アルケニル」、「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル」、「アリールＣ２−Ｃ６アルキニル」、「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルキニル」、「シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」、又は「ヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」から選ばれる基を指す。
「スルホニルＣ１−Ｃ６アルキル」という用語は、スルホニル置換基を有するアルキル基を意味し、２−（メチルスルホニル）エチルなどを含む。
「スルフィニル」という用語は、基「−Ｓ（Ｏ）−Ｒ」において、Ｒが、「アルキル」、ハロゲンによって置換される「アルキル」例えば−ＳＯ−ＣＦ３基、「Ｃ２−Ｃ６アルケニル」、「Ｃ２−Ｃ６アルキニル」、「Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキル」、「ヘテロシクロアルキル」、「アリール」、「ヘテロアリール」、「アリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「ヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「アリールＣ２−Ｃ６アルケニル」、「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル」、「アリールＣ２−Ｃ６アルキニル」、「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルキニル」、「Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」、又は「ヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」から選ばれる基を指す。
「スルフィニルアルキル」という用語は、スルフィニル置換基を有するアルキル基を意味し、２−（メチルスルフィニル）エチルなどを含む。
「スルファニル」という用語は、基−Ｓ−Ｒにおいて、Ｒが、Ｈ、「Ｃ１−Ｃ６アルキル」、ハロゲンによって置換される「Ｃ１−Ｃ６アルキル」例えば-Ｓ−ＣＦ３基、「Ｃ２−Ｃ６アルケニル」、「Ｃ２−Ｃ６アルキニル」、「Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキル」、「ヘテロシクロアルキル」、「アリール」、「ヘテロアリール」、「アリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「ヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「アリールＣ２−Ｃ６アルケニル」、「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル」、「アリールＣ２−Ｃ６アルキニル」、「アルキニルヘテロアリール」、「シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」、又は「ヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」から選ばれる基を指す。好ましいスルファニル基としては、メチルフルファニル、エチルスルファニルなどが挙げられる。
【００３４】
「スルファニルＣ１−Ｃ６アルキル」という用語は、スルファニル置換基を有するＣ１−Ｃ５アルキル基を意味し、２−（メチルスルファニル）エチルなどを含む。
「スルホニルアミノ」という用語は、基−ＲＮＳＯ２−Ｒ’において、Ｒ及びＲ’が、それぞれ独立に、「Ｃ１−Ｃ６アルキル」、「Ｃ２−Ｃ６アルケニル」、「Ｃ２−Ｃ６アルキニル」、「Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキル」、「ヘテロシクロアルキル」、「アリール」、「ヘテロアリール」、「アリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「ヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「アリールＣ２−Ｃ６アルケニル」、「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル」、「アリールＣ２−Ｃ６アルキニル」、「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルキニル」、「Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」、又は「ヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」から選ばれる基を指す。
「スルホニルアミノＣ１−Ｃ６アルキル」という用語は、スルホニルアミノ置換基を有するアルキル基を意味し、２−（エチルスルホニルアミノ）エチルなどを含む。
「アミノスルホニル」という用語は、基−ＳＯ２−ＮＲＲ’において、Ｒ及びＲ’が、それぞれ独立に、Ｈ、「Ｃ１−Ｃ６アルキル」、「Ｃ２−Ｃ６アルケニル」、「Ｃ２−Ｃ６アルキニル」、「Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキル」、「ヘテロシクロアルキル」、「アリール」、「ヘテロアリール」、「アリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「ヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル」、「アリールアルケニル」、「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル」、「アリールＣ２−Ｃ６アルキニル」、「ヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルキニル」、「Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」、又は「ヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル」であり、且つ、Ｒ及びＲ’が、必要に応じて、それらが結合する窒素原子と一緒になって３−８員のヘテロシクロアルキル環を形成することが可能な基を指す。アミノスルホニル基としては、シクロヘキシルアミノスルホニル、ピペリジニルスルホニルなどが挙げられる。
「アミノスルホニルＣ１−Ｃ６アルキル」という用語は、アミノスルホニル置換基を有するＣ１−Ｃ６アルキル基を意味し、２−（シクロヘキシルアミノスルホニル）エチルなどを含む。
【００３５】
個別置換基によって別様に限定されない限り、上記全ての置換基は、全部必要に応じて置換された置換基だと理解されるべきである。
個別置換基によって別様に限定されない限り、「置換された」という用語は、「Ｃ１−Ｃ６アルキル」、「Ｃ２−Ｃ６アルケニル」、「Ｃ２−Ｃ６アルキニル」、「Ｃ３−Ｃ８−シクロアルキル」、「ヘテロシクロアルキル」、「Ｃ１−Ｃ６アルキルアリール」、「Ｃ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール」、「Ｃ１−Ｃ６アルキルシクロアルキル」、「Ｃ１−Ｃ６アルキルヘテロシクロアルキル」、「アミノ」、「アミノスルホニル」、「アンモニウム」、「アシルアミノ」、「アミノカルボニル」、「アリール」、「ヘテロアリール」、「スルフィニル」、「スルホニル」、「アルコキシ」、「アルコキシカルボニル」、「カルバメート」、「スルファニル」、「ハロゲン」、トリハロメチル、シアノ、ヒドロキシ、メルカプト、ニトロなどから選ばれる１から５個の置換基によって置換されている基を指す。
「薬学的に許容可能な塩又は複合体」という用語は、式（Ｉ）の、下記に特定される化合物の塩又は複合体を指す。このような塩の例としては、ただしこれらに限定されないが、式（Ｉ）の化合物を、有機又は無機の塩基、例えば、金属陽イオン、即ち、アルカリ金属（ナトリウム、カリウム、又はリチウム）、アルカリ土類金属（例えば、カルシウム、又はマグネシウムから成る群から選ばれる金属陽イオンの水酸化物、炭酸塩、又は重炭酸塩と、若しくは、有機物の、第１、第２、又は第３アルキルアミンと反応させることによって形成される塩基添加塩が挙げられる。メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、エチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、モルフォリン、Ｎ−Ｍｅ−Ｄ−グルカミン、Ｎ，Ｎ’−ビス（フェニルメチル）−１，２−エタンジアミン、トロメタミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−メチルモルフォリン、プロカイン、ピペリジン、ピペラジンなどから得られるアミン塩は、本発明の範囲内に納まるものと考えられる。
更に考慮の対象とされるものは、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸など）によって形成される酸添加塩の外、有機酸、例えば、酢酸、シュウ酸、酒石酸、コハク酸、リンゴ酸、フマール酸、マレイン酸、アスコルビン酸、安息香酸、タンニン酸、パーム酸、アルギン酸、ポリグルタミン酸、ナフタレンスルフォン酸、ナフタレンジスルフォン酸、及びポリ−ガラクツロン酸などの酸によって形成される塩がある。
【００３６】
「薬学的に活性な誘導体」とは、レシピエントに投与された場合、直接または間接に、本明細書に開示される活性を提供することが可能な任意の化合物を指す。「間接的」という用語はまた、内因性酵素又は代謝を介して薬剤の活性形に変換することが可能なプロドラグを包含する。このプロドラグは、本発明による化合物で、化学的又は代謝的に分解が可能な基を有するＮＡＤＰＨオキシダーゼに対し抑制活性を示す物質の誘導体であり、生体内で、生理的条件下に加溶媒分解によって薬学的に活性な化合物に変換が可能な化合物である。本発明は更に、本発明による化合物の互変異性体を包含する。
「循環器障害又は疾患」という用語は、アテローム硬化症、特に、血管内皮の機能不全と関連する疾患又は障害、例えば、ただしこれらに限定されないが、高血圧、Ｉ又はＩＩ型糖尿病の循環器合併症、血管内膜過形成、冠状動脈性心疾患、脳動脈、冠状動脈又は動脈性血管痙攣、血管内皮の機能不全、鬱血性心不全を含む心不全、末梢動脈疾患、再狭窄、ステントによる傷害、発作、虚血性発作、血管系合併症、例えば、臓器移植後に見られる合併症など、心筋梗塞、高血圧、アテローム硬化プラーク、血小板凝集、狭心症、動脈瘤、動脈切開、虚血性心疾患、心臓肥大、肺塞栓、深部静脈血栓症を含む血栓事象、臓器移植において見られる、血流又は酸素輸送の回復によって、虚血後に引き起こされる傷害、開心術、血管形成術、出血性ショック、心臓、脳、肝臓、腎臓、網膜、及び腸を含む虚血性臓器の血管形成術などの疾患又は障害を含む。
【００３７】
「呼吸器障害又は疾患」という用語は、気管支喘息、気管支炎、アレルギー性鼻炎、成人呼吸器症候群、嚢胞性線維症、肺のウィルス感染（インフルエンザ）、肺高血圧、特発性肺線維症、及び慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）を含む。
「アレルギー障害」という用語は、花粉症及び喘息を含む。
「傷害」という用語は、ポリ傷害を含む。
「代謝を乱す疾患又は障害」という用語は、肥満症、メタボリック症候群、及びＩＩ型糖尿病を含む。
「皮膚病」又は「障害」という用語は、乾癬、湿疹、皮膚炎、外傷治癒及び肉芽形成を含む。
「骨の障害」という用語は、骨粗鬆症、オステオポラシス（ｏｓｔｅｏｐｏｒａｓｉｓ）、骨硬化症、歯周炎、及び上皮小体亢進症を含む。
「神経変性疾患又は障害」という用語は、中枢神経系（ＣＮＳ）、特に神経細胞レベルにおける変性又は変化、例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、癲癇、及び筋ジストロフィーによって特徴づけられる疾患又は状態を含む。本用語は更に、神経炎症及び脱髄状態又は疾患、例えば、白質脳症及び白質ジストロフィーを含む。
「脱髄」という用語は、軸索の周囲のミエリンの変性を含むＣＮＳの状態又は疾患を指す。本発明の背景において、脱髄疾患という用語は、細胞の脱髄を誘発する過程を含む病態、例えば、多発性硬化症、進行性多巣性白質脳症（ＰＭＬ）、ミエロパシー、ＣＮＳ内自動反応性白血球を含む、任意の神経炎症病態、先天性代謝障害、異常な髄鞘形成を有するニューロパシー、薬剤誘発性脱髄、放射線誘発性脱髄、遺伝性脱髄病態、プリオン誘発性脱髄病態、脳炎誘発性脱髄又は脊髄損傷などを含むことが意図される。好ましくは、該病態は多発性硬化症である。
「腎臓疾患又は障害」という用語は、糖尿病腎症、腎不全、糸球体腎炎、アミノグリコシド及び白金化合物の腎毒性、及び過敏性膀胱を含む。ある特定実施態様では、本発明によるこの用語は、慢性腎疾患又は障害を含む。
「生殖器障害又は疾患」という用語は、勃起不能、受精能障害、前立腺肥大、及び良性前立腺肥大を含む。
【００３８】
「眼球及び／又は水晶体を冒す疾患又は障害」という用語は、白内障、例えば、糖尿病白内障、白内障手術後の水晶体白濁の再発、糖尿病及びその他の形の網膜症などを含む。
「内耳を冒す病態」という用語は、老人性難聴、耳鳴、メニエル病及びその他のバランス困難、卵形嚢結石症、前庭片頭痛、並びに、雑音誘発性失聴及び薬剤誘発性失聴（聴器毒性）を含む。
「炎症性障害又は疾患」という用語は、炎症性腸疾患、敗血症、敗血症ショック、成人呼吸促進症候群、膵臓炎、外傷によるショック、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、関節リューマチ、慢性関節リューマチ、動脈硬化、脳内出血、脳梗塞、心不全、心筋梗塞、乾癬、嚢胞性線維症、卒中、急性気管支炎、慢性気管支炎、急性細気管支炎、慢性細気管支炎、骨関節炎、痛風、脊髄炎、強直性脊椎炎、ロイター症候群、乾癬性関節炎、強直性関節炎、若年性関節炎又は若年性強直性脊椎炎、反応性関節炎、感染性関節炎又は感染後関節炎、淋菌性関節炎、梅毒性関節炎、ライム病、「血管炎症候群」によって誘発される関節炎、結節性多発動脈炎、アナフィラキシー血管炎、Ｌｅｕｇｅｎｅｃ肉芽腫症、リューマチ性多筋痛、関節細胞リューマチ、カルシウム結晶沈着関節炎、偽痛風、非関節炎リューマチ、滑液嚢炎、腱滑膜炎、上踝炎症（テニス肘）、手根管症候群、反復使用による障害（タイピング）、混合型関節炎、神経症関節症、出血性関節炎、血管性紫斑病、肥大性骨関節症、多中心性細網組織球症、特定疾患によって誘発される関節炎、血液色素沈着、鎌状細胞病及びその他のヘモグロビン異常、高脂血症、低ガンマグロブリン血症、上皮小体亢進症、巨人症、家系性地中海熱、ベーチェット病、自己免疫疾患全身性エリテマトーズス、多発性硬化症、及び、単独クローン病、又は多発性軟骨炎再発時と同様の複数クローン病、慢性炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、又は、哺乳動物において、ＮＡＤＰＨオキシダーゼを抑制するのに十分な量として式（Ｉ）によって表される化合物の治療的有効量を投与することを必要とする関連疾患を意味する。
【００３９】
「肝臓疾患又は障害」という用語は、肝線維症、アルコール誘発線維症、脂肪症、及び非アルコール性脂肪肝炎を含む。
「関節炎」という用語は、急性リューマチ性関節炎、慢性リューマチ性関節炎、クラミジア関節炎、慢性吸収性関節炎、乳び関節炎、腸疾患に基づく関節炎、フィラリア性関節炎、淋菌性関節炎、痛風関節炎、血友病関節炎、肥厚性関節炎、若年性慢性関節炎、ライム関節炎、新生仔馬の関節炎、結節性関節炎、アルカプトン尿性関節炎、乾癬性関節炎又は化膿性関節炎、若しくは、哺乳動物において、ＮＡＤＰＨオキシダーゼを抑制するのに十分な量として式（Ｉ）によって表される化合物の治療的有効量を投与することを必要とする関連疾患を意味する。
「痛み」という用語は、炎症疼痛に関連する痛覚過敏を含む。
「癌」という用語は、上皮癌（例えば、線維肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫、血管肉腫、血管内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮腫、骨膜腫、中皮腫、ユーイング腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、腎臓癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭癌、乳頭状腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原生癌、腎細胞癌、肝細胞癌、胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胎生期癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、肺腺癌、膀胱癌、または上皮癌）、又は、哺乳動物において、ＮＡＤＰＨオキシダーゼを抑制するのに十分な量として式（Ｉ）によって表される化合物の治療的有効量を投与することを必要とする関連疾患を意味する。
「消化器系の疾患又は障害」という用語は、胃粘膜障害、虚血性腸疾患管理、腸炎／結腸炎、癌化学療法、又は好中球減少症を含む。
「血管形成」という用語は、発芽性血管形成、陥入性血管形成、脈管形成、動脈形成、及びリンパ管形成を含む。血管形成とは、既存の毛細血管又は毛細血管後・細静脈からの新規血管の形成であり、癌、関節炎及び炎症などの病的状態において起こる。秩序だった組織から構成される、様々な組織又は器官、例えば、血管が、血管形成刺激に応じてその内部に侵入することが可能な皮膚、筋肉、結合組織、関節、骨、及び同様組織などは、病的状態において血管形成を助長する場合がある。本明細書で用いる場合、「血管形成依存性状態」という用語は、血管形成又は脈管形成プロセスが、病的状態を助長又は増強する状態を意味することが意図される。脈管形成は、内皮細胞前駆体である血管芽細胞から生じる新規血管の形成から始まる。二つのプロセスは、新規血管の形成をもたらすが、血管形成依存性病態という用語の意味の中に含まれる。同様に、本明細書において使用される「血管形成」という用語も、血管の新規形成、例えば、脈管形成から生じるものの外、既存の血管、毛細管、及び細静脈の分枝及び発芽から生じるものを含むことが意図される。
【００４０】
「血管形成抑制」という用語は、新規脈管形成の程度、量、又は速度の減少に効果的な手段を意味する。組織における内皮細胞の増殖又は移動の程度、量、又は速度の減少をもたらすことは、血管形成抑制の特異的例である。血管形成の抑制活動は、いずれの癌に対してもその治療に有用である。なぜなら、それは、腫瘍の増殖プロセスを標的とするからであり、腫瘍組織の新規脈管形成が起こらないと、腫瘍組織は、必要な栄養素を取得することがなく、増殖が緩慢となり、新たな増殖を止め、後退し、最終的には壊死し、その腫瘍の死をもたらす。更に、血管形成の抑制活動は、いずれの癌に対してもその治療に有用である。なぜなら、それは、転移の形成に対して特に有効だからである。なぜなら、転移の形成も、一次腫瘍の脈管形成を必要とするからであり、それによって、転移癌細胞は、一次腫瘍を抜け出すことが可能となり、二次部位におけるその定着は、該転移の増殖を支える新規脈管形成を必要とするからである。
本明細書で用いる「治療」及び「治療する」などの用語は、一般に、所望の薬理学的、生理学的効果を獲得することを意味する。効果は、病気、その症状又は病態の予防又は部分的予防という点で予防的であってもよいし、若しくは、病気、病態、症状、又は、その病気が原因で起こる不快作用の部分的又は完全な治癒という点で治療的であってもよい。本明細書で用いる「治療」という用語は、哺乳動物、特にヒトの疾患の治療であるならばいずれの治療も包含し、下記：（ａ）ある疾患に罹りやすい素因を有するが、まだそれに罹っているとは診断されていない対象者において該疾患の発生を阻止すること；（ｂ）疾患を抑制すること、即ち、その進行を止めること；又は疾患を緩和すること、即ち、該疾患及び／又はその症状又は病態の後退を誘発すること、を含む。
本明細書で用いる「対象」という用語はほ乳類を指す。例えば、本発明が考慮の対象とするほ乳類は、ヒト、霊長類、家畜動物、例えば、牛、羊、豚、馬などを含む。
本発明の主旨において用いられる「インヒビター」という用語は、ＮＡＤＰＨオキシダーゼの活性を部分的又は完全に抑制するか、及び／又は、活性酸素種（ＲＯＳ）の発生を抑制又は低下させる分子と定義される。
【００４１】
本発明による化合物
一実施態様では、本発明は、式（Ｉ）：
【００４２】
【化１】
2013505930.tif 000003
【００４３】
によるピラゾリンジオン誘導体、並びに、その、薬学的に許容可能な塩及び薬学的に活性な誘導体を提供する。式中、Ｒ１は、Ｈ；必要に応じて置換されるアルコキシカルボニル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルキニル；必要に応じて置換されるアルコキシ；必要に応じて置換されるアルコキシＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるアミノアルキル；必要に応じて置換されるアシル；必要に応じて置換されるアリール、例えば、必要に応じて置換されるフェニル（例えば、２−クロロフェニル、２−メトキシフェニル）；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるヘテロアリール；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８シクロアルキル；必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロシクロアルキル、及び、必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキルから選ばれ、Ｒ２は、Ｈ；必要に応じて置換されるアルコキシカルボニル；必要に応じて置換されるアシル；必要に応じて置換されるアシルＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルキニル；必要に応じて置換されるアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリール；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるアリールＣ１−Ｃ６アルキル、及び、必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキルから選ばれ；
【００４４】
Ｒ３は、Ｈ；必要に応じて置換されるアルコキシカルボニル；必要に応じて置換されるアシル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキル、必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルキニル；必要に応じて置換されるアリール；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるヘテロアリール；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロシクロアルキル、及び、必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキルから選ばれ；Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、それぞれ独立に、Ｈ；ハロゲン、ニトロ、必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルキニル；必要に応じて置換されるアミノ；必要に応じて置換されるアミノアルキル；必要に応じて置換されるアルコキシ；必要に応じて置換されるアルコキシＣ１−Ｃ６アルキルから選ばれ；Ｒ１０は、Ｈ及び必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルから選ばれ；
【００４５】
Ｒ１１は、Ｈ；必要に応じて置換されるアルコキシカルボニル；必要に応じて置換されるアシル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルキニル；必要に応じて置換されるアルコキシ；必要に応じて置換されるアルコキシＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるアミノアルキル；必要に応じて置換されるアシル；必要に応じて置換されるアリール；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるヘテロアリール；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロシクロアルキル、及び、必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキルから選ばれ；
【００４６】
Ｒ１２は、Ｈ；−Ｚ−ＮＲ１３Ｒ１４；−ＣＨＲ１７Ｒ１８；必要に応じて置換されるアルコキシカルボニル、例えば、必要に応じて置換されるカルボン酸塩（例えば、ｔｅｒｔ−ブチルカルボキシレート）；必要に応じて置換されるアシル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルキニル；必要に応じて置換されるアルコキシ；必要に応じて置換されるアルコキシＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるアミノアルキル；必要に応じて置換されるアシル；必要に応じて置換されるアリール；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ１−Ｃ６アルキル、例えば、必要に応じて置換されるフェニルＣ１−Ｃ６アルキル、例えば、必要に応じて置換されるフェニルメチル（例えば、ベンジル、２−クロロベンジル、３−メチルベンジル、３−クロロベンジル、４−クロロベンジル、２−メトキシベンジル；必要に応じて置換されるヘテロアリール；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル、例えば、ピリジンＣ１−Ｃ６アルキル（例えば、必要に応じて置換されるピリジンメチル、例えば、ピリジン−２−イルメチル、ピリジン−３−イルメチル）、又は必要に応じて置換されるフラニルＣ１−Ｃ６アルキル（例えば、必要に応じて置換されるフランメチル、例えば、フラン−３−イルメチル）、又は、必要に応じて置換されるピラゾリルＣ１−Ｃ６アルキル（例えば、必要に応じて置換されるピラゾリルメチル、例えば、１−メチル−１Ｈ−ピラゾル３−イル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロシクロアルキル、及び必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキルから選ばれ；
【００４７】
Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、及びＲ１８は、それぞれ独立に、Ｈ；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルキニル；必要に応じて置換されるアリール；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるヘテロアリール；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルアリール；必要に応じて置換されるアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ２−Ｃ６アルケニルヘテロアリール；必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ２−Ｃ６アルケニル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルＣ３−Ｃ８−シクロアルキル；必要に応じて置換されるＣ３−Ｃ８−シクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキル；必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキルヘテロシクロアルキル；及び、必要に応じて置換されるヘテロシクロアルキルＣ１−Ｃ６アルキルから選ばれ；Ｘは、Ｏ、ＮＲ１２、Ｓ、Ｓ＝Ｏ、及びＳ（Ｏ）２から選ばれ；Ｚは、Ｃ（Ｏ）；Ｃ（Ｓ）；及びＳＯ２から選ばれ、ｎは、０及び１から選ばれる整数である。
【００４８】
組成物
本発明は、患者、好ましくは哺乳動物患者、もっとも好ましくはヒト患者、即ち、医学的障害、特に、ＮＡＤＰＨオキシダーゼによって仲介される障害、例えば、循環器障害、呼吸器障害又は疾患、代謝障害又は疾患、代謝を冒す疾患又は障害、皮膚障害、骨障害、神経炎症障害、神経変性障害、腎臓病、生殖器障害、眼球及び／又は水晶体を冒す疾患又は障害、内耳を冒す病態、肝臓疾患、痛み、癌、血管形成依存性病態及び／又は消化器系の疾患又は障害を患う患者を治療するための組成物としての製剤又は治療剤及び方法を提供する。
【００４９】
本発明の製剤組成物は、一つ以上のピラゾリンジオン誘導体を、本明細書に記載されるいずれかの形において含むことが可能である。本発明の組成物は更に、一つ以上の薬学的に許容可能な添加成分（単数又は複数）、例えば、アラム、安定剤、抗微生物剤、バッファー、着色剤、芳香剤、アジュバントなどを含んでもよい。
【００５０】
本発明の化合物は、従来用いられるアジュバント、担体、希釈剤、又は賦形剤と共に、製剤組成物及びその単位剤形の形状に成形されてもよく、そのような形状において、錠剤又は充填カプセルなどの固体として、又は、溶液、懸濁液、乳剤、エリキシルなどの液体として、又は、同液体によって充たされるカプセルとして、全て経口服用剤として、若しくは、非経口（皮下を含む）服用のための滅菌注射液の形状に成形されてもよい。そのような製剤組成物及びその単位剤形は、成分同士を従来の比率で、活性化合物又は要素の添加付きで、又は添加無しで含んでもよく、この単位剤形は、活性成分を、意図される毎日の用量範囲と一致する、適切な有効量であるならば、いずれの量として含んでもよい。本発明による組成部は、好ましくは、注入可能である。本発明の組成物は更に、液体処方であって、例えば、ただしこれらに限定されないが、水性又は油性懸濁液、溶液、乳液、シロップ、及びエリキシルを含む液体処方であってもよい。経口服用に好適な液体形状は、バッファー、懸濁及び分散剤、着色剤、芳香剤などを含む、適切な水性又は非水性ベヒクルを含んでもよい。組成物は更に、使用前に、水又は他の適切なベヒクルと共に再構築される、乾燥産物として処方されてもよい。このような液体調製品は、添加物、例えば、ただしこれらに限定されないが、懸濁剤、乳化剤、非水性ベヒクル、及び防腐剤を含む添加剤を含んでもよい。懸濁剤としては、ただしこれらに限定されないが、ソルビトールシロップ、メチルセルロース、グルコース／砂糖シロップ、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲル、及び水素添加食用脂肪が挙げられる。乳化剤としては、ただしこれらに限定されないが、レシチン、ソルビタンモノオレエート、及びアカシアが挙げられる。非水性ベヒクルとしては、ただしこれらに限定されないが、食用油、アーモンド油、分留ココナツ油、油状エステル、プロピレングリコール、及びエチルアルコールが挙げられる。防腐剤としては、ただしこれらに限定されないが、メチル又はプロピルｐ−ヒドロシキベンゾエート、及びソルビン酸が挙げられる。更に別の材料並びに加工技術などは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（「レミントンの製薬科学」）、２１ｓｔ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  ２００５，  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓに記載される。なお、この文書を引用により本明細書に含める。
【００５１】
本発明の固体組成物は、通例に従って処方される錠剤又はローゼンジの形状を取ってもよい。例えば、経口服用のための錠剤及びカプセルは、通例の賦形剤、例えば、ただしこれらに限定されないが、結合剤、充填剤、潤滑剤、崩壊剤、及び湿潤剤などの賦形剤を含んでもよい。結合剤としては、ただしこれらに限定されないが、シロップ、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、澱粉及びポリビニールピロリドンから成る粘滑剤が挙げられる。充填剤としては、ただしこれらに限定されないが、ラクトース、糖、微細結晶セルロース、トウモロコシ澱粉、リン酸カルシウム、及びソルビトールが挙げられる。潤滑剤としては、ただしこれらに限定されないが、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、タルク、ポリエチレングリコール、及びシリカが挙げられる。崩壊剤としては、ただしこれらに限定されないが、トマト澱粉、及び澱粉グリコール酸ナトリウムが挙げられる。湿潤剤としては、ただしこれらに限定されないが、ラウリル硫酸ナトリウムが挙げられる。錠剤は、当該技術分野で周知の方法に従ってコートされる。
【００５２】
注入可能組成物は、典型的には、注入可能な滅菌生理的食塩水又はリン酸バッファー生理的食塩水、又は、その他の、当該技術分野で公知の注入可能担体を原材料とする。
【００５３】
本発明の組成物は更に、例えば、ただしこれらに限定されないが、ココアバター又はグリセリドを含む坐剤基剤を含んでもよい坐剤として処方することが可能である。本発明の組成物は更に、吸入用として、例えば、ただしこれらに限定されないが、溶液、懸濁液、又は乳液を含む形状として、即ち、乾燥粉末、又は、ジクロロジフルオロメタン又はトリクロロフルオロメタンなどの推進剤使用のエロゾルの形で投与されてもよい吸入用として処方されてもよい。本発明の組成物は更に、水性又は非水性ベヒクルを含む経皮処方、例えば、ただしこれらに限定されないが、クリーム、軟膏、ローション、ペースト、硬膏剤、パッチ、又は膜を含む処方として処方されてもよい。
【００５４】
本発明の組成物は更に、非経口投与用として、例えば、ただしこれらに限定されないが、注入又は連続輸液による投与用として処方されてもよい。注入用処方は、油性又は水性ベヒクルにおける懸濁液、溶液、又は乳液の形状を取ってもよく、処方剤、例えば、ただしこれらに限定されないが、懸濁剤、安定剤、及び分散剤を含む処方剤を含んでもよい。組成物は更に、適切なベヒクル、例えば、ただしこれらに限定されないが、滅菌、発熱物質非含有水によって再構築される粉末形状として提供されてもよい。
【００５５】
本発明の組成物は更に、埋め込み又は筋肉内注入によって投与されるデポ剤として処方されてもよい。本組成物は、適切なポリマー材料又は疎水性材料（例えば、許容可能な油状物における乳液として）、イオン交換樹脂、又は、難溶性誘導体（例えば、難溶性塩として）と共に処方されてもよい。
【００５６】
本発明の組成物は更に、リポソーム製剤として処方されてもよい。このリポソーム製剤は、対象細胞又は爪角質層に浸透し、細胞膜と融合し、リポソーム内容物の細胞内輸送を実現することが可能である。他に適切な処方として、ニオソームを用いることも可能である。ニオソームとは、リポソーム同様の脂質ベジクルであり、その膜は、大部分が非イオン性脂質から成り、それらの脂質の内、いくつかの形状のものは、化合物を角質層を横切って輸送するのに効果的である。本発明の化合物は更に、持続的放出形態として投与することが可能であり、若しくは、持続放出薬剤送達システムから投与することも可能である。代表的持続放出原料に関する説明は、更に、レミントンの製薬科学中の、本発明に含められた材料の中に見出すことが可能である。
【００５７】
投与方式
本発明の組成物は、任意の方法で、例えば、ただしこれらに限定されないが、経口、非経口、舌下、経皮、直腸、経粘膜、局所、吸入、頬内又は鼻腔内投与、又はそれらの組み合わせなどの方法によって投与されてもよい。非経口投与としては、ただしこれらに限定されないが、静脈内、動脈内、腹腔内、皮下、筋肉内、硬膜下腔内、及び関節内投与が挙げられる。本発明の組成物は更に、該成分の徐放を可能にするばかりでなく、緩徐な調節的経静脈輸液を可能にするインプラントの形で投与してもよい。好ましい実施態様では、本発明によるピラゾリンジオン誘導体は、静脈内又は皮下に投与される。
【００５８】
本発明は更に、下記の実例によって更に具体的に説明される。なお、これらの例は、いかなる点でも本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
【００５９】
個体に対し単一用量又は複数用量として投与される投薬は、様々な因子、例えば、薬剤動態特性、患者の状態及び特徴（性別、年齢、体重、健康、大きさ）、症状の程度、同時治療、治療頻度、及び所望の効果などに応じて変動する。
【００６０】
組み合わせ
本発明の一実施態様によれば、本発明の化合物、及びその製剤処方は、単独で、又は、癌治療に有用な共作用剤と組み合わせて投与することが可能であり、組み合わせは、例えば、固体腫瘍に対向する従来型化学療法に使用される物質、又は、設計された細胞死を誘発することによって作用する、他のいずれかの分子、例えば、プレＤＮＡ分子建設ブロックの合成を阻止する薬剤カテゴリーから選ばれる共作用剤、例えば、メトトレキセート（Ａｂｉｔｒｅｘａｔｅ（登録商標））、フルオロウラシル（Ａｄｒｕｃｉｌ（登録商標））、ヒドロキシウレア（Ｈｙｄｒｅａ（登録商標））、及びメルカプトプリン（Ｐｕｒｉｎｅｔｈｏｌ（登録商標））、例えば、細胞核においてＤＮＡを直接傷害する薬剤カテゴリーから選ばれる共作用剤、例えば、シスプラチン（Ｐｌａｔｉｎｏｌ（登録商標））、及び、抗生物質―ダウノルビシン（Ｃｅｒｕｂｉｄｉｎｅ（登録商標））、ドキソルビシン（Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ（登録商標））、及びエトポシド（ＶｅＰｅｓｉｄ（登録商標））、例えば、有糸分裂紡錘体の合成又は分解を実行する薬剤カテゴリーから選ばれる共作用剤、例えば、ビンブラスチン（Ｖｅｌｂａｎ（登録商標））、ビンクリスチン（Ｏｎｃｏｖｉｎ（登録商標））、及びパシタキセル（Ｔａｘｏｌ（登録商標））と共に行われる。
【００６１】
本発明の別の実施態様によれば、本発明の化合物及びその製剤処方は、細胞表面タンパクを標的とする仲介物、例えば、サイトカイン受容体鎖の遺伝子転移産物、及び、受容体標的細胞毒素投与と組み合わせて投与することが可能である。
【００６２】
本発明の別の実施態様によれば、本発明の化合物及びその製剤処方は、放射線治療と組み合わせて投与することが可能である。
【００６３】
本発明は、本発明による化合物の投与又はその製剤処方の投与において、本発明による化合物又はその製剤処方が、治療有効量として、癌の治療において有用な他の治療処方又は共作用剤（例えば、複数薬剤処方）の前に、と同時に、若しくは、それに次いで投与される投与を包含する。上記共作用剤と同時に投与される、本発明による化合物又はその製剤処方は、同じか又は異なる単数又は複数の組成として、同じか又は異なる単数又は複数の投与ルートを通じて投与することが可能である。
【００６４】
別の特定実施態様では、本発明の化合物及び方法は、癌の治療における使用において、本発明による化合物の投与が、典型的には、化学療法、ホルモン療法、又は放射線療法の際、又はその後に実行される使用が考慮の対象となる。
【００６５】
別の特定実施態様では、本発明の化合物及び方法は、癌の治療における使用において、本発明による化合物の投与が、典型的には、複数回の化学療法、ホルモン療法、又は放射線療法後に実行され、その際、腫瘍組織に対し血液及び栄養補給を実現して血管形成の回復を誘発することによって毒性攻撃に対する反応を誘導する使用が考慮の対象となる。
【００６６】
別の実施態様では、本発明による化合物の投与は、固体腫瘍が切除された部位において転移に対する予防として術後に実行される。
【００６７】
患者
ある実施態様では、本発明による患者は、循環器障害又は疾患を患う患者である。
別の実施態様では、本発明による患者は、呼吸器障害又は疾患を患う患者である。
別の実施態様では、本発明による患者は、代謝を乱す疾患又は障害を患う患者である。
別の実施態様では、本発明による患者は、皮膚障害を患う患者である。
別の実施態様では、本発明による患者は、骨障害を患う患者である。
別の実施態様では、本発明による患者は、神経炎症性障害及び／又は神経変性障害を患う患者である。
別の実施態様では、本発明による患者は、腎臓病を患う患者である。
別の実施態様では、本発明による患者は、生殖器障害を患う患者である。
別の実施態様では、本発明による患者は、眼球及び／又は水晶体を冒す疾患又は障害、及び／又は内耳を冒す病態を患う患者である。
別の実施態様では、本発明による患者は、炎症性障害又は疾患を患う患者である。
別の実施態様では、本発明による患者は、肝臓疾患を患う患者である。
別の実施態様では、本発明による患者は、炎症性痛みなどの痛みに悩む患者である。
別の実施態様では、本発明による患者は、癌を患う患者である。
別の実施態様では、本発明による患者は、血管形成又は血管形成依存性病態を患う患者である。
別の実施態様では、本発明による患者は、アレルギー障害を患う患者である。
別の実施態様では、本発明による患者は、外傷を患う患者である。
別の実施態様では、本発明による患者は、敗血症、出血性及びアナフィラキシーショックを患う患者である。
別の実施態様では、本発明による患者は、消化器系の疾患又は障害を患う患者である。
【００６８】
本発明による使用
別の実施態様では、本発明は、式（Ｉ）によるピラゾリンジオン誘導体、並びに、薬剤として使用される、その薬学的に許容可能な塩及び薬学的に活性な誘導体を提供する。
【００６９】
更に別の実施態様では、本発明は、本発明によるピラゾリンジオン誘導体であって、Ｒ１が、必要に応じて置換されるアリール及び必要に応じて置換されるヘテロアリールから選ばれ；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎが、詳細な説明に定義される通りである誘導体を提供する。
【００７０】
更に別の実施態様では、本発明は、本発明によるピラゾリンジオン誘導体であって、Ｒ２がＨであり；Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎが、詳細な説明に定義される通りである誘導体を提供する。
【００７１】
更に別の実施態様では、本発明は、本発明によるピラゾリンジオン誘導体であって、Ｒ３がＨであり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎが、詳細な説明に定義される通りである誘導体を提供する。
【００７２】
更に別の実施態様では、本発明は、本発明によるピラゾリンジオン誘導体であって、Ｒ４  がＨであり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎが、詳細な説明に定義される通りである誘導体を提供する。
【００７３】
更に別の実施態様では、本発明は、本発明によるピラゾリンジオン誘導体であって、Ｒ４及びＲ５がＨであり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎが、詳細な説明に定義される通りである誘導体を提供する。
【００７４】
更に別の実施態様では、本発明は、本発明によるピラゾリンジオン誘導体であって、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９がＨであり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎが、詳細な説明に定義される通りである誘導体を提供する。
【００７５】
更に別の実施態様では、本発明は、本発明によるピラゾリンジオン誘導体であって、Ｒ１０がＨであり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎが、詳細な説明に定義される通りである誘導体を提供する。
【００７６】
更に別の実施態様では、本発明は、本発明によるピラゾリンジオン誘導体であって、Ｒ１１がＨであり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎが、詳細な説明に定義される通りである誘導体を提供する。
【００７７】
更に別の実施態様では、本発明は、本発明によるピラゾリンジオン誘導体であって、Ｒ１２がＨであり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎが、詳細な説明に定義される通りである誘導体を提供する。
【００７８】
更に別の実施態様では、本発明は、本発明によるピラゾリンジオン誘導体であって、Ｒ１２が、必要に応じて置換されるアリール  Ｃ１−Ｃ６、及び必要に応じて置換されるヘテロアリールＣ１−Ｃ６アルキルから選ばれ；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎが、詳細な説明に定義される通りである誘導体を提供する。
【００７９】
更に別の実施態様では、本発明は、本発明によるピラゾリンジオン誘導体であって、Ｒ１２が、必要に応じて置換されるアルコキシカルボニルであり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎが、詳細な説明に定義される通りである誘導体を提供する。
【００８０】
更に別の実施態様では、本発明は、本発明によるピラゾリンジオン誘導体であって、ＸがＯであり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１  及びｎが、詳細な説明に定義される通りである誘導体を提供する。
【００８１】
更に別の実施態様では、本発明は、本発明によるピラゾリンジオン誘導体であって、ＸがＮＲ１２であり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、及びｎが、詳細な説明に定義される通りである誘導体を提供する。
【００８２】
更に別の実施態様では、本発明は、本発明によるピラゾリンジオン誘導体であって、ｎが０であり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、及びＸが、詳細な説明に定義される通りである誘導体を提供する。
【００８３】
更に別の実施態様では、本発明は、本発明によるピラゾリンジオン誘導体であって、ｎが１であり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、及びＸが、詳細な説明に定義される通りである誘導体を提供する。
【００８４】
更に別の実施態様では、本発明は、本発明によるピラゾリンジオン誘導体であって、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０及びＲ１１がＨであり；Ｒ１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎが、詳細な説明に定義される通りである誘導体を提供する。
【００８５】
更に別の実施態様では、本発明は、本発明によるピラゾリンジオン誘導体であって、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１及びＲ１７がＨであり；Ｒ１２が-ＣＨＲ１７Ｒ１８であり；ＸがＮＲ１２であり；Ｒ１、Ｒ１８及びｎが、詳細な説明に定義される通りである誘導体を提供する。
【００８６】
別の実施態様では、本発明は、式（Ｉ）［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎは、詳細な説明に定義される通りである］によるピラゾリンジオン誘導体、並びに、その薬学的に許容可能な塩及び薬学的に活性な誘導体の使用であって、循環器障害、呼吸器障害、代謝障害、皮膚障害、骨障害、神経炎症及び／又は神経変性障害、腎臓病、生殖器障害、眼球及び／又は水晶体を冒す疾患及び／又は内耳を冒す病態、炎症性障害、肝臓疾患、痛み、癌、アレルギー障害、外傷、敗血症、出血性及びアナフィラキシーショック、消化器系の障害、血管形成、及び、血管形成依存性病態、及び／又は、その他の、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸オキシダーゼ（ＮＡＤＰＨオキシダーゼ）関連性疾患及び障害から選ばれる疾患又は病態の治療又は予防に有用な製剤組成物を調製するための使用を提供する。
【００８７】
別の実施態様では、本発明は、式（Ｉ）［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎは、詳細な説明に定義される通りである］によるピラゾリンジオン誘導体、並びに、その薬学的に許容可能な塩、及び薬学的に活性なその誘導体であって、循環器障害、呼吸器障害、代謝障害、皮膚障害、骨障害、神経炎症及び／又は神経変性障害、腎臓病、生殖器障害、眼球及び／又は水晶体を冒す疾患及び／又は内耳を冒す病態、炎症性障害、肝臓疾患、痛み、癌、アレルギー障害、外傷、敗血症、出血性及びアナフィラキシーショック、消化器系の障害、血管形成、及び、血管形成依存性病態、及び／又は、その他の、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸オキシダーゼ（ＮＡＤＰＨオキシダーゼ）関連性疾患及び障害から選ばれる疾患又は病態の治療又は予防に有用なピラゾリンジオン誘導体、並びに、その薬学的に許容可能な塩、及び薬学的に活性なその誘導体を提供する。
【００８８】
本発明の化合物は、特に、下記の群：
２−（２−クロロフェニル）−１０−（ピリジン−２−イルメチル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ  ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
１０−ベンジル−２−（２−メトキシフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
１０−ベンジル−２−（２−クロロフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］  ［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
１０−（２−クロロベンジル）−２−（２−クロロフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］  ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
２−（２−クロロフェニル）−１０−（３−メトキシベンジル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］  ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
１０−（３−クロロベンジル）−２−（２−クロロフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］  ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
２−（２−クロロフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］  ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
ｔｅｒｔ−ブチル  ２−（２−クロロフェニル）−１，５−ジオキソ−２，３，５，８，９，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ  ［４’，３’：３，４］  ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（７Ｈ）−カルボキシレート；
１０−（４−クロロベンジル）−２−（２−クロロフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］  ピリド［１，２−ａ］  ［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
２−（２−クロロフェニル）−１０−（２−メトキシベンジル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］  ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
【００８９】
２−（２−クロロフェニル）−１０−（４−メトキシベンジル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］  ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
２−（２−クロロフェニル）−１０−（フラン−３−イルメチル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］  ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
９−ベンジル−２−（２−クロロフェニル）−２，３，７，８，９，１０−ヘキサヒドロピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］  ピラジン−１，５−ジオン；
２−（２−クロロフェニル）−２，３，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−１，５  （１０Ｈ）−ジオン；
２−（２−メトキシフェニル）−１０−（ピリジン−２−イルメチル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ  ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
１０−（３−メトキシベンジル）−２−（２−メトキシフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ  ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；
２−（２−クロロフェニル）−１０−［（１−メチル−１Ｈ−ピラゾル−３−イル）メチル］−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン；及び
２−（２−クロロフェニル）−１０−（ピリジン−３−イルメチル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ  ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン
から選ばれるものを含む。
【００９０】
別の実施態様では、本発明は、式（ＩＩ）：
【００９１】
【化２】
2013505930.tif 000004
【００９２】
［式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎは、詳細な説明に定義される通りであり；Ｒ１５は、必要に応じて置換されるＣ１−Ｃ６アルキル、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、又はブチルである］の中間産物を提供する。
【００９３】
更に別の実施態様では、本発明は、本発明による式（ＩＩ）の中間産物であって、下記：
メチル［（４Ｚ）−４−（４−ベンジル−１，４−ジアゼパン−２−イリデン）−１−（２−クロロフェニル）−５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾル３−イル］アセテート；  及び  メチル［（４Ｚ）−４−（４−ベンジル−１，４−ジアゼパン−２−イリデン）−１−（２−メトキシフェニル）−５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾル３−イル］アセテート、
から成る群から選ばれる中間産物を提供する。
【００９４】
別の実施態様では、本発明は、式（ＩＩ）による中間産物の調製プロセスであって、式（Ｖ）の化合物を式（ＩＶ）のアミンと反応させる工程：
【００９５】
【化３】
2013505930.tif 000005
【００９６】
［式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎは、詳細な説明に定義される通りである］を含むプロセスを提供する。
【００９７】
別の実施態様では、本発明は、式（Ｉ）による化合物の調製プロセスであって、塩基の存在下に式（ＩＩ）の化合物を環化する工程：
【００９８】
【化４】
2013505930.tif 000006
【００９９】
［式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎは、詳細な説明に定義される通りであり；Ｒ２  はＨである］を含むプロセスを提供する。
【０１００】
別の実施態様では、本発明は、式（Ｉ）による化合物の調製プロセスであって、式（Ｉａ）の化合物を、塩基の存在下にアルキル化剤又はカップリング剤と反応させる工程：
【０１０１】
【化５】
2013505930.tif 000007
【０１０２】
［式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ及びｎは、詳細な説明に定義される通りであり；Ｒ２  は、説明に記載される通りであるがＨ以外である］を含むプロセスを提供する。
【０１０３】
別の実施態様では、本発明は、患者を治療する方法であって、循環器障害、呼吸器障害、代謝障害、皮膚障害、骨障害、神経炎症及び／又は神経変性障害、腎臓病、生殖器障害、眼球及び／又は水晶体を冒す疾患及び／又は内耳を冒す病態、炎症性障害、肝臓疾患、痛み、癌、アレルギー障害、外傷、敗血症、出血性及びアナフィラキシーショック、消化器系の障害、血管形成、及び、血管形成依存性病態、及び／又は、その他の、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸オキシダーゼ（ＮＡＤＰＨオキシダーゼ）関連性疾患及び障害から選ばれる疾患又は病態を患う患者を治療する方法を提供する。本法は、式（Ｉ）による化合物を、それを必要とする患者に投与することを含む。
【０１０４】
別の実施態様では、本発明は、血管形成の抑制を必要とする患者において血管形成を抑制する方法であって、式（Ｉ）の化合物の血管形成抑制用量を、血管形成の抑制を必要とする患者に投与することを含む方法を提供する。
【０１０５】
別の実施態様では、本発明は、本発明に従って、腫瘍の血管形成を抑制することによって腫瘍の新規脈管形成を抑制する方法を提供する。同様に、本発明は、この血管形成抑制法を実行することによって腫瘍増殖を抑制する方法を提供する。
【０１０６】
ある特定実施態様では、本発明の化合物及び方法は、腫瘍、固体腫瘍、転移巣、癌、メラノーマ、皮膚癌、乳癌、血管腫又は血管線維腫、及び同様の癌を患う患者の腫瘍組織の治療における使用が考えられ、抑制される血管形成は、腫瘍組織の新規脈管形成が見られる腫瘍組織血管形成である。本発明の化合物及び方法によって治療が可能な典型的固体腫瘍組織としては、ただしこれらに限定されないが、皮膚、メラノーマ、肺、膵臓、乳房、結腸、咽頭、卵巣、前立腺、結腸直腸、頭部、頚部、睾丸、リンパ系、骨髄、骨、肉腫、腎臓、汗腺などの組織の腫瘍が挙げられる。治療される癌の更に別の例としては、グリア芽細胞腫がある。
【０１０７】
別の特定実施態様では、本発明の化合物及び方法は、炎症組織の治療における使用が考えられ、抑制される血管形成は、炎症組織の血管形成で、炎症組織の新規脈管形成の見られる血管形成である。この場合、本発明による化合物及び方法は、慢性関節リューマチ患者などに見られる関節炎組織、免疫性又は非免疫性炎症組織、乾癬組織などにおける血管形成の抑制を考慮の対象とする。
【０１０８】
ある実施態様では、本発明は、組織における血管形成の抑制を考慮の対象とする。組織における血管形成の程度、従って、本発明の方法によって達成される抑制の程度は、本明細書に記載されるものなど、様々な方法によって評価することが可能である。
【０１０９】
別の実施態様では、本発明は、式（Ｉ）による、少なくとも一つのピラゾリンジオン誘導体、及び、その薬学的に許容可能な担体、希釈剤、又は賦形剤を含む製剤組成物を提供する。
【０１１０】
本発明の化合物は、プログラムＡＣＤ／名称（製品バージョン１０．０１）において使用されるＩＵＰＡＣ標準に従って命名された。
【０１１１】
本発明による化合物は、式（Ｉ）による化合物、その互変異性体、その幾何異性体、その光学的に活性な形体、例えば、エナンチオマー、ジアステレオマーなど、及びそのラセミ形体、並びに、薬学的に許容可能な、その塩を含む。本発明において例示される誘導体は、下記の一般的方法及び手順を用い、簡単に入手可能な開始材料から調製することが可能である。典型的又は好ましい実験条件（即ち、反応温度、時間、試薬のモル数、溶媒など）が提示されている場合でも、他の実験条件も、別様に言明されない限り、使用が可能であることが了解されよう。最適反応条件は、使用される特定反応因子又は溶媒と共に変動してよく、そのような条件は、当業者によって通例の最適化手順を用いることによって決定することが可能である。
【０１１２】
本明細書に引用される参考文献は、引用することによってその全体が本明細書に含まれる。本発明の範囲は、本発明の個別態様それぞれの例示であることが意図される本明細書に記載される特定実施態様によって制限されてはならない。実際、本明細書に図示し記載するものの外に、本発明の様々な修正が、前述の説明及び付属の図面から当業者には明白となろう。そのような修正は、添付の特許請求項の範囲内に納まることが意図される。
（実施例）
【０１１３】
本発明が説明されたところで、下記の実施例を、具体的説明の観点からで、限定のためではなく、提示する。
【０１１４】
本発明の化合物の合成
式（Ｉ）による新規誘導体は、下記の一般的方法及び手順を用い、簡単に入手可能な開始材料から調製することが可能である。典型的又は好ましい実験条件（即ち、反応温度、時間、試薬のモル数、溶媒など）が提示されている場合でも、他の実験条件も、別様に言明されない限り、使用が可能であることが了解される。最適反応条件は、使用される特定反応因子又は溶媒と共に変動してよく、そのような条件は、当業者によって通例の最適化手順を用いることによって決定することが可能である。
【０１１５】
式（Ｉ）の化合物を取得するための一般的合成法は、下記のスキーム１に図示される。式（Ｉ）によるピラゾロピリジン誘導体［式中、置換基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１７、Ｒ１８、Ｘ  及びｎは上に定義した通りである］は、特注又は市販の、式（ＶＩＩＩ）による置換されたヒドラジン誘導体、式（ＩＸ）によるアセトンジカルボキシレート誘導体、式（ＩＶ）による一次アミン誘導体、及び、式（ＶＩ）によるトリアルキルオルトエーテル誘導体から、下記のスキーム１に略述した合成経路に従って４から５段階の化学工程において調製することが可能である。より特異的方法では、式（ＶＩＩＩ）によるヒドラジン誘導体［式中Ｒ１  は上に定義した通り−−は、式（ＩＸ）によるアセトンジカルボキシレート誘導体［式中Ｒ３  及びＲ１５  は下記に定義する通り−−と、ベンゼン、トルエン、又は他の非反応性溶媒などの適切な溶媒中で、化合物の内在的反応に依存する時間に亘って、中性・還流条件下に反応させて、式（ＶＩＩ）による、対応する４−置換２−ヒドロシキルピラゾル誘導体を提供する。
【０１１６】
【化６】
2013505930.tif 000008
【０１１７】
式（ＶＩＩ）による中間化合物は更に、式（ＶＩ）によるトリアルキルオルトエステル［式中Ｒ４、Ｒ５及びＲ１６は上に定義した通りである］と、酢酸の存在下、還流条件下に反応させて式（Ｖ）の中間産物の形成を可能とする。式（Ｖ）の中間産物は更に、式（ＩＶ）による一次アミン誘導体［式中Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｘ、及びｎは上に定義した通りである］によって、アセトニトリルなどの溶媒中でゼロ度から室温の温度において処理されると、式（ＩＩＩ）の中間化合物を提供する。式（ＩＩＩ）の中間化合物は、通常単離されず、そのままで自発的に同じ反応条件下で、又は場合によって加熱を要することもあるが、式（ＩＩ）による中間産物［式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１５、Ｘ及びｎは上に定義した通りである］を提供する。
【０１１８】
式（Ｉａ）、即ち、式（Ｉ）［式中Ｒ２はＨである］のピラゾロ誘導体は、スキーム１に示すように、式（ＩＩ）の中間化合物の環化の後、好ましくはプロトン性溶媒中で、メタノール酸ナトリウム、イソプロパノール酸ナトリウムなどの塩基の存在下に、当業者に周知の標準的還流条件下に単離される。この反応は、上述のスキーム１に示すように、メタノール、エタノール、イソプロパノール、又は他の非反応性溶媒などの溶媒中で、室温（ただし、通常は、通例の加熱法又はマイクロウェーブ法を要する）で、式（ＩＩ）による化合物の内在的反応性に依存する時間に亘って、当業者に周知の標準条件を用いて実行してもよい。
【０１１９】
次の工程において、式（Ｉａ）のピラゾロピリジン誘導体は、アルキルクロリド、ブロミド、イオダイド、又はメシレートなどの、Ｒ２Ｗのアルキル化剤［式中、Ｒ２及びＷは上に定義した通りである］によって、適切な溶媒、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルフォルムアミド又はテトラヒドロフラン中の塩基として、例えば、トリエチルアミン、水素化ナトリウム、又は炭酸カリウムなどの適切な塩基の存在下に、従来の加熱法によって、又は、マイクロウェーブ技術を用いて処理された。それとは別に、式（Ｉａ）のピラゾロピリジン誘導体は、無水物、塩化アシル、又はカルボン酸［式中、Ｒ２は上に定義した通りである］によって、適切な溶媒、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルフォルムアミド又はテトラヒドロフランにおいて、例えば、トリエチルアミンなどの適切な塩基の存在下に、従来の加熱法によって、又は、マイクロウェーブ技術を用いて処理された。これらの処理プロセス後、式（Ｉｂ）によるピラゾロピリジン誘導体は、スキームに示すような、当業者には周知の標準的技術によって単離される。
【０１２０】
【化７】
2013505930.tif 000009
【０１２１】
もう一つの後続工程では、式（Ｉａ又はＩｂ）のピラゾロピリジン誘導体は、ｍ−クロロ過安息香酸又は酸素などの酸化剤によって、メソ−テトラフェニルポルフィンの存在下で、従来の加熱法によって、又は光化学技術を用いて処理された。この反応は、テトラヒドロフラン又はジクロロメタン、又は他の非活性溶媒などの溶媒において、室温で、式（Ｉａ又はＩｂ）による化合物の内在的反応性に依存する時間に亘って実行されてもよい。このプロセスの後、式（Ｉｃ又はＩｄ）によるピラゾロピリジン誘導体は、上のスキーム２に示すように、当業者に周知の標準的技術によって単離される。
【０１２２】
式（ＩＶ’）による一次アミン誘導体［式中、ＸはＮＣＨＲ１７Ｒ１８であり、置換基Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１７、Ｒ１８、及びｎは上に定義した通りである］は、式（ＸＩ）又は（Ｘ）の中間産物から１又は２段階の化学工程を経て、特注又は市販の、式（Ｘ）による置換されたアミン誘導体から、式（ＸＩＩ）によるアルデヒド又はケトン誘導体から、下記のスキーム３に略述した合成経路に従って調製することが可能である。
【０１２３】
【化８】
2013505930.tif 000010
【０１２４】
より特異的方法では、式（Ｘ）による置換されたアミン誘導体［式中、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１及びｎは上に定義した通りである］は、水素化ホウ素ナトリウムなどの還元剤の存在下、式（ＸＩＩ）によるアルデヒド又はケトン誘導体［式中、Ｒ１７、Ｒ１８は上に定義した通りである］と、ジクロロエタン、ジクロロメタン及びメタノール、又は他の非活性溶媒などの適切な溶媒において、式（ＸＩＩ）による化合物の内在的反応性に依存する時間に亘って反応させられて、式（ＸＩ）又は式（ＩＶ’）、即ち式（ＩＶ）による対応アミン誘導体［式中、ＸはＮＣＨＲ１７Ｒ１８．である］を提供する。式（ＸＩ）による中間化合物は更に、スキーム３に示すように当業者に周知の標準的技術を用い、ジオキサンなどの適切な溶媒中で塩酸によって処理されると、式（ＩＶ’）による一次アミン誘導体［式中、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１７、Ｒ１８及びｎは上に定義した通りである］が得られる。
【０１２５】
下記の略語は、それぞれ、以下の定義に基づく
A  （オングストローム），  Ａｃ２Ｏ  （無水酢酸），  ｅｑ．  （当量），  ｍｉｎ  （分），  ｈ  （時），  ｇ  （グラム），  ＭＨｚ  （メガヘルツ），  ｍＬ  （ミリリットル），  ｍｍ  （ミリメートル），  ｍｍｏｌ  （ミリモル），  ｍＭ  （ミリモル），  ｎｇ  （ナノグラム），  ｎｍ  （ナノメートル），  ｒｔ  （室温），  α−ＳＭＡ  （アルファ平滑筋アクチン），  ＢＬＭ  （ブレオマイシン），  ＢＳＡ  （牛血清アルブミン），  ＤＣＥ  （ジクロロエタン），  ＤＣＦ  （２，７−ジクロロジヒドロフルオロセイン），  ＤＣＭ  （ジクロロメタン），  ＤＥＰＣ  （ジエチルピロカルボネート），  ＤＩＰＥＡ  （ジ−イソプロピルエチラミン），  ＤＭＳＯ  （ジメチルスルフォキシド），  ＤＭＦ  （Ｎ，Ｎ−ジメチルフォルムアミド），  ＤＡＰＩ  （４，６  ジアミジノ−２−フェニルインドール），  ＤＰＩ  （ジフェニル−イオジニウム），  ｃＨｅｘ  （シクロヘキサン），  ＥＤＴＡ  （エチレンジアミン４酢酸），  ＥＧＦ  （上皮増殖因子），  ＥｔＯＡｃ  （酢酸エチル），  ＦＣ  （シリカゲル上フラッシュクロマトグラフィー），  ＧＡＰＤＨ  （グリセルアルデヒド３リン酸デヒドロゲナーゼ），  ＨＢＳＳ  （ハンクス緩衝塩類溶液），  ＨＰＬＣ  （高速液体クロマトグラフィー），  Ｈ２ＤＣＦ−ＤＡ  （２′，７′−ジクロロジヒドロフルオレセインジアセテート），  ＭＥＭ  （２−メトキシエトキシメチル），  ＭＳ  （質量分析），  ＭＯＰＳ  （３−（Ｎ−モルフォリノ）プロパンスルフォン酸），  ＮａＢＨ４  （水素化ホウ素ナトリウム），  ＮＡＤＰＨ  （ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドジフォスフェート還元形），  ＮＢＴ  （ニトロブルーテトラゾリウム），  ＮＭＲ  （核磁気共鳴），  ＰＢＳ  （リン酸緩衝生理的食塩水），  ＰｅｔＥｔｈｅｒ  （石油エーテル），  ＲＯＳ  （活性酸素種），  ＲＩＰＡ  （ラジオイムノ沈降バッファー），  ＳＤＳ  （ドデシル硫酸ナトリウム），  ＳＯＤ  （スーパーオキシドジスムターゼ），  ＳＰＡ  （シンチレーション近接アッセイ），  ｔＢｕＯＫ  （カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド），ＴＥＡ  （トリエチルアミン），  ＴＦＡ  （トリフルオロ酢酸），  ＴＧＦ−β  （腫瘍増殖因子ベータ），  ＴＨＦ  （テトラヒドロフラン），  ＴＬＣ  （薄層クロマトグラフィー），  ＴＲＩＳ  （トリスヒドロキシメチルアミノメタン），  ＵＶ  （紫外線）。
【０１２６】
もしも上記一組の一般的合成法が、式（Ｉ）による化合物、及び／又は式（Ｉ）の化合物の合成のために必要な中間産物を得るのに適用不能である場合には、当業者に公知の適切な調製法を用いなければならない。一般に、式（Ｉ）の個別化合物については、そのいずれの合成経路も、各分子の特定置換基、及び、必要中間産物の速やかな利用可能性に依存するが、これらの要因もまた当業者には了知される。全ての保護及び脱保護法に関しては、Ｐｈｉｌｉｐ  Ｊ．  Ｋｏｃｉｅｎｓｋｉ，  ｉｎ  “Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ（保護基）”，  Ｇｅｏｒｇ  Ｔｈｉｅｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ  Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ，  ２００５、及びＴｈｅｏｄｏｒａ  Ｗ．  Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐｅｔｅｒ  Ｇ．  Ｍ．  Ｗｕｔｓ  ｉｎ  “Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（有機合成における保護基）”，  Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，  ４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  ２００６を参照されたい。
【０１２７】
本発明の化合物は、溶媒分子と関連づけて、適切な溶媒の蒸発による結晶化によって単離することが可能である。塩基性中心を含む式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容可能な酸添加塩は、従来法によって調製することが可能である。例えば、遊離塩基の溶液は、適切な酸によって、純粋状態（ニート）又は適切な溶液状態において処理し、得られた塩は、ろ過、又は、反応溶媒の減圧蒸留によって単離してもよい。薬学的に許容可能な塩基添加塩も、同様にして、式（Ｉ）の化合物の溶液を適切な塩基によって処理することによって取得することが可能である。いずれのタイプの塩も、形成し、又は、イオン交換樹脂技術を用いることによって相互交換することが可能である。
【０１２８】
下記では、本発明が、いくつかの実施例に基づいて具体的に説明され、これらを、本発明の範囲を限定するものと見なしてはならない。
【０１２９】
後述の実施例に提示されるＨＰＬＣ、ＮＭＲ、及びＭＳのデータは、下記のようにして得られる：ＨＰＬＣ：カラムは、Ｗａｔｅｒｓ  Ｓｙｍｍｅｔｒｙ  Ｃ８  ５０  ｘ  ４．６  ｍｍ、条件：ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ、５から１００％  （８分），  ｍａｘ  ｐｌｏｔ  ２３０−４００  ｎｍ；質量分析スペクトラム：ＰＥ−ＳＣＩＥＸ  ＡＰＩ  １５０  ＥＸ  （ＡＰＣＩ及びＥＳＩ），  ＬＣ／ＭＳスペクトラム：  Ｗａｔｅｒｓ  ＺＭＤ  （ＥＳ）；  １Ｈ−ＮＭＲ：  Ｂｒｕｋｅｒ  ＤＰＸ−３００ＭＨｚ。
【０１３０】
予備的ＨＰＬＣ精製は、カラムＰｒｅｐ  Ｎｏｖａ−Ｐａｋ（登録商標）ＨＲ  Ｃ１８６  μｍ  ６０A，  ４０ｘ３０  ｍｍ  （最大  １００  ｍｇ）、又は、ＸＴｅｒｒａ（登録商標）  Ｐｒｅｐ  ＭＳ  Ｃ８，  １０  μｍ，  ５０ｘ３００  ｍｍ  （最大１ｇ）を装備した、ＨＰＬＣ  Ｗａｔｅｒｓ  Ｐｒｅｐ  ＬＣ  ４０００  Ｓｙｓｔｅｍによって実行される。全ての精製は、ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ  ０．０９％  ＴＦＡの勾配；２５４  ｎｍ  及び２２０  ｎｍにおけるＵＶ検出；流量  ２０  ｍＬ／分（最大５０  ｍｇ）によって行われる。ＴＬＣ分析は、Ｍｅｒｃｋ  Ｐｒｅｃｏａｔｅｄ  ６０  Ｆ２５４  プレートにおいて行われる。フラッシュクロマトグラフィーによる精製は、溶出液としてシクロヘキサン／ＥｔＯＡｃ  又はＤＣＭ／ＭｅＯＨ混合液を用いＳｉＯ２  支持体上で行う。
【０１３１】
実施例１：２−（２−クロロフェニル）−１０−（ピリジン−２−イルメチル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン（１）の形成  （化合物Ｉａ、スキーム１）
【０１３２】
【化９】
2013505930.tif 000011
【０１３３】
実施例３に略述される一般法に従って、２−クロロフェニルヒドラジン、ジメチル３−オキソペンタンジオエート、２−クロロ−１，１，１−トリエトキシエタン、３−プロパン−１，３−ジアミン、及び、ピリジン−２−カルバルデヒドを開始材料として、標記の化合物（１）を、黄色固体として３２％収率（９７％純度、ＨＰＬＣによる）で単離した。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ４２２．９．
【０１３４】
実施例２：１０−ベンジル−２−（２−メトキシフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン（２）の形成（化合物Ｉａ、スキーム１）
【０１３５】
【化１０】
2013505930.tif 000012
【０１３６】
実施例３に略述される一般法に従って、２−メトキシフェニルヒドラジン、ジメチル３−オキソペンタンジオエート、２−クロロ−１，１，１−トリエトキシエタン、３−プロパン−１，３−ジアミン、及び、ベンズルデヒドを開始材料として、標記の化合物（２）を、黄色固体として３２％収率（９４％純度、ＨＰＬＣによる）で単離した。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ４１７．７．
【０１３７】
実施例３：１０−ベンジル−２−（２−クロロフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン（３）の形成（化合物Ｉａ、スキーム１）
【０１３８】
【化１１】
2013505930.tif 000013
【０１３９】
ａ）  メチル［１−（２−クロロフェニル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−ピラゾル３−イル］アセテート  （式（ＶＩＩ）の化合物、スキーム１）
【０１４０】
【化１２】
2013505930.tif 000014
【０１４１】
無水トルエン（５０  ｍｌ）に分散させた２−クロロフェニルヒドラジン（１．８２  ｇ，  １０．１６  ｍｍｏｌ、１当量）の懸濁液に対し、ジイソプロピルエチルアミン（２．１  ｍｌ，  １２．１９  ｍｍｏｌ、１．２当量）、及びジメチル３−オキソペンタンジオエート（１．７７  ｇ，  １０．１６  ｍｍｏｌ、１当量）を続けて加えた。得られた混合物を、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ装置を用いて１３０−１４０°Ｃで加熱した（若干の含水トルエンを留去させた）。２時間後、ヒドラジン中間産物が明瞭に形成された。次に、更に別のジイソプロピルエチルアミン（２．１  ｍｌ，  １２．１９  ｍｍｏｌ、１．２当量）を加え、得られた混合物を、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ装置を用いて１４０°Ｃで加熱した。残留ヒドラジンの大部分は、この未精製混合物をトルエンで洗浄することによって除去することが可能である。得られた褐色油状物は、ＳｉＯ２．においてフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。純粋なメチル［１−（２−クロロフェニル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−ピラゾル３−イル］アセテート１．６５  ｇを黄色固体として取得した。収率６１％。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ２６７．８；  ＭＳ（ＥＳＩ−）：  ２６５．６．
【０１４２】
ｂ）  メチル［４−（クロロアセチル）−１−（２−クロロフェニル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−ピラゾル３−イル］アセテート（式（Ｖ）の化合物、スキーム１）
【０１４３】
【化１３】
2013505930.tif 000015
【０１４４】
上で得られたメチル［４−（クロロアセチル）−１−（２−クロロフェニル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−ピラゾル３−イル］アセテート（式（ＩＶ）の化合物、０．６０  ｇ）を、窒素下に、アセトニトリル（５  ｍＬ）及び氷酢酸（１４  ｍｇ、０．１当量）及び２−クロロ−１，１，１−トリエトキシエタン（１．５  ｇ）中に懸濁し、７０°Ｃで４５−６０分加熱した。得られた赤色溶液を減圧濃縮し赤色シロップを得、これを、シクロヘキサンで洗浄し、次いで減圧乾燥した。相対的不安定性のために、メチル［４−（クロロアセチル）−１−（２−クロロフェニル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−ピラゾル３−イル］アセテートのそれ以上の精製は実行しなかった（０．７７  ｇ、定量的収量）。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ３４４．３；  ＭＳ（ＥＳＩ−）：  ３４２．２．
【０１４５】
ｃ）  メチル［（４Ｚ）−４−（４−ベンジル−１，４−ジアゼパン−２−イリデン）−１−（２−クロロフェニル）−５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾル−３−イル］アセテート  （式（ＩＩ）の化合物、スキーム１）
【０１４６】
【化１４】
2013505930.tif 000016
【０１４７】
３  ｍＬのアセトニトリルに溶解した、上で得られたメチル［４−（クロロアセチル）−１−（２−クロロフェニル）−５−ヒドロキシ−１Ｈ−ピラゾル３−イル］アセテートの溶液（式（Ｖ）の化合物、１．８８  ｍｍｏｌ、１当量）に、摂氏ゼロ度において、Ｎ−ベンジルプロパン−１，３−ジアミン（０．２７７  ｍｇ、０．９当量）をゆっくりと加えた。この反応混合物を０°Ｃで０．５時間攪拌した。得られた溶液を、酢酸エチル／０．１％トリエチルアミンを用いシリカプラグによって精製した。溶媒は減圧留去して赤色固体を単離させた。このものは、純粋なメチル［（４Ｚ）−４−（４−ベンジル−１，４−ジアゼパン−２−イリデン）−１−（２−クロロフェニル）−５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾル−３−イル］アセテート（０．５３０  ｇ）であることが判明した。収率７１％。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ４５４．０．
【０１４８】
ｄ）  １０−ベンジル−２−（２−クロロフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン  （式（Ｉａ）の化合物、スキーム１）
窒素下、ナトリウム（０．０５５  ｇ，  ２．４  ｍｍｏｌ、２当量）をＭｅＯＨ（３  ｍｌ）に溶解することによって得られる、ＭｅＯＮａのイソプロパノイン酸液を、メチル［（４Ｚ）−４−（４−ベンジル−１，４−ジアゼパン−２−イリデン）−１−（２−クロロフェニル）−５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾル−３−イル］アセテート（式（ＩＩ）の化合物（５３０  ｍｇ，  １．２  ｍｍｏｌ、１当量）で処理した。この反応混合物を室温で０．５時間攪拌し、水（８  ｍＬ）で希釈し、１Ｍ  ＨＣｌ液を加えることによってｐＨ６に中和した。沈殿物をろ過採取し、減圧乾燥した。この粗製物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製したところ、１２９  ｍｇの純粋産物１０−ベンジル−２−（２−クロロフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオンが得られた。収率２６％。１ＨＮＭＲ  （５００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  １．６２−１．６８  （ｍ，  ２Ｈ）；  ２．８３  （ｔ，  ２Ｈ，  Ｊ＝７．５Ｈｚ）；  ３．６２−３．６６  （ｍ，  ２Ｈ）；  ４．４０−４．７６  （ｍ，  ２Ｈ）；  ５．７３  （ｓ，  １Ｈ）；  ７．２１−７．３２  （ｍ，  ５Ｈ）；  ７．４４−７．５０  （ｍ，  ２Ｈ）；  ７．５５−７．６０  （ｍ，  １Ｈ）；  ７．６１−７．６７  （ｍ，  １Ｈ）；  １０．７５−１０．６８  （ｂｓ，  １Ｈ）．    ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ４２１．９．
【０１４９】
実施例４：１０−（２−クロロベンジル）−２−（２−クロロフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン  （４）の形成（化合物Ｉａ、スキーム１）
【０１５０】
【化１５】
2013505930.tif 000017
【０１５１】
実施例３に略述される一般法に従って、２−クロロフェニルヒドラジン、ジメチル３−オキソペンタンジオエート、２−クロロ−１，１，１−トリエトキシエタン、３−プロパン−１，３−ジアミン、及び、２−クロロベンズアルデヒドを開始材料として、標記の化合物（４）を、黄色固体として２８％収率（９８％純度、ＨＰＬＣによる）で単離した。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ４５６．３；
【０１５２】
実施例５：２−（２−クロロフェニル）−１０−（３−メトキシベンジル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン  （５）の形成（化合物Ｉａ、スキーム１）
【０１５３】
【化１６】
2013505930.tif 000018
【０１５４】
実施例３に略述される一般法に従って、２−クロロフェニルヒドラジン、ジメチル３−オキソペンタンジオエート、２−クロロ−１，１，１−トリエトキシエタン、３−プロパン−１，３−ジアミン、及び、３−メトキシベンズアルデヒドを開始材料として、標記の化合物（５）を、黄色固体として３５％収率（９５％純度、ＨＰＬＣによる）で単離した。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ４５１．９．
【０１５５】
実施例６：１０−（３−クロロベンジル）−２−（２−クロロフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン  （６）の形成（化合物Ｉａ、スキーム１）
【０１５６】
【化１７】
2013505930.tif 000019
【０１５７】
実施例３に略述される一般法に従って、２−クロロフェニルヒドラジン、ジメチル３−オキソペンタンジオエート、２−クロロ−１，１，１−トリエトキシエタン、３−プロパン−１，３−ジアミン、及び、３−クロロベンズアルデヒドを開始材料として、標記の化合物（６）を、黄色固体として３２％収率（９８％純度、ＨＰＬＣによる）で単離した。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ４５６．４；
【０１５８】
実施例７：２−（２−クロロフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン  （７）の形成（化合物Ｉａ、スキーム１）
【０１５９】
【化１８】
2013505930.tif 000020
【０１６０】
実施例３に略述される一般法に従って、２−クロロフェニルヒドラジン、ジメチル３−オキソペンタンジオエート、２−クロロ−１，１，１−トリエトキシエタン、及び３−プロパン−１，３−ジアミンを開始材料として、標記の化合物（７）を、黄色固体として２４％収率（９８％純度、ＨＰＬＣによる）で単離した。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ３３１．９．
【０１６１】
実施例８：ｔｅｒｔ−ブチル  ２−（２−クロロフェニル）−１，５−ジオキソ−２，３，５，８，９，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１０（７Ｈ）−カルボキシレート  （８）の形成（化合物Ｉａ、スキーム１）
【０１６２】
【化１９】
2013505930.tif 000021
【０１６３】
実施例３に略述される一般法に従って、２−クロロフェニルヒドラジン、ジメチル３−オキソペンタンジオエート、２−クロロ−１，１，１−トリエトキシエタン、３−プロパン−１，３−ジアミン、及びジ−ｔｅｒｔ−ブチルカーボネートを開始材料として、標記の化合物（８）を、黄色固体として３６％収率（９７％純度、ＨＰＬＣによる）で単離した。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ４３１．９．
【０１６４】
実施例９：１０−（４−クロロベンジル）−２−（２−クロロフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン  （９）の形成（化合物Ｉａ、スキーム１）
【０１６５】
【化２０】
2013505930.tif 000022
【０１６６】
実施例３に略述される一般法に従って、２−クロロフェニルヒドラジン、ジメチル３−オキソペンタンジオエート、２−クロロ−１，１，１−トリエトキシエタン、３−プロパン−１，３−ジアミン、及び４−クロロベンズアルデヒドを開始材料として、標記の化合物（９）を、黄色固体として３０％収率（９８％純度、ＨＰＬＣによる）で単離した。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ４５６．４．
【０１６７】
実施例１０：２−（２−クロロフェニル）−１０−（２−メトキシベンジル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン  （１０）の形成（化合物Ｉａ、スキーム１）
【０１６８】
【化２１】
2013505930.tif 000023
【０１６９】
実施例３に略述される一般法に従って、２−クロロフェニルヒドラジン、ジメチル３−オキソペンタンジオエート、２−クロロ−１，１，１−トリエトキシエタン、３−プロパン−１，３−ジアミン、及び２−メトキシベンズアルデヒドを開始材料として、標記の化合物（１０）を、黄色固体として３３％収率（９４％純度、ＨＰＬＣによる）で単離した。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ４５１．９．
【０１７０】
実施例１１：２−（２−クロロフェニル）−１０−（４−メトキシベンジル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヘドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン  （１１）の形成（化合物Ｉａ、スキーム１）
【０１７１】
【化２２】
2013505930.tif 000024
【０１７２】
実施例３に略述される一般法に従って、２−クロロフェニルヒドラジン、ジメチル３−オキソペンタンジオエート、２−クロロ−１，１，１−トリエトキシエタン、３−プロパン−１，３−ジアミン、及び４−メトキシベンズアルデヒドを開始材料として、標記の化合物（１１）を、黄色固体として３２％収率（９６％純度、ＨＰＬＣによる）で単離した。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ４５１．９．
【０１７３】
実施例１２：２−（２−クロロフェニル）−１０−（フラン−３−イルメチル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン  （１２）の形成（化合物Ｉａ、スキーム１）
【０１７４】
【化２３】
2013505930.tif 000025
【０１７５】
実施例３に略述される一般法に従って、２−クロロフェニルヒドラジン、ジメチル３−オキソペンタンジオエート、２−クロロ−１，１，１−トリエトキシエタン、３−プロパン−１，３−ジアミン、及びフラン−３−カルバルデヒドを開始材料として、標記の化合物（１２）を、黄色固体として３２％収率（９５％純度、ＨＰＬＣによる）で単離した。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ４１１．９．
【０１７６】
実施例１３：９−ベンジル−２−（２−クロロフェニル）−２，３，７，８，９，１０−ヘキサヒドロピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］ピラジン−１，５−ジオン  （１３）の形成（化合物Ｉａ、スキーム１）
【０１７７】
【化２４】
2013505930.tif 000026
【０１７８】
実施例３に略述される一般法に従って、２−クロロフェニルヒドラジン、ジメチル３−オキソペンタンジオエート、２−クロロ−１，１，１−トリエトキシエタン、及びＮ−ベンジルエタン−１，２−ジアミンを開始材料として、標記の化合物（１３）を、黄色固体として１８％収率（９０％純度、ＨＰＬＣによる）で単離した。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ４０８．０．
【０１７９】
実施例１４：２−（２−クロロフェニル）−２，３，７，８−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［２，１−ｃ］［１，４］オキサジン−１，５（１０Ｈ）−ジオン（１４）の形成（化合物Ｉａ、スキーム１）
【０１８０】
【化２５】
2013505930.tif 000027
【０１８１】
実施例３に略述される一般法に従って、２−クロロフェニルヒドラジン、ジメチル３−オキソペンタンジオエート、２−クロロ−１，１，１−トリエトキシエタン、及び２−アミノエタノールを開始材料として、標記の化合物（１４）を、黄色固体として３５％収率（９１％純度、ＨＰＬＣによる）で単離した。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ３１８．８．
【０１８２】
実施例１５：２−（２−メトキシフェニル）−１０−（ピリジン−２−イルメチル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン  （１５）の形成（化合物Ｉａ、スキーム１）
【０１８３】
【化２６】
2013505930.tif 000028
【０１８４】
実施例３に略述される一般法に従って、２−メトキシフェニルヒドラジン、ジメチル３−オキソペンタンジオエート、２−クロロ−１，１，１−トリエトキシエタン、３−プロパン−１，３−ジアミン、及びピリジン−２−カルバルデヒドを開始材料として、標記の化合物（１５）を、黄色固体として３０％収率（９４％純度、ＨＰＬＣによる）で単離した。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ４１８．６．
【０１８５】
実施例１６：１０−（３−メトキシベンジル）−２−（２−メトキシフェニル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン（１６）の形成（化合物Ｉａ、スキーム１）
【０１８６】
【化２７】
2013505930.tif 000029
【０１８７】
実施例３に略述される一般法に従って、２−メトキシフェニルヒドラジン、ジメチル３−オキソペンタンジオエート、２−クロロ−１，１，１−トリエトキシエタン、３−プロパン−１，３−ジアミン、及び３−メトキシベンズアルデヒドを開始材料として、標記の化合物（１６）を、黄色固体として３３％収率（９７％純度、ＨＰＬＣによる）で単離した。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ４４７．６；．
【０１８８】
実施例１７：２−（２−クロロフェニル）−１０−［（１−メチル−１Ｈ−ピラゾル−３−イル）メチル］−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン  （１７）の形成（化合物Ｉａ、スキーム１）
【０１８９】
【化２８】
2013505930.tif 000030
【０１９０】
実施例３に略述される一般法に従って、２−クロロフェニルヒドラジン、ジメチル３−オキソペンタンジオエート、２−クロロ−１，１，１−トリエトキシエタン、３−プロパン−１，３−ジアミン、及び１−メチル−１Ｈ−ピラゾル−３−カルバルデヒドを開始材料として、標記の化合物（１７）を、黄色固体として２９％収率（９３％純度、ＨＰＬＣによる）で単離した。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ４２５．９．
【０１９１】
実施例１８：２−（２−クロロフェニル）−１０−（ピリジン−３−イルメチル）−２，３，８，９，１０，１１−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４’，３’：３，４］ピリド［１，２−ａ］［１，４］ジアゼピン−１，５（７Ｈ）−ジオン  （１８）の形成（化合物Ｉａ、スキーム１）
【０１９２】
【化２９】
2013505930.tif 000031
【０１９３】
実施例３に略述される一般法に従って、２−クロロフェニルヒドラジン、ジメチル３−オキソペンタンジオエート、２−クロロ−１，１，１−トリエトキシエタン、３−プロパン−１，３−ジアミン、及びピリジン−３−カルバルデヒドを開始材料として、標記の化合物（１８）を、黄色固体として３０％収率（９８％純度、ＨＰＬＣによる）で単離した。ＭＳ（ＥＳＩ＋）：  ４２２．９．
【０１９４】
実施例１９：種々の細胞培養体における活性酸素種レベルの測定
本発明による化合物の活性は、細胞酸素由来の活性酸素種（ＲＯＳ）の形成に対する抑制又は減少におけるその活性について試験することが可能である。本化合物の活性は、下記の細胞培養体において、種々の技術、例えば、ニトロブルーテトラゾリウム、Ａｍｐｌｅｘ  Ｒｅｄ、ケミルミネセンス（Ｌｕｍｉｎｏｌ）、及び、２’，７’−ジクロロジヒドロフルオレセインジアセテート（Ｈ２ＤＣＦ−ＤＡ）を下記に詳述するプロトコールに従って用いて試験される。
【０１９５】
ヒト・ミクログリア細胞系統
ヒトのミクログリア細胞系統（ＭＨＣ３、ヒト・ミクログリアクローン３）（Ｊａｎａｂｉ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９５，  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．  Ｌｅｔｔ．  １９５：１０５）を、５０  Ｕ／ｍｌのペニシリンＧナトリウム、５０  μｇ／ｍｌの硫酸ストレプトマイシン添加の１０％  ＦＢＳを含むＭＥＭ（イーグルの最少必須培地）において培養し、３７°Ｃで２４時間インキュベートした。ＩＦＮ−γ（ヒトのＩＦＮ−γ、Ｒｏｃｈｅ、１１  ０４０  ５９６  ００１）を、培養液に、最終濃度が１０  ｎｇ／ｍｌ  ２４時となるように加え、次いで、Ｏ２−  形成を検出した。
【０１９６】
ヒト臍静脈の内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）
ＨＵＶＥＣを、ハイドロコーチゾン（１  μｇ／ｍＬ、ＣａｌｂｉｏＣｈｅｍ）、牛脳抽出物（１２  μｇ／ｍＬ）、ゲンタマイシン（５０  μｇ／ｍＬ，  ＣａｌｂｉｏＣｈｅｍ）、アンフォテリシンＢ（５０  ｎｇ／ｍＬ，  ＣａｌｂｉｏＣｈｅｍ）、ＥＧＦ（１０  ｎｇ／ｍＬ）、及び１０％  ＦＣＳを添加した内皮基礎培地において第４継代まで培養した。第５継代を開始する時、細胞は、別様に指示しない限り、ＥＧＦ無添加下、より低い濃度（２％）のＦＣＳによって培養した。全ての実験は、第５継代細胞について行った。細胞は、コントロールとしてＯｘＬＤＬ（酸化低密度リポタンパク）又はそのバッファーと共にインキュベートし、次いで、Ｏ２−  形成を検出した。
【０１９７】
ＨＬ−６０細胞
ヒトの急性骨髄性白血病細胞系統ＨＬ−６０を、１０％熱不活性化牛血清、２  ｍＭグルタミン、１００  Ｕ／ｍＬペニシリン（Ｓｉｇｍａ）、及び１００  μｇのストレプトマイシン（Ｓｉｇｍａ）を添加したＲＰＭＩ  １６４０（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）において３７°Ｃで、５％  ＣＯ２の加湿雰囲気下に培養した。ＨＬ６０の、好中球表現形への分化は、培養液にＭｅ２ＳＯ  （最終濃度１．２５％  ｖ／ｖ、６日間）を加えることによって誘発した。
【０１９８】
１．ニトロブルーテトラゾリウム（ＮＢＴ）
細胞内及び細胞外スーパーオキシドは、定量的ニトロブルーテトラゾリウム（ＮＢＴ）試験を用い比色技術によって測定した。スーパーオキシド陰イオンの存在下における、ＮＢＴから青色の微粒子沈殿であるフォルマザンへの変換はＳＯＤ抑制が可能であるが、これは、Ｆｌｕｓｔａｒ  Ｏｐｔｉｍａ分光光度計（ＢＭＧ  ｌａｂｔｅｃｈ）を用いて測定した。適切な刺激と共にインキュベートした後、細胞は、トリプシン処理（１Ｘ  Ｔｒｙｐｓｉｎ−ＥＤＴＡ）し、遠心によって収集し、ＰＢＳによって洗浄して培養液を取り去った。５  Ｘ  １０５  細胞を４８ウェルプレートに撒き、本発明による化合物の存在下又は不在下に、８００  Ｕ／ｍＬ  ＳＯＤの添加又は添加無しで、０．５  ｍｇ／ｍＬ  ＮＢＴを含むハンクスの平衡塩類溶液中でインキュベートした。コントロールとして、ＤＰＩを、１０  μＭの最終濃度において含めた。２．５時間後、細胞を固定し、メタノールで洗浄し、非還元ＮＢＴを除去した。次に、還元フォルマザンを、２３０  μｌの２Ｍ水酸化カリウム、及び２８０  μｌのジメチルスルフォキシドに溶解した。吸収は６３０  ｎｍにおいて測定した。計算のために、６３０  ｎｍにおける吸収は、各個別ウェルについて正規化した。各時点において、各補正値から、４個のブランク値の平均を差し引いた。ＮＯＸ活性は、コントロール細胞の活性の％として表した。ＤＰＩ−処理細胞の残留活性は通常＜１０％であった。
【０１９９】
２．Ａｍｐｌｅｘ  Ｒｅｄ
細胞外過酸化水素は、Ａｍｐｌｅｘ  Ｕｌｔｒａｒｅｄ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ）を用いて測定した。細胞は、トリプシン処理（１Ｘ  Ｔｒｙｐｓｉｎ−ＥＤＴＡ）し、遠心によって収集し、１％グルコースを添加したＨＢＳＳによって再懸濁した。細胞は、黒色９６ウェルプレートに、本発明による化合物の存在下又は不在下に、２００  μｌの試験バッファー（０．００５  Ｕ／ｍＬの西洋ワサビペルオキシダーゼ（Ｒｏｃｈｅ）、及び５０  μＭ  Ａｍｐｌｅｘ  Ｒｅｄを含むＨＢＳＳ  １％グルコース）に対し５０，０００細胞の密度で撒いた。コントロールとして、ＤＰＩを、１０  μＭの最終濃度において含めた。プレートは、Ｏｐｔｉｍａ  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔプレートリーダーに納め、３７°Ｃで２０分維持した。蛍光は、励起波長及び発光波長を、それぞれ、５４４  ｎｍ及び５９０  ｎｍとして１５分測定した。ＮＯＸ活性は、コントロール細胞の活性の％として表した。ＤＰＩ−処理細胞の残留活性は通常＜１０％であった。
【０２００】
下記の表１は、上述のように、ＤＭＳＯ差別化ＨＬ６０細胞を用いＡｍｐｌｅｘ  Ｒｅｄによって測定したＮＯＸ活性の抑制パーセントを要約したものである。
【０２０１】
【表１】
2013505930.tif 000032
【０２０２】
下記の表２は、上述のように、ＤＭＳＯ差別化ＨＬ６０細胞を用いＡｍｐｌｅｘ  Ｒｅｄによって測定したＮＯＸ活性のＩＣ５０を要約したものである。
【０２０３】
【表２】
2013505930.tif 000033
【０２０４】
３．ケミルミネセンス（Ｌｕｍｉｎｏｌ）
ＲＯＳは、ケミルミネセンスプローブのルミノールを用いて測定した。細胞は、Ａｍｐｌｅｘ  Ｒｅｄ剤を１０  μｇ／ｍＬのルミノール（Ｓｉｇｍａ  ０９２３５）で置き換えたことを除き、Ａｍｐｌｅｘ  Ｒｅｄの場合と同様に培養した。発光は、ＦｌｕｏＳｔａｒ  Ｏｐｔｉｍａ蛍光プレートリーダーの蛍光機能を用い３７°Ｃで６０分連続記録した。各時点において、各補正値から、４個のブランク値の平均を差し引いた。ＮＯＸ活性は、コントロール細胞の活性の％として表した。ＤＰＩ−処理細胞の残留活性は通常＜１０％であった。
【０２０５】
４．  ２′，７′−ジクロロジヒドロフルオレセインジアセテート（Ｈ２ＤＣＦ−ＤＡ）  
ＨＵＶＥＣは、カバースリップに撒き、０．５％  ＢＳＡにおいて一晩休止させ、次いで、ＴＧＦ−βによって刺激した。細胞に対し、暗黒下、本発明による化合物の存在下又は不在下に、フェノールレッド非含有培養液において５  μＭ  ＣＭ−Ｈ２ＤＣＦＤＡを１０分間負荷した。次に、細胞を、固定後、ＤＡＰＩによって核を染色した後免疫蛍光顕微鏡検査によって可視化するか、又は、共焦点顕微鏡検査によって生きた状態で調べた。ＤＣＦ蛍光は、４８８  ｎｍの励起波長及び５１５から５４０  ｎｍの発光波長において可視化した。指示染料の光酸化を避けるために、画像は、全てのサンプルについて同じパラメータによる単一高速スキャンによって収集した。計算のために、５４０  ｎｍにおける吸収は、各個別ウェルの５４０  ｎｍにおける吸収について正規化した。各時点において、各補正値から、４個のブランク値の平均を差し引いた。ＮＯＸ活性は、コントロール細胞の活性の％として表した。ＤＰＩ−処理細胞の残留活性は通常＜１０％であった。
【０２０６】
実施例２０：自発的高血圧ラット（ＳＨＲ）における血圧測定
本発明の化合物の、高血圧症治療能力を試験するために、下記のアッセイを実行する。
収縮期血圧が１７０  ｍｍＨｇを上回る、１１週齢のＳＨＲを用いる。本発明による化合物は、ラットに対し、約３、１０、３０、及び１００  ｍｇ／ｋｇの用量で１０：００から１２：００において経口的に投与される。１日間の動的分析を実行するために、平均血圧、収縮及び拡張血圧、及び心拍数を、本発明による化合物の第１投与後、２、４、６、８、及び２４時間後に監視する。その後、血圧を、二日置きに２週間、午前中及び２４時間時点、及び化合物の半減期において監視する。
【０２０７】
最後の注射後、２４時間時点が監視される。動物は、化合物の消失を監視するために、更にもう１週間治療無しでコントロールとして扱われる。動物は、２週間１日１回、胃管栄養用の特別注入針によって５  ｍｌ／ｋｇで処置される。動物は、使用前、２週間馴化され、更に１週間訓練される。血圧は、覚醒ラットにおいて、尾部血管カフプレチスモグラフィー（Ｃｏｄａｓ  ６，  Ｋｅｎｔ）によって測定する。動物は、数日間の訓練後群に分けられるが、ＳＢＰの変動性は≦４０  ｍｍＨｇ、即ち、＋／−  ２０  ｍｍＨｇであった。基礎測定は、少なくとも実験の二日前に行った。実験の開始前、均一な群を構築するために、動物はランダム化した。
【０２０８】
実施例２１：マウスにおけるブレオマイシン誘発性肺傷害
本発明による化合物の、呼吸器障害又は疾患の予防又は治療能力を試験するために、下記のアッセイを実行する。
特発性肺線維症などの呼吸器障害又は疾患に見られるものに相当する肺病巣を惹起するために、致死量未満のブレオマイシン（ＢＬＭ）単一用量（１匹のマウス当たり、４０  μｌの０．９％  ＮａＣｌに溶解した０．０１２５ＵＩ）を動物の気管内に投与する。コントロール動物も同じプロトコールに従って処置したが、ただし、ＢＬＭの代わりに同じ容量の気管内生理的食塩水を投与した。気管内注入は、ケタミン（８０  ｍｇ／体重ｋｇ、ｉ．ｐ．）及びキシラジン（２０  ｍｇ／体重ｋｇ、ｉ．ｐ．）の麻酔下に行う。気管内ＢＬＭ又は生理的食塩水投与の５週後、致死量のペントバルビタールナトリウムの注入後に腹大動脈を瀉血することよって動物を殺した。肺は、重量測定し、後述するように、生化学検査用（群当たりｎ＝１０肺）及び組織学検査用（群当たりｎ＝５肺）に別々に処理した。動物は、４群にランダムに分類した：コントロール−生理的食塩水（ｎ＝８）及びコントロール＋ＢＬＭ（ｎ＝１５）；化合物用量１＋ＢＬＭ（ｎ＝１５）及び化合物用量２＋ＢＬＭ（Ｎ＝１５）。治療ベヒクル又は化合物は５週間投与する。
【０２０９】
マウスは、予防モデルでは０日から始めて５週間、治療モデルでは１０日目から始めて５週まで、本発明による化合物、又は、生理的食塩水／コントロールを毎日経口投与することによって処置する。酸可溶性コラーゲンの肺全体における沈着をＳｉｒｃｏｌアッセイによって分析する。
【０２１０】
予防モデル
大筋で上述のプロコールに従った。０日目、動物に対し、肺病巣を惹起するために、０．０１２５  ＵＩのブレオマイシン（２０  μｌ）を気管内に注入した。予防処置群には、本発明の化合物をやはり０日目から始めて１日１回５週間経口投与した。動物は、４群にランダムに分類した：コントロール−生理的食塩水（ｎ＝１１）；コントロール＋ＢＬＭ（ｎ＝１２）；本発明の化合物３の４０  ｍｇ／ｋｇ経口投与＋ＢＬＭ（ｎ＝１２）；及びＰｉｒｆｅｎｉｄｏｎｅ（ＡＱＣＨＥＭ，  ｒｅｆ  Ｐ１００２）（肺、腎臓、及び肝臓を含む多発性線維症病態に対する活性が知られる抗線維症剤）の１００  ｍｇ／ｋｇ経口投与＋ＢＬＭ（ｎ＝１２）、である。ＢＬＭ又は生理的食塩水の気管内投与後３５日目、動物を殺し、肺を、ＳＩＲＣＯＬアッセイ（ＴｅｂｕＢｉｏ，  ｒｅｆ  Ｓ１０００）によるコラーゲン沈着及び肺炎症の定量化のために、上述のように処理した。４０  ｍｇ／ｋｇの用量における化合物３は、ブレオマイシンコントロールに比べ、コラーゲン沈着を４６％抑制することが可能であり、その程度は１００  ｍｇ／ｋｇのＰｉｒｆｅｎｉｄｏｎｅ（４５％）のものに匹敵する。
【０２１１】
治療モデル
大筋で上述のプロコールに従った。０日目、動物に対し、肺病巣を惹起するために、０．０１２５  ＵＩのブレオマイシン（４０  μｌ）を気管内に注入した。治療処置群には、本発明の化合物を１０日目乃至３５日目から始めて１日１回３．５週間経口投与した。動物は、６群にランダムに分類した：コントロール−生理的食塩水（ｎ＝８）；コントロール＋ＢＬＭ（ｎ＝１３）が２群；本発明の化合物３の４０  ｍｇ／ｋｇ経口投与＋ＢＬＭ（ｎ＝１３）；本発明の化合物３の１０  ｍｇ／ｋｇ経口投与＋ＢＬＭ（ｎ＝１３）；及びＰｉｒｆｅｎｉｄｏｎｅ（ＡＱＣＨＥＭ，  ｒｅｆ  Ｐ１００２）の１００  ｍｇ／ｋｇ経口投与＋ＢＬＭ（ｎ＝１３）、である。一方のブレオマイシンコントロール群は１０日目で停止し、動物を殺し、コラーゲンレベルを測定した。他の群については、ＢＬＭ又は生理的食塩水の気管内投与後３５日目、動物を殺し、肺を、上述のようにＳＩＲＣＯＬアッセイによるコラーゲン沈着及び肺炎症の定量化のために、上述のように処理した。４０  ｍｇ／ｋｇ及び１０  ｍｇ／ｋｇの用量における化合物３は、ブレオマイシンコントロールに比べ、それぞれ、コラーゲン沈着を５２％及び６４％抑制することが可能であり、その程度は、１００  ｍｇ／ｋｇのＰｉｒｆｅｎｉｄｏｎｅ（１２％）よりもはるかに高い。
従って、これらの結果は、肺線維症などの呼吸器障害又は疾患に対する、本発明の化合物の予防及び治療作用を強力に支持する。
【０２１２】
実施例２２：癌の動物モデル
本発明による化合物の癌治療能力、特に、腫瘍成長及び／又は血管形成の抑制能力を試験するために、下記のアッセイを実行する。
【０２１３】
インビボ血管形成アッセイ
７から１０週齢のＣ５７ＢＬ６／Ｊ雌性マウスに、５００  ｎｇ／ｍｌの血管形成因子（ｂ−ＦＧＦ又はＶＥＧＦ）を添加したＭａｔｒｉｇｅｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｒｅｄｕｃｅｄ、４００  μｌを皮下に注入した。移植１週後、ＭｉｃｒｏＣＴ（Ｓｋｙｓｃａｎ）を用いてマウスをスキャンした。血管密度を可視化するために、マウスの後眼窩にトレーサー（４００  μｌのヨード化リポソーム）を注入した。次に、スキャン画像をＲｅｃｏｎプログラムによって再構成し、プラグの灰色密度を、プラグの全スライドについてカウントした。本発明の化合物は、適切な用量１及び２において、経口ルートを通じて１日１回１０日間経口投与される。結果は、灰色密度として表され、これは、血管密度と相関される。更に、Ｍａｔｒｉｇｅｌプラグを凍結し、血管を可視化するためにＣＤ３１について染色する。
【０２１４】
腫瘍成長アッセイ
５  ．１０５  ルイスの肺上皮癌細胞（ＬＬＣＩ）を、マウスの背部の皮下に注入する。マウスを、本発明による化合物４０  ｍｇ／ｋｇを毎日経口投与することによって処置する。コントロール腫瘍が約１  ｃｍ長に達した時点で、マウスを屠殺し、腫瘍を回収し、重量測定し、凍結する。治療アッセイでは、マウスにＬＬＣＩ細胞を注入し、腫瘍が約０．５  ｃｍに達してから、マウスを治療し、腫瘍サイズを毎日評価する。屠殺後、腫瘍を凍結し、腫瘍薄片を抗ＣＤ３１抗体によって染色し、ＲＯＳレベルを分析する。
【０２１５】
実施例２３：ヒトの肺線維芽細胞（ＩＭＲ−９０）に対する作用
本発明による化合物の、呼吸器障害又は疾患の予防又は治療能力を試験するために、下記のアッセイを実行する。
【０２１６】
α−ＳＭＡタンパクの発現
本発明の化合物の活性は、ヒトの肺線維芽細胞から筋線維芽細胞へ移行する、ＴＧＦβ誘発性分化に対する、該化合物の作用を、ＩＭＲ−９０細胞におけるα−ＳＭＡタンパクを定量することによって調べる。
ＩＭＲ−９０細胞（ＡＴＣＣ（ＬＧＣ）、ｒｅｆ  ＡＴＣＣ−ＣＣＬ−１８６）は、１０％の牛胎児血清（ＦＣＳ）を添加したイーグルの最少必須培地（ＥＭＥＭ）において、５％  ＣＯ２添加空気３７°Ｃで培養した。７５−８０％集密度に達した細胞は、トリプシン−ＥＤＴＡ混合物を用いて継代させた。細胞は、６ウェルプレートに、ウェル当たり２００，０００細胞の密度で撒き、１０％  ＦＣＳを添加したＥＭＥＭにおいて２４時間培養した。次に、細胞は、培養液をＦＣＳ無添加ＥＭＥＭで置換することによって飢餓に曝した。２４時間後、細胞を本発明による化合物（０．１、１、及び１０  μＭ）によって処置した。１時間後、細胞は、ＴＧＦβ（２．５  ｎｇ／ｍｌ）に４８時間暴露した。化合物及びＴＧＦβ保存液はＥＭＥＭで調製した。培養液中のＤＭＳＯ濃度は、最終的に１％であった。コントロールはベヒクル（ＤＭＳＯ）で処置した。収集の当日、細胞は、氷冷ＰＢＳで洗浄し、プロテアーゼインヒビター（Ｃｏｍｐｌｅｔｅ，  Ｒｏｃｈｅ）を添加したＰＢＳ  １．１  ｍｌにおいて細胞スクレーパーによって剥がしてバラバラにした。細胞は、１０，０００  ｘ  ｇにおいて４°Ｃで１０分遠心した。細胞ペレットは、プロテアーゼインヒビター（Ｃｏｍｐｌｅｔｅ，  Ｍｉｎｉ  Ｐｒｏｔｅａｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  Ｃｏｃｋｔａｉｌ  Ｔａｂｌｅｔｓ，  Ｒｏｃｈｅ  ｒｅｆ  １１８３６１５３００１、プロテアーゼインヒビターのリストは、供給者に請求することによって入手が可能）を添加した、ＲＩＰＡ分解バッファー（Ｓｉｇｍａ）（１５０  ｍＭ  ＮａＣｌ，  １．０％  ＩＧＥＰＡＬ(R)  ＣＡ−６３０，  ０．５％デオシキコール酸ナトリウム、  ０．１％  ＳＤＳ，  ５０  ｍＭ  Ｔｒｉｓ，  ｐＨ  ８．０）６５  μｌにおいてホモジェナイズし、短時間超音波処理した。分解産物は凍結し、分析するまで−８０°Ｃにおいて保存した。溶液中のタンパクは、Ｂｒａｄｆｏｒｄアッセイ（Ｓｉｇｍａ，  ｒｅｆ  Ｂ６９１９）によって測定し、ＲＩＰＡバッファー及び負荷バッファー（Ｔｒｉｓ−ｂａｓｅ  ０．３１  Ｍ，  グリセロール１０％，  ＳＤＳ  ２％，  β−メルカプトエタノール５％、ブロモフェノールブルー０．００２％）の混合液中で、最終濃度が０．２５  μｇ／μｌとなるように希釈した。サンプルは、９５°Ｃで５分間加熱し、タンパクは、定圧（２００  Ｖ、６０分）下、ＮｕＰａｇｅ  １２％  Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓゲル、及び、ＭＯＰＳ走行バッファー（５０  ｍＭ  ＭＯＰＳ，  ５０  ｍＭ  Ｔｒｉｓ，  ３．５  ｍＭドデシル硫酸ナトリウム、０．８  ｍＭ  ＥＤＴＡ）を用いて分離した。タンパクは、定圧下（３５  Ｖ）、Ｔｒａｎｓｆｅｒバッファー（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用い、湿潤条件下に、再水和ニトロセルロース膜に７５分間移送させた。膜は、ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ（０．０５％  Ｔｗｅｅｎ）に溶解した５％脂肪非含有乾燥ミルクによってブロックした。ブロック後、膜は、３％乾燥ミルク及びＰＢＳ−Ｔで希釈した一次抗体（抗−α−ＳＭＡ）と共に一晩インキュベートした。抗−α−ＳＭＡ抗体（ＲｎＤｓｙｓｔｅｍ，  ＭＡＢ１４２０）は１：３０００に希釈した。次に、膜は、ＰＢＳで濯ぎ、各レーンにおけるタンパクの等しい負荷を実証するために、３％乾燥ミルク及びＰＢＳ−Ｔにおいて１／３，０００に希釈したＧＡＰＤＨ一次抗体（ＳａｎｔａＣｒｕｚ，  ｓｃ４７７２４）と共に１時間インキュベートした。次に、膜は、ＰＢＳ−Ｔで洗浄し、西洋ワサビペルオキシダーゼ接合ヤギ抗マウスＩｇＧ（１：４，０００）によって探査した。３回目の洗浄を実行し、ブロットを、ケミルミネセンス（ＥＣＬ；Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，  バッキンガムシャイア、英国）によって現像した。オートラジオグラムは、画像スキャナーによってスキャンし、パブリックドメインＮＩＨ  ＩｍａｇｅＪ  プログラム（
1333521889218_1
；  Ｖｉｔｔａｌ，  ２００７，  ＪＰＥＴ；  ３２１：３５−４４）使用の画像分析によって処理した。データは、任意のデンシトメトリ単位で取得し、これを、同じブロットにおいて可視化されたコントロールサンプルのスキャンによって得られたデンシトメトリレベルのパーセントに変換した。α−ＳＭＡの強度は、ＧＡＰＤＨの強度に対して相関させた。データは、平均±ＳＥＭとして表し、２群間の統計比較は、スチューデントのｔ−検定によって行った。
【０２１７】
ＨＳＰ−４７タンパクの発現
本発明の化合物の活性は、ヒトの肺線維芽細胞から筋線維芽細胞へ移行する、ＴＧＦβ誘発性分化に対する、該化合物の作用を、ＩＭＲ−９０細胞におけるＨＳＰ−４７タンパクの発現を定量することによって調べる。
ＩＭＲ−９０細胞は、上に示したように、培養され、撒かれ、絶食され、且つ、本発明による化合物によって処置された。
収集の当日、細胞を上に示したように処理した。ブロック後、膜を前述のように一晩インキュベートした。抗Ｈｓｐ４７抗体（Ａｂｃａｍ，  ａｂ１３５１０）を１：３０００に希釈した。次に、膜は前述のように濯いだ。オートラジオグラムは、前述のように分析した。Ｈｓｐ４７の強度は、ＧＡＰＤＨの強度に対して相関させた。
【０２１８】
化合物３は、ヒトの筋線維芽細胞分化（α−ＳＭＡ）及び細胞外基質沈着（ＨＳＰ４７）から成るバイオマーカーを、０．１−２０  μＭの濃度範囲（それぞれ、２１から５１％及び８９から７７％）において抑制することができた。従って、これらの結果は、肺線維症などの線維症機序に与る障害又は疾患に対する、本発明の化合物３の効果を強力に支持する。
【０２１９】
Ｃｏｌ３ａ  ｍＲＮＡレベル
本発明の化合物の活性は、ヒトの肺線維芽細胞から筋線維芽細胞へ移行する、ＴＧＦβ誘発性分化に対する、該化合物の作用を、ＩＭＲ−９０細胞におけるＣｏｌ３ａ  ｍＲＮＡレベルを定量することによって調べる。
ＩＭＲ−９０細胞は上に示したように培養した。培養液は３日置きに変えた。７５−８０％集密度に達した細胞は、トリプシン−ＥＤＴＡ混合物を用いて継代させた。自発性分化を防ぐために、継代数が８以下のＩＭＲ−９０細胞のみを用いた。
ＲＮＡ単離のために、細胞は、６ウェルプレートに、ウェル当たり２００，０００細胞の密度で撒き、完全ＥＭＥＭ培養液において２４時間育成した。その後の日々、細胞は、培養液からＦＢＳを除去することによって成長停止させた。細胞は、本発明による化合物に、０．１及び２０  μＭの最終濃度において１時間暴露し、次いで、ＴＧＦβによって処理した。化合物及びＴＧＦβ保存液は前述のように調製した。ＤＭＳＯ濃度及びコントロールは前述の通りであった。
全体ＲＮＡは、ＲＮｅａｓｙ  Ｍｉｎｉ（Ｑｉａｇｅｎ，  ｒｅｆ  ７４１０４）キットを用いメーカーの指示に従って単離した。簡単に言うと、細胞分解物は、ＲＮｅａｓｙ  Ｍｉｎｉキットによって提供されるＲＬＴ分解バッファーの存在下２０−ゲージ針を用いてホモジェナイズし、ＱＩＡｓｈｒｅｄｄｅｒ（Ｑｉａｇｅｎ，  ｒｅｆ  ７９６５４）カラムに移送してホモジェニゼーションを完了した。次に、この分解産物にエタノールを加え、ＲＮｅａｓｙ膜に対するＲＮＡの選択的結合を促進する状態を創出した。次に、サンプルをＲＮｅａｓｙスピンカラムに印加した。全体ＲＮＡは膜に結合する。残留するゲノムＤＮＡは、このＲＮＡサンプルを室温で１５分、３０単位のＤＮアーゼ（Ｑｉａｇｅｎ，  ｒｅｆ  ７９２５４）とインキュベートすることによって除去した。汚染物は、ＲＮｅａｓｙ  Ｍｉｎｉキットによって提供される洗浄バッファーを用いる洗浄工程によって効率的に洗い流される。ＰｒｉｍｅｒＳｃｒｉｐｔ  （Ｔａｋａｒａ，  ｒｅｆ  ＤＲＲ０２７ｓｐ）逆転写酵素をメーカーのプロトコールに従って用い、５０００  ｎｇの全体ＲＮＡについて、ｃＤＮＡに対する逆転写を行った。ＣＯＬ３ａの発現は定量的リアルタイムＰＣＲによって分析した。増幅は、２Ｘ  ＳＹＢＲ  Ｇｒｅｅｎ  Ｉ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ  （Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，  ｒｅｆ  ４３０９１５５）バッファー、各特異的プライマー０．３  ｍＭ、ｃＤＮＡ鋳型（５００  ｎｇの全体ＲＮＡ）、及びＨ２Ｏ（滅菌ＰＣＲ級）を含む、１０  μｌの最終反応容量において実行した。
【０２２０】
プライマーは、Ｐｒｉｍｅｒ  Ｅｘｐｒｅｓｓ（登録商標）２．０  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  （Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）に基づいて設計され、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎによって合成された。ヒトのＣＯＬ３ａのＰＣＲプライマーは下記であった：
−  Ｃｏｌ３ａ  順行プライマー：５’ＴＴＡ  ＡＡＧ  ＧＡＡ  ＡＧＡ  ＣＡＣ  ＴＣＣ  ＧＡＴ  ＣＡＧ  ＡＧＡ  ＴＧＡ
−  ３’−  Ｃｏｌ３ａ逆行プライマー：５’ＡＡＴ  ＧＴＴ  ＴＣＣ  ＧＧＡ  ＧＴＡ  ＧＧＧ  ＧＡＧ  ＴＣＴ  ＴＴＴ  Ｔ  ３’
ＰＣＲ反応は、ＡＢＩ  ｐｒｉｓｍ（登録商標）７９００  Ｈｔ検出システム（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）で行った。増幅プログラムは、最初の変性工程９５°Ｃ、１０分及び変性９５°Ｃ、１５秒で４５サイクル、アニーリング６０°Ｃ、１分、及び伸長７２°Ｃ、１分を含んでいた。温度転移速度は２０°Ｃ／秒であった。蛍光は各サイクルの終了時に測定した。増幅後、ＰＣＲの特異性を定めるために融解曲線を取得した。この分析は、各条件のＲＮＡサンプルについて３重に行った。
ＣＯＬ３ａについて得られた転写レベルは、ｇｅＮｏｒｍソフトウェア（Ｖａｎｄｅｓｏｍｐｅｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００２，  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｂｉｏｌ．，  Ｊｕｎ  １８；  ３（７））を用い、伸長因子−１複合体（ＥＥＦ１Ａ）、ベータグルクロニダーゼ（ＧＵＳＢ）、及びベータミクロチューブリンの転写レベルに対して正規化した。
データは、コントロールサンプルから得られた転写レベルに比べ、倍増加に改変された。データは、平均±ＳＥＭとして表し、２群間の統計比較は、スチューデントのｔ−検定によって行った。
【０２２１】
ＰＬＯＤ２  ｍＲＮＡレベル
本発明の化合物の活性は、ヒトの肺線維芽細胞から筋線維芽細胞へ移行する、ＴＧＦβ誘発性分化に対する、該化合物の作用を、ＩＭＲ−９０細胞におけるＰＬＯＤ２  ｍＲＮＡレベルを定量することによって調べる。
ＩＭＲ−９０細胞は上に示したように培養した。培養液は３日置きに変えた。７５−８０％集密度に達した細胞は、トリプシン−ＥＤＴＡ混合物を用いて継代させた。自発性分化を防ぐために、継代数が８以下のＩＭＲ−９０細胞のみを用いた。
ＲＮＡの単離及びｃＤＮＡへの逆転写に関しては、前述のものと同じプロトコールに従った。ＰＬＯＤ２の発現は、ＣＯＬ３ａの場合と同様に分析した。
ヒトのＰＬＯＤ２のＰＣＲプライマーは下記であった。：
−  ＰＬＯＤ２  順行プライマー：５’ＴＧＧ  ＣＴＡ  ＣＴＴ  ＣＴＣ  ＧＣＴ  ＣＴＧ  ＣＴ  ３’
−  ＰＬＯＤ２  逆行プライマー：５’ＴＴＣ  ＣＴＧ  ＴＴＧ  ＴＧＣ  ＣＡＡ  ＡＡＴ  ＡＡＴ  ＡＧＴ  Ｇ  ３’
データは上に設定した通りに分析した。
【０２２２】
化合物３は、コラーゲン沈着（Ｃｏｌｌ３ａ）及びコラーゲン線維架橋結合酵素（ＰＬＯＤ２）から成るバイオマーカーを、０．１−２０μＭの濃度範囲（それぞれ、０から５７％及び１から３６％）において抑制することができた。化合物３は、肺線維芽細胞において、Ｃｏｌ３ａ及びＰＬＯＤ２  ｍＲＮＡレベルのＴＧＦβ誘発性増加を抑制した。これらのデータは、化合物３が、線維芽細胞から筋線維芽細胞へのＴＧＦβ誘発性分化、及びそれに続くコラーゲンの過剰生産を抑制することが可能であることを示す。
【０２２３】
従って、これらの結果は、本発明の化合物の、肺線維症などの呼吸器障害又は疾患に対する治療作用を強力に支持する。
【国際調査報告】
2013505930.tif 000040
2013505930.tif 000041